特表 2024-531346 半減期が延長された抗体およびＩｇＧ融合タンパク質

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-08-29

(54)【発明の名称】半減期が延長された抗体およびＩｇＧ融合タンパク質

(51)【国際特許分類】

   C07K 16/00 20060101AFI20240822BHJP

   C07K 19/00 20060101ALI20240822BHJP

   C12N 15/13 20060101ALI20240822BHJP

   C12N 15/63 20060101ALI20240822BHJP

   C12N 1/15 20060101ALI20240822BHJP

   C12N 1/19 20060101ALI20240822BHJP

   C12N 1/21 20060101ALI20240822BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20240822BHJP

   A61P 37/08 20060101ALI20240822BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20240822BHJP

   A61K 38/17 20060101ALI20240822BHJP

   A61K 47/68 20170101ALI20240822BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20240822BHJP

   C07K 16/28 20060101ALN20240822BHJP

【ＦＩ】

C07K16/00 ZNA

C07K19/00

C12N15/13

C12N15/63 Z

C12N1/15

C12N1/19

C12N1/21

C12N5/10

A61P37/08

A61P17/00 171

A61K38/17

A61K47/68

A61K39/395 D

A61K39/395 N

C07K16/28

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024509419

(86)(22)【出願日】2022-08-19

(85)【翻訳文提出日】2024-04-16

(86)【国際出願番号】 EP2022073145

(87)【国際公開番号】W WO2023021169

(87)【国際公開日】2023-02-23

(31)【優先権主張番号】63/235,259

(32)【優先日】2021-08-20

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/235,261

(32)【優先日】2021-08-20

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/341,443

(32)【優先日】2022-05-13

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】510000976

【氏名又は名称】インターベット インターナショナル ベー． フェー．

(74)【代理人】

【識別番号】100114188

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 誠

(74)【代理人】

【識別番号】100119253

【弁理士】

【氏名又は名称】金山 賢教

(74)【代理人】

【識別番号】100124855

【弁理士】

【氏名又は名称】坪倉 道明

(74)【代理人】

【識別番号】100129713

【弁理士】

【氏名又は名称】重森 一輝

(74)【代理人】

【識別番号】100137213

【弁理士】

【氏名又は名称】安藤 健司

(74)【代理人】

【識別番号】100183519

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻田 芳恵

(74)【代理人】

【識別番号】100196483

【弁理士】

【氏名又は名称】川嵜 洋祐

(74)【代理人】

【識別番号】100160749

【弁理士】

【氏名又は名称】飯野 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100160255

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 祐輔

(74)【代理人】

【識別番号】100216839

【弁理士】

【氏名又は名称】大石 敏幸

(74)【代理人】

【識別番号】100146318

【弁理士】

【氏名又は名称】岩瀬 吉和

(74)【代理人】

【識別番号】100127812

【弁理士】

【氏名又は名称】城山 康文

(72)【発明者】

【氏名】モージー，モハマド

(72)【発明者】

【氏名】スタウファー，セス・ディー

【テーマコード（参考）】

4B065

4C076

4C084

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B065AA01X

4B065AA57X

4B065AA72X

4B065AA90X

4B065AB01

4B065AC14

4B065BA02

4B065CA24

4B065CA25

4B065CA43

4C076CC07

4C076CC18

4C076CC41

4C076EE41

4C076EE59

4C084AA02

4C084BA01

4C084BA41

4C084NA05

4C084NA14

4C084ZB13

4C084ZC61

4C085AA13

4C085AA14

4C085AA16

4C085CC22

4C085DD62

4C085EE01

4C085EE03

4C085GG01

4H045AA11

4H045AA20

4H045BA10

4H045BA41

4H045DA76

4H045EA20

4H045FA74

(57)【要約】

本発明は、イヌまたはネコフラグメント結晶化可能領域（Ｆｃ領域）を含む抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質であって、Ｆｃ領域中の１つ以上の特定のアミノ酸置換に起因して増強された半減期を有する、抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質を提供する。増加した半減期は、非置換イヌＦｃ領域または非置換ネコＦｃ領域を含む対応する抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のものに対して、中程度に酸性のｐＨでの新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対する増加した結合親和性の関数であり得る。これらの抗体および／またはＩｇＧ融合タンパク質を含む医薬組成物も提供される。
【選択図】 図１Ａ

【特許請求の範囲】

【請求項1】

１つ以上のアミノ酸置換を含むフラグメント結晶化可能領域（Ｆｃ領域）を含む抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質であって、前記１つ以上のアミノ酸残基置換が、２５２、２５４、２５６、３０８、４３３、４３４、４３６、またはそれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるアミノ酸残基位置にあり、前記アミノ酸残基位置が、ＫａｂａｔのようにＥＵインデックスに従ってナンバリングされ：
前記置換が、アミノ酸残基位置２５２にある場合、前記置換が、チロシン残基によるものであり；
前記置換が、アミノ酸残基位置２５４にある場合、前記置換が、トレオニン残基によるものであり；
前記置換が、アミノ酸残基位置２５６にある場合、前記置換が、アスパラギン酸残基またはグルタミン酸残基によるものであり；
前記置換が、アミノ酸残基位置３０８にある場合、前記置換が、プロリン残基によるものであり；
前記置換が、アミノ酸残基位置４３３にある場合、前記置換が、リジン残基またはロイシン残基によるものであり；
前記置換が、アミノ酸残基位置４３４にある場合、前記置換が、フェニルアラニン残基、ヒスチジン残基、またはチロシン残基によるものであり；
前記置換が、アミノ酸残基位置４３６にある場合、前記置換が、トレオニン残基によるものであり；
前記抗体が、重鎖および軽鎖を含み；
前記Ｆｃ領域が、イヌＦｃ領域（ｃＦｃ）およびネコＦｃ領域（ｆＦｃ）からなる群から選択される、抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項2】

前記ｃＦｃまたは前記ｆＦｃが、
アミノ酸残基位置２５２でのチロシン残基による置換およびアミノ酸残基位置２５６でのアスパラギン酸残基による置換；
アミノ酸残基位置２５６でのアスパラギン酸残基による置換およびアミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換；
アミノ酸残基位置３０８でのプロリン残基による置換およびアミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのリジン残基による置換およびアミノ酸残基位置４３４でのフェニルアラニン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのリジン残基による置換およびアミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのロイシン残基による置換およびアミノ酸残基位置４３４でのフェニルアラニン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのロイシン残基による置換およびアミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換およびアミノ酸残基位置４３６でのトレオニン残基による置換；
アミノ酸残基位置２５２でのチロシン残基による置換、アミノ酸残基位置２５４でのトレオニン残基による置換、およびアミノ酸残基位置２５６でのグルタミン酸残基による置換；
アミノ酸残基位置２５６でのアスパラギン酸残基による置換、アミノ酸残基位置３０８でのプロリン残基による置換、およびアミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのリジン残基による置換、アミノ酸残基位置４３４でのフェニルアラニン残基による置換、およびアミノ酸残基位置４３６でのトレオニン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのリジン残基による置換、アミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換、およびアミノ酸残基位置４３６でのトレオニン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのロイシン残基による置換、アミノ酸残基位置４３４でのフェニルアラニン残基による置換、およびアミノ酸残基位置４３６でのトレオニン残基による置換；ならびに
アミノ酸残基位置４３３でのロイシン残基による置換、アミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換、およびアミノ酸残基位置４３６でのトレオニン残基による置換
からなる群から選択されるアミノ酸残基位置に２つ以上のアミノ酸残基置換を含む、請求項１に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項3】

前記ｆＦｃが、ＩｇＧ－ｌａ Ｆｃ、ＩｇＧ－１ａｍ Ｆｃ、ＩｇＧ－ｌｂ Ｆｃ、ＩｇＧ－１ｂｍ Ｆｃ、ＩｇＧ－２ ＦｃおよびＩｇＧ－２ｍ Ｆｃからなる群から選択される、請求項１または２に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項4】

前記ｆＦｃが、配列番号９、配列番号９と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号１０、配列番号１０と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号１１、配列番号１１と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号１２、配列番号１２と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号５０、配列番号５０と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号５１、および配列番号５１と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記ｆＦｃが、前記１つ以上のアミノ酸置換を保持する、請求項３に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項5】

前記ｃＦｃが、ＩｇＧ－Ａ Ｆｃ、ＩｇＧ－Ａｍ Ｆｃ、ＩｇＧ－Ｂ Ｆｃ、ＩｇＧ－Ｂｍ Ｆｃ、ＩｇＧ－Ｃ Ｆｃ、ＩｇＧ－Ｃｍ Ｆｃ、ＩｇＧ－Ｄ ＦｃおよびＩｇＧ－Ｄｍ Ｆｃからなる群から選択される、請求項１または２に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項6】

前記ｃＦｃが、配列番号１、配列番号１と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号２、配列番号２と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号３、配列番号３と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号４、配列番号４と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号５、配列番号５と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号６、配列番号６と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号７、配列番号７と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号８、および配列番号８と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記ｃＦｃが、前記１つ以上のアミノ酸置換を保持する、請求項５に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項7】

前記ｃＦｃが、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５および配列番号１６からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むイヌヒンジ領域をさらに含む、請求項１、２、５または６のいずれか一項に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項8】

前記ｃＦｃが、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５および配列番号１６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むイヌヒンジ領域をさらに含む、請求項７に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項9】

対応する野生型イヌＦｃまたはネコＦｃを含む対応する抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の半減期と比較して増加した半減期を有する、請求項１～８のいずれか一項に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項10】

中程度に酸性のｐＨで新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対して増強された結合親和性を有する、請求項１～９のいずれか一項に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項11】

配列番号１７のアミノ酸配列、または配列番号１７と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列をさらに含むイヌＩＬ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質であり、前記ｃＦｃが、前記１つ以上のアミノ酸置換を保持する、請求項１、２および５～１０のいずれか一項に記載のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項12】

配列番号１８のアミノ酸配列、または配列番号１８と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列をさらに含むイヌ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質であり、前記ｃＦｃが、前記１つ以上のアミノ酸置換を保持する、請求項１、２、および５～１０に記載のＩｇＧ融合タンパク質。

【請求項13】

配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４および配列番号３５からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４および配列番号３５と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を含むアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１２に記載のイヌ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質。

【請求項14】

請求項１～１０のいずれか一項に記載の抗体もしくはＩｇＧ融合タンパク質、または請求項１１に記載のイヌ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質、または請求項１２もしくは１３に記載のイヌ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質、またはそれらの任意の組み合わせをコードする核酸。

【請求項15】

請求項１４に記載の核酸を含む発現ベクター。

【請求項16】

請求項１５に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。

【請求項17】

イヌ抗体またはイヌ化抗体からなる群から選択される、請求項１、２および５～１０のいずれか一項に記載の抗体。

【請求項18】

イヌインターロイキン－３１受容体アルファ（ｃＩＬ－３１ＲＡ）に対するイヌ化抗体であり、前記重鎖が、配列番号４４のアミノ酸配列を含む可変領域を含む、請求項１７に記載のイヌ化抗体。

【請求項19】

前記重鎖が、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２および配列番号４３からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２および配列番号４３と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を含むアミノ酸配列を含む、請求項１８に記載のｃＩＬ－３１ＲＡに対するイヌ化抗体。

【請求項20】

前記イヌ化抗体の前記軽鎖が、配列番号４５のアミノ酸配列を含むか、または配列番号４５と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を含む、請求項１８または１９に記載のｃＩＬ－３１ＲＡに対するイヌ化抗体。

【請求項21】

請求項２０に記載のイヌ化抗体の軽鎖をコードする核酸。

【請求項22】

請求項１７～２０のいずれか一項に記載のイヌ化抗体の重鎖をコードする核酸。

【請求項23】

請求項２１もしくは２２、または請求項２１および２２の両方に記載の核酸を含む発現ベクター。

【請求項24】

請求項２３に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。

【請求項25】

請求項１１に記載のイヌ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質、請求項１２もしくは１３に記載のイヌ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質、請求項１８～２０のいずれか一項に記載のイヌ化抗体、請求項１５もしくは２３に記載の発現ベクター、またはそれらの任意の組み合わせと、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。

【請求項26】

アトピー性皮膚炎を有するイヌを処置する方法であって、請求項２５に記載の医薬組成物を前記イヌに投与することを含む、方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

配列表
本出願は、ＸＭＬ形式で電子的に提出された配列表を含有し、その全体が参照として本明細書に組み込まれる。２０２２年７月２１日に作成されたＸＭＬファイルのファイル名は、「２５５３０．ｘｍｌ」である。ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して提出されたこの配列表は、本明細書の一部であり、その全体が参照として本明細書に組み込まれる。

【0002】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２２年５月１３日に出願された米国仮特許出願第６３／３４１，４４３号明細書、２０２１年８月２０日に出願された米国特許出願第６３／２３５，２５９号明細書、および２０２１年８月２０日に出願された米国特許出願第６３／２３５，２６１号明細書の米国特許法第１１９条（ｅ）に基づく優先権を主張する。

【0003】

本発明は、イヌまたはネコフラグメント結晶化可能領域（Ｆｃ領域）を含む抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質であって、Ｆｃ領域中の１つ以上の特定のアミノ酸置換に起因して増強された半減期を有する、抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質に関する。増加した半減期は、非置換イヌＦｃ領域または非置換ネコＦｃ領域を含む対応する抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のものに対して、中程度に酸性のｐＨでの新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対する増加した結合親和性の関数であり得る。これらの抗体および／またはＩｇＧ融合タンパク質を含む医薬組成物も提供される。

【背景技術】

【0004】

医薬抗体研究の１つの重要な目的は、比較的低い用量および低い投与頻度で有効な抗体を開発することである。これらの属性は、処置のコストを下げる働きをし、それはより多くの患者アクセスをもたらし、同時に患者の利便性を増大し、かつ患者のコンプライアンスを高め、それによってより良好な治療転帰をもたらす。この目的を達成するために、多くの研究が、ＩｇＧアイソタイプの治療用抗体といわゆる新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）との間の結合を調節することに重点を置いた。これは、ＩｇＧへのＦｃＲｎ結合が、抗体血漿半減期の維持および延長における重要な因子であると考えられるからである。

【0005】

ＦｃＲｎは、ＭＨＣクラスＩ様アルファドメインおよびＢ２－ミクログロブリン（Ｂ２－ｍ）サブユニットで構成されるヘテロ二量体である。ＦｃＲｎは、いくつかの組織：最も顕著には、血管内皮、腎臓、骨髄由来細胞、および血液脳関門で発現される。ＦｃＲｎは、他のＩｇＧ Ｆｃ受容体の部位とは異なるＩｇＧ Ｆｃの部位でＩｇＧに結合する。ＩｇＧのＦｃＲｎへの結合は、ｐＨに高度に依存し、この結合は、エンドソーム区画中の低ｐＨ（例えば、ｐＨ６．５未満）では高い親和性で起こるが、細胞表面の生理学的ｐＨ（例えば、ｐＨ７．４）では有意に低い結合親和性で起こる［例えば、Ｂｏｒｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２９０（７）：４２８２－４２９０，（２０１５）を参照されたい］。エンドソーム区画中のＩｇＧのＦｃＲｎへの強い結合は、エンドソーム中のタンパク質分解酵素による分解から抗体を保護し、受容体結合抗体の細胞表面への再循環を可能にし、そこでｐＨの上昇が相互作用を弱め、生理学的ｐＨで循環中に抗体の放出を可能にする。

【0006】

以前の研究は、ある特定の位置におけるある特定の突然変異がヒトＩｇＧのヒトＦｃＲｎへの結合を変えることを示していた［例えば、米国特許第７，０８３，７８４号明細書、米国特許第７，６５８，９２１号明細書、米国特許第７，２１７，７９７号明細書、米国特許第７，２１７，７９８号明細書、米国特許第８，０８８，３７６号明細書、米国特許第１０，３３６，８１８号明細書および国際公開第２０１９／１４７９７３号を参照されたい］。しかしながら、ヒトおよび犬または猫ＩｇＧタンパク質は、ヒト配列中の残基に、犬または猫配列中とは異なる環境および／または異なる同一性を与えるそれらのアミノ酸配列に多くの相違を有する。この変動性により、ある種のＩｇＧの特性を別の種のＩｇＧに直接伝達することが困難になる。一貫して、最近になって多数の対応する研究がコンパニオンアニマルに対して行われている［例えば、国際公開第２０１８０７３１８５号、国際公開第２０２００８２０４８号、国際公開第２０２１０１１６５６０号、米国特許出願公開第２０２００３６２０３５号明細書、米国特許出願公開第２０２００２１６５３６号明細書、国際公開第２０２０１９１２８９号、国際公開第２０２１２３１４６４号、および米国特許出願公開第２０２１０３４７８５４号明細書を参照されたい］。しかしながら、任意の特定の突然変異または突然変異の組み合わせは、抗体の半減期または他の属性の長期化に対して劇的に異なる効果を有する場合があり、これはまた、抗薬物（抗体）抗体を誘導する可能性を含む重要な抗体特性に対するそのような突然変異の効果を予測することを困難にする。したがって、治療用抗体および／または対応する治療用Ｆｃ融合タンパク質の半減期を延長することができる犬および／または猫ＩｇＧタンパク質における新しい特異的置換／突然変異を同定する必要性が依然として存在する。

【0007】

本明細書における任意の参考文献の引用は、そのような参考文献が本出願に対する「従来技術」として利用可能であることの承認として解釈されるべきではない。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0008】

【特許文献1】米国特許第７，０８３，７８４号明細書

【特許文献2】米国特許第７，６５８，９２１号明細書

【特許文献3】米国特許第７，２１７，７９７号明細書

【特許文献4】米国特許第７，２１７，７９８号明細書

【特許文献5】米国特許第８，０８８，３７６号明細書

【特許文献6】米国特許第１０，３３６，８１８号明細書

【特許文献7】国際公開第２０１９／１４７９７３号

【特許文献8】国際公開第２０１８０７３１８５号

【特許文献9】国際公開第２０２００８２０４８号

【特許文献10】国際公開第２０２１０１１６５６０号

【特許文献11】米国特許出願公開第２０２００３６２０３５号明細書

【特許文献12】米国特許出願公開第２０２００２１６５３６号明細書

【特許文献13】国際公開第２０２０１９１２８９号

【特許文献14】国際公開第２０２１２３１４６４号

【特許文献15】米国特許出願公開第２０２１０３４７８５４号明細書

【非特許文献】

【0009】

【非特許文献1】Ｂｏｒｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２９０（７）：４２８２－４２９０，（２０１５）

【発明の概要】

【0010】

本発明は、半減期が増強された抗体およびＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質を提供する。したがって、本発明の一態様では、軽鎖および重鎖を含む抗体であって、重鎖が、アミノ酸残基位置２５２、アミノ酸残基位置２５４、アミノ酸残基位置２５６、アミノ酸残基位置３０８、アミノ酸残基位置４３３、アミノ酸残基位置４３４、アミノ酸残基位置４３６、またはこれらのアミノ酸位置の任意の組み合わせにおいてＫａｂａｔのようにＥＵインデックスに従ってナンバリングされたアミノ酸残基位置にアミノ酸置換を含むフラグメント結晶化可能領域（Ｆｃ領域）を含む、抗体が提供される。この種のある特定の実施形態では、Ｆｃ領域は、イヌＦｃ領域（ｃＦｃ）である。この種の他の実施形態では、Ｆｃ領域は、ネコＦｃ領域（ｆＦｃ）である。

【0011】

本発明はまた、アミノ酸残基位置２５２、アミノ酸残基位置２５４、アミノ酸残基位置２５６、アミノ酸残基位置３０８、アミノ酸残基位置４３３、アミノ酸残基位置４３４、アミノ酸残基位置４３６、またはこれらのアミノ酸位置の任意の組み合わせにおいてＫａｂａｔのようにＥＵインデックスに従ってナンバリングされたアミノ酸残基位置にアミノ酸置換を含むフラグメント結晶化可能領域（Ｆｃ領域）を含むＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質を提供する。この種のある特定の実施形態では、Ｆｃ領域は、イヌＦｃ領域（ｃＦｃ）である。この種の他の実施形態では、Ｆｃ領域は、ネコＦｃ領域（ｆＦｃ）である。

【0012】

特定の実施形態では、本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、１つ以上のそのようなアミノ酸置換を含む。ある特定の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置２５２のチロシン残基によるものである。他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置２５４のトレオニン残基によるものである。さらに他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置２５６のアスパラギン酸残基によるものである。なお他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置２５６のグルタミン酸残基によるものである。さらに他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置３０８のプロリン残基によるものである。なお他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３３のリジン残基によるものである。さらに他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３３のロイシン残基によるものである。なお他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３４のフェニルアラニン残基によるものである。さらに他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３４のヒスチジン残基によるものである。なお他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３４のチロシン残基によるものである。さらに他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３６のトレオニン残基によるものである。

【0013】

関連する実施形態では、本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、そのようなアミノ酸置換のうちの２つ以上を含む。特定の実施形態では、本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、アミノ酸残基位置２５２にチロシン残基による置換およびアミノ酸残基位置２５６にアスパラギン酸残基による置換を含む。他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置３０８のプロリン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３４のチロシン残基によるものである。さらに他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３３のリジン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３４のフェニルアラニン残基によるものである。なお他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３３のリジン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３４のチロシン残基によるものである。さらに他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３３のロイシン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３４のフェニルアラニン残基によるものである。なお他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３３のロイシン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３４のチロシン残基によるものである。さらに他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置２５６のアスパラギン酸残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３４のチロシン残基によるものである。なお他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３４のチロシン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３６のトレオニン残基によるものである。さらに他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置２５２のチロシン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置２５４のトレオニン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置２５６のグルタミン酸残基によるものである。なお他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置２５６のアスパラギン酸残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置３０８のプロリン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３４のチロシン残基によるものである。さらに他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３３のリジン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３４のフェニルアラニン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３６のトレオニン残基によるものである。なお他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３３のリジン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３４のチロシン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３６のトレオニン残基によるものである。さらに他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３３のロイシン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３４のフェニルアラニン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３６のトレオニン残基によるものである。なお他の実施形態では、置換は、アミノ酸残基位置４３３のロイシン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３４のチロシン残基によるものであり、置換は、アミノ酸残基位置４３６のトレオニン残基によるものである。

【0014】

本発明の抗体およびＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、好ましくは、対応する野生型イヌＦｃまたはネコＦｃを含む対応する抗体または対応するＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の半減期と比較して、増加した半減期を有する。特定の実施形態では、抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、中程度に酸性のｐＨで、対応する野生型イヌＦｃまたはネコＦｃを含む対応する抗体または対応するＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質よりもそれらの新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対して増強された結合親和性を有する。

【0015】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のある特定の実施形態では、Ｆｃ領域は、ネコＦｃ領域（ｆＦｃ）である。特定の実施形態では、ｆＦｃは、ＩｇＧ－ｌａ Ｆｃである。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、ＩｇＧ－１ａｍ Ｆｃである。なお他の実施形態では、ｆＦｃは、ＩｇＧ－ｌｂ Ｆｃである。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、ＩｇＧ－１ｂｍ Ｆｃである。なお他の実施形態では、ｆＦｃは、ＩｇＧ－２ Ｆｃである。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、ＩｇＧ－２ｍ Ｆｃである。

【0016】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のより特定の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号９と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号９と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号９と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号９と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号９と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｆＦｃは、配列番号９のアミノ酸配列を含む。

【0017】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の他の特定の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１０と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１０と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１０と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１０と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１０と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１０のアミノ酸配列を含む。

【0018】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のなお他の特定の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１１と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１１と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１１と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１１と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１１と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１１のアミノ酸配列を含む。

【0019】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のさらに他の特定の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１２と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１２と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１２と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１２と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１２と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｆＦｃは、配列番号１２のアミノ酸配列を含む。

【0020】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のなお他の特定の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号５０と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号５０と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号５０と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号５０と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号５０と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｆＦｃは、配列番号５０のアミノ酸配列を含む。

【0021】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のさらに他の特定の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号５１と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号５１と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号５１と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号５１と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｆＦｃは、配列番号５１と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｆＦｃは、配列番号５１のアミノ酸配列を含む。

【0022】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のある特定の実施形態では、Ｆｃ領域は、イヌＦｃ領域（ｃＦｃ）である。特定の実施形態では、ｃＦｃは、ＩｇＧ－Ａ Ｆｃである。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、ＩｇＧ－Ａｍ Ｆｃである。なお他の実施形態では、ｃＦｃは、ＩｇＧ－Ｂ Ｆｃである。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、ＩｇＧ－Ｂｍ Ｆｃである。なお他の実施形態では、ｃＦｃは、ＩｇＧ－Ｃ Ｆｃである。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、ＩｇＧ－Ｃｍ Ｆｃである。なお他の実施形態では、ｃＦｃは、ＩｇＧ－Ｄ Ｆｃである。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、ＩｇＣ－Ｄｍ Ｆｃである。

【0023】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のより特定の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号１と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号１と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号１と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号１と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号１と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｃＦｃは、配列番号１のアミノ酸配列を含む。

【0024】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の他の特定の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号２と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号２と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号２と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号２と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号２と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｃＦｃは、配列番号２のアミノ酸配列を含む。

【0025】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のなお他の特定の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号３と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号３と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号３と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号３と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号３と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｃＦｃは、配列番号３のアミノ酸配列を含む。

【0026】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のさらに他の特定の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号４と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号４と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号４と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号４と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号４と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｃＦｃは、配列番号４のアミノ酸配列を含む。

【0027】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のなお他の特定の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号５と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号５と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号５と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号５と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号５と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｃＦｃは、配列番号５のアミノ酸配列を含む。

【0028】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のさらに他の特定の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号６と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号６と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号６と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号６と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号６と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｃＦｃは、配列番号６のアミノ酸配列を含む。

【0029】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のなお他の特定の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号７と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号７と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号７と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号７と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号７と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｃＦｃは、配列番号７のアミノ酸配列を含む。

【0030】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のさらに他の特定の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号８と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号８と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号８と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号８と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＦｃは、配列番号８と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、ｃＦｃは、配列番号８のアミノ酸配列を含む。

【0031】

本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の関連する実施形態では、ｃＦｃは、イヌヒンジ領域をさらに含む。ある特定の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１３と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１３と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１３と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１３と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１３のアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１４と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１４と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１４と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１４のアミノ酸配列を含む。代替的な実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１５と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１５と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１５と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１５と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１５のアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１６と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１６と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１６と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。具体的な実施形態では、イヌヒンジ領域は、配列番号１６のアミノ酸配列を含む。

【0032】

特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号１７のアミノ酸配列を含むイヌインターロイキン－１３受容体アルファ１－イヌＩｇＧ融合タンパク質（イヌＩＬ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質）である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１７のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１７のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１７のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１７のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１７のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0033】

他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号１８のアミノ酸配列を含むイヌインターロイキン－１３受容体アルファ２－イヌＩｇＧ融合タンパク質（イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質）である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１８のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１８のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１８のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１８のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１８のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0034】

さらに他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号１９のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１９のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１９のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１９のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１９のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号１９のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0035】

なお他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号２０のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２０のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0036】

さらに他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号２１のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。

【0037】

他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２１のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２１のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２１のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２１のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２１のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0038】

なお他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号２２のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0039】

さらに他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号２３のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0040】

なお他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号２４のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２４のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0041】

さらに他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号２５のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２５のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0042】

なお他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号２６のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0043】

さらに他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号２７のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0044】

なお他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号２８のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0045】

さらに他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号２９のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0046】

なお他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号３０のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0047】

さらに他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号３１のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0048】

なお他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号３２のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３２のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３２のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３２のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３２のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３２のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0049】

さらに他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号３３のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３３のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３３のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３３のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３３のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３３のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0050】

なお他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号３４のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３４のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３４のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３４のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３４のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３４のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0051】

さらに他の特定の実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号３５のアミノ酸配列を含むイヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質である。他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、イヌＩＬ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質は、配列番号３５のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0052】

以下に示されるように、別途具体的に示される場合を除き、本発明の抗体は、ＩｇＧ抗体である。具体的な実施形態では、本発明の抗体は、ネコ抗体である。関連する実施形態では、抗体は、ネコ化抗体である。他の実施形態では、抗体は、イヌ抗体である。なお他の実施形態では、抗体は、イヌ化抗体である。

【0053】

特定の実施形態では、イヌ化抗体は、イヌ化イヌインターロイキン－３１受容体アルファ（ｃＩＬ－３１ＲＡ）抗体である。より具体的な実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４４のアミノ酸配列を含む可変領域を含む。より具体的な実施形態では、抗体は、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の軽鎖をさらに含む。特定の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の軽鎖は、配列番号４５のアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の軽鎖は、配列番号４５のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の軽鎖は、配列番号４５のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の軽鎖は、配列番号４５のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の軽鎖は、配列番号４５のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の軽鎖は、配列番号４５のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0054】

特定の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３６のアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３６のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３６のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３６のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３６のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３６のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0055】

さらに他の特定の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３７のアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３７のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３７のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３７のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３７のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３７のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0056】

さらに他の特定の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３８のアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３８のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３８のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３８のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３８のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３８のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0057】

さらに他の特定の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３９のアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３９のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３９のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３９のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３９のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号３９のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0058】

さらに他の特定の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４０のアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４０のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0059】

さらに他の特定の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４１のアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４１のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0060】

さらに他の特定の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４２のアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４２のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４２のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４２のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４２のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４２のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0061】

さらに他の特定の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４３のアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４３のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４３のアミノ酸配列と少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４３のアミノ酸配列と少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４３のアミノ酸配列と少なくとも９８％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖は、配列番号４３のアミノ酸配列と少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0062】

本発明は、本発明の個々の抗体重鎖、抗体軽鎖またはＩｇＧ融合タンパク質をコードする個々のヌクレオチド配列を含む個々の核酸をさらに提供する。したがって、本発明は、本発明の抗体重鎖、抗体軽鎖またはＩｇＧ融合タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。特定の実施形態では、本発明は、本発明のイヌ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質のいずれか１つをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。関連する特定の実施形態では、本発明は、本発明のイヌ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質のいずれか１つをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。具体的な実施形態では、本発明は、配列番号４４のアミノ酸配列を含む可変領域を含むｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖をコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。関連する実施形態では、本発明は、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の重鎖のいずれか１つをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。本発明はまた、ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の軽鎖のいずれか１つをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。加えて、本発明は、本発明の抗体重鎖および軽鎖をそれぞれコードする複数のヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。本発明は、本発明のＩｇＧ融合タンパク質をそれぞれコードする複数のヌクレオチド配列を含む核酸をさらに提供する。本発明は、これらの核酸を含むベクターをさらに提供する。特定の実施形態では、ベクターは、発現ベクターである。本発明は、本発明のベクターのいずれかを含む宿主細胞をさらに提供する。

【0063】

本発明はまた、本発明の半減期が増強された抗体およびＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。この増強された半減期は、少なくとも部分的には、Ｆｃ領域に１つ以上のアミノ酸置換を含むフラグメント結晶化可能領域（Ｆｃ）を含む抗体およびＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質に起因する。より具体的な実施形態では、医薬は、本発明のイヌ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質および薬学的に許容される担体を含む。関連する実施形態では、医薬は、本発明のイヌ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質および薬学的に許容される担体を含む。さらに別の実施形態では、医薬は、本発明のｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体および薬学的に許容される担体を含む。本発明はまた、イヌ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質、イヌ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質、および／またはイヌ化ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体の組み合わせを含む医薬組成物を提供する。本発明は、本発明の医薬組成物のいずれか１つ以上をイヌに投与することを含む、アトピー性皮膚炎を有するイヌを処置する方法をさらに提供する。

【0064】

本発明のこれらおよび他の態様は、詳細な説明および図を参照することによってよりよく理解されよう。

【図面の簡単な説明】

【0065】

【図1A】ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ［配列番号５４］、イヌＩｇＧ－Ａ［配列番号１］、イヌＩｇＧ－Ｂ［配列番号３］、イヌＩｇＧ－Ｃ［配列番号５］、イヌＩｇＧ－Ｄ［配列番号７］、ネコＩｇＧ－１ａ［配列番号５２］およびネコＩｇＧ－２［配列番号５３］由来のＦｃ領域のアミノ酸配列のアラインメントを、コンセンサス配列［配列番号５５］と共に示す図である。図示のネコＩｇＧ－１ａおよびネコＩｇＧ－２ Ｆｃ領域は、Ｓｔｒｉｅｔｚｅｌ ｅｔ ａｌ．，［Ｖｅｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ＆Ｉｍｍｕｎｐａｔｈｏｌ．，１５８：２１４－２２３（２０１４）］によって定義された対応するネコＦｃ領域に対して２つのさらなるＮ末端アミノ酸残基を有する。実線の矢印は、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ ｅｄ．，Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）によるＥＵナンバリングスキームを反映する特定のアミノ酸残基位置を示す。「ｘ」は、比較される７つのアミノ酸配列についてのコンセンサス配列における位置２５２での均一性の欠如を反映する。

【図1B】ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ［配列番号５４］、イヌＩｇＧ－Ａ［配列番号１］、イヌＩｇＧ－Ｂ［配列番号３］、イヌＩｇＧ－Ｃ［配列番号５］、イヌＩｇＧ－Ｄ［配列番号７］、ネコＩｇＧ－１ａ［配列番号５２］およびネコＩｇＧ－２［配列番号５３］由来のＦｃ領域のアミノ酸配列のアラインメントを、コンセンサス配列［配列番号５５］と共に示す図である。図示のネコＩｇＧ－１ａおよびネコＩｇＧ－２ Ｆｃ領域は、Ｓｔｒｉｅｔｚｅｌ ｅｔ ａｌ．，［Ｖｅｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ＆Ｉｍｍｕｎｐａｔｈｏｌ．，１５８：２１４－２２３（２０１４）］によって定義された対応するネコＦｃ領域に対して２つのさらなるＮ末端アミノ酸残基を有する。実線の矢印は、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ ｅｄ．，Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）によるＥＵナンバリングスキームを反映する特定のアミノ酸残基位置を示す。「ｘ」は、比較される７つのアミノ酸配列についてのコンセンサス配列における位置２５２での均一性の欠如を反映する。

【発明を実施するための形態】

【0066】

ＦｃＲｎへの抗体および／またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の結合は、ｐＨに高度に依存する。したがって、結合は、エンドソーム区画内の中程度に酸性のｐＨでは高い親和性で起こるが、細胞表面の生理学的ｐＨでは有意に低い結合親和性で起こる。エンドソーム区画中のＦｃＲｎへのＩｇＧ抗体の強い結合は、両方ともエンドソーム中のタンパク質分解酵素の分解作用から抗体を保護し、細胞表面での受容体結合抗体の再利用を可能にするが、細胞表面でのより高いｐＨ（すなわち、生理学的ｐＨ）は、その結合を弱め、それによって抗体の循環への放出を可能にする。１つ以上のアミノ酸をＦｃ領域に置換することは、中程度に酸性のｐＨでＦｃＲｎに対する抗体および／またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の結合親和性を増加させ、それによってインビボでの抗体および／またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の半減期を増加させる働きをし得る。

【0067】

本発明は、Ｆｃ領域に１つ以上のアミノ酸特異的置換を含むフラグメント結晶化可能領域（Ｆｃ領域）を含む抗体およびＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質を提供する。本発明の一態様では、これらの抗体およびＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、中程度に酸性のｐＨ（ｐＨ５．５～ｐＨ６．５）でそれらの新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対して増強された結合親和性を有し、非置換Ｆｃ領域を有する対応する抗体および／またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質に対して、抗体および／またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の半減期を延長する。関連する実施形態では、抗体および／またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、中程度に酸性のｐＨではそれらのＦｃＲｎに対して増強された結合親和性を有するが、生理学的ｐＨ（ｐＨ７．２～７．６）ではそれらのＦｃＲｎに対して非改変または最小限に改変された結合親和性を有する。したがって、本発明の一態様では、抗体および／またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のＦｃ領域への特異的アミノ酸置換は、生理学的ｐＨでのそれらのＦｃＲｎからの抗体および／またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の放出に明らかに影響を及ぼさないが、中程度に酸性のｐＨでのそれらのＦｃＲｎに対する抗体および／またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の結合親和性を有意に増加させる。

【0068】

あるいは、または併せて、中程度に酸性のｐＨでの結合親和性と、ＦｃＲｎに対する抗体および／またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の生理学的ｐＨでの結合親和性との間の差を増大させることにより、抗体および／またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の相対的なインビボ半減期を延長することもできる。したがって、本発明は、フラグメント結晶化可能領域（Ｆｃ）を含む抗体およびＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質をさらに提供し、抗体およびＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、それらのＦｃ領域に１つ以上のアミノ酸置換を含み、それらのＦｃ領域にアミノ酸置換を含まないそれらの対応する抗体とＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質との間の差に対して、中程度に酸性のｐＨでのそれらの新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対する抗体および／またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の結合親和性は、生理学的ｐＨでのそれらの結合親和性よりも大きな差をもたらす。この種の特定の実施形態では、抗体およびＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質はまた、中程度に酸性のｐＨでそれらの新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対して増強された結合親和性を有する。

【0069】

略語
本発明の詳細な説明および実施例を通して、以下の略語を使用する：
ＡＤＣＣ 抗体依存性細胞傷害
ＣＤＣ 補体依存性細胞傷害
ＣＤＲ Ｋａｂａｔナンバリングシステムを使用して定義される、免疫グロブリン可変領域中の相補性決定領域
ｃＦｃ イヌフラグメント結晶化可能領域
ＣＨＯ チャイニーズハムスター卵巣
ＥＣ５０ ５０％の有効性または結合をもたらす濃度
ＥＣＤ 細胞外ドメイン
ＥＬＩＳＡ 酵素結合免疫吸着アッセイ
ＥＵインデックス ＥＵインデックス、ＫａｂａｔのＥＵインデックス、またはＥＵナンバリングスキームとも称される、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ ｅｄ．，Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）に従って広く使用されているナンバリング。

【0070】

ｆＦｃ ネコフラグメント結晶化可能領域
ＦＲ 抗体フレームワーク領域：ＣＤＲ領域を除く免疫グロブリン可変領域。

【0071】

ＩＣ５０ ５０％阻害をもたらす濃度
ＩｇＧ 免疫グロブリンＧ
Ｋａｂａｔ Ｅｌｖｉｎ Ａ．Ｋａｂａｔ［Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）］によって開拓された免疫グロブリンのアラインメントおよびナンバリングシステム
ｍＡｂ モノクローナル抗体（同様にＭａｂまたはＭＡｂ）
ＰＣＲ ポリメラーゼ連鎖反応
ＰＫ 薬物動態
Ｖ領域 異なる抗体間で配列が可変であるＩｇＧ鎖のセグメント。

【0072】

ＶＨ 免疫グロブリン重鎖可変領域
ＶＬ 免疫グロブリン軽鎖可変領域
Ｖｋ 免疫グロブリンカッパ軽鎖可変領域
Ｖｌ 免疫グロブリンラムダ軽鎖可変領域
定義
本発明がより容易に理解され得るように、ある特定の技術的および科学的用語を以下に具体的に定義する。本明細書の他の箇所で具体的に定義されていない限り、本明細書で使用される他のすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解される意味を有する。

【0073】

添付の特許請求の範囲を含む本明細書で使用される場合、「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」などの単語の単数形は、文脈が明らかにそうでないことを指示しない限り、それらの対応する複数の言及を含む。

【0074】

分子の「活性」は、分子のリガンドまたは受容体への結合、触媒活性；遺伝子発現もしくは細胞シグナル伝達、分化、または成熟を刺激する能力；抗原活性、他の分子の活性の調節などを記載または指し得る。分子の「活性」はまた、細胞間相互作用、例えば接着を調節もしくは維持する活性、または細胞、例えば細胞膜もしくは細胞骨格の構造を維持する活性を指し得る。「活性」はまた、比活性、例えば、［触媒活性］／［ｍｇタンパク質］、または［免疫活性］／［ｍｇタンパク質］、生物学的区画中の濃度などを意味し得る。「活性」は、自然免疫系または適応免疫系の成分の調節を指し得る。

【0075】

「投与」および「処置」は、それが動物、例えばイヌもしくはネコの対象、細胞、組織、器官、または生物学的流体に適用される場合、外因性の医薬、治療、診断剤、または組成物と動物、例えばイヌもしくはネコの対象、細胞、組織、器官、または生物学的流体との接触を指す。細胞の処理は、細胞への試薬の接触、および流体が細胞と接触している流体への試薬の接触を包含する。

【0076】

「投与」および「処置」はまた、例えば、試薬、診断、結合化合物による、または別の細胞による細胞のインビトロおよびエクスビボ処置を意味する。「対象」という用語は、任意の生物、好ましくは動物、より好ましくは哺乳動物（例えば、イヌ、ネコまたはヒト）、最も好ましくはイヌまたはネコを含む。

【0077】

「処置する」または「処置」は、治療剤、例えば、本発明のＩｇＧ融合タンパク質タンパク質（例えば、イヌまたはネコＩｇＧ融合タンパク質）および／または抗体（例えば、イヌ化、ネコ化、イヌまたはネコ抗体）を含む組成物を、例えば、非ヒト対象、例えば、イヌもしくはネコ、または１つ以上の症状を有するイヌもしくはネコの患者、またはその薬剤が治療活性を有する状態を有すると疑われるイヌもしくはネコの患者に、内部的または外部的に投与することを意味する。典型的には、治療剤は、任意の臨床的に測定可能な程度まで（１もしくは複数の）そのような症状の退縮を誘導するかまたはその進行を阻害することによってであろうとなかろうと、処置された対象または集団における１つ以上の疾患／状態症状（例えば、アトピー性皮膚炎または癌）を緩和かつ／または改良するのに有効な量で投与される。任意の特定の疾患／状態症状を緩和するのに有効な治療剤の量（「治療有効量」とも称される）は、患者（例えば、イヌまたはネコ）の病状、年齢および体重、ならびに対象において所望の応答を誘発する医薬組成物の能力などの因子によって変動し得る。疾患／状態症状が緩和または改良されたかどうかは、その症状の重症度または進行状態を評価するために獣医または他の熟練したヘルスケア提供者によって、典型的に使用される任意の臨床測定によって評価することができる。本発明の実施形態（例えば、処置方法または製造品）は、すべての対象において（１または複数の）標的疾患／状態症状を緩和するのに有効ではないかもしれないが、それは、当技術分野で公知の任意の統計学的検定、例えば、スチューデントのｔ検定、カイ二乗検定、マン・ホイットニーによるＵ検定、クラスカル・ウォリス検定（Ｈ検定）、ヨンクヒール・タープストラ検定およびウィルコクソン検定によって決定されるように、統計学的に有意な数の対象において（１または複数の）標的疾患／状態症状を緩和するはずである。

【0078】

ヒト、獣医学的（例えば、イヌまたはネコ）または研究対象に適用される「処置」は、上に示されるように、治療的処置ならびに研究および診断用途を指し、例えばイヌ、ネコもしくは他の動物対象、細胞、組織、生理学的区画、または生理学的流体への本発明の抗体および／または融合タンパク質の接触を含む。

【0079】

本明細書で使用される場合、「中程度に酸性のｐＨ」は、ｐＨ５．５～ｐＨ６．５の範囲である。以下の実施例では、中程度に酸性のｐＨとしてｐＨ６．０を使用した。

【0080】

本明細書で使用される場合、「生理学的ｐＨ」は、ｐＨ７．２～ｐＨ７．６の範囲である。以下の実施例では、生理学的ｐＨとしてｐＨ７．４を使用した。

【0081】

本明細書で使用される場合、「イヌ」という用語は、特に明記しない限り、すべての家畜犬、カニスルプスファミリアス（Ｃａｎｉｓ ｌｕｐｕｓ ｆａｍｉｌｉａｒｉｓ）またはカニスファミリアス（Ｃａｎｉｓ ｆａｍｉｌｉａｒｉｓ）を含む。

【0082】

本明細書で使用される場合、「ネコ」という用語は、ネコ科の任意のメンバーを指す。このファミリーのメンバーには、イエネコ、純血および／または雑種コンパニオンキャット、ショーキャット、実験室キャット、クローンキャット、および野生または野生化したキャットを含む野生、動物園、および家庭のメンバーが含まれる。

【0083】

本明細書で使用される場合、「抗体」という用語は、所望の生物学的活性を呈する任意の形態の抗体を指す。抗体は、モノマー、二量体またはより大きな多量体であり得る。したがって、それは最も広い意味で使用され、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、およびラクダ化単一ドメイン抗体を具体的に包含するが、これらに限定されない。別途具体的に示される場合を除き、本発明の抗体は、ＩｇＧ抗体である。

【0084】

本明細書で使用される場合、「ＩｇＧ抗体」は、２つの重鎖および２つの軽鎖を含む免疫グロブリンＧ抗体である。本発明のＩｇＧ抗体には、イヌ化抗体、完全イヌ抗体、ネコ化抗体、完全ネコ抗体および対応するキメラ抗体が含まれる。

【0085】

「親抗体」は、イヌ治療用抗体として使用するための抗体のイヌ化などの意図された使用のための抗体の改変の前に免疫系を抗原に曝露することによって得られる抗体である。

【0086】

本明細書で使用される場合、例えば、イヌ受容体をその結合パートナー（例えば、そのリガンド）またはネコ受容体をその結合パートナー（例えば、そのリガンド）に対して「遮断する」もしくは「遮断している」またはイヌ受容体のその結合パートナー（例えば、そのリガンド）もしくはネコ受容体のその結合パートナー（例えば、そのリガンド）への「結合を遮断している」本発明の抗体は、標準的な結合アッセイ（例えば、ＢＩＡＣｏｒｅ（登録商標）、ＥＬＩＳＡまたはフローサイトメトリー）で決定されるように、リガンドとその受容体との結合およびその逆の結合を（部分的または完全に）遮断する抗体である。

【0087】

典型的には、本発明の抗体または抗原結合フラグメントは、その活性がモル基準で発現される場合、（親抗体と比較した場合）そのイヌまたはネコ抗原結合活性の少なくとも１０％を保持する。好ましくは、本発明の抗体または抗原結合フラグメントは、親抗体としてのイヌ抗原結合親和性の少なくとも２０％、５０％、７０％、８０％、９０％、９５％または１００％以上を保持する。本発明の抗体または抗原に結合するフラグメントは、その生物学的活性を実質的に変えない保存的または非保存的アミノ酸置換（抗体の「保存的変異体」または「機能保存された変異体」と称される）を含み得ることも意図される。

【0088】

「単離された抗体」は、精製状態を指し、そのような文脈では、分子が、核酸、タンパク質、脂質、炭水化物などの他の生物学的分子、または細胞残屑および増殖培地などの他の材料を実質的に含まないことを意味する。一般に、「単離された」という用語は、本明細書に記載の結合化合物の実験的または治療的使用を実質的に妨げる量で存在しない限り、そのような材料が完全に存在しないこと、または水、緩衝液もしくは塩が存在しないことを指すことを意図しない。

【0089】

本明細書で使用される場合、「キメラ抗体」は、第１の抗体由来の可変ドメインおよび第２の抗体由来の定常ドメインを有する抗体であり、第１および第２の抗体は、異なる種に由来する。［米国特許第４，８１６，５６７号明細書；およびＭｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：６８５１－６８５５（１９８４）］。典型的には、可変ドメインは、げっ歯類などの実験動物「親抗体」由来の抗体から得られ、定常ドメイン配列は、動物対象抗体、例えばイヌ、ネコまたはヒトから得られ、その結果、得られたキメラ抗体は、親（例えば、げっ歯類）抗体よりもイヌ、ネコまたはヒト対象においてそれぞれ有害な免疫応答を誘発する可能性が低くなる。

【0090】

各軽鎖／重鎖対の可変領域は、抗体結合部位を形成する。したがって、一般に、インタクトな抗体は、２つの結合部位を有する。二機能性抗体または二重特異性抗体を除いて、２つの結合部位は、一般に、同じである。

【0091】

典型的には、重鎖および軽鎖の両方の可変ドメインは、比較的保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）内に位置する、相補性決定領域（ＣＤＲ）とも呼ばれる３つの超可変領域を含む。ＣＤＲは通常、フレームワーク領域によってアラインメントされ、具体的なエピトープへの結合を可能にする。一般に、Ｎ末端からＣ末端に向かって、軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインの両方が、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３およびＦＲ４を含む。各ドメインへのアミノ酸の割り当ては、一般に、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｋａｂａｔ，ｅｔ ａｌ．；Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．；５ｔｈ ｅｄ．；ＮＩＨ Ｐｕｂｌ．Ｎｏ．９１－３２４２（１９９１）；Ｋａｂａｔ，Ａｄｖ．Ｐｒｏｔ．Ｃｈｅｍ．３２：１－７５（１９７８）；Ｋａｂａｔ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９－６６１６（１９７７）］に準拠している。

【0092】

本明細書で使用される場合、「超可変領域」という用語は、抗原結合に関与する抗体のアミノ酸残基を指す。超可変領域は、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」由来のアミノ酸残基を含む［すなわち、軽鎖可変ドメイン中のＣＤＲＬ１（またはＬＣＤＲ１）、ＣＤＲＬ２（またはＬＣＤＲ２）およびＣＤＲＬ３（またはＬＣＤＲ３）ならびに重鎖可変ドメイン中のＣＤＲＨ１（またはＨＣＤＲ１）、ＣＤＲＨ２（またはＨＣＤＲ２）およびＣＤＲＨ３（またはＨＣＤＲ３）］。［配列によって抗体のＣＤＲ領域を定義するＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）を参照されたい；抗体のＣＤＲ領域を構造によって定義するＣｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）も参照されたい］。

【0093】

本明細書で使用される場合、「フレームワーク」または「ＦＲ」残基という用語は、本明細書でＣＤＲ残基として定義される超可変領域残基以外の可変ドメイン残基を指す。

【0094】

「Ｆｃ」と省略され、「Ｆｃ領域」と互換的に使用される「フラグメント結晶化可能領域」は、Ｆｃ受容体と呼ばれる細胞表面受容体と相互作用する抗体のＣＨ２－ＣＨ３部分に対応する。

【0095】

本明細書で使用される場合、「野生型Ｆｃ」は、「野生型Ｆｃ領域」と互換的に使用され、Ｆｃ領域（例えば、ｃＦｃ領域またはｆＦｃ領域）、例えば野生型Ｆｃ領域を含む抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の半減期を増強させるために行われたいかなるアミノ酸置換も含まない天然に見出されたものである。以下に述べるように、抗体またはＩｇＧ融合タンパク質、例えばイヌＩｇＧ－Ｂｍ領域の抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を減少させるために行われた１つ以上のアミノ酸置換を含むＦｃ領域は、天然には見出されず、したがって野生型Ｆｃ領域ではない。しかしながら、そのようなＦｃ領域（例えば、イヌＩｇＧ－Ｂｍ Ｆｃ領域）を含む抗体またはＩｇＧ融合タンパク質は、イヌＩｇＧ－Ｂｍ領域を含む抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の半減期を増強させるために行われたアミノ酸置換の非存在下で、天然に見出された対応する野生型Ｆｃ領域を含む対応する抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質（すなわち、イヌＩｇＧ－Ｂ Ｆｃ領域）と同じ半減期を有するべきである。

【0096】

本明細書で使用される場合、「イヌフレーム」という用語は、本明細書でＣＤＲ残基として定義される超可変領域残基以外のイヌ抗体の重鎖および軽鎖のアミノ酸配列を指す。イヌ化抗体に関して、大部分の実施形態では、天然のイヌＣＤＲのアミノ酸配列は、両方の鎖において対応する外来ＣＤＲ（例えば、マウス、ラット、またはヒト由来のもの）で置き換えられる。イヌ抗体の重鎖および／または軽鎖は、例えば、下記に例示されるように、および／または、その全体が参照として本明細書に組み込まれる米国特許第１０，１０６，６０７ Ｂ２号明細書に開示されるように、イヌ抗体内の外来ＣＤＲのコンフォメーションを保存するために、かつ／または、Ｆｃ領域機能を改変するために、いくつかの外来非ＣＤＲ残基を含有していてもよい。本発明は、本発明の抗体の半減期を増強させるためのイヌフレームのＦｃ領域へのさらなるアミノ酸置換を提供する。

【0097】

本明細書で使用される場合、「ネコフレーム」という用語は、本明細書でＣＤＲ残基として定義される超可変領域残基以外のネコ抗体の重鎖および軽鎖のアミノ酸配列を指す。ネコ化抗体に関して、大部分の実施形態では、天然ネコＣＤＲのアミノ酸配列は、両方の鎖において対応する外来ＣＤＲ（例えば、マウス、ラット、またはヒト由来のもの）で置き換えられる。ネコ抗体の重鎖および／または軽鎖は、例えば、下記に例示されるように、かつ／または、その全体が参照として本明細書に組み込まれる米国特許第１０，１０６，６０７ Ｂ２号明細書においてイヌ化抗体で開示されるように、ネコ抗体内の外来ＣＤＲのコンフォメーションを保存するために、かつ／または、Ｆｃ領域機能を改変するために、いくつかの外来非ＣＤＲ残基を含有していてもよい。本発明は、本発明の抗体の半減期を増強させるための、ネコフレームのＦｃ領域へのさらなるアミノ酸置換を提供する。

【0098】

本明細書で使用される場合、「イヌフラグメント結晶化可能領域」は、「ｃＦｃ領域」または単に「ｃＦｃ」と互換的に省略され、イヌ抗体由来のイヌフラグメント結晶化可能領域に対応する。４つのイヌＩｇＧの各々のイヌフラグメント結晶化可能領域（ｃＦｃ）は、Ｔａｎｇ ｅｔ ａｌ．［Ｖｅｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．８０：２５９－２７０（２００１）；Ｂｅｒｇｅｒｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｖｅｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．１５７：３１－４１（２０１４）も参照されたい］によって最初に記載された。

【0099】

本明細書で使用される場合、「ネコフラグメント結晶化可能領域」は、「ｆＦｃ領域」または単に「ｆＦｃ」と互換的に省略され、ネコ抗体由来のネコフラグメント結晶化可能領域に対応する。３つのネコＩｇＧの各々のネコフラグメント結晶化可能領域（ｆＦｃ）は、［Ｓｔｒｉｅｔｚｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｖｅｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ＆Ｉｍｍｕｎｐａｔｈｏｌ．１５８：２１４－２２３（２０１４）］によって記載された。

【0100】

イヌＩｇＧの４つの公知のＩｇＧ重鎖サブタイプおよび２つの公知の軽鎖サブタイプが存在する。４つのＩｇＧ重鎖は、Ａ、Ｂ、ＣおよびＤと称される。これらの重鎖は、ＩｇＧ－Ａ（またはＩｇＧＡ）、ＩｇＧ－Ｂ（またはＩｇＧＢ）、ＩｇＧ－Ｃ（またはＩｇＧＣ）およびＩｇＧ－Ｄ（またはＩｇＧＤ）と称される犬ＩｇＧの４つの異なるサブクラスを表す。各重鎖は、１つの可変ドメイン（ＶＨ）、ならびにＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３と称される３つの定常ドメインからなる。ＣＨ１ドメインは、「ヒンジ」または代替では「ヒンジ領域」と称されるアミノ酸配列を介してＣＨ２ドメインに接続している。これらの４つの重鎖ＩｇＧのＤＮＡおよびアミノ酸配列は、Ｔａｎｇ ｅｔ ａｌ．［Ｖｅｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．８０：２５９－２７０（２００１）］によって最初に同定された。これらの重鎖ＩｇＧのアミノ酸およびＤＮＡ配列は、ＧｅｎＢａｎｋデータベースからも入手可能である。例えば、ＩｇＧ－Ａ重鎖のアミノ酸配列は、アクセッション番号ＡＡＬ３５３０１．１を有し、ＩｇＧ－Ｂは、アクセッション番号ＡＡＬ３５３０２．１を有し、ＩｇＧ－Ｃは、アクセッション番号ＡＡＬ３５３０３．１を有し、ＩｇＧ－Ｄは、アクセッション番号（ＡＡＬ３５３０４．１）を有する。イヌ抗体はまた、２種類の軽鎖、カッパおよびラムダを含有する。これらの軽鎖のＤＮＡおよびアミノ酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋデータベースから入手することができる。例えば、カッパ軽鎖アミノ酸配列は、アクセッション番号ＡＢＹ ５７２８９．１を有し、ラムダ軽鎖は、アクセッション番号ＡＢＹ ５５５６９．１を有する。

【0101】

ネコＩｇＧサブクラスの定常領域およびそれらのヒンジ領域が記載されている［Ｓｔｒｉｅｔｚｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｖｅｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ＆Ｉｍｍｕｎｐａｔｈｏｌ．，１５８：２１４－２２３（２０１４）］。ネコ重鎖定常領域のアミノ酸配列は、Ｇｅｎｂａｎｋデータベース［ＩｇＧ１ａアクセッション番号ＢＡＡ３２２２９．１、ＩｇＧ１ｂアクセッション番号ＢＡＡ３２２３０．１およびＩｇＧ２アクセッション番号ＡＨＨ３４１６５．１］から入手可能である。ＩｇＧ１ａおよびＩｇＧ１ｂは、対立遺伝子変異体であるようであり、両方ともヒトＣ１ｑに強く結合し、これは補体を活性化できる可能性があることを示唆している。対照的に、ネコＩｇＧ２は、特にヒンジ領域において分岐配列を有し、Ｃ１ｑへの結合は無視できる。

【0102】

本明細書で使用される場合、例えば抗体のアミノ酸配列中の別のアミノ酸残基による「アミノ酸残基の置換」は、別のアミノ酸残基による「アミノ酸残基の置き換え」と等価であり、アミノ酸配列中の具体的な位置の特定のアミノ酸残基が、例えば組換えＤＮＡ技術によって異なるアミノ酸残基によって置き換えられている（または置換されている）ことを示す。そのような置換は、特に設計することができ、すなわち、ＫａｂａｔのようにＥＵインデックスに従ってナンバリングされた、Ｆｃ領域のアミノ酸配列の具体的な位置、例えば位置４３４においてアスパラギン（Ｎ）をフェニルアラニン（Ｆ）で意図的に置き換えることができる。アミノ酸置換は、例えば、所与の抗体もしくはＩｇＧ融合タンパク質の半減期を増加させるために、かつ／または後述するように、抗体もしくはＩｇＧ融合タンパク質の抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を減少させるために行うことができる。

【0103】

Ｆｃ領域が、そのアイソタイプもしくはサブタイプ（例えば、ＩｇＧ－Ｂ）によって、またはそのような置換の非存在下で特定のアミノ酸配列を含む（例えば、配列番号２のアミノ酸配列を含むｃＦｃ）か、またはそのような置換の非存在下で特定のアミノ酸配列とパーセント同一性を有する（すなわち、配列番号２のアミノ酸配列と９０％の同一性を含むｃＦｃ）ことによって同定される、１つ以上のアミノ酸置換を含有する、例えば、ＫａｂａｔのようにＥＵインデックスに従ってナンバリングされる、位置２５２、２５４、２５６、３０８、４３３、４３４、４３６、またはそれらの任意の組み合わせにおけるＦｃ領域（例えば、ｆＦｃまたはｃＦｃ）を含む本発明の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質とは、本明細書で使用される場合、抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質が、ＩｇＧ－Ｂ Ｆｃ領域、配列番号２のアミノ酸配列を含むｃＦｃ、または配列番号２のアミノ酸配列と９０％の同一性を含むｃＦｃを含むことを意味し、それぞれ、それらの１つ以上のアミノ酸置換を具体的に含有する。冗長ではあるが、これは、Ｆｃ領域（例えば、ｆＦｃまたはｃＦｃ）が「前記１つ以上のアミノ酸置換を保持する」という記述によって補強することができる。したがって、抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のＦｃ領域が１つ以上のアミノ酸置換を含み、例えばＩｇＧ－Ｂ Ｆｃ領域を含むものとして同定される場合、ＩｇＧ－Ｂ Ｆｃ領域のアミノ酸配列がそれらの１つ以上のアミノ酸置換を含むと理解される。同様に、抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のＦｃ領域が１つ以上のアミノ酸置換を含み、例えば配列番号２のアミノ酸配列を含むものとして同定される場合、Ｆｃ領域がそれらの１つ以上のアミノ酸置換を含む配列番号２のアミノ酸配列を含むと理解される。加えて、抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のＦｃ領域が１つ以上のアミノ酸置換を含み、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有すると同定される場合、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列が、それらの１つ以上のアミノ酸置換を保持し、アミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性が、配列の残りのアミノ酸位置における置き換え／置換に関するものであると理解される。

【0104】

本明細書で使用される場合、イヌＦｃ（ｃＦｃ）「ＩｇＧ－Ｂｍ」は、配列番号４のアミノ酸配列を含み、これは、イヌＩｇＧ－Ｂ Ｆｃのアミノ酸配列であるが、ＩｇＧ－Ｂの配列番号３のアミノ酸配列中に２つのアミノ酸残基置換、Ｄ３１ＡおよびＮ６３Ａを含む（下記を参照されたい）。したがって、配列番号３の位置３１のアスパラギン酸残基（Ｄ）および配列番号３の位置６３のアスパラギン残基（Ｎ）は、いずれもＩｇＧ－Ｂｍのアミノ酸配列、すなわち配列番号４におけるアラニン残基（Ａ）に置換されている。これらの２つのアミノ酸残基置換は、天然に存在するイヌＩｇＧ－Ｂの抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を有意に減少させる働きをする［その内容全体が参照として本明細書に組み込まれる米国特許第１０，１０６，６０７号明細書を参照されたい］。以下でＩｇＧ－Ａｍ、ＩｇＧ－Ｃｍ、およびＩｇＧ－Ｄｍとして示されるＩｇＧ－Ａ、ＩｇＧ－Ｃ、およびＩｇＧ－Ｄ Ｆｃ領域において類似の置換を行うことができる。加えて、ネコＦｃ領域、ＩｇＧ１ａ、ＩｇＧ１ｂ、およびＩｇＧ２のアミノ酸配列にける類似の変化も以下の実施例に提供され、そのような改変はそれぞれ「ＩｇＧ１ａｍ」、「ＩｇＧ１ａｍ」、または「ＩｇＧ２ｂｍ」と示される。

【0105】

本明細書で使用される場合、イヌインターロイキン－１３受容体アルファ１またはイヌインターロイキン－１３受容体アルファ２などの膜貫通タンパク質の「細胞外ドメイン」または「ＥＣＤ」は、細胞を取り囲む環境に自然に突出する膜貫通タンパク質の部分を指す。ＥＣＤは、膜貫通タンパク質の膜貫通部分を含まない。イヌインターロイキン－１３受容体アルファ１およびイヌインターロイキン－１３受容体アルファ２のＥＣＤは、両方ともイヌＩＬ－１３に結合する。

【0106】

本明細書で使用される場合、「人工タンパク質」および「人工タンパク質分子」は、互換的に使用され、人造融合タンパク質などの本来は天然には存在しないタンパク質（またはタンパク質の多量体、例えば二量体、ヘテロ二量体、四量体およびヘテロ四量体など）を示す。

【0107】

本明細書で使用される場合、「融合タンパク質」は、ペプチド結合によって互いに結合された２つ以上の異なるタンパク質由来のアミノ酸配列を含む人工タンパク質である。

【0108】

本明細書で使用される場合、「Ｆｃ融合タンパク質」は、「ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質」という用語と互換的に使用され、ヒンジ領域、例えばイヌＩｇＧ－Ｂヒンジ領域－ＣＨ２－ＣＨ３またはネコＩｇＧ１ａヒンジ領域－ＣＨ２－ＣＨ３をさらに含むことができるＩｇＧ抗体のＦｃ領域を別の生物学的に活性なタンパク質ドメインと結合させて、固有の構造および治療上の有用性を有する分子を生成する人工タンパク質である。

【0109】

本明細書で使用される場合、「ｃＦｃ融合タンパク質」は、「イヌＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質」という用語と互換的に使用され、ヒンジ領域、例えばＩｇＧ－Ｂヒンジ領域－ＣＨ２－ＣＨ３を含み得るイヌＩｇＧ抗体のｃＦｃを別の生物学的に活性なタンパク質ドメインと結合させて、固有の構造および治療上の有用性を有する分子を生成する人工タンパク質である。例えば、イヌＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質（ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質）は、イヌＩｇＧ Ｆｃ（ｃＦｃ）のＮ末端に連結されたイヌＩＬ－１３Ｒα２の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）を含む。ＩＬ－１３Ｒα２のＥＣＤは、イヌヒンジ領域によってｃＦｃのＮ末端に連結され得る。本発明のｃＦｃ融合タンパク質は、ＩｇＧＢヒンジ領域およびＩｇＧＢ ｃＦｃの使用によって例示されるが、決してそのように限定されず、むしろ、それらは、ＩｇＧＡ、ＩｇＧＣおよびＩｇＧＤのｃＦｃを有し、ＩｇＧＡ、ＩｇＧＣおよびＩｇＧＤのヒンジ領域を有していてもよい対応する融合タンパク質を含む。したがって、イヌＦｃ融合タンパク質ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃは、ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ属のうちの１つの種であり、これはｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＡ－Ｆｃ、ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＣ－Ｆｃ、ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＤ－Ｆｃ、およびそれらの改変された融合タンパク質も含む。

【0110】

本明細書で使用される場合、「イヌインターロイキン－１３受容体アルファ１－イヌフラグメント結晶化可能領域融合タンパク質」、「イヌインターロイキン－１３受容体アルファ１－ｃＦｃ融合タンパク質」、「イヌＩＬ－１３Ｒα１－ｃＦｃ融合タンパク質」、または「ｃＩＬ－１３Ｒα１－ｃＦｃ融合タンパク質」はすべて互換的に使用され、ペプチド結合を介してイヌＩｇＧ Ｆｃ（ｃＦｃ）に接続したｃＩＬ－１３Ｒα１の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）［またはイヌインターロイキン－１３（ｃＩＬ－１３）に結合するＥＣＤのフラグメント］を含む。特定の実施形態では、ｃＩＬ－１３Ｒα１－ｃＦｃ融合タンパク質は、ｃＩＬ－１３Ｒα１のＥＣＤ（またはｃＩＬ－１３に結合するＥＣＤのフラグメント）をｃＦｃに連結するイヌヒンジ領域をさらに含む。ｃＩＬ－１３Ｒα１－ｃＦｃ融合タンパク質は、遺伝子工学によってｃＦｃ（連結ヒンジ領域の有無にかかわらず）と共にｃＩＬ－１３Ｒα１ ＥＣＤ（またはｃＩＬ－１３に結合するＥＣＤのフラグメント）をコードする化学合成核酸から生成することができる。

【0111】

本明細書で使用される場合、「イヌインターロイキン－１３受容体アルファ２－イヌフラグメント結晶化可能領域融合タンパク質」、「イヌインターロイキン－１３受容体アルファ２－ｃＦｃ融合タンパク質」、「イヌＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質」または「ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質」はすべて互換的に使用され、ペプチド結合を介してイヌＩｇＧ Ｆｃ（ｃＦｃ）に接続したｃＩＬ－１３Ｒα２の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）［またはイヌインターロイキン－１３（ｃＩＬ－１３）に結合するＥＣＤのフラグメント］を含む。特定の実施形態では、ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質は、ｃＩＬ－１３Ｒα２のＥＣＤ（またはｃＩＬ－１３に結合するＥＣＤのフラグメント）をｃＦｃに連結するイヌヒンジ領域をさらに含む。ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質は、遺伝子操作によってｃＦｃ（連結ヒンジ領域の有無にかかわらず）と共にｃＩＬ－１３Ｒα２ ＥＣＤ（またはｃＩＬ－１３に結合するＥＣＤのフラグメント）をコードする化学合成核酸から生成することができる。

【0112】

本明細書で使用される場合、「ｃＩＬ－１３に結合するｃＩＬ－１３Ｒα２のＥＣＤのフラグメント」（または互換的に、ｃＩＬ－１３に結合するｃＩＬ－１３Ｒα２のＥＣＤの「そのフラグメント」）を含むｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質は、全長ＥＣＤを含む対応するｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質の結合親和性よりも最大で１００倍低いｃＩＬ－１３に対する結合親和性を有する、すなわち、解離定数は、最大で１０^２倍高い。ある特定の実施形態では、ｃＩＬ－１３に結合するｃＩＬ－１３Ｒα２のＥＣＤのフラグメントを含むｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質は、全長ＥＣＤを含む対応するｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質の結合親和性よりも最大で１０倍低いｃＩＬ－１３に対する結合親和性を有する、すなわち、解離定数は、最大で１０倍高い。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－１３に結合するｃＩＬ－１３Ｒα２のＥＣＤのフラグメントを含むｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質は、全長ＥＣＤを含む対応するｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質の結合親和性よりも最大で５倍低いｃＩＬ－１３に対する結合親和性を有する、すなわち、解離定数は、最大で５倍高い。

【0113】

本明細書で使用される場合、「ｃＩＬ－１３に結合するｃＩＬ－１３Ｒα１のＥＣＤのフラグメント」（または互換的に、ｃＩＬ－１３に結合するｃＩＬ－１３Ｒα１のＥＣＤの「そのフラグメント」）を含むｃＩＬ－１３Ｒα１－ｃＦｃ融合タンパク質は、全長ＥＣＤを含む対応するｃＩＬ－１３Ｒα１－ｃＦｃ融合タンパク質の結合親和性よりも最大で１００倍低いｃＩＬ－１３に対する結合親和性を有する、すなわち、解離定数は、最大で１０^２倍高い。ある特定の実施形態では、ｃＩＬ－１３に結合するｃＩＬ－１３Ｒα１のＥＣＤのフラグメントを含むｃＩＬ－１３Ｒα１－ｃＦｃ融合タンパク質は、全長ＥＣＤを含む対応するｃＩＬ－１３Ｒα１－ｃＦｃ融合タンパク質の結合親和性よりも最大で１０倍低いｃＩＬ－１３に対する結合親和性を有する、すなわち、解離定数は、最大で１０倍高い。なお他の実施形態では、ｃＩＬ－１３に結合するｃＩＬ－１３Ｒα１のＥＣＤのフラグメントを含むｃＩＬ－１３Ｒα１－ｃＦｃ融合タンパク質は、全長ＥＣＤを含む対応するｃＩＬ－１３Ｒα１－ｃＦｃ融合タンパク質の結合親和性よりも最大で５倍低いｃＩＬ－１３に対する結合親和性を有する、すなわち、解離定数は、最大で５倍高い。

【0114】

本明細書で使用される場合、本発明のイヌインターロイキン受容体－ｃＦｃ融合タンパク質の「ホモ二量体」は、同じＥＣＤ（または対応するリガンドに結合するそのＥＣＤのフラグメント）を最小限に有する２つの単量体融合タンパク質の二量体である。２つの単量体融合タンパク質はまた、一般に、同じｃＦｃおよび同じヒンジ領域を有する。例えば、イヌインターロイキン受容体－ｃＦｃ融合タンパク質がｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質である場合、ＥＣＤは、ｃＩＬ－１３Ｒα２ ＥＣＤであり、リガンドは、ｃＩＬ－１３である。ホモ二量体の２つのモノマーは、各モノマーのヒンジ領域内のシステイン残基によって形成されたジスルフィド結合によって一緒に保持される。例えば、ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質のホモ二量体は、２つのｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質モノマーを含み、ｃＩＬ－１３Ｒα１－ｃＦｃ融合タンパク質のホモ二量体は、２つのｃＩＬ－１３Ｒα１－ｃＦｃ融合タンパク質モノマーを含む。

【0115】

本明細書で使用される場合、本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、本発明の抗体、および／または抗体の抗原結合フラグメントは、ある結合パートナーを別の結合パートナー（例えば、そのリガンドに対する受容体）に対して「遮断する」もしくは「遮断している」、またはある結合パートナーの別の結合パートナー（例えば、そのリガンドに対する受容体）への「結合を遮断している」。２つの結合パートナー、例えば受容体とそのリガンドとの結合、およびその逆の結合を（部分的または完全に）遮断する抗体および／または融合タンパク質は、標準的な結合アッセイ（例えば、ＢＩＡＣｏｒｅ（登録商標）、ＥＬＩＳＡまたはフローサイトメトリー）で決定することができる。

【0116】

本明細書で使用される場合、「イヌ化抗体」という用語は、イヌおよび非イヌ（例えば、マウス、ラット、またはヒト）ＩｇＧ抗体の両方に由来するアミノ酸配列を含有するＩｇＧ抗体の形態を指し、一方、本明細書で使用される場合、「ネコ化抗体」という用語は、ネコおよび非ネコ（例えば、マウス、ラット、またはヒト）ＩｇＧ抗体の両方に由来するアミノ酸配列を含有するＩｇＧ抗体の形態を指す。一般に、イヌ化抗体またはネコ化抗体は、少なくとも１つ以上の典型的には２つの可変ドメインの実質的にすべてを含み、超可変ループのすべてまたは実質的にすべてがそれぞれ非イヌまたは非ネコ免疫グロブリンのものに対応し（例えば、以下に例示されるような６つのＣＤＲを含む）、フレームワーク（ＦＲ）領域のすべてまたは実質的にすべて（および典型的には残りのフレームのすべてまたは実質的にすべて）がそれぞれイヌ免疫グロブリンまたはネコ免疫グロブリン配列のものである。改変されたイヌフレームは、例えば、イヌ抗原へのその結合および／またはイヌ抗原の天然結合パートナーへのそのイヌ抗原の結合を遮断するその能力を増加させるために、イヌ化抗体の有効性をさらに最適化する、本明細書に例示される１つ以上のアミノ酸変化を含む。以下に例示されるように、イヌ化抗体は、マウス抗イヌ抗原抗体由来の３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲの両方を、改変されたイヌフレームと共に含む。以下に詳述するように、イヌ化抗体のｃＦｃは、イヌ化抗体のより長い半減期をもたらす、すなわち、ｐＨ５．５～ｐＨ６．５でその新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対する結合親和性の増加を有するアミノ酸置換も含み得る。

【0117】

同様に、ネコ化抗体は、例えばマウス、ラット、またはヒト由来の３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲの両方を、ネコフレームまたはより一般的には改変されたネコフレームと共に含むことができる。改変されたネコフレームは、例えばネコ抗原へのその結合および／またはネコ抗原の天然結合パートナーへのそのネコ抗原の結合を遮断するその能力を増加させるために、ネコ化抗体の有効性をさらに最適化する１つ以上のアミノ酸変化を含む。同様に、ネコ抗体のｆＦｃは、ネコ抗体のより長い半減期をもたらす、すなわち、ｐＨ５．５～ｐＨ６．５でその新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対する結合親和性が増加したアミノ酸置換も含み得る。

【0118】

本明細書で使用される場合、「ｆＦｃ融合タンパク質」は、「ネコＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質」という用語と互換的に使用され、ヒンジ領域、例えばＩｇＧ－１ａヒンジ領域－ＣＨ２－ＣＨ３を含むことができるネコＩｇＧ抗体のｆＦｃを別の生物学的に活性なタンパク質ドメインと結合させて、固有の構造および治療上の有用性を有する分子を生成する人工タンパク質である。

【0119】

イヌインターロイキン－３１（ｃＩＬ－３１）またはイヌインターロイキン－３１受容体アルファ（ｃＩＬ－３１ＲＡまたはｃＩＬ－３１Ｒα）に結合するイヌ化マウスまたはラット抗イヌ抗体には、イヌＩｇＧＡ、ＩｇＧＢ、ＩｇＧＣまたはＩｇＧＤ重鎖、および本明細書に開示される改変されたＦｃを含むイヌＩｇＧＡ、ＩｇＧＢ、ＩｇＧＣまたはＩｇＧＤ重鎖の改変された形態を含む本発明で使用するための抗体、特にｐＨ５．５～ｐＨ６．５でその新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対して増加した結合親和性も示すイヌ化抗体が含まれるが、これらに限定されない。

【0120】

本明細書で使用される場合、「イヌインターロイキン－３１受容体アルファに対するイヌ化抗体」という用語は、「イヌ化ｃＩＬ－３１ＲＡ抗体」および「ｃＩＬ－３１ＲＡイヌ化抗体」と互換的に使用され、ｃＩＬ－３１ＲＡに対して非イヌ哺乳動物（例えば、マウスまたはラット）で産生された哺乳動物抗体のイヌ化抗体である。

【0121】

典型的には、本発明の抗体または抗体の抗原結合フラグメントは、その活性がモル基準で発現される場合、その抗原結合活性の少なくとも１０％（親抗体と比較した場合）を保持する。好ましくは、本発明の抗体または抗原結合フラグメントは、親抗体としての抗原結合親和性の少なくとも２０％、５０％、７０％、８０％、９０％、９５％または１００％以上を保持する。本発明の抗体または抗体の抗原結合フラグメントは、その生物学的活性を実質的に変えない保存的または非保存的アミノ酸置換（抗体の「保存的変異体」または「機能保存された変異体」と称される）を含み得ることも意図される。

【0122】

本明細書で使用される場合、「鎮痒剤」は、掻痒を阻害、軽減、および／または防止する傾向がある化合物、高分子、および／または製剤である。鎮痒剤は、口語的に抗掻痒薬と称される。

【0123】

本明細書で使用される場合、「鎮痒抗体」は、特にアトピー性皮膚炎に関して、ヒト、イヌおよび／またはネコなどの哺乳動物を含む動物において鎮痒剤として作用することができる抗体である。特定の実施形態では、鎮痒抗体は、ＩＬ－３１またはその受容体ＩＬ－３１ＲＡなどのＩＬ－３１シグナル伝達経路の特定のタンパク質に結合する。鎮痒抗体のその対応する抗原（例えば、ＩＬ－３１またはＩＬ－３１ＲＡ）への結合は、例えばＩＬ－３１とＩＬ－３１ＲＡとの結合を阻害し、この経路の成功したシグナル伝達を妨害および／または防止し、それによって、さもなければＩＬ－３１シグナル伝達経路によって引き起こされる掻痒を阻害、軽減および／または防止する。

【0124】

本明細書で使用される場合、「抗炎症剤」は、炎症を引き起こす体内のある特定の物質の相互作用を遮断することによって炎症を低減する化合物、高分子、および／または製剤である。抗炎症剤は、特にアトピー性皮膚炎に関して、ヒト、イヌおよび／またはネコなどの哺乳動物を含む動物において抗炎症剤として作用することができるｃＦｃ融合タンパク質であり得る。特定の実施形態では、抗炎症性ｃＦｃ融合タンパク質は、ＩＬ－４またはＩＬ－１３などのＩＬ－４／ＩＬ－１３シグナル伝達経路中の特定のタンパク質に結合する。抗炎症性ｃＦｃ融合タンパク質のその対応する抗原（例えば、ＩＬ－４）への結合は、例えばＩＬ－４とＩＬ－４Ｒαとの結合を阻害し、この経路のシグナル伝達を妨害および／または防止し、それによってアトピー性皮膚炎に関連する慢性炎症を妨害または防止する。ｃＩＬ－４Ｒα－ｃＦｃ融合タンパク質のホモ二量体とｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質のホモ二量体との組み合わせは、アトピー性皮膚炎の処置において抗炎症剤として作用する。

【0125】

「単離された核酸分子」は、単離されたポリヌクレオチドが自然界で見出されるか、または自然界では連結されていないポリヌクレオチドに連結されているポリヌクレオチドのすべてまたは一部に関連しない、ゲノム、ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡもしくは合成起源またはそれらのいくつかの組み合わせのＤＮＡまたはＲＮＡを意味する。本開示の目的のために、特定のヌクレオチド配列「を含む核酸分子」は、インタクトな染色体を包含しないことを理解されたい。指定された核酸配列「を含む」単離された核酸分子は、指定された配列に加えて、最大１０またはさらには最大２０以上の他のタンパク質またはその一部もしくはフラグメントのコード配列を含み得るか、または列挙された核酸配列のコード領域の発現を制御する作動可能に連結された調節配列を含み得るか、かつ／またはベクター配列を含み得る。

【0126】

「制御シーケンス」という語句は、特定の宿主生物における作動可能に連結されたコード配列の発現に必要なＤＮＡ配列を指す。原核生物に適した制御配列には、例えば、プロモーターが含まれ、オペレーター配列、およびリボソーム結合部位が含まれていてもよい。真核細胞は、プロモーター、ポリアデニル化シグナル、およびエンハンサーを使用することが公知である。

【0127】

核酸は、別の核酸配列と機能的関係にある場合、「作動可能に連結される」。例えば、プレ配列または分泌リーダーのためのＤＮＡは、ポリペプチドの分泌に関与するプレタンパク質として発現される場合、ポリペプチドのためのＤＮＡに作動可能に連結され；プロモーターまたはエンハンサーは、配列の転写に影響を及ぼす場合、コード配列に作動可能に連結され；またはリボソーム結合部位は、翻訳を促進するように配置されている場合、コード配列に作動可能に連結されている。一般に、「作動可能に連結される」とは、連結されているＤＮＡ配列が連続していることを意味し、分泌リーダーの場合、連続しており、読み取り段階にあることを意味する。しかしながら、エンハンサーは、連続している必要はない。連結は、好都合な制限部位でのライゲーションによって達成される。そのような部位が存在しない場合、合成オリゴヌクレオチドアダプターまたはリンカーが従来の慣例に準拠して使用される。

【0128】

本明細書で使用される場合、「細胞」、「細胞株」および「細胞培養」という表現は、互換的に使用され、そのような呼称はすべて子孫を含む。したがって、「形質転換体」および「形質転換細胞」という単語は、移入の回数にかかわらず、初代対象細胞およびそれに由来する培養物を含む。意図的または不注意な突然変異のために、すべての子孫が正確に同一のＤＮＡ含有量を有するわけではないことも理解される。最初に形質転換された細胞においてスクリーニングされたものと同じ機能または生物学的活性を有する突然変異子孫が含まれる。明確な指定が意図されている場合、それは文脈から明らかであろう。

【0129】

配列同一性は、２つの配列が最適にアラインメントされたときに、２つのポリペプチドのアミノ酸が等価な位置で同じである程度を指す。本明細書で使用される場合、両方の配列のアミノ酸残基が同一である場合、１つのアミノ酸配列は、第２のアミノ酸配列に対して１００％「同一」である。したがって、２つのアミノ酸配列のアミノ酸残基の５０％が同一である場合、アミノ酸配列は、第２のアミノ酸配列に対して５０％「同一」である。配列比較は、所与のタンパク質、例えば比較されるタンパク質、またはポリペプチドの一部に含まれるアミノ酸残基の連続ブロックにわたって実行される。特定の実施形態では、そうでなければ２つのアミノ酸配列間の対応関係を変え得る選択された欠失または挿入が考慮される。

【0130】

配列類似性には、同一の残基および同一でない生化学的に関連するアミノ酸が含まれる。同様の特性を共有し、かつ交換可能であり得る生化学的に関連するアミノ酸。

【0131】

「保存的に改変された変異体」または「保存的置換」は、タンパク質の生物学的活性を変えることなく変化が頻繁に起こり得るような、同様の特性（例えば、電荷、側鎖サイズ、疎水性／親水性、主鎖コンフォメーションおよび剛性など）を有する他のアミノ酸によるタンパク質中のアミノ酸の置換を指す。当業者は、一般に、ポリペプチドの非必須領域における単一アミノ酸置換が生物学的活性を実質的に変えないことを認識している［例えば、Ｗａｔｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｇｅｎｅ，Ｔｈｅ Ｂｅｎｊａｍｉｎ／Ｃｕｍｍｉｎｇｓ Ｐｕｂ．Ｃｏ．，ｐ．２２４（４ｔｈ Ｅｄ．；１９８７）を参照されたい］。加えて、構造的または機能的に同様のアミノ酸の置換は、生物学的活性を破壊する可能性が低い。例示的な保存的置換をすぐ下の表Ａに示す。

【表1】

本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の機能保存的変異体もまた、本発明によって企図される。本明細書で使用される「機能保存的変異体」は、所望の特性、そのような抗原親和性および／または特異性を変えることなく１つ以上のアミノ酸残基が変化したＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質または抗体を指す。そのような変異体には、上記の表Ａの保存的アミノ酸置換などの同様の特性を有するものでのアミノ酸の置き換えが含まれるが、これらに限定されない。

【0132】

核酸
本発明は、本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体および抗体の抗原結合フラグメント、ならびに抗体のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体および抗原結合フラグメントを含む組成物を含む（例えば、以下の実施例を参照されたい）。

【0133】

比較がＢＬＡＳＴアルゴリズムによって実行される場合、本明細書に提供されるイヌ化抗体のアミノ酸配列と少なくとも約７０％同一、好ましくは少なくとも約８０％同一、より好ましくは少なくとも約９０％同一、最も好ましくは少なくとも約９５％同一（例えば、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）であるアミノ酸配列を含む、本発明によって提供されるＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体、および抗体の抗原結合フラグメントをコードする核酸も本発明に含まれ、アルゴリズムのパラメータは、それぞれの参照配列の全長にわたってそれぞれの配列の間に正確な一致を与えるように選択され、すなわち、９５％同一とは、２つの配列中のアミノ酸の９５％が同一であることを意味する。本発明は、比較がＢＬＡＳＴアルゴリズムによって実行される場合、参照核酸配列のいずれかと少なくとも約７０％同一、好ましくは少なくとも約８０％同一、より好ましくは少なくとも約９０％同一、最も好ましくは少なくとも約９５％同一（例えば、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）である核酸配列を含む融合タンパク質および／または免疫グロブリンポリペプチドをコードする核酸をさらに提供し、アルゴリズムのパラメータは、それぞれの参照配列の全長にわたってそれぞれのヌクレオチド配列間で正確な一致を与えるように選択され、すなわち、少なくとも９８％同一とは、２つの核酸配列中のヌクレオチドの少なくとも９８％が同一であることを意味し、本発明にも含まれる。

【0134】

本明細書で使用される場合、ヌクレオチドおよびアミノ酸の配列同一性パーセントは、アラインメントデフォルトパラメータおよび同一性のデフォルトパラメータを用いて、Ｃ，ＭａｃＶｅｃｔｏｒ（ＭａｃＶｅｃｔｏｒ，Ｉｎｃ．Ｃａｒｙ，ＮＣ ２７５１９），Ｖｅｃｔｏｒ ＮＴＩ（Ｉｎｆｏｒｍａｘ，Ｉｎｃ．ＭＤ），Ｏｘｆｏｒｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｒｏｕｐ ＰＬＣ（１９９６）およびＣｌｕｓｔａｌＷアルゴリズムを使用して決定することができる。これらの市販のプログラムを使用して、同じまたは類似のデフォルトパラメータを使用して配列類似性を決定することもできる。あるいは、例えば、デフォルトパラメータを使用するＧＣＧ（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ，Ｐｒｏｇｒａｍ Ｍａｎｕａｌ ｆｏｒ ｔｈｅ ＧＣＧ Ｐａｃｋａｇｅ，Ｖｅｒｓｉｏｎ ７，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ）パイルアッププログラムを使用して、デフォルトフィルタ条件下で高度なＢｌａｓｔ検索を使用することができる。

【0135】

以下の参考文献は、配列分析にしばしば使用されるＢＬＡＳＴアルゴリズムに関する：ＢＬＡＳＴアルゴリズム：Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－４１０（１９９０）；Ｇｉｓｈ，Ｗ．，ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔ．３：２６６－２７２（１９９３）；Ｍａｄｄｅｎ，Ｔ．Ｌ．，ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２６６：１３１－１４１（１９９６）；Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．，ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２５：３３８９－３４０２（１９９７）；Ｚｈａｎｇ，Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓ．７：６４９－６５６（１９９７）；Ｗｏｏｔｔｏｎ，Ｊ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｃｏｍｐｕｔ．Ｃｈｅｍ．１７：１４９－１６３（１９９３）；Ｈａｎｃｏｃｋ，Ｊ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．１０：６７－７０（１９９４）；アラインメントスコアリングシステム：Ｄａｙｈｏｆｆ，Ｍ．Ｏ．，ｅｔ ａｌ．，「Ａ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ｃｈａｎｇｅ ｉｎ ｐｒｏｔｅｉｎｓ．」Ａｔｌａｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｖｏｌ．５，ｓｕｐｐｌ．３．Ｍ．Ｏ．Ｄａｙｈｏｆｆ（ｅｄ．），ｐｐ．３４５－３５２，（１９７８）；Ｎａｔｌ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｆｏｕｎｄ．，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ；Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ｒ．Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，「Ｍａｔｒｉｃｅｓ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｄｉｓｔａｎｔ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ．」Ａｔｌａｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｖｏｌ．５，ｓｕｐｐｌ．３．”（１９７８），Ｍ．Ｏ．Ｄａｙｈｏｆｆ（ｅｄ．），ｐｐ．３５３－３５８（１９７８），Ｎａｔｌ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｆｏｕｎｄ．，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ；Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１９：５５５－５６５（１９９１）；Ｓｔａｔｅｓ，Ｄ．Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ３：６６－７０（１９９１）；Ｈｅｎｉｋｏｆｆ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：１０９１５－１０９１９（１９９２）；Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｅｖｏｌ．３６：２９０－３００（１９９３）；アラインメント統計：Ｋａｒｌｉｎ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８７：２２６４－２２６８（１９９０）；Ｋａｒｌｉｎ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：５８７３－５８７７（１９９３）；Ｄｅｍｂｏ，Ａ．，ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｐｒｏｂ．２２：２０２２－２０３９（１９９４）；およびＡｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．「Ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｌｏｃａｌ ａｌｉｇｎｍｅｎｔｓ．」Ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ａｎｄ Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（Ｓ．Ｓｕｈａｉ，ｅｄ．），ｐｐ．１－１４，Ｐｌｅｎｕｍ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９９７）。

【0136】

本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体および抗体の抗原結合フラグメントは、当技術分野で公知の方法によって組換え生産することができる。本明細書に開示される抗体またはフラグメントの発現のための宿主として利用可能な哺乳動物細胞株は、当技術分野で周知であり、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から入手可能な多くの不死化細胞株を含む。これらには、とりわけ、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＮＳＯ、ＳＰ２細胞、ＨｅＬａ細胞、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、サル腎臓細胞（ＣＯＳ）、ヒト肝細胞癌細胞（例えば、Ｈｅｐ Ｇ２）、Ａ５４９細胞、３Ｔ３細胞、ＨＥＫ－２９３細胞およびいくつかの他の細胞株が含まれる。哺乳動物宿主細胞には、ヒト、マウス、ラット、犬、サル、ブタ、ヤギ、ウシ、ウマおよびハムスターの細胞が含まれる。どの細胞株が高い発現レベルを有するかを決定することによって、特に好ましい細胞株を選択する。使用され得る他の細胞株は、Ｓｆ９細胞、両生類細胞、細菌細胞、植物細胞および真菌細胞などの昆虫細胞株である。重鎖またはその抗原結合部分もしくはフラグメント、軽鎖および／またはその抗原結合フラグメントをコードする組換え発現ベクターを哺乳動物宿主細胞に導入する場合、抗体は、宿主細胞における抗体の発現、またはより好ましくは、宿主細胞が成長している培地への抗体の分泌を可能にするのに十分な期間にわたって宿主細胞を培養することによって生産される。

【0137】

抗体は、標準的なタンパク質精製方法を使用して培養培地から回収することができる。さらに、生産細胞株からの本発明の抗体（またはそれからの他の部分）の発現は、いくつかの公知の技術を使用して増強することができる。例えば、グルタミンシンテターゼ遺伝子発現系（ＧＳ系）は、ある特定の条件下で発現を増強するための一般的なアプローチである。ＧＳシステムは、欧州特許第０２１６８４６号明細書、同第０２５６０５５号明細書および同第０３２３９９７号明細書、ならびに欧州特許出願第８９３０３９６４．４号明細書に関連して全体的または部分的に論じられている。

【0138】

医薬組成物および投与
本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体および抗体の抗原結合フラグメントを含む医薬組成物または無菌組成物を調製するために、薬学的に許容される担体または賦形剤と混合することができる。［例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ａｎｄ Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ：Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（１９８４）を参照されたい］。

【0139】

治療剤および診断剤の製剤は、例えば、凍結乾燥粉末、スラリー、水溶液または懸濁液の形態の許容される担体、賦形剤または安定剤と混合することによって調製され得る［例えば、Ｈａｒｄｍａｎ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｇｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ａｖｉｓ，ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．）（１９９３）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｄｉｓｐｅｒｓｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｗｅｉｎｅｒ ａｎｄ Ｋｏｔｋｏｓｋｉｅ（２０００）Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ Ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ Ｓａｆｅｔｙ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹを参照されたい］。一実施形態では、本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体および／または抗体の抗原結合フラグメントを含む医薬組成物を、酢酸ナトリウム溶液ｐＨ５～６で適切な濃度に希釈し、等張性のためにＮａＣｌまたはスクロースを添加する。安定性を増強させるために、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０などのさらなる薬剤を添加してもよい。

【0140】

単独でまたは別の薬剤と組み合わせて投与される、ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体、および組成物の抗体の抗原結合フラグメントの毒性および治療有効性は、例えば、ＬＤ_５０（集団の５０％に対して致死的な用量）およびＥＤ_５０（集団の５０％において治療的に有効な用量）を決定するための、細胞培養または実験動物における標準的な薬学的手順によって決定することができる。毒性効果と治療効果との間の用量比は、治療指数（ＬＤ_５０／ＥＤ_５０）である。特定の態様では、高い治療指数を呈する本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体または抗体の抗原結合フラグメントが望ましい。これらの細胞培養アッセイおよび動物研究から得られたデータは、対象、例えばイヌまたはネコにおいて使用するための投与量の範囲を製剤化するのに使用することができる。そのような化合物の投与量は、好ましくは、毒性がほとんどまたは全くないＥＤ_５０を含む循環濃度の範囲内にある。投与量は、用いられる剤形および投与経路に応じて、この範囲内で変動してもよい。

【0141】

投与様式は、変動し得る。好適な投与経路には、経口、直腸、経粘膜、腸、非経口、筋肉内、皮下、皮内、髄内、髄腔内、直接脳室内、静脈内、腹腔内、鼻腔内、眼内、吸入、吹送、局所、皮膚、経皮、または動脈内が含まれる。特定の実施形態では、本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体および／または抗体の抗原結合フラグメントを含む医薬組成物は、注射などによる侵襲的経路によって投与することができる。本発明のさらなる実施形態では、本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体および／または抗体の抗原結合フラグメントを含む医薬組成物は、静脈内、皮下、筋肉内、動脈内、または吸入によるエアロゾル送達によって投与される。非侵襲的経路（例えば、経口；例えば、丸剤、カプセル剤または錠剤）による投与も本発明の範囲内である。

【0142】

組成物は、当技術分野で公知の医療機器を用いて投与することができる。例えば、本発明の医薬組成物は、例えばプレフィルドシリンジまたは自動注射器を含む皮下注射針での注射によって投与することができる。本明細書に開示される医薬組成物はまた、無針皮下注射装置；例えば、米国特許第６，６２０，１３５号明細書；同６，０９６，００２号明細書；同５，３９９，１６３号明細書；同５，３８３，８５１号明細書；同５，３１２，３３５号明細書；同５，０６４，４１３号明細書；同４，９４１，８８０号明細書；同４，７９０，８２４号明細書または同４，５９６，５５６号明細書に開示されている装置を用いて投与され得る。

【0143】

本明細書に開示される医薬組成物はまた、注入によって投与され得る。医薬組成物を投与する周知のインプラントおよびモジュール形態の例には、制御された速度で医薬品を分配するための植込み型微量注入ポンプを開示している米国特許第４，４８７，６０３号明細書；正確な注入速度で医薬品を送達するための医薬品注入ポンプを開示している米国特許第４，４４７，２３３号明細書；連続薬物送達のための可変流量植込み型注入装置を開示している米国特許第４，４４７，２２４号明細書；マルチチャンバ区画を有する浸透圧薬物送達システムを開示している米国特許第４，４３９，１９６号明細書が含まれる。他の多くのそのようなインプラント、送達システム、およびモジュールは、当業者に周知である。

【0144】

あるいは、本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体および／または抗体の抗原結合フラグメントを含む組成物は、全身的ではなく局所的に、しばしばデポー製剤または持続放出製剤で投与され得る。

【0145】

投与レジメンは、治療用ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体、および／または抗体の抗原結合フラグメントの血清または組織ターンオーバー速度、症状のレベル、治療用ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体、および／または抗体の抗原結合フラグメントの免疫原性、ならびに生物学的マトリックス中の標的細胞の接近可能性を含むいくつかの因子に依存する。好ましくは、投与レジメンは、標的疾患／状態の改善をもたらすと同時に望ましくない副作用を最小限に抑えるために、十分な治療用ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体、および／または抗体の抗原結合フラグメントを送達する。したがって、送達される生物学的製剤の量は、部分的には、特定の治療用抗体および／または融合タンパク質ならびに処置される状態の重症度に依存する。適切な用量の治療用抗体を選択する際の指針が利用可能である［例えば、Ｗａｗｒｚｙｎｃｚａｋ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｂｉｏｓ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂ．Ｌｔｄ，Ｏｘｆｏｒｄｓｈｉｒｅ，ＵＫ（１９９６）；Ｋｒｅｓｉｎａ（ｅｄ．）Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ（１９９１）；Ｂａｃｈ（ｅｄ．）Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ（１９９３）；Ｂａｅｒｔ，ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８：６０１－６０８（２００３）；Ｍｉｌｇｒｏｍ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４１：１９６６－１９７３（１９９９）；Ｓｌａｍｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４４：７８３－７９２（２００１）；Ｂｅｎｉａｍｉｎｏｖｉｔｚ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４２：６１３－６１９（２０００）；Ｇｈｏｓｈ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８：２４－３２（２００３）；Ｌｉｐｓｋｙ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４３：１５９４－１６０２（２０００）を参照されたい］。

【0146】

適切な用量の決定は、例えば、処置に影響を及ぼすことが当技術分野で公知であるまたは疑われるパラメータまたは因子を使用して、獣医によって行われる。一般に、用量は、最適用量よりも幾分少ない量で始まり、その後、任意の負の副作用に対して所望のまたは最適な効果が達成されるまで、少しずつ増加する。重要な診断手段には、症状の診断が含まれる。

【0147】

本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体および／または抗体の抗原結合フラグメントを含む組成物は、単独でまたは本発明で使用される抗体のいずれかと共に、連続注入によって、または例えば毎日、１週間に１～７回、毎週、隔週、毎月、隔月、四半期ごと、半年ごと、毎年などに投与される用量によって提供され得る。用量は、例えば静脈内、皮下、局所、経口、経鼻、直腸、筋肉内、脳内、脊髄内、または吸入によって提供され得る。総毎週用量は、一般に少なくとも０．０５μｇ／ｋｇ体重、より一般的には少なくとも０．２μｇ／ｋｇ、０．５μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、０．２５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、５．０ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ以上である［例えば、Ｙａｎｇ，ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４９：４２７－４３４（２００３）；Ｈｅｒｏｌｄ，ｅｔ ａｌ．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４６：１６９２－１６９８（２００２）；Ｌｉｕ，ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．Ｐｓｙｃｈ．６７：４５１－４５６（１９９９）；Ｐｏｒｔｉｅｌｊｉ，ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５２：１３３－１４４（２００３）を参照されたい］。対象の血清中の本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体、および／または抗体の抗原結合フラグメントの所定の標的濃度、例えば０．１、０．３、１、３、１０、３０、１００、３００μｇ／ｍｌ以上を達成するための用量も提供され得る。他の実施形態では、本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体、および／または抗体の抗原結合フラグメントは、１０、２０、５０、８０、１００、２００、５００、１０００または２５００ｍｇ／対象で、毎週、隔週、「４週間毎」、毎月、隔月または四半期ごとに皮下または静脈内投与される。

【0148】

本明細書で使用される場合、「阻害する」または「処置する」または「処置」は、障害もしくは状態に関連する症状の発症の延期および／またはそのような障害もしくは状態の症状の重症度の低下を含む。この用語は、既存の制御されないまたは望ましくない症状を改良すること、さらなる症状を防止すること、およびそのような症状の根本的な原因を改良または防止することをさらに含む。したがって、この用語は、障害、状態および／もしくは症状を有するか、またはそのような障害、疾患もしくは症状を発症する可能性を有する脊椎動物対象（例えば、イヌ）に有益な結果が与えられたことを示す。

【0149】

本明細書で使用される場合、「治療有効量」、「治療有効用量」および「有効量」という用語は、単独でまたは追加の治療剤と組み合わせて細胞、組織または対象、例えばイヌまたはネコに投与した場合に、疾患もしくは状態のうちの１つ以上またはそのような疾患もしくは状態の進行の症状の測定可能な改善引き起こすのに有効な本発明のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体および／または抗体の抗原結合フラグメントの量を指す。治療有効用量はさらに、症状の少なくとも部分的な改良、例えば関連する医学的状態の処置、治癒、防止もしくは改良、またはそのような状態の処置、治癒、防止もしくは改良の速度の増加をもたらすのに十分なＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質、抗体、および／または抗体の抗原結合フラグメントの量を指す。組み合わせに適用される場合、治療有効用量は、組み合わせて投与されるか、連続的に投与されるか、または同時に投与されるかにかかわらず、治療効果をもたらす有効成分の組み合わせ量を指す。有効量の治療薬は、診断尺度またはパラメータの少なくとも１０％；通常、少なくとも２０％；好ましくは少なくとも約３０％；より好ましくは少なくとも４０％、最も好ましくは少なくとも５０％の改善をもたらすであろう。有効量はまた、症状の重症度を評価するために主観的尺度が使用される場合に主観的尺度の改善をもたらすことができる。

【0150】

［実施例］
［実施例１］
イヌＦｃＲｎ受容体のクローニングおよび発現
イヌＦｃＲｎタンパク質のサブユニット［ＩｇＧ受容体および輸送体（ＦＣＧＲＴ）およびβ２－ミクログロブリン（Ｂ２Ｍ）］が記載されている［Ｂｅｒｇｅｒｏｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｖｅｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．１５７：３１－４１（２０１４）］。それらの配列は、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎデータベースに見出すことができ、以下に提供される。ｃ末端［ＧＧＧＧＳ；配列番号４６］ｘ３リンカー、ＡｖｉＴａｇ、および８ｘＨｉｓタグで操作したＦＣＧＲＴをコードするＤＮＡ、ならびにｃ末端タグなしで調製したＢ２Ｍを、人工シグナル伝達ペプチドＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳ［配列番号４７］を有するｐｃＤＮＡ３．４ベクターにクローニングした。等量の各ベクターをＥｘｐｉ２９３Ｆ細胞に同時トランスフェクトした。ＦｃＲｎヘテロ二量体を精製するために、ＨｉｓＴｒａｐＦＦ（商標）ＣｒｕｄｅおよびＨｉＬｏａｄ（商標）２６／６００ Ｓｕｐｅｒｄｅｘ（商標）２００プレップグレードカラムによって二段階精製を実行した。

【0151】

ＸＰ＿５３３６１８．２ ＩｇＧ受容体ＦｃＲｎ大サブユニットｐ５１アイソフォームＸ２［カニスルプスファミリアス］：
［配列番号４８］
ＭＧＶＰＲＰＲＳＷＧＬＧＦＬＬＦＬＬＰＴＬＲＡＤＳＨＬＳＬＬＹＨＬＴＡＶＳＡＰＰＰＧＴＰＡＦＷＡＳＧＷＬＧＰＱＱＹＬＳＹＮＮＬＲＡＱＡＥＰＹＧＡＷＶＷＥＮＱＶＳＷＹＷＥＫＥＴＴＤＬＲＴＫＥＧＬＦＬＥＡＬＫＡＬＧＤＧＧＰＹＴＬＱＧＬＬＧＣＥＬＧＰＤＮＴＳＶＰＶＡＫＦＡＬＮＧＥＤＦＭＴＦＤＰＫＬＧＴＷＮＧＤＷＰＥＴＥＴＶＳＫＲＷＭＱＱＡＧＡＶＳＫＥＲＴＦＬＬＹＳＣＰＱＲＬＬＧＨＬＥＲＧＲＧＮＬＥＷＫＥＰＰＳＭＲＬＫＡＲＰＧＳＰＧＦＳＶＬＴＣＳＡＦＳＦＹＰＰＥＬＱＬＲＦＬＲＮＧＬＡＡＧＳＧＥＧＤＦＧＰＮＧＤＧＳＦＨＡＷＳＳＬＴＶＫＳＧＤＥＨＨＹＲＣＬＶＱＨＡＧＬＰＱＰＬＴＶＥＬＥＳＰＡＫＳＳＶＰＶＶＧＩＶＩＧＦＬＬＬＴＡＶＡＶＧＧＡＬＬＷＲＲＭＲＫＧＬＰＡＰＷＭＳＬＲＧＤＤＶＧＡＬＬＰＴＰＧＶＰＫＤＡＤＳ
ＸＰ＿５３５４５８．１予測：ベータ－２－ミクログロブリン（Ｂ２Ｍ）前駆体アイソフォーム２［カニスファミリアス］と同様 ［配列番号４９］
ＭＡＰＲＰＡＬＡＴＡＧＦＬＡＬＬＬＩＬＬＡＡＣＲＬＤＡＶＱＨＰＰＫＩＱＶＹＳＲＨＰＡＥＮＧＫＰＮＦＬＮＣＹＶＳＧＦＨＰＰＥＩＥＩＤＬＬＫＮＧＫＥＭＫＡＥＱＴＤＬＳＦＳＫＤＷＴＦＹＬＬＶＨＴＥＦＴＰＮＥＱＤＥＦＳＣＲＶＫＨＶＴＬＳＥＰＱＩＶＫＷＤＲＤＮ
［実施例２］
ＦｃＲｎ受容体へのインビトロ結合
ＦｃＲｎタンパク質に対する抗体およびＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の結合を、ストレプトアビジン（ＳＡ）バイオセンサーを使用してＯｃｔｅｔ（商標）ＨＴＸによって決定した。最初に、ビオチン標識ＦｃＲｎ／Ｂ２Ｍを、１０ｕｇ／ｍＬの濃度で、予備水和ＳＡバイオセンサーに６０秒間負荷した。第２に、遮断段階のために、バイオセンサーをｐＨ６．０ ＴＢＳ／カゼイン緩衝液に１８０秒間入れた。第３に、会合段階のために、ＦｃＲｎ／Ｂ２Ｍ負荷バイオセンサーをｐＨ６．０または７．４ＴＢＳ／カゼイン緩衝液中の５００ｎＭから７．８ｎＭまでの抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の２倍連続希釈液に１５秒間入れた。最後に、解離段階のために、バイオセンサーをｐＨ６．０またはｐＨ７．４のいずれかのＴＢＳ／カゼイン緩衝液に６０秒間入れた。Ｏｃｔｅｔ Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｓｉｓ１２．０ソフトウェアを使用して分析を実行し、１：１結合モデルを使用して曲線を当てはめた。

【0152】

［実施例３］
イヌＩｇＧ Ｆｃ領域およびネコＩｇＧ Ｆｃ領域
以下に、４つのイヌＦｃ領域および３つのネコＦｃ領域のアミノ酸配列、ならびにＩｇＧ－Ｂｍの配列番号４のアミノ酸配列と比較したＩｇＧ－Ｂの配列番号３のアミノ酸配列において例示されるような、２つのアミノ酸残基置換Ｄ３１ＡおよびＮ６３Ａを含む改変Ｆｃ領域の対応するアミノ酸配列を提供する。これらの２つのアミノ酸残基置換は、天然に存在するイヌＩｇＧ－Ｂの抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を有意に減少させる働きをする［その内容全体が参照として本明細書に組み込まれる米国特許第１０，１０６，６０７号明細書を参照されたい］。Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ ｅｄ．，Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）のＥＵナンバリングスキームに従って、Ｄ３１ＡおよびＮ６３Ａは、それぞれアミノ酸位置Ｄ２６５ＡおよびＮ２９７Ａに対応する。

【0153】

イヌＩｇＧ－Ａ［配列番号１］、イヌＩｇＧ－Ｂ［配列番号３］、イヌＩｇＧ－Ｃ［配列番号５］、イヌＩｇＧ－Ｄ［配列番号７］、ネコＩｇＧ－１ａ［配列番号５２］、ネコＩｇＧ－２［配列番号５３］、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ［配列番号５４］由来のＦｃ領域のアミノ酸配列、およびこれらの７つのアミノ酸配列［配列番号５５］のコンセンサス配列のアラインメントを図１に示す。Ｓｔｒｉｅｔｚｅｌ ｅｔ ａｌ．，［Ｖｅｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ＆Ｉｍｍｕｎｐａｔｈｏｌ．，１５８：２１４－２２３（２０１４）］によって示されるように、ネコＩｇＧ－１ａおよびネコＩｇＧ－２ Ｆｃ領域のＦｃ領域のアミノ酸配列は、それぞれのそれらのヒンジ領域に由来する２つのさらなるＮ末端アミノ酸残基をさらに含む。上記のＳｔｒｉｅｔｚｅｌ ｅｔ ａｌ．，によれば、ネコＦｃ領域のアミノ酸配列は、ネコＩｇＧ－１ａについては［配列番号９］、ネコＩｇＧ－１ｂについては［配列番号５０］、およびネコＩｇＧ－２については［配列番号１１］である。

【0154】

イヌＩｇＧ Ｆｃ
ＩｇＧ－Ａ ［配列番号１］
ＬＧＧＰＳＶＬＩＦＰＰＫＰＫＤＩＬＲＩＴＲＴＰＥＶＴＣＶＶＬＤＬＧＲＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＥＶＨＴＡＫＴＱＳＲＥＱＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＥＨＱＤＷＬＴＧＫＥＦＫＣＲＶＮＨＩＤＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＲＡＨＫＰＳＶＹＶＬＰＰＳＰＫＥＬＳＳＳＤＴＶＳＩＴＣＬＩＫＤＦＹＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＲＫＨＲＭＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＱＧＤＰＦＴＣＡＶＭＨＥＴＬＱＮＨＹＴＤＬＳＬＳＨＳＰＧＫ
ＩｇＧ－Ａｍ ［配列番号２］
ＬＧＧＰＳＶＬＩＦＰＰＫＰＫＤＩＬＲＩＴＲＴＰＥＶＴＣＶＶＬＡＬＧＲＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＥＶＨＴＡＫＴＱＳＲＥＱＱＦＡＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＥＨＱＤＷＬＴＧＫＥＦＫＣＲＶＮＨＩＤＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＲＡＨＫＰＳＶＹＶＬＰＰＳＰＫＥＬＳＳＳＤＴＶＳＩＴＣＬＩＫＤＦＹＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＲＫＨＲＭＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＱＧＤＰＦＴＣＡＶＭＨＥＴＬＱＮＨＹＴＤＬＳＬＳＨＳＰＧＫ
ＩｇＧ－Ｂ ［配列番号３］
ＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ＩｇＧ－Ｂｍ ［配列番号４］
ＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＡＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＡＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ＩｇＧ－Ｃ ［配列番号５］
ＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＩＬＶＴＡＲＴＰＴＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＮＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＳＫＱＶＱＴＡＮＴＱＰＲＥＥＱＳＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＳＧＫＱＦＫＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＥＩＩＳＫＴＰＧＱＡＨＱＰＮＶＹＶＬＰＰＳＲＤＥＭＳＫＮＴＶＴＬＴＣＬＶＫＤＦＦＰＰＥＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＭＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＩＳＬＳＨＳＰＧＫ
ＩｇＧ－Ｃｍ ［配列番号６］
ＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＩＬＶＴＡＲＴＰＴＶＴＣＶＶＶＡＬＤＰＥＮＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＳＫＱＶＱＴＡＮＴＱＰＲＥＥＱＳＡＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＳＧＫＱＦＫＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＥＩＩＳＫＴＰＧＱＡＨＱＰＮＶＹＶＬＰＰＳＲＤＥＭＳＫＮＴＶＴＬＴＣＬＶＫＤＦＦＰＰＥＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＭＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＩＳＬＳＨＳＰＧＫ
ＩｇＧ－Ｄ ［配列番号７］
ＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＩＬＲＩＴＲＴＰＥＩＴＣＶＶＬＤＬＧＲＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＥＶＨＴＡＫＴＱＰＲＥＱＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＥＨＱＤＷＬＴＧＫＥＦＫＣＲＶＮＨＩＧＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＰＫＥＬＳＳＳＤＴＶＴＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＥＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＰＥＰＥＳＫＹＨＴＴＡＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＱＧＤＴＦＴＣＡＶＭＨＥＡＬＱＮＨＹＴＤＬＳＬＳＨＳＰＧＫ
ＩｇＧ－Ｄｍ ［配列番号８］
ＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＩＬＲＩＴＲＴＰＥＩＴＣＶＶＬＡＬＧＲＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＥＶＨＴＡＫＴＱＰＲＥＱＱＦＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＥＨＱＤＷＬＴＧＫＥＦＫＣＲＶＮＨＩＧＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＰＫＥＬＳＳＳＤＴＶＴＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＥＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＰＥＰＥＳＫＹＨＴＴＡＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＱＧＤＴＦＴＣＡＶＭＨＥＡＬＱＮＨＹＴＤＬＳＬＳＨＳＰＧＫ
ネコＩｇＧ Ｆｃ
ＩｇＧ－１ａ ［配列番号９］
ＰＰＥＭＬＧＧＰＳＩＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＳＩＳＲＴＰＥＶＴＣＬＶＶＤＬＧＰＤＤＳＤＶＱＩＴＷＦＶＤＮＴＱＶＹＴＡＫＴＳＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＬＨＱＤＷＬＫＧＫＥＦＫＣＫＶＮＳＫＳＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＫＧＱＰＨＥＰＱＶＹＶＬＰＰＡＱＥＥＬＳＲＮＫＶＳＶＴＣＬＩＫＳＦＨＰＰＤＩＡＶＥＷＥＩＴＧＱＰＥＰＥＮＮＹＲＴＴＰＰＱＬＤＳＤＧＴＹＦＶＹＳＫＬＳＶＤＲＳＨＷＱＲＧＮＴＹＴＣＳＶＳＨＥＡＬＨＳＨＨＴＱＫＳＬＴＱＳＰＧＫ
ＩｇＧ－１ａｍ ［配列番号１０］
ＰＰＥＭＬＧＧＰＳＩＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＳＩＳＲＴＰＥＶＴＣＬＶＶＡＬＧＰＤＤＳＤＶＱＩＴＷＦＶＤＮＴＱＶＹＴＡＫＴＳＰＲＥＥＱＦＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＬＨＱＤＷＬＫＧＫＥＦＫＣＫＶＮＳＫＳＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＫＧＱＰＨＥＰＱＶＹＶＬＰＰＡＱＥＥＬＳＲＮＫＶＳＶＴＣＬＩＫＳＦＨＰＰＤＩＡＶＥＷＥＩＴＧＱＰＥＰＥＮＮＹＲＴＴＰＰＱＬＤＳＤＧＴＹＦＶＹＳＫＬＳＶＤＲＳＨＷＱＲＧＮＴＹＴＣＳＶＳＨＥＡＬＨＳＨＨＴＱＫＳＬＴＱＳＰＧＫ
ＩｇＧ－１ｂ ［配列番号５０］
ＰＰＥＭＬＧＧＰＳＩＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＳＩＳＲＴＰＥＶＴＣＬＶＶＤＬＧＰＤＤＳＤＶＱＩＴＷＦＶＤＮＴＱＶＹＴＡＫＴＳＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＬＨＱＤＷＬＫＧＫＥＦＫＣＫＶＮＳＫＳＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＤＫＧＱＰＨＥＰＱＶＹＶＬＰＰＡＱＥＥＬＳＲＮＫＶＳＶＴＣＬＩＥＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＩＴＧＱＰＥＰＥＮＮＹＲＴＴＰＰＱＬＤＳＤＧＴＹＦＬＹＳＲＬＳＶＤＲＳＲＷＱＲＧＮＴＹＴＣＳＶＳＨＥＡＬＨＳＨＨＴＱＫＳＬＴＱＳＰＧＫ
ＩｇＧ－１ｂｍ ［配列番号５１］
ＰＰＥＭＬＧＧＰＳＩＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＳＩＳＲＴＰＥＶＴＣＬＶＶＡＬＧＰＤＤＳＤＶＱＩＴＷＦＶＤＮＴＱＶＹＴＡＫＴＳＰＲＥＥＱＦＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＬＨＱＤＷＬＫＧＫＥＦＫＣＫＶＮＳＫＳＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＤＫＧＱＰＨＥＰＱＶＹＶＬＰＰＡＱＥＥＬＳＲＮＫＶＳＶＴＣＬＩＥＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＩＴＧＱＰＥＰＥＮＮＹＲＴＴＰＰＱＬＤＳＤＧＴＹＦＬＹＳＲＬＳＶＤＲＳＲＷＱＲＧＮＴＹＴＣＳＶＳＨＥＡＬＨＳＨＨＴＱＫＳＬＴＱＳＰＧＫ
ＩｇＧ－２ ［配列番号１１］
ＶＰＥＩＰＧＡＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＳＩＳＲＴＰＥＶＴＣＬＶＶＤＬＧＰＤＤＳＮＶＱＩＴＷＦＶＤＮＴＥＭＨＴＡＫＴＲＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＬＨＱＤＷＬＫＧＫＥＦＫＣＫＶＮＳＫＳＬＰＳＡＭＥＲＴＩＳＫＡＫＧＱＰＨＥＰＱＶＹＶＬＰＰＴＱＥＥＬＳＥＮＫＶＳＶＴＣＬＩＫＧＦＨＰＰＤＩＡＶＥＷＥＩＴＧＱＰＥＰＥＮＮＹＱＴＴＰＰＱＬＤＳＤＧＴＹＦＬＹＳＲＬＳＶＤＲＳＨＷＱＲＧＮＴＹＴＣＳＶＳＨＥＡＬＨＳＨＨＴＱＫＳＬＴＱＳＰＧＫ
ＩｇＧ－２ｍ ［配列番号１２］
ＶＰＥＩＰＧＡＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＳＩＳＲＴＰＥＶＴＣＬＶＶＡＬＧＰＤＤＳＮＶＱＩＴＷＦＶＤＮＴＥＭＨＴＡＫＴＲＰＲＥＥＱＦＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＬＨＱＤＷＬＫＧＫＥＦＫＣＫＶＮＳＫＳＬＰＳＡＭＥＲＴＩＳＫＡＫＧＱＰＨＥＰＱＶＹＶＬＰＰＴＱＥＥＬＳＥＮＫＶＳＶＴＣＬＩＫＧＦＨＰＰＤＩＡＶＥＷＥＩＴＧＱＰＥＰＥＮＮＹＱＴＴＰＰＱＬＤＳＤＧＴＹＦＬＹＳＲＬＳＶＤＲＳＨＷＱＲＧＮＴＹＴＣＳＶＳＨＥＡＬＨＳＨＨＴＱＫＳＬＴＱＳＰＧＫ
ｃＩｇＧ－Ａヒンジ領域［配列番号１３］
ＦＮＥＣＲＣＴＤＴＰＰＣＰＶＰＥＰ
ｃＩｇＧ－Ｂヒンジ領域［配列番号１４］
ＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＴ^１ＰＥＭ
ｃＩｇＧ－Ｃヒンジ領域［配列番号１５］
ＡＫＥＣＥＣＫＣＮＣＮＮＣＰＣＰＧＣＧＬ
ｃＩｇＧ－Ｄヒンジ領域［配列番号１６］
ＰＫＥＳＴＣＫＣＩＳＰＣＰＶＰＥＳ
ＩｇＧ－１ａ Ｆｃ＋２アミノ酸残基 ［配列番号５２］
ＣＰＰＰＥＭＬＧＧＰＳＩＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＳＩＳＲＴＰＥＶＴＣＬＶＶＤＬＧＰＤＤＳＤＶＱＩＴＷＦＶＤＮＴＱＶＹＴＡＫＴＳＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＬＨＱＤＷＬＫＧＫＥＦＫＣＫＶＮＳＫＳＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＫＧＱＰＨＥＰＱＶＹＶＬＰＰＡＱＥＥＬＳＲＮＫＶＳＶＴＣＬＩＫＳＦＨＰＰＤＩＡＶＥＷＥＩＴＧＱＰＥＰＥＮＮＹＲＴＴＰＰＱＬＤＳＤＧＴＹＦＶＹＳＫＬＳＶＤＲＳＨＷＱＲＧＮＴＹＴＣＳＶＳＨＥＡＬＨＳＨＨＴＱＫＳＬＴＱＳＰＧＫ
ＩｇＧ－２ Ｆｃ＋２アミノ酸残基 ［配列番号５３］
ＣＰＶＰＥＩＰＧＡＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＳＩＳＲＴＰＥＶＴＣＬＶＶＤＬＧＰＤＤＳＮＶＱＩＴＷＦＶＤＮＴＥＭＨＴＡＫＴＲＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＬＨＱＤＷＬＫＧＫＥＦＫＣＫＶＮＳＫＳＬＰＳＡＭＥＲＴＩＳＫＡＫＧＱＰＨＥＰＱＶＹＶＬＰＰＴＱＥＥＬＳＥＮＫＶＳＶＴＣＬＩＫＧＦＨＰＰＤＩＡＶＥＷＥＩＴＧＱＰＥＰＥＮＮＹＱＴＴＰＰＱＬＤＳＤＧＴＹＦＬＹＳＲＬＳＶＤＲＳＨＷＱＲＧＮＴＹＴＣＳＶＳＨＥＡＬＨＳＨＨＴＱＫＳＬＴＱＳＰＧＫ
ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ ［配列番号５４］
ＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
コンセンサス配列：［配列番号５５］
ＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＸＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＧＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＥＶＨＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＬＨＱＤＷＬＫＧＫＥＦＫＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＸＧＱＡＨＸＰＸＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＸＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＰＥＰＥＸＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＴＣＡＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＨＳＰＧＫ
図１は、本明細書で使用される、上記のＳｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ ｅｄ．，Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，によるＥＵナンバリングスキームを示す。アミノ酸残基番号２５２、２５４、２５６、３０８、４２８、４３３、４３４、および４３６は、図１において特異的に同定され、したがって、上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，のＥＵナンバリングスキームに従う本発明のｃＦｃ領域およびｆＦｃ領域のアミノ酸配列によって構成されるアミノ酸残基位置である。

【0155】

^１このトレオニン（Ｔ）は、アラニン（Ａ）としても同定されている。

【0156】

［実施例４］
改変されたイヌＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質および抗体の構築、発現および精製
バックグラウンド
アトピー性皮膚炎（ＡＤ）は、免疫系の調節不全および表皮バリア異常を特徴とする、ヒトおよびコンパニオンアニマルにおける再発性の掻痒性および慢性炎症性皮膚疾患である。インターロイキン－４（ＩＬ－４）およびインターロイキン－１３（ＩＬ－１３）の両方が、アトピー性皮膚炎における慢性炎症性皮膚疾患に関与するシグナル伝達経路の一部である。ＩＬ－４は、共通γｃ鎖のモノマー（γｃ）およびＩＬ－４受容体アルファ（ＩＬ－４Ｒα）のモノマーを含むヘテロ二量体受容体に結合する。ＩＬ－１３は、ＩＬ－１３受容体アルファ１（ＩＬ－１３Ｒα１）のモノマーおよびＩＬ－４Ｒαのモノマーを含むヘテロ二量体受容体に結合する。ＩＬ－４のＩＬ－４Ｒαへの結合およびＩＬ－１３のＩＬ－１３Ｒα１への結合の遮断は、付随する皮膚炎症を遮断する。ＩＬ－１３Ｒα１の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）（例えば、ｃＩＬ－１３Ｒα１－ｃＦｃ融合タンパク質）またはＩＬ－１３Ｒα２の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）（例えば、ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＦｃ融合タンパク質）のいずれかを含むＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、ＩＬ－１３に結合することができる。ＩＬ－４ＲαのＥＣＤ（例えば、イヌＩＬ－４Ｒα－ｃＦｃ融合タンパク質）を含むＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質は、ＩＬ－４Ｒαに結合することができる。ＩＬ－１３Ｒα１またはＩＬ－１３Ｒ Ｒα２のいずれかのＥＣＤを含むＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質と、ＩＬ－４ＲαのＥＣＤを含むＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質との両方を組み合わせることにより、ＩＬ－４Ｒαによるシグナル伝達を遮断し、それによってアトピー性皮膚炎の慢性炎症性皮膚疾患を改良することができる。

【0157】

インターロイキン－３１（ＩＬ－３１）のその受容体であるＩＬ－３１受容体α（ＩＬ－３１ＲＡ）への結合は、ヒトおよび犬の両方においてアトピー性皮膚炎の掻痒作用を惹起する。ＩＬ－３１ＲＡに結合する抗体によるＩＬ－３１のＩＬ－３１ＲＡへの結合の遮断は、ＩＬ－３１ＲＡによるシグナル伝達を遮断し、アトピー性皮膚炎の掻痒作用を改良する働きをする。ＩｇＧ Ｆｃ ＩＬ－１３Ｒα１またはＩＬ－１３Ｒ Ｒα２ ＩｇＧ融合タンパク質および／もしくはＩｇＧ Ｆｃ ＩＬ－４Ｒαの半減期を延長すること、ならびに／またはＩＬ－３１ＲＡ抗体の半減期を延長することにより、対応する潜在的な薬物を比較的低い用量および／もしくは低い投与頻度で使用することが可能になる。

【0158】

方法
アミノ酸残基改変をＩｇＧ抗体およびｃＦｃ融合タンパク質の重鎖のイヌＦｃ領域において遺伝子操作して、ｐＨ６で新生児型Ｆｃ受容体ＦｃＲｎに対するそれらの親和性を改善した。抗体がイヌＩｇＧ－Ｂ Ｆｃのヒンジ領域およびイヌＩｇＧ－Ｂｍ Ｆｃ領域を含む場合、人工シグナル伝達ペプチドペプチドＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳ［配列番号１６］をコードする核酸および重鎖のアミノ酸配列。あるいは、イヌＩＬ－１３Ｒａ２の細胞外ドメインをイヌＩｇＧ－Ｂ Ｆｃヒンジ領域およびイヌＩｇＧ－Ｂ Ｆｃ領域に融合した。抗体（上記のイヌ重鎖または対応するイヌ軽鎖）またはｃＦｃ融合タンパク質をコードする核酸をｐｃＤＮＡ３．４ベクターにクローニングした。各ベクターをＥｘｐｉＣＨＯ細胞にトランスフェクトし、採取した上清を組換えプロテインＡアフィニティーカラムで精製した。タンパク質を０．１Ｍグリシン－ＨＣｌ（ｐＨ２．７）に溶出し、次いで、１Ｍ Ｔｒｉｓ緩衝液（ｐＨ８．０）を使用してｐＨ６．０に調整した。

【0159】

イヌＩＬ－１３Ｒα１およびＩＬ－１３Ｒα２
イヌＩＬ－１３Ｒα１ ［配列番号１７］
ＶＬＰＡＫＰＥＮＩＳＣＩＦＹＹＥＥＮＦＴＣＴＷＳＰＥＫＥＡＳＹＴＷＹＫＶＫＲＴＹＳＹＧＹＫＳＤＩＣＳＴＤＮＳＴＲＧＮＨＡＳＣＳＦＬＰＰＴＩＴＮＰＤＮＹＴＩＱＶＥＡＱＮＡＤＧＩＭＫＳＤＩＴＹＷＮＬＤＡＩＭＫＩＥＰＰＥＩＦＳＶＫＳＶＬＧＩＫＲＭＬＱＩＫＷＩＲＰＶＬＡＰＨＳＳＴＬＫＹＴＬＲＦＲＴＩＮＳＡＹＷＭＥＶＮＦＴＫＥＤＩＤＲＤＥＴＹＮＬＴＥＬＱＡＦＴＥＹＶＭＴＬＲＣＡＰＡＥＳＭＦＷＳＧＷＳＱＥＫＶＧＴＴＥＥＥＡＰＹＧＬＤＬＷＲＶＬＫＰＡＭＶＤＧＲＲＰＶＱＬＭＷＫＫＡＴＧＡＰＶＬＥＫＡＬＧＹＮＩＷＹＦＰＥＮＮＴＮＬＴＥＴＶＮＴＴＮＱＴＨＥＬＹＬＧＧＫＴＹＷＶＹＶＶＳＹＮＳＬＧＥＳＰＶＡＴＬＲＩＰＡＬＮＥＫＴＦＱＣＩＥＡＭＱＡＣＬＴＱＤＱＬＶＶＥＷＱＳＳＡＰＥＶＤＴＷＭＶＥＷＦＰＤＶＤＳＥＰＳＳＦＳＷＥＳＶＳＱＡＲＮＷＴＩＱＫＤＥＬＫＰＬＷＣＹＮＩＳＶＹＰＶＬＲＤＲＶＧＱＰＹＳＴＱＡＹＶＱＥＧＩＰＳＡＧＰＶＴＱＡＤＳＩＧＶＫＴＶＴＩＴＷＫＥＩＰＫＳＫＲＮＧＦＩＫＮＹＴＩＦＹＱＡＥＤＧＫＥＦＳＫＴＶＮＳＮＩＬＱＹＲＬＥＳＬＴＲＲＴＳＹＳＬＱＶＭＡＳＴＮＡＧＧＴＮＧＴＫＩＮＦＫＴＬＳＩＳ
イヌＩＬ－１３Ｒα２ ［配列番号１８］
ＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴ
例示的な改変イヌＩＬ－１３Ｒα１およびＩＬ－１３Ｒα２ ＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質のアミノ酸配列
したがって、ｃＦｃ融合タンパク質の半減期を増加させるために、本発明の融合タンパク質のイヌＩｇＧ－Ｂ Ｆｃ領域を、対応する野生型イヌＩｇＧ－Ｂ Ｆｃに対して改変した。そのような改変ｃＦｃ領域は、野生型ｃＦｃ領域に対して、１つ以上のアミノ酸残基２５２、２５４、２５６、４３３、４３４および４３６に１つ以上のアミノ酸置換を含む［Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ ｅｄ．，Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）；ＥＵインデックスに従ってナンバリング］。特定の例は、以下の位置：Ｌ２５２Ｙ、Ａ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｄ、Ｔ２５６Ｅ、Ｉ３０８Ｐ、Ｈ４３３Ｋ、Ｈ４３３Ｌ、Ｎ４３４Ｈ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｙ、およびＹ４３６Ｔのうちの１つ以上における改変を含み、図１に示されるようにナンバリングされ、以下の表１に提供される。

【0160】

ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－Ｙ Ｎ４３４Ｙ ［配列番号１９］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＹＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－Ｆ Ｎ４３４Ｆ ［配列番号２０］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＦＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－Ｌ Ｈ４３３Ｌ ［配列番号２１］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＬＮＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－Ｋ Ｈ４３３Ｋ ［配列番号２２］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＫＮＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－Ｔ Ｙ４３６Ｔ ［配列番号２３］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＮＨＴＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－ＬＹ Ｈ４３３Ｌ／Ｎ４３４Ｙ ［配列番号２４］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＬＹＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－ＫＹ Ｈ４３３Ｋ／Ｎ４３４Ｙ ［配列番号２５］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＫＹＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－ＫＦ Ｈ４３３Ｋ／Ｎ４３４Ｆ ［配列番号２６］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＫＦＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－ＬＦ Ｈ４３３Ｌ／Ｎ４３４Ｆ ［配列番号２７］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＬＦＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－ＫＹＴ Ｈ４３３Ｋ／Ｎ４３４Ｙ／Ｙ４３６Ｔ ［配列番号２８］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＫＹＨＴＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－ＬＹＴ Ｈ４３３Ｌ／Ｎ４３４Ｙ／Ｙ４３６Ｔ ［配列番号２９］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＬＹＨＴＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－ＬＦＴ Ｈ４３３Ｌ／Ｎ４３４Ｆ／Ｙ４３６Ｔ ［配列番号３０］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＬＦＨＴＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－ＫＦＴ Ｈ４３３Ｋ／Ｎ４３４Ｆ／Ｙ４３６Ｔ ［配列番号３１］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＫＦＨＴＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－ＰＹ Ｉ３０８Ｐ／Ｎ４３４Ｙ ［配列番号３２］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＰＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＹＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－ＤＰＹ Ｔ２５６Ｄ／Ｉ３０８Ｐ／Ｎ４３４Ｙ ［配列番号３３］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＤＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＰＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＹＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－ＤＹ Ｔ２５６Ｄ／Ｎ４３４Ｙ ［配列番号３４］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＤＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＹＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃＩＬ－１３Ｒα２－ｃＩｇＧＢ－Ｆｃ－ＹＴ Ｎ４３４Ｙ／Ｙ４３６Ｔ ［配列番号３５］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＳＭＬＳＮＡＥＩＫＶＮＰＰＱＤＦＥＩＶＤＰＧＹＬＧＹＬＳＬＱＷＱＰＰＬＦＰＤＮＦＫＥＣＴＩＥＹＥＬＫＹＲＮＩＤＳＥＮＷＫＴＩＩＴＫＮＬＨＹＫＤＧＦＤＬＮＫＧＩＥＡＫＩＮＴＬＬＰＡＱＣＴＮＧＳＥＶＲＳＳＷＡＥＴＴＹＷＴＳＰＱＧＮＲＥＴＫＩＱＤＭＤＣＶＹＹＮＷＱＹＬＶＣＳＷＫＰＧＭＧＶＨＦＤＴＮＹＱＬＦＹＷＹＥＧＬＤＨＳＡＥＣＴＤＹＩＫＶＮＧＫＮＭＧＣＲＦＰＹＬＥＳＳＤＹＫＤＦＹＩＣＶＮＧＳＳＥＳＱＰＩＲＰＳＹＦＩＦＱＬＱＮＩＶＫＰＭＰＰＤＹＬＳＬＴＶＫＮＳＥＥＩＮＬＫＷＮＭＰＫＧＰＩＰＡＫＣＦＩＹＥＩＥＦＴＥＤＧＴＴＷＶＴＴＴＶＥＮＥＩＱＩＴＲＴＳＮＥＳＱＫＬＣＦＬＶＲＳＫＶＮＩＹＣＳＤＤＧＩＷＳＥＷＳＤＥＱＣＷＫＧＤＩＷＫＥＴＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＮＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＹＨＴＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ

【表2】

例示的な抗体半減期を増強させる改変のアミノ酸配列
イヌ化マウス抗イヌＩＬ－３１ＲＡ抗体の半減期を増加させるために、本発明のイヌ重鎖のイヌＩｇＧ－Ｂｍ Ｆｃ領域を、対応するイヌＩｇＧ－Ｂｍ Ｆｃに対して改変した。そのような改変ｃＦｃ領域は、野生型ｃＦｃ領域に対して、１つ以上のアミノ酸残基２５２、２５６、４３３および４３４に１つ以上のアミノ酸置換を含む［Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ ｅｄ．，Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）；ＥＵインデックスに従ってナンバリング］。特定の例は、以下の位置：Ｌ２５２Ｙ、Ｔ２５６Ｄ、Ｔ２５６Ｅ、Ｈ４３３Ｋ、Ｈ４３３Ｌ、Ｎ４３４Ｆ、およびＮ４３４Ｙのうちの１つ以上における改変を含み、図１に示されるようにナンバリングされ、以下の表２に提供される。

【0161】

ｃ２１８Ｄ９ＶＨ４－ｃＩｇＧＢｍ－Ｆ Ｎ４３４Ｆ ［配列番号３６］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＥＶＴＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＦＳＧＦＳＬＳＴＦＧＲＧＶＧＷＩＲＱＲＰＧＲＧＬＥＷＭＧＨＩＷＷＤＤＤＫＹＹＮＰＡＬＫＳＲＬＳＩＴＫＤＴＡＫＮＱＶＦＬＱＬＳＳＭＴＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＩＡＧＧＬＲＲＡＰＹＡＭＤＳＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＴＡＰＳＶＦＰＬＡＰＳＣＧＳＴＳＧＳＴＶＡＬＡＣＬＶＳＧＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＳＬＴＳＧＶＨＴＦＰＳＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＭＶＴＶＰＳＳＲＷＰＳＥＴＦＴＣＮＶＡＨＰＡＳＫＴＫＶＤＫＰＶＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＡＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＡＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＦＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃ２１８Ｄ９ＶＨ４－ｃＩｇＧＢｍ－Ｙ Ｎ４３４Ｙ ［配列番号３７］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＥＶＴＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＦＳＧＦＳＬＳＴＦＧＲＧＶＧＷＩＲＱＲＰＧＲＧＬＥＷＭＧＨＩＷＷＤＤＤＫＹＹＮＰＡＬＫＳＲＬＳＩＴＫＤＴＡＫＮＱＶＦＬＱＬＳＳＭＴＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＩＡＧＧＬＲＲＡＰＹＡＭＤＳＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＴＡＰＳＶＦＰＬＡＰＳＣＧＳＴＳＧＳＴＶＡＬＡＣＬＶＳＧＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＳＬＴＳＧＶＨＴＦＰＳＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＭＶＴＶＰＳＳＲＷＰＳＥＴＦＴＣＮＶＡＨＰＡＳＫＴＫＶＤＫＰＶＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＡＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＡＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＹＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃ２１８Ｄ９ＶＨ４－ｃＩｇＧＢｍ－ＫＦ Ｈ４３３Ｋ／Ｎ４３４Ｆ ［配列番号３８］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＥＶＴＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＦＳＧＦＳＬＳＴＦＧＲＧＶＧＷＩＲＱＲＰＧＲＧＬＥＷＭＧＨＩＷＷＤＤＤＫＹＹＮＰＡＬＫＳＲＬＳＩＴＫＤＴＡＫＮＱＶＦＬＱＬＳＳＭＴＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＩＡＧＧＬＲＲＡＰＹＡＭＤＳＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＴＡＰＳＶＦＰＬＡＰＳＣＧＳＴＳＧＳＴＶＡＬＡＣＬＶＳＧＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＳＬＴＳＧＶＨＴＦＰＳＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＭＶＴＶＰＳＳＲＷＰＳＥＴＦＴＣＮＶＡＨＰＡＳＫＴＫＶＤＫＰＶＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＡＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＡＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＫＦＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃ２１８Ｄ９ＶＨ４－ｃＩｇＧＢｍ－ＫＹ Ｈ４３３Ｋ／Ｎ４３４Ｙ ［配列番号３９］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＥＶＴＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＦＳＧＦＳＬＳＴＦＧＲＧＶＧＷＩＲＱＲＰＧＲＧＬＥＷＭＧＨＩＷＷＤＤＤＫＹＹＮＰＡＬＫＳＲＬＳＩＴＫＤＴＡＫＮＱＶＦＬＱＬＳＳＭＴＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＩＡＧＧＬＲＲＡＰＹＡＭＤＳＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＴＡＰＳＶＦＰＬＡＰＳＣＧＳＴＳＧＳＴＶＡＬＡＣＬＶＳＧＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＳＬＴＳＧＶＨＴＦＰＳＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＭＶＴＶＰＳＳＲＷＰＳＥＴＦＴＣＮＶＡＨＰＡＳＫＴＫＶＤＫＰＶＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＡＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＡＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＫＹＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃ２１８Ｄ９ＶＨ４－ｃＩｇＧＢｍ－ＬＦ Ｈ４３３Ｌ／Ｎ４３４Ｆ ［配列番号４０］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＥＶＴＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＦＳＧＦＳＬＳＴＦＧＲＧＶＧＷＩＲＱＲＰＧＲＧＬＥＷＭＧＨＩＷＷＤＤＤＫＹＹＮＰＡＬＫＳＲＬＳＩＴＫＤＴＡＫＮＱＶＦＬＱＬＳＳＭＴＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＩＡＧＧＬＲＲＡＰＹＡＭＤＳＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＴＡＰＳＶＦＰＬＡＰＳＣＧＳＴＳＧＳＴＶＡＬＡＣＬＶＳＧＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＳＬＴＳＧＶＨＴＦＰＳＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＭＶＴＶＰＳＳＲＷＰＳＥＴＦＴＣＮＶＡＨＰＡＳＫＴＫＶＤＫＰＶＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＡＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＡＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＬＦＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃ２１８Ｄ９ＶＨ４－ｃＩｇＧＢｍ－ＬＹ Ｈ４３３Ｌ／Ｎ４３４Ｙ ［配列番号４１］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＥＶＴＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＦＳＧＦＳＬＳＴＦＧＲＧＶＧＷＩＲＱＲＰＧＲＧＬＥＷＭＧＨＩＷＷＤＤＤＫＹＹＮＰＡＬＫＳＲＬＳＩＴＫＤＴＡＫＮＱＶＦＬＱＬＳＳＭＴＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＩＡＧＧＬＲＲＡＰＹＡＭＤＳＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＴＡＰＳＶＦＰＬＡＰＳＣＧＳＴＳＧＳＴＶＡＬＡＣＬＶＳＧＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＳＬＴＳＧＶＨＴＦＰＳＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＭＶＴＶＰＳＳＲＷＰＳＥＴＦＴＣＮＶＡＨＰＡＳＫＴＫＶＤＫＰＶＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＡＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＡＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＬＹＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃ２１８Ｄ９ＶＨ４－ｃＩｇＧＢｍ－ＹＤ Ｌ２５２Ｙ／Ｔ２５６Ｄ ［配列番号４２］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＥＶＴＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＦＳＧＦＳＬＳＴＦＧＲＧＶＧＷＩＲＱＲＰＧＲＧＬＥＷＭＧＨＩＷＷＤＤＤＫＹＹＮＰＡＬＫＳＲＬＳＩＴＫＤＴＡＫＮＱＶＦＬＱＬＳＳＭＴＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＩＡＧＧＬＲＲＡＰＹＡＭＤＳＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＴＡＰＳＶＦＰＬＡＰＳＣＧＳＴＳＧＳＴＶＡＬＡＣＬＶＳＧＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＳＬＴＳＧＶＨＴＦＰＳＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＭＶＴＶＰＳＳＲＷＰＳＥＴＦＴＣＮＶＡＨＰＡＳＫＴＫＶＤＫＰＶＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＹＩＡＲＤＰＥＶＴＣＶＶＶＡＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＡＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃ２１８Ｄ９ＶＨ４－ｃＩｇＧＢｍ－Ｈ Ｎ４３４Ｈ ［配列番号４３］
ＭＧＷＳＣＩＩＬＦＬＶＡＴＡＴＧＶＨＳＥＶＴＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＦＳＧＦＳＬＳＴＦＧＲＧＶＧＷＩＲＱＲＰＧＲＧＬＥＷＭＧＨＩＷＷＤＤＤＫＹＹＮＰＡＬＫＳＲＬＳＩＴＫＤＴＡＫＮＱＶＦＬＱＬＳＳＭＴＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＩＡＧＧＬＲＲＡＰＹＡＭＤＳＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＴＡＰＳＶＦＰＬＡＰＳＣＧＳＴＳＧＳＴＶＡＬＡＣＬＶＳＧＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＳＬＴＳＧＶＨＴＦＰＳＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＭＶＴＶＰＳＳＲＷＰＳＥＴＦＴＣＮＶＡＨＰＡＳＫＴＫＶＤＫＰＶＰＫＲＥＮＧＲＶＰＲＰＰＤＣＰＫＣＰＡＰＥＭＬＧＧＰＳＶＦＩＦＰＰＫＰＫＤＴＬＬＩＡＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＡＬＤＰＥＤＰＥＶＱＩＳＷＦＶＤＧＫＱＭＱＴＡＫＴＱＰＲＥＥＱＦＡＧＴＹＲＶＶＳＶＬＰＩＧＨＱＤＷＬＫＧＫＱＦＴＣＫＶＮＮＫＡＬＰＳＰＩＥＲＴＩＳＫＡＲＧＱＡＨＱＰＳＶＹＶＬＰＰＳＲＥＥＬＳＫＮＴＶＳＬＴＣＬＩＫＤＦＦＰＰＤＩＤＶＥＷＱＳＮＧＱＱＥＰＥＳＫＹＲＴＴＰＰＱＬＤＥＤＧＳＹＦＬＹＳＫＬＳＶＤＫＳＲＷＱＲＧＤＴＦＩＣＡＶＭＨＥＡＬＨＨＨＹＴＱＥＳＬＳＨＳＰＧＫ
ｃ２１８Ｄ９ＶＨ４［配列番号４４］
ＥＶＴＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＦＳＧＦＳＬＳＴＦＧＲＧＶＧＷＩＲＱＲＰＧＲＧＬＥＷＭＧＨＩＷＷＤＤＤＫＹＹＮＰＡＬＫＳＲＬＳＩＴＫＤＴＡＫＮＱＶＦＬＱＬＳＳＭＴＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＩＡＧＧＬＲＲＡＰＹＡＭＤＳＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
ｃ２１８Ｄ９ＶＬ３－ｃＣＫ［配列番号４５］
ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＳＰＧＥＴＡＳＩＳＣＲＡＳＥＮＩＹＳＳＬＡＷＦＲＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＶＹＡＡＴＮＬＡＤＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＲＩＳＲＶＥＡＤＤＴＧＶＹＹＣＱＨＦＲＤＴＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＮＤＡＱＰＡＶＹＬＦＱＰＳＰＤＱＬＨＴＧＳＡＳＶＶＣＬＬＮＳＦＹＰＫＤＩＮＶＫＷＫＶＤＧＶＩＱＤＴＧＩＱＥＳＶＴＥＱＤＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＭＳＳＴＥＹＬＳＨＥＬＹＳＣＥＩＴＨＫＳＬＰＳＴＬＩＫＳＦＱＲＳＥＣＱＲＶＤ

【表3】

【表4】

本発明は、本明細書に記載の具体的な実施形態によって範囲が限定されるものではない。実際、本明細書に記載されたものに加えて、本発明の様々な変更は、前述の説明から当業者には明らかになるであろう。そのような変更は、添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図されている。

【図1A】

【図1B】

【配列表】

2024531346000001.xml

【手続補正書】

【提出日】2024-04-17

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

１つ以上のアミノ酸置換を含むフラグメント結晶化可能領域（Ｆｃ領域）を含む抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質であって、前記１つ以上のアミノ酸残基置換が、２５２、２５４、２５６、３０８、４３３、４３４、４３６、またはそれらの任意の組み合わせからなる群から選択されるアミノ酸残基位置にあり、前記アミノ酸残基位置が、ＫａｂａｔのようにＥＵインデックスに従ってナンバリングされ：
前記置換が、アミノ酸残基位置２５２にある場合、前記置換が、チロシン残基によるものであり；
前記置換が、アミノ酸残基位置２５４にある場合、前記置換が、トレオニン残基によるものであり；
前記置換が、アミノ酸残基位置２５６にある場合、前記置換が、アスパラギン酸残基またはグルタミン酸残基によるものであり；
前記置換が、アミノ酸残基位置３０８にある場合、前記置換が、プロリン残基によるものであり；
前記置換が、アミノ酸残基位置４３３にある場合、前記置換が、リジン残基またはロイシン残基によるものであり；
前記置換が、アミノ酸残基位置４３４にある場合、前記置換が、フェニルアラニン残基、ヒスチジン残基、またはチロシン残基によるものであり；
前記置換が、アミノ酸残基位置４３６にある場合、前記置換が、トレオニン残基によるものであり；
前記抗体が、重鎖および軽鎖を含み；
前記Ｆｃ領域が、イヌＦｃ領域（ｃＦｃ）およびネコＦｃ領域（ｆＦｃ）からなる群から選択される、抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項2】

前記ｃＦｃまたは前記ｆＦｃが、
アミノ酸残基位置２５２でのチロシン残基による置換およびアミノ酸残基位置２５６でのアスパラギン酸残基による置換；
アミノ酸残基位置２５６でのアスパラギン酸残基による置換およびアミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換；
アミノ酸残基位置３０８でのプロリン残基による置換およびアミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのリジン残基による置換およびアミノ酸残基位置４３４でのフェニルアラニン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのリジン残基による置換およびアミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのロイシン残基による置換およびアミノ酸残基位置４３４でのフェニルアラニン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのロイシン残基による置換およびアミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換およびアミノ酸残基位置４３６でのトレオニン残基による置換；
アミノ酸残基位置２５２でのチロシン残基による置換、アミノ酸残基位置２５４でのトレオニン残基による置換、およびアミノ酸残基位置２５６でのグルタミン酸残基による置換；
アミノ酸残基位置２５６でのアスパラギン酸残基による置換、アミノ酸残基位置３０８でのプロリン残基による置換、およびアミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのリジン残基による置換、アミノ酸残基位置４３４でのフェニルアラニン残基による置換、およびアミノ酸残基位置４３６でのトレオニン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのリジン残基による置換、アミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換、およびアミノ酸残基位置４３６でのトレオニン残基による置換；
アミノ酸残基位置４３３でのロイシン残基による置換、アミノ酸残基位置４３４でのフェニルアラニン残基による置換、およびアミノ酸残基位置４３６でのトレオニン残基による置換；ならびに
アミノ酸残基位置４３３でのロイシン残基による置換、アミノ酸残基位置４３４でのチロシン残基による置換、およびアミノ酸残基位置４３６でのトレオニン残基による置換
からなる群から選択されるアミノ酸残基位置に２つ以上のアミノ酸残基置換を含む、請求項１に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項3】

前記ｃＦｃまたはｆＦｃが、少なくとも、アミノ酸残基位置２５２でのチロシン残基による置換およびアミノ酸残基位置２５６でのアスパラギン酸残基による置換を含む、請求項１または２に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項4】

前記ｆＦｃが、ＩｇＧ－ｌａ Ｆｃ、ＩｇＧ－１ａｍ Ｆｃ、ＩｇＧ－ｌｂ Ｆｃ、ＩｇＧ－１ｂｍ Ｆｃ、ＩｇＧ－２ ＦｃおよびＩｇＧ－２ｍ Ｆｃからなる群から選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項5】

前記ｆＦｃが、配列番号９、配列番号９と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号１０、配列番号１０と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号１１、配列番号１１と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号１２、配列番号１２と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号５０、配列番号５０と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号５１、および配列番号５１と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記ｆＦｃが、前記１つ以上のアミノ酸置換を保持する、請求項４に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項6】

前記ｃＦｃが、ＩｇＧ－Ａ Ｆｃ、ＩｇＧ－Ａｍ Ｆｃ、ＩｇＧ－Ｂ Ｆｃ、ＩｇＧ－Ｂｍ Ｆｃ、ＩｇＧ－Ｃ Ｆｃ、ＩｇＧ－Ｃｍ Ｆｃ、ＩｇＧ－Ｄ ＦｃおよびＩｇＧ－Ｄｍ Ｆｃからなる群から選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項7】

前記ｃＦｃが、配列番号１、配列番号１と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号２、配列番号２と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号３、配列番号３と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号４、配列番号４と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号５、配列番号５と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号６、配列番号６と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号７、配列番号７と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列、配列番号８、および配列番号８と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記ｃＦｃが、前記１つ以上のアミノ酸置換を保持する、請求項６に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項8】

前記ｃＦｃが、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５および配列番号１６からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％または９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含むイヌヒンジ領域をさらに含む、請求項１、２、３、６または７のいずれか一項に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項9】

前記ｃＦｃが、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５および配列番号１６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むイヌヒンジ領域をさらに含む、請求項８に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項10】

対応する野生型イヌＦｃまたはネコＦｃを含む対応する抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質の半減期と比較して増加した半減期を有する、請求項１～９のいずれか一項に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項11】

中程度に酸性のｐＨで新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対して増強された結合親和性を有する、請求項１～１０のいずれか一項に記載の抗体またはＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項12】

配列番号１７のアミノ酸配列、または配列番号１７と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列をさらに含むイヌＩＬ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質であり、前記ｃＦｃが、前記１つ以上のアミノ酸置換を保持する、請求項１、２、３および６～１１のいずれか一項に記載のＩｇＧ Ｆｃ融合タンパク質。

【請求項13】

配列番号１８のアミノ酸配列、または配列番号１８と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を有するアミノ酸配列をさらに含むイヌ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質であり、前記ｃＦｃが、前記１つ以上のアミノ酸置換を保持する、請求項１、２、３および６～１１に記載のＩｇＧ融合タンパク質。

【請求項14】

配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４および配列番号３５からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４および配列番号３５と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を含むアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載のイヌ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質。

【請求項15】

請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体もしくはＩｇＧ融合タンパク質、または請求項１２に記載のイヌ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質、または請求項１３もしくは１４に記載のイヌ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質、またはそれらの任意の組み合わせをコードする核酸。

【請求項16】

請求項１５に記載の核酸を含む発現ベクター。

【請求項17】

請求項１６に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。

【請求項18】

イヌ抗体またはイヌ化抗体からなる群から選択される、請求項１、２、３および６～１１のいずれか一項に記載の抗体。

【請求項19】

イヌインターロイキン－３１受容体アルファ（ｃＩＬ－３１ＲＡ）に対するイヌ化抗体であり、前記重鎖が、配列番号４４のアミノ酸配列を含む可変領域を含む、請求項１８に記載のイヌ化抗体。

【請求項20】

前記重鎖が、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２および配列番号４３からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２および配列番号４３と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を含むアミノ酸配列を含む、請求項１９に記載のｃＩＬ－３１ＲＡに対するイヌ化抗体。

【請求項21】

前記イヌ化抗体の前記軽鎖が、配列番号４５のアミノ酸配列を含むか、または配列番号４５と少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、９９％の同一性を含む、請求項１９または２０に記載のｃＩＬ－３１ＲＡに対するイヌ化抗体。

【請求項22】

請求項２１に記載のイヌ化抗体の軽鎖をコードする核酸。

【請求項23】

請求項１８～２１のいずれか一項に記載のイヌ化抗体の重鎖をコードする核酸。

【請求項24】

請求項２２もしくは２３に記載の核酸を含むか、または請求項２２および２３に記載の核酸を含む発現ベクター。

【請求項25】

請求項２４に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。

【請求項26】

請求項１２に記載のイヌ－１３Ｒα１－イヌＩｇＧ融合タンパク質、請求項１３もしくは１４に記載のイヌ－１３Ｒα２－イヌＩｇＧ融合タンパク質、請求項１９～２１のいずれか一項に記載のイヌ化抗体、請求項１６もしくは２４に記載の発現ベクター、またはそれらの任意の組み合わせと、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。

【請求項27】

アトピー性皮膚炎を有するイヌを処置する方法であって、請求項２６に記載の医薬組成物を前記イヌに投与することを含む、方法。

【国際調査報告】