特表 2024-533229 ＢＣＮ０５７、ＢＣＮ０７７および類似体を用いた治療の方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-09-12

(54)【発明の名称】ＢＣＮ０５７、ＢＣＮ０７７および類似体を用いた治療の方法

(51)【国際特許分類】

   C07D 471/04 20060101AFI20240905BHJP

   A61K 31/4709 20060101ALI20240905BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20240905BHJP

   A61P 1/18 20060101ALI20240905BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20240905BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20240905BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20240905BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240905BHJP

   A61P 37/04 20060101ALI20240905BHJP

   A61P 33/06 20060101ALI20240905BHJP

   A61P 31/18 20060101ALI20240905BHJP

   A61P 31/20 20060101ALI20240905BHJP

   A61P 31/14 20060101ALI20240905BHJP

   A61P 31/06 20060101ALI20240905BHJP

   A61P 31/04 20060101ALI20240905BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20240905BHJP

【ＦＩ】

C07D471/04 108Q

C07D471/04 CSP

A61K31/4709

A61P1/16

A61P1/18

A61P3/10

A61P11/00

A61P35/02

A61P35/00

A61P37/04

A61P33/06

A61P31/18

A61P31/20

A61P31/14

A61P31/06

A61P31/04

A61K45/00

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024514447

(86)(22)【出願日】2022-09-06

(85)【翻訳文提出日】2024-05-01

(86)【国際出願番号】 US2022042662

(87)【国際公開番号】W WO2023034644

(87)【国際公開日】2023-03-09

(31)【優先権主張番号】63/240,847

(32)【優先日】2021-09-03

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】520046649

【氏名又は名称】ビーシーエヌ バイオサイエンシズ エル．エル．シー．

(74)【代理人】

【識別番号】100114775

【弁理士】

【氏名又は名称】高岡 亮一

(74)【代理人】

【識別番号】100121511

【弁理士】

【氏名又は名称】小田 直

(74)【代理人】

【識別番号】100202751

【弁理士】

【氏名又は名称】岩堀 明代

(74)【代理人】

【識別番号】100208580

【弁理士】

【氏名又は名称】三好 玲奈

(74)【代理人】

【識別番号】100191086

【弁理士】

【氏名又は名称】高橋 香元

(72)【発明者】

【氏名】ノリス，アンドリュー ジェイ．

(72)【発明者】

【氏名】シンガー，エリザベス エム．

(72)【発明者】

【氏名】チャクラボーティ，スディップ

【テーマコード（参考）】

4C084

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C084AA19

4C084NA05

4C084ZA59

4C084ZA75

4C084ZB09

4C084ZB26

4C084ZB27

4C084ZB33

4C084ZB35

4C084ZB38

4C084ZC35

4C084ZC55

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086CB05

4C086GA02

4C086GA07

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA14

4C086ZA59

4C086ZA75

4C086ZB09

4C086ZB26

4C086ZB27

4C086ZB33

4C086ZB35

4C086ZB38

4C086ZC35

4C086ZC55

(57)【要約】

本開示は、ＢＣＮ０５７、ＢＣＮ０７７および類似体の投与により、種々の状態を治療するまたは緩和する方法に関する。ＢＣＮ０５７、ＢＣＮ０７７および類似体は、ＰＤ－１を調節し、ＰＤ－１発現が関与する種々の病気を治療するために使用できる。化合物は、抗悪性腫瘍活性を有する。さらに、化合物はまた、それらがＧＩ管への化学療法誘発毒性に対して保護するので、細胞保護活性も有する。本明細書で開示の化合物は、膵臓癌、胃腸（ＧＩ）癌および上皮癌を含む、癌における腫瘍負荷量を低減するために使用できる。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式Ｉ：

【化1】

の化合物またはその類似体であって、
Ｒ^１＝アルキル、アルキルアミン、エーテル、アリールまたはアリールハライドであり、
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３であり、
Ｒ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である、
化合物またはその類似体。

【請求項2】

式Ｉ：

【化2】

の化合物またはその類似体であって、
Ｒ^１＝

【化3】

であり、
ｎ＝１、２または３であり、
Ｘ＝Ｆ、ＣＦ_３Ｃｌ、ＯＨまたはＣＨ_２ＯＨであり、
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３でありかつＲ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である、
化合物またはその類似体。

【請求項3】

式Ｉ：

【化4】

の化合物またはその類似体であって、
Ｒ^１＝

【化5】

であり、
ｎ＝１、２または３であり、
Ｘ＝Ｆ、ＣＦ_３Ｃｌ、ＯＨまたはＣＨ_２ＯＨであり、
Ｙ＝Ｏ、ＳまたはＮであり、および
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３でありかつＲ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である、
化合物またはその類似体。

【請求項4】

式Ｉ：

【化6】

の化合物またはその類似体であって、
Ｒ^１＝

【化7】

であり、
ｎ＝１、２または３であり、
Ｘ＝Ｆ、ＣＦ_３Ｃｌ、ＯＨまたはＣＨ_２ＯＨであり、
Ｙ＝Ｏ、ＳまたはＮであり、
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３でありかつＲ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である、
化合物またはその類似体。

【請求項5】

式Ｉ：

【化8】

の化合物またはその類似体であって、
Ｒ^１＝

【化9】

であり、
ｎ＝１、２または３でありおよび
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３でありかつＲ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である、
化合物またはその類似体。

【請求項6】

式Ｉ：

【化10】

の化合物またはその類似体であって、
Ｒ^１＝

【化11】

であり、
ｎ＝１、２または３でありおよび
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３でありかつＲ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である、
化合物またはその類似体。

【請求項7】

式Ｉ：

【化12】

の化合物またはその類似体であって、
Ｒ^１＝

【化13】

であり、
ｎ＝１、２または３でありおよび
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３でありかつＲ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である、
化合物またはその類似体。

【請求項8】

請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物の治療量を投与することを含む癌を治療する方法。

【請求項9】

前記癌は、膀胱癌、脳癌、乳癌、結腸直腸癌、子宮頸癌、胃腸癌、泌尿生殖器癌、頭頸部癌、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎癌、直腸癌、皮膚癌、血液癌、精巣癌、胆道癌、膀胱癌、神経節癌（神経芽腫）、白血病、リンパ腫、肝臓癌（例えば、肝細胞癌）、肺癌（例えば、大細胞癌、非小細胞癌および扁平細胞癌）、軟組織癌（例えば、血管肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、横紋筋肉腫、粘液腫および悪性線維性組織球種－悪性線維性組織球腫）、胃癌または甲状腺癌の少なくとも１種である、請求項８に記載の方法。

【請求項10】

前記対象に１種または複数の追加の薬物を投与することをさらに含む、請求項８に記載の方法。

【請求項11】

前記対象への化学療法または放射線療法の投与をさらに含む、請求項８に記載の方法。

【請求項12】

化学療法または放射線療法の１種または複数の副作用を有する対象を治療する方法であって、請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物の治療的有効量を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項13】

治療を必要としている対象において上皮細胞への放射線誘発損傷を予防するまたは治療する方法であって、請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物の治療的有効量を前記対象に投与するステップを含む、方法。

【請求項14】

前記上皮細胞への放射線誘発損傷は、放射線誘発胃腸症候群（ＲＩＧＳ）、放射線誘発粘膜炎、放射線誘発口腔粘膜炎、放射線誘発直腸炎または放射線誘発腸炎の１種または複数として特定される、請求項１３に記載の方法。

【請求項15】

請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物の治療量を投与することを含む、病気を治療するためにＰＤ－１発現を調節する、Ｔ細胞応答を高めるまたは免疫細胞の活性を高める方法。

【請求項16】

前記病気は、脳マラリア、トリパノソーマ・クルージ誘導心筋炎、インフルエンザウィルスＡ、結核菌、クラミジア肺感染症、ＣＯＰＤ、急性肺損傷、肝臓感染症（ＨＢＶまたはＨＣＶ）、膵炎、１型糖尿病、慢性感染症、敗血症、自己免疫疾患またはＨＩＶの少なくとも１種である、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

それを必要としている患者に、請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物、または薬学的に許容可能なその塩の有効量を投与することを含むＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１および／またはＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１相互作用を抑制する方法。

【請求項18】

１種または複数の免疫チェックポイント制御因子の投与をさらに含む、請求項１６に記載の方法。

【請求項19】

追加の治療薬の投与をさらに含み、前記治療薬は、小分子、抗体、抗体フラグメント、抗体コンジュゲートまたは免疫調節剤である、請求項１６に記載の方法。

【請求項20】

対象においてＰＤ－Ｌ１とＰＤ－１および／またはＣＤ８０の相互作用を遮断する方法であって、１～７の化合物の治療的有効量を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項21】

前記自己免疫疾患は、橋本甲状腺炎およびグレーブス病（ＧＤ）、関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）または多発性硬化症（ＭＳ）の少なくとも１種である、請求項１６に記載の方法。

【請求項22】

前記対象に１種または複数の追加の薬物を投与することをさらに含む、請求項１５に記載の方法。

【請求項23】

前記式Ｉ：

【化14】

の化合物またはその類似体の治療量を投与することを含む癌を治療する方法であって、
Ｒ^１は、アルキル、アルキルアミン、またはエーテルであり；
Ｒ^２は、ＨまたはＣＨ_３であり；および
Ｒ^３は、ＨまたはＯＨである、
方法。

【請求項24】

前記癌は、膀胱癌、脳癌、乳癌、結腸直腸癌、子宮頸癌、胃腸癌、泌尿生殖器癌、頭頸部癌、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎癌、直腸癌、皮膚癌、血液癌、精巣癌、胆道癌、膀胱癌、神経節癌（神経芽腫）、白血病、リンパ腫、肝臓癌（例えば、肝細胞癌）、肺癌（例えば、大細胞癌、非小細胞癌および扁平細胞癌）、軟組織癌（例えば、血管肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、横紋筋肉腫、粘液腫および悪性線維性組織球種－悪性線維性組織球腫）、胃癌または甲状腺癌の少なくとも１種である、請求項２３に記載の方法。

【請求項25】

前記対象へ１種または複数の追加の薬物を投与することをさらに含む、請求項２３に記載の方法。

【請求項26】

前記対象への化学療法または放射線療法の投与をさらに含む、請求項２３に記載の方法。

【請求項27】

前記式Ｉ：

【化15】

の化合物またはその類似体の治療量を投与することを含む、病気を治療するためにＰＤ－１発現を調節する、Ｔ細胞応答を高めるまたは免疫細胞の活性を高める方法であって、
Ｒ^１は、アルキル、アルキルアミン、またはエーテルであり；
Ｒ^２は、ＨまたはＣＨ_３であり；および
Ｒ^３は、ＨまたはＯＨである、
方法。

【請求項28】

前記病気は、脳マラリア、トリパノソーマ・クルージ誘導心筋炎、インフルエンザウィルスＡ、結核菌、クラミジア肺感染症、ＣＯＰＤ、急性肺損傷、肝臓感染症（ＨＢＶまたはＨＣＶ）、膵炎、１型糖尿病、慢性感染症、敗血症、自己免疫疾患またはＨＩＶの少なくとも１種である、請求項２７に記載の方法。

【請求項29】

前記対象に１種または複数の追加の薬物を投与することをさらに含む、請求項２７に記載の方法。

【請求項30】

前記１種または複数の追加の薬物は、免疫チェックポイント制御因子である、請求項２９に記載の方法。

【請求項31】

前記１種または複数の追加の薬物は、小分子、抗体、抗体フラグメント、抗体コンジュゲートまたは免疫調節剤である、請求項２９に記載の方法。

【請求項32】

対象においてＰＤ－Ｌ１とＰＤ－１および／またはＣＤ８０の相互作用を遮断する方法であって、式Ｉ：

【化16】

の化合物またはその類似体のいずれかの治療的有効量を前記対象に投与することを含み、
Ｒ^１は、アルキル、アルキルアミン、またはエーテルであり；
Ｒ^２は、ＨまたはＣＨ_３であり；および
Ｒ^３は、ＨまたはＯＨである、
方法。

【請求項33】

前記式Ａ：

【化17】

またはその類似体の治療量を投与することを含む病気を治療する方法であって、
Ｒ^１＝ＨまたはＣＨ_３でありかつＲ^２は、

【化18】

の１種である、
方法。

【請求項34】

前記病気は、癌であり、かつ
前記癌は、膀胱癌、脳癌、乳癌、結腸直腸癌、子宮頸癌、胃腸癌、泌尿生殖器癌、頭頸部癌、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎癌、直腸癌、皮膚癌、血液癌、精巣癌、胆道癌、膀胱癌、神経節癌（神経芽腫）、白血病、リンパ腫、肝臓癌（例えば、肝細胞癌）、肺癌（例えば、大細胞癌、非小細胞癌および扁平細胞癌）、軟組織癌（例えば、血管肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、横紋筋肉腫、粘液腫および悪性線維性組織球種－悪性線維性組織球腫）、胃癌または甲状腺癌の少なくとも１種である、
請求項３３に記載の方法。

【請求項35】

前記対象に１種または複数の追加の薬物を投与することをさらに含む、請求項３３に記載の方法。

【請求項36】

前記１種または複数の追加の薬物は、免疫チェックポイント制御因子である、請求項３５に記載の方法。

【請求項37】

前記１種または複数の追加の薬物は、小分子、抗体、抗体フラグメント、抗体コンジュゲートまたは免疫調節剤である、請求項３５に記載の方法。

【請求項38】

前記対象への化学療法または放射線療法の投与をさらに含む、請求項３３に記載の方法。

【請求項39】

前記病気は、ＰＤ－１発現を調節することにより治療され、および
前記病気は、脳マラリア、トリパノソーマ・クルージ誘導心筋炎、インフルエンザウィルスＡ、結核菌、クラミジア肺感染症、ＣＯＰＤ、急性肺損傷、肝臓感染症（ＨＢＶまたはＨＣＶ）、膵炎、１型糖尿病、慢性感染症、敗血症、自己免疫疾患またはＨＩＶの少なくとも１種である、
請求項３３に記載の方法。

【請求項40】

対象においてＰＤ－Ｌ１とＰＤ－１および／またはＣＤ８０の相互作用を遮断する方法であって、式Ａの前記化合物またはその類似体の治療的有効量を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項41】

患者において化学療法の有害な副作用を防止しながら癌を治療する方法であって、治療量の請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物の投与からなる、方法。

【請求項42】

前記癌は、膀胱癌、脳癌、乳癌、結腸直腸癌、子宮頸癌、胃腸癌、泌尿生殖器癌、頭頸部癌、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎癌、直腸癌、皮膚癌、血液癌、精巣癌、胆道癌、膀胱癌、神経節癌（神経芽腫）、白血病、リンパ腫、肝臓癌（例えば、肝細胞癌）、肺癌（例えば、大細胞癌、非小細胞癌および扁平細胞癌）、軟組織癌（例えば、血管肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、横紋筋肉腫、粘液腫および悪性線維性組織球種－悪性線維性組織球腫）、胃癌または甲状腺癌の少なくとも１種である、請求項４１に記載の方法。

【請求項43】

病気を治療する方法であって、式Ｃ：

【化19】

の構造を有する化合物またはその類似体の治療的有効量を投与することを含み、
Ｒ^３＝

【化20】

であり、
Ｙ＝ＯＣＨ_２ＣＨ_３、ＯＣＨ（ｎ）ＣＨ_３、ＮＨ_２、ＯＨ、ＯＭｅ、Ｍｅ、Ｈ、ＣＨ_２ＯＨ、ＢＨ_２、ＳｅＭｅまたはＳＭｅであり；および
Ｒ^１およびＲ^２は独立に、水素、直鎖または分岐鎖のＣ１－Ｃ２０アルキル、アルケニル、アルキニルであり、これは、置換されるもしくは置換されず、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環式アルキル、またはヘテロ環式アルケニルであり、これは、置換されるもしくは置換されず、フェニル、置換されたフェニル、アリール、置換されたアリール、アミノ、アミド、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、アルキルチオ、セレノール、アルキルセレニル、シリル、シロキシ、ボリル、カルボン酸、スルホリル、－ＳＯ_４Ｈ、アルコキシまたはアシル基である、
方法。

【請求項44】

前記病気は、脳マラリア、トリパノソーマ・クルージ誘導心筋炎、インフルエンザウィルスＡ、結核菌、クラミジア肺感染症、ＣＯＰＤ、急性肺損傷、肝臓感染症（ＨＢＶまたはＨＣＶ）、膵炎、１型糖尿病、慢性感染症、敗血症、自己免疫疾患またはＨＩＶの少なくとも１種である、請求項４３に記載の方法。

【請求項45】

病気を治療するためにＰＤ－１発現を調節する、Ｔ細胞応答を高めるまたは免疫細胞の活性を高める方法であって、前記式Ｃ：

【化21】

の化合物またはその類似体の治療量を投与することを含み、
Ｒ^３＝

【化22】

であり、
Ｙ＝ＯＣＨ_２ＣＨ_３、ＯＣＨ（ｎ）ＣＨ_３、ＮＨ_２、ＯＨ、ＯＭｅ、Ｍｅ、Ｈ、ＣＨ_２ＯＨ、ＢＨ_２、ＳｅＭｅまたはＳＭｅであり；および
Ｒ^１およびＲ^２は独立に、水素、直鎖または分岐鎖のＣ１－Ｃ２０アルキル、アルケニル、アルキニルであり、これは、置換されるもしくは置換されず、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環式アルキル、またはヘテロ環式アルケニルであり、これは、置換されるもしくは置換されず、フェニル、置換されたフェニル、アリール、置換されたアリール、アミノ、アミド、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、アルキルチオ、セレノール、アルキルセレニル、シリル、シロキシ、ボリル、カルボン酸、スルホリル、－ＳＯ_４Ｈ、アルコキシまたはアシル基である、
方法。

【請求項46】

前記病気は、橋本甲状腺炎およびグレーブス病（ＧＤ）、関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）または多発性硬化症（ＭＳ）の少なくとも１種から選択される自己免疫疾患である、請求項４５に記載の方法。

【請求項47】

前記病気は、癌であり、かつ前記癌は、膀胱癌、脳癌、乳癌、結腸直腸癌、子宮頸癌、胃腸癌、泌尿生殖器癌、頭頸部癌、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎癌、直腸癌、皮膚癌、血液癌、精巣癌、胆道癌、膀胱癌、神経節癌、白血病、リンパ腫、肝臓癌、肺癌、軟組織癌、胃癌または甲状腺癌の少なくとも１種である、請求項４５に記載の方法。

【請求項48】

前記式Ｃ：

【化23】

の化合物またはその類似体の有効量を投与することを含むＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１および／またはＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１相互作用を阻害する方法であって、
Ｒ^３＝

【化24】

であり、
Ｙ＝ＯＣＨ_２ＣＨ_３、ＯＣＨ（ｎ）ＣＨ_３、ＮＨ_２、ＯＨ、ＯＭｅ、Ｍｅ、Ｈ、ＣＨ_２ＯＨ、ＢＨ_２、ＳｅＭｅまたはＳＭｅであり；および
Ｒ^１およびＲ^２は独立に、水素、直鎖または分岐鎖のＣ１－Ｃ２０アルキル、アルケニル、アルキニルであり、これは、置換されるもしくは置換されず、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環式アルキル、またはヘテロ環式アルケニルであり、これは、置換されるもしくは置換されず、フェニルり、置換されたフェニル、アリール、置換されたアリール、アミノ、アミド、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、アルキルチオ、セレノール、アルキルセレニル、シリル、シロキシ、ボリル、カルボン酸、スルホリル、－ＳＯ_４Ｈ、アルコキシまたはアシル基である、
方法。

【請求項49】

１種または複数の免疫チェックポイント制御因子の投与をさらに含む、請求項４６に記載の方法。

【請求項50】

追加の治療薬の投与をさらに含み、前記治療薬は、小分子、抗体、抗体フラグメント、抗体コンジュゲートまたは免疫調節剤である、請求項４６に記載の方法。

【請求項51】

対象においてＰＤ－Ｌ１とＰＤ－１および／またはＣＤ８０の相互作用を遮断する方法であって、前記式Ｃ：

【化25】

の化合物、またはその類似体の治療的有効量を前記対象に投与することを含み、
Ｒ^３＝

【化26】

であり、
Ｙ＝ＯＣＨ_２ＣＨ_３、ＯＣＨ（ｎ）ＣＨ_３、ＮＨ_２、ＯＨ、ＯＭｅ、Ｍｅ、Ｈ、ＣＨ_２ＯＨ、ＢＨ_２、ＳｅＭｅまたはＳＭｅであり；および
Ｒ^１およびＲ^２は独立に、水素、直鎖または分岐鎖のＣ１－Ｃ２０アルキル、アルケニル、アルキニルであり、これは、置換されるもしくは置換されず、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環式アルキル、またはヘテロ環式アルケニルであり、これは、置換されるもしくは置換されず、フェニル、置換されたフェニル、アリール、置換されたアリール、アミノ、アミド、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、アルキルチオ、セレノール、アルキルセレニル、シリル、シロキシ、ボリル、カルボン酸、スルホリル、－ＳＯ_４Ｈ、アルコキシまたはアシル基である、
方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願
本出願は、２０２１年９月３日出願の米国特許仮出願第６３／２４０，８４７号に対する優先権を主張する。この仮出願の内容は、参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

発明の分野
本発明は、治療的使用のための小分子、より詳細には、ＢＣＮ０５７、ＢＣＮ０７７およびこれらの類似体の治療適用に関する。

【背景技術】

【0003】

癌は、身体の他の部位を侵襲する、または他の部位に広がる異常な細胞成長を伴う一群の疾患と定義できる。技術の進歩にもかかわらず、癌は、死亡および計り知れない苦痛の大きな原因であり続けている。癌は、米国における死亡の２番目の最も一般的な原因である。

【0004】

癌の患者には多くの場合、限られた治療法の選択肢しかない。治療は、手術、放射線療法、化学療法および標的療法の併用を含み得る。研究の進歩にも関わらず、これらの治療は、最近数十年で比較的変化しないままである。取り組みは、治療がより効果的である、癌の初期診断に注力される場合が多い。しかし、初期診断により得られる生存期間はわずかである。

【0005】

膵臓癌は、胃の後にある腺器官である膵臓の細胞が制御不能状態で増殖し始め、腫瘤を形成する場合に生ずる。これらの癌細胞は、身体の他の部位を侵襲する能力を有する。多くのタイプの膵臓癌が知られている。しかし、最も一般的な膵臓腺癌は、症例の約９０％を占める。最も一般的な形態の膵臓癌の徴候と症状は、黄色皮膚、腹部または胃痛、原因不明の体重減少、淡色便、暗色尿、および食欲不振を含む。通常、症状は、疾患の初期段階では認められない。膵臓癌であることを示唆するのに十分に特異的な症状は通常、疾患が進行期に達するまで発生しない。診断の時点までに、膵臓癌はしばしば、身体の他の部位に広がっている。

【0006】

化学療法は、標準的化学療法計画の一部として１種または複数の抗癌剤（化学療法剤）を使用する癌治療の一種である。従来の化学療法剤は、細胞分裂を妨害することにより、細胞傷害性である。しかし、癌細胞は、これらの薬剤に対する感受性において様々である。大体において、化学療法は、細胞の損傷またはストレスにつながると考えることができ、これは、その後、アポトーシスが開始されると、死に至る可能性がある。化学療法の多くの副作用は、急速に分裂し、従って抗有糸分裂薬物に感受性である正常細胞に対する損傷に遡ることができる。これは、最も一般的な化学療法の副作用：骨髄抑制、粘膜炎、および脱毛症、を生ずる。免疫細胞（特にリンパ球）に対する効果のため、化学療法薬はしばしば、自己に対する免疫系の有害な過活動（いわゆる自己免疫性）に起因する疾患の宿主において使用される。

【0007】

免疫細胞上で発現されるチェックポイント阻害剤受容体（例えば、ＣＴＬＡ４およびＰＤ－１）は、免疫抑制シグナル伝達経路を作動させる。ＣＴＬＡ４は、ＣＤ８０およびＣＤ８６への結合に関し、ＣＤ２８と競合する。ＰＤ－１は、ＰＤ－Ｌ１またはＰＤ－Ｌ２に結合し、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）およびＣＤ２８を介する正のシグナルを妨害する。これらの免疫抑制分子は、適応免疫応答を調節するためのブレーキとして機能する。抑制シグナルは、免疫系のバランスを維持するために様々な方法で使用できる。この適用に基づき、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ経路は、免疫チェックポイントとして際立っている。一般に、ＰＤ－Ｌ１の発現は、Ｔ、Ｂ、および抗原提示細胞上でならびにいくつかの非リンパ組織中で観察される。

【0008】

癌患者における腫瘍特異的抗原、リンパ球、およびＴ細胞応答の特定は、抗腫瘍免疫応答を高めるように設計される免疫療法につながる。生物由来物質または「生物製剤」は、モノクローナル抗体（ＭＡＢ）などの組換え治療タンパク質を含む。生物学的薬物は、身体を刺激して癌細胞を見つけそれらを攻撃できる。いくつかの生物製剤は、癌細胞を直接攻撃し、成長シグナルを妨害する。他の生物製剤は、患者が化学療法後に感染症と闘うのを支援できる。

【0009】

Ｔ細胞は、免疫系の強力な細胞エフェクターであり、同じ抗原により再チャレンジされると応答する記憶を有する。腫瘍免疫療法は、従来の化学療法剤より特異的でかつより毒性が少ないので、それは、再発のリスクのある悪性腫瘍の患者にとって、理想的な補助療法であり得る。化学療法は、活動性疾患を寛解へと誘導するために最初に使用され、続いてメモリーＴ細胞を経由する腫瘍免疫療法が実施される。しかし、生物製剤もまた、限界を有する。免疫療法は、小さい腫瘍負荷量に対して効果的であるように見えるが、それらは、大きな腫瘍塊を制御できない。さらに、進行した疾患を有する患者は、損傷された免疫を有し、これは、免疫療法の有効性を制限する。従って、免疫療法は腫瘍形成の初期段階で使用されるべきであることが提案されてきた。さらに、生物製剤は、他の薬剤に比べ高価であり、かつそれらは、静脈内で投与される必要がある。さらに、それらの比較的大きなサイズは、血液中でのそれらの機能および半減期を制限する。

【0010】

最近の研究は、小分子の使用を含む、癌治療の新しい機会を提供した。特定の小分子は、生物学的微小分子を結合し、エフェクターとして機能し、それにより標的の活性または機能を変える。それらは、種々の生物学的機能または用途を顕在化させ、細胞内シグナル伝達分子として機能する。例えば、小分子制癌剤は、細胞外、細胞表面受容体ならびに、細胞増殖および転移促進のために下流シグナル伝達において重要な役割を果たす抗アポトーシス性タンパク質を含む、細胞内タンパク質を標的とするためにうまく使用されてきた。多くの小分子薬物は、セリン／チロシンキナーゼ、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）、ヒートショックタンパク質（ＨＳＰ）、プロテオソームおよびシグナル伝達経路において重要な他のタンパク質などの重要な癌標的を阻害する。これらの分子の小さなサイズ（＜５００Ｄａ）はまた、それらを細胞膜を通して移動することを可能にする。原理的には、小分子化合物は、標的の細胞内の位置に関係なく、細胞の任意の部分を標的にするように開発され得る。このような薬物は、それらが重要な癌標的を阻害できるので、良好な治療可能性を有する。

【0011】

膵臓癌に対する効果的な治療は、放射線／化学療法に対する抵抗性および不十分な薬物透過性のため困難である。さらに、主に十二指腸および胃腸上皮に対し、治療が引き起こす正常組織毒性は、一般的であり、用量を制限する有害事象である。胃腸毒性はしばしば、治療を受けている患者の全生存期間に影響する重要な因子である、抗癌療法の中断、縮小または早期離脱という結果になる。従って、正常組織毒性を誘発することなく、腫瘍組織を選択的に感受性にする治療薬戦略を開発する差し迫った必要性が存在する。理想的な治療／療法は、癌細胞を標的化し、化学療法の有害な影響を減らすはずである。

【発明の概要】

【0012】

本明細書で開示の化合物ＢＣＮ０５７は以前に、米国特許出願第１３／８１３，９２３号および米国特許出願第１４／８８９，７１９号に記載された。本発明は、新規の分子および類似体ならびに新規の使用の方法を提供する。ＢＣＮ０５７はまた、その構造名により次記のように呼ぶこともできる：（３－［（フラン－２－イルメチル）－アミノ］－２－（７－メトキシ－２－オキソ－１，２－ジヒドロキノリン－３－イル）－６－メチル－イミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－１－イウム）またはＹＥＬ００２。ＢＣＮ０５７およびその類似体は、他の治療法の中でも、炎症性疾患を治療するまたは予防するために、および癌または他の過剰増殖状態を治療するまたは予防するために、有用である。

【化1】

【0013】

出願者らは、小分子ＢＣＮ０５７、ＢＣＮ０７７は、発癌性ＲＡＳ膵臓癌細胞の化学感受性を調節できるが、Ｌｇｒ５陽性腸管幹細胞における化学毒性を緩和すること、それによりバリアー機能を保護することによりこれらの小分子由来のオフターゲット毒性から正常腸上皮を逆に保護する、ということを提案する。さらに、ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７は、ＧＳＫ３βを阻害し、それによりＫＲＡＳ Ｇ１２Ｄ変異体膵臓癌細胞中のｃ－Ｊｕｎに対するアポトーシス促進性リン酸化パターンを誘導し、ＰＴＥＮ発現の回復および結果として生じるアポトーシスをもたらす、ということが示され、これは、発癌性ＲＡＳ表現型についての新規の機構的知見である。最後に、そのＧＳＫ３β阻害と同時に、ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７は、ヒト膵臓癌細胞と共培養されたヒトＴリンパ球上のＰＤ－１発現の小分子阻害剤である。まとめると、ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７は、悪性細胞に対し特異的に合成の致死性を促進でき、従って化学療法および放射線療法と併せて、膵臓および上皮癌治療における治療可能比を改善すると見なされるべきである。

【0014】

一実施形態は、式Ｉ：

【化2】

の化合物またはその類似体であり、
Ｒ^１＝アルキル、アルキルアミン、エーテル、アリールまたはアリールハライドであり、
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３であり、
Ｒ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である。
あるいは、Ｒ^１＝

【化3】

であり、
ｎ＝１、２または３であり；Ｘ＝Ｆ、ＣＦ_３Ｃｌ、ＯＨまたはＣＨ_２ＯＨであり；Ｙ＝Ｏ、ＳまたはＮであり；Ｚ＝ＣＨ_３、ＣＨ_２ＯＨまたはＯＣＨ_３である。
あるいは、Ｒ^１＝

【化4】

であり、ｎ＝１、２または３であり；Ｘ＝Ｆ、ＣＦ_３Ｃｌ、ＯＨまたはＣＨ_２ＯＨであり；Ｙ＝Ｏ、ＳまたはＮであり；Ｚ＝ＣＨ_３、ＣＨ_２ＯＨまたはＯＣＨ_３である。
あるいは、Ｒ^１＝

【化5】

であり、ｎ＝１、２または３であり；Ｘ＝Ｆ、ＣＦ_３Ｃｌ、ＯＨまたはＣＨ_２ＯＨであり；Ｙ＝Ｏ、ＳまたはＮである。
あるいは、Ｒ^１＝

【化6】

であり、ｎ＝１、２または３である。

【0015】

一実施形態は、式Ｉの化合物またはその類似体の治療量を投与することを含む癌を治療する方法である。癌は、例えば、膵臓癌、脳癌、乳癌、結腸直腸癌、子宮頸癌、胃腸癌、泌尿生殖器癌、頭頸部癌、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎癌、直腸癌、皮膚癌、血液癌または精巣癌であり得る。

【0016】

癌はまた、胆道癌、膀胱癌、神経節癌（神経芽腫）、白血病、リンパ腫、肝臓癌（例えば、肝細胞癌）、肺癌（例えば、大細胞癌、非小細胞癌および扁平細胞癌）、軟組織癌（例えば、血管肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、横紋筋肉腫、粘液腫および悪性線維性組織球種－悪性線維性組織球腫）、胃癌または甲状腺癌であり得る。

【0017】

別の実施形態は、式Ｉの化合物またはその類似体の治療量を投与することを含む、病気を治療するためにＰＤ－１発現を調節する方法である。病気は、例えば、癌、脳マラリア、トリパノソーマ・クルージ誘導心筋炎、インフルエンザウィルスＡ、結核、クラミジア肺感染症、ＣＯＰＤ、急性肺損傷、ＨＢＶ＆ＨＣＶ肝臓感染症、膵炎、１型糖尿病、敗血症またはＨＩＶ－１であり得る。

【0018】

別の実施形態は、式Ｉの化合物またはその類似体の有効量を投与することを含むＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１および／またはＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１相互作用を阻害する方法である。いくつかの態様では、方法は、ＰＤ－Ｌ１とＰＤ－１および／またはＣＤ８０の相互作用を遮断する。この方法は、小分子、抗体、抗体フラグメント、抗体コンジュゲートまたは免疫調節剤などの、追加の治療薬の投与を含み得る。いくつかの態様では、方法は、１種または複数の免疫チェックポイント制御因子の投与を含む。

【0019】

追加の実施形態は、式Ｉの化合物またはその類似体を用いて、それを必要としている対象においてウィルス感染症を治療する方法を含む。いくつかの実施形態は、式Ｉの化合物またはその類似体を用いてうつ病を治療する方法を含む。

【0020】

追加の実施形態は、式Ｉの化合物またはその類似体を用いて、それを必要としている対象においてウィルス感染症を治療する方法を含む。いくつかの実施形態は、式Ｉの化合物またはその類似体を用いてうつ病を治療する方法を含む。

【0021】

一実施形態は、式Ａの化合物である。追加の実施形態は、下記式Ａの構造を有する化合物またはその類似体の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象において病気を治療する方法を含む。

【化7】

【化8】

【0022】

追加の実施形態は、治療的有効量の式Ａの化合物またはその類似体で対象における癌を治療する方法を含む。癌は、膵臓癌、脳癌、乳癌、結腸直腸癌、子宮頸癌、胃腸癌、泌尿生殖器癌、頭頸部癌、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎癌、直腸癌、皮膚癌、血液癌または精巣癌であり得る。治療は、化学療法剤または放射線治療薬ならびに、１種または複数の追加の薬物を対象に投与することを含み得る。

【0023】

追加の実施形態は、式Ａの化合物またはその類似体により化学療法剤または放射線治療薬の１種または複数の副作用を有する対象を治療する方法を含む。さらに別の実施形態は、式Ｂの化合物またはその類似体の治療的有効量を投与することにより、上皮細胞への放射線に誘発される損傷を予防するまたは治療する方法である。上皮細胞への放射線に誘発される損傷は、放射線誘発胃腸症候群（ＲＩＧＳ）、放射線誘発粘膜炎、放射線誘発口腔粘膜炎、放射線誘発直腸炎および／または放射線誘発腸炎として特定され得る。

【0024】

追加の実施形態は、式Ａの化合物またはその類似体で線維症を治療する方法を含む。線維症は、肺線維症、特発性肺線維症、急性呼吸窮迫症候群、嚢胞性線維症、非嚢胞性線維症気管支拡張症、肝硬変、肝線維症、心内膜心筋線維症、陳旧性心筋梗塞、心房線維症、縦隔線維症、骨髄線維症、後腹膜線維症、進行性塊状線維症、腎性全身性線維症、クローン病、胃腸線維症、ケロイド状態、強皮症／全身性硬化症、関節線維症（ａｒｔｈｒｏｆｉｂｒｏｓｉｓ）、ペロニー病、デュピュイトラン拘縮、口腔粘膜下線維症、肝線維症、胃腸線維症、透析由来腎線維症および／または癒着性関節包炎であり得る。

【0025】

追加の実施形態は、式Ａの化合物またはその類似体を用いてそれを必要としている対象においてウィルス感染症を治療する方法を含む。いくつかの実施形態は、式Ｂの化合物またはその類似体を用いてうつ病を治療する方法を含む。

【0026】

別の実施形態は、式Ａの化合物またはその類似体の有効量を投与することを含むＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１および／またはＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１相互作用を阻害する方法である。いくつかの態様では、方法は、ＰＤ－Ｌ１とＰＤ－１および／またはＣＤ８０の相互作用を遮断する。この方法は、小分子、抗体、抗体フラグメント、抗体コンジュゲートまたは免疫調節剤などの、追加の治療薬の投与を含み得る。いくつかの態様では、方法は、１種または複数の免疫チェックポイント制御因子の投与を含む。

【0027】

別の実施形態は、式Ｂ：

【化9】

の構造を有する化合物またはその類似体の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象において病気を治療する方法であり、
Ｒ^１は、アルキル、アルキルアミン、またはエーテルであり；
Ｒ^２は、ＨまたはＣＨ_３であり；および
Ｒ^３は、ＨまたはＯＨである。
式Ｂの類似体は、下の表２に詳述される類似体を含み得る。

【0028】

追加の実施形態は、治療的有効量の式Ｂの化合物またはその類似体で対象における癌を治療する方法を含む。癌は、膵臓癌、脳癌、乳癌、結腸直腸癌、子宮頸癌、胃腸癌、泌尿生殖器癌、頭頸部癌、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎癌、直腸癌、皮膚癌、血液癌または精巣癌であり得る。治療は、化学療法剤または放射線治療薬ならびに、１種または複数の追加の薬物を対象に投与することを含み得る。

【0029】

追加の実施形態は、式Ｂの化合物またはその類似体により化学療法剤または放射線治療薬の１種または複数の副作用を有する対象を治療する方法を含む。別の実施形態は、式Ｂの化合物またはその類似体の治療的有効量を投与することにより、上皮細胞への放射線に誘発される損傷を予防または治療する方法である。上皮細胞への放射線に誘発される損傷は、放射線誘発胃腸症候群（ＲＩＧＳ）、放射線誘発粘膜炎、放射線誘発口腔粘膜炎、放射線誘発直腸炎および／または放射線誘発腸炎として特定され得る。

【0030】

追加の実施形態は、式Ｂの化合物またはその類似体で線維症を治療する方法を含む。線維症は、肺線維症、特発性肺線維症、急性呼吸窮迫症候群、嚢胞性線維症、非嚢胞性線維症気管支拡張症、肝硬変、肝線維症、心内膜心筋線維症、陳旧性心筋梗塞、心房線維症、縦隔線維症、骨髄線維症、後腹膜線維症、進行性塊状線維症、腎性全身性線維症、クローン病、胃腸線維症、ケロイド状態、強皮症／全身性硬化症、関節線維症（ａｒｔｈｒｏｆｉｂｒｏｓｉｓ）、ペロニー病、デュピュイトラン拘縮、口腔粘膜下線維症、肝線維症、胃腸線維症、透析由来腎線維症および／または癒着性関節包炎であり得る。

【0031】

追加の実施形態は、式Ｂの化合物またはその類似体を用いてそれを必要としている対象においてウィルス感染症を治療する方法を含む。いくつかの実施形態は、式Ｂの化合物またはその類似体を用いてうつ病を治療する方法を含む。

【0032】

別の実施形態は、下記式Ｃの構造を有する化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象において病気を治療する方法であり、

【化10】

Ｒ^３＝

【化11】

であり、Ｙ＝ＯＣＨ_２ＣＨ_３、ＯＣＨ（ｎ）ＣＨ_３、ＮＨ_２、ＯＨ、ＯＭｅ、Ｍｅ、Ｈ、ＣＨ_２ＯＨ、ＢＨ_２、ＳｅＭｅまたはＳＭｅであり；Ｒ^１およびＲ^２は独立に、水素、直鎖または分岐鎖のＣ１－Ｃ２０アルキル、アルケニル、アルキニルであり、これは置換されるもしくは置換されず、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロ環式アルキル、またはヘテロ環式アルケニルであり、これは置換されるもしくは置換されず、フェニル、置換されたフェニル、アリール、置換されたアリール、アミノ、アミド、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ニトロ、ヒドロキシル、チオール、アルキルチオ、セレノール、アルキルセレニル、シリル、シロキシ、ボリル、カルボン酸、スルホリル、－ＳＯ_４Ｈ、アルコキシまたはアシル基である。

【0033】

一実施形態は、式Ｃの化合物またはその類似体の治療量を投与することを含む癌の治療方法である。癌は、例えば、膵臓癌、脳癌、乳癌、結腸直腸癌、子宮頸癌、胃腸癌、泌尿生殖器癌、頭頸部癌、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎癌、直腸癌、皮膚癌、血液癌または精巣癌であり得る。

【0034】

癌はまた、胆道癌、膀胱癌、神経節癌（神経芽腫）、白血病、リンパ腫、肝臓癌（例えば、肝細胞癌）、肺癌（例えば、大細胞癌、非小細胞癌および扁平細胞癌）、軟組織癌（例えば、血管肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、横紋筋肉腫、粘液腫および悪性線維性組織球種－悪性線維性組織球腫）、胃癌または甲状腺癌であり得る。

【0035】

別の実施形態は、治療量の式Ｃの化合物またはその類似体を投与することを含む、病気を治療するためにＰＤ－１発現を調節する方法である。病気は、例えば、癌、脳マラリア、トリパノソーマ・クルージ誘導心筋炎、インフルエンザウィルスＡ、結核、クラミジア肺感染症、ＣＯＰＤ、急性肺損傷、ＨＢＶ＆ＨＣＶ肝臓感染症、膵炎、１型糖尿病、敗血症またはＨＩＶ－１であり得る。

【0036】

追加の実施形態は、式Ｃの化合物またはその類似体を用いて、それを必要としている対象においてウィルス感染症を治療する方法を含む。いくつかの実施形態は、式Ｃの化合物またはその類似体を用いてうつ病を治療する方法を含む。

【0037】

追加の実施形態は、式Ｃの化合物またはその類似体を用いて、それを必要としている対象においてウィルス感染症を治療する方法を含む。いくつかの実施形態は、式Ｉの化合物またはその類似体を用いてうつ病を治療する方法を含む。

【0038】

別の実施形態は、有効量の式Ｃの化合物またはその類似体を投与することを含むＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１および／またはＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１相互作用を阻害する方法である。いくつかの態様では、方法は、ＰＤ－Ｌ１とＰＤ－１および／またはＣＤ８０の相互作用を遮断する。この方法は、小分子、抗体、抗体フラグメント、抗体コンジュゲートまたは免疫調節剤などの、追加の治療薬の投与を含み得る。いくつかの態様では、方法は、１種または複数の免疫チェックポイント制御因子の投与を含む。

【0039】

別の実施形態では、本開示は、それを必要としている対象において癌を治療する方法を提供し、方法は、ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７の化合物、またはこれらの類似体の治療的有効量を対象に投与するステップを含む。別の実施形態では、本開示は、それを必要としている対象において癌を治療する方法を提供し、方法は、ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７の化合物、またはこれらの類似体の治療的有効量を含む薬物の組み合わせを対象に投与するステップを含む。

【0040】

別の実施形態では、本開示は、対象において化学療法または放射線療法の副作用を治療する方法を提供し、方法は、ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７の化合物、またはこれらの類似体の治療的有効量を対象に投与するステップを含む。別の実施形態では、本開示は、対象において放射線誘発胃腸症候群（ＲＩＧＳ）を治療する方法を提供し、方法は、ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７の化合物、またはこれらの類似体の治療的有効量を対象に投与することを含む。

【0041】

別の実施形態は、対象においてＰＤ－１および／またはＣＤ８０とのＰＤ－Ｌ１の相互作用を遮断する方法であり、方法は、式Ｃの化合物、またはその類似体の治療的有効量を対象に投与することを含む。

【0042】

特定の実施形態では、本発明の化合物は、式ＩまたはＩＩの化合物のプロドラッグであってよく、例えば、親化合物中のヒドロキシルが、エステルまたはカーボネートとして提供され、または親化合物中に存在するカルボン酸が、エステルとして提供される。特定のこのような実施形態では、プロドラッグは、インビボで活性な親化合物へと代謝される（例えば、エステルは、対応するヒドロキシルまたはカルボン酸に加水分解される）。

【0043】

特定の実施形態では、本発明の化合物は、ラセミ化合物であってよい。特定の実施形態では、本発明の化合物は、１種のエナンチオマーが濃縮されてよい。例えば、本発明の化合物は、３０％を超えるｅｅ、４０％を超えるｅｅ、５０％を超えるｅｅ、６０％を超えるｅｅ、７０％を超えるｅｅ、８０％を超えるｅｅ、９０％を超えるｅｅ、あるいは９５％以上のｅｅを有し得る。特定の実施形態では、本発明の化合物は、２つ以上の立体中心を有してもよい。特定の実施形態では、本発明の化合物は、１種または複数のジアステレオマーが濃縮されてよい。例えば、本発明の化合物は、３０％を超えるｄｅ、４０％を超えるｄｅ、５０％を超えるｄｅ、６０％を超えるｄｅ、７０％を超えるｄｅ、８０％を超えるｄｅ、９０％を超えるｄｅ、あるいは９５％以上のｄｅを有し得る。

【0044】

特定の実施形態では、本発明は、上記化合物、その類似体および／または薬学的に許容可能な塩による治療の方法に関する。特定の実施形態では、治療製剤は、主に１種の化合物の鏡像異性体を提供するように濃縮されてよい。

【0045】

特定の実施形態では、治療製剤は、主に１種の化合物のジアステレオマーを提供するように濃縮されてよい。ジアステレオマーが濃縮された混合物は、例えば、少なくとも６０モルパーセント、またはより好ましくは少なくとも７５、９０、９５、あるいは９９モルパーセントの１種のジアステレオマーを含み得る。

【0046】

特定の実施形態では、本発明は、式Ｉ、Ａ、ＢもしくはＣ、または薬学的に許容可能なそれらの塩による治療の方法に関する。特定の実施形態では、治療製剤は、主に１種の化合物の鏡像異性体を提供するように濃縮されてよい。

【0047】

特定の実施形態では、治療製剤は、主に１種の化合物のジアステレオマーを提供するように濃縮されてよい。特定の実施形態では、本発明は、上記のいずれかの化合物、および１種または複数の薬学的に許容可能な賦形剤を含む、ヒト患者で使用するために好適な医薬製剤を提供する。特定の実施形態では、医薬製剤は、本明細書で記載の状態または疾患を治療するまたは予防することにおける使用のためであってよい。特定の実施形態では、医薬製剤は、ヒト患者での使用のために好適であるように、充分低い発熱性物質活性を有する。上記構造のいずれかの化合物は、本明細書で開示の疾患または状態のいずれかの治療のための薬物の製造において使用され得る。

【0048】

本発明の他の様々な目的、特徴、および付随的利点は、それらが添付の図面と併せて考察することによりより良く理解されるようになるので、十分に理解されるであろう。図面では、同様の参照文字は、いくつかの図にわたり同じまたは同様の部分を示す。

【図面の簡単な説明】

【0049】

【図1】膵臓癌細胞の生存に対するＢＣＮ０５７の効果を示すヒストグラムである。

【図2A】１０μＭのＢＣＮ０５７で治療後の０、１５、３０、６０、１２０および２４０分の時点での膵臓癌細胞増殖を示す一群の画像である。

【図2B】系列希釈ＢＣＮ０５７で治療されたＰａｎｃ－１細胞の発光（ＲＬＵ）を示す折れ線グラフである。

【図2C】Ｐａｎｃ－１細胞におけるアポトーシス促進性および抗アポトーシスマーカー：Ｂａｘ、カスパーゼ－３、Ａｋｔ－１およびＢＣｌ－２、のｑＰＣＲ分析の相対的発現を示すヒストグラムである。

【図3A】Ｐａｎｃ－１細胞中の１０μＭのＢＣＮ０５７の添加後のＳ－９でのＧＳＫ３βリン酸化の増加を示すウェスタンブロットである。

【図3B】リン酸化ＧＳＫ３Ｂ／総ＧＳＫ３Ｂタンパク質の比率としての相対的発現を示すヒストグラムである。

【図4A】ＢＣＮ０５７が薬物治療後にＫＲＡＳ変異体Ｐａｎｃ－１癌細胞中でＪＮＫ依存性リン酸化を増大させることを示すウェスタンブロットである。Ｔ－９１／９３でのｃ－Ｊｕｎのリン酸化は、アポトーシスを誘導することが知られている。総ｃ－Ｊｕｎタンパク質レベルは、不変であった。

【図4B】示した時点（２０分、１時間、６時間、１２時間および２４時間）でのビークルまたはＢＣＮ０５７治療（１０ｕＭ）での同じ試料由来のβアクチン染色による２４時間にわたるＰＴＥＮタンパク質発現のウェスタンブロットである。

【図4C】ＰＴＥＮレベルの増大を示す、βアクチンに対するＰＴＥＮの密度計測の比率のヒストグラムである。

【図5A】全ての薬物の７２時間のインキュベーション後の膵臓癌細胞株の生存に対するＢＣＮ０５７および５－ＦＵの効果を示すヒストグラムである。対照（ＮＤ）は、薬物を投与されなかった。試験群は、５ＦＵ（５０μＭ）、０５７（ＢＣＮ０５７：２、５、１０、および２０μＭまたは５ＦＵ＋ＢＣＮ０５７（５０μＭでの５ＦＵと組み合わせて、２、５、１０、および２０μＭでのＢＣＮ０５７）を含む。

【図5B】１０μＭの０５７で治療したＰａｎｃ－１細胞における相対的ＬＧＲ－５およびＢＭＩ－１発現を示すヒストグラムである。

【図5C】ＢＣＮ０５７がＧＩ上皮およびＬＧＲ５幹細胞（緑）を５ＦＵ細胞傷害性から保護することを示す一群の画像である。

【図5D】ＧＩでのＬＧＲ５＋幹細胞中の５－ＦＵ誘導アポトーシスの防止を示す陰窩基底部で１ｍＭ区分中に残っているＬＧＲ５＋細胞の％定量を示すヒストグラムである。

【図6】Ｐａｎｃ－１細胞に対する個別のまたは５ＦＵおよびＢＣＮ０５７と組み合わせたオキサリプラチンおよびイリノテカンの細胞傷害性（％生存率）を示すヒストグラムである。

【図7A】薬物なし（ビークル）で、またはＢＣＮ０５７と共に１、６および１２時間Ｐａｎｃ－１細胞と共培養したヒトＴリンパ球上のＰＤ－１発現を示すウェスタンブロットである。

【図7B】ＧＳＫ３βの阻害は、放射線に曝露されるとリンパ球の生存を誘導することを示すヒストグラム（濃度ｖｓ発光）である。

【図8】薬物なし（ビークル）で、またはＢＣＮ０５７と共に２．５、５、７．５および１０時間ヒトＴリンパ球と共培養したＰａｎｃ－１細胞上のＰＤＬ－１発現（赤矢印）を示すウェスタンブロットである。

【図9】ＢＣＮ０７７の濃度に対する生存率のグラフである。試験を、強力な活性を示すデュークスＢ型腺癌ＢＣＮ０７７から確立されたヒトＫＲＡＳ Ｇ１２Ｄ変異体結腸直腸癌細胞株ＬＳ１７４Ｔ４６を用いて実施した。

【図10A】ＢＣＮ０７６の構造を示す。

【図10B】ＢＣＮ０３６の構造を示す。

【図10C】ＢＣＮ０７７の構造を示す。

【図10D】ＢＣＮ０７８の構造を示す。

【図11】ＢＣＮ０５７、０７６、０７７、０３６および０７８の類似体によるＫＲＡＳ変異体Ｇ１２Ｄ侵襲性膵臓癌細胞株の増殖の阻害を示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0050】

定義
「一実施形態（ｏｎｅ ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔ）／態様」または「ある実施形態（ａｎ ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔ）／態様」への本明細書での参照は、その実施形態／態様に関して記載された特定の特徴、構造、または特性が、本開示の少なくとも１つの実施形態／態様に含まれるということを意味する。本明細書の種々の箇所における「一実施形態／態様では」または「ある実施形態／態様では」という語句の使用は、全てが同じ実施形態／態様を参照することも、他の実施形態／態様の相互に排他的な別のまたは代替の実施形態／態様を参照することも必ずしも意味しない。さらに、種々の特徴が記載され、これらは、いくつかの実施形態／態様により示され得るが、他の実施形態／態様によっては示されない。同様に、種々の要件が記載され、これらは、いくつかの実施形態／態様に対する要件であり得るが、他の実施形態／態様に対してはそうではない。実施形態および態様は、特定の事例では、同じ意味で用いられ得る。

【0051】

本明細書中で使用される用語は一般に、本開示の文脈内の、およびそれぞれの用語が使われる特定の文脈における、技術分野におけるそれらの通常の意味を有する。本開示の記載に使われる特定の用語は、下記で、または本明細書の別の場所で考察されて、本開示の記載に関する開業医への追加の手引きを提供する。同じことが、２つ以上の方法で述べられ得ることが理解されよう。

【0052】

従って、代替の用語および同義語が、本明細書で考察される任意の１つまたは複数の用語に対しても使われてよい。ある用語が本明細書で詳しく述べられているまたは考察されているかどうかには、何ら特別な意味はない。特定の用語に対する同義語が、提供される。１つまたは複数の同義語の記述は、その他の同義語の使用を排除するものではない。本明細書で考察される任意の用語の例を含む、本明細書中のどこかでの例の使用は、例示的な目的のみのためであり、本開示のまたは例示された任意の用語の範囲と意味をさらに限定することを意図するものではない。同様に、本開示は、本明細書で提示された種々の実施形態に限定されない。

【0053】

本開示の範囲をさらに限定する意図なしに、本開示の実施形態による機器、装置、方法およびそれらの関連する結果が、下記に与えられる。見出しまたは小見出しは、読者の便宜のために実施例で使用され得るが、本開示の範囲を限定するものではないことに留意されたい。別に定めのない限り、本明細書で使われる全ての技術および科学用語は、通常、本開示が属する当業者により理解されているものと同じ意味を有する。矛盾がある場合には、定義を含み、本文書が優先される。

【0054】

別段の指示がない限り、本明細書および請求項で使われる特性、項目、量、パラメーター、性質、期間、などを表す全ての数字は、全ての場合において、「約」という語で修飾されているものとして理解されるべきである。本明細書で使用する場合、用語の「約」は、そのように限定された特性、項目、量、パラメーター、性質、期間が、述べられた特性、項目、量、パラメーター、性質、期間の値のプラスまたはマイナス１０％高いまたは低い範囲を包含することを意味する。従って、特に指示がない限り、明細書および添付請求項に記載の数値パラメーターは、変わってもよい近似値である。例えば、質量分析装置は、所与の分析物の質量を決定することにおいて僅かに変動し得るので、イオンの質量またはイオンの質量／電荷比の文脈で用語「約」は、±０．５０原子質量単位を指す。控えめに言っても、また、請求項の範囲に対する均等論の適用を限定しようとするものでもないが、各々の数値表示は少なくとも、報告された有効桁数を考慮に入れて、および通常の丸め技術を適用することによって解釈しなければならない。

【0055】

実施形態または実施形態の態様に関連して、用語「ｍａｙ」または「ｃａｎ」の使用は、「ｍａｙ ｎｏｔ」または「ｃａｎｎｏｔ」の別の意味も有する。従って、本明細書が、実施形態または実施形態の態様が、本発明の主題の一部として含んでもよいまたは含み得ることを開示する場合、消極的な限定または除外条件も同様に明示的に意図され、実施形態または実施形態の態様が本発明の主題の一部として含まれなくてもよい、または含まれ得ないことを意味する。同様に、実施形態または実施形態の態様に関連して、用語「任意に」の使用は、このような実施形態または実施形態の態様が本発明の主題の一部として含まれてもよく、または本発明の主題の一部として含まれなくてもよいことを意味する。このような消極的な限定または除外条件が該当するかどうかは、請求された主題中にその消極的な限定または除外条件が記述されているかどうかに基づくであろう。

【0056】

本開示の広い範囲を記載する数値範囲および値は近似値であるにもかかわらず、具体例な実施例に記載の数値範囲および値は、可能な限り正確に報告される。しかしながら、いずれの数値範囲および値も、それらの各試験測定で認められる標準的なずれに起因して必然的に生じる一定の誤差を本質的に含む。本明細書における値の範囲の記載は、その範囲内に入るそれぞれ別々の値を個別に参照する省略表現法として機能することを意図されるに過ぎない。本明細書で特に指示がない限り、数値範囲のそれぞれの個別値は、あたかもそれが個別に本明細書中に記述されているかのように明細書中に組み込まれる。

【0057】

本開示を記載する文脈において（特に、次の特許請求の範囲の文脈において）使用される用語「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」は、別段の指示がない限り、または文脈と明らかに矛盾することがない限り、単数形および複数形の両方を包含すると解釈されるべきである。さらに、特定した要素に対する順序標識－例えば、「第１の」、「第２の」、「第３の」、など－は、特段の定めが無い限り、要素間を区別するために使用され、必要とされるまたは限られた数のこのような要素を示すものでも、暗示するものでもなく、また、このような要素の特定の位置または順序を示すものでもない。本明細書で記載される全ての方法は、本明細書で別段の指示がない限り、または文脈上明らかに矛盾することがない限り、任意の好適な順序で実施することができる。本明細書に記載されるあらゆる具体例または例示語（例えば、「などの」）の使用は、単に本開示の理解を容易にすることを意図したものであり、別途特許請求される本開示の範囲を限定するものではない。明細書中のどの用語も、本開示の実施に必須のいずれかの請求されない要素を示すものと解釈されるべきではない。

【0058】

特許請求の範囲で使用される場合、出願時、または補正時の追加であるにかかわらず、開放型移行語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」（および含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）、含む（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）および有する（ｈａｖｉｎｇ）などのその等価の開放型移行句）は、全ての明示的に記述された要素、限定、ステップおよび／または特徴を単独でまたは非記述主題と組み合わせて包含し、挙げられる要素、限定および／または特徴は不可欠であるが、他の挙げられない要素、限定および／または特徴が追加されてよく、さらに、特許請求の範囲内の構築物を形成し得る。本明細書で開示される特定の実施形態は、「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」の代わりにまたはそれを補正して、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」、または「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という閉鎖型移行句を使って請求項中でさらに制限され得る。特許請求の範囲で使用される場合、出願時、または補正時の追加であるにかかわらず、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」という閉鎖型移行句は、特許請求の範囲に明示的に記述されないいかなる要素、限定、ステップまたは特徴も除外する。「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という閉鎖型移行句は、特許請求の範囲に明示的に記述される要素、限定、ステップおよび／または特徴および任意ならびに請求される主題の基本的および新規特性に実質的に影響を及ぼさない任意の他の要素、限定、ステップおよび／または特徴を限定する。従って、開放型移行句「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」の意味は、全ての特に記述される要素、限定、ステップおよび／または特徴ならびに任意の自由選択の、指定されない追加のものとして定義される。閉鎖型移行句「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」という閉鎖型移行句の意味は、特許請求の範囲に明示的に記述される要素、限定、ステップおよび／または特徴のみを含むとして定義され、一方、「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という閉鎖型移行句の意味は、特許請求の範囲中に特に記述される要素、限定、ステップおよび／または特徴、および請求される主題の基本的および新規特性に実質的に影響を及ぼさない要素、限定、ステップおよび／または特徴のみを含むとして定義される。従って、開放型移行句「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」（およびその等価の開放型移行句）は、その意味中に、限定的な場合として、閉鎖型移行句「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」または「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」により指定される請求主題を含む。語句「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」を用いて本明細書で記載のまたはそのように請求されるこのような実施形態は、語句「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」および「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」に対し、明示的にまたは本質的に本明細書で明確に記述され、有効にされ、立証される。

【0059】

適用可能な場合、用語「約（ａｂｏｕｔ）」または「通常（ｇｅｎｅｒａｌｌｙ）」は、本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、別段の指示がない限り、±２０％の許容誤差を意味する。また、適用可能な場合、用語「実質的に（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ）」は、本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、別段の指示がない限り、±１０％の許容誤差を意味する。上記用語の全ての使用は、参照範囲が適用できるように数値化できるとは限らないことを理解されたい。

【0060】

用語「活性剤（ａｃｔｉｖｅ ａｇｅｎｔ）」または「有効成分（ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ）」は、生物学的に活性であるか、あるいは、それが投与される対象に対して生物学的または生理学的効果を誘導する、物質、化合物、または分子を指す。換言すれば、「活性剤（ａｃｔｉｖｅ ａｇｅｎｔ）」または「有効成分（ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ）」は、それに対し組成物の効果の全部または一部が原因である、組成物の成分を意味する。活性剤は、主要な活性剤であってよく、または換言すれば、組成物の効果の全部または一部の原因である、組成物の成分であってよい。活性剤は、二次的薬剤であってよく、または換言すれば、組成物の追加の部分および／または他の効果の原因である、組成物の成分であってよい。

【0061】

用語「癌」は、腺様嚢胞癌、副腎癌、アミロイドーシス、肛門癌、毛細血管拡張性運動失調症、非定型モル症候群、異常母斑症候群、基底細胞癌、胆管癌、バート・ホッグ・デューベ症候群、膀胱癌、骨癌、脳腫瘍、乳癌、男性乳癌、カルチノイド腫瘍、子宮頸癌、結腸直腸癌、腺管癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、消化管間質腫瘍（Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｓｔｒｏｍａｌ Ｔｕｍｏｒ）（ＧＩＳＴ）、ＨＥＲ２陽性乳癌、膵島細胞腫瘍、若年性ポリポーシス症候群、腎臓癌、咽喉癌、白血病－急性リンパ芽球性白血病、白血病－急性リンパ球性（ＡＬＬ）、白血病－急性骨髄ＡＭＬ、白血病－成人性、白血病－小児期、白血病ー慢性リンパ球性－ＣＬＬ、白血病－慢性骨髄－ＣＭＬ、肝臓癌、小葉癌、肺癌、肺癌－小細胞、リンパ腫－ホジキン、リンパ腫－非ホジキン、悪性神経膠腫、メラノーマ、髄膜腫、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、上咽頭癌、神経内分泌腫瘍、口腔癌、骨肉腫、卵巣癌、膵臓癌、膵内分泌腫瘍、副甲状腺癌、陰茎癌、腹膜癌、ポイツ・ジェガース症候群、脳下垂体腫瘍、真性多血症、前立腺癌、腎細胞癌、網膜芽細胞腫、唾液腺癌、肉腫、肉腫－カポジ、皮膚癌、小腸癌、胃癌、精巣癌、胸腺腫、甲状腺癌、子宮（内膜）癌、膣癌およびウイルムス腫瘍、の１種または複数を挙げることができる。用語「血液癌」には、白血病、リンパ腫、骨髄腫、骨髄異形成症候群および骨髄増殖性疾患の１種または複数を含んでよい。

【0062】

用語「誘導体」は、その化合物に同じまたは類似のコア構造を有するが、１種または複数の原子または官能基の置換、欠失、および／または付加を含む、少なくとも１つの構造的差異を有する任意の化合物を指し得る。用語「誘導体」は、これが該当する場合であっても、出発物質または中間体としての親化合物から誘導体が合成されることを意味しない。用語「誘導体」は、親化合物のプロドラッグ、または代謝物を含んでよい。誘導体は、親化合物中のカルボキシル基が誘導体化されて、メチルおよびエチルエステル、または他のタイプのエステルもしくはヒドラジドを形成している化合物を含む。誘導体は、親化合物中のヒドロキシル基が誘導体化されて、Ｏ－アシルまたはＯ－アルキル誘導体を形成している化合物を含む。誘導体は、親化合物中の水素結合供与基がＯＨ、ＮＨ、またはＳＨなどの別の水素結合供与基で置換されている化合物を含む。誘導体は、親化合物中の水素結合受容体基を、エステル、ケトン、カーボネート、第三級アミン、イミン、チオン、スルホン、第三級アミドおよび硫化物などの別の水素結合受容体基で置換することを含む。誘導体はまた、親化合物の薬学的に許容される塩型またはその誘導体などの、塩型を含み得る。

【0063】

用語「線維症」は、修復のまたは反応の過程で臓器または組織中の過剰線維状結合組織の形成を伴う状態を指す。これは、反応性の、良性の、または病理学的な状態であり得る。

【0064】

本明細書で使用される場合、「軽減（ｍｉｔｉｇａｔｉｎｇ）」は、同じ時間量の間であるが、治療されない、症状または状態を示す細胞、臓器、組織、または生物に比べて、状態の１種または複数の負の症状を低減することを意味する。

【0065】

いくつかの実施形態では、細胞、臓器、組織、または生物を本発明の化合物と接触させることは、対象に化合物の治療的有効量を投与することを含み得る。本明細書で使用される場合、「治療的有効量」は、負の症状または状態を軽減するのに十分な量である。

【0066】

用語「対象」または「患者」は、治療が望まれる任意の単一の動物、より好ましくは哺乳類（例えば、イヌ、ＣＡＴ、ウマ、ウサギ、動物園の動物、雌ウシ、ブタ、ヒツジ、および非ヒト霊長類などの非ヒト動物を含む）を指す。最も好ましくは、本明細書における患者は、ヒトである。

【0067】

本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容可能な担体」という用語は、薬学的投与に適合する任意のすべての溶媒、分散媒、コーティング、等張剤および吸収遅延剤などを指す。薬学的に活性な物質に対しこのような媒体および薬剤を使用することは、当該分野において周知である。組成物はまた、補助的、追加の、または強化された治療作用を提供する他の活性化合物を含み得る。

【0068】

本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容可能な組成物」は、１種または複数の薬学的に許容可能な担体と共に処方される本明細書で開示の少なくとも１種の化合物を含む組成物を指す。

【0069】

本明細書で使用する場合、「薬学的に許容可能なプロドラッグ」という用語は、健全な医学判断の範囲内で、合理的利益／リスク比率に見合い過剰な毒性、刺激、およびアレルギー反応なしにヒトおよび下等動物の組織との接触下の使用に適し、かつそれらの意図される使用に対し効果的である、本開示の化合物のプロドラッグ、ならびに可能な場合、本開示の化合物の双性イオン型を表す。考察は、Ｈｉｇｕｃｈｉ ｅｔ ａｌ．，“Ｐｒｏｄｒｕｇｓ ａｓ Ｎｏｖｅｌ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，” ＡＣＳ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｓｅｒｉｅｓ，Ｖｏｌ．１４，およびＲｏｃｈｅ，Ｅ．Ｂ．，ｅｄ．Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ，１９８７で提供される。これら文献の両方は、参照により本明細書に組み込まれる。

【0070】

用語「薬学的に許容される塩」は、本組成物中に使用される化合物中に存在し得る酸性または塩基性基の塩を指す。塩基性の性質の本組成物中に含まれる化合物は、種々の無機および有機酸と多種多様の塩を形成できる。このような塩基性化合物の薬学的に許容可能な酸付加塩の調製に使用され得る酸は、非毒性酸付加塩、即ち、薬学的に許容可能なアニオンを含む塩を形成する酸であり、限定されないが、硫酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩（ｍａｌａｔｅ）、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物塩、臭化物塩、ヨウ化物塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩（ｇｌｕｃｕｒｏｎａｔｅ）、サッカリン酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩およびパモ酸塩（即ち、１，１′－メチレン－ビス－（２－ヒドロキシ－３－ナフトエ酸塩））を含む。アミノ部分を含む本組成物に含まれる化合物は、前述の酸に加えて、種々のアミノ酸を含む薬学的に許容可能な塩を形成し得る。本来は酸性である、本組成物中に含まれる化合物は、種々の薬学的に許容可能なカチオンと共に塩基性塩を形成できる。このような塩の例は、アルカリ金属またはアルカリ土類金属塩および、特に、カルシウム、マグネシウム、ナトリウム、リチウム、亜鉛、カリウム、および鉄塩を含む。

【0071】

用語「化学療法」は、１種または複数の抗癌剤（即ち、化学療法剤）使用する癌治療の一種を指す。化学療法は、治癒的目的で与えられてよく（通常、薬物の組み合わせで）、またはそれは、寿命を延長するまたは症状を軽減するために使用できる（即ち、対症療法的化学療法）。従来の化学療法剤は、細胞分裂（有糸分裂）を妨害することにより、細胞傷害性である。化学療法の共通の副作用は、骨髄抑制、粘膜炎（消化管の内側の炎症）および脱毛症を含む。

【0072】

用語「ＫＲＡＳ」は、細胞内シグナル伝達において「オン／オフ」スイッチとして作用する遺伝子を指す。それが通常に機能する場合、それは、細胞増殖を制御する。それは、アロステリックに活性化され、ｃ－ＲａｆおよびＰＩ３－キナーゼなどの他の細胞内シグナル伝達受容体と共に、成長因子の増殖に必要なタンパク質を動員し、活性化する。それが変異されると、負のシグナル伝達は破壊され、細胞を過剰増殖させ、癌へと発達させる。

【0073】

用語「ＰＤ－１」、「プログラム細胞死タンパク質１」または「ＣＤ２７９」は、Ｔ細胞炎症活性を抑制することにより、免疫系を下方調節すること、および自己免疫寛容を促進することにより、人体の細胞に対する免疫系の応答の調節における役割を有する、ＴおよびＢ細胞の表面上のタンパク質を指す。これは、自己免疫疾患を防止するが、それはまた、免疫系が癌細胞を死滅させることを妨害できる。ＰＤ－１は免疫チェックポイントであり、２つの機序により自己免疫に対し保護する。第１に、それは、リンパ節中の抗原特異的Ｔ細胞のアポトーシス（プログラム細胞死）を促進する。第２に、それは、制御性Ｔ細胞（抗炎症、抑制性Ｔ細胞）のアポトーシスを低減する。ＰＤ－１を遮断する薬物クラスである、ＰＤ－１阻害剤は、免疫系を活性化して、腫瘍を攻撃し、特定のタイプの癌を治療するために使用される。隣接する細胞上の、そのリガンド、ＰＤ－Ｌ１またはＰＤ－Ｌ２のいずれかによるＰＤ－１の結合は、ＴＣＲシグナル伝達およびＴＣＲ媒介増殖、転写活性化およびサイトカイン産生を抑制する。これは、自己免疫疾患を防止するが、それはまた、免疫系が癌細胞を死滅させることを妨害できる。ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１相互作用を遮断するように設計された治療抗体は、癌の治療に対する潜在能力を有する。

【0074】

プログラム死リガンド１（ＰＤ－Ｌ１）は、表面抗原分類２７４（ＣＤ２７４）またはＢ７相同体１（Ｂ７－Ｈ１）としても知られ、ヒトではＣＤ２７４遺伝子によりコードされるタンパク質である。ＰＤ－Ｌ１は、活性化されたＴ細胞、Ｂ細胞、および骨髄細胞上で見出されるその受容体である、ＰＤ－１に結合し、活性化または阻害を調節する。

【0075】

「免疫調節薬」は、免疫応答を調節する物質、薬剤、シグナル伝達経路またはそれらの成分を指す。免疫応答を「制御すること（Ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ）」、「変更すること（ｍｏｄｉｆｙｉｎｇ）」または「調節すること（ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ）」は、免疫系の細胞におけるまたはこのような細胞の活性における何らかの変化を指す。このような調節は、種々の細胞型の数における増大または減少、これらの細胞の活性における増大または減少、または免疫系内で起こり得る他の何らかの変化により顕在化され得る、免疫系の刺激または抑制を含む。阻害的なおよび刺激的な免疫調節薬の両方は、特定されてきており、これらのいくつかは、癌、感染性疾患または神経変性微小環境において高められた機能を有し得る。

【0076】

用語「免疫療法」は、免疫応答を誘導する、強化する、抑制するあるいは変更することを含む方法による疾患に罹患している、または疾患の再発に苦しむまたは再発の危険がある対象の治療を指す。対象の「治療（Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「療法（ｔｈｅｒａｐｙ）」は、疾患に関連する発症、進行、発達、症状の重症度または再発、合併症、状態、または生化学的指標を回復する、緩和する、改善する、抑制する、遅延するまたは予防する目的で、対象に対し実施される任意のタイプの介入または処理、または対象への活性薬剤の投与を指す。

【0077】

用語「グリコーゲンシンターゼキナーゼ３β」または「ＧＳＫ３β」は、ヒトにおいてＧＳＫ３Ｂ遺伝子によりコードされる酵素を指す。それは一体的に、細胞増殖およびアポトーシスの経路に関係する。ＧＳＫ－３βは、βカテニンをリン酸化することが示されており、従って、それを分解の標的にする。ＧＳＫ－３βは従って、カノニカルβカテニン／Ｗｎｔ経路の一部であり、これは、分裂し増殖するよう細胞に信号を送る。それはまた、アポトーシスを調節する転写因子をリン酸化することにより、多数のアポトーシス性シグナル伝達経路に関与する。ＧＳＫ－３βはまた、結腸直腸、卵巣、および前立腺癌などの、いくつかのタイプの癌で過剰発現される。ＧＳＫ－３β阻害剤はまた、アルツハイマー病、脳卒中および双極性障害を含む気分障害の治療に役立つ。糖尿病では、ＧＳＫ－３β阻害剤は、インスリン感受性、グリコーゲン合成、および骨格筋のグルコース代謝を高め、脂肪生成過程に作用することにより肥満症を低減する。

【0078】

用語「ＳＦＲＰ」または「分泌フリズルド関連タンパク質」は、可溶性フリズルド関連タンパク質（ｓＦＲＰＳ）の一部であるＷｎｔシグナル伝達経路阻害剤を指す。ｓＦＲＰＳは、Ｗｎｔとの直接相互作用を介してＷｎｔシグナル伝達の調節剤として機能する。５つの哺乳類ｓＦＲＰＳが、特定されている（ｓＦＲＰ－１、ｓＦＲＰ－２、ｓＦＲＰ－３、ｓＦＲＰ－４およびｓＦＲＰ－５）。これらのタンパク質は、シグナル配列、フリズルド様システインリッチドメイン（ＣＲＤ）、および小さい親水性Ｃ末端ドメインを含む約３００個のアミノ酸からなる。１つのグループとして、ｓＦＲＰＳは、種々の胚性および成体組織で発現され、Ｗｎｔシグナル伝達を阻害するための共通の機序を示唆する。しかし、個別のファミリーメンバーは、特異的な空間的および時間的発現パターンを有する。

【0079】

用語「Ｗｎｔシグナル伝達経路」は、細胞表面受容体を介してシグナルを細胞へ通す一群のシグナル伝達経路を指す。カノニカルＷｎｔ経路は、遺伝子転写の調節をもたらす。

【0080】

用語「ＲＩＧＳ」または「放射線誘発胃腸症候群」は、腸陰窩細胞および間質細胞に対する放射線照射の直接の細胞破壊効果の組み合わせから生じ、粘膜のバリアーの喪失および下痢から電解質アンバランス、体重減少および死亡にわたる範囲の症状を伴う。かなりの割合の患者は、放射線照射場中の正常組織に対する損傷に起因する放射線誘発毒性を経験する。放射線療法により誘発される正常組織毒性を低減するまたは防止することを目的とした化学的または生物学的手法の使用は、長年の目標である。

【0081】

用語「放射線療法（ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ）」または「放射性療法（ｒａｄｉｏ ｔｈｅｒａｐｙ）」は、通常悪性細胞を制御するまたは死滅させる癌治療の一部として、電離放射線を用いる療法を意味する。放射線療法は通常、細胞増殖を制御するその能力のため、癌性腫瘍に適用される。電離放射線は、癌組織のＤＮＡに損傷を与えることにより機能し、細胞の死滅をもたらす。主要な副作用は、疲労および皮膚刺激である。急性副作用は、悪心および嘔吐、上皮の表面、口、咽頭への損傷および胃もたれ、腫脹、腸不快感を含み得る。ＲＩＧＳ（放射線誘発胃腸症候群）は、胃腸系に関連する副作用を記述するために使用される一般的用語である。

【0082】

用語「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、（１）疾患を抑制すること；例えば、疾患、病状または障害の病態または症候学を経験しているまたは示している個体の疾患、病状または障害を抑制すること（即ち、病態および／または症候学の更なる進展を阻止すること）；および（２）疾患を緩和すること；例えば、疾患、病状または障害の病態または症候学を経験しているまたは示している個体の疾患、病状または障害を緩和すること（即ち、病態および／または症候学を回復させること）、例えば疾患の重症度を低減すること、の１つまたは複数を指す。処置は、予防的および／または治療的であり得る。用語「予防的または治療的」処置は当該技術分野において承認されており、１種または複数の目的の組成物の宿主への投与を含む。それが、望ましくない状態（例えば、宿主動物の疾患または他の望ましくない状態）の臨床症状前に投与される場合、処置は、予防的（すなわち、これは、宿主を望ましくない状態の発症に対し保護する）であり、一方でそれが、望ましくない状態の徴候後に投与される場合、処置は、治療的（すなわち、既存の望ましくない状態またはその副作用を減弱させる、寛解する、または安定化させることが意図される）である。

【0083】

本明細書で使用される場合、「単位剤形」または「単位」という用語は、ヒトおよび動物の対象のための単位投与量として適した物理的に個別の単位を指し、各単位は、薬学的に許容可能な希釈剤、担体またはビークルと一緒に所望の効果を生じさせるのに十分な量で計算された所定の量の化合物を含有する。本開示の新規単位剤形についての仕様は、特定の用いられる化合物および達成されるべき効果、および対象における各化合物に関連する薬力学に依存する。

【0084】

本開示の化合物は、１種または複数のキラル中心および／または二重結合を含み得、従って、幾何異性体、鏡像異性体またはジアステレオマーなどの立体異性体として存在する。用語「立体異性体」は、本明細書で使われる場合、全ての幾何異性体、鏡像異性体またはジアステレオマーからなる。これらの化合物は、ステレオジェニックな炭素原子の周りの置換基の配置に応じて、略号「Ｒ」または「Ｓ」により命名され得る。本開示は、これら化合物の種々の立体異性体およびそれらの混合物を包含する。立体異性体は、鏡像異性体およびジアステレオマーを含む。鏡像異性体またはジアステレオマーの混合物は、命名法では「（±）」と命名され得るが、当業者は、構造は、キラル中心を暗黙的に表し得ることを理解するであろう。

【0085】

本開示の化合物の個別の立体異性体は、非対称または不斉中心を含む商業的に入手できる出発材料から合成的に、またはラセミ混合物の調合とそれに続く当業者に周知の分離法により、調製できる。これらの分離の方法は、（１）キラル補助剤への鏡像異性体混合物の結合、得られるジアステレオマー混合物の再結晶化またはクロマトグラフィーによる分離および補助剤からの光学的に純粋な生成物の遊離、（２）光学的に活性な分割剤を用いる塩形成、または（３）キラルクロマトグラフィーカラムでの光学的鏡像異性体の混合物の直接分離、により代表される。立体異性体混合物はまた、キラル相ガスクロマトグラフィー、キラル相高速液体クロマトグラフィー、キラル塩錯体としての化合物の結晶化、またはキラル溶媒中での化合物の結晶化などの周知の方法によりそれらの成分立体異性体へ分割できる。立体異性体はまた、よく知られた非対称合成法により、ステレオマー的に純粋な中間体、試薬、および触媒から得ることができる。

【0086】

幾何異性体は、本開示の化合物中にも存在し得る。本開示は、炭素－炭素二重結合の周りの置換基の配置、または炭素環の周りの置換基の配置に起因する種々の幾何異性体およびこれらの混合物を包含する。炭素－炭素二重結合の周りの置換基は、「Ｚ」または「Ｅ」配置と表記され、「Ｚ」および「Ｅ」は、ＩＵＰＡＣ標準に従って使用される。別段の指定がない限り、二重結合を示す構造は、ＥおよびＺ異性体の両方を包含する。

【0087】

炭素－炭素二重結合の周りの置換基は、代わりに、「シス」または「トランス」と呼ばれることもあり、「シス」は、二重結合の同じ側の置換基を表し、「トランス」は、二重結合の反対側の置換基を表す。炭素環の周りの置換基の配置は、「シス」または「トランス」と表記される。用語「シス」は、環の面の同じ側の置換基を表し、「トランス」は、環の面の反対側の置換基を表す。置換基が環の面の同じおよび反対側の両方に位置される化合物の混合物は、「シス／トランス」と呼ばれる。

【0088】

本明細書で開示される化合物は、互変異性体として存在してよく、両方の互変異性型が、１つのみの互変異体構造が示されていても、両方の互変異性体が本開示の範囲に包含されると意図される。

【0089】

用語「アルコキシ」は、式－ＯＲの化学的置換基を表し、Ｒは、別段の指定がない限り、任意に置換されるＣ_１－Ｃ_６アルキル基である。いくつかの実施形態では、アルキル基は置換でき、例えば、アルコキシ基は、本明細書で定義されるように、１、２、３、４、５または６個の置換基を有し得る。

【0090】

用語「アルコキシアルキル」は、本明細書で定義されるように、ヘテロアルキル基を表し、アルコキシ基で置換されるアルキル基と見なされる。例示的な置換されないアルコキシアルキル基は、２～１２個の炭素を含む。いくつかの実施形態では、アルキルおよびアルコキシは、それぞれの基について本明細書で定義されるように、１、２、３、または４個の置換基でさらに置換できる。

【0091】

用語「アルキル」、「アルケニル」および「アルキニル」は、直鎖、分岐鎖および環状一価置換基、ならびに、置換されない場合ＣおよびＨのみを含む、これらの組み合わせを含む。実施例としては、メチル、エチル、イソブチル、シクロヘキシル、シクロペンチルエチル、２－プロペニル、３－ブチニル、などが挙げられる。本明細書で使用される場合、用語「シクロアルキル」は、別段の指定がない限り、３～９個炭素（例えば、Ｃ_３－Ｃ_９シクロアルキル）を有する一価飽和または不飽和の非芳香族環状アルキル基を表し、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、ビシクロ［２．２．１．］ヘプチル、などにより例示される。シクロアルキル基が１個の炭素－炭素二重結合を含む場合、シクロアルキル基は、「シクロアルケニル」基と呼ばれてよい。例示的シクロアルケニル基は、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、などを含む。典型的には、アルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、１～１２個の炭素（例えば、Ｃ_１－Ｃ_１２アルキル）または２～１２個の炭素（例えば、Ｃ_２－Ｃ_１２アルケニルまたはＣ_２－Ｃ_１２アルキニル）を含む。いくつかの実施形態では、アルキル基は、Ｃ_１－Ｃ_８、Ｃ_ｌ－Ｃ_６、Ｃ_１－Ｃ_４、Ｃ_１－Ｃ_３、またはアルキル基である；またはＣ_２－Ｃ_８、Ｃ_２－Ｃ_６、Ｃ_２－Ｃ_４、またはＣ_２－Ｃ_３アルケニルまたはアルキニル基である。さらに、これらの基の１個上の任意の水素原子は、本明細書で記載される置換基で置換できる。

【0092】

ヘテロアルキル、ヘテロアルケニルおよびヘテロアルキニルは、同様に定義され、少なくとも１個の炭素原子を含むが、主鎖残基内に１個または複数のＯ、ＳまたはＮヘテロ原子またはこれらの組み合わせも含み、それによりヘテロアルキル、ヘテロアルケニルまたはヘテロアルキニル中の各ヘテロ原子は、ヘテロ型が対応するアルキル、アルケニルまたはアルキニル基の１個の炭素原子を置換する。いくつかの実施形態では、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニルおよびヘテロアルキニル基は、他の基に基が付着される各末端でＣを有し、存在するヘテロ原子は、末端位置に配置されない。当該技術分野で理解されるように、これらのヘテロ型は、３個より多くの近接ヘテロ原子を含まない。いくつかの実施形態では、ヘテロ原子は、ＯまたはＮである。本明細書で使用される場合、用語「ヘテロシクリル」は、例えば、別段の指定がない限り、窒素、酸素、および硫黄からなる群より独立に選択される１、２、３、または４個のヘテロ原子を含む、３－、４－、５－、６－または７－員環である環状ヘテロアルキルまたはヘテロアルケニルを表す。５－員環は、０～２個の二重結合を有し、６－および７－員環は、０～３個の二重結合を有する。用語「ヘテロシクリル」はまた、１個または複数の炭素および／またはヘテロ原子が単環の２つの非隣接メンバーを架橋する、架橋された多環式構造を有するヘテロ環式化合物、例えば、キヌクリジニル基を表す。用語「ヘテロシクリル」は、上記ヘテロ環のいずれかが１、２または３個の炭素環、例えば、アリール環、シクロヘキサン環、シクロヘキセン環、シクロペンタン（ｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｎｅ）環、シクロペンテン環、または別の単環式ヘテロ環に縮合される二環式、三環式、および四環式基、例えば、インドリル、キノリル、イソキノリル、テトラヒドロキノリル、ベンゾチエニル基、などを含む。

【0093】

本明細書で使用される場合、用語「アルキルスルホニル」は、本明細書で記載されるように、－Ｓ（Ｏ）_２－基を含む、任意に置換されるアルキル基として記載される、ヘテロアルキル基を表す。

【0094】

本明細書で使用される場合、用語「アミノ」は－Ｎ（Ｒ）_２を表し、各Ｒは、独立に、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、Ｎ（Ｒ）_２、ＳＯ_２ＯＲ、ＳＯ_２Ｒ、ＳＯＲ、ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、ＳＯＮ（Ｒ）_２、Ｎ－保護基、アルキル、アルケニル、アルコキシ、アリール、アルカリル、シクロアルキル、アルクシクロアルキル（ａｌｋｃｙｃｌｏａｌｋｙｌ）、ヘテロシクリル（例えば、ヘテロアリール）、アルクヘテロシクリル（ａｌｋｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｙｌ）（例えば、アルクヘテロアリール）であり、または２個のＲが、組み合わさって、ヘテロシクリルまたはＮ－保護基を形成し、各Ｒ^Ｎ２は、独立に、Ｈ、アルキル、またはアリールである。好ましい実施形態では、アミノは、－ＮＨ_２、または－ＮＨＲであり、Ｒは、独立に、ＯＨ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＮＲ_２、ＳＯ_２ＯＲ、ＳＯ_２Ｒ、ＳＯＲ、ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、ＳＯＮ（Ｒ）_２、アルキル、またはアリールであり、各Ｒは、Ｈ、アルキル、またはアリールであり得る。本明細書で使用される場合、用語「アミノアルキル」は、本明細書で定義されるヘテロアルキル基を表し、本明細書で定義されるように、アミノ基で置換されるアルキル基と記述される。アルキルおよびアミノはそれぞれ、それぞれの基について本明細書で定義されるように、１、２、３、または４個の置換基でさらに置換できる。例えば、アルキル部分は、オキソ（＝Ｏ）置換基を含み得る。

【0095】

「芳香族」部分または「アリール」部分は、環系全体の電子分布の観点で芳香族性の特徴を有する任意の単環または縮合環二環系を指し、フェニルまたはナフチルなどの単環または縮合二環部分を含む；「ヘテロ芳香族」または「ヘテロアリール」はまた、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１個または複数のヘテロ原子を含むこのような単環または縮合二環系を指す。ヘテロ原子の含有は、６－員環ならびに芳香族とみなされる５－員環の含有を可能にする。従って、典型的芳香族／ヘテロ芳香族系は、ピリジル、ピリミジニル、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、イソキノリル、キノリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾフラニル、チエニル、フリル、ピロリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、イミダゾリルを含む。互変異性体が理論的に可能であるので、フタルイミドもまた、芳香族と見なされる。典型的には、環系は、５～１２環員原子または６～１０環員原子を含む。いくつかの実施形態では、芳香族またはヘテロ芳香族部分は、１～２個の窒素原子を任意に含んでよい６－員芳香環系である。より詳細には、部分は、任意に置換されてよいフェニル、ピリジル、インドリル、ピリミジニル、ピリダジニル、ベンゾチアゾリルまたはベンゾイミダゾリル、ピラゾリル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、ベンゾチアゾリル、インドリルである。さらに詳細には、このような部分は、フェニル、ピリジル、またはピリミジニルであり、さらにより詳細には、それはフェニルである。「Ｏ－アリール」または「Ｏ－ヘテロアリール」は、酸素原子を介して別の残基と結合される芳香族またはヘテロ芳香族系を指す。Ｏ－アリールの典型例は、フェノキシである。同様に、「アリールアルキル」は、飽和または不飽和の、典型的には、Ｃ_１－Ｃ_２、Ｃ_１－Ｃ_６、またはより詳細には飽和の場合Ｃ_１－Ｃ_４またはＣ_１－Ｃ_３あるいは不飽和の場合Ｃ_２－Ｃ_８、Ｃ_２－Ｃ_６、Ｃ_２－Ｃ_４、またはＣ_２－Ｃ_３の炭素鎖を介して別の残基に結合される、芳香族およびそれらのヘテロ型を含むヘテロ芳香族系を指す。より明確にするために述べると、従って、アリールアルキルは、上でまた定義されるアルキル、ヘテロアルキル、アルケニル、ヘテロアルケニル、アルキニルまたはヘテロアルキニル部分に結合された上記で定義されるアリールまたはヘテロアリール基を含む。典型的なアリールアルキルは、アリール（Ｃ_６－Ｃ_１２）アルキル（Ｃ_１－Ｃ_８）、アリール（Ｃ_６－Ｃ_１２）アルケニル（Ｃ_２－Ｃ_８）、またはアリール（Ｃ_６－Ｃ_１２）アルキニル（Ｃ_２－Ｃ_８）、さらにそれらのヘテロ型であろう。典型例は、一般にベンジルと呼ばれる、フェニルメチルである。

【0096】

ハロは、任意のハロゲン原子、特にＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり得、さらに詳細にはフルオロまたはクロロである。

【0097】

本明細書で使用される場合、用語「ハロアルキル」は、ハロゲン基（即ち、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩ）で置換された、本明細書で定義されるアルキル基を表す。ハロアルキルは、１個、２個、３個のハロゲン、または２個またはそれを超える炭素のアルキル基の場合、４個のハロゲンで置換され得る。ハロアルキル基は、ペルフルオロアルキルを含む。いくつかの実施形態では、ハロアルキル基は、アルキル基について本明細書で記載されるように、１、２、３、または４個の置換基でさらに置換できる。

【0098】

本明細書で使われる場合、用語「ヒドロキシル」は、－ＯＨ基を表す。

【0099】

本明細書で使用される場合、用語「ヒドロキシアルキル」は、わずか１個のヒドロキシ基がアルキル基の１個の炭素原子に付着され得ることを条件として、１～３個のヒドロキシ基で置換された、本明細書で定義されるアルキル基を表し、ヒドロキシメチル、ジヒドロキシプロピル、などにより例示される。

【0100】

一般に、置換基（例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、またはアリール（上記で定義のヘテロ型を含む）は其れ自体、追加の置換基により任意に置換されてよい。これらの置換基の性質は、上記の基本構造上の置換に関して詳述されるものに類似である。従って、置換基の実施形態がアルキルである場合、このアルキルは、これが化学的に合理的であり、およびこれがアルキルのサイズ限界其れ自体を損なわない場合、置換基として列挙された残りの置換基で任意に置換されてよく；例えば、アルキルによるまたはアルケニルによるアルキル置換は、これらの実施形態について炭素原子の上限を単に拡張し、組み込まれない。例えば、基が置換される場合、その基は、１、２、３、４、５、または６個の置換基で置換されてよい。任意の置換基は、限定されないが、Ｃ_１－Ｃ_６アルキルまたはヘテロアリール、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニルまたはヘテロアルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニルまたはヘテロアルキニル、ハロゲン；アリール、ヘテロアリール、アジド（－Ｎ_３）、ニトロ（－ＮＯ_２）、シアノ（－ＣＮ）、アシルオキシ（－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ’）、アシル（－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’）、アルコキシ（－ＯＲ’）、アミド（－ＮＲ’Ｃ（＝Ｏ）Ｒ”または－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’）、アミノ（－ＮＲ’Ｒ’’）、カルボン酸（－ＣＯ_２Ｈ）、カルボン酸エステル（－ＣＯ_２Ｒ’）、カルバモイル（－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ’Ｒ”または－ＮＲＣ（＝Ｏ）ＯＲ’）、ヒドロキシ（－ＯＨ）、イソシアノ（－ＮＣ）、スルホネート（－Ｓ（＝ＯＨＯＲ）、スルホンアミド（－Ｓ（＝ＯＨＮＲＲ’または－ＮＲＳ（＝Ｏ）_２Ｒ’）、またはスルホニル（－Ｓ（＝Ｏ）_２Ｒ）を含み、各ＲまたはＲ’は、フロム Ｈ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキルまたはヘテロアリール、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニルまたはヘテロアルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニルまたはヘテロアルキニル、アリール、または ヘテロアリールから独立に選択される。置換基は、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、または９個の置換基を有し得る。

【0101】

典型的な任意の置換基は、独立にハロ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＣＦ_３、ＯＣＦ_３、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＲ^Ｙ _２、ＯＲ、ＳＲ、ＳＯＲ、ＳＯ_２Ｒ、ＮＲ_２、ＮＲ（ＣＯ）Ｒ、ＮＲＣ（Ｏ）ＯＲ、ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ_２、ＮＲＳＯ_２ＮＲ_２、またはＮＲＳＯ_２Ｒを含み、各Ｒは独立に、Ｈまたは、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロアリール、およびアリール（全て、上記で定義の通り）から選択される任意に置換されてよい基であり；または置換基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、Ｏ－アリール、Ｏ－ヘテロアリールおよびアリールアルキルから選択される任意に置換されてよい基であり得る。

【0102】

本明細書で使われる他の技術的用語は、それらが種々の技術的辞書により例示されるように使用される当該技術分野における通常の意味を有する。これらの非限定例で考察される特定の値および配置は、変わってもよく、それらは、単に少なくとも１つの実施形態を説明するために言及され、それらの範囲を限定する意図はない。

【0103】

発明の詳細な説明
前述の一般的説明と後述の詳細な説明との両方は、例示的かつ説明的な記述であり、請求される本願の技術のさらなる説明を提供すると意図されることを理解されたい。
本願の技術の追加の特徴と利点は、以下の記述で示され、一部にはその記述から明らかとなる、または本願の技術を実施することにより知り得るであろう。本願の技術の利点は、明細書およびこれに関する請求項において特に指摘される構造により実現および達成されるであろう。

【0104】

ＢＣＮ０５７および類似体
ＹＥＬ００２としても知られるＢＣＮ０５７は、下記の構造により表される：

【化12】

本発明がＢＣＮ０５７の化合物、その類似体および塩を包含することは理解されよう。一実施形態では、本発明は、遊離塩基の形態のＢＣＮ０５７の化合物に関する。別の実施形態では、本発明は、ＢＣＮ０５７の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0105】

それらの医薬における利用可能性のために、ＢＣＮ０５７の化合物の塩は、薬学的に許容可能な塩として好ましい可能性がある。好適な薬学的に許容可能な塩は、酸付加塩を含み得る。薬学的に許容可能な塩は、必要に応じて所望の酸または塩基を用いることにより容易に調製できる。得られた塩は、溶液から沈殿され、濾過により収集されるか、溶媒の蒸発により回収できる。化合物は、立体異性体、互変異性体、薬学的に許容可能な塩、またはその水和物として存在できる。ＢＣＮ０５７のいくつかの類似体を以下に示す。

【0106】

実施形態は、式Ｂ：

【化13】

の構造を有する化合物の治療的有効量を投与することを含む治療の方法を含み、
Ｒ^１は、アルキル、アルキルアミン、またはエーテルであり；
Ｒ^２は、ＨまたはＣＨ_３であり；および
Ｒ^３は、ＨまたはＯＨである。

【0107】

いくつかの実施形態では、化合物は、式ＩＩ～ＸＩＸから選択される類似体であり、下表２に示されるような化合物Ｈ、化合物Ｋ、化合物ＢＮＢ－１、化合物ＢＮＢ－２、化合物ＢＮＢ－３、化合物ＢＮＢ－４および化合物ＢＮＢ－５を含む。

【0108】

一実施形態は、下記で詳述される、式Ｉの化合物またはその類似体である。

【化14】

【0109】

ＢＣＮ０５７は、本明細書で開示される化合物および類似体と共に、有機合成の当該技術分野で確立された方法に従って調製できる。化合物を合成する一般的な方法は、例えば、Ｓｔｕａｒｔ Ｗａｒｒｅｎ ａｎｄ Ｐａｕｌ Ｗｙａｔｔ，Ｗｏｒｋｂｏｏｋ ｆｏｒ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ｔｈｅ Ｄｉｓｃｏｎｎｅｃｔｉｏｎ Ａｐｐｒｏａｃｈ，ｓｅｃｏｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，２０１０、で見つけることができる。化合物を製造する例示的な方法は、米国特許出願第１３／８１３，９２３号および米国特許出願第１４／８８９，７１９号で提供される。これらの特許出願は参照により本明細書に組み込まれる。化合物はまた、その化合物の薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物、その溶媒和物およびその多形性の結晶も含む。化合物は、医薬組成物として投与できる。

【0110】

有用性および投与
本明細書で記載のＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７ならびに類似体は、本発明の方法での使用に有用であり、理論に束縛されるものではないが、一部にはＷｎｔ－βカテニンシグナル伝達を調節するそれらの能力によりそれらの望ましい効果を発揮すると考えられる。Ｗｎｔ経路は、胚中の組織発生および成体での組織維持に関与する。それは、細胞成長、移動および細胞生存を制御する一連の特異的遺伝子を制御する。これらの遺伝子の長期の活性化およびＷｎｔ経路の異常な活性化は、制御されない細胞成長および生存につながり、結果として、結腸、肝臓および卵巣を含む一連の組織中で癌形成を促進できる。

【0111】

Ｗｎｔシグナル伝達経路は、細胞表面受容体を介して細胞中へシグナルを渡すタンパク質により開始される、一群のシグナル伝達経路である。Ｗｎｔ経路の異常活性化は、ヒト癌、特に、胃腸（ＧＩ）管の癌と関連付けられている。癌細胞株における異常なＷｎｔ経路活性の阻害は、それらの増殖を遮断でき、新規治療薬の可能性を提供する。

【0112】

Ｗｎｔリガンドは、上皮陰窩細胞上に存在するＬＲＰ５／６およびフリズルド共受容体に結合し、β－カテニン安定化および核移行をもたらし、そこでそれは、核転写因子ＴＣＦ４に結合して、幹細胞維持、増殖および分化を支援する遺伝子発現プログラムを促進する。Ｗｎｔ／β－カテニンシグナル伝達の活性化はまた、傷害後の陰窩再生にとって重要である。いくつかの研究は、ＩＳＣ成長因子およびＬＧＲ５受容体アゴニストであるＲｅｓｐｏｎｄｉｎ １（ＲＳＰＯ１）が、Ｗｎｔ／β－カテニン経路を活性化して、化学療法－放射線誘発傷害後の腸を修復および再生することを実証した。Ｗｎｔ／β－カテニン経路の負の制御因子であるＤＫＫ１は、ＲＳＰＯ１に誘導される腸再生を損なう。

【0113】

Ｗｎｔシグナルの不在下では、転写活性化因子β－カテニンは、細胞中で活発に分解される。
リン酸化β－カテニンはその後、認識され、ユビチキン化され、そのプロテアソーム分解に至る。遊離β－カテニンのレベルはその結果、低いままであり、これは、ＤＮＡ結合Ｔ細胞因子／リンパ因子エンハンサー因子（Ｔｃｆ／Ｌｅｆ）タンパク質が転写補助抑制因子と相互作用することを可能にして核中の標的遺伝子発現を阻止する。

【0114】

癌を治療することに加えて、Ｗｎｔ／β－カテニンシグナル伝達を制御する治療薬はまた、線維症、炎症状態、骨成長、創傷治癒、骨粗鬆症、脱毛症（即ち、抜け毛）、うつ病およびウィルス感染症を含む、他の病気を治療することにおける潜在能力も有する。従って、Ｗｎｔ／β－カテニンシグナル伝達を抑制および／または調節できる化合物および方法に対するニーズが存在する。

【0115】

ＢＣＮ０５７および類似体－癌の治療および療法
いくつかの研究は、Ｗｎｔ経路が、遺伝性家族性大腸腺腫症および自然発生的形態の結腸癌の両方で持続的に活性化されていることを実証した。これらの細胞中のＷｎｔ経路の長期活性化は、良性腺腫（ポリープとも呼ばれる）へのそれらの増殖を促進し、これらはしばしば、侵襲的結腸癌腫に進行する。散発性結腸癌の約９０％は、通常ＡＰＣ中の変異の結果として、異常なＷｎｔシグナル伝達活性を示す。

【0116】

ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７は、癌を治療する、特に膵臓および胃腸（ＧＩ）癌を治療することにおいて効果的である、抗悪性腫瘍小分子である。それは、二重作用により機能する。それは、癌細胞でアポトーシスを誘導する。第２に、それは、上皮細胞の増殖および生存を促進できる。ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７は特に、膵臓および胃腸（ＧＩ）癌に対し効果的である。ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７は、「ＫＲＡＳ」癌に対し抗悪性腫瘍効果を示した。

【0117】

放射線／化学療法との併用使用
ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７は、癌を治療する、特に膵臓および胃腸（ＧＩ）癌を治療することにおいて効果的である。一態様では、本明細書で開示されるのは、それを必要としている対象における放射線誘発性胃腸症候群（ＲＩＧＳ）を治療する方法であり、方法は、ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７の化合物、またはこれらの類似体の治療的有効量を対象に投与するステップを含む。類似体は、式ＩＩ～ＸＩＸの化合物の１種または複数であり得る。ＢＣＮ０５７（およびＢＣＮ０７７）は、ＲＩＧＳを軽減し、腹部放射線療法の治療可能比を改善する。さらに、ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７は、口腔粘膜炎、例えば、咽頭、胃および腸のＧＩ粘膜炎、腸炎および直腸炎を含む、放射線誘発粘膜炎を軽減する。さらに、それは、放射線および化学療法由来の上皮組織に対する損傷を予防および治療できる。化合物はまた、放射線療法に付随するこれらの放射線症候群を治療するまたは予防するために有用である。

【0118】

併用療法
併用療法は、異なる機序で働く薬物により特に効果的であり得、それにより耐性癌細胞が発生する可能性を減らす。異なる効果を有する薬物を組み合わせると、各薬物は、耐えられない副作用なしに、その最適投与量で使用できる。ＢＣＮ０５７（およびＢＣＮ０７７）および第２の薬物は、治療効果のために組み合わせることができる。第２の薬物は、異なる機序を有し得る。あるいは、それは、治療効果のために、ＢＣＮ０５７と同じ機序を使用し得る。組み合わせは、相乗的効果を介して作用し得る。併用療法はまた、追加の（例えば、第３、第４、第５の、などの）薬物を含み得る。ＢＣＮ５１２は、同じ方式で、併用療法において使用できる。

【0119】

ウィルス感染症の治療
追加の実施形態は、ウィルス感染症の治療のためのＢＣＮ０５７、ＢＣＮ０７７およびこれらの類似体の使用を含む。ウィルス性疾患感染は、身体が病原性ウィルスにより侵入され、感染性ウィルス粒子が感受性細胞に付着し、侵入する場合に起こる。宿主免疫応答は、疾患および過剰炎症を媒介できる。ウィルス感染症に応答した自然および適応免疫系の刺激は、感染された細胞を破壊し、これは、宿主に対する重篤な病理学的結果（即ち、ウィルス誘導免疫病理学）をもたらし得る。特に、免疫病理は、抗体、インターフェロンおよび炎症促進性サイトカインの過剰な放出、補体系の活性化、または細胞傷害性Ｔ細胞の運動亢進に起因する。インターフェロンおよび他のサイトカインの分泌は、細胞損傷、発熱およびインフルエンザ様症状を誘発し得る。２００５年のトリＨ５Ｎ１インフルエンザにおけるような、特定のウィルス感染症の重症の場合、宿主免疫応答の異常な誘導は、サイトカインストームとして知られるサイトカインの激発的放出（ｆｌａｒｉｎｇ ｒｅｌｅａｓｅ）を誘発し得る。

【0120】

Ｗｎｔシグナル伝達は、ウィルスに対する自然免疫応答にとって重要である。病原性ウィルスは、重要な遺伝子のβ－カテニン下流の発現を抑制して、免疫系の第１の防御線を回避する。β－カテニンは、ＩＦＮα／βの発現およびそれに続くインターフェロン誘導遺伝子の転写活性化に不可欠である。ＩＦＮβは、抗ウィルス作用遺伝子の自己発現およびパラクリン発現を誘導する。従って、ＢＣＮ０５７、ＢＣＮ０７７および類似体は、ウィルス誘発免疫病理学などの病理学的結果を防止する。

【0121】

うつ病の治療
追加の実施形態は、うつ病の治療のためのＢＣＮ０５７、ＢＣＮ０７７および類似体の使用を含む。Ｗｎｔシグナル伝達はまた、うつ病を治療するために重要である。１９５０年代から、炭酸リチウムおよび他の塩が、うつ病を治療するために同様に使用されてきた。リチウムは、ｗｎｔ下流シグナル伝達経路中のＧＳＫ３Ｂを阻害すること、およびβ－カテニン下流の遺伝子を転写することにより機能する。

【0122】

最近の研究は、改変されたＷｎｔシグナル伝達が気分障害の病態生理学に関与できることを示した。β－カテニンレベルは、海馬ＣＡ３およびＣＡ４領域中で低減され、Ｗｎｔレベルは、死後の統合失調症脳の海馬ＣＡ４領域で増大される。リチウムは、カノニカルＷｎｔ経路の成分であるシンターゼキナーゼ３β（ＧＳＫ３β）を阻害するので、この経路は、双極性障害の治療における特異的標的として提案されている。従って、ＢＣＮ０５７、ＢＣＮ０７７および類似体は、うつ病および気分障害を治療するために使用できる。

【0123】

ＰＤ－１調節およびＰＤ－１活性に関連する病気の治療
ＰＤ－１は、ＰＤ－Ｌ１およびＰＤ－Ｌ２の受容体である。ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌシグナル伝達経路は、周辺免疫寛容において中心的な役割を果たし、それは、生理的条件下で不適切な免疫応答を防止する。ＰＤ－１は、癌および慢性感染症における免疫系応答を減らすと示される免疫チェックポイント阻害剤である。しかし、感染症または癌では、免疫抑制につながるこの経路の別の役割は、重大な問題を引き起こし得る。

【0124】

いくつかの研究は、ＰＤ－１が、癌、自己免疫疾患、慢性感染症および敗血症を含む種々の病気に関与していることを示した。このような研究は、免疫寛容におけるＰＤ－１の二重の役割を強調し、ＰＤ－１の減少は、自己免疫疾患を引き起こす。ＰＤ－１＋Ｔ細胞の枯渇は、自己免疫疾患における有益な効果をもたらし、炎症および疾患進行を遅らせる。ＰＤ－１の減少は、マウスのＰＤ－１遮断またはノックアウトの実験で記載されるように、自己免疫疾患に罹りやすくさせる。ＰＤ－１はまた、多発性硬化症（ＭＳ）における免疫療法の標的でもあり得る。

【0125】

癌におけるＰＤ－１の役割は、広範に研究されてきた。腫瘍中または浸潤性免疫細胞中のいずれかでのＰＤ－Ｌ１および／またはＰＤ－Ｌ２の発現は、多数の腫瘍で検証されており、予後形質および治療標的としてのＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１軸の役割を示している。自己免疫疾患は、生物の自分自身の細胞および組織に対する異常な免疫応答として定義される。自己免疫疾患の発生率は世界中で増大しており、ＰＤ－１およびＰＤ－Ｌは、中枢性および末梢性の両方の免疫寛容の調節に関与することが示された。特に、胸腺細胞発生の間に、ＰＤ－１は、ポジティブ選択の間のシグナル伝達閾値を調節することにより重要な役割を果たす。従って、ＣＤ４＋ＣＤ８＋胸腺細胞の集団は、ＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１の不在下で増大する。さらに、ＰＤ－１経路は、自己反応性ＴおよびＢ細胞中で負の制御因子として働いて免疫寛容を維持する。

【0126】

本明細書で記載のＢＣＮ０５７、ＢＣＮ０７７および類似体は、本発明の方法において有用であり、理論に束縛されるものではないが、一部にはＰＤ－１活性を調節するそれらの能力によりそれらの効果を発揮すると考えられる。特に、出願者らは、ＰＤ－１活性を調節するための治療的なＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０５７の類似体の使用を提案する。従って、ＢＣＮ０５７は、ＰＤ－１が関与する特定の病気を治療できる。機序は、ＧＳＫ３β阻害を伴う。

【0127】

特に、出願者らは、ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７が、ＧＳＫ３βを阻害し、それによりＫＲＡＳ Ｇ１２Ｄ変異体膵臓癌細胞中のｃ－Ｊｕｎ上のアポトーシス促進性リン酸化パターンを誘導し、ＰＴＥＮ発現の回復および結果としてのアポトーシスをもたらすことを提案する。そのＧＳＫ３β阻害と同時に、ＢＣＮ０５７（およびＢＣＮ０７７）は、ヒト膵臓癌細胞と共培養されたヒトＴリンパ球上のＰＤ－１発現の小分子阻害剤である。ＢＣＮ０５７およびＢＣＮ０７７は、悪性細胞に対し特異的に合成致死性を促進でき、従って化学療法および放射線療法と併せて、膵臓および上皮癌治療における治療可能比を改善すると見なされるべきである。

【0128】

慢性感染症は、持続的な高レベルの抗原露出により特徴づけられ、Ｔ細胞が次第にエフェクター機能を失い癌の状態に類似の疲弊に進行することを引き起こす。癌の治療におけるその成功を考慮すると、抗ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１療法は、重度慢性感染症の治療における可能性を有する。さらに、最近の研究は、ＰＤ－１が、Ｔ細胞疲弊の発生におけるいくつかの代謝変化を調節することを示した。

【0129】

集中治療室での高い死亡率に関連する敗血症は、最初の炎症促進性の時間後の重度の免疫抑制を特徴とする。死亡した敗血症患者の死後検査は、宿主免疫を損なう重要な免疫学的な欠陥を強調する。敗血症は、癌のものと類似の免疫抑制機序を有する。癌患者での宿主免疫の改善および生存の増大におけるＣＴＬＡ－４およびＰＤ－１特異的抗体の効力を考慮すると、これらの薬剤は、敗血症に対する新規医薬の開発への有望な道を開くことが予測される。

【0130】

実施例
以下の非限定的実施例は、現時点で考えられる代表的実施形態のより完全な理解を容易にするために、例示の目的のみで提供される。これらの実施例は、本明細書で記載の、化合物、医薬組成物、方法および使用に関するものを含む本明細書で記載の実施形態のいずれかを限定するものと解釈されるべきではない。

【0131】

材料および方法
ヒト末梢血汎Ｔ細胞を、Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ，ＢＣ，Ｃａｎａｄａ）から購入し、Ｐａｎｃ－１細胞を、Ｋａｎｓａｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｅｎｔｅｒから得た。５－Ｆｕ、イリノテカン、およびオキサリプラチン（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）を、Ｓｉｇｍａ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，ＵＳＡ）から購入した。ＩｍｍｕｎｏＣｕｌｔ－ＸＦ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｅｘｐ Ｍｅｄｉｕｍ、ＩｍｍｕｎｏＣｕｌｔ ＨｕＣＤ３／ＣＤ２８／ＣＤ２ ＴＣｅｌｌＡｃｔ、Ｈｕ Ｒｅｃｏｍ ＩＬ－２（ＣＨＯ Ｅｘｐｒ．）を、Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ，ＢＣ，Ｃａｎａｄａ）から購入した。ＡＴＰＬｉｔｅ Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍおよび９６－ウェルの白色の、不透明無菌組織培養液処理マイクロプレートを、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ（Ｗａｌｔｈａｍ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ，ＵＳＡ）から購入した。ＲｅａｌＴｉｍｅ Ｇｌｏ Ａｎｎｘｉｎ Ｖ Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｎｄ Ａｎｎｅｘｉｎ Ａｓｓａｙを、Ｐｒｏｍｅｇａ（Ｓａｎ Ｌｕｉｓ Ｏｂｉｓｐｏ，ＣＡ，ＵＳＡ）から購入した。Ｐｈｏｓｐｈｏ－ＧＳＫ－３β（Ｓｅｒ９）、ＰＤ－Ｌ１（Ｅ１Ｌ３Ｎ）、ＰＤ－１（Ｄ４Ｗ２Ｊ）、β－アクチン、抗ウサギＩｇＧ、ＨＲＰ連結抗体、Ｐｈｏｓｐｈｏ－Ａｋｔ（Ｔｈｒ３０８）、Ｐｈｏｓｐｈｏ－ｃ－Ｊｕｎ（Ｔ－９３）を、Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｄａｎｖｅｒｓ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ，ＵＳＡ）から購入した。ＰＣ膜６ウェルプレートを有する０．４μｍ ＴＣプレートインサート（ｔｈｉｎｓｅｒｔ）を、ＶＷＲ（Ｒａｄｎｏｒ Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，ＵＳＡ）から購入した。ＡＰＣ標識ＰＤ－Ｌ１（Ｂ７－Ｈ１）モノクローナル抗体（ＭＩＨ１）およびＦＩＴＣ標識（ＰＤ－１）モノクローナル抗体（ＭＩＨ４）を、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｗａｌｔｈａｍ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ，ＵＳＡ）から購入した。

【0132】

化合物の調製：以下の化合物のストック溶液を、調製した。ＤＭＳＯ中の１５０ｍＭオキサリプラチン、ＤＭＳＯ中の１００ｍＭイリノテカン、ＤＭＳＯ中の５０ｍＭの５Ｆｕ、およびＢＣＮ０５７：３０％のカプチゾール（登録商標）（β－シクロデキストリンスルホブチルエーテルナトリウム）中の１６ｍｇ／ｍＬのＢＣＮ０５７。

【0133】

細胞株および細胞培養：Ｐａｎｃ－１細胞を、１０％ウシ胎仔血清を補充したＤＭＥＭ培地中で培養し、３７℃、５％ＣＯ_２下で維持した。ヒト末梢血汎Ｔ細胞を、１０ｎｇ／ｍｌのｒｈＩＬ－２を含む無血清Ｔ細胞拡張培地中で培養し、製造業者の説明書に従って拡張させた。Ｐａｎｃ－１細胞およびＴ細胞を、成長させ、Ｔ７５フラスコ中で別々に拡張させた。Ｐａｎｃ－１細胞を用いる共培養実験のために、ウェル当り２５０万個のＴ細胞を、６個のウェルプレートを用いてウェルに播種した。２５０万個のＰａｎｃ－１細胞を、ｔｈｉｎｓｅｒｔ中に播種し、これを、細胞を物理的に分離させるが培地を共有するように、６個のウェルプレートのウェル中に配置した。細胞を、５％ＣＯ_２下、３７℃で２４時間インキュベートした。２４時間で、培地を、ビークルまたは１０ｕＭのＢＣＮ０５７を含有する培地で置換し、次の時点：１時間、６時間、１２時間、２４時間、の間インキュベートした。Ｐａｎｃ－１細胞を、ｔｈｉｎｓｅｒｔから細胞を静かにかき取ることにより取り出した。

【0134】

フローサイトメトリー：フローサイトメトリー分析：Ｐａｎｃ－１およびＴ細胞を、独立に採取し、１ｘＰＢＳで洗浄した。細胞を、３ｘＰＢＳで洗浄し、室温で１間抗体とインキュベートした。細胞を次に、３ｘＰＢＳで洗浄し、１ｘＰＢＳに再懸濁し、ＮｏｖｏＣｙｔｅフローサイトメーター（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ，ＣＡ）を用いるフローサイトメトリーにより分析し、データを、ＮｏｖｏＥｘｐｒｅｓｓソフトウエアで分析した。

【0135】

ウェスタンブロット：細胞を、採取し、氷上で１５分間、細胞溶解緩衝液に溶解し、溶解物を、１３，０００ｒｐｍ、４℃で１０分間遠心分離した。上清を、ＢＣＡタンパク質定量化アッセイ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）のために新規チューブに移し、試料を、正規化した。３ｘローディング緩衝液（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）を、タンパク質試料に加え、５分間煮沸した。試料を、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析に使用し、ニトロセルロース膜に転写した。膜を、５％ＢＳＡを用いて室温下で１時間ブロックし、４℃で一晩一次抗体とインキュベートした。膜を、３回１ｘＴＢＳＴで５分間洗浄し、室温で１時間西洋ワサビペルオキシダーゼ標識二次抗体とインキュベートした。タンパク質を、ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ Ｗｅｓｔ Ｐｉｃｏ Ｓｔａｂｌｅ Ｐｅｒｏｘｉｄｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）により可視化した。ブロットを、ＢｉｏＲａｄ Ｖｅｒｓａｄｏｃ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍを用いる化学発光により可視化した。

【0136】

生存率アッセイ。イリノテカン、オキサリプラチンおよび５ＦＵと比較しておよびこれらと組み合わせてＢＣＮ０５７の効果を決定するために、ＡＴＰｌｉｔｅ発光アッセイシステムを、製造業者の説明書に従って使用した。１日目に、ウェル当り、３，０００個のＰａｎｃ－１細胞を、９６ウェルの白色の、不透明な無菌組織培養処理されたマイクロプレートに播種し、３７℃、５％ＣＯ_２で完全培地中にて２４時間インキュベートした。２日目に、培地を、１０ｕＭのＢＣＮ０５７、２５μＭの５Ｆｕ、７５μＭのオキサリプラチン、および５０μＭのイリノテカンの種々の組み合わせを含む培地と交換し、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートした。３、４、および５日目に、ＡＴＰ Ｌｉｔｅ Ａｓｓａｙを、２４、４８、９および７２時間の時点について、製造業者の説明書に従い実施した。別に定める場合を除き、値を、各薬物に対するビークルである対照のパーセントとして表した。生存率における差異は、いずれの対照ビークルの間でも認められなかった。

【0137】

ＱＰＣＲ：ＢＣＮ０５７またはビークルで治療したＰａｎｃ－１細胞中のＢＭＩ１およびＬＧＲ５標的遺伝子のｍＲＮＡレベルを比較する。定量的ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）を用いて、表１に収載したプライマー対を用いるリアルタイムＰＣＲにより検出された幹細胞マーカーＬＧＲ５、およびＢＭＩ１の発現を、測定した。全ＲＮＡを、トリゾールキット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて抽出した。

【表1】

【0138】

統計。結果を、（ｎ）で示される治療されない対照と比較して平均値（±標準偏差）を計算することにより示す。パーセント生存率を、各条件の平均を未治療対照（ビークル）の平均で除算することにより計算した。統計解析を、エクセルで実施した。

【0139】

実施例１
ＢＣＮ０５７は、アポトーシスの回復により膵臓癌細胞増殖を抑制する：
最初の実施例は、膵臓癌細胞におけるＢＣＮ０５７の効果を試験することを伴った。Ｇ１２Ｄ ＫＲＡＳ変異体細胞株であるＰａｎｃ－１細胞を、ＢＣＮ０５７で４８時間治療した。ＡＴＰｌｉｔｅ（商標）アッセイ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）は、ＢＣＮ０５７の漸増用量によるＰａｎｃ１細胞の生存能力における顕著な減少を示した。

【0140】

図１は、薬物の適用後７２時間のインキュベーションによるＡＴＰ Ｌｉｔｅ（商標）アッセイ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）により評価した、膵臓癌細胞株の生存に対するＢＣＮ０５７の効果を示すヒストグラムである。全てのデータポイントは、ｎ＝５である。対照（ＮＤ）は、薬物を受けず、ＢＣＮ０５７は、最終濃度２、５、１０、および２０μＭの投与である。パーセント生存率を、各条件についての平均値を各時点での対照細胞の平均値（Ｖ）により除算することにより計算した。

【数1】

【0141】

このデータを、式１を用いてＱｕｅｓｔ Ｇｒａｐｈ（商標）ＩＣ_５０ Ｃａｌｃｕｌａｔｏｒでプロットし、それは、１．３３ｍｍのＩＣ_５０を与えた。この値は、ＩＣ_５０が４９４ｎＭ～２３．９μＭの範囲である、膵管腺癌細胞（ＡｓＰＣ－１、ＢｘＰＣ－３、ＭＩＡ ＰａＣａ－２およびＰａｎｃ－１）に対する、ゲムシタビンなどの細胞傷害性薬物の他の分析に匹敵する。薬物は、用量反応曲線の全ての濃度で細胞に対し強力な細胞傷害性を示すと見出された。さらに、これらの投与量は、げっ歯類の有効性試験中に血漿中で認められた濃度範囲を包含する。その後、顕微鏡画像は、ＢＣＮ０５７の適用直後に、細胞の小疱形成およびフラグメント化を示すように見え、アポトーシスの可能性を示している。図２Ａは、１０μＭのＢＣＮ０５７での治療後の膵臓癌細胞増殖の時間の経過を示す。小疱形成および細胞フラグメント化は、薬物とのインキュベーションの２０分に以内に認められた（矢印で示す）。細胞フラグメント化は、薬物への曝露後の２０～３０分の間に認められた。

【0142】

Ｐａｎｃ－１細胞は、他のＫＲＡＳ変異体腫瘍細胞と類似のコドン１２におけるヘテロ接合型ミスセンス変異を有する（ｐ．Ｇ１２Ｄ；ＧＧＴ＞Ｋ－ＲＡＳのＧＡＴ）ので、表現型は、アポトーシスの能力の喪失、および結果としての化学療法抵抗性である。ＢＣＮ０５７治療は、薬物への曝露後の２０分ですぐにアポトーシスの迅速で用量依存性の回復を示すように見えた。

【0143】

ＢＣＮ０５７誘導細胞死におけるアポトーシスの関与を検証するために、ＢＣＮ０５７含有／不含Ｐａｎｃ１細胞を、アネキシンＶ染色に供した。アネキシンＶ染色を、最大で６時間まで実施し、ＢＣＮ０５７の用量応答の関数として測定した。アポトーシスにおける用量および時間依存性の増大を、ＢＣＮ０５７で治療したＰａｎｃ１細胞で検出した。図２Ｂは、Ｐａｎｃ－１細胞でのアネキシンＶアポトーシスおよびネクローシスアッセイのグラフである。Ｐａｎｃ－１細胞を、ＲｅａｌＴｉｍｅ－Ｇｌｏ（商標）アネキシンＶアポトーシスおよびネクローシスアッセイ試薬の存在または不在下で、ＢＣＮ０５７の段階希釈物に曝露した。プレートを、３７℃／５％ＣＯ_２でインキュベートし、発光（アネキシンＶ結合）を、６時間にわたり測定した。変化は、同じ時間にわたり蛍光では観察されなかった。アポトーシスは、ＢＣＮ０５７の漸増濃度と共に増加するように見えた。アポトーシスは、１０分、３０分、１時間および６時間の時点で用量依存的におよび時間依存的に観察された。

【0144】

さらなるｑＰＣＲ分析を、Ｂａｘ、Ｂｃｌ－２、Ａｋｔ－１およびカスパーゼ－３に対し実施し、それは、ＢＣＮ０５７が、治療後１時間にＰａｎｃ１細胞で、アポトーシス促進性遺伝子Ｂａｘの発現を誘導するが、抗アポトーシス性Ｂｃｌ２遺伝子発現を抑制したことを示した。図２Ｃは、Ｐａｎｃ－１細胞中のアポトーシス促進性および抗アポトーシスマーカーのｑＰＣＲ分析の結果のヒストグラムである。ＢＡＸは、ＢＣＮ０５７への曝露の１時間後に有意に上昇され、Ｂｃｌ－２は減少された。＊ｐ＜０．０５。発現プロファイルは、Ａｋｔ－１またはカスパーゼ－３に影響せず、カスパーゼ非依存性細胞死と一致した。

【0145】

実施例２
ＢＣＮ０５７は、ＧＳＫ３βシグナル伝達を抑制してＰＡＮＣ１細胞においてアポトーシスを回復する。
Ｐａｎｃ１細胞株は、ＫＲＡＳＧ１２Ｄ変異を有し、アポトーシスの能力を喪失しており、これは、発癌性ＲＡＳ変異の特徴である。ＢＣＮ０５７がこの細胞株でのアポトーシスの回復において有し得る役割を調査するために、ＧＳＫ３Ｂ ｃ－Ｊｕｎ相関を評価した。なぜならそれは、アポトーシスと直接関連づけられているからである。他の研究者は、Ｘが発癌性ＫＲＡＳ表現型中で過剰発現されるという事実と一緒に、ＧＳＫ３Ｂとｃ－Ｊｕｎおよびアポトーシスの関連を報告した。１０μＭのＢＣＮ０５７への曝露後の経時的なＧＳＫ３Ｂ抑制についてのＰａｎｃ１細胞の分析は、Ｓ－９でのリン酸化の急速な誘導を示した（図３Ａおよび図３Ｂ）。この抑制は、ＨＥＫ２９８などの他の形質転換されない細胞型中でも認められた。

【0146】

ｃ－Ｊｕｎ中のＴ９１／９３のリン酸化を、総ｃ－Ｊｕｎの関数として測定した。Ｔ９１／９３の顕著なリン酸化が観察され、これは、ｃ－Ｊｕｎのアポトーシス促進活性の活性化と関連すると報告された。この活性は、ＢＣＮ０５７あるいは形質転換されないＨＥＫ２９８上皮細胞で治療された場合、形質転換されない細胞で誘導されるとは見出されなかった（データは示さず）。

【0147】

ＫＲＡＳ依存性腫瘍では、ｃ－Ｊｕｎは、プロモーターレベルでホスファターゼおよびテンシン相同体（ＰＴＥＮ）発現を抑制するように作用し、ＰＴＥＮ発現のその抑制は、発癌性ＲＡＳによる抗アポトーシスおよび細胞形質転換にとって不可欠である。従って、我々は、ＢＣＮ０５７に応答したＰＴＥＮ発現レベルを調査した。細胞のＢＣＮ０５７治療下でのｃ－Ｊｕｎアポトーシス促進性活性化の知見と一致して、我々は、細胞のアポトーシスの我々の知見と一致して、ＰＴＥＮタンパク質の最大で１時間の増大された発現（図４Ｂおよび４Ｃ）およびその後に続く減少を見出した（図２）。

【0148】

図４Ａは、ホスホ－ｃ－Ｊｕｎ（Ｔ－９１／９３）のウェスタンブロットである。ＢＣＮ０５７は、薬物治療後の２０分以内にＫＲＡＳ変異体Ｐａｎｃ－１癌細胞中でＪＮＫ依存性リン酸化を顕著に増大させる。Ｔ－９１／９３のｃ－Ｊｕｎのリン酸化は、アポトーシスを誘導することが知られている。総ｃ－Ｊｕｎタンパク質レベルは、不変であった。図４Ｂは、Ｐａｎｃ－１細胞中のＰＴＥＮ発現を示す。特に、ＰＴＥＮのウェスタンブロットは、示した時点でのビークルまたはＢＣＮ０５７治療（１０μＭ）と同じ試料由来のβアクチン染色による２４時間にわたるタンパク質発現を示す。図４Ｃは、ＢにおけるＰＴＥＮレベルの増加倍率を示すβアクチンに対するＰＴＥＮの密度計測値の比率のヒストグラムである。矢印は、アポトーシスの開始を示す。

【0149】

実施例３
ＢＣＮ０５７は、化学療法剤の抗悪性腫瘍効果を高める。
ＫＲＡＳの抗アポトーシス性表現型は、化学療法に対する大きな抵抗性と関連する。従って、ＢＣＮ０５７が、５－フルオロウラシル（５ＦＵとしても知られる）などの細胞傷害性化学療法剤を強化するかどうかを調査するために、Ｐａｎｃ１細胞を、報告されたように５ＦＵで前治療し、ＢＣＮ０５７とインキュベートした。同等の濃度および条件での５ＦＵとＢＣＮ０５７の組み合わせは、５ＦＵ単独より大きな細胞傷害性を示した（図５Ａ）。効果は、ＢＣＮ０５７に対する用量依存性応答に従い、ＢＮ０５７治療後２４、４８および７２時間にわたり一定であった（２４および４８時間は示さず）。

【0150】

図５Ａは、ＡＴＰ Ｌｉｔｅ（商標）アッセイ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）により評価した膵臓癌細胞株の生存に対するＢＣＮ０５７および５－ＦＵの効果を示す（全ての薬物を７２時間インキュベーションした）。全てのデータポイントは、ｎ＝５である。対照（ＮＤ）は、薬物を受けなかった。試験群は、５ＦＵ（５０μＭ）、０５７（ＢＣＮ０５７：２、５、１０、および２０μＭまたは５ＦＵ＋ＢＣＮ０５７（５０μＭの５ＦＵと組み合わせて、ＢＣＮ０５７：２、５、１０、および２０μＭ）を含む。パーセント生存率を、各条件についての平均値を各時点での対照細胞の標準偏差を含む平均値（Ｖ）で除算することにより計算した。

【0151】

膵臓癌中のＬＧＲ５およびＢＭＩ１：ＬＧＲ５は、膵臓腫瘍の全ての細胞中で広範な発現を示した。他の研究者は、Ｐａｎｃ－１で測定可能な化学療法抵抗性および侵襲性に対する重要な寄与因子としてＢＭＩ１を採用した。我々は、ＢＣＮ０５７がＰａｎｃ－１細胞中でこれらの細胞集団の増大をもたらすかどうかを試験したが、存在量の有意な増大は１０μｍでの投与で認められなかった（図５Ｂ）。

【0152】

上皮ＬＧＲ５幹細胞：我々のグループならびに他の研究者からの以前の報告は、Ｌｇｒ５＋ｖｅ陰窩基底部円柱細胞は、化学放射線療法に感受性であることを示した。我々はまた、治療が誘導する毒性からのＬｇｒ５＋ｖｅ ＩＳＣの保護は、腸上皮損傷を最小化するために非常に重要であると報告した。５ＦＵは、フォルフィリノックスの成分であり、カペシタビン（Ｘｅｌｏｄａ（登録商標））から代謝される活性剤である。Ｌｇｒ５＋ＩＳＣにおいて化学療法剤が誘導する毒性に対するＢＣＮ０５７の効果を調査するために、Ｌｇｒ５－Ｃｒｅ－ＥＲＴ－ＧＦＰマウスを、報告されたように５ＦＵで前治療し、その後、ＢＣＮ０５７治療に供した。空腸部分の共焦点顕微鏡的画像化は、５ＦＵ治療マウス中のＬｇｒ５＋ＩＳＣの顕著な減少を明確に示した。しかし、ＢＣＮ０５７を受ける５ＦＵ治療マウスは、Ｌｇｒ５＋ｖｅ ＩＳＣの顕著な存在を示し（図５Ｃおよび図５Ｄ）、ＢＣＮ０５７が放射線に類似の化学毒性からＩＳＣを保護することを示唆している。

【0153】

図５Ｃは、ＢＣＮ０５７が、５ＦＵ細胞傷害性からＧＩ上皮およびＬＧＲ５幹細胞（緑）を保護することを示す。緑色を有するＧＩ陰窩の染色＝ＬＧＲ５＋幹細胞。マウスを、５ＦＵおよび５ＦＵ＋ＢＣＮ０５７で５日間治療した。ＢＣＮ０５７を、５ＦＵ治療後に追加の２日間にわたり投与した。小腸試料を採取し、最後の５ＦＵ注入後に３日間ＬＧＲ５について染色した。図５Ｄは、陰窩基底部の１ｍＭ区分中に残存するＬＧＲ５＋細胞の％定量化のヒストグラムであり、ＧＩでのＬＧＲ５＋幹細胞中の５－ＦＵ誘導アポトーシスの防止を示す。

【0154】

化学療法と細胞傷害作用の組み合わせ：膵臓または結腸直腸癌の治療でよく使われる他の細胞傷害性薬物、例えば、５ＦＵ、イリノテカンおよびオキサリプラチンなどのフォルフィリノックス内のものなどを次に、２４、４８および７２時間にわたり同等の投与量のＢＣＮ０５７と組み合わせて類似の方式で調査した。それぞれの場合で、アポトーシスの回復は、治療後に１つ（７２時間でのイリノテカン（ＩＲＩ）およびオキサリプラチン（Ｏｘ））を除く全ての時点で、薬物またはＢＣＮ０５７との組み合わせの細胞毒性作用に対し統計的に有意な感受性を誘導した。

【0155】

図６は、Ｐａｎｃ－１細胞に対する、個別のまたは５ＦＵおよびＢＣＮ０５７と組み合わせた、オキサリプラチンおよびイリノテカンの細胞傷害性を示すヒストグラムである。細胞を、全てのアッセイでｎ＝４にて、１０μＭの濃度を有するオキサリプラチン、イリノテカンおよび５ＦＵと、およびまた１０μＭのＢＣＮ０５７（０５７）とインキュベートした。全ての場合で、ＢＣＮ０５７の添加は、７２時間にわたり腫瘍生存率が減少する一般的な傾向をもたらした。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．００５。

【0156】

この傾向は、遙かに高い投与量のオキサリプラチン（７５μＭ）、イリノテカンおよび５ＦＵのそれぞれ５０μＭの濃度および１０μＭのままであるＢＣＮ０５７（０５７）（ｎ＝６，データは示さず）を用いた別の試験でも同じままであり、他の研究者の観察と一致する。

【0157】

ＢＣＮ０５７および免疫チェックポイント遮断：ＰＤＡＣを含む、多くの形態の癌に対する治療の新たな方法は、免疫チェックポイント阻害剤である。ＧＳＫ３Ｂは、特にＰＤ－１／ＰＤＬ－１軸において、免疫チェックポイントの重要な制御因子であるので、我々は、ＰＤ－１／ＰＤＬ－１発現に対するＢＣＮ０５７の効果を調査しようとした。膜により隔てられるＰａｎｃ１細胞およびヒトＴ細胞からなる培養系を、以前に記載されたように用いた（Ｎｅｕｂｅｒｔ，Ｎ．Ｊ．ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ７，２０１６）。 Ｐａｎｃ－１細胞を、Ｔ細胞と１日間共培養し、続いて最大で１２時間１０μＭのＢＣＮ０５７で治療した。

【0158】

図７Ａは、薬物不含（ビークル）でまたはＢＣＮ０５７と共に１、６および１２時間Ｐａｎｃ－１細胞と共培養されたヒトＴリンパ球上のＰＤ－１発現を示すウェスタンブロットである。図７Ｂは、ＧＳＫ３Ｂの阻害が、放射線に曝露されるとリンパ球の生存を誘導することを示すグラフである。放射線照射されたマウスＴリンパ球に対し漸増濃度のＢＣＮ０５７を用いるインビトロ生存率アッセイでは、ＥＣ_５０＝５．３４ｍＭであり、これは、薬物について観察される血漿中濃度内である。

【0159】

図８は、薬物なし（ビークル）でまたはＢＣＮ０５７と共に２．５、５、７．５および１０時間ヒトＴリンパ球と共培養されたＰａｎｃ－１細胞上のＰＤＬ－１発現（赤矢印）を示すウェスタンブロットである。Ｐａｎｃ－１細胞上のＰＤＬ－１発現は、認識できるほどに変化しなかったが、細胞は、記載されるように、急速なアポトーシスを受けた。しかし、ヒトＴリンパ球上のＰＤ－１発現は、図７Ａに示すように、最初の１時間以内に顕著に減少し、治療後１２時間にわたり持続した。マウスＴリンパ球を用いた別の試験では、２Ｇｙ照射を用いて、漸増量のＢＣＮ０５７を伴いアポトーシスを誘導した。結果は、ＥＣ_５０＝５．３４μＭで放射線の存在下でのＢＣＮ０５７によるＴリンパ球の保護を示し（図７Ｂ）、従って腫瘍と免疫細胞の間の生物学的応答における差異を確立する。

【0160】

まとめると、結果は、ＢＣＮ０５７が、発癌性ＫＲＡＳ膵臓癌細胞において化学療法剤の細胞毒性効果を選択的に高めることができることを示す。さらに、それは、正常腸上皮において化学療法剤毒性効果を軽減し、ＢＣＮ０５７が治療指数を改選するための補助療法と見なすことができることを示唆する。発癌性ＲＡＳ表現型においてアポトーシスを回復できる薬剤として、これは、化学療法剤に対するより大きな腫瘍感受性を誘導するための使用事例とうまく合致する。以前の論文（Ｂｈａｎｊａ，Ｐ．，ｅｔ．ａｌ．，Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ＆ Ｔｈｅｒａｐｙ ９，２０１８）で、我々は、同系ＫＲＡＳＧ１３Ｒ変異体ＭＣ３８腫瘍細胞株を用いるマウスでのモデルを示し、そこでＢＣＮ０５７を受けるマウスは、対照よりも顕著に低い腫瘍負荷量を有したが、放射線療法と共にＢＣＮ０５７を受けたマウスは、より低い腫瘍負荷量を有し、さらに放射線単独を受けたマウスよりも遙かに高い放射線量に絶えることができた。これは、形質転換された表現型対形質転換されない表現型において非常に異なって接続される標的化経路の価値を強調し、殺腫瘍性活性ならびに正常組織温存活性におけるこの二重の活性は、より良好な全生存および無進行生存期間をもたらし得る。

【0161】

医薬担体および投与
本発明の方法は、疾患または状態または疾患または状態の１種または複数の症状を予防し得る。本明細書で使用される場合、障害または状態を「予防する」治療薬は、統計的試料において、治療されない対照試料に比べて治療される試料における障害もしくは状態の発生を減らす、または治療されない対照試料に比べて発症を遅らせるもしくは１種もしくは複数の障害もしくは状態の症状の重症度を低減させる化合物を指す。

【0162】

本開示の組成物および方法は、それを必要としている個体を治療するために使用されてよい。特定の実施形態では、個体は、ヒトまたは非ヒト哺乳動物などの哺乳動物である。ヒトなどの動物に投与される場合、組成物または化合物は、例えば、本開示の化合物および薬学的に許容可能なキャリアを含む医薬組成物として好ましくは投与されるまたは使用される。

【0163】

薬学的に許容可能な担体は、当該技術分野において周知であり、例えば、水もしくは緩衝生理食塩水などの水溶液またはその他の溶媒またはグリコール、グリセロールなどのビークル、オリーブ油などの油、または注射可能有機エステルを含む。好ましい実施形態では、このような医薬組成物が、ヒトへの投与のため、特に侵襲的投与経路（すなわち、上皮性関門を通る輸送または拡散を回避する注射または埋め込み、などの経路）のためである場合、水溶液は、発熱性物質非含有または実質的に発熱性物質非含有である。賦形剤は、例えば、薬剤の遅延放出を行うように、または１種または複数の細胞、組織または臓器を選択的に標的にするように、選択できる。医薬組成物は、錠剤、カプセル剤（スプリンクルカプセルおよびゼラチンカプセルを含む）、顆粒剤、再構成用の凍結乾燥製剤、粉剤、液剤、シロップ、坐剤、注射剤などの投与単位形態であってよい。組成物はまた、経皮送達システム、例えば、皮膚パッチ中に存在してよい。

【0164】

本明細書で開示の医薬組成物は、個体への日常的な投与を可能にするのに十分な量の治療化合物を含んでよい。特定の実施形態では、本明細書で開示の医薬組成物は、例えば、少なくとも５ｍｇ、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも１５ｍｇ、少なくとも２０ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも３０ｍｇ、少なくとも３５ｍｇ、少なくとも４０ｍｇ、少なくとも４５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも５５ｍｇ、少なくとも６０ｍｇ、少なくとも６５ｍｇ、少なくとも７０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇ、少なくとも８０ｍｇ、少なくとも８５ｍｇ、少なくとも９０ｍｇ、少なくとも９５ｍｇ、または少なくとも１００ｍｇの治療化合物を含んでよい。特定の実施形態では、本明細書で開示の医薬組成物は、例えば、少なくとも５ｍｇ、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも２０ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇ、少なくとも１００ｍｇ、少なくとも２００ｍｇ、少なくとも３００ｍｇ、少なくとも４００ｍｇ、少なくとも５００ｍｇ、少なくとも６００ｍｇ、少なくとも７００ｍｇ、少なくとも８００ｍｇ、少なくとも９００ｍｇ、少なくとも１，０００ｍｇ、少なくとも１，１００ｍｇ、少なくとも１，２００ｍｇ、少なくとも１，３００ｍｇ、少なくとも１，４００ｍｇ、または少なくとも１，５００ｍｇの治療化合物を含んでよい。この実施形態のさらに他の態様では、本明細書で開示の医薬組成物は、例えば、約５ｍｇ～約１００ｍｇ、約１０ｍｇ～約１００ｍｇ、約５０ｍｇ～約１５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約２５０ｍｇ、約１５０ｍｇ～約３５０ｍｇ、約２５０ｍｇ～約５００ｍｇ、約３５０ｍｇ～約６００ｍｇ、約５００ｍｇ～約７５０ｍｇ、約６００ｍｇ～約９００ｍｇ、約７５０ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約８５０ｍｇ～約１，２００ｍｇ、または約１，０００ｍｇ～約１，５００ｍｇの範囲で含んでよい。さらなる特定の実施形態では、本明細書で開示の医薬組成物は、例えば、約１０ｍｇ～約２５０ｍｇ、約１０ｍｇ～約５００ｍｇ、約１０ｍｇ～約７５０ｍｇ、約１０ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約１０ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約５０ｍｇ～約２５０ｍｇ、約５０ｍｇ～約５００ｍｇ、約５０ｍｇ～約７５０ｍｇ、約５０ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約５０ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約１００ｍｇ～約２５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約５００ｍｇ、約１００ｍｇ～約７５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約１００ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約２００ｍｇ～約５００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７５０ｍｇ、約２００ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約２００ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約５ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約５ｍｇ～約１，０００ｍｇ、または約５ｍｇ～約２５０ｍｇの範囲で含んでよい。

【0165】

本明細書で開示の医薬組成物は、本明細書で開示の治療化合物を溶解するために十分な量の溶媒、乳剤または他の希釈剤を含んでよい。特定の実施形態では、本明細書で開示の医薬組成物は、溶媒、乳剤または希釈剤を、例えば、約９０％（ｖ／ｖ）未満、約８０％（ｖ／ｖ）未満、約７０％（ｖ／ｖ）未満、約６５％（ｖ／ｖ）未満、約６０％（ｖ／ｖ）未満、約５５％（ｖ／ｖ）未満、約５０％（ｖ／ｖ）未満、約４５％（ｖ／ｖ）未満、約４０％（ｖ／ｖ）未満、約３５％（ｖ／ｖ）未満、約３０％（ｖ／ｖ）未満、約２５％（ｖ／ｖ）未満、約２０％（ｖ／ｖ）未満、約１５％（ｖ／ｖ）未満、約１０％（ｖ／ｖ）未満、約５％（ｖ／ｖ）、または約１％（ｖ／ｖ）未満の量で含んでよい。特定の実施形態では、本明細書で開示の医薬組成物は、溶媒、乳剤または他の希釈剤を、例えば、約１％（ｖ／ｖ）～９０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～７０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～６０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～１０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～１０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～１０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～１０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～１５％（ｖ／ｖ）、または約８％（ｖ／ｖ）～１２％（ｖ／ｖ）の範囲の量で含んでよい。

【0166】

本明細書で開示される医薬組成物中の本明細書で開示される治療化合物の最終濃度は、任意の好適な濃度であってよい。特定の実施形態では、医薬組成物中の治療化合物の最終濃度は、治療的有効量であってよい。特定の実施形態では、医薬組成物中の治療化合物の最終濃度は、例えば、少なくとも０．００００１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．０００１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．００１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．０１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも７００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１，０００ｍｇ／ｍＬ、または少なくとも１，２００ｍｇ／ｍＬであってよい。特定の実施形態では、本明細書で開示される溶液中の治療化合物の濃度は、例えば、最大１，０００ｍｇ／ｍＬ、最大１，１００ｍｇ／ｍＬ、最大１，２００ｍｇ／ｍＬ、最大１，３００ｍｇ／ｍＬ、最大１，４００ｍｇ／ｍＬ、最大１，５００ｍｇ／ｍＬ、最大２，０００ｍｇ／ｍＬ、最大２，０００ｍｇ／ｍＬ、または最大３，０００ｍｇ／ｍＬであってよい。特定の実施形態では、医薬組成物中の治療化合物の最終濃度は、例えば、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約０．０００１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．０００１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．００１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．０１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約０．０１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約０．１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、または約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬの範囲であってよい。

【0167】

特定の実施形態では、本明細書で開示される治療化合物の治療的有効量は通常、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。特定の実施形態では、本明細書で開示される治療化合物の有効量は、例えば、少なくとも０．００１ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも０．０１ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１．０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも５．０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４５ｍｇ／ｋｇ／日、または少なくとも５０ｍｇ／ｋｇ／日であってよい。特定の実施形態では、本明細書で開示される治療化合物の有効量は、例えば、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約７５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約１５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約２００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約２５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約３００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約３５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約４００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約４５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約５００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約５５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約６００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約６５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約７００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約７５０ｍｇ／ｋｇ／日、または約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約８００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であってよい。この実施形態のさらに他の態様では、本明細書で開示される治療化合物の有効量は、例えば、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約７５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約１５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約２００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約２５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約３００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約３５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約４００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約４５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約５００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約５５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約６００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約６５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約７００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約７５０ｍｇ／ｋｇ／日、または約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約８００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であってよい。特定の実施形態では、本明細書で開示される治療化合物の有効量は、例えば、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約７５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約１５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約２００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約２５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約３００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約３５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約４００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約４５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約５００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約５５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約６００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約６５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約７００ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約７５０ｍｇ／ｋｇ／日、または約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約８００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であってよい。特定の実施形態では、本明細書で開示される治療化合物の有効量は、例えば、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約７５ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約１５０ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約２００ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約２５０ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約３００ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約３５０ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約４００ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約４５０ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約５００ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約５５０ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約６００ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約６５０ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約７００ｍｇ／ｋｇ／日、約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約７５０ｍｇ／ｋｇ／日、または約１０ｍｇ／ｋｇ／日～約８００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であってよい。

【0168】

この実施形態の他の態様では、本明細書で開示される治療化合物の有効量は、例えば、約１ｍｇ／ｋｇ／日～約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日～約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日～約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日～約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日～約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日～約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日～約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日～約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日～約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日～約７５ｍｇ／ｋｇ／日、または約１ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であってよい。特定の実施形態では、本明細書で開示される治療化合物の有効量は、例えば、約５ｍｇ／ｋｇ／日～約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日～約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日～約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日～約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日～約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日～約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日～約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日～約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日～約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日～約７５ｍｇ／ｋｇ／日、または約５ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であってよい。

【0169】

液体および半固形製剤では、本明細書で開示される治療化合物の濃度は典型的には、約５０ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬであってよい。特定の実施形態では、本明細書で開示される治療化合物の治療的有効量は、例えば、約５０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約２００ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約３００ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約４００ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約６００ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約７００ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約８００ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約９００ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約２００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約３００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約４００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約６００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約７００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約８００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約９００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ～約３００ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ～約４００ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ～約６００ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ～約７００ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ～約８００ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ～約９００ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約３００ｍｇ／ｍＬ～約４００ｍｇ／ｍＬ、約３００ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約３００ｍｇ／ｍＬ～約６００ｍｇ／ｍＬ、約３００ｍｇ／ｍＬ～約７００ｍｇ／ｍＬ、約３００ｍｇ／ｍＬ～約８００ｍｇ／ｍＬ、約３００ｍｇ／ｍＬ～約９００ｍｇ／ｍＬ、約３００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約４００ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約４００ｍｇ／ｍＬ～約６００ｍｇ／ｍＬ、約４００ｍｇ／ｍＬ～約７００ｍｇ／ｍＬ、約４００ｍｇ／ｍＬ～約８００ｍｇ／ｍＬ、約４００ｍｇ／ｍＬ～約９００ｍｇ／ｍＬ、約４００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約６００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約７００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約８００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約９００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約６００ｍｇ／ｍＬ～約７００ｍｇ／ｍＬ、約６００ｍｇ／ｍＬ～約８００ｍｇ／ｍＬ、約６００ｍｇ／ｍＬ～約９００ｍｇ／ｍＬ、または約６００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、であってよい。

【0170】

対象は、ヒト、ラット、マウス、ネコ、イヌ、ウマ、ヒツジ、雌ウシ、サル、トリ、または両生類であってよい。他の実施形態では、細胞は、インビボまたはインビトロである。本開示の化合物が投与され得る典型的な対象は、哺乳類、特に霊長類である。獣医学用途については、多種多様な対象、例えば、ウシ、ヒツジ、ヤギ、雌ウシ、ブタなどの家畜；ニワトリ、アヒル、ガチョウ、七面鳥、などの家禽類；および家畜，特にイヌおよびネコなどのペットが好適である。診断または研究用途については、多種多様な哺乳類が好適な対象であり、げっ歯類（例えば、マウス、ラット、ハムスター）、ウサギ、霊長類、およびブタ、例えば、近交系ブタなどを含む。さらに、インビトロ診断および研究用途などのインビトロ用途については、上記対象の体液および細胞試料などの哺乳類、特に霊長類、例えば、ヒト血液、尿または組織試料、または獣医学用途について記述した動物の血液尿または組織試料が使用に好適である。

【0171】

生物に投与する場合、化合物は、任意の好適な手段で投与され得る。いくつかの実施形態では、化合物または製剤は、経口投与される。いくつかの実施形態では、化合物または製剤は、注射、例えば、皮下、非経口、または静脈内注射により投与される。

【0172】

いくつかの実施形態では、化合物は、他の可能な緩和剤と組み合わせて投与され得る。特定の実施形態では、組成物は、上記状態の治療のために、成長因子、ＮＳＡＩＤ、化学療法剤、抗炎症剤、抗生物質、メトホルミン（ルコファージ、グルメツア、他）、スルホニルウレア、メグリチニド、チアゾリジンジオン、ＤＰＰ－４阻害剤、ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＳＧＬＴ２阻害剤、および／またはインスリン療法剤、と共に投与され得る。一態様では、成長因子は、Ｇ－ＣＳＦ（別名、フィルグラスチム、ＮＥＵＰＯＧＥＮ（登録商標）またはエリスロポエチン（別名、エポジェン（登録商標））であり得る。

【0173】

他の実施形態では、組成物は、生理学的に許容可能な担体中の有効量の調節物質および／または他の薬学的活性剤を含み得る。担体は、特定の投与経路に望ましい製剤の形態に応じて多種多様な形態であってよい。適切な担体およびそれらの製剤は、例えば、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎによる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓに記載されている。いくつかの実施形態では、化合物は、任意の好適な担体物質中で任意の適切な量で含まれてよく、通常は、組成物の総重量の１～９５重量％の量で存在する。組成物は、非経口の（例えば、皮下、静脈内、筋肉内、または腹腔内で）または経口の投与経路に好適な剤形で提供され得る。医薬組成物は、従来の薬務に従って処方され得る（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（２０ｔｈ ｅｄ．），ｅｄ．Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００ ａｎｄ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｅｄｓ．Ｊ．Ｓｗａｒｂｒｉｃｋ ａｎｄ Ｊ．Ｃ．Ｂｏｙｌａｎ，１９８８－１９９９，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、を参照）。

【0174】

いくつかの実施形態では、組成物は、無菌注射による投与に好適な形態であってよい。一例では、このような組成物を調製するために、組成物は、非経口的に許容可能な液体ビークル中に溶解または懸濁される。許容可能なビークルおよび溶媒で特に使用してよいのは、水、適切な量の塩酸、水酸化ナトリウムまたは好適な緩衝液の添加により好適なｐＨに調節された水、１，３－ブタンジオール、リンゲル液および等張性塩化ナトリウムおよびデキストロース溶液である。水性の製剤はまた、１種または複数の防腐剤（例えば、メチル、エチルまたはｐ－オキシ安息香酸プロピル）を含有してよい。非経口製剤の場合、担体は通常、滅菌水を含むが、他の成分、例えば、溶解性を助けるまたは保存のための成分を含んでもよい。注射可能な懸濁液もまた、調製でき、その場合、適切な安定化剤を用い得る。一実施形態では、製剤は、メタンスルホン酸、ポビドン、ベンジルアルコール、ｎ－メチルピロリドン、エタノール、ポロキサマー１８８、乳酸、カプチゾール（ＳＢＥ－ベータ－ＣＤ）、またはビタミンＥ、例えばＴＰＧＳ（ｄ－アルファトコフェリルポリエチレングリコール１０００スクシネート）の少なくとも１種または複数を含む。

【0175】

非経口的投与に好適な製剤は通常、化合物の無菌の水性の製剤を含み、これは、レシピエントの血液と等張である（例えば、生理食塩水）。このような製剤は、懸濁剤および増粘剤、ならびに化合物を血液成分または１つまたは複数の臓器に向けるように設計されるリポソームまたは他の微粒子系を含んでよい。製剤は、単回投与形態または複数回投与形態で投与され得る。

【0176】

非経口的投与は、全身送達または局所送達に好適な任意の形態を含み得る。投与は、例えば、静脈内、動脈内、髄腔内、筋肉内、皮下、筋肉内、腹部内（例えば、腹腔内）などであってよく、および注入ポンプ（外部または埋め込み型）または任意の他の目的の投与形式に好適な手段で実施されてよい。

【0177】

いくつかの実施形態では、組成物は、経口投与に好適な形態であってよい。経口剤形の組成物では、通常の医薬品媒体のいずれかを用いてよい。従って、例えば、懸濁剤、エリキシル剤および液剤などの液状経口製剤の場合、適切な担体および添加剤は、水、グリコール、油、アルコール、香料、防腐剤、着色剤などを含む。例えば、散剤、カプセル剤および錠剤のなどの固形経口製剤では、好適な担体および添加剤は、デンプン、糖、希釈剤、造粒剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤などを含む。所望により、錠剤は、標準的な技術により糖をコートされるか若しくは腸溶コートされてよい。

【0178】

経口投与（例えば、摂取による）に好適な組成物は、カプセル剤、カシェ剤、錠剤、またはロゼンジ剤などの個別の単位として提供されてよく、それぞれが粉末または顆粒として所定の量の有効成分を含む。場合により、水溶液または非水溶液中の懸濁液、例えば、シロップ、エリキシル剤、乳剤、または頓服水剤を、採用し得る。経口使用のための製剤としては、薬学的に許容可能な賦形剤との混合物中の有効成分を含む錠剤が挙げられる。このような製剤は、当業者に既知である。賦形剤は、例えば、不活性希釈剤または充填剤（例えば、スクロース、ソルビトール、ショ糖、マンニトール、微結晶セルロース微結晶セルロース、ジャガイモデンプンを含むデンプン、炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、またはリン酸ナトリウム）；造粒およびおよび崩壊剤（例えば、微結晶セルロース、デンプンセルロース誘導体、ジャガイモデンプンを含むデンプン、クロスカルメロースナトリウム、アルギン酸ナトリウム、またはアルギン酸）；結合剤（例えば、スクロース、グルコース、ソルビトール、アラビアゴム、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、デンプン、アルファ化デンプン、微結晶セルロース、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン、またはポリエチレングリコール）；および潤滑剤、流動促進剤、および抗接着剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸、シリカ、硬化植物油、または滑石）であり得る。他の薬学的に許容可能な賦形剤は、着色剤、香味剤、可塑剤、保水剤、緩衝剤、などであり得る。

【0179】

シロップは、ショ糖、例えばスクロースの濃縮水溶液（これにはまた、任意の補助成分を加えてもよい）に化合物を加えることにより作製できる。このような補助成分は、香味剤、好適な防腐剤、ショ糖の結晶化を遅らせる薬剤、および多価アルコール（例えばグリセロールまたはソルビトール）などの、任意の他の成分の溶解度を高める薬剤、を含み得る。

【0180】

いくつかの実施形態では、組成物は、鼻のまたは他の粘膜の噴霧製剤の形態（例えば、吸入可能な形態）であり得る。これらの製剤は、保存剤および等張剤を含む、活性化合物の精製水溶液を含み得る。このような製剤は、鼻のまたは他の粘膜と適合するｐＨおよび等張状態に調節され得る。あるいは、製剤は、ガス担体に懸濁される微粉化された固体粉末の形態であり得る。このような製剤は、任意の適切な手段または方法により、例えば、ネブライザー、アトマイザー、定量吸入器などにより送達され得る。

【0181】

いくつかの実施形態では、組成物は、直腸の投与に好適な形態であり得る。これらの製剤は、ココアバター、水素添加油脂または水素添加脂肪カルボン酸などの好適な担体を用いて坐剤として提供され得る。

【0182】

いくつかの実施形態では、組成物は、経皮投与に好適な形態であり得る。これらの製剤は、例えば、セルロース系媒体、例えば、メチルセルロースまたはヒドロキシエチルセルロースなどのチキソトロピーまたはゼラチン状担体中に活性化合物を組み込むこと、得られた製剤をその後、着用者の皮膚と経皮接触状態で固定されるように適合された経皮装置中に充填することにより、調製され得る。

【0183】

上述の成分に加えて、本開示の組成物は、カプセル化用材料、希釈剤、緩衝液、香味剤、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、増粘剤、潤滑剤、防腐剤（抗酸化剤を含む）、などから選択される１種または複数の補助成分をさらに含み得る。

【0184】

いくつかの実施形態では、組成物は、即放、徐放、遅延開始放出または当業者に既知の任意の他の放出プロファイル用に処方され得る。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、投与時に実質的に直ちに、または任意の所定の時間に、または投与後の所定の期間に活性化合物を放出するように処方され得る。後者のタイプの組成物は通常、制御放出製剤として知られ、これらは、（ｉ）長期間にわたり身体内で薬物の実質的に一定の濃度を作る製剤；（ｉｉ）予め決められている遅れ時間後に、長期間にわたり身体内で薬物の実質的に一定の濃度を作る製剤；（ｉｉｉ）身体中で相対的に一定の効果的なレベルを維持することにより所定の期間作用を維持し、活性物質の血漿中濃度の変動（鋸歯状運動パターン（ｓａｗｔｏｏｔｈ ｋｉｎｅｔｉｃ ｐａｔｔｅｒｎ））と関連する望ましくない副作用を同時に最小化する製剤；（ｉｖ）例えば、中枢神経系または脳脊髄液に隣接するまたはそれらの中での制御放出組成物の空間配置により作用を局在化する製剤；（ｖ）用量が、例えば、１または２週毎に１回投与されるように、便利な投与を可能にする製剤；および（ｖｉ）病状の部位を標的にする製剤、を含む。いくつかの用途の場合、制御放出製剤は、医学的に有利なレベルで活性を維持するための高頻度の投与の必要性を不要にする。

【0185】

いくつかの戦略のいずれかは、放出の速度が当該化合物の代謝の速度を上回る、制御放出を得るように追求できる。一例では、制御放出は、例えば、種々のタイプの制御放出組成物およびコーティングを含む、種々の処方パラメーターおよび成分の適切な選択により得られる。従って、化合物は、適切な賦形剤と共に、投与時に制御された方式で化合物を放出する医薬組成物へと処方される。例としては、単一または複数単位の錠剤またはカプセル組成物、油剤、懸濁液、乳剤、マイクロカプセル、マイクロスフェア、分子錯体、ナノ粒子、貼付剤、およびリポソームが挙げられる。

【0186】

いくつかの実施形態では、組成物は、リポソームまたは他のカプセル化媒体中の化合物のカプセル化により、または化合物の固定化により、例えば、タンパク質、リポタンパク質、糖タンパク質およびポリサッカライドから選択されるものなどの、好適な生体分子上の、共有結合、キレート化、または会合配位（ａｓｓｏｃｉａｔｉｖｅ ｃｏｏｒｄｉｎａｔｉｏｎ）などにより、「ベクター化された」形態を含み得る。

【0187】

いくつかの実施形態では、組成物は、制御放出のために、マイクロスフェア、マイクロカプセル、ナノ粒子、リポソーム、などの中に組み込まれてよい。さらに、組成物は、懸濁化、可溶化、安定化、ｐＨ調節剤、張度調整剤、および／または分散剤を含み得る。あるいは、化合物は、生体適合性担体、インプラント、または注入装置中に組み込まれ得る。

【0188】

マイクロスフェアおよび／またはマイクロカプセルの調製における使用のための材料は、例えば、生分解性／生体内分解性高分子、例えばポリグラクチン（ｐｏｌｙｇｌａｃｔｉｎ）、ポリ（イソブチルシアノアクリレート）、ポリ（２－ヒドロキシエチル－Ｌ－グルタミン）およびポリ（乳酸）である。制御放出非経口の製剤を処方する場合に使われ得る生体適合性担体は、炭水化物（例えば、デキストラン）、タンパク質（例えば、アルブミン）、リポタンパク質、または抗体である。インプラントにおける使用のための材料は、非生分解性（例えば、ポリジメチルシロキサン）または生分解性（例えば、ポリ（カプロラクトン））、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）またはポリ（オルトエステル）またはこれらの組み合わせであり得る。

【0189】

全ての実施形態では、化合物または他の活性化合物は、薬学的に許容可能な塩として、または活性化合物の他の誘導体、例えばエーテル誘導体、エステル誘導体、酸誘導体、および水溶解度を変更する誘導体として存在し得る。誘導体は、化合物の個別の鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ体、および他の異性体を含む。誘導体はまた、化合物の全ての多型および溶媒和物、例えば、水和物、および有機溶媒で形成されるものを含む。このような異性体、多型、および溶媒和物は、当該技術分野において既知の方法、例えば位置特異的、および／またはエナンチオ選択的合成および分離により調製され得る。

【0190】

塩を調製する能力は、化合物の酸性または塩基性に依存する。化合物の好適な塩は、限定されないが、酸付加塩、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、ペルクルまたは酸、硫酸、硝酸、リン酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、炭酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、ベネゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、シクロヘキサンスルファミン酸、サリチル酸、ｐ－アミノサリチル酸、２－フェノキシ安息香酸、および２－アセトキシ安息香酸を用いて作製される塩；サッカリンを用いて作製される塩；アルカリ金属塩、例えばナトリウムおよびカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えばカルシウムおよびマグネシウム塩；および有機または無機リガンドを用いて形成される塩、例えば第四級アンモニウム塩を含む。

【0191】

追加の好適な塩は、限定されないが、化合物の、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、硼酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム塩、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストル酸塩、エシル酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレソルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフタレン酸塩、ヨウ化物、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、臭化メチル、メチル硝酸塩、硫酸メチル、ムコ酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ－メチルグルカミンアンモニウム塩、オレイン酸塩、パモ酸塩（エンボネート）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクレート、トシル酸塩、トリエチオジドおよび吉草酸塩を含む。

【0192】

薬学的に許容可能な酸付加塩はまた、例えば水、メタノール、エタノール、ジメチルホルムアミドなどとの種々の溶媒和物として存在できる。このような溶媒和物の混合物もまた、調製できる。このような溶媒和物の原材料は、結晶化の溶媒、調製または結晶化の溶媒中の内在性の溶媒、またはこのような溶媒に対する外来性の溶媒由来であってよい。

【0193】

湿潤剤、乳化剤およびラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、ならびに着色料、剥離剤、コーティング剤、甘味料、調味料および芳香剤、防腐剤および酸化防止剤もまた、組成物中に存在してよい。

【0194】

薬学的に許容可能な抗酸化剤の例としては、（１）水可溶性抗酸化剤、例えばアスコルビン酸、塩酸システイン、重硫酸ナトリウム、メタ重硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、など；（２）油溶性抗酸化剤、例えばアスコルビン酸パルミテート、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、ガリウム酸プロピル、アルファトコフェロール、など；および（３）金属キレート化剤、例えばクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸、など、が挙げられる。

【0195】

文脈上明白に他の意味に解すべき場合を除き、全ての実施形態の組成物は、種々の薬学的に許容可能な塩、または上記の他の誘導体を含み得る。

【0196】

このような組成物の処方および製剤は、医薬製剤の当業者に周知である。処方は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、中で見出すことができる。

【0197】

本開示で使用するために用いられる化合物の量は、状態、患者／対象、および状態の程度に応じて変化する。

【0198】

本出願を通して引用される全ての参考文献（文献、発行特許、刊行特許出願を含む）の内容は、これにより、明示的に参照により本明細書に組み込まれる。本開示および方式および製造およびその使用方法は、すべての関連する当業者にこれらの製造および使用を可能にするように、完全、明確、簡潔で正確な用語で記述される。

【0199】

医薬組成物中の有効成分の実際の用量レベルは、患者に対し毒性を示すことなく、特定の患者、組成物および投与方法について所望の治療応答を達成するために効果的である、有効成分の量を得るように、変更されてよい。

【0200】

選択される用量レベルは、用いる特定の化合物もしくは化合物の組み合わせまたはそれらのエステル、塩またはアミドの活性、投与の経路、投与の時間、用いられる特定の化合物（単一または複数）の排出の速度、治療の期間、用いられる特定の化合物（単一または複数）と組み合わせて使用される他の薬物、化合物および／または材料、治療される患者の年齢、性別、体重、病状、総体的な健康および既往の病歴ならびに医学分野で周知の類似の因子などを含む種々の要因に依存するであろう。

【0201】

当業者である医師または獣医師は、必要とされる医薬組成物の治療的有効量を容易に決定し処方できる。例えば、医師または獣医師は、所望の治療効果を得るために必要とされる量より少ないレベルの用量の医薬組成物または化合物から始め、所望の効果が達成されるまで、徐々に用量を増加するであろう。「治療的有効量」という用語は、所望の治療効果を誘発するのに十分な化合物の濃度を意味する。化合物の有効量は、対象の体重、性別、年齢および病歴に応じて変化すると一般的に理解されている。有効量に影響を与える他の因子は、限定されないが、患者状態の重症度、治療される障害、化合物の安定性および、必要に応じ、本開示の化合物と共に投与される別のタイプの治療薬を含み得る。さらに多くの合計用量を、薬剤の複数回の投与により送達できる。効力および投与量を決定する方法は、当業者にとって既知である（Ｉｓｓｅｌｂａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １３ ｅｄ．，１８１４－１８８２；この文献は、参照により本明細書に組み込まれる）。

【0202】

一般に、本開示の組成物および方法で使用される活性化合物の好適な一日量は、治療効果を生じるために効果的な最低の用量である化合物の量であろう。このような有効量は通常、上記の要因に依存する。

【0203】

投与量は、一回用量または、累積投与量（逐次投与）であってよく、当業者により容易に決定できる。例えば、治療は、本明細書で開示される医薬組成物の有効量の１回のみの投与を含んでよい。あるいは、治療は、例えば、１日１回、１日２回、１日３回、数日ごとに１回、または１週間に１回などの期間の範囲にわたって行われる医薬組成物の有効量の複数回の投与を含んでよい。投与のタイミングは、個体の症状の重症度などの因子に応じて、個体ごとに変わってよい。例えば、本明細書で開示される医薬組成物の有効量は、不確定の期間、または個体がそれ以上治療を必要としなくなるまで、１日１回、個体に投与されてよい。当業者は、個体の状態が治療の全過程にわたりモニターされること、および投与される本明細書で開示される医薬組成物の有効量がそれに応じて調節できることを認識するであろう。

【0204】

必要に応じ、活性化合物の有効一日量は、任意で、単位剤形で、その日全体にわたり適切な間隔で別個に投与される１、２、３、４、５、６回のまたはそれを超える回数の分割用量として投与されてよい。本開示の特定の実施形態では、活性化合物は、１日２回または３回投与されてよい。好ましい実施形態では、活性化合物は、１日１回投与される。

【0205】

特定の実施形態では、治療化合物の投与の期間は、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日間、３週、４週、５週、６週、７週、８週、９週、１０週、１１週、１２週間、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月間、またはそれを越える期間である。特定の実施形態では、治療レジメンは、その間に投与が１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日間、３週、４週、５週、６週、７週、８週、９週、１０週、１１週、１２週間、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、１２ヶ月間、またはそれを超えて停止される期間を含み得る。

【0206】

この治療を受ける患者は通常、霊長類を含む、それを必要としている任意の動物、特にヒトおよび他の哺乳動物、例えばウマ、ウシ、ブタおよびヒツジ、ならびに家禽およびペットである。

【0207】

他の実施形態では、本明細書で記載の化合物は、単一の容器中で一緒にまたは別々の容器中でのいずれかで、キット中で１種または複数の追加の治療薬と共に、例えば、本明細書で考察される同席療法で一緒に使用できる別の医薬製剤として、提供されてよい。特定のこのような実施形態では、キットは、例えば、上述のいずれかの状態を治療するまたは予防するための、医薬製剤の共同投与のための説明書をさらに含んでよい。

【0208】

このような組み合わせ製剤は、本明細書の上記で記載の投与量範囲内の本開示の化合物、または薬学的に許容可能なその塩、および認可投与範囲内の他の薬学的活性剤を採用してよい。

【0209】

いくつかの実施形態では、化合物は、電離放射線への曝露後、または偶発的なまたは治療の放射線を含む放射線曝露の開始後、などの述語（ｐｒｅｄｉｃａｔｅ）イベント後に投与され得る。一実施形態では、化合物は、曝露後直ちに投与される。別の実施形態では、化合物は、曝露の１２時間以内に投与される。別の実施形態では、化合物は、曝露の２４時間以内に投与される。別の実施形態では、化合物は、曝露後２４時間で投与される。別の実施形態では、化合物は、曝露の２４時間後に投与される。別の実施形態では、化合物は、曝露の３６時間後に投与される。別の実施形態では、化合物は、曝露の４８時間以内に投与される。別の実施形態では、化合物は、曝露の６０時間以内に投与される。別の実施形態では、化合物は、曝露の７２時間以内に投与される。別の実施形態では、化合物は、曝露の８４時間以内に投与される。

【0210】

特定の実施形態または特定の処方では、ＹＥＬ００２／ＢＣＮ０５７は、１００ｍＭのメタンスルホン酸（ＭＳＡ）／１０％ポビドン（ＰＶＰ）；１００ｍＭのＭＳＡ／２％ベンジルアルコール／２％のＮ－Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）；および１００ｍＭのＭＳＡ／１０％エタノール／１％ポロキサマー１８８を用いて、生理学的に適合するｐＨで水溶液中に可溶化（ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｅｄ）された。さらなる態様では、１００ｍＭの乳酸を加え、これらの混合物の溶解度をまた改善した。さらに別の実施形態では、ＹＥＬ００２および３０％のカプチゾール（ＳＢＥ－β－ＣＤ）および１００ｍＭのＭＳＡを含む処方は、最大でｐＨ４．１にてまたはそれを超えて優れた溶解度をもたらした。

【0211】

別の実施形態では、治療レベルのＹＥＬ００２／ＢＣＮ０５７の静脈内、皮下および経口送達のための処方を、ｐＨ４．１以上（１．０ＮのＮａＯＨで調節した）で３０重量％のカプチゾール（ＳＢＥ－β－ＣＤ）および１００ｍＭのＭＳＡを含んで開発した。

【0212】

本開示はここで一般的に説明され、それは、次の実施例に言及することによりさらに容易に理解されるであろう。これらの実施例は、特定の態様および本発明の実施形態を例示する目的のためのみに含まれ、本発明を限定する意図はない。

【0213】

この実施形態の他の態様では、本明細書で開示される分子は、疾患の重症度を、例えば、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減させる。この実施形態のさらに他の態様では、本明細書で開示される融合タンパク質またはキメラ分子は、例えば、約５％～約１００％、約１０％～約１００％、約２０％～約１００％、約３０％～約１００％、約４０％～約１００％、約５０％～約１００％、約６０％～約１００％、約７０％～約１００％、約８０％～約１００％、約１０％～約９０％、約２０％～約９０％、約３０％～約９０％、約４０％～約９０％、約５０％～約９０％、約６０％～約９０％、約７０％～約９０％、約１０％～約８０％、約２０％～約８０％、約３０％～約８０％、約４０％～約８０％、約５０％～約８０％、または約６０％～約８０％、約１０％～約７０％、約２０％～約７０％、約３０％～約７０％、約４０％～約７０％、または約５０％～約７０％疾患の重症度を低減させる。

【0214】

最後に、本明細書の態様が、特定の実施形態に言及することにより強調されるが、これらの開示実施形態は、本明細書で開示される主題の原理の例示に過ぎないことは、当業者に容易に認識されるであろうことを理解されたい。従って、開示される主題は、特に明記されない限り、本明細書で記載の特定の化合物、組成物、物品、装置、方法、プロトコル、および／または試薬、などに決して限定されないことを理解されたい。加えて、当業者なら、特定の変更、修正、並べ替え、変化、付加、取り消しおよびこれらの副組み合わせを、本明細書の趣旨から逸脱することなく本明細書の教示に従って行うことができることを理解するであろう。したがって、次の添付特許請求項および以降で導入される特許請求項は、全てのこのような変更、修正、並べ替え、変化、付加、取り消しおよび副組合わせを、それらの請求項の真の趣旨および範囲内にあるものとして包含すると解釈されるべきであると意図される。

【0215】

本開示の特定の実施形態は、本開示を実施するために本発明者らが知る最良の形態を含め、本明細書に記載される。当然のことながら、これらの記載される実施形態に対する変形形態は、これまでの記載を読めば、当業者に明らかとなるであろう。本発明者らは、当業者が必要に応じてこのような変形形態を用いることを予想し、本発明が本明細書に具体的に記載されている以外の方法で実施されることを意図する。したがって、本発明は、準拠法により認められる、添付の特許請求の範囲に記載される内容の修正物および均等物をすべて包含する。さらに、その全ての可能な変形物としての上述の実施形態のいずれの組み合わせもまた、本明細書で特に指示がない限り、または別の理由で文脈と明確に矛楯することがない限り、本開示により包含される。

【0216】

本発明の代替実施形態、要素、またはステップのグループ分けは、本開示を限定するものと解釈されるべきではない。各グループのメンバーは、個別に、または本明細書で開示される他のグループメンバーとの任意の組み合わせで参照され請求されてよい。グループの１つまたは複数のメンバーは、利便性および／または特許性の理由で、グループに含まれてよく、またはグループから除去されてよいことが予測される。このような何らかの包含または削除が生じた場合、明細書は、修正されしたがって添付の請求項で使用される全てのマーカッシュグループの記述要件を満たすグループを含むものと見なされる。

【0217】

本明細書で言及され、特定される全ての特許、特許公報、および他の出版物は、例えば、このような出版物に記載され、本開示との関係で使用可能な組成物および方法を説明し、開示するために、個別に、明示的に参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。これらの出版物は、本出願の出願日に先立つそれらの開示のためにのみ提供される。これに関しては、先行開示を理由にしてまたは何らかの他の理由で本発明者らがそのような開示に先行する権利を与えられないことを承認するものと解釈されるべきではない。これらの文書の内容に関する日付または表現は、出願者らに入手可能な情報に基づいており、これらの文書の日付または内容の正確さに関して何ら承認するものではない。

【0218】

最後に、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを説明する目的のためであり、本開示の範囲を制限すると意図されない。本発明の範囲は、特許請求の範囲によってのみ規定される。したがって、本開示は、図示されおよび記載されるものと正確に同じものに限定されない。

【0219】

実施形態は、式Ｉ：

【化15】

の化合物を含み、
Ｒ^１＝アルキル、アルキルアミン、エーテル、アリールまたはアリールハライドであり、
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３であり、
Ｒ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である。

【0220】

実施形態は、式Ｉ：

【化16】

の化合物を含み、
Ｒ^１＝

【化17】

であり、ｎ＝１、２または３であり、
Ｘ＝Ｆ、ＣＦ_３Ｃｌ、ＯＨまたはＣＨ_２ＯＨであり、
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３であり、Ｒ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である。

【0221】

実施形態は、式Ｉ：

【化18】

の化合物を含み、
Ｒ^１＝

【化19】

であり、
ｎ＝１、２または３であり、
Ｘ＝Ｆ、ＣＦ_３Ｃｌ、ＯＨまたはＣＨ_２ＯＨであり、
Ｙ＝Ｏ、ＳまたはＮであり、および
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３であり、Ｒ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である。

【0222】

実施形態は、式Ｉ：

【化20】

の化合物を含み、
Ｒ^１＝

【化21】

であり、
ｎ＝１、２または３であり、
Ｘ＝Ｆ、ＣＦ_３Ｃｌ、ＯＨまたはＣＨ_２ＯＨであり、
Ｙ＝Ｏ、ＳまたはＮであり、
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３であり、Ｒ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である。

【0223】

実施形態は、式Ｉ：

【化22】

の化合物を含み、
Ｒ^１＝

【化23】

であり、
ｎ＝１、２または３であり、および
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３であり、Ｒ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である。

【0224】

実施形態は、式Ｉ：

【化24】

の化合物を含み、
Ｒ^１＝

【化25】

であり、
ｎ＝１、２または３であり、および
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３であり、Ｒ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である。

【0225】

実施形態は、式Ｉ：

【化26】

の化合物を含み、
Ｒ^１＝

【化27】

であり、
ｎ＝１、２または３であり、および
Ｒ^２＝ＨまたはＣＨ_３であり、Ｒ^３＝Ｈ、ＯＨまたはＯＣＨ_３である。

【0226】

実施形態は、式Ａ：

【化28】

の化合物を含み、Ｒ^１＝ＨまたはＣＨ_３であり、Ｒ^２は、下記の１種である。

【化29】

【0227】

いくつかの実施形態では、本明細書で記載の１種または複数の化合物は、癌を治療するために治療的に使用され得、免疫チェックポイント制御因子として、ＰＤ－１発現を調節し、病気を治療するためにＴ細胞応答を高めるまたは免疫細胞の活性を高め、化学療法または放射線療法の１種または複数の副作用を改善し、上皮細胞に対する放射線誘発損傷を予防または治療し、ウィルス感染症などの感染症を治療し、および／または炎症を低減する。

【表2】

【図1】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図3】

【図4】

【図5A】

【図5B】

【図5C】

【図5D】

【図6】

【図7A】

【図7B】

【図8】

【図9】

【図10A】

【図10B】

【図10C】

【図10D】

【図11】

【国際調査報告】