特表 2024-534469 多孔質ポリマー粒子の製造のための配合物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-09-20

(54)【発明の名称】多孔質ポリマー粒子の製造のための配合物

(51)【国際特許分類】

   B01J 20/285 20060101AFI20240912BHJP

   B01J 20/281 20060101ALI20240912BHJP

【ＦＩ】

B01J20/285 N

B01J20/281 X

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024517047

(86)(22)【出願日】2022-09-16

(85)【翻訳文提出日】2024-05-10

(86)【国際出願番号】 GB2022052347

(87)【国際公開番号】W WO2023041921

(87)【国際公開日】2023-03-23

(31)【優先権主張番号】2113284.0

(32)【優先日】2021-09-17

(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】524101054

【氏名又は名称】アストレア ユーケー サービシズ リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110000671

【氏名又は名称】ＩＢＣ一番町弁理士法人

(72)【発明者】

【氏名】ラランセッテ，ナディア

(57)【要約】

本開示は、多孔質ポリマー粒子の製造のための配合物を提供する。配合物は、ポリマー；塩；および少なくとも１種の緩衝液を含む。塩は抗カオトロピック塩であり、少なくとも１種の緩衝液は、少なくとも１種の緩衝液のポリマーに対する重量比が少なくとも１：４０で存在する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

多孔質ポリマー粒子の製造のための配合物であって、ポリマー；塩；および少なくとも１種の緩衝液を含み；前記塩が抗カオトロピック塩であり、前記少なくとも１種の緩衝液が、前記少なくとも１種の緩衝液の前記ポリマーに対する重量比が少なくとも１：４０で存在する、配合物。

【請求項2】

溶媒を含み、前記溶媒が水である、請求項１に記載の配合物。

【請求項3】

前記ポリマーが、１０ｇ／Ｌから２００ｇ／Ｌまでの間、２０ｇ／Ｌから１７５ｇ／Ｌまでの間、３０ｇ／Ｌから１５０ｇ／Ｌまでの間、４０ｇ／Ｌから１２５ｇ／Ｌまでの間、または５０ｇ／Ｌから１００ｇ／Ｌまでの間である量で存在する、請求項２に記載の配合物。

【請求項4】

前記抗カオトロピック塩が、０．０１Ｍから２Ｍまでの間、０．０５Ｍから１．５Ｍまでの間、０．１Ｍから１．２Ｍまでの間、０．２Ｍから１Ｍまでの間、０．３Ｍから０．８Ｍまでの間、０．４Ｍから０．７Ｍまでの間、０．５Ｍから０．６Ｍまでの間、または０．５５Ｍから０．５７Ｍまでの間である量で存在する、請求項２または請求項３に記載の配合物。

【請求項5】

前記少なくとも１種の緩衝液が、リン酸塩緩衝液、硫酸塩緩衝液、クエン酸塩緩衝液、酢酸塩緩衝液、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリス）緩衝液、および／または２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）緩衝液を含むか、またはそれらである、請求項１から４のいずれか一項に記載の配合物。

【請求項6】

前記少なくとも１種の緩衝液が、リン酸塩緩衝液を含むか、またはそれである、請求項５に記載の配合物。

【請求項7】

前記少なくとも１種の緩衝液が、リン酸二水素塩緩衝液およびリン酸水素塩緩衝液の組み合わせを含むか、またはそれである、請求項６に記載の配合物。

【請求項8】

前記少なくとも１種の緩衝液の前記ポリマーに対する前記重量比が、１：２から１：４０までの間、１：３から１：３０までの間、１：４から１：２０までの間、１：５から１：１５までの間、１：６から１：１０までの間、１：６．５から１：８までの間、または１：７から１：７．５までの間である、請求項１から７のいずれか一項に記載の配合物。

【請求項9】

２０℃で、２．５から１２までの間、３から１０までの間、３．５から８までの間、４から６までの間、または４．５から５．５までの間のｐＨを有する、請求項１から８のいずれか一項に記載の配合物。

【請求項10】

前記ポリマーが多糖類であり、前記多糖類がアガロースである、請求項１から９のいずれか一項に記載の配合物。

【請求項11】

前記抗カオトロピック塩が、硫酸イオン、リン酸イオン、炭酸イオン、クエン酸イオン、およびフッ化物イオンからなる群から選択されるアニオンを含む塩である、請求項１から１０のいずれか一項に記載の配合物。

【請求項12】

前記抗カオトロピック塩が硫酸塩である、請求項１１に記載の配合物。

【請求項13】

前記ポリマーの前記抗カオトロピック塩に対する重量比が、０．５：１から２：１までの間、０．６：１から１．７５：１までの間、または０．７：１から１．５：１までの間、好ましくは０．８：１から１．４：１までの間、０．８５：１から１．３：１までの間、０．９：１から１．２：１までの間、０．９５：１から１．１：１までの間、または１：１から１．０５：１までの間である、請求項１から１２のいずれか一項に記載の配合物。

【請求項14】

多孔質ポリマー粒子の製造のための配合物を製造する方法であって、ポリマー、少なくとも１種の緩衝液、および塩を接触させるステップを含み、前記塩が抗カオトロピック塩であり、前記少なくとも１種の緩衝液が、前記少なくとも１種の緩衝液の前記ポリマーに対する重量比が少なくとも１：４０で存在し、それによって多孔質ポリマー粒子の製造のための前記配合物を製造する、方法。

【請求項15】

前記ポリマー、前記少なくとも１種の緩衝液、および前記塩を接触させるステップが：
－ 前記ポリマー、前記少なくとも１種の緩衝液、および溶媒を接触させて、第１の混合物をもたらすステップ；
－ 前記ポリマーを前記溶媒中に溶解させて、ポリマー溶液をもたらすステップ；ならびに
－ 前記ポリマー溶液を前記抗カオトロピック塩に接触させるステップ
を含む、請求項１４に記載の方法。

【請求項16】

前記ポリマーを前記溶媒中に溶解させて、ポリマー溶液をもたらすステップが、前記第１の混合物を上昇させた温度に加熱するステップを含み、前記上昇させた温度が、２０℃から５００℃までの間、３０℃から４００℃までの間、４０℃から３００℃までの間、５０℃から２００℃までの間、６０℃から１７５℃までの間、７０℃から１５０℃までの間、８０℃から１２５℃までの間、９０℃から１１０℃までの間、９５℃から１００℃までの間、または９７℃から９９℃までの間である、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

第１の溶液と前記塩とを接触させるステップの前に、前記第１の溶液を冷却するステップを含み、前記第１の溶液が、３０℃から９５℃までの間、４０℃から９０℃までの間、５０℃から８５℃までの間、６０℃から８０℃までの間、６５℃から７５℃までの間、または６９℃から７１℃までの間の温度に冷却される、請求項１６に記載の方法。

【請求項18】

多孔質ポリマー粒子を製造するための、請求項１から１３のいずれか一項に記載の配合物の使用。

【請求項19】

多孔質ポリマー粒子を製造する方法であって、請求項１から１３のいずれか一項に記載の配合物を噴霧器に供給して、多孔質ポリマー粒子を製造するステップを含む、方法。

【請求項20】

前記配合物を前記噴霧器に供給するステップの前に、請求項１４から１７のいずれか一項に記載の方法を実施して前記配合物を製造するステップを含む、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

少なくとも３０分、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも５時間、または少なくとも６時間で、前記配合物を噴霧器に連続的に供給するステップを含む、請求項１９または請求項２０に記載の方法。

【請求項22】

少なくとも１リットル、少なくとも２リットル、少なくとも４リットル、少なくとも６リットル、少なくとも８リットル、少なくとも１０リットル、少なくとも１２リットル、少なくとも１４リットル、少なくとも１６リットル、少なくとも１８リットル、または少なくとも２０リットルの前記配合物を前記噴霧器に連続的に供給するステップを含む、請求項１９から２１のいずれか一項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、多孔質ポリマー粒子を製造するために使用され得る配合物に関連する。特に、本開示は、連続的な、または半連続的な方法において、回転ディスクを使用して多孔質ポリマービーズを製造するのに使用され得る配合物に関連する。本開示は、配合物を製造する方法、その使用、および多孔質ポリマー粒子を製造する方法に拡張する。

【背景技術】

【0002】

サイズまたは形状のいずれかに基づいた選択的な遅延を引き起こすための、ある種の多孔質支持粒子の性質は周知である。こうした粒子は、クロマトグラフィー分離技術、例えば、ゲルろ過において、生体高分子、例えば、タンパク質、ＤＮＡ、ＲＮＡ、多糖類などを分離するために使用される。ふるい粒子は、移動溶質高分子への選択的作用を及ぼす微多孔質構造の存在によって特徴づけられ、より小さな粒子の通過よりもより大きな粒子の通過を制限する。したがって、ふるいの有用性は、様々なサイズおよび様々な形状の分子を区別するための粒子の性質にある。

【0003】

アフィニティークロマトグラフィーは、タンパク質および他の生体化合物の単離に使用されるクロマトグラフィー法である。この技術は、支持粒子に付着したアフィニティーリガンドおよびクロマトグラフィーカラムに充填された、得られた吸着剤を使用して実施される。標的タンパク質は、固定リガンドに選択的に結合することによって、溶液から捕獲される。結合されたタンパク質は、洗浄されて不要な汚染物質を取り除くことができ、その後、高純度の形態で溶離され得る。

【0004】

クロマトグラフィー技術を使用した良好な分離は、粒子のサイズ、粒子の粒度分布、および粒子の有孔度（ｐｏｒｏｓｉｔｙ）に依存する。一度カラムに充填されたビーズは、精製およびカラム再生の間に観測される液体流量を支えるために高強度のものであるべきある。製造される任意のポリマービーズが好適であることを確認するために、バッチは、望ましい流量を示すこと、および／またはビーズが望ましい有孔度を有することを調べるように試験され得る。

【0005】

ポリマービーズを製造するために使用された配合物は、時間と共に物理的変化を受けることがあると分かった。これは、一工程において、後半で製造されたビーズが、より低い流量（ｆｌｏｗ ｒａｔｅ）および／またはより高い有孔度を有することができ、クロマトグラフィーにおける使用に適さない可能性があることを意味する。この問題を克服するために、ポリマービーズを製造する場合、小さいバッチを実行することだけが必要であった。これにより、全体の配合物は、分解が多大な影響を及ぼす前に処理されることが可能になる。しかし、可能であれば、より大きなバッチサイズを処理し得ることが、より高い効率を可能にするので望まれるであろう。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

本発明は、先行技術に関係した問題を克服しようとする、発明者らの研究からのものである。

【課題を解決するための手段】

【0007】

本開示の第１の態様によれば、多孔質ポリマー粒子の製造のための配合物（ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）であって、ポリマー；塩；および少なくとも１種の緩衝液を含み；塩が抗カオトロピック（ａｎｔｉｃｈａｏｔｒｏｐｉｃ）塩であり、少なくとも１種の緩衝液が、少なくとも１種の緩衝液のポリマーに対する重量比が少なくとも１：４０で存在する、配合物が提供される。

【0008】

有利なことに、発明者らは、少なくとも１種の緩衝液が配合物を安定化させ得ることを見出した。これは、第１の態様の配合物の大きなバッチを使用して、クロマトグラフィー技術において使用され得るための、要求された規格を有するポリマービーズを製造することが可能であることを意味する。これにより、これらのポリマービーズがより効率的に製造され得る。これは、先行技術の配合物を使用すると不可能であろう。

【図面の簡単な説明】

【0009】

【図1】アガロースビーズ組成物中の流量が、組成物が製造された工程のどの時点にあるかに応じて、どのように変わるかを示す図である。

【図2】アガロースビーズ組成物の有孔度が、組成物が製造された工程のどの時点にあるかに応じて、どのように変わるかを示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0010】

任意の重量比は、別段の記載がない限り、純粋な成分の重量比に関連すると認識され得る。したがって、別段の記載がない限り、重量比は、各成分を含有する溶液の溶媒成分の重量に関連しない。さらに、重量比は、任意の溶媒和分子の重量を組み込まない。例えば、少なくとも１種の緩衝液のポリマーに対する重量比は、純粋なポリマーの重量と比較された、純粋な緩衝液の重量であると理解することができ、配合物中に存在し得る、任意の溶媒の重量を含まない。

【0011】

一部の実施形態において、配合物は溶媒を含む。溶媒は、水を含んでもよいか、または水で構成され得る。

【0012】

配合物は、２０℃で、２．５から１２までの間、より好ましくは３から１０までの間、３．５から８までの間、または２０℃で４から６までの間、最も好ましくは２０℃で４．５から５．５までの間のｐＨを有することができる。少なくとも１種の緩衝液は、このｐＨで配合物を維持するための適切な濃度で、選択することができ、提供することができる。

【0013】

少なくとも１種の緩衝液は、リン酸塩緩衝液、硫酸塩緩衝液、クエン酸塩緩衝液、酢酸塩緩衝液、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリス）緩衝液、および／または２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）緩衝液を含み得るか、またはそれらであり得る。好ましくは、少なくとも１種の緩衝液は、リン酸塩緩衝液および／または硫酸塩緩衝液を含むか、またはそれらである。最も好ましくは、少なくとも１種の緩衝液は、リン酸塩緩衝液を含むか、またはそれである。

【0014】

少なくとも１種の緩衝液は、カチオンおよびアニオンを含んでもよい。アニオンは、リン酸二水素イオン、リン酸水素イオン、リン酸イオン、ピロリン酸イオン、硫酸イオン、または硫酸水素イオンを含んでもよい。好ましくは、緩衝液は、リン酸二水素イオン、リン酸水素イオン、リン酸イオン、またはその組み合わせを含む。カチオンは、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、遷移金属イオン、または^＋ＮＲ_４であってもよく、それぞれのＲは、独立に、水素、アルキル、アルケニル、またはアルキニルである。アルキルはＣ_１～６アルキルであってもよく、アルケニルはＣ_２～６アルケニルであってもよく、アルキニルはＣ_２～６アルキニルであってもよい。したがって、カチオンは、リチウムイオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、ベリリウムイオン、マグネシウムイオン、カルシウムイオン、アンモニウムイオン、またはトリメチルアンモニウムであってもよい。したがって、少なくとも１種の緩衝液は、リン酸二水素リチウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸二水素カリウム、リン酸二水素ベリリウム、リン酸二水素マグネシウム、リン酸二水素カルシウム、リン酸二水素アンモニウム、リン酸水素二リチウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素二カリウム、リン酸水素ベリリウム、リン酸水素マグネシウム、リン酸水素アンモニウム、リン酸リチウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、リン酸ベリリウム、またはリン酸アンモニウムを含んでもよい。

【0015】

一部の実施形態において、少なくとも１種の緩衝液は、リン酸二水素塩緩衝液およびリン酸水素塩緩衝液の組み合わせを含むか、またはそれである。最も好ましくは、少なくとも１種の緩衝液は、リン酸二水素ナトリウムおよびリン酸水素ナトリウムを含むか、またはそれらで構成される。

【0016】

リン酸二水素塩のリン酸水素塩に対する重量比は、少なくとも１０：１、少なくとも２０：１、少なくとも３０：１、少なくとも３５：１、少なくとも４０：１、または少なくとも４５：１であってもよい。リン酸二水素塩のリン酸水素塩に対する重量比は、１００未満：１、８０未満：１、７０未満：１、６０未満：１、５５未満：１、または５０未満：１であってもよい。リン酸二水素塩のリン酸水素塩に対する重量比は、１０：１から１００：１までの間、２０：１から８０：１までの間、３０：１から７０：１までの間、３５：１から６０：１までの間、４０：１から５５：１までの間、または４５：１から５０：１までの間であってもよい。

【0017】

リン酸二水素塩のリン酸水素塩に対するモル比は、少なくとも１０：１、少なくとも２０：１、少なくとも３０：１、少なくとも４０：１、少なくとも５０：１、または少なくとも５５：１であってもよい。リン酸二水素塩のリン酸水素塩に対する重量比は、２００未満：１、１５０未満：１、１００未満：１、８０未満：１、６５未満：１、または６０未満：１であってもよい。リン酸二水素塩のリン酸水素塩に対する重量比は、１０：１から２００：１までの間、２０：１から１５０：１までの間、３０：１から１００：１までの間、４０：１から８０：１までの間、５０：１から６５：１までの間、または５５：１から６０：１までの間であってもよい。

【0018】

少なくとも１種の緩衝液のポリマーに対する重量比は、１：２未満、１：３未満、１：４未満、１：５未満、１：６未満、１：６．５未満、または１：７未満であってもよい。少なくとも１種の緩衝液のポリマーに対する重量比は、少なくとも１：３０、少なくとも１：２０、少なくとも１：１５、少なくとも１：１０、少なくとも１：８、または少なくとも１：７．５であってもよい。少なくとも１種の緩衝液のポリマーに対する重量比は、１：２から１：４０までの間、１：３から１：３０までの間、または１：４から１：２０までの間であってもよい。少なくとも１種の緩衝液のポリマーに対する重量比は、１：４から１：１０までの間、１：４から１：８までの間、１：４から１：６までの間、または１：４から１：５までの間であってもよい。少なくとも１種の緩衝液のポリマーに対する重量比は、１：５から１：１５までの間、または１：６から１：１０までの間であってもよい。一実施形態において、少なくとも１種の緩衝液のポリマーに対する重量比は、１：６から１：８までの間、または１：６から１：７までの間であってもよい。好ましい一実施形態において、少なくとも１種の緩衝液のポリマーに対する重量比は、１：６．５から１：８までの間、または１：７から１：７．５までの間であってもよい。少なくとも１種の緩衝液が、２種以上の異なる化合物を含む実施形態において、重量比は、２種以上の異なる化合物の合わせた重量を用いて計算されることが認識され得る。

【0019】

配合物が溶媒を含む実施形態において、少なくとも１種の緩衝液は、少なくとも３ｇ／Ｌ、少なくとも４ｇ／Ｌ、少なくとも５ｇ／Ｌ、少なくとも６ｇ／Ｌ、少なくとも７ｇ／Ｌ、少なくとも８ｇ／Ｌ、少なくとも９ｇ／Ｌ、または少なくとも１０ｇ／Ｌである量で存在してもよい。少なくとも１種の緩衝液は、５０ｇ／Ｌ未満、４５ｇ／Ｌ未満、４０ｇ／Ｌ未満、３５ｇ／Ｌ未満、３０ｇ／Ｌ未満、２５ｇ／Ｌ未満、２０ｇ／Ｌ未満、１５ｇ／Ｌ未満、１２．５ｇ／Ｌ未満、または１１ｇ／Ｌ未満である量で存在してもよい。少なくとも１種の緩衝液は、３ｇ／Ｌから５０ｇ／Ｌまでの間、４ｇ／Ｌから４０ｇ／Ｌまでの間、５ｇ／Ｌから３０ｇ／Ｌまでの間、６ｇ／Ｌから２５ｇ／Ｌまでの間、または７ｇ／Ｌから２０ｇ／Ｌまでの間である量で存在してもよい。少なくとも１種の緩衝液は、７ｇ／Ｌから１５ｇ／Ｌまでの間、７ｇ／Ｌから１０ｇ／Ｌまでの間、７．５ｇ／Ｌから９ｇ／Ｌまでの間、または７．５ｇ／Ｌから８．５ｇ／Ｌまでの間である量で存在してもよい。少なくとも１種の緩衝液は、８ｇ／Ｌから１５ｇ／Ｌまでの間、９ｇ／Ｌから１２．５ｇ／Ｌまでの間、１０ｇ／Ｌから１１ｇ／Ｌまでの間、または１０ｇ／Ｌから１２ｇ／Ｌまでの間である量で存在してもよい。少なくとも１種の緩衝液が２種以上の異なる化合物を含む実施形態において、濃度は、２種以上の異なる化合物の合わせた重量を用いて計算されることが認識され得る。

【0020】

配合物が溶媒を含む実施形態において、少なくとも１種の緩衝液は、少なくとも０．００１Ｍ、少なくとも０．００２５Ｍ、少なくとも０．００５Ｍ、少なくとも０．０１Ｍ、少なくとも０．０２５Ｍ、少なくとも０．０５Ｍ、少なくとも０．０７Ｍ、または少なくとも０．０８Ｍである量で存在してもよい。少なくとも１種の緩衝液は、２Ｍ未満、１Ｍ未満、０．５Ｍ未満、０．３Ｍ未満、０．２Ｍ未満、０．１５Ｍ未満、０．１Ｍ未満、または０．０９Ｍ未満である量で存在してもよい。少なくとも１種の緩衝液は、０．００１Ｍから２Ｍまでの間、０．００２５Ｍから１Ｍまでの間、０．００５Ｍから０．５Ｍまでの間、０．０１Ｍから０．３Ｍまでの間、０．０２５Ｍから０．２Ｍまでの間、０．０５Ｍから０．１５Ｍまでの間、０．０７Ｍから０．１Ｍまでの間、または０．０８Ｍから０．０９Ｍまでの間である量で存在してもよい。少なくとも１種の緩衝液が２種以上の異なる化合物を含む実施形態において、濃度は、２種以上の異なる化合物の合わせたモルを用いて計算されることが認識され得る。

【0021】

少なくとも１種の緩衝液が溶媒和物として提供される実施形態において、重量比または濃度を詳述する場合、溶媒和分子の重量は含まれないことが認識され得る。

【0022】

ポリマーは多糖類であってもよい。多糖類はアガロースであってもよい。

【0023】

配合物が溶媒を含む実施形態において、ポリマーは、少なくとも１０ｇ／Ｌ、少なくとも２０ｇ／Ｌ、少なくとも３０ｇ／Ｌ、少なくとも４０ｇ／Ｌ、少なくとも５０ｇ／Ｌ、少なくとも６０ｇ／Ｌ、少なくとも７０ｇ／Ｌ、または少なくとも７５ｇ／Ｌである量で存在してもよい。ポリマーは、２００ｇ／Ｌ未満、１７５ｇ／Ｌ未満、１５０ｇ／Ｌ未満、１２５ｇ／Ｌ未満、１００ｇ／Ｌ未満、９０ｇ／Ｌ未満、８０ｇ／Ｌ未満、７７ｇ／Ｌ未満、７０ｇ／Ｌ未満、６５ｇ／Ｌ未満、または６０ｇ／Ｌ未満である量で存在してもよい。ポリマーは、１０ｇ／Ｌから２００ｇ／Ｌまでの間、２０ｇ／Ｌから１７５ｇ／Ｌまでの間、３０ｇ／Ｌから１５０ｇ／Ｌまでの間、４０ｇ／Ｌから１２５ｇ／Ｌまでの間、または５０ｇ／Ｌから１００ｇ／Ｌまでの間である量で存在してもよい。一実施形態において、ポリマーは、６０ｇ／Ｌから９０ｇ／Ｌまでの間、７０ｇ／Ｌから８０ｇ／Ｌまでの間、または７５ｇ／Ｌから７７ｇ／Ｌまでの間である量で存在してもよい。別の実施形態において、ポリマーは、４０ｇ／Ｌから８０ｇ／Ｌまでの間、４５ｇ／Ｌから７０ｇ／Ｌまでの間、５０ｇ／Ｌから６０ｇ／Ｌまでの間、または５２ｇ／Ｌから５７ｇ／Ｌまでの間である量で存在してもよい。ポリマーは、４５ｇ／Ｌから５５ｇ／Ｌまでの間である量で存在してもよい。

【0024】

抗カオトロピック塩は、水溶液中の疎水効果を高めることになる塩であると理解され得る。ホフマイスターシリーズの左方のアニオンを含む、任意の塩は、抗カオトロピック塩であると考えられ得る。

【0025】

したがって、塩は、それに限定されないが、硫酸イオン、リン酸イオン、炭酸イオン、クエン酸イオン、酢酸イオン、およびフッ化物イオンを含む、ホフマイスターシリーズの左方から選択されるアニオンを含む場合、抗カオトロピック塩であると考えられ得る。一部の実施形態において、抗カオトロピック塩は、硫酸塩またはリン酸塩である。好ましくは、抗カオトロピック塩は硫酸塩である。

【0026】

抗カオトロピック塩は、カチオンを含むことになると認識され得る。カチオンは、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、遷移金属イオンであってもよく、または式^＋ＮＲ_４を有してもよく、それぞれのＲは、独立に、水素、アルキル、アルケニル、またはアルキニルである。アルキルはＣ_１～６アルキルであってもよく、アルケニルはＣ_２～６アルケニルであってもよく、アルキニルはＣ_２～６アルキニルであってもよい。したがって、カチオンは、リチウムイオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、ベリリウムイオン、マグネシウムイオン、カルシウムイオン、アンモニウムイオン、またはトリメチルアンモニウムイオンであってもよい。したがって、抗カオトロピック塩は、硫酸リチウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、硫酸ベリリウム、硫酸マグネシウム、硫酸カルシウム、硫酸アンモニウム、硫酸トリメチルアンモニウム、リン酸リチウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、リン酸ベリリウム、リン酸アンモニウム、またはリン酸トリメチルアンモニウムであり得る。一部の実施形態において、抗カオトロピック塩は、硫酸アンモニウムである。

【0027】

ポリマーの抗カオトロピック塩に対する重量比は、少なくとも０．１：１、少なくとも０．２：１、または少なくとも０．３：１であってもよい。ポリマーの抗カオトロピック塩に対する重量比は、少なくとも０．４：１、少なくとも０．５：１、少なくとも０．６：１、または少なくとも０．７：１、好ましくは少なくとも０．８：１、少なくとも０．８５：１、少なくとも０．９：１、少なくとも０．９５：１、または少なくとも１：１であってもよい。ポリマーの抗カオトロピック塩に対する重量比は、２未満：１、１．７５未満：１、または１．５未満：１、好ましくは１．４未満：１、１．３未満：１、１．２未満：１、１．１未満：１、または１．０５未満：１であり得る。ポリマーの抗カオトロピック塩に対する重量比は、０．１：１から５：１までの間、０．２：１から４：１までの間、０．３：１から３：１までの間、０．４：１から２：１までの間、０．５：１から１．７５：１までの間、または０．６：１から１．５：１までの間、好ましくは０．７：１から１．４：１までの間、０．８：１から１．３：１までの間、０．９：１から１．２：１までの間、０．９５：１から１．１：１までの間、または１：１から１．０５：１までの間であってもよい。ポリマーの抗カオトロピック塩に対する重量比は、０．１：１から１：１までの間、０．２：１から０．８：１までの間、０．３：１から０．６：１までの間、または０．４：１から０．５：１までの間であってもよい。

【0028】

配合物が溶媒を含む実施形態において、抗カオトロピック塩は、少なくとも１０ｇ／Ｌ、少なくとも２０ｇ／Ｌ、少なくとも３０ｇ／Ｌ、少なくとも４０ｇ／Ｌ、少なくとも５０ｇ／Ｌ、少なくとも６０ｇ／Ｌ、少なくとも７０ｇ／Ｌ、または少なくとも７４ｇ／Ｌである量で存在してもよい。抗カオトロピック塩は、２００ｇ／Ｌ未満、１７５ｇ／Ｌ未満、１５０ｇ／Ｌ未満、１２５ｇ／Ｌ未満、１００ｇ／Ｌ未満、９０ｇ／Ｌ未満、８０ｇ／Ｌ未満、または７５ｇ／Ｌ未満である量で存在してもよい。抗カオトロピック塩は、１０ｇ／Ｌから２００ｇ／Ｌまでの間、２０ｇ／Ｌから１７５ｇ／Ｌまでの間、３０ｇ／Ｌから１５０ｇ／Ｌまでの間、または４０ｇ／Ｌから１２５ｇ／Ｌまでの間である量で存在してもよい。抗カオトロピック塩は、５０ｇ／Ｌから１００ｇ／Ｌまでの間、６０ｇ／Ｌから９０ｇ／Ｌまでの間、７０ｇ／Ｌから８０ｇ／Ｌまでの間、または７４ｇ／Ｌから７５ｇ／Ｌまでの間である量で存在してもよい。抗カオトロピック塩は、６０ｇ／Ｌから１２５ｇ／Ｌまでの間、８０ｇ／Ｌから１２０ｇ／Ｌまでの間、１００ｇ／Ｌから１１５ｇ／Ｌまでの間、または１１０ｇ／Ｌから１１２ｇ／Ｌまでの間である量で存在してもよい。

【0029】

配合物が溶媒を含む実施形態において、抗カオトロピック塩は、少なくとも０．０１Ｍ、少なくとも０．０５Ｍ、少なくとも０．１Ｍ、少なくとも０．２Ｍ、少なくとも０．３Ｍ、少なくとも０．４Ｍ、少なくとも０．５Ｍ、または少なくとも０．５５Ｍである量で存在してもよい。抗カオトロピック塩は、２Ｍ未満、１．５Ｍ未満、１．２Ｍ未満、１Ｍ未満、０．８Ｍ未満、０．７Ｍ未満、０．６Ｍ未満、または０．５７Ｍ未満である量で存在してもよい。抗カオトロピック塩は、０．０１Ｍから２Ｍまでの間、０．０５Ｍから１．５Ｍまでの間、０．１Ｍから１．２Ｍまでの間、０．２Ｍから１Ｍまでの間、０．３Ｍから０．８Ｍまでの間、０．４Ｍから０．７Ｍまでの間、０．５Ｍから０．６Ｍまでの間、または０．５５Ｍから０．５７Ｍまでの間である量で存在してもよい。

【0030】

有利なことに、発明者らは、少なくとも１種の緩衝液の添加により、抗カオトロピック塩の量を減らすことが可能になると見出した。これはまた、ポリマーの塩析を排除する。

【0031】

第２の態様によれば、多孔質ポリマー粒子の製造のための配合物を製造する方法であって、ポリマー、少なくとも１種の緩衝液、および塩を接触させるステップを含み、塩が抗カオトロピック塩であり、緩衝液が、少なくとも１種の緩衝液のポリマーに対する重量比が少なくとも１：４０で存在し、それによって多孔質ポリマー粒子の製造のための配合物を製造する、方法が提供される。

【0032】

第２の態様の方法は、好ましくは、第１の態様の配合物を製造する。

【0033】

ポリマー、少なくとも１種の緩衝液、および抗カオトロピック塩を接触させるステップは：
－ ポリマー、少なくとも１種の緩衝液、および溶媒を接触させて、第１の混合物をもたらすステップ；
－ ポリマーを溶媒中に溶解させて、ポリマー溶液をもたらすステップ；ならびに
－ ポリマー溶液を抗カオトロピック塩に接触させるステップ
を含んでもよい。

【0034】

ポリマー、少なくとも１種の緩衝液、抗カオトロピック塩、および溶媒は、第１の態様に関連して定められた通りであってもよい。

【0035】

ポリマー、少なくとも１種の緩衝液、および溶媒を接触させるステップは、ポリマーを緩衝溶液に接触させるステップを含むことができ、緩衝溶液は、溶媒および少なくとも１種の緩衝液を含む。緩衝溶液は、水溶液であってもよい。したがって、溶媒は、水であってもよい。

【0036】

ポリマーを溶媒中に溶解させてポリマー溶液をもたらすステップは、第１の混合物を上昇させた温度に加熱するステップを含んでもよい。上昇させた温度は、少なくとも２０℃、少なくとも３０℃、少なくとも４０℃、少なくとも５０℃、少なくとも６０℃、少なくとも７０℃、少なくとも８０℃、少なくとも９０℃、少なくとも９５℃、または少なくとも９７℃であってもよい。上昇させた温度は、２０℃から５００℃までの間、３０℃から４００℃までの間、４０℃から３００℃までの間、５０℃から２００℃までの間、６０℃から１７５℃までの間、７０℃から１５０℃までの間、８０℃から１２５℃までの間、９０℃から１１０℃までの間、９５℃から１００℃までの間、または９７℃から９９℃までの間であってもよい。

【0037】

第１の混合物は、上昇させた温度で、少なくとも５分間、少なくとも１０分間、少なくとも１５分間、少なくとも２０分間、少なくとも２５分間、または少なくとも３０分間加熱され得る。第１の混合物は、上昇させた温度で、５分から３００分までの間、１０分から１２０分までの間、１５分から６０分までの間、２０分から４５分までの間、または２５分から３０分までの間加熱され得る。

【0038】

方法は、ポリマー溶液と抗カオトロピック塩とを接触させるステップの前に、ポリマー溶液を冷却するステップを含んでもよい。方法は、ポリマー溶液を、９５℃未満、９０℃未満、８５℃未満、８０℃未満、７５℃未満、または７１℃未満の温度に冷却するステップを含んでもよい。方法は、ポリマー溶液を、３０℃から９５℃までの間、４０℃から９０℃までの間、５０℃から８５℃までの間、６０℃から８０℃までの間、６５℃から７５℃までの間、または６９℃から７１℃までの間の温度に冷却するステップを含んでもよい。

【0039】

ポリマー溶液を抗カオトロピック塩に接触させるステップは、ポリマー溶液を塩溶液に接触させるステップを含むことができ、塩溶液は、抗カオトロピック塩および溶媒を含む。塩溶液は、水溶液であってもよい。したがって、溶媒は水であってもよい。塩溶液は、３０℃から９５℃までの間、４０℃から９０℃までの間、５０℃から８５℃までの間、６０℃から８０℃までの間、６５℃から７５℃までの間、または６９℃から７１℃までの間の温度であってもよい。

【0040】

ポリマー溶液の塩溶液に対する体積比は、１：１から２０：１までの間、２：１から１５：１までの間、３：１から１０：１までの間、４：１から８：１までの間、４．５：１から７：１までの間、５：１から６．５：１までの間、５．２５：１から６：１までの間、または５．５：１から５．７：１までの間であってもよい。

【0041】

少なくとも１種の緩衝液、ポリマー、および抗カオトロピック塩は、緩衝溶液、ポリマー溶液、および塩溶液において、好適な濃度で提供されて、第１の態様に関連して定められた、得られた配合物における濃度をもたらすことができると認識され得る。

【0042】

第３の態様によれば、多孔質ポリマー粒子を製造するための、第１の態様の配合物の使用が提供される。

【0043】

第４の態様によれば、多孔質ポリマー粒子を製造する方法であって、第１の態様の配合物を噴霧器に供給して、多孔質ポリマー粒子を製造するステップを含む、方法が提供される。

【0044】

方法は、配合物を噴霧器に供給するステップの前に、第２の態様の方法を実施して、配合物を製造するステップを含んでもよい。第２の態様の方法は、第４の態様の方法を実施する前に、１０時間未満で、より好ましくは第４の態様の方法を実施する前に、８時間未満で、６時間未満で、４時間未満で、２時間未満で、１時間未満で、または３０分未満で完了され得る。説明されたように、第１の態様の配合物は、時間と共に分解する。したがって、配合物が製造された後、第４の態様の方法を可能な限り速やかに実施することが有利である。

【0045】

配合物は、少なくとも２０℃、少なくとも３０℃、少なくとも４０℃、少なくとも４５℃、少なくとも５０℃、少なくとも５５℃、または少なくとも５６℃の温度で噴霧器に供給され得る。配合物は、１００℃未満、９０℃未満、８０℃未満、７０℃未満、６５℃未満、６０℃未満、または５７℃未満の温度で噴霧器に供給され得る。配合物は、２０℃から１００℃までの間、３０℃から９０℃までの間、４０℃から８０℃までの間、４５℃から７０℃までの間、５０℃から６５℃までの間、または５３℃から６１℃までの間の温度で噴霧器に供給され得る。

【0046】

方法は、配合物を噴霧器に供給するステップの前に、配合物を冷却するステップを含んでもよい。方法は、５℃／分以下、２℃／分以下、１℃／分以下、０．５℃／分以下、０．２℃／分以下、または０．１℃／分以下の比率で配合物を冷却するステップを含んでもよい。方法は、０．０００１℃／分から５℃／分までの間、０．０００５℃／分から２℃／分までの間、０．００１℃／分から１℃／分までの間、０．００５℃／分から０．５℃／分までの間、０．０１℃／分から０．２℃／分までの間、または０．０５℃／分から０．１℃／分までの間の比率で配合物を冷却するステップを含んでもよい。

【0047】

噴霧器は、米国特許第７２０７４９９Ｂ２号において記載された通りであってもよい。

【0048】

第１の態様の配合物を噴霧器に供給して多孔質ポリマー粒子を製造するステップは：
－ 配合物を噴霧ホイール（ａｔｏｍｉｚａｔｉｏｎ ｗｈｅｅｌ）上に散布するステップ；
－ 噴霧ホイールを回転させ、それによって遠心力に起因して、配合物の層を形成させるステップ；
－ 層をフィラメントに分けるステップ；および
－ 空気をホイールにわたって流し、それによってフィラメントを多孔質ポリマー粒子に分けるステップ
を含んでもよい。

【0049】

噴霧ホイール回転の速度は、多孔質ポリマー粒子の望ましいサイズに応じて選択され得ることが認識され得る。当業者は、好適な回転速度を選択することができる。一実施形態において、噴霧ホイールを回転させるステップは、１０００ＲＰＭから２５０００ＲＰＭまでの間、２０００ＲＰＭから２００００ＲＰＭまでの間、４０００ＲＰＭから１５０００ＲＰＭまでの間、４５００ＲＰＭから１００００ＲＰＭまでの間、または５０００ＲＰＭから８０００ＲＰＭまでの間の速度でホイールを回転させるステップを含んでもよい。

【0050】

好ましくは、方法は、ポリマー粒子を噴霧ホイールから受け皿へ移動させるステップを含む。

【0051】

一部の実施形態において、方法は、粒子の、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％が、５０μｍから２００μｍまでの間、６０μｍから１５０μｍまでの間、または７６μｍから１４１μｍまでの間の直径を有する、ポリマー粒子を製造するステップを含む。

【0052】

説明されたように、第１の態様の配合物は、時間と共に分解する。したがって、工程時間の長さは、最終製品の規格に応じて決まり得る。発明者らは、６時間から７時間までの間の工程時間の後、高品質の多孔質粒子を得ることができたが、より長い工程時間は、より低い規格の製品に使用され得ることを認識されたい。したがって、方法は、少なくとも３０分、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも５時間、または少なくとも６時間で、第１の態様の配合物を噴霧器に連続的に供給するステップを含んでもよい。方法は、３０時間未満、２０時間未満、１５時間未満、１２時間未満、１０時間未満、８時間未満、または７時間未満で、第１の態様の配合物を噴霧器に連続的に供給するステップを含んでもよい。方法は、３０分から３０時間までの間、１時間から２０時間までの間、２時間から１５時間までの間、３時間から１２時間までの間、４時間から１０時間までの間、５時間から８時間までの間、または６時間から７時間までの間で、第１の態様の配合物を噴霧器に連続的に供給するステップを含んでもよい。

【0053】

配合物の全体積は、用いられる、工程時間、所望のポリマー粒径、噴霧ホイールの直径および／または噴霧ホイールの数に応じて変わることができる。発明者らは、配合物の２０リットル体積を使用して、直径約１００μｍを有する高品質の多孔質粒子を得ることができた。より大きな体積は、より大きなビーズサイズ、またはより低い規格を有する製品について使用され得ることが認識され得る。したがって、方法は、少なくとも１リットル、少なくとも２リットル、少なくとも４リットル、少なくとも６リットル、少なくとも８リットル、少なくとも１０リットル、少なくとも１２リットル、少なくとも１４リットル、少なくとも１６リットル、少なくとも１８リットル、または少なくとも２０リットルの、第１の態様の配合物を噴霧器に連続的に供給するステップを含んでもよい。方法は、６０リットル未満、５０リットル未満、４５リットル未満、４０リットル未満、３５リットル未満、３０リットル未満、２８リットル未満、２６リットル未満、２４リットル未満、２２リットル未満、または２１リットル未満の、第１の態様の配合物を噴霧器に連続的に供給するステップを含んでもよい。方法は、１リットルから６０リットルまでの間、２リットルから５０リットルまでの間、４リットルから４５リットルまでの間、６リットルから４０リットルまでの間、８リットルから３５リットルまでの間、１０リットルから３０リットルまでの間、１２リットルから２８リットルまでの間、１４リットルから２６リットルまでの間、１６リットルから２４リットルまでの間、１８リットルから２２リットルまでの間、または１９リットルから２０リットルまでの間の、第１の態様の配合物を噴霧器に連続的に供給するステップを含んでもよい。

【0054】

本明細書（任意の添付の特許請求の範囲、要約書、および図面を含める）に記載の、全ての特徴、および／または開示された任意の方法もしくは工程のステップの全ては、こうした特徴および／またはステップの少なくとも一部が互いに排他的である組み合わせを除いた、任意の組み合わせで、上記の態様のいずれかと組み合わせられ得る。

【0055】

本発明をさらに十分に理解するために、かつ本発明の実施形態がどのように実行され得るかを示すために、ここで例として添付の図面が参照される：
図１は、アガロースビーズ組成物中の流量が、組成物が製造された工程のどの時点にあるかに応じて、どのように変わるかを示す図であり；
図２は、アガロースビーズ組成物の有孔度が、組成物が製造された工程のどの時点にあるかに応じて、どのように変わるかを示す図である。

【実施例】

【0056】

実施例１－第１の配合物を使用したアガロースビーズの製造
アガロースビーズ組成物は、表１に示された配合物を使用して製造された。

【0057】

【表1】

【0058】

要するに、水８５％をリン酸一ナトリウムと合わせた。次いで、アガロースは、勢いよく混ぜながら、水中にゆっくりと注がれた。この溶液を９７～９９℃まで３０分間加熱し、７０℃に冷却した。加熱／冷却流体を反応器のジャケットにおいて使用して、温度を正確に制御した。７０℃で維持された、残りの水を含む硫酸アンモニウム溶液は、アガロース溶液に、勢いよく撹拌しながら、極めてゆっくりと添加された。最終溶液は、０．１℃／分以下の比率で５６～５７℃に冷却された。

【0059】

次いで、配合物を処理して、３００分の時間にわたってポリマービーズ組成物を製造した。

【0060】

手順中の異なる時点で製造されたビーズの流量（ｆｌｏｗ ｒａｔｅ）を分析して、流量および有孔度（ｐｏｒｏｓｉｔｙ）を求めた。流量は、１．６ｃｍ径カラムを使用して測定された。結果を図１および図２に示す。特に、図１に示されるように、プロセスの後半で製造されたビーズについて流量が急速に低下した。工程全体を通して製造された組成物が合わされた場合、得られた組成物はやはり、出願者の規格要件外にあった。図２はまた、ビーズの有孔度がプロセス中に増加したことを示す。

【0061】

実施例２－新規の７リットルバッチ配合物を使用したアガロースビーズの製造
アガロースビーズ組成物は、表２に示された新規の配合物を使用して製造された。

【0062】

【表2】

【0063】

配合物は、上記の通り製造された。特に、方法の第１のステップは、水８５％をリン酸一ナトリウムおよびリン酸二ナトリウムを合わせるステップを含んだ。他のステップは同じであった。

【0064】

新規の配合物は、調製溶液の表面に泡状アガロースの雲状のものを形成させる現象である塩析を排除したことが記される。この現象は、先行技術の配合物が使用された場合に観測された。これにより、形成において、表面積およびビーズ密度に影響を及ぼし、有孔度を減らすことがある、封入された空気が形成されるのが妨げられるので有利である。

【0065】

配合物の３種の異なるバッチを処理して、ポリマービーズ組成物を製造した。得られた組成物は、表３に示されるように、規格に適合したことを確認するために評価された。

【0066】

【表3】

【0067】

バッチの全ては、実施例１において製造されたバッチよりも改善を示したことに留意されたい。特に、圧力対流れ試験は、実施例１の工程全体を通して製造された組成物が合わされた場合に得られたものよりも、有意により高い比率を示した。バッチの全てが出願者の規格要件を満たしたことが記される。

【0068】

実施例３－新規の１２リットルバッチ配合物を使用したアガロースビーズの製造
アガロースビーズは、表４に示された新規の配合物を使用して製造された。

【0069】

【表4】

【0070】

配合物は、上記の方法を使用して調製された。

【0071】

配合物の３種の異なるバッチを処理して、ポリマービーズ組成物を製造した。得られた組成物は、表５に示されるように、規格に適合したことを確認するために評価された。

【0072】

【表5】

【0073】

異なる直径のカラムが使用されたため、圧力対流れ試験結果が変わったことに留意されたい。バッチの全ては、出願者の規格要件を満たした。

【0074】

実施例４－新規の１５リットルバッチ配合物を使用したアガロースビーズの製造
アガロースビーズは、表６に示された新規の配合物を使用して製造された。

【0075】

【表6】

【0076】

配合物は、上記の方法を使用して調製された。塩濃度の範囲は、アガロースにおける変化によるものである。

【0077】

配合物の３種の異なるバッチを処理して、ポリマービーズ組成物を製造した。得られた組成物は、表７に示されるように、規格に適合したことを確認するために評価された。

【0078】

【表7】

【0079】

再度、バッチの全ては、出願者の規格要件を満たした。

【0080】

実施例５－緩衝液が有孔度に及ぼす影響を調査すること
硫酸アンモニウムは、得られた組成物の有孔度に影響を及ぼすことが公知である。しかし、上記で示されたように、発明者等は、許容できる程度の有孔度を依然として維持しながら、硫酸アンモニウム濃度を減らすことができた。

【0081】

上記の実施例におけるリン酸一ナトリウムおよびリン酸二ナトリウムは、配合物を安定化させるために緩衝液として添加された。発明者等は、他の緩衝液が使用され得る場合、およびこれが、得られた組成物の有孔度に影響を及ぼし得る場合を試験することを決定した。

【0082】

実施例２から実施例４において記載されたリン酸塩緩衝液は、２０℃でｐＨ約５を有する配合物を提供する。これは、５ｍＭの酢酸塩緩衝液で置き換えられ、２０℃でｐＨ５．０を有する配合物を提供した。酢酸塩配合物を処理して、ポリマービーズ組成物を製造し、有孔度を評価した。結果を表８に示す。

【0083】

【表8】

【0084】

上記の表は、緩衝液が組成物の有孔度に影響を及ぼすことを示す。

【0085】

実施例６－緩衝液が有孔度に及ぼす影響をさらに調査すること
次いで、発明者等は、さらなる代替の緩衝液を使用することの影響を調査し、結果を以下の表に示す。

【0086】

【表9】

【0087】

ｐＨは、組成物の特性に影響を及ぼすことが明らかではないことに留意されたい。しかし、リン酸塩緩衝液は、他の緩衝液と比較して、組成物の有孔度を有意に増やした。

【0088】

実施例７－塩の選択が有孔度に及ぼす影響を調査すること
発明者等は、塩の選択が、得られた組成物の有孔度に及ぼす影響を調査することを決定した。

【0089】

初めに、発明者等は、硫酸アンモニウムまたは塩化アンモニウムのいずれかを含む配合物を使用してポリマービーズを調製することによって、硫酸塩基が有した影響を調査した。アンモニウム濃度は、２種の配合物について一定に保たれ、結果を表１０に示す。

【0090】

【表10】

【0091】

次いで、発明者等は、アンモニウム基を置き換えることが影響を及ぼすかどうかについて着目した。

【0092】

【表11】

【0093】

表１０は、硫酸アンモニウムを塩化アンモニウムで置き換える場合、有孔度が有意に減少することを示す。その一方で、表１１は、塩化ナトリウムがほぼ有孔度を生じないことを示し、それは、塩化アンモニウムで観測された結果と一致する。硫酸ナトリウムは、硫酸アンモニウムについて観測された有孔度の約３分の２を生じるが、その差は、アンモニウムイオンの置き換えではなく、濃度の差によるものであり得る。それゆえに、表は、アンモニウムイオンが置き換えられる場合、有孔度を誘発することが可能であることを示す。したがって、アニオンの選択が有孔度を誘発するためにより重要なものであることが分かる。

【0094】

実施例８－さらなる組成物を試験すること
次いで、発明者等は、以下の表に記載されたさらなる配合物を生成した。

【0095】

【表12】

【0096】

配合物は、上記の方法を使用して製造された。配合物Ａのバッチを使用して、望ましい直径１００μｍを有するポリマービーズ組成物を製造し、配合物Ｂのバッチを使用して、望ましい直径６０μｍおよび１００μｍを有するポリマービーズ組成物を製造し、配合物Ｃのバッチを使用して、望ましい直径２００μｍを有するポリマービーズ組成物を製造した。表１３に示すように、得られた組成物を評価して、それらが規格に適合したことを確認した。

【0097】

【表13】

【0098】

より低いアガロース濃度および高い塩濃度ゆえに、これらの組成物は、高い有孔度および低い流量を有したことが記される。したがって、配合物は、必要であれば、得られた組成物の特性を微調整するように変化させることができる。

【0099】

方法
実施例に記載されたポリマービーズ組成物の全ては、米国特許第７２０７４９９Ｂ２号に記載の装置および方法を使用して製造され、それは参照によって組み込まれる。

【0100】

圧力対流れ分析（Ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｖｓ Ｆｌｏｗ Ａｎａｌｙｓｉｓ）
実施例に記載された配合物から製造されたアガロースビーズについての圧力対流れは、２つの異なる方法において、ビーズのカラムを通して一定の流れ（ｆｌｏｗ）を維持し、圧力を測定することによって、または一定の圧力を維持し、流れを測定することによって測定された。

【0101】

方法１（一定の流れ）
この方法は、実施例２において報告された圧力対流れ分析で使用された。

【0102】

アガロースビーズは、精製水を使用して全部で４回洗浄され、最終の一定分量の水を加え、重量下で排水させた。沈降させたビーズ６６ｇを計量し、精製水で８０ｇまで補給し、次いで１０分間脱気した。

【0103】

懸濁液を直径１．６ｃｍのカラムに移し、流量１．０ｍＬ／分で９０分間平衡状態にした。平衡状態の後、範囲３０±１ｃｍのベッド高（ｂｅｄ ｈｅｉｇｈｔ）が予測された。圧力は、流れ０．８ｍＬ／分で１０分間にわたって測定され、圧力が１０分間にわたって安定である場合、流量が０．２ｍＬ／分増加し、圧力測定が繰り返された。流れ測定およびさらなる圧力測定における、さらなる増加は、停止させた圧力が１０分間にわたって安定になるまで続けられた。０．８ｍＬ／分で安定な圧力を得ることができなかった場合、流れは、０．７ｍ／分に低下し、圧力測定が繰り返された。

【0104】

測定のそれぞれのセットについて、線形流量（ｌｉｎｅａｒ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ）は、以下の式を用いて計算された：

【0105】

【数1】

【0106】

式中、２．０１は、カラムの断面積（ｃｍ^２）であった。

【0107】

得られた最大線形流量が記録された。

【0108】

方法２（一定の圧力）
この方法は、実施例３および実施例４において報告された圧力対流れ分析で使用された。

【0109】

アガロースビーズは、精製水を使用して全部で４回洗浄され、最終の一定分量の水を加え、重量下で排水させた。沈降させたビーズ１４２ｇを計量し、精製水で１８０ｇまで補給し、次いで１５分間脱気した。

【0110】

懸濁液は直径３．２ｃｍを有するカラムに移され、圧力１０ｐｓｉで２０分間平衡状態にされた。平衡状態の後、範囲１５±１ｃｍのベッド高が予測された。圧力は、２．５ｐｓｉに調節され、５分間安定化させ、カラムからの溶質をその後の５分間にわたって回収し、体積を測定した。分析は、圧力５．０ｐｓｉ、７．５ｐｓｉ、１０．０ｐｓｉ、１２．５ｐｓｉ、および１５．０ｐｓｉで繰り返された。それぞれの圧力についての実流量（ａｃｔｕａｌ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ）は、以下の式を用いて計算された。

【0111】

【数2】

【0112】

式中、５はその体積が回収された分数であった。

【0113】

それぞれの圧力レベルについて、線形流量は以下の式を用いて計算された：

【0114】

【数3】

【0115】

式中、８．０４は、カラムの断面積（ｃｍ^２）であった。

【0116】

得られた最大線形流量は、対応するベッド高および圧力と同様に記載された。

【0117】

最大線形流れの結果は、以下の式を用いてベッド高１５ｃｍに規格化された：
規格化流量＝線形流量（ｃｍ／時間）×Ｆ
式中、Ｆは、１５で割った、測定されたゲルベッド高であり、０．９３３～１．０６７の範囲であると予測される。

【0118】

ビーズサイズ分析
ビーズサイズは、機器の標準の手順を用いて、ベンチトップＦｌｏｗＣａｍを使用して測定された。

【0119】

有孔度分析
有孔度は、ウォーターズＨＰＬＣシステム（溶媒セレクター、ポンプ１５１５、オートサンプラー７１７プラス、カラムセレクター、およびＵＶ－ＶＩＳ検出器２４８７）を使用して測定された。アダプター（ピストンおよびカラム下部）および充填漏斗を備えたウォーターズＡＰ－２２．０ｃｍ（Ｉ．Ｄ．）×２０．０ｃｍ（Ｌ）目盛り付きガラスカラムにｐＨ７．５のトリス／ＨＣｌ緩衝液（５０ｍＭ）ＫＣｌ（１００ｍＭ）溶液を満たし、実施例に記載の配合物から製造されたアガロースビーズを脱気した。カラムを６０分間充填させた。圧縮されたゲルベッド高は、少なくとも１６ｃｍであると確認され、ＨＰＬＣシステムは、分析条件（流量０．７０ｍｌ／分、検出器波長２８０ｎｍ、およびオートサンプラー温度４℃）の下、平衡状態にされた。システムは、４５分間、または安定なベースラインインテグレーションライン（ｂａｓｅｌｉｎｅ ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ ｌｉｎｅ）が得られるまで平衡状態にさせた。

【0120】

ブルーデキストランの溶液（２ｍｇ／ｍｌ）およびチログロブリン（ｔｈｙｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎ）のさらなる溶液（８ｍｇ／ｍｌ）を緩衝液（トリス／ＨＣｌ（５０ｍＭ）ＫＣｌ（１００ｍＭ）ｐＨ＝７．５０）中に補給した。

【0121】

ゲルベッド高が記され、ブルーデキストラン溶液２５０μＬが注入された。デキストランブルーに対する有孔度（ＫＡＶ）は、以下の通り計算された：

【0122】

【数4】

【0123】

式中：
Ｔｒ_{（チログロブリン）}は、チログロブリンの保持時間であり；
Ｔｒ_{（デキストランブルー）}は、デキストランブルーの保持時間であり；
πｃｍ^２は、カラムの断面積である。

【図1】

【図2】

【手続補正書】

【提出日】2024-05-16

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

多孔質ポリマー粒子の製造のための配合物であって、ポリマー；塩；および少なくとも１種の緩衝液を含み；前記塩が抗カオトロピック塩であり、前記少なくとも１種の緩衝液が、前記少なくとも１種の緩衝液の前記ポリマーに対する重量比が少なくとも１：４０で存在する、配合物。

【請求項2】

溶媒を含み、前記溶媒が水である、請求項１に記載の配合物。

【請求項3】

前記ポリマーが、１０ｇ／Ｌから２００ｇ／Ｌまでの間、２０ｇ／Ｌから１７５ｇ／Ｌまでの間、３０ｇ／Ｌから１５０ｇ／Ｌまでの間、４０ｇ／Ｌから１２５ｇ／Ｌまでの間、または５０ｇ／Ｌから１００ｇ／Ｌまでの間である量で存在する、請求項２に記載の配合物。

【請求項4】

前記抗カオトロピック塩が、０．０１Ｍから２Ｍまでの間、０．０５Ｍから１．５Ｍまでの間、０．１Ｍから１．２Ｍまでの間、０．２Ｍから１Ｍまでの間、０．３Ｍから０．８Ｍまでの間、０．４Ｍから０．７Ｍまでの間、０．５Ｍから０．６Ｍまでの間、または０．５５Ｍから０．５７Ｍまでの間である量で存在する、請求項２または請求項３に記載の配合物。

【請求項5】

前記少なくとも１種の緩衝液が、リン酸塩緩衝液、硫酸塩緩衝液、クエン酸塩緩衝液、酢酸塩緩衝液、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリス）緩衝液、および／または２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）緩衝液を含むか、またはそれらである、請求項１または２に記載の配合物。

【請求項6】

前記少なくとも１種の緩衝液が、リン酸塩緩衝液を含むか、またはそれである、請求項５に記載の配合物。

【請求項7】

前記少なくとも１種の緩衝液が、リン酸二水素塩緩衝液およびリン酸水素塩緩衝液の組み合わせを含むか、またはそれである、請求項６に記載の配合物。

【請求項8】

前記少なくとも１種の緩衝液の前記ポリマーに対する前記重量比が、１：２から１：４０までの間、１：３から１：３０までの間、１：４から１：２０までの間、１：５から１：１５までの間、１：６から１：１０までの間、１：６．５から１：８までの間、または１：７から１：７．５までの間である、請求項１または２に記載の配合物。

【請求項9】

２０℃で、２．５から１２までの間、３から１０までの間、３．５から８までの間、４から６までの間、または４．５から５．５までの間のｐＨを有する、請求項１または２に記載の配合物。

【請求項10】

前記ポリマーが多糖類であり、前記多糖類がアガロースである、請求項１または２に記載の配合物。

【請求項11】

前記抗カオトロピック塩が、硫酸イオン、リン酸イオン、炭酸イオン、クエン酸イオン、およびフッ化物イオンからなる群から選択されるアニオンを含む塩である、請求項１または２に記載の配合物。

【請求項12】

前記抗カオトロピック塩が硫酸塩である、請求項１１に記載の配合物。

【請求項13】

前記ポリマーの前記抗カオトロピック塩に対する重量比が、０．５：１から２：１までの間、０．６：１から１．７５：１までの間、または０．７：１から１．５：１までの間、好ましくは０．８：１から１．４：１までの間、０．８５：１から１．３：１までの間、０．９：１から１．２：１までの間、０．９５：１から１．１：１までの間、または１：１から１．０５：１までの間である、請求項１または２に記載の配合物。

【請求項14】

多孔質ポリマー粒子の製造のための配合物を製造する方法であって、ポリマー、少なくとも１種の緩衝液、および塩を接触させるステップを含み、前記塩が抗カオトロピック塩であり、前記少なくとも１種の緩衝液が、前記少なくとも１種の緩衝液の前記ポリマーに対する重量比が少なくとも１：４０で存在し、それによって多孔質ポリマー粒子の製造のための前記配合物を製造する、方法。

【請求項15】

前記ポリマー、前記少なくとも１種の緩衝液、および前記塩を接触させるステップが：
－ 前記ポリマー、前記少なくとも１種の緩衝液、および溶媒を接触させて、第１の混合物をもたらすステップ；
－ 前記ポリマーを前記溶媒中に溶解させて、ポリマー溶液をもたらすステップ；ならびに
－ 前記ポリマー溶液を前記抗カオトロピック塩に接触させるステップ
を含む、請求項１４に記載の方法。

【請求項16】

前記ポリマーを前記溶媒中に溶解させて、ポリマー溶液をもたらすステップが、前記第１の混合物を上昇させた温度に加熱するステップを含み、前記上昇させた温度が、２０℃から５００℃までの間、３０℃から４００℃までの間、４０℃から３００℃までの間、５０℃から２００℃までの間、６０℃から１７５℃までの間、７０℃から１５０℃までの間、８０℃から１２５℃までの間、９０℃から１１０℃までの間、９５℃から１００℃までの間、または９７℃から９９℃までの間である、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

第１の溶液と前記塩とを接触させるステップの前に、前記第１の溶液を冷却するステップを含み、前記第１の溶液が、３０℃から９５℃までの間、４０℃から９０℃までの間、５０℃から８５℃までの間、６０℃から８０℃までの間、６５℃から７５℃までの間、または６９℃から７１℃までの間の温度に冷却される、請求項１６に記載の方法。

【請求項18】

多孔質ポリマー粒子を製造するための、請求項１または２に記載の配合物の使用。

【請求項19】

多孔質ポリマー粒子を製造する方法であって、請求項１に記載の配合物を噴霧器に供給して、多孔質ポリマー粒子を製造するステップを含む、方法。

【請求項20】

前記配合物を前記噴霧器に供給するステップの前に、請求項１４から１７のいずれか一項に記載の方法を実施して前記配合物を製造するステップを含む、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

少なくとも３０分、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも５時間、または少なくとも６時間で、前記配合物を噴霧器に連続的に供給するステップを含む、請求項１９に記載の方法。

【請求項22】

少なくとも１リットル、少なくとも２リットル、少なくとも４リットル、少なくとも６リットル、少なくとも８リットル、少なくとも１０リットル、少なくとも１２リットル、少なくとも１４リットル、少なくとも１６リットル、少なくとも１８リットル、または少なくとも２０リットルの前記配合物を前記噴霧器に連続的に供給するステップを含む、請求項１９または２１に記載の方法。

【国際調査報告】