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特表2024-532787持続的な免疫応答を誘導するためのリン酸化タウペプチドを含むリポソーム
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-09-10
(54)【発明の名称】持続的な免疫応答を誘導するためのリン酸化タウペプチドを含むリポソーム
(51)【国際特許分類】
A61K 39/00 20060101AFI20240903BHJP
A61K 38/10 20060101ALI20240903BHJP
A61P 37/06 20060101ALI20240903BHJP
A61K 9/127 20060101ALI20240903BHJP
A61K 39/39 20060101ALI20240903BHJP
A61K 48/00 20060101ALI20240903BHJP
A61K 31/7024 20060101ALI20240903BHJP
A61K 31/7125 20060101ALI20240903BHJP
A61K 31/7088 20060101ALI20240903BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240903BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20240903BHJP
C07K 14/47 20060101ALN20240903BHJP
C12N 15/117 20100101ALN20240903BHJP
【ＦＩ】
A61K39/00 H ZNA
A61K38/10
A61P37/06
A61K9/127
A61K39/39
A61K48/00
A61K31/7024
A61K31/7125
A61K31/7088
A61P43/00 121
A61P25/28
C07K14/47
C12N15/117 Z
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024508568
(86)(22)【出願日】2022-08-12
(85)【翻訳文提出日】2024-04-09
(86)【国際出願番号】 US2022074902
(87)【国際公開番号】W WO2023019241
(87)【国際公開日】2023-02-16
(31)【優先権主張番号】63/260,227
(32)【優先日】2021-08-12
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/263,541
(32)【優先日】2021-11-04
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/267,975
(32)【優先日】2022-02-14
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
２．ＰＬＵＲＯＮＩＣ
３．ＳＰＡＮ
(71)【出願人】
【識別番号】514010601
【氏名又は名称】ヤンセン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド
(71)【出願人】
【識別番号】513022966
【氏名又は名称】エーシー イミューン エス．エー．
(74)【代理人】
【識別番号】100092783
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 浩
(74)【代理人】
【識別番号】100095360
【弁理士】
【氏名又は名称】片山 英二
(74)【代理人】
【識別番号】100093676
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 純子
(74)【代理人】
【識別番号】100120134
【弁理士】
【氏名又は名称】大森 規雄
(74)【代理人】
【識別番号】100149010
【弁理士】
【氏名又は名称】星川 亮
(72)【発明者】
【氏名】プファイファー，アンドレア
(72)【発明者】
【氏名】ムース，アンドレアス
(72)【発明者】
【氏名】ガルパーン，ウェンディ
(72)【発明者】
【氏名】テュニス，クララ
(72)【発明者】
【氏名】ステウカース，レンナルト
【テーマコード（参考）】
4C076
4C084
4C085
4C086
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C076AA19
4C076BB15
4C076BB16
4C076CC01
4C076CC07
4C084AA02
4C084AA03
4C084AA13
4C084BA01
4C084BA08
4C084BA18
4C084BA20
4C084BA23
4C084BA33
4C084CA18
4C084CA26
4C084DC50
4C084MA02
4C084MA24
4C084MA66
4C084NA14
4C084ZA16
4C084ZB09
4C084ZC75
4C085AA06
4C085AA38
4C085BB11
4C085EE03
4C085EE06
4C085FF13
4C085FF14
4C085GG03
4C085GG04
4C086AA01
4C086AA02
4C086EA16
4C086MA03
4C086MA04
4C086MA24
4C086MA66
4C086NA14
4C086ZA16
4C086ZB09
4C086ZC75
4H045AA10
4H045AA30
4H045BA10
4H045CA40
4H045DA86
4H045EA20
4H045EA31
(57)【要約】
リン酸化タウに対する持続的な免疫応答をヒトにおいて誘導するための方法が記載される。方法は、ｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、ヘルパーＴ細胞エピトープと、脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチドと、リポソームの表面に提示されているタウホスホペプチドとを含む有効量のリポソームを対象に投与して、それによって持続的な免疫応答を得ることを含む。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
リン酸化タウタンパク質（ｐタウ）に対する抗体応答を、それを必要とするヒト対象において誘導する方法であって、（１）１用量当たり３００μｇ～１８００μｇの量の、配列番号２８のアミノ酸配列からなるタウホスホペプチドと、
（２）モノホスホリルリピドＡを含むｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）配列番号１３～配列番号１７、配列番号２３～配列番号２６、および配列番号３９～配列番号４４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）配列番号１８～配列番号２２からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含む有効量のリポソームを前記対象に投与することを含み、
前記タウホスホペプチドが前記リポソームの表面に提示され、
前記抗体応答が、前記ヒト対象への前記有効量のリポソームの初回投与の後に少なくとも６週間持続する、方法。
【請求項2】
前記有効量のリポソームが、（１）１用量当たり３００μｇ～１８００μｇの量の前記タウホスホペプチドと、
（２）１用量当たり１００μｇ～５８５μｇの量の前記ｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）１用量当たり７５μｇ～５５０μｇの量の前記ヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）１用量当たり１５０μｇ～９００μｇの量の前記ＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記有効量のリポソームが、１用量当たり３００μｇ、９００μｇまたは１８００μｇの前記タウホスホペプチドを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項4】
前記有効量のリポソームが皮下投与される、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項5】
前記有効量のリポソームが筋肉内投与される、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項6】
前記ＣｐＧオリゴヌクレオチドが、１つまたは複数のホスホロチオエートヌクレオチド間連結を有し、前記ＣｐＧオリゴヌクレオチドが、少なくとも１つの親油基と、任意選択でＰＥＧリンカーを介して、共有結合により連結している、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項7】
前記タウホスホペプチドが配列番号２８のアミノ酸配列からなり、前記ｔｏｌｌ様受容体４アゴニストがモノホスホリルヘキサアシルリピドＡ、３－脱アシルを含み、前記ヘルパーＴ細胞エピトープが配列番号３９のアミノ酸配列を含み、前記ＣｐＧオリゴヌクレオチドが配列番号１８のヌクレオチド配列を含み、前記リポソームが、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホリル－３’－ｒａｃ－グリセロール（ＤＭＰＧ）、およびコレステロールからなる群から選択される少なくとも１つの脂質をさらに含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項8】
前記抗体応答が前記ｐタウを対象にする特異的ＩｇＧ抗体応答を含み、好ましくは前記特異的ＩｇＧ抗体応答が、プラセボ対照のものよりも少なくとも５０、６０、７０、８０、９０、１００倍またはそれ以上の高さの抗ｐタウＩｇＧ力価を有する、請求項１から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項9】
前記抗体応答が、特異的ＩｇＭ抗体応答の、前記ｐタウを対象にする特異的ＩｇＧ抗体応答へのクラススイッチを誘導する、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項10】
前記抗体応答が、前記ｐタウを非リン酸化タウタンパク質よりも選好的に認識するＩｇＧ免疫応答を含み、好ましくは前記抗ｐタウＩｇＧ力価と前記抗タウＩｇＧ力価との比が少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５または７０である、請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項11】
前記抗体応答が、濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）に対するＩｇＧ免疫応答を含む、請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項12】
前記ＩｇＧ免疫応答が、プラセボ対照のものよりも少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０倍またはそれ以上の高さの抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価を有する、請求項１１に記載の方法。
【請求項13】
前記抗ｅＰＨＦ ＩｇＧが、前記有効量のリポソームの初回投与の後に少なくとも６週間、８週間、１０週間、１２週間、１４週間、１６週間、１８週間、２０週間、２２週間、２４週間またはそれ以上にわたって病理的なｅＰＨＦタウに対する結合アビディティの増加を有し、好ましくは前記抗ｅＰＨＦ ＩｇＧが少なくとも０．３、０．４、０．５、０．６、または０．７のアビディティ指数を有する、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項14】
前記有効量のリポソームの初回投与の４～１２週間後、例えば８週間後に第２の用量の前記有効量のリポソームを前記対象に投与することをさらに含む、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項15】
前記抗体応答、好ましくは前記抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価が、第２の用量の前記有効量のリポソームの投与後にブーストされ、好ましくは抗体応答が、第２の用量の前記有効量のリポソームの投与の少なくとも２週間後に測定した場合に少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する、請求項１４に記載の方法。
【請求項16】
前記有効量のリポソームの初回投与の２０～２８週間後、例えば２４週間後に第３の用量の前記有効量のリポソームを前記対象に投与することをさらに含む、請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項17】
前記抗体応答、好ましくは前記抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価が、第３の用量の前記有効量のリポソームの投与後にブーストされ、好ましくは抗体応答が、第３の用量の前記有効量のリポソームの投与の少なくとも２週間後に測定した場合に少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する、請求項１６に記載の方法。
【請求項18】
前記有効量のリポソームの初回投与の４４～５２週間後、例えば４８週間後に第４の用量の前記有効量のリポソームを前記対象に投与することをさらに含む、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項19】
前記抗体応答、好ましくは前記抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価が、第４の用量の前記有効量のリポソームの投与後にブーストされ、好ましくは抗体応答が、第４の用量の前記有効量のリポソームの投与によって少なくとも２週間で測定した場合に少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する、請求項１８に記載の方法。
【請求項20】
リン酸化タウタンパク質（ｐタウ）に対する持続的な免疫応答を、それを必要とするヒト対象において誘導する方法であって、ｉ．有効量のリポソームを含むプライミングワクチンを前記対象に筋肉内投与すること、および
ｉｉ．前記プライミングワクチンの投与の６～１０週間後に前記有効量のリポソームを含む第１のブースターワクチンを前記対象に筋肉内投与すること
を含み、
前記持続的な免疫応答が前記プライミングワクチンの投与後に少なくとも約２０週間持続し、
前記リポソームが、
（１）配列番号２８のアミノ酸配列からなるタウホスホペプチドであって、前記リポソームの表面に存在する前記タウホスホペプチドと、
（２）モノホスホリルリピドＡを含むｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）配列番号２３、２４、２５、および２６からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）配列番号１８～配列番号２２からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含み、
前記有効量のリポソームが、
（１）１用量当たり３００μｇ～１８００μｇの量の前記タウホスホペプチドと、
（２）１用量当たり１００μｇ～５８５μｇの量の前記ｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）１用量当たり８５μｇ～５２５μｇの量の前記ヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）１用量当たり１５０μｇ～９００μｇの量の前記ＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含む、方法。
【請求項21】
前記ヘルパーＴ細胞エピトープが、配列番号３９、４０、４１、４２、および４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する、請求項２０に記載の方法。
【請求項22】
前記ヘルパーＴ細胞エピトープが、配列番号１３、１４、１５、１６、１７、および４４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する、請求項２０に記載の方法。
【請求項23】
脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチドが配列番号１８のヌクレオチド配列を有し、前記ＣｐＧオリゴヌクレオチドが少なくとも１つのコレステロールとリンカーを介して共有結合により連結している、請求項２０～２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項24】
前記第１のブースターワクチンが前記プライミングワクチンの投与の８週間後に投与され、前記持続的な免疫応答が前記プライミングワクチンの投与後に少なくとも約２４週間持続する、請求項２０～２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項25】
前記プライミングワクチンの投与の２２～２６週間後に前記有効量のリポソームを含む第２のブースターワクチンを前記対象に筋肉内投与することをさらに含み、前記持続的な免疫応答が前記プライミングワクチンの投与後に少なくとも約３６週間持続する、請求項２０～２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項26】
前記第２のブースターワクチンが前記プライミングワクチンの投与の２４週間後に投与され、前記持続的な免疫応答が前記プライミングワクチンの投与後に少なくとも約４８週間持続する、請求項２５に記載の方法。
【請求項27】
前記プライミングワクチンの投与の４５～５０週間後に前記有効量のリポソームを含む第３のブースターワクチンを前記対象に筋肉内投与することをさらに含み、前記持続的な免疫応答が前記プライミングワクチンの投与後に少なくとも約６０週間持続する、請求項２５または２６に記載の方法。
【請求項28】
前記第３のブースターワクチンが前記プライミングワクチンの投与の４８週間後に投与され、前記持続的な免疫応答が前記プライミングワクチンの投与後に少なくとも約７２週間持続する、請求項２７に記載の方法。
【請求項29】
前記有効量のリポソームが、１用量当たり３００μｇのタウホスホペプチドを含む、請求項２０から２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項30】
前記有効量のリポソームが、１用量当たり９００μｇのタウホスホペプチドを含む、請求項２０から２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項31】
前記有効量のリポソームが、１用量当たり１８００μｇのタウホスホペプチドを含む、請求項２０から２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項32】
前記持続的な免疫応答が、前記ｐタウを非リン酸化タウタンパク質よりも選好的に認識するＩｇＧ免疫応答を含み、好ましくは前記抗ｐタウＩｇＧ力価と前記抗タウＩｇＧ力価との比が少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５または７０である、請求項２０から３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項33】
前記持続的な免疫応答が、プラセボ対照のものよりも少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０倍またはそれ以上の高さの抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価を有する濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）に対するＩｇＧ免疫応答を含む、請求項２０から３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項34】
前記対象がタウの凝集体の排除を必要とする、請求項１から３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項35】
前記対象が、前臨床期アルツハイマー病、軽度から中等度のアルツハイマー病または早期アルツハイマー病、アルツハイマー病に起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）のようなアルツハイマー病の防止または処置を必要とする、請求項１から３４のいずれか一項に記載の方法。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年８月１２日に出願された米国仮特許出願第６３／２６０，２２７号、２０２１年１１月４日に出願された米国仮特許出願第６３／２６３，５４１号、および２０２２年２月１４日に出願された米国仮特許出願第６３／２６７，９７５号のそれぞれの優先権を主張する国際出願であり、これらのそれぞれの開示はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２１年８月１２日に出願された米国仮特許出願第６３／２６０，２２７号、２０２１年１１月４日に出願された米国仮特許出願第６３／２６３，５４１号、および２０２２年２月１４日に出願された米国仮特許出願第６３／２６７，９７５号のそれぞれの優先権を主張する国際出願であり、これらのそれぞれの開示はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
電子配列表の参照
電子配列表（ＳｅｑｕｅｎｃｅＬｉｓｔｉｎｇ＿７ＷＯ１．ｘｍｌ；サイズ：４２，６００バイト；および作成日：２０２２年７月８日）の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
電子配列表（ＳｅｑｕｅｎｃｅＬｉｓｔｉｎｇ＿７ＷＯ１．ｘｍｌ；サイズ：４２，６００バイト；および作成日：２０２２年７月８日）の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0003】
発明の分野
本発明は医学の分野におけるものである。本発明は詳細には、リン酸化タウタンパク質（ｐタウ）に対する持続的な抗体応答を、アルツハイマー病等のタウオパチーを防止または処置することを必要とする対象において誘導するための、リン酸化タウペプチドを含有するリポソームに関する。
本発明は医学の分野におけるものである。本発明は詳細には、リン酸化タウタンパク質（ｐタウ）に対する持続的な抗体応答を、アルツハイマー病等のタウオパチーを防止または処置することを必要とする対象において誘導するための、リン酸化タウペプチドを含有するリポソームに関する。
【0004】
背景
アルツハイマー病（ＡＤ）は、世界中で推定４４００万人が患う進行性衰弱性神経変性疾患である（Alzheimers.net）。現在商業化されているＡＤ療法は、臨床症状に作用することを目的としているが、疾患の根底にある発病過程（疾患修飾効果）を標的としていない。残念なことに、現在の療法は最小限度で有効であるに過ぎず、したがって追加の防止および治療措置を開発して試験する緊急の必要性が存在する。
アルツハイマー病（ＡＤ）は、世界中で推定４４００万人が患う進行性衰弱性神経変性疾患である（Alzheimers.net）。現在商業化されているＡＤ療法は、臨床症状に作用することを目的としているが、疾患の根底にある発病過程（疾患修飾効果）を標的としていない。残念なことに、現在の療法は最小限度で有効であるに過ぎず、したがって追加の防止および治療措置を開発して試験する緊急の必要性が存在する。
【0005】
アルツハイマー病に特徴的な病態は、著しく凝集したアミロイドベータタンパク質を含む細胞外プラークの蓄積、および過剰リン酸化タウタンパク質の細胞内「濃縮体（tangle）」または凝集である。これらのタンパク質の蓄積を引き起こす分子事象は特徴付けが不十分である。アミロイドに関しては、アミロイド前駆体タンパク質の異常な切断がアミノ酸１～４２を含む易凝集性断片の蓄積を引き起こすと仮定されている。タウに関しては、キナーゼ、ホスファターゼ、またはその両方の調節不全がタウの異常なリン酸化を引き起こすと仮定されている。タウは、過剰リン酸化すると、微小管と効果的に結合してそれを安定化させる能力を喪失し、代わりに影響を受けたニューロンの細胞質に蓄積する。未結合過剰リン酸化タウは、初めにオリゴマー、次いでより高次の凝集体を形成するようであり、これらの存在は、それらが形成されるニューロンの機能に、おそらくは正常な軸索輸送の中断を介して、負の影響を及ぼすと考えられる。
【0006】
先進諸国では、アルツハイマー病または他の認知症性タウオパチーと診断された個体は、一般的にコリンエステラーゼ阻害薬（例えばＡｒｉｃｅｐｔ（登録商標））またはメマンチン（例えばＮａｍｅｎｄａ（商標））を用いて処置される。これらの薬物は、適度に良好な忍容性を示すが、非常にわずかな有効性を有する。例えば、Ａｒｉｃｅｐｔ（登録商標）は、処置された個体のうちのおよそ５０％において、症状の悪化を６～１２か月遅延させる。残りの処置は、非薬理的であり、患者の認知能力が低下する一方で患者が日々の課題をより処理できるようにすることに焦点を当てている。
【0007】
アルツハイマー病における病理的なタウを標的とするように設計された活性ペプチドワクチンであるＡＡＤｖａｃ１の２４か月間の二重盲検並行群間ランダム化第２相多施設プラセボ対照研究であるＡＤＡＭＡＮＴ（ＥｕｄｒａＣＴ ２０１５－０００６３０－３０）の結果が最近発表された（Novak et al., Nature Aging vol 1: 521-534, 2021）。ＡＡＤｖａｃ１は、Ｎ末端システインを介してキーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）とカップリングしたタウ配列のアミノ酸２９４～３０５に由来する合成ペプチドを含有する。軽度ＡＤ認知症の患者に対して、研究期間中に１用量当たり４０μｇのＡＡＤｖａｃ１が１１回投与された。このワクチンは高レベルのＩｇＧ抗体を誘導したが、研究サンプル全体に対する認知および機能の検査では有意な効果は見出されなかった（同上）。
【0008】
ヒトｐ－タウ３９６／４０４に基づく合成ペプチドを使用したワクチンであるＡＣＩ－３５は、Ｐ３０１Ｌ変異を保有するマウスの運動能力を改善し、生存期間を延長させることが示された（Theunis et al., PLOS ONE. 2013. 8(8): e72301）。第１ｂ相研究では、ＡＣＩ－３５は忍容性が良好であり、抗体応答を誘発したが、ブースター応答可能性は限定的であった。
【0009】
アルツハイマー病等のニューロン変性疾患に対する安全かつ効果的な処置の必要性が存在する。
【発明の概要】
【0010】
本発明は、リポソームの表面に提示されているリン酸化タウペプチドを含む改良されたリポソームワクチンの臨床研究からの知見に基づく。ワクチンはｐタウに対する持続的な抗体応答等の強力で持続的な免疫応答を誘導し、抗体応答はブースターショットによってブースト可能であった。
【0011】
したがって、全般的な一態様では、本発明は、リン酸化タウタンパク質（ｐタウ）に対する抗体応答を、それを必要とするヒト対象において誘導する方法であって、
（１）１用量当たり２５～７５０ｎｍｏｌｅ、例えば３００μｇ～１８００μｇの量の、配列番号２７～配列番号２９および配列番号３１～配列番号３８からなる群から選択されるアミノ酸配列からなるタウホスホペプチドと、
（２）モノホスホリルリピドＡを含むｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）配列番号１３～配列番号１７、配列番号２３～配列番号２６、および配列番号３９～配列番号４４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）配列番号１８～配列番号２２からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含む有効量のリポソームを対象に投与することを含み、
タウホスホペプチドがリポソームの表面に提示され、
抗体応答が、ヒト対象への有効量のリポソームの初回投与の後に少なくとも６週間、例えば少なくとも６、７、８、９、１０週間持続する、方法を提供する。
（１）１用量当たり２５～７５０ｎｍｏｌｅ、例えば３００μｇ～１８００μｇの量の、配列番号２７～配列番号２９および配列番号３１～配列番号３８からなる群から選択されるアミノ酸配列からなるタウホスホペプチドと、
（２）モノホスホリルリピドＡを含むｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）配列番号１３～配列番号１７、配列番号２３～配列番号２６、および配列番号３９～配列番号４４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）配列番号１８～配列番号２２からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含む有効量のリポソームを対象に投与することを含み、
タウホスホペプチドがリポソームの表面に提示され、
抗体応答が、ヒト対象への有効量のリポソームの初回投与の後に少なくとも６週間、例えば少なくとも６、７、８、９、１０週間持続する、方法を提供する。
【0012】
一部の実施形態では、有効量のリポソームは、
（１）１用量当たり３００μｇ～１８００μｇの量の配列番号２８のアミノ酸配列からなるタウホスホペプチドと、
（２）１用量当たり１００μｇ～５８５μｇの量のｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）１用量当たり７５μｇ～５５０μｇの量のヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）１用量当たり１００μｇ～１０００μｇの量のＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含む。
（１）１用量当たり３００μｇ～１８００μｇの量の配列番号２８のアミノ酸配列からなるタウホスホペプチドと、
（２）１用量当たり１００μｇ～５８５μｇの量のｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）１用量当たり７５μｇ～５５０μｇの量のヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）１用量当たり１００μｇ～１０００μｇの量のＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含む。
【0013】
一部の実施形態では、ＣｐＧオリゴヌクレオチドは、１つまたは複数のホスホロチオエートヌクレオチド間連結を有し、ＣｐＧオリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの親油基と、任意選択でＰＥＧリンカーを介して、共有結合により連結している。
【0014】
一部の実施形態では、タウホスホペプチドは、１用量当たり約２５ｎｍｏｌｅ～約７５０ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約２９．７ｎｍｏｌｅ～約７４２．５ｎｍｏｌｅ、好ましくは約９０ｎｍｏｌｅ～約７１５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約８９．１ｎｍｏｌｅ～約７１２．８ｎｍｏｌｅ、または１用量当たり約９０ｎｍｏｌｅ～約５３５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約８９．１ｎｍｏｌｅ～約５３４．６ｎｍｏｌｅ、または１用量当たり約９０ｎｍｏｌｅ～約２７５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約８９．１ｎｍｏｌｅ～約２６７．３ｎｍｏｌｅの量で投与される。ある特定の実施形態では、タウホスホペプチドは、配列番号２７～配列番号２９および配列番号３１～配列番号３８からなる群から選択されるアミノ酸配列からなり、好ましくは配列番号２８のアミノ酸配列からなる。一実施形態では、テトラパルミトイル化タウホスホペプチドは、１用量当たり２９．７ｎｍｏｌｅ～７４２．５ｎｍｏｌｅに対応する１用量当たり１００μｇ～２５００μｇ、好ましくは１用量当たり８９．１ｎｍｏｌｅ～７１２．８ｎｍｏｌｅに対応する１用量当たり３００μｇ～２４００μｇ、例えば１用量当たり８９．１ｎｍｏｌｅ、２６７．３ｎｍｏｌｅ、５３４．６ｎｍｏｌｅまたは７１２．８ｎｍｏｌｅに対応する１用量当たり３００μｇ、９００μｇ、１８００μｇまたは２４００μｇの量が投与される。
【0015】
ある特定の実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり３０μｇ～９００μｇ、好ましくは１００μｇ～５８５μｇの量のｔｏｌｌ様受容体４アゴニストを含む。ある特定の実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり３０μｇ～９００μｇ、好ましくは１００μｇ～５８５μｇの量のｔｏｌｌ様受容体アゴニストであるモノホスホリルヘキサアシルリピドＡ、３－脱アシルを含む。
【0016】
ある特定の実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり２５μｇ～６２５μｇ、好ましくは７５μｇ～５５０μｇ、例えば７５μｇ～４５０μｇの量のヘルパーＴ細胞エピトープを含む。ある特定の実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり２５μｇ～６２５μｇ、好ましくは７５μｇ～４５０μｇの量の、配列番号１３のアミノ酸配列からなるＴ５０ヘルパーＴ細胞エピトープを含む。ある特定の実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり約２ｎｍｏｌｅ～約１１０ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約４．０２ｎｍｏｌｅ～約１００．４４ｎｍｏｌｅ、または１用量当たり約４ｎｍｏｌｅ～約７５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約４．０２ｎｍｏｌｅ～約７２．３２ｎｍｏｌｅ、または１用量当たり約１０ｎｍｏｌｅ～約１０５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約１２．０６ｎｍｏｌｅ～約１００．４４ｎｍｏｌｅ、または１用量当たり約７０～約１０５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約７２．３２ｎｍｏｌｅ～約１００．４４ｎｍｏｌｅの量のヘルパーＴ細胞エピトープを含む。ある特定の実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり約３ｎｍｏｌｅ～約１０５ｎｍｏｌｅ、好ましくは１用量当たり約１０ｎｍｏｌｅ～約１０５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約１２．０６ｎｍｏｌｅ～約１００．４４ｎｍｏｌｅの量の、配列番号１３のアミノ酸配列からなるＴ５０ヘルパーＴ細胞エピトープを含む。一実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり２～５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり２、３、４、もしくは５ｎｍｏｌｅ、またはそれらの間の任意の値、例えば１用量当たり約３．８２、３．９２、４．０２、もしくは４．１２ｎｍｏｌｅの量のヘルパーＴ細胞エピトープを含む。別の実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり１０～１５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり１０、１１、１２、１３、１４、もしくは１５ｎｍｏｌｅ、またはそれらの間の任意の値、例えば１用量当たり１１．８６、１１．９６、１２．０６、１２．１６ｎｍｏｌｅの量のヘルパーＴ細胞エピトープを含む。別の実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり７０～７５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり７０、７１、７２、７３、７４もしくは７５ｎｍｏｌｅ、またはそれらの間の任意の値、例えば１用量当たり７２．０２、７２．１２、７２．２２、７２．３２、７２．４２ｎｍｏｌｅの量のヘルパーＴ細胞エピトープを含む。さらに別の実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり９８～１０３ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり９８、９９、１００、１０１、１０２、もしくは１０３ｎｍｏｌｅ、またはそれらの間の任意の値、例えば１用量当たり１００．２４、１００．３４、１００．４４、１００．５４、もしくは１００．６４ｎｍｏｌｅの量のヘルパーＴ細胞エピトープを含む。
【0017】
ある特定の実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり５０μｇ～１２５０μｇ、好ましくは１００μｇ～１０００μｇ、例えば１５０μｇ～８００μｇの量の脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチドを含む。ある特定の実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり５０μｇ～１２５０μｇ、好ましくは１５０μｇ～８００μｇの量の、配列番号１８のヌクレオチド配列からなるＣｐＧオリゴヌクレオチドを含む。
【0018】
ある特定の実施形態では、リポソームは皮下投与される。
【0019】
ある特定の実施形態では、リポソームは筋肉内投与される。
【0020】
ある特定の実施形態では、リポソームは、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホリル－３’－ｒａｃ－グリセロール（ＤＭＰＧ）、およびコレステロールからなる群から選択される１つまたは複数の脂質をさらに含む。
【0021】
ある特定の実施形態では、リポソームは、
（１）配列番号２８のアミノ酸配列を有するタウホスホペプチドと、
（２）モノホスホリルヘキサアシルリピドＡ、３－脱アシルを含むｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）配列番号３９のアミノ酸配列を含むヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）配列番号１８のヌクレオチド配列を含む脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチドと、
（５）１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホリル－３’－ｒａｃ－グリセロール（ＤＭＰＧ）、およびコレステロールからなる群から選択される少なくとも１つの脂質
とを含む。
（１）配列番号２８のアミノ酸配列を有するタウホスホペプチドと、
（２）モノホスホリルヘキサアシルリピドＡ、３－脱アシルを含むｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）配列番号３９のアミノ酸配列を含むヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）配列番号１８のヌクレオチド配列を含む脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチドと、
（５）１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホリル－３’－ｒａｃ－グリセロール（ＤＭＰＧ）、およびコレステロールからなる群から選択される少なくとも１つの脂質
とを含む。
【0022】
本出願の実施形態において、抗体応答は、ｐタウを対象にする特異的ＩｇＧ抗体応答を含む。好ましくは、特異的ＩｇＧ抗体応答は、プラセボ対照のものよりも少なくとも５０、６０、７０、８０、９０、１００倍またはそれ以上の高さの抗ｐタウＩｇＧ力価を有する。
【0023】
本出願の別の実施形態では、抗体応答は、ｐタウを対象にする特異的ＩｇＭ抗体応答、および特異的ＩｇＭ抗体応答のｐタウを対象にする特異的ＩｇＧ抗体応答へのクラススイッチを含む。
【0024】
本出願のさらに別の実施形態では、抗体応答は、ｐタウを非リン酸化タウタンパク質よりも選好的に認識するＩｇＧ抗体応答を含む。好ましくは、抗ｐタウＩｇＧ力価と抗タウＩｇＧ力価との比は、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５もしくは７０、またはそれ以上である。
【0025】
本出願の別の実施形態では、抗体応答は、濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）に対するＩｇＧ抗体応答を含む。好ましくは、ＩｇＧ抗体応答は、プラセボ対照のものよりも少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０倍またはそれ以上の高さの抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価を有する。より好ましくは、抗ｅＰＨＦ ＩｇＧは、有効量のリポソームの初回投与の後またはブースティング投与の後に、ブースティング投与の少なくとも２週間後に測定した場合に少なくとも６週間にわたって病理的なｅＰＨＦタウに対する結合アビディティの増加を有し、好ましくは抗ｅＰＨＦ ＩｇＧは少なくとも０．３、０．４、０．５、０．６、または０．７のアビディティ指数を有する。
【0026】
本出願の実施形態において、抗体応答は、ブースター投与によってブーストされ得る。
【0027】
一実施形態では、本出願の方法は、有効量のリポソームの初回投与の４～１２週間後、例えば８週間後に第２の用量の有効量のリポソームを対象に投与することをさらに含む。抗体応答は、第２の用量の有効量のリポソームの投与の少なくとも２週間後に測定した場合にブーストされる。好ましくは、抗体応答は、第２の用量の有効量のリポソームの投与の少なくとも２週間後に測定した場合に少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上ブーストされる。
【0028】
別の実施形態では、本出願の方法は、有効量のリポソームの初回投与の２０～２８週間後、例えば２４週間後に第３の用量の有効量のリポソームを対象に投与することをさらに含む。抗体応答は、第３の用量の有効量のリポソームの投与の少なくとも２週間後に測定した場合にブーストされ、好ましくは抗体応答は、第３の用量の有効量のリポソームの投与の少なくとも２週間後に測定した場合に少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する。
【0029】
さらに別の実施形態では、本出願の方法は、有効量のリポソームの初回投与の４４～５２週間後、例えば４８週間後に第４の用量の有効量のリポソームを対象に投与することをさらに含む。抗体応答は、第４の用量の有効量のリポソームの投与の少なくとも２週間後にブーストされ、好ましくは抗体応答は、第４の用量の有効量のリポソームの投与によって少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する。
【0030】
ある特定の実施形態では、ヒト対象はタウの凝集体の排除を必要とする。ある特定の実施形態では、対象は、アルツハイマー病、例えば、前臨床期アルツハイマー病、早期アルツハイマー病、アルツハイマー病に起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）、軽度アルツハイマー病、または軽度から中等度のアルツハイマー病の防止または処置を必要とする。他の実施形態では、対象は、脳においてアミロイド陽性であるが、顕著な認知障害をまだ示していない。
【0031】
本発明はまた、免疫応答、例えばホスホ－タウタンパク質（ｐタウ）に対する抗体応答を、それを必要とするヒト対象において誘導することにおける使用のためのワクチン組合せ体であって、本発明の実施形態のプライミングワクチンおよびブースターワクチンを含み、免疫応答が、ヒト対象へのプライミングワクチンの投与の後に少なくとも１０週間、例えば少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０週間またはそれ以上持続する、ワクチン組合せ体にも関する。
【0032】
本発明のさらなる態様、特色、および利点は、本発明の以下の詳細な説明および特許請求の範囲を読むことでより良好に理解されるだろう。
【図面の簡単な説明】
【0033】
前述の概要、および本発明の以下の詳細な説明は、添付の図面と併せて読む場合、より良好に理解されるだろう。本発明は図面に示される正確な実施形態に限定されないことが理解されるべきである。
【0034】
【図1】第１ｂ／２ａ相研究（ＮＣＴ０４４４５８３１）におけるコホート１（ＡＣＩ－３５．０３０またはプラセボ）のための研究デザインの概観である。
【図2】０週目、８週目、および２４週目にプラセボまたは３００μｇもしくは９００μｇの用量のＡＣＩ－３５．０３０を用いて処置された早期アルツハイマー病を有する患者における抗ｐタウＩｇＧ力価の幾何平均を示す。
【図3】０週目、８週目、および２４週目にプラセボまたは３００μｇもしくは９００μｇの用量のＡＣＩ－３５．０３０を用いて処置された早期アルツハイマー病を有する患者における抗タウ（非リン酸化）ＩｇＧ力価の幾何平均を示す。
【図4】０週目、８週目、および２４週目にプラセボまたは３００μｇもしくは９００μｇの用量のＡＣＩ－３５．０３０を用いて処置された早期アルツハイマー病を有する患者における抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価の幾何平均を示す。
【図5】プラセボまたは３００μｇ、９００μｇもしくは１８００μｇの用量のＡＣＩ－３５．０３０を用いて処置された早期アルツハイマー病を有する患者における抗タウ（非リン酸化）ＩｇＧ力価の幾何平均を示す。
【図6】プラセボまたは３００μｇ、９００μｇもしくは１８００μｇの用量のＡＣＩ－３５．０３０を用いて処置された早期アルツハイマー病を有する患者における抗ｐタウＩｇＧ力価の幾何平均を示す。
【図7】プラセボまたは３００μｇ、９００μｇもしくは１８００μｇの用量のＡＣＩ－３５．０３０を用いて処置された早期アルツハイマー病を有する患者における抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価の幾何平均を示す。
【発明を実施するための形態】
【0035】
様々な刊行物、論文、および特許が背景技術および本明細書全体にわたって引用または記載されるが、これらの参考文献のそれぞれはその全体が参照によって本明細書に組み込まれる。本明細書に含まれている文書、行為、材料、デバイス、物品等に関する考察は、本発明のための文脈を提供することを目的とする。そのような考察は、開示または特許請求されるいかなる発明に関しても、これらの事項のいずれかまたは全てが先行技術の一部を形成することを承認するものではない。
【0036】
別段の定義がない限り、本明細書で使用する全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般的に理解されるものと同じ意味を有する。その他の場合、本明細書で使用するある特定の用語は本明細書に記載される意味を有する。
【0037】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用する場合、単数形の「１つの（a）」、「１つの（an）」、および「その（the）」は、文脈上別段の指示が明確にない限り、複数の指示対象を含むことに留意しなければならない。
【0038】
別段の記述がない限り、本明細書に記載されるあらゆる数値、例えば濃度または濃度範囲は、全ての場合において「約」という用語によって修飾されていると理解されるべきである。したがって、数値は典型的には示された値の±１０％を含む。例えば、１ｍｇ／ｍＬの濃度は０．９ｍｇ／ｍＬ～１．１ｍｇ／ｍＬを含む。同様に、１％～１０％（ｗ／ｖ）の濃度範囲は０．９％（ｗ／ｖ）～１１％（ｗ／ｖ）を含む。本明細書で使用する場合、数値範囲の使用は、文脈上別段の指示が明確にない限り、全ての可能な部分範囲、すなわち、そのような範囲内の整数およびその値の小数部を含むその範囲内の全ての個々の数値を明白に含む。
【0039】
別段の指示がない限り、一連の要素に先行する「少なくとも」という用語は、その一連のあらゆる要素を指すと理解されるべきである。当業者は、単に慣例的な実験を使用して、本明細書に記載される本発明の具体的な実施形態の多くの均等物を認識するかまたは確かめることができるだろう。そのような均等物は本発明によって包含されると意図される。
【0040】
本明細書で使用する場合、「含む（comprises）」、「含む（comprising）」、「含む（includes）」、「含む（including）」、「有する（has）」、「有する（having）」、「含有する（contains）」、もしくは「含有する（containing）」という用語、またはそれらの任意の他の変化形は、述べられた整数または整数群を含むがいかなる他の整数も整数群も除外するものではないということを含意すると理解することができ、非排他的または非限定的であると意図される。例えば、リストの要素を含む組成物、混合物、工程、方法、物品、または装置は、必ずしもそれらの要素のみに限定されず、明示的に列挙されていないかまたはそのような組成物、混合物、工程、方法、物品、もしくは装置に固有の他の要素を含むことができる。さらに、反対のことが明示的に述べられていない限り、「または」は、排他的なまたはではなく、非排他的なまたはを指す。例えば、条件ＡまたはＢは、以下：Ａが真である（または存在する）かつＢが偽である（または存在しない）、Ａが偽である（または存在しない）かつＢが真である（または存在する）、およびＡとＢの両方が真である（または存在する）のうちのいずれか１つによって満たされる。
【0041】
好ましい発明の構成成分の寸法または特徴に言及する場合に本明細書で使用する「約」、「およそ」、「全般的に」、「実質的に」という用語、および同様の用語が、記載された寸法／特徴は、当業者によって理解され得るように、厳密な境界でもパラメータでもなく、機能的に同じであるかまたは類似するそこからのわずかな変動を除外しないことを示すということもまた理解されるべきである。少なくとも、数値パラメータを含むような指示対象は、当技術分野で受け入れられている数学的および工業的原理（例えば、丸め、測定または他の系統誤差、製作公差等）を使用する、最下位桁を変えることのない変動を含み得る。
【0042】
本発明は、研究ワクチンと関連する可能性が幾分またはかなりあると考えられる脳炎等の重度有害事象を誘発せずに、抗リン酸化タウ抗体を、それを必要とするヒト対象において誘導する方法を提供する。特定の実施形態では、方法は、リポソームの表面に提示されているタウホスホペプチドとｔｏｌｌ様受容体４アゴニストとを含む有効量のリポソームを対象に投与することを含む。
【0043】
本明細書で使用する場合、「抗リン酸化タウ抗体」という用語は、タウのアミノ酸配列の１つまたは複数の位置のアミノ酸残基がリン酸化されているタウに結合する抗体を指す。リン酸化されるアミノ酸残基は例えば、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、またはチロシン（Ｔｙｒ）であり得る。抗リン酸化タウ抗体が結合するリン酸化タウの部位は好ましくは、アルツハイマー病等の神経変性疾患において特異的にリン酸化される部位である。抗リン酸化タウ抗体が結合するリン酸化タウの部位の例としては、例えば、Ｔｙｒ１８、Ｓｅｒ１９９、Ｓｅｒ２０２、Ｔｈｒ２０５、Ｔｈｒ２１２、Ｓｅｒ２１４、Ｓｅｒ３９６、Ｓｅｒ４０４、Ｓｅｒ４０９、Ｓｅｒ４２２、Ｔｈｒ４２７が挙げられる。本出願全体にわたって使用する場合、アミノ酸位は、アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００５９０１．２に表されるヒト微小管関連タンパク質タウアイソフォーム２の配列を参照して得られる。
【0044】
投与時に抗リン酸化タウ抗体を誘導することができるかどうかは、対象由来の生体試料（例えば、血液、血漿、血清、ＰＢＭＣ、尿、唾液、糞便、ＣＳＦ、またはリンパ液）を、医薬組成物において投与された免疫原性タウペプチドを対象とする抗体、例えばＩｇＧまたはＩｇＭ抗体の存在に関して試験することによって決定することができる（例えばHarlow, 1989, Antibodies, Cold Spring Harbor Pressを参照のこと）。例えば、免疫原を提供する組成物の投与に応答して産生される抗体の力価は、酵素連結免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、他のＥＬＩＳＡに基づくアッセイ（例えば、ＭＳＤ－Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）、ドットブロット、ＳＤＳ－ＰＡＧＥゲル、ＥＬＩＳＰＯＴ、または抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）アッセイによって測定することができる。
【0045】
本明細書で使用する場合、「有害事象」（ＡＥ）という用語は、医薬製剤が投与された患者における、処置との因果関係を必ずしも有しないあらゆる好ましくない医療上の出来事を指す。本発明の実施形態において、ＡＥは以下の定義を使用する、重症度が増加する３段階の尺度により評価される：軽度（グレード１）、対象によって容易に耐えられ、最小の不快感を引き起こし、日常活動を妨害しないＡＥを指す；中等度（グレード２）、正常な日常活動を妨害するほど十分に不快であり、介入が必要となる場合があるＡＥを指す；重度（グレード３）、正常な日常活動を妨げ、処置または他の介入が通例必要であるＡＥを指す。重篤なＡＥ（ＳＡＥ）とは、以下の転帰のいずれかをもたらす任意の用量において生じるいかなるＡＥであってもよい：事象ではなく転帰である死亡；事象の発現時点で患者が死亡のリスクにさらされているある事象を指す、生命を脅かすもの；生命を脅かすものは、仮により重度であった場合に死亡を引き起こした可能性がある事象を指さない；治療のための入院、すなわち、計画外の一晩の入院、または現行の入院の延長；正常な生活機能を遂行する能力の、永続的もしくは顕著な機能不全または実質的な破壊；先天異常／先天性欠損；患者を危険にさらすおそれがあるか、または上に列挙した他の転帰のうちの１つを防止するための医学的もしくは外科的介入を必要とし得る重要な医学的事象（研究者によって判断される）（例えば、アレルギー性気管支痙攣のための緊急治療室もしくは自宅での集中処置、または入院に至らない血液疾患もしくは痙攣）。入院とは、病院への公式な受け入れである。入院または入院の延長は、ＡＥが重篤となる基準を構成するが、それ自体はＳＡＥとは見なされない。ＡＥの非存在下では、入院または入院の延長は、参加している研究者によってＳＡＥとして報告されるべきではない。これは、以下の状況において当てはまり得る：入院もしくは入院の延長がプロトコルによって必要とされる手順に必要である；または入院もしくは入院の延長が、中央施設が従う慣例的な手順（例えば外科処置後のステント除去）の一部である。このことは、研究ファイルに記録されるべきである。研究中に悪化しなかった既存の状態の待機的処置のための入院は、ＡＥとは見なされない。
【0046】
入院中に生じる合併症はＡＥである。合併症が入院を延長させるか、または他のＳＡＥ基準のいずれかを満たす場合、その事象はＳＡＥである。
【0047】
本明細書で使用する場合、「脳炎」という用語は、感染性および非感染性の原因に起因し得る脳の炎症を指す。本明細書で使用する場合、「髄膜脳炎」という用語は、脳髄膜および脳の感染症または炎症によって特徴付けられる状態を指す。脳炎または髄膜脳炎の診断は、本開示を考慮すると、当業者に公知の技法によって、例えば、臨床的、神経学的、および精神医学的検査、血液およびＣＳＦ試料採取を含む生体試料採取、ＭＲＩ走査法、ならびに脳波記録法（ＥＥＧ）によって決定することができる。
【0048】
本明細書で使用する場合、「リポソーム」という用語は全般的に、高脂質含量を有する材料、例えば、リン脂質、コレステロールから作製される脂質小胞を指す。これらの小胞の脂質は全般的に脂質二重層の形態に組織化される。脂質二重層は全般的に、多重ラメラ脂質小胞（ＭＬＶ）を形成する脂質二重層の複数のタマネギ様の骨組みの間に散在しているかまたは中心部の無定形な空洞内に含有される容量を封入する。中心部の無定形な空洞を有する脂質小胞は、単ラメラ脂質小胞、すなわち、空洞を囲む単一の外縁の二重層を有する脂質小胞である。大単ラメラ小胞（ＬＵＶ）は全般的に、１００ｎｍ～数マイクロメートル、例えば１００～２００ｎｍまたはそれ以上の直径を有し、小単ラメラ脂質小胞（ＳＵＶ）は全般的に、１００ｎｍ未満、例えば２０～１００ｎｍ、典型的には１５～３０ｎｍの直径を有する。
【0049】
本明細書で使用する場合、微小管関連タンパク質タウ、ＭＡＰＴ、神経原線維濃縮体タンパク質、対らせん状細線維－タウ、ＰＨＦ－タウ、ＭＡＰＴＬ、ＭＴＢＴ１としても公知である「タウ」または「タウタンパク質」という用語は、複数のアイソフォームを有する豊富に存在する中枢および末梢神経系タンパク質を指す。ヒト中枢神経系（ＣＮＳ）では、３５２～４４１アミノ酸長のサイズの範囲の６種類の主要なタウアイソフォームが選択的スプライシングのために存在する（Hanger et al., Trends Mol Med. 15:112-9, 2009）。タウの例としては、これらに限定されないが、ＣＮＳにおけるタウアイソフォーム、例えば４つの反復配列と２つの挿入断片とを有する、微小管関連タンパク質タウアイソフォーム２とも命名される４４１アミノ酸の最も長いタウアイソフォーム（４Ｒ２Ｎ）、例えばアミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００５９０１．２に表されるヒトタウアイソフォーム２が挙げられる。タウの他の例としては、３つの反復配列を有し、挿入断片を有しない、微小管関連タンパク質タウアイソフォーム４とも命名される３５２アミノ酸の長さの最も短い（胎児型）アイソフォーム（３Ｒ０Ｎ）、例えばアミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿０５８５２５．１に表されるヒトタウアイソフォーム４が挙げられる。タウの例としてはまた、３００の追加の残基（エクソン４ａ）を含有する、末梢神経に発現する「大型タウ」アイソフォームが挙げられる。Friedhoff et al., Biochimica et Biophysica Acta 1502 (2000) 122-132。タウの例としては、６７６２ヌクレオチドの長さのｍＲＮＡ転写物（ＮＭ＿０１６８３５．４）によってコードされる７５８アミノ酸の長さのタンパク質であるヒト大型タウ、またはそのアイソフォームが挙げられる。例示されるヒト大型タウのアミノ酸配列はＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿０５８５１９．３に表される。本明細書で使用する場合、「タウ」という用語には、ヒト以外の種、例えば、カニクイザル（Macaca Fascicularis）（カニクイザル）、リーサスザル、またはチンパンジー（Pan troglodytes）（チンパンジー）由来のタウの相同体が含まれる。本明細書で使用する場合、「タウ」という用語には、全長野生型タウの変異、例えば点変異、断片、挿入、欠失、およびスプライスバリアントを含むタンパク質が含まれる。「タウ」という用語にはまた、タウアミノ酸配列の翻訳後修飾が包含される。翻訳後修飾としては、これに限定されないが、リン酸化が挙げられる。
【0050】
本明細書で使用する場合、「ペプチド」または「ポリペプチド」という用語は、ペプチド結合を介して連結した、アミノ酸残基から構成されるポリマー、関連する天然に存在する構造バリアント、およびその天然に存在しない合成アナログを指す。この用語は、任意のサイズ、構造、または機能のペプチドを指す。典型的には、ペプチドは少なくとも３アミノ酸の長さである。ペプチドは、天然に存在するペプチド、組換えペプチド、もしくは合成ペプチド、またはそれらの任意の組合せであり得る。合成ペプチドは、例えば全自動ポリペプチド合成装置を使用して合成することができる。タウペプチドの例としては、約５～約３０アミノ酸長、好ましくは約１０～約２５アミノ酸長、より好ましくは約１６～約２１アミノ酸長のタウタンパク質の任意のペプチドが挙げられる。本開示では、ペプチドは、リン酸残基が「ｐ」で示される標準的な３または１文字アミノ酸略記法を使用してＮ末端からＣ末端へと列挙される。本発明に有用なタウペプチドの例としては、これらに限定されないが、配列番号１～１２のいずれかのアミノ酸配列を含むタウペプチド、または配列番号１～１２のいずれかのアミノ酸配列と少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一のアミノ酸配列を有するタウペプチドが挙げられる。
【0051】
本明細書で使用する場合、「ホスホペプチド」または「ホスホエピトープ」という用語は、１つまたは複数のアミノ酸残基においてリン酸化されているペプチドを指す。タウホスホペプチドの例としては、１つまたは複数のリン酸化アミノ酸残基を含む任意のタウペプチドが挙げられる。
【0052】
本発明のタウペプチドは、固相ペプチド合成法または組換え発現系によって合成することができる。自動ペプチド合成装置は数多くの供給業者、例えばＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ、Ｃａｌｉｆ．）から市販されている。組換え発現系としては、細菌、例えば大腸菌（E. coli）、酵母、昆虫細胞、または哺乳動物細胞を挙げることができる。組換え発現の手順は、Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (C.S.H.P. Press, NY 2d ed., 1989)によって記載されている。
【0053】
特定の実施形態において、リポソームは１つまたは複数のタウペプチドを含む。特定の実施形態において、リポソーム中のタウペプチドは同じであっても異なっていてもよい。本開示を考慮すると、当業者に公知のいかなる好適なタウペプチドも本発明に使用することができる。特定の実施形態において、１つまたは複数のタウペプチドは、配列番号１～１２のうちの１つのアミノ酸配列を含む。他の実施形態では、１つまたは複数のタウペプチドは、配列番号１～１２のうちの１つのアミノ酸配列と少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％同一のアミノ酸配列を含み、いずれのアミノ酸残基もリン酸化されていないか、または１つもしくは複数のアミノ酸残基がリン酸化されている。
【0054】
特定の実施形態において、１つまたは複数のタウペプチドはタウホスホペプチドである。特定の実施形態において、１つまたは複数のタウホスホペプチドは、配列番号１～３もしくは５～１２のうちの１つのアミノ酸配列、または配列番号１～３もしくは５～１２のうちの１つのアミノ酸配列と少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一のアミノ酸配列を含み、１つまたは複数の示されたアミノ酸残基はリン酸化されている。好ましくは、タウホスホペプチドは、配列番号１～３のうちの１つのアミノ酸配列を含む。タウペプチドは、Ｃ末端がアミド化されていてもよい。
【0055】
本出願の実施形態において、タウペプチドはリポソームの表面に提示されている。タウペプチド、好ましくは、タウホスホペプチドは、本開示を考慮すると、当技術分野で公知の方法を使用してリポソームの表面に提示され得る。例えば、それらの内容が参照によって本明細書に組み込まれる米国特許第８，６４７，６３１号および同第９，６８７，４４７号、ならびに国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／５７２８６号における関連する開示を参照のこと。特定の実施形態において、ホスホペプチドを含む１つまたは複数のタウペプチドは、タウペプチドをリポソームの表面に提示させる１つまたは複数の修飾、例えばパルミトイル化またはドデシル修飾をさらに含む。追加のアミノ酸残基、例えば、Ｌｙｓ、Ｃｙｓ、または場合によりＳｅｒもしくはＴｈｒは、タウペプチドに付加されて修飾を容易にすることができる。脂質アンカーの位置がペプチド配列の異なる立体構造を誘導することが報告された（Hickman et al., J. Biol. Chem. vol. 286, No. 16, pp. 13966-13976, April 22, 2011）。理論に拘束されることを望むものではないが、疎水性部分を両末端に付加することは、タウペプチドの病理的なベータシート立体構造を増大し得ると考えられる。したがって、１つまたは複数のタウペプチドは、両末端に疎水性部分をさらに含む。修飾タウペプチドは、Ｃ末端がアミド化されていてもよい。好ましくは、リポソームの表面に提示されているタウペプチドは、配列番号２７～配列番号２９および配列番号３１～配列番号３８のうちの１つのアミノ酸配列からなる。
【0056】
本発明に有用なタウリポソームの例としては、これらに限定されないが、米国特許第８，６４７，６３１号および同第９，６８７，４４７号、ならびに国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／５７２８６号に記載されているタウリポソームが挙げられ、それぞれの開示は、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる。
【0057】
本明細書で使用する場合、「有効量」という用語は、対象において所望の生物学的または医学的応答を誘発する有効成分または構成成分の量を指す。特定の有効用量の選択は、処置または防止される疾患、関係している症状、患者の体重、患者の免疫状況、および当業者によって公知の他の因子を含むいくつかの因子の考慮に基づいて、当業者によって（例えば臨床試験を介して）決定することができる。製剤に用いられる正確な用量は、投与方法、投与経路、標的部位、患者の生理状態、投与される他の医薬、および疾患の重症度にも依存し得、実施者の判断および各患者の状況に従って決定されるべきである。例えば、タウホスホペプチドの有効量は、アジュバントもまた投与されるか否かにも依存し、アジュバントの非存在下ではより高い投薬量が必要とされる。有効用量は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたは動物モデル試験系に由来する用量応答曲線から外挿することができる。
【0058】
本出願の実施形態において、有効量のリポソームは、脳炎等の重度有害事象を誘発せずに抗リン酸化タウ抗体のレベルを増加させるのに十分な量のタウホスホペプチドを含む。特定の実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり約２５ｎｍｏｌｅ～約７５０ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約２９．７ｎｍｏｌｅ～約７４２．５ｎｍｏｌｅ、好ましくは１用量当たり約９０ｎｍｏｌｅ～約７１５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約８９．１ｎｍｏｌｅ～約７１２．８ｎｍｏｌｅ、または１用量当たり約９０ｎｍｏｌｅ～約５３５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約８９．１ｎｍｏｌｅ～約５３４．６ｎｍｏｌｅ、または１用量当たり約９０ｎｍｏｌｅ～約２７５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約８９．１ｎｍｏｌｅ～約２６７．３ｎｍｏｌｅの量のタウホスホペプチドを含む。投与されるタウホスホペプチドの量は、重量で表すこともできる。例えば、１用量当たり２９．７ｎｍｏｌｅは１用量当たり１００μｇの配列番号２８のアミノ酸配列からなるテトラパルミトイル化タウホスホペプチドに対応し、１用量当たり７４２．５ｎｍｏｌｅは１用量当たり２５００μｇの配列番号２８のアミノ酸配列からなるテトラパルミトイル化タウホスホペプチドに対応し、１用量当たり８９．１ｎｍｏｌｅは１用量当たり３００μｇの配列番号２８のアミノ酸配列からなるテトラパルミトイル化タウホスホペプチドに対応し、１用量当たり７１２．８ｎｍｏｌｅは１用量当たり２４００μｇの配列番号２８のアミノ酸配列からなるテトラパルミトイル化タウホスホペプチドに対応し、１用量当たり５３４．６ｎｍｏｌｅは１用量当たり１８００μｇの配列番号２８のアミノ酸配列からなるテトラパルミトイル化タウホスホペプチドに対応する。テトラパルミトイル化タウホスホペプチドは、タウホスホペプチドのリポソームの表面への提示を可能にする４本の脂質鎖を有する。３００、９００、１８００μｇの用量の配列番号２８のアミノ酸配列からなるテトラパルミトイル化タウホスホペプチドは、それぞれ１６９、５０８、１０１６μｇの、いずれの脂質鎖も有しない対応する「裸の」ペプチドに対応する。
【0059】
本出願の実施形態において、有効量のリポソームは、１用量当たり約２５ｎｍｏｌｅ～約７５０ｎｍｏｌｅの量のタウホスホペプチド、例えば１用量当たり約２５ｎｍｏｌｅ、約３０ｎｍｏｌｅ、約３５ｎｍｏｌｅ、約４０ｎｍｏｌｅ、約４５ｎｍｏｌｅ、約５０ｎｍｏｌｅ、約５５ｎｍｏｌｅ、約６０ｎｍｏｌｅ、約６５ｎｍｏｌｅ、約７０ｎｍｏｌｅ、約７５ｎｍｏｌｅ、約８０ｎｍｏｌｅ、約８５ｎｍｏｌｅ、約９０ｎｍｏｌｅ、約９５ｎｍｏｌｅ、約１００ｎｍｏｌｅ、約１２５ｎｍｏｌｅ、約１５０ｎｍｏｌｅ、約１７５ｎｍｏｌｅ、約２００ｎｍｏｌｅ、約２２５ｎｍｏｌｅ、約２５０ｎｍｏｌｅ、約２７５ｎｍｏｌｅ、約３００ｎｍｏｌｅ、約３２５ｎｍｏｌｅ、約３５０ｎｍｏｌｅ、約３７５ｎｍｏｌｅ、約４００ｎｍｏｌｅ、約４２５ｎｍｏｌｅ、約４５０ｎｍｏｌｅ、約４７５ｎｍｏｌｅ、約５００ｎｍｏｌｅ、約５２５ｎｍｏｌｅ、約５５０ｎｍｏｌｅ、約５７５ｎｍｏｌｅ、約６００ｎｍｏｌｅ、約６２５ｎｍｏｌｅ、約６５０ｎｍｏｌｅ、約６７５ｎｍｏｌｅ、約７００ｎｍｏｌｅ、約７２５ｎｍｏｌｅ、約７５０ｎｍｏｌｅの配列番号１～３または５～１２のうちの１つのアミノ酸配列を含むタウホスホペプチドを含む。好ましくは、タウホスホペプチドは配列番号２７～配列番号２９および配列番号３１～配列番号３８のうちの１つのアミノ酸配列からなる。より好ましくは、タウホスホペプチドは配列番号２８のアミノ酸配列からなる。
【0060】
本出願の実施形態において、有効量のリポソームは、１用量当たり１００μｇ～２５００μｇ、３００μｇ～２４００μｇ、３００μｇ～１８００μｇ、または３００μｇ～９００μｇ、例えば１用量当たり１００μｇ、１５０μｇ、２００μｇ、２５０μｇ、３００μｇ、４００μｇ、５００μｇ、６００μｇ、７００μｇ、８００μｇ、９００μｇ、１０００μｇ、１１００μｇ、１２００μｇ、１３００μｇ、１４００μｇ、１５００μｇ、１６００μｇ、１７００μｇ、１８００μｇ、１９００μｇ、２０００μｇ、２１００μｇ、２２００μｇ、２３００μｇ、２４００μｇ、または２５００μｇの量のテトラパルミトイル化タウホスホペプチドを含む。
【0061】
本出願の実施形態において、タウホスホペプチドはリポソームの表面に提示されている。本出願の実施形態において、タウホスホペプチドは配列番号１～３または５～１２のうちの１つのアミノ酸配列を含む。好ましくは、タウホスホペプチドは配列番号２７～配列番号２９および配列番号３１～配列番号３８のうちの１つのアミノ酸配列からなる。より好ましくは、タウホスホペプチドは配列番号２８のアミノ酸配列からなる。
【0062】
本出願の他の実施形態において、有効量のリポソームは、１用量当たり３０μｇ～９００μｇ、好ましくは１００μｇ～５８５μｇの量のｔｏｌｌ様受容体４アゴニストをさらに含む。例えば、有効量のリポソームは、１用量当たり３０μｇ、５０μｇ、１００μｇ、１５０μｇ、２００μｇ、２５０μｇ、３００μｇ、３３０μｇ、３６０μｇ、３９０μｇ、４２０μｇ、４５０μｇ、４８０μｇ、５００μｇ、５２０μｇ、５４０μｇ、５６０μｇ、５８０μｇ、６００μｇ、７００μｇ、８００μｇ、または９００μｇの量のｔｏｌｌ様受容体４アゴニストを含むことができる。
【0063】
本出願の実施形態において、ｔｏｌｌ様受容体４は３Ｄ－（６－ａｃｙｌ）ＰＨＡＤ（登録商標）を含む。
【0064】
本出願の他の実施形態において、有効量のリポソームは、１用量当たり２５μｇ～６２５μｇ、好ましくは、７５μｇ～５５０μｇ、例えば７５μｇ～４５０μｇ、８０μｇ～５４０μｇ、８２．５μｇ～５３５μｇ、８５μｇ～５３０μｇ、８７．５μｇ～５２５μｇ、または９０μｇ～５２０μｇのヘルパーＴ細胞エピトープをさらに含む。例えば、有効量のリポソームは、１用量当たり２５μｇ、５０μｇ、７０μｇ、７２．５μｇ、７５μｇ、７７．５μｇ、８０μｇ、８２．５μｇ、８５μｇ、８７．５μｇ、９０μｇ、１００μｇ、１２５μｇ、１５０μｇ、１７５μｇ、２００μｇ、２２５μｇ、２５０μｇ、２７５μｇ、３００μｇ、３２５μｇ、３５０μｇ、３７５μｇ、４００μｇ、４２５μｇ、４５０μｇ、４７５μｇ、５００μｇ、５２５μｇ、５５０μｇ、５７５μｇ、６００μｇ、または６２５μｇの量のヘルパーＴ細胞エピトープを含むことができる。
【0065】
本出願の他の実施形態において、有効量のリポソームは、１用量当たり約３ｎｍｏｌｅ～約１０５ｎｍｏｌｅ、例えば１用量当たり約４ｎｍｏｌｅ、約５ｎｍｏｌｅ、約６ｎｍｏｌｅ、約７ｎｍｏｌｅ、約８ｎｍｏｌｅ、約９ｎｍｏｌｅ、約１０ｎｍｏｌｅ、約１５ｎｍｏｌｅ、約２０ｎｍｏｌｅ、約２５ｎｍｏｌｅ、約３０ｎｍｏｌｅ、約３５ｎｍｏｌｅ、約４０ｎｍｏｌｅ、約４５ｎｍｏｌｅ、約５０ｎｍｏｌｅ、約５５ｎｍｏｌｅ、約６０ｎｍｏｌｅ、約６５ｎｍｏｌｅ、約７０ｎｍｏｌｅ、約７５ｎｍｏｌｅ、約８０ｎｍｏｌｅ、約８５ｎｍｏｌｅ、約９０ｎｍｏｌｅ、約９５ｎｍｏｌｅ、約１００ｎｍｏｌｅ、または約１０５ｎｍｏｌｅの量のヘルパーＴ細胞エピトープをさらに含む。
【0066】
本出願の実施形態において、ヘルパーＴ細胞エピトープは、配列番号１３のアミノ酸配列からなるＴ５０ヘルパーＴ細胞エピトープ、配列番号１４のアミノ酸配列からなるＴ４６ヘルパーＴ細胞エピトープ、配列番号１５のアミノ酸配列からなるＴ４８ヘルパーＴ細胞エピトープ、配列番号１６のアミノ酸配列からなるＴ５１ヘルパーＴ細胞エピトープ、または配列番号１７のアミノ酸配列からなるＴ５２ヘルパーＴ細胞エピトープであり、好ましくは、ヘルパーＴ細胞エピトープは、配列番号１３のアミノ酸配列からなるＴ５０ヘルパーＴ細胞エピトープである。
【0067】
ある特定の実施形態では、有効量のリポソームは、１用量当たり５０μｇ～１２５０μｇ、好ましくは１００μｇ～１０００μｇ、例えば１５０μｇ～８００μｇ、１５０～９００μｇ、１２５μｇ～９５０μｇ、または１５０μｇ～８５０μｇの量の脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチドをさらに含む。例えば、有効量のリポソームは、１用量当たり５０μｇ、１００μｇ、１５０μｇ、２００μｇ、２５０μｇ、３００μｇ、３５０μｇ、４００μｇ、４５０μｇ、５００μｇ、５５０μｇ、６００μｇ、６５０μｇ、７００μｇ、７５０μｇ、８００μｇ、８５０μｇ、９００μｇ、９５０μｇ、１０００μｇ、１０５０μｇ、１１００μｇ、１２００μｇ、または１２５０μｇの量の脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチドを含むことができる。
【0068】
本出願の実施形態において、脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチドは配列番号１８～２２のうちの１つのヌクレオチド配列を含むＣｐＧオリゴヌクレオチドであり、好ましくは、脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチドは配列番号１８のヌクレオチド配列を含むＣｐＧオリゴヌクレオチドである。本出願の実施形態において、脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチドは、１つまたは複数のホスホロチオエートヌクレオチド間連結を有し、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含むリンカーを介してコレステロールと共有結合により連結している、配列番号１８のヌクレオチド配列を含むＣｐＧオリゴヌクレオチドである。
【0069】
実施形態において、有効量のリポソームは、１用量当たり５０μｇ、１００μｇ、１５０μｇ、２００μｇ、２５０μｇ、３００μｇ、３５０μｇ、４００μｇ、４５０μｇ、５００μｇ、５５０μｇ、６００μｇ、６５０μｇ、７００μｇ、７５０μｇ、８００μｇ、８５０μｇ、９００μｇ、９５０μｇ、１０００μｇ、１０５０μｇ、１１００μｇ、１２００μｇ、または１２５０μｇの、コレステロールとＰＥＧリンカーを介して共有結合により連結しているＣｐＧオリゴヌクレオチドを含む。
【0070】
本明細書で使用する場合、「持続的な免疫応答」または「持続可能な免疫応答」は、有効量のリポソームの初回投与の後に少なくとも６週間持続する免疫応答を指す。本出願の実施形態において、「持続的な免疫応答」は、少なくとも６週間、少なくとも１２週間、少なくとも２４週間、少なくとも３６週間、少なくとも４８週間、少なくとも６０週間、少なくとも７２週間またはそれ以上持続する持続的な抗体応答であり、抗体応答は、抗リン酸化タウＩｇＧ、抗リン酸化タウＩｇＭ、または抗ｅＰＨＦの存在によって特徴付けることができる。抗リン酸化タウＩｇＧ、抗リン酸化タウＩｇＭおよび抗ｅＰＨＦは、本明細書に記載されるものを含む、当業者に公知の任意の方法によって検出および測定することができる。
【0071】
本明細書で使用する場合、「持続する抗体応答」は、有効量のリポソームの初回投与後の特定の期間中、規定の閾値レベルに等しいかまたはそれよりも高いレベルで維持される抗体応答を指し、規定の閾値レベルは、有効量のリポソームの初回投与の前に測定されたベースラインレベルよりも高い。一部の実施形態では、ベースラインレベルは、初回投与前の抗体力価の平均測定レベルに基づいて決定され、好ましくは２回の測定が行われる。一実施形態では、抗体応答は、ｐタウを対象にする特異的ＩｇＧ抗体応答を含み、規定の閾値レベルは、ベースラインレベルの少なくとも１．５倍またはそれ以上、例えば、ベースラインレベルの少なくとも１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０倍またはそれ以上である。別の実施形態では、抗体応答は、ｅＰＨＦに対するＩｇＧ免疫応答を含み、規定の閾値レベルは、ベースラインレベルの少なくとも２．０倍またはそれ以上、例えば、ベースラインレベル少なくとも２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５倍またはそれ以上である。
【0072】
特定の実施形態において、ヒト対象は、神経変性疾患、障害、または状態の処置を必要とする。
【0073】
本明細書で使用する場合、「神経変性疾患、障害、または状態」には、本開示を考慮すると、当業者に公知のあらゆる神経変性疾患、障害、または状態が含まれる。神経変性疾患、障害、または状態の例としては、神経原線維病変の形成によって引き起こされるかまたはそれと関連する神経変性疾患または障害、例えばタウオパチーと称されるタウ関連疾患、障害、または状態が挙げられる。特定の実施形態において、神経変性疾患、障害、または状態としては、アルツハイマー病、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、ボクサー認知症、ダウン症候群、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、グアム島のパーキンソン認知症複合、神経原線維濃縮体を伴う非グアム型運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、レビー認知症を伴う筋萎縮性側索硬化症（Dementia Lewy Amyotrophic Lateral sclerosis）、石灰化を伴うびまん性神経原線維濃縮体、前頭側頭型認知症、好ましくは第１７染色体と連鎖するパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症（ＦＴＤＰ－１７）、前頭側頭葉型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、濃縮体型認知症（Tangle only dementia）、脳炎後パーキンソン症候群、筋強直性ジストロフィー、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、原発性年齢関連タウオパチー（ＰＡＲＴ）、脳血管症、またはレビー小体型認知症（ＬＢＤ）を含むがこれらに限定されない、タウとアミロイド病理との共存を示す任意の疾患または障害が挙げられる。特定の実施形態において、神経変性疾患、障害、または状態は、アルツハイマー病または別のタウオパチーである。好ましい実施形態において、神経変性疾患、障害、または状態は、アルツハイマー病である。
【0074】
アルツハイマー病の臨床経過は、認知および機能障害の進行パターンにより複数の段階に分けることができる。段階は、例えばＮＩＡ－ＡＡ研究枠組みを含む当技術分野で公知の評価尺度を使用して定義することができる。例えば、それぞれの内容の全体が参照によって本明細書に組み込まれる、Dubois et al., Alzheimer's & Dementia 12 (2016) 292-323、Dubois et al., Lancet Neurol 2014; 13: 614-29、Jack et al., Alzheimer's & Dementia 14 (2018) 535-562を参照のこと。
【0075】
好ましい実施形態において、神経変性疾患、障害、または状態は、早期アルツハイマー病、アルツハイマー病に起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）、軽度アルツハイマー病、または軽度から中等度のアルツハイマー病である。
【0076】
一部の実施形態では、処置を必要とする対象は、脳においてアミロイド陽性であるが、顕著な認知障害をまだ示していない。脳におけるアミロイド沈着は、当技術分野で公知の方法、例えば、ＰＥＴ走査、免疫沈降質量分析、または他の方法を使用して検出することができる。
【0077】
本明細書で使用する場合、「ｔｏｌｌ様受容体」または「ＴＬＲ」という用語は、自然免疫応答において重要な役割を果たすパターン認識受容体（ＰＲＲ）タンパク質のクラスを指す。ＴＬＲは、宿主分子と区別することができる、微生物病原体、例えば、細菌、真菌、寄生虫、およびウイルス由来の病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）を認識する。ＴＬＲは、典型的には二量体として機能し、抗原提示樹状細胞および貪食マクロファージを含む自然免疫応答に関与する細胞によって発現される膜貫通タンパク質である。少なくとも１０のヒトＴＬＲファミリーメンバー、すなわちＴＬＲ１～ＴＬＲ１０、ならびに少なくとも１２のマウスＴＬＲファミリーメンバー、すなわちＴＬＲ１～ＴＬＲ９およびＴＬＲ１１～ＴＬＲ１３が存在し、これらは認識する抗原の種類の点で異なる。例えば、ＴＬＲ４は、多くのグラム陰性菌に存在する構成成分であるリポ多糖（ＬＰＳ）、ならびにウイルスタンパク質、多糖、および内在性タンパク質、例えば、低密度リポタンパク質、ベータデフェンシン、および熱ショックタンパク質を認識し、ＴＬＲ９は、原核ゲノムにおいては豊富に存在するが脊椎動物ゲノムにおいては希少である非メチル化シトシン－リン酸－グアニン（ＣｐＧ）一本鎖または二本鎖ジヌクレオチドによって活性化するヌクレオチド感知性ＴＬＲである。ＴＬＲの活性化は一連のシグナル伝達事象を引き起こし、Ｉ型インターフェロン（ＩＦＮ）、炎症性サイトカイン、およびケモカインの産生、ならびに免疫応答の誘導をもたらす。最終的に、この炎症は獲得免疫系も活性化させ、次いで侵入病原体および感染細胞の排除をもたらす。
【0078】
本明細書で使用する場合、「アゴニスト」という用語は、１つまたは複数のＴＬＲに結合し、受容体媒介性応答を誘導する分子を指す。例えば、アゴニストは、受容体の活性を誘導するか、賦活化するか、上昇させるか、活性化させるか、容易にするか、増強するか、または上方調節することができる。そのような活性は「アゴニスト活性」と称される。例えば、ＴＬＲ４またはＴＬＲ９アゴニストは、結合した受容体を介して細胞シグナル伝達を活性化または増加させることができる。アゴニストとしては、これらに限定されないが、核酸、低分子、タンパク質、炭水化物、脂質、または受容体と結合もしくは相互作用する任意の他の分子が挙げられる。アゴニストは天然受容体リガンドの活性を模倣することができる。アゴニストは、配列、立体構造、電荷、またはアゴニストが受容体によって認識されることが可能となるような他の特徴に関して、これらの天然受容体リガンドと一致し得る。この認識は、天然受容体リガンドが存在する場合と同様に細胞がアゴニストの存在に反応するように、生理学的および／または生化学的変化を細胞内に生じ得る。特定の実施形態において、ｔｏｌｌ様受容体アゴニストは、ｔｏｌｌ様受容体４アゴニストおよびｔｏｌｌ様受容体９アゴニストのうちの少なくとも一方である。
【0079】
本明細書で使用する場合、「誘導する」および「賦活化する」という用語ならびにそれらの変化形は、細胞活性の任意の測定可能な上昇を指す。免疫応答の誘導としては、例えば、免疫細胞の集団の活性化、増殖、もしくは成熟、サイトカインの産生を増加させること、および／または免疫機能の増加の別の指標を挙げることができる。ある特定の実施形態では、免疫応答の誘導としては、Ｂ細胞の増殖を高めること、抗原特異的抗体を産生させること、抗原特異的Ｔ細胞の増殖を高めること、樹状細胞抗原提示を向上すること、ならびに／またはある特定のサイトカイン、ケモカイン、および共刺激マーカーの発現を増加させることを挙げることができる。
【0080】
本明細書で使用する場合、「ｔｏｌｌ様受容体４アゴニスト」という用語は、ＴＬＲ４のアゴニストとして作用する任意の化合物を指す。本開示を考慮すると、当業者に公知のいかなる好適なｔｏｌｌ様受容体４アゴニストも本発明に使用することができる。本発明に有用なｔｏｌｌ様受容体４リガンドの例としては、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬＡ）を含むがこれに限定されないＴＬＲ４アゴニストが挙げられる。本明細書で使用する場合、「モノホスホリルリピドＡ」または「ＭＰＬＡ」という用語は、内毒素であるグラム陰性菌リポ多糖（ＬＰＳ）の生物学的に活性な部分であるリピドＡの修飾形態を指す。ＭＰＬＡは、ＬＰＳよりも毒性が低いが、免疫賦活活性を維持する。ワクチンアジュバントとして、ＭＰＬＡは、ワクチン抗原に対する細胞性応答と液性応答の両方を賦活化する。ＭＰＬＡの例としては、これらに限定されないが、３－Ｏ－デスアシル－４’－モノホスホリルリピドＡ、モノホスホリルヘキサアシルリピドＡ、３－脱アシル（合成）（３Ｄ－（６－ａｃｙｌ）ＰＨＡＤ（登録商標）とも称される）、モノホスホリル３－脱アシルリピドＡ、およびそれらの構造的に関連する変種が挙げられる。本発明に有用なＭＰＬＡは、当技術分野で公知の方法を使用するか、または商業的供給源から取得することができ、例えば、Ａｖａｎｔｉ Ｐｏｌａｒ Ｌｉｐｉｄｓ（Ａｌａｂａｓｔｅｒ、Ａｌａｂａｍａ、ＵＳＡ）製の３Ｄ－（６－ａｃｙｌ）ＰＨＡＤ（登録商標）、ＰＨＡＤ（登録商標）、ＰＨＡＤ（登録商標）－５０４、３Ｄ－ＰＨＡＤ（登録商標）、または様々な商業的供給源からのＭＰＬ（商標）である。特定の実施形態において、ｔｏｌｌ様受容体４アゴニストはＭＰＬＡである。特定の実施形態において、タウホスホペプチドとｔｏｌｌ様受容体４アゴニストとを含むリポソームは、大半または全てのＨＬＡ ＤＲ（ヒト白血球抗原－抗原Ｄ関連）分子と結合することができるヘルパーＴ細胞エピトープも含む。ヘルパーＴ細胞エピトープは次いで、ＣＤ４＋Ｔ細胞を活性化させることができ、不可欠な成熟および生存シグナルをタウ特異的Ｂ細胞に提供する。タウリポソームは、リポソームがプライムおよび／またはブーストにおいて使用される同種または異種免疫化スキームにおいて、ｐタウ抗原に対する高品質抗体を生成するために使用することができる。
【0081】
本明細書で使用する場合、「ヘルパーＴ細胞エピトープ」という用語は、ヘルパーＴ細胞による認識が可能であるエピトープを含むポリペプチドを指す。ヘルパーＴ細胞エピトープの例としては、これらに限定されないが、破傷風トキソイド（例えば、それぞれＴ２およびＴ３０とも命名されるＰ２およびＰ３０エピトープ）、Ｂ型肝炎表面抗原、コレラ毒素Ｂ、ジフテリアトキソイド、麻疹ウイルスＦタンパク質、クラミジア・トラコマチス（Chlamydia trachomatis）主要外膜タンパク質、熱帯熱マラリア原虫（Plasmodium falciparum）スポロゾイト周囲Ｔ、熱帯熱マラリア原虫（P. falciparum）ＣＳ抗原、マンソン住血吸虫（Schistosoma mansoni）トリオースリン酸イソメラーゼ、百日咳菌（Bordetella pertussis）、破傷風菌（Clostridium tetani）、ペルツサリア・トラキタリナ（Pertusaria trachythallina）、大腸菌（Escherichia coli）ＴｒａＴ、ならびにインフルエンザウイルスヘマグルチニン（ＨＡ）が挙げられる。
【0082】
本開示を考慮すると、当業者に公知のいかなる好適なヘルパーＴ細胞エピトープも本発明に使用することができる。特定の実施形態において、ヘルパーＴ細胞エピトープは配列番号２３～配列番号２６からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を含む。好ましくは、ヘルパーＴ細胞エピトープは、リンカー、例えば１つまたは複数のアミノ酸、例えば、Ｖａｌ（Ｖ）、Ａｌａ（Ａ）、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、Ｌｙｓ（Ｋ）を含むペプチドリンカーを介して一緒に融合した、配列番号２３～配列番号２６のアミノ酸配列のうちの２つ以上を含む。リンカーの長さは変えることができ、好ましくは１～５アミノ酸である。好ましくは、ヘルパーＴ細胞エピトープは、ＶＶＲ、ＧＳ、ＲＲ、ＲＫからなる群から選択される１つまたは複数のリンカーを介して一緒に融合した、配列番号２３～配列番号２６のアミノ酸配列のうちの３つ以上を含む。ヘルパーＴ細胞エピトープは、そのＣ末端がアミド化されていてもよい。
【0083】
本出願の実施形態において、ヘルパーＴ細胞エピトープは、リポソーム表面に組み込む、例えば共有結合した疎水性部分によって固定することができ、ここで前記疎水性部分は、特に少なくとも３個の炭素原子、特に少なくとも４個の炭素原子、特に少なくとも６個の炭素原子、特に少なくとも８個の炭素原子、特に少なくとも１２個の炭素原子、特に少なくとも１６個の炭素原子の炭素骨格を有する、アルキル基、脂肪酸、トリグリセリド、ジグリセリド、ステロイド、スフィンゴ脂質、糖脂質、またはリン脂質、特にアルキル基または脂肪酸である。本発明の一実施形態では、疎水性部分はパルミチン酸である。あるいは、ヘルパーＴ細胞エピトープはリポソームに封入することができる。特定の実施形態において、ヘルパーＴ細胞エピトープはリポソームに封入される。
【0084】
本開示を考慮すると、ヘルパーＴ細胞エピトープは、リポソームにおける所望の位置のために当技術分野で公知の方法を使用して修飾することができる。特定の実施形態において、本発明に有用なヘルパーＴ細胞エピトープは配列番号３９～配列番号４４のうちの１つのアミノ酸配列を含む。好ましくは、ヘルパーＴ細胞エピトープは配列番号１３～配列番号１７からなる群から選択されるアミノ酸配列からなる。
【0085】
特定の実施形態において、タウホスホペプチドとｔｏｌｌ様受容体４アゴニストとを含むリポソームは、ｔｏｌｌ様受容体９アゴニストも含む。本明細書で使用する場合、「ｔｏｌｌ様受容体９アゴニスト」という用語は、ＴＬＲ９のアゴニストとして作用する任意の化合物を指す。本開示を考慮すると、当業者に公知のいかなる好適なｔｏｌｌ様受容体９アゴニストも本発明に使用することができる。本発明に有用なｔｏｌｌ様受容体９リガンドの例としては、ＣｐＧオリゴヌクレオチドを含むがこれに限定されないＴＬＲ９アゴニストが挙げられる。
【0086】
本明細書で使用する場合、「ＣｐＧオリゴヌクレオチド」、「ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド」、または「ＣｐＧ ＯＤＮ」という用語は、少なくとも１つのＣｐＧモチーフを含むオリゴヌクレオチドを指す。本明細書で使用する場合、「オリゴヌクレオチド」、「オリゴデオキシヌクレオチド」または「ＯＤＮ」とは、複数の連結したヌクレオチド単位から形成されるポリヌクレオチドを指す。そのようなオリゴヌクレオチドは、現存する核酸源から取得することができるか、または合成法によって生産することができる。本明細書で使用する場合、「ＣｐＧモチーフ」という用語は、リン酸結合またはホスホジエステル骨格または他のヌクレオチド間連結によって連結した非メチル化シトシン－リン酸－グアニン（ＣｐＧ）ジヌクレオチド（すなわち、シトシン（Ｃ）の次にグアニン（Ｇ）が続く）を含有するヌクレオチド配列を指す。
【0087】
特定の実施形態において、ＣｐＧオリゴヌクレオチドは脂質化、すなわち脂質部分とコンジュゲート（共有結合により連結）している。
【0088】
本明細書で使用する場合、「脂質部分」とは、親油性構造を含有する部分を指す。脂質部分、例えば、アルキル基、脂肪酸、トリグリセリド、ジグリセリド、ステロイド、スフィンゴ脂質、糖脂質、またはリン脂質、特にコレステロール等のステロールまたは脂肪酸は、高度に親水性の分子、例えば核酸に結合する場合、血漿タンパク結合、および結果として親水性分子の循環半減期を実質的に向上させることができる。加えて、ある特定の血漿タンパク質、例えばリポタンパク質に結合することは、対応するリポタンパク質受容体（例えば、ＬＤＬ受容体、ＨＤＬ受容体、またはスカベンジャー受容体ＳＲ－Ｂ１）を発現する特定の組織への取込みを増加させることが示されている。特に、ホスホペプチドおよび／またはＣｐＧオリゴヌクレオチドとコンジュゲートした脂質部分は、前記ペプチドおよび／またはオリゴヌクレオチドをリポソームの膜に疎水性部分を介して固定することを可能にする。
【0089】
特定の実施形態において、本開示を考慮すると、ＣｐＧオリゴヌクレオチドはいかなる好適なヌクレオチド間連結も含むことができる。
【0090】
本明細書で使用する場合、「ヌクレオチド間連結」という用語は、２つのヌクレオチドをそれらの糖を介してつなぐ、隣接するヌクレオシド間のリン原子および荷電または中性基からなる化学的連結を指す。ヌクレオチド間連結の例としては、ホスホジエステル（ｐｏ）、ホスホロチオエート（ｐｓ）、ホスホロジチオエート（ｐｓ２）、メチルホスホネート（ｍｐ）、およびメチルホスホロチオエート（ｒｐ）が挙げられる。ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、メチルホスホネート、およびメチルホスホロチオエートは安定化ヌクレオチド間連結であり、ホスホジエステルは天然に存在するヌクレオチド間連結である。オリゴヌクレオチドホスホロチオエートは典型的にはＲｐおよびＳｐホスホロチオエート連結の無作為なラセミ混合物として合成される。
【0091】
本開示を考慮すると、当業者に公知のいかなる好適なＣｐＧオリゴヌクレオチドも本発明に使用することができる。そのようなＣｐＧオリゴヌクレオチドの例としては、これらに限定されないが、ＣｐＧ２００６（ＣｐＧ７９０９としても公知）（配列番号１８）、ＣｐＧ１０１８（配列番号１９）、ＣｐＧ２３９５（配列番号２０）、ＣｐＧ２２１６（配列番号２１）、またはＣｐＧ２３３６（配列番号２２）が挙げられる。
【0092】
ＣｐＧオリゴヌクレオチドは、本開示を考慮すると、当技術分野で公知の方法を使用して脂質化することができる。一部の実施形態では、ＣｐＧオリゴヌクレオチドはコレステロール分子と共有結合により直接連結する。一部の実施形態では、ＣｐＧオリゴヌクレオチドの３’末端はコレステロール分子とリン酸結合によって、任意選択でＰＥＧリンカーを介して、共有結合により連結する。一部の実施形態では、ＣｐＧオリゴヌクレオチドの５’末端はコレステロール分子とリン酸結合によって、任意選択でＰＥＧリンカーを介して、共有結合により連結する。他の親油性部分もまたＣｐＧオリゴヌクレオチドの５’または３’末端と共有結合により連結することができる。例えば、ＣｐＧオリゴヌクレオチドは、リポソーム由来のリン脂質と同じ長さの脂質アンカー、例えば１本のパルミチン酸鎖（カップリングのために活性化させたＰａｌ－ＯＨもしくは類似体を使用する）、または２つのパルミチン酸（例えば、カップリングのために活性化させた１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－（スクシニル）もしくは類似体を使用する）と、任意選択でＰＥＧリンカーを介して、共有結合により連結することができる。例えば、その内容が参照によって本明細書に組み込まれる米国特許第７，７４１，２９７号における関連する開示を参照のこと。ＰＥＧの長さは変えることができ、例えば１～５ＰＥＧ単位である。
【0093】
他のリンカーもまた、ＣｐＧオリゴヌクレオチドを親油性部分（例えばコレステロール分子）に共有結合により接続するために使用することができ、その例としては、これに限定されないが、３～１２個の炭素を有するアルキルスペーサーが挙げられる。オリゴヌクレオチド化学と適合性の短いリンカーはアミノジオールとして必要である。ある実施形態では、リンカーは共有結合に使用されない。例えば、その関連する開示が参照によって本明細書に組み込まれる、Ries et al., "Convenient synthesis and application of versatile nucleic acid lipid membrane anchors in the assembly and fusion of liposomes," Org. Biomol. Chem., 2015, 13, 9673を参照のこと。
【0094】
特定の実施形態において、本発明に有用な脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチドは配列番号１８～配列番号２２からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含み、ヌクレオチド配列は１つまたは複数のホスホロチオエートヌクレオチド間連結を含み、ヌクレオチド配列は少なくとも１つのコレステロールとリンカーを介して共有結合により連結している。好ましい実施形態において、脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチドは、配列番号１８のヌクレオチド配列を含み、１つまたは複数のホスホロチオエートヌクレオチド間連結を有し、コレステロールと共有結合により連結している。いかなる好適なリンカーも、ＣｐＧオリゴヌクレオチドをコレステロール分子と共有結合により連結するために使用することができる。好ましくは、リンカーはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む。
【0095】
特定の実施形態において、リポソームは、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホリル－３’－ｒａｃ－グリセロール（ＤＭＰＧ）、およびコレステロールからなる群から選択される１つまたは複数の脂質をさらに含む。
【0096】
特定の実施形態において、リポソームは緩衝液をさらに含む。本開示を考慮すると、当業者に公知のいかなる好適な緩衝液も本発明に使用することができる。一実施形態では、リポソームはリン酸緩衝食塩水を含む。特定の実施形態において、緩衝液はヒスチジンおよびスクロースを含む。
【0097】
本発明に使用される例示的なリポソームは、タウテトラパルミトイル化ホスホペプチド（ｐタウペプチドＴ３、配列番号２８）であって、該タウペプチドの各末端の２つのパルミチン酸を介してリポソームの表面に提示されている、タウテトラパルミトイル化ホスホペプチド；コレステロール分子を介してリポソーム膜に組み込まれている脂質化ＣｐＧ（アジュバントＣｐＧ７９０９（ＣｐＧ２００６）、配列番号１８）を含むＴＬＲ－９リガンドであって、コレステロール分子がＣｐＧとＰＥＧリンカーを介して共有結合により連結している、ＴＬＲ－９リガンド；膜に組み込まれているＴＬＲ－４リガンド（モノホスホリルリピドＡ（例えば３Ｄ－（６－ａｃｙｌ）ＰＨＡＤ（登録商標）））；封入されたヘルパーＴ細胞エピトープ（ＰＡＮ－ＤＲ結合部位Ｔ５０、配列番号１３）；ならびにリポソームの脂質構成成分としての１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－コリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－［ホスホ－ｒａｃ－（１－グリセロール）］ナトリウム塩（ＤＭＰＧ）、およびコレステロールを含む。
【0098】
本発明のリポソームは、本開示を考慮すると、当技術分野で公知の方法を使用して作製することができる。リポソームの各構成成分の最適な比は、本開示を考慮すると、当業者に公知の技法によって決定することができる。
【0099】
リポソームは、予防および／または治療処置に好適な手段によって投与することができる。好ましい実施形態において、リポソームは皮下または筋肉内注射によって投与される。筋肉内注射は最も典型的には腕または脚の筋肉に対して実施される。
【0100】
全般的な一態様では、本発明は、治療有効量のリポソームを薬学的に許容される賦形剤および／または担体と一緒に含む医薬組成物に関する。薬学的に許容される賦形剤および／または担体は当技術分野で周知である（Remington's Pharmaceutical Science (15th ed.), Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1980を参照のこと）。医薬組成物の好ましい製法は、所期の投与方法および治療用途に依存する。組成物は、動物またはヒト投与のための医薬組成物を製剤化するために一般的に使用されるビヒクルとして定義される、薬学的に許容される非毒性の担体または希釈剤を含むことができる。希釈剤は、組合せ体の生物活性に影響を及ぼさないように選択される。そのような希釈剤の例は、蒸留水、生理学的リン酸緩衝食塩水、リンガー液、デキストロース溶液、およびハンクス液である。加えて、医薬組成物または製剤はまた、他の担体、アジュバント、または非毒性、非治療性、および非免疫原性安定剤等を含んでもよい。担体、賦形剤、または希釈剤の特徴は特定の用途のための投与経路に依存し得ることが理解されるだろう。
【0101】
ワクチンの標的抗原は脳に位置しており、脳は血液脳関門（ＢＢＢ）と呼ばれる特殊な細胞構造によって循環から隔てられている。ＢＢＢは物質の循環から脳への移行を制限する。このことは毒素、微生物等の中枢神経系への進入を防止する。ＢＢＢはまた、免疫メディエーター（例えば抗体）の、脳を囲む間質液および脳脊髄液への効率的な進入を妨げるという潜在的により望ましくない効果を有する。
【0102】
体循環に存在する抗体のうちのおよそ０．１％がＢＢＢを越えて脳に進入する。これは、ＣＮＳ抗原を標的とするワクチンによって誘導される全身力価が、脳において有効となる最小有効力価よりも少なくとも１０００倍大きくなければならないことを示唆する。有効性をもたらすために必要となる血清中の抗体の最小力価は容易には明らかでない。加えて、免疫応答の量だけでなく質（例えばアビディティ）も、ＣＮＳ障害、例えば神経変性疾患、障害、または状態を標的とする安全かつ効果的な免疫療法のために考慮しなければならない。
【0103】
抗体のアビディティは、本開示を考慮すると、当技術分野で公知の方法を使用してアビディティ指数によって測定することができる。特定の抗原に対する抗体の力価は、コーティングされた抗原の２つの異なる濃度で測定される：一方は全ての抗体が抗原に結合することができる飽和濃度であり、もう一方は非常に高い結合能を有する抗体のみが抗原に結合することができる低濃度である。本明細書で使用する場合、「アビディティ指数」は、抗原の低密度コーティングおよび高密度コーティングで測定される抗体力価のレベルの比を指す。例えば、抗原、例えばｅＰＨＦまたはｐタウに対する抗体のアビディティを、１回の免疫化の後もしくは複数の免疫化の後に複数の異なる時点で測定して、アビディティ（アビディティ指数によって測定した場合）が経時的に増加するか否かを評価することができる。本明細書で使用する場合、抗原に対する「アビディティの増加」または「結合アビディティの増加」を有する抗体は、処置または免疫化の過程において経時的に、抗原に対するアビディティ指数の増加を有する抗体を指す。アビディティの増加は、抗体の親和性成熟の可能性があることを示唆する。
【0104】
したがって、特定の実施形態において、本発明の医薬組成物は、対象において所望の免疫応答を達成するために１種または複数種の好適なアジュバントをさらに含む。好適なアジュバントは、リポソームの投与の前、後、または同時に投与することができる。好ましいアジュバントは、応答の質的な形式に影響を及ぼす免疫原の立体構造変化を引き起こさずに、免疫原に対する固有の応答を増大させる。アジュバントの例は、アルミニウム塩（アラム）、例えば、水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム、および硫酸アルミニウムである。そのようなアジュバントは、他の特異的免疫賦活剤、例えば、ＭＰＬＡ類（３脱－Ｏ－アシル化モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ（商標））、モノホスホリルヘキサアシルリピドＡ ３－脱アシル合成（３Ｄ－（６－ａｃｙｌ）ＰＨＡＤ（登録商標）、ＰＨＡＤ（商標）、ＰＨＡＤ（登録商標）－５０４、３Ｄ－ＰＨＡＤ（登録商標））リピドＡ）、ポリマーもしくはモノマーアミノ酸、例えばポリグルタミン酸もしくはポリリジンと共にまたはこれらを伴わずに使用することができる。そのようなアジュバントは、他の特異的免疫賦活剤、例えば、ムラミルペプチド（例えば、Ｎ－アセチルムラミル－Ｌ－スレオニル－Ｄ－イソグルタミン（ｔｈｒ－ＭＤＰ）、Ｎ－アセチル－ノルムラミル－Ｌ－アラニル－Ｄ－イソグルタミン（ｎｏｒ－ＭＤＰ）、Ｎ－アセチルムラミル－Ｌ－アラニル－Ｄ－イソグルタミニル－Ｌ－アラニン－２－（１’－２’ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ヒドロキシホスホリルオキシ）－エチルアミン（ＭＴＰ－ＰＥ）、Ｎ－アセチルグルコサミニル－Ｎ－アセチルムラミル－Ｌ－Ａｌ－Ｄ－ｉｓｏｇｌｕ－Ｌ－Ａｌａ－ジパルミトキシプロピルアミド（ＤＴＰ－ＤＰＰ）Ｔｈｅｒａｍｉｄｅ（商標））、もしくは他の細菌細胞壁構成成分と共にまたはこれらを伴わずに使用することができる。水中油型エマルションとしては、マイクロ流動化装置を使用してマイクロメートル未満の粒子に製剤化される、５％スクアレン、０．５％Ｔｗｅｅｎ８０、および０．５％Ｓｐａｎ８５を含有する（任意選択で、様々な量のＭＴＰ－ＰＥを含有する）ＭＦ５９（国際公開第９０／１４８３７号パンフレットを参照のこと）；マイクロメートル未満のエマルションにマイクロ流動化されるかまたはより大きな粒径のエマルションを生成するためにボルテックスされる、１０％スクアレン、０．４％Ｔｗｅｅｎ８０、５％ｐｌｕｒｏｎｉｃブロックポリマーＬ１２１、およびｔｈｒ－ＭＤＰを含有するＳＡＦ；ならびにＲｉｂｉ（商標）アジュバントシステム（ＲＡＳ）（Ｒｉｂｉ ＩｍｍｕｎｏＣｈｅｍ、Ｈａｍｉｌｔｏｎ、Ｍｏｎｔ．）０．２％Ｔｗｅｅｎ８０、および、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ（商標））、トレハロースジミコール酸（ＴＤＭ）、および細胞壁骨格（ＣＷＳ）、好ましくはＭＰＬ（商標）＋ＣＷＳ（Ｄｅｔｏｘ（商標））からなる群から選択される１つまたは複数の細菌細胞壁構成成分が挙げられる。他のアジュバントとしては、完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）、ならびにサイトカイン、例えば、インターロイキン（ＩＬ－１、ＩＬ－２、およびＩＬ－１２）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）、および腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）が挙げられる。
【0105】
本明細書で使用する場合、「組合せにおいて」という用語は、対象への２種以上の療法の投与の文脈では、１種類よりも多い療法の使用を指す。「組合せにおいて」という用語の使用は、療法が対象に投与される順番を制限しない。例えば、第１の療法（例えば本明細書に記載される組成物）は、第２の療法の投与の前（例えば、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、１６時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間、または１２週間前）、同時、または後（例えば、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、１６時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間、または１２週間後）に対象に投与することができる。本発明の一部の実施形態では、本発明の医薬組成物を、アルツハイマー病に関与するアミロイドまたはアミロイド様タンパク質、例えばアミロイドβタンパク質に関連する一群の疾患および障害であるタウオパチーおよび／またはアミロイドーシスの医薬に使用される生物学的に活性な物質、例えば、既知の化合物と組み合わせて使用することができる。他の生物学的に活性な化合物には、神経伝達促進剤、精神治療薬、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、カルシウムチャンネル遮断薬、生体アミン、ベンゾジアゼピン系精神安定剤、アセチルコリン合成、貯蔵または放出促進剤、アセチルコリンシナプス後受容体アゴニスト、モノアミンオキシダーゼ－Ａまたは－Ｂ阻害剤、Ｎ－メチル－０－アスパラギン酸グルタミン酸受容体アンタゴニスト、非ステロイド性抗炎症薬、抗酸化剤、およびセロトニン作動性受容体アンタゴニストが含まれ得る。特に、他の生物学的に活性な化合物は、酸化ストレスに抗する化合物、抗アポトーシス性化合物、金属キレート剤、ＤＮＡ修復の阻害剤、例えばピレンゼピンおよび代謝産物、３－アミノ－１－プロパンスルホン酸（３ＡＰＳ）、１，３－プロパンジスルホン酸（１，３ＰＤＳ）、セクレターゼ活性化剤、およびｖ－セクレターゼ阻害剤、タウタンパク質、神経伝達物質、β－シートブレーカー、抗炎症分子、またはコリンエステラーゼ阻害剤（ＣｈＥＩ）、例えばタクリン、リバスチグミン、ドネペジル、および／もしくはガランタミン、ならびに他の薬剤および栄養補助剤からなる群から、本発明の治療用ワクチン、ならびに任意選択で、薬学的に許容される担体および／または希釈剤および／または賦形剤と共に選択することができる。さらなる実施形態では、他の生物学的に活性な化合物は、ナイアシンまたはメマンチンを、本発明のリポソーム、ならびに任意選択で、薬学的に許容される担体および／または希釈剤および／または賦形剤と共に含むことができる。本発明のさらに別の実施形態では、他の化合物は、幻覚、妄想、思考障害（顕著な思考散乱、脱線、脱線思考によって現れる）、および奇異または混乱した行動、ならびに快感喪失、情動の平板化、感情鈍麻、および引きこもりを含む、陽性または陰性の精神病症状を処置する「非定型抗精神病薬」、例えば、クロザピン、ジプラシドン、リスペリドン、アリピプラゾールまたはオランザピンを、本発明のリポソームと共に含むことができる。本発明の医薬組成物と組み合わせて好適に使用することができる他の化合物は、例えば、国際公開第２００４／０５８２５８号パンフレットに記載されており（特に１６頁および１７頁を参照）、これには治療薬標的（３６～３９頁）、アルカンスルホン酸およびアルカノール硫酸（３９～５１頁）、コリンエステラーゼ阻害剤（５１～５６頁）、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト（５６～５８頁）、エストロゲン（５８～５９頁）、非ステロイド性抗炎症薬（６０～６１頁）、抗酸化剤（６１～６２頁）、ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体（ＰＰＡＲ）アゴニスト（６３～６７頁）、コレステロール低下剤（６８～７５頁）；アミロイド阻害剤（７５～７７頁）、アミロイド形成阻害剤（７７～７８頁）、金属キレート剤（７８～７９頁）、抗精神薬および抗うつ薬（８０～８２頁）、栄養補助剤（８３～８９頁）、ならびに脳内での生物学的に活性な物質の利用能を増加させる化合物（８９～９３頁を参照）およびプロドラッグ（９３頁および９４頁）が含まれ、この文書は参照により本明細書に組み込まれるが、特に上に示した頁で言及されている化合物を挙げている。
【0106】
投与のタイミングは、１日に１回から１年に１回、１０年に１回まで大きく変えることができる。典型的なレジメンは、免疫化と、その後の時間間隔、例えば１～２４週間の間隔を空けたブースター注射とからなる。別のレジメンは、免疫化と、その後の１、２、４、６、８、１０、および１２か月後のブースター注射とからなる。別のレジメンは、生涯にわたる２か月ごとの注射を伴う。あるいは、ブースター注射は、免疫応答のモニタリングによって適応となる場合、不定期であってもよい。
【0107】
プライミングおよびブースティング投与に関するレジメンが投与後に測定される免疫応答に基づいて調整できることは当業者によって容易に理解される。例えば、ブースティング組成物は全般的に、プライミング組成物の投与の数週間もしくは数か月後、例えば、約１週間、もしくは２週間、もしくは３週間、もしくは４週間、もしくは８週間、もしくは１６週間、もしくは２０週間、もしくは２４週間、もしくは２８週間、もしくは３２週間、もしくは３６週間、もしくは４０週間、もしくは４４週間、もしくは４８週間、もしくは５２週間、もしくは５６週間、もしくは６０週間、もしくは６４週間、もしくは６８週間、もしくは７２週間、もしくは７６週間、またはプライミング組成物の投与の１～２年後に投与される。
【0108】
特定の態様において、１回または複数回の追加免疫が投与され得る。それぞれのプライミングおよびブースティング組成物における抗原は、いかに多くのブースティング組成物が用いられるとしても、同一である必要はなく、共通の抗原決定基を有するかまたは互いに実質的に類似するべきである。
【0109】
当業者には公知であるように、免疫原性、ブースト可能性および持続可能性は、ワクチンの有効性にとって重要な考慮事項である。本明細書に記載される有効量のリポソームの投与は、ｐタウに対する強力な抗体応答を、それを必要とする患者、例えば、アルツハイマー病（例えば、軽度から中等度のアルツハイマー病または早期アルツハイマー病）またはアルツハイマー病に起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）を処置することを必要とする患者において誘導することができることが、本発明において発見された。抗体応答は持続可能であり、例えば、リポソームの初回投与の後に少なくとも６週間持続する。抗体応答はまた、１回または複数回の後続のブースティング投与によって、ブーストもされる。本明細書で使用する場合、抗体応答の文脈における「ブーストされる」は、後続投与の投与の少なくとも２週間後に測定した場合に、後続の投与の後に維持または強化される抗体応答を指す。例えば、後続投与の２週間後に測定した場合の抗体力価が後続投与の前の抗体力価と比較して増加している場合には、抗体応答は、後続投与によって「ブーストされる」。
【0110】
本発明の医薬組成物は、本開示を考慮すると、当技術分野で公知の方法に従って製剤化することができる。組成物における各構成成分の最適な比は、本開示を考慮すると、当業者に公知の技法によって決定することができる。
【0111】
本発明の好ましい実施形態では、本発明のある実施形態に従った医薬組成物の投与を介したタウペプチドの投与は、能動免疫応答、例えばタウペプチドおよびタウの病理形態に対する抗体応答を対象において誘導し、それにより、関連するタウ凝集体の排除を容易にし、タウ病態関連行動の進行を緩慢にし、および／または根底にあるタウオパチーを処置する。
【0112】
タウはヒト「自己」タンパク質である。このことは、原則として、タウに特異的な受容体を保有する全てのリンパ球が発達中に取り除かれる（中枢性免疫寛容）か、または末梢性免疫寛容機構によって不応性となるはずだったことを意味する。この問題は、自己または「変化した自己」タンパク質（例えば腫瘍抗原）に対するワクチンの開発における大きな障害であることが判明している。抗原（自己または感染性）に対する高品質抗体を生成することは、抗体を産生するＢリンパ球だけでなく、ＣＤ４＋Ｔ「ヘルパー」リンパ球の作用も必要とする。ＣＤ４＋Ｔ細胞は極めて重要な生存および成熟シグナルをＢリンパ球に提供し、ＣＤ４＋Ｔ細胞欠損動物は大いに免疫抑制される。ＣＤ４＋Ｔ細胞はまた免疫寛容機構の影響を受けやすく、強力な抗自己（例えば抗タウ）抗体応答を引き起こすことにおけるさらなる障害は、タウ反応性ＣＤ４＋Ｔ細胞がまた、ヒト／動物レパートリーにおいて希少であるかまたは存在しない可能性が高いことである。
【0113】
本発明のこの態様においては、免疫応答は、タウペプチドを対象にする有益な液性（抗体媒介性）応答、およびＴ細胞エピトープまたは免疫原性担体を対象にする細胞性（抗原特異的Ｔ細胞またはその分泌産物によって媒介される）応答の発生を伴う。
【0114】
本明細書で使用する場合、タウ病態関連行動表現型としては、限定されないが、認知障害、早期人格変化および脱抑制、感情鈍麻、無為、無言症、失行、保続、常同運動／行動、口唇傾向、解体、連続した課題を計画または整理する能力の欠如、利己的行動／冷淡、反社会的特徴、共感の欠如、一貫性の欠如、頻繁な錯誤的誤りを含むが理解力は比較的保たれている失文法的発言、理解力障害および喚語障害、緩徐進行性歩行不安定、後方突進、すくみ、頻回転倒、非レボドパ応答性体軸性固縮、核上性注視麻痺、矩形波眼球運動、緩徐な垂直性衝動性眼球運動、仮性球麻痺、四肢失行、ジストニア、皮質性感覚消失、ならびに振戦が挙げられる。
【0115】
本発明の方法を実行する場合、本発明の特定の実施形態において、本発明の免疫原性ペプチドまたは抗体を投与する前にアルツハイマー病もしくは他のタウオパチーを有しているかもしくは有しているリスクがある対象、タウ凝集体を脳に有している対象、または濃縮体関連行動表現型を呈している対象を選択することが好ましい。処置可能な対象としては、疾患のリスクがあるが症状を示していない個体、および症状を現在示している患者が挙げられる。アルツハイマー病の場合、事実上全ての人がアルツハイマー病に罹患するリスクがある。したがって、本方法は、対象患者のリスクに関するいかなる評価も必要とせずに、一般集団に予防的に投与することができる。本方法は、アルツハイマー病の公知の遺伝的リスクを有する個体にとって、本疾患の防止または処置のためにとりわけ有用である。そのような個体としては、該疾患を経験している親族を有する個体、および遺伝子マーカーまたは生化学的マーカーの分析によってリスクが決定される個体が挙げられる。好ましい実施形態では、対象は、アルツハイマー病、好ましくは早期アルツハイマー病、アルツハイマー病に起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）、軽度アルツハイマー病、または軽度から中等度のアルツハイマー病の処置を必要とする。別の好ましい実施形態では、対象は、アルツハイマー病、好ましくは、前臨床期アルツハイマー病、早期アルツハイマー病、アルツハイマー病に起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）、軽度アルツハイマー病、または軽度から中等度のアルツハイマー病の防止を必要とする。前臨床期アルツハイマー病は、早期アルツハイマー病の前の病期である。
【0116】
無症候性患者では、処置は任意の年齢（例えば、１０、２０、３０歳）で開始することができる。しかしながら、通例、患者が４０、５０、６０、または７０歳に達するまでは処置を開始する必要はない。処置は典型的にはある期間にわたり複数の投薬量を伴う。処置は、抗体、または治療剤に対する活性化Ｔ細胞もしくはＢ細胞応答をアッセイすることによって経時的にモニタリングすることができる。応答が低下する場合、ブースター投薬量が適応となる。
【0117】
予防用途では、タウペプチドを含有する医薬組成物は、アルツハイマー病もしくは他のタウオパチーに罹患しやすいかまたはそうでなければそれらのリスクがある患者に、疾患の生化学的、組織学的、および／または行動学的症状、その合併症、ならびに疾患の発生中に現れる病理学的中間表現型を含む疾患の、リスクを取り除くもしくは低下させるか、重症度を軽減するか、または発症を遅延させるのに十分な量投与される。治療用途では、タウペプチドを含有する医薬組成物は、そのような疾患の疑いがあるか、またはすでに罹患している患者に、疾患の合併症および疾患の発生における病理学的中間表現型を含む疾患の症状（生化学的、組織学的、および／または行動学的）を治療するか、または少なくとも部分的に停止させるのに十分な量投与される。
【0118】
組成物は、所望される場合、有効成分を含有する１つまたは複数の単位剤形を含有することができるキット、容器、または分注装置において提供することができる。キットは、例えば、ブリスターパックのように金属またはプラスチック箔を含むことができる。キット、容器、または分注装置には投与のための説明書を添付することができる。
【0119】
実施形態
本発明はまた、以下の非限定的な実施形態を提供する。
本発明はまた、以下の非限定的な実施形態を提供する。
【0120】
実施形態１．免疫応答、例えばリン酸化タウタンパク質（ｐタウ）に対する抗体応答を、それを必要とするヒト対象において誘導する方法であって、
（１）１用量当たり３００μｇ～１８００μｇの量の、配列番号２７～配列番号２９および配列番号３１～配列番号３８のアミノ酸配列からなるタウホスホペプチドと、
（２）モノホスホリルリピドＡを含むｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）配列番号１３～配列番号１７、配列番号２３～配列番号２６、および配列番号３９～配列番号４４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）配列番号１８～配列番号２２からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含む有効量のリポソームを対象に投与することを含み、
タウホスホペプチドがリポソームの表面に提示され、
抗体応答が、ヒト対象への有効量のリポソームの初回投与の後に少なくとも６週間持続する、方法。
（１）１用量当たり３００μｇ～１８００μｇの量の、配列番号２７～配列番号２９および配列番号３１～配列番号３８のアミノ酸配列からなるタウホスホペプチドと、
（２）モノホスホリルリピドＡを含むｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）配列番号１３～配列番号１７、配列番号２３～配列番号２６、および配列番号３９～配列番号４４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）配列番号１８～配列番号２２からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含む有効量のリポソームを対象に投与することを含み、
タウホスホペプチドがリポソームの表面に提示され、
抗体応答が、ヒト対象への有効量のリポソームの初回投与の後に少なくとも６週間持続する、方法。
【0121】
実施形態２：有効量のリポソームが、
（１）１用量当たり３００μｇ～１８００μｇの量の、配列番号２８のアミノ酸配列からなるタウホスホペプチドと、
（２）１用量当たり１００μｇ～５８５μｇの量のｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）１用量当たり７５μｇ～４５０μｇの量のヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）１用量当たり１５０μｇ～８００μｇの量のＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含む、実施形態１に記載の方法。
（１）１用量当たり３００μｇ～１８００μｇの量の、配列番号２８のアミノ酸配列からなるタウホスホペプチドと、
（２）１用量当たり１００μｇ～５８５μｇの量のｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）１用量当たり７５μｇ～４５０μｇの量のヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）１用量当たり１５０μｇ～８００μｇの量のＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含む、実施形態１に記載の方法。
【0122】
実施形態３．有効量のリポソームが、１用量当たり３００μｇ、９００μｇまたは１８００μｇのタウホスホペプチドを含む、実施形態１または２に記載の方法。
【0123】
実施形態３ａ．有効量のリポソームが、１用量当たり３００μｇのタウホスホペプチドを含む、実施形態１または２に記載の方法。
【0124】
実施形態３ｂ．有効量のリポソームが、１用量当たり９００μｇのタウホスホペプチドを含む、実施形態１または２に記載の方法。
【0125】
実施形態３ｃ．有効量のリポソームが、１用量当たり１８００μｇのタウホスホペプチドを含む、実施形態１または２に記載の方法。
【0126】
実施形態４．有効量のリポソームが皮下投与される、実施形態１～３ｃのいずれか１つに記載の方法。
【0127】
実施形態５．有効量のリポソームが筋肉内投与される、実施形態１～３ｃのいずれか１つに記載の方法。
【0128】
実施形態６．ＣｐＧオリゴヌクレオチドが、１つまたは複数のホスホロチオエートヌクレオチド間連結を有し、ＣｐＧオリゴヌクレオチドが、少なくとも１つの親油基と、任意選択でＰＥＧリンカーを介して、共有結合により連結している、実施形態１～５のいずれか１つに記載の方法。
【0129】
実施形態７．タウホスホペプチドが配列番号２８のアミノ酸配列からなり、ｔｏｌｌ様受容体４アゴニストがモノホスホリルヘキサアシルリピドＡ、３－脱アシルを含み、ヘルパーＴ細胞エピトープが配列番号３９のアミノ酸配列を含み、ＣｐＧオリゴヌクレオチドが配列番号１８のヌクレオチド配列を含み、リポソームが、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホリル－３’－ｒａｃ－グリセロール（ＤＭＰＧ）、およびコレステロールからなる群から選択される少なくとも１つの脂質をさらに含む、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
【0130】
実施形態８．抗体応答が病理的なタウタンパク質に対するコンフォメーション特異性を有し、それがヒト対象への有効量のリポソームの初回投与後に経時的に増加し、好ましくは抗体応答がｐタウを対象にする特異的ＩｇＧ抗体応答を含み、好ましくは特異的ＩｇＧ抗体応答が、プラセボ対照のものよりも少なくとも５０、６０、７０、８０、９０、１００倍またはそれ以上の高さの抗ｐタウＩｇＧ力価を有する、実施形態１～７のいずれか１つに記載の方法。
【0131】
実施形態９．抗体応答が、特異的ＩｇＭ抗体応答の、ｐタウを対象にする特異的ＩｇＧ抗体応答へのクラススイッチを、記憶形成の指標を伴って誘導する、実施形態１～８のいずれか１つに記載の方法。
【0132】
実施形態１０．抗体応答が、ｐタウを非リン酸化タウタンパク質よりも選好的に認識するＩｇＧ免疫応答を含み、好ましくは抗ｐタウＩｇＧ力価と抗タウＩｇＧ力価との比が少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５または７０である、実施形態１～９のいずれか１つに記載の方法。
【0133】
実施形態１０ａ．ｐタウに対するＩｇＧ免疫応答が経時的に維持される、実施形態１～１０のいずれか１つに記載の方法。
【0134】
実施形態１０ｂ．非リン酸化タウタンパク質に対するＩｇＧ免疫応答が経時的に低下する、実施形態１～１０ａのいずれか１つに記載の方法。
【0135】
実施形態１１．抗体応答が、濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）に対するＩｇＧ免疫応答を含む、実施形態１～１０ｂのいずれか１つに記載の方法。
【0136】
実施形態１２．ＩｇＧ免疫応答が、プラセボ対照のものよりも少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０倍またはそれ以上の高さの抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価を有する、実施形態１１に記載の方法。
【0137】
実施形態１２ａ．ＩｇＧ免疫応答が、ｅＰＨＦへの結合に対するより強い選好性に向かって成熟し、同時に非リン酸化タウに対する抗体力価を低下させる、実施形態１１または１２に記載の方法。
【0138】
実施形態１２ｂ．ＩｇＧ免疫応答が、非リン酸化タウに対するＩｇＧ力価よりも、ｅＰＨＦに対してより高いＩｇＧ力価を有する、実施形態１１または１２に記載の方法。
【0139】
実施形態１３．抗ｅＰＨＦ ＩｇＧが、有効量のリポソームの初回投与の後に少なくとも６週間、８週間、１０週間、１２週間、１４週間、１６週間、１８週間、２０週間、２２週間、２４週間またはそれ以上にわたって病理的なｅＰＨＦタウに対する結合アビディティの増加を有し、好ましくは抗ｅＰＨＦ ＩｇＧが少なくとも０．３、０．４、０．５、０．６、または０．７のアビディティ指数を有する、実施形態１１、１２、１２ａまたは１２ｂに記載の方法。
【0140】
実施形態１４．有効量のリポソームの初回投与の４～１２週間後、例えば８週間後に第２の用量の有効量のリポソームを対象に投与することをさらに含む、実施形態１～１３のいずれか１つに記載の方法。
【0141】
実施形態１４ａ．有効量のリポソームが、初回投与および第２の用量のそれぞれについて１用量当たり３００μｇのタウホスホペプチドを含み、第２の用量が初回投与の８週間後に対象に投与される、実施形態１４に記載の方法。
【0142】
実施形態１４ｂ．有効量のリポソームが、初回投与および第２の用量のそれぞれについて１用量当たり９００μｇのタウホスホペプチドを含み、第２の用量が初回投与の８週間後に対象に投与される、実施形態１４に記載の方法。
【0143】
実施形態１４ｃ．有効量のリポソームが、初回投与および第２の用量のそれぞれについて１用量当たり１８００μｇのタウホスホペプチドを含み、第２の用量が初回投与の８週間後に対象に投与される、実施形態１４に記載の方法。
【0144】
実施形態１５．ｐタウに対するＩｇＧ免疫応答を含む抗体応答が、第２の用量の有効量のリポソームの投与後にブーストされ、好ましくは抗体応答が、第２の用量の有効量のリポソームの投与の少なくとも２週間後に測定した場合に少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する、実施形態１４～１４ｃのいずれか１つに記載の方法。
【0145】
実施形態１５ａ．抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ応答が、第２の用量の有効量のリポソームの投与の少なくとも２週間後に測定した場合に、第２の用量の有効量のリポソームの投与後にブーストされる、実施形態１５に記載の方法。
【0146】
実施形態１６．有効量のリポソームの初回投与の２０～２８週間後、例えば２４週間後に第３の用量の有効量のリポソームを対象に投与することをさらに含む、実施形態１４～１５ａのいずれか１つに記載の方法。
【0147】
実施形態１６ａ．有効量のリポソームが、初回投与、第２の用量および第３の用量のそれぞれについて１用量当たり３００μｇのタウホスホペプチドを含み、第２の用量および第３の用量が初回投与のそれぞれ８週間後および２４週間後に対象に投与される、実施形態１６に記載の方法。
【0148】
実施形態１６ｂ．有効量のリポソームが、初回投与、第２の用量および第３の用量のそれぞれについて１用量当たり９００μｇのタウホスホペプチドを含み、第２の用量および第３の用量が初回投与のそれぞれ８週間後および２４週間後に対象に投与される、実施形態１６に記載の方法。
【0149】
実施形態１６ｃ．有効量のリポソームが、初回投与、第２の用量および第３の用量のそれぞれについて１用量当たり１８００μｇのタウホスホペプチドを含み、第２の用量および第３の用量が初回投与のそれぞれ８週間後および２４週間後に対象に投与される、実施形態１６に記載の方法。
【0150】
実施形態１７．ｐタウに対するＩｇＧ免疫応答を含む抗体応答が、第３の用量の有効量のリポソームの投与後にブーストされ、好ましくは抗体応答が、第３の用量の有効量のリポソームの投与の少なくとも２週間後に測定した場合に少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する、実施形態１６～１６ｃのいずれか１つに記載の方法。
【0151】
実施形態１７ａ．抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ応答が、第２の用量の有効量のリポソームの投与の少なくとも２週間後に測定した場合に、第３の用量の有効量のリポソームの投与後にブーストされる、実施形態１７に記載の方法。
【0152】
実施形態１８．有効量のリポソームの初回投与の４４～５２週間後、例えば４８週間後に第４の用量の有効量のリポソームを対象に投与することをさらに含む、実施形態１６～１７ａのいずれか１つに記載の方法。
【0153】
実施形態１８ａ．有効量のリポソームが、初回投与、第２、第３および第４の用量のそれぞれについて１用量当たり３００μｇのタウホスホペプチドを含み、第２、第３および第４の用量が初回投与のそれぞれ８週間後、２４週間後および４８週間後に対象に投与される、実施形態１８に記載の方法。
【0154】
実施形態１８ｂ．有効量のリポソームが、初回投与、第２、第３および第４の用量のそれぞれについて１用量当たり９００μｇのタウホスホペプチドを含み、第２、第３および第４の用量が初回投与のそれぞれ８週間後、２４週間後および４８週間後に対象に投与される、実施形態１８に記載の方法。
【0155】
実施形態１８ｃ．有効量のリポソームが、初回投与、第２、第３および第４の用量のそれぞれについて１用量当たり１８００μｇのタウホスホペプチドを含み、第２、第３および第４の用量が初回投与のそれぞれ８週間後、２４週間後および４８週間後に対象に投与される、実施形態１８に記載の方法。
【0156】
実施形態１９．ｐタウに対するＩｇＧ免疫応答を含む抗体応答が、第４の用量の有効量のリポソームの投与後にブーストされ、好ましくは抗体応答が、第４の用量の有効量のリポソームの投与によって少なくとも２週間で測定した場合に少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する、実施形態１８に記載の方法。
【0157】
実施形態１９ａ．抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ応答が、第２の用量の有効量のリポソームの投与の少なくとも２週間後に測定した場合に、第４の用量の有効量のリポソームの投与後にブーストされる、実施形態１９に記載の方法。
【0158】
実施形態２０．リン酸化タウタンパク質（ｐタウ）に対する持続的な免疫応答を、それを必要とするヒト対象において誘導する方法であって、
ｉ．有効量のリポソームを含むプライミングワクチンを対象に筋肉内投与すること、および
ｉｉ．プライミングワクチンの投与の６～１０週間後に有効量のリポソームを含む第１のブースターワクチンを対象に筋肉内投与すること
を含み、
持続的な免疫応答がプライミングワクチンの投与後に少なくとも約２０週間持続し、
リポソームが、
（１）配列番号２８のアミノ酸配列からなるタウホスホペプチドであって、リポソームの表面に提示されるタウホスホペプチドと、
（２）モノホスホリルリピドＡを含むｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）配列番号２３、２４、２５、および２６からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）配列番号１８～配列番号２２からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含み、
有効量のリポソームが、
（１）１用量当たり３００μｇ～１８００μｇの量のタウホスホペプチドと、
（２）１用量当たり１００μｇ～５８５μｇの量のｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）１用量当たり７５μｇ～５５０μｇ、例えば１用量当たり７５μｇ～４５０μｇ、８０μｇ～５４０μｇ、８２．５μｇ～５３５μｇ、８５μｇ～５３０μｇ、８７．５μｇ～５２５μｇ、または９０μｇ～５２０μｇの量のヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）１用量当たり１００μｇ～１０００μｇ、例えば１５０～８００μｇ、１２５μｇ～９５０μｇ、１５０μｇ～９００μｇ、または１５０μｇ～８５０μｇの量のＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含む、方法。
ｉ．有効量のリポソームを含むプライミングワクチンを対象に筋肉内投与すること、および
ｉｉ．プライミングワクチンの投与の６～１０週間後に有効量のリポソームを含む第１のブースターワクチンを対象に筋肉内投与すること
を含み、
持続的な免疫応答がプライミングワクチンの投与後に少なくとも約２０週間持続し、
リポソームが、
（１）配列番号２８のアミノ酸配列からなるタウホスホペプチドであって、リポソームの表面に提示されるタウホスホペプチドと、
（２）モノホスホリルリピドＡを含むｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）配列番号２３、２４、２５、および２６からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）配列番号１８～配列番号２２からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含み、
有効量のリポソームが、
（１）１用量当たり３００μｇ～１８００μｇの量のタウホスホペプチドと、
（２）１用量当たり１００μｇ～５８５μｇの量のｔｏｌｌ様受容体４アゴニストと、
（３）１用量当たり７５μｇ～５５０μｇ、例えば１用量当たり７５μｇ～４５０μｇ、８０μｇ～５４０μｇ、８２．５μｇ～５３５μｇ、８５μｇ～５３０μｇ、８７．５μｇ～５２５μｇ、または９０μｇ～５２０μｇの量のヘルパーＴ細胞エピトープと、
（４）１用量当たり１００μｇ～１０００μｇ、例えば１５０～８００μｇ、１２５μｇ～９５０μｇ、１５０μｇ～９００μｇ、または１５０μｇ～８５０μｇの量のＣｐＧオリゴヌクレオチド
とを含む、方法。
【0159】
実施形態２０ａ．ヘルパーＴ細胞エピトープが、配列番号３９、４０、４１、４２、および４３からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する、実施形態２０に記載の方法。
【0160】
実施形態２０ｂ．ヘルパーＴ細胞エピトープが、配列番号１３、１４、１５、１６、１７、および４４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する、実施形態２０に記載の方法。
【0161】
実施形態２０ｃ．脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチドが配列番号１８のヌクレオチド配列を有し、ＣｐＧオリゴヌクレオチドが少なくとも１つのコレステロールとリンカーを介して共有結合により連結している、実施形態２０～２０ｂのいずれか１つに記載の方法。
【0162】
実施形態２０ｄ．第１のブースターワクチンがプライミングワクチンの投与の８週間後に投与され、持続的な免疫応答がプライミングワクチンの投与後に少なくとも約２４週間持続する、実施形態２０～２０ｃのいずれか１つに記載の方法。
【0163】
実施形態２０ｅ．プライミングワクチンの投与の２２～２６週間後に有効量のリポソームを含む第２のブースターワクチンを対象に筋肉内投与することをさらに含み、持続的な免疫応答がプライミングワクチンの投与後に少なくとも約３６週間持続する、実施形態２０～２０ｄのいずれか１つに記載の方法。
【0164】
実施形態２０ｆ．第２のブースターワクチンがプライミングワクチンの投与の２４週間後に投与され、持続的な免疫応答がプライミングワクチンの投与後に少なくとも約４８週間持続する、実施形態２０ｅに記載の方法。
【0165】
実施形態２０ｇ．プライミングワクチンの投与の４５～５０週間後に有効量のリポソームを含む第３のブースターワクチンを対象に筋肉内投与することをさらに含み、持続的な免疫応答がプライミングワクチンの投与後に少なくとも約６０週間持続する、実施形態２０ｅまたは２０ｆに記載の方法。
【0166】
実施形態２０ｈ．第３のブースターワクチンがプライミングワクチンの投与の４８週間後に投与され、持続的な免疫応答がプライミングワクチンの投与後に少なくとも約７２週間持続する、実施形態２０ｇに記載の方法。
【0167】
実施形態２０ｉ．有効量のリポソームが、１用量当たり３００μｇのタウホスホペプチドを含む、実施形態２０～２０ｈのいずれか１つに記載の方法。
【0168】
実施形態２０ｊ．有効量のリポソームが、１用量当たり９００μｇのタウホスホペプチドを含む、実施形態２０～２０ｈのいずれか１つに記載の方法。
【0169】
実施形態２０ｋ．有効量のリポソームが、１用量当たり１８００μｇのタウホスホペプチドを含む、実施形態２０～２０ｈのいずれか１つに記載の方法。
【0170】
実施形態２０ｋ１．有効量のリポソームが、１用量当たり８０μｇ～５４０μｇのヘルパーＴ細胞エピトープと、１用量当たり１２５μｇ～９５０μｇのＣｐＧオリゴヌクレオチドとを含む、実施形態２０ｉ～２０ｋのいずれか１つに記載の方法。
【0171】
実施形態２０ｋ２．有効量のリポソームが、１用量当たり８２．５μｇ～５３５μｇのヘルパーＴ細胞エピトープと、１用量当たり１２５μｇ～９５０μｇのＣｐＧオリゴヌクレオチドとを含む、実施形態２０ｉ～２０ｋのいずれか１つに記載の方法。
【0172】
実施形態２０ｋ３．有効量のリポソームが、１用量当たり８７．５μｇ～５２５μｇのヘルパーＴ細胞エピトープと、１用量当たり１５０μｇ～９００μｇのＣｐＧオリゴヌクレオチドとを含む、実施形態２０ｉ～２０ｋのいずれか１つに記載の方法。
【0173】
実施形態２０ｋ４．有効量のリポソームが、１用量当たり８５μｇ～５３０μｇのヘルパーＴ細胞エピトープと、１用量当たり１５０μｇ～９００μｇのＣｐＧオリゴヌクレオチドとを含む、実施形態２０ｉ～２０ｋのいずれか１つに記載の方法。
【0174】
実施形態２０ｌ．持続的な免疫応答が、ｐタウを非リン酸化タウタンパク質よりも選好的に認識するＩｇＧ免疫応答を含み、好ましくは抗ｐタウＩｇＧ力価と抗タウＩｇＧ力価との比が少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５または７０である、実施形態２０～２０ｋ４のいずれか１つに記載の方法。
【0175】
実施形態２０ｍ．持続的な免疫応答が、プラセボ対照のものよりも少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０倍またはそれ以上の高さの抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価を有する濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）に対するＩｇＧ免疫応答を含む、実施形態２０～２０ｌのいずれか１つに記載の方法。
【0176】
実施形態２１．対象がタウの凝集体の排除を必要とする、実施形態１～２０ｍのいずれか１つに記載の方法。
【0177】
実施形態２２．対象が、アルツハイマー病、例えば、前臨床期アルツハイマー病、軽度から中等度のアルツハイマー病または早期アルツハイマー病、アルツハイマー病に起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）の処置を必要とする、実施形態１～２１のいずれか１つに記載の方法。
【0178】
実施形態２３．対象が、アルツハイマー病、例えば、前臨床期アルツハイマー病、軽度から中等度のアルツハイマー病または早期アルツハイマー病、アルツハイマー病に起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）の防止を必要とする、実施形態１～２１のいずれか１つに記載の方法。
【0179】
実施形態２４．免疫応答が、リン酸化Ｓｅｒ３９６を含むエピトープに特異的に結合する抗リン酸化タウ抗体を含む、実施形態１～２３のいずれか１つに記載の方法。
【0180】
実施形態２５．エピトープがリン酸化Ｓｅｒ４０４をさらに含む、実施形態２４に記載の方法。
【実施例】
【0181】
以下の本発明の実施例は本発明の本質をさらに例証するためのものである。以下の実施例は本発明を限定せず、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲によって決定されるべきであることが理解されるべきである。
【0182】
以下の実施例において使用される実験方法は、別段の指示がない限り、全て常法である。以下の実施形態において使用される試薬は、別段の指示がない限り、全て通常の試薬供給業者から購入されている。
【0183】
以下の全ての実施例では、ＡＣＩ－３５．０３０とは、配列番号２８のアミノ酸配列を有するリン酸化タウペプチド、ＭＰＬＡ（３Ｄ－（６－ａｃｙｌ）ＰＨＡＤ（登録商標））、ＤＭＰＣ、ＤＭＰＧ、コレステロール、配列番号１３のヘルパーＴ細胞エピトープ、コレステロール基とＰＥＧリンカーを介して共有結合により連結しているＣｐＧ２００６オリゴヌクレオチド、および緩衝液を含有する本発明の実施形態のリポソーム製剤であり、ＡＣＩ－３５とは、配列番号２８のアミノ酸配列を有するリン酸化タウペプチド、ＭＰＬＡ、ＤＭＰＣ、ＤＭＰＧ、コレステロール、および緩衝液を含有する本発明の実施形態のリポソーム製剤である。
【0184】
[実施例１]
ヒトにおけるＡＣＩ－３５．０３０の安全性および有効性に関する臨床研究
ＡＣＩ－３５．０３０ワクチン（ＡＣＩ－３５．０３０）の安全性、忍容性、および免疫原性を、欧州の早期ＡＤ（ＡＤに起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）または軽度ＡＤ）を有する患者において行った第１ｂ／２ａ相多施設二重盲検無作為化プラセボ対照臨床研究において評価する（ＡＣＩ－３５－１８０２研究）。また、ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖにおける研究番号ＮＣＴ０４４４５８３１も参照のこと。研究のデザインの概要を図１に示す。
ヒトにおけるＡＣＩ－３５．０３０の安全性および有効性に関する臨床研究
ＡＣＩ－３５．０３０ワクチン（ＡＣＩ－３５．０３０）の安全性、忍容性、および免疫原性を、欧州の早期ＡＤ（ＡＤに起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）または軽度ＡＤ）を有する患者において行った第１ｂ／２ａ相多施設二重盲検無作為化プラセボ対照臨床研究において評価する（ＡＣＩ－３５－１８０２研究）。また、ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖにおける研究番号ＮＣＴ０４４４５８３１も参照のこと。研究のデザインの概要を図１に示す。
【0185】
目的：早期ＡＤ（例えばＡＤに起因する軽度認知障害（ＭＣＩまたは軽度ＡＤ）を有する患者における最大３種の投薬量でのＡＣＩ－３５．０３０を、早期ＡＤを有する患者における安全性および忍容性、ならびに抗ホスホ－タウ抗体（例えば、抗ｐタウおよびｅＰＨＦタウに結合するもの）の血清への誘導を含むタウタンパク質の異常形態に対する抗体応答の誘導に関して、７４週の時間枠で評価すること。
【0186】
副次的目的：７４週の時間枠で、例えばタウに対するＩｇＧ力価およびｐタウとタウとに対するＩｇＭ力価の血清への誘導を評価することによって研究ワクチンの免疫原性をさらに評価すること、ならびに免疫化によって誘発される抗体のアビディティを評価すること。
【0187】
探索的目的：それぞれ７４週の時間枠で、ＡＤの進行に関する推定バイオマーカー、例えば総タウおよびｐタウタンパク質の血中および／またはＣＳＦ中濃度に対する研究ワクチンの効果を探索すること；血中のＴ細胞の活性化に対する研究ワクチンの効果を探索すること；血中炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＦＮ－γ、およびＴＮＦ－α）に対する研究ワクチンの効果を探索すること；行動、認知的および機能的活動に対する研究ワクチンの効果を探索すること。
【0188】
方法：３つのサブコホートのそれぞれは、４８週間にわたって続く（０、８、２４および４８週目に用量投与）、プラセボ、または組成物におけるｐタウペプチドＴ３の量（３００μｇ、９００μｇまたは１８００μｇのテトラパルミトイル化ホスホペプチドｐタウペプチドＴ３、配列番号２８）によって言及される種々の投薬量のＡＣＩ－３５．０３０と、その後の２４週間の追跡期間とを受ける患者からなる。
【0189】
４１名の患者が３つのサブコホートに無作為化され、各サブコホートにおいてＡＣＩ－３５．０３０またはプラセボのいずれかを受けた（実薬／プラセボ比は３：１）。用量を筋肉内投与した。
【0190】
安全性評価は、各投薬直後およびその４８～７２時間後に電話によって全ての研究患者に関して実施した／実施する。各サブコホートでは、最初の４名の患者の１回目の投薬は、前の患者の４８～７２時間での安全性評価を実施して、現場の研究責任者によって研究ワクチンと関連がある臨床的に関連のある安全性問題が存在しないことを確認してから実施した／実施する。
【0191】
全ての処置患者は、処置期間の終了後に２４週間の追跡期間を有する。この期間中、患者は、最終投与の１９週間後の１回目の追跡来院と、追跡期間の終了時（最終投与の２６週間後）の最終来院とをするように求められる。患者の安全性は、独立したデータ安全性モニタリング委員会（ＤＳＭＢ）による安全性データの定期的な検討によって研究全体にわたってモニタリングする。
【0192】
中間分析を以下の通りに実行した／実行する：
【0193】
第１の中間分析は、コホート１の全てのサブコホートにおいて、それらの各々のサブコホートにおける全ての対象が４回目の来院（１０週目）を完了してから、すなわち２回目の注射の２週間後に行った。目的は、この時点までのＡＣＩ－３５．０３０に関する安全性、忍容性、および免疫原性データを検討することであった。
【0194】
第２の中間分析は、サブコホート１．１、１．２、および１．３において、それらの各々のサブコホートにおける全ての対象が６回目の来院（２６週目）を完了してから、すなわち、３回目の注射の２週間後に行った／行う。目的は、コホート１を延長して、免疫原性、安全性および忍容性の点で最も好ましいプロファイルを提示する用量での追加の安全性／忍容性データを収集する可能性について決定することである。
【0195】
第３の中間分析は、処置期間の終了時（すなわち４回目の注射の２週間後）に実施した。目的は、該当する場合はサブコホート拡大の患者のデータを含む、この時点までの安全性／忍容性および免疫原性データを検討することである。バイオマーカー結果は、支持的な探索データとして含めることができる。結果を、他のコホートに関してその後に取得された結果と比較して、さらなる臨床開発のための最良の戦略を全ての研究コホートから選択する。
【0196】
第４の中間分析は、追跡期間の終了時、すなわち全てのコホート１患者が１１回目の来院（７４週目）を完了してから実施した／実施する。目的は、第４の中間分析と同じであり、その後、結果を全てのコホートにわたって比較する。
【0197】
研究集団は、ＮＩＡ－ＡＡ基準に従った軽度ＡＤまたはＡＤに起因するＭＣＩの診断を有する５０～７５歳（男性および女性）である。
【0198】
選択基準は以下の通りである：
１．５０から７５歳までの男性または女性。
２．ＮＩＡ－ＡＡ基準に従ったＡＤに起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）または軽度ＡＤ、かつ０．５または１の臨床認知症評価尺度（ＣＤＲ）総合スコア。
３．２２以上のミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）スコア。
４．ＡＤ病態に関するＮＩＡ－ＡＡ２０１８基準と矛盾しないスクリーニング時のＣＳＦアミロイドベータ４２（Ａβ４２）およびリン酸化タウのレベル。ＣＳＦ Ａβ４２レベルに関して境界である症例では、アミロイド陽性を決定するのに役立つ他の結果、例えばＡβ４２／Ａβ４０比、および症例ごとの陽性アミロイドＰＥＴ走査または陽性ＣＳＦ Ａβ４２レベルの病歴を考慮してもよい。スクリーニング前３か月以内に実施したＣＳＦ試料採取の結果は、それらがアミロイド病理の存在と矛盾せず、かつ対応するＣＳＦ試料を検査のために研究に使用することができるという条件で、症例ごとに許容される。
５．ベースライン前の少なくとも３か月間に、販売されているＡＤのためのいかなる処置も受けていないか、または安定用量のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬および／もしくはメマンチンを受けている患者。
６．服薬遵守を保証し、臨床評価を支援し、安全性問題を報告する信頼できる情報提供者または介護者によって介護されている患者。
７．女性は閉経後少なくとも１年経過していなければならない、および／または外科的に不妊となっていなければならない。出産の可能性があるかまたは閉経後ではない女性は、スクリーニング時に陰性の妊娠検査結果を有し、かつスクリーニング来院から参加の終了まで高度に効果的な避妊方法を使用する意思を有していなければならない。尿妊娠再検査を処置期間の全体にわたって実施して、対象が研究ワクチンを受け続けることができるかどうかを決定する。出産の可能性があるパートナーを有する男性患者は、研究中適切な避妊措置を使用する意思を有していなければならない。
８．研究者の見解において、書面によるインフォームドコンセントを理解して同意することができる患者。
９．患者および情報提供者または介護者は、研究の言語のうちの１つが流暢であり、腰椎穿刺を含む全ての研究手順に従うことができなければならない。
１．５０から７５歳までの男性または女性。
２．ＮＩＡ－ＡＡ基準に従ったＡＤに起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）または軽度ＡＤ、かつ０．５または１の臨床認知症評価尺度（ＣＤＲ）総合スコア。
３．２２以上のミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）スコア。
４．ＡＤ病態に関するＮＩＡ－ＡＡ２０１８基準と矛盾しないスクリーニング時のＣＳＦアミロイドベータ４２（Ａβ４２）およびリン酸化タウのレベル。ＣＳＦ Ａβ４２レベルに関して境界である症例では、アミロイド陽性を決定するのに役立つ他の結果、例えばＡβ４２／Ａβ４０比、および症例ごとの陽性アミロイドＰＥＴ走査または陽性ＣＳＦ Ａβ４２レベルの病歴を考慮してもよい。スクリーニング前３か月以内に実施したＣＳＦ試料採取の結果は、それらがアミロイド病理の存在と矛盾せず、かつ対応するＣＳＦ試料を検査のために研究に使用することができるという条件で、症例ごとに許容される。
５．ベースライン前の少なくとも３か月間に、販売されているＡＤのためのいかなる処置も受けていないか、または安定用量のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬および／もしくはメマンチンを受けている患者。
６．服薬遵守を保証し、臨床評価を支援し、安全性問題を報告する信頼できる情報提供者または介護者によって介護されている患者。
７．女性は閉経後少なくとも１年経過していなければならない、および／または外科的に不妊となっていなければならない。出産の可能性があるかまたは閉経後ではない女性は、スクリーニング時に陰性の妊娠検査結果を有し、かつスクリーニング来院から参加の終了まで高度に効果的な避妊方法を使用する意思を有していなければならない。尿妊娠再検査を処置期間の全体にわたって実施して、対象が研究ワクチンを受け続けることができるかどうかを決定する。出産の可能性があるパートナーを有する男性患者は、研究中適切な避妊措置を使用する意思を有していなければならない。
８．研究者の見解において、書面によるインフォームドコンセントを理解して同意することができる患者。
９．患者および情報提供者または介護者は、研究の言語のうちの１つが流暢であり、腰椎穿刺を含む全ての研究手順に従うことができなければならない。
【0199】
除外基準は以下の通りである：
１．患者がプラセボのみを用いて処置され、プラセボ製剤がいかなる特異的免疫応答も誘導すると予期されないという文書化された証拠が存在する場合を除く、能動免疫化を使用したＡＤおよび／または神経障害に関する以前の臨床試験への参加。
２．対象がプラセボのみを用いて処置され、プラセボがいかなる特異的免疫応答も誘導すると予期されないという文書化された証拠が存在する場合を除く、任意の受動的免疫化を使用したＡＤおよび／または神経障害に関する以前の臨床試験へのスクリーニング前過去６か月（または被験抗体の５半減期のうち長い方）以内の参加。
３．ＢＡＣＥ－１阻害薬を含む任意の低分子薬を使用したＡＤおよび／または神経障害に関する以前の臨床試験へのスクリーニング前過去３か月以内の参加。
４．実験的または承認された医薬または療法を使用する任意の他の臨床試験への同時参加。
５．自己免疫疾患の臨床症状を有しない患者における少なくとも１／１６０の希釈度での陽性抗核抗体（ＡＮＡ）力価の存在。
６．自己免疫疾患、または自己免疫疾患の存在と矛盾しない臨床症状の現在または過去の病歴。
７．スクリーニング前に３か月を超えて一時的に処方されている場合を除く、免疫抑制薬または全身性ステロイドの使用を含むがこれに限定されない免疫抑制。
８．以前のワクチンおよび／または医薬に対する重度のアレルギー反応を含むがこれに限定されない重度のアレルギー反応（例えばアナフィラキシー）の病歴。
９．臨床的に有意な低血糖エピソードの前歴。
１０．精神障害の診断・統計マニュアルＶ（ＤＳＭ－Ｖ）基準に従って現在満たされているかまたは過去５年以内に満たされていた薬物またはアルコール乱用または依存。
１１．研究処置の安全性および忍容性の評価、ならびに／または全研究来院予定の遵守を妨害する可能性が高い任意の臨床的に有意な医学的状態。
１２．患者における、免疫系に影響を与える可能性が高い、および／または研究ワクチンの免疫化可能性を潜在的に損なうと予期される任意の臨床的に有意な医学的状態（例えば獲得または自然免疫抑制障害の任意の病歴）。
１３．ヒドララジン、プロカインアミド、キニジン、イソニアジド、ＴＮＦ阻害薬、ミノサイクリンのスクリーニング直前１２か月以内の使用。
１４．安定用量の場合を除く、スクリーニング前の少なくとも３か月間のジルチアゼムの使用。
１５．コロンビア自殺重症度評価尺度を使用して、対象が自殺念慮質問４もしくは５に「はい」と回答するかまたは過去１２か月以内の自殺行動に「はい」と回答することとして定義される、顕しい自殺のリスク。
１６．ＡＤと関連があると考えられるもの以外の併発している精神または神経性障害（例えば、意識喪失を伴う頭部損傷、症候性脳卒中、パーキンソン病、重度の頸動脈閉塞性疾患、ＴＩＡ）。
１７．非制御型てんかん発作の病歴または存在。てんかん発作の病歴の場合、てんかん発作は、その発生がベースライン前２年以内に存在しないように良好に制御されていなければならない。抗てんかん薬の使用は、スクリーニング前の少なくとも３か月間安定用量である場合に容認される。
１８．スクリーニング前過去１０年以内の髄膜脳炎の病歴。
１９．出血性および／または非出血性脳卒中の病歴を有する患者。
２０．末梢神経障害の存在または病歴。
２１．ＣＮＳ関与の可能性を有する炎症性神経障害の病歴。
２２．患者の症状を引き起こし得るＡＤと矛盾する代替病態の構造的証拠を示すスクリーニングＭＲＩ走査。１ｃｍ未満の直径の良性髄膜腫、３つ以上のラクナ梗塞もしくは直径１ｃｍ超のただ１つの梗塞、または脳表ヘモジデリン沈着症の任意の単一の領域以外の空間占有性病変の証拠、あるいは１０ｍｍ以上の以前の大出血の証拠。Ｔ２＊ＭＲＩにおける微小出血は、部位にかかわらず最大で１０まで認められる。
２３．ＭＲＩ検査を、ＭＲＩ研究が禁忌である金属インプラントおよび／または重度の閉所恐怖症を含むがこれらに限定されない何らかの理由のために行うことができない。
２４．顕著な聴力もしくは視力障害、またはプロトコルに従うことおよびアウトカム測定を実施することを妨げることに関連すると研究者によって判断される他の問題。
２５．スクリーニング前３か月以内の臨床的に有意な感染症または大きな外科手術。研究への参加中に行われることが予想される計画された外科処置は、スクリーニング時に医療監視者によって検討および承認されなければならない。
２６．インフルエンザワクチンを含む、ベースライン前過去２週間以内に投与された任意のワクチン。
２７．スクリーニング時のＥＣＧにおける臨床的に有意な不整脈または他の臨床的に有意な異常。
２８．ベースライン前１年以内の心筋梗塞、不安定狭心症、または重大な冠動脈疾患。
２９．処置された扁平上皮癌腫、基底細胞癌腫、および表皮内黒色腫、または完全に除去され、治療されたと考えられる非浸潤性前立腺癌もしくは非浸潤性乳癌以外の癌の病歴を過去５年以内に有する患者。
３０．現場の研究者の見解における、血液学的パラメータ、肝機能検査、および他の生化学的測定に関する、臨床的に有意と判断される正常値からの臨床的に有意な逸脱。
３１．スクリーニング時の血清検査によって確認した場合に妊娠しているか、または妊娠を計画しているかまたは授乳中の女性対象。
３２．毎日１００ｍｇ未満の用量のアスピリンを除く任意の抗凝固薬または抗血小板薬を受けている患者（予定されているかまたは予定されていない腰椎穿刺中の出血のリスクを避けるため）。
３３．不眠症の処置のための安定低用量の場合を除く、抗精神病薬を受けている患者。
３４．スクリーニング前３０日の間に血液もしくは血液製剤を提供したか、または研究に参加している間に血液を提供することを計画している患者。
３５．スクリーニング時の活性梅毒と矛盾しない陽性のＶＤＲＬ（性病研究所）。
３６．スクリーニング時に陽性のＨＩＶ検査結果を有する患者。
３７．スクリーニング時に検査によって測定した場合に活性Ｂおよび／またはＣ型肝炎を有する患者。
３８．正常の上限の１．５倍超のクレアチニン、異常な甲状腺機能検査結果、または血清Ｂ１２もしくは葉酸レベルの臨床的に有意な低下を有する患者（注：甲状腺補充剤の全ての経口用量、Ｂ１２、または葉酸は、スクリーニング前の少なくとも３か月間安定でなければならない）。
１．患者がプラセボのみを用いて処置され、プラセボ製剤がいかなる特異的免疫応答も誘導すると予期されないという文書化された証拠が存在する場合を除く、能動免疫化を使用したＡＤおよび／または神経障害に関する以前の臨床試験への参加。
２．対象がプラセボのみを用いて処置され、プラセボがいかなる特異的免疫応答も誘導すると予期されないという文書化された証拠が存在する場合を除く、任意の受動的免疫化を使用したＡＤおよび／または神経障害に関する以前の臨床試験へのスクリーニング前過去６か月（または被験抗体の５半減期のうち長い方）以内の参加。
３．ＢＡＣＥ－１阻害薬を含む任意の低分子薬を使用したＡＤおよび／または神経障害に関する以前の臨床試験へのスクリーニング前過去３か月以内の参加。
４．実験的または承認された医薬または療法を使用する任意の他の臨床試験への同時参加。
５．自己免疫疾患の臨床症状を有しない患者における少なくとも１／１６０の希釈度での陽性抗核抗体（ＡＮＡ）力価の存在。
６．自己免疫疾患、または自己免疫疾患の存在と矛盾しない臨床症状の現在または過去の病歴。
７．スクリーニング前に３か月を超えて一時的に処方されている場合を除く、免疫抑制薬または全身性ステロイドの使用を含むがこれに限定されない免疫抑制。
８．以前のワクチンおよび／または医薬に対する重度のアレルギー反応を含むがこれに限定されない重度のアレルギー反応（例えばアナフィラキシー）の病歴。
９．臨床的に有意な低血糖エピソードの前歴。
１０．精神障害の診断・統計マニュアルＶ（ＤＳＭ－Ｖ）基準に従って現在満たされているかまたは過去５年以内に満たされていた薬物またはアルコール乱用または依存。
１１．研究処置の安全性および忍容性の評価、ならびに／または全研究来院予定の遵守を妨害する可能性が高い任意の臨床的に有意な医学的状態。
１２．患者における、免疫系に影響を与える可能性が高い、および／または研究ワクチンの免疫化可能性を潜在的に損なうと予期される任意の臨床的に有意な医学的状態（例えば獲得または自然免疫抑制障害の任意の病歴）。
１３．ヒドララジン、プロカインアミド、キニジン、イソニアジド、ＴＮＦ阻害薬、ミノサイクリンのスクリーニング直前１２か月以内の使用。
１４．安定用量の場合を除く、スクリーニング前の少なくとも３か月間のジルチアゼムの使用。
１５．コロンビア自殺重症度評価尺度を使用して、対象が自殺念慮質問４もしくは５に「はい」と回答するかまたは過去１２か月以内の自殺行動に「はい」と回答することとして定義される、顕しい自殺のリスク。
１６．ＡＤと関連があると考えられるもの以外の併発している精神または神経性障害（例えば、意識喪失を伴う頭部損傷、症候性脳卒中、パーキンソン病、重度の頸動脈閉塞性疾患、ＴＩＡ）。
１７．非制御型てんかん発作の病歴または存在。てんかん発作の病歴の場合、てんかん発作は、その発生がベースライン前２年以内に存在しないように良好に制御されていなければならない。抗てんかん薬の使用は、スクリーニング前の少なくとも３か月間安定用量である場合に容認される。
１８．スクリーニング前過去１０年以内の髄膜脳炎の病歴。
１９．出血性および／または非出血性脳卒中の病歴を有する患者。
２０．末梢神経障害の存在または病歴。
２１．ＣＮＳ関与の可能性を有する炎症性神経障害の病歴。
２２．患者の症状を引き起こし得るＡＤと矛盾する代替病態の構造的証拠を示すスクリーニングＭＲＩ走査。１ｃｍ未満の直径の良性髄膜腫、３つ以上のラクナ梗塞もしくは直径１ｃｍ超のただ１つの梗塞、または脳表ヘモジデリン沈着症の任意の単一の領域以外の空間占有性病変の証拠、あるいは１０ｍｍ以上の以前の大出血の証拠。Ｔ２＊ＭＲＩにおける微小出血は、部位にかかわらず最大で１０まで認められる。
２３．ＭＲＩ検査を、ＭＲＩ研究が禁忌である金属インプラントおよび／または重度の閉所恐怖症を含むがこれらに限定されない何らかの理由のために行うことができない。
２４．顕著な聴力もしくは視力障害、またはプロトコルに従うことおよびアウトカム測定を実施することを妨げることに関連すると研究者によって判断される他の問題。
２５．スクリーニング前３か月以内の臨床的に有意な感染症または大きな外科手術。研究への参加中に行われることが予想される計画された外科処置は、スクリーニング時に医療監視者によって検討および承認されなければならない。
２６．インフルエンザワクチンを含む、ベースライン前過去２週間以内に投与された任意のワクチン。
２７．スクリーニング時のＥＣＧにおける臨床的に有意な不整脈または他の臨床的に有意な異常。
２８．ベースライン前１年以内の心筋梗塞、不安定狭心症、または重大な冠動脈疾患。
２９．処置された扁平上皮癌腫、基底細胞癌腫、および表皮内黒色腫、または完全に除去され、治療されたと考えられる非浸潤性前立腺癌もしくは非浸潤性乳癌以外の癌の病歴を過去５年以内に有する患者。
３０．現場の研究者の見解における、血液学的パラメータ、肝機能検査、および他の生化学的測定に関する、臨床的に有意と判断される正常値からの臨床的に有意な逸脱。
３１．スクリーニング時の血清検査によって確認した場合に妊娠しているか、または妊娠を計画しているかまたは授乳中の女性対象。
３２．毎日１００ｍｇ未満の用量のアスピリンを除く任意の抗凝固薬または抗血小板薬を受けている患者（予定されているかまたは予定されていない腰椎穿刺中の出血のリスクを避けるため）。
３３．不眠症の処置のための安定低用量の場合を除く、抗精神病薬を受けている患者。
３４．スクリーニング前３０日の間に血液もしくは血液製剤を提供したか、または研究に参加している間に血液を提供することを計画している患者。
３５．スクリーニング時の活性梅毒と矛盾しない陽性のＶＤＲＬ（性病研究所）。
３６．スクリーニング時に陽性のＨＩＶ検査結果を有する患者。
３７．スクリーニング時に検査によって測定した場合に活性Ｂおよび／またはＣ型肝炎を有する患者。
３８．正常の上限の１．５倍超のクレアチニン、異常な甲状腺機能検査結果、または血清Ｂ１２もしくは葉酸レベルの臨床的に有意な低下を有する患者（注：甲状腺補充剤の全ての経口用量、Ｂ１２、または葉酸は、スクリーニング前の少なくとも３か月間安定でなければならない）。
【0200】
患者背景：
研究は進行中である。サブコホート１．１および１．２に関する患者背景（２０２１年９月末日のカットオフ時点）を表１にまとめる。
研究は進行中である。サブコホート１．１および１．２に関する患者背景（２０２１年９月末日のカットオフ時点）を表１にまとめる。
【0201】
【表1】
【0202】
結果／結論：
以下の主要評価項目を評価した／評価する：
安全性および忍容性－有害事象、即時および遅延型反応原性（例えばアナフィラキシー、疼痛、発赤、免疫複合体疾患、腫脹、発熱を含む局所および全身性反応原性）；忍容性の総合評価；自殺念慮（Ｃ－ＳＳＲＳ）；行動（ＮＰＩ）；安全性を評価するための認知および機能評価（ＲＢＡＮＳ、ＣＤＲ－ＳＢ）；バイタルサイン；ＭＲＩ画像診断；心電図；血液および尿における慣例的な血液学および生化学評価；血液における抗ＤＮＡ抗体を含む自己免疫抗体の評価；血中およびＣＳＦ中の炎症性マーカー。
免疫応答－血清中の抗ｐタウＩｇＧ力価（幾何平均、ベースラインからの変化、応答者率、ピーク、および曲線下面積）。
以下の主要評価項目を評価した／評価する：
安全性および忍容性－有害事象、即時および遅延型反応原性（例えばアナフィラキシー、疼痛、発赤、免疫複合体疾患、腫脹、発熱を含む局所および全身性反応原性）；忍容性の総合評価；自殺念慮（Ｃ－ＳＳＲＳ）；行動（ＮＰＩ）；安全性を評価するための認知および機能評価（ＲＢＡＮＳ、ＣＤＲ－ＳＢ）；バイタルサイン；ＭＲＩ画像診断；心電図；血液および尿における慣例的な血液学および生化学評価；血液における抗ＤＮＡ抗体を含む自己免疫抗体の評価；血中およびＣＳＦ中の炎症性マーカー。
免疫応答－血清中の抗ｐタウＩｇＧ力価（幾何平均、ベースラインからの変化、応答者率、ピーク、および曲線下面積）。
【0203】
以下の副次的評価項目を評価した／評価する：
免疫応答－血清中の抗タウＩｇＧ、抗ｐタウＩｇＭ、抗ｅＰＨＦ ＩｇＧおよび抗タウＩｇＭ力価（幾何平均、ベースラインからの変化、応答者率、ピークおよび曲線下面積）、アビディティ検査によるＩｇＧ応答プロファイルの決定。
免疫応答－血清中の抗タウＩｇＧ、抗ｐタウＩｇＭ、抗ｅＰＨＦ ＩｇＧおよび抗タウＩｇＭ力価（幾何平均、ベースラインからの変化、応答者率、ピークおよび曲線下面積）、アビディティ検査によるＩｇＧ応答プロファイルの決定。
【0204】
以下の探索的評価項目を評価した／評価する：
血中および／またはＣＳＦ中のバイオマーカー力価のベースラインからの変化（例えば総タウおよびｐタウタンパク質）、血中のＴ細胞活性化レベルのベースラインからの変化、血中の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ－１Ｂ、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＦＮ－γ、およびＴＮＦ－α）力価のベースラインからの変化、自殺念慮（Ｃ－ＳＳＲＳ）、行動（ＮＰＩ）、認知的および機能的活動（ＲＢＡＮＳ、ＣＤＲ－ＳＢ）スコアのベースラインからの変化。
血中および／またはＣＳＦ中のバイオマーカー力価のベースラインからの変化（例えば総タウおよびｐタウタンパク質）、血中のＴ細胞活性化レベルのベースラインからの変化、血中の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ－１Ｂ、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＦＮ－γ、およびＴＮＦ－α）力価のベースラインからの変化、自殺念慮（Ｃ－ＳＳＲＳ）、行動（ＮＰＩ）、認知的および機能的活動（ＲＢＡＮＳ、ＣＤＲ－ＳＢ）スコアのベースラインからの変化。
【0205】
研究は進行中である。表２に示すように、３つのサブコホートが、３００μｇ、９００μｇまたは１８００μｇのテトラパルミトイル化ホスホペプチドｐタウペプチドＴ３（配列番号２８）という投薬量レベルのＡＣＩ－３５．０３０、およびプラセボを受けた。
【0206】
【表2】
【0207】
２０２２年６月２０日のカットオフ日時点での安全性および忍容性の中間結果から、ＡＣＩ－３５．０３０について安全性または忍容性の問題は同定されなかったことが示された。コホート１のサブコホート１．１、１．２および１．３において、有害事象に起因する中止はなかった。さらに、これまでに検討された患者において、ＭＲＩで報告されたＣＮＳ炎症または他の顕著な変化を呈した者はなかった。
【0208】
３００μｇ、９００μｇまたは１８００μｇのテトラパルミトイル化ホスホペプチドｐタウペプチドＴ３（配列番号２８）の初回投与後、対象の１００％の血清中で、ＡＣＩ－３５．０３０の投与の２週間後に抗ｐタウ特異的ＩｇＧ力価のベースラインに比しての増加が観察された。この抗ｐタウＩｇＧ応答は、実薬で処置された全ての早期ＡＤ対象において非ｐタウペプチドよりもｐタウに対する選好性を示し、抗体応答は、ＡＣＩ－３５．０３０の追加投与の２週間後に測定した抗ｐタウ特異的ＩｇＧ力価の増加および／または抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価の増加によって示されるように、ＡＣＩ－３５．０３０の追加投与によってブーストされた。抗体応答はプラセボを受けた対象では観察されなかったが、ただし、プラセボを受けたサブコホート１．２の１名の対象で６７週目の研究処置期間後にＩｇＭおよびＩｇＧ抗ｐタウ力価の１回の限定的な上昇が認められ、その応答は応答者を定義するために設定された閾値に近かった。
【0209】
ヒトにおけるＡＣＩ－３５．０３０の抗ｐタウＩｇＧ応答
表２の３つのサブコホートにおいてＡＣＩ－３５．０３０ワクチンによって誘導されたリン酸化タウペプチド（ｐタウ）を対象にする特異的ＩｇＧ抗体応答を、ＭＳＤによって測定した。
表２の３つのサブコホートにおいてＡＣＩ－３５．０３０ワクチンによって誘導されたリン酸化タウペプチド（ｐタウ）を対象にする特異的ＩｇＧ抗体応答を、ＭＳＤによって測定した。
【0210】
表３は、サブコホート１．１における、テトラパルミトイル化ホスホペプチドｐタウペプチドＴ３の投薬量レベルが３００μｇのＡＣＩ－３５．０３０（ＡＣＩ－３５．０３０ ３００μｇ）またはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｐタウＩｇＧ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を示す。
【0211】
【表3-1】
【0212】
【表3-2】
【0213】
サブコホート１．２における、テトラパルミトイル化ホスホペプチドｐタウペプチドＴ３の投薬量レベルが９００μｇのＡＣＩ－３５．０３０（ＡＣＩ－３５．０３０ ９００μｇ）またはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｐタウＩｇＧ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を、表４にまとめる。
【0214】
【表4-1】
【0215】
【表4-2】
【0216】
サブコホート１．３における、テトラパルミトイル化ホスホペプチドｐタウペプチドＴ３の投薬量レベルが１８００μｇのＡＣＩ－３５．０３０（ＡＣＩ－３５．０３０ １８００μｇ）またはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｐタウＩｇＧ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を、表５にまとめる。
【0217】
【表5-1】
【0218】
【表5-2】
【0219】
表３、４および５、ならびに図２および６における結果によって示されるように、３００μｇ、９００μｇおよび１８００μｇ用量レベルのそれぞれのＡＣＩ－３５．０３０を用いた免疫化により、配列番号２８のアミノ酸配列を有するＴ３．５ペプチドを対象にする抗ｐタウＩｇＧ応答が誘導された。３００μｇ用量レベルのＡＣＩ－３５．０３０を用いて処置された全ての対象は、２週目から１０週目まで応答者であり、そのうち６６．７％が３６週目にも応答者であったが、このサブコホートにおける対象８名のうち７名には、Ｃｏｖｉｄ－１９パンデミックが理由で２４週目の事前の注射が行われなかった。研究の盲検解除の可能性を避けるために、サブコホート１における３６週目以降の応答者の百分率は当面は報告されない。９００μｇ用量レベルのＡＣＩ－３５．０３０を用いて処置された全ての対象は、２週目から７４週目までの間の全ての時点で応答者であったが、プラセボを受けた１名の対象では、応答者を定義するために設定した閾値（ベースラインの１．８１倍）よりもわずかに高い限定的な抗ｐタウＩｇＧ応答（ベースラインの１．９倍）が、６７週目（処置期間の後）に生じた。１８００μｇ用量レベルのＡＣＩ－３５．０３０を用いて処置された全ての対象は、２週目から５０週目までの間の全ての時点で応答者であったが、プラセボを受けた対象では４２週目までに抗ｐタウＩｇＧ応答が生じなかった。
【0220】
３００μｇまたは９００μｇのいずれかのＡＣＩ－３５．０３０を用いて処置された対象では、ワクチン接種の２週間後という早い時点から高い応答者率が観察された。全体として、初回のワクチン接種後および全てのワクチン接種の後に、高い応答者率が観察された。９００μｇ用量のＡＣＩ－３５．０３０では、２週目から７４週目までのいずれの研究時点で分析した場合にもリン酸化タウに対する応答者率は１００％であった。９００μｇ用量のＡＣＩ－３５．０３０による病理的なｅＰＨＦに対する応答者率は、２週目から４８週目までの間の処置期間中のいずれの時点でも６６．７％から１００％の範囲であり、５０週目から７４週目までの処置期間後のいずれの時点でも５０％から１００％の範囲であった。その上、３００μｇまたは９００μｇのいずれかのＡＣＩ－３５．０３０を用いて処置された患者では、ＩｇＭからＩｇＧへの急速なクラススイッチが観察された。それぞれ３００μｇ、９００μｇまたは１８００μｇのＡＣＩ－３５．０３０を用いて処置されたサブコホート１．１、１．２および１．３に関する全体的な応答率の概要を表６に示す。
【0221】
【表6】
【0222】
一般に、３００および９００μｇの両方の用量レベルでの８、２４または４８週目の各追加免疫化は、１０、２６および５０週目の追加免疫化の投与の２週間後にそれぞれ測定した抗ｐタウ特異的ＩｇＧ力価の増加によって示されるように、抗ｐタウＩｇＧ応答のブースティングをもたらした（図２および６）。１８００μｇ用量レベルを用いた８、２４、および４８週目の追加免疫化も、１０、２６および５０週目の追加免疫化の投与の２週間後に測定した抗ｐタウ特異的ＩｇＧ力価の増加によって示されるように、抗ｐタウＩｇＧ応答のブースティングをもたらした（図４および７）。
【0223】
ヒトにおけるＡＣＩ－３５．０３０の抗ｐタウＩｇＭ応答
表２の３つのサブコホートにおいてＡＣＩ－３５．０３０ワクチンによって誘導されたリン酸化タウペプチドを対象にする特異的ＩｇＭ抗体応答を、ＭＳＤによって測定した。サブコホート１．１におけるＡＣＩ－３５．０３０ ３００μｇまたはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｐタウＩｇＭ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を、表７に示す。
表２の３つのサブコホートにおいてＡＣＩ－３５．０３０ワクチンによって誘導されたリン酸化タウペプチドを対象にする特異的ＩｇＭ抗体応答を、ＭＳＤによって測定した。サブコホート１．１におけるＡＣＩ－３５．０３０ ３００μｇまたはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｐタウＩｇＭ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を、表７に示す。
【0224】
【表7-1】
【0225】
【表7-2】
【0226】
サブコホート１．２における、ＡＣＩ－３５．０３０ ９００μｇまたはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｐタウＩｇＭ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を、表８に示す。
【0227】
【表8-1】
【0228】
【表8-2】
【0229】
サブコホート１．３における、ＡＣＩ－３５．０３０ １８００μｇまたはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｐタウＩｇＭ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を、表９に示す。
【0230】
【表9-1】
【0231】
【表9-2】
【0232】
表７から９までの結果によって示されるように、３００μｇ、９００μｇおよび１８００μｇ用量のそれぞれのＡＣＩ－３５．０３０を用いた早期ＡＤ対象の免疫化により、配列番号２８のアミノ酸配列を有するＴ３．５ペプチドを対象にする抗ｐタウＩｇＭ応答が１０週目までに誘導された。ＡＣＩ－３５．０３０を用いて処置された全ての対象は応答者であったが、プラセボを用いて処置された対象では、応答者を定義するために設定した閾値よりもわずかに高い限定的な抗ｐタウＩｇＭ応答が認められた６７週目（処置期間の後）の１名の対象を除いて抗ｐタウＩｇＭ応答は生じなかった。以上を総合すると、８週目までの抗ｐタウＩｇＭ応答の低下、および２週目以降に測定された抗ｐタウＩｇＧ抗体応答は、ＡＣＩ－３５．０３０がＩｇＭからＩｇＧへのクラススイッチを誘導したことを示唆する。
【0233】
タウ（非ｐタウ）に対するものを上回るｐタウに対する特異性
様々な投薬量のＡＣＩ－３５．０３０またはプラセボによって経時的に誘導された非リン酸化タウに対するＩｇＧ力価（抗タウＩｇＧ力価）については、図３および５を参照のこと。表２の３つのサブコホートにおいてＡＣＩ－３５．０３０を用いた免疫化によって誘導されたＩｇＧ抗体応答の、タウへのものを上回るｐタウへの結合に対する特異性（ここでタウに対する応答は非ｐタウに対する応答を表す）を、抗ｐタウＩｇＧ／抗タウＩｇＧ応答の比として経時的に測定した。サブコホート１．１における、ＡＣＩ－３５．０３０ ３００μｇまたはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗タウＩｇＧ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を、表１０に示す。
様々な投薬量のＡＣＩ－３５．０３０またはプラセボによって経時的に誘導された非リン酸化タウに対するＩｇＧ力価（抗タウＩｇＧ力価）については、図３および５を参照のこと。表２の３つのサブコホートにおいてＡＣＩ－３５．０３０を用いた免疫化によって誘導されたＩｇＧ抗体応答の、タウへのものを上回るｐタウへの結合に対する特異性（ここでタウに対する応答は非ｐタウに対する応答を表す）を、抗ｐタウＩｇＧ／抗タウＩｇＧ応答の比として経時的に測定した。サブコホート１．１における、ＡＣＩ－３５．０３０ ３００μｇまたはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗タウＩｇＧ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を、表１０に示す。
【0234】
【表10-1】
【0235】
【表10-2】
【0236】
サブコホート１．２における、ＡＣＩ－３５．０３０ ９００μｇまたはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗タウＩｇＧ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を、表１１に示す。
【0237】
【表11-1】
【0238】
【表11-2】
【0239】
サブコホート１．３における、ＡＣＩ－３５．０３０ １８００μｇまたはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗タウＩｇＧ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を、表１２に示す。
【0240】
【表12-1】
【0241】
【表12-2】
【0242】
【表12-3】
【0243】
サブコホート１における、ＡＣＩ－３５．０３０ ３００μｇを用いた免疫化の後の抗ｐタウＩｇＧ／抗タウＩｇＧ力価の比（ＩＴＴ集団）を、表１３に示す。
【0244】
【表13】
【0245】
表１４は、サブコホート１．２における、ＡＣＩ－３５．０３０ ９００μｇを用いた免疫化の後の抗ｐタウＩｇＧ／抗タウＩｇＧ力価の比（ＩＴＴ集団）を示す。
【0246】
【表14】
【0247】
表１５は、サブコホート１．３における、ＡＣＩ－３５．０３０ １８００μｇを用いた免疫化の後の抗ｐタウＩｇＧ／抗タウＩｇＧ力価の比（ＩＴＴ集団）を示す。
【0248】
【表15】
【0249】
表１３から１５までの結果によって示されるように、３００μｇ、９００μｇおよび１８００μｇ用量のそれぞれのＡＣＩ－３５．０３０を用いた免疫化により、ｐタウペプチドを非ｐタウペプチドよりも選好的に認識するＩｇＧ抗体応答が誘導され、この選好性は経時的に持続した。
【0250】
ヒトＡＤ脳に由来する病理的なｐタウ（濃縮対らせん状細線維－ｅＰＨＦ）の認識
表２の３つのサブコホートにおいてＡＣＩ－３５．０３０を用いた免疫化によって誘導されたＩｇＧポリクローナル抗体が、ヒトＡＤ脳に由来するｅＰＨＦに結合する能力を、ＭＳＤによって経時的に測定した。表１６は、サブコホート１．１における、ＡＣＩ－３５．０３０ ３００μｇまたはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を示す。
表２の３つのサブコホートにおいてＡＣＩ－３５．０３０を用いた免疫化によって誘導されたＩｇＧポリクローナル抗体が、ヒトＡＤ脳に由来するｅＰＨＦに結合する能力を、ＭＳＤによって経時的に測定した。表１６は、サブコホート１．１における、ＡＣＩ－３５．０３０ ３００μｇまたはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を示す。
【0251】
【表16-1】
【0252】
【表16-2】
【0253】
表１７は、サブコホート１．２における、ＡＣＩ－３５．０３０ ９００μｇまたはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を示す。
【0254】
【表17-1】
【0255】
【表17-2】
【0256】
表１８は、サブコホート１．３における、ＡＣＩ－３５．０３０ １８００μｇまたはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価および応答者率（ＩＴＴ集団）を示す。
【0257】
【表18-1】
【0258】
【表18-2】
【0259】
表１６から１８まで、ならびに図４および図７の結果から、３００μｇ、９００μｇおよび１８００μｇ用量のそれぞれのＡＣＩ－３５．０３０を用いた免疫化により、ヒトＡＤ脳に由来する病理的なｅＰＨＦタウを認識するＩｇＧ抗体応答が誘導され得ることが示された。さらに、抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価はブースト可能であった。抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価の幾何平均は各免疫化の２週間後に増加した。ＡＣＩ－３５．０３０ ３００μｇを用いて処置された対象におけるＩｇＧ抗ｅＰＨＦに関する応答者率は、それぞれ２週目に６６．７％、８および１０週目に８３．３％、ならびに３６週目に３３．３％であったが、このサブコホートにおける対象８名のうち７名には、Ｃｏｖｉｄ－１９パンデミックが理由で２４週目の事前の注射が行われなかった。研究の盲検解除の可能性を避けるために、このサブコホートにおける３６週目以降の応答者の百分率は現時点では報告されない。ＡＣＩ－３５．０３０ ９００μｇを用いて処置された対象における抗ｅＰＨＦ ＩｇＧに関する応答者率は、それぞれ２、１０および２６週目に１００％、８および２４週目に６６．７％、３６および４８週目に８３．３％、ならびに５０週目に１００％であった。実薬で処置された同じ２名の対象は、これらの２つの時点（８および２４週目）では非応答者であり、一方、２、１０および２６週目（例えば、それぞれ０、８および２４週目に行われた注射の２週間後）には応答者であったと考えられる。ＡＣＩ－３５．０３０ １８００μｇを用いて処置された対象におけるＩｇＧ抗ｅＰＨＦ ＩｇＧに関する応答者率は、２、８および１０週目にそれぞれ６６．７％、３３．３％および８３．３％であり、続いて２４週目に５０％、２６週目に６６．７％、および５０週目に８０％であった。
【0260】
ヒトＡＤ脳に由来する病理的なｐタウ（濃縮対らせん状細線維－ｅＰＨＦ）に対するアビディティ
サブコホート１．１、サブコホート１．２、およびサブコホート１．３においてＡＣＩ－３５．０３０を用いた免疫化によって誘導されたＩｇＧ抗体応答が、ヒトＡＤ脳に由来するｅＰＨＦに結合する能力を、ｅＰＨＦのプレート上への低密度および高密度コーティングの両方を使用するＭＳＤによって経時的に測定した。抗体濃度を、低密度コーティング（結合能の非常に高い抗体のみが結合し得る）および高密度コーティング（全ての抗体が結合し得る）で測定する。アビディティ指数は、低／高密度コーティングでの抗体濃度の比によって算出される。表１９は、サブコホート１．１における、ＡＣＩ－３５．０３０を３００μｇで用いた免疫化の後のｅＰＨＦに対するアビディティ指数を示す。
サブコホート１．１、サブコホート１．２、およびサブコホート１．３においてＡＣＩ－３５．０３０を用いた免疫化によって誘導されたＩｇＧ抗体応答が、ヒトＡＤ脳に由来するｅＰＨＦに結合する能力を、ｅＰＨＦのプレート上への低密度および高密度コーティングの両方を使用するＭＳＤによって経時的に測定した。抗体濃度を、低密度コーティング（結合能の非常に高い抗体のみが結合し得る）および高密度コーティング（全ての抗体が結合し得る）で測定する。アビディティ指数は、低／高密度コーティングでの抗体濃度の比によって算出される。表１９は、サブコホート１．１における、ＡＣＩ－３５．０３０を３００μｇで用いた免疫化の後のｅＰＨＦに対するアビディティ指数を示す。
【0261】
【表19】
【0262】
表２０は、サブコホート１．２における、ＡＣＩ－３５．０３０を９００μｇで用いた免疫化の後のｅＰＨＦに対するアビディティ指数を示す。
【0263】
【表20】
【0264】
表２１は、サブコホート１．３における、ＡＣＩ－３５．０３０を１８００μｇで用いた免疫化の後のｅＰＨＦに対するアビディティ指数を示す。
【0265】
【表21】
【0266】
表１９、２０、および２１の結果から、ほとんどの患者では、３００μｇ、９００および１８００μｇ用量のそれぞれのＡＣＩ－３５．０３０を用いた免疫化により、２週目から１０週目までの間に結合アビディティの増加を示すＩｇＧ免疫応答が誘導されたことが示された。
【0267】
現在までのところ、予備的な結果から、例えば、ＡＣＩ－３５．０３０は、タウの病理的な種（ホスホ－タウおよびｅＰＨＦ）に向けて高度で特異的でかつ持続的な抗体応答を誘導することが示され、これには低用量と中用量の間での明らかな用量応答と、ＩｇＭからＩｇＧへの免疫グロブリンのクラススイッチの証拠が伴っていた。個々の応答者率は高くかつ一貫しており、特に抗ｐタウおよびｅＰＨＦ抗体についてそうであった。ＡＣＩ－３５．０３０の投与は、データ分析の時点では研究ワクチンに関するいかなる特定の安全性の懸念も引き起こさないように思われ、このことはＡＣＩ－３５．０３０の好ましい安全性および忍容性プロファイルの裏付けを提供し、ＡＣＩ－３５．０３０は免疫化された患者においてベースライン値を上回る持続的な抗体応答を誘導することができた。経時的には、このデータは、ＩｇＧ応答が、より病理的な種であるｅＰＨＦへの結合に対するより強い選好性に向けて成熟し、同時に病理的でない非リン酸化タウに対する抗体力価を低下させることを実証している。予備的な結果は、有効なＡＤ疾患修飾処置として、ならびにＡＤの潜在的な防止のための手法としての、このワクチンのさらなる開発を裏付けるものである。
【0268】
[実施例２]
ＡＣＩ－３５．０３０を用いたワクチン接種は、幅広いエピトープカバー範囲を有する比較的均一な抗体応答を誘導する
病理的なｐタウに対する幅広さおよび選択性について抗体応答をさらにプロファイリングするために、ヒト対象の血清に対してエピトープマッピングを行った。ヒト対象においてリポソームワクチンによって誘導される抗体のエピトープ認識プロファイルを決定するための研究を行った。第１／２相臨床試験において、７名のアルツハイマー病（ＡＤ）患者に対して、０、８、２４、および４８週目に、１用量当たり９００ｕｇの酢酸テトラパルミトイル化リン酸化タウペプチドＴ３（配列番号２８）を有するリポソームワクチンまたはプラセボ（サブコホート１．２）を用いた筋肉内免疫化を行った。抗体のエピトープ認識プロファイルを、第１の免疫化の前（Ｖ１、０週目）および第３の免疫化の後（Ｖ６、２６週目）に、１アミノ酸のシフトを有し、ホスホ－タウペプチドＴ３．３０（配列番号４５）の全配列ならびに非リン酸化タウペプチドＴ３．５６（配列番号４６）の対応する配列をカバーするＮ末端ビオチン化８－ｍｅｒペプチドのライブラリーを使用するエピトープマッピングＥＬＩＳＡによって決定した。加えて、完全長ホスホ－タウペプチドＴ３．３０（およびタウペプチドＴ３．５６、ならびに別のＮ末端ビオチン化ホスホ－タウペプチドＴ３．８５（配列番号４７）および対応する非リン酸化タウペプチドＴ３．８６（配列番号４８）（追加のＣ末端アミノ酸を有する）への抗体の結合も決定した。
ＡＣＩ－３５．０３０を用いたワクチン接種は、幅広いエピトープカバー範囲を有する比較的均一な抗体応答を誘導する
病理的なｐタウに対する幅広さおよび選択性について抗体応答をさらにプロファイリングするために、ヒト対象の血清に対してエピトープマッピングを行った。ヒト対象においてリポソームワクチンによって誘導される抗体のエピトープ認識プロファイルを決定するための研究を行った。第１／２相臨床試験において、７名のアルツハイマー病（ＡＤ）患者に対して、０、８、２４、および４８週目に、１用量当たり９００ｕｇの酢酸テトラパルミトイル化リン酸化タウペプチドＴ３（配列番号２８）を有するリポソームワクチンまたはプラセボ（サブコホート１．２）を用いた筋肉内免疫化を行った。抗体のエピトープ認識プロファイルを、第１の免疫化の前（Ｖ１、０週目）および第３の免疫化の後（Ｖ６、２６週目）に、１アミノ酸のシフトを有し、ホスホ－タウペプチドＴ３．３０（配列番号４５）の全配列ならびに非リン酸化タウペプチドＴ３．５６（配列番号４６）の対応する配列をカバーするＮ末端ビオチン化８－ｍｅｒペプチドのライブラリーを使用するエピトープマッピングＥＬＩＳＡによって決定した。加えて、完全長ホスホ－タウペプチドＴ３．３０（およびタウペプチドＴ３．５６、ならびに別のＮ末端ビオチン化ホスホ－タウペプチドＴ３．８５（配列番号４７）および対応する非リン酸化タウペプチドＴ３．８６（配列番号４８）（追加のＣ末端アミノ酸を有する）への抗体の結合も決定した。
【0269】
データは処置前減算光学密度（Ｏ．Ｄ．）値として表現され、これは各ペプチドおよび各患者について、第３の免疫化の後（Ｖ６、２６週目）に得られたＯ．Ｄ．から初回免疫化の前（Ｖ１、０週目）に得られたものを減算して得られる。減算の後に負の値となる場合は０．０００とした。
【0270】
表２２および２３は、ホスホ－ペプチドＴ３．３０およびＴ３．８５ならびに非ホスホ－ペプチドＴ３．５６およびＴ３．８６をカバー範囲とする短い８－ｍｅｒ重複ペプチドに関するエピトープマッピングＥＬＩＳＡによって決定された、ＡＣＩ－３５．０３０を用いたワクチン接種によって誘導された抗体のエピトープ認識プロファイルを示す。
【0271】
【表22】
【0272】
【表23】
【0273】
表２２および図８Ａは、２名のＡＤ患者が、２６週目の３回の免疫化の後にホスホ－タウペプチドＴ３．３０およびＴ３．８５の配列またはその内部の配列に対していかなるＩｇＧ抗体も本質的に産生しなかった（患者＃１および＃２）のに対して、他の５名のＡＤ患者では、ホスホ－タウペプチドＴ３．３０およびＴ３．８５の配列またはその内部の配列に対するＩｇＧ抗体が生じ、ホスホ－タウペプチドＴ３．３０およびＴ３．８５の配列への結合が全体的に同程度であったことを示す。８－ｍｅｒペプチドに関して得られたＯ．Ｄ．値は、３回の免疫化の後に誘導されたＩｇＧ抗体が、３９６位のリン酸化セリンを含む、ホスホ－タウペプチドＴ３．３０（配列番号４５）およびＴ３．８５（配列番号４７）の配列のＮ末端部分に主として結合したことを示す。４０４位のリン酸化セリンを含む、ホスホ－タウペプチドＴ３．３０（配列番号４５）およびＴ３．８５（配列番号４７）の配列のＣ末端部分に対しては、全体的により低い結合が観察された。
【0274】
表２３および図８Ｂは、２名のＡＤ患者が、２６週目に非リン酸化タウペプチドＴ３．５６およびＴ３．８６の配列に対していかなるＩｇＧ抗体も本質的に産生しなかったことを示す（患者＃１および＃２）。４名のＡＤ患者では、非リン酸化タウペプチドＴ３．５６およびＴ３．８６の配列またはその内部の配列を弱く認識するＩｇＧ抗体が生じ、その結合はＣ末端８－ｍｅｒペプチド（タウ４０１～４０８）の結合と関連するように思われた。１名のＡＤ患者（患者＃３）は、非リン酸化タウペプチドＴ３．５６およびＴ３．８６の配列またはその内部の配列に対するＩｇＧ抗体を産生し、その結合は配列のＮ末端部分に主に関連するように思われる。
【0275】
ＡＣＩ－３５．０３０については、対象のＩｇＧ応答は比較的均一であり、結合が検査したｐタウ配列にわたって生じたことからみて幅広いエピトープカバー範囲を示し、重要なこととして、ペプチド配列の末端に対する実質的な特異性も、非リン酸化配列に対する実質的な結合も伴わなかった。
【0276】
【化1-1】
【0277】
【化1-2】
【0278】
【化1-3】
【0279】
【化1-4】
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【配列表】
【国際調査報告】