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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-09-12
(54)【発明の名称】がんの治療のためのＤＲ５標的化Ｍｕｌｔａｂｏｄｙ
(51)【国際特許分類】
C07K 19/00 20060101AFI20240905BHJP
C07K 16/00 20060101ALI20240905BHJP
C07K 14/47 20060101ALI20240905BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240905BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20240905BHJP
A61K 47/68 20170101ALI20240905BHJP
C12N 15/13 20060101ALN20240905BHJP
C12N 15/62 20060101ALN20240905BHJP
【ＦＩ】
C07K19/00 ZNA
C07K16/00
C07K14/47
A61P35/00
A61K39/395 D
A61K39/395 N
A61K47/68
C12N15/13
C12N15/62 Z
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024516380
(86)(22)【出願日】2022-09-13
(85)【翻訳文提出日】2024-03-12
(86)【国際出願番号】 CA2022051361
(87)【国際公開番号】W WO2023035084
(87)【国際公開日】2023-03-16
(31)【優先権主張番号】63/243,372
(32)【優先日】2021-09-13
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】501181075
【氏名又は名称】ザ・ホスピタル・フォー・シック・チルドレン
【氏名又は名称原語表記】ＴＨＥ ＨＯＳＰＩＴＡＬ ＦＯＲ ＳＩＣＫ ＣＨＩＬＤＲＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】524094745
【氏名又は名称】レイディアント バイオセラピューティクス インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100078282
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 秀策
(74)【代理人】
【識別番号】100113413
【弁理士】
【氏名又は名称】森下 夏樹
(74)【代理人】
【識別番号】100181674
【弁理士】
【氏名又は名称】飯田 貴敏
(74)【代理人】
【識別番号】100181641
【弁理士】
【氏名又は名称】石川 大輔
(74)【代理人】
【識別番号】230113332
【弁護士】
【氏名又は名称】山本 健策
(72)【発明者】
【氏名】ジュリアン， ジャン－フィリップ
(72)【発明者】
【氏名】ルハス ディエス， エドゥルネ
(72)【発明者】
【氏名】ヒューム， ジョアン
(72)【発明者】
【氏名】ベイリス， ピーター エドワード
(72)【発明者】
【氏名】ヘ， シンウェン
(72)【発明者】
【氏名】バイルシュミット， メリッサ
【テーマコード（参考）】
4C076
4C085
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C076CC27
4C076CC41
4C076EE59
4C085AA13
4C085AA14
4C085BB11
4C085BB36
4C085BB42
4C085GG02
4C085GG03
4C085GG04
4C085GG10
4H045AA10
4H045AA30
4H045BA41
4H045CA40
4H045DA76
(57)【要約】
１）ナノケージ単量体またはそのサブユニットに連結したＦｃポリペプチドを含む融合ポリペプチドと、２）ＤＲ５に結合することができる抗原結合抗体断片を含む融合ポリペプチドと、を含む自己組織化ポリペプチド複合体。本発明は、（ａ）（１）Ｆｃポリペプチド及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含む融合ポリペプチドと、（ｂ）（１）ＤＲ５に結合することができる抗体断片及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含む融合ポリペプチドと、を含む自己組織化ポリペプチド複合体の提供によって、この必要性に対処する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
自己組織化ポリペプチド複合体であって、（ａ）複数の第１の融合ポリペプチドであって、各第１の融合ポリペプチドが、（１）Ｆｃポリペプチド及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含む、前記複数の第１の融合ポリペプチドと、
（ｂ）複数の第２の融合ポリペプチドであって、各第２の融合ポリペプチドが、（１）ＤＲ５に結合することができる抗体断片及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含む、前記複数の第２の融合ポリペプチドと、を含み、
前記Ｆｃポリペプチドが、ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖を含み、前記ＩｇＧ１鎖が、ＥＵ番号付けによる、（１）２３７位のグリシン以外のアミノ酸残基、及び（２）３２９位のプロリン残基を含む、前記自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項2】
各第１の融合ポリペプチド及び各第２の融合ポリペプチドにおける前記ナノケージ単量体またはそのサブユニットが、フェリチン単量体またはそのサブユニットである、請求項１に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項3】
前記フェリチン単量体またはそのサブユニットが、フェリチン軽鎖またはそのサブユニットである、請求項２に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項4】
前記フェリチン単量体またはそのサブユニットが、ヒトフェリチンまたはそのサブユニットである、請求項２または３に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項5】
いずれのフェリチン重鎖またはフェリチン重鎖のサブユニットも含まない、請求項２～４のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項6】
前記フェリチン単量体またはそのサブユニットが、フェリチン単量体サブユニットである、請求項２～５のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項7】
ａ．各第１の融合ポリペプチドが、Ｃ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドが、Ｎ－半フェリチンを含むか、またはｂ．各第１の融合ポリペプチドが、Ｎ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドが、Ｃ－半フェリチンを含む、請求項６に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項8】
各第１の融合ポリペプチドが、アミノ酸リンカーを介して前記Ｃ－半フェリチンのＮ末端に連結されたＦｃポリペプチドを含む、請求項７に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項9】
前記アミノ酸リンカーが、（ＧｎＳ）ｍリンカーを含む、請求項８に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項10】
前記（ＧｎＳ）ｍリンカーが、（ＧＧＧＧＳ）ｍ（配列番号５４）リンカーである、請求項９に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項11】
前記Ｆｃポリペプチドが、２つのＦｃ鎖を含む一本鎖Ｆｃ（ｓｃＦｃ）を含み、前記２つのＦｃ鎖が、アミノ酸リンカーを介して連結されている、請求項１～１０のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項12】
前記２つのＦｃ鎖を連結する前記アミノ酸リンカーが、（ＧｎＳ）ｍリンカーを含む、請求項１１に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項13】
前記（ＧｎＳ）ｍリンカーが、（ＧＧＧＧＳ）ｍ（配列番号５４）リンカーである、請求項１２に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項14】
前記Ｆｃポリペプチドが、ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖を含む、請求項１～１３のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項15】
前記ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖が、ＥＵ番号付けによる、２３７位のアラニンを含む、請求項１４に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項16】
前記ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖が、ＥＵ番号付けによる、２３４位のアラニン、２３５位のアラニン、２３６位のアルギニン、及び３３０位のロイシンを含む、請求項１４または１５に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項17】
各第２の融合ポリペプチド内で、前記抗原結合抗体断片が、前記ナノケージ単量体またはそのサブユニットのＮ末端に連結されている、請求項１～１６のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項18】
各第２の融合ポリペプチドの前記抗原結合抗体断片が、Ｆａｂ断片である、請求項１～１７のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項19】
各第２の融合ポリペプチドが、いずれの抗体ＣＨ２またはＣＨ３ドメインも含まない、請求項１～１８のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項20】
複数の第３の融合ポリペプチドをさらに含み、各第３の融合ポリペプチドが、（１）抗原結合抗体断片及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含み、前記第３の融合ポリペプチドが、前記第２の融合ポリペプチドとは異なる、請求項１～１９のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項21】
各第３の融合ポリペプチドの前記抗原結合抗体断片が、Ｆａｂ断片である、請求項２０に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項22】
各第３の融合ポリペプチドが、いずれの抗体ＣＨ２またはＣＨ３ドメインも含まない、請求項２１に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項23】
各第１の融合ポリペプチド及び各第２の融合ポリペプチドの前記ナノケージ単量体またはそのサブユニットが、フェリチン単量体サブユニットであり、ａ．各第１の融合ポリペプチドが、Ｃ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドが、Ｎ－半フェリチンを含むか、または
ｂ．各第１の融合ポリペプチドが、Ｎ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドが、Ｃ－半フェリチンを含む、請求項１～２２のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項24】
前記自己組織化ポリペプチド複合体が、第１の融合ポリペプチド対第２の融合ポリペプチドの比が１：１であることを特徴とする、請求項１～２３のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項25】
合計で２４～４８個の融合ポリペプチドを含む、請求項１～２４のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項26】
合計で少なくとも２４個の融合ポリペプチドを含む、請求項１～２５のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項27】
合計で少なくとも３２個の融合ポリペプチドを含む、請求項２６に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項28】
合計で約３２個の融合ポリペプチドを有する、請求項２７に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項29】
前記自己組織化ポリペプチド複合体を含む組成物を投与した後に、前記自己組織化ポリペプチド複合体の濃度が、投与を必要とする対象への投与後の最初の７日間、同じ投与経路によって及び同様の組成物中で投与される参照ＩｇＧ分子の濃度と実質的に同様であることを特徴とする、請求項１～２８のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項30】
インビトロアッセイで決定された場合、少なくとも１つのヒトＦｃγ受容体への結合を示さない、請求項１～２９のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項31】
インビトロアッセイで決定された場合、ｈＦｃγＲＩ、ｈＦｃγＲＩＩａ、ｈＦｃγＲＩＩｂ、ｈＦｃγＲＩＩＩａ、ｈＦｃγＲＩＩＩｂ、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される１つ以上のヒトＦｃγ受容体への結合を示さない、請求項３０に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項32】
インビトロアッセイで決定された場合、ｈＦｃγＲＩへの結合を示さない、請求項３１に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項33】
インビトロアッセイで決定された場合、ｈＦｃγＲＩＩａへの結合を示さない、請求項３１または３２に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項34】
インビトロアッセイで決定された場合、ｈＦｃγＲＩＩＩａへの結合を示さない、請求項３１、３２、または３３のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項35】
インビトロアッセイで決定された場合、ｈＦｃγＲＩＩｂへの結合を示さない、請求項３１～３４のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項36】
インビトロアッセイで決定された場合、ｈＦｃγＲＩＩＩｂへの結合を示さない、請求項３１～３６のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項37】
自己組織化ポリペプチド複合体であって、（ａ）複数の第１の融合ポリペプチドであって、各第１の融合ポリペプチドが、（１）ｓｃＦｃ及び（２）フェリチン単量体またはそのサブユニットを含む、前記複数の第１の融合ポリペプチドと、
（ｂ）複数の第２の融合ポリペプチドであって、各第２の融合ポリペプチドが、（１）ＤＲ５に結合することができる抗体断片及び（２）フェリチン単量体またはそのサブユニットを含む、前記複数の第２の融合ポリペプチドと、を含み、前記ｓｃＦｃが、２つのＩｇＧ１ Ｆｃ鎖を含み、各ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖が、ＥＵ番号付けによる、２３４位のアラニン、２３５位のアラニン、２３６位のアルギニン、２３７位のアラニン、３２９位のプロリン、及び３３０位のロイシンを含む、前記自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項38】
ａ．各第１の融合ポリペプチドが、Ｃ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドが、Ｎ－半フェリチンを含むか、またはｂ．各第１の融合ポリペプチドが、Ｎ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドが、Ｃ－半フェリチンを含む、請求項３７に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項39】
各第１の融合ポリペプチドが、前記Ｃ－半フェリチンのＮ末端に連結されたｓｃＦｃを含み、各第２の融合ポリペプチドが、前記Ｎ－半フェリチンのＮ末端に連結されたＦａｂを含む、請求項３８に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項40】
（１）各第１の融合ポリペプチドにおいて、前記ｓｃＦｃが、アミノ酸リンカーを介して、前記Ｃ－半フェリチンのＮ末端に連結されており、及び／または（２）各第２の融合ポリペプチドにおいて、前記Ｆａｂが、アミノ酸リンカーを介して、Ｎ－半フェリチンのＮ末端に連結されている、請求項３９に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項41】
前記自己組織化ポリペプチド複合体が、第１の融合ポリペプチド対第２の融合ポリペプチドの比が１：１であることを特徴とする、請求項３８～４０のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項42】
複数の第３の融合ポリペプチドをさらに含み、各第３の融合ポリペプチドが、（１）抗原結合抗体断片及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含み、前記第３の融合ポリペプチドが、前記第２の融合ポリペプチドとは異なる、請求項３７～４１のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項43】
合計で２４～４８個の融合ポリペプチドを含む、請求項３７～４２のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項44】
合計で少なくとも２４個の融合ポリペプチドを含む、請求項３７～４３のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項45】
合計で少なくとも３２個の融合ポリペプチドを含む、請求項４４に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項46】
合計で約３２個の融合ポリペプチドを有する、請求項４５に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項47】
前記抗体断片が、（１）ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖と、（２）ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖と、を含み、（ａ）（ｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ１が、配列番号２７の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ２が、配列番号２８の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ３が、配列番号２９の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ１が、配列番号２４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ２が、配列番号２５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）前記ＣＤＲ－Ｌ３が、配列番号２６の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有するか、
（ｂ）（ｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ１が、配列番号３５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ２が、配列番号３６の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ３が、配列番号３７の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ１が、配列番号３２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ２が、配列番号３３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）前記ＣＤＲ－Ｌ３が、配列番号３４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有するか、
（ｃ）（ｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ１が、配列番号４３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ２が、配列番号４４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ３が、配列番号４５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ１が、配列番号４０の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ２が、配列番号４１の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）前記ＣＤＲ－Ｌ３が、配列番号４２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有するか、
または
（ｄ）（ｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ１が、配列番号５１の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ２が、配列番号５２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ３が、配列番号５３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ１が、配列番号４８の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ２が、配列番号４９の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）前記ＣＤＲ－Ｌ３が、配列番号５０の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有する、請求項１～４６のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項48】
前記抗体断片が、（１）ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖と、（２）ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖と、を含み、
（ａ）（ｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ１が、配列番号２７の配列を有し、
（ｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ２が、配列番号２８の配列を有し、
（ｉｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ３が、配列番号２９の配列を有し、
（ｉｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ１が、配列番号２４の配列を有し、
（ｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ２が、配列番号２５の配列を有し、
（ｖｉ）前記ＣＤＲ－Ｌ３が、配列番号２６の配列を有するか、
（ｂ）（ｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ１が、配列番号３５の配列を有し、
（ｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ２が、配列番号３６の配列を有し、
（ｉｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ３が、配列番号３７の配列を有し、
（ｉｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ１が、配列番号３２の配列を有し、
（ｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ２が、配列番号３３の配列を有し、
（ｖｉ）前記ＣＤＲ－Ｌ３が、配列番号３４の配列を有するか、
（ｃ）（ｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ１が、配列番号４３の配列を有し、
（ｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ２が、配列番号４４の配列を有し、
（ｉｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ３が、配列番号４５の配列を有し、
（ｉｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ１が、配列番号４０の配列を有し、
（ｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ２が、配列番号４１の配列を有し、
（ｖｉ）前記ＣＤＲ－Ｌ３が、配列番号４２の配列を有するか、
または
（ｄ）（ｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ１が、配列番号５１の配列を有し、
（ｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ２が、配列番号５２の配列を有し、
（ｉｉｉ）前記ＣＤＲ－Ｈ３が、配列番号５３の配列を有し、
（ｉｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ１が、配列番号４８の配列を有し、
（ｖ）前記ＣＤＲ－Ｌ２が、配列番号４９の配列を有し、
（ｖｉ）前記ＣＤＲ－Ｌ３が、配列番号５０の配列を有する、請求項４７に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項49】
前記抗体断片が、（１）参照ＶＨ配列と少なくとも８５％同一である重鎖可変領域と、
（２）参照ＶＬ配列と少なくとも８５％同一である軽鎖可変領域と、を含み、
（ａ）前記参照ＶＨ配列が、配列番号２３の配列を有し、前記参照ＶＬ配列が、配列番号２２の配列を有するか、
（ｂ）前記参照ＶＨ配列が、配列番号３１の配列を有し、前記参照ＶＬ配列が、配列番号３０の配列を有するか、
（ｃ）前記参照ＶＨ配列が、配列番号３９の配列を有し、前記参照ＶＬ配列が、配列番号３８の配列を有するか、または
（ｄ）前記参照ＶＨ配列が、配列番号４７の配列を有し、前記参照ＶＬ配列が、配列番号４６の配列を有する、請求項１～４８のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体。
【請求項50】
請求項１～４９のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体を含む組成物を、哺乳動物対象に投与することを含む、方法。
【請求項51】
前記対象が、ヒトである、請求項５０に記載の方法。
【請求項52】
前記対象が、投与時に、腫瘍を有すると診断されるか、または腫瘍を発症するリスクがある、請求項５０または５１に記載の方法。
【請求項53】
前記投与ステップが、前記腫瘍の進行の遅延または阻害をもたらす、請求項５２に記載の方法。
【請求項54】
前記投与ステップが、前記腫瘍の退縮をもたらす、請求項５３に記載の方法。
【請求項55】
前記投与ステップが、前記腫瘍の完全な退縮をもたらす、請求項５４に記載の方法。
【請求項56】
全身経路による投与を含む、請求項５０～５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項57】
前記全身経路が、皮下、静脈内、または筋肉内注射、吸入、または鼻腔内投与を含む、請求項５６に記載の方法。
【請求項58】
哺乳動物対象への投与のための、請求項１～４９のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体を含む組成物の使用。
【請求項59】
前記対象が、ヒトである、請求項５８に記載の使用。
【請求項60】
前記対象が、投与時に、腫瘍を有すると診断されるか、または腫瘍を発症するリスクがある、請求項５８または５９に記載の使用。
【請求項61】
前記腫瘍の進行を遅延または阻害するための、請求項６０に記載の使用。
【請求項62】
前記腫瘍の退縮を引き起こすための、請求項６０または６１に記載の使用。
【請求項63】
前記腫瘍の完全な退縮を引き起こすための、請求項６２に記載の使用。
【請求項64】
全身投与のための、請求項５８～６３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項65】
全身投与が、皮下、静脈内、もしくは筋肉内注射、吸入、または鼻腔内投与を含む、請求項６４に記載の使用。
【請求項66】
哺乳動物対象への投与で使用するための、請求項１～４９のいずれか１項に記載の自己組織化ポリペプチド複合体を含む組成物。
【請求項67】
前記対象が、ヒトである、請求項６６に記載の使用のための組成物。
【請求項68】
前記対象が、投与時に、腫瘍を有すると診断されるか、または腫瘍を発症するリスクがある、請求項６６または６７に記載の使用のための組成物。
【請求項69】
前記腫瘍の進行を遅延または阻害するための、請求項６８に記載の使用のための組成物。
【請求項70】
前記腫瘍の退縮を引き起こすための、請求項６８または６９に記載の使用のための組成物。
【請求項71】
前記腫瘍の完全な退縮を引き起こすための、請求項７０に記載の使用のための組成物。
【請求項72】
全身投与のための、請求項６６～７１のいずれか１項に記載の使用のための組成物。
【請求項73】
全身投与が、皮下、静脈内、もしくは筋肉内注射、吸入、または鼻腔内投与を含む、請求項７２に記載の使用のための組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年９月１３日に出願された米国仮出願第６３／２４３，３７２号の利益及び優先権を主張するものであり、その全体の内容は、すべての目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２１年９月１３日に出願された米国仮出願第６３／２４３，３７２号の利益及び優先権を主張するものであり、その全体の内容は、すべての目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
配列表
本出願は、ＸＭＬフォーマットで電子的に提出され、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる配列表を含む。当該ＸＭＬファイルは、２０２２年９月１３日に作成され、Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｌｉｓｔｉｎｇ Ｓｅｐ－２０２２ ３２０６－５０６９＿Ｒという名前で、サイズは５７．６キロバイトである。
本出願は、ＸＭＬフォーマットで電子的に提出され、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる配列表を含む。当該ＸＭＬファイルは、２０２２年９月１３日に作成され、Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｌｉｓｔｉｎｇ Ｓｅｐ－２０２２ ３２０６－５０６９＿Ｒという名前で、サイズは５７．６キロバイトである。
【背景技術】
【0003】
デスレセプター５（ＤＲ５）は、ＴＮＦ受容体スーパーファミリーのメンバーである。ＤＲ５は、リガンド結合時に受容体三量体化によって活性化される。活性化されると、ＤＲ５は、細胞内アポトーシスシグナルを細胞に送達する。ＤＲ５は、様々な種類のがん細胞において上方制御され、がん療法のための魅力的な標的を提示する。しかしながら、ＤＲ５を標的とすることに基づく候補の治療薬の有効性は、例えば、細胞膜内の受容体を架橋する能力が不十分であるなどの要因によって制限され得る。
【0004】
ＤＲ５を標的とするための改善された組成物及び方法の必要性が存在する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0005】
本発明は、（ａ）（１）Ｆｃポリペプチド及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含む融合ポリペプチドと、（ｂ）（１）ＤＲ５に結合することができる抗体断片及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含む融合ポリペプチドと、を含む自己組織化ポリペプチド複合体の提供によって、この必要性に対処する。ある特定の実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、特定の位置にあるある特定のアミノ酸残基、及び自己組織化ポリペプチド複合体を含む。
【0006】
一態様では、
（ａ）複数の第１の融合ポリペプチドであって、各第１の融合ポリペプチドが、（１）Ｆｃポリペプチド及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含む、複数の第１の融合ポリペプチドと、
（ｂ）複数の第２の融合ポリペプチドであって、各第２の融合ポリペプチドが、（１）ＤＲ５に結合することができる抗体断片及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含む、複数の第２の融合ポリペプチドと、を含む自己組織化ポリペプチド複合体が提供され、
Ｆｃポリペプチドは、ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖を含み、ＩｇＧ１鎖は、ＥＵ番号付けによる、（１）２３７位のグリシン以外のアミノ酸残基、及び（２）３２９位のプロリン残基を含む。
（ａ）複数の第１の融合ポリペプチドであって、各第１の融合ポリペプチドが、（１）Ｆｃポリペプチド及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含む、複数の第１の融合ポリペプチドと、
（ｂ）複数の第２の融合ポリペプチドであって、各第２の融合ポリペプチドが、（１）ＤＲ５に結合することができる抗体断片及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含む、複数の第２の融合ポリペプチドと、を含む自己組織化ポリペプチド複合体が提供され、
Ｆｃポリペプチドは、ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖を含み、ＩｇＧ１鎖は、ＥＵ番号付けによる、（１）２３７位のグリシン以外のアミノ酸残基、及び（２）３２９位のプロリン残基を含む。
【0007】
いくつかの実施形態では、各第１の融合ポリペプチド及び各第２の融合ポリペプチドにおけるナノケージ単量体またはそのサブユニットは、フェリチン単量体またはそのサブユニットである。
【0008】
いくつかの実施形態では、フェリチン単量体またはそのサブユニットは、フェリチン軽鎖またはそのサブユニットである。
【0009】
いくつかの実施形態では、フェリチン単量体またはそのサブユニットは、ヒトフェリチンまたはそのサブユニットである。
【0010】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、いずれのフェリチン重鎖またはフェリチン重鎖のサブユニットも含まない。
【0011】
いくつかの実施形態では、フェリチン単量体またはそのサブユニットは、フェリチン単量体サブユニットである。
【0012】
いくつかの実施形態では、
ａ．各第１の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンを含むか、または
ｂ．各第１の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンを含む。
ａ．各第１の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンを含むか、または
ｂ．各第１の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンを含む。
【0013】
いくつかの実施形態では、各第１の融合ポリペプチドは、アミノ酸リンカーを介してＣ－半フェリチンのＮ末端に連結されたＦｃポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、アミノ酸リンカーは、（ＧｎＳ）ｍリンカーを含む。いくつかの実施形態では、（ＧｎＳ）ｍリンカーは、（ＧＧＧＧＳ）ｍ（配列番号５４）リンカーである。
【0014】
いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、２つのＦｃ鎖を含む一本鎖Ｆｃ（ｓｃＦｃ）を含み、２つのＦｃ鎖は、アミノ酸リンカー、例えば、（ＧｎＳ）ｍリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）ｍ（配列番号５４）リンカーを含むアミノ酸リンカーを介して連結されている。
【0015】
いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖を含む。
【0016】
いくつかの実施形態では、ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖は、ＥＵ番号付けによる、２３７位のアラニンを含む。いくつかの実施形態では、ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖は、ＥＵ番号付けによる、２３４位のアラニン、２３５位のアラニン、２３６位のアルギニン、及び３３０位のロイシンを含む。
【0017】
いくつかの実施形態では、各第２の融合ポリペプチド内で、抗原結合抗体断片は、ナノケージ単量体またはそのサブユニットのＮ末端に連結されている。
【0018】
いくつかの実施形態では、各第２の融合ポリペプチドの抗原結合抗体断片は、Ｆａｂ断片である。いくつかの実施形態では、各第２の融合ポリペプチドは、いずれの抗体ＣＨ２またはＣＨ３ドメインも含まない。
【0019】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、複数の第３の融合ポリペプチドをさらに含み、各第３の融合ポリペプチドは、（１）抗原結合抗体断片及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含み、第３の融合ポリペプチドは、第２の融合ポリペプチドとは異なる。
【0020】
いくつかの実施形態では、各第３の融合ポリペプチドの抗原結合抗体断片は、Ｆａｂ断片である。
【0021】
いくつかの実施形態では、各第３の融合ポリペプチドは、いずれの抗体ＣＨ２またはＣＨ３ドメインも含まない。
【0022】
いくつかの実施形態では、各第１の融合ポリペプチド及び各第２の融合ポリペプチドのナノケージ単量体またはそのサブユニットは、フェリチン単量体またはそのサブユニットであり、
ａ．各第１の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンを含むか、または
ｂ．各第１の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンを含む。
ａ．各第１の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンを含むか、または
ｂ．各第１の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンを含む。
【0023】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、第１の融合ポリペプチド対第２の融合ポリペプチドの比が１：１であることを特徴とする。
【0024】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、合計で２４～４８個の融合ポリペプチドを含む。
【0025】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、合計で少なくとも２４個の融合ポリペプチドを含む。
【0026】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、合計で少なくとも３２個の融合ポリペプチドを含む。
【0027】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、合計約３２個の融合ポリペプチドを有する。
【0028】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体を含む組成物を投与した後に、自己組織化ポリペプチド複合体の濃度は、投与を必要とする対象への投与後の最初の７日間、同じ投与経路によって及び同様の組成物中で投与される参照ＩｇＧ分子の濃度と実質的に同様である。
【0029】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、インビトロアッセイで決定された場合、少なくとも１つのヒトＦｃγ受容体への結合を示さない。
【0030】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、インビトロアッセイで決定された場合、ｈＦｃγＲＩ、ｈＦｃγＲＩＩａ、ｈＦｃγＲＩＩｂ、ｈＦｃγＲＩＩＩａ、ｈＦｃγＲＩＩＩｂ、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される１つ以上のヒトＦｃγ受容体への結合を示さない。
【0031】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、インビトロアッセイで決定された場合、ｈＦｃγＲＩへの結合を示さない。いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、インビトロアッセイで決定された場合、ｈＦｃγＲＩＩａへの結合を示さない。いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、インビトロアッセイで決定された場合、ｈＦｃγＲＩＩＩａへの結合を示さない。いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、インビトロアッセイで決定された場合、ｈＦｃγＲＩＩｂへの結合を示さない。いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、インビトロアッセイで決定された場合、ｈＦｃγＲＩＩＩｂへの結合を示さない。
【0032】
ある特定の実施形態では、
（ａ）複数の第１の融合ポリペプチドであって、各第１の融合ポリペプチドが、（１）ｓｃＦｃ及び（２）フェリチン単量体またはそのサブユニットを含む、複数の第１の融合ポリペプチドと、
（ｂ）複数の第２の融合ポリペプチドであって、各第２の融合ポリペプチドが、（１）ＤＲ５に結合することができる抗体断片及び（２）フェリチン単量体またはそのサブユニットを含む、複数の第２の融合ポリペプチドと、を含む自己組織化ポリペプチド複合体が提供され、ｓｃＦｃは、２つのＩｇＧ１ Ｆｃ鎖を含み、各ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖が、ＥＵ番号付けによる、２３４位のアラニン、２３５位のアラニン、２３６位のアルギニン、２３７位のアラニン、３２９位のプロリン、及び３３０位のロイシンを含む。
（ａ）複数の第１の融合ポリペプチドであって、各第１の融合ポリペプチドが、（１）ｓｃＦｃ及び（２）フェリチン単量体またはそのサブユニットを含む、複数の第１の融合ポリペプチドと、
（ｂ）複数の第２の融合ポリペプチドであって、各第２の融合ポリペプチドが、（１）ＤＲ５に結合することができる抗体断片及び（２）フェリチン単量体またはそのサブユニットを含む、複数の第２の融合ポリペプチドと、を含む自己組織化ポリペプチド複合体が提供され、ｓｃＦｃは、２つのＩｇＧ１ Ｆｃ鎖を含み、各ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖が、ＥＵ番号付けによる、２３４位のアラニン、２３５位のアラニン、２３６位のアルギニン、２３７位のアラニン、３２９位のプロリン、及び３３０位のロイシンを含む。
【0033】
いくつかの実施形態では、
ａ．各第１の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンを含むか、または
ｂ．各第１の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンを含む。
ａ．各第１の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンを含むか、または
ｂ．各第１の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンを含む。
【0034】
いくつかの実施形態では、各第１の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンのＮ末端に連結されたｓｃＦｃを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンのＮ末端に連結されたＦａｂを含む。
【0035】
いくつかの実施形態では、各第１の融合ポリペプチドにおいて、ｓｃＦｃが、アミノ酸リンカーを介して、Ｃ－半フェリチンのＮ末端に連結されており、及び／または（２）各第２の融合ポリペプチドにおいて、Ｆａｂは、アミノ酸リンカーを介して、Ｎ－半フェリチンのＮ末端に連結されている。
【0036】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、第１の融合ポリペプチド対第２の融合ポリペプチドの比が１：１であることを特徴とする。
【0037】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、複数の第３の融合ポリペプチドをさらに含み、各第３の融合ポリペプチドは、（１）抗原結合抗体断片及び（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットを含み、第３の融合ポリペプチドは、第２の融合ポリペプチドとは異なる。
【0038】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、合計で２４～４８個の融合ポリペプチドを含む。
【0039】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、合計で少なくとも２４個の融合ポリペプチドを含む。
【0040】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、合計で少なくとも３２個の融合ポリペプチドを含む。
【0041】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、合計約３２個の融合ポリペプチドを有する。
【0042】
いくつかの実施形態では、抗体断片は、（１）ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖と、（２）ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖と、を含み、
（ａ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号２７の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号２８の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号２９の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号２４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号２５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号２６の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有するか、
（ｂ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号３５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号３６の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号３７の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号３２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号３３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号３４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有するか、
（ｃ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号４３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号４４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号４５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４０の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４１の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号４２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有するか、
または
（ｄ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号５１の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号５２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号５３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４８の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４９の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号５０の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有する。
（ａ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号２７の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号２８の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号２９の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号２４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号２５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号２６の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有するか、
（ｂ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号３５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号３６の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号３７の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号３２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号３３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号３４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有するか、
（ｃ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号４３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号４４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号４５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４０の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４１の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号４２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有するか、
または
（ｄ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号５１の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号５２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号５３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４８の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４９の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号５０の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸だけ異なる配列を有する。
【0043】
いくつかの実施形態では、抗体断片は、（１）ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖と、（２）ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖と、を含み、
（ａ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号２７の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号２８の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号２９の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号２４の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号２５の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号２６の配列を有するか、
（ｂ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号３５の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号３６の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号３７の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号３２の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号３３の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号３４の配列を有するか、
（ｃ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号４３の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号４４の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号４５の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４０の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４１の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号４２の配列を有するか、
または
（ｄ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号５１の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号５２の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号５３の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４８の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４９の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号５０の配列を有する。
（ａ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号２７の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号２８の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号２９の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号２４の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号２５の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号２６の配列を有するか、
（ｂ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号３５の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号３６の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号３７の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号３２の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号３３の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号３４の配列を有するか、
（ｃ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号４３の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号４４の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号４５の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４０の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４１の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号４２の配列を有するか、
または
（ｄ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号５１の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号５２の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号５３の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４８の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４９の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号５０の配列を有する。
【0044】
いくつかの実施形態では、抗体断片は、
（１）参照ＶＨ配列と少なくとも８５％同一である重鎖可変領域と、
（２）参照ＶＬ配列と少なくとも８５％同一である軽鎖可変領域と、を含み、
（ａ）参照ＶＨ配列は、配列番号２３の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号２２の配列を有するか、
（ｂ）参照ＶＨ配列は、配列番号３１の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号３０の配列を有するか、
（ｃ）参照ＶＨ配列は、配列番号３９の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号３８の配列を有するか、または
（ｄ）参照ＶＨ配列は、配列番号４７の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号４６の配列を有する。
（１）参照ＶＨ配列と少なくとも８５％同一である重鎖可変領域と、
（２）参照ＶＬ配列と少なくとも８５％同一である軽鎖可変領域と、を含み、
（ａ）参照ＶＨ配列は、配列番号２３の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号２２の配列を有するか、
（ｂ）参照ＶＨ配列は、配列番号３１の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号３０の配列を有するか、
（ｃ）参照ＶＨ配列は、配列番号３９の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号３８の配列を有するか、または
（ｄ）参照ＶＨ配列は、配列番号４７の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号４６の配列を有する。
【0045】
一態様では、本明細書に開示される自己組織化ポリペプチド複合体を含む組成物を哺乳動物対象に投与することを含む方法が提供される。
【0046】
いくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。
【0047】
いくつかの実施形態では、対象は、投与時に腫瘍を有すると診断されるか、または腫瘍を発症するリスクがある。
【0048】
いくつかの実施形態では、投与ステップは、腫瘍の進行の遅延または阻害をもたらす。
【0049】
いくつかの実施形態では、投与ステップは、腫瘍の退縮をもたらす。
【0050】
いくつかの実施形態では、投与ステップは、腫瘍の完全な退縮をもたらす。
【0051】
いくつかの実施形態では、方法は、全身経路、例えば、皮下、静脈内、もしくは筋肉内注射、吸入、または鼻腔内投与を含む全身経路による投与を含む。
【0052】
一態様では、哺乳動物対象への投与のための、本明細書に記載の自己組織化ポリペプチド複合体を含む組成物の使用が提供される。
【0053】
いくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。
【0054】
いくつかの実施形態では、対象は、投与時に腫瘍を有すると診断されるか、または腫瘍を発症するリスクがある。
【0055】
いくつかの実施形態では、使用は、腫瘍の進行を遅延または阻害するためのものである。
【0056】
いくつかの実施形態では、使用は、腫瘍の退縮を引き起こすためのものである。
【0057】
いくつかの実施形態では、使用は、腫瘍の完全な退縮を引き起こすためのものである。
【0058】
いくつかの実施形態では、使用は、全身投与のためのものである。
【0059】
いくつかの実施形態では、全身投与は、皮下、静脈内、もしくは筋肉内注射、吸入、または鼻腔内投与を含む。
【0060】
一態様では、哺乳動物対象への投与で使用するための、本明細書に記載の自己組織化ポリペプチド複合体を含む組成物が提供される。
【0061】
いくつかの実施形態では、対象は、ヒトである。
【0062】
いくつかの実施形態では、対象は、投与時に腫瘍を有すると診断されるか、または腫瘍を発症するリスクがある。
【0063】
いくつかの実施形態では、組成物は、腫瘍の進行を遅延または阻害するためのものである。
【0064】
いくつかの実施形態では、組成物は、腫瘍の退縮を引き起こすためのものである。
【0065】
いくつかの実施形態では、組成物は、腫瘍の完全な退縮を引き起こすためのものである。
【0066】
いくつかの実施形態では、組成物は、全身投与のためのものである。
【0067】
いくつかの実施形態では、全身投与は、皮下、静脈内、もしくは筋肉内注射、吸入、または鼻腔内投与を含む。
【図面の簡単な説明】
【0068】
【図1A】ヒトフェリチン軽鎖（ｈＦＴＬ）及び例示的なＮ－半フェリチン（Ｎ－ｈＦＴＬ）及びＣ－半フェリチン（Ｃ－ｈＦＴＬ）分子の図的表現である。
【0069】
【図1B】本開示の例示的なＭｕｌｔａｂｏｄｙを一緒に形成する融合ポリペプチドの図的表現である。
【0070】
【図2】それぞれ、ヒトＤＲ５、ヒトＤＲ４、ヒトオステオプロテゲリン（ＯＰＧ）、ヒトデコイ受容体１（ＤｃＲ１）、及びヒトＤｃＲ２へのＤＲ５標的化Ｍｕｌｔａｂｏｄｙ（Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ）の結合のためのバイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）時間応答曲線を示す。
【0071】
【図3】会合のためにｐＨ６．０及び解離のためにｐＨ７．４で測定した、ヒト、カニクイザル、及びマウスのＦｃＲｎへの様々なＦｃ鎖を含むＤＲ５標的化Ｍｕｌｔａｂｏｄｙの結合のための例示的なＢＬＩ時間応答曲線を示す。
【0072】
【図4】定量化され、ビヒクル処置された腫瘍細胞に対するＭｕｌｔａｂｏｄｙまたは抗体処置後の生存可能な細胞の割合として表される、異なるヒト腫瘍細胞株におけるＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ｗｔ、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ、及びコナツムマブ（Ｃｏｎａ）によるがん細胞の用量依存的殺傷を示す。
【0073】
【図5A】実施例６に記載される薬物動態研究の設計を示す概略図である。
【0074】
【図5B】重症複合免疫不全症（ＳＣＩＤ）マウスに投与された単回腹腔内（ｉ．ｐ．）または静脈内（ｉ．ｖ．）用量後のＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ｗｔ、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ、またはコナツムマブ（Ｃｏｎａ）の血漿レベルを示すプロットを示す。
【0075】
【図5C】９６時間間隔で、２つの腹腔内用量を投与されたＳＣＩＤマウスにおけるＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬまたはコナツムマブの血漿レベルを示す。
【0076】
【図6A】実施例７に記載され、かつＣＯＬＯ２０５異種移植マウスモデルで実施されたインビボ有効性実験の設計を示す概略図である。
【0077】
【0078】
【0079】
【図6H】ＣＯＬＯ２０５異種移植腫瘍保有マウスへの腹腔内投与後のＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬまたはコナツムマブの血漿レベルを示す時間プロットである。
【0080】
【図7A】第１の用量以来の経時的な様々な群におけるマウスの腫瘍体積を示すプロットである。「ＭＢ」は、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ群を示す。Ｘ軸上の三角形は、治療時点を示す。
【図7B】ビヒクル（図７Ｂ）ならびに５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、０．２５ｍｇ／ｋｇ、及び０．１ｍｇ／ｋｇのＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ処置（それぞれ、図７Ｃ、図７Ｄ、図７Ｅ、及び図７Ｆ）群内の個々のマウスの腫瘍体積を示す。図７Ｂ～７Ｆにおいて、「ＣＲ」は、完全な退縮を示す。
【図7C】ビヒクル（図７Ｂ）ならびに５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、０．２５ｍｇ／ｋｇ、及び０．１ｍｇ／ｋｇのＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ処置（それぞれ、図７Ｃ、図７Ｄ、図７Ｅ、及び図７Ｆ）群内の個々のマウスの腫瘍体積を示す。図７Ｂ～７Ｆにおいて、「ＣＲ」は、完全な退縮を示す。
【図7D】ビヒクル（図７Ｂ）ならびに５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、０．２５ｍｇ／ｋｇ、及び０．１ｍｇ／ｋｇのＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ処置（それぞれ、図７Ｃ、図７Ｄ、図７Ｅ、及び図７Ｆ）群内の個々のマウスの腫瘍体積を示す。図７Ｂ～７Ｆにおいて、「ＣＲ」は、完全な退縮を示す。
【0081】
【図7G】第１の用量が投与された後の様々な時点で収集された血液試料中で検出可能なＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬの量を示すプロットである。Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬは、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ／、及び５ｍｇ／ｋｇのＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ処置群で試験されたすべての時点で検出可能であり、薬物動態はすべての用量群で直線的に現れた。
【0082】
【図8】ＣＯＬＯ２０５異種移植マウスモデルにおけるＤＲ５標的化Ｍｕｌｔａｂｏｄｙによる大腫瘍浸透及びアポトーシス誘導の研究の設計を示す概略図である。実験は実施例９に記載する。
【0083】
【発明を実施するための形態】
【0084】
定義
用語「約（ａｂｏｕｔ）」及び「およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」は、値に関して本明細書で使用されるとき、互換的に使用され、参照される値と同様の値を指す。一般に、文脈に精通している当業者は、その文脈において「約」または「およそ」に包含される関連する程度の変動を理解するであろう。例えば、いくつかの実施形態では、用語「約」及び「およそ」は、参照値の２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、またはそれ以下の範囲に入る値を包含し得る。
用語「約（ａｂｏｕｔ）」及び「およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」は、値に関して本明細書で使用されるとき、互換的に使用され、参照される値と同様の値を指す。一般に、文脈に精通している当業者は、その文脈において「約」または「およそ」に包含される関連する程度の変動を理解するであろう。例えば、いくつかの実施形態では、用語「約」及び「およそ」は、参照値の２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、またはそれ以下の範囲に入る値を包含し得る。
【0085】
本明細書で使用される場合、用語「改変する」、「改変された」、「減少させる」、「減少された」、「増加させる」、「増加された」、または「低減」、「低減された」（例えば、特定の結果または効果に関して）は、参照レベルに対する意味を有する。いくつかの実施形態では、Ｆｃ鎖またはＦｃポリペプチドにおける変異を考察する文脈において、参照レベルは、Ｆｃ領域内の参照される変異（複数可）を含まないＩｇＧで既知または決定されるレベルである。
【0086】
本明細書で使用される場合、「結合」という用語は、別途指定されない限り、２つ以上の実体間の、またはそれらの間の非共有結合会合を指す。「直接」結合は、実体または部分間の物理的接触を伴い、間接結合は、１つ以上の中間実体との物理的接触による物理的相互作用を伴う。２つ以上の実体間の結合は、典型的には、様々な状況のうちのいずれかで評価することができ、これには、相互作用する実体または部分が、単独で、またはより複雑なシステムの状況で（例えば、共有結合的に、またはそうでなければ担体実体と会合している間、及び／または生物学的システムもしくは細胞内で）研究される場合が含まれる。本明細書で使用される場合、２つの実体間の「非結合（ｎｏｎ－ｂｉｎｄｉｎｇ）」もしくは「非結合（ｎｏ ｂｉｎｄｉｎｇ）」、または同様の語句は、１）検出可能な結合の欠如、または２）適切なアッセイ、例えば、バイオレイヤー干渉法などのインビトロ結合アッセイにおける非結合に対応する、設定された閾値を下回る結合を指す。例えば、いくつかの実施形態では、インビトロバイオレイヤー干渉法アッセイにおいて、試験物品が２０ｎＭの濃度で存在する場合、０．８ｎｍの標的を充填したバイオセンサへの、１８０秒後の０．１ｎｍ未満の最大会合結合応答は、「非結合」として分類される。
【0087】
「フェリチン」及び「アポフェリチン」という用語は、本明細書において互換的に使用され、一般に、典型的には２４個のタンパク質サブユニットを含むフェリチン複合体へと組織化することができるポリペプチド（例えば、フェリチン鎖）を指す。いくつかの実施形態では、フェリチンは、ヒトフェリチン、例えば、ヒトフェリチン軽鎖、例えば、配列番号１またはＵｎｉＰｒｏｔ Ｐ０２７９２と少なくとも８５％の配列同一性を有するヒトフェリチン軽鎖である。いくつかの実施形態では、フェリチンは野生型フェリチンである。例えば、フェリチンは、野生型ヒトフェリチンであってもよい。
【0088】
「フェリチン単量体」という用語は、他のフェリチン鎖の存在下で、複数のフェリチン鎖、例えば２４個以上のフェリチン鎖を含むポリペプチド複合体に自己組織化することができるフェリチンの一本鎖を指すために本明細書で使用される。
【0089】
本明細書で使用される場合、「リンカー」という用語は、２つ以上のエレメントを接続して多エレメント剤（ａｇｅｎｔ）を形成する実体を指すために使用される。例えば、当業者は、２つ以上の機能的または組織的ドメインを含む構造を有するポリペプチド（例えば、融合ポリペプチド）が、それらを互いに連結するそのようなドメインの間に一連のアミノ酸を含むことが多いことを理解する。いくつかの実施形態では、リンカー要素を含むポリペプチドは、一般的な形態Ｓ１－Ｌ－Ｓ２の全体的な構造を有し、Ｓ１及びＳ２は、同じであっても異なっていてもよく、リンカー（Ｌ）によって互いに会合する２つのドメインを表す。いくつかの実施形態では、リンカーは、「アミノ酸リンカー」つまり、アミノ酸残基を含み、例えば、アミノ酸リンカーは、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００個以上のアミノ酸残基を含み得る。いくつかの実施形態では、リンカーは、硬直した三次元構造を採用する傾向がなく、むしろポリペプチドに柔軟性を提供することを特徴とする。
【0090】
本明細書で使用される「多重特異性」という用語は、少なくとも２つの異なる結合パートナー、例えば、抗原または受容体（例えば、Ｆｃ受容体）が結合することができる少なくとも２つの結合部位を有する特徴を指す。例えば、少なくとも２つのＦａｂ断片を含むポリペプチド複合体であって、２つのＦａｂ断片のそれぞれが異なる抗原に結合することができるポリペプチド複合体は、「多重特異性」である。追加の例として、Ｆｃ断片（Ｆｃ受容体に結合することができる）及びＦａｂ断片（抗原に結合することができる）を含むポリペプチド複合体は、「多重特異性」である。
【0091】
本明細書で使用される「多価」という用語は、結合パートナー、例えば、抗原または受容体（例えば、Ｆｃ受容体）が結合することができる少なくとも２つの結合部位を有する特徴を指す。少なくとも２つの結合部位に結合することができる結合パートナーは、同じであっても異なっていてもよい。
【0092】
本明細書で使用される「ナノケージ単量体」という用語は、他のナノケージ単量体と自己組織化し、複数のナノケージ単量体を含む自己組織化ポリペプチド複合体を形成することができるポリペプチドの単一鎖を指す。いくつかの実施形態では、ナノケージ単量体は、フェリチン、アポフェリチン、エンカプスリン（ｅｎｃａｐｓｕｌｉｎ）、硫黄オキシゲナーゼ還元酵素（ＳＯＲ）、ルマジン合成酵素、ピルビン酸脱水素酵素、カルボキシソーム、ヴォールトタンパク質、ＧｒｏＥＬ、熱ショックタンパク質、Ｅ２Ｐコートタンパク質、ＭＳ２コートタンパク質、その断片、及びその変異体の単量体から選択される。
【0093】
本明細書で使用される「ポリペプチド」という用語は、一般に、少なくとも３つのアミノ酸のポリマー、例えば、ペプチド結合によって互いに連結されたポリマーという当技術分野で認識されている意味を有する。当業者は、「ポリペプチド」という用語が、本明細書に列挙される完全な配列を有するポリペプチドだけでなく、そのような完全なポリペプチドの機能的断片（すなわち、少なくとも１つの活性を保持する断片）を表すポリペプチドを包含するように十分に一般的であることが意図されていることを理解するであろう。さらに、当業者は、タンパク質配列が一般に、活性を破壊することなくいくつかの置換を許容することを理解する。したがって、活性を保持し、少なくとも約３０～４０％、しばしば約５０％、約６０％、約７０％、または約８０％を超え、さらに通常は、はるかに高い同一性の少なくとも１つの領域内の１つ以上の高度に保存された領域においてしばしば９０％を超え、またはなおも９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％を超え、通常、少なくとも３～４個、しばしば最大２０個以上のアミノ酸を包含する全体的な配列同一性を、同じクラスの別のポリペプチドと共有する任意のポリペプチドは、本明細書で使用される関連用語「ポリペプチド」に包含される。ポリペプチドは、Ｌ－アミノ酸、Ｄ－アミノ酸、またはその両方を含み得、当前記技術分野で既知の様々なアミノ酸修飾または類似体のいずれかを含み得る。有用な修飾としては、例えば、末端アセチル化、アミド化、メチル化、グリコシル化などが挙げられる。いくつかの実施形態では、タンパク質は、天然アミノ酸、非天然アミノ酸、合成アミノ酸、及びこれらの組み合わせを含んでもよい。
【0094】
巨大分子複合体（例えば、ポリペプチド複合体）に関して使用される場合、「自己組織化」という用語は、形成される複合体（例えば、融合ポリペプチド）の十分な構成要素が存在するときに、その複合体が自発的に形成されることを指す。いくつかの実施形態では、複合体は、生理学的条件において、または生理学的条件に対応する緩衝液（例えば、溶液）において自己組織化する。
【0095】
本明細書で使用される場合、用語「対象」は、生物、典型的には哺乳動物（例えば、ヒト）を指す。いくつかの実施形態では、対象は、関連する疾患、障害または状態に罹患しているか、または罹患しやすい。いくつかの実施形態では、対象は、疾患、障害または状態の１つ以上の症状または特徴を示す。いくつかの実施形態では、対象は、疾患、障害、または状態の感受性またはリスクに特徴的な１つ以上の特徴を有する人である。いくつかの実施形態では、対象は患者である。いくつかの実施形態では、対象は、診断及び／または治療が施される及び／または施されている対象である。
【0096】
本明細書で使用される場合、「治療」（また「治療する」または「治療すること」）という用語は、特定の疾患、障害、及び／または状態の１つ以上の症状、特徴、及び／または原因の一部または完全に軽減する（ａｌｌｅｖｉａｔｅ）、緩和する、軽減する（ｒｅｌｉｅｖｅ）、阻害する、発症を遅らせる、重症度を低下させる、及び／または発生率を低下させる任意の療法を施すことを指す。いくつかの実施形態では、そのような処置は、関連する疾患、障害及び／または状態の徴候を示さない対象、及び／または疾患、障害及び／または状態の初期徴候のみを示す対象の処置であってもよい。代替的に、または追加的に、そのような処置は、関連する疾患、障害、及び／または状態の１つ以上の確立された兆候を示す対象のものであってもよい。いくつかの実施形態では、治療は、関連する疾患、障害、及び／または状態に罹患していると診断された対象の治療であってもよい。いくつかの実施形態では、治療は、関連する疾患、障害、及び／または状態の発症のリスクの増加と統計的に相関する１つ以上の感受性因子を有することが知られている対象のものであってもよい。
【0097】
Ａ．融合ポリペプチド
多くの実施形態では、本明細書に開示される組成物及び方法と適合性のある融合ポリペプチドは、概して、Ｆｃポリペプチドまたは抗原結合抗体断片のいずれかに連結されたナノケージ単量体またはそのサブユニットを含む。融合ポリペプチド内で、Ｆｃポリペプチドまたは抗原結合抗体断片は、ナノケージ単量体またはそのサブユニットの特定の末端、例えば、Ｎ末端またはＣ末端でナノケージ単量体またはそのサブユニットに連結され得る。いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドまたは抗原結合抗体断片は、本明細書に記載されるリンカーなどのアミノ酸リンカーを介して連結される。
多くの実施形態では、本明細書に開示される組成物及び方法と適合性のある融合ポリペプチドは、概して、Ｆｃポリペプチドまたは抗原結合抗体断片のいずれかに連結されたナノケージ単量体またはそのサブユニットを含む。融合ポリペプチド内で、Ｆｃポリペプチドまたは抗原結合抗体断片は、ナノケージ単量体またはそのサブユニットの特定の末端、例えば、Ｎ末端またはＣ末端でナノケージ単量体またはそのサブユニットに連結され得る。いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドまたは抗原結合抗体断片は、本明細書に記載されるリンカーなどのアミノ酸リンカーを介して連結される。
【0098】
１．ナノケージ単量体及びそのサブユニット
いくつかの実施形態では、ナノケージ単量体はフェリチン単量体である。
いくつかの実施形態では、ナノケージ単量体はフェリチン単量体である。
【0099】
「フェリチン単量体」という用語は、他のフェリチン鎖の存在下で、複数のフェリチン鎖、例えば２４個以上のフェリチン鎖を含むポリペプチド複合体に自己組織化することができるフェリチンの一本鎖を指すために本明細書で使用される。いくつかの実施形態では、フェリチン単量体はフェリチン軽鎖である。いくつかの実施形態では、フェリチン単量体は、鉄に結合することができるか、またはフェロキシダーゼ活性が可能であるフェリチン重鎖または他のフェリチン成分を含まない。
【0100】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体内の各融合ポリペプチドは、フェリチン軽鎖またはフェリチン軽鎖のサブユニットを含む。これらの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、いずれのフェリチン重鎖またはフェリチン重鎖のサブユニットも含まない。
【0101】
いくつかの実施形態では、フェリチン単量体は、ヒトフェリチン鎖、例えば、ヒトフェリチン軽鎖、例えば、配列番号１の少なくとも残基２～１７５の配列を有するヒトフェリチン軽鎖である。
【0102】
フェリチン単量体の「サブユニット」は、サブユニットが一緒にフェリチン単量体を形成するように、フェリチン単量体の別の、別個のサブユニットと自発的に会合することができるフェリチン単量体の一部を指し、フェリチン単量体は、次に、他のフェリチン単量体と自己組織化してポリペプチド複合体を形成することができる。
【0103】
いくつかの実施形態では、フェリチン単量体サブユニットは、フェリチン単量体の約半分を含む。本明細書で使用される場合、「Ｎ－半フェリチン」という用語は、フェリチン鎖のＮ末端を含むフェリチン鎖の約半分を指す。本明細書で使用される場合、「Ｃ－半フェリチン」という用語は、フェリチン鎖のＣ末端を含むフェリチン鎖の約半分を指す。フェリチン鎖がＮ－半フェリチン及びＣ－半フェリチンを形成するために分割され得る正確な点は、実施形態に応じて変動し得る。例えば、ヒトフェリチン軽鎖に基づくフェリチン単量体サブユニットの文脈では、半分は、配列番号１の約７５位～約１００位（またはその実質的な部分）の位置に対応する点で分割され得る。例えば、いくつかの実施形態では、ヒトフェリチン軽鎖に基づくＮ－半フェリチンは、配列番号１の残基１～９５（またはその実質的な部分、例えば、配列番号１の残基２～９５）に対応するアミノ酸配列を有し、ヒトフェリチン軽鎖に基づくＣ－半フェリチンは、配列番号１の残基９６～１７５（またはその実質的な部分）に対応するアミノ酸配列を有する。
【0104】
いくつかの実施形態では、半分は、配列番号１の約８５～約９２位の位置に対応する点で分割される。例えば、いくつかの実施形態では、ヒトフェリチン軽鎖に基づくＮ－半フェリチンは、配列番号１の残基１～９０（またはその実質的な部分、例えば、配列番号１の残基２～９０）に対応するアミノ酸配列を有し、ヒトフェリチン軽鎖に基づくＣ－半フェリチンは、配列番号１の残基９１～１７５（またはその実質的な部分）に対応するアミノ酸配列を有する。
【0105】
２．Ｆｃポリペプチド
ある特定の実施形態では、断片結晶化可能な（Ｆｃ）ポリペプチドは、それぞれが、同じＩｇクラスの参照Ｆｃ鎖に対して１つ以上の変異を有するＦｃ鎖を含む。以下でさらに説明するように、参照Ｆｃ鎖は、例えば、ＩｇＧ１クラスのものであってもよい。
ある特定の実施形態では、断片結晶化可能な（Ｆｃ）ポリペプチドは、それぞれが、同じＩｇクラスの参照Ｆｃ鎖に対して１つ以上の変異を有するＦｃ鎖を含む。以下でさらに説明するように、参照Ｆｃ鎖は、例えば、ＩｇＧ１クラスのものであってもよい。
【0106】
特に明記しない限り、本開示を通しての抗体断片、例えば、Ｆｃ鎖内の残基の番号付けは、ＥＵ番号付けに従う。
【0107】
いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、１つ以上のヒトＩｇＧ１ Ｆｃ鎖を含み、すなわち、本明細書に記載の変異を除いて、Ｆｃポリペプチドは、野生型ヒトＩｇＧ１内のＦｃ鎖のものと実質的に類似するＦｃ鎖を含む。
【0108】
いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、１つ以上のＩｇＧ１ Ｆｃ鎖（例えば、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ鎖またはヒトＦｃ鎖）を含み、すなわち、本明細書に記載のある特定の位置に特定の残基（複数可）（対応する野生型Ｆｃ鎖内の残基（複数可）とは異なる場合がある）を有することを除いて、Ｆｃポリペプチドは、野生型ＩｇＧ１ Ｆｃ内の鎖のものと実質的に類似するアミノ酸配列を有するＦｃ鎖を含む。いくつかの実施形態では、野生型ＩｇＧ１ Ｆｃは、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃであり、各Ｆｃ鎖は配列番号４のアミノ酸配列を有する。
例えば、Ｆｃポリペプチドは、野生型ＩｇＧ１ Ｆｃ内のＦｃ鎖の配列と少なくとも８５％、少なくとも８７．５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を有するＦｃ鎖を含み得る。いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、そのＦｃ鎖に対して特異的に記載されるある特定の位置（複数可）に特定の残基（複数可）を含むが、それ以外では、野生型Ｆｃ鎖、例えば、野生型ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖内の対応するＦｃ鎖と１００％同一であるアミノ酸配列を有するＦｃ鎖を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、配列番号４の配列と少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つのアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を有するＦｃ鎖を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、配列番号４の配列から１０以下、９つ以下、８つ以下、７つ以下、６つ以下、５つ以下、または４つ以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を有するＦｃ鎖を含む。
例えば、Ｆｃポリペプチドは、野生型ＩｇＧ１ Ｆｃ内のＦｃ鎖の配列と少なくとも８５％、少なくとも８７．５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を有するＦｃ鎖を含み得る。いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、そのＦｃ鎖に対して特異的に記載されるある特定の位置（複数可）に特定の残基（複数可）を含むが、それ以外では、野生型Ｆｃ鎖、例えば、野生型ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖内の対応するＦｃ鎖と１００％同一であるアミノ酸配列を有するＦｃ鎖を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、配列番号４の配列と少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つのアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を有するＦｃ鎖を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、配列番号４の配列から１０以下、９つ以下、８つ以下、７つ以下、６つ以下、５つ以下、または４つ以下のアミノ酸残基が異なるアミノ酸配列を有するＦｃ鎖を含む。
【0109】
いくつかの実施形態では、Ｆｃポリペプチドは、例えばアミノ酸リンカーを介して共有結合リンカーによって一緒に連結された２つのＦｃ鎖を含む一本鎖Ｆｃ（ｓｃＦｃ）である。
【0110】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ鎖は、（１）２３７位のグリシン以外のアミノ酸残基、及び（２）３２９位のプロリン残基を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃ鎖は、２３７位のアラニンを含む。
【0111】
いくつかの実施形態では、Ｆｃ鎖は、ＩｇＧ１ Ｆｃ鎖であり、２３４位、２３５位、２３６位、３３０位、及びこれらの組み合わせから選択される１つ以上の位置に変異または変異のセットをさらに含む。
【0112】
例えば、いくつかの実施形態では、Ｆｃ鎖は、２３４位のアラニン、２３５位のアラニン、２３６位のアルギニン、２３７位のアラニン、３２９位のプロリン、及び３３０位のロイシンを含むＩｇＧ１ Ｆｃ鎖である。
【0113】
いくつかの実施形態では、Ｆｃ鎖は、グリコシル化に関連する位置、例えば、２９７位（例えば、２９７位のグルタミンを含むことによって）での変異をさらに含む。
【0114】
いくつかの実施形態では、Ｆｃ鎖は、本明細書においてさらに記載されるような改変された特徴に関連する変異または変異のセット（対応する野生型Ｆｃ鎖に対して）を含む。「に関連する」とは、変異または変異のセットが、ＩｇＧ抗体等の抗体の文脈において、改変された特徴（例えば、ＦｃＲｎへの改変された結合、改変されたエフェクター機能等）を付与するものとして以前に特徴付けられていることを意味する。「改変された」とは、特性（例えば、Ｆｃ受容体（例えば、Ｆｃγ受容体またはＦｃＲｎ）への結合）が、変異または変異のセットなしで観察されたものとは異なることを意味する。
【0115】
例えば、いくつかの実施形態では、改変された特徴は、Ｆｃ受容体への改変された結合を含む。
【0116】
いくつかの実施形態では、改変された特徴は、Ｆｃγ受容体、例えば、ヒトＦｃγＲへの改変された結合を含む。いくつかの実施形態では、ＦｃγＲは、ｈＦｃγＲＩ、ｈＦｃγＲＩＩａ、ｈＦｃγＲＩＩｂ、ｈＦｃγＲＩＩＩａ、ｈＦｃγＲＩＩＩｂ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されるヒトＦｃγＲである。
【0117】
いくつかの実施形態では、改変された結合は、アッセイ、例えば、インビトロアッセイにおいて、対応する対照（例えば、対応する野生型鎖と同様の状況下で典型的に観察される結合レベル）と比較して、結合を含まないか、または著しく低減した結合を含む。
【0118】
３．ＤＲ５に結合することができる抗体断片
抗体断片は、典型的には、ＤＲ５内のエピトープに結合することができ、その例示的な配列は、配列番号１８～配列番号２１に示される。
抗体断片は、典型的には、ＤＲ５内のエピトープに結合することができ、その例示的な配列は、配列番号１８～配列番号２１に示される。
【0119】
いくつかの実施形態では、抗体断片は、Ｆａｂである。いくつかの実施形態では、抗体断片は、一本鎖Ｆａｂ（ｓｃＦａｂ）であり、例えば、任意選択でリンカー（例えば、本明細書に開示されるアミノ酸リンカー）によって連結される、Ｆａｂの重鎖及び軽鎖の両方を含む融合ポリペプチドが使用される。
【0120】
ある特定の実施形態では、抗体断片は、重鎖可変領域（例えば、ＶＨ）を含む。ある特定の実施形態では、抗体断片は、重鎖可変ドメイン（例えば、ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（例えば、ＶＬまたはＶＫ）を含む。ある特定の実施形態では、抗体断片は、重鎖可変ドメイン（例えば、ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（例えば、ＶＬまたはＶＫ）を含むＦａｂを含む。
【0121】
ある特定の実施形態では、抗体断片は、Ｆｃ領域由来のいずれのドメインも含まず、例えば、いずれのＣＨ２またはＣＨ３ドメインも含まない。ある特定の実施形態では、ＤＲ５に結合することができる抗体断片は、例えば、完全ヒト、ヒト化、またはキメラＤＲ５抗体を含む、様々なＤＲ５抗体のうちのいずれかの抗体断片、またはそれに由来するものである。抗体断片が得られるか、または由来するＤＲ５抗体は、例えば、ＩｇＧ１抗体、ＩｇＧ２抗体、ＩｇＧ４抗体を含む様々な抗体クラスのうちのいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、抗体断片は、アゴニストＤＲ５抗体、例えば、アゴニストヒト化ＤＲ５抗体から得られるか、またはそれに由来する。
【0122】
ＤＲ５抗体の非限定的な例としては、例えば、コナツムマブ、チガツズマブ、レキサツムマブ、及びドロジツマブが挙げられる。
【0123】
いくつかの実施形態では、ＤＲ５に結合することができる抗体断片は、ＤＲ５抗体の重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲの配列と同様の配列（例えば、各ＣＤＲが同一であるか、または１つもしくは２つのアミノ酸置換を有する）を有する重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【0124】
いくつかの実施形態では、ＤＲ５に結合することができる抗体断片は、（１）ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖と、（２）ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖と、を含み、
（ａ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号２７の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号２８の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号２９の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号２４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号２５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号２６の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有するか、
（ｂ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号３５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号３６の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号３７の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号３２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号３３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号３４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有るか、
または
（ｃ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号４３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号４４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号４５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４０の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４１の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号４２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有するか、
または
（ｄ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号５１の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号５２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号５３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４８の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４９の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号５０の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有する。
（ａ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号２７の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号２８の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号２９の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号２４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号２５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号２６の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有するか、
（ｂ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号３５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号３６の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号３７の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号３２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号３３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号３４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有るか、
または
（ｃ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号４３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号４４の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号４５の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４０の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４１の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号４２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有するか、
または
（ｄ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号５１の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号５２の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号５３の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４８の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４９の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号５０の配列、またはそれとは１つもしくは２つのアミノ酸残基だけ異なる配列を有する。
【0125】
いくつかの実施形態では、ＤＲ５に結合することができる抗体断片は、６つのＣＤＲすべてにわたって合計１つまたは２つのアミノ酸置換を除いて、ＤＲ５抗体の重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲの配列と同一である配列を有する重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む。
【0126】
いくつかの実施形態では、ＤＲ５に結合することができる抗体断片は、ＤＲ５抗体のＣＤＲと同じ配列を有する重鎖及び軽鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
【0127】
いくつかの実施形態では、ＤＲ５に結合することができる抗体断片は、（１）ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、及びＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖と、（２）ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖と、を含み、
（ａ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号２７の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号２８の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号２９の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号２４の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号２５の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号２６の配列を有するか、
（ｂ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号３５の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号３６の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号３７の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号３２の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号３３の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号３４の配列を有するか、
（ｃ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号４３の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号４４の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号４５の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４０の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４１の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号４２の配列を有するか、
または
（ｄ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号５１の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号５２の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号５３の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４８の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４９の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号５０の配列を有する。
（ａ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号２７の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号２８の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号２９の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号２４の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号２５の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号２６の配列を有するか、
（ｂ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号３５の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号３６の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号３７の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号３２の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号３３の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号３４の配列を有するか、
（ｃ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号４３の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号４４の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号４５の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４０の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４１の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号４２の配列を有するか、
または
（ｄ）（ｉ）ＣＤＲ－Ｈ１は、配列番号５１の配列を有し、
（ｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ２は、配列番号５２の配列を有し、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ－Ｈ３は、配列番号５３の配列を有し、
（ｉｖ）ＣＤＲ－Ｌ１は、配列番号４８の配列を有し、
（ｖ）ＣＤＲ－Ｌ２は、配列番号４９の配列を有し、
（ｖｉ）ＣＤＲ－Ｌ３は、配列番号５０の配列を有する。
【0128】
いくつかの実施形態では、ＤＲ５に結合することができる抗体断片は、
（１）ＤＲ５抗体からの重鎖可変領域と少なくとも８５％、少なくとも８７．５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である重鎖可変領域と、
（２）ＤＲ５抗体からの軽鎖可変領域と少なくとも８５％、少なくとも８７．５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である軽鎖可変領域と、を含む。
（１）ＤＲ５抗体からの重鎖可変領域と少なくとも８５％、少なくとも８７．５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である重鎖可変領域と、
（２）ＤＲ５抗体からの軽鎖可変領域と少なくとも８５％、少なくとも８７．５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である軽鎖可変領域と、を含む。
【0129】
いくつかの実施形態では、ＤＲ５に結合することができる抗体断片は、
（１）参照ＶＨ配列と少なくとも８５％、少なくとも８７．５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である重鎖可変領域と、
（２）参照ＶＬ配列と少なくとも８５％、少なくとも８７．５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である軽鎖可変領域と、を含み、
（ａ）参照ＶＨ配列は、配列番号２３の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号２２の配列を有するか、
（ｂ）参照ＶＨ配列は、配列番号３１の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号３０の配列を有するか、
（ｃ）参照ＶＨ配列は、配列番号３９の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号３８の配列を有するか、または
（ｄ）参照ＶＨ配列は、配列番号４７の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号４６の配列を有する。
（１）参照ＶＨ配列と少なくとも８５％、少なくとも８７．５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である重鎖可変領域と、
（２）参照ＶＬ配列と少なくとも８５％、少なくとも８７．５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である軽鎖可変領域と、を含み、
（ａ）参照ＶＨ配列は、配列番号２３の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号２２の配列を有するか、
（ｂ）参照ＶＨ配列は、配列番号３１の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号３０の配列を有するか、
（ｃ）参照ＶＨ配列は、配列番号３９の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号３８の配列を有するか、または
（ｄ）参照ＶＨ配列は、配列番号４７の配列を有し、参照ＶＬ配列は、配列番号４６の配列を有する。
【0130】
抗体断片を有する複数のタイプの融合ポリペプチドが使用される実施形態では、様々なタイプの融合ポリペプチドにおける抗体断片は、ＤＲ５上の同じエピトープに結合することが可能であってもよいか、ＤＲ５上の別個でありかつ重複していないエピトープに結合することが可能であってもよいか、またはＤＲ５上の別個であるが重複しているエピトープに結合することが可能であってもよい。
【0131】
４．リンカー
ある特定の実施形態では、リンカーは、融合ポリペプチド内及び／またはｓｃＦｃなどの一本鎖分子内で使用される。いくつかの実施形態では、リンカーはアミノ酸リンカーである。例えば、本明細書で使用されるリンカーは、約１～約１００アミノ酸残基、例えば、約１～約７０、約２～約７０、約１～約３０、または約２～約３０個のアミノ酸残基を含み得る。いくつかの実施形態では、リンカーは、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、または少なくとも１０個のアミノ酸残基を含む。
ある特定の実施形態では、リンカーは、融合ポリペプチド内及び／またはｓｃＦｃなどの一本鎖分子内で使用される。いくつかの実施形態では、リンカーはアミノ酸リンカーである。例えば、本明細書で使用されるリンカーは、約１～約１００アミノ酸残基、例えば、約１～約７０、約２～約７０、約１～約３０、または約２～約３０個のアミノ酸残基を含み得る。いくつかの実施形態では、リンカーは、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、または少なくとも１０個のアミノ酸残基を含む。
【0132】
ある特定の実施形態では、リンカーは、リンカー内の少なくとも１、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、または少なくとも１４のコピーに存在するグリシンセリン配列、例えば、（ＧｎＳ）ｍ配列（例えば、ＧＧＳ、ＧＧＧＳ（配列番号５５）、またはＧＧＧＧＳ（配列番号５４））を含む。
【0133】
Ｂ．自己組織化ポリペプチド複合体
ある態様では、本明細書に開示される複数の融合ポリペプチドを含む自己組織化ポリペプチド複合体が提供される。概して、提供される自己組織化ポリペプチド複合体は、（ａ）複数の第１の融合ポリペプチドであって、各第１の融合ポリペプチドが、（１）Ｆｃポリペプチドであって、（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットに連結されたＦｃポリペプチドを含み、Ｆｃポリペプチドが、同じＩｇクラスの参照Ｆｃ鎖に対して１つ以上の変異を有するＦｃ鎖を含む、複数の第１の融合ポリペプチドと、（ｂ）複数の第２の融合ポリペプチドであって、各第２の融合ポリペプチドが、（１）抗原結合抗体断片であって、（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットに連結された抗原結合抗体断片を含む、複数の第２の融合ポリペプチドと、を含む。
ある態様では、本明細書に開示される複数の融合ポリペプチドを含む自己組織化ポリペプチド複合体が提供される。概して、提供される自己組織化ポリペプチド複合体は、（ａ）複数の第１の融合ポリペプチドであって、各第１の融合ポリペプチドが、（１）Ｆｃポリペプチドであって、（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットに連結されたＦｃポリペプチドを含み、Ｆｃポリペプチドが、同じＩｇクラスの参照Ｆｃ鎖に対して１つ以上の変異を有するＦｃ鎖を含む、複数の第１の融合ポリペプチドと、（ｂ）複数の第２の融合ポリペプチドであって、各第２の融合ポリペプチドが、（１）抗原結合抗体断片であって、（２）ナノケージ単量体またはそのサブユニットに連結された抗原結合抗体断片を含む、複数の第２の融合ポリペプチドと、を含む。
【0134】
いくつかの実施形態では、ナノケージ単量体はフェリチン単量体であり、自己組織化ポリペプチド複合体内の各融合ポリペプチドは、フェリチン軽鎖またはフェリチン軽鎖のサブユニットを含む。これらの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、いずれのフェリチン重鎖、フェリチン重鎖のサブユニット、または鉄に結合することができるか、もしくはフェロキシダーゼ活性が可能である他のフェリチン成分も含まない。
【0135】
いくつかの実施形態では、ナノケージ単量体またはそのサブユニットは、フェリチン単量体サブユニットであり、（ａ）各第１の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンであるフェリチン単量体サブユニットを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンであるフェリチン単量体サブユニットを含む、または（ｂ）各第１の融合ポリペプチドは、Ｎ－半フェリチンであるフェリチン単量体サブユニットを含み、各第２の融合ポリペプチドは、Ｃ－半フェリチンであるフェリチン単量体サブユニットを含む。
【0136】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、合計で２４～４８個の融合ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、合計で２４個の融合ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、合計で２４個を超える融合ポリペプチド、例えば、少なくとも２６個、少なくとも２８個、少なくとも３０個、少なくとも３２個の融合ポリペプチド、少なくとも３４個の融合ポリペプチド、少なくとも３６個の融合ポリペプチド、少なくとも３８個の融合ポリペプチド、少なくとも４０個の融合ポリペプチド、少なくとも４２個の融合ポリペプチド、少なくとも４４個の融合ポリペプチド、少なくとも４６個の融合ポリペプチド、または少なくとも４８個の融合ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、約３２個の融合ポリペプチドを含む。
【0137】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、または少なくとも８個の第１の融合ポリペプチドを含む。
【0138】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、または少なくとも８個の第２の融合ポリペプチドを含む。
【0139】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、少なくとも４個、少なくとも５個、少なくとも６個、少なくとも７個、少なくとも８個、少なくとも９個、少なくとも１０個、少なくとも１１個、少なくとも１２個、少なくとも１３個、少なくとも１４個、少なくとも１５個、または少なくとも１６個の第３の融合ポリペプチドをさらに含む。
【0140】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体は、他のすべての融合ポリペプチドに対する第１の融合ポリペプチドの約１：１、１１：１３、３：５、１：２、７：１７、１：３、２：７、５：１９、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：１２、１：２４の比を含む。
【0141】
薬物動態学的特徴
ある特定の実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体を必要とする対象に投与されたとき、提供される自己組織化ポリペプチド複合体は、参照ＩｇＧ分子（例えば、自己組織化ポリペプチド複合体内の第１の融合ポリペプチドのＦｃポリペプチド内のＦｃ鎖のクラスにマッチするＩｇＧ分子）のものと同様な１つ以上の薬物動態学的特徴を有する。いくつかの実施形態では、本明細書で論じられる薬物動態学的特徴（例えば、半減期、ＡＵＣ、及び／またはＣｍａｘ）の範囲は、自己組織化ポリペプチド複合体がヒト対象に投与されたときに得られる。いくつかの実施形態では、本明細書で論じられる薬物動態学的特徴の範囲は、自己組織化ポリペプチド複合体が全身経路、例えば、静脈内または皮下投与を介して投与されたときに得られる。
ある特定の実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体を必要とする対象に投与されたとき、提供される自己組織化ポリペプチド複合体は、参照ＩｇＧ分子（例えば、自己組織化ポリペプチド複合体内の第１の融合ポリペプチドのＦｃポリペプチド内のＦｃ鎖のクラスにマッチするＩｇＧ分子）のものと同様な１つ以上の薬物動態学的特徴を有する。いくつかの実施形態では、本明細書で論じられる薬物動態学的特徴（例えば、半減期、ＡＵＣ、及び／またはＣｍａｘ）の範囲は、自己組織化ポリペプチド複合体がヒト対象に投与されたときに得られる。いくつかの実施形態では、本明細書で論じられる薬物動態学的特徴の範囲は、自己組織化ポリペプチド複合体が全身経路、例えば、静脈内または皮下投与を介して投与されたときに得られる。
【0142】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される自己組織化ポリペプチド複合体は、参照ＩｇＧ分子と同様の半減期を有する。参照ＩｇＧ分子は、例えば、自己組織化ポリペプチド複合体内の第２及び／または第３の融合ポリペプチド内の抗原結合抗体断片が由来する抗体であってもよい。例えば、第２及び／または第３の融合ポリペプチド内の抗原結合断片が「抗体Ａ」由来の可変領域を含む場合、いくつかの実施形態では、参照ＩｇＧ分子は、「抗体Ａ」であってもよい。
【0143】
いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体を必要とする対象に投与した後に、自己組織化ポリペプチド複合体は、約３～３５日、約３～約２８日、約３～約２１日、約３～約１４日、約３～約１０日、約３～約７日、約３～約５日、約５～約３５日、約５～約２８日、約５～約２１日、約５～約１４日、約５～約１０日、約５～約７日、約７～約３５日、約７～約２８日、約７～約２１日、約７～約１４日、約７～約１０日、約１０～約３５日、約１０～約２８日、約１０～約２１日、約１０～約１４日、約１４～約３５日、約１４～約２８日、約１４～約２１日、約２１日～約３５日、または約２１～約２８日の半減期を有する。いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体を必要とする対象に投与した後に、自己組織化ポリペプチド複合体は、少なくとも３日、少なくとも５日、少なくとも７日、少なくとも１０日、少なくとも１４日、少なくとも２１日、または少なくとも２８日の半減期を有する。いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体を必要とする対象に投与した後、自己組織化ポリペプチド複合体は、少なくとも３日後、少なくとも５日後、少なくとも７日後、少なくとも１０日後、少なくとも１４日後、少なくとも２１日後、または少なくとも２８日後に血清中で検出可能である。
【0144】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される自己組織化ポリペプチド複合体は、参照ＩｇＧ分子、例えば、自己組織化ポリペプチド複合体に含まれるＦａｂ断片が由来する抗体のものと同様のバイオアベイラビリティを有する。例えば、いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体を必要とする対象に投与した後、自己組織化ポリペプチド複合体は、約１０～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約３０００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約２５００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約１０００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約１５００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約１０００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約７５０日・μｇ／ｍＬ、約１０～約５００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約４００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約３００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約２００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約１００日・μｇ／ｍＬ、約１０～約５０日・μｇ／ｍＬ、約１０～約２５日・μｇ／ｍＬ、約２５～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約３０００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約２５００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約１０００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約１５００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約１０００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約７５０日・μｇ／ｍＬ、約２５～約５００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約４００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約３００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約２００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約１００日・μｇ／ｍＬ、約２５～約５０日・μｇ／ｍＬ、約５０～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約３０００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約２５００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約２０００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約１５００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約１０００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約７５０日・μｇ／ｍＬ、約５０～約５００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約４００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約３００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約２００日・μｇ／ｍＬ、約５０～約１００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約３０００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約２５００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約１０００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約１５００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約１０００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約７５０日・μｇ／ｍＬ、約１００～約５００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約４００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約３００日・μｇ／ｍＬ、約１００～約２００日・μｇ／ｍＬ、約２００～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約２００～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約２００～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約２００～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約２００～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約２００～約３０００日・μｇ／ｍＬ、約２００～約２０００日・μｇ／ｍＬ、約２００～約１０００日・μｇ／ｍＬ、約２００～約１５００日・μｇ／ｍＬ、約２００～約１０００日・μｇ／ｍＬ、約２００～約７５０日・μｇ／ｍＬ、約２００～約５００日・μｇ／ｍＬ、約２００～約４００日・μｇ／ｍＬ、約２００～約３００日・μｇ／ｍＬ、約３００～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約３００～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約３００～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約３００～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約３００～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約３００～約３０００日・μｇ／ｍＬ、約３００～約２５００日・μｇ／ｍＬ、約３００～約２０００日・μｇ／ｍＬ、約３００～約１５００日・μｇ／ｍＬ、約３００～約１０００日・μｇ／ｍＬ、約３００～約７５０日・μｇ／ｍＬ、約３００～約５００日・μｇ／ｍＬ、約３００～約４００日・μｇ／ｍＬ、約４００～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約４００～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約４００～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約４００～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約４００～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約４００～約３０００日・μｇ／ｍＬ、約４００～約２５００日・μｇ／ｍＬ、約４００～約２０００日・μｇ／ｍＬ、約４００～約１５００日・μｇ／ｍＬ、約４００～約１０００日・μｇ／ｍＬ、約４００～約７５０日・μｇ／ｍＬ、約４００～約５００日・μｇ／ｍＬ、約５００～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約５００～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約５００～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約５００～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約５００～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約５００～約３０００日・μｇ／ｍＬ、約５００～約２５００日・μｇ／ｍＬ、約５００～約２０００日・μｇ／ｍＬ、約５００～約１５００日・μｇ／ｍＬ、約５００～約１０００日・μｇ／ｍＬ、約５００～約７５０日・μｇ／ｍＬ、約７５０～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約７５０～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約７５０～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約７５０～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約７５０～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約７５０～約３０００日・μｇ／ｍＬ、約７５０～約２５００日・μｇ／ｍＬ、約７５０～約２０００日・μｇ／ｍＬ、約７５０～約１５００日・μｇ／ｍＬ、約７５０～約１０００日・μｇ／ｍＬ、約１０００～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約１０００～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約１０００～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約１０００～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約１０００～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約１０００～約３０００日・μｇ／ｍＬ、約１０００～約２５００日・μｇ／ｍＬ、約１０００～約２０００日・μｇ／ｍＬ、約１０００～約１５００日・μｇ／ｍＬ、約１５００～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約１５００～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約１５００～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約１５００～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約１５００～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約１５００～約３０００日・μｇ／ｍＬ、約１５００～約２５００日・μｇ／ｍＬ、約１５００～約２０００日・μｇ／ｍＬ、約２０００～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約２０００～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約２０００～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約２０００～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約２０００～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約２０００～約３０００日・μｇ／ｍＬ、約２０００～約２５００日・μｇ／ｍＬ、約２５００～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約２５００～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約２５００～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約２５００～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約２５００～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約２５００～約３０００日・μｇ／ｍＬ、約３０００～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約３０００～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約３０００～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約３０００～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約３０００～約４０００日・μｇ／ｍＬ、約４０００～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約４０００～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約４０００～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約４０００～約５０００日・μｇ／ｍＬ、約５０００～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約５０００～約７０００日・μｇ／ｍＬ、約５０００～約６０００日・μｇ／ｍＬ、約６０００～約８０００日・μｇ／ｍＬ、約６０００～約７０００日・μｇ／ｍＬ、または約７０００～約８０００日・μｇ／ｍＬの曲線下面積（ＡＵＣ）を有する。いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体を必要とする対象に投与した後、自己組織化ポリペプチド複合体は、少なくとも１０日・μｇ／ｍＬ、少なくとも２５日・μｇ／ｍＬ、少なくとも５０日・μｇ／ｍＬ、少なくとも１００日・μｇ／ｍＬ、少なくとも２００日・μｇ／ｍＬ、少なくとも３００日・μｇ／ｍＬ、少なくとも４００日・μｇ／ｍＬ、少なくとも５００日・μｇ／ｍＬ、少なくとも７５０日・μｇ／ｍＬ、少なくとも１０００日・μｇ／ｍＬ、少なくとも１５００日・μｇ／ｍＬ、少なくとも２０００日・μｇ／ｍＬ、少なくとも２５００日・μｇ／ｍＬ、少なくとも３０００日・μｇ／ｍＬ、少なくとも４０００日・μｇ／ｍＬ、少なくとも５０００日・μｇ／ｍＬ、少なくとも６０００日・μｇ／ｍＬ、少なくとも７０００日・μｇ／ｍＬ、または少なくとも８０００日・μｇ／ｍＬのＡＵＣを有する。
【0145】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される自己組織化ポリペプチド複合体は、参照ＩｇＧ分子のものと同様のバイオアベイラビリティを有する。例えば、いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体を必要とする対象に投与した後に、自己組織化ポリペプチド複合体は、約１０μｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約７５０μｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約７５ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約７５０μｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約７５ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約７５０μｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約７５ｍｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約２５０ｍｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約７５０μｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約７５ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約７５ｍｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約７５ｍｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約７５ｍｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約７５ｍｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約７５ｍｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ～約７５ｍｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ～約７５ｍｇ／ｍＬ、約７５０μｇ／ｍＬ～約７５ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ～約７５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ～約７５ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ～約７５ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ～約７５ｍｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約７５０μｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、約７５０μｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、約７５０μｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約７５０μｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約７５０μｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約７５０μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約７５０μｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約７５０μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約７５０μｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ～約７５０μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ～約７５０μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約５００μｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約５００μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約５００μｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約５００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約５００μｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ～約５００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約２５０μｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約２５０μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約２５０μｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約２５０μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約２５０μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約７５μｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約７５μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約７５μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬ、または約１０μｇ／ｍＬ～約２５μｇ／ｍＬの最大濃度（Ｃｍａｘ）を有する。いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体を必要とする対象に投与した後に、自己組織化ポリペプチド複合体は、少なくとも１０μｇ／ｍＬ、少なくとも２５μｇ／ｍＬ、少なくとも５０μｇ／ｍＬ、少なくとも１００μｇ／ｍＬ、少なくとも２５０μｇ／ｍＬ、少なくとも５００μｇ／ｍＬ、少なくとも７５０μｇ／ｍＬ、少なくとも１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも７５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５００ｍｇ／ｍＬ、または少なくとも７５０ｍｇ／ｍＬの最大濃度（Ｃｍａｘ）を有する。
【0146】
効果
ある特定の実施形態では、提供される自己組織化ポリペプチド複合体は、標的細胞（例えば、がん細胞）上のＤＲ５受容体の多量体化（例えば、三量体化）を誘導することができる。
ある特定の実施形態では、提供される自己組織化ポリペプチド複合体は、標的細胞（例えば、がん細胞）上のＤＲ５受容体の多量体化（例えば、三量体化）を誘導することができる。
【0147】
いくつかの実施形態では、対象への本明細書に開示される自己組織化ポリペプチド複合体の投与は、対象における臨床転帰または測定基準の改善をもたらす。例えば、腫瘍を有する対象において、自己組織化ポリペプチド複合体の投与は、腫瘍の阻害または進行の遅延、例えば、腫瘍の退縮を引き起こし得る。いくつかの実施形態では、自己組織化ポリペプチド複合体の投与は、腫瘍の完全な退縮をもたらす。
【0148】
Ｃ．治療方法
ある態様では、一般に、本開示の自己組織化ポリペプチド複合体を含む組成物を対象に投与するステップを含む、疾患または状態（例えば、感染症、がん、または自己免疫疾患）の治療、緩和、または予防に有用であり得る方法が提供される。
ある態様では、一般に、本開示の自己組織化ポリペプチド複合体を含む組成物を対象に投与するステップを含む、疾患または状態（例えば、感染症、がん、または自己免疫疾患）の治療、緩和、または予防に有用であり得る方法が提供される。
【0149】
いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物、例えばヒトである。
【0150】
対象に投与するための組成物は、一般に、本明細書に開示される自己組織化ポリペプチド複合体を含む。いくつかの実施形態では、そのような組成物は、薬学的に許容される賦形剤をさらに含む。
【0151】
組成物は、全身経路（例えば、経口、吸入、鼻腔内、静脈内、腹腔内、皮下、または筋肉内投与）を含む、様々な投与経路のいずれかの投与のために製剤化され得る。
【0152】
いくつかの実施形態では、投与ステップは、対象における１つ以上の臨床転帰または測定基準の改善をもたらす。
【0153】
いくつかの実施形態では、投与ステップは、腫瘍の進行の遅延または阻害、例えば、腫瘍の退縮をもたらす。いくつかの実施形態では、投与ステップは、腫瘍の完全な退縮をもたらす。
【実施例】
【0154】
実施例１．代表的なＤＲ５標的化Ｍｕｌｔａｂｏｄｙの構築及び発現
この実施例は、（１）ヒトフェリチン軽鎖またはそのサブユニットと、（２）本明細書に記載の（Ｇｌｙｎ－Ｓｅｒ）ｍアミノ酸リンカーなどのリンカーを介して融合された一本鎖Ｆａｂ（ｓｃＦａｂ）または一本鎖Ｆｃ－二量体（ｓｃＦｃ）とを含む融合タンパク質の組み合わせを含むＤＲ５標的化Ｍｕｌｔａｂｏｄｙ（ＭＢ）の生成を説明する。
この実施例は、（１）ヒトフェリチン軽鎖またはそのサブユニットと、（２）本明細書に記載の（Ｇｌｙｎ－Ｓｅｒ）ｍアミノ酸リンカーなどのリンカーを介して融合された一本鎖Ｆａｂ（ｓｃＦａｂ）または一本鎖Ｆｃ－二量体（ｓｃＦｃ）とを含む融合タンパク質の組み合わせを含むＤＲ５標的化Ｍｕｌｔａｂｏｄｙ（ＭＢ）の生成を説明する。
【0155】
遺伝子コード融合タンパク質、（１）ｈＦＴＬ（ａＤＲ５－ｈＦＴＬ、配列番号９）のＮ末端に融合した抗ＤＲ５抗体（この場合、コナツムマブ）のｓｃＦａｂ、（２）Ｎ－半フェリチンのＮ末端に融合した抗ＤＲ５抗体（ａＤＲ５－Ｎ＿ｈＦＴＬ、配列番号１１）のｓｃＦａｂ、及び（３）Ｃ－半フェリチンのＮ末端に融合したｓｃＦｃ（以下にさらに記載される様々なｓｃＦｃ－Ｃ＿ｈＦＴＬ構築物）を調製し、２：１：１のモル比で混合し、ＤＲ５標的化ＭＢの産生及び形成のためにＥｘｐｉＣＨＯ－Ｓ細胞に一過性トランスフェクションした。図１Ｂを参照されたい。
【0156】
ｓｃＦｃ－フェリチン融合タンパク質は、野生型（ＷＴ）または操作されたＩｇＧ１ Ｆｃ鎖を含んでいた。操作されたＩｇＧ１ Ｆｃ鎖は、以下の表１に示されるように、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６Ｒ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ３２９Ｇ、及びＡ３３０Ｌ変異の様々な組み合わせを含んでいた。表１の番号付けは、ＥＵ番号付けスキームに従う。
【0157】
表１．ｓｃＦｃ－Ｃ＿ｈＦＴＬ構築物のＭｕｌｔａｂｏｄｙ及び対応する配列番号で使用されるＩｇＧ１ Ｆｃ鎖内のある特定の位置の残基
操作されたＦｃ鎖のセットに対応する行では、残基は、野生型残基とは異なる位置でのみ示される。
操作されたＦｃ鎖のセットに対応する行では、残基は、野生型残基とは異なる位置でのみ示される。
【表1】
【0158】
実施例２．バイオレイヤー干渉法によって決定されるＭｕｌｔａｂｏｄｙの標的結合
組換えヒトＤＲ５（ｈＤＲ５）、カニクイザルＤＲ５（ｃＤＲ５）、マウスＤＲ５（ｍＤＲ５）、及びラットＤＲ５（ｒＤＲ５）への実施例１に記載されるように生成された例示的なＭＢの結合動態及び親和性を、Ｏｃｔｅｔ ＲＥＤ９６機器を使用して、バイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）によって決定した。（１）ＤＲ５に結合する完全ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体であるコナツムマブ、及び（２）表１に記載の「ＬＬＲＡＬ」変異を有するｓｃＦｃを含む融合ポリペプチドを含み、コナツムマブに由来するｓｃＦａｂを含む融合ポリペプチドも含むＭｕｌｔａｂｏｄｙであるＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬについて、結合特性を決定した。
組換えヒトＤＲ５（ｈＤＲ５）、カニクイザルＤＲ５（ｃＤＲ５）、マウスＤＲ５（ｍＤＲ５）、及びラットＤＲ５（ｒＤＲ５）への実施例１に記載されるように生成された例示的なＭＢの結合動態及び親和性を、Ｏｃｔｅｔ ＲＥＤ９６機器を使用して、バイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）によって決定した。（１）ＤＲ５に結合する完全ヒトモノクローナルＩｇＧ１抗体であるコナツムマブ、及び（２）表１に記載の「ＬＬＲＡＬ」変異を有するｓｃＦｃを含む融合ポリペプチドを含み、コナツムマブに由来するｓｃＦａｂを含む融合ポリペプチドも含むＭｕｌｔａｂｏｄｙであるＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬについて、結合特性を決定した。
【0159】
簡潔には、Ｎｉ－ＮＴＡバイオセンサをｈＤＲ５－Ｈｉｓ、ｃＤＲ５－Ｈｉｓ、ｍＤＲ５－Ｈｉｓ、またはｒＤＲ５－Ｈｉｓ（Ｃ末端ポリヒスチジンタグを有するｈＤＲ５、ｃＤＲ５、ｍＤＲ５、またはｒＤＲ５の細胞外ドメイン）でコーティングして、０．８ｎｍのシグナル応答に達した。コーティングしたバイオセンサを、ＰＢＳ－０．０２％Ｔ－０．０１％ＢＳＡ（０．０２％（ｖ／ｖ）Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０及び０．０１％（ｗ／ｖ）ＢＳＡを補充したＰＢＳ）中の試験ＭＢ（２０－１０－５－２．５－１．２５－０．６３ｎＭ）の連続希釈物を含むウェルに、１８０秒間（会合段階）浸し、次いで、ＰＢＳ－０．０２％Ｔ－０．０１％ＢＳＡに１８０秒間（解離段階）浸した。すべての測定は、振盪速度１０００ｒｐｍで、ＰＢＳ－０．０２％Ｔ－０．０１％ＢＳＡ、ｐＨ７．４中で、３０℃で行い、リアルタイムで監視された。実験の間に、１０ｍＭのｐＨ１．７のグリシンを５秒間４回適用し、続いて、１０ｍＭのＮｉＳＯ４を１分間再充填することによって、バイオセンサを再生成した。
【0160】
会合段階の終了時の最大会合結合応答、解離速度（ｋｏｆｆ）、及び／または１：１の適合モデルを使用して計算された平衡解離定数（ＫＤ）に基づいて、標的結合を評価した。試験ＭＢが２０ｎＭのときの０．１ｎｍ未満の最大会合結合応答は、「非結合」として分類した。
【0161】
ｋｏｎ、ｋｏｆｆ、及び得られた試験分子のＫＤについて決定した値を表２に要約する。およそのピコモル以下の親和性でヒト及びカニクイザルＤＲ５に結合したＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬは、マウスまたはラットＤＲ５への結合を示さなかった。（装置は１ピコモルの検出限界を有する。）これらの観察は、コナツムマブ（「Ｃｏｎａ」）の結合プロファイルと一致している。
【表2】
【0162】
実施例３．バイオレイヤー干渉法によって決定されるＭｕｌｔａｂｏｄｙの結合特異性
ＢＬＩを用いて、例示的なＤＲ標的化ＭＢの関連する腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）メンバーへの非特異的結合を評価した。
ＢＬＩを用いて、例示的なＤＲ標的化ＭＢの関連する腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）メンバーへの非特異的結合を評価した。
【0163】
実験は、ヒトＤＲ４、ヒトオステオプロテゲリン（ＯＰＧ）、ヒトデコイ受容体１（ＤｃＲ１）、またはヒトＤｃＲ２－ｈＤＲ４－Ｈｉｓ、ｈＯＰＧ－Ｈｉｓ、ｈＤｃＲ１－Ｈｉｓ、もしくはｈＤｃＲ２－ＨｉｓのＨｉｓタグ付き細胞外ドメインをＮｉ－ＮＴＡバイオセンサ上にコーティングし、様々な濃度での試験ＭＢで滴定したことを除いて、実施例２に記載されるように同様に行った。
【0164】
図２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、２Ｄ、及び２Ｅは、得られたセンサグラムの関連するセグメントの代表的な例を示す。Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬは高い特異性でＤＲ５と結合し、他の試験したＴＮＦＲＳＦメンバーへの結合を示さなかった。
【0165】
実施例４．バイオレイヤー干渉法によって決定されるＦｃ受容体に対するＭｕｌｔａｂｏｄｙの結合
様々なＤＲ５標的化ＭＢ（各々が異なるＦｃ変異のセットを含み、実施例１に記載されるように生成される）の様々なＦｃ受容体への結合動態及び親和性をＢＬＩによって決定した。
様々なＤＲ５標的化ＭＢ（各々が異なるＦｃ変異のセットを含み、実施例１に記載されるように生成される）の様々なＦｃ受容体への結合動態及び親和性をＢＬＩによって決定した。
【0166】
この実施例で試験したすべてのＭＢは、ＤＲ５に結合するコナツムマブに由来するｓｃＦａｂを含むポリペプチドを含んでいた。これらのＤＲ５標的化ＭＢ（「Ｃｏｎａ ＭＢ」）はまた、野生型Ｆｃ鎖（ＩｇＧ１ ｗｔ）またはある特定の変異の組み合わせを有するＦｃ鎖（ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ）のいずれかを有するｓｃＦｃを有するポリペプチドを含む。（表１を参照されたい）
【0167】
以下のヒト、カニクイザル、及びマウスＦｃ受容体への結合を決定した：ヒトＦｃガンマ受容体Ｉ型（ｈＦｃγＲＩ）、ｈＦｃγＲＩＩａ、ｈＦｃγＲＩＩｂ、ｈＦｃγＲＩＩＩａ、ｈＦｃγＲＩＩＩｂ、ヒト新生児Ｆｃ受容体（ｈＦｃＲｎ）、カニクイザルＦｃγＲＩ（ｃＦｃγＲＩ）、ｃＦｃγＲＩＩａ、ｃＦｃγＲＩＩｂ、ｃＦｃγＲＩＩＩ、ｃＦｃＲｎ、マウスＦｃγＲＩ（ｍＦｃγＲＩ）、ｍＦｃγＲＩＩｂ、ｍＦｃγＲＩＩＩ、ｍＦｃγＲＩＶ、及びｍＦｃＲｎ。
【0168】
実験は、Ｈｉｓタグ付きＦｃ受容体をＮｉ－ＮＴＡバイオセンサ上にコーティングし、様々な濃度での試験ＭＢで滴定したことを除いて、実施例２に記載されるように同様に行った。ＭＢがエンドソームリサイクルを受ける可能性を評価するために、会合についてはｐＨ６．０及び解離についてはｐＨ７．４でＦｃＲｎへの結合を測定した。
【0169】
表３は、様々なＦｃγＲに結合するＭＢについて決定されたｋｏｎ、ｋｏｆｆ、及びＫＤ値を要約する。野生型ＩｇＧ１ Ｆｃ（ＩｇＧ１ ＷＴ）を有するＣｏｎａ ＭＢは、ヒト、カニクイザル、及びマウスＦｃγＲに結合した。ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬを有するＣｏｎａ ＭＢは、ヒト、カニクイザル、及びマウスＦｃγＲへの減少した結合を示した。
【0170】
図３は、ＦｃＲｎ結合研究から得られたセンサグラムの関連するセグメントの代表的な例を示す。すべての試験したＭＢは、ｐＨ６．０でヒト、カニクイザル、及びマウスＦｃＲｎに結合し、ｐＨ７．４で受容体から解離した。Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬは、ｐＨ７．４でヒトまたはカニクイザルＦｃＲｎからＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＷＴと同等の速度で解離した。
【表3-1】
【表3-2】
【0171】
実施例５．インビトロ腫瘍細胞傷害性の評価
例示的なＤＲ５標的化ＭＢ（実施例１に記載されるように生成される）の細胞傷害性を、異なる腫瘍細胞株を使用して評価した。Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ｗｔ及びＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬを、ＣＯＬＯ２０５（ヒト結腸癌）、ＨＣＴ－１５（ヒト結腸癌）、ＮＣＩ－Ｈ２１２２（ヒト肺癌）、ＳＮＵ－５（ヒト胃癌）、Ｃａｐａｎ－１（ヒト膵臓癌）、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１（浸潤性導管癌）、ＢｘＰＣ－３（ヒト膵臓癌）、及びＮＣＩ－Ｈ２２２８（ヒト肺癌）細胞株に対して試験した。
例示的なＤＲ５標的化ＭＢ（実施例１に記載されるように生成される）の細胞傷害性を、異なる腫瘍細胞株を使用して評価した。Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ｗｔ及びＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬを、ＣＯＬＯ２０５（ヒト結腸癌）、ＨＣＴ－１５（ヒト結腸癌）、ＮＣＩ－Ｈ２１２２（ヒト肺癌）、ＳＮＵ－５（ヒト胃癌）、Ｃａｐａｎ－１（ヒト膵臓癌）、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１（浸潤性導管癌）、ＢｘＰＣ－３（ヒト膵臓癌）、及びＮＣＩ－Ｈ２２２８（ヒト肺癌）細胞株に対して試験した。
【0172】
腫瘍細胞株を、９６ウェルプレート中にウェル当たり５０００個の細胞で播種し、一晩インキュベートして、結合を容易にした。翌日、細胞をＤＲ５標的化ＭＢまたは抗ＤＲ５（コナツムマブ）の連続希釈で処理し、３７℃で２４時間インキュベートした。細胞生存率を、製造業者の指示に従って、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ Ｃｅｌｌ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して測定した。簡潔には、アッセイ試薬（１００μＬ）を室温で１００μＬの細胞に添加し、プレートシェーカーを使用して５００ｒｐｍで２分間混合し、室温で１０分間インキュベートした。発光シグナルは、Ｓｙｎｅｒｇｙ Ｎｅｏ２ Ｍｕｌｔｉ－Ｍｏｄｅ Ａｓｓａｙ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ（ＢｉｏＴｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を使用して読み取った。
【0173】
図４は、これらの実験からの結果を示す。図４において、（ビヒクル処置された腫瘍細胞と比較した）生存細胞のパーセンテージを、ｘ軸上の試験分子濃度に対してｙ軸上にプロットした。データを、非線形回帰（対数阻害剤対応答、可変スロープ、４つのパラメータ）を用いてＰｒｉｓｍ９．１．２ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ）を使用して適合させた。表４は、得られたＩＣ５０値を提供する。試験したＤＲ５標的化ＭＢ（Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ｗｔ及びＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ）の両方は、ヒトがん細胞株の細胞傷害性を誘導することができた。一方、ＩｇＧ１抗体であるコナツムマブは、腫瘍細胞傷害性を誘導しなかったか、または非常に乏しい誘導であった。
【表4】
【0174】
実施例６．マウスにおけるＭｕｌｔａｂｏｄｙの薬物動態
実施例１に記載されるように生成された例示的なＤＲ５標的化ＭＢ（Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ及びコナツムマブ）の薬物動態（ＰＫ）を、８週齢の雌ＢＡＬＢ／ｃ ＳＣＩＤマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｓ）において分析した。
実施例１に記載されるように生成された例示的なＤＲ５標的化ＭＢ（Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ及びコナツムマブ）の薬物動態（ＰＫ）を、８週齢の雌ＢＡＬＢ／ｃ ＳＣＩＤマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｓ）において分析した。
【0175】
単回用量ＰＫ研究について、マウスは、５ｍｇ／ｋｇで、２００μＬの試験分子の単回ボーラス注射を腹腔内（ｉ．ｐ．）または静脈内（ｉ．ｖ．）で受けた（１群当たりＮ＝８匹のマウス、１時点当たりＮ＝４匹のマウス）。５０～１００μＬの血液試料を、３時間、２４時間、４８時間、７２時間、５日、７日、１５日、及び２１日の時点で収集した。
【0176】
複数回用量ＰＫ研究について、マウスに、９日目に、５ｍｇ／ｋｇで２００μＬの試験分子を注射し、続いて、９６時間後に５ｍｇ／ｋｇで２００μＬの試験分子の第２の注射を行った。５０～１００μＬの血液試料を、第１の用量の３時間後、２４時間後、４８時間後、７２時間後、及び９６時間後、ならびに第２の用量の３時間後、２４時間後、４８時間後、７２時間後、５日後、７日後、及び１４日後に収集した。
【0177】
血液試料を伏在静脈からヘパリンでコーティングしたチューブに収集し、指でボルテックスして混合を確実にした。その後、試料を、４℃で、１５００×ｇで１５分間遠心分離し、血漿試料を収集し、ＥＬＩＳＡアッセイで使用するまで直ちに－８０℃で保存した。
【0178】
ＥＬＩＳＡで血漿薬物レベルを測定するために、ＰＢＳ中２μｇ／ｍＬの組換えＤＲ５を４℃で一晩、Ｍａｘｉｓｏｒｐプレート（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）にコーティングした。ＰＢＳ－０．０５％Ｔ（０．０５％（ｖ／ｖ）Ｔｗｅｅｎ（登録商標）－２０を補充したＰＢＳ）で２回洗浄した後、プレートをＰＢＳ中３％（ｗ／ｖ）ＢＳＡで、室温で１時間ブロックし、その後、ＰＢＳ－０．０５％Ｔで２回洗浄した。血漿試料を、ＰＢＳ－０．０５％Ｔ－０．５％ＢＳＡ（０．０５％（ｖ／ｖ）Ｔｗｅｅｎ（登録商標）－２０及び０．５％（ｗ／ｖ）ＢＳＡを補充したＰＢＳ）中に希釈し、ウェルに添加し、室温及び５００ｒｐｍの振動数で１時間インキュベートし、続いて、ＰＢＳ－０．０５％Ｔで別の洗浄ステップを行った。１：１００００で希釈したヤギポリクローナル抗ヒトＦｃ－ＨＲＰ二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ）でインキュベーションすることによって、結合分子を検出した。ＰＢＳ－０．０５％Ｔでのさらなる洗浄ステップの後、ＯｐｔＥＩＡ（商標）ＴＭＢ基質試薬セット（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を製造業者の指示に従って検出に使用し、Ｓｙｎｅｒｇｙ Ｎｅｏ２ Ｍｕｌｔｉ－Ｍｏｄｅ Ａｓｓａｙ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ Ｒｅａｄｅｒ（ＢｉｏＴｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を使用して４５０ｎｍでの吸光度を読み取った。ＰＢＳ－０．０５％Ｔ－０．５％ＢＳＡ中の試験分子の希釈を使用して、較正曲線を準備した。
【0179】
図５Ａは、これらの薬物動態研究の設計を示す概略図である。
【0180】
図５Ｂは、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ｗｔ、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ、及びコナツムマブ（「Ｃｏｎａ」）の単回用量ＰＫ研究における経時的な血漿濃度のプロットを示す。表５は、計算された半減期の要約を表す。Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬは、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ｗｔと比較して著しく増強されたＰＫ特性を示した。最初の７日間、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬの血漿濃度は、コナツムマブの血漿濃度と同等のままであった。１５日目のＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ血漿濃度は、インビトロ細胞傷害性アッセイ（実施例５を参照されたい）で決定したＩＣ５０値（約０．０４μｇ／ｍＬ）の１２５倍、及び２１日目でＩＣ５０値の４０倍であった。
【0181】
【0182】
実施例７．異種移植マウスモデルにおけるＤＲ５標的化Ｍｕｌｔａｂｏｄｙの治療効果
例示的なＭｕｌｔａｂｏｄｙの治療効果を、結腸癌異種移植モデルにおいて評価した。図６Ａは、インビボ有効性研究の試験設計を示す概略図を示す。
例示的なＭｕｌｔａｂｏｄｙの治療効果を、結腸癌異種移植モデルにおいて評価した。図６Ａは、インビボ有効性研究の試験設計を示す概略図を示す。
【0183】
５×１０６のＣＯＬＯ２０５細胞を、ＢＡＬＢ／ｃ ＳＣＩＤマウス（群当たりｎ＝１２）の脇腹に皮下注射した。腫瘍を２００ｍｍ３の平均サイズまで成長させた。平均腫瘍体積が群間で等しくなるように、マウスを処置群または対照群に分類した（図６Ｂ）。マウスは、２週間にわたって週１回または２回、腹腔内（ｉ．ｐ．）注射を介して処置（用量当たり５ｍｇ／ｋｇ）または対照を受けた（図６Ａ）。腫瘍体積を、キャリパーを使用して週２回測定した。血液試料を、初回用量の２４時間後、７日後、１４日後、及び２１日後に収集し、血漿中の薬物レベルを実施例６に記載されるように測定した。
【0184】
図６Ｂ～６Ｇは、様々な群におけるマウスの腫瘍体積を示すプロットである。図６Ｂ及び図６Ｄ～６Ｇのプロットは、経時的な腫瘍体積を示し、図６Ｃのプロットは、処置開始後８８日目の腫瘍体積を示す。Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬによる処置は、週１回または２回、大きな確立された腫瘍の成長を著しく阻害し、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬが大きなサイズであっても腫瘍を浸潤することができたことを示唆している。Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬは、コナツムマブよりも腫瘍成長をより強く阻害し、それぞれ、週１回処置群及び週２回処理群において９／１２及び１１／１２の完全な退縮がもたらされた。これは、コナツムマブ処置群でわずか１／１２の完全な寛解と比較している。
【0185】
図６Ｈは、第１の用量（ｘ軸）後の時間の関数としての血漿（ｙ軸）中の試験分子の濃度を示すプロットである。ＣＯＬＯ２０５結腸癌マウスモデルで観察されたＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬの薬物動態プロファイルは、実施例６に記載の複数回用量ＰＫ研究で観察されたものと同様であった。（図５Ｂを参照されたい）。これらの結果は、腫瘍の存在が、Ｍｕｌｔａｂｏｄｙのクリアランスに影響を与えないことを示唆している。
【0186】
これらの実験を、ビヒクル、コナツムマブ、またはＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬを２週間にわたって１週間に１回、用量当たり５ｍｇ／ｋｇで使用して、同じ研究設計を有する第２の研究で繰り返した。この第２の研究の結果は、第１の研究の結果と同様であり、ビヒクル群で腫瘍退縮は観察されず、コナツムマブ群の１０匹のマウスのいずれも完全な腫瘍退縮を示さず、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ群の１０匹すべてのマウスは完全な腫瘍退縮を示した（データには示さず）。この第２の研究の結果は、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬの治療効果が週１回の投与で非常に再現性があることを示す。
【0187】
実施例８．異種移植マウスモデルにおけるＤＲ５標的化Ｍｕｌｔａｂｏｄｙの用量範囲有効性
Ｃｏｎａ ＩｇＧ１ ＭＢ ＬＬＲＡＬの用量範囲有効性も、実施例６で使用した同じ結腸癌異種移植モデルで調査した。
Ｃｏｎａ ＩｇＧ１ ＭＢ ＬＬＲＡＬの用量範囲有効性も、実施例６で使用した同じ結腸癌異種移植モデルで調査した。
【0188】
５×１０６個のＣＯＬＯ２０５細胞を、Ｂａｌｂ／ｃ ＳＣＩＤマウスの脇腹に皮下注射した。腫瘍を２００ｍｍ３の平均サイズまで成長させた。平均腫瘍体積が各群にわたって等しくなるように、マウスを５つのグループ（ビヒクルまたは用量当たり０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、もしくは５ｍｇ／ｋｇのＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ）のうちの１つに分類した。マウスは、３週間にわたって週１回腹腔内（ｉ．ｐ．）注射を介して処置またはビヒクルを受けた。腫瘍体積を、キャリパーを使用して週２回測定した。実験全体を通して血液試料を採取した。
【0189】
図７Ａは、第１の用量後の経時的な様々な群におけるマウスの腫瘍体積を示すプロットである。「ＭＢ」は、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ群を示す。図７Ｂ～７Ｆは、ビヒクル（図７Ｂ）ならびに５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、０．２５ｍｇ／ｋｇ、及び０．１ｍｇ／ｋｇのＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ処置（それぞれ、図７Ｃ、図７Ｄ、図７Ｅ、及び図７Ｆ）群内の個々のマウスの腫瘍体積を示す。図７Ａに示されるように、０．２５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ／、及び５ｍｇ／ｋｇの用量で、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬで処置したマウスは、ビヒクル群よりも著しい改善を示した。Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬは、最初は１ｍｇ／ｋｇ及び５ｍｇ／ｋｇの用量で同様の有効性を有するように思われた。しかしながら、１ｍｇ／ｋｇは、１２匹のマウスのうち１２匹で完全な退縮が見られた５ｍｇ／ｋｇの処置群よりも、より少ない完全奏効及びさらなる再成長を示した。
【0190】
図７Ｇは、第１の用量が投与された後の様々な時点で収集された血液試料中で検出可能なＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬの量を示すプロットである。Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬは、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ／、及び５ｍｇ／ｋｇのＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ処置群で試験されたすべての時点で血漿中で検出可能であり、薬物動態はすべての用量群で直線的に現れた。
【0191】
これらの結果は、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬが、実施例６で試験されたものよりも５倍低い用量レベルでの同等の有効性を含む、試験された複数回用量で治療有効性を示したことを実証する。しかしながら、５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで完全な腫瘍の退縮が観察されたが、用量レベルを１ｍｇ／ｋｇに低下させたときにいくつかの腫瘍の再成長が観察された。
【0192】
実施例９．ＤＲ５標的化Ｍｕｌｔａｂｏｄｙによる大腫瘍の浸潤及びアポトーシスの誘導
実施例１に記載されるように生成された例示的なＭｕｌｔａｂｏｄｙを、結腸異種移植モデルにおいて、大腫瘍を浸潤し、アポトーシスを誘導する能力について評価した。
実施例１に記載されるように生成された例示的なＭｕｌｔａｂｏｄｙを、結腸異種移植モデルにおいて、大腫瘍を浸潤し、アポトーシスを誘導する能力について評価した。
【0193】
５×１０６個のＣＯＬＯ２０５細胞を、Ｂａｌｂ／ｃ ＳＣＩＤマウスの脇腹に皮下注射した。腫瘍を５００ｍｍ３の平均サイズまで成長させた。腫瘍体積を、キャリパーを使用して週２回測定した。マウスを、平均腫瘍サイズが２つの群にわたって同一であり、各群において約５００ｍｍ３であるように、ビヒクルまたは処置群に無作為に割り当てた。次いで、マウスに、１回の用量のビヒクルまたは５ｍｇ／ｋｇのＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬを、腹腔内（ｉ．ｐ．）注射によって投与した。血液試料は、ビヒクルまたはＣｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬの注射の２４時間後に収集し、その後の組織学的分析のために腫瘍を採取した。図８は、これらの実験の概略図及びタイムラインを示す。
【0194】
腫瘍をホルマリン固定し、パラフィン中に埋め込み、切片化した。腫瘍切片を、アポトーシスのマーカーである切断カスパーゼ－３について免疫組織化学的に染色した。染色された組織切片の代表的な画像を、図９Ａ及び９Ｃ（ビヒクル処置マウス）ならびに図９Ｂ及び９Ｄ（Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ処置マウス）に示す。これらの図に示されるように、ビヒクル処置マウス由来の腫瘍切片において、ほとんどのアポトーシス細胞が検出されなかった。対照的に、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ処置マウスからの組織切片は、腫瘍マージンから離れた腫瘍のコア内の深部を含む腫瘍全体にわたってアポトーシス細胞の大部分を含んでいた（図９Ｂ及び９Ｄの染色細胞を参照されたい）。
【0195】
これらの結果は、Ｃｏｎａ ＭＢ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬが腫瘍全体の腫瘍細胞のアポトーシスを誘導したことを確認する。さらに、これらの結果は、Ｍｕｌｔａｂｏｄｙが大規模な確立された腫瘍のコアに浸透することができることを確認する。
配列表
融合配列内の下線は、リンカー配列を示す。
融合配列内の太字は、フェリチンまたはフェリチンサブユニット配列を示す。
可変領域の配列内では、下線及び太字が一緒になって、相補的決定領域の配列を示す。
ボックスを付した残基及び太字の残基は、参照分子に対して、例えば、ＩｇＧ１ Ｆｃに対して変異した残基を示す。
配列番号１ ｈＦＴＬ
ＭＳＳＱＩＲＱＮＹＳＴＤＶＥＡＡＶＮＳＬＶＮＬＹＬＱＡＳＹＴＹＬＳＬＧＦＹＦＤＲＤＤＶＡＬＥＧＶＳＨＦＦＲＥＬＡＥＥＫＲＥＧＹＥＲＬＬＫＭＱＮＱＲＧＧＲＡＬＦＱＤＩＫＫＰＡＥＤＥＷＧＫＴＰＤＡＭＫＡＡＭＡＬＥＫＫＬＮＱＡＬＬＤＬＨＡＬＧＳＡＲＴＤＰＨＬＣＤＦＬＥＴＨＦＬＤＥＥＶＫＬＩＫＫＭＧＤＨＬＴＮＬＨＲＬＧＧＰＥＡＧＬＧＥＹＬＦＥＲＬＴＬＲＨＤ
配列番号２ Ｎ＿ｈＦＴＬ
ＭＳＳＱＩＲＱＮＹＳＴＤＶＥＡＡＶＮＳＬＶＮＬＹＬＱＡＳＹＴＹＬＳＬＧＦＹＦＤＲＤＤＶＡＬＥＧＶＳＨＦＦＲＥＬＡＥＥＫＲＥＧＹＥＲＬＬＫＭＱＮＱＲＧＧＲＡＬＦＱＤＩＫＫＰＡＥＤＥＷ
配列番号３ Ｃ＿ｈＦＴＬ
ＧＫＴＰＤＡＭＫＡＡＭＡＬＥＫＫＬＮＱＡＬＬＤＬＨＡＬＧＳＡＲＴＤＰＨＬＣＤＦＬＥＴＨＦＬＤＥＥＶＫＬＩＫＫＭＧＤＨＬＴＮＬＨＲＬＧＧＰＥＡＧＬＧＥＹＬＦＥＲＬＴＬＲＨＤ
配列番号４ ＩｇＧ１ Ｆｃ
ＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号５ ＩｇＧ１ ｓｃＦｃ
配列番号６ Ｃｏｎａ ＬＣ
ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＧＩＳＲＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＳＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＦＧＳＳＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号７ Ｃｏｎａ ＨＣ
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＳＳＧＤＹＦＷＳＷＩＲＱＬＰＧＫＧＬＥＷＩＧＨＩＨＮＳＧＴＴＹＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＫＱＦＳＬＲＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＧＧＤＹＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号８ Ｃｏｎａ ｓｃＦａｂ
配列番号９ ａＤＲ５－ｈＦＴＬ
配列番号１０ ａＤＲ５－ｈＦＴＬ、代替配列
配列番号１１ ａＤＲ５－Ｎ＿ｈＦＴＬ
配列番号１２ ａＤＲ５－Ｎ＿ｈＦＴＬ、代替配列
配列番号１３ ｓｃＦｃ－Ｃ＿ｈＦＴＬ ＩｇＧ１ ＷＴ
配列番号１４ ｓｃＦｃ－Ｃ＿ｈＦＴＬ ＩｇＧ１ ＬＡＬＡ
配列番号１５ ｓｃＦｃ－Ｃ＿ｈＦＴＬ ＩｇＧ１ ＬＡＬＡＰ
配列番号１６ ｓｃＦｃ－Ｃ＿ｈＦＴＬ ＩｇＧ１ ＬＬＲＡＬ
配列番号１７ ｓｃＦｃ－Ｃ＿ｈＦＴＬ ＩｇＧ１ ＬＬＧＲＡＬ
配列番号１８ ヒトＤＲ５（ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＡＡＢ６７１０９．１）
配列番号１９ ヒトＤＲ５（ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＡＡＢ７１４１２．１）
配列番号２０ ヒトＤＲ５（ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＡＡＣ０１５６５．１）
配列番号２１ ヒトＤＲ５（ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＡＡＢ６７１０３．１）
配列番号２２ コナツムマブ由来のＶＬ
配列番号２３ コナツムマブ由来のＶＨ
配列番号２４ コナツムマブ由来のＣＤＲ－Ｌ１
ＲＡＳＱＧＩＳＲＳＹＬＡ
配列番号２５ コナツムマブ由来のＣＤＲ－Ｌ２
ＧＡＳＳＲＡＴ
配列番号２６ コナツムマブ由来のＣＤＲ－Ｌ３
ＱＱＦＧＳＳＰＷＴ
配列番号２７ コナツムマブ由来のＣＤＲ－Ｈ１
ＧＧＳＩＳＳＧＤＹＦＷＳ
配列番号２８ コナツムマブ由来のＣＤＲ－Ｈ２
ＨＩＨＮＳＧＴＴＹＹＮＰＳＬＫＳ
配列番号２９ コナツムマブ由来のＣＤＲ－Ｈ３
ＤＲＧＧＤＹＹＹＧＭＤＶ
配列番号３０ チガツズマブ由来のＶＬ
配列番号３１ チガツズマブ由来のＶＨ
配列番号３２ チガツズマブ由来のＣＤＲ－Ｌ１
ＫＡＳＱＤＶＧＴＡＶＡ
配列番号３３ チガツズマブ由来のＣＤＲ－Ｌ２
ＷＡＳＴＲＨＴ
配列番号３４ チガツズマブ由来のＣＤＲ－Ｌ３
ＱＱＹＳＳＹＲＴ
配列番号３５ チガツズマブ由来のＣＤＲ－Ｈ１
ＧＦＴＦＳＳＹＶＭＳ
配列番号３６ チガツズマブ由来のＣＤＲ－Ｈ２
ＴＩＳＳＧＧＳＹＴＹＹＰＤＳＶＫＧ
配列番号３７ チガツズマブ由来のＣＤＲ－Ｈ３
ＲＧＤＳＭＩＴＴＤＹ
配列番号３８ ドロジツマブ由来のＶＬ
配列番号３９ ドロジツマブ由来のＶＨ
配列番号４０ ドロジツマブ由来のＣＤＲ－Ｌ１
ＳＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳ
配列番号４１ ドロジツマブ由来のＣＤＲ－Ｌ２
ＧＡＮＮＲＰＳ
配列番号４２ ドロジツマブ由来のＣＤＲ－Ｌ３
ＮＳＡＤＳＳＧＮＨＶＶ
配列番号４３ ドロジツマブ由来のＣＤＲ－Ｈ１
ＧＦＴＦＤＤＹＡＭＳ
配列番号４４ ドロジツマブ由来のＣＤＲ－Ｈ２
ＩＮＷＱＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧ
配列番号４５ ドロジツマブ由来のＣＤＲ－Ｈ３
ＩＬＧＡＧＲＧＷＹＦＤＹ
配列番号４６ レキサツムマブ由来のＶＬ
配列番号４７ レキサツムマブ由来のＶＨ
配列番号４８ レキサツムマブ由来のＣＤＲ－Ｌ１
ＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳ
配列番号４９ レキサツムマブ由来のＣＤＲ－Ｌ２
ＧＫＮＮＲＰＳ
配列番号５０ レキサツムマブ由来のＣＤＲ－Ｌ３
ＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶ
配列番号５１ レキサツムマブ由来のＣＤＲ－Ｈ１
ＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳ
配列番号５２ レキサツムマブ由来のＣＤＲ－Ｈ２
ＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧ
配列番号５３ レキサツムマブ由来のＣＤＲ－Ｈ３
ＩＬＧＡＧＲＧＷＹＦＤＬ
配列番号５４ ＧＳリンカー配列
ＧＧＧＧＳ
配列番号５５ ＧＳリンカー配列
ＧＧＧＳ
配列表
融合配列内の下線は、リンカー配列を示す。
融合配列内の太字は、フェリチンまたはフェリチンサブユニット配列を示す。
可変領域の配列内では、下線及び太字が一緒になって、相補的決定領域の配列を示す。
ボックスを付した残基及び太字の残基は、参照分子に対して、例えば、ＩｇＧ１ Ｆｃに対して変異した残基を示す。
配列番号１ ｈＦＴＬ
ＭＳＳＱＩＲＱＮＹＳＴＤＶＥＡＡＶＮＳＬＶＮＬＹＬＱＡＳＹＴＹＬＳＬＧＦＹＦＤＲＤＤＶＡＬＥＧＶＳＨＦＦＲＥＬＡＥＥＫＲＥＧＹＥＲＬＬＫＭＱＮＱＲＧＧＲＡＬＦＱＤＩＫＫＰＡＥＤＥＷＧＫＴＰＤＡＭＫＡＡＭＡＬＥＫＫＬＮＱＡＬＬＤＬＨＡＬＧＳＡＲＴＤＰＨＬＣＤＦＬＥＴＨＦＬＤＥＥＶＫＬＩＫＫＭＧＤＨＬＴＮＬＨＲＬＧＧＰＥＡＧＬＧＥＹＬＦＥＲＬＴＬＲＨＤ
配列番号２ Ｎ＿ｈＦＴＬ
ＭＳＳＱＩＲＱＮＹＳＴＤＶＥＡＡＶＮＳＬＶＮＬＹＬＱＡＳＹＴＹＬＳＬＧＦＹＦＤＲＤＤＶＡＬＥＧＶＳＨＦＦＲＥＬＡＥＥＫＲＥＧＹＥＲＬＬＫＭＱＮＱＲＧＧＲＡＬＦＱＤＩＫＫＰＡＥＤＥＷ
配列番号３ Ｃ＿ｈＦＴＬ
ＧＫＴＰＤＡＭＫＡＡＭＡＬＥＫＫＬＮＱＡＬＬＤＬＨＡＬＧＳＡＲＴＤＰＨＬＣＤＦＬＥＴＨＦＬＤＥＥＶＫＬＩＫＫＭＧＤＨＬＴＮＬＨＲＬＧＧＰＥＡＧＬＧＥＹＬＦＥＲＬＴＬＲＨＤ
配列番号４ ＩｇＧ１ Ｆｃ
ＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号５ ＩｇＧ１ ｓｃＦｃ
【化1】
ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＧＩＳＲＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＳＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＦＧＳＳＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号７ Ｃｏｎａ ＨＣ
ＱＶＱＬＱＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＳＳＧＤＹＦＷＳＷＩＲＱＬＰＧＫＧＬＥＷＩＧＨＩＨＮＳＧＴＴＹＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＫＱＦＳＬＲＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＧＧＤＹＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号８ Ｃｏｎａ ｓｃＦａｂ
【化2】
【化3】
【化4】
【化5】
【化6】
【化7】
【化8】
【化9】
【化10】
【化11】
【化12】
【化13】
【化14】
【化15】
【化16】
【化17】
ＲＡＳＱＧＩＳＲＳＹＬＡ
配列番号２５ コナツムマブ由来のＣＤＲ－Ｌ２
ＧＡＳＳＲＡＴ
配列番号２６ コナツムマブ由来のＣＤＲ－Ｌ３
ＱＱＦＧＳＳＰＷＴ
配列番号２７ コナツムマブ由来のＣＤＲ－Ｈ１
ＧＧＳＩＳＳＧＤＹＦＷＳ
配列番号２８ コナツムマブ由来のＣＤＲ－Ｈ２
ＨＩＨＮＳＧＴＴＹＹＮＰＳＬＫＳ
配列番号２９ コナツムマブ由来のＣＤＲ－Ｈ３
ＤＲＧＧＤＹＹＹＧＭＤＶ
配列番号３０ チガツズマブ由来のＶＬ
【化18】
【化19】
ＫＡＳＱＤＶＧＴＡＶＡ
配列番号３３ チガツズマブ由来のＣＤＲ－Ｌ２
ＷＡＳＴＲＨＴ
配列番号３４ チガツズマブ由来のＣＤＲ－Ｌ３
ＱＱＹＳＳＹＲＴ
配列番号３５ チガツズマブ由来のＣＤＲ－Ｈ１
ＧＦＴＦＳＳＹＶＭＳ
配列番号３６ チガツズマブ由来のＣＤＲ－Ｈ２
ＴＩＳＳＧＧＳＹＴＹＹＰＤＳＶＫＧ
配列番号３７ チガツズマブ由来のＣＤＲ－Ｈ３
ＲＧＤＳＭＩＴＴＤＹ
配列番号３８ ドロジツマブ由来のＶＬ
【化20】
【化21】
ＳＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳ
配列番号４１ ドロジツマブ由来のＣＤＲ－Ｌ２
ＧＡＮＮＲＰＳ
配列番号４２ ドロジツマブ由来のＣＤＲ－Ｌ３
ＮＳＡＤＳＳＧＮＨＶＶ
配列番号４３ ドロジツマブ由来のＣＤＲ－Ｈ１
ＧＦＴＦＤＤＹＡＭＳ
配列番号４４ ドロジツマブ由来のＣＤＲ－Ｈ２
ＩＮＷＱＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧ
配列番号４５ ドロジツマブ由来のＣＤＲ－Ｈ３
ＩＬＧＡＧＲＧＷＹＦＤＹ
配列番号４６ レキサツムマブ由来のＶＬ
【化22】
【化23】
ＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳ
配列番号４９ レキサツムマブ由来のＣＤＲ－Ｌ２
ＧＫＮＮＲＰＳ
配列番号５０ レキサツムマブ由来のＣＤＲ－Ｌ３
ＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶ
配列番号５１ レキサツムマブ由来のＣＤＲ－Ｈ１
ＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳ
配列番号５２ レキサツムマブ由来のＣＤＲ－Ｈ２
ＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧ
配列番号５３ レキサツムマブ由来のＣＤＲ－Ｈ３
ＩＬＧＡＧＲＧＷＹＦＤＬ
配列番号５４ ＧＳリンカー配列
ＧＧＧＧＳ
配列番号５５ ＧＳリンカー配列
ＧＧＧＳ
【0196】
等価物／他の実施形態
本発明は、その特定の実施形態に関連して説明されているが、さらなる修正が可能であり、本出願は、一般的に、本発明の原理に従う本発明の任意の変形、使用、または適応をカバーすることを意図しており、本発明が属する技術分野内の既知のまたは慣習的な実践の範囲内にある本開示からのそのような逸脱を含み、本明細書で先に記載される本発明の本質的な特徴に適用され得ることを理解されたい。
本発明は、その特定の実施形態に関連して説明されているが、さらなる修正が可能であり、本出願は、一般的に、本発明の原理に従う本発明の任意の変形、使用、または適応をカバーすることを意図しており、本発明が属する技術分野内の既知のまたは慣習的な実践の範囲内にある本開示からのそのような逸脱を含み、本明細書で先に記載される本発明の本質的な特徴に適用され得ることを理解されたい。
【図1A】
【図1B】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5A】
【図5B】
【図5C】
【図6A】
【図6B】
【図6C】
【図6D】
【図6E】
【図6F】
【図6G】
【図6H】
【図7A】
【図7B】
【図7C】
【図7D】
【図7E】
【図7F】
【図7G】
【図8】
【図9】
【配列表】
【国際調査報告】