(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-09-26
(54)【発明の名称】抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体による癌治療方法
(51)【国際特許分類】
A61K 39/395 20060101AFI20240918BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240918BHJP
A61P 15/00 20060101ALI20240918BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20240918BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240918BHJP
A61P 1/04 20060101ALI20240918BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20240918BHJP
A61P 35/04 20060101ALI20240918BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20240918BHJP
A61K 45/06 20060101ALI20240918BHJP
A61K 31/505 20060101ALI20240918BHJP
A61K 31/519 20060101ALI20240918BHJP
A61K 33/243 20190101ALI20240918BHJP
A61K 31/7068 20060101ALI20240918BHJP
A61K 31/282 20060101ALI20240918BHJP
A61K 31/337 20060101ALI20240918BHJP
C07K 16/28 20060101ALI20240918BHJP
C07K 16/46 20060101ALI20240918BHJP
【ＦＩ】
A61K39/395 D ZNA
A61K39/395 N
A61P35/00
A61P15/00
A61P1/16
A61P43/00 111
A61P1/04
A61P11/00
A61P35/04
A61P43/00 121
A61K45/00
A61K45/06
A61K31/505
A61K31/519
A61K33/243
A61K31/7068
A61K31/282
A61K31/337
C07K16/28
C07K16/46
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024516626
(86)(22)【出願日】2022-09-15
(85)【翻訳文提出日】2024-04-11
(86)【国際出願番号】 CA2022051375
(87)【国際公開番号】W WO2023039672
(87)【国際公開日】2023-03-23
(31)【優先権主張番号】63/244,690
(32)【優先日】2021-09-15
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】510214045
【氏名又は名称】ザイムワークス ビーシー インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100102978
【弁理士】
【氏名又は名称】清水 初志
(74)【代理人】
【識別番号】100205707
【弁理士】
【氏名又は名称】小寺 秀紀
(74)【代理人】
【識別番号】100160923
【弁理士】
【氏名又は名称】山口 裕孝
(74)【代理人】
【識別番号】100119507
【弁理士】
【氏名又は名称】刑部 俊
(74)【代理人】
【識別番号】100142929
【弁理士】
【氏名又は名称】井上 隆一
(74)【代理人】
【識別番号】100148699
【弁理士】
【氏名又は名称】佐藤 利光
(74)【代理人】
【識別番号】100188433
【弁理士】
【氏名又は名称】梅村 幸輔
(74)【代理人】
【識別番号】100128048
【弁理士】
【氏名又は名称】新見 浩一
(74)【代理人】
【識別番号】100129506
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 智彦
(74)【代理人】
【識別番号】100114340
【弁理士】
【氏名又は名称】大関 雅人
(74)【代理人】
【識別番号】100214396
【弁理士】
【氏名又は名称】塩田 真紀
(74)【代理人】
【識別番号】100121072
【弁理士】
【氏名又は名称】川本 和弥
(74)【代理人】
【識別番号】100221741
【弁理士】
【氏名又は名称】酒井 直子
(74)【代理人】
【識別番号】100114926
【弁理士】
【氏名又は名称】枝松 義恵
(72)【発明者】
【氏名】デイビス ルパート エイチ．
(72)【発明者】
【氏名】ジョセフソン ニール シー．
(72)【発明者】
【氏名】プロクター ジェフリー ライアン
【テーマコード（参考）】
4C084
4C085
4C086
4C206
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C084AA19
4C084AA22
4C084AA23
4C084NA05
4C084NA14
4C084ZA591
4C084ZA661
4C084ZA751
4C084ZA811
4C084ZB092
4C084ZB261
4C084ZB262
4C084ZC411
4C085AA13
4C085AA14
4C085AA16
4C085CC23
4C085DD62
4C085EE01
4C085EE03
4C086AA01
4C086AA02
4C086BA02
4C086BC43
4C086CB09
4C086EA17
4C086HA12
4C086HA24
4C086HA26
4C086HA28
4C086MA02
4C086MA04
4C086NA05
4C086NA14
4C086ZA59
4C086ZA66
4C086ZA75
4C086ZA81
4C086ZB26
4C086ZC41
4C086ZC75
4C206AA01
4C206AA02
4C206JB16
4C206MA02
4C206MA04
4C206NA05
4C206NA14
4C206ZA59
4C206ZA66
4C206ZA75
4C206ZA81
4C206ZB26
4C206ZC41
4C206ZC75
4H045AA11
4H045AA20
4H045AA30
4H045BA41
4H045DA76
4H045EA20
4H045FA72
4H045FA74
(57)【要約】
治療される対象の体重に基づいた２段階固定投与レジメンを使用する、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体による治療方法を記載する。化学療法剤及び／又はＰＤ－１阻害剤、例えば抗ＰＤ－１抗体との併用療法も記載する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法であって、前記方法が、前記対象に有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を投与することを含み、前記有効量が、２段階（２－ｔｉｅｒｅｄ）固定投与レジメンに従って投与され、前記２段階固定投与レジメンが、固定された時間間隔で、体重が用量カットオフ体重未満の対象に低い固定用量を投与し且つ体重が前記用量カットオフ体重以上の対象に高い固定用量を投与することを含む、前記方法。
【請求項2】
前記低い固定用量が約６００ｍｇであり、前記高い固定用量が約８００ｍｇであり、前記用量カットオフ体重が７０ｋｇであり、前記固定された時間間隔が１週間ごと（ＱＷ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記低い固定用量が約８００ｍｇであり、前記高い固定用量が約１２００ｍｇであり、前記用量カットオフ体重が７０ｋｇであり、前記固定された時間間隔が１週間ごと（ＱＷ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項4】
前記低い固定用量が約８００ｍｇであり、前記高い固定用量が約１０００ｍｇであり、前記用量カットオフ体重が７０ｋｇであり、前記固定された時間間隔が１週間ごと（ＱＷ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項5】
前記低い固定用量が約１８００ｍｇであり、前記高い固定用量が約２２００ｍｇであり、前記用量カットオフ体重が７０ｋｇであり、前記固定された時間間隔が２週間ごと（Ｑ２Ｗ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項6】
前記低い固定用量が約１２００ｍｇであり、前記高い固定用量が約１６００ｍｇであり、前記用量カットオフ体重が７０ｋｇであり、前記固定された時間間隔が２週間ごと（Ｑ２Ｗ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項7】
前記低い固定用量が約１２００ｍｇであり、前記高い固定用量が約１８００ｍｇであり、前記用量カットオフ体重が７０ｋｇであり、前記固定された時間間隔が３週間ごと（Ｑ３Ｗ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項8】
前記低い固定用量が約１８００ｍｇであり、前記高い固定用量が約２４００ｍｇであり、前記用量カットオフ体重が７０ｋｇであり、前記固定された時間間隔が３週間ごと（Ｑ３Ｗ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項9】
前記抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が、（ａ）それぞれ配列番号３２、３４及び３３に示す、ＣＤＲ配列ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３、並びにそれぞれ配列番号２２、２４及び２３に示す、ＣＤＲ配列ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３を含む、第１の抗原結合ドメインと、
（ｂ）それぞれ配列番号５６、５７及び５８に示す、ＣＤＲ配列ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３、並びにそれぞれ配列番号５３、５４及び５５に示す、ＣＤＲ配列ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３配列を含む、第２の抗原結合ドメインと
を含む、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項10】
前記第１の抗原結合ドメインがＦａｂであり、前記第２の抗原結合ドメインがｓｃＦｖである、請求項９に記載の方法。
【請求項11】
前記抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が、（ａ）配列番号３１に示す配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び配列番号２１に示す配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、第１の抗原結合ドメインと、
（ｂ）配列番号５２に示すＶＨ配列、及び配列番号５１に示すＶＬ配列を含む、第２の抗原結合ドメインと
を含む、請求項９又は１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項12】
前記抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が、配列番号３０に示す配列を含む重鎖Ｈ１、配列番号５０に示す配列を含む重鎖Ｈ２、及び配列番号２０に示す配列を含む軽鎖Ｌ１を含む、請求項１～１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項13】
前記ＨＥＲ２発現癌が固形腫瘍である、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項14】
前記ＨＥＲ２発現癌が、乳癌、胆道癌、胃食道腺癌（ＧＥＡ）、胃食道接合部癌（ＧＥＪ）、胃癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮頸癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肛門癌又は結腸直腸癌（ＣＲＣ）である、請求項１～１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項15】
前記ＨＥＲ２発現癌が胃食道腺癌（ＧＥＡ）である、請求項１～１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項16】
前記対象が、抗ＨＥＲ２標的療法であるトラスツズマブ、ペルツズマブ、Ｔ－ＤＭ１又はＥｎｈｅｒｔｕ（商標）（ｆａｍ－トラスツズマブデルクステカン－ｎｘｋｉ）のうちの１つ又は複数による事前治療を受けている、請求項１～１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項17】
前記対象が抗ＨＥＲ２標的療法による事前治療を受けていない、請求項１～１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項18】
前記対象が、化学療法剤による事前の全身治療を受けていない、請求項１～１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項19】
前記癌が転移性である、請求項１～１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項20】
前記癌が局所進行性である、請求項１～１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項21】
前記癌が、免疫組織化学（ＩＨＣ）による測定では、ＨＥＲ２ ３＋、ＨＥＲ２ ２＋／３＋、ＨＥＲ２ ２＋又はＨＥＲ２ １＋であり、蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）又はｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＩＳＨ）による測定では、遺伝子増幅されている、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項22】
前記癌が、免疫組織化学（ＩＨＣ）による測定では、ＨＥＲ２ ３＋、ＨＥＲ２ ２＋／３＋又はＨＥＲ２ ２＋又はＨＥＲ２ １＋であり、蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）又はｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＩＳＨ）による測定では、ＨＥＲ２遺伝子増幅を伴う又は伴わない、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項23】
前記癌が、ＩＨＣによる測定ではＨＥＲ２ ３＋であり、ＨＥＲ２遺伝子増幅を伴う又は伴わない、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項24】
前記癌が、ＩＨＣによる測定ではＨＥＲ２ ２＋であり、ＦＩＳＨ又はＩＳＨによる測定では、ＨＥＲ２遺伝子増幅を伴う、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項25】
前記バイパラトピック抗体が１つ又は複数の化学療法レジメンと組み合わせて投与される、請求項１～２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項26】
前記化学療法レジメンが、ｍＦＯＬＦＯＸ６（５－ＦＵ及びロイコボリン＋オキサリプラチン）、ＣＡＰＯＸ（カペシタビン＋オキサリプラチン）又はＦＰ（フルオロウラシル［５－ＦＵ］＋シスプラチン）を含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項27】
前記化学療法レジメンがタキサンを含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項28】
前記抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体がＰＤ－１阻害剤と組み合わせて投与される、請求項１～２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項29】
前記抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が別の抗ＨＥＲ２剤と組み合わせて投与される、請求項１～２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項30】
前記ＰＤ－１阻害剤が抗ＰＤ－１抗体である、請求項２８に記載の方法。
【請求項31】
前記抗ＰＤ－１抗体がチスレリズマブ、ペムブロリズマブ、ニボルマブ又はセミプリマブから選択される、請求項３０に記載の。
【請求項32】
前記抗ＰＤ－１抗体がチスレリズマブである、請求項３０に記載の方法。
【請求項33】
ＨＥＲ２発現癌の治療における使用のための抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体であって、前記抗体の有効用量が、体重が用量カットオフ体重未満の対象のための低い固定用量、及び体重が用量カットオフ体重以上の対象のための高い固定用量を含む２段階固定用量レジメンである、前記抗体。
【請求項34】
前記低い固定用量が約８００ｍｇであり、前記高い固定用量が約１２００ｍｇであり、前記用量カットオフ体重が７０ｋｇであり、前記固定された時間間隔が１週間ごと（ＱＷ）である、請求項３３に記載の抗体。
【請求項35】
前記低い固定用量が約１２００ｍｇであり、前記高い固定用量が約１６００ｍｇであり、前記用量カットオフ体重が７０ｋｇであり、前記固定された時間間隔が２週間ごと（Ｑ２Ｗ）である、請求項３３に記載の抗体。
【請求項36】
前記低い固定用量が約１８００ｍｇであり、前記高い固定用量が約２４００ｍｇであり、前記用量カットオフ体重が７０ｋｇであり、前記固定された時間間隔が３週間ごと（Ｑ３Ｗ）である、請求項３３に記載の抗体。
【請求項37】
前記抗体がｖ１００００である、請求項３３～３６のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項38】
（ｉ）抗ＨＥＲ－２バイパラトピック抗体を含む１つ又は複数の容器と、（ｉｉ）前記１つ又は複数の容器内の又は前記容器に付随したラベル又は添付文書であって、前記抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が、ＨＥＲ２発現癌を有する対象に対して、（ａ）体重７０ｋｇ未満の対象については１８００ｍｇの用量で、又は（ｂ）体重７０ｋｇ以上の対象については２４００ｍｇの用量で、３週間ごと（Ｑ３Ｗ）に投与するためのものであると指示する、前記ラベル又は添付文書と
を含む、医薬キット。
【請求項39】
（ｉ）抗ＨＥＲ－２バイパラトピック抗体を含む１つ又は複数の容器と、（ｉｉ）前記１つ又は複数の容器内の又は前記容器に付随したラベル又は添付文書であって、前記抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が、ＨＥＲ２発現癌を有する対象に対して、（ａ）体重７０ｋｇ未満の対象については１２００ｍｇの用量で、又は（ｂ）体重７０ｋｇ以上の対象については１６００ｍｇの用量で、２週間ごと（Ｑ２Ｗ）に投与するためのものであると指示する、前記ラベル又は添付文書と
を含む、医薬キット。
【請求項40】
前記ラベル又は添付文書が、前記ＨＥＲ２発現癌が乳癌、胆道癌、胃食道腺癌（ＧＥＡ）、胃食道接合部癌（ＧＥＪ）、胃癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮頸癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肛門癌又は結腸直腸癌（ＣＲＣ）であると更に指示する、請求項３８又は３９のいずれか１項に記載の医薬キット。
【請求項41】
前記ラベル又は添付文書が、前記ＨＥＲ２発現癌が転移性又は局所進行性であると更に指示する、請求項３８～４０のいずれか１項に記載の医薬キット。
【請求項42】
前記ラベル又は添付文書が、前記抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が抗ＰＤ－１抗体と組み合わせて投与するのに適すると更に指示する、請求項３８～４１のいずれか１項に記載の医薬キット。
【請求項43】
前記ラベル又は添付文書が、前記抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体がｍＦＯＬＦＯＸ６（５－ＦＵ及びロイコボリン＋オキサリプラチン）、ＣＡＰＯＸ（カペシタビン＋オキサリプラチン）又はＦＰ（フルオロウラシル［５－ＦＵ］＋シスプラチン）と組み合わせて投与するのに適すると更に指示する、請求項３８～４２のいずれか１項に記載の医薬キット。
【請求項44】
前記ラベル又は添付文書が、前記抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が別の抗ＨＥＲ２剤、任意でツカチニブと組み合わせて投与するのに適すると更に指示する、請求項３８～４１のいずれか１項に記載の医薬キット。
【請求項45】
前記容器の各々が３００ｍｇの前記抗ＨＥＲ２抗体を含む、請求項３８～４４のいずれか１項に記載の医薬キット。
【請求項46】
前記容器の各々が６００ｍｇの前記抗ＨＥＲ２抗体を含む、請求項３８～４４のいずれか１項に記載の医薬キット。
【請求項47】
前記ラベル又は添付文書が、前記抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体がｖ１００００であると更に指示する、請求項３８～４１のいずれか１項に記載の医薬キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
分野
本開示は癌治療の分野に関し、特に、バイパラトピック抗ＨＥＲ２抗体による癌治療における使用のための投与レジメンに関する。
本開示は癌治療の分野に関し、特に、バイパラトピック抗ＨＥＲ２抗体による癌治療における使用のための投与レジメンに関する。
【背景技術】
【0002】
背景
ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）は、受容体チロシンキナーゼのＥｒｂＢファミリーのメンバーである膜貫通型表面結合型受容体チロシンキナーゼであり、通常、細胞成長及び分化を引き起こすシグナル伝達経路に関与している。ＨＥＲ２は、乳癌患者の４分の１で過剰発現されることが判明されているため、乳癌治療の有望な標的である（Ｂａｎｇｅ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ７：５４８（２００１）（非特許文献１））。
ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）は、受容体チロシンキナーゼのＥｒｂＢファミリーのメンバーである膜貫通型表面結合型受容体チロシンキナーゼであり、通常、細胞成長及び分化を引き起こすシグナル伝達経路に関与している。ＨＥＲ２は、乳癌患者の４分の１で過剰発現されることが判明されているため、乳癌治療の有望な標的である（Ｂａｎｇｅ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ７：５４８（２００１）（非特許文献１））。
【0003】
Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）（トラスツズマブ、米国特許第５，８２１，３３７号（特許文献１））は、ＨＥＲ２陽性乳癌の治療のために開発された初めのモノクローナル抗体であったが、患者の生存期間が延長されたため、現在では、ＨＥＲ２陰性乳癌患者に対しても同じである。ペルツズマブ（Ｐｅｒｊｅｔａ（登録商標）、米国特許第７，８６２，８１７号（特許文献２））は、ＨＥＲ２受容体が細胞の表面で他のＨＥＲ受容体（ＥＧＦＲ／ＨＥＲ１、ＨＥＲ３及びＨＥＲ４）とペアになる（二量体化）プロセスを防ぐように特別に設計されたヒト化モノクローナル抗体であり、前記プロセスは腫瘍の成長及び生存につながると考えられている。Ｐｅｒｊｅｔａ、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎと化学療法の併用は、ＨＥＲシグナル伝達経路のより包括的な遮断をもたらすと考えられている。ペルツズマブは、二量体化に不可欠なＨＥＲ２のドメインＩＩに結合し、トラスツズマブは、ＨＥＲ２の細胞外ドメインＩＶに結合する。
【0004】
Ｌｉら（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，７３：６４７１－６４８３（２０１３）（非特許文献２））は、天然のトラスツズマブ及びペルツズマブ配列に基づく、トラスツズマブ耐性を克服する、ＨＥＲ２に対する二重特異性二価抗体を説明している。他の二重特異性抗ＨＥＲ２抗体が記載されている（国際特許出願公開番号ＷＯ２０１５／０７７８９１（特許文献３）及びＷＯ２０１６／１７９７０７（特許文献４）、米国特許出願公開第２０１４／０１７０１４８号（特許文献５）、同第２０１５／０２８４４６３号（特許文献６）、同第２０１７／００２９５２９号（特許文献７）及び同第２０１７／０２９１９５５号（特許文献８）、米国特許第９，７４５，３８２号（特許文献９））。
【0005】
国際特許出願公開番号ＷＯ２０１６／０８２０４４（特許文献１０）には、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体のための投与レジメンが記載されている。
【0006】
国際特許出願公開番号ＷＯ２０１９／１７３９１１（特許文献１１）には、オーリスタチン類似体を含む抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体－薬物コンジュゲートが記載されている。
【0007】
大部分の市販の抗体ベースの治療薬は、対象の体重又は体表面積に基づいた用量で対象に投与される。例えば、治療用抗体は、Ｘｍｇ／ｋｇ体重、又はＹｍｇ／ｍ２体表面積の用量で投与され得る。例えば、モノクローナル抗体パニツムマブは、２週間ごと（Ｑ２Ｗ）６ｍｇ／ｋｇの用量での投与用に承認されており、モノクローナル抗体ニボルマブは、３ｍｇ／ｋｇ Ｑ２Ｗの用量での投与用に承認されている。モノクローナル抗体リツキシマブは、３７５ｍｇ／ｍ２体表面積の用量での投与用に承認されている。モノクローナル抗体セツキシマブは、４００ｍｇ／ｍ２の負荷用量後に１週間ごと２５０ｍｇ／ｍ２体表面積の用量での投与用に承認されている。最近、固定用量（体重又は体表面積に依存しない）での治療用抗体の投与が提案されている（Ｈｅｎｄｒｉｋｘ，Ｊ．ｅｔ ａｌ．，Ｆｉｘｅｄ Ｄｏｓｉｎｇ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｎ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｔｈｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ ２２：１２１２（２０１７）（非特許文献３））。
【0008】
この背景情報は、本開示に関連する可能性があると出願人が考える情報を周知させる目的で提供される。前述した情報のいずれかが特許請求される発明に対する先行技術を構成すると認めることを必然的に意図しているわけではなく、またそのように解釈されるべきでもない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0009】
【特許文献1】米国特許第５，８２１，３３７号
【特許文献2】米国特許第７，８６２，８１７号
【特許文献3】ＷＯ２０１５／０７７８９１
【特許文献4】ＷＯ２０１６／１７９７０７
【特許文献5】米国特許出願公開第２０１４／０１７０１４８号
【特許文献6】米国特許出願公開第２０１５／０２８４４６３号
【特許文献7】米国特許出願公開第２０１７／００２９５２９号
【特許文献8】米国特許出願公開第２０１７／０２９１９５５号
【特許文献9】米国特許第９，７４５，３８２号
【特許文献10】ＷＯ２０１６／０８２０４４
【特許文献11】ＷＯ２０１９／１７３９１１
【非特許文献】
【0010】
【非特許文献1】Ｂａｎｇｅ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ７：５４８（２００１）
【非特許文献2】Ｌｉら（Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，７３：６４７１－６４８３（２０１３）
【非特許文献3】Ｈｅｎｄｒｉｋｘ，Ｊ．ｅｔ ａｌ．，Ｆｉｘｅｄ Ｄｏｓｉｎｇ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｎ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｔｈｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ ２２：１２１２（２０１７）
【発明の概要】
【0011】
概要
本明細書は、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を使用する癌治療方法を記載する。一態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法であって、前記方法が、固定された時間間隔で前記対象に有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を投与することを含み、前記有効量が、投与される前記抗体の固定用量を含む、前記方法に関する。
本明細書は、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を使用する癌治療方法を記載する。一態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法であって、前記方法が、固定された時間間隔で前記対象に有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を投与することを含み、前記有効量が、投与される前記抗体の固定用量を含む、前記方法に関する。
【0012】
別の態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法であって、前記方法が、前記対象に対して、固定された時間間隔で、有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を投与することを含み、前記有効量が、２段階（ｔｗｏ－ｔｉｅｒｅｄ）固定用量を含み、ここで、低い固定用量が、体重カットオフポイント未満の体重の対象に投与され、高い固定用量が、前記体重カットオフポイント以上の体重の対象に投与される、前記方法に関する。
【0013】
別の態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法であって、前記方法が、前記対象に対して、固定された時間間隔で、有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を投与することを含み、前記有効量が、２段階固定用量を含み、ここで、低い固定用量が、体重７０ｋｇ未満の対象に投与され、高い固定用量が、体重７０ｋｇ以上の対象に投与される、前記方法に関する。
【0014】
別の態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法であって、前記方法が、有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を前記対象に投与することを含み、前記有効量が、体重７０ｋｇ未満の対象に対する１８００ｍｇの固定用量、又は体重７０ｋｇ以上の対象に対する２４００ｍｇの固定用量を含み、前記用量が、３週間ごと（Ｑ３Ｗ）に投与される、前記方法に関する。
【0015】
別の態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法であって、前記方法が、有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を前記対象に投与することを含み、前記有効量が、体重７０ｋｇ未満の対象に対する１８００ｍｇの固定用量、又は体重７０ｋｇ以上の対象に対する２４００ｍｇの固定用量を含み、前記用量が、３週間ごと（Ｑ３Ｗ）に投与され、前記ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が、（ａ）配列番号３１に示す配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び配列番号２１に示す配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、第１の抗原結合ドメインと、（ｂ）配列番号５２に示すＶＨ配列、及び配列番号５１に示すＶＬ配列を含む、第２の抗原結合ドメインと、を含む、前記方法に関する。
【0016】
別の態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法であって、前記方法が、有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を前記対象に投与することを含み、前記有効量が、体重７０ｋｇ未満の対象に対する１８００ｍｇの固定用量、又は体重７０ｋｇ以上の対象に対する２４００ｍｇの固定用量を含み、前記用量が、３週間ごと（Ｑ３Ｗ）に投与され、前記対象が、乳癌、胃食道腺癌（ＧＥＡ）、食道癌、胃癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮頸癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肛門癌、結腸直腸癌（ＣＲＣ）又は胆道癌と診断されている、前記方法に関する。
【0017】
別の態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法であって、前記方法が、有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を前記対象に投与することを含み、前記有効量が、体重７０ｋｇ未満の対象に対する１８００ｍｇの固定用量、又は体重７０ｋｇ以上の対象に対する２４００ｍｇの固定用量を含み、前記用量が、３週間ごと（Ｑ３Ｗ）に投与され、前記対象が、胃食道腺癌（ＧＥＡ）、食道癌、胃食道接合部癌（ＧＥＪ）、又は胃癌と診断されている、前記方法に関する。
【0018】
別の態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法であって、前記方法が、有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を前記対象に投与することを含み、前記有効量が、体重７０ｋｇ未満の対象に対する１２００ｍｇの固定用量、又は体重７０ｋｇ以上の対象に対する１６００ｍｇの固定用量を含み、前記用量が、２週間ごと（Ｑ２Ｗ）に投与される、前記方法に関する。
【0019】
別の態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法であって、前記方法が、有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を前記対象に投与することを含み、前記有効量が、体重７０ｋｇ未満の対象に対する１２００ｍｇの固定用量、又は体重７０ｋｇ以上の対象に対する１６００ｍｇの固定用量を含み、前記用量が、２週間ごと（Ｑ２Ｗ）に投与され、前記対象が、胆道癌と診断されている、前記方法に関する。
【0020】
別の態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法であって、前記方法が、有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を前記対象に投与することを含み、前記有効量が、体重７０ｋｇ未満の対象に対する１２００ｍｇの固定用量、又は体重７０ｋｇ以上の対象に対する１６００ｍｇの固定用量を含み、前記用量が、２週間ごと（Ｑ２Ｗ）に投与され、前記ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が、（ａ）配列番号３１に示す配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び配列番号２１に示す配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、第１の抗原結合ドメインと、（ｂ）配列番号５２に示すＶＨ配列、及び配列番号５１に示すＶＬ配列を含む、第２の抗原結合ドメインと、を含む、前記方法に関する。
【0021】
別の態様において、本開示は、（ｉ）抗ＨＥＲ－２バイパラトピック抗体を含む１つ又は複数の容器と、（ｉｉ）前記１つ又は複数の容器内の又は前記容器に付随したラベル又は添付文書であって、前記抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が、ＨＥＲ２発現癌を有する対象に対して、（ａ）体重７０ｋｇ未満の対象については１８００ｍｇの用量で、又は（ｂ）体重７０ｋｇ以上の対象については２４００ｍｇの用量で、３週間ごと（Ｑ３Ｗ）に投与するためのものであると指示する、前記ラベル又は添付文書と、を含む医薬キットに関する。
【0022】
別の態様において、本開示は、抗ＨＥＲ－２バイパラトピック抗体と、（ｉｉ）前記１つ又は複数の容器内の又は前記容器に付随したラベル又は添付文書であって、前記抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が、ＨＥＲ２発現癌を有する対象に対して、（ａ）体重７０ｋｇ未満の対象については１２００ｍｇの用量で、又は（ｂ）体重７０ｋｇ以上の対象については１６００ｍｇの用量で、２週間ごと（Ｑ２Ｗ）に投与するためのものであると指示する、前記ラベル又は添付文書と、を含む医薬キットに関する。
【図面の簡単な説明】
【0023】
【図1】抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体ｖ１００００の略図を示す。
【図2A】図２は、様々な投与レジメンについての、予測曝露量の中央値（実線）、観測データ（白丸）と比較した９５％予測区間（灰色のバンド）、観測濃度の中央値（点線）、及び観測された第２．５／９７．５百分位数（破線）の視覚的事後予測性能評価を示す。図２Ａ：１週間ごと（ＱＷ）に投与される５ｍｇ／ｋｇの用量。
【図2B】図２は、様々な投与レジメンについての、予測曝露量の中央値（実線）、観測データ（白丸）と比較した９５％予測区間（灰色のバンド）、観測濃度の中央値（点線）、及び観測された第２．５／９７．５百分位数（破線）の視覚的事後予測性能評価を示す。図２Ｂ：１週間ごと（Ｑ２Ｗ）に投与される１０ｍｇ／ｋｇの用量。
【図2C】図２は、様々な投与レジメンについての、予測曝露量の中央値（実線）、観測データ（白丸）と比較した９５％予測区間（灰色のバンド）、観測濃度の中央値（点線）、及び観測された第２．５／９７．５百分位数（破線）の視覚的事後予測性能評価を示す。図２Ｃ：２週間ごと（Ｑ２Ｗ）に投与される２０ｍｇ／ｋｇの用量。
【図2D】図２は、様々な投与レジメンについての、予測曝露量の中央値（実線）、観測データ（白丸）と比較した９５％予測区間（灰色のバンド）、観測濃度の中央値（点線）、及び観測された第２．５／９７．５百分位数（破線）の視覚的事後予測性能評価を示す。図２Ｄ：３週間ごと（Ｑ３Ｗ）に投与される３０ｍｇ／ｋｇの用量。
【図3C】図３は、いくつかの投与レジメンを使用した、体重別の定常状態でのモデル予測ＡＵＣを示す。図３Ｃ：２段階フラット投与（１８００／２４００ｍｇ Ｑ３Ｗ）。該２段階フラット用量（１８００／２４００ｍｇ Ｑ３Ｗ）は、７０ｋｇ未満の患者には１８００ｍｇで、７０ｋｇ以上の患者には２４００ｍｇで投与される。
【図4】胃腸癌の治療におけるｖ１００００の実施例４に記載の臨床研究の設計を示す概略図である。５－ＦＵ＝５－フルオロウラシル。ＤＣＲ＝疾患制御率。ＤＯＲ＝奏効期間。ＥＣＯＧ ＰＳ＝東部協力腫瘍学グループのパフォーマンスステータス。ＦＩＳＨ＝蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション。ＧＥＡ＝胃食道腺癌。ＩＨＣ＝免疫組織化学。ＯＲＲ＝客観的奏効率。ＰＤ＝病勢進行。ＰＦＳ＝無増悪生存期間。ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１＝固形腫瘍における奏効評価基準、バージョン１．１。ＳＤ＝病勢安定。
【図5】ｖ１００００及び化学療法レジメンＣＡＰＯＸ、ＦＰ又はｍＦＯＬＦＯＸのうちの１つで治療される対象における標的病変部サイズの変化を示すウォーターフォールプロットである。５－ＦＵ＝５－フルオロウラシル。ＣＡ＝原発腫瘍部位。ＣＡＰＯＸ＝カペシタビン＋オキサリプラチン。Ｅ＝食道癌。Ｆ＝フラット投与。ＦＩＳＨ＝蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション。ＦＰ＝５－ＦＵ＋シスプラチン。Ｇ＝胃癌。ＩＨＣ＝免疫組織化学。Ｊ＝胃食道接合部癌。ｍＦＯＬＦＯＸ６＝５－ＦＵ＋オキサリプラチン及びロイコボリン。Ｗ＝体重ベースの投与。ＺＤＲ＝２段階フラット投与レジメン。
【発明を実施するための形態】
【0024】
詳細な説明
本開示は、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体によるＨＥＲ２発現癌の治療方法に関する。大部分の抗体ベースの治療薬は、対象の体重（ｋｇ）又は体表面積（ｍ２）に基づいた用量で対象に投与される。しかし、この投与方法は、患者ごとに特定の量を計算し分注する必要があるため、不便である。一部の対象が他の対象より多くの薬物を要するが、通常、薬物が１つ又は２つの均一なバイアルサイズで包装されるため、薬物の浪費も引き起こされる。バイアル内の未使用の薬物は多くの場合廃棄しなければならない。治療用抗体の製造コストが高く、薬物の浪費によりその費用が嵩む。これらの問題を回避するために、一部の抗体製造業者は、体重又は体表面積に依存せずに全ての患者に使用できる「フリーサイズ」又は固定用量の治療用抗体を開発していた。しかし、このアプローチは、対象間の薬物濃度の不均一を引き起こす可能性があり、一部の対象は他の対象より薬物曝露量が著しく多い。集団薬物動態を使用したところ、発明者らは、特定の体重より軽い対象に、より重い対象に与えられる固定用量よりも少ない固定用量が与えられる段階的固定投与方法を開発した。
本開示は、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体によるＨＥＲ２発現癌の治療方法に関する。大部分の抗体ベースの治療薬は、対象の体重（ｋｇ）又は体表面積（ｍ２）に基づいた用量で対象に投与される。しかし、この投与方法は、患者ごとに特定の量を計算し分注する必要があるため、不便である。一部の対象が他の対象より多くの薬物を要するが、通常、薬物が１つ又は２つの均一なバイアルサイズで包装されるため、薬物の浪費も引き起こされる。バイアル内の未使用の薬物は多くの場合廃棄しなければならない。治療用抗体の製造コストが高く、薬物の浪費によりその費用が嵩む。これらの問題を回避するために、一部の抗体製造業者は、体重又は体表面積に依存せずに全ての患者に使用できる「フリーサイズ」又は固定用量の治療用抗体を開発していた。しかし、このアプローチは、対象間の薬物濃度の不均一を引き起こす可能性があり、一部の対象は他の対象より薬物曝露量が著しく多い。集団薬物動態を使用したところ、発明者らは、特定の体重より軽い対象に、より重い対象に与えられる固定用量よりも少ない固定用量が与えられる段階的固定投与方法を開発した。
【0025】
したがって、本明細書に開示される方法の特定の態様において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象に、２段階固定投与レジメンに従って対象の体重に応じて１週間ごと（ＱＷ）、２週間ごと（Ｑ２Ｗ）又は３週間ごと（Ｑ３Ｗ）と固定された間隔で投与される。特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、対象に、各２１日サイクルの１日目に、約１８００ｍｇの用量で（＜７０ｋｇの対象）又は約２４００ｍｇの用量で（≧７０ｋｇの対象）Ｑ３ＷでＩＶ投与される。特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、対象に、各２８日サイクルの１日目と１５日目に、約１２００ｍｇの用量で（＜７０ｋｇの対象）又は約１６００ｍｇの用量で（≧７０ｋｇの対象）Ｑ２ＷでＩＶ投与される。
【0026】
本明細書に開示される方法の特定の態様において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、化学療法剤と組み合わせて投与される。本開示の方法の特定の態様において、抗ＨＥＲ２抗体は、ＰＤ－１阻害剤、例えば、抗ＰＤ－１抗体と組み合わせて投与される。
【0027】
定義
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。
【0028】
本明細書で使用されるように、用語「対象」とは、治療及び／又は観察の対象であるヒト患者を指す。
【0029】
本明細書で使用されるように、用語「約」とは、所与の値からの変動がおよそ＋／－１０％であることを指す。こうした変動は、具体的に言及しているかに関わらず、本明細書で提供される任意の所与の値に常に含まれることが理解される。
【0030】
本明細書で用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」と組み合わせて使用される場合の語句「１つ（ａ）」又は「１つ（ａｎ）」の使用は、「１つ（ｏｎｅ）」を意味し得るが、特定の実施形態において「１つ又は複数」、「少なくとも１つ」又は「１つ又は１つ以上」の意味とも矛盾しない。
【0031】
本明細書で使用されるように、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「包含する（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」及び「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」並びにそれらの文法的変形は、包括的又は制限のないものであり、追加の列挙されていない要素及び／又は方法ステップを除外するものではない。用語「…から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」は、組成物、使用又は方法に関連して本明細書で使用される場合、追加の要素及び／又は方法ステップが存在し得るが、これらの追加が、列挙された組成物、方法、又は使用の機能する方式に実質的な影響を与えないことを意味する。用語「…からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」は、組成物、使用又は方法に関連して本明細書で使用される場合、追加の要素及び／又は方法ステップが存在しないものとする。特定の要素及び／又はステップを含むものとして本明細書に記載の組成物、使用及び／又は方法はまた、特定の実施形態では、それらの要素及び／又はステップから本質的になり、他の実施形態では、これらの実施形態が具体的に言及するか否かに関わらず、これらの要素及び／又はステップからなるようにしてもよい。
【0032】
用語「…に由来する」及び「…に基づく」は、組換えアミノ酸配列に関して使用される場合、該組換えアミノ酸配列が対応する参照アミノ酸配列の配列と実質的に同一であることを意味する。例えば、野生型Ｉｇ Ｆｃ配列に由来する（又はそれに基づく）Ｉｇ Ｆｃアミノ酸配列は、該野生型Ｉｇ Ｆｃ配列と実質的に同一である（例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の配列同一性を共有する）。
【0033】
用語「第１選択療法」、「第１選択治療」又は「一次療法」は、癌のタイプ及び病期を考慮して、患者の初期治療として一般に受け入れられる治療レジメンである。用語「第２選択療法」又は「第２選択治療」は、第１選択療法が所望の有効性を提供しない場合に通常施される治療レジメンである。
【0034】
用語「ネオアジュバント療法」とは、主な治療、通常は手術が行われる前に、腫瘍を縮小させるために最初のステップとして行われる治療を指す。ネオアジュバント療法の例は、化学療法、放射線療法、及びホルモン療法を含むが、それらに限定されない。ネオアジュバント療法は、第１選択療法として考慮される場合がある。
【0035】
用語「アジュバント療法」とは、癌が再発するリスクを下げるために、第１選択治療後に行われる追加の癌治療を指す。アジュバント療法は、化学療法、放射線療法、ホルモン療法、標的療法（典型的には、正常細胞ではなく特定のタイプの癌細胞を標的とする小分子薬物又は抗体）、又は生物学的療法（例えばワクチン、サイトカイン、抗体、又は遺伝子療法等）を含み得るが、それらに限定されない。
【0036】
「進行癌」とは、安全に切除できないほど進行した癌又は治癒もしくは長期寛解の可能性が非常に低い癌のことである。癌は、その切除を妨げる構造に隣接して成長したり、その発生した場所から組織線を横切るか、又はリンパ節もしくは他の器官等、体の他の部分に浸潤したりすることによって、進行する。進行癌は局所進行性である場合があり、これは、癌が原発部位の器官外に浸潤しているが、離れた部位にはまだ浸潤していないことを意味する。進行癌は転移性である場合もあり、これは、癌細胞が癌の発生した場所（原発部位）から体の他のより離れた部分（続発部位）に浸潤していることを意味する。
【0037】
「切除可能な」癌とは、手術で治療できる癌のことである。「切除不能な」癌とは、通常は主な腫瘍の周囲の組織に浸潤しているため、手術で治療できない癌のことである。特定の癌は、周囲の組織への浸潤の程度に基づいて医師によって「部分切除可能」と評価される場合がある。
【0038】
用語「固定された時間間隔」とは、薬物を投与するための推奨スケジュール、例えば、１週間ごと（ＱＷ）、２週間ごと（Ｑ２Ｗ）、３週間ごと（Ｑ３Ｗ）等を指す。
【0039】
本明細書で論じられるあらゆる実施形態は、本明細書で開示される任意の方法、使用、又は組成物に関して実施できることが意図される。
【0040】
本明細書に開示される実施形態に関連して記載されている特定の特徴、構造及び／又は特性は、１つ又は複数の更なる実施形態を提供するために、任意の好適な方式で本明細書に開示されている別の実施形態に関連して記載されている特徴、構造及び／又は特性と組み合わせてもよい。
【0041】
また、一実施形態における特徴の明確な列挙は、代替的実施形態における該特徴を除外するための基礎として働くことも理解される。例えば、選択肢のリストが所与の実施形態又は請求項に対して提示される場合、こうした代替的実施形態が具体的に言及するか否かに関わらず、１つ又は複数の選択肢が該リストから削除され、短縮されたリストが代替的実施形態を形成し得ることが理解される。
【0042】
抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体
本明細書に記載の抗体は、ＨＥＲ２の２つの異なるエピトープに結合する抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を含む。
本明細書に記載の抗体は、ＨＥＲ２の２つの異なるエピトープに結合する抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を含む。
【0043】
本明細書で使用されるように、用語「抗体」とは、一般に、免疫グロブリン様機能を有するタンパク質性結合分子を指す。抗体の典型的な例は、免疫グロブリン、及び依然として結合特異性を保持しているその誘導体又は機能的断片である。抗体を産生するための技法は、当分野で周知である。用語「抗体」は、異なるクラス（即ち、ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＤ及びＩｇＥ）及びサブクラス（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２等）の免疫グロブリンも含み得る。抗体の例示的な例は、全抗体及びその抗原結合断片、例えば、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）、ダイアボディ、ドメイン抗体、及びそれらの組み合わせである。ドメイン抗体は、単一ドメイン抗体、単一可変ドメイン抗体又は可変ドメインを１つのみ有する免疫グロブリン単一可変ドメインであってもよく、これらは、重鎖可変ドメイン又は軽鎖可変ドメインであり得、他の可変領域又はドメインとは関係なく、抗原又はエピトープに特異的に結合する。用語「抗体」はまた、キメラ抗体、単鎖抗体、及びヒト化抗体等のような実施形態も含む。
【0044】
典型的な全抗体は、ジスルフィド結合によって相互連結される少なくとも２つの重（Ｈ）鎖及び２つの軽（Ｌ）鎖を含む。各重鎖は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び重鎖定常領域（ＣＨ）から構成される。重鎖定常領域は、３つのドメインＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインはそれぞれ、α（ＩｇＡ）、δ（ＩｇＤ）、ε（ＩｇＥ）、γ（ＩｇＧ）、及びμ（ＩｇＭ）として公知である。各軽鎖は、軽鎖可変領域（ＶＬ）及び軽鎖定常領域から構成される。軽鎖定常領域は、１つのドメインＣＬのみを含む。軽鎖は、カッパ又はラムダのいずれかに分類される。ＶＨ及びＶＬ領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される超可変性の領域に更に細分化でき、フレームワーク領域（ＦＷ）と称されるより保存された領域が散在している。各ＶＨ及びＶＬは、３つのＣＤＲ及び４つのＦＷから構成され、アミノ末端からカルボキシ末端へと、ＦＷ１、ＣＤＲ１、ＦＷ２、ＣＤＲ２、ＦＷ３、ＣＤＲ３、ＦＷ４の順序で配列される。重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメイン（パラトープ）を含む。抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（エフェクター細胞等）及び補体系の構成要素であるＣ１ｑを含めて、宿主組織又は因子への免疫グロブリンの結合を媒介できる。
【0045】
特定の実施形態において、本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、それぞれがＨＥＲ２の異なるエピトープに結合する２つの抗原結合ドメインを含む。本明細書で交換可能に使用される用語「抗原結合ポリペプチド構築物」及び「抗原結合ドメイン」とは、免疫グロブリンベースの構築物、例えば、抗体断片を指す。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物は抗体断片である。
【0046】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物は、それぞれ独立して、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、ｓｃＦｖ又はｓｄＡｂであり得る。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物はそれぞれ独立して、Ｆａｂ断片又はｓｃＦｖであり得る。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる１つの抗原結合ポリペプチド構築物は、Ｆａｂ断片であり得、別の抗原結合ポリペプチド構築物はｓｃＦｖであり得る。
【0047】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物のうちの少なくとも１つは、Ｆａｂ断片又はＦａｂ’断片であり得る。「Ｆａｂ断片」は、軽鎖（ＣＬ）の定常ドメイン及び重鎖（ＣＨ１）の第１定常ドメイン並びに軽鎖及び重鎖の可変ドメイン（それぞれＶＬ及びＶＨ）を含む。Ｆａｂ’断片は、重鎖ＣＨ１ドメインのＣ末端に数個のアミノ酸残基が付加している点でＦａｂ断片と異なり、抗体ヒンジ領域からの１つ又は複数のシステインを含む。Ｆａｂ断片は、単鎖Ｆａｂ分子、即ちＦａｂ軽鎖及びＦａｂ重鎖がペプチドリンカーによって連結されて単一のペプチド鎖を形成するＦａｂ分子であってもよい。例えば、単鎖Ｆａｂ分子内においてＦａｂ軽鎖のＣ末端がＦａｂ重鎖のＮ末端に連結され得る。
【0048】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物のうちの少なくとも１つは、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）であり得る。「ｓｃＦｖ」は、単一のポリペプチド鎖における抗体の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。任意に、ｓｃＦｖは、ＶＨとＶＬドメインの間にポリペプチドリンカーを更に含み得、これにより、ｓｃＦｖが抗原結合に望ましい構造を形成できるようになる。例えば、ｓｃＦｖは、ポリペプチドリンカーによってそのＣ末端からＶＨのＮ末端に連結されたＶＬを含み得る。あるいは、ｓｃＦｖは、ポリペプチド鎖又はリンカーによってそのＣ末端を介してＶＬのＮ末端に連結されたＶＨを含み得る（Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９－３１５（１９９４）のレビューを参照）。
【0049】
本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、様々なフォーマットを有し得る。抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の最小成分は、第１ＨＥＲ２エピトープに結合する第１抗原結合ポリペプチド構築物、及び第２ＨＥＲ２エピトープに結合する第２抗原結合ポリペプチド構築物であり、第１及び第２ＨＥＲ２エピトープが異なる。異なるＨＥＲ２エピトープに結合する２つの抗原結合ポリペプチド構築物を含む抗体は、二価のバイパラトピック抗体と見なされ得る。例えば、それぞれが第１又は第２ＨＥＲ２エピトープのいずれかに結合する１つ又は複数の追加の抗原結合ポリペプチド構築物を含む抗体も、バイパラトピックであるが、三価又は四価であると見なされる。特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は二価の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体である。
【0050】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、第１及び第２抗原結合ポリペプチド構築物が作動可能に連結される足場を含む。本明細書で使用されるように、用語「作動可能に連結される」とは、記載された構成要素が、それらの意図された方式で機能することを可能にする関係にあることを意味する。好適な足場を以下に説明する。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、足場に作動可能に連結された２つの抗原結合ポリペプチド構築物を含み、該抗原結合ポリペプチド構築物のうちの少なくとも１つはｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、足場に作動可能に連結された２つの抗原結合ポリペプチド構築物を含み、該抗原結合ポリペプチド構築物のうちの少なくとも１つはＦａｂである。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、足場に作動可能に連結された２つの抗原結合ポリペプチド構築物を含み、そのうち、１つの該抗原結合ポリペプチド構築物はｓｃＦｖであり、別の該抗原結合ポリペプチド構築物はＦａｂである。
【0051】
好適な足場の例は、免疫グロブリンＦｃ領域、アルブミン、アルブミン類似体及び誘導体、ヘテロ二量化ペプチド（ロイシンジッパー、Ｊｕｎ及びＦｏｓ由来のヘテロ二量体形成「ジッパー」ペプチド、ＩｇＧ ＣＨ１及びＣＬドメイン又はバルナーゼ－バルスター毒素等）、サイトカイン、ケモカイン又は成長因子を含むが、それらに限定されない。他の例は、ＩＢＣ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．及びＩｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ，Ｉｎｃ．によって開発されたＤＯＣＫ－ＡＮＤ－ＬＯＣＫ（商標）（ＤＮＬ（商標））技術に基づく抗体を含む（例えば、Ｃｈａｎｇ，ｅｔ ａｌ．，２００７，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，１３：５５８６ｓ－５５９１ｓを参照）。
【0052】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、免疫グロブリンＦｃ領域、アルブミン又はアルブミン類似体もしくは誘導体（例えば、国際特許出願公開ＷＯ２０１２／１１６４５３又はＷＯ２０１４／０１２０８２に記載のもの）に基づく足場を含む。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃ領域に基づくタンパク質足場を含む。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、ＩｇＧ Ｆｃ領域に基づくタンパク質足場を含む。
【0053】
本明細書で使用されるように、用語「Ｆｃ領域」、「Ｆｃ」又は「Ｆｃドメイン」とは、定常領域の少なくとも一部を含有する免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を指す。該用語は天然配列Ｆｃ領域及びバリアントＦｃ領域を含む。本明細書において別段明記されない限り、Ｆｃ領域又は定常領域内のアミノ酸残基の番号付けは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）に記載されている、ＥＵインデックスとも呼ばれるＥＵナンバリングシステムに従う。
【0054】
Ｉｇ Ｆｃ領域は、典型的に二量体であり、２つのＦｃポリペプチドで構成される。二量体Ｆｃの「Ｆｃポリペプチド」は、二量体Ｆｃドメインを形成する２つのポリペプチドのうちの１つ、即ち免疫グロブリン重鎖の１つ又は複数のＣ末端定常領域を含む、安定した自己会合が可能なポリペプチドを指す。用語「第１Ｆｃポリペプチド」及び「第２Ｆｃポリペプチド」は、Ｆｃ領域が１つの第１Ｆｃポリペプチド及び１つの第２Ｆｃポリペプチドを含むという前提で、二量体Ｆｃ領域に含まれるＦｃポリペプチドの記述に交換可能に使用され得る。
【0055】
Ｆｃ領域は、ＣＨ３ドメイン、又はＣＨ３とＣＨ２ドメインの両方を含む。例えば、二量体ＩｇＧ Ｆｃ領域のＦｃポリペプチドは、ＩｇＧ ＣＨ２及びＩｇＧ ＣＨ３定常ドメイン配列を含む。ＣＨ３ドメインは、２つのＣＨ３配列を含み、その１つは二量体Ｆｃ領域の２つのＦｃポリペプチドのそれぞれに由来する。ＣＨ２ドメインは、２つのＣＨ２配列を含み、その１つは二量体Ｆｃ領域の２つのＦｃポリペプチドのそれぞれに由来する。
【0056】
いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、ＩｇＧ Ｆｃ領域に基づく足場を含み得る。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、ヒトＦｃ領域に基づく足場を含み得る。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域、例えば、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域に基づく足場を含み得る。
【0057】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、ＩｇＧ Ｆｃ領域に基づく足場を含み得、該ＩｇＧ Ｆｃ領域は、ヘテロ二量体Ｆｃ領域であり、それぞれがＣＨ３配列、及び任意にＣＨ２配列を含む第１Ｆｃポリペプチド及び第２Ｆｃポリペプチドを含む。
【0058】
いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、第１及び第２Ｆｃポリペプチドを含むＦｃ領域に基づく足場を含み得、第１抗原結合ポリペプチド構築物は第１Ｆｃポリペプチドに作動可能に連結され、第２抗原結合ポリペプチド構築物は第２Ｆｃポリペプチドに作動可能に連結される。
【0059】
いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、第１及び第２Ｆｃポリペプチドを含むＦｃ領域に基づく足場を含み得、ここで、第１抗原結合ポリペプチド構築物は第１Ｆｃポリペプチドに作動可能に連結され、第２抗原結合ポリペプチド構築物は第２Ｆｃポリペプチドに作動可能に連結され、第１及び第２抗原結合ポリペプチド構築物は独立して、Ｆａｂ断片又はｓｃＦｖである。
【0060】
いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、２つのＣＨ３配列を含むＦｃ領域に基づく足場を含み得、該２つのＣＨ３配列のうちの少なくとも１つは１つ又は複数のアミノ酸修飾を含む。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、修飾されたＣＨ３ドメインを含むヘテロ二量体Ｆｃ領域を含み、ここで該修飾されたＣＨ３ドメインは非対称的に修飾されたＣＨ３ドメインである。一般に、ヘテロ二量体Ｆｃの第１Ｆｃポリペプチドは第１ＣＨ３配列を含み、第２Ｆｃポリペプチドは第２ＣＨ３配列を含む。
【0061】
本明細書で使用されるように、「非対称アミノ酸修飾」とは、第１ＣＨ３配列上の特定の位置のアミノ酸が第２ＣＨ３配列上の同じ位置のアミノ酸と異なる修飾を指す。非対称アミノ酸修飾を含むＣＨ３配列について、第１及び第２ＣＨ３配列は、典型的に好ましくは、ホモ二量体よりもヘテロ二量体を形成するように対になる。これらの非対称アミノ酸修飾は、各配列の同じ各アミノ酸位置にある２つのアミノ酸のうちの１つのみが修飾されているか、又は第１及び第２ＣＨ３配列のそれぞれの同じ各位置にある各配列の両方のアミノ酸の修飾が異なっていることによる結果であり得る。ヘテロ二量体Ｆｃの第１及び第２ＣＨ３配列のそれぞれは、１つ又は複数の非対称アミノ酸修飾を含み得る。
【0062】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、国際特許出願公開ＷＯ２０１２／０５８７６８又はＷＯ２０１３／０６３７０２に記載されているように、修飾されたＦｃ領域に基づく足場を含み得る。
【0063】
表１は、全長ヒトＩｇＧ１重鎖のアミノ酸２３１～４４７に対応するヒトＩｇＧ１ Ｆｃ配列のアミノ酸配列（配列番号１）を提供する。ＣＨ３配列は全長ヒトＩｇＧ１重鎖のアミノ酸３４１～４４７を含む。
【0064】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、ホモ二量体Ｆｃではなくヘテロ二量体Ｆｃの形成を促進する非対称アミノ酸修飾を含む修飾されたＣＨ３ドメインを含むヘテロ二量体Ｆｃ足場を含み得る。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、Ｌ３５１、Ｆ４０５、Ｙ４０７、Ｔ３６６、Ｋ３９２、Ｔ３９４、Ｔ３５０、Ｓ４００及び／又はＮ３９０（ＥＵナンバリングを使用）という位置のうちの１つ又は複数に下記の修飾を含むヘテロ二量体Ｆｃ足場を含み得る。
【0065】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、Ｆ４０５位及びＹ４０７位にアミノ酸修飾を含み且つ任意にＬ３５１位にアミノ酸修飾を更に含む第１ポリペプチド配列と、Ｔ３６６位及びＴ３９４位にアミノ酸修飾を含み且つ任意にＫ３９２位にアミノ酸修飾を更に含む第２ポリペプチド配列とを有する修飾されたＣＨ３ドメインを含むヘテロ二量体Ｆｃを含み得る。いくつかの実施形態において、修飾されたＣＨ３ドメインの第１ポリペプチド配列は、Ｆ４０５位及びＹ４０７位にアミノ酸修飾を含み得且つ任意にＬ３５１位にアミノ酸修飾を更に含み、修飾されたＣＨ３ドメインの第２ポリペプチド配列は、Ｔ３６６位及びＴ３９４位にアミノ酸修飾を含み且つ任意にＫ３９２位にアミノ酸修飾を更に含み、Ｆ４０５位のアミノ酸修飾は、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ又はＦ４０５Ｖであり、Ｙ４０７位のアミノ酸修飾は、Ｙ４０７Ｉ又はＹ４０７Ｖであり、Ｔ３６６位のアミノ酸修飾は、Ｔ３６６Ｉ、Ｔ３６６Ｌ又はＴ３６６Ｍであり、Ｔ３９４位のアミノ酸修飾は、Ｔ３９４Ｗであり、Ｌ３５１位のアミノ酸修飾は、Ｌ３５１Ｙであり、Ｋ３９２位のアミノ酸修飾は、Ｋ３９２Ｆ、Ｋ３９２Ｌ又はＫ３９２Ｍである。いくつかの実施形態において、Ｆ４０５位のアミノ酸修飾は、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ又はＦ４０５Ｖである。
【0066】
いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、Ｆ４０５及びＹ４０７位にアミノ酸修飾を含み且つ任意にＬ３５１位にアミノ酸修飾を更に含む第１Ｆｃポリペプチド配列と、Ｔ３６６位及びＴ３９４位にアミノ酸修飾を含み且つ任意にＫ３９２位にアミノ酸修飾を更に含む第２Ｆｃポリペプチド配列とを有する修飾されたＣＨ３ドメインを含むヘテロ二量体Ｆｃを含み得、Ｆ４０５位のアミノ酸修飾は、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｉ、Ｆ４０５Ｍ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ又はＦ４０５Ｖであり、Ｙ４０７位のアミノ酸修飾は、Ｙ４０７Ｉ又はＹ４０７Ｖであり、Ｔ３６６位のアミノ酸修飾は、Ｔ３６６Ｉ、Ｔ３６６Ｌ又はＴ３６６Ｍであり、Ｔ３９４位のアミノ酸修飾は、Ｔ３９４Ｗであり、Ｌ３５１位のアミノ酸修飾は、Ｌ３５１Ｙであり、Ｋ３９２位のアミノ酸修飾は、Ｋ３９２Ｆ、Ｋ３９２Ｌ又はＫ３９２Ｍであり、第１及び第２Ｆｃポリペプチド配列の一方又は両方ともアミノ酸修飾Ｔ３５０Ｖを更に含む。いくつかの実施形態において、Ｆ４０５位のアミノ酸修飾は、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ又はＦ４０５Ｖである。
【0067】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、上述したように、修飾されたＣＨ３ドメインを含むヘテロ二量体Ｆｃを含み得、ここで、第１Ｆｃポリペプチド配列は、Ｆ４０５位及びＹ４０７位にアミノ酸修飾を含み且つ任意にＬ３５１位にアミノ酸修飾を更に含み、第２Ｆｃポリペプチド配列は、Ｔ３６６及びＴ３９４位にアミノ酸修飾を含み且つ任意にＫ３９２位にアミノ酸修飾を更に含み、第１Ｆｃポリペプチド配列は、Ｓ４００位又はＱ３４７位の一方又は両方にアミノ酸修飾を更に含み、及び／又は第２Ｆｃポリペプチド配列は、Ｋ３６０位又はＮ３９０位の一方又は両方にアミノ酸修飾を更に含み、そのうち、Ｓ４００位のアミノ酸修飾は、Ｓ４００Ｅ、Ｓ４００Ｄ、Ｓ４００Ｒ又はＳ４００Ｋであり、Ｑ３４７位のアミノ酸修飾は、Ｑ３４７Ｒ、Ｑ３４７Ｅ又はＱ３４７Ｋであり、Ｋ３６０位のアミノ酸修飾は、Ｋ３６０Ｄ又はＫ３６０Ｅであり、Ｎ３９０位のアミノ酸修飾は、Ｎ３９０Ｒ、Ｎ３９０Ｋ又はＮ３９０Ｄである。いくつかの実施形態において、Ｆ４０５位のアミノ酸修飾は、Ｆ４０５Ａ、Ｆ４０５Ｓ、Ｆ４０５Ｔ又はＦ４０５Ｖである。
【0068】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、表１に示すように、バリアント１、バリアント２、バリアント３、バリアント４又はバリアント５のうちのいずれか１つの修飾を含む修飾されたＣＨ３ドメインを有するヘテロ二量体Ｆｃ足場を含み得る。
【0069】
（表１）ＩｇＧ１ Ｆｃ配列
【0070】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、Ｌ３５１Ｙ、Ｆ４０５Ａ、及びＹ４０７Ｖから選択される１つ又は複数のアミノ酸修飾を含む第１ＣＨ３配列と、アミノ酸修飾Ｔ３６６Ｌ又はＴ３６６Ｉ、Ｋ３９２Ｌ又はＫ３９２Ｍ、及びＴ３９４Ｗを含む第２ＣＨ３配列とを有する修飾されたＣＨ３ドメインを有するヘテロ二量体Ｆｃ足場を含み得、第１及び第２ＣＨ３配列の一方又は両方は任意にアミノ酸修飾Ｔ３５０Ｖを更に含み得る。
【0071】
抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる２つの抗原結合ポリペプチド構築物は、それぞれＨＥＲ２の異なるエピトープに結合し、即ち、第１抗原結合ポリペプチド構築物は第１ＨＥＲ２エピトープに結合し、第２抗原結合ポリペプチド構築物は第２ＨＥＲ２エピトープに結合する。本開示の文脈において、抗原結合ポリペプチド構築物のそれぞれは、その標的エピトープに特異的に結合する。
【0072】
「特異的に結合する」又は「特異的結合」は、結合が抗原に対して選択的であり、不要の又は非特異的な相互作用から区別できることを意味する。特定のエピトープに結合する抗原結合ポリペプチド構築物の能力は、例えば、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術（ＢＩＡｃｏｒｅ装置で分析）（Ｌｉｌｊｅｂｌａｄ ｅｔ ａｌ，Ｇｌｙｃｏ Ｊ １７，３２３－３２９（２０００））又は従来の結合アッセイ（Ｈｅｅｌｅｙ，Ｅｎｄｏｃｒ Ｒｅｓ ２８，２１７－２２９（２００２））によって測定できる。いくつかの実施形態において、抗原結合ポリペプチド構築物の非関連タンパク質への結合の程度が、例えばＳＰＲによって測定される場合、抗原結合ポリペプチド構築物のその標的エピトープへの結合の約１０％未満であると、抗原結合ポリペプチド構築物は、その標的エピトープに特異的に結合していると見なされる。
【0073】
「ＨＥＲ２」（ＥｒｂＢ２としても公知である）とは、例えば、Ｓｅｍｂａ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ（ＵＳＡ），８２：６４９７－６５０１（１９８５）及びＹａｍａｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３１９：２３０－２３４（１９８６）（ＧｅｎＢａｎｋ ａｃｃｅｓｓｉｏｎ ｎｕｍｂｅｒ Ｘ０３３６３）に記載されているヒトＨＥＲ２タンパク質を指す。用語「ｅｒｂＢ２」及び「ｎｅｕ」とは、ヒトＨＥＲ２タンパク質をコードする遺伝子を指す。用語ｐ１８５又はｐ１８５ｎｅｕは、ｎｅｕ遺伝子のタンパク質産物を指すためにも使用され得る。
【0074】
ＨＥＲ２は、典型的にはＨＥＲリガンドと結合する細胞外ドメイン、親油性膜貫通ドメイン、保存された細胞内チロシンキナーゼドメイン、及びリン酸化できる複数のチロシン残基を有するカルボキシル末端シグナル伝達ドメインを含む。ＨＥＲ２の細胞外（エクト）ドメインは、ドメインＩ～ＩＶの４つのドメインを含む。ＨＥＲ２の配列（配列番号２）を表２に提供する。細胞外ドメイン（ＥＣＤ）境界は、ドメインＩ－アミノ酸約１～１６５、ドメインＩＩ－アミノ酸約１６６～３２２、ドメインＩＩＩ－アミノ酸約３２３～４８８、及びドメインＩＶ－アミノ酸約４８９～６０７のとおりである。
【0075】
（表２）ヒトＨＥＲ２のアミノ酸配列（配列番号２）
【0076】
「エピトープ２Ｃ４」は、抗体２Ｃ４が結合するＨＥＲ２の細胞外ドメイン内の領域であり、ＨＥＲ２の細胞外ドメイン（ＥＣＤ２とも呼ばれる）のドメインＩＩからの残基を含む。２Ｃ４及びペルツズマブは、ドメインＩ、ＩＩ及びＩＩＩの接合部でＨＥＲ２の細胞外ドメインに結合する（Ｆｒａｎｋｌｉｎ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ５：３１７－３２８（２００４））。
【0077】
「エピトープ４Ｄ５」は、抗体４Ｄ５（ＡＴＣＣ ＣＲＬ １０４６３）及びトラスツズマブが結合するＨＥＲ２の細胞外ドメイン内の領域である。このエピトープは、ＨＥＲ２の膜貫通ドメインに近く、ＨＥＲ２のドメインＩＶ（ＥＣＤ４とも呼ばれる）内にある。
【0078】
一般に、本開示の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、ＨＥＲ２の細胞外ドメイン内のエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の第１及び第２抗原結合ポリペプチド構築物によって結合される第１及び第２ＨＥＲ２エピトープは、非重複エピトープである。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の第１及び第２抗原結合ポリペプチド構築物によって結合される第１及び第２ＨＥＲ２エピトープは、ＨＥＲ２の異なる細胞外ドメイン上にある。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の第１抗原結合ポリペプチド構築物は、ＨＥＲ２の第１ドメイン上の第１ＨＥＲ２エピトープに結合し、第２抗原結合ポリペプチド構築物は、ＨＥＲ２の第２ドメイン上の第２ＨＥＲ２エピトープに結合する。いくつかの実施形態において、ＨＥＲ２の第１ドメインは、ＥＣＤ２であり、ＨＥＲ２の第２ドメインはＥＣＤ４である。
【0079】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、ＨＥＲ２への結合についてトラスツズマブと競合する。特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、ＨＥＲ２への結合についてペルツズマブと競合する。特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、ＨＥＲ２への結合についてトラスツズマブと競合し、別の抗原結合ポリペプチド構築物は、ＨＥＲ２への結合についてペルツズマブと競合する。
【0080】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、Ｆａｂ又はｓｃＦｖフォーマットであり、ＨＥＲ２への結合についてトラスツズマブと競合し、別の抗原結合ポリペプチド構築物は、Ｆａｂ又はｓｃＦｖフォーマットであり、ＨＥＲ２への結合についてペルツズマブと競合する。特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、Ｆａｂフォーマットであり、ＨＥＲ２への結合についてトラスツズマブと競合し、別の抗原結合ポリペプチド構築物は、ｓｃＦｖフォーマットであり、ＨＥＲ２への結合についてペルツズマブと競合する。
【0081】
いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、トラスツズマブと同じＨＥＲ２上のエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、ペルツズマブと同じＨＥＲ２上のエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、トラスツズマブと同じＨＥＲ２上のエピトープに結合し、別の抗原結合ポリペプチド構築物は、ペルツズマブと同じＨＥＲ２上のエピトープに結合する。
【0082】
いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体に含まれる抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、ＨＥＲ２結合を増加させると知られている１つ又は複数の変異を含むトラスツズマブ又はそのバリアントのＣＤＲ配列を含み、別の抗原結合ポリペプチド構築物は、ＨＥＲ２結合を増加させると知られている１つ又は複数の変異を含むペルツズマブ又はそのバリアントのＣＤＲを含む。トラスツズマブ又はペルツズマブによるＨＥＲ２結合を増強すると知られている文献での変異は、下記表３及び４に列挙されているものを含む（ＨＣ＝重鎖、ＬＣ＝軽鎖）。これらの変異の組み合わせも意図される。
【0083】
（表３）ＨＥＲ２への結合を増加させるトラスツズマブ変異
【0084】
（表４）ＨＥＲ２への結合を増加させるペルツズマブ変異
【0085】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、米国特許出願公開第２０１６／０２８９３３５号に記載のバイパラトピック抗体のうちの１つである。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、ｖ５０１９、ｖ５０２０、ｖ７０９１、ｖ１００００、ｖ６９０２、ｖ６９０３又はｖ６７１７のうちの１つである（表５、６及び７、並びに配列一覧表を参照）。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、ｖ５０１９、ｖ５０２０、ｖ７０９１、ｖ１００００、ｖ６９０２、ｖ６９０３又はｖ６７１７のうちの１つのＥＣＤ２結合アームからのＶＨ配列及びＶＬ配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、ｖ５０１９、ｖ５０２０、ｖ７０９１、ｖ１００００、ｖ６９０２、ｖ６９０３又はｖ６７１７のうちの１つのＥＣＤ２結合アームからのＶＨ配列及びＶＬ配列を含み、別の抗原結合ポリペプチド構築物は、ｖ５０１９、ｖ５０２０、ｖ７０９１、ｖ１００００、ｖ６９０２、ｖ６９０３又はｖ６７１７のうちの１つのＥＣＤ４結合アームからのＶＨ配列及びＶＬ配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、ｖ１００００のＥＣＤ２結合アームからのＶＨ配列及びＶＬ配列を含み、別の抗原結合ポリペプチド構築物は、ｖ１００００のＥＣＤ４結合アームからのＶＨ配列及びＶＬ配列を含む。
【0086】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、ｖ５０１９、ｖ５０２０、ｖ７０９１、ｖ１００００、ｖ６９０２、ｖ６９０３又はｖ６７１７のうちの１つのＥＣＤ２結合アームからのＣＤＲ配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、ｖ５０１９、ｖ５０２０、ｖ７０９１、ｖ１００００、ｖ６９０２、ｖ６９０３又はｖ６７１７のうちの１つのＥＣＤ２結合アームからのＣＤＲ配列を含み、別の抗原結合ポリペプチド構築物は、ｖ５０１９、ｖ５０２０、ｖ７０９１、ｖ１００００、ｖ６９０２、ｖ６９０３又はｖ６７１７のうちの１つのＥＣＤ４結合アームからのＣＤＲ配列を含む。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の抗原結合ポリペプチド構築物の１つは、ｖ１００００のＥＣＤ２結合アームからのＣＤＲ配列を含み、別の抗原結合ポリペプチド構築物は、ｖ１００００のＥＣＤ４結合アームからのＣＤＲ配列を含む。
【0087】
（表５）例示的な抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体
＊ＫａｂａｔによるＦａｂ又は可変ドメインのナンバリング（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＵＳ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２，ｐ．６４７，１９９１）
§ＫａｂａｔのＥＵインデックスによるＣＨ３ナンバリング（Ｅｄｅｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．，１９６９，ＰＮＡＳ ＵＳＡ，６３：７８－８５）
§ＫａｂａｔのＥＵインデックスによるＣＨ３ナンバリング（Ｅｄｅｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．，１９６９，ＰＮＡＳ ＵＳＡ，６３：７８－８５）
【0088】
（表６）バリアントｖ５０１９、ｖ５０２０、ｖ７０９１、ｖ１００００、ｖ６９０２、ｖ６９０３及びｖ６７１７のＥＣＤ２結合アームのＣＤＲ配列
【0089】
（表７）バリアントｖ５０１９、ｖ５０２０、ｖ７０９１、ｖ１００００、ｖ６９０２、ｖ６９０３及びｖ６７１７のＥＣＤ４結合アームのＣＤＲ配列
【0090】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、（ａ）配列番号３２、３４及び３３、並びに配列番号２２、２４及び２３に示すＣＤＲ配列を含む、第１の抗原結合ドメインと、（ｂ）配列番号５３、５４及び５５、並びに配列番号５６、５７及び５８に示すＣＤＲ配列を含む、第２の抗原結合ドメインと、を含む。
【0091】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、（ａ）Ｆａｂであり且つ配列番号３２、３４及び３３、並びに配列番号２２、２４及び２３に示すＣＤＲ配列を含む、第１の抗原結合ドメインと、（ｂ）ｓｃＦｖであり且つ配列番号５３、５４及び５５、並びに配列番号５６、５７及び５８に示すＣＤＲ配列を含む、第２の抗原結合ドメインと、を含む。
【0092】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、（ａ）配列番号３２に示すＣＤＲ１配列、配列番号３４に示すＣＤＲ２配列及び配列番号３３に示すＣＤＲ３配列を含むＣＤＲの第１のセット、並びに配列番号２２に示すＣＤＲ１配列、配列番号２４に示すＣＤＲ２配列及び配列番号２３に示すＣＤＲ３配列を含むＣＤＲ配列の第２のセットを含む、第１の抗原結合ドメインと、（ｂ）配列番号５３に示すＣＤＲ１配列、配列番号５４に示すＣＤＲ２配列及び配列番号５５に示すＣＤＲ３配列を含むＣＤＲ配列の第３のセット、並びに配列番号５６に示すＣＤＲ１配列、配列番号５７に示すＣＤＲ２配列及び配列番号５８に示すＣＤＲ３配列を含むＣＤＲ配列の第４のセットを含む、第２の抗原結合ドメインと、を含む。
【0093】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、（ａ）配列番号３２、３４及び３３に示すＣＤＲ配列を含む第１重鎖（Ｈ１）と、（ｂ）配列番号５３、５４、５５、５６、５７及び５８に示すＣＤＲ配列を含む第２重鎖（Ｈ２）ｓｃＦｖと、（ｃ）配列番号２２、２４及び２３に示すＣＤＲ配列を含む軽鎖（Ｌ１）と、を含む。
【0094】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、（ａ）配列番号３２に示すＣＤＲ１配列、配列番号３４に示すＣＤＲ２配列及び配列番号３３に示すＣＤＲ３配列を含むＣＤＲ配列の第１のセットを含む第１重鎖（Ｈ１）と、（ｂ）配列番号５３に示すＣＤＲ１配列、配列番号５４に示すＣＤＲ２配列及び配列番号５５に示すＣＤＲ３配列を含むＣＤＲ配列の第２のセット、並びに配列番号５６に示すＣＤＲ１配列、配列番号５７に示すＣＤＲ２配列及び配列番号５８に示すＣＤＲ３配列を含むＣＤＲ配列の第３のセットを含む第２重鎖（Ｈ２）と、配列番号２２に示すＣＤＲ１配列、配列番号２４に示すＣＤＲ２配列及び配列番号２３に示すＣＤＲ３配列を含むＣＤＲ配列の第４のセットを含む軽鎖（Ｌ１）と、を含む。
【0095】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、（ａ）配列番号３１に示すＶＨ配列、及び配列番号２１に示すＶＬ配列を含む、第１の抗原結合ドメインと、（ｂ）配列番号５２に示すＶＨ配列、及び配列番号５１に示すＶＬ配列を含む、第２の抗原結合ドメインと、を含む。
【0096】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、（ａ）Ｆａｂであり且つ配列番号３１に示すＶＨ配列、及び配列番号２１に示すＶＬ配列を含む、第１の抗原結合ドメインと、（ｂ）ｓｃＦｖであり且つ配列番号５２に示すＶＨ配列、及び配列番号５１に示すＶＬ配列を含む、第２の抗原結合ドメインと、を含む。
【0097】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、配列番号３１に示すＶＨ配列を含む第１重鎖（Ｈ１）と、配列番号５２に示すＶＨ配列及び配列番号５１に示すＶＬ配列を含む第２重鎖（Ｈ２）と、配列番号２１に示すＶＬ配列を含む軽鎖（Ｌ１）と、を含む。
【0098】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、（ａ）配列番号３０に示す配列を含む第１重鎖（Ｈ１）と、配列番号５０に示す配列を含む第２重鎖（Ｈ２）と、配列番号２０に示す配列を含む軽鎖（Ｌ１）と、を含む。
【0099】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、（ａ）配列番号３０に示す配列からなる第１重鎖（Ｈ１）と、配列番号５０に示す配列からなる第２重鎖（Ｈ２）と、配列番号２０に示す配列からなる軽鎖（Ｌ１）と、を含む。
【0100】
二重特異性抗ＨＥＲ２抗原結合構築物の調製
本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号又は国際特許公開ＷＯ２０１５／０７７８９１に記載のように、組換え方法及び組成物を使用して産生され得る。
本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号又は国際特許公開ＷＯ２０１５／０７７８９１に記載のように、組換え方法及び組成物を使用して産生され得る。
【0101】
１つの実施形態において、本明細書に記載の二重特異性抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体をコードする単離された核酸を提供する。このような核酸は、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び／又はそのＶＨを含むアミノ酸配列（例えば、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の軽鎖及び／又は重鎖）をコードし得る。更なる実施形態において、このような核酸を含む１つ又は複数のベクター（例えば、発現ベクター）を提供する。当分野で公知のように、多数のアミノ酸が複数のコドンによってコードされるため、複数の核酸が単一のポリペプチド配列をコードし得る。
【0102】
１つの実施形態において、核酸をマルチシストロン性ベクターで提供する。更なる実施形態において、このような核酸を含む宿主細胞を提供する。１つのこのような実施形態において、宿主細胞は、（１）抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び抗原結合ポリペプチド構築物のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含むベクター、又は（２）抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体のＶＬを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第１ベクター及び抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第２ベクターを含む（例えば、それらで形質転換されている）。１つの実施形態において、宿主細胞は真核細胞、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、又はヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）細胞、又はリンパ系細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。１つの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の作製方法を提供し、ここで該方法は、上記で提供されたように、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の発現に適した条件下で、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養し、そして任意に宿主細胞（又は宿主細胞培地）から抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を回収することを含む。
【0103】
抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の組換え産生について、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体をコードする核酸を、例えば、上述したように、単離し、更なるクローニング及び／又は宿主細胞での発現のために１つ又は複数のベクターに挿入する。このような核酸は、従来の手順を使用して（例えば、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合可能なオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）容易に単離及び配列決定され得る。
【0104】
用語「実質的に精製された」とは、自然発生環境、即ち、ネイティブ細胞、又は組換え的に産生された抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の場合における宿主細胞で発見されるような、タンパク質に通常付随する又はタンパク質と相互作用する成分を実質的に又は本質的に含まない場合がある本明細書に記載の構築物又はそのバリアントのことをいい、これは、特定の実施形態では細胞性物質を実質的に含まず、混入しているタンパク質が（乾燥重量で）約３０％未満、約２５％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２％未満、又は約１％未満である、タンパク質の調製物を含む。抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が宿主細胞で組換え的に産生される場合、特定の実施形態においてタンパク質は、細胞の乾燥重量の約３０％、約２５％、約２０％、約１５％、約１０％、約５％、約４％、約３％、約２％、又は約１％以下である。二重特異性抗ＨＥＲ２抗原結合構築物が宿主細胞で組換え的に産生される場合、特定の実施形態においてタンパク質は、培地中に細胞の乾燥重量として約５ｇ／Ｌ、約４ｇ／Ｌ、約３ｇ／Ｌ、約２ｇ／Ｌ、約１ｇ／Ｌ、約７５０ｍｇ／Ｌ、約５００ｍｇ／Ｌ、約２５０ｍｇ／Ｌ、約１００ｍｇ／Ｌ、約５０ｍｇ／Ｌ、約１０ｍｇ／Ｌ、又は約１ｍｇ／Ｌ以下で存在する。特定の実施形態において、本明細書に記載の方法で産生された「実質的に精製された」二重特異性抗ＨＥＲ２抗原結合構築物は、ＳＤＳ／ＰＡＧＥ分析、ＲＰ－ＨＰＬＣ、ＳＥＣ、及びキャピラリー電気泳動等の適切な方法によって決定される少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％の純度レベル、具体的には、少なくとも約７５％、８０％、８５％の純度レベル、より具体的には、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９％以上の純度レベルを有する。
【0105】
抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体をコードするベクターのクローニング又は発現に好適な宿主細胞は、本明細書に記載の原核細胞又は真核細胞を含む。
【0106】
「組換え宿主細胞」又は「宿主細胞」とは、挿入に使用される方法、例えば、直接取り込み、形質導入、ｆ－交配、又は当分野で組換え宿主細胞を作製するための他の公知の方法に関わらず、外来性ポリヌクレオチドを含む細胞を指す。外来性ポリヌクレオチドは、非組み込みベクター、例えば、プラスミドとして維持されてもよく、あるいは、宿主ゲノムに組み込まれてもよい。
【0107】
本明細書で使用されるように、用語「真核生物（ｅｕｋａｒｙｏｔｅ）」とは、動物（哺乳類、昆虫、爬虫類、鳥類等を含むがこれらに限定されない）、繊毛虫類、植物（単子葉植物、双子葉植物、藻類等を含むがこれらに限定されない）、真菌、酵母菌、鞭毛虫類、微胞子虫類、原生生物等、系統発生ドメイン真核生物に属する生物を指す。
【0108】
本明細書で使用されるように、用語「原核生物（ｐｒｏｋａｒｙｏｔｅ）」とは、原核生物（ｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃ ｏｒｇａｎｉｓｍｓ）を指す。例えば、非真核生物は、真正細菌（大腸菌、サーマス・サーモフィラス（Ｔｈｅｒｍｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、バチルス・ステアロサーモフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、シュードモナス・フルオレッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、シュードモナス・プチダ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ）等を含むがこれらに限定されない）の系統発生ドメイン、又は古細菌（メタノコッカス・ジャナスキー（Ｍｅｔｈａｎｏｃｏｃｃｕｓ ｊａｎｎａｓｃｈｉｉ）、メタノバクテリウム・サーモオートトロフィカム（Ｍｅｔｈａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｈｅｒｍｏａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃｕｍ）、ハロフェラックス・ボルカニ（Ｈａｌｏｆｅｒａｘ ｖｏｌｃａｎｉｉ）及びハロバクテリウム属の種ＮＲＣ－１等のハロバクテリウム、アーケオグロブス・フルギダス（Ａｒｃｈａｅｏｇｌｏｂｕｓ ｆｕｌｇｉｄｕｓ）、パイロコッカス・フリオサス（Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｕｒｉｏｓｕｓ）、パイロコッカス・ホリコシイ（Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ ｈｏｒｉｋｏｓｈｉｉ）、アエロピュルム・ペルニクス（Ａｅｕｒｏｐｙｒｕｍ ｐｅｒｎｉｘ）等を含むがこれらに限定されない）の系統発生ドメインに属してもよい。
【0109】
例えば、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、特にグリコシル化及びＦｃエフェクター機能が必要とされない場合に、細菌内で産生され得る。抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体断片及びポリペプチドの細菌における発現については、例えば、米国特許第５，６４８，２３７号、第５，７８９，１９９号、及び第５，８４０，５２３号を参照されたい（大腸菌における抗体断片の発現を説明するＣｈａｒｌｔｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．，２００３），ｐｐ．２４５－２５４も参照）。発現後、二重特異性抗ＨＥＲ２抗原結合構築物は、可溶性画分中で細菌細胞ペーストから単離されてもよく、更に精製することができる。
【0110】
原核生物に加えて、糸状菌又は酵母等のような真核微生物は、二重特異性抗ＨＥＲ２抗原結合構築物をコードするベクターに好適なクローニング又は発現宿主であり、グリコシル化経路が「ヒト化」されていることにより部分又は完全ヒトグリコシル化パターンを有する二重特異性抗ＨＥＲ２抗原結合構築物の産生をもたらす真菌及び酵母株を含む。Ｇｅｒｎｇｒｏｓｓ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２２：１４０９－１４１４（２００４）、及びＬｉ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２４：２１０－２１５（２００６）を参照されたい。
【0111】
グリコシル化された抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の発現に好適な宿主細胞は、多細胞生物（無脊椎動物及び脊椎動物）にも由来する。無脊椎動物細胞の例は、植物及び昆虫細胞を含む。昆虫細胞と併せて特にスポドプテラ・フルギペルダ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）細胞のトランスフェクションに使用され得る、多数のバキュロウイルス株が同定されている。
【0112】
植物細胞培養物も、宿主として利用することができる。例えば、米国特許第５，９５９，１７７号、第６，０４０，４９８号、第６，４２０，５４８号、第７，１２５，９７８号、及び第６，４１７，４２９号を参照されたい（トランスジェニック植物において抗原結合構築物を産生するためのＰＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ（商標）技術を記載している）。
【0113】
脊椎動物細胞も、宿主として使用され得る。例えば、懸濁液中で成長するように適合された哺乳類細胞株が有用であり得る。有用な哺乳動物宿主細胞株の他の例は、ＳＶ４０により形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ－７）、ヒト胎児腎臓株（例えばＧｒａｈａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７）に記載されているような２９３又は２９３細胞）、ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）、マウスセルトリ細胞（例えばＭａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３－２５１（１９８０）に記載されているようなＴＭ４細胞）、サル腎臓細胞（ＣＶ１）、アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ－７６）、ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ）、イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ）、バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ ３Ａ）、ヒト肺細胞（Ｗ１３８）、ヒト肝臓細胞（Ｈｅｐ Ｇ２）、マウス乳房腫瘍（ＭＭＴ ０６０５６２）、例えばＭａｔｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４－６８（１９８２）に記載されているようなＴＲＩ細胞、ＭＲＣ５細胞、及びＦＳ４細胞である。他の有用な哺乳動物宿主細胞株は、ＤＨＦＲ－ＣＨＯ細胞（Ｕｒｌａｕｂ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：４２１６（１９８０））を含むチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、及びＹ０、ＮＳ０及びＳｐ２／０等のような骨髄腫細胞株を含む。抗原結合構築物の産生に好適な特定の哺乳動物宿主細胞株のレビューについては、例えば、Ｙａｚａｋｉ ａｎｄ Ｗｕ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．），ｐｐ．２５５－２６８（２００３）を参照されたい。
【0114】
１つの実施形態において、本明細書に記載の－ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、少なくとも１つの安定した哺乳動物細胞に、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体をコードする核酸を所定の比率でトランスフェクトし、そして少なくと１つの哺乳動物細胞において核酸を発現させることを含む方法によって、安定した哺乳動物細胞内で産生される。いくつかの実施形態において、核酸の所定の比率は、一過性トランスフェクション実験で決定されて、発現産物中の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の最も高いパーセンテージをもたらす入力核酸の相対比率を決定する。
【0115】
いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、安定した哺乳動物細胞で産生され、ここで少なくとも１つの該安定した哺乳動物細胞の発現産物は、単量体重鎖又は軽鎖ポリペプチド、又は他の抗体に比べて、より大きなパーセンテージの所望のグリコシル化された抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を含む。いくつかの実施形態において、グリコシル化された抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の同定は、液体クロマトグラフィー及び質量分析法の一方又は両方によって行われる。
【0116】
必要に応じて、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は発現後に精製又は単離することができる。タンパク質は当業者に公知の様々な方法で単離又は精製されてもよい。標準な精製方法は、イオン交換、疎水性相互作用、アフィニティー、サイジング又はゲル濾過、及び逆相を含むクロマトグラフ技法を含み、ＦＰＬＣ及びＨＰＬＣ等のシステムを使用して大気圧又は高圧で実行される。精製方法は、電気泳動、免疫学的、沈殿、透析、及びクロマトフォーカシング技法も含む。タンパク質濃縮と組み合わせた限外濾過及びダイアフィルトレーション技法も有用である。当分野で周知のように、様々なタンパク質はＦｃ及び抗体に結合し、これらのタンパク質は本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の精製に使用することができる。例えば、細菌タンパク質Ａ及びＧはＦｃ領域に結合する。同様に、細菌タンパク質Ｌは一部の抗体のＦａｂ領域に結合する。多くの場合、精製は特定の融合パートナーによって可能になる。例えば、抗体は、ＧＳＴ融合が採用される場合にグルタチオン樹脂、Ｈｉｓタグが採用される場合にＮｉ＋２アフィニティークロマトグラフィー、又はｆｌａｇタグが使用される場合に固定化抗ｆｌａｇ抗体を使用して精製され得る。好適な精製技法の一般的なガイダンスについては、例えば、参照によって本明細書に組み込まれるＰｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，３ｒｄ Ｅｄ．，Ｓｃｏｐｅｓ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，ＮＹ，１９９４を参照されたい。必要な精製の程度は、二重特異性抗ＨＥＲ２抗原結合構築物の使用に応じて異なる。場合によっては、精製は必要でない。
【0117】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、Ｑセファロース、ＤＥＡＥセファロース、ポロスＨＱ、ポロスＤＥＡＦ、トヨパールＱ、トヨパールＱＡＥ、トヨパールＤＥＡＥ、リソース／ソースＱ及びＤＥＡＥ、フラクトゲルＱ及びＤＥＡＥカラムでのクロマトグラフィーに限定されない陰イオン交換クロマトグラフィーを使用して精製される。
【0118】
特定の実施形態において、本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、ＳＰセファロース、ＣＭセファロース、ポロスＨＳ、ポロスＣＭ、トヨパールＳＰ、トヨパールＣＭ、リソース／ソースＳ及びＣＭ、フラクトゲルＳ及びＣＭカラム、並びにそれらの等価物及び同等物を含むがそれらに限定されない陽イオン交換クロマトグラフィーを使用して精製される。
【0119】
加えて、本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体構築物は、当分野で公知の技法を使用して化学的に合成することができる（例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，１９８３，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ＆ Ｃｏ．，Ｎ．Ｙ及びＨｕｎｋａｐｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３１０：１０５－１１１（１９８４）を参照）。例えば、ポリペプチドの断片に対応するポリペプチドは、ペプチド合成機の使用により合成することができる。更に、必要に応じて、非古典的アミノ酸又は化学的アミノ酸類似体はポリペプチド配列への置換又は付加として導入することができる。非古典的アミノ酸は一般に、一般的なアミノ酸のＤ異性体、２，４ジアミノ酪酸、α－アミノイソ酪酸、４アミノ酪酸、Ａｂｕ、２－アミノ酪酸、γ－Ａｂｕ、ε－Ａｈｘ、６アミノヘキサン酸、Ａｉｂ、２－アミノイソ酪酸、３－アミノプロピオン酸、オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、ヒドロキシプロリン、サルコシン、シトルリン、ホモシトルリン、システイン酸、ｔ－ブチルグリシン、ｔ－ブチルアラニン、フェニルグリシン、シクロヘキシルアラニン、β－アラニン、フルオロアミノ酸、及びβ－メチルアミノ酸、Ｃα－メチルアミノ酸、Ｎα－メチルアミノ酸等のようなデザイナーアミノ酸、並びにアミノ酸類似体を含むが、それらに限定されない。更に、アミノ酸はＤ（右旋性）又はＬ（左旋性）であってもよい。
【0120】
翻訳後修飾
特定の実施形態において、本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、翻訳中又は翻訳後に差次的に修飾される。
特定の実施形態において、本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、翻訳中又は翻訳後に差次的に修飾される。
【0121】
本明細書で使用されるように、用語「修飾」とは、ポリペプチドの長さ、アミノ酸配列の長さ、ポリペプチドの化学構造に対する変更、ポリペプチドの翻訳時修飾、又は翻訳後修飾等、所与のポリペプチドに対してなされる任意の変更を指す。「（修飾された）」という形式の用語は、考察されているポリペプチドが任意に修飾されること、即ち、二重特異性抗ＨＥＲ２抗原結合構築物のポリペプチドが修飾されてもなくてもよいことを意味する。
【0122】
用語「翻訳後修飾」とは、天然又は非天然アミノ酸がポリペプチド鎖に組み込まれた後にこうしたアミノ酸に加えられる任意の修飾を指す。該用語は、単なる例として、翻訳時インビボ修飾、翻訳時インビトロ修飾（無細胞翻訳系において等）、翻訳後インビボ修飾、及び翻訳後インビトロ修飾を包含する。
【0123】
いくつかの実施形態において、修飾は、グリコシル化、アセチル化、リン酸化、アミド化、既知の保護／遮断基による誘導体化、タンパク質分解による切断、及び抗体分子又は抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体又は他の細胞リガンドへの連結のうちの少なくとも１つである。いくつかの実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、臭化シアン、トリプシン、キモトリプシン、パパイン、Ｖ８プロテアーゼ、ＮａＢＨ４による特異的化学的切断、アセチル化、ホルミル化、酸化、還元、及びツニカマイシンの存在下での代謝合成に限定されない既知の技法によって化学的に修飾される。
【0124】
抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の追加の翻訳後修飾は、例えば、Ｎ結合型又はＯ結合型炭水化物鎖、Ｎ末端又はＣ末端のプロセシング、アミノ酸骨格への化学部分の付着、Ｎ結合型又はＯ結合型炭水化物鎖の化学修飾、及び原核宿主細胞発現の結果としてのＮ末端メチオニン残基の付加又は欠失を含む。本明細書に記載の二重特異性抗ＨＥＲ２抗原結合構築物は、タンパク質の検出及び単離を可能にするために、酵素標識、蛍光標識、同位体又はアフィニティー標識等のような検出可能な標識で修飾される。特定の実施形態において、好適な酵素標識の例は、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β－ガラクトシダーゼ、又はアセチルコリンエステラーゼを含み、好適な補欠分子族複合体の例は、ストレプトアビジン－ビオチン及びアビジン／ビオチンを含み、好適な蛍光物質の例は、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、塩化ダンシル又はフィコエリトリンを含み、発光物質の例は、ルミノールを含み、生物発光物質の例は、ルシフェラーゼ、ルシフェリン、及びエクオリンを含み、好適な放射性物質の例は、ヨウ素、炭素、硫黄、トリチウム、インジウム、テクネチウム、タリウム、ガリウム、パラジウム、モリブデン、キセノン、フッ素を含む。
【0125】
特定の実施形態において、本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、放射性金属イオンと関連する大環状キレート剤が付着されている。
【0126】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、翻訳後プロセシング等のような天然プロセス、又は当分野で周知の化学的修飾技法のいずれかによって修飾される。特定の実施形態において、同じタイプの修飾は、所与のポリペプチド中のいくつかの部位に同じ程度又は様々な程度で存在し得る。特定の実施形態において、本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体からのポリペプチドは、例えば、ユビキチン化の結果として分枝しており、いくつかの実施形態では、分枝を伴うか又は伴わない環式である。環式、分枝、及び分枝環式ポリペプチドは、翻訳後天然プロセスからの結果であるか、又は合成方法によって作製される。修飾は、アセチル化、アシル化、ＡＤＰ－リボシル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチド又はヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質又は脂質誘導体の共有結合、ホスホチジルイノシトールの共有結合、架橋、環化、ジスルフィド結合形成、脱メチル化、共有架橋の形成、システインの形成、ピログルタミン酸の形成、ホルミル化、γ－カルボキシル化、グリコシル化、ＧＰＩアンカー形成、ヒドロキシル化、ヨウ素化、メチル化、ミリストイル化、酸化、ペグ化、タンパク質分解プロセシング、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫化、タンパク質への転移ＲＮＡ媒介アミノ酸付加、例えばアルギニル化、及びユビキチン化を含む（例えば、ＰＲＯＴＥＩＮＳ－－ＳＴＲＵＣＴＵＲＥ ＡＮＤ ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳ，２ｎｄ Ｅｄ．，Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９９３）、ＰＯＳＴ－ＴＲＡＮＳＬＡＴＩＯＮＡＬ ＣＯＶＡＬＥＮＴ ＭＯＤＩＦＩＣＡＴＩＯＮ ＯＦ ＰＲＯＴＥＩＮＳ，Ｂ．Ｃ．Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｇｓ．１－１２（１９８３）、Ｓｅｉｆｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．１８２：６２６－６４６（１９９０）、Ｒａｔｔａｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．６６３：４８－６２（１９９２）を参照）。
【0127】
医薬組成物
治療的使用のために、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、該抗体及び薬学的に許容可能な担体又は希釈剤を含む組成物の形態で提供され得る。組成物は、周知の容易に入手できる成分を使用して、既知の手順によって調製することができる。
治療的使用のために、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、該抗体及び薬学的に許容可能な担体又は希釈剤を含む組成物の形態で提供され得る。組成物は、周知の容易に入手できる成分を使用して、既知の手順によって調製することができる。
【0128】
医薬組成物は、例えば、経口（例えば、頬側又は舌下を含む）、局所、非経口、直腸又は膣経路によるか、又は吸入もしくはスプレーによる対象への投与のために製剤化され得る。本明細書で使用される用語「非経口」は、皮下注射、及び皮内、関節内、静脈内、筋肉内、血管内、胸骨内、髄腔内の注射又は注入を含む。医薬組成物は、典型的には、例えば、シロップ、エリキシル、錠剤、トローチ、ロゼンジ、ハード又はソフトカプセル、ピル、坐剤、油性又は水性懸濁液、分散性粉末又は顆粒、エマルジョン、注射剤又は溶液として、選択された経路による対象への投与に好適である形式で製剤化される。医薬組成物は、単位投与製剤として提供されてもよい。
【0129】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を含む医薬組成物は、例えば凍結乾燥製剤又は水溶液として、注射可能な形態で、非経口投与用に製剤化される。
【0130】
薬学的に許容される担体は、一般に、用いられる用量及び濃度で、レシピエントにとって非毒性である。こうした担体の例は、リン酸、クエン酸、及び他の有機酸のような緩衝液；アスコルビン酸及びメチオニンのような抗酸化剤；塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、ブチルアルコール、ベンジルアルコール、アルキルパラベン（メチル又はプロピルパラベン等）、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、３－ペンタノール及びｍ－クレゾールのような保存剤；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；血清アルブミン又はゼラチンのようなタンパク質；ポリビニルピロリドンのような親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、又はリジンのようなアミノ酸；グルコース、マンノース、又はデキストリンのような単糖類、二糖類、及び他の炭水化物；ＥＤＴＡのようなキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトールのような糖類；ナトリウムのような、塩を形成する対イオン；亜鉛タンパク質複合体のような金属複合体；並びに、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のような非イオン性界面活性剤を含むが、それらに限定されない。
【0131】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を含む組成物は、無菌の注射可能な水性又は油性の溶液又は懸濁液の形態であってもよい。こうした懸濁液は、当分野で公知である好適な分散剤又は湿潤剤及び／又は懸濁剤を使用して製剤化してもよい。無菌の注射可能な溶液又は懸濁液は、非毒性の非経口的に許容される希釈剤又は担体中に抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を含んでもよい。使用できる許容可能な希釈剤及び担体は、例えば、１，３－ブタンジオール、水、リンガー溶液、等張塩化ナトリウム溶液又は右旋糖を含む。加えて、無菌の固定油を担体として使用してもよい。この目的のために、合成モノ又はジグリセリド等、様々な無刺激性固定油が利用されてもよい。また、オレイン酸等の脂肪酸が注射剤の調製に有用であることが分かっている。局所麻酔薬、防腐剤及び／又は緩衝剤等のアジュバントもまた、注射可能な溶液又は懸濁液に含まれ得る。
【0132】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を含む組成物は、ヒトへの静脈内投与のために製剤化され得る。典型的には、静脈内投与用の化合物は、滅菌等張水溶液中の溶液であり、例えば、塩化ナトリウム又は右旋糖を含有する。必要な場合、組成物は可溶化剤及び／又は注射部位での痛みを和らげるためのリグノカイン等の局所麻酔剤を含んでもよい。概して、成分は、単位剤形で、例えば、活性剤の量を示すアンプルもしくはサシェ等の気密封止容器内の凍結乾燥粉末又は水不含濃縮物として、別々に供給されるか、又は一緒に混合されて供給される。組成物は、注入によって投与される場合、例えば、薬学的グレードの無菌の水、生理食塩水又は右旋糖を含む注入ボトルで分注され得る。組成物を注射によって投与する場合、投与の前に成分を混合することができるように、アンプル入りの注射用滅菌水又は生理食塩水を提供してもよい。
【0133】
他の医薬組成物及び医薬組成物を調製する方法は、当分野で公知であり、例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ」（公式には「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」）；Ｇｅｎｎａｒｏ，Ａ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ（２０００）に記載されている。
【0134】
使用方法
本開示の特定の態様は、本明細書に記載の有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を投与することで対象のＨＥＲ２発現癌を治療する方法に関する。
本開示の特定の態様は、本明細書に記載の有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を投与することで対象のＨＥＲ２発現癌を治療する方法に関する。
【0135】
ＨＥＲ２発現癌は典型的に固形腫瘍である。ＨＥＲ２発現固形腫瘍の例は、乳癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮頸癌、肺癌、胃癌、食道癌、結腸直腸癌、肛門癌、尿路上皮癌、膵臓癌、唾液腺癌及び脳癌を含むが、それらに限定されない。ＨＥＲ２発現乳癌は、エストロゲン受容体陰性（ＥＲ－）及び／又はプロゲステロン受容体陰性（ＰＲ－）乳癌並びに三種陰性（ＥＲ－、ＰＲ－、低ＨＥＲ２）乳癌を含む。ＨＥＲ２発現肺癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び小細胞肺癌を含む。
【0136】
特定の実施形態において、本明細書に記載の方法はＨＥＲ２発現固形腫瘍の治療に用いられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の方法は、ＨＥＲ２発現乳癌、胃食道腺癌（ＧＥＡ）、食道癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮頸癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肛門癌又は結腸直腸癌（ＣＲＣ）の治療に用いられる。
【0137】
特定の実施形態において、本明細書に記載の方法は、転移性又は局所進行性ＨＥＲ２発現癌の治療に用いられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の方法は、脳に転移したＨＥＲ２発現癌の治療に用いられる。特定の実施形態において、本明細書に記載の方法は、ＨＥＲ２発現癌の第１選択治療に用いられる。特定の実施形態において、本明細書に記載の方法は、ＨＥＲ２発現癌の第２選択治療に用いられる。
【0138】
当分野で公知のように、ＨＥＲ２発現癌は、それらが発現するＨＥＲ２のレベルによって（即ち「ＨＥＲ２状態」によって）特徴付けられ得る。ＨＥＲ２状態は、例えば、免疫組織化学（ＩＨＣ）、蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）及び発色ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＣＩＳＨ）又はＤＮＡｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＩＳＨ、例えばＤＮＡｓｃｏｐｅ（商標））によって評価できる。患者のＨＥＲ２状態を評価するためには、多数の市販キットが入手可能である。ＩＨＣを使用するＨＥＲ２検出に利用できるＦＤＡ承認の市販キットの例は、ＨｅｒｃｅｐＴｅｓｔ（商標）（Ｄａｋｏ Ｄｅｎｍａｒｋ Ａ／Ｓ）、ＰＡＴＨＷＡＹ（Ｖｅｎｔａｎａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．）、ＩｎＳｉｔ（商標）ＨＥＲ２／ＮＥＵキット（Ｂｉｏｇｅｎｅｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）及びＢｏｎｄ Ｏｒａｃｌｅ ＨＥＲ２ ＩＨＣ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｌｅｉｃａ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を含む。
【0139】
ＩＨＣでは、細胞膜上でのＨＥＲ２タンパク質発現を同定する。例えば、腫瘍生検からのパラフィン包埋組織切片は、ＩＨＣアッセイに供され、以下のＨＥＲ２染色強度基準に一致し得る。
スコア０：染色が観察されないか、又は腫瘍細胞の１０％未満（典型的には、＜２０，０００受容体／細胞）において膜染色が観察される。
スコア１＋：僅かな／ほとんど認識不可能な膜染色が、腫瘍細胞の１０％超（典型的には、約１００，０００受容体／細胞）において検出される。細胞は、それらの膜の一部分が染色されるのみである。
スコア２＋：弱～中度の完全膜染色が、腫瘍細胞の１０％超（典型的には、約５００，０００受容体／細胞）において観察される。
スコア３＋：中～強度の完全膜染色が、腫瘍細胞の１０％超（典型的には、約２，０００，０００受容体／細胞）において観察される。
スコア０：染色が観察されないか、又は腫瘍細胞の１０％未満（典型的には、＜２０，０００受容体／細胞）において膜染色が観察される。
スコア１＋：僅かな／ほとんど認識不可能な膜染色が、腫瘍細胞の１０％超（典型的には、約１００，０００受容体／細胞）において検出される。細胞は、それらの膜の一部分が染色されるのみである。
スコア２＋：弱～中度の完全膜染色が、腫瘍細胞の１０％超（典型的には、約５００，０００受容体／細胞）において観察される。
スコア３＋：中～強度の完全膜染色が、腫瘍細胞の１０％超（典型的には、約２，０００，０００受容体／細胞）において観察される。
【0140】
本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、ＨＥＲ２を様々なレベルで発現する癌の治療に有用であり得る。特定の実施形態において、本開示によるＨＥＲ２発現癌の治療方法は、本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、ＩＨＣ ３＋と定義された高レベルのＨＥＲ２（ＨＥＲ２高）を発現する癌を有する対象に投与することを含む。いくつかの実施形態において、本開示によるＨＥＲ２発現癌の治療方法は、本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、ＩＨＣ ２＋、ＩＨＣ ２＋／３＋又はＩＨＣ ３＋と定義された高レベルのＨＥＲ２（高ＨＥＲ２）を発現する癌を有する対象に投与することを含む。いくつかの実施形態において、本開示によるＨＥＲ２発現癌の治療方法は、本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、ＩＨＣ １＋又はＩＨＣ １＋／２＋と定義された低レベルのＨＥＲ２（低ＨＥＲ２）を発現する癌を有する対象に投与することを含む。特定の実施形態において、癌は、ＦＩＳＨアッセイ又はＩＳＨアッセイを使用して検出可能な増幅されたＨＥＲ２遺伝子を有する。特定の実施形態において、癌は、ＦＩＳＨアッセイ又はＩＳＨアッセイによってＨＥＲ２遺伝子増幅されていないと検出され、ＩＨＣによってＨＥＲ２ ３＋と決定される。特定の実施形態において、癌は、ＩＨＣによってＨＥＲ２ ２＋と決定され、ＦＩＳＨアッセイによってＨＥＲ２遺伝子増幅されたと判定される。特定の実施形態において、癌は、ＩＨＣによってＨＥＲ２ ２／３＋と決定され、ＦＩＳＨアッセイ又はＩＳＨアッセイによって、ＨＥＲ２遺伝子増幅されたと判定される。
【0141】
特定の実施形態において、本明細書に記載の方法は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の第１選択治療に用いられる。特定の実施形態において、本明細書に記載の方法は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の第２選択治療に用いられる。
【0142】
特定の実施形態において、本明細書に記載の方法は、他の標準治療法に耐性があるか又は耐性を有するようになるＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療に用いられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の方法は、トラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標））、ペルツズマブ（Ｐｅｒｊｅｔａ（登録商標））、Ｔ－ＤＭ１（Ｋａｄｃｙｌａ（登録商標）又はトラスツズマブエムタンシン）、Ｅｎｈｅｒｔｕ（商標）（ｆａｍ－トラスツズマブデルクステカン－ｎｘｋｉ）、又はタキサン（例えばパクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセル）等の１つ又は複数の現在の治療法に応答しないＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療に用いられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の方法は、トラスツズマブに耐性であるＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療に用いられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の方法は、以前の抗ＨＥＲ２療法で進行した転移性癌を有する対象の治療に用いられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の方法は、トラスツズマブ、ペルツズマブ、Ｔ－ＤＭ１及びＥｎｈｅｒｔｕ（商標）（ｆａｍ－トラスツズマブデルクステカン－ｎｘｋｉ）のうちの１つ又は複数による治療を以前に受けた対象の治療に用いられる。
【0143】
特定の態様において、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法は、対象に有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を投与することを含み、ここで前記有効量は、固定された時間間隔で前記対象に固定用量で投与される。
【0144】
本方法の特定の実施形態において、固定用量は、体重が用量カットオフ体重未満の対象に対して低い固定用量が選択され、体重が用量カットオフ体重超の対象に対してより高い固定用量が選択される。
【0145】
本方法の特定の実施形態において、低い固定用量は約６００ｍｇであり、高い固定用量は約８００ｍｇであり、用量カットオフ体重は７０ｋｇであり、固定された時間間隔は１週間ごと（ＱＷ）である。
【0146】
本方法の特定の実施形態において、低い固定用量は約８００ｍｇであり、高い固定用量は約１２００ｍｇであり、用量カットオフ体重は７０ｋｇであり、固定された時間間隔は１週間ごと（ＱＷ）である。
【0147】
本方法の特定の実施形態において、低い固定用量は約８００ｍｇであり、高い固定用量は約１０００ｍｇであり、用量カットオフ体重は７０ｋｇであり、固定された時間間隔は１週間ごと（ＱＷ）である。
【0148】
本方法の特定の実施形態において、低い固定用量は約１８００ｍｇであり、高い固定用量は約２２００ｍｇであり、用量カットオフ体重は７０ｋｇであり、固定された時間間隔は２週間ごと（Ｑ２Ｗ）である。
【0149】
本方法の特定の実施形態において、低い固定用量は約１２００ｍｇであり、高い固定用量は約１６００ｍｇであり、用量カットオフ体重は７０ｋｇであり、固定された時間間隔は２週間ごと（Ｑ２Ｗ）である。
【0150】
本方法の特定の実施形態において、低い固定用量は約１２００ｍｇであり、高い固定用量は約１８００ｍｇであり、用量カットオフ体重は７０ｋｇであり、固定された時間間隔は３週間ごと（Ｑ３Ｗ）である。
【0151】
本方法の特定の実施形態において、低い固定用量は約１８００ｍｇであり、高い固定用量は約２４００ｍｇであり、用量カットオフ体重は７０ｋｇであり、固定された時間間隔は３週間ごと（Ｑ３Ｗ）である。
【0152】
本方法の特定の実施形態において、対象に投与される抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、（ａ）配列番号３２、３４及び３３、並びに配列番号２２、２４及び２３に示すＣＤＲ配列を含む、第１の抗原結合ドメインと、（ｂ）配列番号５３、５４及び５５、並びに配列番号５６、５７及び５８に示すＣＤＲ配列を含む、第２の抗原結合ドメインと、を含む。
【0153】
本方法のいくつかの実施形態において、対象に投与される抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の第１の抗原結合ドメインはＦａｂであり、対象に投与される抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体の第２の抗原結合ドメインはｓｃＦｖである。
【0154】
本方法の特定の実施形態において、対象に投与される抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、配列番号３０に示す配列を含む重鎖Ｈ１と、配列番号５０に示す配列を含む重鎖Ｈ２と、配列番号２０に示す配列を含む軽鎖Ｌ１と、を含む。
【0155】
本方法の特定の実施形態において、ＨＥＲ２発現癌は固形腫瘍である。
【0156】
本方法の特定の実施形態において、ＨＥＲ２発現癌は、乳癌、胆道癌、胃食道腺癌（ＧＥＡ）、食道癌、胃食道癌（ＧＥＪ）、胃癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮頸癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肛門癌又は結腸直腸癌（ＣＲＣ）である。
【0157】
本方法の特定の実施形態において、ＨＥＲ２発現癌は胃食道腺癌（ＧＥＡ）である。
【0158】
本方法の特定の実施形態において、対象は、トラスツズマブ、ペルツズマブ、Ｔ－ＤＭ１又はＥｎｈｅｒｔｕ（商標）（ｆａｍ－トラスツズマブデルクステカン－ｎｘｋｉ）のうちの１つ又は複数による事前治療を受けている。
【0159】
本方法の特定の実施形態において、対象は、抗ＨＥＲ２標的療法による事前治療を受けていない。
【0160】
本方法の特定の実施形態において、対象は、治療されるＨＥＲ２発現癌に対する化学療法剤による事前の全身治療を受けていない。
【0161】
本方法の特定の実施形態において、ＨＥＲ２発現癌は転移性である。
【0162】
本方法の特定の実施形態において、ＨＥＲ２発現癌は局所進行性である。
【0163】
本方法の特定の実施形態において、ＨＥＲ２発現癌は、免疫組織化学（ＩＨＣ）による測定では、ＨＥＲ２ ３＋、ＨＥＲ２ ２＋／３＋又はＨＥＲ２ ２＋又はＨＥＲ２ １＋であり、蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）による測定では、遺伝子増幅されている。
【0164】
本方法の特定の実施形態において、ＨＥＲ２発現癌は、免疫組織化学（ＩＨＣ）による測定では、ＨＥＲ２ ３＋、ＨＥＲ２ ２＋／３＋又はＨＥＲ２ ２＋又はＨＥＲ２ １＋であり、蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）による測定では、ＨＥＲ２遺伝子増幅されていない。
【0165】
本方法の特定の実施形態において、ＨＥＲ２発現癌は、ＩＨＣによる測定では、ＨＥＲ２ ３＋、又はＨＥＲ２ ２＋であり、ＦＩＳＨによる測定では、遺伝子増幅されている。
【0166】
本開示の別の態様は、ＨＥＲ２発現癌の治療における使用のための抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体であり、ここで前記抗体の有効用量は、体重が用量カットオフ体重未満の対象に対する低い固定用量、及び体重が用量カットオフ体重超の対象に対する高い固定用量を含む複数段階固定用量である。特定の実施形態において、低い固定用量は約８００ｍｇであり、高い固定用量は約１２００ｍｇであり、用量カットオフ体重は７０ｋｇであり、固定された時間間隔は１週間ごと（ＱＷ）である。いくつかの実施形態において、低い固定用量は約１２００ｍｇであり、高い固定用量は約１６００ｍｇであり、用量カットオフ体重は７０ｋｇであり、固定された時間間隔は２週間ごと（Ｑ２Ｗ）である。いくつかの実施形態において、低い固定用量は約１８００ｍｇであり、高い固定用量は約２４００ｍｇであり、用量カットオフ体重は７０ｋｇであり、固定された時間間隔は３週間ごと（Ｑ３Ｗ）である。いくつかの実施形態において、前記抗体はｖ１００００である。
【0167】
別の態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法に関し、該方法は前記対象に有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を投与することを含み、前記有効量は体重７０ｋｇ未満の対象に対する１８００ｍｇの固定用量、又は体重７０ｋｇ以上の対象に対する２４００ｍｇの固定用量を含み、ここで前記用量は３週間ごと（Ｑ３Ｗ）に投与され、前記対象は乳癌、胃食道腺癌（ＧＥＡ）、食道癌、胃癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮頸癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肛門癌又は結腸直腸癌（ＣＲＣ）と診断されている。
【0168】
別の態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法に関し、該方法は、前記対象に有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を投与することを含み、前記有効量は、体重７０ｋｇ未満の対象に対する１２００ｍｇの固定用量、又は体重７０ｋｇ以上の対象に対する１６００ｍｇの固定用量を含み、ここで前記用量は２週間ごと（Ｑ２Ｗ）に投与される。
【0169】
別の態様において、本開示は、ＨＥＲ２発現癌を有する対象の治療方法に関し、該方法は、前記対象に有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を投与することを含み、前記有効量は、体重７０ｋｇ未満の対象に対する１２００ｍｇの固定用量、又は体重７０ｋｇ以上の対象に対する１６００ｍｇの固定用量を含み、ここで前記用量は２週間ごと（Ｑ２Ｗ）に投与され、前記対象は胆道癌と診断されている。
【0170】
本明細書に記載の投与レジメンは、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を投与するための推奨用量であるが、対象が治療により有害な副作用を経験する場合、投与される用量が低減されてもよいことが理解される。同様に、投与間の固定間隔は、便宜上、僅かに変更されてもよい。
【0171】
併用療法
様々な化学療法レジメンは、２段階投与レジメンの文脈において抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体と併用され得る。特定の実施形態において、化学療法レジメンは、使用される化学療法剤の承認用量及び投与スケジュールに従って施される。いくつかの実施形態において、化学療法剤の用量は、忍容性の理由から、治療の最初のサイクル後に減量され得る。
様々な化学療法レジメンは、２段階投与レジメンの文脈において抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体と併用され得る。特定の実施形態において、化学療法レジメンは、使用される化学療法剤の承認用量及び投与スケジュールに従って施される。いくつかの実施形態において、化学療法剤の用量は、忍容性の理由から、治療の最初のサイクル後に減量され得る。
【0172】
特定の実施形態において、化学療法レジメンは、パクリタキセル、カペシタビン、ｍＦＯＬＦＯＸ６（フルオロウラシル＋ロイコボリン＋オキサリプラチン）、フルベストラント＋パルボシクリブ、カペシタビン＋オキサリプラチン（ＣＡＰＯＸであって、ＸＥＬＯＸとも呼ばれる）、ビノレルビン、及びシスプラチン＋フルオロウラシル（ＦＰ）のうちの１つ又は複数を含む。
【0173】
ＣＡＰＯＸ（ＸＥＬＯＸとしても公知である）は、カペシタビン及びオキサリプラチンからなる多剤化学療法レジメンである。ＸＥＬＯＸは、結腸直腸癌及び結腸癌並びに進行胆道系腺癌を含めて様々なＧＥＡの治療に有効な細胞毒性レジメンとして確立されている。ＣＡＰＯＸはアジュバント療法としても使用される。
【0174】
特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、以下の用量及びスケジュールでＣＡＰＯＸと組み合わせて投与される。
（ａ）各２１日サイクルの１日目に、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、１８００ｍｇの用量（＜７０ｋｇの対象）又は２４００ｍｇの用量（≧７０ｋｇの対象）でＱ３ＷでＩＶ投与する。
（ｂ）ＣＡＰＯＸを、各２１日サイクルの１～１４日目にカペシタビン１，０００ｍｇ／ｍ２ ＰＯ ｂｉｄ（毎日の総用量２０００ｍｇ／ｍ２）＋各２１日サイクルの１日目にオキサリプラチン１３０ｍｇ／ｍ２ ＩＶ Ｑ３Ｗのように施す。
（ａ）各２１日サイクルの１日目に、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、１８００ｍｇの用量（＜７０ｋｇの対象）又は２４００ｍｇの用量（≧７０ｋｇの対象）でＱ３ＷでＩＶ投与する。
（ｂ）ＣＡＰＯＸを、各２１日サイクルの１～１４日目にカペシタビン１，０００ｍｇ／ｍ２ ＰＯ ｂｉｄ（毎日の総用量２０００ｍｇ／ｍ２）＋各２１日サイクルの１日目にオキサリプラチン１３０ｍｇ／ｍ２ ＩＶ Ｑ３Ｗのように施す。
【0175】
ＦＰは、５－ＦＵ及びシスプラチンからなる多剤化学療法レジメンである。ＦＰは、胃癌の治療に有効な細胞毒性レジメンとして確立されており、ネオアジュバント／アジュバント療法としても使用される。ＦＰは、第３相盲検ランダム化対照試験でＨＥＲ２陽性進行胃癌又はＧＥＪ癌に対するトラスツズマブと組み合わせて評価されており、現在、ＨＥＲ２過剰発現胃食道癌においてトラスツズマブと併用する標準な第１選択化学療法と考えられる。特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、以下の用量及びスケジュールを使用してＦＰと組み合わせて投与される。
（ａ）各２１日サイクルの１日目に、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、１８００ｍｇの用量（＜７０ｋｇの対象）又は２４００ｍｇの用量（≧７０ｋｇの対象）でＱ３ＷでＩＶ投与する。
（ｂ）ＦＰを、各２１日サイクルの１～５日目に５－ＦＵを８００ｍｇ／ｍ２／日で連続的にＩＶ注入＋各２１日サイクルの１日目にシスプラチンを８０ｍｇ／ｍ２でＱ３ＷでＩＶ投与のように施す。
（ａ）各２１日サイクルの１日目に、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、１８００ｍｇの用量（＜７０ｋｇの対象）又は２４００ｍｇの用量（≧７０ｋｇの対象）でＱ３ＷでＩＶ投与する。
（ｂ）ＦＰを、各２１日サイクルの１～５日目に５－ＦＵを８００ｍｇ／ｍ２／日で連続的にＩＶ注入＋各２１日サイクルの１日目にシスプラチンを８０ｍｇ／ｍ２でＱ３ＷでＩＶ投与のように施す。
【0176】
ｍＦＯＬＦＯＸ６は、オキサリプラチン、ロイコボリン、及び５－ＦＵからなる多剤化学療法レジメンである。ｍＦＯＬＦＯＸは、様々な癌において管理可能な安全性プロファイルを有する有効な細胞毒性レジメンとして確立されている。特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、以下の用量及びスケジュールを使用してｍＦＯＬＦＯＸ６と組み合わせて投与される。
（ａ）各２８日サイクルの１日目と１５日目に、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、１２００ｍｇの用量（＜７０ｋｇの対象）又は１６０００ｍｇの用量（≧７０ｋｇの対象）でＱ２ＷでＩＶ投与する。
（ｂ）ｍＦＯＬＦＯＸ６を次のように投与する：各２８日サイクルの１日目と１５日目に、４００ｍｇ／ｍ２でＩＶボーラス、ロイコボリンを４００ｍｇ／ｍ２でＩＶ、及びオキサリプラチンを８５ｍｇ／ｍ２でＩＶ、Ｑ２Ｗ；各２８日サイクルの１日目と２日目、及び１５日目と１６日目にＱ２Ｗで、５－ＦＵを、１日当たり１２００ｍｇ／ｍ２、合計２４００ｍｇ／ｍ２で、約４６～４８時間にわたって連続的ＩＶ注入。
（ａ）各２８日サイクルの１日目と１５日目に、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、１２００ｍｇの用量（＜７０ｋｇの対象）又は１６０００ｍｇの用量（≧７０ｋｇの対象）でＱ２ＷでＩＶ投与する。
（ｂ）ｍＦＯＬＦＯＸ６を次のように投与する：各２８日サイクルの１日目と１５日目に、４００ｍｇ／ｍ２でＩＶボーラス、ロイコボリンを４００ｍｇ／ｍ２でＩＶ、及びオキサリプラチンを８５ｍｇ／ｍ２でＩＶ、Ｑ２Ｗ；各２８日サイクルの１日目と２日目、及び１５日目と１６日目にＱ２Ｗで、５－ＦＵを、１日当たり１２００ｍｇ／ｍ２、合計２４００ｍｇ／ｍ２で、約４６～４８時間にわたって連続的ＩＶ注入。
【0177】
他の併用療法
パルボシクリブはＣＤＫ４及びＣＤＫ６の阻害剤である。サイクリンＤ１及びＣＤＫ４／６は、細胞増殖を引き起こすシグナル伝達経路の下流にある。インビトロで、パルボシクリブは、細胞周期のＧ１期からＳ期への細胞の進行を阻止することによって、エストロゲン受容体（ＥＲ）陽性乳癌細胞株の細胞増殖を減少させた。パルボシクリブは、内分泌療法後に疾患が進行した患者においてフルベストラントと併用してホルモン受容体（ＨＲ）陽性、ＨＥＲ２陰性の進行性又は転移性乳癌の治療用に承認されている。パルボシクリブの推奨用量は、２８日間の治療サイクル中に、１２５ｍｇのカプセルを１日１回（ＱＤ）連続２１日間食事とともに経口服用（ＰＯ）し、その後、治療を７日間中止する（ＩＢＲＡＮＣＥ（登録商標））。
パルボシクリブはＣＤＫ４及びＣＤＫ６の阻害剤である。サイクリンＤ１及びＣＤＫ４／６は、細胞増殖を引き起こすシグナル伝達経路の下流にある。インビトロで、パルボシクリブは、細胞周期のＧ１期からＳ期への細胞の進行を阻止することによって、エストロゲン受容体（ＥＲ）陽性乳癌細胞株の細胞増殖を減少させた。パルボシクリブは、内分泌療法後に疾患が進行した患者においてフルベストラントと併用してホルモン受容体（ＨＲ）陽性、ＨＥＲ２陰性の進行性又は転移性乳癌の治療用に承認されている。パルボシクリブの推奨用量は、２８日間の治療サイクル中に、１２５ｍｇのカプセルを１日１回（ＱＤ）連続２１日間食事とともに経口服用（ＰＯ）し、その後、治療を７日間中止する（ＩＢＲＡＮＣＥ（登録商標））。
【0178】
フルベストラントは、エストラジオールに匹敵するアフィニティーで競合的にＥＲに結合し、ヒト乳癌細胞内のＥＲタンパク質を下方制御するエストロゲン受容体（ＥＲ）アンタゴニストである。フルベストラントは、内分泌療法後に疾患が進行した患者においてパルボシクリブを併用してＨＲ陽性、ＨＥＲ２陰性の進行性又は転移性乳癌の治療用に承認される。フルベストラントの推奨用量は、１、１５、及び２９日目、並びにその後、１カ月間ごとに、２回の５ｍＬ注射として各臀部に１回ずつ、臀部（臀部領域）に緩徐にＩＭ投与される（１回の注射につき１～２分間）、５００ｍｇである（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標））。
【0179】
特定の実施形態において、バイパラトピック抗ＨＥＲ２抗体は、上記の投与レジメンに従ってパルボシクリブ及びフルベストラントと組み合わせて投与される。
【0180】
本開示の特定の態様は、本明細書に記載の有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、チェックポイント阻害剤と組み合わせて投与することで対象のＨＥＲ２発現癌を治療する方法に関する。特定の実施形態において、チェックポイント阻害剤はＰＤ－１阻害剤、例えば、抗ＰＤ－１抗体である。抗ＰＤ－１抗体の例は、ペムブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標））、ニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標））、セミプリマブ（Ｌｉｂｔａｙｏ（登録商標））、ＪＴＸ－４０１４（Ｊｏｕｎｃｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、スパルタリズマブ（ＰＤＲ００１）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、カムレリズマブ（ＳＨＲ１２１０）（Ｊｉａｎｇｓｕ ＨｅｎｇＲｕｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）、シンチリマブ（Ｉｎｎｏｖｅｎｔ、Ｅｌｉ－Ｌｉｌｌｙ）、チスレリズマブ（ＢＧＢ－Ａ３１７）（Ｂｅｉｇｅｎｅ）、トリパリマブ（ＪＳ００１）（Ｊｕｎｓｈｉ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ドスターリマブ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ＩＮＣＭＧＡ０００１２（ＭＧＡ０１２）（Ｉｎｃｙｔｅ、ＭａｃｒｏＧｅｎｉｃｓ）、ＡＭＰ－２２４（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ／ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ及びＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）及びＡＭＰ－５１４（ＭＥＤＩ０６８０）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）を含むが、それらに限定されない。
【0181】
特定の実施形態は、本明細書に記載の有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、抗ＰＤ－１抗体と組み合わせて投与することで対象のＨＥＲ２発現癌を治療する方法に関する。特定の実施形態は、本明細書に記載の有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、チスレリズマブと組み合わせて投与することで対象のＨＥＲ２発現癌を治療する方法に関する。特定の実施形態において、チスレリズマブは、２００ｍｇのフラット用量（対象の体重に依存せず）でＱ３Ｗで投与される。特定の実施形態において、対象のＨＥＲ２発現癌は、本明細書に記載の有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、ペムブロリズマブと組み合わせて投与することで治療される。特定の実施形態において、ペムブロリズマブは、２００ｍｇのフラット用量でＱ３Ｗで、又は４００ｍｇのフラット用量でＱ６Ｗで投与される。
【0182】
特定の実施形態において、抗ＰＤ－１抗体と併用される抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、１８００ｍｇの用量（対象の体重が７０ｋｇ未満である）又は２４００ｍｇの用量（対象の体重が７０ｋｇ以上である）で投与され、かつこれは２１日サイクルの１日目に投与され、チスレリズマブは、２００ｍｇの固定用量（対象の体重に依存せず）でＱ３Ｗで投与される。
【0183】
特定の実施形態は、本明細書に記載の有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、抗ＣＤ４７抗体又はＣＤ４７遮断薬と組み合わせて投与することで対象のＨＥＲ２発現癌を治療する方法に関する。ＣＤ４７は、自身のマーカーとして機能する、広く発現されている細胞表面タンパク質である。ＣＤ４７は、生存細胞／健康細胞とアポトーシス／異常細胞を区別する「私を食べないで（ｄｏｎ’ｔ ｅａｔ ｍｅ）」という抗食作用シグナルを提供する。ＳＩＲＰαは、マクロファージ上のＣＤ４７受容体である。この受容体に結合するＣＤ４７は、健康細胞の食作用を阻害するが、ＣＤ４７レベルが低い細胞は、マクロファージ媒介破壊を受けやすい。腫瘍細胞は、免疫監視のマクロファージ成分を回避するためにＣＤ４７を過剰発現し、幅広い種類の血液腫瘍及び固形腫瘍において大量のＣＤ４７発現が観察されている。特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、ＣＤ４７遮断骨髄チェックポイント阻害剤であるエボルパセプト（ＡＬＸ１４８）と組み合わせて投与され、エボルパセプトは１０ｍｇ／ｋｇ体重ＱＷ、又は３０ｍｇ／ｋｇ体重Ｑ２Ｗの体重ベースの用量で投与される。特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体ｖ１００００は２段階フラット投与レジメンを使用して投与され、ここで、低い固定用量が１８００ｍｇであり、高い固定用量が２４００ｍｇであり、用量カットオフ体重が７０ｋｇである（Ｑ３Ｗ）。
【0184】
特定の実施形態は、本明細書に記載の有効量の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を、異なる作用機序を持つ別の抗ＨＥＲ２剤と組み合わせて投与することで対象のＨＥＲ２発現癌を治療する方法に関する。特定の実施形態において、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体は、ＨＥＲ２タンパク質のチロシンキナーゼ阻害剤である経口薬のツカチニブ（ＴＵＫＹＳＡ（登録商標））と組み合わせて投与される。特定の実施形態において、ツカチニブは、３００ｍｇ／用量で１日２回経口投与される。
【0185】
医薬キット
特定の実施形態は、本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を含む医薬キットを提供する。
特定の実施形態は、本明細書に記載の抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を含む医薬キットを提供する。
【0186】
キットは、典型的に、１つ又は複数の容器、及び前記容器上の又はそれに付随したラベル及び／又は添付文書を含む。ラベル又は添付文書は、治療薬の商用包装に通常含まれる説明書を含み、係る治療薬の適応症、用途、用量、投与、禁忌及び／又はその使用に関する警告に関する情報を提供する。例えば、ラベル又は添付文書は、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が、Ｑ３Ｗで約１８００ｍｇの固定用量（体重７０ｋｇ未満の対象に対して）又は体重７０ｋｇ以上の対象に対して２４００ｍｇの固定用量で投与するか、又はＱ２Ｗで１２００ｍｇの固定用量（体重７０ｋｇ未満の対象に対して）又は１６００ｍｇの固定用量（体重７０ｋｇ以上の対象に対して）で投与するためのものであると明記してもよい。
【0187】
キットは、１８００ｍｇのｖ１００００を含む容器を含んでもよい。キットは、２４００ｍｇのｖ１００００を含む容器を含んでもよい。キットは、それぞれが３００ｍｇのｖ１００００を含む６つの容器、及び前記６つのバイアルが体重７０ｋｇ未満の対象の治療に用いられると明記する添付文書を含んでもよい。キットは、それぞれが３００ｍｇのｖ１００００を含む８つの容器、及び前記８つのバイアルが体重７０ｋｇ以上の対象の治療に用いられると明記する添付文書を含んでもよい。キットは、それぞれが６００ｍｇのｖ１００００を含む３つの容器、及び前記３つの容器が体重７０ｋｇ未満の対象の治療に用いられると明記する添付文書を含んでもよい。キットは、それぞれが６００ｍｇのｖ１００００を含む４つの容器、及び前記６つの容器が体重７０ｋｇ以上の対象の治療に用いられると明記する添付文書を含んでもよい。
【0188】
医薬キット用のラベル又は添付文書は、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が、乳癌、胆道癌、胃食道腺癌（ＧＥＡ）、胃食道接合部癌（ＧＥＪ）、胃癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮頸癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肛門癌又は結腸直腸癌（ＣＲＣ）を含み得るＨＥＲ２発現癌の治療に用いられると指示してもよい。
【0189】
医薬キット用のラベル又は添付文書は、治療中のＨＥＲ２発現癌が転移性又は局所進行性であると指示してもよい。
【0190】
医薬キット用のラベル又は添付文書は、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が抗ＰＤ－１抗体と組み合わせて投与するのに適すると指示してもよい。
【0191】
医薬キット用のラベル又は添付文書は、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体がｍＦＯＬＦＯＸ６（５－ＦＵ及びロイコボリン＋オキサリプラチン）、ＣＡＰＯＸ（カペシタビン＋オキサリプラチン）又はＦＰ（フルオロウラシル［５－ＦＵ］＋シスプラチン）と組み合わせて投与するのに適すると指示してもよい。
【0192】
医薬キット用のラベル又は添付文書は、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体が別の抗ＨＥＲ２剤、任意でツカチニブと組み合わせて投与するのに適すると指示してもよい。
【0193】
ラベル又は添付文書は、医薬又は生物学的産物の製造、使用、又は販売を管轄する政府機関により規定された書式の説明書を更に含んでもよく、この説明書は、ヒト又は動物の投与に関する製造、使用、又は販売の政府機関による承認を反映する。ラベル又は添付文書は、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体がＨＥＲ２発現癌の治療用途に用いられることも指示する。容器は、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を含む組成物を保持し、いくつかの実施形態において無菌アクセスポートを有し得る（例えば、容器は、皮下注射針によって貫通され得るストッパーを有する静脈内溶液バッグ又はバイアルであり得る）。
【0194】
抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体を含む組成物を含む容器に加えて、キットは、キットの他の成分を含む１つ又は複数の追加の容器を含んでもよい。例えば、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー溶液又は右旋糖溶液等のような薬学的に許容される緩衝液、他の緩衝液又は希釈剤が挙げられる。
【0195】
好適な容器は、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、静注液バッグ等を含む。容器は、ガラス又はプラスチック等、様々な材料から形成され得る。適切な場合、キットの１つ又は複数の成分は、凍結乾燥させるか、又は粉末又は顆粒等の乾燥形態で提供し得、キットには、凍結乾燥又は乾燥成分（複数可）を再構成するための好適な溶媒を追加で含めることができる。
【0196】
キットは、フィルター、針、及びシリンジ等、商業的及びユーザの立場から望ましい他の材料を更に含んでもよい。
【0197】
以下の実施例は、例証目的のために提供されており、本発明の範囲を何ら限定することを意図するものではない。
【実施例】
【0198】
実施例１ バリアント１００００（Ｖ１００００）の説明と調製
ｖ１００００は、ヒトＨＥＲ２抗原のＥＣＤの２つの非重複エピトープを認識するヒト化二重特異性抗体である。ｖ１００００のＩｇＧ１様Ｆｃ領域は、ヘテロ二量体分子を生成し、それに対応してホモ二量体の形成を妨げるように優先的に対合を引き起こす相補的変異を各ＣＨ３ドメインに含む。図１は、重鎖Ａ及び軽鎖Ａ’が抗体のＥＣＤ２結合部分を形成し、重鎖Ｂが抗体のＥＣＤ４結合部分を形成するｓｃＦｖを含むｖ１００００のフォーマットの図を示す。バリアント１００００は、配列番号３０に示す配列を含む重鎖Ｈ１（図１中の重鎖Ａに対応）、配列番号５０に示す配列を含む重鎖Ｈ２（図１中の重鎖Ｂに対応）、及び配列番号２０に示す配列を含む軽鎖Ｌ１（軽鎖Ａ’に対応）を含む。ｖ１００００の調製方法は、国際特許公開ＷＯ２０１５／０７７８９１に詳細に記載されている。
ｖ１００００は、ヒトＨＥＲ２抗原のＥＣＤの２つの非重複エピトープを認識するヒト化二重特異性抗体である。ｖ１００００のＩｇＧ１様Ｆｃ領域は、ヘテロ二量体分子を生成し、それに対応してホモ二量体の形成を妨げるように優先的に対合を引き起こす相補的変異を各ＣＨ３ドメインに含む。図１は、重鎖Ａ及び軽鎖Ａ’が抗体のＥＣＤ２結合部分を形成し、重鎖Ｂが抗体のＥＣＤ４結合部分を形成するｓｃＦｖを含むｖ１００００のフォーマットの図を示す。バリアント１００００は、配列番号３０に示す配列を含む重鎖Ｈ１（図１中の重鎖Ａに対応）、配列番号５０に示す配列を含む重鎖Ｈ２（図１中の重鎖Ｂに対応）、及び配列番号２０に示す配列を含む軽鎖Ｌ１（軽鎖Ａ’に対応）を含む。ｖ１００００の調製方法は、国際特許公開ＷＯ２０１５／０７７８９１に詳細に記載されている。
【0199】
ｖ１００００を、ヒト試験に関する規制要件に従って製造し、環境温度でのＩＶ注入用に、生体適合性水性緩衝液中で１５ｍｇ／ｍＬで製剤化した。ｖ１００００を、２０ｍＬの緩衝液中に３００ｍｇのｖ１００００を含むバイアルで供給した。ｖ１００００のバイアルを冷凍で発送し、使用するまで－２０℃（＋／－５℃）にて保存した。バイアルを使用前に環境温度で解凍した。バイアル内の解凍した溶液を、環境温度で最大２４時間、又は冷蔵条件（２℃～８℃）で最大７２時間保存し、ラベルに表示された使用期限までに使用した。
【0200】
実施例２ ｖ１００００の薬物動態モデリング
集団ＰＫモデリングを使用して、抗体のいくつかの用量レジメン（図２）、即ち（Ａ）１０ｍｇ／ｋｇ ＱＷ、（Ｂ）２０ｍｇ／ｋｇ Ｑ２Ｗ及び（Ｃ）３０ｍｇ／ｋｇ Ｑ３Ｗ、に従って静脈内注射された対象における抗ＨＥＲ２抗体ｖ１００００の曝露をシミュレートした。
集団ＰＫモデリングを使用して、抗体のいくつかの用量レジメン（図２）、即ち（Ａ）１０ｍｇ／ｋｇ ＱＷ、（Ｂ）２０ｍｇ／ｋｇ Ｑ２Ｗ及び（Ｃ）３０ｍｇ／ｋｇ Ｑ３Ｗ、に従って静脈内注射された対象における抗ＨＥＲ２抗体ｖ１００００の曝露をシミュレートした。
【0201】
介護者に便宜を与え、薬物製品の浪費を減らすために、集団ＰＫモデルを使用するシミュレーションによって、ｖ１００００のフラット（又は固定）用量を評価した。中央コンパートメントの容積とクリアランスに関する体重共変量項のパワーモデルを使用して、曝露に対する体重の影響を推定した。
【0202】
ｖ１００００の可変性を、集団ＰＫモデルを使用した体重ベースのフラット投与のシミュレーションによって比較した。図３は、ｖ１００００のＱ３Ｗ投与に基づく、ＧＥＡと診断された対象における、体重ベースの投与（Ａ）、フラット投与（Ｂ）、及び２段階フラット投与（Ｃ）のモデル予測定常状態でのトラフ濃度の比較を示す。
【0203】
フラット投与（ＣＶ：４３．５％）及び体重ベースの投与（ＣＶ：４３．４％）の両方とも、定常状態トラフ濃度に同様の変化をもたらす。集団ＰＫモデルシミュレーションによれば、体重が高いほど体重スケール投与では曝露量が高くなる傾向があるが、フラット投与では体重が低いほど曝露が高くなる（図３）。体重ベースの投与と、７０キログラム（＜７０ｋｇ、≧７０ｋｇ）の体重カットオフポイントでの２段階フラット用量を利用したフラット投与とによるハイブリッドアプローチは、単段フラット投与及び／又は体重ベースの投与に比べ、全体重にわたってより一貫した曝露量をもたらす。
【0204】
４つの臨床試験に参加した３０５人の対象から観測された共変量からサンプリングすること、及びモデルに適合した個体間変動及び固定効果不確実性からサンプリングすることで、薬物曝露を集団ＰＫモデルからシミュレートした。
【0205】
実施例３ ｖ１００００のインビボ薬物動態
表８には、３０ｍｇ／ｋｇ Ｑ３Ｗでの体重ベースの投与レジメン、又は体重７０ｋｇ未満の臨床試験対象に対する１８００ｍｇ及び体重７０ｋｇ以上の対象に対する２４００ｍｇでの２段階固定（フラット）投与レジメンのいずれかで投与されたｖ１００００の薬物動態パラメータを示す。表から明らかなように、体重ベースの投与レジメン及びフラット投与レジメンが、同様の薬物動態をもたらした。表８には、２０ｍｇ／ｋｇ Ｑ２Ｗでの体重ベースの投与レジメン、又は体重７０ｋｇ未満の対象に対する１２００ｍｇ及び体重７０ｋｇ以上の対象に対する１６００ｍｇでの２段階固定（フラット）投与レジメンのいずれかで投与されたｖ１００００の薬物動態パラメータを示す。この場合も、体重ベースの投与レジメン及びフラット投与レジメンが、同様の薬物動態をもたらした。
表８には、３０ｍｇ／ｋｇ Ｑ３Ｗでの体重ベースの投与レジメン、又は体重７０ｋｇ未満の臨床試験対象に対する１８００ｍｇ及び体重７０ｋｇ以上の対象に対する２４００ｍｇでの２段階固定（フラット）投与レジメンのいずれかで投与されたｖ１００００の薬物動態パラメータを示す。表から明らかなように、体重ベースの投与レジメン及びフラット投与レジメンが、同様の薬物動態をもたらした。表８には、２０ｍｇ／ｋｇ Ｑ２Ｗでの体重ベースの投与レジメン、又は体重７０ｋｇ未満の対象に対する１２００ｍｇ及び体重７０ｋｇ以上の対象に対する１６００ｍｇでの２段階固定（フラット）投与レジメンのいずれかで投与されたｖ１００００の薬物動態パラメータを示す。この場合も、体重ベースの投与レジメン及びフラット投与レジメンが、同様の薬物動態をもたらした。
【0206】
（表８）ｖ１００００の薬物動態パラメータｇ＊
Ｃｍａｘ＝血清又は血漿中の薬物の観測された最大濃度。Ｃｔｒｏｕｇｈ＝投与間隔の終了時に観測された濃度。ｔ１／２＝２の自然対数を終末相の消失速度定数で割ることによって計算された、血清又は血漿中の薬物の終末相半減期の推定値。ＡＵＣ０－ｔ＝時間０から時間ｔまでのＡＵＣ。ＡＵＣ０－∞＝時間０から無限時間までのＡＵＣ。ＣＬ＝血清クリアランス。Ｖｚ＝終末消失相。
ａ．非ＧＥＡ（乳癌、結腸直腸癌、胆道癌、その他全て）
ｂ．転移性胃／胃食道接合部腺癌
ｃ．転移性胃／胃食道接合部腺癌
ｄ．転移性乳癌
ｅ．転移性胃／胃食道接合部腺癌
ｆ．転移性胃／胃食道接合部腺癌
ｇ．＊値は幾何平均（変動係数）で表す
ａ．非ＧＥＡ（乳癌、結腸直腸癌、胆道癌、その他全て）
ｂ．転移性胃／胃食道接合部腺癌
ｃ．転移性胃／胃食道接合部腺癌
ｄ．転移性乳癌
ｅ．転移性胃／胃食道接合部腺癌
ｆ．転移性胃／胃食道接合部腺癌
ｇ．＊値は幾何平均（変動係数）で表す
【0207】
実施例４ 体重ベースの投与レジメン及び２段階固定投与レジメンの両方を使用してｖ１０００００を投与した対象の抗腫瘍効果
局所進行性（切除不能な）及び／又は転移性ＨＥＲ２発現胃腸癌を有する患者の第１選択治療としての抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体ｖ１００００（実施例１を参照）の第２相臨床研究を実施する。
局所進行性（切除不能な）及び／又は転移性ＨＥＲ２発現胃腸癌を有する患者の第１選択治療としての抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体ｖ１００００（実施例１を参照）の第２相臨床研究を実施する。
【0208】
これは、抗ＨＥＲ２バイパラトピック抗体であるｖ１００００（実施例１を参照）＋医師が選択する併用化学療法の安全性、忍容性、及び抗腫瘍活性を調査するための多施設共同、包括的、第２相、非盲検、第１選択、２部構成の研究である。医師が選択する併用化学療法は、３つのグローバルに認識された多剤併用の第１選択治療：
（１）カペシタビン＋オキサリプラチンからなるＸＥＬＯＸ
ＸＥＬＯＸとｖ１００００の組み合わせの３つのバリアント（ＸＥＬＯＸ－１、ＸＥＬＯＸ－２、及びＸＥＬＯＸ－３）を試験する。バリアントはｖ１００００レジメンで異なる；
（２）フルオロウラシル（５－ＦＵ）＋シスプラチンからなるＦＰ
ＦＰとｖ１００００の組み合わせの２つのバリアント（ＦＰ－１及びＦＰ－２）を試験する。バリアントはｖ１００００レジメンで異なる；及び
（３）５－ＦＵ及びロイコボリン＋オキサリプラチンからなるｍＦＯＬＦＯＸ６
ｍＦＯＬＦＯＸ６とｖ１００００の組み合わせの２つのバリアント（ｍＦＯＬＦＯＸ６－１及びｍＦＯＬＦＯＸ６－２）を試験する。バリアントは、各４週間の治療サイクルの１日目と１５日目にボーラス投与される５－ＦＵの存在（ｍＦＯＬＦＯＸ６－１）又は不在（ｍＦＯＬＦＯＸ６－２）、及びｖ１００００用量（体重ベースの用量対フラット用量）で異なる
を含む。
（１）カペシタビン＋オキサリプラチンからなるＸＥＬＯＸ
ＸＥＬＯＸとｖ１００００の組み合わせの３つのバリアント（ＸＥＬＯＸ－１、ＸＥＬＯＸ－２、及びＸＥＬＯＸ－３）を試験する。バリアントはｖ１００００レジメンで異なる；
（２）フルオロウラシル（５－ＦＵ）＋シスプラチンからなるＦＰ
ＦＰとｖ１００００の組み合わせの２つのバリアント（ＦＰ－１及びＦＰ－２）を試験する。バリアントはｖ１００００レジメンで異なる；及び
（３）５－ＦＵ及びロイコボリン＋オキサリプラチンからなるｍＦＯＬＦＯＸ６
ｍＦＯＬＦＯＸ６とｖ１００００の組み合わせの２つのバリアント（ｍＦＯＬＦＯＸ６－１及びｍＦＯＬＦＯＸ６－２）を試験する。バリアントは、各４週間の治療サイクルの１日目と１５日目にボーラス投与される５－ＦＵの存在（ｍＦＯＬＦＯＸ６－１）又は不在（ｍＦＯＬＦＯＸ６－２）、及びｖ１００００用量（体重ベースの用量対フラット用量）で異なる
を含む。
【0209】
図４は研究設計の概略図を示す。研究に適格であるためには、対象は、切除不能な局所進行性又は転移性ＧＥＡ、ＧＥＪ又は胃癌を患っており、事前のＨＥＲ２標的療法を受けていない必要がある。バリアント１００００を、体重ベースの投与レジメン又は２段階フラット投与レジメンに従って投与した。研究のパート１では、ＨＥＲ２状態の局所又は中央評価を使用し、ＨＥＲ２ ＦＩＳＨ状態に関わらずＨＥＲ２ ＩＨＣ ３＋又はＩＨＣ ２＋を許容した。パート２では、ＨＥＲ２陽性癌（ＩＨＣ ３＋又はＩＨＣ ２＋／ＦＩＳＨ＋）を有する対象のみが含まれた。
【0210】
データカットオフ日の時点で３６人の対象が研究に登録しており、９人が食道癌、１４人が胃食道接合部癌、１３人が胃癌を有した。年齢の中央値は５８歳であり、範囲は２７～７７歳であった。
【0211】
ＣＡＰＯＸ＋ｚコホートは、２１サイクル中に、１～１５日目にカペシタビン１，０００ｍｇ／ｍ２ ＰＯ ＢＩＤ、１日目にオキサリプラチン１３０ｍｇ／ｍ２ ＩＶ Ｑ３Ｗ、及び１日目に３０ｍｇ／ｋｇの体重ベースの用量又は７０ｋｇ未満の対象に対する１８００ｍｇと７０ｋｇ以上の対象に対する２４００ｍｇからなる２段階フラット用量のいずれかでのｖ１００００の投与を受けた。
【0212】
ＦＰコホートは、２１日サイクル中に、１日目にシスプラチン８０ｍｇ／ｍ２ ＩＶ Ｑ３Ｗ、１～５日目に連続５－ＦＵ ８００ｍｇ／ｍ２／日 ＩＶ、及び１１日目に３０ｍｇ／ｋｇの体重ベースの用量又は７０ｋｇ未満の対象に対する１８００ｍｇと７０ｋｇ以上の対象に対する２４００ｍｇからなる２段階フラット用量のいずれかでのｖ１００００の投与を受けた。
【0213】
ｍＦＯＬＦＯＸ６－１コホートは、２８日サイクル中に、以下の投与を受けた：ロイコボリン４００ｍｇ／ｍ２ ＩＶ Ｑ２Ｗ（１日目、１５日目）；オキサリプラチン８５ｍｇ／ｍ２ ＩＶ Ｑ２Ｗ（１日目、１５日目）；連続する１～２日目及び１５～１６日目に５－ＦＵ １２００ｍｇ／ｍ２／日 ＩＶ、及び４００ｍｇ／ｍ２ ＩＶ Ｑ２Ｗ（１日目、１５日目）；並びに１日目、１５日目に、２０ｍｇ／ｋｇの体重ベースの用量、又は７０ｋｇ未満の対象に対する１２００ｍｇと７０ｋｇ以上の対象に対する１６００ｍｇからなる２段階フラット用量のいずれかでの、ｖ１００００。
【0214】
ｍＦＯＬＦＯＸ６－２レジメンは、１日目と１５日目の５－ＦＵ ４００ｍｇ／ｍ２ ＩＶ Ｑ２Ｗ用量を省略した以外、ｍＦＯＬＦＯＸ６－１レジメンと同一である。
【0215】
研究のパート１は安全性及び用量制限毒性（ＤＬＴ）に注目した。以下のことが観察された。Ｖ１００００＋ＣＡＰＯＸは、６人の対象においてＤＬＴをもたらさなかった。Ｖ１００００＋ＦＰは、２人の対象のうち１人にＤＬＴ（急性腎傷害、グレード３）をもたらした。Ｖ１００００＋ｍＦＯＬＦＯＸ６－１は、１３人の対象のうち２人にＤＬＴ（下痢、グレード３）をもたらし、１３人中８人（６２％）にグレード３の下痢があった。安全監視委員会は、１日目、１５日目の５－ＦＵ ４００ｍｇ／ｍ２ボーラスを省略する修正レジメン（ｍＦＯＬＦＯＸ６－２）を推奨した。Ｖ１００００＋ｍＦＯＬＦＯＸ６－２は、７人の対象のうち１人にＤＬＴ（下痢、グレード３）をもたらし、７人中２人（２９％）にグレード３の下痢があった。
【0216】
研究のパート２は、ＨＥＲ２陽性癌を有する対象におけるｖ１００００＋併用化学療法の抗腫瘍活性に注目した。疾患制御率（ＤＣＲ）を、完全奏効（ＣＲ）、部分奏効（ＰＲ）、又は病勢安定（ＳＤ）のうちの最良の奏効として定義した。奏効期間（ＤＯＲ）を、後続で確認される最初の客観的奏効から、最後の試験治療の３０日以内に何らかの原因によるＰＤ又は死亡が記録された時点までの時間として定義した。無増悪生存期間（ＰＦＳ）を、試験治療の初回投与から、何らかの原因による疾患の進行、臨床的進行、又は死亡が記録された時点までの時間として定義した。５－ＦＵ＝５－フルオロウラシル。ＤＣＲ＝疾患制御率。ＤＯＲ＝奏効期間。ＥＣＯＧ ＰＳ＝東部協力腫瘍学グループのパフォーマンスステータス。ＦＩＳＨ＝蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション。ＧＥＡ＝胃食道腺癌。ＩＨＣ＝免疫組織化学。ＯＲＲ＝客観的奏効率。ＰＤ＝病勢進行。ＰＦＳ＝無増悪生存期間。ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１＝固形腫瘍における奏効評価基準、バージョン１．１。ＳＤ＝病勢安定。データカットオフ日の時点で、パート１及び２で有効性評価可能な対象は２８人であった。最上位の結果を表９に示す。ＯＲＲは７５％、ＤＣＲは８９％であった。
【0217】
（表９）奏効率及び疾患制御率
ａＨＥＲ２陽性を、ＩＨＣ ３＋又はＩＨＣ ２＋／ＦＩＳＨ＋として定義した。ｂｃＯＲＲは、ベースラインスキャン及び客観的奏効の初期文書化から４週間以上後に取得された確認スキャンを含んだ。有効性評価可能な集団を、１回以上の評価可能ベースライン後疾患評価を経験するか、又は死亡もしくは臨床的進行により試験治療を中止した全てのＨＥＲ２陽性対象として定義した。
５－ＦＵ＝５－フルオロウラシル。ＣＡＰＯＸ＝カペシタビン＋オキサリプラチン。ＣＲ＝完全奏効。ＤＣＲ＝疾患制御率。ＦＰ＝５－ＦＵ及びシスプラチン。ｍＦＯＬＦＯＸ６＝５－ＦＵ＋オキサリプラチン及びロイコボリン。ＮＲ＝未到達。ＯＲＲ＝奏効率（ＣＲ＋ＰＲ）。ＰＤ＝病勢進行。ＰＲ＝部分奏効。ＳＤ＝病勢安定。
５－ＦＵ＝５－フルオロウラシル。ＣＡＰＯＸ＝カペシタビン＋オキサリプラチン。ＣＲ＝完全奏効。ＤＣＲ＝疾患制御率。ＦＰ＝５－ＦＵ及びシスプラチン。ｍＦＯＬＦＯＸ６＝５－ＦＵ＋オキサリプラチン及びロイコボリン。ＮＲ＝未到達。ＯＲＲ＝奏効率（ＣＲ＋ＰＲ）。ＰＤ＝病勢進行。ＰＲ＝部分奏効。ＳＤ＝病勢安定。
【0218】
図５中のウォーターフォールプロットは、３つのレジメン（ｖ１００００＋ＣＡＰＯＸ、ＦＰ又はｍＦＯＬＦＯＸ）で治療された有効性評価可能な２８人の対象の個々の標的病変部サイズを示す。このプロットは、体重ベースのレジメン又は上記の２段階フラット投与レジメンで治療された個々の対象を示す。データは、２段階フラット投与レジメンが体重ベースのレジメンと同等の有効性を提供することを示唆する。２段階フラット投与レジメンで治療された対象の８人中８人（１００％）は、標的病変部サイズが３０％超の減少を示した。体重ベースのレジメンを使用して治療された対象の２０人中１７人（８５％）は、標的病変部サイズが３０％超の減少を示した。
【0219】
本明細書で言及した全ての特許、特許出願、刊行物、及びデータベースエントリの開示は、これらの個々の特許、特許出願、刊行物、及びデータベースエントリが各々具体的且つ個別に、参照により組み込まれると示されているのと同じ程度に、その全体が参照により具体的に組み込まれる。
【0220】
本明細書に記載の、当業者には明らかであろう特定の実施形態の修正は、添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図されている。
【0221】
配列一覧表
（表Ａ）バリアントｖ５０１９、ｖ５０２０、ｖ７０９１、ｖ１００００、ｖ６９０３、ｖ６９０２及びｖ６７１７のクローン番号
（表Ａ）バリアントｖ５０１９、ｖ５０２０、ｖ７０９１、ｖ１００００、ｖ６９０３、ｖ６９０２及びｖ６７１７のクローン番号
【0222】
（表Ｂ）クローン番号別のバリアントｖ５０１９、ｖ５０２０、ｖ７０９１、ｖ１００００、ｖ６９０３、ｖ６９０２及びｖ６７１７の配列
【図1】
【図2A】
【図2B】
【図2C】
【図2D】
【図3A】
【図3B】
【図3C】
【図4】
【図5】
【手続補正書】
【提出日】2024-05-21
【手続補正1】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
【国際調査報告】