特表 2024-534138 ヒト化フレームワーク領域を有する抗体

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-09-18

(54)【発明の名称】ヒト化フレームワーク領域を有する抗体

(51)【国際特許分類】

   C07K 16/28 20060101AFI20240910BHJP

   C07K 19/00 20060101ALI20240910BHJP

   C07K 14/725 20060101ALI20240910BHJP

   C12N 15/13 20060101ALI20240910BHJP

   C12N 15/12 20060101ALI20240910BHJP

   C12N 15/62 20060101ALI20240910BHJP

   C12N 15/79 20060101ALI20240910BHJP

   C12N 1/15 20060101ALI20240910BHJP

   C12N 1/19 20060101ALI20240910BHJP

   C12N 1/21 20060101ALI20240910BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20240910BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240910BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20240910BHJP

   A61K 47/68 20170101ALI20240910BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20240910BHJP

   A61K 47/54 20170101ALI20240910BHJP

   A61K 38/05 20060101ALI20240910BHJP

【ＦＩ】

C07K16/28 ZNA

C07K19/00

C07K14/725

C12N15/13

C12N15/12

C12N15/62 Z

C12N15/79 Z

C12N1/15

C12N1/19

C12N1/21

C12N5/10

A61P35/00

A61K45/00

A61K47/68

A61K39/395 N

A61K47/54

A61K38/05

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024512129

(86)(22)【出願日】2022-08-24

(85)【翻訳文提出日】2024-04-19

(86)【国際出願番号】 US2022075424

(87)【国際公開番号】W WO2023028537

(87)【国際公開日】2023-03-02

(31)【優先権主張番号】63/236,928

(32)【優先日】2021-08-25

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．テフロン

２．ＴＷＥＥＮ

３．ＢＲＩＪ

４．ＴＲＩＴＯＮ

５．ＰＬＵＴＲＯＮＩＣ

(71)【出願人】

【識別番号】520355792

【氏名又は名称】アール．ピー．シェーラー テクノロジーズ，エルエルシー

(74)【代理人】

【識別番号】100114188

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 誠

(74)【代理人】

【識別番号】100119253

【弁理士】

【氏名又は名称】金山 賢教

(74)【代理人】

【識別番号】100124855

【弁理士】

【氏名又は名称】坪倉 道明

(74)【代理人】

【識別番号】100129713

【弁理士】

【氏名又は名称】重森 一輝

(74)【代理人】

【識別番号】100137213

【弁理士】

【氏名又は名称】安藤 健司

(74)【代理人】

【識別番号】100183519

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻田 芳恵

(74)【代理人】

【識別番号】100196483

【弁理士】

【氏名又は名称】川嵜 洋祐

(74)【代理人】

【識別番号】100160749

【弁理士】

【氏名又は名称】飯野 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100160255

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 祐輔

(74)【代理人】

【識別番号】100219265

【弁理士】

【氏名又は名称】鈴木 崇大

(74)【代理人】

【識別番号】100203208

【弁理士】

【氏名又は名称】小笠原 洋平

(74)【代理人】

【識別番号】100216839

【弁理士】

【氏名又は名称】大石 敏幸

(74)【代理人】

【識別番号】100146318

【弁理士】

【氏名又は名称】岩瀬 吉和

(74)【代理人】

【識別番号】100127812

【弁理士】

【氏名又は名称】城山 康文

(72)【発明者】

【氏名】シュプラコフ，ステパン

(72)【発明者】

【氏名】オグンコヤ，アヨデル・オー

(72)【発明者】

【氏名】ドレイク，ペネロペ・エム

(72)【発明者】

【氏名】キム，ユン

(72)【発明者】

【氏名】ボーゾン，マキシン

(72)【発明者】

【氏名】ヒックル，コリン

(72)【発明者】

【氏名】バーフィールド，ロビン・エム

【テーマコード（参考）】

4B065

4C076

4C084

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B065AA91X

4B065AB01

4B065AC14

4B065BA02

4B065CA25

4B065CA44

4B065CA46

4C076AA01

4C076AA06

4C076AA11

4C076AA24

4C076AA29

4C076AA31

4C076AA36

4C076AA53

4C076AA93

4C076BB01

4C076BB11

4C076CC27

4C076DD60

4C076EE59

4C084AA01

4C084AA02

4C084AA03

4C084AA17

4C084AA27

4C084BA01

4C084BA14

4C084BA42

4C084MA05

4C084MA13

4C084MA17

4C084MA28

4C084MA31

4C084MA35

4C084MA37

4C084MA41

4C084MA43

4C084MA56

4C084MA60

4C084MA66

4C084NA05

4C084NA10

4C084ZB261

4C084ZB262

4C085AA13

4C085AA14

4C085AA16

4C085BB11

4C085BB36

4C085BB41

4C085BB43

4C085CC23

4C085EE01

4C085GG01

4C085GG08

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045BA72

4H045CA40

4H045DA76

4H045EA28

4H045FA74

(57)【要約】

本開示は、ヒト化フレームワーク領域を含む可変領域を含む結合剤（特に、抗体）を提供する。本開示の結合剤の可変鎖の一方又は両方をコードする核酸も、そのような核酸を含む細胞と同様に提供される。また、本明細書に開示される結合剤を含む組成物（いくつかの事例において、薬学的組成物を含む）も提供される。本開示の結合剤を作製し、使用する方法も提供される。特定の態様において、細胞増殖性障害を有する個体に、治療有効量の本明細書に開示される結合剤を投与することを含み、結合剤を個体に投与して、異常増殖性細胞に対する免疫応答、例えば、Ｔ細胞応答を増強する方法が提供される。結合剤は、様々な診断及びモニタリング用途にも有用であり、これらも提供される。
【選択図】図２Ａ

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＣＤ３０タンパク質に特異的に結合する結合剤であって、前記結合剤が、
ｉ）
ＱＶＱＬＱＱＳＧＰＥＶＶＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＹＭＴＷＶＲＱＫＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＹＰＧＳＧＮＴＫＹＮＱＫＦＫＧＲＶＴＩＴＶＤＴＳＳＳＴＡＦＭＥＬＳＳＬＴＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＮＹＧＮＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＡ（配列番号６）、及び
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＹＩＴＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＹＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＶＤＴＳＡＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＮＹＧＮＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１１）から選択される配列を含む、可変重鎖（ＶＨ）鎖と、
ｉｉ）
ＤＩＶＭＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＫＳＳＱＳＶＤＦＤＧＤＳＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＡＡＳＴＲＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＥＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＳＮＥＤＰＷＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２１）、及び
ＤＩＶＬＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣＫＡＳＱＳＶＤＦＤＧＤＳＹＭＮＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＡＡＳＮＲＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＱＳＮＥＤＰＷＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２６）から選択される配列を含む、可変軽鎖（ＶＬ）鎖と、を含む、結合剤。

【請求項2】

配列番号１１を含むＶＨ鎖と、配列番号２６を含むＶＬ鎖と、を含む、請求項１に記載の結合剤。

【請求項3】

ＣＤ３０に特異的に結合する結合剤であって、
それぞれ、配列番号３１～３３の配列を有するＨ－ＣＤＲ１、Ｈ－ＣＤＲ２、及びＨ－ＣＤＲ３を含むＶＨ鎖と、それぞれ、配列番号３４～３６の配列を有するＬ－ＣＤＲ１、Ｌ－ＣＤＲ２、及びＬ－ＣＤＲ３を含むＶＬ鎖と、を含み、
前記ＶＨ鎖が、
ｉ）配列番号７の配列を有する重鎖フレームワーク領域１（ＨＦＲ１）、配列番号８の配列を有する重鎖フレームワーク領域２（ＨＦＲ２）、配列番号９の配列を有する重鎖フレームワーク領域３（ＨＦＲ３）、及び配列番号１０の配列を有する重鎖フレームワーク領域４（ＨＦＲ４）、又は
ｉｉ）配列番号１２の配列を有するＨＦＲ１、配列番号１３の配列を有するＨＦＲ２、配列番号１４の配列を有するＨＦＲ３、及び配列番号１５の配列を有するＨＦＲ４を含み、
前記ＶＬ鎖が、
ｉ）配列番号２２の配列を有する軽鎖フレームワーク領域１（ＬＦＲ１）、配列番号２３の配列を有する軽鎖フレームワーク領域２（ＬＦＲ２）、配列番号２４の配列を有する軽鎖フレームワーク領域３（ＬＦＲ３）、及び配列番号２５の配列を有する軽鎖フレームワーク領域４（ＬＦＲ４）、又は
ｉｉ）配列番号２７の配列を有するＬＦＲ１、配列番号２８の配列を有するＬＦＲ２、配列番号２９の配列を有するＬＦＲ３、及び配列番号３０の配列を有するＬＦＲ４を含む、結合剤。

【請求項4】

抗原に特異的に結合する結合剤であって、
Ｈ－ＣＤＲ１、Ｈ－ＣＤＲ２、及びＨ－ＣＤＲ３を含むＶＨ鎖と、Ｌ－ＣＤＲ１、Ｌ－ＣＤＲ２、及びＬ－ＣＤＲ３を含むＶＬ鎖と、を含み、相補性決定領域が、前記抗原に対する前記結合剤の結合特異性を決定し、前記結合剤において、
前記ＶＨ鎖が、
ｉ）配列番号７の配列を有するＨＦＲ１、配列番号８の配列を有するＨＦＲ２、配列番号９の配列を有するＨＦＲ３、及び配列番号１０の配列を有するＨＦＲ４、又は
ｉｉ）配列番号１２の配列を有するＨＦＲ１、配列番号１３の配列を有するＨＦＲ２、配列番号１４の配列を有するＨＦＲ３、及び配列番号１５の配列を有するＨＦＲ４を含み、
前記ＶＬ鎖が、
ｉ）配列番号２２の配列を有するＬＦＲ１、配列番号２３の配列を有するＬＦＲ２、配列番号２４の配列を有するＬＦＲ３、及び配列番号２５の配列を有するＬＦＲ４、又は
ｉｉ）配列番号２７の配列を有するＬＦＲ１、配列番号２８の配列を有するＬＦＲ２、配列番号２９の配列を有するＬＦＲ３、及び配列番号３０の配列を有するＬＦＲ４を含む、結合剤。

【請求項5】

前記結合剤が、ＣＤ３０に特異的に結合し、それぞれ、配列番号３１～３３の配列を有するＨ－ＣＤＲ１、Ｈ－ＣＤＲ２、及びＨ－ＣＤＲ３を含むＶＨ鎖と、それぞれ、配列番号３４～３６の配列を有するＬ－ＣＤＲ１、Ｌ－ＣＤＲ２、及びＬ－ＣＤＲ３を含むＶＬ鎖と、を含む、請求項１に記載の結合剤。

【請求項6】

前記結合剤が、キメラ抗体である、請求項１～５のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項7】

前記結合剤が、Ｔ細胞受容体、Ｔ細胞受容体様抗体、ＩｇＧ、Ｆｖ、一本鎖抗体、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、又はＦａｂ’からなる群から選択される、請求項１～６のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項8】

前記結合剤が、ＩｇＧである、請求項１～７のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項9】

前記ＩｇＧが、ＩｇＧ１である、請求項８に記載の結合剤。

【請求項10】

前記結合剤が、Ｆａｂである、請求項１～７のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項11】

前記結合剤が、ｓｃＦｖである、請求項１～７のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項12】

ＣＤ３０に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインを含む二重特異性結合剤であって、前記第１の抗原結合ドメインが、請求項１～５のいずれか一項に記載のＶＨ鎖及びＶＬ鎖を含む、二重特異性結合剤。

【請求項13】

前記結合剤が、検出可能に標識されている、請求項１～１２のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項14】

前記結合剤が、活性薬剤にコンジュゲートされている、請求項１～１２のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項15】

前記活性薬剤が、サイトトキシンである、請求項１４に記載の結合剤。

【請求項16】

前記結合剤が、スルファターゼモチーフのアミノ酸配列を含む定常領域アミノ酸配列を含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項17】

前記結合剤が、スルファターゼモチーフのアミノ酸配列を含む定常領域アミノ酸配列を含む抗体であり、前記スルファターゼモチーフが、２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）部分を含むように修飾される、請求項１～１６のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項18】

以下の配列：
Ｘ^１（ｆＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０
を含み、
式中、
Ｚ^２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ^３０が、塩基性アミノ酸又は脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ^１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、前記配列が前記抗体のＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、任意のアミノ酸である、請求項１７に記載の結合剤。

【請求項19】

前記配列が、Ｌ（ｆＧｌｙ）ＴＰＳＲである、請求項１８に記載の結合剤。

【請求項20】

Ｚ^３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、及びＰから選択され、
Ｘ^１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、及びＶから選択され、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、及びＣから選択される、請求項１８に記載の結合剤抗体。

【請求項21】

前記配列が、前記抗体の重鎖定常領域のＣ末端にある、請求項１８～２０のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項22】

前記重鎖定常領域が、以下の配列：
Ｘ^１（ｆＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０
を含み、
式中、
Ｚ^２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ^３０が、塩基性アミノ酸又は脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ^１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、前記配列が前記コンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、任意のアミノ酸であり、
前記配列が、アミノ酸配列ＳＬＳＬＳＰＧに対してＣ末端である、請求項２１に記載の結合剤。

【請求項23】

前記重鎖定常領域が、配列ＳＰＧＳＬ（ｆＧｌｙ）ＴＰＳＲＧＳを含む、請求項２１に記載の結合剤。

【請求項24】

Ｚ^３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、及びＰから選択され、
Ｘ^１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、及びＶから選択され、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、及びＣから選択される、請求項２１に記載の結合剤。

【請求項25】

前記ｆＧｌｙ部分が、前記抗体の軽鎖定常領域内に配置されている、請求項１８～２０のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項26】

前記軽鎖定常領域が、以下の配列：
Ｘ^１（ｆＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０
を含み、
式中、
Ｚ^２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ^３０が、塩基性アミノ酸又は脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ^１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、前記配列が前記コンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、任意のアミノ酸であり、
前記配列が、配列ＫＶＤＮＡＬに対してＣ末端であり、かつ／又は配列ＱＳＧＮＳＱに対してＮ末端である、請求項２５に記載の結合剤。

【請求項27】

前記軽鎖定常領域が、配列ＫＶＤＮＡＬ（ｆＧｌｙ）ＴＰＳＲＱＳＧＮＳＱを含む、請求項２６に記載の結合剤。

【請求項28】

Ｚ^３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、及びＰから選択され、
Ｘ^１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、及びＶから選択され、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、及びＣから選択される、請求項２７に記載の結合剤。

【請求項29】

前記ｆＧｌｙ部分が、前記抗体の重鎖ＣＨ１領域内に配置されている、請求項１８～２０のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項30】

前記重鎖ＣＨ１領域が、以下の配列：
Ｘ^１（ｆＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０
を含み、
式中、
Ｚ^２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ^３０が、塩基性アミノ酸又は脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ^１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、前記配列が前記コンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、任意のアミノ酸であり、
前記配列が、アミノ酸配列ＳＷＮＳＧＡに対してＣ末端であり、かつ／又はアミノ酸配列ＧＶＨＴＦＰに対してＮ末端である、請求項２９に記載の結合剤。

【請求項31】

前記重鎖ＣＨ１領域が、配列ＳＷＮＳＧＡＬ（ｆＧｌｙ）ＴＰＳＲＧＶＨＴＦＰを含む、請求項３０に記載の結合剤。

【請求項32】

Ｚ^３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、及びＰから選択され、
Ｘ^１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、及びＶから選択され、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、及びＣから選択される、請求項３０に記載の結合剤。

【請求項33】

前記結合剤が、前記重鎖ＣＨ１領域の９１番目の位置のアスパラギン残基の前に、配列Ｘ^１（ｆＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０を含む、請求項２９又は３０及び３２のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項34】

前記重鎖ＣＨ１領域が、配列番号１７５の配列、又は配列番号１７５の配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含む、請求項２９又は３０及び３２又は３３のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項35】

配列Ｘ^１（ｆＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０が、配列ＬＣＴＰＳＲ（配列番号５８）を含む、請求項３３又は３４に記載の結合剤。

【請求項36】

配列番号１７５の９１番目の位置のアスパラギン残基の前に配列ＬＣＴＰＳＲ（配列番号５８）を含み、ＫＰＳＬＣＴＰＳＲＮＴＫ（配列番号１８９）の配列を含む抗体を産生する、請求項３５に記載の結合剤。

【請求項37】

以下の配列：
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＬＣＴＰＳＲＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１９０）を含む、請求項３６に記載の結合剤。

【請求項38】

前記ｆＧｌｙ部分が、前記抗体の重鎖ＣＨ２領域内に配置されている、請求項１８～２０のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項39】

前記ｆＧｌｙ部分が、前記抗体の重鎖ＣＨ３領域内に配置されている、請求項１８～２０のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項40】

前記結合剤が、前記ｆＧｌｙ部分を介して前記抗体に共有結合された異種部分を含む、請求項１７～３９のいずれか一項に記載の結合剤。

【請求項41】

前記異種部分が、薬物、オリゴヌクレオチド、タンパク質、脂質ナノ粒子、ウイルス粒子、毒素、検出可能な標識、水溶性ポリマー、又は合成ペプチドである、請求項４０に記載の結合剤。

【請求項42】

請求項１～４１のいずれか一項に記載の結合剤の可変重（ＶＨ）鎖、可変軽鎖（ＶＬ）、又はその両方をコードする核酸。

【請求項43】

前記結合剤が、一本鎖抗体であり、前記核酸が、前記一本鎖抗体をコードする、請求項４２に記載の核酸。

【請求項44】

前記一本鎖抗体が、ｓｃＦｖである、請求項４３に記載の核酸。

【請求項45】

請求項４２～４４のいずれか一項に記載の核酸を含む組換え発現ベクターであって、前記核酸が、真核細胞内で活性である転写制御エレメントに作動可能に連結されている、組換え発現ベクター。

【請求項46】

請求項４２～４４のいずれか一項に記載の核酸又は請求項４５に記載の発現ベクターを含む、細胞。

【請求項47】

前記核酸が、前記結合剤の前記ＶＨ鎖及び前記ＶＬ鎖をコードする、請求項４２に記載の細胞。

【請求項48】

前記結合剤が、一本鎖抗体であり、前記核酸が、前記一本鎖抗体をコードする、請求項４７に記載の細胞。

【請求項49】

前記一本鎖抗体が、ｓｃＦｖである、請求項４に記載の細胞。

【請求項50】

細胞であって、
結合剤のＶＨ鎖をコードする第１の核酸と、
前記結合剤のＶＬ鎖をコードする第２の核酸と、を含み、
前記ＶＨ鎖及び前記ＶＬ鎖が、請求項１～４１のいずれか一項に記載の結合剤を生成する、細胞。

【請求項51】

前記第１の核酸を含む第１の発現ベクターと、
前記第２の核酸を含む第２の発現ベクターと、を含む、請求項５０に記載の細胞。

【請求項52】

融合タンパク質であって、
異種アミノ酸配列に融合した、請求項１～４１のいずれか一項に記載の結合剤のＶＨ鎖、ＶＬ鎖、又はその両方を含む、融合タンパク質。

【請求項53】

コンジュゲートであって、
請求項１～４１のいずれか一項に記載の結合剤と、
前記結合剤にコンジュゲートされた薬剤と、を含む、コンジュゲート。

【請求項54】

前記薬剤が、半減期延長部分、標識剤、及び薬物からなる群から選択される、請求項５３に記載のコンジュゲート。

【請求項55】

前記コンジュゲートが、式（Ｉ）：

【化1】

のコンジュゲートであり、
式中、
Ｚが、ＣＲ^４又はＮであり、
Ｒ^１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ^２及びＲ^３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、又はＲ^２及びＲ^３が任意選択的に環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ^４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｌが、リンカーであり、
Ｗ^１が、薬物であり、
Ｗ^２が、前記結合剤である、請求項５４に記載のコンジュゲート。

【請求項56】

Ｌが、
－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－
を含み、
式中、
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆが、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆの合計は、１～６であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６が、各々独立して、共有結合、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシ（ＭＡＢＯ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＭＡＢＣ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシ（ＰＡＢＯ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢＣ）、パラ－アミノベンジル（ＰＡＢ）、パラ－アミノ－ベンジルアミノ（ＰＡＢＡ）、パラ－アミノ－フェニル（ＰＡＰ）、パラ－ヒドロキシ－フェニル（ＰＨＰ）、アセタール、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｍが、１～１２の整数であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、及びＶ^６が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ^１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される、請求項５５に記載のコンジュゲート。

【請求項57】

Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル及び置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルから選択され、
Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６が、各々独立して、共有結合、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、ＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、ＰＨＰ、アセタール基、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、及びＶ^６が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、
（ＰＥＧ）_ｎが、

【化2】

であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡは、以下の構造：

【化3】

を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、

【化4】

であり、
各Ｒ^１２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アリール、及び置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ^１２基が、環状に連結され、ピペラジニル環を形成してもよい、請求項５６に記載のコンジュゲート。

【請求項58】

ＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰが各々、任意選択的にグリコシドで置換されている、請求項５６又は５７に記載のコンジュゲート。

【請求項59】

前記グリコシドが、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択される、請求項５８に記載のコンジュゲート。

【請求項60】

Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^２が、アミノ酸類似体であり、Ｖ^２が、－ＮＨ－であり、
Ｔ^３が、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^３が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^４が、ＡＡであり、Ｖ^４が、存在せず、
Ｔ^５が、ＰＡＢＣであり、Ｖ^５が、存在せず、
ｆが、０である、請求項５６～５９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項61】

前記薬物が、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）である、請求項５５～６０のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項62】

前記コンジュゲートが、以下の構造：

【化5】

を有する、請求項５５～６１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項63】

前記コンジュゲートが、式（Ｉａ）：

【化6】

のコンジュゲートであり、
式中、
Ｚが、ＣＲ^４又はＮであり、
Ｒ^１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ^２及びＲ^３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、又はＲ^２及びＲ^３が任意選択的に環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ^４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｌが、－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－を含むリンカーであり、式中、ａ、ｂ、ｃ及びｄが、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ及びｄの合計が、１～４であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３及びＴ^４が、各々独立して、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－、ピペリジン－４－アミノ（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、式中、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコール又は修飾ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基であり、式中、ｗが、１～２０の整数であり、ｎが、１～３０の整数であり、ｐが、１～２０の整数であり、ｈが、１～１２の整数であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、及びＶ^４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、式中、ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ^１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｗ^１が、薬物であり、
Ｗ^２が、前記結合剤である、請求項５４に記載のコンジュゲート。

【請求項64】

Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル及び置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルから選択され、
Ｔ^２、Ｔ^３及びＴ^４が、各々独立して、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３及びＶ^４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、
（ＰＥＧ）_ｎが、

【化7】

であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡは、以下の構造：

【化8】

を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、

【化9】

であり、
各Ｒ^１２及びＲ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アリール、及び置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ^１２基が、環状に連結して、ピペラジニル環を形成してもよく、
Ｒ^１３が、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される、請求項６３に記載のコンジュゲート。

【請求項65】

Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１が、－ＣＯ－であり、Ｔ^２が、４ＡＰであり、Ｖ^２が、－ＣＯ－であり、Ｔ^３が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^３が、－ＣＯ－であり、Ｔ^４が、存在せず、Ｖ^４が、存在しない、請求項６３又は６４に記載のコンジュゲート。

【請求項66】

前記リンカーＬが、以下の構造：

【化10】

を含み、
式中、
各ｆが、独立して、１～１２の整数であり、
ｎが、１～３０の整数である、請求項６３～６５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項67】

前記コンジュゲートが、式（ＩＩ）：

【化11】

のコンジュゲートであり、
式中、
Ｚ^１、Ｚ^２、Ｚ^３及びＺ^４が、各々独立して、ＣＲ^２４、Ｎ及びＣ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２から選択され、少なくとも１つのＺ^１、Ｚ^２、Ｚ^３及びＺ^４が、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２であり、
Ｒ^２１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ^２２及びＲ^２３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、又はＲ^２２及びＲ^２３が任意選択的に環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ^２４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｌ^Ａが、第１のリンカーであり、
Ｌ^Ｂが、第２のリンカーであり、
Ｗ^１１が、第１の薬物であり、
Ｗ^１２が、第２の薬物であり、
Ｗ^１３が、前記結合剤である、請求項５４に記載のコンジュゲート。

【請求項68】

Ｚ^１が、ＣＲ^２４である、請求項６７に記載のコンジュゲート。

【請求項69】

Ｚ^１が、Ｎである、請求項６７に記載のコンジュゲート。

【請求項70】

Ｚ^３が、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２である、請求項６７に記載のコンジュゲート。

【請求項71】

Ｌ^Ａが、
－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－
を含み、
式中、
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆが、各々独立して、０又は１であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６が、各々独立して、共有結合、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｘ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシ（ＭＡＢＯ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＭＡＢＣ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシ（ＰＡＢＯ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢＣ）、パラ－アミノベンジル（ＰＡＢ）、パラ－アミノ－ベンジルアミノ（ＰＡＢＡ）、パラ－アミノ－フェニル（ＰＡＰ）、パラ－ヒドロキシ－フェニル（ＰＨＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｘが、１～１２の整数であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、及びＶ^６が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ^１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される、請求項６７～７０のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項72】

ＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰが各々、任意選択的にグリコシドで置換されている、請求項６１に記載のコンジュゲート。

【請求項73】

前記グリコシドが、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択される、請求項７２に記載のコンジュゲート。

【請求項74】

Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１が、－ＣＯＮＨ－であり、
Ｔ^２が、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^２が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^３が、ＡＡであり、Ｖ^３が、存在せず、
Ｔ^４が、ＰＡＢＣであり、Ｖ^４が、存在せず、
ｅ及びｆが、各々０である、請求項６７～７３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項75】

Ｌ^Ｂが、
－（Ｔ^７－Ｖ^７）_ｇ－（Ｔ^８－Ｖ^８）_ｈ－（Ｔ^９－Ｖ^９）_ｉ－（Ｔ^１０－Ｖ^１０）_ｊ－（Ｔ^１１－Ｖ^１１）_ｋ－（Ｔ^１２－Ｖ^１２）_ｌ－（Ｔ^１３－Ｖ^１３）_ｍ－を含み、
式中、
ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍが、各々独立して、０又は１であり、
Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及びＴ^１３が、各々独立して、共有結合、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｘ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシ（ＭＡＢＯ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＭＡＢＣ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシ（ＰＡＢＯ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢＣ）、パラ－アミノベンジル（ＰＡＢ）、パラ－アミノ－ベンジルアミノ（ＰＡＢＡ）、パラ－アミノ－フェニル（ＰＡＰ）、パラ－ヒドロキシ－フェニル（ＰＨＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｘが、１～１２の整数であり、
Ｖ^７、Ｖ^８、Ｖ^９、Ｖ^１０、Ｖ^１１、Ｖ^１２及びＶ^１３が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ^１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される、請求項６７～７４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項76】

ＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰが各々、任意選択的にグリコシドで置換されている、請求項７１に記載のコンジュゲート。

【請求項77】

前記グリコシドが、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択される、請求項７５又は７６に記載のコンジュゲート。

【請求項78】

Ｔ^７が、存在せず、Ｖ^７が、－ＮＨＣＯ－であり、
Ｔ^８が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^８が、－ＣＯＮＨ－であり、
Ｔ^９が、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^９が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^１０が、ＡＡであり、Ｖ^１０が、存在せず、
Ｔ^１１が、ＰＡＢＣであり、Ｖ^１１が、存在せず、
ｌ及びｍが、各々０である、請求項７５～７７のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項79】

前記コンジュゲートが、以下の構造：

【化12】

を有する、請求項６７に記載のコンジュゲート。

【請求項80】

薬学的組成物であって、
ａ）請求項１～４１のいずれか一項に記載の結合剤と、
ｂ）薬学的に許容される担体と、を含む、薬学的組成物。

【請求項81】

薬学的組成物であって、
ａ）請求項５２に記載の融合タンパク質と、
ｂ）薬学的に許容される担体と、を含む、薬学的組成物。

【請求項82】

薬学的組成物であって、
ａ）請求項５３～７９のいずれか一項に記載のコンジュゲートと、
ｂ）薬学的に許容される担体と、を含む、薬学的組成物。

【請求項83】

対象における細胞増殖性障害を治療する方法であって、前記方法が、
細胞増殖性障害を有する対象に、治療有効量の請求項８０～８２のいずれか一項に記載の薬学的組成物を投与することを含む、方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年８月２５日に出願された米国仮特許出願第６３／２３６，９２８号に対する優先権の利益を主張し、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

電子的に提出された資料の参照による組み込み
配列表は、２０２２年８月２４日に作成され、１５０ＫＢのサイズを有するＳｅｑｕｅｎｃｅ Ｌｉｓｔｉｎｇ ＸＭＬ「ＲＤＷＤ－０４３ＷＯ＿ＳＥＱ＿ＬＩＳＴ」として本明細書と共に提供される。Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｌｉｓｔｉｎｇ ＸＭＬの内容は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【背景技術】

【0003】

序論
抗体生物学的製剤は、臨床的にますます普及しつつあり、したがって、いくつかの疾患を治療するための有望なクラスの薬物を提示し、がんは、抗体による治療のための特に重要な標的である。例えば、ＣＤ３０に対する抗体、すなわちブレンツキシマブは、化学療法と併用して、以前に治療されていないステージＩＩＩ又はＩＶの古典的ホジキンリンパ腫（ｃＨＬ）を有する成人患者の治療に使用される。

【0004】

がんなどの慢性疾患を治療するためには、典型的には、数ヶ月又は数年にわたって抗体などの生物学的なものの投与を繰り返す必要がある。しかしながら、患者の免疫系は、投与された抗体に対して指向される自身の抗体を生成する場合があり、それによって、望ましくない免疫応答を誘導し、抗体薬物の有効性を低下させ、臨床的合併症を提示する場合がある。

【0005】

したがって、抗体などの治療薬は、ヒトに投与されたときに免疫応答を誘導しないことが望ましい。

【発明の概要】

【0006】

本開示は、特に、結合剤の抗原結合部分のフレームワーク領域における、ヒト化アミノ酸配列を含む結合剤を提供する。いくつかの実施形態において、本開示は、ＣＤ３０などの標的に特異的に結合する抗体であって、本抗体が、特に、抗体などの結合剤の可変重（ＶＨ）鎖及び可変軽（ＶＬ）鎖のフレームワーク領域における、ヒト化アミノ酸配列を含む、抗体を提供する。

【0007】

本開示の特定の実施形態は、抗原に特異的に結合する結合剤であって、結合剤が、
Ｈ－ＣＤＲ１、Ｈ－ＣＤＲ２、及びＨ－ＣＤＲ３を含むＶＨ鎖と、Ｌ－ＣＤＲ１、Ｌ－ＣＤＲ２、及びＬ－ＣＤＲ３を含むＶＬ鎖と、を含み、ＣＤＲが、抗原に対する結合剤の結合特異性を決定し、結合剤において、
ＶＨ鎖が、
ｉ）配列番号７の配列を有する重鎖フレームワーク領域１（ＨＦＲ１）、配列番号８の配列を有する重鎖フレームワーク領域２（ＨＦＲ２）、配列番号９の配列を有する重鎖フレームワーク領域３（ＨＦＲ３）、及び配列番号１０の配列を有する重鎖フレームワーク領域４（ＨＦＲ４）、又は
ｉｉ）配列番号１２の配列を有するＨＦＲ１、配列番号１３の配列を有するＨＦＲ２、配列番号１４の配列を有するＨＦＲ３、及び配列番号１５の配列を有するＨＦＲ４を含み、
ＶＬ鎖が、
ｉ）配列番号２２の配列を有する軽鎖フレームワーク領域１（ＬＦＲ１）、配列番号２３の配列を有する軽鎖フレームワーク領域２（ＬＦＲ２）、配列番号２４の配列を有する軽鎖フレームワーク領域３（ＬＦＲ３）、及び配列番号２５の配列を有する軽鎖フレームワーク領域４（ＬＦＲ４）、又は
ｉｉ）配列番号２７の配列を有するＬＦＲ１、配列番号２８の配列を有するＬＦＲ２、配列番号２９の配列を有するＬＦＲ３、及び配列番号２５の配列を有するＬＦＲ４を含む、結合剤を提供する。

【0008】

いくつかの場合において、結合剤は、ＣＤ３０に特異的に結合し、それぞれ、配列番号３１～３３の配列を有するＨ－ＣＤＲ１、Ｈ－ＣＤＲ２、及びＨ－ＣＤＲ３を含むＶＨ鎖と、それぞれ、配列番号３４～３６の配列を有するＬ－ＣＤＲ１、Ｌ－ＣＤＲ２、及びＬ－ＣＤＲ３を含むＶＬ鎖と、を含む。

【0009】

特定のそのような実施形態において、結合剤は、ｉ）配列番号６及び配列番号１１から選択される配列を含むＶＨ鎖と、ｉｉ）配列番号２１及び配列番号２６から選択される配列を含むＶＬ鎖と、を含む。

【0010】

結合剤は、抗体、例えば、ＩｇＧ、Ｆｖ、一本鎖抗体、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、又はＦａｂ’であり得る。結合剤はまた、Ｔ細胞受容体又はＴ細胞受容体（ＴＣＲ）様抗体であり得る。

【0011】

結合剤は、検出可能な標識、非ペプチド合成ポリマー、脂質若しくは脂肪酸、造影剤、親和性ドメイン、サイトトキシン、薬物、オリゴヌクレオチド、タンパク質、脂質ナノ粒子、ウイルス粒子、水溶性ポリマー、又は合成ペプチドなどの別の部分にコンジュゲートすることができる。

【0012】

本開示の更なる実施形態は、本明細書に開示されるＶＨ鎖及び／又はＶＬ鎖を含む結合剤をコードする核酸を提供する。核酸は、一過性又は永久に宿主細胞中に存在し得る。例えば、宿主細胞において、ＶＨ鎖及び／又はＶＬ鎖を含む結合剤をコードする核酸は、宿主細胞内で活性である転写制御エレメントに作動可能に連結され得る。

【0013】

本開示の更に更なる実施形態は、本明細書に開示される結合剤と、薬学的に許容される担体と、を含む、薬学的組成物を提供する。

【0014】

本開示の特定の実施形態は、対象における細胞増殖性障害などの疾患を治療することを提供し、本方法は、対象に、治療有効量の本明細書に開示される結合剤を含む薬学的組成物を投与することを含む。

【図面の簡単な説明】

【0015】

【図1A】本明細書に開示されるＡＣ１０抗体及びＨ１バリアントの重鎖フレームワーク領域１～４の配列アラインメント。

【図1B】本明細書に開示されるＡＣ１０抗体及びＨ４バリアントの重鎖フレームワーク領域１～４の配列アラインメント。

【図1C】本明細書に開示されるＡＣ１０抗体及びＬ２バリアントの軽鎖フレームワーク領域１～４の配列アラインメント。

【図1D】本明細書に開示されるＡＣ１０抗体及びＬ４バリアントの重鎖フレームワーク領域１～４の配列アラインメント。

【図2A】ＨＩＰＳ媒介性コンジュゲート化を使用した、アルデヒドタグ化抗体の産生及びＡＤＣの生成。ホルミルグリシン認識配列（ＣＸＰＸＲ）は、抗体に遺伝的にコードされる。

【図2B】ＨＩＰＳ媒介性コンジュゲート化を使用した、アルデヒドタグ化抗体の産生及びＡＤＣの生成。共翻訳的にホルミルグリシンを生成する酵素は、認識配列内のシステインを、ヒドラジノ－イソ－ピクテット－スペングラー（ＨＩＰＳ）コンジュゲート化エレメントと特異的にコンジュゲートすることができるアルデヒド官能基を含有するホルミルグリシン残基に変換する。

【図2C】ＨＩＰＳ媒介性コンジュゲート化を使用した、アルデヒドタグ化抗体の産生及びＡＤＣの生成。ヒドラジノ－イソ－ピクテット－スペングラー（ＨＩＰＳ）コンジュゲート化エレメント。

【図3】メイタンシンペイロード（ＲＥＤ－１０６）を有する非切断可能なリンカーにコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ１／Ｌ１抗体は、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）によって決定される場合、１．８８のＤＡＲをもたらす。

【図4】ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ１／Ｌ１抗体は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって決定される場合、９９．２％が単量体である。

【図5】ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ１／Ｌ４抗体は、ＨＩＣによって決定される場合、１．９１のＤＡＲをもたらす。

【図6】ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ１／Ｌ４抗体は、ＳＥＣによって決定される場合、９９．５％が単量体である。

【図7】ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ４／Ｌ２抗体は、ＨＩＣによって決定される場合、１．８９のＤＡＲをもたらす。

【図8】ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ４／Ｌ２抗体は、ＳＥＣによって決定される場合、９９．７％が単量体である。

【図9】ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ４／Ｌ４抗体は、ＨＩＣによって決定される場合、１．９０のＤＡＲをもたらす。

【図10】ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ４／Ｌ４抗体は、ＳＥＣによって決定される場合、９９．５％が単量体である。

【図11】組換えヒトＣＤ３０タンパク質に対するヒト化抗ＣＤ３０抗体のＥＬＩＳＡ結合。Ｈ１重鎖バリアントとＬ１～Ｌ５軽鎖との様々な組み合わせを含む抗体バリアントを試験した。キメラ抗体（Ｈ／Ｌ）は、参照のために含まれる。

【図12】組換えヒトＣＤ３０タンパク質に対するヒト化抗ＣＤ３０抗体のＥＬＩＳＡ結合。Ｈ４重鎖バリアントとＬ１～Ｌ５軽鎖との様々な組み合わせを含む抗体バリアントを試験した。キメラ抗体（Ｈ／Ｌ）は、参照のために含まれる。

【図13】Ｈ１重鎖バリアントとＬ１～Ｌ５軽鎖バリアントとの様々な組み合わせを含む、メイタンシンコンジュゲートヒト化抗ＣＤ３０ ＡＤＣのＳＵ－ＤＨＬ－１細胞に対するインビトロ効力。キメラ抗体（Ｈ／Ｌ）により作製されたＡＤＣは、参照のために含まれる。

【図14】Ｈ１重鎖バリアントとＬ１～Ｌ５軽鎖バリアントとの様々な組み合わせを含む、メイタンシンコンジュゲートヒト化抗ＣＤ３０ ＡＤＣのＬ５４０細胞に対するインビトロ効力。キメラ抗体（Ｈ／Ｌ）により作製されたＡＤＣは、参照のために含まれる。

【図15】Ｈ４重鎖バリアントとＬ１～Ｌ５軽鎖バリアントとの様々な組み合わせを含む、メイタンシンコンジュゲートヒト化抗ＣＤ３０ ＡＤＣのＳＵ－ＤＨＬ－１細胞に対するインビトロ効力。キメラ抗体（Ｈ／Ｌ）により作製されたＡＤＣは、参照のために含まれる。

【図16】Ｈ４重鎖バリアントとＬ１～Ｌ５軽鎖バリアントとの様々な組み合わせを含む、メイタンシンコンジュゲートヒト化抗ＣＤ３０ ＡＤＣのＬ５４０細胞に対するインビトロ効力。キメラ抗体（Ｈ／Ｌ）により作製されたＡＤＣは、参照のために含まれる。

【図17】ＶＨ１／ＶＬ４、ＶＨ４／ＶＬ２、及びＶＨ４／ＶＬ４バリアントを含むメイタンシンコンジュゲートヒト化抗ＣＤ３０ ＡＤＣのＨｕＴ１０２異種移植片に対するインビボ有効性。ＶＨ４／ＶＬ４バリアントを、ＤＡＲ４及びＤＡＲ２組成物として両方とも試験した。１回の１０ｍｇ／ｋｇ用量のＡＤＣを０日目に投与した。

【図18】列挙された抗ＣＤ３０ ＡＤＣを０日目に単回静脈内投与したＬ－８２異種移植片試験のグラフを示す。ＶＨ４／ＶＬ４化合物８（ＲＥＤ－６０１）は、内部９１Ｎタグを使用し、アドセトリスと比較して、ペイロード用量の半分を送達する。５０％のＡＤＣ投薬（１．５ｍｇ／ｋｇ）及び等しい投薬（３ｍｇ／ｋｇ）では、ＶＨ４／ＶＬ４化合物８は、アドセトリスと比較して等しく有効であり、全てのアームは、８匹のマウス／群のうち８匹の完全奏効を示している。ＶＨ４／ＶＬ４抗体単独では、最小限の活性を有していた。

【図19】列挙された抗ＣＤ３０ ＡＤＣを０日目に単回静脈内投与したＫａｒｐａｓ２９９異種移植片試験のグラフを示す。ＶＨ４／ＶＬ４化合物８（ＲＥＤ－６０１）は、内部９１Ｎタグを使用し、アドセトリスと比較して、ペイロード用量の半分を送達する。５０％のＡＤＣ投薬（１．５ｍｇ／ｋｇ）及び等しい投薬（３ｍｇ／ｋｇ）で、ＶＨ４／ＶＬ４化合物８は、アドセトリスと比較して５／６及び６／６の完全奏効をもたらしたが、アドセトリスは、ＶＨ４／ＶＬ４化合物８と比較して２倍のペイロード量で６／６の完全奏効をもたらした。ＶＨ４／ＶＬ４抗体単独では、最小限の活性を有していた。

【図20】９１Ｎにおいて化合物８（ＲＥＤ－６０１）にコンジュゲートされた単一タグ化ＣＤ３０ ＶＨ４／ＶＬ４抗体は、ＰＬＲＰによって決定される場合、１．５８のＤＡＲをもたらす。

【図21】９１Ｎにおいて化合物８（ＲＥＤ－６０１）にコンジュゲートされた単一タグ化ＣＤ３０ ＶＨ４／ＶＬ４抗体は、ＳＥＣによって決定される場合、９８％が単量体である。

【0016】

定義
「結合剤」という用語は、可変重（ＶＨ）鎖及び可変軽（ＶＬ）鎖を含むタンパク質を指す。各ＶＨ鎖及びＶＬ鎖は、相補性決定領域（ＣＤＲ）によって中断されるフレームワーク（ＦＲ）領域を含む。典型的には、ＶＨ鎖は、連続的に配置されたＨＦＲ１－ＨＣＤＲ１－ＨＦＲ２－ＨＣＤＲ２－ＨＦＲ３－ＨＣＤＲ３－ＨＦＲ４を含む。同様に、ＶＬ鎖は、典型的には、連続的に配置されたＬＦＲ１－ＬＣＤＲ１－ＬＦＲ２－ＬＣＤＲ２－ＬＦＲ３－ＬＣＤＲ３－ＬＦＲ４を含む。したがって、「フレームワーク」という用語は、抗体などの結合剤に関して使用される場合、結合剤の可変領域内のＣＤＲの外側のアミノ酸残基を意味することが意図される。

【0017】

「抗体」及び「免疫グロブリン」という用語は、任意のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４）、ＩｇＥ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、ＩｇＭなど）、全抗体（例えば、重鎖及び軽鎖ポリペプチドの２つの二量体から構成される四量体から構成される抗体）、一本鎖抗体（例えば、ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、及びＦｄ断片、キメラ抗体、ヒト化抗体、一本鎖抗体、及び抗体及び非抗体タンパク質の抗原結合部分を含む融合タンパク質を含むがこれらに限定されない、抗原への特異的結合を保持する抗体の断片（例えば、全鎖抗体又は一本鎖抗体の断片）の抗体又は免疫グロブリンを含む。抗体は、例えば、放射性同位体、検出可能な生成物を生成する酵素、蛍光タンパク質などで検出可能に標識され得る。抗体は、他の部分、例えば、特異的結合対のメンバー、例えば、ビオチン（ビオチン－アビジン特異的結合対のメンバー）などに更にコンジュゲートされ得る。抗体はまた、限定されないが、ポリスチレンプレート又はビーズなどを含む固体支持体に結合してもよい。また、本用語に包含されるのは、Ｆａｂ’、Ｆｖ、Ｆ（ａｂ’）_２、及び／又は抗原への特異的結合を保持する他の抗体断片、並びにモノクローナル抗体である。抗体は、一価又は二価であり得る。
「抗体断片」は、インタクト抗体の一部分、好ましくはインタクト抗体の抗原結合領域又は可変領域を含む。抗体断片の例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、及びＦｖ断片、ダイアボディ、線形抗体（Ｚａｐａｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．８（１０）：１０５７－１０６２（１９９５））、一本鎖抗体分子、及び抗体断片から形成された多重特異性抗体が含まれる。抗体のパパイン消化は、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる、各々が単一の抗原結合部位を有する２つの同一の抗原結合断片と、容易に結晶化する能力を反映する名称である残留「Ｆｃ」断片とを生成する。ペプシン処理は、２つの抗原組み合わせ部位を有し、なおも抗原を架橋することができるＦ（ａｂ’）_２断片を生成する。

【0018】

いくつかの実施形態において、主題の結合剤は、組換え若しくは修飾された結合剤、例えば、キメラ抗体、ヒト化抗体、脱免疫化抗体、又はインビトロで生成された抗体である。本明細書で使用される場合、「組換え」又は「修飾」結合剤又は抗体という用語は、組換え手段によって調製され、発現され、作製されるか、又は単離される全ての結合剤、例えば、（ｉ）宿主細胞にトランスフェクトされた組換え発現ベクターを使用して発現された抗体、（ｉｉ）組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリから単離された抗体、（ｉｉｉ）ヒト免疫グロブリン遺伝子にトランスジェニックである動物（例えば、マウス）から単離された抗体、あるいは（ｉｖ）ヒト免疫グロブリン遺伝子配列からの他のＤＮＡ配列へのスプライシングを伴う任意の他の手段によって調製され、発現され、作製されるか、又は単離された抗体を含むことを意図している。そのような組換え抗体は、ヒト化、ＣＤＲグラフティング、キメラ、脱免疫化、及びインビトロで生成された抗体を含み、任意選択的に、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列に由来する定常領域を含み得る。

【0019】

「Ｆｖ」は、完全な抗原認識部位及び結合部位を含む最小抗体断片である。この領域は、非共有結合性会合における１つの重鎖可変ドメイン及び１つの軽鎖可変ドメインの二量体からなる。この構造においては、各可変ドメインの３つのＣＤＲが相互作用して、ＶＨ－ＶＬ二量体の表面上の抗原結合部位を規定する。まとめると、６つのＣＤＲは、抗体に抗原結合特異性を付与する。しかしながら、単一の可変ドメイン（又は抗原に特異的な３つのＣＤＲのみを含むＦｖの半分）でさえ、抗原を認識し、それに結合する能力を有するが、それは結合部位全体よりも低い親和性である。

【0020】

「Ｆａｂ」断片はまた、軽鎖の定常ドメイン及び重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ_１）を含有する。Ｆａｂ断片は、抗体ヒンジ領域由来の１つ以上のシステインを含む重鎖ＣＨ_１ドメインのカルボキシル末端での数個の残基の付加により、Ｆａｂ’断片とは異なる。Ｆａｂ’－ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離チオール基を有するＦａｂ’の本明細書における名称である。Ｆ（ａｂ’）_２抗体断片は、元々、それらの間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として生成された。抗体断片の他の化学結合もまた既知である。

【0021】

任意の脊椎動物種由来の抗体（免疫グロブリン）の「軽鎖」は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ及びラムダと呼ばれる２つの明確に異なるタイプのうちの１つに割り当てることができる。それらの重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは、異なるクラスに割り当てられ得る。免疫グロブリンには、５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭが存在し、これらのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、及びＩｇＡ２に更に分けられ得る。

【0022】

「一本鎖Ｆｖ」又は「ｓＦｖ」抗体断片は、抗体のＶＨ及びＶＬドメインを含み、これらのドメインは、単一のポリペプチド鎖に存在する。いくつかの態様において、Ｆｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間にポリペプチドリンカーを更に含み、それにより、ｓＦｖが抗原結合のための所望の構造を形成することを可能にする。

【0023】

「ダイアボディ」という用語は、２つの抗原結合部位を有する小さい抗体断片を指し、その断片は、同じポリペプチド鎖（Ｖ_Ｈ－Ｖ_Ｌ）内の軽鎖可変ドメイン（Ｖ_Ｌ）に結合された重鎖可変ドメイン（Ｖ_Ｈ）を含む。同じ鎖上の２つのドメイン間の対合を可能にするには短すぎるリンカーを使用することによって、これらのドメインは、別の鎖の相補的なドメインと対合し、２つの抗原結合部位を作成するように強制される。

【0024】

「結合」という用語は、例えば、塩架橋及び水架橋などの相互作用を含む、共有結合、静電結合、疎水性結合、及びイオン性結合及び／又は水素結合の相互作用に起因する、２つの分子間の直接会合を指す。主題の抗ＣＤ３０抗体は、ＣＤ３０タンパク質、例えば、ヒトＣＤ３０タンパク質、例えば、グリコシル化ＣＤ３０又はその断片内のエピトープに特異的に結合する。非特異的結合は、約１０^－７Ｍ未満の親和性を有する結合、例えば、１０^－６Ｍ、１０^－５Ｍ、１０^－４Ｍなどの親和性を有する結合を指す。

【0025】

抗体及び抗原の文脈において「特異的に結合する」という用語は、抗体が、例えば、約１０^５Ｍ^－１以上の親和性又はＫ_ａ（すなわち、１／Ｍの単位での特定の結合相互作用の平衡会合定数）を有する抗原に結合するか、又はその抗原と会合することを意味する。

【0026】

本明細書で使用される場合、「ＣＤＲ」又は「相補性決定領域」という用語は、重鎖及び軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見られる非連続的抗原組み合わせ部位を意味することが意図される。ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９－６６１６（１９７７）、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９９１）によって、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）、及びＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６）によって説明されており、その定義は、互いに比較された場合にアミノ酸残基の重複又はサブセットを含む。それにもかかわらず、抗体又は移植抗体又はそのバリアントのＣＤＲを指すためのいずれかの定義の適用は、本明細書で定義及び使用される用語の範囲内であることが意図される。上で引用された参考文献の各々によって定義されるＣＤＲを包含するアミノ酸残基を、比較として以下の表１に記載する。

【表1】

【0027】

本開示全体を通して、免疫グロブリン重鎖及び免疫グロブリン軽鎖内の残基の付番は、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）に記載されており、参照により本明細書に明示的に組み込まれる。また、本開示に参照されるフレームワーク領域及びＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．によって記載される通りである。

【0028】

免疫グロブリンポリペプチドの文脈において、「定常領域」という用語は、当該技術分野で十分に理解されており、Ｉｇ重鎖又はＩｇ軽鎖のＣ末端領域を指す。Ｉｇ重鎖定常領域は、ＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、及びＣＨ３ドメイン（並びに、重鎖がμ重鎖又はε重鎖である場合、ＣＨ４ドメイン）を含む。天然Ｉｇ重鎖において、ＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン（及び、存在する場合、ＣＨ４）ドメインは、重鎖可変（ＶＨ）領域の直後（これに対してＣ末端）で開始し、かつ各々約１００アミノ酸～約１３０アミノ酸長である。天然Ｉｇ軽鎖において、定常領域は、軽鎖可変（ＶＬ）領域の直後（これに対してＣ末端）で開始し、約１００アミノ酸～約１２０アミノ酸長である。

【0029】

「エピトープ」は、抗体が結合する抗原上の部位（例えば、ＣＤ３０上の部位）である。エピトープは、タンパク質の折り畳み（例えば、三次折り畳み）によって並置された連続アミノ酸又は非連続アミノ酸の両方から形成することができる。連続するアミノ酸から形成されるエピトープは、典型的には、変性溶媒への曝露時に保持されるが、折り畳みによって形成されるエピトープは、典型的には、変性溶媒での処理時に失われる。エピトープは、典型的には、少なくとも３個、更に通常には、少なくとも５個又は８～１０個のアミノ酸を線形又は空間コンフォメーションで含む。エピトープの空間コンフォメーションを決定する方法には、例えば、Ｘ線結晶学及び二次元核磁気共鳴が含まれる。例えば、Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６６，Ｇｌｅｎｎ Ｅ．Ｍｏｒｒｉｓ，Ｅｄ（１９９６）を参照されたい。いくつかの商業的研究所は、エピトープマッピングサービスを提供している。膜関連抗原と免疫反応性の抗体によって結合されたエピトープは、細胞の表面上（例えば、膜貫通タンパク質の細胞外領域内）に存在し得るため、そのようなエピトープは、細胞表面に接近可能である、溶媒に接近可能である、及び／又は細胞表面が露出しているとみなされる。

【0030】

ポリペプチド、ペプチド、又はタンパク質のアミノ酸配列に関して使用される「遺伝子的にコード可能な」とは、アミノ酸配列が、そのアミノ酸配列をコードする核酸の転写及び翻訳によって産生することができるアミノ酸残基で構成され、転写及び／又は翻訳が、細胞中、又は無細胞インビトロ転写／翻訳系において生じ得ることを意味する。

【0031】

「制御配列」という用語は、特定の発現系、例えば、哺乳類細胞、細菌細胞、無細胞合成などにおいて作動可能に連結されたコード配列の発現を容易にするＤＮＡ配列を指す。原核生物系に好適な制御配列は、例えば、プロモーター、任意選択によりオペレーター配列、及びリボソーム結合部位を含む。真核細胞系は、プロモーター、ポリアデニル化シグナル、及びエンハンサーを利用し得る。

【0032】

核酸は、別の核酸配列と機能的関係に置かれた場合、「作動可能に連結される」。例えば、前配列又は分泌リーダーのＤＮＡは、ポリペプチドの分泌に関与する前タンパク質として発現される場合、ポリペプチドのＤＮＡに作動可能に連結され、プロモーター若しくはエンハンサーが、配列の転写に影響を及ぼす場合、コード配列に作動可能に連結され、又はリボソーム結合部位は、翻訳の開始を促進するように配置される場合、コード配列に作動可能に連結される。一般に、「作動可能に連結された」とは、連結されているＤＮＡ配列が連続しており、分泌リーダーの場合、連続しており、リーディングフレームにあることを意味する。連結は、ライゲーションによって、又は増幅反応によって達成される。合成オリゴヌクレオチドアダプタ又はリンカーは、従来の慣行に従って配列を連結するために使用され得る。

【0033】

特定の実施形態において、本明細書に開示される抗体分子は、本明細書に提供される可変重鎖領域を含む重鎖と、ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ０１８５７－１，ｖｅｒｓｉｏｎ １に示されるアミノ酸配列配列を有するヒトＩｇＧ１定常領域と、を含む。特定の実施形態において、本明細書に開示される抗体分子は、本明細書に提供される可変軽鎖領域及びヒト軽鎖定常領域を含む軽鎖を含む。特定の実施形態において、ヒト軽鎖定常領域は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ：Ｐ０１８３４．２に示されるアミノ酸を有するヒトカッパ軽鎖定常領域である。特定の実施形態において、対象の抗体に存在するヒトＩｇＧ１重鎖定常領域は、変異、例えば、Ｆｃ機能を調節するための置換を含んでもよい。例えば、ＬＡＬＡＰＧエフェクター機能変異（Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３２９Ｇ）又はＮ２９７Ａ変異を導入して、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を低減し得る。置換の付番は、ＥＵ付番システムに基づく。「ＥＵ付番システム」又は「ＥＵインデックス」は、一般に、免疫グロブリン重鎖定常領域内の残基を参照するときに使用される（例えば、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ．（１９９１）で報告されたＥＵインデックス）。「ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックス」は、ヒトＩｇＧ １ ＥＵ抗体の残基の付番を指す。

【0034】

「キメラ結合剤」という用語は、軽鎖及び重鎖遺伝子が、異なる種に属している可変領域及び定常領域遺伝子から、典型的には遺伝子操作によって構築されている結合剤を指す。例えば、マウスからの遺伝子の可変セグメントは、ヒト定常セグメントに結合され得る。「キメラ結合剤」の一例は、キメラ抗体又はキメラＴＣＲ様抗体である。ＴＣＲ様抗体の特定の態様は、Ｈｅ ｅｔ ａｌ．（２０１９），Ｊ Ｈｅｍａｔｏｌ Ｏｎｃｏｌ．；１２（１）：９９によって記載されている。

【0035】

「キメラ抗体」という用語は、軽鎖及び重鎖遺伝子が、異なる種に属している抗体可変領域及び定常領域遺伝子から、典型的には遺伝子操作によって構築されている抗体を指す。例えば、マウスモノクローナル抗体からの遺伝子の可変セグメントは、ガンマ１及びガンマ３などのヒト定常セグメントに結合され得る。治療用キメラ抗体の一例は、マウス抗体由来の可変ドメイン又は抗原結合ドメインと、ヒト抗体由来の定常ドメイン又はエフェクタードメインとで構成されたハイブリッドタンパク質であるが、他の哺乳類種由来のドメインも使用され得る。

【0036】

「ヒト化抗体」という用語は、ヒトにおいて天然に産生された抗体との類似性を増加させるようにタンパク質配列が修飾されている非ヒト種由来の抗体を指す。ヒト化抗体は、ヒトに投与された場合、これらの抗体に対する免疫応答を誘導しないか、又は対応する非ヒト抗体の投与と比較してはるかに弱い免疫応答を誘導する。ヒト化抗体は、元の非ヒト抗体を上回る、以下の少なくとも３つの利点を有する：（マウスＩｇ定常領域に対して免疫応答の多くが生じるため）抗体の免疫原性が低下する、ヒト定常領域は、ヒトエフェクター機能が生じることを可能にする、及びヒトにおけるヒト化抗体の血清半減期が有意に増加する。

【0037】

本明細書に開示される結合剤はまた、結合パートナー、例えば、特定又は精製に有用な、固体支持体上に固定化されたものなどと相互作用し得るペプチド配列を含む親和性ドメインも含み得る。ヒスチジンなどの連続した単一のアミノ酸は、タンパク質に融合すると、ニッケルセファロースなどの樹脂カラムに高親和性で結合することによって、融合タンパク質のワンステップ精製に使用することができる。親和性ドメインの例としては、Ｈｉｓ５（ＨＨＨＨＨ）（配列番号１７７）、Ｈｉｓ Ｘ６（ＨＨＨＨＨＨ）（配列番号１７８）、Ｃ－ｍｙｃ（ＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬ）（配列番号１７９）、Ｆｌａｇ（ＤＹＫＤＤＤＤＫ）（配列番号１８０）、ＳｔｒｅｐＴａｇ（ＷＳＨＰＱＦＥＫ）（配列番号１８１）、ヘマグルチニン、例えば、ＨＡタグ（ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ、配列番号１８２）、グルタチオン－Ｓ－トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、チオレドキシン、セルロース結合ドメイン、ＲＹＩＲＳ（配列番号１８３）、Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－Ｈｉｓ－Ｔｈｒ（配列番号１８４）、キチン結合ドメイン、Ｓ－ペプチド、Ｔ７ペプチド、ＳＨ２ドメイン、Ｃ末端ＲＮＡタグ、ＷＥＡＡＡＲＥＡＣＣＲＥＣＣＡＲＡ（配列番号１８５）、金属結合ドメイン、例えば、亜鉛結合ドメイン又はカルシウム結合ドメイン、例えば、カルシウム結合タンパク質由来のもの、例えば、カルモジュリン、トロポニンＣ、カルシニューリンＢ、ミオシン軽鎖、リカバリン、Ｓ－モジュリン、ビシニン、ＶＩＬＩＰ、ニューロカルシン、ヒポカルシン、フリクエニン、カルトラクチン、カルパイン大ユニット、Ｓ１００タンパク質、パルブアルブミン、カルビンジンＤ９Ｋ、カルビンジンＤ２８Ｋ、及びカルレチニン、インテイン、ビオチン、ストレプトアビジン、ＭｙｏＤ、ロイシンジッパー配列、及びマルトース結合タンパク質が挙げられる。

【0038】

「天然アミノ酸配列」又は「親アミノ酸配列」は、本明細書で交換可能に使用され、修飾アミノ酸残基を含むような修飾の前のポリペプチドのアミノ酸配列を指す。本開示では、「天然アミノ酸配列」又は「親アミノ酸配列」は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、米国特許出願公開第２００５／０１２３５３６号に記載されているような抗ＣＤ３０抗体ＡＣ１０に見出される配列を指す。特に、ＡＣ１０抗体のＶＨ鎖及びＶＬ鎖における様々なドメインのアミノ酸配列は、以下の表（表２）に示されている。

【表2】

【0039】

「コンジュゲートされた」という用語は、一般に、目的の１つの分子を目的の第２の分子と近位に会合させる、共有結合又は非共有結合、通常は共有結合のいずれかの化学結合を指す。いくつかの実施形態において、薬剤は、半減期延長部分、標識剤、及び薬物から選択される。半減期延長に関して、例えば、本開示の抗体は、任意選択的に、（例えば、ＰＥＧ化、ハイパーグリコシル化などによって）改善された薬物動態プロファイルを提供するように修飾され得る。血清半減期を向上させることができる修飾は、目的のものである。

【0040】

本明細書で使用される場合、「治療」、「治療する」などの用語は、望ましい薬理学的効果及び／又は生理学的効果を得ることを指す。効果は、疾患若しくはその症状を完全に若しくは部分的に予防する点で予防的であり得、かつ／又は疾患及び／若しくは疾患に起因する副作用の部分的若しくは完全な治癒の点で治療的であり得る。本明細書で使用される場合、「治療」は、哺乳動物、特にヒトにおける疾患の任意の治療を網羅し、（ａ）疾患の素因があり得るが、まだそれを有すると診断されていない対象において疾患が発生することを防止することと、（ｂ）疾患を阻害すること、すなわち、その発症を阻止することと、（ｃ）疾患を軽減すること、すなわち、疾患の退行を引き起こすことと、を含む。

【0041】

「個体」、「対象」、「宿主」、及び「患者」という用語は、本明細書において互換的に使用され、マウス（ラット、マウス）、非ヒト霊長類、ヒト、イヌ、ネコ、有蹄動物（例えば、ウマ、ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ）を含むが、これらに限定されない哺乳動物を指す。

【0042】

「治療有効量」又は「有効量」は、疾患を治療するために哺乳動物又は他の対象に投与される場合、疾患に対するそのような治療をもたらすのに十分である、抗体、例えば、抗ＣＤ３０抗体などの主題の結合剤の量を指す。「治療有効量」は、抗体、疾患及びその重症度、並びに治療する対象の年齢、体重などに応じて異なるであろう。

【0043】

「アルキル」は、１～１０個の炭素原子、例えば１～６個の炭素原子、又は１～５個、又は１～４個、又は１～３個の炭素原子を有する一価の飽和脂肪族ヒドロカルビル基を指す。この用語は、例として、メチル（ＣＨ_３－）、エチル（ＣＨ_３ＣＨ_２－）、ｎ－プロピル（ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＨ_２－）、イソプロピル（（ＣＨ_３）_２ＣＨ－）、ｎ－ブチル（ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－）、イソブチル（（ＣＨ_３）_２ＣＨＣＨ_２－）、ｓｅｃ－ブチル（（ＣＨ_３）（ＣＨ_３ＣＨ_２）ＣＨ－）、ｔ－ブチル（（ＣＨ_３）_３Ｃ－）、ｎ－ペンチル（ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－）、及びネオペンチル（（ＣＨ_３）_３ＣＣＨ_２－）などの直鎖及び分岐鎖ヒドロカルビル基を含む。

【0044】

「置換アルキル」という用語は、本明細書で定義されるアルキル基を指し、アルキル鎖の１つ以上の炭素原子（Ｃ_１炭素原子を除く）が、任意選択的に、－Ｏ－、－Ｎ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）_ｎ－（式中、ｎが、０～２である）、－ＮＲ－（式中、Ｒが、水素又はアルキルである）などのヘテロ原子で置き換えられ、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－アリール、－ＳＯ_２－ヘテロアリール、及び－ＮＲ^ａＲ^ｂからなる群から選択される１～５個の置換基を有し、Ｒ’及びＲ”が、同じでも異なっていてもよく、水素、任意選択的に置換されたアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、及び複素環式から選択される。

【0045】

「アルキレン」は、好ましくは、直鎖又は分岐鎖のいずれかである１～６個、より好ましくは１～３個の炭素原子を有し、任意選択的に－Ｏ－、－ＮＲ^１０－、－ＮＲ^１０Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１０－などから選択される１つ以上の基で中断されている、二価脂肪族ヒドロカルビル基を指す。この用語は、例として、メチレン（－ＣＨ_２－）、エチレン（－ＣＨ_２ＣＨ_２－）、ｎ－プロピレン（－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－）、イソプロピレン（－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）－）、（－Ｃ（ＣＨ_３）_２ＣＨ_２ＣＨ_２－）、（－Ｃ（ＣＨ_３）_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）－）、（－Ｃ（ＣＨ_３）_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ－）、（－ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２－）などを含む。

【0046】

「置換アルキレン」は、以下の「置換」の定義において炭素について記載されているように、置換基で置き換えられた１～３個の水素を有するアルキレン基を指す。

【0047】

「アルカン」という用語は、本明細書で定義されるアルキル基及びアルキレン基を指す。

【0048】

「アルキルアミノアルキル」、「アルキルアミノアルケニル」、及び「アルキルアミノアルキニル」という用語は、Ｒ^’ＮＨＲ^”－基を指し、式中、Ｒ^’は本明細書で定義されるアルキル基であり、Ｒ^”は本明細書で定義されるアルキレン、アルケニレン又はアルキニレン基である。

【0049】

「アルカリール」又は「アラルキル」という用語は、－アルキレン－アリール及び－置換アルキレン－アリール基を指し、アルキレン、置換アルキレン及びアリールは、本明細書で定義される。

【0050】

「アルコキシ」は、－Ｏ－アルキル基を指し、アルキルは本明細書で定義される通りである。アルコキシは、例として、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ－ブトキシ、ｔ－ブトキシ、ｓｅｃ－ブトキシ、ｎ－ペントキシなどを含む。「アルコキシ」という用語はまた、アルケニル－Ｏ－、シクロアルキル－Ｏ－、シクロアルケニル－Ｏ－、及びアルキニル－Ｏ－基を指し、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル及びアルキニルは、本明細書で定義される通りである。

【0051】

「置換アルコキシ」という用語は、置換アルキル－Ｏ－、置換アルケニル－Ｏ－、置換シクロアルキル－Ｏ－、置換シクロアルケニル－Ｏ－、及び置換アルキニル－Ｏ－の基を指し、置換アルキル、置換アルケニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、及び置換アルキニルが、本明細書で定義される通りである。

【0052】

「アルコキシアミノ」という用語は、－ＮＨ－アルコキシ基を指し、アルコキシは、本明細書で定義される。

【0053】

「ハロアルコキシ」という用語は、アルキル－Ｏ－基を指し、アルキル基上の１個以上の水素原子がハロ基で置換されており、例として、トリフルオロメトキシなどの基を含む。

【0054】

「ハロアルキル」という用語は、上述の置換アルキル基を指し、アルキル基上の１個以上の水素原子がハロ基で置換されている。そのような基の例としては、限定されないが、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロエチルなどのフルオロアルキル基が挙げられる。

【0055】

「アルキルアルコキシ」という用語は、－アルキレン－Ｏ－アルキル、アルキレン－Ｏ－置換アルキル、置換アルキレン－Ｏ－アルキル、及び置換アルキレン－Ｏ－置換アルキル基を指し、アルキル、置換アルキル、アルキレン及び置換アルキレンは、本明細書で定義される通りである。

【0056】

「アルキルチオアルコキシ」という用語は、－アルキレン－Ｓ－アルキル、アルキレン－Ｓ－置換アルキル、置換アルキレン－Ｓ－アルキル、及び置換アルキレン－Ｓ－置換アルキル基を指し、アルキル、置換アルキル、アルキレン、及び置換アルキレンは、本明細書で定義される通りである。

【0057】

「アルケニル」は、２～６個の炭素原子、好ましくは２～４個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１～２個の二重結合不飽和部位を有する直鎖又は分岐鎖ヒドロカルビル基を指す。この用語は、例として、ビ－ビニル、アリル、及びブタ－３－エン－１－イルを含む。この用語には、シス及びトランス異性体、又はこれらの異性体の混合物が含まれる。

【0058】

「置換アルケニル」という用語は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換アルキル、－ＳＯ_２－アリール、及び－ＳＯ_２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基を有する本明細書で定義されるアルケニル基を指す。

【0059】

「アルキニル」は、２～６個の炭素原子、好ましくは２～３個の炭素原子を有し、少なくとも１個、好ましくは１～２個の三重結合不飽和部位を有する直鎖又は分岐鎖一価ヒドロカルビル基を指す。そのようなアルキニル基の例としては、アセチレニル（－Ｃ≡ＣＨ）、及びプロパルギル（－ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨ）が挙げられる。

【0060】

「置換アルキニル」という用語は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換アルキル、－ＳＯ_２－アリール、及び－ＳＯ_２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基を有する本明細書で定義されるアルキニル基を指す。

【0061】

「アルキニルオキシ」は、－Ｏ－アルキニル基を指し、アルキニルは、本明細書で定義される通りである。アルキニルオキシは、例として、エチニルオキシ、プロピニルオキシなどを含む。

【0062】

「アシル」は、Ｈ－Ｃ（Ｏ）－、アルキル－Ｃ（Ｏ）－、置換アルキル－Ｃ（Ｏ）－、アルケニル－Ｃ（Ｏ）－、置換アルケニル－Ｃ（Ｏ）－、アルキニル－Ｃ（Ｏ）－、置換アルキニル－Ｃ（Ｏ）－、シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）－、置換シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）－、シクロアルケニル－Ｃ（Ｏ）－、置換シクロアルケニル－Ｃ（Ｏ）－、アリール－Ｃ（Ｏ）－、置換アリール－Ｃ（Ｏ）－、ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）－、置換ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）－、ヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）－、及び置換ヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）－基を指し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義される通りである。例えば、アシルは、「アセチル」基ＣＨ_３Ｃ（Ｏ）－を含む。

【0063】

「アシルアミノ」は、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）アルキル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換アルキル、ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）シクロアルキル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換シクロアルキル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）シクロアルケニル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換シクロアルケニル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）アルケニル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換アルケニル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）アルキニル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換アルキニル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）アリール、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換アリール、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換ヘテロアリール、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）複素環式、及び－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換複素環式の基を指し、Ｒ^２０は、水素又はアルキルであり、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義される通りである。

【0064】

「アミノカルボニル」又は「アミノアシル」という用語は、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^５１Ｒ^５２基を指し、Ｒ^５１及びＲ^５２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式からなる群から選択され、Ｒ^５１及びＲ^５２は、任意選択的に、それらに結合した窒素と連結して、複素環式又は置換複素環式基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義される通りである。

【0065】

「アミノカルボニルアミノ」は、－ＮＲ^５１Ｃ（Ｏ）ＮＲ^５２Ｒ^５３基を指し、Ｒ^５１、Ｒ^５２、及びＲ^５３は、独立して、水素、アルキル、アリール、若しくはシクロアルキルから選択されるか、又は２つのＲ基が結合してヘテロシクリル基を形成する。

【0066】

「アルコキシカルボニルアミノ」という用語は、－ＮＲＣ（Ｏ）ＯＲ基を指し、式中、各Ｒは、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロシクリルであり、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリルは、本明細書で定義される通りである。

【0067】

「アシルオキシ」という用語は、アルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、置換アルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、置換シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、アリール－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、及びヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－の基を指し、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリルは、本明細書で定義される通りである。

【0068】

「アミノスルホニル」は、－ＳＯ_２ＮＲ^５１Ｒ^５２基を指し、式中、Ｒ^５１及びＲ^５２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、置換複素環式からなる群から選択され、Ｒ^５１及びＲ^５２は、任意選択により、それらに結合した窒素と結合して、複素環式又は置換複素環式基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義される通りである。

【0069】

「スルホニルアミノ」は、－ＮＲ^５１ＳＯ_２Ｒ^５２基を指し、式中、Ｒ^５１及びＲ^５２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式からなる群から選択され、Ｒ^５１及びＲ^５２は、任意選択により、それらに結合した原子と結合して、複素環式又は置換複素環式基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義される通りである。

【0070】

「アリール」又は「Ａｒ」は、単環（例えば、フェニル基に存在する）、又は結合点が芳香環の原子を介することを条件として、縮合環が芳香族であってもよい、若しくは芳香族でなくてもよい、複数の縮合環を有する環系（そのような芳香環系の例には、ナフチル、アントリル、及びインダニルが含まれる）を有する、６～１８個の炭素原子の一価芳香族炭素環式基を指す。この用語は、例として、フェニル及びナフチルを含む。アリール置換基の定義によって別段制約を受けない限り、そのようなアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリール、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオテロアリールオキシ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換アルキル、－ＳＯ_２－アリール、－ＳＯ_２－ヘテロアリール、及びトリハロメチルから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基で任意選択的に置換され得る。

【0071】

「アリールオキシ」は、－Ｏ－アリール基を指し、アリールは、本明細書で定義される通りであり、例として、フェノキシ、ナフトキシなどを含み、同様に本明細書で定義される任意選択的に置換されたアリール基を含む。

【0072】

「アミノ」は、－ＮＨ_２基を指す。

【0073】

「置換アミノ」という用語は、－ＮＲＲ基を指し、式中、各Ｒは、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクリルからなる群から選択され、但し、少なくとも１つのＲは水素ではないことを条件とする。

【0074】

「アジド」という用語は、－Ｎ_３基を指す。

【0075】

「カルボキシル」、「カルボキシ」、又は「カルボキシレート」は、－ＣＯ_２Ｈ又はその塩を指す。

【0076】

「カルボキシルエステル」若しくは「カルボキシエステル」、又は「カルボキシアルキル」若しくは「カルボキシルアルキル」という用語は、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルキニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－ヘテロアリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換ヘテロアリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－複素環式、及び－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換複素環式の基を指し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義される通りである。

【0077】

「（カルボキシルエステル）オキシ」又は「カーボネート」は、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アルキニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換アリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換シクロアルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－ヘテロアリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換ヘテロアリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－複素環式、及び－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換複素環式の基を指し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義される通りである。

【0078】

「シアノ」又は「ニトリル」は、－ＣＮ基を指す。

【0079】

「シクロアルキル」は、単一の環式環、又は縮合環式環系、架橋環系、及びスピロ環系を含む複数の環式環を有する３～１０個の炭素原子の環式アルキル基を指す。好適なシクロアルキル基の例は、例えば、アダマンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどを含む。そのようなシクロアルキル基は、例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどの単環構造、又はアダマンタニルなどの複数の環構造を含む。

【0080】

「置換シクロアルキル」という用語は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換アルキル、－ＳＯ_２－アリール、及び－ＳＯ_２－ヘテロアリールから選択される１～５つの置換基、又は１～３つの置換基を有するシクロアルキル基を指す。

【0081】

「シクロアルケニル」は、単一又は複数の環を有し、かつ少なくとも１個の二重結合、好ましくは１～２個の二重結合を有する、３～１０個の炭素原子の非芳香族環状アルキル基を指す。

【0082】

「置換シクロアルケニル」という用語は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ケト、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換アルキル、－ＳＯ_２－アリール、及び－ＳＯ_２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基を有するシクロアルケニル基を指す。

【0083】

「シクロアルキニル」は、単一又は複数の環を有し、かつ少なくとも１個の三重結合を有する、５～１０個の炭素原子の非芳香族シクロアルキル基を指す。

【0084】

「シクロアルコキシ」は、－Ｏ－シクロアルキルを指す。

【0085】

「シクロアルケニルオキシ」は、－Ｏ－シクロアルケニルを指す。

【0086】

「ハロ」又は「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨードを指す。

【0087】

「ヒドロキシ」又は「ヒドロキシル」は、－ＯＨ基を指す。

【0088】

「ヘテロアリール」は、環内の１～１０個の炭素原子などの１～１５個の炭素原子と、酸素、窒素、及び硫黄からなる群から選択される１～１０個のヘテロ原子との、芳香族基を指す。そのようなヘテロアリール基は、環系内に単一の環（ピリジニル、イミダゾリル、又はフリルなど）又は（例えば、インドリジニル、キノリニル、ベンゾフラン、ベンズイミダゾリル、又はベンゾチエニルなどの基におけるような）複数の縮合環を有し得、環系内の少なくとも１つの環は、芳香族である。価数の要件を満たすために、そのようなヘテロアリール環内の任意のヘテロ原子は、Ｈ又は置換基、例えば、本明細書に記載のアルキル基若しくは他の置換基に結合していてもよく、又は結合していなくてもよい。特定の実施形態において、ヘテロアリール基の窒素環原子及び／又は硫黄環原子（複数可）は、任意選択的に酸化されて、Ｎ－オキシド（Ｎ→Ｏ）、スルフィニル、又はスルホニル部分を提供する。この用語は、例として、ピリジニル、ピロリル、インドリル、チオフェニル、及びフラニルを含む。ヘテロアリール置換基の定義によって別段制約を受けない限り、そのようなヘテロアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリール、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオテロアリールオキシ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換アルキル、－ＳＯ_２－アリール及び－ＳＯ_２－ヘテロアリール、並びにトリハロメチルから選択される１～５個の置換基、又は１～３個の置換基で任意選択的に置換され得る。

【0089】

「ヘテロアラルキル」という用語は、－アルキレン－ヘテロアリール基を指し、アルキレン及びヘテロアリールは、本明細書で定義される通りである。この用語は、例として、ピリジルメチル、ピリジルエチル、インドリルメチルなどを含む。

【0090】

「ヘテロアリールオキシ」は、－Ｏ－ヘテロアリールを指す。

【0091】

「複素環」、「複素環式」、「ヘテロシクロアルキル」、及び「ヘテロシクリル」という用語は、単環又は縮合架橋環系及びスピロ環系を含む複数の縮合環を有し、１～１０個のヘテロ原子を含む３～２０個の環原子を有する、飽和又は不飽和基を指す。これらの環原子は、窒素、硫黄、又は酸素から選択され、縮合環系において、環のうちの１つ以上が、シクロアルキル、アリール、又はヘテロアリールであり得、但し、結合点は、非芳香環を介することを条件とする。特定の実施形態において、複素環式基の窒素原子及び／又は硫黄原子（複数可）は、任意選択的に酸化されて、Ｎ－オキシド、－Ｓ（Ｏ）－、又は－ＳＯ_２－部分を提供する。価数の要件を満たすために、そのような複素環式環内の任意のヘテロ原子は、１つ以上のＨ又は１つ以上の置換基、例えば、本明細書に記載のアルキル基若しくは他の置換基に結合してもよく、又は結合しなくてもよい。

【0092】

複素環及びヘテロアリールの例としては、限定されないが、アゼチジン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、ジヒドロインドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチルピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソオキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、フタルイミド、１，２，３，４－テトラヒドロイソキノリン、４，５，６，７－テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン、チアゾール、チアゾリジン、チオフェン、ベンゾ［ｂ］チオフェン、モルホリニル、チオモルホリニル（チアモルホリニルとも称される）、１，１－ジオキソチオモルホリニル、ピペリジニル、ピロリジン、テトラヒドロフラニルなどが挙げられる。

【0093】

複素環式置換基の定義によって別段制約を受けない限り、そのような複素環式基は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換アルキル、－ＳＯ_２－アリール、ＳＯ_２－ヘテロアリール、及び縮合複素環から選択される１～５個、又は１～３個の置換基で任意選択的に置換され得る。

【0094】

「ヘテロシクリルオキシ」は、－Ｏ－ヘテロシクリル基を指す。

【0095】

「ヘテロシクリルチオ」という用語は、複素環式－Ｓ－基を指す。

【0096】

「ヘテロシクレン」という用語は、本明細書で定義されるように、複素環から形成されるジラジカル基を指す。

【0097】

「ヒドロキシアミノ」という用語は、－ＮＨＯＨ基を指す。

【0098】

「ニトロ」は、－ＮＯ_２基を指す。

【0099】

「オキソ」は、原子（＝Ｏ）を指す。

【0100】

「スルホニル」は、ＳＯ_２－アルキル、ＳＯ_２－置換アルキル、ＳＯ_２－アルケニル、ＳＯ_２－置換アルケニル、ＳＯ_２－シクロアルキル、ＳＯ_２－置換シクロアルキル、ＳＯ_２－シクロアルケニル、ＳＯ_２－置換シルコアルケニル、ＳＯ_２－アリール、ＳＯ_２－置換アリール、ＳＯ_２－ヘテロアリール、ＳＯ_２－置換ヘテロアリール、ＳＯ_２－複素環式、及びＳＯ_２－置換複素環式の基を指し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義される通りである。スルホニルは、例として、メチル－ＳＯ_２－、フェニル－ＳＯ_２－、及び４－メチルフェニル－ＳＯ_２－を含む。

【0101】

「スルホニルオキシ」は、－ＯＳＯ_２－アルキル、ＯＳＯ_２－置換アルキル、ＯＳＯ_２－アルケニル、ＯＳＯ_２－置換アルケニル、ＯＳＯ_２－シルコアルキル、ＯＳＯ_２－置換シクロアルキル、ＯＳＯ_２－シクロアルケニル、ＯＳＯ_２－置換シルコアルケニル、ＯＳＯ_２－アリール、ＯＳＯ_２－置換アリール、ＯＳＯ_２－ヘテロアリール、ＯＳＯ_２－置換ヘテロアリール、ＯＳＯ_２－複素環式、及びＯＳＯ_２－置換複素環式の基を指し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、及び置換複素環式は、本明細書で定義される通りである。

【0102】

「アミノカルボニルオキシ」という用語は、－ＯＣ（Ｏ）ＮＲＲ基を指し、各Ｒは、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、又は複素環式であり、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、及び複素環式は、本明細書で定義される通りである。

【0103】

「チオール」は、－ＳＨ基を指す。

【0104】

「チオキソ」、又は「チオケト」という用語は、原子（＝Ｓ）を指す。

【0105】

「アルキルチオ」又は「チオアルコキシ」という用語は、－Ｓ－アルキル基を指し、アルキルは本明細書で定義される通りである。特定の実施形態において、硫黄は、－Ｓ（Ｏ）－へと酸化され得る。スルホキシドは、１つ以上の立体異性体として存在し得る。

【0106】

「置換チオアルコキシ」という用語は、－Ｓ－置換アルキル基を指す。

【0107】

「チオアリールオキシ」という用語は、アリール－Ｓ－基を指し、アリール基は本明細書で定義される通りであり、本明細書で定義される任意選択的に置換されたアリール基を含む。

【0108】

「チオヘテロアリールオキシ」という用語は、ヘテロアリール－Ｓ－基を指し、ヘテロアリール基は本明細書で定義される通りであり、同様に本明細書で定義される任意選択的に置換されたアリール基を含む。

【0109】

「チオヘテロシクロオキシ」という用語は、ヘテロシクリル－Ｓ－基を指し、ヘテロシクリル基は本明細書で定義される通りであり、同様に本明細書で定義される任意選択的に置換されたヘテロシクリル基を含む。

【0110】

本明細書の開示に加えて、「置換された」という用語はまた、指定された基（ｇｒｏｕｐ）又は基（ｒａｄｉｃａｌ）を修飾するために使用される場合、指定された基（ｇｒｏｕｐ）又は基（ｒａｄｉｃａｌ）の１つ以上の水素原子が、互いに独立して、以下に定義されるのと同じ又は異なる置換基で置き換えられることを意味することができる。

【0111】

本明細書の個々の用語に関して開示される基に加えて、特定の基又はラジカル中の飽和炭素原子上の１個以上の水素を置換するための置換基（単一の炭素上の任意の２個の水素を、＝Ｏ、＝ＮＲ^７０、＝Ｎ－ＯＲ^７０、＝Ｎ_２、又は＝Ｓで置き換えることができる）は、別段の指定がない限り、－Ｒ^６０、ハロ、＝Ｏ、－ＯＲ^７０、－ＳＲ^７０、－ＮＲ^８０Ｒ^８０、トリハロメチル、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－ＮＯ、－ＮＯ_２、＝Ｎ_２、－Ｎ_３、－ＳＯ_２Ｒ^７０、－ＳＯ_２Ｏ^－Ｍ^＋、－ＳＯ_２ＯＲ^７０、－ＯＳＯ_２Ｒ^７０、－ＯＳＯ_２Ｏ^－Ｍ^＋、－ＯＳＯ_２ＯＲ^７０、－Ｐ（Ｏ）（Ｏ^－）_２（Ｍ^＋）_２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^７０）Ｏ^－Ｍ^＋、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^７０）_２、－Ｃ（Ｏ）Ｒ^７０、－Ｃ（Ｓ）Ｒ^７０、－Ｃ（ＮＲ^７０）Ｒ^７０、－Ｃ（Ｏ）Ｏ^－Ｍ^＋、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^７０、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ^７０、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－Ｃ（ＮＲ^７０）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ^７０、－ＯＣ（Ｓ）Ｒ^７０、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ^－Ｍ^＋、－ＯＣ（Ｏ）ＯＲ^７０、－ＯＣ（Ｓ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）Ｒ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｓ）Ｒ^７０、－ＮＲ^７０ＣＯ_２ ^－Ｍ^＋、－ＮＲ^７０ＣＯ_２Ｒ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－ＮＲ^７０Ｃ（ＮＲ^７０）Ｒ^７０、及び－ＮＲ^７０Ｃ（ＮＲ^７０）ＮＲ^８０Ｒ^８０であり、Ｒ^６０が、任意選択的に置換されたアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、及びヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、各Ｒ^７０が、独立して、水素若しくはＲ^６０であり、各Ｒ^８０が、独立してＲ^７０であるか、又は代替的に、２つのＲ^８０が、それらが結合する窒素原子と一緒になって、５員、６員、若しくは７員のヘテロシクロアルキルを形成し、これらは、任意選択的に、Ｏ、Ｎ、及びＳからなる群から選択される同じ若しくは異なる１～４個の追加のヘテロ原子を含み得、そのうち、Ｎが、－Ｈ若しくはＣ_１－Ｃ_３アルキル置換を有していてもよく、各Ｍ^＋が、正味の単一正電荷を有する対イオンである。各Ｍ^＋は、独立して、例えば、アルカリイオン、例えば、Ｋ^＋、Ｎａ^＋、Ｌｉ^＋、アンモニウムイオン、例えば、^＋Ｎ（Ｒ^６０）_４、又はアルカリ土類イオン、例えば、［Ｃａ^２＋］_０．５、［Ｍｇ^２＋］_０．５、又は［Ｂａ^２＋］_０．５（「添え字の０．５は、かかる二価のアルカリ土類イオンの対イオンのうちの１つが、本発明の化合物のイオン化した形態であってもよく、塩化物などの他の典型的な対イオン、又は本明細書に開示される２つのイオン化した化合物が、かかる二価アルカリ土類イオンの対イオンとして機能し得るか、本発明の二重イオン化した化合物が、かかる二価アルカリ土類イオンの対イオンとして機能し得ることを意味する）であってもよい。具体的な例として、－ＮＲ^８０Ｒ^８０は、－ＮＨ_２、－ＮＨ－アルキル、Ｎ－ピロリジニル、Ｎ－ピペラジニル、４Ｎ－メチル－ピペラジン－１－イル、及びＮ－モルホリニルを含むことを意味する。

【0112】

本明細書の開示に加えて、「置換」アルケン、アルキン、アリール及びヘテロアリール基中の不飽和炭素原子上の水素の置換基は、別段の指定がない限り、－Ｒ^６０、ハロ、－Ｏ^－Ｍ^＋、－ＯＲ^７０、－ＳＲ^７０、－Ｓ^－Ｍ^＋、－ＮＲ^８０Ｒ^８０、トリハロメチル、－ＣＦ_３、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－ＮＯ、－ＮＯ_２、－Ｎ_３、－ＳＯ_２Ｒ^７０、－ＳＯ_３ ^－Ｍ^＋、－ＳＯ_３Ｒ^７０、－ＯＳＯ_２Ｒ^７０、－ＯＳＯ_３ ^－Ｍ^＋、－ＯＳＯ_３Ｒ^７０、－ＰＯ_３ ^－２（Ｍ^＋）_２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^７０）Ｏ^－Ｍ^＋、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^７０）_２、－Ｃ（Ｏ）Ｒ^７０、－Ｃ（Ｓ）Ｒ^７０、－Ｃ（ＮＲ^７０）Ｒ^７０、－ＣＯ_２ ^－Ｍ^＋、－ＣＯ_２Ｒ^７０、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ^７０、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－Ｃ（ＮＲ^７０）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ^７０、－ＯＣ（Ｓ）Ｒ^７０、－ＯＣＯ_２ ^－Ｍ^＋、－ＯＣＯ_２Ｒ^７０、－ＯＣ（Ｓ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）Ｒ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｓ）Ｒ^７０、－ＮＲ^７０ＣＯ_２ ^－Ｍ^＋、－ＮＲ^７０ＣＯ_２Ｒ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－ＮＲ^７０Ｃ（ＮＲ^７０）Ｒ^７０及び－ＮＲ^７０Ｃ（ＮＲ^７０）ＮＲ^８０Ｒ^８０であり、式中、Ｒ^６０、Ｒ^７０、Ｒ^８０、及びＭ^＋が、既に定義されている通りであり、但し、置換アルケン又はアルキンの場合には、置換基は、－Ｏ^－Ｍ^＋、－ＯＲ^７０、－ＳＲ^７０、又は－Ｓ^－Ｍ^＋ではないことを条件とする。

【0113】

本明細書の個々の用語に関して開示される基に加えて、「置換」ヘテロアルキル及びシクロヘテロアルキル基中の窒素原子上の水素の置換基は、別段に指定されない限り、－Ｒ^６０、－Ｏ^－Ｍ^＋、－ＯＲ^７０、－ＳＲ^７０、－Ｓ^－Ｍ^＋、－ＮＲ^８０Ｒ^８０、トリハロメチル、－ＣＦ_３、－ＣＮ、－ＮＯ、－ＮＯ_２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^７０、－Ｓ（Ｏ）_２Ｏ^－Ｍ^＋、－Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ^７０、－ＯＳ（Ｏ）_２Ｒ^７０、－ＯＳ（Ｏ）_２Ｏ^－Ｍ^＋、－ＯＳ（Ｏ）_２ＯＲ^７０、－Ｐ（Ｏ）（Ｏ^－）_２（Ｍ^＋）_２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^７０）Ｏ^－Ｍ^＋、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^７０）（ＯＲ^７０）、－Ｃ（Ｏ）Ｒ^７０、－Ｃ（Ｓ）Ｒ^７０、－Ｃ（ＮＲ^７０）Ｒ^７０、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^７０、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ^７０、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－Ｃ（ＮＲ^７０）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ^７０、－ＯＣ（Ｓ）Ｒ^７０、－ＯＣ（Ｏ）ＯＲ^７０、－ＯＣ（Ｓ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）Ｒ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｓ）Ｒ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－ＮＲ^７０Ｃ（ＮＲ^７０）Ｒ^７０及び－ＮＲ^７０Ｃ（ＮＲ^７０）ＮＲ^８０Ｒ^８０であり、式中、Ｒ^６０、Ｒ^７０、Ｒ^８０及びＭ^＋は、以前に定義された通りである。

【0114】

本明細書における開示に加えて、特定の実施形態において、置換される基は、１、２、３、若しくは４つの置換基、１、２、若しくは３つの置換基、１若しくは２つの置換基、又は１つの置換基を有する。

【0115】

上で定義された全ての置換された基において、それ自体に更なる置換基を有する置換基（例えば、それ自体が置換アリール基で置換されており、置換アリール基によって更に置換されている、置換基として置換アリール基を有する置換アリールなど）を定義することによって到達するポリマーは、本明細書に含まれることを意図していないことが理解される。そのような場合において、そのような置換の最大数は３である。例えば、本明細書で具体的に企図される置換アリール基の連続的な置換は、置換アリール－（置換アリール）－置換アリールに限定される。

【0116】

別段示されない限り、本明細書で明示的に定義されない置換基の命名は、結合点に向かって、官能基の末端部分に続いて隣接する官能基を命名することによって到達される。例えば、「アリールアルキルオキシカルボニル」という置換基は、基（アリール）－（アルキル）－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－を指す。

【0117】

１つ以上の置換基を含む本明細書に開示される基のいずれかに関して、そのような基は、立体的に実施不可能であり、及び／又は合成的に実現不可能である任意の置換又は置換パターンを当然含まないことを理解されたい。加えて、対象化合物には、これらの化合物の置換から生じる全ての立体化学異性体が含まれる。

【0118】

「薬学的に許容される塩」という用語は、哺乳動物などの患者への投与に対して許容される塩（所与の投薬レジメンに対して許容される哺乳類の安全性を有する対イオンを含む塩）を意味する。そのような塩は、薬学的に許容される無機又は有機塩基、及び薬学的に許容される無機又は有機酸に由来し得る。「薬学的に許容される塩」は、化合物の薬学的に許容される塩を指し、塩が、当該技術分野で周知の多様な有機及び無機対イオンに由来し、例としてのみであるが、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムなど、並びに、分子が塩基性官能基を含有する場合、塩酸塩、臭化水素酸塩、ギ酸塩、酒石酸塩、ベシル酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩などの有機又は無機酸の塩が挙げられる。

【0119】

「その塩」という用語は、酸のプロトンが、金属カチオン又は有機カチオンなどのカチオンによって置き換えられた場合に形成される化合物を意味する。該当する場合、塩は、薬学的に許容される塩であるが、これは、患者への投与を意図していない中間化合物の塩には必要ではない。例として、本発明の化合物の塩は、化合物が無機酸又は有機酸によってプロトン化されてカチオンを形成し、無機酸又は有機酸の共役塩基を塩のアニオン性成分として有するものを含む。

【0120】

「溶媒和物」は、溶媒分子と溶質の分子又はイオンとの組み合わせによって形成された複合体を指す。溶媒は、有機化合物、無機化合物、又は両方の混合物であり得る。溶媒のいくつかの例には、メタノール、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、及び水が含まれるが、これらに限定されない。溶媒が水であるとき、形成される溶媒和物は水和物である。

【0121】

「立体異性体（ｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒ）」及び「立体異性体（ｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒｓ）」は、同じ原子連結性を有するが、空間における異なる原子配置を有する化合物を指す。立体異性体には、シス－トランス異性体、Ｅ及びＺ異性体、鏡像異性体、並びにジアステレオマーが含まれる。

【0122】

「互変異性体」とは、原子の電子結合においてのみ、及び／又は陽子の位置において異なる分子の代替形態、例えば、エノールケト及びイミン－エナミン互変異性体、又はピラゾール、イミダゾール、ベンズイミダゾール、トリアゾール、及びテトラゾールなどの－Ｎ＝Ｃ（Ｈ）－ＮＨ－環原子配置を含むヘテロアリール基の互変異性体を指す。当業者は、他の互変異性環原子配置が可能であることを認識するであろう。

【0123】

「又はその塩若しくは溶媒和物若しくは立体異性体」という用語は、塩、溶媒和物、及び立体異性体の全ての置換（ｐｅｒｍｕｔａｔｉｏｎ）、例えば、対象化合物の立体異性体の薬学的に許容される塩の溶媒和物を含むことを意図していることを認識されたい。

【0124】

「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、任意の長さのアミノ酸のポリマー形態を指すように本明細書において互換的に使用される。別段に指定されない限り、「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」は、遺伝的にコードされた及びコードされていないアミノ酸、化学的若しくは生化学的に修飾された、又は誘導されたアミノ酸、並びに修飾ペプチド骨格を有するポリペプチドを含み得る。この用語は、異種のアミノ酸配列を有する融合タンパク質、異種及び相同のリーダー配列を有する融合物、少なくとも１つのＮ末端メチオニン残基を含有するタンパク質（例えば、組換え宿主細胞における産生を促進するため）などを含むが、これらに限定されない、融合タンパク質を含む。特定の実施形態において、ポリペプチドは、本明細書に記載の抗体又は結合剤である。

【0125】

本発明を更に説明する前に、本発明は記載された特定の実施形態に限定されず、それ自体は勿論、変化し得ることを理解されたい。また、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によってのみ限定されることになるため、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを説明する目的のためのものであり、限定することを意図されないことも理解されるべきである。

【0126】

値の範囲が提供される場合、文脈が明確に別段の指示をしない限り、その範囲の上限と下限との間の、下限の単位の１０分の１までの各中間値、及びこの記載の範囲内の任意の他の記載される値又は中間値が本発明に包含されることが理解される。これらのより小さい範囲の上限及び下限は、独立して、より小さい範囲に含まれてもよく、また、記載された範囲内の任意の特異的に除外された制限に従って、本発明内に包含されてもよい。記載された範囲が限界の一方又は両方を含む場合、それらの含まれる限界のいずれか又は両方を除外する範囲も、同様に本発明に含まれる。

【0127】

別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する当業者によって一般に理解される意味と同じ意味を有する。本明細書に記載されるものと類似又は均等の任意の方法及び材料も、本発明の実施又は試験に使用され得るが、好ましい方法及び材料が、以下に記載される。本明細書で言及される全ての刊行物は、刊行物が引用されることに関連して方法及び／又は材料を開示及び説明するために、参照により本明細書に組み込まれる。

【0128】

本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が明確に別段の指示をしない限り、複数の指示対象を含むことに留意されたい。したがって、例えば、「抗体」への言及は、そのような複数の抗体を含み、「ＣＤＲ」への言及は、当業者に既知の１つ以上のＣＤＲ及びその均等物への言及などを含む。特許請求の範囲は、あらゆる任意選択的な要素を排除するように起草され得ることに更に留意されたい。したがって、この記述は、特許請求項の要素の列挙に関連する「単に」、「のみ」などの排他的な用語の使用、又は「否定的」な限定の使用の先行詞としての役割を果たすことが意図される。

【0129】

本明細書で考察される刊行物は、本出願の出願日前に専らそれらの開示のために提供されている。本明細書におけるいかなるものも、本発明が先行発明によってそのような公開に先行する権利がないことを認めるものと解釈されるべきではない。更に、提供される刊行物の日付は、独立して確認する必要があり得る実際の刊行日とは異なる場合がある。

【発明を実施するための形態】

【0130】

上で述べられたように、「ヒト化抗体」は、ヒトにおいて天然に産生される抗体バリアントとの類似性を増加させるようにタンパク質配列が修飾されている非ヒト種由来の抗体である。ヒト化抗体は、ヒトに投与された場合、これらの抗体に対する免疫応答を誘導しないか、又は対応する非ヒト抗体の投与と比較してはるかに弱い免疫応答を誘導する。ヒト化抗体は、元の非ヒト抗体を上回る、以下の少なくとも３つの利点を有する：（マウスＩｇ定常領域に対して免疫応答の多くが生じるため）抗体の免疫原性が低下する、ヒト定常領域は、ヒトエフェクター機能が生じることを可能にする、及びヒトにおけるヒト化抗体の血清半減期が有意に増加する。

【0131】

また、上述したように、「フレームワーク」又は「フレームワーク領域」は、可変領域に関して使用される場合、抗体などの結合タンパク質の可変領域内のＣＤＲの外側のアミノ酸残基を指す。可変領域フレームワークは、一般に、約１００～１２０アミノ酸長の間の不連続アミノ酸配列であるが、ＣＤＲの外側のそれらのアミノ酸のみを参照することを意図する。本明細書で使用される場合、「フレームワーク領域」という用語は、ＣＤＲによって分離されるフレームワークの各ドメインを意味することが意図される。

【0132】

本開示の特定の実施形態は、ヒト化アミノ酸配列を有するフレームワーク領域を含む結合剤を提供する。ヒト化フレームワーク領域内に挿入されたＣＤＲ領域に応じて、本明細書に開示される結合剤は、任意の抗原、特にＣＤ３０タンパク質に特異的に結合することができる。また、本明細書に開示される結合剤の可変鎖ポリペプチドの一方又は両方をコードする核酸も本明細書で提供される。そのような核酸を含む細胞もまた記載される。更に、いくつかの事例において、薬学的組成物を含む、本明細書に開示される結合剤、特に抗体を含む組成物が提供される。

【0133】

本開示の結合剤を作製し、使用する方法も提供される。特定の態様において、細胞増殖性障害を有する個体に、治療有効量の本開示の結合剤、特に抗体を投与することを含み、結合剤を個体に投与して、細胞増殖性障害の異常増殖性細胞に対する免疫応答、例えば、Ｔ細胞応答を増強する方法が提供される。抗体は、様々な診断及びモニタリング用途にも有用であり、これらも提供される。

【0134】

ヒト化フレームワーク領域
上で要約したように、本開示は、ヒト化フレームワーク領域を含む結合剤を提供する。「親アミノ酸配列」として、抗ＣＤ３０抗体であるＡＣ－１０抗体のアミノ酸配列を使用して、ヒト化フレームワーク領域を有する結合剤を誘導する。

【0135】

例えば、図１Ａは、ＡＣ１０抗体のＶＨ鎖のフレームワーク領域１～４（それぞれ、ＨＦＲ１～ＨＦＲ４について配列番号２～４、及び１０）と、重鎖バリアント１（Ｈ１バリアント）のフレームワーク領域１～４（それぞれ、ＨＦＲ１～ＨＦＲ４について配列番号７～１０）との間の配列アラインメントを説明する。ＡＣ１０のものと比較したＨ１バリアントのフレームワーク領域内の特異的変異は、ヒトに投与された場合に、Ｈ１バリアントのフレームワーク領域を含む結合剤の免疫原性をより小さくし得る。

【0136】

同様に、図１Ｂは、ＡＣ１０抗体のＶＨ鎖のフレームワーク領域１～４（それぞれ、ＨＦＲ１～ＨＦＲ４について配列番号２～４、及び１０）と、重鎖バリアント４（Ｈ４バリアント）のフレームワーク領域１～４（それぞれ、ＨＦＲ１～ＨＦＲ４について配列番号１２～１５、）との間の配列アラインメントを説明する。ＡＣ１０のものと比較したＨ４バリアントのフレームワーク領域内の特異的変異は、ヒトに投与された場合に、Ｈ４バリアントのフレームワーク領域を含む結合剤の免疫原性をより小さくし得る。

【0137】

更に、図１Ｃは、ＡＣ１０抗体のＶＬ鎖のフレームワーク領域１～４（それぞれ、ＬＦＲ１～ＬＦＲ４について配列番号１７～２０）と、軽鎖バリアント２（Ｌ２バリアント）のフレームワーク領域１～４（それぞれ、ＬＦＲ１～ＬＦＲ４について配列番号２２～２５）との間の配列アラインメントを説明する。ＡＣ１０のものと比較したＬ２バリアントのフレームワーク領域内の特異的変異は、ヒトに投与された場合に、Ｌ２バリアントのフレームワーク領域を含む結合剤の免疫原性をより小さくし得る。

【0138】

更に、図１Ｄは、ＡＣ１０抗体のＶＬ鎖のフレームワーク領域１～４（それぞれ、ＬＦＲ１～ＬＦＲ４について配列番号１７～２０）と、軽鎖バリアント４（Ｌ４バリアント）のフレームワーク領域１～４（それぞれ、ＬＦＲ１～ＬＦＲ４について配列番号２７～３０）との間の配列アラインメントを説明する。ＡＣ１０のものと比較したＬ４バリアントのフレームワーク領域内の特異的変異は、ヒトに投与された場合に、Ｌ４バリアントのフレームワーク領域を含む結合剤の免疫原性をより小さくし得る。

【0139】

特定の実施形態において、
１）Ｌ２バリアントからのフレームワーク領域を有するＨ１バリアントからのフレームワーク領域、
２）Ｌ４バリアントからのフレームワーク領域を有するＨ１バリアントからのフレームワーク領域、
３）Ｌ２バリアントからのフレームワーク領域を有するＨ４バリアントからのフレームワーク領域、又は
４）Ｌ４バリアントからのフレームワーク領域を有するＨ４バリアントからのフレームワーク領域を含有する結合剤が記載される。

【0140】

本開示の特定の実施形態は、結合剤であって、Ｈ－ＣＤＲ１、Ｈ－ＣＤＲ２、及びＨ－ＣＤＲ３を含むＶＨ鎖と、Ｌ－ＣＤＲ１、Ｌ－ＣＤＲ２、及びＬ－ＣＤＲ３を含むＶＬ鎖と、を含み、ＣＤＲが、抗原に対する結合剤の結合特異性を決定し、結合剤において、
ＶＨ鎖が、
ｉ）配列番号７の配列を有するＨＦＲ１、配列番号８の配列を有するＨＦＲ２、配列番号９の配列を有するＨＦＲ３、及び配列番号１０の配列を有するＨＦＲ４、又は
ｉｉ）配列番号１２の配列を有するＨＦＲ１、配列番号１３の配列を有するＨＦＲ２、配列番号１４の配列を有するＨＦＲ３、及び配列番号１５の配列を有するＨＦＲ４を含み、
ＶＬ鎖が、
ｉ）配列番号２２の配列を有するＬＦＲ１、配列番号２３の配列を有するＬＦＲ２、配列番号２４の配列を有するＬＦＲ３、及び配列番号２５の配列を有するＬＦＲ４、又は
ｉｉ）配列番号２７の配列を有するＬＦＲ１、配列番号２８の配列を有するＬＦＲ２、配列番号２９の配列を有するＬＦＲ３、及び配列番号２５の配列を有するＬＦＲ４を含む、結合剤を提供する。

【0141】

ＣＤＲグラフティング
本明細書で使用される「ＣＤＲグラフティング」という用語は、ＣＤＲドナー抗体の特異性及び親和性を、フレームワーク領域を提供する抗体に移すために、抗体から別の抗体のフレームワーク領域にＣＤＲを移植することを指す。ＣＤＲグラフティングは、典型的には、非ヒト抗体からヒト抗体のフレームワーク領域にＣＤＲを移してヒト化抗体を産生するために使用されるが、本明細書で使用される「ＣＤＲグラフティング」という用語は、任意のドナー抗体から任意のアクセプター抗体のフレームワーク領域にＣＤＲを移植することを包含する。

【0142】

Ａｌｍａｇｒｏ ｅｔ ａｌ．（２０１８），Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．８，Ａｒｔｉｃｌｅ １７５１（「Ａｌｍａｇｒｏ」）は、ＣＤＲグラフティングの特定の態様を記載する。特に、Ａｌｍａｇｒｏは、抗体由来のＣＤＲを別の抗体のフレームワーク領域にグラフティングして、ＣＤＲドナー抗体の特異性及び親和性を、フレームワーク領域を提供する抗体に移すことができることを教示する。Ａｌｍａｇｒｏはまた、ＣＤＲグラフティングを使用して、ＣＤ５２に対するヒト抗体であり、臨床使用のために承認されたアレムツズマブを操作したと述べている。ラットＩｇＧ２ａ由来のＣＤＲをヒトＶＨ及びＶＬフレームワーク領域にグラフティングして、アレムツズマブを産生した。Ａｌｍａｇｒｏはまた、マウス抗体からのＣＤＲグラフトを使用して、ヒト化抗体ダクリズマブを産生したことも教示している。Ａｌｍａｇｒｏは、ＣＤＲグラフティングが２０１７年７月３０日時点で治療的使用のために承認された全てのヒト化抗体を操作するために使用されたことを教示している。実際、Ａｌｍａｇｒｏは、げっ歯類ＣＤＲをヒトＦＲにグラフティングすることによってヒト化抗体を調製することが、「治療用抗体の工学的及び臨床開発における顕著な進歩」を構成することを教示する。

【0143】

したがって、抗原に特異的に結合する第１の抗体からのＣＤＲを、フレームワーク領域、例えば、ヒト化配列に起因する特定の有益な特徴を有する第２の抗体のフレームワーク領域にグラフティングすることができる。得られる抗体は、第１の抗体の結合特異性を保持すると同時に、ヒトにおける免疫原性の低下など、第２の抗体のフレームワーク領域の有益な特徴も獲得する。

【0144】

上で述べられたように、本開示の特定の実施形態は、ヒト化フレームワーク領域を有する抗体を提供する。したがって、抗原に特異的に結合する任意の抗体由来のＣＤＲを、本明細書に開示されるフレームワーク領域にグラフティングして、ＣＤＲを提供する抗体に対して結合特異性を有するヒト化抗体を産生することができる。

【0145】

したがって、本開示の特定の実施形態は、抗原に特異的に結合する結合剤であって、結合剤が、Ｈ－ＣＤＲ１、Ｈ－ＣＤＲ２、及びＨ－ＣＤＲ３を含むＶＨ鎖と、Ｌ－ＣＤＲ１、Ｌ－ＣＤＲ２、及びＬ－ＣＤＲ３を含むＶＬ鎖と、を含み、ＣＤＲが、抗原に対する結合剤の結合特異性を決定し、結合剤において、
ＶＨ鎖が、
ｉ）配列番号７の配列を有するＨＦＲ１、配列番号８の配列を有するＨＦＲ２、配列番号９の配列を有するＨＦＲ３、及び配列番号１０の配列を有するＨＦＲ４、又は
ｉｉ）配列番号１２の配列を有するＨＦＲ１、配列番号１３の配列を有するＨＦＲ２、配列番号１４の配列を有するＨＦＲ３、及び配列番号１５の配列を有するＨＦＲ４を含み、
ＶＬ鎖が、
ｉ）配列番号２２の配列を有するＬＦＲ１、配列番号２３の配列を有するＬＦＲ２、配列番号２４の配列を有するＬＦＲ３、及び配列番号２５の配列を有するＬＦＲ４、又は
ｉｉ）配列番号２７の配列を有するＬＦＲ１、配列番号２８の配列を有するＬＦＲ２、配列番号２９の配列を有するＬＦＲ３、及び配列番号２５の配列を有するＬＦＲ４を含む、結合剤を提供する。

【0146】

特定の実施形態において、結合剤のＶＨ鎖は、フレームワーク領域において、表３に記載のＦＲ１～ＦＲ４に示されるアミノ酸配列に対して８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、親ＡＣ－１０配列と比較して、バリアントにおいて変異した残基は除き、すなわち、変異した残基は保持される。親ＡＣ－１０配列と比較して、Ｈ１及びＨ４バリアントにおける変異を、それぞれ、図１Ａ及び図１Ｂに示す。

【0147】

特定の実施形態において、ＣＤ－３０結合剤のＶＬ鎖は、フレームワーク領域において、表３に記載のＦＲ１～ＦＲ４に示されるアミノ酸配列に対して８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、親ＡＣ－１０配列と比較して、バリアントにおいて変異した残基は除き、すなわち、変異した残基は保持される。親ＡＣ－１０配列と比較して、Ｌ２及びＬ４バリアントにおける変異を、それぞれ、図１Ｃ及び図１Ｄに示す。

【0148】

いくつかの場合において、結合剤は、キメラ結合剤である。キメラ結合剤は、キメラ抗体又はキメラＴＣＲ様抗体であり得る。

【0149】

いくつかの場合において、結合剤は、Ｔ細胞受容体、Ｔ細胞受容体様抗体、ＩｇＧ、Ｆｖ、一本鎖抗体、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、又はＦａｂ’である。ＩｇＧは、ＩｇＧ１であり得る。

【0150】

いくつかの実施形態において、主題の結合剤は、免疫グロブリンの定常領域（例えば、Ｆｃ領域）を含む。Ｆｃ領域は、存在する場合、ヒトＦｃ領域であり得る。定常領域が存在する場合、抗体は、軽鎖定常領域及び重鎖定常領域の両方を含有し得る。本明細書に記載の抗体は、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＥを含む全てのタイプの定常領域、並びにＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含む任意のアイソタイプを有する抗体を含む。好適な重鎖Ｆｃ領域の一例は、ヒトアイソタイプＩｇＧ１ Ｆｃである。軽鎖定常領域は、ラムダ又はカッパであり得る。主題の結合剤（例えば、主題のヒト化抗体）は、１つより多いクラス又はアイソタイプからの配列を含み得る。抗体は、２つの軽鎖及び２つの重鎖を含有する四量体、別個の重鎖、軽鎖として、Ｆａｂ、Ｆａｂ’Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖとして、又は重鎖及び軽鎖可変ドメインがスペーサーを通して連結される一本鎖抗体として、発現され得る。

【0151】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示される結合剤、例えば、抗体、例えば、抗ＣＤ３０抗体は、Ｆｃ領域に導入される１つ以上のアミノ酸置換を含み得る。いくつかの実施形態において、アミノ酸置換のうちの１つ以上は、Ｆｃ領域の位置２３９、２９８、３２６、３３０、及び３３２にあり得る。いくつかの実施形態において、本開示の抗体は、Ｆｃ領域に導入された以下のアミノ酸置換のうちの１つ以上を含み得る：Ｉ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ／Ａ３３０Ｌ／Ｉ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ／Ｓ２９８Ａ／Ｉ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ／Ｋ３２６Ｔ／Ｉ３３２Ｅ；Ｓ２３９Ｄ／Ｓ２９８Ａ／Ｋ３２６Ｔ／Ｉ３３２Ｅ；又はＳ２３９Ｄ／Ａ３３０Ｌ／Ｉ３３２Ｅ／Ｄ３５６Ｅ／Ｌ３５８Ｍ。

【0152】

いくつかの実施形態において、抗体などの主題の結合剤は、カルボキシル末端に遊離チオール（－ＳＨ）基を含み、遊離チオール基を使用して、第２のポリペプチド（例えば、主題の抗体を含む別の抗体）、足場、担体などに抗体を結合させることができる。

【0153】

いくつかの実施形態において、抗体などの主題の結合剤は、１つ以上の天然に存在しないアミノ酸を含む。いくつかの実施形態において、天然にコードされないアミノ酸は、カルボニル基、アセチル基、アミノオキシ基、ヒドラジン基、ヒドラジド基、セミカルバジド基、アジド基、又はアルキン基を含む。天然に存在しないアミノ酸を含むことで、ポリマー、第２のポリペプチド、足場などへの結合を提供することができる。そのような天然に存在しないアミノ酸の例としては、限定されないが、Ｎ－アセチルグルコサミニル－Ｌ－セリン、Ｎ－アセチルグルコサミニル－Ｌ－トレオニン、及びＯ－ホスホチロシンが挙げられる。

【0154】

いくつかの場合において、結合剤は、二重特異性結合剤、例えば、二重特異性抗体である。例えば、二重特異性抗体は、２つの連結した抗原結合断片又は追加のドメインが結合した２つの大きい免疫グロブリン様分子を含み得る。かかる二重特異性抗体において、２つの可変ドメインは、本明細書に記載のフレームワーク領域を有することができるが、異なる標的に特異的であるＣＤＲを有する。

【0155】

完全長二重特異性抗体は、例えば、２つの単一特異性二価抗体間のＦａｂアーム交換（又は半分の分子の交換）を使用して、各半分の分子の重鎖ＣＨ３界面に置換を導入して、インビトロの無細胞環境で、又は共発現を使用して、異なる特異性を有する２つの抗体の半分の分子のヘテロ二量体形成を促進することによって、生成されてもよい。Ｆａｂアーム交換反応は、ジスルフィド結合異性化反応及びＣＨ３ドメインの解離－会合の結果である。親の単一特異性抗体のヒンジ領域における重鎖ジスルフィド結合が減少する。親の単一特異性抗体のうちの１つの得られる遊離システインは、第２の親の単一特異性抗体分子のシステイン残基と重鎖ジスルフィド間結合を形成し、同時に親抗体のＣＨ３ドメインは、解離－会合によって放出され、改質される。ＦａｂアームのＣＨ３ドメインは、ホモ二量体化よりもヘテロ二量体化を好むように操作され得る。得られた生成物は、各々が異なるエピトープを結合する２つのＦａｂアーム又は半分の分子を有する二重特異性抗体である。

【0156】

「ノブ・イン・ホール」戦略（例えば、ＰＣＴ国際公開第ＷＯ２００６／０２８９３６号を参照されたい）を使用して、完全長二重特異性抗体を生成してもよい。簡潔に述べると、ヒトＩｇＧ中のＣＨ３ドメインの界面を形成する選択されたアミノ酸は、ＣＨ３ドメイン相互作用に影響を及ぼす位置で変異させて、ヘテロ二量体形成を促進することができる。小さい側鎖（ホール）を有するアミノ酸を、第１の抗原に特異的に結合する抗体の重鎖に導入し、大きい側鎖（ノブ）を有するアミノ酸を、第２の抗原に特異的に結合する抗体の重鎖に導入する。２つの抗体の共発現後、ヘテロ二量体は、「ホール」を有する重鎖と「ノブ」を有する重鎖との優先的相互作用の結果として形成される。ノブ及びホールを形成する例示的なＣＨ３置換対は、以下である（第１の重鎖の第１のＣＨ３ドメインにおける修飾位置／第２の重鎖の第２のＣＨ３ドメインにおける修飾位置として表される）：Ｔ３６６Ｙ／Ｆ４０５Ａ、Ｔ３６６Ｗ／Ｆ４０５Ｗ、Ｆ４０５Ｗ／Ｙ４０７Ａ、Ｔ３９４Ｗ／Ｙ４０７Ｔ、Ｔ３９４５／Ｙ４０７Ａ、Ｔ３６６Ｗ／Ｔ３９４Ｓ、Ｆ４０５Ｗ／Ｔ３９４Ｓ及びＴ３６６Ｗ／Ｔ３６６Ｓ／Ｌ３６８Ａ／Ｙ４０７Ｖ。

【0157】

米国特許公開第２０１０／００１５１３３号、米国特許公開第２００９／０１８２１２７号、米国特許公開第８２０１０／０２８６３７号、又は米国特許公開第２０１１／０１２３５３２号に記載されるように、１つのＣＨ３表面で正に帯電した残基を置換し、第２のＣＨ３表面で負に帯電した残基を置換することによって、静電相互作用を使用して重鎖ヘテロ二量体化を促進するなどの他の戦略を使用してもよい。他の戦略において、ヘテロ二量体化は、以下の置換によって促進され得る（第１の重鎖の第１のＣＨ３ドメインにおける修飾位置／第２の重鎖の第２のＣＨ３ドメインにおける修飾位置として表される）：米国特許公開第２０１２／０１４９８７６号又は米国特許公開第２０１３／０１９５８４９号に記載されるような、Ｌ３５１Ｙ／Ｆ４０５Ａ／Ｙ４０７Ｖ／Ｔ３９４Ｗ、Ｔ３６６Ｉ／Ｋ３９２Ｍ／Ｔ３９４Ｗ／Ｆ４０５Ａ／Ｙ４０７Ｖ、Ｔ３６６Ｌ／Ｋ３９２Ｍ／Ｔ３９４Ｗ／Ｆ４０５Ａ／Ｙ４０７Ｖ、Ｌ３５１Ｙ／Ｙ４０７Ａ／Ｔ３６６Ａ／Ｋ４０９Ｆ、Ｌ３５１Ｙ／Ｙ４０７Ａ／Ｔ３６６Ｖ／Ｋ４０９Ｆ、Ｙ４０７Ａ／Ｔ３６６Ａ／Ｋ４０９Ｆ、又はＴ３５０Ｖ／Ｌ３５１Ｙ／Ｆ４０５Ａ／Ｙ４０７Ｖ、Ｔ３５０Ｖ／Ｔ３６６Ｌ／Ｋ３９２Ｌ／Ｔ３９４Ｗ。

【0158】

一本鎖二重特異性抗体も提供される。いくつかの実施形態において、本開示の一本鎖二重特異性抗体は、二重特異性ｓｃＦｖである。

【0159】

いくつかの実施形態において、主題の結合剤は、ｓｃＦｖ多量体を含む。例えば、いくつかの実施形態において、主題の結合剤は、ｓｃＦｖ二量体（例えば、２つのタンデムｓｃＦｖ（ｓｃＦｖ_２）を含む）、ｓｃＦｖ三量体（例えば、３つのタンデムｓｃＦｖ（ｓｃＦｖ_３）を含む）、ｓｃＦｖ四量体（例えば、４つのタンデムｓｃＦｖ（ｓｃＦｖ_４）を含む）、又は４つを超えるｓｃＦｖの多量体（例えば、タンデムで）である。ｓｃＦｖ単量体は、長さが約２アミノ酸～約１０アミノ酸、例えば、長さが２ａａ、３ａａ、４ａａ、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、又は１０ａａのリンカーを介してタンデムに連結することができる。好適なリンカーとしては、例えば、（Ｇｌｙ）_ｘ（式中、ｘは２～１０の整数（配列番号１９１）である）、グリシン－セリンポリマーなどが挙げられる。

【0160】

ＣＤ３０結合剤
上にまとめたように、抗原に特異的に結合する第１の抗体からのＣＤＲのＣＤＲグラフティングによって、フレームワーク領域、例えば、ヒト化配列に起因する特定の有益な特徴を有する第２の抗体のフレームワーク領域にグラフティングすることができる。得られる抗体は、第１の抗体の結合特異性を保持すると同時に、ヒトにおける免疫原性の低下など、第２の抗体のフレームワーク領域の有益な特徴も獲得する。

【0161】

また、上で考察されたように、本開示の特定の実施形態は、ヒト化フレームワーク領域を有する抗体を提供する。したがって、抗原に特異的に結合する任意の抗体由来のＣＤＲを、本明細書に開示されるフレームワーク領域にグラフティングして、ＣＤＲを提供する抗体に対して結合特異性を有するヒト化抗体を産生することができる。

【0162】

特定の実施形態において、本開示は、ＣＤ３０タンパク質に特異的に結合する結合剤を提供する。そのような結合剤は、抗ＣＤ３０抗体であり得る。ＣＤ－３０結合剤は、結合剤の可変ドメインにＣＤ３０に特異的に結合する能力を付与するＣＤＲをグラフティングすることによって生成することができる。

【0163】

一実施形態において、結合剤にＣＤ３０結合特異性を付与するＶＨ鎖ＣＤＲは、配列番号３１～３３の配列を含み、結合剤にＣＤ３０結合特異性を付与するＶＬ鎖ＣＤＲは、配列番号３４～３６の配列を含む。結合剤にＣＤ３０結合特異性を付与するＣＤＲの任意の他の組み合わせも、本明細書に記載のＶＨドメイン及びＶＬドメインにグラフティングすることができる。

【0164】

したがって、本開示の特定の実施形態は、ＣＤ３０タンパク質に特異的に結合する結合剤であって、結合剤が、
ｉ）配列番号６及び配列番号１１から選択される配列を含むＶＨ鎖と、
ｉｉ）配列番号２１及び配列番号２６から選択される配列を含むＶＬ鎖と、を含む、結合剤を提供する。

【0165】

例えば、ＣＤ３０に特異的に結合する結合剤は、１）それぞれ、配列番号３１～３３の配列を有するＨ－ＣＤＲ１、Ｈ－ＣＤＲ２、及びＨ－ＣＤＲ３を含むＶＨ鎖と、それぞれ、配列番号３４～３６の配列を有するＬ－ＣＤＲ１、Ｌ－ＣＤＲ２、及びＬ－ＣＤＲ３を含むＶＬ鎖と、を含み得る。

【0166】

一実施形態において、ＣＤ３０に特異的に結合する結合剤は、配列番号３１～３３の配列を有するＨ－ＣＤＲ１、Ｈ－ＣＤＲ２、及びＨ－ＣＤＲ３と、配列番号３４～３６の配列を有するＬ－ＣＤＲ１、Ｌ－ＣＤＲ２、及びＬ－ＣＤＲ３と、を含み、結合剤において、
ＶＨ鎖が、
ｉ）配列番号７の配列を有するＨＦＲ１、配列番号８の配列を有するＨＦＲ２、配列番号９の配列を有するＨＦＲ３、及び配列番号１０の配列を有するＨＦＲ４、又は
ｉｉ）配列番号１２の配列を有するＨＦＲ１、配列番号１３の配列を有するＨＦＲ２、配列番号１４の配列を有するＨＦＲ３、及び配列番号１５の配列を有するＨＦＲ４を含み、
ＶＬ鎖が、
ｉ）配列番号２２の配列を有するＬＦＲ１、配列番号２３の配列を有するＬＦＲ２、配列番号２４の配列を有するＬＦＲ３、及び配列番号２５の配列を有するＬＦＲ４、又は
ｉｉ）配列番号２７の配列を有するＬＦＲ１、配列番号２８の配列を有するＬＦＲ２、配列番号２９の配列を有するＬＦＲ３、及び配列番号２５の配列を有するＬＦＲ４を含む。

【0167】

本開示の特定の実施形態は、ＣＤ３０タンパク質に特異的に結合する結合剤であって、結合剤が、
ａ）配列番号６を含むＶＨ鎖及び配列番号２１を含むＶＬ鎖、
ｂ）配列番号６を含むＶＨ鎖及び配列番号２６を含むＶＬ鎖、
ｃ）配列番号１１を含むＶＨ鎖及び配列番号２１を含むＶＬ鎖、並びに
ｄ）配列番号１１を含むＶＨ鎖及び配列番号２６を含むＶＬ鎖から選択されるＶＨ鎖とＶＬ鎖の組み合わせを含む、結合剤を提供する。

【0168】

いくつかの実施形態によれば、本開示の抗体は、ＣＤ３０に特異的に結合し、ＣＤ３０に対する結合について、以下を含む抗体と競合する。

【0169】

第１の抗体が、ＣＤ３０に対する結合に関して第２の抗体と競合するかどうかを決定するための任意の好適なアプローチを用いてもよい。第１の抗体が、化合物への結合に関して第２の抗体「と競合する」かどうかは、当該技術分野で既知の競合結合アッセイを使用して容易に決定され得る。競合抗体は、例えば、抗体競合アッセイを介して特定され得る。例えば、第１の抗体の試料を、固体支持体に結合させることができる。次いで、そのような第１の抗体と競合し得ると疑われる第２の抗体の試料を添加する。この２つの抗体のうちの１つが標識される。標識された抗体及び標識されていない抗体が、化合物上の別個の異なる部位に結合する場合、標識された抗体は、疑われる競合抗体が存在するか否かにかかわらず、同じレベルまで結合する。しかしながら、相互作用の部位が同一であるか、又は重複している場合、標識されていない抗体が競合し、抗原に結合した標識された抗体の量が低下する。標識されていない抗体が過剰に存在する場合、標識された抗体は、もしあるとしても、結合することはほとんどない。

【0170】

本開示の目的のために、競合抗体は、化合物に対する抗体の結合を約５０％以上、約６０％以上、約７０％以上、約８０％以上、約８５％以上、約９０％以上、約９５％以上、又は約９９％以上低下させる抗体である。かかる競合アッセイを実施するための手順の詳細は、当該技術分野において周知である。そのようなアッセイは、精製された抗体を使用することによって定量的に行うことができる。標準曲線は、１つの抗体をそれ自体に対して滴定することによって確立され得、すなわち、同じ抗体が標識及び競合物の両方に使用される。標識されていない競合抗体がプレートへの標識された抗体の結合を阻害する能力が、滴定され得る。その結果がプロットされ得、望ましい結合阻害度を達成するために必要な濃度が比較され得る。

【0171】

いくつかの実施形態によれば、本開示の抗体は、ＣＤ３０に特異的に結合し、以下を含む。

【0172】

Ｃｈｏｔｈｉａ命名法によって定義されるＨＣＤＲ１～ＨＣＤＲ３及びＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３。列挙される命名法に従って定義されるような本明細書に開示される抗ＣＤ３０抗体のＨＣＤＲ１～３及びＬＣＤＲ１～ＬＣＤＲ３は、以下の表（表３）に記載される通りであってもよい。

【0173】

表３：配列番号によって特定される、ＡＣ－１０抗体並びにＨ１、Ｈ４、Ｌ２、及びＬ４バリアントにおけるドメイン及び配列

【表3】

【0174】

特定の実施形態において、ＣＤ３０結合剤のＶＨ鎖は、表３に示されるＨＣＤＲ１～ＨＣＤＲ３を含み、フレームワーク領域において、表３に記載のＦＲ１～ＦＲ４に示されるアミノ酸配列に対して８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、親ＡＣ－１０配列と比較して、バリアントにおいて変異した残基は除き、すなわち、変異した残基は保持され、すなわち、変異した残基は保持される。親ＡＣ－１０配列と比較して、Ｈ１及びＨ４バリアントにおける変異を、それぞれ、図１Ａ及び図１Ｂに示す。

【0175】

特定の実施形態において、ＣＤ－３０結合剤のＶＬ鎖は、本明細書で表３に示されるＬＣＤＲ１～３を含み、フレームワーク領域において、表３に記載のＦＲ１～ＦＲ４に示されるアミノ酸配列に対して８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、親ＡＣ－１０配列と比較して、バリアントにおいて変異した残基は除き、すなわち、変異した残基は保持される。親ＡＣ－１０配列と比較して、Ｌ２及びＬ４バリアントにおける変異を、それぞれ、図１Ｃ及び図１Ｄに示す。

【0176】

本明細書に開示されるＣＤ３０結合剤は、米国特許出願第２００２／００６４５２７号、同第２００４／０１３６９９２号、同第２００８／０００３２２１号、同第２００８／０２０６２４２号、同第２００６／０１７７４４２号、同第２０１０／０２３９５７１号、同第２００９／０２１４５４４号、同第２０１９／０２１８２９３号、同第２０１８／０２８０５３２号、同第２０２０／００９５３２９号、同第２０２０／００９５３３０号、及び同第２０２０／０１０２３９９号に記載の方法のうちのいずれかを実施するためのものを含む、様々な研究、診断、及び治療用途での使用が見出され、その開示は、その全体があらゆる目的のために参照により本明細書に組み込まれる。

【0177】

「ＣＤ３０抗原」又は「ＣＤ３０タンパク質」は、ＮＣＢＩ Ｅｎｔｒｙ，ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＣＡＣ１６６５２．１に記載のタンパク質配列に対して少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。

【0178】

いくつかの場合において、本明細書に開示されるＣＤ３０結合剤は、例えば、追加の部分にコンジュゲートすることによって修飾される。本明細書に開示される抗体、例えば、抗ＣＤ３０抗体などの結合剤にコンジュゲートされ得る様々な部分を以下に記載する。

【0179】

結合剤コンジュゲート
本開示は、結合剤コンジュゲートなどのコンジュゲートを提供する。いくつかの事例において、結合剤は、抗体であり、したがって、これらの事例において、本開示は、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を提供する。「コンジュゲート」とは、目的の部分（例えば、薬物又は活性薬剤）に共有結合するポリペプチド（例えば、結合剤又は抗体）を意味する。例えば、結合剤コンジュゲートは、薬物又は活性薬剤に共有結合する結合剤（例えば、抗体）を含む。特定の実施形態において、ポリペプチド（例えば、抗体）及び薬物又は活性薬剤は、１つ以上の官能基及び共有結合を介して互いに結合している。例えば、１つ以上の官能基及び共有結合は、本明細書に記載のリンカーを含み得る。

【0180】

特定の実施形態において、コンジュゲートは、目的の部分にコンジュゲートされたポリペプチドを含む、ポリペプチドコンジュゲートである。特定の実施形態において、ポリペプチドにコンジュゲートされる部分は、限定されないが、検出可能な標識、薬物、水溶性ポリマー、又は膜若しくは表面へのポリペプチドの固定化のための部分などの、様々な目的の部分のいずれかであり得る。特定の実施形態において、コンジュゲートは、ポリペプチドが、薬物又は活性薬剤にコンジュゲートされた薬物コンジュゲートである。好適な薬物及び活性薬剤、並びにそれらの類似体及び誘導体は、本明細書により詳細に記載される。

【0181】

目的の部分（例えば、薬物又は活性薬剤）は、ポリペプチドの任意の所望の部位でポリペプチドにコンジュゲートされ得る。したがって、本開示は、例えば、ポリペプチドのＣ末端又はその付近の部位でコンジュゲートされた部分を有するポリペプチドを提供する。他の例としては、ポリペプチドのＮ末端又はその付近の位置でコンジュゲートされた部分を有するポリペプチドが挙げられる。また、例としては、ポリペプチドのＣ末端とＮ末端との間の位置（例えば、ポリペプチドの内部部位）にコンジュゲートされた部分を有するポリペプチドも挙げられる。上の組み合わせは、ポリペプチドが２つ以上の部分にコンジュゲートされている場合にも可能である。

【0182】

特定の実施形態において、本開示のコンジュゲートは、アミノ酸残基のα炭素でポリペプチドのアミノ酸残基にコンジュゲートされた薬物又は活性薬剤を含む。別の言い方をすれば、コンジュゲートは、ポリペプチド中の１つ以上のアミノ酸残基の側鎖が、薬物又は活性薬剤に結合される（例えば、本明細書に記載されるリンカーを介して薬物又は活性薬剤に結合される）ポリペプチドを含む。例えば、コンジュゲートは、ポリペプチド中の１つ以上のアミノ酸残基のα－炭素が、薬物又は活性薬剤に結合される（例えば、本明細書に記載されるリンカーを介して薬物又は活性薬剤に結合される）ポリペプチドを含む。

【0183】

本開示の実施形態は、ポリペプチドが、１個以上の部分、例えば、２個の部分、３個の部分、４個の部分、５個の部分、６個の部分、７個の部分、８個の部分、９個の部分、又は１０個以上の部分にコンジュゲートされるコンジュゲートを含む。部分は、ポリペプチド中の１つ以上の部位でポリペプチドにコンジュゲートされ得る。例えば、１つ以上の部分は、ポリペプチドの単一アミノ酸残基にコンジュゲートされ得る。いくつかの場合において、１つの部分が、ポリペプチドのアミノ酸残基にコンジュゲートされる。他の実施形態において、２つの部分が、ポリペプチドの同じアミノ酸残基にコンジュゲートされ得る。他の実施形態において、第１の部分は、ポリペプチドの第１のアミノ酸残基にコンジュゲートされ、第２の部分は、ポリペプチドの第２のアミノ酸残基にコンジュゲートされる。例えば、ポリペプチドが第１のアミノ酸残基で第１の部分にコンジュゲートされ、第２のアミノ酸残基で２つの他の部分にコンジュゲートされる場合、上記の組み合わせもまた可能である。これらに限定されないが、第１のアミノ酸残基で第１及び第２の部分にコンジュゲートされ、第２のアミノ酸残基で第３及び第４の部分にコンジュゲートされたポリペプチドなどの他の組み合わせも可能である。

【0184】

１つ以上の部分にコンジュゲートされるポリペプチドの１つ以上のアミノ酸残基は、天然に存在するアミノ酸、非天然アミノ酸、又はそれらの組み合わせであり得る。例えば、コンジュゲートは、ポリペプチドの天然に存在するアミノ酸残基にコンジュゲートされた部分を含み得る。他の事例において、コンジュゲートは、ポリペプチドの非天然アミノ酸残基にコンジュゲートされた部分を含み得る。１つ以上の部分は、上述のように、単一の天然又は非天然アミノ酸残基でポリペプチドにコンジュゲートされ得る。ポリペプチド中の１つ以上の天然又は非天然アミノ酸残基は、本明細書に記載のように、１つ以上の部分にコンジュゲートされ得る。例えば、ポリペプチド中の２つ（以上）のアミノ酸残基（例えば、天然又は非天然アミノ酸残基）は、各々、１つ又は２つの部分にコンジュゲートされてもよく、その結果、ポリペプチド中の複数の部位が、目的の部分にコンジュゲートされる。

【0185】

本明細書に記載されるように、ポリペプチドは、１つ以上の部分にコンジュゲートされ得る。特定の実施形態において、目的の部分は、薬物又は検出可能な標識などの化学エンティティである。例えば、薬物又は活性薬剤は、ポリペプチドにコンジュゲート化されてもよく、又は他の実施形態において、検出可能な標識が、ポリペプチドにコンジュゲートされてもよい。したがって、例えば、本開示の実施形態としては、限定されないが、ポリペプチド及び薬物のコンジュゲート、ポリペプチド及び検出可能な標識のコンジュゲート、２つ以上の薬物及びポリペプチドのコンジュゲート、２つ以上の検出可能な標識及びポリペプチドのコンジュゲートなどが挙げられる。

【0186】

特定の実施形態において、目的のポリペプチド及び部分は、カップリング部分を介してコンジュゲートされる。例えば、ポリペプチド及び目的の部分は、各々、カップリング部分に結合（例えば、共有結合）してもよく、したがって、ポリペプチド及び目的の部分（例えば、薬物又は活性薬剤）は、カップリング部分を介して一緒に間接的に結合する。いくつかの場合において、カップリング部分は、ヒドラジニル－インドリル若しくはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物、又はヒドラジニル－インドリル若しくはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物の誘導体を含む。例えば、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を介して目的の部分（例えば、薬物又は活性薬剤）をポリペプチドにカップリングするための一般的なスキームは、以下の一般的反応スキームに示される。ヒドラジニル－インドリル及びヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分は、本明細書において、それぞれ、ヒドラジノ－イソ－ピクテット－スペングラー（ＨＩＰＳ）カップリング部分及びアザ－ヒドラジノ－イソ－ピクテット－スペングラー（ａｚａＨＩＰＳ）カップリング部分とも称される。

【化1】

【0187】

上の反応スキームにおいて、各Ｒは、ポリペプチドにコンジュゲートされる目的の部分（例えば、薬物又は活性薬剤）であり、式中、ｎは、１～４の整数である。上の反応スキームに示されるように、２－ホルミルグリシン残基（ｆＧｌｙ）を含むポリペプチドは、カップリング部分（例えば、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分）を含むように修飾されている薬物と反応し、カップリング部分に結合したポリペプチドコンジュゲートを産生し、したがって、カップリング部分を介して、薬物をポリペプチドに結合する。

【0188】

本明細書に記載されるように、この部分は、様々な部分、例えば、限定されないが、化学エンティティ、例えば、検出可能な標識、又は薬物若しくは活性薬剤のうちのいずれかであり得る。Ｒ’及びＲ”は、各々独立して、任意の所望の置換基、例えば、限定されないが、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルであり得る。Ｚは、ＣＲ^６１、ＮＲ^６２、Ｎ、Ｏ、又はＳであってもよく、式中、Ｒ^６１及びＲ^６２は、各々独立して、上記Ｒ’及びＲ”について説明される置換基のいずれかから選択される。

【0189】

本明細書に記載のコンジュゲート及び化合物において示されるように、他のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分もまた可能である。例えば、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分は、リンカーに結合（例えば、共有結合）し得る。したがって、本開示の実施形態は、リンカーを介して薬物又は活性薬剤に結合されるヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含む。ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を薬物又は活性薬剤にカップリングし得るリンカーの様々な実施形態を、本明細書で詳細に記載する。

【0190】

本明細書に記載されるコンジュゲート及び化合物に示されるように、追加のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分もまた可能である。例えば、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分は、２つ以上のリンカーに結合（例えば、共有結合）し得る。したがって、本開示の実施形態は、各々対応するリンカーを介して２つ以上の薬物又は活性薬剤に結合されたヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分を含む。したがって、本開示のコンジュゲートは、２つ以上のリンカーを含んでいてもよく、各リンカーは、対応する薬物又は活性薬剤をヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分に結合する。したがって、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分及び２つ以上のリンカーは、全体として「分岐リンカー」とみなすことができ、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分は、多くの「分岐」のうちの２つに結合し、各分岐は、薬物又は活性薬剤に結合するリンカーを含む。

【0191】

異なるペイロードの同じものの組み合わせは、分岐リンカーを介してポイペプチドにコンジュゲート化され得る。特定の実施形態において、分岐リンカーに結合した２つのペイロード（例えば、薬物、活性薬剤、又は検出可能な標識）は、同じペイロード（例えば、薬物、活性薬剤、又は検出可能な標識）である。例えば、分岐リンカーの第１の分岐は、ペイロード（例えば、薬物、活性薬剤、又は検出可能なラベル）に結合し得、分岐リンカーの第２の分岐は、第１の分岐と同じペイロード（例えば、薬物、活性薬剤、又は検出可能なラベル）に結合し得る。

【0192】

他の実施形態において、分岐リンカーに結合した２つのペイロード（例えば、薬物、活性薬剤、又は検出可能な標識）は、異なるペイロード（例えば、薬物、活性薬剤、又は検出可能な標識）である。例えば、分岐リンカーの第１の分岐は、第１のペイロード（例えば、第１の薬物、活性薬剤、又は検出可能なラベル）に結合し得、分岐リンカーの第２の分岐は、第１の分岐に結合した第１のペイロード（例えば、第１の薬物、活性薬剤、又は検出可能なラベル）とは異なる第２のペイロード（例えば、第２の薬物、活性薬剤、又は検出可能なラベル）に結合し得る。

【0193】

特定の実施形態において、ポリペプチド（例えば、抗体）は、目的の部分にコンジュゲートされてもよく、ポリペプチドの１つ以上のアミノ酸は、目的の部分にコンジュゲートする前に修飾される。ポリペプチドの１つ以上のアミノ酸の修飾は、目的の部分にコンジュゲートするのに好適な１つ以上の反応性基を含有するポリペプチドを産生し得る。いくつかの場合において、ポリペプチドは、１つ以上の修飾アミノ酸残基を含み、目的の部分（例えば、上述のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分などのカップリング部分を含む部分）へのコンジュゲート化に好適な１つ以上の反応性基を提供し得る。例えば、ポリペプチドのアミノ酸は、反応性アルデヒド基（例えば、反応性アルデヒド）を含むように修飾され得る。反応性アルデヒドは、「アルデヒドタグ」又は「ａｌｄ－タグ」に含まれてもよく、これらは、本明細書で使用される場合、ホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用によって、２－ホルミルグリシン残基（本明細書では「ｆＧｌｙ」と称される）を含有するように変換されている、スルファターゼモチーフから産生されるアミノ酸配列（例えば、Ｌ（Ｃ／Ｓ）ＴＰＳＲ）を指す。ＦＧＥによって生成されるｆＧｌｙ残基は、「ホルミルグリシン」としても称され得る。言い換えれば、「アルデヒドタグ」という用語は、本明細書において、「変換された」スルファターゼモチーフ（すなわち、システイン又はセリン残基がＦＧＥの作用によってｆＧｌｙに変換されているスルファターゼモチーフ、例えば、Ｌ（ｆＧｌｙ）ＴＰＳＲ）を含むアミノ酸配列を指すように使用される。変換されたスルファターゼモチーフは、「変換されていない」スルファターゼモチーフ（すなわち、システイン又はセリン残基がＦＧＥによってｆＧｌｙに変換されていないが、変換されることは可能であるスルファターゼモチーフ、例えば、配列Ｌ（Ｃ／Ｓ）ＴＰＳＲを有する変換されていないスルファターゼモチーフ）を含むアミノ酸配列から生成され得る。スルファターゼモチーフ上のホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用の文脈において使用される場合の「変換」は、スルファターゼモチーフにおけるシステイン又はセリン残基のホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）残基への（例えば、ＣｙｓからｆＧｌｙへの、又はＳｅｒからｆＧｌｙへの）生化学的修飾を指す。部位特異的タンパク質修飾におけるアルデヒドタグ及びその使用の追加の態様は、米国特許第７，９８５，７８３号及び米国特許第８，７２９，２３２号に記載され、これらの各々の開示は、参照により本明細書に組み込まれる。

【0194】

いくつかの場合において、コンジュゲートを産生するために、ｆＧｌｙ残基を含有するポリペプチドは、ｆＧｌｙと化合物（例えば、上述のように、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する化合物）との反応によって、目的の部分にコンジュゲートされ得る。例えば、ｆＧｌｙ含有ポリペプチドを、ポリペプチドへの薬物のコンジュゲート化を提供するのに好適な条件下、反応性パートナーを含有する薬物と接触させてもよい。いくつかの事例において、反応性パートナー含有薬物は、上述のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含み得る。例えば、薬物又は活性薬剤は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含むように修飾され得る。いくつかの場合において、薬物又は活性薬剤は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に結合し、例えば、本明細書に詳細に記載されるリンカーを介して、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に共有結合する。

【0195】

特定の実施形態において、本開示のコンジュゲートは、目的の部分（例えば、薬物又は活性薬剤）に結合している少なくとも１つのアミノ酸残基を有するポリペプチド（例えば、結合剤又は抗体）を含む。コンジュゲートを作製するために、ポリペプチドのアミノ酸残基が修飾され、次いで、上述のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する薬物又は活性薬剤にカップリングされ得る。特定の実施形態において、ポリペプチドのアミノ酸残基は、上述のように、ｆＧｌｙ残基に変換されるシステイン又はセリン残基である。特定の実施形態において、アミノ酸残基（例えば、ｆＧｌｙ残基）は、上述のヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する薬物又は活性薬剤にコンジュゲートし、薬物又は活性薬剤がヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を介してポリペプチドにコンジュゲートされる本開示のコンジュゲートを提供する。本明細書で使用される場合、ｆＧｌｙ’という用語は、目的の部分（例えば、薬物又は活性薬剤）にカップリングされるポリペプチド（例えば、結合剤又は抗体）のアミノ酸残基を指す。

【0196】

特定の実施形態において、コンジュゲートは、本明細書に記載のリンカーに結合する少なくとも１つのアミノ酸残基を有するポリペプチド（例えば、結合剤又は抗体）を含み、これが次いで薬物又は活性薬剤に結合する。例えば、コンジュゲートは、薬物又は活性薬剤にコンジュゲートされた少なくとも１つのアミノ酸残基（ｆＧｌｙ’）を有するポリペプチド（例えば、結合薬剤又は抗体）を含み得る。

【0197】

式（Ｉ）のコンジュゲート
本開示の態様は、式（Ｉ）：

【化2】

のコンジュゲートを含み、
式中、
Ｚが、ＣＲ^４又はＮであり、
Ｒ^１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ^２及びＲ^３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、又はＲ^２及びＲ^３が任意選択的に環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ^４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｌが、リンカーであり、
Ｗ^１が、薬物（又は活性薬剤）であり、
Ｗ^２が、本明細書に記載の結合剤である。

【0198】

特定の実施形態において、Ｚは、ＣＲ^４又はＮである。特定の実施形態において、Ｚは、ＣＲ^４である。特定の実施形態において、Ｚは、Ｎである。

【0199】

特定の実施形態において、Ｒ^１は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。

【0200】

特定の実施形態において、Ｒ^１は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^１は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、アルキニル若しくは置換アルキニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0201】

特定の実施形態において、Ｒ^２及びＲ^３は、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、又はＲ^２及びＲ^３が任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。

【0202】

特定の実施形態において、各Ｒ^２は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^２は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0203】

特定の実施形態において、各Ｒ^３は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^３は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0204】

特定の実施形態において、Ｒ^２及びＲ^３は、任意選択的に環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^２及びＲ^３は、環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^２及びＲ^３は、環状に連結して、５員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^２及びＲ^３は、環状に連結して、６員のヘテロシクリルを形成する。

【0205】

特定の実施形態において、各Ｒ^４は、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。

【0206】

各Ｒ^４についての様々な可能性が、以下でより詳細に説明される。特定の実施形態において、Ｒ^４は、水素である。特定の実施形態において、各Ｒ^４は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^４は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩなどのハロゲンである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、Ｆである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、Ｃｌである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、Ｂｒである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、Ｉである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリール（例えば、フェニル又は置換フェニル）である。特定の実施形態において、Ｒ^４は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0207】

特定の実施形態において、Ｗ^１は、薬物である。薬物の更なる説明は、本明細書の開示に見出される。

【0208】

特定の実施形態において、Ｗ^２は、本明細書に記載の結合剤である。特定の実施形態において、Ｗ^２は、本明細書に記載の１つ以上のｆＧｌｙ’残基を含む。特定の実施形態において、結合剤は、本明細書に記載のｆＧｌｙ’残基を介して、コンジュゲートの残りの部分に結合する。本主題のコンジュゲートにおける用途が見出される結合剤の更なる記載は、本明細書の開示に見出される。

【0209】

特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、リンカーＬを含む。リンカーは、目的の１つ以上の部分にコンジュゲート化部分（例えば、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分）を結合させるために利用され得る。リンカーは、任意の好都合な位置で（例えば、本明細書に記載されるように）コンジュゲート化部分に結合され得る（例えば、共有結合され得る）。例えば、リンカーは、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分を薬物に結合し得る。ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を使用して、リンカー（したがって薬物）をポリペプチド、例えば、本明細書に記載の抗体又は結合剤にコンジュゲートし得る。例えば、コンジュゲート化部分を使用して、リンカー（したがって薬物）を、ポリペプチドの修飾アミノ酸残基、例えば、本明細書に記載されるような、抗体又は結合剤のｆＧｌｙ残基にコンジュゲートし得る。

【0210】

特定の実施形態において、Ｌは、コンジュゲート化部分をＷ^１に結合し、したがって、コンジュゲート化部分は、リンカーＬを介してＷ^１に間接的に結合される。上述のように、Ｗ^１は、薬物であり、したがって、Ｌは、コンジュゲート化部分を薬物に結合し、例えば、コンジュゲート化部分は、リンカーＬを介して薬物に間接的に結合される。

【0211】

任意の好都合なリンカーが、主題のコンジュゲートで利用され得る。特定の実施形態において、Ｌは、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシルアミノ、アルキルアミド、置換アルキルアミド、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルキル又は置換アルキル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルケニル又は置換アルケニル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルキニル又は置換アルキニル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルコキシ又は置換アルコキシ基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アミノ又は置換アミノ基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、カルボキシル又はカルボキシルエステル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アシルアミノ基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルキルアミド又は置換アルキルアミド基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アリール又は置換アリール基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリール基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、シクロアルキル又は置換シクロアルキル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリル基を含む。

【0212】

特定の実施形態において、Ｌは、ポリマーを含む。例えば、ポリマーは、ポリエチレングリコール、メトキシポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールホモポリマー、ポリプロピレングリコールホモポリマー、エチレングリコールとプロピレングリコールとのコポリマー（例えば、ホモポリマー及びコポリマーは、非置換であるか、又はアルキル基で一端で置換されている）、ポリビニルアルコール、ポリビニルエチルエーテル、ポリビニルピロリドン、それらの組み合わせなどを含む、ポリアルキレングリコール及びその誘導体を含み得る。特定の実施形態において、ポリマーは、ポリアルキレングリコールである。特定の実施形態において、ポリマーは、ポリエチレングリコールである。以下でより詳細に説明されるコンジュゲート及び化合物において示されるように、他のリンカーもまた可能である。

【0213】

いくつかの実施形態において、Ｌは、以下の式：
－（Ｌ^１）_ａ－（Ｌ^２）_ｂ－（Ｌ^３）_ｃ－（Ｌ^４）_ｄ－（Ｌ^５）_ｅ－（Ｌ^６）_ｆ－、
によって記載されるリンカーであり、
式中、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｌ^４、Ｌ^５、及びＬ^６が、各々独立して、リンカーサブユニットであり、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆが、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆの合計は、１～６である。

【0214】

特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、１である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、２である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、３である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、４である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、５である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、６である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆは、各々１である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、及びｅは、各々１であり、ｆは、０である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、及びｄは、各々１であり、ｅ及びｆは、各々０である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、及びｃは、各々１であり、ｄ、ｅ、及びｆは、各々０である。特定の実施形態において、ａ及びｂは、各々１であり、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆは、各々０である。特定の実施形態において、ａは、１であり、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆは、各々０である。

【0215】

特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^１は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分（例えば、上の式（Ｉ）に示される通り）に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^２は、存在する場合、薬物に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^３は、存在する場合、薬物に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^４は、存在する場合、薬物に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^５は、存在する場合、薬物に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^６は、存在する場合、薬物に結合する。

【0216】

任意の好都合なリンカーサブユニットが、リンカーＬに利用され得る。目的のリンカーサブユニットとしては、限定されないが、ポリエチレングリコール、ポリエチレン及びポリアクリレート、アミノ酸残基（複数可）、炭水化物系ポリマー又はその炭水化物残基及びその誘導体、ポリヌクレオチド、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基などのポリマーの単位、それらの組み合わせ、並びにそれらの置換バージョンが挙げられる。いくつかの実施形態において、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｌ^４、Ｌ^５、及びＬ^６（存在する場合）の各々は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、及びジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）から独立して選択される１つ以上の基を含む。

【0217】

いくつかの実施形態において、Ｌ^１（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0218】

いくつかの実施形態において、Ｌ^２（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0219】

いくつかの実施形態において、Ｌ^３（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0220】

いくつかの実施形態において、Ｌ^４（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0221】

いくつかの実施形態において、Ｌ^５（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^５は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^５は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^５は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^５は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^５は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^５は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0222】

いくつかの実施形態において、Ｌ^６（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^６は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^６は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^６は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^６は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^６は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^６は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0223】

いくつかの実施形態において、Ｌは、－（Ｌ^１）_ａ－（Ｌ^２）_ｂ－（Ｌ^３）_ｃ－（Ｌ^４）_ｄ－（Ｌ^５）_ｅ－（Ｌ^６）_ｆ－を含むリンカーであり、式中、
－（Ｌ^１）_ａ－が、－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－であり、
－（Ｌ^２）_ｂ－が、－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－であり、
－（Ｌ^３）_ｃ－は、－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－であり、
－（Ｌ^４）_ｄ－は、－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－であり、
－（Ｌ^５）_ｅ－は、－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－であり、
－（Ｌ^６）_ｆ－は、－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６が、存在する場合、テザー基であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、及びＶ^６が、存在する場合、共有結合又は連結官能基であり、
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆが、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆの合計は、１～６である。

【0224】

上述のように、特定の実施形態において、Ｌ^１は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分に結合している（例えば、上の式（Ｉ）において示される通り）。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^１は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分に結合している（例えば、上の式（Ｉ）において示される通り）。特定の実施形態において、Ｖ^１は、薬物に結合している。特定の実施形態において、Ｌ^２は、存在する場合、薬物に結合している。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^２は、存在する場合、薬物に結合しているか、又はＶ^２は、存在する場合、薬物に結合している。特定の実施形態において、Ｌ^３は、存在する場合、薬物に結合している。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^３は、存在する場合、薬物に結合しているか、又はＶ^３は、存在する場合、薬物に結合している。特定の実施形態において、Ｌ^４は、存在する場合、薬物に結合している。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^４は、存在する場合、薬物に結合しているか、又はＶ^４は、存在する場合、薬物に結合している。特定の実施形態において、Ｌ^５は、存在する場合、薬物に結合している。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^５は、存在する場合、薬物に結合しているか、又はＶ^５は、存在する場合、薬物に結合している。特定の実施形態において、Ｌ^６は、存在する場合、薬物に結合している。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^６は、存在する場合、薬物に結合しているか、又はＶ^６は、存在する場合、薬物に結合している。

【0225】

テザー基、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６に関して、任意の好都合なテザー基が、本主題のリンカーで利用され得る。いくつかの実施形態において、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６は各々、共有結合、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシ（ＭＡＢＯ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＭＡＢＣ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシ（ＰＡＢＯ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢＣ）、パラ－アミノベンジル（ＰＡＢ）、パラ－アミノ－ベンジルアミノ（ＰＡＢＡ）、パラ－アミノ－フェニル（ＰＡＰ）、パラ－ヒドロキシ－フェニル（ＰＨＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから独立して選択される１つ以上の基を含み、式中、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｍが、１～１２の整数である。

【0226】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及び／又はＴ^６）は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル又は置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルを含む。特定の実施形態において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、又は１～８個の炭素原子、又は１～６個の炭素原子、又は１～５個の炭素原子、又は１～４個の炭素原子、又は１～３個の炭素原子を含む直鎖若しくは分岐鎖アルキル基である。いくつかの事例において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、アルキル又は置換アルキル、例えば、Ｃ_１－Ｃ_１２アルキル、又はＣ_１－Ｃ_１０アルキル、又はＣ_１－Ｃ_６アルキル、又はＣ_１－Ｃ_３アルキルであり得る。いくつかの事例において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、Ｃ_２－アルキルである。例えば、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、アルキレン又は置換アルキレン、例えば、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキレン、又はＣ_１－Ｃ_１０アルキレン、又はＣ_１－Ｃ_６アルキレン、又はＣ_１－Ｃ_３アルキレンであり得る。いくつかの事例において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、Ｃ_２－アルキレン（例えば、ＣＨ_２ＣＨ_２）である。

【0227】

特定の実施形態において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、又は１～８個の炭素原子、又は１～６個の炭素原子、又は１～５個の炭素原子、又は１～４個の炭素原子、又は１～３個の炭素原子を含む直鎖若しくは分岐鎖置換アルキル基である。いくつかの事例において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換アルキル、例えば、置換Ｃ_１－Ｃ_１２アルキル、又は置換Ｃ_１－Ｃ_１０アルキル、又は置換Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、又は置換Ｃ_１－Ｃ_３アルキルであり得る。いくつかの事例において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換Ｃ_２－アルキルである。例えば、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換アルキレン、例えば、置換Ｃ_１－Ｃ_１２アルキレン、又は置換Ｃ_１－Ｃ_１０アルキレン、又は置換Ｃ_１－Ｃ_６アルキレン、又は置換Ｃ_１－Ｃ_３アルキレンであり得る。いくつかの事例において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換Ｃ_２－アルキレンである。

【0228】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及び／又はＴ^６）は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、又は置換ヘテロシクリルを含む。いくつかの事例において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６）は、アリール又は置換アリールを含む。例えば、アリールは、フェニルであり得る。いくつかの場合において、置換アリールは、置換フェニルである。置換フェニルは、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される１つ以上の置換基で置換され得る。いくつかの事例において、置換アリールは、置換フェニルであり、置換基は、本明細書に記載の切断可能な部分（例えば、酵素的に切断可能な部分、例えば、グリコシド又はグリコシド誘導体）を含む。

【0229】

いくつかの事例において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及び／又はＴ^６）は、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリールを含む。いくつかの事例において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６）は、シクロアルキル又は置換シクロアルキルを含む。いくつかの事例において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６）は、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリルを含む。いくつかの事例において、置換ヘテロアリール、置換シクロアルキル、又は置換ヘテロシクリル上の置換基は、本明細書に記載の切断可能な部分（例えば、酵素的に切断可能な部分、例えば、グリコシド又はグリコシド誘導体）を含む。

【0230】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及び／又はＴ^６）は、エチレンジアミン（ＥＤＡ）部分、例えば、ＥＤＡ含有テザーを含む。特定の実施形態において、（ＥＤＡ）_ｗは、１つ以上のＥＤＡ部分を含み、例えば、式中、ｗは、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、又は６の整数である）。連結したエチレンジアミン（ＥＤＡ）部分は、任意選択的に、１つ以上の好都合な位置で、任意の好都合な置換基、例えば、アルキル、置換アルキル、アシル、置換アシル、アリール、又は置換アリールで置換されてもよい。特定の実施形態において、ＥＤＡ部分は、以下の構造：

【化3】

により説明され、
式中、ｙが、１～６、又は０若しくは１の整数であり、各Ｒ^１２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、ｙは、１、２、３、４、５、又は６である。特定の実施形態において、ｙは、１であり、ｒは、０である。特定の実施形態において、ｙは、１であり、ｒは、１である。特定の実施形態において、ｙは、２であり、ｒは、０である。特定の実施形態において、ｙは、２であり、ｒは、１である。特定の実施形態において、各Ｒ^１２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。特定の実施形態において、ＥＤＡの任意の２つの隣接するＲ^１２基は、環状に連結して、例えば、ピペラジニル環を形成してもよい。特定の実施形態において、ｙは、１であり、２つの隣接するＲ^１２基は、アルキル基であり、環状に連結してピペラジニル環を形成する。特定の実施形態において、ｙは、１であり、隣接するＲ^１２基は、水素、アルキル（例えば、メチル）、及び置換アルキル（例えば、低級アルキル－ＯＨ、例えば、エチル－ＯＨ又はプロピル－ＯＨ）から選択される。

【0231】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及び／又はＴ^６）は、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）部分（本明細書では、ピペリジン－４－アミノ、Ｐ４Ａとも称される）を含む。４ＡＰ部分は、任意選択的に、１つ以上の好都合な位置で、任意の好都合な置換基、例えば、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アシル、置換アシル、アリール、又は置換アリールで置換されてもよい。特定の実施形態において、４ＡＰ部分は、以下の構造：

【化4】

により説明され、
式中、Ｒ^１２は、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分（例えば、ポリエチレングリコール又は修飾ポリエチレングリコール）、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^１２は、ポリエチレングリコール部分である。特定の実施形態において、Ｒ^１２は、カルボキシ修飾ポリエチレングリコールである。

【0232】

特定の実施形態において、Ｒ^１２は、式（ＰＥＧ）_ｋによって説明されるポリエチレングリコール部分を含み、以下の構造：

【化5】

によって表され得、
式中、ｋは、１～２０、例えば、１～１８、又は１～１６、又は１～１４、又は１～１２、又は１～１０、又は１～８、又は１～６、又は１～４、又は１若しくは２、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０の整数である。いくつかの事例において、ｋは、２である。特定の実施形態において、Ｒ^１７は、ＯＨ、ＣＯＯＨ、又はＣＯＯＲから選択され、式中、Ｒは、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^１７は、ＣＯＯＨである。

【0233】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及び／又はＴ^６）は、（ＰＥＧ）_ｎを含み、式中、（ＰＥＧ）_ｎが、ポリエチレングリコール又は修飾ポリエチレングリコール連結単位である。特定の実施形態において、（ＰＥＧ）_ｎは、以下の構造：

【化6】

により説明され、
式中、ｎは、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０の整数である。いくつかの事例において、ｎは、２である。いくつかの事例において、ｎは、３である。いくつかの事例において、ｎは、６である。いくつかの事例において、ｎは、１２である。

【0234】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及び／又はＴ^６）は、（ＡＡ）_ｐを含み、式中、ＡＡが、アミノ酸残基である。任意の好都合なアミノ酸が利用され得る。目的のアミノ酸としては、限定されないが、Ｌ－アミノ酸及びＤ－アミノ酸、天然に存在するアミノ酸、例えば、２０個の主なアルファ－アミノ酸及びベータ－アラニンのうちのいずれか、天然に存在しないアミノ酸（例えば、アミノ酸類似体）、例えば、天然に存在しないアルファ－アミノ酸又は天然に存在しないベータ－アミノ酸などが挙げられる。特定の実施形態において、ｐは、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０などの整数である。特定の実施形態において、ｐは、１である。特定の実施形態において、ｐは、２である。

【0235】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及び／又はＴ^６）は、アミノ酸類似体を含む。アミノ酸類似体は、天然に存在するタンパク質（例えば、Ａｌａ又はＡ、Ｃｙｓ又はＣ、Ａｓｐ又はＤ、Ｇｌｕ又はＥ、Ｐｈｅ又はＦ、Ｇｌｙ又はＧ、Ｈｉｓ又はＨ、Ｉｌｅ又はＩ、Ｌｙｓ又はＫ、Ｌｅｕ又はＬ、Ｍｅｔ又はＭ、Ａｓｎ又はＮ、Ｐｒｏ又はＰ、Ｇｌｎ又はＱ、Ａｒｇ又はＲ、Ｓｅｒ又はＳ、Ｔｈｒ又はＴ、Ｖａｌ又はＶ、Ｔｒｐ又はＷ、Ｔｙｒ又はＹ）中に一般的に見出される１つ以上のアミノ酸と構造及び／又は全体的な形状が類似している化合物を含む。アミノ酸類似体はまた、修飾側鎖又は骨格を有する天然アミノ酸を含む。アミノ酸類似体はまた、天然に存在するＤ形態と同じ立体化学を有するアミノ酸類似体、並びにアミノ酸類似体のＬ形態を含む。いくつかの事例において、アミノ酸類似体は、１つ以上の天然アミノ酸の骨格構造及び／又は側鎖構造を共有し、その違い（複数可）は、分子中の１つ以上の修飾基である。そのような修飾としては、限定されないが、ある原子（例えばＮ）の関連する原子（例えばＳ）による置換、ある基（例えば、メチル、若しくはヒドロキシルなど）又はある原子（例えば、Ｃｌ、若しくはＢｒなど）の付加、ある基の欠失、共有結合の置換（例えば、単結合の二重結合による置換）、あるいはそれらの組み合わせが挙げられ得る。例えば、アミノ酸類似体は、α－ヒドロキシ酸、及びα－アミノ酸などを含み得る。アミノ酸類似体の例としては、スルホアラニンなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0236】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及び／又はＴ^６）は、式－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－によって記載される部分を含み、式中、ｍが０であるか、又はｎが、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１又は１２の整数である。特定の実施形態において、ｍは、１である。特定の実施形態において、ｍは、２である。特定の実施形態において、各Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0237】

特定の実施形態において、Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。これらの実施形態において、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールは、Ｒ^１３について上で説明された通りである。

【0238】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及び／又はＴ^６）は、メタ－アミノ－ベンジルオキシ（ＭＡＢＯ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＭＡＢＣ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシ（ＰＡＢＯ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢＣ）、パラ－アミノベンジル（ＰＡＢ）、パラ－アミノ－ベンジルアミノ（ＰＡＢＡ）、パラ－アミノ－フェニル（ＰＡＰ）、又はパラ－ヒドロキシ－フェニル（ＰＨＰ）を含む。

【0239】

いくつかの実施形態において、テザーは、以下の構造：

【化7】

によって記載されるＭＡＢＯ基を含む。

【0240】

いくつかの実施形態において、テザーは、以下の構造：

【化8】

によって記載されるＭＡＢＣ基を含む。

【0241】

いくつかの実施形態において、テザーは、以下の構造：

【化9】

によって記載されるＰＡＢＯ基を含む。

【0242】

いくつかの実施形態において、テザーは、以下の構造：

【化10】

によって記載されるＰＡＢＣ基を含む。

【0243】

いくつかの実施形態において、テザーは、以下の構造：

【化11】

によって記載されるＰＡＢ基を含む。

【0244】

いくつかの実施形態において、テザーは、以下の構造：

【化12】

によって記載されるＰＡＢＡ基を含む。

【0245】

いくつかの実施形態において、テザーは、以下の構造：

【化13】

によって記載されるＰＡＰ基を含む。

【0246】

いくつかの実施形態において、テザーは、以下の構造：

【化14】

によって記載されるＰＨＰ基を含む。

【0247】

特定の実施形態において、各Ｒ^１４は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。

【0248】

特定の実施形態において、Ｒ^１４は、水素である。特定の実施形態において、各Ｒ^１４は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0249】

上に示されるＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰテザー構造のいくつかの実施形態において、フェニル環は、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される１つ以上の追加の基で置換され得る。

【0250】

リンカーＬの特定の実施形態において、テザー基Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、又はＴ^６のうちの１つ以上は各々、任意選択的にグリコシド又はグリコシド誘導体で置換されている。特定の実施形態において、グリコシド又はグリコシド誘導体は、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択される。

【0251】

特定の実施形態において、上に示されるＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰテザー構造は、グリコシド及びグリコシド誘導体から選択される１つ以上の追加の基で置換され得る。例えば、上に示されるＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰテザー構造のいくつかの実施形態において、フェニル環は、グリコシド及びグリコシド誘導体から選択される１つ以上の追加の基で置換され得る。特定の実施形態において、グリコシド又はグリコシド誘導体は、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択される。

【0252】

例えば、いくつかの実施形態において、グリコシド又はグリコシド誘導体は、以下の構造：

【化15】

から選択される。

【0253】

連結官能基、Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、及びＶ^６に関して、任意の好都合な連結官能基が、リンカーＬで利用され得る。目的の連結官能基としては、限定されないが、アミノ、カルボニル、アミド、オキシカルボニル、カルボキシ、スルホニル、スルホキシド、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、チオ、オキシ、ホスホ、ホスホロアミデート、チオホスホライデートなどが挙げられる。いくつかの実施形態において、Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、及びＶ^６は、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－から選択され、式中、ｑは、１～６の整数である。特定の実施形態において、ｑは、１～６（例えば、１、２、３、４、５、又は６）の整数である。特定の実施形態において、ｑは、１である。特定の実施形態において、ｑは、２である。特定の実施形態において、ｑは、３である。特定の実施形態において、ｑは、４である。特定の実施形態において、ｑは、５である。特定の実施形態において、ｑは、６である。

【0254】

いくつかの実施形態において、各Ｒ^１５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。

【0255】

特定の実施形態において、Ｒ^１５は、水素である。特定の実施形態において、各Ｒ^１５は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0256】

特定の実施形態において、各Ｒ^１５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。これらの実施形態において、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルは、Ｒ^１５について上に記載されている通りである。

【0257】

特定の実施形態において、テザー基は、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、又はエステルを含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、アセタール基を含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、ヒドラジンを含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、ジスルフィドを含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、エステルを含む。

【0258】

上述のように、いくつかの実施形態において、Ｌは、－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－を含むリンカーであり、式中、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆが、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆの合計が、１～６である。

【0259】

いくつかの実施形態において、リンカーＬにおいて、
Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル及び置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルから選択され、
Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６が、各々独立して、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、ＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、ＰＨＰ、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、及びＶ^６が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－から選択され、式中、ｑが、１～６の整数であり、
（ＰＥＧ）_ｎが、

【化16】

であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡは、以下の構造：

【化17】

を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、

【化18】

であり、
ＡＡは、アミノ酸残基であり、ｐは、１～２０の整数であり、
各Ｒ^１２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アリール、及び置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ^１２基が、環状に連結され、ピペラジニル環を形成してもよく、
各Ｒ^１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。

【0260】

特定の実施形態において、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５及びＴ^６、並びにＶ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５及びＶ^６は、以下から選択され、
Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^２が、アミノ酸類似体であり、Ｖ^２が、－ＮＨ－であり、
Ｔ^３が、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^３が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^４が、ＡＡであり、Ｖ^４が、存在せず、
Ｔ^５が、ＰＡＢＣであり、Ｖ^５が、存在せず、
ｆが、０であるか、又は
Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^２が、４ＡＰであり、Ｖ^２が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^３が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^３が、－ＣＯ－であり、
ｄ、ｅ、及びｆが、各々０である。

【0261】

例えば、特定の実施形態において、式（Ｉ）のコンジュゲートは、以下から選択される構造を有する。

【化19】

【0262】

特定の実施形態において、リンカー構造の左側は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分に結合し、リンカー構造の右側は、例えば、上に示されるように、薬物Ｗ^１に結合している。

【0263】

特定の実施形態において、コンジュゲートは、上述のように、抗体及び薬物がリンカー（例えば、Ｌ）によって一緒に連結されている、抗体－薬物コンジュゲートである。いくつかの事例において、リンカーは、切断可能なリンカーである。切断可能なリンカーは、１つ以上の切断可能な部分を含むリンカーであり、切断可能な部分は、特定の条件下で解離することができ、したがって、切断可能なリンカーを２つ以上の分離可能な部分に分離することができる１つ以上の結合を含む。例えば、切断可能な部分は、１つ以上の共有結合を含んでもよく、１つ以上の共有結合は、特定の条件下で解離又は分離して、切断可能なリンカーを２つ以上の部分に分離することができる。そのような切断可能なリンカーは、抗体－薬物コンジュゲート中に含まれ得るため、その結果、適切な条件下で、切断可能なリンカーが切断され、その薬物についての所望の作用標的部位で抗体から薬物を分離するか、又は放出する。

【0264】

いくつかの事例において、切断可能なリンカーは、２つの切断可能な部分、例えば、第１の切断可能な部分及び第２の切断可能な部分を含む。切断可能な部分は、その薬物についての所望の作用標的部位で抗体から薬物を分離するためか、又は放出するために、両方の切断可能な部分の切断が必要となるように構成され得る。例えば、切断可能なリンカーの切断は、最初に２つの切断可能な部分のうちの１つを切断し、次いで２つの切断可能な部分の他方を切断することによって達成することができる。特定の実施形態において、切断可能なリンカーは、第１の切断可能な部分と、第１の切断可能な部分の切断を妨害する第２の切断可能な部分と、を含む。「切断を妨害する」とは、切断されていない第２の切断可能な部分の存在が、第１の切断可能な部分の切断の可能性を減少させるか、又は切断を実質的に阻害し、したがって、切断可能なリンカーの切断の量を実質的に減少させるか、又は切断を防止することを意味する。例えば、切断されていない第２の切断可能な部分の存在は、第１の切断可能な部分の切断を妨害することができる。第２の切断可能な部分の存在による第１の切断可能な部分の切断の妨害は、ひいては、抗体からの薬物の放出の量を実質的に減少させるか、又は放出を防止する。例えば、抗体－薬物コンジュゲートが、その薬物についての所望の作用標的部位にあるか、又はその付近にあるようになるまで、抗体からの薬物の早期放出を実質的に減少又は防止することができる。

【0265】

いくつかの場合において、第２の切断可能な部分が、第１の切断可能な部分の切断を妨害するため、切断可能なリンカーの切断は、最初に第２の切断可能な部分を切断し、次いで第１の切断可能な部分を切断することによって達成することができる。第２の切断可能な部分の切断は、第１の切断可能な部分の切断に対する妨害を減少させるか、又はなくすことができ、したがって、第１の切断可能な部分の切断を可能にする。第１の切断可能な部分の切断により、切断可能なリンカーが上述のように２つ以上の部分に解離又は分離して、抗体－薬物コンジュゲートから薬物を放出することができる。いくつかの事例において、第１の切断可能な部分の切断は、切断されていない第２の切断可能な部分の存在下では実質的に起こらない。実質的にとは、切断されていない第２の切断可能な部分の存在下で、第１の切断可能な部分の約１０％以下の切断が起こること、例えば、切断されていない第２の切断可能な部分の存在下で、第１の切断可能な部分の約９％以下、又は約８％以下、又は約７％以下、又は約６％以下、又は約５％以下、又は約４％以下、又は約３％以下、又は約２％以下、又は約１％以下、又は約０．５％以下、又は約０．１％以下の切断が起こることを意味する。

【0266】

別の言い方をすれば、第２の切断可能な部分は、第１の切断可能な部分を切断されないように保護することができる。例えば、切断されていない第２の切断可能な部分の存在は、第１の切断可能な部分を切断されないように保護することができ、したがって、抗体－薬物コンジュゲートが、その薬物についての所望の作用標的部位にあるか、又はその付近にあるようになるまで、抗体からの薬物の早期放出を実質的に減少又は防止することができる。したがって、第２の切断可能な部分の切断により、第１の切断可能な部分を露出させ（例えば、第１の切断可能な部分を脱保護し）、したがって、第１の切断可能な部分の切断を可能にし、切断可能なリンカーの切断が起こり、次いで、上述の薬物についての所望の作用標的部位で抗体から薬物を分離又は放出する。特定の事例において、第２の切断可能な部分の切断により、第１の切断可能な部分を、その後の切断に対して露出させるが、第２の切断可能な部分の切断は、切断可能なリンカーの中にはなく、それ自体は切断可能なリンカーの切断をもたらさない（例えば、切断可能なリンカーを切断するために、第１の切断可能な部分の切断が依然として必要である）。

【0267】

切断可能なリンカーに含まれる切断可能な部分は、各々、酵素的に切断可能な部分であり得る。例えば、第１の切断可能な部分は、第１の酵素的に切断可能な部分であってもよく、第２の切断可能な部分は、第２の酵素的に切断可能な部分であってもよい。酵素的に切断可能な部分は、酵素の酵素作用によって上述のように２つ以上の部分に分離することができる切断可能な部分である。酵素的に切断可能な部分は、酵素の酵素作用によって切断することができる任意の切断可能な部分、例えば、限定されないが、ペプチド、グリコシドなどであり得る。いくつかの事例において、酵素的に切断可能な部分を切断する酵素は、抗体－薬物コンジュゲートから放出される薬物の所望の作用標的部位などの所望の作用標的部位に存在する。いくつかの場合において、酵素的に切断可能な部分を切断する酵素は、全血液、血漿、又は血清などの他の領域に有意な量では存在しない。したがって、酵素的に切断可能な部分の切断は、実質的な切断が所望の作用部位で起こるように制御することができ、一方で、他の領域で、又は抗体－薬物コンジュゲートが所望の作用部位に到達する前に、切断は有意に起こらない。

【0268】

例えば、本明細書に記載されるように、本開示の抗体－薬物コンジュゲートは、がんの治療のために、例えば、がん細胞が存在する所望の作用部位へのがん療法薬の送達のために使用することができる。いくつかの場合において、酵素、例えば、プロテアーゼ酵素カテプシンＢは、がん細胞において過剰発現される、がんについてのバイオマーカーであり得る。がんにおける特定の酵素の過剰発現、したがって局在化を、本開示の抗体－薬物コンジュゲートの切断可能なリンカーに含まれる酵素的に切断可能な部分の文脈で使用して、所望の作用部位（例えば、がん（及び過剰発現した酵素）の部位）で薬物を特異的に放出させることができる。したがって、いくつかの実施形態において、酵素的に切断可能な部分は、がん細胞において過剰発現される酵素によって切断され得る切断可能な部分（例えば、ペプチド）である。例えば、酵素は、プロテアーゼ酵素カテプシンＢであり得る。したがって、いくつかの事例において、酵素的に切断可能な部分は、プロテアーゼ酵素（例えば、カテプシンＢ）によって切断され得る切断可能な部分（例えば、ペプチド）である。

【0269】

特定の実施形態において、酵素的に切断可能な部分は、ペプチドである。ペプチドは、切断可能なリンカーにおける使用に好適であり、かつ酵素の酵素作用によって切断することができる、任意のペプチドであり得る。酵素的に切断可能な部分として使用され得るペプチドの非限定的な例としては、例えば、Ｖａｌ－Ａｌａ、Ｐｈｅ－Ｌｙｓなどが挙げられる。例えば、上述の第１の切断可能な部分（例えば、第２の切断可能な部分によって早期切断から保護される切断可能な部分）は、ペプチドを含み得る。切断されていない第２の切断可能な部分の存在は、第１の切断可能な部分（ペプチド）を、プロテアーゼ酵素（例えば、カテプシンＢ）によって切断されないように保護することができ、したがって、抗体－薬物コンジュゲートが、その薬物についての所望の作用標的部位にあるか、又はその付近にあるようになるまで、抗体からの薬物の早期放出を実質的に減少又は防止することができる。いくつかの事例において、第１の切断可能な部分を含むペプチドのアミノ酸残基のうちの１つは、置換基に連結しているか、又は置換基を含み、置換基は、第２の切断可能な部分を含む。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、グリコシドを含む。

【0270】

いくつかの実施形態において、酵素的に切断可能な部分は、糖部分、例えば、グリコシド（又はグリコシル）である。いくつかの場合において、グリコシドは、グリコシドを含まない切断可能なリンカーと比較して、切断可能なリンカーの親水性の増加を促進することができる。グリコシドは、切断可能なリンカーにおける使用に好適であり、かつ酵素の酵素作用によって切断することができる、任意のグリコシド又はグリコシド誘導体であり得る。例えば、第２の切断可能な部分（例えば、第１の切断可能な部分を早期切断から保護する切断可能な部分）は、グリコシドであり得る。例えば、いくつかの実施形態において、第１の切断可能な部分は、ペプチドを含み、第２の切断可能な部分は、グリコシドを含む。特定の実施形態において、第２の切断可能な部分は、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択されるグリコシド又はグリコシド誘導体である。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、グルクロニドである。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、ガラクトシドである。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、グルコシドである。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、マンノシドである。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、フコシドである。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃである。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、Ｏ－ＧａｌＮＡｃである。

【0271】

グリコシドは、グリコシド結合を介して切断可能なリンカーに結合（例えば、共有結合）することができる。グリコシド結合は、様々なタイプの結合、例えば、限定されないが、Ｏ－グリコシド結合（Ｏ－グリコシド）、Ｎ－グリコシド結合（グリコシルアミン）、Ｓ－グリコシド結合（チオグリコシド）、又はＣ－グリコシド結合（Ｃ－グリコシド又はＣ－グリコシル）を介して、グリコシドを切断可能なリンカーに連結し得る。いくつかの事例において、グリコシド結合は、Ｏ－グリコシド結合（Ｏ－グリコシド）である。いくつかの場合において、グリコシドは、酵素によって結合する切断可能なリンカーから（例えば、グリコシド結合の酵素によって媒介される加水分解を介して）切断され得る。グリコシドを、グリコシドを切断可能なリンカーに結合するグリコシド結合の切断（加水分解）を実行することが可能な任意の好都合な酵素によって、切断可能なリンカーから除去又は切断することができる。グリコシドを切断可能なリンカーに結合するグリコシド結合の切断（加水分解）を媒介するために使用され得る酵素の一例は、グルクロニダーゼ、グリコシダーゼ、例えば、ガラクトシダーゼ、グルコシダーゼ、マンノシダーゼ、フコシダーゼなどである。他の好適な酵素も、グリコシドを切断可能なリンカーに結合するグリコシド結合の切断（加水分解）を媒介するために使用され得る。いくつかの場合において、グリコシドを切断可能なリンカーに結合するグリコシド結合の切断（加水分解）を媒介するために使用される酵素は、抗体－薬物コンジュゲートの薬物についての所望の作用部位に、又はその付近に見出される。例えば、酵素は、抗体－薬物コンジュゲートの薬物についての所望の作用部位に、又はその付近の細胞において見出される、リソソーム酵素、例えば、リソソームグリコシダーゼであり得る。いくつかの場合において、酵素は、第１の切断可能な部分の切断を媒介する酵素が見出される標的部位、又はその付近で見出される酵素である。

【0272】

特定の実施形態において、式（Ｉ）のコンジュゲートは、以下から選択される構造を有する。

【化20】

【0273】

上の説明及び構造において示される化学エンティティ、薬物、リンカー及びカップリング部分のうちのいずれも、主題のコンジュゲートにおける使用に適合され得る。

【0274】

ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物、及びコンジュゲートを生成するための方法に関する追加の開示は、米国特許第９，３１０，３７４号及び米国特許第９，４９３，４１３号に見出され、これらの各々の開示は、参照により本明細書に組み込まれる。切断可能なリンカーに関連する追加の開示は、２０２１年６月２４日に出願された米国仮特許出願第６３／２１４，５２５号に見出され、その開示は、参照により本明細書に組み込まれる。

【0275】

式（Ｉ）の特定の実施形態において、コンジュゲートは、式（Ｉａ）：

【化21】

のコンジュゲートであり、
式中、
Ｚが、ＣＲ^４又はＮであり、
Ｒ^１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ^２及びＲ^３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、又はＲ^２及びＲ^３が任意選択的に環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ^４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｌが、－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－を含むリンカーであり、式中、ａ、ｂ、ｃ及びｄが、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ及びｄの合計が、１～４であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３及びＴ^４が、各々独立して、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－、ピペリジン－４－アミノ（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、式中、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコール又は修飾ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基であり、式中、ｗが、１～２０の整数であり、ｎが、１～３０の整数であり、ｐが、１～２０の整数であり、ｈが、１～１２の整数であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、及びＶ^４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、式中、ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ^１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｗ^１が、薬物（又は活性薬剤）であり、
Ｗ^２が、本明細書に記載の結合剤である。

【0276】

特定の実施形態において、Ｚは、ＣＲ^４又はＮである。特定の実施形態において、Ｚは、ＣＲ^４である。特定の実施形態において、Ｚは、Ｎである。

【0277】

特定の実施形態において、Ｒ^１は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^１は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^１は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、アルキニル若しくは置換アルキニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0278】

特定の実施形態において、Ｒ^２及びＲ^３は、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、又はＲ^２及びＲ^３が任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。

【0279】

特定の実施形態において、各Ｒ^２は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^２は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^２は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0280】

特定の実施形態において、各Ｒ^３は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^３は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0281】

特定の実施形態において、Ｒ^２及びＲ^３は、任意選択的に環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^２及びＲ^３は、環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^２及びＲ^３は、環状に連結して、５員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^２及びＲ^３は、環状に連結して、６員のヘテロシクリルを形成する。

【0282】

特定の実施形態において、各Ｒ^４は、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。

【0283】

各Ｒ^４についての様々な可能性が、以下でより詳細に説明される。特定の実施形態において、Ｒ^４は、水素である。特定の実施形態において、各Ｒ^４は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^４は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩなどのハロゲンである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、Ｆである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、Ｃｌである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、Ｂｒである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、Ｉである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリール（例えば、フェニル又は置換フェニル）である。特定の実施形態において、Ｒ^４は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^４は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0284】

特定の実施形態において、Ｗ^１は、薬物又は活性薬剤である。本主題のコンジュゲートに好適な薬物及び活性薬剤の更なる記載は、本明細書の開示に見出される。

【0285】

特定の実施形態において、Ｗ^２は、本明細書に記載の結合剤である。例えば、いくつかの場合において、Ｗ^２は、抗体である。特定の実施形態において、Ｗ^２は、本明細書に記載の１つ以上のｆＧｌｙ’残基を含む。特定の実施形態において、結合剤は、本明細書に記載のｆＧｌｙ’残基を介して、コンジュゲートの残りの部分に結合する。本主題のコンジュゲートにおける用途が見出される結合剤及び抗体の更なる記載は、本明細書の開示に見出される。

【0286】

特定の実施形態において、式（Ｉａ）の化合物は、リンカーＬを含む。リンカーは、目的の１つ以上の部分及び／又は１つ以上のポリペプチドにカップリング部分を結合させるために利用され得る。いくつかの実施形態において、リンカーは、カップリング部分をポリペプチド又は化学エンティティのいずれかに結合する。リンカーは、任意の好都合な位置で（例えば、本明細書に記載の）カップリング部分に結合され得る（例えば、共有結合され得る）。例えば、リンカーは、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を薬物又は活性薬剤に結合し得る。ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を使用して、リンカー（したがって薬物又は活性薬剤）をポリペプチド、例えば、結合剤又は抗体にコンジュゲートし得る。例えば、カップリング部分を使用して、リンカー（したがって薬物又は活性薬剤）を、ポリペプチドのアミノ酸残基、例えば、結合剤又は抗体のｆＧｌｙ残基（ｒｅｓｉｄｅ）にコンジュゲートし得る。

【0287】

特定の実施形態において、Ｌは、カップリング部分をＷ^１に結合し、したがって、カップリング部分は、リンカーＬを介してＷ^１に間接的に結合される。上述のように、Ｗ^１は、薬物又は活性薬剤であり、したがって、Ｌは、カップリング部分を薬物又は活性薬剤に結合し、例えば、カップリング部分は、リンカーＬを介して薬物又は活性薬剤に間接的に結合される。

【0288】

任意の好都合なリンカーが、主題のコンジュゲート及び化合物において利用され得る。特定の実施形態において、Ｌは、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシルアミノ、アルキルアミド、置換アルキルアミド、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルキル又は置換アルキル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルケニル又は置換アルケニル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルキニル又は置換アルキニル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルコキシ又は置換アルコキシ基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アミノ又は置換アミノ基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、カルボキシル又はカルボキシルエステル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アシルアミノ基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アルキルアミド又は置換アルキルアミド基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、アリール又は置換アリール基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリール基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、シクロアルキル又は置換シクロアルキル基を含む。特定の実施形態において、Ｌは、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリル基を含む。

【0289】

特定の実施形態において、Ｌは、ポリマーを含む。例えば、ポリマーは、ポリエチレングリコール、メトキシポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールホモポリマー、ポリプロピレングリコールホモポリマー、エチレングリコールとプロピレングリコールとのコポリマー（例えば、ホモポリマー及びコポリマーは、非置換であるか、又はアルキル基で一端で置換されている）、ポリビニルアルコール、ポリビニルエチルエーテル、ポリビニルピロリドン、それらの組み合わせなどを含む、ポリアルキレングリコール及びその誘導体を含み得る。特定の実施形態において、ポリマーは、ポリアルキレングリコールである。特定の実施形態において、ポリマーは、ポリエチレングリコールである。以下でより詳細に説明されるコンジュゲート及び化合物において示されるように、他のリンカーもまた可能である。

【0290】

いくつかの実施形態において、Ｌは、式－（Ｌ^１）_ａ－（Ｌ^２）_ｂ－（Ｌ^３）_ｃ－（Ｌ^４）_ｄ－によって説明されるリンカーであり、式中、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３及びＬ^４は、各々独立して、リンカー単位であり、ａ、ｂ、ｃ、及びｄは、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ、及びｄの合計は、１～４である。

【0291】

特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ及びｄの合計は、１である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ及びｄの合計は、２である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ及びｄの合計は、３である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ及びｄの合計は、４である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、及びｄは、各々１である。特定の実施形態において、ａ、ｂ及びｃは、各々１であり、ｄは、０である。特定の実施形態において、ａ及びｂは、各々１であり、ｃ及びｄは、各々０である。特定の実施形態において、ａは、１であり、ｂ、ｃ及びｄは、各々０である。

【0292】

特定の実施形態において、Ｌ^１は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に結合している（例えば、上記の式（Ｉａ）に示される通り）。特定の実施形態において、Ｌ^２は、存在する場合、Ｗ^１に結合している。特定の実施形態において、Ｌ^３は、存在する場合、Ｗ^１に結合している。特定の実施形態において、Ｌ^４は、存在する場合、Ｗ^１に結合している。

【0293】

任意の好都合なリンカー単位が、主題のリンカーで利用され得る。目的のリンカー単位としては、限定されないが、ポリエチレングリコール、ポリエチレン及びポリアクリレート、アミノ酸残基（複数可）、炭水化物系ポリマー又は炭水化物残基及びそれらの誘導体、ポリヌクレオチド、アルキル基、アリール基、複素環式基、それらの組み合わせ、並びにそれらの置換型などのポリマーの単位が挙げられる。いくつかの実施形態において、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、及びＬ^４（存在する場合）の各々は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、及びジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）から独立して選択される１つ以上の基を含む。

【0294】

いくつかの実施形態において、Ｌ^１（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0295】

いくつかの実施形態において、Ｌ^２（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0296】

いくつかの実施形態において、Ｌ^３（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0297】

いくつかの実施形態において、Ｌ^４（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0298】

いくつかの実施形態において、Ｌは、－（Ｌ^１）_ａ－（Ｌ^２）_ｂ－（Ｌ^３）_ｃ－（Ｌ^４）_ｄ－を含むリンカーであり、式中、
－（Ｌ^１）_ａ－が、－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－であり、
－（Ｌ^２）_ｂ－が、－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－であり、
－（Ｌ^３）_ｃ－が、－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－であり、
－（Ｌ^４）_ｄ－が、－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、及びＴ^４は、存在する場合、テザー基であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、及びＶ^４は、存在する場合、共有結合又は連結官能基であり、
ａ、ｂ、ｃ及びｄが、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ及びｄの合計が、１～４である。

【0299】

上述のように、特定の実施形態において、Ｌ^１は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に結合している（例えば、上記の式（Ｉａ）に示される通り）。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^１は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に結合している（例えば、上記の式（Ｉａ）に示される通り）。特定の実施形態において、Ｖ^１は、Ｗ^１（薬物又は活性薬剤）に結合している。特定の実施形態において、Ｌ^２は、存在する場合、Ｗ^１に結合している。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^２は、存在する場合、Ｗ^１に結合しているか、又は、Ｖ^２は、存在する場合、Ｗ^１に結合している。特定の実施形態において、Ｌ^３は、存在する場合、Ｗ^１に結合している。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^３は、存在する場合、Ｗ^１に結合しているか、又は、Ｖ^３は、存在する場合、Ｗ^１に結合している。特定の実施形態において、Ｌ^４は、存在する場合、Ｗ^１に結合している。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^４は、存在する場合、Ｗ^１に結合しているか、又は、Ｖ^４は、存在する場合、Ｗ^１に結合している。

【0300】

テザー基、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、及びＴ^４に関して、任意の好都合なテザー基が、主題のリンカーで利用され得る。いくつかの実施形態において、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、及びＴ^４は、各々、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－、ピペリジン－４－アミノ（４ＡＰ）、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、及びエステルから独立して選択される１つ以上の基を含み、式中、ｗは、１～２０の整数であり、ｎは、１～３０の整数であり、ｐは、１～２０の整数であり、ｈは、１～１２の整数である。

【0301】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、及び／又はＴ^４）は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル又は置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルを含む。特定の実施形態において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、又は１～８個の炭素原子、又は１～６個の炭素原子、又は１～５個の炭素原子、又は１～４個の炭素原子、又は１～３個の炭素原子を含む直鎖若しくは分岐鎖アルキル基である。いくつかの事例において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、アルキル又は置換アルキル、例えば、Ｃ_１－Ｃ_１２アルキル、又はＣ_１－Ｃ_１０アルキル、又はＣ_１－Ｃ_６アルキル、又はＣ_１－Ｃ_３アルキルであり得る。いくつかの事例において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、Ｃ_２－アルキルである。例えば、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、アルキレン又は置換アルキレン、例えば、Ｃ_１－Ｃ_１２アルキレン、又はＣ_１－Ｃ_１０アルキレン、又はＣ_１－Ｃ_６アルキレン、又はＣ_１－Ｃ_３アルキレンであり得る。いくつかの事例において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、Ｃ_２－アルキレンである。

【0302】

特定の実施形態において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、又は１～８個の炭素原子、又は１～６個の炭素原子、又は１～５個の炭素原子、又は１～４個の炭素原子、又は１～３個の炭素原子を含む直鎖若しくは分岐鎖置換アルキル基である。いくつかの事例において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換アルキル、例えば、置換Ｃ_１－Ｃ_１２アルキル、又は置換Ｃ_１－Ｃ_１０アルキル、又は置換Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、又は置換Ｃ_１－Ｃ_３アルキルであり得る。いくつかの事例において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換Ｃ_２－アルキルである。例えば、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換アルキレン、例えば、置換Ｃ_１－Ｃ_１２アルキレン、又は置換Ｃ_１－Ｃ_１０アルキレン、又は置換Ｃ_１－Ｃ_６アルキレン、又は置換Ｃ_１－Ｃ_３アルキレンであり得る。いくつかの事例において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換Ｃ_２－アルキレンである。

【0303】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、及び／又はＴ^４）は、エチレンジアミン（ＥＤＡ）部分、例えば、ＥＤＡ含有テザーを含む。特定の実施形態において、（ＥＤＡ）_ｗは、１つ以上のＥＤＡ部分を含み、例えば、式中、ｗは、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、又は６の整数である）。連結したエチレンジアミン（ＥＤＡ）部分は、任意選択的に、１つ以上の好都合な位置で、任意の好都合な置換基、例えば、アルキル、置換アルキル、アシル、置換アシル、アリール、又は置換アリールで置換されてもよい。特定の実施形態において、ＥＤＡ部分は、以下の構造：

【化22】

により説明され、
式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、各Ｒ^１２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、ｙは、１、２、３、４、５、又は６である。特定の実施形態において、ｙは、１であり、ｒは、０である。特定の実施形態において、ｙは、１であり、ｒは、１である。特定の実施形態において、ｙは、２であり、ｒは、０である。特定の実施形態において、ｙは、２であり、ｒは、１である。特定の実施形態において、各Ｒ^１２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。特定の実施形態において、ＥＤＡの任意の２つの隣接するＲ^１２基は、環状に連結して、例えば、ピペラジニル環を形成してもよい。特定の実施形態において、ｙは、１であり、２つの隣接するＲ^１２基は、アルキル基であり、環状に連結してピペラジニル環を形成する。特定の実施形態において、ｙは、１であり、隣接するＲ^１２基は、水素、アルキル（例えば、メチル）、及び置換アルキル（例えば、低級アルキル－ＯＨ、例えば、エチル－ＯＨ又はプロピル－ＯＨ）から選択される。

【0304】

特定の実施形態において、テザー基は、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）部分（ピペリジン－４－アミノ、Ｐ４Ａとも称される）を含む。４ＡＰ部分は、任意選択的に、１つ以上の好都合な位置で、任意の好都合な置換基、例えば、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アシル、置換アシル、アリール、又は置換アリールで置換されてもよい。特定の実施形態において、４ＡＰ部分は、以下の構造：

【化23】

により説明され、
式中、Ｒ^１２は、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分（例えば、ポリエチレングリコール又は修飾ポリエチレングリコール）、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^１２は、ポリエチレングリコール部分である。特定の実施形態において、Ｒ^１２は、カルボキシ修飾ポリエチレングリコールである。

【0305】

特定の実施形態において、Ｒ^１２は、式（ＰＥＧ）_ｋにより説明されるポリエチレングリコール部分を含み、これは、以下の構造：

【化24】

により表され得、
式中、ｋは、１～２０、例えば、１～１８、又は１～１６、又は１～１４、又は１～１２、又は１～１０、又は１～８、又は１～６、又は１～４、又は１若しくは２、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０の整数である。いくつかの事例において、ｋは、２である。特定の実施形態において、Ｒ^１７は、ＯＨ、ＣＯＯＨ、又はＣＯＯＲから選択され、式中、Ｒは、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^１７は、ＣＯＯＨである。

【0306】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、及び／又はＴ^４）は、（ＰＥＧ）_ｎを含み、式中、（ＰＥＧ）_ｎは、ポリエチレングリコール又は修飾ポリエチレングリコール連結単位である。特定の実施形態において、（ＰＥＧ）_ｎは、以下の構造：

【化25】

により説明され、
式中、ｎは、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０の整数である。いくつかの事例において、ｎは、２である。いくつかの事例において、ｎは、３である。いくつかの事例において、ｎは、６である。いくつかの事例において、ｎは、１２である。

【0307】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、及び／又はＴ^４）は、（ＡＡ）_ｐを含み、ＡＡは、アミノ酸残基である。任意の好都合なアミノ酸が利用され得る。目的のアミノ酸としては、限定されないが、Ｌ－アミノ酸及びＤ－アミノ酸、天然に存在するアミノ酸、例えば、２０個の主なアルファ－アミノ酸及びベータ－アラニンのうちのいずれか、天然に存在しないアミノ酸（例えば、アミノ酸類似体）、例えば、天然に存在しないアルファ－アミノ酸又は天然に存在しないベータ－アミノ酸などが挙げられる。特定の実施形態において、ｐは、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０などの整数である。特定の実施形態において、ｐは、１である。特定の実施形態において、ｐは、２である。

【0308】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、及び／又はＴ^４）は、式－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－により説明される部分を含み、式中、ｈは、０であるか、又は、ｎは、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１又は１２などの整数である。特定の実施形態において、ｈは、１である。特定の実施形態において、ｈは、２である。特定の実施形態において、各Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0309】

特定の実施形態において、Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。これらの実施形態において、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールは、Ｒ^１３について上で説明された通りである。

【0310】

連結官能基、Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、及びＶ^４に関して、任意の好都合な連結官能基が、主題のリンカーで利用され得る。目的の連結官能基としては、限定されないが、アミノ、カルボニル、アミド、オキシカルボニル、カルボキシ、スルホニル、スルホキシド、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、チオ、オキシ、ホスホ、ホスホロアミデート、チオホスホライデートなどが挙げられる。いくつかの実施形態において、Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、及びＶ^４は、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－から選択され、式中、ｑは、１～６の整数である。特定の実施形態において、ｑは、１～６（例えば、１、２、３、４、５、又は６）の整数である。特定の実施形態において、ｑは、１である。特定の実施形態において、ｑは、２である。

【0311】

いくつかの実施形態において、各Ｒ^１５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。

【0312】

各Ｒ^１５についての様々な可能性が、以下でより詳細に説明される。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、水素である。特定の実施形態において、各Ｒ^１５は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0313】

特定の実施形態において、各Ｒ^１５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。これらの実施形態において、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル置換基は、Ｒ^１５について上で説明された通りである。

【0314】

特定の実施形態において、テザー基は、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、又はエステルを含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、アセタール基を含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、ジスルフィドを含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、ヒドラジンを含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、エステルを含む。

【0315】

上述のように、いくつかの実施形態において、Ｌは、－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－を含むリンカーであり、式中、ａ、ｂ、ｃ及びｄは、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ及びｄの合計は、１～４である。

【0316】

いくつかの実施形態において、主題のリンカー中、
Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル及び置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルから選択され、
Ｔ^２、Ｔ^３及びＴ^４は、各々独立して、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、及びＶ^４は、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－から選択され、式中、ｑは、１～６の整数であり、
（ＰＥＧ）_ｎが、

【化26】

であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡは、以下の構造：

【化27】

を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、

【化28】

であり、
ＡＡが、アミノ酸残基であり、式中、ｐが、１～２０の整数であり、
各Ｒ^１５及びＲ^１２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ^１２基は、環状に連結して、ピペラジニル環を形成してもよく、
Ｒ^１３が、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。

【0317】

特定の実施形態において、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、及びＴ^４、並びにＶ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、及びＶ^４は、以下の表、例えば、以下の表（表Ａ）の１つの列から選択される。

【表4】

【0318】

特定の実施形態において、Ｌは、－（Ｌ^１）_ａ－（Ｌ^２）_ｂ－（Ｌ^３）_ｃ－（Ｌ^４）_ｄ－を含むリンカーであり、式中、－（Ｌ^１）_ａ－は、－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－であり、－（Ｌ^２）_ｂ－は、－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－であり、－（Ｌ^３）_ｃ－は、－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－であり、－（Ｌ^４）_ｄ－は、－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－である。

【0319】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^２は、－ＮＲ^１５－であり、Ｔ^３は、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0320】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＥＤＡ）_ｗであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈであり、Ｖ^３は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^４は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^４は、－ＣＯ－である。

【0321】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^２は、－ＮＲ^１５－であり、Ｔ^３は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0322】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^２は、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、存在せず、Ｖ^３は、存在せず、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0323】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^２は、存在せず、Ｔ^３は、存在せず、Ｖ^３は、存在せず、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0324】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^２は、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^２は、－ＮＲ^１５－であり、Ｔ^３は、存在せず、Ｖ^３は、存在せず、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0325】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^２は、－ＮＲ^１５－であり、Ｔ^３は、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^３は、－ＮＲ^１５－であり、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0326】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＥＤＡ）_ｗであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、存在せず、Ｖ^３は、存在せず、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0327】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^２は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^２は、－ＮＲ^１５－であり、Ｔ^３は、存在せず、Ｖ^３は、存在せず、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0328】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^２は、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、（ＥＤＡ）_ｗであり、Ｖ^３は、存在せず、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0329】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＥＤＡ）_ｗであり、Ｖ^２は、存在せず、Ｔ^３は、存在せず、Ｖ^３は、存在せず、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0330】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^２は、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^３は、存在せず、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0331】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＥＤＡ）_ｗであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈであり、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、（ＡＡ）_ｐアルキルであり、Ｖ^４は、存在しない。

【0332】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^２は、－ＮＲ^１５－であり、Ｔ^３は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^４は、存在しない。

【0333】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^２は、－ＮＲ^１５－であり、Ｔ^３は、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^４は、存在しない。

【0334】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^２は、－ＮＲ^１１－であり、Ｔ^３は、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^３は、－ＳＯ_２－であり、Ｔ^４は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^４は、存在しない。

【0335】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＥＤＡ）_ｗであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈであり、Ｖ^３は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^４は、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^４は、－ＣＯ－である。

【0336】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、存在せず、Ｖ^３は、存在せず、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0337】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^２は、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^２は、－ＮＲ^１５－であり、Ｔ^３は、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0338】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＳＯ_２－であり、Ｔ^２は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、存在せず、Ｖ^３は、存在せず、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0339】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^２は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^２は、存在せず、Ｔ^３は、（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈであり、Ｖ^３は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0340】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^２は、－ＮＲ^１５－であり、Ｔ^３は、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^４は、－ＮＲ^１５－である。

【0341】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^２は、－ＮＲ^１５－であり、Ｔ^３は、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^３は、－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－であり、Ｔ^４は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^４は、存在しない。

【0342】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＥＤＡ）_ｗであり、Ｖ^２は、存在せず、Ｔ^３は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^３は、存在せず、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0343】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＥＤＡ）_ｗであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈであり、Ｖ^３は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^４は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^４は、－ＣＯ（ＡＡ）_ｐ－である。

【0344】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^２は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^２は、－ＮＲ^１５－であり、Ｔ^３は、存在せず、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0345】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^２は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^２は、－ＮＲ^１５－であり、Ｔ^３は、存在せず、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^４は、－ＮＲ^１５－である。

【0346】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、（ＥＤＡ）_ｗであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈであり、Ｖ^３は、－ＣＯＮＲ^１５－であり、Ｔ^４は、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^４は、－ＣＯ（ＡＡ）_ｐ－である。

【0347】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、４ＡＰであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、（ＡＡ）_ｐであり、Ｖ^４は、存在しない。

【0348】

特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、４ＡＰであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。

【0349】

特定の実施形態において、リンカーは、以下の構造のうちの１つにより説明される。

【化29-1】

【表29-2】

【表29-3】

【0350】

上で描画されたリンカー構造の特定の実施形態において、各ｆは、独立して、０又は１～１２の整数であり、各ｙは、独立して、０又は１～２０の整数であり、各ｎは、独立して、０又は１～３０の整数であり、各ｐは、独立して、０又は１～２０の整数であり、各ｈは、独立して、０又は１～１２の整数であり、各Ｒは、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルであり、各Ｒ’は、独立して、Ｈ、アミノ酸の側鎖、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルである。上で描画されたリンカー構造の特定の実施形態において、各ｆは、独立して、０、１、２、３、４、５、又は６であり、各ｙは、独立して、０、１、２、３、４、５、又は６であり、各ｎは、独立して、０、１、２、３、４、５、又は６であり、各ｐは、独立して、０、１、２、３、４、５、又は６であり、各ｈは、独立して、０、１、２、３、４、５、又は６である。上で描画されたリンカー構造の特定の実施形態において、各Ｒは、独立して、Ｈ、メチル、又は－（ＣＨ_２）_ｍ－ＯＨであり、式中、ｍは、１、２、３、又は４（例えば、２）である。

【0351】

リンカーＬの特定の実施形態において、Ｔ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、４ＡＰであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。特定の実施形態において、Ｔ^１は、エチレンであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、４ＡＰであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、エチレンであり、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在しない。特定の実施形態において、Ｔ^１は、エチレンであり、Ｖ^１は、－ＣＯ－であり、Ｔ^２は、４ＡＰであり、Ｖ^２は、－ＣＯ－であり、Ｔ^３は、エチレンであり、Ｖ^３は、－ＣＯ－であり、Ｔ^４は、存在せず、Ｖ^４は、存在せず、Ｔ^２（例えば、４ＡＰ）は、以下の構造：

【化30】

を有し、
式中、
Ｒ^１２は、ポリエチレングリコール部分（例えば、ポリエチレングリコール又は修飾ポリエチレングリコール）である。

【0352】

特定の実施形態において、リンカーＬは、以下の構造：

【化31】

を含み、
式中、
各ｆが、独立して、１～１２の整数であり、
ｎが、１～３０の整数である。

【0353】

特定の実施形態において、ｆは、１である。特定の実施形態において、ｆは、２である。特定の実施形態において、１つのｆが２であり、１つのｆが１である。

【0354】

特定の実施形態において、ｎは、１である。

【0355】

特定の実施形態において、上記リンカー構造の左側は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に結合しており、上記リンカー構造の右側は、薬物又は活性薬剤に結合している。

【0356】

上記構造において示される化学エンティティ、リンカー及びカップリング部分のうちのいずれも、主題の化合物及びコンジュゲートにおける使用に適合され得る。

【0357】

ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物、及びコンジュゲートを生成するための方法に関する追加の開示は、米国特許第９，３１０，３７４号及び米国特許第９，４９３，４１３号に見出され、これらの各々の開示は、参照により本明細書に組み込まれる。

【0358】

式（ＩＩ）のコンジュゲート
本開示の態様は、式（ＩＩ）：

【化32】

のコンジュゲートを含み、
式中、
Ｚ^１、Ｚ^２、Ｚ^３及びＺ^４が、各々独立して、ＣＲ^２４、Ｎ及びＣ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２から選択され、少なくとも１つのＺ^１、Ｚ^２、Ｚ^３及びＺ^４が、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２であり、
Ｒ^２１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ^２２及びＲ^２３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、又はＲ^２２及びＲ^２３が任意選択的に環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ^２４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｌ^Ａが、第１のリンカーであり、
Ｌ^Ｂが、第２のリンカーであり、
Ｗ^１１が、第１の薬物（又は活性薬剤）であり、
Ｗ^１２が、第２の薬物（又は活性薬剤）であり、
Ｗ^１３が、本明細書に記載の結合剤である。

【0359】

式（ＩＩ）のコンジュゲートに関連する置換基は、以下により詳細に記載される。

【0360】

特定の実施形態において、Ｚ^１、Ｚ^２、Ｚ^３及びＺ^４が、各々独立して、ＣＲ^２４、Ｎ及びＣ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２から選択され、少なくとも１つのＺ^１、Ｚ^２、Ｚ^３及びＺ^４が、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２である。特定の実施形態において、Ｚ^１は、ＣＲ^２４である。特定の実施形態において、Ｚ^１は、Ｎである。特定の実施形態において、Ｚ^１は、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２である。特定の実施形態において、Ｚ^２は、ＣＲ^２４である。特定の実施形態において、Ｚ^２は、Ｎである。特定の実施形態において、Ｚ^２は、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２である。特定の実施形態において、Ｚ^３は、ＣＲ^２４である。特定の実施形態において、Ｚ^３は、Ｎである。特定の実施形態において、Ｚ^３は、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２である。特定の実施形態において、Ｚ^４は、ＣＲ^２４である。特定の実施形態において、Ｚ^４は、Ｎである。特定の実施形態において、Ｚ^４は、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２である。

【0361】

様々なＺ^１、Ｚ^２、Ｚ^３、及びＺ^４の組み合わせが可能である。例えば、いくつかの事例において、Ｚ^１は、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２であり、Ｚ^２は、ＣＲ^２４であり、Ｚ^３は、ＣＲ^２４であり、Ｚ^４は、ＣＲ^２４である。いくつかの事例において、Ｚ^１は、ＣＲ^２４であり、Ｚ^２は、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２であり、Ｚ^３は、ＣＲ^２４であり、Ｚ^４は、ＣＲ^２４である。いくつかの事例において、Ｚ^１は、ＣＲ^２４であり、Ｚ^２は、ＣＲ^２４であり、Ｚ^３は、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２であり、Ｚ^４は、ＣＲ^２４である。いくつかの事例において、Ｚ^１は、ＣＲ^２４であり、Ｚ^２は、ＣＲ^２４であり、Ｚ^３は、ＣＲ^２４であり、Ｚ^４は、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２である。

【0362】

特定の実施形態において、Ｒ^２１は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^２１は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^２１は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^２１は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２１は、アルキニル若しくは置換アルキニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２１は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^２１は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^２１は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^２１は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0363】

特定の実施形態において、Ｒ^２２及びＲ^２３は、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、又はＲ^２２及びＲ^２３が任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。

【0364】

特定の実施形態において、各Ｒ^２２は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^２２は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0365】

特定の実施形態において、各Ｒ^２３は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^２３は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0366】

特定の実施形態において、Ｒ^２２及びＲ^２３の両方が、メチルである。

【0367】

特定の実施形態において、Ｒ^２２及びＲ^２３は、任意選択的に環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^２２及びＲ^２３は、環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^２２及びＲ^２３は、環状に連結して、５員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^２２及びＲ^２３は、環状に連結して、６員のヘテロシクリルを形成する。

【0368】

特定の実施形態において、各Ｒ^２４は、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。

【0369】

各Ｒ^２４についての様々な可能性が、以下でより詳細に説明される。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、水素である。特定の実施形態において、各Ｒ^２４は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩなどのハロゲンである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、Ｆである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、Ｃｌである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、Ｂｒである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、Ｉである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリール（例えば、フェニル又は置換フェニル）である。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^２４は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0370】

特定の実施形態において、Ｌ^Ａは、第１のリンカーである。本開示のコンジュゲートで使用され得るリンカーの例は、以下により詳細に記載される。

【0371】

特定の実施形態において、Ｌ^Ｂは、第２のリンカーである。本開示のコンジュゲートで使用され得るリンカーの例は、以下により詳細に記載される。

【0372】

特定の実施形態において、Ｗ^１１は、第１の薬物（又は第１の活性薬剤）である。本開示のコンジュゲートに使用され得る薬物及び活性薬剤の例は、以下により詳細に記載される。

【0373】

特定の実施形態において、Ｗ^１２は、第２の薬物（又は第２の活性薬剤）である。本開示のコンジュゲートに使用され得る薬物及び活性薬剤の例は、以下により詳細に記載される。

【0374】

特定の実施形態において、Ｗ^１３は、ポリペプチド（例えば、本明細書に記載の抗体又は結合剤）である。特定の実施形態において、Ｗ^１３は、本明細書に記載の１つ以上のｆＧｌｙ’残基を含む。特定の実施形態において、ポリペプチドは、本明細書に記載のｆＧｌｙ’残基を介して、コンジュゲートの残りの部分に結合する。本開示のコンジュゲートで使用され得るポリペプチド（例えば、抗体及び結合剤）の例は、以下により詳細に記載される。いくつかの事例において、Ｗ^１３は、抗体（例えば、本明細書に記載の抗体）である。いくつかの事例において、Ｗ^１３は、結合剤（例えば、本明細書に記載の結合剤）である。

【0375】

特定の実施形態において、式（ＩＩ）のコンジュゲートは、第１のリンカー、Ｌ^Ａを含む。第１のリンカー、Ｌ^Ａは、コンジュゲート化部分を介して、目的の第１の部分（例えば、第１の薬物又は活性薬剤）をポリペプチド（例えば、抗体）に結合するために利用され得る。第１のリンカー、Ｌ^Ａは、（例えば、本明細書に記載されるように）コンジュゲート化部分に結合（例えば、共有結合）し得る。例えば、第１のリンカー、Ｌ^Ａは、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分を第１の薬物に結合し得る。ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分を使用して、第１のリンカー、Ｌ^Ａ（したがって第１の薬物）をポリペプチド、例えば、抗体にコンジュゲート化し得る。

【0376】

例えば、上の式（ＩＩ）に示されるように、Ｌ^Ａは、コンジュゲート化部分を介してＷ^１３に結合し、したがって、Ｗ^１３は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分を介してリンカーＬ^Ａに間接的に結合する。上述のように、Ｗ^１３は、ポリペプチド（例えば、本明細書に記載の抗体又は結合剤）であり、したがって、Ｌ^Ａは、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分を介してポリペプチド（例えば、本明細書に記載の抗体又は結合剤）に結合し、例えば、リンカーＬ^Ａは、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分を介してポリペプチド（例えば、本明細書に記載の抗体又は結合剤）に間接的に結合する。

【0377】

任意の好都合なリンカーが、本主題のコンジュゲート及び化合物中の第１のリンカーＬ^Ａのために利用され得る。特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシルアミノ、アルキルアミド、置換アルキルアミド、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される基を含み得る。特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、アルキル又は置換アルキル基を含み得る。特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、アルケニル又は置換アルケニル基を含み得る。特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、アルキニル又は置換アルキニル基を含み得る。特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、アルコキシ又は置換アルコキシ基を含み得る。特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、アミノ又は置換アミノ基を含み得る。特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、カルボキシル又はカルボキシルエステル基を含み得る。特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、アシルアミノ基を含み得る。特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、アルキルアミド又は置換アルキルアミド基を含み得る。特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、アリール又は置換アリール基を含み得る。特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリール基を含み得る。特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、シクロアルキル又は置換シクロアルキル基を含み得る。特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリル基を含み得る。

【0378】

特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａは、ポリマーを含み得る。例えば、ポリマーは、ポリエチレングリコール、メトキシポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールホモポリマー、ポリプロピレングリコールホモポリマー、エチレングリコールとプロピレングリコールとのコポリマー（例えば、ホモポリマー及びコポリマーは、非置換であるか、又はアルキル基で一端で置換されている）、ポリビニルアルコール、ポリビニルエチルエーテル、ポリビニルピロリドン、それらの組み合わせなどを含む、ポリアルキレングリコール及びその誘導体を含み得る。特定の実施形態において、ポリマーは、ポリアルキレングリコールである。特定の実施形態において、ポリマーは、ポリエチレングリコールである。以下でより詳細に説明されるコンジュゲート及び化合物において示されるように、他のリンカーもまた可能である。

【0379】

いくつかの実施形態において、Ｌ^Ａは、以下の式：
－（Ｌ^１）_ａ－（Ｌ^２）_ｂ－（Ｌ^３）_ｃ－（Ｌ^４）_ｄ－（Ｌ^５）_ｅ－（Ｌ^６）_ｆ－、
により説明された第１のリンカーであり、
式中、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｌ^４、Ｌ^５及びＬ^６は、各々独立して、リンカーサブユニットであり、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆは、各々独立して、０又は１である。

【0380】

特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、０～６である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、０である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、１である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、２である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、３である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、４である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、５である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、６である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆは、各々１である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、及びｅは、各々１であり、ｆは、０である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、及びｄは、各々１であり、ｅ及びｆは、各々０である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、及びｃは、各々１であり、ｄ、ｅ、及びｆは、各々０である。特定の実施形態において、ａ及びｂは、各々１であり、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆは、各々０である。特定の実施形態において、ａは、１であり、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆは、各々０である。

【0381】

特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^１は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分（例えば、上の式（Ｉ）に示される通り）に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^２は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤Ｗ^１１に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^３は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤Ｗ^１１に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^４は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤Ｗ^１１に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^５は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤Ｗ^１１に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^６は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤Ｗ^１１に結合する。

【0382】

任意の好適なリンカーサブユニットが、第１のリンカーＬ^Ａに利用され得る。目的のリンカーサブユニットとしては、ポリエチレングリコール、ポリエチレン及びポリアクリレート、アミノ酸残基（複数可）、炭水化物系ポリマー又はその炭水化物残基及びその誘導体、ポリヌクレオチド、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基などのポリマーの単位、それらの組み合わせ、並びにそれらの置換態様が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｌ^４、Ｌ^５、及びＬ^６（存在する場合）の各々は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、及びジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）から独立して選択される１つ以上の基を含む。

【0383】

いくつかの実施形態において、Ｌ^１（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0384】

いくつかの実施形態において、Ｌ^２（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^２は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0385】

いくつかの実施形態において、Ｌ^３（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^３は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0386】

いくつかの実施形態において、Ｌ^４（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^４は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0387】

いくつかの実施形態において、Ｌ^５（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^５は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^５は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^５は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^５は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^５は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^５は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0388】

いくつかの実施形態において、Ｌ^６（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^６は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^６は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^６は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^６は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^６は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^６は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0389】

いくつかの実施形態において、Ｌ^Ａは、－（Ｌ^１）_ａ－（Ｌ^２）_ｂ－（Ｌ^３）_ｃ－（Ｌ^４）_ｄ－（Ｌ^５）_ｅ－（Ｌ^６）_ｆ－を含む第１のリンカーであり、式中、
－（Ｌ^１）_ａ－が、－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－であり、
－（Ｌ^２）_ｂ－が、－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－であり、
－（Ｌ^３）_ｃ－は、－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－であり、
－（Ｌ^４）_ｄ－は、－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－であり、
－（Ｌ^５）_ｅ－は、－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－であり、
－（Ｌ^６）_ｆ－は、－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６が、存在する場合、テザー基であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、及びＶ^６が、存在する場合、共有結合又は連結官能基であり、
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆが、各々独立して、０又は１である。

【0390】

特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、０～６である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、０である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、１である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、２である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、３である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、４である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、５である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ及びｆの合計は、６である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆは、各々１である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、及びｅは、各々１であり、ｆは、０である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、ｃ、及びｄは、各々１であり、ｅ及びｆは、各々０である。特定の実施形態において、ａ、ｂ、及びｃは、各々１であり、ｄ、ｅ、及びｆは、各々０である。特定の実施形態において、ａ及びｂは、各々１であり、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆは、各々０である。特定の実施形態において、ａは、１であり、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆは、各々０である。

【0391】

上述のように、特定の実施形態において、Ｌ^１は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分（例えば、上の式（ＩＩ）に示される通り）に結合する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^１は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分（例えば、上の式（ＩＩ）に示される通り）に結合する。特定の実施形態において、Ｖ^１は、第１の薬物又は活性薬剤に結合する。特定の実施形態において、Ｌ^２は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^２は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合するか、又はＶ^２は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合する。特定の実施形態において、Ｌ^３は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^３は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合するか、又はＶ^３は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合する。特定の実施形態において、Ｌ^４は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^４は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合するか、又はＶ^４は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合する。特定の実施形態において、Ｌ^５は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^５は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合するか、又はＶ^５は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合する。特定の実施形態において、Ｌ^６は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^６は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合するか、又はＶ^６は、存在する場合、第１の薬物又は活性薬剤に結合する。

【0392】

特定の実施形態において、式（ＩＩ）のコンジュゲートは、第２のリンカー、Ｌ^Ｂを含む。第２のリンカー、Ｌ^Ｂは、コンジュゲート化部分を介して、目的の第２の部分（例えば、第２の薬物又は活性薬剤）をポリペプチド（例えば、抗体）に結合するために利用され得る。第２のリンカー、Ｌ^Ｂは、（例えば、本明細書に記載されるように）コンジュゲート化部分に結合（例えば、共有結合）し得る。例えば、第２のリンカー、Ｌ^Ｂは、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分を第２の薬物に結合し得る。ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分を使用して、第２のリンカー、Ｌ^Ｂ（したがって第２の薬物）をポリペプチド、例えば、抗体にコンジュゲート化し得る。

【0393】

例えば、上の式（ＩＩ）に示されるように、Ｌ^Ｂは、コンジュゲート化部分を介してＷ^１３に結合し、したがって、Ｗ^１３は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分を介して第２のリンカーＬ^Ｂに間接的に結合する。上述のように、Ｗ^１３は、ポリペプチド（例えば、抗体）であり、したがって、Ｌ^Ｂは、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分を介してポリペプチド（例えば、抗体）に結合し、例えば、リンカーＬ^Ｂは、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分を介してポリペプチド（例えば、抗体）に間接的に結合する。

【0394】

任意の好都合なリンカーが、本主題のコンジュゲート及び化合物中の第２のリンカーＬ^Ｂのために利用され得る。特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシルアミノ、アルキルアミド、置換アルキルアミド、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される基を含み得る。特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、アルキル又は置換アルキル基を含み得る。特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、アルケニル又は置換アルケニル基を含み得る。特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、アルキニル又は置換アルキニル基を含み得る。特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、アルコキシ又は置換アルコキシ基を含み得る。特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、アミノ又は置換アミノ基を含み得る。特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、カルボキシル又はカルボキシルエステル基を含み得る。特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、アシルアミノ基を含み得る。特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、アルキルアミド又は置換アルキルアミド基を含み得る。特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、アリール又は置換アリール基を含み得る。特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリール基を含み得る。特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、シクロアルキル又は置換シクロアルキル基を含み得る。特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリル基を含み得る。

【0395】

特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂは、ポリマーを含み得る。例えば、ポリマーは、ポリエチレングリコール、メトキシポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールホモポリマー、ポリプロピレングリコールホモポリマー、エチレングリコールとプロピレングリコールとのコポリマー（例えば、ホモポリマー及びコポリマーは、非置換であるか、又はアルキル基で一端で置換されている）、ポリビニルアルコール、ポリビニルエチルエーテル、ポリビニルピロリドン、それらの組み合わせなどを含む、ポリアルキレングリコール及びその誘導体を含み得る。特定の実施形態において、ポリマーは、ポリアルキレングリコールである。特定の実施形態において、ポリマーは、ポリエチレングリコールである。以下でより詳細に説明されるコンジュゲート及び化合物において示されるように、他のリンカーもまた可能である。

【0396】

いくつかの実施形態において、Ｌ^Ｂは、以下の式：
－（Ｌ^７）_ｇ－（Ｌ^８）_ｈ－（Ｌ^９）_ｉ－（Ｌ^１０）_ｊ－（Ｌ^１１）_ｋ－（Ｌ^１２）_ｌ－（Ｌ^１３）_ｍ、
によって説明される第２のリンカーであり、
式中、Ｌ^７、Ｌ^８、Ｌ^９、Ｌ^１０、Ｌ^１１、Ｌ^１２及びＬ^１３が、各々独立して、リンカーサブユニットであり、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍが、各々独立して、０又は１である。

【0397】

特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、０～７である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、０である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、１である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、２である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、３である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、４である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、５である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、６である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、７である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍは、各々１である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、及びｌは、各々１であり、ｍは、０である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、及びｋは、各々１であり、ｌ及びｍは、各々０である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、及びｊは、各々１であり、ｋ、ｌ、及びｍは、各々０である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、及びｉは、各々１であり、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍは、各々０である。特定の実施形態において、ｇ及びｈは、各々１であり、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍは、各々０である。特定の実施形態において、ｇは、１であり、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍは、各々０である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍは、各々０である。

【0398】

特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^７は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分（例えば、上の式（ＩＩ）に示される通り）に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^８は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤Ｗ^１２に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^９は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤Ｗ^１２に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^１０は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤Ｗ^１２に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^１１は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤Ｗ^１２に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^１２は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤Ｗ^１２に結合する。特定の実施形態において、リンカーサブユニットＬ^１３は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤Ｗ^１２に結合する。

【0399】

任意の好都合なリンカーサブユニットが、第２のリンカーＬ^Ｂに利用され得る。目的のリンカーサブユニットとしては、ポリエチレングリコール、ポリエチレン及びポリアクリレート、アミノ酸残基（複数可）、炭水化物系ポリマー又はその炭水化物残基及びその誘導体、ポリヌクレオチド、アルキル基、アリール基、ヘテロ環基などのポリマーの単位、それらの組み合わせ、並びにそれらの置換態様が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、Ｌ^７、Ｌ^８、Ｌ^９、Ｌ^１０、Ｌ^１１、Ｌ^１２及びＬ^１３（存在する場合）の各々は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、及びジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）から独立して選択される１つ以上の基を含む。

【0400】

いくつかの実施形態において、Ｌ^７（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^７は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^７は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^７は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^７は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^７は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^７は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0401】

いくつかの実施形態において、Ｌ^８（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^８は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^８は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^８は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^８は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^８は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^８は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0402】

いくつかの実施形態において、Ｌ^９（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^９は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^９は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^９は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^９は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^９は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^９は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0403】

いくつかの実施形態において、Ｌ^１０（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１０は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１０は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１０は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１０は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１０は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１０は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0404】

いくつかの実施形態において、Ｌ^１１（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１１は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１１は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１１は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１１は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１１は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１１は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0405】

いくつかの実施形態において、Ｌ^１２（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１２は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１２は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１２は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１２は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１２は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１２は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0406】

いくつかの実施形態において、Ｌ^１３（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾ポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換アルキル、アリール基、置換アリール基、又はジアミンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１３は、ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１３は、修飾ポリエチレングリコールを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１３は、アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１３は、アルキル基又は置換アルキルを含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１３は、アリール基又は置換アリール基を含む。いくつかの実施形態において、Ｌ^１３は、ジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0407】

いくつかの実施形態において、Ｌ^Ｂは、－（Ｌ^７）_ｇ－（Ｌ^８）_ｈ－（Ｌ^９）_ｉ－（Ｌ^１０）_ｊ－（Ｌ^１１）_ｋ－（Ｌ^１２）_ｌ－（Ｌ^１３）_ｍ－を含む第２のリンカーであり、式中、
－（Ｌ^７）_ｇ－は、－（Ｔ^７－Ｖ^７）_ｇ－であり、
－（Ｌ^８）_ｈ－は、－（Ｔ^８－Ｖ^８）_ｈ－であり、
－（Ｌ^９）_ｉ－は、－（Ｔ^９－Ｖ^９）_ｉ－であり、
－（Ｌ^１０）_ｊ－は、－（Ｔ^１０－Ｖ^１０）_ｊ－であり、
－（Ｌ^１１）_ｋ－は、－（Ｔ^１１－Ｖ^１１）_ｋ－であり、
－（Ｌ^１２）_ｌ－は、－（Ｔ^１２－Ｖ^１２）_ｌ－であり、
－（Ｌ^１３）_ｍ－は、－（Ｔ^１３－Ｖ^１３）_ｍ－であり、
Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及びＴ^１３が、存在する場合、テザー基であり、
Ｖ^７、Ｖ^８、Ｖ^９、Ｖ^１０、Ｖ^１１、Ｖ^１２、及びＶ^１３が、存在する場合、共有結合又は連結官能基であり、
ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍが、各々独立して、０又は１である。

【0408】

特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、０～７である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、０である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、１である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、２である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、３である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、４である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、５である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、６である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍの合計は、７である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍは、各々１である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、及びｌは、各々１であり、ｍは、０である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、及びｋは、各々１であり、ｌ及びｍは、各々０である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、及びｊは、各々１であり、ｋ、ｌ、及びｍは、各々０である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、及びｉは、各々１であり、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍは、各々０である。特定の実施形態において、ｇ及びｈは、各々１であり、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍは、各々０である。特定の実施形態において、ｇは、１であり、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍは、各々０である。特定の実施形態において、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍは、各々０である。

【0409】

上述のように、特定の実施形態において、Ｌ^７は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分（例えば、上の式（ＩＩ）に示される通り）に結合する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^７は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分（例えば、上の式（ＩＩ）に示される通り）に結合する。特定の実施形態において、Ｖ^７は、第２の薬物又は活性薬剤に結合する。特定の実施形態において、Ｌ^８は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^８は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合するか、又はＶ^８は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合する。特定の実施形態において、Ｌ^９は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^９は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合するか、又はＶ^９は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合する。特定の実施形態において、Ｌ^１０は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^１０は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合するか、又はＶ１０^４は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合する。特定の実施形態において、Ｌ^１１は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^１１は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合するか、又はＶ^１１は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合する。特定の実施形態において、Ｌ^１２は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^１２は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合するか、又はＶ^１２は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合する。特定の実施形態において、Ｌ^１３は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合する。したがって、特定の実施形態において、Ｔ^１３は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合するか、又はＶ^１３は、存在する場合、第２の薬物又は活性薬剤に結合する。

【0410】

テザー基、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及びＴ^１３に関して、任意の好都合なテザー基が、本主題のリンカーで利用され得る。いくつかの実施形態において、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及びＴ^１３は、各々、共有結合、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｘ－、４－アミノピペリジン（４ＡＰ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシ（ＭＡＢＯ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＭＡＢＣ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシ（ＰＡＢＯ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢＣ）、パラ－アミノベンジル（ＰＡＢ）、パラ－アミノ－ベンジルアミノ（ＰＡＢＡ）、パラ－アミノ－フェニル（ＰＡＰ）、パラ－ヒドロキシ－フェニル（ＰＨＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから独立して選択される１つ以上の基を含み、式中、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｘが、１～１２の整数である。

【0411】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及び／又はＴ^１３）は、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル又は置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルを含む。特定の実施形態において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、又は１～８個の炭素原子、又は１～６個の炭素原子、又は１～５個の炭素原子、又は１～４個の炭素原子、又は１～３個の炭素原子を含む直鎖若しくは分岐鎖アルキル基である。いくつかの事例において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、アルキル又は置換アルキル、例えば、Ｃ_１－Ｃ_１２アルキル、又はＣ_１－Ｃ_１０アルキル、又はＣ_１－Ｃ_６アルキル、又はＣ_１－Ｃ_３アルキルであり得る。いくつかの事例において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、Ｃ_２－アルキルである。例えば、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、アルキレン又は置換アルキレン、例えば、Ｃ_１－Ｃ_１２アルキレン、又はＣ_１－Ｃ_１０アルキレン、又はＣ_１－Ｃ_６アルキレン、又はＣ_１－Ｃ_３アルキレンであり得る。いくつかの事例において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、Ｃ_１－アルキレン（例えば、ＣＨ_２）である。いくつかの事例において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、Ｃ_２－アルキレン（例えば、ＣＨ_２ＣＨ_２）である。いくつかの事例において、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、Ｃ_３－アルキレン（例えば、ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２）である。

【0412】

特定の実施形態において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、又は１～８個の炭素原子、又は１～６個の炭素原子、又は１～５個の炭素原子、又は１～４個の炭素原子、又は１～３個の炭素原子を含む直鎖若しくは分岐鎖置換アルキル基である。いくつかの事例において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換アルキル、例えば、置換Ｃ_１－Ｃ_１２アルキル、又は置換Ｃ_１－Ｃ_１０アルキル、又は置換Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、又は置換Ｃ_１－Ｃ_３アルキルであり得る。いくつかの事例において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換Ｃ_２－アルキルである。例えば、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換アルキレン、例えば、置換Ｃ_１－Ｃ_１２アルキレン、又は置換Ｃ_１－Ｃ_１０アルキレン、又は置換Ｃ_１－Ｃ_６アルキレン、又は置換Ｃ_１－Ｃ_３アルキレンであり得る。いくつかの事例において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換Ｃ_１－アルキレン（例えば、－ＳＯ_３Ｈで置換されたＣ_１－アルキレン）である。いくつかの事例において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換Ｃ_２－アルキレンである。いくつかの事例において、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、置換Ｃ_３－アルキレンである。例えば、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルは、本明細書に記載の（ＰＥＧ）_ｋ基（例えば、－ＣＯＮＨ（ＰＥＧ）_ｋ、例えば、－ＣＯＮＨ（ＰＥＧ）_３若しくは－ＣＯＮＨ（ＰＥＧ）_５、又は－ＮＨＣＯ（ＰＥＧ）_ｋ、例えば、－ＮＨＣＯ（ＰＥＧ）_７）で置換されたＣ_１－Ｃ_１２アルキレン（例えば、Ｃ_３－アルキレン又はＣ_５－アルキレン）を含み得るか、又は－ＣＯＮＨＣＨ_２ＣＨ_２ＳＯ_３Ｈ基で置換されたＣ_１－Ｃ_１２アルキレン（例えば、Ｃ_３－アルキレン）を含み得るか、又は－ＮＨＣＯＣＨ_２ＳＯ_３Ｈ基で置換されたＣ_１－Ｃ_１２アルキレン（例えば、Ｃ_５－アルキレン）を含み得る。

【0413】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２及び／又はＴ^１３）は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、又は置換ヘテロシクリルを含む。いくつかの事例において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及び／又はＴ^１３）は、アリール又は置換アリールを含む。例えば、アリールは、フェニルであり得る。いくつかの場合において、置換アリールは、置換フェニルである。置換フェニルは、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される１つ以上の置換基で置換され得る。いくつかの事例において、置換アリールは、置換フェニルであり、置換基は、本明細書に記載の切断可能な部分（例えば、酵素的に切断可能な部分、例えば、グリコシド又はグリコシド誘導体）を含む。

【0414】

いくつかの事例において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及び／又はＴ^１３）は、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリール、そのようなトリアゾリル（例えば、１，２，３－トリアゾリル）を含む。いくつかの事例において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及び／又はＴ^１３）は、シクロアルキル又は置換シクロアルキルを含む。いくつかの事例において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及び／又はＴ^１３）は、ヘテロシクリル又は置換ヘテロシクリルを含む。いくつかの事例において、置換ヘテロアリール、置換シクロアルキル、又は置換ヘテロシクリル上の置換基は、本明細書に記載の切断可能な部分（例えば、酵素的に切断可能な部分、例えば、グリコシド又はグリコシド誘導体）を含む。

【0415】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２及び／又はＴ^１３）は、エチレンジアミン（ＥＤＡ）部分、例えば、ＥＤＡ含有テザー基を含む。特定の実施形態において、（ＥＤＡ）_ｗは、１つ以上のＥＤＡ部分を含み、例えば、ｗは、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、又は６の整数である）。連結したエチレンジアミン（ＥＤＡ）部分は、任意選択的に、１つ以上の好都合な位置で、任意の好都合な置換基、例えば、アルキル、置換アルキル、アシル、置換アシル、アリール、又は置換アリールで置換されてもよい。特定の実施形態において、ＥＤＡ部分は、以下の構造：

【化33】

により説明され、
式中、ｙが、１～６、又は０若しくは１の整数であり、各Ｒ^１２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、ｙは、１、２、３、４、５、又は６である。特定の実施形態において、ｙは、１であり、ｒは、０である。特定の実施形態において、ｙは、１であり、ｒは、１である。特定の実施形態において、ｙは、２であり、ｒは、０である。特定の実施形態において、ｙは、２であり、ｒは、１である。特定の実施形態において、各Ｒ^１２は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。特定の実施形態において、ＥＤＡの任意の２つの隣接するＲ^１２基は、環状に連結して、例えば、ピペラジニル環を形成してもよい。特定の実施形態において、ｙは、１であり、２つの隣接するＲ^１２基は、アルキル基であり、環状に連結してピペラジニル環を形成する。特定の実施形態において、ｙは、１であり、隣接するＲ^１２基は、水素、アルキル（例えば、メチル）、及び置換アルキル（例えば、低級アルキル－ＯＨ、例えば、エチル－ＯＨ又はプロピル－ＯＨ）から選択される。

【0416】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２及び／又はＴ^１３）は、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）部分（本明細書では、ピペリジン－４－アミノ、Ｐ４Ａとも称される）を含む。４ＡＰ部分は、任意選択的に、１つ以上の好都合な位置で、任意の好都合な置換基、例えば、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アシル、置換アシル、アリール、又は置換アリールで置換されてもよい。特定の実施形態において、４ＡＰ部分は、以下の構造：

【化34】

により説明され、
式中、Ｒ^１２は、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分（例えば、ポリエチレングリコール又は修飾ポリエチレングリコール）、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^１２は、ポリエチレングリコール部分である。特定の実施形態において、Ｒ^１２は、カルボキシ修飾ポリエチレングリコールである。

【0417】

特定の実施形態において、Ｒ^１２は、式（ＰＥＧ）_ｋによって説明されるポリエチレングリコール部分を含み、以下の構造：

【化35】

によって表され得、
式中、ｋは、１～２０、例えば、１～１８、又は１～１６、又は１～１４、又は１～１２、又は１～１０、又は１～８、又は１～６、又は１～４、又は１若しくは２、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０の整数である。いくつかの事例において、ｋは、２である。特定の実施形態において、Ｒ^１７は、ＯＨ、ＣＯＯＨ、ＯＲ、又はＣＯＯＲから選択され、式中、Ｒが、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^１７は、ＣＯＯＨである。特定の実施形態において、Ｒ^１７は、ＯＨである。特定の実施形態において、Ｒ^１７は、ＯＣＨ_３である。

【0418】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２及び／又はＴ^１３）は、（ＰＥＧ）_ｎを含み、式中、（ＰＥＧ）_ｎが、ポリエチレングリコール又は修飾ポリエチレングリコール連結単位である。特定の実施形態において、（ＰＥＧ）_ｎは、以下の構造：

【化36】

により説明され、
式中、ｎは、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０の整数である。いくつかの事例において、ｎは、２である。いくつかの事例において、ｎは、３である。いくつかの事例において、ｎは、６である。いくつかの事例において、ｎは、１２である。

【0419】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２及び／又はＴ^１３）は、（ＡＡ）_ｐを含み、式中、ＡＡが、アミノ酸残基である。任意の好都合なアミノ酸が利用され得る。目的のアミノ酸としては、限定されないが、Ｌ－アミノ酸及びＤ－アミノ酸、天然に存在するアミノ酸、例えば、２０個の主なアルファ－アミノ酸及びベータ－アラニンのうちのいずれか、天然に存在しないアミノ酸（例えば、アミノ酸類似体）、例えば、天然に存在しないアルファ－アミノ酸又は天然に存在しないベータ－アミノ酸などが挙げられる。特定の実施形態において、ｐは、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０などの整数である。特定の実施形態において、ｐは、１である。特定の実施形態において、ｐは、２である。

【0420】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２及び／又はＴ^１３）は、アミノ酸類似体を含む。アミノ酸類似体は、天然に存在するタンパク質（例えば、Ａｌａ又はＡ、Ｃｙｓ又はＣ、Ａｓｐ又はＤ、Ｇｌｕ又はＥ、Ｐｈｅ又はＦ、Ｇｌｙ又はＧ、Ｈｉｓ又はＨ、Ｉｌｅ又はＩ、Ｌｙｓ又はＫ、Ｌｅｕ又はＬ、Ｍｅｔ又はＭ、Ａｓｎ又はＮ、Ｐｒｏ又はＰ、Ｇｌｎ又はＱ、Ａｒｇ又はＲ、Ｓｅｒ又はＳ、Ｔｈｒ又はＴ、Ｖａｌ又はＶ、Ｔｒｐ又はＷ、Ｔｙｒ又はＹ）中に一般的に見出される１つ以上のアミノ酸と構造及び／又は全体的な形状が類似している化合物を含む。アミノ酸類似体はまた、修飾側鎖又は骨格を有する天然アミノ酸を含む。アミノ酸類似体はまた、天然に存在するＤ形態と同じ立体化学を有するアミノ酸類似体、並びにアミノ酸類似体のＬ形態を含む。いくつかの事例において、アミノ酸類似体は、１つ以上の天然アミノ酸の骨格構造及び／又は側鎖構造を共有し、その違い（複数可）は、分子中の１つ以上の修飾基である。そのような修飾としては、限定されないが、ある原子（例えばＮ）の関連する原子（例えばＳ）による置換、ある基（例えば、メチル、若しくはヒドロキシルなど）又はある原子（例えば、Ｃｌ、若しくはＢｒなど）の付加、ある基の欠失、共有結合の置換（例えば、単結合の二重結合による置換）、あるいはそれらの組み合わせが挙げられ得る。例えば、アミノ酸類似体は、α－ヒドロキシ酸、及びα－アミノ酸などを含み得る。アミノ酸類似体の例としては、スルホアラニンなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0421】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２及び／又はＴ^１３）は、式－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｘ－によって記載される部分を含み、式中、ｘが０であるか、又はｘが、１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２、又は１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１又は１２の整数である。特定の実施形態において、ｘは、１である。特定の実施形態において、ｘは、２である。特定の実施形態において、各Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１３は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0422】

特定の実施形態において、Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。これらの実施形態において、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールは、Ｒ^１３について上で説明された通りである。

【0423】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２及び／又はＴ^１３）は、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、又はエステルを含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、アセタール基を含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、ヒドラジンを含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、ジスルフィドを含む。いくつかの実施形態において、テザー基は、エステルを含む。

【0424】

特定の実施形態において、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２及び／又はＴ^１３）は、メタ－アミノ－ベンジルオキシ（ＭＡＢＯ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＭＡＢＣ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシ（ＰＡＢＯ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢＣ）、パラ－アミノベンジル（ＰＡＢ）、パラ－アミノ－ベンジルアミノ（ＰＡＢＡ）、パラ－アミノ－フェニル（ＰＡＰ）、又はパラ－ヒドロキシ－フェニル（ＰＨＰ）を含む。

【0425】

いくつかの実施形態において、テザー基は、以下の構造：

【化37】

によって記載されるＭＡＢＯ基を含む。

【0426】

いくつかの実施形態において、テザー基は、以下の構造：

【化38】

によって記載されるＭＡＢＣ基を含む。

【0427】

いくつかの実施形態において、テザー基は、以下の構造：

【化39】

によって記載されるＰＡＢＯ基を含む。

【0428】

いくつかの実施形態において、テザー基は、以下の構造：

【化40】

によって記載されるＰＡＢＣ基を含む。

【0429】

いくつかの実施形態において、テザー基は、以下の構造：

【化41】

によって記載されるＰＡＢ基を含む。

【0430】

いくつかの実施形態において、テザー基は、以下の構造：

【化42】

によって記載されるＰＡＢＡ基を含む。

【0431】

いくつかの実施形態において、テザー基は、以下の構造：

【化43】

によって記載されるＰＡＰ基を含む。

【0432】

いくつかの実施形態において、テザー基は、以下の構造：

【化44】

によって記載されるＰＨＰ基を含む。

【0433】

特定の実施形態において、各Ｒ^１４は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。

【0434】

特定の実施形態において、Ｒ^１４は、水素である。特定の実施形態において、各Ｒ^１４は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１４は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0435】

上に示されるＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰテザー構造のいくつかの実施形態において、フェニル環は、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される１つ以上の追加の基で置換され得る。

【0436】

特定の実施形態において、テザー基Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２及び／又はＴ^１３のうちの１つ以上は各々、任意選択的にグリコシド又はグリコシド誘導体で置換されている。例えば、いくつかの事例において、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６は各々、任意選択的にグリコシドで置換されている。いくつかの事例において、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及びＴ^１３は各々、任意選択的にグリコシドで置換されている。特定の実施形態において、グリコシド又はグリコシド誘導体は、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択される。

【0437】

特定の実施形態において、上に示されるＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰテザー構造は、グリコシド及びグリコシド誘導体から選択される１つ以上の追加の基で置換され得る。例えば、上に示されるＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰテザー構造のいくつかの実施形態において、フェニル環は、グリコシド及びグリコシド誘導体から選択される１つ以上の追加の基で置換され得る。特定の実施形態において、グリコシド又はグリコシド誘導体は、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択される。

【0438】

例えば、いくつかの実施形態において、グリコシド又はグリコシド誘導体は、以下の構造：

【化45】

から選択される。

【0439】

連結官能基、Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、Ｖ^６、Ｖ^７、Ｖ^８、Ｖ^９、Ｖ^１０、Ｖ^１１、Ｖ^１２、及びＶ^１３に関して、任意の好都合な連結官能基が、本主題のリンカーで利用され得る。目的の連結官能基としては、限定されないが、アミノ、カルボニル、アミド、オキシカルボニル、カルボキシ、スルホニル、スルホキシド、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、チオ、オキシ、ホスホ、ホスホロアミデート、チオホスホライデートなどが挙げられる。いくつかの実施形態において、Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、Ｖ^６、Ｖ^７、Ｖ^８、Ｖ^９、Ｖ^１０、Ｖ^１１、Ｖ^１２及びＶ^１３は、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－から選択され、式中、ｑは、１～６の整数である。特定の実施形態において、ｑは、１～６（例えば、１、２、３、４、５、又は６）の整数である。特定の実施形態において、ｑは、１である。特定の実施形態において、ｑは、２である。特定の実施形態において、ｑは、３である。特定の実施形態において、ｑは、４である。特定の実施形態において、ｑは、５である。特定の実施形態において、ｑは、６である。

【0440】

いくつかの実施形態において、各Ｒ^１５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。

【0441】

特定の実施形態において、Ｒ^１５は、水素である。特定の実施形態において、各Ｒ^１５は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、カルボキシル又はカルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アシル又はアシルオキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アシルアミノ又はアミノアシルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アルキルアミド又は置換アルキルアミドである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、スルホニルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、チオアルコキシ又は置換チオアルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^１５は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－８ヘテロシクリル若しくはＣ_３－８置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0442】

特定の実施形態において、各Ｒ^１５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。これらの実施形態において、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルは、Ｒ^１５について上に記載されている通りである。

【0443】

上述のように、いくつかの実施形態において、Ｌ^Ａは、－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－を含む第１のリンカーであり、式中、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆは、各々独立して、０又は１である。

【0444】

いくつかの実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａにおいて、
Ｔ^１が、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル及び置換（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルから選択され、
Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６が、各々独立して、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｘ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、ＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、ＰＨＰ、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、及びＶ^６が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－から選択され、式中、ｑが、１～６の整数であり、
（ＰＥＧ）_ｎが、

【化46】

であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡは、以下の構造：

【化47】

を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、

【化48】

であり、
ＡＡは、アミノ酸残基であり、ｐは、１～２０の整数であり、
各Ｒ^１２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アリール、及び置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ^１２基が、環状に連結され、ピペラジニル環を形成してもよく、
各Ｒ^１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。

【0445】

特定の実施形態において、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５及びＴ^６、並びにＶ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５及びＶ^６は、以下から選択され、
Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１が、－ＣＯＮＨ－であり、
Ｔ^２が、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^２が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^３が、ＡＡであり、Ｖ^３が、存在せず、
Ｔ^４が、ＰＡＢＣであり、Ｖ^４が、存在せず、
ｅ及びｆが、各々０である。

【0446】

特定の実施形態において、第１のリンカーＬ^Ａについての上のリンカー構造の左側は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分に結合し、第１のリンカーＬ^Ａについての上のリンカー構造の右側は、第１の薬物又は活性薬剤に結合している。

【0447】

上述のように、いくつかの実施形態において、Ｌ^Ｂは、－（Ｔ^７－Ｖ^７）_ｇ－（Ｔ^８－Ｖ^８）_ｈ－（Ｔ^９－Ｖ^９）_ｉ－（Ｔ^１０－Ｖ^１０）_ｊ－（Ｔ^１１－Ｖ^１１）_ｋ－（Ｔ^１２－Ｖ^１２）_ｌ－（Ｔ^１３－Ｖ^１３）_ｍ－を含む第２のリンカーであり、式中、ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍは、各々独立して、０又は１である。

【0448】

いくつかの実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂにおいて、
Ｔ^７が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル及び置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルから選択され、
Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及びＴ^１３が、各々独立して、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｘ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、ＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、ＰＨＰ、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
Ｖ^７、Ｖ^８、Ｖ^９、Ｖ^１０、Ｖ^１１、Ｖ^１２及びＶ^１３が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－から選択され、式中、ｑが、１～６の整数であり、
（ＰＥＧ）_ｎが、

【化49】

であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡは、以下の構造：

【化50】

を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、

【化51】

であり、
ＡＡは、アミノ酸残基であり、ｐは、１～２０の整数であり、
各Ｒ^１２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アリール、及び置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ^１２基が、環状に連結され、ピペラジニル環を形成してもよく、
各Ｒ^１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。

【0449】

任意の好都合なテザー基は、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及びＴ^１３で利用され得る。例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６に関連して上に記載されるテザー基のうちのいずれかが、テザー基Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及びＴ^１３のために使用され得る。

【0450】

任意の好都合な連結官能基が、Ｖ^７、Ｖ^８、Ｖ^９、Ｖ^１０、Ｖ^１１、Ｖ^１２、及びＶ^１３のために利用され得る。例えば、Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、及びＶ^６に関連して上に記載される連結官能基のうちのいずれかが、連結官能基Ｖ^７、Ｖ^８、Ｖ^９、Ｖ^１０、Ｖ^１１、Ｖ^１２、及びＶ^１３のために使用され得る。

【0451】

特定の実施形態において、各Ｒ^１３は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される。これらの実施形態において、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールは、Ｒ^１３について上で説明された通りである。

【0452】

特定の実施形態において、各Ｒ^１５は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。これらの実施形態において、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルは、Ｒ^１５について上に記載されている通りである。これらの実施形態において、様々な可能な置換基は、Ｒ^１５について上に記載されている通りである。

【0453】

第２のリンカーＬ^Ｂの特定の実施形態において、テザー基Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及びＴ^１３のうちの１つ以上は各々、任意選択的にグリコシド又はグリコシド誘導体で置換されている。特定の実施形態において、グリコシド又はグリコシド誘導体は、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択される。

【0454】

第２のリンカーＬ^Ｂの特定の実施形態において、上に示されるＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰテザー構造は、グリコシド及びグリコシド誘導体から選択される１つ以上の追加の基で置換され得る。例えば、上に示されるＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰテザー構造のいくつかの実施形態において、フェニル環は、グリコシド及びグリコシド誘導体から選択される１つ以上の追加の基で置換され得る。特定の実施形態において、グリコシド又はグリコシド誘導体は、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択される。

【0455】

特定の実施形態において、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２及びＴ^１３、並びにＶ^７、Ｖ^８、Ｖ^９、Ｖ^１０、Ｖ^１１、Ｖ^１２及びＶ^１３は、以下のものから選択され、
Ｔ^７が、存在せず、Ｖ^７が、－ＮＨＣＯ－であり、
Ｔ^８が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^８が、－ＣＯＮＨ－であり、
Ｔ^９が、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^９が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^１０が、ＡＡであり、Ｖ^１０が、存在せず、
Ｔ^１１が、ＰＡＢＣであり、Ｖ^１１が、存在せず、
ｌ及びｍが、各々０である。

【0456】

特定の実施形態において、第２のリンカーＬ^Ｂについての上のリンカー構造の左側は、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルコンジュゲート化部分に結合し、第２のリンカーＬ^Ｂについての上のリンカー構造の右側は、第２の薬物又は活性薬剤に結合している。

【0457】

特定の実施形態において、コンジュゲートは、上述のように、抗体及び薬物がリンカーによって一緒に連結されている、抗体－薬物コンジュゲートである。いくつかの事例において、リンカーｍ（例えば、Ｌ^Ａ及び／又はＬ^Ｂ）は、切断可能なリンカーである。切断可能なリンカーは、１つ以上の切断可能な部分を含むリンカーであり、切断可能な部分は、特定の条件下で解離することができ、したがって、切断可能なリンカーを２つ以上の分離可能な部分に分離することができる１つ以上の結合を含む。例えば、切断可能な部分は、１つ以上の共有結合を含んでもよく、１つ以上の共有結合は、特定の条件下で解離又は分離して、切断可能なリンカーを２つ以上の部分に分離することができる。したがって、抗体－薬物コンジュゲート中に含まれるそのようなリンカーは、切断可能なリンカーであり得、その結果、適切な条件下で、切断可能なリンカーが切断され、その薬物についての所望の作用標的部位で、その薬物をその抗体から分離するか、又は放出する。
いくつかの事例において、切断可能なリンカーは、２つの切断可能な部分、例えば、第１の切断可能な部分及び第２の切断可能な部分を含む。切断可能な部分は、その薬物についての所望の作用標的部位で抗体から薬物を分離するためか、又は放出するために、両方の切断可能な部分の切断が必要となるように構成され得る。例えば、切断可能なリンカーの切断は、最初に２つの切断可能な部分のうちの１つを切断し、次いで２つの切断可能な部分の他方を切断することによって達成することができる。特定の実施形態において、切断可能なリンカーは、第１の切断可能な部分と、第１の切断可能な部分の切断を妨害する第２の切断可能な部分と、を含む。「切断を妨害する」とは、切断されていない第２の切断可能な部分の存在が、第１の切断可能な部分の切断の可能性を減少させるか、又は切断を実質的に阻害し、したがって、切断可能なリンカーの切断の量を実質的に減少させるか、又は切断を防止することを意味する。例えば、切断されていない第２の切断可能な部分の存在は、第１の切断可能な部分の切断を妨害することができる。第２の切断可能な部分の存在による第１の切断可能な部分の切断の妨害は、ひいては、抗体からの薬物の放出の量を実質的に減少させるか、又は放出を防止する。例えば、抗体－薬物コンジュゲートが、その薬物についての所望の作用標的部位にあるか、又はその付近にあるようになるまで、抗体からの薬物の早期放出を実質的に減少又は防止することができる。

【0458】

いくつかの場合において、第２の切断可能な部分が、第１の切断可能な部分の切断を妨害するため、切断可能なリンカーの切断は、最初に第２の切断可能な部分を切断し、次いで第１の切断可能な部分を切断することによって達成することができる。第２の切断可能な部分の切断は、第１の切断可能な部分の切断に対する妨害を減少させるか、又はなくすことができ、したがって、第１の切断可能な部分の切断を可能にする。第１の切断可能な部分の切断により、切断可能なリンカーが上述のように２つ以上の部分に解離又は分離して、抗体－薬物コンジュゲートから薬物を放出することができる。いくつかの事例において、第１の切断可能な部分の切断は、切断されていない第２の切断可能な部分の存在下では実質的に起こらない。実質的にとは、切断されていない第２の切断可能な部分の存在下で、第１の切断可能な部分の約１０％以下の切断が起こること、例えば、切断されていない第２の切断可能な部分の存在下で、第１の切断可能な部分の約９％以下、又は約８％以下、又は約７％以下、又は約６％以下、又は約５％以下、又は約４％以下、又は約３％以下、又は約２％以下、又は約１％以下、又は約０．５％以下、又は約０．１％以下の切断が起こることを意味する。

【0459】

別の言い方をすれば、第２の切断可能な部分は、第１の切断可能な部分を切断されないように保護することができる。例えば、切断されていない第２の切断可能な部分の存在は、第１の切断可能な部分を切断されないように保護することができ、したがって、抗体－薬物コンジュゲートが、その薬物についての所望の作用標的部位にあるか、又はその付近にあるようになるまで、抗体からの薬物の早期放出を実質的に減少又は防止することができる。したがって、第２の切断可能な部分の切断により、第１の切断可能な部分を露出させ（例えば、第１の切断可能な部分を脱保護し）、したがって、第１の切断可能な部分の切断を可能にし、切断可能なリンカーの切断が起こり、次いで、上述の薬物についての所望の作用標的部位で抗体から薬物を分離又は放出する。特定の事例において、第２の切断可能な部分の切断により、第１の切断可能な部分を、その後の切断に対して露出させるが、第２の切断可能な部分は、切断可能なリンカーの中にはなく、それ自体は切断可能なリンカーの切断をもたらさない（すなわち、切断可能なリンカーを切断するために、第１の切断可能な部分の切断が依然として必要である）。

【0460】

切断可能なリンカーに含まれる切断可能な部分は、各々、酵素的に切断可能な部分であり得る。例えば、第１の切断可能な部分は、第１の酵素的に切断可能な部分であってもよく、第２の切断可能な部分は、第２の酵素的に切断可能な部分であってもよい。酵素的に切断可能な部分は、酵素の酵素作用によって上述のように２つ以上の部分に分離することができる切断可能な部分である。酵素的に切断可能な部分は、酵素の酵素作用によって切断することができる任意の切断可能な部分、例えば、限定されないが、エステル、ペプチド、グリコシドなどであり得る。いくつかの事例において、酵素的に切断可能な部分を切断する酵素は、抗体－薬物コンジュゲートから放出される薬物の所望の作用標的部位などの所望の作用標的部位に存在する。いくつかの場合において、酵素的に切断可能な部分を切断する酵素は、全血液、血漿、又は血清などの他の領域に有意な量では存在しない。したがって、酵素的に切断可能な部分の切断は、実質的な切断が所望の作用部位で起こるように制御することができ、一方で、他の領域で、又は抗体－薬物コンジュゲートが所望の作用部位に到達する前に、切断は有意に起こらない。

【0461】

例えば、本明細書に記載されるように、本開示の抗体－薬物コンジュゲートは、がんの治療のために、例えば、がん細胞が存在する所望の作用部位へのがん療法薬の送達のために使用することができる。いくつかの場合において、酵素、例えば、エステル結合を切断するエステラーゼは、がん細胞において過剰発現される、がんについてのバイオマーカーであり得る。がんにおける特定の酵素の過剰発現、したがって局在化を、本開示の抗体－薬物コンジュゲートの切断可能なリンカーに含まれる酵素的に切断可能な部分の文脈で使用して、所望の作用部位（すなわち、がん（及び過剰発現した酵素）の部位）で薬物を特異的に放出させることができる。したがって、いくつかの実施形態において、酵素的に切断可能な部分は、がん細胞において過剰発現される酵素によって切断され得る切断可能な部分（例えば、エステル又はグリコシド）である。例えば、酵素は、エステラーゼであり得る。したがって、いくつかの事例において、酵素的に切断可能な部分は、エステラーゼ酵素によって切断され得る切断可能な部分（例えば、エステル）である。いくつかの事例において、酵素は、グリコシダーゼであり得る。したがって、いくつかの事例において、酵素的に切断可能な部分は、グリコシダーゼ酵素によって切断され得る切断可能な部分（例えば、グリコシド又はグリコシド誘導体）である。

【0462】

特定の実施形態において、酵素的に切断可能な部分は、エステル結合である。例えば、上述の第１の切断可能な部分（すなわち、第２の切断可能な部分によって早期切断から保護される切断部分）は、エステルを含み得る。切断されていない第２の切断可能な部分の存在は、第１の切断可能な部分（エステル）を、エステラーゼ酵素によって切断されないように保護することができ、したがって、抗体－薬物コンジュゲートが、その薬物についての所望の作用標的部位にあるか、又はその付近にあるようになるまで、抗体からの薬物の早期放出を実質的に減少又は防止することができる。いくつかの事例において、第１の切断可能な部分に隣接するリンカーの部分は、置換基に連結しているか、又は置換基を含み、置換基は、第２の切断可能な部分を含む。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、グリコシド又はグリコシド誘導体を含む。

【0463】

いくつかの実施形態において、酵素的に切断可能な部分は、糖部分、例えば、グリコシド（若しくはグリコシル）又はグリコシド誘導体である。いくつか場合において、グリコシド又はグリコシド誘導体は、グリコシド又はグリコシド誘導体を含まない切断可能なリンカーと比較して、切断可能なリンカーの親水性の増加を促進することができる。グリコシド又はグリコシド誘導体は、切断可能なリンカーにおける使用に好適であり、かつ酵素の酵素作用によって切断することができる、任意のグリコシド又はグリコシド誘導体であり得る。例えば、第２の切断可能な部分（すなわち、第１の切断可能な部分を早期切断から保護する切断可能な部分）は、グリコシド又はグリコシド誘導体であり得る。例えば、いくつかの実施形態において、第１の切断可能な部分は、エステルを含み、第２の切断可能な部分は、グリコシド又はグリコシド誘導体を含む。特定の実施形態において、第２の切断可能な部分は、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択されるグリコシド又はグリコシド誘導体である。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、グルクロニドである。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、ガラクトシドである。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、グルコシドである。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、マンノシドである。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、フコシドである。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃである。いくつかの事例において、第２の切断可能な部分は、Ｏ－ＧａｌＮＡｃである。

【0464】

グリコシド又はグリコシド誘導体は、グリコシド結合を介して切断可能なリンカーに結合（共有結合）することができる。グリコシド結合は、様々なタイプの結合、例えば、限定されないが、Ｏ－グリコシド結合（Ｏ－グリコシド）、Ｎ－グリコシド結合（グリコシルアミン）、Ｓ－グリコシド結合（チオグリコシド）、又はＣ－グリコシド結合（Ｃ－グリコシド又はＣ－グリコシル）を介して、グリコシド又はグリコシド誘導体を切断可能なリンカーに連結し得る。いくつかの事例において、グリコシド結合は、Ｏ－グリコシド結合（Ｏ－グリコシド）である。いくつかの場合において、グリコシド又はグリコシド誘導体は、酵素によって結合する切断可能なリンカーから（例えば、グリコシド結合の酵素によって媒介される加水分解を介して）切断され得る。グリコシド又はグリコシド誘導体を、グリコシド又はグリコシド誘導体を切断可能なリンカーに結合するグリコシド結合の切断（加水分解）を実行することが可能な任意の好都合な酵素によって、切断可能なリンカーから除去又は切断することができる。グリコシド又はグリコシド誘導体を切断可能なリンカーに結合するグリコシド結合の切断（加水分解）を媒介するために使用され得る酵素の一例は、グリコシダーゼ、例えば、グルクロニダーゼ、ガラクトシダーゼ、グルコシダーゼ、マンノシダーゼ、フコシダーゼなどである。他の好適な酵素も、グリコシド又はグリコシド誘導体を切断可能なリンカーに結合するグリコシド結合の切断（加水分解）を媒介するために使用され得る。いくつかの場合において、グリコシド又はグリコシド誘導体を切断可能なリンカーに結合するグリコシド結合の切断（加水分解）を媒介するために使用される酵素は、抗体－薬物コンジュゲートの薬物についての所望の作用部位に、又はその付近に見出される。例えば、酵素は、抗体－薬物コンジュゲートの薬物についての所望の作用部位に、又はその付近の細胞において見出される、リソソーム酵素、例えば、リソソームグリコシダーゼであり得る。いくつかの場合において、酵素は、第１の切断可能な部分の切断を媒介する酵素が見出される標的部位、又はその付近で見出される酵素である。

【0465】

本開示によるコンジュゲートの例としては、以下の構造が挙げられるが、これらに限定されない。

【化52】

【0466】

上の構造において示される化学エンティティ、リンカー及びコンジュゲート化部分のうちのいずれも、本主題の化合物及びコンジュゲートにおける使用に適合され得る。

【0467】

ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物、及びコンジュゲートを生成するための方法に関する追加の開示は、米国特許第９，３１０，３７４号及び米国特許第９，４９３，４１３号に見出され、これらの各々の開示は、参照により本明細書に組み込まれる。

【0468】

結合剤コンジュゲートの追加の実施形態
いくつかの場合において、結合剤は、目的の結合部分、例えば、検出可能な標識、薬物、又は半減期延長部分を有する。結合剤の修飾は、様々な合成及び／又は組換え方法によって達成され得る。結合剤に結合した１つ以上の部位は、幅広い様々な機能又は特徴のうちの１つ以上を提供し得る。例示的な部分には、検出可能な標識（例えば、染料標識（例えば、発色団、フルオロフォア）、生体物理学的プローブ（スピン標識、核磁気共鳴（ＮＭＲ）プローブ）、蛍光共鳴エネルギー伝達（ＦＲＥＴ）型の標識（例えば、フルオロフォア／クエンチャーペアの少なくとも１つのメンバーを含む、ＦＲＥＴ対の少なくとも１つのメンバー）、生物発光共鳴エネルギー伝達（ＢＲＥＴ）型の標識（例えば、ＢＲＥＴ対の少なくとも１つのメンバー）、免疫検出可能なタグ（例えば、ＦＬＡＧ、Ｈｉｓ（６）など）が含まれる。

【0469】

結合した部分はまた、水溶性ポリマー（例えば、ＰＥＧ化）、精製タグ（例えば、親和性クロマトグラフィー（例えば、ＦＬＡＧエピトープの結合）による単離を容易にするため）、膜局在化ドメイン（例えば、脂質又はグリコホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）型アンカー）、固定化タグ（例えば、選択的結合を含む、ポリペプチドの表面への結合を容易にするため）、薬物（例えば、薬物の抗体への結合を介した薬物標的化を容易にするため）などであり得る。

【0470】

半減期延長に関して、本開示の結合剤は、任意選択的に、（例えば、ＰＥＧ化、ハイパーグリコシル化などによって）改善された薬物動態プロファイルを提供するように修飾され得る。

【0471】

いくつかの場合において、結合剤は、共有結合された非ペプチドポリマーを有し得る。好適なポリマーとしては、例えば、生体適合性ポリマー、及び水溶性生体適合性ポリマーが挙げられる。適切なポリマーには、合成ポリマー及び天然に存在するポリマーが含まれる。好適なポリマーとしては、例えば、置換若しくは非置換の直鎖若しくは分岐鎖ポリアルキレン、ポリアルケニレン若しくはポリオキシアルキレンポリマー、又は分岐若しくは非分岐多糖、例えば、ホモ多糖若しくはヘテロ多糖が挙げられる。好適なポリマーとしては、例えば、エチレンビニルアルコールコポリマー（一般的な名称ＥＶＯＨ又は商品名ＥＶＡＬによって一般的に知られる）；ポリメタクリル酸ブチル；ポリ（ヒドロキシバレレート）；ポリ（Ｌ－乳酸）；ポリカプロラクトン；ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）；ポリ（ヒドロキシブチレート）；ポリ（ヒドロキシブチレート－コ－バレレート）；ポリジオキサノン；ポリオルトエステル；ポリ無水物；ポリ（グリコール酸）；ポリ（Ｄ，Ｌ－乳酸）；ポリ（グリコール酸－コ－トリメチレンカーボネート）；ポリホスホエステル；ポリホスホエステルウレタン；ポリ（アミノ酸）；シアンアクリレート；ポリ（トリメチレンカーボネート）；ポリ（イミノカーボネート）；コポリ（エーテル－エステル）（例えば、ポリ（エチレンオキシド）－ポリ（乳酸）（ＰＥＯ／ＰＬＡ）コポリマー）；ポリアルキレンオキサレート；ポリホスファゼン；フィブリン、フィブリノーゲン、セルロース、デンプン、コラーゲン及びヒアルロン酸などの生体分子；ポリウレタン；シリコーン；ポリエステル；ポリオレフィン；ポリイソブチレン及びエチレン－アルファオレフィンコポリマー；アクリルポリマー及びコポリマー；ポリ塩化ビニルなどのハロゲン化ビニルポリマー及びコポリマー；ポリビニルエーテル、例えば、ポリビニルメチルエーテル、ハロゲン化ポリビニリデン、例えば、フッ化ポリビニリデン及び塩化ポリビニリデン；ポリアクリニトリル；ポリビニルケトン；ポリスチレンなどのポリスチレン芳香族；ポリ酢酸ビニルなどのポリエステル；エチレン－メチル－メタクリレートコポリマー、アクリロニトリル－スチレンコポリマー、ＡＢＳ樹脂、及びエチレン－酢酸ビニルコポリマーなどの互いのビニルモリマーのコポリマー及びオレフィンとのコポリマー；Ｎｙｌｏｎ６６及びポリカプロラクタムなどのポリアミド；アルキド樹脂；ポリカーボネート；ポリオキシメチレン；ポリイミド；ポリエーテル；エポキシ樹脂；ポリウレタン；レーヨン；レーヨン－トリアセテート；セルロース；酢酸セルロース；酪酸セルロース；酢酸酪酸セルロース；セロファン；硝酸セルロース；プロピオン酸セルロース；セルロースエーテル；非晶質テフロン；ポリ（エチレングリコール）；並びにカルボキシメチルセルロースが挙げられる。

【0472】

好適な合成ポリマーとしては、非置換及び置換の直鎖又は分岐鎖ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）ポリ（ビニルアルコール）、及びその誘導体、例えば、メトキシポリ（エチレングリコール）などの置換ポリ（エチレングリコール）、並びにそれらの誘導体が挙げられる。好適な天然に存在するポリマーは、例えば、アルブミン、アミロース、デキストラン、グリコーゲン、及びその誘導体を含む。

【0473】

好適なポリマーは、５００Ｄａ～５００００Ｄａ、例えば、５０００Ｄａ～４００００Ｄａ、又は２５０００～４００００Ｄａの範囲の平均分子量を有し得る。例えば、主題の抗体がポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）又はメトキシポリ（エチレングリコール）ポリマーを含むいくつかの実施形態において、ＰＥＧ又はメトキシポリ（エチレングリコール）ポリマーは、約０．５キロダルトン（ｋＤａ）～１ｋＤａ、約１ｋＤａ～５ｋＤａ、５ｋＤａ～１０ｋＤａ、１０ｋＤａ～２５ｋＤａ、２５ｋＤａ～４０ｋＤａ、又は４０ｋＤａ～６０ｋＤａの範囲の分子量を有し得る。

【0474】

いくつかの実施形態において、主題の結合剤は、ＰＥＧポリマーに共有結合している。いくつかの実施形態において、主題のｓｃＦｖ多量体は、ＰＥＧポリマーに共有結合している。タンパク質へのコンジュゲート化に好適なＰＥＧは、一般に、室温で水に可溶性であり、一般式Ｒ（Ｏ－ＣＨ_２－ＣＨ_２）_ｎ－Ｏ－Ｒを有し、式中、Ｒが、水素又は保護基、例えば、アルキル又はアルカノール基であり、ｎが、１～１０００の整数である。Ｒが保護基である場合、それは、一般に、１～８個の炭素を有する。主題の抗体にコンジュゲートされたＰＥＧは、直鎖状であっても、分岐状であってもよい。分岐ＰＥＧ誘導体としては、星型ＰＥＧ及び多アーム型ＰＥＧが挙げられる。

【0475】

主題の結合剤、例えば、抗体は、グリコシル化されてもよく、例えば、主題の抗体は、共有結合された炭水化物又は多糖部分を含んでもよい。抗体のグリコシル化は、典型的には、Ｎ結合型又はＯ結合型であり得る。抗体へのグリコシル化部位の付加は、Ｎ結合又はＯ結合したグリコシル化部位を含むようにアミノ酸配列を改変することによって好都合に達成される。同様に、グリコシル化部位の除去は、抗体の天然グリコシル化部位内のアミノ酸変化によって達成され得る。

【0476】

主題の結合剤、例えば、抗体は、例えば、グルタルアルデヒド、ホモ二官能性架橋剤、又はヘテロ二官能性架橋剤を使用して、第２の部分（例えば、脂質、主題の抗体以外のポリペプチド、合成ポリマー、炭水化物など）に共有結合してもよい。グルタルアルデヒドは、それらのアミノ部分を介してポリペプチドを架橋する。ホモ二官能性架橋剤（例えば、ホモ二官能性イミドエステル、ホモ二官能性Ｎ－ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳ）エステル、又はホモ二官能性スルフヒドリル反応性架橋剤）は、２つ以上の同一の反応性部分を含有し、架橋剤が、連結されるポリペプチドの混合物を含有する溶液に添加されるワンステップ反応手順で使用することができる。ホモ二官能性ＮＨＳエステル及びイミドエステルは、アミン含有ポリペプチドを架橋する。穏和なアルカリ性ｐＨでは、イミドエステルは一級アミンとのみ反応してイミドアミドを形成し、架橋ポリペプチドの全体的な電荷は影響を受けない。ホモ二官能性スルフヒドリル反応性架橋剤としては、ビスマレイミドヘキサン（ＢＭＨ）、１，５－ジフルオロ－２，４－ジニトロベンゼン（ＤＦＤＮＢ）、及び１，４－ジ－（３’，２’－ピリジルジチオ）プロピオンアミドブタン（ＤＰＤＰＢ）が挙げられる。

【0477】

ヘテロ二官能性架橋剤は、２つ以上の異なる反応性部分（例えば、アミン反応性部分及びスルフヒドリル反応性部分）を有し、アミン又はスルフヒドリル反応性部分を介してポリペプチドのうちの１つと架橋され、次いで、非反応性部分を介して他のポリペプチドと反応する。ピリジルジスルフィド架橋剤と同様に、複数のヘテロ二官能性ハロアセチル架橋剤が利用可能である。カルボジイミドは、アミド結合をもたらす、カルボキシルをアミンにカップリングさせるためのヘテロ二官能性架橋試薬の典型的な例である。

【0478】

主題の結合剤、例えば、抗体は、固体支持体上に固定化され得る。好適な支持体は、当該技術分野で周知であり、とりわけ、市販のカラム材料、ポリスチレンビーズ、ラテックスビーズ、磁気ビーズ、コロイド金属粒子、ガラス及び／又はシリコンチップ及び表面、ニトロセルロースストリップ、ナイロン膜、シート、デュラサイト、反応トレイのウェル（例えば、マルチウェルプレート）、プラスチックチューブなどを含む。固体支持体は、例えば、ガラス、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリカーボネート、デキストラン、ナイロン、アミロース、天然及び修飾セルロース、ポリアクリルアミド、寒天、及び磁鉄鉱を含む様々な物質のうちのいずれかを含み得る。主題の抗体を固体支持体上に固定するための適切な方法は周知であり、限定されないが、イオン性、疎水性、共有結合相互作用などが挙げられる。固体支持体は、例えば、水溶液中で、可溶性又は不溶性であり得る。いくつかの実施形態において、好適な固体支持体は、一般に、水溶液中で不溶である。

【0479】

抗体などの主題の結合剤は、いくつかの実施形態において、検出可能な標識を含み得る。好適な検出可能な標識としては、分光学的、光化学的、生化学的、免疫化学的、電気的、光学的、又は化学的手段によって検出可能な任意の組成物が挙げられる。好適なものとしては、磁気ビーズ（例えば、Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（商標））、蛍光性染料（例えば、フルオレセインイソチオシアネート、テキサスレッド、ローダミン、緑色蛍光性タンパク質、赤色蛍光性タンパク質、黄色蛍光性タンパク質など）、放射性標識（例えば、^３Ｈ、^１２５Ｉ、^３５Ｓ、^１４Ｃ、又は^３２Ｐ）、酵素（例えば、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ルシフェラーゼ、及び酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）で一般的に使用される他のもの）、並びにコロイドゴールド又はカラーガラス若しくはプラスチック（例えば、ポリスチレン、ポリプロピレン、ラテックスなど）ビーズなどの比色標識が挙げられるが、これらに限定されない。

【0480】

いくつかの実施形態において、抗体などの主題の結合剤は、造影剤又は放射性同位体を含み、造影剤又は放射性同位体は、例えば、撮像、例えば、ヒトで実施される撮像手順において、検出可能な標識としての使用に好適であるものである。標識の非限定的な例としては、^１２３１Ｉ（ヨウ素）、^１８Ｆ（フッ素）、^９９Ｔｃ（テクネチウム）、^１１１Ｉｎ（インジウム）、及び^６７Ｇａ（ガリウム）などの放射性同位体、並びにガドリニウム（Ｇｄ）、ジスプロシウム、及び鉄などの造影剤が挙げられる。放射性Ｇｄ同位体（^１５３Ｇｄ）も入手可能であり、非ヒト哺乳動物での撮像手順に好適である。

【0481】

抗体などの主題の結合剤は、標準的な技術を使用して標識することができる。例えば、主題の抗体は、クロラミンＴ又は１，３，４，６－テトラクロロ－３α，６α－デフェニルグリコウリルを使用してヨウ素化することができる。抗体などの対象の結合剤は、標準的な技術を介して造影剤で標識することもできる。例えば、主題の抗体は、Ｇｄジエチレントリアミン五酢酸（ＧｄＤＴＰＡ）又はＧｄテトラアザシクロドデカン四酢酸（ＧｄＤＯＴＡ）などの低分子Ｇｄキレートを抗体にコンジュゲートすることによって、Ｇｄで標識することができる。主題の抗体は、例えば、ポリリジン－Ｇｄキレートを抗体にコンジュゲートすることによって、Ｇｄで標識することができる。代替的に、主題の抗体は、Ｇｄキレーター脂質を含む常磁性重合リポソームをアビジン及びビオチン化抗体とインキュベートすることによって、Ｇｄで標識することができる。

【0482】

主題の結合剤に連結され得る好適な蛍光タンパク質としては、限定されないが、Ａｅｑｕｏｒｉａ ｖｉｃｔｏｒｉａ由来の緑色蛍光タンパク質又はその変異体若しくは誘導体、Ｅｎｈａｎｃｅｄ ＧＦＰ、例えば、Ｃｌｏｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．から市販されている多くのそのようなＧＦＰ、赤色蛍光タンパク質、黄色蛍光タンパク質、Ａｎｔｈｏｚｏａｎ種由来の様々な蛍光及び着色タンパク質のいずれかなどが挙げられる。

【0483】

抗体などの主題の結合剤は、いくつかの実施形態において、「放射線不透過性」標識、例えば、例えばＸ線を使用して容易に視覚化することができる標識を含む。放射線不透過性材料は、当業者に周知である。最も一般的な放射線不透過性材料には、ヨウ化物、臭化物、又はバリウム塩が含まれる。他の放射線不透過性材料も知られており、限定されないが、有機ビスマス誘導体、放射線不透過性マルチウレタン、有機ビスマス複合体、放射線不透過性バリウム多量体複合体などが挙げられる。

【0484】

抗体などの主題の結合剤は、いくつかの実施形態において、融合パートナー、例えば、リガンド、エピトープタグ、ペプチド、抗体以外のタンパク質などに連結される（例えば、共有結合又は非共有結合される）。好適な融合パートナーとしては、インビボでの安定性の増強（例えば、血清半減期の増強）を付与し、精製の容易さなども提供し、細胞からの融合タンパク質の分泌を提供し、エピトープタグ、例えば、Ｈｉｓ５（ＨＨＨＨＨ）（配列番号１７７）、Ｈｉｓ Ｘ６（ＨＨＨＨＨＨ）（配列番号１７８）、Ｃ－ｍｙｃ（ＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬ）（配列番号１７９）、Ｆｌａｇ（ＤＹＫＤＤＤＤＫ）（配列番号１８０）、ＳｔｒｅｐＴａｇ（ＷＳＨＰＱＦＥＫ）（配列番号１８１）、ヘマグルチニン、例えば、ＨＡ Ｔａｇ（ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ、配列番号１８２）、グルタチオン－Ｓ－トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、チオレドキシン、セルラーゼ結合ドメイン、ＲＹＩＲＳ（配列番号１８３）、Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－Ｈｉｓ－Ｔｈｒ（配列番号１８４）、キチン結合ドメイン、Ｓ－ペプチド、Ｔ７ペプチド、ＳＨ２ドメイン、Ｃ末端ＲＮＡタグ、ＷＥＡＡＡＲＥＡＣＣＲＥＣＣＡＲＡ（配列番号１８５）などを提供し、検出可能なシグナル、例えば、検出可能な生成物（例えば、β－ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ）を生成する酵素、又はそれ自体を検出可能なタンパク質、例えば、緑色蛍光タンパク質、赤色蛍光タンパク質、黄色蛍光タンパク質などを提供し、多量体化、例えば、免疫グロブリンのＦｃ部分などの多量化ドメインなどを提供する、ペプチド及びポリペプチドが挙げられる。

【0485】

いくつかの実施形態において、主題の抗体は、ポリアミン修飾を含む。主題の抗体は、天然に存在するか、又は合成のいずれかであるポリアミンで修飾され得る。有用な天然に存在するポリアミンとしては、プトレシン、スペルミジン、スペルミン、１，３－デアミノプロパン、ノルスペルミジン、ｓｙｎ－ホモスペルミジン、テルミン、テルモスペルミン、カルドペンタミン、ホモカルドペンタミン、及びカナバルミンが挙げられる。プトレシン、スペルミジン、及びスペルミンは、特に有用である。合成ポリアミンは、経験式Ｃ_ＸＨ_ＹＮ_Ｚで構成され、１～６個のＮＲ又はＮ（Ｒ）_２部分を更に含む３～１２個の炭素原子の環状又は非環状、分岐又は非分岐の炭化水素鎖であってもよく、式中、ＲはＨ、（Ｃ_１－Ｃ_４）アルキル、フェニル、又はベンジルである。ポリアミンは、任意の標準的な架橋法を使用して抗体に連結され得る。

【0486】

本開示の抗体などの結合剤が、共有結合した異種部分を含む場合、異種部分は、重鎖及び／若しくは軽鎖に直接的に、又はリンカーを介して連結してもよい。好適なリンカーは、容易に選択されてもよく、１個のアミノ酸（例えば、Ｇｌｙ）～２０個のアミノ酸、２個のアミノ酸～１５個のアミノ酸、３個のアミノ酸～１２個のアミノ酸（４個のアミノ酸～１０個のアミノ酸、５個のアミノ酸～９個のアミノ酸、６個のアミノ酸～８個のアミノ酸、又は７個のアミノ酸～８個のアミノ酸を含む）などの様々な長さの好適なもののうちのいずれかであってもよく、１、２、３、４、５、６、又は７個のアミノ酸であり得る。

【0487】

可撓性リンカーの例としては、グリシンポリマー（Ｇ）ｎ、グリシン－セリンポリマー（例えば、（ＧＳ）_ｎ、（ＧＳＧＧＳ）_ｎ（配列番号１８６）及び（ＧＧＧＳ）_ｎ（配列番号１８７）を含む、式中、ｎは、少なくとも１の整数である）、グリシン－アラニンポリマー、アラニン－セリンポリマー、及び当該技術分野で既知の他の可撓性リンカーが挙げられる。

【0488】

いくつかの場合において、結合剤、例えば、抗体は、共有結合された脂質又は脂肪酸部分を含む。

【0489】

特定の実施形態において、結合剤は、切断可能なリンカー又は非切断可能なリンカーを介して、薬剤にコンジュゲートされる。主題の抗体を使用するのに好適なリンカーとしては、「可撓性リンカー」が挙げられる。存在する場合、リンカー分子は、一般に、連結領域間のある程度の柔軟な移動を可能にするのに十分な長さである。リンカー分子は、一般に、約６～５０原子長である。リンカー分子はまた、例えば、アリールアセチレン、２～１０個の単量体単位を含有するエチレングリコールオリゴマー、ジアミン、二塩基酸、アミノ酸、又はそれらの組み合わせであり得る。ポリペプチドに結合することができる他のリンカー分子が、本開示に照らして使用され得る。

【0490】

いくつかの実施形態によれば、リンカーは、中性ｐＨ（血流ｐＨ７．３～７．５）では安定であるが、標的細胞（例えば、がん細胞）の穏やかな酸性エンドソーム（ｐＨ５．０～６．５）及びリソソーム（ｐＨ４．５～５．０）への内在化時に加水分解を受ける酸切断可能なリンカーなどの化学的に不安定なリンカーである。化学的に不安定なリンカーとしては、限定されないが、ヒドラゾン系リンカー、オキシム系リンカー、カーボネート系リンカー、エステル系リンカーなどが挙げられる。特定の実施形態において、リンカーは、酵素に不安定なリンカー、例えば、血流中で安定であるが、標的細胞への内在化時に、例えば、標的細胞（例えば、がん細胞）のリソソーム内のリソソームプロテアーゼ（例えば、カテプシン又はプラスミン）によって酵素切断を受ける、酵素に不安定なリンカーである。酵素に不安定なリンカーとしては、限定されないが、ペプチド結合、例えば、マレイミドカプロイル－バリン－シトルリン－ｐ－アミノベンジル（ＭＣ－ｖｃ－ＰＡＢ）リンカー、バリル－アラニル－パラ－アミノベンジルオキシ（Ｖａｌ－Ａｌａ－ＰＡＢ）リンカーなどのバリン－シトルリン（ＶＣ）リンカーなどのジペプチド系リンカーを含むリンカーが挙げられる。

【0491】

結合剤の修飾のための方法
抗体などの結合剤は、様々な方法のうちのいずれかを使用することによって、共有結合した異種部分（例えば、検出可能な標識、薬物など）を有するように修飾され得る。本開示は、目的の部分にコンジュゲートされた結合剤を提供し、ここで、目的の部分にコンジュゲートされた結合剤は、「結合剤コンジュゲート」と称される。本開示の結合剤コンジュゲートは、１）目的の部分にコンジュゲートされたＩｇ重鎖定常領域、及び目的の部分にコンジュゲートされたＩｇ軽鎖定常領域、２）目的の部分にコンジュゲートされたＩｇ重鎖定常領域、及び目的の部分にコンジュゲートされていないＩｇ軽鎖定常領域、又は３）目的の部分にコンジュゲートされていないＩｇ重鎖定常領域、及び目的の部分にコンジュゲートされたＩｇ軽鎖定常領域を含み得る。主題の結合剤コンジュゲートは、本明細書に記載されるＶＨドメイン及び／又はＶＬドメインを含み得る。

【0492】

上に説明されるように、結合剤は、異種部分の結合のための化学ハンドルとして機能し得る２－ホルミルグリシン残基（ｆＧｌｙ）を含むように修飾され得る。例えば、本開示の結合剤の重鎖定常領域及び／又は軽鎖定常領域は、２－ホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用によって、２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）を含有するように変換されることができる、スルファターゼモチーフのアミノ酸配列を含むように修飾され得る。そのようなスルファターゼモチーフは、本明細書では、ＦＧＥ修飾部位とも称され得る。ＦＧＥの作用は、ＦＧＥが免疫グロブリンポリペプチド内に配置されたスルファターゼモチーフに作用するという点で、配列特異的な様式で指向される。目的の部分は、本明細書に記載されるように、タグ化Ｉｇポリペプチドの変換されたアルデヒドタグのｆＧｌｙ残基のアルデヒドと反応するための反応性パートナーの構成要素として提供される。

【0493】

修飾定常領域配列
いくつかの場合において、本明細書に開示される結合剤（例えば、抗体）のアミノ酸配列は、インビボで（例えば、細胞においてアルデヒドタグ含有タンパク質の翻訳時に）、又はインビトロで（例えば、無細胞系においてアルデヒドタグ含有タンパク質とＦＧＥとを接触させることによって）のいずれかで、ホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用によって、２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）残基へと変換する（酸化する）ことが可能なセリン又はシステイン残基を含有するスルファターゼモチーフを含むように修飾される。そのようなスルファターゼモチーフは、本明細書では、ＦＧＥ修飾部位とも称され得る。

【0494】

スルファターゼモチーフ
アルデヒドタグの最小スルファターゼモチーフは、通常、５アミノ酸残基又は６アミノ酸残基の長さであり、通常、６アミノ酸残基以下の長さである。Ｉｇポリペプチドにおいて提供されるスルファターゼモチーフは、少なくとも５個又は６個のアミノ酸残基であり、例えば、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８又は７アミノ酸残基未満の長さを有するスルファターゼモチーフを定義するために、５～１６、６～１６、５～１５、６～１５、５～１４、６～１４、５～１３、６～１３、５～１２、６～１２、５～１１、６～１１、５～１０、６～１０、５～９、６～９、５～８、又は６～８アミノ酸残基の長さであり得る。

【0495】

特定の実施形態において、目的の結合剤は、結合剤中にスルファターゼモチーフの配列を提供するための天然アミノ酸配列に比べて、１個以上のアミノ酸残基、例えば、２個以上、又は３個以上、又は４個以上、又は５個以上、又は６個以上、又は７個以上、又は８個以上、又は９個以上、又は１０個以上、又は１１個以上、又は１２個以上、又は１３個以上、又は１４個以上、又は１５個以上、又は１６個以上、又は１７個以上、又は１８個以上、又は１９個以上、又は２０個以上のアミノ酸残基が挿入され、欠失され、置換され（置き換えられ）ているものを含む。特定の実施形態において、ポリペプチドは、結合剤の天然アミノ酸配列に比べて、アミノ酸配列の２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、又は２個未満のアミノ酸残基の修飾（挿入、付加、欠失、及び／又は置換／置き換え）を含む。結合剤（例えば、抗ＣＤ３０抗体）の天然のアミノ酸配列が、所望のスルファターゼモチーフの１つ以上の残基を含有する場合、残基の修飾の総数は、例えば、所望のスルファターゼモチーフの配列を提供するような天然のアミノ酸残基に隣接するアミノ酸残基の部位特異的修飾（挿入、付加、欠失、置換／置き換え）によって低減され得る。特定の実施形態において、挿入される、欠失される、置換される（置き換えられる）、又は付加される（例えば、Ｎ末端又はＣ末端に対して）アミノ酸残基の数を最小限に抑えるために、標的結合剤、例えば、抗ＣＤ３０抗体の天然アミノ酸配列の修飾の程度が最小限に抑えられる。結合剤、例えば、抗ＣＤ３０抗体のアミノ酸配列の修飾の程度を最小限に抑えることによって、そのような修飾が結合剤の機能及び／又は構造に及ぼし得る影響を最小限に抑えることができる。

【0496】

特定の目的のアルデヒドタグは、少なくとも最小スルファターゼモチーフ（「コンセンサススルファターゼモチーフ」とも称される）を含むものであるが、より長いアルデヒドタグが、本開示によって企図及び包含され、本開示の組成物及び方法において用途を見出し得ることが容易に理解されることに留意されたい。したがって、アルデヒドタグは、５個又は６個の残基の最小スルファターゼモチーフを含んでもよく、又はより長くてもよく、追加のアミノ酸残基がモチーフのＮ末端側及び／又はＣ末端側に隣接し得る最小スルファターゼモチーフを含んでもよい。例えば、５個又は６個のアミノ酸残基のアルデヒドタグ、並びに５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０個以上を超えるアミノ酸残基のより長いアミノ酸配列が企図される。

【0497】

アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣ末端又はその付近に存在してもよく、例えば、アルデヒドタグは、天然の野生型Ｉｇ重鎖のＣ末端の１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個のアミノ酸内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ１ドメイン内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ２ドメイン内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ３ドメイン内に存在し得る。アルデヒドタグは、Ｉｇ軽鎖定常領域内に、例えば、カッパ軽鎖定常領域又はラムダ軽鎖定常領域内に存在し得る。

【0498】

特定の実施形態において、使用されるスルファターゼモチーフは、以下の式：
Ｘ^１Ｚ^１０Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０（Ｉ’）
により説明されてもよく、
式中、
Ｚ^１０は、システイン又はセリンであり（（Ｃ／Ｓ）により表すこともできる）、
Ｚ^２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ^３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、例えば、リジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ^１は、存在するか、又は存在せず、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｓ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが結合剤のＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３は、独立して、任意のアミノ酸であってもよいが、通常は、脂肪族アミノ酸、極性非帯電アミノ酸、又は硫黄含有アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよい。

【0499】

抗体の重鎖及び／又は軽鎖のアミノ酸配列は、式Ｘ^１Ｚ^１０Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０の少なくとも５個のアミノ酸の配列を提供するように修飾されてもよく、式中、
Ｚ^１０は、システイン又はセリンであり、
Ｚ^２０は、プロリン又はアラニン残基であり、
Ｚ^３０は、脂肪族アミノ酸又は塩基性アミノ酸であり、
Ｘ^１は、存在するか、又は存在せず、存在する場合、任意のアミノ酸であり、但し、異種スルファターゼモチーフがポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３は、各々独立して、任意のアミノ酸であり、
この配列は、Ｉｇ定常領域の溶媒接近可能なループ領域の内部にあるか、又はそれに隣接しており、この配列は、Ｉｇ重鎖のＣ末端にはない。

【0500】

スルファターゼモチーフは、一般に、選択されたＦＧＥ、例えば、アルデヒドタグ化結合剤が発現される宿主細胞中に存在するＦＧＥ、又は無細胞インビトロ法においてアルデヒドタグ化ポリペプチドと接触されるＦＧＥによって変換可能なように選択される。

【0501】

例えば、ＦＧＥが真核生物ＦＧＥ（例えば、ヒトＦＧＥを含む哺乳類ＦＧＥ）である場合、スルファターゼモチーフは、以下の式：
Ｘ^１ＣＸ^２ＰＸ^３Ｚ^３０（Ｉ”）
のものであってもよく、
式中、
Ｘ^１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｓ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよく、
Ｚ^３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、例えば、リジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）である。

【0502】

スルファターゼモチーフの具体例としては、ＶＣＴＰＳＲ（配列番号３７）、ＬＣＳＰＳＲ（配列番号３８）、ＬＣＡＰＳＲ（配列番号３９）、ＬＣＶＰＳＲ（配列番号４０）、ＬＣＧＰＳＲ（配列番号４１）、ＩＣＴＰＡＲ（配列番号４２）、ＬＣＴＰＳＫ（配列番号４３）、ＭＣＴＰＳＫ（配列番号４４）、ＶＣＴＰＳＫ（配列番号４５）、ＬＣＳＰＳＫ（配列番号４６）、ＬＣＡＰＳＫ（配列番号４７）、ＬＣＶＰＳＫ（配列番号４８）、ＬＣＧＰＳＫ（配列番号４９）、ＬＣＴＰＳＡ（配列番号５０）、ＩＣＴＰＡＡ（配列番号５１）、ＭＣＴＰＳＡ（配列番号５２）、ＶＣＴＰＳＡ（配列番号５３）、ＬＣＳＰＳＡ（配列番号５４）、ＬＣＡＰＳＡ（配列番号５５）、ＬＣＶＰＳＡ（配列番号５６）、ＬＣＧＰＳＡ（配列番号５７）、ＬＣＴＰＳＲ（配列番号５８）、及びＭＣＴＰＳＲ（配列番号５９）が挙げられる。

【0503】

ｆＧｌｙ含有配列
重鎖及び／又は軽鎖にＦＧＥが作用すると、スルファターゼモチーフ中のセリン又はシステインが、ｆＧｌｙに変換される。したがって、ｆＧｌｙ含有スルファターゼモチーフは、以下の式：
Ｘ^１（ｆＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０（Ｉ’’’）
のものであってもよく、
式中、
ｆＧｌｙは、ホルミルグリシン残基であり、
Ｚ^２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ^３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ^１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよい。

【0504】

上述のように、コンジュゲートを産生するために、ｆＧｌｙ残基を含有する結合剤は、ｆＧｌｙと薬物又は活性薬剤に結合したリンカーの反応性部分（例えば、上述のように、ヒドラジニル－インドリル又はヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分）との反応によって、薬物又は活性薬剤にコンジュゲートされ、ｆＧｌｙ’含有スルファターゼモチーフを産生し得る。本明細書で使用される場合、ｆＧｌｙ’という用語は、本明細書に記載されるように、リンカーを介して薬物又は活性薬剤にカップリングされるスルファターゼモチーフのアミノ酸残基を指す。したがって、ｆＧｌｙ’含有スルファターゼモチーフは、以下の式：
Ｘ^１（ｆＧｌｙ’）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０（ＩＩ）
のものであってもよく、
式中、
ｆＧｌｙ’は、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性薬剤にカップリングされたアミノ酸残基であり、
Ｚ^２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ^３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ^１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが結合剤のＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよい。

【0505】

特定の実施形態において、薬物又は活性薬剤にカップリングされたアミノ酸残基は、結合剤の重鎖定常領域のＣ末端に配置されている。いくつかの事例において、重鎖定常領域は、式（ＩＩＩ）の配列を含み、
Ｘ^１（ｆＧｌｙ’）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０（ＩＩＩ）
式中、
ｆＧｌｙ’は、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性薬剤にカップリングされたアミノ酸残基であり、
Ｚ^２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ^３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ^１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよく、
この配列は、アミノ酸配列ＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１８８）に対してＣ末端であり、この配列は、天然の野生型重鎖Ｉｇ定常領域内に存在しない１、２、３、４、５、又は５～１０個のアミノ酸を含んでもよい。

【0506】

特定の実施形態において、重鎖定常領域は、Ｉｇ重鎖のＣ末端に、例えば、天然ＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号６１）配列の代わりに、配列ＳＬＳＬＳＰＧＳＬ（ｆＧｌｙ’）ＴＰＳＲＧＳ（配列番号６０）を含む。

【0507】

特定の実施形態において、薬物又は活性薬剤にカップリングされたアミノ酸残基は、結合剤の軽鎖定常領域内に配置されている。特定の実施形態において、軽鎖定常領域は、式（ＩＩＩ）の配列を含み、
Ｘ^１（ｆＧｌｙ’）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０（ＩＩＩ）
式中、
ｆＧｌｙ’は、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性薬剤にカップリングされたアミノ酸残基であり、
Ｚ^２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ^３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ^１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよく、
この配列が、アミノ酸配列ＫＶＤＮＡＬ（配列番号６２）に対してＣ末端であり、かつ／又はアミノ酸配列ＱＳＧＮＳＱ（配列番号６３）に対してＮ末端である。

【0508】

特定の実施形態において、軽鎖定常領域は、配列ＫＶＤＮＡＬ（ｆＧｌｙ’）ＴＰＳＲＱＳＧＮＳＱ（配列番号６４）を含む。

【0509】

特定の実施形態において、薬物又は活性薬剤にカップリングされたアミノ酸残基は、抗体などの結合剤の重鎖ＣＨ１領域内に配置されている。特定の実施形態において、重鎖ＣＨ１領域は、式（ＩＩＩ）の配列を含み、
Ｘ^１（ｆＧｌｙ’）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０（ＩＩＩ）
式中、
ｆＧｌｙ’は、本明細書に記載のリンカーを介して薬物又は活性薬剤にカップリングされたアミノ酸残基であり、
Ｚ^２０は、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり（（Ｐ／Ａ）により表すこともできる）、
Ｚ^３０は、塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）又はヒスチジン（Ｈ）、通常はリジンであってもよい）、又は脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、又はプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、又はＩ）であり、
Ｘ^１は、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、Ｓ又はＴ、例えば、Ｌ、Ｍ又はＶであってもよく、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３は、独立して、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、又は極性非帯電アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸又は帯電アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ又はＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ又はＧであってもよく、
この配列が、アミノ酸配列ＳＷＮＳＧＡ（配列番号６５）に対してＣ末端であり、かつ／又はアミノ酸配列ＧＶＨＴＦＰ（配列番号６６）に対してＮ末端である。

【0510】

特定の実施形態において、重鎖ＣＨ１領域は、配列ＳＷＮＳＧＡＬ（ｆＧｌｙ’）ＴＰＳＲＧＶＨＴＦＰ（配列番号６７）を含む。

【0511】

修飾部位
上に示されるように、抗体などの結合剤のアミノ酸配列は、インビボ（例えば、細胞中のアルデヒドタグ含有タンパク質の翻訳のときに）又はインビトロ（例えば、無細胞系において、アルデヒドタグ含有タンパク質をＦＧＥと接触させることによって）のいずれかで、ＦＧＥの作用によってｆＧｌｙ残基に変換（酸化）され得るセリン又はシステイン残基を含有するスルファターゼモチーフを含むように修飾される。本開示のコンジュゲートを生成するために使用された結合剤は、少なくともＩｇ定常領域、例えば、Ｉｇ重鎖定常領域（例えば、少なくともＣＨ１ドメイン；少なくともＣＨ１ドメイン及びＣＨ２ドメイン；ＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、及びＣＨ３ドメイン；若しくはＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、及びＣＨ４ドメイン）、又はＩｇ軽鎖定常領域を含む。そのようなＩｇポリペプチドは、本明細書において「標的Ｉｇポリペプチド」又は「標的抗ＣＤ３０抗体」又は「標的抗ＣＤ３０ Ｉｇポリペプチド」と称される。

【0512】

スルファターゼモチーフが導入される結合剤、例えば、抗体、特に、抗ＣＤ３０抗体中の部位は、任意の好都合な部位であり得る。上に示されるように、いくつかの事例において、挿入される、欠失される、置換される（置き換えられる）、及び／又は付加される（例えば、Ｎ末端又はＣ末端に対して）アミノ酸残基の数を最小限に抑えるために、標的抗ＣＤ３０ポリペプチドの天然アミノ酸配列の修飾の程度が最小限に抑えられる。標的抗ＣＤ３０ポリペプチドのアミノ酸配列の修飾の程度を最小限に抑えることによって、そのような修飾が抗ＣＤ３０の機能及び／又は構造に及ぼし得る影響を最小限に抑えることができる。

【0513】

抗体、例えば、抗ＣＤ３０抗体において、重鎖定常領域は、任意の重鎖アイソタイプのＩｇ定常領域、天然に存在しないＩｇ重鎖定常領域（コンセンサスＩｇ重鎖定常領域を含む）を含み得る。Ｉｇ定常領域アミノ酸配列は、アルデヒドタグを含むように修飾されてもよく、アルデヒドタグは、Ｉｇ定常領域の溶媒接近可能なループ領域の中、又はそれに隣接して存在する。Ｉｇ定常領域アミノ酸配列は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、若しくは１６個のアミノ酸、又は１６個超のアミノ酸の挿入及び／又は置換によって修飾され、上述のようなスルファターゼモチーフのアミノ酸配列を提供することができる。

【0514】

いくつかの場合において、アルデヒドタグ化抗体、例えば、抗ＣＤ３０抗体は、アルデヒドタグ化Ｉｇ重鎖定常領域（例えば、少なくともＣＨ１ドメイン；少なくともＣＨ１ドメイン及びＣＨ２ドメイン；ＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、及びＣＨ３ドメイン；又はＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、及びＣＨ４ドメイン）を含む。アルデヒドタグ化Ｉｇ重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、若しくはＩｇＧ４のアイソタイプ重鎖、又はその任意のアロタイプバリアントの重鎖定常領域配列、例えば、ヒト重鎖定常領域配列若しくはマウス重鎖定常領域配列、ハイブリッド重鎖定常領域、合成重鎖定常領域、又はＦＧＥによって修飾され、ｆＧｌｙ修飾Ｉｇポリペプチドを生成し得る少なくとも１つのスルファターゼモチーフを含むコンセンサス重鎖定常領域配列などを含み得る。Ｉｇ重鎖のアロタイプバリアントは、当該技術分野で既知である。例えば、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ（２００９）ＭＡｂｓ １：４を参照されたい。

【0515】

いくつかの場合において、アルデヒドタグ化抗体、例えば、抗ＣＤ３０抗体は、アルデヒドタグ化Ｉｇ軽鎖定常領域を含む。アルデヒドタグ化Ｉｇ軽鎖定常領域は、カッパ軽鎖、ラムダ軽鎖の定常領域配列、例えば、ヒトカッパ軽鎖定常領域若しくはラムダ軽鎖定常領域、ハイブリッド軽鎖定常領域、合成軽鎖定常領域、又はＦＧＥによって修飾され、ｆＧｌｙ修飾抗体、例えば、ｆＧｌｙ修飾抗ＣＤ３０抗体を生成し得る少なくとも１つのスルファターゼモチーフを含むコンセンサス軽鎖定常領域配列などを含み得る。例示的な定常領域は、ヒトガンマ１及びガンマ３領域を含む。スルファターゼモチーフを除き、定常領域は、野生型アミノ酸配列を有していてもよく、又は野生型アミノ酸配列に対して少なくとも７０％同一（例えば、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％同一）であるアミノ酸配列を有し得る。

【0516】

いくつかの実施形態において、スルファターゼモチーフは、Ｉｇポリペプチド重鎖のＣ末端以外の位置、又はそれに追加した位置にある。上に示されるように、単離されたアルデヒドタグ化抗体、例えば、抗ＣＤ３０抗体は、上述のスルファターゼモチーフを含むように修飾された重鎖定常領域アミノ酸配列を含んでいてもよく、スルファターゼモチーフは、抗体重鎖定常領域の表面接近可能なループ領域の中にあるか、又はそれに隣接している。

【0517】

いくつかの事例において、抗体、例えば、抗ＣＤ３０抗体において、免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、１）アミノ酸１２２～１２７、２）アミノ酸１３７～１４３、３）アミノ酸１５５～１５８、４）アミノ酸１６３～１７０、５）アミノ酸１６３～１８３、６）アミノ酸１７９～１８３、７）アミノ酸１９０～１９２、８）アミノ酸２００～２０２、９）アミノ酸１９９～２０２、１０）アミノ酸２０８～２１２、１１）アミノ酸２２０～２４１、１２）アミノ酸２４７～２５１、１３）アミノ酸２５７～２６１、１４）アミノ酸２６９～２７７、１５）アミノ酸２７１～２７７、１６）アミノ酸２８４～２８５、１７）アミノ酸２８４～２９２、１８）アミノ酸２８９～２９１、１９）アミノ酸２９９～３０３、２０）アミノ酸３０９～３１３、２１）アミノ酸３２０～３２２、２２）アミノ酸３２９～３３５、２３）アミノ酸３４１～３４９、２４）アミノ酸３４２～３４８、２５）アミノ酸３５６～３６５、２６）アミノ酸３７７～３８１、２７）アミノ酸３８８～３９４、２８）アミノ酸３９８～４０７、２９）アミノ酸４３３～４５１、及び３０）アミノ酸４４６～４５１のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ１重鎖定常領域の領域内であるか、又はそれに隣接しており、アミノ酸の付番は、ヒトＩｇＧ１のアミノ酸の付番に基づく。

【0518】

いくつかの事例において、抗体、例えば、抗ＣＤ３０抗体において、免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１６～２２、３）アミノ酸３４～４７、４）アミノ酸４２～４９、５）アミノ酸４２～６２、６）アミノ酸３４～３７、７）アミノ酸６９～７１、８）アミノ酸７９～８１、９）アミノ酸７８～８１、１０）アミノ酸８７～９１、１１）アミノ酸１００～１２１、１２）アミノ酸１２７～１３１、１３）アミノ酸１３７～１４１、１４） ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ １４９～１５７、１５）アミノ酸１５１～１５７、１６）アミノ酸１６４～１６５、１７）アミノ酸１６４～１７２、１８）アミノ酸１６９～１７１、１９）アミノ酸１７９～１８３、２０）アミノ酸１８９～１９３、２１）アミノ酸２００～２０２、２２）アミノ酸２０９～２１５、２３）アミノ酸２２１～２２９、２４）アミノ酸２２～２２８、２５）アミノ酸２３６～２４５、２６）アミノ酸２１７～２６１、２７）アミノ酸２６８～２７４、２８）アミノ酸２７８～２８７、２９）アミノ酸３１３～３３１、ａｎｄ ３０）アミノ酸３２４～３３１のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ１重鎖定常領域の領域内であるか、又はそれに隣接しており、アミノ酸の付番は、ヒトＩｇＧ１（ヒトＩｇＧ１定常領域）のアミノ酸の付番に基づく。

【0519】

ＩｇＧ１重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＡＳＴＫＧＰ（配列番号６８）、２）ＫＳＴＳＧＧＴ（配列番号６９）、３）ＰＥＰＶ（配列番号７０）、４）ＮＳＧＡＬＴＳＧ（配列番号７１）、５）ＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬ（配列番号７２）、６）ＱＳＳＧＬ（配列番号７３）、７）ＶＴＶ、８）ＱＴＹ、９）ＴＱＴＹ（配列番号７４）、１０）ＨＫＰＳＮ（配列番号７５）、１１）ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧ（配列番号７６）、１２）ＦＰＰＫＰ（配列番号７７）、１３）ＩＳＲＴＰ（配列番号７８）、１４）ＤＶＳＨＥＤＰＥＶ（配列番号７９）、１５）ＳＨＥＤＰＥＶ（配列番号８０）、１６）ＤＧ、１７）ＤＧＶＥＶＨＮＡＫ（配列番号８１）、１８）ＨＮＡ、１９）ＱＹＮＳＴ（配列番号８２）、２０）ＶＬＴＶＬ（配列番号８３）、２１）ＧＫＥ、２２）ＮＫＡＬＰＡＰ（配列番号８４）、２３）ＳＫＡＫＧＱＰＲＥ（配列番号８５）、２４）ＫＡＫＧＱＰＲ（配列番号８６）、２５）ＰＰＳＲＫＥＬＴＫＮ（配列番号８７）、２６）ＹＰＳＤＩ（配列番号８８）、２７）ＮＧＱＰＥＮＮ（配列番号８９）、２８）ＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳ（配列番号９０）、２９）ＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号９１）、及び３０）ＳＬＳＰＧＫ（配列番号９２）が挙げられる。

【0520】

いくつかの事例において、標的免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１３～２４、３）アミノ酸３３～３７、４）アミノ酸４３～５４、５）アミノ酸５８～６３、６）アミノ酸６９～７１、７）アミノ酸７８～８０、８）８７～８９、９）アミノ酸９５～９６、１０）１１４～１１８、１１）１２２～１２６、１２）１３４～１３６、１３）１４４～１５２、１４）１５９～１６７、１５）１７５～１７６、１６）１８４～１８８、１７）１９５～１９７、１８）２０４～２１０、１９）２１６～２２４、２０）２３１～２３３、２１）２３７～２４１、２２）２５２～２５６、２３）２６３～２６９、２４）２７３～２８２、２５）アミノ酸２９９～３０２のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ２重鎖定常領域の領域内であるか、又はそれに隣接しており、アミノ酸の付番は、アミノ酸配列（ヒトＩｇＧ２）の付番に基づく。

【0521】

ＩｇＧ２重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＡＳＴＫＧＰ（配列番号６８）、２）ＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡ（配列番号９３）、３）ＦＰＥＰＶ（配列番号９４）、４）ＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰ（配列番号９５）、５）ＱＳＳＧＬＹ（配列番号９６）、６）ＶＴＶ、７）ＴＱＴ、８）ＨＫＰ、９）ＤＫ、１０）ＶＡＧＰＳ（配列番号９７）、１１）ＦＰＰＫＰ（配列番号７７）、１２）ＲＴＰ、１３）ＤＶＳＨＥＤＰＥＶ（配列番号７９）、１４）ＤＧＶＥＶＨＮＡＫ（配列番号８１）、１５）ＦＮ、１６）ＶＬＴＶＶ（配列番号１０１）、１７）ＧＫＥ、１８）ＮＫＧＬＰＡＰ（配列番号１０２）、１９）ＳＫＴＫＧＱＰＲＥ（配列番号１０３）、２０）ＰＰＳ、２１）ＭＴＫＮＱ（配列番号１０４）、２２）ＹＰＳＤＩ（配列番号８８）、２３）ＮＧＱＰＥＮＮ（配列番号８９）、２４）ＴＰＰＭＬＤＳＤＧＳ（配列番号１０７）、２５）ＧＮＶＦ（配列番号１０８）、及び２６）ＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号９１）が挙げられる。

【0522】

いくつかの事例において、標的免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１３～２２、３）アミノ酸３３～３７、４）アミノ酸４３～６１、５）アミノ酸７１、６）アミノ酸７８～８０、７）８７～９１、８）アミノ酸９７～１０６、９）１１１～１１５、１０）１４７～１６７、１１）１７３～１７７、１６）１８５～１８７、１３）１９５～２０３、１４）２１０～２１８、１５）２２６～２２７、１６）２３８～２３９、１７）２４６～２４８、１８）２５５～２６１、１９）２６７～２７５、２０）２８２～２９１、２１）アミノ酸３０３～３０７、２２）アミノ酸３１３～３２０、２３）アミノ酸３２４～３３３、２４）アミノ酸３５０～３５２、２５）アミノ酸３５９～３６５、及び２６）アミノ酸３７２～３７７のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ３重鎖定常領域の領域内であるか、又はそれに隣接しており、アミノ酸の付番は、アミノ酸配列（ヒトＩｇＧ３）の付番に基づく。

【0523】

ＩｇＧ３重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＡＳＴＫＧＰ（配列番号６８）、２）ＰＣＳＲＳＴＳＧＧＴ（配列番号１１０）、３）ＦＰＥＰＶ（配列番号９４）、４）ＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧ（配列番号１１２）、５）Ｖ、６）ＴＱＴ、７）ＨＫＰＳＮ（配列番号７５）、８）ＲＶＥＬＫＴＰＬＧＤ（配列番号１１４）、９）ＣＰＲＣＰＫＰ（配列番号１１５）、１０）ＰＫＳＣＤＴＰＰＰＣＰＲＣＰＡＰＥＬＬＧＧ（配列番号１１６）、１１）ＦＰＰＫＰ（配列番号７７）、１２）ＲＴＰ、１３）ＤＶＳＨＥＤＰＥＶ（配列番号７９）、１４）ＤＧＶＥＶＨＮＡＫ（配列番号８１）、１５）ＹＮ、１６）ＶＬ、１７）ＧＫＥ、１８）ＮＫＡＬＰＡＰ（配列番号８４）、１９）ＳＫＴＫＧＱＰＲＥ（配列番号１０３）、２０）ＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮ（配列番号１２２）、２１）ＹＰＳＤＩ（配列番号８８）、２２）ＳＳＧＱＰＥＮＮ（配列番号１２４）、２３）ＴＰＰＭＬＤＳＤＧＳ（配列番号１０７）、２４）ＧＮＩ、２５）ＨＥＡＬＨＮＲ（配列番号１２６）、及び２６）ＳＬＳＰＧＫ（配列番号９２）が挙げられる。

【0524】

いくつかの事例において、標的免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、１）アミノ酸１～５、２）アミノ酸１２～２３、３）アミノ酸３２～３６、４）アミノ酸４２～５３、５）アミノ酸５７～６２、６）アミノ酸６８～７０、７）アミノ酸７７～７９、８）アミノ酸８６～８８、９）アミノ酸９４～９５、１０）アミノ酸１０１～１０２、１１）アミノ酸１０８～１１８、１２）アミノ酸１２２～１２６、１３）アミノ酸１３４～１３６、１４）アミノ酸１４４～１５２、１５）アミノ酸１５９～１６７、１６）アミノ酸１７５～１７６、１７）アミノ酸１８５～１８６、１８）アミノ酸１９６～１９８、１９）アミノ酸２０５～２１１、２０）アミノ酸２１７～２２６、２１）アミノ酸２３２～２４１、２２）アミノ酸２５３～２５７、２３）アミノ酸２６４～２６５、２４）２６９～２７０、２５）アミノ酸２７４～２８３、２６）アミノ酸３００～３０３、２７）アミノ酸３９９～４１７のうちの１つ以上に対応するＩｇＧ４重鎖定常領域の領域内であるか、又はそれに隣接しており、アミノ酸の付番は、アミノ酸配列（ヒトＩｇＧ４）の付番に基づく。

【0525】

ＩｇＧ４重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＳＴＫＧＰ（配列番号１２８）、２）ＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡ（配列番号９３）、３）ＦＰＥＰＶ（配列番号９４）、４）ＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰ（配列番号９５）、５）ＱＳＳＧＬＹ（配列番号９６）、６）ＶＴＶ、７）ＴＫＴ、８）ＨＫＰ、９）ＤＫ、１０）ＹＧ、１１）ＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳ（配列番号１３３）、１２）ＦＰＰＫＰ（配列番号７７）、１３）ＲＴＰ、１４）ＤＶＳＱＥＤＰＥＶ（配列番号１３５）、１５）ＤＧＶＥＶＨＮＡＫ（配列番号８１）、１６）ＦＮ、１７）ＶＬ、１８）ＧＫＥ、１９）ＮＫＧＬＰＳＳ（配列番号１３７）、２０）ＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰ（配列番号１３８）、２１）ＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮ（配列番号１３９）、２２）ＹＰＳＤＩ（配列番号８８）、２３）ＮＧ、２４）ＮＮ、２５）ＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳ（配列番号９０）、２６）ＧＮＶＦ（配列番号１０８）、及び２７）ＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号１４３）が挙げられる。

【0526】

いくつかの事例において、結合剤は、上に記載されるスルファターゼモチーフを含むように修飾され、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換を含む。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、１）アミノ酸１～１３、２）アミノ酸１７～２１、３）アミノ酸２８～３２、４）アミノ酸４４～５４、５）アミノ酸６０～６６、６）アミノ酸７３～７６、７）アミノ酸８０～８２、８）アミノ酸９０～９１、９）アミノ酸１２３～１２５、１０）アミノ酸１３０～１３３、１１）アミノ酸１３８～１４２、１２）アミノ酸１５１～１５８、１３）アミノ酸１６５～１７４、１４）アミノ酸１８１～１８４、１５）アミノ酸１９２～１９５、１６）アミノ酸１９９、１７）アミノ酸２０９～２１０、１８）アミノ酸２２２～２４５、１９）アミノ酸２５２～２５６、２０）アミノ酸２６６～２７６、２１）アミノ酸２９３～２９４、２２）アミノ酸３０１～３０４、２３）アミノ酸３１７～３２０、２４）アミノ酸３２９～３５３のうちの１つ以上に対応するＩｇＡ重鎖定常領域の領域内であるか、又はそれに隣接しており、アミノ酸の付番は、アミノ酸配列（ヒトＩｇＡ）の付番に基づく。

【0527】

ＩｇＡ重鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、１）ＡＳＰＴＳＰＫＶＦＰＬＳＬ（配列番号１４４）、２）ＱＰＤＧＮ（配列番号１４５）、３）ＶＱＧＦＦＰＱＥＰＬ（配列番号１４６）、４）ＳＧＱＧＶＴＡＲＮＦＰ（配列番号１４７）、５）ＳＧＤＬＹＴＴ（配列番号１４８）、６）ＰＡＴＱ（配列番号１４９）、７）ＧＫＳ、８）ＹＴ、９）ＣＨＰ、１０）ＨＲＰＡ（配列番号１５０）、１１）ＬＬＧＳＥ（配列番号１５１）、１２）ＧＬＲＤＡＳＧＶ（配列番号１５２）、１３）ＳＳＧＫＳＡＶＱＧＰ（配列番号１５３）、１４）ＧＣＹＳ（配列番号１５４）、１５）ＣＡＥＰ（配列番号１５５）、１６）ＰＥ、１７）ＳＧＮＴＦＲＰＥＶＨＬＬＰＰＰＳＥＥＬＡＬＮＥＬ（配列番号１５６）、１８）ＡＲＧＦＳ（配列番号１５７）、１９）ＱＧＳＱＥＬＰＲＥＫＹ（配列番号１５８）、２０）ＡＶ、２１）ＡＡＥＤ（配列番号１５９）、２２）ＨＥＡＬ（配列番号１６０）、及び２３）ＩＤＲＬＡＧＫＰＴＨＶＮＶＳＶＶＭＡＥＶＤＧＴＣＹ（配列番号１６１）が挙げられる。

【0528】

スルファターゼモチーフは、Ｉｇ重鎖のそのような修飾部位のこれらのアミノ酸配列のうちの１つ以上の内部に、又はそれに隣接して提供され得る。例えば、Ｉｇ重鎖ポリペプチドアミノ酸配列は、これらのアミノ酸配列のうちの１つ以上で修飾され（例えば、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換を含む場合）、これらの修飾部位に隣接してＮ末端に、及び／又は隣接してＣ末端にスルファターゼモチーフを提供することができる。代替的に、又はこれに加えて、Ｉｇ重鎖ポリペプチドアミノ酸配列は、これらのアミノ酸配列のうちの１つ以上で修飾され（例えば、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換を含む場合）、Ｉｇ重鎖修飾部位の任意の２つの残基間にスルファターゼモチーフを提供することができる。いくつかの実施形態において、Ｉｇ重鎖ポリペプチドアミノ酸配列は、２つのモチーフを含むように修飾されてもよく、これらは互いに隣接していてもよく、又は１個、２個、３個、４個以上（例えば、約１～約２５個、約２５～約５０個、若しくは約５０～約１００個以上）のアミノ酸によって分離されてもよい。代替的に、又はこれに加えて、天然アミノ酸配列がスルファターゼモチーフ配列の１つ以上のアミノ酸残基を提供する場合、Ｉｇ重鎖ポリペプチドアミノ酸配列の修飾部位の選択されたアミノ酸残基は、修飾部位にスルファターゼモチーフを提供するように修飾され得る（例えば、修飾が、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換を含む場合）。

【0529】

したがって、表面接近可能なループ領域のアミノ酸配列を修飾してスルファターゼモチーフを提供することができ、修飾は、挿入、欠失、及び／又は置換を含み得る。例えば、修飾がＣＨ１ドメイン中にある場合、表面接近可能なループ領域は、アミノ酸配列ＮＳＧＡＬＴＳＧ（配列番号７１）を有していてもよく、アルデヒドタグ化配列は、例えば、ＮＳＧＡＬＣＴＰＳＲＧ（配列番号１６２）であってもよく、例えば、ＮＳＧＡＬＴＳＧ（配列番号７１）配列の「ＴＳ」残基が、スルファターゼモチーフが配列ＬＣＴＰＳＲを有するように、「ＣＴＰＳＲ」と置き換えられている。別の例として、修飾がＣＨ２ドメイン内にある場合、表面接近可能なループ領域は、アミノ酸配列ＮＫＡＬＰＡＰ（配列番号８４）を有してもよく、アルデヒドタグ化配列は、例えば、ＮＬＣＴＰＳＲＡＰ（配列番号１６３）であってもよく、例えば、ＮＫＡＬＰＡＰ配列の「ＫＡＬ」残基は、スルファターゼモチーフが配列ＬＣＴＰＳＲを有するように、「ＬＣＴＰＳＲ」と置き換えられている。別の例として、修飾がＣＨ２／ＣＨ３ドメイン内にある場合、表面接近可能なループ領域は、アミノ酸配列ＫＡＫＧＱＰＲ（配列番号８６）を有してもよく、アルデヒドタグ化配列は、例えば、
（配列表１）

であってもよく、例えば、ＫＡＫＧＱＰＲ配列の「ＧＱＰ」残基は、スルファターゼモチーフが配列ＬＣＴＰＳＲを有するように、「ＬＣＴＰＳ」と置き換えられている。

【0530】

上に示されるように、単離されたアルデヒドタグ化抗体、例えば、抗ＣＤ３０抗体は、上述のスルファターゼモチーフを含むように修飾された軽鎖定常領域アミノ酸配列を含んでいてもよく、スルファターゼモチーフは、Ｉｇポリペプチド軽鎖定常領域の表面接近可能なループ領域の中にあるか、又はそれに隣接している。

【0531】

いくつかの事例において、標的免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、１）アミノ酸１３０～１３５、２）アミノ酸１４１～１４３、３）アミノ酸１５０、４）アミノ酸１６２～１６６、５）アミノ酸１６３～１６６、６）アミノ酸１７３～１８０、７）アミノ酸１８６～１９４、８）アミノ酸２１１～２１２、９）アミノ酸２２０～２２５、１０）アミノ酸２３３～２３６のうちの１つ以上に対応するＩｇ軽鎖定常領域の領域内であるか、又はそれに隣接しており、アミノ酸の付番は、ヒトカッパ軽鎖のアミノ酸の付番に基づく。いくつかの事例において、標的免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１２～１４、３）アミノ酸２１、４）アミノ酸３３～３７、５）アミノ酸３４～３７、６）アミノ酸４４～５１、７）アミノ酸５７～６５、８）アミノ酸８３～８３、９）アミノ酸９１～９６、１０）アミノ酸１０４～１０７のうちの１つ以上に対応するＩｇ軽鎖定常領域の領域内であるか、又はそれに隣接しており、アミノ酸の付番は、ヒトカッパ軽鎖に基づく。

【0532】

Ｉｇ軽鎖（例えば、ヒトカッパ軽鎖）の例示的な表面接近可能なループ領域は、１）ＲＴＶＡＡＰ（配列番号１６５）、２）ＰＰＳ、３）Ｇｌｙ（例えば、ヒトカッパ軽鎖配列の位置１５０のＧｌｙを参照されたい）、４）ＹＰＲＥＡ（配列番号１６６）、５）ＰＲＥＡ、６）ＤＮＡＬＱＳＧＮ（配列番号１６７）、７）ＴＥＱＤＳＫＤＳＴ（配列番号１６８）、８）ＨＫ、９）ＨＱＧＬＳＳ（配列番号１６９）、及び１０）ＲＧＥＣ（配列番号１７０）を含む。

【0533】

Ｉｇラムダ軽鎖の例示的な表面接近可能なループ領域としては、ＱＰＫＡＡＰ（配列番号１７１）、ＰＰＳ、ＮＫ、ＤＦＹＰＧＡＶ（配列番号１７２）、ＤＳＳＰＶＫＡＧ（配列番号１７３）、ＴＴＰ、ＳＮ、ＨＫＳ、ＥＧ、及びＡＰＴＥＣＳ（配列番号１７４）が挙げられる。

【0534】

いくつかの事例において、標的免疫グロブリンアミノ酸配列は、上記のスルファターゼモチーフを含むように修飾され、この修飾には、１つ以上のアミノ酸残基の挿入、欠失、及び／又は置換が含まれる。特定の実施形態において、スルファターゼモチーフは、１）アミノ酸１～６、２）アミノ酸１２～１４、３）アミノ酸１２１～２２、４）アミノ酸３１～３７、５）アミノ酸４４～５１、６）アミノ酸５５～５７、７）アミノ酸６１～６２、８）アミノ酸８１～８３、９）アミノ酸９１～９２、１０）アミノ酸１０２～１０５のうちの１つ以上に対応するラットＩｇ軽鎖定常領域の領域内であるか、又はそれに隣接しており、アミノ酸の付番は、ラット軽鎖のアミノ酸の付番に基づく。

【0535】

いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、重鎖定常領域のＣＨ１領域に導入される。いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、重鎖のＣ末端又はその付近（例えば、１～１０アミノ酸以内）に導入される。いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、軽鎖定常領域に導入される。

【0536】

いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＣＤ３０重鎖定常領域のＣＨ１領域に、例えば、ＩｇＧ１重鎖アミノ酸配列のアミノ酸１２１～２１９内に導入される。例えば、いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、以下のアミノ酸配列に導入される。
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥ（配列番号１７５）。例えば、これらの実施形態のいくつかにおいて、アミノ酸配列ＧＡＬＴＳＧＶＨ（配列番号１９３）は、ＧＡＬＣＴＰＳＲＧＶＨ（配列番号１９４）へと修飾され、ここで、スルファターゼモチーフが、ＬＣＴＰＳＲ（配列番号５８）である。

【0537】

いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、配列番号１７５の９１番目の位置のアスパラギン残基の前に追加される。スルファターゼモチーフは、ＬＣＴＰＳＲ（配列番号５８）であってもよい。例えば、スルファターゼモチーフＬＣＴＰＳＲ（配列番号５８）を、配列番号１７５の９１番目の位置のアスパラギン残基の前に追加し、ＫＰＳＬＣＴＰＳＲＮＴＫ（配列番号１８９）の配列を含む抗体を産生することができる。スルファターゼモチーフのこの挿入部位は、本明細書において９１Ｎとして参照される。

【0538】

９１Ｎ部位におけるスルファターゼモチーフの挿入の特定の詳細は、米国特許出願公開第２０２０／００１０５６１号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。

【0539】

例えば、スルファターゼモチーフＬＣＴＰＳＲ（配列番号５８）を、配列番号１７５の９１番目の位置のアスパラギン残基の前に追加し、以下の配列を含む抗体を産生することができる（スルファターゼモチーフは、太字及び斜体で強調表示され、９１番目のアスパラギン残基は、太字で強調表示される）。
（配列表２）

【0540】

いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、配列番号１７５に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の配列同一性を有する配列において、９１番目のアスパラギン残基の前に追加される。そのような配列と配列番号１７５の配列との配列アラインメントに基づいて、当業者は、９１番目のアスパラギン残基の位置を容易に決定することができ、したがって、スルファターゼモチーフの挿入部位を決定することができる。

【0541】

９１Ｎ部位にスルファターゼモチーフの挿入を有する抗体の非限定的な例は、以下に記載される実施例９～１０及び図１８～２１に提供される。

【0542】

いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗体重鎖のＣ末端又はその付近に導入され、例えば、スルファターゼモチーフは、抗体重鎖のＣ末端の１アミノ酸、２アミノ酸（ａａ）、３ａａ、４ａａ、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、又は１０ａａ内に導入される。１つの非限定的な例として、抗体重鎖のＣ末端リジン残基を、アミノ酸配列ＳＬＣＴＰＳＲＧＳ（配列番号１９５）と置き換えることができる。

【0543】

いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＣＤ３０抗体の軽鎖の定常領域に導入される。１つの非限定的な例として、いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、抗ＣＤ３０抗体の軽鎖の定常領域に導入され、スルファターゼモチーフが、ＫＶＤＮＡＬ（配列番号６２）に対してＣ末端であり、かつ／又はＱＳＧＮＳＱ（配列番号６３）に対してＮ末端である。例えば、いくつかの場合において、スルファターゼモチーフは、ＬＣＴＰＳＲ（配列番号５８）であり、抗ＣＤ３０軽鎖は、アミノ酸配列ＫＶＤＮＡＬＬＣＴＰＳＲＱＳＧＮＳＱ（配列番号１７６）を含む。

【0544】

薬物
いくつかの場合において、本開示の結合剤は、抗体の重鎖及び／又は軽鎖に共有結合した薬物を含む。「薬物」としては、小分子薬物、ペプチド薬物、毒素（例えば、サイトトキシン）などが挙げられる。いくつかの場合において、本開示の結合剤は、抗体の重鎖及び／又は軽鎖に共有結合した薬物（例えば、本明細書に記載の式（Ｉ）及び式（Ｉａ）のコンジュゲート中のＷ^１、又は本明細書に記載の式（ＩＩ）のコンジュゲート中のＷ^１１若しくはＷ^１２）を有する。例えば、本開示の結合剤（例えば、抗体）コンジュゲートは、置換基Ｗ^１、Ｗ^１１又はＷ^１２として、本明細書に記載されるような薬物又は活性薬剤を含み得る。

【0545】

本明細書で使用される場合の「小分子薬物」は、化合物、例えば、有機化合物を指し、それは、対象の薬学的活性を示し、それが概して、約８００Ｄａ以下、又は２０００Ｄａ以下の分子量であるが、最大５ｋＤａの分子を包含してもよく、約１０ｋＤａと同じ程度の大きさであり得る。小さな無機分子は、炭素原子を含有しない分子を指し、小さな有機分子は、少なくとも１個の炭素原子を含有する化合物を指す。

【0546】

本明細書で使用される場合の「ペプチド薬物」は、ポリマー化合物を含有するアミノ酸を指し、天然型及び非天然型ペプチド、オリゴペプチド、環式ペプチド、及びタンパク質、並びにペプチド模倣物を包含することを意味する。ペプチド薬物は、化学合成によって得られることができるか、又は遺伝子的にコードされた供給源（例えば、組換え源）から生成され得る。ペプチド薬物は、分子量を変動し得、２００Ｄａ～１０ｋＤａ以上の分子量であり得る。

【0547】

いくつかの場合において、薬物は、毒素、例えば、サイトトキシンである。高等植物に遍在するタンパク質の一種であるリボソーム不活性化タンパク質（ＲＩＰ）は、そのようなサイトトキシンの一例である。好適なサイトトキシンとしては、限定するものではないが、リシン、アブリン、ジフテリア毒素、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素（例えば、ＰＥ３５、ＰＥ３７、ＰＥ３８、ＰＥ４０など）、サポリン、ゲロニン、ポケウィード抗ウイルスタンパク質（ＰＡＰ）、ボツリヌス毒素、ブリオジン、モモルジン、及びブガニンが挙げられる。

【0548】

いくつかの場合において、薬物は、がん化学療法剤である。がん化学療法剤は、がん細胞の増殖を低減する非ペプチド性（すなわち、非タンパク質性）化合物を含み、細胞傷害性剤及び細胞増殖抑制剤を包含する。化学療法剤の非限定的な例としては、アルキル化剤、ニトロソウレア、代謝拮抗物質、抗腫瘍抗生物質、植物（ビンカ）アルカロイド、又はステロイドホルモンが挙げられる。ペプチド性化合物も又は使用され得る。

【0549】

好適ながん化学療法剤は、ドラスタチン並びにその活性類似体及び誘導体と、アウリスタチン並びにその活性類似体及び誘導体とを含む。好適ながん化学療法剤はまた、メイタンシノイド並びにその活性類似体及び誘導体と、デュオカルマイシン並びにその活性類似体及び誘導体とを含む。

【0550】

特定の実施形態において、薬物又は活性薬剤は、メイタンシンであり得る。「メイタンシン」、「メイタンシン部分」、「メイタンシン活性薬剤部分」、及び「メイタンシノイド」は、メイタンシン、並びにその類似体及び誘導体、並びに薬学的に活性なメイタンシン部分及び／又はその一部を指す。ポリペプチドにコンジュゲートされたメイタンシンは、限定されないが、本明細書に記載されるようなメイタンシン並びにその類似体及び誘導体（例えば、デアシルメイタンシン）など、様々なメイタンシノイド部分のうちのいずれかであり得る。

【0551】

特定の実施形態において、薬物又は活性薬剤は、アウリスタチン、又はその類似体若しくは誘導体、又は薬学的に活性なアウリスタチン部分及び／又はその部分であり得る。ポリペプチドにコンジュゲートされたアウリスタチンは、限定されないが、本明細書に記載されるようなアウリスタチン並びにその類似体及び誘導体など、様々なアウリスタチン部分のうちのいずれかであり得る。本明細書に記載のコンジュゲート及び化合物で使用されることが見出される薬物の例としては、モノメチルアウリスタチンＤ（ＭＭＡＤ）、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）、モノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）、それらの誘導体などのアウリスタチン又はアウリスタチン誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。

【0552】

いくつかの場合において、好適ながん化学療法剤は、カンプトテシン及びその誘導体（例えば、トポテカン、イリノテカン、ベロテカン、エキサテカン、ＳＮ－３８、シラテカン、コシテカン、ルルトテカン、ギマテカン、ルビテカン、９－アミノカンプトテシン（９－ＡＣ）など）などのトポイソメラーゼ阻害剤を含むが、これらに限定されない。

【0553】

特定の実施形態において、本明細書に記載の式（Ｉ）及び式（Ｉａ）中の薬物Ｗ^１、又は本明細書に記載の式（ＩＩ）中のＷ^１１若しくはＷ^１２は、カンプトテシン、又はその類似体若しくは誘導体である。例えば、いくつかの事例において、カンプトテシン、又はその類似体若しくは誘導体は、式（ＩＶ）：

【化53】

の化合物であり、
式中、
Ｒ^３１及びＲ^３２が、各々独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択されるか、又はＲ^３１及びＲ^３２が、任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のシクロアルキル若しくはヘテロシクリル環を形成し、
Ｒ^３３及びＲ^３４が、各々独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択されるか、又はＲ^３３及びＲ^３４が、任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のシクロアルキル若しくはヘテロシクリル環を形成し、
Ｒ^３５が、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ^３６が、ＯＨ及びＯＣ（Ｏ）Ｒ^３７から選択され、
Ｒ^３７が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。

【0554】

式（ＩＶ）の特定の実施形態において、本明細書に記載の式（Ｉ）又は式（Ｉａ）中のリンカーＬ、又は本明細書に記載の式（ＩＩ）中の第１のリンカーＬ^Ａ若しくは第２のリンカーＬ^Ｂは、Ｒ^３１、Ｒ^３２、Ｒ^３３、Ｒ^３４、Ｒ^３５又はＲ^３６で式（ＩＶ）の化合物に結合している。

【0555】

特定の実施形態において、Ｒ^３１及びＲ^３２は、各々独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択されるか、又はＲ^３１及びＲ^３２が、任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のシクロアルキル若しくはヘテロシクリル環を形成する。

【0556】

特定の実施形態において、Ｒ^３１は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^３１は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^３１は、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）である。特定の実施形態において、Ｒ^３１は、ヒドロキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３１は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^３１は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３１は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３１は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３１は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0557】

特定の実施形態において、Ｒ^３２は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^３２は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^３２は、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）である。特定の実施形態において、Ｒ^３２は、ヒドロキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３２は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^３２は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３２は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３２は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３２は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0558】

特定の実施形態において、Ｒ^３１及びＲ^３２は、任意選択的に環状に連結され、５又は６員のシクロアルキル又はヘテロシクリル環を形成する。特定の実施形態において、Ｒ^３１及びＲ^３２は、環状に連結され、５又は６員のシクロアルキルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^３１及びＲ^３２は、環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^３１及びＲ^３２は、環状に連結して、５員のシクロアルキルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^３１及びＲ^３２は、環状に連結され、６員のシクロアルキルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^３１及びＲ^３２は、環状に連結して、５員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^３１及びＲ^３２は、環状に連結して、６員のヘテロシクリルを形成する。

【0559】

特定の実施形態において、Ｒ^３３及びＲ^３４は、各々独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択されるか、又はＲ^３３及びＲ^３４が、任意選択的に環状に連結され、５若しくは６員のシクロアルキル若しくはヘテロシクリル環を形成する。

【0560】

特定の実施形態において、Ｒ^３３は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^３３は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^３３は、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）である。特定の実施形態において、Ｒ^３３は、ヒドロキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３３は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^３３は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１～６アルキル若しくはＣ_１～６置換アルキル、又はＣ_１～４アルキル若しくはＣ_１～４置換アルキル、又はＣ_１～３アルキル若しくはＣ_１～３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３３は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^３３は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３３は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３３は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３３は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３３は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３３は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３３は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0561】

特定の実施形態において、Ｒ^３４は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^３４は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^３４は、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）である。特定の実施形態において、Ｒ^３４は、ヒドロキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３４は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^３４は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３４は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^３４は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３４は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３４は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３４は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３４は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３４は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３４は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0562】

特定の実施形態において、Ｒ^３３及びＲ^３４は、任意選択的に環状に連結され、５又は６員のシクロアルキル又はヘテロシクリル環を形成する。特定の実施形態において、Ｒ^３３及びＲ^３４は、環状に連結され、５又は６員のシクロアルキルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^３３及びＲ^３４は、環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^３３及びＲ^３４は、環状に連結して、５員のシクロアルキルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^３３及びＲ^３４は、環状に連結され、６員のシクロアルキルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^３３及びＲ^３４は、環状に連結して、５員のヘテロシクリルを形成する。特定の実施形態において、Ｒ^３３及びＲ^３４は、環状に連結して、６員のヘテロシクリルを形成する。

【0563】

特定の実施形態において、Ｒ^３５は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、置換アミノ、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^３５は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^３５は、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）である。特定の実施形態において、Ｒ^３５は、ヒドロキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３５は、アミノ又は置換アミノである。特定の実施形態において、Ｒ^３５は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３５は、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ^３５は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３５は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３５は、アルコキシ又は置換アルコキシである。特定の実施形態において、Ｒ^３５は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３５は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３５は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３５は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0564】

特定の実施形態において、Ｒ^３６は、ＯＨ及びＯＣ（Ｏ）Ｒ^３７から選択される。特定の実施形態において、Ｒ^３６は、ＯＨである。特定の実施形態において、Ｒ^３６は、ＯＣ（Ｏ）Ｒ^３７である。

【0565】

特定の実施形態において、Ｒ^３７は、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^３７は、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^３７は、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３７は、アルケニル若しくは置換アルケニル、例えば、Ｃ_２－６アルケニル若しくはＣ_２－６置換アルケニル、又はＣ_２－４アルケニル若しくはＣ_２－４置換アルケニル、又はＣ_２－３アルケニル若しくはＣ_２－３置換アルケニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３７は、アルキニル又は置換アルキニルである。特定の実施形態において、Ｒ^３７は、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３７は、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３７は、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３７は、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。

【0566】

特定の実施形態において、式（ＩＶ）の化合物は、式（ＩＶａ）：

【化54】

の構造を有する。

【0567】

式（ＩＶａ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３３は、上に説明した通りである。

【0568】

式（ＩＶａ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３６は、上に説明した通りである。

【0569】

式（ＩＶａ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３３は、ＯＨであり、Ｌは、Ｒ^３６に結合している。式（ＩＶａ）の化合物の特定の実施形態において、Ｌは、Ｒ^３３に結合しており、Ｒ^３６は、ＯＨである。

【0570】

特定の実施形態において、式（ＩＶ）の化合物は、式（ＩＶｂ）：

【化55】

の構造を有する。

【0571】

式（ＩＶｂ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３１ａは、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、及びスルホニルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^３１ａは、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^３１ａは、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ａは、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ａは、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ａは、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ａは、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ａは、カルボキシルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ａは、カルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ａは、アシルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ａは、スルホニルである。

【0572】

式（ＩＶｂ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３６は、上に説明した通りである。

【0573】

式（ＩＶｂ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３１ａは、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、及びスルホニルから選択され、Ｌは、Ｒ^３６に結合している。式（ＩＶｂ）の化合物の特定の実施形態において、Ｌは、Ｒ^３１ａに結合しており、Ｒ^３６は、ＯＨである。

【0574】

特定の実施形態において、式（ＩＶ）の化合物は、式（ＩＶｃ）：

【化56】

の構造を有する。

【0575】

式（ＩＶｃ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３１ｂは、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、及びスルホニルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^３１ｂは、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^３１ｂは、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ｂは、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ｂは、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ｂは、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ｂは、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ｂは、カルボキシルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ｂは、カルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ｂは、アシルである。特定の実施形態において、Ｒ^３１ｂは、スルホニルである。

【0576】

式（ＩＶｃ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３６は、上に説明した通りである。

【0577】

式（ＩＶｃ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３１ｂは、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、及びスルホニルから選択され、Ｌは、Ｒ^３６に結合している。式（ＩＶｃ）の化合物の特定の実施形態において、Ｌは、Ｒ^３１ｂに結合しており、Ｒ^３６は、ＯＨである。

【0578】

特定の実施形態において、式（ＩＶ）の化合物は、式（ＩＶｄ）：

【化57】

の構造を有する。

【0579】

式（ＩＶｄ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３２ａ及びＲ^３２ｂは、各々独立して、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、及びスルホニルから選択される。

【0580】

式（ＩＶｄ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３２ａは、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、及びスルホニルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^３２ａは、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^３２ａは、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ａは、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ａは、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ａは、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ａは、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ａは、カルボキシルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ａは、カルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ａは、アシルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ａは、スルホニルである。

【0581】

式（ＩＶｄ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３２ｂは、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、及びスルホニルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ^３２ｂは、水素である。特定の実施形態において、Ｒ^３２ｂは、アルキル若しくは置換アルキル、例えば、Ｃ_１－６アルキル若しくはＣ_１－６置換アルキル、又はＣ_１－４アルキル若しくはＣ_１－４置換アルキル、又はＣ_１－３アルキル若しくはＣ_１－３置換アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ｂは、アリール若しくは置換アリール、例えば、Ｃ_５－８アリール若しくはＣ_５－８置換アリール、例えば、Ｃ_５アリール若しくはＣ_５置換アリール、又はＣ_６アリール若しくはＣ_６置換アリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ｂは、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５－８ヘテロアリール若しくはＣ_５－８置換ヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリール若しくはＣ_５置換ヘテロアリール、又はＣ_６ヘテロアリール若しくはＣ_６置換ヘテロアリールである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ｂは、シクロアルキル若しくは置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－８シクロアルキル若しくはＣ_３－８置換シクロアルキル、例えば、Ｃ_３－６シクロアルキル若しくはＣ_３－６置換シクロアルキル、又はＣ_３－５シクロアルキル若しくはＣ_３－５置換シクロアルキルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ｂは、ヘテロシクリル若しくは置換ヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３－６ヘテロシクリル若しくはＣ_３－６置換ヘテロシクリル、又はＣ_３－５ヘテロシクリル若しくはＣ_３－５置換ヘテロシクリルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ｂは、カルボキシルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ｂは、カルボキシルエステルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ｂは、アシルである。特定の実施形態において、Ｒ^３２ｂは、スルホニルである。

【0582】

式（ＩＶｄ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３６は、上に説明した通りである。

【0583】

式（ＩＶｄ）の化合物の特定の実施形態において、Ｒ^３２ａ及びＲ^３２ｂは、各々独立して、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、置換ヘテロシクリル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、及びスルホニルから選択され、Ｌは、Ｒ^３６に結合している。式（ＩＶｄ）の化合物の特定の実施形態において、Ｌは、Ｒ^３２ａ又はＲ^３２ｂに結合しており、Ｒ^３６は、ＯＨである。式（ＩＶｄ）の化合物の特定の実施形態において、Ｌは、Ｒ^３２ａに結合しており、Ｒ^３６は、ＯＨである。式（ＩＶｄ）の化合物の特定の実施形態において、Ｌは、Ｒ^３２ｂに結合しており、Ｒ^３６は、ＯＨである。

【0584】

細胞増殖を減少させるために作用する薬剤は、当該技術分野で既知であり、幅広く使用される。そのような薬剤としては、メクロレタミン、シクロホスファミド（シトキサン（商標））、メルファラン（Ｌ－サルコリシン）、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、セムスチン（メチル－ＣＣＮＵ）、ストレプトゾシン、クロロゾトシン、ウラシルマスタード、クロルメチン、イホスファミド、クロラムブシル、ピポブロマン、トリエチレンメラミン、トリエチレンチオホスホラミン、ブスルファン、ダカルバジン、及びテモゾロミドを含むが、これらに限定されない、ナイトロジェンマスタード、ニトロソウレア、エチレンイミン誘導体、アルキルスルホネート、及びトリアゼンなどのアルキル化剤が挙げられる。

【0585】

代謝拮抗剤としては、シタラビン（ＣＹＴＯＳＡＲ－Ｕ）、シトシンアラビノシド、フルオロウラシル（５－ＦＵ）、フロクスウリジン（ＦｕｄＲ）、６－チオグアニン、６－メルカプトプリン（６－ＭＰ）、ペントスタチン、５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）、メトトレキサート、１０－プロパルギル－５，８－ジデアザフォレート（ＰＤＤＦ、ＣＢ３７１７）、５，８－ジデアザテトラヒドロ葉酸（ＤＤＡＴＨＦ）、ロイコボリン、リン酸フルダラビン、ペントスタチン、及びゲムシタビンを含む、葉酸類似体、ピリミジン類似体、プリン類似体、及びアデノシンデアミナーゼ阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。

【0586】

好適な天然生成物及びそれらの誘導体（例えば、ビンカアルカロイド、抗腫瘍抗生物質、酵素、リンホカイン、及びエピポドフィロトキシン）としては、Ａｒａ－Ｃ、パクリタキセル（タキソール（登録商標））、ドセタキセル（タキソテール（登録商標））、デオキシコホルマイシン、マイトマイシン－Ｃ、Ｌ－アスパラギナーゼ、アザチオプリン；ブレキナル；アルカロイド、例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシンなど；ポドフィロトキシン、例えば、エトポシド、テニポシドなど；抗生物質、例えば、アントラサイクリン、ダウノルビシン塩酸塩（ダウノマイシン、ルビドマイシン、セルビジン）、イダルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、及びモルホリノ誘導体など；フェノキシゾンビスシクロペプチド、例えば、クチノマイシン；塩基糖ペプチド、例えば、ブレオマイシン；アントラキノン配糖体、例えば、プリカマイシン（ミトラマイシン）；アントラセンジオン、例えば、ミトキサントロン；アジリノピロロインドールジオン、例えば、マイトマイシン；大環状免疫抑制剤、例えば、シクロスポリン、ＦＫ－５０６（タクロリムス、プログラフ）、ラパマイシンなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0587】

他の抗増殖性細胞傷害性剤は、ナベルビン、ＣＰＴ－１１、アナストロゾール、レトロゾール、カペシタビン、ラロキサフェン、シクロホスファミド、イホスファミド、及びドロロキシフェンである。

【0588】

抗増殖性活性を有する微小管作用剤はまた、使用するのに好適であり、これらに限定されないが、アロコルヒチン（ＮＳＣ ４０６０４２）、ハリコンドリンＢ（ＮＳＣ ６０９３９５）、コルヒチン（ＮＳＣ ７５７）、コルヒチン誘導体（例えば、ＮＳＣ ３３４１０）、ドラスタチン１０（ＮＳＣ ３７６１２８）、メイタンシン（ＮＳＣ １５３８５８）、リゾキシン（ＮＳＣ ３３２５９８）、パクリタキセル（タキソール（登録商標））、タキソール（登録商標）誘導体、ドセタキセル（タキソテール（登録商標））、チオコルヒチン（ＮＳＣ ３６１７９２）、トリチルシステイン、ビンブラスチンサルフェート、ビンクリスチンサルフェート、これらに限定されないが、エポチロンＡ、エポチロンＢ、ジスコデルモリドを含む天然及び合成エポチロン；エストラムスチン、ノコダゾールなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0589】

使用するのに好適であるホルモン調節剤及びステロイド（合成類似体を含む）としては、副腎皮質ステロイド、例えば、プレドニゾン、デキサメタゾンなど；エストロゲン及びプレゲスチン、例えば、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、メドロキシプロゲステロンアセテート、メゲストロールアセテート、エストラジオール、クロミフェン、タモキシフェンなど；及び副腎皮質抑制剤、例えば、アミノグルテチミド；１７α－エチニルエストラジオール；ジエチルスチルベストロール、テストステロン、フルオキシメステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、テストラクトン、メチルプレドニゾロン、メチル－テストステロン、プレドニゾン、トリアムシノロン、クロロトリアニセン、ヒドロキシプロゲステロン、アミノグルテチミド、エストラムスチン、メドロキシプロゲステロンアセテート、ロイプロリド、フルタミド（ドロゲニル（Ｄｒｏｇｅｎｉｌ））、トレミフェン（フェアストン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ））、及びゾラデックス（登録商標）が挙げられるが、これらに限定されない。エストロゲンは増殖及び分化を刺激し、それ故に、エストロゲン受容体に結合する化合物がこの活性を抑止するために使用される。

【0590】

他の好適な化学療法剤としては、金属錯体、例えばシスプラチン（シス－ＤＤＰ）、カルボプラチンなど；尿素、例えば、ヒドロキシ尿素；及びヒドラジン、例えば、Ｎ－メチルヒドラジン；エピポフィロトキシン；トポイソメラーゼ阻害剤；プロカルバジン；ミトキサントロン；ロイコボリン；テガフールなどが挙げられる。目的の他の抗増殖性剤としては、免疫抑制剤、例えば、ミコフェノール酸、サリドマイド、デスオキシスペルグアリン、アザスポリン、レフルノミド、ミゾリビン、アザスピラン（ＳＫＦ１０５６８５）；イレッサ（登録商標）（ＺＤ１８３９、４－（３－クロロ－４－フルオロフェニルアミノ）－７－メトキシ－６－（３－（４－モルホリニル）プロポキシ）キナゾリン）などが挙げられる。

【0591】

タキサンは、使用するのに好適である。「タキサン」は、パクリタキセル、並びに任意の活性タキサン誘導体又はプロドラッグを含む。「パクリタキセル」（例えば、ドセタキセル、タキソール（商標）、タキソテール（商標）、パクリタキセルの１０－デスアセチル類似体、及びパクリタキセルの３’Ｎ－デスベンゾイル－３’Ｎ－ｔ－ブトキシカルボニル類似体などの類似体、製剤、及び誘導体を含むことを本明細書で理解されるべきである）は、当業者に既知の技術を利用して容易に調製され得るか（ＷＯ９４／０７８８２、ＷＯ９４／０７８８１、ＷＯ９４／０７８８０、ＷＯ９４／０７８７６、ＷＯ９３／２３５５５、ＷＯ９３／１００７６、米国特許第５，２９４，６３７号、同第５，２８３，２５３号、同第５，２７９，９４９号、同第５，２７４，１３７号、同第５，２０２，４４８号、同第５，２００，５３４号、同第５，２２９，５２９号、及びＥＰ５９０，２６７もまた参照されたい）、又は例えば、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏを含む様々な市販の供給源から得ることができる（Ｔａｘｕｓ ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａからのＴ７４０２、又はＴａｘｕｓ ｙａｎｎａｎｅｎｓｉｓからのＴ－１９１２）。

【0592】

パクリタキセルは、一般の化学的に利用可能な形態のパクリタキセルのみではなく、類似体及び誘導体（例えば、上記に記載されるようなタキソテール（商標）ドセタキセル）並びにパクリタキセルコンジュゲート（例えば、パクリタキセル－ＰＥＧ、パクリタキセル－デキストラン、又はパクリタキセル－キシロース）も指すことを理解されるべきである。

【0593】

親水性誘導体、及び疎水性誘導体の両方を含む、様々な既知の誘導体もまた、用語「タキサン」の内に含まれる。タキサン誘導体としては、ガラクトース及びマンノース誘導体、ピペラジノ及びピペラジノ誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。

【0594】

抗体を産生する方法
主題の結合剤は、任意の既知の方法、例えば、タンパク質合成のための従来の合成方法、組換えＤＮＡ方法などによって生成され得る。

【0595】

主題の結合剤が一本鎖ポリペプチドである場合、それは、標準的な化学ペプチド合成技術を使用して合成することができる。ポリペプチドが化学合成される場合、合成は、液相又は固相を介して進行し得る。配列のＣ末端アミノ酸が不溶性支持体に結合し、続いて配列中の残りのアミノ酸を連続的に追加する固相ポリペプチド合成（ＳＰＰＳ）は、主題の抗体の化学合成のための好適な方法の一例である。Ｆｍｏｃ及びＢｏｃなどの様々な形態のＳＰＰＳは、主題の抗体を合成するために利用可能である。

【0596】

標準的な組換え方法は、主題の結合剤の生成に使用することができる。例えば、任意選択的に定常領域に連結された、軽鎖及び重鎖可変領域をコードする核酸は、発現ベクターに挿入される。軽鎖及び重鎖は、同じ又は異なる発現ベクターでクローニングすることができる。免疫グロブリン鎖をコードするＤＮＡセグメントは、免疫グロブリンポリペプチドの発現を確実にする発現ベクター（複数可）中の制御配列に作動可能に連結される。発現制御配列としては、これらに限定されないが、プロモーター（例えば、天然関連又は異種プロモーター）、シグナル配列、エンハンサーエレメント、及び転写終結配列が挙げられる。発現制御配列は、真核宿主細胞（例えば、ＣＯＳ又はＣＨＯ細胞）を形質転換又はトランスフェクトすることができるベクターにおける真核プロモーター系であり得る。ベクターが適切な宿主に組み込まれると、宿主は、ヌクレオチド配列の高レベル発現、並びに抗体の収集及び精製に好適な条件下で維持される。

【0597】

コードの縮重のために、様々な核酸配列が、各免疫グロブリンアミノ酸配列をコードすることができる。所望の核酸配列は、デノボ固相ＤＮＡ合成によって、又は所望のポリヌクレオチドの以前に調製されたバリアントのポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）変異誘発によって生成され得る。

【0598】

好適な発現ベクターは、典型的には、エピソームとして、又は宿主染色体ＤＮＡの不可欠な部分として、宿主生物において複製可能である。一般に、発現ベクターは、所望のＤＮＡ配列で形質転換されたそれらの細胞の検出を可能にする選択マーカー（例えば、アンピシリン耐性、ハイグロマイシン耐性、テトラサイクリン耐性、カナマイシン耐性又はネオマイシン耐性）を含む。

【0599】

Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉは、主題の抗体コードポリヌクレオチドをクローニングするために使用することができる原核宿主細胞の一例である。使用するのに好適な他の微生物宿主としては、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓなどの細菌、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｓｅｒｒａｔｉａ、及び様々なＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ種などの他の腸内細菌が挙げられる。酵母などの他の微生物も、発現に有用である。Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ（例えば、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）及びＰｉｃｈｉａは、好適な酵母宿主細胞の一例である。

【0600】

微生物に加えて、哺乳類細胞（例えば、インビトロ細胞培養で成長した哺乳類細胞）を使用して、本発明のポリペプチド（例えば、免疫グロブリン又はその断片をコードするポリヌクレオチド）を発現し、産生することもできる。好適な哺乳類宿主細胞としては、ＣＨＯ細胞株、様々なＣｏｓ細胞株、ＨｅＬａ細胞、骨髄腫細胞株、及び形質転換されたＢ細胞又はハイブリドーマが挙げられる。これらの細胞の発現ベクターとしては、複製起点、プロモーター、及びエンハンサーなどの発現制御配列、並びにリボソーム結合部位、ＲＮＡスプライス部位、ポリアデニル化部位、及び転写ターミネーター配列などの必要な処理情報部位を挙げることができる。好適な発現制御配列の例は、免疫グロブリン遺伝子、ＳＶ４０、アデノウイルス、ウシパピローマウイルス、サイトメガロウイルスなどに由来するプロモーターである。

【0601】

（化学的又は組換えのいずれかで）合成されると、抗体全体、それらの二量体、個々の軽鎖及び重鎖、又は主題の抗体の他の形態（例えば、ｓｃＦｖなど）は、硫酸アンモニウム沈殿、親和性カラム、カラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）精製、ゲル電気泳動などを含む当該技術分野の標準的な手順に従って精製され得る（一般に、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎ．Ｙ．，（１９８２）を参照されたい）。主題の抗体は、実質的に純粋、例えば、少なくとも約８０％～８５％純粋、少なくとも約８５％～９０％純粋、少なくとも約９０％～９５％純粋、若しくは９８％～９９％、又はそれ以上純粋、例えば、細胞デブリ、主題の抗体以外の巨大分子などの汚染物質を含まなくてもよい。

【0602】

組成物
本開示は、主題の結合剤を含む組成物を提供する。主題の結合剤組成物は、結合剤に加えて、塩、例えば、ＮａＣｌ、ＭｇＣｌ_２、ＫＣｌ、ＭｇＳＯ_４など；緩衝剤、例えば、Ｔｒｉｓ緩衝液、Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）ピペラジン－Ｎ’－（２－エタンスルホン酸）（ＨＥＰＥＳ）、２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸ナトリウム塩（ＭＥＳ）、３－（Ｎ－モルホリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、Ｎ－トリス［ヒドロキシメチル］メチル－３－アミノプロパンスルホン酸（ＴＡＰＳ）など；可溶化剤；洗剤、例えば、Ｔｗｅｅｎ－２０などの非イオン性洗剤；プロテアーゼ阻害剤；グリセロールなどのうちの１つ以上を含み得る。

【0603】

核酸
本開示は、主題の結合剤をコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。主題の結合剤をコードするヌクレオチド配列は、意図した標的細胞（例えば、コードされた抗体を合成するように遺伝子修飾された細胞）でのヌクレオチド配列の発現を可能にする、プロモーター及びエンハンサーなどの１つ以上の調節エレメントに作動可能に連結され得る。

【0604】

好適なプロモーター及びエンハンサーエレメントは、当該技術分野で知られている。細菌細胞内での発現のために、好適なプロモーターには、ｌａｃＩ、ｌａｃＺ、Ｔ３、Ｔ７、ｇｐｔ、ラムダＰ及びｔｒｃが含まれるが、これらに限定されない。真核細胞における発現のために、好適なプロモーターとしては、軽鎖及び／又は重鎖の免疫グロブリン遺伝子プロモーター及びエンハンサーエレメント、サイトメガロウイルス最初期プロモーター、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼプロモーター、早期及び後期ＳＶ４０プロモーター、レトロウイルスからの長い末端反復に存在するプロモーター、マウスメタロチオネイン－Ｉプロモーター、並びに様々な当該技術分野で知られている組織特異的プロモーターが挙げられるが、これらに限定されない。

【0605】

いくつかの実施形態において、例えば、酵母細胞での発現のために、好適なプロモーターは、ＡＤＨ１プロモーター、ＰＧＫ１プロモーター、ＥＮＯプロモーター、ＰＹＫ１プロモーターなどの構成的プロモーター、又は調節可能なプロモーター、例えば、ＧＡＬ１プロモーター、ＧＡＬ１０プロモーター、ＡＤＨ２プロモーター、ＰＨＯ５プロモーター、ＣＵＰ１プロモーター、ＧＡＬ７プロモーター、ＭＥＴ２５プロモーター、ＭＥＴ３プロモーター、ＣＹＣ１プロモーター、ＨＩＳ３プロモーター、ＡＤＨ１プロモーター、ＰＧＫプロモーター、ＧＡＰＤＨプロモーター、ＡＤＣ１プロモーター、ＴＲＰ１プロモーター、ＵＲＡ３プロモーター、ＬＥＵ２プロモーター、ＥＮＯプロモーター、ＴＰ１プロモーター、及びＡＯＸ１（例えば、Ｐｉｃｈｉａにおいて使用するための）である。適切なベクター及びプロモーターの選択は、十分に当該技術分野のレベル内である。

【0606】

原核宿主細胞で使用するための好適なプロモーターとしては、限定されないが、バクテリオファージＴ７ ＲＮＡポリメラーゼプロモーター、ｔｒｐプロモーター、ｌａｃオペロンプロモーター、ハイブリッドプロモーター、例えば、ｌａｃ／ｔａｃハイブリッドプロモーター、ｔａｃ／ｔｒｃハイブリッドプロモーター、ｔｒｐ／ｌａｃプロモーター、Ｔ７／ｌａｃプロモーター、ｔｒｃプロモーター、ｔａｃプロモーターなどが挙げられる。Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉなどの原核生物で使用するのに好適な強力なプロモーターとしては、限定されないが、Ｔｒｃ、Ｔａｃ、Ｔ５、Ｔ７、及びＰ_{Ｌａｍｂｄａ}が挙げられる。細菌宿主細胞で使用するためのオペレーターの非限定的な例としては、ラクトースプロモーターオペレーター（ＬａｃＩリプレッサータンパク質は、ラクトースと接触したときにコンフォメーションを変化させ、それによって、ＬａｃＩリプレッサータンパク質がオペレーターに結合するのを防ぐ）、トリプトファンプロモーターオペレーター（トリプトファンと複合体化された場合、ＴｒｐＲリプレッサータンパク質は、オペレーターに結合するコンフォメーションを有し、トリプトファンの不在下では、ＴｒｐＲリプレッサータンパク質は、オペレーターに結合しないコンフォメーションを有する）、及びｔａｃプロモーターオペレーターが挙げられる。

【0607】

主題の結合剤をコードするヌクレオチド配列は、発現ベクター及び／又はクローニングベクター中に存在し得る。主題の結合剤が２つの別個のポリペプチドを含む場合、その２つのポリペプチドをコードするヌクレオチド配列は、同じ又は別個のベクターでクローニングすることができる。発現ベクターは、選択可能なマーカー、複製起点、及びベクターの複製及び／又は維持を提供する他の特徴を含み得る。

【0608】

多数の好適なベクター及びプロモーターが、当業者に既知であり、多くが、主題の組換え構築物を生成するために市販されている。以下のベクターが、例として提供される。細菌：ｐＢｓ、ファージスクリプト、ＰｓｉＸ１７４、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫ、ｐＢｓ ＫＳ、ｐＮＨ８ａ、ｐＮＨ１６ａ、ｐＮＨ１８ａ、ｐＮＨ４６ａ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ、Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃａｌｉｆ．，ＵＳＡ）；ｐＴｒｃ９９Ａ、ｐＫＫ２２３－３、ｐＫＫ２３３－３、ｐＤＲ５４０、及びｐＲＩＴ５（Ｐｈａｒｍａｃｉａ、Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）。真核生物：ｐＷＬｎｅｏ、ｐＳＶ２ｃａｔ、ｐＯＧ４４、ＰＸＲ１、ｐＳＧ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）ｐＳＶＫ３、ｐＢＰＶ、ｐＭＳＧ、及びｐＳＶＬ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）。

【0609】

細胞
本開示は、主題の核酸で遺伝子修飾された、単離された遺伝子修飾された宿主細胞（例えば、インビトロ細胞）を提供する。いくつかの実施形態において、主題の単離された遺伝子修飾された宿主細胞は、主題の結合剤を生成することができる。

【0610】

好適な哺乳類細胞には、初代細胞及び不死化細胞株が含まれる。好適な哺乳類細胞株としては、ヒト細胞株、非ヒト霊長類細胞株、げっ歯類（例えば、マウス、ラット）細胞株などが挙げられる。好適な哺乳類細胞系としては、限定されないが、ＨｅＬａ細胞（例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）番号ＣＣＬ－２）、ＣＨＯ細胞（例えば、ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ９６１８、ＣＣＬ６１、ＣＲＬ９０９６）、Ｖｅｒｏ細胞、ＮＩＨ ３Ｔ３細胞（例えば、ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ－１６５８）、Ｈｕｈ－７細胞、ＢＨＫ細胞（例えば、ＡＴＣＣ番号ＣＣＬ１０）、ＰＣ１２細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１７２１）、ＣＯＳ細胞、ＣＯＳ－７細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１６５１）、ＲＡＴ１細胞、マウスＬ細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＣＬＩ．３）、ヒト胚性腎臓（ＨＥＫ）２９３細胞（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ１５７３）、ＨＬＨｅｐＧ２細胞が挙げられる。

【0611】

好適な酵母細胞には、限定されないが、Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ、Ｐｉｃｈｉａ ｆｉｎｌａｎｄｉｃａ、Ｐｉｃｈｉａ ｔｒｅｈａｌｏｐｈｉｌａ、Ｐｉｃｈｉａ ｋｏｃｌａｍａｅ、Ｐｉｃｈｉａ ｍｅｍｂｒａｎａｅｆａｃｉｅｎｓ、Ｐｉｃｈｉａ ｏｐｕｎｔｉａｅ、Ｐｉｃｈｉａ ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓ、Ｐｉｃｈｉａ ｓａｌｉｃｔａｒｉａ、Ｐｉｃｈｉａ ｇｕｅｒｃｕｕｍ、Ｐｉｃｈｉａ ｐｉｊｐｅｒｉ、Ｐｉｃｈｉａ ｓｔｉｐｔｉｓ、Ｐｉｃｈｉａ ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃａ、Ｐｉｃｈｉａ ｓｐ．、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．、Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｌａｃｔｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ ｌｕｃｋｎｏｗｅｎｓｅ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｐ．、Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｅｕｍ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｖｅｎｅｎａｔｕｍ、Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ ｃｒａｓｓａ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｍｏｎａｓ ｒｅｉｎｈａｒｄｔｉｉなどが含まれる。

【0612】

好適な原核細胞としては、限定されないが、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｓｐ．、Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｓｐ．などの様々な実験室株のうちのいずれかが挙げられる。

【0613】

薬学的組成物
本開示は、主題の結合剤、例えば、本明細書に記載されるＶＨ配列及びＶＬ配列を含む抗体を含む、薬学的組成物を含む組成物を提供する。具体的な実施形態において、薬学的組成物は、本明細書に記載のＶＨ及びＶＬフレームワーク領域を含む抗ＣＤ３０抗体を含む。特定の実施形態において、薬学的組成物は、配列番号６、１１、２１、又は２６の配列を有する少なくとも１つのＶＨ鎖又はＶＬ鎖を含む抗ＣＤ３０抗体を含む。

【0614】

一般に、製剤は、有効量の主題の結合剤を含む。「有効量」とは、所望の結果、例えば、がん性細胞の数の低減を引き起こすのに十分な投薬量を意味する。いくつかの場合において、所望の結果は、対照と比較して、悪性腫瘍の症状の少なくとも低減である。

【0615】

製剤
主題の方法において、主題の結合剤は、所望の治療効果又は診断効果をもたらすことができる任意の便利な手段を使用して、宿主に投与され得る。結合剤は、本明細書に記載されるＶＨ配列及びＶＬ配列を含む抗体であり得る。具体的な実施形態において、結合剤は、本明細書に記載のＶＨ及びＶＬフレームワーク領域を含む抗ＣＤ３０抗体である。特定の実施形態において、薬学的組成物は、配列番号６、１１、２１、又は２６の配列を有する少なくとも１つのＶＨ鎖又はＶＬ鎖を含む抗ＣＤ３０抗体を含む。

【0616】

結合剤は、治療投与のために様々な製剤に組み込むことができる。より具体的には、結合剤は、適切な薬学的に許容される担体又は希釈剤との組み合わせによって薬学的組成物へと製剤化されてもよく、錠剤、カプセル、粉末、顆粒、軟膏、溶液、坐剤、注射剤、吸入剤、及びエアロゾルなどの固体、半固体、液体又は気体形態の調製物へと製剤化され得る。

【0617】

医薬剤形において、主題の結合剤は、それらの薬学的に許容される塩の形態で投与されてもよく、又はそれらは、単独で、又は適切な組み合わせで、若しくは他の薬学的に活性な化合物と組み合わせて使用されてもよい。以下の方法及び賦形剤は、単なる例示であり、決して限定的ではない。

【0618】

経口調製物については、主題の結合剤を単独で、又は適切な添加剤と組み合わせて使用して、例えば、ラクトース、マンニトール、トウモロコシデンプン又はジャガイモデンプンなどの従来の添加剤と、結晶性セルロース、セルロース誘導体、アカシア、トウモロコシデンプン又はゼラチンなどの結合剤と、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン又はカルボキシメチルセルロースナトリウムなどの崩壊剤と、タルク又はステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤と、及び必要に応じて希釈剤、緩衝剤、保湿剤、保存剤及び香味剤と共に、錠剤、粉末、顆粒、又はカプセルを作製することができる。

【0619】

主題の結合剤は、植物性又は他の同様の油、合成脂肪酸グリセリド、高級脂肪酸のエステル、又はプロピレングリコールなどの水性又は非水性溶媒中にそれらを溶解、懸濁、又は乳化させることによって、及び必要に応じて、可溶化剤、等張化剤、懸濁化剤、乳化剤、安定化剤、及び保存剤などの従来の添加剤と共に注射用の調製物へと製剤化され得る。

【0620】

主題の結合剤を含む薬学的組成物は、所望の純度を有する結合剤を、任意選択的な生理学的に許容される担体、賦形剤、安定剤、界面活性剤、緩衝剤、及び／又は張力剤と混合することによって調製される。許容される担体、賦形剤及び／又は安定剤は、用いられる投薬量及び濃度でレシピエントに無毒であり、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸などの緩衝剤；アスコルビン酸、グルタチオン、システイン、メチオニン及びクエン酸を含む抗酸化剤；保存剤（エタノール、ベンジルアルコール、フェノール、ｍ－クレゾール、ｐ－クロル－ｍ－クレゾール、メチル若しくはプロピルパラベン、塩化ベンザルコニウム、又はそれらの組み合わせなど）；アルギニン、グリシン、オルニチン、リジン、ヒスチジン、グルタミン酸、アスパラギン、イソロイシン、ロイシン、アラニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、メチオニン、セリン、プロリン及びそれらの組み合わせなどのアミノ酸；単糖類、二糖類及び他の炭水化物；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；ゼラチン又は血清アルブミンなどのタンパク質；ＥＤＴＡなどのキレート剤；トレハロース、スクロース、ラクトース、グルコース、マンノース、マルトース、ガラクトース、フルクトース、ソルボース、ラフィノース、グルコサミン、Ｎ－メチルグルコサミン、ガラクトサミン、及びノイラミン酸などの糖類；並びに／あるいはＴｗｅｅｎ、Ｂｒｉｊ Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ、Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ、又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤が挙げられる。

【0621】

薬学的組成物は、液体形態、凍結乾燥形態、又は凍結乾燥形態から再構成された液体形態であってもよく、凍結乾燥調製物は、投与前に滅菌溶液で再構成される。凍結乾燥組成物を再構成するための標準的な手順は、ある体積の（典型的には、凍結乾燥中に除去された体積に等しい）純水を加えることであるが、抗菌剤を含む溶液は、非経口投与のための薬学的組成物の生成に使用され得る。

【0622】

主題の薬学的組成物中の例示的な抗体濃度は、約１ｍｇ／ｍＬ～約２００ｍｇ／ｍＬ、又は約５０ｍｇ／ｍＬ～約２００ｍｇ／ｍＬ、又は約１５０ｍｇ／ｍＬ～約２００ｍｇ／ｍＬの範囲であり得る。

【0623】

結合剤の水性製剤は、ｐＨ緩衝溶液中、例えば、約４．０～約７．０、又は約５．０～約６．０の範囲、又は代替的に約５．５のｐＨで調製され得る。この範囲内のｐＨに好適な緩衝液の例としては、リン酸緩衝液、ヒスチジン緩衝液、クエン酸緩衝液、コハク酸緩衝液、酢酸緩衝液、及び他の有機酸緩衝液が挙げられる。緩衝液濃度は、例えば、緩衝液及び製剤の所望の張力に応じて、約１ｍＭ～約１００ｍＭ、又は約５ｍＭ～約５０ｍＭであってもよい。

【0624】

また、凍結乾燥プロセス中に不安定な活性成分（例えば、タンパク質）を不安定化条件から保護するために、凍結保護剤を添加してもよい。例えば、既知の凍結保護剤としては、糖（グルコース及びスクロースを含む）、ポリオール（マンニトール、ソルビトール、及びグリセロールを含む）、並びにアミノ酸（アラニン、グリシン、及びグルタミン酸を含む）が挙げられる。凍結保護剤は、約１０ｍＭ～５００ｎＭの量で含まれ得る。

【0625】

いくつかの実施形態において、主題の製剤は、主題の結合剤、及び１つ以上の薬剤（例えば、界面活性剤、緩衝液、安定剤、張力剤）を含み、エタノール、ベンジルアルコール、フェノール、ｍ－クレゾール、ｐ－クロル－ｍ－クレゾール、メチル若しくはプロピルパラベン、塩化ベンザルコニウム、及びそれらの組み合わせなどの１つ以上の保存剤を本質的に含まない。他の実施形態において、保存剤は、製剤に、例えば、約０．００１～約２％（ｗ／ｖ）の範囲の濃度で含まれる。

【0626】

例えば、主題の製剤は、非経口投与に好適な液体又は凍結乾燥製剤であってもよく、約１ｍｇ／ｍＬ～約２００ｍｇ／ｍＬの主題の抗体、約０．００１％～約１％の少なくとも１つの界面活性剤、約１ｍＭ～約１００ｍＭの緩衝液、任意選択的に約１０ｍＭ～約５００ｍＭの安定剤、及び約５ｍＭ～約３０５ｍＭの張力剤を含んでもよく、約４．０～約７．０のｐＨを有する。

【0627】

別の例として、主題の非経口製剤は、約１ｍｇ／ｍＬ～約２００ｍｇ／ｍＬの主題の抗体、０．０４％のＴｗｅｅｎ２０（ｗ／ｖ）、２０ｍＭのＬ－ヒスチジン、及び２５０ｍＭのスクロースを含む液体又は凍結乾燥製剤であり、ｐＨは５．５である。

【0628】

「単位剤形」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒト及び動物対象のための単位投薬量として好適な物理的に別個の単位を指し、各単位が、薬学的に許容される希釈剤、担体、又はビヒクルと関連して所望な効果を引き起こすのに十分な量で計算された所定の量の本発明の結合剤を含有する。主題の結合剤の仕様は、用いられる特定の抗体及び達成される効果、並びに宿主中の各結合剤に関連する薬力学に依存し得る。

【0629】

主題の結合剤は、注射可能な製剤として投与することができる。典型的には、注射可能な組成物は、液体溶液又は懸濁液のいずれかとして調製されるが、注射前の液体ビヒクル中の溶液又は懸濁液に好適な固体形態も調製することができる。調製物はまた、乳化されてもよく、又は抗体は、リポソームビヒクルに封入されてもよい。

【0630】

ビヒクル、アジュバント、担体、又は希釈剤などの薬学的に許容される賦形剤は、容易に公的に入手可能である。更に、ｐＨ調整剤及び緩衝剤、張度調整剤、安定剤、湿潤剤などの薬学的に許容される補助物質は、容易に公的に入手可能である。

【0631】

いくつかの実施形態において、主題の結合剤は、制御放出製剤中で製剤化される。徐放性調製物は、当該技術分野で周知の方法を使用して調製され得る。徐放性調製物の好適な例としては、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透明性マトリックスが挙げられ、マトリックスは、成形物品、例えば、フィルム、又はマイクロカプセルの形態である。徐放性マトリックスの例には、ポリエステル、Ｌ－グルタミン酸及びＬ－グルタミン酸エチルのコポリマー、非分解性エチレン－酢酸ビニル、ヒドロゲル、ポリラクチド、分解性乳酸－グリコール酸コポリマー、並びにポリ－Ｄ－（－）－３－ヒドロキシ酪酸が含まれる。生物学的活性の損失の可能性及び徐放性調製物に含まれる抗体の免疫原性の変化の可能性は、適切な添加物を使用すること、水分含有量を制御すること、及び特定のポリマーマトリックス組成物を開発することによって防止され得る。

【0632】

物理的系は、マイクロカプセル化、マクロカプセル化、及び膜系などの速度制御膜を有するリザーバ系；中空繊維、超微多孔質セルローストリアセテート、及び多孔質ポリマー基材及び発泡体などの速度制御膜を伴わないリザーバ系；非多孔質、ポリマー、又はエラストマーマトリックス（例えば、非侵食性、侵食性、環境剤浸入、及び分解性）に物理的に溶解した系、及び非多孔質、ポリマー、又はエラストマーマトリックス（例えば、非侵食性、侵食性、環境剤浸入、及び分解性）に物理的に分散した材料を含むモノリシック系；外側制御層とは化学的に類似又は外側制御層とは異なるリザーバ層を含む積層構造；並びに浸透性ポンプ、又はイオン交換樹脂への吸着などの他の物理的方法を含むが、これらに限定されない。

【0633】

化学系としては、限定されないが、ポリマーマトリックスの化学侵食（例えば、不均一な、若しくは均一な侵食）、又はポリマーマトリックスの生物学的侵食（例えば、不均一な、若しくは均一な）が挙げられる。

【0634】

投薬量
好適な投与量は、様々な臨床的要因に基づいて、主治医又は他の資格を有する医療従事者によって決定することができる。医療分野で周知であるように、任意の１人の患者の投薬量は、患者の大きさ、体表面積、年齢、投与される特定の化合物、患者の性別、投与の時間及び経路、一般的な健康状態、並びに同時に投与される他の薬物を含む、多くの要因に依存する。主題の結合剤は、１用量当たり１ｎｇ／ｋｇ体重～２０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ体重～１０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、０．５ｍｇ／ｋｇ体重～５ｍｇ／ｋｇ体重の量で投与され得るが、特に前述の要因を考慮して、この例示的な範囲を下回るか、又は上回る用量が想定される。レジメンが連続注入である場合、１分当たり体重１キログラム当たり１μｇ～１０ｍｇの範囲にもあり得る。

【0635】

当業者は、用量レベルが、特異的結合剤、症状の重症度、及び副作用に対する対象の感受性の関数として変化し得ることを容易に理解するであろう。所与の化合物の好ましい投薬量は、様々な手段によって当業者によって容易に決定可能である。

【0636】

投与経路
主題の結合剤は、インビボ及びエクスビボの方法、並びに全身及び局所化された投与経路を含む、薬物送達に好適な任意の利用可能な方法及び経路を使用して個体に投与される。

【0637】

従来かつ薬学的に許容される投与経路としては、鼻腔内、筋肉内、気管内、皮下、皮内、局所塗布、静脈内、動脈内、直腸、鼻腔、経口、並びに他の経腸及び非経口投与経路が挙げられる。所望の場合、投与経路を組み合わせてもよく、又は抗体及び／若しくは所望の効果に応じて調整してもよい。主題の抗体組成物は、単回用量又は複数回用量で投与され得る。いくつかの実施形態において、主題の抗体組成物は、経口投与される。いくつかの実施形態において、主題の抗体組成物は、吸入経路を介して投与される。いくつかの実施形態において、主題の抗体組成物は、鼻腔内投与される。いくつかの実施形態において、主題の抗体組成物は、局所投与される。いくつかの実施形態において、主題の抗体組成物は、頭蓋内投与される。いくつかの実施形態において、主題の抗体組成物は、静脈内投与される。

【0638】

結合剤は、全身的経路又は局所的経路を含む、従来の薬物の送達に好適な任意の利用可能な従来の方法及び経路を使用して、宿主に投与され得る。一般に、本発明によって企図される投与経路には、必ずしも限定されないが、経腸、非経口、又は吸入経路が含まれる。

【0639】

吸入投与以外の非経口投与経路としては、局所経路、経皮経路、皮下経路、筋肉内経路、眼窩内経路、嚢内経路、脊髄内経路、胸骨内経路、肝臓内経路、及び静脈内経路、すなわち、消化管経由以外の任意の投与経路が挙げられるが、必ずしもこれらに限定されない。非経口投与を実施して、主題の抗体の全身性送達又は局所送達をもたらすことができる。全身送達が所望される場合、投与は、典型的には、薬学的調製物の侵襲的又は全身的に吸収された局所的投与又は粘膜投与を伴う。

【0640】

主題の結合剤はまた、経腸投与によって対象に送達され得る。経腸投与経路としては、必ずしも限定されないが、経口及び直腸（例えば、座薬を使用した）送達が挙げられる。

【0641】

治療とは、宿主が罹患している病的状態と関連する症状の少なくとも改善を意味し、改善は、治療されている病的状態（例えば、乳がん、膵臓がん、又は肺がん）と関連するパラメータ、例えば症状の大きさの少なくとも低減を指すために広義で使用される。したがって、治療はまた、病的状態、又は少なくともそれと関連する症状が、宿主がもはやその病的状態、又は少なくともその病的状態を特徴付ける症状を患わないように、完全に阻害される、例えば発生が防止されるか、又は停止される、例えば終了される状況も含む。

【0642】

いくつかの実施形態において、主題の結合剤は、注射によって、例えば、全身送達（例えば、静脈内注入）のために、又は局所部位に投与される。

【0643】

様々な宿主（「宿主」という用語は、本明細書で「対象」、「個体」、及び「患者」という用語と交換可能に使用される）は、主題の方法に従って治療可能である。一般に、そのような宿主は、「哺乳動物」又は「哺乳類」であり、これらの用語は、肉食動物（例えば、イヌ及びネコ）、げっ歯類（例えば、マウス、モルモット、及びラット）、並びに霊長類（例えば、ヒト、チンパンジー、及びサル）を含む、哺乳綱内にある生物を広く説明するために使用される。いくつかの実施形態において、宿主は、ヒトであろう。

【0644】

治療方法
本開示は、細胞、ＣＤ３０陽性細胞、例えば、がん性ＣＤ３０陽性細胞、自己反応性ＣＤ３０陽性細胞に関連するか、又はそれらによって引き起こされる疾患又は障害を治療する方法を提供する。

【0645】

本明細書に開示されるフレームワーク領域を含むＶＨ鎖及びＶＬ鎖を使用して、任意の標的に対する特異性を有する抗体を産生することができるため、そのような抗体は、目的の標的に結合する抗体を投与することによって治療することができる疾患又は障害を治療する方法で使用することができる。

【0646】

悪性腫瘍の治療
本開示は、固形腫瘍又は血液悪性腫瘍を含む悪性腫瘍を治療する方法を提供し、本方法は、一般に、それを必要とする個体（例えば、悪性腫瘍を有する個体）に、有効量の主題の結合剤を、単独で（例えば、単独療法で）、又は１つ以上の追加の治療剤と組み合わせて（例えば、併用療法で）投与することを含む。

【0647】

悪性腫瘍には、例えば、ＨＣＣ、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、多発性骨髄腫、慢性リンパ球性白血病、有毛細胞白血病、前リンパ球性白血病、肛門がん、虫垂がん、胆道がん（すなわち、胆管がん）、膀胱がん、脳腫瘍、乳がん、子宮頸がん、結腸がん、原発不明がん（ＣＵＰ）、食道がん、眼のがん、卵管がん、胃腸がん、腎臓がん、肝臓がん、肺がん、髄芽腫、黒色腫、口腔がん、卵巣がん、膵臓がん、副甲状腺疾患、陰茎がん、下垂体腫瘍、前立腺がん、直腸がん、皮膚がん、胃がん、精巣がん、咽喉がん、甲状腺がん、子宮がん、膣がん、外陰がんなどが挙げられる。

【0648】

いくつかの実施形態において、主題の結合剤の有効量は、単独で（例えば、単独療法で）、又は１つ以上の追加の治療剤と併用して（例えば、併用療法で）投与される場合に、１回以上の用量で、結合剤での治療の不在下での個体におけるがん性細胞の数と比較して、個体におけるがん性細胞の数を、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％以上減少させるのに有効な量である。

【0649】

併用療法
いくつかの実施形態において、悪性腫瘍を治療する主題の方法は、主題の結合剤及び１つ以上の追加の治療剤を投与することを伴う。好適な追加の治療剤としては、がん化学療法剤（上述のもの）が挙げられるが、これらに限定されない。

【0650】

いくつかの場合において、追加の治療剤は、チェックポイント阻害剤又はインターロイキンなどの免疫調節治療薬である。免疫チェックポイント阻害剤は、タンパク質などの免疫阻害チェックポイント分子の機能を阻害する。免疫チェックポイント阻害剤は、免疫チェックポイントタンパク質に特異的に結合する抗体であり得る。様々な免疫チェックポイント阻害剤が知られている。免疫チェックポイント阻害剤には、ペプチド、抗体、核酸分子、及び小分子が挙げられるが、これらに限定されない。

【0651】

任意の好適なチェックポイント阻害剤が、本明細書に開示される方法において使用され得る。阻害性チェックポイント分子の例としては、Ａ２ＡＲ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ－４、ＣＤ２７７、ＩＤＯ、ＫＩＲ、ＰＤ－１、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３、ＴＩＧＩＴ及びＶＩＳＴＡが挙げられる。

【0652】

いくつかの実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、例えば、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１の阻害を介して、ＰＤ－１シグナル伝達を阻害する。いくつかの実施形態において、ＰＤ－１シグナル伝達を阻害する薬剤は、抗ＰＤ－１抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、又はアベルマブである。いくつかの実施形態において、ＰＤ－Ｌ１を阻害する免疫チェックポイント阻害剤としては、例えば、ＡＭＰ－２４４、ＭＥＤＩ－４７３６、ＭＰＤＬ３２８ＯＡ、及びＭＩＨ１が挙げられる。

【0653】

いくつかの実施形態において、免疫チェックポイント阻害剤は、ＣＴＬＡ－４を標的とする抗体、例えば、イピリムマブなどのＣＴＬＡ－４の阻害剤である。

【0654】

いくつかの実施形態において、チェックポイント阻害剤は、Ｔ細胞免疫グロブリン及びムチンドメイン含有タンパク質－３（ＴＩＭ－３）としても知られる膜貫通タンパク質であるＣＤ３６６を標的とする。

【0655】

免疫チェックポイント阻害剤の追加の例及び特定の態様は、Ｈｕｉ（２０１９），Ｉｍｍｕｎｅ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．，Ｖｏｌ．２１８ Ｎｏ．３ ７４０－７４１（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載されている。

【0656】

治療に好適な対象
様々な対象が、主題の方法による治療に好適である。好適な対象には、悪性腫瘍を有する、悪性腫瘍を有すると診断されている、過去に悪性腫瘍を有しており、悪性腫瘍の再発のリスクがある、主題の結合剤以外の薬剤で悪性腫瘍を治療されている（例えば、がん化学療法剤で治療されている）が、その薬剤に応答していない、又は主題の結合剤以外の薬剤で悪性腫瘍を治療されている（例えば、がん化学療法剤で治療されている）が、薬剤に最初は応答したが、その後応答を停止した（例えば、再発した）、任意の個体、例えば、ヒトが挙げられる。

【0657】

検出方法
本開示は、主題の結合剤の使用を伴う様々な検出方法を提供する。検出方法には、診断方法、予後方法、及びモニタリング方法が含まれる。主題の検出方法は、一般に、主題の結合剤の標的を発現する細胞、例えば、がん性細胞を検出することを伴う。

【0658】

いくつかの実施形態において、主題の方法は、例えば、個体が悪性腫瘍を有するかどうかを決定するための診断方法である。

【0659】

いくつかの実施形態において、主題の方法は、モニタリング方法であり、例えば、悪性腫瘍を有すると診断され、障害のために治療されている個人は、障害の治療及び／又は進行／退行への応答についてモニタリングされる。

【0660】

いくつかの場合において、主題の検出方法は、個体に、本開示の検出可能に標識された結合剤、特に、抗ＣＤ３０抗体を投与することと、個体の組織への結合剤の結合を検出することと、を伴う。検出は、例えば、磁気共鳴撮像又は他の好適な撮像技術によって達成することができる。

【0661】

他の事例において、主題の検出方法は、本開示の検出可能に標識された結合剤、例えば、ＣＤ３０抗体を、個体から得られた生物学的試料と接触させることと、生物学的試料中の分子への結合剤の結合を検出することと、を伴う。

【0662】

結合剤、例えば、ＣＤ３０抗体は、直接的又は間接的に標識することができる。間接標識は、検出可能な標識を含む二次抗体を含み、二次抗体は、主題の結合剤に結合する。他の間接標識としては、ビオチンが挙げられ、抗ＣＤ３０抗体などのビオチン化結合剤は、検出可能な標識を含むアビジン又はストレプトアビジンを使用して検出され得る。

【0663】

好適な検出可能な標識としては、分光学的、光化学的、生化学的、免疫化学的、電気的、光学的、又は化学的手段によって検出可能な任意の組成物が挙げられる。好適なものとしては、磁気ビーズ（例えば、Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（商標））、蛍光性染料（例えば、フルオレセインイソチオシアネート、テキサスレッド、ローダミン、緑色蛍光性タンパク質、赤色蛍光性タンパク質、黄色蛍光性タンパク質など）、放射性標識（例えば、^３Ｈ、^１２５Ｉ、^３５Ｓ、^１４Ｃ、又は^３２Ｐ）、酵素（例えば、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ルシフェラーゼ、及び酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）で一般的に使用される他のもの）、並びにコロイド金又はカラーガラス若しくはプラスチック（例えば、ポリスチレン、ポリプロピレン、ラテックスなど）ビーズなどの比色標識が挙げられるが、これらに限定されない。

【0664】

実施形態
本開示の特定の実施形態は、以下に列挙される項に記載される。これらの実施形態は、例示のみであり、範囲を限定することは意図されない。
１．ＣＤ３０タンパク質に特異的に結合する結合剤であって、結合剤が、
ｉ）
ＱＶＱＬＱＱＳＧＰＥＶＶＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＹＭＴＷＶＲＱＫＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＹＰＧＳＧＮＴＫＹＮＱＫＦＫＧＲＶＴＩＴＶＤＴＳＳＳＴＡＦＭＥＬＳＳＬＴＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＮＹＧＮＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＡ（配列番号６）、及び
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＹＩＴＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＹＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＶＤＴＳＡＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＮＹＧＮＹＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１１）から選択される配列を含む、可変重鎖（ＶＨ）鎖と、
ｉｉ）
ＤＩＶＭＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＳＣＫＳＳＱＳＶＤＦＤＧＤＳＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＡＡＳＴＲＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＥＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＳＮＥＤＰＷＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２１）、及び
ＤＩＶＬＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣＫＡＳＱＳＶＤＦＤＧＤＳＹＭＮＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＡＡＳＮＲＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＱＳＮＥＤＰＷＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２６）から選択される配列を含む、可変軽鎖（ＶＬ）鎖と、を含む、結合剤。
２．配列番号１１を含むＶＨ鎖と、配列番号２６を含むＶＬ鎖と、を含む、項１に記載の結合剤。
３．ＣＤ３０に特異的に結合する結合剤であって、
それぞれ、配列番号３１～３３の配列を有するＨ－ＣＤＲ１、Ｈ－ＣＤＲ２、及びＨ－ＣＤＲ３を含むＶＨ鎖と、それぞれ、配列番号３４～３６の配列を有するＬ－ＣＤＲ１、Ｌ－ＣＤＲ２、及びＬ－ＣＤＲ３を含むＶＬ鎖と、を含み、
ＶＨ鎖が、
ｉ）配列番号７の配列を有する重鎖フレームワーク領域１（ＨＦＲ１）、配列番号８の配列を有する重鎖フレームワーク領域２（ＨＦＲ２）、配列番号９の配列を有する重鎖フレームワーク領域３（ＨＦＲ３）、及び配列番号１０の配列を有する重鎖フレームワーク領域４（ＨＦＲ４）、又は
ｉｉ）配列番号１２の配列を有するＨＦＲ１、配列番号１３の配列を有するＨＦＲ２、配列番号１４の配列を有するＨＦＲ３、及び配列番号１５の配列を有するＨＦＲ４を含み、
ＶＬ鎖が、
ｉ）配列番号２２の配列を有する軽鎖フレームワーク領域１（ＬＦＲ１）、配列番号２３の配列を有する軽鎖フレームワーク領域２（ＬＦＲ２）、配列番号２４の配列を有する軽鎖フレームワーク領域３（ＬＦＲ３）、及び配列番号２５の配列を有する軽鎖フレームワーク領域４（ＬＦＲ４）、又は
ｉｉ）配列番号２７の配列を有するＬＦＲ１、配列番号２８の配列を有するＬＦＲ２、配列番号２９の配列を有するＬＦＲ３、及び配列番号２５の配列を有するＬＦＲ４を含む、結合剤。
４．抗原に特異的に結合する結合剤であって、
Ｈ－ＣＤＲ１、Ｈ－ＣＤＲ２、及びＨ－ＣＤＲ３を含むＶＨ鎖と、Ｌ－ＣＤＲ１、Ｌ－ＣＤＲ２、及びＬ－ＣＤＲ３を含むＶＬ鎖と、を含み、相補性決定領域が、抗原に対する結合剤の結合特異性を決定し、結合剤において、
ＶＨ鎖が、
ｉ）配列番号７の配列を有するＨＦＲ１、配列番号８の配列を有するＨＦＲ２、配列番号９の配列を有するＨＦＲ３、及び配列番号１０の配列を有するＨＦＲ４、又は
ｉｉ）配列番号１２の配列を有するＨＦＲ１、配列番号１３の配列を有するＨＦＲ２、配列番号１４の配列を有するＨＦＲ３、及び配列番号１５の配列を有するＨＦＲ４を含み、
ＶＬ鎖が、
ｉ）配列番号２２の配列を有するＬＦＲ１、配列番号２３の配列を有するＬＦＲ２、配列番号２４の配列を有するＬＦＲ３、及び配列番号２５の配列を有するＬＦＲ４、又は
ｉｉ）配列番号２７の配列を有するＬＦＲ１、配列番号２８の配列を有するＬＦＲ２、配列番号２９の配列を有するＬＦＲ３、及び配列番号３０の配列を有するＬＦＲ４を含む、結合剤。
５．結合剤が、ＣＤ３０に特異的に結合し、それぞれ、配列番号３１～３３の配列を有するＨ－ＣＤＲ１、Ｈ－ＣＤＲ２、及びＨ－ＣＤＲ３を含むＶＨ鎖と、それぞれ、配列番号３４～３６の配列を有するＬ－ＣＤＲ１、Ｌ－ＣＤＲ２、及びＬ－ＣＤＲ３を含むＶＬ鎖と、を含む、項１に記載の結合剤。
６．結合剤が、キメラ抗体である、項１～５のいずれか一項に記載の結合剤。
７．結合剤が、Ｔ細胞受容体、Ｔ細胞受容体様抗体、ＩｇＧ、Ｆｖ、一本鎖抗体、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、又はＦａｂ’からなる群から選択される、項１～６のいずれか一項に記載の結合剤。
８．結合剤が、ＩｇＧである、項１～７のいずれか一項に記載の結合剤。
９．ＩｇＧが、ＩｇＧ１である、項８に記載の結合剤。
１０．結合剤が、Ｆａｂである、項１～７のいずれか一項に記載の結合剤。
１１．結合剤が、ｓｃＦｖである、項１～７のいずれか一項に記載の結合剤。
１２．ＣＤ３０に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインを含む二重特異性結合剤であって、第１の抗原結合ドメインが、項１～５のいずれか一項に記載のＶＨ鎖及びＶＬ鎖を含む、二重特異性結合剤。
１３．結合剤が、検出可能に標識されている、項１～１２のいずれか一項に記載の結合剤。
１４．結合剤が、共有結合した非ペプチド合成ポリマーを含む、項１～１３のいずれか一項に記載の結合剤。
１５．合成ポリマーが、ポリ（エチレングリコール）ポリマーである、項１４に記載の結合剤。
１６．抗体が、共有結合した脂質又は脂肪酸部分を含む、項１～１５のいずれか一項に記載の結合剤。
１７．結合剤が、共有結合した多糖又は炭水化物部分を含む、項１～１６のいずれか一項に記載の結合剤。
１８．結合剤が、造影剤を含む、項１～１７のいずれか一項に記載の結合剤。
１９．結合剤が、親和性ドメインを更に含む、項１～１８のいずれか一項に記載の結合剤。
２０．結合剤が、固体支持体上に固定される、項１～１９のいずれか一項に記載の結合剤。
２１．結合剤が、共有結合したサイトトキシンを含む、項１～２０のいずれか一項に記載の結合剤。
２２．結合剤が、スルファターゼモチーフのアミノ酸配列を含む定常領域アミノ酸配列を含む、項１～２１のいずれか一項に記載の結合剤。
２３．結合剤が、スルファターゼモチーフのアミノ酸配列を含む定常領域アミノ酸配列を含む抗体であり、スルファターゼモチーフが、２－ホルミルグリシン（ｆＧｌｙ）部分を含むように修飾される、項１～２２のいずれか一項に記載の結合剤。
２４．以下の配列：
Ｘ^１（ｆＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０
を含み、
式中、
Ｚ^２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ^３０が、塩基性アミノ酸又は脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ^１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、配列が抗体のＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、任意のアミノ酸である、項２３に記載の結合剤。
２５．配列が、Ｌ（ｆＧｌｙ）ＴＰＳＲである、項２４に記載の結合剤。
２６．
Ｚ^３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、及びＰから選択され、
Ｘ^１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、及びＶから選択され、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、及びＣから選択される、項２４に記載の結合剤抗体。
２７．配列が、抗体の重鎖定常領域のＣ末端にある、項２４～２６のいずれか一項に記載の結合剤。
２８．重鎖定常領域が、以下の配列：
Ｘ^１（ｆＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０
を含み、
式中、
Ｚ^２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ^３０が、塩基性アミノ酸又は脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ^１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、配列がコンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３は、各々独立して、任意のアミノ酸であり、
配列が、アミノ酸配列ＳＬＳＬＳＰＧに対してＣ末端である、項２７に記載の結合剤。
２９．重鎖定常領域が、配列ＳＰＧＳＬ（ｆＧｌｙ）ＴＰＳＲＧＳを含む、項２７に記載の結合剤。
３０．
Ｚ^３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、及びＰから選択され、
Ｘ^１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、及びＶから選択され、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、及びＣから選択される、項２７に記載の結合剤。
３１．ｆＧｌｙ部分が、抗体の軽鎖定常領域内に配置されている、項２４～２６のいずれか一項に記載の結合剤。
３２．重鎖定常領域が、以下の配列：
Ｘ^１（ｆＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０
を含み、
式中、
Ｚ^２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ^３０が、塩基性アミノ酸又は脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ^１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、配列がコンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、任意のアミノ酸であり、
配列が、配列ＫＶＤＮＡＬに対してＣ末端であり、かつ／又は配列ＱＳＧＮＳＱに対してＮ末端である、項３１に記載の結合剤。
３３．軽鎖定常領域が、配列ＫＶＤＮＡＬ（ｆＧｌｙ）ＴＰＳＲＱＳＧＮＳＱを含む、項３２に記載の結合剤。
３４．
Ｚ^３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、及びＰから選択され、
Ｘ^１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、及びＶから選択され、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、及びＣから選択される、項３３に記載の結合剤。
３５．ｆＧｌｙ部分が、抗体の重鎖ＣＨ１領域内に配置されている、項２４～２６のいずれか一項に記載の結合剤。
３６．重鎖ＣＨ１領域が、以下の配列：
Ｘ^１（ｆＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０
を含み、
式中、
Ｚ^２０が、プロリン又はアラニン残基のいずれかであり、
Ｚ^３０が、塩基性アミノ酸又は脂肪族アミノ酸であり、
Ｘ^１が、存在してもよく、又は存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸であってもよく、但し、配列がコンジュゲートのＮ末端にある場合、Ｘ^１が存在することを条件とし、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、任意のアミノ酸であり、
配列が、アミノ酸配列ＳＷＮＳＧＡに対してＣ末端であり、かつ／又はアミノ酸配列ＧＶＨＴＦＰに対してＮ末端である、項３５に記載の結合剤。
３７．重鎖ＣＨ１領域が、配列ＳＷＮＳＧＡＬ（ｆＧｌｙ）ＴＰＳＲＧＶＨＴＦＰを含む、項３６に記載の結合剤。
３８．
Ｚ^３０が、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、Ｉ、及びＰから選択され、
Ｘ^１が、Ｌ、Ｍ、Ｓ、及びＶから選択され、
Ｘ^２及びＸ^３が、各々独立して、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、及びＣから選択される、項３６に記載の結合剤。
３９．結合剤が、重鎖ＣＨ１領域の９１番目の位置のアスパラギン残基の前に、配列Ｘ^１（ｆＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０を含む、項３５又は３６及び３８のいずれか一項に記載の結合剤。
４０．重鎖ＣＨ１領域が、配列番号１７５の配列、又は配列番号１７５の配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含む、項３５又は３６及び３８又は３９のいずれか一項に記載の結合剤。
４１．配列Ｘ^１（ｆＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０が、配列ＬＣＴＰＳＲ（配列番号５８）を含む、項３９又は４０に記載の結合剤。
４２．配列番号１７５の９１番目の位置のアスパラギン残基の前に配列ＬＣＴＰＳＲ（配列番号５８）を含み、ＫＰＳＬＣＴＰＳＲＮＴＫ（配列番号１８９）の配列を含む抗体を産生する、項４１に記載の結合剤。
４３．以下の配列：
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＬＣＴＰＳＲＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１９０）を含む、項４２に記載の結合剤。
４４．ｆＧｌｙ部分が、抗体の重鎖ＣＨ２領域内に配置されている、項２４～２６のいずれか一項に記載の結合剤。
４５．ｆＧｌｙ部分が、抗体の重鎖ＣＨ３領域内に配置されている、項２４～２６のいずれか一項に記載の結合剤。
４６．結合剤が、ｆＧｌｙ部分を介して抗体に共有結合された異種部分を含む、項２３～４５のいずれか一項に記載の結合剤。
４７．異種部分が、薬物、オリゴヌクレオチド、タンパク質、脂質ナノ粒子、ウイルス粒子、毒素、検出可能な標識、水溶性ポリマー、又は合成ペプチドである、項４６に記載の結合剤。
４８．項１～４７のいずれか一項に記載の結合剤の可変重（ＶＨ）鎖、可変軽鎖（ＶＬ）、又はその両方をコードする核酸。
４９．結合剤が、一本鎖抗体であり、核酸が、一本鎖抗体をコードする、項４８に記載の核酸。
５０．一本鎖抗体が、ｓｃＦｖである、項４９に記載の核酸。
５１．項４８～５０のいずれか一項に記載の核酸を含む組換え発現ベクターであって、核酸が、真核細胞内で活性である転写制御エレメントに作動可能に連結されている、組換え発現ベクター。
５２．項４８～５０のいずれか一項に記載の核酸又は項５１に記載の発現ベクターを含む、細胞。
５３．核酸が、結合剤のＶＨ鎖及びＶＬ鎖をコードする、項５２に記載の細胞。
５４．結合剤が、一本鎖抗体であり、核酸が、一本鎖抗体をコードする、項５３に記載の細胞。
５５．一本鎖抗体が、ｓｃＦｖである、項５４に記載の細胞。
５６．細胞であって、
結合剤のＶＨ鎖をコードする第１の核酸と、
結合剤のＶＬ鎖をコードする第２の核酸と、を含み、
ＶＨ鎖及びＶＬ鎖が、項１～４７のいずれか一項に記載の結合剤を生成する、細胞。
５７．
第１の核酸を含む第１の発現ベクターと、
第２の核酸を含む第２の発現ベクターと、を含む、項５６に記載の細胞。
５８．融合タンパク質であって、
異種アミノ酸配列に融合した、項１～４７のいずれか一項に記載の結合剤のＶＨ鎖、ＶＬ鎖、又はその両方を含む、融合タンパク質。
５９．コンジュゲートであって、
項１～４７のいずれか一項に記載の結合剤と、
結合剤にコンジュゲートされた薬剤と、を含む、コンジュゲート。
６０．薬剤が、半減期延長部分、標識剤、及び薬物からなる群から選択される、項５９に記載のコンジュゲート。
６１．コンジュゲートが、式（Ｉ）：

【化58】

のコンジュゲートであり、
式中、
Ｚが、ＣＲ^４又はＮであり、
Ｒ^１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ^２及びＲ^３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、又はＲ^２及びＲ^３が任意選択的に環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ^４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｌが、リンカーであり、
Ｗ^１が、薬物であり、
Ｗ^２が、結合剤である、項６０に記載のコンジュゲート。
６２．Ｌが、
－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－を含み、
式中、
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆが、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆの合計は、１～６であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６が、各々独立して、共有結合、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシ（ＭＡＢＯ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＭＡＢＣ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシ（ＰＡＢＯ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢＣ）、パラ－アミノベンジル（ＰＡＢ）、パラ－アミノ－ベンジルアミノ（ＰＡＢＡ）、パラ－アミノ－フェニル（ＰＡＰ）、パラ－ヒドロキシ－フェニル（ＰＨＰ）、アセタール、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｍが、１～１２の整数であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、及びＶ^６が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ^１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される、項６１に記載のコンジュゲート。
６３．
Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル及び置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルから選択され、
Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６が、各々独立して、共有結合、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、ＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、ＰＨＰ、アセタール基、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、及びＶ^６が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、
（ＰＥＧ）_ｎが、

【化59】

であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡは、以下の構造：

【化60】

を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、

【化61】

であり、
各Ｒ^１２が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アリール、及び置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ^１２基が、環状に連結され、ピペラジニル環を形成してもよい、項６２に記載のコンジュゲート。
６４．ＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰが各々、任意選択的にグリコシドで置換されている、項６２又は６３に記載のコンジュゲート。
６５．グリコシドが、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択される、項５８に記載のコンジュゲート。
６６．
Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^２が、アミノ酸類似体であり、Ｖ^２が、－ＮＨ－であり、
Ｔ^３が、（ＰＥＧ）_ｎであり、Ｖ^３が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^４が、ＡＡであり、Ｖ^４が、存在せず、
Ｔ^５が、ＰＡＢＣであり、Ｖ^５が、存在せず、
ｆが、０である、項６２～６５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
６７．薬物が、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）である、項６１～６６のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
６８．コンジュゲートが、以下の構造：

【化62】

を有する、項６１～６７のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
６９．コンジュゲートが、式（Ｉａ）：

【化63】

のコンジュゲートであり、
式中、
Ｚが、ＣＲ^４又はＮであり、
Ｒ^１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ^２及びＲ^３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、又はＲ^２及びＲ^３が任意選択的に環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ^４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｌが、－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－を含むリンカーであり、式中、ａ、ｂ、ｃ及びｄが、各々独立して、０又は１であり、ａ、ｂ、ｃ及びｄの合計が、１～４であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３及びＴ^４が、各々独立して、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－、ピペリジン－４－アミノ（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、式中、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコール又は修飾ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基であり、式中、ｗが、１～２０の整数であり、ｎが、１～３０の整数であり、ｐが、１～２０の整数であり、ｈが、１～１２の整数であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、及びＶ^４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、式中、ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ^１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｗ^１が、薬物であり、
Ｗ^２が、結合剤である、項６０に記載のコンジュゲート。
７０．
Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル及び置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルから選択され、
Ｔ^２、Ｔ^３及びＴ^４が、各々独立して、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、及びエステルから選択され、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３及びＶ^４が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、
（ＰＥＧ）_ｎが、

【化64】

であり、式中、ｎが、１～３０の整数であり、
ＥＤＡは、以下の構造：

【化65】

を有するエチレンジアミン部分であり、式中、ｙが、１～６の整数であり、ｒが、０又は１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が、

【化66】

であり、
各Ｒ^１２及びＲ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、ポリエチレングリコール部分、アリール、及び置換アリールから選択され、任意の２つの隣接するＲ^１２基が、環状に連結して、ピペラジニル環を形成してもよく、
Ｒ^１３が、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択される、項６９に記載のコンジュゲート。
７１．Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３及びＴ^４、並びにＶ^１、Ｖ^２、Ｖ^３及びＶ^４が、以下の表から選択される、項６９に記載のコンジュゲート。

【表5】

７２．リンカーＬが、以下の構造のうちの１つから選択され、

【化67-1】

【化67-2】

【化67-3】

式中、
各ｆが、独立して、０又は１～１２の整数であり、
各ｙが、独立して、０又は１～２０の整数であり、
各ｎが、独立して、０又は１～３０の整数であり、
各ｐが、独立して、０又は１～２０の整数であり、
各ｈが、独立して、０又は１～１２の整数であり、
各Ｒが、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルであり、
各Ｒ’が、独立して、Ｈ、アミノ酸の側鎖基、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルである、項６９～７１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
７３．Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１が、－ＣＯ－であり、Ｔ^２が、４ＡＰであり、Ｖ^２が、－ＣＯ－であり、Ｔ^３が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^３が、－ＣＯ－であり、Ｔ^４が、存在せず、Ｖ^４が、存在しない、項６９～７２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
７４．リンカーＬが、以下の構造：

【化68】

を含み、
式中、
各ｆが、独立して、１～１２の整数であり、
ｎが、１～３０の整数である、項６９～７３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
７５．コンジュゲートが、式（ＩＩ）：

【化69】

のコンジュゲートであり、
式中、
Ｚ^１、Ｚ^２、Ｚ^３及びＺ^４が、各々独立して、ＣＲ^２４、Ｎ及びＣ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２から選択され、少なくとも１つのＺ^１、Ｚ^２、Ｚ^３及びＺ^４が、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２であり、
Ｒ^２１が、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｒ^２２及びＲ^２３が、各々独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、又はＲ^２２及びＲ^２３が任意選択的に環状に連結して、５若しくは６員のヘテロシクリルを形成し、
各Ｒ^２４が、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換アルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択され、
Ｌ^Ａが、第１のリンカーであり、
Ｌ^Ｂが、第２のリンカーであり、
Ｗ^１１が、第１の薬物であり、
Ｗ^１２が、第２の薬物であり、
Ｗ^１３が、結合剤である、項６０に記載のコンジュゲート。
７６．Ｚ^１が、ＣＲ^２４である、項７５に記載のコンジュゲート。
７７．Ｚ^１が、Ｎである、項７５に記載のコンジュゲート。
７８．Ｚ^３が、Ｃ－Ｌ^Ｂ－Ｗ^１２である、項７５に記載のコンジュゲート。
７９．Ｌ^Ａが、
－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－を含み、
式中、
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、及びｆが、各々独立して、０又は１であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｔ^５、及びＴ^６が、各々独立して、共有結合、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｘ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシ（ＭＡＢＯ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＭＡＢＣ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシ（ＰＡＢＯ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢＣ）、パラ－アミノベンジル（ＰＡＢ）、パラ－アミノ－ベンジルアミノ（ＰＡＢＡ）、パラ－アミノ－フェニル（ＰＡＰ）、パラ－ヒドロキシ－フェニル（ＰＨＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｘが、１～１２の整数であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、Ｖ^４、Ｖ^５、及びＶ^６が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ^１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される、項７５～７８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
８０．ＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰが各々、任意選択的にグリコシドで置換されている、項７９に記載のコンジュゲート。
８１．グリコシドが、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択される、項８０に記載のコンジュゲート。
８２．
Ｔ^１が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^１が、－ＣＯＮＨ－であり、
Ｔ^２が、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^２が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^３が、ＡＡであり、Ｖ^３が、存在せず、
Ｔ^４が、ＰＡＢＣであり、Ｖ^４が、存在せず、
ｅ及びｆが、各々０である、項７５～８１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
８３．Ｌ^Ｂが、
－（Ｔ^７－Ｖ^７）_ｇ－（Ｔ^８－Ｖ^８）_ｈ－（Ｔ^９－Ｖ^９）_ｉ－（Ｔ^１０－Ｖ^１０）_ｊ－（Ｔ^１１－Ｖ^１１）_ｋ－（Ｔ^１２－Ｖ^１２）_ｌ－（Ｔ^１３－Ｖ^１３）_ｍ－を含み、
式中、
ｇ、ｈ、ｉ、ｊ、ｋ、ｌ、及びｍが、各々独立して、０又は１であり、
Ｔ^７、Ｔ^８、Ｔ^９、Ｔ^１０、Ｔ^１１、Ｔ^１２、及びＴ^１３が、各々独立して、共有結合、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｘ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシ（ＭＡＢＯ）、メタ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＭＡＢＣ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシ（ＰＡＢＯ）、パラ－アミノ－ベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢＣ）、パラ－アミノベンジル（ＰＡＢ）、パラ－アミノ－ベンジルアミノ（ＰＡＢＡ）、パラ－アミノ－フェニル（ＰＡＰ）、パラ－ヒドロキシ－フェニル（ＰＨＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、及びエステルから選択され、ＥＤＡが、エチレンジアミン部分であり、ＰＥＧが、ポリエチレングリコールであり、ＡＡが、アミノ酸残基又はアミノ酸類似体であり、各ｗが、１～２０の整数であり、各ｎが、１～３０の整数であり、各ｐが、１～２０の整数であり、各ｘが、１～１２の整数であり、
Ｖ^７、Ｖ^８、Ｖ^９、Ｖ^１０、Ｖ^１１、Ｖ^１２及びＶ^１３が、各々独立して、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－及び－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群から選択され、各ｑが、１～６の整数であり、
各Ｒ^１３が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールから選択され、
各Ｒ^１５が、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクリル、及び置換ヘテロシクリルから選択される、項７５～８２のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
８４．ＭＡＢＯ、ＭＡＢＣ、ＰＡＢＯ、ＰＡＢＣ、ＰＡＢ、ＰＡＢＡ、ＰＡＰ、及びＰＨＰが各々、任意選択的にグリコシドで置換されている、項８３に記載のコンジュゲート。
８５．グリコシドが、グルクロニド、ガラクトシド、グルコシド、マンノシド、フコシド、Ｏ－ＧｌｃＮＡｃ、及びＯ－ＧａｌＮＡｃから選択される、項８３又は８４に記載のコンジュゲート。
８６．
Ｔ^７が、存在せず、Ｖ^７が、－ＮＨＣＯ－であり、
Ｔ^８が、（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^８が、－ＣＯＮＨ－であり、
Ｔ^９が、置換（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキルであり、Ｖ^９が、－ＣＯ－であり、
Ｔ^１０が、ＡＡであり、Ｖ^１０が、存在せず、
Ｔ^１１が、ＰＡＢＣであり、Ｖ^１１が、存在せず、
ｌ及びｍが、各々０である、項８３～８５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
８７．コンジュゲートが、以下の構造：

【化70】

を有する、項７５に記載のコンジュゲート。
８８．薬学的組成物であって、
ａ）項１～４７のいずれか一項に記載の結合剤と、
ｂ）薬学的に許容される担体と、を含む、薬学的組成物。
８９．薬学的組成物であって、
ａ）項５８に記載の融合タンパク質と、
ｂ）薬学的に許容される担体と、を含む、薬学的組成物。
９０．薬学的組成物であって、
ａ）項５９～８７のいずれか一項に記載のコンジュゲートと、
ｂ）薬学的に許容される担体と、を含む、薬学的組成物。
９１．Ｔ細胞活性化剤を更に含む、項８８～９０のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
９２．Ｔ細胞活性化剤が、免疫チェックポイント阻害剤、サイトカイン、及び阻害性免疫受容体のアンタゴニストからなる群から選択される、項９１に記載の薬学的組成物。
９３．抗体が、リポソーム中に封入される、項８８～９２のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
９４．対象における細胞増殖性障害を治療する方法であって、本方法が、
細胞増殖性障害を有する対象に、治療有効量の項８８～９３のいずれか一項に記載の薬学的組成物を投与することを含む、方法。
９５．対象に、治療有効量の免疫調節治療剤を投与することを更に含む、項９４に記載の方法。
９６．免疫調節治療剤が、免疫チェックポイント阻害剤又はインターロイキンである、項９５に記載の方法。
９７．免疫チェックポイント阻害剤が、Ａ２ＡＲ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ－４、ＣＤ２７７、ＩＤＯ、ＫＩＲ、ＰＤ－１、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３、ＴＩＧＩＴ及びＶＩＳＴＡを阻害する、項９６に記載の方法。
９８．免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１シグナル伝達を阻害する、項９７に記載の方法。
９９．ＰＤ－１シグナル伝達を阻害する免疫チェックポイント阻害剤が、抗ＰＤ－１抗体である、項９８に記載の方法。
１００．抗ＰＤ－１抗体が、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、又はアベルマブである、項９９に記載の方法。
１０１．免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＴＬＡ－４を阻害する、項９７に記載の方法。
１０２．ＣＴＬＡ－４の阻害が、抗ＣＴＬＡ－４抗体である、項１０１に記載の方法。
１０３．ＣＴＬＡ－４抗体が、イピリムマブである、項１０２に記載の方法。

【実施例】

【0665】

以下の実施例は、当業者に、本発明の作製及び使用方法の完全な開示及び記載を提供するために提示されるものであり、発明者が発明とみなす範囲を限定することを意図せず、また、以下の実験が実行される全て又は唯一の実験であることを表すことを意図するものではない。使用される数字（例えば、量、温度など）に対する正確性を確保する努力がなされているが、ある程度の実験誤差及び偏差が考慮されるべきである。別段示されない限り、部とは重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏であり、圧力は大気圧又は略大気圧である。標準的な略語、例えば、ｂｐ（塩基対）（複数可）、ｋｂ（キロ塩基）（複数可）、ｐｌ（ピコリットル）（複数可）、ｓ又はｓｅｃ（秒）（複数可）、ｍｉｎ（分）（複数可）、ｈ又はｈｒ（時間）（複数可）、ａａ（アミノ酸）（複数可）、ｋｂ（キロ塩基）（複数可）、ｂｐ（塩基対）（複数可）、ｎｔ（ヌクレオチド）（複数可）、ｉ．ｍ．（筋肉内（で））、ｉ．ｐ．（腹腔内（で））、ｓ．ｃ．（皮下（で））などが使用されてもよい。

【0666】

実施例で言及される市販の試薬は、別段の指示がない限り、製造業者の指示に従って使用した。別途明示されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する当業者によって通常理解されているものと同じ意味を有する。以下に例示的な方法及び材料が記載されているが、本明細書に記載の方法及び材料に類似又はそれらと同等の方法及び材料もまた、本発明の実践又は試験に使用することができる。材料、方法、及び実施例は、例示にすぎず、範囲を限定することを意図するものではない。

【0667】

実施例１：ＡＣ－１０のバリアントの生成
異なるレベルのヒト生殖細胞系列様類似性を有するフレームワーク領域へのキメラ配列のＣＤＲグラフティングに基づいて、２５個のＡＣ－１０の変異体を生成した。具体的には、フレームワーク領域が８３．５％～１００％のヒト生殖系列配列の範囲である、５つの重鎖及び５つの軽鎖配列バリアントを設計した。各重鎖及び軽鎖を互いに組み合わせて試験し、合計２５個のバリアントを分析した。これらのうち、２つの重鎖バリアント（ＶＨ２及びＶＨ３）を、任意の軽鎖配列と組み合わせて試験した場合、ＣＤ３０抗原にもはや結合しない抗体が得られ、１０個の抗体バリアントを選択から除外した。８５～９８．９％のヒト生殖系列細胞様の範囲の組み合わせられた重鎖及び軽鎖フレームワーク領域を表す残りの１５個の抗体を、ＡＤＣとして調製し、インビトロ効力について試験した（表４～６）。これらのデータから、最も強力なヒト化バリアントを、安定性試験及びＡＤＣとしてのインビボ有効性を含む追加の試験へと進めた。

【0668】

実施例２
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）基を含有するリンカー－ペイロード（ＲＥＤ－１０６）を、以下に示すスキーム１に従って合成した。

【0669】

スキーム１

【化71】

ｔｅｒｔ－ブチル４－オキソピペリジン－１－カルボキシレート（２１０）の合成
磁気撹拌棒が入った１００ｍＬの丸底フラスコに、ピペリジン－４－オン塩酸塩一水和物（１．５３ｇ、１０ｍｍｏｌ）、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（２．３９ｇ、１１ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（１．２２ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）、ジオキサン（１０ｍＬ）、及び水（１ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた材料を真空下で乾燥させ、１．７４ｇ（８７％）の化合物２１０を白色固体として得た。

【0670】

^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３） δ ３．７３ （ｔ， ４Ｈ， Ｊ ＝ ６．０）， ２．４６ （ｔ， ４Ｈ， Ｊ ＝ ６．０）， １．５１ （ｓ， ９Ｈ）．

【0671】

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｃ_１０Ｈ_１８ＮＯ_３についての計算値２００．３、実測値２００．２。

【0672】

ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（２－（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）エトキシ）エチル）アミノ）ピペリジン－１－カルボキシレート（２１１）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、ｔｅｒｔ－ブチル４－オキソピペリジン－１－カルボキシレート（３９９ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、Ｈ_２Ｎ－ＰＥＧ_２－ＣＯＯｔ－Ｂｕ（５５０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）、４Åモレキュラーシーブ（活性化粉末、２００ｍｇ）、及び１，２－ジクロロエタン（５ｍＬ）を加えた。混合物を、室温で１時間撹拌した。反応混合物にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（８４５ｍｇ、４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を３日間、室温で撹拌した。得られた混合物をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液との間で分配した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、８５０ｍｇの化合物２１１を粘性油として得た。

【0673】

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｃ_２１Ｈ_４１Ｎ_２Ｏ_６についての計算値４１７．３、実測値４１７．２。

【0674】

１３－（１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペリジン－４－イル）－２，２－ジメチル－４，１４－ジオキソ－３，７，１０－トリオキサ－１３－アザヘプタデカン－１７－酸（２１２）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（２－（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）エトキシ）エチル）アミノ）ピペリジン－１－カルボキシレート２１１（２２０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、無水コハク酸（５５ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、４－（ジメチルアミノ）ピリジン（５ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）、及びジクロロメタン（３ｍＬ）を加えた。混合物を、室温で２４時間撹拌した。反応混合物をフラッシュクロマトグラフィー（５０～１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出）によって部分的に精製して、１１７ｍｇの化合物２１２を透明油として得て、これを更に特性決定することなく次に進めた。

【0675】

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｃ_２５Ｈ_４５Ｎ_２Ｏ_９についての計算値５１７．６、実測値５１７．５。

【0676】

１７－（ｔｅｒｔ－ブチル）１－（（１^４Ｓ，１^６Ｓ，３^３Ｓ，２Ｒ，４Ｓ，１０Ｅ，１２Ｅ，１４Ｒ）－８^６－クロロ－１^４－ヒドロキシ－８^５，１４－ジメトキシ－３^３，２，７，１０－テトラメチル－１^２，６－ジオキソ－７－アザ－１（６，４）－オキサジナナ－３（２，３）－オキシラナ－８（１，３）－ベンゼナシクロテトラデカファン－１０，１２－ジエン－４－イル）（２Ｓ）－８－（１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペリジン－４－イル）－２，３－ジメチル－４，７－ジオキソ－１１，１４－ジオキサ－３，８－ジアザヘプタデカンジオエート（２１３）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、１３－（１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペリジン－４－イル）－２，２－ジメチル－４，１４－ジオキソ－３，７，１０－トリオキサ－１３－アザヘプタデカン－１７－酸２１２（５５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、Ｎ－デアシルメイタンシン１２４（６５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（４３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（１ｍＬ）、及びジクロロメタン（０．５ｍＬ）を加えた。混合物を、室温で８時間撹拌した。反応混合物をＣ１８フラッシュクロマトグラフィー（５～１００％のＭｅＣＮ／水で溶出）によって直接的に精製して、１８ｍｇ（１６％）の化合物２１３を白色フィルムとして得た。

【0677】

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｃ_５７Ｈ_８７ＣｌＮ_５Ｏ_１７についての計算値１１４８．６、実測値１１４８．７。

【0678】

（２Ｓ）－１－（（（１^４Ｓ，１^６Ｓ，３^３Ｓ，２Ｒ，４Ｓ，１０Ｅ，１２Ｅ，１４Ｒ）－８^６－クロロ－１^４－ヒドロキシ－８^５，１４－ジメトキシ－３^３，２，７，１０－テトラメチル－１^２，６－ジオキソ－７－アザ－１（６，４）－オキサジナナ－３（２，３）－オキシラナ－８（１，３）－ベンゼナシクロテトラデカファン－１０，１２－ジエン－４－イル）オキシ）－２，３－ジメチル－１，４，７－トリオキソ－８－（ピペリジン－４－イル）－１１，１４－ジオキサ－３，８－ジアザヘプタデカン－１７－酸（２１４）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、メイタンシノイド２１３（３１ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１ｍＬ）を加えた。溶液を０℃まで冷却し、四塩化スズ（ＩＶ）（ジクロロメタン中１．０Ｍの溶液、０．３ｍＬ、０．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で１時間撹拌した。反応混合物をＣ１８フラッシュクロマトグラフィー（５～１００％のＭｅＣＮ／水で溶出）によって直接的に精製して、１６ｍｇ（６０％）の化合物２１４を白色固体として得た（１６ｍｇ、収率６０％）。

【0679】

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｃ_４８Ｈ_７１ＣｌＮ_５Ｏ_１５についての計算値９９２．５、実測値９９２．６。

【0680】

（２Ｓ）－８－（１－（３－（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－インドール－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－１－（（（１^４Ｓ，１^６Ｓ，３^３Ｓ，２Ｒ，４Ｓ，１０Ｅ，１２Ｅ，１４Ｒ）－８^６－クロロ－１^４－ヒドロキシ－８^５，１４－ジメトキシ－３^３，２，７，１０－テトラメチル－１^２，６－ジオキソ－７－アザ－１（６，４）－オキサジナナ－３（２，３）－オキシラナ－８（１，３）－ベンゼナシクロテトラデカファン－１０，１２－ジエン－４－イル）オキシ）－２，３－ジメチル－１，４，７－トリオキソ－１１，１４－ジオキサ－３，８－ジアザヘプタデカン－１７－酸（２１５）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、メイタンシノイド２１４（１６ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）、（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル１，２－ジメチル－２－（（１－（３－オキソ－３－（ペルフルオロフェノキシ）プロピル）－１Ｈ－インドール－２－イル）メチル）ヒドラジン－１－カルボキシレート（５）（１３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（８μＬ、０．０５ｍｍｏｌ）、及びＤＭＦ（１ｍＬ）を加えた。溶液を１８時間、室温で撹拌した。反応混合物をＣ１８フラッシュクロマトグラフィー（５～１００％のＭｅＣＮ／水で溶出）によって直接的に精製して、１８ｍｇ（７７％）の化合物２１５を白色固体として得た。

【0681】

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｃ_７７Ｈ_９８ＣｌＮ_８Ｏ_１８についての計算値１４５７．７、実測値１４５７．９。

【0682】

（２Ｓ）－１－（（（１^４Ｓ，１^６Ｓ，３^３Ｓ，２Ｒ，４Ｓ，１０Ｅ，１２Ｅ，１４Ｒ）－８^６－クロロ－１^４－ヒドロキシ－８^５，１４－ジメトキシ－３^３，２，７，１０－テトラメチル－１^２，６－ジオキソ－７－アザ－１（６，４）－オキサジナナ－３（２，３）－オキシラナ－８（１，３）－ベンゼナシクロテトラデカファン－１０，１２－ジエン－４－イル）オキシ）－８－（１－（３－（２－（１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－インドール－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－２，３－ジメチル－１，４，７－トリオキソ－１１，１４－ジオキサ－３，８－ジアザヘプタデカン－１７－酸（２１６）の合成
磁気撹拌棒が入った乾燥したシンチレーションバイアルに、メイタンシノイド２１５（１８ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）、ピペリジン（２０μＬ、０．０２ｍｍｏｌ）、及びＤＭＦ（１ｍＬ）を加えた。溶液を２０分間、室温で撹拌した。反応混合物をＣ１８フラッシュクロマトグラフィー（１～６０％のＭｅＣＮ／水で溶出）によって直接的に精製して、１５ｍｇ（９８％）の化合物２１６（本明細書では、ＨＩＰＳ－４ＡＰ－メイタンシン又はＨＩＰＳ－４－アミノ－ピペリジン－メイタンシンとも称される）を白色固体として得た。

【0683】

ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］^＋ Ｃ_６２Ｈ_８８ＣｌＮ_８Ｏ_１６についての計算値１２３５．６、実測値１２３６．０。

【0684】

実施例３：ＡＤＣのバイオコンジュゲート化、精製、及びＨＰＬＣ分析
１つ又は２つのアルデヒドタグ（単一又は二重タグ化構築物、図１Ａ～１Ｃ）を有する抗体（１５ｍｇ／ｍＬ）を、それぞれ、１．１又は１．７ｍＭでリンカー－ペイロードにコンジュゲートした。反応は、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、０．８５～２．５％のＤＭＡを含有する５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ５．５（２０／５０緩衝液）中、３７℃で７２時間進行した。いくつかの場合において、Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ－１００を０．２５％に添加して、リンカー－ペイロード溶解度を改善した。コンジュゲート化の後、遊離薬物を、３０ｋＤのＭＷＣＯ ０．５ｍＬのＡｍｉｃｏｎスピン濃縮器を使用して除去した。試料をスピン濃縮器に添加し、１５，０００×ｇで７分間遠心分離し、次いで４５０μＬの２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ５．５で希釈し、再び遠心分離した。このプロセスを１０回繰り返した。最終生成物の薬物－抗体比（ＤＡＲ）を決定するために、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を、ＨＩＣ（Ｔｏｓｏｈ＃１４９４７）又はＰＬＲＰ－ＲＰ（Ａｇｉｌｅｎｔ ＰＬ１９１２－１８０２ １０００Ａ、８μｍ、５０×２．１ｍｍ）カラムを使用する分析クロマトグラフィーによって調べた。ＨＩＣ分析は、移動相Ａ：１．５Ｍの硫酸アンモニウム、２５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ７．０、及び移動相Ｂ：２５％イソプロパノール、１８．７５ｍＭのリン酸ナトリウム ｐＨ７．０を使用した。ＰＬＲＰ分析は、移動相Ａ：水中の０．１％のトリフルオロ酢酸、及び移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．１％のトリフルオロ酢酸を使用した。ＰＬＲＰ分析前に、試料を、５０ｍＭのＤＴＴ、４ＭのグアニジンＨＣｌ（最終濃度）の添加によって変性し、３７℃で３０分間加熱した。凝集を測定するために、３００ｍＭのＮａＣｌ、２５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ６．８の移動相を用いた分析サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ、Ｔｏｓｏｈ＃０８５４１）を使用して試料を分析した。

【0685】

ＡＤＣを、約１．９のＤＡＲについてメイタンシンペイロード（ＲＥＤ－１０６）を有する非切断可能なリンカーに対して抗体重鎖Ｃ末端でコンジュゲートした。

【0686】

図３。メイタンシンペイロード（ＲＥＤ－１０６）を有する非切断可能なリンカーにコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ１／Ｌ１抗体は、疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）によって決定される場合、１．８８のＤＡＲをもたらす。

【0687】

図４。ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ１／Ｌ１抗体は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって決定される場合、９９．２％が単量体である。

【0688】

図５。ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ１／Ｌ４抗体は、ＨＩＣによって決定される場合、１．９１のＤＡＲをもたらす。

【0689】

図６。ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ１／Ｌ４抗体は、ＳＥＣによって決定される場合、９９．５％が単量体である。

【0690】

図７。ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ４／Ｌ２抗体は、ＨＩＣによって決定される場合、１．８９のＤＡＲをもたらす。

【0691】

図８。ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ４／Ｌ２抗体は、ＳＥＣによって決定される場合、９９．７％が単量体である。

【0692】

図９。ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ４／Ｌ４抗体は、ＨＩＣによって決定される場合、１．９０のＤＡＲをもたらす。

【0693】

図１０。ＲＥＤ－１０６にコンジュゲートされたＣＴタグ化Ｈ４／Ｌ４抗体は、ＳＥＣによって決定される場合、９９．５％が単量体である。

【0694】

実施例４：組換えＣＤ３０に対するヒト化抗ＣＤ３０抗体の結合
本開示に記載のＶＨ鎖及びＶＬ鎖からのフレームワーク領域を含む抗ＣＤ３０抗体の結合を推定するために、ＥＬＩＳＡを実施した。ＣＤ３０への結合は、いくつかの軽鎖バリアントＬ１～Ｌ５と組み合わせたＨ１バリアントを含有する試験されたバリアントの様々な組み合わせでは影響を受けなかった（図１１）。

【0695】

同様に、本開示に記載のＶＨ鎖及びＶＬ鎖からのフレームワーク領域を含む抗ＣＤ３０抗体の結合を推定するために、ＥＬＩＳＡを実施した。ＣＤ３０への結合は、いくつかの軽鎖バリアントＬ１～Ｌ５と組み合わせたＨ４バリアントを含有する試験されたバリアントの様々な組み合わせでは影響を受けなかった（図１２）。

【0696】

実施例５：ＣＤ３０発現細胞株に対する抗ＣＤ３０ ＡＤＣのインビトロ細胞傷害性
細胞株を、１００μＬの成長培地中で５×１０^４細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ３６１０）に播種した。翌日に、培地で連続希釈した２０μＬの試験結合剤で細胞を処理した。５％ＣＯ２、３７℃で５日間インキュベートした後、製造者の推奨に従ってＰｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ Ｇｌｏ（登録商標）試薬を使用して、生存率を測定した。ＧＩ５０曲線を、ペイロード濃度に対して正規化されたＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍで計算した。重鎖及び軽鎖バリアントの様々な組み合わせを、標的細胞に対するそれらのインビトロ細胞傷害性の効力について試験した。

【0697】

表４。抗体Ｈ１重鎖を含むヒト化ＣＤ３０標的化メイタンシンとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力を反映するＩＣ５０値。

【表6】

【0698】

ＡＤＣを、約１．９のＤＡＲについてメイタンシンペイロードを有する非切断可能なリンカーに対して抗体重鎖Ｃ末端でコンジュゲートした。

【0699】

表５。抗体Ｈ４重鎖を含むヒト化ＣＤ３０標的化メイタンシンとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力を反映するＩＣ５０値。

【表7】

【0700】

表６。抗体Ｈ５重鎖を含むヒト化Ｃ３０標的化メイタンシンとコンジュゲートしたＡＤＣのインビトロ効力を反映するＩＣ５０値。

【表8】

【0701】

本開示に記載のＶＨ鎖及びＶＬ鎖からのフレームワーク領域を含む抗ＣＤ３０抗体について、インビトロ細胞傷害性評価を実施した。いくつかの軽鎖バリアントＬ１～Ｌ５と組み合わせたＨ１バリアントを含有する試験したバリアントのいくつかは、ＳＵ－ＤＨＬ－１細胞に対する望ましい細胞傷害性を示した（図１３）。

【0702】

本開示に記載のＶＨ鎖及びＶＬ鎖からのフレームワーク領域を含む抗ＣＤ３０抗体について、インビトロ細胞傷害性評価を実施した。いくつかの軽鎖バリアントＬ１～Ｌ５と組み合わせたＨ１バリアントを含有する試験したバリアントのいくつかは、Ｌ５４０細胞に対する望ましい細胞傷害性を示した（図１４）。

【0703】

本開示に記載のＶＨ鎖及びＶＬ鎖からのフレームワーク領域を含む抗ＣＤ３０抗体について、インビトロ細胞傷害性評価を実施した。いくつかの軽鎖バリアントＬ１～Ｌ５と組み合わせたＨ４バリアントを含有する試験したバリアントのいくつかは、ＳＵ－ＤＨＬ－１細胞に対する望ましい細胞傷害性を示した（図１５）。

【0704】

本開示に記載のＶＨ鎖及びＶＬ鎖からのフレームワーク領域を含む抗ＣＤ３０抗体について、インビトロ細胞傷害性評価を実施した。いくつかの軽鎖バリアントＬ１～Ｌ５と組み合わせたＨ４バリアントを含有する試験したバリアントのいくつかは、Ｌ５４０細胞に対する望ましい細胞傷害性を示した（図１６）。

【0705】

実施例６：生物物理学的特性評価－安定性
融解温度及び強制安定性の結果は、ヒト化バリアントが、親キメラと比較して改善された特性を示したことを示した。例えば、以下の表７は、示差走査蛍光定量法によって決定されるヒト化抗体及びＡＤＣ融解温度が、キメラ配列よりも改善を示すことを示す。

【0706】

【表9】

【0707】

ＡＤＣを、約１．９のＤＡＲについてメイタンシンペイロードを有する非切断可能なリンカーに対して抗体重鎖Ｃ末端でコンジュゲートした。

【0708】

【表10】

【0709】

ＡＤＣを、約１．９のＤＡＲについてメイタンシンペイロードを有する非切断可能なリンカーに対して抗体重鎖Ｃ末端でコンジュゲートした。試料を、指定されたｐＨ及び温度の緩衝液中に３日間配置し、次いでサイズ排除クロマトグラフィーによって分析した。ＨＭＷ、高分子量種。

【0710】

実施例７：ＨＵＴ１０２異種移植片モデルに対する抗ＣＤ３０ ＡＤＣのインビボ有効性
方法：雌ＮＣＧマウス（８匹／群）に、ＨｕＴ１０２細胞を皮下接種した。治療は、腫瘍が平均１３９ｍｍ^３に達したときに開始し、その時点で、動物に、ビヒクル単独、又は１０ｍｇ／ｋｇの単回用量の抗ＣＤ３０ ＡＤＣを静脈内投与した。２つのアルデヒドタグ（ＣＨ１／ＣＴ）又は１つのアルデヒドタグ（ＣＴ）を担持し、メイタンシンペイロード（ＲＥＤ－１０６）を担持する非切断性リンカーにコンジュゲートして、それぞれ、約４又は約２の薬物対抗体比を得た抗ＣＤ３０ ＡＤＣを試験した。動物を、体重及び腫瘍サイズについて週に２回モニタリングした。腫瘍が２０００ｍｍ^３に達したとき、動物を安楽死させた。全てのＤＡＲ４ ＡＤＣは、ＨｕＴ １０２腫瘍に対して有効であり、投与後約２週間腫瘍成長を遅らせた。ＤＡＲ２ ＡＤＣは、更により有効であり、研究の期間中、腫瘍成長を防止した（図１７）。

【0711】

実施例８
ＭＭＡＥ構築物８の合成
化合物１及び４は、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｍｅｄｉｃｉｌｏｎから商業的に入手し、受領したまま使用した。モノメチルアウリスタチンＡ５（ＭＭＡＥ）は、ＢｒｏａｄＰｈａｒｍから購入した。他の全ての試薬は、商業的供給源から得て、精製することなく使用した。

【0712】

（Ｒ）－２－（３－（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジンエニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパンアミド）－３－オキソ－３－（（２－（２－（３－オキソ－３－（ペルフルオロフェノキシ）プロポキシ）エトキシ）エチル）アミノ）プロパン－１－スルホン酸（３）の調製

【化72】

カルボン酸１（１．３３ｇ、１．６７ｍｍｏｌ）を、６．５ｍＬの無水ＤＭＦ中のペンタフルオロフェノール２（１．２３ｇ、６．６８ｍｍｏｌ）と合わせた。この混合物を、ＥＤＣＩ－ＨＣｌ（０．６４ｇ、３．３４ｍｍｏｌ）を用いて、室温で一度に処理し、ＨＰＬＣ分析によって判断される場合に、１が完全に消費されるまで、２０時間撹拌した。反応混合物を逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム、０．０５％ＴＦＡを含む０～８０％アセトニトリル－水）によって直接精製した。純粋な画分を合わせ、濁るまで真空下で濃縮し、凍結乾燥させて、黄褐色粉末としてＰＦＰ－エステル生成物３（１．４０ｇ、１．４６ｍｍｏｌ、収率８７％）を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ９６１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋、Ｃ_４４Ｈ_４５Ｆ_５Ｎ_６Ｏ_１１Ｓについての計算値ｍ／ｚ ９６１．３。

【0713】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（６）の調製

【化73】

２０ｍＬのガラスバイアル中、モノメチルアウリスタチンＡ５（７２０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、５ｍＬの無水ＤＭＦ、及び０．３５ｍＬのＤＩＰＥＡ（２．０ｍｍｏｌ）を室温で合わせた。得られた混合物を撹拌し、固体としてＰＮＰカーボネート４（１０１４ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を用いて少量ずつ処理し、続いて、ＨＯＡｔ（１３６ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を室温で一度に添加した。反応が完了したと判断されるまで（ＨＰＬＣ）、反応混合物を６時間撹拌した。反応混合物を３０ｍＬの水に注ぎ、得られた沈殿物を紡糸によって分離して収集し、５ｍＬの水で洗浄し、高真空下で短時間乾燥させて、１．８７ｇの粗生成物６を黄色がかった固体として得て、これを精製することなく次のステップに進めた。

【0714】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボン酸（７）の調製

【化74】

１５ｍＬのＴＨＦ中の粗化合物６（１．８７ｇ）の溶液を氷浴中で０℃まで冷却し、１Ｍの水酸化リチウム水溶液（３ｍＬ）でゆっくりと処理した。反応混合物を０℃で３時間撹拌し、次いで周囲温度まで加温し、３ｍＬの１Ｍ水酸化リチウム水溶液で処理し、３ｍＬのメタノールで希釈した。得られた混合物を、加水分解が完了するまで（ＨＰＬＣ）、室温で３時間撹拌し、次いで、１ＭのＨＣｌ水溶液をｐＨ７に添加することによってクエンチした。次いで、反応混合物を減圧下で濃縮し、１０ｍＬのＭＴＢＥで洗浄した。水層を逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム、０．０５％ＴＦＡを含む０～４０％アセトニトリル－水）によって精製した。純粋な生成物画分を合わせ、減圧下で濃縮し、凍結乾燥させて、化合物７を白色固体として得た（７３５ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ、２ステップで収率６０％）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １２２９．７［Ｍ＋Ｈ］^＋、Ｃ_６１Ｈ_９６Ｎ_８Ｏ_１８についての計算値ｍ／ｚ １２２９．７。

【0715】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－（５－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）－２－（（２Ｓ，５Ｓ，１８Ｒ）－２２－（２－（（１，２－ジメチルヒドラジンエニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）－５－イソプロピル－２－メチル－４，７，１７，２０－テトラオキソ－１８－（スルホメチル）－１０，１３－ジオキサ－３，６，１６，１９－テトラアザドコサナミド）フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボン酸（８）の調製

【化75】

化合物７（７３５ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）の３ｍＬの無水ＤＭＡ中の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．２１ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）及びＰＦＰ－エステル３（５７５ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）の２ｍＬのＤＭＡ中の溶液を室温で添加し、続いてＨＯＡｔ（８４ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を添加した。カップリングが完了したと判断されるまで（ＨＰＬＣ分析）、得られた混合物を３０分間撹拌し、次いで、室温で１．２ｍＬのピペリジンで直接処理した。１５分後、反応混合物を逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム、０～４０％勾配のアセトニトリル－水）によって精製した。純粋な画分を合わせ、減圧及び室温下で濃縮し、凍結乾燥させ、化合物８（８０８ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、収率７５％）を白色のふわふわの粉末として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １７８３．９［Ｍ＋Ｈ］^＋、Ｃ_８４Ｈ_１３０Ｎ_１４Ｏ_２６Ｓについての計算値ｍ／ｚ １７８３．９。

【0716】

ベロテカン構築物２１の合成
合成中間体４及び９は、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｍｅｄｉｃｉｌｏｎから商業的に入手し、受領したまま使用した。ベロテカン１５は、ＡｓｔａＴｅｃｈから購入した。全ての他の試薬は、商業的供給源から得て、精製することなく使用した。

【0717】

スキーム２。中間体１４の合成。

【化76】

（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル２－（（５－アミノ－１－（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロピル）－１Ｈ－インドール－２－イル）メチル）－１，２－ジメチルヒドラジン－１－カルボキシレート（１０）の調製
ニトロ化合物９（１１６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を１ｍＬのＴＨＦに溶解し、塩化アンモニウム（８５ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）の０．５ｍＬの水及び１ｍＬのメタノール中の溶液と合わせた。得られた混合物を室温で激しく撹拌し、５分間にわたって亜鉛粉末（１０４ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を少量ずつ用いて処理した。反応混合物を２時間撹拌し、固体を濾別し、濾液を２０ｍＬの飽和塩化アンモニウム水溶液で希釈し、酢酸エチル（２×２５ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を高減圧下で除去して粗生成物１０を得て、これを精製することなく次のステップに進めた。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ５５５．３［Ｍ＋Ｈ］^＋、Ｃ_３３Ｈ_３８Ｎ_４Ｏ_４についての計算値ｍ／ｚ ５５５．３。

【0718】

（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル２－（（１－（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロピル）－５－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－４－オキソブタンアミド）－１Ｈ－インドール－２－イル）メチル）－１，２－ジメチルヒドラジン－１－カルボキシレート（１２）の調製
粗化合物１０（約０．２０ｍｍｏｌ）を、２ｍＬのＤＭＦ中の４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－４－オキソブタン酸１１（４０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と合わせた。この混合物に、ＤＩＰＥＡ（０．１２ｍＬ、０．６ｍｍｏｌ）、続いてＰｙＡＯＰ（１１０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を室温で一度に加えた。３０分後、反応を、飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぐことによってクエンチし、酢酸エチルで抽出し、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を高減圧下で除去して、１２０ｍｇ（０．１７ｍｍｏｌ、２ステップで収率８５％）の生成物１２を暗色油として得て、それを更に精製することなく使用した。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ７３３．４［Ｍ＋Ｎａ］^＋、Ｃ_４１Ｈ_５０Ｎ_４Ｏ_７についての計算値ｍ／ｚ ７３３．４。

【0719】

４－（（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１－（２－カルボキシエチル）－１Ｈ－インドール－５－イル）アミノ）－４－オキソブタン酸（１３）の調製
ビス－ｔｅｒｔ－ブチルエステル化合物１２（１２０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を、２ｍＬの無水ＤＣＭ、２ｍＬのＴＦＡ、及び０．５ｍＬのトリソプロピルシラン（ｔｒｉｓｏｐｒｏｐｙｌｓｉｌａｎｅ）の混合物に溶解した。得られた混合物を室温で４時間放置した。溶媒を高減圧下で除去し、残渣を逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム、０．０５％ＴＦＡを含むＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏの０～７０％ｖ／ｖ勾配）によって精製して、５３ｍｇ（０．０９ｍｍｏｌ、収率５３％）の二塩基酸生成物１３を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ５９９．３［Ｍ＋Ｈ］^＋、Ｃ_３３Ｈ_３４Ｎ_４Ｏ_７についての計算値ｍ／ｚ ５９９．２。

【0720】

（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル１，２－ジメチル－２－（（１－（３－オキソ－３－（ペルフルオロフェノキシ）プロピル）－５－（４－オキソ－４－（ペルフルオロフェノキシ）ブタンアミド）－１Ｈ－インドール－２－イル）メチル）ヒドラジン－１－カルボキシレート（１４）の調製
二塩基酸１３（５０ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）及びペンタフルオロフェノール（４６ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）の２ｍＬの無水ＴＨＦ中の混合物に、ＤＣＣ（５１ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を室温で一度に添加した。得られた混合物を１６時間撹拌し、固体を濾別し、濾液を濃縮し、逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム、０．０５％ＴＦＡを含むＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏの０～１００％ｖ／ｖ勾配）によって精製した。生成物を含有する画分を約２０ｍＬに濃縮し、５０ｍＬの１０％クエン酸水溶液に注ぎ、酢酸エチル（２×２０ｍＬ）で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を高減圧下で除去して、６７ｍｇ（０．０７２ｍｍｏｌ、収率８６％）のｂｉｓ－ＰＦＰエステル生成物１４を、暗色粘性油として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ９５３．１［Ｍ＋Ｎａ］^＋、Ｃ_４５Ｈ_３２Ｆ_１０Ｎ_４Ｏ_７についての計算値ｍ／ｚ ９５３．２。

【0721】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（（（２－（（Ｓ）－４－エチル－４－ヒドロキシ－３，１４－ジオキソ－３，４，１２，１４－テトラヒドロ－１Ｈ－ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２－ｂ］キノリン－１１－イル）エチル）（イソプロピル）カルバモイル）オキシ）メチル）フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボン酸（１６）の調製

【化77】

２ｍＬのＤＭＦ中のベロテカン１５（ＨＣｌ塩、２０ｍｇ、４３μｍｏｌ）の溶液に、１５ｕＬのＤＩＰＥＡ（８６μｍｏｌ）及び６ｍｇのＨＯＡｔ（４３μｍｏｌ）を添加した。得られた混合物をＰＮＰカーボネート４（４３ｍｇ、４３μｍｏｌ）によって室温で処理し、１時間撹拌し、次いでＤＭＦを高減圧下で除去した。残渣を１ｍＬのＭｅＯＨに溶解し、１ＭのＬｉＯＨ水溶液１ｍＬで処理した。１０分後、１ＭのＨＣｌ水溶液１ｍＬを混合物に加え、続いて、０．５ＭのｐＨ４．７酢酸緩衝液１ｍＬを添加した。得られた混合物を室温で３０分間撹拌し、逆相ＨＰＬＣ（Ｃ１８カラム、０．０５％ＴＦＡを含むＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏの０～５０％ｖ／ｖの勾配）によって直接精製した。溶媒を真空下で除去して、ガラス状黄色固体として１７ｍｇ（１８μｍｏｌ、収率４３％）の化合物１６を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ９４５．４［Ｍ＋Ｈ］^＋、Ｃ_４７Ｈ_５６Ｎ_６Ｏ_１５についての計算値ｍ／ｚ ９４５．４。

【0722】

スキーム３。分岐鎖ベロテカン構築物２１の合成

【化78】

Ｎ^６－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－Ｎ^２－（３－（２－（２－メトキシエトキシ）エトキシ）プロパノイル）－Ｌ－リジン１９）
２ｍＬの無水ＤＭＦ中のｍＰＥＧ８－酸１７（１００ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．１３ｍＬ、０．７２ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（９３ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を室温で添加した。得られた混合物を１時間撹拌し、次いで、Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨ １８（８９ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を混合物に添加し、撹拌を１時間続けた。反応混合物を逆相クロマトグラフィーＨＰＬＣ（Ｃ１８、０．０５％ＴＦＡを含む０～７０％ｖ／ｖのＭｅＣＮ－Ｈ_２Ｏ）によって直接精製し、１２０ｍｇの化合物１９（０．１６ｍｍｏｌ、収率６７％）を無色油として得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ ７６３．４［Ｍ＋Ｈ］^＋、Ｃ_３９Ｈ_５８Ｎ_２Ｏ_１３についての計算値ｍ／ｚ ７６３．４。

【0723】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－（２－（（２８Ｓ，３１Ｓ，３４Ｓ）－２８－（４－アミノブチル）－３１－イソプロピル－３４－メチル－２６，２９，３２－トリオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサ－２７，３０，３３－トリアザペンタトリアコンタン－３５－アミド）－５－（（（（２－（（Ｓ）－４－エチル－４－ヒドロキシ－３，１４－ジオキソ－３，４，１２，１４－テトラヒドロ－１Ｈ－ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２－ｂ］キノリン－１１－イル）エチル）（イソプロピル）カルバモイル）オキシ）メチル）フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボン酸（２０）の調製
３ｍＬの無水ＤＭＦ中のカルボン酸２３（４５ｍｇ、５９μｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＰＥＡ（２１μＬ、１２０μｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（２２ｍｇ、５９μｍｏｌ）を室温で添加した。得られた混合物を２０分間撹拌し、１ｍＬのＤＭＦ中のアミン１６（５５ｍｇ、５８μｍｏｌ）と合わせた。反応混合物を３０分間撹拌し、次いで、ピペリジン（１１５μＬ、１．２ｍｍｏｌ）を混合物に室温で添加した。２０分後、反応混合物を逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８、０．０５％ＴＦＡを含む０～５０％ｖ／ｖのＭｅＣＮ－Ｈ_２Ｏ）によって直接精製した。純粋な画分の凍結乾燥により、黄色粉末として３４ｍｇの化合物２０（２３μｍｏｌ、収率４０％）を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １４６７．７［Ｍ＋Ｈ］^＋、Ｃ_７１Ｈ_１０２Ｎ_８Ｏ_２５についての計算値ｍ／ｚ １４６７．７。

【0724】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－（２－（（２８Ｓ，３１Ｓ，３４Ｓ）－２８－（４－（３－（５－（（Ｓ）－２８－（（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（２－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－６－カルボキシ－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）－４－（（（（２－（（Ｓ）－４－エチル－４－ヒドロキシ－３，１４－ジオキソ－３，４，１２，１４－テトラヒドロ－１Ｈ－ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２－ｂ］キノリン－１１－イル）エチル）（イソプロピル）カルバモイル）オキシ）メチル）フェニル）アミノ）－１－オキソプロパン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバモイル）－２６，３４－ジオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサ－２７，３３－ジアザヘプタトリアコンタン－３７－アミド）－２－（（１，２－ジメチルヒドラジンエニル）メチル）－１Ｈ－インドール－１－イル）プロパンアミド）ブチル）－３１－イソプロピル－３４－メチル－２６，２９，３２－トリオキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサ－２７，３０，３３－トリアザペンタトリアコンタン－３５－アミド）－５－（（（（２－（（Ｓ）－４－エチル－４－ヒドロキシ－３，１４－ジオキソ－３，４，１２，１４－テトラヒドロ－１Ｈ－ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２－ｂ］キノリン－１１－イル）エチル）（イソプロピル）カルバモイル）オキシ）メチル）フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボン酸（２１）の調製
２ｍＬのＤＭＡ中の化合物２０（３４ｍｇ、２３μｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（８μＬ、４６μｍｏｌ）の混合物に、ビス－ＰＦＰ－エステル１４（９．４ｍｇ、１０．５μｍｏｌ）を添加し、続いてＨＯＡｔ（３ｍｇ、２３μｍｏｌ）を室温で添加した。得られた混合物を室温で３０分間放置し、次いでピペリジン（２１μＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を混合物に室温で添加した。２０分後、反応混合物を逆相分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８、０．０５％ＴＦＡを含む０～５０％ｖ／ｖのＭｅＣＮ－Ｈ_２Ｏ）によって直接精製した。純粋な画分を合わせ、凍結乾燥させ、黄色固体として化合物２１（２３ｍｇ、７μｍｏｌ、収率６７％）を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ １６３８．３［Ｍ＋Ｈ］^２＋、Ｃ_１６０Ｈ_２２４Ｎ_２０Ｏ_５３についての計算値ｍ／ｚ １６３８．８。

【0725】

実施例９
バイオコンジュゲート化、精製、及びＨＰＬＣ分析
１つのアルデヒドタグを有するアルデヒドタグ化抗体である抗体（１５ｍｇ／ｍＬ）のＨＩＰＳコンジュゲート化を、それぞれ、１．１ｍＭでリンカー－ペイロード（実施例７を参照）にコンジュゲートした。反応は、２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、０．８５～２．５％のＤＭＡを含有する５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ５．５（２０／５０緩衝液）中、３７℃で７２時間進行した。コンジュゲート化の後、遊離薬物を、３０ｋＤのＭＷＣＯ ０．５ｍＬのＡｍｉｃｏｎスピン濃縮器を使用して除去した。試料をスピン濃縮器に添加し、１５，０００×ｇで７分間遠心分離し、次いで４５０μＬの２０ｍＭのクエン酸ナトリウム、５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ５．５で希釈し、再び遠心分離した。このプロセスを１０回繰り返した。最終生成物のＤＡＲを決定するために、ＡＤＣを、ＨＩＣ（Ｔｏｓｏｈ＃１４９４７）又はＰＬＲＰ－ＲＰ（Ａｇｉｌｅｎｔ ＰＬ１９１２－１８０２ １０００Ａ、８ｕｍ、５０×２．１ｍｍ）カラムを使用して分析クロマトグラフィーによって検査した。ＨＩＣ分析は、移動相Ａ：１．５Ｍの硫酸アンモニウム、２５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ７．０、及び移動相Ｂ：２５％イソプロパノール、１８．７５ｍＭのリン酸ナトリウム ｐＨ７．０を使用した。ＰＬＲＰ分析は、移動相Ａ：水中の０．１％のトリフルオロ酢酸、及び移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．１％のトリフルオロ酢酸を使用した。ＰＬＲＰ分析前に、試料を、５０ｍＭのＤＴＴ、４ＭのグアニジンＨＣｌ（最終濃度）の添加によって変性し、３７℃で３０分間加熱した。凝集を測定するために、３００ｍＭのＮａＣｌ、２５ｍＭのリン酸ナトリウムｐＨ６．８の移動相を用いた分析サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ、Ｔｏｓｏｈ＃０８５４１）を使用して試料を分析した。

【0726】

図２０。９１Ｎにおいて化合物８（ＲＥＤ－６０１）にコンジュゲートされた単一タグ化ＣＤ３０ ＶＨ４／ＶＬ４抗体は、ＰＬＲＰによって決定される場合、１．５８のＤＡＲをもたらす。

【0727】

図２１。９１Ｎにおいて化合物８（ＲＥＤ－６０１）にコンジュゲートされた単一タグ化ＣＤ３０ ＶＨ４／ＶＬ４抗体は、ＳＥＣによって決定される場合、９８％が単量体である。

【0728】

実施例１０：異種移植片試験
ＣＤ３０ ＡＤＣを有するＬ－８２異種移植片
雌ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウス（８匹／群）を試験に使用した。５０％ＰＢＳ／５０％Ｍａｔｒｉｇｅｌ中１０００万個の細胞を、動物の脇腹に皮下接種した。腫瘍が平均体積１００ｍｍ^３に達したとき、全ての動物を、単回の１０ｍｇ／ｋｇ静脈内用量のヒトＩｇＧで治療した（０日目）。次いで、１日目に、動物を、ビヒクル単独、非コンジュゲート抗体（３ｍｇ／ｋｇ）、又は１．５若しくは３ｍｇ／ｋｇのＡＤＣで治療した。動物を、体重及び腫瘍サイズについて週に２回モニタリングした。腫瘍が２０００ｍｍ^３に達したとき、動物を安楽死させた。この試験において、ＡＤＣは、非常に有効であった。

【0729】

図１８は、列挙された抗ＣＤ３０ ＡＤＣを０日目に単回静脈内投与したＬ－８２異種移植片試験のグラフを示す。ＶＨ４／ＶＬ４化合物８（ＲＥＤ－６０１）は、内部９１Ｎタグを使用し、アドセトリスと比較して、ペイロード用量の半分を送達する。５０％のＡＤＣ投薬（１．５ｍｇ／ｋｇ）及び等しい投薬（３ｍｇ／ｋｇ）では、ＶＨ４／ＶＬ４化合物８は、アドセトリスと比較して等しく有効であり、全てのアームは、８匹のマウス／群のうち８匹の完全奏効を示している。ＶＨ４／ＶＬ４抗体単独では、最小限の活性を有していた。

【0730】

ＣＤ３０ ＡＤＣを有するＫａｒｐａｓ２９９異種移植片
雌ＣＢ１７／ＳＣＩＤマウス（６匹／群）を試験に使用した。ＰＢＳ中５００万個の細胞を、動物の脇腹に皮下接種した。腫瘍が平均体積２１４ｍｍ^３に達したとき、動物を、ビヒクル単独、非コンジュゲート抗体（３ｍｇ／ｋｇ）、又は１．５若しくは３ｍｇ／ｋｇのＡＤＣで治療した。動物を、体重及び腫瘍サイズについて週に２回モニタリングした。腫瘍が２０００ｍｍ^３に達したとき、動物を安楽死させた。この試験において、ＡＤＣは、非常に有効であった。

【0731】

図１９は、列挙された抗ＣＤ３０ ＡＤＣを０日目に単回静脈内投与したＫａｒｐａｓ２９９異種移植片試験のグラフを示す。ＶＨ４／ＶＬ４化合物８（ＲＥＤ－６０１）は、内部９１Ｎタグを使用し、アドセトリスと比較して、ペイロード用量の半分を送達する。５０％のＡＤＣ投薬（１．５ｍｇ／ｋｇ）及び等しい投薬（３ｍｇ／ｋｇ）で、ＶＨ４／ＶＬ４化合物８は、アドセトリスと比較して５／６及び６／６の完全奏効をもたらしたが、アドセトリスは、ＶＨ４／ＶＬ４化合物８と比較して２倍のペイロード量で６／６の完全奏効をもたらした。ＶＨ４／ＶＬ４抗体単独では、最小限の活性を有していた。

【0732】

本発明は、その特定の実施形態に関して説明されてきたが、本発明の真の趣旨及び範囲から逸脱することなく、様々な変更が行われてもよく、均等物が置換され得ることを当業者は理解すべきである。加えて、特定の状況、材料、物質の組成、プロセス、単一のプロセスステップ、又は複数のプロセスステップを本発明の目的、趣旨、及び範囲に適合させるために、多くの修正を行うことができる。全てのそのような修正は、本明細書に添付される特許請求の範囲の範囲内であることが意図される。

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図1D】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【配列表】

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【国際調査報告】