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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-09-26
(54)【発明の名称】抗ヒトＣＤ４５ＲＣ結合ドメインおよびその使用
(51)【国際特許分類】
C12N 15/13 20060101AFI20240918BHJP
C07K 16/28 20060101ALI20240918BHJP
C07K 14/725 20060101ALI20240918BHJP
C07K 19/00 20060101ALI20240918BHJP
C12N 15/12 20060101ALI20240918BHJP
C12N 15/62 20060101ALI20240918BHJP
C12N 5/10 20060101ALI20240918BHJP
A61P 37/06 20060101ALI20240918BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240918BHJP
A61K 35/17 20150101ALI20240918BHJP
A61K 48/00 20060101ALI20240918BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20240918BHJP
【ＦＩ】
C12N15/13 ZNA
C07K16/28
C07K14/725
C07K19/00
C12N15/12
C12N15/62 Z
C12N5/10
A61P37/06
A61P35/00
A61K35/17
A61K48/00
A61K39/395 N
A61K39/395 D
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024517061
(86)(22)【出願日】2022-09-16
(85)【翻訳文提出日】2024-05-14
(86)【国際出願番号】 EP2022075794
(87)【国際公開番号】W WO2023041717
(87)【国際公開日】2023-03-23
(31)【優先権主張番号】21306283.9
(32)【優先日】2021-09-16
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】524101940
【氏名又は名称】アボレリス ファーマ
(71)【出願人】
【識別番号】519134337
【氏名又は名称】ユニバーシテ デ ナンテス
(71)【出願人】
【識別番号】511074305
【氏名又は名称】インセルム（インスティチュート ナショナル デ ラ サンテ エ デ ラ リシェルシェ メディカル）
(74)【代理人】
【識別番号】100114775
【弁理士】
【氏名又は名称】高岡 亮一
(74)【代理人】
【識別番号】100121511
【弁理士】
【氏名又は名称】小田 直
(74)【代理人】
【識別番号】100202751
【弁理士】
【氏名又は名称】岩堀 明代
(74)【代理人】
【識別番号】100208580
【弁理士】
【氏名又は名称】三好 玲奈
(74)【代理人】
【識別番号】100191086
【弁理士】
【氏名又は名称】高橋 香元
(72)【発明者】
【氏名】ギロノー，カロル
(72)【発明者】
【氏名】アネゴン，イグナシオ
(72)【発明者】
【氏名】ファーブル－ビュル，オリヴィエ
【テーマコード（参考）】
4B065
4C084
4C085
4C087
4H045
【Ｆターム（参考）】
4B065AA90X
4B065AA90Y
4B065AB01
4B065AC14
4B065AC20
4B065BA01
4B065CA24
4B065CA25
4B065CA44
4C084AA13
4C084MA66
4C084NA14
4C084ZB081
4C084ZB082
4C084ZB261
4C084ZB262
4C085AA13
4C085AA14
4C085BB11
4C085EE01
4C085GG02
4C085GG03
4C085GG04
4C085GG05
4C085GG06
4C087AA01
4C087AA02
4C087BB65
4C087CA04
4C087MA66
4C087NA14
4C087ZB08
4C087ZB26
4H045AA10
4H045AA11
4H045AA30
4H045BA10
4H045BA41
4H045CA40
4H045DA50
4H045DA75
4H045EA20
4H045FA74
(57)【要約】
本発明は、ＣＤ４５ＲＣに特異的に結合する抗原結合ドメイン、ならびにそれを含む抗体およびキメラ抗原受容体に関する。本発明はさらに、移植拒絶反応、特に移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）を予防するおよび／または軽減するためを含む、治療目的の様々な方法におけるそれらの使用に関する。
【選択図】図なし
【選択図】図なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ＣＤ４５ＲＣに特異的に結合する抗原結合ドメインであって、（ａ）以下の３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）：
（ｉ）配列番号１０の配列のＶＨ－ＣＤＲ１；
（ｉｉ）配列番号１１の配列のＶＨ－ＣＤＲ２；および
（ｉｉｉ）配列番号１２の配列のＶＨ－ＣＤＲ３；ならびに
（ｂ）以下の３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）：
（ｉ）配列番号１３の配列のＶＬ－ＣＤＲ１；
（ｉｉ）配列番号１４の配列のＶＬ－ＣＤＲ２；および
（ｉｉｉ）配列番号１５の配列のＶＬ－ＣＤＲ３、
を含み、
配列番号１３中のＸは、不在であるかまたはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、およびＧｌｙ（Ｇ）からなる群から選択されるかのいずれかであり；好ましくは配列番号１３中のＸは、不在である、抗原結合ドメイン。
【請求項2】
１）配列番号２４の配列のＨＣＶＲおよび配列番号２５の配列のＬＣＶＲ；または２）配列番号１０、１１および１２を有する３つのＣＤＲならびに配列番号２４のフレームワーク領域と少なくとも７０％の配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＨＣＶＲと、配列番号１３、１４および１５を有する３つのＣＤＲならびに配列番号２５のフレームワーク領域と少なくとも７０％の配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＬＣＶＲ、を含み、ＣＤ４５ＲＣに対するその結合特異性を保持し；
配列番号２５中のＸ１は、不在であるかまたはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）およびＧｌｙ（Ｇ）からなる群から選択されるかのいずれかであり；好ましくは配列番号１３中のＸは、不在であり；かつ
配列番号２５中のＸ２は、Ｔｙｒ（Ｙ）およびＰｈｅ（Ｆ）からなる群から選択され、好ましくは配列番号２５中のＸ２は、Ｔｙｒ（Ｙ）である、
請求項１に記載の抗原結合ドメイン。
【請求項3】
単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、タンデム－ジ－ｓｃＦｖ、タンデム－トリ－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－Ｆｃ、ミニボディ、マキシボディ、ダイアボディ、トリアボディ、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、およびＦ（ａｂ’）２からなる群から選択される、請求項１または２に記載の抗原結合ドメイン。
【請求項4】
ＣＤ４５ＲＣに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片であって、前記抗体が、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗原結合ドメインを含む、抗体またはその抗原結合断片。
【請求項5】
重鎖定常領域（ＨＣＣＲ）および軽鎖定常領域（ＬＣＣＲ）をさらに含み、好ましくは前記ＨＣＣＲは、配列番号２６～２８のいずれか１つのアミノ酸配列と、より好ましくは配列番号２６と、少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を含みおよび前記ＬＣＣＲは、配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を含み；かつ
ＣＤ４５ＲＣに対するその結合特異性を保持する、
請求項４に記載の抗体またはその抗原結合断片。
【請求項6】
ＣＤ４５ＲＣに特異的に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）であって、ｉ）請求項１～３のいずれか一項に記載の少なくとも１つの細胞外抗原結合ドメイン；
ｉｉ）任意により、細胞外ヒンジドメイン、
ｉｉｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメインであって、
好ましくはＣＤ８膜貫通ドメインおよびＣＤ２８膜貫通ドメインからなる群から選択され、より好ましくは配列番号４９のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を有するＣＤ８膜貫通ドメインおよび配列番号５０のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を有するＣＤ２８膜貫通ドメインからなる群から選択される、少なくとも１つの膜貫通ドメイン；
ｉｖ）少なくとも１つの一次シグナル伝達ドメインおよび任意により、１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインを含む少なくとも１つの細胞内シグナル伝達ドメインであって、
好ましくは前記少なくとも１つの一次シグナル伝達は、ＣＤ３ζのシグナル伝達ドメインであり、好ましくは前記少なくとも１つの一次シグナル伝達は、配列番号５１のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を有するＣＤ３ζのシグナル伝達ドメインである、少なくとも１つの細胞内シグナル伝達ドメイン
を含む、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）。
【請求項7】
その細胞表面で請求項６に記載のキメラ抗原受容体を発現している免疫細胞集団。
【請求項8】
前記集団の免疫細胞が、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ダブルポジティブＴ細胞、ダブルネガティブＴ細胞、γδＴ細胞、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、Ｂ細胞、マクロファージ、または樹状細胞を含むかまたはそれらからなる群から選択される、請求項７に記載の免疫細胞集団。
【請求項9】
好ましくは調節エレメントの制御下にある、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗原結合ドメイン、請求項４もしくは５に記載の抗体もしくはその抗原結合断片、または請求項６に記載のＣＡＲをコードする核酸。
【請求項10】
医薬品としての使用のための、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗原結合ドメイン、請求項４もしくは５に記載の抗体もしくはその抗原結合断片、請求項７もしくは８に記載の免疫細胞集団、または請求項９に記載の核酸。
【請求項11】
それを必要とする対象において免疫寛容を誘導することにおける使用のための、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗原結合ドメイン、請求項４もしくは５に記載の抗体もしくはその抗原結合断片、請求項７もしくは８に記載の免疫細胞集団、または請求項９に記載の核酸。
【請求項12】
それを必要とする対象においてＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞を枯渇させることにおける使用のための、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗原結合ドメイン、請求項４もしくは５に記載の抗体もしくはその抗原結合断片、請求項７もしくは８に記載の免疫細胞集団、または請求項９に記載の核酸。
【請求項13】
それを必要とする対象において移植拒絶反応を防ぐおよび／または軽減することにおける使用のための、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗原結合ドメイン、請求項４もしくは５に記載の抗体もしくはその抗原結合断片、請求項７もしくは８に記載の免疫細胞集団、または請求項９に記載の核酸。
【請求項14】
移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）を防ぐおよび／または低減するための、請求項１３に記載の使用のための、抗原結合ドメイン、抗体もしくはその抗原結合断片、免疫細胞集団、または核酸。
【請求項15】
それを必要とする対象においてＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害または状態を防ぐ、軽減するおよび／または処置することにおける使用のための、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗原結合ドメイン、請求項４もしくは５に記載の抗体もしくはその抗原結合断片、請求項７もしくは８に記載の免疫細胞集団、または請求項９に記載の核酸であって、好ましくはＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害または状態が、自己免疫疾患、望ましくない免疫応答、単一遺伝子疾患、リンパ腫、およびがんからなる群から選択される、抗原結合ドメイン、抗体もしくはその抗原結合断片、免疫細胞集団、または核酸。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ＣＤ４５ＲＣに特異的に結合する抗原結合ドメイン、ならびにそれを含む抗体およびキメラ抗原受容体に関する。本発明はさらに、移植拒絶反応、特に移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）を防ぐおよび／または低減することを含む、治療目的の様々な方法におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【0002】
ＣＤ４５（白血球共通抗原（ＬＣＡ）、ＥＣ３．１．３．４８、Ｔ２００、Ｌｙ５、およびＰＴＰＲＣとしても知られる）は、最初の原型の受容体様プロテインチロシンホスファターゼ（ＲＰＴＰ）を構成する。その発現は、白血球に限定されており、そこでそれは最も豊富な細胞表面糖タンパク質の１つであり、細胞表面のほぼ１０％を構成している（Ｔｒｏｗｂｒｉｄｇｅ ＆ Ｔｈｏｍａｓ，１９９４．Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２：８５－１１６；Ｈｅｒｍｉｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，２００３．Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２１：１０７－３７；Ｈｏｌｍｅｓ，２００６．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．１１７（２）：１４５－５５）。
【0003】
ＣＤ４５は、細胞外ドメイン、単膜貫通ドメイン、および大きな細胞質ドメインから構成される。膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインは、種間で高度に保存されている。特に、ＣＤ４５の細胞質ドメインは、２つのタンデムに複製されたホスファターゼドメインを含み、そのうちの膜近位ドメインのみが酵素活性を有する（Ｄｅｓａｉ ｅｔ ａｌ．，１９９４．ＥＭＢＯ Ｊ．１３（１７）：４００２－１０）。ＣＤ４５中のよりＣ末端の第２のホスファターゼドメインの機能は、依然として不明であるが、それは第１のドメインを安定化することにより間接的にＣＤ４５活性に寄与し得ると示唆されている。この細胞質ドメインを通じて、ＣＤ４５は、チロシンプロテインキナーゼのＳｒｃファミリー（Ｔ細胞中のＬｃｋ、またはＢ細胞中のＬｙｎ、Ｆｙｎ、およびＬｃｋなど）の活性を調節することにより、少なくともリンパ球におけるホスホチロシンレベルの中心調節因子として機能する（Ｐａｌａｃｉｏｓ ＆ Ｗｅｉｓｓ，２００４．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ．２３（４８）：７９９０－８０００；Ｌｏｗｅｌｌ，２００４．Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．４１（６－７）：６３１－４３）。
【0004】
膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインとは対照的に、ＣＤ４５のＮ末端細胞外ドメインは、異なる白血球系統間でより高い多型を示す。実際に、この細胞外ドメインは、高度にグリコシル化され、３つの選択的にスプライシングされるエクソン（４、５、および６－これらは、それぞれＡ、Ｂ、およびＣ決定基をコードする）を含み、これらは両方ともＯ結合型グリコシル化およびシアル化されている（Ｈｅｒｍｉｓｔｏｎｅｔ ａｌ．，２００３．Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２１：１０７－３７；Ｈｏｌｍｅｓ，２００６．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．１１７（２）：１４５－５５）。サイズ、形状、および電荷が異なるＣＤ４５アイソフォームはしたがって、白血球の分化および細胞活性化の両方において動的に制御される選択的スプライシングにより生成され、分子の細胞外ドメインにおける変化を引き起こし得る（Ｈａｌｌ ｅｔ ａｌ．，１９８８．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４１（８）：２７８１－７；Ｌｙｎｃｈ，２００４．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ．４（１２）：９３１－４０）。
【0005】
すべての３つの選択的にスプライシングされるエクソンを含む最大のＣＤ４５アイソフォームであるＣＤ４５ＲＡＢＣは、約２３５ｋＤａであり、一方ですべての３つのエクソンを含まない最小のアイソフォームであるＣＤ４５ＲＯは、約１８０ｋＤａである。その中間では、３つのエクソンの２つのみ（例えば、ＣＤ４５ＲＡＢ、ＣＤ４５ＲＢＣ）または１つのみ（例えば、ＣＤ４５ＲＢ）を含むアイソフォームが、あり得る。
【0006】
異なるＣＤ４５アイソフォームの機能は明らかではないが、これらのアイソフォームの差次的発現は、Ｔ細胞の活性化レベルと関連しており、ナイーブＴ細胞とメモリーＴ細胞の解離を可能にする（Ｂｉｒｋｅｌａｎｄｅｔ ａｌ．，１９８９．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．８６（１７）：６７３４－８）。例えば、ＣＤ４５ＲＡは、末梢ナイーブ成熟ＣＤ４＋Ｔ細胞上に存在し、一方でＣＤ４５ＲＯは、活性化されたメモリーＣＤ４＋Ｔ細胞上で発現される。ＣＤ４５ＲＡＢＣは、Ｂ細胞およびそれらの前駆体上で、樹状細胞のサブグループおよび他の抗原提示細胞上で発現される。最終的に分化されたメモリーＴ細胞のサブタイプである、エフェクターメモリーＲＡ Ｔ細胞（ＴＥＭＲＡ）もまた、ナイーブＴ細胞マーカーＣＤ４５ＲＡを再発現する（Ｋｏｃｈ ｅｔ ａｌ．，２００８．Ｉｍｍｕｎ Ａｇｅｉｎｇ．５：６）。重要なことに、アイソフォーム発現のこのパターンは、種を超えて高度に保存されており、その機能的役割および重要性を強調する（Ｈｅｒｍｉｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，２００３．Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２１：１０７－３７）。
【0007】
ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞上のＣＤ４５ＲＣアイソフォームの特定の発現パターンは、増殖およびサイトカイン分泌に関して異なって挙動する、機能的に異なるアロ反応性Ｔ細胞サブセットを区別することを可能にする。例えばげっ歯類では、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈＴ細胞の両方が、移植拒絶反応および器官炎症を促進できる前駆体および／または強力なＴｈ１エフェクター細胞であることが示されており（Ｓｐｉｃｋｅｔｔｅｔ ａｌ．，１９８３．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．１５８（３）：７９５－８１０；Ｘｙｓｔｒａｋｉｓ ｅｔ ａｌ．，２００４．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．３４（２）：４０８－１７）、その一方で、検出できないまたは低レベルのＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－を発現するＴ細胞は、Ｔｈ２細胞および制御性Ｔ細胞であり、同種移植片拒絶反応、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）および細胞性自己免疫疾患を阻害する（Ｘｙｓｔｒａｋｉｓ ｅｔ ａｌ．，２００４．Ｂｌｏｏｄ．１０４（１０）：３２９４－３０；Ｇｕｉｌｌｏｎｎｅａｕ ｅｔ ａｌ．，２００７．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．１１７（４）：１０９６－１０６；Ｐｏｗｒｉｅ ＆ Ｍａｓｏｎ，１９９０．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．１７２（６）：１７０１－８）。ヒトでは、移植前のＣＤ４５ＲＣ＋ＣＤ８＋Ｔ細胞の高い割合は、腎移植患者における移植片生着の低下と相関している（Ｏｒｄｏｎｅｚ ｅｔ ａｌ．，２０１３．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ．８（７）：ｅ６９７９１）。
【0008】
ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈＴ細胞集団の排除はしたがって、ヒトにおける免疫寛容を誘導するための、したがって移植拒絶反応（特にＧｖＨＤ）および自己免疫疾患を防ぐ、軽減するおよび／または治療するための有望なアプローチである。
【0009】
ＧｖＨＤ（移植片対宿主病）は、幹細胞移植患者における罹患率および死亡率の重大な原因である。これは、ドナー細胞がレシピエント細胞に対して反応する、Ｔ細胞媒介免疫反応プロセスである。現在、コルチコステロイドなどの免疫調節薬による免疫抑制が、ＧｖＨＤ予防の中心である。時間の経過とともに生存転帰が改善する進展があるが、コルチコステロイドは、高い割合の患者においてＧｖＨＤを予防せず（初期の疾患の重症度に応じて、急性ＧｖＨＤを有する患者の５０％未満、慢性ＧｖＨＤを有する患者の４０～５０％－Ｇａｒｎｅｔｔ ｅｔ ａｌ．，２０１３．Ｔｈｅｒ Ａｄｖ Ｈｅｍａｔｏｌ．４（６）：３６６－３７８）、重大な毒性と関連しており、現在利用可能な救済療法の多くは、免疫抑制の増大および感染性合併症を伴う。したがって、長期的な移植後の転帰を改善するための、ＧｖＨＤの新しい治療戦略の開発に対するニーズは、依然として満たされていない。
【0010】
本発明者らは、ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈＴ細胞の枯渇が、攻撃的なエフェクターＴ細胞を減少させる一方で、寛容原性制御性Ｔ細胞を増加させることにより、移植拒絶反応を防ぐかまたは軽減する新しい治療戦略であることを以前に記載した。実際に、一過性の抗ＣＤ４５ＲＣ ｍＡｂ治療は、記憶免疫を保持しながら、迅速なＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈＴ細胞アポトーシスを引き起こす。さらに、本発明者らは、短期間の抗ＣＤ４５ＲＣ抗体治療が、慢性拒絶反応の兆候なしに、永続的な同種移植片の生存をもたらすことを示した（国際特許出願２０１６／０１６４４２；Ｐｉｃａｒｄａ ｅｔ ａｌ．，２０１７．ＪＣＩ Ｉｎｓｉｇｈｔ．２（３）：ｅ９００８８）。本発明者らはまた驚くべきことに、ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈＴ細胞を特異的に枯渇させる抗ＣＤ４５ＲＣ抗体による治療が、筋力を改善したこと（Ｏｕｉｓｓｅ ｅｔ ａｌ．，２０１９．Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：２１３１）、およびデュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）または自己免疫性多腺性内分泌不全症・カンジダ症・外胚葉性ジストロフィー（ＡＰＥＣＥＤ）などの単一遺伝子疾患を予防しおよび治療したこと（国際特許出願２０１９／１１５７９１）を実証した。
【0011】
近年では、本発明者らは、市販の抗ＣＤ４５ＲＣ抗体ＭＴ２と比較して、特に異種ＧｖＨＤの免疫ヒト化ＮＳＧマウスモデルにおいて、標的Ｔ細胞アポトーシスの誘導におけるより高い効率と改善された治療効果を示したｄｅ ｎｏｖｏヒト化抗ヒトＣＤ４５ＲＣ抗体を生成した（国際特許出願２０２０／０５８４９５）。
【0012】
ここで、本発明者らはさらに一歩進み、さらに優れた治療効果を有する、国際公開第２０２０／０５８４９５号の既に改善された抗ヒトＣＤ４５ＲＣ抗体の改善型を開発した。
【発明の概要】
【0013】
本発明は、ＣＤ４５ＲＣに特異的に結合する抗原結合ドメインに関し、上記抗原結合ドメインは：
（ａ）以下の３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）：
（ｉ）配列番号１０の配列のＶＨ－ＣＤＲ１；
（ｉｉ）配列番号１１の配列のＶＨ－ＣＤＲ２；および
（ｉｉｉ）配列番号１２の配列のＶＨ－ＣＤＲ３；ならびに
（ｂ）以下の３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）：
（ｉ）配列番号１３の配列のＶＬ－ＣＤＲ１；
（ｉｉ）配列番号１４の配列のＶＬ－ＣＤＲ２；および
（ｉｉｉ）配列番号１５の配列のＶＬ－ＣＤＲ３、
を含み、
配列番号１３中のＸは、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、およびＧｌｙ（Ｇ）からなる群から選択され；好ましくは、配列番号１３中のＸは、存在しない。
（ａ）以下の３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）：
（ｉ）配列番号１０の配列のＶＨ－ＣＤＲ１；
（ｉｉ）配列番号１１の配列のＶＨ－ＣＤＲ２；および
（ｉｉｉ）配列番号１２の配列のＶＨ－ＣＤＲ３；ならびに
（ｂ）以下の３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）：
（ｉ）配列番号１３の配列のＶＬ－ＣＤＲ１；
（ｉｉ）配列番号１４の配列のＶＬ－ＣＤＲ２；および
（ｉｉｉ）配列番号１５の配列のＶＬ－ＣＤＲ３、
を含み、
配列番号１３中のＸは、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、およびＧｌｙ（Ｇ）からなる群から選択され；好ましくは、配列番号１３中のＸは、存在しない。
【0014】
一実施形態では、抗原結合ドメインは、
１）配列番号２４の配列のＨＣＶＲおよび配列番号２５の配列のＬＣＶＲ；または
２）配列番号１０、１１、および１２を有する３つのＣＤＲと、配列番号２４のフレームワーク領域と少なくとも７０％の配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＨＣＶＲと、配列番号１３、１４、および１５を有する３つのＣＤＲと、配列番号２５のフレームワーク領域と少なくとも７０％の配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＬＣＶＲ、
を含み、ここで、抗原結合ドメインは、ＣＤ４５ＲＣに対するその結合特異性を保持し；
ここで、配列番号２５中のＸ１は、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、およびＧｌｙ（Ｇ）からなる群から選択され；好ましくは、配列番号１３中のＸは、不在であり；
配列番号２５中のＸ２は、Ｔｙｒ（Ｙ）およびＰｈｅ（Ｆ）からなる群から選択され、好ましくは、配列番号２５中のＸ２は、Ｔｙｒ（Ｙ）である。
１）配列番号２４の配列のＨＣＶＲおよび配列番号２５の配列のＬＣＶＲ；または
２）配列番号１０、１１、および１２を有する３つのＣＤＲと、配列番号２４のフレームワーク領域と少なくとも７０％の配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＨＣＶＲと、配列番号１３、１４、および１５を有する３つのＣＤＲと、配列番号２５のフレームワーク領域と少なくとも７０％の配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＬＣＶＲ、
を含み、ここで、抗原結合ドメインは、ＣＤ４５ＲＣに対するその結合特異性を保持し；
ここで、配列番号２５中のＸ１は、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、およびＧｌｙ（Ｇ）からなる群から選択され；好ましくは、配列番号１３中のＸは、不在であり；
配列番号２５中のＸ２は、Ｔｙｒ（Ｙ）およびＰｈｅ（Ｆ）からなる群から選択され、好ましくは、配列番号２５中のＸ２は、Ｔｙｒ（Ｙ）である。
【0015】
一実施形態では、抗原結合ドメインは、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、タンデム－ジ－ｓｃＦｖ、タンデム－トリ－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－Ｆｃ、ミニボディ、マキシボディ、ダイアボディ、トリアボディ、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、およびＦ（ａｂ’）２からなる群から選択される。
【0016】
本発明はさらに、ＣＤ４５ＲＣに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片に関し、ここで、上記抗体は、本発明による抗原結合ドメインを含む。
【0017】
一実施形態では、抗体またはその抗原結合断片は、重鎖定常領域（ＨＣＣＲ）および軽鎖定常領域（ＬＣＣＲ）をさらに含み、
好ましくは、ＨＣＣＲは、配列番号２６～２８のいずれか１つのアミノ酸配列、より好ましくは配列番号２６と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を含み、かつＬＣＣＲは、配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を含み；
抗体またはその抗原結合断片は、ＣＤ４５ＲＣに対する結合特異性を保持する。
好ましくは、ＨＣＣＲは、配列番号２６～２８のいずれか１つのアミノ酸配列、より好ましくは配列番号２６と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を含み、かつＬＣＣＲは、配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を含み；
抗体またはその抗原結合断片は、ＣＤ４５ＲＣに対する結合特異性を保持する。
【0018】
本発明はさらに、
ｉ）本発明による少なくとも１つの細胞外抗原結合ドメイン；
ｉｉ）任意により、細胞外ヒンジドメイン、
ｉｉｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメインであって、
好ましくは、ＣＤ８膜貫通ドメインおよびＣＤ２８膜貫通ドメインからなる群から選択され、
より好ましくは、配列番号４９のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を有するＣＤ８膜貫通ドメイン、および配列番号５０のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を有するＣＤ２８膜貫通ドメインからなる群から選択される、膜貫通ドメイン；
ｉｖ）少なくとも１つの一次シグナル伝達ドメインと、任意により１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインを含む少なくとも１つの細胞内シグナル伝達ドメインであって、
好ましくは、少なくとも１つの一次シグナル伝達は、ＣＤ３ζのシグナル伝達ドメインであり、
好ましくは、少なくとも１つの一次シグナル伝達は、配列番号５１のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を有するＣＤ３εのシグナル伝達ドメインである、細胞内シグナル伝達ドメイン
を含む、ＣＤ４５ＲＣに特異的に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）に関する。
ｉ）本発明による少なくとも１つの細胞外抗原結合ドメイン；
ｉｉ）任意により、細胞外ヒンジドメイン、
ｉｉｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメインであって、
好ましくは、ＣＤ８膜貫通ドメインおよびＣＤ２８膜貫通ドメインからなる群から選択され、
より好ましくは、配列番号４９のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を有するＣＤ８膜貫通ドメイン、および配列番号５０のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を有するＣＤ２８膜貫通ドメインからなる群から選択される、膜貫通ドメイン；
ｉｖ）少なくとも１つの一次シグナル伝達ドメインと、任意により１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインを含む少なくとも１つの細胞内シグナル伝達ドメインであって、
好ましくは、少なくとも１つの一次シグナル伝達は、ＣＤ３ζのシグナル伝達ドメインであり、
好ましくは、少なくとも１つの一次シグナル伝達は、配列番号５１のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性を共有するアミノ酸配列を有するＣＤ３εのシグナル伝達ドメインである、細胞内シグナル伝達ドメイン
を含む、ＣＤ４５ＲＣに特異的に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）に関する。
【0019】
本発明はさらに、その細胞表面において本発明によるキメラ抗原受容体を発現する免疫細胞集団に関する。
【0020】
一実施形態では、上記集団の免疫細胞は、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ダブルポジティブＴ細胞、ダブルネガティブＴ細胞、γδＴ細胞、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、Ｂ細胞、マクロファージ、または樹状細胞を含むかまたはそれらからなる群から選択される。
【0021】
本発明はさらに、好ましくは調節エレメントの制御下にある、本発明による抗原結合ドメイン、本発明による抗体もしくはその抗原結合断片、または本発明によるＣＡＲをコードする核酸に関する。
【0022】
本発明は、医薬品としての使用のための、本発明による抗原結合ドメイン、本発明による抗体もしくはその抗原結合断片、本発明による免疫細胞集団、または本発明による核酸に関する。
【0023】
本発明はさらに、それを必要とする対象において免疫寛容を誘導することにおける使用のための、本発明による抗原結合ドメイン、本発明による抗体もしくはその抗原結合断片、本発明による免疫細胞集団、または本発明による核酸に関する。
【0024】
本発明はさらに、それを必要とする対象においてＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞を枯渇させることにおける使用のための、本発明による抗原結合ドメイン、本発明による抗体もしくはその抗原結合断片、本発明による免疫細胞集団、または本発明による核酸に関する。
【0025】
本発明はさらに、それを必要とする対象において移植拒絶反応を防ぐおよび／または低減することにおける使用のための、本発明による抗原結合ドメイン、本発明による抗体もしくはその抗原結合断片、本発明による免疫細胞集団、または本発明による核酸に関する。
【0026】
一実施形態では、移植拒絶反応を防ぐことおよび／または低減することは、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）を防ぐことおよび／または低減することを含むかまたはそれらからなる。
【0027】
本発明はさらに、それを必要とする対象においてＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害または状態を防ぐ、低減するおよび／または処置することにおける使用のための、本発明による抗原結合ドメイン、本発明による抗体もしくはその抗原結合断片、本発明による免疫細胞集団、または本発明による核酸に関し、好ましくはＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害または状態は、自己免疫疾患、望ましくない免疫応答、単一遺伝子疾患、リンパ腫、およびがんからなる群から選択される。
【0028】
定義
「抗体」または「免疫グロブリン」
本明細書で使用される、「免疫グロブリン」という用語は、それが任意の関連する特異的免疫反応性を有するか否かにかかわらず、２つの重鎖と２つの軽鎖の組み合わせを有するタンパク質を指す。「抗体」は、目的の抗原（例えば、ヒトＣＤ４５ＲＣ）に対し有意な既知の特異的免疫反応性活性を有する集合体を指す。「抗ｈＣＤ４５ＲＣ抗体」という用語は本明細書では、ヒトＣＤ４５ＲＣタンパク質に対する免疫学的特異性を呈する抗体を指すために使用される。本明細書の他の場所で説明されるように、ヒトＣＤ４５ＲＣに対する「特異性」は、ＣＤ４５ＲＣが発現される種との交差反応を排除すしない。
抗体および免疫グロブリンは、それらの間の鎖間共有結合による連結の有無にかかわらず、軽鎖および重鎖を含む。脊椎動物系における基本的な免疫グロブリンの構造は、比較的よく理解されている。「免疫グロブリン」という総称は、生化学的に区別できる５つの異なるクラスの抗体を含む。以下の議論は一般に免疫グロブリン分子のＩｇＧクラスに向けられるが、すべての５つのクラスの抗体が、本発明の範囲内にある。ＩｇＧに関して、免疫グロブリンは、約２３ｋＤａの分子量の２つの同一の軽ポリペプチド鎖、および約５３～７０ｋＤａの分子量の２つの同一の重鎖を含む。４つの鎖は、「Ｙ」構成でジスルフィド結合により結合され、軽鎖は、「Ｙ」の口から始まり可変領域を通って続く重鎖を包み込む。抗体の軽鎖は、カッパ（κ）またはラムダ（λ）のいずれかとして分類される。各重鎖クラスは、κまたはλ軽鎖のいずれかと結合され得る。一般に、軽鎖および重鎖は互いに共有結合により結合され、２つの重鎖の「テール」領域は、免疫グロブリンがハイブリドーマ、Ｂ細胞または遺伝子操作された宿主細胞のいずれかにより生成されると共有ジスルフィド連結または非共有連結により互いに結合される。重鎖では、アミノ酸配列は、Ｙ配置のフォーク型端部のＮ末端から各鎖の下部のＣ末端へと延在する。当業者であれば、重鎖はガンマ（γ）、ミュー（μ）、アルファ（α）、デルタ（Δ）またはイプシロン（ε）として分類され、それらの中にいくつかのサブクラス（例えば、γ１～γ４）があることを理解するであろう。抗体の「クラス」をそれぞれＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ ＩｇＤ、またはＩｇＥとして決定するのは、この鎖の性質である。免疫グロブリンのサブクラスまたは「アイソタイプ」（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１など）は、十分に特徴づけられており、機能的な特化をもたらすことが公知である。これらのクラスおよびアイソタイプのそれぞれの修飾型は、本開示の観点から当業者には容易に識別可能であり、したがって、本発明の範囲内である。上述したとおり、抗体の可変領域は、抗体が抗原上のエピトープを選択して認識し、特異的に結合することを可能にする。すなわち、抗体の軽鎖可変ドメイン（ＶＬドメイン）と重鎖可変ドメイン（ＶＨドメイン）が組み合わさって、三次元の抗原結合部位を画定する可変領域を形成する。この四次元の抗体構造は、「Ｙ」の各アームの端部に存在する抗原結合部位を形成する。より具体的には、抗原結合部位は、ＶＨ鎖およびＶＬ鎖のそれぞれの３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）により画定される。
「抗体」または「免疫グロブリン」
本明細書で使用される、「免疫グロブリン」という用語は、それが任意の関連する特異的免疫反応性を有するか否かにかかわらず、２つの重鎖と２つの軽鎖の組み合わせを有するタンパク質を指す。「抗体」は、目的の抗原（例えば、ヒトＣＤ４５ＲＣ）に対し有意な既知の特異的免疫反応性活性を有する集合体を指す。「抗ｈＣＤ４５ＲＣ抗体」という用語は本明細書では、ヒトＣＤ４５ＲＣタンパク質に対する免疫学的特異性を呈する抗体を指すために使用される。本明細書の他の場所で説明されるように、ヒトＣＤ４５ＲＣに対する「特異性」は、ＣＤ４５ＲＣが発現される種との交差反応を排除すしない。
抗体および免疫グロブリンは、それらの間の鎖間共有結合による連結の有無にかかわらず、軽鎖および重鎖を含む。脊椎動物系における基本的な免疫グロブリンの構造は、比較的よく理解されている。「免疫グロブリン」という総称は、生化学的に区別できる５つの異なるクラスの抗体を含む。以下の議論は一般に免疫グロブリン分子のＩｇＧクラスに向けられるが、すべての５つのクラスの抗体が、本発明の範囲内にある。ＩｇＧに関して、免疫グロブリンは、約２３ｋＤａの分子量の２つの同一の軽ポリペプチド鎖、および約５３～７０ｋＤａの分子量の２つの同一の重鎖を含む。４つの鎖は、「Ｙ」構成でジスルフィド結合により結合され、軽鎖は、「Ｙ」の口から始まり可変領域を通って続く重鎖を包み込む。抗体の軽鎖は、カッパ（κ）またはラムダ（λ）のいずれかとして分類される。各重鎖クラスは、κまたはλ軽鎖のいずれかと結合され得る。一般に、軽鎖および重鎖は互いに共有結合により結合され、２つの重鎖の「テール」領域は、免疫グロブリンがハイブリドーマ、Ｂ細胞または遺伝子操作された宿主細胞のいずれかにより生成されると共有ジスルフィド連結または非共有連結により互いに結合される。重鎖では、アミノ酸配列は、Ｙ配置のフォーク型端部のＮ末端から各鎖の下部のＣ末端へと延在する。当業者であれば、重鎖はガンマ（γ）、ミュー（μ）、アルファ（α）、デルタ（Δ）またはイプシロン（ε）として分類され、それらの中にいくつかのサブクラス（例えば、γ１～γ４）があることを理解するであろう。抗体の「クラス」をそれぞれＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ ＩｇＤ、またはＩｇＥとして決定するのは、この鎖の性質である。免疫グロブリンのサブクラスまたは「アイソタイプ」（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１など）は、十分に特徴づけられており、機能的な特化をもたらすことが公知である。これらのクラスおよびアイソタイプのそれぞれの修飾型は、本開示の観点から当業者には容易に識別可能であり、したがって、本発明の範囲内である。上述したとおり、抗体の可変領域は、抗体が抗原上のエピトープを選択して認識し、特異的に結合することを可能にする。すなわち、抗体の軽鎖可変ドメイン（ＶＬドメイン）と重鎖可変ドメイン（ＶＨドメイン）が組み合わさって、三次元の抗原結合部位を画定する可変領域を形成する。この四次元の抗体構造は、「Ｙ」の各アームの端部に存在する抗原結合部位を形成する。より具体的には、抗原結合部位は、ＶＨ鎖およびＶＬ鎖のそれぞれの３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）により画定される。
【0029】
「抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性」または「ＡＤＣＣ」
本明細書で使用される、「抗体依存性細胞媒介性細胞傷害」または「ＡＤＣＣ」という用語は、抗原保有標的細胞に結合した抗体のＦｃ領域が、主にＮＫ細胞上に存在するＣＤ１６ａ型のＦｃγ受容体（ＦｃγＲ）を結合する、細胞傷害の形態を指す（ＤｉＬｉｌｌｏ＆Ｒａｖｅｔｃｈ，２０１５．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ．３（７）：７０４－１３）。ＣＤ３２またはＣＤ６４などの他のＦｃγＲへの特定のＩｇＧアイソタイプの結合は、単球、マクロファージ、およびＰＭＮなどの細胞の活性化と、炎症標的細胞の破壊を媒介するリアーゼ、パーフォリン、グランザイム、ＴＦＮなどの様々な物質の分泌を引き起こす。ＮＫ細胞上のＣＤ１６ａの係合もまた、サイトカインの産生を引き起こす（Ａｎｅｇｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．１６７（２）：４５２－７２）。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するために、米国特許第５，５００，３６２号または第５，８２１，３３７号に記載されるような、ｉｎ ｖｉｔｒｏＡＤＣＣアッセイを実施してもよい。
本明細書で使用される、「抗体依存性細胞媒介性細胞傷害」または「ＡＤＣＣ」という用語は、抗原保有標的細胞に結合した抗体のＦｃ領域が、主にＮＫ細胞上に存在するＣＤ１６ａ型のＦｃγ受容体（ＦｃγＲ）を結合する、細胞傷害の形態を指す（ＤｉＬｉｌｌｏ＆Ｒａｖｅｔｃｈ，２０１５．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ．３（７）：７０４－１３）。ＣＤ３２またはＣＤ６４などの他のＦｃγＲへの特定のＩｇＧアイソタイプの結合は、単球、マクロファージ、およびＰＭＮなどの細胞の活性化と、炎症標的細胞の破壊を媒介するリアーゼ、パーフォリン、グランザイム、ＴＦＮなどの様々な物質の分泌を引き起こす。ＮＫ細胞上のＣＤ１６ａの係合もまた、サイトカインの産生を引き起こす（Ａｎｅｇｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８．Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．１６７（２）：４５２－７２）。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するために、米国特許第５，５００，３６２号または第５，８２１，３３７号に記載されるような、ｉｎ ｖｉｔｒｏＡＤＣＣアッセイを実施してもよい。
【0030】
「抗体依存性細胞媒介性食作用」または「ＡＤＣＰ」
本明細書で使用される、「抗体依存性細胞媒介性食作用」または「ＡＤＣＰ」という用語は、抗原保有標的細胞に結合した抗体のＦｃ領域が、特定の食細胞（例えば、好中球、単球、マクロファージ、および樹状細胞）上に存在するＦｃγ受容体（ＦｃγＲ）を結合する、食作用の形態を指す。この結合は、食作用プロセスの開始を引き起こして標的細胞の破壊を媒介する。
本明細書で使用される、「抗体依存性細胞媒介性食作用」または「ＡＤＣＰ」という用語は、抗原保有標的細胞に結合した抗体のＦｃ領域が、特定の食細胞（例えば、好中球、単球、マクロファージ、および樹状細胞）上に存在するＦｃγ受容体（ＦｃγＲ）を結合する、食作用の形態を指す。この結合は、食作用プロセスの開始を引き起こして標的細胞の破壊を媒介する。
【0031】
「抗原結合断片」または「抗原結合ドメイン」
本明細書で使用される、「抗原結合断片」または「抗原結合ドメイン」という用語は、抗体全体よりも少ないアミノ酸残基を含むが、抗原を結合できる、および／または抗原結合（例えば、ヒトＣＤ４５ＲＣへの特異的結合）に関して抗体全体と競合できる抗体または免疫グロブリンの部分または領域を指す。抗原結合断片は、これらに限定されないが、単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨおよびＦ（ａｂ’）２を含む。
本明細書で使用される、「抗原結合断片」または「抗原結合ドメイン」という用語は、抗体全体よりも少ないアミノ酸残基を含むが、抗原を結合できる、および／または抗原結合（例えば、ヒトＣＤ４５ＲＣへの特異的結合）に関して抗体全体と競合できる抗体または免疫グロブリンの部分または領域を指す。抗原結合断片は、これらに限定されないが、単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨおよびＦ（ａｂ’）２を含む。
【0032】
「補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）」または「ＣＤＣ」
「補体依存性細胞傷害」または「ＣＤＣ」という用語は、補体の存在下での標的細胞の溶解を指す。古典的補体経路の活性化は、それらの同族抗原に結合される抗体への補体系の第１の成分の結合により開始される。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイ（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ－Ｓａｎｔｏｒｏ ｅｔ ａｌ．，１９９７．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０２（２）：１６３－７１に記載されているようなＣＤＣアッセイ）を実施してよい。
「補体依存性細胞傷害」または「ＣＤＣ」という用語は、補体の存在下での標的細胞の溶解を指す。古典的補体経路の活性化は、それらの同族抗原に結合される抗体への補体系の第１の成分の結合により開始される。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイ（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ－Ｓａｎｔｏｒｏ ｅｔ ａｌ．，１９９７．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０２（２）：１６３－７１に記載されているようなＣＤＣアッセイ）を実施してよい。
【0033】
「ＣＤ４５」
本明細書で使用される、用語「ＣＤ４５」（ＣＤ４５ＲまたはＰＴＰＲＣとしても知られる）は、異なるアイソフォームで存在する膜貫通型糖タンパク質を指す。ＣＤ４５のこれらの異なるアイソフォームは、ＣＤ４５細胞外領域のＡ、Ｂ、Ｃ決定基をそれぞれコードする３つの可変エクソン（エクソン４、５、および６）の選択的スプライシングから生じる、細胞外ドメイン構造において異なる。制限されたエピトープと反応する抗体は、「ＣＤ４５Ｒ」としてクラスター化される。したがって、抗ＣＤ４５ＲＡ、抗ＣＤ４５ＲＢ、および抗ＣＤ４５ＲＣ抗体は、それぞれ、Ａ、Ｂ、およびＣ決定基の発現を含むＣＤ４５アイソフォームを認識する。全ての３つのＡ、Ｂ、およびＣ決定基が存在しない場合、アイソフォームは、ＣＤ４５ＲＯと称される。ＣＤ４５の様々なアイソフォームは、異なる細胞外ドメインを有するが、膜の近位に同一の細胞外配列、ならびに膜貫通ドメイン、および約３００残基の２つのタンデムに相同な高度に保存されたホスファターゼドメインを含む大きな細胞質尾部セグメントを有する。ＣＤ４５とそのアイソフォームは、ＴおよびＢリンパ球上のリンパ球ホスファターゼ関連リンタンパク質（ＬＰＡＰ）と非共有により会合する。ＣＤ４５は、ＣＤ１、ＣＤ２、ＣＤ３、およびＣＤ４を含む、他のいくつかの細胞表面抗原と会合されると報告されている。ＣＤ４５は、リンパ球活性化のシグナル伝達に関与する。文字「ｈ」が前に付く場合（例えば、ｈＣＤ４５）、ＣＤ４５がヒト起源であることを意味する。
本明細書で使用される、用語「ＣＤ４５」（ＣＤ４５ＲまたはＰＴＰＲＣとしても知られる）は、異なるアイソフォームで存在する膜貫通型糖タンパク質を指す。ＣＤ４５のこれらの異なるアイソフォームは、ＣＤ４５細胞外領域のＡ、Ｂ、Ｃ決定基をそれぞれコードする３つの可変エクソン（エクソン４、５、および６）の選択的スプライシングから生じる、細胞外ドメイン構造において異なる。制限されたエピトープと反応する抗体は、「ＣＤ４５Ｒ」としてクラスター化される。したがって、抗ＣＤ４５ＲＡ、抗ＣＤ４５ＲＢ、および抗ＣＤ４５ＲＣ抗体は、それぞれ、Ａ、Ｂ、およびＣ決定基の発現を含むＣＤ４５アイソフォームを認識する。全ての３つのＡ、Ｂ、およびＣ決定基が存在しない場合、アイソフォームは、ＣＤ４５ＲＯと称される。ＣＤ４５の様々なアイソフォームは、異なる細胞外ドメインを有するが、膜の近位に同一の細胞外配列、ならびに膜貫通ドメイン、および約３００残基の２つのタンデムに相同な高度に保存されたホスファターゼドメインを含む大きな細胞質尾部セグメントを有する。ＣＤ４５とそのアイソフォームは、ＴおよびＢリンパ球上のリンパ球ホスファターゼ関連リンタンパク質（ＬＰＡＰ）と非共有により会合する。ＣＤ４５は、ＣＤ１、ＣＤ２、ＣＤ３、およびＣＤ４を含む、他のいくつかの細胞表面抗原と会合されると報告されている。ＣＤ４５は、リンパ球活性化のシグナル伝達に関与する。文字「ｈ」が前に付く場合（例えば、ｈＣＤ４５）、ＣＤ４５がヒト起源であることを意味する。
【0034】
「ＣＤ４５ＲＣ」
本明細書で使用される、用語「ＣＤ４５ＲＣ」は、当業者に周知の２００～２２０ｋＤａの単鎖Ｉ型膜糖タンパク質を指す。ＣＤ４５ＲＣは、Ｃ決定基をコードするエクソン６を含むＣＤ４５の選択的スプライシングアイソフォーム（したがって、用語ＣＤ４５ＲＣ、すなわち、Ｃ決定基に制限された（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ Ｃ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔ）ＣＤ４５）である。ヒトＣＤ４５ＲＣのアミノ酸配列を配列番号１に示す（ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｐ０８５７５－１０に対応する）。このＣＤ４５ＲＣアイソフォームは、Ｂ細胞およびＮＫ細胞、ならびにＣＤ８＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋Ｔ細胞のサブセット上で発現されるが、ＣＤ８＋またはＣＤ４＋Ｔｒｅｇ、ＣＤ１４＋単球またはＰＭＮ上では発現されない（Ｐｉｃａｒｄａ ｅｔ ａｌ．，２０１７．ＪＣＩ Ｉｎｓｉｇｈｔ．２（３）：ｅ９００８８）。いくつかのモノクローナル抗体は、すべての異なるアイソフォームに共通するＣＤ４５部分中のエピトープを認識できる（これらは、抗ＣＤ４５抗体と呼ばれる）が、他のモノクローナル抗体は、それらが認識する決定基（Ａ、ＢまたはＣ）に応じて、所定のアイソフォームへの制限された特異性を有する。文字「ｈ」が前に付く場合（例えば、ｈＣＤ４５ＲＣ）、ＣＤ４５ＲＣがヒト起源であることを意味する。
本明細書で使用される、用語「ＣＤ４５ＲＣ」は、当業者に周知の２００～２２０ｋＤａの単鎖Ｉ型膜糖タンパク質を指す。ＣＤ４５ＲＣは、Ｃ決定基をコードするエクソン６を含むＣＤ４５の選択的スプライシングアイソフォーム（したがって、用語ＣＤ４５ＲＣ、すなわち、Ｃ決定基に制限された（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ Ｃ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔ）ＣＤ４５）である。ヒトＣＤ４５ＲＣのアミノ酸配列を配列番号１に示す（ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｐ０８５７５－１０に対応する）。このＣＤ４５ＲＣアイソフォームは、Ｂ細胞およびＮＫ細胞、ならびにＣＤ８＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋Ｔ細胞のサブセット上で発現されるが、ＣＤ８＋またはＣＤ４＋Ｔｒｅｇ、ＣＤ１４＋単球またはＰＭＮ上では発現されない（Ｐｉｃａｒｄａ ｅｔ ａｌ．，２０１７．ＪＣＩ Ｉｎｓｉｇｈｔ．２（３）：ｅ９００８８）。いくつかのモノクローナル抗体は、すべての異なるアイソフォームに共通するＣＤ４５部分中のエピトープを認識できる（これらは、抗ＣＤ４５抗体と呼ばれる）が、他のモノクローナル抗体は、それらが認識する決定基（Ａ、ＢまたはＣ）に応じて、所定のアイソフォームへの制限された特異性を有する。文字「ｈ」が前に付く場合（例えば、ｈＣＤ４５ＲＣ）、ＣＤ４５ＲＣがヒト起源であることを意味する。
【0035】
「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」
本明細書で使用される、「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」という用語は、重鎖ポリペプチドおよび軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見出される非隣接抗原組み合わせ部位を意味する。ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，（１９９１．Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ（５ｔｈ ｅｄ．）．Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ：Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ；ａｎｄ Ｃｈｏｔｈｉａ ＆ Ｌｅｓｋ，１９８７．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．１９６（４）：９０１－１７）から推定されるように、表１の規則に従い特定された。
本明細書で使用される、「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」という用語は、重鎖ポリペプチドおよび軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見出される非隣接抗原組み合わせ部位を意味する。ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，（１９９１．Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ（５ｔｈ ｅｄ．）．Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ：Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ；ａｎｄ Ｃｈｏｔｈｉａ ＆ Ｌｅｓｋ，１９８７．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．１９６（４）：９０１－１７）から推定されるように、表１の規則に従い特定された。
【表1】
【0036】
「操作された」
本明細書で使用される、「操作された」または「修飾された」という用語は、トランスフェクト、形質転換、または形質導入されている細胞を指す。
本明細書で使用される、「操作された」または「修飾された」という用語は、トランスフェクト、形質転換、または形質導入されている細胞を指す。
【0037】
「エピトープ」
本明細書で使用される、用語「エピトープ」は、それに抗体またはその結合断片が結合する、タンパク質（複数可）上に位置するアミノ酸の特定の配置を指す。エピトープは多くの場合、アミノ酸または糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面グループで構成され、特定の三次元構造特性および特定の電荷特性を有する。エピトープは、直鎖状（もしくは連続的）または立体配座であってよく、すなわち、必ずしも隣接していなくてもよい抗原の様々な領域中のアミノ酸の２つ以上の配列が関与している。
本明細書で使用される、用語「エピトープ」は、それに抗体またはその結合断片が結合する、タンパク質（複数可）上に位置するアミノ酸の特定の配置を指す。エピトープは多くの場合、アミノ酸または糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面グループで構成され、特定の三次元構造特性および特定の電荷特性を有する。エピトープは、直鎖状（もしくは連続的）または立体配座であってよく、すなわち、必ずしも隣接していなくてもよい抗原の様々な領域中のアミノ酸の２つ以上の配列が関与している。
【0038】
「フレームワーク領域」または「ＦＲ」または「非ＣＤＲ領域」
本明細書で使用される、「フレームワーク領域」または「ＦＲ」または「非ＣＤ領域」という用語は、可変領域の一部であるが、ＣＤＲの一部ではない（例えば、ＣＤＲのＫａｂａｔ／Ｃｈｏｔｈｉａ定義を使用して）アミノ酸残基を含む。したがって、可変領域フレームワークは、約１００～１２０アミノ酸長であるが、ＣＤＲの外側のアミノ酸のみを含む。
ＨＣＶＲの具体例、およびＫａｂａｔ／Ｃｈｏｔｈｉａにより定義されるＣＤＲについて：
－ＦＲ１は、Ｃｈｏｔｈｉａ／ＡｂＭの定義に従いアミノ酸１～２５を含む可変領域のドメイン、またはＫａｂａｔの定義に従い５残基後に対応し得る；
－ＦＲ２は、アミノ酸３６～４９を含む可変領域のドメインに対応し得る；
－ＦＲ３は、アミノ酸６７～９８を含む可変領域のドメインに対応し得る；
－ＦＲ４は、アミノ酸１０４～１１０から可変領域の末端への可変領域のドメインに対応し得る。
軽鎖のフレームワーク領域は、ＬＣＶＲのＣＤＲの各々により同様に分離される。天然に存在する抗体では、各単量体抗体に存在する６つのＣＤＲは、アミノ酸の短い非隣接配列であり、抗体が水性環境でその三次元構成をとるときに、抗原結合部位を形成するように特異的に位置される。重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインの残りの部分は、アミノ酸配列においてより少ない分子間変動を有し、フレームワーク領域と呼ばれる。フレームワーク領域は主に、βシートコンフォメーションを採用し、ＣＤＲは、ループを形成し、それは接続し、場合によってはβシート構造の一部を形成する。したがって、これらのフレームワーク領域は、鎖間の非共有結合による相互作用により、正しい配向での６つのＣＤＲの位置づけを提供する足場を形成するように作用する。位置づけされたＣＤＲにより形成される抗原結合部位は、免疫反応性抗原上のエピトープに相補的な表面を画定する。この相補的な表面は、免疫反応性抗原エピトープへの抗体の非共有的結合を促進する。ＣＤＲの位置は、当業者により容易に特定できる。
本明細書で使用される、「フレームワーク領域」または「ＦＲ」または「非ＣＤ領域」という用語は、可変領域の一部であるが、ＣＤＲの一部ではない（例えば、ＣＤＲのＫａｂａｔ／Ｃｈｏｔｈｉａ定義を使用して）アミノ酸残基を含む。したがって、可変領域フレームワークは、約１００～１２０アミノ酸長であるが、ＣＤＲの外側のアミノ酸のみを含む。
ＨＣＶＲの具体例、およびＫａｂａｔ／Ｃｈｏｔｈｉａにより定義されるＣＤＲについて：
－ＦＲ１は、Ｃｈｏｔｈｉａ／ＡｂＭの定義に従いアミノ酸１～２５を含む可変領域のドメイン、またはＫａｂａｔの定義に従い５残基後に対応し得る；
－ＦＲ２は、アミノ酸３６～４９を含む可変領域のドメインに対応し得る；
－ＦＲ３は、アミノ酸６７～９８を含む可変領域のドメインに対応し得る；
－ＦＲ４は、アミノ酸１０４～１１０から可変領域の末端への可変領域のドメインに対応し得る。
軽鎖のフレームワーク領域は、ＬＣＶＲのＣＤＲの各々により同様に分離される。天然に存在する抗体では、各単量体抗体に存在する６つのＣＤＲは、アミノ酸の短い非隣接配列であり、抗体が水性環境でその三次元構成をとるときに、抗原結合部位を形成するように特異的に位置される。重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインの残りの部分は、アミノ酸配列においてより少ない分子間変動を有し、フレームワーク領域と呼ばれる。フレームワーク領域は主に、βシートコンフォメーションを採用し、ＣＤＲは、ループを形成し、それは接続し、場合によってはβシート構造の一部を形成する。したがって、これらのフレームワーク領域は、鎖間の非共有結合による相互作用により、正しい配向での６つのＣＤＲの位置づけを提供する足場を形成するように作用する。位置づけされたＣＤＲにより形成される抗原結合部位は、免疫反応性抗原上のエピトープに相補的な表面を画定する。この相補的な表面は、免疫反応性抗原エピトープへの抗体の非共有的結合を促進する。ＣＤＲの位置は、当業者により容易に特定できる。
【0039】
「重鎖領域」
本明細書で使用される、「重鎖領域」という用語は、免疫グロブリン重鎖の定常ドメインに由来するアミノ酸配列を含む。重鎖領域を含むタンパク質は、ＣＨ１ドメイン、ヒンジ（例えば、上部、中間、および／または下部ヒンジ領域）ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、またはそれらのバリアントもしくは断片の少なくとも１つを含む。一実施形態では、本発明による抗体またはその結合断片は、免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域（例えば、ヒンジ部分、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン）を含み得る。別の実施形態では、本発明による抗体またはその結合断片は、少なくとも定常ドメインの領域（例えば、ＣＨ２ドメインの全部または一部）を含まない。ある実施形態では、定常ドメインの少なくとも１つ、好ましくはすべては、ヒト免疫グロブリン重鎖に由来する。例えば、１つの好ましい実施形態では、重鎖領域は、完全ヒトヒンジドメインを含む。他の好ましい実施形態では、重鎖領域は、完全ヒトＦｃ領域（例えば、ヒト免疫グロブリンからのヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３ドメイン配列）を含む。ある実施形態では、重鎖領域の構成定常ドメインは、異なる免疫グロブリン分子に由来する。例えば、タンパク質の重鎖領域は、ＩｇＧ１分子に由来するＣＨ２ドメインと、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４分子に由来するヒンジ領域を含み得る。他の実施形態では、定常ドメインは、異なる免疫グロブリン分子の領域を含むキメラドメインである。例えば、ヒンジは、ＩｇＧ１分子からの第１の領域と、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４分子からの第２の領域を含み得る。上記のとおり、当業者であれば、重鎖領域の定常ドメインは、それらが天然に存在する（野生型）免疫グロブリン分子からのアミノ酸配列において異なるように修飾され得ることを理解するであろう。すなわち、本発明による抗体またはその結合断片は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２またはＣＨ３）および／または軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）の１つ以上への改変または修飾を含み得る。例示的な修飾は、１つ以上のドメインにおける１つ以上のアミノ酸の付加、欠失または置換を含む。
本明細書で使用される、「重鎖領域」という用語は、免疫グロブリン重鎖の定常ドメインに由来するアミノ酸配列を含む。重鎖領域を含むタンパク質は、ＣＨ１ドメイン、ヒンジ（例えば、上部、中間、および／または下部ヒンジ領域）ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、またはそれらのバリアントもしくは断片の少なくとも１つを含む。一実施形態では、本発明による抗体またはその結合断片は、免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域（例えば、ヒンジ部分、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメイン）を含み得る。別の実施形態では、本発明による抗体またはその結合断片は、少なくとも定常ドメインの領域（例えば、ＣＨ２ドメインの全部または一部）を含まない。ある実施形態では、定常ドメインの少なくとも１つ、好ましくはすべては、ヒト免疫グロブリン重鎖に由来する。例えば、１つの好ましい実施形態では、重鎖領域は、完全ヒトヒンジドメインを含む。他の好ましい実施形態では、重鎖領域は、完全ヒトＦｃ領域（例えば、ヒト免疫グロブリンからのヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３ドメイン配列）を含む。ある実施形態では、重鎖領域の構成定常ドメインは、異なる免疫グロブリン分子に由来する。例えば、タンパク質の重鎖領域は、ＩｇＧ１分子に由来するＣＨ２ドメインと、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４分子に由来するヒンジ領域を含み得る。他の実施形態では、定常ドメインは、異なる免疫グロブリン分子の領域を含むキメラドメインである。例えば、ヒンジは、ＩｇＧ１分子からの第１の領域と、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４分子からの第２の領域を含み得る。上記のとおり、当業者であれば、重鎖領域の定常ドメインは、それらが天然に存在する（野生型）免疫グロブリン分子からのアミノ酸配列において異なるように修飾され得ることを理解するであろう。すなわち、本発明による抗体またはその結合断片は、重鎖定常ドメイン（ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２またはＣＨ３）および／または軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）の１つ以上への改変または修飾を含み得る。例示的な修飾は、１つ以上のドメインにおける１つ以上のアミノ酸の付加、欠失または置換を含む。
【0040】
「ヒンジ領域」または「ヒンジドメイン」
本明細書で使用される、「ヒンジ領域」または「ヒンジドメイン」という用語は、互換的に使用され、ＣＨ１ドメインをＣＨ２ドメインに連結する免疫グロブリン重鎖の領域を含む。このヒンジ領域は、約２５残基を含み、柔軟であり、そのため２つのＮ末端抗原結合領域が独立して移動することを可能にする。ヒンジ領域は、３つの異なるドメイン：上部、中間、および下部のヒンジドメイン、に細分化され得る（Ｒｏｕｘ ｅｔ ａｌ．，１９９８．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６１（８）：４０８３－９０）。キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）の文脈において、「ヒンジ領域」または「ヒンジドメイン」という用語は、細胞外結合ドメインを膜貫通ドメインと接続する領域を指す。
本明細書で使用される、「ヒンジ領域」または「ヒンジドメイン」という用語は、互換的に使用され、ＣＨ１ドメインをＣＨ２ドメインに連結する免疫グロブリン重鎖の領域を含む。このヒンジ領域は、約２５残基を含み、柔軟であり、そのため２つのＮ末端抗原結合領域が独立して移動することを可能にする。ヒンジ領域は、３つの異なるドメイン：上部、中間、および下部のヒンジドメイン、に細分化され得る（Ｒｏｕｘ ｅｔ ａｌ．，１９９８．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６１（８）：４０８３－９０）。キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）の文脈において、「ヒンジ領域」または「ヒンジドメイン」という用語は、細胞外結合ドメインを膜貫通ドメインと接続する領域を指す。
【0041】
「同一性」または「同一の」
本明細書で使用される、「同一性」または「同一の」という用語は、２つ以上のアミノ酸配列の配列間、または２つ以上の核酸配列の配列間の関係で使用される場合、２つ以上のアミノ酸残基または核酸残基のストリング間の一致数により決定されるような、アミノ酸配列間または核酸配列間の配列関連性の程度を指す。「同一性」は、特定の数学的モデルまたはコンピュータプログラム（すなわち、「アルゴリズム」）により指定されるギャップアラインメント（存在する場合）を有する２つ以上の配列の小さい方の間の同一の一致の割合（パーセント）を測定する。
関連するアミノ酸配列または核酸配列の同一性は、既知の方法により容易に計算できる。このような方法としては、これらに限定されないが、以下に記載されるものが挙げられる；Ｌｅｓｋ，１９８８．Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ：Ｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ；Ｓｍｉｔｈ，１９９３．Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ：Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ｐｒｏｊｅｃｔｓ．Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ：Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ；Ｇｒｉｆｆｉｎ＆Ｇｒｉｆｆｉｎ，１９９４．Ｃｏｍｐｕｔｅｒ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｄａｔａ，Ｐａｒｔ １．Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ：Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ；ｖｏｎ Ｈｅｉｊｎｅ，１９８７．Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ：ｔｒｅａｓｕｒｅ ｔｒｏｖｅ ｏｒ ｔｒｉｖｉａｌ ｐｕｒｓｕｉｔ．Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ：Ａｃａｄｅｍｉｃ ｐｒｅｓｓ；Ｇｒｉｂｓｋｏｖ＆Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，１９９１．Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｐｒｉｍｅｒ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ；Ｃａｒｉｌｌｏ ｅｔ ａｌ．，１９８８．ＳＩＡＭ Ｊ Ａｐｐｌ Ｍａｔｈ．４８（５）：１０７３－８２。
同一性を決定するための好ましい方法は、試験対象の配列間で最大の一致が得られるように設計される。同一性を決定する方法は、公開されているコンピュータプログラムに記述されている。２つの配列間の同一性を決定するための好ましいコンピュータプログラム方法としては、ＧＣＧプログラムパッケージ、例えば、ＧＡＰ（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ；Ｄｅｖｅｒｅｕｘら、１９８４．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１２（１ Ｐｔ １）：３８７－９５）、ＢＬＡＳＴＰ，ＢＬＡＳＴＮ、およびＦＡＳＴＡ（Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，１９９０．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２１５（３）：４０３－１０）が挙げられる。ＢＬＡＳＴＸプログラムは、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ）および他の情報源（ＢＬＡＳＴ Ｍａｎｕａｌ，Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．ＮＣＢ／ＮＬＭ／ＮＩＨ Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．２０８９４）から公開されている。周知のＳｍｉｔｈＷａｔｅｒｍａｎアルゴリズムもまた、同一性を決定するために使用されてよい。
本明細書で使用される、「同一性」または「同一の」という用語は、２つ以上のアミノ酸配列の配列間、または２つ以上の核酸配列の配列間の関係で使用される場合、２つ以上のアミノ酸残基または核酸残基のストリング間の一致数により決定されるような、アミノ酸配列間または核酸配列間の配列関連性の程度を指す。「同一性」は、特定の数学的モデルまたはコンピュータプログラム（すなわち、「アルゴリズム」）により指定されるギャップアラインメント（存在する場合）を有する２つ以上の配列の小さい方の間の同一の一致の割合（パーセント）を測定する。
関連するアミノ酸配列または核酸配列の同一性は、既知の方法により容易に計算できる。このような方法としては、これらに限定されないが、以下に記載されるものが挙げられる；Ｌｅｓｋ，１９８８．Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ：Ｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ；Ｓｍｉｔｈ，１９９３．Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ：Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ｐｒｏｊｅｃｔｓ．Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ：Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ；Ｇｒｉｆｆｉｎ＆Ｇｒｉｆｆｉｎ，１９９４．Ｃｏｍｐｕｔｅｒ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｄａｔａ，Ｐａｒｔ １．Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ：Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ；ｖｏｎ Ｈｅｉｊｎｅ，１９８７．Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ：ｔｒｅａｓｕｒｅ ｔｒｏｖｅ ｏｒ ｔｒｉｖｉａｌ ｐｕｒｓｕｉｔ．Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ：Ａｃａｄｅｍｉｃ ｐｒｅｓｓ；Ｇｒｉｂｓｋｏｖ＆Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，１９９１．Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｐｒｉｍｅｒ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ；Ｃａｒｉｌｌｏ ｅｔ ａｌ．，１９８８．ＳＩＡＭ Ｊ Ａｐｐｌ Ｍａｔｈ．４８（５）：１０７３－８２。
同一性を決定するための好ましい方法は、試験対象の配列間で最大の一致が得られるように設計される。同一性を決定する方法は、公開されているコンピュータプログラムに記述されている。２つの配列間の同一性を決定するための好ましいコンピュータプログラム方法としては、ＧＣＧプログラムパッケージ、例えば、ＧＡＰ（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ；Ｄｅｖｅｒｅｕｘら、１９８４．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１２（１ Ｐｔ １）：３８７－９５）、ＢＬＡＳＴＰ，ＢＬＡＳＴＮ、およびＦＡＳＴＡ（Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，１９９０．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２１５（３）：４０３－１０）が挙げられる。ＢＬＡＳＴＸプログラムは、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ）および他の情報源（ＢＬＡＳＴ Ｍａｎｕａｌ，Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．ＮＣＢ／ＮＬＭ／ＮＩＨ Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．２０８９４）から公開されている。周知のＳｍｉｔｈＷａｔｅｒｍａｎアルゴリズムもまた、同一性を決定するために使用されてよい。
【0042】
「免疫特異的な」、「に特異的な」、または「特異的に結合する」
本明細書で使用される、抗体またはその結合断片は、それが抗原（例えば、ｈＣＤ４５ＲＣ）と検出可能なレベルで反応する場合、抗原に「免疫特異的である」、「特異的である」、または「特異的に結合」すると言われ、好ましくは約１０６Ｍ－１以上、好ましくは約１０７Ｍ－１、１０８Ｍ－１、５ｘ１０８Ｍ－１、１０９Ｍ－１、５ｘ１０９Ｍ－１のまたはそれより大きな親和定数（ＫＡ）を有する。
その同族抗原に対する抗体またはまたはそれらの結合断片の親和性はまた一般に、平衡解離定数（ＫＤ）として表される。抗体またはその結合断片は、それが抗原（例えば、ｈＣＤ４５ＲＣ）と検出可能なレベルで、好ましくは１０－６Ｍ以上、好ましくは１０－７Ｍ以下、５ｘ１０－８Ｍ、１０－８Ｍ、５ｘ１０－９Ｍ、１０－９Ｍ以下のＫＤで反応する場合、抗原に「免疫特異的な」、「特異的な」、または「特異的に結合する」と言われる。
抗体またはその結合断片の親和性は、従来の技術、例えば、以下に記載のものを使用して容易に決定され得る；Ｓｃａｔｃｈａｒｄ、１９４９．Ａｎｎ ＮＹ Ａｃａｄ Ｓｃｉ．５１：６６０－６７２。抗原、細胞または組織への抗体またはその結合断片の結合特性は一般に、免疫検出法、例えば、ＥＬＩＳＡ、免疫蛍光ベースアッセイ、例えば、免疫組織化学（ＩＨＣ）および／または蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）、または表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ、例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）を使用して）などを使用して決定され、判定され得る。
本明細書で使用される、抗体またはその結合断片は、それが抗原（例えば、ｈＣＤ４５ＲＣ）と検出可能なレベルで反応する場合、抗原に「免疫特異的である」、「特異的である」、または「特異的に結合」すると言われ、好ましくは約１０６Ｍ－１以上、好ましくは約１０７Ｍ－１、１０８Ｍ－１、５ｘ１０８Ｍ－１、１０９Ｍ－１、５ｘ１０９Ｍ－１のまたはそれより大きな親和定数（ＫＡ）を有する。
その同族抗原に対する抗体またはまたはそれらの結合断片の親和性はまた一般に、平衡解離定数（ＫＤ）として表される。抗体またはその結合断片は、それが抗原（例えば、ｈＣＤ４５ＲＣ）と検出可能なレベルで、好ましくは１０－６Ｍ以上、好ましくは１０－７Ｍ以下、５ｘ１０－８Ｍ、１０－８Ｍ、５ｘ１０－９Ｍ、１０－９Ｍ以下のＫＤで反応する場合、抗原に「免疫特異的な」、「特異的な」、または「特異的に結合する」と言われる。
抗体またはその結合断片の親和性は、従来の技術、例えば、以下に記載のものを使用して容易に決定され得る；Ｓｃａｔｃｈａｒｄ、１９４９．Ａｎｎ ＮＹ Ａｃａｄ Ｓｃｉ．５１：６６０－６７２。抗原、細胞または組織への抗体またはその結合断片の結合特性は一般に、免疫検出法、例えば、ＥＬＩＳＡ、免疫蛍光ベースアッセイ、例えば、免疫組織化学（ＩＨＣ）および／または蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）、または表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ、例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）を使用して）などを使用して決定され、判定され得る。
【0043】
「モノクローナル抗体」
本明細書で使用される、「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均質な抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、集団に含まれる個々の抗体は、少量で存在し得る天然に起こる変異を除き同一である。モノクローナル抗体は、非常に特異的であり、単一の抗原部位に対して向けられる。さらに、異なる決定基（エピトープ）に対して向けられる異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して向けられる。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体は、それらが他の抗体に混入されずに合成され得るという点で有利である。修飾語句「モノクローナル」は、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とすると解釈されない。例えば、本発明によるモノクローナル抗体またはそれらの結合断片は、Ｋｏｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９７５．Ｎａｔｕｒｅ．２５６（５５１７）：４９５－７により最初に記述されたハイブリドーマ方法論により調製され得るか、または細菌、真核動物もしくは植物細胞において組換えＤＮＡ法を使用して作出されてよい（米国特許第４，８１６，５６７号）。「モノクローナル抗体」はまた、例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９１．Ｎａｔｕｒｅ．３５２（６３３６）：６２４－８およびＭａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，１９９１．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２２２（３）：５８１－９７に記載の技術を使用して、ファージ抗体ライブラリーから単離され得る。
本明細書で使用される、「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均質な抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、集団に含まれる個々の抗体は、少量で存在し得る天然に起こる変異を除き同一である。モノクローナル抗体は、非常に特異的であり、単一の抗原部位に対して向けられる。さらに、異なる決定基（エピトープ）に対して向けられる異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して向けられる。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体は、それらが他の抗体に混入されずに合成され得るという点で有利である。修飾語句「モノクローナル」は、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とすると解釈されない。例えば、本発明によるモノクローナル抗体またはそれらの結合断片は、Ｋｏｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９７５．Ｎａｔｕｒｅ．２５６（５５１７）：４９５－７により最初に記述されたハイブリドーマ方法論により調製され得るか、または細菌、真核動物もしくは植物細胞において組換えＤＮＡ法を使用して作出されてよい（米国特許第４，８１６，５６７号）。「モノクローナル抗体」はまた、例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９１．Ｎａｔｕｒｅ．３５２（６３３６）：６２４－８およびＭａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，１９９１．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２２２（３）：５８１－９７に記載の技術を使用して、ファージ抗体ライブラリーから単離され得る。
【0044】
「防ぐ（ｐｒｅｖｅｎｔ）」、または「防ぐこと（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」または「防止（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）」
本明細書で使用される、「防ぐ（ｐｒｅｖｅｎｔ）」、「防ぐこと（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」および「防止（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）」という用語は、予防的手段および防止的手段を指し、その目的は、対象が所与の期間にわたり病的状態または障害を発症する可能性を低下させることである。そのような低下は、例えば、対象の病的状態または障害の少なくとも１つの症状の発症の遅延に反映され得る。
本明細書で使用される、「防ぐ（ｐｒｅｖｅｎｔ）」、「防ぐこと（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」および「防止（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）」という用語は、予防的手段および防止的手段を指し、その目的は、対象が所与の期間にわたり病的状態または障害を発症する可能性を低下させることである。そのような低下は、例えば、対象の病的状態または障害の少なくとも１つの症状の発症の遅延に反映され得る。
【0045】
「単鎖可変断片」
本明細書で使用される、「単鎖可変断片」という用語は、「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」とも略称され、単一のアミノ酸鎖へと接続されるＶＨおよびＶＬ抗体ドメインを含む抗原結合ドメインを指す。好ましくは、ｓｃＦｖアミノ酸配列は、ｓｃＦｖが抗原結合のための所望の構造を形成することを可能にする、ＶＨドメインとＶＬドメインの間のペプチドリンカーを含む（Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，１９９４．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｆｒｏｍ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ．Ｉｎ Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ＆Ｍｏｏｒｅ（Ｅｄｓ．），Ｔｈｅ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１１３：２６９－３１５．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ：Ｂｅｒｌｉｎ，Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ）。タンデム－ジ－ｓｃＦｖ、タンデム－トリ－ｓｃＦｖなどと呼ばれる、二価、三価、およびそれより多価のｓｃＦｖは、２つ、３つの、またはそれより多いｓｃＦｖを一緒に連結することにより操作され得る。あるいは、２つのｓｃＦｖを、ＶＨドメインとＶＬドメインの間で短すぎるリンカーペプチド（典型的には、約５～１０アミノ酸）を使用することにより、ダイアボディへと強制的に二量体化させることができる。ダイアボディは、欧州特許ＥＰ ０ ４０４ ０９７、国際公開第１９９３／０１１１６１号、およびＨｏｌｌｉｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９３．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．９０（１４）：６４４４－８にさらに詳細に記載される。あるいは、さらに短いリンカーペプチド（典型的には、約１～２アミノ酸）は、トリアボディまたはトリボディとも呼ばれるｓｃＦｖ三量体の形成をもたらす。
本明細書で使用される、「単鎖可変断片」という用語は、「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」とも略称され、単一のアミノ酸鎖へと接続されるＶＨおよびＶＬ抗体ドメインを含む抗原結合ドメインを指す。好ましくは、ｓｃＦｖアミノ酸配列は、ｓｃＦｖが抗原結合のための所望の構造を形成することを可能にする、ＶＨドメインとＶＬドメインの間のペプチドリンカーを含む（Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，１９９４．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｆｒｏｍ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ．Ｉｎ Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ＆Ｍｏｏｒｅ（Ｅｄｓ．），Ｔｈｅ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１１３：２６９－３１５．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ：Ｂｅｒｌｉｎ，Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ）。タンデム－ジ－ｓｃＦｖ、タンデム－トリ－ｓｃＦｖなどと呼ばれる、二価、三価、およびそれより多価のｓｃＦｖは、２つ、３つの、またはそれより多いｓｃＦｖを一緒に連結することにより操作され得る。あるいは、２つのｓｃＦｖを、ＶＨドメインとＶＬドメインの間で短すぎるリンカーペプチド（典型的には、約５～１０アミノ酸）を使用することにより、ダイアボディへと強制的に二量体化させることができる。ダイアボディは、欧州特許ＥＰ ０ ４０４ ０９７、国際公開第１９９３／０１１１６１号、およびＨｏｌｌｉｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９３．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．９０（１４）：６４４４－８にさらに詳細に記載される。あるいは、さらに短いリンカーペプチド（典型的には、約１～２アミノ酸）は、トリアボディまたはトリボディとも呼ばれるｓｃＦｖ三量体の形成をもたらす。
【0046】
「対象」
本明細書で使用される、「対象」という用語は、哺乳動物、好ましくはヒトを指す。一実施形態では、対象は、「患者」、すなわち、温血動物、より好ましくはヒトであり得、医療を受けることを待機している、もしくは医療を受けているか、または医療処置の対象であった／、もしくは対象である／対象となるであろう、または疾患の発症について監視される。ここでの用語「哺乳動物」は、ヒト、家畜、ならびに動物園、競技、またはペット動物、例えばイヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウサギなどを含む、任意の哺乳動物を指す。好ましくは、哺乳動物は、霊長類であり、より好ましくはヒトである。
本明細書で使用される、「対象」という用語は、哺乳動物、好ましくはヒトを指す。一実施形態では、対象は、「患者」、すなわち、温血動物、より好ましくはヒトであり得、医療を受けることを待機している、もしくは医療を受けているか、または医療処置の対象であった／、もしくは対象である／対象となるであろう、または疾患の発症について監視される。ここでの用語「哺乳動物」は、ヒト、家畜、ならびに動物園、競技、またはペット動物、例えばイヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウサギなどを含む、任意の哺乳動物を指す。好ましくは、哺乳動物は、霊長類であり、より好ましくはヒトである。
【0047】
「処置すること」または「処置」または「軽減」
本明細書で使用される、「処置すること」または「処置」または「軽減」という用語は、予防的または防止的手段を除く、治療的処置を指し、ここで、目的は、標的とされる病理学的状態または障害を減速（低減）させることである。処置を必要とするものは、すでに障害を有するもの、ならびに障害を有することが疑われるものを含む。対象は、本発明による単離された抗体またはその結合断片、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または医薬品の治療量を受けた後に、上記対象が以下の１つ以上の観察可能なおよび／または測定可能な減少または不在を示すならば、標的とされる病態または障害について良好に「処置され」る：ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞の数の減少；ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞である全細胞の割合の減少；特定の疾患または状態に関連する症状の１つ以上の、ある程度の軽減；罹患率および死亡率の低下；および／または生活の質の問題における改善。良好な処置および疾患の改善を判定するための上記のパラメータは、医師が精通しているルーチン手順により容易に測定可能である。
本明細書で使用される、「処置すること」または「処置」または「軽減」という用語は、予防的または防止的手段を除く、治療的処置を指し、ここで、目的は、標的とされる病理学的状態または障害を減速（低減）させることである。処置を必要とするものは、すでに障害を有するもの、ならびに障害を有することが疑われるものを含む。対象は、本発明による単離された抗体またはその結合断片、核酸、発現ベクター、組成物、医薬組成物または医薬品の治療量を受けた後に、上記対象が以下の１つ以上の観察可能なおよび／または測定可能な減少または不在を示すならば、標的とされる病態または障害について良好に「処置され」る：ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞の数の減少；ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞である全細胞の割合の減少；特定の疾患または状態に関連する症状の１つ以上の、ある程度の軽減；罹患率および死亡率の低下；および／または生活の質の問題における改善。良好な処置および疾患の改善を判定するための上記のパラメータは、医師が精通しているルーチン手順により容易に測定可能である。
【0048】
「可変領域」または「可変ドメイン」
本明細書で使用される、「可変」という用語は、可変ドメインＶＨおよびＶＬの特定の領域が、抗体間で配列において広範囲に異なり、かつその標的抗原に対する各特定の抗体の結合および特異性において使用されることを指す。しかし、可変性は、抗体の可変ドメイン全体に均等に分散されない。それは、抗原結合部位の部分を形成するＶＬドメインおよびＶＨドメインのそれぞれにおいて「超可変ループ」と呼ばれる３つのセグメントに集中している。
Ｖλ軽鎖ドメインの第１、第２、および第３の超可変ループは、本明細書ではＬ１（λ）、Ｌ２（λ）およびＬ３（λ）と呼ばれ、ＶＬドメインで残基２４～３３（Ｌ１（λ）、９、１０または１１アミノ酸残基からなる）、４９～５３（Ｌ２（λ）、３残基からなる）および９０～９６（Ｌ３（λ）、６残基からなる）を含むものとして定義され得る（Ｍｏｒｅａ ｅｔ ａｌ．，２０００．Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０（３）：２６７－７９）。
Ｖκ軽鎖ドメインの第１、第２、および第３の超可変ループは、本明細書ではＬ１（κ）、Ｌ２（κ）およびＬ３（κ）と呼ばれ、ＶＬドメインで残基２５～３３（Ｌ１（κ）、６、７、８、１１、１２または１３残基からなる）、４９～５３（Ｌ２（κ）、３残基からなる）および９０～９７（Ｌ３（κ）、６残基からなる）を含むものとして定義され得る（Ｍｏｒｅａ ａｌ．，２０００．Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０（３）：２６７－７９）。
ＶＨドメインの第１、第２、および第３の超可変ループは、本明細書ではＨ１、Ｈ２およびＨ３と呼ばれ、ＶＨドメインで残基２５～３３（Ｈ１、７、８または９残基からなる）、５２～５６（Ｈ２、３または４残基からなる）および９１～１０５（Ｈ３、長さは大きく変わる）を含むものとして定義され得る（Ｍｏｒｅａ ｅｔ ａｌ，２０００．Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０（３）：２６７－７９）。
特に明記しない限り、用語Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３はそれぞれ、ＶＬドメインの第１、第２、および第３の超可変ループを指し、ＶκおよびＶλアイソタイプの両方から得られる超可変ループを含む。用語Ｈ１、Ｈ２、およびＨ３はそれぞれ、ＶＨドメインの第１、第２、および第３の超可変ループを指し、ガンマ（γ）、ミュー（μ）、アルファ（α）、デルタ（）またはイプシロン（ε）を含む、既知の重鎖アイソタイプのいずれかから得られる超可変ループを含む。超可変ループＬ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｈ１、Ｈ２およびＨ３はそれぞれ、上で定義されるとおり、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」の一部を含み得る。
本明細書で使用される、「可変」という用語は、可変ドメインＶＨおよびＶＬの特定の領域が、抗体間で配列において広範囲に異なり、かつその標的抗原に対する各特定の抗体の結合および特異性において使用されることを指す。しかし、可変性は、抗体の可変ドメイン全体に均等に分散されない。それは、抗原結合部位の部分を形成するＶＬドメインおよびＶＨドメインのそれぞれにおいて「超可変ループ」と呼ばれる３つのセグメントに集中している。
Ｖλ軽鎖ドメインの第１、第２、および第３の超可変ループは、本明細書ではＬ１（λ）、Ｌ２（λ）およびＬ３（λ）と呼ばれ、ＶＬドメインで残基２４～３３（Ｌ１（λ）、９、１０または１１アミノ酸残基からなる）、４９～５３（Ｌ２（λ）、３残基からなる）および９０～９６（Ｌ３（λ）、６残基からなる）を含むものとして定義され得る（Ｍｏｒｅａ ｅｔ ａｌ．，２０００．Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０（３）：２６７－７９）。
Ｖκ軽鎖ドメインの第１、第２、および第３の超可変ループは、本明細書ではＬ１（κ）、Ｌ２（κ）およびＬ３（κ）と呼ばれ、ＶＬドメインで残基２５～３３（Ｌ１（κ）、６、７、８、１１、１２または１３残基からなる）、４９～５３（Ｌ２（κ）、３残基からなる）および９０～９７（Ｌ３（κ）、６残基からなる）を含むものとして定義され得る（Ｍｏｒｅａ ａｌ．，２０００．Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０（３）：２６７－７９）。
ＶＨドメインの第１、第２、および第３の超可変ループは、本明細書ではＨ１、Ｈ２およびＨ３と呼ばれ、ＶＨドメインで残基２５～３３（Ｈ１、７、８または９残基からなる）、５２～５６（Ｈ２、３または４残基からなる）および９１～１０５（Ｈ３、長さは大きく変わる）を含むものとして定義され得る（Ｍｏｒｅａ ｅｔ ａｌ，２０００．Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０（３）：２６７－７９）。
特に明記しない限り、用語Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３はそれぞれ、ＶＬドメインの第１、第２、および第３の超可変ループを指し、ＶκおよびＶλアイソタイプの両方から得られる超可変ループを含む。用語Ｈ１、Ｈ２、およびＨ３はそれぞれ、ＶＨドメインの第１、第２、および第３の超可変ループを指し、ガンマ（γ）、ミュー（μ）、アルファ（α）、デルタ（）またはイプシロン（ε）を含む、既知の重鎖アイソタイプのいずれかから得られる超可変ループを含む。超可変ループＬ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｈ１、Ｈ２およびＨ３はそれぞれ、上で定義されるとおり、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」の一部を含み得る。
【0049】
「ベクター」
本明細書で使用される、「ベクター」という用語は、その中に、そこでそれが複製され得る細胞中への導入のために、核酸配列が挿入され得る、担体核酸分子を指す。核酸配列は、「外因性」であり得、これは、その中にベクターが導入される細胞にとって外来性であるか、または配列が細胞中の配列に相同であるが、その中でその配列が通常は見出されない宿主細胞の核酸内のある位置にあることを意味する。ベクターとしては、ＤＮＡベクター、ＲＮＡベクター、プラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、ウイルス（例えば、バクテリオファージ、動物ウイルス、および植物ウイルス）、コスミド、および人工染色体（例えば、ＹＡＣ）が挙げられる。当業者であれば、当技術分野で知られている標準組換え技術を通じてベクターを構築する能力を十分に備えているであろう。
本明細書で使用される、「ベクター」という用語は、その中に、そこでそれが複製され得る細胞中への導入のために、核酸配列が挿入され得る、担体核酸分子を指す。核酸配列は、「外因性」であり得、これは、その中にベクターが導入される細胞にとって外来性であるか、または配列が細胞中の配列に相同であるが、その中でその配列が通常は見出されない宿主細胞の核酸内のある位置にあることを意味する。ベクターとしては、ＤＮＡベクター、ＲＮＡベクター、プラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、ウイルス（例えば、バクテリオファージ、動物ウイルス、および植物ウイルス）、コスミド、および人工染色体（例えば、ＹＡＣ）が挙げられる。当業者であれば、当技術分野で知られている標準組換え技術を通じてベクターを構築する能力を十分に備えているであろう。
【発明を実施するための形態】
【0050】
第１の態様では、本発明は、ＣＤ４５ＲＣ、好ましくはヒトＣＤ４５ＲＣ（ｈＣＤ４５ＲＣ）に特異的に結合する、抗原結合ドメインに関する。したがって、本発明の抗原結合ドメインは、「ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン」であり、好ましくは「ｈＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン」である。
【0051】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、配列番号１を有するｈＣＤ４５ＲＣに特異的に結合する。
【化1】
【0052】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５ＲＣの細胞外ドメインに特異的に結合する。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５ＲＣの細胞外ドメイン上に存在する少なくとも１つのエピトープに特異的に結合する。
【0053】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５のエクソン６によりコードされるＣ決定基に特異的に結合する。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５のエクソン６によりコードされるＣ決定基上の少なくとも１つのエピトープに特異的に結合する。
【0054】
一実施形態では、ｈＣＤ４５のエクソン６によりコードされるＣ決定基のアミノ酸配列は、配列番号２を含むかまたはそれからなる。
【化2】
【0055】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、配列番号２またはその断片と少なくとも約７０％、好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える同一性を共有する配列を含むかまたはそれからなる少なくとも１つのエピトープに特異的に結合する。
【0056】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、配列番号２の少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６または４７個のアミノ酸；または配列番号２と少なくとも約７０％、好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える同一性を共有する配列を含むかまたはそれらからなる少なくとも１つのエピトープに特異的に結合する。
【0057】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、配列番号２の少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６または４７個の連続アミノ酸；または配列番号２と少なくとも約７０％、好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える同一性を共有する配列を含むかまたはそれらからなる少なくとも１つのエピトープに特異的に結合する。
【0058】
一実施形態では、配列番号２を含むかまたはそれからなる少なくとも１つのエピトープの断片は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６または４７個のアミノ酸残基、好ましくは連続アミノ酸残基を含むかまたはそれらからなる。
【0059】
一実施形態では、配列番号２を含むかまたはそれからなる少なくとも１つのエピトープの断片は、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０、８００、８１０、８２０、８３０、８４０、８５０、８６０、８７０、８８０、８９０、９００、９１０、９２０、９３０、９４０、９５０、９６０、９７０、９８０、９９０、１０００、１０１０、１０２０、１０３０、１０４０、１０５０、１０６０、１０７０、１０８０、１０９０、１１００個のまたはそれを超える配列番号２を含むかまたはそれからなる配列の連続アミノ酸残基の範囲にまたがり広がる、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６または４７個のアミノ酸残基を含むかまたはそれらからなる。
【0060】
一実施形態では、配列番号２を含む配列は、配列番号１に記載のｈＣＤ４５ＲＣの配列である。
【0061】
一実施形態では、配列番号２を含む配列は、ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｐ０８５７５－３に対応する、配列番号３に記載の、ｈＣＤ４５ＲＡＢＣとしても知られる、ｈＣＤ４５の配列（すなわち、Ａ、Ｂ、およびＣ決定基を含む）である。
【化3】
【0062】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５のエクソン４によりコードされるＡ決定基に結合しない。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５のエクソン４によりコードされるＡ決定基上の少なくとも１つのエピトープに結合しない。
【0063】
一実施形態では、ｈＣＤ４５のエクソン４によりコードされるＣ決定基のアミノ酸配列は、配列番号４を含むかまたはそれからなる。
【化4】
【0064】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５のエクソン５によりコードされるＢ決定基に結合しない。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５のエクソン５によりコードされるＢ決定基上の少なくとも１つのエピトープに結合しない。
【0065】
一実施形態では、ｈＣＤ４５のエクソン４によりコードされるＢ決定基のアミノ酸配列は、配列番号５を含むかまたはそれからなる。
【化5】
【0066】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５ＲＡに結合しない。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５ＲＡの少なくとも１つのエピトープに結合しない。
【0067】
一実施形態では、ｈＣＤ４５ＲＡのアミノ酸配列は、配列番号６を含むかまたはそれからなり、ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｐ０８５７５－８に対応する。
【化6】
【0068】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５ＲＢに結合しない。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５ＲＢの少なくとも１つのエピトープに結合しない。
【0069】
一実施形態では、ｈＣＤ４５ＲＢのアミノ酸配列は、配列番号７を含むかまたはそれからなり、ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｐ０８５７５－９に対応する。
【化7】
【0070】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５ＲＡＢに結合しない。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５ＲＡＢの少なくとも１つのエピトープに結合しない。
【0071】
一実施形態では、ｈＣＤ４５ＲＡＢのアミノ酸配列は、配列番号８を含むかまたはそれからなり、ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｐ０８５７５－５に対応する。
【化8】
【0072】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５ＲＯに結合しない。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ｈＣＤ４５ＲＯの少なくとも１つのエピトープに結合しない。
【0073】
一実施形態では、ｈＣＤ４５ＲＢのアミノ酸配列は、配列番号９を含むかまたはそれからなり、ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｐ０８５７５－４に対応する。
【化9】
【0074】
一実施形態では、少なくとも１つのエピトープは、立体構造エピトープである。別の実施形態では、少なくとも１つのエピトープは、連続エピトープである。
【0075】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、例えば、固定化されたｈＣＤ４５ＲＣでＢｉａｃｏｒｅにより測定され得るように、約５×１０－７Ｍ以下の、好ましくは約２．５×１０－７Ｍ以下、約１×１０－７Ｍ以下、約７．５×１０－８Ｍ以下、約５×１０－８Ｍ以下、約２．５×１０－８Ｍ以下、約１×１０－８Ｍ以下、約７．５×１０－９Ｍ以下、約５×１０－９Ｍ以下、約２．５×１０－９Ｍ以下、約１×１０－９Ｍ以下の平衡解離定数（Ｋｄ）でｈＣＤ４５ＲＣに結合する。
【0076】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、例えば、固定化されたｈＣＤ４５ＲＣでＢｉａｃｏｒｅにより決定され得るように、９ｎＭ、８ｎＭ、７ｎＭ、６ｎＭ、５ｎＭ、４ｎＭ、３ｎＭ、またはそれ未満などの、１０ｎＭ未満のＫｄで、ｈＣＤ４５ＲＣに結合する。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、固定化されたｈＣＤ４５ＲＣでＢｉａｃｏｒｅにより測定される約２．２４ｎＭのＫｄでｈＣＤ４５ＲＣに結合する。
【0077】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、約１×１０４Ｍ－１秒－１以上の、好ましくは約５×１０４Ｍ－１秒－１以上、約１×１０５Ｍ－１秒－１以上、約２．５×１０５Ｍ－１秒－１以上、約５×１０５Ｍ－１秒－１以上の会合速度（Ｋｏｎ）で、ｈＣＤ４５ＲＣに結合する。
【0078】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、約５×１０－２秒－１以下の、好ましくは約４×１０－２秒－１以下、約３×１０－２秒－１以下、約２×１０－２秒－１以下、約１．５×１０－２秒－１以下の解離速度（Ｋｏｆｆ）でｈＣＤ４５ＲＣに結合する。
【0079】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、
－約５×１０－７Ｍ以下の、好ましくは約２．５×１０－７Ｍ以下、約１×１０－７Ｍ以下、約７．５×１０－８Ｍ以下、約５×１０－８Ｍ以下、約１×１０－８Ｍ以下の平衡解離定数（Ｋｄ）；
－約１×１０４Ｍ－１秒－１以上の、好ましくは約５×１０４Ｍ－１秒－１以上、約１×１０５Ｍ－１秒－１以上、約２．５×１０５Ｍ－１秒－１以上、約５×１０５Ｍ－１秒－１以上の会合速度（Ｋｏｎ）；および
－約５×１０－２秒－１以下の、好ましくは約４×１０－２秒－１以下、約３×１０－２秒－１以下、約２×１０－２秒－１以下、約１．５×１０－２秒－１以下の解離速度（Ｋｏｆｆ）
の少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つを有してｈＣＤ４５ＲＣに結合する。
－約５×１０－７Ｍ以下の、好ましくは約２．５×１０－７Ｍ以下、約１×１０－７Ｍ以下、約７．５×１０－８Ｍ以下、約５×１０－８Ｍ以下、約１×１０－８Ｍ以下の平衡解離定数（Ｋｄ）；
－約１×１０４Ｍ－１秒－１以上の、好ましくは約５×１０４Ｍ－１秒－１以上、約１×１０５Ｍ－１秒－１以上、約２．５×１０５Ｍ－１秒－１以上、約５×１０５Ｍ－１秒－１以上の会合速度（Ｋｏｎ）；および
－約５×１０－２秒－１以下の、好ましくは約４×１０－２秒－１以下、約３×１０－２秒－１以下、約２×１０－２秒－１以下、約１．５×１０－２秒－１以下の解離速度（Ｋｏｆｆ）
の少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つを有してｈＣＤ４５ＲＣに結合する。
【0080】
抗原結合ドメインのまたはそのリガンドに対する抗体の親和性を決定するための方法（例えば、Ｋｄ、ｋｏｆｆおよびｋｏｎを決定することを含む）は、当技術分野で周知であり、限定されないが、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、ＡｌｐｈａＬＩＳＡ、およびＫｉｎＥｘＡを含む。
【0081】
好ましい方法は、ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）であり、これは、抗原結合ドメインのまたは抗体の親和性を決定するために固定化されたＣＤ４５ＲＣを使用するＳＰＲに依存する。
【0082】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、単離されたＣＤ４５ＲＣ結合ドメインである。
【0083】
「単離された」は、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインが、異なる抗原特異性を有する他の抗原結合ドメインを実質的に含まないことを意味する；換言すれば、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ＣＤ４５ＲＣ以外の抗原に特異的に結合する抗原結合ドメインを実質的に含まない。しかし、単離されたＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、他の抗原、特に他の種由来のＣＤ４５ＲＣタンパク質に対する交差反応性を有し得る。さらに、単離されたＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、他の細胞物質および／または化学物質、特に酵素、ホルモン、および他のタンパク質性または非タンパク質性成分を含むが限定されない、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインの診断的または治療的使用を妨害するもの、を実質的に含まないであろう。
【0084】
一実施形態では、単離されたＣＤ４５ＲＣ結合ドメインはしたがって、精製される。
【0085】
一実施形態では、単離されたＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、
（１）Ｌｏｗｒｙ法により決定され得る、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインの８０重量％超、８５重量％、９０重量％、９１重量％、９２重量％、９３重量％、９４重量％、９５重量％、またはそれより多く、最も好ましくは９６重量％、９７重量％、９８重量％または９９重量％超へと；
（２）スピニングカップシーケンターの使用により、Ｎ末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るのに十分な程度へと；または
（３）還元または非還元条件下で、かつクーマシーブルーまたは好ましくは銀染色を使用するＳＤＳ－ＰＡＧＥにより示され得るような、均一性へと、
精製される。
（１）Ｌｏｗｒｙ法により決定され得る、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインの８０重量％超、８５重量％、９０重量％、９１重量％、９２重量％、９３重量％、９４重量％、９５重量％、またはそれより多く、最も好ましくは９６重量％、９７重量％、９８重量％または９９重量％超へと；
（２）スピニングカップシーケンターの使用により、Ｎ末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るのに十分な程度へと；または
（３）還元または非還元条件下で、かつクーマシーブルーまたは好ましくは銀染色を使用するＳＤＳ－ＰＡＧＥにより示され得るような、均一性へと、
精製される。
【0086】
一実施形態では、抗原結合ドメインは、単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、およびＦ（ａｂ’）２を含むかまたはそれらからなる群から選択される分子である。
【0087】
一実施形態では、抗原結合ドメインは、単鎖抗体である。一実施形態では、単鎖抗体は、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、ａｓｃＦｖ－Ｆｃ，タンデム－ｄｉ－ｓｃＦｖ、タンデム－ｔｒｉ－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－Ｆｃ、（ｓｃＦｖ－ＣＨ３）２（ミニボディとも呼ばれる）、（ｓｃＦｖ－ＣＨ２－ＣＨ３）２（マキシボディとも呼ばれる）、ダイアボディ、およびトリアボディを含むかまたはそれらからなる群から選択される。
【0088】
一実施形態では、抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖである。
【0089】
一実施形態では、ｓｃＦｖは、ｓｃＦｖが抗原の結合に望ましい構造を形成することを可能にする、ＶＨドメインとＶＬドメインの間のリンカーを含む。一実施形態では、リンカーは、短いポリペプチドであり、好ましくは２～２５アミノ酸の範囲の長さを有する。
【0090】
例えば、グリシン－セリンリンカーは、特に好適なリンカーを提供する。グリシン－セリンリンカーの例としては、これらに限定されないが、（ＧＳ）ｎリンカー、（Ｇ２Ｓ）ｎリンカー、（Ｇ３Ｓ）ｎリンカー、（Ｇ４Ｓ）ｎリンカーなどが挙げられ、ｎは、正の整数である。一実施形態では、ｎは、１、２、３、４、５またはそれより多くに等しい。
【0091】
グリシン－セリンリンカーの特定の例としては、これらに限定されないが、配列番号３０～３９が挙げられる。
【化10】
【0092】
以下では、特に明記されない限り、ＣＤＲの番号付けおよび定義は、Ｋａｂａｔ／Ｃｈｏｔｈｉａ定義に準拠する。
【0093】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは以下の３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含む：
ＶＨ－ＣＤＲ１：ＮＹＹＩＧ（配列番号：１０）；
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＤＩＦＰＧＧＤＹＡＮＹＮＥＫＦＱＧ（配列番号：１１）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＲＮＦＤＹ（配列番号：１２）。
ＶＨ－ＣＤＲ１：ＮＹＹＩＧ（配列番号：１０）；
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＤＩＦＰＧＧＤＹＡＮＹＮＥＫＦＱＧ（配列番号：１１）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＲＮＦＤＹ（配列番号：１２）。
【0094】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、以下の３つのＣＤＲを含むＨＣＶＲを含む：
ＶＨ－ＣＤＲ１：ＮＹＹＩＧ（配列番号：１０）；
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＤＩＦＰＧＧＤＹＡＮＹＮＥＫＦＱＧ（配列番号：１１）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＲＮＦＤＹ（配列番号：１２）。
ＶＨ－ＣＤＲ１：ＮＹＹＩＧ（配列番号：１０）；
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＤＩＦＰＧＧＤＹＡＮＹＮＥＫＦＱＧ（配列番号：１１）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＲＮＦＤＹ（配列番号：１２）。
【0095】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは以下の３つのＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＲＡＳＳＳＶＳ－Ｘ－ＹＭＨ（配列番号：１３）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＮＴＡＮＬＰＳ（配列番号：１４）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＲＳＳＹＰＬＴＦ（配列番号：１５）
を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含み、
Ｘは、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）およびＧｌｙ（Ｇ）を含むかもしくはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸは、存在しない。
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＲＡＳＳＳＶＳ－Ｘ－ＹＭＨ（配列番号：１３）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＮＴＡＮＬＰＳ（配列番号：１４）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＲＳＳＹＰＬＴＦ（配列番号：１５）
を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含み、
Ｘは、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）およびＧｌｙ（Ｇ）を含むかもしくはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸは、存在しない。
【0096】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、以下の３つのＣＤＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＲＡＳＳＳＶＳ－Ｘ－ＹＭＨ（配列番号：１３）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＮＴＡＮＬＰＳ（配列番号：１４）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＲＳＳＹＰＬＴＦ（配列番号：１５）
を含むＬＣＶＲを含み、
Ｘは、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）およびＧｌｙ（Ｇ）を含むかもしくはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸは、存在しない。
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＲＡＳＳＳＶＳ－Ｘ－ＹＭＨ（配列番号：１３）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＮＴＡＮＬＰＳ（配列番号：１４）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＲＳＳＹＰＬＴＦ（配列番号：１５）
を含むＬＣＶＲを含み、
Ｘは、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）およびＧｌｙ（Ｇ）を含むかもしくはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸは、存在しない。
【0097】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、
－少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは以下の３つのＣＤＲを含むＨＣＶＲ：
ＶＨ－ＣＤＲ１：ＮＹＹＩＧ（配列番号：１０）；
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＤＩＦＰＧＧＤＹＡＮＹＮＥＫＦＱＧ（配列番号：１１）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＲＮＦＤＹ（配列番号：１２）；および
－少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは以下の３つのＣＤＲを含むＬＣＶＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＲＡＳＳＳＶＳ－Ｘ－ＹＭＨ（配列番号：１３）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＮＴＡＮＬＰＳ（配列番号：１４）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＲＳＳＹＰＬＴＦ（配列番号：１５）
を含み、
Ｘは、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）およびＧｌｙ（Ｇ）を含むかもしくはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸは、存在しない。
－少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは以下の３つのＣＤＲを含むＨＣＶＲ：
ＶＨ－ＣＤＲ１：ＮＹＹＩＧ（配列番号：１０）；
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＤＩＦＰＧＧＤＹＡＮＹＮＥＫＦＱＧ（配列番号：１１）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＲＮＦＤＹ（配列番号：１２）；および
－少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは以下の３つのＣＤＲを含むＬＣＶＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＲＡＳＳＳＶＳ－Ｘ－ＹＭＨ（配列番号：１３）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＮＴＡＮＬＰＳ（配列番号：１４）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＲＳＳＹＰＬＴＦ（配列番号：１５）
を含み、
Ｘは、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）およびＧｌｙ（Ｇ）を含むかもしくはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸは、存在しない。
【0098】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、
－３つの以下のＣＤＲを含むＨＣＶＲ：
ＶＨ－ＣＤＲ１：ＮＹＹＩＧ（配列番号：１０）；
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＤＩＦＰＧＧＤＹＡＮＹＮＥＫＦＱＧ（配列番号：１１）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＲＮＦＤＹ（配列番号：１２）；および
－以下の３つのＣＤＲを含むＬＣＶＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＲＡＳＳＳＶＳ－Ｘ－ＹＭＨ（配列番号：１３）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＮＴＡＮＬＰＳ（配列番号：１４）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＲＳＳＹＰＬＴＦ（配列番号：１５）
を含み、
Ｘは、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）およびＧｌｙ（Ｇ）を含むかもしくはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸは、存在しない。
－３つの以下のＣＤＲを含むＨＣＶＲ：
ＶＨ－ＣＤＲ１：ＮＹＹＩＧ（配列番号：１０）；
ＶＨ－ＣＤＲ２：ＤＩＦＰＧＧＤＹＡＮＹＮＥＫＦＱＧ（配列番号：１１）；および
ＶＨ－ＣＤＲ３：ＲＮＦＤＹ（配列番号：１２）；および
－以下の３つのＣＤＲを含むＬＣＶＲ：
ＶＬ－ＣＤＲ１：ＲＡＳＳＳＶＳ－Ｘ－ＹＭＨ（配列番号：１３）；
ＶＬ－ＣＤＲ２：ＮＴＡＮＬＰＳ（配列番号：１４）；および
ＶＬ－ＣＤＲ３：ＱＱＲＳＳＹＰＬＴＦ（配列番号：１５）
を含み、
Ｘは、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）およびＧｌｙ（Ｇ）を含むかもしくはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸは、存在しない。
【0099】
一実施形態では、上で定義したＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、ＶＨ－ＣＤＲ３、ＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２および／またはＶＬ－ＣＤＲ３のいずれかは、特定のＣＤＲまたは上で定義したＣＤＲのセットと、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える同一性を共有するアミノ酸配列を有するとして特徴付けられてよく、一方でＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、その全体的な機能的特性、特にＣＤ４５ＲＣに対する、好ましくはｈＣＤ４５ＲＣに対する結合特異性を保持する。
【0100】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは少なくとも３つ、さらにより好ましくは４つの以下のフレームワーク領域（ＦＲ）を含むＨＣＶＲを含む：
ＶＨ－ＦＲ１：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴ（配列番号：１６）；
ＶＨ－ＦＲ２：ＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧ（配列番号：１７）；
ＶＨ－ＦＲ３：ＲＶＴＬＴＡＤＴＳＩＳＴＡＹＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤＴＶＶＹＹＣＶＲ（配列番号：１８）；
ＶＨ－ＦＲ４：ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号：１９）。
ＶＨ－ＦＲ１：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴ（配列番号：１６）；
ＶＨ－ＦＲ２：ＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧ（配列番号：１７）；
ＶＨ－ＦＲ３：ＲＶＴＬＴＡＤＴＳＩＳＴＡＹＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤＴＶＶＹＹＣＶＲ（配列番号：１８）；
ＶＨ－ＦＲ４：ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号：１９）。
【0101】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、４つの以下のＦＲを含むＨＣＶＲを含む：
ＶＨ－ＦＲ１：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴ（配列番号：１６）；
ＶＨ－ＦＲ２：ＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧ（配列番号：１７）；
ＶＨ－ＦＲ３：ＲＶＴＬＴＡＤＴＳＩＳＴＡＹＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤＴＶＶＹＹＣＶＲ（配列番号：１８）；
ＶＨ－ＦＲ４：ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号：１９）。
ＶＨ－ＦＲ１：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴ（配列番号：１６）；
ＶＨ－ＦＲ２：ＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧ（配列番号：１７）；
ＶＨ－ＦＲ３：ＲＶＴＬＴＡＤＴＳＩＳＴＡＹＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤＴＶＶＹＹＣＶＲ（配列番号：１８）；
ＶＨ－ＦＲ４：ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号：１９）。
【0102】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは少なくとも３つ、さらにより好ましくは４つの以下のＦＲ：
ＶＬ－ＦＲ１：ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣ（配列番号：２０）；
ＶＬ－ＦＲ２：ＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＷＩＹ（配列番号：２１）；
ＶＬ－ＦＲ３：ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥ－Ｘ－ＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣ（配列番号：２２）；
ＶＬ－ＦＲ４：ＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号：２３）
を含むＬＣＶＲを含み、
Ｘは、Ｔｙｒ（Ｙ）およびＰｈｅ（Ｆ）を含むかまたはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸは、Ｔｙｒ（Ｙ）である。
ＶＬ－ＦＲ１：ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣ（配列番号：２０）；
ＶＬ－ＦＲ２：ＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＷＩＹ（配列番号：２１）；
ＶＬ－ＦＲ３：ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥ－Ｘ－ＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣ（配列番号：２２）；
ＶＬ－ＦＲ４：ＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号：２３）
を含むＬＣＶＲを含み、
Ｘは、Ｔｙｒ（Ｙ）およびＰｈｅ（Ｆ）を含むかまたはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸは、Ｔｙｒ（Ｙ）である。
【0103】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、４つの以下のＦＲ：
ＶＬ－ＦＲ１：ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣ（配列番号：２０）；
ＶＬ－ＦＲ２：ＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＷＩＹ（配列番号：２１）；
ＶＬ－ＦＲ３：ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥ－Ｘ－ＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣ（配列番号：２２）；
ＶＬ－ＦＲ４：ＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号：２３）
を含むＬＣＶＲを含み、
Ｘは、Ｔｙｒ（Ｙ）およびＰｈｅ（Ｆ）を含むかまたはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸは、Ｔｙｒ（Ｙ）である。
ＶＬ－ＦＲ１：ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣ（配列番号：２０）；
ＶＬ－ＦＲ２：ＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＷＩＹ（配列番号：２１）；
ＶＬ－ＦＲ３：ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥ－Ｘ－ＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣ（配列番号：２２）；
ＶＬ－ＦＲ４：ＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号：２３）
を含むＬＣＶＲを含み、
Ｘは、Ｔｙｒ（Ｙ）およびＰｈｅ（Ｆ）を含むかまたはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸは、Ｔｙｒ（Ｙ）である。
【0104】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、配列番号２４のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲを含む。
【0105】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、配列番号１０、１１、および１２を有する３つのＣＤＲと、配列番号２４のフレームワーク領域と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＨＣＶＲを含む。
【化11】
【0106】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、配列番号２５のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲを含む。
【0107】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、配列番号１３、１４、および１５を有する３つのＣＤＲと、配列番号２５のフレームワーク領域と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＬＣＶＲを含み、
－Ｘ１は、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）およびＧｌｙ（Ｇ）を含むかまたはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸ１は存在せず；および
－Ｘ２は、Ｔｙｒ（Ｙ）およびＰｈｅ（Ｆ）を含むかまたはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸ２は、Ｔｙｒ（Ｙ）である。
－Ｘ１は、存在しないか、またはＡｓｎ（Ｎ）、Ｓｅｒ（Ｓ）およびＧｌｙ（Ｇ）を含むかまたはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸ１は存在せず；および
－Ｘ２は、Ｔｙｒ（Ｙ）およびＰｈｅ（Ｆ）を含むかまたはそれらからなる群から選択され、好ましくはＸ２は、Ｔｙｒ（Ｙ）である。
【化12】
【0108】
一実施形態では、Ｘ１は、存在せず、Ｘ２は、Ｔｙｒ（Ｙ）である。
【0109】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、
－配列番号２４のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲ；および
－配列番号２５のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲ
を含む。
－配列番号２４のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲ；および
－配列番号２５のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲ
を含む。
【0110】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、
－配列番号１０、１１、および１２を有する３つのＣＤＲと、配列番号２４のフレームワーク領域と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＨＣＶＲ；および
－配列番号１３、１４、および１５を有する３つのＣＤＲと、配列番号２５のフレームワーク領域と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＬＣＶＲ
を含む。
－配列番号１０、１１、および１２を有する３つのＣＤＲと、配列番号２４のフレームワーク領域と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＨＣＶＲ；および
－配列番号１３、１４、および１５を有する３つのＣＤＲと、配列番号２５のフレームワーク領域と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＬＣＶＲ
を含む。
【0111】
一実施形態では、上で定義したＨＣＶＲおよび／またはＬＣＶＲは、上で定義した特定のＨＣＶＲおよび／またはＬＣＶＲと、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える同一性を共有するアミノ酸配列を有するとして特徴付けられてよく、一方でＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、その全体的な機能的特性、特にＣＤ４５ＲＣに対する、好ましくはｈＣＤ４５ＲＣに対する結合特異性を保持する。
【0112】
一実施形態では、上で定義したＨＣＶＲおよび／またはＬＣＶＲのフレームワーク領域の配列は、上で定義した特定のＨＣＶＲおよび／またはＬＣＶＲのフレームワーク領域の配列と、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える同一性を共有するアミノ酸配列を有するとして特徴付けられてよく、一方でＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、その全体的な機能的特性、特にＣＤ４５ＲＣに対する、好ましくはｈＣＤ４５ＲＣに対する結合特異性を保持する。
【0113】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ペイロードに、任意によりリンカーを介してコンジュゲートされる。
【0114】
好適なペイロードの例としては、これらに限定されないが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、ポリマー、核酸分子、低分子、模倣剤、合成薬物、無機分子、有機分子および放射性同位体が挙げられる。
【0115】
代替的または追加的に、好適なペイロードの例としては、これらに限定されないが、化学療法剤、標的治療剤、細胞傷害剤（またはサイトトキシン）、細胞周期同調剤、細胞受容体（複数可）のリガンド、免疫調節剤、アポトーシス促進剤、溶解ペプチド、抗血管新生剤、サイトカイン、成長因子、ホルモン、コーディングまたは非コーディングのオリゴヌクレオチド、光検出可能標識、造影剤、放射性標識などが挙げられる。
【0116】
いくつかのペイロードが複数のカテゴリに分類され得ることは明らかである。
【0117】
一実施形態では、ペイロードは、化学療法剤である。本明細書で使用される、「化学療法剤」という用語は、腫瘍成長を阻害することにおいて有効である任意の分子を指す。
【0118】
化学療法剤の好適な例としては、解剖学的治療化学分類システムのサブグループＬ０１に記載されているものが挙げられる。
【0119】
化学療法剤の好適な例としては、これらに限定されないが、以下が挙げられる：
－アルキル化剤、例えば：
・ナイトロジェンマスタード、例えば、クロロメチン、シクロホスファミド、イホスファミド、トロホスファミド、クロラムブシル、メルファラン、プレドニムスチン、ベンダムスチン、ウラムスチン、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、ノベンビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン、ウラシルマスタードなど；
・ニトロソウレア類、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、フォテムスチン、ニムスチン、ラニムスチン、ストレプトゾシン、クロロゾトシンなど；
・アルキルスルホネート、例えば、ブスルファン、マンノスルファン（ｍａｎｎｏｓｕｌｆａｎ）、トレオスルファンなど；
・アジリジン、例えば、カルボコン、チオテパ、トリアジクオン（ｔｒｉａｚｉｑｕｏｎｅ）、トリエチレンメラミン、ベンゾドーパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、メツレドーパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、ウレドーパ（ｕｒｅｄｏｐａ）など；ヒドラジン、例えば、プロカルバジンなど；
・トリアゼン、例えば、ダカルバジン、テモゾロミドなど；エチレンイミン、およびメチルアメラミン、例えば、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、トリメチロールメラミンなど；
・およびその他、例えば、ミトブロニトール、ピポブロマン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、マイトマイシン（マイトマイシンＣなど）、プリカマイシンなど；
－アセトゲニン、例えば、ブラタシン、ブラタシノンなど；
－ベンゾジアゼピン、例えば、２－オキソクアゼパム、３－ヒドロキシフェナゼパム、ブロマゼパム、カマゼパム、カルブラゼパム、クロルジアゼポキシド、シナゼパム、シノラゼパム、クロナゼパム、クロニプラゼパム、クロラゼプ酸、シプラゼパム、デロラゼパム、デモキセパム、デスメチルフルニトラゼパム、デブアゼピド、ジアゼパム、ジクラゼパム、ジフルジアゼパム、ドキセファゼパム、エルファゼパム、カルフルゼプ酸エチル（ｅｔｈｙｌｃａｒｆｌｕｚｅｐａｔｅ）、ジラゼプ酸エチル（ｅｔｈｙｌｄｉｒａｚｅｐａｔｅ）、ロフラゼプ酸エチル、フルブロマゼパム、フルラゼパム、フルジアゼパム、フルニトラゼパム、フルラゼパム、フルテマゼパム（ｆｌｕｔｅｍａｚｅｐａｍ）、フルトプラゼパム、ホサゼパム、ギダゼパム、ハラゼパム、イクラゼパム（ｉｃｌａｚｅｐａｍ）、イラゼピン、ケナゼピン（ｋｅｎａｚｅｐｉｎｅ）、ケタゾラム、ロラゼパム、ロルメタゼパム、ルフラドム、メクロナゼパム、メダゼパム、メニトラゼパム（ｍｅｎｉｔｒａｚｅｐａｍ）、メタクラゼパム、モトラゼパム（ｍｏｔｒａｚｅｐａｍ）、Ｎ－デスアルキルフルラゼパム、ニフォキサパム、ニメタゼパム、ニテマゼパム（ｎｉｔｅｍａｚｅｐａｍ）、ニトラゼパム、ニトラゼプ酸、ノルダゼパム、ノルテトラゼパム、オキサゼパム、フェナゼパム、ピナゼパム、ピボキサゼパム、プラゼパム、プロフラゼパム、クアゼパム、ＱＨ－ＩＩ－６６、レクラゼパム、ＲＯ４４９１５３３、Ｒｏ５－４８６４、ＳＨ－Ｉ－０４８Ａ、スラゼパム、テマゼパム、テトラゼパム、チフルアドム、トルファゼパム、トリフルノルダゼパム（ｔｒｉｆｌｕｎｏｒｄａｚｅｐａｍ）、ツクラゼパム、ウルダゼパム（ｕｌｄａｚｅｐａｍ）、アルフェンダザム、クロバザム、ＣＰ－１４１４Ｓ、ロフェンダザム、トリフルバザム、ギリソパム、ＧＹＫＩ－５２４６６、ＧＹＫＩ－５２８９５、ネリソパム、タランパネル、トフィソパム、アジナゾラム、アルプラゾラム、ブロマゾラム、クロナゾラム、エスタゾラム、フルアルプラゾラム、フルブロマゾラム、フルニトラゾラム（ｆｌｕｎｉｔｒａｚｏｌａｍ）、ニトラゾラム、ピラゾラム、トリアゾラム、ブレタゼニル、クリマゾラム、ＥＶＴ－２０１、ＦＧ－８２０５、フルマゼニル、ＧＬ－ＩＩ－７３、イミダゼニル、１２３Ｉ－イオマゼニル、Ｌ－６５５，７０８、ロプラゾラム、ミダゾラム、ＰＷＺ－０２９、レミマゾラム、Ｒｏ１５－４５１３、Ｒｏ４８－６７９１、Ｒｏ４８－８６８４、Ｒｏ４９３８５８１、サルマゼニル、ＳＨ－０５３－Ｒ－ＣＨ３－２’Ｆ、クロキサゾラム、フルタゾラム、ハロキサゾラム、メキサゾラム、オキサゾラム、ベンタゼパム、クロチアゼパム、ブロチゾラム、シクロチゾラム、デスクロロエチゾラム、エチゾラム、フルクロチゾラム、イスラパファント、ＪＱ１、メチゾラム、オランザピン、テレンゼピン、ロピラゼパム（ｌｏｐｉｒａｚｅｐａｍ）、ザピゾラム、ラゾバザム、リパゼパム、ゾラゼパム、ゾメバザム、ゾメタピン、プレマゼパム、クラゾラム、アントラマイシン、アビザフォン、リルマザホンなど；
－代謝拮抗剤、例えば：
・葉酸拮抗剤、アミノプテリン、メトトレキサート、ペメトレキセド、プララトレキサート、プテロプテリン、ラルチトレキセド、デノプテリン、トリメトレキサート、ペメトレキセドなどを含む；
・プリン類似体、ペントスタチン、クラドリビン、クロファラビン、フルダラビン、ネララビン、チオグアニン、メルカプトプリンなどを含む；
・ピリミジン類似体、フルオロウラシル、カペシタビン、ドキシフルリジン、テガフール、テガフール／ギメラシル／オテラシル、カルモフール、フロクスウリジン、シタラビン、ゲムシタビン、アザシチジン、デシタビンなどを含む；および
・ヒドロキシカルバミド；
－アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなど；
－抗副腎剤、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなど；
－葉酸補充剤、例えばフロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）など；
－メイタンシノイド、例えばメイタンシン、アンサマイトシンなど；
－白金類似体、例えば、白金、カルボプラチン、シスプラチン、ジシクロプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、サトラプラチンなど；
－抗ホルモン剤、例えば：
・抗エストロゲン剤、タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害４（５）－イミダゾール、４－ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、トレミフェンなどを含む；
・抗アンドロゲン剤、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリンなどを含む；
－トリコテセン、例えば、Ｔ－２毒素、ベルラクリンＡ、ロリジンＡ、アングイジンなど；
－トキソイド、例えば、カバジタキセル、ドセタキセル、ラロタキセル、オルタタキセル、パクリタキセル、テセタキセルなど；
－トポイソメラーゼＩ阻害剤、例えばベロテカン、カンプトテシン、コシテカン、エチリノテカンペゴル、エキサテカン、ギマテカン、イリノテカン、ルルトテカン、ルビテカン、シラテカン、トポテカンなど；
－トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、例えばエトポシド、テニポシドなど；
－その他、例えば、カンプトテシン（合成類似体トポテカンなど）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ－１０６５（アドゼレシンなど）カルゼレシンおよびビゼレシン合成類似体）；クリプトフィシン（クリプトフィシン１およびクリプトフィシン８など）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（その合成類似体ＫＷ－２１８９およびＣＢＩ－ＴＭＩなど）；エロイスロビン（ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｂｉｎ）；パンクラチスタチン；サルコディクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）；スポンジスタチン；アクラシノマイシン；オートラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）；アザセリン；ブレオマイシン；カクチノマイシン；カラビシン；カルミノマイシン；カルジノフィリン；クロモマイシン；ダクチノマイシン；ダウノルビシン；デトルビシン；６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン；ドキソルビシン（モルホリノドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン、デオキシドキソルビシン、など）；エピルビシン；エソルビシン；イダンリビシン（ｉｄａｎｒｂｉｃｉｎ）；マルセロマイシン；ミコフェノール酸；ノガラルマイシン（ｎｏｇａｌａｒｎｙｃｉｎ）；オリボマイシン；ペプロマイシン；ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）；ピューロマイシン；クラマイシン；ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）；ストレプトムグリン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｇｒｉｎ）；ストレプトゾシン；ツベルシジン；ウベニメクス；ジノスタチン；ゾルビシン；アセグラトン；アルドホスファニド配糖体；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート；デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）デメコルシン；ジアジクオン；エフロルニチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン（ｎｉｔｒａｃｒｉｎｅ）；フェナメット（ｐｈｅｎａｍｅｔ）；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２－エチルヒドラジド；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲンナニウム（ｓｐｉｒｏｇｅｎｎａｎｉｕｍ）；テヌアゾン酸；２，２’，２’’－トリクロロトリエチルアミン；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロムトール（ｍｉｔｏｂｒｏｍｔｏｌ）；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド；６－チオグアニン；ビンブラスチン；エトポシド；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；ゼローダ；イバンドロン酸；ＣＰＴ－１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；トポイソメラーゼＩ阻害剤ＳＮ３８；ジフルオロメチルオルニチン；レチノイン酸など。
－アルキル化剤、例えば：
・ナイトロジェンマスタード、例えば、クロロメチン、シクロホスファミド、イホスファミド、トロホスファミド、クロラムブシル、メルファラン、プレドニムスチン、ベンダムスチン、ウラムスチン、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、ノベンビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン、ウラシルマスタードなど；
・ニトロソウレア類、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、フォテムスチン、ニムスチン、ラニムスチン、ストレプトゾシン、クロロゾトシンなど；
・アルキルスルホネート、例えば、ブスルファン、マンノスルファン（ｍａｎｎｏｓｕｌｆａｎ）、トレオスルファンなど；
・アジリジン、例えば、カルボコン、チオテパ、トリアジクオン（ｔｒｉａｚｉｑｕｏｎｅ）、トリエチレンメラミン、ベンゾドーパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、メツレドーパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、ウレドーパ（ｕｒｅｄｏｐａ）など；ヒドラジン、例えば、プロカルバジンなど；
・トリアゼン、例えば、ダカルバジン、テモゾロミドなど；エチレンイミン、およびメチルアメラミン、例えば、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、トリメチロールメラミンなど；
・およびその他、例えば、ミトブロニトール、ピポブロマン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、マイトマイシン（マイトマイシンＣなど）、プリカマイシンなど；
－アセトゲニン、例えば、ブラタシン、ブラタシノンなど；
－ベンゾジアゼピン、例えば、２－オキソクアゼパム、３－ヒドロキシフェナゼパム、ブロマゼパム、カマゼパム、カルブラゼパム、クロルジアゼポキシド、シナゼパム、シノラゼパム、クロナゼパム、クロニプラゼパム、クロラゼプ酸、シプラゼパム、デロラゼパム、デモキセパム、デスメチルフルニトラゼパム、デブアゼピド、ジアゼパム、ジクラゼパム、ジフルジアゼパム、ドキセファゼパム、エルファゼパム、カルフルゼプ酸エチル（ｅｔｈｙｌｃａｒｆｌｕｚｅｐａｔｅ）、ジラゼプ酸エチル（ｅｔｈｙｌｄｉｒａｚｅｐａｔｅ）、ロフラゼプ酸エチル、フルブロマゼパム、フルラゼパム、フルジアゼパム、フルニトラゼパム、フルラゼパム、フルテマゼパム（ｆｌｕｔｅｍａｚｅｐａｍ）、フルトプラゼパム、ホサゼパム、ギダゼパム、ハラゼパム、イクラゼパム（ｉｃｌａｚｅｐａｍ）、イラゼピン、ケナゼピン（ｋｅｎａｚｅｐｉｎｅ）、ケタゾラム、ロラゼパム、ロルメタゼパム、ルフラドム、メクロナゼパム、メダゼパム、メニトラゼパム（ｍｅｎｉｔｒａｚｅｐａｍ）、メタクラゼパム、モトラゼパム（ｍｏｔｒａｚｅｐａｍ）、Ｎ－デスアルキルフルラゼパム、ニフォキサパム、ニメタゼパム、ニテマゼパム（ｎｉｔｅｍａｚｅｐａｍ）、ニトラゼパム、ニトラゼプ酸、ノルダゼパム、ノルテトラゼパム、オキサゼパム、フェナゼパム、ピナゼパム、ピボキサゼパム、プラゼパム、プロフラゼパム、クアゼパム、ＱＨ－ＩＩ－６６、レクラゼパム、ＲＯ４４９１５３３、Ｒｏ５－４８６４、ＳＨ－Ｉ－０４８Ａ、スラゼパム、テマゼパム、テトラゼパム、チフルアドム、トルファゼパム、トリフルノルダゼパム（ｔｒｉｆｌｕｎｏｒｄａｚｅｐａｍ）、ツクラゼパム、ウルダゼパム（ｕｌｄａｚｅｐａｍ）、アルフェンダザム、クロバザム、ＣＰ－１４１４Ｓ、ロフェンダザム、トリフルバザム、ギリソパム、ＧＹＫＩ－５２４６６、ＧＹＫＩ－５２８９５、ネリソパム、タランパネル、トフィソパム、アジナゾラム、アルプラゾラム、ブロマゾラム、クロナゾラム、エスタゾラム、フルアルプラゾラム、フルブロマゾラム、フルニトラゾラム（ｆｌｕｎｉｔｒａｚｏｌａｍ）、ニトラゾラム、ピラゾラム、トリアゾラム、ブレタゼニル、クリマゾラム、ＥＶＴ－２０１、ＦＧ－８２０５、フルマゼニル、ＧＬ－ＩＩ－７３、イミダゼニル、１２３Ｉ－イオマゼニル、Ｌ－６５５，７０８、ロプラゾラム、ミダゾラム、ＰＷＺ－０２９、レミマゾラム、Ｒｏ１５－４５１３、Ｒｏ４８－６７９１、Ｒｏ４８－８６８４、Ｒｏ４９３８５８１、サルマゼニル、ＳＨ－０５３－Ｒ－ＣＨ３－２’Ｆ、クロキサゾラム、フルタゾラム、ハロキサゾラム、メキサゾラム、オキサゾラム、ベンタゼパム、クロチアゼパム、ブロチゾラム、シクロチゾラム、デスクロロエチゾラム、エチゾラム、フルクロチゾラム、イスラパファント、ＪＱ１、メチゾラム、オランザピン、テレンゼピン、ロピラゼパム（ｌｏｐｉｒａｚｅｐａｍ）、ザピゾラム、ラゾバザム、リパゼパム、ゾラゼパム、ゾメバザム、ゾメタピン、プレマゼパム、クラゾラム、アントラマイシン、アビザフォン、リルマザホンなど；
－代謝拮抗剤、例えば：
・葉酸拮抗剤、アミノプテリン、メトトレキサート、ペメトレキセド、プララトレキサート、プテロプテリン、ラルチトレキセド、デノプテリン、トリメトレキサート、ペメトレキセドなどを含む；
・プリン類似体、ペントスタチン、クラドリビン、クロファラビン、フルダラビン、ネララビン、チオグアニン、メルカプトプリンなどを含む；
・ピリミジン類似体、フルオロウラシル、カペシタビン、ドキシフルリジン、テガフール、テガフール／ギメラシル／オテラシル、カルモフール、フロクスウリジン、シタラビン、ゲムシタビン、アザシチジン、デシタビンなどを含む；および
・ヒドロキシカルバミド；
－アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなど；
－抗副腎剤、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなど；
－葉酸補充剤、例えばフロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）など；
－メイタンシノイド、例えばメイタンシン、アンサマイトシンなど；
－白金類似体、例えば、白金、カルボプラチン、シスプラチン、ジシクロプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、サトラプラチンなど；
－抗ホルモン剤、例えば：
・抗エストロゲン剤、タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害４（５）－イミダゾール、４－ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、トレミフェンなどを含む；
・抗アンドロゲン剤、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリンなどを含む；
－トリコテセン、例えば、Ｔ－２毒素、ベルラクリンＡ、ロリジンＡ、アングイジンなど；
－トキソイド、例えば、カバジタキセル、ドセタキセル、ラロタキセル、オルタタキセル、パクリタキセル、テセタキセルなど；
－トポイソメラーゼＩ阻害剤、例えばベロテカン、カンプトテシン、コシテカン、エチリノテカンペゴル、エキサテカン、ギマテカン、イリノテカン、ルルトテカン、ルビテカン、シラテカン、トポテカンなど；
－トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、例えばエトポシド、テニポシドなど；
－その他、例えば、カンプトテシン（合成類似体トポテカンなど）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ－１０６５（アドゼレシンなど）カルゼレシンおよびビゼレシン合成類似体）；クリプトフィシン（クリプトフィシン１およびクリプトフィシン８など）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（その合成類似体ＫＷ－２１８９およびＣＢＩ－ＴＭＩなど）；エロイスロビン（ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｂｉｎ）；パンクラチスタチン；サルコディクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）；スポンジスタチン；アクラシノマイシン；オートラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）；アザセリン；ブレオマイシン；カクチノマイシン；カラビシン；カルミノマイシン；カルジノフィリン；クロモマイシン；ダクチノマイシン；ダウノルビシン；デトルビシン；６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン；ドキソルビシン（モルホリノドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン、デオキシドキソルビシン、など）；エピルビシン；エソルビシン；イダンリビシン（ｉｄａｎｒｂｉｃｉｎ）；マルセロマイシン；ミコフェノール酸；ノガラルマイシン（ｎｏｇａｌａｒｎｙｃｉｎ）；オリボマイシン；ペプロマイシン；ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）；ピューロマイシン；クラマイシン；ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）；ストレプトムグリン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｇｒｉｎ）；ストレプトゾシン；ツベルシジン；ウベニメクス；ジノスタチン；ゾルビシン；アセグラトン；アルドホスファニド配糖体；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート；デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）デメコルシン；ジアジクオン；エフロルニチン；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン（ｎｉｔｒａｃｒｉｎｅ）；フェナメット（ｐｈｅｎａｍｅｔ）；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２－エチルヒドラジド；ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲンナニウム（ｓｐｉｒｏｇｅｎｎａｎｉｕｍ）；テヌアゾン酸；２，２’，２’’－トリクロロトリエチルアミン；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロムトール（ｍｉｔｏｂｒｏｍｔｏｌ）；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド；６－チオグアニン；ビンブラスチン；エトポシド；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；ゼローダ；イバンドロン酸；ＣＰＴ－１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；トポイソメラーゼＩ阻害剤ＳＮ３８；ジフルオロメチルオルニチン；レチノイン酸など。
【0120】
一実施形態では、ペイロードは、標的化された治療剤である。
【0121】
本明細書で使用される、「標的化された治療剤」という用語は、腫瘍の起源、腫瘍の進行、腫瘍転移、腫瘍細胞の増殖、細胞修復などに関与する１つ以上の特定の標的分子（例えば、タンパク質など）を対象とする任意の分子を指す。
【0122】
標的化された治療剤の好適な例としては、これらに限定されないが、チロシンキナーゼ阻害剤、セリン／トレオニンキナーゼ阻害剤、モノクローナル抗体などが挙げられる。
【0123】
標的化された治療剤の好適な例としては、これらに限定されないが、ＨＥＲ１／ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、ブリガチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、オルムチニブ、オシメルチニブ、ロシレチニブ、バンデタニブ、など）；ＨＥＲ２／ｎｅｕ阻害剤（例えば、アファチニブ、ラパチニブ、ネラチニブ、など）；Ｃ－ｋｉｔおよびＰＤＧＦＲ阻害剤（例えば、アキシチニブ、マシチニブ、パゾパニブ、スニチニブ、ソラフェニブ、トセラニブ、など）；ＦＬＴ３阻害剤（例えば、レスタウルチニブ、など）；ＶＥＧＦＲ阻害剤（例えば、アキシチニブ、セジラニブ、レンバチニブ、ニンテダニブ、パゾパニブ、レゴラフェニブ、セマキサニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、チボザニブ、トセラニブ、バンデタニブ、など）；ＲＥＴ阻害剤（例えば、バンデタニブ、エレクチニブ、など）；ｃ－ＭＥＴ阻害剤（例えば、カボザンチニブ、など）；ｂｃｒ－ａｂｌ阻害剤（例えば、イマチニブ、ダサチニブ、ニロチニブ、ポナチニブ、ラドチニブ、など）；Ｓｒｃ阻害剤（例えば、ボスチニブ、ダサチニブ、など）；ヤヌスキナーゼ阻害剤（例えば、レスタウルチニブ、モメロチニブ、ルキソリチニブ、パクリチニブ、など）；ＭＡＰ２Ｋ阻害剤（例えば、コビメチニブ、セルメチニブ、トラメチニブ、ビニメチニブ、など）；ＥＭＬ４－ＡＬＫ阻害剤（例えば、アレクチニブ、ブリガチニブ、セリチニブ、クリゾチニブ、など）；ブルトン型阻害剤（例えば、イブルチニブ、など）；ｍＴＯＲ阻害剤（例えば、エベロリムス、テムシロリムス、など）；ヘッジホッグ阻害剤（例えば、ソニデギブ、ビスモデギブ、など）；ＣＤＫ阻害剤（例えば、パルボシクリブ、リボシクリブ、など）；抗ＨＥＲ１／ＥＧＦＲモノクローナル抗体（例えば、セツキシマブ、ネシツムマブ、パニツムマブ、など）；抗ＨＥＲ２／ｎｅｕモノクローナル抗体（例えば、アドトラスツズマブエムタンシン、ペルツズマブ、トラスツズマブ、トラスツズマブ－ｄｋｓｔ、など）；抗ＥｐＣＡＭモノクローナル抗体（例えば、カツマキソマブ、エドレコロマブ、など）；抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体（例えば、ベバシズマブ、ベバシズマブ－ａｗｗｂ、など）；抗ＣＤ２０モノクローナル抗体（例えば、イブリツモマブ、オビヌツズマブ、オクレリズマブ、オファツムマブ、リツキシマブ、トシツモマブ、など）；抗ＣＤ３０モノクローナル抗体（例えば、ブレンツキシマブ、など）；抗ＣＤ３３モノクローナル抗体（例えば、ゲムツズマブ、など）；および抗ＣＤ５２モノクローナル抗体（例えば、例えば、アレムツズマブ、など）が挙げられる。
【0124】
一実施形態では、ペイロードは、細胞傷害剤である。
【0125】
本明細書で使用される、「細胞傷害剤」または「細胞毒素」という用語は、任意の機構により細胞死をもたらす任意の分子を指す。
【0126】
細胞傷害剤の好適な例としては、これらに限定されないが、タキサン、アントラサイクリン、アルキル化剤、ビンカアルカロイド、代謝拮抗剤、白金剤、ステロイド、化学療法剤およびアウリスタチンが挙げられる。
【0127】
タキサンの好適な例としては、これらに限定されないが、カバジタキセル、ドセタキセル、ラロタキセル、オルタタキセル、パクリタキセル、およびテセタキセルが挙げられる。
【0128】
アントラサイクリンの好適な例としては、これらに限定されないが、アクラルビシン、アムルビシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ピラルビシン、バルルビシンおよびゾルビシンが挙げられる。
【0129】
アルキル化剤の好適な例としては、これらに限定されないが、ナイトロジェンマスタード（例えば、クロルメチン、シクロホスファミド、イホスファミド、トロホスファミド、クロラムブシル、メルファラン、プレドニムスチン、ベンダムスチン、ウラムスチンなど）、ニトロソウレア（例えば、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、フォテムスチン、ニムスチン、ラニムスチン、ストレプトゾシンなど）、アルキルスルホネート（例えば、ブスルファン、マンノスルファン、トレオスルファンなど）、アジリジン（例えば、カルボクオン、チオテパ、トリアジクオン（ｔｒｉａｚｉｑｕｏｎｅ）、トリエチレンメラミン、ベンゾドーパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、メツレドーパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、ウレドーパ（ｕｒｅｄｏｐａ）など）、ヒドラジン（例えば、プロカルバジンなど）、トリアゼン（例えば、ダカルバジン、テモゾロミドなど）、アルトレタミン、ミトブロニトール、ピポブロマン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、マイトマイシンおよびプリカマイシンが挙げられる。
【0130】
ビンカアルカロイドの好適な例としては、これらに限定されないが、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンフルニン、ビンデシンおよびビノレルビンが挙げられる。
【0131】
代謝拮抗剤の好適な例としては、これらに限定されないが、葉酸拮抗剤（例えば、アミノプテリン、メトトレキサート、ペメトレキセド、プララトレキサート、ラルチトレキセド、ペメトレキセドなど）、プリン類似体（例えば、ペントスタチン、クラドリビン、クロファラビン、フルダラビン、ネララビン、チオグアニン、メルカプトプリンなど）、ピリミジン類似体（例えば、フルオロウラシル、カペシタビン、ドキシフルリジン、テガフール、テガフール／ギメラシル／オテラシル、カルモフール、フロクスウリジン、シタラビン、ゲムシタビン、アザシチジン、デシタビンなど）、およびヒドロキシカルバミドが挙げられる。
【0132】
白金剤の好適な例としては、これらに限定されないが、カルボプラチン、シスプラチン、ジシクロプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、およびサトラプラチンが挙げられる。
【0133】
ステロイドの好適な例としては、これらに限定されないが、エストロゲン受容体モジュレーター、アンドロゲン受容体モジュレーター、およびプロゲステロン受容体モジュレーターが挙げられる。
【0134】
化学療法剤の好適な例は、上に記載されている。
【0135】
アウリスタチンの好適な例としては、これらに限定されないが、アウリスタチンＥ、アウリスタチンＦ、モノメチルアウリスタチンＥ、およびモノメチルアウリスタチンＦが挙げられる。
【0136】
一実施形態では、ペイロードは、細胞周期同調剤である。
【0137】
本明細書で使用される、「細胞周期同調剤」という用語は、投与時に細胞集団の細胞周期を同じ位相に統一できる任意の分子を指す。
【0138】
細胞周期同調剤の好適な例としては、これらに限定されないが、アフィジコリン、ブチロラクトンＩ、コルヒチン、シクロヘキシミド、デメコルシン、ジメチルスルホキシド、５－フルオロデオキシウリジン、Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２、ミモシン、ノコダゾール、ロスコビチン、およびチミジンが挙げられる。
【0139】
一実施形態では、ペイロードは、細胞受容体に対するリガンドである。
【0140】
本明細書で使用される、「細胞受容体に対するリガンド」という用語は、細胞受容体（例えば、細胞表面受容体、細胞内受容体または共受容体、例えば、転写因子など）に結合する任意の分子を指し、アゴニストおよびアンタゴニスト、部分アゴニスト、インバースアゴニスト、およびアロステリックモジュレーターを含む。
【0141】
細胞受容体に対するリガンドの好適な例としては、これらに限定されないが、ＡＡＴＹＫ受容体、アセチルコリン受容体、ＡＤＧＲＧ受容体、アディポネクチン受容体、アドレナリン作動性α１受容体、アドレナリン作動性α２受容体、アドレナリン作動性β１受容体、アドレナリン作動性β２受容体、アドレナリン作動性β３受容体、アドレノメデュリン受容体、ＡＭＰＡ受容体、アナフィラトキシン受容体、アンジオポエチン受容体、アンジオテンシン受容体、抗ミュラー管ホルモン受容体、アペリン受容体、アシアロ糖タンパク質受容体、ＡＸＬ受容体、ベンゾジアゼピン受容体、胆汁酸受容体、ボンベシン受容体、骨形成タンパク質受容体、ブラジキニン受容体、脳特異的血管新生阻害剤、カドヘリン受容体、カルシトニン受容体、カルシトニン受容体様受容体、カルシウム感知受容体、カンナビノイド受容体、ＣＤ９７受容体、ケモカイン受容体、コレシストキニン受容体、補体受容体、コルチコトロピン放出ホルモン受容体、ＣｙｓＬＴ受容体、サイトカイン受容体、ＤＤＲ受容体、ドーパミン受容体、ＥＢＩ２受容体、エクトディスプラシン（ｅｃｔｏｄｙｓｐｌａｓｉｎ）Ａ受容体、ＥＧＦモジュール含有ムチン様ホルモン受容体、ＥＧＦ受容体、エンドセリン受容体、ＥＰＨ受容体、エストロゲン受容体、ＦＧＦ受容体、遊離脂肪酸受容体、ｆｒｉｚｚｌｅｄ受容体、ＦＳＨ受容体、ＧＡＢＡＢ受容体、ガラニン受容体、ＧＨＢ受容体、グレリン受容体、グルカゴン受容体、グルカゴン様ペプチド受容体、グルタミン酸受容体、グリシン受容体、ゴナドトロピン受容体、ゴナドトロピン放出ホルモン受容体、ＧＰＲＣ６Ａ受容体、成長因子受容体、成長ホルモン受容体、成長ホルモン放出ホルモン受容体、グアニル酸シクラーゼ共役受容体、ＨＧＦ受容体、ヒスタミン受容体、ヒドロキシカルボン酸受容体、免疫グロブリン免疫受容体、インスリン受容体、カイニン酸受容体、ＫｉＳＳ１誘導ペプチド受容体、ラトロフィリン受容体、レプチン受容体、ロイコトリエンＢ４受容体、リポタンパク質受容体関連タンパク質受容体、ＬＴＫ受容体、黄体形成ホルモン／絨毛性ゴナドトロピン受容体、リゾホスファチジン酸受容体、リゾリン脂質受容体、マンノース受容体、ＭＡＳ受容体、メラニン濃縮ホルモン受容体、メラノコルチン受容体、メラトニン受容体、メトセラ様タンパク質受容体、モチリン受容体、ＭｕＳＫ受容体、Ｎ－アセチルグルコサミン受容体、ニューロメジン受容体、神経ペプチドＢ／Ｗ受容体、神経ペプチドＦＦ受容体、神経ペプチドＳ受容体、神経ペプチドＹ受容体、ニューロピリン受容体、ニューロテンシン受容体、Ｎ－ホルミルペプチド受容体、ニコチン性アセチルコリン受容体、ＮＭＤＡ受容体、核内受容体、嗅覚受容体、オピオイド受容体、オプシン受容体、オレキシン受容体、オキソエイコサノイド受容体、オキソグルタル酸受容体、オキシトシン受容体、副甲状腺ホルモン受容体、ＰＤＧＦ受容体、下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ポリペプチドＩ型受容体、血小板活性化因子受容体、プロゲスチンおよびアディポＱ受容体、プロキネチシン受容体、プロラクチン受容体、プロラクチン放出ペプチド受容体、プロスタサイクリン受容体、プロスタグランジン受容体、プロテアーゼ活性化受容体、ＰＴＫ７受容体、プリン作動性アデノシン受容体、プリン作動性Ｐ２Ｘ受容体、プリン作動性Ｐ２Ｙ受容体、リラキシン受容体、ＲＥＴ受容体、レチノイン酸誘導性オーファンＧタンパク質共役受容体、ＲＯＲ受容体、ＲＯＳ受容体、ＲＹＫ受容体、スカベンジャー受容体、セクレチン受容体、セリン／トレオニン特異的受容体プロテインキナーゼ受容体、セロトニン受容体、ｓｍｏｏｔｈｅｎｅｄ受容体、ソマトスタチン受容体、スフィンゴシン－１－リン酸受容体、ＳＲＥＢ受容体、インターフェロン遺伝子刺激因子（ＳＴＩＮＧ）受容体、コハク酸受容体、タキキニン受容体、トロンボキサン受容体、甲状腺刺激ホルモン受容体、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン受容体、ｔｏｌｌ様受容体、微量アミン関連受容体、トランスフェリン受容体、Ｔｒｋ受容体、腫瘍壊死因子受容体、チロシンホスファターゼ受容体、ウロテンシンＩＩ受容体、血管作動性腸ペプチド受容体（ｖａｓｏａｃｔｉｖｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ）、血管作動性腸ペプチド受容体（ｖａｓｏａｃｔｉｖｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ ｐｅｐｔｉｄｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ）、バソプレシン受容体、ＶＥＧＦ受容体、鋤鼻受容体、および亜鉛活性化イオンチャネル受容体に結合するリガンドが挙げられる。
【0142】
一実施形態では、ペイロードは、免疫調節剤である。
【0143】
免疫調節剤の好適な例としては、これらに限定されないが、免疫刺激剤および免疫抑制剤が挙げられる。
【0144】
免疫刺激剤の好適な例としては、解剖学的治療化学分類システムのサブグループＬ０３に記載されているものが挙げられる。
【0145】
免疫刺激剤の好適な例としては、これらに限定されないが、サイトカイン（例えば、フィルグラスチム、ペグフィルグラスチム、レノグラスチム、モルグラモスチム、サルグラモスチム、アンセスティム、アルビンインターフェロン、インターフェロンα天然、インターフェロンα２ａ、ペグインターフェロンα２ａ、インターフェロンα２ｂ、ペグインターフェロンα－２ｂ、インターフェロンα ｎ１、インターフェロン アルファコン－１、インターフェロン α－ｎ３、インターフェロンβ天然、インターフェロンβ１ａ、インターフェロンβ１ｂ、インターフェロンγ、アルデスロイキン、オプレルベキンなど）；免疫チェックポイント阻害剤（例えば、ＣＴＬＡ４、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＬＡＧ－３、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＴＩＭ３、Ａ２ＡＲ、および／またはＩＤの阻害剤、例えば、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ、ＡＭＰ－２２４、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＤＸ－１１０５、ＭＥＤＩ－４７３６、アレルマブ、イピリムマブ、トレメリムマブ、ピディリズマブ、ＩＭＰ３２１、ＭＧＡ２７１、ＢＭＳ－９８６０１６、リリルマブ、ウレルマブ、ＰＦ－０５０８２５６６、ＩＰＨ２１０１、ＭＥＤＩ－６４６９、ＣＰ－８７０、８９３、モガムリズマブ、バルリルマブ、アベルマブ、ガリキシマブ、ＡＭＰ－５１４、ＡＵＮＰ１２、インドキシモド、ＮＬＧ－９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０、など）；ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト（例えば、ブプレノルフィン、カルバマゼピン、エタノール、フェンタニル、ＧＳ－９６２０、イミキモド、レフィトリモド、レボルファノール、メタドン、モルヒネ、（＋）－モルヒネ、モルヒネ－３－グルクロニド、オクスカルバゼピン、オキシコドン、ペチジンなど）、レシキモド、ＳＤ－１０１、タペンタドール、ティルソトリモド、ＶＴＸ－２３３７、クリプトコッカス属由来のグルクロノキシロマンナン、マイコプラズマ由来のＭＡＬＰ－２、マイコプラズマ由来のＭＡＬＰ－４０４、ボレリア由来のＯｓｐＡ、ナイセリアまたはヘモフィルス由来のポリン、ｈｓｐ６０、ヘマグルチニン、エルシニア由来のＬｃｒＶ、細菌フラジェリン、リポ多糖、リポタイコ酸、マイコバクテリウム由来のリポマンナン、グリコシルホスファチジルイノシトール、リゾホスファチジルセリン、リーシュマニア由来のリポホスホグリカン、サッカロマイセス由来のザイモサン、Ｐａｍ２ＣＧＤＰＫＨＰＫＳＦ、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド、ポリ（Ｉ：Ｃ）核酸配列、ポリ（Ａ：Ｕ）核酸配列、二本鎖ウイルスＲＮＡなど）；ＳＴＩＮＧ受容体アゴニスト（例えば、国際公開第２０１７１００３０５号に記載のもの、バジメザン、ＣＬ６５６、ＡＤＵ－Ｓ１００、３’３’－ｃＧＡＭＰ、２’３’－ｃＧＡＭＰ、ＭＬ ＲＲ－Ｓ２ ＣＤＧ、ＭＬ ＲＲ－Ｓ２ ｃＧＡＭＰ、環状ジ－ＧＭＰ、ＤＭＸＡＡ、ＤｉＡＢＺＩなど）；ＣＤ１ リガンド；成長ホルモン；免疫シアニン；ペガデマーゼ；プロラクチン；タソネルミン；女性用性ステロイド；ヒスタミン二塩酸塩；ポリＩＣＬＣ；ビタミンＤ；レンチナン；プレリキサホル；ロキニメックス；ミファムルチド；グラチラマー酢酸塩；チモペンチン；チモシンα１；チムリン；ポリイノシン酸：ポリシチジル酸；ピドチモド；カルメット・ゲラン桿菌；黒色腫ワクチン；シピュリューセル－Ｔ；などが挙げられる。
【0146】
免疫抑制剤の好適な例としては、解剖学的治療化学分類システムのサブグループＬ０４に記載されているものが挙げられる。
【0147】
免疫抑制剤の好適な例としては、これらに限定されないが、以下が挙げられる：
－代謝拮抗剤、例えば：
・葉酸拮抗剤、アミノプテリン、メトトレキサート、ペメトレキセド、プララトレキサート、プテロプテリン、ラルチトレキセド、デノプテリン、トリメトレキサート、ペメトレキセドなどを含む；
・プリン類似体、ペントスタチン、クラドリビン、クロファラビン、フルダラビン、ネララビン、チオグアニン、メルカプトプリンなどを含む；
・ピリミジン類似体、フルオロウラシル、カペシタビン、ドキシフルリジン、テガフール、テガフール／ギメラシル／オテラシル、カルモフール、フロクスウリジン、シタラビン、ゲムシタビン、アザシチジン、デシタビンなどを含む；および
・ヒドロキシカルバミド；
－マクロライド、例えば、タクロリムス、シクロスポリン、ピメクロリムス、ａｂｅｔｉｍｕｓ、グスペリムスなど；
－免疫調節イミド薬、例えば、レナリドミド、ポマリドミド、サリドマイド、アプレミラストなど；
－ＩＬ－１受容体アンタゴニスト、例えばアナキンラなど；
－ｍＴＯＲ阻害剤、例えば、シロリムス、エベロリムス、リダフォロリムス、テムシロリムス、ウミロリムス、ゾタロリムスなど；
－血清標的抗体、例えば、エクリズマブ、アダリムマブ、アフェリモマブ、セルトリズマブペゴル、ゴリムマブ、インフリキシマブ、ネレリモマブ、メポリズマブ、オマリズマブ、ファラリモマブ、エルシリモマブ（ｅｌｓｉｌｉｍｏｍａｂ）、レブリキズマブ、ウステキヌマブ、セクキヌマブなど；
－細胞標的化抗体、例えばムロモナブ－ＣＤ３、オテリキシズマブ、テプリズマブ、ビシリズマブ、クレノリキシマブ、ケリキシマブ、ザノリムマブ、エファリズマブ、エルリズマブ、オビヌツズマブ、リツキシマブ、オクレリズマブ、パスコリズマブ、ゴミリキシマブ、ルミリキシマブ、テネリキシマブ、トラリズマブ、アセリズマブ（ａｓｅｌｉｚｕｍａｂ）、ガリキシマブ、ガビリモマブ（ｇａｖｉｌｉｍｏｍａｂ）、ルプリズマブ、ベリムマブ、ブリシビモド、イピリムマブ、トレメリムマブ、ベルティリムマブ（ｂｅｒｔｉｌｉｍｕｍａｂ）、レルデリムマブ（ｌｅｒｄｅｌｉｍｕｍａｂ）、メテリムマブ、ナタリズマブ、トシリズマブ、オドゥリモマブ（ｏｄｕｌｉｍｏｍａｂ）、バシリキシマブ、ダクリズマブ、イノリモマブ、ゾリモマブ アリトックス（ｚｏｌｉｍｏｍａｂ ａｒｉｔｏｘ）、アトロリムマブ（ａｔｏｒｏｌｉｍｕｍａｂ）、セデリズマブ、フォントリズマブ、マスリモマブ、モロリムマブ（ｍｏｒｏｌｉｍｕｍａｂ）、ペキセリズマブ、レスリズマブ、ロベリズマブ、シプリズマブ、タリズマブ、テリモマブ・アリトックス（ｔｅｌｉｍｏｍａｂ ａｒｉｔｏｘ）、バパリキシマブ（ｖａｐａｌｉｘｉｍａｂ）、ベパリモマブ（ｖｅｐａｌｉｍｏｍａｂ）など；
－融合抗体、例えば、アバタセプト、ベラタセプト、エタネルセプト、ペグスネルセプト、アフリベルセプト、アレファセプト、リロナセプトなど。
－代謝拮抗剤、例えば：
・葉酸拮抗剤、アミノプテリン、メトトレキサート、ペメトレキセド、プララトレキサート、プテロプテリン、ラルチトレキセド、デノプテリン、トリメトレキサート、ペメトレキセドなどを含む；
・プリン類似体、ペントスタチン、クラドリビン、クロファラビン、フルダラビン、ネララビン、チオグアニン、メルカプトプリンなどを含む；
・ピリミジン類似体、フルオロウラシル、カペシタビン、ドキシフルリジン、テガフール、テガフール／ギメラシル／オテラシル、カルモフール、フロクスウリジン、シタラビン、ゲムシタビン、アザシチジン、デシタビンなどを含む；および
・ヒドロキシカルバミド；
－マクロライド、例えば、タクロリムス、シクロスポリン、ピメクロリムス、ａｂｅｔｉｍｕｓ、グスペリムスなど；
－免疫調節イミド薬、例えば、レナリドミド、ポマリドミド、サリドマイド、アプレミラストなど；
－ＩＬ－１受容体アンタゴニスト、例えばアナキンラなど；
－ｍＴＯＲ阻害剤、例えば、シロリムス、エベロリムス、リダフォロリムス、テムシロリムス、ウミロリムス、ゾタロリムスなど；
－血清標的抗体、例えば、エクリズマブ、アダリムマブ、アフェリモマブ、セルトリズマブペゴル、ゴリムマブ、インフリキシマブ、ネレリモマブ、メポリズマブ、オマリズマブ、ファラリモマブ、エルシリモマブ（ｅｌｓｉｌｉｍｏｍａｂ）、レブリキズマブ、ウステキヌマブ、セクキヌマブなど；
－細胞標的化抗体、例えばムロモナブ－ＣＤ３、オテリキシズマブ、テプリズマブ、ビシリズマブ、クレノリキシマブ、ケリキシマブ、ザノリムマブ、エファリズマブ、エルリズマブ、オビヌツズマブ、リツキシマブ、オクレリズマブ、パスコリズマブ、ゴミリキシマブ、ルミリキシマブ、テネリキシマブ、トラリズマブ、アセリズマブ（ａｓｅｌｉｚｕｍａｂ）、ガリキシマブ、ガビリモマブ（ｇａｖｉｌｉｍｏｍａｂ）、ルプリズマブ、ベリムマブ、ブリシビモド、イピリムマブ、トレメリムマブ、ベルティリムマブ（ｂｅｒｔｉｌｉｍｕｍａｂ）、レルデリムマブ（ｌｅｒｄｅｌｉｍｕｍａｂ）、メテリムマブ、ナタリズマブ、トシリズマブ、オドゥリモマブ（ｏｄｕｌｉｍｏｍａｂ）、バシリキシマブ、ダクリズマブ、イノリモマブ、ゾリモマブ アリトックス（ｚｏｌｉｍｏｍａｂ ａｒｉｔｏｘ）、アトロリムマブ（ａｔｏｒｏｌｉｍｕｍａｂ）、セデリズマブ、フォントリズマブ、マスリモマブ、モロリムマブ（ｍｏｒｏｌｉｍｕｍａｂ）、ペキセリズマブ、レスリズマブ、ロベリズマブ、シプリズマブ、タリズマブ、テリモマブ・アリトックス（ｔｅｌｉｍｏｍａｂ ａｒｉｔｏｘ）、バパリキシマブ（ｖａｐａｌｉｘｉｍａｂ）、ベパリモマブ（ｖｅｐａｌｉｍｏｍａｂ）など；
－融合抗体、例えば、アバタセプト、ベラタセプト、エタネルセプト、ペグスネルセプト、アフリベルセプト、アレファセプト、リロナセプトなど。
【0148】
一実施形態では、ペイロードは、アポトーシス促進剤である。
【0149】
本明細書で使用される、「アポトーシス促進剤」という用語は、投与時に細胞においてアポトーシスまたはプログラムされた細胞死を誘導できる任意の分子を指す。
【0150】
アポトーシス促進剤の好適な例としては、これらに限定されないが、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（例えば、酪酸ナトリウム、デプシペプチドなど）、ボルテゾミブ、デグエリン、フラボピリドール、フェニレンチニド、フルダラビン、ケンフェロール、ミルテホシン、ナルシクラシン、オバトクラックス、オブリマーセン、オンクラシンが挙げられる。
【0151】
一実施形態では、ペイロードは、溶解ペプチドである。
【0152】
本明細書で使用される、「溶解ペプチド」という用語は、膜を溶解するまたは貫通する能力を有するペプチドを指す。
【0153】
溶解ペプチドの例としては、これらに限定されないが、ＬＬ－３７、α－ディフェンシン、
β－ディフェンシン、θ－ディフェンシン、ダームシジン、ヒスタチン、パーフォリン、セクロピン、デルマセプチン、ｍａｇａｉｎｏｎ、メリチン、ナイシン、ニューモリシン、および毒素が挙げられる。
β－ディフェンシン、θ－ディフェンシン、ダームシジン、ヒスタチン、パーフォリン、セクロピン、デルマセプチン、ｍａｇａｉｎｏｎ、メリチン、ナイシン、ニューモリシン、および毒素が挙げられる。
【0154】
毒素の例としては、これらに限定されないが、以下が挙げられる：細菌毒素（例えば、破傷風菌破傷風菌毒素、破傷風菌テタノリシン（ｔｅｔａｎｏｌｙｓｉｎ）、ウェルシュ菌α毒素、ウェルシュ菌エンテロトキシン、クロストリジウム・ディフィシル毒素Ａ、クロストリジウム・ディフィシル毒素Ｂ、ボツリヌス菌毒素、ボツリヌス菌Ｃ３外酵素、炭疽毒素、リステリオリシンＯ、黄色ブドウ球菌α毒素、黄色ブドウ球菌β毒素、黄色ブドウ球菌δ毒素、黄色ブドウ球菌凝集因子Ａ、黄色ブドウ球菌フィブロネクチン結合プロテインＡ、エクスフォリアチン、トキシックショック症候群毒素、エンテロトキシンＢ型、コード因子、ジフテリア毒素、ストレプトリシン、ロイコシジン（ｌｅｕｃｏｃｉｄｉｎ）、志賀毒素、志賀様毒素、耐熱性エンテロトキシン、コレラ毒素、百日咳毒素、シュードモナス外毒素、細胞外アデニル酸シクラーゼ、バチルス・チューリンゲンシスデルタエンドトキシン）、マイコトキシン（例えば、アフラトキシン、アルファ－アマニチン、ベータ－アマニチン、ガンマ－アマニチン、イプシロン－アマニチン、β－ニトロプロピオン酸、シトリニン、サイトカラシン、エルゴタミン、フモニシンＢ１、フモニシンＢ２、フモニシンＢ３、フモニシンＢ４、グリオトキシン、イボテン酸、ロリトレムＢ、ムシモール、オクラトキシン、パツリン、ファロイジン、ステリグマトシスチン、トリコテセン、ボミトキシン、ゼラノール、ゼアラレノン）、植物毒素（例えば、アミグダリン、アニサチン、アンチアリン、ブルシン、チャコニン、シクトキシン、ダフニン、デルフィニン、ジビシン、ジェンコール酸、ファルカリノール、ゴシポール、ヘレナリン、レドール、リナマリン、ロタウストラリン、ミモシン、エナントトキシン、オレアンドリン、ペルシン、プロトアネモニンなど） 、ｐｓｅｕｄａｃｏｎｉｔｉｎｅ、レトロネシン、レジニフェラトキシン；スコポラミン、ソラマージン、ソラニジン、ソラニン、ソラソダミン（ｓｏｌａｓｏｄａｍｉｎｅ）、ソラソジン、ソラソニン、ソラウリシジン（ｓｏｌａｕｒｉｃｉｄｉｎｅ，）、ソラウリシン（ｓｏｌａｕｒｉｃｉｎｅ）、ストリキニーネ、スワインソニン、タゲチトキシン、チニアトキシン、トマチン、アブリン、リシン、ツチン）、無脊椎動物毒素（例えば、アンドロクトヌス・オーストラリス・ヘクター昆虫毒、カリブドトキシン、マウロトキシン（ｍａｕｒｏｔｏｘｉｎ）、アジトキシン、マルガトキシン、スロトキシン（ｓｌｏｔｏｘｉｎ）、シラトキシン、ヘフトキシン（ｈｅｆｕｔｏｘｉｎ）、ＨｇｅＴｘ１、ＨｓＴｘ１、Ｌｑ２、ビルトキシン、ベストキシン（ｂｅｓｔｏｘｉｎ）、ＢｍＫＡＥＰ、ファイオドトキシン（ｐｈａｉｏｄｏｔｏｘｉｎ）、インペラトキシン、Ｐｉ３、ラトロトキシン、ＣＳＴＸ、クピエニン（ｃｕｐｉｅｎｎｉｎｓ）、ＰｈＴｘ ３、ストロマトキシン、バニロトキシン（ｖａｎｉｌｌｏｔｏｘｉｎ）、フエントキシン、コノトキシン、エレドイシン、オンキダール、サキシトキシン、テトロドトキシン）、および脊椎動物毒素（例えば、シガテラ、テトロドトキシン、（＋）－アロプリミリオトキシン２６７Ａ、バトラコトキシン、アレノブファギン、ブフォタリン、ブフォテニン、シノブファギン、マリノブファギン、エピバチジン、ヒストリオニコトキシン、プミリオトキシン２５１Ｄ、サマンダリン、サマンダリジン、タリカトキシン、ゼテキトキシンＡＢ、α－ブンガロトキシン、β－ブンガロトキシン、カルシセプチン、タイカトキシン（ｔａｉｃａｔｏｘｉｎ）、カルシクルジン、心臓毒ＩＩＩ）。
【0155】
一実施形態では、ペイロードは、抗血管新生剤である。
【0156】
本明細書で使用される、「抗血管新生剤」という用語は、血管の成長および発達を担う血管新生を減少させるかまたは防ぐ分子を指す。
【0157】
抗血管新生剤の好適な例としては、これらに限定されないが、正常状態および病的状態における血管新生の主要な誘導因子であり、かつ胎児の血管形成に必須である、血管内皮成長因子ＶＥＧＦ－Ａ、ＶＥＧＦ－Ｂ、ＶＥＧＦ－Ｃ、またはＶＥＧＦ－Ｄのいずれかの阻害剤である。
【0158】
追加的にまたは代替的に、抗血管新生剤はまた、限定されないが、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）ファミリーのメンバー、例えば、ＦＧＦ－１（酸性）、ＦＧＦ－２（塩基性）、ＦＧＦ－４またはＦＧＦ－５；またはアンジオポエチン－１、内皮細胞特異的なＴｉｅ２受容体チロシンキナーゼを介してシグナル伝達する因子；またはこれらの血管新生因子のいずれかの受容体などの、他の血管新生因子を阻害できる。
【0159】
一実施形態では、ペイロードは、サイトカインである。
【0160】
サイトカインの好適な例としては、これらに限定されないが、ケモカイン、腫瘍壊死因子、インターロイキン、およびコロニー刺激因子が挙げられる。
【0161】
ケモカインの好適な例としては、これらに限定されないが、ケモカインＣ－Ｃモチーフリガンド（ＣＣＬ）１、ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＣＬ６、ＣＣＬ７、ＣＣＬ８、ＣＣＬ９、ＣＣＬ１１、ＣＣＬ１２、ＣＣＬ１３、ＣＣＬ１４、ＣＣＬ１５、ＣＣＬ１６、ＣＣＬ１７、ＣＣＬ１８、ＣＣＬ１９、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ２１、ＣＣＬ２２、ＣＣＬ２３、ＣＣＬ２４、ＣＣＬ２５、ＣＣＬ２６、ＣＣＬ２７、ＣＣＬ２８、ケモカインＣ－Ｘ－Ｃモチーフリガンド（ＣＸＣＬ）１、ＣＸＣＬ２、ＣＸＣＬ３、ＣＸＣＬ４、ＣＸＣＬ５、ＣＸＣＬ６、ＣＸＣＬ７、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１２、ＣＸＣＬ１３、ＣＸＣＬ１４、ＣＸＣＬ１５、ＣＸＣＬ１６、ＣＸＣＬ１７、フラクタルカイン、ケモカインＣモチーフリガンド（ＸＣＬ）１、およびＸＣＬ２が挙げられる。
【0162】
腫瘍壊死因子の好適な例としては、これらに限定されないが、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）α、リンホトキシン、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ４０ＬＧ、Ｆａｓリガンド、ＣＤ７０、ＣＤ１５３、４－１ＢＢリガンド、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）、核因子κ－Ｂ受容体活性化因子リガンド（ＲＡＮＫＬ）、増殖誘導リガンド（ＡＰＲＩＬ）、Ｂ細胞活性化因子（ＢＡＦＦ）、およびエクトジスプラシンＡ（ＥＤＡ）が挙げられる。
【0163】
インターロイキンの好適な例としては、これらに限定されないが、インターロイキン－（ＩＬ－）１α、ＩＬ－１β、ＩＬ－１Ｒａ、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－１４、ＩＬ－１５、ＩＬ－１６、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－１９、ＩＬ－２０、ＩＬ－２１、ＩＬ－２２、ＩＬ－２３、ＩＬ－２４、ＩＬ－２５、ＩＬ－２６、ＩＬ－２７、ＩＬ－２８、ＩＬ－２９、ＩＬ－３０、ＩＬ－３１、ＩＬ－３２、ＩＬ－３３、ＩＬ－３４、ＩＬ－３５、ＩＬ－３６α、ＩＬ－３６β、ＩＬ－３６γ、ＩＬ－３６Ｒａ、ＩＬ－３７、ＩＬ－３８、インターフェロン（ＩＦＮ）α、ＩＦＮβ、ＩＦＮκ、およびＩＦＮωが挙げられる。
【0164】
コロニー刺激因子の好適な例としては、これらに限定されないが、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）（顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）およびマクロファージコロニー刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）など）、ヘマトポエチン、およびトロンボポエチンが挙げられる。
【0165】
一実施形態では、ペイロードは、成長因子である。
【0166】
成長因子の好適な例としては、これらに限定されないが、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、ＦＧＦ７、ＦＧＦ８、ＦＧＦ９、ＦＧＦ１０、ＦＧＦ１１、ＦＧＦ１２、ＦＧＦ１３、ＦＧＦ１４、ＦＧＦ１６、ＦＧＦ１７、ＦＧＦ１８、ＦＧＦ１９、ＦＧＦ２０、ＦＧＦ２１、ＦＧＦ２３、トランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）α、上皮成長因子（ＥＧＦ）、ヘパリン結合性ＥＧＦ様成長因子（ＨＢ－ＥＧＦ）、トランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）β、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）１、ＩＧＦ２、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）サブユニットＡ（ＰＤＧＦＡ）、ＰＤＧＦサブユニットＢ（ＰＤＧＦＢ）、ＰＤＧＦサブユニットＣ（ＰＤＧＦＣ）、ＰＤＧＦサブユニットＤ（ＰＤＧＦＤ）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）－Ａ、ＶＥＧＦ－Ｂ、ＶＥＧＦ－Ｃ、ＶＥＧＦ－Ｄ、胎盤成長因子（ＰＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、および肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）が挙げられる。
【0167】
一実施形態では、ペイロードは、ホルモンである。
【0168】
ホルモンの好適な例としては、これらに限定されないが、ＧｎＲＨ、ＴＲＨ、ドーパミン、ＣＲＨ、ＧＨＲＨ、ソマトスタチン、ＭＣＨ、オキシトシン、バソプレシン、ＦＳＨ、ＬＨ、ＴＳＨ、プロラクチン、ＰＯＭＣ、ＣＬＩＰ、ＡＣＴＨ、ＭＳＨ、エンドルフィン、リポトロピン、ＧＨ、アルドステロン、コルチゾール、コルチゾン、ＤＨＥＡ、ＤＨＥＡ－Ｓ、アンドロステンジオン、エピネフリン、ノルアドレナリン、甲状腺ホルモンＴ３、甲状腺ホルモンＴ４、カルシトニン、ＰＴＨ、テストステロン、ＡＭＨ、インヒビン、エストラジオール、プロゲステロン、アクチビン、リラキシン、ＧｎＳＡＦ、ｈＣＧ、ＨＰＬ、エストロゲン、グルカゴン、インスリン、アミリン、膵臓ポリペプチド、メラトニン、Ｎ、Ｎ－ジメチルトリプタミン、５－メトキシ－Ｎ、Ｎ－ジメチルトリプタミン、チモシンα１、ベータチモシン、チモポエチン、チムリン、ガストリン、グレリン、ＣＣＫ、ＧＩＰ、ＧＬＰ－１、セクレチン、モチリン、ＶＩＰ、エンテログルカゴン、ペプチドＹＹ、ＩＧＦ－１、ＩＧＦ－２、レプチン、アディポネクチン、レジスチン、オステオカルシン、レニン、ＥＰＯ、カルシトリオール、プロスタグランジン、ＡＮＰ、およびＢＮＰが挙げられる。
【0169】
一実施形態では、ペイロードは、コーディングまたはノンコーディングオリゴヌクレオチドである。
【0170】
コーディングまたはノンコーディングオリゴヌクレオチドの好適な例としては、これらに限定されないが、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、アンチセンスＲＮＡ（ａｓＲＮＡ）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、長鎖ノンコーディングＲＮＡ（ｌｎｃＲＮＡ）、例えば、トランスファーＲＮＡ［ｔＲＮＡ］、リボソームＲＮＡ［ｒＲＮＡ］、など）、ｓｔＲＮＡ（ｓｍａｌｌ ｔｅｍｐｏｒａｌ ＲＮＡ）、トランス作用性ｓｉＲＮＡ、短鎖ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、シス天然アンチセンス転写物（ＮＡＴ）、クリスプＲＮＡ、長いノンコーディングＲＮＡ、ｐｉｗｉ相互作用ＲＮＡ（ｐｉＲＮＡ）、リピート関連ｓｉＲＮＡ（ｒａｓｉＲＮＡ）、ＲＮＡアプタマー、リボザイムなどが挙げられる。
【0171】
コーディングまたは非コーディングオリゴヌクレオチドのさらに好適な例としては、これらに限定されないが、ｒｅｃａｐｕｌｄｅｎｃｅｌ－Ｔ、ＴｒｉＭｉｘ、ＢＩ－１３６１８４９、ヌシネルセン、ボラネソルセンナトリウム、エテプリルセン、ＡＴＬ１１０５、ＡＳＭ－８、インクリシラン、パチシラン、ＲＸＩ－１０９、フィツシラン、セムジシラン、ＱＰＩ－１００２、ＢＭＳ－９８６２６３、ＰＦ－６５５、ペガプタニブ、アバシンカプタド ペゴル ナトリウム、オラプテスド ペゴル（ｏｌａｐｔｅｓｅｄ ｐｅｇｏｌ）、ｅｍａｐｔｉｃａｐ ｐｅｇｏｌ、ＳＰＣ３６４９、ベバシラニブ、ＡＧＮ－７４５、ＱＰＩ－１００７、ＴＤ１０１、ＳＹＬ０４００１２、ＳＹＬ１００１、Ｅｘｃｅｌｌａｉｒ、ＡＬＮ－ＲＳＶ０１、ＣＥＱ５０８、ｓｉＧ１２Ｄ ＬＯＤＥＲ、ＴＫＭ－ＡｐｏＢ、ＴＫＭ－ＰＬＫ１、ＡＬＮ－ＶＳＰ０２、ＡＬＮ－ＴＴＲ０１、Ｂｃｒ－Ａｂｌ ｓｉＲＮＡ、Ａｔｕ０２７、Ｉ５ＮＰ、ＣＡＬＡＡ－０１、ＦＡＮＧ ワクチン、ｉＰｓｉＲＮＡ、Ｔａｔ／Ｒｅｖ ｓｈＲＮＡ、ＡＲＣ１７７９、ＡＲＣ１９４９９、ＡＳ１４１１（ＡＧＲＯ００１）、Ｆｏｖｉｓｔａ、ＮＯＸ－Ａ１２、ＮＯＸ－Ｅ３６、ＮＯＸ－Ｈ９４、ＮＵ１７２、ＲＢ００６ ｐｌｕｓ ＲＢ００７、ＡＲＣ１９０５、およびＣｒｏｏｋｅ ｅｔ ａｌ．，２０１８（Ｃｅｌｌ Ｍｅｔａｂ．２７（４）：７１４－７３９）の表１および表２に記載のもの（これらは、参照により本明細書に組み込まれる）が挙げられる。
【0172】
一実施形態では、ペイロードは、光検出可能な標識である。
【0173】
本明細書で使用される場合、「光検出可能な標識」または「蛍光団」という用語は、光励起時に光を再発光できる部分を指す。
【0174】
光検出可能な標識の好適な例としては、これらに限定されないが、ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（登録商標）色素、ＢＯＤＩＰＹ（登録商標）色素、フルオレセイン、５－カルボキシフルオレセイン、５－（４，６－ジクロロトリアジン－２－イル）アミノフルオレセイン、２’７’－ジメトキシ－４’５’－ジクロロ－６－カルボキシフルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、ＱＦＩＴＣ、Ｏｒｅｇｏｎ Ｇｒｅｅｎ（登録商標）４８８、Ｏｒｅｇｏｎ Ｇｒｅｅｎ（登録商標）５１４、ローダミンおよびその誘導体（例えば、ローダミングリーン、ローダミングリーン－Ｘ、ローダミンレッド－など）Ｘ、Ｘ－ローダミン、６－カルボキシ－Ｘ－ローダミン（ＲＯＸ）、６－カルボキシローダミン（Ｒ６Ｇ）、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチル－６－カルボキシローダミン（ＴＡＭＲＡ）、リサミンローダミンＢ、ローダミン１２３、ローダミンＸイソチオシアネート、スルホローダミンＢ、スルホローダミン１０１（Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ）、テトラメチルローダミン、テトラメチルローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ））、エオシン、エオシンイソチオシアネート、エリスロシン、エリスロシンＢ、エリスロシンイソチオシアネート、Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ（登録商標）、Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ（登録商標）－Ｘ、ナフトフルオレセイン、マラカイトグリーン、マラカイトグリーンイソチオシアネート、クマリン誘導体、Ｐａｃｉｆｉｃ Ｏｒａｎｇｅ、ｃａｓｃａｄｅ ｂｌｕｅ、ｃａｓｃａｄｅ ｙｅｌｌｏｗ、ダンシルクロリド、ダポキシル色素、１－ジメチルアミン－Ｎ（２－アジド－エチル）ナフタレン－５－スルホンアミド、６－（６－アミノ－２－（２－アジドエチル）－１，３－ジオキソ－１Ｈ－ベンゾ（ｄｅ）－２（３Ｈ）イソキノリン、６－（６－アミノ－２－（２－プロピニル）－１，３－ジオキソ－１Ｈ－ベンゾ（ｄｅ）－２（３Ｈ）イソキノリン、８－（４－アジドエチルオキシフェニル）－２，６－ジエチル－１，３，５，７－テトラメチル－４，４－ジフルオロ－４－ボラ－３ａ，４ａ－ジアザ－ｓ－インダセン、８－（４－プロピニルオキシフェニル）－２，６－ジエチル－１，３，５，７－テトラメチル－４，４－ジフルオロ－４－ボラ－３ａ，４ａ－ジアザ－ｓ－インダセン、１－（３－アジド－プロポキシ）－７－メチルアミノ－フェノキサジン－３－オン、１－（２－プロピニル）－７－メチルアミノ－フェノキサジン－３－オン、Ｎ－（５－（３－アジドプロピルアミノ））－９Ｈ－ベンゾ（ａ）－フェノキサ－２－イン－９－イリデン）－Ｎ－メチル－メタンアミニウムクロリド、Ｎ－（５－（３－プロピニル－アミノ）－９Ｈ－ベンゾ（ａ）－フェノキサジン－９－イレン）－Ｎ－メチル－メタンアミニウムクロリド、（９－（３－アジド－プロポキシ）－７－ピペリジン－１－イル－フェノキサジン－３－イリデン）－ジメチル－アンモニウム過塩素酸塩、４－アセトアミド－４’－イソチオシアナトスチルベン－２，２’－ジスルホン酸、アクリジン、アクリジンイソチオシアネート、５－（２’－アミノエチル）アミノナフタレン－１－スルホン酸、４－アミノ－Ｎ－［３－ビニルスルホニル）フェニル］ナフタルイミド－３，５ジスルホネート、Ｎ－（４－アニリノ－１－ナフチル）マレイミド、アントラニルアミド、ブリリアントイエロー、クマリン、クマリン誘導体、７－アミノ－４－メチルクマリン、７－アミノ－トリフルオロメチルクマリン、シアノシン、４’，６－ジミニジノ－２－フェニルインドール、５’，５’’－ジブロモピロガロール－スルホンフタレイン、７－ジエチルアミノ－３－（４’－イソチオシアナトフェニル）－４－メチルクマリン－４，４’－ジイソチオシアナトジヒドロ－スチルベン－２，２’－ジスルホン酸、４，４’－ジイソチオシアナトスチルベン－２，２’－ジスルホン酸、エチジウム、ＩＲ１４４、ＩＲ１４４６、４－メチルウンベリフェロン、ｏ－クレゾールフタレイン、ニトロチロシン、パラローズアニリン、フェノールレッド、Ｂ－フィコエリトリン、ｏ－フタルジアルデヒド、ピレン、ピレン酪酸、１－ピレン酪酸スクシンイミジル、リアクティブレッド４、リボフラビン、ロゾール酸、ランタニドキレート、量子ドット、シアニン、ピレリウム（ｐｙｒｅｌｉｕｍ）色素、スクアラインが挙げられる。
【0175】
一実施形態では、ペイロードは、造影剤である。
【0176】
本明細書で使用される、「造影剤」という用語は、医療画像処理において身体内の構造または流体のコントラストを高めるために使用される任意の分子を指す。造影剤は、外部の電磁気または超音波を吸収するかまたは変化させる（これは、放射線自体を発する放射性標識とは異なる）。
【0177】
放射性標識の好適な例としては、解剖学的治療化学分類システムのサブグループＶ０８に記載されているものが挙げられる。
【0178】
造影剤の好適な例としては、これらに限定されないが、ジアトリゾ酸、メトリゾ酸、ヨーダミド、イオタラム酸、イオキシタラム酸、イオグリン酸（ｉｏｇｌｉｃｉｃ ａｃｉｄ）、アセトリゾ酸、イオカルミン酸（ｉｏｃａｒｍｉｃ ａｃｉｄ，）、メチオーダル（ｍｅｔｈｉｏｄａｌ）、ジオドン、メトリザミド、イオヘキソール、イオキサグリ酸、イオパミドール、イオプロミド、イオトロラン、イオベルソール、イオペントール（ｉｏｐｅｎｔｏｌ）、イオジキサノール、イオメプロール、イオビトリドール、イオキシラン、ヨードキサム酸、イオトロクス酸、イオグリカミン酸（ｉｏｇｌｙｃａｍｉｃ ａｃｉｄ）、アジピオドン、イオベンザミン酸（ｉｏｂｅｎｚａｍｉｃ ａｃｉｄ）、イオパノ酸、イオセタミン酸、イオポダートナトリウム、チロパン酸、イオポダートカルシウム、イオピドール、プロピリオドン、ｉｏｆｅｎｄｙｌａｔｅ、リピオドール、硫酸バリウム、ガドベン酸、ガドブトロール、ガドジアミド、ガドフォスベセセット、ガドリニウム、ガドペンテト酸、ガドテル酸、ガドテリドール、ガドベルセタミド、ガドキセト酸、クエン酸鉄アンモニウム、マンガホジピル、フェルモクシル、フェリステン（ｆｅｒｒｉｓｔｅｎｅ）、ペルフルブロン、ヒトアルブミンのマイクロスフェア、ガラクトース微粒子、ペルフレナペント、リン脂質のマイクロスフェア、六フッ化硫黄などが挙げられる。
【0179】
一実施形態では、ペイロードは、放射性標識である。
【0180】
本明細書で使用される、「放射性標識」、「放射性医薬品」、または「放射性同位体」という用語は、放射線を放出する任意の分子を指す。放射性標識は、治療または診断の目的のために使用され得る。
【0181】
放射性標識の好適な例としては、解剖学的治療化学分類システムのサブグループＶ０９およびｖ１０に記載されているものが挙げられる。
【0182】
放射性標識の好適な例としては、これらに限定されないが、９９ｍＴｃ化合物（例えば、エキサメタジム、メドロン酸、マクロ凝集アルブミン、セスタミビ、テトロホスミン、エキサメタジム、スレソマブ、チルマノセプト、アルシツモマブ、ボツムマブ、ヒニック－オクトレオチド（ｈｙｎｉｃ－ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ）など）；１２３Ｉ、１２５Ｉまたは１３１Ｉ化合物（例えば、イオフルパン、イオフェタミン、イオマゼニル、ヨード馬尿酸ナトリウム、イオベングアン、ヨードコレステロール、ミンレツモマブ（ｍｉｎｒｅｔｕｍｏｍａｂ）、トシツモマブなど）；１８Ｆ化合物（例えば、フロルベタピル、フルテメタモル、フルシクロビン、フルデオキシグルコース、フルオロエチルチロシン、フッ化ナトリウムなど）；６４Ｃｕ化合物（例えば、Ｃｕ－ＥＴＳ２など）；７５Ｓｅ化合物（例えば、ＳｅＨＣＡＴなど）；１１１Ｉｎ化合物（例えば、イムシロマブ（ｉｍｃｉｒｏｍａｂ）、カプロマブペンデチド、サツモマブペンデチドなど）；８２Ｒｂ化合物（例えば、塩化ルビジウムなど）；１５３Ｓｍ化合物（例えば、レキシドロナムなど）；８９Ｓｒ化合物（例えば、塩化ストロンチウム８９など）；９０Ｙ化合物（例えば、イブリツモマブチウキセタンなど）；２２３Ｒａ化合物（例えば、塩化ラジウム２２３など）；１７７Ｌｕ化合物（例えば、オキソドトレオチドなど）；および少なくとも１つの２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｎ、１４Ｃ、１５Ｏ、１８Ｆ、２２Ｎａ、２４Ｎａ、３２Ｐ、３３Ｐ、４０Ｋ、４７Ｃａ、５１Ｃｒ、５５Ｅｕ、５７Ｃｏ、５８Ｃｏ、６０Ｃｏ、５９Ｆｅ、６４Ｃｕ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、７５Ｓｅ、８１ｍＫｒ、８２Ｒｂ、８９Ｓｒ、９０Ｓｒ、９０Ｙ、９７Ｔｃ、９９ｍＴｃ、１０３Ｐｄ、１０６Ｒｕ、１０７Ｐｄ、１１１Ｉｎ、１１３Ｃｄ、１２１Ｓｎ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１２６Ｓｎ、１２９Ｉ、１３１Ｉ、１３３Ｘｅ、１３５Ｃｓ、１３７Ｃｓ、１５３Ｓｍ、１６５Ｄｙ、１６９Ｅｒ、１７７Ｌｕ、１８６Ｒｅ、１９２Ｉｒ、１９８Ａｕ、２０１Ｔｌ、２１３Ｂｉ、２２３Ｒａ、および／または２２５Ｒａ原子を含む任意の化合物が挙げられる。
【0183】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、アウリスタチン、またはその類似体、誘導体もしくはプロドラッグにコンジュゲートされる。アウリスタチンは、微小管の動態、ＧＴＰ加水分解、核および細胞分裂を妨害することが示されており（Ｗｏｙｋｅ ｅｔ ａｌ．，２００１．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４６（１２）：３８０２－８）、抗がん活性（米国特許第５，６６３，１４９号）および抗真菌活性（Ｐｅｔｔｉｔ ｅｔ ａｌ．，１９９８．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４２（１１）：２９６１－５）を有する。例えば、アウリスタチンＥは、パラアセチル安息香酸またはベンゾイル吉草酸と反応されて、それぞれ、ＡＥＢおよびＡＥＶＢを生成できる。他の典型的なアウリスタチン誘導体としては、ＭＭＡＦ（モノメチルアウリスタチンＦ）、およびＭＭＡＥ（モノメチルアウリスタチンＥ）が挙げられる。好適なアウリスタチンおよびアウリスタチン類似体、誘導体およびプロドラッグ、ならびに抗体へのアウリスタチンのコンジュゲーションのための好適なリンカーは、例えば、米国特許第５，６３５，４８３号、同第５，７８０，５８８号および同第６，２１４，３４５号、ならびに国際公開第２００２／０８８１７２号、国際公開第２００４／０１０９５７号、国際公開第２００５／０８１７１１号、国際公開第２００５／０８４３９０号、国際公開第２００６／１３２６７０号、国際公開第２００３／０２６５７７号、国際公開第２００７／００８６０号、国際公開第２００７／０１１９６８号、および国際公開第２００５／０８２０２３号に記載されている。
【0184】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ピロロ［２，１－ｃ］［１，４］－ベンゾジアゼピン（ＰＤＢ）（例えば、アントラマイシンなど）またはその類似体、誘導体もしくはプロドラッグにコンジュゲートされる。好適なＰＤＢおよびＰＤＢ誘導体、および関連技術は、当該技術分野で説明されている。
【0185】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、アントラサイクリン、メイタンシン、カリケアマイシン、デュオカルマイシン、ラケルマイシン（ＣＣ－１０６５）、ドラスタチン１０、ドラスタチン１５、イリノテカン、モノメチルアウリスタチンＥ、モノメチルアウリスタチンＦ、ＰＤＢ、またはそれらの類似体、誘導体、またはプロドラッグから選択される細胞傷害部分にコンジュゲートされる。
【0186】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、アントラサイクリンまたはその類似体、誘導体もしくはプロドラッグにコンジュゲートされる。
【0187】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、メイタンシンまたはその類似体、誘導体もしくはプロドラッグにコンジュゲートされる。
【0188】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、カリケアマイシンまたはその類似体、誘導体もしくはプロドラッグにコンジュゲートされる。
【0189】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、デュオカルマイシンまたはその類似体、誘導体もしくはプロドラッグにコンジュゲートされる。
【0190】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ラケルマイシン（ＣＣ－１０６５）またはその類似体、誘導体もしくはプロドラッグにコンジュゲートされる。
【0191】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、ドラスタチンまたはその類似体、誘導体もしくはプロドラッグにコンジュゲートされる。
【0192】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、モノメチルアウリスタチンＥまたはその類似体、誘導体またはプロドラッグにコンジュゲートされる。
【0193】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、モノメチルアウリスタチンＦまたはその類似体、誘導体またはプロドラッグにコンジュゲートされる。
【0194】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、イリノテカン、またはその類似体、誘導体もしくはプロドラッグにコンジュゲートされる。
【0195】
第２の態様では、本発明は、ＣＤ４５ＲＣに、好ましくはｈＣＤ４５ＲＣに特異的に結合する、抗体またはその抗原結合断片に関する。したがって、本発明の抗体またはその抗原結合断片は、「抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片」であり、好ましくは「抗ｈＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片」である。
【0196】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、上で定義したように、少なくとも１つのＣＤ４５ＲＣ結合ドメインを含む。
【0197】
ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインについて上述したすべての特徴および実施形態は、必要な変更を加えて、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片に適用される。追加の特徴は、以降定義される。
【0198】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、ポリクローナル抗体である。好ましくは、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、モノクローナル抗体である。
【0199】
ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体、ならびにそれらの断片を生成する方法は、当技術分野でよく知られている（例えば、Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８８を参照されたい）。
【0200】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、ＩｇＧ（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４を含む）、ＩｇＭ、ＩｇＡ（ＩｇＡ１およびＩｇＡ２を含む）、ＩｇＤおよびＩｇＥを含むかまたはそれらからなる群から選択されるアイソタイプを有する。
【0201】
抗体の定常領域は、補体を固定しかつ細胞依存性細胞傷害および食作用を媒介する抗体の能力において重要である。したがって、本明細書において論じられるとおり、抗体のアイソタイプは、抗体が細胞傷害／食作用を媒介することが望ましいか否かに基づいて選択され得る。抗体のアイソタイプの決定または選択は、当技術分野で既知の方法により実行され得る。
【0202】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、重鎖定常領域（ＨＣＣＲまたはＣＨと略記される）および／または軽鎖定常領域（ＬＣＣＲまたはＣＬと略記される）を含む。
【0203】
一実施形態では、ＨＣＣＲおよび／または軽鎖定常領域ＬＣＣＲは、マウスＨＣＣＲおよび／またはＬＣＣＲである。
【0204】
一実施形態では、ＨＣＣＲおよび／または軽鎖定常領域ＬＣＣＲ、好ましくは両方は、ヒトであるかまたはヒト化される。
【0205】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２６のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるヒトまたはヒト化ＨＣＣＲ；または、配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のもしくはそれを超える配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるヒトまたはヒト化ＨＣＣＲを含む。
【化13】
【0206】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２７のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるヒトまたはヒト化ＨＣＣＲ；または、配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のもしくはそれを超える配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるヒトまたはヒト化ＨＣＣＲを含む。
【化14】
【0207】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２８のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるヒトまたはヒト化ＨＣＣＲ；または、配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のもしくはそれを超える配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるヒトまたはヒト化ＨＣＣＲを含む。
【化15】
【0208】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２９のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるヒトまたはヒト化ＨＣＣＲ；または、配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のもしくはそれを超える配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるヒトまたはヒト化ＨＣＣＲを含む。
【化16】
【0209】
したがって、一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号２４のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲ；
－配列番号２５のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲ；
－配列番号２６、２７、または２８のアミノ酸配列、好ましくは配列番号２６のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＨＣＣＲ；および
－配列番号２９のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＬＣＣＲ
を含む。
－配列番号２４のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＨＣＶＲ；
－配列番号２５のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＬＣＶＲ；
－配列番号２６、２７、または２８のアミノ酸配列、好ましくは配列番号２６のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＨＣＣＲ；および
－配列番号２９のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＬＣＣＲ
を含む。
【0210】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、
－配列番号１０、１１、および１２を有する３つのＣＤＲと、配列番号２４のフレームワーク領域と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＨＣＶＲ；
－配列番号１３、１４、および１５を有する３つのＣＤＲと、配列番号２５のフレームワーク領域と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＬＣＶＲ；
－配列番号２６、２７または２８のいずれか１つのアミノ酸配列、好ましくは配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれらからなるＨＣＣＲ；および
－配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＣＲ；
を含み、
その一方で、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、その全体的な機能的特性、特にＣＤ４５ＲＣに対する、好ましくはｈＣＤ４５ＲＣに対する結合特異性を保持する。
－配列番号１０、１１、および１２を有する３つのＣＤＲと、配列番号２４のフレームワーク領域と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＨＣＶＲ；
－配列番号１３、１４、および１５を有する３つのＣＤＲと、配列番号２５のフレームワーク領域と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するフレームワーク領域を含むＬＣＶＲ；
－配列番号２６、２７または２８のいずれか１つのアミノ酸配列、好ましくは配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれらからなるＨＣＣＲ；および
－配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のまたはそれを超える配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれらからなるＬＣＣＲ；
を含み、
その一方で、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、その全体的な機能的特性、特にＣＤ４５ＲＣに対する、好ましくはｈＣＤ４５ＲＣに対する結合特異性を保持する。
【0211】
抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、例えば、単離された抗体もしくはその抗原結合断片の特性を改善するため、または抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞媒介性食作用（ＡＤＣＰ）、および／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を増強するために、当技術分野で周知の方法を使用して修飾され得ることが理解されるであろう。このような修飾は、当技術分野でよく知られている。
【0212】
例えば、ｉｎ ｖｉｖｏでのクリアランスを減速させ、かつより望ましい薬物動態プロファイルを得るために、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）で修飾されてよい。抗体またはその抗原結合断片にＰＥＧを部位特異的にコンジュゲートする方法は、例えば、Ｌｅｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００１．Ｃｙｔｏｋｉｎｅ．１６（３）：１０６－１９またはＤｅｌｇａｄｏ ｅｔ ａｌ．，１９９６．Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ．７３（２）：１７５－８２に記載されている。
【0213】
修飾の別の非限定的な例は、Ｆｃγ受容体に対するその親和性を高めるために、抗体のヒトＦｃ領域の修飾にある。Ｆｃγ受容体結合を増強する方法としては、Ｆｃ断片、特にＨＣＣＲの一次アミノ酸配列の修飾、およびＦｃ断片の炭水化物構造および含量の改変が挙げられる。
【0214】
したがって、低減されたフコース含量を含む抗体は、ＡＤＣＣおよび／またはＡＤＣＰ応答を増強することが知られている。実際に、Ｆｃ断片オリゴ糖からのコアα－１，６－フコース部分の除去は、改善されたＦｃγＲＩＩＩ受容体結合を介してＡＤＣＣおよび／またはＡＤＣＰ活性を改善すると実証されている（例えば、Ｃａｒｔｅｒ，２００１．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ．１（２）：１１８－２９；Ｋａｎｄａ ｅｔ ａｌ．，２００７．Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ．１７（１）：１０４－１８；Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，２００２．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２７７（３０）：２６７３３－４０；Ｓｈｉｎｋａｗａ ｅｔ ａｌ．，２００３．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２７８（５）：３４６６－７３；Ｎｉｗａ ｅｔ ａｌ．，２００４．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６４（６）：２１２７－３３；国際公開第２０１４／１４０３２２号を参照されたい）。
【0215】
したがって、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、低減されたフコース含量を含み得る。
【0216】
本明細書で使用される、「フコース含量」という用語は、各抗体の各重鎖のＦｃ断片のＮ２９７残基（配列番号２６または２７のＮ１８０に対応する）に付着されるＮ－グリカン内のフコース化された形態のパーセンテージを指す。
【0217】
本明細書で使用される、「低減されたフコース含量」という用語は、８５％以下のフコース含量を指す。有利には、フコース含量は、約６５％～約８５％の範囲である。あるいは、フコース含量は、８５％以下、８０％、７５％、７０％、６５％、またはさらに少なく、例えば６０％、５５％、５０％、４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、または２０％であり得る。しかしながら、フコース含量がゼロである必要はなく、例えば、５％、１０％、１５％、または２０％以上あってよい。
【0218】
別のグリコフォームである二分型Ｎ結合型炭水化物のレベルもまた、ＡＤＣＣおよび／またはＡＤＣＰを増加させることが示唆されている（例えば、Ｕｍａｎａ ｅｔ ａｌ．，１９９９．Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１７（２）：１７６－８０；Ｈｏｄｏｎｉｃｚｋｙ ｅｔ ａｌ．，２００５．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｐｒｏｇ．２１（６）：１６４４－５２を参照されたい）。
【0219】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、それらが上で定義したような低減されたフコース含量を有するという条件で（国際特許公開第２００７／０４８０７７号）、異なるタイプのグリコシル化（二分岐複合体タイプのＮ－グリカンの場合、可変の比率の二分型Ｎ－アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）残基またはガラクトース残基を有する、オリゴマンノースまたは二分岐複合体タイプのＮ－グリカン）をさらに含み得る。例えば、低減されたフコース含量を有する抗体は、例えば欧州特許公開１ １７６ １９５または国際特許公開２００１／０７７１８１号もしくは国際特許公開 ２０１２／０４１７６８号に記載される方法により得ることができる。
【0220】
オリゴマンノースタイプのＮ－グリカンは、二分岐複合体タイプのＮ－グリカンと比較して、ｉｎ ｖｉｖｏにおいて低減された半減期を有する。したがって、有利には、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、上で定義したように、Ｆｃ断片のＮ－グリコシル化部位に、低減されたフコース含量を有する、二分岐複合体タイプのグリカン構造を有する。
【0221】
Ｆｃγ受容体に対する最適化された結合親和性および／または増強されたＡＤＣＣおよび／またはＡＤＣＰを有する様々なＦｃ断片バリアントが、記載され、かつ当技術分野において知られている。
【0222】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片は、ペイロードに、任意によりリンカーを介して、コンジュゲートされる。ペイロードの好適な例は、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインに関連して、上に記載されており、これは、必要な変更を加えて、ここで準用される。
【0223】
一実施形態では、ペイロードは、薬物である。抗体またはその抗原結合断片と薬物の間のコンジュゲート体は、当技術分野において、「抗体－薬物コンジュゲート体」または「ＡＤＣ」として知られている。
【0224】
第３の態様では、本発明は、ＣＤ４５ＲＣに、好ましくはｈＣＤ４５ＲＣに特異的に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）に関する。したがって、本発明のＣＡＲは、「抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ」、好ましくは「抗ｈＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ」である。
【0225】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲは、
（ｉ）上述のように、少なくとも１つの細胞外ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、好ましくは少なくとも１つの細胞外ｈＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン；
（ｉｉ）任意により、細胞外ヒンジドメイン；
（ｉｉｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン；および
（ｉｖ）少なくとも１つの一次シグナル伝達ドメイン、および任意により１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインを含む、少なくとも１つの細胞内シグナル伝達ドメイン
を含む。
（ｉ）上述のように、少なくとも１つの細胞外ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、好ましくは少なくとも１つの細胞外ｈＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン；
（ｉｉ）任意により、細胞外ヒンジドメイン；
（ｉｉｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン；および
（ｉｖ）少なくとも１つの一次シグナル伝達ドメイン、および任意により１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインを含む、少なくとも１つの細胞内シグナル伝達ドメイン
を含む。
【0226】
一実施形態では、ＣＡＲは、上記のとおり、少なくとも１つの細胞外ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインを含む。
【0227】
一実施形態では、細胞外ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ＣＤ４５ＲＣ結合ｓｃＦｖである。
【0228】
一実施形態では、ＣＡＲは、２つ以上の細胞外抗原結合ドメインを含み、その少なくとも第１のドメインは、上記のようにＣＤ４５ＲＣ結合ドメインであり、その少なくとも第２のドメインは、ＣＤ４５ＲＣ以外の抗原に特異的に結合する。このようなＣＡＲはしたがって、少なくとも２つの異なる抗原に結合でき、そのうちの１つは、ＣＤ４５ＲＣである。
【0229】
一実施形態では、細胞外抗原結合ドメイン、特に細胞外ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインは、ヒンジドメインを介して膜貫通ドメインに接続される。
【0230】
一実施形態では、ヒンジドメインは、好ましくは２～２５アミノ酸の範囲の長さを有する、短いポリペプチドリンカーである。一実施形態では、ヒンジドメインは、上記のように、ｓｃＦｖにおけるＶＨドメインとＶＬドメインの間のリンカーと同様のリンカーである。
【0231】
一実施形態では、ヒンジドメインは、上述のグリシン－セリンリンカー、例えば、（ＧＳ）ｎリンカー、（Ｇ２Ｓ）ｎリンカー、（Ｇ３Ｓ）ｎリンカー、（Ｇ４Ｓ）ｎリンカーなどであり；ｎは、正の整数である。一実施形態では、ｎは、１、２、３、４、５またはそれより多くに等しい。一実施形態では、ヒンジドメインは、配列番号３０～３９のいずれか１つを有するグリシン－セリンリンカーであり得る。
【0232】
好適なヒンジドメインの別の例は、参照により本明細書に組み込まれる国際特許公開第２０１２／１３８４７５号に記載されている。
【0233】
一実施形態では、ヒンジドメインは、配列番号４０～４４のいずれか１つであり得る。
【化17】
【0234】
一実施形態では、ヒンジドメインは、配列番号４５を有するＣＤ８ヒンジのアミノ酸配列、または配列番号４５と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる。
【化18】
【0235】
別の実施形態では、ヒンジドメインは、配列番号４６を有するＩｇＧ４ヒンジのアミノ酸配列、または配列番号４６と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる。
【化19】
【0236】
別の実施形態では、ヒンジドメインは、配列番号４７を有するＩｇＤヒンジのアミノ酸配列、または配列番号４７と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる。
【化20】
【0237】
別の実施形態では、ヒンジドメインは、配列番号４８を有するＣＤ２８ヒンジのアミノ酸配列、または配列番号４８と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる。
【化21】
【0238】
本発明によるＣＡＲにおいて使用され得る膜貫通ドメインの例としては、これらに限定されないが、Ｔ細胞受容体のα鎖、β鎖もしくはζ鎖の膜貫通ドメイン、ＣＤ２８、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５４、ＫＩＲＤＳ２、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＬＦＡ－１αサブユニット（ＣＤ１１ａ）、ＬＦＡ－１βサブユニット（ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＧＩＴＲ、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＣＤ１６０、ＣＤ１９、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ１、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ－６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１１ｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ、ＰＤ１、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＩＴＧＢ７、ＴＮＦＲ２、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、Ｌｙ－９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＳＬＡＭＦ６（Ｌｙ－１０８）、ＳＬＡＭＦ１（ＣＤ１５０）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、およびＮＫＧ２Ｃの膜貫通ドメインが挙げられる。
【0239】
一実施形態では、膜貫通ドメインは、それが由来する分子の膜貫通ドメイン全体を含み得るか、またはそれは、その機能的断片および／もしくは構造的断片またはそのバリアントのみを含み得る。
【0240】
一実施形態では、膜貫通ドメインは、配列番号４９を有するＣＤ８膜貫通ドメインのアミノ酸配列、または配列番号４９と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる。
【化22】
【0241】
別の実施形態では、膜貫通ドメインは、配列番号５０を有するＣＤ２８膜貫通ドメインのアミノ酸配列、または配列番号５０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のアミノ酸配列同一性を共有するアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる。
【化23】
【0242】
本明細書で使用される場合、「細胞内シグナル伝達ドメイン」という用語は、分子の細胞内部分を指す。細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＡＲ含有免疫細胞の免疫エフェクター機能を促進するシグナルを生成する。ＣＡＲ免疫細胞における免疫エフェクター機能の例としては、これらに限定されないが、サイトカインの分泌を含む、細胞溶解活性、抑制活性、調節活性およびヘルパー活性が挙げられる。
【0243】
一実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、少なくとも１つの一次シグナル伝達ドメイン、および任意により、１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインを含む。
【0244】
エンドドメインとも呼ばれる一次シグナル伝達ドメインは、細胞質にあり、その抗原への細胞外結合ドメインの結合の際にエフェクター機能シグナルを伝達し、かつＣＡＲ含有免疫細胞にその特殊な機能を実行するように指示する。
【0245】
一次シグナル伝達ドメインの例としては、これらに限定されないが、Ｔ細胞受容体のζ鎖またはその相同体のいずれか、例えば、η鎖、ＦｃεＲ１γ鎖およびβ鎖、ＭＢ１（Ｉｇα）鎖、Ｂ２９（Ｉｇβ）鎖、など）、ＣＤ３ポリペプチド（例えば、Δ、δおよびε）、ｓｙｋファミリーチロシンキナーゼ（例えば、例えば、Ｓｙｋ、ＺＡＰ７０、など）、ｓｒｃファミリーチロシンキナーゼ（例えば、Ｌｃｋ、Ｆｙｎ、Ｌｙｎなど）およびＴ細胞の形質導入に関与する他の分子、例えば、ＣＤ２、ＣＤ５およびＣＤ２８が挙げられる。
【0246】
一実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ヒトＣＤ３ε鎖、ＦｃγＲＩＩＩ、ＦｃεＲＩ、Ｆｃ受容体の細胞質尾部、細胞質受容体を有する免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）、またはそれらの組み合わせであり得る。追加の細胞内シグナル伝達ドメインは、当業者には明らかであり、本発明の代替的実施形態と関連して使用され得る。
【0247】
一実施形態では、少なくとも１つの細胞内シグナル伝達ドメインは、それが由来する分子の細胞内部分全体、または天然の細胞内シグナル伝達ドメイン全体、またはその機能的断片もしくは誘導体を含み得る。
【0248】
一実施形態では、少なくとも１つの細胞内一次シグナル伝達ドメインは、Ｔ細胞一次シグナル伝達ドメイン（またはそれに由来する配列）を含むかまたはそれからなる。
【0249】
一実施形態では、Ｔ細胞一次シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、共通ＦｃＲγ（ＦＣＥＲ１Ｇ）、ＦｃＲε（ＦｃイプシロンＲｉｂ）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＦｃγＲＩＩａ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２の群、およびそれらに由来する配列において選択されるタンパク質のシグナル伝達ドメインを含むかまたはそれらからなる。
【0250】
一実施形態では、Ｔ細胞一次シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζの機能的シグナル伝達ドメインを含むかまたはそれからなる。
【0251】
一実施形態では、Ｔ細胞一次シグナル伝達ドメインは、配列番号５１または配列番号５１と少なくとも約７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％同一性を有するアミノ酸配列を有するＣＤ３ζの機能的シグナル伝達ドメインを含むかまたはそれらからなる。
【化24】
【0252】
刺激性の様式で作用するＴ細胞一次シグナル伝達ドメインは追加的にまたは代替的に、免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭＳ）として知られるシグナル伝達モチーフを含み得る。
【0253】
ＩＴＡＭ含有Ｔ細胞の一次細胞内シグナル伝達ドメインの例としては、これらに限定されないが、ＣＤ３ζ、共通ＦｃＲγ（ＦＣＥＲ１Ｇ）、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃＲβ（ＦｃεＲ１ｂ）、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ６６ｂ、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＤＡＰ１０、およびＤＡＰ１２のもの（これらに由来するもの）が挙げられる。
【0254】
一実施形態では、Ｔ細胞一次シグナル伝達ドメインは、修飾されたＩＴＡＭドメイン（例えば、天然ＩＴＡＭドメインと比較して変更された、例えば、増加されたまたは減少された、活性を有する変異されたＩＴＡＭドメイン）を含む。一実施形態では、一次シグナル伝達ドメインは、修飾されたＩＴＡＭを含有する一次細胞内シグナル伝達ドメイン、例えば、最適化されたおよび／または短縮されたＩＴＡＭを含有する一次細胞内シグナル伝達ドメインを含む。一実施形態では、一次シグナル伝達ドメインは、１つ、２つ、３つ、４つのまたはそれより多くのＩＴＡＭモチーフを含む。
【0255】
一実施形態では、ＣＡＲは、２つ以上の細胞内一次シグナル伝達ドメイン、例えば、２、３、４、５個の、またはそれより多い、細胞内一次シグナル伝達ドメインを含む。
【0256】
一実施形態では、これらの２つ以上の細胞内一次シグナル伝達ドメインは、ランダムにまたは特定の順序で、互いにタンデムに連結され得る。任意により、上記のような柔軟なペプチドリンカーなどのリンカーは、２つの異なる細胞内一次シグナル伝達ドメイン間の連結を形成してよい。上述のグリシン－セリンリンカーの他に、単一のアミノ酸（例えば、アラニンまたはグリシン残基など）もまた、好適なリンカーであり得る。
【0257】
一実施形態では、本発明のＣＡＲは任意により、１つまたは複数の共刺激シグナル伝達ドメインを含んでよい。
【0258】
本明細書で使用される、「共刺激シグナル伝達ドメイン」という用語は、共刺激分子の細胞内部分、すなわち共刺激リガンドと特異的に結合し、それによりＴ細胞による共刺激応答（これらに限定されないが、増強された細胞増殖、増強された細胞生存およびメモリー細胞の発達など）を媒介する、Ｔ細胞上の同族結合パートナーを指す。
【0259】
１つまたは複数の共刺激シグナル伝達ドメインは、個別に、共刺激分子の細胞内ドメインのすべてまたは一部であり得る。共刺激分子としては、これらに限定されないが、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４（ＣＤ１５２）、ＰＤ－１、ＭＨＣクラスＩ分子、ＢＴＬＡ、Ｔｏｌｌリガンド受容体、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンド、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ－１、ＧＩＴＲ、ＡＲＨＲ、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＣＤ１９、ＣＤ１９ａ、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ８β、ＩＬ２Ｒα、ＩＬ６Ｒα、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＬ－１３Ｒα１、ＩＬ－１３Ｒα２、ＩＬ－３３Ｒ、ＩＬ－１０Ｒα、ＩＬ－１０Ｒβ、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－５Ｒ（ＣＳＦ２ＲＢ）、ＩＬ－２１Ｒ、ＩＴＧＡ４、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ－６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１１ｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＩＴＧＢ７、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫＧ２Ｃ、ＣＤ９５、ＴＧＦｂＲ１／２／３、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ６９、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ－Ａ、Ｌｙｌ０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ－３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＬＡＴ、ＧＡＤＳ、ＳＬＰ－７６、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、コモンガンマ鎖、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンド、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【0260】
一実施形態では、ＣＡＲは、４－１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ４、またはＰＤ－１の細胞内ドメインのすべてまたは一部を含む少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインを含む。
【0261】
一実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、４－１ＢＢの細胞内ドメインのすべてまたは一部を含むかまたはそれらからなる。
【0262】
一実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、配列番号５２または配列番号５２と少なくとも約７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列、またはその機能的に活性な断片を有する４－１ＢＢの細胞内ドメインを含むかまたはそれからなる。
【化25】
【0263】
一実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、ＩＣＯＳの細胞内ドメインのすべてまたは一部を含むかまたはそれらからなる。
【0264】
一実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、配列番号５３または配列番号５３と少なくとも約７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列、またはその機能的に活性な断片を有するＩＣＯＳの細胞内ドメインを含むかまたはそれからなる。
【化26】
【0265】
一実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、ＯＸ４０の細胞内ドメインのすべてまたは一部を含むかまたはそれらからなる。
【0266】
一実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、配列番号５４または配列番号５４と少なくとも約７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列、またはその機能的に活性な断片を有するＯＸ４０の細胞内ドメインを含むかまたはそれからなる。
【化27】
【0267】
一実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２８の細胞内ドメインのすべてまたは一部を含むかまたはそれらからなる。
【0268】
一実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、配列番号５５または配列番号５５と少なくとも約７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列、またはその機能的に活性な断片を有するＣＤ２８の細胞内ドメインを含むかまたはそれからなる。
【化28】
【0269】
一実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＴＬＡ４の細胞内ドメインのすべてまたは一部を含むかまたはそれらからなる。
【0270】
一実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、配列番号５６または配列番号５６と少なくとも約７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列、またはその機能的に活性な断片を有するＣＴＬＡ４の細胞内ドメインを含むかまたはそれからなる。
【化29】
【0271】
一実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、ＰＤ－１の細胞内ドメインのすべてまたは一部を含むかまたはそれらからなる。
【0272】
一実施形態では、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、配列番号５７または配列番号５７と少なくとも約７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列、またはその機能的に活性な断片を有するＰＤ－１の細胞内ドメインを含むかまたはそれからなる。
【化30】
【0273】
一実施形態では、ＣＡＲは、２つ以上の細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン、例えば、２、３、４、５個の、またはそれより多い、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを含む。
【0274】
一実施形態では、これらの２つ以上の細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、ランダムにまたは特定の順序で、互いにタンデムに連結され得る。任意により、上記のような柔軟なペプチドリンカーなどのリンカーは、２つの異なる細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン間の連結を形成してよい。上記のグリシン－セリンリンカーの他に、単一のアミノ酸（例えば、アラニンまたはグリシン残基など）もまた、好適なリンカーであり得る。
【0275】
一実施形態では、少なくとも１つの細胞内一次シグナル伝達ドメインおよび少なくとも１つの細胞内共刺激シグナル伝達ドメインは、ランダムにまたは特定の順序で、互いにタンデムに連結され得る。任意により、例えば上記の柔軟なペプチドリンカーなどのリンカーは、細胞内一次シグナル伝達ドメインと細胞内共刺激シグナル伝達ドメインの間の連結を形成し得る。上述のグリシン－セリンリンカーの他に、単一のアミノ酸（例えば、アラニンまたはグリシン残基など）もまた、好適なリンカーであり得る。
【0276】
本発明によるＣＡＲは、第１世代、第２世代または第３世代のＣＡＲであってよい。
【0277】
第１世代のＣＡＲは、３０年以上前に開発された（Ｋｕｗａｎａ ｅｔ ａｌ．，１９８７．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ．１４９（３）：９６０－９６８；Ｇｒｏｓｓ ｅｔ ａｌ．，１９８９．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｐｒｏｃ．２１（１ Ｐｔ １）：１２７－１３０；Ｇｒｏｓｓ ｅｔ ａｌ．，１９８９．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．８６（２４）：１００２４－１００２８）。
【0278】
一実施形態では、本発明のＣＡＲは、第１世代のＣＡＲであり、
（ｉ）上述のように、少なくとも１つの細胞外ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、好ましくは少なくとも１つの細胞外ｈＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、
（ｉｉ）任意により、細胞外ヒンジドメイン、
（ｉｉｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン、および
（ｉｖ）１つ以上の細胞内一次シグナル伝達ドメイン（複数可）
を含む。
（ｉ）上述のように、少なくとも１つの細胞外ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、好ましくは少なくとも１つの細胞外ｈＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、
（ｉｉ）任意により、細胞外ヒンジドメイン、
（ｉｉｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン、および
（ｉｖ）１つ以上の細胞内一次シグナル伝達ドメイン（複数可）
を含む。
【0279】
第１世代のＣＡＲは、例えば、シグナル伝達がＣＤ３ζにより提供されるＣＡＲであり得、すなわち、細胞内一次シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζである。
【0280】
第２世代のＣＡＲは、ＣＤ２８または４－１ＢＢなどの、細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを添加する。これらの細胞内シグナル伝達ドメインの関与は、Ｔ細胞の増殖、サイトカイン分泌、アポトーシスに対する耐性、およびｉｎ ｖｉｖｏでの持続性を改善する。
【0281】
一実施形態では、本発明のＣＡＲは、第２世代のＣＡＲであり、
（ｉ）上述のように、少なくとも１つの細胞外ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、好ましくは少なくとも１つの細胞外ｈＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、
（ｉｉ）任意により、細胞外ヒンジドメイン、
（ｉｉｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン、
（ｉｖ）共刺激シグナル伝達ドメイン、および
（ｖ）１つ以上の細胞内一次シグナル伝達ドメイン（複数可）
を含む。
（ｉ）上述のように、少なくとも１つの細胞外ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、好ましくは少なくとも１つの細胞外ｈＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、
（ｉｉ）任意により、細胞外ヒンジドメイン、
（ｉｉｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン、
（ｉｖ）共刺激シグナル伝達ドメイン、および
（ｖ）１つ以上の細胞内一次シグナル伝達ドメイン（複数可）
を含む。
【0282】
第３世代のＣＡＲは、例えばＣＤ２８－４－１ＢＢまたはＣＤ２８－ＯＸ４０などの複数の共刺激ドメインを組み合わせて、Ｔ細胞活性を増加させる。
【0283】
一実施形態では、本発明のＣＡＲは、第３世代のＣＡＲであり、
（ｉ）上述のように、少なくとも１つの細胞外ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、好ましくは少なくとも１つの細胞外ｈＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、
（ｉｉ）任意により、細胞外ヒンジドメイン、
（ｉｉｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン、
（ｉｖ）少なくとも２つの共刺激シグナル伝達ドメイン、および
（ｖ）１つ以上の細胞内一次シグナル伝達ドメイン（複数可）
を含む。
（ｉ）上述のように、少なくとも１つの細胞外ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、好ましくは少なくとも１つの細胞外ｈＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、
（ｉｉ）任意により、細胞外ヒンジドメイン、
（ｉｉｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン、
（ｉｖ）少なくとも２つの共刺激シグナル伝達ドメイン、および
（ｖ）１つ以上の細胞内一次シグナル伝達ドメイン（複数可）
を含む。
【0284】
第４の態様では、本発明は、上記のような、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、または抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、または抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲをコードする核酸に関する。
【0285】
本発明はまた、上記のような、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、または抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、または抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲをコードする核酸を含むベクターにも関する。
【0286】
一実施形態では、ベクターは、発現ベクターであり、細胞中でＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、または抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲの発現を可能にする調節エレメントをさらに含む。
【0287】
「発現ベクター」は、転写され得る配列をコードする核酸を含む任意の種類の遺伝子構築物を意味する。発現ベクターは、様々な「調節エレメント」を含むことができ、これは、特定の宿主細胞における作動可能に連結されたコード配列の転写およびおそらく翻訳のために必要な核酸配列を指す。このような調節エレメントの例としては、これらに限定されないが、プロモーター、エンハンサー、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、スプライシング部位、終結シグナルなどが挙げられる。
【0288】
ベクターの例としては、これらに限定されないが、ＤＮＡベクター、ＲＮＡベクター、プラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、ウイルスおよびコスミドが挙げられる。
【0289】
一実施形態では、発現ベクターは、プラスミドである。
【0290】
一実施形態では、発現ベクターは、ウイルスベクターである。ウイルスベクターの例としては、これらに限定されないが、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター、レトロウイルスベクター（例えば、レンチウイルス）、ワクシニアウイルスベクター、シンドビスウイルスベクター、サイトメガロウイルスベクター、単純ヘルペスウイルスベクターなどが挙げられる。
【0291】
一実施形態では、発現ベクターは、モノシストロン性であり得る。「モノシストロン性」は、単一のタンパク質をコードする単一の核酸が、単一の発現ベクターで発現されることを意味する。
【0292】
一実施形態では、発現ベクターは、好ましくは調節エレメントに作動可能に連結された、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインの、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片の、または抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲのＨＣＶＲをコードする配列を含む。一実施形態では、発現ベクターは、好ましくは調節エレメントに作動可能に連結された、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片の、ＨＣＶＲおよびＨＣＣＲを含む重鎖をコードする配列を含む。一実施形態では、ＨＣＶＲおよびＨＣＣＲの配列は、同じオープンリーディングフレーム中にあり、したがって単一のポリペプチド鎖として発現され得る。
【0293】
一実施形態では、発現ベクターは、好ましくは調節エレメントに作動可能に連結された、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインの、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片の、または抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲのＬＣＶＲをコードする配列を含む。一実施形態では、発現ベクターは、好ましくは調節エレメントに作動可能に連結された、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体またはその抗原結合断片の、ＬＣＶＲおよびＬＣＣＲを含む軽鎖をコードする配列を含む。一実施形態では、ＬＣＶＲおよびＬＣＣＲの配列は、同じオープンリーディングフレーム中にあり、したがって単一のポリペプチド鎖として発現され得る。
【0294】
したがって、本発明はまた、少なくとも２つの発現ベクターを含むかまたはそれらからなる発現ベクター系にも関し、１つは、好ましくは調節エレメントに作動可能に連結された、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインの、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片の、または抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲのＨＣＶＲをコードする配列を含み、かつ１つは、好ましくは調節エレメントに作動可能に連結された、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインの、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片の、または抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲのＬＣＶＲをコードする配列を含む。
【0295】
一実施形態では、発現ベクターは、好ましくは調節エレメントに作動可能に連結された、細胞外ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、任意により、細胞外ヒンジドメイン、少なくとも１つの膜貫通ドメイン、および少なくとも１つの一次シグナル伝達ドメインおよび任意により１つ以上の共刺激的なシグナル伝達ドメインを含む少なくとも１つの細胞内シグナル伝達ドメイン、をコードする配列を含む。一実施形態では、これらの配列は、同じオープンリーディングフレーム中にあり、したがって単一のポリペプチド鎖として発現され得る。
【0296】
一実施形態では、発現ベクターは、ポリシストロン性であってよい。「ポリシストロン性」は、それぞれ単一のタンパク質をコードする、少なくとも２つ以上の核酸が、単一の発現ベクターで発現されることを意味する。
【0297】
一実施形態では、発現ベクターは、
－好ましくは調節エレメントに作動可能に連結された、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインの、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片の、または抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲのＨＣＶＲをコードする配列；
－好ましくは調節エレメントに作動可能に連結された、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインの、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片の、または抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲのＬＣＶＲをコードする配列
を含む。
－好ましくは調節エレメントに作動可能に連結された、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインの、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片の、または抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲのＨＣＶＲをコードする配列；
－好ましくは調節エレメントに作動可能に連結された、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメインの、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片の、または抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲのＬＣＶＲをコードする配列
を含む。
【0298】
当業者であれば本明細書に開示されるＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ、ＨＣＣＲおよび／またはＬＣＣＲをコードする核酸配列を設計できることが、容易に理解されるであろう。当業者は、コドン最適化などにより、例えば、組換え生産速度を改善するために、核酸配列を修飾することを目的とした分子生物学的方法に精通していることが、さらに理解される。最終的に、本出願はしたがって、本明細書に開示される任意のＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ、ＨＣＣＲおよび／またはＬＣＣＲをコードする任意の核酸を包含する。
【0299】
一実施形態では、核酸またはベクターは、単離された核酸またはベクターである。
【0300】
「単離された」は、核酸またはベクターが、ゲノムＤＮＡ配列、ならびに天然配列に天然に付随する、リボソームおよびポリメラーゼなどのタンパク質または複合体を実質的に含まないことを意味する。この用語は、その自然に起こる環境から除去されている核酸配列を包含し、かつ組換えまたはクローン化されたＤＮＡ単離物、および化学的に合成された類似体または異種系により生物学的に合成された類似体を含む。
【0301】
一実施形態では、単離された核酸またはベクターは、精製される。
【0302】
一実施形態では、単離された核酸またはベクターは、
（１）吸光度法または蛍光法（例えば、２６０および２８０ｎｍでの吸光度（Ａ２６０／２８０）による測定など）により決定されるような、８０重量％超、８５重量％、９０重量％、９１重量％、９２重量％、９３重量％、９４重量％、９５重量％の、またはそれを超える
、かつ最も好ましくは９６重量％、９７重量％、９８重量％、または９９重量％超の核酸、または
（２）アガロースゲル電気泳動により、および臭化エチジウム、ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ、ＧｅｌＧｒｅｅｎなどの挿入剤を使用して示されるような、均質性
へと精製される。
（１）吸光度法または蛍光法（例えば、２６０および２８０ｎｍでの吸光度（Ａ２６０／２８０）による測定など）により決定されるような、８０重量％超、８５重量％、９０重量％、９１重量％、９２重量％、９３重量％、９４重量％、９５重量％の、またはそれを超える
、かつ最も好ましくは９６重量％、９７重量％、９８重量％、または９９重量％超の核酸、または
（２）アガロースゲル電気泳動により、および臭化エチジウム、ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ、ＧｅｌＧｒｅｅｎなどの挿入剤を使用して示されるような、均質性
へと精製される。
【0303】
第５の態様では、本発明は、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、または抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片を産生する、および精製する方法に関する。
【0304】
一実施形態では、本方法は、
－核酸、好ましくは上記の発現ベクターを含む宿主細胞を、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、または抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片の発現に好適である条件下で培養することと、
－発現されたＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、または抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片を回収すること、
を含む。
－核酸、好ましくは上記の発現ベクターを含む宿主細胞を、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、または抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片の発現に好適である条件下で培養することと、
－発現されたＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、または抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片を回収すること、
を含む。
【0305】
この組換えプロセスは、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏおよび／またはｉｎ ｖｉｖｏの治療的使用および／または診断的使用を目的としたモノクローナル抗体を含む、抗体またはその抗原結合断片の大規模産生に使用できる。
【0306】
核酸または発現ベクターは、核酸の切除、ライゲーション、形質転換、およびトランスフェクションのための日常的に実施される様々な手順のいずれかに従い、増殖され発現され得る。特定の実施形態では、発現は、大腸菌などの原核宿主細胞（すなわち、核酸または発現ベクターを含む宿主細胞は、原核宿主細胞である）で実施され得る。他の実施形態では、発現は、動物細胞（哺乳動物細胞など）、酵母（例えば、サッカロミケス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）、分裂酵母（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐｏｍｂｅ）、またはピキア酵母（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ））；および植物細胞を含む、真核宿主細胞（すなわち、核酸または発現ベクターを含む宿主細胞は、真核宿主細胞である）で行われ得る。
【0307】
当業者に公知の方法により、かつ本開示に基づき、核酸または発現ベクターが、特定の宿主系において外来配列を発現するために設計されてよく、次いで、細胞ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列が、挿入されてよい。調節エレメントは、特定の宿主に応じて変化する。
【0308】
すべてのこれらのプロセスは、当技術分野において周知である（例えば、Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ（Ｅｄ．），２００４．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（１ｓｔ ｅｄ．，Ｖｏｌ．１：Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ）．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｓｐｒｉｎｇｅｒ ＵＳを参照されたい）。
【0309】
一実施形態では、発現されたＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、または抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片は、さらに精製される。
【0310】
抗体またはその抗原結合断片を精製する方法は、当技術分野でよく知られている（例えば、Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ（Ｅｄ．），２００４．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（１ｓｔ ｅｄ．，Ｖｏｌ． １：Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ）．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｓｐｒｉｎｇｅｒ ＵＳを参照されたい）。
【0311】
第６の態様では、本発明は、本明細書に記載の抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞、およびそのような免疫細胞の集団に関する。
【0312】
本明細書で使用される、「免疫細胞」という用語は、骨髄で産生される造血幹細胞（ＨＳＣ）に由来する白血球（ｗｈｉｔｅ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌ）（白血球（ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ））を指す。
【0313】
一実施形態では、免疫細胞は、上記の抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲをコードする、核酸またはベクター、好ましくは発現ベクターを含み、それによりその細胞表面上で抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する操作された免疫細胞を生成する。
【0314】
一実施形態では、免疫細胞は、哺乳動物の免疫細胞、例えば、ヒト免疫細胞、家畜（例えば、ウシ、ブタ、またはウマ）由来の免疫細胞、またはペット（例えば、ネコまたはイヌ）由来の免疫細胞である。
【0315】
一実施形態では、免疫細胞は、自己細胞、異種細胞、または同種異系細胞である。
【0316】
一実施形態では、免疫細胞は、リンパ球、骨髄系細胞、およびそれらの任意の組み合わせを含むかまたはそれらからなる群から選択される。
【0317】
一実施形態では、免疫細胞は、リンパ球、例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、およびそれらの任意の組み合わせを含むかまたはそれらからなる群から選択される細胞である。
【0318】
一実施形態では、免疫細胞は、Ｔ細胞であり、それは、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、γδＴ細胞、ダブルネガティブ（ＤＮ）Ｔ細胞、およびそれらの任意の組み合わせを含むかまたはそれらからなる群から選択され得る。
【0319】
一実施形態では、免疫細胞は、例えば、ヘルパーＴ細胞、制御性Ｔ細胞、エフェクターＴ細胞、およびそれらの任意の組み合わせなどの、ＣＤ４＋Ｔ細胞である。一実施形態では、免疫細胞は、例えば、細胞傷害性ＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋制御性Ｔ細胞などの、ＣＤ８＋Ｔ細胞である。一実施形態では、免疫細胞は、エフェクターγδＴ細胞である。一実施形態では、免疫細胞は、規定のγδＴＣＲを発現するように操作されたＴ細胞（ＴＥＧ細胞）である。一実施形態では、免疫細胞は、ＤＮ Ｔ細胞である。一実施形態では、免疫細胞は、ＮＫ細胞である。一実施形態では、免疫細胞は、ＮＫＴ細胞である。
【0320】
一実施形態では、免疫細胞は、例えば、細胞療法での使用に好適な任意の制御性免疫細胞などの、制御性免疫細胞である。一実施形態では、制御性免疫細胞は、制御性Ｔ細胞、ＣＤ４＋制御性Ｔ細胞、ＣＤ８＋制御性Ｔ細胞、制御性γδＴ細胞、制御性ＤＮ Ｔ細胞、制御性Ｂ細胞、制御性ＮＫ細胞、制御性ＮＫ Ｔ細胞、制御性マクロファージ、制御性樹状細胞、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。
【0321】
一実施形態では、制御性免疫細胞は、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、特に、胸腺由来Ｔｒｅｇまたは適応型または誘導型Ｔｒｅｇである。一実施形態では、免疫細胞は、ＣＤ４＋Ｔｒｅｇである。一実施形態では、Ｔｒｅｇは、胸腺由来Ｔｒｅｇ、または適応型または誘導型Ｔｒｅｇである。一実施形態では、Ｔｒｅｇは、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋ＴｒｅｇまたはＣＤ４＋ＦｏｘＰ３－Ｔｒｅｇ（Ｔｒ１細胞）である。一実施形態では、免疫細胞は、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋制御性Ｔ細胞である。一実施形態では、免疫細胞は、ＣＤ８＋Ｔｒｅｇである。ＣＤ８＋Ｔｒｅｇの例としては、これらに限定されないが、ＣＤ８＋ＣＤ２８－Ｔｒｅｇ、ＣＤ８＋ＣＤ１０３＋Ｔｒｅｇ、ＣＤ８＋ＦｏｘＰ３＋Ｔｒｅｇ、ＣＤ８＋ＣＤ１２２＋Ｔｒｅｇ、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【0322】
一実施形態では、制御性免疫細胞は、制御性γδＴ細胞である。一実施形態では、制御性免疫細胞は、制御性ＤＮ Ｔ細胞である。一実施形態では、制御性免疫細胞は、制御性ＮＫ細胞である。一実施形態では、制御性免疫細胞は、制御性ＮＫ Ｔ細胞である。
【0323】
一実施形態では、免疫細胞は、例えば、細胞療法での使用に好適である任意のエフェクター免疫細胞などの、エフェクター免疫細胞である。一実施形態では、エフェクター免疫細胞は、エフェクターＴ細胞、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞、エフェクターγδＴ細胞、エフェクターＤＮ Ｔ細胞、エフェクターＮＫ細胞、エフェクターＮＫ Ｔ細胞、およびそれらの任意の組み合わせを含むかまたはそれらからなる群から選択される。
【0324】
一実施形態では、免疫細胞は、エフェクターＴ細胞（Ｔｅｆｆ）である。一実施形態では、エフェクター免疫細胞は、ＣＤ４＋Ｔｅｆｆである。ＣＤ４＋Ｔｅｆｆ細胞の例としては、これらに限定されないが、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、ＣＤ４＋Ｔ濾胞ヘルパー（Ｔｆｈ）細胞、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられる。一実施形態では、エフェクター免疫細胞は、ＣＤ８＋Ｔｅｆｆである。ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞の例としては、これらに限定されないが、ＣＤ８＋ＣＤ４５ＲＯ＋ＣＣＲ７－ＣＤ６２Ｌ－Ｔｅｆｆ、ＣＤ８＋ＣＤ４５ＲＡ＋ＣＣＲ７－ＣＤ６２Ｌ－Ｔｅｆｆ、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【0325】
一実施形態では、免疫細胞は、エフェクターγδ Ｔ細胞である。一実施形態では、免疫細胞は、エフェクターＤＮ Ｔ細胞である。一実施形態では、免疫細胞は、エフェクターＮＫ細胞である。一実施形態では、免疫細胞は、エフェクターＮＫ Ｔ細胞である。
【0326】
本発明はまた、上に記載される免疫細胞の単離された集団および／または実質的に精製された集団に関する。
【0327】
本明細書で使用される、「単離された集団」は、その自然環境（末梢血など）から除去され、かつ単離された、精製された、または分離された細胞集団を指し、それと共に天然に存在するが、それに基づきそれらの細胞が単離される細胞表面マーカーを欠く他の細胞が、少なくとも約７５％フリー、８０％フリー、８５％フリーであり、ある実施形態では約９０％フリー、９５％フリー、９６％フリー、９７％フリー、９８％フリー、９９％フリーである。
【0328】
本発明はまた、上記のような免疫細胞の濃縮された集団にも関する。一実施形態では、濃縮された集団は、少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％のまたはそれを超える目的の免疫細胞を含む。
【0329】
第７の態様では、本発明は、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、または抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、または抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ；または上記のような、核酸またはそれらをコードするベクター、好ましくは発現ベクター；または上記の抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞を含む組成物に関する。
【0330】
一実施形態では、組成物は、医薬組成物であり、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤をさらに含む。
【0331】
「薬学的に許容される賦形剤」という用語は、あらゆる任意の溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを含む。上記賦形剤は、動物、好ましくはヒトに投与された場合、有害な、アレルギー性の、または他の不都合な反応を引き起こさない。ヒト投与の場合、調製物は、例えば、ＦＤＡ ＯｆｆｉｃｅまたはＥＭＡなどの、規制当局により要求される無菌性、発熱性、ならびに一般的な安全性および純度の基準を満たす必要がある。
【0332】
これらの組成物に使用され得る薬学的に許容される賦形剤としては、これらに限定されないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、例えば、ヒト血清アルブミン、緩衝物質、例えば、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質、例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイダルシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム）、ポリエチレングリコール、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン－ポリオキシプロピレン－ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂が挙げられる。
【0333】
一実施形態では、医薬組成物は、対象に注射され得る製剤に対して薬学的に許容されるビヒクルを含む。これらは、特に等張性で、無菌の、生理食塩水（リン酸一ナトリウムまたは二ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウムまたは塩化マグネシウムなど、またはそのような塩の混合物）であってよく、または乾燥した、特に場合によっては、滅菌水または生理食塩水の添加時に、注射用溶液の構成を可能にする凍結乾燥された組成物であり得る。
【0334】
一実施形態では、組成物は、医薬品である。
【0335】
第８の態様では、本発明は、以下でさらに説明されるように、治療目的の様々な方法における、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸またはそれらをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞またはそのような免疫細胞の集団、および組成物の使用に関する。
【0336】
一実施形態では、本発明は、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物のいずれかを対象に投与することにより、それを必要とする対象において免疫寛容を誘導する方法に関する。本発明はまた、それを必要とする対象において免疫寛容を誘導することにおける使用のための、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物に関する。本発明はまた、それを必要とする対象において免疫寛容を誘導するための医薬品の調製における、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の使用に関する。
【0337】
本明細書で使用される、「免疫寛容」という用語は、他の物質または組織に対する免疫応答を維持しながら免疫応答を誘発する能力を有する特定の物質または組織に対して、免疫系の応答がない状態に関する。
【0338】
本明細書で使用される、「免疫応答」という用語は、Ｔ細胞媒介性免疫応答および／またはＢ細胞媒介性免疫応答を含む。例示的な免疫応答としては、これらに限定されないが、Ｔ細胞応答（例えば、サイトカイン産生および細胞傷害性）、およびまたＴ細胞活性化により間接的に影響を受ける免疫応答（例えば、マクロファージ）が挙げられる。免疫応答に関与する免疫細胞としては、リンパ球（例えば、Ｂ細胞およびＴ細胞、例えば、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、Ｔｈ１およびＴｈ２細胞）、抗原提示細胞（例えば、樹状細胞などの専門的な抗原提示細胞）、ナチュラルキラー細胞、骨髄細胞（例えば、マクロファージ、好酸球、肥満細胞、好塩基球、および顆粒球）が挙げられる。
【0339】
一実施形態では、本発明は、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物のいずれかを対象に投与することにより、それを必要とする対象においてＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞を枯渇させる方法に関する。本発明はまた、それを必要とする対象においてＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞を枯渇させることにおける使用のための上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物にも関する。本発明はまた、それを必要とする対象においてＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞を枯渇させるための医薬品の調製における、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の使用に関する。
【0340】
ＣＤ４５ＲＣの発現の相対レベルは、フローサイトメトリーを使用して測定され得る。３種類の細胞が区別可能である：高レベル、中間レベル、または陰性レベルのＣＤ４５ＲＣ発現を提示する細胞。
【0341】
一実施形態では、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物は、ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞を枯渇させる。
【0342】
「ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞」は、上で定義したように、ＣＤ４５ＲＣマーカーを高レベルで発現する細胞（例えば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、Ｂ細胞など）である。
【0343】
本明細書で使用される、ＣＤ４５ＲＣを発現する細胞に関して「枯渇する」または「枯渇すること」という用語は、対象における細胞の数の測定可能な減少を指す。減少は、少なくとも約１０％、例えば少なくとも約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれより多くであり得る。一実施形態では、この用語は、検出限界未満への対象中のまたはサンプル中のＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞の数の減少を指す。
【0344】
特に、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物は、ＣＤ４５ＲＣに結合することおよびアポトーシス促進シグナルを伝達することにより、かつ／または抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞媒介性食作用（ＡＤＣＰ）、および／もしくは補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を活性化することにより、ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞を枯渇させる。
【0345】
一実施形態では、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物は、補体依存性細胞傷害を媒介する。
【0346】
一実施形態では、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、または抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲは、細胞傷害剤または成長阻害剤にコンジュゲートされ得る。
【0347】
一実施形態では、本発明は、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物のいずれかを対象に投与することにより、それを必要とする対象において制御性Ｔ細胞を拡大するおよび／または増強する方法に関する。本発明はまた、それを必要とする対象において制御性Ｔ細胞を拡大するおよび／または増強することにおける使用のための、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物に関する。本発明はまた、それを必要とする対象において制御性Ｔ細胞を拡大するおよび／または増強するための医薬品の調製における、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の使用に関する。
【0348】
本明細書で使用される、用語「拡大」は、所与の細胞集団（例えば、Ｔｒｅｇなどの免疫細胞）を変換するおよび／または増幅するプロセスを指す。細胞集団の拡大は、ｉｎ ｖｉｖｏ、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで生じ得る。
【0349】
本明細書で使用される、「増強する」という用語は、所与の細胞集団の機能を増加させる（例えば、Ｔｒｅｇの抑制能力を増加させる）プロセスを指す。細胞集団の増強は、ｉｎ ｖｉｖｏ、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで生じ得る。
【0350】
「制御性Ｔ細胞」または「Ｔｒｅｇ」は、異常または過剰な免疫応答を抑制し、かつ免疫寛容に関与するＴ細胞である。Ｔｒｅｇは典型的には、「フォークヘッドボックスＰ３（Ｆｏｘｐ３＋）制御性Ｔ細胞」および／または「ＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－細胞」である。
【0351】
本明細書で使用される、「フォークヘッドボックスＰ３（Ｆｏｘｐ３＋）制御性Ｔ細胞」および「ＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－細胞」という用語は、その特徴的なマーカーが転写因子Ｆｏｘｐ３である、ヒトおよびげっ歯類における０．１～１０％のＣＤ４＋および／またはＣＤ８＋Ｔ細胞を指す。
【0352】
一実施形態では、方法および使用は、Ｆｏｘｐ３＋および／またはＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－Ｔｒｅｇを拡大するおよび／または増強するためのものである。
【0353】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－Ｔｒｅｇは、刺激により拡大される。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－Ｔｒｅｇは、ＩＬ－２および／またはＩＬ－１５の存在下での刺激により拡大される。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－Ｔｒｅｇは、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８抗体および／または同種異系抗原提示細胞（ＡＰＣ）および／または特異的抗原による刺激により拡大される。
【0354】
追加的にまたは代替的に、本発明は、ＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－Ｔｒｅｇを精製するｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏの方法に関する。
【0355】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－Ｔｒｅｇは、ＣＤ８＋／ＣＤ４＋Ｔ細胞である。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－Ｔｒｅｇは、ＣＤ８＋／ＣＤ４－Ｔ細胞である。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－Ｔｒｅｇは、ＣＤ８－／ＣＤ４＋Ｔ細胞である。
【0356】
一実施形態では、精製されたＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－Ｔｒｅｇは、それを必要とする対象への投与の前に、投与と同時に、または投与の後に、さらに拡大されおよび／または増強され得る。
【0357】
一実施形態では、本発明は、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物のいずれかを対象に投与することにより、それを必要とする対象において移植拒絶反応を予防するおよび／または軽減する方法に関する。本発明はまた、それを必要とする対象において移植拒絶反応を予防するおよび／または減少させることにおける使用のための、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物に関する。本発明はまた、それを必要とする対象において移植拒絶反応を予防するおよび／または軽減するための医薬品の調製における、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の使用に関する。
【0358】
「移植拒絶反応を防ぐ」および「移植拒絶反応を減少させる」という用語は、免疫移植拒絶反応の防止または阻害、ならびに免疫移植拒絶反応の発症または進行を遅延させることを包含することを意味する。この用語はまた、対象中の移植片の生存を延長させること、または対象における移植の非奏効を逆転させることを包含することを意味する。さらに、この用語は、例えば、間質性線維症、慢性移植片動脈硬化症、または血管炎などの免疫拒絶に関連する免疫学的合併症を改善することを含む、免疫移植拒絶反応の症状を改善することを包含することを意味する。
【0359】
「移植」という用語およびその変形は、移植が同系（ドナーとレシピエントが遺伝的に同一である場合）、同種異系（ドナーとレシピエントが異なる遺伝的起源であるが、同じ種である場合）または異種（ドナーとレシピエントが異なる種に由来する場合）に関わらず、レシピエント中への移植片（グラフトとも呼ばれる）の挿入を指す。したがって、典型的なシナリオでは、宿主は、ヒトであり、グラフトは、同じまたは異なる遺伝的起源のヒトに由来する、同系グラフトである。別のシナリオでは、グラフトは、系統発生的に広く離れた種の動物、例えば、ヒト宿主中に移植されるヒヒの心臓を含む、それが移植される種とは異なる種に由来する。
【0360】
本明細書で使用される、「移植拒絶反応」という用語は、急性および慢性の両方の移植拒絶反応を包含する。
【0361】
「急性拒絶反応」は、移植される組織が免疫学的に異物である場合の、組織移植レシピエントの免疫系による拒絶反応を指す。急性拒絶反応は、レシピエントの免疫細胞による移植組織の浸潤により特徴づけられ、免疫細胞は、それらのエフェクター機能を実施し移植組織を破壊する。急性拒絶反応の発症は、急速であり、一般に、ヒトでは移植手術後数週間以内に生じる。一般に、急性拒絶反応は、ラパマイシン、シクロスポリン、抗ＣＤ４０Ｌモノクローナル抗体などの免疫抑制薬により阻害され得るかまたは抑制され得る。
【0362】
「慢性拒絶反応」は一般に、急性拒絶反応の免疫抑制が成功した場合であっても、生着後数ヶ月から数年以内にヒトにおいて生じる。線維症は、あらゆる種類の臓器移植の慢性拒絶反応の共通の要因である。
【0363】
一実施形態では、移植拒絶反応は、同種異系移植拒絶反応である。したがって、一実施形態では、移植のドナーは、ヒトである。移植のドナーは、生体ドナーであっても、死亡ドナー、すなわち死体ドナーであってもよい。
【0364】
一実施形態では、移植片は、器官、組織または細胞である。
【0365】
本明細書で使用される、「器官」という用語は、生物体内で特定の機能または機能群を実施する、頑丈な、血管が発達した器官を指す。器官という用語は、限定されないが、心臓、肺、腎臓、肝臓、膵臓、皮膚、子宮、骨、軟骨、小腸または大腸、膀胱、脳、乳房、血管、食道、卵管、胆嚢、卵巣、膵臓、前立腺、胎盤、脊髄、上肢および下肢、脾臓、胃、精巣、胸腺、甲状腺、気管、尿管、尿道、子宮を含む。
【0366】
本明細書で使用される、「組織」という用語は、ヒトまたは動物の任意の種類の組織を指し、これらに限定されないが、血管組織、皮膚組織、肝臓組織、膵臓組織、神経組織、泌尿生殖器組織、胃腸組織、骨および軟骨を含む骨格組織、脂肪組織、腱および靱帯を含む結合組織、羊膜組織、絨毛膜組織、硬膜、心膜、筋肉組織、腺組織、顔面組織、眼組織を含む。
【0367】
「細胞」という用語は、本明細書では、目的の細胞を豊富に含む組成物、好ましくは少なくとも３０％、好ましくは少なくとも５０％、さらにより好ましくは少なくとも６５％の目的の細胞を含む組成物を指す。一実施形態では、細胞は、骨髄、末梢血、または臍帯血由来の多能性造血幹細胞；または多能性（すなわち、胚性幹細胞［ＥＳ］または人工多能性幹細胞［ｉＰＳ］）、またはこれに限定されないが、心筋細胞、β－膵臓細胞、肝細胞、ニューロンなどの異なる細胞系統の多能性幹細胞由来の分化細胞を含むかまたはそれらかなる群から選択される。
【0368】
移植が同種異系造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）である一実施形態では、細胞は、通常は骨髄、末梢血、または臍帯血に由来する多能性造血幹細胞を含むかまたはそれらからなる群から選択される。
【0369】
「ＨＳＣＴ」または「造血幹細胞移植」は、白血病およびリンパ腫（これに限定されないが、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖症候群、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）および多発性骨髄腫を含む）に罹患した患者を治癒できる移植療法である。しかし、同種異系ＨＳＣＴの重要な制限は、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の発症であり、それは、この治療を受けるヒトの約３０～５０％において、重篤な形態で生じる。
【0370】
したがって、一実施形態では、方法および使用は、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）を予防するおよび／または軽減するためのものである。
【0371】
一実施形態では、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような細胞の集団免疫細胞、または組成物は、多能性造血幹細胞と組み合わせて使用されて、白血病および／またはリンパ腫などの悪性疾患（これに限定されないが、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病）（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖症候群、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、神経芽腫、ユーイング肉腫、骨髄異形成症候群、神経膠腫、および多発性骨髄腫を含む）、または非悪性疾患、例えば副腎白質ジストロフィー、サラセミア、腎細胞性貧血、再生不良性貧血、鎌状赤血球貧血、ファンコニ貧血、骨髄不全症候群、ヘモグロビン症、乳児悪性大理石骨病、ムコ多糖症、ピルビン酸キナーゼ欠損症、免疫不全症候群、血球貪食性リンパ組織球症、先天性代謝エラー、骨硬化性骨髄腫（別名ＰＯＥＭＳ症候群）および原発性アミロイドーシス、を防ぐおよび／または処置し得る。
【0372】
追加的にまたは代替的に、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物は、グラフトの操作に使用され得る。
【0373】
一実施形態では、グラフト移植される移植片は、ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞を枯渇させるために、移植の前に上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物で処置される。
【0374】
一実施形態では、移植片は、骨髄であり、ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞を枯渇させるために、移植の前に、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物で処置される。一実施形態では、骨髄は、ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈＴ細胞およびＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－Ｔ細胞を含むＣＤ３４＋細胞を含む。
【0375】
一実施形態では、本発明は、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物のいずれかを対象に投与することにより、それを必要とする対象においてＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害、または状態を防ぐ、軽減させる、および／または処置する方法に関する。本発明はまた、それを必要とする対象においてＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害、または状態を防ぐ、軽減させる、および／または処置することにおける使用のための、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物に関する。本発明はまた、それを必要とする対象においてＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害、または状態を防ぐ、軽減させる、および／または処置するための医薬品の調製における、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の使用に関する。
【0376】
本明細書で使用される、「ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害または状態」という用語は、対象におけるＣＤ４５ＲＣ細胞を発現する細胞の増加された割合および／または対象の細胞におけるＣＤ４５ＲＣの発現の増加されたレベルにより引き起こされる、またはそれにより潜在的に引き起こされる、またはそれにより特徴付けられる、疾患、障害または状態を指す。
【0377】
「増加されたＣＤ４５ＲＣを発現する細胞の割合」は、参照、例えば、実質的に健康な対象（すなわち、問題となっているＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害、または状態を患っていない対象）におけるＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞の数など、と比較して、所与の対象におけるＣＤ４５ＲＣを発現する細胞（すなわち、ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞）の数の約５％、好ましくは、約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％のまたはそれを超える増加を意味する。
【0378】
「増加されたＣＤ４５ＲＣの発現のレベル」は、参照、例えば、実質的に健康な対象（すなわち、問題となっているＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害または状態を患っていない対象）の細胞におけるＣＤ４５ＲＣの発現レベルなど、と比較して、特定の対象の細胞における、ｍＲＮＡレベルでまたはタンパク質レベルでのいずれかで、ＣＤ４５ＲＣの発現レベルの約５％、好ましくは約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％のまたはそれを超える増加を意味する。
【0379】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害または状態は、自己免疫疾患、望ましくない免疫応答、単一遺伝子性疾患、およびリンパ腫またはがんを含むかまたはそれらからなる群から選択される。
【0380】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害または状態は、自己免疫疾患、望ましくない免疫応答、および単一遺伝子性疾患を含むかまたはそれらからなる群から選択される。
【0381】
本明細書で使用される、「自己免疫疾患」という用語は、免疫系が、結果として組織に損傷を与える、正常な宿主の一部である抗原（すなわち自己－抗原）に対する免疫応答（例えば、Ｂ細胞またはＴ細胞応答）を生じさせる疾患を指す。自己免疫疾患では、宿主の免疫系は、特定の抗原を「自己」として認識できず、免疫反応が、抗原を発現する宿主の組織に対して高められる。
【0382】
本発明で企図される例示的な自己免疫疾患としては、これらに限定されないが、関節リウマチ、若年性乏関節炎、コラーゲン誘導関節炎、アジュバント誘導関節炎、シェーグレン症候群、多発性硬化症、実験的自己免疫性脳脊髄炎、炎症性腸疾患（クローン病および潰瘍性大腸炎を含む）、自己免疫性胃萎縮、尋常性天疱瘡、乾癬、白斑、円形脱毛症、１型糖尿病、非肥満糖尿病、重症筋無力症、バセドウ病、橋本甲状腺炎、硬化性胆管炎、硬化性唾液腺炎、全身性エリテマトーデス、自己免疫性血栓性血小板減少性紫斑病、グッドパスチャー症候群、アジソン病、全身性硬化症、多発性筋炎、皮膚筋炎、後天性血友病、血栓性血小板減少性紫斑病、ブドウ膜炎、ＩｇＧ４関連自己免疫疾患（例えば、Ｋｌｅｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，（２０１５．Ｄｔｓｃｈ Ａｒｚｔｅｂｌ Ｉｎｔ．１１２（８）：１２８－１３５）の表１に列挙される疾患など、この表は、参照により組み込まれる）などが挙げられる。
【0383】
一実施形態では、自己免疫疾患は、全身性エリテマトーデスである。
【0384】
一実施形態では、自己免疫疾患は、クローン病、大腸炎および潰瘍性大腸炎を含む炎症性腸疾患である。一実施形態では、自己免疫疾患は、クローン病である。一実施形態では、自己免疫疾患は、潰瘍性大腸炎である。
【0385】
本明細書で使用される、「望ましくない免疫応答」という用語は、任意の望ましくない免疫反応、好ましくは（ｉ）遺伝子治療の過程で発現されるタンパク質、（ｉｉ）遺伝子治療の過程で使用されるベクター（例えば、ウイルスベクターなど）および／または（ｉｉｉ）治療用タンパク質、に向けられる任意の望ましくない免疫反応を指す。このようなタンパク質としては、例えば、第ＶＩＩＩ因子（血友病Ａ）および他の凝固因子、酵素補充療法、モノクローナル抗体（例えば、ナタリズマブ、リツキシマブ、インフリキシマブ）、ポリクローナル抗体、酵素およびサイトカイン（例えば、ＩＦＮβ）が挙げられる。「望ましくない免疫応答」という用語はまた、アレルギーおよびアレルギー反応も指す。
【0386】
一実施形態では、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような細胞の集団免疫細胞、または組成物は、免疫応答を抑制するために、特に、対応する遺伝子欠損を有する対象において遺伝子療法により特定のタンパク質の発現が回復されるときに、特定のタンパク質に対する免疫反応を防ぐために、対象に投与され得る。したがって、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞、またはそのような免疫細胞の集団、または組成物は、変異により対象に通常存在しないタンパク質に対する免疫反応性を防ぐために使用されてよく、一方でそれらの再構成は、遺伝子療法により達成される。さらに、タンパク質療法は、より普及するようになっている医療革新の分野であり、かつ治療製品として対象への直接的な、酵素、抗体、サイトカインなどの、タンパク質の適用を含む。このような医薬品の送達における主要な障害の１つは、治療用タンパク質自体に対して向けられる免疫応答に関与する。タンパク質ベースの治療薬の投与は多くの場合、免疫抑制剤の投与を伴い、免疫抑制剤は、タンパク質のより長い寿命およびそれにより生物体の細胞および組織中へのタンパク質の増加された取り込みを促進するために使用される。一般的な免疫抑制剤はしかしながら、実施される免疫抑制の非特異的性質により不利であり、患者において望ましくない副作用を引き起こし得る。したがって、このアプローチは、患者に投与される治療用抗体、サイトカイン、酵素、または他の任意のタンパク質などの、治療用タンパク質およびペプチドに対する免疫応答を抑制するために適用され得る。
【0387】
一実施形態では、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような細胞の集団免疫細胞、または組成物は、免疫応答を抑制するために、特に遺伝子療法で使用されるベクター、特に遺伝子療法で使用されるウイルスベクターに対する免疫反応を防ぐために、対象に投与され得る。このようなウイルスベクターとしては、例えば、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター、アデノウイルス（Ａｄ）ベクター、レンチウイルスベクターなどが挙げられる。概説については、Ｎａｙａｋ＆Ｈｅｒｚｏｇ，２０１０．Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．１７（３）：２９５－３０４を参照されたい。
【0388】
本明細書で使用される、「アレルギー（複数可）」という用語は、免疫系の適切でない反応を指す。アレルギー反応は、アレルゲンとして知られる、通常は無害な環境物質に対して生じ、これらの反応は、後天的で、予測可能であり、急速である。厳密には、アレルギーは、過敏症の４つの形態の１つであり、Ｉ型（または即時型）過敏症と呼ばれる。この疾患は、ＩｇＥとして知られる抗体の一種による肥満細胞および好塩基球と呼ばれる特定の白血球の過剰な活性化により特徴づけられ、極度の炎症応答をもたらす。一般的なアレルギー反応としては、湿疹、蕁麻疹、花粉症、喘息、食物アレルギー、セリアック病、スズメバチおよびミツバチなどの針で刺す昆虫の毒に対する反応などが挙げられる。
【0389】
本明細書で使用される、「単一遺伝子性疾患」という用語は、以下の遺伝子の中から選択される単一遺伝子中のある変異により生じる疾患を指す：
（ｉ）免疫機能と関連しないが、その欠損が炎症および／または自己免疫反応と関連する遺伝子、例えば、以下の疾患：デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）、嚢胞性線維症、リソソーム疾患、α１－アンチトリプシン欠乏症、において欠損する遺伝子；および
（ｉｉ）免疫系に関与し、かつその欠損が炎症および／または自己免疫反応を引き起こす遺伝子、例えば、以下の疾患：Ｔ細胞原発性免疫不全症、例えば、ＩＰＥＸ（免疫調節異常多腺性内分泌障害腸疾患Ｘ連鎖症候群）、自己免疫性多内分泌腺症候群１型（ＡＰＳ－１）（別名自己免疫性多腺性内分泌不全症・カンジダ症・外胚葉性ジストロフィーまたはＡＰＥＣＥＤ）、自己免疫性多内分泌腺症候群２型（ＡＰＳ－２）など）（別名Ｓｃｈｍｉｄｔ症候群）、自己免疫性多内分泌腺症候群３型（ＡＰＳ－３）（別名自己免疫性多発内分泌症）、Ｂ細胞原発性免疫不全症、Ｍｕｃｋｌｅ－Ｗｅｌｌｓ症候群、自己炎症性自己免疫混合症候群（ｍｉｘｅｄ ａｕｔｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｎｄ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、遺伝性ＮＬＲＰ１２関連周期性発熱症候群、腫瘍壊死因子受容体１関連周期性症候群、において欠損する遺伝子。
（ｉ）免疫機能と関連しないが、その欠損が炎症および／または自己免疫反応と関連する遺伝子、例えば、以下の疾患：デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）、嚢胞性線維症、リソソーム疾患、α１－アンチトリプシン欠乏症、において欠損する遺伝子；および
（ｉｉ）免疫系に関与し、かつその欠損が炎症および／または自己免疫反応を引き起こす遺伝子、例えば、以下の疾患：Ｔ細胞原発性免疫不全症、例えば、ＩＰＥＸ（免疫調節異常多腺性内分泌障害腸疾患Ｘ連鎖症候群）、自己免疫性多内分泌腺症候群１型（ＡＰＳ－１）（別名自己免疫性多腺性内分泌不全症・カンジダ症・外胚葉性ジストロフィーまたはＡＰＥＣＥＤ）、自己免疫性多内分泌腺症候群２型（ＡＰＳ－２）など）（別名Ｓｃｈｍｉｄｔ症候群）、自己免疫性多内分泌腺症候群３型（ＡＰＳ－３）（別名自己免疫性多発内分泌症）、Ｂ細胞原発性免疫不全症、Ｍｕｃｋｌｅ－Ｗｅｌｌｓ症候群、自己炎症性自己免疫混合症候群（ｍｉｘｅｄ ａｕｔｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｎｄ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、遺伝性ＮＬＲＰ１２関連周期性発熱症候群、腫瘍壊死因子受容体１関連周期性症候群、において欠損する遺伝子。
【0390】
遺伝的起源に由来する他の自己免疫疾患（すなわち、本明細書で定義される単一遺伝子疾患）は、当技術分野で公知であり、本明細書では「単一遺伝子疾患」という用語に包含され、例えばＲａｍｏｓ ｅｔ ａｌ．，の表１（２０１５（Ｊ Ｈｕｍ Ｇｅｎｅｔ．６０（１１）：６５７－６４）に記載されており、この表は参照により本明細書に組み込まれる。特に、本明細書に包含される遺伝的起源による自己免疫疾患は、以下の遺伝子のいずれか１つの変異と関連するものである：ＨＬＡ－ＤＲ対立遺伝子、ＳＴＡＴ４、ＰＴＰＮ２２、ＩＦＩＨ１、ＴＲＡＦ３ＩＰ２、ＴＲＡＦ１－Ｃ５、ＰＡＤＩ４、ＴＮＦ、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＯＰＮ、ＩＬ１２ＡおよびＩＬ１２ＲＢ２。
【0391】
一実施形態では、単一遺伝子性疾患は、ＡＰＥＣＥＤ（自己免疫性多腺性内分泌不全症・カンジダ症・外胚葉性ジストロフィー）である。
【0392】
一実施形態では、単一遺伝子性疾患は、デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）である。
【0393】
本明細書で使用される、「リンパ腫またはがん」という用語は、ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞と関連するリンパ腫またはがんを包含する。ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ細胞と関連する例示的なリンパ腫またはがんとしては、これらに限定されないが、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）／骨髄増殖症候群、リンパ腫（例えば、ホジキンリンパ腫および非ホジキンリンパ腫）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）および多発性骨髄腫が挙げられる。
【0394】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害または状態は、全身性エリテマトーデス、炎症性腸疾患（クローン病および潰瘍性大腸炎など）、ＡＰＥＣＥＤ（自己免疫性多腺性内分泌不全症・カンジダ症・外胚葉性ジストロフィー）、またはデュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）である。
【0395】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈ関連疾患、障害または状態は、全身性エリテマトーデス、炎症性腸疾患（クローン病および潰瘍性大腸炎など）、またはＡＰＥＣＥＤ（自己免疫性多腺性内分泌不全症・カンジダ症・外胚葉性ジストロフィー）である。
【0396】
一実施形態では、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物は、対象への投与用に製剤化される。
【0397】
一実施形態では、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物は、全身でまたは局所的に投与される。
【0398】
一実施形態では、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、それをコードする核酸またはベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような細胞の集団免疫細胞、または組成物は、経口、局所、鼻腔、頬側、直腸、膣、気管内による注射、内視鏡、経粘膜、または経皮投与により投与される。
【0399】
一実施形態では、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物は、注射される、好ましくは全身で注射される。
【0400】
注射に適合された製剤の例としては、これらに限定されないが、溶液（例えば、滅菌水溶液など）、ゲル、分散液、エマルジョン、懸濁液、固体形態（例えば、粉末、リポソーム形態などの、使用の前の液体の添加時に溶液または懸濁液を調製するために使用するのに好適なもの）が挙げられる。
【0401】
全身注射の例としては、これらに限定されないが、静脈内（ｉｖ）、皮下、筋肉内（ｉｍ）、皮内（ｉｄ）、腹腔内（ｉｐ）注射および灌流が挙げられる。
【0402】
他の好適な投与経路もまた、本発明において企図されることが理解され、投与様式は最終的に、健全な医学的判断の範囲内で主治医により決定されるであろう。注射（ｉ．ｖ．、ｉ．ｐ．、ｉ．ｍ．など）による投与とは別に、噴霧法（Ｒｅｓｐａｕｄ ｅｔ ａｌ．，２０１４．ＭＡｂｓ．６（５）：１３４７－５５；Ｇｕｉｌｌｅｍｉｎａｕｌｔ ｅｔ ａｌ．，２０１４．Ｊ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｒｅｌｅａｓｅ．１９６：３４４－５４；Ｒｅｓｐａｕｄ ｅｔ ａｌ．，２０１５．Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．１２（６）：１０２７－３９）または皮下投与（Ｊａｃｋｉｓｃｈ ｅｔ ａｌ．，２０１４．Ｇｅｂｕｒｔｓｈｉｌｆｅ Ｆｒａｕｅｎｈｅｉｌｋｄ．７４（４）：３４３－３４９；Ｓｏｌａｌ－Ｃｅｌｉｇｎｙ，２０１５．Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ｈｅｍａｔｏｌ．８（２）：１４７－５３）などの、他の経路も利用可能である。
【0403】
一実施形態では、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物は、治療的有効量でそれを必要とする対象に投与される。
【0404】
本明細書で使用される、用語「治療的有効量」は、所望の予防結果および／または治療結果を達成するために、必要な投薬量でおよび期間の間、有効な量を指す。
【0405】
しかし、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の１日の総使用量は、健全な医学的判断の範囲内で主治医により決定されるであろうことが理解される。任意の特定の患者に対する具体的な治療的に有効な用量レベルは、以下の様々な要因により異なる；処置される疾患およびその疾患の重症度；使用されるＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、それをコードする核酸もしくはベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の活性；対象の年齢、体重、全身健康状態、性別および食事；投与の時間、投与の経路、および使用される特定のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、それをコードする核酸もしくはベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の排出の速度；処置の期間；使用される特定のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、それをコードする核酸もしくはベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物と組み合わせてまたはそれらと同時に使用される薬物；医療分野でよく知られている同様の要因。例えば、所望の治療効果を達成するために必要とされるレベルよりも低いレベルで化合物の投与を開始し、所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増加させることは、当業者の技術の十分な範囲内である。各処置に必要とされる総用量は、複数回投与によりまたは単回投与で投与されてよい。
【0406】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、または抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片の治療的有効量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、約０．２ｍｇ／ｋｇ～約４ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、約０．４ｍｇ／ｋｇ～約２．５ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ～約２ｍｇ／ｋｇの範囲である。
【0407】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、または抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片の治療的有効量は、約１０μｇ／ｋｇ～約４００μｇ／ｋｇ、約２０μｇ／ｋｇ～約３００μｇ／ｋｇ、約３０μｇ／ｋｇ～約２５０μｇ／ｋｇ、約３５μｇ／ｋｇ～約２００μｇ／ｋｇ、約４０μｇ／ｋｇ～約１６０μｇ／ｋｇの範囲である。
【0408】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞またはそのような免疫細胞の集団の治療的有効量は、約１×１０２個～約１×１０９個の細胞／ｋｇ体重、好ましくは約１×１０３～約１×１０８個の細胞／ｋｇ体重の範囲（これらの範囲内のすべての整数値を含む）である。
【0409】
一実施形態では、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞またはそのような免疫細胞の集団の治療的有効量は、少なくとも１×１０２、１×１０３、１×１０４、１×１０５、１×１０６、１×１０７、１×１０８または１×１０９細胞／ｋｇ体重である。
【0410】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の治療的有効量は、１日１回、１日２回、１日３回、またはそれより多く投与される。
【0411】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の治療的有効量は、毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごとに投与される。
【0412】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の治療的有効量は、毎週、２週間ごと、３週間ごとに投与される。
【0413】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の治療的有効量は、毎月、２ヶ月ごと、３ヶ月ごと、４ヶ月ごと、５ヶ月ごと、６ヶ月ごとに投与される。
【0414】
好ましい実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の治療的有効量は、１２時間ごと、２４時間ごと、３６時間ごと、４８時間ごと、６０時間ごと、７２時間ごと、９６時間ごとに投与される。
【0415】
好ましい実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の治療的有効量は、６０時間ごとに投与される。
【0416】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物は、急性投与用である。一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物は、慢性投与用である。
【0417】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の治療的有効量は、約５日間、７日間、１０日間、１４日間、２１日間、２８日間、１ヶ月間、２ヶ月間、３ヶ月間、６ヶ月間、１年間またはそれを超えて与される。
【0418】
一実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の治療的有効量は、約１週間～約８週間、約２週間～約７週間、約２週間～約６週間、約２週間～約５週間の範囲の期間投与される。
【0419】
好ましい実施形態では、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物の治療的有効量は、約１０日～約４０日、約１５日～約３５日、約２０日～約３０日の範囲の期間、投与される。
【0420】
一実施形態では、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物は、治療薬の前に、治療薬と同時に、または治療薬の後で投与される。
【0421】
好適な治療薬の例は、ＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲとコンジュゲートされる好適なペイロードとして上に記載されており、化学療法剤、標的治療剤、細胞傷害性剤（または細胞毒素）、細胞周期同調剤、細胞受容体（複数可）のリガンド、免疫調節剤、アポトーシス促進剤、溶解ペプチド、抗血管新生剤、サイトカイン、成長因子、およびホルモンを含む。
【0422】
これらの治療薬はしたがって、コンジュゲートされた形態でのみでなく、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、それをコードする核酸もしくはベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物と共に、コンジュゲートされない（または遊離の）形態でも投与され得ることが容易に理解される。
【0423】
共投与のための特定の治療薬は、予防されるおよび／または治療されれる疾患または状態に依存することもまた、当業者には理解されよう。
【0424】
例示的な実施形態では、上記のＣＤ４５ＲＣ結合ドメイン、抗ＣＤ４５ＲＣ抗体もしくはその抗原結合断片、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲ、核酸もしくはそれをコードするベクター、抗ＣＤ４５ＲＣ ＣＡＲを発現する免疫細胞もしくはそのような免疫細胞の集団、または組成物が、それを必要とする対象において免疫寛容を誘導するためのもの、または移植拒絶反応を防ぐおよび／または軽減するためのものである場合、免疫抑制剤が共投与されることが望ましいであろう。
【図面の簡単な説明】
【0425】
【0426】
実施例
本発明は、以下の実施例によりさらに説明される。実施例全体を通じて、次の命名法を適用する。
本発明は、以下の実施例によりさらに説明される。実施例全体を通じて、次の命名法を適用する。
【0427】
「ＡＢＩＳ－４５ＲＣ」：国際公開第２０２０／０５８４９５号の表２に開示される抗体＃１に対応するマウス抗ｈＣＤ４５ＲＣ抗体。
【0428】
「ＡＢＯ－２１００１」：国際公開第２０２０／０５８４９５号の表２に開示される抗体＃９２に対応する、国際公開第２０２０／０５８４９５号のＡＢＩＳ－４５ＲＣのクラスで最高のヒト化変異体の１つ。
【0429】
「ＡＢＯ－２１００９」：国際公開第２０２０／０５８４９５号の表２に開示される抗体＃１０３に対応する、国際公開第２０２０／０５８４９５号のＡＢＩＳ－４５ＲＣのクラスで最高のヒト化変異体の１つ。
【0430】
「ＡＢＯ－２１００７」：以下を含む、本発明の対象であるＡＢＩＳ－４５ＲＣのヒト化バリアント：
－配列番号２４を有する重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）：
－配列番号２５を有する軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）、ここで、Ｘ１は、存在せず、Ｘ２は、Ｔｙｒ（Ｙ）である；
－配列番号２６を有する重鎖定常領域（ＨＣＣＲ）；および
－配列番号２９を有する軽鎖定常領域（ＬＣＣＲ）。
－配列番号２４を有する重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）：
－配列番号２５を有する軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）、ここで、Ｘ１は、存在せず、Ｘ２は、Ｔｙｒ（Ｙ）である；
－配列番号２６を有する重鎖定常領域（ＨＣＣＲ）；および
－配列番号２９を有する軽鎖定常領域（ＬＣＣＲ）。
【0431】
実施例１：ＡＢＯ－２１００７による移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）の処置
材料および方法
ＰＢＭＣの単離
血液を、健康な個体からＥｔａｂｌｉｓｓｅｍｅｎｔ Ｆｒａｎｃａｉｓ ｄｕ Ｓａｎｇ（Ｎａｎｔｅｓ，Ｆｒａｎｃｅ）において採取した。書面によるインフォームドコンセントを、施設のガイドラインに従い提供した。ＰＢＭＣを、Ｆｉｃｏｌｌ－Ｐａｑｕｅ密度勾配遠心分離（Ｅｕｒｏｂｉｏ， Ｃｏｕｒｔａｂｏｅｕｆ，Ｆｒａｎｃｅ）により単離した。残存する赤血球および血小板を、低張液および遠心分離により除去した。
材料および方法
ＰＢＭＣの単離
血液を、健康な個体からＥｔａｂｌｉｓｓｅｍｅｎｔ Ｆｒａｎｃａｉｓ ｄｕ Ｓａｎｇ（Ｎａｎｔｅｓ，Ｆｒａｎｃｅ）において採取した。書面によるインフォームドコンセントを、施設のガイドラインに従い提供した。ＰＢＭＣを、Ｆｉｃｏｌｌ－Ｐａｑｕｅ密度勾配遠心分離（Ｅｕｒｏｂｉｏ， Ｃｏｕｒｔａｂｏｅｕｆ，Ｆｒａｎｃｅ）により単離した。残存する赤血球および血小板を、低張液および遠心分離により除去した。
【0432】
動物
生後８～１２週齢のＮＯＤ／ＳＣＩＤ／ＩＬ２Ｒ－／－（ＮＳＧ）マウスを、ＳＰＦ条件下にて本発明者ら独自の動物施設で飼育した（認定番号Ｃ４４－２７８）。
生後８～１２週齢のＮＯＤ／ＳＣＩＤ／ＩＬ２Ｒ－／－（ＮＳＧ）マウスを、ＳＰＦ条件下にて本発明者ら独自の動物施設で飼育した（認定番号Ｃ４４－２７８）。
【0433】
ＧｖＨＤモデル
成体ＮＳＧ免疫不全マウスに、全身に亜致死量の放射線を照射して（－１日目に２Ｇｙの照射線量）、ＧｖＨＤの発症に有利な組織損傷を誘導した。翌日（０日目）、健康なボランティアからの１．５×１０７個のＰＢＭＣ（ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈおよびＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－Ｔ細胞など）を、これらのマウスに静脈内で注射した。ヒトＰＢＭＣ、特にＴ細胞は、病変を誘導するマウス組織に対し反応し、かつそれらを攻撃する。これらのＴ細胞と肝臓、腸、肺、および皮膚で観察される病変は、ヒトの骨髄移植後に観察されるＧｖＨＤ、またはげっ歯類をドナーおよびレシピエントとして使用する他のＧｖＨＤ実験系を模倣する。特に、これらの組織病変は典型的に、体重減少を誘導し、それは、注射されたＰＢＭＣの数および本発明者の実験系に応じて、ＰＢＭＣ注射後１３日目付近から始まる。体重減少を毎日観測し、動物を、不必要な苦痛を回避するために、体重減少が元の体重の２０％へと低下した時点で屠殺する。
成体ＮＳＧ免疫不全マウスに、全身に亜致死量の放射線を照射して（－１日目に２Ｇｙの照射線量）、ＧｖＨＤの発症に有利な組織損傷を誘導した。翌日（０日目）、健康なボランティアからの１．５×１０７個のＰＢＭＣ（ＣＤ４５ＲＣｈｉｇｈおよびＣＤ４５ＲＣｌｏｗ／－Ｔ細胞など）を、これらのマウスに静脈内で注射した。ヒトＰＢＭＣ、特にＴ細胞は、病変を誘導するマウス組織に対し反応し、かつそれらを攻撃する。これらのＴ細胞と肝臓、腸、肺、および皮膚で観察される病変は、ヒトの骨髄移植後に観察されるＧｖＨＤ、またはげっ歯類をドナーおよびレシピエントとして使用する他のＧｖＨＤ実験系を模倣する。特に、これらの組織病変は典型的に、体重減少を誘導し、それは、注射されたＰＢＭＣの数および本発明者の実験系に応じて、ＰＢＭＣ注射後１３日目付近から始まる。体重減少を毎日観測し、動物を、不必要な苦痛を回避するために、体重減少が元の体重の２０％へと低下した時点で屠殺する。
【0434】
処置
ＮＳＧマウスを、０日目から２０日間２．５日ごとに０．８ｍｇ／ｋｇで、精製した抗ＣＤ４５ＲＣ抗体ＡＢＯ－２１００１、ＡＢＯ－２１００７およびＡＢＯ－２１００９、またはＰＢＳにより腹腔内で処置した。
ＮＳＧマウスを、０日目から２０日間２．５日ごとに０．８ｍｇ／ｋｇで、精製した抗ＣＤ４５ＲＣ抗体ＡＢＯ－２１００１、ＡＢＯ－２１００７およびＡＢＯ－２１００９、またはＰＢＳにより腹腔内で処置した。
【0435】
全体的臨床スコアリング
ＧｖＨＤの全体的臨床スコア（０～１２）を、次の６つの個別スコアを集計することにより決定した：
－体重減少スコア（０～２）；
－姿勢スコア（０～２）；
－脱毛スコア（ｓｋｉｎ ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ ｓｃｏｒｅ）（０～２）；
－活動性スコア（０～２）；
－毛並みスコア（０～２）；および
－蒼白スコア（０～２）。
ＧｖＨＤの全体的臨床スコア（０～１２）を、次の６つの個別スコアを集計することにより決定した：
－体重減少スコア（０～２）；
－姿勢スコア（０～２）；
－脱毛スコア（ｓｋｉｎ ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ ｓｃｏｒｅ）（０～２）；
－活動性スコア（０～２）；
－毛並みスコア（０～２）；および
－蒼白スコア（０～２）。
【0436】
結果
ＰＢＭＣのみ（ＰＢＳ）による処置は、マウスの死亡を誘導し、１１日目あたりから始まり、図１Ａに示すように、１５日目までにすべてのマウスが死亡した。ＡＢＯ－２１００１およびＡＢＯ－２１００９による処置は、ＰＢＳ処置マウスと比較して、マウスの生存を増加させた。３５日目の時点で、処置されたマウスの平均４０％が、依然として生存している（図１Ａ）。しかし、驚くべきことに、ＡＢＯ－２１００７による処置は、マウスの生存率を有意に増加させ、平均７０％のマウスが、３５日の時点で依然として生存していた（図１Ａ）。
ＰＢＭＣのみ（ＰＢＳ）による処置は、マウスの死亡を誘導し、１１日目あたりから始まり、図１Ａに示すように、１５日目までにすべてのマウスが死亡した。ＡＢＯ－２１００１およびＡＢＯ－２１００９による処置は、ＰＢＳ処置マウスと比較して、マウスの生存を増加させた。３５日目の時点で、処置されたマウスの平均４０％が、依然として生存している（図１Ａ）。しかし、驚くべきことに、ＡＢＯ－２１００７による処置は、マウスの生存率を有意に増加させ、平均７０％のマウスが、３５日の時点で依然として生存していた（図１Ａ）。
【0437】
同様に、ＡＢＯ－２１００１またはＡＢＯ－２１００９で処置したときに、ＮＳＧマウスは、体重が減少したが、ＰＢＳで処置したＮＳＧマウスよりも有意に少なかった（図１Ｂ）。しかし、驚くべきことに、ＡＢＯ－２１００７による処置は、いかなる体重減少ももたらさなかった。
【0438】
最後に、ＧｖＨＤ臨床スコアもまた、ＡＢＯ－２１００７で処置したマウスで最も低かった（図１Ｃ）。
【0439】
まとめると、これらの結果は、国際公開第２０２０／０５８４９５号のすでに改善された抗ヒトＣＤ４５ＲＣ抗体と比較して、改善されたＡＢＯ－２１００７の特性を実証する。
【図1A】
【図1B】
【図1C】
【配列表】
【国際調査報告】