知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
▶ フォースィー ファーマシューティカルズ カンパニー リミテッドの特許一覧
特表2024-533945ＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出性送達のためのポリマーデポ組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-09-18
(54)【発明の名称】ＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出性送達のためのポリマーデポ組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 45/00 20060101AFI20240910BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240910BHJP
A61P 25/14 20060101ALI20240910BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20240910BHJP
A61K 47/34 20170101ALI20240910BHJP
A61K 47/22 20060101ALI20240910BHJP
A61K 47/20 20060101ALI20240910BHJP
A61K 47/10 20170101ALI20240910BHJP
A61K 47/14 20170101ALI20240910BHJP
A61K 31/4375 20060101ALI20240910BHJP
【ＦＩ】
A61K45/00
A61P43/00 111
A61P25/14
A61P25/00
A61K47/34
A61K47/22
A61K47/20
A61K47/10
A61K47/14
A61K31/4375
【審査請求】未請求
【予備審査請求】有
(21)【出願番号】P 2024503489
(86)(22)【出願日】2022-08-16
(85)【翻訳文提出日】2024-01-18
(86)【国際出願番号】 US2022040425
(87)【国際公開番号】W WO2023023026
(87)【国際公開日】2023-02-23
(31)【優先権主張番号】63/233,659
(32)【優先日】2021-08-16
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】517132647
【氏名又は名称】フォースィー ファーマシューティカルズ カンパニー リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100110766
【弁理士】
【氏名又は名称】佐川 慎悟
(74)【代理人】
【識別番号】100165515
【弁理士】
【氏名又は名称】太田 清子
(74)【代理人】
【識別番号】100169340
【弁理士】
【氏名又は名称】川野 陽輔
(74)【代理人】
【識別番号】100195682
【弁理士】
【氏名又は名称】江部 陽子
(74)【代理人】
【識別番号】100206623
【弁理士】
【氏名又は名称】大窪 智行
(72)【発明者】
【氏名】リィ ユィホア
(72)【発明者】
【氏名】ジャン シーファン
(72)【発明者】
【氏名】ホアン ウェンイエン
(72)【発明者】
【氏名】ホアン チワティン
【テーマコード（参考）】
4C076
4C084
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076BB11
4C076CC01
4C076DD37
4C076DD45
4C076DD55
4C076DD60
4C076EE24
4C076FF31
4C084AA17
4C084MA66
4C084NA12
4C084ZA02
4C084ZC42
4C086AA01
4C086AA02
4C086CB09
4C086GA16
4C086MA03
4C086MA05
4C086MA66
4C086NA13
4C086ZA02
(57)【要約】
本出願は、遅発性ジスキネジア（ＴＤ）、ハンチントン病（ＨＤ）舞踏運動、振戦、ジストニア、舞踏運動、チック、ミオクローヌス、常同症、レストレスレッグス症候群、及び異常な不随意運動を伴う様々な他の障害を含むがこれらに限定されない、多動性運動障害の治療のための、小胞性モノアミン輸送体２型（ＶＭＡＴ２）阻害剤、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグの持続放出性送達組成物に関する。組成物を作製又は使用する方法も開示される。
【選択図】図１
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
注射可能なポリマーデポ組成物であって、ａ）ＶＭＡＴ２阻害剤、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグと、ｂ）ホモポリマーポリラクチド又はポリ乳酸（ＰＬＡ）、コポリマーポリ（乳酸－ｃｏ－グリコール酸）又はポリ（ラクチド－ｃｏ－グリコリド）（ＰＬＧＡ）、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される生分解性ポリマーであって、前記ＰＬＧＡが、５０：５０～９９：１（両端を含む）のラクチド：グリコリド（又は乳酸：グリコール酸）のモノマー比を有する、生分解性ポリマーと、ｃ）Ｎ－メチル－２－ピロリドン、２－ピロリドン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される薬学的に許容される有機溶媒と、を含む、注射可能なポリマーデポ組成物。
【請求項2】
前記ＶＭＡＴ２阻害剤が、（＋）－ＴＢＺである、請求項１に記載の注射可能なポリマーデポ組成物。
【請求項3】
前記ＶＭＡＴ２阻害剤が、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺである、請求項１に記載の注射可能なポリマーデポ組成物。
【請求項4】
前記薬学的に許容される有機溶媒が、Ｎ－メチル－２－ピロリドンである、請求項１に記載の注射可能なポリマーデポ組成物。
【請求項5】
前記ＶＭＡＴ２阻害剤の量が、前記ポリマーデポ組成物中で５～７０重量％の範囲である、請求項１に記載の注射可能なポリマーデポ組成物。
【請求項6】
１０重量％～９０重量％の前記生分解性ポリマーを含む、請求項１に記載の注射可能なポリマーデポ組成物。
【請求項7】
前記生分解性ポリマーが、約１００：０、９５：５、９０：１０、８５：１５、８０：２０、７５：２５、７０：３０、６５：３５、６０：４０、５５：４５、又は５０：５０の乳酸対グリコール酸のモノマー比を有する、請求項１に記載の注射可能なポリマーデポ組成物。
【請求項8】
前記生分解性ポリマーが、エステル末端官能基、カルボン酸末端官能基、ヒドロキシル基、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される基を含む、請求項１に記載の注射可能なポリマーデポ組成物。
【請求項9】
前記生分解性ポリマーが、５，０００～１２０，０００の平均重量分子量（Ｍｗ）を有する、請求項１に記載の注射可能なポリマーデポ組成物。
【請求項10】
前記生分解性ポリマー及び前記薬学的に許容される有機溶媒の総量に基づいて、１０重量％～９０重量％の前記薬学的に許容される有機溶媒を含む、請求項１に記載の注射可能なポリマーデポ組成物。
【請求項11】
安定化剤、抗酸化剤、緩衝剤、放出改質剤、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される添加剤を更に含む、請求項１に記載の注射可能なポリマーデポ組成物。
【請求項12】
前記ＶＭＡＴ２阻害剤が、約２μｍ～約３００μｍの範囲のＤ（５０）を特徴とする粒径分布を有する、請求項１に記載の注射可能なポリマーデポ組成物。
【請求項13】
前記ＶＡＭＴ２阻害剤が、前記組成物中に均一に分散され、かつ皮下又は筋肉内注射のためにシリンジに充填される、請求項１に記載の注射可能なポリマーデポ組成物。
【請求項14】
請求項１に記載の注射可能なポリマーデポ組成物を作製する方法であって、前記ＶＡＭＴ２阻害剤、その前記重水素化誘導体、前記塩、前記活性代謝産物、又は前記プロドラッグをシリンジＡに予め充填することと、前記生分解性ポリマー及び前記薬学的に許容される有機溶媒を均質に混合して均質な混合物を形成し、前記均質な混合物をシリンジＢに予め充填することと、前記シリンジＡ及びＢ内の成分を完全に混合して前記ポリマーデポ組成物を形成することと、を含む、方法。
【請求項15】
多動性運動障害を治療する方法であって、その治療を必要とする患者に、注射を介して、請求項１に記載の組成物を投与することと、前記患者に投与する際に、インサイチュ持続放出性インプラント／デポを形成することと、前記ＶＭＡＴ２阻害剤、その前記重水素化誘導体、その前記薬学的に許容される塩、その前記活性代謝産物、又はその前記プロドラッグを、少なくとも１週間、前記患者に徐々に放出することと、を含む、方法。
【請求項16】
前記投与後、前記ＶＭＡＴ２阻害剤、その前記重水素化誘導体、その前記薬学的に許容される塩、その前記活性代謝産物、又はその前記プロドラッグの持続放出を、１～１０の血漿レベルピーク／トラフ（Ｐ／Ｔ）比で提供することを含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項17】
前記インサイチュ持続放出性インプラント／デポからの、前記ＶＭＡＴ２阻害剤、その前記重水素化誘導体、その前記薬学的に許容される塩、その前記活性代謝産物、又はその前記プロドラッグの放出が、前記投与の２４時間後に装填された全ＶＭＡＴ２阻害剤の３０％以下である、請求項１５に記載の方法。
【請求項18】
前記多動性運動障害が、遅発性ジスキネジア（ＴＤ）、ハンチントン病（ＨＤ）に関連する舞踏運動、振戦、ジストニア、チック、ミオクローヌス、常同症、レストレスレッグス症候群、及び異常な不随意運動を伴う様々な他の障害からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年８月１６日に出願された米国仮特許出願第６３２３３６５９号の利益を主張し、その開示は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２１年８月１６日に出願された米国仮特許出願第６３２３３６５９号の利益を主張し、その開示は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【0002】
本出願は、可逆的ヒト小胞性モノアミン輸送体２型（ＶＭＡＴ２）阻害剤の持続放出性送達系として安定かつ有効である生分解性ポリマーデポ組成物を提供する。本出願の組成物は、ａ）ＶＭＡＴ２阻害剤であって、（３Ｒ，１１ｂＲ）－テトラベナジン［（＋）－ＴＢＺ，（３Ｒ，１１ｂＲ）－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－９，１０－ジメトキシ－３－（２－メチルプロピル）－２Ｈ－ベンゾ［ａ］キノリジン－２－オン］，（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）－ジヒドロテトラベナジン［（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ，（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）－３－イソブチル－９，１０－ジメトキシ－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］イソキノリン－２－オール）］，（２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ）－ジヒドロテトラベナジン［（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ，（２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ）－３－イソブチル－９，１０－ジメトキシ－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］イソキノリン－２－オール）］を含むがこれらに限定されない、ＶＭＡＴ２阻害剤、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグ、ｂ）１つ以上の生分解性、生体適合性、ポリマー担体、ｃ）１つ以上の薬学的に許容され、生体適合性の溶媒、及びｄ）薬物送達の最適化を達成することを可能にする１つ以上の任意の薬学的に許容される賦形剤を含む。本出願はまた、そのような組成物の製造方法、並びにそのような組成物を遅発性ジスキネジアなどの多動性疾患及び障害の治療を必要とするヒト又は温血動物に投与することによる、その治療における使用を提供する。
【背景技術】
【0003】
遅発性ジスキネジア（ＴＤ）は、前述の不随意運動を誘発する他の障害、例えば、パーキンソン病又はチック障害に関連しない、不随意の反復的な身体運動をもたらす多動性運動障害である。代わりに、ＴＤは、抗精神病薬（神経弛緩薬又はドーパミン受容体拮抗薬としても知られている）などのドーパミン遮断薬の長期使用によって最も一般的に引き起こされる神経障害である。第１の世代の神経弛緩薬（典型的な神経弛緩薬、例えば、ハロペリドール及びクロルプロマジン）は、ＴＤを引き起こす可能性が非常に高い；一方、新しい神経弛緩薬（非定型の神経弛緩薬、例えば、アリピプラゾール及びパリペリドン）は、一方で、同じことを行うことができるが、より少ない程度である。
【0004】
従来技術では、神経弛緩薬への継続的な曝露は、ドーパミン受容体のアップレギュレーション／超感受性を引き起こし、それによって多動性運動障害を誘発する可能性があることが示唆されている。小胞性モノアミン輸送体２型（ＶＭＡＴ２）は、ドーパミンなどのモノアミンをシナプス前からシナプス小胞に輸送する膜タンパク質である。多くの多動性運動障害、すなわち、ＴＤ、トゥレット症候群、及びハンチントン病は、ＶＭＡＴ２阻害剤によってシナプス前ドーパミンを枯渇させることによって減少させることができる。シス－ｒａｃ－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－９，１０－ジメトキシ－３－（２－メチルプロピル）－２Ｈ－ベンゾ［ａ］キノリジン－２－オンとして知られるテトラベナジン（ＴＢＺ、商品名ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標））は、ヒトＶＭＡＴ２ Ｋｉ～１００ｎＭ、ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標）医薬品承認パッケージ、ＮＤＡ０２１８９４の強力で可逆的な阻害剤である。しかし、ＴＢＺはラセミ体混合物として経口投与される一方で、（主に肝臓でカルボニルレダクターゼによって）速やかに４つの立体異性体代謝産物に代謝される：Ｒ、Ｒ、Ｒ－ＤＨＴＢＺ（（＋）－α）、Ｓ、Ｒ、Ｒ－ＤＨＴＢＺ（（＋）－β）、Ｓ、Ｓ、Ｓ－ＤＨＴＢＺ（（－）－α）、及びＲ、Ｓ、Ｓ－ＤＨＴＢＺ（（－）－β）（ＤＨＴＢＺ、ジヒドロテトラベナジン、９，１０－ジメトキシ－３－（２－メチルプロピル）－２，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ａ］キノリジン－２－オール）（Ｓｋｏｒ Ｈ．ｅｔ ｅｌ．，Ｄｒｕｇｓ Ｒ Ｄ．２０１７ Ｓｅｐ；１７（３）：４４９－４５９）。しかし、各代謝産物はラットＶＭＡＴ２に対して様々な親和性を示す：Ｋｉは、Ｒ、Ｒ、Ｒ－ＤＨＴＢＺ（（＋）－α）、Ｓ、Ｒ、Ｒ－ＤＨＴＢＺ（（＋）－β）、Ｓ、Ｓ、Ｓ－ＤＨＴＢＺ（（－）－α）、及びＲ、Ｓ、Ｓ－ＤＨＴＢＺ（（－）－β）にそれぞれ対応する４．２、９．７、２５０、及び６９０ｎＭである（Ｇｒｉｇｏｒｉａｄｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｊｕｎｅ ２０１７，３６１（３）４５４－４６１）。加えて、Ｓ，Ｓ，Ｓ－ＤＨＴＢＺ（（－）－α）及びＲ，Ｓ，Ｓ－ＤＨＴＢＺ（（－）－β）は、ドーパミンＤ２及びセロトニン５－ＨＴ７受容体に対して高いオフターゲット結合親和性（それぞれ、（（－）－α）及び（（－）－β）に対して１８０／７１ｎＭ及び５３／５．９ｎＭ）を有し、ＴＢＺ投与の重篤な副作用（すなわち、不眠症、振戦、剛性筋肉、バランスの問題など）をもたらす。）（Ｈａｒｒｉｏｔｔ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｖｏｌｕｍｅ ５７，２０１８，Ｐａｇｅｓ ８７－１１１）。更に、ＴＢＺのＣＹＰ２Ｄ６媒介代謝が可変であるため、ＴＢＺの維持用量は、個体によって異なるため、ＴＢＺを服用している対象についても、ＣＹＰ２Ｄ６誘導剤又は阻害剤を避けるべきである。更に重要であり、潜在的に不便なのは、患者間の代謝変動により、従来利用可能なＴＢＺ薬の用量滴定が避けられないことである。更に、鎮静、うつ病、アカシシア及びパーキンソニズムなどのＴＢＺに関連する副作用、並びに治療的変動性は、その応用可能性を阻害している。
【0005】
２０１７年、ＴＤの治療薬として２つの新薬が承認された。バルベナジン（ＶＢＺ）（ＩＮＧＲＥＺＺＡ（登録商標）、Ｎｅｕｒｏｃｒｉｎｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．、１日１回４０ｍｇ又は８０ｍｇのカプセル）及びデュテトラベナジン（ＡＵＳＴＥＤＯ（登録商標）、Ｔｅｖａ、６ｍｇ、９ｍｇ、又は１２ｍｇの錠剤、１日２回）である。ＴＢＺとは異なり、デュテトラベナジン及びＶＢＺは、より良好な忍容性のためにより少ない投与頻度を可能にする薬物動態学的利点を有する。ＶＢＺ、Ｌ－バリン、（２Ｒ、３Ｒ、１１ｂＲ）－１、３、４、６、７、１１ｂ－ヘキサヒドロ－９，１０－ジメトキシ－３－（２－メチルプロピル）－２Ｈ－ベンゾ［α］キノリジン－２－イルエステルは、アミノ酸Ｌ－バリンを有する（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺのエステルである。（－）－（α）－ＤＨＴＢＺ及び（－）－（β）－ＤＨＴＢＺなどの立体異性体代謝産物を誘導する他の副作用の存在なしに（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺを単独で導入することにより、ＶＢＺはＴＢＺよりもはるかに忍容性があり、安全であると考えられる。一方、ＡＵＳＴＥＤＯ（登録商標）の場合、ＴＢＺの重水素化誘導体は、投与頻度の低減に有益なデュテトラベナジンの半減期を増加させる。
【0006】
ＩＮＧＲＥＺＺＡ（登録商標）及びＡＵＳＴＥＤＯ（登録商標）の成功は、経口剤形におけるＴＤ処置を改善するが、両方の製品は依然として１日１回の投薬を必要とし、これは、患者のアドヒアランスの観点からは理想的ではない。コンプライアンスの低下は、依然として慢性疾患の治療における最も重要な課題である。例えば、統合失調症は、しばしば、認知機能障害、動機づけの欠如、うつ病、及び士気低下と関連している。抗精神病薬の導入は１９５０年代にさかのぼることができるが、経口剤形への不十分なアドヒアランスは常に重要な問題であった。再発は統合失調症患者の継続的なリスクであり、そのような疾患に関連する主要な公衆衛生上の問題の１つである。長時間作用型注射剤（ＬＡＩ）の使用は、頻繁な投与の負担を軽減し、不十分／部分的なアドヒアランスを回避するのに役立つ。細菌感染症、疼痛管理、前立腺癌、糖尿病、及びＡＴＲＩＧＥＬ（登録商標）、ＳＡＢＥＲ（登録商標）、及びＦｌｕｉｄＣｒｙｓｔａｌ（登録商標）などの様々な製剤技術を採用した特定の統合失調症の治療のために市場にはすでに多くのＬＡＩ医薬品が投入されているが、多動性運動障害に対する成功を収めるＬＡＩ医薬品はまだ開発されていない。抗精神病薬を服用している患者は、ＬＡＩ抗精神病薬の恩恵を受けているが、不随意運動を発症すると、毎日錠剤（ＩＮＧＲＥＺＺＡ（登録商標）又はＡＵＳＴＥＤＯ（登録商標））を服用する必要がある。これは確かに患者のアドヒアランスの観点からは依然として面倒である。したがって、投与頻度が大幅に減少し、患者のコンプライアンスが改善された、不随意運動障害の治療のための安定した、より安全なＬＡＩ薬の医学的ニーズは確実に満たされていない。
【発明の概要】
【0007】
本出願は、ａ）ＶＭＡＴ２阻害剤であって、テトラベナジン（ＴＢＺ）、（３Ｒ，１１ｂＲ）－テトラベナジン［（＋）－ＴＢＺ，（３Ｒ，１１ｂＲ）－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－９，１０－ジメトキシ－３－（２－メチルプロピル）－２Ｈ－ベンゾ［ａ］キノリジン－２－オン］，（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）－ジヒドロテトラベナジン［（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ，（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）－３－イソブチル－９，１０－ジメトキシ－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］イソキノリン－２－オール）］，（２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ）－ジヒドロテトラベナジン［（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ，（２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ）－３－イソブチル－９，１０－ジメトキシ－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］イソキノリン－２－オール）］を含むがこれらに限定されない、ＶＭＡＴ２阻害剤、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグ、ｂ）１つ以上の生分解性、生体適合性、ポリマー担体、ｃ）１つ以上の薬学的に許容され、生体適合性の溶媒、及びｄ）意図された使用のために最適な薬物送達を達成することを可能にする１つ以上の任意の薬学的に許容される賦形剤を含む、ポリマーデポート組成物を提供する。
【0008】
本出願は、（＋）－ＴＢＺ、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグの長時間作用型注射剤送達系であって、高いＶＭＡＴ２受容体結合親和性（１０ｎＭ未満）を有するが、ドーパミン、セロトニン、及びアドレナリン受容体（１０００ｎＭ超）などの低いオフターゲット結合を有するものに関する。
【0009】
適切には、本出願は、（＋）－ＴＢＺ、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ、その重水素化誘導体、その薬学的に許容されるその塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグの長期の制御された放出を可能にする、インサイチュ形成デポとして有効である安定した生分解性組成物を提供する。本ポリマーデポ組成物は、粘性流体、溶液、ゲル、エマルジョン、懸濁液、又は皮下若しくは筋肉内注射のために容易に予め充填されたシリンジに保存される半固体分散液であり得る。ポリマーデポ組成物は、安定化され、２つの分離されたシリンジに保存され得、すなわち、一方のシリンジが活性薬学的成分を含有し、他方のシリンジが送達ビヒクルを含有することもできる。２つのシリンジを適切に混合した後、最終混合物は、皮下又は筋肉内注射のための粘性流体、溶液、ゲル、エマルジョン、懸濁液、又は半固体分散液であり得る。
【0010】
具体的には、本出願は、注射部位で生体対象への投与時に、持続放出性インプラント／デポを形成することができる。好ましくは、本発明の組成物は、治療レベルを超える（＋）－ＴＢＺ、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ及び活性代謝産物の長期血漿濃度を、好ましくは１～２週間、より好ましくは２～４週間、及び最も好ましくは１～３ヶ月間、血漿濃度の最小変動及び狭いピーク／トラフ（Ｐ／Ｔ）比で維持するのに適しており、潜在的なオフターゲット効果（ＴＢＺ及びＤＨＴＢＺの（－）立体異性体に起因する）を制限することができ、最終的に、市場で現在入手可能な医薬品の満たされていない医学的ニーズを解決するための改善された安全性プロファイルを提供する。
【図面の簡単な説明】
【0011】
【図1】（＋）－ＴＢＺポリマーデポ組成物（ａ）及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物（ｂ）の持続放出を示す。表２に記載されているように、小（Ｓ）及び大（Ｌ）の粒子Ｄ（５０）値は、それぞれ１０～３５μｍ及び１００～１３０μｍであった。
【図2】（＋）－ＴＢＺポリマーデポ組成物（ａ）及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物（ｂ）の持続放出に対するポリマー／ＮＭＰ比の効果を示す。小（Ｓ）及び大（Ｌ）の粒子Ｄ（５０）値は、それぞれ１０～３５μｍ及び１００～１３０μｍであった。
【図3】（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物の持続放出に対する疎水性溶媒添加剤の効果を示す。大（Ｌ）の粒子Ｄ（５０）値は１００－１３０μｍであった。
【図4-1】（＋）－ＴＢＺポリマーデポ組成物（ａ及びｂ）並びに（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物（ｃ）の持続放出に対する薬物負荷％の効果を示す。小（Ｓ）、中（Ｍ）、及び大（Ｌ）の粒子Ｄ（５０）値は、それぞれ１０～３５μｍ、５０～８０μｍ、及び１００～１３０μｍであった。
【図4-2】（＋）－ＴＢＺポリマーデポ組成物（ａ及びｂ）並びに（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物（ｃ）の持続放出に対する薬物負荷％の効果を示す。小（Ｓ）、中（Ｍ）、及び大（Ｌ）の粒子Ｄ（５０）値は、それぞれ１０～３５μｍ、５０～８０μｍ、及び１００～１３０μｍであった。
【図5-1】ＡＰＩ粒径がａ．及びｂ．（＋）－ＴＢＺポリマーデポ組成物（ａ及びｂ）並びに（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物（ｃ）の持続放出に及ぼす効果を示す。小（Ｓ）、中（Ｍ）、及び大（Ｌ）の粒子Ｄ（５０）値は、それぞれ１０～３５μｍ、５０～８０μｍ、及び１００～１３０μｍであった。
【図5-2】ＡＰＩ粒径がａ．及びｂ．（＋）－ＴＢＺポリマーデポ組成物（ａ及びｂ）並びに（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物（ｃ）の持続放出に及ぼす効果を示す。小（Ｓ）、中（Ｍ）、及び大（Ｌ）の粒子Ｄ（５０）値は、それぞれ１０～３５μｍ、５０～８０μｍ、及び１００～１３０μｍであった。
【図6】（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物の持続放出に対するガンマ線照射（ａ）及び０．２２μｍ濾過（ｂ）の効果を示す。小（Ｓ）及び大（Ｌ）の粒子Ｄ（５０）値は、それぞれ１０～３５μｍ及び１００～１３０μｍであった。
【図7】動物ＰＫ試験及びＰＫシミュレーション：ラットへのＳＣ投与後の注射可能な（＋）－ＴＢＺポリマーデポ組成物からの（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出、並びにラットへの強制経口投与後のＴＢＺ又はＶＢＺ水性懸濁液からの（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出を示す。小（Ｓ）及び大（Ｌ）の粒子Ｄ（５０）値は、それぞれ１０～３５μｍ及び１００～１３０μｍであった。
【図8】動物ＰＫ試験：ラットへのＳＣ投与後の注射可能な（＋）－ＴＢＺポリマーデポ組成物からの（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出、並びにラットへの強制経口投与後のＴＢＺ又はＶＢＺ水性懸濁液からの（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出を示す。培体（Ｍ）の粒子Ｄ（５０）値は、５０～８０μｍであった。
【図9】動物ＰＫ試験：ラットへのＳＣ投与後の注射可能な（＋）－ＴＢＺ－ＰＬＧＡ８８－１２ポリマーデポ組成物からの（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出、並びにラットへ強制経口投与後のＴＢＺ又はＶＢＺ水性懸濁液からの（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出。大（Ｌ）の粒子Ｄ（５０）値は１００－１３０μｍであった。
【図10】動物ＰＫ試験及びＰＫシミュレーション：ラットへのＳＣ投与後の注射可能な（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物からの（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出、並びにラットへの強制経口投与後のＴＢＺ又はＶＢＺ水性懸濁液からの（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出を示す。小（Ｓ）及び大（Ｌ）の粒子Ｄ（５０）値は、それぞれ１０～３５μｍ及び１００～１３０μｍであった。
【図11】動物ＰＫ試験及びＰＫシミュレーション：ラットへのＳＣ投与後の注射可能な（＋）－（α）ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物からの（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出、及びラットへの強制経口投与後のＴＢＺ又はＶＢＺ水性懸濁液からの（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出を示す。小（Ｓ）及び大（Ｌ）の粒子Ｄ（５０）値は、それぞれ１０～３５μｍ及び１００～１３０μｍであった。
【発明を実施するための形態】
【0012】
本明細書及び添付の請求項で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」及び同様の指示は、別様に本明細書に示唆されるか、又は文脈に明確に矛盾しない限り、単数形及び複数形の両方を網羅するように解釈されるべきであることに留意されたい。
【0013】
本明細書で使用される場合、本出願の文脈において、本明細書で開示される全ての数字は、「約」又は「およそ」という言葉が使用されるかどうかにかかわらず、近似値である。各数値は、別途示されない限り、数値の±１０％の範囲を意味する。例えば、「約１００ｍＬ」又は「１００ｍＬ」は、９０～１１０ｍＬの間の任意の値を含む。
【0014】
本明細書で使用される場合、数値又は一連の数値の前にある「約」又は「およそ」という用語は、別途示されない限り、数値の±１０％を意味する。例えば、「およそ１００ｍｇ」は、９０～１１０ｍｇを意味する。
【0015】
別途示されない限り、一連の要素の前にある「少なくとも」という用語は、一連の全ての要素を指すと理解されるべきである。当業者は、本明細書に記載される本出願の特定の実施形態の多くの等価物を、ルーチン実験を使用するだけで認識するか、又は確認することができるであろう。そのような等価物は、本出願によって包含されることが意図される。
【0016】
本明細書及びそれに続く特許請求の範囲全体を通して、文脈が別途必要とする場合を除き、用語「ｃｏｍｐｒｉｓｅ」、並びに「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」及び「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」などの変形は、記載された整数又はステップ、又は整数若しくはステップのグループを含むことを意味するが、任意の他の整数又はステップ、又は整数若しくはステップのグループを除外することを意味しないと理解される。本明細書で使用される場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」又は「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という用語で置換することができ、又は本明細書で使用する場合、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」という用語で置換する場合もある。
【0017】
本明細書で使用される場合、「からなる」は、特許請求の範囲の要素に指定されていない任意の要素、ステップ、又は成分を除外する。本明細書で使用される場合、「から本質的になる」は、特許請求の範囲の基本的及び新規の特徴に重大な影響を及ぼさない材料又はステップを排除しない。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、及び「有する（ｈａｖｉｎｇ）」という前述の用語のいずれかは、本出願の態様又は実施形態の文脈で本明細書で使用されるときはいつでも、本開示の範囲を変化させるために「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」又は「本質的にからなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という用語で置換することができる。
【0018】
本明細書で使用される場合、複数の列挙される要素間の結合用語「及び／又は」は、個々の選択肢及び組み合わせられた選択肢の両方を包含するものとして理解される。例えば、２つの要素が「及び／又は」によって結合されている場合、第１のオプションは、第２の要素なしで第１の要素の適用可能性を指す。第２のオプションは、第１の要素なしの第２の要素の適用可能性を指す。第３のオプションは、第１及び第２の要素を一緒に適用することを指す。これらのオプションのいずれか１つは、意味の範囲内にあると理解され、したがって、本明細書で使用される場合、用語「及び／又は」の要件を満たす。オプションのうちの２つ以上の同時適用性はまた、その意味の範囲内であると理解され、したがって、「及び／又は」という用語の要件を満たす。
【0019】
本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、本発明の方法が実施される任意の個体又は患者を指す。一般に、対象はヒトであるが、当業者によって理解されるように、対象は動物であり得る。「対象」及び「患者」という用語は、互換的に使用される。いくつかの実施形態では、対象は哺乳類である。いくつかの実施形態では、対象はヒトである。いくつかの実施形態では、対象は、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、サル、又は実験動物などの動物である。
【0020】
本出願は、制御された持続的な方法で薬学的に活性な成分を送達するためのデポ又はインプラントのインサイチュ形成に好適な、ポリマー、生分解性、生体適合性の長時間作用型注射可能な薬物送達系に関する。本出願の好ましいポリマーデポ組成物は、ａ）ＶＭＡＴ２阻害剤であって、（３Ｒ，１１ｂＲ）－テトラベナジン［（＋）－ＴＢＺ，（３Ｒ，１１ｂＲ）－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－９，１０－ジメトキシ－３－（２－メチルプロピル）－２Ｈ－ベンゾ［ａ］キノリジン－２－オン］，（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）－ジヒドロテトラベナジン［（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ，（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）－３－イソブチル－９，１０－ジメトキシ－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］イソキノリン－２－オール）］，（２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ）－ジヒドロテトラベナジン［（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ，（２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ）－３－イソブチル－９，１０－ジメトキシ－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］イソキノリン－２－オール）］を含むがこれらに限定されない、ＶＭＡＴ２阻害剤、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグ、ｂ）１つ以上の生分解性、生体適合性、ポリマー、ｃ）１つ以上の薬学的に許容され、生体適合性の溶媒、及びｄ）薬物送達の最適化を達成することを可能にする１つ以上の任意の薬学的に許容される賦形剤の組み合わせである。
【0021】
本明細書で使用される場合、ＴＢＺの用語は、テトラベナジン、（±）－ＴＢＺ、又は１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－９，１０－ジメトキシ－３－（２－メトキシプロピル）－２Ｈ－ベンゾ（ａ）キノリン－２－オンとして定義される。これは、小胞性モノアミン輸送体２型（ＶＭＡＴ－２）の可逆的な阻害剤である。
【0022】
本明細書で使用される場合、（＋）－ＴＢＺの用語は、（＋）－テトラベナジン、（３Ｒ，１１ｂＲ）－ＴＢＺ、又は（３Ｒ，１１ｂＲ）－テトラベナジンとして定義される。
【0023】
本明細書で使用される場合、（－）－ＴＢＺの用語は、（－）－テトラベナジン、（３Ｒ，１１ｂＳ）－ＴＢＺ、又は（３Ｒ，１１ｂＳ）－テトラベナジンとして定義される。
【0024】
本明細書で使用される場合、ＶＢＺの用語は、バルベナジン又はＬ－バリン、（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－９，１０－ジメトキシ－３－（２－メチルプロピル）－２Ｈ－ベンゾ［ａ］キノリジン－２－イルエステルとして定義される。
【0025】
本明細書で使用される場合、（±）－ｄ６－ＴＢＺの用語は、デュテトラベナジン、又はラセミデュテトラベナジンとして定義される。デュテトラベナジンは、ヘキサヒドロジメトキシベンゾキノリジン誘導体であり、以下の化学名を有する：（ＲＲ、ＳＳ）－１、３、４、６、７、１１ｂ－ヘキサヒドロ－９、１０－ジ（メトキシ－ｄ３）－３－（２－メチルプロピル）－２Ｈ－ベンゾ［ａ］キノリジン－２－オン。デュテトラベナジンは、ＲＲ－デュテトラベナジン（（＋）－ｄ６－ＴＢＺ）及びＳＳ－デュテトラベナジン（（－）－ｄ６－ＴＢＺ）を含有するラセミ混合物である。
【0026】
本明細書で使用される場合、（＋）－ｄ６－ＴＢＺの用語は、ＲＲ－デュテトラベナジンとして定義され、（－）－ｄ６－ＴＢＺの用語は、ＳＳ－デュテトラベナジンとして定義される。
【0027】
本明細書で使用される場合、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの用語は、テトラベナジンの代謝産物の１つである［＋］－α－ジヒドロテトラベナジンとして定義される。
【0028】
本明細書で使用される場合、（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺの用語は、テトラベナジンの代謝産物の１つである［＋］－β－ジヒドロテトラベナジンとして定義される。
【0029】
本明細書で使用される場合、（－）－（α）－ＤＨＴＢＺの用語は、テトラベナジンの代謝産物の１つである［－］－α－ジヒドロテトラベナジンとして定義される。
【0030】
本明細書で使用される場合、（－）－（β）－ＤＨＴＢＺの用語は、テトラベナジンの代謝産物の１つである［－］－β－ジヒドロテトラベナジンとして定義される。
【0031】
本明細書で使用される場合、（＋）－ｄ６－（α）－ＤＨＴＢＺの用語は、デュテトラベナジンの代謝産物の１つである（＋）－ｄ６－α－ジヒドロテトラベナジンとして定義される。
【0032】
本明細書で使用される場合、（－）－ｄ６－（α）－ＤＨＴＢＺの用語は、デュテトラベナジンの代謝産物の１つである（－）－ｄ６－α－ジヒドロテトラベナジンとして定義される。
【0033】
本明細書で使用される場合、（＋）－ｄ６－（β）－ＤＨＴＢＺの用語は、デュテトラベナジンの代謝産物の１つである（＋）－ｄ６－β－ジヒドロテトラベナジンとして定義される。
【0034】
本明細書で使用される場合、（－）－ｄ６－（β）－ＤＨＴＢＺの用語は、デュテトラベナジンの代謝産物の１つである（－）－ｄ６－β－ジヒドロテトラベナジンとして定義される。
【0035】
本ポリマーデポ組成物は、粘性流体、溶液、ゲル、エマルジョン、懸濁液、又は半固体分散液であり得、これは予め充填されたシリンジに保存され、皮下若しくは筋肉内注射の準備ができている。
【0036】
ポリマーデポ組成物は、安定化され、２つの分離されたシリンジに充填されることもできる。一方のシリンジ（Ａ）では、（＋）－ＴＢＺ、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグの乾燥粉末が予め充填され、他方のシリンジ（Ｂ）は、１つ以上の生分解性、生体適合性ポリマー、生体適合性有機溶媒、及び薬学的賦形剤を含む送達ビヒクルで充填される。注射の前に、シリンジＡ及びＢは、コネクタを介して接続され、その後、２つのシリンジプランジャーを十分な回数前後に押すことによって成分を完全に混合する。好ましくは、シリンジＡ及びＢは、互いに直接接続され、切断されることが容易であり得る雄－雌ルアーロックシリンジである。より好ましくは、シリンジＡ及びＢは、Ｅビーム、Ｘ線、及びガンマ線照射を含むが、これらに限定されない、末端滅菌に好適なポリマーシリンジである。注射用の最終混合物は、粘性液体、溶液、ゲル、エマルジョン、懸濁液、又は半固体分散液であり得、これは安定であり、好ましくは約３０分以内、より好ましくは約１～２時間以内で注射の準備ができている。
【0037】
ポリマーデポ組成物は、当該シリンジ又はそのデバイスを介して、生体対象に皮下、筋肉内、腹腔内、又は皮内に投与し、注射部位でデポ又はインプラントをインサイチュに形成することができる。ポリマー貯蔵所組成物が水性媒体又は体液と接触するとすぐに、生体適合性有機溶媒がポリマー貯蔵所組成物から消失し、生分解性、生体適合性、ポリマー担体を残してデポを形成するか、又はＴＢＺ、（＋）－ＴＢＺ、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグを含むが、これらに限定されない薬学的に活性な成分を封入する固体マトリックスを沈殿させて形成する。
【0038】
本明細書で使用される場合、「ＶＭＡＴ２」という用語は、小胞性モノアミン輸送２型の略語である。ＶＭＡＴ２阻害剤は、神経末端におけるドーパミンなどの神経活性ペプチドの枯渇を引き起こす薬剤であり、神経変性疾患（ハンチントン病など）に起因する舞踏運動、又は神経弛緩薬（遅発性ジスキネジア、ＴＤ）に起因するジスキネジアを治療するために使用される。２０２２年の時点で、米国ではジスキネジア症候群の管理のために３つのＶＭＡＴ２阻害剤医薬品が入手可能になっており、各々が多少異なる範囲の承認された適応症を有する：テトラベナジン（ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標）及びジェネリック医薬品、２００８）、デュテトラベナジン（ＡＵＳＴＥＤＯ（登録商標）、２０１７）及びバルベナジン（ＩＮＧＲＥＺＺＡ（登録商標）、２０１７）。ＶＭＡＴ２阻害剤は、治療中の血清酵素上昇に関連付けられておらず、臨床的に明らかな肝損傷の事例に関連付けられていないが、一般的な臨床使用は限られている。
【0039】
本明細書で使用される場合、ＶＭＡＴ２阻害剤としては、テトラベナジン（ＴＢＺ）、ジヒドロテトラベナジン（ＤＨＴＢＺ），デュテトラベナジン（ｄ６－ＴＢＺ）、及び重水素化ジヒドロテトラベナジン（ｄ６－ＤＨＴＢＺ）、（３Ｒ，１１ｂＲ）－テトラベナジン［（＋）－ＴＢＺ，（３Ｒ，１１ｂＲ）－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－９，１０－ジメトキシ－３－（２－メチルプロピル）－２Ｈ－ベンゾ［ａ］キノリジン－２－オン］、（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）－ジヒドロテトラベナジン［（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）－３－イソブチル－９，１０－ジメトキシ－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］イソキノリン－２－オール）］、（２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ）－ジヒドロテトラベナジン［（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ，（２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ）－３－イソブチル－９，１０－ジメトキシ－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］イソキノリン－２－オール）］、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグが挙げられるが、これらに限定されない。
【0040】
ヘキサヒドロジメトキシベンゾキノリジン誘導体であるテトラベナジンは、主に、ＶＭＡＴ２に選択的に結合することによって、シナプス前ニューロンの粒状小胞へのモノアミン取り込みの可逆的高親和性阻害剤として作用する［Ｋｅｎｎｅｙ Ｃ，Ｊａｎｋｏｖｉｃ Ｊ．Ｔｅｔｒａｂｅｎａｚｉｎｅ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈｙｐｅｒｋｉｎｅｔｉｃ ｍｏｖｅｍｅｎｔ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．Ｅｘｐ Ｒｅｖ Ｎｅｕｒｏｔｈｅｒ．２００６；６（１）：７－１７］。テトラベナジン（ＴＢＺ）及びその活性代謝産物ジヒドロテトラベナジン（ＤＨＴＢＺ）の両方が、ＶＭＡＴ２の強力な阻害剤である。
【0041】
テトラベナジンは、２－ケト基のファーストパス代謝低減によって迅速かつ広範囲に代謝され、（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）－ＤＨＴＢＺ、（２Ｓ，３Ｓ，１１ｂＳ）－ＤＨＴＢＺ、（２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ）－ＤＨＴＢＺ、及び（２Ｒ，３Ｓ，１１ｂＳ）－ＤＨＴＢＺを含むジヒドロテトラベナジン（ＤＨＴＢＺ）の４つの異性体を生成する。４つのＴＢＺ代謝産物は、インビボで主要な薬理学的に活性な物質である可能性が高い。ＴＢＺ及びその活性代謝産物の主な薬理作用は、ヒトＶＭＡＴ２を阻害することにより、中枢神経系内のモノアミン（例えば、ドーパミン、セロトニン、ノルエピネフリン）の水準を減少させることである［Ｄ．Ｓｃｈｅｒｍａｎ，Ｂ．Ｇａｓｎｉｅｒ，Ｐ．Ｊａｕｄｏｎ，Ｊ．Ｐ．Ｈｅｎｒｙ，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３３（１９８８）７２－７７；Ａ．Ｐｌｅｔｓｃｈｅｒ，Ａ．Ｂｒｏｓｓｉ，Ｋ．Ｆ．Ｇｅｙ，Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．４（１９６２）２７５－３０６；Ａ．Ｐ．Ｖａｒｔａｋ，Ｊ．Ｒ．Ｎｉｃｋｅｌｌ，Ｊ．Ｃｈａｇｋｕｔｉｐ，Ｌ．Ｐ．Ｄｗｏｓｋｉｎ，Ｐ．Ａ．Ｃｒｏｏｋｓ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５２（２００９）７８７８－７８８２］。この輸送体は主に脳で発現しており、モノアミンを細胞質からシナプス小胞に移行させ、シナプス放出前にそこで貯蔵され、代謝から保護される。複数のエビデンスは、ＶＭＡＴ２へのＴＢＺ代謝産物の結合が立体特異的であることを示す［Ｍ．Ｋｉｌｂｏｕｒｎ，Ｌ．Ｌｅｅ，Ｔ．Ｖ．Ｂｏｒｇｈｔ，Ｄ．Ｍ．Ｊｅｗｅｔｔ，Ｋ．Ｆｒｅｙ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２７８（１９９５）２４９ｅ２５２；Ｍ．Ｒ．Ｋｉｌｂｏｕｒｎ，Ｌ．Ｃ．Ｌｅｅ，Ｍ．Ｊ．Ｈｅｅｇ，Ｄ．Ｍ．Ｊｅｗｅｔｔ，Ｃｈｉｒａｌｉｔｙ ９（１９９７）５９ｅ６２；Ｍ．Ｒ．Ｋｉｌｂｏｕｒｎ，Ｌ．Ｃ．Ｌｅｅ，Ｄ．Ｍ．Ｊｅｗｅｔｔ，Ｒ．Ａ．Ｋｏｅｐｐｅ，Ｋ．Ａ．Ｆｒｅｙ，Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ．１５（１９９５）Ｓ６５０］。テトラベナジンのエナンチオマー及びジヒドロテトラベナジンの８つの立体異性体全てを合成し、ＶＭＡＴ２阻害剤として評価した［Ｚｈａｎｇｙｕ Ｙａｏ，Ｘｕｅｙｉｎｇ Ｗｅｉ，Ｘｉａｏｍｉｎｇ Ｗｕ，Ｊｏｎａｔｈａｎ Ｌ．Ｋａｔｚ，Ｔｈｅｒｅｓａ Ｋｏｐａｊｔｉｃ，Ｎｉｇｅｌ Ｈ．Ｇｒｅｉｇ、及びＨｏｎｇｂｉｎ Ｓｕｎ，Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ４６（２０１１）１８４１－１８４８］。ＴＢＺエナンチオマー及び８つのＤＨＴＢＺ異性体のうち、（＋）－ＴＢＺ、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ及び（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺは、それぞれ４．４７、３．９６、及び１３．４ｎＭの比較的高いラットＶＭＡＴ２結合親和性を示した。
【0042】
本明細書で使用される場合、ＶＭＡＴ２阻害剤は、（３Ｒ，１１ｂＲ）－テトラベナジン、又は（３Ｒ，１１ｂＲ）－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－９，１０－ジメトキシ－３－（２－メチルプロピル）－２Ｈ－ベンゾ［ａ］キノリジン－２－オン、又は（＋）－ＴＢＺである。
【0043】
本明細書で使用される場合、ＶＭＡＴ２阻害剤は、（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）－９，１０－ジメトキシ－３－（２－メチルプロピル）－２，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ａ］キノリジン－２－オール、又は（２Ｒ，３Ｒ，１１ｂＲ）－ジヒドロテトラベナジン、又は（＋）－α－３－イソブチル－９，１０－ジメトキシ－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］イソキノリン－２－オール、又は（＋）－α－ジヒドロテトラベナジン、又は（＋）－（α）－ＨＴＢＺ、又は（＋）－（α）－ＤＴＢＺ、又は（＋）－（α）－（α）－ＤＨＴＢＺと称される。これらの略語は、本明細書では互換的に使用される。「（＋）－α－ＤＨＴＢＺ」は、テトラベナジンの活性代謝産物の１つである。
【0044】
本明細書で使用される場合、ＶＭＡＴ２阻害剤は、（２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ）－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－９，１０－ジメトキシ－３－（２－メチルプロピル）－２Ｈ－ベンゾ［ａ］キノリジン－２－オール、又は（２Ｓ，３Ｒ，１１ｂＲ）－ジヒドロテトラベナジン、又は（＋）－（β）－３－イソブチル－９，１０－ジメトキシ－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］イソキノリン－２－オール、又は（＋）－ベータ－ジヒドロテトラベナジン、又は（＋）－（β）－ＨＴＢＺ、又は（＋）－（β）－ＤＴＢＺ、又は（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺである。これらの略語は、本明細書では互換的に使用される。「（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ」は、テトラベナジンの活性代謝産物の１つである。
【0045】
本明細書で使用される場合、デュテトラベナジンは、６個の水素原子が重水素原子に置き換えられたテトラベナジンの同位体異性体である。重水素の組み込みは、薬物代謝の速度を遅らせ、薬物の半減期を延長し、より少ない頻度の投与を可能にする［Ｃｏｐｐｅｎ ＥＭ，Ｒｏｏｓ ＲＡ，“Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ Ｒｅｄｕｃｅ Ｃｈｏｒｅａ ｉｎ Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ”．Ｄｒｕｇｓ．７７（２０１７）：２９－４６］。デュテトラベナジンは、肝臓によって、重水素化α－ジヒドロテトラベナジン（α－ＤＨＴＢＺ）及び重水素化β－ジヒドロテトラベナジン（β－ＤＨＴＢＺ）を含む活性代謝産物に広範囲に代謝される。
【0046】
好ましいＶＭＡＴ２阻害剤は、低いオフターゲット結合親和性を有する。より好ましくは、ＶＭＡＴ２阻害剤は、（＋）－ＴＢＺ、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグである。重水素化誘導体としては、重水素化ＴＢＺ、重水素化（＋）－ＴＢＺ、重水素化（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、重水素化（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺなどが挙げられる。
【0047】
好ましい実施形態では、ＶＭＡＴ２阻害剤は、（＋）－ＴＢＺである。（＋）－ＴＢＺは、他の立体異性体（－）－ＴＢＺが除去されるラセミＴＢＺから光学的に精製される。ラセミＴＢＺは、インビボで、その４つの還元型（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（－）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ、及び（－）－（β）－ＤＨＴＢＺに迅速に代謝され得る。その中で、（－）－（α）－ＤＨＴＢＺと（－）－（β）－ＤＨＴＢＺは、ドーパミンＤ２ｓとセロトニン５－ＨＴ受容体との高い変化性結合による重篤な副作用の原因となる可能性が高い。この特定の実施形態では、光学的に純粋な（＋）－ＴＢＺを唯一の薬学的に活性な成分として使用することは、オフターゲット結合から生じる重篤な副作用のリスクを著しく低下させ、これは非常に好ましく、より安全な医薬品を提供する。
【0048】
別の好ましい実施形態では、ＶＭＡＴ２阻害剤は、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ又は（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺである。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ及び（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺの両方は、（＋）－ＴＢＺの還元形態である。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ及び（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺは、インビボで（＋）－ＴＢＺから主に肝臓でカルボニルレダクターゼによって生成することができ、又は、当業者によっても容易に合成することができる。親化合物の代わりに、単一の活性代謝産物は、ＶＭＡＴ２阻害剤を投与されている間に追加の合併症を引き起こす可能性のある患者間の最小限の代謝変動を更に保証することができる（特にＣＹＰ ２Ｄ６多型を有する患者の場合）。
【0049】
本出願のポリマーデポ組成物は、（＋）－ＴＢＺ、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグを含むＶＭＡＴ２阻害剤と、１つ以上の薬学的に許容される生体適合性溶媒に溶解された固体の生分解性の生体適合性ポリマーの溶液とを組み合わせることによって製造される。ポリマーデポ組成物は、シリンジ及び針によって、治療を必要とする患者に投与され得る。生分解性ポリマーが体液に少なくとも実質的に不溶であることを条件に、任意の好適な生分解性ポリマーを用いることができる。
【0050】
本出願は、粘性デポビヒクルへのＶＭＡＴ２阻害剤の組み込みが、インビボでの低い初期バースト放出、最小のラグタイム、及びほぼゼロオーダー放出を有する製剤を生成するという発見に部分的に基づいている。デポ製剤の場合、この放出プロファイルは、当技術分野のエビデンスは、薬物及びマイクロカプセル化のためのコーティングなどの特別なステップが取られない限り、低バースト、ほぼゼロオーダー放出を達成することは事実上不可能であるということであるため、驚くべきことである。
【0051】
本出願の実施形態によるポリマーデポ組成物は、注射剤として調製することができる。投与経路には、皮下、筋肉内、心筋内、外膜内、腫瘍内、又は脳内が含まれ得る。複数回又は繰り返しの注射は、治療効果を維持するために対象に、又は任意の理由で薬物の更なる投与を必要とする対象に投与され得る。ポリマーデポ組成物は、対象への注射後に移植された持続放出性薬物送達系として機能する。そのような制御された放出は、１週間、１週間超、１ヶ月、又は１ヶ月超の期間にわたってあり得る。好ましくは、制御された放出は、少なくとも１週間の期間にわたって、より好ましくは少なくとも１ヶ月の期間にわたってである。
【0052】
本出願の特定の実施形態では、粘性デポビヒクルは、生体適合性ポリマー、すなわち、対象の組織に刺激又は壊死を引き起こさないポリマーを含む。本出願の生体適合性ポリマーは、生体浸食性であってもよく、すなわち、徐々に分解、溶解、加水分解及び／又はインサイチュで浸食してもよい。生体浸食性ポリマーの例としては、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリカプロラクトン、ポリ無水物、ポリアミン、ポリウレタン、ポリエステルアミド、ポリオルトエステル、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリオルトカーボネート、ポリホスファゼン、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（アミノ酸）、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシセルロース、多糖類、キチン、キトサン、及びこれらのコポリマー、ターポリマー、並びに混合物が挙げられるが、これらに限定されない。ポリマーは、薬学的に許容される溶媒中に溶解され、典型的には、約５～８０重量％、好ましくは約２０～７０重量％、より好ましくは約３０～６５重量％の範囲の量で溶液中に存在する。
【0053】
一実施形態において、生体適合性ポリマーは、ポリラクチドである。ポリラクチドポリマーは、乳酸に基づくポリマーである。本明細書で使用される場合、「乳酸」という用語は、異性体Ｌ－乳酸、Ｄ－乳酸、ＤＬ－乳酸、Ｌ－ラクチド、Ｄ－ラクチド、及びＤＬ－ラクチドを含む。ポリラクチド、別名ポリ（乳酸）又はポリ乳酸（略称ＰＬＡ）は、水（Ｈ２Ｏ）を除去することによって乳酸Ｃ（ＣＨ３）（ＯＨ）ＨＣＯＯＨの縮合によって正式に得られる、骨格式（Ｃ３Ｈ４Ｏ２）ｎ又は［－Ｃ（ＣＨ３）ＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－］ｎを有する熱可塑性ポリエステルである。塩基性反復単位の環状二量体であるラクチド［－Ｃ（ＣＨ３）ＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－］２の開環重合によっても調製することができる。ポリラクチドは、不斉α－炭素を含有し、これはそれぞれ、典型的には、古典的な立体化学的用語でＤ又はＬ形態として記述され、Ｒ及びＳ形態として記述されることもある。ポリマーＰＬＡのエナンチオマー形態は、ポリＤ－乳酸（ＰＤＬＡ）及びポリＬ－乳酸（ＰＬＬＡ）である。本明細書で使用される場合、「ポリラクチド」という用語は、ポリ（Ｌ－乳酸）、ポリ（Ｄ－乳酸）、ポリ（ＤＬ－乳酸）、ポリ（Ｌ－ラクチド）、ポリ（Ｄ－ラクチド）、及びポリ（ＤＬ－ラクチド）を含む。
【0054】
本出願の別の実施形態では、生体適合性ポリマーは、ポリ（ラクチド－ｃｏ－グリコリド）、乳酸及びグリコール酸に基づくコポリマーである。ＰＬＧＡ又はＰＬＧは、一般に、ポリ（Ｄ、Ｌ－ラクチド－ｃｏ－グリコリド）又はポリ（Ｄ、Ｌ－乳酸－ｃｏ－グリコール酸）の頭字語であり、Ｄ－及びＬ－乳酸形態は等しい比率である。本明細書で使用される場合、「グリコール酸」という用語は、グリコリドを含む。ＰＬＧＡは、グリコール酸及び乳酸の環状二量体（１，４－ジオキサン－２，５－ジオン）という２つの異なるモノマーの開環共重合によって合成される。ポリマーは、ランダム又はブロックコポリマーのいずれかとして合成され、それによって追加のポリマー特性を付与することができる。このポリマーの調製に使用される一般的な触媒には、スズ（ＩＩ）２－エチルヘキサノエート、スズ（ＩＩ）アルコキシド、又はアルミニウムイソプロポキシドが含まれる。重合中、（グリコール又は乳酸の）連続したモノマー単位は、エステル結合によってＰＬＧＡにおいて一緒に連結され、したがって、生成物として直鎖脂肪族ポリエステルをもたらす［Ａｓｔｅｔｅ，Ｃ．Ｅ．＆Ｓａｂｌｉｏｖ，Ｃ．Ｍ．（２００６）。重合中、（グリコール又は乳酸の）連続したモノマー単位は、エステル結合によってＰＬＧＡにおいて一緒に連結され、したがって、生成物として直鎖脂肪族ポリエステルをもたらす［Ａｓｔｅｔｅ，Ｃ．Ｅ．＆Ｓａｂｌｉｏｖ，Ｃ．Ｍ．（２００６）．“Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ＰＬＧＡ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ”．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｅｄｉｔｉｏｎ．１７（３）：２４７－２８９］。
【0055】
ＰＬＧＡは、その構成モノマーである乳酸（ＬＡ）とグリコール酸（ＧＡ）との間の異なる比率で調製することができる直鎖状コポリマーである。重合に使用されるラクチド対グリコリドの比率に応じて、異なる形態のＰＬＧＡを得ることができ、これらは通常、使用されるモノマーの比率に関して特定される（すなわち、ＰＬＧＡ７５：２５は、７５％の乳酸及び２５％のグリコール酸からなるコポリマーを特定する）。ＰＬＧＡの結晶化度は、ブロック構造及びモル比に応じて、完全に非晶質から完全に結晶性まで変化する。ＰＬＧＡは、典型的には、４０～６０℃の範囲のガラス転移温度を示す。ＰＬＧＡは、組成に応じて、幅広い溶媒によって溶解することができる。
【0056】
本明細書で使用されるポリ（Ｄ，Ｌ－ラクチド－ｃｏ－グリコリド）及びポリ（Ｄ，Ｌ－ラクチド）は、Ｅｖｏｎｉｋ及びＡｓｈｌａｎｄなどの様々なサプライヤーから購入することができる。様々なポリマーの命名は、２００７年にＬａｋｅｓｈｏｒｅ ＢｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓのＪｏｈｎ Ｍｉｄｄｌｅｔｏｎによってプレゼンテーションスライド２９に最初に公開された（参照「Ｔａｉｌｏｒｉｎｇ ｏｆ Ｐｏｌｙ（ｌａｃｔｉｄｅ－ｃｏ－ｇｌｙｃｏｌｉｄｅ） ｔｏ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ」：ｈｔｔｐｓ：／／ｍａｆｉａｄｏｃ．ｃｏｍ／ｔａｉｌｏｒｉｎｇ－ｏｆ－ｐｏｌｙｌａｃｔｉｄｅ－ｃｏ－ｇｌｙｃｏｌｉｄｅ－ｔｏ－ｃｏｎｔｒｏｌ－＿５９ｃ９８９ｃ４１７２３ｄｄｅ２８０２ｄ６９５６．ｈｔｍｌ）。２０１８年、Ｅｖｏｎｉｋは以下に示すように、「Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｓｅｌｅｃｔ ｎａｍｉｎｇ（Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｓｅｌｅｃｔ命名」を含む「ＲＥＳＯＭＥＲ（登録商標）製品パンフレット」を発行した。
【表1】
【表2】
【0057】
ＰＬＧＡ又はＰＬＡは、水の存在下でそのエステル結合を加水分解することによって分解する。ＰＬＧＡの分解に必要な時間は、ＰＬＧＡにおけるモノマーの比率に関連することが示されており、グリコリド単位の含有量が高いほど、主にラクチド材料であるＰＬＡと比較して分解に必要な時間が短くなる。加えて、（遊離カルボン酸とは対照的に）エステルで末端がキャップされたポリマーは、より長い分解半減期を示す［Ｓａｍａｄｉ，Ｎ．；Ａｂｂａｄｅｓｓａ，Ａ．；Ｄｉ Ｓｔｅｆａｎｏ，Ａ．；ｖａｎ Ｎｏｓｔｒｕｍ，Ｃ．Ｆ．；Ｖｅｒｍｏｎｄｅｎ，Ｔ．；Ｒａｈｉｍｉａｎ，Ｓ．；Ｔｅｕｎｉｓｓｅｎ，Ｅ．Ａ．；ｖａｎ Ｓｔｅｅｎｂｅｒｇｅｎ，Ｍ．Ｊ．；Ａｍｉｄｉ，Ｍ．＆Ｈｅｎｎｉｎｋ，Ｗ．Ｅ．（２０１３）．“Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｌａｕｒｙｌ ｃａｐｐｉｎｇ ｇｒｏｕｐ ｏｎ ｐｒｏｔｅｉｎ ｒｅｌｅａｓｅ ａｎｄ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙ（Ｄ，Ｌ－ｌａｃｔｉｃ－ｃｏ－ｇｌｙｃｏｌｉｃ ａｃｉｄ）ｐａｒｔｉｃｌｅｓ”．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ．１７２（２）：４３６－４４３］。分解におけるこの柔軟性は、移植片、縫合糸、インプラント、補綴デバイス、外科用シーラントフィルム、マイクロ及びナノ粒子などの多くの医療機器の製造に便利である［Ｐａｖｏｔ，Ｖ；Ｂｅｒｔｈｅｔ，Ｍ；Ｒｅｓｓｅｇｕｉｅｒ，Ｊ；Ｌｅｇａｚ，Ｓ；Ｈａｎｄｋｅ，Ｎ；Ｇｉｌｂｅｒｔ，ＳＣ；Ｐａｕｌ，Ｓ；Ｖｅｒｒｉｅｒ，Ｂ（Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２０１４）．“Ｐｏｌｙ（ｌａｃｔｉｃ ａｃｉｄ）ａｎｄ ｐｏｌｙ（ｌａｃｔｉｃ－ｃｏ－ｇｌｙｃｏｌｉｃ ａｃｉｄ）ｐａｒｔｉｃｌｅｓ ａｓ ｖｅｒｓａｔｉｌｅ ｃａｒｒｉｅｒ ｐｌａｔｆｏｒｍｓ ｆｏｒ ｖａｃｃｉｎｅ ｄｅｌｉｖｅｒｙ”．Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｌｏｎｄ．）．９（１７）：２７０３－１８］。
【0058】
本出願の特定の実施形態では、ＰＬＧＡポリマーは、約１００：０～５０：５０、好ましくは約８５：１５（７５：２５～９５：５）、約７５：２５（６５：３５～８５：１５）、約６５：３５（５５：４５～７５：２５）、及び約５０：５０（４０：６０～６０：４０）の乳酸対グリコール酸モノマー比を有し得る。ＰＬＧＡポリマーは、ゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）によって決定されるように、約１，０００～約１２０，０００、好ましくは約５，０００～約４０，０００の範囲の重量平均分子量（Ｍｗ）を有する。更に好ましくは、ＰＬＧＡポリマーを、エタノール又はドデカノールなどのモノアルコールで合成して、１つのエステル末端官能基及び１つのヒドロキシル末端基を有するＰＬＧＡポリマーを得る。ＰＬＧＡポリマーは、プロピレン－１，３－ジオール、１，４－ブタンジオール、１，５－ペンタンジオール、１，６－ヘキサンジオール、１，１０－デカンジオールなどのジオールと合成して、ポリマーの各末端に１つのヒドロキシル基を有するＰＬＧＡポリマーを得ることもできる。ＰＬＧＡポリマーは、１つ又は２つのカルボキシル末端基を有するようにすることもできる。好ましくは、ＰＬＧＡポリマーは、水性媒体又は体液中に実質的に不溶性であるが、生体適合性有機溶媒中に容易に溶解又は混和して、溶液又は粘性流体を形成する。
【0059】
更に別の実施形態では、所望の生分解性、生体適合性、ポリマー担体は、限定されないが、ポリ乳酸－ｃｏ－グリコール酸（ＰＬＧＡ）及びポリ乳酸（ＰＬＡ）である。ＰＬＧＡ及びＰＬＡの両方は、水に不溶であるが、生体適合性溶媒又は溶媒の組み合わせにおいて一定の溶解性を有する。そのような生体適合性溶媒又はそれらの組み合わせに溶解すると、粘性送達ビヒクルを形成することができる。送達ビヒクルは、その後、本出願のポリマーデポ組成物を形成するために、薬学的に活性な成分とともに製剤化することができる。ポリマーデポ組成物が水性媒体又は体液と接触するとすぐに、生体適合性有機溶媒がポリマーデポ組成物から消失し、生体分解性、生体適合性ポリマーを残してゲルデポを形成するか、（＋）－ＴＢＺ、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺなどのＶＭＡＴ２阻害剤、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグを封入する固体マトリックスを沈殿させて形成し、その後、少なくとも１週間、より好ましくは少なくとも１ヶ月間、制御された持続的な方法で放出される。
【0060】
一実施形態では、ＰＬＧＡポリマーは、Ｅｖｏｎｉｋ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓによって供給される。Ｒｅｓｏｍｅｒポリマーの例のいくつかを以下の表に示す。
【表3】
【0061】
本出願における薬学的に許容される生体適合性溶媒は、水溶性、混和性から分散性であるか、又は少なくとも水に部分的に溶解性を示す。本明細書で使用される場合、「可溶性」及び「混和性」という用語は、互換的に使用されることを意味する。生分解性の疎水性ポリマーと組み合わせると、溶媒は当該ポリマーを容易に溶媒和することができ、所望の粘度を有する送達ビヒクルをもたらす。送達ビヒクルは、制御された持続的な薬物送達を達成するに、本出願のポリマーデポ組成物を形成するために、薬学的に活性な成分とともに更に製剤化することができる。薬学的に許容される生体適合性の溶媒の例としては、エタノール（ＥｔＯＨ）、１－メチル－２－ピロリドン又はＮ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、安息香酸ベンジル（ＢＢ）、ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、テトラグリコール（又はグリコフロール）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）、トリアセチン（ＴＡ）、低分子量ポリエチレングリコール（すなわち、ＰＥＧ３００及びＰＥＧ４００）、ポリエチレングリコールエステル、酢酸メチル、酢酸エチル、オレイン酸エチル、グリセロール、カプリル酸及び／又はカプリン酸のエステル、及びグリセロール若しくはアルキレングリコール、並びにその組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【0062】
１つの好ましい実施形態において、薬学的に許容される生体適合性溶媒は、Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）である。
【0063】
本出願によれば、ポリマーデポ組成物は、送達ビヒクルを形成するために、１つの生分解性、生体適合性ポリマー及び１つの薬学的に許容される溶媒を含む。好ましくは、生分解性、生体適合性ポリマーは、実質的に水不溶性であり、注射後に水不溶性デポ又はインプラントを沈殿又は形成する。好ましい実施形態では、本明細書に定義されるＰＬＧＡを使用して、（＋）－ＴＢＺ、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺなどのＶＭＡＴ２阻害剤、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグの放出を延長する。一実施形態では、４５／５５ｗ／ｗ比でＲＧ５０２／ＮＭＰのポリマー溶液中に懸濁した３０％（＋）－ＴＢＺを含むポリマーデポ組成物は、インビトロで３週間にわたって（＋）－ＴＢＺの約４０％の累積放出を示したが、３５／６５ｗ／ｗ比でＲＧ５０３／ＮＭＰのポリマー溶液中に懸濁した３０％（＋）－ＴＢＺを含むポリマーデポ組成物は、インビトロで３週間にわたって（＋）－ＴＢＺのわずか２０％超の累積放出を示した。更に、ＰＬＡを使用してＰＬＧＡを置き換えることによって、放出期間を更に延長することができる。別の実施形態では、６０／４０ｗ／ｗ比でＰＬＡ／ＮＭＰのポリマー溶液中に懸濁した３０％（＋）－ＴＢＺを含むポリマーデポ組成物は、インビトロで３週間にわたって２０％未満の蓄積薬物放出を示した。
【0064】
本出願によれば、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの制御された持続された送達も達成され得る。一実施形態では、ＲＧ５０２／ＮＭＰのポリマー溶液中に６５／３５ｗ／ｗ比で懸濁した３０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺを含むポリマーデポ組成物は、３週間にわたる約７０％の累積放出を伴う持続的な方法で薬物放出を示した。別の実施形態において、４５／５５ｗ／ｗ比でＲＧ５０３／ＮＭＰのポリマー溶液中に懸濁した３０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺを含むポリマーデポ組成物は、インビトロで３週間にわたって４０％未満の蓄積放出を示した。これら全ての実施形態では、ポリマーデポ組成物は、生体対象への投与時に、注射部位にデポ／インプラントを形成することができる。本発明の組成物は、治療レベル以上の（＋）－ＴＢＺ、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ及び（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺの血漿濃度を、好ましくは１～２週間、より好ましくは２～４週間、最も好ましくは１～３ヶ月間、血漿濃度の最小変動及び狭いピーク／トラフ（Ｐ／Ｔ）比で維持するのに適している。
【0065】
本出願によれば、ＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出性プロファイルは調節可能である。ＶＭＡＴ２阻害剤の放出プロファイルに影響を与える因子としては、生分解性ポリマーの種類、生分解性ポリマーの末端官能基（エステル末端処理された、若しくはカルボン酸末端処理された、若しくはヒドロキシル末端処理された）、ポリマーの分子量（Ｍｗ）及びＭｗ分布、生体適合性溶媒の種類、又はこれらの組み合わせ、生分解性ポリマーと生体適合性溶媒との比率、ＶＭＡＴ２阻害剤の種類（（＋）－ＴＢＺ又は（＋）－ＤＨＴＢＺ）、薬物負荷、並びにＶＭＡＴ２阻害剤の粒径が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、約５０：５０の比率でのＤＬ－ラクチド／グリコリドコポリマー、酸末端との約５０：５０の比率でのＤＬ－ラクチド／グリコリドコポリマー（ＰＬＧＡ）、約７５：２５の比率でのＤＬ－ラクチド／グリコリドコポリマー、酸末端との約７５：２５の比率でのＤＬ－ラクチド／グリコリドコポリマー、約８８：１２の比率でのＤＬ－ラクチド／グリコリドコポリマー、及びポリ（ＤＬ－ラクチド）（ＰＬＡ）を含むがこれらに限定されない様々な種類の生分解性ポリマーを選択して、ＮＭＰにおけるポリマー溶液ビヒクルを作製した。持続放出性組成物は、生分解性ポリマーと生体適合性溶媒との比、有益な薬学的許容される賦形剤の種類、ＶＭＡＴ２阻害剤の種類、薬物負荷、並びにＶＭＡＴ２阻害剤の粒径を含むがこれらに限定されない、製剤パラメータを制御することによって得られた。
【0066】
生体適合性溶媒に対するポリマーの比率は、インサイチュ形成デポ薬物送達系の放出プロファイルに影響を与える重要な要因の１つであり得る。しかしながら、ＶＭＡＴ２阻害剤の最初のバースト放出とポリマー／溶媒比との間の相関は、単純ではないことが見出された。一実施形態では、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺは、ポリマー含有量が増加するにつれて、ＰＬＧＡ／ＮＭＰインサイチュ形成デポからの初期放出が減少したことを示した。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの薬物負荷が３０％に固定されている場合、ＲＧ５０２／ＮＭＰの比率を６５／３５から３０／７０ｗ／ｗに変更すると、それぞれ約４％及び約１８％の初期薬物放出がもたらされ、ＲＧ５０３／ＮＭＰの比率を５０／５０から４５／５５ｗ／ｗに変更すると、それぞれ約５％及び約８％の初期薬物放出がもたらされた。驚くべきことに、別の実施形態において、インサイチュ形成薬物送達系におけるポリマー対生体適合性溶媒比は、（＋）－ＴＢＺの初期放出に影響を示さなかった。薬物負荷が２０％に固定されている場合、ＲＧ５０２／ＮＭＰの比率を４５／５５から３５／６５ｗ／ｗに変更すると、同じレベルの初期薬物放出が約１０％になった。加えて、薬物負荷は３０％に固定されているが、ＲＧ５０３／ＮＭＰの比率を３５／６５、２５／７５、及び１５／８５ｗ／ｗから変更すると、同じレベルの初期薬物放出が約４％になった。これらの結果は、一般に、ポリマー対生体適合性溶媒比の低下は、ポリマー溶液の粘度の低下に起因してより高い初期破裂をもたらすため、予想外である。
【0067】
生体適合性溶媒又は生体適合性溶媒の組み合わせは、長時間作用型の持続的な薬物送達に大きな影響を及ぼし得る。Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．は、インサイチュ形成系に基づく親水性溶媒誘導ＰＬＧＡで構成される持続放出系を開発した。彼らは、生体適合性溶媒の効果を含む、薬物放出に影響を与える因子を調査した。初回放出は３．７－８．０倍低減され、親水性ＮＭＰが９０％安息香酸ベンジル（ＢＢ）及び１０％共溶媒（ベンジルアルコール、トリアセチン、又はＮＭＰ）からなる疎水性共溶媒に置き換えられたため、血漿レベルは４日から１０～１５日に有意に延長された（Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，ＲＳＣ Ａｄｖ．，２０１７，７，５３４９－５３６１）。全く逆の方法で、ＮＭＰをＢＢの少量に置き換えると、実際には同様の初期放出が行われ、その後より速く蓄積放出が行われたことがわかった。一実施形態では、４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺをＲＧ５０２／ＢＢ／ＮＭＰ（６５／５／３０）と混合して、デポ組成物を形成し、インビトロ放出について試験した。結果は、ポリマー溶液中のＮＭＰのわずか５％（ｗ／ｗ）がＢＢで置換されたとき（１４日間の放出が約５０％から約７０％に増加した）、実質的により速い放出を示した。別の実施形態では、５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺを、５０／５／４５ｗ／ｗ比でＲＧ５０３Ｈ／ＢＢ／ＮＭＰと混合して、ポリマーデポ組成物を形成し、インビトロ放出について試験した。結果はまた、ポリマー溶液ビヒクル中のＮＭＰの５％（ｗ／ｗ）をＢＢに置き換えた後の加速放出を実証した（１４日間の放出は、約２０％から約３０％に増加する）。加えて、治療薬として（＋）－ＴＢＺを使用した場合にも同様の傾向が見られた。一実施形態では、５０％（＋）－ＴＢＺを、ＲＧ５０３／ＮＭＰからなるポリマー溶液ビヒクルと４５／５５ｗ／ｗ比で混合して、ポリマーデポ組成物を形成し、インビトロ放出について試験した。初期放出は同じであったが、結果は、ポリマー溶液中のＮＭＰの５％（ｗ／ｗ）のみがＢＢによって置換されたときの全体的な放出がより速いことを示した（２１日間の放出は約２０％から約３０％に増加した）。これらの発見は、関連分野における先行技術が明らかにしたものには予想外であった。更に、本出願中の明細書で示したそのような方法は、初期放出に影響を与えることなく、ＶＭＡＴ２阻害剤の全体的な放出プロファイルを制御する上での利点を提供し、これは、持続放出性のインサイチュ形成デポ薬物送達系を開発するときにほとんどの時間を達成することが非常に困難である。
【0068】
特定の実施形態では、注射量を合理的な範囲内に維持することが重要であるため、長時間作用型の持続送達系では、あまり強力でない薬物には、薬物負荷（ＤＬ％）が高いことが望ましい。ただし、ＤＬ％は、放出プロファイルを変更することもできる。より高い薬物負荷は、通常、ＡＴＲＩＧＥＬ（登録商標）又はその関連する薬物送達系におけるバースト放出の増加を伴う。Ｇｅｎｇ及び彼のチームは、イベルメクチンの持続放出のためのＰＬＡマトリックスデポに基づいたインサイチュ形成ゲルを開発した。彼らは、イベルメクチンの放出速度がそのＤＬ％と正の相関があることを見出した。累積放出は、イベルメクチン負荷がそれぞれ１％から２％、及び１％から４％に増加するにつれて、２．４～２．９及び３．１～３．７倍増加した（Ｇｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ Ｖｏｌ．８５，Ａｐｒｉｌ ２０１６，２７１－２７６）。先行技術は、ＤＬ％と薬物放出との間のそのような単純な正の相関を示唆しているように思われるが、一実施形態では、（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ放出に対するＤＬ％の効果がはるかに複雑であることが予想外にわかった。例えば、様々なＤＬ％で３５／６５ｗ／ｗ比でＲＧ５０３／ＮＭＰで構成されるポリマー溶液ビヒクルに懸濁した（＋）－ＴＢＺで構成される製剤では、累積放出はＤＬ％を段階的に上昇させるとともに増加したが、初期放出は、２０、３０、及び５０％での薬物負荷について約３％でほぼ同一であった。しかしながら、同じ製剤組成物であっても、５％で薬物負荷が低下した場合、より大きなＡＰＩ粒子であっても、有意に高い初期バースト放出（１０％超）が見出された。別の実施形態では、初期放出は、５０／５０ｗ／ｗ比でＲＧ７５２Ｈ／ＮＭＰで構成されるポリマー溶液ビヒクルに懸濁した（＋）－ＴＢＺで構成される製剤において、５０、６０、及び７０％の薬物充填に対して、約３～５％でほぼ同一であった。一方、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの場合、ＤＬ％は放出プロファイルに更に異なる影響を与える。例えば、初期バースト放出は変化するＤＬ％では変化しなかったが、５０／５０ｗ／ｗ比でＲＧ５０３／ＮＭＰで構成されるポリマー溶液ビヒクルにおいてＤＬ％が増加した場合、全体の放出速度は１５％から２５％に加速された。一方、放出プロファイルは、３０％及び４０％の薬物負荷の両方で同一のポリマービヒクルで構成される製剤についてほぼ同一であった。更に例外的なのは、ＤＬ％を変化させると、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺと組み合わせた、カルボン酸末端処理されたＲＧ５０３Ｈとは完全に反対に作用した。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出は、ＲＧ５０３Ｈ製剤におけるＤＬ％の増加とともに実際に遅くなった。これらの知見は、ＶＭＡＴ２阻害剤の放出プロファイルに対する薬物負荷の効果は、他で開示されている他の関連する先行技術の製剤を単純に模倣又は再現することによって管理することができないことを再度強調した。
【0069】
ＶＭＡＴ２阻害剤のための持続放出性のインサイチュ形成デポ送達系を開発するために、当業者は、所望の放出プロファイルを達成するために、他の従来技術に開示されている既知の情報に単純に頼ることができないことは明らかである。
【0070】
一般的に言って、粒径は、懸濁液製剤中の放出プロファイルを変更することができる（Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ．Ｄｅｖｅｌ．Ｔｈｅｒ．２０１３；７：１０２７－１０３３．）。溶解速度は、懸濁液製剤中の粒子の表面積と正の相関がある。薬物の粒径の減少に伴い比表面積は増加するが、薬物の溶解速度も増加する。溶解速度の実質的な差は、特に溶解の初期期間中、粒径及び相対表面積の変動に応じて存在し得る。本出願では、我々は、ＶＭＡＴ２阻害剤の所望の放出プロファイルの調整に関する効果的なアプローチとしてＡＰＩ粒径を調整した。驚くべきことに、薬物放出に対するＡＰＩ粒径の影響ははるかに複雑であり、ある種類のＶＭＡＴ２阻害剤から別の種類のＶＭＡＴ２阻害剤に単純に適用することはできなかった。一実施形態では、小（＋）－ＴＢＺ粒子（Ｄ５０～５０μｍ）は、５０％の薬物負荷を有する６０／４０ｗ／ｗ比でＲＧ５０２／ＮＭＰ、及び３０％の薬物負荷を有する３５／６５ｗ／ｗ比でＲＧ５０３／ＮＭＰからなる製剤からの大（＋）－ＴＢＺ粒子（Ｄ５０、～１００μｍ）と比較して、より高い初期放出及びより速い蓄積放出を示した。一方、通常のエステル末端処理されたポリマーをカルボン酸末端処理されたポリマーに置き換えると、（＋）－ＴＢＺ粒径の放出への効果は消失した（３５／６５ｗ／ｗ比でＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰで構成されるポリマー溶液ビヒクルにおける３０％の薬物負荷）。別の実施形態では、より小さい（＋）－ＴＢＺ粒子は、ＤＬ％が６０又は７０％であっても、５５／４５ｗ／ｗ比でＲＧ７５２Ｈ／ＮＭＰから構成されるポリマー溶液からのインビトロ放出に限定的な効果をもたらした。したがって、我々がカルボン酸末端処理されたＰＬＧＡポリマーから発見した結果は、独特であった。カルボン酸末端処理されたＰＬＧＡポリマーは、通常のエステル末端処理されたＰＬＧＡポリマーと比較して、そのポリマー分解が速いため、１ヶ月の送達のためにいくつかの承認された医薬品（すなわち、ＰＥＲＳＥＲＩＳ（登録商標）、ＰＬＧＨ８０２０）で利用されている。放出プロファイル上のＡＰＩ粒径の変動を排除することにおけるカルボン酸末端処理されたＰＬＧＡポリマーの利点を利用することは新規であり、他の従来技術では開示されていない。更に、バッチ間ＡＰＩ粒径の変動は、製品開発の観点からハードルであり得るため、本出願に開示されたものは、再現可能な放出プロファイルを有する一貫性のある医薬品を製造する上で大きなメリットとなり得る。
【0071】
本出願によれば、我々はまた、生分解性のポリマービヒクル及びＶＭＡＴ２阻害剤で構成される持続放出性製剤のための末端滅菌プロセスを可能にした。ガンマ線照射は、注射用医薬品及び医療機器のための最も広く採用されている末端滅菌プロセスの１つである。しかしながら、ポリマー分子量（Ｍｗ）などのポリマー特性は、ガンマ線への曝露後に実質的に変化することができるが、ポリマーＭｗの変化は薬物放出プロファイルを有意に変化させることができることは周知である。Ｓｈａｐｏｕｒｇａｎ及び同僚は、ＰＬＧＡベースのインサイチュ形成系からのロイプロリドアセテートの放出プロファイルに対するガンマ線照射の効果を調査した。８ｋＧｙでのガンマ線照射後、ＰＬＧＡのガラス転移温度（Ｔｇ）が４３．４℃から３８．１℃に低下したことが観察された。ＰＬＧＡ Ｍｗもまた、ガンマ線照射後に多かれ少なかれ１８％減少した。更に、ガンマ線照射後のＰＬＧＡマトリックスは、非照射ＰＬＧＡマトリックスよりも高い多孔性を示した。これらの影響はともに、非照射ＰＬＧＡマトリックスと比較して、インサイチュ形成デポにおけるガンマ線照射ＰＬＧＡからのロイプロリドアセテートのより速い放出をもたらした（Ｓｈａｐｏｕｒｇａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．２０１７；１４（８）：１１７０－１１７７）。一実施形態において、ガンマ滅菌（２５～４０ｋＧｙ）を、いくつかの粘性（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマー懸濁液について調査した。予想外に、４０％の薬物負荷で５０／５０ｗ／ｗ比でＲＧ５０３／ＮＭＰで構成されるポリマー溶液ビヒクルに懸濁した（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、及び５０％の薬物負荷で５０／５０ｗ／ｗ比でＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰで構成されるポリマー溶液ビヒクルに懸濁した（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺから構成される照射後製剤からは、加速放出が見出されたが、ガンマ線照射プロセス後、４０％の薬物負荷で６０／４０ｗ／ｗ比でＲＧ５０２Ｈ／ＮＭＰで構成されるポリマー溶液ビヒクルに懸濁した（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出プロファイルはほとんど変化しなかった。
【0072】
更に、０．２２μｍフィルターを介した濾過などの代替アプローチは、低粘度、ポリマーベース、インサイチュ形成デポ薬物送達系のための末端滅菌のための別のオプションであり得る。しかしながら、持続的な方法で長期放出を提供するために、ＰＬＧＡ又はＰＬＡベースの製剤は、一般に、粘性溶液又は懸濁液であり、これは、濾過を非常に困難にする。一実施形態では、４０／６０ｗ／ｗ比でＲＧ５０２／ＮＭＰから作製した（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ製剤を、２３％の薬物負荷で調製した。０．２２μｍのディスクフィルターを介したそのようなビヒクルの濾過は、容易かつ単純であった。濾過されたポリマー溶液ビヒクル及び非濾過ポリマー溶液ビヒクルから作製された製剤のインビトロ放出プロファイルは同一であり、これは、粘度の低いポリマー溶液ビヒクルで構成されるこれらの製剤の末端滅菌プロセスとして０．２２μｍの濾過を使用することの実現可能性を実証した。本出願において、我々は、０．２２μｍの濾過又は２５～４０ｋＧｙのガンマ線照射のいずれかが、提案されたＶＭＡＴ２阻害剤ポリマー懸濁液の任意の末端滅菌プロセスであり得ることを実証した。
【0073】
本出願は、そのようなポリマーデポ組成物を調製し、使用する方法を更に提供する。一実施形態では、（＋）－ＴＢＺ、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグ、１つ以上の生体適合性有機溶媒、及び１つ以上の薬学的に許容されるポリマー、水不溶性担体を含む、そのような組成物の調製方法が提供される。好ましくは、薬学的に許容される重合体の水不溶性担体を最初に溶解するか、又は生体適合性有機溶媒と混合して送達ビヒクルを形成し、続いて、送達ビヒクル中に（＋）－ＴＢＺ、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ、（＋）－（β）－ＤＨＴＢＺ、その重水素化誘導体、その薬学的に許容される塩、その活性代謝産物、又はそのプロドラッグを溶解又は懸濁する。本発明のポリマーデポ組成物は、予め充填されたシリンジ中に注入する準備ができた粘性流体、半固体、又は均一な懸濁液であり得る。好ましい組成物は、注射前に十分に混合した後の均質、粘性流体、半固体、又は均一な懸濁液であってもよい。そのような組成物は、調製プロセスの前及びその間に生理化学的に安定である。好ましくは、そのような組成物は、生体対象への製造、滅菌、保管、及びその後の投与中に安定である。ポリマーデポ組成物は、好ましくは、シリンジ又はその類似のデバイスを介して、生体対象に皮下、筋肉内、腹腔内、又は皮内に投与され、インサイチュ形成デポ又はインプラントを形成する。好ましくは、本出願のポリマーデポ組成物は、２４時間以内にインビボで３０％以下、より好ましくは２４時間以内に２０％以下、最も好ましくは２４時間以内に１０％以下の初期放出を有する。所望の成分では、ポリマーデポ組成物は、治療レベルを超える医薬活性成分を、好ましくは１～２週間、より好ましくは２～４週間、最も好ましくは１～３ヶ月、血漿濃度の最小変動及び狭いＰ／Ｔ比（好ましくは１～１０、より好ましくは１～４、更により好ましくは１～２）で持続的に送達することができ、これは確実に潜在的な副作用を制限して、患者の安全性プロファイルを改善するのに役立つことができる。ポリマーデポ組成物は、生体対象内で生体適合性であり、分解し、薬物送達が行われた後に身体に吸収され得る。
【実施例】
【0074】
以下の実施例は、本出願の組成物及び方法を示す。以下の実施例は、限定として考慮されるべきではなく、単に効果的な持続放出性の注射可能ポリマーデポ組成物を作製する方法を当業者に教示すべきものである。
【0075】
ＨＰＬＣ分析方法
以下のＨＰＬＣ法を通じて較正曲線を得て、未知のＡＰＩ含有量を有する試料中の（＋）－ＴＢＺ及び／又は（＋）－ＤＨＴＢＺの濃度を定量した。
材料
試薬
－ミルＱ水、１８．０ＭΩ－ｃｍ以上の抵抗率、又は同等品
－酢酸アンモニウム、ＡＣＳグレード又は同等品
－水酸化ナトリウム、ＡＣＳグレード又は同等品
－メタノール（ＭｅＯＨ）、ＨＰＬＣグレード
－イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、ＨＰＬＣグレード
－Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、ＨＰＬＣグレード
参照標準
（＋）－定義された効力を有するＴＢＺ ＡＰＩ
機器及びパラメータ
ＨＰＬＣ
Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＨＰＬＣシステム：
バイナリポンプ：モデルＬＣ－２０ＡＴ
脱気装置：モデルＤＧＵ－２０Ａ３Ｒ
オートサンプラー：モデルＳＩＬ－３０Ａ ＨＴ
カラムオーブン：Ｅｎｓｈｉｎｅ，Ｓｕｐｅｒ ＣＯ－１５０（Ｓｈｉｍａｄｚｕ製ではない）
検出器：モデルＳＰＤ－２０Ａ
パラメータ
カラムＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ Ｃｏｌｕｍｎ，５μｍ ４．６ｘ１５０ｍｍ
移動相Ａ：１０ｍＭの酢酸アンモニウム、ｐＨ６．８±０．１、
Ｂ：ＭｅＯＨ
アイソクラティックモード：Ａ／Ｂ＝３０／７０
流量：１ｍＬ／分
カラム温度：４０℃
注射量：２μＬ
検出：２１４ｎｍ
実行時間：８分
試料調製
移動相Ａ
約０．７７ｇの酢酸アンモニウムを１０００ｍＬの水に溶かし、０．１Ｎの水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを６．８±０．１に調整する。使用前に０．２２μｍのＰＴＦＥ膜フィルターで濾過し、脱気する。
試料溶媒：
イソプロピルアルコール
標準溶液
２０±１ｍｇの（＋）－ＴＢＺ参照標準を２０ｍＬの容量フラスコに正確に量り、１０ｍＬの試料溶媒を加えて溶解させ、試料溶媒で体積に希釈し、よく混合する。この溶液を試料溶媒で希釈して、２、５、１０、５０、１００、２００、及び５００μｇ／ｍＬの標準溶液を得る。
試料溶媒
（＋）－ＴＢＺ ＡＰＩ試料（０．１ｍｇ／ｍＬ ＴＢＺ）の場合：
１０ｍＬの容量フラスコに１０ｍｇのＡＰＩ試料を正確に量り、５ｍＬの試料溶媒を添加して溶解させ、試料溶媒で体積に希釈し、よく混合する。上記溶液１ｍＬを１０ｍＬの容量フラスコにピペットし、試料溶媒で体積に希釈し、よく混ぜ合わせる。
（＋）－ＴＢＺ医薬品試料（０．１ｍｇ／ｍＬ ＴＢＺ）の場合：
２０ｍＬの容量フラスコに、４０ｍｇの医薬品（ＰＬＧＡ又はＰＬＡ含有製剤、薬物負荷が５０％、ｗ／ｗであると仮定）試料を正確に量り、１５ｍＬのＮＭＰを添加して溶解させ、ＮＭＰで体積に希釈し、よく混合する。上記で調製した試料溶液１ｍＬを採取し、１０ｍＬ容量フラスコに添加し、５ｍＬのＩＰＡを添加して希釈し、ＩＰＡで体積に希釈し、よく混合する。溶液をボルテックスし、１２０００ｒｐｍで３分間遠心分離して沈殿物を凝集させる。次いで、上清を０．２２μｍのＰＴＦＥフィルターを通して濾過し（最初の２ｍＬを捨てる）、注射のためにＨＰＬＣバイアルに移す。
以下のＨＰＬＣ法を通じて較正曲線を得て、未知のＡＰＩ含有量を有する試料中の（＋）－ＴＢＺ及び／又は（＋）－ＤＨＴＢＺの濃度を定量した。
材料
試薬
－ミルＱ水、１８．０ＭΩ－ｃｍ以上の抵抗率、又は同等品
－酢酸アンモニウム、ＡＣＳグレード又は同等品
－水酸化ナトリウム、ＡＣＳグレード又は同等品
－メタノール（ＭｅＯＨ）、ＨＰＬＣグレード
－イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）、ＨＰＬＣグレード
－Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、ＨＰＬＣグレード
参照標準
（＋）－定義された効力を有するＴＢＺ ＡＰＩ
機器及びパラメータ
ＨＰＬＣ
Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＨＰＬＣシステム：
バイナリポンプ：モデルＬＣ－２０ＡＴ
脱気装置：モデルＤＧＵ－２０Ａ３Ｒ
オートサンプラー：モデルＳＩＬ－３０Ａ ＨＴ
カラムオーブン：Ｅｎｓｈｉｎｅ，Ｓｕｐｅｒ ＣＯ－１５０（Ｓｈｉｍａｄｚｕ製ではない）
検出器：モデルＳＰＤ－２０Ａ
パラメータ
カラムＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ Ｃｏｌｕｍｎ，５μｍ ４．６ｘ１５０ｍｍ
移動相Ａ：１０ｍＭの酢酸アンモニウム、ｐＨ６．８±０．１、
Ｂ：ＭｅＯＨ
アイソクラティックモード：Ａ／Ｂ＝３０／７０
流量：１ｍＬ／分
カラム温度：４０℃
注射量：２μＬ
検出：２１４ｎｍ
実行時間：８分
試料調製
移動相Ａ
約０．７７ｇの酢酸アンモニウムを１０００ｍＬの水に溶かし、０．１Ｎの水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを６．８±０．１に調整する。使用前に０．２２μｍのＰＴＦＥ膜フィルターで濾過し、脱気する。
試料溶媒：
イソプロピルアルコール
標準溶液
２０±１ｍｇの（＋）－ＴＢＺ参照標準を２０ｍＬの容量フラスコに正確に量り、１０ｍＬの試料溶媒を加えて溶解させ、試料溶媒で体積に希釈し、よく混合する。この溶液を試料溶媒で希釈して、２、５、１０、５０、１００、２００、及び５００μｇ／ｍＬの標準溶液を得る。
試料溶媒
（＋）－ＴＢＺ ＡＰＩ試料（０．１ｍｇ／ｍＬ ＴＢＺ）の場合：
１０ｍＬの容量フラスコに１０ｍｇのＡＰＩ試料を正確に量り、５ｍＬの試料溶媒を添加して溶解させ、試料溶媒で体積に希釈し、よく混合する。上記溶液１ｍＬを１０ｍＬの容量フラスコにピペットし、試料溶媒で体積に希釈し、よく混ぜ合わせる。
（＋）－ＴＢＺ医薬品試料（０．１ｍｇ／ｍＬ ＴＢＺ）の場合：
２０ｍＬの容量フラスコに、４０ｍｇの医薬品（ＰＬＧＡ又はＰＬＡ含有製剤、薬物負荷が５０％、ｗ／ｗであると仮定）試料を正確に量り、１５ｍＬのＮＭＰを添加して溶解させ、ＮＭＰで体積に希釈し、よく混合する。上記で調製した試料溶液１ｍＬを採取し、１０ｍＬ容量フラスコに添加し、５ｍＬのＩＰＡを添加して希釈し、ＩＰＡで体積に希釈し、よく混合する。溶液をボルテックスし、１２０００ｒｐｍで３分間遠心分離して沈殿物を凝集させる。次いで、上清を０．２２μｍのＰＴＦＥフィルターを通して濾過し（最初の２ｍＬを捨てる）、注射のためにＨＰＬＣバイアルに移す。
【0076】
ＧＰＣ分析方法
本出願における製剤開発におけるポリマー選択のための１つの重要なパラメータとして、ゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ、サイズ排除クロマトグラフィー、ＳＥＣとも呼ばれる）を介してポリマーＭＷを分析した。
材料
試薬
－テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、安定化、ＨＰＬＣグレード。
－Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、医薬品グレード又はＡＣＳ試薬。
ＧＰＣ標準
－ＧＰＣ較正キット：Ｐｓｋｉｔｒ１Ｌ ＲｅａｄｙＣａｌ－Ｋｉｔ（ポリスチレン）、Ｍｐ：２６６～６６，０００ＤａをＰＳＳ－Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ Ｓｅｒｖｉｃｅ ＵＳＡ．Ｉｎｃ．から購入する。ＲｅｄｙＣａｌ－Ｋｉｔの公式文書からの分子量情報、ＰＳＳ－ｐｓｋｉｔｒ１ｌを以下の表１に列挙する。標準の各バイアルは、異なるＭｐを有する４つのポリスチレン標準を含有する。
機器及びパラメータ
ＧＰＣシステム
－Ｓｈｉｍａｄｚｕ Ｎｅｘｅｒａ ＨＰＬＣシステムは、以下で構成されている：脱気装置、モデルＤＧＵ－２０Ａ ５Ｒ、バイナリポンプ、モデルＬＣ－３０ＡＤ、ＲＩ検出器、モデルＲＩＤ－１０Ａ、オートサンプラー、モデルＳＩＬ－３０ＡＣ、カラムオーブン、モデルＣＴＯ－２０ＡＣ
－ソフトウェア：ＬａｂＳｏｌｕｔｉｏｎｓ
ＧＰＣカラム
－２本のＡｇｉｌｅｎｔ ＲｅｓｉＰｏｒｅ（＃１１１３－６３００）３００×７．５ｍｍ、３μｍ粒径の直列カラム。
ＧＰＣ条件
－移動相／試料緩衝剤：ＴＨＦ（安定化）。
－流量：１ｍＬ／分。
－カラム温度：４０℃。
－注射量：５０μＬ。
－実行時間：３０分。
－反射指数検出器：
－極性：ポジティブ
－温度：４０℃
－応答：１．５秒
－検体濃度：ＴＨＦ中２ｍｇ（ポリマー）／ｍＬ。
試料調製
標準調製
ＰＳＳ－ｐｓｋｉｔｒ１ｌ ＲｅａｄｙＣａｌ－Ｋｉｔの公式説明書に従って、分子量標準（ポリスチレン）を調製する。各バイアルに１ｍＬのＴＨＦを添加して、標準溶液（Ｍｐ２６６～６６０００ダルトンを覆う３つの個々の標準バイアル）を各標準について２．２５ｍｇ／ｍＬの濃度で作製する。全ての標準は２時間にわたって溶解される。
注意：ポリスチレン標準及び較正曲線は、毎回新しく調製されなければならない。
試料調製
純粋なＰＬＧＡ又はＰＬＡ試料については、１．５ｍＬのＥｐｐｅｎｄｏｒｆチューブ中で１０ｍｇの試料を量る。１ｍＬのＴＨＦを添加し、２時間（室温）にわたって軌道シェーカーを介してポリマーを溶解させる。溶解したポリマー／ＴＨＦ試料を１４０００ｒｐｍで２分間遠心分離し、希釈のために１００μＬの上清を採取して、ＧＰＣ分析のための最終２ｍｇ／ｍＬの試料（１００μＬの上清＋４００μＬのＴＨＦ）を作製する。
製剤試料については、１．５ｍＬのＥｐｐｅｎｄｏｒｆチューブ中で十分な量の製剤（１０ｍｇのポリマーに相当する）を量る。例えば、５０／５０のＰＬＧＡ対ＮＭＰ比を有する５０％薬物負荷製剤の場合、４０ｍｇの製剤を量らなければならない。溶解した製剤／ＴＨＦ試料を１４０００ｒｐｍで２分間遠心分離し、希釈のために１００μＬの上清を採取して、ＧＰＣ分析のための最終２ｍｇ／ｍＬの試料（１００μＬの上清＋４００μＬのＴＨＦ）を作製する。
本出願における製剤開発におけるポリマー選択のための１つの重要なパラメータとして、ゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ、サイズ排除クロマトグラフィー、ＳＥＣとも呼ばれる）を介してポリマーＭＷを分析した。
材料
試薬
－テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、安定化、ＨＰＬＣグレード。
－Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、医薬品グレード又はＡＣＳ試薬。
ＧＰＣ標準
－ＧＰＣ較正キット：Ｐｓｋｉｔｒ１Ｌ ＲｅａｄｙＣａｌ－Ｋｉｔ（ポリスチレン）、Ｍｐ：２６６～６６，０００ＤａをＰＳＳ－Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ Ｓｅｒｖｉｃｅ ＵＳＡ．Ｉｎｃ．から購入する。ＲｅｄｙＣａｌ－Ｋｉｔの公式文書からの分子量情報、ＰＳＳ－ｐｓｋｉｔｒ１ｌを以下の表１に列挙する。標準の各バイアルは、異なるＭｐを有する４つのポリスチレン標準を含有する。
【表4】
ＧＰＣシステム
－Ｓｈｉｍａｄｚｕ Ｎｅｘｅｒａ ＨＰＬＣシステムは、以下で構成されている：脱気装置、モデルＤＧＵ－２０Ａ ５Ｒ、バイナリポンプ、モデルＬＣ－３０ＡＤ、ＲＩ検出器、モデルＲＩＤ－１０Ａ、オートサンプラー、モデルＳＩＬ－３０ＡＣ、カラムオーブン、モデルＣＴＯ－２０ＡＣ
－ソフトウェア：ＬａｂＳｏｌｕｔｉｏｎｓ
ＧＰＣカラム
－２本のＡｇｉｌｅｎｔ ＲｅｓｉＰｏｒｅ（＃１１１３－６３００）３００×７．５ｍｍ、３μｍ粒径の直列カラム。
ＧＰＣ条件
－移動相／試料緩衝剤：ＴＨＦ（安定化）。
－流量：１ｍＬ／分。
－カラム温度：４０℃。
－注射量：５０μＬ。
－実行時間：３０分。
－反射指数検出器：
－極性：ポジティブ
－温度：４０℃
－応答：１．５秒
－検体濃度：ＴＨＦ中２ｍｇ（ポリマー）／ｍＬ。
試料調製
標準調製
ＰＳＳ－ｐｓｋｉｔｒ１ｌ ＲｅａｄｙＣａｌ－Ｋｉｔの公式説明書に従って、分子量標準（ポリスチレン）を調製する。各バイアルに１ｍＬのＴＨＦを添加して、標準溶液（Ｍｐ２６６～６６０００ダルトンを覆う３つの個々の標準バイアル）を各標準について２．２５ｍｇ／ｍＬの濃度で作製する。全ての標準は２時間にわたって溶解される。
注意：ポリスチレン標準及び較正曲線は、毎回新しく調製されなければならない。
試料調製
純粋なＰＬＧＡ又はＰＬＡ試料については、１．５ｍＬのＥｐｐｅｎｄｏｒｆチューブ中で１０ｍｇの試料を量る。１ｍＬのＴＨＦを添加し、２時間（室温）にわたって軌道シェーカーを介してポリマーを溶解させる。溶解したポリマー／ＴＨＦ試料を１４０００ｒｐｍで２分間遠心分離し、希釈のために１００μＬの上清を採取して、ＧＰＣ分析のための最終２ｍｇ／ｍＬの試料（１００μＬの上清＋４００μＬのＴＨＦ）を作製する。
製剤試料については、１．５ｍＬのＥｐｐｅｎｄｏｒｆチューブ中で十分な量の製剤（１０ｍｇのポリマーに相当する）を量る。例えば、５０／５０のＰＬＧＡ対ＮＭＰ比を有する５０％薬物負荷製剤の場合、４０ｍｇの製剤を量らなければならない。溶解した製剤／ＴＨＦ試料を１４０００ｒｐｍで２分間遠心分離し、希釈のために１００μＬの上清を採取して、ＧＰＣ分析のための最終２ｍｇ／ｍＬの試料（１００μＬの上清＋４００μＬのＴＨＦ）を作製する。
【0077】
注射用懸濁液からの（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺのインビトロ放出
（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ懸濁製剤について、インビトロ放出をシンク条件下で行った。放出培体の体積は、製剤のデポサイズ及び薬物負荷（％）に従って調節することができる。一実施形態では、３５ｍｇの３０％の薬物負荷製剤を、３７℃で、０．２％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ８０を含む４００ｍＬのｐＨ７．４リン酸緩衝液生理食塩水に注入した。溶媒消散後、インサイチュ形成インプラントは、放出媒体中に形成される。所定の時間点で、ＨＰＬＣ分析のために０．５ｍＬの放出培体を取り出し、放出培体中の薬物濃度を計算した。放出された薬物の蓄積量を所定の時点で計算して、蓄積放出プロファイルを得た。
（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ懸濁製剤について、インビトロ放出をシンク条件下で行った。放出培体の体積は、製剤のデポサイズ及び薬物負荷（％）に従って調節することができる。一実施形態では、３５ｍｇの３０％の薬物負荷製剤を、３７℃で、０．２％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ８０を含む４００ｍＬのｐＨ７．４リン酸緩衝液生理食塩水に注入した。溶媒消散後、インサイチュ形成インプラントは、放出媒体中に形成される。所定の時間点で、ＨＰＬＣ分析のために０．５ｍＬの放出培体を取り出し、放出培体中の薬物濃度を計算した。放出された薬物の蓄積量を所定の時点で計算して、蓄積放出プロファイルを得た。
【0078】
ジェットミルによる（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ粒子のサイズ低減
最大５ｇの生の（＋）－ＴＢＺ又は（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ粉末を量り、６０秒当たり約１ｇの速度でジェットミル（Ｍｉｃｒｏｍａｃｉｎａｚｉｏｎｅ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）に供給した。供給圧力及び研削圧力は、収集される所望の粒径に応じて調整可能であった。ミル後、（＋）－ＴＢＺ又は（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ粒子を回収し、密封し、所望の保管条件で保存した。狭い粒径分布を有する大きなＡＰＩ粒子（すなわち、１００μｍを超えるＤ（５０）を有する粒子）を取得するために、ジェットミルされたＡＰＩ粉末を、分散剤として０．５％ｗ／ｗのＴｗｅｅｎ８０水溶液を使用して２５μｍフィルターを通して更に濾過し、続いてオーブン乾燥することもできる。次いで、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ ３０００（Ｍａｌｖｅｒｎ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｌｔｄ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）によって粒径を測定した。
最大５ｇの生の（＋）－ＴＢＺ又は（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ粉末を量り、６０秒当たり約１ｇの速度でジェットミル（Ｍｉｃｒｏｍａｃｉｎａｚｉｏｎｅ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）に供給した。供給圧力及び研削圧力は、収集される所望の粒径に応じて調整可能であった。ミル後、（＋）－ＴＢＺ又は（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ粒子を回収し、密封し、所望の保管条件で保存した。狭い粒径分布を有する大きなＡＰＩ粒子（すなわち、１００μｍを超えるＤ（５０）を有する粒子）を取得するために、ジェットミルされたＡＰＩ粉末を、分散剤として０．５％ｗ／ｗのＴｗｅｅｎ８０水溶液を使用して２５μｍフィルターを通して更に濾過し、続いてオーブン乾燥することもできる。次いで、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ ３０００（Ｍａｌｖｅｒｎ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｌｔｄ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）によって粒径を測定した。
【0079】
（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ粒子の粒径分析
分散媒体として脱イオン水を使用して、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ ３０００を使用して、ジェットミルされたＡＰＩ粒子の粒径及び粒径分布を分析した。粒径分布を測定し、記録した。表２は、以下の実施例で使用される医薬活性成分のＤ（５０）における３つの主要な粒径範囲を分類した。この粒径分類されたシステムは、更に説明されない場合、本出願を通して採用されるであろう。
分散媒体として脱イオン水を使用して、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ ３０００を使用して、ジェットミルされたＡＰＩ粒子の粒径及び粒径分布を分析した。粒径分布を測定し、記録した。表２は、以下の実施例で使用される医薬活性成分のＤ（５０）における３つの主要な粒径範囲を分類した。この粒径分類されたシステムは、更に説明されない場合、本出願を通して採用されるであろう。
【表5】
【0080】
ポリマー分子量測定
各製剤からの約５～１０ｍｇの試料を１．５ｍＬの遠心管に添加し、０．８μＬのＴＨＦに完全に溶解した。溶液を、プレートシェーカーとともに設置されたボルテックスシェーカーを使用して、完全に溶解するまでボルテックスした。次いで、各試料を１２，０００ｒｐｍで２分間遠心分離した。上清を回収し、ＧＰＣによって分析して、ポリマーの重量平均分子量（Ｍｗ）及び多分散指数（ＰＤＩ）を決定した。ポリマーのＭｗ及びＰＤＩは、２６６～６６，０００ＤａのＭｐ範囲を有するポリスチレン標準（Ｐｓｋｉｔｒ１Ｌ ＲｅａｄｙＣａｌ－Ｋｉｔ）と比較することによって得た。表３は、本出願で試験されているいくつかのＰＬＧＡ及びＰＬＡポリマーのＭｗ情報をまとめた。更に、ガンマ線照射（２５～４０ｋＧｙ）後のポリマーＭｗ変化も測定し、表３に列挙した。
各製剤からの約５～１０ｍｇの試料を１．５ｍＬの遠心管に添加し、０．８μＬのＴＨＦに完全に溶解した。溶液を、プレートシェーカーとともに設置されたボルテックスシェーカーを使用して、完全に溶解するまでボルテックスした。次いで、各試料を１２，０００ｒｐｍで２分間遠心分離した。上清を回収し、ＧＰＣによって分析して、ポリマーの重量平均分子量（Ｍｗ）及び多分散指数（ＰＤＩ）を決定した。ポリマーのＭｗ及びＰＤＩは、２６６～６６，０００ＤａのＭｐ範囲を有するポリスチレン標準（Ｐｓｋｉｔｒ１Ｌ ＲｅａｄｙＣａｌ－Ｋｉｔ）と比較することによって得た。表３は、本出願で試験されているいくつかのＰＬＧＡ及びＰＬＡポリマーのＭｗ情報をまとめた。更に、ガンマ線照射（２５～４０ｋＧｙ）後のポリマーＭｗ変化も測定し、表３に列挙した。
【表6】
【0081】
（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物の調製
（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ懸濁液は、所望の粒径を有するＡＰＩ粒子の計量量を好適なルアーロック雄シリンジに充填することによって調製した。均質なポリマー溶液ビヒクルを、適切な混合デバイス、すなわちプラネタリミキサーを使用して、量った量のポリマー及び生体適合性の溶媒を混合することによって調製した。調製したら、量った量のポリマー溶液ビヒクルを、好適な雌のルアーロックシリンジに充填した。注射前に、雄及び雌のシリンジを一緒に接続し、続いて２つのプランジャーを介して最大１００回前後に混合して、均一な、乳白色又はわずかに黄色がかった懸濁液を得た。より好ましくは、混合は７５回であり、更により好ましくは、混合は５０回であった。注射用の最終混合物は、粘性液体、ゲル、エマルジョン、懸濁液、又は半固体分散液であり得、これは安定であり、好ましくは３０分間注射の準備ができており、より好ましくは安定であり、沈降及び凝集なしで１～２時間以内に注射の準備ができている。懸濁液の準備ができたら、雌のシリンジを取り外し、所望のルアーロック針を注射用の雄のシリンジにねじ込んだ。好ましくは、注射用針は、１６ゲージの針、より好ましくは１８ゲージ又は１９ゲージの針、最も好ましくは２０ゲージ以下のサイズの針であった。
（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ懸濁液は、所望の粒径を有するＡＰＩ粒子の計量量を好適なルアーロック雄シリンジに充填することによって調製した。均質なポリマー溶液ビヒクルを、適切な混合デバイス、すなわちプラネタリミキサーを使用して、量った量のポリマー及び生体適合性の溶媒を混合することによって調製した。調製したら、量った量のポリマー溶液ビヒクルを、好適な雌のルアーロックシリンジに充填した。注射前に、雄及び雌のシリンジを一緒に接続し、続いて２つのプランジャーを介して最大１００回前後に混合して、均一な、乳白色又はわずかに黄色がかった懸濁液を得た。より好ましくは、混合は７５回であり、更により好ましくは、混合は５０回であった。注射用の最終混合物は、粘性液体、ゲル、エマルジョン、懸濁液、又は半固体分散液であり得、これは安定であり、好ましくは３０分間注射の準備ができており、より好ましくは安定であり、沈降及び凝集なしで１～２時間以内に注射の準備ができている。懸濁液の準備ができたら、雌のシリンジを取り外し、所望のルアーロック針を注射用の雄のシリンジにねじ込んだ。好ましくは、注射用針は、１６ゲージの針、より好ましくは１８ゲージ又は１９ゲージの針、最も好ましくは２０ゲージ以下のサイズの針であった。
【0082】
実施例１．製剤の均一性
製剤の均一性は、あらゆる種類の注射用剤形を開発する上で重要である。それは、毎回一貫した投与を可能にする、医薬品中のＡＰＩの均質な分布を保証する。予め充填された注射可能な剤形の場合、バッチ間のばらつきを最小限に抑えて一貫したＤＬ％を得ることも重要である。一実施形態では、（＋）－ＴＢＺポリマー懸濁液を、プラネタリミキサー（ＭＡＺＥＲＵＳＴＡＲ ＫＫシリーズＰｌａｎｅｔａｒｙ Ｍｉｘｅｒ，Ｋｕｒａｂｏ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ．，Ｏｓａｋａ，Ｊａｐａｎ）によって調製し、次いで、注射の準備ができていた予め充填されたシリンジとして、１ｍＬのポリプロピレン（ＰＰ）シリンジ（Ｔｅｒｕｍｏ、Ｊａｐａｎ）に手動で充填した。製剤の均一性は、正確に同じ組成物を有する３つの独立して調製されたバッチからの製剤のＤＬ％を調べることによって決定された。ＤＬ％は、予め充填されたシリンジ内の無作為に選択された部分で所定量の製剤をサンプリングすることによって測定した。表４は、３つの異なるＲＥＳＯＭＥＲ製剤からのＤＬ％結果をまとめた。異なるバッチにわたって２％未満のＳＴＤで、それは、良好な製剤均一性及び最小限の調製バリエーションを強く示し、これらは一緒に、予め充填された（＋）－ＴＢＺポリマー製剤を開発するための有望な可能性をもたらす。
製剤の均一性は、あらゆる種類の注射用剤形を開発する上で重要である。それは、毎回一貫した投与を可能にする、医薬品中のＡＰＩの均質な分布を保証する。予め充填された注射可能な剤形の場合、バッチ間のばらつきを最小限に抑えて一貫したＤＬ％を得ることも重要である。一実施形態では、（＋）－ＴＢＺポリマー懸濁液を、プラネタリミキサー（ＭＡＺＥＲＵＳＴＡＲ ＫＫシリーズＰｌａｎｅｔａｒｙ Ｍｉｘｅｒ，Ｋｕｒａｂｏ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ．，Ｏｓａｋａ，Ｊａｐａｎ）によって調製し、次いで、注射の準備ができていた予め充填されたシリンジとして、１ｍＬのポリプロピレン（ＰＰ）シリンジ（Ｔｅｒｕｍｏ、Ｊａｐａｎ）に手動で充填した。製剤の均一性は、正確に同じ組成物を有する３つの独立して調製されたバッチからの製剤のＤＬ％を調べることによって決定された。ＤＬ％は、予め充填されたシリンジ内の無作為に選択された部分で所定量の製剤をサンプリングすることによって測定した。表４は、３つの異なるＲＥＳＯＭＥＲ製剤からのＤＬ％結果をまとめた。異なるバッチにわたって２％未満のＳＴＤで、それは、良好な製剤均一性及び最小限の調製バリエーションを強く示し、これらは一緒に、予め充填された（＋）－ＴＢＺポリマー製剤を開発するための有望な可能性をもたらす。
【表7】
【0083】
別の実施形態では、デュアルシリンジ混合の製剤の均一性も実証された。量った量の（＋）－ＴＢＺを好適な雄のルアーロックＰＰシリンジ（例えば、Ｑｏｓｉｎａ，ＵＳＡの１．２ｍＬ雄ＰＰシリンジ）に充填し、一方、既知量のポリマー溶液ビヒクルを好適な雌のルアーロックＰＰシリンジ（例えば、Ｑｏｓｉｎａ，ＵＳＡの１．２ｍＬ雌ＰＰシリンジ）に充填した。次いで、２つのシリンジを接続し、１００サイクル前後に混合して、注射の準備ができた最終的な懸濁液製剤を得た。均一性は、最終懸濁液を含有する混合シリンジの上部、中部、及び底部のＤＬ％を測定することによって決定した。加えて、懸濁液製剤の物理的安定性もまた、デュアルシリンジ混合後２時間後にシリンジの上部、中部、及び底部のＤＬ％を測定することによって調査した。表５は、デュアルシリンジ混合直後及び混合後２時間後のＤＬ％分析をまとめたものである。混合後の初期及び２時間の両方で、シリンジの全長（上部、中央、及び底部）にわたって最小限のＤＬ％の差が示され、ＡＰＩ粒径にかかわらず、混合後２時間以内に沈降しないデュアルシリンジによる均一な混合及び良好な物理的安定性を示した。
【表8】
【0084】
更に別の実施形態では、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ懸濁液製剤のデュアルシリンジ混合後の均一性も実証された。量った量の（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺを好適な雄のルアーロックＰＰシリンジ（例えば、Ｑｏｓｉｎａ，ＵＳＡの１．２ｍＬ雄のＰＰシリンジ）に充填し、一方、既知量のポリマー溶液ビヒクルを好適な雌のルアーロックＰＰシリンジ（例えば、Ｑｏｓｉｎａ，ＵＳＡの１．２ｍＬ雌のＰＰシリンジ）に充填した。次いで、２つのシリンジを接続し、１００回前後に混合して、注射の準備ができた最終的な懸濁液製剤を得た。均一性は、シリンジの上部及び底部の製剤ＤＬ％、並びに１９Ｇ針（Ｔｅｒｕｍｏ、Ｊａｐａｎ）を介して注射部分を測定することによって決定した。表６は、デュアルシリンジ混合直後のＤＬ％分析をまとめたものである。ＤＬ％の結果は、シリンジ（上部及び底部）、並びに１９Ｇ針を介した注射部分にわたって最小限の差を示し、デュアルシリンジによる均一な混合及び良好な製剤注射性を示した。加えて、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ粒径は、デュアルシリンジ混合後の製剤の均一性には影響しなかった。デュアルシリンジ混合後、小さいか大きいかにかかわらず、良好な製剤の均一性を達成した（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ粒子を製剤中で試験した（表６）。
【表9】
【0085】
実施例２．（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺのポリマー製剤からの持続放出
一実施形態において、小さい（＋）－ＴＢＺ粒子（Ｄ（５０）：１０～３５μｍ）を有する３０％の薬物負荷で、４５／５５ｗ／ｗ比でＲＧ５０２及びＮＭＰで構成される製剤は、約１２．５％の初期バーストでの持続放出、続いて１週間及び３週間での約３０％及び４５％のインビトロ放出をそれぞれ示した（図１ａ）。別の実施形態では、我々は、ＲＧ５０３及びＮＭＰの様々な組み合わせを使用することによって、ＶＭＡＴ２阻害剤のバースト放出を抑制する方法を可能にした。小さな（＋）－ＴＢＺ粒子を用いた同じ３０％の薬物負荷で、３５／６５ｗ／ｗ比でＲＧ５０３及びＮＭＰで構成される製剤は、インビトロ放出が遅く、最初の２４時間で５％未満のバースト放出であり、３週間後には約２０％しか放出しないことが示された（図１ａ）。更に別の実施形態では、我々は、３週間の放出が依然として３０％未満であったが、薬物負荷が５０％まで上昇したときに、初期バーストが依然として４％未満に維持され得ることを実証した［３５／６５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤、図４ａ］。別の実施例では、我々は、３５／６５ｗ／ｗ比でＲＧ５０３／ＮＭＰからなる製剤について、放出プロファイルが２０～３０％の間の薬物負荷で同じであることを実証した（図１ａ）。これはまた、ＰＬＧＡインサイチュ形成デポ薬物送達系における１０％の薬物負荷の増加が、一般的に、より高い初期バースト及びより速い全体的な放出をもたらすため、予想外であった。このように、放出プロファイルを変更することなく薬物負荷を増加させることを可能にすることは、注射量を減少させた製剤を開発するのに有益である。
一実施形態において、小さい（＋）－ＴＢＺ粒子（Ｄ（５０）：１０～３５μｍ）を有する３０％の薬物負荷で、４５／５５ｗ／ｗ比でＲＧ５０２及びＮＭＰで構成される製剤は、約１２．５％の初期バーストでの持続放出、続いて１週間及び３週間での約３０％及び４５％のインビトロ放出をそれぞれ示した（図１ａ）。別の実施形態では、我々は、ＲＧ５０３及びＮＭＰの様々な組み合わせを使用することによって、ＶＭＡＴ２阻害剤のバースト放出を抑制する方法を可能にした。小さな（＋）－ＴＢＺ粒子を用いた同じ３０％の薬物負荷で、３５／６５ｗ／ｗ比でＲＧ５０３及びＮＭＰで構成される製剤は、インビトロ放出が遅く、最初の２４時間で５％未満のバースト放出であり、３週間後には約２０％しか放出しないことが示された（図１ａ）。更に別の実施形態では、我々は、３週間の放出が依然として３０％未満であったが、薬物負荷が５０％まで上昇したときに、初期バーストが依然として４％未満に維持され得ることを実証した［３５／６５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤、図４ａ］。別の実施例では、我々は、３５／６５ｗ／ｗ比でＲＧ５０３／ＮＭＰからなる製剤について、放出プロファイルが２０～３０％の間の薬物負荷で同じであることを実証した（図１ａ）。これはまた、ＰＬＧＡインサイチュ形成デポ薬物送達系における１０％の薬物負荷の増加が、一般的に、より高い初期バースト及びより速い全体的な放出をもたらすため、予想外であった。このように、放出プロファイルを変更することなく薬物負荷を増加させることを可能にすることは、注射量を減少させた製剤を開発するのに有益である。
【0086】
一方、ＰＬＡは、ポリ（グリコール酸）（ＰＧＡ）と比較して、より疎水性の乳酸単位で構成されるポリマーであり、これは分解に長い時間を必要とし、通常、長期持続放出性注射剤（一般的に４～６ヶ月）に使用される（Ｂｌａｓｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，２０１９（４９）ｐｇ．３３７－３４６）。ＰＬＧＡポリマーについても同様である。一般的に言えば、より高いラクチド含有量（より疎水性）を有するＰＬＧＡポリマーは、分解により長い時間を要するであろう。したがって、更にいくつかの他の実施形態では、ＰＬＡ、又はＮＭＰを有するＰＬＧＡ８８／１２で構成されるポリマー溶液ビヒクルを採用して、（＋）－ＴＢＺ懸濁液を調製した。ＰＬＡ及びＰＬＧＡ（ＲＧ５０２）を同等の分子量（約１５０００Ｄａ）と比較すると、より長持ちするＰＬＡは、実際にインビトロ放出プロファイルが遅いことを示した（図１ａ）。３０％の薬物負荷でのＰＬＧＡ８８－１２／ＮＭＰ６０／４０製剤は、わずか約１５％の３週間の放出で、更に遅いインビトロ放出を示した。したがって、本出願では、我々は、初期バーストが低い又はなしで（＋）－ＴＢＺの送達のための様々な持続時間を実証した調節可能なポリマーベースの送達系を可能にした。
【0087】
本出願では、生分解性のポリマービヒクルで構成される製剤からの（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの持続送達も可能にした。一実施例（図１ｂ）では、６０／４０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０２Ｈ／ＮＭＰからなる製剤は、３週間の期間にわたって、５％未満の初期バースト放出及び約８０％の蓄積放出を伴う持続的な方法での薬物放出を実証した。一方、初期バースト放出が低いが薬物負荷が高いポリマーデポ組成物において、活性医薬成分（ＡＰＩ）として（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺを用いた調整可能な放出プロファイルを実証した。一実施例では、５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰで構成される製剤は、インビトロで４週間にわたって約４０％の蓄積放出しか示さなかった（図１ｂ）。
【0088】
実施例３．（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出に対するポリマー／溶媒比の効果
製剤に使用されるポリマーの含有量（％）が薬物放出に顕著な影響を及ぼすことはよく認識されている。一般的に言えば、ポリマーの含有量（％）が高いほど、薬物放出が遅くなる。ポリマー溶液は、ポリマーの含有量（％）が増加するにつれてより粘性になり、これにより、より低いバースト及びより遅い薬物放出がもたらされる。加えて、ポリマーの含有量が高いほど、ＡＰＩがデポマトリックスから拡散するのにかかる時間が長くなり、薬物放出も遅くなる。ポリマー製剤からの（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺのインビトロ放出は、ポリマーと溶媒の比率を調節することによって調整することができることが本明細書で示される。放出時にポリマー／溶媒比を変えることが放出にどのような影響を与えるかを理解することは、その後の製剤開発のための微調整だけでなく、生産変動の許容性を特定する上でも非常に重要であり得る。ＶＭＡＴ２阻害剤の長時間作用型の、持続的な送達のための候補を探索するために、好ましくは１ヶ月間、より好ましくは２ヶ月間、ＲＧ５０３／ＮＭＰ及びＲＧ５０２／ＮＭＰ製剤を更に調査した。図２ａは、（＋）－ＴＢＺのインビトロ放出に対するポリマー／ＮＭＰ比の効果を示す。予想外に、ポリマー／ＮＭＰ比は、ＲＧ５０３／ＮＭＰ（３０％の薬物負荷）及びＲＧ５０２／ＮＭＰ（２０％の薬物負荷）製剤について、それぞれ５％未満及び約１０％未満の放出で、（＋）－ＴＢＺの初期バースト放出に限定的な効果を与えるか又は全く効果を与えない（図２ａ）。これは、より低いポリマー濃度（％）は、一般に、ＰＬＧＡのインサイチュ形成デポ剤形においてより高い初期バーストをもたらすため、非常に独特であった。この場合、３０％の薬物負荷でのＲＧ５０３／ＮＭＰ製剤について、ポリマー％が３５％、又は２５％、又は１５％であっても、初期バーストは見出されなかった。しかしながら、３０％の薬物負荷では、ポリマー溶液ビヒクルにおいて、ＲＧ５０３％が３５％ｗ／ｗから１５％ｗ／ｗに減少したとき、より速い全体的な放出が観察された（図２ａ）。同じ傾向は、４５／５５及び３５／６５ｗ／ｗポリマー／ＮＭＰ比を有するＲＧ５０２を使用して、小さいＡＰＩ粒子を用いて２０％の薬物負荷で製剤においても観察された。特に、ポリマー／ＮＭＰ比の影響は、最初の数日間は有意ではなく、これにより、制御された薬物送達のための好適なインビボピーク／トラフ（Ｐ／Ｔ）を決定するための鍵と典型的にみなされる初期バースト放出を変更することなく、全体的な薬物放出を調整することができる。なお、３０％の薬物負荷では、３５／６５及び２５／７５ｗ／ｗ比でのＲＧ５０３／ＮＭＰの放出プロファイルは、かなり類似していることに留意されたい。この特定の知見は、より広いポリマー／ＮＭＰ範囲が所望の放出プロファイルに受け入れられ得るため、製造プロセス及び下流の製品開発に値する場合がある。
製剤に使用されるポリマーの含有量（％）が薬物放出に顕著な影響を及ぼすことはよく認識されている。一般的に言えば、ポリマーの含有量（％）が高いほど、薬物放出が遅くなる。ポリマー溶液は、ポリマーの含有量（％）が増加するにつれてより粘性になり、これにより、より低いバースト及びより遅い薬物放出がもたらされる。加えて、ポリマーの含有量が高いほど、ＡＰＩがデポマトリックスから拡散するのにかかる時間が長くなり、薬物放出も遅くなる。ポリマー製剤からの（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺのインビトロ放出は、ポリマーと溶媒の比率を調節することによって調整することができることが本明細書で示される。放出時にポリマー／溶媒比を変えることが放出にどのような影響を与えるかを理解することは、その後の製剤開発のための微調整だけでなく、生産変動の許容性を特定する上でも非常に重要であり得る。ＶＭＡＴ２阻害剤の長時間作用型の、持続的な送達のための候補を探索するために、好ましくは１ヶ月間、より好ましくは２ヶ月間、ＲＧ５０３／ＮＭＰ及びＲＧ５０２／ＮＭＰ製剤を更に調査した。図２ａは、（＋）－ＴＢＺのインビトロ放出に対するポリマー／ＮＭＰ比の効果を示す。予想外に、ポリマー／ＮＭＰ比は、ＲＧ５０３／ＮＭＰ（３０％の薬物負荷）及びＲＧ５０２／ＮＭＰ（２０％の薬物負荷）製剤について、それぞれ５％未満及び約１０％未満の放出で、（＋）－ＴＢＺの初期バースト放出に限定的な効果を与えるか又は全く効果を与えない（図２ａ）。これは、より低いポリマー濃度（％）は、一般に、ＰＬＧＡのインサイチュ形成デポ剤形においてより高い初期バーストをもたらすため、非常に独特であった。この場合、３０％の薬物負荷でのＲＧ５０３／ＮＭＰ製剤について、ポリマー％が３５％、又は２５％、又は１５％であっても、初期バーストは見出されなかった。しかしながら、３０％の薬物負荷では、ポリマー溶液ビヒクルにおいて、ＲＧ５０３％が３５％ｗ／ｗから１５％ｗ／ｗに減少したとき、より速い全体的な放出が観察された（図２ａ）。同じ傾向は、４５／５５及び３５／６５ｗ／ｗポリマー／ＮＭＰ比を有するＲＧ５０２を使用して、小さいＡＰＩ粒子を用いて２０％の薬物負荷で製剤においても観察された。特に、ポリマー／ＮＭＰ比の影響は、最初の数日間は有意ではなく、これにより、制御された薬物送達のための好適なインビボピーク／トラフ（Ｐ／Ｔ）を決定するための鍵と典型的にみなされる初期バースト放出を変更することなく、全体的な薬物放出を調整することができる。なお、３０％の薬物負荷では、３５／６５及び２５／７５ｗ／ｗ比でのＲＧ５０３／ＮＭＰの放出プロファイルは、かなり類似していることに留意されたい。この特定の知見は、より広いポリマー／ＮＭＰ範囲が所望の放出プロファイルに受け入れられ得るため、製造プロセス及び下流の製品開発に値する場合がある。
【0089】
一方、ポリマー／溶媒比の調整によって影響を受けるこの特徴的な放出プロファイルを別のＶＭＡＴ２阻害剤で再現できるかどうかを調べるために、非常に類似した化学構造を共有する（＋）－ＴＢＺの単なる還元形態である（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺを用いて同じ放出研究を行った（図２ｂ）。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ ＰＬＧＡポリマー懸濁液の場合、初期バーストがポリマー／溶媒比の影響をほとんど受けなかった（＋）－ＴＢＺとは異なり、ポリマーの含有量（％）の低下は、全体的なより速い放出だけでなく、ＲＧ５０２／ＮＭＰ及びＲＧ５０３／ＮＭＰポリマー溶液ビヒクルの両方の場合において、より高い初期バースト（３０％の薬物負荷）をもたらした。そのような小さな構造的差異では、これらの２つのＶＭＡＴ２阻害剤は、製剤中のそれらの相対的なポリマー％に対応して、依然として有意に異なるパターンの放出プロファイルを示した。当業者が単に先行技術に従うことによって放出特性を予測することは明らかにかなり困難である。更に、より高いバースト放出を示した低含有量のポリマー（％）で構成される製剤は、治療範囲内のＶＭＡＴ２阻害剤を保証するために、初期段階で血漿（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺレベルを引き上げるためのレジメンにおける「ブースト」用量として利用することができる。
【0090】
実施例４．インビトロ放出に対する疎水性溶媒の効果
生分解性／生体適合性、高い薬物負荷、より良い患者のコンプライアンス、及び低減された投与頻度の利点のために、インサイチュ形成デポ薬物送達系は、非経口用途のための一般的なアプローチとなっている。しかしながら、典型的には、親水性溶媒の体液への迅速な消散によって引き起こされる初期バーストの問題に起因して、長期間の送達系においてゼロオーダー放出プロファイルを達成することは非常に困難である。初期バーストを回避するための１つの潜在的なアプローチは、ＰＬＧＡポリマー溶液ビヒクルに疎水性溶媒を導入して、薬物放出を延長するために溶媒拡散を遅くすることである。ＢＢ、ＢＡ、及びトリアセチンは、ＡＴＲＩＧＥＬ（登録商標）薬物送達系などにおける薬物放出を制御するようにＮＭＰで調整された、一般的に入手可能な生体適合性の疎水性溶媒のいくつかである。驚くべきことに、ＢＢは、当業者が予想するのとは逆の方法で（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出を変更することができることがわかった（図３）。一実施形態では、６５／５／３０の比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０２／ＢＢ／ＮＭＰからなる製剤は、ポリマー溶液ビヒクル中のＮＭＰのわずか５％（ｗ／ｗ）がＢＢで置換されたとき（１４日間の放出が約５０％から約７０％に増加した）、実質的により速い放出を示した。別の実施形態では、５０／５／４５の比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＢＢ／ＮＭＰからなる製剤は、ポリマー溶液ビヒクル中の５％（ｗ／ｗ）のＮＭＰをＢＢに置き換えた後の加速放出も示した（１４日間の放出は、約２０％から約３０％に増加する）。また、ＢＢのこの小さな部分によるＮＭＰの置き換えは、より速い蓄積放出にしかつながらなかったが、実際には初期放出には影響しなかったこともわかった。これは、通常、ＢＢを導入すると、ポリマー溶液の粘度が増加し、初期破裂を低減するのに役立つため、予想外でもあった。これらの発見は、関連分野における先行技術が明らかにしたものと比べて例外的であった。更に、本明細書で使用されるそのような方法は、初期放出に影響を与えることなく、ＶＭＡＴ２阻害剤の全体的な放出プロファイルを制御する上での利点を提供し、これは、生体対象における低血漿Ｐ／Ｔ比を維持するのを潜在的に助けることができる。これは、持続放出性のインサイチュ形成デポ薬物送達系を開発する場合に達成することが非常に困難である。
生分解性／生体適合性、高い薬物負荷、より良い患者のコンプライアンス、及び低減された投与頻度の利点のために、インサイチュ形成デポ薬物送達系は、非経口用途のための一般的なアプローチとなっている。しかしながら、典型的には、親水性溶媒の体液への迅速な消散によって引き起こされる初期バーストの問題に起因して、長期間の送達系においてゼロオーダー放出プロファイルを達成することは非常に困難である。初期バーストを回避するための１つの潜在的なアプローチは、ＰＬＧＡポリマー溶液ビヒクルに疎水性溶媒を導入して、薬物放出を延長するために溶媒拡散を遅くすることである。ＢＢ、ＢＡ、及びトリアセチンは、ＡＴＲＩＧＥＬ（登録商標）薬物送達系などにおける薬物放出を制御するようにＮＭＰで調整された、一般的に入手可能な生体適合性の疎水性溶媒のいくつかである。驚くべきことに、ＢＢは、当業者が予想するのとは逆の方法で（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出を変更することができることがわかった（図３）。一実施形態では、６５／５／３０の比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０２／ＢＢ／ＮＭＰからなる製剤は、ポリマー溶液ビヒクル中のＮＭＰのわずか５％（ｗ／ｗ）がＢＢで置換されたとき（１４日間の放出が約５０％から約７０％に増加した）、実質的により速い放出を示した。別の実施形態では、５０／５／４５の比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＢＢ／ＮＭＰからなる製剤は、ポリマー溶液ビヒクル中の５％（ｗ／ｗ）のＮＭＰをＢＢに置き換えた後の加速放出も示した（１４日間の放出は、約２０％から約３０％に増加する）。また、ＢＢのこの小さな部分によるＮＭＰの置き換えは、より速い蓄積放出にしかつながらなかったが、実際には初期放出には影響しなかったこともわかった。これは、通常、ＢＢを導入すると、ポリマー溶液の粘度が増加し、初期破裂を低減するのに役立つため、予想外でもあった。これらの発見は、関連分野における先行技術が明らかにしたものと比べて例外的であった。更に、本明細書で使用されるそのような方法は、初期放出に影響を与えることなく、ＶＭＡＴ２阻害剤の全体的な放出プロファイルを制御する上での利点を提供し、これは、生体対象における低血漿Ｐ／Ｔ比を維持するのを潜在的に助けることができる。これは、持続放出性のインサイチュ形成デポ薬物送達系を開発する場合に達成することが非常に困難である。
【0091】
実施例５インビトロ放出に対する薬物負荷の効果
インサイチュ形成、注射可能な持続放出性デポ／インプラント製剤中の薬物負荷（ＤＬ％）は、投与量及び治療効果がどのくらい持続し得るかを決定するという点で非常に重要である。典型的には、注射量が少ないほど、患者のコンプライアンスは良好である。なぜなら、必要な注射時間が短縮されるほど、患者の苦痛は軽減されるからである。３５／６５ｗ／ｗ比で３０％（＋）－ＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤は、インビトロ放出が遅く持続することを実証したため、我々は、この同一のポリマー溶液ビヒクルからの薬物放出プロファイルに対するＤＬ％効果を更に探索した。（＋）－ＴＢＺの調整した放出プロファイルは、ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成されるビヒクル中のＤＬ％を３５／６５の比率で調節することによって得られる。一実施形態では、ＤＬ％を５０％に増加させると、（＋）－ＴＢＺの放出が、同じビヒクルで構成されるが、３０％の薬物負荷で構成される製剤と比較して有意に速くなった（図４ａ）。予想外に、初期バーストは、２０％から５０％に増加したＤＬ％の影響を受けず、その後の放出速度のみの影響を受けた。これは、特定の状況下で、大きな血漿レベルの変動（より小さい血漿レベルのＰ／Ｔ比）を回避するために、高い初期バーストを伴わないより速い全体的な放出プロファイルが好ましいという事実に起因して、長期持続放出性のインサイチュ形成デポ／インプラント製剤を開発するための有益な調整アプローチを提供するであろう。
インサイチュ形成、注射可能な持続放出性デポ／インプラント製剤中の薬物負荷（ＤＬ％）は、投与量及び治療効果がどのくらい持続し得るかを決定するという点で非常に重要である。典型的には、注射量が少ないほど、患者のコンプライアンスは良好である。なぜなら、必要な注射時間が短縮されるほど、患者の苦痛は軽減されるからである。３５／６５ｗ／ｗ比で３０％（＋）－ＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤は、インビトロ放出が遅く持続することを実証したため、我々は、この同一のポリマー溶液ビヒクルからの薬物放出プロファイルに対するＤＬ％効果を更に探索した。（＋）－ＴＢＺの調整した放出プロファイルは、ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成されるビヒクル中のＤＬ％を３５／６５の比率で調節することによって得られる。一実施形態では、ＤＬ％を５０％に増加させると、（＋）－ＴＢＺの放出が、同じビヒクルで構成されるが、３０％の薬物負荷で構成される製剤と比較して有意に速くなった（図４ａ）。予想外に、初期バーストは、２０％から５０％に増加したＤＬ％の影響を受けず、その後の放出速度のみの影響を受けた。これは、特定の状況下で、大きな血漿レベルの変動（より小さい血漿レベルのＰ／Ｔ比）を回避するために、高い初期バーストを伴わないより速い全体的な放出プロファイルが好ましいという事実に起因して、長期持続放出性のインサイチュ形成デポ／インプラント製剤を開発するための有益な調整アプローチを提供するであろう。
【0092】
ＤＬ％が他の生分解性ポリマーに同様の方法で放出に影響を与えるかどうかを理解するために、我々は、様々なＤＬ％を有する３５／６５ｗ／ｗ比で（＋）－ＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰからなる製剤を更に調査し、同一の傾向を見出した。初期バーストは同じままであったが、ＤＬを５０％に増加させると、３０％の薬物負荷よりも速いインビトロ放出プロファイルが得られた（図４ａ）。そのような傾向は、小さい又は大きいＡＰＩ粒子が試験されたかどうかにかかわらず、真であり続けた。これらの結果は、上昇した初期バーストを効果的に回避しながら、放出プロファイルを調整するためのツールとしてＤＬ％を使用するアプローチを更に強化する。
【0093】
より驚くべきことに、別の実施形態では、初期放出及び全体的な放出プロファイルの両方が、５０／５０ｗ／ｗ比で（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ７５２Ｈ／ＮＭＰで構成される製剤において、ＤＬ％を５０％から６０％及び７０％に増加させることによって著しく影響されないことを実証した（図４ｂ）。これは、ＤＬ％が５０％から６０％又は７０％に上昇している間に低い初期バースト及び同様の放出プロファイルを維持しながら、投与量を減少させた持続放出性ＶＭＡＴ２阻害剤のインサイチュ形成デポの開発を可能にする、異なる方法で製剤設計に利益をもたらすであろう。
【0094】
別の実施形態では、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出プロファイルに対するＤＬ％効果を、ポリマー溶液又は懸濁液製剤中で調査した。（＋）－ＴＢＺから発見されたものと同様に、ＤＬ％は、初期バーストでの（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ放出及び全体的な放出速度に異なる影響を与えた。初期バースト放出は、ＤＬ％を変化させることでわずかに変化したが、５０／５０ｗ／ｗ比でＲＧ５０３／ＮＭＰで構成されるビヒクルにおいて、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ負荷が３０％から４５％に増加した場合、全体的な放出速度はより速かった。しかしながら、放出プロファイルが、３０％及び４０％の薬物負荷で例外的にほぼ同一であったことは独特であった（図４ｃ）。これは、様々な用量強度の持続放出性医薬品を開発することが一般的であり、用量強度が増加した製剤の初期バーストを増加させることなく、良好な用量比例性を達成することができるため、非常に有利であった。更に予想外なのは、ＤＬ％を変化させると、カルボン酸末端処理されたＲＧ５０３Ｈ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺとは完全に反対に作用した。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの放出は、ＲＧ５０３Ｈ製剤におけるＤＬ％の増加とともに実際に遅かった（図４ｃ）。そのような知見は、ＶＭＡＴ２阻害剤の放出プロファイルに対する薬物負荷の効果は、他で開示されている他の関連する先行技術の製剤を単純に模倣又は再現することによって再現することができないことを再度強調した。
【0095】
実施例６（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ粒径がポリマー製剤からの放出に及ぼす効果
典型的には、粒径は、懸濁液製剤中の放出プロファイルを変更する（Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ．Ｄｅｖｅｌ．Ｔｈｅｒ．２０１３；７：１０２７－１０３３．）。溶解速度は、懸濁液製剤中の粒子の表面積と正の相関がある。ＡＰＩ粒子の粒径の減少に伴い比表面積が増加するが、薬物の溶解速度も増加する。溶解速度の実質的な差は、特に溶解試験の初期期間中、粒径及び相対表面積の変動に応じて存在し得る。図５ａは、異なる粒径を有する（＋）－ＴＢＺを使用した、ＲＥＳＯＭＥＲ／ＮＭＰポリマー溶液製剤における（＋）－ＴＢＺ放出の調整を示した。３５／６５ｗ／ｗ比でＲＧ５０３／ＮＭＰ、及び６０／４０ｗ／ｗ比でＲＧ５０２／ＮＭＰで構成される両方のポリマー溶液ビヒクルについて、大きなＡＰＩ粒子（Ｄ（５０）：１００～１３０μｍ）は、ＤＬ％が３０％又は５０％であったにもかかわらず、実際には小粒子よりもインビトロ放出が遅いことを示した。
典型的には、粒径は、懸濁液製剤中の放出プロファイルを変更する（Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ．Ｄｅｖｅｌ．Ｔｈｅｒ．２０１３；７：１０２７－１０３３．）。溶解速度は、懸濁液製剤中の粒子の表面積と正の相関がある。ＡＰＩ粒子の粒径の減少に伴い比表面積が増加するが、薬物の溶解速度も増加する。溶解速度の実質的な差は、特に溶解試験の初期期間中、粒径及び相対表面積の変動に応じて存在し得る。図５ａは、異なる粒径を有する（＋）－ＴＢＺを使用した、ＲＥＳＯＭＥＲ／ＮＭＰポリマー溶液製剤における（＋）－ＴＢＺ放出の調整を示した。３５／６５ｗ／ｗ比でＲＧ５０３／ＮＭＰ、及び６０／４０ｗ／ｗ比でＲＧ５０２／ＮＭＰで構成される両方のポリマー溶液ビヒクルについて、大きなＡＰＩ粒子（Ｄ（５０）：１００～１３０μｍ）は、ＤＬ％が３０％又は５０％であったにもかかわらず、実際には小粒子よりもインビトロ放出が遅いことを示した。
【0096】
しかし、予期せぬことに、（＋）－ＴＢＺ放出に対するそのような粒径効果は、特定の種類のポリマー溶液ビヒクルとの組み合わせでのみ特異的であり得ることがわかった。図５ａに示されるように、懸濁液製剤からの薬物放出は、（＋）－ＴＢＺ粒子からなり、ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰ溶液は、ＡＰＩ粒子サイズによって予期せぬ影響を受けなかった。同様に、（＋）－ＴＢＺの粒径は、ＤＬ％が６０％又は７０％であったにもかかわらず、５５／４５ｗ／ｗ比でＲＧ７５２Ｈ／ＮＭＰからなるポリマー溶液ビヒクルからの放出に対する限定的な効果を示した（図５ｂ）。これは、ＰＥＲＳＥＲＩＳ（登録商標）（同じカルボン酸末端官能基であるＰＬＧＨ８０２０を有するＰＬＧＡポリマーに懸濁したリスペリドンで構成される市販の製品）が、ＡＰＩ粒径の減少とともに放出速度の増加の傾向があることを明らかにしたため、更に驚くべきことであった（ＰＥＲＳＥＲＩＳ（登録商標）ＦＤＡ製品品質レビュー）。本出願におけるそのような独特の知見は、ポリマー製剤からの（＋）－ＴＢＺの持続放出が、関連する従来技術に開示されている製剤を単純に模倣することによって容易に達成されないことを示唆した。
【0097】
別のアプローチでは、ＡＰＩとして（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺで構成されるポリマー溶液ベースの懸濁液もまた、ＴＤの治療のためのＶＭＡＴ２阻害剤の長期持続放出について調査されていた。一実施形態では、５０／５０ｗ／ｗ比でのＲＧ５０３／ＮＭＰ及び４０％の薬物負荷での小（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ粒子で構成される製剤は、大（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ粒子であるが、正確に同一のポリマー溶液ビヒクル（図５ｃ）で構成される製剤と比較して、インビトロ放出が全体的により速いことを実証した。そのような傾向は、様々な溶媒比（すなわち、図５ｃの５０／５０及び４５／５５）でＲＧ５０３／ＮＭＰで構成されるポリマー溶液の間で真であり続けた。ＲＧ５０３Ｈ（酸末端処理されたＲＧ５０３）からの放出に対する（＋）－ＴＢＺの粒径効果の欠如と同様に、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺの粒径もまた、同じカルボン酸末端処理されたポリマー溶液ビヒクルからの放出速度への影響を示さなかったことに留意する価値がある。異なるポリマー溶液ビヒクルにおける薬物放出にＡＰＩ粒径がどのように影響し得るかについて、矛盾があることは明らかである。ＡＰＩ粒径は、ポリマー溶液ベースの製剤のいくつかで薬物放出プロファイルに対するその効果を実証したが、放出プロファイルは、明らかに、特定の種類のポリマー溶液ビヒクル、例えば、ＲＧ５０３Ｈ又はＲＧ７５２Ｈでは、ＡＰＩ粒径の変動には影響されなかった。再度、本出願におけるそのような独特の知見は、ポリマー製剤からのＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出は、他で開示されている他の関連する先行技術の製剤を単純に模倣又は再現することによって達成することができないことを示唆した。
【0098】
実施例７．インビトロ（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ放出に対する末端滅菌の効果
ガンマ線照射は、注射可能な製品並びに医療機器のための効果的な末端滅菌方法であり、通常、周囲条件下で実施することができ、高エネルギー貫通能力を有する（一般的に包装の変更は必要ない）。しかし、持続放出性、生分解性、ポリマー溶液ビヒクル系配合物の場合、ガンマ線照射は、そのような滅菌プロセス中にポリマー分解が起こり得るという事実のために大きなハードルであり得るか、又はポリマー安定性は、ガンマ線照射後に脆弱であり得る。更に、ポリマーＭｗは、水性媒体と接触すると異なるビヒクル粘度、様々な分解速度、及び固化速度をもたらす可能性があり、これは確かに製剤の放出プロファイルに劇的な影響を与えることが一般に認識されている。一般に、より高いＭｗポリマーは、一般的に、より低いＭｗポリマーよりも速く固化し、したがって、減少した初期バーストをもたらすと考えられている（Ｅｌｉａｚ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，５０（３），２０００）。加えて、５０／５０のラクチド対グリコリド比を有するＰＬＧＡポリマー／ＮＭＰで構成される製剤について、より小さいＭｗのＰＬＧＡポリマー（ＲＧ ５０２Ｈ）から作製したものは、より大きいＭｗのポリマー、ＲＧ ５０４Ｈから作製したものと比較して、より高い多孔性及びより大きな孔を有するインプラントを形成し、したがって、増加した初期バーストを示した（Ａｓａｎｅｈ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，９８（１），２００９）。一方、初期放出もまた、ビヒクル粘度の影響を受ける可能性があり、例えば、より小さいＭｗを有するポリマーで構成される製剤は、より大きいＭｗを有するポリマーで構成される製剤よりも粘性が低く、逆に、より速い溶媒消散を引き起こし、より高い初期バーストをもたらすであろう。より複雑な方法では、Ｍｗの差は、ポリマーが分解し、したがって薬物放出速度を変化させるのに必要な時間も決定する異なるポリマー鎖の長さを示す。全体として、ポリマーＭｗは、持続的な薬物放出に有意な影響を及ぼすことが認識されている。したがって、ポリマーＭｗを変化させる可能性のある原因は、薬物放出結果を変更すると予想される。したがって、一実施形態において、我々は、ＲＧ ５０３Ｈポリマーに対するガンマ滅菌の影響を評価した。ポリマーを最初に約３５ｋＧｙでガンマ線照射した後、（＋）－ＴＢＺ－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰ製剤にした。驚くべきことに、３５ｋＧｙでのガンマ線照射後、ポリマーＭｗが３０，６９２から２２，２７５（ＭＷ、表３）にほぼ３０％低下したが、３０％（＋）－ＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰ（３５／６５ｗ／ｗ比）で構成される製剤のインビトロ放出プロファイルに２８日までの変化は見られなかった（図６ａ）。この一貫した放出プロファイルは、Ｍｗの変化とは無関係であり、予想外に、ガンマ線照射がそのような製剤の潜在的な末端滅菌方法であり得ることが現れた。一方、別の実施形態では、いくつかの粘性（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマー懸濁液に対して、ガンマ滅菌（２５～３０ｋＧｙ）を行った。予想外に、５０／５０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成され、５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰで構成される照射後製剤からは、加速放出が見出されたが、ガンマ線照射後、６０／４０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０２Ｈ／ＮＭＰで構成される製剤の放出プロファイルはほとんど変化しなかった（図６ａ）。
ガンマ線照射は、注射可能な製品並びに医療機器のための効果的な末端滅菌方法であり、通常、周囲条件下で実施することができ、高エネルギー貫通能力を有する（一般的に包装の変更は必要ない）。しかし、持続放出性、生分解性、ポリマー溶液ビヒクル系配合物の場合、ガンマ線照射は、そのような滅菌プロセス中にポリマー分解が起こり得るという事実のために大きなハードルであり得るか、又はポリマー安定性は、ガンマ線照射後に脆弱であり得る。更に、ポリマーＭｗは、水性媒体と接触すると異なるビヒクル粘度、様々な分解速度、及び固化速度をもたらす可能性があり、これは確かに製剤の放出プロファイルに劇的な影響を与えることが一般に認識されている。一般に、より高いＭｗポリマーは、一般的に、より低いＭｗポリマーよりも速く固化し、したがって、減少した初期バーストをもたらすと考えられている（Ｅｌｉａｚ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，５０（３），２０００）。加えて、５０／５０のラクチド対グリコリド比を有するＰＬＧＡポリマー／ＮＭＰで構成される製剤について、より小さいＭｗのＰＬＧＡポリマー（ＲＧ ５０２Ｈ）から作製したものは、より大きいＭｗのポリマー、ＲＧ ５０４Ｈから作製したものと比較して、より高い多孔性及びより大きな孔を有するインプラントを形成し、したがって、増加した初期バーストを示した（Ａｓａｎｅｈ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，９８（１），２００９）。一方、初期放出もまた、ビヒクル粘度の影響を受ける可能性があり、例えば、より小さいＭｗを有するポリマーで構成される製剤は、より大きいＭｗを有するポリマーで構成される製剤よりも粘性が低く、逆に、より速い溶媒消散を引き起こし、より高い初期バーストをもたらすであろう。より複雑な方法では、Ｍｗの差は、ポリマーが分解し、したがって薬物放出速度を変化させるのに必要な時間も決定する異なるポリマー鎖の長さを示す。全体として、ポリマーＭｗは、持続的な薬物放出に有意な影響を及ぼすことが認識されている。したがって、ポリマーＭｗを変化させる可能性のある原因は、薬物放出結果を変更すると予想される。したがって、一実施形態において、我々は、ＲＧ ５０３Ｈポリマーに対するガンマ滅菌の影響を評価した。ポリマーを最初に約３５ｋＧｙでガンマ線照射した後、（＋）－ＴＢＺ－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰ製剤にした。驚くべきことに、３５ｋＧｙでのガンマ線照射後、ポリマーＭｗが３０，６９２から２２，２７５（ＭＷ、表３）にほぼ３０％低下したが、３０％（＋）－ＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰ（３５／６５ｗ／ｗ比）で構成される製剤のインビトロ放出プロファイルに２８日までの変化は見られなかった（図６ａ）。この一貫した放出プロファイルは、Ｍｗの変化とは無関係であり、予想外に、ガンマ線照射がそのような製剤の潜在的な末端滅菌方法であり得ることが現れた。一方、別の実施形態では、いくつかの粘性（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマー懸濁液に対して、ガンマ滅菌（２５～３０ｋＧｙ）を行った。予想外に、５０／５０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成され、５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰで構成される照射後製剤からは、加速放出が見出されたが、ガンマ線照射後、６０／４０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０２Ｈ／ＮＭＰで構成される製剤の放出プロファイルはほとんど変化しなかった（図６ａ）。
【0099】
あるいは、ポリマーに有害でない代替の滅菌アプローチも非常に求められている。例えば、０．２２μｍフィルターによる濾過は、末端滅菌のための別のオプションとなり得る。それにもかかわらず、持続的な方法で長期放出を提供するために、ＰＬＧＡ又はＰＬＡベースの製剤は、一般に、粘性溶液又は懸濁液として入ってきて、これにより濾過が非常に問題となる。一実施形態では、４０／６０ｗ／ｗ比でＲＧ５０２／ＮＭＰから作製した（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマー懸濁液を、２３％の薬物負荷で調製した。０．２２μｍのディスクフィルターを介したそのようなビヒクルの濾過は、容易かつ簡単であった。濾過されたポリマー溶液ビヒクル及び非濾過ポリマー溶液ビヒクルから作製された製剤のインビトロ放出プロファイルは同一であり（図６ｂ）、これは、粘度のより低いポリマー溶液ベースの製剤の末端滅菌プロセスとして０．２２μｍの濾過を使用することの実現可能性を実証した。
【0100】
本出願において、我々は、０．２２μｍの濾過又はガンマ線照射のいずれかが、ＴＤ治療のためのＶＭＡＴ２阻害剤を含有する提案されたポリマーデポ組成物の末端滅菌プロセスとして適用され得ることを実証した。
【0101】
実施例８．ラットにおける皮下投与（＋）－ＴＢＺ－ＲＧ５０３／ＮＭＰ３５／６５懸濁液のＰＫ
一実施例では、３５／６５ｗ／ｗポリマー比で（＋）－ＴＢＺ－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤のＰＫ試験を、Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットで行った。本出願の前の実施例で実証されているように、これらの製剤を高い初期バーストなしで持続的なインビトロ放出のために選択した。（＋）－ＴＢＺを含有するポリマー溶液又は懸濁液製剤を、前述のように調製した。一実施形態では、３５／６５ｗ／ｗ比で３０％（＋）－ＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰ、及び３５／６５ｗ／ｗ比で２０％（＋）－ＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤を、６０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでＳＤラット（Ｎ＝３）に皮下投与したが、それ以外は、１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでＴＢＺ又はＶＢＺ溶液を、参照として強制経口投与（Ｎ＝３）を介して投与した。（＋）－ＴＢＺを含有する製剤を投与した動物を、１日目に投与し、その後、投与後２、６、１２、２４時間及び４、７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６日に採血した。ＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を経口投与した動物については、投与後２、６、１２、２４、及び４８時間に採血を行った。各動物について、血漿（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ及び（＋）－ＴＢＺの両方の濃度を、ＬＣ－ＭＳを介して測定した。ＰＫ結果は、血漿（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ及び（＋）－ＴＢＺレベルの合計によって評価した。更に、２つの（＋）－ＴＢＺ－ＲＥＳＯＭＥＲ懸濁液の毎月の繰り返し投与、並びにＴＢＺ又はＶＢＺの毎日の繰り返し投与のＰＫシミュレーションを得て、図７として提示した。図７の下部の大図は、両方の（＋）－ＴＢＺ－ポリマー懸濁液が、小さいＰ／Ｔ比で、１ヶ月間、ＶＭＡＴ２阻害剤（（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ及び（＋）－ＴＢＺ）の持続放出を首尾よくもたらすことができたことを実証した。加えて、ＰＫ研究を通して、ポリマー製剤から放出されるＶＭＡＴ２阻害剤の血漿レベルは、１０～２００ｎｇ／ｍＬのウィンドウの間にあり、これは、ＶＢＺの経口剤形によって与えられる血漿レベルの範囲である。より重要なことに、本出願は、他の市販の医薬品と比較して、有意に少ない血漿レベルの変動でＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出を提供することができるポリマーデポ組成物を可能にした。ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標）（ＴＢＺ、（＋）及び（－）－ＴＢＺのラセミ体混合物）は、ＴＤの治療のために１日３回投与するように設計されており、Ｉｎｇｒｅｚｚａ（ＶＢＺ）は１日１回投与するように処方されている。ＴＢＺの１日３回の繰り返し投与及びＶＢＺの１日１回の繰り返し投与のＰＫシミュレーションを、３５／６５ｗ／ｗ比で３０％（＋）－ＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰ及び３５／６５ｗ／ｗ比で２０％（＋）－ＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤の毎月の繰り返し投与のＰＫシミュレーションと並べて比較した（図７の上部、小さい図）。ＴＢＺ又はＶＢＺの毎日の送達［ＶＢＺ群の場合、血漿レベルは、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺとしてのみ実証された］が、ＶＭＡＴ２阻害剤の明らかに大きな血漿変動を示したが、両方の（＋）－ＴＢＺ－ポリマーデポ組成物は、ＶＭＡＴ２阻害剤の実質的に小さいＰ／Ｔ比を可能にした。本出願に提示される製剤は、はるかに低い投薬頻度を必要とする持続放出性薬として使用される大きな可能性を疑いなく提示したが、効果的な治療範囲内でＶＭＡＴ２阻害剤を連続的に送達することができ、ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標）の現在利用可能な治療に伴う副作用を大幅に減少させるであろう。
一実施例では、３５／６５ｗ／ｗポリマー比で（＋）－ＴＢＺ－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤のＰＫ試験を、Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットで行った。本出願の前の実施例で実証されているように、これらの製剤を高い初期バーストなしで持続的なインビトロ放出のために選択した。（＋）－ＴＢＺを含有するポリマー溶液又は懸濁液製剤を、前述のように調製した。一実施形態では、３５／６５ｗ／ｗ比で３０％（＋）－ＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰ、及び３５／６５ｗ／ｗ比で２０％（＋）－ＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤を、６０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでＳＤラット（Ｎ＝３）に皮下投与したが、それ以外は、１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでＴＢＺ又はＶＢＺ溶液を、参照として強制経口投与（Ｎ＝３）を介して投与した。（＋）－ＴＢＺを含有する製剤を投与した動物を、１日目に投与し、その後、投与後２、６、１２、２４時間及び４、７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６日に採血した。ＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を経口投与した動物については、投与後２、６、１２、２４、及び４８時間に採血を行った。各動物について、血漿（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ及び（＋）－ＴＢＺの両方の濃度を、ＬＣ－ＭＳを介して測定した。ＰＫ結果は、血漿（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ及び（＋）－ＴＢＺレベルの合計によって評価した。更に、２つの（＋）－ＴＢＺ－ＲＥＳＯＭＥＲ懸濁液の毎月の繰り返し投与、並びにＴＢＺ又はＶＢＺの毎日の繰り返し投与のＰＫシミュレーションを得て、図７として提示した。図７の下部の大図は、両方の（＋）－ＴＢＺ－ポリマー懸濁液が、小さいＰ／Ｔ比で、１ヶ月間、ＶＭＡＴ２阻害剤（（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ及び（＋）－ＴＢＺ）の持続放出を首尾よくもたらすことができたことを実証した。加えて、ＰＫ研究を通して、ポリマー製剤から放出されるＶＭＡＴ２阻害剤の血漿レベルは、１０～２００ｎｇ／ｍＬのウィンドウの間にあり、これは、ＶＢＺの経口剤形によって与えられる血漿レベルの範囲である。より重要なことに、本出願は、他の市販の医薬品と比較して、有意に少ない血漿レベルの変動でＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出を提供することができるポリマーデポ組成物を可能にした。ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標）（ＴＢＺ、（＋）及び（－）－ＴＢＺのラセミ体混合物）は、ＴＤの治療のために１日３回投与するように設計されており、Ｉｎｇｒｅｚｚａ（ＶＢＺ）は１日１回投与するように処方されている。ＴＢＺの１日３回の繰り返し投与及びＶＢＺの１日１回の繰り返し投与のＰＫシミュレーションを、３５／６５ｗ／ｗ比で３０％（＋）－ＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰ及び３５／６５ｗ／ｗ比で２０％（＋）－ＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤の毎月の繰り返し投与のＰＫシミュレーションと並べて比較した（図７の上部、小さい図）。ＴＢＺ又はＶＢＺの毎日の送達［ＶＢＺ群の場合、血漿レベルは、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺとしてのみ実証された］が、ＶＭＡＴ２阻害剤の明らかに大きな血漿変動を示したが、両方の（＋）－ＴＢＺ－ポリマーデポ組成物は、ＶＭＡＴ２阻害剤の実質的に小さいＰ／Ｔ比を可能にした。本出願に提示される製剤は、はるかに低い投薬頻度を必要とする持続放出性薬として使用される大きな可能性を疑いなく提示したが、効果的な治療範囲内でＶＭＡＴ２阻害剤を連続的に送達することができ、ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標）の現在利用可能な治療に伴う副作用を大幅に減少させるであろう。
【0102】
実施例９．ラットにおける皮下投与（＋）－ＴＢＺ－ＲＧ７５２Ｈ／ＮＭＰ６５／３５及び（＋）－ＴＢＺ－ＲＧ５０３／ＮＭＰポリマーデポ組成物のＰＫ
ＶＭＡＴ２阻害剤の１ヶ月間の送達のためにＲＧ５０３で構成されるポリマー溶液ビヒクルを使用することの実現可能性を実証した後、我々は、２つのアプローチによって投薬期間を延長することについて更に探索した：１．ＲＧ５０３を他のＰＬＧＡポリマーに置き換えるが、ラクチド対グリコリド比が高い；及び２．同じＲＧ５０３ポリマーを使用しているが、ＮＭＰに対するポリマーの比が高くなっている。更に、大きな注射量を避けるために、我々はまた、より高いＤＬ％（＞４０％）を有する製剤を調査して、同じ低Ｐ／Ｔ比、ポリマー溶液製剤を介したＶＭＡＴ２阻害剤の持続的な送達を達成した。一実施形態では、６５／３５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ７５２Ｈ／ＮＭＰ、５５／４５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰ、及び４５／５５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤を、前述と同じ方法で調製した。５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでインサイチュ形成インプラントをＳＤラット（Ｎ＝３）に皮下投与し、続いて、投与後２、６、１２、２４時間及び４、７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６、及び６０日で血液採取を行った。参照として、１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルのＴＢＺ及びＶＢＺ懸濁液を、強制経口投与を介してＳＤラットに与え、続いて２、６、１２、２４及び４８時間で採血した（Ｎ＝３）。ＰＫ結果を二軸チャートとして図８に示す。実線軸は、経口投与されたＴＢＺ又はＶＢＺ［ＶＢＺ群の場合、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺとしてのみ実証された血漿レベル］懸濁液を投与された動物の血漿（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺレベルに経時的に対応する。これに対し斜線軸は、注射されたポリマー溶液製剤を皮下投与された動物の血漿（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺレベルに経時的に対応する。奨励することに、ＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を経口で投与された動物では大きな血漿レベルの変動が観察されたが、６５／３５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ７５２Ｈ／ＮＭＰ、５５／４５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰ、及び４５／５５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤を投与された動物では、有意に少ないＶＭＡＴ２阻害剤の血漿レベルの変動が観察された。本出願で実証したことは、ＶＭＡＴ２の血漿レベルを維持し、所望の範囲に保持することができることを条件として、そのような小さい血漿Ｐ／Ｔ比を有するそのような長期の皮下送達剤形には、用量滴定が不要であり得るため、ＴＤ治療のための貴重な利点であった。更に、５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰ（５５／４５ｗ／ｗ比）及び５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰ（４５／５５ｗ／ｗ比）で構成される２つの製剤の持続時間は、ラットの（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ血漿レベル（これは、経口経路を介してＶＢＺで投与されたラットの治療ウィンドウ内であった）を少なくとも１ヶ月半にわたって維持することができた。更に奨励することに、６５／３５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ７５２Ｈ／ＮＭＰで構成される製剤は、更に長い持続時間を首尾よく可能にした。（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺのラット血漿レベルは、６０日間のＰＫ試験で合わせて１０ｎｇ／ｍＬを超えており、Ｐ／Ｔ比は２未満であった（図８）。最後に、ＤＬ％を５０％ｗ／ｗに上昇させると、３０％以下のＤＬ％と比較して、注射量を有意に減少させることができる。それにもかかわらず、そのような知見は、本出願では、初期バースト放出なしで高薬物負荷ポリマー製剤を可能にしたため、独特であった。注射量の少ない長期的な持続放出性製剤は、間違いなく患者のコンプライアンスを向上させるであろう。
ＶＭＡＴ２阻害剤の１ヶ月間の送達のためにＲＧ５０３で構成されるポリマー溶液ビヒクルを使用することの実現可能性を実証した後、我々は、２つのアプローチによって投薬期間を延長することについて更に探索した：１．ＲＧ５０３を他のＰＬＧＡポリマーに置き換えるが、ラクチド対グリコリド比が高い；及び２．同じＲＧ５０３ポリマーを使用しているが、ＮＭＰに対するポリマーの比が高くなっている。更に、大きな注射量を避けるために、我々はまた、より高いＤＬ％（＞４０％）を有する製剤を調査して、同じ低Ｐ／Ｔ比、ポリマー溶液製剤を介したＶＭＡＴ２阻害剤の持続的な送達を達成した。一実施形態では、６５／３５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ７５２Ｈ／ＮＭＰ、５５／４５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰ、及び４５／５５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤を、前述と同じ方法で調製した。５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでインサイチュ形成インプラントをＳＤラット（Ｎ＝３）に皮下投与し、続いて、投与後２、６、１２、２４時間及び４、７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６、及び６０日で血液採取を行った。参照として、１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルのＴＢＺ及びＶＢＺ懸濁液を、強制経口投与を介してＳＤラットに与え、続いて２、６、１２、２４及び４８時間で採血した（Ｎ＝３）。ＰＫ結果を二軸チャートとして図８に示す。実線軸は、経口投与されたＴＢＺ又はＶＢＺ［ＶＢＺ群の場合、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺとしてのみ実証された血漿レベル］懸濁液を投与された動物の血漿（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺレベルに経時的に対応する。これに対し斜線軸は、注射されたポリマー溶液製剤を皮下投与された動物の血漿（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺレベルに経時的に対応する。奨励することに、ＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を経口で投与された動物では大きな血漿レベルの変動が観察されたが、６５／３５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ７５２Ｈ／ＮＭＰ、５５／４５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰ、及び４５／５５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰで構成される製剤を投与された動物では、有意に少ないＶＭＡＴ２阻害剤の血漿レベルの変動が観察された。本出願で実証したことは、ＶＭＡＴ２の血漿レベルを維持し、所望の範囲に保持することができることを条件として、そのような小さい血漿Ｐ／Ｔ比を有するそのような長期の皮下送達剤形には、用量滴定が不要であり得るため、ＴＤ治療のための貴重な利点であった。更に、５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰ（５５／４５ｗ／ｗ比）及び５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰ（４５／５５ｗ／ｗ比）で構成される２つの製剤の持続時間は、ラットの（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ血漿レベル（これは、経口経路を介してＶＢＺで投与されたラットの治療ウィンドウ内であった）を少なくとも１ヶ月半にわたって維持することができた。更に奨励することに、６５／３５ｗ／ｗ比で５０％（＋）－ＴＢＺ（Ｍ）－ＲＧ７５２Ｈ／ＮＭＰで構成される製剤は、更に長い持続時間を首尾よく可能にした。（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺのラット血漿レベルは、６０日間のＰＫ試験で合わせて１０ｎｇ／ｍＬを超えており、Ｐ／Ｔ比は２未満であった（図８）。最後に、ＤＬ％を５０％ｗ／ｗに上昇させると、３０％以下のＤＬ％と比較して、注射量を有意に減少させることができる。それにもかかわらず、そのような知見は、本出願では、初期バースト放出なしで高薬物負荷ポリマー製剤を可能にしたため、独特であった。注射量の少ない長期的な持続放出性製剤は、間違いなく患者のコンプライアンスを向上させるであろう。
【0103】
実施例１０．ラットにおける皮下投与（＋）－ＴＢＺ－ＰＬＧＡ８８－１２／ＮＭＰ製剤のＰＫ
ＰＬＡは、ＰＧＡと比較して分解に時間がそのような小さな乳酸単位で構成されたポリマーである。ＶＭＡＴ２阻害剤の１ヶ月間の送達のために、５０／５０の比率でＰＬＧＡで構成されるポリマー溶液ビヒクルを使用することの実現可能性を実証した後、我々は、ＰＬＧＡ５０／５０を、より高いラクチド対グリコリド比を有する他のＰＬＧＡポリマーに置き換えることによって、送達期間を延長することを更に探求した。一実施形態では、４０％（＋）－ＴＢＺ（Ｌ）からなる製剤を、前述と同じ方法で調製したが、ポリマー溶液ビヒクルとして６０／４０ｗ／ｗ比でＰＬＧＡ８８－１２／ＮＭＰを使用した。６０ｍｇ／ｋｇの用量レベルのインサイチュ形成インプラントをＳＤラット（Ｎ＝３）に皮下投与し、その後、投与後２、６、１２、２４時間及び４、７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６日に採血した。参照として、１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルのＴＢＺ及びＶＢＺ懸濁液を、強制経口投与を介してＳＤラットに与え、続いて２、６、１２、２４及び４８時間で採血した（Ｎ＝３）。ＰＫ結果を二軸チャートとして図９に示す。実線軸は、経口投与されたＴＢＺ又はＶＢＺ［ＶＢＺ群の場合、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺとしてのみ実証された血漿レベル］懸濁液を投与された動物の血漿（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺレベルに経時的に対応する。これに対し斜線軸は、注射された４０％（＋）－ＴＢＺ－ＰＬＧＡ８８－１２／ＮＭＰ６０／４０懸濁液を皮下投与された動物の血漿（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺレベルに経時的に対応する。驚くべきことに、ＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を経口投与された動物では大きな血漿レベルの変動が観察されたが、４０％（＋）－ＴＢＺ（Ｌ）－ＰＬＧＡ８８－１２／ＮＭＰ６０／４０懸濁液を投与された動物では、有意に少ないＶＭＡＴ２阻害剤の血漿レベルの変動が見出された。これは、ＶＭＡＴ２の血漿レベルを維持し、所望の範囲に保持することができることを条件に、低血漿Ｐ／Ｔ比を有するそのような長期の皮下送達剤形には、用量滴定が不要であり得るため、ＴＤ治療にとってかなりの利点である。更に、４０％（＋）－ＴＢＺ（Ｌ）－ＰＬＧＡ８８－１２／ＮＭＰ６０／４０懸濁液の持続時間は、少なくとも２ヶ月間、（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－α－ＤＨＴＢＺを放出することができた。
ＰＬＡは、ＰＧＡと比較して分解に時間がそのような小さな乳酸単位で構成されたポリマーである。ＶＭＡＴ２阻害剤の１ヶ月間の送達のために、５０／５０の比率でＰＬＧＡで構成されるポリマー溶液ビヒクルを使用することの実現可能性を実証した後、我々は、ＰＬＧＡ５０／５０を、より高いラクチド対グリコリド比を有する他のＰＬＧＡポリマーに置き換えることによって、送達期間を延長することを更に探求した。一実施形態では、４０％（＋）－ＴＢＺ（Ｌ）からなる製剤を、前述と同じ方法で調製したが、ポリマー溶液ビヒクルとして６０／４０ｗ／ｗ比でＰＬＧＡ８８－１２／ＮＭＰを使用した。６０ｍｇ／ｋｇの用量レベルのインサイチュ形成インプラントをＳＤラット（Ｎ＝３）に皮下投与し、その後、投与後２、６、１２、２４時間及び４、７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６日に採血した。参照として、１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルのＴＢＺ及びＶＢＺ懸濁液を、強制経口投与を介してＳＤラットに与え、続いて２、６、１２、２４及び４８時間で採血した（Ｎ＝３）。ＰＫ結果を二軸チャートとして図９に示す。実線軸は、経口投与されたＴＢＺ又はＶＢＺ［ＶＢＺ群の場合、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺとしてのみ実証された血漿レベル］懸濁液を投与された動物の血漿（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺレベルに経時的に対応する。これに対し斜線軸は、注射された４０％（＋）－ＴＢＺ－ＰＬＧＡ８８－１２／ＮＭＰ６０／４０懸濁液を皮下投与された動物の血漿（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺレベルに経時的に対応する。驚くべきことに、ＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を経口投与された動物では大きな血漿レベルの変動が観察されたが、４０％（＋）－ＴＢＺ（Ｌ）－ＰＬＧＡ８８－１２／ＮＭＰ６０／４０懸濁液を投与された動物では、有意に少ないＶＭＡＴ２阻害剤の血漿レベルの変動が見出された。これは、ＶＭＡＴ２の血漿レベルを維持し、所望の範囲に保持することができることを条件に、低血漿Ｐ／Ｔ比を有するそのような長期の皮下送達剤形には、用量滴定が不要であり得るため、ＴＤ治療にとってかなりの利点である。更に、４０％（＋）－ＴＢＺ（Ｌ）－ＰＬＧＡ８８－１２／ＮＭＰ６０／４０懸濁液の持続時間は、少なくとも２ヶ月間、（＋）－ＴＢＺ及び（＋）－α－ＤＨＴＢＺを放出することができた。
【0104】
実施例１１．ラットにおける皮下投与のＰＫ（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ＰＬＧＡ５０－５０／ＮＭＰ製剤
インビボ動物試験は、６０／４０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０２Ｈ／ＮＭＰ、５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰ、及び５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰからなる製剤を使用して、ＳＤラットを用いて実施した。本出願の前の実施例で実証されているように、全ての懸濁液を、高い初期バーストなしで持続的なインビトロ放出のために選択した。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物を前述のように調製した。一実施形態において、６０／４０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０２Ｈ／ＮＭＰ、５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰ、及び５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰで構成される製剤を、５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでＳＤラット（Ｎ＝３）に皮下投与したが、それ以外は、１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を、参照として強制経口投与（Ｎ＝３）を介して投与した。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ポリマー懸濁液を投与した動物に１日目に投与し、その後、投与後２、６、１２、２４時間及び４、７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６日に採血した。ＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を経口投与した動物については、投与後２、６、１２、２４、及び４８時間に採血を行った。各動物について、血漿（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ濃度をＬＣ－ＭＳを介して測定し、３５日間のＰＫプロファイルを評価した。更に、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ＲＥＳＯＭＥＲ懸濁液の隔週反復投与、並びにＴＢＺ又はＶＢＺの毎日の反復投与のＰＫシミュレーションを取得し、図１０として提示した。図１０の下部の大きな図は、全ての（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマー懸濁液が、低Ｐ／Ｔ比で、２週間にわたってＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出を首尾よくもたらすことができたことを実証した。加えて、ＰＫ研究を通して、ポリマー製剤から放出されるＶＭＡＴ２阻害剤の血漿レベルは、１０～２００ｎｇ／ｍＬのウィンドウの間にあり、これは、ＶＢＺの経口剤形によって与えられる血漿レベルの範囲内である。より重要なことに、本出願は、他の市販の医薬品と比較して、有意に少ない血漿レベルの変動でＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出を提供することができるポリマーデポ組成物を可能にした。ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標）（ＴＢＺ、（＋）及び（－）－ＴＢＺのラセミ体混合物）は、遅発性ジスキネジア（ＴＤ）の治療のために１日３回投与するように設計されており、Ｉｎｇｒｅｚｚａ（ＶＢＺ）は１日１回投与するように処方されている。ＴＢＺの１日３回の反復投与及びＶＢＺの１日１回の反復投与のＰＫシミュレーションを、６０／４０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０２Ｈ／ＮＭＰ、５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰ、及び５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰで構成される製剤の隔週の繰り返し投与のＰＫシミュレーションと並べて比較した（図１０の上部、小さい図）。ＴＢＺ又はＶＢＺの毎日の送達は、ＶＭＡＴ２阻害剤の大きな血漿変動を示したが、全ての（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ポリマー溶液製剤は、ＶＭＡＴ２阻害剤の実質的に小さいＰ／Ｔ比を可能にした。特に、インビトロ試験で見出されたものと一致して、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ粒径は実際にインビトロラットＰＫプロファイルに効果を示さなかった。この知見は、ＡＰＩ粒径範囲を狭い範囲に設定する必要がないかもしれないという点で有利であり、これは製品開発の観点から有益であろう。全体として、本出願に提示される（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ製剤は、はるかに低い投薬頻度を必要とする持続放出性薬として使用される大きな可能性を疑いなくもたらしたが、効果的な治療範囲内でＶＭＡＴ２阻害剤を継続的に送達することができ、ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標）の現在利用可能な治療に伴う副作用を大幅に低減する。
インビボ動物試験は、６０／４０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０２Ｈ／ＮＭＰ、５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰ、及び５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３／ＮＭＰからなる製剤を使用して、ＳＤラットを用いて実施した。本出願の前の実施例で実証されているように、全ての懸濁液を、高い初期バーストなしで持続的なインビトロ放出のために選択した。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物を前述のように調製した。一実施形態において、６０／４０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０２Ｈ／ＮＭＰ、５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰ、及び５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰで構成される製剤を、５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでＳＤラット（Ｎ＝３）に皮下投与したが、それ以外は、１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を、参照として強制経口投与（Ｎ＝３）を介して投与した。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ポリマー懸濁液を投与した動物に１日目に投与し、その後、投与後２、６、１２、２４時間及び４、７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６日に採血した。ＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を経口投与した動物については、投与後２、６、１２、２４、及び４８時間に採血を行った。各動物について、血漿（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ濃度をＬＣ－ＭＳを介して測定し、３５日間のＰＫプロファイルを評価した。更に、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ＲＥＳＯＭＥＲ懸濁液の隔週反復投与、並びにＴＢＺ又はＶＢＺの毎日の反復投与のＰＫシミュレーションを取得し、図１０として提示した。図１０の下部の大きな図は、全ての（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマー懸濁液が、低Ｐ／Ｔ比で、２週間にわたってＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出を首尾よくもたらすことができたことを実証した。加えて、ＰＫ研究を通して、ポリマー製剤から放出されるＶＭＡＴ２阻害剤の血漿レベルは、１０～２００ｎｇ／ｍＬのウィンドウの間にあり、これは、ＶＢＺの経口剤形によって与えられる血漿レベルの範囲内である。より重要なことに、本出願は、他の市販の医薬品と比較して、有意に少ない血漿レベルの変動でＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出を提供することができるポリマーデポ組成物を可能にした。ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標）（ＴＢＺ、（＋）及び（－）－ＴＢＺのラセミ体混合物）は、遅発性ジスキネジア（ＴＤ）の治療のために１日３回投与するように設計されており、Ｉｎｇｒｅｚｚａ（ＶＢＺ）は１日１回投与するように処方されている。ＴＢＺの１日３回の反復投与及びＶＢＺの１日１回の反復投与のＰＫシミュレーションを、６０／４０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０２Ｈ／ＮＭＰ、５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰ、及び５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ５０３Ｈ／ＮＭＰで構成される製剤の隔週の繰り返し投与のＰＫシミュレーションと並べて比較した（図１０の上部、小さい図）。ＴＢＺ又はＶＢＺの毎日の送達は、ＶＭＡＴ２阻害剤の大きな血漿変動を示したが、全ての（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ポリマー溶液製剤は、ＶＭＡＴ２阻害剤の実質的に小さいＰ／Ｔ比を可能にした。特に、インビトロ試験で見出されたものと一致して、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ粒径は実際にインビトロラットＰＫプロファイルに効果を示さなかった。この知見は、ＡＰＩ粒径範囲を狭い範囲に設定する必要がないかもしれないという点で有利であり、これは製品開発の観点から有益であろう。全体として、本出願に提示される（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ製剤は、はるかに低い投薬頻度を必要とする持続放出性薬として使用される大きな可能性を疑いなくもたらしたが、効果的な治療範囲内でＶＭＡＴ２阻害剤を継続的に送達することができ、ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標）の現在利用可能な治療に伴う副作用を大幅に低減する。
【0105】
実施例１２．ラットにおける皮下投与（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ＰＬＧＡ５０５０／ＮＭＰ製剤のＰＫ
インビボ動物試験は、４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ ５０３／ＮＭＰ（５０／５０ｗ／ｗ比）、４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ ５０３／ＮＭＰ（５０／５０ｗ／ｗ比）、４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ ５０２Ｈ／ＮＭＰ（６０／４０ｗ／ｗ比）、５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ ５０３Ｈ／ＮＭＰ（５０／５０ｗ／ｗ比）、及び５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ ５０３Ｈ／ＮＭＰ（５０／５０ｗ／ｗ比）で構成される製剤を使用して、ＳＤラットを用いて実施した。本出願の前の実施例で実証されているように、全ての懸濁液を、高い初期バーストなしで持続的なインビトロ放出のために選択した。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物を前述のように調製した。上記の５つの製剤全てを５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでＳＤラット（Ｎ＝３）に皮下投与し、それ以外は、１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を、参照として強制経口投与（Ｎ＝３）を介して投与した。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ポリマー懸濁液を投与した動物に１日目に投与し、その後、投与後２、６、１２、２４時間及び４、７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６日に採血した。ＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を経口投与した動物については、投与後２、６、１２、２４、及び４８時間に採血を行った。各動物について、血漿（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ濃度をＬＣ－ＭＳを介して測定し、３５日間のＰＫプロファイルを評価した。更に、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ＲＥＳＯＭＥＲ懸濁液の隔週反復投与、並びにＴＢＺ又はＶＢＺの毎日の反復投与のＰＫシミュレーションを取得し、図１１として提示した。図１１の下部の大きな図は、全ての（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマー懸濁液が、低Ｐ／Ｔ比であるが、２週間にわたってＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出を首尾よくもたらすことができたことを実証した。加えて、ＰＫ試験を通して、ポリマー製剤から放出されるＶＭＡＴ２阻害剤の血漿レベルは、１０～２００ｎｇ／ｍＬのウィンドウの間にあり、これは、ＶＢＺの経口剤形によって与えられる血漿レベルの範囲内である。更に重要なことに、本出願は、他の市販の医薬品と比較して、有意に少ない血漿レベルの変動でＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出を提供することができるポリマーデポ組成物を再び可能にした。ＴＢＺの１日３回の反復投与及びＶＢＺの１日１回の反復投与のＰＫシミュレーションを、５０／５０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ ５０３／ＮＭＰ、５０／５０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ ５０３／ＮＭＰ、６０／４０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ ５０２Ｈ／ＮＭＰ、５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ ５０３Ｈ／ＮＭＰ、及び５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ ５０３Ｈ／ＮＭＰで構成される製剤の隔週の繰り返し投与のＰＫシミュレーションと並べて比較した（図１１の上部、小さい図）。ＴＢＺ又はＶＢＺの毎日の送達は、ＶＭＡＴ２阻害剤の大きな血漿変動を示したが、全ての（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ポリマー溶液製剤は、ＶＭＡＴ２阻害剤の有意に減少したＰ／Ｔ比を可能にした。注目すべきことに、本出願に提示される（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ製剤は、はるかに低い投薬頻度を必要とする持続放出性薬として使用される大きな可能性を疑いなく提示したが、効果的な治療範囲内でＶＭＡＴ２阻害剤を連続的に送達することができ、ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標）の現在利用可能な治療に伴う副作用を大幅に減少させるであろう。
インビボ動物試験は、４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ ５０３／ＮＭＰ（５０／５０ｗ／ｗ比）、４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ ５０３／ＮＭＰ（５０／５０ｗ／ｗ比）、４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ ５０２Ｈ／ＮＭＰ（６０／４０ｗ／ｗ比）、５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ ５０３Ｈ／ＮＭＰ（５０／５０ｗ／ｗ比）、及び５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ ５０３Ｈ／ＮＭＰ（５０／５０ｗ／ｗ比）で構成される製剤を使用して、ＳＤラットを用いて実施した。本出願の前の実施例で実証されているように、全ての懸濁液を、高い初期バーストなしで持続的なインビトロ放出のために選択した。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマーデポ組成物を前述のように調製した。上記の５つの製剤全てを５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでＳＤラット（Ｎ＝３）に皮下投与し、それ以外は、１０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を、参照として強制経口投与（Ｎ＝３）を介して投与した。（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ポリマー懸濁液を投与した動物に１日目に投与し、その後、投与後２、６、１２、２４時間及び４、７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６日に採血した。ＴＢＺ又はＶＢＺ懸濁液を経口投与した動物については、投与後２、６、１２、２４、及び４８時間に採血を行った。各動物について、血漿（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ濃度をＬＣ－ＭＳを介して測定し、３５日間のＰＫプロファイルを評価した。更に、（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ＲＥＳＯＭＥＲ懸濁液の隔週反復投与、並びにＴＢＺ又はＶＢＺの毎日の反復投与のＰＫシミュレーションを取得し、図１１として提示した。図１１の下部の大きな図は、全ての（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺポリマー懸濁液が、低Ｐ／Ｔ比であるが、２週間にわたってＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出を首尾よくもたらすことができたことを実証した。加えて、ＰＫ試験を通して、ポリマー製剤から放出されるＶＭＡＴ２阻害剤の血漿レベルは、１０～２００ｎｇ／ｍＬのウィンドウの間にあり、これは、ＶＢＺの経口剤形によって与えられる血漿レベルの範囲内である。更に重要なことに、本出願は、他の市販の医薬品と比較して、有意に少ない血漿レベルの変動でＶＭＡＴ２阻害剤の持続放出を提供することができるポリマーデポ組成物を再び可能にした。ＴＢＺの１日３回の反復投与及びＶＢＺの１日１回の反復投与のＰＫシミュレーションを、５０／５０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ ５０３／ＮＭＰ、５０／５０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ ５０３／ＮＭＰ、６０／４０ｗ／ｗ比で４０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ ５０２Ｈ／ＮＭＰ、５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｌ）－ＲＧ ５０３Ｈ／ＮＭＰ、及び５０／５０ｗ／ｗ比で５０％（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ（Ｓ）－ＲＧ ５０３Ｈ／ＮＭＰで構成される製剤の隔週の繰り返し投与のＰＫシミュレーションと並べて比較した（図１１の上部、小さい図）。ＴＢＺ又はＶＢＺの毎日の送達は、ＶＭＡＴ２阻害剤の大きな血漿変動を示したが、全ての（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ－ポリマー溶液製剤は、ＶＭＡＴ２阻害剤の有意に減少したＰ／Ｔ比を可能にした。注目すべきことに、本出願に提示される（＋）－（α）－ＤＨＴＢＺ製剤は、はるかに低い投薬頻度を必要とする持続放出性薬として使用される大きな可能性を疑いなく提示したが、効果的な治療範囲内でＶＭＡＴ２阻害剤を連続的に送達することができ、ＸＥＮＡＺＩＮＥ（登録商標）の現在利用可能な治療に伴う副作用を大幅に減少させるであろう。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4-1】
【図4-2】
【図5-1】
【図5-2】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【国際調査報告】