(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-09-05
(54)【発明の名称】ナフチリジン誘導体及びその中間体を合成するプロセス
(51)【国際特許分類】
C07D 491/147 20060101AFI20240829BHJP
【ＦＩ】
C07D491/147
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024513032
(86)(22)【出願日】2022-08-30
(85)【翻訳文提出日】2024-04-17
(86)【国際出願番号】 US2022075648
(87)【国際公開番号】W WO2023034786
(87)【国際公開日】2023-03-09
(31)【優先権主張番号】63/238,337
(32)【優先日】2021-08-30
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/354,464
(32)【優先日】2022-06-22
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】500049716
【氏名又は名称】アムジエン・インコーポレーテツド
(74)【代理人】
【識別番号】110001173
【氏名又は名称】弁理士法人川口國際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】アルナチャラムピライ，アティムーラム
(72)【発明者】
【氏名】クロケット，リチャード・デイビッド
(72)【発明者】
【氏名】ファレル，ロバート・ピー
(72)【発明者】
【氏名】ジャッド，テッド・チャールズ
(72)【発明者】
【氏名】オルティス，アドリアン
(72)【発明者】
【氏名】ロビンソン，ジョアンナ
(72)【発明者】
【氏名】ウェイ，キャロリン・エス
(72)【発明者】
【氏名】ヤマモト，クミコ
(72)【発明者】
【氏名】ファガー，ダイアナ・キャサリン
(72)【発明者】
【氏名】ジョンソン，ヘザー・クレア
(72)【発明者】
【氏名】ランギル，ニール・フレッド
(72)【発明者】
【氏名】ジャン，リャン
(57)【要約】
本開示は、本明細書に記載の化合物Ａ、化合物Ｅ、化合物Ｉ
、それらの塩及び／又はそれらの立体異性体を調製するプロセスを提供する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
化合物Ａ：【化1】
Ｘ１は、ＮＨ、ＮＲ１、Ｏ、Ｓ又はＳＯ２であり；
Ｙ１は、－ＣＮ、－Ｃｌ、－ＣＨＯ、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨＲ１、－ＣＯＮ（Ｒ１）２又は－ＣＯ２Ｒ１であり；
Ｚ１及びＺ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｆ又はＣ１～Ｃ６アルキルであり；及び
各Ｒ１は、独立して、Ｃ１～Ｃ６アルキルである）
又はその塩を調製するプロセスであって、
（ａ）化合物Ｂを第１の遷移金属触媒及びホウ素含有化合物と混合して、ＲＢが水素である場合には化合物Ｃを形成するか、又はＲＢが－ＣＯＯＲ４である場合には化合物Ｃ’を形成し、且つ任意選択で化合物Ｃ又は化合物Ｃ’：
【化2】
を単離することと、
（ｂ）化合物Ｃ又は化合物Ｃ’を化合物Ｄ
【化3】
及び第２の遷移金属触媒と混合して、化合物Ａ又はその塩を形成することと
を含むプロセス。
【請求項2】
化合物Ａは、Ａ１又はＡ２：【化4】
【請求項3】
前記第１の遷移金属触媒は、イリジウムを含む、請求項１又は２に記載のプロセス。
【請求項4】
前記ホウ素含有化合物は、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）又は４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロランである、請求項１～３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項5】
化合物Ｃ’は、Ｃ’－４、Ｃ’－５、Ｃ’－６又はＣ’－７：【化5】
【請求項6】
化合物Ｄは、Ｄ１：【化6】
【請求項7】
前記第２の遷移金属触媒は、化合物Ｂを基準として１～５モル％又は重量％の量で存在し、且つパラジウム触媒又はニッケル触媒を含む、請求項１～６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項8】
化合物Ｅ：【化7】
Ｘ２は、ＮＲ１、Ｏ又はＳであり、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり；
Ｙ２は、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又はＣ１～Ｃ６ハロアルキルであり；及び
Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又は塩化物である）
、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスであって、化合物Ｆ
【化8】
【請求項9】
Ｘ２は、Ｏであり、Ｙ２は、ＣＦ３であり、及びＺ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、Ｈである、請求項８に記載のプロセス。
【請求項10】
化合物Ｅは、（Ｓ）－立体異性体：【化9】
【請求項11】
化合物Ｇ又はその塩を化合物Ｈ及び有機金属試薬又はマグネシウム金属と混合して、化合物Ｆ’【化10】
を形成することをさらに含む、請求項８～１０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項12】
前記有機金属試薬は、ｉＰｒＭｇＣｌであり、及び前記保護基は、ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）及びトリメチルシリル（ＴＭＳ）からなる群から選択される、請求項１１に記載のプロセス。
【請求項13】
化合物Ｆ’を脱保護して化合物Ｆ又はその塩を形成することをさらに含む、請求項１１又は１２に記載のプロセス。
【請求項14】
化合物Ｉ【化11】
【化12】
Ｘ１は、ＮＨ、ＮＲ１、Ｏ、Ｓ又はＳＯ２であり；
Ｘ２は、ＮＲ１、Ｏ又はＳであり；
各Ｒ１は、独立して、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり；
Ｙ２は、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又はＣ１～Ｃ６ハロアルキルであり；
Ｚ１及びＺ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｆ又はＣ１～Ｃ６アルキルであり；及び
Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又は塩化物である）
及びカップリング剤と混合して、化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を形成することを含むプロセス。
【請求項15】
Ｘ１及びＸ２は、それぞれＯであり；Ｙ２は、－ＣＦ３であり；及びＺ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、Ｈである、請求項１４に記載のプロセス。
【請求項16】
前記カップリング剤は、クロロ－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（ＴＣＦＨ）、Ｏ－［（エトキシカルボニル）シアノメチレンアミノ］－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＯＴＵ）、１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＣＯＭＵ）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、Ｎ－［（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－（ジメチルアミノ）メチレン］－ＮメチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ－オキシド（ＨＢＴＵ）、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、ビス（２－オキソ－３－オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（ＢＯＰＣｌ）、２－クロロ－４，６－ジメトキシ－１，３，５－トリアジン（ＣＤＭＴ）、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）及び１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ－トリス－ピロリジノ－ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＯｘｉｍ）からなる群から選択される、請求項１４又は１５に記載のプロセス。
【請求項17】
前記カップリング剤は、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）である、請求項１６に記載のプロセス。
【請求項18】
前記カップリング剤は、ＣＤＩである、請求項１６に記載のプロセス。
【請求項19】
前記混合は、添加剤の存在下で行われる、請求項１４～１８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項20】
前記添加剤は、Ｎ－メチルイミダゾール（ＮＭＩ）又はトリエチルアミンである、請求項１９に記載のプロセス。
【請求項21】
前記添加剤は、トリフルオロメタンスルホン酸、塩酸、臭化水素酸又はヨウ化水素酸である、請求項１９に記載のプロセス。
【請求項22】
化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を結晶化させることをさらに含む、請求項１４～２１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項23】
化合物Ｉは、構造：【化13】
【請求項24】
化合物Ｂは、Ｂ１【化14】
【化15】
の構造を有する、請求項１～１３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項25】
溶媒中で２－シアノ－５－ニトロピリジン【化16】
【化17】
【請求項26】
前記ニトロ還元酵素は、ＮＲ－１７又はＮＲ－３６であり、且つ２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として５～７重量％の量で存在する、請求項２５に記載のプロセス。
【請求項27】
グルコース脱水素酵素（ＧＤＨ）、第３の遷移金属触媒、補因子、還元剤又は緩衝剤の１つ以上の存在下で２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩と前記ニトロ還元酵素とを混合することをさらに含む、請求項２５又は２６に記載のプロセス。
【請求項28】
前記第３の遷移金属触媒は、バナジウム、鉄、銅又はそれらの組み合わせを含む、請求項２７に記載のプロセス。
【請求項29】
前記第３の遷移金属触媒は、メタバナジン酸アンモニウム（ＮＨ４ＶＯ３）又は五酸化バナジウム（Ｖ２Ｏ５）である、請求項２８に記載のプロセス。
【請求項30】
前記第３の遷移金属触媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．０１～２．５ｅｑの量で存在する、請求項２７～２９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項31】
前記グルコース脱水素酵素は、ＧＤＨ－１０１、ＧＤＨ－１０５、ＣＤＸ－９０１及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２７～３０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項32】
前記還元剤は、グルコースである、請求項２７～３１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項33】
前記緩衝剤は、トリシン緩衝剤、リン酸カリウム緩衝剤、４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔｒｉｓ）又はそれらの組み合わせを含む、請求項２７～３２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項34】
２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩と前記ニトロ還元酵素との前記混合は、水、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、トルエン、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、酢酸イソプロピル又はそれらの組み合わせを含む溶媒中で実施される、請求項２５～３３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項35】
前記溶媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．５～２０体積のＤＭＳＯを含む、請求項３４に記載のプロセス。
【請求項36】
２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩と前記ニトロ還元酵素との前記混合は、３２～３８℃の温度で実施される、請求項２５～３５のいずれか一項に記載のプロセス。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【0001】
ナフチリジン誘導体及び中間体は、多くの生物学的用途において重要であることが示されている。その有効性を調べるために、大量の材料が必要とされる。そのため、大きい規模に適している、効率的で費用対効果の高い、ナフチリジン誘導体を調製するプロセスが必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0002】
本開示は、化合物Ａ
（式中、Ｘ１は、独立して、ＮＨ、ＮＲ１、Ｏ、Ｓ又はＳＯ２であり；Ｙ１は、－ＣＮ、－Ｃｌ、－ＣＨＯ、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨＲ１、－ＣＯＮ（Ｒ１）２又は－ＣＯ２Ｒ１であり；Ｚ１及びＺ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｆ又はＣ１～Ｃ６アルキルであり；及び各Ｒ１は、独立して、Ｃ１～Ｃ６アルキルである）
又はその塩を調製するプロセスであって、
（ａ）化合物Ｂ
（式中、Ｙ１Ａは、－ＣＮ、－Ｃｌ、－ＣＯＮＨＲ１、－ＣＯＮ（Ｒ１）２又は－ＣＯ２Ｒ１であり、ＲＢは、水素又は－ＣＯＯＲ４であり；及びＲ４は、Ｃ１～６アルキルである）
を第１の遷移金属触媒及びホウ素含有化合物と混合して、ＲＢが水素である場合には化合物Ｃ
（式中、Ｒ２及びＲ３の各々は、独立して、Ｈ若しくはＣ１～Ｃ６アルキルであるか、又はそれらが結合されているホウ素原子及び酸素原子と一緒になるとき、５員、６員若しくは８員の環状ボロネートを形成する）
を形成するか、又はＲＢが－ＣＯＯＲ４である場合には化合物Ｃ’
を形成し、且つ任意選択で化合物Ｃ又は化合物Ｃ’を単離することと、
（ｂ）化合物Ｃ又は化合物Ｃ’を化合物Ｄ
（式中、Ｘ１Ａは、ＮＲ７、Ｏ又はＳであり、及びＲ７は、Ｃ１～Ｃ６アルキル、ベンジル又はｐ－メトキシベンジルである）
及び第２の遷移金属触媒を混合して、化合物Ａ又はその塩を形成することと
を含み、ＬＧは、脱離基である、プロセスを提供する。化合物ＡのＹ１がＣＨＯ又はＣＯＯＨである実施形態では、本プロセスは、－ＣＮ、－Ｃｌ、－ＣＯＮＨＲ１、－ＣＯＮ（Ｒ１）２又は－ＣＯ２Ｒ１をＣＨＯ又はＣＯＯＨに変換することをさらに含み得る。化合物ＡのＸ１がＮＨである実施形態では、本プロセスは、Ｘ１ＡをＮＨに変換することをさらに含み得る。
【化1】
又はその塩を調製するプロセスであって、
（ａ）化合物Ｂ
【化2】
を第１の遷移金属触媒及びホウ素含有化合物と混合して、ＲＢが水素である場合には化合物Ｃ
【化3】
を形成するか、又はＲＢが－ＣＯＯＲ４である場合には化合物Ｃ’
【化4】
（ｂ）化合物Ｃ又は化合物Ｃ’を化合物Ｄ
【化5】
及び第２の遷移金属触媒を混合して、化合物Ａ又はその塩を形成することと
を含み、ＬＧは、脱離基である、プロセスを提供する。化合物ＡのＹ１がＣＨＯ又はＣＯＯＨである実施形態では、本プロセスは、－ＣＮ、－Ｃｌ、－ＣＯＮＨＲ１、－ＣＯＮ（Ｒ１）２又は－ＣＯ２Ｒ１をＣＨＯ又はＣＯＯＨに変換することをさらに含み得る。化合物ＡのＸ１がＮＨである実施形態では、本プロセスは、Ｘ１ＡをＮＨに変換することをさらに含み得る。
【0003】
本開示は、化合物Ｅ
（式中、Ｘ２は、ＮＲ１、Ｏ又はＳであり、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり；Ｙ２は、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又はＣ１～Ｃ６ハロアルキルであり；及びＺ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又は塩化物である）
、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスであって、化合物Ｆ
又はその塩をイミン還元酵素（ＩＲＥＤ）と混合して、化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を形成することを含むプロセスを提供する。
【化6】
、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスであって、化合物Ｆ
【化7】
【0004】
本開示は、化合物Ｉ
、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスであって、化合物Ａ’又はその塩を化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩
（式中、Ｘ１は、ＮＨ、ＮＲ１、Ｏ、Ｓ又はＳＯ２であり；Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり；Ｘ２は、ＮＲ１、Ｏ又はＳであり；Ｙ２は、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又はＣ１～Ｃ６ハロアルキルであり；Ｚ１及びＺ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｆ又はＣ１～Ｃ６アルキルであり；及び
Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又は塩化物である）
及びカップリング剤と混合して、化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を形成することを含むプロセスをさらに提供する。
【化8】
【化9】
Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又は塩化物である）
及びカップリング剤と混合して、化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を形成することを含むプロセスをさらに提供する。
【0005】
本明細書では、
の構造を有する化合物も提供される。
【化10】
【発明を実施するための形態】
【0006】
本明細書では、原薬（ＡＰＩ）及び／又はその合成中間体として有用な種々の化合物を調製するプロセスが提供される。
【0007】
いくつかの実施形態では、開示されるプロセスは、バッチモード（すなわち「バッチ化学」又は「フェドバッチモード」）で実施される。他の実施形態では、開示されるプロセスは、連続製造プロセス（すなわち「フローケミストリー」又は「連続ケミストリー」）を使用して実施される。本明細書で使用される場合、連続製造とは、一定の流れ（定常的又は周期的）を有する、操作単位の統合システムを指す。開示されている連続ケミストリーを利用したプロセスは、グラムからメートルトン単位の量の原薬（ＡＰＩ）の製造を提供することができる。いくつかの実施形態では、開示されるプロセスは、バッチケミストリーを用いて実施されるステップと連続ケミストリーを用いて実施されるステップとの組み合わせから構成される。
【0008】
いくつかの実施形態では、本開示は、スキーム１に示され、本明細書に記載されるように化合物Ａ又はその塩を調製するプロセスを提供する。
スキーム１Ａ。化合物Ａ又はその塩のための例示的なプロセス
スキーム１Ｂ。化合物Ａ又はその塩のための例示的なプロセス
スキーム１Ａ。化合物Ａ又はその塩のための例示的なプロセス
【化11】
【化12】
【0009】
いくつかの実施形態では、本開示は、スキーム２に示され、本明細書に記載されるように化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスを提供する。
スキーム２。化合物Ｅ又はその塩のための例示的なプロセス
スキーム２。化合物Ｅ又はその塩のための例示的なプロセス
【化13】
【0010】
いくつかの実施形態では、本開示は、スキーム３に示され、本明細書に記載されるように化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスを提供する。
スキーム３。化合物Ｉ又はその塩のための例示的なプロセス
スキーム３。化合物Ｉ又はその塩のための例示的なプロセス
【化14】
【0011】
本明細書に記載されるように、本開示は、化合物Ｉ並びに出発物質／中間体（例えば、化合物Ａ、Ａ’、Ａ１、Ｃ、Ｃ’、Ｃ１、Ｃ１－ａ、Ｅ、（Ｓ）－Ｅ並びにそれらの塩、それらの立体異性体及びそれらの立体異性体の塩）を調製するプロセスを提供する。いくつかの実施形態では、開示されるプロセスは、有利には、酵素反応を利用しながら、市販の材料からわずか３段階で化合物Ｅを提供する。例えば、本明細書に記載の化合物Ｆ／Ｆ’を化合物Ｅに変換する一連の反応は、酵素的還元を含み、イミン還元酵素（ＩＲＥＤ）によって触媒される還元は、生成物（例えば、（Ｓ）－化合物Ｅ）を立体化学的に制御する。酵素を介するプロセスによるキラル制御は、高度に選択的であることが多く、この例では、開示されるプロセスは、９９％超のエナンチオマー過剰率（ｅｅ）の立体化学的純度で所望のエナンチオマーを提供する。さらに、いくつかの実施形態では、開示されるプロセスは、非常に簡便且つ効率的な一段階のイリジウムＣ－Ｈ挿入／ホウ素化、続いてパラジウムを触媒とする鈴木反応から構成されるプロセスにおいて、市販の原料から２段階で化合物Ａを有利に提供する。
【0012】
開示されるプロセスは、有利には、遷移金属（例えば、イリジウム）触媒／パラジウム触媒反応を用いた１段階の手順で化合物Ａを提供する。例えば、いくつかの実施形態では、イリジウムＣ－Ｈ挿入／ホウ素化反応を使用することにより、他の合成で使用される５－アミノ－４－ブロモピコリン酸メチルではなく、安価でより容易に入手可能な５－アミノピコリノニトリルから本プロセスを開始することができる。５－アミノ－４－ブロモピコリン酸メチルを使用すると、２回目の鈴木ステップ前にボロネートを単離する必要があるため、収率も低下する。開示されるプロセスは、収率が改善された１段階又は２段階のプロセスを提供し、それによって効率が向上し、製造スケジュールが短縮され、必要な出発物質の相違によりかなりコストが削減される。
【0013】
さらに、開示されるプロセスは、従来のプロセスと比較して費用対効率が高い。例えば、化合物Ｅは、多段階プロセスで大量に合成するために長いリードタイムを必要とする。対照的に、開示されるプロセスは、はるかに効率的に化合物Ｅを提供し、市販の出発物質からわずか３段階を必要とし、そのうちの２段階は、専ら水性条件下で実行されるため、費用対効果が高い。
【0014】
種々の実施形態では、化合物Ｅのための開示されるプロセスは、多数の工程を採用し、その多くが、収率が低く、高価な触媒及びキラル配位子の使用並びに高圧の使用を必要とする従来のプロセスを上回る利点をもたらす。対照的に、開示されるプロセスは、高圧が必要となるのを避け、水中及び低温（例えば、２０～５０℃）で実施することが可能な生体触媒還元から構成される。さらに、生体触媒プロセスでは、抽出も蒸留も必要とせず、ｐＨ調整及び生成物の濾過のみの最小限の単位操作が必要とされるため、バッチサイクル時間が短くなる。
【0015】
用語「ハロゲン化物」又は「ハロ」は、Ｆ、ＣＩ、Ｂｒ又はＩを指す。
【0016】
本明細書で使用される用語「アルキル」は、飽和直鎖又は分岐鎖炭化水素を指す。用語「シクロアルキル」は、３～６つの環炭素原子を有する飽和の非芳香族の炭素のみを含有する環系を指す。Ｃ１～Ｃ６アルキル基の例としては、メチル、エチル、イソプロピル、ｎ－プロピル、イソブチル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、イソペンチル、ｎ－ペンチル、ネオペンチル、ｓｅｃ－ペンチル、３－ペンチル、ｓｅｃ－イソペンチル、活性ペンチル、イソヘキシル、ｎ－ヘキシル、ｓｅｃ－ヘキシル、ネオヘキシル及びｔｅｒｔ－ヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。検討されるシクロアルキル基としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが挙げられる。
【0017】
用語「ハロアルキル」は、１つ以上（例えば、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ又は６つ）のハロゲン原子で置換されたアルキルを指す。この用語には、－ＣＦ３及び－ＣＦ２ＣＦ３などのペルフルオロアルキル基が含まれる。
【0018】
化合物Ａ
いくつかの実施形態では、本開示は、化合物Ａ
（式中、Ｘ１は、独立して、ＮＨ、ＮＲ１、Ｏ、Ｓ又はＳＯ２であり；Ｙ１は、－ＣＮ、－Ｃｌ、－ＣＨＯ、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨＲ１、－ＣＯＮ（Ｒ１）２又は－ＣＯ２Ｒ１であり；Ｚ１及びＺ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｆ又はＣ１～Ｃ６アルキルであり；及び各Ｒ１は、独立して、Ｃ１～Ｃ６アルキルである）
又はその塩を調製するプロセスを提供する。
いくつかの実施形態では、本開示は、化合物Ａ
【化15】
又はその塩を調製するプロセスを提供する。
【0019】
いくつかの実施形態では、上記又は下記の他の実施形態と併せて、Ｘ１は、Ｏである。
【0020】
種々の実施形態では、上記又は下記の他の実施形態と併せて、Ｙ１は、－ＣＮ、－Ｃｌ又は－ＣＯ２Ｈである。例えば、いくつかの実施形態では、Ｙ１は、－ＣＮであり、いくつかの実施形態では、Ｙ１は、－ＣＯ２Ｈである。さらに、いくつかの実施形態では、Ｙ１は、－Ｃｌである。
【0021】
いくつかの実施形態では、上記又は下記の他の実施形態と併せて、Ｚ１及びＺ２は、それぞれＨである。
【0022】
いくつかの実施形態では、上記又は下記の他の実施形態と併せて、化合物Ａは、Ａ’：
の構造を有する。
【化16】
【0023】
いくつかの実施形態では、化合物Ａ’は、ＣＨＯ、ＣＮ、ＣＯＮＨＲ１又はＣＯＮ（Ｒ１）２であるＹ１をＣＯ２Ｈに変換することによって調製される。いくつかの実施形態では、化合物Ａ’は、以下の構造：
を有する。
【化17】
【0024】
いくつかの実施形態では、上記又は下記の他の実施形態と併せて、化合物Ａは、Ａ１：
の構造を有する。
【化18】
【0025】
いくつかの実施形態では、上記又は下記の他の実施形態と併せて、化合物Ａは、Ａ２：
の構造を有する。
【化19】
【0026】
化合物Ｅ
いくつかの実施形態では、本開示は、化合物Ｅ
（式中、Ｘ２は、ＮＲ１、Ｏ又はＳであり、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり；Ｙ２は、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又はＣ１～Ｃ６ハロアルキルであり；及びＺ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又は塩素である）
、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスを提供する。
いくつかの実施形態では、本開示は、化合物Ｅ
【化20】
、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスを提供する。
【0027】
本明細書に記載されるように、いくつかの実施形態では、化合物Ｅは、（Ｓ）－立体異性体に富んでいる。
本明細書で使用される場合、「（Ｓ）－立体異性体に富んでいる」とは、出発物質よりも高い立体化学的純度（エナンチオマー過剰率で測定される）を有する生成物の（Ｓ）－立体異性体を指す。いくつかの実施形態では、生成物（Ｓ）－化合物Ｅのエナンチオマー過剰率は、５０％以上（例えば、７５％、８０％、８５％、９０％又は９５％以上）であり得る。いくつかの実施形態では、化合物Ｆは、９９％超のｅｅを有する（Ｓ）－化合物Ｅに変換される。いくつかの実施形態では、化合物Ｅは、以下の構造：
を有する（Ｓ）－化合物である。
【化21】
【化22】
【0028】
いくつかの実施形態では、（Ｓ）－化合物Ｅは、以下の構造：
を有する塩である。
【化23】
【0029】
化合物Ｉ
種々の実施形態では、本開示は、化合物Ｉ
（式中、Ｘ１は、ＮＨ、ＮＲ１、Ｏ、Ｓ又はＳＯ２であり；Ｘ２は、ＮＲ１、Ｏ又はＳであり；Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり；Ｙ２は、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又はＣ１～Ｃ６ハロアルキルであり；Ｚ１及びＺ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｆ又はＣ１～Ｃ６アルキルであり；及びＺ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又は塩化物である）
、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスをさらに提供する。
種々の実施形態では、本開示は、化合物Ｉ
【化24】
、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスをさらに提供する。
【0030】
いくつかの実施形態では、化合物（Ｉ）は、化合物Ｉの（Ｓ）－立体異性体又はその塩である。
【化25】
【0031】
いくつかの実施形態では、化合物Ｉは、以下の構造：
又はその塩を有する。
【化26】
【0032】
化合物Ｂ
化合物Ｂは、以下の構造：
（式中、各Ｚ１及びＺ２は、化合物Ａについて定義された通りであり、ＲＢは、水素又は－ＣＯＯＲ４であり、及びＹ１Ａは、－ＣＮ、－Ｃｌ、－ＣＯＮＨＲ１、ＣＯＮ（Ｒ１）２又はＣＯ２Ｒ１であり、Ｒ４は、Ｃ１～Ｃ６アルキルである）
を有する。いくつかの実施形態では、Ｙ１Ａは、ＣＮである。いくつかの実施形態では、Ｙ１Ａは、Ｃｌである。いくつかの実施形態では、ＲＢは、ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）である。
化合物Ｂは、以下の構造：
【化27】
を有する。いくつかの実施形態では、Ｙ１Ａは、ＣＮである。いくつかの実施形態では、Ｙ１Ａは、Ｃｌである。いくつかの実施形態では、ＲＢは、ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）である。
【0033】
いくつかの実施形態では、化合物Ｂは、構造
を有する。
【化28】
【0034】
いくつかの実施形態では、化合物Ｂは、構造Ｂ１：
を有する。いくつかの実施形態では、化合物Ｂは、Ｂ１’：
の構造を有する。いくつかの実施形態では、化合物Ｂは、Ｂ２：
の構造を有する。
【化29】
【化30】
【化31】
【0035】
化合物Ｃ及び化合物Ｃ’
いくつかの実施形態では、化合物Ｃは、以下の構造：
（式中、Ｒ２及びＲ３の各々は、独立して、Ｈ若しくはＣ１～Ｃ６アルキルであるか、又はそれらが結合されているホウ素原子及び酸素原子と一緒になるとき、５員、６員若しくは８員の環状ボロネートを形成し；Ｙ１Ａは、－ＣＮ、－Ｃｌ、－ＣＯＮＨＲ１、－ＣＯＮ（Ｒ１）２又は－ＣＯ２Ｒ１であり、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり、及びＺ１及びＺ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｆ又はＣ１～Ｃ６アルキルである）
を有する。
いくつかの実施形態では、化合物Ｃは、以下の構造：
【化32】
を有する。
【0036】
いくつかの実施形態では、化合物Ｃは、Ｃ１：
の構造を有する。
【化33】
【0037】
いくつかの実施形態では、化合物Ｃは、Ｃ１－ａ：
の構造を有する。
【化34】
【0038】
いくつかの実施形態では、化合物Ｃ’は、以下の構造：
（式中、Ｒ２及びＲ３の各々は、化合物Ｃについて定義した通りであり、及びＲ４は、Ｃ１～Ｃ６アルキルである）
を有する。場合により、化合物Ｃ’は、以下の構造：
を有する。
【化35】
を有する。場合により、化合物Ｃ’は、以下の構造：
【化36】
【0039】
いくつかの実施形態では、化合物Ｃ’は、Ｃ’－２：
の構造を有する。
【化37】
【0040】
いくつかの実施形態では、化合物Ｃ’は、Ｃ’－３：
の構造を有する。
【化38】
【0041】
いくつかの実施形態では、化合物Ｃ’は、Ｃ’－４：
の構造を有する。
【化39】
【0042】
いくつかの実施形態では、化合物Ｃ’は、Ｃ’－５、Ｃ’－６又はＣ’－７：
の構造を有する。
【化40】
【0043】
場合により、化合物Ｃ’は、Ｃ’－５の構造を有する。場合により、化合物Ｃ’は、Ｃ’－６の構造を有する。場合により、化合物Ｃ’は、Ｃ’－７の構造を有する。
【0044】
化合物Ｄ
いくつかの実施形態では、化合物Ｄは、以下の構造：
（式中、Ｘ１Ａは、ＮＲ７、Ｏ又はＳであり、及びＲ７は、Ｃ１～Ｃ６アルキル、ベンジル又はｐ－メトキシベンジルであり、及びＬＧは、脱離基である）
を有する。化合物ＡのＸ１が化合物ＤのＸ１Ａと異なる実施形態では、本プロセスは、Ｘ１ＡをＸ１に変換することをさらに含み得る。例えば、化合物ＡのＸ１がＮＨである実施形態では、本プロセスは、Ｘ１ＡをＮＨに変換することをさらに含む。
いくつかの実施形態では、化合物Ｄは、以下の構造：
【化41】
を有する。化合物ＡのＸ１が化合物ＤのＸ１Ａと異なる実施形態では、本プロセスは、Ｘ１ＡをＸ１に変換することをさらに含み得る。例えば、化合物ＡのＸ１がＮＨである実施形態では、本プロセスは、Ｘ１ＡをＮＨに変換することをさらに含む。
【0045】
脱離基は、任意の好適な脱離基であり得る。具体的に検討される離脱基としては、例えば、スルホネートエステル、スルファメート又はハロゲン化物が挙げられる。いくつかの実施形態では、脱離基は、トシル、メシル、ノシル又はトリフリルである。いくつかの実施形態では、離脱基は、ハロゲン化物（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）である。場合により、ハロゲン化物離脱基は、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩである。
【0046】
いくつかの実施形態では、化合物Ｄは、Ｄ１：
の構造を有する。
【化42】
【0047】
化合物Ｆ
いくつかの実施形態では、化合物Ｆは、以下の構造：
（式中、Ｘ２、Ｙ２、Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、化合物Ｅについて定義した通りである）
を有する。
いくつかの実施形態では、化合物Ｆは、以下の構造：
【化43】
を有する。
【0048】
いくつかの実施形態では、化合物Ｆは、Ｆ’：
（式中、ＰＧは、保護基である）
の構造を有する。
【化44】
の構造を有する。
【0049】
保護基は、アミン窒素に対する任意の好適な保護基である。いくつかの実施形態では、保護基は、ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）及びトリメチルシリル（ＴＭＳ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、脱離基は、Ｂｏｃである。いくつかの実施形態では、脱離基は、Ｃｂｚである。いくつかの実施形態では、脱離基は、ＴＭＳである。
【0050】
いくつかの実施形態では、化合物Ｆ’は、以下の構造：
を有する。
【化45】
【0051】
化合物Ｇ
いくつかの実施形態では、開示されるプロセスは、化合物Ｇ又はその塩、化合物Ｈ及び有機金属試薬又はマグネシウム金属を混合することにより、化合物Ｆ又は化合物Ｆ’を形成することを含む。いくつかの実施形態では、化合物Ｇは、以下の構造：
（式中、Ｘ２は、化合物Ｅについて定義した通りであり、及びＰＧは、化合物Ｆ’について定義した保護基である）
を有する。いくつかの実施形態では、化合物Ｇの保護基は、Ｂｏｃである。
いくつかの実施形態では、開示されるプロセスは、化合物Ｇ又はその塩、化合物Ｈ及び有機金属試薬又はマグネシウム金属を混合することにより、化合物Ｆ又は化合物Ｆ’を形成することを含む。いくつかの実施形態では、化合物Ｇは、以下の構造：
【化46】
を有する。いくつかの実施形態では、化合物Ｇの保護基は、Ｂｏｃである。
【0052】
いくつかの実施形態では、化合物Ｇは、以下の構造：
を有する。
【化47】
【0053】
化合物Ｈ
いくつかの実施形態では、化合物Ｈは、以下の構造：
（式中、Ｙ２並びにＺ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、化合物Ｅについて定義した通りであり、及びＸｈは、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩである）
を有する。
いくつかの実施形態では、化合物Ｈは、以下の構造：
【化48】
を有する。
【0054】
いくつかの実施形態では、Ｘｈは、Ｉである。いくつかの実施形態では、Ｘｈは、Ｂｒである。いくつかの実施形態では、Ｙ２は、ＣＦ３である。いくつかの実施形態では、Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、Ｈである。
【0055】
いくつかの実施形態では、化合物Ｈは、以下の構造：
を有する。
【化49】
【0056】
化合物Ａ及びＢを調製するプロセス
開示される化合物Ａ又はその塩を調製するプロセスは、（ａ）化合物Ｂを第１の遷移金属触媒及びホウ素含有化合物と混合して化合物Ｃを形成することと、（ｂ）化合物Ｃを化合物Ｄ及び第２の遷移金属触媒と混合して化合物Ａ又はその塩を形成することとを含む。いくつかの実施形態では、化合物Ｃは、化合物Ｃ１又はＣ１－ａである。
開示される化合物Ａ又はその塩を調製するプロセスは、（ａ）化合物Ｂを第１の遷移金属触媒及びホウ素含有化合物と混合して化合物Ｃを形成することと、（ｂ）化合物Ｃを化合物Ｄ及び第２の遷移金属触媒と混合して化合物Ａ又はその塩を形成することとを含む。いくつかの実施形態では、化合物Ｃは、化合物Ｃ１又はＣ１－ａである。
【0057】
化合物Ｂは、適切な量の第１の遷移金属触媒及びホウ素含有化合物と混合されて、化合物Ｃを形成する。いくつかの実施形態では、化合物Ｂは、１当量（ｅｑ）未満のホウ素含有化合物（例えば、０．５ｅｑのホウ素含有化合物）と混合されて、化合物Ｃを形成する。
【0058】
化合物Ｃは、適切な量の化合物Ｄ及び第２の遷移金属触媒と混合されて、化合物Ａ又はその塩を形成する。いくつかの実施形態では、化合物Ｃは、少なくとも１当量の化合物Ｄ（例えば、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４又は１．５ｅｑ以上の化合物Ｄ）と混合される。いくつかの実施形態では、Ｘ１Ａは、Ｘ１に変換される。
【0059】
いくつかの実施形態では、本プロセスは、化合物Ｃを（例えば、結晶化又はクロマトグラフィーにより）単離することをさらに含む。いくつかの実施形態では、化合物Ａ又はその塩を調製するプロセスは、化合物Ｃを単離することなく容器中で実施される（例えば、「ワンポット」プロセス）。このような場合、化合物Ｃは、単離なしにステップ（ｂ）に直接進められる。
【0060】
いくつかの実施形態では、開示されるプロセスは、生体触媒反（例えば、生体触媒還元）を用いて、化合物Ｂ（例えば、化合物Ｂ１）又はその塩を調製することをさらに含む。開示されるプロセスの態様は、Ｂｏｒｎａｄｅｌ ｅｔ ａｌ．“Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｅｎｈａｎｃｅｄ Ｎｉｔｒｏｒｅｄｕｃｔａｓｅ－Ｃａｔａｌｙｚｅｄ Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ２－Ｍｅｔｈｙｌ－５－ｎｉｔｒｏｐｙｒｉｄｉｎｅ．”Ｏｒｇ．Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｒｅｓ．Ｄｅｖ．２５，３，（２０２１）：６４８－６５３に記載され、この開示は、参照により本明細書に援用される。
【0061】
いくつかの実施形態では、開示されるプロセスは、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジン
又はその塩から化合物Ｂ１又は化合物Ｂ１’を調製することを含む。
【化50】
【0062】
例として、開示されるプロセスのいくつかの実施形態は、溶媒中で２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素とを混合して、化合物Ｂ１若しくは化合物Ｂ１’又はその塩を形成することを含む。
【0063】
ニトロ還元酵素は、２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩を化合物Ｂ１又はその塩に変換することができる任意の好適なニトロ還元酵素であり得る。好適なニトロ還元酵素は、市販されている（例えば、Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｍａｔｔｈｅｙ（Ｌｏｎｄｏｎ，Ｕ．Ｋ．））。ニトロ還元酵素の好適な非限定的な例としては、Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｍａｔｔｈｅｙから市販されているＮＲ－１７、ＮＲ－Ｘ４－ｍｕｔ２、ＮＲ－Ｘ４－ｍｕｔ１０、ＮＲ－Ｘ１８、ＮＲ－Ｘ２７、ＮＲ－Ｘ３０、ＮＲ－Ｘ３２、ＮＲ－Ｘ３６、ＮＲ－Ｘ３９、ＮＲ－Ｘ４１、ＮＲ－Ｘ５３、ＮＲ－Ｘ５４及びそれらの組み合わせが挙げられる。いくつかの実施形態では、ニトロ還元酵素は、ＮＲ－１７又はＮＲ－Ｘ３６である。
【0064】
開示されるプロセスでは、化合物Ｂ１又は化合物Ｂ１’又はその塩を提供するために、適切な量のニトロ還元酵素が採用される。存在するＮＲ－１７又はＮＲ－Ｘ３６が少なすぎると、酵素反応が適切な速度で進行しないことがある。対照的に、存在するＮＲ－１７又はＮＲ－Ｘ３６が多すぎると、反応は、費用対効率が悪くなり、望ましくない副生成物が生じ得る。いくつかの実施形態では、ＮＲ－１７は、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．１～１０重量％の量（例えば、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、８．６、８．７、８．８、８．９、９、９．１、９．２、９．３、９．４、９．５、９．６、９．７、９．８、９．９又は１０重量％のＮＲ－１７）で存在する。したがって、ＮＲ－１７又はＮＲ－Ｘ３６は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として前述の値のいずれかに挟まれ、且つそれらを含む量、例えば０．１～１０、０．２～９．９、０．３～９．８、０．４～９．７、０．５～９．６、０．６～９．５、０．７～９．４、０．８～９．３、０．９～９．２又は１～９．１重量％（例えば、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として１～１０、１～９、２～９、２～８、３～８、３～７、４～７、４～６、５～６重量％）で存在し得る。いくつかの実施形態では、ＮＲ－１７又はＮＲ－３６は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として５～７重量％の量で存在する。
【0065】
いくつかの実施形態では、開示されるプロセスにおける２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩の生体触媒還元は、グルコース脱水素酵素（ＧＤＨ）、第３の遷移金属触媒、補因子、還元剤又は緩衝剤の１つ以上の存在下で２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩及びニトロ還元酵素を混合することをさらに含む。いくつかの実施形態では、開示されるプロセスは、グルコース脱水素酵素（ＧＤＨ）、第３の遷移金属触媒、補因子、還元剤及び緩衝剤の存在下で２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素とを混合することを含む。補因子、還元剤及びＧＤＨを含む実施形態では、補因子（例えば、ＮＡＤＰＨ）は、ＧＤＨによる還元剤（例えば、グルコース）の触媒酸化を介して再生される。
【0066】
第３の遷移金属触媒
本明細書に記載されるように、開示されるプロセスのいくつかの実施形態は、２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素とを第３の遷移金属触媒の存在下で混合することを含む。いくつかの実施形態では、第３の遷移金属触媒は、バナジウム、鉄、銅又はそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、第３の遷移金属触媒は、バナジウムを含む。バナジウムの好適な形態は、メタバナジン酸アンモニウム（ＮＨ４ＶＯ３）又は酸化バナジウム（Ｖ）（例えば、酸化バナジウム（ＩＶ）及び／又は酸化バナジウム（Ｖ））である。いくつかの実施形態では、第３の遷移金属触媒は、メタバナジン酸アンモニウム（ＮＨ４ＶＯ３）又は五酸化バナジウム（Ｖ２Ｏ５）である。
本明細書に記載されるように、開示されるプロセスのいくつかの実施形態は、２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素とを第３の遷移金属触媒の存在下で混合することを含む。いくつかの実施形態では、第３の遷移金属触媒は、バナジウム、鉄、銅又はそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、第３の遷移金属触媒は、バナジウムを含む。バナジウムの好適な形態は、メタバナジン酸アンモニウム（ＮＨ４ＶＯ３）又は酸化バナジウム（Ｖ）（例えば、酸化バナジウム（ＩＶ）及び／又は酸化バナジウム（Ｖ））である。いくつかの実施形態では、第３の遷移金属触媒は、メタバナジン酸アンモニウム（ＮＨ４ＶＯ３）又は五酸化バナジウム（Ｖ２Ｏ５）である。
【0067】
開示されるプロセスでは、適切な量の第３の遷移金属触媒が採用される。存在する第３の遷移金属触媒が少なすぎると、酵素反応が適切な速度で進行しないか、又は望ましくない副生成物が生成することがある。対照的に、存在する第３の遷移金属触媒が多すぎると、反応は、費用対効率が低くなり、望ましくない副生成物が生じることがある。いくつかの実施形態では、第３の遷移金属触媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．０１～２ｅｑの量（例えば、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．０１、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２ｅｑ）で存在する。いくつかの実施形態では、第３の遷移金属触媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．０５～０．２ｅｑの量（例えば、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．０５、０．０８、０．１、０．１５又は０．２ｅｑの第３の遷移金属触媒）で存在する。したがって、第３の遷移金属触媒は、前述の値のいずれかによって挟まれ、且つそれらを含む量（例えば、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．０１～２、０．１～１．９、０．２～１．８、０．３～１．７、０．４～１．６、０．５～１．５、０．６～１．４、０．７～１．３、０．８～１．２若しくは０．９～１．１ｅｑ又は２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．０５～０．２、０．０８～０．１５ｅｑ）で存在し得る。いくつかの実施形態では、第３の遷移金属触媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．１ｅｑの量で存在する。いくつかの実施形態では、第３の遷移金属触媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として２ｅｑの量で存在する。
【0068】
グルコース脱水素酵素（ＧＤＨ）
本明細書に記載されるように、開示されるプロセスのいくつかの実施形態は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンとニトロ還元酵素とをグルコース脱水素酵素（ＧＤＨ）の存在下で混合することを含む。ＧＤＨは、補因子の再生を促進するために、開示されるプロセスのいくつかの実施形態において存在する。
本明細書に記載されるように、開示されるプロセスのいくつかの実施形態は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンとニトロ還元酵素とをグルコース脱水素酵素（ＧＤＨ）の存在下で混合することを含む。ＧＤＨは、補因子の再生を促進するために、開示されるプロセスのいくつかの実施形態において存在する。
【0069】
好適なグルコース脱水素酵素は、市販されている（例えば、Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｍａｔｔｈｅｙ（Ｌｏｎｄｏｎ，Ｕ．Ｋ．）及びＣｏｄｅｘｉｓ（Ｒｅｄｗｏｏｄ Ｃｉｔｙ，ＣＡ））。グルコース脱水素酵素の好適な非限定的な例としては、ＧＤＨ－５、ＧＤＨ－８、ＧＤＨ－１０１、ＧＤＨ－１０５、ＣＤＸ－９０１及びそれらの組み合わせが挙げられる。いくつかの実施形態では、グルコース脱水素酵素は、ＧＤＨ－１０１である。例として、ＧＤＨ－１０１は、Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｍａｔｔｈｅｙから市販されており、ＧＤＨ－１０５及びＣＤＸ－９０１は、Ｃｏｄｅｘｉｓから市販されている。
【0070】
開示されるプロセスでは、適切な量のグルコース脱水素酵素が採用される。存在するグルコース脱水素酵素が少なすぎると、酵素反応が適切な速度で進行しないことがある。対照的に、存在するグルコース脱水素酵素が多すぎると、反応は、費用対効率が低くなり、望ましくない副生成物が生じることがある。いくつかの実施形態では、グルコース脱水素酵素は、２シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．１～２５重量％の量（例えば、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．１、０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４又は２５重量％）で存在する。したがって、グルコース脱水素酵素は、前述の値のいずれかに挟まれ、且つそれらを含む量（例えば、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．１～２５、０．５～２５、１～２４、２～２３、３～２２、４～２１、５～２０、６～１９、７～１８、８～１７、９～１６、１０～１５、１１～１４又は１２～１３重量％）で存在し得る。いくつかの実施形態では、グルコース脱水素酵素は、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として１重量％の量で存在する。
【0071】
補因子
本明細書に記載されるように、開示されるプロセスのいくつかの実施形態は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンとニトロ還元酵素とを補因子の存在下で混合することを含む。理解されるように、補因子は、ニトロ還元酵素によって触媒される生体触媒還元反応を促進する。補因子の好適な非限定的な例としては、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ＋）、ジヒドロニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰ＋）、ジヒドロニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰＨ）、ＮＡＤＰＨの塩及びそれらの組み合わせが挙げられる。いくつかの実施形態では、補因子は、ＮＡＤＰ＋である。
本明細書に記載されるように、開示されるプロセスのいくつかの実施形態は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンとニトロ還元酵素とを補因子の存在下で混合することを含む。理解されるように、補因子は、ニトロ還元酵素によって触媒される生体触媒還元反応を促進する。補因子の好適な非限定的な例としては、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ＋）、ジヒドロニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰ＋）、ジヒドロニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰＨ）、ＮＡＤＰＨの塩及びそれらの組み合わせが挙げられる。いくつかの実施形態では、補因子は、ＮＡＤＰ＋である。
【0072】
開示されるプロセスでは、適切な量の補因子が採用される。存在する補因子が少なすぎると、酵素反応が適切な速度で進行しないことがある。対照的に、存在する補因子が多すぎると、反応は、費用対効率が低くなり、望ましくない副生成物が生じることがある。いくつかの実施形態では、補因子は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．５～２０重量％の量（例えば、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０重量％）で存在する。したがって、補因子は、前述の値のいずれかに挟まれ、且つそれらを含む量（例えば、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．５～２０、０．６～１９、０．７～１８、０．８～１７、０．９～１６、１～１５、２～１４、３～１３、４～１２、５～１１、６～１０又は７～９重量％の補因子）で存在し得る。いくつかの実施形態では、補因子は、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．７重量％の量で存在する。
【0073】
還元剤
本明細書に記載されるように、開示されるプロセスのいくつかの実施形態は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンとニトロ還元酵素とを還元剤の存在下で混合することを含む。還元剤は、補因子の再生を促進する。いくつかの実施形態では、還元剤は、グルコースである。
本明細書に記載されるように、開示されるプロセスのいくつかの実施形態は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンとニトロ還元酵素とを還元剤の存在下で混合することを含む。還元剤は、補因子の再生を促進する。いくつかの実施形態では、還元剤は、グルコースである。
【0074】
開示されるプロセスでは、適切な量の還元剤が採用される。存在する還元剤が少なすぎると、酵素反応が適切な速度で進行しないことがある。対照的に、存在する還元剤が多すぎると、反応は、費用対効率が低くなり、望ましくない副生成物が生じることがある。いくつかの実施形態では、還元剤は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として３～５ｅｑの量（例えば、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３，５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９又は５．０ｅｑ）で存在する。したがって、還元剤は、前述の値のいずれかに挟まれ、且つそれらを含む量（例えば、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として３．０～５．０、３．５～４．５又は３．０～４．０ｅｑの還元剤）で存在し得る。いくつかの実施形態では、還元剤は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として３．１ｅｑの量で存在する。
【0075】
化合物Ｂを調製するための緩衝剤
いくつかの実施形態では、開示されるプロセスは、好適な緩衝剤の存在下で実施される。好適な緩衝剤としては、７～８（例えば、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９又は８．０）のｐＨに維持できる緩衝剤が含まれる。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、７．２～７．５のｐＨを維持する。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、トリシン緩衝剤、リン酸カリウム緩衝剤、４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔｒｉｓ）又はそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、リン酸カリウム緩衝剤である。
いくつかの実施形態では、開示されるプロセスは、好適な緩衝剤の存在下で実施される。好適な緩衝剤としては、７～８（例えば、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９又は８．０）のｐＨに維持できる緩衝剤が含まれる。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、７．２～７．５のｐＨを維持する。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、トリシン緩衝剤、リン酸カリウム緩衝剤、４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔｒｉｓ）又はそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、リン酸カリウム緩衝剤である。
【0076】
緩衝剤は、任意の適切な量で存在する。緩衝剤の量が少なすぎると、反応のｐＨが適切に（例えば、ｐＨ７～８）維持されない。対照的に、緩衝剤の量が多すぎると、反応は、費用対効率が低くなり、望ましくない副生成物が生じることがある。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、８０～９５％（ｖ／ｗ）（例えば、８０～９０％、８０～８５％、８５～９５％、８５～９０％又は９０～９５％（ｖ／ｗ））の量で存在する。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、９２％（ｖ／ｗ）の量で存在する。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、１００～２５０ｍＭの量（例えば、１００、１２５、１５０、１７５、２００、２２５又は２５０ｍＭ）で存在する。
【0077】
化合物Ｂを調製するための溶媒
本明細書に開示される化合物Ｂを調製するプロセスは、適切な溶媒中で実施される。有機共溶媒の好適な非限定的な例としては、エタノール、イソプロピルアルコール、ｔｅｒｔ－ブチルアルコール、テトラヒドロフラン、２－メチルテトラヒドロフラン、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、トルエン、酢酸イソアミル、酢酸ｔｅｒｔ－ブチル、シクロペンチルメチルエーテル、ジメチルアセトアミド、アセトン、ジメチルカーボネート、アセトニトリル及びそれらの組み合わせが挙げられる。いくつかの実施形態では、２－シアノ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素との混合は、水、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、トルエン、ＭＴＢＥ、イソプロピルアルコール、酢酸イソプロピル又はそれらの組み合わせを含む溶媒中で実施される。いくつかの実施形態では、２－シアノ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素との混合は、水、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）又はそれらの組み合わせを含む溶媒中で実施される。いくつかの実施形態では、溶媒は、ＤＭＳＯを含む。特定の理論に拘束されることを望むものではないが、ＤＭＳＯは、有機共溶媒として機能する。典型的には、ＤＭＳＯは、０．５～２０体積の量（例えば、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０体積）で存在し得る。いくつかの実施形態では、溶媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．５体積のＤＭＳＯを含む。
本明細書に開示される化合物Ｂを調製するプロセスは、適切な溶媒中で実施される。有機共溶媒の好適な非限定的な例としては、エタノール、イソプロピルアルコール、ｔｅｒｔ－ブチルアルコール、テトラヒドロフラン、２－メチルテトラヒドロフラン、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、トルエン、酢酸イソアミル、酢酸ｔｅｒｔ－ブチル、シクロペンチルメチルエーテル、ジメチルアセトアミド、アセトン、ジメチルカーボネート、アセトニトリル及びそれらの組み合わせが挙げられる。いくつかの実施形態では、２－シアノ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素との混合は、水、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、トルエン、ＭＴＢＥ、イソプロピルアルコール、酢酸イソプロピル又はそれらの組み合わせを含む溶媒中で実施される。いくつかの実施形態では、２－シアノ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素との混合は、水、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）又はそれらの組み合わせを含む溶媒中で実施される。いくつかの実施形態では、溶媒は、ＤＭＳＯを含む。特定の理論に拘束されることを望むものではないが、ＤＭＳＯは、有機共溶媒として機能する。典型的には、ＤＭＳＯは、０．５～２０体積の量（例えば、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０体積）で存在し得る。いくつかの実施形態では、溶媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．５体積のＤＭＳＯを含む。
【0078】
温度
本明細書に開示される化合物Ｂを調製するプロセスは、適切な温度、典型的には２０～５０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、２－シアノ－５－ニトロピリジン又はその塩は、３２～３８℃（例えば、３５～３８℃）の温度でニトロ還元酵素と混合される。
本明細書に開示される化合物Ｂを調製するプロセスは、適切な温度、典型的には２０～５０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、２－シアノ－５－ニトロピリジン又はその塩は、３２～３８℃（例えば、３５～３８℃）の温度でニトロ還元酵素と混合される。
【0079】
フェドバッチモード
いくつかの実施形態では、開示される化合物Ｂを調製するプロセスは、フェドバッチモードで実施される。フェドバッチモードで実施される例示的実施形態では、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンは、連続添加（例えば、一定流量におけるシリンジポンプ）を介して、他の成分を含有する反応混合物に添加され得る。開示されるプロセスをフェドバッチモードで実施することにより、例えば反応を実施するのに必要とされるニトロ還元酵素、第３の遷移金属触媒、補因子及び溶媒の必要量を低減するなどの利点が得られる。例えば、いくつかの実施形態では、必要とされる全酵素（ＮＲ及びＧＤＨ）の量は、約７０％低減され；必要とされる第３の遷移金属触媒（例えば、ＮＨ４ＶＯ３）の量は、約８８％低減され；必要とされる補因子（例えば、ＮＡＤＰＨ）の量は、約９５％低減され；且つ／又は必要とされる溶媒の量は、約９７％低減される。
いくつかの実施形態では、開示される化合物Ｂを調製するプロセスは、フェドバッチモードで実施される。フェドバッチモードで実施される例示的実施形態では、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンは、連続添加（例えば、一定流量におけるシリンジポンプ）を介して、他の成分を含有する反応混合物に添加され得る。開示されるプロセスをフェドバッチモードで実施することにより、例えば反応を実施するのに必要とされるニトロ還元酵素、第３の遷移金属触媒、補因子及び溶媒の必要量を低減するなどの利点が得られる。例えば、いくつかの実施形態では、必要とされる全酵素（ＮＲ及びＧＤＨ）の量は、約７０％低減され；必要とされる第３の遷移金属触媒（例えば、ＮＨ４ＶＯ３）の量は、約８８％低減され；必要とされる補因子（例えば、ＮＡＤＰＨ）の量は、約９５％低減され；且つ／又は必要とされる溶媒の量は、約９７％低減される。
【0080】
化合物Ａ又はその塩を調製するプロセスは、バッチモード又は連続モードで実施され得る。
【0081】
開示されるプロセスは、化合物Ａ又はその塩を適切な収率で提供する。いくつかの実施形態では、化合物Ａ又はその塩は、化合物Ｂを基準として４０％以上の全体収率で（例えば、化合物Ｂを基準として４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０又は９５％以上の収率で）調製される。化合物Ｃが化合物Ｄとの反応前に単離されるいくつかの実施形態（例えば、「２ポット」プロセス）において、化合物Ａ又はその塩は、化合物Ｂを基準として少なくとも４０％以上、例えば４０～６０％、４５～６０％、５０～６０％、５０～５５％又は５５～６０％の全体収率で得られる。化合物Ｃが化合物Ｄとの反応前に単離されない（例えば、「ワンポット」プロセス）いくつかの実施形態では、化合物Ａは、５０％以上、例えば６０％以上の全体収率で得られる。いくつかの実施形態では、化合物Ａは、ワンポットプロセスから６０～９５％、６０～８０％又は６０～７０％の全体収率で得られる。
【0082】
いくつかの実施形態では、化合物Ａ１又はその塩は、化合物Ａ’又はその塩に変換される。これらの実施形態では、化合物Ａ１は、化合物Ａ１の－ＣＮ官能基を化合物Ａ’の－ＣＯ２Ｈ官能基に変換するための任意の好適な反応条件を使用して、化合物Ａ’に変換される。いくつかの実施形態では、化合物Ａ１から化合物Ａ’への変換は、－ＣＮ官能基を加水分解するための塩基性条件を用いて実施される。いくつかの実施形態では、化合物Ａ１又はその塩は、９０％以上（例えば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上）の化学収率で化合物Ａ’又はその塩に変換される。いくつかの実施形態では、化合物Ａ１は、塩基性加水分解条件を用いて化合物Ａ’に変換される。
【0083】
化合物Ｃ又は化合物Ｃ’を形成するための溶媒及び温度
化合物Ｂと第１の遷移金属触媒及びホウ素含有化合物との混合は、好適な溶媒中で実施される。場合により、溶媒は、非プロトン性溶媒である。例示的な非プロトン性溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、２－メチルテトラヒドロフラン、シクロペンチルメチルエーテル（ＣＰＭＥ）及びトルエンが挙げられる。いくつかの実施形態では、溶媒は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である。
化合物Ｂと第１の遷移金属触媒及びホウ素含有化合物との混合は、好適な溶媒中で実施される。場合により、溶媒は、非プロトン性溶媒である。例示的な非プロトン性溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、２－メチルテトラヒドロフラン、シクロペンチルメチルエーテル（ＣＰＭＥ）及びトルエンが挙げられる。いくつかの実施形態では、溶媒は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）である。
【0084】
化合物Ｂと第１の遷移金属触媒及びホウ素含有化合物との混合は、適当な温度で実施される。場合により、反応は、約５０～１００℃（例えば、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５又は１００℃）の温度で実施される。いくつかの実施形態では、温度は、５５～９５℃、６０～９０℃、６５～８５℃、７０～８０℃又は７５℃である。例えば、いくつかの実施形態では、化合物Ｂは、約６５℃で第１の遷移金属触媒及びホウ素含有化合物と混合される。いくつかの実施形態では、化合物Ｂ、第１の遷移金属触媒及びホウ素含有化合物は、低い温度（例えば、２５～３５℃）で反応容器中において一緒に添加された後、高い温度（例えば、６０～６５℃）で混合される。いくつかの実施形態では、反応混合物は、反応混合物が急冷される前に低い温度（例えば、４０～４５℃）まで冷却される。
【0085】
ホウ素含有化合物
ホウ素含有化合物は、所望の反応条件下で所望のホウ素化反応に適合する任意の好適なホウ素化合物である。いくつかの実施形態では、ホウ素含有化合物は、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）又は４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロランである。
ホウ素含有化合物は、所望の反応条件下で所望のホウ素化反応に適合する任意の好適なホウ素化合物である。いくつかの実施形態では、ホウ素含有化合物は、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）又は４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロランである。
【0086】
第１の遷移金属触媒
第１の遷移金属触媒は、ホウ素化の所望の変換に影響を及ぼすことができる任意の好適な遷移金属触媒である。このように、第１の遷移金属触媒は、化合物Ｂから化合物Ｃ又はＣ’への変換を触媒することができる任意の好適な遷移金属触媒である。検討される第１の遷移金属触媒は、イリジウムを含む。いくつかの実施形態では、第１の遷移金属触媒は、［Ｉｒ（ＯＭｅ）（ＣＯＤ）］２又は［Ｉｒ（Ｃｌ）（ＣＯＤ）］２である。理解されるように、これらのイリジウム触媒は、所望の反応性を促進するために有機配位子と共に使用される。好適な配位子としては、例えば、４，４’ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－２，２’－ビピリジン（ｄｉｂｙ）、３，４，７，８－テトラメチル－１，１０－フェナントロリン及び１，１０－フェナントロリンが挙げられる。
第１の遷移金属触媒は、ホウ素化の所望の変換に影響を及ぼすことができる任意の好適な遷移金属触媒である。このように、第１の遷移金属触媒は、化合物Ｂから化合物Ｃ又はＣ’への変換を触媒することができる任意の好適な遷移金属触媒である。検討される第１の遷移金属触媒は、イリジウムを含む。いくつかの実施形態では、第１の遷移金属触媒は、［Ｉｒ（ＯＭｅ）（ＣＯＤ）］２又は［Ｉｒ（Ｃｌ）（ＣＯＤ）］２である。理解されるように、これらのイリジウム触媒は、所望の反応性を促進するために有機配位子と共に使用される。好適な配位子としては、例えば、４，４’ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－２，２’－ビピリジン（ｄｉｂｙ）、３，４，７，８－テトラメチル－１，１０－フェナントロリン及び１，１０－フェナントロリンが挙げられる。
【0087】
第１の遷移金属触媒は、適切な量で使用される。使用される触媒が少なすぎると、所望の反応速度が得られないことがある。逆に、使用される触媒が多すぎると、望ましくない副生成物が得られることがあり、且つ／又は反応の費用が不必要に高くなる。いくつかの実施形態では、第１の遷移触媒は、化合物Ｂを基準として０．３～５モル％の量（例えば、化合物Ｂを基準として０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．２５、１．５、１．７５、２、２．２５、２．５、２．７５、３、３．２５、３．５、３．７５、４、４．２５、４．５、４．７５又は５モル％）で存在する。いくつかの実施形態では、第１の遷移金属触媒は、化合物Ｂを基準として１．５モル％の量で（二量体錯体として）存在する。理解されるように、配位子を有していない金属触媒は、配位子を添加した後、第１の遷移金属－リガンド触媒が化合物Ｂを基準として３モル％の量で存在するように、二量体として存在し得る。いくつかの実施形態では、第１の遷移金属触媒は、１．５モル％の［Ｉｒ（ＯＭｅ）（ｃｏｄ）］２－３％ｄｉｂｐｙである。いくつかの実施形態では、第１の遷移金属触媒は、ホウ素含有化合物（例えば、ビス（ピナコラト）ジボロン）（０．５ｅｑの二量体；１ｅｑのボラン）、配位子（０．０３ｅｑ）及びイリジウム含有化合物（０．０１５ｅｑ）の溶液を混合することによって調製される。いくつかの実施形態では、過剰なホウ素含有化合物が使用される。例えば、いくつかの実施形態では、１．５ｅｑのピナコールボランを添加してＮ－ボロネート誘導体を形成し、続いて第１の遷移金属触媒及びビス（ピナコラト）ジボランを添加する。いくつかの実施形態では、２ｅｑ以上のピナコールボランが添加され、続いて第１の遷移金属触媒が添加される。典型的には、２ｅｑ以上のピナコールボランが添加される実施形態では、ビス（ピナコラト）ジボロンは、反応混合物に添加する必要はない。いくつかの実施形態では、化合物Ｂは、第１の遷移金属－配位子触媒及びホウ素含有化合物の溶液として添加される。
【0088】
第２の遷移金属触媒
本明細書に記載されるように、開示される化合物Ａを調製するプロセスも、化合物Ｃ又はＣ’を化合物Ｄ及び第２の遷移金属触媒と混合することを含む。いくつかの実施形態では、化合物Ｃ又はＣ’と化合物Ｄ及び第２の遷移金属触媒との混合は、有機溶媒（例えば、ＴＨＦ）及び水の混合物を含む溶媒中で実施される。第１の遷移金属触媒と同様に、第２の遷移金属触媒は、所望の条件下で化合物Ｃ又はＣ’と化合物Ｄとのカップリングに影響を及ぼすことができる任意の好適な触媒である。検討される第２の遷移金属触媒は、パラジウム触媒又はニッケル触媒を含む。いくつかの実施形態では、第２の遷移金属触媒は、ジクロロ［９，９－ジメチル－４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ）キサンテン］パラジウム（ＩＩ）である。いくつかの実施形態では、第２の遷移金属触媒は、１，４－ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタン－パラジウム（ＩＩ）クロリド、トリ－ｎ－ブチルホスホニウムテトラフルオロボレートを有するビス（１，５－シクロオクタジエン）ニッケル（０）又は［（Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルエタン－１，２－ジアミン）ニッケル（オルト－トリル）クロリド］錯体である。いくつかの実施形態では、第２の遷移金属触媒は、トリ－ｎ－ブチルホスフィンを有するクロロ（２－メチルフェニル）（Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチル－１，２－エチレンジアミン）ニッケル（ＩＩ）である。いくつかの実施形態では、ｎ－ヘキシルマグネシウムクロリド、メチルマグネシウムクロリド、マンガン又は亜鉛のような還元添加剤が添加される。
本明細書に記載されるように、開示される化合物Ａを調製するプロセスも、化合物Ｃ又はＣ’を化合物Ｄ及び第２の遷移金属触媒と混合することを含む。いくつかの実施形態では、化合物Ｃ又はＣ’と化合物Ｄ及び第２の遷移金属触媒との混合は、有機溶媒（例えば、ＴＨＦ）及び水の混合物を含む溶媒中で実施される。第１の遷移金属触媒と同様に、第２の遷移金属触媒は、所望の条件下で化合物Ｃ又はＣ’と化合物Ｄとのカップリングに影響を及ぼすことができる任意の好適な触媒である。検討される第２の遷移金属触媒は、パラジウム触媒又はニッケル触媒を含む。いくつかの実施形態では、第２の遷移金属触媒は、ジクロロ［９，９－ジメチル－４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ）キサンテン］パラジウム（ＩＩ）である。いくつかの実施形態では、第２の遷移金属触媒は、１，４－ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタン－パラジウム（ＩＩ）クロリド、トリ－ｎ－ブチルホスホニウムテトラフルオロボレートを有するビス（１，５－シクロオクタジエン）ニッケル（０）又は［（Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルエタン－１，２－ジアミン）ニッケル（オルト－トリル）クロリド］錯体である。いくつかの実施形態では、第２の遷移金属触媒は、トリ－ｎ－ブチルホスフィンを有するクロロ（２－メチルフェニル）（Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチル－１，２－エチレンジアミン）ニッケル（ＩＩ）である。いくつかの実施形態では、ｎ－ヘキシルマグネシウムクロリド、メチルマグネシウムクロリド、マンガン又は亜鉛のような還元添加剤が添加される。
【0089】
第１の遷移金属触媒と同様に、第２の遷移金属触媒は、適切な量で使用される。いくつかの実施形態では、第２の遷移金属触媒は、化合物Ｂを基準として１～１０又は１～５モル％の量で存在する。いくつかの実施形態では、第２の遷移金属触媒は、ホスフィン配位子及びＰｄ触媒を有機溶媒中で混合することによって調製される。
【0090】
化合物Ｃ’の代替合成スキーム
化合物Ｃ’は、上記スキームで概ね概説したように調製され得る。
【化51】
【0091】
最初に化合物Ｂを金属－アミド塩基（例えば、金属は塩化メチルマグネシウム、塩化エチルマグネシウム、塩化イソプロピルマグネシウム、塩化ｎ－ヘキシルマグネシウム、臭化メチルマグネシウム、臭化エチルマグネシウム、臭化イソプロピルマグネシウム、臭化ｎ－ヘキシルマグネシウム、ｎ－ブチリチウム又はｔｅｒｔ－ブチリチウムであり；アミドが２，２，６，６－テトラメチルピペリジン、ジイソプロピルアミンである）、次にホウ素含有化合物（トリメチルボレート、トリエチルボレート、トリイソプロピルボレート、２－メトキシ－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン又は２－エトキシ－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン）、その後、任意選択で水又はジオール（ジエタノールアミン）又は二酸（メチルイミノ二酢酸）と混合して、化合物Ｃ’を形成する。化合物Ｃ’は、単離するか又は次のステップで直接使用することができる。このような化合物Ｃ’の調製は、（貴金属触媒の代わりに）この変換を促進するために金属－アミド塩基を使用して、費用及び持続可能性を含め多くの利点を提供する。さらに、結晶性ボロン酸エステルを単離することにより、より優れた純度及び収率を提供することができる。
【0092】
いくつかの実施形態では、化合物Ｃ’の調製は、塩化メチルマグネシウム（２．０～５．０モル当量；又はより具体的には３．６モル当量の量）及び／又は２，２，６，６－テトラメチルピペリジン（１．０～４．０モル当量；又はより具体的には３．６モル当量の量）及び／又はトリエチルボレート（２．０～５．０モル当量；又はより具体的には３．８モル当量の量）を使用することを含む。場合により、化合物Ｃ’を形成するための化合物Ｂの反応は、エーテル含有溶媒（テトラヒドロフラン、２－メチルテトラヒドロフラン、１，２－ジメトキシエタン、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル、イソプロピルエーテル）などの溶媒中で行う。場合により、７．５Ｌ／ｋｇのテトラヒドロフラン及び１２．５Ｌ／ｋｇの１，２－ジメトキシエタンが使用される。場合により、ジエタノールアミンのようなジオールで処理して化合物Ｃ’－６を形成することも考えられる。
【0093】
場合により、化合物Ｃ’は、以下のスキームに示すように調製される。
【化52】
【0094】
上記のスキームに示すように、化合物Ｃ’は、ジクロロ－ピリジル化合物を金属触媒と混合してシアノ－塩化ピリジル化合物を形成することにより調製することができる。例えば、１．５％モル当量の（トリス）ジベンジリデンアセトンパラジウム（０）及び３．０％モル当量の１，１’－ビス（ジ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィノ）フェロセン及び０．６５モル当量のシアン化亜鉛（ＩＩ）又はフェロシアン化カリウムを、２０モル当量の亜鉛金属の存在下、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（例えば、９Ｌ／ｋｇ）及びテトラヒドロフラン（例えば、１Ｌ／ｋｇ）のような溶媒中において７０℃でジクロロ－ピリジル化合物と混合し、上記に示すシアノ－クロロ－ピリジル化合物を形生成することができる。次に、シアノ－クロロ－ピリジル化合物を、ビス（ピナコラト）ジボロン（例えば、１．２モル当量）のようなホウ素源の存在下、且つ塩基（例えば２モル当量の酢酸カリウム）の存在下で、エーテル溶媒（例えば２－メチルテトラヒドロフラン）中、例えば７０℃で酢酸パラジウム（ＩＩ）（例えば、２．５％モル当量）及び２－ジシクロヘキシルホスフィノ－２’，６’－ジメトキシビフェニル（ＳＰｈｏｓとしても知られており、例えば、５．０モル当量）と混合し、化合物Ｃ’を形成することができる。
【0095】
化合物Ａを形成するための溶媒及び温度
化合物Ｃ又はＣ’と化合物Ｄとの混合は、好適な溶媒中で実施される。理解されるように、本プロセスが「ワンポット」プロセスである場合、溶媒は、ステップ（ａ）の溶媒を含み得る。いくつかの実施形態では、溶媒は、ステップ（ａ）の溶媒と異なり得る。いくつかの実施形態では、化合物Ｃ又はＣ’と化合物Ｄとの混合は、ＴＨＦ及び水を含む溶媒中で実施される。
化合物Ｃ又はＣ’と化合物Ｄとの混合は、好適な溶媒中で実施される。理解されるように、本プロセスが「ワンポット」プロセスである場合、溶媒は、ステップ（ａ）の溶媒を含み得る。いくつかの実施形態では、溶媒は、ステップ（ａ）の溶媒と異なり得る。いくつかの実施形態では、化合物Ｃ又はＣ’と化合物Ｄとの混合は、ＴＨＦ及び水を含む溶媒中で実施される。
【0096】
化合物Ｅを調製するプロセス
開示される化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスは、化合物Ｆ又はその塩をイミン還元酵素（ＩＲＥＤ）と混合して、化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を形成することを含む。いくつかの実施形態では、化合物Ｅは、化合物Ｅの（Ｓ）－立体異性体であるか、又は化合物Ｅの（Ｓ）－立体異性体に富んでいる。例として、種々の実施形態では、上記又は下記の他の実施形態と併せて、開示されるプロセスに従って製造される（Ｓ）－化合物Ｅは、９５％以上（例えば、９５、９６、９７、９８、９９、９９．５、９９．６、９９．７、９９．８又は９９．９％以上）のエナンチオマー過剰率を有する。
開示される化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスは、化合物Ｆ又はその塩をイミン還元酵素（ＩＲＥＤ）と混合して、化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を形成することを含む。いくつかの実施形態では、化合物Ｅは、化合物Ｅの（Ｓ）－立体異性体であるか、又は化合物Ｅの（Ｓ）－立体異性体に富んでいる。例として、種々の実施形態では、上記又は下記の他の実施形態と併せて、開示されるプロセスに従って製造される（Ｓ）－化合物Ｅは、９５％以上（例えば、９５、９６、９７、９８、９９、９９．５、９９．６、９９．７、９９．８又は９９．９％以上）のエナンチオマー過剰率を有する。
【0097】
種々の実施形態では、上記又は下記の他の実施形態と併せて、化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩は、化合物Ｆを基準として７５％以上の全体収率で調製される。いくつかの実施形態では、化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩は、化合物Ｆを基準として８０～９０％の収率において９９％ｅｅ超の立体化学的純度で調製される。いくつかの実施形態では、化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩は、化合物
から、９０％以上の収率において高い立体化学的純度で（例えば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％以上の収率；キラルＨＰＬＣによる＋９９％ｅｅ）調製される。いくつかの実施形態では、（Ｓ）－化合物Ｅは、収率９１％、キラルＨＰＬＣによるｅｅが＋９９％で調製される。
【化53】
【0098】
ＩＲＥＤ酵素は、任意の好適なＩＲＥＤであり得る。ＩＲＥＤは、市販されている（例えば、Ｐｒｏｚｏｍｉｘ Ｌｉｍｉｔｅｄ（Ｎｏｒｔｈｕｍｂｅｒｌａｎｄ、ＵＫ））。いくつかの実施形態では、使用されるＩＲＥＤはＩＲＥＤ－１５５であり、代わりにＩＲＥＤ－０７１２－Ｃと呼ばれることもある。
【0099】
ＩＲＥＤは、適切な量で存在する。例えば、いくつかの実施形態では、ＩＲＥＤは、化合物Ｆを基準として５～１０重量％存在する。いくつかの実施形態では、ＩＲＥＤは、化合物Ｆを基準として１０重量％の量で存在する。例えば、いくつかの実施形態では、ＩＲＥＤは、化合物Ｆを基準として５重量％の量で存在する。
【0100】
いくつかの実施形態では、酵素還元は、緩衝水溶液中で実施される。望ましくは、酵素還元は、６～９のｐＨ（例えば、６～８又は７～８のｐＨ）で実施される。好適な緩衝剤としては、例えば、２－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）－１，３－プロパンジオール（Ｔｒｉｓ）及びリン酸緩衝剤が挙げられる。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、３０体積の量で存在するリン酸カリウム緩衝剤（ｐＨ７．４）である。いくつかの実施形態では、緩衝剤は、１５体積の量で存在するリン酸カリウム緩衝剤（ｐＨ７．４）である。
【0101】
酵素反応混合物は、所望の速度の酵素活性を維持することができる任意の好適な還元剤、酸化剤及び／又は補因子を含む。例として、いくつかの実施形態では、化合物Ｆ又はその塩とＩＲＥＤとの混合は、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰ＋）（３重量％）、グルコース脱水素酵素（ＧＤＨ）（１．５～３重量％）及びグルコース（還元剤）を使用して実施される。いくつかの実施形態では、基質を基準としてわずかに過剰のＮＡＤＰ＋（１．０１ｍｍｏｌ）が使用される。同様に、過剰の還元剤が使用され得る（例えば、１．１ｅｑ、１．２ｅｑ、１．３ｅｑ、１．４ｅｑ又は１．５ｅｑの還元剤）。いくつかの実施形態では、酵素反応混合物は、１．４ｅｑのＤ－（＋）－グルコースを含む。
【0102】
化合物Ｆ又はその塩とＩＲＥＤとの混合は、適切な温度で実施される。様々な場合において、混合反応は、５０℃未満（例えば、４５℃）の温度で実施される。例えば、いくつかの実施形態では、化合物Ｆ又はその塩とイミン還元酵素との混合は、２０～４５℃、２０～４０℃、２０～３５℃又は３０～３５℃で実施される。
【0103】
本明細書に記載されるように、種々の実施形態では、上記又は下記の他の実施形態と併せて、開示されるプロセスは、化合物Ｇ又はその塩を化合物Ｈ及び有機金属試薬又はマグネシウム金属と混合して、化合物Ｆ’を形成することをさらに含む。これらの実施形態では、アミン保護基を含有する化合物Ｆ’は、アミン基から保護基を除去（例えば、脱保護）することによって化合物Ｆに変換される。いくつかの実施形態では、化合物Ｆ’の保護基は、Ｂｏｃであり、これは、例えば、酸性水溶液（例えば、ＨＣｌ）を使用して除去され得る。化合物Ｆ’から化合物Ｆ、次いで化合物Ｅへの変換を示す例示的な実施形態をスキーム４に示す。
スキーム４
スキーム４
【化54】
【0104】
いくつかの実施形態では、化合物Ｆ、例えば、
は、化合物Ｅに変換する前に単離される。
【化55】
【0105】
化合物Ｆを調製するプロセスは、バッチモード又は連続モードで実施できる。
【0106】
様々な場合において、化合物Ｆは、化合物Ｇを基準として４０％以上（例えば、化合物Ｇを基準として４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０又は８５％以上）の収率で調製される。化合物Ｇが、バッチモードにおいて、化合物Ｈ及び有機金属試薬又はマグネシウム金属を含む混合物と混合されるいくつかの実施形態では、化合物Ｆの収率は、４５～６５％である。いくつかの実施形態では、化合物Ｆは、６７～８２％の収率で連続モードにおいて調製され、ここで、化合物Ｇは、化合物Ｈ及び有機金属試薬又はマグネシウム金属を含む混合物と混合され、化合物Ｈ及び有機金属試薬を含む混合物は、連続モードで調製される。
【0107】
化合物Ｈと混合するための有機金属試薬は、任意の適切な有機金属試薬である。非限定的な好適な有機金属試薬としては、グリニャール試薬が挙げられる。いくつかの実施形態では、有機金属試薬は、塩化イソプロピルマグネシウム（ｉＰｒＭｇＣｌ）である。場合により、過剰の有機金属試薬が使用される。例えば、いくつかの実施形態では、化合物Ｈに対して１．５ｅｑのｉＰｒＭｇＣｌが使用される。いくつかの実施形態では、化合物Ｇは、限定試薬であり、すなわち化合物Ｈに対して１ｅｑ未満の化合物Ｇ（例えば、０．９５、０．９、０．８５又は０．８ｅｑ）が反応中に存在する。例えば、いくつかの実施形態では、０．８５ｅｑの化合物Ｇは、化合物Ｈ及びｉＰｒＭｇＣｌから形成されるグリニャール試薬に添加される。いくつかの実施形態では、有機金属試薬は、反応においてマグネシウム金属で置換され、すなわち、化合物Ｇは、化合物Ｈ及びマグネシウム金属を含む混合物と混合され、化合物Ｆを形成する。
【0108】
化合物Ｉ
本開示は、開示されるプロセスを用いて化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスを提供する。いくつかの実施形態では、開示されるプロセスは、化合物Ａ’（Ｙ１が－ＣＯ２Ｈである化合物Ａ）又はその塩を化合物Ｅ、その塩又はその立体異性体の塩及びカップリング剤と混合して、化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を形成することを含む。
本開示は、開示されるプロセスを用いて化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスを提供する。いくつかの実施形態では、開示されるプロセスは、化合物Ａ’（Ｙ１が－ＣＯ２Ｈである化合物Ａ）又はその塩を化合物Ｅ、その塩又はその立体異性体の塩及びカップリング剤と混合して、化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を形成することを含む。
【0109】
開示されるプロセスは、化合物Ｉを適切な収率で提供する。いくつかの実施形態では、化合物Ｉは、開示されるプロセスから、化合物Ａに対して７０％以上（例えば、７５％、８０％、８５％又は９０％以上）の化学的収率で形成される。さらに、化合物Ｉの立体化学的純度は、化合物Ａ１と（Ｓ）－化合物Ｅとの反応中に低下しない。
【0110】
カップリング剤は、化合物Ｉに存在するように、化合物Ａ’と化合物Ｅとの間にアミド結合を形成することができる任意の好適なカップリング剤であり得る。好適なカップリング剤としては、例えば、ホスホニウム塩及びウロニウム塩が挙げられる。いくつかの実施形態では、カップリング剤は、クロロ－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（ＴＣＦＨ）、Ｏ－［（エトキシカルボニル）シアノメチレンアミノ］－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＯＴＵ）、１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＣＯＭＵ）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、Ｎ－［（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－（ジメチルアミノ）メチレン］－ＮメチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ－オキシド（ＨＢＴＵ）、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、ビス（２－オキソ－３－オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（ＢＯＰＣｌ）、２－クロロ－４，６－ジメトキシ－１，３，５－トリアジン（ＣＤＭＴ）、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）及び１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ－トリス－ピロリジノ－ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＯｘｉｍ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、カップリング剤は、ＴＢＴＵ又はＣＤＩ又はクロロ－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（ＴＣＦＨ）である。さらに、いくつかの実施形態では、カップリング剤は、ＴＢＴＵである。いくつかの実施形態では、カップリング剤は、ＴＣＦＨである。いくつかの実施形態では、カップリング剤は、ＣＤＩである。
【0111】
いくつかの実施形態では、上記又は下記の他の実施形態と併せて、化合物Ａ’と化合物Ｅとの混合は、添加剤の存在下で行われる。添加剤の存在は、カップリング反応を促進し得る（例えば、化学収率の向上及び／又は立体化学的純度の向上）。添加剤の好適な非限定的な例としては、Ｎ－メチルイミダゾール及びアルキルアミン塩基（例えば、トリメチルアミン及びジイソプロピルエチルアミン）が挙げられる。いくつかの実施形態では、添加剤は、トリエチルアミンである。いくつかの実施形態では、添加剤は、Ｎ－メチルイミダゾール（ＮＭＩ）、トリメチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン又はそれらの混合物である。添加剤の好適な非限定的な例としては、有機酸（例えば、トリフルオロメタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、酢酸）及び鉱酸（例えば、塩酸、臭化水素酸）が挙げられる。いくつかの実施形態では、添加剤は、トリフルオロメタンスルホン酸である。いくつかの実施形態では、添加剤は、塩酸である。
【0112】
いくつかの実施形態では、化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスは、化合物Ｉの精製をさらに含む。例えば、いくつかの実施形態では、本プロセスは、化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を結晶化させることをさらに含む。いくつかの実施形態では、化合物Ｉは、アセトンを含む有機溶媒から再結晶される。いくつかの実施形態では、有機溶媒は、例えば、炭化水素溶媒（例えば、ヘプタン）などの貧溶媒をさらに含む。
【0113】
開示される化合物Ａ及び化合物Ｅを調製するプロセスは、化合物Ｉを調製するために有用であることが理解されるべきである。例えば、種々の実施形態では、上記又は下記の他の実施形態と併せて、開示される化合物Ｉを調製するプロセスは、本明細書に開示されるプロセスに従って化合物Ｅを調製することを含む。化合物Ａが、ＣＯ２Ｈ部分ではないＹ１を含むいくつかの場合、本明細書に開示されるプロセスは、化合物ＡのＹ１をＣＯ２Ｈ（すなわち化合物Ａ’）に変換することをさらに含み得る。例えば、Ｙ１がエステル又はアミドである場合、エステル又はアミドは、加水分解されて酸になる。Ｙ１がアルデヒドの場合、アルデヒドは、酸化されて酸になる。Ｙ１がニトリルの場合、ニトリルは、酸に変換される。Ｙ１がハロゲン化物（例えば、塩化物）である場合、ハロゲン化物は、酸に変換される。
【0114】
場合により、Ｙ１がハロゲン化物（例えば、Ｃｌ）である場合、化合物Ｉは、以下のスキームに示すように調製される。
【化56】
【0115】
いくつかの実施形態では、Ｙ１＝Ｃｌである化合物（Ａ）は、金属触媒０．５％モル～５．０％モル（酢酸パラジウム（ＩＩ）、塩化パラジウム（ＩＩ）、［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）を含むがこれらに限定されない）及び配位子０．５％モル～１０％モル（［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］、１，３－ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパンビス（テトラフルオロボレート）、１，３－ビス（ジシクロヘキシルホスフィノ）プロパンビス（テトラフルオロボレート）を含むが、これらに限定されない）及び一酸化炭素（２０～１００ポンド毎平方インチ；又はより具体的には５０ポンド毎平方インチ）及び２．０～１０．０モル当量の無機若しくは有機塩基又はそれらの混合物（酢酸カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カリウム、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（ＤＢＵとしても知られている）、１，５，７－トリアザビシクロ［４．４．０］デカ－５－エン（ＴＢＤとしても知られる）、１，５－ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ－５－エン（ＤＢＮとしても知られる；正確な実施形態において炭酸カリウム及びＤＢＵ）及び１．０～１５．０モル当量の求核剤を用いて所望の生成物を形成する（求核剤：生成物のＲ７）：（水：ＯＲ７＝ＯＨ；エタノール：ＯＲ７＝ＯＣＨ２ＣＨ３；メタノール：ＯＲ７＝ＯＣＨ３；フェニル：ＯＲ７＝ＯＰｈ；化合物（Ｅ）：生成物は、化合物Ｉである）を溶媒（例えば、１－メチルピロリジン、ジメチルスルホキシド、メタノール、アセトニトリル、酢酸）中、８５℃で形成する。
【0116】
Ｙ１がハロゲン化物（例えば、Ｃｌ）である場合、化合物Ｉを調製する前に、最初にハロゲン化物をＣＮ基に変換する。
【化57】
【0117】
化合物Ａ（Ｙ１＝Ｃｌの場合）は、１％～１０モル当量の配位子（４、５－ビス（ジフェニルホスフィノ）９，９－ジメチルキサンテン、１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン、ビス（２－ジシクロヘキシルホスフィノフェニル）エーテル）を有する１％～１０モル当量の金属触媒（ビス（１，５－シクロオクタジエン）ニッケル（０）又は酢酸パラジウム（ＩＩ）又は塩化パラジウム（ＩＩ）を含むがこれらに限定されない）と、０．５～１．５モル当量のシアン化亜鉛（ＩＩ）、及び１．０～１．５モル当量の添加剤４－ジメチルアミノピリジン、及び０．１～１．０モル当量の亜鉛、及び溶媒（ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミドを含むが、これらに限定されない）と例えば８０℃で混合され、Ｙ１がＣＮである化合物Ａを８０℃で形成する。
【0118】
実施形態
１．化合物Ａ
（式中、
Ｘ１は、ＮＨ、ＮＲ１、Ｏ、Ｓ又はＳＯ２であり；
Ｙ１は、－ＣＮ、－Ｃｌ、－ＣＨＯ、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨＲ１、－ＣＯＮ（Ｒ１）２又は－ＣＯ２Ｒ１であり；
Ｚ１及びＺ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｆ又はＣ１～Ｃ６アルキルであり；及び
各Ｒ１は、独立して、Ｃ１～Ｃ６アルキルである）
又はその塩を調製するプロセスであって、
（ａ）化合物Ｂ
を第１の遷移金属触媒及びホウ素含有化合物と混合して、ＲＢが水素である場合には化合物Ｃを形成するか、又はＲＢが－ＣＯＯＲ４である場合には化合物Ｃ’を形成し、且つ任意選択で化合物Ｃ又は化合物Ｃ’
（式中、ＲＢは、水素又は－ＣＯＯＲ４であり、Ｒ２及びＲ３の各々は、独立して、Ｈ若しくはＣ１～Ｃ６アルキルであるか、又はそれらが結合されているホウ素原子及び酸素原子と一緒になるとき、５員、６員若しくは８員の環状ボロネートを形成し；Ｒ４は、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり；Ｙ１Ａは、－ＣＮ、－Ｃｌ、－ＣＯＮＨＲ１、－ＣＯＮ（Ｒ１）２又は－ＣＯ２Ｒ１である）
を単離することと、
（ｂ）化合物Ｃ又は化合物Ｃ’を化合物Ｄ
（式中、Ｘ１Ａは、ＮＲ７、Ｏ又はＳであり、及びＲ７は、Ｃ１～Ｃ６アルキル、ベンジル又はｐ－メトキシベンジルであり、及びＬＧは、脱離基である）
及び第２の遷移金属触媒と混合して、化合物Ａ又はその塩を形成することと
を含むプロセス。
２．Ｘ１は、Ｏである、実施形態１のプロセス。
３．Ｙ１は、－ＣＮである、実施形態１又は２に記載のプロセス。
４．Ｙ１は、－Ｃｌである、実施形態１又は２に記載のプロセス。
５．化合物ＡのＹ１がＣＨＯ又はＣＯＯＨである場合、－ＣＮ、－ＣＯＮＨＲ１、－ＣＯＮ（Ｒ１）２又はＣＯ２Ｒ１をＣＨＯ又はＣＯＯＨに変換することをさらに含む、実施形態１又は２に記載のプロセス。
６．化合物ＡのＸ１は、ＮＨであり、及びプロセスは、Ｘ１ＡをＮＨに変換することをさらに含む、実施形態１～５のいずれか１つに記載のプロセス。
７．Ｚ１及びＺ２は、それぞれＨである、実施形態１～６のいずれか１つに記載のプロセス。
８．化合物Ａは、Ａ１：
の構造を有する、実施形態１～７のいずれか１つに記載のプロセス。
９．化合物Ａは、Ａ２：
の構造を有する、実施形態１～７のいずれか１つに記載のプロセス。
１０．第１の遷移金属触媒は、イリジウムを含む、実施形態１～９のいずれか１つに記載のプロセス。
１１．第１の遷移金属触媒は、［Ｉｒ（ＯＭｅ）（ｃｏｄ）］２、［Ｉｒ（Ｃｌ）（ｃｏｄ）］２からなる群から選択される、実施形態１０に記載のプロセス。
１２．第１の遷移触媒は、化合物Ｂを基準として１～５モル％又は重量％の量で存在する、実施形態１～１１のいずれか１つに記載のプロセス。
１３．ホウ素含有化合物は、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）又は４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロランである、実施形態１～１２のいずれか１つに記載のプロセス。
１４．ホウ素含有化合物は、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）である、実施形態１３に記載のプロセス。
１５．化合物Ｃは、Ｃ１：
の構造を有する、実施形態１～１４のいずれか１つに記載のプロセス。
１６．化合物Ｃ’は、Ｃ’－２：
の構造を有する、実施形態１～１４のいずれか１つに記載のプロセス。
１７．化合物Ｃ’は、Ｃ’－３：
の構造を有する、実施形態１～１４のいずれか１つに記載のプロセス。
１８．化合物Ｃ’は、Ｃ’－４、Ｃ’－５、Ｃ’－６又はＣ’－７：
の構造を有する、実施形態１～１４のいずれか１つに記載のプロセス。
１９．化合物ＤのＬＧは、スルホネートエステル、スルファメート又はハロゲン化物である、実施形態１～１８のいずれか１つに記載のプロセス。
２０．スルホネートエステルは、トシル、メシル、ノシル又はトリフリルである、実施形態１９に記載のプロセス。
２１．化合物Ｄは、Ｄ１：
の構造を有する、実施形態１～２０のいずれか１つに記載のプロセス。
２２．第２の遷移金属触媒は、パラジウム触媒又はニッケル触媒を含む、実施形態１～２１のいずれか１つに記載のプロセス。
２３．第２の遷移金属触媒は、ジクロロ［９，９－ジメチル－４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ）キサンテン］パラジウム（ＩＩ）である、実施形態２２に記載のプロセス。
２４．第２の遷移金属触媒は、化合物Ｂを基準として１～５モル％又は重量％の量で存在する、実施形態１～２３のいずれか１つに記載のプロセス。
２５．化合物Ｃ又は化合物Ｃ’を単離することなく容器中で実施される、実施形態１～２４のいずれか１つに記載のプロセス。
２６．化合物Ｃ又は化合物Ｃ’は、単離される、実施形態１～２５のいずれか１つに記載のプロセス。
２７．化合物Ｃは、Ｃ１－ａ：
の構造を有する、実施形態２６に記載のプロセス。
２８．化合物Ｃ’は、Ｃ’－５、Ｃ’－６又はＣ’－７：
の構造を有する、実施形態２６に記載のプロセス。
２９．化合物Ａは、化合物Ｂを基準として５０％以上の全体収率で調製される、実施形態１～２８のいずれか１つに記載のプロセス。
３０．化合物Ｅ：
（式中、
Ｘ２は、ＮＲ１、Ｏ又はＳであり、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり；
Ｙ２は、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又はＣ１～Ｃ６ハロアルキルであり；及び
Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又は塩化物である）
、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスであって、化合物Ｆ
又はその塩をイミン還元酵素（ＩＲＥＤ）と混合して、化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を形成することを含むプロセス。
３１．Ｘ２は、Ｏである、実施形態３０に記載のプロセス。
３２．Ｙ２は、ＣＦ３である、実施形態３０又は３１に記載のプロセス。
３３．Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、Ｈである、実施形態３０～３２のいずれか１つに記載のプロセス。
３４．化合物Ｅは、（Ｓ）－立体異性体：
に富んでいる、実施形態３０～３３のいずれか１つに記載のプロセス。
３５．化合物Ｅは、９５％以上のエナンチオマー過剰率を有する、実施形態３４に記載のプロセス。
３６．化合物Ｅは、９８％以上のエナンチオマー過剰率を有する、実施形態３５に記載のプロセス。
３７．化合物Ｅは、９９％以上のエナンチオマー過剰率を有する、実施形態３６に記載のプロセス。
３８．化合物Ｅは、９９．９％以上のエナンチオマー過剰率を有する、実施形態３７に記載のプロセス。
３９．混合は、２０～５０℃の温度で実施される、実施形態３０～３８のいずれか１つに記載のプロセス。
４０．温度は、２０～３５℃である、実施形態３９に記載のプロセス。
４１．温度は、３０～３５℃である、実施形態１に記載のプロセス。
４２．化合物Ｇ又はその塩を化合物Ｈ及び有機金属試薬又はマグネシウム金属と混合して、化合物Ｆ’
（式中、ＰＧは、保護基であり、及びＸｈは、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩである）
を形成することをさらに含む、実施形態３０～４１のいずれか１つに記載のプロセス。
４３．Ｘｈは、Ｉである、実施形態４２に記載のプロセス。
４４．Ｘｈは、Ｂｒである、実施形態４２に記載のプロセス。
４５．Ｙ２は、ＣＦ３である、実施形態４２又は４４のプロセス。
４６．Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、Ｈである、実施形態４２～４５のいずれか１つに記載のプロセス。
４７．有機金属試薬は、ｉＰｒＭｇＣｌである、実施形態４２～４６のいずれか１つに記載のプロセス。
４８．保護基は、ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）及びトリメチルシリル（ＴＭＳ）からなる群から選択される、実施形態４２～４７のいずれか１つに記載のプロセス。
４９．保護基は、Ｂｏｃである、実施形態４８に記載のプロセス。
５０．バッチモードで実施される、実施形態３０～４９のいずれか１つに記載のプロセス。
５１．連続モードで実施される、実施形態３０～４９のいずれか１つに記載のプロセス。
５２．化合物Ｆ’を脱保護して化合物Ｆ又はその塩を形成することをさらに含む、実施形態３０～５１のいずれか１つに記載のプロセス。
５３．化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩は、化合物Ｆを基準として７５％以上の全体収率で調製される、実施形態３０～５１のいずれか１つに記載のプロセス。
５４．化合物Ｉ：
、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスであって、化合物Ａ’又はその塩を化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩及びカップリング剤と混合して、化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩
（式中、
Ｘ１は、ＮＨ、ＮＲ１、Ｏ、Ｓ又はＳＯ２であり；
Ｘ２は、ＮＲ１、Ｏ又はＳであり；
各Ｒ１は、独立して、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり；
Ｙ２はＨ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又はＣ１～Ｃ６ハロアルキルであり；
Ｚ１及びＺ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｆ又はＣ１～Ｃ６アルキルであり；及び
Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又は塩化物である）
を形成することを含むプロセス。
５５．化合物Ｉは、（Ｓ）－立体異性体
である、実施形態５４に記載のプロセス。
５６．Ｘ１及びＸ２は、それぞれＯであり；Ｙ２は、－ＣＦ３であり；及びＺ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、Ｈである、実施形態５５に記載のプロセス。
５７．カップリング剤は、クロロ－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（ＴＣＦＨ）、Ｏ－［（エトキシカルボニル）シアノメチレンアミノ］－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＯＴＵ）、１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＣＯＭＵ）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、Ｎ－［（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－（ジメチルアミノ）メチレン］－ＮメチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ－オキシド（ＨＢＴＵ）、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、ビス（２－オキソ－３－オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（ＢＯＰＣｌ）、２－クロロ－４，６－ジメトキシ－１，３，５－トリアジン（ＣＤＭＴ）、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）及び１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ－トリス－ピロリジノ－ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＯｘｉｍ）からなる群から選択される、実施形態５４～５６のいずれか１つに記載のプロセス。
５８．カップリング剤は、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）である、実施形態５４～５７のいずれか１つに記載のプロセス。
５９．カップリング剤は、ＣＤＩである、実施形態５７に記載のプロセス。
６０．混合は、添加剤の存在下で行われる、実施形態５４～５９のいずれか１つに記載のプロセス。
６１．添加剤は、Ｎ－メチルイミダゾール（ＮＭＩ）又はトリエチルアミンである、実施形態６０に記載のプロセス。
６２．添加剤は、トリフルオロメタンスルホン酸、塩酸、臭化水素酸又はヨウ化水素酸である、実施形態６０に記載のプロセス。
６３．化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を結晶化させることをさらに含む、実施形態５４～６２のいずれか１つに記載のプロセス。
６４．化合物Ｅは、実施形態３０～５３のいずれか１つに記載のプロセスに従って調製される、実施形態５４～６３のいずれか１つに記載のプロセス。
６５．プロセスは、化合物Ａを化合物Ａ’に変換することをさらに含み、及び化合物Ａは、実施形態１～２９のいずれか１つに記載のプロセスに従って調製される、実施形態５４～６４のいずれか１つに記載のプロセス。
６６．化合物Ｉは、（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノンである、実施形態５４～６５のいずれか１つに記載のプロセス。
６７．化合物Ｉは、（Ｓ）－立体異性体に富んでいる、実施形態６６に記載のプロセス。
６８．化合物Ｉは、構造：
を有する、実施形態６６に記載のプロセス。
６９．化合物Ｂは、Ｂ１
（化合物Ｂ１）又はＢ１’
（化合物Ｂ１’）
の構造を有する、実施形態１～２８及び６５～６７のいずれか１つに記載のプロセス。
７０．溶媒中で２－シアノ－５－ニトロピリジン
若しくは２－クロロ－５－ニトロピリジン
又はその塩をニトロ還元酵素と混合して、化合物Ｂ１、化合物Ｂ１’又はその塩を形成することをさらに含む、実施形態６９に記載のプロセス。
７１．ニトロ還元酵素は、ＮＲ－１７、ＮＲ－Ｘ４－ｍｕｔ２、ＮＲ－Ｘ４－ｍｕｔ１０、ＮＲ－Ｘ１８、ＮＲ－Ｘ２７、ＮＲ－Ｘ３０、ＮＲ－Ｘ３２、ＮＲ－Ｘ３６、ＮＲ－Ｘ３９、ＮＲ－Ｘ４１、ＮＲ－Ｘ５３、ＮＲ－Ｘ５４及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、実施形態７０に記載のプロセス。
７２．ニトロ還元酵素は、ＮＲ－１７又はＮＲ－Ｘ３６である、実施形態７０又は７１に記載のプロセス。
７３．ＮＲ－１７又はＮＲ－３６は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．１～１０重量％の量で存在する、実施形態７２に記載のプロセス。
７４．ＮＲ－１７又はＮＲ－３６は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として５～７重量％の量で存在する、実施形態７３に記載のプロセス。
７５．グルコース脱水素酵素（ＧＤＨ）、第３の遷移金属触媒、補因子、還元剤又は緩衝剤の１つ以上の存在下で２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素とを混合することをさらに含む、実施形態７０～７４のいずれか１つに記載のプロセス。
７６．第３の遷移金属触媒は、バナジウム、鉄、銅又はそれらの組み合わせを含む、実施形態７５に記載のプロセス。
７７．バナジウムは、酸化バナジウムである、実施形態７５又は７６に記載のプロセス。
７８．酸化バナジウムは、酸化バナジウム（ＩＶ）又は酸化バナジウム（Ｖ）である、実施形態７５～７７のいずれか１つに記載のプロセス。
７９．第３の遷移金属触媒は、メタバナジン酸アンモニウム（ＮＨ４ＶＯ３）又は五酸化バナジウム（Ｖ２Ｏ５）である、実施形態７５～７８のいずれか１つに記載のプロセス。
８０．第３の遷移金属触媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．０１～２．５ｅｑの量で存在する、実施形態７３～７７のいずれか１つに記載のプロセス。
８１．第３の遷移金属触媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．１ｅｑの量で存在する、実施形態８０に記載のプロセス。
８２．第３の遷移金属触媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として２ｅｑの量で存在する、実施形態８０に記載のプロセス。
８３．グルコース脱水素酵素は、ＧＤＨ－１０１、ＧＤＨ－１０５、ＣＤＸ－９０１及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、実施形態７５～８２のいずれか１つに記載のプロセス。
８４．グルコース脱水素酵素は、ＧＤＨ－１０１である、実施形態７５～８３のいずれか１つに記載のプロセス。
８５．グルコース脱水素酵素は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．１～２５重量％の量で存在する、実施形態７５～８４のいずれか１つに記載のプロセス。
８６．グルコース脱水素酵素は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として１重量％の量で存在する、実施形態８５に記載のプロセス。
８７．補因子は、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ＋）、ジヒドロニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰ＋）、ジヒドロニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰＨ）、ＮＡＤＰＨの塩及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、実施形態７５～８６のいずれか１つに記載のプロセス。
８８．補因子は、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰ＋）である、実施形態７５～８７のいずれか１つに記載のプロセス。
８９．補因子は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．５～２０重量％の量で存在する、実施形態７５～８８のいずれか１つに記載のプロセス。
９０．補因子は、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．７重量％の量で存在する、実施形態８９に記載のプロセス。
９１．還元剤は、グルコースである、実施形態７５～９０のいずれか１つに記載のプロセス。
９２．還元剤は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として３～５ｅｑの量で存在する、実施形態７５～９１のいずれか１つのプロセス。
９３．還元剤は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として３．１ｅｑの量で存在する、実施形態９２に記載のプロセス。
９４．緩衝剤は、トリシン緩衝剤、リン酸カリウム緩衝剤、４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔｒｉｓ）又はそれらの組み合わせを含む、実施形態７５～９３のいずれか１つに記載のプロセス。
９５．緩衝剤は、リン酸カリウム緩衝剤である、実施形態７５～９４のいずれか１つに記載のプロセス。
９６．緩衝剤は、６～９のｐＨを維持する、実施形態７５～９５のいずれか１つに記載のプロセス。
９７．緩衝剤は、７．２～７．５のｐＨを維持する、実施形態９６に記載のプロセス。
９８．緩衝剤は、１００～２５０ｍＭの量で存在する、実施形態７５～９７のいずれか１つに記載のプロセス。
９９．緩衝剤は、８０～９５％（ｖ／ｗ）の量で存在する、実施形態９８に記載のプロセス。
１００．緩衝剤は、９２％（ｖ／ｗ）の量で存在する、実施形態９９に記載のプロセス。
１０１．２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素との混合は、水、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、トルエン、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、酢酸イソプロピル又はそれらの組み合わせを含む溶媒中で実施される、実施形態７０～１００のいずれか１つに記載のプロセス。
１０２．溶媒は、ＤＭＳＯを含む、実施形態７０～１０１のいずれか１つに記載のプロセス。
１０３．溶媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．５～２０体積のＤＭＳＯを含む、実施形態１０２に記載のプロセス。
１０４．溶媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．５体積のＤＭＳＯを含む、実施形態１０３に記載のプロセス。
１０５．２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素との混合は、２０～５０℃の温度で実施される、実施形態７０～１０４のいずれか１つに記載のプロセス。
１０６．温度は、３２～３８℃である、実施形態１０５に記載のプロセス。
１０７．２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素との混合は、フェドバッチモードで実施される、実施形態７０～１０６のいずれか１つに記載のプロセス。
１．化合物Ａ
【化58】
Ｘ１は、ＮＨ、ＮＲ１、Ｏ、Ｓ又はＳＯ２であり；
Ｙ１は、－ＣＮ、－Ｃｌ、－ＣＨＯ、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＮＨＲ１、－ＣＯＮ（Ｒ１）２又は－ＣＯ２Ｒ１であり；
Ｚ１及びＺ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｆ又はＣ１～Ｃ６アルキルであり；及び
各Ｒ１は、独立して、Ｃ１～Ｃ６アルキルである）
又はその塩を調製するプロセスであって、
（ａ）化合物Ｂ
【化59】
【化60】
を単離することと、
（ｂ）化合物Ｃ又は化合物Ｃ’を化合物Ｄ
【化61】
及び第２の遷移金属触媒と混合して、化合物Ａ又はその塩を形成することと
を含むプロセス。
２．Ｘ１は、Ｏである、実施形態１のプロセス。
３．Ｙ１は、－ＣＮである、実施形態１又は２に記載のプロセス。
４．Ｙ１は、－Ｃｌである、実施形態１又は２に記載のプロセス。
５．化合物ＡのＹ１がＣＨＯ又はＣＯＯＨである場合、－ＣＮ、－ＣＯＮＨＲ１、－ＣＯＮ（Ｒ１）２又はＣＯ２Ｒ１をＣＨＯ又はＣＯＯＨに変換することをさらに含む、実施形態１又は２に記載のプロセス。
６．化合物ＡのＸ１は、ＮＨであり、及びプロセスは、Ｘ１ＡをＮＨに変換することをさらに含む、実施形態１～５のいずれか１つに記載のプロセス。
７．Ｚ１及びＺ２は、それぞれＨである、実施形態１～６のいずれか１つに記載のプロセス。
８．化合物Ａは、Ａ１：
【化62】
９．化合物Ａは、Ａ２：
【化63】
１０．第１の遷移金属触媒は、イリジウムを含む、実施形態１～９のいずれか１つに記載のプロセス。
１１．第１の遷移金属触媒は、［Ｉｒ（ＯＭｅ）（ｃｏｄ）］２、［Ｉｒ（Ｃｌ）（ｃｏｄ）］２からなる群から選択される、実施形態１０に記載のプロセス。
１２．第１の遷移触媒は、化合物Ｂを基準として１～５モル％又は重量％の量で存在する、実施形態１～１１のいずれか１つに記載のプロセス。
１３．ホウ素含有化合物は、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）又は４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロランである、実施形態１～１２のいずれか１つに記載のプロセス。
１４．ホウ素含有化合物は、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）である、実施形態１３に記載のプロセス。
１５．化合物Ｃは、Ｃ１：
【化64】
１６．化合物Ｃ’は、Ｃ’－２：
【化65】
１７．化合物Ｃ’は、Ｃ’－３：
【化66】
１８．化合物Ｃ’は、Ｃ’－４、Ｃ’－５、Ｃ’－６又はＣ’－７：
【化67】
１９．化合物ＤのＬＧは、スルホネートエステル、スルファメート又はハロゲン化物である、実施形態１～１８のいずれか１つに記載のプロセス。
２０．スルホネートエステルは、トシル、メシル、ノシル又はトリフリルである、実施形態１９に記載のプロセス。
２１．化合物Ｄは、Ｄ１：
【化68】
２２．第２の遷移金属触媒は、パラジウム触媒又はニッケル触媒を含む、実施形態１～２１のいずれか１つに記載のプロセス。
２３．第２の遷移金属触媒は、ジクロロ［９，９－ジメチル－４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ）キサンテン］パラジウム（ＩＩ）である、実施形態２２に記載のプロセス。
２４．第２の遷移金属触媒は、化合物Ｂを基準として１～５モル％又は重量％の量で存在する、実施形態１～２３のいずれか１つに記載のプロセス。
２５．化合物Ｃ又は化合物Ｃ’を単離することなく容器中で実施される、実施形態１～２４のいずれか１つに記載のプロセス。
２６．化合物Ｃ又は化合物Ｃ’は、単離される、実施形態１～２５のいずれか１つに記載のプロセス。
２７．化合物Ｃは、Ｃ１－ａ：
【化69】
２８．化合物Ｃ’は、Ｃ’－５、Ｃ’－６又はＣ’－７：
【化70】
２９．化合物Ａは、化合物Ｂを基準として５０％以上の全体収率で調製される、実施形態１～２８のいずれか１つに記載のプロセス。
３０．化合物Ｅ：
【化71】
Ｘ２は、ＮＲ１、Ｏ又はＳであり、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり；
Ｙ２は、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又はＣ１～Ｃ６ハロアルキルであり；及び
Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又は塩化物である）
、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を調製するプロセスであって、化合物Ｆ
【化72】
３１．Ｘ２は、Ｏである、実施形態３０に記載のプロセス。
３２．Ｙ２は、ＣＦ３である、実施形態３０又は３１に記載のプロセス。
３３．Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、Ｈである、実施形態３０～３２のいずれか１つに記載のプロセス。
３４．化合物Ｅは、（Ｓ）－立体異性体：
【化73】
３５．化合物Ｅは、９５％以上のエナンチオマー過剰率を有する、実施形態３４に記載のプロセス。
３６．化合物Ｅは、９８％以上のエナンチオマー過剰率を有する、実施形態３５に記載のプロセス。
３７．化合物Ｅは、９９％以上のエナンチオマー過剰率を有する、実施形態３６に記載のプロセス。
３８．化合物Ｅは、９９．９％以上のエナンチオマー過剰率を有する、実施形態３７に記載のプロセス。
３９．混合は、２０～５０℃の温度で実施される、実施形態３０～３８のいずれか１つに記載のプロセス。
４０．温度は、２０～３５℃である、実施形態３９に記載のプロセス。
４１．温度は、３０～３５℃である、実施形態１に記載のプロセス。
４２．化合物Ｇ又はその塩を化合物Ｈ及び有機金属試薬又はマグネシウム金属と混合して、化合物Ｆ’
【化74】
を形成することをさらに含む、実施形態３０～４１のいずれか１つに記載のプロセス。
４３．Ｘｈは、Ｉである、実施形態４２に記載のプロセス。
４４．Ｘｈは、Ｂｒである、実施形態４２に記載のプロセス。
４５．Ｙ２は、ＣＦ３である、実施形態４２又は４４のプロセス。
４６．Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、Ｈである、実施形態４２～４５のいずれか１つに記載のプロセス。
４７．有機金属試薬は、ｉＰｒＭｇＣｌである、実施形態４２～４６のいずれか１つに記載のプロセス。
４８．保護基は、ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）及びトリメチルシリル（ＴＭＳ）からなる群から選択される、実施形態４２～４７のいずれか１つに記載のプロセス。
４９．保護基は、Ｂｏｃである、実施形態４８に記載のプロセス。
５０．バッチモードで実施される、実施形態３０～４９のいずれか１つに記載のプロセス。
５１．連続モードで実施される、実施形態３０～４９のいずれか１つに記載のプロセス。
５２．化合物Ｆ’を脱保護して化合物Ｆ又はその塩を形成することをさらに含む、実施形態３０～５１のいずれか１つに記載のプロセス。
５３．化合物Ｅ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩は、化合物Ｆを基準として７５％以上の全体収率で調製される、実施形態３０～５１のいずれか１つに記載のプロセス。
５４．化合物Ｉ：
【化75】
【化76】
Ｘ１は、ＮＨ、ＮＲ１、Ｏ、Ｓ又はＳＯ２であり；
Ｘ２は、ＮＲ１、Ｏ又はＳであり；
各Ｒ１は、独立して、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり；
Ｙ２はＨ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又はＣ１～Ｃ６ハロアルキルであり；
Ｚ１及びＺ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｆ又はＣ１～Ｃ６アルキルであり；及び
Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル又は塩化物である）
を形成することを含むプロセス。
５５．化合物Ｉは、（Ｓ）－立体異性体
【化77】
５６．Ｘ１及びＸ２は、それぞれＯであり；Ｙ２は、－ＣＦ３であり；及びＺ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４、Ｚ５及びＺ６の各々は、Ｈである、実施形態５５に記載のプロセス。
５７．カップリング剤は、クロロ－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（ＴＣＦＨ）、Ｏ－［（エトキシカルボニル）シアノメチレンアミノ］－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＯＴＵ）、１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロホスフェート（ＣＯＭＵ）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、Ｎ－［（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－（ジメチルアミノ）メチレン］－ＮメチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ－オキシド（ＨＢＴＵ）、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、プロパンホスホン酸無水物（Ｔ３Ｐ）、ビス（２－オキソ－３－オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（ＢＯＰＣｌ）、２－クロロ－４，６－ジメトキシ－１，３，５－トリアジン（ＣＤＭＴ）、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）及び１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ－トリス－ピロリジノ－ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＯｘｉｍ）からなる群から選択される、実施形態５４～５６のいずれか１つに記載のプロセス。
５８．カップリング剤は、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）である、実施形態５４～５７のいずれか１つに記載のプロセス。
５９．カップリング剤は、ＣＤＩである、実施形態５７に記載のプロセス。
６０．混合は、添加剤の存在下で行われる、実施形態５４～５９のいずれか１つに記載のプロセス。
６１．添加剤は、Ｎ－メチルイミダゾール（ＮＭＩ）又はトリエチルアミンである、実施形態６０に記載のプロセス。
６２．添加剤は、トリフルオロメタンスルホン酸、塩酸、臭化水素酸又はヨウ化水素酸である、実施形態６０に記載のプロセス。
６３．化合物Ｉ、その立体異性体、その塩又はその立体異性体の塩を結晶化させることをさらに含む、実施形態５４～６２のいずれか１つに記載のプロセス。
６４．化合物Ｅは、実施形態３０～５３のいずれか１つに記載のプロセスに従って調製される、実施形態５４～６３のいずれか１つに記載のプロセス。
６５．プロセスは、化合物Ａを化合物Ａ’に変換することをさらに含み、及び化合物Ａは、実施形態１～２９のいずれか１つに記載のプロセスに従って調製される、実施形態５４～６４のいずれか１つに記載のプロセス。
６６．化合物Ｉは、（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノンである、実施形態５４～６５のいずれか１つに記載のプロセス。
６７．化合物Ｉは、（Ｓ）－立体異性体に富んでいる、実施形態６６に記載のプロセス。
６８．化合物Ｉは、構造：
【化78】
６９．化合物Ｂは、Ｂ１
【化79】
【化80】
の構造を有する、実施形態１～２８及び６５～６７のいずれか１つに記載のプロセス。
７０．溶媒中で２－シアノ－５－ニトロピリジン
【化81】
【化82】
７１．ニトロ還元酵素は、ＮＲ－１７、ＮＲ－Ｘ４－ｍｕｔ２、ＮＲ－Ｘ４－ｍｕｔ１０、ＮＲ－Ｘ１８、ＮＲ－Ｘ２７、ＮＲ－Ｘ３０、ＮＲ－Ｘ３２、ＮＲ－Ｘ３６、ＮＲ－Ｘ３９、ＮＲ－Ｘ４１、ＮＲ－Ｘ５３、ＮＲ－Ｘ５４及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、実施形態７０に記載のプロセス。
７２．ニトロ還元酵素は、ＮＲ－１７又はＮＲ－Ｘ３６である、実施形態７０又は７１に記載のプロセス。
７３．ＮＲ－１７又はＮＲ－３６は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．１～１０重量％の量で存在する、実施形態７２に記載のプロセス。
７４．ＮＲ－１７又はＮＲ－３６は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として５～７重量％の量で存在する、実施形態７３に記載のプロセス。
７５．グルコース脱水素酵素（ＧＤＨ）、第３の遷移金属触媒、補因子、還元剤又は緩衝剤の１つ以上の存在下で２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素とを混合することをさらに含む、実施形態７０～７４のいずれか１つに記載のプロセス。
７６．第３の遷移金属触媒は、バナジウム、鉄、銅又はそれらの組み合わせを含む、実施形態７５に記載のプロセス。
７７．バナジウムは、酸化バナジウムである、実施形態７５又は７６に記載のプロセス。
７８．酸化バナジウムは、酸化バナジウム（ＩＶ）又は酸化バナジウム（Ｖ）である、実施形態７５～７７のいずれか１つに記載のプロセス。
７９．第３の遷移金属触媒は、メタバナジン酸アンモニウム（ＮＨ４ＶＯ３）又は五酸化バナジウム（Ｖ２Ｏ５）である、実施形態７５～７８のいずれか１つに記載のプロセス。
８０．第３の遷移金属触媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．０１～２．５ｅｑの量で存在する、実施形態７３～７７のいずれか１つに記載のプロセス。
８１．第３の遷移金属触媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．１ｅｑの量で存在する、実施形態８０に記載のプロセス。
８２．第３の遷移金属触媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として２ｅｑの量で存在する、実施形態８０に記載のプロセス。
８３．グルコース脱水素酵素は、ＧＤＨ－１０１、ＧＤＨ－１０５、ＣＤＸ－９０１及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、実施形態７５～８２のいずれか１つに記載のプロセス。
８４．グルコース脱水素酵素は、ＧＤＨ－１０１である、実施形態７５～８３のいずれか１つに記載のプロセス。
８５．グルコース脱水素酵素は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．１～２５重量％の量で存在する、実施形態７５～８４のいずれか１つに記載のプロセス。
８６．グルコース脱水素酵素は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として１重量％の量で存在する、実施形態８５に記載のプロセス。
８７．補因子は、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ＋）、ジヒドロニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰ＋）、ジヒドロニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰＨ）、ＮＡＤＰＨの塩及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、実施形態７５～８６のいずれか１つに記載のプロセス。
８８．補因子は、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰ＋）である、実施形態７５～８７のいずれか１つに記載のプロセス。
８９．補因子は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として０．５～２０重量％の量で存在する、実施形態７５～８８のいずれか１つに記載のプロセス。
９０．補因子は、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．７重量％の量で存在する、実施形態８９に記載のプロセス。
９１．還元剤は、グルコースである、実施形態７５～９０のいずれか１つに記載のプロセス。
９２．還元剤は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として３～５ｅｑの量で存在する、実施形態７５～９１のいずれか１つのプロセス。
９３．還元剤は、２－シアノ－５－ニトロピリジン又は２－クロロ－５－ニトロピリジンを基準として３．１ｅｑの量で存在する、実施形態９２に記載のプロセス。
９４．緩衝剤は、トリシン緩衝剤、リン酸カリウム緩衝剤、４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔｒｉｓ）又はそれらの組み合わせを含む、実施形態７５～９３のいずれか１つに記載のプロセス。
９５．緩衝剤は、リン酸カリウム緩衝剤である、実施形態７５～９４のいずれか１つに記載のプロセス。
９６．緩衝剤は、６～９のｐＨを維持する、実施形態７５～９５のいずれか１つに記載のプロセス。
９７．緩衝剤は、７．２～７．５のｐＨを維持する、実施形態９６に記載のプロセス。
９８．緩衝剤は、１００～２５０ｍＭの量で存在する、実施形態７５～９７のいずれか１つに記載のプロセス。
９９．緩衝剤は、８０～９５％（ｖ／ｗ）の量で存在する、実施形態９８に記載のプロセス。
１００．緩衝剤は、９２％（ｖ／ｗ）の量で存在する、実施形態９９に記載のプロセス。
１０１．２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素との混合は、水、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、トルエン、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、酢酸イソプロピル又はそれらの組み合わせを含む溶媒中で実施される、実施形態７０～１００のいずれか１つに記載のプロセス。
１０２．溶媒は、ＤＭＳＯを含む、実施形態７０～１０１のいずれか１つに記載のプロセス。
１０３．溶媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．５～２０体積のＤＭＳＯを含む、実施形態１０２に記載のプロセス。
１０４．溶媒は、２－シアノ－５－ニトロピリジンを基準として０．５体積のＤＭＳＯを含む、実施形態１０３に記載のプロセス。
１０５．２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素との混合は、２０～５０℃の温度で実施される、実施形態７０～１０４のいずれか１つに記載のプロセス。
１０６．温度は、３２～３８℃である、実施形態１０５に記載のプロセス。
１０７．２－シアノ－５－ニトロピリジン、２－クロロ－５－ニトロピリジン又はその塩とニトロ還元酵素との混合は、フェドバッチモードで実施される、実施形態７０～１０６のいずれか１つに記載のプロセス。
【実施例】
【0119】
以下の実施例は、開示されるプロセスをさらに例示するが、当然のことながら、決してその範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
【0120】
本明細書では、以下の略語を使用する。ＮＭＲは、核磁気共鳴を意味し；ＳＦＣは、超臨界流体クロマトグラフィーを意味し；ＤＩＰＥＡは、ジイソプロピルエチルアミンを意味し；ＤＭＦは、ジメチルホルムアミドを意味し；ＰｙＢｒｏＰは、ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェートを意味し；ＮａＨＣＯ３は、炭酸水素ナトリウムを意味し；ＥｔＯＡｃは、酢酸エチルを意味し；ＥｔＯＨは、エタノールを意味し；ＤＣＭは、ジクロロメタンを意味し；ＴＥＡは、トリメチルアミンを意味し；ＥＳＩは、エレクトロスプレーイオン化を意味し；ＤＭＳＯは、ジメチルスルホキシドを意味し；ｎｄは、不検出を意味し；Ｖ又はｖｏｌは、体積（Ｌ／ｋｇ）を意味し；ＧＣは、ガスクロマトグラフィーを意味する。
【0121】
比較プロセス例
比較例１ － （４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）（２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－１－イル）メタノン
２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン（０．１００ｇ、０．４３６ｍｍｏｌ、Ａｒｃｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎｓ、ＮＪ）、４－（（２，４－ジメトキシベンジル）アミノ）－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボン酸ヒドロクロリド（０．２７３ｇ、０．６５４ｍｍｏｌ）及び１，１’－ジメチルトリエチルアミン（０．５６４ｇ、０．７６２ｍＬ、４．３６ｍｍｏｌ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）のＤＭＡ（４ｍＬ）溶液に、ブロモトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（０．２０３ｇ、０．４３６ｍｍｏｌ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を添加し、得られた混合物を５０℃で３０分間加熱した。反応物を室温にし、水、飽和ＮａＨＣＯ３で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中０～５０％（３：１ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ）を用いてシリカゲル上でクロマトグラフ処理し、（４－（（２，４－ジメトキシベンジル）アミノ）－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）（２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－１－イル）メタノンを淡黄色固体として得た。ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：５９３（Ｍ＋Ｈ）＋。
比較例１ － （４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）（２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－１－イル）メタノン
【化83】
【0122】
（４－（（２，４－ジメトキシベンジル）アミノ）－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）（２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－１－イル）メタノンのＤＣＭ（２ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（１４．８０ｇ、１０ｍＬ、１３０ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を添加し、得られた混合物を５０℃で１時間加熱した。反応物を濃縮し、１０％Ｎａ２ＣＯ３で洗浄し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を濃縮し、０～５０％（３：１ＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ）を用いてシリカゲル上でクロマトグラフ処理し、（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）（２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－１－イル）メタノン（０．０４２ｇ、０．０９５ｍｍｏｌ、２１．７６％収率）をオフホワイトの固体として得た。ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：４４３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【0123】
化合物を、８０ｍＬ／分の流量を使用して、７５％液体ＣＯ２及び２５％ＭｅＯＨ（０．２％ＴＥＡを含む）を移動相に用いてＣｈｉｒａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＡＳカラム（２５０×２１ｍｍ、５ｍｍ）を使用する分取ＳＦＣにより精製し、１３．５ｍｇのピーク１（ｅｅが＞９９％）及び１３ｍｇのピーク２（ｅｅが＞９９％）を生成し、立体化学は任意に割り当てた。ピーク１：（Ｓ）－（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）（２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－１－イル）メタノン（０．０１３ｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）。白色固体。ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：４４３（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ｐｐｍ ８．６９－８．９９（ｍ，１Ｈ），７．７３－７．８６（ｍ，３Ｈ），７．５７－７．６７（ｍ，２Ｈ），７．０３（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．３８（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．０５（ｂｒ ｓ，２Ｈ），３．６４－３．９１（ｍ，１Ｈ），２．３５－２．４６（ｍ，２Ｈ），１．８６－２．０１（ｍ，１Ｈ），１．２９－１．７２（ｍ，５Ｈ）．ピーク２：３４１５６３４＃１（Ｒ）－（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）（２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－１－イル）メタノン（０．０１１ｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）。白色固体。１２６７７３－１５－２ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：４４３（Ｍ＋Ｈ）＋．１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ ｐｐｍ ８．８１－８．９８（ｍ，１Ｈ），７．７４－７．８４（ｍ，３Ｈ），７．６２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ），７．０３（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．３９（ｂｒ ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，２Ｈ），５．０５（ｂｒ ｓ，２Ｈ），３．７２－３．８７（ｍ，１Ｈ），２．３６－２．４５（ｍ，２Ｈ），１．８５－２．０４（ｍ，１Ｈ），１．３１－１．７２（ｍ，５Ｈ）．
【0124】
（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノンを上記と同様の方式で調製した。エナンチオマーは、表１に概説したように分離した。
【0125】
【表1】
【0126】
実施例１。化合物Ａ１の合成 － ４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボニトリル
カリウム４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－オレート
合成１
カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１２４．５ｇ、１．１モル、１．０ｅｑ）のテトラヒドロフラン（３．０Ｌ、３０Ｖ）溶液に、メチル２－ヒドロキシアセテート（１００ｇ、１．１モル、１．０ｅｑ）のテトラヒドロフラン（５００ｍＬ、５．０Ｖ）溶液を、追加の漏斗を用いて０～１０℃で３０～４５分間かけて添加した。他の好適な塩基としては、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム及び炭酸水素ナトリウムが挙げられる。得られた溶液を０～１０℃でさらに１５～２０分間撹拌した。次に、アクリロニトリル（８８．３ｇ、１．７モル、１．５ｅｑ）のテトラヒドロフラン（１．０Ｌ、１０Ｖ）溶液を、５～１０℃で３．５～４時間かけて上記の反応塊にゆっくりと添加した。他の好適な溶媒としてはＭＴＢＥが挙げられる。５～１０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を水（２０ｍＬ、１．１モル、１．０ｅｑ）で急冷し、５～１０℃で３０分間撹拌し、得られたスラリーを濾過し、得られた固体をＴＨＦ（２００ｍＬ、２．０Ｖ）で洗浄して、所望の生成物であるカリウム４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－オレートを得た。分析データ：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：４．５１（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ），３．７０（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）．
【化84】
【化85】
カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１２４．５ｇ、１．１モル、１．０ｅｑ）のテトラヒドロフラン（３．０Ｌ、３０Ｖ）溶液に、メチル２－ヒドロキシアセテート（１００ｇ、１．１モル、１．０ｅｑ）のテトラヒドロフラン（５００ｍＬ、５．０Ｖ）溶液を、追加の漏斗を用いて０～１０℃で３０～４５分間かけて添加した。他の好適な塩基としては、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム及び炭酸水素ナトリウムが挙げられる。得られた溶液を０～１０℃でさらに１５～２０分間撹拌した。次に、アクリロニトリル（８８．３ｇ、１．７モル、１．５ｅｑ）のテトラヒドロフラン（１．０Ｌ、１０Ｖ）溶液を、５～１０℃で３．５～４時間かけて上記の反応塊にゆっくりと添加した。他の好適な溶媒としてはＭＴＢＥが挙げられる。５～１０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を水（２０ｍＬ、１．１モル、１．０ｅｑ）で急冷し、５～１０℃で３０分間撹拌し、得られたスラリーを濾過し、得られた固体をＴＨＦ（２００ｍＬ、２．０Ｖ）で洗浄して、所望の生成物であるカリウム４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－オレートを得た。分析データ：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：４．５１（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ），３．７０（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）．
【0127】
合成２
カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１８．７ｇ、１６７ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）の２－メチルテトラヒドロフラン（４５０ｍＬ、３０Ｌ／ｋｇ）溶液に、メチル２－ヒドロキシアセテート（１５．０ｇ、１６７ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）の２－メチルテトラヒドロフラン（７５．０ｍＬ，５．０Ｌ／ｋｇ）溶液を、０～１０℃で３０分かけて添加した。アクリロニトリル（１９．４ｇ、３６６ｍｍｏｌ、２．２ｅｑ）のテトラヒドロフラン（１５０ｍＬ、１０Ｌ／ｋｇ）溶液を、５～１０℃で４時間かけてゆっくり添加した。５～１０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を水（３．０ｍＬ、１６７ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）で急冷し、スラリーを５～１０℃で３０分間撹拌し、濾過し、２－ＭｅＴＨＦ（３０ｍＬ、２．０Ｌ／ｋｇ）で洗浄して、所望の生成物であるカリウム４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－オレートを生成した。分析データ：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：４．５１（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ），３．７０（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）．
カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１８．７ｇ、１６７ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）の２－メチルテトラヒドロフラン（４５０ｍＬ、３０Ｌ／ｋｇ）溶液に、メチル２－ヒドロキシアセテート（１５．０ｇ、１６７ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）の２－メチルテトラヒドロフラン（７５．０ｍＬ，５．０Ｌ／ｋｇ）溶液を、０～１０℃で３０分かけて添加した。アクリロニトリル（１９．４ｇ、３６６ｍｍｏｌ、２．２ｅｑ）のテトラヒドロフラン（１５０ｍＬ、１０Ｌ／ｋｇ）溶液を、５～１０℃で４時間かけてゆっくり添加した。５～１０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を水（３．０ｍＬ、１６７ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）で急冷し、スラリーを５～１０℃で３０分間撹拌し、濾過し、２－ＭｅＴＨＦ（３０ｍＬ、２．０Ｌ／ｋｇ）で洗浄して、所望の生成物であるカリウム４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－オレートを生成した。分析データ：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：４．５１（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ），３．７０（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）．
【0128】
化合物Ｄ － （４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－イル）４－メチルベンゼンスルホネート
合成１
２－ＭｅＴＨＦ（３０ｍＬ、１０．０Ｖ）中のカリウム４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－オレート（３．０ｇ、２０．１ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ、８８．０％ｗ／ｗ）のスラリーに、炭酸カリウム（２．８ｇ、２０ｍｍｏｌ、１ｅｑ）及び塩化トシル（３．９ｇ、２０ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を２０～２５℃で順次添加し、得られたスラリーを２０～２５℃で２～３時間撹拌した。反応はガスクロマトグラフィー（ＧＣ）でモニタした。反応混合物を濾過し、濾液を１．５ＮのＨＣｌ水溶液（５Ｖ）、続いて１０％炭酸水素ナトリウム水溶液（５Ｖ）で洗浄した。有機相を分離し、減圧下で濃縮し、生成物を得た。分析データ：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：２．５０（ｓ，３Ｈ），４．７２（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）．
【化86】
２－ＭｅＴＨＦ（３０ｍＬ、１０．０Ｖ）中のカリウム４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－オレート（３．０ｇ、２０．１ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ、８８．０％ｗ／ｗ）のスラリーに、炭酸カリウム（２．８ｇ、２０ｍｍｏｌ、１ｅｑ）及び塩化トシル（３．９ｇ、２０ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を２０～２５℃で順次添加し、得られたスラリーを２０～２５℃で２～３時間撹拌した。反応はガスクロマトグラフィー（ＧＣ）でモニタした。反応混合物を濾過し、濾液を１．５ＮのＨＣｌ水溶液（５Ｖ）、続いて１０％炭酸水素ナトリウム水溶液（５Ｖ）で洗浄した。有機相を分離し、減圧下で濃縮し、生成物を得た。分析データ：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：２．５０（ｓ，３Ｈ），４．７２（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）．
【0129】
合成２
カリウム４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－オレート（４．６ｇ活性、３１．５ｍｍｏｌ；全質量６．６ｇ）のアセトニトリル（３５ｍＬ、７．６Ｌ／ｋｇ）溶液に炭酸カリウム（８．０ｇ、５８ｍｍｏｌ、１．８当量）、ｐ－トルエンスルホニルクロリド（９．３ｇ、４９ｍｍｏｌ、１．５当量）及び４－ジメチルアミノピリジン（７７０ｍｇ、６．３ｍｍｏｌ、０．２０当量）を２０℃で添加した。他の好適な塩基としては、アミン塩基、例えばジイソプロピルエチルアミン、ジイソプロピルアミン、ピリジン、２，６－ルチジン、２，４，６－コリジンだけでなく、カーボネート、例えば炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウムが挙げられる。反応混合物を２０℃で２～３時間撹拌した。反応混合物を濾過し、固体をＭｅＣＮ（１０ｍＬ、２．２Ｌ／ｋｇ）で洗浄した。他の好適な溶媒としては、テトラヒドロフラン、２－メチルテトラヒドロフラン、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル及び酢酸イソプロピルが挙げられる。ＭｅＣＮ溶液を水（９６ｍＬ、２１Ｌ／ｋｇ）の撹拌サンプルに滴加し、次いで混合物を１時間撹拌した。生成物を濾過し、水（１５ｍＬ、３Ｌ／ｋｇ）で洗浄した。生成物を窒素下、周囲温度で乾燥させ、（４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－イル）４－メチルベンゼンスルホネートを生成した。分析データ：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：２．５０（ｓ，３Ｈ），４．７２（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）．
カリウム４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－オレート（４．６ｇ活性、３１．５ｍｍｏｌ；全質量６．６ｇ）のアセトニトリル（３５ｍＬ、７．６Ｌ／ｋｇ）溶液に炭酸カリウム（８．０ｇ、５８ｍｍｏｌ、１．８当量）、ｐ－トルエンスルホニルクロリド（９．３ｇ、４９ｍｍｏｌ、１．５当量）及び４－ジメチルアミノピリジン（７７０ｍｇ、６．３ｍｍｏｌ、０．２０当量）を２０℃で添加した。他の好適な塩基としては、アミン塩基、例えばジイソプロピルエチルアミン、ジイソプロピルアミン、ピリジン、２，６－ルチジン、２，４，６－コリジンだけでなく、カーボネート、例えば炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウムが挙げられる。反応混合物を２０℃で２～３時間撹拌した。反応混合物を濾過し、固体をＭｅＣＮ（１０ｍＬ、２．２Ｌ／ｋｇ）で洗浄した。他の好適な溶媒としては、テトラヒドロフラン、２－メチルテトラヒドロフラン、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル及び酢酸イソプロピルが挙げられる。ＭｅＣＮ溶液を水（９６ｍＬ、２１Ｌ／ｋｇ）の撹拌サンプルに滴加し、次いで混合物を１時間撹拌した。生成物を濾過し、水（１５ｍＬ、３Ｌ／ｋｇ）で洗浄した。生成物を窒素下、周囲温度で乾燥させ、（４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－イル）４－メチルベンゼンスルホネートを生成した。分析データ：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：２．５０（ｓ，３Ｈ），４．７２（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）．
【0130】
合成３
カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１２．４ｇ、１６７ｍｍｏｌ、１．０当量）の２－メチルテトラヒドロフラン（３００ｍＬ、３０Ｌ／ｋｇ）溶液に、メチル２－ヒドロキシアセテート（１０．０ｇ、１１１ｍｍｏｌ、１．０当量）の２－メチルテトラヒドロフラン（５０．０ｍＬ、５．０Ｌ／ｋｇ）溶液を０～１０℃で３０分かけて添加した。アクリロニトリル（１２．７ｇ、２４４ｍｍｏｌ、２．２当量）の２－メチルテトラヒドロフラン（１００ｍＬ、１０Ｌ／ｋｇ）溶液を５～１０℃で４時間かけてゆっくり添加した。５～１０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、２－ＭｅＴＨＦ（３０ｍＬ、２．０Ｌ／ｋｇ）で洗浄した。得られた溶液にｐ－トルエンスルホニルクロリド（２１．２ｇ、１１１ｍｍｏｌ、１．０当量）及び４－ジメチルアミノピリジン（２．７ｇ、２２．２ｍｍｏｌ、０．２０当量）を添加した。２０℃で１８時間撹拌した後、反応混合物を１０％ｗ／ｗ炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ、５．０Ｌ／ｋｇ）で急冷し、層を分離した。その後、有機層を水（２０ｍＬ、２．０Ｌ／ｋｇ）で洗浄し、層を分離した。合わせた有機層を全量３０ｍＬまで蒸留して水を除去し、ヘプタン（８０ｍＬ、８．０Ｌ／ｋｇ）をゆっくり添加した。生成物を濾過し、１０％２－ＭｅＴＨＦ／ヘプタン（２０ｍＬ、２．０Ｌ／ｋｇ）で洗浄した。ケークを窒素下、周囲温度で乾燥させ、（４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－イル）４－メチルベンゼンスルホネートを生成した。分析データ：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：２．５０（ｓ，３Ｈ），４．７２（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）．
カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１２．４ｇ、１６７ｍｍｏｌ、１．０当量）の２－メチルテトラヒドロフラン（３００ｍＬ、３０Ｌ／ｋｇ）溶液に、メチル２－ヒドロキシアセテート（１０．０ｇ、１１１ｍｍｏｌ、１．０当量）の２－メチルテトラヒドロフラン（５０．０ｍＬ、５．０Ｌ／ｋｇ）溶液を０～１０℃で３０分かけて添加した。アクリロニトリル（１２．７ｇ、２４４ｍｍｏｌ、２．２当量）の２－メチルテトラヒドロフラン（１００ｍＬ、１０Ｌ／ｋｇ）溶液を５～１０℃で４時間かけてゆっくり添加した。５～１０℃で１時間撹拌した後、反応混合物を濾過し、２－ＭｅＴＨＦ（３０ｍＬ、２．０Ｌ／ｋｇ）で洗浄した。得られた溶液にｐ－トルエンスルホニルクロリド（２１．２ｇ、１１１ｍｍｏｌ、１．０当量）及び４－ジメチルアミノピリジン（２．７ｇ、２２．２ｍｍｏｌ、０．２０当量）を添加した。２０℃で１８時間撹拌した後、反応混合物を１０％ｗ／ｗ炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ、５．０Ｌ／ｋｇ）で急冷し、層を分離した。その後、有機層を水（２０ｍＬ、２．０Ｌ／ｋｇ）で洗浄し、層を分離した。合わせた有機層を全量３０ｍＬまで蒸留して水を除去し、ヘプタン（８０ｍＬ、８．０Ｌ／ｋｇ）をゆっくり添加した。生成物を濾過し、１０％２－ＭｅＴＨＦ／ヘプタン（２０ｍＬ、２．０Ｌ／ｋｇ）で洗浄した。ケークを窒素下、周囲温度で乾燥させ、（４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－イル）４－メチルベンゼンスルホネートを生成した。分析データ：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：２．５０（ｓ，３Ｈ），４．７２（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）．
【0131】
化合物Ａ１ － ４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボニトリル
４０～４５℃の３０Ｌのジャケット付きガラス反応器中の５－アミノ－２－ピリジンカルボニトリル（８００ｇ、６．７モル、１ｅｑ）のＴＨＦ（６．４Ｌ、８Ｖ）溶液に、４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン（１．３ｋｇ、９．９モル、１．５ｅｑ）を、内部温度を約５０℃未満に維持しながら、窒素雰囲気下で２５分間かけて添加した。反応混合物を５０℃に１時間加熱し、その後、２０～２５℃に冷却した。冷却した溶液に、ビス（ピナコラト）ジボロン（８５４ｇ、３．３モル、０．５ｅｑ）、４，４’－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－２－２’－ジピリジル（５４．３ｇ、０．２モル、０．０３ｅｑ）、［Ｉｒ（ＯＭｅ）（ｃｏｄ）］２（６７ｇ、０．１０モル、０．０１５ｅｑ）のＴＨＦ（３．２Ｌ，４Ｖ）溶液を、温度を２５～３５℃に維持しながら２０分間かけて添加した。反応物を２～３時間、６０～６５℃に加熱し、次いで４０～４５℃に冷却し、イソプロピルアルコール（８００ｍＬ、１Ｖ）を４０～４５℃で３０分間かけて添加することにより急冷し、さらに同温度で２０分間撹拌した。反応物を２０～２５℃に冷却し、１時間窒素ガスでパージした。水（８Ｌ，１０Ｖ）中のＫ３ＰＯ４（４．７ｋｇ、２０．１モル、３ｅｑ）の脱気溶液、続いてＰｄＣｌ２（Ｘａｎｔｐｈｏｓ）（２５０ｇ、３．３モル、０．０５ｅｑ）及び（４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－イル）４－メチルベンゼンスルホネート（１７８２ｇ、６．７２モル、１ｅｑ）を窒素雰囲気下、２５～３０℃で添加した。反応物を６０～６５℃に２時間加熱した。反応終了をＨＰＬＣで確認し、反応物を２０～２５℃に冷却した。アセトニトリル（４Ｌ、５Ｖ）をゆっくり添加し、２～３時間撹拌し、スラリーをブフナー漏斗で濾過した。得られたケークを水（８Ｌ、１０Ｖ）で洗浄し、次いでジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）（４Ｌ、５Ｖ）で洗浄し、真空下で４～５時間乾燥させた。粗物質及びＤＭＡｃ（９．６Ｌ、１２Ｖ）を３０Ｌのガラス製反応器に移し、続いて１，２－ビス（ジフェニルホスフィノ）エタン（１３６ｇ、０．３４１モル、０．０５ｅｑ）を２０～２５℃で添加し、得られた混合物を６０～６５℃に５～６時間加熱した。反応塊を２０～２５℃に冷却し、同温度で１時間撹拌し、濾過し、得られた固体をＤＭＡｃ（９．６Ｌ、１２Ｖ）、水（８Ｌ、１０Ｖ）及びｎ－ヘプタン（２．５Ｌ、３Ｖ）で洗浄し、乾燥させて９７７ｇの生成物を得た。単離した物質（９７７ｇ）及びＩＰＡ（９．５Ｌ、１２Ｖ）を３０Ｌの反応器に添加し、５５～６０℃に２時間加熱し、２０～３０℃に冷却して３０分間撹拌し、濾過し、乾燥させて生成物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＴＦＡ－ｄ）：９．４０（ｓ，１Ｈ），８．３０（ｓ，１Ｈ），５．７６（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，２Ｈ），５．５９（ｓ，２Ｈ）．ＬＣＭＳ：２１３．１（Ｍ＋Ｈ）＋．
【化87】
【0132】
実施例２。化合物Ａ’の合成 － ４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボン酸
４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボニトリル（２．０ｋｇ、１．０当量）、続いて水（２０．０Ｌ）を清浄で乾燥した１００Ｌのジャケット付き反応器に投入した。ＮａＯＨ（１０Ｎ、４．２当量、４．０Ｌ）、次いでさらなる量の水（１６．１Ｌ）を投入した。混合物を８５±５℃に加熱し、１７時間超撹拌した。次いで、混合物を２０±５℃に冷却し、カルボイに排出した。反応器を水で洗浄し、本プロセスのストリームを仕上げ濾過（ｐｏｌｉｓｈ－ｆｉｌｔｅｒ）して反応器に戻した。反応物を５５±５℃に加熱した後、温度を約６０℃未満に保ちながらＨＣｌ（３７重量％、２．２当量、１．７Ｌ）を添加した。温度を約６０℃未満に保ちながら、追加のＨＣｌ（３７重量％、３．０当量、２．３Ｌ）を混合物に約２時間かけて添加した。生成物スラリーを５５±５℃で約０．５時間熟成させ、約２時間かけて２０±５℃まで冷却し、さらに１．０時間熟成させた。生成物スラリーを濾過し、ケークを水（２×４．０Ｌ）で２回洗浄した後、イソプロパノール（２×４．０Ｌ）で２回洗浄した。生成物ケークを窒素気流下で真空乾燥させ、生成物を得た。ＬＣＭＳ：２３２．０８（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，１：１ ＴＦＡ－ｄ／トルエン－ｄ８）：９．３０（ｓ，１Ｈ），８．２９（ｓ，１Ｈ），５．１１（ａｐｐ ｓ，４Ｈ）．
【化88】
【0133】
実施例３。（Ｓ）－化合物の合成 － Ｅ－（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン
化合物Ｆ’ － ｔｅｒｔ－ブチル（２－（２－オキソ－２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）エトキシ）エチル）カルバメート
０℃に冷却した１－ヨード－４－（トリフルオロメチル）ベンゼン（５．０ｇ、１８．４ｍｍｏｌ、１．０当量）（化合物Ｈ）のトルエン（２０ｍＬ、４Ｖ）溶液に、塩化イソプロピルマグネシウム（１３．８ｍＬ、２７．６ｍｍｏｌ，１．５当量）の２ＭＴＨＦ溶液を添加した。溶液を２時間撹拌した後、－２０℃に冷却した。次に、ｔｅｒｔ－ブチル３－オキソモルホリン－４－カルボキシレート（３．２ｇ、１５．６ｍｍｏｌ、０．８５当量）（化合物Ｇ）のトルエン（１５ｍＬ、３Ｖ）溶液をゆっくりと添加し、－２０℃で２時間撹拌した。反応物を急冷し、ＤＣＭ／ヘプタン（１：４０）で２回スラリー化することにより精製し、表題化合物であるｔｅｒｔ－ブチル（２－（２－オキソ－２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）エトキシ）エチル）カルバメート（化合物Ｆ’）を得た。ＬＣＭＳ：２４８（Ｍ＋Ｈ－Ｂｏｃ）＋。
【化89】
【化90】
【0134】
５－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）－３，６－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－オキサジン
合成１
２Ｍ塩酸（１３７ｍＬ、２７４ｍｍｏｌ、２．５当量）水溶液に、ｔｅｒｔ－ブチル（２－（２－オキソ－２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）エトキシ）エチル）カルバメート（３８．２ｇ、１１１．３ｍｍｏｌ、１．０当量）（化合物Ｆ’）を室温で添加した。得られた反応塊を、ＨＰＬＣ分析によりＢｏｃ基の完全な脱保護が観察されるまで、２．５～３．５時間かけて撹拌し、５０℃に加熱した。反応物を室温まで冷却し、仕上げ濾過した。別の容器において、炭酸カリウム（３６．８９ｇ、２６６．９ｍｍｏｌ、２．４当量）を水（３８０ｍＬ、１０Ｖ）に添加し、透明な溶液になるまで撹拌した。塩酸水溶液中の中間体２－（２－アミノエトキシ）－１－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）エタン－１－オンの溶液を、炭酸カリウム水溶液に１５分超かけてゆっくりと添加した添加後、反応スラリーを５～１０分間撹拌し、濾過した。ケークを水（１９０ｍＬ、５Ｖ）で洗浄し、直ちに窒素パージしながら真空下で乾燥させ、５－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）－３，６－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－オキサジンを得た。ＬＣＭＳ：２４８．０２（Ｍ＋Ｈ＋Ｈ２Ｏ）＋。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：７．８１（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｔ，Ｊ＝２．４９Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｍ，２Ｈ）．
【化91】
２Ｍ塩酸（１３７ｍＬ、２７４ｍｍｏｌ、２．５当量）水溶液に、ｔｅｒｔ－ブチル（２－（２－オキソ－２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）エトキシ）エチル）カルバメート（３８．２ｇ、１１１．３ｍｍｏｌ、１．０当量）（化合物Ｆ’）を室温で添加した。得られた反応塊を、ＨＰＬＣ分析によりＢｏｃ基の完全な脱保護が観察されるまで、２．５～３．５時間かけて撹拌し、５０℃に加熱した。反応物を室温まで冷却し、仕上げ濾過した。別の容器において、炭酸カリウム（３６．８９ｇ、２６６．９ｍｍｏｌ、２．４当量）を水（３８０ｍＬ、１０Ｖ）に添加し、透明な溶液になるまで撹拌した。塩酸水溶液中の中間体２－（２－アミノエトキシ）－１－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）エタン－１－オンの溶液を、炭酸カリウム水溶液に１５分超かけてゆっくりと添加した添加後、反応スラリーを５～１０分間撹拌し、濾過した。ケークを水（１９０ｍＬ、５Ｖ）で洗浄し、直ちに窒素パージしながら真空下で乾燥させ、５－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）－３，６－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－オキサジンを得た。ＬＣＭＳ：２４８．０２（Ｍ＋Ｈ＋Ｈ２Ｏ）＋。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：７．８１（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｔ，Ｊ＝２．４９Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｍ，２Ｈ）．
【0135】
合成２
反応器にジメチルスルホキシド（６００ｍＬ、３Ｌ／ｋｇ）及びｔｅｒｔ－ブチル（２－（２－オキソ－２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）エトキシ）エチル）カルバメート（２００ｇ、５７６ｍｍｏｌ）を投入した。他の好適な溶媒としては、例えば、Ｎ－メチルピロリジノン、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド又は１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノンを含む極性非プロトン性溶媒が挙げられる。混合物を４０℃に加熱し、バッチを溶解させた。得られた溶液に１Ｎ塩酸（２．５９Ｌ、４．５当量）をゆっくりと添加した。他の好適な鉱酸としては、リン酸、硫酸；さらにはトリフルオロ酢酸を含む有機酸が挙げられる。反応混合物を６０℃に２．５時間加熱した後、２０℃に冷却し、仕上げ濾過した。反応混合物を、スパージされ予備混合された炭酸ナトリウム（１８３ｇ、３．０当量）の水（２．０Ｌ、１０Ｌ／ｋｇ）溶液にゆっくりと添加した。他の好適な無機塩基としては、水酸化ナトリウム及び炭酸カリウムが挙げられる。２０℃で３０分間撹拌した後、バッチを濾過した。固体を１０％ＤＭＳＯ／水（６００ｍＬ、３Ｌ／ｋｇ）で洗浄し、次いで水（６００ｍＬ、３Ｌ／ｋｇ）で２回洗浄した。ケークを窒素気流下、周囲温度で乾燥させ、５－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）－３，６－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－オキサジンを得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：７．８１（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｔ，Ｊ＝２．４９Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｍ，２Ｈ）．
反応器にジメチルスルホキシド（６００ｍＬ、３Ｌ／ｋｇ）及びｔｅｒｔ－ブチル（２－（２－オキソ－２－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）エトキシ）エチル）カルバメート（２００ｇ、５７６ｍｍｏｌ）を投入した。他の好適な溶媒としては、例えば、Ｎ－メチルピロリジノン、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド又は１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノンを含む極性非プロトン性溶媒が挙げられる。混合物を４０℃に加熱し、バッチを溶解させた。得られた溶液に１Ｎ塩酸（２．５９Ｌ、４．５当量）をゆっくりと添加した。他の好適な鉱酸としては、リン酸、硫酸；さらにはトリフルオロ酢酸を含む有機酸が挙げられる。反応混合物を６０℃に２．５時間加熱した後、２０℃に冷却し、仕上げ濾過した。反応混合物を、スパージされ予備混合された炭酸ナトリウム（１８３ｇ、３．０当量）の水（２．０Ｌ、１０Ｌ／ｋｇ）溶液にゆっくりと添加した。他の好適な無機塩基としては、水酸化ナトリウム及び炭酸カリウムが挙げられる。２０℃で３０分間撹拌した後、バッチを濾過した。固体を１０％ＤＭＳＯ／水（６００ｍＬ、３Ｌ／ｋｇ）で洗浄し、次いで水（６００ｍＬ、３Ｌ／ｋｇ）で２回洗浄した。ケークを窒素気流下、周囲温度で乾燥させ、５－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）－３，６－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－オキサジンを得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：７．８１（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝８．２９Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｔ，Ｊ＝２．４９Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｍ，２Ｈ）．
【0136】
（Ｓ）－化合物Ｅ
合成１
β－ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰ＋）（７５３．４ｍｇ、１．０１３ｍｍｏｌ、３重量％）、Ｄ－（＋）－グルコース（２６．１ｇ、１４５ｍｍｏｌ、１．４当量）及びＧＤＨ－１０１（７５４．８ｍｇ、３重量％）をｐＨ７．４の１００ｍＭリン酸カリウム緩衝剤（７５０ｍＬ、３０Ｖ）に投入し、全ての固体が溶解するまで約１０～１５分間撹拌した。ＩＲＥＤ－１５５（ＩＲＥＤ－０７１２－Ｃとも呼ばれる）（Ｐｒｏｚｏｍｉｘ）（２．５３３ｇ、１０重量％）を投入し、全ての固体が溶液になるまで反応塊を１０～１５分間撹拌した。溶液を３０℃に加熱し、５－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）－３，６－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－オキサジン（２３．５ｇ、１０２．４ｍｍｏｌ、１．０当量）を投入し、反応物を１８時間撹拌した。反応物を２０℃に冷却した。６Ｎ塩酸水溶液（６１．０ｍＬ、２．６Ｖ）を約１５分かけてｐＨが約１．０未満になるまで添加した。反応塊を２時間撹拌した。反応塊に濾過剤（０．７５当量質量）を添加し、混合物を１時間撹拌した。混合物を濾過助剤（０．２５当量質量）のパッド上で濾過し、水で洗浄した。濾液を反応器に投入し、１０Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（５１．６ｍＬ、２．２当量）をｐＨが１１になるまで１５分超かけて添加した。約３０分間撹拌した後、混合物を濾過し、窒素パージしながら真空下で乾燥させ、（Ｓ）－３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）モルホリン（（Ｓ）－化合物Ｅ）を得た。（分析データ：（キラルＨＰＬＣによると＋９９％ｅｅ、ＬＣＭＳ：２３２．０８（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：７．６８（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），３．８９（ｄｄ，Ｊ＝９．９５，２．９Ｈｚ，１Ｈ），３．７４（ｍ，２Ｈ），３．４７（ｍ，１Ｈ），３．１５（ｔ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），２．９５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）２．８８（ｍ，２Ｈ）．
【化92】
β－ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート（ＮＡＤＰ＋）（７５３．４ｍｇ、１．０１３ｍｍｏｌ、３重量％）、Ｄ－（＋）－グルコース（２６．１ｇ、１４５ｍｍｏｌ、１．４当量）及びＧＤＨ－１０１（７５４．８ｍｇ、３重量％）をｐＨ７．４の１００ｍＭリン酸カリウム緩衝剤（７５０ｍＬ、３０Ｖ）に投入し、全ての固体が溶解するまで約１０～１５分間撹拌した。ＩＲＥＤ－１５５（ＩＲＥＤ－０７１２－Ｃとも呼ばれる）（Ｐｒｏｚｏｍｉｘ）（２．５３３ｇ、１０重量％）を投入し、全ての固体が溶液になるまで反応塊を１０～１５分間撹拌した。溶液を３０℃に加熱し、５－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）－３，６－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－オキサジン（２３．５ｇ、１０２．４ｍｍｏｌ、１．０当量）を投入し、反応物を１８時間撹拌した。反応物を２０℃に冷却した。６Ｎ塩酸水溶液（６１．０ｍＬ、２．６Ｖ）を約１５分かけてｐＨが約１．０未満になるまで添加した。反応塊を２時間撹拌した。反応塊に濾過剤（０．７５当量質量）を添加し、混合物を１時間撹拌した。混合物を濾過助剤（０．２５当量質量）のパッド上で濾過し、水で洗浄した。濾液を反応器に投入し、１０Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（５１．６ｍＬ、２．２当量）をｐＨが１１になるまで１５分超かけて添加した。約３０分間撹拌した後、混合物を濾過し、窒素パージしながら真空下で乾燥させ、（Ｓ）－３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）モルホリン（（Ｓ）－化合物Ｅ）を得た。（分析データ：（キラルＨＰＬＣによると＋９９％ｅｅ、ＬＣＭＳ：２３２．０８（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：７．６８（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），３．８９（ｄｄ，Ｊ＝９．９５，２．９Ｈｚ，１Ｈ），３．７４（ｍ，２Ｈ），３．４７（ｍ，１Ｈ），３．１５（ｔ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），２．９５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）２．８８（ｍ，２Ｈ）．
【0137】
合成２
反応器に０．１Ｍリン酸カリウム緩衝剤（ｐＨ６．４、１．６２Ｌ、１３．５Ｌ／ｋｇ）及びＤ－グルコース（１３２ｇ、１．４当量）を投入した。ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート、一ナトリウム塩（ＮＡＤＰ、１．８ｇ、１．５重量％）、グルコース脱水素酵素（ＧＤＨ、１．８ｇ、１．５重量％）及びイミン還元酵素（ＩＲＥＤ、６ｇ、５重量％）を全て順次投入した後、５－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）－３，６－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－オキサジン（１２０ｇ）を固体として投入した。好適なＩＲＥＤとしては、例えば、ＩＲＥＤ－１５５（ＩＲＥＤ－０７１２－Ｃとも呼ばれる）（Ｐｒｏｚｏｍｉｘ）が挙げられる。好適なＧＤＨとしては、例えば、ＧＤＨ－１０１が挙げられる。ＮＡＤＰの二ナトリウム塩も適している。反応器を３０℃に加熱した。ｐＨを連続的にモニタし、ｐＨを維持するために水酸化カリウム（２Ｍ）を使用した。反応の過程でＮＡＤＰをゆっくり添加した（６０ｍＬ（０．５Ｌ／ｋｇ）の緩衝剤中１．８ｇ（１．５重量％）のＮＡＤＰ）。２４時間後、反応混合物をアセトニトリル（１．１４Ｌ、９．５Ｌ／ｋｇ）で希釈し、１０分間撹拌しながら熟成させた。その後、２－メチルテトラヒドロフラン（９００ｍＬ、７．５Ｌ／ｋｇ）を投入し、相分離した後、水層を排出した。有機層を２０％ｗ／ｗ塩化ナトリウム水溶液（６００ｍＬ、５Ｌ／ｋｇ）で洗浄し、次いで真空下で３６０ｍＬになるまで蒸留した。イソプロピルアルコール（１．４４Ｌ、１２Ｌ／ｋｇ）を添加し、混合物を３６０ｍＬになるまで蒸留した。イソプロピルアルコール（１．２０Ｌ、１０Ｌ／ｋｇ）を添加し、溶液を仕上げ濾過した。真空下で４８０ｍＬまで蒸留した。別個に、塩化アセチル（４５ｍＬ、１．２当量）を０℃でイソプロパノール（２４０ｍＬ、２Ｌ／ｋｇ）に滴加し、混合物を２０℃に加熱し、１５分間熟成させた。代わりに、溶媒（例えば、イソプロパノール、エタノール又は２－メチルテトラヒドロフラン）中のＨＣＬを添加することもできた。生成物／イソプロパノール混合物を６０℃に加熱し、ＨＣｌ／イソプロパノール溶液をゆっくりと投入した。スラリーを２０℃まで冷却した。ヘプタン（１．４４Ｌ，１２Ｌ／ｋｇ）を２時間かけて投入した。他の好適な溶媒としては、メチルエチルケトンが挙げられる。固体生成物を濾過し、予混合した２：１ヘプタン：イソプロパノール（２×４８０ｍＬ、２×４Ｌ／ｋｇ）で２回洗浄した。ケークを窒素気流下で真空乾燥させ、（Ｓ）－３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）モルホリンヒドロクロリド（＞９９．８％のキラル純度）を生成した。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：Δ ９．８０－１０．９９（ｍ，２Ｈ），７．９５（ｄ，２Ｈ），７．８３（ｄ，２Ｈ），４．６１（ｍ，１Ｈ），４．０２（ｍ，２Ｈ），３．８６（ｍ，２Ｈ），３．２４－３．３２（ｍ，２Ｈ）；ｍｐ １９８℃．
反応器に０．１Ｍリン酸カリウム緩衝剤（ｐＨ６．４、１．６２Ｌ、１３．５Ｌ／ｋｇ）及びＤ－グルコース（１３２ｇ、１．４当量）を投入した。ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート、一ナトリウム塩（ＮＡＤＰ、１．８ｇ、１．５重量％）、グルコース脱水素酵素（ＧＤＨ、１．８ｇ、１．５重量％）及びイミン還元酵素（ＩＲＥＤ、６ｇ、５重量％）を全て順次投入した後、５－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）－３，６－ジヒドロ－２Ｈ－１，４－オキサジン（１２０ｇ）を固体として投入した。好適なＩＲＥＤとしては、例えば、ＩＲＥＤ－１５５（ＩＲＥＤ－０７１２－Ｃとも呼ばれる）（Ｐｒｏｚｏｍｉｘ）が挙げられる。好適なＧＤＨとしては、例えば、ＧＤＨ－１０１が挙げられる。ＮＡＤＰの二ナトリウム塩も適している。反応器を３０℃に加熱した。ｐＨを連続的にモニタし、ｐＨを維持するために水酸化カリウム（２Ｍ）を使用した。反応の過程でＮＡＤＰをゆっくり添加した（６０ｍＬ（０．５Ｌ／ｋｇ）の緩衝剤中１．８ｇ（１．５重量％）のＮＡＤＰ）。２４時間後、反応混合物をアセトニトリル（１．１４Ｌ、９．５Ｌ／ｋｇ）で希釈し、１０分間撹拌しながら熟成させた。その後、２－メチルテトラヒドロフラン（９００ｍＬ、７．５Ｌ／ｋｇ）を投入し、相分離した後、水層を排出した。有機層を２０％ｗ／ｗ塩化ナトリウム水溶液（６００ｍＬ、５Ｌ／ｋｇ）で洗浄し、次いで真空下で３６０ｍＬになるまで蒸留した。イソプロピルアルコール（１．４４Ｌ、１２Ｌ／ｋｇ）を添加し、混合物を３６０ｍＬになるまで蒸留した。イソプロピルアルコール（１．２０Ｌ、１０Ｌ／ｋｇ）を添加し、溶液を仕上げ濾過した。真空下で４８０ｍＬまで蒸留した。別個に、塩化アセチル（４５ｍＬ、１．２当量）を０℃でイソプロパノール（２４０ｍＬ、２Ｌ／ｋｇ）に滴加し、混合物を２０℃に加熱し、１５分間熟成させた。代わりに、溶媒（例えば、イソプロパノール、エタノール又は２－メチルテトラヒドロフラン）中のＨＣＬを添加することもできた。生成物／イソプロパノール混合物を６０℃に加熱し、ＨＣｌ／イソプロパノール溶液をゆっくりと投入した。スラリーを２０℃まで冷却した。ヘプタン（１．４４Ｌ，１２Ｌ／ｋｇ）を２時間かけて投入した。他の好適な溶媒としては、メチルエチルケトンが挙げられる。固体生成物を濾過し、予混合した２：１ヘプタン：イソプロパノール（２×４８０ｍＬ、２×４Ｌ／ｋｇ）で２回洗浄した。ケークを窒素気流下で真空乾燥させ、（Ｓ）－３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）モルホリンヒドロクロリド（＞９９．８％のキラル純度）を生成した。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：Δ ９．８０－１０．９９（ｍ，２Ｈ），７．９５（ｄ，２Ｈ），７．８３（ｄ，２Ｈ），４．６１（ｍ，１Ｈ），４．０２（ｍ，２Ｈ），３．８６（ｍ，２Ｈ），３．２４－３．３２（ｍ，２Ｈ）；ｍｐ １９８℃．
【0138】
実施例４。化合物Ｉの合成 － （４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノン
反応スケール１
４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボン酸（１．０ｋｇ、４．３モル、１．０当量）、（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン（１．２ｋｇ、５．２ｍｍｏｌ、１．２当量）及びＤＭＦ（６．６ｋｇ、７．０Ｖ）を清浄で乾燥した反応器に投入した。混合物にトリエチルアミン（１．１Ｋｇ、１３．８モル、２．６当量）を添加した。混合物を１０±５℃に冷却し、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）（１．６７ｋｇ、５．２モル、１．２当量）をゆっくり添加した。次に、追加量のＤＭＦ（０．９４Ｋｇ、１Ｖ）を添加した。反応混合物を２５±５℃に温め、１８時間かけて撹拌した。水（１．０ｋｇ、１Ｖ）、続いてＭｅＣＮ（１．６ｋｇ、２Ｖ）を投入し、反応塊を４５℃に温めた。次に、水（７．０ｋｇ、７Ｖ）を３０分かけて添加した。シードロットの４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノン（１０ｇ、２２ｍｍｏｌ、０．０１当量）を投入し、混合物を４５℃で２時間かけて撹拌した後、１０時間かけて２０℃に冷却した。水（１２．０ｋｇ、１２Ｖ）を２０℃で２時間かけて添加し、さらに４時間以上撹拌した後、濾過した。反応器を水（９．８３ｋｇ、１０Ｖ）中の１０％ＤＭＦの混合物ですすぎ、得られたすすぎ混合物をケークの洗浄に使用した。反応器を水（１０．０ｋｇ、１０Ｖ）の混合物ですすぎ、得られたすすぎ混合物をケークの洗浄に使用した。このすすぎ及び洗浄のプロトコルを、水（１０．０ｋｇ、１０Ｖ）を用いてもう１回繰り返した。ケークを、窒素気流を用いて真空乾燥させ、（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノンを得た。ＬＣＭＳ：４４５．２０ １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，１３０℃におけるＤＭＳＯ－ｄ６）：８．８７（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），６．５８（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．７２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），５．３８（ｍ，２Ｈ），５．０９（ｔ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，２Ｈ），４．４４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９６（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，３．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８６（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１１．４，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｔｄ，Ｊ＝１１．４，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．２８（ｍ，１Ｈ）．
【化93】
４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボン酸（１．０ｋｇ、４．３モル、１．０当量）、（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン（１．２ｋｇ、５．２ｍｍｏｌ、１．２当量）及びＤＭＦ（６．６ｋｇ、７．０Ｖ）を清浄で乾燥した反応器に投入した。混合物にトリエチルアミン（１．１Ｋｇ、１３．８モル、２．６当量）を添加した。混合物を１０±５℃に冷却し、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）（１．６７ｋｇ、５．２モル、１．２当量）をゆっくり添加した。次に、追加量のＤＭＦ（０．９４Ｋｇ、１Ｖ）を添加した。反応混合物を２５±５℃に温め、１８時間かけて撹拌した。水（１．０ｋｇ、１Ｖ）、続いてＭｅＣＮ（１．６ｋｇ、２Ｖ）を投入し、反応塊を４５℃に温めた。次に、水（７．０ｋｇ、７Ｖ）を３０分かけて添加した。シードロットの４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノン（１０ｇ、２２ｍｍｏｌ、０．０１当量）を投入し、混合物を４５℃で２時間かけて撹拌した後、１０時間かけて２０℃に冷却した。水（１２．０ｋｇ、１２Ｖ）を２０℃で２時間かけて添加し、さらに４時間以上撹拌した後、濾過した。反応器を水（９．８３ｋｇ、１０Ｖ）中の１０％ＤＭＦの混合物ですすぎ、得られたすすぎ混合物をケークの洗浄に使用した。反応器を水（１０．０ｋｇ、１０Ｖ）の混合物ですすぎ、得られたすすぎ混合物をケークの洗浄に使用した。このすすぎ及び洗浄のプロトコルを、水（１０．０ｋｇ、１０Ｖ）を用いてもう１回繰り返した。ケークを、窒素気流を用いて真空乾燥させ、（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノンを得た。ＬＣＭＳ：４４５．２０ １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，１３０℃におけるＤＭＳＯ－ｄ６）：８．８７（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），６．５８（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．７２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），５．３８（ｍ，２Ｈ），５．０９（ｔ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，２Ｈ），４．４４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９６（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，３．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８６（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１１．４，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｔｄ，Ｊ＝１１．４，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．２８（ｍ，１Ｈ）．
【0139】
反応スケール２
４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボン酸（８５．０ｇ、３５２．２ｍｍｏｌ、１．０当量）、（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン（９９．６ｇ、４２２．６ｍｍｏｌ、１．２当量）及びＤＭＦ（６７４ｍＬ、８．７モル、７．９Ｖ）を清浄で乾燥した５Ｌ反応器に投入した。混合物に１－メチルイミダゾール（７５．２ｇ、９１６．２ｍｍｏｌ、２．６当量）を添加した。混合物を０℃に冷却し、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルクロロホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（ＴＣＦＨ）（１１８．６ｇ、４２２．６ｍｍｏｌ、１．２当量）をゆっくりと添加した。次に、追加量のＤＭＦ（１７０ｍＬ、２Ｖ）を０℃で添加した。反応混合物を２５℃に温め、一晩撹拌した。次に、反応塊を４５℃に温め、２－メチルテトラヒドロフラン（１６９．２ｍＬ、２Ｖ）を添加し、続いて水（８５０ｍＬ、１０Ｖ）を添加漏斗で３０分かけてゆっくり添加した。シードロットの４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノン（１．６ｇ、３．５ｍｍｏｌ、０．１当量）を、１：１ｖ／ｖのＤＭＦ及び水（３１．３ｍＬ）中のスラリーとし投入し、混合物を４５℃で約１２時間撹拌した。水（５１０ｍＬ、６Ｖ）を添加漏斗で１時間１０分かけて添加し、混合物を４５℃で３０分間さらに撹拌した後、濾過した。反応器を水（３４０ｍＬ、４Ｖ）ですすぎ、得られたすすぎ混合物をケークの洗浄に使用した。このすすぎ及び洗浄のプロトコルをさらに２回繰り返した。ケークを、窒素気流を用いて真空乾燥させ、（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノンを得た。ＬＣＭＳ：４４５．２０ １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，１３０℃におけるＤＭＳＯ－ｄ６）：８．８７（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），６．５８（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．７２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），５．３８（ｍ，２Ｈ），５．０９（ｔ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，２Ｈ），４．４４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９６（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，３．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８６（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１１．４，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｔｄ，Ｊ＝１１．４，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．２８（ｍ，１Ｈ）．
４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボン酸（８５．０ｇ、３５２．２ｍｍｏｌ、１．０当量）、（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン（９９．６ｇ、４２２．６ｍｍｏｌ、１．２当量）及びＤＭＦ（６７４ｍＬ、８．７モル、７．９Ｖ）を清浄で乾燥した５Ｌ反応器に投入した。混合物に１－メチルイミダゾール（７５．２ｇ、９１６．２ｍｍｏｌ、２．６当量）を添加した。混合物を０℃に冷却し、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルクロロホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（ＴＣＦＨ）（１１８．６ｇ、４２２．６ｍｍｏｌ、１．２当量）をゆっくりと添加した。次に、追加量のＤＭＦ（１７０ｍＬ、２Ｖ）を０℃で添加した。反応混合物を２５℃に温め、一晩撹拌した。次に、反応塊を４５℃に温め、２－メチルテトラヒドロフラン（１６９．２ｍＬ、２Ｖ）を添加し、続いて水（８５０ｍＬ、１０Ｖ）を添加漏斗で３０分かけてゆっくり添加した。シードロットの４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノン（１．６ｇ、３．５ｍｍｏｌ、０．１当量）を、１：１ｖ／ｖのＤＭＦ及び水（３１．３ｍＬ）中のスラリーとし投入し、混合物を４５℃で約１２時間撹拌した。水（５１０ｍＬ、６Ｖ）を添加漏斗で１時間１０分かけて添加し、混合物を４５℃で３０分間さらに撹拌した後、濾過した。反応器を水（３４０ｍＬ、４Ｖ）ですすぎ、得られたすすぎ混合物をケークの洗浄に使用した。このすすぎ及び洗浄のプロトコルをさらに２回繰り返した。ケークを、窒素気流を用いて真空乾燥させ、（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノンを得た。ＬＣＭＳ：４４５．２０ １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，１３０℃におけるＤＭＳＯ－ｄ６）：８．８７（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），６．５８（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．７２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），５．３８（ｍ，２Ｈ），５．０９（ｔ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，２Ｈ），４．４４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９６（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，３．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８６（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１１．４，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｔｄ，Ｊ＝１１．４，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．２８（ｍ，１Ｈ）．
【0140】
反応スケール３
４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボン酸（化合物Ａ’）（２０．０ｇ、８６．５ｍｍｏｌ、１．０当量）を２０℃でジメチルスルホキシド（４００ｍＬ）に添加した。混合物に１，１’－カルボニルジイミダゾール（１５．４ｇ、９５．２ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加し、混合物を６０℃に１時間加熱した。（Ｓ）－３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）モルホリン－４－イウムクロリド（２５．５ｇ、９５．２ｍｍｏｌ、１．１当量）及びジメチルスルホキシド（４０ｍＬ）の溶液を添加し、混合物を８０℃に１１時間加熱した。反応混合物を３５℃に冷却し、水（２６５ｍＬ）を添加し、バッチを２０℃に冷却した。反応物を濾過し、４０％水：ＤＭＳＯ（８０ｍＬ）で洗浄し、次いで水（１００ｍＬ）で洗浄した。ケークを、窒素気流を用いて真空乾燥させ、（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノン（化合物Ｉ）を得た。ＬＣＭＳ：４４５．２０ １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，１３０℃におけるＤＭＳＯ－ｄ６）：８．８７（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），６．５８（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．７２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），５．３８（ｍ，２Ｈ），５．０９（ｔ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，２Ｈ），４．４４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９６（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，３．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８６（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１１．４，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｔｄ，Ｊ＝１１．４，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．２８（ｍ，１Ｈ）．
４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボン酸（化合物Ａ’）（２０．０ｇ、８６．５ｍｍｏｌ、１．０当量）を２０℃でジメチルスルホキシド（４００ｍＬ）に添加した。混合物に１，１’－カルボニルジイミダゾール（１５．４ｇ、９５．２ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加し、混合物を６０℃に１時間加熱した。（Ｓ）－３－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）モルホリン－４－イウムクロリド（２５．５ｇ、９５．２ｍｍｏｌ、１．１当量）及びジメチルスルホキシド（４０ｍＬ）の溶液を添加し、混合物を８０℃に１１時間加熱した。反応混合物を３５℃に冷却し、水（２６５ｍＬ）を添加し、バッチを２０℃に冷却した。反応物を濾過し、４０％水：ＤＭＳＯ（８０ｍＬ）で洗浄し、次いで水（１００ｍＬ）で洗浄した。ケークを、窒素気流を用いて真空乾燥させ、（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノン（化合物Ｉ）を得た。ＬＣＭＳ：４４５．２０ １Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，１３０℃におけるＤＭＳＯ－ｄ６）：８．８７（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），６．５８（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．７２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），５．３８（ｍ，２Ｈ），５．０９（ｔ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，２Ｈ），４．４４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９６（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，３．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８６（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１１．４，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｔｄ，Ｊ＝１１．４，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．２８（ｍ，１Ｈ）．
【0141】
化合物Ｉの再結晶
清浄で乾燥した５Ｌの反応器に、（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノン（２７９．７ｇ、０．６モル、１．０当量）、続いてアセトン（６．２Ｌ、２２Ｖ）を投入した。混合物を４０℃で１５分間撹拌した後、２５℃に冷却した。反応物をフラスコに排出し、反応器をアセトンで洗浄し、本プロセスのストリームを仕上げ濾過して反応器に戻した。反応器のジャケットを６５℃に設定し、大気圧で蒸留することにより反応容積を約６Ｖまで減少させると、結晶化が観察された。反応温度を２時間かけて２０℃まで冷却した。ヘプタン（２．８Ｌ、１０Ｖ）を２時間かけて添加した。スラリーを濾過し、ケークを４：１ヘプタン／アセトン混合液（７５０ｍＬ、各３Ｖ）で２回洗浄し、窒素パージを用いて真空下で乾燥させ、（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノンを得た。
清浄で乾燥した５Ｌの反応器に、（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノン（２７９．７ｇ、０．６モル、１．０当量）、続いてアセトン（６．２Ｌ、２２Ｖ）を投入した。混合物を４０℃で１５分間撹拌した後、２５℃に冷却した。反応物をフラスコに排出し、反応器をアセトンで洗浄し、本プロセスのストリームを仕上げ濾過して反応器に戻した。反応器のジャケットを６５℃に設定し、大気圧で蒸留することにより反応容積を約６Ｖまで減少させると、結晶化が観察された。反応温度を２時間かけて２０℃まで冷却した。ヘプタン（２．８Ｌ、１０Ｖ）を２時間かけて添加した。スラリーを濾過し、ケークを４：１ヘプタン／アセトン混合液（７５０ｍＬ、各３Ｖ）で２回洗浄し、窒素パージを用いて真空下で乾燥させ、（４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）－［（３Ｓ）－３－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］モルホリン－４－イル］メタノンを得た。
【0142】
実施例５。化合物Ｂ１の合成
本実施例は、本開示の実施形態に従った化合物Ｂ１を調製するプロセスを示す。
本実施例は、本開示の実施形態に従った化合物Ｂ１を調製するプロセスを示す。
【0143】
２－シアノ－５－ニトロピリジンを、ニトロ還元酵素ＮＲ－１７、グルコース脱水素酵素ＧＤＨ－１０１、第３の遷移金属触媒としてのＮＨ４ＶＯ３、補因子としてのＮＡＤＰ、還元剤としてのグルコース及び緩衝剤と、下記及び表２に示す反応条件Ａ又はＢで混合した。
【化94】
【0144】
【表2】
【0145】
反応条件Ａは、以下の通りである：１０ｍｇの２－シアノ－５－ニトロピリジン；ＮＲ－１７（１重量％）；ＮＨ４ＶＯ３（１ｅｑ）；ＮＡＤＰ＋（１４重量％）；ＧＤＨ（１９重量％）；グルコース（４ｅｑ）；ＤＭＳＯ（１９Ｖ）；トリシン緩衝剤（１７０Ｖ；ｐＨ８）；３５℃；及び反応時間２時間。
【0146】
反応条件Ｂ（フェドバッチ）は、以下の通りである：０．７ＶのＤＭＳＯ中２ｇの２－シアノ－５－ニトロピリジンを６３時間かけて添加；ＮＲ－１７（７重量％）；ＮＨ４ＶＯ３（１６モル％）；ＮＡＤＰ＋（１重量％）；ＧＤＨ（１重量％）；グルコース（３ｅｑ）；ＫＰｉ緩衝剤（９Ｖ；ｐＨ７．２）；３５℃及び反応時間１８～５６時間。
【0147】
実施例６。化合物Ｂ１の合成
本実施例は、開示されるプロセスの実施形態に従った化合物Ｂ１の合成を示す。
【化95】
【0148】
ｐＨ約７．５且つ温度２０～２５℃の緩衝剤（ＫＰｉ Ｂｕｆｆｅｒ；３０ｍＬ、１００ｍＭ）中、ニトロ還元酵素（ＮＲ－１７；２５０ｍｇ、５ｍｇ／ｍＬ％）、グルコース脱水素酵素（ＧＤＨ－１０５；５０ｍｇ、１ｍｇ／ｍＬ％）、補因子（ＮＡＤＰ；３６ｍｇ、１ｍＭ）、第３の遷移金属触媒（ＮＨ４ＶＯ３；４６８ｍｇ、０．１２ｅｑ）のスラリーに、２０～２５℃の温度で還元剤（Ｄ－グルコース；１８．２ｇ、３．０５ｅｑ）を添加した。反応混合物を１０～１５分間混合した。反応混合物のｐＨは、塩基（例えば、４０％ＮａＯＨ溶液）を用いて約７．５に維持した。反応混合物を３５～３８℃の温度（内部温度）まで加熱した。この加熱した混合物に、塩基（例えば、４０％ＮａＯＨ溶液）を用いて混合物のｐＨを７～８に維持しながら、２－シアノ－５－ニトロピリジン（５ｇ、３３．５ｍｍｏｌ、１００質量％）のＤＭＳＯ（２．５ｍＬ、０．５Ｖ）溶液（全溶液量５．５ｍＬ）を６時間かけて添加した（例えば、０．０１５ｍＬ／分の流速でシリンジポンプを使用）。
【0149】
反応塊を３５～３８℃の温度で１６時間撹拌した。反応の進行はＨＰＬＣによりモニタした。ＨＰＬＣによるＩＰＣ：出発物質＝４．１％、生成物＝８６％。反応物を２０～２５℃の温度に冷却し、水（３０Ｖ）で急冷し、１０～１５分間撹拌した。反応混合物のｐＨを約１０に調整した。反応混合物を濾過し、未溶解の粒子（固体重量：０．３ｇ）を除去した。水性濾液を有機溶媒（例えば、３×１０Ｖの２－メチルテトラヒドロフラン）で抽出した。合わせた有機層を全て水（１０Ｖ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、４０～４５℃で真空下において濃縮し、２．５ｇの化合物Ｂ１（遊離塩基）を得た。
【0150】
実施例７ － 化合物Ｂ２の合成
反応器に固体ジ－ｔｅｒｔ－ブチルカーボネート（８．１ｇ、１．２当量）及び固体６－クロロピリジン－３－アミン（４．０ｇ、３１ｍｍｏｌ）を投入した。窒素でパージした後、イソプロパノール（２０ｍＬ、５．０Ｌ／ｋｇ）を添加し、混合物を５５～６０℃に加熱した。他の好適な溶媒としては、ｔｅｒｔ－ブタノール又はｔｅｒｔ－アミルアルコールが挙げられる。１９時間後、反応混合物を水（３５ｍＬ、８．７５Ｌ／ｋｇ）で希釈し、混合物を６０℃で１時間保持した。反応混合物をゆっくりと２０℃まで冷却し、２時間熟成させ、濾過し、次に３５％ ｉ－ＰｒＯＨ／水（２４ｍＬ、６Ｌ／ｋｇ）で置換洗浄した。固体を窒素掃引下、周囲温度で乾燥させ、ｔｅｒｔ－ブチル（６－クロロピリジン－３－イル）カルバメートを得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：Δ ８．２８（ｄ，１Ｈ），７．９７（ｂｓ，１Ｈ），７．２８（ｄ，１Ｈ），６．７９（ｂｓ，１Ｈ），１．５３（ｓ，９Ｈ）；ｍｐ １２８℃．
【化96】
【0151】
実施例８ － 化合物Ｃ’－６ｔｅｒｔ－ブチル（６－クロロ－４－（１，３，６，２－ジオキサザボロカン－２－イル）ピリジン－３－イル）カルバメートの合成
ｔｅｒｔ－ブチル（６－クロロピリジン－３－イル）カルバメート（３．０ｇ、１３．１ｍｍｏｌ、１．０当量）、塩化メチルマグネシウム（テトラヒドロフラン中３．０Ｍ、４７．２ｍｍｏｌ、３．６当量）、２，２，６，６－テトラメチルピペリジン（６．６６ｇ、４７．２ｍｍｏｌ、３．６当量）、塩化リチウム（６６５ｍｇ、１５．７ｍｍｏｌ、１．２当量）、テトラヒドロフラン（７ｍＬ）及び１，２－ジメトキシエタン（３８ｍＬ）の混合物を反応完了まで２５℃で２４時間超撹拌した。トリエチルボレート（７．２７ｇ、４９．８ｍｍｏｌ、３．８当量）のテトラヒドロフラン（９ｍＬ）溶液を添加した。反応混合物を６０ｍＬの酒石酸ナトリウムカリウム水溶液及び２－メチルテトラヒドロフランに注ぎ、層を分離した。有機層を水で洗浄し、蒸留して１，２－ジメトキシエタン及びテトラヒドロフランを除去した。２－メチルテトラヒドロフラン（約３０ｍＬ）中の生成物の流れに、ジエタノールアミン（１．５２ｇ、１．４４ｍｍｏｌ、１．１当量）のイソプロパノール（１５ｍＬ）溶液を添加した。ヘプタン（３０ｍＬ）を添加し、反応混合物を濾過した。生成物ケークを５０％２－メチルテトラヒドロフラン／ヘプタン（３０ｍＬ）で洗浄し、窒素掃引下、周囲温度で乾燥させ、生成物ｔｅｒｔ－ブチル（６－クロロ－４－（１，３，６，２－ジオキサザボロカン－２－イル）ピリジン－３－イル）カルバメート（化合物Ｃ’－６）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）：９．５１（ｓ，１Ｈ），８．７７（ｓ，１Ｈ），７．５０（ｂｓ，１Ｈ），７．２５（ｂｓ，１Ｈ），３．７０－３．９５（ｍ，４Ｈ），３．１７－３．２３（ｍ，２Ｈ），３．０２－３．０９（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）．
【化97】
【0152】
実施例９ － ８－クロロ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－４－アミン（Ａ２）の合成
ｔｅｒｔ－ブチル（６－クロロ－４－（１，３，６，２－ジオキサザボロカン－２－イル）ピリジン－３－イル）カルバメート（化合物Ｃ’－６）（２．０ｇ、５．８５ｍｍｏｌ、１．０当量）のサンプルを２－メチルテトラヒドロフラン（３６ｍＬ）と合わせ、４－シアノ－２，５－ジヒドロフラン－３－イル４－メチルベンゼンスルホネート（化合物Ｄ）（２．３３ｇ、８．７８ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。混合物を２．５％酢酸水溶液（１８ｍＬ）で２回洗浄した。有機生成物層にビス（１，５－シクロオクタジエン）ニッケル（０）（５７ｍｇ、０．１７６ｍｍｏｌ、３モル％）、トリブチルホスホニウムテトラフルオロボレート（１５３ｍｇ、０．５２７ｍｍｏｌ、９モル％）、トリエチルアミン（５９ｍｇ、０．５８５ｍｍｏｌ、０．１当量）、水（１０ｍＬ）及びリン酸カリウム（２．５ｇ，１１．７ｍｍｏｌ、２．０当量）を添加した。反応物を６０℃に加熱した。バッチを濾過し、水（１０ｍＬ）、イソプロパノール（１０ｍＬ）及びｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル（１０ｍＬ）で洗浄した。次に、生成物ケークを窒素気流下で真空乾燥させ、生成物８－クロロ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－４－アミン（化合物Ａ２）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトニトリル－ｄ３）：８．６９（ｓ，１Ｈ），７．４７（ｓ，１Ｈ），６．５２（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．２７（ｂｒ ｔ，Ｊ＝３．６６Ｈｚ，２Ｈ），５．０３（ｂｒ ｔ，Ｊ＝３．６６Ｈｚ，２Ｈ）．
【化98】
【0153】
実施例１０ － 化合物Ａ’の合成 － ４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボン酸
８－クロロ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－４－アミン（化合物Ａ２）（２０．０ｇ、９０．２ｍｍｏｌ、１．０当量）、ジメチルスルホキシド（９００ｍＬ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（５０６ｍｇ、２．２６ｍｍｏｌ、２．５モル％）、１，３－ビス（ジシクロヘキシルホスフィノ）プロパンビス（テトラフルオロボレート）（１．３８ｇ、２．２６ｍｍｏｌ、２．５モル％）、水（２４ｍＬ）、フェノール（２５．５ｇ，２７１ｍｍｏｌ、３．０当量）及び炭酸カリウム（６２．３ｇ、４５１ｍｍｏｌ、５．０当量）を５０ポンド毎平方インチの一酸化炭素下で合わせ、８５℃に２１時間加熱した。混合物を冷却し、窒素雰囲気を導入した。バッチを水（４５０ｍＬ）で希釈し、濾過し、３３％水：ＤＭＳＯ（１００ｍＬ）で洗浄した。得られた生成物固体に４８℃で水（７００ｍＬ）を添加し、塩酸（６Ｎ、１００ｍＬ）を添加した。バッチを２０℃に冷却し、濾過し、水（１００ｍＬ）、イソプロパノール（１００ｍＬ）及びｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル（１００ｍＬ）で洗浄した。次に、生成物ケークを窒素気流下で真空乾燥させ、生成物４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボン酸（化合物Ａ’）を得た。ＬＣＭＳ：２３２．０８（Ｍ＋Ｈ）＋。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，１：１ ＴＦＡ－ｄ／トルエン－ｄ８）：９．３０（ｓ，１Ｈ），８．２９（ｓ，１Ｈ），５．１１（ａｐｐ ｓ，４Ｈ）．
【化99】
【0154】
実施例１１ － 化合物Ａ１ － ４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボニトリル
ビス（１，５－シクロオクタジエン）ニッケル（０）（６２ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、５モル％）及び４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ）－９，９－ジメチルキサンテン）（Ｘａｎｔｐｈｏｓ、１３０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、５モル％）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中混合物を２０℃で２０分間撹拌した。８－クロロ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－４－アミン（化合物Ａ２）（１．０ｇ、４．５１ｍｍｏｌ、１．０当量）及びテトラヒドロフラン（５ｍＬ）を添加し、溶媒をストリッピングした。バッチをジメチルスルホキシド（３０ｍＬ）で希釈し、４－ジメチルアミノピリジン（５５０ｍｇ、４．５１ｍｍｏｌ、１．０当量）を添加した。このバッチにシアン化亜鉛（４２５ｍｇ、３．６１ｍｍｏｌ、０．８当量）及び亜鉛末（８８ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ、０．３当量）を添加した。反応物を８０℃に１６時間加熱した。反応物を周囲温度まで冷却し、濾過し、２－メチルテトラヒドロフランで希釈した。混合物を水酸化アンモニウム水溶液、次いで水で洗浄し、溶媒をストリッピングした。残渣をＮ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（１０ｍＬ）に溶解し、ヘプタン（１０ｍＬ）を添加した。スラリーを濾過し、イソプロパノール（１０ｍＬ）で洗浄して、生成物である化合物Ａ１の４－アミノ－１，３－ジヒドロフロ［３，４－ｃ］［１，７］ナフチリジン－８－カルボニトリルを得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＴＦＡ－ｄ）：９．４０（ｓ，１Ｈ），８．３０（ｓ，１Ｈ），５．７６（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，２Ｈ），５．５９（ｓ，２Ｈ）．ＬＣＭＳ：２１３．１（Ｍ＋Ｈ）＋．
【化100】
【0155】
本明細書で引用される全ての参考文献（例えば、刊行物、特許出願及び特許）は、それぞれの参考文献が、あたかも個々に及び具体的に参照により組み込まれることが示され、且つ本明細書にその全体が記載されたのと同程度に参照により本明細書に組み込まれる。
【0156】
本明細書における値の範囲の記載は、本明細書で別段の指示がない限り、単にその範囲及び各端点にある別個の値の各々を個々に指す簡略法の役割を果たすものにすぎず、別個の値及び端点の各々は、それが個々に本明細書で列挙されたかのように本明細書に組み込まれる。
【0157】
本発明の説明に関する（とりわけ以下の特許請求の範囲に関する）「１つの（ａ）」及び「１つの（ａｎ）」並びに「その」という用語及び類似の指示対象の使用は、本明細書に別段の指示がない限り又は文脈と明確に矛盾しない限り、単数及び複数の両方を包含するものと解釈されるべきである。１つ又は複数の品目の一覧がその後に続く「少なくとも１つ」という用語（例えば、「Ａ及びＢの少なくとも１つ」）は、本明細書で別段の指定がない限り又は文脈上明らかに矛盾しない限り、一覧に記載された品目から選択される１つの品目（Ａ又はＢ）又は一覧に記載された品目の２つ以上の任意の組み合わせ（Ａ及びＢ）を意味すると解釈すべきである。「含む」、「有する」、「包含する」及び「含有する」という用語は、特記しない限り、オープンエンドの用語（すなわち「含むが、限定されない」を意味する）と解釈されるべきである。本明細書における値の範囲の記載は、本明細書に別段の指示がない限り、その範囲内に入る別個の各値に個別に言及する簡略法としての役割を果たすことを意図しているにすぎず、別個の各値は、あたかも個別に本明細書に列挙されたかのように本明細書に組み込まれる。本明細書で説明されている方法の全ては、別途本明細書で指示されない限り又は文脈と明確に矛盾しない限り、任意の適切な順序で実施され得る。本明細書に提供されるあらゆる例又は例示的な語（例えば、「など」）の使用は、単に本発明をさらに明らかにすることを意図され、別段の主張がない限り、本発明の範囲に限定を課すものではない。本明細書のいかなる表現も、特許請求されない要素を本発明の実施に不可欠のものとして示していると解釈されるべきではない。
【国際調査報告】