▶ アール．ピー．シェーラー テクノロジーズ，エルエルシーの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-09-05
(54)【発明の名称】抗体－薬物コンジュゲートを使用する方法
(51)【国際特許分類】
A61K 47/68 20170101AFI20240829BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20240829BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240829BHJP
A61K 31/537 20060101ALI20240829BHJP
C07K 16/28 20060101ALN20240829BHJP
【ＦＩ】
A61K47/68
A61K39/395 D
A61K39/395 C
A61K39/395 N
A61K39/395 L
A61P35/00
A61K31/537
C07K16/28 ZNA
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024512134
(86)(22)【出願日】2022-08-24
(85)【翻訳文提出日】2024-04-03
(86)【国際出願番号】 US2022041410
(87)【国際公開番号】W WO2023028168
(87)【国際公開日】2023-03-02
(31)【優先権主張番号】63/236,988
(32)【優先日】2021-08-25
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/272,450
(32)【優先日】2021-10-27
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】520355792
【氏名又は名称】アール．ピー．シェーラー テクノロジーズ，エルエルシー
(74)【代理人】
【識別番号】100114188
【弁理士】
【氏名又は名称】小野 誠
(74)【代理人】
【識別番号】100119253
【弁理士】
【氏名又は名称】金山 賢教
(74)【代理人】
【識別番号】100124855
【弁理士】
【氏名又は名称】坪倉 道明
(74)【代理人】
【識別番号】100129713
【弁理士】
【氏名又は名称】重森 一輝
(74)【代理人】
【識別番号】100137213
【弁理士】
【氏名又は名称】安藤 健司
(74)【代理人】
【識別番号】100183519
【弁理士】
【氏名又は名称】櫻田 芳恵
(74)【代理人】
【識別番号】100196483
【弁理士】
【氏名又は名称】川嵜 洋祐
(74)【代理人】
【識別番号】100160749
【弁理士】
【氏名又は名称】飯野 陽一
(74)【代理人】
【識別番号】100160255
【弁理士】
【氏名又は名称】市川 祐輔
(74)【代理人】
【識別番号】100219265
【弁理士】
【氏名又は名称】鈴木 崇大
(74)【代理人】
【識別番号】100203208
【弁理士】
【氏名又は名称】小笠原 洋平
(74)【代理人】
【識別番号】100216839
【弁理士】
【氏名又は名称】大石 敏幸
(74)【代理人】
【識別番号】100146318
【弁理士】
【氏名又は名称】岩瀬 吉和
(74)【代理人】
【識別番号】100127812
【弁理士】
【氏名又は名称】城山 康文
(72)【発明者】
【氏名】ドレイク，ペネロペ・エム
【テーマコード（参考）】
4C076
4C085
4C086
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C076EE41
4C076EE59
4C076FF34
4C085AA13
4C085AA14
4C085AA16
4C085AA25
4C085BB36
4C085CC23
4C085DD62
4C085EE01
4C085GG10
4C086AA01
4C086AA02
4C086CB25
4C086MA01
4C086MA04
4C086MA55
4C086MA70
4C086NA10
4C086ZB26
4H045AA11
4H045AA30
4H045BA10
4H045BA50
4H045BA72
4H045CA40
4H045DA75
4H045DA76
4H045EA20
(57)【要約】
本開示は、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートを使用する方法を提供する。具体的には、本開示は、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を使用することによって、標的媒介性交差反応性を低減する方法を提供する。本開示はまた、様々な治療適応症においてそのようなコンジュゲートを使用する方法、及びそのようなコンジュゲートの産生方法を含む。
【選択図】図１
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
対象に、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を投与することによる、前記対象における標的媒介性交差反応性と関連する毒性を低減する方法であって、式（Ｉ）の前記ＡＤＣが、以下であり、
【化1】
前記投与することが、前記ＡＤＣの標的媒介性交差反応性と関連する前記対象における前記毒性を低減する、方法。
【請求項2】
前記抗原が、前記対象の皮膚又は粘膜上皮において発現される、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記抗原が、ネクチン－４、ＴＡＣＳＴＤ２、ＥＧＦＲ、ＥＲＢＢ３、糖タンパク質非転移性黒色腫タンパク質Ｂ（ＧＰＮＭＢ）、ＳＬＣ３９Ａ６（ＬＩＶ－１）、ＳＬＩＴＲＫ６、ＧＵＣＹ２Ｃ、ＭＵＣ１、ＮａＰｉ２ｂ、及びカドヘリン３からなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項4】
前記抗体が、抗ネクチン－４抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項5】
前記抗体が、抗腫瘍関連カルシウムシグナルトランスデューサー２（ＴＡＣＳＴＤ２）抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項6】
前記抗体が、以下の配列を含み、Ｘ１（ｆＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０
式中、
Ｚ２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸又は脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、
但し、前記配列が前記抗体のＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３が、各々独立して、任意のアミノ酸であることを条件とする、請求項１に記載の方法。
【請求項7】
前記抗体が、抗Ｍｕｃ１抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項8】
前記抗体が、抗ＮａＰｉ２ｂ抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項9】
前記抗体が、前記対象の生命維持に不可欠な臓器上に発現される少なくとも１つの標的抗原に結合する、請求項１に記載の方法。
【請求項10】
同じ抗原を標的とし、かつ式（Ｉ）の前記ＡＤＣとは異なるリンカー及びペイロードを含む抗体－薬物コンジュゲートが前記対象に投与される場合と比較して、前記毒性が低減する、請求項１に記載の方法。
【請求項11】
前記対象が、細胞増殖性障害を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項12】
前記抗体が、ＩｇＧ１抗体である、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項13】
前記抗体が、ＩｇＧ１カッパ抗体である、請求項１２に記載の方法。
【請求項14】
前記抗体が、ｆＧｌｙ’残基を含み、ｆＧｌｙ’が、Ｗ１においてカップリングされた前記抗体のアミノ酸である、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項15】
前記ｆＧｌｙ’が、前記抗体の重鎖定常領域のＣ末端に、又はその付近に配置されている、請求項１４に記載の方法。
【請求項16】
前記ｆＧｌｙ’残基が、前記抗体の軽鎖定常領域内に配置されている、請求項１４に記載の方法。
【請求項17】
前記ｆＧｌｙ’残基が、前記抗体の重鎖ＣＨ１領域内に配置されている、請求項１４に記載の方法。
【請求項18】
前記ｆＧｌｙ’残基が、前記抗体の重鎖ＣＨ２領域内に配置されている、請求項１４に記載の方法。
【請求項19】
前記ｆＧｌｙ’残基が、前記抗体の重鎖ＣＨ３領域内に配置されている、請求項１４に記載の方法。
【請求項20】
式（Ｉ）の前記抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）が、前記対象に非経口投与される、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項21】
式（Ｉ）の前記抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）が、前記対象に非経口以外で投与される、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項22】
前記抗体が、モノクローナル抗体である、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項23】
前記抗体が、ヒト化抗体である、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項24】
式（Ｉ）の前記抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）中の薬物が、抗がん薬物である、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項25】
前記抗がん薬物が、メイタンシノイドを含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項26】
同じ抗原を標的とし、かつ式（Ｉ）の前記ＡＤＣとは異なるリンカー及びペイロードを含む抗体－薬物コンジュゲートが前記対象に投与される場合と比較して、式（Ｉ）の前記ＡＤＣが投与される場合、前記毒性が、前記対象において少なくとも２倍低減する、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年８月２５日に出願された米国仮特許出願第６３／２３６，９８８号、及び２０２１年１０月２７日に出願された米国仮特許出願第６３／２７２，４５０号に対する優先権の利益を主張するものであり、その開示は参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２１年８月２５日に出願された米国仮特許出願第６３／２３６，９８８号、及び２０２１年１０月２７日に出願された米国仮特許出願第６３／２７２，４５０号に対する優先権の利益を主張するものであり、その開示は参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【0002】
タンパク質－小分子治療コンジュゲートの分野は大幅に進化し、今後数年間でより多くの薬物を提供する見込みを有する多くの臨床的に有益な薬物が提供されている。タンパク質－コンジュゲート治療薬は、例えば、特異性、機能の多様性、及び比較的低い標的外活性に起因して、いくつかの利点を提供することができ、より少ない副作用をもたらす。タンパク質の化学修飾は、これらの利点をより強力に、安定に、又は多様にすることによって、これらの利点を拡張し得る。
【0003】
いくつかの標準的な化学的転換は、タンパク質に対して翻訳後修飾を作製及び操作するために一般的に使用される。特定のアミノ酸の側鎖を選択的に修飾することができるいくつかの方法が存在する。例えば、カルボン酸側鎖（アスパルテート及びグルタメート）は、水溶性カルボジイミド試薬による初期活性化及びアミンによるその後の反応によって標的化され得る。同様に、リジンは、活性化したエステル又はイソチオシアネートの使用を通じて標的化することができ、システインチオールは、マレイミド及びα－ハロ－カルボニルを用いて標的化することができる。
【0004】
化学改変タンパク質治療薬又は試薬の作製に対する１つの重大な障害は、生物学的に活性な均質な形態でのタンパク質の産生である。ポリペプチドに対する薬物又は検出可能な標識のコンジュゲーションは制御が困難な場合があり、結合した薬物分子の数及び化学的コンジュゲーションの位置が異なるコンジュゲートの不均一な混合物をもたらす。いくつかの事例において、合成有機化学のツールを使用して、コンジュゲーションの部位及び／又はポリペプチドに対してコンジュゲートされた薬物若しくは検出可能な標識を制御して、ポリペプチドに対する化学結合の正確かつ選択的な形成を指示することが望ましい場合がある。
【0005】
腫瘍関連カルシウムシグナルトランスデューサー２（ＴＡＣＳＴＤ２）は、トロホブラスト細胞表面抗原２（Ｔｒｏｐ－２）としても知られ、ＴＡＣＳＴＤ２遺伝子によってコードされる膜貫通糖タンパク質である。ＴＡＣＳＴＤ２は、細胞内カルシウムシグナルトランスデューサーである。ＴＡＣＳＴＤ２は、多くのがんで差次的に発現される。特に、ＴＡＣＳＴＤ２は、多くの正常組織で発現されるが、多くのがんで過剰発現される。実際に、ＴＡＣＳＴＤ２の過剰発現は、予後的価値を有する。したがって、ＴＡＣＳＴＤ２は、特定のがん、特に乳がんを有する患者における好適な治療標的である。がん細胞上のＴＡＣＳＴＤ２は、抗体、抗体融合タンパク質、化学阻害剤、ナノ粒子などを介して標的化することができる。例えば、サシツズマブゴビテカンは、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体を含む抗体－薬物コンジュゲートである。サシツズマブゴビテカンは、特定の種類の乳がんを有する患者の治療のために承認されている。
【0006】
ムチン－１（ムチン１又はＭＵＣ１とも称される）は、ムチンファミリーのメンバーである。ムチンは、上皮表面上に保護性粘膜障壁を形成する上で不可欠な役割を果たすＯ－グリコシル化タンパク質である。ＭＵＣ１は、肺、乳房、胃、及び膵臓を含む多くの異なる組織の粘膜表面を覆う上皮細胞の頂端表面上に発現される。このタンパク質は、ヘテロ二量体複合体を形成するアルファサブユニット及びベータサブユニットへとタンパク質分解的に切断される。Ｎ末端アルファサブユニットは、細胞接着において機能し、Ｃ末端ベータサブユニットは、細胞シグナル伝達に関与する。過剰発現、異常な細胞内局在化、及びこのタンパク質のグリコシル化の変化は、がん腫と関連している。
【0007】
ＮａＰｉ２Ｂ（リン酸ナトリウム輸送タンパク質２Ｂとも称される）は、複数回膜貫通ナトリウム依存性リン酸トランスポーターである。ＮａＰｉ２Ｂは、多くの正常組織で発現されるが、多くのがんで過剰発現される。特に、ＮａＰｉ２Ｂは、ヒト肺がん、卵巣がん、及び甲状腺がんで発現される。実際に、ＮａＰｉ２Ｂの過剰発現は、予後的価値を有する。ＳＬＣ３４溶質キャリアタンパク質ファミリーのメンバーとして、無機リン酸の経細胞吸収及びリン酸ホメオスタシスの維持に関与し、細胞分化及び腫瘍発生と関連している。がん細胞上のＮＡＰｉ２Ｂは、抗体、抗体融合タンパク質、化学阻害剤、ナノ粒子などを介して標的化することができる。例えば、リファスツズマブベドチンは、抗ＮａＰｉ２Ｂ抗体を含む抗体－薬物コンジュゲートである。
【0008】
ネクチン－４は、ヒトにおいて多様な生理学的機能及び病理学的機能を有するネクチンファミリーに属する。ＰＶＲＬ４（ポリオウイルス受容体様４）は、胚及び胎盤で特異的に発現する。ネクチン－４が、肺がん、卵巣がん、及び乳がんを含むいくつかのヒトがんにおいて過剰発現されることが最近報告された。また、ネクチン－４の可溶性形態が、いくつかのがんの診断マーカーとしての可能性を有することが明示された。更に、いくつかの臨床研究は、腫瘍ネクチン－４の発現と、肺がん及び乳がんを有する患者の予後との間に有意な逆相関があったことを示している。エンホルツマブベドチンは、抗ネクチン－４抗体を含む抗体－薬物コンジュゲートである。
【発明の概要】
【0009】
抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）は、一般に、細胞傷害性小分子に連結された抗体を含み、健康ではない細胞を標的とする。標的抗原は、時に、健康ではない細胞及び健康な細胞の両方で発現されるため、インビボで、ペイロード（リンカー－薬物又はリンカー－小分子）は、いずれかの細胞上でオフロードされ得る。この場合、ＡＤＣは、健康ではない細胞と同じ抗原を発現するオフターゲット細胞又は健康な細胞を標的とし得る。これにより、臨床的に検出することができる交差反応性と呼ばれるものを引き起こす場合がある。例えば、対象へのＡＤＣの投与は、ＡＤＣの標的媒介性交差反応性に関連する毒性を誘発し得る。毒性は、ＡＤＣ自体の特異性又は有効性に関係なく、投薬量の制限を暗示し得る。したがって、いくつかの事例において、標的抗原（複数可）を発現する健康な細胞とのＡＤＣの交差反応性によって引き起こされる毒性を低減することが望ましい場合がある。
【0010】
本開示は、対象に、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を投与することによる、対象における毒性を低減する方法であって、式（Ｉ）のＡＤＣが、以下であり、
ＡＤＣが対象に投与される場合に、毒性が、ＡＤＣの標的媒介性交差反応性と関連する、方法を提供する。
【化1】
【0011】
本開示はまた、そのようなコンジュゲートの産生方法、及びコンジュゲートを使用する方法を包含する。
【0012】
本開示は、ネクチン－４、ＴＡＣＳＴＤ２、ＥＧＦＲ、ＥＲＢＢ３、糖タンパク質非転移性黒色腫タンパク質Ｂ（ＧＰＮＭＢ）、ＳＬＣ３９Ａ６（ＬＩＶ－１）、ＳＬＩＴＲＫ６、ＧＵＣＹ２Ｃ、ＭＵＣ１、ＮａＰｉ２Ｂ、及びカドヘリン３からなる群から選択される抗原を標的とするための式（Ｉ）の抗体を包含する。
【0013】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）のＡＤＣの抗体は、対象における細胞増殖性障害を治療するためのネクチン－４、ＴＡＣＳＴＤ２、ＮａＰｉ２Ｂ又はＭｕｃ－１のうちのいずれか１つを標的とする。
【0014】
いくつかの実施形態において、ＴＡＣＳＴＤ２を標的とする式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートは、以下の配列を含み、
Ｘ１（ｆＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０
式中、
Ｚ２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸又は脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、
但し、配列が抗体のＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３が、各々独立して、任意のアミノ酸であることを条件とする。
Ｘ１（ｆＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０
式中、
Ｚ２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ３０が、塩基性アミノ酸又は脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、
但し、配列が抗体のＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３が、各々独立して、任意のアミノ酸であることを条件とする。
【0015】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）のＡＤＣ中の抗体は、ＩｇＧ１抗体である。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）のＡＤＣ中の抗体は、カッパ抗体である。
【0016】
いくつかの態様において、式（Ｉ）のＡＤＣ中の抗体は、ｆＧｌｙ’残基を含み、ｆＧｌｙ’が、Ｗ１においてカップリングされた抗体のアミノ酸である。
【0017】
いくつかの態様において、式（Ｉ）のＡＤＣ中の抗体は、抗体の重鎖定常領域のＣ末端に、又はその付近に配置されているｆＧｌｙ’残基を含む。
【0018】
いくつかの態様において、式（Ｉ）のＡＤＣ中の抗体は、抗体の軽鎖定常領域内に配置されたｆＧｌｙ’残基を含む。
【0019】
いくつかの態様において、式（Ｉ）のＡＤＣ中の抗体は、抗体の重鎖ＣＨ１領域内に配置されたｆＧｌｙ’残基を含む。
【0020】
いくつかの態様において、式（Ｉ）のＡＤＣ中の抗体は、抗体の重鎖ＣＨ２領域内に配置されたｆＧｌｙ’残基を含む。
【0021】
いくつかの態様において、式（Ｉ）のＡＤＣ中の抗体は、抗体の重鎖ＣＨ３領域内に配置されたｆＧｌｙ’残基を含む。
【0022】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートは、ＴＡＣＳＴＤ２抗原を標的とし、これに結合し、ＴＡＣＳＴＤ２抗原に対する結合について、
可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＮＹＮＭＮ（配列番号１）を含むＶＨＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧ（配列番号２）を含むＶＨＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶ（配列番号３）を含むＶＨＣＤＲ３を含む、ＶＨポリペプチドと、
可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡ（配列番号４）を含むＶＬＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＳＡＳＹＲＹＴ（配列番号５）を含むＶＬＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＱＱＨＹＩＴＰＬＴ（配列番号６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む、ＶＬポリペプチドと、を含む、抗体と競合する。
可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＮＹＮＭＮ（配列番号１）を含むＶＨＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧ（配列番号２）を含むＶＨＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶ（配列番号３）を含むＶＨＣＤＲ３を含む、ＶＨポリペプチドと、
可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡ（配列番号４）を含むＶＬＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＳＡＳＹＲＹＴ（配列番号５）を含むＶＬＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＱＱＨＹＩＴＰＬＴ（配列番号６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む、ＶＬポリペプチドと、を含む、抗体と競合する。
【0023】
いくつかの事例において、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、
アミノ酸配列ＮＹＮＭＮ（配列番号１）を含むＶＨＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧ（配列番号２）を含むＶＨＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶ（配列番号３）を含むＶＨＣＤＲ３と、
可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡ（配列番号４）を含むＶＬＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＳＡＳＹＲＹＴ（配列番号５）を含むＶＬＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＱＱＨＹＩＴＰＬＴ（配列番号６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む、ＶＬポリペプチドと、を含む。
アミノ酸配列ＮＹＮＭＮ（配列番号１）を含むＶＨＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧ（配列番号２）を含むＶＨＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶ（配列番号３）を含むＶＨＣＤＲ３と、
可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡ（配列番号４）を含むＶＬＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＳＡＳＹＲＹＴ（配列番号５）を含むＶＬＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＱＱＨＹＩＴＰＬＴ（配列番号６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む、ＶＬポリペプチドと、を含む。
【0024】
いくつかの態様において、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートは、ＴＡＣＳＴＤ２抗原を標的とし、これに結合し、抗体は、
配列番号７に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
配列番号８に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む。
配列番号７に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
配列番号８に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む。
【0025】
他の実施形態において、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートは、Ｍｕｃ－１抗原を標的とし、これに結合し、抗体は、
以下の配列：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＴＶＫＩＳＣＫＶＳＧＹＴＦＴＤＨＴＭＨＷＩＫＱＲＰＧＫＧＬＥＷＭＧＹＦＹＰＲＤＤＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＬＴＡＤＫＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＬＲＹＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号９）を有するＶＨ鎖の重鎖ＣＤＲ１～重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ１～ＨＣＤＲ３）を含む可変重鎖（ＶＨ）鎖と、
以下の配列：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹＷＹＱＱＫＰＱＡＰＲＬＷＩＹＧＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＡＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号７）、
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＧＳＳＮＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＹＲＳＴＫＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＲＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１）、又は
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＩＧＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＳＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号２）を有するＶＬ鎖の軽鎖ＣＤＲ１～軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３）を含む可変軽鎖（ＶＬ）鎖と、を含む。
以下の配列：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＴＶＫＩＳＣＫＶＳＧＹＴＦＴＤＨＴＭＨＷＩＫＱＲＰＧＫＧＬＥＷＭＧＹＦＹＰＲＤＤＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＬＴＡＤＫＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＬＲＹＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号９）を有するＶＨ鎖の重鎖ＣＤＲ１～重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ１～ＨＣＤＲ３）を含む可変重鎖（ＶＨ）鎖と、
以下の配列：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹＷＹＱＱＫＰＱＡＰＲＬＷＩＹＧＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＡＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号７）、
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＧＳＳＮＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＹＲＳＴＫＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＲＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１）、又は
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＩＧＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＳＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号２）を有するＶＬ鎖の軽鎖ＣＤＲ１～軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３）を含む可変軽鎖（ＶＬ）鎖と、を含む。
【0026】
他の実施形態において、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートは、Ｍｕｃ－１抗原を標的とし、これに結合し、抗体は、Ｋａｂａｔ定義に従って、
ＨＣＤＲ１が、アミノ酸配列ＤＨＴＭＨ（配列番号１０）を含むこと、
ＨＣＤＲ２が、アミノ酸配列ＹＦＹＰＲＤＤＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１１）を含むこと、
ＨＣＤＲ３が、アミノ酸配列ＧＬＲＹＡＬＤＹ（配列番号５）を含むこと、
ＬＣＤＲ１が、アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹ（配列番号６）を含むこと、
ＬＣＤＲ２が、アミノ酸配列ＧＴＳＮＬＡＳ（配列番号１２）を含むこと、かつ
ＬＣＤＲ３が、アミノ酸配列ＨＱＹＡＷＳＰＰＴ（配列番号１３）を含むこと、を含む。
ＨＣＤＲ１が、アミノ酸配列ＤＨＴＭＨ（配列番号１０）を含むこと、
ＨＣＤＲ２が、アミノ酸配列ＹＦＹＰＲＤＤＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１１）を含むこと、
ＨＣＤＲ３が、アミノ酸配列ＧＬＲＹＡＬＤＹ（配列番号５）を含むこと、
ＬＣＤＲ１が、アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹ（配列番号６）を含むこと、
ＬＣＤＲ２が、アミノ酸配列ＧＴＳＮＬＡＳ（配列番号１２）を含むこと、かつ
ＬＣＤＲ３が、アミノ酸配列ＨＱＹＡＷＳＰＰＴ（配列番号１３）を含むこと、を含む。
【0027】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートは、Ｍｕｃ－１抗原を標的とし、これに結合し、抗体は、Ｋａｂａｔ定義に従って、
ＨＣＤＲ１が、アミノ酸配列ＤＨＴＭＨ（配列番号１０）を含むこと、
ＨＣＤＲ２が、アミノ酸配列ＹＦＹＰＲＤＤＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１１）を含むこと、
ＨＣＤＲ３が、アミノ酸配列ＧＬＲＹＡＬＤＹ（配列番号５）を含むこと、
ＬＣＤＲ１が、アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＧＳＳＮＬＹ（配列番号１４）を含むこと、
ＬＣＤＲ２が、アミノ酸配列ＲＳＴＫＬＡＳ（配列番号１５）を含むこと、かつ
ＬＣＤＲ３が、アミノ酸配列ＨＱＹＲＷＳＰＰＴ（配列番号１６）を含むこと、を含む。
ＨＣＤＲ１が、アミノ酸配列ＤＨＴＭＨ（配列番号１０）を含むこと、
ＨＣＤＲ２が、アミノ酸配列ＹＦＹＰＲＤＤＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１１）を含むこと、
ＨＣＤＲ３が、アミノ酸配列ＧＬＲＹＡＬＤＹ（配列番号５）を含むこと、
ＬＣＤＲ１が、アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＧＳＳＮＬＹ（配列番号１４）を含むこと、
ＬＣＤＲ２が、アミノ酸配列ＲＳＴＫＬＡＳ（配列番号１５）を含むこと、かつ
ＬＣＤＲ３が、アミノ酸配列ＨＱＹＲＷＳＰＰＴ（配列番号１６）を含むこと、を含む。
【0028】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートは、Ｍｕｃ－１抗原を標的とし、これに結合し、抗体は、Ｋａｂａｔ定義に従って、
ＨＣＤＲ１が、アミノ酸配列ＤＨＴＭＨ（配列番号１０）を含むこと、
ＨＣＤＲ２が、アミノ酸配列ＹＦＹＰＲＤＤＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１１）を含むこと、
ＨＣＤＲ３が、アミノ酸配列ＧＬＲＹＡＬＤＹ（配列番号５）を含むこと、
ＬＣＤＲ１が、アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹ（配列番号６）を含むこと、
ＬＣＤＲ２が、アミノ酸配列ＧＴＳＮＬＡＳ（配列番号１２）を含むこと、かつ
ＬＣＤＲ３が、アミノ酸配列ＨＱＹＳＷＳＰＰＴ（配列番号１７）を含むこと、を含む。
ＨＣＤＲ１が、アミノ酸配列ＤＨＴＭＨ（配列番号１０）を含むこと、
ＨＣＤＲ２が、アミノ酸配列ＹＦＹＰＲＤＤＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号１１）を含むこと、
ＨＣＤＲ３が、アミノ酸配列ＧＬＲＹＡＬＤＹ（配列番号５）を含むこと、
ＬＣＤＲ１が、アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹ（配列番号６）を含むこと、
ＬＣＤＲ２が、アミノ酸配列ＧＴＳＮＬＡＳ（配列番号１２）を含むこと、かつ
ＬＣＤＲ３が、アミノ酸配列ＨＱＹＳＷＳＰＰＴ（配列番号１７）を含むこと、を含む。
【0029】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートは、Ｍｕｃ－１抗原を標的とし、これに結合し、抗体は、
配列番号９に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
配列番号７に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む。
配列番号９に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
配列番号７に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む。
【0030】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートは、Ｍｕｃ－１抗原を標的とし、これに結合し、抗体は、
配列番号９に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
配列番号１に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む。
配列番号９に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
配列番号１に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む。
【0031】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートは、Ｍｕｃ－１抗原を標的とし、これに結合し、抗体は、
配列番号９に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
配列番号２に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む。
配列番号９に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
配列番号２に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む。
【0032】
いくつかの態様において、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）は、対象に、非経口又は非経口以外で投与される。
【0033】
いくつかの態様において、式（Ｉ）のＡＤＣ中の抗体は、モノクローナル抗体である。
【0034】
いくつかの態様において、式（Ｉ）のＡＤＣ中の抗体は、ヒト化抗体である。
【0035】
いくつかの態様において、式（Ｉ）のＡＤＣ中の薬物は、抗がん薬物である。いくつかの実施形態において、抗がん薬物は、メイタンシノイドである。
【0036】
いくつかの態様において、対象の皮膚又は粘膜上皮において発現される標的抗原に結合した、式（Ｉ）のＡＤＣ中の抗体。いくつかの実施形態において、標的抗原は、対象の生命維持に不可欠な臓器上に発現される。対象の生命維持に不可欠な臓器は、生体対象の生存に不可欠である臓器である。例えば、生命維持に不可欠な臓器は、脳、心臓、肺、肝臓、腎臓、又は脾臓のいずれかであり得る。いくつかの実施形態において、対象に式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートを投与することによって毒性を低減する方法は、細胞増殖性障害を患う対象を対象とする。
【図面の簡単な説明】
【0037】
【図1】ネクチン－４を標的とするＡＤＣを比較する、インビトロ毒性アッセイを示す。
【図2】抗ネクチン－４ ＲＥＤ－１０６コンジュゲートに対する、抗ネクチン－４ベドチンコンジュゲートを投与された場合のラットにおける臨床観察の比較を示す。
【図3A】ネクチン－４ ＡＤＣ反復用量毒性試験からのラット血漿試料の毒物動態分析が、投与レベルを確認し、ベドチンコンジュゲートに対して、ＲＥＤ－１０６コンジュゲートの改善されたインビボ安定性を示す。
【図3B】ネクチン－４ ＡＤＣ反復用量毒性試験からのラット血漿試料の毒物動態分析が、投与レベルを確認し、ベドチンコンジュゲートに対して、ＲＥＤ－１０６コンジュゲートの改善されたインビボ安定性を示す。
【図3C】ネクチン－４ ＡＤＣ反復用量毒性試験からのラット血漿試料の毒物動態分析が、投与レベルを確認し、ベドチンコンジュゲートに対して、ＲＥＤ－１０６コンジュゲートの改善されたインビボ安定性を示す。
【図3D】ネクチン－４ ＡＤＣ反復用量毒性試験からのラット血漿試料の毒物動態分析が、投与レベルを確認し、ベドチンコンジュゲートに対して、ＲＥＤ－１０６コンジュゲートの改善されたインビボ安定性を示す。
【図4A】式（Ｉ）によるＴＡＣＳＴＤ２標的化コンジュゲートをＴＡＣＳＴＤ２を発現する標的細胞株に曝露する場合と、ＴＡＣＳＴＤ２を標的とするＡＤＣを保有するメイタンシンを標的細胞株に曝露する場合と比較した、効力の比較を示す。
【図4B】式（Ｉ）によるＴＡＣＳＴＤ２標的化コンジュゲートをＴＡＣＳＴＤ２を発現する標的細胞株に曝露する場合と、ＴＡＣＳＴＤ２を標的とするＡＤＣを保有するメイタンシンを標的細胞株に曝露する場合と比較した、効力の比較を示す。
【図4C】式（Ｉ）によるＴＡＣＳＴＤ２標的化コンジュゲートをＴＡＣＳＴＤ２を発現する標的細胞株に曝露する場合と、ＴＡＣＳＴＤ２を標的とするＡＤＣを保有するメイタンシンを標的細胞株に曝露する場合と比較した、効力の比較を示す。
【図4D】式（Ｉ）によるＴＡＣＳＴＤ２標的化コンジュゲートをＴＡＣＳＴＤ２を発現する標的細胞株に曝露する場合と、ＴＡＣＳＴＤ２を標的とするＡＤＣを保有するメイタンシンを標的細胞株に曝露する場合と比較した、効力の比較を示す。
【図5】肺異種移植モデルＮＣＩ－Ｈ２９２に対するＴＡＣＳＴＤ２を標的とするＡＤＣのインビボ有効性を示す。
【図6】ＨＩＣによって決定される場合の１．７１のＣＡＴ－１０－１０６ ＤＡＲを示す。
【図7】ＣＡＴ－１０－１０６が、分析ＳＥＣによって決定される場合、９８．７％の単量体であることを示す。
【図8A】分析ＰＬＲＰによって決定される場合、３．４９のネクチン－４ ＣＨ１／ＣＴタグ化ＲＥＤ－１０６コンジュゲートＤＡＲを示す。
【図8B】ネクチン－４ ＣＨ１／ＣＴタグ化ＲＥＤ－１０６コンジュゲートが、分析ＳＥＣによって決定される場合、９７％の単量体であることを示す。
【図8C】ＨＩＣによって決定される場合の４．１７のネクチン－４ベドチンコンジュゲートＤＡＲを示す。
【図8D】ネクチン－４ベトチンコンジュゲートが、ＳＥＣによって決定される場合、９６％の単量体であることを示す。
【図9A】アルデヒドタグ化Ｉｇポリペプチドの生成のための可能な修飾部位を示すサイトマップを示す。上の配列は、ＩｇＧ１軽鎖ポリペプチドの保存領域のアミノ酸配列であり（配列番号１６３）、Ｉｇ軽鎖内の可能な修飾部位を示し、下の配列は、Ｉｇ重鎖ポリペプチドの保存領域のアミノ酸配列であり（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＡＧ００９０９、配列番号／／）、Ｉｇ重鎖内の可能な修飾部位を示す。重鎖及び軽鎖の付番は、全長重鎖及び軽鎖に基づく。
【図9B】ＩｇＧ１（配列番号４７）、ＩｇＧ２（配列番号７３）、ＩｇＧ３（配列番号９２）、ＩｇＧ４（配列番号１１２）、及びＩｇＡ（配列番号１２９）の免疫グロブリン重鎖定常領域のアラインメントを示し、アルデヒドタグが免疫グロブリン重鎖中に提供され得る修飾部位を示している。重鎖及び軽鎖の付番は、全重鎖及び軽鎖に基づく。
【図9C】免疫グロブリン軽鎖定常領域（上から下まで配列番号１６３、／／、／／、／／、及び１７５）のアラインメントを示し、アルデヒドタグが免疫グロブリン軽鎖中に提供され得る修飾部位を示している。
【0038】
定義
以下の用語は、別段で指示がない限り、以下の意味を有する。任意の定義されていない用語は、当該技術分野で認識されている意味を有する。
以下の用語は、別段で指示がない限り、以下の意味を有する。任意の定義されていない用語は、当該技術分野で認識されている意味を有する。
【0039】
「アルキル」は、１～１０個の炭素原子、例えば１～６個の炭素原子、又は１～５個、又は１～４個、又は１～３個の炭素原子を有する一価の飽和脂肪族ヒドロカルビル基を指す。この用語には、例として、直鎖及び分岐鎖のヒドロカルビル基、例えば、メチル（ＣＨ３）、エチル（ＣＨ３ＣＨ２）、ｎ－プロピル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２－）、イソプロピル（（ＣＨ３）２ＣＨ－）、ｎ－ブチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２）、イソブチル（（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２）、ｓｅｃ－ブチル（（ＣＨ３）（ＣＨ３ＣＨ２）ＣＨ－）、ｔ－ブチル（（ＣＨ３）３Ｃ－）、ｎ－ペンチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－）、及びネオペンチル（（ＣＨ３）３ＣＣＨ２－）が含まれる。
【0040】
「置換アルキル」という用語は、本明細書で定義されるアルキル基であって、アルキル鎖の１つ以上の炭素原子（Ｃ１炭素原子を除く）が、任意選択的に、－Ｏ－、－Ｎ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）ｎ－（式中、ｎが、０～２である）、－ＮＲ－（式中、Ｒが、水素又はアルキルである）などのヘテロ原子で置き換えられ、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－アリール、－ＳＯ２－ヘテロアリール、及び－ＮｒａＲｂからなる群から選択される１～５個の置換基を有し、Ｒ’及びＲ”が、同じでも異なっていてもよく、水素、任意選択的に置換されたアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、及び複素環式から選択される、アルキル基を指す。
【0041】
「アルキレン」は、好ましくは、直鎖又は分岐鎖のいずれかである１～６個、より好ましくは１～３個の炭素原子を有し、任意選択的に－Ｏ－、－ＮＲ１０－、ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０－などから選択される１つ以上の基で中断されている、二価脂肪族ヒドロカルビル基を指す。この用語には、例として、メチレン（ＣＨ２）、エチレン（ＣＨ２ＣＨ２）、ｎ－プロピレン（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２）、ｉｓｏ－プロピレン（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３））、（Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２）、（Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（Ｏ））、（Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ）、（ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２－）などが含まれる。
【0042】
「置換アルキレン」は、以下の「置換」の定義において炭素について記載されているように、置換基で置き換えられた１～３個の水素を有するアルキレン基を指す。
【0043】
「アルカン」という用語は、本明細書で定義されるアルキル基及びアルキレン基を指す。
【0044】
「アルキルアミノアルキル」、「アルキルアミノアルケニル」、及び「アルキルアミノアルキニル」という用語は、Ｒ’ＮＨＲ”－基を指し、式中、Ｒ’は本明細書で定義されるアルキル基であり、Ｒ”は本明細書で定義されるアルキレン、アルケニレン又はアルキニレン基である。
【0045】
「アルカリール」又は「アラルキル」という用語は、－アルキレン－アリール及び－置換アルキレン－アリール基を指し、アルキレン、置換アルキレン及びアリールは、本明細書で定義される。
【0046】
「アルコキシ」は、－Ｏ－アルキル基を指し、アルキルは本明細書で定義されるとおりである。アルコキシは、例として、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ－ブトキシ、ｔ－ブトキシ、ｓｅｃ－ブトキシ、ｎ－ペントキシなどを含む。「アルコキシ」という用語はまた、アルケニル－Ｏ－、シクロアルキル－Ｏ－、シクロアルケニル－Ｏ－、及びアルキニル－Ｏ－基を指し、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル及びアルキニルは、本明細書で定義されるとおりである。
【0047】
「置換アルコキシ」という用語は、置換アルキル－Ｏ－、置換アルケニル－Ｏ－、置換シクロアルキル－Ｏ－、置換シクロアルケニル－Ｏ－、及び置換アルキニル－Ｏ－の基を指し、置換アルキル、置換アルケニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、及び置換アルキニルが、本明細書で定義されるとおりである。
【0048】
「アルコキシアミノ」という用語は、－ＮＨ－アルコキシ基を指し、アルコキシは、本明細書で定義される。
【0049】
「ハロアルコキシ」という用語は、アルキル－Ｏ－基を指し、アルキル基上の１個以上の水素原子がハロ基で置換されており、例として、トリフルオロメトキシなどの基を含む。
【0050】
「ハロアルキル」という用語は、上述の置換アルキル基を指し、アルキル基上の１個以上の水素原子がハロ基で置換されている。そのような基の例としては、限定されないが、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロエチルなどのフルオロアルキル基が挙げられる。
【0051】
「アルキルアルコキシ」という用語は、－アルキレン－Ｏ－アルキル、アルキレン－Ｏ－置換アルキル、置換アルキレン－Ｏ－アルキル、及び置換アルキレン－Ｏ－置換アルキル基を指し、アルキル、置換アルキル、アルキレン及び置換アルキレンは、本明細書で定義されるとおりである。
【0052】
「アルキルチオアルコキシ」という用語は、－アルキレン－Ｓ－アルキル、アルキレン－Ｓ－置換アルキル、置換アルキレン－Ｓ－アルキル、及び置換アルキレン－Ｓ－置換アルキル基を指し、アルキル、置換アルキル、アルキレン、及び置換アルキレンは、本明細書で定義されるとおりである。
【0053】
「アルケニル」は、２～６個の炭素原子、好ましくは２～４個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１～２個の二重結合不飽和部位を有する直鎖又は分岐鎖ヒドロカルビル基を指す。この用語は、例として、ビ ビニル、アリル、及びブタ３エン１イルを含む。この用語には、シス及びトランス異性体、又はこれらの異性体の混合物が含まれる。
【0054】
「置換アルケニル」という用語は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、及び－ＳＯ２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基を有する本明細書で定義されるアルケニル基を指す。
【0055】
「アルキニル」は、２～６個の炭素原子、好ましくは２～３個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１～２個の三重結合不飽和部位を有する直鎖又は分岐鎖一価ヒドロカルビル基を指す。そのようなアルキニル基の例としては、アセチレニル（Ｃ≡ＣＨ）、及びプロパルギル（ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）が挙げられる。
【0056】
「置換アルキニル」という用語は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、及び－ＳＯ２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基を有する本明細書で定義されるアルキニル基を指す。
【0057】
「アルキニルオキシ」は、－Ｏ－アルキニル基を指し、アルキニルは、本明細書で定義されるとおりである。アルキニルオキシは、例として、エチニルオキシ、プロピニルオキシなどを含む。
【0058】
「アシル」は、Ｈ－Ｃ（Ｏ）－、アルキル－Ｃ（Ｏ）－、置換アルキル－Ｃ（Ｏ）－、アルケニル－Ｃ（Ｏ）－、置換アルケニル－Ｃ（Ｏ）－、アルキニル－Ｃ（Ｏ）－、置換アルキニル－Ｃ（Ｏ）－、シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）－、置換シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）－、シクロアルケニル－Ｃ（Ｏ）－、置換シクロアルケニル－Ｃ（Ｏ）－、アリール－Ｃ（Ｏ）－、置換アリール－Ｃ（Ｏ）－、ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）－、置換ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）－、ヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）－、及び置換ヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）－基を指し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義されるとおりである。例えば、アシルは、「アセチル」基ＣＨ３Ｃ（Ｏ）－を含む。
【0059】
「アシルアミノ」は、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アルキル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アルキル、ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）シクロアルキル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換シクロアルキル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）シクロアルケニル、ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換シクロアルケニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アルケニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アルケニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アルキニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アルキニル、－ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アリール、ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アリール、ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール、ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換ヘテロアリール、ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）複素環式、及びＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換複素環式の基を指し、Ｒ２０は、水素又はアルキルであり、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義されるとおりである。
【0060】
「アミノカルボニル」、又は「アミノアシル」という用語は、Ｃ（Ｏ）ＮＲ２１Ｒ２２基を指し、式中、Ｒ２１及びＲ２２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式からなる群から選択され、Ｒ２１及びＲ２２は、任意選択的に、それらに結合した窒素と結合して、複素環式又は置換複素環式基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義されるとおりである。
【0061】
「アミノカルボニルアミノ」は、－ＮＲ２１Ｃ（Ｏ）ＮＲ２２Ｒ２３基を指し、式中、Ｒ２１、Ｒ２２、及びＲ２３は、独立して、水素、アルキル、アリール、若しくはシクロアルキルから選択されるか、又は２つのＲ基が連結してヘテロシクリル基を形成する。
【0062】
「アルコキシカルボニルアミノ」という用語は、－ＮＲＣ（Ｏ）ＯＲ基を指し、式中、各Ｒは、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロシクリルであり、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリルは、本明細書で定義されるとおりである。
【0063】
「アシルオキシ」という用語は、アルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、置換アルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、置換シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、アリール－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、及びヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－の基を指し、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリルは、本明細書で定義されるとおりである。
【0064】
「アミノスルホニル」は、－ＳＯ２ＮＲ２１Ｒ２２基を指し、式中、Ｒ２１及びＲ２２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、置換複素環式からなる群から選択され、Ｒ２１及びＲ２２は、任意選択的に、それらに結合した窒素と結合して、複素環式又は置換複素環式基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義されるとおりである。
【0065】
「スルホニルアミノ」は、－ＮＲ２１ＳＯ２Ｒ２２基を指し、式中、Ｒ２１及びＲ２２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式からなる群から選択され、Ｒ２１及びＲ２２は、任意選択的に、それらに結合した原子と結合して、複素環式又は置換複素環式基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義されるとおりである。
【0066】
「アリール」又は「Ａｒ」は、単環（例えば、フェニル基に存在する）、又は結合点が芳香環の原子を介することを条件として、縮合環が芳香族であってもよい、若しくは芳香族でなくてもよい、複数の縮合環を有する環系（そのような芳香環系の例には、ナフチル、アントリル、及びインダニルが含まれる）を有する、６～１８個の炭素原子の一価芳香族炭素環式基を指す。この用語は、例として、フェニル及びナフチルを含む。アリール置換基の定義によって別段制約を受けない限り、そのようなアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリール、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、－ＳＯ２－ヘテロアリール、及びトリハロメチルから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基で任意選択的に置換され得る。
【0067】
「アリールオキシ」は、－Ｏ－アリール基を指し、アリールは、本明細書で定義されるとおりであり、例として、フェノキシ、ナフトキシなどを含み、同様に本明細書で定義される任意選択的に置換されたアリール基を含む。
【0068】
「アミノ」は、－ＮＨ２基を指す。
【0069】
「置換アミノ」という用語は、－ＮＲＲ基を指し、式中、各Ｒは、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリルからなる群から選択され、但し、少なくとも１つのＲは水素ではないことを条件とする。
【0070】
「アジド」という用語は、－Ｎ３基を指す。
【0071】
「カルボキシル」、「カルボキシ」、又は「カルボキシレート」は、－ＣＯ２Ｈ又はその塩を指す。
【0072】
「カルボキシルエステル」若しくは「カルボキシエステル」、又は「カルボキシアルキル」若しくは「カルボキシルアルキル」という用語は、Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏ置換アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏアルケニル、Ｃ（Ｏ）Ｏ置換アルケニル、Ｃ（Ｏ）Ｏアルキニル、Ｃ（Ｏ）Ｏ置換アルキニル、Ｃ（Ｏ）Ｏアリール、Ｃ（Ｏ）Ｏ置換アリール、Ｃ（Ｏ）Ｏシクロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏ置換シクロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏシクロアルケニル、Ｃ（Ｏ）Ｏ置換シクロアルケニル、Ｃ（Ｏ）Ｏヘテロアリール、Ｃ（Ｏ）Ｏ置換ヘテロアリール、Ｃ（Ｏ）Ｏ複素環式、及びＣ（Ｏ）Ｏ置換複素環式の基を指し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義されるとおりである。
【0073】
「（カルボキシルエステル）オキシ」又は「カーボネート」は、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキル、ＯＣ（Ｏ）Ｏ置換アルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキニル、ＯＣ（Ｏ）Ｏ置換アルキニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルキル、Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルケニル、ＯＣ（Ｏ）Ｏ－ヘテロアリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換ヘテロアリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－複素環式、及びＯＣ（Ｏ）Ｏ置換複素環式の基を指し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義されるとおりである。
【0074】
「シアノ」又は「ニトリル」は、－ＣＮ基を指す。
【0075】
「シクロアルキル」は、単一の環式環、又は縮合環式環系、架橋環系、及びスピロ環系を含む複数の環式環を有する３～１０個の炭素原子の環式アルキル基を指す。好適なシクロアルキル基の例としては、例えば、アダマンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどが挙げられる。そのようなシクロアルキル基としては、例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどの単環構造、又はアダマンタニルなどの複数の環構造が挙げられる。
【0076】
「置換シクロアルキル」という用語は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、ＳＯ２－アリール、及び－ＳＯ２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基を有するシクロアルキル基を指す。
【0077】
「シクロアルケニル」は、単一又は複数の環を有し、かつ少なくとも１個の二重結合、好ましくは１～２個の二重結合を有する、３～１０個の炭素原子の非芳香族環状アルキル基を指す。
【0078】
「置換シクロアルケニル」という用語は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ケト、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、ＳＯ－アルキル、ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、及び－ＳＯ２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基を有するシクロアルケニル基を指す。
【0079】
「シクロアルキニル」は、単一又は複数の環を有し、かつ少なくとも１個の三重結合を有する、５～１０個の炭素原子の非芳香族シクロアルキル基を指す。
【0080】
「シクロアルコキシ」は、－Ｏ－シクロアルキルを指す。
【0081】
「シクロアルケニルオキシ」は、－Ｏ－シクロアルケニルを指す。
【0082】
「ハロ」又は「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨードを指す。
【0083】
「ヒドロキシ」又は「ヒドロキシル」は、－ＯＨ基を指す。
【0084】
「ヘテロアリール」は、環内の１～１０個の炭素原子などの１～１５個の炭素原子と、酸素、窒素、及び硫黄からなる群から選択される１～１０個のヘテロ原子との、芳香族基を指す。そのようなヘテロアリール基は、環系内に単一の環（ピリジニル、イミダゾリル、又はフリルなど）又は（例えば、インドリジニル、キノリニル、ベンゾフラン、ベンズイミダゾリル、又はベンゾチエニルなどの基におけるような）複数の縮合環を有し得、環系内の少なくとも１つの環は、芳香族である。価数の要件を満たすために、そのようなヘテロアリール環内の任意のヘテロ原子は、Ｈ又は置換基、例えば、本明細書に記載のアルキル基若しくは他の置換基に結合していてもよく、又は結合していなくてもよい。ある特定の実施形態において、ヘテロアリール基の窒素及び／又は硫黄環原子（複数可）は、任意選択的に酸化されて、Ｎ－オキシド（Ｎ→Ｏ）、スルフィニル、又はスルホニル部分を提供する。この用語は、例として、ピリジニル、ピロリル、インドリル、チオフェニル、及びフラニルを含む。ヘテロアリール置換基の定義によって別段制約を受けない限り、そのようなヘテロアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリール、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、ＳＯ－ヘテロアリール、ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール及び－ＳＯ２－ヘテロアリール、及びトリハロメチルから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基で任意選択的に置換され得る。
【0085】
「ヘテロアラルキル」という用語は、－アルキレン－ヘテロアリール基を指し、アルキレン及びヘテロアリールは、本明細書で定義されるとおりである。この用語は、例として、ピリジルメチル、ピリジルエチル、インドリルメチルなどを含む。
【0086】
「ヘテロアリールオキシ」は、－Ｏ－ヘテロアリールを指す。
【0087】
「複素環」、「複素環式」、「ヘテロシクロアルキル」、及び「ヘテロシクリル」という用語は、単環又は縮合架橋環系及びスピロ環系を含む複数の縮合環を有し、１～１０個のヘテロ原子を含む３～２０個の環原子を有する、飽和又は不飽和基を指す。これらの環原子は、窒素、硫黄、又は酸素から選択され、縮合環系において、環のうちの１つ以上が、シクロアルキル、アリール、又はヘテロアリールであり得、但し、結合点は、非芳香環を介することを条件とする。ある特定の実施形態において、複素環式基の窒素及び／又は硫黄原子（複数可）は、任意選択的に酸化されて、Ｎ－オキシド、－Ｓ（Ｏ）－、又は－ＳＯ２－部分を提供する。価数の要件を満たすために、そのような複素環式環内の任意のヘテロ原子は、１つ以上のＨ又は１つ以上の置換基、例えば、本明細書に記載のアルキル基若しくは他の置換基に結合していてもよく、又は結合していなくてもよい。
【0088】
複素環及びヘテロアリールの例としては、限定されないが、アゼチジン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、ジヒドロインドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチルピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソオキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、フタルイミド、１，２，３，４－テトラヒドロイソキノリン、４，５，６，７－テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン、チアゾール、チアゾリジン、チオフェン、ベンゾ［ｂ］チオフェン、モルホリニル、チオモルホリニル（チアモルホリニルとも称される）、１，１－ジオキソチオモルホリニル、ピペリジニル、ピロリジン、テトラヒドロフラニルなどが挙げられる。
【0089】
複素環式置換基の定義によって別段制約を受けない限り、そのような複素環式基は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、ＳＯ２－アルキル、－ＳＯ２－置換アルキル、－ＳＯ２－アリール、ＳＯ２－ヘテロアリール、及び縮合複素環から選択される１～５個、又は１～３個の置換基で任意選択的に置換され得る。
【0090】
「ヘテロシクリルオキシ」は、－Ｏ－ヘテロシクリル基を指す。
【0091】
「ヘテロシクリルチオ」という用語は、複素環式－Ｓ－基を指す。
【0092】
「ヘテロシクレン」という用語は、本明細書で定義されるように、複素環から形成されるジラジカル基を指す。
【0093】
「ヒドロキシアミノ」という用語は、－ＮＨＯＨ基を指す。
【0094】
「ニトロ」は、－ＮＯ２基を指す。
【0095】
「オキソ」は、原子（＝Ｏ）を指す。
【0096】
「スルホニル」は、ＳＯ２－アルキル、ＳＯ２－置換アルキル、ＳＯ２－アルケニル、ＳＯ２－置換アルケニル、ＳＯ２－シクロアルキル、ＳＯ２－置換シクロアルキル、ＳＯ２－シクロアルケニル、ＳＯ２－置換シルコアルケニル（ｃｙｌｃｏａｌｋｅｎｙｌ）、ＳＯ２－アリール、ＳＯ２－置換アリール、ＳＯ２－ヘテロアリール、ＳＯ２－置換ヘテロアリール、ＳＯ２－複素環式、及びＳＯ２－置換複素環式の基を指し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義されるとおりである。スルホニルは、例として、メチル－ＳＯ２－、フェニル－ＳＯ２－、及び４－メチルフェニル－ＳＯ２－を含む。
【0097】
「スルホニルオキシ」は、－ＯＳＯ２－アルキル、ＯＳＯ２－置換アルキル、ＯＳＯ２－アルケニル、ＯＳＯ２－置換アルケニル、ＯＳＯ２－シクロアルキル、ＯＳＯ２－置換シクロアルキル、ＯＳＯ２－シクロアルケニル、ＯＳＯ２－置換シルコアルケニル、ＯＳＯ２－アリール、ＯＳＯ２－置換アリール、ＯＳＯ２－ヘテロアリール、ＯＳＯ２－置換ヘテロアリール、ＯＳＯ２－複素環式、及びＯＳＯ２置換複素環式の基を指し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義されるとおりである。
【0098】
「アミノカルボニルオキシ」という用語は、ＯＣ（Ｏ）ＮＲＲ基を指し、式中、各Ｒは、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、又は複素環式であり、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、及び複素環式は、本明細書で定義されるとおりである。
【0099】
「チオール」は、－ＳＨ基を指す。
【0100】
「チオキソ」、又は「チオケト」という用語は、原子（＝Ｓ）を指す。
【0101】
「アルキルチオ」又は「チオアルコキシ」という用語は、－Ｓ－アルキル基を指し、アルキルは本明細書で定義されるとおりである。ある特定の実施形態において、硫黄は、－Ｓ（Ｏ）－へと酸化され得る。スルホキシドは、１つ以上の立体異性体として存在し得る。
【0102】
「置換チオアルコキシ」という用語は、－Ｓ－置換アルキル基を指す。
【0103】
「チオアリールオキシ」という用語は、アリール－Ｓ－基を指し、アリール基は本明細書で定義されるとおりであり、本明細書で定義される任意選択的に置換されたアリール基を含む。
【0104】
「チオヘテロアリールオキシ」という用語は、ヘテロアリール－Ｓ－基を指し、ヘテロアリール基は本明細書で定義されるとおりであり、同様に本明細書で定義される任意選択的に置換されたアリール基を含む。
【0105】
「チオヘテロシクロオキシ」という用語は、ヘテロシクリル－Ｓ－基を指し、ヘテロシクリル基は本明細書で定義されるとおりであり、同様に本明細書で定義される任意選択的に置換されたヘテロシクリル基を含む。
【0106】
本明細書における開示に加えて、「置換された」という用語は、特定の基又はラジカルを修飾するために使用される場合、特定の基又はラジカルの１つ以上の水素原子が、各々互いに独立して、以下で定義される同じか又は異なる置換基で置き換えられていることを意味し得る。
【0107】
本明細書の個々の用語に関して開示される基に加えて、特定の基又はラジカル中の飽和炭素原子上の１個以上の水素を置換するための置換基（単一の炭素上の任意の２個の水素を、＝Ｏ、＝ＮＲ７０、＝Ｎ－ＯＲ７０、＝Ｎ２又は＝Ｓで置き換えることができる）は、別段の指定がない限り、Ｒ６０、ハロ、＝Ｏ、ＯＲ７０、ＳＲ７０、ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、ＣＮ、ＯＣＮ、ＳＣＮ、ＮＯ、ＮＯ２、＝Ｎ２、Ｎ３、ＳＯ２Ｒ７０、ＳＯ２Ｏ－Ｍ＋、ＳＯ２ＯＲ７０、ＯＳＯ２Ｒ７０、ＯＳＯ２Ｏ－Ｍ＋、ＯＳＯ２ＯＲ７０、Ｐ（Ｏ）（Ｏ－）２（Ｍ＋）２、Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ－Ｍ＋、Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｍ＋、Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、ＯＣ（Ｏ）Ｏ Ｍ＋、ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７０、ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、ＮＲ７０ＣＯ２－Ｍ＋、ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０及びＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であり、Ｒ６０は、任意選択的に置換されたアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、及びヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、各Ｒ７０は、独立して、水素若しくはＲ６０であり、各Ｒ８０は、独立してＲ７０であるか、又は代替的に、２つのＲ８０が、それらが結合する窒素原子と一緒になって、５員、６員、若しくは７員のヘテロシクロアルキルを形成し、これらは、任意選択的に、Ｏ、Ｎ、及びＳからなる群から選択される同じ若しくは異なる１～４個の追加のヘテロ原子を含んでもよく、そのうち、Ｎは、－Ｈ若しくはＣ１～Ｃ３アルキル置換を有していてもよく、各Ｍ＋は、正味の単一正電荷を有する対イオンである。各Ｍ＋は、独立して、例えば、アルカリイオン、例えば、Ｋ＋、Ｎａ＋、Ｌｉ＋；アンモニウムイオン、例えば、＋Ｎ（Ｒ６０）４；又はアルカリ土類イオン、例えば、［Ｃａ２＋］０．５、［Ｍｇ２＋］０．５、若しくは［Ｂａ２＋］０．５（下付きの０．５は、そのような二価アルカリ土類イオンの対イオンのうちの１つが、本発明の化合物のイオン化形態であってもよく、他方が塩化物などの典型的な対イオンであってもよい、又は本明細書に開示される２つのイオン化化合物が、そのような二価アルカリ土類イオンの対イオンとして機能し得る、又は本発明の二重イオン化化合物が、そのような二価アルカリ土類イオンの対イオンとして機能し得ることを意味する）であってもよい。具体的な例として、ＮＲ８０Ｒ８０は、ＮＨ２、ＮＨアルキル、Ｎ－ピロリジニル、Ｎ－ピペラジニル、４Ｎ－メチル－ピペラジン－１－イル、及びＮ－モルホリニルを含むことを意味する。
【0108】
本明細書の開示に加えて、「置換」アルケン、アルキン、アリール及びヘテロアリール基中の不飽和炭素原子上の水素の置換基は、別段の指定のない限り、Ｒ６０、ハロ、Ｏ－Ｍ＋、ＯＲ７０、ＳＲ７０、Ｓ－Ｍ＋、ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、ＣＦ３、ＣＮ、ＯＣＮ、ＳＣＮ、ＮＯ、ＮＯ２、Ｎ３、ＳＯ２Ｒ７０、ＳＯ３－Ｍ＋、ＳＯ３Ｒ７０、ＯＳＯ２Ｒ７０、ＯＳＯ３－Ｍ＋、ＯＳＯ３Ｒ７０、ＰＯ３ ２（Ｍ＋）２、Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ－Ｍ＋、Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、ＣＯ２－Ｍ＋、ＣＯ２Ｒ７０、Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、ＯＣＯ２－Ｍ＋、ＯＣＯ２Ｒ７０、ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、ＮＲ７０ＣＯ２－Ｍ＋、ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０及びＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であり、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０及びＭ＋は、既に定義されているとおりであり、但し、置換アルケン又はアルキンの場合には、置換基は、Ｏ－Ｍ＋、ＯＲ７０、ＳＲ７０、又はＳ－Ｍ＋ではないことを条件とする。
【0109】
本明細書の個々の用語に関して開示される基に加えて、「置換」ヘテロアルキル及びシクロヘテロアルキル基中の窒素原子上の水素の置換基は、別段の指定のない限り、Ｒ６０、ＯＭ＋、ＯＲ７０、ＳＲ７０、ＳＭ＋、ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、ＣＦ３、ＣＮ、ＮＯ、ＮＯ２、Ｓ（Ｏ）２Ｒ７０、Ｓ（Ｏ）２ＯＭ＋、Ｓ（Ｏ）２ＯＲ７０、ＯＳ（Ｏ）２Ｒ７０、ＯＳ（Ｏ）２ＯＭ＋、ＯＳ（Ｏ）２ＯＲ７０、Ｐ（Ｏ）（Ｏ）２（Ｍ＋）２、Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）ＯＭ＋、Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）（ＯＲ７０）、Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７０、ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０及びＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０であり、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０及びＭ＋は、既に定義されているとおりである。
【0110】
本明細書における開示に加えて、ある特定の実施形態において、置換される基は、１、２、３、若しくは４つの置換基、１、２、若しくは３つの置換基、１若しくは２つの置換基、又は１つの置換基を有する。
【0111】
上で定義された全ての置換された基において、それ自体に更なる置換基を有する置換基（例えば、それ自体が置換アリール基で置換されており、更に置換アリール基によって置換されている、置換基として置換アリール基を有する置換アリールなど）を定義することによって到達するポリマーは、本明細書に含まれることを意図していないことが理解される。そのような場合において、そのような置換の最大数は３である。例えば、本明細書で具体的に企図される置換アリール基の連続的な置換は、置換アリール－（置換アリール）－置換アリールに限定される。
【0112】
別段示されない限り、本明細書で明示的に定義されない置換基の命名は、結合点に向かって、官能基の末端部分に続いて隣接する官能基を命名することによって到達される。例えば、「アリールアルキルオキシカルボニル」という置換基は、基（アリール）－（アルキル）－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－を指す。
【0113】
１つ以上の置換基を含有する本明細書に開示の基のうちのいずれかに関して、無論、そのような基は、立体的に実用的でなく、及び／又は合成的に実現不可能である任意の置換若しくは置換パターンを含有しないことが理解される。加えて、主題の化合物は、これらの化合物の置換から生じる全ての立体化学異性体を含む。
【0114】
「薬学的に許容される塩」という用語は、哺乳類などの患者への投与に対して許容される塩（所与の投薬レジメンに対して許容される哺乳類の安全性を有する対イオンを含む塩）を意味する。そのような塩は、薬学的に許容される無機又は有機塩基、及び薬学的に許容される無機又は有機酸に由来し得る。「薬学的に許容される塩」は、化合物の薬学的に許容される塩を指し、塩が、当該技術分野で周知の多様な有機及び無機対イオンに由来し、例としてのみであるが、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムなど、並びに、分子が塩基性官能基を含有する場合、塩酸塩、臭化水素酸塩、ギ酸塩、酒石酸塩、ベシル酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩などの有機又は無機酸の塩が挙げられる。
【0115】
「その塩」という用語は、酸のプロトンが、金属カチオン又は有機カチオンなどのカチオンによって置き換えられた場合に形成される化合物を意味する。該当する場合、塩は、薬学的に許容される塩であるが、これは、患者への投与を意図していない中間化合物の塩には必要ではない。例として、本発明の化合物の塩は、化合物が無機酸又は有機酸によってプロトン化されてカチオンを形成し、無機酸又は有機酸の共役塩基を塩のアニオン性成分として有するものを含む。
【0116】
「溶媒和物」は、溶媒分子と溶質の分子又はイオンとの組み合わせによって形成される複合体を指す。溶媒は、有機化合物、無機化合物、又は両方の混合物であり得る。溶媒のいくつかの例としては、限定されないが、メタノール、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、及び水が挙げられる。溶媒が水である場合、形成される溶媒和物は、水和物である。
【0117】
「立体異性体（ｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒ）」及び「立体異性体（ｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒｓ）」は、同じ原子連結性を有するが、空間における異なる原子配置を有する化合物を指す。立体異性体は、シス－トランス異性体、Ｅ及びＺ異性体、鏡像異性体、並びにジアステレオマーを含む。
【0118】
「互変異性体」とは、原子の電子結合においてのみ、及び／又は陽子の位置においてのみ異なる分子の代替形態、例えば、エノール－ケト及びイミン－エナミン互変異性体、又はピラゾール、イミダゾール、ベンズイミダゾール、トリアゾール、及びテトラゾールなどの－Ｎ＝Ｃ（Ｈ）－ＮＨ－環原子配置を含有するヘテロアリール基の互変異性体を指す。当業者は、他の互変異性環原子配置が可能であることを認識するであろう。
【0119】
「又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体」という用語は、塩、溶媒和物、及び立体異性体の全ての順列、例えば、主題の化合物の立体異性体の薬学的に許容される塩の溶媒和物を含むことを意図していることを理解されたい。
【0120】
「薬学的有効量」及び「治療有効量」は、特定の障害若しくは疾患、又はその症状の１つ以上を治療し、かつ／あるいはその疾患又は障害の発生を防止するのに十分な化合物の量を指す。腫瘍原性増殖性障害に関して、薬学的有効量又は治療有効量は、特に、腫瘍を縮小させるか、又は腫瘍の成長速度を低下させるのに十分な量を含む。
【0121】
「患者」は、ヒト及び非ヒト対象、特に哺乳動物対象を指す。
【0122】
本明細書で使用される「治療すること」又は「治療」という用語は、哺乳動物（特にヒト）などの患者の疾患又は医学的状態を治療すること、又は治療を意味し、（ａ）対象の予防的治療など、疾患又は医学的状態の発生を防止すること、（ｂ）患者の疾患又は医学的状態をなくすか、逆行させるなど、疾患又は医学的状態を改善すること、（ｃ）例えば、患者の疾患若しくは医学的状態の発症を遅延させるか、又は停止させることなどにより、疾患又は医学的状態を抑制すること、あるいは（ｄ）患者の疾患又は医学的状態の症状を緩和することを含む。
【0123】
「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、任意の長さのアミノ酸のポリマー形態を指すように本明細書において互換的に使用される。別段に指定されない限り、「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」は、遺伝的にコードされた及びコードされていないアミノ酸、化学的若しくは生化学的に修飾された、又は誘導されたアミノ酸、並びに修飾ペプチド骨格を有するポリペプチドを含み得る。この用語は、異種のアミノ酸配列を有する融合タンパク質、異種及び相同のリーダー配列を有する融合物、少なくとも１つのＮ末端メチオニン残基を含有するタンパク質（例えば、組換え宿主細胞における産生を促進するため）などを含むが、これらに限定されない、融合タンパク質を含む。ある特定の実施形態において、ポリペプチドは、抗体である。
【0124】
「天然アミノ酸配列」又は「親アミノ酸配列」は、本明細書で互換的に使用され、少なくとも１つの修飾アミノ酸残基を含むような修飾前のポリペプチドのアミノ酸配列を指す。
【0125】
「アミノ酸類似体」、「非天然アミノ酸」などの用語は、交換可能に使用されてもよく、天然に存在するタンパク質（例えば、Ａｌａ又はＡ、Ｃｙｓ又はＣ、Ａｓｐ又はＤ、Ｇｌｕ又はＥ、Ｐｈｅ又はＦ、Ｇｌｙ又はＧ、Ｈｉｓ又はＨ、Ｉｌｅ又はＩ、Ｌｙｓ又はＫ、Ｌｅｕ又はＬ、Ｍｅｔ又はＭ、Ａｓｎ又はＮ、Ｐｒｏ又はＰ、Ｇｌｎ又はＱ、Ａｒｇ又はＲ、Ｓｅｒ又はＳ、Ｔｈｒ又はＴ、Ｖａｌ又はＶ、Ｔｒｐ又はＷ、Ｔｙｒ又はＹ）中に一般的に見出される１つ以上のアミノ酸と構造及び／又は全体的な形状が類似しているアミノ酸様化合物を含む。アミノ酸類似体はまた、修飾側鎖又は骨格を有する天然アミノ酸を含む。アミノ酸類似体はまた、天然に存在するＤ形態と同じ立体化学を有するアミノ酸類似体、並びにアミノ酸類似体のＬ形態を含む。いくつかの事例において、アミノ酸類似体は、１つ以上の天然アミノ酸の骨格構造及び／又は側鎖構造を共有し、その違い（複数可）は、分子中の１つ以上の修飾基である。そのような修飾としては、限定されないが、ある原子（例えばＮ）の関連する原子（例えばＳ）による置換、ある基（例えば、メチル、若しくはヒドロキシルなど）又はある原子（例えば、Ｃｌ、若しくはＢｒなど）の付加、ある基の欠失、共有結合の置換（例えば、単結合の二重結合による置換）、あるいはそれらの組み合わせが挙げられ得る。例えば、アミノ酸類似体は、α－ヒドロキシ酸、及びα－アミノ酸などを含み得る。
【0126】
「アミノ酸側鎖」又は「アミノ酸の側鎖」などの用語は、天然アミノ酸、非天然アミノ酸、及びアミノ酸類似体を含む、アミノ酸残基のα炭素に結合した置換基を指すように使用され得る。アミノ酸側鎖はまた、本明細書に記載の修飾アミノ酸及び／又はコンジュゲートの文脈で説明されるアミノ酸側鎖を含み得る。
【0127】
「炭水化物」などの用語は、単糖類、二糖類、オリゴ糖類、及び多糖類のモノマー単位及び／又はポリマーを指すように使用され得る。糖という用語は、単糖類、二糖類などのより小さな炭水化物を指すように使用され得る。「炭水化物誘導体」という用語は、目的の炭水化物の１つ以上の官能基が置換される（任意の好都合な置換基によって置き換えられる）、修飾される（任意の好都合な化学物質を使用して別の基に変換される）、又は存在しない（例えば、除去される、若しくはＨによって置き換えられる）化合物を含む。様々な炭水化物及び炭水化物誘導体が入手可能であり、主題の化合物及びコンジュゲートでの使用に適合され得る。
【0128】
「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及び多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト化抗体、一本鎖抗体（例えば、ｓｃＦｖ）、キメラ抗体、抗体断片（例えば、Ｆａｂ断片）などを含む。抗体は、標的抗原に結合することができる。（Ｊａｎｅｗａｙ，Ｃ．，Ｔｒａｖｅｒｓ，Ｐ．，Ｗａｌｐｏｒｔ，Ｍ．，Ｓｈｌｏｍｃｈｉｋ（２００１）Ｉｍｍｕｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｙ，５ｔｈ Ｅｄ．，Ｇａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）。標的抗原は、抗体の１つ以上の可変領域によって形成される相補性決定領域（ＣＤＲ）によって認識される、エピトープとも呼ばれる１つ以上の結合部位を有し得る。
【0129】
「天然抗体」という用語は、抗体の重鎖及び軽鎖が作製されており、多細胞生物の免疫系によって対形成されている抗体を指す。脾臓、リンパ節、骨髄、及び血清は、天然抗体を産生する組織の例である。例えば、抗原で免疫化された第一の動物から分離された抗体産生細胞によって産生される抗体は、天然抗体である。
【0130】
「ヒト化抗体」又は「ヒト化免疫グロブリン」という用語は、ヒト抗体からの対応して位置するアミノ酸で置換されている１つ以上のアミノ酸を（例えば、フレームワーク領域、定常領域又はＣＤＲ中に）含有する非ヒト（例えば、マウス又はウサギ）抗体を指す。概して、ヒト化抗体は、非ヒト化型の同じ抗体と比較した場合、ヒト宿主中で低減された免疫応答を生成する。抗体は、例えば、ＣＤＲグラフティング（ＥＰ２３９，４００、ＰＣＴ公開第ＷＯ９１／０９９６７号、米国特許第５，２２５，５３９号、同第５，５３０，１０１号、及び同第５，５８５，０８９号）、ベニヤリング又はリサーフェシング（ＥＰ５９２，１０６、ＥＰ５１９，５９６、Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２８（４／５）：４８９－４９８（１９９１）、Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ７（６）：８０５－８１４（１９９４）、Ｒｏｇｕｓｋａ．Ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ９１：９６９－９７３（１９９４））、並びに鎖シャッフリング（米国特許第５，５６５，３３２号）を含む、当該技術分野で既知の様々な技術を使用してヒト化され得る。ある特定の実施形態において、フレームワーク置換は、抗原結合及び配列比較に重要なフレームワーク残基を特定し、特定の位置にある異常なフレームワーク残基を特定するために、ＣＤＲ及びフレームワーク残基の相互作用のモデリングによって特定される（例えば、米国特許第５，５８５，０８９号、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３（１９８８）を参照されたい）。本発明における使用が企図される抗体をヒト化するための追加の方法は、米国特許第５，７５０，０７８号、同第５，５０２，１６７号、同第５，７０５，１５４号、同第５，７７０，４０３号、同第５，６９８，４１７号、同第５，６９３，４９３号、同第５，５５８，８６４号、同第４，９３５，４９６号、及び同第４，８１６，５６７号、並びにＰＣＴ公開第ＷＯ９８／４５３３１号及びＷＯ９８／４５３３２に記載されている。特定の実施形態において、主題のウサギ抗体は、ＵＳ２００４００８６９７９及びＵＳ２００５００３３０３１に記載される方法に従ってヒト化され得る。したがって、上述の抗体は、当該技術分野で周知の方法を使用してヒト化され得る。
【0131】
「キメラ抗体」という用語は、軽鎖及び重鎖遺伝子が、異なる種に属している抗体可変領域及び定常領域遺伝子から、典型的には遺伝子操作によって構築されている抗体を指す。例えば、マウスモノクローナル抗体からの遺伝子の可変セグメントは、ガンマ１及びガンマ３などのヒト定常セグメントに結合され得る。治療用キメラ抗体の一例は、マウス抗体由来の可変ドメイン又は抗原結合ドメインと、ヒト抗体由来の定常ドメイン又はエフェクタードメインとで構成されているハイブリッドタンパク質であるが、他の哺乳動物種由来のドメインも使用され得る。
【0132】
免疫グロブリンポリペプチドの免疫グロブリン軽鎖又は重鎖可変領域は、「相補性決定領域」又は「ＣＤＲ」とも呼ばれる３つの超可変領域によって中断されているフレームワーク領域（ＦＲ）で構成されている。フレームワーク領域及びＣＤＲの範囲は、定義されている（“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”，Ｅ．Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，１９９１を参照されたい）。構成要素である軽鎖及び重鎖の組み合わされるフレームワーク領域である、抗体のフレームワーク領域は、ＣＤＲを位置決定し、アラインメントするのに役立つ。ＣＤＲは、主に、抗原のエピトープへの結合に関与する。
【0133】
本明細書で使用される場合、「免疫グロブリン」という用語は、免疫グロブリン遺伝子によって実質的にコードされる１つ以上のポリペプチドからなるタンパク質を指す。認識されるヒト免疫グロブリン遺伝子は、カッパ、ラムダ、アルファ（ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）、ガンマ（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）、デルタ、イプシロン、及びミュー定常領域遺伝子、並びに多数の免疫グロブリン可変領域遺伝子を含む。全長免疫グロブリン軽鎖（約２５ｋＤ又は２１４個のアミノ酸）は、Ｎ末端の可変領域遺伝子（約１１０アミノ酸）及びＣ末端のカッパ又はラムダ定常領域によってコードされる。全長免疫グロブリン重鎖（約５０ｋＤ又は４４６個のアミノ酸）は、Ｎ末端の可変領域遺伝子（約１１６個のアミノ酸）及びＣ末端の他の前述の定常領域遺伝子、例えばガンマ（約３３０個のアミノ酸をコードする）のうちの１つによってコードされる。いくつかの実施形態において、主題の抗体は、全長免疫グロブリン重鎖及び全長免疫グロブリン軽鎖を含む。
【0134】
本開示全体において、免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖内の残基の付番は、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）に記載の付番であり、これは参照により本明細書に明示的に組み込まれる。
【0135】
「親Ｉｇポリペプチド」は、本明細書に記載のアルデヒドタグ化定常領域を欠くアミノ酸配列を含むポリペプチドである。親ポリペプチドは、天然配列定常領域を含んでもよく、又は既存のアミノ酸配列修飾（付加、欠失、及び／又は置換など）を有する定常領域を含んでもよい。
【0136】
Ｉｇポリペプチドの文脈において、「定常領域」という用語は、当該技術分野で十分に理解されており、Ｉｇ重鎖又はＩｇ軽鎖のＣ末端領域を指す。Ｉｇ重鎖定常領域は、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３ドメイン（並びに、重鎖がμ又はε重鎖である場合、ＣＨ４ドメイン）を含む。天然Ｉｇ重鎖において、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３（及び、存在する場合、ＣＨ４）ドメインは、重鎖可変（ＶＨ）領域の直後（これに対してＣ末端）で開始し、かつ各々約１００アミノ酸～約１３０アミノ酸長である。天然Ｉｇ軽鎖において、定常領域は、軽鎖可変（ＶＬ）領域の直後（これに対してＣ末端）で開始し、約１００アミノ酸～約１２０アミノ酸長である。
【0137】
本明細書で使用される場合、「ＣＤＲ」又は「相補性決定領域」という用語は、重鎖及び軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見られる非連続的抗原組み合わせ部位を意味することが意図される。ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９－６６１６（１９７７）、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９９１）によって、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）、及びＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６）によって説明されており、その定義は、互いに比較された場合にアミノ酸残基の重複又はサブセットを含む。それにもかかわらず、抗体又は移植抗体又はそのバリアントのＣＤＲを指すためのいずれかの定義の適用は、本明細書で定義及び使用される用語の範囲内であることが意図される。上で引用された参考文献の各々によって定義されるＣＤＲを包含するアミノ酸残基を、比較として以下の表１に記載する。
【表1】
【0138】
ポリペプチド、ペプチド、又はタンパク質のアミノ酸配列に関して使用される「遺伝子的にコード可能な」とは、アミノ酸配列が、そのアミノ酸配列をコードする核酸の転写及び翻訳によって産生することができるアミノ酸残基で構成され、転写及び／又は翻訳が、細胞中、又は無細胞インビトロ転写／翻訳系において生じ得ることを意味する。
【0139】
「制御配列」及び「調節配列」という用語は、特定の発現系、例えば、哺乳動物細胞、細菌細胞、無細胞合成などにおいて作動可能に連結されたコード配列の発現を容易にするＤＮＡ配列を指す。原核生物系に好適である制御配列は、例えば、プロモーター、任意選択的にオペレーター配列、及びリボソーム結合部位を含む。真核細胞系は、プロモーター、ポリアデニル化シグナル、及びエンハンサーを利用し得る。
【0140】
核酸は、別の核酸配列と機能的関係に置かれる場合、「作動可能に連結される」。例えば、前配列又は分泌リーダーのＤＮＡは、ポリペプチドの分泌に関与する前タンパク質として発現される場合、ポリペプチドのＤＮＡに作動可能に連結され、プロモーター若しくはエンハンサーが、配列の転写に影響を及ぼす場合、コード配列に作動可能に連結され、又はリボソーム結合部位は、翻訳の開始を促進するように配置される場合、コード配列に作動可能に連結される。一般に、「作動可能に連結された」とは、連結されているＤＮＡ配列が連続しており、分泌リーダーの場合、連続しており、リーディングフレームにあることを意味する。連結は、ライゲーションによって、又は増幅反応によって達成される。合成オリゴヌクレオチドアダプタ又はリンカーは、従来の慣行に従って配列を連結するために使用され得る。
【0141】
本明細書で使用される「発現カセット」という用語は、（例えば、目的の構築物へのライゲーションと適合性のある制限部位の使用によって、又は目的の構築物へ、若しくは宿主細胞ゲノムへの相同組換えによって）核酸に挿入することができる、核酸、通常はＤＮＡのセグメントを指す。概して、核酸セグメントは、目的のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含み、カセット及び制限部位は、転写及び翻訳のための適切なリーディングフレームへのカセットの挿入を促進するように設計される。発現カセットはまた、宿主細胞、例えば哺乳動物宿主細胞内で目的のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの発現を促進するエレメントを含み得る。これらのエレメントとしては、限定されないが、プロモーター、ミニマルプロモーター、エンハンサー、応答エレメント、ターミネーター配列、ポリアデニル化配列などが挙げられる。
【0142】
本明細書で使用される場合、「単離された」という用語は、化合物が天然で存在するものとは異なる環境にある目的の化合物を説明することを意図する。「単離された」は、目的の化合物が実質的に濃縮されており、かつ／又は目的の化合物が部分的若しくは実質的に精製されている試料内にある化合物を含むことを意図する。
【0143】
本明細書で使用される場合、「実質的に精製された」という用語は、その天然の環境から除去され、天然で関連する他の構成要素を少なくとも６０％含まない、少なくとも７５％含まない、少なくとも８０％含まない、少なくとも８５％含まない、少なくとも９０％含まない、少なくとも９５％含まない、少なくとも９８％含まない、又は９８％超を含まない化合物を指す。
【0144】
「生理学的条件」という用語は、生細胞と適合性のあるそれらの条件、例えば、生細胞と適合性のある温度、ｐＨ、塩分などの主に水性の条件を包含することを意図する。
【0145】
「反応性パートナー」とは、別の反応性パートナーと特異的に反応し、反応生成物を生成する分子又は分子部分を意味する。例示的な反応性パートナーは、スルファターゼモチーフのシステイン又はセリン、及びホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）を含み、これらが反応して、モチーフ中のシステイン又はセリンの代わりに、ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）を含有する変換されたアルデヒドタグの反応生成物を形成する。他の例示的な反応性パートナーは、変換されたアルデヒドタグのｆＧｌｙ残基のアルデヒド（例えば、反応性アルデヒド基）、並びにアルデヒド反応性基及び目的の部分を含む「アルデヒド反応性の反応性パートナー」を含み、これらが反応して、ｆＧｌｙ残基を介してポリペプチドにコンジュゲートされた目的の部分を有するポリペプチドの反応生成物を形成する。
【0146】
「Ｎ末端」は、遊離アミン基を有するポリペプチドの末端アミノ酸残基を指し、非Ｎ末端アミノ酸残基中のアミン基が、通常、ポリペプチドの共有結合性骨格の一部を形成する。
【0147】
「Ｃ末端」は、遊離カルボキシル基を有するポリペプチドの末端アミノ酸残基を指し、非Ｃ末端アミノ酸残基中のカルボキシル基が、通常、ポリペプチドの共有結合性骨格の一部を形成する。
【0148】
ポリペプチド又はポリペプチドのアミノ酸配列に関して使用される場合の「内部部位」とは、Ｎ末端又はＣ末端ではないポリペプチドの領域を意味する。
【0149】
同等のＡＤＣに関して本明細書で使用する場合、「式（Ｉ）以外のＡＤＣ」とは、抗体－薬物コンジュゲートであって、リンカー－ペイロードが、本明細書に開示の式（Ｉ）のＡＤＣとは構造的若しくは機能的に、又はその両方で異なる抗体－薬物コンジュゲートを指す。いくつかの事例において、式（Ｉ）以外のＡＤＣは、本開示の式（Ｉ）に包含されない。例えば、式（Ｉ）以外のＡＤＣは、ペイロード（薬物）に連結された抗体を指すことができ、ペイロードは、モノメチルアウリスタチンＥ（ベドチン）、ドラスタチン１０、ＤＸｄ（ＭＡＡＡ－１１８１ａ、ＭＡＡＡ－１１８１）、ＳＮ－３８（例えば、Ｔｒｏｄｅｌｖｙ）、カンプトテシン、ＭＭＡＥ、及びこれらの類似体のうちの任意の１つ以上である。例えば、式（Ｉ）以外のＡＤＣは、式（Ｉ）と比較して異なる構造を有するリンカーを有するＡＤＣを指すことができる。
【0150】
本発明を更に説明する前に、本発明は記載された特定の実施形態に限定されず、それ自体は勿論、変化し得ることを理解されたい。また、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によってのみ限定されることになるため、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを説明する目的のためのものであり、限定することが意図されるものではないことも理解されるべきである。
【0151】
値の範囲が提供される場合、文脈が明確に別段の指示をしない限り、その範囲の上限と下限との間の、下限の単位の１０分の１までの各中間値、及びこの記載の範囲内の任意の他の記載される値又は中間値が本発明に包含されることが理解される。これらのより小さい範囲の上限及び下限は、独立して、より小さい範囲に含まれてもよく、また、記載された範囲内の任意の特異的に除外された制限に従って、本発明内に包含されてもよい。記載された範囲が限界の一方又は両方を含む場合、それらの含まれる限界のいずれか又は両方を除外する範囲も、同様に本発明に含まれる。
【0152】
明確にするために、別個の実施形態の文脈で記載される本発明の特定の特徴はまた、組み合わされて単一の実施形態で提供され得ることが理解される。逆に、簡潔にするために単一の実施形態の文脈において説明される本発明の様々な特徴はまた、別々に又は任意の好適なサブコンビネーションで提供され得る。本発明に関する実施形態の全ての組み合わせは、本発明によって具体的に包含され、そのような組み合わせが、例えば、安定した化合物（すなわち、作製し、単離し、特性決定し、生物学的活性について試験することができる化合物）である化合物である主題を包含する程度まで、ありとあらゆる組み合わせが、個々に、かつ明示的に開示されたかのように、本明細書に開示される。加えて、様々な実施形態及びその要素（例えば、そのような変数を説明する実施形態において列挙される化学基の要素）の全てのサブコンビネーションはまた、本発明によって具体的に包含され、ありとあらゆるそのようなサブコンビネーションが個別かつ明示的に本明細書に開示されたかのように、本明細書に開示される。
【0153】
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する当業者によって一般に理解される意味と同じ意味を有する。本明細書に記載されるものと類似又は均等の任意の方法及び材料も、本発明の実施又は試験に使用され得るが、好ましい方法及び材料が、以下に記載される。本明細書で言及される全ての刊行物は、刊行物が引用されることに関連して方法及び／又は材料を開示及び説明するために、参照により本明細書に組み込まれる。
【0154】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が明確に別段の指示をしない限り、複数の指示対象を含むことに留意されたい。特許請求の範囲は、あらゆる任意選択的な要素を排除するように記載され得ることに更に留意されたい。したがって、この記述は、特許請求要素の列挙に関連した「もっぱら（ｓｏｌｅｌｙ）」及び「のみ（ｏｎｌｙ）」などの排他的用語の使用のための、又は「消極的な」限定の使用のための先行詞として機能することが意図される。
【0155】
明確にするために、別個の実施形態の文脈で記載される本発明の特定の特徴はまた、組み合わされて単一の実施形態で提供され得ることが理解される。逆に、簡潔にするために単一の実施形態の文脈において説明される本発明の様々な特徴はまた、別々に又は任意の好適なサブコンビネーションで提供され得る。
【0156】
本明細書で考察される刊行物は、本出願の出願日より前のそれらの開示について、もっぱら提供される。本明細書のいかなる内容も、本発明が先行発明のために、そのような刊行物に先行する権利がないことの承認として解釈されるべきではない。更に、提供された公開日は、実際の公開日とは異なる場合があり、個別に確認される必要がある場合がある。
【発明を実施するための形態】
【0157】
本開示のある特定の実施形態は、対象に式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートを投与することによって毒性を低減する方法を提供する。本明細書ではまた、そのようなコンジュゲートの産生の有効性及び安定性を改善する方法、並びにそのコンジュゲートを使用する方法を提供する。各々の実施形態は、以下のセクションでより詳細に説明される。
【0158】
抗体－薬物コンジュゲートを使用する方法
本開示は、コンジュゲート、例えば、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の標的媒介性交差反応性によって引き起こされる毒性を低減する方法を提供する。特に、本開示は、式（Ｉ）のＡＤＣとの標的媒介性交差反応性によって引き起こされる毒性を低減する方法を提供する。「コンジュゲート」とは、目的の部分（例えば、薬物又は活性剤）に共有結合するポリペプチド（例えば、抗体）を意味する。例えば、メイタンシンコンジュゲートは、抗体に共有結合するメイタンシン（例えば、メイタンシン活性剤部分）を含む。ある特定の実施形態において、抗体及び薬物又は活性剤は、１つ以上の官能基及び共有結合を介して互いに結合している。例えば、１つ以上の官能基及び共有結合は、本明細書に記載のリンカーを含み得る。
本開示は、コンジュゲート、例えば、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の標的媒介性交差反応性によって引き起こされる毒性を低減する方法を提供する。特に、本開示は、式（Ｉ）のＡＤＣとの標的媒介性交差反応性によって引き起こされる毒性を低減する方法を提供する。「コンジュゲート」とは、目的の部分（例えば、薬物又は活性剤）に共有結合するポリペプチド（例えば、抗体）を意味する。例えば、メイタンシンコンジュゲートは、抗体に共有結合するメイタンシン（例えば、メイタンシン活性剤部分）を含む。ある特定の実施形態において、抗体及び薬物又は活性剤は、１つ以上の官能基及び共有結合を介して互いに結合している。例えば、１つ以上の官能基及び共有結合は、本明細書に記載のリンカーを含み得る。
【0159】
本発明の方法は、対象におけるＡＤＣの標的媒介性交差反応性を低減する方法を含む。対象が抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）で治療されると、抗体は、細胞の表面上に発現される特定の抗原を標的とし、それに結合する。いくつかの事例において、標的化された抗原は、対象の健康な細胞及び健康ではない細胞の両方で発現される。そのような場合、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）の抗体は、両方とも標的抗原を発現するため、健康な細胞及び健康ではない細胞の両方に作用する。この現象は、標的媒介性交差反応性であると理解され、このことの暗示として、特に、ＡＤＣの薬物を健康な細胞に送達した結果、対象は、臨床的適応症若しくは反応のいずれか、又はそれらの組み合わせを示し得る。例えば、臨床的適応症又は反応としては、限定されないが、以下の表２に列挙されるものが挙げられ得る。
【0160】
いくつかの実施形態において、本発明の方法は、式（Ｉ）のものではない抗体－薬物コンジュゲートが対象に投与される場合に交差反応性によって引き起こされる毒性と比較して、対象における交差反応性によって引き起こされる毒性を低下させるか、又は低減する、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を含む。
【0161】
毒性を低減するとは、表２に記載のパラメータのうちの１つ以上において減少又は低下を意味する。パラメータは、臨床観察スコアリングシステムに基づいてスコアリングすることができ、パラメータ３が最も強く、０が最も弱い。各パラメータは、対象における身体領域、又は機能的側面、生理学的側面若しくは行動的側面に対応し得る。毒性を低減することによって、本明細書に開示される式（Ｉ）のＡＤＣは、対象の各身体領域又は生理学的側面若しくは行動的側面についての臨床スコア（複数可）に基づいて、対象における反応パラメータの強度を低減するか、又は低下させる。例えば、細胞増殖性障害に罹患している対象における、式（Ｉ）のＡＤＣの投与は、対象の毛皮／皮膚における「深部創傷」（臨床的に３としてスコアされるか、又は最も強い反応）の出現を、最小限の紅斑又は浮腫を示すスコア１まで効果的に低減することができる。特に、本明細書に開示されるような式（Ｉ）の抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体－薬物コンジュゲートの使用は、抗ＴＡＣＳＴＤ２を標的とする式（Ｉ）以外のＡＤＣが同じ対象に投与された場合の皮膚発疹、病変及び粘膜の観察（表２に基づくスコア２）と比較して、対象に投与された場合、０の皮膚観察（表２に基づくスコア０）をもたらした。
【表2】
【0162】
いくつかの事例において、本明細書に記載の式（Ｉ）以外のＡＤＣは、リンカー－ペイロードが、本明細書に開示の式（Ｉ）のＡＤＣとは構造的若しくは機能的に、又はその両方で異なる抗体－薬物コンジュゲートを指す。いくつかの事例において、式（Ｉ）以外のＡＤＣは、本開示の式（Ｉ）に包含されない。例えば、式（Ｉ）以外のＡＤＣは、ペイロード（薬物）に連結された抗体を指すことができ、ペイロードは、モノメチルアウリスタチンＥ（ベドチン）、ドラスタチン１０、ＤＸｄ（ＭＡＡＡ－１１８１ａ、ＭＡＡＡ－１１８１）、ＳＮ－３８（例えば、Ｔｒｏｄｅｌｖｙ）、カンプトテシン、ＭＭＡＥ、及びこれらの類似体のうちの任意の１つ以上である。例えば、式（Ｉ）以外のＡＤＣは、式（Ｉ）と比較して異なる構造を有するリンカーを有するＡＤＣを指すことができる。
【0163】
いくつかの更なる事例において、式（Ｉ）のＡＤＣは、ＡＤＣに対する臨床観察又は反応の数を低減するか、又は減少させる。一部の対象において、式（Ｉ）のＡＤＣ以外のＡＤＣは、表２に示される臨床パラメータの組み合わせを示す。例えば、大きい膿瘍又は腫瘍（治療されている基礎疾患とは無関係）の成長又は出現と、対象に投与される式（Ｉ）のＡＤＣ以外のＡＤＣに対する反応としての対象の皮膚の様々な部分における深部創傷との組み合わせの臨床観察が存在し得る。対照的に、同じ抗原を標的とする式（Ｉ）のＡＤＣが同じ対象に投与される場合、観察される臨床観察は、軽度の皮膚発疹のみに限定され得る。
【0164】
いくつかの実施形態において、対象に式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートを投与することによって、標的媒介性交差反応性は、その対象において、少なくとも１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、又は１０倍以上低減される。
【0165】
いくつかの実施形態において、対象に式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートを投与することによって、標的媒介性交差反応性は、対象において、特定のパラメータ（表２のような）の臨床観察スコアを、３のスコアから０のスコアまで、２のスコアから１のスコアまで、１のスコアから０のスコアまで、３のスコアから２のスコアまで、３のスコアから１のスコアまで、又は２のスコアから０のスコアまで低減することで低減される。いくつかの実施形態において、スコアの臨床観察の低減は、表２に列挙される複数のパラメータにわたって観察される。
【0166】
いくつかの実施形態において、対象に式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートを投与することによって、インビボでのコンジュゲートの安定性は、式（Ｉ）のもの以外の抗体－薬物コンジュゲート（標的抗原は同じである）が対象に投与される場合と比較して、増加する。
【0167】
いくつかの実施形態において、インビボでの式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートの安定性は、少なくとも２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８若しくは１００以上増加する。
【0168】
いくつかの実施形態において、インビボでの式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートの安定性は、式（Ｉ）のもの以外の抗体－薬物コンジュゲートの安定性と比較して、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、９９％、若しくは１００％以上増加し、両方のＡＤＣは、本明細書で比較される場合、同じ抗原を標的とする。
【0169】
いくつかの態様において、対象に式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートを投与することによって、ＡＤＣは、式（Ｉ）のもの以外の抗体－薬物コンジュゲートと比較して、ある用量範囲にわたって改善された有効性を示す。
【0170】
更に、有効量の本開示のコンジュゲートのいずれかを対象に投与することを含む方法が本明細書で提供される。
【0171】
ある特定の態様において、対象における標的部位に薬物を送達する方法であって、本方法が、本開示のコンジュゲートのうちのいずれかを含む薬学的組成物を対象に投与することを含み、投与することは、対象における標的部位に治療有効量の薬物を送達するのに有効である、方法が提供される。
【0172】
「治療」とは、宿主が罹患している状態と関連する症状の少なくとも改善が達成されることを意味し、改善は、治療されている状態と関連するパラメータ、例えば症状の大きさの少なくとも低減を指すために広義で使用される。したがって、治療はまた、病的状態、又は少なくともそれと関連する症状が、宿主がもはやその状態、又は少なくともその状態を特徴付ける症状を患わないように、完全に阻害される、例えば発生が防止されるか、又は停止される、例えば終了される状況も含む。したがって、治療は、（ｉ）予防、すなわち、有害な状態への疾患進行を予防するなど、臨床症状を発症させないようにすることを含め、臨床症状の発症のリスクを減らすこと、（ｉｉ）阻害、すなわち、活動性の疾患を緩和又は完全に阻害することなど、臨床症状の発症又は更なる発症を阻止すること、及び／又は（ｉｉｉ）軽減、すなわち、臨床症状を逆行させることを含む。
【0173】
治療される対象は、治療の必要がある対象であり得、治療される宿主は、親薬物を使用した治療に適した宿主であり得る。したがって、様々な対象が、本明細書に開示されるポリペプチド－薬物コンジュゲートを使用した治療に適し得る。概して、そのような対象は、目的のヒトを含む「哺乳動物」である。他の対象としては、家庭用ペット（例えば、イヌ及びネコ）、家畜（例えば、ウシ、ブタ、ヤギ、ウマなど）、げっ歯類（例えば、マウス、モルモット、及びラット、例えば、疾患の動物モデルとして）、並びに非ヒト霊長類（例えば、チンパンジー及びサル）を挙げることができる。
【0174】
投与されるポリペプチド－薬物コンジュゲートの量は、親薬物の用量及び／又は投薬量レジメンの指導に基づいて最初に決定され得る。概して、ポリペプチド－薬物コンジュゲートは、結合した薬物の標的化送達及び／又は血清半減期の向上を提供することができ、したがって、投薬量レジメンにおける用量の低減又は投与の低減のうちの少なくとも１つを提供する。したがって、ポリペプチド－薬物コンジュゲートは、本開示のポリペプチド－薬物コンジュゲートにおいてコンジュゲートされる前の親薬物と比べて、投薬量レジメンにおける用量の低減及び／又は投与の低減を提供し得る。
【0175】
更に、上に示されるように、ポリペプチド－薬物コンジュゲートは、制御された化学量論量の薬物送達を提供し得るため、ポリペプチド－薬物コンジュゲートの投薬量は、ポリペプチド－薬物コンジュゲートを基準として提供される薬物分子の数に基づいて計算され得る。
【0176】
いくつかの実施形態において、複数回用量のポリペプチド－薬物コンジュゲートが投与される。ポリペプチド－薬物コンジュゲートの投与の頻度は、様々な要因、例えば、症状の重症度、対象の状態などのいずれかに依存して変化し得る。例えば、いくつかの実施形態において、ポリペプチド－薬物コンジュゲートは、１ヶ月に１回、１ヶ月に２回、１ヶ月に３回、隔週、週に１回（ｑｗｋ）、週に２回、週に３回、週に４回、週に５回、週に６回、１日おき、毎日（ｑｄ／ｏｄ）、１日に２回（ｂｄｓ／ｂｉｄ）、又は１日に３回（ｔｄｓ／ｔｉｄ）などで投与される。
【0177】
がんを治療する方法
本開示は、がんを有する個体に本開示のコンジュゲートを送達することを含む方法を提供する。本方法は、がん腫、肉腫、白血病、及びリンパ腫を含む、多種多様ながんを治療するのに有用である。がんの文脈において、「治療する」という用語は、固形腫瘍の成長を低減すること、がん細胞の複製を阻害すること、全体的な腫瘍負荷を低減すること、及びがんと関連する１つ以上の症状を改善することのうちの１つ以上（例えば、各々）を含む。
本開示は、がんを有する個体に本開示のコンジュゲートを送達することを含む方法を提供する。本方法は、がん腫、肉腫、白血病、及びリンパ腫を含む、多種多様ながんを治療するのに有用である。がんの文脈において、「治療する」という用語は、固形腫瘍の成長を低減すること、がん細胞の複製を阻害すること、全体的な腫瘍負荷を低減すること、及びがんと関連する１つ以上の症状を改善することのうちの１つ以上（例えば、各々）を含む。
【0178】
主題の方法を使用して治療され得るがん腫としては、限定されないが、食道がん、肝細胞がん、基底細胞がん（皮膚がんの形態）、扁平上皮がん（様々な組織）、移行細胞がん（膀胱の悪性腫瘍）を含む膀胱がん、気管支原性がん、結腸がん、大腸がん、胃がん、肺の小細胞がん及び非小細胞がんを含む肺がん、副腎皮質がん、甲状腺がん、膵臓がん、乳がん、卵巣がん、前立腺がん、腺がん、汗腺がん、皮脂腺がん、乳頭がん、乳頭腺がん、嚢胞腺がん、腎髄質がん、腎細胞がん、腺管上皮内がん又は胆管がん、絨毛がん、セミノーマ、胎芽性がん、ウイルム腫瘍、子宮頸部がん、子宮がん、精巣がん、骨原性がん、上皮がん、及び上咽頭がんなどが挙げられる。
【0179】
主題の方法を使用して治療され得る肉腫としては、限定されないが、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、脊索腫、骨原性肉腫、骨肉腫、脈管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑液腫瘍、中皮腫、ユーイング肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、及び他の軟組織肉腫が挙げられる。
【0180】
主題の方法を使用して治療され得る他の固形腫瘍としては、限定されないが、神経膠腫、星細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫瘍、乏突起膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽腫、及び網膜芽腫が挙げられる。
【0181】
主題の方法を使用して治療され得る白血病としては、限定されないが、ａ）慢性骨髄増殖性症候群（多能性造血幹細胞の新生物性障害）、ｂ）急性骨髄性白血病（多能性造血幹細胞又は系統可能性が制限された造血幹細胞の新生物性形質転換）、ｃ）慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ、免疫学的に未成熟であり、機能不全である小さいリンパ球のクローン増殖）、Ｂ細胞ＣＬＬ、Ｔ細胞ＣＬＬ前リンパ球性白血病、及び有毛細胞白血病を含む、並びにｄ）急性リンパ芽球性白血病（リンパ芽球の蓄積を特徴とする）が挙げられる。主題の方法を使用して治療され得るリンパ腫としては、限定されないが、Ｂ細胞リンパ腫（例えば、バーキットリンパ腫）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンＢ細胞リンパ腫などが挙げられる。
【0182】
ある特定の態様において、対象におけるがんを治療する方法が提供され、そのような方法は、治療有効量の本開示のコンジュゲートのうちのいずれかを含む薬学的組成物を対象に投与することを含み、投与することは、対象におけるがんを治療するのに有効である。いくつかの実施形態において、がんは、血液悪性腫瘍である。目的の血液悪性腫瘍としては、限定されないが、悪性Ｂ細胞を特徴とする血液悪性腫瘍が挙げられる。悪性Ｂ細胞を特徴とする血液悪性腫瘍の非限定的な例としては、白血病（例えば、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ））及びリンパ腫（例えば、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ））が挙げられる。リンパ腫がＮＨＬである場合、ある特定の態様において、ＮＨＬは、再発性及び／又は難治性の非ホジキンリンパ腫である。
【0183】
併用療法
いくつかの実施形態において、悪性腫瘍を治療する主題の方法は、主題のコンジュゲート及び１つ以上の追加の治療剤を投与することを伴う。好適な追加の治療剤としては、がん化学療法剤（上述のもの）が挙げられるが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態において、悪性腫瘍を治療する主題の方法は、主題のコンジュゲート及び１つ以上の追加の治療剤を投与することを伴う。好適な追加の治療剤としては、がん化学療法剤（上述のもの）が挙げられるが、これらに限定されない。
【0184】
いくつかの場合において、追加の治療剤は、チェックポイント阻害剤又はインターロイキンなどの免疫調節治療薬である。免疫チェックポイント阻害剤は、タンパク質などの免疫阻害チェックポイント分子の機能を阻害する。免疫チェックポイント阻害剤は、免疫チェックポイントタンパク質に特異的に結合する抗体であり得る。様々な免疫チェックポイント阻害剤が知られている。免疫チェックポイント阻害剤には、ペプチド、抗体、核酸分子、及び小分子が挙げられるが、これらに限定されない。
【0185】
任意の好適なチェックポイント阻害剤が、本明細書に開示される方法において使用され得る。阻害性チェックポイント分子の例としては、Ａ２ＡＲ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ－４、ＣＤ２７７、ＩＤＯ、ＫＩＲ、ＰＤ－１、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３、ＴＩＧＩＴ及びＶＩＳＴＡが挙げられる。
【0186】
いくつかの実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、例えば、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１の阻害を介して、ＰＤ－１シグナル伝達を阻害する。いくつかの実施形態において、ＰＤ－１シグナル伝達を阻害する免疫チェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ－１抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、又はアベルマブである。いくつかの実施形態において、ＰＤ－Ｌ１を阻害する免疫チェックポイント阻害剤としては、例えば、ＡＭＰ－２４４、ＭＥＤＩ－４７３６、ＭＰＤＬ３２８ＯＡ、及びＭＩＨ１が挙げられる。
【0187】
いくつかの実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ－４を標的とする抗体、例えば、イピリムマブなどのＣＴＬＡ－４の阻害剤である。
【0188】
いくつかの実施形態において、チェックポイント阻害剤は、Ｔ細胞免疫グロブリン及びムチンドメイン含有タンパク質－３（ＴＩＭ－３）としても知られる膜貫通タンパク質であるＣＤ３６６を標的とする。
【0189】
免疫チェックポイント阻害剤の追加の例及びある特定の態様は、Ｈｕｉ（２０１９），Ｉｍｍｕｎｅ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．，Ｖｏｌ．２１８ Ｎｏ．３ ７４０－７４１（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【0190】
式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲート
ある特定の実施形態において、コンジュゲートは、リンカーを介して薬物又は活性剤にコンジュゲートされた抗体を含む、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）である。ある特定の実施形態において、コンジュゲートは、抗体がメイタンシン又はメイタンシン活性剤部分にコンジュゲートされたメイタンシンコンジュゲートである。「メイタンシン」、「メイタンシン部分」、「メイタンシン活性剤部分」、及び「メイタンシノイド」は、メイタンシン、及びその類似体及び誘導体、並びに薬学的に活性なメイタンシン部分及び／又はその部分を指す。抗体にコンジュゲートされたメイタンシンは、限定されないが、本明細書に記載されるメイタンシン並びにその類似体及び誘導体などの様々なメイタンシノイド部分のうちのいずれか（例えば、限定されないが、デアシルメイタンシン）であり得る。
ある特定の実施形態において、コンジュゲートは、リンカーを介して薬物又は活性剤にコンジュゲートされた抗体を含む、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）である。ある特定の実施形態において、コンジュゲートは、抗体がメイタンシン又はメイタンシン活性剤部分にコンジュゲートされたメイタンシンコンジュゲートである。「メイタンシン」、「メイタンシン部分」、「メイタンシン活性剤部分」、及び「メイタンシノイド」は、メイタンシン、及びその類似体及び誘導体、並びに薬学的に活性なメイタンシン部分及び／又はその部分を指す。抗体にコンジュゲートされたメイタンシンは、限定されないが、本明細書に記載されるメイタンシン並びにその類似体及び誘導体などの様々なメイタンシノイド部分のうちのいずれか（例えば、限定されないが、デアシルメイタンシン）であり得る。
【0191】
薬物又は活性剤は、抗体の任意の所望な部位で抗体にコンジュゲートされ得る。したがって、本開示は、例えば、抗体のＣ末端又はその付近の部位でコンジュゲートされた薬物又は活性剤を有する抗体を提供する。他の例としては、抗体のＮ末端又はその付近の位置でコンジュゲートされた薬物又は活性剤を有する抗体が挙げられる。例としては、抗体のＣ末端とＮ末端との間の位置（例えば、抗体の内部部位）でコンジュゲートされた薬物又は活性剤を有する抗体も挙げられる。上の組み合わせは、抗体が２つ以上の薬物又は活性剤にコンジュゲートされている場合にも可能である。
【0192】
ある特定の実施形態において、本開示のコンジュゲートは、アミノ酸残基のα炭素で抗体のアミノ酸残基にコンジュゲートされたメイタンシンを含む。別の言い方をすれば、メイタンシンコンジュゲートは、抗体中の１つ以上のアミノ酸残基の側鎖が、修飾され、メイタンシンに結合している（例えば、本明細書に記載のリンカーを介してメイタンシンに結合している）抗体を含む。例えば、メイタンシンコンジュゲートは、抗体中の１つ以上のアミノ酸残基のα炭素が修飾され、メイタンシンに結合している（例えば、本明細書に記載のリンカーを介してメイタンシンに結合している）抗体を含む。
【0193】
本開示の実施形態は、抗体が、１個以上の部分（例えば、薬物若しくは活性剤）、例えば、２個の部分、３個の部分、４個の部分、５個の部分、６個の部分、７個の部分、８個の部分、９個の部分、又は１０個以上の部分にコンジュゲートされるコンジュゲートを含む。部分（例えば、薬物又は活性剤）は、抗体中の１つ以上の部位で抗体にコンジュゲートされ得る。例えば、１つ以上の部分は、抗体の単一アミノ酸残基にコンジュゲートされ得る。いくつかの場合において、１つの部分が、抗体のアミノ酸残基にコンジュゲートされる。他の実施形態において、２つの部分が、抗体の同じアミノ酸残基にコンジュゲートされ得る。他の実施形態において、第１の部分は、抗体の第１のアミノ酸残基にコンジュゲートされ、第２の部分は、抗体の第２のアミノ酸残基にコンジュゲートされる。例えば、抗体が第１のアミノ酸残基で第１の部分にコンジュゲートされ、第２のアミノ酸残基で２つの他の部分にコンジュゲートされる場合、上記の組み合わせもまた可能である。これらに限定されないが、第１のアミノ酸残基で第１及び第２の部分にコンジュゲートされ、第２のアミノ酸残基で第３及び第４の部分にコンジュゲートされたポリペプチドなどの他の組み合わせも可能である。
【0194】
ある特定の実施形態において、コンジュゲートは、０．１～１０、又は０．５～１０、又は１～１０、例えば、１～９、又は１～８、又は１～７、又は１～６、又は１～５、又は１～４、又は１～３、又は１～２の範囲内の平均薬物対抗体比（ＤＡＲ）（モル比）を有する。ある特定の実施形態において、コンジュゲートは、１～２、例えば、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、又は２の平均ＤＡＲを有する。ある特定の実施形態において、コンジュゲートは、１．５～２．５の平均ＤＡＲを有する。ある特定の実施形態において、コンジュゲートは、１．５～２の平均ＤＡＲを有する。平均とは、算術平均を意味する。
【0195】
１つ以上の部分にコンジュゲートされる抗体の１つ以上のアミノ酸残基は、天然に存在するアミノ酸、非天然アミノ酸、又はそれらの組み合わせであり得る。例えば、コンジュゲートは、抗体の天然に存在するアミノ酸残基にコンジュゲートされた部分（例えば、薬物又は活性剤）を含み得る。他の事例において、コンジュゲートは、抗体の非天然アミノ酸残基にコンジュゲートされた部分を含み得る。１つ以上の部分は、上述のように、単一の天然又は非天然アミノ酸残基で抗体にコンジュゲートされ得る。抗体中の１つ以上の天然又は非天然アミノ酸残基は、本明細書に記載のように、１つ以上の部分にコンジュゲートされ得る。例えば、抗体中の２つ（以上）のアミノ酸残基（例えば、天然又は非天然アミノ酸残基）は、各々１つ又は２つの部分にコンジュゲートされてもよく、その結果、抗体中の複数の部位が、目的の部分にコンジュゲートされる。
【0196】
ある特定の実施形態において、抗体及び薬物又は活性剤は、カップリング部分を介してコンジュゲートされる。例えば、抗体及び薬物又は活性剤は、各々カップリング部分に結合（例えば、共有結合）してもよく、したがって、カップリング部分を介して、抗体及び薬物又は活性剤（例えば、メイタンシン）を一緒に間接的に結合する。いくつかの場合において、カップリング部分は、ヒドラジニル－インドリル若しくはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物、又はヒドラジニル－インドリル若しくはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物の誘導体を含む。例えば、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を介して薬物又は活性剤（例えば、メイタンシン）を抗体にカップリングするための一般的なスキームは、以下の一般的反応スキームに示される。ヒドラジニル－インドリル及びヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分は、本明細書において、それぞれ、４２イドラジン－イソ－ピクテット－スペングラー（ＨＩＰＳ）カップリング部分及びアザ－ヒドラジノ－イソ－ピクテット－スペングラー（ａｚａＨＩＰＳ）カップリング部分とも称される。
【化2】
【0197】
上記の反応スキームにおいて、Ｒは、抗体にコンジュゲートされる薬物又は活性剤（例えば、メイタンシン）である。上記の反応スキームに示されるように、２－ホルミルグリシン残基（ｆＧｌｙ）を含む抗体は、カップリング部分（例えば、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分）を含むように修飾されている薬物（例えば、メイタンシン）と反応し、カップリング部分に結合した抗体コンジュゲートを産生し、したがって、カップリング部分を介して、メイタンシンを抗体に結合する。
【0198】
本明細書に記載のように、この部分は、限定されないが、化学エンティティ、例えば、薬物又は活性剤（例えば、メイタンシノイド）などの様々な部分のうちのいずれかであり得る。Ｒ’及びＲ”は、各々独立して、任意の所望の置換基、例えば、限定されないが、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルであり得る。Ｚは、ＣＲ１１、ＮＲ１２、Ｎ、Ｏ、又はＳであってもよく、式中、Ｒ１１及びＲ１２は、各々独立して、上記Ｒ’及びＲ”について説明される置換基のいずれかから選択される。
【0199】
本明細書に記載のコンジュゲート及び化合物において示されるように、他のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分もまた可能である。例えば、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分は、リンカーに結合（例えば、共有結合）し得る。したがって、本開示の実施形態は、リンカーを介して薬物（例えば、メイタンシン）に結合したヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含む。ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を薬物（例えば、メイタンシン）にカップリングし得るリンカーの様々な実施形態が、本明細書で詳細に説明される。
【0200】
ある特定の実施形態において、抗体は、薬物又は活性剤にコンジュゲートされてもよく、抗体の１つ以上のアミノ酸は、薬物又は活性剤にコンジュゲートする前に修飾される。抗体の１つ以上のアミノ酸の修飾は、薬物又は活性剤にコンジュゲートするのに好適な１つ以上の反応性基を含有する抗体を生成し得る。いくつかの場合において、抗体は、１つ以上の修飾アミノ酸残基を含み、目的の部分（例えば、上述のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分などのカップリング部分を含む部分）へのコンジュゲーションに好適な１つ以上の反応性基を提供し得る。例えば、抗体のアミノ酸は、反応性アルデヒド基（例えば、反応性アルデヒド）を含むように修飾され得る。反応性アルデヒドは、「アルデヒドタグ」又は「ａｌｄ－タグ」に含まれてもよく、これらは、本明細書で使用される場合、ホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用によって、２－ホルミルグリシン残基（本明細書では「ｆＧｌｙ」と称される）を含有するように変換されている、スルファターゼモチーフ由来のアミノ酸配列（例えば、Ｌ（Ｃ／Ｓ）ＴＰＳＲ）を指す。ＦＧＥによって生成されるｆＧｌｙ残基は、「ホルミルグリシン」としても称され得る。言い換えれば、「アルデヒドタグ」という用語は、本明細書において、「変換された」スルファターゼモチーフ（すなわち、システイン又はセリン残基がＦＧＥの作用によってｆＧｌｙに変換されているスルファターゼモチーフ、例えば、Ｌ（ｆＧｌｙ）ＴＰＳＲ）を含むアミノ酸配列を指すように使用される。変換されたスルファターゼモチーフは、「変換されていない」スルファターゼモチーフ（すなわち、システイン又はセリン残基がＦＧＥによってｆＧｌｙに変換されていないが、変換されることは可能であるスルファターゼモチーフ、例えば、配列Ｌ（Ｃ／Ｓ）ＴＰＳＲを有する変換されていないスルファターゼモチーフ）を含むアミノ酸配列から生成され得る。スルファターゼモチーフ上のホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用の文脈において使用される場合の「変換」は、スルファターゼモチーフにおけるシステイン又はセリン残基のホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）残基への（例えば、ＣｙｓからｆＧｌｙへの、又はＳｅｒからｆＧｌｙへの）生化学的修飾を指す。部位特異的タンパク質修飾におけるアルデヒドタグ及びその使用の追加の態様は、米国特許第７，９８５，７８３号及び米国特許第８，７２９，２３２号に記載され、これらの各々の開示は、参照によって本明細書に組み込まれる。
【0201】
いくつかの場合において、コンジュゲートを生成するために、ｆＧｌｙ残基を含有する抗体は、ｆＧｌｙと化合物（例えば、上述のように、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する化合物）との反応によって、目的の部分（例えば、薬物又は活性剤）にコンジュゲートされ得る。例えば、ｆＧｌｙ含有抗体を、抗体への薬物のコンジュゲーションを提供するのに好適な条件下、反応性パートナーを含有する薬物と接触させてもよい。いくつかの事例において、反応性パートナー含有薬物は、上述のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含み得る。例えば、メイタンシンは、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含むように修飾され得る。いくつかの場合において、メイタンシンは、本明細書で詳細に説明されるように、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルに結合し、例えば、リンカーを介してヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルに共有結合する。
【0202】
ある特定の実施形態において、本開示の方法は、目的の部分（例えば、薬物又は活性剤）に結合している少なくとも１つのアミノ酸残基を有する抗体を含む式（Ｉ）のＡＤＣの使用を伴う。コンジュゲートを作製するために、抗体のアミノ酸残基が修飾され、次いで、上述のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する薬物（例えば、メイタンシン）にカップリングされ得る。ある特定の実施形態において、抗体（例えば、抗体ＴＡＣＳＴＤ２抗体、Ｍｕｃ－１抗体、ネクチン－４抗体、又はＮａＰｉ２Ｂ抗体）のアミノ酸残基は、上述のように、ｆＧｌｙ残基に修飾されるシステイン又はセリン残基である。ある特定の実施形態において、修飾アミノ酸残基（例えば、ｆＧｌｙ残基）は、上述のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する薬物にコンジュゲートされ、薬物がヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を介して抗体にコンジュゲートされた本開示のコンジュゲートを提供する。本明細書で使用される場合、ｆＧｌｙ’という用語は、目的の部分（例えば、メイタンシンなどの薬物）にカップリングする抗体（例えば、抗体ＴＡＣＳＴＤ２抗体、Ｍｕｃ－１抗体、ネクチン－４抗体、又はＮａＰｉ２Ｂ抗体）のアミノ酸残基を指す。
【0203】
ある特定の実施形態において、本明細書に開示される方法は、本明細書に記載のリンカーに結合する少なくとも１つのアミノ酸残基を有する抗体を含み、これが次いで薬物又は活性剤に結合する。例えば、コンジュゲートは、薬物（例えば、メイタンシン）にコンジュゲートされた少なくとも１つのアミノ酸残基（ｆＧｌｙ’）を有する抗体を含み得る。
【0204】
本開示の態様は、式（Ｉ）のコンジュゲートを含み、
式中、Ｗ１が、抗原に結合する抗体であり、
投与することが、ＡＤＣの標的媒介性交差反応性と関連する対象における毒性を低減する。
【化3】
投与することが、ＡＤＣの標的媒介性交差反応性と関連する対象における毒性を低減する。
【0205】
いくつかの事例において、抗体は、抗ネクチン－４抗体である。いくつかの事例において、抗体は、抗腫瘍関連カルシウムシグナルトランスデューサー２（ＴＡＣＳＴＤ２）抗体である。いくつかの事例において、抗体は、抗Ｍｕｃ１抗体である。いくつかの事例において、抗体は、抗ＮａＰｉ２ｂ抗体である。
【0206】
本発明で使用することが見出される抗体及び抗体－薬物コンジュゲートに関連する追加の開示は、２０１３年３月１１日に出願された米国出願公開第２０１４／０１４１０２５号、２０１４年１１月２６日に出願された米国出願公開第２０１５／０１５７７３６号、２０２１年７月３０日に出願された米国出願第１７／３８９，７２３号、２０２１年８月２５日に出願された米国出願第６３／２３６，９８８号、及び２０２１年７月３０日に出願された米国出願第６３／２２７，６６６号に見出され、これらの各々の開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【0207】
抗体
上に示されるように、本明細書に開示される方法は、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートの投与を含み、抗体は、標的抗原を標的とする。本明細書で使用される場合、抗体は、対象の任意の生命維持に不可欠な臓器上に発現される抗原を標的とすることができる。ある特定の態様において、抗体は、様々な標的臓器の表面上で同じ抗原を発現する標的細胞を標的とすることができる。例えば、抗体は、対象の脳、心臓、肝臓、腎臓、膵臓、肺、胃、卵巣、乳房、甲状腺、皮膚のいずれか、又はそれらの組み合わせで発現される標的抗原に結合することができる。
上に示されるように、本明細書に開示される方法は、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートの投与を含み、抗体は、標的抗原を標的とする。本明細書で使用される場合、抗体は、対象の任意の生命維持に不可欠な臓器上に発現される抗原を標的とすることができる。ある特定の態様において、抗体は、様々な標的臓器の表面上で同じ抗原を発現する標的細胞を標的とすることができる。例えば、抗体は、対象の脳、心臓、肝臓、腎臓、膵臓、肺、胃、卵巣、乳房、甲状腺、皮膚のいずれか、又はそれらの組み合わせで発現される標的抗原に結合することができる。
【0208】
抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体
上に示されるように、本発明の方法に従って、対象は、置換基Ｗ１として抗体を含むコンジュゲートを投与され得る。ある特定の実施形態において、抗体は、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体であってもよく、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体のアミノ酸配列は、２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）残基を含むように修飾されている。本明細書で使用される場合、アミノ酸は、それらの標準的な名称、それらの標準的な３文字の略称、及び／又はそれらの標準的な１文字の略称、例えば、アラニン又はＡｌａ又はＡ、システイン又はＣｙｓ又はＣ、アスパラギン酸又はＡｓｐ又はＤ、グルタミン酸又はＧｌｕ又はＥ、フェニルアラニン又はＰｈｅ又はＦ、グリシン又はＧｌｙ又はＧ、ヒスチジン又はＨｉｓ又はＨ、イソロイシン又はＩｌｅ又はＩ、リジン又はＬｙｓ又はＫ、ロイシン又はＬｅｕ又はＬ、メチオニン又はＭｅｔ又はＭ、アスパラギン又はＡｓｎ又はＮ、プロリン又はＰｒｏ又はＰ、グルタミン又はＧｌｎ又はＱ、アルギニン又はＡｒｇ又はＲ、セリン又はＳｅｒ又はＳ、トレオニン又はＴｈｒ又はＴ、バリン又はＶａｌ又はＶ、トリプトファン又はＴｒｐ又はＷ、及びチロシン又はＴｙｒ又はＹにより称され得る。
上に示されるように、本発明の方法に従って、対象は、置換基Ｗ１として抗体を含むコンジュゲートを投与され得る。ある特定の実施形態において、抗体は、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体であってもよく、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体のアミノ酸配列は、２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）残基を含むように修飾されている。本明細書で使用される場合、アミノ酸は、それらの標準的な名称、それらの標準的な３文字の略称、及び／又はそれらの標準的な１文字の略称、例えば、アラニン又はＡｌａ又はＡ、システイン又はＣｙｓ又はＣ、アスパラギン酸又はＡｓｐ又はＤ、グルタミン酸又はＧｌｕ又はＥ、フェニルアラニン又はＰｈｅ又はＦ、グリシン又はＧｌｙ又はＧ、ヒスチジン又はＨｉｓ又はＨ、イソロイシン又はＩｌｅ又はＩ、リジン又はＬｙｓ又はＫ、ロイシン又はＬｅｕ又はＬ、メチオニン又はＭｅｔ又はＭ、アスパラギン又はＡｓｎ又はＮ、プロリン又はＰｒｏ又はＰ、グルタミン又はＧｌｎ又はＱ、アルギニン又はＡｒｇ又はＲ、セリン又はＳｅｒ又はＳ、トレオニン又はＴｈｒ又はＴ、バリン又はＶａｌ又はＶ、トリプトファン又はＴｒｐ又はＷ、及びチロシン又はＴｙｒ又はＹにより称され得る。
【0209】
いくつかの場合において、好適な抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、ＴＡＣＳＴＤ２ポリペプチドに特異的に結合し、エピトープは、ＴＡＣＳＴＤ２抗原内にアミノ酸残基を含む。ヒトＴＡＣＳＴＤ２ポリペプチドのアミノ酸配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ－Ｐ０９７５８）を以下の表３に示す。
【表3】
【0210】
ＴＡＣＳＴＤ２エピトープは、表３に示されるヒトＴＡＣＳＴＤ２アミノ酸配列の約４アミノ酸～約２０アミノ酸の連続伸長部に対して少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は１００％のアミノ酸配列同一性を有するポリペプチドによって形成され得る。ＴＡＣＳＴＤ２エピトープはまた、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体が、ＴＡＣＳＴＤ２の三次元構造において互いに近接している特定のアミノ酸に結合するコンフォメーションエピトープであってもよいが、配列番号１２に示されるような配列では連続していない。
【0211】
いくつかの場合において、好適な抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、ＴＡＣＳＴＤ２への高親和性結合を示す。例えば、いくつかの場合において、好適な抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、少なくとも約１０－７Ｍ、少なくとも約１０－８Ｍ、少なくとも約１０－９Ｍ、少なくとも約１０－１０Ｍ、少なくとも約１０－１１Ｍ、若しくは少なくとも約１０－１２Ｍ、又は１０－１２Ｍより大きい親和性でＴＡＣＳＴＤ２に結合する。いくつかの場合において、好適な抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、約１０－７Ｍ～約１０－８Ｍ、約１０－８Ｍ～約１０－９Ｍ、約１０－９Ｍ～約１０－１０Ｍ、約１０－１０Ｍ～約１０－１１Ｍ、若しくは約１０－１１Ｍ～約１０－１２Ｍ、又は１０－１２Ｍより大きい親和性で、ＴＡＣＳＴＤ２上に存在するエピトープに結合する。
【0212】
いくつかの場合において、好適な抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、ＴＡＣＳＴＤ２内のエピトープに対する結合に関して、第２の抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体と競合し、かつ／又は第２の抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体として、ＴＡＣＳＴＤ２内の同じエピトープに結合する。いくつかの場合において、ＴＡＣＳＴＤ２内のエピトープに対する結合に関して第２の抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体と競合する抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、第２の抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体と同じエピトープにも結合する。いくつかの場合において、ＴＡＣＳＴＤ２内のエピトープに対する結合に関して第２の抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体と競合する抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、第２の抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体によって結合するエピトープと重複しているエピトープに結合する。いくつかの場合において、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、ヒト化される。
【0213】
いくつかの実施形態によれば、本開示のコンジュゲートは、ＴＡＣＳＴＤ２に特異的に結合し、ＴＡＣＳＴＤ２に対する結合について、
可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＮＹＮＭＮ（配列番号１）を含むＶＨＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧ（配列番号２）を含むＶＨＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶ（配列番号３）を含むＶＨＣＤＲ３を含む、ＶＨポリペプチドと、
可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡ（配列番号４）を含むＶＬＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＳＡＳＹＲＹＴ（配列番号５）を含むＶＬＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＱＱＨＹＩＴＰＬＴ（配列番号６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む、ＶＬポリペプチドと、を含む、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体と競合する、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体を含む。
可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＮＹＮＭＮ（配列番号１）を含むＶＨＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧ（配列番号２）を含むＶＨＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶ（配列番号３）を含むＶＨＣＤＲ３を含む、ＶＨポリペプチドと、
可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡ（配列番号４）を含むＶＬＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＳＡＳＹＲＹＴ（配列番号５）を含むＶＬＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＱＱＨＹＩＴＰＬＴ（配列番号６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む、ＶＬポリペプチドと、を含む、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体と競合する、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体を含む。
【0214】
ある特定の実施形態において、本開示のコンジュゲートは、
可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＮＹＮＭＮ（配列番号１）を含むＶＨＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧ（配列番号２）を含むＶＨＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶ（配列番号３）を含むＶＨＣＤＲ３を含む、ＶＨポリペプチドと、
可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡ（配列番号４）を含むＶＬＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＳＡＳＹＲＹＴ（配列番号５）を含むＶＬＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＱＱＨＹＩＴＰＬＴ（配列番号６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む、ＶＬポリペプチドと、を含む、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体を含む。
可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＮＹＮＭＮ（配列番号１）を含むＶＨＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＷＩＮＴＹＴＧＥＰＴＹＴＤＤＦＫＧ（配列番号２）を含むＶＨＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＧＧＦＧＳＳＹＷＹＦＤＶ（配列番号３）を含むＶＨＣＤＲ３を含む、ＶＨポリペプチドと、
可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドであって、
アミノ酸配列ＫＡＳＱＤＶＳＩＡＶＡ（配列番号４）を含むＶＬＣＤＲ１、
アミノ酸配列ＳＡＳＹＲＹＴ（配列番号５）を含むＶＬＣＤＲ２、及び
アミノ酸配列ＱＱＨＹＩＴＰＬＴ（配列番号６）を含むＶＬＣＤＲ３を含む、ＶＬポリペプチドと、を含む、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体を含む。
【0215】
いくつかの実施形態によれば、本開示のコンジュゲートは、
配列番号７に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
配列番号８に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体を含む。
配列番号７に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）ポリペプチドと、
配列番号８に記載されているアミノ酸配列に対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）ポリペプチドと、を含む抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体を含む。
【0216】
第１の抗体が、ＴＡＣＳＴＤ２への結合に関して第２の抗体「と競合する」かどうかは、当該技術分野で既知の競合結合アッセイを使用して容易に決定され得る。競合抗体は、例えば、抗体競合アッセイを介して特定され得る。例えば、第１の抗体の試料を、固体支持体に結合させることができる。次いで、そのような第１の抗体と競合し得ると疑われる第２の抗体の試料を次に添加する。この２つの抗体のうちの１つが標識される。標識された抗体及び標識されていない抗体が、ＴＡＣＳＴＤ２上の別個の異なる部位に結合する場合、標識された抗体は、疑われる競合抗体が存在するか否かにかかわらず、同じレベルまで結合する。しかしながら、相互作用の部位が同一であるか、又は重複している場合、標識されていない抗体が競合し、ＴＡＣＳＴＤ２に結合した標識された抗体の量が低下する。標識されていない抗体が過剰に存在する場合、標識された抗体は、もしあるとしても、結合することはほとんどない。
【0217】
本開示の目的のために、競合抗体は、ＴＡＣＳＴＤ２に対する抗体の結合を約５０％以上、約６０％以上、約７０％以上、約８０％以上、約８５％以上、約９０％以上、約９５％以上、又は約９９％以上低下させる抗体である。そのような競合アッセイを実施するための手順の詳細は、当該技術分野で周知であり、例えば、Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８８，５６７－５６９，１９８８，ＩＳＢＮ０－８７９６９－３１４－２に見出すことができる。そのようなアッセイは、精製された抗体を使用することによって定量的に行うことができる。標準曲線は、１つの抗体をそれ自体に対して滴定することによって確立され得、すなわち、同じ抗体が標識及び競合物の両方に使用される。標識されていない競合抗体がプレートへの標識された抗体の結合を阻害する能力が、滴定され得る。その結果がプロットされ得、望ましい結合阻害度を達成するために必要な濃度が比較され得る。
【0218】
いくつかの実施形態によれば、本開示のコンジュゲートは、表４に提供される重鎖ポリペプチドに対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチドを含む抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体を含む。ある特定の実施形態において、かかる抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、表４に提供されるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３を含む。
【0219】
いくつかの実施形態によれば、本開示のコンジュゲートは、表４に提供される軽鎖ポリペプチドに対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドを含む抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体を含む。ある特定の実施形態において、かかる抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、表４に提供されるＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。
【0220】
いくつかの実施形態によれば、本開示のコンジュゲートは、表４に提供される重鎖ポリペプチドに対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチドと、表４に提供される軽鎖ポリペプチドに対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖ポリペプチドと、を含む、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体を含む。ある特定の実施形態において、かかる抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、表４に提供されるＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。
【0221】
本開示の抗ＴＡＣＳＴＤ２の一例の重鎖ポリペプチド、ＶＨポリペプチド、ＶＨＣＤＲ、軽鎖ポリペプチド、ＶＬポリペプチド、及びＶＬＣＤＲのアミノ酸配列は、以下の表４に提供される（太字でのＫａｂａｔによるＣＤＲ、下線が引かれた可変領域を含む）。
【表4-1】
【表4-2】
【0222】
いくつかの実施形態によれば、本開示のコンジュゲートは、表４（配列番号９）に提供される重鎖ポリペプチドに対して７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖ポリペプチドを含む抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体を含み、抗体が、Ｌ２３４Ａ置換、Ｌ２３５Ａ置換、又は両方（例えば、Ｌ２３４Ａ置換及びＬ２３５Ａ置換）を含み、位置２３４及び２３５は、ＥＵ付番システムに従う。Ｅｄｅｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．（１９６９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．６３：７８－８５。ＥＵ付番システムによる残基Ｌ２３４及びＬ２３５は、表４に太字及び斜体で示されている。これらのロイシン残基は、表４に提供される配列番号９の２３８位及び２３９位にある。ある特定の実施形態において、かかる抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、ＴＡＣＳＴＤ２に対する結合に関して、表４に記載されているＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む抗体と競合する。ある特定の実施形態において、かかる抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、表４に記載されているＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む。
【0223】
いくつかの実施形態において、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、ＩｇＧ１抗体である。例えば、ある特定の態様において、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、ＩｇＧ１カッパ抗体である。
【0224】
ある特定の態様において、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、表４に示される抗体に基づくｆＧｌｙ’含有抗体である。例えば、いくつかの実施形態において、抗体は、表４に示される抗体の誘導体であり、抗体と誘導体との間の差は、誘導体中の１つ以上のｆＧｌｙ残基（及び任意選択的に、関連するＦＧＥ認識配列アミノ酸）の存在である。表４のアミノ酸配列において、可変領域は、下線が引かれており、ＣＤＲは、太字で示されている。この例において、重鎖のＣ末端の斜体の残基は、標準的なＩｇＧ１重鎖のＣ末端のリジン残基を置き換える。斜体の残基の中の下線が引かれた残基（ＬＣＴＰＳＲ）は、アルデヒドタグを構成し、Ｃは、重鎖の発現時にＦＧＥによってｆＧｌｙ残基に変換される。斜体の残基の中の下線が引かれていない残基は、標準的なＩｇＧ１重鎖配列とは異なる追加の残基である。
【0225】
いくつかの実施形態において、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体サシツズマブの１個、２個、３個、４個、５個、又は６個全ての相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
【0226】
ある特定の態様において、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、表４に示される抗体に基づくｆＧｌｙ’含有抗体である。例えば、いくつかの実施形態において、抗体は、表４に示される抗体の誘導体であり、抗体と誘導体との間の差は、誘導体中の１つ以上のｆＧｌｙ残基（及び任意選択的に、関連するＦＧＥ認識配列アミノ酸）の存在である。本開示の一実施形態による例示的なサシツズマブベースの抗体の核酸及びアミノ酸配列を、表４に提供する。表４のアミノ酸配列において、可変領域は、下線が引かれており、ＣＤＲは、太字で示されている。この例示的なサシツズマブベースの抗体において、重鎖のＣ末端の斜体の残基は、標準的なＩｇＧ１重鎖のＣ末端のリジン残基を置き換える。斜体の残基の中の下線が引かれた残基（ＬＣＴＰＳＲ）は、アルデヒドタグを構成し、式中、Ｃは、重鎖の発現時にＦＧＥによってｆＧｌｙ残基に変換される。斜体の残基の中の下線が引かれていない残基は、標準的なＩｇＧ１重鎖配列とは異なる追加の残基である。
【0227】
主題のコンジュゲートでの使用に好適な抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、いくつかの場合において、その表面上でＴＡＣＳＴＤ２を発現する（例えば、過剰発現する）ヒト腫瘍細胞の増殖を阻害し、阻害は、インビトロ、インビボ、又はインビトロ及びインビボの両方で生じる。例えば、いくつかの場合において、主題のコンジュゲートでの使用に好適な抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、その表面上でＴＡＣＳＴＤ２を発現する（例えば、過剰発現する）ヒト腫瘍細胞の増殖を、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、又は８０％超、例えば、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は１００％阻害する。
【0228】
修飾定常領域配列
上に示されるように、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体のアミノ酸配列は、インビボ（例えば、細胞中のアルデヒドタグ含有タンパク質の翻訳のときに）又はインビトロ（例えば、無細胞系において、アルデヒドタグ含有タンパク質をホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）と接触させることによって）のいずれかで、ＦＧＥの作用によって２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）残基に変換（酸化）され得るセリン又はシステイン残基を含有するスルファターゼモチーフを含むように修飾され得る。そのようなスルファターゼモチーフは、本明細書では、ＦＧＥ修飾部位とも称され得る。
上に示されるように、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体のアミノ酸配列は、インビボ（例えば、細胞中のアルデヒドタグ含有タンパク質の翻訳のときに）又はインビトロ（例えば、無細胞系において、アルデヒドタグ含有タンパク質をホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）と接触させることによって）のいずれかで、ＦＧＥの作用によって２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）残基に変換（酸化）され得るセリン又はシステイン残基を含有するスルファターゼモチーフを含むように修飾され得る。そのようなスルファターゼモチーフは、本明細書では、ＦＧＥ修飾部位とも称され得る。
【0229】
スルファターゼモチーフ
アルデヒドタグの最小スルファターゼモチーフは、通常、５アミノ酸残基又は６アミノ酸残基の長さであり、通常、６アミノ酸残基以下の長さである。Ｉｇポリペプチドにおいて提供されるスルファターゼモチーフは、少なくとも５個又は６個のアミノ酸残基であり、例えば、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８又は７アミノ酸残基未満の長さを有するスルファターゼモチーフを定義するために、５～１６、６～１６、５～１５、６～１５、５～１４、６～１４、５～１３、６～１３、５～１２、６～１２、５～１１、６～１１、５～１０、６～１０、５～９、６～９、５～８、又は６～８アミノ酸残基の長さであり得る。
アルデヒドタグの最小スルファターゼモチーフは、通常、５アミノ酸残基又は６アミノ酸残基の長さであり、通常、６アミノ酸残基以下の長さである。Ｉｇポリペプチドにおいて提供されるスルファターゼモチーフは、少なくとも５個又は６個のアミノ酸残基であり、例えば、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８又は７アミノ酸残基未満の長さを有するスルファターゼモチーフを定義するために、５～１６、６～１６、５～１５、６～１５、５～１４、６～１４、５～１３、６～１３、５～１２、６～１２、５～１１、６～１１、５～１０、６～１０、５～９、６～９、５～８、又は６～８アミノ酸残基の長さであり得る。
【0230】
ある特定の実施形態において、目的のポリペプチドは、ポリペプチド中にスルファターゼモチーフの配列を提供するための天然アミノ酸配列に比べて、１個以上のアミノ酸残基、例えば、２個以上、又は３個以上、又は４個以上、又は５個以上、又は６個以上、又は７個以上、又は８個以上、又は９個以上、又は１０個以上、又は１１個以上、又は１２個以上、又は１３個以上、又は１４個以上、又は１５個以上、又は１６個以上、又は１７個以上、又は１８個以上、又は１９個以上、又は２０個以上のアミノ酸残基が挿入され、欠失され、置換され（置き換えられ）ているものを含む。ある特定の実施形態において、ポリペプチドは、ポリペプチドの天然アミノ酸配列に比べて、アミノ酸配列の２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、又は２個未満のアミノ酸残基の修飾（挿入、付加、欠失、及び／又は置換／置き換え）を含む。ポリペプチド（例えば、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体）の天然のアミノ酸配列が、所望のスルファターゼモチーフの１つ以上の残基を含有する場合、残基の修飾の総数は、例えば、所望のスルファターゼモチーフの配列を提供するような天然のアミノ酸残基に隣接するアミノ酸残基の部位特異的修飾（挿入、付加、欠失、置換／置き換え）によって低減され得る。ある特定の実施形態において、挿入される、欠失される、置換される（置き換えられる）、又は付加される（例えば、Ｎ末端又はＣ末端に対して）アミノ酸残基の数を最小限に抑えるために、標的抗ＴＡＣＳＴＤ２ポリペプチドの天然アミノ酸配列の修飾の程度が最小限に抑えられる。標的抗ＴＡＣＳＴＤ２ポリペプチドのアミノ酸配列の修飾の程度を最小限に抑えることによって、そのような修飾が抗ＴＡＣＳＴＤ２の機能及び／又は構造に及ぼし得る影響を最小限に抑えることができる。
【0231】
特定の目的のアルデヒドタグは、少なくとも最小スルファターゼモチーフ（「コンセンサススルファターゼモチーフ」とも称される）を含むものであるが、より長いアルデヒドタグが、本開示によって企図及び包含され、本開示の組成物及び方法において用途を見出し得ることが容易に理解されることに留意されたい。したがって、アルデヒドタグは、５個又は６個の残基の最小スルファターゼモチーフを含んでもよく、又はより長くてもよく、追加のアミノ酸残基がモチーフのＮ末端側及び／又はＣ末端側に隣接し得る最小スルファターゼモチーフを含んでもよい。例えば、５個又は６個のアミノ酸残基のアルデヒドタグ、並びに５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０個以上を超えるアミノ酸残基のより長いアミノ酸配列が企図される。
【0232】
アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣ末端又はその付近に存在してもよく、例えば、アルデヒドタグは、天然の野生型Ｉｇ重鎖のＣ末端の１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個のアミノ酸内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ１ドメイン内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ２ドメイン内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ３ドメイン内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ軽鎖定常領域内に、例えば、カッパ軽鎖定常領域又はラムダ軽鎖定常領域内に存在し得る。
【0233】
ある特定の実施形態において、使用されるスルファターゼモチーフは、以下の式により説明されてもよく、
Ｘ１Ｚ１０Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（Ｉ’）
式中、
Ｚ１０は、システイン又はセリンであり（（Ｃ／Ｓ）により表すこともできる）、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニンＩであり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、例えば、リジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ１は、存在するか、又は存在せず、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｓ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸であってもよいが、通常は、脂肪族アミノ酸、極性非帯電アミノ酸、又は硫黄含有アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよいことを条件とする。
Ｘ１Ｚ１０Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（Ｉ’）
式中、
Ｚ１０は、システイン又はセリンであり（（Ｃ／Ｓ）により表すこともできる）、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニンＩであり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、例えば、リジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ１は、存在するか、又は存在せず、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｓ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸であってもよいが、通常は、脂肪族アミノ酸、極性非帯電アミノ酸、又は硫黄含有アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよいことを条件とする。
【0234】
抗ＴＡＣＳＴＤ２の重鎖及び／又は軽鎖のアミノ酸配列は、式Ｘ１Ｚ１０Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０の少なくとも５個のアミノ酸の配列を提供するように修飾されてもよく、式中、
Ｚ１０は、システイン又はセリンであり、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基であり、
Ｚ３０は、脂肪族アミノ酸又は塩基性アミノ酸であり、
Ｘ１は、存在するか、又は存在せず、存在する場合、任意のアミノ酸であり、但し、異種スルファターゼモチーフがポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、各々独立して、任意のアミノ酸であり、
この配列は、Ｉｇ定常領域の溶媒接近可能なループ領域の内部にあるか、又はそれに隣接しており、この配列は、Ｉｇ重鎖のＣ末端にはないことを条件とする。
Ｚ１０は、システイン又はセリンであり、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基であり、
Ｚ３０は、脂肪族アミノ酸又は塩基性アミノ酸であり、
Ｘ１は、存在するか、又は存在せず、存在する場合、任意のアミノ酸であり、但し、異種スルファターゼモチーフがポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、各々独立して、任意のアミノ酸であり、
この配列は、Ｉｇ定常領域の溶媒接近可能なループ領域の内部にあるか、又はそれに隣接しており、この配列は、Ｉｇ重鎖のＣ末端にはないことを条件とする。
【0235】
スルファターゼモチーフは、一般に、選択されたＦＧＥ、例えば、アルデヒドタグ化ポリペプチドが発現される宿主細胞中に存在するＦＧＥ、又は無細胞インビトロ法においてアルデヒドタグ化ポリペプチドと接触されるＦＧＥによって変換可能なように選択される。
【0236】
例えば、ＦＧＥが真核生物ＦＧＥ（例えば、ヒトＦＧＥを含む哺乳動物ＦＧＥ）である場合、スルファターゼモチーフは、以下の式のものであってもよく、
Ｘ１ＣＸ２ＰＸ３Ｚ３０（Ｉ”）
式中、
Ｘ１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｓ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよく、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニＩ（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、例えば、リジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であることを条件とする。
Ｘ１ＣＸ２ＰＸ３Ｚ３０（Ｉ”）
式中、
Ｘ１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｓ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよく、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニＩ（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、例えば、リジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であることを条件とする。
【0237】
スルファターゼモチーフの具体例としては、ＬＣＴＰＳＲ（配列番号１３）、ＭＣＴＰＳＲ（配列番号１４）、ＶＣＴＰＳＲ（配列番号１５）、ＬＣＳＰＳＲ（配列番号１６）、ＬＣＡＰＳＲ（配列番号１７）、ＬＣＶＰＳＲ（配列番号１０）、ＬＣＧＰＳＲ（配列番号１１）、ＩＣＴＰＡＲ（配列番号２３）、ＬＣＴＰＳＫ（配列番号２４）、ＭＣＴＰＳＫ（配列番号２５）、ＶＣＴＰＳＫ（配列番号２６）、ＬＣＳＰＳＫ（配列番号２７）、ＬＣＡＰＳＫ（配列番号２８）、ＬＣＶＰＳＫ（配列番号２９）、ＬＣＧＰＳＫ（配列番号３０）、ＬＣＴＰＳＡ（配列番号３１）、ＩＣＴＰＡＡ（配列番号３２）、ＭＣＴＰＳＡ（配列番号３３）、ＶＣＴＰＳＡ（配列番号３４）、ＬＣＳＰＳＡ（配列番号３５）、ＬＣＡＰＳＡ（配列番号３６）、ＬＣＶＰＳＡ（配列番号３７）、及びＬＣＧＰＳＡ（配列番号３８）が挙げられる。
【0238】
ｆＧｌｙ含有配列
抗ＴＡＣＳＴＤ２の重鎖及び／又は軽鎖にＦＧＥが作用すると、スルファターゼモチーフ中のセリン又はシステインが、ｆＧｌｙに修飾される。したがって、ｆＧｌｙ含有スルファターゼモチーフは、以下の式のものであってもよく、
Ｘ１（ｆＧｌｙ）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（Ｉ’’’）
式中、
ｆＧｌｙは、ホルミルグリシン残基であり、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギン（ａｒｇＩｎｅ）（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよいことを条件とする。
抗ＴＡＣＳＴＤ２の重鎖及び／又は軽鎖にＦＧＥが作用すると、スルファターゼモチーフ中のセリン又はシステインが、ｆＧｌｙに修飾される。したがって、ｆＧｌｙ含有スルファターゼモチーフは、以下の式のものであってもよく、
Ｘ１（ｆＧｌｙ）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（Ｉ’’’）
式中、
ｆＧｌｙは、ホルミルグリシン残基であり、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギン（ａｒｇＩｎｅ）（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよいことを条件とする。
【0239】
上述のように、コンジュゲートを生成するために、ｆＧｌｙ残基を含有するポリペプチドは、ｆＧｌｙと薬物又は活性剤に連結したリンカーの反応性部分（例えば、上述のように、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分）との反応によって、薬物又は活性剤（例えば、メイタンシノイド）にコンジュゲートされ、ｆＧｌｙ’含有スルファターゼモチーフを生成し得る。本明細書で使用される場合、ｆＧｌｙ’という用語は、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性剤（メイタンシノイドなど）にカップリングされるスルファターゼモチーフのアミノ酸残基を指す。したがって、ｆＧｌｙ’含有スルファターゼモチーフは、以下の式のものであってもよく、
Ｘ１（ｆＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（ＩＩ）
式中、
ｆＧｌｙ’は、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性剤にカップリングされたアミノ酸残基であり、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、イイニン（Ｉｉｎｉｎｅ）（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよいことを条件とする。
Ｘ１（ｆＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（ＩＩ）
式中、
ｆＧｌｙ’は、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性剤にカップリングされたアミノ酸残基であり、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、イイニン（Ｉｉｎｉｎｅ）（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよいことを条件とする。
【0240】
ある特定の実施形態において、式（ＩＩ）の配列は、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体の重鎖定常領域のＣ末端に配置されている。いくつかの事例において、重鎖定常領域は、式（ＩＩ）の配列を含み、
Ｘ１（ｆＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（ＩＩ）
式中、
ｆＧｌｙ’は、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性剤にカップリングされたアミノ酸残基であり、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよく、
この配列は、アミノ酸配列ＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫに対してＣ末端であり、この配列は、天然の野生型重鎖Ｉｇ定常領域内に存在しない１、２、３、４、５、又は５～１０個のアミノ酸を含んでもよいことを条件とする。
Ｘ１（ｆＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（ＩＩ）
式中、
ｆＧｌｙ’は、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性剤にカップリングされたアミノ酸残基であり、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよく、
この配列は、アミノ酸配列ＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫに対してＣ末端であり、この配列は、天然の野生型重鎖Ｉｇ定常領域内に存在しない１、２、３、４、５、又は５～１０個のアミノ酸を含んでもよいことを条件とする。
【0241】
ある特定の実施形態において、重鎖定常領域は、例えば、天然ＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号４０）配列の代わりに、Ｉｇ重鎖のＣ末端に配列ＳＬＳＬＳＰＧＳＬ（ｆＧｌｙ’）ＴＰＳＲＧＳ（配列番号３９）を含む。
【0242】
ある特定の実施形態において、薬物又は活性剤（ｆＧｌｙ’）にカップリングされたアミノ酸残基は、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体の軽鎖定常領域内に配置されている。ある特定の実施形態において、軽鎖定常領域は、式（ＩＩ）の配列を含み、
Ｘ１（ｆＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（ＩＩ）
式中、
ｆＧｌｙ’は、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性剤にカップリングされたアミノ酸残基であり、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよく、
この配列が、アミノ酸配列ＫＶＤＮＡＬ（配列番号４１）に対してＣ末端であり、かつ／又はアミノ酸配列ＱＳＧＮＳＱ（配列番号４２）に対してＮ末端であることを条件とする。
Ｘ１（ｆＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（ＩＩ）
式中、
ｆＧｌｙ’は、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性剤にカップリングされたアミノ酸残基であり、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよく、
この配列が、アミノ酸配列ＫＶＤＮＡＬ（配列番号４１）に対してＣ末端であり、かつ／又はアミノ酸配列ＱＳＧＮＳＱ（配列番号４２）に対してＮ末端であることを条件とする。
【0243】
ある特定の実施形態において、軽鎖定常領域は、配列ＫＶＤＮＡＬ（ｆＧｌｙ’）ＴＰＳＲＱＳＧＮＳＱ（配列番号４３）を含む。
【0244】
ある特定の実施形態において、薬物又は活性剤（ｆＧｌｙ’）にカップリングされたアミノ酸残基は、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体の重鎖ＣＨ１領域内に配置されている。ある特定の実施形態において、重鎖ＣＨ１領域は、式（ＩＩ）の配列を含み、
Ｘ１（ｆＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（ＩＩ）
式中、
ｆＧｌｙ’は、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性剤にカップリングされたアミノ酸残基であり、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよく、
この配列が、アミノ酸配列ＳＷＮＳＧＡ（配列番号４４）に対してＣ末端であり、かつ／又はアミノ酸配列ＧＶＨＴＦＰ（配列番号４５）に対してＮ末端であることを条件とする。
Ｘ１（ｆＧｌｙ’）Ｘ２Ｚ２０Ｘ３Ｚ３０（ＩＩ）
式中、
ｆＧｌｙ’は、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性剤にカップリングされたアミノ酸残基であり、
Ｚ２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ１が存在し、
Ｘ２及びＸ３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよく、
この配列が、アミノ酸配列ＳＷＮＳＧＡ（配列番号４４）に対してＣ末端であり、かつ／又はアミノ酸配列ＧＶＨＴＦＰ（配列番号４５）に対してＮ末端であることを条件とする。
【0245】
ある特定の実施形態において、重鎖ＣＨ１領域は、配列ＳＷＮＳＧＡＬ（ｆＧｌｙ’）ＴＰＳＲＧＶＨＴＦＰ（配列番号４６）を含む。
【0246】
修飾部位
上に示されるように、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体のアミノ酸配列は、インビボ（例えば、細胞中のアルデヒドタグ含有タンパク質の翻訳のときに）又はインビトロ（例えば、無細胞系において、アルデヒドタグ含有タンパク質をＦＧＥと接触させることによって）のいずれかで、ＦＧＥの作用によってｆＧｌｙ残基に変換（酸化）され得るセリン又はシステイン残基を含有するスルファターゼモチーフを含むように修飾され得る。本開示のコンジュゲートを生成するために使用される抗ＴＡＣＳＴＤ２ポリペプチドは、少なくともＩｇ定常領域、例えば、Ｉｇ重鎖定常領域（例えば、少なくともＣＨ１ドメイン、少なくともＣＨ１及びＣＨ２ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３ドメイン、若しくはＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、及びＣＨ４ドメイン）、又はＩｇ軽鎖定常領域を含む。そのようなＩｇポリペプチドは、本明細書において「標的Ｉｇポリペプチド」又は「標的抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体」又は「標的抗ＴＡＣＳＴＤ２ Ｉｇポリペプチド」と称される。
上に示されるように、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体のアミノ酸配列は、インビボ（例えば、細胞中のアルデヒドタグ含有タンパク質の翻訳のときに）又はインビトロ（例えば、無細胞系において、アルデヒドタグ含有タンパク質をＦＧＥと接触させることによって）のいずれかで、ＦＧＥの作用によってｆＧｌｙ残基に変換（酸化）され得るセリン又はシステイン残基を含有するスルファターゼモチーフを含むように修飾され得る。本開示のコンジュゲートを生成するために使用される抗ＴＡＣＳＴＤ２ポリペプチドは、少なくともＩｇ定常領域、例えば、Ｉｇ重鎖定常領域（例えば、少なくともＣＨ１ドメイン、少なくともＣＨ１及びＣＨ２ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３ドメイン、若しくはＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、及びＣＨ４ドメイン）、又はＩｇ軽鎖定常領域を含む。そのようなＩｇポリペプチドは、本明細書において「標的Ｉｇポリペプチド」又は「標的抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体」又は「標的抗ＴＡＣＳＴＤ２ Ｉｇポリペプチド」と称される。
【0247】
スルファターゼモチーフが導入される抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体中の部位は、任意の好都合な部位であり得る。上に示されるように、いくつかの事例において、挿入される、欠失される、置換される（置き換えられる）、及び／又は付加される（例えば、Ｎ末端又はＣ末端に対して）アミノ酸残基の数を最小限に抑えるために、標的抗ＴＡＣＳＴＤ２ポリペプチドの天然アミノ酸配列の修飾の程度が最小限に抑えられる。標的抗ＴＡＣＳＴＤ２ポリペプチドのアミノ酸配列の修飾の程度を最小限に抑えることによって、そのような修飾が抗ＴＡＣＳＴＤ２の機能及び／又は構造に及ぼし得る影響を最小限に抑えることができる。
【0248】
抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体重鎖定常領域は、任意の重鎖アイソタイプのＩｇ定常領域、天然に存在しないＩｇ重鎖定常領域（コンセンサスＩｇ重鎖定常領域を含む）を含み得る。Ｉｇ定常領域アミノ酸配列は、アルデヒドタグを含むように修飾されてもよく、アルデヒドタグは、Ｉｇ定常領域の溶媒接近可能なループ領域の中、又はそれに隣接して存在する。Ｉｇ定常領域アミノ酸配列は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、若しくは１６個のアミノ酸、又は１６個超のアミノ酸の挿入及び／又は置換によって修飾され、上述のようなスルファターゼモチーフのアミノ酸配列を提供することができる。
【0249】
いくつかの場合において、アルデヒドタグ化抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、アルデヒドタグ化Ｉｇ重鎖定常領域（例えば、少なくともＣＨ１ドメイン；少なくともＣＨ１及びＣＨ２ドメイン；ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３ドメイン；又はＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、及びＣＨ４ドメイン）を含む。アルデヒドタグ化Ｉｇ重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、若しくはＩｇＧ４アイソタイプ重鎖、又はその任意のアロタイプバリアントの重鎖定常領域配列、例えば、ヒト重鎖定常領域配列若しくはマウス重鎖定常領域配列、ハイブリッド重鎖定常領域、合成重鎖定常領域、又はＦＧＥによって修飾され、ｆＧｌｙ修飾Ｉｇポリペプチドを生成し得る少なくとも１つのスルファターゼモチーフを含むコンセンサス重鎖定常領域配列などを含み得る。Ｉｇ重鎖のアロタイプバリアントは、当該技術分野で既知である。例えば、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ（２００９）ＭＡｂｓ １：４を参照されたい。
【0250】
いくつかの場合において、アルデヒドタグ化抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体は、アルデヒドタグ化Ｉｇ軽鎖定常領域を含む。アルデヒドタグ化Ｉｇ軽鎖定常領域は、カッパ軽鎖、ラムダ軽鎖の定常領域配列、例えば、ヒトカッパ若しくはラムダ軽鎖定常領域、ハイブリッド軽鎖定常領域、合成軽鎖定常領域、又はＦＧＥによって修飾され、ｆＧｌｙ修飾抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体ポリペプチドを生成し得る少なくとも１つのスルファターゼモチーフを含むコンセンサス軽鎖定常領域配列などを含み得る。例示的な定常領域は、ヒトガンマ１及びガンマ３領域を含む。スルファターゼモチーフを除き、定常領域は、野生型アミノ酸配列を有していてもよく、又は野生型アミノ酸配列に対して少なくとも７０％同一（例えば、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％同一）であるアミノ酸配列を有し得る。
【0251】
いくつかの実施形態において、スルファターゼモチーフは、Ｉｇポリペプチド重鎖のＣ末端以外の位置、又はそれに追加した位置にある。上に示されるように、単離されたアルデヒドタグ化抗ＴＡＣＳＴＤ２ポリペプチドは、上述のスルファターゼモチーフを含むように修飾された重鎖定常領域アミノ酸配列を含んでもよく、スルファターゼモチーフは、抗ＴＡＣＳＴＤ２ポリペプチド重鎖定常領域の表面接近可能なループ領域の中にあるか、又はそれに隣接している。
【0252】
いくつかの事例において、標的抗ＴＡＣＳＴＤ２免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。ある特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ１重鎖定常領域の領域内にあるか、又はそれに隣接している：１）アミノ酸１２２～１２７、２）アミノ酸１３７～１４３、３）アミノ酸１５５～１５８、４）アミノ酸１６３～１７０、５）アミノ酸１６３～１８３、６）アミノ酸１７９～１８３、７）アミノ酸１９０～１９２、８）アミノ酸２００～２０２、９）アミノ酸１９９～２０２、１０）アミノ酸２０８～２１２、１１）アミノ酸２２０～２４１、１２）アミノ酸２４７～２５１、１３）アミノ酸２５７～２６１、１４）アミノ酸２６９～２７７、１５）アミノ酸２７１～２７７、１６）アミノ酸２８４～２８５、１７）アミノ酸２８４～２９２、１８）アミノ酸２８９～２９１、１９）アミノ酸２９９～３０３、２０）アミノ酸３０９～３１３、２１）アミノ酸３２０～３２２、２２）アミノ酸３２９～３３５、２３）アミノ酸３４１～３４９、２４）アミノ酸３４２～３４８、２５）アミノ酸３５６～３６５、２６）アミノ酸３７７～３８１、２７）アミノ酸３８８～３９４、２８）アミノ酸３９８～４０７、２９）アミノ酸４３３～４５１、及び３０）アミノ酸４４６～４５１（ここで、アミノ酸の付番は、ヒトＩｇＧ１のアミノ酸の付番に基づく）。
【0253】
いくつかの事例において、標的抗ＴＡＣＳＴＤ２免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。ある特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ１重鎖定常領域の領域内にあるか、又はそれに隣接している：１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１６～２２、３）アミノ酸３４～４７、４）アミノ酸４２～４９、５）アミノ酸４２～６２、６）アミノ酸３４～３７、７）アミノ酸６９～７１、８）アミノ酸７９～８１、９）アミノ酸７８～８１、１０）アミノ酸８７～９１、１１）アミノ酸１００～１２１、１２）アミノ酸１２７～１３１、１３）アミノ酸１３７～１４１、１４）アミノ酸１４９～１５７、１５）アミノ酸１５１～１５７、１６）アミノ酸１６４～１６５、１７）アミノ酸１６４～１７２、１８）アミノ酸１６９～１７１、１９）アミノ酸１７９～１８３、２０）アミノ酸１８９～１９３、２１）アミノ酸２００～２０２、２２）アミノ酸２０９～２１５、２３）アミノ酸２２１～２２９、２４）アミノ酸２２～２２８、２５）アミノ酸２３６～２４５、２６）アミノ酸２１７～２６１、２７）アミノ酸２６８～２７４、２８）アミノ酸２７８～２８７、２９）アミノ酸３１３～３３１、及び３０）アミノ酸３２４～３３１（ここで、アミノ酸の付番は、図９Ｂに示されるような配列番号４７（ヒトＩｇＧ１定常領域）に示されるヒトＩｇＧ１のアミノ酸の付番に基づく）。
【0254】
ＩｇＧ１重鎖の例示的な表面アクセス可能ループ領域には、１）ＡＳＴＫＧＰ（配列番号４８）、２）ＫＳＴＳＧＧＴ（配列番号４９）、３）ＰＥＰＶ（配列番号５０）、４）ＮＳＧＡＬＴＳＧ（配列番号５１）、５）ＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬ（配列番号５２）、６）ＱＳＳＧＬ（配列番号５３）、７）ＶＴＶ、８）ＱＴＹ、９）ＴＱＴＹ（配列番号５４）、１０）ＨＫＰＳＮ（配列番号５５）、１１）ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧ（配列番号５６）、１２）ＦＰＰＫＰ（配列番号５７）、１３）ＩＳＲＴＰ（配列番号５８）、１４）ＤＶＳＨＥＤＰＥＶ（配列番号５９）、１５）ＳＨＥＤＰＥＶ（配列番号６０）、１６）ＤＧ、１７）ＤＧＶＥＶＨＮＡＫ（配列番号６１）、１８）ＨＮＡ、１９）ＱＹＮＳＴ（配列番号６２）、２０）ＶＬＴＶＬ（配列番号６３）、２１）ＧＫＥ、２２）ＮＫＡＬＰＡＰ（配列番号６４）、２３）ＳＫＡＫＧＱＰＲＥ（配列番号６５）、２４）ＫＡＫＧＱＰＲ（配列番号６６）、２５）ＰＰＳＲＫＥＬＴＫＮ（配列番号６７）、２６）ＹＰＳＤＩ（配列番号６８）、２７）ＮＧＱＰＥＮＮ（配列番号６９）、２８）ＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳ（配列番号７０）、２９）ＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号７１）、及び３０）ＳＬＳＰＧＫ（配列番号７２）が挙げられる。
【0255】
いくつかの事例において、標的免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。ある特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ２重鎖定常領域の領域内にあるか、又はそれに隣接している：１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１３～２４、３）アミノ酸３３～３７、４）アミノ酸４３～５４、５）アミノ酸５８～６３、６）アミノ酸６９～７１、７）アミノ酸７８～８０、８）８７～８９、９）アミノ酸９５～９６、１０）１１４～１１８、１１）１２２～１２６、１２）１３４～１３６、１３）１４４～１５２、１４）１５９～１６７、１５）１７５～１７６、１６）１８４～１８８、１７）１９５～１９７、１８）２０４～２１０、１９）２１６～２２４、２０）２３１～２３３、２１）２３７～２４１、２２）２５２～２５６、２３）２６３～２６９、２４）２７３～２８２、２５）アミノ酸２９９～３０２（ここで、アミノ酸の付番は、図９Ｂに示されるような配列番号７３（ヒトＩｇＧ２）に示されるアミノ酸配列の付番に基づく）。
【0256】
ＩｇＧ２重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＡＳＴＫＧＰ（配列番号７４）、２）ＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡ（配列番号７５）、３）ＦＰＥＰＶ（配列番号７６）、４）ＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰ（配列番号７７）、５）ＱＳＳＧＬＹ（配列番号７８）、６）ＶＴＶ、７）ＴＱＴ、８）ＨＫＰ、９）ＤＫ、１０）ＶＡＧＰＳ（配列番号７９）、１１）ＦＰＰＫＰ（配列番号８０）、１２）ＲＴＰ、１３）ＤＶＳＨＥＤＰＥＶ（配列番号８１）、１４）ＤＧＶＥＶＨＮＡＫ（配列番号８２）、１５）ＦＮ、１６）ＶＬＴＶＶ（配列番号８３）、１７）ＧＫＥ、１８）ＮＫＧＬＰＡＰ（配列番号８４）、１９）ＳＫＴＫＧＱＰＲＥ（配列番号８５）、２０）ＰＰＳ、２１）ＭＴＫＮＱ（配列番号８６）、２２）ＹＰＳＤＩ（配列番号８７）、２３）ＮＧＱＰＥＮＮ（配列番号８８）、２４）ＴＰＰＭＬＤＳＤＧＳ（配列番号８９）、２５）ＧＮＶＦ（配列番号９０）、及び２６）ＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号９１）が挙げられる。
【0257】
いくつかの事例において、標的免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。ある特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ３重鎖定常領域の領域内にあるか、又はそれに隣接している：１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１３～２２、３）アミノ酸３３～３７、４）アミノ酸４３～６１、５）アミノ酸７１、６）アミノ酸７８～８０、７）８７～９１、８）アミノ酸９７～１０６、９）１１１～１１５、１０）１４７～１６７、１１）１７３～１７７、１６）１８５～１８７、１３）１９５～２０３、１４）２１０～２１８、１５）２２６～２２７、１６）２３８～２３９、１７）２４６～２４８、１８）２５５～２６１、１９）２６７～２７５、２０）２８２～２９１、２１）アミノ酸３０３～３０７、２２）アミノ酸３１３～３２０、２３）アミノ酸３２４～３３３、２４）アミノ酸３５０～３５２、２５）アミノ酸３５９～３６５、及び２６）アミノ酸３７２～３７７（ここで、アミノ酸の付番は、図９Ｂに示されるような配列番号９２（ヒトＩｇＧ３）に示されるアミノ酸配列の付番に基づく）。
【0258】
ＩｇＧ３重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＡＳＴＫＧＰ（配列番号９３）、２）ＰＣＳＲＳＴＳＧＧＴ（配列番号９４）、３）ＦＰＥＰＶ（配列番号９５）、４）ＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧ（配列番号９６）、５）Ｖ、６）ＴＱＴ、７）ＨＫＰＳＮ（配列番号９７）、８）ＲＶＥＬＫＴＰＬＧＤ（配列番号９８）、９）ＣＰＲＣＰＫＰ（配列番号９９）、１０）ＰＫＳＣＤＴＰＰＰＣＰＲＣＰＡＰＥＬＬＧＧ（配列番号１００）、１１）ＦＰＰＫＰ（配列番号１０１）、１２）ＲＴＰ、１３）ＤＶＳＨＥＤＰＥＶ（配列番号１０２）、１４）ＤＧＶＥＶＨＮＡＫ（配列番号１０３）、１５）ＹＮ、１６）ＶＬ、１７）ＧＫＥ、１８）ＮＫＡＬＰＡＰ（配列番号１０４）、１９）ＳＫＴＫＧＱＰＲＥ（配列番号１０５）、２０）ＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮ（配列番号１０６）、２１）ＹＰＳＤＩ（配列番号１０７）、２２）ＳＳＧＱＰＥＮＮ（配列番号１０８）、２３）ＴＰＰＭＬＤＳＤＧＳ（配列番号１０９）、２４）ＧＮＩ、２５）ＨＥＡＬＨＮＲ（配列番号１１０）、及び２６）ＳＬＳＰＧＫ（配列番号１１１）が挙げられる。
【0259】
いくつかの事例において、標的免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。ある特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ４重鎖定常領域の領域内にあるか、又はそれに隣接している：１）アミノ酸１～５、２）アミノ酸１２～２３、３）アミノ酸３２～３６、４）アミノ酸４２～５３、５）アミノ酸５７～６２、６）アミノ酸６８～７０、７）アミノ酸７７～７９、８）アミノ酸８６～８８、９）アミノ酸９４～９５、１０）アミノ酸１０１～１０２、１１）アミノ酸１０８～１１８、１２）アミノ酸１２２～１２６、１３）アミノ酸１３４～１３６、１４）アミノ酸１４４～１５２、１５）アミノ酸１５９～１６７、１６）アミノ酸１７５～１７６、１７）アミノ酸１８５～１８６、１８）アミノ酸１９６～１９８、１９）アミノ酸２０５～２１１、２０）アミノ酸２１７～２２６、２１）アミノ酸２３２～２４１、２２）アミノ酸２５３～２５７、２３）アミノ酸２６４～２６５、２４）２６９～２７０、２５）アミノ酸２７４～２８３、２６）アミノ酸３００～３０３、２７）アミノ酸３９９～４１７（ここで、アミノ酸の付番は、図９Ｂに示されるような配列番号１１２（ヒトＩｇＧ４）に示されるアミノ酸配列の付番に基づく）。
【0260】
ＩｇＧ４重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＳＴＫＧＰ（配列番号１１３）、２）ＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡ（配列番号１１４）、３）ＦＰＥＰＶ（配列番号１１５）、４）ＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰ（配列番号１１６）、５）ＱＳＳＧＬＹ（配列番号１１７）、６）ＶＴＶ、７）ＴＫＴ、８）ＨＫＰ、９）ＤＫ、１０）ＹＧ、１１）ＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳ（配列番号１１８）、１２）ＦＰＰＫＰ（配列番号１１９）、１３）ＲＴＰ、１４）ＤＶＳＱＥＤＰＥＶ（配列番号１２０）、１５）ＤＧＶＥＶＨＮＡＫ（配列番号１２１）、１６）ＦＮ、１７）ＶＬ、１８）ＧＫＥ、１９）ＮＫＧＬＰＳＳ（配列番号１２２）、２０）ＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰ（配列番号１２３）、２１）ＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮ（配列番号１２４）、２２）ＹＰＳＤＩ（配列番号１２５）、２３）ＮＧ、２４）ＮＮ、２５）ＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳ（配列番号１２６）、２６）ＧＮＶＦ（配列番号１２７）、及び２７）ＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号１２８）が挙げられる。
【0261】
いくつかの事例において、標的免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。ある特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇＡ重鎖定常領域の領域内にあるか、又はそれに隣接している：１）アミノ酸１～１３、２）アミノ酸１７～２１、３）アミノ酸２８～３２、４）アミノ酸４４～５４、５）アミノ酸６０～６６、６）アミノ酸７３～７６、７）アミノ酸８０～８２、８）アミノ酸９０～９１、９）アミノ酸１２３～１２５、１０）アミノ酸１３０～１３３、１１）アミノ酸１３８～１４２、１２）アミノ酸１５１～１５８、１３）アミノ酸１６５～１７４、１４）アミノ酸１８１～１８４、１５）アミノ酸１９２～１９５、１６）アミノ酸１９９、１７）アミノ酸２０９～２１０、１８）アミノ酸２２２～２４５、１９）アミノ酸２５２～２５６、２０）アミノ酸２６６～２７６、２１）アミノ酸２９３～２９４、２２）アミノ酸３０１～３０４、２３）アミノ酸３１７～３２０、２４）アミノ酸３２９～３５３（ここで、アミノ酸の付番は、図９Ｂに示されるような配列番号１２９（ヒトＩｇＡ）に示されるアミノ酸配列の付番に基づく）。
【0262】
ＩｇＡ重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＡＳＰＴＳＰＫＶＦＰＬＳＬ（配列番号１３０）、２）ＱＰＤＧＮ（配列番号１３１）、３）ＶＱＧＦＦＰＱＥＰＬ（配列番号１３２）、４）ＳＧＱＧＶＴＡＲＮＦＰ（配列番号１３３）、５）ＳＧＤＬＹＴＴ（配列番号１３４）、６）ＰＡＴＱ（配列番号１３５）、７）ＧＫＳ、８）ＹＴ、９）ＣＨＰ、１０）ＨＲＰＡ（配列番号１３６）、１１）ＬＬＧＳＥ（配列番号１３７）、１２）ＧＬＲＤＡＳＧＶ（配列番号１３８）、１３）ＳＳＧＫＳＡＶＱＧＰ（配列番号１３９）、１４）ＧＣＹＳ（配列番号１４０）、１５）ＣＡＥＰ（配列番号１４１）、１６）ＰＥ、１７）ＳＧＮＴＦＲＰＥＶＨＬＬＰＰＰＳＥＥＬＡＬＮＥＬ（配列番号１４２）、１８）ＡＲＧＦＳ（配列番号１４３）、１９）ＱＧＳＱＥＬＰＲＥＫＹ（配列番号１４４）、２０）ＡＶ、２１）ＡＡＥＤ（配列番号１４５）、２２）ＨＥＡＬ（配列番号１４６）、及び２３）ＩＤＲＬＡＧＫＰＴＨＶＮＶＳＶＶＭＡＥＶＤＧＴＣＹ（配列番号１４７）が挙げられる。
【0263】
スルファターゼモチーフは、Ｉｇ重鎖のそのような修飾部位のこれらのアミノ酸配列のうちの１つ以上の内部に、又はそれに隣接して提供され得る。例えば、Ｉｇ重鎖ポリペプチドアミノ酸配列は、これらのアミノ酸配列のうちの１つ以上で修飾され（例えば、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換を含む場合）、これらの修飾部位に隣接してＮ末端に、及び／又は隣接してＣ末端にスルファターゼモチーフを提供することができる。代替的に、又はこれに加えて、Ｉｇ重鎖ポリペプチドアミノ酸配列は、これらのアミノ酸配列のうちの１つ以上で修飾され（例えば、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換を含む場合）、Ｉｇ重鎖修飾部位の任意の２つの残基間にスルファターゼモチーフを提供することができる。いくつかの実施形態において、Ｉｇ重鎖ポリペプチドアミノ酸配列は、２つのモチーフを含むように修飾されてもよく、これらは互いに隣接していてもよく、又は１個、２個、３個、４個以上（例えば、約１～約２５個、約２５～約５０個、若しくは約５０～約１００個以上）のアミノ酸によって分離されてもよい。代替的に、又はこれに加えて、天然アミノ酸配列がスルファターゼモチーフ配列の１つ以上のアミノ酸残基を提供する場合、Ｉｇ重鎖ポリペプチドアミノ酸配列の修飾部位の選択されたアミノ酸残基は、修飾部位にスルファターゼモチーフを提供するように修飾され得る（例えば、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換を含む場合）。
【0264】
したがって、表面接近可能なループ領域のアミノ酸配列を修飾してスルファターゼモチーフを提供することができ、修飾は、挿入、欠失、及び／又は置換を含み得る。例えば、修飾がＣＨ１ドメイン中にある場合、表面接近可能なループ領域は、アミノ酸配列ＮＳＧＡＬＴＳＧ（配列番号１４８）を有していてもよく、アルデヒドタグ化配列は、例えば、ＮＳＧＡＬＣＴＰＳＲＧ（配列番号１４９）であってもよく、例えば、ＮＳＧＡＬＴＳＧ（配列番号１５０）配列の「ＴＳ」残基が、スルファターゼモチーフが配列ＬＣＴＰＳＲ（配列番号１５２）を有するように、「ＣＴＰＳＲ」（配列番号１５１）と置き換えられている。別の例として、修飾がＣＨ２ドメイン中にある場合、表面接近可能なループ領域は、アミノ酸配列ＮＫＡＬＰＡＰ（配列番号１５３）を有していてもよく、アルデヒドタグ化配列は、例えば、ＮＬＣＴＰＳＲＡＰ（配列番号１５４）であってもよく、例えば、ＮＫＡＬＰＡＰ（配列番号１５５）配列の「ＫＡＬ」残基が、スルファターゼモチーフが配列ＬＣＴＰＳＲ（配列番号１５７）を有するように、「ＬＣＴＰＳＲ」（配列番号１５６）と置き換えられている。別の例として、修飾がＣＨ２／ＣＨ３ドメイン中にある場合、表面接近可能なループ領域は、アミノ酸配列ＫＡＫＧＱＰＲ（配列番号１５８）を有していてもよく、アルデヒドタグ化配列は、例えば、ＫＡＫＧＬＣＴＰＳＲ（配列番号１５９）であってもよく、例えば、ＫＡＫＧＱＰＲ（配列番号１６０）配列の「ＧＱＰ」残基が、スルファターゼモチーフが配列ＬＣＴＰＳＲ（配列番号１６２）を有するように、「ＬＣＴＰＳ」（配列番号１６１）と置き換えられている。
【0265】
上に示されるように、単離されたアルデヒドタグ化抗ＴＡＣＳＴＤ２ Ｉｇポリペプチドは、上述のスルファターゼモチーフを含むように修飾された軽鎖定常領域アミノ酸配列を含んでもよく、スルファターゼモチーフは、Ｉｇポリペプチド軽鎖定常領域の表面接近可能なループ領域の中にあるか、又はそれに隣接している。
【0266】
いくつかの事例において、標的免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。ある特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇ軽鎖定常領域の領域内にあるか、又はそれに隣接している：１）アミノ酸１３０～１３５、２）アミノ酸１４１～１４３、３）アミノ酸１５０、４）アミノ酸１６２～１６６、５）アミノ酸１６３～１６６、６）アミノ酸１７３～１８０、７）アミノ酸１８６～１９４、８）アミノ酸２１１～２１２、９）アミノ酸２２０～２２５、１０）アミノ酸２３３～２３６（ここで、アミノ酸の付番は、図９Ｃに示されるようなヒトカッパ軽鎖のアミノ酸の付番に基づく）。いくつかの事例において、標的免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。ある特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するＩｇ軽鎖定常領域の領域内にあるか、又はそれに隣接している：１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１２～１４、３）アミノ酸２１、４）アミノ酸３３～３７、５）アミノ酸３４～３７、６）アミノ酸４４～５１、７）アミノ酸５７～６５、８）アミノ酸８３～８３、９）アミノ酸９１～９６、１０）アミノ酸１０４～１０７（ここで、アミノ酸の付番は、図９Ｃに示されるような配列番号１６３（ヒトカッパ軽鎖）に基づく）。
【0267】
Ｉｇ軽鎖（例えば、ヒトカッパ軽鎖）の例示的な表面アクセス可能ループ領域には、１）ＲＴＶＡＡＰ（配列番号１６４）、２）ＰＰＳ、３）Ｇｌｙ（例えば、図９Ｃに示されるヒトカッパ軽鎖配列の位置１５０にあるＧｌｙ）、４）ＹＰＲＥＡ（配列番号１６５）、５）ＰＲＥＡ（配列番号１６６）、６）ＤＮＡＬＱＳＧＮ（配列番号１６７）、７）ＴＥＱＤＳＫＤＳＴ（配列番号１６８）、８）ＨＫ、９）ＨＱＧＬＳＳ（配列番号１６９）、及び１０）ＲＧＥＣ（配列番号１７０）が挙げられる。
【0268】
Ｉｇラムダ軽鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、ＱＰＫＡＡＰ（配列番号１７１）、ＰＰＳ、ＮＫ、ＤＦＹＰＧＡＶ（配列番号１７２）、ＤＳＳＰＶＫＡＧ（配列番号１７３）、ＴＴＰ、ＳＮ、ＨＫＳ、ＥＧ、及びＡＰＴＥＣＳ（配列番号１７４）が挙げられる。
【0269】
いくつかの事例において、標的免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。ある特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、以下のうちの１つ以上に対応するラットＩｇ軽鎖定常領域の領域内にあるか、又はそれに隣接している：１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１２～１４、３）アミノ酸１２１～２２、４）アミノ酸３１～３７、５）アミノ酸４４～５１、６）アミノ酸５５～５７、７）アミノ酸６１～６２、８）アミノ酸８１～８３、９）アミノ酸９１～９２、１０）アミノ酸１０２～１０５（ここで、アミノ酸の付番は、図９Ｃに示されるような配列番号１７５に示されるラット軽鎖のアミノ酸の付番に基づく）。
【0270】
いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＴＡＣＳＴＤ２重鎖定常領域のＣＨ１領域に導入される。いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＴＡＣＳＴＤ２重鎖のＣ末端又はその付近（例えば、１～１０アミノ酸以内）に導入される。いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、軽鎖定常領域に導入される。
【0271】
いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＴＡＣＳＴＤ２重鎖定常領域のＣＨ１領域に、例えば、ＩｇＧ１重鎖アミノ酸配列のアミノ酸１２１～２１９内に導入される。例えば、いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、以下のアミノ酸配列に導入される。ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥ（配列番号１７６）。例えば、これらの実施形態のいくつかにおいて、アミノ酸配列ＧＡＬＴＳＧＶＨ（配列番号１７７）は、ＧＡＬＣＴＰＳＲＧＶＨ（配列番号１７８）へと修飾され、スルファターゼモチーフが、ＬＣＴＰＳＲ（配列番号１７９）である。
【0272】
いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＴＡＣＳＴＤ２重鎖のＣ末端又はその付近に導入され、例えば、スルファターゼモチーフは、抗ＴＡＣＳＴＤ２重鎖のＣ末端の１アミノ酸、２アミノ酸（ａａ）、３ａａ、４ａａ、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、又は１０ａａ内に導入される。１つの非限定的な例として、抗ＴＡＣＳＴＤ２重鎖のＣ末端リジン残基を、アミノ酸配列ＳＬＣＴＰＳＲＧＳ（配列番号１８０）と置き換えることができる。
【0273】
いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体の軽鎖の定常領域に導入される。１つの非限定的な例として、いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＴＡＣＳＴＤ２抗体の軽鎖の定常領域に導入され、スルファターゼモチーフが、ＫＶＤＮＡＬ（配列番号１８１）に対してＣ末端であり、かつ／又はＱＳＧＮＳＱ（配列番号１８２）に対してＮ末端である。例えば、いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、ＬＣＴＰＳＲ（配列番号１８３）であり、抗ＴＡＣＳＴＤ２軽鎖は、アミノ酸配列ＫＶＤＮＡＬＬＣＴＰＳＲＱＳＧＮＳＱ（配列番号１８４）を含む。
【0274】
ＭＵＣ－１抗体
上に示されるように、本発明の方法に従って、対象は、置換基Ｗ１として抗体を含むコンジュゲートを投与され得る。ある特定の実施形態において、本明細書に記載の方法のうち、対象は、ＭＵＣ１陽性細胞、例えば、がん性ＭＵＣ１陽性細胞又は自己反応性ＭＵＣ１陽性細胞によって示される障害を有する。本明細書に開示される方法のある特定の実施形態において、抗体Ｗ２は、抗Ｍｕｃ－１抗体であってもよく、抗Ｍｕｃ－１抗体のアミノ酸配列は、２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）残基を含むように修飾されている。本明細書で使用される場合、アミノ酸は、それらの標準的な名称、それらの標準的な３文字の略称、及び／又はそれらの標準的な１文字の略称、例えば、アラニン又はＡｌａ又はＡ、システイン又はＣｙｓ又はＣ、アスパラギン酸又はＡｓｐ又はＤ、グルタミン酸又はＧｌｕ又はＥ、フェニルアラニン又はＰｈｅ又はＦ、グリシン又はＧｌｙ又はＧ、ヒスチジン又はＨｉｓ又はＨ、イソロイシン又はＩｌｅ又はＩ、リジン又はＬｙｓ又はＫ、ロイシン又はＬｅｕ又はＬ、メチオニン又はＭｅｔ又はＭ、アスパラギン又はＡｓｎ又はＮ、プロリン又はＰｒｏ又はＰ、グルタミン又はＧｌｎ又はＱ、アルギニン又はＡｒｇ又はＲ、セリン又はＳｅｒ又はＳ、トレオニン又はＴｈｒ又はＴ、バリン又はＶａｌ又はＶ、トリプトファン又はＴｒｐ又はＷ、及びチロシン又はＴｙｒ又はＹにより称され得る。
上に示されるように、本発明の方法に従って、対象は、置換基Ｗ１として抗体を含むコンジュゲートを投与され得る。ある特定の実施形態において、本明細書に記載の方法のうち、対象は、ＭＵＣ１陽性細胞、例えば、がん性ＭＵＣ１陽性細胞又は自己反応性ＭＵＣ１陽性細胞によって示される障害を有する。本明細書に開示される方法のある特定の実施形態において、抗体Ｗ２は、抗Ｍｕｃ－１抗体であってもよく、抗Ｍｕｃ－１抗体のアミノ酸配列は、２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）残基を含むように修飾されている。本明細書で使用される場合、アミノ酸は、それらの標準的な名称、それらの標準的な３文字の略称、及び／又はそれらの標準的な１文字の略称、例えば、アラニン又はＡｌａ又はＡ、システイン又はＣｙｓ又はＣ、アスパラギン酸又はＡｓｐ又はＤ、グルタミン酸又はＧｌｕ又はＥ、フェニルアラニン又はＰｈｅ又はＦ、グリシン又はＧｌｙ又はＧ、ヒスチジン又はＨｉｓ又はＨ、イソロイシン又はＩｌｅ又はＩ、リジン又はＬｙｓ又はＫ、ロイシン又はＬｅｕ又はＬ、メチオニン又はＭｅｔ又はＭ、アスパラギン又はＡｓｎ又はＮ、プロリン又はＰｒｏ又はＰ、グルタミン又はＧｌｎ又はＱ、アルギニン又はＡｒｇ又はＲ、セリン又はＳｅｒ又はＳ、トレオニン又はＴｈｒ又はＴ、バリン又はＶａｌ又はＶ、トリプトファン又はＴｒｐ又はＷ、及びチロシン又はＴｙｒ又はＹにより称され得る。
【0275】
いくつかの実施形態によれば、本開示の抗体は、ＭＵＣ１に特異的に結合し、ＭＵＣ１に対する結合について、
以下の配列：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＴＶＫＩＳＣＫＶＳＧＹＴＦＴＤＨＴＭＨＷＩＫＱＲＰＧＫＧＬＥＷＭＧＹＦＹＰＲＤＤＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＬＴＡＤＫＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＬＲＹＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号９）を有するＶＨ鎖の重鎖ＣＤＲ１～重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ１～ＨＣＤＲ３）を含む可変重鎖（ＶＨ）鎖と、
以下の配列：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＹＧＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＡＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号７）、
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＧＳＳＮＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＹＲＳＴＫＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＲＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１）、又は
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＩＧＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＳＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号２）を有するＶＬ鎖の軽鎖ＣＤＲ１～軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３）を含む可変軽鎖（ＶＬ）鎖と、を含む、抗体と競合する。
以下の配列：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＴＶＫＩＳＣＫＶＳＧＹＴＦＴＤＨＴＭＨＷＩＫＱＲＰＧＫＧＬＥＷＭＧＹＦＹＰＲＤＤＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＬＴＡＤＫＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＬＲＹＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号９）を有するＶＨ鎖の重鎖ＣＤＲ１～重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ１～ＨＣＤＲ３）を含む可変重鎖（ＶＨ）鎖と、
以下の配列：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＹＧＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＡＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号７）、
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＧＳＳＮＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＹＲＳＴＫＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＲＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１）、又は
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＩＧＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＳＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号２）を有するＶＬ鎖の軽鎖ＣＤＲ１～軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３）を含む可変軽鎖（ＶＬ）鎖と、を含む、抗体と競合する。
【0276】
第１の抗体が、ＭＵＣ１に対する結合に関して第２の抗体と競合するかどうかを決定するための任意の好適なアプローチを使用してもよい。第１の抗体が、ＭＵＣ１に対する結合に関して第２の抗体「と競合する」かどうかは、当該技術分野で既知の競合結合アッセイを使用して容易に決定され得る。競合抗体は、例えば、抗体競合アッセイを介して特定され得る。例えば、第１の抗体の試料を、固体支持体に結合させることができる。次いで、そのような第１の抗体と競合し得ると疑われる第２の抗体の試料を添加する。この２つの抗体のうちの１つが標識される。標識された抗体及び標識されていない抗体が、ＭＵＣ１上の別個の異なる部位に結合する場合、標識された抗体は、疑われる競合抗体が存在するか否かにかかわらず、同じレベルまで結合する。しかしながら、相互作用の部位が同一であるか、又は重複している場合、標識されていない抗体が競合し、ＭＵＣ１に結合した標識された抗体の量が低下する。標識されていない抗体が過剰に存在する場合、標識された抗体は、もしあるとしても、結合することはほとんどない。
【0277】
本開示の目的のために、競合抗体は、ＭＵＣ１に対する抗体の結合を約５０％以上、約６０％以上、約７０％以上、約８０％以上、約８５％以上、約９０％以上、約９５％以上、又は約９９％以上低下させる抗体である。かかる競合アッセイを実施するための手順の詳細は、当該技術分野において周知である。そのようなアッセイは、精製された抗体を使用することによって定量的に行うことができる。標準曲線は、１つの抗体をそれ自体に対して滴定することによって確立され得、すなわち、同じ抗体が標識及び競合物の両方に使用される。標識されていない競合抗体が抗原に対する標識された抗体の結合を阻害する能力が、滴定され得る。その結果がプロットされ得、望ましい結合阻害度を達成するために必要な濃度が比較され得る。
【0278】
いくつかの実施形態によれば、本開示の抗体は、ＭＵＣ１に特異的に結合し、
以下の配列：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＴＶＫＩＳＣＫＶＳＧＹＴＦＴＤＨＴＭＨＷＩＫＱＲＰＧＫＧＬＥＷＭＧＹＦＹＰＲＤＤＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＬＴＡＤＫＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＬＲＹＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号９）を有するＶＨ鎖の重鎖ＣＤＲ１～重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ１～ＨＣＤＲ３）を含む可変重鎖（ＶＨ）鎖と、
以下の配列：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＹＧＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＡＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号７）、
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＧＳＳＮＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＹＲＳＴＫＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＲＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１）、又は
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＩＧＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＳＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号２）を有するＶＬ鎖の軽鎖ＣＤＲ１～軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３）を含む可変軽鎖（ＶＬ）鎖と、を含む。
以下の配列：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＴＶＫＩＳＣＫＶＳＧＹＴＦＴＤＨＴＭＨＷＩＫＱＲＰＧＫＧＬＥＷＭＧＹＦＹＰＲＤＤＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＬＴＡＤＫＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＬＲＹＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号９）を有するＶＨ鎖の重鎖ＣＤＲ１～重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ１～ＨＣＤＲ３）を含む可変重鎖（ＶＨ）鎖と、
以下の配列：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＹＧＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＡＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号７）、
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＧＳＳＮＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＹＲＳＴＫＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＲＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１）、又は
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＷＩＩＧＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＡＡＶＹＹＣＨＱＹＳＷＳＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号２）を有するＶＬ鎖の軽鎖ＣＤＲ１～軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３）を含む可変軽鎖（ＶＬ）鎖と、を含む。
【0279】
ＨＣＤＲ１～ＨＣＤＲ３及びＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３は、Ｃｈｏｔｈｉａ、Ｋａｂａｔ、又はＩＭＴ命名法によって定義されるとおりであり得る。列挙された命名法に従って定義される、本明細書に開示される抗ＭＵＣ１抗体のＨＣＤＲ１～ＨＣＤＲ３は、以下のとおりであってもよい。
【表5】
【0280】
本明細書に開示される抗ＭＵＣ１抗体のＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３は、表６～８に列挙される命名法に従って定義されるとおりであり得る。
【表6】
【表7】
【表8】
【0281】
ある特定の実施形態において、抗ＭＵＣ１抗体のＶＨ鎖は、本明細書に記載のＨＣＤＲ１～ＨＣＤＲ３を含み、抗ＭＵＣ１抗体のＶＬ鎖は、ＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３を含み、Ｋａｂａｔ定義に従って、
ＬＣＤＲ１は、アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＧ／ＳＳＳＹＬＹ（配列番号４５）を含み、
ＬＣＤＲ２は、アミノ酸配列Ｇ／ＲＴ／ＳＳ／ＴＮ／ＫＬＡＳ（配列番号４６）を含み、
ＬＣＤＲ３は、アミノ酸配列ＨＱＹＡ／Ｒ／ＳＷＳＰＰＴ（配列番号４７）を含む。
ＬＣＤＲ１は、アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＧ／ＳＳＳＹＬＹ（配列番号４５）を含み、
ＬＣＤＲ２は、アミノ酸配列Ｇ／ＲＴ／ＳＳ／ＴＮ／ＫＬＡＳ（配列番号４６）を含み、
ＬＣＤＲ３は、アミノ酸配列ＨＱＹＡ／Ｒ／ＳＷＳＰＰＴ（配列番号４７）を含む。
【0282】
ある特定の実施形態において、抗ＭＵＣ１抗体のＶＨ鎖は、本明細書に記載のＨＣＤＲ１～ＨＣＤＲ３を含み、配列番号９に記載のアミノ酸配列に対して８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態において、本開示の抗ＭＵＣ１抗体のＶＨ鎖と配列番号９との間の任意のアミノ酸の違いは、ＣＤＲの外側の領域、例えば、フレームワーク領域（ＦＲ）、例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／又はＦＲ４のうちの１つ以上の領域に限定され得る。
【0283】
ある特定の実施形態において、抗ＭＵＣ１抗体のＶＬ鎖は、表６において本明細書に記載のＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３を含み、配列番号７に記載のアミノ酸配列に対して８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【0284】
ある特定の実施形態において、抗ＭＵＣ１抗体のＶＬ鎖は、表７において本明細書に記載のＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３を含み、配列番号１に記載のアミノ酸配列に対して８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【0285】
ある特定の実施形態において、抗ＭＵＣ１抗体のＶＬ鎖は、表８において本明細書に記載のＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３を含み、配列番号２に記載のアミノ酸配列に対して８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【0286】
ある特定の実施形態において、本開示の抗ＭＵＣ１抗体のＶＬ鎖と配列番号７、１、及び２との間の任意のアミノ酸の違いは、ＣＤＲの外側の領域、例えば、フレームワーク領域（ＦＲ）、例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及び／又はＦＲ４のうちの１つ以上の領域に限定され得る。
【0287】
ある特定の実施形態において、本開示の抗ＭＵＣ１抗体は、ａ）配列番号９に記載されているアミノ酸配列を有するＶＨ領域と、配列番号７、１、又は２に記載されているアミノ酸配列を有するＶＬ領域と、を含む重鎖を含み得る。
【0288】
本開示の抗ＭＵＣ１抗体は、がん性組織に結合してもよく、正常組織に対する結合を示し得ない（例えば、免疫組織化学によって測定される場合の有意ではない結合、又は免疫組織化学によって検出することができない結合）。例えば、本明細書に記載の抗ＭＵＣ１抗体は、がん性細胞を有するヒトの胃、乳房、及び／又は肺組織に結合し得るが、がん性細胞を有していないヒトの胃、乳房、及び／又は肺組織に対して検出可能な結合を示さない。
【0289】
ある特定の実施形態において、本開示の抗ＭＵＣ１抗体のＶＨ領域は、以下の核酸配列：
ＧＡＧＧＴＣＣＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＣＴＧＧＧＧＣＴＧＡＧＧＴＧＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＧＧＣＴＡＣＡＧＴＧＡＡＡＡＴＣＴＣＣＴＧＣＡＡＧＧＴＴＴＣＴＧＧＡＴＡＣＡＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＣＣＡＴＡＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＡＴＣＡＡＡＣＡＧＣＧＡＣＣＴＧＧＡＡＡＡＧＧＧＣＴＴＧＡＧＴＧＧＡＴＧＧＧＡＴＡＣＴＴＣＴＡＣＣＣＴＡＧＡＧＡＴＧＡＴＴＣＣＡＣＡＡＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＧＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＧＣＡＧＡＧＴＣＡＣＣＣＴＴＡＣＣＧＣＧＧＡＣＡＡＡＴＣＴＡＣＡＧＡＣＡＣＡＧＣＣＴＡＣＡＴＧＧＡＧＣＴＧＡＧＣＡＧＣＣＴＧＡＧＡＴＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＧＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＧＣＧＴＧＧＴＣＴＴＣＧＡＴＡＣＧＣＴＣＴＴＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＡＡＣＣＣＴＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡ（配列番号２３）に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は１００％の配列同一性を有する核酸によってコードされる。
ＧＡＧＧＴＣＣＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＣＴＧＧＧＧＣＴＧＡＧＧＴＧＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＧＧＣＴＡＣＡＧＴＧＡＡＡＡＴＣＴＣＣＴＧＣＡＡＧＧＴＴＴＣＴＧＧＡＴＡＣＡＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＣＣＡＴＡＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＡＴＣＡＡＡＣＡＧＣＧＡＣＣＴＧＧＡＡＡＡＧＧＧＣＴＴＧＡＧＴＧＧＡＴＧＧＧＡＴＡＣＴＴＣＴＡＣＣＣＴＡＧＡＧＡＴＧＡＴＴＣＣＡＣＡＡＡＴＴＡＣＡＡＣＧＡＧＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＧＣＡＧＡＧＴＣＡＣＣＣＴＴＡＣＣＧＣＧＧＡＣＡＡＡＴＣＴＡＣＡＧＡＣＡＣＡＧＣＣＴＡＣＡＴＧＧＡＧＣＴＧＡＧＣＡＧＣＣＴＧＡＧＡＴＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＧＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＧＣＧＴＧＧＴＣＴＴＣＧＡＴＡＣＧＣＴＣＴＴＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＡＡＣＣＣＴＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡ（配列番号２３）に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は１００％の配列同一性を有する核酸によってコードされる。
【0290】
ある特定の実施形態において、本開示の抗ＭＵＣ１抗体のＶＬ領域は、以下の核酸配列：
ＧＡＡＡＴＴＧＴＧＴＴＧＡＣＡＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＴＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＧＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＴＣＡＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＧＣＴＡＣＴＴＡＴＡＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＴＧＧＡＴＣＴＡＴＧＧＴＡＣＣＴＣＣＡＡＣＣＴＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＧＴＣＣＣＡＧＣＡＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＣＴＡＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＴＣＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＣＣＡＡＴＡＣＧＣＣＴＧＧＴＣＣＣＣＧＣＣＧＡＣＧＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＡＧＴＴＧＧＡＡＡＴＣＡＡＡ（配列番号４２）、
ＧＡＡＡＴＴＧＴＧＴＴＧＡＣＡＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＴＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＧＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＴＣＡＡＧＴＧＴＴＧＧＣＡＧＣＡＧＣＡＡＣＴＴＡＴＡＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＴＧＧＡＴＣＴＡＴＡＧＧＴＣＣＡＣＣＡＡＡＣＴＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＧＴＣＣＣＡＧＣＡＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＣＴＡＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＴＣＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＣＣＡＡＴＡＣＡＧＡＴＧＧＴＣＣＣＣＧＣＣＧＡＣＧＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＡＧＴＴＧＧＡＡＡＴＣＡＡＡ（配列番号４３）、又は
ＧＡＡＡＴＴＧＴＧＴＴＧＡＣＡＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＴＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＧＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＴＣＡＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＧＣＴＡＣＴＴＡＴＡＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＴＧＧＡＴＣＡＴＴＧＧＴＡＣＣＴＣＣＡＡＣＣＴＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＧＴＣＣＣＡＧＣＡＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＣＴＡＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＴＣＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＣＣＡＡＴＡＣＴＣＣＴＧＧＴＣＣＣＣＧＣＣＧＡＣＧＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＡＧＴＴＧＧＡＡＡＴＣＡＡＡ（配列番号４４）に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は１００％の配列同一性を有する核酸によってコードされる。
ＧＡＡＡＴＴＧＴＧＴＴＧＡＣＡＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＴＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＧＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＴＣＡＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＧＣＴＡＣＴＴＡＴＡＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＴＧＧＡＴＣＴＡＴＧＧＴＡＣＣＴＣＣＡＡＣＣＴＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＧＴＣＣＣＡＧＣＡＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＣＴＡＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＴＣＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＣＣＡＡＴＡＣＧＣＣＴＧＧＴＣＣＣＣＧＣＣＧＡＣＧＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＡＧＴＴＧＧＡＡＡＴＣＡＡＡ（配列番号４２）、
ＧＡＡＡＴＴＧＴＧＴＴＧＡＣＡＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＴＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＧＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＴＣＡＡＧＴＧＴＴＧＧＣＡＧＣＡＧＣＡＡＣＴＴＡＴＡＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＴＧＧＡＴＣＴＡＴＡＧＧＴＣＣＡＣＣＡＡＡＣＴＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＧＴＣＣＣＡＧＣＡＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＣＴＡＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＴＣＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＣＣＡＡＴＡＣＡＧＡＴＧＧＴＣＣＣＣＧＣＣＧＡＣＧＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＡＧＴＴＧＧＡＡＡＴＣＡＡＡ（配列番号４３）、又は
ＧＡＡＡＴＴＧＴＧＴＴＧＡＣＡＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＴＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＧＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＴＣＡＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＧＣＴＡＣＴＴＡＴＡＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＴＧＧＡＴＣＡＴＴＧＧＴＡＣＣＴＣＣＡＡＣＣＴＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＧＴＣＣＣＡＧＣＡＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＣＴＡＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＴＣＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＣＣＡＡＴＡＣＴＣＣＴＧＧＴＣＣＣＣＧＣＣＧＡＣＧＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＡＧＴＴＧＧＡＡＡＴＣＡＡＡ（配列番号４４）に対して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は１００％の配列同一性を有する核酸によってコードされる。
【0291】
本発明のある特定の態様において、本抗体は、ＭＵＣ１ポリペプチドに特異的に結合し、エピトープは、以下の配列番号２４に記載のアミノ酸配列を含むヒトＭＵＣ１抗原内にアミノ酸残基を含む。
ＭＴＰＧＴＱＳＰＦＦＬＬＬＬＬＴＶＬＴＶＶＴＧＳＧＨＡＳＳＴＰＧＧＥＫＥＴＳＡＴＱＲＳＳＶＰＳＳＴＥＫＮＡＶＳＭＴＳＳＶＬＳＳＨＳＰＧＳＧＳＳＴＴＱＧＱＤＶＴＬＡＰＡＴＥＰＡＳＧＳＡＡＴＷＧＱＤＶＴＳＶＰＶＴＲＰＡＬＧＳＴＴＰＰＡＨＤＶＴＳＡＰＤＮＫＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＮＲＰＡＬＧＳＴＡＰＰＶＨＮＶＴＳＡＳＧＳＡＳＧＳＡＳＴＬＶＨＮＧＴＳＡＲＡＴＴＴＰＡＳＫＳＴＰＦＳＩＰＳＨＨＳＤＴＰＴＴＬＡＳＨＳＴＫＴＤＡＳＳＴＨＨＳＳＶＰＰＬＴＳＳＮＨＳＴＳＰＱＬＳＴＧＶＳＦＦＦＬＳＦＨＩＳＮＬＱＦＮＳＳＬＥＤＰＳＴＤＹＹＱＥＬＱＲＤＩＳＥＭＦＬＱＩＹＫＱＧＧＦＬＧＬＳＮＩＫＦＲＰＧＳＶＶＶＱＬＴＬＡＦＲＥＧＴＩＮＶＨＤＶＥＴＱＦＮＱＹＫＴＥＡＡＳＲＹＮＬＴＩＳＤＶＳＶＳＤＶＰＦＰＦＳＡＱＳＧＡＧＶＰＧＷＧＩＡＬＬＶＬＶＣＶＬＶＡＬＡＩＶＹＬＩＡＬＡＶＣＱＣＲＲＫＮＹＧＱＬＤＩＦＰＡＲＤＴＹＨＰＭＳＥＹＰＴＹＨＴＨＧＲＹＶＰＰＳＳＴＤＲＳＰＹＥＫＶＳＡＧＮＧＧＳＳＬＳＹＴＮＰＡＶＡＡＴＳＡＮＬ（配列番号２４）。
ＭＴＰＧＴＱＳＰＦＦＬＬＬＬＬＴＶＬＴＶＶＴＧＳＧＨＡＳＳＴＰＧＧＥＫＥＴＳＡＴＱＲＳＳＶＰＳＳＴＥＫＮＡＶＳＭＴＳＳＶＬＳＳＨＳＰＧＳＧＳＳＴＴＱＧＱＤＶＴＬＡＰＡＴＥＰＡＳＧＳＡＡＴＷＧＱＤＶＴＳＶＰＶＴＲＰＡＬＧＳＴＴＰＰＡＨＤＶＴＳＡＰＤＮＫＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＴＲＰＡＰＧＳＴＡＰＰＡＨＧＶＴＳＡＰＤＮＲＰＡＬＧＳＴＡＰＰＶＨＮＶＴＳＡＳＧＳＡＳＧＳＡＳＴＬＶＨＮＧＴＳＡＲＡＴＴＴＰＡＳＫＳＴＰＦＳＩＰＳＨＨＳＤＴＰＴＴＬＡＳＨＳＴＫＴＤＡＳＳＴＨＨＳＳＶＰＰＬＴＳＳＮＨＳＴＳＰＱＬＳＴＧＶＳＦＦＦＬＳＦＨＩＳＮＬＱＦＮＳＳＬＥＤＰＳＴＤＹＹＱＥＬＱＲＤＩＳＥＭＦＬＱＩＹＫＱＧＧＦＬＧＬＳＮＩＫＦＲＰＧＳＶＶＶＱＬＴＬＡＦＲＥＧＴＩＮＶＨＤＶＥＴＱＦＮＱＹＫＴＥＡＡＳＲＹＮＬＴＩＳＤＶＳＶＳＤＶＰＦＰＦＳＡＱＳＧＡＧＶＰＧＷＧＩＡＬＬＶＬＶＣＶＬＶＡＬＡＩＶＹＬＩＡＬＡＶＣＱＣＲＲＫＮＹＧＱＬＤＩＦＰＡＲＤＴＹＨＰＭＳＥＹＰＴＹＨＴＨＧＲＹＶＰＰＳＳＴＤＲＳＰＹＥＫＶＳＡＧＮＧＧＳＳＬＳＹＴＮＰＡＶＡＡＴＳＡＮＬ（配列番号２４）。
【0292】
ある特定の実施形態において、本明細書に開示される抗ＭＵＣ１抗体によって結合されるＭＵＣ１エピトープは、グリコシル化される。ある特定の実施形態において、本明細書に開示される抗ＭＵＣ１抗体によって結合されるＭＵＣ１エピトープは、肺上皮腺がん細胞株及び肺上皮細胞によって発現されるＭＵＣ１上に存在する。
【0293】
他の実施形態において、主題の抗体は、ＭＵＣ１に対する高親和性結合を示す。例えば、主題の抗体は、少なくとも約１０－７Ｍ、少なくとも約１０－８Ｍ、少なくとも約１０－９Ｍ、少なくとも約１０－１０Ｍ、少なくとも約１０－１１Ｍ、又は少なくとも約１０－１２Ｍ、又は１０－１２Ｍより大きい親和性でＭＵＣ１に結合する。主題の抗体は、約１０－７Ｍ～約１０－８Ｍ、約１０－８Ｍ～約１０－９Ｍ、約１０－９Ｍ～約１０－１０Ｍ、約１０－１０Ｍ～約１０－１１Ｍ、若しくは約１０－１１Ｍ～約１０－１２Ｍ、又は１０－１２Ｍより大きい親和性で、ＭＵＣ１上に存在するエピトープに結合する。
【0294】
本開示の抗ＭＵＣ１抗体は、いくつかの場合において、その細胞表面上でＭＵＣ１を発現する細胞においてアポトーシスを誘導し得る。
【0295】
更に、「ＭＵＣ１抗原」又は「ＭＵＣ１ポリペプチド」は、配列番号２４に対して少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。
【0296】
いくつかの実施形態において、本開示の抗ＭＵＣ１抗体は、Ｆｃ領域に導入された１つ以上のアミノ酸置換を含み得る。いくつかの実施形態において、アミノ酸置換のうちの１つ以上は、Ｆｃ領域の位置２３９、２９８、３２６、３３０、及び３３２にあり得る。いくつかの実施形態において、本開示の抗ＭＵＣ１抗体は、Ｆｃ領域に導入された以下のアミノ酸置換のうちの１つ以上を含み得る。Ｉ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ／Ａ３３０Ｌ／Ｉ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ／Ｓ２９８Ａ／Ｉ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ／Ｋ３２６Ｔ／Ｉ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ／Ｓ２９８Ａ／Ｋ３２６Ｔ／Ｉ３３２Ｅ；又はＳ２３９Ｄ／Ａ３３０Ｌ／Ｉ３３２Ｅ／Ｄ３５６Ｅ／Ｌ３５８Ｍ。
【0297】
ネクチン－４抗体
本明細書に開示されるように、本発明の方法によれば、対象は、置換基Ｗ１として抗体を含む式（Ｉ）のコンジュゲートを投与され得る。ある特定の実施形態において、抗体は、抗ネクチン－４抗体であってもよく、抗ネクチン－４抗体のアミノ酸配列は、２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）残基を含むように修飾されている。
本明細書に開示されるように、本発明の方法によれば、対象は、置換基Ｗ１として抗体を含む式（Ｉ）のコンジュゲートを投与され得る。ある特定の実施形態において、抗体は、抗ネクチン－４抗体であってもよく、抗ネクチン－４抗体のアミノ酸配列は、２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）残基を含むように修飾されている。
【0298】
ネクチン－４に結合する抗体は、例えば、ＷＯ２０１８／２２６５７８（その開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているようなものであり得る。
【0299】
ＮＡＰＩ２Ｂ抗体
本明細書に開示されるように、本発明の方法によれば、対象は、置換基Ｗ１として抗体を含む式（Ｉ）のコンジュゲートを投与され得る。ある特定の実施形態において、抗体は、抗ネクチン－４抗体であってもよく、抗ネクチン－４抗体のアミノ酸配列は、２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）残基を含むように修飾されている。
本明細書に開示されるように、本発明の方法によれば、対象は、置換基Ｗ１として抗体を含む式（Ｉ）のコンジュゲートを投与され得る。ある特定の実施形態において、抗体は、抗ネクチン－４抗体であってもよく、抗ネクチン－４抗体のアミノ酸配列は、２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）残基を含むように修飾されている。
【0300】
ネクチン－４に結合する抗体は、例えば、ＷＯ２０１７／１６０７５４（その開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているようなものであり得る。
【0301】
ポリペプチドのコンジュゲーションのための薬物
本開示は、式（Ｉ）の薬物－ポリペプチドコンジュゲートを使用することによって毒性を低減する方法を提供する。薬物の例としては、がん化学療法剤などの小分子薬物が挙げられる。例えば、ポリペプチドが、腫瘍細胞に対する特異性を有する抗体（又はその断片）である場合、抗体は、本明細書に記載されるように、修飾アミノ酸を含むように修飾されてもよく、その後、微小管作用剤などのがん化学療法剤にコンジュゲート化され得る。ある特定の実施形態において、薬物は、メイタンシノイドなどの抗増殖活性を有する微小管作用剤である。ある特定の実施形態において、薬物は、以下の構造を有するメイタンシノイドであり、
式中、
は、メイタンシノイドと式（Ｉ）におけるリンカーとの間の結合点を示す。「結合点」は、
記号が、メイタンシノイドのＮと式（Ｉ）におけるリンカーとの間の結合を示すことを意味する。例えば、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートにおいて、薬物は、メイタンシノイド、例えば、上記構造のメイタンシノイドであり、式中、
は、メイタンシノイドとリンカーとの間の結合点を示す。いくつかの事例において、上に示されるメイタンシノイド構造は、デアシルメイタンシンと称され得る。
本開示は、式（Ｉ）の薬物－ポリペプチドコンジュゲートを使用することによって毒性を低減する方法を提供する。薬物の例としては、がん化学療法剤などの小分子薬物が挙げられる。例えば、ポリペプチドが、腫瘍細胞に対する特異性を有する抗体（又はその断片）である場合、抗体は、本明細書に記載されるように、修飾アミノ酸を含むように修飾されてもよく、その後、微小管作用剤などのがん化学療法剤にコンジュゲート化され得る。ある特定の実施形態において、薬物は、メイタンシノイドなどの抗増殖活性を有する微小管作用剤である。ある特定の実施形態において、薬物は、以下の構造を有するメイタンシノイドであり、
【化4】
【0302】
上述のように、ある特定の実施形態において、リンカーは、本明細書に記載の式（Ｉ）の抗体及び抗体－薬物コンジュゲートの薬物を一緒に（例えば、１つ以上の共有結合を介して）結合することができる。
【0303】
ある特定の実施形態において、式（Ｉ）の抗体－薬物コンジュゲートのリンカーは、以下の構造を有する。
【化5】
【0304】
上に示したリンカー構造のある特定の実施形態において、各ｆは、独立して、０又は１～１２の整数であり、ｎは、０又は１～３０の整数である。上に示したリンカー構造のある特定の実施形態において、各ｆは、独立して、０、１、２、３、４、５、又は６であり、ｎは、０、１、２、３、４、５、又は６である。上に示したリンカー構造のある特定の実施形態において、各ｆは、２であり、ｎは、１である。上に示したリンカー構造において、波線
は、リンカーとヒドラジニル－インドリルカップリング部位とリンカーとの間（左側の波線）、及びリンカーとメイタンシノイドとの間（右側の波線）のそれぞれの結合点を示す。
【0305】
製剤
本開示のコンジュゲートは、様々な異なる方式で製剤化され得る。概して、コンジュゲートが抗体－薬物コンジュゲートである場合、コンジュゲートは、抗体にコンジュゲートされる薬物、治療される条件、及び使用される投与経路と適合性のある様式で製剤化される。
本開示のコンジュゲートは、様々な異なる方式で製剤化され得る。概して、コンジュゲートが抗体－薬物コンジュゲートである場合、コンジュゲートは、抗体にコンジュゲートされる薬物、治療される条件、及び使用される投与経路と適合性のある様式で製剤化される。
【0306】
いくつかの実施形態において、本開示のコンジュゲートのうちのいずれかと、薬学的に許容される賦形剤と、を含む、薬学的組成物が提供される。
【0307】
コンジュゲート（例えば、抗体－薬物コンジュゲート）は、任意の好適な形態で、例えば、薬学的に許容される塩の形態で提供されてもよく、投与の任意の好適な経路、例えば、経口、局所、又は非経口投与のために製剤化され得る。コンジュゲートは、注射可能な液体として提供される場合（例えば、それらが静脈内又は直接的に組織に投与される実施形態の場合）、コンジュゲートは、すぐに使用可能な剤形として、又は薬学的に許容される担体及び賦形剤で構成される再構築可能な貯蔵安定性粉末若しくは液体として提供され得る。
【0308】
コンジュゲートを製剤化するための方法は、容易に利用可能なものから適合され得る。例えば、コンジュゲートは、治療有効量のコンジュゲートと薬学的に許容される担体（例えば、生理食塩水）とを含む薬学的組成物中に提供され得る。薬学的組成物は、任意選択的に、他の添加剤（例えば、緩衝剤、安定剤、保存剤など）を含み得る。いくつかの実施形態において、製剤は、哺乳動物への投与に好適であり、例えば、ヒトへの投与に好適なものである。
【実施例】
【0309】
以下の実施例は、当業者に、本発明の作製及び使用方法の完全な開示及び説明を提供するために提示されるものであり、発明者らが発明とみなす範囲を限定することを意図せず、また、以下の実験が行われる全て又は唯一の実験であることを表すことを意図するものではない。使用される数字（例えば、量、温度など）に対する正確性を確保する努力がなされているが、ある程度の実験誤差及び偏差が考慮されるべきである。別段示されない限り、部とは重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏であり、圧力は大気圧又は略大気圧である。「平均」とは、算術平均を意味する。標準的な略語、例えば、ｂｐ（塩基対（複数可））、ｋｂ（キロ塩基（複数可））、ｐｌ（ピコリットル（複数可））、ｓ又はｓｅｃ（秒（複数可））、ｍｉｎ（分（複数可））、ｈ又はｈｒ（時間（複数可））、ａａ（アミノ酸（複数可））、ｋｂ（キロ塩基（複数可））、ｂｐ（塩基対（複数可））、ｎｔ（ヌクレオチド（複数可））、ｉ．ｍ．（筋肉内（で））、ｉ．ｐ．（腹腔内（で））、ｓ．ｃ．（皮下（で））などが使用されてもよい。
【0310】
一般的な合成手順
一般的に知られている化学的合成スキーム及び開示されている化合物を合成するのに有用な条件を提供する多くの一般的な参考文献が利用可能である（例えば、Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｍａｒｃｈ，Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，２００１、又はＶｏｇｅｌ，Ａ Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｆｏｕｒｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｌｏｎｇｍａｎ，１９７８を参照されたい）。
一般的に知られている化学的合成スキーム及び開示されている化合物を合成するのに有用な条件を提供する多くの一般的な参考文献が利用可能である（例えば、Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｍａｒｃｈ，Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，２００１、又はＶｏｇｅｌ，Ａ Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｆｏｕｒｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｌｏｎｇｍａｎ，１９７８を参照されたい）。
【0311】
本明細書に記載の化合物は、ＨＰＬＣ、分取薄層クロマトグラフィー、フラッシュカラムクロマトグラフィー、及びイオン交換クロマトグラフィーなどのクロマトグラフィーを含む、当該技術分野で既知の任意の精製プロトコルによって精製され得る。順相及び逆相、並びにイオン性樹脂を含む任意の好適な固定相が使用され得る。ある特定の実施形態において、開示される化合物は、シリカゲル及び／又はアルミナクロマトグラフィーを介して精製される。例えば、Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｍｏｄｅｒｎ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｅｄ．Ｌ．Ｒ．Ｓｎｙｄｅｒ ａｎｄ Ｊ．Ｊ．Ｋｉｒｋｌａｎｄ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９７９、及びＴｈｉｎ Ｌａｙｅｒ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，編集Ｅ．Ｓｔａｈｌ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９６９を参照されたい。
【0312】
主題の化合物の調製のための任意のプロセス中に、関心のある分子のうちのいずれかの感受性基又は反応性基を保護することが必要となる場合があり、かつ／又は望ましい場合がある。このことは、例えば、Ｊ．Ｆ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，”Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９７３、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”Ｔｈｉｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９９９、“Ｔｈｅ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ”； Ｖｏｌｕｍｅ ３（編集者：Ｅ．Ｇｒｏｓｓ及びＪ．Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ），Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９８１、“Ｍｅｔｈｏｄｅｎ ｄｅｒ ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ Ｃｈｅｍｉｅ，”Ｈｏｕｂｅｎ－Ｗｅｙｌ，４ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．１５／ｌ，Ｇｅｏｒｇ Ｔｈｉｅｍｅ Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ １９７４、Ｈ．－Ｄ．Ｊａｋｕｂｋｅ ａｎｄ Ｈ．Ｊｅｓｃｈｅｉｔ，“Ａｍｉｎｏｓａｕｒｅｎ，Ｐｅｐｔｉｄｅ，Ｐｒｏｔｅｉｎｅ，”Ｖｅｒｌａｇ Ｃｈｅｍｉｅ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ Ｂｅａｃｈ，ａｎｄ Ｂａｓｅｌ １９８２、及び／又はＪｏｃｈｅｎ Ｌｅｈｍａｎｎ，“Ｃｈｅｍｉｅ ｄｅｒ Ｋｏｈｌｅｎｈｙｄｒａｔｅ：Ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ａｎｄ Ｄｅｒｉｖａｔｅ，”Ｇｅｏｒｇ Ｔｈｉｅｍｅ Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ １９７４などの標準的な研究に記載されているように、従来の保護基の手段により達成され得る。保護基は、当該技術分野で既知の方法を使用して、好都合なその後の段階で除去されてもよい。
【0313】
主題の化合物は、市販の出発物質、及び／又は従来の合成方法によって調製された出発物質を使用して、様々な異なる合成経路を介して合成され得る。本明細書に開示される化合物を合成するために使用され得る合成経路の様々な例が、以下のスキームで説明される。
【0314】
実施例１
ＲＥＤ－１０６バイオコンジュゲート化、精製、及びＨＰＬＣ分析
アルデヒドタグ化抗体（１５ｍｇ／ｍＬ）を、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、０．８５％ＤＭＡを含有する５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ５．５中、３７℃で７２時間、リンカー－ペイロード（８モル当量の薬物：抗体）にコンジュゲートした。いくつかの場合において、リンカー－ペイロード溶解度を改善するために、追加のＤＭＡを、最大１０％体積／体積まで添加した。コンジュゲート化の後、遊離薬物を、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ５．５中の希釈、及びＡｍｉｃｏｎ ０．５ｍＬ ３０ｋＤ ＭＷＣＯ遠心分離フィルタ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｓｉｇｍａ＃ＵＦＣ５０３０ＢＫ）を使用した濃縮を複数回使用することによって除去した。最終生成物のＤＡＲを決定するために、ＡＤＣを、分析ＨＩＣ又はＰＬＲＰによって試験した。ＨＩＣカラム（Ｔｏｓｏｈ＃１４９４７）を、移動相Ａ：１．５Ｍの硫酸アンモニウム、２５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ７．０、及び移動相Ｂ：２５％のイソプロパノール、１８．７５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ７．０によって試験した。ＰＬＲＰカラム（Ａｇｉｌｅｎｔ＃ＰＬ１９１２－１８０２）を、移動相Ａ：Ｈ２Ｏ中の０．１％のトリフルオロ酢酸、及び移動相Ｂ：ＣＨ３ＣＮ中の０．１％のトリフルオロ酢酸を用い、カラムを８０℃まで加熱して試験した。凝集を測定するために、３００ｍＭのＮａＣｌ、２５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ６．８、５％イソプロパノールの移動相を用いた分析サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ、Ｔｏｓｏｈ＃０８５４１）を使用して試料を分析した。
ＲＥＤ－１０６バイオコンジュゲート化、精製、及びＨＰＬＣ分析
アルデヒドタグ化抗体（１５ｍｇ／ｍＬ）を、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、０．８５％ＤＭＡを含有する５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ５．５中、３７℃で７２時間、リンカー－ペイロード（８モル当量の薬物：抗体）にコンジュゲートした。いくつかの場合において、リンカー－ペイロード溶解度を改善するために、追加のＤＭＡを、最大１０％体積／体積まで添加した。コンジュゲート化の後、遊離薬物を、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ５．５中の希釈、及びＡｍｉｃｏｎ ０．５ｍＬ ３０ｋＤ ＭＷＣＯ遠心分離フィルタ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｓｉｇｍａ＃ＵＦＣ５０３０ＢＫ）を使用した濃縮を複数回使用することによって除去した。最終生成物のＤＡＲを決定するために、ＡＤＣを、分析ＨＩＣ又はＰＬＲＰによって試験した。ＨＩＣカラム（Ｔｏｓｏｈ＃１４９４７）を、移動相Ａ：１．５Ｍの硫酸アンモニウム、２５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ７．０、及び移動相Ｂ：２５％のイソプロパノール、１８．７５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ７．０によって試験した。ＰＬＲＰカラム（Ａｇｉｌｅｎｔ＃ＰＬ１９１２－１８０２）を、移動相Ａ：Ｈ２Ｏ中の０．１％のトリフルオロ酢酸、及び移動相Ｂ：ＣＨ３ＣＮ中の０．１％のトリフルオロ酢酸を用い、カラムを８０℃まで加熱して試験した。凝集を測定するために、３００ｍＭのＮａＣｌ、２５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ６．８、５％イソプロパノールの移動相を用いた分析サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ、Ｔｏｓｏｈ＃０８５４１）を使用して試料を分析した。
【0315】
非タグ化（野生型）抗体のマレイミドコンジュゲーション
抗体（５ｍｇ／ｍＬ）を、ＰＢＳ（ｐＨ８．０）、１ｍＭ ＤＴＰＡ中で、３７℃で９０分間、２．５モル当量のＴＣＥＰを使用して還元した。ＴＣＥＰを除去し、タンジェンシャルフロー濾過を使用して、タンパク質をＰＢＳ（ｐＨ７．４）、１ｍＭ ＤＴＰＡに交換した。還元された抗体（３ｍｇ／ｍＬ）を、１０モル当量のマレイミド－ｖａｌｃｉｔ－ＭＭＡＥとともに、氷上で６０分間コンジュゲート化した。遊離薬物を除去し、タンジェンシャルフロー濾過を使用して、最終的なＡＤＣをＰＢＳ（ｐＨ７．４）に交換した。
抗体（５ｍｇ／ｍＬ）を、ＰＢＳ（ｐＨ８．０）、１ｍＭ ＤＴＰＡ中で、３７℃で９０分間、２．５モル当量のＴＣＥＰを使用して還元した。ＴＣＥＰを除去し、タンジェンシャルフロー濾過を使用して、タンパク質をＰＢＳ（ｐＨ７．４）、１ｍＭ ＤＴＰＡに交換した。還元された抗体（３ｍｇ／ｍＬ）を、１０モル当量のマレイミド－ｖａｌｃｉｔ－ＭＭＡＥとともに、氷上で６０分間コンジュゲート化した。遊離薬物を除去し、タンジェンシャルフロー濾過を使用して、最終的なＡＤＣをＰＢＳ（ｐＨ７．４）に交換した。
【0316】
インビトロ細胞傷害性アッセイ
－１日目に、細胞株を、１００μＬの成長培地中、４×１０３細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ＃３６０３）にプレーティングした。０日目に、試験試料の段階希釈を、６×最終濃度の成長培地中で実施し、２０μＬを細胞に添加した。５％ＣＯ２、３７℃で５日間インキュベートした後、製造者の推奨に従って、Ｐｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ Ｇｌｏ（登録商標）を使用して、生存率を測定した。
－１日目に、細胞株を、１００μＬの成長培地中、４×１０３細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ＃３６０３）にプレーティングした。０日目に、試験試料の段階希釈を、６×最終濃度の成長培地中で実施し、２０μＬを細胞に添加した。５％ＣＯ２、３７℃で５日間インキュベートした後、製造者の推奨に従って、Ｐｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ Ｇｌｏ（登録商標）を使用して、生存率を測定した。
【0317】
非ＧＬＰラット毒性試験
雄Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラット（試験開始時に８～９週齢、５匹／群）に、ビヒクル単独又はラット交差反応性抗体エンホルツマブの可変領域を保有する抗体を使用して作製されたネクチン－４コンジュゲートのいずれかを静脈内投与した。試験したＡＤＣは、ネクチン－４ベドチン（１０ｍｇ／ｋｇで投与）、及びネクチン－４ ＣＨ１／ＣＴ ＲＥＤ－１０６（１０又は２０ｍｇ／ｋｇのいずれかで投与）であった。投与は、合計で４回の投与（１日目、８日目、１５日目、及び２２日目）にわたって毎週行われた。動物を、最終投与後７日間にわたって観察した。体重を週に４回記録した。血液を、５、１２、１９、及び２６日目の臨床病理、並びに投与後８時間、及び４及び７日目の毒物動態分析のために、全ての動物から収集した（全ての用量について）。臨床観察は毎日行った。臨床観察スコアリングシステムのスケールは、０（正常）～３（重度）の範囲であり、表２に示される。
雄Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラット（試験開始時に８～９週齢、５匹／群）に、ビヒクル単独又はラット交差反応性抗体エンホルツマブの可変領域を保有する抗体を使用して作製されたネクチン－４コンジュゲートのいずれかを静脈内投与した。試験したＡＤＣは、ネクチン－４ベドチン（１０ｍｇ／ｋｇで投与）、及びネクチン－４ ＣＨ１／ＣＴ ＲＥＤ－１０６（１０又は２０ｍｇ／ｋｇのいずれかで投与）であった。投与は、合計で４回の投与（１日目、８日目、１５日目、及び２２日目）にわたって毎週行われた。動物を、最終投与後７日間にわたって観察した。体重を週に４回記録した。血液を、５、１２、１９、及び２６日目の臨床病理、並びに投与後８時間、及び４及び７日目の毒物動態分析のために、全ての動物から収集した（全ての用量について）。臨床観察は毎日行った。臨床観察スコアリングシステムのスケールは、０（正常）～３（重度）の範囲であり、表２に示される。
【0318】
異種移植片試験
方法：雌のＳＣＩＤ Ｂｅｉｇｅマウス（８匹／群）に、ＰＢＳ中５００万個のＮＣＩ－Ｈ２９２細胞を皮下接種した。腫瘍が平均１２１ｍｍ３に達したときに治療を開始した（１日目）。治療のために、動物に、ビヒクル単独、ＣＡＴ－１０－１０６、Ｔｒｏｄｅｌｖｙ、又はＤＳ－１０６２を静脈内投与した。投与スケジュールは、Ｔｒｏｄｅｌｖｙ及びＤＳ－１０６２臨床投与スケジュールを反映するように設計された。ＡＤＣを、０日目、７日目、２１日目、及び２８日目に投与し（Ｔｒｏｄｅｌｖｙ及びいくつかのＣＡＴ－１０－１０６群）、又は０日目及び２１日目に投与した（ＤＳ－１０６２及び１つのＣＡＴ－１０－１０６群）。動物を、体重及び腫瘍サイズについて週に２回モニタリングした。腫瘍が２０００ｍｍ３に達したとき、又は体重減少が１５％を超えたとき、動物を安楽死させた。ＮＣＩ－Ｈ２９２は、マウスにおいて悪液質を誘導するため、制御されていない、又は上手く制御されていない腫瘍成長を有する動物は、体重減少を示した。
方法：雌のＳＣＩＤ Ｂｅｉｇｅマウス（８匹／群）に、ＰＢＳ中５００万個のＮＣＩ－Ｈ２９２細胞を皮下接種した。腫瘍が平均１２１ｍｍ３に達したときに治療を開始した（１日目）。治療のために、動物に、ビヒクル単独、ＣＡＴ－１０－１０６、Ｔｒｏｄｅｌｖｙ、又はＤＳ－１０６２を静脈内投与した。投与スケジュールは、Ｔｒｏｄｅｌｖｙ及びＤＳ－１０６２臨床投与スケジュールを反映するように設計された。ＡＤＣを、０日目、７日目、２１日目、及び２８日目に投与し（Ｔｒｏｄｅｌｖｙ及びいくつかのＣＡＴ－１０－１０６群）、又は０日目及び２１日目に投与した（ＤＳ－１０６２及び１つのＣＡＴ－１０－１０６群）。動物を、体重及び腫瘍サイズについて週に２回モニタリングした。腫瘍が２０００ｍｍ３に達したとき、又は体重減少が１５％を超えたとき、動物を安楽死させた。ＮＣＩ－Ｈ２９２は、マウスにおいて悪液質を誘導するため、制御されていない、又は上手く制御されていない腫瘍成長を有する動物は、体重減少を示した。
【0319】
非ヒト霊長類毒性試験（非ＧＬＰ）
方法：雌カニクイザルに、１、８、２２、及び２９日目に、１．５、３、又は５ｍｇ／ｋｇのＣＡＴ－１０－１０６を４回投与し、続いて１４日間の観察期間を与えた（表９）。臨床観察は毎日行い、体重は、投与前に２回、次いで週に１回測定した。投与部位の皮膚観察は、投与前及び投与日に１回行った。臨床病理（血液学、凝固、化学）を、投与前及び５日目、８日目（投与前）、１２日目、１８日目、２２日目（投与前）、２６日目、２９日目、及び３２日目に２回、並びに回復動物について４３日目（回復１２日目）に評価した。投与前、３２日目、及び回復動物について４３日目（回復１２日目）に、尿分析を１回行った。
方法：雌カニクイザルに、１、８、２２、及び２９日目に、１．５、３、又は５ｍｇ／ｋｇのＣＡＴ－１０－１０６を４回投与し、続いて１４日間の観察期間を与えた（表９）。臨床観察は毎日行い、体重は、投与前に２回、次いで週に１回測定した。投与部位の皮膚観察は、投与前及び投与日に１回行った。臨床病理（血液学、凝固、化学）を、投与前及び５日目、８日目（投与前）、１２日目、１８日目、２２日目（投与前）、２６日目、２９日目、及び３２日目に２回、並びに回復動物について４３日目（回復１２日目）に評価した。投与前、３２日目、及び回復動物について４３日目（回復１２日目）に、尿分析を１回行った。
【表9】
【0320】
毒物動態試料分析
方法：全抗体及び全ＡＤＣ濃度を、既に記載され、また、図に示されるように、ＥＬＩＳＡによって定量化した。全抗体について、コンジュゲートを抗ヒトＩｇＧ特異的抗体で捕捉し、ＨＲＰとコンジュゲートした抗ヒトＦｃ特異的抗体で検出した。全ＡＤＣについて、コンジュゲートを抗ヒトＦａｂ特異的抗体で捕捉し、マウス抗メイタンシン一次抗体、続いて、ＨＲＰとコンジュゲートした抗マウスＩｇＧサブクラス１特異的二次抗体で検出した。結合した二次抗体を、Ｕｌｔｒａ ＴＭＢ Ｏｎｅ－Ｓｔｅｐ ＥＬＩＳＡ基質（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）を使用して検出した。硫酸で反応をクエンチした後、ＳｏｆｔＭａｘ Ｐｒｏソフトウェアを備えたＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ｓｐｅｃｔｒａ Ｍａｘ Ｍ５プレートリーダーで、４５０ｎｍで吸光度を得ることによってシグナルを読み取った。データを、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ及びＭｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌソフトウェアを使用して分析した。
方法：全抗体及び全ＡＤＣ濃度を、既に記載され、また、図に示されるように、ＥＬＩＳＡによって定量化した。全抗体について、コンジュゲートを抗ヒトＩｇＧ特異的抗体で捕捉し、ＨＲＰとコンジュゲートした抗ヒトＦｃ特異的抗体で検出した。全ＡＤＣについて、コンジュゲートを抗ヒトＦａｂ特異的抗体で捕捉し、マウス抗メイタンシン一次抗体、続いて、ＨＲＰとコンジュゲートした抗マウスＩｇＧサブクラス１特異的二次抗体で検出した。結合した二次抗体を、Ｕｌｔｒａ ＴＭＢ Ｏｎｅ－Ｓｔｅｐ ＥＬＩＳＡ基質（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）を使用して検出した。硫酸で反応をクエンチした後、ＳｏｆｔＭａｘ Ｐｒｏソフトウェアを備えたＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ｓｐｅｃｔｒａ Ｍａｘ Ｍ５プレートリーダーで、４５０ｎｍで吸光度を得ることによってシグナルを読み取った。データを、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ及びＭｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌソフトウェアを使用して分析した。
【0321】
実施例２：抗ネクチン－４ ＡＤＣを試験するインビトロ細胞傷害性アッセイ
方法：遊離ペイロード（ＭＭＡＥ及びカンプトテシン）、並びにＭＭＡＥ、カンプトテシン、又はメイタンシンのいずれかを保有するネクチン－４ ＡＤＣを、ネクチン－４を発現する細胞株、ＮＣＩ－Ｈ１７８１に対するインビトロ細胞傷害性アッセイにおいて生成し、試験した（図１）。
方法：遊離ペイロード（ＭＭＡＥ及びカンプトテシン）、並びにＭＭＡＥ、カンプトテシン、又はメイタンシンのいずれかを保有するネクチン－４ ＡＤＣを、ネクチン－４を発現する細胞株、ＮＣＩ－Ｈ１７８１に対するインビトロ細胞傷害性アッセイにおいて生成し、試験した（図１）。
【0322】
結果：図１に示されるように、ＲＥＤ－１０６及びＭＭＡＥコンジュゲートのインビトロでの効力は、標的細胞株に対して類似していた。
【0323】
実施例３：ＲＥＤ－１０６を保有する抗ネクチン－４又はベドチンリンカーペイロードを保有する抗ネクチン－４を使用した、非ＧＬＰラット毒性試験及び毒物動態の比較試験
方法：ＲＥＤ－１０６又はベドチンリンカーペイロードのいずれかを保有するラット交差反応性ネクチン－４ ＡＤＣを調製し（図８Ａ～８Ｄに示されるＤＡＲ）、ラット毒性試験で試験した。
方法：ＲＥＤ－１０６又はベドチンリンカーペイロードのいずれかを保有するラット交差反応性ネクチン－４ ＡＤＣを調製し（図８Ａ～８Ｄに示されるＤＡＲ）、ラット毒性試験で試験した。
【0324】
結果：４回の用量で週に１０ｍｇ／ｋｇを投与されるネクチン－４ベドチンコンジュゲートの効果の以前の報告では、毛皮及び皮膚の毒性及び死亡率が示されていた。毛皮及び皮膚の毒性は、皮膚におけるネクチン－４標的抗原の発現に起因し、オンターゲット毒性であると考えられた。この試験では、以前に観察された効果を再現し、ベドチン投与群の１匹の動物を苦痛状態で安楽死させ、全ての動物が、毛皮及び皮膚で毒性の臨床的徴候を示した。対照的に、ＲＥＤ－１０６コンジュゲートの効果は欠如していたか、又ははるかに顕著性が少ないわけではなく、ベドチンコンジュゲートと比較して、２倍の投与レベルでも死亡率は存在せず、毛皮／皮膚の毒性の徴候は少なかった（図２）。
【0325】
更に、動物由来の血漿試料の毒物動態分析により、投与レベル及び曝露が確認され、ベドチンＡＤＣと比較して、ＲＥＤ－１０６コンジュゲートの改善された安定性を明示した（図３Ａ～３Ｄ）。
【0326】
実施例４：腫瘍関連カルシウムシグナルトランスデューサー２（ＴＡＣＳＴＤ２）ＲＥＤ－１０６ ＡＤＣ
Ａ．インビトロでの効力
様々な固形腫瘍の適応症を表すＴＡＣＳＴＤ２発現細胞株を、遊離メイタンシン及びＴＡＣＳＴＤ２ ＲＥＤ－１０６ ＡＤＣ（ＣＡＴ－１０－１０６としても知られる）で処理して（図４Ａ～４Ｄ）、インビトロでの効力を試験した。ＴＡＣＳＴＤ２ ＡＤＣは、試験した細胞株にわたって遊離ペイロードと同等の能力を有していた。
Ａ．インビトロでの効力
様々な固形腫瘍の適応症を表すＴＡＣＳＴＤ２発現細胞株を、遊離メイタンシン及びＴＡＣＳＴＤ２ ＲＥＤ－１０６ ＡＤＣ（ＣＡＴ－１０－１０６としても知られる）で処理して（図４Ａ～４Ｄ）、インビトロでの効力を試験した。ＴＡＣＳＴＤ２ ＡＤＣは、試験した細胞株にわたって遊離ペイロードと同等の能力を有していた。
【表10】
【0327】
Ｂ．インビボ有効性
ＴＡＣＳＴＤ２を発現する肺異種移植モデルＮＣＩ－Ｈ２９２を使用して、ＲＥＤ－１０６コンジュゲート（ＣＡＴ－１０－１０６）、Ｔｒｏｄｅｌｖｙ、及びＤＳ－１０６２を含むＴＡＣＳＴＤ２標的化ＡＤＣのインビボ有効性を試験した（図５）。ある範囲の用量及び投与スケジュールにわたって、ＣＡＴ－１０－１０６は、Ｔｒｏｄｅｌｖｙ及びＤＳ－１０６２と比較して、同等以上の効力を示した。
ＴＡＣＳＴＤ２を発現する肺異種移植モデルＮＣＩ－Ｈ２９２を使用して、ＲＥＤ－１０６コンジュゲート（ＣＡＴ－１０－１０６）、Ｔｒｏｄｅｌｖｙ、及びＤＳ－１０６２を含むＴＡＣＳＴＤ２標的化ＡＤＣのインビボ有効性を試験した（図５）。ある範囲の用量及び投与スケジュールにわたって、ＣＡＴ－１０－１０６は、Ｔｒｏｄｅｌｖｙ及びＤＳ－１０６２と比較して、同等以上の効力を示した。
【0328】
Ｃ．非ＧＬＰ非ヒト霊長類毒性試験
カニクイザル交差反応性ＴＡＣＳＴＤ２ ＲＥＤ－１０６ ＡＤＣ（ＣＡＴ－１０－１０６）を調製し（図６及び図７）、非ヒト霊長類毒性研究で試験した。２つの他のＴＡＣＳＴＤ２標的化ＡＤＣ（ＤＳ－１０６２及びＰＦ－０６６６４１７８）の前臨床効果及び臨床効果の以前の報告は、皮膚及び粘膜の毒性を指摘していた。皮膚及び粘膜の毒性は、それらの組織におけるＴＡＣＳＴＤ２標的抗原の発現に起因し、オンターゲット毒性であると考えられた。対照的に、この試験では、動物に５ｍｇ／ｋｇで繰り返し投与した場合でも（合計１０ｍｇ／ｋｇのＡＤＣ用量を２１日間にわたって投与した場合）、治療関連の所見はなかった。特に重要なのは、皮膚観察の欠如である（表１１）。
カニクイザル交差反応性ＴＡＣＳＴＤ２ ＲＥＤ－１０６ ＡＤＣ（ＣＡＴ－１０－１０６）を調製し（図６及び図７）、非ヒト霊長類毒性研究で試験した。２つの他のＴＡＣＳＴＤ２標的化ＡＤＣ（ＤＳ－１０６２及びＰＦ－０６６６４１７８）の前臨床効果及び臨床効果の以前の報告は、皮膚及び粘膜の毒性を指摘していた。皮膚及び粘膜の毒性は、それらの組織におけるＴＡＣＳＴＤ２標的抗原の発現に起因し、オンターゲット毒性であると考えられた。対照的に、この試験では、動物に５ｍｇ／ｋｇで繰り返し投与した場合でも（合計１０ｍｇ／ｋｇのＡＤＣ用量を２１日間にわたって投与した場合）、治療関連の所見はなかった。特に重要なのは、皮膚観察の欠如である（表１１）。
【表11-1】
【図1】
【図2】
【図3A】
【図3B】
【図3C】
【図3D】
【図4A】
【図4B】
【図4C】
【図4D】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8A】
【図8B】
【図8C】
【図8D】
【図9A】
【図9B-1】
【図9B-2】
【図9B-3】
【図9C】
【配列表】
【国際調査報告】