特表 2024-531353 抗ＩＬ４Ｒ抗体の医薬組成物及びその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-08-29

(54)【発明の名称】抗ＩＬ４Ｒ抗体の医薬組成物及びその使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20240822BHJP

   A61K 9/10 20060101ALI20240822BHJP

   A61K 47/04 20060101ALI20240822BHJP

   A61K 47/12 20060101ALI20240822BHJP

   A61K 47/22 20060101ALI20240822BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20240822BHJP

   A61K 47/18 20170101ALI20240822BHJP

   A61P 37/08 20060101ALI20240822BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20240822BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240822BHJP

   C07K 16/28 20060101ALI20240822BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 N

A61K39/395 D

A61K9/10

A61K47/04

A61K47/12

A61K47/22

A61K47/26

A61K47/18

A61P37/08

A61P37/06

A61P35/00

C07K16/28 ZNA

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024509458

(86)(22)【出願日】2022-08-25

(85)【翻訳文提出日】2024-03-06

(86)【国際出願番号】 CN2022114652

(87)【国際公開番号】W WO2023025217

(87)【国際公開日】2023-03-02

(31)【優先権主張番号】202110988008.3

(32)【優先日】2021-08-26

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】516089784

【氏名又は名称】チア タイ ティエンチン ファーマシューティカル グループ カンパニー リミテッド

【氏名又は名称原語表記】Ｃｈｉａ Ｔａｉ Ｔｉａｎｑｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｇｒｏｕｐ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ．３６９ Ｙｕｚｈｏｕ Ｓｏｕｔｈ Ｒｄ．，Ｌｉａｎｙｕｎｇａｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ ２２２０６２ Ｃｈｉｎａ

(74)【代理人】

【識別番号】110001195

【氏名又は名称】弁理士法人深見特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】程 艶 菊

(72)【発明者】

【氏名】李 盈 淳

(72)【発明者】

【氏名】孔 令 ▲ジエ▼

(72)【発明者】

【氏名】郭 暁 ▲ルー▼

(72)【発明者】

【氏名】趙 偉

【テーマコード（参考）】

4C076

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C076BB11

4C076CC03

4C076CC07

4C076CC27

4C076DD26Z

4C076DD38Q

4C076DD41Z

4C076DD51Q

4C076DD60Z

4C076DD67Q

4C076EE23F

4C076FF16

4C076FF36

4C076FF61

4C076FF63

4C085AA13

4C085AA14

4C085BB11

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045DA76

4H045EA20

4H045FA74

(57)【要約】

本発明は、抗ＩＬ４Ｒ抗体の医薬組成物及びその使用を提供する。前記医薬組成物は、抗ＩＬ４Ｒ抗体又はその抗原結合断片及び緩衝剤を含み、前記医薬組成物は、界面活性剤及び安定化剤をさらに含んでもよい。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

（ａ）抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）緩衝剤と、（ｃ）界面活性剤と、（ｄ）安定化剤とを含む医薬組成物。

【請求項2】

前記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、重鎖可変領域ＣＤＲ３、軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含み、前記重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、重鎖可変領域ＣＤＲ３、軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３はそれぞれ、配列番号１、２、３、４、５及び６で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項3】

前記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、配列番号７、８又は９で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み、ここで、配列番号８のアミノ酸配列は、ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＶＸ_１ＶＸ_２ＴＩＮＳＮＧＧＳＴＳＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＦＦＲＦＲＮＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号８におけるＸ_１＝Ｗ且つＸ_２＝Ｓ、又はＸ_１＝Ｌ且つＸ_２＝Ａ、又はＸ_１＝Ｗ且つＸ_２＝Ａ）であり、及び／又は、
前記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、配列番号１０、１１又は１２で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、ここで、配列番号１１のアミノ酸配列は、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＴＳＥＮＩＹＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＸ_１ＬＸ_２ＹＮＡＫＴＬＡＥＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＹＧＰＰＴＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１１におけるＸ_１＝Ｌ且つＸ_２＝Ｉ、又はＸ_１＝Ｆ且つＸ_２＝Ｖ、又はＸ_１＝Ｆ且つＸ_２＝Ｉ）である、請求項１又は２に記載の医薬組成物。

【請求項4】

前記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、
（１）それぞれ配列番号７及び１０で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列、
（２）それぞれ配列番号８及び１１で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列（配列番号８におけるＸ_１＝Ｗ且つＸ_２＝Ｓ）、
（３）それぞれ配列番号８及び１２で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列（配列番号８におけるＸ_１＝Ｗ且つＸ_２＝Ｓ）、
（４）それぞれ配列番号９及び１１で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列、
（５）それぞれ配列番号９及び１２で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列、
（６）それぞれ配列番号８及び１１で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列（配列番号８におけるＸ_１＝Ｌ且つＸ_２＝Ａ）、
（７）それぞれ配列番号８及び１２で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列（配列番号８におけるＸ_１＝Ｌ且つＸ_２＝Ａ）、
（８）それぞれ配列番号８及び１１で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列（配列番号８におけるＸ_１＝Ｗ且つＸ_２＝Ａ）、又は、
（９）それぞれ配列番号８及び１２で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列（配列番号８におけるＸ_１＝Ｗ且つＸ_２＝Ａ）、を含み、
ここで、配列番号８のアミノ酸配列は、ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＶＸ_１ＶＸ_２ＴＩＮＳＮＧＧＳＴＳＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＦＦＲＦＲＮＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳであり、
配列番号１１のアミノ酸配列は、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＴＳＥＮＩＹＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＸ_１ＬＸ_２ＹＮＡＫＴＬＡＥＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＹＧＰＰＴＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１１におけるＸ_１＝Ｌ且つＸ_２＝Ｉ、Ｘ_１＝Ｆ且つＸ_２＝Ｖ、又はＸ_１＝Ｆ且つＸ_２＝Ｉ）である、
請求項１～３のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項5】

前記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片はさらに、配列番号１３で表されるアミノ酸配列を含む重鎖定常領域と、配列番号１４で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖定常領域とを含む、請求項１～４のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項6】

前記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片の濃度は３０ｍｇ／ｍＬ～３００ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ～２５０ｍｇ／ｍＬ、７０ｍｇ／ｍＬ～２００ｍｇ／ｍＬ、１００ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬ、１２０ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬ、１２０ｍｇ／ｍＬ～１５０ｍｇ／ｍＬ、又は１５０ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬである、請求項１～５のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項7】

前記緩衝剤は、リン酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤を含み、好ましくは、前記リン酸塩緩衝剤はリン酸ナトリウム緩衝剤であり、前記酢酸塩緩衝剤は酢酸ナトリウム－酢酸緩衝剤であり、及び／又は、前記ヒスチジン塩緩衝剤はヒスチジン－塩酸ヒスチジン緩衝剤であり、所望により、前記緩衝剤の濃度は１ｍＭ～１００ｍＭ、２ｍＭ～８０ｍＭ、４ｍＭ～６０ｍＭ、８ｍＭ～４０ｍＭ、１０ｍＭ～３０ｍＭ、１０ｍＭ～２０ｍＭ、又は２０ｍＭ～３０ｍＭである、請求項１～６のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項8】

前記界面活性剤は、ポリソルベート８０又はポリソルベート２０を含み、所望により、前記界面活性剤の濃度は０．０１ｍｇ／ｍＬ～２ｍｇ／ｍＬ、０．０５ｍｇ／ｍＬ～１ｍｇ／ｍＬ、０．１ｍｇ／ｍＬ～０．８ｍｇ／ｍＬ、０．２ｍｇ／ｍＬ～０．６ｍｇ／ｍＬ、又は０．２ｍｇ／ｍＬ～０．４ｍｇ／ｍＬである、請求項１～７のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項9】

前記安定化剤は、トレハロース、マンニトール、スクロース、アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、プロリン又は塩化ナトリウムから選択され、所望により、前記スクロースの濃度は１０ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ～８０ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬ～６０ｍｇ／ｍＬ、４０ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬ、又は５０ｍｇ／ｍＬ～６０ｍｇ／ｍＬであり、前記アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩の濃度は１０ｍＭ～１００ｍＭ、２０ｍＭ～８０ｍＭ、３０ｍＭ～６０ｍＭ、４０ｍＭ～５０ｍＭ、又は５０ｍＭ～６０ｍＭであり、前記プロリンの濃度は６０ｍＭ～６００ｍＭ、８０ｍＭ～５００ｍＭ、１００ｍＭ～４５０ｍＭ、１２０ｍＭ～４００ｍＭ、１５０ｍＭ～３５０ｍＭ、２００ｍＭ～３５０ｍＭ、又は２５０ｍＭ～３５０ｍＭであり、及び／又は、前記塩化ナトリウムの濃度は１ｍＭ～８０ｍＭ、２ｍＭ～６０ｍＭ、４ｍＭ～５０ｍＭ、８ｍＭ～４０ｍＭ、１０ｍＭ～３０ｍＭ、又は１０ｍＭ～２０ｍＭである、請求項１～８のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項10】

前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である、請求項１～９のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項11】

前記医薬組成物は、（ａ）３０ｍｇ／ｍＬ～３００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）１ｍＭ～１００ｍＭの緩衝剤と、（ｃ）０．０１ｍｇ／ｍＬ～２ｍｇ／ｍＬの界面活性剤と、（ｄ）トレハロース、マンニトール、スクロース、アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、プロリン及び／又は塩化ナトリウムを含む安定化剤とを含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３であり、
所望により、前記医薬組成物は、（ａ）３０ｍｇ／ｍＬ～３００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）１ｍＭ～１００ｍＭのリン酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）０．０１ｍｇ／ｍＬ～２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０又はポリソルベート２０と、（ｄ）１０ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬのスクロース、１０ｍＭ～１００ｍＭのアルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、６０ｍＭ～６００ｍＭのプロリン、及び／又は１ｍＭ～８０ｍＭの塩化ナトリウムとを含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である、請求項１～１０のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項12】

抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片を含む凍結乾燥製剤であって、請求項１～１１のいずれか１項に記載の医薬組成物を凍結乾燥させることによって得られたもの、又は、溶解して請求項１～１１のいずれか１項に記載の医薬組成物を形成できるものである、前記凍結乾燥製剤。

【請求項13】

被験者における過剰なＩＬ４及び／又はＩＬ１３シグナル伝達に関連するアレルギー性疾患の治療方法であって、請求項１～１１のいずれか１項に記載の医薬組成物又は請求項１２に記載の凍結乾燥製剤を被験者に投与することを含み、好ましくは、前記アレルギー性疾患はアトピー性皮膚炎、アレルギー反応、アレルギー性鼻炎又はアレルギー性喘息である、前記治療方法。

【請求項14】

被験者におけるＳＴＡＴ６活性化の増加に関連する腫瘍の治療方法であって、請求項１～１１のいずれか１項に記載の医薬組成物又は請求項１２に記載の凍結乾燥製剤を被験者に投与することを含み、好ましくは、前記腫瘍は固形腫瘍であり、より好ましくは、前記腫瘍は黒色腫、肺癌、腎臓癌、前立腺癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、胃癌、膵臓癌、卵巣癌及び／又は尿路上皮癌である、前記治療方法。

【請求項15】

被験者におけるＩＬ４及び／又はＩＬ１３シグナル伝達又は被験者における２型免疫応答を低減する方法であって、請求項１～１１のいずれか１項に記載の医薬組成物又は請求項１２に記載の凍結乾燥製剤を被験者に投与することを含み、好ましくは、前記ＩＬ４及び／又はＩＬ１３シグナル伝達は、Ｂ細胞、好酸球、マクロファージの活性化及び／又は増殖、線維芽細胞の増殖及び平滑肌の増殖として現れるものであり、好ましくは、前記平滑筋細胞の増殖は気道平滑筋細胞の増殖である、前記方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は製剤の分野に属し、具体的には、本開示は、抗ＩＬ４Ｒ抗体又はその抗原結合断片を含む安定な医薬組成物、及び、過剰なＩＬ４及び／又はＩＬ１３シグナル伝達に関連する疾患の治療及び／又は予防のための当該医薬組成物の使用に関する。

【背景技術】

【0002】

アトピー性皮膚炎、アナフィラキシー、アレルギー性鼻炎、アレルギー性喘息などの２型炎症関連アレルギー性疾患は、世界中で３０億人以上を苦しめており、その発生率は増加し続けている。衛生仮説によれば、発生率が高い理由の一つは、生活水準の向上につれて感染性物質にさらされる機会が減少し、免疫系が本来は無害なアレルゲンに対してより敏感になることである（Ｓｔｅｐｈｅｎ Ｊ．Ｇａｌｌｉ ｅｔ ａｌ．，（２００８）Ｎａｔｕｒｅ ４５４（７２０３）：４４５－４５４）。インターロイキン４（ＩＬ４又はＩＬ－４）及びＩＬ－１３は、２型免疫における２つの重要な因子であり、免疫グロブリンＥの産生や炎症部位での自然免疫細胞の動員など、２型炎症に関連する主要マーカーのほとんどを駆動するために必要なものである（Ｇｒｕｎｉｎｇ Ｇ ｅｔ ａｌ．，（１９９８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８２：２２６１－２２６３；Ｒａｎｋｉｎ ＪＡ ｅｔ ａｌ．，（１９９６）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９３：７８２１－７８２５；Ｗｉｌｌｓ－Ｋａｒｐ Ｍ ｅｔ ａｌ．，（１９９８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８２：２２５８－２２６１）。

【0003】

ＩＬ－４及びＩＬ－１３は、細胞表面の受容体に結合することで細胞機能を調節し、転写機構を活性化する。具体的には、ＩＬ－４はまず、ピコモルの親和性でＩＬ－４Ｒα鎖に結合し、次にＩＬ－２Ｒγ（γｃ）を動員してＩ型受容体複合体を形成するか、又は、ＩＬ－１３Ｒα１を動員してＩＩ型受容体複合体を形成する。研究により、非造血細胞はγｃを発現しないか、低レベルで発現し、ＩＬ－１３Ｒα１を高発現するのに対して、リンパ球はその逆であり、骨髄細胞はこれらの中間に位置することが判明した。ＩＩ型受容体複合体は、ＩＬ－１３のＩＬ－１３Ｒα１鎖への結合（ナノモルの親和性による結合）と、ＩＬ－４Ｒα鎖のさらなる動員によっても形成される。さらに、ＩＬ－１３はピコモルの親和性でＩＬ－１３Ｒα２に結合し、デコイ受容体の形成を開始させることもできる（Ｉｒｉｎａ Ｇ．Ｌｕｚｉｎａ ｅｔ ａｌ．，（２０１２）Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ９２（４）：７５３－７６４）。ＩＬ－４受容体複合体が形成されると、細胞内シグナル伝達分子が活性化され、ＳＴＡＴ６及びＩＲＳシグナル伝達はＩ型ＩＬ－４受容体に応答して活性化されるが、ＩＩ型ＩＬ－４受容体は、ＩＲＳを有意に活性化することができない（Ｈｅｌｌｅｒ ＮＭ ｅｔ ａｌ．，（２００８）Ｓｃｉ Ｓｉｇｎａｌ １（５１）：ｒａ１７－ｒａ１７）。ＳＴＡＴ６シグナル伝達は、Ｔ_Ｈ２細胞分化及びＩＬ－４の産生にとって非常に重要であり、ＩＲＳはＰＩ３Ｋ及びｍＴＯＲシグナル伝達経路を活性化することができる（Ｇａｄａｎｉ ＳＰ ｅｔ ａｌ．，（２０１２）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １８９：４２１３－４２１９）。研究によれば、過剰なＩＬ－４及び／又はＩＬ－１３シグナル伝達はアレルギー性疾患を引き起こす可能性がある。また、他の研究では、ＳＴＡＴ６阻害剤が前立腺がん細胞の増殖を阻害できることが分かっている（Ｎａｐｐｏ Ｇ ｅｔ ａｌ．，（２０１７）Ｏｎｃｏｇｅｎｅｓｉｓ ６（５）：ｅ３４２）。したがって、ＩＬ－４及び／又はＩＬ－１３媒介シグナル伝達を調節する治療用抗体が相次いで開発され、その一例として、ＩＬ４Ｒに対する抗体Ｄｕｐｉｌｕｍａｂが挙げられる。

【0004】

ヒトを対象とする抗体薬は、保存及びその後の使用中に生物活性及び安定性を維持する必要があるが、抗体薬は分子量が大きく、構造が複雑で、分解、重合又は望ましくない化学修飾が発生することで不安定になりやすい。そのため、当分野では、上記の問題を解決すべく、製造及び患者への投与に適するとともに長い保存期間を有する抗体薬を提供できるように、安定な抗体医薬組成物（例えば、抗ＩＬ４Ｒ抗体医薬組成物）を開発する必要がある。しかしながら、抗体が高濃度で存在する場合、高レベルの凝集、生理学的水準より高い浸透圧、特に粘度の増加による注入性の低下などの問題を解決する必要がある。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

本開示は、高レベルの凝集を引き起こすことなく、高濃度の抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片を含み、許容可能な粘度レベルを有する医薬組成物を提供する。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本開示による医薬組成物は、（ａ）抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）緩衝剤と、（ｃ）界面活性剤と、（ｄ）安定化剤とを含む。

【0007】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片の濃度は、３０ｍｇ／ｍＬ～３００ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ～２５０ｍｇ／ｍＬ、７０ｍｇ／ｍＬ～２００ｍｇ／ｍＬ、１００ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬ、１２０ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬ、１２０ｍｇ／ｍＬ～１５０ｍｇ／ｍＬ、又は１５０ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片の濃度は約１５０ｍｇ／ｍＬである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片の濃度は約１７５ｍｇ／ｍＬである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片の濃度の一例としては、約７０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１１０ｍｇ／ｍＬ、約１２０ｍｇ／ｍＬ、約１２５ｍｇ／ｍＬ、約１３０ｍｇ／ｍＬ、約１３５ｍｇ／ｍＬ、約１４０ｍｇ／ｍＬ、約１４５ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、約１５５ｍｇ／ｍＬ、約１６０ｍｇ／ｍＬ、約１６５ｍｇ／ｍＬ、約１７０ｍｇ／ｍＬ、約１７５ｍｇ／ｍＬ、約１８０ｍｇ／ｍＬ、約１９０ｍｇ／ｍＬ、又は約２００ｍｇ／ｍＬが挙げられるが、これらに限定されない。

【0008】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記緩衝剤の一例としては、リン酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤が挙げられる。上記医薬組成物における上記緩衝剤の好ましい例としては、ヒスチジン塩緩衝剤が挙げられる。いくつかの特定の実施形態において、前記リン酸塩緩衝剤の一例としては、リン酸ナトリウム緩衝剤又はリン酸カリウム緩衝剤が挙げられ、前記酢酸塩緩衝剤の一例としては、酢酸ナトリウム緩衝剤、酢酸カリウム緩衝剤又は酢酸ナトリウム－酢酸緩衝剤が挙げられ、前記ヒスチジン塩緩衝剤の一例としては、ヒスチジン－塩酸緩衝剤、ヒスチジン－酢酸緩衝剤、ヒスチジン－塩酸ヒスチジン緩衝剤又は塩酸ヒスチジン緩衝剤が挙げられる。

【0009】

いくつかの特定の実施形態において、前記リン酸ナトリウム緩衝剤は、リン酸水素二ナトリウム及びリン酸二水素ナトリウムを含む。いくつかの特定の実施形態において、前記酢酸ナトリウム－酢酸緩衝剤は酢酸ナトリウム及び酢酸を含む。いくつかの特定の実施形態において、前記ヒスチジン－塩酸ヒスチジン緩衝剤はヒスチジン及び塩酸ヒスチジンを含む。

【0010】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記緩衝剤の濃度は１ｍＭ～１００ｍＭ、２ｍＭ～８０ｍＭ、４ｍＭ～６０ｍＭ、８ｍＭ～４０ｍＭ、１０ｍＭ～３０ｍＭ、１０ｍＭ～２０ｍＭ、又は２０ｍＭ～３０ｍＭである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記緩衝剤の濃度は約２０ｍＭである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記緩衝剤の濃度の一例としては、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１１ｍＭ、約１２ｍＭ、約１３ｍＭ、約１４ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、約２０ｍＭ、約２１ｍＭ、約２２ｍＭ、約２３ｍＭ、約２４ｍＭ、約２５ｍＭ、約２６ｍＭ、約２７ｍＭ、約２８ｍＭ、約３０ｍＭ、約３２ｍＭ、約３４ｍＭ、約３６ｍＭ、約３８ｍＭ、又は約４０ｍＭが挙げられるが、これらに限定されない。

【0011】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記緩衝剤のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記緩衝剤のｐＨは約５．８である。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記緩衝剤のｐＨは約６である。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記緩衝剤のｐＨは約５である。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記緩衝剤のｐＨの一例としては、約５、約５．１、約５．２、約５．３、約５．４、約５．５、約５．６、約５．７、約５．８、約５．９、約６、約６．１、約６．２、約６．３、約６．４、約６．５、約６．６、約６．７、約６．８、約６．９、又は約７が挙げられるが、これらに限定されない。

【0012】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記界面活性剤は、ポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８１又はポリソルベート８５）、ポロキサマー（例えば、ポロキサマー１８１、ポロキサマー１８８又はポロキサマー４０７）、ポリエチレングリコール又はポリヒドロキシ体などから選択される。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記界面活性剤はポリソルベート８０である。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記界面活性剤はポリソルベート２０である。

【0013】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記界面活性剤の濃度は０．０１ｍｇ／ｍＬ～２ｍｇ／ｍＬ、０．０５ｍｇ／ｍＬ～１ｍｇ／ｍＬ、０．１ｍｇ／ｍＬ～０．８ｍｇ／ｍＬ、０．２ｍｇ／ｍＬ～０．６ｍｇ／ｍＬ、又は０．２ｍｇ／ｍＬ～０．４ｍｇ／ｍＬである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記界面活性剤の濃度は約０．４ｍｇ／ｍＬである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記界面活性剤の濃度の一例としては、約０．０５ｍｇ／ｍＬ、約０．０６ｍｇ／ｍＬ、約０．０７ｍｇ／ｍＬ、約０．０８ｍｇ／ｍＬ、約０．０９ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬ、約０．２ｍｇ／ｍＬ、約０．３ｍｇ／ｍＬ、約０．４ｍｇ／ｍＬ、約０．５ｍｇ／ｍＬ、約０．６ｍｇ／ｍＬ、約０．７ｍｇ／ｍＬ、約０．８ｍｇ／ｍＬ、約０．９ｍｇ／ｍＬ、又は約１ｍｇ／ｍＬが挙げられるが、これらに限定されない。

【0014】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記安定化剤は、トレハロース、マンニトール、スクロース、アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、プロリン又は塩化ナトリウムから選択される１つ以上である。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記安定化剤はスクロースを含む。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記安定化剤は、アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩を含む。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記安定化剤はプロリンを含む。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記安定化剤は塩化ナトリウムを含む。前記アルギニンの薬学的に許容される塩の一例としては、塩酸アルギニン又は酢酸アルギニンが挙げられる。いくつかの特定の実施形態において、上記医薬組成物における上記安定化剤は、スクロース及び塩酸アルギニンを含む。いくつかの特定の実施形態において、上記医薬組成物における上記安定化剤は、プロリン及び塩化ナトリウムを含む。いくつかの特定の実施形態において、上記医薬組成物における上記安定化剤は、スクロース、プロリン及び塩化ナトリウムを含む。

【0015】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記スクロースの濃度は１０ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ～８０ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬ～６０ｍｇ／ｍＬ、４０ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬ、又は５０ｍｇ／ｍＬ～６０ｍｇ／ｍＬである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記スクロースの濃度は約５０ｍｇ／ｍＬである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記スクロースの濃度の一例としては、約２０ｍｇ／ｍＬ、約２２ｍｇ／ｍＬ、約２４ｍｇ／ｍＬ、約２６ｍｇ／ｍＬ、約２８ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約３２ｍｇ／ｍＬ、約３４ｍｇ／ｍＬ、約３６ｍｇ／ｍＬ、約３８ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４２ｍｇ／ｍＬ、約４４ｍｇ／ｍＬ、約４６ｍｇ／ｍＬ、約４８ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約５２ｍｇ／ｍＬ、約５４ｍｇ／ｍＬ、約５６ｍｇ／ｍＬ、約５８ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約６２ｍｇ／ｍＬ、約６４ｍｇ／ｍＬ、約６６ｍｇ／ｍＬ、約６８ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約７２ｍｇ／ｍＬ、約７４ｍｇ／ｍＬ、約７６ｍｇ／ｍＬ、約７８ｍｇ／ｍＬ、又は約８０ｍｇ／ｍＬが挙げられるが、これらに限定されない。

【0016】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩（例えば、塩酸アルギニン）の濃度は１０ｍＭ～１００ｍＭ、２０ｍＭ～８０ｍＭ、３０ｍＭ～６０ｍＭ、４０ｍＭ～５０ｍＭ、又は５０ｍＭ～６０ｍＭである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩（例えば、塩酸アルギニン）の濃度は約５０ｍＭである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩（例えば、塩酸アルギニン）の濃度の一例としては、約２０ｍＭ、約２２ｍＭ、約２４ｍＭ、約２６ｍＭ、約２８ｍＭ、約３０ｍＭ、約３２ｍＭ、約３４ｍＭ、約３６ｍＭ、約３８ｍＭ、約４０ｍＭ、約４２ｍＭ、約４４ｍＭ、約４６ｍＭ、約４８ｍＭ、約５０ｍＭ、約５２ｍＭ、約５４ｍＭ、約５６ｍＭ、約５８ｍＭ、約６０ｍＭ、約６２ｍＭ、約６４ｍＭ、約６６ｍＭ、約６８ｍＭ、約７０ｍＭ、約７２ｍＭ、約７４ｍＭ、約７６ｍＭ、約７８ｍＭ、又は約８０ｍＭが挙げられるが、これらに限定されない。

【0017】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記プロリンの濃度は６０ｍＭ～６００ｍＭ、８０ｍＭ～５００ｍＭ、１００ｍＭ～４５０ｍＭ、１２０ｍＭ～４００ｍＭ、１５０ｍＭ～３５０ｍＭ、２００ｍＭ～３５０ｍＭ、又は２５０ｍＭ～３５０ｍＭである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記プロリンの濃度は約２５０ｍＭである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記プロリンの濃度は約３５０ｍＭである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記プロリンの濃度の一例としては、約１２０ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１４０ｍＭ、約１５０ｍＭ、約１６０ｍＭ、約１７０ｍＭ、約１８０ｍＭ、約１９０ｍＭ、約２００ｍＭ、約２１０ｍＭ、約２２０ｍＭ、約２３０ｍＭ、約２４０ｍＭ、約２５０ｍＭ、約２６０ｍＭ、約２７０ｍＭ、約２８０ｍＭ、約２９０ｍＭ、約３００ｍＭ、約３１０ｍＭ、約３２０ｍＭ、約３３０ｍＭ、約３４０ｍＭ、約３５０ｍＭ、約３６０ｍＭ、約３７０ｍＭ、約３８０ｍＭ、約３９０ｍＭ、又は約４００ｍＭが挙げられるが、これらに限定されない。

【0018】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記塩化ナトリウムの濃度は１ｍＭ～８０ｍＭ、２ｍＭ～６０ｍＭ、４ｍＭ～５０ｍＭ、８ｍＭ～４０ｍＭ、１０ｍＭ～３０ｍＭ、又は１０ｍＭ～２０ｍＭである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記塩化ナトリウムの濃度は約２０ｍＭである。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物における上記塩化ナトリウムの濃度の一例としては、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１１ｍＭ、約１２ｍＭ、約１３ｍＭ、約１４ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、約２０ｍＭ、約２１ｍＭ、約２２ｍＭ、約２３ｍＭ、約２４ｍＭ、約２５ｍＭ、約２６ｍＭ、約２７ｍＭ、約２８ｍＭ、約２９ｍＭ、約３０ｍＭ、約３２ｍＭ、約３４ｍＭ、約３６ｍＭ、約３８ｍＭ、又は約４０ｍＭが挙げられるが、これらに限定されない。

【0019】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物のｐＨは約５．８である。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物のｐＨは約６である。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物のｐＨは約５である。いくつかの実施形態において、上記医薬組成物のｐＨの一例としては、約５、約５．１、約５．２、約５．３、約５．４、約５．５、約５．６、約５．７、約５．８、約５．９、約６、約６．１、約６．２、約６．３、約６．４、約６．５、約６．６、約６．７、約６．８、約６．９、又は約７が挙げられるが、これらに限定されない。

【0020】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）リン酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤及び／又はヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）ポリソルベート８０又はポリソルベート２０と、（ｄ）トレハロース、マンニトール、スクロース、アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、プロリン及び／又は塩化ナトリウムとを含む。

【0021】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）リン酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）ポリソルベート８０と、（ｄ）スクロース、アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、プロリン及び／又は塩化ナトリウムとを含む。

【0022】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）ヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）ポリソルベート８０と、（ｄ）スクロース及びアルギニン若しくはその薬学的に許容される塩とを含む。

【0023】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）ヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）ポリソルベート８０と、（ｄ）スクロース、プロリン及び塩化ナトリウムとを含む。

【0024】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）ヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）ポリソルベート８０と、（ｄ）プロリン及び塩化ナトリウムとを含む。

【0025】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）ヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）ポリソルベート８０と、（ｄ）プロリンとを含む。

【0026】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）３０ｍｇ／ｍＬ～３００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）１ｍＭ～１００ｍＭの緩衝剤と、（ｃ）０．０１ｍｇ／ｍＬ～２ｍｇ／ｍＬの界面活性剤と、（ｄ）トレハロース、マンニトール、スクロース、アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、プロリン及び／又は塩化ナトリウムを含む安定化剤とを含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0027】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）５０ｍｇ／ｍＬ～２５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）２ｍＭ～８０ｍＭの緩衝剤と、（ｃ）０．０５ｍｇ／ｍＬ～１ｍｇ／ｍＬの界面活性剤と、（ｄ）トレハロース、マンニトール、スクロース、アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、プロリン及び／又は塩化ナトリウムを含む安定化剤とを含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0028】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）７０ｍｇ／ｍＬ～２００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）４ｍＭ～６０ｍＭの緩衝剤と、（ｃ）０．１ｍｇ／ｍＬ～０．８ｍｇ／ｍＬの界面活性剤と、（ｄ）トレハロース、マンニトール、スクロース、アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、プロリン及び／又は塩化ナトリウムを含む安定化剤とを含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0029】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）１００ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬ又は１２０ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）８ｍＭ～４０ｍＭ又は１０ｍＭ～３０ｍＭの緩衝剤と、（ｃ）０．２ｍｇ／ｍＬ～０．６ｍｇ／ｍＬの界面活性剤と、（ｄ）トレハロース、マンニトール、スクロース、アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、プロリン及び／又は塩化ナトリウムを含む安定化剤とを含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0030】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）１２０ｍｇ／ｍＬ～１５０ｍｇ／ｍＬ又は１５０ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）１０ｍＭ～２０ｍＭ又は２０ｍＭ～３０ｍＭの緩衝剤と、（ｃ）０．２ｍｇ／ｍＬ～０．４ｍｇ／ｍＬの界面活性剤と、（ｄ）トレハロース、マンニトール、スクロース、アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、プロリン及び／又は塩化ナトリウムを含む安定化剤とを含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0031】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）３０ｍｇ／ｍＬ～３００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）１ｍＭ～１００ｍＭのリン酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）０．０１ｍｇ／ｍＬ～２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０又はポリソルベート２０と、（ｄ）１０ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬのスクロース、１０ｍＭ～１００ｍＭのアルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、６０ｍＭ～６００ｍＭのプロリン、及び／又は１ｍＭ～８０ｍＭの塩化ナトリウムとを含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0032】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）５０ｍｇ／ｍＬ～２５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）２ｍＭ～８０ｍＭのリン酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）０．０５ｍｇ／ｍＬ～１ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０又はポリソルベート２０と、（ｄ）２０ｍｇ／ｍＬ～８０ｍｇ／ｍＬのスクロース、２０ｍＭ～８０ｍＭのアルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、８０ｍＭ～５００ｍＭのプロリン、及び／又は２ｍＭ～６０ｍＭの塩化ナトリウムとを含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0033】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）７０ｍｇ／ｍＬ～２００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）４ｍＭ～６０ｍＭのリン酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）０．１ｍｇ／ｍＬ～０．８ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０又はポリソルベート２０と、（ｄ）３０ｍｇ／ｍＬ～６０ｍｇ／ｍＬのスクロース、３０ｍＭ～６０ｍＭのアルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、１００ｍＭ～４５０ｍＭ又は１２０ｍＭ～４００ｍＭのプロリン、及び／又は４ｍＭ～５０ｍＭの塩化ナトリウムとを含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0034】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）１００ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬ又は１２０ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）８ｍＭ～４０ｍＭ又は１０ｍＭ～３０ｍＭのリン酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）０．２ｍｇ／ｍＬ～０．６ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０又はポリソルベート２０と、（ｄ）４０ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬのスクロース、４０ｍＭ～５０ｍＭのアルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、１５０ｍＭ～３５０ｍＭのプロリン、及び／又は８ｍＭ～４０ｍＭの塩化ナトリウムとを含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0035】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）１２０ｍｇ／ｍＬ～１５０ｍｇ／ｍＬ又は１５０ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）１０ｍＭ～２０ｍＭ又は２０ｍＭ～３０ｍＭのリン酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）０．２ｍｇ／ｍＬ～０．４ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０又はポリソルベート２０と、（ｄ）５０ｍｇ／ｍＬ～６０ｍｇ／ｍＬのスクロース、５０ｍＭ～６０ｍＭのアルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、２００ｍＭ～３５０ｍＭ又は２５０ｍＭ～３５０ｍＭのプロリン、及び／又は１０ｍＭ～３０ｍＭ又は１０ｍＭ～２０ｍＭの塩化ナトリウムとを含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0036】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）３０ｍｇ／ｍＬ～３００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）１ｍＭ～１００ｍＭのリン酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）０．０１ｍｇ／ｍＬ～２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０と、（ｄ）６０ｍＭ～６００ｍＭのプロリン及び１ｍＭ～８０ｍＭの塩化ナトリウムとを含み、所望により、１０ｍｇ／ｍＬ～１００ｍｇ／ｍＬのスクロースをさらに含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0037】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）５０ｍｇ／ｍＬ～２５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）２ｍＭ～８０ｍＭのリン酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）０．０５ｍｇ／ｍＬ～１ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０と、（ｄ）８０ｍＭ～５００ｍＭのプロリン及び２ｍＭ～６０ｍＭの塩化ナトリウムとを含み、所望により、２０ｍｇ／ｍＬ～８０ｍｇ／ｍＬのスクロースをさらに含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0038】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）７０ｍｇ／ｍＬ～２００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）４ｍＭ～６０ｍＭのリン酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）０．１ｍｇ／ｍＬ～０．８ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０と、（ｄ）１００ｍＭ～４５０ｍＭ又は１２０ｍＭ～４００ｍＭのプロリン及び４ｍＭ～５０ｍＭの塩化ナトリウムとを含み、所望により、３０ｍｇ／ｍＬ～６０ｍｇ／ｍＬのスクロースをさらに含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0039】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）１００ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬ又は１２０ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）８ｍＭ～４０ｍＭ又は１０ｍＭ～３０ｍＭのリン酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）０．２ｍｇ／ｍＬ～０．６ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０と、（ｄ）１５０ｍＭ～３５０ｍＭのプロリン及び８ｍＭ～４０ｍＭの塩化ナトリウムとを含み、所望により、４０ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬのスクロースをさらに含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0040】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）１２０ｍｇ／ｍＬ～１５０ｍｇ／ｍＬ又は１５０ｍｇ／ｍＬ～１８０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）１０ｍＭ～２０ｍＭ又は２０ｍＭ～３０ｍＭのリン酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤と、（ｃ）０．２ｍｇ／ｍＬ～０．４ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０と、（ｄ）２００ｍＭ～３５０ｍＭ又は２５０ｍＭ～３５０ｍＭのプロリン及び１０ｍＭ～３０ｍＭ又は１０ｍＭ～２０ｍＭの塩化ナトリウムとを含み、所望により、５０ｍｇ／ｍＬ～６０ｍｇ／ｍＬのスクロースをさらに含み、前記医薬組成物のｐＨは４～７、５～７、５～６．５、５．３～６．５、５．３～６．３、５．３～５．８、又は５．８～６．３である。

【0041】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）２０ｍＭのヒスチジン－塩酸ヒスチジン緩衝剤と、（ｃ）０．４ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０と、（ｄ）５０ｍｇ／ｍＬスクロース及び５０ｍＭの塩酸アルギニンとを含み、前記医薬組成物のｐＨは５．８である。

【0042】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）２０ｍＭのヒスチジン－塩酸ヒスチジン緩衝剤と、（ｃ）０．４ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０と、（ｄ）２５０ｍＭのプロリン及び２０ｍＭの塩化ナトリウムとを含み、前記医薬組成物のｐＨは５．８である。

【0043】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）２０ｍＭのヒスチジン－塩酸ヒスチジン緩衝剤と、（ｃ）０．４ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０と、（ｄ）３５０ｍＭのプロリンとを含み、前記医薬組成物のｐＨは５．８である。

【0044】

いくつかの実施形態において、上記医薬組成物は、（ａ）１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片と、（ｂ）２０ｍＭのヒスチジン－塩酸ヒスチジン緩衝剤と、（ｃ）０．４ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０と、（ｄ）５０ｍｇ／ｍＬのスクロース、２５０ｍＭのプロリン及び２０ｍＭの塩化ナトリウムとを含み、前記医薬組成物のｐＨは５．８である。

【0045】

任意の実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は重鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域は、それぞれ配列番号１、２及び３で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２及び重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。

【0046】

任意の実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は重鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域は、配列番号７、８又は９で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。ここで、配列番号８のアミノ酸配列は、
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＶＸ_１ＶＸ_２ＴＩＮＳＮＧＧＳＴＳＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＦＦＲＦＲＮＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（Ｘ_１＝Ｗ且つＸ_２＝Ｓ、又はＸ_１＝Ｌ且つＸ_２＝Ａ、又はＸ_１＝Ｗ且つＸ_２＝Ａ）である。

【0047】

任意の実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は軽鎖可変領域を含み、前記軽鎖可変領域は、それぞれ配列番号４、５及び６で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。

【0048】

任意の実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は軽鎖可変領域を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１０、１１又は１２で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。ここで、配列番号１１のアミノ酸配列は、
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＴＳＥＮＩＹＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＸ_１ＬＸ_２ＹＮＡＫＴＬＡＥＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＹＧＰＰＴＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫである（Ｘ_１＝Ｌ且つＸ_２＝Ｉ、又はＸ_１＝Ｆ且つＸ_２＝Ｖ、又はＸ_１＝Ｆ且つＸ_２＝Ｉ）。

【0049】

任意の実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域及び軽鎖可変領域のそれぞれはＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで、重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、重鎖可変領域ＣＤＲ３、軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３は、それぞれ配列番号１、２、３、４、５及び６で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0050】

任意の実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、
（１）それぞれ配列番号７及び１０で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列、
（２）それぞれ配列番号８及び１１で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列（配列番号８におけるＸ_１＝Ｗ且つＸ_２＝Ｓ）、
（３）それぞれ配列番号８及び１２で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列（配列番号８におけるＸ_１＝Ｗ且つＸ_２＝Ｓ）、
（４）それぞれ配列番号９及び１１で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列、
（５）それぞれ配列番号９及び１２で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列、
（６）それぞれ配列番号８及び１１で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列（配列番号８におけるＸ_１＝Ｌ且つＸ_２＝Ａ）、
（７）それぞれ配列番号８及び１２で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列（配列番号８におけるＸ_１＝Ｌ且つＸ_２＝Ａ）、
（８）それぞれ配列番号８及び１１で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列（配列番号８におけるＸ_１＝Ｗ且つＸ_２＝Ａ）、又は、
（９）それぞれ配列番号８及び１２で表されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列（配列番号８におけるＸ_１＝Ｗ且つＸ_２＝Ａ）、を含む。
ここで、配列番号８のアミノ酸配列は、
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＶＸ_１ＶＸ_２ＴＩＮＳＮＧＧＳＴＳＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＦＦＲＦＲＮＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳであり、
配列番号１１のアミノ酸配列は、
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＴＳＥＮＩＹＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＸ_１ＬＸ_２ＹＮＡＫＴＬＡＥＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＹＧＰＰＴＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫである（Ｘ_１＝Ｌ且つＸ_２＝Ｉ、Ｘ_１＝Ｆ且つＸ_２＝Ｖ、又はＸ_１＝Ｆ且つＸ_２＝Ｉ）。

【0051】

任意の実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、重鎖可変領域及び重鎖定常領域を含む重鎖と、軽鎖可変領域及び軽鎖定常領域を含む軽鎖とを含み、重鎖可変領域のＣ末端は重鎖定常領域のＮ末端に連結し、軽鎖可変領域のＣ末端は軽鎖定常領域のＮ末端に連結する。ここで、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、上記のアミノ酸配列を含み、重鎖定常領域は、配列番号１３で表されるアミノ酸配列のヒトＩｇＧ４定常領域を有し、軽鎖定常領域は、配列番号１４で表されるアミノ酸配列のヒトκ定常領域を有する。

【0052】

任意の実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、全長抗体であってもよく、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４アイソタイプの全長抗体であってもよく、好ましくはＩｇＧ４アイソタイプの全長抗体である。他の実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、単一鎖可変領域（ｓｃＦｖ）抗体、又は、ＦａｂやＦ（ａｂ’）_２断片などの抗体断片であってもよい。

【0053】

任意の実施形態において、上記医薬組成物における上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、出願番号ＰＣＴ／ＣＮ２０２１０７７７８４の特許文献に記載されているＣ２Ｃ１Ａ１Ａ１抗体である。

【0054】

本開示はさらに、上記抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片を緩衝剤に接触させる工程を含む上記医薬組成物の製造方法を提供する。前記工程としては、例えば、抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片を緩衝剤に置換することが挙げられる。前記緩衝剤は、リン酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤等を含む。さらに、前記製造方法は、界面活性剤及び安定化剤を任意の順序で添加することも含む。前記安定化剤は、トレハロース、マンニトール、スクロース、アルギニン若しくはその薬学的に許容される塩、プロリン及び／又は塩化ナトリウムを含み、前記界面活性剤は、ポリソルベート、ポロキサマー、ポリエチレングリコール又はポリヒドロキシ体を含む。

【0055】

本開示はさらに、上記医薬組成物を凍結乾燥させる工程を含む、抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片を含む凍結乾燥製剤の製造方法を提供する。いくつかの実施形態において、前記凍結乾燥は、当分野で知られている方法に従って実施され、予備凍結、一次乾燥及び二次乾燥の工程が含まれるが、これらに限定されない。本開示の医薬組成物から水を除去する方法であれば、本開示に適用できることは当業者には理解される。

【0056】

本開示はさらに、上記凍結乾燥製剤の製造方法により製造された、抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片を含む凍結乾燥製剤を提供する。

【0057】

本開示はさらに、溶解して上記医薬組成物を形成できる、抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片を含む凍結乾燥製剤を提供する。

【0058】

本開示はさらに、上記医薬組成物又は上記凍結乾燥製剤が充填された容器を含む製品を提供する。

【0059】

本開示の医薬組成物又は凍結乾燥製剤は、公知の方法で投与することができる。例えば、適切な手法で一定期間にわたって注射又は注入を行うことができ、例えば、皮下、静脈内、腹腔内、筋肉内、動脈内、病巣内又は関節内の経路で、局所投与、吸入、又は持続放出や遅延放出により投与することができる。本開示の医薬組成物又は凍結乾燥製剤は、最適な所望の応答（例えば、治療応答）を提供するために、投与前に適切な希釈液で適切な濃度に希釈することができる。

【0060】

本開示は、治療有効量の本開示の医薬組成物、凍結乾燥製剤又は製品を被験者に投与することを含む、被験者におけるＩＬ４及び／又はＩＬ１３シグナル伝達の低減方法を提供する。ＩＬ４は、ＩＬ－４Ｒα及びγｃを含む受容体を介してシグナルを伝達し、ＩＬ１３は、ＩＬ－４Ｒα及びＩＬ１３Ｒα１を含む受容体を介してシグナルを伝達する。ＩＬ４及び／又はＩＬ１３シグナル伝達は、Ｂ細胞、好酸球、マクロファージの活性化及び／又は増殖、線維芽細胞の増殖及び平滑筋細胞の増殖（例えば、気道平滑筋細胞の増殖など）として現れる。

【0061】

本開示は、治療有効量の本開示の医薬組成物、凍結乾燥製剤又は製品を被験者に投与することを含む、被験者における２型免疫応答の低減方法を提供する。

【0062】

本開示は、治療有効量の本開示の医薬組成物、凍結乾燥製剤又は製品を被験者に投与することを含む、被験者における過剰なＩＬ４及び／又はＩＬ１３シグナル伝達に関連する疾患の治療方法を提供する。前記過剰なＩＬ４及び／又はＩＬ１３シグナル伝達に関連する疾患は、アレルギー性疾患であり、非制限的な一例としては、アトピー性皮膚炎、アレルギー反応、アレルギー性鼻炎又はアレルギー性喘息が挙げられる。

【0063】

本開示は、治療有効量の本開示の医薬組成物、凍結乾燥製剤又は製品を被験者に投与することを含む、被験者におけるＳＴＡＴ６活性化の増加に関連する腫瘍の治療方法を提供する。いくつかの実施形態において、前記腫瘍は固形腫瘍又は非固形腫瘍を含む。いくつかの実施形態において、前記腫瘍の一例としては、黒色腫、肺癌、腎臓癌、前立腺癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、胃癌、膵臓癌、卵巣癌及び尿路上皮癌が挙げられるが、これらに限定されない。

【0064】

以下の詳細な説明及び実施例により、本開示の他の特徴及び利点がより明確になる。詳細な説明及び実施例は限定的なものではない。本願で引用されるすべての文献、Ｇｅｎｂａｎｋ記録、特許及び公開特許出願の内容は、参照により本明細書に明確に組み込まれる。

【発明を実施するための形態】

【0065】

本開示の理解の便宜上、まずは用語の一部を定義する。他の定義は詳細な説明において記載する。本明細書において他に定義されない限り、本明細書中で使用されるすべての他の技術用語及び科学用語は、本発明の属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。

【0066】

「緩衝剤」とは、医薬組成物のｐＨを所望のｐＨ範囲に維持することができる薬学的に許容される物質又は物質の混合物を指す。本開示の医薬組成物に適用される緩衝剤の例としては、リン酸塩緩衝剤、酢酸塩緩衝剤又はヒスチジン塩緩衝剤が挙げられる。

【0067】

「リン酸塩緩衝剤」は、リン酸イオンを含む緩衝剤である。例えば、リン酸及び／又はリン酸塩を含む緩衝剤が挙げられ、ここで、リン酸には、リン酸及び／又はその水和物が含まれ、リン酸塩には、リン酸塩及び／又はその水和物が含まれる。リン酸塩緩衝剤の例としては、リン酸ナトリウム緩衝剤又はリン酸カリウム緩衝剤が挙げられるが、これらに限定されず、好ましいリン酸塩緩衝剤はリン酸ナトリウム緩衝剤である。特定の一例において、リン酸ナトリウム緩衝剤は、リン酸二水素ナトリウム一水和物（ＮａＨ_２ＰＯ_４・Ｈ_２Ｏ）及びリン酸水素二ナトリウム十二水和物（Ｎａ_２ＨＰＯ_４・１２Ｈ_２Ｏ）を含む。

【0068】

「酢酸塩緩衝剤」は、酢酸イオンを含む緩衝剤である。例えば、酢酸及び／又は酢酸塩を含む緩衝剤が挙げられ、ここで、酢酸には酢酸及び／又はその水和物が含まれ、酢酸塩には酢酸塩及び／又はその水和物が含まれる。酢酸塩緩衝剤の例としては、酢酸カリウム緩衝剤、酢酸アンモニウム緩衝剤又は酢酸ナトリウム緩衝剤、酢酸ナトリウム－酢酸緩衝剤が挙げられるが、これらに限定されず、好ましい酢酸塩緩衝剤は、酢酸ナトリウム－酢酸緩衝剤である。酢酸ナトリウム－酢酸緩衝剤は、酢酸及び酢酸ナトリウムを含み、ここで、酢酸には酢酸及び／又はその水和物が含まれ、酢酸ナトリウムには酢酸ナトリウム及び／又はその水和物が含まれる。特定の一例において、酢酸ナトリウム－酢酸緩衝剤は、酢酸と酢酸ナトリウム三水和物（ＣＨ_３ＣＯＯＮａ・３Ｈ_２Ｏ）を含む。

【0069】

「ヒスチジン塩緩衝剤」は、ヒスチジンイオンを含む緩衝剤である。例えば、ヒスチジン及び／又はヒスチジン塩を含む緩衝剤が挙げられ、ここで、ヒスチジンにはヒスチジン及び／又はその水和物が含まれ、ヒスチジン塩にはヒスチジン塩及び／又はその水和物が含まれる。ヒスチジン塩緩衝剤の例としては、ヒスチジン－塩酸緩衝剤、ヒスチジン－酢酸緩衝剤、ヒスチジン－塩酸ヒスチジン又は塩酸ヒスチジン緩衝剤が挙げられ、好ましいヒスチジン塩緩衝剤はヒスチジン－塩酸ヒスチジン緩衝剤である。ヒスチジン－塩酸ヒスチジンはヒスチジン及び塩酸ヒスチジンを含み、ここで、ヒスチジンにはヒスチジン及び／又はその水和物が含まれ、塩酸ヒスチジンには塩酸ヒスチジン及び／又はその水和物が含まれる。特定の一例において、ヒスチジン－塩酸ヒスチジン緩衝剤は、ヒスチジンと塩酸ヒスチジン一水和物（Ｃ_６Ｈ_９Ｎ_３Ｏ_２・ＨＣｌ・Ｈ_２Ｏ）を含む。

【0070】

「安定化剤」とは、医薬組成物における活性成分の安定性を維持するための、薬学的に許容される物質又は物質の混合物を指す。本開示において、安定化剤は、粘度低下剤及び／又は等張剤等としても機能する。

【0071】

「医薬組成物」とは、所望により特定の活性成分（例えば、抗体）を特定の量で含むもの、及び、所望により特定の活性成分を特定の量で組み合わせることにより直接的又は間接的に得られた任意のものを意味する。医薬組成物の目的は、活性成分を製造及び患者への投与に適させ、保存及びその後の使用中においても生物活性及び／又は安定性を維持することである。いくつかの形態において、前記医薬組成物は水溶性注射剤である。前記水溶性注射剤としては、凍結乾燥されていない水溶性製剤、又は、凍結乾燥粉末から再構成された水溶性製剤が挙げられる。別の形態において、前記医薬組成物は凍結乾燥製剤である。本開示において、「医薬組成物」と「製剤」は相互に排他的ではない。

【0072】

「安定な」又は「安定化された」医薬組成物とは、活性成分（例えば、抗体）がその中に保存されたときにその物理的安定性及び／又は化学的安定性及び／又は生物活性が実質的に保持されている医薬組成物を指す。当分野では、活性成分の安定性を測定するための様々な分析技術が知られており、例えば、Ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，２４７－３０１，Ｖｉｎｃｅｎｔ Ｌｅｅ Ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，Ｐｕｂｓ．（１９９１） Ｊｏｎｅｓ，Ａ．Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．１０：２９－９０（１９９３）に記載されている。安定性は、選択した温度、選択した期間及びその他の保管条件で測定することができる。例えば、色及び／又は透明度の目視検査、又はＵＶ光散乱、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）又は示差走査蛍光法（ＤＳＦ）による検査を行った結果、活性成分が顕著な凝集の増加、沈殿及び／又は変性を示さなかった場合、上記活性成分は医薬組成物中で「その物理的安定性が保持されている」と考えられる。好ましくは、本開示の医薬組成物を使用する場合、ＳＥＣ、又は凝集形成の測定に用いられる他の適切な方法で測定したとき、凝集体（高分子不純物とも呼ばれる。）を形成した活性成分が１０％以下、５％以下、４％以下である。活性成分（例えば、抗体）が顕著な化学的変化を示さなかった場合、上記活性成分は医薬組成物中で「その化学的安定性が保持されている」と考えられる。化学的安定性は、化学的に変化した抗体の検出及び定量化によって評価できる。一般にタンパク質の化学構造を変化させるプロセスとしては、加水分解や切断（サイズ排除クロマトグラフィーやＳＤＳ－ＰＡＧＥなどの方法により評価）、酸化（質量分析法やＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ／ＭＳと組み合わせたペプチドマッピングなどの方法により評価）、脱アミド化（イオン交換クロマトグラフィー、キャピラリー等電点電気泳動、ペプチドマッピング、イソアスパラギン酸測定などの方法により評価）、及び、異性化（イソアスパラギン酸含有量の測定、ペプチドマッピングなどにより評価）が挙げられる。所定の期間における活性成分（例えば、抗体）の生物活性が、医薬組成物の製造時に示された生物活性の所定の範囲内にある場合、活性成分は医薬組成物中で所定の期間において「その生物活性が保持されている」と考えられる。例えば、抗原結合アッセイによって確認することができる。

【0073】

「高分子不純物」又は「凝集体」は、目的活性成分（例えば、抗体）より大きい分子量を有する不純物の総称である。

【0074】

「電荷変異体」とは、抗体のグリコシル化、脱アミド化、酸化及び／又は異性化により、抗体分子の電荷の変化が直接的又は間接的に引き起こされた変異体を指す。これらの電荷変異体は、キャピラリー等電点電気泳動（ＣＩＥＦ）や陽イオン交換クロマトグラフィー（ＣＥＸ－ＨＰＬＣ）などにより検出できる。

【0075】

冠詞「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、冠詞の１つ又は複数（つまり、少なくとも１つ）の文法的対象を指すために使用される。例えば、「医薬組成物」とは、１つの医薬組成物又は複数の医薬組成物を指す。

【0076】

「約」又は「およそ」とは、その値が、当業者によって決定される特定の値に対して許容される誤差範囲内であることを意味し、その値がどのように測定又は決定されるか（つまり、測定システムの限界）に部分的に依存する。例えば、当分野において、「約」又は「およそ」は、１以内又は１より大きい標準偏差を意味することができる。或いは、「約」又は「およそ」とは、かかる値に対してプラス又はマイナス１５％、１０％、５％又は１％の範囲を意味する。さらに、特に生物学的なシステム又はプロセスについて、この用語は、値の１桁程度以内の大きさ又は値の５倍以内を意味することができる。特に断りのない限り、「約○○」又は「およそ○○」又は「実質的に○○を含む」とは、特定の値「○○」に対して許容される誤差範囲内の値を意味する（値「○○」自体と、当業者によって決定されるこの値に対して許容される誤差範囲内の値とを含む）。

【0077】

本明細書において、任意のパーセンテージ範囲、比率範囲又は整数範囲は、他に特記しない限り、列挙される範囲内の任意の整数の値を含み、そして、必要に応じて、その分数（整数の１／１０及び１／１００など）を含むものと理解される。

【0078】

本明細書において、文脈上特に記載がない限り、用語「含む」、「包含する」及び「含有する」は、記載された工程若しくは要素又は工程若しくは要素の群を含むが、任意のその他の工程若しくは要素又は工程若しくは要素の群も排除しないことを意味する。「～からなる」とは、「～からなる」が続く要素を包含し、かつ、これらに限定されることを意味する。したがって、「～からなる」という語句は、列挙された要素が必要又は必須であり、他の要素は存在しないことを示す。「実質的に～からなる」とは、この語句の前に列挙された任意の要素を含み、これらの列挙された要素に関して本発明に記載の活性又は作用に干渉又は寄与しない他の要素に限定されることを意味する。したがって、「実質的に～からなる」という語句は、列挙された要素が必要又は必須であるが、他の要素は任意であり、列挙された要素の活性又は作用に影響を及ぼすか否かに応じて、存在してもよく、存在しなくてもよいことを意味する。

【0079】

用語「ＩＬ４Ｒα」とは、インターロイキン４受容体αサブユニットを指す。用語「ＩＬ４Ｒα」には、変異体、アイソフォーム、ホモログ、オルソログ及びパラログが含まれる。例えば、場合によっては、ヒトＩＬ４Ｒαタンパク質に特異的な抗体は、ヒト以外の種（例えば、サル）のＩＬ４Ｒαタンパク質と交差反応し得る。他の実施形態において、ヒトＩＬ４Ｒαタンパク質に特異的な抗体は、他の種又は他の種類のタンパク質との交差反応性がなく、ヒトＩＬ４Ｒαタンパク質に完全に特異的であるか、又は、他のすべての種ではなく特定の種のみのＩＬ４Ｒαとの交差反応性がある。

【0080】

用語「ヒトＩＬ４Ｒα」とは、Ｇｅｎｂａｎｋ登録番号ＮＰ＿００１２４４３３５．１のヒトＩＬ４Ｒαのアミノ酸配列などのヒトアミノ酸配列を有するＩＬ４Ｒαタンパク質を指す。用語「カニクイザルＩＬ４Ｒα」及び「マーモセットＩＬ４Ｒα」とは、それぞれ、例えばＧｅｎｂａｎｋ登録番号ＥＨＨ６０２６５．１及びＮＰ＿００１２４４１６１．１のアミノ酸配列を有するＩＬ４Ｒα配列を指す。

【0081】

本明細書における用語「抗体」には、全長抗体及びその任意の抗原結合断片又はその単一鎖が含まれる。全長抗体は、２つの重（Ｈ）鎖と、２つの軽（Ｌ）鎖とを含む糖タンパク質であり、重鎖と軽鎖がジスルフィド結合を介して連結される。重鎖のそれぞれは、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）と重鎖定常領域とから構成される。重鎖定常領域は、Ｃ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ２及びＣ_Ｈ３の３つのドメインから構成される。軽鎖のそれぞれは、軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）と軽鎖定常領域とから構成される。軽鎖定常領域は１つのドメインＣ_Ｌから構成される。Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌ領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）とも呼ばれる超可変領域に分けることができ、ＣＤＲの間に、より保存的なフレームワーク領域（ＦＲ）が散在する。各Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌは、アミノ末端からカルボキシル末端に向かってＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順に配置された３つのＣＤＲと４つのＦＲとから構成される。重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。抗体の定常領域は、様々な免疫系細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典的補体系の第１成分（Ｃ１ｑ）を含む宿主の組織又は因子への免疫グロブリンの結合を媒介することができる。

【0082】

本明細書で使用される場合、抗体の「抗原結合断片」（又は「抗体断片」と略称）とは、抗原（例えば、ＩＬ４Ｒαタンパク質）に特異的に結合する能力を保持する抗体中の１以上の断片を意味する。抗体の抗原結合機能が全長抗体の断片により発揮できることは明らかにされている。抗体の「抗原結合断片」に含まれる抗体断片の例としては、（ｉ）Ｖ_Ｌ、Ｖ_Ｈ、Ｃ_Ｌ及びＣ_Ｈ１ドメインから構成される一価断片であるＦａｂ断片、（ｉｉ）ヒンジ領域のジスルフィド結合により連結された２つのＦａｂ断片を含んでなる二価断片であるＦ（ａｂ’）_２断片、（ｉｉｉ）Ｖ_ＨとＣ_Ｈ１から構成されるＦｄ断片、（ｉｖ）抗体の単腕のＶ_ＬとＶ_Ｈから構成されるＦｖ断片、（ｖ）Ｖ_Ｈから構成されるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ３４１：５４４－５４６）、（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）、及び、（ｖｉｉ）１つの可変ドメインと、２つの定常ドメインとを含む重鎖可変領域であるナノボディが挙げられる。さらに、Ｆｖ断片の２つのドメインＶ_Ｌ及びＶ_Ｈは、別々の遺伝子によりコードされるが、これらを組換え法を用いて、Ｖ_ＬとＶ_Ｈが対になって一価の分子を形成する単一のタンパク質鎖（単一鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られる；例えば、Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｌ．，（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ２４２：４２３－４２６及びＨｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８５：５８７９－５８８３を参照）として作製されることを可能にする合成リンカーによって連結することができる。このような単一鎖抗体も、抗体の「抗原結合断片」という用語に包含される。これらの抗体断片は、当業者に知られている従来技術により得られ、全長抗体と同じ方法で有用性についてスクリーニングすることができる。

【0083】

本明細書で使用される場合、用語「単離された抗体」とは、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を意味する（例えば、ＩＬ４Ｒαタンパク質に特異的に結合する単離された抗体は、ＩＬ４Ｒαタンパク質以外の抗原に特異的に結合する抗体を実質的に含まないものである）。ただし、ヒトＩＬ４Ｒαタンパク質に特異的に結合する単離された抗体は、例えば、他の種に由来するＩＬ４Ｒαタンパク質などの他の抗原に対する交差反応性を有するものであってもよい。さらに、単離された抗体は、他の細胞物質及び／又は化学物質を実質的に含まないものである。

【0084】

本明細書で使用される場合、用語「マウス抗体」とは、可変領域のフレームワーク領域及びＣＤＲ領域がともにマウス生殖系列免疫グロブリン配列に由来する抗体を意味する。さらに、抗体が定常領域を含む場合、定常領域もマウス生殖系列免疫グロブリン配列に由来するものである。本明細書のマウス抗体は、マウス生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、インビトロでランダムな若しくは部位特異的な変異生成によって、又はインビボで体細胞変異によって導入された変異）を含んでもよい。ただし、本明細書で使用される用語「マウス抗体」は、別の哺乳動物種に由来するＣＤＲ配列がマウスのフレームワーク配列に移植された抗体を含まない。

【0085】

用語「キメラ抗体」とは、非ヒト由来の遺伝物質と、ヒト由来の遺伝物質とを組み合わせた抗体を意味する。或いは、より大まかに言えば、キメラ抗体とは、ある種由来の遺伝物質と、別の種由来の遺伝物質とを有する抗体を指す。

【0086】

本明細書で使用される場合、用語「ヒト化抗体」とは、非ヒト種に由来するが、天然のヒト抗体との類似性を高めるためにタンパク質配列が改変された抗体を意味する。いくつかの特定の例において、「ヒト化抗体」は、非ヒト抗体からの相補性決定領域（ＣＤＲ）と、ヒト抗体からのフレームワーク領域（ＦＲ）及び定常領域とを含む。

【0087】

用語「アイソタイプ」とは、重鎖定常領域遺伝子によってコードされる抗体クラス（例えば、ＩｇＭ又はＩｇＧ１）を意味する。

【0088】

語句「抗原を認識する抗体」及び「抗原に特異的な抗体／抗原に対する特異性を有する抗体」は、本明細書において、用語「抗原に特異的に結合する抗体」と互換的に使用される。

【0089】

本明細書で使用される場合、「ヒトＩＬ４Ｒαに特異的に結合する」抗体とは、ヒトＩＬ４Ｒαタンパク質（及び場合によっては一以上の非ヒト動物種のＩＬ４Ｒαタンパク質）に結合するが、非ＩＬ４Ｒαタンパク質に実質的に結合しない抗体を意味する。好ましくは、抗体はヒトＩＬ４Ｒαタンパク質に「高親和性」で結合し、すなわち、５．０×^－８Ｍ以下、好ましくは１．０×１０^－８Ｍ以下、より好ましくは７．０×１０^－９Ｍ以下のＫ_ＤでヒトＩＬ４Ｒαタンパク質に結合する。

【0090】

本明細書で使用される場合、タンパク質又は細胞に「実質的に結合しない」とは、タンパク質又は細胞に結合しないか、又は、高親和性で結合しないこと、すなわち、１．０×１０^－６Ｍ以上、好ましくは１．０×１０^－５Ｍ以上、より好ましくは１．０×１０^－４Ｍ以上、より好ましくは１．０×１０^－３Ｍ以上、より好ましくは１．０×１０^－２Ｍ以上のＫ_Ｄでタンパク質又は細胞に結合することを意味する。

【0091】

用語「高親和性」とは、ＩｇＧ抗体に関しては、抗体が抗原に対して、１．０×１０^－６Ｍ以下、好ましくは５．０×１０^－８Ｍ以下、より好ましくは１．０×１０^－８Ｍ以下、より好ましくは７．０×１０^－９Ｍ以下、より好ましくは１．０×１０^－９Ｍ以下のＫ_Ｄを有することを意味する。一方、他の抗体アイソタイプに関しては、「高親和性」結合の意味が異なる場合がある。例えば、ＩｇＭアイソタイプの場合、「高親和性」とは、抗体が１．０×１０^－６Ｍ以下、好ましくは１．０×１０^－７Ｍ以下、より好ましくは１．０×１０^－８Ｍ以下のＫ_Ｄを有することを意味する。

【0092】

本明細書で使用される用語「Ｋ_{ａｓｓｏｃ}」又は「Ｋ_ａ」とは、特定の抗体－抗原相互作用の結合速度を意味し、本明細書で使用される用語「Ｋ_ｄｉｓ」又は「Ｋ_ｄ」とは、特定の抗体－抗原相互作用の解離速度を意味する。本明細書で使用される用語「Ｋ_Ｄ」とは、Ｋ_ａに対するＫ_ｄの比（即Ｋ_ｄ／Ｋ_ａ）であり、モル濃度（Ｍ）で表される解離定数を指す。抗体のＫ_Ｄ値は、当分野で周知の方法により測定することができる。抗体のＫ_Ｄ値の好ましい測定方法は、表面プラズモン共鳴を用いる方法であり、好ましくは、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ^ＴＭシステムなどのバイオセンサーシステムを用いる方法である。

【0093】

用語「ＥＣ_５０」は、半有効濃度とも呼ばれ、特定の曝露時間後にベースラインと最大値の中間の反応を誘導する抗体濃度を指す。用語「ＩＣ_５０」は、最大半値阻害濃度とも呼ばれ、抗体が存在しない場合と比較して、特異的な生物学的又は生化学的機能を５０％阻害する抗体濃度を指す。

【0094】

用語「被験者」は、あらゆるヒト又は非ヒト動物を含む。用語「非ヒト動物」は、哺乳動物及び非哺乳動物などのすべての脊椎動物を包含し、例えば、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ニワトリ、両生類、爬虫類が挙げられるが、哺乳動物であることが好ましく、例えば、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウシ及びウマが挙げられる。

【0095】

用語「治療有効量」とは、疾患又は障害（例えば、癌）に関連する症状の予防若しくは改善、及び／又は、疾患又は障害の重篤度の軽減をもたらすのに十分な本発明の抗体の量を指す。治療有効量は、治療される疾患に関連しており、当業者は実際の有効量を容易に判断することができる。

【0096】

用語「同一性」とは、２つのポリヌクレオチド配列間又は２つのポリペプチド間の配列類似性を指す。２つの配列間の配列比較及び同一性百分率は、アメリカ国立生物工学情報センターのウェブサイトにおけるアルゴリズムＢＬＡＳＴＮ／ＢＬＡＳＴＰのデフォルト設定により決定することができる。

【0097】

用語「Ｘｎ」と「Ｘａａ」は同じもので、不特定のアミノ酸（Ｕｎｓｐｅｃｉｆｉｅｄ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ）を指すが、その範囲は、関連する記載における定義により規定される。

【0098】

以下に本発明の各側面をより詳細に説明する。

【0099】

抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片
本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、ヒトＩＬ４Ｒαに特異的に結合するものであり、報告された抗ＩＬ４Ｒα抗体（例えば、Ｄｕｐｉｌｕｍａｂ）と比較して、同等（より優れるものでなければ）の結合親和性／能力を有する。

【0100】

本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、ＩＬ４又はＩＬ１３－ＩＬ１３Ｒα１に対するＩＬ４Ｒαの結合を遮断することができ、これによって、細胞内シグナル伝達を遮断することができる。報告された抗ＩＬ４Ｒα抗体（例えば、Ｄｕｐｉｌｕｍａｂ）と比較して、同等以上の遮断活性を有する。

【0101】

好ましくは、本発明の抗ＩＬ４Ｒα抗体はヒト化モノクローナル抗体である。さらに、或いは、本発明の抗ＩＬ４Ｒα抗体は、例えば、マウス、キメラ又はヒトモノクローナル抗体であり得る。

【0102】

本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体は、後述及び実施例の記載のように構造的及び化学的に特徴付けられるモノクローナル抗体である。抗体の重／軽鎖可変領域のアミノ酸配列番号を以下の表１にまとめる。いくつかの抗体は、同じＶ_Ｈ又はＶ_Ｌを有する。抗体の重鎖定常領域は、配列番号１３で表されるアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ４重鎖定常領域であり得、抗体の軽鎖定常領域は、配列番号１４で表されるアミノ酸配列を有するヒトκ定常領域であり得る。

【0103】

【表1】

【0104】

表１における重鎖可変領域ＣＤＲｓ及び軽鎖可変領域ＣＤＲｓは、Ｋａｂａｔナンバリングシステムにより定義されている。一方、当分野で知られているように、ＣＤＲ領域は、重／軽鎖可変領域配列に基づき、他のナンバリングシステム、例えば、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＩＭＧＴ、ＡｂＭ又はＣｏｎｔａｃｔナンバリングシステム／方法を用いて決定することもできる。抗体又はその抗原結合断片が具体的なＣＤＲ配列により特徴付けられる場合、前記抗体の範囲には、当分野の任意のナンバリングシステム（例えば、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＩＭＧＴ、ＡｂＭ又はＣｏｎｔａｃｔナンバリングシステム）により定義されたＣＤＲ配列によって特徴付けられる抗体又はその抗原結合断片が含まれる。

【0105】

ヒトＩＬ４Ｒαに結合する他の抗ＩＬ４Ｒα抗体のＶ_Ｈ及びＶ_Ｌ配列（又はＣＤＲ配列）と、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体のＶ_Ｈ及びＶ_Ｌ配列（又はＣＤＲ配列）は、「混合及び対合」させることができる。好ましくは、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌ鎖（又はこれらの鎖におけるＣＤＲ）を混合及び対合させる場合、特定のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌ対のＶ_Ｈ配列は、構造的に類似したＶ_Ｈ配列により置換される。同様に、好ましくは特定のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌ対のＶ_Ｌ配列も、構造的に類似したＶ_Ｌ配列により置換される。

【0106】

したがって、一実施形態において、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）表１に示されたアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、
（ｂ）表１に示されたアミノ酸配列、又は別の抗ＩＬ４Ｒα抗体（当該抗体又はその抗原結合断片はヒトＩＬ４Ｒαに特異的に結合する。）のＶ_Ｌを含む軽鎖可変領域と、を含む。

【0107】

別の実施形態において、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）表１に示された重鎖可変領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と、
（ｂ）表１に示された軽鎖可変領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又は別の抗ＩＬ４Ｒα抗体（当該抗体又はその抗原結合断片はヒトＩＬ４Ｒαに特異的に結合する。）のＣＤＲｓと、を含む。

【0108】

別の実施形態において、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体の重鎖可変領域のＣＤＲ２と、ヒトＩＬ４Ｒαに結合する他の抗体のＣＤＲｓ、例えば、他の抗ＩＬ４Ｒα抗体からの重鎖可変領域のＣＤＲ１及び／又はＣＤＲ３、及び／又は軽鎖可変領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及び／又はＣＤＲ３とを含む。

【0109】

さらに、ＣＤＲ１及び／又はＣＤＲ２ドメインとは独立してＣＤＲ３ドメイン単独で相同抗原についての抗体の結合特異性を決定できること、及び、同じ結合特異性を有する複数の抗体を、共通のＣＤＲ３配列に基づいて予想通りに作製できることが当分野においてよく知られている。

【0110】

したがって、別の実施形態において、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体の重鎖可変領域のＣＤＲ２と、少なくとも本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体の重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域のＣＤＲ３、又は、ヒトＩＬ４Ｒαに特異的に結合する別の抗ＩＬ４Ｒα抗体の重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域のＣＤＲ３とを含む。好ましくは、これらの抗体と本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体は、（ａ）競合してＩＬ４Ｒαに結合し、（ｂ）機能的特徴を保持し、（ｃ）同じエピトープに結合し、及び／又は、（ｄ）類似する結合親和性を有する。別の実施形態において、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体は、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体の軽鎖可変領域のＣＤＲ２、又は、ヒトＩＬ４Ｒαに特異的に結合する別の抗ＩＬ４Ｒα抗体の軽鎖可変領域のＣＤＲ２をさらに含んでもよい。別の実施形態において、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体は、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体の重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域のＣＤＲ１、又は、ヒトＩＬ４Ｒαに特異的に結合する別の抗ＩＬ４Ｒα抗体の重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域のＣＤＲ１をさらに含んでもよい。

【0111】

別の実施形態において、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、１つ以上の保存的修飾により本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３の配列とは異なるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域を含む。抗原結合性を除去しない特定の保存的配列修飾が行われ得ることは当分野において理解される。例えば、Ｂｒｕｍｍｅｌｌ ｅｔ ａｌ．，（１９９３）Ｂｉｏｃｈｅｍ ３２：１１８０－８；ｄｅ Ｗｉｌｄｔ ｅｔ ａｌ．，（１９９７）Ｐｒｏｔ．Ｅｎｇ．１０：８３５－４１；Ｋｏｍｉｓｓａｒｏｖ ｅｔ ａｌ．，（１９９７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ． ２７２：２６８６４－２６８７０；Ｈａｌｌ ｅｔ ａｌ．，（１９９２）Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４９：１６０５－１２；Ｋｅｌｌｅｙ ａｎｄ Ｏ’Ｃｏｎｎｅｌｌ （１９９３） Ｂｉｏｃｈｅｍ．３２：６８６２－３５；Ａｄｉｂ－Ｃｏｎｑｕｙ ｅｔ ａｌ．， （１９９８） Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：３４１－６及びＢｅｅｒｓ ｅｔ ａｌ．， （２０００）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎ．Ｒｅｓ．６：２８３５－４３を参照されたい。

【0112】

したがって、一実施形態において、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３をそれぞれ含む重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域を含み、ここで、
（ａ）重鎖可変領域のＣＤＲ１は、表１に示された配列、及び／又はその保存的修飾を含み、及び／又は、
（ｂ）重鎖可変領域のＣＤＲ２は、表１に示された配列、及び／又はその保存的修飾を含み、及び／又は、
（ｃ）重鎖可変領域のＣＤＲ３は、表１に示された配列、及び／又はその保存的修飾を含み、及び／又は、
（ｄ）軽鎖可変領域のＣＤＲ１、及び／又はＣＤＲ２、及び／又はＣＤＲ３は、表１に示された配列、及び／又はその保存的修飾を含み、かつ、
（ｅ）当該抗体又はその抗原結合断片はヒトＩＬ４Ｒαに特異的に結合する。

【0113】

本明細書で使用される場合、用語「保存的配列修飾」とは、抗体の結合特性に特に影響及び変化を与えないアミノ酸修飾を指す。このような保存的修飾としては、アミノ酸の置換、挿入、欠失が挙げられる。修飾は、例えば、部位特異的変異導入やＰＣＲ媒介変異導入などの当分野で知られている標準的な技術により本開示の抗体に導入することができる。保存的アミノ酸置換とは、アミノ酸残基が類似の側鎖を有するアミノ酸残基により置換されることを指す。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当分野で知られている。これらのアミノ酸残基のファミリーとしては、塩基性側鎖を有するアミノ酸（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、非極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、β分岐側鎖を有するアミノ酸（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）、及び、芳香族側鎖を有するアミノ酸（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）が挙げられる。このようにして、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体のＣＤＲ領域における１つ以上のアミノ酸残基は、同じ側鎖ファミリーからの他のアミノ酸残基で置換することができ、得られた抗体は、保持された機能（つまり、上記機能）について本明細書に記載の機能試験方法により試験することができる。

【0114】

本開示の医薬組成物、凍結乾燥製剤又は製品は、例えば、過剰なＩＬ４及び／又はＩＬ１３シグナル伝達に関連する疾患の治療を含む多数のインビトロ及びインビボでの有用性を有する。

【0115】

一側面において、抗ＩＬ４Ｒα抗体又はその抗原結合断片は、ＩＬ４又はＩＬ１３－ＩＬ１３Ｒα１に対するＩＬ４Ｒαの結合を遮断することにより、２型免疫を低減させることができる。本開示は、本開示の医薬組成物、凍結乾燥製剤又は製品を被験者に投与することを含む、被験者における２型免疫関連アレルギー性疾患を治療する方法を提供する。前記アレルギー性疾患は、アトピー性皮膚炎、アレルギー反応、アレルギー性鼻炎又はアレルギー性喘息であり得る。

【0116】

別の側面において、ＩＬ４又はＩＬ１３シグナル伝達は、ＳＴＡＴ６を活性化することができ、ＳＴＡＴ６阻害剤はがん細胞の増殖を阻害することが分かっている。本開示は、本開示の医薬組成物、凍結乾燥製剤又は製品を被験者に投与することを含む、被験者における腫瘍細胞の増殖を阻害する方法を提供する。前記腫瘍の非制限的な一例としては、黒色腫、肺癌、腎臓癌、前立腺癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、胃癌、膵臓癌、卵巣癌及び尿路上皮癌が挙げられるが、これらに限定されない。

【0117】

別の側面において、本開示は、被験者におけるＩＬ－４又はＩＬ－１３に応答する細胞の活性化を低減又は阻害する方法を提供する。いくつかの実施形態において、活性化の阻害は、サイトカインの産生又は分泌の阻害を含む。いくつかの実施形態において、活性化の阻害は増殖の阻害を含む。ハイブリッドＩＬ－４Ｒα／γｃ受容体を活性化することによってＩＬ－４に応答する細胞としては、Ｂ細胞、好酸球及びマクロファージが挙げられるが、これらに限定されない。ハイブリッドＩＬ－４Ｒα／ＩＬ－１３Ｒα１受容体を活性化することによってＩＬ－１３に応答する細胞としては、線維芽細胞及び平滑筋細胞が挙げられるが、これらに限定されない。したがって、一実施形態において、本開示は、平滑筋細胞の増殖を阻害する方法を提供する。別の実施形態において、本開示は、線維芽細胞の増殖を阻害する方法を提供する。

【0118】

本発明について、以下の実施例によりさらに詳しく説明するが、実施例は制限を意図するものではない。本願のすべての図面及び本願において参照されたすべての参考文献、Ｇｅｎｅｂａｎｋ配列、特許及び公開特許出願は、参照により入本明細書に明確に組み込まれる。

【実施例】

【0119】

本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体の調製、精製方法は、出願番号ＰＣＴ／ＣＮ２０２１０７７７８４の特許文献に記載されている。ＰＣＴ／ＣＮ２０２１０７７７８４出願書類全体は本開示に組み込まれる。

【0120】

（実施例１）ＢＩＡＣＯＲＥ表面プラズモン共鳴による抗ＩＬ４Ｒα抗体の親和性アッセイ
ＢｉａｃｏｒｅＴ２００システム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ、ＰＡ、ＵＳＡ）により、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体（ｍＡｂ）の結合親和性及び結合速度を測定した。

【0121】

簡単に説明すると、Ｂｉａｃｏｒｅ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ、ＰＡ、ＵＳＡ）に付属の標準アミンカップリングキットを用いて、ヤギ抗ヒトＩｇＧ（ＧＥ ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、カタログＢＲ１００８３９、Ｈｕｍａｎ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｃａｐｔｕｒｅ Ｋｉｔ）を一級アミン基を介してＣＭ５チップ（カルボキシメチル化デキストラン被覆チップ）に共有結合させた。バイオセンサー表面の未反応部分をエタノールアミンでブロッキングした。次に、濃度６６．６７ｎＭの本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体、及び、濃度１０μｇ／ｍＬの抗ＩＬ４Ｒα抗体参照物質（Ｄｕｐｉｌｕｍａｂ（登録商標）、ＢＭとも呼ばれるもの）を１０μＬ／分間の流速でチップに流した。その後、ＨＢＳＥＰバッファー（Ｂｉａｃｏｒｅより）で段階希釈した組換えヒトＩＬ４Ｒα－ｈｉｓタンパク質（自社調製、アミノ酸配列は配列番号１５のとおり）、カニクイザルＩＬ４Ｒα－ｈｉｓタンパク質（Ｓｉｎｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｃ．、カタログ９０８９７－Ｃ０８Ｈ）、又はマーモセットＩＬ４Ｒα－ｈｉｓタンパク質（Ｓｉｎｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｃ．の特注品で、ｃａｌ－ＩＬ４Ｒα－ｈｉｓとも呼ばれる。アミノ酸配列は配列番号１６のとおり）を３０μＬ／ｍｉｎの流速でチップに流した。抗原－抗体結合速度を２分間追跡し、解離速度を１０分間追跡した。ソフトウェアＢＩＡ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎにより、結合曲線及び解離曲線を１：１ラングミュア結合モデルに適合させ、Ｋ_Ｄ、Ｋ_ａ及びＫ_ｄ値を求めた。

【0122】

（実施例２）ＩＬ４Ｒαに対する抗ＩＬ４Ｒα抗体の結合活性
捕捉ＥＬＩＳＡ、フローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）及び間接ＥＬＩＳＡにより、ＩＬ４Ｒαに対する本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体の結合活性を測定した。

【0123】

２．１捕捉ＥＬＩＳＡ
簡単に説明すると、２μｇ／ｍＬの濃度でＰＢＳに溶解したアフィニティー精製ヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｆｃγ断片特異性、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ、カタログ１０９－００５－０９８）を９６ウェルプレートに１００μＬ／ウェルでコーティングし、４℃で一晩インキュベートした。洗浄バッファー（ＰＢＳ＋０．０５％ｗ／ｖＴｗｅｅｎ－２０、ＰＢＳＴ）でプレートを１回洗浄してから、ブロッキングバッファー（５％ｗ／ｖのスキムミルクを含むＰＢＳＴ）を２００μＬ／ウェルで加え、３７℃で２時間ブロッキングした。プレートを再度洗浄し、各ウェルに、段階希釈（６６．７ｎＭの出発濃度から、２．５％ｗ／ｖのスキムミルクを含むＰＢＳＴで５倍段階希釈）した本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体、参照物質又は陰性対照ｈＩｇＧ（静脈内注射用ヒト免疫グロブリン（ｐＨ４）、Ｈｕａｌａｎ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｉｎｃ．）１００μＬを添加し、３７℃で４０分間、同時インキュベートした後、プレートを４回洗浄した。抗ＩＬ４Ｒα抗体が捕捉された９６ウェルプレートにビオチン標識ヒトＩＬ４Ｒα－ｈｉｓタンパク質（自社調製、アミノ酸配列は配列番号１５のとおり。２．５％ｗ／ｖのスキムミルクを含むＰＢＳＴに０．１４ｎＭの濃度で溶解したもの）を１００μＬ／ウェルで添加し、３７℃で４０分間、同時インキュベートした後、プレートを４回洗浄した。その後、ＨＲＰ標識ストレプトアビジン（ＰＢＳＴで１：１００００に希釈したもの、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ、カタログ０１６－０３０－０８４）を１００μＬ／ウェルで添加し、３７℃で４０分間インキュベートした。最終回の洗浄後、ＥＬＩＳＡ基質ＴＭＢ（Ｉｎｎｏｒｅａｇｅｎｔｓ、カタログＴＭＢ－Ｓ－００２）を１００μＬ／ウェルで加えてインキュベートした。１０分後、２５℃で１ＭのＨ_２ＳＯ_４を５０μＬ／ウェルで添加して反応を停止させ、４５０ｎｍでの吸光度を測定した。ソフトウェアＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍでデータ分析を行い、ＥＣ_５０値を求めた。

【0124】

２．２細胞ベースのＦＡＣＳ結合
フローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）により、２９３Ｆ－ＩＬ４Ｒα細胞表面に発現するＩＬ４Ｒαに対する本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体の結合活性を分析した。簡単に説明すると、ＥｃｏＲＩとＸｂａＩの間にヒトＩＬ４Ｒα（ｕｎｉｐｒｏｔ＃Ｐ２４３９４－１のアミノ酸残基１～８２５）をコードするヌクレオチドを有するｐＣＭＶ－Ｔ－Ｐプラスミド構築物を用いて、２９３Ｆ細胞（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ Ｉｎｃ．、カタログ１１６２５０１９）をトランスフェクトし、その後の細胞ベースのＦＡＣＳ結合及び細胞ベースのリガンド遮断ＦＡＣＳ分析のために、安定した細胞プール（２９３Ｆ－ＩＬ４Ｒαと名付けたもの）を選択した。２９３Ｆ－ＩＬ４Ｒα細胞を細胞培養フラスコから採取し、２回洗浄して、ＦＡＣＳバッファー（２％ｖ／ｖのウシ胎児血清を含むリン酸塩バッファー（ＰＢＳ））に再懸濁した。次に、２×１０^５細胞／ウェルを含む９６ウェルプレートにＦＡＣＳバッファーで段階希釈（８０ｎＭの出発濃度から４倍段階希釈）した抗ＩＬ４Ｒα抗体又は対照物質を１００μＬ／ウェルで添加し、４０分間氷浴した。細胞をＦＡＣＳバッファーで２回洗浄した後、Ｒ－フィコエリトリン標識アフィニティー精製ヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｆｃγ断片特異性、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ、カタログ１０９－１１５－０９８、ＦＡＣＳバッファーで１：１０００に希釈したもの）を１００μＬ／ウェルで添加した。４℃、暗所で４０分間インキュベートした後、細胞を３回洗浄してからＦＡＣＳバッファーに再懸濁した。ベクトン・ディッキンソン社製ＦＡＣＳ ＣａｎｔｏＩＩ－ＨＴＳにより蛍光値を測定した。ソフトウェアＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍでデータ分析を行い、ＥＣ_５０値を求めた。

【0125】

２．３間接ＥＬＩＳＡ
本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体と、カニクイザルＩＬ４Ｒαタンパク質又はｃａｌ－ＩＬ４Ｒα－ｈｉｓタンパク質との交差反応性について分析した。簡単に説明すると、炭酸塩／重炭酸塩バッファー（ｐＨ９．６）に２μｇ／ｍＬの濃度で溶解したカニクイザルＩＬ４Ｒα－ｈｉｓタンパク質（Ｓｉｎｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｃ．、カタログ９０８９７－Ｃ０８Ｈ）、又は、炭酸塩／重炭酸塩バッファー（ｐＨ９．６）に０．２μｇ／ｍＬの濃度で溶解したｃａｌ－ＩＬ４Ｒα－ｈｉｓタンパク質（Ｓｉｎｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｃ．の特注品、カタログＢＡＸ２）をそれぞれ９６ウェルプレートに１００μＬ／ウェルでコーティングし、３７℃で２時間インキュベートした。洗浄バッファー（ＰＢＳ＋０．０５％ｗ／ｖＴｗｅｅｎ－２０、ＰＢＳＴ）でプレートを１回洗浄してから、ブロッキングバッファー（５％ｗ／ｖのスキムミルクを含むＰＢＳＴ）を２００μＬ／ウェルで加え、３７℃で２時間ブロッキングした。プレートを再度洗浄し、段階希釈（０．００４－６６．７ｎＭ、６６．７ｎＭの出発濃度から、２．５％ｗ／ｖのスキムミルクを含むＰＢＳＴで５倍段階希釈）した本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体又は対照物質１００μＬを各ウェルに加え、３７℃で４０分間インキュベートした。プレートを４回洗浄した後、ペルオキシダーゼ標識アフィニティー精製Ｆ（ａｂ’）_２断片化ヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｆｃγ断片特異性、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ、カタログ１０９－０３６－０９８、ＰＢＳＴバッファーで１：５０００に希釈したもの）を１００μＬ／ウェルで加え、３７℃で４０分間インキュベートした。最終回の洗浄後、ＴＭＢ（Ｉｎｎｏｒｅａｇｅｎｔｓ）を１００μＬ／ウェルで添加してインキュベートした。３～１０分後、２５℃で１ＭのＨ_２ＳＯ_４を５０μＬ／ウェルで添加して反応を停止させ、４５０ｎｍでの吸光度を測定した。ソフトウェアＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍでデータ分析を行い、ＥＣ_５０値を求めた。

【0126】

（実施例３）ＩＬ４Ｒα－参照物質又はＩＬ４Ｒα－ＩＬ４の相互作用に対する抗ＩＬ４Ｒα抗体の遮断活性
３．１リガンド遮断ＥＬＩＳＡ
競合ＥＬＩＳＡにより、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体の、ＩＬ４－ＩＬ４Ｒα相互作用を遮断する能力を確認した。簡単に説明すると、ＰＢＳに２μｇ／ｍＬの濃度で溶解したヒトＩＬ４Ｒα－ｈｉｓタンパク質（自社調製、アミノ酸配列は配列番号１５のとおり）を１００μＬ／ウェルで９６ウェルプレートにコーティングし、４℃で一晩インキュベートした。翌日、洗浄バッファー（ＰＢＳ＋０．０５％ｗ／ｖＴｗｅｅｎ－２０、ＰＢＳＴ）でプレートを洗浄し、５％ｗ／ｖのスキムミルクを含むＰＢＳＴを添加して、３７℃で２時間ブロッキングした。その後、洗浄バッファーでプレートを再度洗浄した。

【0127】

２．５％ｗ／ｖのスキムミルクを含むＰＢＳＴバッファーで本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体又は対照物質を段階希釈（８０ｎＭの出発濃度から４倍段階希釈）し、段階希釈した抗ＩＬ４Ｒα抗体又は対照物質を、ＩＬ４Ｒαがコーティングされたプレートに１００μＬ／ウェルで加え、３７℃でヒトＩＬ４Ｒα－ｈｉｓタンパク質と４０分間、同時インキュベートした。洗浄バッファーでプレートを４回洗浄した後、濃度０．５６ｎＭのビオチン標識ヒトＩＬ４タンパク質（Ｓｉｎｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｃ．、カタログ１１８４６－ＨＮＡＥ）１００μＬを各ウェルに添加し、３７℃で４０分間インキュベートした。洗浄バッファーでプレートを再度洗浄した。その後、ＨＲＰ標識ストレプトアビジン（ＰＢＳＴバッファーで１：１００００に希釈したもの、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ、カタログ０１６－０３０－０８４）を１００μＬ／ウェルで添加し、３７℃で４０分間、同時インキュベートした。洗浄バッファーでプレートを再度洗浄した。最後に、ＴＭＢを加え、１ＭのＨ_２ＳＯ_４で反応を停止させ、４５０ｎｍでの吸光度を測定した。ソフトウェアＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍでデータ分析を行い、ＩＣ_５０値を求めた。

【0128】

３．２参照物質遮断ＥＬＩＳＡ
競合ＥＬＩＳＡにより、本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体の、参照物質－ヒトＩＬ４Ｒα結合を遮断する能力を確認した。簡単に説明すると、２μｇ／ｍＬの濃度でＰＢＳに溶解した参照物質を１００μＬ／ウェルで９６ウェルプレートにコーティングし、４℃で一晩インキュベートした。翌日、洗浄バッファー（ＰＢＳ＋０．０５％ｗ／ｖＴｗｅｅｎ－２０、ＰＢＳＴ）でプレートを洗浄し、５％ｗ／ｖのスキムミルクを含むＰＢＳＴを添加して、３７℃で２時間ブロッキングした。９６ウェルプレートのブロッキング中に、ビオチン標識ヒトＩＬ４Ｒα－ｈｉｓタンパク質（自社調製、アミノ酸配列は配列番号１５のとおり。２．５％ｗ／ｖのスキムミルクを含むＰＢＳＴに０．５５ｎＭの濃度で溶解したもの）により本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体又は対照物質を希釈（１００ｎＭの出発濃度から４倍段階希釈）して、２５℃で４０分間インキュベートした。プレート洗浄後、抗体／ＩＬ４Ｒα－ｈｉｓ混合物を、参照物質がコーティングされたプレートに１００μＬ／ウェルで添加した。３７℃で４０分間インキュベートし、洗浄バッファーでプレートを再度洗浄した。次に、プレートにＨＲＰ標識ストレプトアビジンを１００μＬ／ウェルで添加し、３７℃で４０分間インキュベートして、プレートに結合したビオチン標識ヒトＩＬ４Ｒα－ｈｉｓを検出した。洗浄バッファーでプレートを再度洗浄した。最後にＴＭＢを加え、１ＭのＨ_２ＳＯ_４を用いて反応を停止させ、４５０ｎｍでの吸光度を測定した。ソフトウェアＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍでデータ分析を行い、ＩＣ_５０値を求めた。

【0129】

３．３細胞ベースのリガンド遮断ＦＡＣＳ
上記調製した２９３Ｆ－ＩＬ４Ｒα細胞を用いて、細胞表面のＩＬ４Ｒαに対するＩＬ４タンパク質の結合を遮断する抗ＩＬ４Ｒα抗体の活性をフローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）により評価した。

【0130】

簡単に説明すると、２９３Ｆ－ＩＬ４Ｒα細胞を細胞培養フラスコから採取し、２回洗浄して、ＦＡＣＳバッファー（２％ｖ／ｖのウシ胎児血清を含むＰＢＳ）に再懸濁した。次に、１×１０^５細胞／ウェルを含む９６ウェルプレートに、ＦＡＣＳバッファーで段階希釈（８０ｎＭの出発濃度から４倍段階希釈）した抗ＩＬ４Ｒα抗体又は対照物質を１００μＬ／ウェルで添加し、４０分間氷浴した。プレートをＦＡＣＳバッファーで２回洗浄した後、濃度１．６７ｎＭのビオチン標識ヒトＩＬ４タンパク質（Ｓｉｎｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｃ．、カタログ１１８４６－ＨＮＡＥ）１００μＬを各ウェルに添加し、４℃、暗所で４０分間インキュベートした。ＦＡＣＳバッファーでプレートを２回洗浄した後、Ｒ－フィコエリトリン標識ストレプトアビジン（ＦＡＣＳバッファーで１：５００に希釈したもの。Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ、カタログ０１６－１１０－０８４）１００μＬを各ウェルに添加し、４℃、暗所で４０分間インキュベートした。細胞を２回洗浄した後、ＦＡＣＳバッファーに再懸濁した。ベクトン・ディッキンソン社製ＦＡＣＳ ＣａｎｔｏＩＩ－ＨＴＳにより蛍光値を測定した。ソフトウェアＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍでデータ分析を行い、ＩＣ_５０値を求めた。

【0131】

（実施例４）細胞ベースの抗ＩＬ４Ｒα抗体の機能アッセイ
ＩＬ４及びＩＬ１３は、ＩＬ４Ｒαに結合し、ＨＥＫ２９３Ｔ－ＩＬ４Ｒα－ＳＴＡＴ６－ＳＴＡＴ６ＬＵＣ－ＬＢ２細胞におけるＳＴＡＴ６リン酸化を誘導することができる。ＳＴＡＴ６リン酸化は、ＩＬ４／ＩＬ１３シグナル伝達経路において極めて重要である。

【0132】

簡単に説明すると、ｐｃＤＮＡ３．１－Ｐｕｒｏ（ＹｏｕＢｉｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｃ．、カタログＶＴ９２２２）プラスミド構築物（ＢａｍＨＩとＸｈｏＩの間にヒトＩＬ４Ｒαをコードするヌクレオチドを有するもの）、ＳＴＡＴ６プラスミド（Ｓｉｎｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｃ．、カタログＨＧ１３１９０－ＮＨ）（ＫｐｎＩとＸｂａＩの間にヒトＳＴＡＴ６をコードするヌクレオチドを有するもの）、及び、ＳＴＡＴ６ルシフェラーゼレポータープラスミドＳＴＡＴ６－Ｌｕｃ（Ｙｅａｓｅｎ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｃ．、カタログ１１５８８ＥＳ０３）を用いて、ＩＬ１３Ｒα１を自然に発現するＨＥＫ２９３Ｔ細胞（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１１２６８）を安定にトランスフェクトし、社内でＨＥＫ２９３Ｔ－ＩＬ４Ｒα－ＳＴＡＴ６－ＳＴＡＴ６ＬＵＣ－ＬＢ２細胞を調製した。次に、その後のすべての機能アッセイを行うための単一細胞クローンＬＢ２を選択した。

【0133】

ＩＬ４及びＩＬ１３によって誘導されるＳＴＡＴ６リン酸化に対する本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体の阻害作用を分析した。

【0134】

簡単に説明すると、対数期のＨＥＫ２９３Ｔ－ＩＬ４Ｒα－ＳＴＡＴ６－ＳＴＡＴ６ＬＵＣ－ＬＢ２細胞を培地（ＲＰＭＩ１６４０＋１０％のＦＢＳ）に再懸濁し、１ウェル当たり５×１０^５細胞となるように、１００μＬ／ウェルで９６ウェルプレートに播種した。次に、段階希釈（１００ｎＭの出発濃度から５倍段階希釈）した本開示の抗ＩＬ４Ｒα抗体又は対照物質（社内で調製した抗ＣＤ２２抗体を含む）５０μＬを各ウェルに添加し、３７℃で３０分間インキュベートした。その後、ＩＬ４タンパク質（６００ｐｇ／ｍＬ、Ｓｉｎｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｃ．、カタログ１１８４６－ＨＮＡＥ）又はＩＬ１３タンパク質（５０ｎｇ／ｍＬ、Ｓｉｎｏ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｃ．、カタログ１０３６９－ＨＮＡＣ）５０μＬを各ウェルに添加し、３７℃で２０分間インキュベートした。プレートを遠心分離し、染色バッファー（自社調製、ＤＰＢＳ＋０．５％のｗ／ｖＢＳＡ＋２ｍＭのＥＤＴＡ）でプレートを２回洗浄した後、固定バッファー（ＢＤ ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ ｉｎｃ．、カタログ５５４５６５５）５０μＬを各ウェルに加え、４℃で３０分間インキュベートした。細胞を２回洗浄し、透過化バッファー（ＢＤ ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ ｉｎｃ．、品番５５８０５０）２００μＬを各ウェルに加え、３０分間氷浴した。染色バッファーでプレートを３回洗浄した。その後、抗ｐＳＴＡＴ６抗体（ｐＳＴＡＴ６原液２０倍希釈、ＢＤ ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ ｉｎｃ．、カタログ５６２０７９）を加え、氷上で６０分間静置した。最後にプレートを２回洗浄し、染色バッファーに再懸濁した。ベクトン・ディッキンソン社製ＦＡＣＳ ＣａｎｔｏＩＩ－ＨＴＳにより蛍光値を測定した。ソフトウェアＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍでデータ分析を行い、ＩＣ_５０値を求めた。

【0135】

（実施例５）キメラ抗体の産生及び分析
マウス抗ＩＬ４Ｒαモノクローナル抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の配列決定を行った。配列番号を表１にまとめた。

【0136】

マウス抗ＩＬ４Ｒαモノクローナル抗体Ｃ２Ｃ１Ａ１Ａ１の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域をそれぞれ、可変領域のＣ末端が、対応する定常領域のＮ末端に連結するように、ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域（配列番号１３）を含むベクター及びヒトκ軽鎖定常領域（配列番号１４）を含むベクターにクローニングした。

【0137】

ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域に連結する重鎖可変領域をコードするヌクレオチドを含むベクター、及び、ヒトκ軽鎖定常領域に連結する軽鎖可変領域をコードするヌクレオチドを含むベクターを、軽鎖構築物：重鎖構築物が６０％：４０％の比率となるように、１ｍｇ／ｍＬのＰＥＩで５０ｍＬの２９３Ｆ懸濁細胞に一時的トランスフェクトした。
振盪フラスコでの６日間の培養後に細胞上清を回収し、上清中の細胞を遠心分離によって沈降させ、免疫グロブリンの単離のために０．２２μｍのフィルターによりろ過した。キメラ抗体はプロテインＡアフィニティークロマトグラフィーによって精製した。簡単に説明すると、プロテインＡアガロースカラム（ｂｅｓｔｃｈｒｏｍ （Ｓｈａｎｇｈａｉ） Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログＡＡ０２７３）を５～１０カラム容量のＰＢＳバッファーで洗浄した。細胞上清をプロテインＡアガロースカラムに通した後、タンパク質の吸光度がベースラインに戻るまで、カラムをＰＢＳバッファーで洗浄した。溶出バッファー（０．１Ｍグリシン－ＨＣｌ、ｐＨ２．７）によりカラムから溶出させた溶出液を直ちに１．５ｍＬチューブに回収し、中和バッファー（１Ｍ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、ｐＨ９．０）で中和した。免疫グロブリンを含む画分をプールし、ＰＢＳ中で４℃で一晩透析した。

【0138】

精製した抗体は、上記実施例のプロトコールに従い、捕捉ＥＬＩＳＡ、競合ＥＬＩＳＡ、ＢＩＡｃｏｒｅ親和性アッセイ、細胞ベースのＦＡＣＳ結合アッセイ及び細胞ベースの機能アッセイにより分析した。一方、マウスＣ２Ｃ１Ａ１Ａ１については、分析方法は上記実施例において下記の調整を行った。

【0139】

捕捉ＥＬＩＳＡについて、ヤギ抗ヒトＩｇＧの代わりに、２μｇ／ｍＬのヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｆｃγ断片特異性、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ、カタログ１１５－００５－００８）を１００μＬ／ウェルで加えた。

【0140】

ＢＩＡｃｏｒｅについて、ヤギ抗ヒトＩｇＧの代わりに、ヤギ抗マウスＩｇＧ（ＧＥ ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、カタログＢＲ１００８３８、Ｍｏｕｓｅ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｃａｐｔｕｒｅ Ｋｉｔ）をＣＭ５チップに共有結合させた。

【0141】

細胞ベースのＦＡＣＳ結合について、Ｒ－フィコエリトリン標識アフィニティー精製ヤギ抗ヒトＩｇＧの代わりに、Ｒ－フィコエリトリン標識アフィニティー精製Ｆ（ａｂ’）_２断片化ヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ、カタログ１１５－１１６－１４６）を１００μＬ／ウェルで加えた。

【0142】

結果を表２に示す。キメラ抗体が親のマウス抗体と同様の結合親和性／能力及び遮断活性を有することがデータから分かった。

【0143】

【表2】

【0144】

（実施例６）抗ＩＬ４Ｒαモノクローナル抗体のヒト化
マウス抗ＩＬ４Ｒα抗体Ｃ２Ｃ１Ａ１Ａ１をヒト化して特性分析を行った。マウス抗体のヒト化は、確立されたＣＤＲ移植法により以下のとおり行った。

【0145】

マウス抗体Ｃ２Ｃ１Ａ１Ａ１をヒト化するための受容体フレームワークを選択するために、各マウス抗体の軽鎖可変領域及び重鎖可変領域の配列をヒト免疫グロブリン遺伝子データベースに対してＢＬＡＳＴした。最も高い相同性を持つヒト生殖系列抗体をヒト化のための受容体フレームワークとして選択した。マウス抗体の重／軽鎖可変領域ＣＤＲｓを、選択したフレームワークに挿入し、さらにフレームワーク中の残基を復帰変異させることによって、より多くの候補重／軽鎖可変領域を得た。ｈｕＣ２Ｃ１Ａ１Ａ１－Ｖ１～ｈｕＣ２Ｃ１Ａ１Ａ１－Ｖ１６の計１６個の例示的なヒト化Ｃ２Ｃ１Ａ１Ａ１抗体を得た。これらの重／軽鎖可変領域の配列番号は表１に示したとおりである。

【0146】

ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域（配列番号１３）に連結するヒト化重鎖可変領域をコードするヌクレオチドを含むベクター、及び、ヒトκ軽鎖定常領域（配列番号１４）に連結するヒト化軽鎖可変領域をコードするヌクレオチドを含むベクターを、軽鎖構築物：重鎖構築物が６０％：４０％の比率となるように、１ｍｇ／ｍＬのＰＥＩで５０ｍＬの２９３Ｆ懸濁細胞に一時的トランスフェクトした。

【0147】

振盪フラスコでの６日間の培養後に細胞上清を回収し、上清中の細胞を遠心分離によって沈降させ、免疫グロブリンの単離のために０．２２μｍのフィルターによりろ過した。抗体はプロテインＡアフィニティークロマトグラフィーによって精製した。簡単に説明すると、プロテインＡアガロースカラム（ｂｅｓｔｃｈｒｏｍ（Ｓｈａｎｇｈａｉ）Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログＡＡ０２７３）を５～１０カラム容量のＰＢＳバッファーで洗浄した。細胞上清をプロテインＡアガロースカラムに通した後、タンパク質の吸光度がベースラインに戻るまで、カラムをＰＢＳバッファーで洗浄した。溶出バッファー（０．１Ｍグリシン－ＨＣｌ、ｐＨ２．７）によりカラムから溶出させた溶出液を直ちに１．５ｍＬチューブに回収し、中和バッファー（１Ｍ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、ｐＨ９．０）で中和した。免疫グロブリンを含む画分をプールし、ＰＢＳ中で４℃で一晩透析した。

【0148】

（実施例７）ヒト化抗体の特性分析
上記実施例のプロトコールに従い、ヒトＩＬ４Ｒαに対するヒト化抗体の結合親和性をＢＩＡｃｏｒｅ技術により評価し、Ｋ_ａ、Ｋ_ｄ及びＫ_Ｄ値を測定した。結果を表３にまとめる。

【0149】

【表3】

【0150】

結果によれば、ヒト化抗体は、キメラ抗体に類似するヒトＩＬ４Ｒα結合親和性を有する。また、参照物質と比較して、すべてのヒト化ｈｕＣ２Ｃ１Ａ１Ａ１抗体はいずれも、より高いヒトＩＬ４Ｒα結合親和性を示した。

【0151】

上記実施例のプロトコールに従い、Ｂｉａｃｏｒｅ、捕捉ＥＬＩＳＡ、間接ＥＬＩＳＡ、細胞ベースのＦＡＣＳ結合、競合ＥＬＩＳＡ、細胞ベースのリガンド遮断ＦＡＣＳ及び細胞ベースの機能アッセイにより、ヒト化抗体ｈｕＣ２Ｃ１Ａ１Ａ１－Ｖ１４及びｈｕＣ２Ｃ１Ａ１Ａ１－Ｖ１５をさらに分析した。

【0152】

また、ヒト化抗体ｈｕＣ２Ｃ１Ａ１Ａ１－Ｖ１５の熱安定性も分析した。簡単に言うと、ＧｌｏＭｅｌｔ^（商標） Ｔｈｅｒｍａｌ Ｓｈｉｆｔ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ Ｋｉｔ（Ｂｉｏｔｉｕｍ、カタログ３３０２２－Ｔ、ロット番号１８１２１４）によりタンパク質サーマルシフトアッセイによってＴｍ（融解温度）を測定した。簡単に説明すると、ＧｌｏＭｅｌｔ^（商標）色素を室温まで解凍し、色素が入ったバイアルをボルテックスして遠心分離した。次に、５μＬの２００×色素を９５μＬのＰＢＳに加えて、１０×色素を調製した。反応系に２μＬの１０×色素及び１０μｇのヒト化抗体を加え、総反応量が２０μＬになるまでＰＢＳを添加した。色素及び抗体が入った遠心管をしばらく遠心分離し、表４のパラメーターで設定されたプログラムＭｅｌｔＣｕｒｖｅを備えたリアルタイムＰＣＲサーマルサイクラー（Ｒｏｃｈｅ、ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ ４８０ＩＩ）に設置した。結果を表５－１、５－２及び５－３に示す。データによれば、ヒト化Ｃ２Ｃ１Ａ１Ａ１抗体は参照物質と比較して、同等（より優れるものでなければ）のヒトＩＬ４Ｒα結合親和性／活性及びＩＬ４Ｒα－ＩＬ４／ＩＬ１３に対する遮断能力を示した。

【0153】

【表4】

【0154】

【表5】

【0155】

【表6】

【0156】

【表7】

【0157】

（実施例８）医薬組成物の調製及びスクリーニング
［測定方法］
（１）サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ－ＵＰＬＣ）
試料中の抗体の純度を測定するために、Ｔｈｅｒｍｏ Ｖａｎｑｕｉｓｈ Ｆによる高速液体クロマトグラフィーで、Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ Ｐｒｏｔｅｉｎ ＢＥＨ ＳＥＣカラム（２００Å、１．７μｍ、４．６ｍｍ×３００ｍｍ）、プレカラムとしてのＷａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ Ｐｒｏｔｅｉｎ ＢＥＨ ＳＥＣガードカラム（２００Å、１．７μｍ、４．６ｍｍ×３０ｍｍ）を用いて、５０ｍｍｏｌ／Ｌのリン酸塩バッファー＋２００ｍｍｏｌ／Ｌの塩化ナトリウム（ｐＨ７．０）を移動相にして溶出を行い、測定波長は２８０ｎｍとした。面積正規化法により、高分子不純物及び免疫グロブリンモノマーの含有率を算出した。

【0158】

（２）示差走査蛍光法（ＤＳＦ）
タンパク質安定性分析装置（Ｎａｎｏ Ｔｅｍｐｅｒ、Ｐｒｏｍｅｔｈｅｕｓ ＮＴ．４８）により試料のアンフォールディング温度（Ｔｍ）を測定し、キャピラリーチューブで１０μｌの試料を試料室に入れ、プロセスについて、走査開始温度を２５℃とし、走査終了温度を９５℃とし、昇温速度を０．３℃／分とした。

【0159】

（３）ＨＶＲＯＣ－Ｓ粘度計（Ｒｈｅｏｓｅｎｓｅ、μＶＩＳＣ）によりサンプルの粘度を分析し、自動モードを選択して、測定結果を記録した。

【0160】

（４）全カラムイメージングキャピラリー等電点電気泳動法（ｉＣＩＥＦ）
試料の電荷変異体を同定するために、イメージングキャピラリー等電点電気泳動装置（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ ｉＣＥ３）、高速かつ全自動のタンパク質特性分析システム（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ、Ｍａｕｒｉｃｅ）、保護層付き石英キャピラリーチューブ（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ）、紫外線検出器を用いて、紫外線の検出波長２８０ｎｍで検出を行った。注入時間を６０秒に設定し、１５００ボルトで１分間プリフォーカスし、３００ボルトで１０分間フォーカスした。ピーク面積正規化法により、各電荷変異体のピーク面積率を求めた。

【0161】

［緩衝剤の調製］
（１）ヒスチジン－塩酸ヒスチジン緩衝剤はヒスチジン及び塩酸ヒスチジンを含む。特定の実施例において、ヒスチジン－塩酸ヒスチジン緩衝剤は、ヒスチジン及び塩酸ヒスチジン一水和物を含み、例えば、２０ｍＭのヒスチジン－塩酸ヒスチジン緩衝剤（ｐＨ５．８）は、約１．１７ｍｇ／ｍＬのヒスチジンと、約２．６２ｍｇ／ｍＬの塩酸ヒスチジン一水和物からなる。

【0162】

（２）リン酸ナトリウム緩衝剤はリン酸水素二ナトリウム及びリン酸二水素ナトリウムを含む。特定の実施例において、リン酸ナトリウム緩衝剤は、リン酸二水素ナトリウム一水和物及びリン酸水素二ナトリウム十二水和物を含み、例えば、２０ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝剤（ｐＨ６．０）は、約２．５３９ｍｇ／ｍＬのリン酸二水素ナトリウム一水和物と、約０．５７３ｍｇ／ｍＬのリン酸水素二ナトリウム十二水和物とで形成される。

【0163】

（３）酢酸ナトリウム－酢酸緩衝剤は酢酸ナトリウム及び酢酸を含む。特定の実施例において、酢酸ナトリウム－酢酸緩衝剤は、酢酸ナトリウム三水和物及び酢酸を含み、例えば、２０ｍＭの酢酸ナトリウム－酢酸緩衝剤（ｐＨ６．０）は、約２．６０５ｍｇ／ｍＬの酢酸ナトリウム三水和物と、約０．１４１ｍｇ／ｍＬの酢酸とで形成される。

【0164】

限外ろ過により、抗ＩＬ４Ｒα抗体（ｈｕＣ２Ｃ１Ａ１Ａ１－Ｖ１５）を表６の緩衝剤のそれぞれに置換し、置換後に濃縮を行ってから、表６のとおりに界面活性剤及び安定化剤を添加した。均一に混合した後、０．２２μｍのフィルターでろ過して除菌し、バイアルに分注し、栓をしてキャップをした。医薬組成物Ｆ１～Ｆ４のＳＥＣ－ＵＰＬＣ測定結果を表７に示す。そのうち、Ｆ４は、４０℃で１ヶ月間保管後の高分子不純物の増加（１．３６％から５．６６％まで増加）がＦ１～Ｆ３より多かった。

【0165】

【表8】

【0166】

【表9】

【0167】

一例として、２０ｍＭのヒスチジン－塩酸ヒスチジンを緩衝剤として選択した。限外ろ過により、抗ＩＬ４Ｒα抗体（ｈｕＣ２Ｃ１Ａ１Ａ１－Ｖ１５）を表８の緩衝剤に置換し、置換後に濃縮を行ってから、表８のとおりに界面活性剤及び安定化剤を添加した。均一に混合した後、０．２２μｍのフィルターでろ過して除菌し、バイアルに分注し、栓をしてキャップをした。医薬組成物Ｆ５～Ｆ７のＴｍ及びＳＥＣ－ＵＰＬＣ測定結果を表９に示す。そのうち、Ｆ６は、４０℃で１ヶ月間保管後の高分子不純物の増加が最も少なかった。

【0168】

【表10】

【0169】

【表11】

【0170】

一例として、２０ｍＭのヒスチジン－塩酸ヒスチジンを緩衝剤として選択した。限外ろ過により、抗ＩＬ４Ｒα抗体（ｈｕＣ２Ｃ１Ａ１Ａ１－Ｖ１５）を表１０の緩衝剤に置換し、置換後に濃縮を行ってから、表１０のとおりに界面活性剤及び安定化剤を添加した。均一に混合した後、０．２２μｍのフィルターでろ過して除菌し、バイアルに分注し、栓をしてキャップをした。医薬組成物Ｆ８及びＦ９のＴｍ、粘度、ＳＥＣ－ＵＰＬＣ及びｉＣＩＥＦ測定結果を表１１に示す。そのうち、Ｆ８はＦ９より低粘度であった。

【0171】

【表12】

【0172】

【表13】

【0173】

本開示において、一以上の実施形態を挙げて説明したが、本開示はこれらの実施形態だけでなく、添付の特許請求の範囲の精神及び範囲に含まれるすべての代替物、変形及び均等物も包含することを意図していると理解されるべきである。本明細書において参照した文献はすべて、参照により本明細書に組み込まれる。
本開示の配列情報を以下の表１２にまとめる。

【0174】

【表14-1】

【0175】

【表14-2】

【0176】

【表14-3】

【配列表】

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【国際調査報告】