特表 2024-534080 誘導性ＩＬ－２及びＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１の併用療法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-09-18

(54)【発明の名称】誘導性ＩＬ－２及びＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１の併用療法

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20240910BHJP

   A61K 38/20 20060101ALI20240910BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240910BHJP

   A61P 37/04 20060101ALI20240910BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240910BHJP

   C07K 14/55 20060101ALI20240910BHJP

   C07K 16/28 20060101ALI20240910BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 T

A61K38/20 ZNA

A61P35/00

A61P37/04

A61P43/00 121

C07K14/55

C07K16/28

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024510252

(86)(22)【出願日】2022-08-16

(85)【翻訳文提出日】2024-03-21

(86)【国際出願番号】 US2022040485

(87)【国際公開番号】W WO2023023070

(87)【国際公開日】2023-02-23

(31)【優先権主張番号】63/233,966

(32)【優先日】2021-08-17

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】520446126

【氏名又は名称】ウェアウルフ セラピューティクス， インコーポレイテッド

(71)【出願人】

【識別番号】524061910

【氏名又は名称】エムエスディー インターナショナル ビジネス ゲーエムベーハー

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】ウィンストン， ウィリアム

(72)【発明者】

【氏名】ヒックリン， ダニエル

(72)【発明者】

【氏名】サルメロン－ガルシア， ホセ アンドレス

(72)【発明者】

【氏名】サイデル－デュガン， シンシア

(72)【発明者】

【氏名】ブロドキン， ヘザー

(72)【発明者】

【氏名】アイザックス， ランディ

【テーマコード（参考）】

4C084

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C084AA02

4C084BA01

4C084BA08

4C084BA22

4C084BA23

4C084BA41

4C084CA53

4C084DA14

4C084MA02

4C084MA17

4C084MA44

4C084MA66

4C084NA05

4C084NA06

4C084NA15

4C084ZB091

4C084ZB092

4C084ZB261

4C084ZB262

4C084ZC751

4C085AA13

4C085AA14

4C085BB11

4C085DD62

4C085EE01

4C085GG02

4H045AA10

4H045AA11

4H045AA30

4H045BA09

4H045DA04

4H045DA76

4H045EA20

(57)【要約】

本開示は、ペムブロリズマブ（抗ＰＤ－１抗体）と併用した誘導性ＩＬ－２プロドラッグを含む併用療法を使用してがんを治療するための方法及び組成物に関する。この方法は概して、有効量の誘導性ＩＬ－２プロドラッグ、及び抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、投与を必要とする被験者に投与することを含む。好ましい抗ＰＤ－１抗体はペムブロリズマブである。誘導性ＩＬ－２プロドラッグとは、化合物１、化合物２、化合物３または化合物４のことであってもよい。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

必要とする被験者に併用療法を投与することを含む、がんの治療方法であって、前記併用療法は、化合物１（配列番号１／配列番号５）、化合物２（配列番号２／配列番号５）、化合物３（配列番号３／配列番号５）、化合物４（配列番号４／配列番号５）または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体、及び抗ＰＤ－１抗体またはそれらの抗原結合断片を含み、前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含む、前記治療方法。

【請求項2】

ａ）前記化合物１は、配列番号１の第１ポリペプチド鎖、及び配列番号５の第２ポリペプチド鎖を含み、前記化合物１の前記アミノ酸配列変異体は、配列番号１に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第１ポリペプチド鎖と、配列番号５に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第２ポリペプチド鎖とを含み、ｂ）前記化合物２は、配列番号２の第１ポリペプチド鎖、及び配列番号５の第２ポリペプチド鎖を含み、前記化合物２の前記アミノ酸配列変異体は、配列番号２に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第１ポリペプチド鎖と、配列番号５に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第２ポリペプチド鎖とを含み、ｃ）前記化合物３は、配列番号３の第１ポリペプチド鎖、及び配列番号５の第２ポリペプチド鎖を含み、前記化合物３の前記アミノ酸配列変異体は、配列番号３に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第１ポリペプチド鎖と、配列番号５に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第２ポリペプチド鎖とを含み、ｄ）前記化合物４は、配列番号１の第１ポリペプチド鎖、及び配列番号４の第２ポリペプチド鎖を含み、前記化合物４の前記アミノ酸配列変異体は、配列番号４に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第１ポリペプチド鎖と、配列番号５に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第２ポリペプチド鎖とを含む、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含む、請求項１または２に記載の方法。

【請求項4】

重鎖及び軽鎖を含む前記抗ＰＤ－１抗体を含み、前記重鎖及び前記軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５の前記アミノ酸配列を含む、請求項１または２に記載の方法。

【請求項5】

ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体である前記抗ＰＤ－１抗体を含む、請求項１または２に記載の方法。

【請求項6】

ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）である前記抗ＰＤ－１抗体を含む、請求項１または２に記載の方法。

【請求項7】

有効量の前記併用療法を前記被験者に投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

前記化合物１、前記化合物２、前記化合物３、前記化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体を、前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片と同時に投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項9】

前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、前記化合物１、前記化合物２、前記化合物３、前記化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体の前記投与の前に投与する、請求項８に記載の方法。

【請求項10】

前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、前記化合物１、前記化合物２、前記化合物３、前記化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体の前記投与の後に投与する、請求項８に記載の方法。

【請求項11】

前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を投与し、次いで前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片の前記投与の完了から約３０分後に前記化合物１、前記化合物２、前記化合物３、前記化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体を投与する、請求項８に記載の方法。

【請求項12】

前記化合物１、前記化合物２、前記化合物３、前記化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体を投与し、次いで前記化合物１、前記化合物２、前記化合物３、前記化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体の前記投与の完了から約３０分後に前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を投与する、請求項８に記載の方法。

【請求項13】

前記化合物１、前記化合物２、前記化合物３、前記化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体及び前記抗ＰＤ－１抗体、またはその抗原結合断片を、静脈内投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項14】

前記投与は静脈内注入によるものである、請求項１３に記載の方法。

【請求項15】

前記投与は、経口、非経口、静脈内、関節内、腹腔内、筋肉内、皮下、腔内、経皮、肝内、頭蓋内、噴霧／吸入、気管支鏡検査による設置による、または腫瘍内の投与である、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項16】

約１００ｍｇ～約６００ｍｇの前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を約３～６週間ごとに投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項17】

２００ｍｇの前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を約３週間ごとに投与する、請求項１６に記載の方法。

【請求項18】

４００ｍｇの前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を約６週間ごとに投与する、請求項１６に記載の方法。

【請求項19】

約１ｍｇ～約５００ｍｇの前記化合物１、前記化合物２、前記化合物３、前記化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体を２週間ごとに投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項20】

約１ｍｇ～約２４０ｍｇの前記化合物１、前記化合物２、前記化合物３、前記化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体を２週間ごとに投与する、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

約１ｍｇ、約３ｍｇ、約１０ｍｇ、約３０ｍｇ、約６０ｍｇ、約１２０ｍｇもしくは約２４０ｍｇの化合物１、化合物２、化合物３、化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体を２週間ごとに投与する、請求項１９に記載の方法。

【請求項22】

前記併用療法が第１選択療法として投与される、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項23】

前記被験者は、以前の治療または進行中の治療に対して完全奏効を達成していない、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項24】

前記以前の治療または進行中の治療には、チェックポイント阻害剤による治療が含まれる、請求項２３に記載の方法。

【請求項25】

前記チェックポイント阻害剤とは、抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体のことである、請求項２４に記載の方法。

【請求項26】

前記チェックポイント阻害剤とは、抗ＣＴＬＡ－４抗体のことである、請求項２４に記載の方法。

【請求項27】

前記がんは転移性である、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項28】

前記がんは固形腫瘍を含む、請求項１～２７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項29】

前記がんとは、肉腫または癌腫のことである、請求項１～２７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項30】

前記がんとは、副腎皮質癌腫、肛門癌、虫垂癌、星細胞腫、基底細胞癌腫、脳腫瘍、胆管癌、膀胱癌、骨癌、乳癌、気管支腫瘍、原発不明癌腫、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、管癌腫、胎児性腫瘍、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、鼻腔神経芽細胞腫、線維性組織球腫、ユーイング肉腫、眼癌、細菌細胞腫瘍、胆嚢癌、胃癌、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍、妊娠性絨毛膜疾患、神経膠腫、頭頸部癌、肝細胞癌、組織球増殖症、下咽頭癌、眼球内黒色腫、島細胞腫瘍、カポジ肉腫、腎臓癌、ランゲルハンス病細胞組織球症、喉頭癌、口唇及び口腔癌、肝臓癌、上皮内小葉癌腫、肺癌、マクログロブリン血症、悪性線維性組織球腫、黒色腫、メルケル細胞癌腫、中皮腫、原発不明の転移性の扁平上皮頚部癌、ＮＵＴ遺伝子に関連する正中線上の癌腫、口腔癌、多発性内分泌腫瘍症候群、菌状息肉症、骨髄異形成症候群、骨髄異形成／骨髄増殖性新生物、鼻腔及び副鼻腔癌、鼻咽頭癌、神経芽腫、非小細胞肺癌、中咽頭癌、骨肉腫、卵巣癌、膵臓癌、乳頭腫症、傍神経節腫、副甲状腺癌、陰茎癌、咽頭癌、褐色細胞腫、下垂体腫瘍、胸膜肺芽腫、前立腺癌、直腸癌、腎細胞癌、腎盂及び尿管癌、網膜芽細胞腫、ラブドイド腫瘍、唾液腺癌、セザリー症候群、皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟部組織肉腫、脊髄腫瘍、胃の癌、Ｔ細胞リンパ腫、奇形腫瘍、精巣癌、咽喉癌、胸腺腫及び胸腺癌腫、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、膣癌、外陰部癌、ならびにウィルムス腫瘍のことである、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項31】

前記がんとは、結腸癌、肺癌、黒色腫、腎細胞癌腫、または乳癌のことである、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項32】

前記がんとは、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、古典的ホジキンリンパ腫（ｃＨＬ）、縦隔原発大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、尿路上皮癌腫、マイクロサテライト不安定性が高いまたはミスマッチ修復機構欠損のある癌、マイクロサテライト不安定性が高いまたはミスマッチ修復機構欠損のある結腸直腸癌、胃癌、食道癌、子宮頸癌、肝細胞癌腫（ＨＣＣ）、メルケル細胞癌腫（ＭＣＣ）、腎臓細胞癌腫（ＲＣＣ）、子宮内膜癌腫、腫瘍変異負荷の高い癌、皮膚扁平上皮癌腫（ｃＳＣＣ）、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）、または食道癌腫のことである、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項33】

前記がんとは、転移性腎明細胞癌腫または転移性皮膚悪性黒色腫のことである、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項34】

前記がんとは、非小細胞肺癌のことであり、前記方法は、前記被験者にペメトレキセド及びプラチナ化学療法剤を投与することをさらに含む、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項35】

前記がんとは、非小細胞肺癌のことであり、前記方法は、前記被験者にパクリタキセルを投与することをさらに含む、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項36】

前記がんとは、非小細胞肺癌のことであり、前記方法は、前記被験者にタンパク質結合パクリタキセルを投与することをさらに含む、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項37】

前記がんとは、頭頸部扁平上皮癌のことであり、前記方法は、前記被験者にフルオロウラシルを投与することをさらに含む、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項38】

前記がんとは、食道癌腫または胃食道接合部癌腫のことであり、前記方法は、前記被験者にプラチナベース及びフルオロピリミジンベースの化学療法剤を投与することをさらに含む、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項39】

前記がんとは、腎細胞癌腫のことであり、前記方法は、前記被験者にアキシチニブを投与することをさらに含む、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項40】

前記がんとは、子宮内膜癌腫のことであり、前記方法は、前記被験者にレンバチニブを投与することをさらに含む、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項41】

前記がんとは、トリプルネガティブ乳癌のことであり、前記方法は、前記被験者に化学療法剤を投与することをさらに含む、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項42】

請求項１～４１のいずれか１項に記載の方法に従って、治療を必要とする被験者のがんを治療するために抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片と併用して使用するための前記化合物１、前記化合物２、前記化合物３、前記化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体を含む医薬組成物であって、前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含む、前記医薬組成物。

【請求項43】

請求項１～４１のいずれか１項に記載の方法に従って、治療を必要とする被験者のがんを治療するために前記化合物１、前記化合物２、前記化合物３、前記化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体と併用して使用するための抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を含む医薬組成物であって、前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含む、前記医薬組成物。

【請求項44】

化合物１、化合物２、化合物３、化合物４またはその前述のいずれかのアミノ酸配列変異体と、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片と、適切な担体と、を含む医薬組成物であって、前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含む、前記医薬組成物。

【請求項45】

ａ）前記化合物１は、配列番号１の第１ポリペプチド鎖、及び配列番号５の第２ポリペプチド鎖を含み、前記化合物１の前記アミノ酸配列変異体は、配列番号１に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第１ポリペプチド鎖と、配列番号５に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第２ポリペプチド鎖とを含み、ｂ）前記化合物２は、配列番号２の第１ポリペプチド鎖、及び配列番号５の第２ポリペプチド鎖を含み、前記化合物２の前記アミノ酸配列変異体は、配列番号２に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第１ポリペプチド鎖と、配列番号５に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第２ポリペプチド鎖とを含み、ｃ）前記化合物３は、配列番号３の第１ポリペプチド鎖、及び配列番号５の第２ポリペプチド鎖を含み、前記化合物３の前記アミノ酸配列変異体は、配列番号３に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第１ポリペプチド鎖と、配列番号５に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第２ポリペプチド鎖とを含み、ｄ）前記化合物４は、配列番号１の第１ポリペプチド鎖、及び配列番号４の第２ポリペプチド鎖を含み、前記化合物４の前記アミノ酸配列変異体は、配列番号４に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第１ポリペプチド鎖と、配列番号５に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第２ポリペプチド鎖とを含む、請求項４４に記載の医薬組成物。

【請求項46】

前記抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含む、請求項４４または４５に記載の医薬組成物。

【請求項47】

重鎖及び軽鎖を含む前記抗ＰＤ－１抗体を含み、前記重鎖及び前記軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５の前記アミノ酸配列を含む、請求項４４または４５に記載の医薬組成物。

【請求項48】

ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体である前記抗ＰＤ－１抗体を含む、請求項４４または４５に記載の医薬組成物。

【請求項49】

ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）である前記抗ＰＤ－１抗体を含む、請求項４４または４５に記載の医薬組成物。

【請求項50】

前記医薬組成物とは、静脈内投与用の液体組成物のことである、請求項４４～４９のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項51】

前記医薬組成物とは、凍結乾燥組成物のことである、請求項４４～４９のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項52】

前記凍結乾燥組成物は、注射用の水または生理食塩水を使用して再構成するためのものであり、再構成された製剤は静脈内投与に好適である、請求項５１に記載の医薬組成物。

【請求項53】

がんの治療で使用するための、化合物１、化合物２、化合物３、化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体、ならびに（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含む抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本明細書には、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片、及び誘導性ＩＬ－２プロドラッグの併用を投与することを含む、がんの治療に有用な治療法及びがんの治療方法が開示される。

【0002】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年８月１７日に出願された米国仮出願第６３／２３３，９６６号の利益を主張するものであり、その開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【背景技術】

【0003】

インターロイキン－２（ＩＬ－２）は強力な免疫賦活性作用を有しており、マウスモデルの腫瘍の根絶に効果的である可能性があり、組み換え型ＩＬ－２療法（アルデスロイキン）が転移性腎細胞癌腫及び転移性黒色腫の治療としてアメリカ食品医薬品局によって承認された。アルデスロイキンは、転移性黒色腫及び腎癌の治療を受けた患者の約１０％でがんの完全な退縮を実証した。残念なことに、ｒＩＬ－２は、末梢で高親和性及び中親和性のＩＬ－２受容体（それぞれ、ＩＬ－２Ｒα／β／γ及びＩＬ－２Ｒβ／γ）に結合するため、弱い薬物動態（ＰＫ）特性、及び用量制限的な全身毒性を有している。高用量のＩＬ－２投与の結果として重篤な低血圧及び血管漏出症候群（ＶＬＳ）が生じるため、ＩＬ－２の使用は専門のケアセンターに限定され、有効レベルに達するまで用量が制限されている。（Ｐａｃｈｅｌｌａ ＬＡ， ｅｔ ａｌ． Ｊ Ａｄｖ Ｐｒａｃｔ Ｏｎｃｏｌ． ２０１５；６（３）：２１２－２２１．）これらの副作用により、推奨される治療レジメンに耐えることができる患者の数が制限され、その結果、ＩＬ－２療法の臨床上の利得が全面的に達成される。

【0004】

プロテアーゼ切断を通じて腫瘍微小環境内で条件付きで活性化され、腫瘍内で完全に活性な天然のＩＬ－２サイトカインを放出して強力な抗腫瘍免疫応答を刺激する、ＩＬ－２の誘導型は、ＷＯ２０２１０９７３７６に記載されている。これらのＩＬ－２プロドラッグは、プロテアーゼで切断可能なリンカーを介して半減期延長ドメイン（例えば、ＶＨドメインなどの抗ヒト血清アルブミン抗体結合断片）に結合した天然ＩＬ－２分子と、末梢の正常組織上のＩＬ－２β／γ受容体へのＩＬ－２の結合をブロックするＩＬ－２ブロック要素（例えば、Ｆａｂなどの抗ＩＬ－２抗体結合断片）を含む。プロテアーゼ切断可能なリンカーが切断されると、完全に活性な天然ＩＬ－２が腫瘍内で放出され、強力な抗腫瘍免疫応答を刺激する。

【0005】

免疫チェックポイント阻害剤は、Ｔ細胞の機能を調節するタンパク質である。Ｔ細胞エフェクター機能は、腫瘍を治療する免疫療法アプローチにとって重要である。しかし、腫瘍の成長、及びがんの進行に伴って、免疫抑制、及びエフェクター機能の低下がしばしば見られる。この現象の背後にある機序の１つは、がん細胞による免疫チェックポイント阻害剤の活性化であり、抗腫瘍免疫応答の抑制につながる。これは通常、がん細胞がその表面にタンパク質を発現し、このタンパク質が腫瘍微小環境内のＴ細胞表面の免疫チェックポイントタンパク質と相互作用してＴ細胞の活性を抑制し得る場合に生じる。免疫チェックポイントタンパク質には、例えば、リガンドＰＤ－Ｌ１（Ｂ７－Ｈ１、ＣＤ２７４）及びＰＤ－Ｌ２（Ｂ７－ＤＣ、ＣＤ２７３）に結合するＰＤ－１；Ｂ７－１（ＣＤ８０）及びＢ７－２（ＣＤ８６）に結合するＣＴＬＡ－４（ＣＤ１５２）；ガレクチン３、ＬＳＥＣｔｉｎ及びＦＧＬ１に結合するＬＡＧ３（ＣＤ２２３）；リガンドＣｅａｃａｍ１及びガレクチン９に結合するＴＩＭ３（ＨＡＶＣＲ２）；ＣＤ１１２及びＣＤ１５５に結合するＴＩＧＩＴ（ＶＳＴＭ３、ＷＵＣＡＭ）；ＨＶＥＭ（ＴＮＦＲＳＦ１４）、Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）、Ｂ７－Ｈ４（ＶＴＣＮ１）、ＶＩＳＴＡ（Ｂ７－Ｈ５）、ＫＩＲ、ＣＤ４４（２Ｂ４）に結合するＢＴＬＡ（ＣＤ２７２）；ＨＶＥＭに結合するＣＤ１６０（ＢＹ５５）；ＣＤ２５２（ＯＸ－４０Ｌ）に結合するＣＤ１３４（ＴＮＲＦＳＲ４、ＯＸ４０）が含まれる。

【0006】

ＰＤ－１は、免疫調節、及び末梢寛容の持続において重要な役割を果たしていると認識されている。ＰＤ－１は、ナイーブＴ、Ｂ及びＮＫＴ細胞で適度に発現され、リンパ球、単球、骨髄性細胞上のＴ／Ｂ細胞受容体シグナル伝達によって上方制御される（Ｓｈａｒｐｅ ｅｔ ａｌ．， Ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ １ ａｎｄ ｉｔｓ ｌｉｇａｎｄｓ ｉｎ ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ ａｎｄ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｎａｔｕｒｅ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ （２００７）；８：２３９－２４５）。

【0007】

ＰＤ－１の２つのリガンドとして知られているＰＤ－Ｌ１（Ｂ７－Ｈ１）及びＰＤ－Ｌ２（Ｂ７－ＤＣ）は、様々な組織に発生するヒトがんに発現している。例えば、卵巣癌、腎癌、結腸直腸癌、膵臓癌、肝癌、黒色腫の大規模なサンプルセットにおいて、ＰＤ－Ｌ１発現は予後不良と相関し、その後の治療に関係なく全生存率を低下させることが示された（Ｄｏｎｇ， Ｈａｉｄｏｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｔｕｍｏｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｂ７－Ｈ１ ｐｒｏｍｏｔｅｓ Ｔ－ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ： ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ ｅｖａｓｉｏｎ． Ｎａｔ Ｍｅｄ． ２００２ Ａｕｇ；８（８）：７９３－８００；Ｙａｎｇ， Ｗａｎｈｕａ ｅｔ ａｌ．，ＰＤ－１ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ ｔｏ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｔ－ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ． ２００８ Ｊｕｎ；４９（６ （２００８）： ４９： ２５１８－２５２５；Ｇｈｅｂｅｈ， Ｈａｚｅｍ ｅｔ ａｌ．， Ｔｈｅ Ｂ７－Ｈ１ （ＰＤ－Ｌ１） Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ－ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｉｓ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ ｄｕｃｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ： ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｈｉｇｈ－ｒｉｓｋ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒｓ．Ｎｅｏｐｌａｓｉａ （２００６） ８： １９０－１９８；Ｈａｍａｎｉｓｈｉ， Ｊｕｎｚｏ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ １ ｌｉｇａｎｄ １ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ－ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ ＣＤ８＋ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ａｒｅ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ．Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ （２００７）： １０４： ３３６０－３３６５；Ｔｈｏｍｐｓｏｎ， Ｒ Ｈｏｕｓｔｏｎ， ａｎｄ Ｅｕｇｅｎｅ Ｄ Ｋｗｏｎ， Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ Ｂ７－Ｈ１ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｋｉｄｎｅｙ ｃａｎｃｅｒ． Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｇｅｎｉｔｏｕｒｉｎ Ｃａｎｃｅｒ （２００６）： ５： ２０６－２１１；Ｎｏｍｉ， Ｔａｋｅｏ ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｄｅａｔｈ－１ ｌｉｇａｎｄ／ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｄｅａｔｈ－１ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ （２００７）；１３：２１５１－２１５７；Ｏｈｉｇａｓｈｉ， Ｙｕｉｃｈｉｒｏ ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｄｅａｔｈ－１ ｌｉｇａｎｄ－１ ａｎｄ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｄｅａｔｈ－１ ｌｉｇａｎｄ ２ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｃａｎｃｅｒ．Ｃｌｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ （２００５）： １１： ２９４７－２９５３；Ｉｎｍａｎ， Ｂｒａｎｔ Ａ ｅｔ ａｌ．，ＰＤ－Ｌ１（Ｂ７－Ｈ１） ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ ｕｒｏｔｈｅｌｉａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｏｆ ｔｈｅ ｂｌａｄｄｅｒ ａｎｄ ＢＣＧ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｇｒａｎｕｌｏｍａｔａ： ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ ｗｉｔｈ ｌｏｃａｌｉｚｅｄ ｓｔａｇｅ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ．Ｃａｎｃｅｒ （２００７）： １０９： １４９９－１５０５；Ｓｈｉｍａｕｃｈｉ， Ｔａｋａｔｏｓｈｉ ｅｔ ａｌ．， Ａｕｇｍｅｎｔｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｄｅａｔｈ－１ ｉｎ ｂｏｔｈ ｎｅｏｐｌａｓｍａｔｉｃ ａｎｄ ｎｏｎｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ ＣＤ４＋ Ｔ－ｃｅｌｌｓ ｉｎ ａｄｕｌｔ Ｔ－ｃｅｌｌ Ｌｅｕｋｅｍｉａ／ Ｌｙｍｐｈｏｍａ．Ｉｎｔ． Ｊ． Ｃａｎｃｅｒ （２００７）： １２１：２５８５－２５９０；Ｇａｏ， Ｑｉａｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆＰＤ－Ｌ１ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｔｕｍｏｒ ａｇｇｒｅｓｓｉｖｅｎｅｓｓ ａｎｄ ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ （２００９） １５： ９７１－９７９；Ｎａｋａｎｉｓｈｉ， Ｊｕｒｏ ｅｔ ａｌ．， Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｂ７－Ｈ１ （ＰＤ－Ｌ１） ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｔｕｍｏｒ ｇｒａｄｅ ａｎｄ ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｕｒｏｔｈｅｌｉａｌ ｃａｎｃｅｒｓ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ． （２００７） ５６： １１７３－１１８２；Ｈｉｎｏ ｅｔ ａｌ．， Ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ－１ ｉｓ ａ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｆｏｒ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｃａｎｃｅｒ （２０１０）： ００： １－９）。

【0008】

同様に、腫瘍浸潤リンパ球上のＰＤ－１発現は、乳癌及び黒色腫における機能不全のＴ細胞をマークすること（Ｇｈｅｂｅｈ， Ｈａｚｅｍ ｅｔ ａｌ．， Ｆｏｘｐ３＋ｔｒｅｇｓ ａｎｄ Ｂ７－Ｈ１＋／ＰＤ－１＋ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｃｏ－ｉｎｆｉｌｔｒａｔｅ ｔｈｅ ｔｕｍｏｒ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｈｉｇｈ－ｒｉｓｋ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ： ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ．ＢＭＣ Ｃａｎｃｅｒ． ２００８ Ｆｅｂ ２３；８：５７；Ａｈｍａｄｚａｄｅｈ， Ｍｏｊｇａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｔｕｍｏｒ ａｎｔｉｇｅｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ８ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｔｕｍｏｒ ｅｘｐｒｅｓｓ ｈｉｇｈ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＰＤ－１ ａｎｄ ａｒｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｌｙ ｉｍｐａｉｒｅｄ．Ｂｌｏｏｄ （２００９） １１４： １５３７－１５４４）、及び腎癌における予後不良と相関すること（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ， Ｒ Ｈｏｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，ＰＤ－１ ｉｓ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｂｙ ｔｕｍｏｒ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｐｏｏｒ ｏｕｔｃｏｍｅ ｆｏｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｒｅｎａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ （２００７） １５： １７５７－１７６１）が見出された。したがって、ＰＤ－Ｌ１発現腫瘍細胞は、ＰＤ－１発現Ｔ細胞と相互作用して、Ｔ細胞の活性化と免疫学的監視の回避を弱め、それによって腫瘍に対する免疫応答を弱めることに寄与すると提案されている。

【0009】

ＰＤ－１軸を標的とする免疫チェックポイント療法は、複数のヒト癌における臨床応答で画期的な改善をもたらした（Ｂｒａｈｍｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１２， ３６６： ２４５５－６５；Ｇａｒｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１５， ３７２： ２０１８－２８；Ｈａｍｉｄ ｅｔ ａｌ．， Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１３， ３６９： １３４－４４；Ｒｏｂｅｒｔ ｅｔ ａｌ．， Ｌａｎｃｅｔ ２０１４， ３８４： １１０９－１７；Ｒｏｂｅｒｔ ｅｔ ａｌ．， Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１５， ３７２： ２５２１－３２；Ｒｏｂｅｒｔ ｅｔ ａｌ．， Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１５， ３７２： ３２０－３０；Ｔｏｐａｌｉａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１２， ３６６： ２４４３－５４；Ｔｏｐａｌｉａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２０１４， ３２： １０２０－３０；Ｗｏｌｃｈｏｋ ｅｔ ａｌ．， Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１３， ３６９： １２２－３３）。
免疫チェックポイントタンパク質に結合し、その免疫抑制活性を阻害する抗体などの治療剤が抗腫瘍剤として開発されてきた。現在、そのような薬剤のいくつかががん治療用に市販されており、その例には、抗ＰＤ１抗体ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ（商標））、Ｍｅｒｃｋ ａｎｄ Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｒａｈｗａｙ，ＮＪ，ＵＳＡ、ドスタルリマブ（ＪＥＭＰＥＲＬＩ）、セミプリマブ－ｒｗｌｃ（ＬＩＢＡＴＹＯ）、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ（商標））、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ，ＵＳＡ）、カムレリズマブ、チスレリズマブ、トリパリマブ、シンチリマブ（ＴＹＶＹＴ）；抗ＰＤ－Ｌ１抗体アベルマブ（ＢＡＶＥＮＣＩＯ）、デュルバルマブ（ＩＭＦＩＮＺＩ）及びアテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ）；抗ＣＴＬＡ－４抗体イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ）が含まれる。このような免疫チェックポイント阻害剤を用いる治療は、がん治療に利点を提供するが、全体的な成功率は低いままであり、再発が起こり、チェックポイント阻害に対する耐性が生じる。がんを治療するための改善された方法に対する医療ニーズは満たされていない。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0010】

【非特許文献1】Ｐａｃｈｅｌｌａ ＬＡ， ｅｔ ａｌ． Ｊ Ａｄｖ Ｐｒａｃｔ Ｏｎｃｏｌ． ２０１５；６（３）：２１２－２２１．

【非特許文献2】Ｓｈａｒｐｅ ｅｔ ａｌ．， Ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ １ ａｎｄ ｉｔｓ ｌｉｇａｎｄｓ ｉｎ ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ ａｎｄ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｎａｔｕｒｅ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ （２００７）；８：２３９－２４５

【非特許文献3】Ｄｏｎｇ， Ｈａｉｄｏｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｔｕｍｏｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｂ７－Ｈ１ ｐｒｏｍｏｔｅｓ Ｔ－ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ： ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｉｍｍｕｎｅ ｅｖａｓｉｏｎ． Ｎａｔ Ｍｅｄ． ２００２ Ａｕｇ；８（８）：７９３－８００

【非特許文献4】Ｙａｎｇ， Ｗａｎｈｕａ ｅｔ ａｌ．，ＰＤ－１ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ ｔｏ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｔ－ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｕｖｅａｌ ｍｅｌａｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ． ２００８ Ｊｕｎ；４９（６ （２００８）： ４９： ２５１８－２５２５

【非特許文献5】Ｇｈｅｂｅｈ， Ｈａｚｅｍ ｅｔ ａｌ．， Ｔｈｅ Ｂ７－Ｈ１ （ＰＤ－Ｌ１） Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ－ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｉｓ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ ｄｕｃｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ： ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｈｉｇｈ－ｒｉｓｋ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒｓ．Ｎｅｏｐｌａｓｉａ （２００６） ８： １９０－１９８

【非特許文献6】Ｈａｍａｎｉｓｈｉ， Ｊｕｎｚｏ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ １ ｌｉｇａｎｄ １ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ－ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ ＣＤ８＋ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ａｒｅ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ．Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ （２００７）： １０４： ３３６０－３３６５

【非特許文献7】ｈｏｍｐｓｏｎ， Ｒ Ｈｏｕｓｔｏｎ， ａｎｄ Ｅｕｇｅｎｅ Ｄ Ｋｗｏｎ， Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ Ｂ７－Ｈ１ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｋｉｄｎｅｙ ｃａｎｃｅｒ． Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｇｅｎｉｔｏｕｒｉｎ Ｃａｎｃｅｒ （２００６）： ５： ２０６－２１１

【非特許文献8】Ｎｏｍｉ， Ｔａｋｅｏ ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｄｅａｔｈ－１ ｌｉｇａｎｄ／ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｄｅａｔｈ－１ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ （２００７）；１３：２１５１－２１５７

【非特許文献9】Ｏｈｉｇａｓｈｉ， Ｙｕｉｃｈｉｒｏ ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｄｅａｔｈ－１ ｌｉｇａｎｄ－１ ａｎｄ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｄｅａｔｈ－１ ｌｉｇａｎｄ ２ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｃａｎｃｅｒ．Ｃｌｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ （２００５）： １１： ２９４７－２９５３

【非特許文献10】Ｉｎｍａｎ， Ｂｒａｎｔ Ａ ｅｔ ａｌ．，ＰＤ－Ｌ１（Ｂ７－Ｈ１） ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ ｕｒｏｔｈｅｌｉａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｏｆ ｔｈｅ ｂｌａｄｄｅｒ ａｎｄ ＢＣＧ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｇｒａｎｕｌｏｍａｔａ： ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ ｗｉｔｈ ｌｏｃａｌｉｚｅｄ ｓｔａｇｅ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ．Ｃａｎｃｅｒ （２００７）： １０９： １４９９－１５０５

【非特許文献11】Ｓｈｉｍａｕｃｈｉ， Ｔａｋａｔｏｓｈｉ ｅｔ ａｌ．， Ａｕｇｍｅｎｔｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｄｅａｔｈ－１ ｉｎ ｂｏｔｈ ｎｅｏｐｌａｓｍａｔｉｃ ａｎｄ ｎｏｎｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ ＣＤ４＋ Ｔ－ｃｅｌｌｓ ｉｎ ａｄｕｌｔ Ｔ－ｃｅｌｌ Ｌｅｕｋｅｍｉａ／ Ｌｙｍｐｈｏｍａ．Ｉｎｔ． Ｊ． Ｃａｎｃｅｒ （２００７）： １２１：２５８５－２５９０

【非特許文献12】Ｇａｏ， Ｑｉａｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆＰＤ－Ｌ１ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｔｕｍｏｒ ａｇｇｒｅｓｓｉｖｅｎｅｓｓ ａｎｄ ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ （２００９） １５： ９７１－９７９

【非特許文献13】Ｎａｋａｎｉｓｈｉ， Ｊｕｒｏ ｅｔ ａｌ．， Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｂ７－Ｈ１ （ＰＤ－Ｌ１） ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｔｕｍｏｒ ｇｒａｄｅ ａｎｄ ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｕｒｏｔｈｅｌｉａｌ ｃａｎｃｅｒｓ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ． （２００７） ５６： １１７３－１１８２

【非特許文献14】Ｈｉｎｏ ｅｔ ａｌ．， Ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ－１ ｉｓ ａ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｆｏｒ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｃａｎｃｅｒ （２０１０）： ００： １－９

【発明の概要】

【0011】

本開示は、誘導性ＩＬ－２プロドラッグ及び抗ＰＤ－１抗体、例えばペムブロリズマブを使用してがんを治療するための組成物及び方法に関する。この方法は概して、有効量の誘導性ＩＬ－２プロドラッグ、及び抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、投与を必要とする被験者に投与することを含む。好ましい抗ＰＤ－１抗体はペムブロリズマブである。誘導性ＩＬ－２プロドラッグとは、化合物１、化合物２、化合物３または化合物４のことであってもよい。

【0012】

誘導性ＩＬ－２プロドラッグは条件付きで活性になる。誘導性ＩＬ－２プロドラッグは２つのポリペプチド鎖を含む。第１ポリペプチド鎖は、アミノ末端からカルボキシ末端までを、すなわちＩＬ－２ポリペプチド（プロテアーゼ切断可能なリンカー）抗ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）結合単一抗体可変ドメイン（好ましくはプロテアーゼ切断可能なリンカー）ＩＬ－２に結合する抗体のＶＨ及びＣＨ１を含む。第２ポリペプチド鎖は、ＩＬ－２に結合する抗体のＶＬ及びＣＬを含み、第１ポリペプチド鎖のＶＨ及びＣＨ１と一緒に、ＩＬ－２ポリペプチドに結合するＦａｂを形成する。誘導性ＩＬ－２プロドラッグが、関心の部位（例えば、腫瘍微小環境）にない場合、プロドラッグは通常、無損のまま残っている。無損プロドラッグが、ＩＬ－２受容体アゴニスト活性を弱めている。誘導性ＩＬ－２プロドラッグが、関心の部位（腫瘍微小環境など）にある場合、プロテアーゼ切断可能リンカーは関心の部位で活性なプロテアーゼによって切断され、非弱力化型のＩＬ－２が放出される。この条件付き活性は、非誘導性ＩＬ－２療法に付随する全身毒性を制限しながら、ＩＬ－２の免疫刺激効果を維持する。無損ＩＬ－２プロドラッグには半減期を延長する要素が含まれているが、切断後の非弱力化型のＩＬ－２には含まれていない。その結果、ＩＬ－２の短い半減期により、関心の部位の外側での毒性が効果的に制限される。

【0013】

理論に束縛されるものではないが、誘導性ＩＬ－２プロドラッグの免疫賦活性効果、及び抗ＰＤ－１抗体または抗原結合断片によって引き起こされる免疫抑制の予防により、被験者の免疫系がより効果的にがんと闘うことができる可能性がある。

【0014】

本明細書には、がんを治療する方法が記載される。この方法は、併用療法を、必要とする被験者に投与することを含み、この併用療法は、化合物１、化合物２、化合物３、化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体、及び抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を含み、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含む。本明細書に開示される方法は、本明細書に開示される有効量の併用療法を、必要とする被験者に投与することを含む。

【0015】

化合物１は、配列番号１の第１ポリペプチド鎖、及び配列番号５の第２ポリペプチド鎖を含み、化合物１のアミノ酸配列変異体は、配列番号１に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第１ポリペプチド鎖を含むことができ、第２ポリペプチド鎖は配列番号５に対して少なくとも約８０％の同一性を含むことができる。化合物２は、配列番号２の第１ポリペプチド鎖、及び配列番号５の第２ポリペプチド鎖を含み、化合物２のアミノ酸配列変異体は、配列番号２に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第１ポリペプチド鎖、及び配列番号５に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第２ポリペプチド鎖を含むことができる。化合物３は、配列番号３の第１ポリペプチド鎖、及び配列番号５の第２ポリペプチド鎖を含み、化合物３のアミノ酸配列変異体は、配列番号３に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第１ポリペプチド鎖、及び配列番号５に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第２ポリペプチド鎖を含むことができる。化合物４は、配列番号１の第１ポリペプチド鎖、及び配列番号４の第２ポリペプチド鎖を含み、化合物４のアミノ酸配列変異体は、配列番号４に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第１ポリペプチド鎖、及び配列番号５に対して少なくとも約８０％の同一性を有する第２ポリペプチド鎖を含むことができる。

【0016】

抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含むことができる。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ、ペムブロリズマブ変異体またはバイオシミラーのことであってもよい。

【0017】

化合物１、化合物２、化合物３、化合物４またはアミノ酸配列変異体を、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片の前、同時、または後に投与することができる。例えば、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を投与することができ、次いで抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片の投与完了から約３０分後に化合物１、化合物２、化合物３、化合物４またはアミノ酸配列変異体を投与することができる。

【0018】

化合物１、化合物２、化合物３、化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体、及び抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、静脈内投与することができる。例えば、静脈内注入によって投与を行うことができる。他の投与経路には、経口、非経口、静脈内、関節内、腹腔内、筋肉内、皮下、腔内、経皮、肝内、頭蓋内、噴霧／吸入、気管支鏡検査による設置による、または腫瘍内が含まれるが、これらに限定されない。

【0019】

約１００ｍｇ～約６００ｍｇの抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、治療期間中約３～６週間ごとに投与することができる。場合によっては、患者には、２００ｍｇ、２４０ｍｇ、４００ｍｇ、４８０ｍｇ、７２０ｍｇ、または２ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ－１抗体が投与される。場合によっては、２００ｍｇの抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、治療期間中約３週間ごとに投与することができる。場合によっては、４００ｍｇの抗ＰＤ１抗体またはその抗原結合断片を、治療期間中約６週間ごとに投与することができる。場合によっては、ヒト患者には３週間に１回、２００ｍｇのペムブロリズマブが投与される。場合によっては、ヒト患者には３週間に１回、２ｍｇ／ｋｇのペムブロリズマブが投与される。場合によっては、ヒト患者には６週間に１回、４００ｍｇのペムブロリズマブが投与される。

【0020】

約１ｍｇ～約５００ｍｇの化合物１、化合物２、化合物３、化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体を、治療期間中２週間ごとに投与することができる。例えば、１ｍｇ～約２４０ｍｇの化合物１、化合物２、化合物３、化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体を、治療期間中２週間ごとに投与することができる。例えば、１ｍｇ、約３ｍｇ、約１０ｍｇ、約３０ｍｇ、約６０ｍｇ、約１２０ｍｇもしくは約２４０ｍｇの化合物１、化合物２、化合物３、化合物４または前述のいずれかのアミノ酸配列変異体を、治療期間中２週間ごとに投与することができる。

【0021】

この併用を、第１選択療法として投与することができる。本明細書に開示される方法に好適な被験者は、以前の治療または進行中の治療に対して完全奏効を達成できなかった可能性がある。以前の治療または進行中の治療の例には、チェックポイント阻害剤による治療が含まれ得る。チェックポイント阻害剤とは、抗ＰＤ－１抗体または抗ＰＤ－Ｌ１抗体のことであってもよい。チェックポイント阻害剤とは、ペムブロリズマブのことであってもよい。

【0022】

チェックポイント阻害剤とは、抗ＣＴＬＡ－４抗体のことであってもよい。

【0023】

本明細書に開示される方法による治療に好適ながんには、副腎皮質癌腫、肛門癌、虫垂癌、星細胞腫、基底細胞癌腫、脳腫瘍、胆管癌、膀胱癌、骨癌、乳癌、気管支腫瘍、原発不明癌腫、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、管癌腫、胎児性腫瘍、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、鼻腔神経芽細胞腫、線維性組織球腫、ユーイング肉腫、眼癌、細菌細胞腫瘍、胆嚢癌、胃癌、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍、妊娠性絨毛膜疾患、神経膠腫、頭頸部癌、肝細胞癌、組織球増殖症、下咽頭癌、眼球内黒色腫、島細胞腫瘍、カポジ肉腫、腎臓癌、ランゲルハンス病細胞組織球症、喉頭癌、口唇及び口腔癌、肝臓癌、上皮内小葉癌腫、肺癌、マクログロブリン血症、悪性線維性組織球腫、黒色腫、メルケル細胞癌腫、中皮腫、原発不明の転移性の扁平上皮頚部癌、ＮＵＴ遺伝子に関連する正中線上の癌腫、口腔癌、多発性内分泌腫瘍症候群、菌状息肉症、骨髄異形成症候群、骨髄異形成／骨髄増殖性新生物、鼻腔及び副鼻腔癌、鼻咽頭癌、神経芽腫、非小細胞肺癌、中咽頭癌、骨肉腫、卵巣癌、膵臓癌、乳頭腫症、傍神経節腫、副甲状腺癌、陰茎癌、咽頭癌、褐色細胞腫、下垂体腫瘍、胸膜肺芽腫、前立腺癌、直腸癌、腎細胞癌、腎盂及び尿管癌、網膜芽細胞腫、ラブドイド腫瘍、唾液腺癌、セザリー症候群、皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟部組織肉腫、脊髄腫瘍、胃の癌、Ｔ細胞リンパ腫、奇形腫瘍、精巣癌、咽喉癌、胸腺腫及び胸腺癌腫、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、膣癌、外陰部癌、ならびにウィルムス腫瘍が含まれるが、これらに限定されない。

【0024】

特定の実施形態では、がんとは、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、古典的ホジキンリンパ腫（ｃＨＬ）、縦隔原発大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、尿路上皮癌腫、マイクロサテライト不安定性が高いまたはミスマッチ修復機構欠損のある癌、マイクロサテライト不安定性が高いまたはミスマッチ修復機構欠損のある結腸直腸癌、胃癌、食道癌、子宮頸癌、肝細胞癌腫（ＨＣＣ）、メルケル細胞癌腫（ＭＣＣ）、腎臓細胞癌腫（ＲＣＣ）、子宮内膜癌腫、腫瘍変異負荷の高い癌、皮膚扁平上皮癌腫（ｃＳＣＣ）、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）、または結腸直腸癌のことであってもよい。

【0025】

特定の実施形態では、がんは、黒色腫、非小細胞肺癌、頭頸部扁平上皮癌、古典的ホジキンリンパ腫、縦隔原発大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、尿路上皮癌腫、高マイクロサテライト不安定性またはミスマッチ修復機構欠損癌、胃癌、食道癌、子宮頸癌、肝細胞癌腫、メルケル細胞癌腫、腎細胞癌腫、子宮内膜癌腫、高い突然変異負荷を有する腫瘍を特徴とする癌、皮膚扁平上皮癌腫、トリプルネガティブ乳癌からなる群から選択される。

【0026】

がんとは、転移性、固形腫瘍、肉腫または癌腫のことであってもよい。がんとは、結腸癌、肺癌、黒色腫、腎細胞癌腫、または乳癌のことであってもよい。がんとは、転移性腎明細胞癌腫または転移性皮膚悪性黒色腫のことであってもよい。

【0027】

がんとは、非小細胞肺癌のことであってもよく、方法は、被験者にペメトレキセド及びプラチナ化学療法剤を投与することをさらに含み得る。例えば、化学療法剤とは、パクリタキセルまたはタンパク質結合パクリタキセルのことであってもよい。がんとは、頭頸部扁平上皮癌のことであってもよく、方法は、被験者にフルオロウラシルを投与することをさらに含み得る。がんとは、食道癌腫または胃食道接合部癌腫のことであってもよく、方法は、プラチナベース及びフルオロピリミジンベースの化学療法剤を被験者に投与することをさらに含み得る。がんとは、腎細胞癌腫のことであってもよい。

【0028】

がんとは、子宮内膜癌腫のことであってもよい。がんとは、トリプルネガティブ乳癌のことであってもよく、方法は、被験者に化学療法剤を投与することをさらに含み得る。

【0029】

本開示はまた、ペムブロリズマブ及びペムブロリズマブ変異体などのＰＤ－１アンタゴニストと併用した誘導性ＩＬ－２プロドラッグを含む医薬組成物にも関する。この医薬組成物を使用して、本明細書に開示される方法に従ってがんを治療することができる。この医薬組成物とは、静脈内投与用の液体組成物のことであってもよい。代替的に、組成物とは、凍結乾燥組成物のことであってもよい。凍結乾燥組成物を、注射用の水または生理食塩水を使用して再構成することができ、再構成された製剤は静脈内投与に好適である可能性がある。

【図面の簡単な説明】

【0030】

【図1】ＭＣ３８腫瘍を移植され、種々の用量レベルの化合物１、非切断可能リンカーを有するＩＬ－２プロドラッグ（比較例１－ＮＣ）、または賦形剤のみで処置されたマウスにおける平均腫瘍体積の進行を示すグラフである。

【図2】ＭＣ３８腫瘍移植４０日後に動物から採取した脾臓中の腫瘍特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞の量を示すチャートである。動物は、誘導性ＩＬ－２プロドラッグまたは賦形剤のみで治療された。四量体染色を使用して腫瘍特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞を特定し、それらの細胞の記憶マーカーを検査した。

【図3】誘導性ＩＬ－２プロドラッグによる処置後に、ナイーブマウス、または以前に完全なＭＣ３８腫瘍退縮があったマウスにおける腫瘍体積の進行を示すグラフである。最初の移植から６０日後に、マウスにＭＣ３８腫瘍細胞を再投与した。再投与中に治療は施されなかった。

【図4】ＭＣ３８腫瘍を移植され、誘導性ＩＬ－２プロドラッグまたは賦形剤のみのいずれかで処置されたマウスから抽出された腫瘍における様々な免疫細胞種類の細胞数を示す一連のチャートである。

【図5】ＭＣ３８腫瘍を有するマウスに誘導性ＩＬ－２プロドラッグを投与した後の様々な時点で収集された血漿及び腫瘍サンプル中の無損誘導性ＩＬ－２プロドラッグ及び遊離ＩＬ－２レベルを示す一連のグラフである。

【図6】非ヒト霊長類に、０．０５ｍｇ／ｋｇから１．２５ｍｇ／ｋｇまで増加量の化合物１を週１回、２週間投与した後の、化合物１またはｒＩＬ－２の血漿曝露を示す一連のグラフである。

【図7-1】マウスを１００μｇの化合物１、２００μｇの化合物１、または賦形剤のみで処置したＢ１６Ｆ１０腫瘍モデルにおける腫瘍体積の進行を示すグラフである。１ｘ１０^５個の腫瘍細胞を動物の脇腹に移植し、腫瘍の増殖をモニタリングした。ひとたび腫瘍が平均体積３０～６０ｍｍ^３に達したら、動物を無作為に抽出して投与した。腫瘍体積及び体重を週に３回記録した。

【図7-2】マウスを１００μｇの化合物１、２００μｇの抗ＰＤ－１抗体（ＲＭＰ１－１４）単独、１００μｇの化合物１及び２００μｇの抗ＰＤ－１抗体（ＲＭＰ１－１４）、または賦形剤のみで処置したＢ１６Ｆ１０腫瘍モデルにおける腫瘍体積の進行を示すグラフである。１ｘ１０^５個の腫瘍細胞を動物の脇腹に移植し、腫瘍の増殖をモニタリングした。ひとたび腫瘍が平均体積３０～６０ｍｍ^３に達したら、動物を無作為に抽出して投与した。腫瘍体積及び体重を週に３回記録した。

【図8】マウスを化合物１、化合物１及びＲＭＰ１－１４、または賦形剤のみで処置したＢ１６Ｆ１０腫瘍モデルにおける体重の進行を示すグラフである。１ｘ１０^５個の腫瘍細胞を動物の脇腹に移植し、腫瘍の増殖をモニタリングした。ひとたび腫瘍が平均体積３０～６０ｍｍ^３に達したら、動物を無作為に抽出して投与した。体重を週に３回記録した。

【図9】実施例２に記載の臨床試験の治験デザイン概略図である。

【図10-1】賦形剤（ＰＢＳ、丸）、誘導性ＩＬ－２プロドラッグ（化合物１、四角）、抗ＰＤ－１（三角）、または誘導性ＩＬ－２プロドラッグ（化合物１）及び抗ＰＤ－１（ダイヤモンド）で処置したマウスにおける平均腫瘍体積を示すグラフである。投与スケジュールも示されている（矢印）。

【図10-2】賦形剤で処置された個々のマウスにおける腫瘍体積のグラフである。

【図10-3】誘導性ＩＬ－２プロドラッグ（化合物１）で処置された個々のマウスにおける腫瘍体積のグラフである。

【図10-4】抗ＰＤ－１で処置された個々のマウスにおける腫瘍体積のグラフである。

【図10-5】誘導性ＩＬ－２プロドラッグ（化合物１）及び抗ＰＤ－１で処置された個々のマウスにおける腫瘍体積のグラフである。

【図10-6】賦形剤（ＰＢＳ、丸）、誘導性ＩＬ－２プロドラッグ（化合物１、四角）、抗ＰＤ－１（三角）、ならびに誘導性ＩＬ－２プロドラッグ及び抗ＰＤ－１（ダイヤモンド）で処置したマウスにおける平均体重を示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0031】

本開示は、ペムブロリズマブ及びペムブロリズマブ変異体などのＰＤ－１アンタゴニストと併用した誘導性ＩＬ－２プロドラッグを含む併用療法を使用してがんを治療するための方法及び組成物に関する。

【0032】

定義と略語
他に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語及び科学用語は、特許請求される主題が属する当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。前述の一般的な説明及び以下の詳細な説明は、例示及び説明にすぎず、請求される主題を限定するものではないことを理解するべきである。参照により本明細書に組み込まれているいずれかの資料が本開示の明示的な内容と矛盾する場合、明示的な内容が優先する。本出願では、特に別段の記載がない限り、単数形の使用には複数形も含まれる。本明細書及び付属の特許請求の範囲において使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈上、別途明確に指示されない限り、複数形の指示対象を含むことに留意されなければならない。本出願では、文脈上別段の要求がない限り、「または」の使用は「及び／または」を意味する。更に、「含むこと（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という用語、ならびに「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、及び「含まれる（ｉｎｃｌｕｄｅｄ）」等の他の形態の使用は、限定的でない。

【0033】

本明細書で使用される節の見出しは、構成目的のみのためであり、記載される主題を限定するものと解釈されるべきではない。

【0034】

本明細書における「いくつかの実施形態」、「ある実施形態」、「一実施形態」、または「他の実施形態」への言及は、実施形態に関連して説明される特定の特徴、構造、または特性が、本発明の少なくともいくつかの実施形態に含まれることを意味しており、必ずしもすべての実施形態に含まれることを意味していない。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、もしくは「からなる（ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ ｏｆ）」などの変形は、明細書及び特許請求の範囲全体を通じて、包括的な意味で使用される。つまり、記載された特徴の存在を明確にするが、明示的な表現または必要な含意により文脈上別段の要求がある場合を除き、本発明のいずれかの実施形態の動作または有用性を実質的に高める可能性があるさらなる特徴の存在または追加を排除するものではないという意味で使用される。

【0035】

誘導性ＩＬ－２プロドラッグ
本開示の方法及び組成物で使用する誘導性ＩＬ－２プロドラッグは、腫瘍学におけるサイトカインの臨床使用を著しく制限してきた毒性及び短い半減期の問題を克服する。誘導性ＩＬ－２プロドラッグには、ＩＬ－２Ｒα／β／γ及びＩＬ－２Ｒβ／γへの結合及びそれらを通るシグナル伝達の活性化など、天然ＩＬ－２の受容体アゴニスト活性を有するＩＬ－２ポリペプチドが含まれているが、誘導性プロドラッグであるため、サイトカイン受容体アゴニスト活性が弱められ、循環半減期が延長される。プロドラッグには、腫瘍微小環境に関連し、典型的には腫瘍微小環境に豊富に存在するか、または選択的に存在するプロテアーゼによって切断されるプロテアーゼ切断配列が含まれる。したがって、誘導性ＩＬ－２プロドラッグは腫瘍微小環境で優先的（または選択的）かつ効率的に切断されて活性なＩＬ－２を放出し、ＩＬ－２活性を腫瘍微小環境に実質的に制限する。切断により放出されるＩＬ－２は短い半減期を有し、天然に生じるＩＬ－２の半減期と実質的に同様であり、ＩＬ－２活性を腫瘍微小環境にさらに制限する。たとえ誘導性ＩＬ－２プロドラッグの半減期が延長されたとしても、循環プロドラッグがＩＬ－２活性を弱め、活性なＩＬ－２が腫瘍微小環境に限定されるため、毒性は劇的に低減または排除される。

【0036】

誘導性ＩＬ－２プロドラッグは２つのポリペプチド鎖を含む。第１ポリペプチド鎖は、アミノ末端からカルボキシ末端までを、すなわちＩＬ－２ポリペプチド（プロテアーゼ切断可能なリンカー）抗ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）結合単一抗体可変ドメイン（好ましくはプロテアーゼ切断可能なリンカー）ＩＬ－２に結合する抗体のＶＨ及びＣＨ１を含む。第２ポリペプチド鎖は、ＩＬ－２に結合する抗体のＶＬ及びＣＬを含み、第１ポリペプチド鎖のＶＨ及びＣＨ１と一緒に、ＩＬ－２ポリペプチドに結合するＦａｂを形成する。化合物１、２、３及び４は、本開示に従って使用するための誘導性ＩＬ－２プロドラッグの具体的な例である。化合物１、２、３及び４、ならびにそれらの活性に関する追加の詳細は、ＷＯ２０２１／０９７３７６に開示されている。

【表1】

【0037】

末梢において弱められたＩＬ－２活性を保持し、腫瘍微小環境においてプロテアーゼ切断により活性なＩＬ－２を放出する化合物１、２、３及び４のアミノ酸配列変異体も、本開示に従って使用することができる。例えば、プロドラッグは、配列番号１との少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％のアミノ酸配列同一性を有する第１ポリペプチドと、配列番号５との少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％のアミノ酸配列同一性を有する第２ポリペプチドとを含むことができる。

【0038】

プロドラッグは、配列番号２との少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％のアミノ酸配列同一性を有する第１ポリペプチドと、配列番号５との少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％のアミノ酸配列同一性を有する第２ポリペプチドとを含むことができる。

【0039】

プロドラッグは、配列番号３との少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％のアミノ酸配列同一性を有する第１ポリペプチドと、配列番号５との少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％のアミノ酸配列同一性を有する第２ポリペプチドとを含むことができる。

【0040】

プロドラッグは、配列番号４との少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％のアミノ酸配列同一性を有する第１ポリペプチドと、配列番号５との少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％のアミノ酸配列同一性を有する第２ポリペプチドとを含むことができる。

【0041】

すべてのアミノ酸配列変異体プロドラッグについて、プロテアーゼ切断部位がアミノ酸置換を含まないか、または保存的アミノ酸置換のみを含むことで、配列変異体プロドラッグが腫瘍微小環境で切断され、対応する親プロドラッグと実質的に同じ程度でＩＬ－２を放出することが好ましい。同様に、抗ＨＡＳ単一可変ドメイン及び抗ＩＬ２ Ｆａｂの相補性決定領域は、アミノ酸置換を含まないか、または保存的アミノ酸置換のみを含むことで、ａ）配列変異体プロドラッグの血清半減期は、対応する親プロドラッグと実質的に同じになり、ｂ）配列変異体プロドラッグのＩＬ－２アゴニスト活性の減弱は、対応する親プロドラッグと実質的に同じになることが好ましい。

【0042】

例示的なアミノ酸置換を表２に示す。

【表2】

【0043】

ＰＤ－１アンタゴニスト
「ペムブロリズマブ」という言葉は、Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．，Ｉｎｃ．（Ｒａｈｗａｙ，ＮＪ，ＵＳＡ）によってブランド名「Ｋｅｙｔｒｕｄａ」で販売されているヒト化抗ＰＤ－１抗体を指す国際一般名である。ペムブロリズマブ（以前はＭＫ－３４７５、ＳＣＨ９００４７５及びランブロリズマブとして知られていた）は、本明細書では「ペンブロ」とも呼ばれ、ＷＨＯ Ｄｒｕｇ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ， Ｖｏｌ． ２７， Ｎｏ． ２， ｐａｇｅｓ １６１－１６２ （２０１３）に記載された構造を有し、表３に記載されている重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列及びＣＤＲを含むヒト化ＩｇＧ４ ｍＡｂである。ペムブロリズマブは、Ｐｒｅｓｃｒｉｂｉｎｇ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｆｏｒ ＫＥＹＴＲＵＤＡ（商標）（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｒａｈｗａｙ，ＮＪ，ＵＳＡ、最初の米国承認は２０１４年、更新は２０２２年６月）に記載されているように、米国ＦＤＡによって承認されている。

【0044】

いずれの治療方法でも使用される「ＰＤ－１アンタゴニスト」または「抗ＰＤ－１抗体」は、がん細胞上に発現するＰＤ－Ｌ１の、免疫細胞（Ｔ細胞、Ｂ細胞またはＮＫＴ細胞）上に発現するＰＤ－１への結合をブロックし、好ましくは、がん細胞上に発現するＰＤ－Ｌ２の、免疫細胞に発現するＰＤ－１への結合もブロックするあらゆる化学化合物または生物分子を意味する。ＰＤ－１及びそのリガンドの代替名または同義語には、ＰＤ－１の場合はＰＤＣＤ１、ＰＤ１、ＣＤ２７９及びＳＬＥＢ２が、ＰＤ－Ｌ１の場合はＰＤＣＤ１Ｌ１、ＰＤＬ１、Ｂ７Ｈ１、Ｂ７－４、ＣＤ２７４及びＢ７－Ｈが、ＰＤ－Ｌ２の場合はＰＤＣＤ１Ｌ２、ＰＤＬ２、Ｂ７－ＤＣ、Ｂｔｄｃ及びＣＤ２７３が含まれる。個々のヒトが治療される本発明の治療方法、薬剤及び使用のいずれにおいても、ＰＤ－１アンタゴニストはヒトＰＤ－Ｌ１のヒトＰＤ－１への結合をブロックし、好ましくは、ヒトＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－Ｌ２の両方のヒトＰＤ－１への結合もブロックする。ヒトＰＤ－１アミノ酸配列は、ＮＣＢＩ Ｌｏｃｕｓ Ｎｏ．： ＮＰ＿００５００９に記載されている。ヒトＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－Ｌ２のアミノ酸配列は、それぞれＮＣＢＩ Ｌｏｃｕｓ Ｎｏ．： ＮＰ＿０５４８６２及びＮＰ＿０７９５１５に記載されている。

【0045】

本発明の治療方法、薬剤及び使用において有用なＰＤ－１アンタゴニストは、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）またはその抗原結合断片を含み、これはＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１に特異的に結合し、好ましくはヒトＰＤ－１またはヒトＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する。ｍＡｂは、ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体であってもよく、ヒト定常領域を含んでもよい。いくつかの実施形態では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４の定常領域からなる群から選択され、いくつかの実施形態では、ヒト定常領域は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４の定常領域である。いくつかの実施形態では、抗原結合断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）_２、ｓｃＦｖ及びＦｖ断片からなる群から選択される。

【0046】

本発明の治療方法、薬剤及び使用においてＰＤ－１アンタゴニストとして有用な特定の抗ヒトＰＤ－１ ｍＡｂは、ペムブロリズマブである。ペムブロリズマブは、プログラム細胞死１（ＰＤ－１）受容体への高い結合特異性を有するが故にプログラム細胞死リガンド１（ＰＤ－Ｌ１）及びプログラム細胞死リガンド２（ＰＤ－Ｌ２）との相互作用を阻害する強力なヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体である。ＰＤ－１リガンドは一部の腫瘍で高レベルで発現しており、ＰＤ－１／ＰＤ－１リガンド経路を通るシグナル伝達が腫瘍のＴ細胞免疫学的監視の不活性化に寄与する可能性がある。ペムブロリズマブはＰＤ－１に結合し、ＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－Ｌ２との相互作用をブロックし、抗腫瘍免疫応答を含む免疫応答のＰＤ－１経路媒介阻害を解除する。ペムブロリズマブは、多くのがんの適応症にわたって患者の治療に適応されており、そのがんには、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、古典的ホジキンリンパ腫（ｃＨＬ）、縦隔原発大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、尿路上皮癌腫、マイクロサテライト不安定性が高いまたはミスマッチ修復機構欠損のある癌、マイクロサテライト不安定性が高いまたはミスマッチ修復機構欠損のある結腸直腸癌、胃癌、食道癌、子宮頸癌、肝細胞癌腫（ＨＣＣ）、メルケル細胞癌腫（ＭＣＣ）、腎臓細胞癌腫（ＲＣＣ）、子宮内膜癌腫、腫瘍変異負荷の高い癌、皮膚扁平上皮癌腫（ｃＳＣＣ）、及びトリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）が含まれる。ペムブロリズマブの重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列を表３に示す。米国特許第８，３５４，５０９号及び第８，９００，５８７号を参照されたい。両方とも参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【0047】

ペムブロリズマブの変異体またはバイオシミラーも、本発明の治療方法、薬剤及び使用に使用してもよい。本明細書で使用する場合、「ペムブロリズマブ変異体」とは、軽鎖ＣＤＲの外側にある位置での３個、２個または１個の保存的アミノ酸置換と、重鎖ＣＤＲの外側に位置する６個、５個、４個、３個、２個または１個の保存的アミノ酸置換とを有することを除いて（例えば、変異の位置はＦＲ領域または定常領域にある）、ペムブロリズマブのものと実質的に同一の重鎖及び軽鎖配列を含むが、場合によっては重鎖のＣ末端リジン残基が欠失しているモノクローナル抗体を意味する。言い換えれば、ペムブロリズマブ及びペムブロリズマブ変異体は同一のＣＤＲ配列を含むが、それぞれ、それらの完全長軽鎖配列及び重鎖配列における３個または６個以下の他の位置に保存的アミノ酸置換を有するため互いに異なる。ペムブロリズマブ変異体は、以下の特性に関して、ペムブロリズマブと実質的に同じである：すなわち、以下の特性とはＰＤ－１に対する結合親和性、ならびにＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－Ｌ２のそれぞれのＰＤ－１への結合をブロックする能力である。

【0048】

本発明の治療方法、薬剤及び使用のいくつかの実施形態では、ＰＤ－１アンタゴニストは、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むモノクローナル抗体またはその抗原結合断片である。

【0049】

本発明の治療方法、薬剤及び使用のいくつかの実施形態では、ＰＤ－１アンタゴニストは、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むモノクローナル抗体またはその抗原結合断片である。重鎖可変領域配列の変異体は、フレームワーク領域（すなわち、ＣＤＲの外側）に最大１７個の保存的アミノ酸置換を有することを除いて参照配列と同一であり、好ましくはフレームワーク領域内に１０個、９個、８個、７個、６個または５個未満の保存的アミノ酸置換を有する。軽鎖可変領域配列の変異体は、フレームワーク領域（すなわち、ＣＤＲの外側）に最大５個の保存的アミノ酸置換を有することを除いて参照配列と同一であり、好ましくは４個、３個または２個未満の保存的アミノ酸置換をフレームワーク領域に有する。

【0050】

本発明の治療方法、薬剤及び使用の別の実施形態では、ＰＤ－１アンタゴニストは、（ａ）配列番号１５を含む重鎖と、（ｂ）配列番号１９を含む軽鎖とを含むモノクローナル抗体である。

【0051】

本発明の治療方法、薬剤及び使用のすべてにおいて、ＰＤ－１アンタゴニストはＰＤ－Ｌ１のＰＤ－１への結合を阻害し、好ましくはＰＤ－Ｌ２のＰＤ－１への結合も阻害する。上記の治療方法、薬剤及び使用のいくつかの実施形態では、ＰＤ－１アンタゴニストは、ＰＤ－１に特異的に結合し、ＰＤ－Ｌ１のＰＤ－１への結合をブロックするモノクローナル抗体またはその抗原結合断片である。一実施形態では、ＰＤ－１アンタゴニストは、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含む抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片である。一実施形態では、ＰＤ－１アンタゴニストは、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含む抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片である。一実施形態では、ＰＤ－１アンタゴニストは、重鎖及び軽鎖を含む抗ＰＤ－１抗体であり、重鎖及び軽鎖は、それぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。一実施形態では、ＰＤ－１アンタゴニストは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体である。一実施形態では、ＰＤ－１アンタゴニストはペムブロリズマブである。

【0052】

以下の表３は、本発明の治療方法、薬剤及び使用において使用するための例示的な抗ＰＤ－１抗体のアミノ酸配列のリストを提供する。

【表3-1】

【表3-2】

【0053】

併用療法及び医薬組成物
本開示はさらに、誘導性ＩＬ－２プロドラッグとＰＤ－１アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ－１抗体、例えば、ペムブロリズマブ）との併用を含む併用療法を使用してがんを治療する方法に関する。本開示はまた、そのような方法で使用するための医薬組成物、薬剤とも呼ばれ得る組成物にも関する。この開示により提供されるのは、誘導性ＩＬ－２プロドラッグと併用して使用するためのＰＤ－１アンタゴニストを含む医薬組成物と、ＰＤ－１アンタゴニストと併用して使用するための誘導性ＩＬ－２プロドラッグを含む医薬組成物と、好ましくはペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体であるＰＤ－１アンタゴニストと併用して誘導性ＩＬ－２プロドラッグを含む医薬組成物と、である。

【0054】

併用療法はまた、１つまたは複数の追加の治療剤を含んでもよい。追加の治療剤とは、例えば、化学療法剤、生物療法剤、免疫原性薬剤（例えば、弱力化したがん細胞、腫瘍抗原、腫瘍由来の抗原または核酸でパルスされた樹状細胞などの抗原提示細胞、免疫刺激性サイトカイン（例えば、ＩＬ－２、ＩＦＮα２、ＧＭ－ＣＳＦ）、これに限定されないがＧＭ－ＣＳＦなどの免疫刺激性サイトカインをコード化する遺伝子でトランスフェクションされた細胞）のことであってもよい。追加の治療剤の具体的な用量及び投与スケジュールはさらに変化することがあり、最適な用量、投与スケジュール及び投与経路は、使用される特定の治療剤に基づいて決定される。

【0055】

本開示は、がんを治療する方法に関するものであり、この方法は、誘導性ＩＬ－２プロドラッグと、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体などのＰＤ－１アンタゴニストとを含む併用療法を、必要とする被験者に投与することを含む。誘導性ＩＬ－２プロドラッグ、及びペムブロリズマブなどのＰＤ－１アンタゴニストは、２つの治療剤の薬理学的活性が重複するように被験者に投与される。したがって、誘導性ＩＬ－２プロドラッグを、ペムブロリズマブなどのＰＤ－１アンタゴニストの前に、後で、同時に、または手術の直前・術中・直後に投与することができる。この方法のいくつかの実施では、ペムブロリズマブなどのＰＤ－１アンタゴニストが、誘導性ＩＬ－２プロドラッグの前に投与される。この方法のいくつかの実施では、ペムブロリズマブなどのＰＤ－１アンタゴニストが、誘導性ＩＬ－２プロドラッグの後に投与される。この方法のいくつかの特定の実施では、ペムブロリズマブなどのＰＤ－１アンタゴニストが投与され、次いで、ペムブロリズマブなどのＰＤ－１アンタゴニストの投与が完了してから約３０分後に、誘導性ＩＬ－２プロドラッグが投与される。

【0056】

本明細書で使用される「有効量」という用語は、投与条件下で所望の効果を達成するために投与される薬剤（誘導性ＩＬ－２プロドラッグ及びＰＤ－１アンタゴニスト）の量、すなわち、腫瘍サイズを低減するような、腫瘍負荷を低減するような、無増悪生存期間を延長するような、または全生存期間を延長するような量を指す。選択される実際の有効量は、治療される特定のがん及びそのステージ、ならびに被験者の年齢、性別、体重、民族、以前の治療及びそれらの治療に対する応答及び他の要因などの他の要因に依存する。投与される誘導性ＩＬ－２プロドラッグ、及びペムブロリズマブなどのＰＤ－１アンタゴニストの適切な量、ならびに特定の患者に対する投与スケジュールを、これら及び他の考慮事項に基づいて、通常の技量の臨床医によって決定することができる。

【0057】

例えば、約１ｍｇ～約５００ｍｇの誘導性ＩＬ－２プロドラッグを約２週間ごとに投与することができる。そして、約１００ｍｇ～約６００ｍｇのペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体を約３～６週間ごとに投与することができる（例えば、３週間ごと（Ｑ３Ｗ）に２００ｍｇまたは６週間ごと（Ｑ６Ｗ）に４００ｍｇ）。例えば、約１ｍｇ～約５００ｍｇの誘導性ＩＬ－２プロドラッグを約２週間ごとに投与することができる。そして、２００ｍｇまたは４００ｍｇのペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体を約３～６週間ごとに投与することができる（例えば、３週間ごと（Ｑ３Ｗ）に２００ｍｇまたは６週間ごと（Ｑ６Ｗ）に４００ｍｇ）。小児への投与量は異なる場合がある。例えば、小児患者の場合、ペムブロリズマブは通常、３週間ごとに約２ｍｇ／ｋｇで、最大２００ｍｇで投与される。

【0058】

本開示の方法及び組成物は、第１選択療法として、または他の療法の後、もしくは他の療法に加えて、必要とする被験者に投与することができる。本開示による治療の必要とする被験者とは、以前の治療または進行中の治療に対して完全奏効を達成できなかった、または以前の治療または進行中の治療に対して部分奏効を達成できなかった被験者のことであってもよい。例えば、本開示による、必要とする被験者または治療中の被験者は、チェックポイント阻害剤を含む以前のまたは進行中の治療に対して完全奏効または部分奏効を達成できなかった被験者のことであってもよい。本開示による治療の必要とする被験者とは、チェックポイント阻害剤を含む進行中または以前の治療により、６ヶ月を超えて（ＳＤ＞６）安定した疾患を達成できなかった被験者のことであってもよい。実施形態では、被験者は、以前の治療または進行中の治療に対して完全奏効または部分奏効を達成できず、その治療では、１）ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ）、ドスタルリマブ（ＪＥＭＰＥＲＬＩ）、セミプリマブ－ｒｗｌｃ（ＬＩＢＡＴＹＯ）、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ）、カムレリズマブ、チスレリズマブ、トリパリマブ及びシンチリマブ（ＴＹＶＹＴ）などの抗ＰＤ１抗体、２）アベルマブ（ＢＡＶＥＮＣＩＯ）、デュルバルマブ（ＩＭＦＩＮＺＩ）及びアテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ）などの抗ＰＤ－Ｌ１抗体、または３）イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ）などの抗ＣＴＬＡ－４抗体が用いられた。

【0059】

誘導性ＩＬ－２プロドラッグ及びＰＤ－１アンタゴニスト（例えば、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体）は、典型的には、例えば静脈内注射または好ましくは静脈内注入によって全身投与される。他の種類の投与、例えば、経口、非経口、静脈内、関節内、腹腔内、筋肉内、皮下、腔内、経皮、肝内、頭蓋内、噴霧／吸入、気管支鏡法による設置、または腫瘍内などを使用することができる。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１アンタゴニストは皮下投与される。

【0060】

本発明の特定の実施形態では、併用療法におけるＰＤ－１アンタゴニストは、本明細書に記載の抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片である。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、１ｍｇ／ｋｇ Ｑ２Ｗ、２ｍｇ／ｋｇ Ｑ２Ｗ、３ｍｇ／ｋｇ Ｑ２Ｗ、５ｍｇ／ｋｇ Ｑ２Ｗ、１０ｍｇ／ｋｇ Ｑ２Ｗ、１ｍｇ／ｋｇ Ｑ３Ｗ、２ｍｇ／ｋｇ Ｑ３Ｗ、３ｍｇ／ｋｇ Ｑ３Ｗ、５ｍｇ／ｋｇ Ｑ３Ｗ、１０ｍｇ／ｋｇ Ｑ３Ｗ、及びこれらの用量のいずれかの固定用量当量、すなわち、２００ｍｇ Ｑ３Ｗまたは４００ｍｇ Ｑ６Ｗなど、からなる群から選択される用量で液体薬剤として投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、２５ｍｇ／ｍｌの抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片と、１０ｍＭヒスチジン緩衝液ｐＨ５．５中の７％（ｗ／ｖ）スクロース及び０．０２％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０とを含む液体薬剤として提供される。他の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、約１２５～約２００ｍｇ／ｍＬの抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片と、約１０ｍＭのヒスチジン緩衝液と、約１０ｍＭのＬ－メチオニンまたはその薬学的に受容可能な塩と、約７％（ｗ／ｖ）スクロースと、約０．０２％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０とを含む液体薬剤として提供される。一実施形態では、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含む。一実施形態では、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含む。一実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含み、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。一実施形態では、抗ＰＤ－１抗体はペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体である。一実施形態では、抗ＰＤ－１抗体はペムブロリズマブである。

【0061】

いくつかの実施形態では、選択された用量の抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、ＩＶ注入によって投与される。一実施形態では、選択された用量の抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、２５～４０分間、または約３０分間の時間にわたってＩＶ注入によって投与される。他の実施形態では、選択された用量の抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は皮下投与される。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブのことであってもよい。

【0062】

いくつかの実施形態では、患者は少なくとも２４週間、例えば３週間を８サイクル、併用療法で治療される。いくつかの実施形態では、併用療法での治療を、患者がＰＤ効果、またはＣＲ、または進行性疾患の徴候を示すまで継続する。

【0063】

本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、任意の適切ながん、特に肉腫及び癌腫などの固形腫瘍を治療することができる。例えば、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、副腎皮質癌腫、肛門癌、虫垂癌、星細胞腫、基底細胞癌腫、脳腫瘍、胆管癌、膀胱癌、骨癌、乳癌、気管支腫瘍、原発不明癌腫、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、管癌腫、胎児性腫瘍、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、鼻腔神経芽細胞腫、線維性組織球腫、ユーイング肉腫、眼癌、細菌細胞腫瘍、胆嚢癌、胃癌、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍、妊娠性絨毛膜疾患、神経膠腫、頭頸部癌、肝細胞癌、組織球増殖症、ホジキンリンパ腫、下咽頭癌、眼球内黒色腫、島細胞腫瘍、カポジ肉腫、腎臓癌、ランゲルハンス病細胞組織球症、喉頭癌、口唇及び口腔癌、肝臓癌、上皮内小葉癌腫、肺癌、悪性線維性組織球腫、黒色腫、メルケル細胞癌腫、中皮腫、原発不明の転移性の扁平上皮頚部癌、ＮＵＴ遺伝子に関連する正中線上の癌腫、口腔癌、多発性内分泌腫瘍症候群、菌状息肉症、鼻腔及び副鼻腔癌、鼻咽頭癌、神経芽腫、非小細胞肺癌、中咽頭癌、骨肉腫、卵巣癌、膵臓癌、乳頭腫症、傍神経節腫、副甲状腺癌、陰茎癌、咽頭癌、褐色細胞腫、下垂体腫瘍、胸膜肺芽腫、原発性中枢神経系リンパ腫、前立腺癌、直腸癌、腎細胞癌、腎盂及び尿管癌、網膜芽細胞腫、ラブドイド腫瘍、唾液腺癌、セザリー症候群、皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟部組織肉腫、脊髄腫瘍、胃の癌、Ｔ細胞リンパ腫、奇形腫瘍、精巣癌、咽喉癌、胸腺腫及び胸腺癌腫、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、膣癌、外陰部癌、非ホジキンリンパ腫、頭頸部扁平上皮癌腫、悪性胸膜中皮腫、ならびにウィルムス腫瘍を治療することができる。

【0064】

好ましくは、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、結腸癌、肺癌、黒色腫、腎細胞癌腫、または乳癌を治療する。

【0065】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、古典的ホジキンリンパ腫（ｃＨＬ）、縦隔原発大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、尿路上皮癌腫、高マイクロサテライト不安定性またはミスマッチ修復機構欠損の癌、高マイクロサテライト不安定性またはミスマッチ修復機構欠損の結腸直腸癌、胃癌、食道癌、子宮頸癌、肝細胞癌腫（ＨＣＣ）、メルケル細胞癌腫（ＭＣＣ）、腎臓細胞癌腫（ＲＣＣ）、子宮内膜癌腫、腫瘍変異負荷の高い癌、皮膚扁平上皮癌腫（ｃＳＣＣ）、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）、尿路上皮癌腫、結腸直腸癌、または食道癌腫を治療する。

【0066】

本明細書に開示される方法及び組成物のいずれをも使用して、ＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－Ｌ２の一方または両方について検査結果が陽性、好ましくはＰＤ－Ｌ１発現について検査結果が陽性であるがんを有するヒト被験者を治療することができる。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１発現は、患者から採取された腫瘍サンプルのＦＦＰＥまたは凍結組織切片に関するＩＨＣアッセイにおいて、診断用抗ヒトＰＤ－Ｌ１抗体またはその抗原結合断片を使用して検出される。通常、被験者の医師は、ＰＤ－１アンタゴニストによる治療の開始前に、患者から採取した腫瘍組織サンプルにおけるＰＤ－Ｌ１発現を判定するための診断用検査を指示することになるが、医師は、例えば治療サイクルの完了後など治療開始後いつでも、最初の診断検査またはその後の診断用検査を指示できることが想定される。一実施形態では、ＰＤ－Ｌ１発現は、ＰＤ－Ｌ１ ＩＨＣ ２２Ｃ３ ｐｈａｒｍＤｘアッセイによって測定される。別の実施形態では、患者のＰＤ－Ｌ１発現についての単核炎症密度スコアは≧２である。別の実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての単核炎症密度スコアは≧３である。別の実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての単核炎症密度スコアは≧４である。別の実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての腫瘍割合スコアは≧１％である。別の実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての腫瘍割合スコアは≧１０％である。別の実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての腫瘍割合スコアは≧２０％である。別の実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての腫瘍割合スコアは≧３０％である。別の実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての腫瘍割合スコアは≧４０％である。別の実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての腫瘍割合スコアは≧５０％である。さらなる実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての複合陽性スコアは≧１％である。さらなる実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての複合陽性スコアは１～２０％である。さらなる実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての複合陽性スコアは≧２％である。さらなる実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての複合陽性スコアは≧５％である。なおもさらなる実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての複合陽性スコアは≧１０％である。さらなる実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての複合陽性スコアは≧１５％である。なおもさらなる実施形態では、被験者のＰＤ－Ｌ１発現についての複合陽性スコアは≧２０％である。

【0067】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、黒色腫を治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、切除不能または転移性の黒色腫を有する被験者における黒色腫を治療することができる。別の一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を、完全切除後のリンパ節（複数可）が関与する黒色腫を有する被験者のアジュバント治療に使用することができる。

【0068】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、ＮＳＣＬＣを有する被験者におけるＮＳＣＬＣを治療することができ、このＮＳＣＬＣは、ＦＤＡ承認の検査により判定されたとおりＰＤ－Ｌ１を発現しており（例えば、腫瘍割合スコア（ＴＰＳ）≧１％）、ＥＧＦＲ異常もＡＬＫゲノム腫瘍異常もなく、被験者が外科的切除または根治的化学放射線療法の候補にならないステージＩＩＩであるか、または転移性である。別の一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、転移性ＮＳＣＬＣを有する患者におけるＮＳＣＬＣを治療することができ、この患者の腫瘍は、ＦＤＡ承認の検査により判定されたとおりＰＤ－Ｌ１（ＴＰＳ≧１％）を発現しており、プラチナ含有化学療法中またはプラチナ含有化学療法後に疾患進行が見られる。別の一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を、ＥＧＦＲ異常もＡＬＫゲノム腫瘍異常もない転移性非扁平上皮ＮＳＣＬＣ患者の第１選択治療として、ペメトレキセド及びプラチナ化学療法と併用して使用することができる。別の一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を、転移性扁平上皮を有するＮＳＣＬＣ患者の第１選択治療として、カルボプラチンと、パクリタキセルまたはパクリタキセルタンパク質結合型のいずれかとを併用して使用することができる。

【0069】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、ＳＣＬＣを治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、転移性ＳＣＬＣを有する被験者におけるＳＣＬＣを治療することができ、このＳＣＬＣでは、プラチナベース化学療法中またはプラチナベース化学療法後に疾患進行が見られ、以前に少なくとも１つの他の治療法が用いられていた。

【0070】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、ＨＮＳＣＣを治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、転移性または切除不能再発性のＨＮＳＣＣを有する被験者におけるＨＮＳＣＣを治療することができ、この被験者の腫瘍は、ＦＤＡ承認の検査により判定されたとおりＰＤ－Ｌ１（例えば、複合陽性スコア（ＣＰＳ）≧１）を発現している。別の一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、再発性または転移性のＨＮＳＣＣを有する被験者におけるＨＮＳＣＣを治療することができ、このＨＮＳＣＣでは、プラチナ含有化学療法中またはプラチナ含有化学療法後に疾患進行が見られる。別の一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を、転移性または切除不能再発性のＨＮＳＣＣを有する患者の第１選択治療のために、プラチナ及びフルオロウラシルと併用して使用することができる。

【0071】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、ｃＨＬを治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、再発性または難治性のｃＨＬを有する被験者におけるｃＨＬを治療することができる。別の一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、小児被験者におけるｃＨＬを治療することができ、この小児被験者は、難治性ｃＨＬ、または２つもしくはそれより多くの治療法の後に再発したｃＨＬを有している。

【0072】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、ＰＭＢＣＬを治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、被験者におけるＰＭＢＣＬを治療することができ、この被験者は難治性ＰＭＢＣＬを有しているか、またはこの被験者は以前の２つもしくはそれより多くの治療法の後に再発している。

【0073】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、尿路上皮癌腫を治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、尿路上皮癌腫を治療することができ、この尿路上皮癌腫を有する被験者は、局所進行性または転移性の尿路上皮癌を有しており、シスプラチン含有化学療法に適格ではなく、その腫瘍がＦＤＡ承認の検査により判定されたとおりＰＤ－Ｌ１（例えば、複合陽性スコア（ＣＰＳ）≧１０）を発現しているか、または被験者は、ＰＤ－Ｌ１の状態にかかわらず、いかなるプラチナ含有化学療法にも適格ではない。別の一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、尿路上皮癌腫を治療することができ、この尿路上皮癌腫を有する被験者は、局所進行性または転移性の尿路上皮癌を有しており、プラチナ含有化学療法中もしくはプラチナ含有化学療法後、またはプラチナ含有化学療法によるネオアジュバントもしくはアジュバントの治療後１２ヶ月以内に、進行した疾患を有している。別の一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、尿路上皮癌腫を治療することができ、この尿路上皮癌腫を有する被験者は、カルメットゲラン桿菌（ＢＣＧ）非反応性高リスク筋層非浸潤性膀胱癌（ＮＭＩＢＣ）を有し、乳頭状腫瘍の有無にかかわらず上皮内癌（ＣＩＳ）を有し、膀胱切除術を受ける資格がない、または受けないことを選択した被験者である。

【0074】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、高マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）またはミスマッチ修復機構欠損（ｄＭＭＲ）の癌を治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、切除不能または転移性のＭＳＩ－ＨまたはｄＭＭＲの癌を有する被験者のＭＳＩ－ＨまたはｄＭＭＲの癌を治療することができ、ここでは、固形腫瘍が以前の治療後に進行したが被験者には満足のいく代替治療の選択肢がない、またはフルオロピリミジン、オキサリプラチン及びイリノテカンによる治療後に結腸直腸癌が進行している。

【0075】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、高マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）またはミスマッチ修復機構欠損（ｄＭＭＲ）の結腸直腸癌を治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、切除不能または転移性のＭＳＩ－ＨまたはｄＭＭＲの結腸直腸癌を有する被験者におけるＭＳＩ－ＨまたはｄＭＭＲの結腸直腸癌を治療することができる。

【0076】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、胃癌を治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、再発性の局所進行性または転移性の胃または胃食道接合部の腺癌を有する被験者における胃癌を治療することができ、この被験者の腫瘍は、ＦＤＡ承認の検査により判定されたとおりＰＤ－Ｌ１（例えば、複合陽性スコア（ＣＰＳ）≧１）を発現しており、フルオロピリミジン含有及びプラチナ含有の化学療法、ならびに適切であればＨＥＲ２／ｎｅｕ標的療法を含む以前の２つまたはそれ以上の治療法中または治療法後に疾患進行が見られる。

【0077】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、食道癌を治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、被験者における食道癌を治療するために使用することができ、この被験者は、局所進行性または転移性の食道または胃食道接合部（ＧＥＪ）の癌腫（例えば、ＧＥＪより１～５センチメートル上に発生源を有する腫瘍）を有するが、この癌腫は外科的切除またはプラチナ及びフルオロピリミジンベースの化学療法と併用した根治的化学放射線療法には適さない。別の一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、被験者における食道癌を治療するために使用することができ、この被験者は、局所進行性または転移性の食道または胃食道接合部（ＧＥＪ）の癌腫（例えば、ＧＥＪより１～５センチメートル上に発生源を有する腫瘍）を有するが、この癌腫は、ＦＤＡ承認の検査により判定されたとおりＰＤ－Ｌ１（ＣＰＳ≧１０）を発現する扁平上皮組織型腫瘍を有する患者向けの以前の１つまたは複数の全身治療法の後での、外科的切除または根治的化学放射線療法には適さない。

【0078】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、子宮頸癌を治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、再発性または転移性子宮頸癌を有する被験者における子宮頸癌を治療することができ、この被験者には、化学療法中または化学療法後に疾患進行が見られ、その腫瘍は、ＦＤＡ承認の検査により判定されたとおりＰＤ－Ｌ１（例えば、複合陽性スコア（ＣＰＳ）≧１）を発現している。

【0079】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、ＨＣＣを治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、ソラフェニブで以前に治療された被験者におけるＨＣＣを治療することができる。

【0080】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、ＭＣＣを治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、再発性の局所進行性または転移性のＭＣＣを有する被験者におけるＭＣＣを治療することができる。

【0081】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、ＲＣＣを治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物は、進行性ＲＣＣを有する患者の第１選択治療のために、アキシチニブと併用して使用することができる。

【0082】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、子宮内膜癌腫を治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を、ＭＳＩ－ＨでもｄＭＭＲでもない進行性子宮内膜癌腫を有する被験者の治療のためにレンバチニブと併用して使用することができ、この被験者は、以前の全身療法後に疾患が進行しており、根治目的の手術または放射線療法の候補ではない。

【0083】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、高腫瘍遺伝子変異量（ＴＭＢ－Ｈ）癌を治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、被験者におけるＴＭＢ－Ｈ癌を治療することができ、この被験者は、ＦＤＡ承認の検査により判定されたとおり腫瘍遺伝子変異量高スコア（例えば、≧１０変異／百万塩基（ｍｕｔ／Ｍｂ））の切除不能または転移性の固形腫瘍を有し、この固形腫瘍は以前の治療後に進行しており、この被験者には満足のいく代替治療の選択肢がない。

【0084】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、皮膚扁平上皮癌腫（ｃＳＣＣ）を治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を、再発性または転移性の皮膚扁平上皮癌腫を有する被験者におけるｃＳＣＣを治療するために使用することができ、この皮膚扁平上皮癌腫は手術または放射線療法では治癒できない。

【0085】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）を治療する。一例として、本明細書に開示される方法及び組成物を、局所再発性切除不能または転移性のＴＮＢＣを有する被験者の治療のために化学療法と併用して使用することができ、この被験者の腫瘍は、ＦＤＡ承認の検査により判定されたとおりＰＤ－Ｌ１（例えば、複合陽性スコア（ＣＰＳ）≧１０）を発現している。

【0086】

本開示の方法及び組成物を使用して治療されるがんとは、転移性癌のことであってもよい。

【0087】

特定の実施形態では、本明細書に開示される方法及び組成物を使用して、転移性腎明細胞癌腫または転移性皮膚悪性黒色腫を治療する。

【0088】

この方法の実施形態では、化合物１、２、３もしくは４またはそのアミノ酸配列変異体を、３週間ごとに約１ｍｇ～約２４０ｍｇの量でがんを有する被験者に投与し、ペムブロリズマブ（またはペムブロリズマブ変異体、またはバイオシミラー）を、約３週間ごと（Ｑ３Ｗ）に２００ｍｇ、または約６週間ごと（Ｑ６Ｗ）に４００ｍｇの量で投与する。

【0089】

化合物１、２、３もしくは４またはそのアミノ酸配列変異体を、がんを有する被験者に３週間ごとに約１ｍｇの量で投与することができ、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、転移性腎明細胞癌腫または転移性皮膚悪性黒色腫など、本明細書に開示されるがんまたは腫瘍を治療するために、約３週間ごとに２００ｍｇ、または約６週間ごとに４００ｍｇの量で投与する。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0090】

化合物１、２、３もしくは４またはそのアミノ酸配列変異体を、がんを有する被験者に３週間ごとに約１ｍｇ～約３ｍｇ（例えば、１ｍｇ、２ｍｇまたは３ｍｇ）の量で投与することができ、ペムブロリズマブなどの抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、転移性腎明細胞癌腫または転移性皮膚悪性黒色腫など、本明細書に開示されるがんまたは腫瘍を治療するために、約３週間ごと（Ｑ３Ｗ）に２００ｍｇ、または約６週間ごと（Ｑ６Ｗ）に４００ｍｇの量で投与する。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0091】

化合物１、２、３もしくは４またはそのアミノ酸配列変異体を、がんを有する被験者に３週間ごとに約１０ｍｇの量で投与することができ、ペムブロリズマブなどの抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、転移性腎明細胞癌腫または転移性皮膚悪性黒色腫など、本明細書に開示されるがんまたは腫瘍を治療するために、約３週間ごとに２００ｍｇ、または約６週間ごとに４００ｍｇの量で投与する。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0092】

化合物１、２、３もしくは４またはそのアミノ酸配列変異体を、がんを有する被験者に３週間ごとに約３０ｍｇの量で投与することができ、ペムブロリズマブなどの抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、転移性腎明細胞癌腫または転移性皮膚悪性黒色腫など、本明細書に開示されるがんまたは腫瘍を治療するために、約３週間ごとに２００ｍｇ、または約６週間ごとに４００ｍｇの量で投与する。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0093】

化合物１、２、３もしくは４またはそのアミノ酸配列変異体を、がんを有する被験者に３週間ごとに約６０ｍｇの量で投与することができ、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、転移性腎明細胞癌腫または転移性皮膚悪性黒色腫など、本明細書に開示されるがんまたは腫瘍を治療するために、約３週間ごとに２００ｍｇ、または約６週間ごとに４００ｍｇの量で投与する。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0094】

化合物１、２、３もしくは４またはそのアミノ酸配列変異体を、がんを有する被験者に３週間ごとに約１２０ｍｇの量で投与することができ、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、転移性腎明細胞癌腫または転移性皮膚悪性黒色腫など、本明細書に開示されるがんまたは腫瘍を治療するために、約３週間ごとに２００ｍｇ、または約６週間ごとに４００ｍｇの量で投与する。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0095】

化合物１、２、３もしくは４またはそのアミノ酸配列変異体を、がんを有する被験者に３週間ごとに約２４０ｍｇの量で投与することができ、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を、転移性腎明細胞癌腫または転移性皮膚悪性黒色腫など、本明細書に開示されるがんまたは腫瘍を治療するために、約３週間ごとに２００ｍｇ、または約６週間ごとに４００ｍｇの量で投与する。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0096】

所望により、追加の治療剤を被験者に投与することができる。通常、このような追加の治療剤は、化学療法剤（例えば、アドリアマイシン、セルビジン、ブレオマイシン、アルケラン、ベルバン、オンコビン、フルオロウラシル、チオテパ、メトトレキサート、ビサントレン、ノアントロン、チグアニン、シタリビン、プロカラビジン）などの抗がん剤、他の免疫チェックポイント阻害剤（例えば、抗ＣＴＬＡ４（イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ）））、他のサイトカイン（ＩＬ－１２または誘導性ＩＬ－１２プロドラッグなど）、血管新生阻害剤、抗体薬物複合体（例えば、トラスツズマブエムタンシン（ＫＡＤＣＹＬＡ）、トラスツズマブデルクステカン（ＥＮＨＥＲＴＵ）、エンフォルツマブベドチン（ＰＡＤＣＥＶ）、サシツズマブゴビテカン（ＴＲＯＤＥＬＶＹ）、細胞療法（例えば、ＣＡＲ－Ｔ、ＴＣＴ－Ｔ、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）療法などのＴ細胞療法）、腫瘍溶解性ウイルス、放射線療法及び／または低分子である。

【0097】

追加の治療剤とは、例えば、ペメトレキセド、プラチナ化学療法剤、カルボプラチン、パクリタキセル、タンパク質結合パクリタキセル、フルオロウラシル、フルオロピリミジンベースの化学療法剤、またはアキシチニブのことであってもよい。

【0098】

例えば、転移性非扁平上皮非小細胞肺癌を治療するための方法は、本明細書に開示される誘導性ＩＬ－２プロドラッグ、抗ＰＤ－１抗体（またはその抗原結合断片）、ペメトレキセド及びプラチナ化学療法剤を投与することを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0099】

別の例では、転移性扁平上皮非小細胞肺癌を治療するための方法は、本明細書に開示される誘導性ＩＬ－２プロドラッグ、抗ＰＤ－１抗体（またはその抗原結合断片）、及びパクリタキセルを投与することを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0100】

別の例では、転移性扁平上皮非小細胞肺癌を治療するための方法は、本明細書に開示される誘導性ＩＬ－２プロドラッグ、抗ＰＤ－１抗体（またはその抗原結合断片）、及びタンパク質結合パクリタキセルを投与することを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0101】

別の例では、転移性または切除不能な再発性の頭頸部扁平上皮癌を治療するための方法は、本明細書に開示される誘導性ＩＬ－２プロドラッグ、抗ＰＤ－１抗体（またはその抗原結合断片）、及びフルオロウラシルを投与することを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0102】

別の例では、外科的切除または根治的化学放射線療法が適さない局所進行性または転移性の食道または胃食道接合部の癌腫を治療する方法は、本明細書に開示される誘導性ＩＬ－２プロドラッグ、抗ＰＤ－１抗体（またはその抗原結合断片）、ならびにプラチナベース及びフルオロピリミジンベースの化学療法剤を投与することを含む。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0103】

別の例では、進行性腎細胞癌腫を治療する方法は、本明細書に開示される誘導性ＩＬ－２プロドラッグ、抗ＰＤ－１抗体（またはその抗原結合断片）、及びアキシチニブを投与することを含む。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0104】

別の例では、腎細胞癌腫を治療するための方法は、化合物１、２、３もしくは４またはそのアミノ酸配列変異体を３週間ごとに約２４０ｍｇの量でがんを有する被験者に投与することを含むことができ、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を約３週間ごとに２００ｍｇ、または約６週間ごとに４００ｍｇの量で投与し、アキシチニブを５ｍｇの量で毎日２回経口投与する。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0105】

別の例では、以前の全身療法後に疾患が進行し、根治目的の手術または放射線療法の候補者ではない被験者における、高マイクロサテライト不安定性でなく、ミスマッチ修復機構欠損でもない進行性子宮内膜癌腫を治療する方法は、本明細書に開示される誘導性ＩＬ－２プロドラッグ、抗ＰＤ－１抗体（またはその抗原結合断片）、及びレンバチニブを投与することを含む。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0106】

別の例では、子宮内膜癌腫または腎細胞癌腫を治療するための方法は、化合物１、２、３もしくは４またはそのアミノ酸配列変異体を３週間ごとに約２４０ｍｇの量でがんを有する被験者に投与することを含むことができ、抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片を約３週間ごとに２００ｍｇ、または約６週間ごとに４００ｍｇの量で投与し、レンバチニブを２０ｍｇの量で毎日１回経口投与する。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0107】

別の例では、腫瘍がＰＤ－Ｌ１を発現する局所再発性切除不能または転移性のトリプルネガティブ乳癌を治療する方法は、本明細書に開示される誘導性ＩＬ－２プロドラッグ、抗ＰＤ－１抗体（またはその抗原結合断片）、及び化学療法剤を投与することを含む。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0108】

医薬組成物は、液体、凍結乾燥などの様々な形態をとることができ、典型的には適切な薬学的に受容可能な担体を含む。薬学的に受容可能な担体（または賦形剤）は、医薬組成物の非活性成分構成要素であり、生物学的またはその他の点で望ましくないものではない。すなわち、材料は、望ましくない生物学的影響を引き起こしたり、またはそれが含まれる医薬製剤または組成物の他の成分と有害な様式で相互作用を起こしたりすることなく被験者に投与される。担体を頻繁に選択して、活性成分の分解を最小限に抑え、被験者における悪い副作用を最小限に抑える。

【0109】

適切な担体及びその処方は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１^ｓｔＥｄｉｔｉｏｎ， Ｄａｖｉｄ Ｂ． Ｔｒｏｙ， ｅｄ．， Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ （２００５）に記載されている。薬学的に受容可能な担体の例には、滅菌水、生理食塩水、リンゲル溶液などの緩衝溶液、及びデキストロース溶液が含まれるが、これらに限定されない。他の担体には、免疫原性ポリペプチドを含む固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスなどの徐放性製剤が含まれる。マトリックスは、フィルム、リポソームまたは微粒子などの成形品の形態をしている。例えば、投与経路及び投与される組成物の濃度に依存して、特定の担体がより好ましい場合がある。担体は、キメラポリペプチド、またはキメラポリペプチドをコード化する核酸配列をヒトもしくは他の被験者に投与するのに好適な担体である。

【0110】

非経口投与用の調合剤には、滅菌水溶液または非水溶液、懸濁液及び乳濁液が含まれる。非水溶媒の例には、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、オレイン酸エチルなどの注射用有機エステルが挙げられる。水性担体には、水、アルコール／水溶液、乳濁液または懸濁液（生理食塩水及び緩衝媒体など）が含まれる。非経口賦形剤には、塩化ナトリウム溶液、デキストロースリンゲル液、デキストロース及び塩化ナトリウム、乳酸リンゲル液または不揮発性油が含まれる。静脈内賦形剤には、流体及び栄養補給剤、電解質補給剤（デキストロースリンゲル液をベースとするものなど）などが含まれる。保存剤及び他の添加剤、例えば抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤及び不活性ガスなどが場合によっては存在する。典型的には、適切な量の薬学的に受容可能な塩を製剤中で使用して製剤を等張にするが、所望により、製剤を高張または低張にすることもできる。溶液のｐＨは概して約５～約８、または約７～７．５である。

【0111】

局所投与用の製剤には、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、滴剤、座薬、スプレー、液体及び粉末が含まれる。従来の医薬担体、水溶液、粉末、または油性基剤、増粘剤などが場合によっては必要であるか、または望ましい。

【0112】

経口投与用の組成物には、粉末もしくは顆粒、水もしくは非水性媒体中の懸濁液もしくは溶液、カプセル、小袋またはテーブルが含まれる。増粘剤、香味料、希釈剤、乳化剤、分散助剤または結合剤が場合によっては望ましい。

【0113】

また、本開示はキットに関連し、このキットは、ａ）適切な容器（例えば、バイアル、バッグなど）中の誘導性ＩＬ－２プロドラッグ組成物を含む医薬組成物（例えば液体組成物または凍結乾燥組成物として）と、ｂ）適切な容器（例えば、バイアル、バッグなど）中の抗ＰＤ－１抗体（またはその抗原結合断片）を含む組成物（例えば液体組成物または凍結乾燥組成物として）とを含む。キットは、凍結乾燥組成物の再構成のための滅菌水または生理食塩水などの他の成分をさらに含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）軽鎖ＣＤＲ配列番号６、７及び８と、（ｂ）重鎖ＣＤＲ配列番号１１、１２及び１３とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体またはその抗原結合断片は、（ａ）配列番号１４またはその変異体を含む重鎖可変領域と、（ｂ）配列番号９またはその変異体を含む軽鎖可変領域とを含むことができる。抗ＰＤ－１抗体は重鎖及び軽鎖を含むことができ、重鎖及び軽鎖はそれぞれ配列番号１０及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブまたはペムブロリズマブ変異体のことであってもよい。抗ＰＤ－１抗体とは、ペムブロリズマブ（またはバイオシミラー）のことであってもよい。

【0114】

他に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての専門用語、表記法、及びその他の科学用語は、本発明が関係する当業者によって一般的に理解される意味を有することを意図している。場合によっては、一般に理解されている意味を有する用語は、明快にするため、及び／またはすぐに参照できるように、本明細書で定義されており、このような定義を本明細書に含めることは、必ずしも当技術分野で概して理解されているものとの違いを表すものと解釈されるべきではない。本明細書に記載または参照される技術及び手順は、当業者によって概して理解されており、従来の方法論を使用して一般的に採用されている。その例には、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ ４ｔｈ ｅｄ． （２０１２） Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ， ＮＹに記載され、広く利用されている分子クローニング手法がある。必要に応じて、市販のキット及び試薬の使用を伴う手順は、特に明記されない限り、概して製造業者が定めたプロトコル及び条件に従って実施される。

【0115】

「サイトカイン」は、特に免疫系の細胞によって分泌され、免疫系のモジュレーターである免疫調節タンパク質（インターロイキンまたはインターフェロンなど）の分類のいずれかを指す周知の専門用語である。本明細書に開示される融合タンパク質に使用することができるサイトカインポリペプチドには、これらに限定されないが、ＴＧＦ－α及びＴＧＦ－β（例えば、ＴＧＦｂｅｔａ１、ＴＧＦｂｅｔａ２、ＴＧＦｂｅｔａ３）などの形質転換成長因子と、インターフェロン（例えば、インターフェロンα、インターフェロンβ、インターフェロンγ、インターフェロンカッパ、インターフェロンオメガなど）と、インターロイキン（例えば、ＩＬ－１、ＩＬ－１α、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－１４、ＩＬ－１５、ＩＬ－１６、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１及びＩＬ－２５）と、腫瘍壊死因子（腫瘍壊死因子α及びリンホトキシンなど）と、ケモカイン（例えば、Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフケモカイン１０（ＣＸＣＬ１０）、ＣＣＬ１９、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ２１）と、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳ）と、さらには、サイトカインの同族受容体を活性化するそのようなポリペプチドの断片（すなわち、前述のものの機能的断片）も含まれる。「ケモカイン」は、近くの応答性細胞に指向性走化性を誘導する能力を持つ小型サイトカインのファミリーのいずれかを指す専門用語である。

【0116】

本明細書で使用する場合、「誘導性」という用語は、プロドラッグの一部であるタンパク質、すなわちＩＬ－２がその受容体に結合し、腫瘍微小環境におけるプロドラッグの切断時に活性を引き起こす能力を指す。本明細書に開示される誘導性ＩＬ－２プロドラッグは、ＩＬ－２アゴニスト活性が減弱しているか、または活性がないが、腫瘍微小環境で切断されると活性なＩＬ－２を放出する。

【0117】

「減弱した」活性は、生物活性、典型的にはＩＬ－２受容体アゴニスト活性が、天然ＩＬ－２の活性と比較して低下することを意味する。本明細書に開示される誘導性ＩＬ－２プロドラッグは、ＩＬ－２受容体アゴニスト活性が減弱しており、天然ＩＬ－２と比較して、少なくとも約１０倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍、少なくとも約２５０倍、少なくとも約５００倍、少なくとも約１０００倍以下のアゴニスト活性である。腫瘍微小環境で切断されると、活性なＩＬ－２が放出される。典型的には、放出されるＩＬ－２は、そのプロドラッグのＩＬ－２受容体活性化活性よりも少なくとも約１０倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍、少なくとも約２５０倍、少なくとも約５００倍、または少なくとも約１０００倍大きいＩＬ－２受容体アゴニスト活性を有している。

【0118】

本明細書で使用する場合、「ペプチド」、「ポリペプチド」、または「タンパク質」という用語は、ペプチド結合によって結合された２つまたはそれよりも多くのアミノ酸を意味するために広く使用される。タンパク質、ペプチド及びポリペプチドも、本明細書ではアミノ酸配列を指すために互換的に使用される。ポリペプチドという用語は、本明細書では分子を構成するアミノ酸の特定のサイズまたは数を示唆するために使用されるものではなく、本発明のペプチドは数個以上のアミノ酸残基を含み得ることを認識すべきである。

【0119】

全体を通して使用される「被験者」とは、脊椎動物、より具体的には、哺乳類（例えば、ヒト、ウマ、ネコ、イヌ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、マウス、ウサギ、ラット及びモルモット）、鳥類、爬虫類、両生類、魚類、その他の任意の動物のことであってもよい。いくつかの実施形態では、哺乳類はヒトである。この用語は特定の年齢または性別を意味するものではない。したがって、男性か女性かを問わず、成人及び新生児の被験者が対象となることが意図されている。本明細書で使用する場合、「患者」または「被験者」は互換的に使用されてもよく、疾患または障害（例えば、がん）を有する被験者を指することができる。患者または被験者という用語には、ヒト及び獣医学の被験者が含まれる。本明細書で使用する「必要とする被験者」という用語は、本明細書で定義されるがんまたは感染病と診断された、またはそれらを有すると疑われる被験者を指す。

【0120】

本明細書で使用する場合、「治療」、「治療する」または「治療すること」という用語は、疾患もしくは病態の影響、または疾患もしくは病態の症状を軽減する方法を指す。したがって、開示された方法において、治療とは、腫瘍体積の低減、腫瘍負荷の低減、死亡の低減など、確立された疾患もしくは病態の重症度において、または疾患もしくは病態の症状において、少なくとも約１０％の、少なくとも約２０％の、少なくとも約３０％の、少なくとも約４０％の、少なくとも約５０％の、少なくとも約６０％の、少なくとも約７０％の、少なくとも約８０％の、少なくとも約９０％の、または実質的に完全な軽減のことを指すことができる。例えば、疾患を治療するための方法は、対照と比較して被験者において疾患の１つまたは複数の症状において１０％の軽減がある場合に、治療であるとみなされる。したがって、この軽減は、天然レベルまたは対照レベルと比較して１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、または１０％～１００％の間の任意のパーセントの軽減になる可能性がある。治療は、必ずしも疾患、病態、または疾患もしくは病態の症状の治癒または完全な除去を指すわけではないことが理解される。

【0121】

本明細書で使用する場合、疾患または障害の「予防する」、「予防する」、及び「予防」という用語は、例えば、被験者が疾患または障害の１つまたは複数の症状を示し始める前、またはほぼ同時に起こる、キメラポリペプチドまたはキメラポリペプチドをコード化する核酸配列の投与し、これにより、疾患または障害の１つまたは複数の症状の発症または悪化を抑制または遅延させる行動を指す。

【0122】

本明細書で使用する場合、「低下する」、「軽減する」または「抑制する」の言及には、適切な対照レベルと比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％以上の変化が含まれる。このような用語には、アゴニスト活性などの機能または特性の完全な除去が含まれる場合があるが、必ずしも含まれるわけではない。

【0123】

「配列変異体」という用語は、参照ポリペプチドと実質的に同様の生物学的活性を有するが、アミノ酸配列が異なるポリペプチドのアミノ酸配列を指す、または参照配列と実質的に同様の生物学的活性を有する（例えば、実質的に同様の活性を有するタンパク質をコード化する）が、ヌクレオチド配列が異なる核酸のヌクレオチド配列を指す。典型的には、「配列変異体」のアミノ酸配列またはヌクレオチド配列は、参照配列のアミノ酸配列またはヌクレオチド配列と非常に類似している（例えば、少なくとも約８０％類似している）。当業者は、２つのポリペプチドまたは２つの核酸の同一性を決定する方法を容易に理解する。例えば、定義された数のヌクレオチドまたはアミノ酸にわたって同一性が最高レベルとなるように、２つの配列を整列させた後に同一性を計算することができる。比較のための配列の最適な整列を、Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｗａｔｅｒｍａｎ Ａｄｖ． Ａｐｐｌ． Ｍａｔｈ． ２：４８２ （１９８１）の局所的同一性アルゴリズムによって、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ａｎｄ Ｗｕｎｓｃｈ， Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ４８：４４３ （１９７０）の同一性整列アルゴリズムによって、Ｐｅａｒｓｏｎ ａｎｄ Ｌｉｐｍａｎ， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８５：２４４４ （１９８８）の類似性検索法によって、これらのアルゴリズム（ＧＡＰ， ＢＥＳＴＦＩＴ， ＦＡＳＴＡ及びＴＦＡＳＴＡ、ただし、Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｐａｃｋａｇｅ（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ， ５７５ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｄｒ．， Ｍａｄｉｓｏｎ， Ｗｉｓ．）より）のコンピュータによる実装によって、または検査によって実施してもよい。

【0124】

「保存的アミノ酸置換」という用語は、ポリペプチド内のアミノ酸を、参照アミノ酸と同様の生化学的特性（サイズ、電荷、疎水性など）を有する別のアミノ酸で置換することを指す専門用語である。ポリペプチドのアミノ酸配列における保存的アミノ酸置換は、頻繁にはポリペプチドの全体的な構造または機能を大きく変化させないことは周知である。例示的な保存的置換を以下の表４に示す。

【表4】

【0125】

本明細書で引用されるすべての特許及び非特許刊行物の全開示は、すべての目的のためにその全体が参照によりそれぞれ本明細書に組み込まれる。

【表5-1】

【表5-2】

【表5-3】

【実施例】

【0126】

以下は本発明の方法及び組成物の例である。本明細書に提供される全体的な説明を考慮すれば、他の様々な実施形態を実施してもよいことが理解される。

【0127】

実施例１：誘導性ＩＬ－２及び抗ＰＤ－１前臨床モデル
これらの実施例では、「インダカイン（ＩＮＤＵＫＩＮＥ）」という用語は、詳細な説明に開示されている誘導性ＩＬ－２プロドラッグを指すために使用される。

【0128】

化合物１は、ＭＣ３８結腸癌腫、Ｂ１６Ｆ１０黒色腫及びＣＴ２６結腸癌腫モデルを含む複数のマウス同系腫瘍モデルで評価され、強力な単剤抗腫瘍活性及び免疫記憶形成が実証されている。

【0129】

実施例１Ａ：ＭＣ３８マウスモデル
マウスにＭＣ３８腫瘍を移植し、腫瘍の大きさが１００～１５０ｍｍ^３の場合に無作為に治療グループに分けた。次いで、マウスを週に２回、滴定量のリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）（賦形剤として機能）、化合物１、または対照ＩＬ－２インダカイン分子のいずれかで治療した。この対照ＩＬ－２インダカイン分子は、プロテアーゼで切断可能なリンカーを使用せずに処理されており、したがって、切断されおらず、腫瘍微小環境でＩＬ－２を放出しない（非切断可能対照）。合計で４回の用量を投与した。マウスはインダカイン分子による治療によく耐え、体重減少の兆候はなかった。図１に示すように、化合物１は用量依存的な様式で腫瘍を効果的に治療した。

【0130】

腫瘍の免疫学的拒絶の特徴の１つは、その後の腫瘍再免疫試験に対する防御記憶の発達である。ＩＬ－２インダカイン分子で処置した動物における腫瘍拒絶の結果として免疫学的記憶が生じるかどうかを調べるために、最初のＭＣ３８移植から４０日後の腫瘍特異的記憶ＣＤ８＋Ｔ細胞の存在を求めて、ＩＬ－２インダカインツール分子（本質的に化合物１と同じ生物学的特性を有する）で処置した動物の脾臓を検査した。四量体染色を使用して腫瘍特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞を特定し、それらの細胞の記憶マーカーを検査した。図２に示すように、保護動物からの四量体陽性細胞の約６０％が記憶細胞表現型ＣＤ４４＋ＫＬＲＧ１－ＣＤ１２７＋を発現したのと比較して、対照動物からの四量体陽性細胞はわずか２０％であった。

【0131】

これらの脾細胞の表現型は腫瘍特異的記憶の生成を示唆しているが、記憶応答の最終的な試験は、同じ腫瘍モデルによる再免疫試験に対する防御である。したがって、ＩＬ－２インダカインツール分子による治療後に完全なＭＣ３８腫瘍退縮を前もって示したマウスに、最初の移植から６０日後により多くのＭＣ３８腫瘍細胞を移植することによって再免疫試験を行った。再免疫試験中に治療は施されなかった。図３に示すように、ＭＣ３８腫瘍細胞を移植されたナイーブ対照動物とは異なり、ＩＬ－２インダカインツール分子で以前に治療した動物はいずれも腫瘍を発症しなかった。これは、ＩＬ－２インダカイン分子による以前の治療後の腫瘍拒絶の結果として免疫学的記憶が生じていることを示唆している。

【0132】

ＩＬ－２インダカイン分子が腫瘍退縮を誘導する機序をより深く理解するために、ＰＢＳまたはＩＬ－２インダカインツール分子のいずれかで治療したマウスからのＭＣ３８腫瘍を、第１週の２回目の投与から２４時間後に採取し、腫瘍浸潤リンパ球を収集した。その後、腫瘍浸潤リンパ球はフローサイトメトリーによって分析された。初回投与の５日後、ＩＬ－２インダカインツール分子による治療の結果として、ＮＫ細胞、ＣＤ８＋Ｔエフェクター細胞、腫瘍特異的四量体＋ＣＤ８＋Ｔエフェクター細胞を含む免疫細胞が大量に流入することが観察された。Ｔｒｅｇ（ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦＯＸＰ３＋細胞として定義される）の数は増加したが、ＣＤ８＋Ｔ細胞の増加はＴｒｅｇの増加をはるかに上回り、その結果、ＣＤ８＋／Ｔｒｅｇ比が大幅に増加した（図４を参照）。さらに、ＩＬ－２インダカインツール分子による治療の結果として、グランザイムＢなどの炎症性サイトカインを産生するＴｒｅｇのサブセットが得られ、腫瘍内に広がるＴｒｅｇが抑制的な表現型を持たないことが示された。まとめると、これらのデータは、ＩＬ－２インダカイン分子による治療により、このモデルにおける免疫細胞の腫瘍浸潤と活性化が増加し、それによって抗腫瘍免疫が促進されることを示している。

【0133】

ＩＬ－２インダカイン分子内の条件的に活性化されたプロテアーゼで切断可能なリンカーが、ＩＬ－２を腫瘍に局所送達しながら、ＩＬ－２の全身活性を制限することが観察された。全身投与の結果として腫瘍へのＩＬ－２の局所送達を生じさせることができるかどうかを試験するために、ＭＣ３８腫瘍を有するマウスにＩＬ－２インダカインツール分子を投与した後の様々な時点で血漿及び腫瘍サンプルを収集し、総インダカイン分子または無損インダカイン分子、及びインダカイン分子の活性化により放出された遊離ＩＬ－２の存在を分析した。図５に示されるように、血漿中の総インダカイン分子の曝露は、腫瘍内での曝露よりも約８倍高く、したがって、このモデルにおけるプロドラッグの腫瘍組織浸透が好ましいことを示している。血漿中には低レベルの遊離ＩＬ－２が検出され、血漿中の無損インダカイン分子の０．０３％が遊離ＩＬ－２を放出するように処理された。対照的に、腫瘍内の無損インダカイン分子の総数の２％がＩＬ－２を放出するように処理された。さらに、血漿中の遊離ＩＬ－２は、投与後２４時間で観察された最大血漿濃度（Ｃ_ｍａｘ）に達したが、この曝露は一時的であった。対照的に、腫瘍内の遊離ＩＬ－２曝露レベルは、より高いＣ_ｍａｘを有し、長期にわたり持続された。腫瘍内でのインダカイン分子のこの優先的な活性化の結果として、血漿と比較して腫瘍内で約１１倍の遊離ＩＬ－２の曝露が生じる。これは、ＩＬ－２インダカイン分子の全身送達後、腫瘍依存性処理が腫瘍内でのＩＬ－２の蓄積を促進することを示唆している。

【0134】

実施例１Ｂ．非ヒト霊長類の忍容性及びＰＫ
探索的調査では、化合物１を非ヒト霊長類（ＮＨＰ）に投与して、化合物１の忍容性を決定し、化合物１、及び化合物１から放出されるＩＬ－２の両方のＰＫ特性を測定した。最初の調査では、週に１回、２週間、０．０５ｍｇ／ｋｇから１．２５ｍｇ／ｋｇまで増加する量の化合物１を動物に投与した。１．２５ｍｇ／ｋｇの用量での濃度対時間曲線下面積（ＡＵＣ）として測定された化合物１の血漿曝露は、最大耐用量（ＭＴＤ）である０．０８４ｍｇ／ｋｇの用量でのｒＩＬ－２の血漿曝露よりも５００倍以上高くなっており、図６の上部パネル（それぞれ左及び右）に示されるように、化合物１がＩＬ ２の高い全身曝露を達成したことを確認した。初回投与後の化合物１の平均半減期は約５７時間であり、これは複数の用量レベルにわたって一貫していた。化合物１から放出された遊離ＩＬ－２の血漿レベルは非常に低く、図６の下部パネルに示すように、遊離ＩＬ－２を放出するように処理された血漿化合物１の０．０１％未満であった。これは、ＮＨＰ中の循環における化合物１の安定性を裏付ける。重要なことに、ＮＨＰの化合物１処置後に測定できた循環遊離ＩＬ－２のＣ_ｍａｘは、そのＭＴＤにおけるｒＩＬ－２のＣ_ｍａｘよりも大幅に低かった。その後の調査では、動物は、最大２ｍｇ／ｋｇの用量の化合物１によく耐えた。

【0135】

実施例１Ｃ：抗ＰＤ－１抗体と併用した化合物１
化合物１を、抗ＰＤ１抗体（ＲＭＰ１－１４）の添加の有無にかかわらず、Ｂ１６Ｆ１０同系腫瘍モデルにおいて試験した。１ｘ１０^５個の腫瘍細胞を動物の脇腹に移植し、腫瘍の増殖をモニタリングした。ひとたび腫瘍が平均体積３０～６０ｍｍ^３に達したら、表６に記載されているように動物を無作為に抽出して投与した。

【表6】

【0136】

腫瘍体積及び体重は週に３回記録され、２回の測定の間には２～３日の隔たりがあった。化合物１による治療は、単剤療法として用量依存的な有効性を示した。このモデルにおける抗ＰＤ１による単剤療法には有効性がなく、抗ＰＤ１処置マウスの腫瘍体積は賦形剤のみで処置したマウスの腫瘍体積と同様であった。しかし、化合物１及び抗ＰＤ１抗体を使用した併用療法は腫瘍制御を相乗的に改善し、化合物１または抗ＰＤ－１抗体のいずれの単剤療法よりも効果的であった。その結果を図７Ａ、図７Ｂ及び図８に示す。

【0137】

実施例２：選択された進行性または転移性の固形腫瘍を有する患者における単剤療法としての、及びペムブロリズマブと併用してのＩＬ－２プロドラッグの多施設共同フェーズＩ／Ｉｂ用量漸増調査

【表7-1】

【表7-2】

【表7-3】

【表7-4】

【0138】

概要及び背景情報
インターロイキン－２
インターロイキン（ＩＬ）－２は炎症誘発性サイトカインであり、Ｔ細胞とナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖と活性化を通じて免疫介在性のがん細胞の死滅を促進し、分化抗原群（ＣＤ）８細胞のエフェクター細胞及びメモリー細胞への分化を誘導することができる。ＩＬ－２受容体（ＩＬ－２Ｒ）は、ＩＬ－２Ｒα（ＣＤ２５）、ＩＬ－２Ｒβ（ＣＤ１２２）、及びＩＬ－２Ｒγ（ＣＤ１３２）という名の３つのサブユニットで構成される。単量体ＩＬ－２Ｒαへの結合はシグナル伝達を誘導しないが、β及びγサブユニットの複合体から構成される中親和性二量体受容体への結合はシグナル伝達を誘導する。３つのサブユニットすべてで構成される三量体受容体は、ＩＬ－２に対する高親和性受容体であり、中親和性受容体よりも約１００倍高い結合親和性を有している。中親和性または高親和性ＩＬ－２Ｒへの結合により、標的免疫細胞内のヤヌスキナーゼ／シグナル伝達兼転写活性化因子（ＳＴＡＴ）、分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）、及びホスホイノシチド３キナーゼシグナル伝達経路は活性化され、その結果として、免疫細胞の活性化及び増殖がもたらされる。

【0139】

中親和性のＩＬ－２Ｒβ／γは、ＮＫ細胞、単球、マクロファージ、ならびに静止したＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞に発現するが、高親和性のＩＬ－２Ｒα／β／γは、活性化されたＴ細胞及びＮＫ細胞上で一時的に誘導され、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）に構成的に発現する。ＩＬ－２の基礎レベルは主にＴｒｅｇ上の高親和性ＩＬ－２Ｒα／β／γに結合し、免疫恒常性を維持する。免疫応答中のＩＬ－２産生の結果として、中親和性受容体及び高親和性受容体の両方を活性化することができるレベルのＩＬ－２が生じ、その結果として、エフェクターリンパ球集団の活性化及び増殖が生じる。

【0140】

多数の前臨床研究により、ＩＬ－２の投与がマウスモデルにおける腫瘍の根絶に効果的であることが実証されている。この概念は臨床的にも検証されており、組み換え型ＩＬ－２（ｒＩＬ－２）療法（アルデスロイキン）が１９９２年に腎細胞癌腫に対して承認され、１９９８年には転移性黒色腫に対して承認された。アルデスロイキンは、転移性黒色腫及び腎臓癌の治療を受けた患者の約１０％でがんの完全な退縮を実証した。残念なことに、ｒＩＬ－２は薬物動態（ＰＫ）特性が弱く、末梢の高親和性及び中親和性受容体に結合するために用量規定全身毒性がある。高用量のＩＬ－２投与の結果として重篤な低血圧及び血管漏出症候群（ＶＬＳ）が生じるため、ＩＬ－２の使用は専門のケアセンターに限定され、有効レベルに達するまで用量が制限されている。これらの副作用により、推奨される治療レジメンに耐えることができる患者の数が制限され、その結果、ＩＬ－２療法の臨床上の利得が全面的に達成される。ＩＬ－２の臨床上の利得を制限する別の要因は、ＩＬ－２は高親和性ＩＬ－２Ｒα／β／γに結合することによって、抗腫瘍免疫応答に対抗する可能性がある免疫抑制性Ｔｒｅｇの拡大を誘導することであると主張されている。

【0141】

ＩＬ－２プロドラッグ
ＩＬ－２プロドラッグは、ｒＩＬ－２療法で観察される重篤な毒性を最小限に抑えると共に、進行性腫瘍または転移性腫瘍に単剤療法として、または免疫チェックポイント阻害剤と併用して投与した場合に臨床上の利得を最大化するように設計された、全身送達され、条件付きで活性化されるインターロイキン２の形態である。

【0142】

ＩＬ－２プロドラッグは、末梢及び半減期延長ドメインのＩＬ－２Ｒβ／γ発現正常組織へのＩＬ－２の結合を排除するために、プロテアーゼで切断可能なリンカーを介してＩＬ－２Ｒβ／γ阻害要素の両方に結合した天然ＩＬ－２分子を用いて処理されている。プロドラッグは、プロテアーゼ切断を通じて腫瘍微小環境で条件付きで活性化され、腫瘍内で完全に活性な天然のＩＬ－２サイトカインを放出し、強力な抗腫瘍免疫応答を刺激する。

【0143】

いくつかの企業はまた、毒性を軽減すると共にＴｒｅｇの活性化を軽減することを期待して、中親和性受容体ＩＬ－２Ｒβ／γにのみ結合し、高親和性受容体ＩＬ－２Ｒα／β／γへの結合を回避する分子（いわゆる「非アルファ」分子）を処理することにより、ｒＩＬ－２の限界に対処するように設計されたＩＬ－２療法を開発している。しかしながら、これらの分子の多くは末梢でＩＬ－２Ｒβ／γ受容体を活性化し（ＩＬ－２Ｒβ／γ阻害要素の欠如により）、ＩＬ－２Ｒα結合が減少するために腫瘍微小環境（ＴＭＥ）における新たにプライミングを受けたＴ細胞増殖の誘導も弱められる。そのため、有効な曝露に達する能力が制限される可能性がある。最近発表された研究が示すように、最適な抗腫瘍活性には高親和性受容体ＩＬ－２Ｒα／β／γへの結合が必要である可能性がある。第１に、抗プログラム細胞死１（ＰＤ－１）療法に対する陽性応答後の基底細胞癌腫を有するがん患者におけるＴ細胞のクローン含有量及び活性化状態の分析により、それらの腫瘍はクローン置換の処理を経ており、その処理では、治療後に見つかる活性化／枯渇したＴ細胞のほとんどは、拡大中に高親和性受容体ＩＬ－２Ｒα／β／γを発現する新たに活性化されたクローンであることが示された。これらの細胞は、この処理中に外因性の完全に活性なＩＬ－２の存在から利得を受けることになる。第２に、高親和性受容体ＩＬ－２Ｒα／β／γを通るシグナル伝達は、効果的な記憶形成及び二次応答の生成を指示する重要な役割を果たす。

【0144】

ＩＬ－２プロドラッグの具体的な設計特徴は、ＩＬ－２とＩＬ－２Ｒβ／γとの相互作用を末梢で阻害して全身毒性を最小限に抑えながら、ＩＬ－２Ｒα／β／γ結合により天然ＩＬ－２をＴＭＥに送達し、抗腫瘍免疫応答の促進におけるＩＬ－２の全面的な薬効を実現することにより、これらの課題に対処する。特定の実施形態では、この実施例２で使用されるＩＬ－２プロドラッグは化合物１である。特定の実施形態では、この実施例２で使用されるＩＬ－２プロドラッグは化合物２である。特定の実施形態では、この実施例２で使用されるＩＬ－２プロドラッグは化合物３である。特定の実施形態では、この実施例２で使用されるＩＬ－２プロドラッグは化合物４である。

【0145】

ペムブロリズマブ
ペムブロリズマブは、プログラム細胞死１（ＰＤ－１）受容体への高い結合特異性を有する強力なヒト化免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｇ４（ＩｇＧ４）モノクローナル抗体である。したがって、プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ－Ｌ１）及びプログラム細胞死リガンド２（ＰＤ－Ｌ２）とのその相互作用を阻害する。前臨床インビトロデータに基づくと、ペムブロリズマブはＰＤ－１に対して高い親和性及び強力な受容体ブロック活性を有している。ペムブロリズマブは、受容可能な前臨床安全性プロファイルを有しており、進行性悪性腫瘍に対する静脈内（ＩＶ）免疫療法として臨床開発中である。ＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）（ペムブロリズマブ）は、さまざまな適応症にわたる患者の治療に適応されている。

【0146】

ペムブロリズマブに関する詳細な背景情報については、承認されたラベルを参照のこと。

【0147】

調剤上の背景及び治療の背景
腫瘍性形質転換の増殖を制御する上で、無損の免疫学的監視機能が重要であることは数十年前から知られている。蓄積されている証拠により、がん組織内の腫瘍浸潤リンパ球と様々な悪性腫瘍における好ましい予後との間に相関関係があることが示されている。特に、ＣＤ８＋Ｔ細胞の存在及びＣＤ８＋エフェクターＴ細胞／ＦｏｘＰ３＋Ｔｒｅｇの比率は、卵巣癌、結腸直腸癌、膵臓癌、肝細胞癌腫、悪性黒色腫及び腎細胞癌腫などの固形悪性腫瘍における予後の改善と長期生存と相関している。腫瘍浸潤リンパ球はエクスビボで増殖させて再注入されて、黒色腫などのがんにおいて永続的な客観的な腫瘍応答を誘導することができる。

【0148】

ＰＤ－１受容体とリガンドとの相互作用は、免疫制御を抑制するように腫瘍によって乗っ取られる主要な経路である。健常な状態下で活性化されたＴ細胞の細胞表面に発現されるＰＤ－１の通常の機能は、自己免疫反応を含む不要なまたは過剰な免疫応答を抑制的に調節することである。ＰＤ－１（遺伝子ＰＤＣＤ１によってコード化される）は、ＣＤ２８及び細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ－４）に関連するＩｇスーパーファミリーのメンバーであり、このＣＴＬＡ－４は、そのリガンド（ＰＤ－Ｌ１及び／またはＰＤ Ｌ２）の結合時に抗原受容体シグナル伝達を負に調節することが示されている。

【0149】

マウスＰＤ－１の構造は解明されている。ＰＤ－１とそのファミリーメンバーは、リガンド結合を担うＩｇ可変（ＩｇＶ）型ドメインと、シグナル伝達分子の結合を担う細胞質尾部とを含む１型膜貫通型糖タンパク質である。ＰＤ－１の細胞質尾部には、２つのチロシン依存性シグナル伝達モチーフ、免疫受容体チロシン依存性抑制モチーフ、及び免疫受容体チロシン依存性スイッチモチーフが含まれる。Ｔ細胞刺激後、ＰＤ－１はチロシンホスファターゼ、Ｓｒｃホモロジー２ドメイン含有タンパク質チロシンホスファターゼ（ＳＨＰ）－１及びＳＨＰ－２を細胞質尾部内の免疫受容体チロシン依存性スイッチモチーフに動員し、ＣＤ３Ｔ細胞シグナル伝達カスケードに関与するＣＤ３ζ、タンパク質キナーゼＣθ、ゼータ鎖関連タンパク質キナーゼ７０などのエフェクター分子の脱リン酸化を引き起こす。ＰＤ－１がＴ細胞応答を抑制的に調節する機序は、ＣＴＬＡ－４の機序と同様であるが、ＣＴＬＡ－４とは異なる。これは、両方の分子が重複するシグナル伝達タンパク質のセットを調節するためである。結果として、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１経路は、炎症誘発性Ｔ細胞指向機序（本明細書に開示されるＩＬ－２プロドラッグによって生成されるものなど）と併用した治療介入の魅力的な標的である。

【0150】

調査の理論的根拠
ｒＩＬ－２などの炎症誘発性サイトカインを含む免疫療法は、複数のがんの適応症に対する十分に確立された治療法となっている。ｒＩＬ－２療法は、転移性腎細胞癌腫（ｍＲＣＣ）及び皮膚悪性黒色腫において永続的な完全奏効を伴う劇的な臨床活性を実証し、それぞれ１９９２年と１９９８年にこれらの適応症についてアメリカ食品医薬品局（ＦＤＡ）の承認を得た。しかしながら、高用量ＩＬ－２療法の投与は、その半減期が短く、薬学的特性が乏しく、集中治療室で監視された条件下で患者に投与する必要がある重篤な毒性のために制限されてきた。したがって、時間の経過とともに、ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストなどのチェックポイント阻害剤及び標的療法など、より忍容性の高い他の治療法に置き換えられてきた。高用量（ＨＤ）ＩＬ－２による現在の治療結果を記録及び調査するために設立された全国的な観察データベースである悪性腫瘍登録における治療パターン及び臨床応答を評価するためのプロロイキンＲ観察調査からのデータは、以前のチェックポイント阻害剤治療を含む標準治療後に、または標準治療と併用して、配列決定された、転移性黒色腫及びｍＲＣＣにおけるＨＤ ＩＬ－２の全奏効率及び延命効果が、永続的で長期的な応答を示した以前の報告データと一貫していることを示した。

【0151】

がん治療は向上し、悪性黒色腫及びｍＲＣＣ以外にも多数の腫瘍タイプがチェックポイント阻害に敏感であることが証明されているにもかかわらず、安全に投与することができる次世代の全面的に強力なＩＬ－２に対する医療ニーズは依然として満たされてないままである。ＩＬ－２プロドラッグは、全身に送達され、条件付きで活性化されるＩＬ－２インダカイン分子であり、免疫感受性の進行性または転移性の固形腫瘍において、ｒＩＬ－２療法で観察される重篤な毒性を最小限に抑え、単剤療法として、または免疫チェックポイント阻害剤（ＣＰＩ）と併用して投与した場合に、臨床上の利得が最大化されるように開発されている。

【0152】

ＣＰＩ療法が活性を実証した腫瘍タイプにおける単剤療法としての、またはＣＰＩと併用してのＩＬ－２プロドラッグは、ＩＬ－２の全面的な生物学的効力を安全に送達し、その結果として、強力な抗腫瘍免疫応答を生じさせる可能性がある。

【0153】

カニクイザルからのデータは、マウス腫瘍モデルにおける有効な曝露に関連する用量でのＩＬ－２プロドラッグの安全な送達により、幅広い治療指数を実証した。抗ＰＤ－１耐性モデルにおけるＩＬ－２プロドラッグと抗ＰＤ－１の併用は、相乗的な抗腫瘍活性を示した。

【0154】

これは、選択された進行性または転移性の固形腫瘍における単独またはペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグの全身投与での安全性、忍容性、ＰＫ、及び予備的な抗腫瘍活性を判定する、ならびにさらなる調査に適切な用量及びスケジュールを特定する、第１／１ｂ相の用量漸増及び拡大の調査である。

【0155】

ＩＬ－２プロドラッグ開始用量の理論的根拠
ＩＬ－２プロドラッグの開始用量は、ＩＮＤ実現調査データまたはＧＬＰ毒性学データに基づいて選択され、２週間ごと（Ｑ２Ｗ）に全身に送達される。ＩＬ－２プロドラッグの現在の提案用量は、１、３、１０、３０、６０、１２０、及び２４０ｍｇである。３ｍｇの用量に対して予測されるＣ_ｍａｘ及びＡＵＣは、ＤＲＦ ＮＨＰ毒性学調査で投与された最高用量と比較した場合、それぞれ６５倍及び３１倍の曝露マージンを有すると予想される。また、３ｍｇの用量（７０ｋｇの患者では０．５４２ｎｍｏｌ／ｋｇ）は、連続５日間８時間ごとに投与されるｒＩＬ－２の推奨用量（２．３８７ｎｍｏｌ／ｋｇ）よりも少なく、ＩＬ－２プロドラッグのすべての用量レベルにおいて、遊離ＩＬ－２への全身曝露は、連続ＩＶ注入として与えられるｒＩＬ ２の最大許容曝露を下回ると予想される。ＩＬ－２プロドラッグのファースト・イン・ヒューマン（ＦＩＨ）開始用量及び理論的根拠の確認は、ＧＬＰ毒性学調査の実施後に最終決定される。

【0156】

ペムブロリズマブの用量の理論的根拠
この調査でのペムブロリズマブの計画用量は６週間ごと（Ｑ６Ｗ）に４００ｍｇである。

【0157】

ペムブロリズマブの４００ｍｇ Ｑ６Ｗ投与レジメンは、Ｑ３Ｗで２００ｍｇのペムブロリズマブが現在のところ適切であるすべての治療環境において、３週間ごと（Ｑ３Ｗ）に２００ｍｇ投与と同様の利得－リスクのプロファイルを有すると予想される。具体的には、以下の理論的根拠を考慮すれば、モデル及びシミュレーション分析に基づいて、ペムブロリズマブの４００ｍｇ Ｑ６Ｗの投与レジメンが適切であると考えられる。
・ ＰＫシミュレーションは、ペムブロリズマブ曝露の観点で次のことを示している。
・ ４００ｍｇ Ｑ６Ｗでの投与間隔にわたる平均濃度（またはＡＵＣ）は、承認された２００ｍｇ Ｑ３Ｗ用量の場合と同様であり、よって投与レジメンの間の有効性の橋渡しとなる。
・ ４００ｍｇ Ｑ６Ｗでのトラフ濃度（Ｃ_ｍｉｎ）は、概して、大多数（＞９９％）の患者で２ｍｇ／ｋｇまたは２００ｍｇ Ｑ３Ｗで達成される濃度の範囲内にある。
・ ４００ｍｇ Ｑ６Ｗでのピーク濃度（Ｃ_ｍａｘ）は、臨床試験された最高用量の１０ｍｇ／ｋｇ Ｑ２ＷのＣ_ｍａｘをはるかに下回っており、４００ｍｇ Ｑ６Ｗの安全性プロファイルがペムブロリズマブの確立された安全性プロファイルに匹敵するはずであることを裏付けている。
・ ペムブロリズマブの曝露応答は適応症全体で平坦であることが実証されており、黒色腫及び非小細胞肺癌における全生存率予測では、同様の曝露を考慮すれば、４００ｍｇ Ｑ６Ｗでの有効性が２００ｍｇまたは２ｍｇ／ｋｇ Ｑ３Ｗでの有効性と同様であると予想されることが実証されている。したがって、４００ｍｇ Ｑ６Ｗはあらゆる適応症にわたって有効であると予想される。

【0158】

リスク／利益
この調査に登録される患者は、治療の選択肢が限られている転移性悪性腫瘍を有する患者である。このプロトコルには、適切な適格基準及び具体的な用量規定毒性（ＤＬＴ）の定義、ならびに具体的なモニタリングガイドライン、用量の変更、及び個々の患者の中止規則が含まれている。

【0159】

調査の目的
一次的目的
この調査の用量漸増フェーズの一次的目的は以下のとおりである。
・ ＭＴＤ及び／または拡大期推奨用量（ＲＤＥ）を決定し、ＩＬ－２プロドラッグの安全性及び忍容性を評価する。
・ ＭＴＤ及び／またはＲＤＥを決定し、ペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグの安全性と忍容性を評価する。

【0160】

この調査の拡大フェーズの主な目的は以下のとおりである。
・ 単剤療法として、及びペムブロリズマブと併用して投与した場合のＩＬ－２プロドラッグの安全性をさらに特徴付ける。
・ 進行性または転移性の腎明細胞癌腫及び進行性または転移性の皮膚悪性黒色腫において、（単剤療法としての、及びペムブロリズマブと併用しての）ＩＬ－２プロドラッグの抗腫瘍活性を、固形がんの治療効果判定基準（ＲＥＣＩＳＴ）１．１による全奏効率（ＯＲＲ）（完全奏効［ＣＲ］＋部分奏効［ＰＲ］）、及び免疫ＲＥＣＩＳＴ（ｉＲＥＣＩＳＴ）による免疫ＯＲＲ（ｉＯＲＲ）（ｉＯＲＲ＝免疫ＣＲ＋免疫ＰＲ）による測定で評価する。

【0161】

二次的目的
この調査の二次的目的は以下のとおりである。
・ ＩＬ－２プロドラッグ（親化合物及び遊離ＩＬ－２）のＰＫプロファイルを特徴付ける。
・ ＲＥＣＩＳＴ１．１及びｉＲＥＣＩＳＴによるＯＲＲ（ＣＲ＋ＰＲ）、ＤＯＲ及びＰＦＳによって測定される、ＩＬ－２プロドラッグの抗腫瘍活性を評価する。
・ ＲＥＣＩＳＴ１．１によるＯＲＲ（ＣＲ＋ＰＲ）、ＤＯＲ及びＰＦＳ、ならびにｉＲＥＣＩＳＴによるｉＯＲＲ（ｉＯＲＲ＝免疫完全奏効［ｉＣＲ］＋免疫部分奏効［ｉＰＲ］）、ｉＤＯＲ及びｉＰＦＳによって測定される、ペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグの抗腫瘍活性を評価する。
・ 単剤療法としての、またはペムブロリズマブと併用してのＩＬ－２プロドラッグへの応答での、血液中、ベースライン及び治療後の腫瘍生検における特定の免疫学的バイオマーカーの変化を評価する。
・ ＲＥＣＩＳＴ１．１及び免疫ＲＥＣＩＳＴ（ｉＲＥＣＩＳＴ）による奏効期間（ＤＯＲ）と無増悪生存期間（ＰＦＳ）によって測定される、進行性または転移性の腎細胞癌腫及び進行性または転移性の皮膚悪性黒色腫における（単剤療法としての、またはペムブロリズマブと併用しての）ＩＬ－２プロドラッグの抗腫瘍活性を評価する。
・ 抗薬物抗体（ＡＤＡ）応答を生成する可能性を含む、ＩＬ－２プロドラッグの免疫原性を評価する。

【0162】

探索的目的
この調査の探索的目的は以下のとおりである。
・ ＩＬ－２プロドラッグ（単独及びペムブロリズマブと併用して）の薬力学（ＰＤ）活性を評価する。
・ 単剤療法としての、またはペムブロリズマブと併用してのＩＬ－２プロドラッグの治療結果と相関する可能性のある末梢血液及び腫瘍中の免疫学的バイオマーカーを調査する。
・ 標的の関与及び免疫経路活性化の潜在的なバイオマーカーを求めて、腫瘍生検を評価する。

【0163】

調査の説明
これは、単独またはペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグの安全性プロファイル及びＭＴＤならびに／またはＲＤＥを決定するためのＦＩＨの非盲検の多施設共同の調査である。

【0164】

この調査では、再発性／難治性の局所進行性または転移性の免疫療法感受性固形腫瘍（ＣＰＩが承認される特定の適応症として定義される）を有する用量漸増フェーズの単剤療法及び併用アームに、標準治療で進行したか、または標準治療に耐えられない、もしくは利得が証明された標準治療が存在しない患者を登録する。患者は、以前の抗ＰＤ－１または－（Ｌ）１阻害剤を単独または他の薬剤と併用して含む以前のＣＰＩ療法を受けることになる。併用アームの患者は、疾患の進行、または毒性以外の理由のいずれかにより、その治療を中止するべきであった。調査のすべてのフェーズの患者は、以前にＩＬ２指向治療を受けていない可能性がある。

【0165】

進行性もしくは転移性の腎明細胞癌腫、または進行性もしくは転移性の皮膚悪性黒色腫を有する患者は用量拡大フェーズの単剤療法及び併用療法アームに登録される。単剤療法の用量拡大の場合、ｍＲＣＣを有する患者は以前に最大３種類の治療法を受けていた可能性があり、以前に血管新生抑制療法（ＶＥＧＦｉ）及びＣＰＩを受けていなければならない。ｖ－ｒａｆマウス肉腫ウイルスがん遺伝子ホモログＢ１（ＢＲＡＦ）野生型皮膚悪性黒色腫を有する患者は、抗ＰＤ－（Ｌ）１阻害剤療法を単独またはＣＴＬＡ－４阻害剤もしくは他の療法と併用して受けていなければならない。ＢＲＡＦ変異黒色腫を有する患者は、ＭＥＫ阻害剤の有無にかかわらずＣＰＩ及びＢＲＡＦ阻害剤を含む２種類の治療法を以前に受けていた可能性がある。

【0166】

具体的には、用量拡大フェーズの併用部分にいるｍＲＣＣ患者の場合、患者は以前に２つ以下の治療法を受けていなければならず、そのうち１つのみが単独または併用した抗ＰＤ－（Ｌ）１阻害剤を含んでいなければならない。用量拡大フェーズの併用部分に登録された皮膚悪性黒色腫の患者は、ＢＲＡＦ変異の状態に応じて、以前に０～２つの治療法を受けていた可能性がある。用量拡大フェーズの併用療法アームの患者は、免疫関連毒性のために以前のＣＰＩ療法を中止すべきではなかった。

【0167】

用量漸増中の特定の用量コホートへの患者の割り当て、及び用量拡大中の特定のアームへの患者の割り当ては、スポンサーによって調整される。単剤療法及び併用療法アームが並行して開設される場合、適格な患者は利用可能なスロットに順番に登録される。

【0168】

この調査の全体的なサンプルサイズは、用量漸増フェーズ及び用量拡大フェーズの間で約１５０人の患者だが、ＩＬ－２プロドラッグの単剤療法、及びペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグの観察されたＤＬＴプロファイルに応じて異なる。

【0169】

全体的な治験デザイン概略図を図９に提示する。

【0170】

用量漸増フェーズ
用量漸増には、修正毒性確率間隔（ｍＴＰＩ）－２の設計を利用する。ＩＬ－２プロドラッグの開始用量は、２週間ごと（Ｑ２Ｗ）に１ｍｇまたは３ｍｇの固定用量でＩＶ投与であってもよく、提案される用量は、ｍＴＰＩ－２によってサポートされている場合、１、３、１０、３０、６０、１２０、及び２４０ｍｇＩＶ Ｑ２Ｗであってもよい。中間用量を評価してもよい。Ｑ３Ｗへの投与レジメンの変更は、観察されたＰＫ及び安全性プロファイルに基づいて行ってもよく、修正によって実施される。それぞれの新しい未試験の用量レベルでの第１患者及び第２患者への投与の間には少なくとも２日の時差が必要であり、第２患者及び第３患者への投与の間には１日の時差が必要である。

【0171】

ｍＴＰＩ－２設計を使用した用量確認

【0172】

ＩＬ－２プロドラッグのＭＴＤ及び／またはＲＤＥを決定するために、目標ＤＬＴ率に約３０％、及び受容可能なＤＬＴ範囲に２５％～３５％（ε１＝ε２＝０．０５）を有するｍＴＰＩ－２設計が適用される。

【0173】

ＩＬ－２プロドラッグの現在の提案用量は、１、３、１０、３０、６０、１２０、及び２４０ｍｇである。３ｍｇの用量に対して予測されるＣ_ｍａｘ及びＡＵＣは、ＧＬＰ ＮＨＰ毒性学調査で投与された最高用量と比較した場合、それぞれ６５倍及び３１倍の曝露マージンを有すると予想される（ＦＩＨ開始用量は、ＧＬＰ毒性学調査の完了後に最終的に承認される）。また、３ｍｇの用量（７０ｋｇの患者では０．５４２ｎｍｏｌ／ｋｇ）は、連続５日間８時間ごとに投与されるｒＩＬ ２の推奨用量（２．３８７ｎｍｏｌ／ｋｇ）よりも少なく、ＩＬ－２プロドラッグのすべての用量レベルにおいて、遊離ＩＬ－２への全身曝露は、連続ＩＶ注入として与えられるｒＩＬ－２の最大許容曝露を下回ると予想される。総親薬（ＩＬ－２プロドラッグ）及び遊離ＩＬ－２の両方の測定を実行し、観察されたＰＫ及び安全性プロファイルに基づいて次のコホートの用量を選択する際に考慮してもよい。

【0174】

漸増または段階的縮小の決定は、最初の２８日の期間（サイクル１）の所与の用量でのＤＬＴ及び有害事象、特に重篤な免疫関連毒性の発生に基づいて、用量漸増委員会（ＤＥＣ）によって行われる。

【0175】

連続的な安全性評価フェーズでは、各投与ごとに最少でも３人の患者が必要である。ＤＬＴの集積率及び発生率に応じて、最後の患者が２８日のＤＬＴ評価期間を完了するまで、３人、４人、５人または６人の患者を新しい用量ごとに登録してもよい。例えば、所与の用量レベルで最初の３人の患者のうち１人がＤＬＴを発症した場合、追加のＤＬＴデータが入手可能になるまで、この用量レベルで追加で登録する患者は３人以下とすべきである。なぜなら、追加の患者のうち２人（すなわち、５人の患者中３人）がＤＬＴを経験した場合、この用量は段階的に縮小されるからである。所与の用量レベルで最初の３人の患者のうち２人がＤＬＴを発症した場合、用量は次に低いレベルに段階的に縮小される。所与の用量レベルで最初の３人の患者のうち３人がＤＬＴを発症した場合、この用量は受容不可能なほど有毒であるとみなされる（すなわち、用量は段階的に縮小し、再びその用量に再漸増されることはない）。より低い用量が使用され、所与の用量レベルで次の３人の患者のうち０人がＤＬＴを発症した場合、用量を次のレベルに再漸増させることができる。同じ用量コホートに３人、４人、５人または６人の患者が登録されている場合でも、同じ原則が適用される。

【0176】

ｍＴＰＩ－２の設計に基づくと、ある用量で登録されているがＤＬＴ評価についてまだ完全に評価可能でない患者の数は、その用量が受容不可能なほど有毒であるとみなされる前に、ＤＬＴを発症するリスクがある残りの患者の数を超えてはならない。合計で３～１２人の患者を、所与の用量レベルで連続安全性評価フェーズに登録してもよい。

【0177】

用量の漸増及びＲＤＥの確認は概して、最大１２人の患者が、受容可能だと見出されて選択された用量のうちのいずれかで治療を受けた後に終了する。ＭＴＤは、推定されるＤＬＴ確率が約３０％に最も近くなるように与えられ得る用量レベルとして定義される。ＭＴＤの推定は、ＤＬＴの発生率の推定に基づいている。投与量を選択してさらなる登録に進む前にデータの全体性を熟考し、調査全体を通して明らかになったＰＫ及び安全性データに基づいて漸増スケジュールを調節してＲＤＥを決定してもよい。

【0178】

ガイドラインを生成するために使用した目標毒性率は３０％であったが、ＭＴＤで観察されたＤＬＴを有する患者の比率は３０％をわずかに上回るかまたは下回ってもよいことに留意されたい。

【0179】

ペムブロリズマブによる用量漸増フェーズ
最初の併用コホートの用量漸増は、第３回の単剤療法用量コホートの完了後（すなわち、第４回の単剤療法用量コホートと並行して）ペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグで開始される。ペムブロリズマブコホートと併用したＩＬ－２プロドラッグの用量漸増は、上述のような、単剤療法の場合と同じルールを使用するｍＴＰＩ２設計に従い、ＩＬ－２プロドラッグの開始用量レベルは、その時点での単剤療法の用量漸増において安全であると判定された最高用量よりも１つ下の用量レベルである。新しい用量レベルごとに、ペムブロリズマブと併用して試験されるＩＬ－２プロドラッグの用量レベルは、単剤療法として安全かつ忍容可能であることが示されていなければならない。ペムブロリズマブの服用量は、４００ｍｇ Ｑ６Ｗという承認された用量で投与され、漸増または段階的縮小は行われない。

【0180】

用量制限毒性基準
毒性は、米国国立がん研究所－有害事象共通用語規準（ＮＣＩ ＣＴＣＡＥ）バージョン５．０に従って評価される。ＩＬ－２プロドラッグの単剤療法、及びペムブロリズマブの併用用量漸増の両方のＤＬＴ観察期間は２８日間である。ＤＬＴは、少なくとも調査薬に関連している可能性があると共に患者に内在する基礎疾患、他の医学的状態、または併用投薬もしくは処置に合理的に起因するとは考えられない有害事象として定義される。

【0181】

調査中止のルール
サイクル１以降の漸増部分では、及び拡大部分中は、調査ではＤＬＴ基準が使用され、いずれかの時点で被験者の３３％を超えてこれらのＤＬＴ基準を満たす毒性が観察された場合、ＤＥＣは入手可能な安全性データを審査するために招集され、適切なその後のステップ（例えば、用量の改良、調査評価の変更、調査の終了など）を決定する。このような審査が行われている間、登録は一時停止される場合がある。単独またはペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグに関連する可能性があると考えられると共に、調査治療の初回投与を受けてから２８日以内に発生したいかなる死亡も、その結果として、調査登録の一時停止及び現在の投与レベルの中止をもたらし、調査にさらに登録する前に、ＤＥＣによる迅速な臨時評価を可能にする。

【0182】

用量拡大フェーズ
ひとたび、用量漸増フェーズにおいて単剤療法としての、またはペムブロリズマブと併用してのＩＬ－２プロドラッグについて、それぞれのＭＴＤ（複数可）及び／またはＲＤＥ（複数可）が決定されると、患者は、以下に具体的に述べる腫瘍タイプのそれぞれの拡大アーム、つまり２つの単剤療法拡大アーム及び２つの併用拡大アームに登録され、それぞれに最大２０人の患者が登録される。単剤療法及び併用療法の拡大アームが開設され、個別に登録を開始する場合がある。進化する安全性及び有効性データに基づいて、修正により追加の患者を登録してもよい。４つの拡大コホートには以下が含まれる。
１．アームＡ：進行性またはｍＲＣＣにおけるＲＤＥでの単剤療法としてのＩＬ－２プロドラッグ；
２．アームＢ：進行性または転移性皮膚悪性黒色腫におけるＲＤＥでの単剤療法としてのＩＬ－２プロドラッグ；
３．アームＣ：進行性またはｍＲＣＣにおけるＲＤＥでのペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグ；及び
４．アームＤ：進行性または転移性皮膚悪性黒色腫におけるＲＤＥでのペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグ。

【0183】

調査対象集団の選択
この調査では、再発性／難治性の局所進行性または転移性の免疫療法感受性固形腫瘍（ＣＰＩが承認される特定の適応症として定義される）を有する用量漸増フェーズの単剤療法及び併用アームに、標準治療で進行したか、または標準治療に耐えられない、もしくは利得が証明された標準治療が存在しない患者を登録する。患者は、以前の抗プログラム死１（ＰＤ－１）または－（Ｌ）１阻害剤を単独または他の薬剤と併用して含む以前のＣＰＩ療法を受けることになる。用量漸増フェーズの併用アームに登録された患者は、疾患の進行、または免疫関連毒性以外の理由のいずれかにより、その治療を中止するべきであった。調査のすべてのフェーズの患者は、以前にＩＬ２指向治療を受けていない可能性がある。

【0184】

局所進行性もしくは転移性の腎明細胞癌腫、または局所進行性もしくは転移性の皮膚悪性黒色腫を有する患者は用量拡大フェーズの単剤療法及び併用療法アームに登録される。単剤療法の用量拡大の場合、ｍＲＣＣを有する患者は以前に最大３種類の治療法を受けていた可能性があり、以前に血管新生抑制療法（血管内皮増殖因子阻害剤「ＶＥＧＦｉ」）及びＣＰＩを受けていなければならない。ＢＲＡＦ野生型皮膚悪性黒色腫患者は、以前に１つの治療法を受けていた可能性があり、ＣＰＩ、抗ＰＤ－（Ｌ）１阻害剤療法を単独または細胞毒性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ－４）阻害剤または他の治療法と併用して受けている必要がある。ｖ－ｒａｆマウス肉腫ウイルスがん遺伝子ホモログＢ１（ＢＲＡＦ）変異黒色腫を有する患者は、分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼキナーゼ（ＭＥＫ）阻害剤の有無にかかわらずＣＰＩ及びＢＲＡＦ阻害剤を含む２つの治療法を以前に受けていた可能性がある。具体的には、用量拡大フェーズの併用部分にいるｍＲＣＣ患者の場合、患者は以前に２つ以下の治療法を受けていなければならず、そのうち１つのみが単独または併用した抗ＰＤ－（Ｌ）１阻害剤、及びＶＥＧＦｉを含んでいなければならない。用量拡大フェーズの併用部分に登録された皮膚悪性黒色腫の患者は、ＢＲＡＦ変異の状態に応じて、以前に０～２つの治療法を受けていた可能性がある。用量拡大フェーズの併用療法群の患者は、免疫関連毒性のために以前のＣＰＩ療法を中止すべきではなかった。

【0185】

包含基準
調査に参加するには、各患者が以下の基準をすべて満たしていなければならない。
１．書面によるインフォームドコンセントフォーム（ＩＣＦ）を理解し、自発的に署名することができ、プロトコルの要件に喜んで従うことができる；
２．臨床調査のすべての部分で抗ＰＤ－（Ｌ）１治療に適応となる固形腫瘍の適応症（例えば、黒色腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、頭頸部扁平上皮癌、尿路上皮癌、高マイクロサテライト不安定性またはミスマッチ修復機構欠損の癌、高マイクロサテライト不安定性またはミスマッチ修復機構欠損の結腸直腸癌、胃癌、食道癌、子宮頸癌、肝細胞癌腫、メルケル細胞癌腫、腎明細胞癌腫、子宮内膜癌腫、腫瘍遺伝子変異量高スコア癌、皮膚扁平上皮癌腫、進行性基底細胞癌腫）の組織学的または細胞学的記録を有する；
３．単剤療法の用量漸増：免疫療法が承認されている再発性／難治性の局所進行性または転移性の固形腫瘍を有し、ＣＰＩを含む標準治療で進行したか、もしくはそれに耐えられない、または利得が証明された標準治療が存在しない患者；

【0186】

併用療法の用量漸増：免疫療法が承認されている再発性／難治性の局所進行性または転移性の固形腫瘍を有し、ＣＰＩを含む標準治療で進行したか、もしくはそれに耐えられない、または利得が証明された標準治療が存在しない患者。患者は、ＲＥＣＩＳＴ１．１もしくはｉＲＥＣＩＳＴで定義されている以前のＣＰＩで進行したか、または毒性以外の理由で中止していなければならない。
・ いずれの用量漸増アームの患者も、以前に３つ以下の治療法を受けていた可能性がある。

【0187】

単剤療法の用量拡大：以前にＣＰＩを単独または併用して受けた、再発した進行性／ｍＲＣＣまたは皮膚悪性黒色腫を有する患者。
・ アームＡ：再発した進行性またはｍＲＣＣを有する患者：以前に３つ以下の治療法を受けていた可能性があり、そのうちの１つのみにＣＰＩが含まれており、抗血管新生剤（ＶＥＧＦｉ）を受けていなければならない；
・ アームＢ：再発した進行性または転移性の皮膚悪性黒色腫を有する患者：ＢＲＡＦ Ｖ６００野生型（ＷＴ）に対する以前の１つ以下の治療法と、ＢＲＡＦ Ｖ６００変異体に対する以前の２つ以下の治療法とを受けていた可能性があり、分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼキナーゼ（ＭＥＫ）阻害剤の有無にかかわらずＢＲＡＦ阻害剤を受けていた可能性がある。再発までに６か月を超える場合、アジュバント療法は治療法の１つとして除外される。Ｔ－ＶＥＣ療法は許可されているものの、治療済み病変を生検の標的病変として使用することはできない。

【0188】

併用用量拡大：再発した進行性／ｍＲＣＣまたは転移性の皮膚悪性黒色腫を有する患者。
・ アームＣ：再発した進行性またはｍＲＣＣを有する患者：以前に２つ以下の治療法を受けていた可能性があり、そのうちの１つのみにＣＰＩが含まれており、抗血管新生剤（ＶＥＧＦｉ）を受けていなければならない；
・ アームＤ：再発した進行性または転移性の皮膚悪性黒色腫を有する患者：ＢＲＡＦの状態に応じた以前の０～２つの治療法と、ＢＲＡＦ Ｖ６００ ＷＴに対する以前の０～１つの治療法と、ＶＲＡＦ Ｖ６００変異体に対する以前の０～２つの治療法とを受けていた可能性があり、これには、ＭＥＫ阻害剤の有無にかかわらず、ＣＰＩ及びＢＲＡＦ阻害剤が含まれる可能性がある。再発までに６か月を超える場合、アジュバント療法は治療法の１つとして除外される。Ｔ－ＶＥＣ療法は許可されているものの、治療済み病変を標的病変として、または生検に使用することはできない。
４．１８歳以上；
５．米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータスは０または１である；
６．ＲＥＣＩＳＴ１．１による少なくとも１つの測定可能な病変を有する（以前に照射された領域にある病変は、そのような病変で進行が実証されている場合は測定可能であるとみなされる）；
７．原発性または転移性の固形腫瘍病変の治療前及び治療後の生検を受けることに同意する；
８．以下によって定義される適切な臓器及び骨髄機能を有している。
ａ．好中球絶対数≧１．５×１０^９／Ｌ（≧１５００／ｍｍ^３）；
ｂ．ヘモグロビン≧９．０ｇ／ｄＬまたは同等。以前の２週間以内に濃厚赤血球輸血を行わずに基準を満たさなければならない；
ｃ．血小板数≧１００×１０^９／Ｌ（≧１００，０００／ｍｍ^３）；
ｄ．総ビリルビンが、ジルベール症候群がない場合には≦１．５×ＵＬＮ、患者がジルベール症候群を有している場合には≦３×ＵＬＮ；
ｅ．測定または計算されたクレアチニンクリアランス（推定糸球体濾過速度）≧３０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２；及び
ｆ．肝臓転移を有する患者の場合にはＡＬＴ及びＡＳＴ≦２．５×ＵＬＮまたは≦５×ＵＬＮ。
９．生殖能力のある男性及び女性は、治療期間中、及び調査薬の最後の投与後４か月間は非常に効果的な避妊を順守する意欲があること；

【0189】

男性の調査参加者は、調査治療中、及び調査薬の最後の投与後最長６か月間は精子の提供を控えるべきである。

【0190】

出産の可能性のある女性とは、初経後、永久的に不妊でない限り閉経になるまで繁殖力がある女性のことである。永久的不妊法には、子宮摘出術、両側卵管切除術、両側卵巣摘出術などがある。

【0191】

男性は、両側精巣摘出術によって永久的に不妊にならない限り、思春期以降は繁殖力があるとみなされる。

【0192】

除外基準
以下の基準のいずれかを満たす患者は、調査への参加から除外される。
１．現在治療中のがんとは無関係であり、治癒したとみなされており、治験責任医師の意見では再発のリスクは低いことが提示されている別の活動性悪性腫瘍（第２がん）の病歴が、限局性がんを除いて前の２年以内にある。これらの例外には、基底細胞もしくは扁平上皮皮膚癌、表在性膀胱癌、または前立腺、子宮頸部もしくは乳房の上皮内癌が含まれるが、これらに限定されない；
２．ステロイドを必要とした（非感染性）肺炎／間質性肺疾患の病歴がある、または現在肺炎／間質性肺疾患を有している。
３．用量拡大フェーズアームでブドウ膜黒色腫または粘膜黒色腫の診断を受けている；
４．以前にＩＬ－２指向治療を受けたことがある；
５．同種組織／固形臓器移植を受けたことがある；
６．ステロイドを必要とする症候性脳転移があることがわかっている。以前に脳転移と診断された患者は、治療を完了し、登録前に放射線療法または手術の急性影響から回復し、神経学的に安定しており、無症状であれば、適格である；
７．重度の心血管疾患を有している。その例には、調査薬の初回投与前６か月以内の心筋梗塞、動脈血栓塞栓症もしくは脳血管血栓塞栓症、症候性律動不整、もしくは医学的治療を必要とする不安定な律動不整、治療が必要な狭心症、症候性の末梢血管疾患、ニューヨーク心臓協会分類３または４のうっ血性心不全、または先天性ＱＴ延長症候群の病歴が含まれる；
８．スクリーニング時に重大な心電図（ＥＣＧ）異常がある。その例には、投薬を必要とする不安定な心臓不整脈、左脚ブロック、第２度房室（ＡＶ）ブロック２型、第３度ＡＶブロック、グレード２以上の徐脈、またはフリデリシアの式（ＱＴｃＦ）を使用して心拍数に対して補正された４７０ｍｓｅｃ超のＱＴ間隔が含まれる；
９．過去２年間に全身治療（すなわち、疾患修飾性抗リウマチ薬剤または免疫抑制薬の使用）を必要とした活動性の自己免疫疾患を有している；
注：補充療法（例えば、副腎、甲状腺、または下垂体機能不全に対するチロキシン、インスリン、または生理的コルチコステロイド補充療法）は許可されている。
１０．免疫不全と診断され、免疫抑制療法を受けている、または慢性的な全身もしくは腸内ステロイド療法（プレドニゾンまたは同等の用量＞１０ｍｇ／日）もしくは調査薬の初回投与前７日以内の他の任意の形態の免疫抑制療法を受けている；
注：スクリーニング時及び調査参加中、患者は全身性コルチコステロイド（１０ｍｇ／日以下の用量のプレドニゾンまたは同等物）、または局所、眼球内、関節内または吸入のコルチコステロイドを使用してもよい。
１１．調査薬の初回投与前２週間以内の大手術（バスキュラーアクセス配置を除く）；
１２．調査薬の初回投与前５半減期または４週間（いずれか短い方）以内の治験薬剤または抗がん療法（化学療法、生物学的療法、免疫療法、抗がん漢方薬、または他の抗がん薬草療法を含む）。さらに、治験抗がん療法を同時に行うことは許可されていない；
１３．以前の放射線療法を、調査治療開始から２週間以内に受けている。参加者は、すべての放射線関連毒性から回復して、コルチコステロイドを必要とせず、放射線肺炎を有していないことが必須である。非ＣＮＳ疾患に対する緩和放射線療法（２週間以内の放射線療法）の場合は、１週間のウォッシュアウトが許される；
１４．脱毛症、及びグレード２の以前のプラチナ治療に関連した神経障害を除いて、調査薬の開始時点で米国国立がん研究所有害事象共通用語規準（ＮＣＩ ＣＴＣＡＥ）バージョン５．０グレード１を超える、以前の治療による毒性が継続している；
１５．調査薬の開始前及び調査参加中にシトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）３Ａ４の強力な阻害剤または誘導剤を使用している；
１６．主要なＣＹＰ４５０アイソザイムに対する感受性の高い基材を使用している；
１７．患者がＩＣＦに署名する能力を妨げる、患者が調査に協力し参加する能力に悪影響を及ぼす、または調査結果の解釈を危うくする可能性が高いと治験責任医師が判断した、精神疾患または薬物乱用を含む、何らかの病気、医学的状態、臓器系の機能不全、または社会的状況がある；
１８．調査薬の初回投与後３０日以内に生ワクチンまたは弱毒化生ワクチンの接種を受けた；
注：死菌ワクチンまたはその他の形式の投与は許可されている。
１９．活動性無制御全身性の細菌、ウイルス、または真菌感染症を有する；
２０．既知のヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）抗体を有する；
２１．Ｂ型肝炎表面抗原及びＢ型肝炎コア抗体、または定量的ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）検査によるＢ型肝炎ウイルスＤＮＡによって判定される活動性感染症を有する；
２２．ｑＰＣＲ検査によるＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）抗体またはＨＣＶ ＲＮＡによって判定される活動性感染症を有する；
２３．妊娠中または授乳中である；
注：治療前（７２時間以内）に尿妊娠検査で陽性反応が出たＷＯＣＢＰと定義される。尿検査が陽性である場合、または陰性が確認できない場合は、血清妊娠検査が必要になる。
２４．調査薬成分のいずれかに対する過敏症の病歴がある；または
２５．患者は、甲状腺異常、または補充療法における有害事象を除く、任意のグレードの免疫関連有害事象（ｉｒＡＥ）により以前の抗ＰＤ－（Ｌ）－１療法を中止した場合、ＩＬ－２プロドラッグとペムブロリズマブの併用アームから除外される。

【0193】

調査治療
治験生成物
ＩＬ－２プロドラッグは、フリップキャップを有する２０Ｒガラスバイアルで供給される凍結乾燥生成物として開発された。滅菌水で再構成すると、各バイアルは５ｍｇ／ｍＬまたは１０ｍｇ／ｍＬの公称容積６ｍＬを含む。凍結乾燥されたＩＬ－２プロドラッグは２℃～８℃で貯蔵される。

【0194】

調査薬の投与
全体的な投与の説明
ＩＬ－２プロドラッグ：

【0195】

ＩＬ－２プロドラッグの単剤療法は、ＲＥＣＩＳＴによる進行性疾患、受容不可能な毒性、患者による同意の撤回、治験責任医師による患者の中止、調査もしくは治療を終了するというスポンサーの決定、または死亡まで、２８日サイクルでシリンジポンプを介した１５分間のＩＶ注入としてＱ２Ｗで投与される。注入に関連した反応が発生した場合、注入継続時間を延長してもよい。

【0196】

用量漸増フェーズ中は、それぞれの新しい未試験の用量レベルでの第１患者及び第２患者への投与の間には少なくとも２日の時差が必要であり、第２患者及び第３患者への投与の間には１日の時差が必要である。

【0197】

ペムブロリズマブ：

【0198】

ペムブロリズマブは、すべての処置と評価が完了した後、６週間（４２日）の各治療サイクルの１日目にＩＶ注入を使用して投与される。

【0199】

ペムブロリズマブは、３０分間のＩＶ注入を使用して４００ｍｇの用量として投与される。施設は、注入タイミングを可能な限り３０分に近づけるようにあらゆる努力を払う必要がある。しかしながら、施設ごとの注入ポンプのばらつきを考慮すれば、－５分から＋１０分の時間枠が許容される（すなわち、注入時間は３０分［－５分／＋１０分］）。

【0200】

用量漸増フェーズまたは用量拡大フェーズのＩＬ－２プロドラッグ＋ペムブロリズマブ併用アームの場合、ペムブロリズマブが最初に投与される。患者は、ペムブロリズマブの全注入を受けてから約３０分後にＩＬ－２プロドラッグの注入を受けることができる。

【0201】

ペムブロリズマブの投与は１８サイクル（約２年）に制限される。しかしながら、患者が臨床上の利得を得ている限り、上記のＩＬ－２プロドラッグのセクションの基準に従って、ＩＬ－２プロドラッグを単剤療法として継続してもよい。

【0202】

用量変更ガイドライン
患者が、ＩＬ－２プロドラッグ、ペムブロリズマブ、またはその両方（ｉｒＡＥを含む）に関連する可能性のある、試験治療下で発現した有害事象（ＴＥＡＥ）を経験した場合、さらなる用量の変更、中止、または永久的中止が行われる可能性がある。サイクル１では、患者が、調査薬に関連するグレード２以上のＴＥＡＥを経験していない場合、用量変更を回避するべきである。後続のサイクルでは、投与の中断及び／または変更は許容される。

【0203】

調査手順
試験と評価
バイタルサインと身体診察
バイタルサインが測定され、これには収縮期血圧と拡張期血圧、心拍数、体温の測定が含まれる。

【0204】

スクリーニングでは、身体診察、ならびに関連する系統、体重及び身長の検査が行われる。身長はスクリーニングビジット時にのみ測定されるが、やり残した場合には後に測定してもよい。疾患部位及び症状を対象とした簡易身体診察は、サイクル１後の次のサイクルの１日目に実行される。

【0205】

薬物動態及び心電図
薬物動態
親化合物及び遊離ＩＬ－２のＩＬ－２プロドラッグＰＫ評価用の血漿サンプルを取得する。可能性のある安全性または抗腫瘍活性の所見と関連して曝露を理解するために治験責任医師が必要と考えた場合、追加のＰＫ評価を実施してもよい。サンプルを収集し、ＩＬ－２プロドラッグ及び遊離ＩＬ－２の濃度を、検証された生物分析方法で測定する。

【0206】

心電図
１２誘導ＥＣＧを取る。用量漸増フェーズ中のＤＬＴ期間全体を通して、連続３回の１２誘導ＥＣＧを（１分以上の間隔をあけて）取る。用量漸増フェーズ中のＤＬＴ期間後及び用量拡大フェーズ全体を通して単一の１２誘導ＥＣＧを取る。例外的事象または異常が観察された場合は、単一のＥＣＧを繰り返す必要がある。ＥＣＧ測定が血液サンプルの採取と同時に行われる場合、ＰＫサンプルの収集時間に影響を与えないように、血液サンプル収集の十分前にＥＣＧ評価のタイミングを選ぶ必要がある。患者が安静な（半横臥位または半仰臥位の）姿勢で５分間静かに呼吸した後にＥＣＧを記録する。調査薬投与の１５～３０分前に投与前のすべてのＥＣＧを取る。ＥＣＧの評価には、心拍数、ＰＲ、ＱＲＳ、ＱＴ、及びＱＴｃＦ間隔というＥＣＧパラメータにおける変化の評価が含まれる。Ｍｅｄｐａｃｅ Ｃｏｒｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙは調査の用量漸増フェーズ用の機器を提供し、ＥＣＧ画像はセンターに保存される。ＥＣＧのローカル評価及び機器は調査の拡大フェーズ中に利用され、ＥＣＧ画像はローカルに保存される。

【0207】

薬力学
以下の表８に具体的に述べているように、薬力学的評価及びバイオマーカー評価のために全血液サンプルを収集する。

【0208】

バイオマーカー評価の目標は、臨床調査の裏付けとなるデータを提供することだが、実際的な理由または戦略的な理由（例えば、サンプル数が不十分、サンプルの品質に関連する問題、または分析を妨げるアッセイに関連する問題、相関分析の実行が不可能であるなど）のいずれかにより、収集を停止する、分析を実行しない、または中止するという決定が下される状況がある。したがって、調査中に得られた結果に応じて、スポンサーの裁量でサンプル収集分析が省略される場合がある。

【表8】

【0209】

ＲＥＣＩＳＴ及びｉＲＥＣＩＳＴによる腫瘍測定
腫瘍はＲＥＣＩＳＴ１．１（Ｔｕｍｏｒ Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ ａｎｄ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｕｓｉｎｇ ＲＥＣＩＳＴ １．１を参照）及びｉＲＥＣＩＳＴ（Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｉｎ Ｓｏｌｉｄ Ｔｕｍｏｒｓ １．１ ｆｏｒ Ｉｍｍｕｎｅ－Ｂａｓｅｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ （ＩＲＥＣＩＳＴ） Ｑｕｉｃｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅを参照）に基づいて評価される。ベースライン疾患評価には、胸部、腹部、骨盤、またはサイクル１の１日目から２８日以内のスクリーニング時に疾患関与が疑われるその他の任意の領域のコンピュータ断層撮影（ＣＴ）または磁気共鳴（ＭＲ）画像検査を使用した放射線腫瘍測定が含まれる。ＣＮＳ転移を有する患者は、スクリーニング中に脳画像検査を受けなければならない（ＭＲ画像検査が好ましいが、ＭＲ画像検査が禁忌の場合は造影ＣＴも許容される）。各モダリティでは、明らかな禁忌（例えば、標準的な予防治療では対処できない腎機能の低下またはアレルギー）がない限り、静脈内（ＩＶ）及び経口造影剤を利用する必要がある（胸部ＣＴにはＩＶ造影剤は必要ない）。調査中のスキャンは、最初の６サイクルについてはサイクル１の１日目から８週間（±７日）ごとに、その後は１２週間（±７日）ごとに実行する必要があり、胸部、腹部、骨盤、またはベースラインでの既知の疾患のその他の任意の領域の画像検査を含み、ＲＥＣＩＳＴ１．１及びｉＲＥＣＩＳＴによる進行性疾患、同意の撤回、または新しい抗がん療法の開始まで、ベースライン画像検査に使用したものと同じモダリティを使用する。

【0210】

生検及びアーカイブ腫瘍サンプル
免疫表現型検査、がん遺伝子発現解析、免疫組織化学による腫瘍免疫構造の評価には、治療前及び治療後の生検が必要である。しかしながら、必要な数のコアを含む新鮮な生検の収集が医学的に不可能な場合、患者は調査を継続してもよく、アーカイブ腫瘍サンプルが要求される。ベースラインでは、フローサイトメトリーによる免疫表現型検査のために新鮮な生検（２コア）が必要である。また、ベースラインでは、新たに得られた生検（４コア）、または新鮮な生検が医学的に不可能な場合には（腫瘍ブロックが好ましい）アーカイブ生検のいずれかからの組織が、癌遺伝子発現分析、及び免疫組織化学による腫瘍免疫構造評価のために収集される。登録後の２８日間のスクリーニング期間中、いつでもベースラインサンプルを収集してもよい。調査では、免疫表現型検査、癌遺伝子発現分析、及び免疫組織化学による腫瘍免疫構造評価のために、サイクル１の２２日目と２８日目の間に生検（６コア）を収集する。２回目の生検のタイミングは、進化するバイオマーカーデータに基づいて変更してもよい。

【0211】

有効性及び薬物動態の評価
調査の評価項目
一次評価項目（用量漸増フェーズ）
この調査の用量漸増フェーズの一次評価項目は以下のとおりである。
・ ＩＬ－２プロドラッグ単独のＭＴＤ及び／またはＲＤＥ；
・ ペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグのＭＴＤ及び／またはＲＤＥ；及び
・ 単独及びペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグのＴＥＡＥ及び重篤な有害事象（ＳＡＥ）の頻度、重症度、関連性、安全性検査パラメータの変化、及びＤＬＴ（観察された場合）。

【0212】

一次評価項目（用量拡大フェーズ）
この調査の用量拡大フェーズの一次評価項目は以下のとおりである。
・ 単独及びペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグのＴＥＡＥ及びＳＡＥの頻度、重症度、関連性、安全性検査パラメータの変化、及びＤＬＴ（観察された場合）；及び
・ ＯＲＲ（ＯＲＲ＝ＣＲ＋ＰＲ）、ＲＥＣＩＳＴ１．１によるＤＯＲ、及びｉＲＥＣＩＳＴによるｉＯＲＲ（ｉＯＲＲ＝ｉＣＲ＋ｉＰＲ）。

【0213】

二次評価項目（用量漸増フェーズ及び用量拡大フェーズ）
この調査の用量漸増フェーズ及び用量拡大フェーズの二次評価項目は以下のとおりである。
・ ＩＬ－２プロドラッグ及び遊離ＩＬ－２の血漿濃度ならびに計算されたＰＫパラメータ；
・ ＤＯＲ、ならびにＲＥＣＩＳＴ１．１及びｉＤＯＲによるＰＦＳ、ならびにｉＲＥＣＩＳＴによるｉＰＦＳ；
・ 単独及びペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグに対する応答での、Ｔ細胞サブセットを含む末梢免疫細胞のベースラインからの変化の特性評価；
・ 免疫組織化学（ＩＨＣ）によって測定される、単独及びペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグに対する応答での、ベースライン及び治療後の腫瘍生検における免疫学的バイオマーカーの変化；及び
・ ＡＤＡのレベルによって示される、ＩＬ－２プロドラッグ（単独及びペムブロリズマブと併用して）の免疫原性の発生率。

【0214】

探索的評価項目
この調査の用量漸増フェーズ及び用量拡大フェーズの探索的評価項目は以下のとおりである。
・ 単独及びペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグによるＰＤ効果は以下のとおりである。
・ ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５、可溶性ＣＤ２５、インターフェロンガンマ、形質転換成長因子ベータ、腫瘍壊死因子アルファを含むが、これらに限定されないサイトカインの調節；
・ 末梢血液中のリンパ球及び好酸球のレベルの変化；
・ Ｔ細胞サブセットを含む腫瘍内免疫細胞の特性評価；
・ 腫瘍における免疫応答の遺伝子発現プロファイルの変化；
・ ＩＬ－２の腫瘍内レベルの変化。

【0215】

安全性評価：特に関心のある有害事象
単独及びペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグの安全性及び忍容性プロファイルは、有害事象（ＤＬＴ、ＳＡＥ、及び特別に関心のある有害事象［ＡＥＳＩ］を含む）、身体診察所見（ＥＣＯＧのパフォーマンスステータスを含む）、臨床検査評価、バイタルサイン測定及びＥＣＧをモニタリングすることによって評価される。有害事象は、ＮＣＩ ＣＴＣＡＥバージョン５．０に従って等級分けされる。この調査では、ＡＥＳＩには以下のものが含まれる。
・ ≧グレード２ ＣＲＳ；及び
・ ≧グレード２ ＣＬＳ。

【0216】

併用アームの場合、ＡＥＳＩには以下のものが含まれる。
・ 過剰摂取の治療で定義されている、臨床症状にも異常な検査結果にも関連しないペムブロリズマブの過剰摂取。
・ プロトコル指定の臨床検査または予定外の臨床検査によって決定される、正常値の上限の３倍以上になるＡＳＴまたはＡＬＴ検査値の上昇、正常値の上限の２倍以上になる総ビリルビン検査値の上昇、及び同時に検査値が正常値の上限の２倍未満であるアルカリホスファターゼ。

【0217】

統計分析
ＩＬ－２プロドラッグ及び遊離ＩＬ－２の血漿濃度を、検証済みの生物分析アッセイで測定する。ＩＬ－２プロドラッグ及び遊離ＩＬ－２の以下のＰＫパラメータを、ノンコンパートメント解析、すなわち観察された最大血漿濃度（Ｃ_ｍａｘ）、観察された最大血漿濃度までの時間（Ｔ_ｍａｘ）、時間０からｔまでの濃度対時間曲線の下の面積（ＡＵＣ_０－ｔ）、濃度時間対時間０から無限大までの曲線の下の面積（ＡＵＣ_{０－ｉｎｆ}）、クリアランス（ＣＬ）、分布容積（Ｖ_ｄ）、及び消失半減期（ｔ_１／２）を使用して血漿濃度から計算する。必要に応じて、用量コホートごとに要約統計を生成する。

【0218】

平均ＩＬ－２プロドラッグ及び遊離ＩＬ－２の血漿濃度と時間の関係を示すプロットを、用量グループ及びフェーズごとに線形及び片対数形式で生成する。個々の血漿濃度と時間の関係を示すグラフも提供される。

【0219】

特に指定のない限り、抗腫瘍活性解析を安全性解析対象集団で実施する。ＲＥＣＩＳＴ１．１及びｉＲＥＣＩＳＴ基準による腫瘍応答データをリスト化して要約する。最良の全体的な応答がＣＲまたはＰＲであることが確認された患者の観察された割合に基づいて、各コホートについてＯＲＲを推定する。最良の全体的な応答がｉＣＲまたはｉＰＲであると確認された患者の観察された割合に基づいて、各コホートについてｉＯＲＲを推定する。カプラン・マイヤー法を使用して、ＤＯＲ、ｉＤＯＲ、ＰＦＳ及びｉＰＦＳを説明的に要約する。

【0220】

概して、すべての安全分析は説明的であり、安全性解析対象集団の適切な要約統計とともに表形式で提示される。

【0221】

単独及びペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグの安全性及び忍容性プロファイルは、有害事象（ＤＬＴ、ＳＡＥ及びＡＥＳＩを含む）、身体診察所見（ＥＣＯＧのパフォーマンスステータスを含む）、臨床検査評価、バイタルサイン測定及びＥＣＧをモニタリングすることによって評価される。有害事象は、ＮＣＩ ＣＴＣＡＥバージョン５．０に従って等級分けされる。

【0222】

ＴＥＡＥを有する患者の数と割合を、器官別大分類及び基本語によって要約する。グレード３以上のＴＥＡＥ、薬関連のＴＥＡＥ、試験治療下で発現したＳＡＥ、薬関連の試験治療下で発現したＳＡＥ、調査薬の中止につながるＴＥＡＥ、調査薬の中止につながる、薬関連のＴＥＡＥ、調査薬の用量低減／中断につながるＴＥＡＥ、及び調査薬の用量低減／中断につながる、薬関連のＴＥＡＥを同じ様式で要約する。この調査の用量漸増フェーズのサイクル１中のＤＬＴを、主要な器官別大分類及び基本語によって要約する。

【0223】

抗腫瘍活性解析
現地の治験責任医師の評価に基づいてＲＥＣＩＳＴ１．１及びｉＲＥＣＩＳＴ基準を使用して、すべての有効性を行う。

【0224】

全奏効率：

【0225】

確認されたＣＲ及び／またはＰＲの達成によって定義される全奏効率を、パーセント率及び９５％信頼区間（ＣＩ）によって提示する。固形腫瘍のサイズの変化については、ウォーターフォールプロットを提示する。すべての応答評価について、スイマープロットを提示する。すべての応答評価をリスト化する。

【0226】

３、６、及び９か月目の臨床的有効率：

【0227】

ＣＲ及び／またはＰＲ及び／またはＳＤの達成によって定義される、３、６、及び９か月目の臨床的有効率を、パーセント率及び９５％ＣＩで提示する。ウォーターフォールプロットを提示する。

【0228】

奏効期間：

【0229】

ＰＲまたはＣＲの最初の評価からＰＤのその後の最初の評価までの時間として定義される奏効期間を、奏効期間の中央値及びそれぞれの９５％ＣＩを含む説明的統計によって要約する。奏効期間もまた、リスト化される。

【0230】

無増悪生存期間（ＰＦＳ）及び全生存率（ＯＳ）：

【0231】

最初の治療を受けてからＰＤ／ＯＳまでの時間を、カプラン・マイヤー推定値、ＰＦＳ／ＯＳの中央値、及びそれぞれの９５％ＣＩによって要約する。イベントのない患者は、ＰＦＳについては最後に利用可能な腫瘍評価が行われた時点で、ＯＳについては生存が分かっている最後の時点で打ち切られる。

【0232】

最良の全体的な応答がｉＣＲまたはｉＰＲであると確認された患者の観察された割合に基づいて、各コホートについてｉＯＲＲを推定する。カプラン・マイヤー法を使用して、ＤＯＲ、ｉＤＯＲ、ＰＦＳ及びｉＰＦＳを説明的に要約する。

【0233】

薬物動態解析
ＰＫ解析対象集団を、すべてのＰＫデータの要約に使用する。記述統計を超える正式な統計分析は計画されていない。各ＰＫパラメータについて、個々及び平均のデータならびに要約統計を提示する。このＰＫパラメータの例には、患者数、算術平均、幾何平均（最大血漿濃度までの時間（ｔ_ｍａｘ）、及び最後の測定可能な血漿濃度までの時間（ｔ_ｌａｓｔ）については、幾何平均は計算されない）、標準偏差（ＳｔＤ）、信頼値（ＣＶ）、中央値、最小値と最大値が含まれる。

【0234】

薬力学解析
血液及び腫瘍微小環境における血清サイトカイン及び免疫細胞サブセットに対する免疫学的変化の結果、変化、増減率、及び最大増減率を説明的に要約する。

【0235】

サンプルサイズの決定
この調査の全体的なサンプルサイズは、用量漸増フェーズ及び用量拡大フェーズの間で約１５０人の患者であり、ＩＬ－２プロドラッグの単剤療法、及びペムブロリズマブと併用したＩＬ－２プロドラッグの観察されたＤＬＴプロファイルに応じて異なる。

【0236】

実施例３：ＣＴ２６マウスモデル
インビトロでＭＭＰ９を発現する急速増殖結腸腺癌細胞株であるＣＴ２６細胞株を使用した。この腫瘍モデルを使用して、融合タンパク質が腫瘍の増殖に影響を与える能力を検査した。

【表9】

【0237】

潰瘍形成を低減させる細胞を移植するために、マウスにイソフルランで麻酔を施した。雌ＢＡＬＢ／ｃマウスを、脇腹への１．５ｘ１０^５のＣＴ２６腫瘍細胞皮下注射により準備した。細胞注入量は０．１ｍＬ／マウスであった。開始日のマウスの年齢は８～１２週であった。腫瘍が平均サイズ１００～１５０ｍｍ^３に達した時にペアマッチを実行し、表９に従って処置を開始した。誘導性ＩＬ－２プロドラッグは化合物１（ＷＷ０６２１／ＷＷ０５２３）、抗ＰＤ－１抗体はＲＭＰ１－１４であった。体重は調査の開始時に測定され、その後は調査の終了まで隔週で測定された。調査が終了するまで、腫瘍サイズのキャリパー測定を隔週で実施した。有害反応があれば直ちに報告された。３０％を超える体重減少が１回観察された、または３回連続して２５％を超える体重減少が測定されたいかなる個々の動物もすべて安楽死させた。平均体重減少が２０％を超える、または死亡率が１０％を超えるいかなるグループでも、結果として投与は停止された。このグループは安楽死にならず、回復が許可された。動物は個々に監視された。調査の評価項目は、腫瘍体積１５００ｍｍ^３または４５日のいずれか早い方であった。応答個体はより長く追跡された。終点に達した時、動物を安楽死させた。この調査における化合物１または抗ＰＤ－１による処置は、単剤療法としての有効性を示した。化合物１及び抗ＰＤ１抗体を使用する併用療法は腫瘍制御を改善し、化合物１または抗ＰＤ－１抗体のいずれかの単剤療法よりも効果的であった。結果を図１０Ａ～図１０Ｆに示す。

【0238】

他の実施形態
上記の開示は、独立した有用性を有する複数の異なる発明を包含し得る。これらの発明の各々を、その好ましい形態（複数可）で開示してきたが、多数の変形が可能であるため、本明細書に開示及び例示されるその具体的な実施形態は限定的な意味で考慮されるべきではない。本発明の主題には、本明細書で開示される様々な要素、特徴、機能、及び／または特性の、すべての新規かつ非自明の組み合わせ及び部分組み合わせが含まれる。以下の特許請求の範囲は、新規かつ非自明とみなされる特定の組み合わせ及び部分組み合わせを特に指摘している。特徴、機能、要素、及び／または特性の他の組み合わせ及び部分組み合わせで具体化された発明は、本出願、本出願からの優先権を主張する出願、または関連出願において特許請求され得る。そのような特許請求の範囲もまた、異なる発明を対象とするのか、または同じ発明を対象とするのか、また、元の特許請求の範囲と比較して範囲が広いか、狭いか、等しいか、もしくは異なるかということにかかわらず、本開示の発明の主題に含まれるとみなされる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7-1】

【図7-2】

【図8】

【図9】

【図10-1】

【図10-2】

【図10-3】

【図10-4】

【図10-5】

【図10-6】

【配列表】

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【国際調査報告】