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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-10-02
(54)【発明の名称】ＡＭＰＫ活性化剤として有用なチアジアゾロン誘導体
(51)【国際特許分類】
C07D 285/08 20060101AFI20240925BHJP
A61K 31/433 20060101ALI20240925BHJP
C07D 417/12 20060101ALI20240925BHJP
A61P 9/00 20060101ALI20240925BHJP
A61P 9/04 20060101ALI20240925BHJP
A61P 13/12 20060101ALI20240925BHJP
A61P 3/10 20060101ALI20240925BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20240925BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20240925BHJP
A61P 25/36 20060101ALI20240925BHJP
A61P 3/04 20060101ALI20240925BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240925BHJP
A61P 37/02 20060101ALI20240925BHJP
A61P 19/10 20060101ALI20240925BHJP
A61P 1/00 20060101ALI20240925BHJP
C07K 5/068 20060101ALI20240925BHJP
C12N 9/12 20060101ALN20240925BHJP
C12N 9/99 20060101ALN20240925BHJP
【ＦＩ】
C07D285/08 CSP
A61K31/433
C07D417/12
A61P9/00
A61P9/04
A61P13/12
A61P3/10
A61P1/16
A61P29/00
A61P25/36
A61P3/04
A61P35/00
A61P37/02
A61P19/10
A61P1/00
C07K5/068
C12N9/12
C12N9/99
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024514006
(86)(22)【出願日】2022-09-01
(85)【翻訳文提出日】2024-04-25
(86)【国際出願番号】 GB2022052234
(87)【国際公開番号】W WO2023031609
(87)【国際公開日】2023-03-09
(31)【優先権主張番号】2112529.9
(32)【優先日】2021-09-02
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】522156427
【氏名又は名称】ベタゲノン アーベー
【氏名又は名称原語表記】ＢＥＴＡＧＥＮＯＮ ＡＢ
(74)【代理人】
【識別番号】110000338
【氏名又は名称】弁理士法人 ＨＡＲＡＫＥＮＺＯ ＷＯＲＬＤ ＰＡＴＥＮＴ ＆ ＴＲＡＤＥＭＡＲＫ
(72)【発明者】
【氏名】エドランド，トーマス
(72)【発明者】
【氏名】ウェストマン，ヤコブ
【テーマコード（参考）】
4C086
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086CB27
4C086GA07
4C086GA10
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZA08
4C086ZA36
4C086ZA66
4C086ZA70
4C086ZA75
4C086ZA81
4C086ZA97
4C086ZB07
4C086ZB11
4C086ZB26
4C086ZC35
4C086ZC39
4C086ZC41
4H045AA10
4H045AA20
4H045AA30
4H045BA11
4H045BA51
4H045EA20
4H045EA27
4H045EA28
4H045FA20
4H045FA50
(57)【要約】
本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、本明細書において定義されるとおりであり、これらの化合物は、ＡＭＰＫの活性化によって改善される障害または健康状態の処置において、特にプロドラッグとして有用である。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物：【化1】
Ｒ１およびＲ２は独立して、水素、タンパク質構成アミノ酸の側鎖、ならびに、－ＯＨ、－ＮＨ２および－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２からなる群から選択される１つ以上の置換基によって任意に置換されたＣ１－６アルキルからなる群から選択され；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、水素、フェニル基によって任意に置換されたＣ１－４アルキル、およびＡ１からなる群から選択される；または
Ｒ１（もしくはＲ２）およびＲ３（もしくはＲ４）は、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともに、４員～６員のヘテロシクロアルキル基を形成し；
Ａ１は、
【化2】
または
【化3】
を表し、
Ａ２は、水素、フェニル基で任意に置換されたＣ１－４アルキル、
【化4】
または
【化5】
を表し、
各Ａ３は、独立して、水素、または、フェニル基で任意に置換されたＣ１－４アルキルを表し；そして
Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、タンパク質構成アミノ酸の側鎖、ならびに－ＯＨ、－ＮＨ２および－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２からなる群から選択される１つ以上の置換基によって任意に置換されたＣ１－６アルキルからなる群から選択される。
【請求項2】
Ｒ２が水素であり、さらに、Ｒ１が水素、もしくは、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｓｅｃ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＶａｌからなる群から選択されるタンパク質構成アミノ酸の側鎖であるか；または、Ｒ２が水素であり、さらに、Ｒ１およびＲ３が、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともにピロリジン環を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項3】
Ｒ２が水素であり、さらに、Ｒ１が水素、もしくは、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、ＬｙｓおよびＴｒｐからなる群から選択されるタンパク質構成アミノ酸の側鎖であるか、または、Ｒ２が水素であり、さらに、Ｒ１およびＲ３が、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともにピロリジン環を形成する、請求項１または請求項２に記載の化合物。
【請求項4】
Ｒ２が水素であり、さらに、Ｒ１がアスパラギン酸の側鎖である、請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項5】
Ｒ３およびＲ４が、独立して、水素、１つ以上のフェニル基によって任意に置換されたＣ１－３アルキル、【化6】
および
【化7】
からなる群から選択され、さらに、
Ｒ５ａが水素またはタンパク質構成アミノ酸の側鎖である、請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項6】
Ｒ３およびＲ４が、独立して、水素、１つ以上のフェニル基によって任意に置換されたＣ１－３アルキル、【化8】
および
【化9】
からなる群から選択される、または、
Ｒ１およびＲ３が、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともにピロリジン環を形成し、さらに、Ｒ４が、水素、１つ以上のフェニル基で任意に置換されたＣ１－３アルキル、
【化10】
および
【化11】
からなる群から選択され、そして、
Ｒ５ａが、Ｐｈｅ、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、ＡｓｐおよびＡｒｇからなる群から選択されるタンパク質構成アミノ酸の側鎖である、請求項１～５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項7】
Ｒ３およびＲ４が、独立して、水素および１つ以上のフェニル基によって任意に置換されたＣ１－３アルキルからなる群から選択される、請求項１～６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項8】
Ｒ３およびＲ４が、独立して、水素およびメチルからなる群から選択される、請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項9】
Ｒ２が水素であり、Ｒ１が水素、もしくは、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｓｅｃ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＶａｌからなる群から選択されるタンパク質構成アミノ酸の側鎖であり、Ｒ３およびＲ４が、独立して、水素、１つ以上のフェニル基によって任意に置換されたＣ１－３アルキル、【化12】
および
【化13】
からなる群から選択され、または、
Ｒ２が水素であり、Ｒ１およびＲ３が、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともにピロリジン環を形成し、さらに、Ｒ４が、水素、１つ以上のフェニル基で任意に置換されたＣ１－３アルキル、
【化14】
および
【化15】
からなる群から選択され、そして、
Ｒ５ａが、水素、もしくは、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｓｅｃ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＶａｌからなる群から選択されるタンパク質構成アミノ酸の側鎖である、請求項１に記載の化合物。
【請求項10】
上記化合物が、ジメチルアミノ酢酸５－［（Ｚ）－４－クロロ－ベンゾイルイミノ］－２－（４－クロロ－ベンジル）－３－オキソ－［１，２，４］チアジアゾリジン－４－イルメチルエステル；
ジメチルアミノ酢酸５－［（Ｚ）－４－クロロ－ベンゾイルイミノ］－２－（４－クロロ－ベンジル）－３－オキソ－［１，２，４］チアジアゾリジン－４－イルメチルエステルのクエン酸塩；
２－（｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝カルボニル）ピロリジン－１－イウム トリフルオロアセテート；
６－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－６－オキソヘキサン－１，５－ビス（アミニウム）ジ－トリフルオロアセテート；
（６－アザニウミル－１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－１－オキソヘキサン－２－イル）ジメチルアザニウム ジ－トリフルオロアセテート；
（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）（メチル）アザニウム トリフルオロアセテート；
２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエタン－１－アミニウム トリフルオロアセテート；
２－（｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝カルボニル）－１－メチルピロリジン－１－イウム トリフルオロアセテート；
１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－１－オキソプロパン－２－アミニウム トリフルオロアセテート；
１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－３－メチル－１－オキソペンタン－２－アミニウム トリフルオロアセテート；
［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－（ジメチルアミノ）－３－フェニルプロパノエート；
１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－アミニウム トリフルオロアセテート；
１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－４－メチル－１－オキソペンタン－２－アミニウム トリフルオロアセテート；
１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－３－ヒドロキシ－１－オキソプロパン－２－アミニウム トリフルオロアセテート；
３－カルボキシ－１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－１－オキソプロパン－２－アミニウム トリフルオロアセテート；
［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２－アザニウミル－３－フェニルプロパンアミド］アセテート クロリド；
［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｓ）－２－［（２Ｓ）－２－アザニウミル－３－メチルブタンアミド］－３－メチルブタノエート クロリド；
［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｒ）－２－［（２Ｒ）－２－アザニウミル－３－メチルブタンアミド］－３－メチルブタノエート クロリド；
［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２，６－ジアザニウミルヘキサンアミド］アセテート ジクロリド；
（１Ｓ）－２－カルボキシ－１－［（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）カルバモイル］エタン－１－アミニウム クロリド；および
［アザニウミル（｛［（４Ｓ）－４－アザニウミル－４－［（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）カルバモイル］ブチル］アミノ｝）メチリデン］アザニウム トリクロリド
からなる群から選択される、請求項１～９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項11】
請求項１～１０のいずれか１項に定義される化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、および、薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬製剤。
【請求項12】
医薬において使用するための、請求項１～１０のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、あるいは、請求項１１に定義される医薬製剤。
【請求項13】
ＡＭＰＫの活性化によって改善される障害または健康状態の処置において使用するための、請求項１～１０のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、あるいは、請求項１１に定義される医薬製剤。
【請求項14】
ＡＭＰＫの活性化によって改善される障害または健康状態の処置のための医薬の製造における、請求項１～１０のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、あるいは、請求項１１に定義される医薬製剤の使用。
【請求項15】
請求項１～１０のいずれか１項に定義される式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、あるいは、請求項１１に定義される医薬製剤を、必要とする対象に投与する工程を含む、ＡＭＰＫの活性化によって改善される障害または健康状態を処置する方法。
【請求項16】
ＡＭＰＫの活性化により改善される障害または健康状態が、心血管疾患（心不全等）、糖尿病性腎疾患、２型糖尿病、インスリン抵抗性、非アルコール性脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪肝炎、疼痛、オピオイド中毒、肥満、がん、炎症（慢性炎症性疾患を含む）、自己免疫疾患、骨粗鬆症、腸疾患、および、肥満または心血管疾患に伴う高インスリン血症からなる群から選択される、請求項１３に記載の使用のための化合物、請求項１４に記載の使用または請求項１５に記載の方法。
【請求項17】
（ｉ）式ＩＩＩの化合物と、【化16】
式ＩＶの化合物との反応、
【化17】
または、
（ｉｉ）式Ｖの化合物と、
【化18】
式ＩＶの化合物との反応を含み、
【化19】
Ｒ１およびＲ２が、請求項１～１０のいずれか１項に定義されているとおりであり；そして、
Ｒ３およびＲ４が、請求項１～１０のいずれか１項に定義されたとおりであるか、または、独立して保護基を表す、請求項１～１０のいずれか１項に定義される化合物を調製するための方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【0001】
［発明の分野］
本発明は、新規化合物、および医薬における当該化合物の使用に関する。特に、本発明は、ＡＭＰ活性化プロテインキナーゼの活性化によって改善される障害または健康状態の処置に有用な化合物に関する。
本発明は、新規化合物、および医薬における当該化合物の使用に関する。特に、本発明は、ＡＭＰ活性化プロテインキナーゼの活性化によって改善される障害または健康状態の処置に有用な化合物に関する。
【0002】
［発明の背景］
ＡＭＰ活性化タンパク質キナーゼ（ＡＭＰＫ）は３つのタンパク質サブユニットからなるプロテインキナーゼ酵素であり、ホルモン、サイトカイン、運動、および細胞エネルギー状態を減少させるストレス（例えば、グルコース欠乏）によって活性化される。ＡＭＰＫの活性化はアデノシン５’－三リン酸（ＡＴＰ）を生成するプロセス（例えば、脂肪酸酸化）を増加させ、ＡＴＰを消費するが生存には急速に必要ではない脂肪酸、グリセロ脂質、およびタンパク質合成等の他のものを抑制する。逆に、細胞が持続的な過剰のグルコースを提示されると、ＡＭＰＫ活性が減少し、脂肪酸、グリセロ脂質およびタンパク質合成が増強される。したがって、ＡＭＰＫは、細胞エネルギー恒常性において重要な役割を果たすタンパク質キナーゼ酵素である。したがって、ＡＭＰＫの活性化はグルコース低下効果と共役し、コレステロール合成、脂質生成、トリグリセリド合成の阻害、および高インスリン血症の低減を含む、いくつかの他の生物学的効果を誘発する。
ＡＭＰ活性化タンパク質キナーゼ（ＡＭＰＫ）は３つのタンパク質サブユニットからなるプロテインキナーゼ酵素であり、ホルモン、サイトカイン、運動、および細胞エネルギー状態を減少させるストレス（例えば、グルコース欠乏）によって活性化される。ＡＭＰＫの活性化はアデノシン５’－三リン酸（ＡＴＰ）を生成するプロセス（例えば、脂肪酸酸化）を増加させ、ＡＴＰを消費するが生存には急速に必要ではない脂肪酸、グリセロ脂質、およびタンパク質合成等の他のものを抑制する。逆に、細胞が持続的な過剰のグルコースを提示されると、ＡＭＰＫ活性が減少し、脂肪酸、グリセロ脂質およびタンパク質合成が増強される。したがって、ＡＭＰＫは、細胞エネルギー恒常性において重要な役割を果たすタンパク質キナーゼ酵素である。したがって、ＡＭＰＫの活性化はグルコース低下効果と共役し、コレステロール合成、脂質生成、トリグリセリド合成の阻害、および高インスリン血症の低減を含む、いくつかの他の生物学的効果を誘発する。
【0003】
上記を考慮すると、ＡＭＰＫは、メタボリックシンドローム、特に２型糖尿病の処置のための好ましい標的である。ＡＭＰＫはまた、多くの種々の疾患にとって重要である多くの経路に関与する（例えば、ＡＭＰＫはまた、ＣＮＳ障害、線維症、骨粗鬆症、心不全、および性機能障害において重要である多くの経路に関与する）。
【0004】
ＡＭＰＫはまた、がんにおいて重要な多くの経路に関与する。いくつかの腫瘍抑制因子がＡＭＰＫ経路の一部である。ＡＭＰＫは哺乳類ＴＯＲ（ｍＴＯＲ）およびＥＦ２経路の負の調節因子として作用し、これらは、細胞成長および増殖の重要な調節因子である。したがって、制御異常（deregulation）は、がん（および糖尿病）等の疾患に関連し得る。したがって、ＡＭＰＫ活性化剤は、抗癌剤として有用であり得る。
【0005】
ＡＭＰＫ活性化剤（例えば、メトホルミンおよび４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミド（すなわち、以下の式ＩＩの化合物））は、疼痛の処置に有効であることが示されている。Ｄａｓおよび共同研究者らは、腰椎椎間板穿刺後、ＡＭＰＫ活性化剤によるマウスにおける傷害後処置が機械的過敏症を低減することを報告している（Das V, et al. Reg Anesth Pain Med 2019;0:1-5. doi:10.1136/rapm-2019-100839）。同様に、Ｄａｓおよび共同研究者らは、ＡＭＰＫ活性化剤による早期治療がマウスにおける術後疼痛モデルにおいて機械的過敏症を低減することも報告している（Das V, et al. Reg Anesth Pain Med 2019;0:1-6. doi:10.1136/rapm-2019-100651）。これらの薬物はまた、後根神経節におけるＡＭＰＫ経路を正常化する。したがって、ＡＭＰＫ活性化剤は、疼痛、特に術後疼痛の処置に使用することができる。
【0006】
肝臓脂肪症はＡＭＰＫによって調節され得ることも示されている（Zhao et al. J. Biol. Chem. 2020 295: 12279-12289）。ＡＭＰＫの活性化は肝臓における脂肪酸酸化（β酸化）を促進しながら、デノボ（de novo）脂質生成を阻害する。ＡＭＰＫ活性化はまた、脂肪組織からの遊離脂肪酸放出を減少させ、肝臓脂肪症を予防する。肝臓におけるＡＭＰＫの薬理学的活性化は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の複数の態様に対する有益な効果を促進することが報告された。例えば、ＡＭＰＫの活性化は、マウスおよびサルの両方の動物モデルにおいて非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を改善することが見出された。したがって、ＡＭＰＫ活性化剤は、ＮＡＦＬＤおよびＮＡＳＨの治療に有用であり得る。
【0007】
ＡＭＰＫ活性化剤の例は４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミド（すなわち、式ＩＩの化合物）であり、これはＷＯ２０１１／００４１６２に初めて開示された。
【化1】
【0008】
ＡＭＰＫアゴニスト（すなわち、ＡＭＰＫ活性化剤）として、式ＩＩの化合物は、ＡＭＰＫの活性化によって改善される障害または健康状態の処置に有用である。当該化合物は、心血管疾患（心不全等）、糖尿病性腎疾患、２型糖尿病、インスリン抵抗性、非アルコール性脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、疼痛、オピオイド依存症、肥満、がん、炎症（慢性炎症性疾患を含む）、自己免疫疾患、骨粗鬆症および腸疾患の処置に有用であり得る。
【0009】
多くのＡＭＰＫ活性化剤が知られているが、ＡＭＰＫの活性化によって改善される障害または健康状態の処置のための新規化合物の開発に対する必要性が依然として存在する。本発明者らは、このたび、インビボ（in vivo）で代謝されて既知のＡＭＰＫ活性化剤を形成し、ＡＭＰＫ活性化剤のバイオアベイラビリティが驚くほど向上する新規化合物を見出した。当該化合物は、ＡＭＰＫを活性化することも見出した。
【0010】
本明細書中の明らかに以前に公開された文書のリストまたは考察は、必ずしも、その文書が従来技術の一部であるか、または共通の一般知識であることを認めるものと解釈されるべきではない。
【0011】
［発明の詳細な説明］
本発明の第１の態様において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が提供される：
Ｒ１およびＲ２は独立して、水素、タンパク質構成アミノ酸の側鎖、ならびに、－ＯＨ、－ＮＨ２および－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２からなる群から選択される１つ以上の置換基によって任意に置換されたＣ１－６アルキルからなる群から選択され；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、水素、フェニル基によって任意に置換されたＣ１－４アルキル、およびＡ１からなる群から選択される；または
Ｒ１（もしくはＲ２）およびＲ３（もしくはＲ４）は、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともに、４員～６員のヘテロシクロアルキル基を形成し；
Ａ１は、
または
を表し、
Ａ２は、水素、フェニル基で任意に置換されたＣ１－４アルキル、
または
を表し、
各Ａ３は、独立して、水素、または、フェニル基で任意に置換されたＣ１－４アルキルを表し；そして
Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、タンパク質構成アミノ酸の側鎖、ならびに－ＯＨ、－ＮＨ２および－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２からなる群から選択される１つ以上の置換基によって任意に置換されたＣ１－６アルキルからなる群から選択される。
本発明の第１の態様において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が提供される：
【化2】
Ｒ１およびＲ２は独立して、水素、タンパク質構成アミノ酸の側鎖、ならびに、－ＯＨ、－ＮＨ２および－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２からなる群から選択される１つ以上の置換基によって任意に置換されたＣ１－６アルキルからなる群から選択され；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、水素、フェニル基によって任意に置換されたＣ１－４アルキル、およびＡ１からなる群から選択される；または
Ｒ１（もしくはＲ２）およびＲ３（もしくはＲ４）は、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともに、４員～６員のヘテロシクロアルキル基を形成し；
Ａ１は、
【化3】
または
【化4】
を表し、
Ａ２は、水素、フェニル基で任意に置換されたＣ１－４アルキル、
【化5】
または
【化6】
を表し、
各Ａ３は、独立して、水素、または、フェニル基で任意に置換されたＣ１－４アルキルを表し；そして
Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、独立して、水素、タンパク質構成アミノ酸の側鎖、ならびに－ＯＨ、－ＮＨ２および－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２からなる群から選択される１つ以上の置換基によって任意に置換されたＣ１－６アルキルからなる群から選択される。
【0012】
これらの化合物は、その薬学的に許容される塩および溶媒和物を含めて、本明細書では「本発明の化合物」と称することがある。
【0013】
本発明の第１の態様の好ましい実施形態において、Ａ２は水素、
または
を表し、
各Ａ３は、水素を表す。
【化7】
または
【化8】
を表し、
各Ａ３は、水素を表す。
【0014】
本発明の化合物は、インビボで代謝されて、ＡＭＰＫ活性化剤として知られている４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミド（本明細書では式ＩＩの化合物と称する）を形成することが見出されている。この点で、本発明の化合物は、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドのプロドラッグであると考えられ得る。
【0015】
潜在的な有用性がある薬学的に許容される塩としては、BergeらによるJ. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977)で議論されているものが挙げられる。式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩は、当業者に周知の技術に従って調製してもよい。
【0016】
薬学的に許容される付加塩の例としては、クエン酸、酒石酸、酢酸（トリフルオロ酢酸等の酢酸のハロゲン化形態を含む）、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、安息香酸、グリコール酸、グルコン酸、コハク酸、およびアリールスルホン酸等の有機酸由来の付加塩；ならびに塩酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸、および硫酸等の鉱酸由来の付加塩が挙げられる。特定の実施形態において、薬学的に許容される塩は、式Ｉの化合物のクエン酸塩またはトリフルオロ酢酸塩である。
【0017】
別段の規定がない限り、本明細書で定義されるアルキル基は、直鎖であるか、または十分な数（すなわち、必要に応じて、最低２つまたは３つ）の炭素原子が存在するときには、分枝鎖であるか、および／または環状であってもよい（したがって、シクロアルキル基を形成する）。十分な数（すなわち、最低４つ）の炭素原子が存在するとき、当該基はまた、一部が環状であってもよい（したがって、部分シクロアルキル基を形成する）。例えば、列挙してもよいシクロアルキル基には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが含まれる。同様に、列挙してもよい部分環状アルキル基（これはまた、「部分シクロアルキル」基とも称してもよい）には、シクロプロピルメチルが含まれる。
【0018】
列挙してもよいヘテロシクロアルキル基には、環系中の原子の少なくとも１つ（例えば、１～４つ）が炭素以外の原子（すなわち、ヘテロ原子、例えば硫黄、酸素または特に窒素）であり、環系中の原子の総数が４～６である非芳香族単環式ヘテロシクロアルキル基が含まれる。本明細書で言及するヘテロシクロアルキル基の炭素原子は、１つ以上の＝Ｏ置換基によって置換されていてもよい。
【0019】
疑義を避けるために、式Ｉの化合物中の２つ以上の置換基の同一性が同じであっても、それぞれの置換基の実際の同一性は何ら相互に依存しない。
【0020】
本明細書において基が任意に置換されていると言及される場合、当該任意の置換基が存在しなくてもよい（すなわち、当該任意の置換基の言及が除去されてもよい）ことが特に意図され、その場合、任意に置換された基は、特定の実施形態において、非置換であると言及されてもよい。
【0021】
式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩は、当業者に周知の技術に従って調製してもよい。例えば、式Ｉの化合物を適切な有機酸または鉱酸と反応させてもよい。ある塩を別の塩に変換するために、塩スイッチング技術を使用してもよい。
【0022】
本明細書に開示された化合物は、水およびエタノール等の薬学的に許容される溶媒による溶媒和形態だけでなく、非溶媒和形態でも存在してもよく、本発明は、本発明の化合物の溶媒和形態および非溶媒和形態の両方を包含することが意図される。
【0023】
用語「溶媒和物」は、溶質および溶媒によって形成される、化学量論が変化する複合体を指す。本発明の目的のための当該溶媒は、溶質の生物学的活性を妨げなくてもよい。好適な溶媒の例としては、水、メタノール、エタノール、および酢酸が挙げられるが、これらに限定されない。水が溶媒分子である溶媒和物は、典型的には水和物と称される。水和物には、化学量論量の水を含む組成物、および可変量の水を含む組成物が含まれる。
【0024】
式Ｉの化合物は二重結合を含むので、各個々の二重結合についてＥ（entgegen）およびＺ（zusammen）幾何異性体として存在してもよい。当該異性体およびその混合物はすべて本発明の範囲に含まれる。
【0025】
式Ｉの化合物は、位置異性体として存在してもよく、互変異性を示してもよい。すべての互変異性体およびそれらの混合物は本発明の範囲に含まれる。
【0026】
本発明はまた、本明細書に記載されるものと同一であるが、１つ以上の原子が、自然界に通常見出される原子質量または質量数（または自然界に最も豊富に見出される原子質量または質量数）とは異なる原子質量または質量数を有する原子で置換されているという事実のために、式Ｉの同位体標識化合物を包含する。本明細書で規定される任意の特定の原子または元素のすべての同位体は、本発明の範囲内であることが企図される。したがって、式Ｉの化合物には、重水素化化合物、すなわち、１つ以上の水素原子が水素同位体重水素によって置換された式Ｉの化合物も含まれる。
【0027】
当業者は、本発明の主題である本発明の化合物には安定な化合物が含まれることを理解するであろう。すなわち、本発明の化合物には、例えば反応混合物から有用な純度まで単離するのに十分な堅牢性を有する化合物が含まれる。
【0028】
本明細書全体を通して、構造は化学名で示される場合と示されない場合がある。命名法に疑義が生じる場合は、構造を優先する。化合物が互変異性体（例えば、別の共鳴形態）として存在し得る場合、示される構造は、可能性がある互変異性体の１つを表し、実際に観察される互変異性体は、溶媒、温度またはｐＨ等の環境要因によって異なる場合がある。すべての互変異性体（および共鳴）形態ならびにそれらの混合物は本発明の範囲に含まれる。
【0029】
別段の指示がない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって理解される一般的な意味を有する。
【0030】
疑義を避けるために、当業者は、本発明の特定の態様（本発明の第１の態様、等）への本明細書での言及は、そのすべての実施形態および特定の特徴への言及を含み、これらの実施形態および特定の特徴は、本発明のさらなる実施形態および特徴を形成するために組み合わせて用いてもよいことを理解するであろう。
【0031】
アミノ酸は、アミノ官能基（－ＮＨ２）およびカルボキシル官能基（－ＣＯ２Ｈ）を含む有機化合物であり、（ほとんどの場合）側鎖を有する。α－アミノ酸は、アミノ官能基およびカルボキシル官能基が同じ炭素原子（すなわち、α－炭素原子）に結合しているアミノ酸である。列挙してもよいα－アミノ酸の中で特に挙げられるのは、タンパク質構成アミノ酸である。タンパク質構成アミノ酸は、翻訳中にタンパク質に生合成的に組み込まれるアミノ酸である。タンパク質構成アミノ酸は、グリシン（Ｇｌｙ）、アラニン（Ａｌａ）、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、システイン（Ｃｙｓ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、リシン（Ｌｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、ピロリシン（Ｐｙｌ）、セレノシステイン（Ｓｅｃ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）、およびバリン（Ｖａｌ）である。
【0032】
したがって、用語「タンパク質構成アミノ酸の側鎖」は、タンパク質構成アミノ酸のα－炭素原子に結合している水素以外の基を指す。本発明の文脈において、１つ以上のタンパク質構成アミノ酸の側鎖は、式Ｉの化合物のＲ１、Ｒ２、Ｒ５ａまたはＲ５ｂ位のいずれに位置していてもよい。疑義を避けるために、本発明の化合物は、これらの位置に複数の異なる側鎖を含んでもよく、すなわち、化合物ＩＩのプロドラッグは、チアジアゾール環に連結した２つまたは３つの異なるアミノ酸を有する鎖を含んでもよい。タンパク質構成アミノ酸側鎖の特定の例としては、イミダゾリル基またはインドリル基で置換されたメチル（ヒスチジンおよびトリプトファンに対する）、グアニジノ基で置換されたプロピル（アルギニンに対する）およびアミノ基で置換されたブチル（リジンに対する）が挙げられる。
【0033】
列挙してもよい特定の本発明の化合物は、Ｒ１およびＲ２が同一である化合物である。例えば、Ｒ１およびＲ２は両方とも水素であってもよい。
【0034】
列挙してもよい本発明の他の化合物は、Ｒ１およびＲ２が異なる化合物である。例えば、Ｒ１がタンパク質構成アミノ酸の側鎖であり、Ｒ２が水素であってもよい。
【0035】
したがって、本発明の第１の態様の化合物は、１つ以上の非対称炭素原子を含んでいてもよく、したがって光学異性および／またはジアステレオ異性を示してもよい。特に、Ｒ１およびＲ２が異なる（例えば、Ｒ１がメチルであり、Ｒ２が水素である）、式Ｉの化合物は、当業者によって理解されるように、Ｒ１およびＲ２で置換された炭素がＬ－配置またはＤ－配置である化合物であってもよい。化合物がＲ５ａおよび／またはＲ５ｂ基を含む場合、それらのＲ５ａおよびＲ５ｂ基が結合しているキラル中心もまた、独立して、Ｌ－配置またはＤ－配置のいずれかであってもよい。
【0036】
特定の実施形態において、Ｒ１およびＲ２が異なる場合、Ｒ１およびＲ２で置換された炭素はＬ－配置である。あるいは、Ｒ１およびＲ２が異なる場合、Ｒ１およびＲ２で置換された炭素は、Ｄ－配置であってもよい。例えば、式Ｉの化合物は、式Ｉ－Ａの化合物または式Ｉ－Ｂの化合物であってもよい。
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、本明細書に記載されているとおりである（すなわち、すべての実施形態および特定の特徴、ならびにそれらの組み合わせを含む、本発明の第１の態様に記載されているとおりである）。本発明の化合物の特定の例は、Ｒ１およびＲ２が両方とも水素であるか、または、Ｒ１およびＲ２で置換された炭素がＬ－配置である化合物であり、例えば、Ｒ１およびＲ２の一方が水素であるとき、他方はタンパク質構成アミノ酸の側鎖である。
【化9】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、本明細書に記載されているとおりである（すなわち、すべての実施形態および特定の特徴、ならびにそれらの組み合わせを含む、本発明の第１の態様に記載されているとおりである）。本発明の化合物の特定の例は、Ｒ１およびＲ２が両方とも水素であるか、または、Ｒ１およびＲ２で置換された炭素がＬ－配置である化合物であり、例えば、Ｒ１およびＲ２の一方が水素であるとき、他方はタンパク質構成アミノ酸の側鎖である。
【0037】
同様に、Ｒ３またはＲ４がＡ１を表す場合、Ａ１は
を表してもよく、そして、Ａ２は水素、フェニル基で任意に置換されたＣ１－４アルキル、
を表してもよく、Ａ３、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、本明細書に記載されているとおりである（すなわち、すべての実施形態および特定の特徴、ならびにそれらの組み合わせを含む、本発明の第１の態様に記載されているとおりである）。本発明の化合物の特定の例は、Ａ１がタンパク質構成アミノ酸または２つの連結したタンパク質構成アミノ酸を表す化合物である。
【化10】
を表してもよく、そして、Ａ２は水素、フェニル基で任意に置換されたＣ１－４アルキル、
【化11】
を表してもよく、Ａ３、Ｒ５ａおよびＲ５ｂは、本明細書に記載されているとおりである（すなわち、すべての実施形態および特定の特徴、ならびにそれらの組み合わせを含む、本発明の第１の態様に記載されているとおりである）。本発明の化合物の特定の例は、Ａ１がタンパク質構成アミノ酸または２つの連結したタンパク質構成アミノ酸を表す化合物である。
【0038】
列挙してもよい本発明の化合物の好ましい例として、Ａ２が水素、
または
を表し；各Ａ３が水素を表し；そして、Ｒ５ｂが本明細書に記載のとおりである、化合物が挙げられる。
【化12】
または
【化13】
を表し；各Ａ３が水素を表し；そして、Ｒ５ｂが本明細書に記載のとおりである、化合物が挙げられる。
【0039】
好ましくは、Ｒ１は、水素、タンパク質構成アミノ酸の側鎖、ならびに－ＯＨ、－ＮＨ２および－Ｃ（Ｏ）ＮＨ２からなる群から選択される１つ以上の置換基によって任意に置換されたＣ１－６アルキルからなる群から選択されるか、または、Ｒ１およびＲ３は連結して（プロリンで見出される）ピロリジン環を形成し；そしてＲ２は水素である。
【0040】
特定の実施形態において、Ｒ２は水素であり、Ｒ１は水素、または、Ｇｌｕ、特にＡｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｓｅｃ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＶａｌからなる群から選択されるタンパク質構成アミノ酸の側鎖である；あるいは、Ｒ２は水素であり、Ｒ１およびＲ３は、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともにピロリジン環を形成する。
【0041】
特定の実施形態において、Ｒ２は水素であり、そしてＲ１は、水素、またはＡｒｇ、Ｈｉｓ、ＬｙｓおよびＴｒｐからなる群から選択されるアミノ酸（例えば、Ａｒｇ、ＨｉｓおよびＬｙｓ）の側鎖である；あるいは、Ｒ２は水素であり、Ｒ１およびＲ３は、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともにピロリジン環を形成する。
【0042】
さらなる実施形態において、Ｒ２は水素であり、そしてＲ１は、水素、またはＬｙｓ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、ＳｅｒおよびＡｓｐからなる群から選択されるアミノ酸の側鎖である；あるいは、Ｒ２は水素であり、Ｒ１およびＲ３は、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともにピロリジン環を形成する。
【0043】
好ましくは、Ｒ２は水素である。
【0044】
本発明の特定の実施形態には、式Ｉの化合物が含まれ、式中、Ｒ１は、水素、またはＡｒｇ、Ｈｉｓ、ＬｙｓおよびＴｒｐからなる群から選択されるアミノ酸（例えば、Ａｒｇ、ＨｉｓおよびＬｙｓ）の側鎖である；あるいは、Ｒ１およびＲ３は、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともにピロリジン環を形成し；そして、Ｒ２は水素である。
【0045】
他の実施形態において、Ｒ３およびＲ４は独立して、水素、１つ以上のフェニル基（例えば、メチル基またはベンジル基）によって任意に置換されたＣ１－３アルキル、
および
からなる群から選択され；そしてＲ５ａは、水素またはタンパク質構成アミノ酸の側鎖である。好ましい実施形態において、Ｒ３およびＲ４は独立して、水素および１つ以上のフェニル基によって任意に置換されたＣ１－３アルキルからなる群から選択される（例えば、Ｒ３およびＲ４は独立して、水素、メチルまたはベンジルである）。好ましくは、Ｒ３およびＲ４は独立して、水素およびメチルからなる群から選択される（例えば、Ｒ３およびＲ４は、両方ともメチルである）。
【化14】
および
【化15】
からなる群から選択され；そしてＲ５ａは、水素またはタンパク質構成アミノ酸の側鎖である。好ましい実施形態において、Ｒ３およびＲ４は独立して、水素および１つ以上のフェニル基によって任意に置換されたＣ１－３アルキルからなる群から選択される（例えば、Ｒ３およびＲ４は独立して、水素、メチルまたはベンジルである）。好ましくは、Ｒ３およびＲ４は独立して、水素およびメチルからなる群から選択される（例えば、Ｒ３およびＲ４は、両方ともメチルである）。
【0046】
他の好ましい実施形態では、Ｒ３およびＲ４は独立して、水素、１つ以上のフェニル基（例えば、メチル基またはベンジル基）によって任意に置換されたＣ１－３アルキル、
および
からなる群から選択され；または、Ｒ１およびＲ３は、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともにピロリジン環を形成し、Ｒ４は、水素、１つ以上のフェニル基で任意に置換されたＣ１－３アルキル、
および
からなる群から選択され；そして、Ｒ５ａはタンパク質構成アミノ酸（例えばＰｈｅ、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、ＡｓｐまたはＡｒｇ）の側鎖である。
【化16】
および
【化17】
からなる群から選択され；または、Ｒ１およびＲ３は、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともにピロリジン環を形成し、Ｒ４は、水素、１つ以上のフェニル基で任意に置換されたＣ１－３アルキル、
【化18】
および
【化19】
からなる群から選択され；そして、Ｒ５ａはタンパク質構成アミノ酸（例えばＰｈｅ、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、ＡｓｐまたはＡｒｇ）の側鎖である。
【0047】
列挙してもよい本発明の好ましい化合物には、Ｒ１が、水素、または、Ｇｌｕ、特にＡｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｓｅｃ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＶａｌからなる群から選択されるタンパク質構成アミノ酸（例えば、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、ＳｅｒおよびＡｓｐ；またはＡｒｇ、Ｈｉｓ、ＬｙｓおよびＴｒｐ）の側鎖であり；Ｒ２が水素を表し；Ｒ３およびＲ４が独立して、水素、および１つ以上のフェニル基（例えばメチル）によって任意に置換されたＣ１－３アルキルからなる群から選択され；または、Ｒ１およびＲ３が、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともにピロリジン環を形成する、化合物が含まれる。
【0048】
列挙してもよい本発明の他の好ましい化合物には、Ｒ２が水素を表し；Ｒ１が、水素、またはＧｌｕ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｓｅｃ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＶａｌ（例えば、Ｌｙｓ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、ＳｅｒおよびＡｓｐ）からなる群から選択されるタンパク質構成アミノ酸の側鎖であり；Ｒ３およびＲ４が独立して、水素、１つ以上のフェニル基（例えば、メチル基またはベンジル基）で任意に置換されたＣ１－３アルキル、
および
からなる群から選択され；あるいは、Ｒ１およびＲ３が、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともにピロリジン環を形成し、Ｒ４が、水素、１つ以上のフェニル基（例えば、メチル基またはベンジル基）によって任意に置換されたＣ１－３アルキル、
および
からなる群から選択され；Ｒ５ａが、水素、またはＧｌｕ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｓｅｃ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＶａｌ（例えば、Ｐｈｅ、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、ＡｓｐおよびＡｒｇ）からなる群から選択されるタンパク質構成アミノ酸の側鎖であり；そしてＡ２およびＡ３が独立して本明細書で定義されるとおりである、化合物が含まれる。
【化20】
および
【化21】
からなる群から選択され；あるいは、Ｒ１およびＲ３が、それらが結合する炭素原子および窒素原子とともにピロリジン環を形成し、Ｒ４が、水素、１つ以上のフェニル基（例えば、メチル基またはベンジル基）によって任意に置換されたＣ１－３アルキル、
【化22】
および
【化23】
からなる群から選択され；Ｒ５ａが、水素、またはＧｌｕ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｓｅｃ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＶａｌ（例えば、Ｐｈｅ、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、ＡｓｐおよびＡｒｇ）からなる群から選択されるタンパク質構成アミノ酸の側鎖であり；そしてＡ２およびＡ３が独立して本明細書で定義されるとおりである、化合物が含まれる。
【0049】
本発明の実施形態において、Ａ２は
を表し、Ｒ５ｂは好ましくは、水素またはＧｌｕ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｓｅｃ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＶａｌ（例えばＰｈｅ、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、ＡｓｐおよびＡｒｇ）からなる群から選択されるタンパク質構成アミノ酸の側鎖であり；そして、各Ａ３は独立して、水素およびＣ１－３アルキル（例えばメチル）からなる群から選択される。
【化24】
を表し、Ｒ５ｂは好ましくは、水素またはＧｌｕ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｓｅｃ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、ＡｓｐおよびＶａｌ（例えばＰｈｅ、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、ＡｓｐおよびＡｒｇ）からなる群から選択されるタンパク質構成アミノ酸の側鎖であり；そして、各Ａ３は独立して、水素およびＣ１－３アルキル（例えばメチル）からなる群から選択される。
【0050】
上述のとおり、本発明の化合物は、インビボで代謝されて４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミド（本明細書では式ＩＩの化合物と称する）を形成することが見出されている。それにもかかわらず、本発明の化合物が式ＩＩの化合物に変換される正確なメカニズムは、本発明の化合物によって異なる場合がある。理論に束縛されることを望むものではないが、本発明の化合物は２つのステップで式ＩＩの化合物に分解されると考えられる。最初にエステルが（化学的または酵素的に）加水分解され、Ｎ－ヒドロキシメチル中間体（本明細書の他の箇所で式ＩＩＩの化合物と称する）が形成され、次いでその中間体が式ＩＩの化合物に変換される。
【0051】
本出願人は、いくつかの化合物は酸性条件下（例えば、ヒトの胃に存在すると予想される条件下）でより迅速に加水分解されるのに対し、他の化合物はよりアルカリ性条件下（例えば、小腸内の条件に類似した条件下）でより迅速に加水分解されることを見出した。
【0052】
酸性条件下よりもアルカリ性条件下（例えば、小腸内の条件に類似した条件下）でより迅速に加水分解される本発明の化合物は、臨床的にさらなる利点を提供する場合がある点で有利であり、例えば、胃で十分な変換を達成できない（例えば、必要な速度または必要な程度で変換を達成できない）患者に有用である場合がある。当該患者は、例えば、エステラーゼ酵素の機能不全に苦しんでいる場合がある。さらに、加水分解の結果として形成される中間体（すなわち、式ＩＩＩの化合物）は、式ＩＩの化合物と比較して、腸内でより容易に取り込まれる場合があり、したがって、腸内での式ＩＩＩの化合物の形成は、患者にとって最適な全身曝露を達成するために有利である場合がある。
【0053】
Ｒ１／Ｒ２に親油性（アルキル）基を含む本発明の化合物は、ｐＨ７．４で比較的高い安定性を有することが見出された。Ｒ１／Ｒ２基がＨまたは－ＮＨ２含有アミノ酸側鎖（例えば、グリシンベースまたはリシンベース）のときは、このｐＨでの安定性が低い。Ｒ１／Ｒ２基のうちの１つが電子吸引性アミノ酸側鎖（例えばアスパラギン酸ベース、アルギニンベースまたはグルタミン酸ベースの側鎖）であるときは、このｐＨでの安定性が非常に低い。
【0054】
この点で列挙してもよい特定の化合物は、式Ａの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である：
（ｉ）Ｒ１は水素を表し、Ｒ２はアスパラギン酸の側鎖、アルギニンの側鎖もしくはグルタミン酸の側鎖を表し、Ｒ３は水素もしくはメチルであり、Ｒ４は水素もしくはメチルであるか；または
（ｉｉ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は水素を表し、Ｒ４はＡ１を表し、Ａ１は
を表し、Ａ２は水素もしくはメチルであり、Ａ３は水素もしくはメチルであり、Ｒ５ａは、アスパラギン酸の側鎖、アルギニンの側鎖もしくはグルタミン酸の側鎖を表す。
【化25】
（ｉ）Ｒ１は水素を表し、Ｒ２はアスパラギン酸の側鎖、アルギニンの側鎖もしくはグルタミン酸の側鎖を表し、Ｒ３は水素もしくはメチルであり、Ｒ４は水素もしくはメチルであるか；または
（ｉｉ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は水素を表し、Ｒ４はＡ１を表し、Ａ１は
【化26】
を表し、Ａ２は水素もしくはメチルであり、Ａ３は水素もしくはメチルであり、Ｒ５ａは、アスパラギン酸の側鎖、アルギニンの側鎖もしくはグルタミン酸の側鎖を表す。
【0055】
この点で列挙してもよいさらなる化合物は、式Ｂの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である：
（ｉ）Ｒ１は水素を表し、Ｒ２はアスパラギン酸の側鎖またはアルギニンの側鎖を表し、Ｒ３は水素もしくはメチルであり、Ｒ４は水素もしくはメチルであるか；または
（ｉｉ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は水素を表し、Ｒ４はＡ１を表し、Ａ１は
を表し、Ａ２は水素もしくはメチルであり、Ａ３は水素もしくはメチルであり、Ｒ５ａは、アスパラギン酸の側鎖もしくはアルギニンの側鎖を表す。
【化27】
（ｉ）Ｒ１は水素を表し、Ｒ２はアスパラギン酸の側鎖またはアルギニンの側鎖を表し、Ｒ３は水素もしくはメチルであり、Ｒ４は水素もしくはメチルであるか；または
（ｉｉ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は水素を表し、Ｒ４はＡ１を表し、Ａ１は
【化28】
を表し、Ａ２は水素もしくはメチルであり、Ａ３は水素もしくはメチルであり、Ｒ５ａは、アスパラギン酸の側鎖もしくはアルギニンの側鎖を表す。
【0056】
この点で列挙してもよい、さらなる特定の化合物は、式Ｃの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である：
（ｉ）Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は水素を表し、Ｒ２はアスパラギン酸の側鎖、アルギニンの側鎖もしくはグルタミン酸の側鎖を表すか；または
（ｉｉ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は水素を表し、Ｒ４はＡ１を表し、Ａ１は
を表し、Ｒ５ａは、アスパラギン酸の側鎖、アルギニンの側鎖もしくはグルタミン酸の側鎖を表す。
【化29】
（ｉ）Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は水素を表し、Ｒ２はアスパラギン酸の側鎖、アルギニンの側鎖もしくはグルタミン酸の側鎖を表すか；または
（ｉｉ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は水素を表し、Ｒ４はＡ１を表し、Ａ１は
【化30】
を表し、Ｒ５ａは、アスパラギン酸の側鎖、アルギニンの側鎖もしくはグルタミン酸の側鎖を表す。
【0057】
別の実施形態において、本発明の化合物は、Ｒ２が水素であり、さらに、Ｒ１がアスパラギン酸の側鎖であり、任意で、Ｒ３およびＲ４が独立して水素またはメチルである、式Ｉの化合物である。
【0058】
この点で、列挙してもよいさらなる化合物は、以下の化合物およびその薬学的に許容される塩または溶媒和物である。
【化31】
【0059】
さらなる実施形態において、本発明はまた、以下を条件として、本明細書で定義される式Ｉの化合物（本明細書に規定される好ましい実施形態のいずれかに従って定義される式Ｉの化合物を含む）に関する：
（ｉ）化合物は式Ａの化合物ではない；または
（ｉｉ）化合物は式Ｂの化合物でない；または
（ｉｉｉ）化合物は式Ｃの化合物ではない；または
（ｉｖ）化合物は、以下からなる群から選択されない：
または
（ｖ）化合物は、Ｒ２が水素であり、Ｒ１がアスパラギン酸の側鎖である（任意で、Ｒ３およびＲ４が独立して水素またはメチルである）式Ｉの化合物ではない；または
（ｖｉ）化合物は
ではない。
（ｉ）化合物は式Ａの化合物ではない；または
（ｉｉ）化合物は式Ｂの化合物でない；または
（ｉｉｉ）化合物は式Ｃの化合物ではない；または
（ｉｖ）化合物は、以下からなる群から選択されない：
【化32】
または
（ｖ）化合物は、Ｒ２が水素であり、Ｒ１がアスパラギン酸の側鎖である（任意で、Ｒ３およびＲ４が独立して水素またはメチルである）式Ｉの化合物ではない；または
（ｖｉ）化合物は
【化33】
ではない。
【0060】
本発明の特に好ましい化合物は以下の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である。
【化34】
【化35】
【化36】
【0061】
本発明の化合物は、インビボで分解されて上記化合物を形成することが見出されているので、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドのプロドラッグであると考えられ得る。４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドは、式ＩＩの化合物として表され得る。
【化37】
【0062】
用語「プロドラッグ」は、経口または非経口投与後、インビボで代謝され、実験的に検出可能な量で、所定の時間内（例えば、６～２４時間の投与間隔内（すなわち、１日１～４回））に薬学的に活性がある化合物が得られる化合物を指す。疑義を避けるために、用語「非経口」投与は、経口投与以外のすべての投与形態を含む。プロドラッグに関する一般的な情報は、例えばBundegaard, H. "Design of Prodrugs" p. l-92, Elsevier, New York-Oxford (1985)に記載されている。
【0063】
本発明の化合物の投与により、驚くべきことに、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドのバイオアベイラビリティおよび全身曝露が、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドの投与後に観察されたバイオアベイラビリティおよび全身曝露と比較して有意に増加することが見出された。
【0064】
薬物のバイオアベイラビリティとは、投与された用量がその薬物の形態で全身循環に到達する量のことである。十分なバイオアベイラビリティは、作用部位で治療上有効である濃度を達成するために重要である。バイオアベイラビリティの向上（すなわち、増加）は、対象に化合物（またはその医薬製剤）を投与した後に、対象の血中Ｃｍａｘまたは曲線下面積（ＡＵＣ）を測定することによって証明してもよい。本発明の化合物および製剤は、本明細書に記載の療法を必要とする対象における当該療法に有用である。列挙してもよい対象には、哺乳動物等の動物が含まれる。列挙してもよい特定の哺乳動物には、例えば、霊長類（例えば、ヒト、オスまたはメス）、ウシ、ウマ、イヌおよびネコが含まれる。好ましくは、対象はヒトである。
【0065】
用語「Ｃｍａｘ」および「ＡＵＣ」は本文脈において、（例えば、ヒト対象への）投与後の４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドの最高血漿中濃度、および、本発明の化合物（またはその製剤）の投与後のその物質の濃度／時間曲線の積分をそれぞれ指すことが、当業者にはよく理解されるであろう。
【0066】
本発明の化合物の投与により、実施例のデータから明らかなように、インビボにおいて４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドのバイオアベイラビリティが特に向上することが見出された。これらのデータは、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドの投与後に観察される血漿曝露と比較して、本発明の化合物を哺乳動物対象に投与した場合に４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドの血漿曝露が増加することを示している。
【0067】
したがって、本発明の化合物の投与は、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドの投与と比較して、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドのバイオアベイラビリティを増加させることが可能である。この文脈において、「バイオアベイラビリティを増加させる」という表現は、本発明の化合物の投与が、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドの投与と比較して、インビボで４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドのより大きな全身的に利用可能な画分をもたらすことを意味する。４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドの全身的に利用可能な部分（fraction）の増加は、少なくとも約１０％、（少なくとも）約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約１００％（すなわち、２倍）、約２００％（すなわち、３倍）、約３００％（すなわち、４倍）、約４００％（すなわち、５倍）、約５００％（すなわち、６倍）、約６００％（すなわち、７倍）、約７００％（すなわち、８倍）、約８００％（すなわち、９倍）または約９００％（すなわち、１０倍）であってもよい。
【0068】
本発明の化合物によって提供されるバイオアベイラビリティの向上は、当技術分野で公知の好適な方法を使用して証明してもよい。例えば、バイオアベイラビリティの向上は、本発明の化合物が投与された対象の薬物動態データ（例えば、ＡＵＣデータ）と、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドを投与された対象の対応するデータとを比較することによって証明してもよい。
【0069】
実施例で示されているように、本発明の化合物は酸性条件下（例えば、ｐＨ１．２）で安定性が向上している。したがって、本発明の化合物は、胃の通過が必要な患者への経口投与のための医薬製剤の調製に適している。
【0070】
本発明の化合物はまた、実施例のデータによって証明されるように、ＡＭＰＫを活性化するのに驚くべく有効であることが見出されている。ＡＭＰＫ活性化剤（すなわち、ＡＭＰＫアゴニスト）として、本発明の化合物は、ＡＭＰＫの活性化によって改善される障害または健康状態の処置において有用である場合がある。したがって、当該化合物は、本明細書に記載される特定の疾患の処置に有用である場合がある。
【0071】
本発明の化合物は、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドから調製してもよい。４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドは、当業者に周知の技術に従って順に調製してもよい。例えば、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドは、国際特許出願ＷＯ２０１１／００４１６２に記載されている技術に従って製造してもよく、その内容はすべて参照により本明細書に組み込まれる。
【0072】
本明細書に記載される本発明の化合物は、以下に提供される実施例に記載される技術等の、当業者に周知の技術に従って調製してもよい。
【0073】
適切な試薬および反応条件を使用して、入手可能な出発物質から、文献で公知の方法を類推することによってまたは従来の合成手順によって、標準的な技術に従って、式Ｉの化合物を取得してもよい。この点に関して、当業者は特に、"Comprehensive Organic Synthesis" by B. M. Trost and I. Fleming, Pergamon Press, 1991を参照してもよい。
【0074】
例えば、本明細書において定義される本発明の化合物の調製のための方法が提供され、
（ｉ）式ＩＩＩの化合物と、
式ＩＶの化合物との反応
または
（ｉｉ）式Ｖの化合物と、
式ＩＶの化合物との反応を含み、
Ｒ１およびＲ２は、本明細書で定義したとおりであり、Ｒ３およびＲ４は、本明細書で定義したとおりであるか、または独立して、好適な保護基（例えばＢｏｃ）を表し、好適な塩基（例えば、４－ジメチルアミノピリジン）、好適なアミドカップリング剤（例えば、Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド）および好適な溶媒（例えば、テトラヒドロフラン）の存在下、当業者に公知の手順に従って行われる。
（ｉ）式ＩＩＩの化合物と、
【化38】
式ＩＶの化合物との反応
【化39】
または
（ｉｉ）式Ｖの化合物と、
【化40】
式ＩＶの化合物との反応を含み、
【化41】
Ｒ１およびＲ２は、本明細書で定義したとおりであり、Ｒ３およびＲ４は、本明細書で定義したとおりであるか、または独立して、好適な保護基（例えばＢｏｃ）を表し、好適な塩基（例えば、４－ジメチルアミノピリジン）、好適なアミドカップリング剤（例えば、Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド）および好適な溶媒（例えば、テトラヒドロフラン）の存在下、当業者に公知の手順に従って行われる。
【0075】
疑義を避けるために、本発明の化合物を調製するための本明細書中に記載される方法は、式ＩＩＩの化合物と、３つ（例えば２つ）までの式ＩＶの化合物との連続的な反応を含む方法を包含する。例えば、以下の工程を含む：
（ｉ）本明細書に記載される方法に従って、式ＩＩＩの化合物と式ＩＶの化合物とを反応させる工程；
（ｉｉ）任意で、１つ以上の脱保護工程を実施する工程；
（ｉｉｉ）本明細書に記載される方法に従って、工程（ｉ）または工程（ｉｉ）の生成物と式ＩＶの化合物とを反応させる工程；
（ｉｖ）任意で、１つ以上の脱保護工程を行う工程；
（ｖ）任意で、本明細書に記載される方法に従って、工程（ｉｉｉ）または工程（ｉｖ）の生成物と式ＩＶの化合物とを反応させる工程；および
（ｖｉ）任意に、１つ以上の脱保護工程を実施する工程。
（ｉ）本明細書に記載される方法に従って、式ＩＩＩの化合物と式ＩＶの化合物とを反応させる工程；
（ｉｉ）任意で、１つ以上の脱保護工程を実施する工程；
（ｉｉｉ）本明細書に記載される方法に従って、工程（ｉ）または工程（ｉｉ）の生成物と式ＩＶの化合物とを反応させる工程；
（ｉｖ）任意で、１つ以上の脱保護工程を行う工程；
（ｖ）任意で、本明細書に記載される方法に従って、工程（ｉｉｉ）または工程（ｉｖ）の生成物と式ＩＶの化合物とを反応させる工程；および
（ｖｉ）任意に、１つ以上の脱保護工程を実施する工程。
【0076】
上記実施形態において、式ＩＶの化合物は、工程（ｉ）、（ｉｉｉ）および（ｖ）のそれぞれにおいて、同一であっても異なっていてもよい。
【0077】
当業者には、上記および以下に記載する方法において、中間体化合物の官能基を保護基で保護する必要がある場合があることが理解されよう。例えば、特定の実施形態において、式ＩＶの化合物において、Ｒ３およびＲ４の一方は水素を表し、他方は好適な保護基（例えばＢｏｃ）を表す場合がある。官能基の保護および脱保護は、上記の反応の前または後に行われてもよい。
【0078】
保護基は、当業者に周知であり、以下に記載するような技術に従って除去してもよい。例えば、本明細書に記載される保護された化合物／中間体は、標準的な脱保護技術を使用して、保護されていない化合物に化学的に変換されてもよい。保護基の使用は、“Protective Groups in Organic Synthesis”, 3rd edition, T.W. Greene & P.G.M. Wutz, Wiley-Interscience (1999)に完全に記載されている。
【0079】
したがって、式Ｉの化合物を形成するために採用してもよい具体的な変換工程には、脱保護工程、例えば、酸の存在下での反応によるＮ－Ｂｏｃ保護基の脱保護を含み、または、シリルエーテルとして保護されたヒドロキシ基（例えば、ｔｅｒｔ－ブチル－ジメチルシリル保護基）は、酸またはフッ化物イオン源との反応、例えば、試薬テトラブチルアンモニウムフルオリド（ＴＢＡＦ）の使用によって脱保護してもよい。
【0080】
式ＩＩＩの化合物は、適切な試薬および反応条件を使用して、入手可能な出発物質から、標準的な技術に従って、従来の合成手順によって取得してもよい。例えば、式ＩＩＩの化合物（実施例では化合物２と称する）は、当業者に公知の手順に従って、好適な塩基（例えば、トリエチルアミン）および好適な溶媒（例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド）の存在下、式ＩＩの化合物とホルムアルデヒドとを反応させることにより調製してもよい。
【0081】
同様に、式ＩＩの化合物（すなわち、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミド；実施例では化合物１と称する）は、当業者に周知の技術、例えば国際特許出願番号ＷＯ２０１１／００４１６２に記載されている技術に従って調製してもよい。
【0082】
当業者は、式Ｖの化合物が、適切な試薬および反応条件を使用して、入手可能な出発物質から、本明細書に例示する合成手順によって取得してもよいことを認識するであろう。
【0083】
本発明の化合物は、それらの反応混合物から単離してもよく、そして必要に応じて、当業者に公知の従来技術を使用して精製してもよい。したがって、本明細書に記載される、本発明の化合物の調製のための方法は、最終工程として、本発明の化合物の単離および任意に精製を含んでいてもよい。
【0084】
［医薬製剤］
本明細書で示されるように、本発明の化合物は、種々の医学的障害または健康状態を処置するための治療剤として有用である。典型的には、本発明の化合物は、医薬製剤の形態で、それを必要とする対象に投与される。
本明細書で示されるように、本発明の化合物は、種々の医学的障害または健康状態を処置するための治療剤として有用である。典型的には、本発明の化合物は、医薬製剤の形態で、それを必要とする対象に投与される。
【0085】
本発明の第２の態様によれば、式Ｉの化合物（またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物）を含む医薬製剤が提供される。当該製剤は、本明細書において本発明の製剤と称される。本発明の第１の態様に関して本明細書に記載されたすべての実施形態およびその特定の特徴は、本発明の第２の態様に関して本明細書に開示される。
【0086】
本発明の第２の態様の医薬製剤は、標準的および／または認められた医薬実務に従って調製してもよい。
【0087】
本発明の第２の態様の実施形態において、本発明の化合物（またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物）は、製剤中に存在する唯一の医薬有効成分である。本発明の第２の態様のさらなる実施形態において、本発明の化合物（またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物）は、１つ以上の他の医薬有効成分とともに製剤中に存在するか、または１つ以上の他の医薬有効成分との併用療法の一部として投与されてもよい。
【0088】
本発明の第２の態様の製剤は、一般に、本発明の化合物（またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物）および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む混合物として提供される。１つ以上の薬学的に許容される賦形剤は、標準的な医薬実務に従って、意図される投与経路に適切に考慮して選択してもよい。当該薬学的に許容される賦形剤は好ましくは活性化合物に対して化学的に不活性であり、好ましくは、使用条件下で有害な副作用または毒性を有さない。好適な医薬製剤は例えば、Remington The Science and Practice of Pharmacy, 19th ed., Mack Printing Company, Easton, Pennsylvania (1995)において見出してもよい。薬物送達の方法の簡単な概説は例えば、Langer, Science 249, 1527 (1990)において見出してもよい。
【0089】
例えば、本発明の製剤は、滑沢剤、結合剤、充填剤、界面活性剤、希釈剤、付着防止剤、コーティング、香味剤、着色剤、流動促進剤、防腐剤、甘味剤、崩壊剤、吸着剤、緩衝剤、抗酸化剤、キレート剤、溶解促進剤、溶解遅延剤および／または湿潤剤を含んでいてもよい。
【0090】
列挙してもよい特定の薬学的に許容される賦形剤には、微結晶セルロース、ラクトース一水和物、クロスポビドン、ステアリン酸マグネシウム、コロイド状二酸化ケイ素、無水ラクトース、リン酸二カルシウム、マンニトール、アルファ化デンプン、ヒドロキシプロピルセルロース、ポビドン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、フマル酸ステアリルナトリウム、タルク、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリソルベート８０、ラウリル硫酸ナトリウム、ポロキサマー１８８、ポロキサマー４０７、プロピレングリコール、二酸化チタン、ヒプロメロースフタレート、ヒプロメロースアセテートサクシネート、メタクリル酸、メタクリル酸メチルコポリマー、Opadry（登録商標）Ｉ、Opadry（登録商標）ＩＩが含まれる。
【0091】
経口投与のための本発明の化合物の医薬製剤の調製において、本発明の化合物は、一緒にまたは別々に、上記の医薬賦形剤の１つ以上と混合してもよい。
【0092】
本発明の化合物と１つ以上の薬学的に許容される賦形剤との混合物は、ペレットまたは顆粒に加工するか、または錠剤に圧縮してもよい。したがって、本発明の医薬製剤は、経口投与のための錠剤、ミニ錠剤、ブロック、ペレット、粒子、顆粒または粉末の形態で提供される製剤を含む。本発明の化合物と１つ以上の薬学的に許容される賦形剤との混合物はまた、皮下または筋肉内投与に適した形態、例えば、注射液または投与前に好適な流体中で再構成するのに適した凍結乾燥粉末等の形態で提供されてもよい。
【0093】
当業者は、本明細書に記載される製剤が全身で作用する場合があり、したがって、当業者に公知の好適な技術を使用して投与してもよいことを理解するであろう。本明細書に記載される製剤は、通常、好適な薬学的に許容される剤形で経口、皮下または筋肉内に投与される。本発明の第２の態様の医薬製剤は、特に本発明の化合物について観察されている酸性条件下での安定性の向上の観点から、好ましくは経口医薬製剤である。
【0094】
本発明の製剤は、カプセルの形態で経口投与用に調製してもよい。例えば、軟ゼラチンカプセル等のカプセルは、本発明の化合物（またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物）単独を、任意で好適なビヒクル、例えば、植物油、脂肪等と共に含有するように調製してもよい。同様に、硬ゼラチンカプセルは、本発明の化合物（またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物）を単独で、または二糖（例えば、ラクトースもしくはサッカロース）、アルコール糖（例えば、ソルビトールもしくはマンニトール）、植物デンプン（例えば、ジャガイモデンプンもしくはコーンスターチ）、多糖類（例えば、アミロペクチンもしくはセルロース誘導体）もしくはゲル化剤（例えば、ゼラチン）等の固体粉末成分と組み合わせて含有してもよい。
【0095】
本発明の特定の医薬製剤は、例えば経口投与のためのカプセル剤または錠剤の形態で提供される製剤として列挙してもよい製剤を含む。
【0096】
列挙してもよい医薬製剤には、本発明の化合物（またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物）が、製剤の少なくとも１重量％（または少なくとも１０重量％、少なくとも３０重量％または少なくとも５０重量％）および最大９９重量％である総量で存在する製剤が含まれる。本発明の化合物（またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物）の、医薬製剤の成分の全体（すなわち、本発明の化合物およびすべての医薬賦形剤、例えばアジュバント、希釈剤および担体）に対する重量比は、少なくとも１：９９（または少なくとも１０：９０、少なくとも３０：７０または少なくとも５０：５０）であり、最大９９：１である。
【0097】
本明細書で使用する「治療上有効な量」、「有効量」および「投与量」とは、治療効果および／または有益な効果であり得る所望の臨床効果をもたらすのに十分な本発明の化合物（またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物）の量を指す。有効量または投与量は、対象（例えばヒト）の年齢または一般的な健康状態、処置される健康状態の重症度、投与される特定の薬剤、処置期間、任意の同時処置の性質、使用される薬学的に許容される賦形剤、ならびに当業者の知識および専門知識の範囲内の同様の因子によって変化する。適切には、個々の場合における「治療上有効な量」、「有効量」または「投与量」は、当業者によって、関連するテキストおよび文献を参照することによって、ならびに／または日常的な実験を使用することによって決定され得る。当業者は、対象に何らかの利益が提供される限り、治療効果が完全または治癒的である必要はないことを理解するであろう。
【0098】
当業者は、本発明の化合物およびその製剤が、様々な用量で（例えば、本明細書に記載される１つ以上の調製物によって）投与されてもよく、好適な用量は当業者によって容易に決定されることを理解するであろう。必要とする対象に投与される本発明の化合物（またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物）の総投与量は、約１ミリグラム／日（ｍｇ／日）～約３０００ｍｇ／日、約２ｍｇ／日～約２０００ｍｇ／日、または約５ｍｇ／日～約１０００ｍｇ／日（例えば、約１０ｍｇ／日～約５００ｍｇ／日）の範囲であってもよい。当該投与量は、例えば、本発明の第２の態様の製剤の経口投与量であってもよい。本発明の化合物（またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物）を筋肉内または皮下に投与するとき、当業者は、投与量を適宜調節すべきであることを認識するであろう。
【0099】
経口投与するとき、上記製剤による処置は、本発明の化合物を約１ｍｇ～約３０００ｍｇ、例えば約２ｍｇ～約２０００ｍｇ、または約５ｍｇ～約１０００ｍｇ（例えば約１０ｍｇ～約５００ｍｇ）の本発明の化合物を含む単位用量製剤の投与を含んでいてもよい。有利には、処置は、１日１回の用量を使用した本発明の化合物（例えば、上記製剤を含む１つ以上のカプセルの形態で）の投与を含んでいてもよい。あるいは、本発明の化合物の１日の総投与量を、１日２回、３回または４回に分けて投与してもよい（例えば、本明細書に記載の用量を参照して１日２回、例えば、１００ｍｇ、２５０ｍｇ、５００ｍｇまたは１０００ｍｇの用量を１日２回投与する）。専門医は、投与量が対象によって異なることを認識するであろう。
【0100】
特定の実施形態において、対象に投与される本発明の化合物の１日用量は、約１ｍｇ～約３０００ｍｇ、好ましくは約１ｍｇ～約１０００ｍｇの範囲である。
【0101】
本明細書で使用される用語「約」は、化合物の量、用量、時間、温度等の測定可能な値を指す場合、特定の量の２０％、１０％、５％、１％、０．５％、またはさらには０．１％の変動を指す。各場合において、当該用語は、「±１０％」等の表記に（または関連する値に基づいて計算された特定の量の分散を示すことによって）置き換えてもよいことが企図される。また、各場合において、当該用語を削除してもよいことも企図される。
【0102】
疑義を避けるために、本発明の文脈において、対象、特にヒト対象、に投与される用量は、合理的な時間枠にわたって対象において治療応答を果たすのに十分であるべきである。当業者は、正確な用量および組成物ならびに最も適切な送達レジメンの選択がとりわけ、製剤の薬理学的特性、処置される健康状態の性質および重症度、ならびにレシピエントの身体的状態および精神的鋭敏性、ならびに特定の化合物の効力、処置される対象の年齢、状態、体重、性別および応答、ならびに疾患の段階／重症度によっても影響されることを認識するであろう。
【0103】
いずれにしても、医師または他の当業者は、個々の対象に最も好適な実際の投与量を日常的に決定することができるであろう。上記の投与量は、平均的な場合の例示である；もちろん、より高いまたはより低い投与量範囲が妥当である個々の場合が存在し得、そして当該場合も本発明の範囲内である。
【0104】
［医療用途］
本明細書で示されるように、本発明の化合物は医薬として有用である。本発明の化合物は、薬理学的活性を有し、および／または経口投与もしくは非経口投与後に体内で代謝されて薬理学的活性を有する化合物を形成するので有用である。
本明細書で示されるように、本発明の化合物は医薬として有用である。本発明の化合物は、薬理学的活性を有し、および／または経口投与もしくは非経口投与後に体内で代謝されて薬理学的活性を有する化合物を形成するので有用である。
【0105】
したがって、本発明の第３の態様によれば、医薬に使用するための、本明細書において既に定義された本発明の化合物（すなわち、本発明の第１の態様において定義された化合物）、または本発明の第２の態様に関して定義した医薬製剤が提供される。疑義を避けるために、本発明の第１の態様において定義された化合物への言及は、式Ｉの化合物（そのすべての実施形態を含む）ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物への言及を含む。
【0106】
本発明の化合物（すなわち、本発明の第１の態様で定義される化合物）、およびそれを含む製剤は、ＡＭＰ活性化プロテインキナーゼ（ＡＭＰＫ）の活性化によって改善される障害または健康状態の処置に特に有用である場合がある。したがって、本発明の第４の態様において、ＡＭＰＫの活性化によって改善される障害または健康状態の処置における使用のための、本発明の化合物、または当該化合物を含む製剤が提供される。
【0107】
同様に、ＡＭＰＫの活性化により改善される障害または健康状態の処置のための医薬の製造における、本発明の化合物、または当該化合物を含む製剤の使用が提供される。本発明のさらなる代替的な第４の態様において、本発明の化合物（または当該化合物を含む製剤）を、それを必要とする対象（例えばヒト）に投与することを含む、ＡＭＰＫの活性化によって改善される障害または健康状態を処置する方法が提供される。
【0108】
「ＡＭＰＫを活性化する」とは、ＡＭＰＫ－α（ＡＭＰＫ－アルファ）サブユニットのＴｈｒ－１７２部分のリン酸化の定常状態レベルが式Ｉの化合物またはその活性代謝物（例えば、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミド）の非存在下でのリン酸化の定常状態レベルと比較して増加することを意味する。あるいはまたは加えて、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）などのＡＭＰＫの下流の任意の他のタンパク質のより高い定常状態レベルのリン酸化が存在することを意味する。
【0109】
用語「ＡＭＰＫの活性化によって改善される障害または健康状態」が、心血管疾患（例えば、心不全）、糖尿病性腎疾患、糖尿病（例えば、２型糖尿病）、インスリン抵抗性、非アルコール性脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、疼痛、オピオイド依存症、肥満、がん、炎症（慢性炎症性疾患を含む）、自己免疫疾患、骨粗鬆症、腸疾患、および肥満または心血管疾患に伴う高インスリン血症を含むことを当業者には理解されるであろう。ＡＭＰＫの活性化によって改善し得る他の疾患または健康状態には、高インスリン血症および関連する状態、線維症が役割を果たす健康状態／障害、性機能障害および神経変性疾患が含まれる。
【0110】
用語「がん」は、細胞の制御されない分裂、および浸潤、増殖を通じた隣接組織への直接的な成長によるか、または転移による遠隔部位への移植性転移によるかのいずれかによって、他の組織に浸潤するこれらの細胞の能力によって特徴づけられる障害の種類における１つ以上の疾患を含むことが当業者には理解されるであろう。「増殖」は、癌細胞の数および／またはサイズの増加を含む。「転移」は、対象の体内の原発腫瘍部位から対象の体内の１つ以上の他の領域への癌細胞の移動または遊走（例えば、浸潤）を意味する（細胞は、次いで、続発性腫瘍を形成することができる）。
【0111】
したがって、本発明の化合物は、すべての腫瘍（非固形および好ましくは固形腫瘍、例えば、癌腫、腺腫、腺癌、臓器とは無関係に、血液がん）を含む、任意の種類のがんの処置の使用に適し得る。例えば、がん細胞は、乳房、胆管、脳、結腸、胃、生殖器、甲状腺、造血系、肺および気道、皮膚、胆嚢、肝臓、鼻咽頭、神経細胞、腎臓、前立腺、リンパ腺および胃腸管のがん細胞からなる群から選択されてもよい。好ましくは、がんは結腸がん（結腸直腸腺腫を含む）、乳がん（例えば閉経後乳がん）、子宮内膜がん、造血系のがん（例えば白血病、リンパ腫など）、甲状腺がん、腎臓がん、食道腺がん、卵巣がん、前立腺がん、膵がん、胆嚢がん、肝臓がんおよび子宮頸がんからなる群から選択される。より好ましくは、がんは結腸、前立腺、および特に乳がんからなる群から選択される。がんが非固形腫瘍であるとき、好ましくは、がんは白血病（例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、または慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ））などの造血腫瘍である。好ましくは、がん細胞は乳がん細胞である。
【0112】
用語「糖尿病」（すなわち、真性糖尿病）は、１型（インスリン依存性）糖尿病および２型（インスリン非依存性）糖尿病の両方を指すことが当業者には理解され、その両方がグルコースホメオスタシスの機能不全を伴う。本発明の化合物およびその製剤は、１型糖尿病および／または２型糖尿病の処置における使用に特に好適であり得る。本発明の化合物は、２型糖尿病の処置に特に適している。
【0113】
糖尿病の処置に有用であるだけでなく、本発明の化合物は糖尿病性腎疾患（すなわち、糖尿病性腎症）の処置にも好適である。「糖尿病性腎疾患」は糖尿病によって引き起こされる腎障害を指し、１型糖尿病および２型糖尿病の重篤な合併症である。糖尿病性腎疾患は血液から老廃物を除去して尿として排泄する腎臓の能力に影響を及ぼし、腎不全を引きこし得る。
【0114】
本発明の化合物はまた、２型糖尿病の非存在下での慢性腎疾患を含む慢性腎疾患を処置するのに好適である。「慢性腎疾患」は、経時的な腎機能の漸進的喪失を特徴とする健康状態である。慢性腎疾患は、通常、高血圧、糖尿病、高コレステロール、腎臓感染症、糸球体腎炎、多発性嚢胞腎疾患、尿の流れにおける尿路閉塞の閉塞、および長期薬物使用など、腎臓に影響を及ぼす１つ以上の他の疾患または健康状態の結果として生じる。
【0115】
用語「高インスリン血症または関連状態」は、高インスリン血症、２型糖尿病、グルコース不耐性、インスリン抵抗性、メタボリックシンドローム、脂質異常症、小児期の高インスリン血症、高コレステロール血症、高血圧、肥満、脂肪肝状態、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、脳卒中などの脳血管状態、全身性エリテマトーデス、アルツハイマー病などの神経変性疾患、および多嚢胞性卵巣症候群を含むことが当業者によって理解される。他の疾患状態には、慢性腎不全などの進行性腎疾患が含まれる。
【0116】
特に、本発明の化合物およびその製剤は、高インスリン血症に関連する肥満および／または高インスリン血症に関連する心血管疾患の処置における使用に好適であり得る。
【0117】
本発明の化合物およびその製剤はまた、心血管疾患（例えば、心不全）の処置における使用に好適であり得、当該心血管疾患は、高インスリン血症と関連しない。同様に、本発明の化合物およびその製剤は、高インスリン血症と関連しない肥満の処置における使用にも好適であり得る。疑義を避けるために、ＡＭＰＫ活性化が有益であり得る肥満および／または心血管疾患（心不全など）の処置は、本発明の範囲内に含まれる。
【0118】
線維症が役割を果たす健康状態／障害には、瘢痕治癒、ケロイド、強皮症、肺線維症（特発性肺線維症を含む）、腎原性全身性線維症、および心血管線維症（心内膜筋線維症を含む）、全身性硬化症、肝硬変、眼黄斑変性症、網膜および硝子体網膜症、クローン病／炎症性腸疾患、手術瘢痕組織形成、放射線および化学療法薬誘発性線維症、ならびに心血管線維症が含まれる（これらに限定されない）。
【0119】
本発明の化合物はまた、性機能不全の処置（例えば、勃起不全の処置）に有用であり得る。本発明の化合物は、炎症の処置にも有用であり得る。
【0120】
列挙してもよい神経変性疾患には、アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、脊髄および眼球筋萎縮症（ＳＢＭＡ）などのポリグルタミン障害、歯状核および淡蒼球ルイ体萎縮症（ＤＲＰＬＡ）、ならびにいくつかの脊髄小脳失調症（ＳＣＡ）が含まれる。
【0121】
本発明の化合物は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の処置に有用であり得る。
【0122】
非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は、肝臓におけるトリグリセリド（脂肪症）の形態での過剰な脂肪蓄積（組織学的に肝細胞の５％超の蓄積と称される）によって定義される。これは、先進国において最も一般的な肝障害であり（例えば、米国成人の約３０％に影響を及ぼす）、ほとんどの患者は無症候性である。処置せずに放置すると、状態は次第に悪化し、最終的に肝硬変に至る可能性がある。ＮＡＦＬＤは肥満患者において特に一般的であり、約８０％がこの疾患を有すると考えられる。
【0123】
患者のアルコール摂取が主な原因因子であると考えられない場合にＮＡＦＬＤと診断される可能性がある。脂肪肝疾患を「アルコールに関連しない」と診断するための典型的な閾値は、女性対象では２０ｇ未満、男性対象では３０ｇ未満の１日摂取量である。
【0124】
ＮＡＦＬＤに関連する特定の疾患または健康状態には、糖尿病、高血圧、肥満、脂質異常症、脂質異常タンパク質血症、グリコーゲン貯蔵疾患、ウェバー－クリスチャン病、妊娠の急性脂肪肝、およびリポジストロフィーなどの代謝状態が含まれる。脂肪肝疾患に関連する他の非アルコール関連因子には、栄養不良、完全非経口栄養、重度の体重減少、再摂食症候群、空腸油膜バイパス、胃バイパス、多嚢胞性卵巣症候群および憩室症が含まれる。
【0125】
非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）はＮＡＦＬＤの最も攻撃的な形態であり、過剰な脂肪蓄積（脂肪症）が肝臓の炎症を伴う状態である。進行した場合、ＮＡＳＨは、肝臓における瘢痕組織の開発（線維症）、および最終的には肝硬変をもたらし得る。上記のように、本発明の化合物は、ＮＡＦＬＤおよび炎症の処置に有用であることが見出されている。したがって、本発明の化合物は、ＮＡＳＨの処置にも有用である。したがって、さらなる実施形態において、当該処置は非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の処置である。
【0126】
ＡＭＰＫ活性化剤化合物（例えば、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミド（すなわち、式ＩＩの化合物））は、疼痛を処置することができることが示されており（Das V, et al. Reg Anesth Pain Med 2019;0:1-5. doi:10.1136/rapm-2019-100839、および、Das V, et al. Reg Anesth Pain Med 2019;0:1-6. doi:10.1136/rapm-2019-100651）、当該化合物は鎮痛剤とみなされ得る。したがって、本発明の化合物は、ＡＭＰＫを活性化することができるか、またはインビボで代謝されて公知のＡＭＰＫ活性化化合物を形成するので、本発明の化合物は疼痛の処置に有用であり得るということになる。特に、本発明の化合物は、重度の疼痛、慢性疼痛を有する患者の処置に有用であり得るか、または手術後の疼痛の管理に有用であり得る。
【0127】
オピオイド鎮痛薬などのオピオイドベースの治療は、重度の慢性癌性疼痛、急性疼痛（例えば、手術からの回復および突発性疼痛）を処置するために使用され、それらの使用は、慢性の非悪性疼痛の管理において増加している。しかしながら、疼痛を処置するためのオピオイドベースの療法の使用の増加はオピオイド依存（例えば、オピオイド中毒）の増加をもたらした。ＡＭＰＫ活性化剤として、本発明の化合物は当業者に知られているように、オピオイドベースの治療の代わりに疼痛を処置するために使用され得る。したがって、本発明の化合物は、オピオイド中毒を処置するのに有用であり得る。
【0128】
当業者に知られている特定の自己免疫疾患には、クローン病／炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデスおよび１型糖尿病が含まれる。
【0129】
言及すべき特定の腸疾患には、クローン病／炎症性腸疾患および胃腸管のがんが含まれる。
【0130】
当業者は特定の健康状態の「処置」（または同様に、その健康状態の「処置」）への言及が、医学の分野においてそれらの通常の意味をとることを理解するであろう。特に、この用語は、そのような症状を有するか、またはそのような症状に罹りやすい対象を主治する医師によって判断される、健康状態に関連する１つ以上の臨床症状の発生の重症度および／または頻度の低減を達成することを指してもよい。
【0131】
当業者は、上記処置または予防がそれを必要とする対象において実施されることを理解するであろう。上記処置または予防のための対象の必要性は、当業者によって、日常的な技術を用いて評価されてもよい。本発明の文脈において、本発明の化合物を「必要とする対象」は、ＡＭＰＫの活性化によって改善される障害または健康状態に罹患している対象を含む。本明細書中で使用される場合、用語「疾患」および「障害」（ならびに同様に、用語「健康状態」、「病気」、「医学的問題」など）は、互換的に使用されてもよい。
【0132】
理論に拘束されることを望むものではないが、本発明の化合物の投与は、全身循環における４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドのバイオアベイラビリティを向上させるものと考えられる。本発明の化合物を含む製剤の投与は、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドを含有する製剤の投与と比較して、一定の状況下で４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドの血漿中濃度が約１０倍増加することが示されている。
【0133】
本発明の化合物（およびその製剤）は、上記の徴候で使用するためであろうとそうでない場合であろうと、先行技術において公知の他の治療法よりも、より有効であり、より毒性が低く、より作用時間が長く、より強力であり、より副作用が少なく、より吸収されやすく、および／またはより良好な薬物動態プロファイル（例えば、より高い経口バイオアベイラビリティおよび／またはより低いクリアランス）を有し、および／または他の有用な薬理学的、物理的、または化学的特性を有するという利点を有し得る。特に、本発明の化合物は、インビボにおいてより有効であり、および／または有利な特性を示すという利点を有し得る。
【0134】
［図］
以下の図面は、本発明の概念の様々な態様を説明するために提供されるものであり、本明細書で指定されない限り、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
以下の図面は、本発明の概念の様々な態様を説明するために提供されるものであり、本明細書で指定されない限り、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【0135】
図１は、化合物３が用量依存的にＡＭＰＫのリン酸化を増加させることを示すウェスタンブロット画像である。
【0136】
図２は、化合物１および化合物３を使用した、経口薬物動態試験の比較結果である。
【0137】
図３は、化合物５、６、７、９、１０、１３、１４、１６および１７を使用した、経口薬物動態試験の比較結果である。
【0138】
［実施例］
本発明を以下の非限定的な実施例でより詳細に説明する。
本発明を以下の非限定的な実施例でより詳細に説明する。
【0139】
以下に記載する反応スキームは、本発明の化合物の調製において採用される手順の一般的な説明を提供することを意図している。本明細書で提供される実施例は、本発明の化合物ならびに当該化合物および中間体の調製を説明するために提供されるが、限定するものではない。
【0140】
本発明の化合物を合成するために使用されるすべての出発物質、ビルディングブロック、試薬、酸、塩基、脱水剤、溶媒および触媒は、市販されているか、または文献、例えば、Houben-Weyl "Science of Synthesis" volumes 1-48, Georg Thieme Verlagおよびその後のバージョンに記載されている手順によって日常的に調製し得る。
【0141】
反応は、有機合成技術の当業者に公知の方法で、好適な溶媒もしくは希釈剤またはそれらの混合物の存在下で実施してもよい。反応はまた、必要に応じて、酸または塩基の存在下、冷却または加熱しながら、例えば約－３０℃～約１５０℃の温度範囲で実施してもよい。いくつかの実施形態において、反応は、約０℃～約１００℃の温度範囲、より詳細には室温～約８０℃の温度範囲で、開放または閉鎖反応容器中および／または不活性ガス、例えば窒素の雰囲気中で実施される。
【0142】
［略語］
本明細書で使用する略語は、当業者に公知であろう。特に、本明細書では以下の略語を使用してもよい。
ＡＵＣ：濃度－時間曲線下面積
ａｑ：水性
ｂ．ｗ：体重
Ｃｍａｘ：ピーク血漿中濃度
ｄ：二重項
ＤＣＣ：Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＡＰ：４－ジメチルアミノピリジン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ｅｑ：当量
ＥＳＩ：エレクトロスプレーイオン化
Ｅｔ３Ｎ：トリエチルアミン
ＥｔＯＨ：エタノール
ｇ：グラム
ｈ：時間
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＬＣ：液体クロマトグラフィー
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー－質量分析
ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ：液体クロマトグラフィー－（タンデム）質量分析
ＬＬＯＱ：定量下限
ｍ：多重項
ＭｅＯＨ：メタノール
ＭｅＯＤ：メタノール－ｄ４
Ｍｉｎ：分
ｍＬ：ミリリットル
ＭＲＴ：平均滞留時間
ＮＤ：未検出
ＮＭＲ：核磁気共鳴
ＲＴ：室温
ｓ：一重項
Ｔ１／２：半減期
ＴＢＤＭＳ－Ｃｌ：ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルクロリド
Ｔｍａｘ：血漿中濃度がピークに達するまでの時間
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
本明細書で使用する略語は、当業者に公知であろう。特に、本明細書では以下の略語を使用してもよい。
ＡＵＣ：濃度－時間曲線下面積
ａｑ：水性
ｂ．ｗ：体重
Ｃｍａｘ：ピーク血漿中濃度
ｄ：二重項
ＤＣＣ：Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＡＰ：４－ジメチルアミノピリジン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ｅｑ：当量
ＥＳＩ：エレクトロスプレーイオン化
Ｅｔ３Ｎ：トリエチルアミン
ＥｔＯＨ：エタノール
ｇ：グラム
ｈ：時間
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＬＣ：液体クロマトグラフィー
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー－質量分析
ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ：液体クロマトグラフィー－（タンデム）質量分析
ＬＬＯＱ：定量下限
ｍ：多重項
ＭｅＯＨ：メタノール
ＭｅＯＤ：メタノール－ｄ４
Ｍｉｎ：分
ｍＬ：ミリリットル
ＭＲＴ：平均滞留時間
ＮＤ：未検出
ＮＭＲ：核磁気共鳴
ＲＴ：室温
ｓ：一重項
Ｔ１／２：半減期
ＴＢＤＭＳ－Ｃｌ：ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルクロリド
Ｔｍａｘ：血漿中濃度がピークに達するまでの時間
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
【0143】
【表1】
【0144】
以下の実施例を参照して本発明をさらに説明するが、これらは本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【0145】
［実施例１］ジメチルアミノ酢酸５－［（Ｚ）－４－クロロ－ベンゾイルイミノ］－２－（４－クロロ－ベンジル）－３－オキソ－［１，２，４］チアジアゾリジン－４－イルメチルエステル（化合物３）の調製
【化42】
【0146】
化合物１：４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミド
化合物１は、ＷＯ２０１１／００４１６２に記載されている手順に従って調製した。
化合物１は、ＷＯ２０１１／００４１６２に記載されている手順に従って調製した。
【0147】
化合物２：４－クロロ－Ｎ－｛２－［（４－クロロフェニル）メチル］－４－（ヒドロキシメチル）－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－５－イリデン｝ベンズアミド
ＴＨＦ（２．０Ｌ）中の化合物１（１００ｇ、０．２６ｍｏｌ）の撹拌している溶液に、Ｅｔ３Ｎ（１５０ｍＬ、１．０５ｍｏｌ）を加え、次いで３７％ホルムアルデヒド（８５ｍＬ、１．０５ｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴにて１２～１４時間撹拌した。
ＴＨＦ（２．０Ｌ）中の化合物１（１００ｇ、０．２６ｍｏｌ）の撹拌している溶液に、Ｅｔ３Ｎ（１５０ｍＬ、１．０５ｍｏｌ）を加え、次いで３７％ホルムアルデヒド（８５ｍＬ、１．０５ｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴにて１２～１４時間撹拌した。
【0148】
次に、反応混合物を濃縮してＴＨＦを除去した。得られた原料をトルエン（２×１００ｍＬ）で処理し、３５～４０℃で減圧下乾燥させ、化合物２を白色固体として得た（１０３ｇ、収率９５．５％）。
【0149】
化合物３：ジメチルアミノ酢酸５－［（Ｚ）－４－クロロ－ベンゾイルイミノ］－２－（４－クロロ－ベンジル）－３－オキソ－［１，２，４］チアジアゾリジン－４－イルメチルエステル
ＴＨＦ（２．０Ｌ）中のＮ，Ｎ－ジメチルグリシン（５０．３ｇ、０．４８ｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（８．９３ｇ、０．０７ｍｏｌ）およびＤＣＣ（１００．６ｇ、０．４８ｍｏｌ）を加えた。１０分後、化合物２（２００ｇ、０．４９ｍｏｌ）を３０分かけて４回に分けて反応混合物に加えた。反応混合物を４０～５０℃で１６～１８時間撹拌した。反応混合物を２０～３０℃に冷却し、Celite（登録商標）でろ過し、ＴＨＦ（２００ｍＬ）で洗浄し、ろ液を濃縮してＴＨＦを除去した。ＭｅＯＨ（３００ｍＬ）を使用して得られた原料を３０分間ＲＴでスラリー化し、ろ過し、ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄した。回収した固体を３５～４０℃で減圧下乾燥させ、化合物３を白色固体として得た（１０２ｇ、収率４２％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.20 (s, 6H), 3.21 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 6.03 (s, 2H), 7.40 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.15 (d, 2H)
LCMS: 495.2 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．５７分において、純度９６．３％
ＴＨＦ（２．０Ｌ）中のＮ，Ｎ－ジメチルグリシン（５０．３ｇ、０．４８ｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（８．９３ｇ、０．０７ｍｏｌ）およびＤＣＣ（１００．６ｇ、０．４８ｍｏｌ）を加えた。１０分後、化合物２（２００ｇ、０．４９ｍｏｌ）を３０分かけて４回に分けて反応混合物に加えた。反応混合物を４０～５０℃で１６～１８時間撹拌した。反応混合物を２０～３０℃に冷却し、Celite（登録商標）でろ過し、ＴＨＦ（２００ｍＬ）で洗浄し、ろ液を濃縮してＴＨＦを除去した。ＭｅＯＨ（３００ｍＬ）を使用して得られた原料を３０分間ＲＴでスラリー化し、ろ過し、ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄した。回収した固体を３５～４０℃で減圧下乾燥させ、化合物３を白色固体として得た（１０２ｇ、収率４２％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.20 (s, 6H), 3.21 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 6.03 (s, 2H), 7.40 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.15 (d, 2H)
LCMS: 495.2 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．５７分において、純度９６．３％
【0150】
［実施例２］ジメチルアミノ酢酸５－［（Ｚ）－４－クロロ－ベンゾイルイミノ］－２－（４－クロロ－ベンジル）－３－オキソ－［１，２，４］チアジアゾリジン－４－イルメチルエステルのクエン酸塩（化合物４）の調製
【化43】
【0151】
アセトン（３０．０ｖ）中のジメチルアミノ酢酸５－［（Ｚ）－４－クロロ－ベンゾイルイミノ］－２－（４－クロロ－ベンジル）－３－オキソ－［１，２，４］チアジアゾリジン－４－イルメチルエステル（化合物３；５５０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、クエン酸（０．９ｅｑ．）を加えた。反応はＲＴにて２．３時間撹拌した。次に、沈殿した化合物をろ過して回収し、乾燥させて化合物４（４５０ｍｇ）を得た。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.20 (s, 6H), 3.21 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 6.03 (s, 2H), 7.40 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.15 (d, 2H)
LCMS: 495.2 [M+H]
ＨＰＬＣ：９．９５分において純度９８．３％
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.20 (s, 6H), 3.21 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 6.03 (s, 2H), 7.40 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.15 (d, 2H)
LCMS: 495.2 [M+H]
ＨＰＬＣ：９．９５分において純度９８．３％
【0152】
［実施例３］２－（｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝カルボニル）ピロリジン－１－イウム トリフルオロアセテート（化合物５）の調製
【化44】
【0153】
（工程１）１－［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］ピロリジン－２－カルボン酸（化合物Ａ２）
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＬ－プロリン（Ａ１）（１．０ｇ、８．６８ｍｍｏｌ）の懸濁液に、トリエチルアミン（１．３４ｍＬ、９．５５ｍｍｏｌ）を０℃で加え、次いでジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（２．１８ｍＬ、９．５５ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物をＲＴにて１６時間撹拌した。反応混合物を５％クエン酸溶液でｐＨ３まで慎重に酸性化した。生成物を酢酸エチルで抽出し、抽出液を乾燥させ、真空中で蒸発させて、化合物Ａ２を白色固体として得た（１．５５ｇ、収率８３％）。
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＬ－プロリン（Ａ１）（１．０ｇ、８．６８ｍｍｏｌ）の懸濁液に、トリエチルアミン（１．３４ｍＬ、９．５５ｍｍｏｌ）を０℃で加え、次いでジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（２．１８ｍＬ、９．５５ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物をＲＴにて１６時間撹拌した。反応混合物を５％クエン酸溶液でｐＨ３まで慎重に酸性化した。生成物を酢酸エチルで抽出し、抽出液を乾燥させ、真空中で蒸発させて、化合物Ａ２を白色固体として得た（１．５５ｇ、収率８３％）。
【0154】
（工程２）１－ｔｅｒｔ－ブチル ２－［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチルピロリジン－１，２－ジカルボンキシレート（化合物Ａ３）
ＴＨＦ（１１ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ａ２（０．５５ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０６ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．５２ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．７ｇ、１．７ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ａ３を白色固体として得た（０．５ｇ、収率５０％）。
ＴＨＦ（１１ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ａ２（０．５５ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０６ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．５２ｇ、２．５６ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．７ｇ、１．７ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ａ３を白色固体として得た（０．５ｇ、収率５０％）。
【0155】
（工程３）２－（｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝カルボニル）ピロリジン－１－イウム トリフルオロアセテート（化合物５）
ジクロロメタン（５ｍＬ）中の化合物Ａ３（０．５ｇ、０．８２ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１ｍＬ、２．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６ｈ撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をメタノール／エーテルで再沈殿させ、真空下でろ過して、化合物５を白色固体として得た（０．２ｇ、収率３９％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 1.90 (m, 2H), 1,98 (m, 1H), 2.22 (m, 1H), 3,18 (m, 2H), 4.48 (m, 1H), 4.84 (s, 2H), 6.13 (s, 2H), 7.42 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.16 (d, 2H)
LCMS: 507.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：１０．０７分において、純度９５．３％
ジクロロメタン（５ｍＬ）中の化合物Ａ３（０．５ｇ、０．８２ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１ｍＬ、２．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６ｈ撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をメタノール／エーテルで再沈殿させ、真空下でろ過して、化合物５を白色固体として得た（０．２ｇ、収率３９％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 1.90 (m, 2H), 1,98 (m, 1H), 2.22 (m, 1H), 3,18 (m, 2H), 4.48 (m, 1H), 4.84 (s, 2H), 6.13 (s, 2H), 7.42 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.16 (d, 2H)
LCMS: 507.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：１０．０７分において、純度９５．３％
【0156】
本実施例の工程１では、Ｌ－プロリン、すなわち天然に存在するアミノ酸のＬ－エナンチオマーを使用した。以降のすべての実施例では、天然に存在するそれぞれのアミノ酸のＬ－エナンチオマー（またはそのアルキル化誘導体および／または保護誘導体）を使用した。
【0157】
［実施例４］６－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－６－オキソヘキサン－１，５－ビス（アミニウム）ジ－トリフルオロアセテート（化合物６）の調製
【化45】
【0158】
（工程１）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサノエート（化合物Ｂ２）
ＴＨＦ（１７ｍＬ、２０Ｖ）中の２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサン酸（化合物Ｂ１；０．８４ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０７４ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．５０ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｂ２を白色固体として得た（０．５ｇ、収率５５％）。
ＴＨＦ（１７ｍＬ、２０Ｖ）中の２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサン酸（化合物Ｂ１；０．８４ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０７４ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．５０ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｂ２を白色固体として得た（０．５ｇ、収率５５％）。
【0159】
（工程２）６－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－６－オキソヘキサン－１，５－ビス（アミニウム）ジ－トリフルオロアセテート（６）
ジクロロメタン（５ｍＬ）中の化合物Ｂ２（０．５ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１ｍＬ、２．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をアセトン／ヘキサンで再沈殿させ、真空下でろ過して、化合物６を白色固体として得た（０．２８ｇ、収率６３％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 1.40 (m, 4H), 1,75 (m, 2H), 2.62 (m, 2H), 4,05 (m, 1H), 4.85 (s, 2H), 6.13 (s, 2H), 7.42 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.16 (d, 2H)
LCMS: 538.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．２８分において、純度９５．０％
ジクロロメタン（５ｍＬ）中の化合物Ｂ２（０．５ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１ｍＬ、２．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をアセトン／ヘキサンで再沈殿させ、真空下でろ過して、化合物６を白色固体として得た（０．２８ｇ、収率６３％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 1.40 (m, 4H), 1,75 (m, 2H), 2.62 (m, 2H), 4,05 (m, 1H), 4.85 (s, 2H), 6.13 (s, 2H), 7.42 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.16 (d, 2H)
LCMS: 538.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．２８分において、純度９５．０％
【0160】
［実施例５］（６－アザニウミル（azaniumyl）－１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－１－オキソヘキサン－２－イル）ジメチルアザニウム ジ－トリフルオロアセテート（化合物７）の調製
【化46】
【0161】
（工程１）６－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－２－（ジメチルアミノ）ヘキサン酸（化合物Ｃ２）
メタノール（２０ｍＬ）中のＢｏｃ－Ｌｙｓ－ＯＨ（Ｃ１）（２．０ｇ、８．１ｍｍｏｌ）の溶液に、３７％ホルムアルデヒド（２．６ｍＬ、３２．４ｍｍｏｌ）、次いでＰｄ／Ｃ（０．２ｇ、１０％ｗ／ｗ）を加え、得られた混合物をｐａｒｒ装置（５ｋｇ、Ｈ２圧）で１６時間、水素添加した。反応終了後、反応混合物をCelite（登録商標）でろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をエーテルで粉末にし、化合物Ｃ２を白色固体として得た（１．５ｇ、収率６７％）。
メタノール（２０ｍＬ）中のＢｏｃ－Ｌｙｓ－ＯＨ（Ｃ１）（２．０ｇ、８．１ｍｍｏｌ）の溶液に、３７％ホルムアルデヒド（２．６ｍＬ、３２．４ｍｍｏｌ）、次いでＰｄ／Ｃ（０．２ｇ、１０％ｗ／ｗ）を加え、得られた混合物をｐａｒｒ装置（５ｋｇ、Ｈ２圧）で１６時間、水素添加した。反応終了後、反応混合物をCelite（登録商標）でろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をエーテルで粉末にし、化合物Ｃ２を白色固体として得た（１．５ｇ、収率６７％）。
【0162】
（工程２）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ６－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－２－（ジメチルアミノ）ヘキサノエート（化合物Ｃ３）
ＴＨＦ（１４ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｃ２（０．６６ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０３５ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．５０ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．４ｇ、０．９７ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィー（８：２ アセトニトリルおよび水）で精製して、化合物Ｃ３を白色固体として得た（０．１８ｇ、収率６４．９％）。
ＴＨＦ（１４ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｃ２（０．６６ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０３５ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．５０ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．４ｇ、０．９７ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィー（８：２ アセトニトリルおよび水）で精製して、化合物Ｃ３を白色固体として得た（０．１８ｇ、収率６４．９％）。
【0163】
（工程３）（６－アザニウミル－１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－１－オキソヘキサン－２－イル）ジメチルアザニウム ジ－トリフルオロアセテート（化合物７）
ジクロロメタン（３．６ｍＬ）中の化合物Ｃ３（０．１８ｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（０．３６ｍＬ、２．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で３時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をアセトン／ヘキサンで再沈殿させ、真空下でろ過して、化合物７をオフホワイトの固体として得た（０．１５ｇ、収率８１％）。
1H NMR (400 MHz, D2O) δ (ppm): 1.24 (m, 2H), 1,39 (m, 2H), 1.80 (m, 2H), 2.73 (s, 6H), 4.77 (s, 2H), 6.16 (m, 2H), 7.35 (dd, 4H), 7.58 (d, 2H), 8.12 (d, 2H)
LCMS: 566.4 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．０９分において、純度９７．５％
ジクロロメタン（３．６ｍＬ）中の化合物Ｃ３（０．１８ｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（０．３６ｍＬ、２．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で３時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をアセトン／ヘキサンで再沈殿させ、真空下でろ過して、化合物７をオフホワイトの固体として得た（０．１５ｇ、収率８１％）。
1H NMR (400 MHz, D2O) δ (ppm): 1.24 (m, 2H), 1,39 (m, 2H), 1.80 (m, 2H), 2.73 (s, 6H), 4.77 (s, 2H), 6.16 (m, 2H), 7.35 (dd, 4H), 7.58 (d, 2H), 8.12 (d, 2H)
LCMS: 566.4 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．０９分において、純度９７．５％
【0164】
［実施例６］（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）（メチル）アザニウム トリフルオロアセテート（化合物８）の調製
【化47】
【0165】
（工程１）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］（メチル）アミノ｝アセテート（Ｄ２）
ＴＨＦ（１２ｍＬ、２０Ｖ）中のＮ－Ｂｏｃサルコシン（化合物Ｄ１；０．５７ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｄ２を白色固体として得た（０．２２ｇ、収率３１％）。
ＴＨＦ（１２ｍＬ、２０Ｖ）中のＮ－Ｂｏｃサルコシン（化合物Ｄ１；０．５７ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｄ２を白色固体として得た（０．２２ｇ、収率３１％）。
【0166】
（工程２）（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）（メチル）アザニウム トリフルオロアセテート（化合物８）
ジクロロメタン（４．０ｍＬ）中の化合物Ｄ２（０．２ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（０．４ｍＬ、２．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物８を白色固体として得た（０．１７ｇ、収率８４％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.57 (s, 3H), 4.09 (s, 2H), 4.85 (s, 2H), 6.13 (m, 2H), 7.42 (dd, 4H), 7.64 (d, 2H), 8.17 (d, 2H)
LCMS: 481.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．９１分において、純度９８．６％
ジクロロメタン（４．０ｍＬ）中の化合物Ｄ２（０．２ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（０．４ｍＬ、２．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物８を白色固体として得た（０．１７ｇ、収率８４％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.57 (s, 3H), 4.09 (s, 2H), 4.85 (s, 2H), 6.13 (m, 2H), 7.42 (dd, 4H), 7.64 (d, 2H), 8.17 (d, 2H)
LCMS: 481.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．９１分において、純度９８．６％
【0167】
［実施例７］２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエタン－１－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物９）の調製
【化48】
【0168】
（工程１）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝アセテート（化合物Ｅ２）
ＴＨＦ（１１ｍＬ、２０Ｖ）中のＮ－Ｂｏｃグリシン（化合物Ｅ１；０．５３ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に、化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｅ２を白色固体として得た（０．３２ｇ、収率４６％）。
ＴＨＦ（１１ｍＬ、２０Ｖ）中のＮ－Ｂｏｃグリシン（化合物Ｅ１；０．５３ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に、化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｅ２を白色固体として得た（０．３２ｇ、収率４６％）。
【0169】
（工程２）２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエタン－１－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物９）
ジクロロメタン（３．０ｍＬ）中の化合物Ｅ２（０．３ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（０．６ｍＬ、２．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物９を白色固体として得た（０．２３ｇ、収率７６％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 3.91 (s, 2H), 4.85 (s, 2H), 6.13 (m, 2H), 7.42 (dd, 4H), 7.64 (d, 2H), 8.17 (d, 2H)
LCMS: 467.2 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．５５分において、純度９８．２％
ジクロロメタン（３．０ｍＬ）中の化合物Ｅ２（０．３ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（０．６ｍＬ、２．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物９を白色固体として得た（０．２３ｇ、収率７６％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 3.91 (s, 2H), 4.85 (s, 2H), 6.13 (m, 2H), 7.42 (dd, 4H), 7.64 (d, 2H), 8.17 (d, 2H)
LCMS: 467.2 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．５５分において、純度９８．２％
【0170】
［実施例８］２－（｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝カルボニル）－１－メチルピロリジン（化合物１０）の調製
【化49】
【0171】
（工程１）１－メチルピロリジン－２－カルボン酸（化合物Ｆ１）
メタノール（２０ｍＬ）中のＬ－プロリン（化合物Ａ１；２．０ｇ、１７．３７ｍｍｏｌ）の溶液に、３７％ホルムアルデヒド（１．５４ｍＬ、１９．１ｍｍｏｌ）、次いでＰｄ／Ｃ（０．５ｇ、２５％ｗ／ｗ）を加え、得られた混合物をＰａｒｒ装置（１ｋｇ Ｈ２圧力）で１６時間水素添加した。反応終了後、反応混合物をCelite（登録商標）でろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をエーテルで粉末にし、化合物Ｆ１を白色固体として得た（１．９ｇ、収率８４％）。
メタノール（２０ｍＬ）中のＬ－プロリン（化合物Ａ１；２．０ｇ、１７．３７ｍｍｏｌ）の溶液に、３７％ホルムアルデヒド（１．５４ｍＬ、１９．１ｍｍｏｌ）、次いでＰｄ／Ｃ（０．５ｇ、２５％ｗ／ｗ）を加え、得られた混合物をＰａｒｒ装置（１ｋｇ Ｈ２圧力）で１６時間水素添加した。反応終了後、反応混合物をCelite（登録商標）でろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をエーテルで粉末にし、化合物Ｆ１を白色固体として得た（１．９ｇ、収率８４％）。
【0172】
（工程２）２－（｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝カルボニル）－１－メチルピロリジン－１－イウム トリフルオロアセテート（化合物１０）
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｆ１（０．３９ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０７４ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、０．１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製し、次いでアセトン／ジエチルエーテルを使用して再沈殿し、化合物１０を白色固体として得た（０．２５ｇ、収率３９％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 1.83 (br, 1H), 2,03 (m, 2h), 2.40 (br, 1H), 2,87 (br, 1H), 3,13 (br, 1H), 3.57 (br, 1H), 4.85 (s, 2H), 6.13 (m, 2H), 7.41 (dd, 4H), 7.64 (d, 2H), 8.15(d, 2H)
LCMS: 521.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：９．１６分において、純度９６．９％
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｆ１（０．３９ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０７４ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、０．１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製し、次いでアセトン／ジエチルエーテルを使用して再沈殿し、化合物１０を白色固体として得た（０．２５ｇ、収率３９％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 1.83 (br, 1H), 2,03 (m, 2h), 2.40 (br, 1H), 2,87 (br, 1H), 3,13 (br, 1H), 3.57 (br, 1H), 4.85 (s, 2H), 6.13 (m, 2H), 7.41 (dd, 4H), 7.64 (d, 2H), 8.15(d, 2H)
LCMS: 521.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：９．１６分において、純度９６．９％
【0173】
［実施例９］１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－１－オキソプロパン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物１１）の調製
【化50】
【0174】
（工程１）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝プロパノエート（化合物Ｇ２）
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中のＮ－Ｂｏｃアラニン（化合物Ｇ１）（０．５７ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｇ２を白色固体として得た（０．３１ｇ、収率４３％）。
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中のＮ－Ｂｏｃアラニン（化合物Ｇ１）（０．５７ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｇ２を白色固体として得た（０．３１ｇ、収率４３％）。
【0175】
（工程２）１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－１－オキソプロパン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物１１）
ジクロロメタン（３．０ｍＬ）中の化合物Ｇ２（０．３ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（０．９ｍＬ、３．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物１１を白色固体として得た（０．１４ｇ、収率４５％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 1.33 (d, 3H), 4.19 (t, 1h), 4.85 (s, 2H), 6.12 (m, 2H), 7.41 (dd, 4H), 7.64 (m, 1H), 8.15(d, 2H)
LCMS: 481.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：９．１４分において、純度９５．７％
ジクロロメタン（３．０ｍＬ）中の化合物Ｇ２（０．３ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（０．９ｍＬ、３．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物１１を白色固体として得た（０．１４ｇ、収率４５％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 1.33 (d, 3H), 4.19 (t, 1h), 4.85 (s, 2H), 6.12 (m, 2H), 7.41 (dd, 4H), 7.64 (m, 1H), 8.15(d, 2H)
LCMS: 481.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：９．１４分において、純度９５．７％
【0176】
［実施例１０］１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－３－メチル－１－オキソペンタン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物１２）の調製
【化51】
【0177】
（工程１）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－メチルペンタノエート（化合物Ｈ２）
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中のＮ－Ｂｏｃイソロイシン（化合物Ｈ１；０．５６ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｈ２を白色固体として得た（０．４ｇ、収率５２％）。
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中のＮ－Ｂｏｃイソロイシン（化合物Ｈ１；０．５６ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｈ２を白色固体として得た（０．４ｇ、収率５２％）。
【0178】
（工程２）１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－３－メチル－１－オキソペンタン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物１２）
ジクロロメタン（３．０ｍＬ）中の化合物Ｈ２（０．４ｇ、０．６４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１．２ｍＬ、３．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物１２を白色固体として得た（０．２２ｇ、収率５３％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 0.67 (t, 3H), 0.84 (d, 2H), 1.15 (m, 1H), 1.33 (m, 1H), 1.81 (br, 1H), 4.10 (s, 1h), 4.86 (s, 2H), 6.03 (d, 1H), 6.20 (d, 1H), 7.45 (dd, 4H), 7.64 (d, 1H), 8.17(d, 2H)
LCMS: 523.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：１０．３８分において、純度９８．０％
ジクロロメタン（３．０ｍＬ）中の化合物Ｈ２（０．４ｇ、０．６４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１．２ｍＬ、３．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物１２を白色固体として得た（０．２２ｇ、収率５３％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 0.67 (t, 3H), 0.84 (d, 2H), 1.15 (m, 1H), 1.33 (m, 1H), 1.81 (br, 1H), 4.10 (s, 1h), 4.86 (s, 2H), 6.03 (d, 1H), 6.20 (d, 1H), 7.45 (dd, 4H), 7.64 (d, 1H), 8.17(d, 2H)
LCMS: 523.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：１０．３８分において、純度９８．０％
【0179】
［実施例１１］［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－（ジメチルアミノ）－３－フェニルプロパノエート（化合物１３）の調製
【化52】
【0180】
（工程１）２－（ジメチルアミノ）－３－フェニルプロパン酸（化合物Ｉ２）
メタノール（２０ｍＬ）中のＰｈｅ－Ａｌａ－ＯＨ（化合物Ｉ１；１．０ｇ、６．０５ｍｍｏｌ）の溶液に、３７％ホルムアルデヒド（１．９６ｍＬ、２４．２１ｍｍｏｌ）を加え、次いでＰｄ／Ｃ（０．１ｇ、１０％ｗ／ｗ）を加え、得られた混合物をｐａｒｒ装置（５ｋｇ Ｈ２圧力）で１６時間水素添加した。反応終了後、反応混合物をCelite（登録商標）でろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をエーテルで粉末にし、化合物Ｉ２を白色固体として得た（１．０ｇ、収率８６％）。
メタノール（２０ｍＬ）中のＰｈｅ－Ａｌａ－ＯＨ（化合物Ｉ１；１．０ｇ、６．０５ｍｍｏｌ）の溶液に、３７％ホルムアルデヒド（１．９６ｍＬ、２４．２１ｍｍｏｌ）を加え、次いでＰｄ／Ｃ（０．１ｇ、１０％ｗ／ｗ）を加え、得られた混合物をｐａｒｒ装置（５ｋｇ Ｈ２圧力）で１６時間水素添加した。反応終了後、反応混合物をCelite（登録商標）でろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をエーテルで粉末にし、化合物Ｉ２を白色固体として得た（１．０ｇ、収率８６％）。
【0181】
（工程２）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－（ジメチルアミノ）－３－フェニルプロパノエート（化合物１３）
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｉ２（０．４７ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物１３を白色固体として得た（０．２２ｇ、収率３０％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.49 (s, 6H), 2.92 (m, 2h), 3.51 (t, 1H), 4.89 (s, 2h), 5.97 (m, 2H), 7.07 (m, 5H), 7.40 (d, 2H), 7.45 (d, 2H), 7.64 (d, 2H), 8.15 (d, 2H)
LCMS: 586.0 [M+H]
ＨＰＬＣ：１１．５４分において、純度９７．５％
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｉ２（０．４７ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物１３を白色固体として得た（０．２２ｇ、収率３０％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.49 (s, 6H), 2.92 (m, 2h), 3.51 (t, 1H), 4.89 (s, 2h), 5.97 (m, 2H), 7.07 (m, 5H), 7.40 (d, 2H), 7.45 (d, 2H), 7.64 (d, 2H), 8.15 (d, 2H)
LCMS: 586.0 [M+H]
ＨＰＬＣ：１１．５４分において、純度９７．５％
【0182】
［実施例１２］１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物１４）の調製
【化53】
【0183】
（工程１）２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－フェニルプロパン酸（化合物Ｊ１）
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＰｈｅ－Ａｌａ－ＯＨ（化合物Ｉ１；１．０ｇ、６．０５ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（１．７０ｍＬ、１２．１７ｍｍｏｌ）を０℃で加え、次いでジ－ｔｅｒｔ－ブチル ピロカーボネート（２．１８ｍＬ、９．０８ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を５％クエン酸溶液でｐＨ４まで慎重に酸性化した。生成物をＤＣＭで抽出し、抽出液を乾燥させ、真空中で蒸発させ、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｊ１を無色ワックスとして得た（１．３ｇ、収率８１％）。
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＰｈｅ－Ａｌａ－ＯＨ（化合物Ｉ１；１．０ｇ、６．０５ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（１．７０ｍＬ、１２．１７ｍｍｏｌ）を０℃で加え、次いでジ－ｔｅｒｔ－ブチル ピロカーボネート（２．１８ｍＬ、９．０８ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を５％クエン酸溶液でｐＨ４まで慎重に酸性化した。生成物をＤＣＭで抽出し、抽出液を乾燥させ、真空中で蒸発させ、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｊ１を無色ワックスとして得た（１．３ｇ、収率８１％）。
【0184】
（工程２）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－フェニルプロパノエート（化合物Ｊ２）
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｊ１（０．６４ｇ、２．４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｊ２を白色固体として得た（０．３ｇ、収率３７％）。
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｊ１（０．６４ｇ、２．４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｊ２を白色固体として得た（０．３ｇ、収率３７％）。
【0185】
（工程３）１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物１４）
ジクロロメタン（３．０ｍＬ）中の化合物Ｊ２（０．３ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（０．９ｍＬ、３．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物１４を白色固体として得た（０．２ｇ、収率６６％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.98 (m, 1H), 3.14 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.85 (s, 2h), 5.877 (s, 1H), 6.20 (d, 1H), 7.07 (m, 5H), 7.41 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 7.64 (d, 2H), 8.16 (d, 2H)
LCMS: 558.0 [M+H]
ＨＰＬＣ：１０．４７分において、純度９８．６％
ジクロロメタン（３．０ｍＬ）中の化合物Ｊ２（０．３ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（０．９ｍＬ、３．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物１４を白色固体として得た（０．２ｇ、収率６６％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.98 (m, 1H), 3.14 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.85 (s, 2h), 5.877 (s, 1H), 6.20 (d, 1H), 7.07 (m, 5H), 7.41 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 7.64 (d, 2H), 8.16 (d, 2H)
LCMS: 558.0 [M+H]
ＨＰＬＣ：１０．４７分において、純度９８．６％
【0186】
［実施例１３］１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－４－メチル－１－オキソペンタン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物１５）の調製
【化54】
【0187】
（工程１）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－４－メチルペンタノエート（化合物Ｋ２）
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中の２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－４－メチルペンタン酸（化合物Ｋ１；０．５６ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｋ２を白色固体として得た（０．４ｇ、収率７５％）。
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中の２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－４－メチルペンタン酸（化合物Ｋ１；０．５６ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｋ２を白色固体として得た（０．４ｇ、収率７５％）。
【0188】
（工程２）１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－４－メチル－１－オキソペンタン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物１５）
ジクロロメタン（３．０ｍＬ）中の化合物Ｋ２（０．３５ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１．０５ｍＬ、３．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物１５を白色固体として得た（０．２７ｇ、収率９３％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.98 (m, 1H), 3.14 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.85 (s, 2h), 5.877 (s, 1H), 6.20 (d, 1H), 7.07 (m, 5H), 7.41 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 7.64 (d, 2H), 8.16 (d, 2H)
LCMS: 523.4 [M+H]
ＨＰＬＣ：１０．５６分において、純度９８．０％
ジクロロメタン（３．０ｍＬ）中の化合物Ｋ２（０．３５ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１．０５ｍＬ、３．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物１５を白色固体として得た（０．２７ｇ、収率９３％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.98 (m, 1H), 3.14 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.85 (s, 2h), 5.877 (s, 1H), 6.20 (d, 1H), 7.07 (m, 5H), 7.41 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 7.64 (d, 2H), 8.16 (d, 2H)
LCMS: 523.4 [M+H]
ＨＰＬＣ：１０．５６分において、純度９８．０％
【0189】
［実施例１４］１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－３－ヒドロキシ－１－オキソプロパン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物１６）の調製
【化55】
【0190】
（工程１）２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－［（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ］プロパン酸（化合物Ｌ２）
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＢｏｃ－Ｓｅｒ－ＯＨ（化合物Ｌ１；１．０ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でイミダゾール（０．５３ｍｇ、７．７９ｍｍｏｌ）を加え、次いでＴＢＤＭＳ－Ｃｌ（１．１０ｇ、７．３０ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。生成物をＤＣＭで抽出し、抽出物を乾燥させ、真空中で蒸発させ、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｌ２を無色ワックスとして得た（０．７ｇ、収率４６％）。
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＢｏｃ－Ｓｅｒ－ＯＨ（化合物Ｌ１；１．０ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でイミダゾール（０．５３ｍｇ、７．７９ｍｍｏｌ）を加え、次いでＴＢＤＭＳ－Ｃｌ（１．１０ｇ、７．３０ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。生成物をＤＣＭで抽出し、抽出物を乾燥させ、真空中で蒸発させ、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｌ２を無色ワックスとして得た（０．７ｇ、収率４６％）。
【0191】
（工程２）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－［（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ］プロパノエート（化合物Ｌ３）
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｌ２（０．７７ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｌ３を白色固体として得た（０．４ｇ、収率４６％）。
ＴＨＦ（１０ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｌ２（０．７７ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｌ３を白色固体として得た（０．４ｇ、収率４６％）。
【0192】
（工程３）１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－３－ヒドロキシ－１－オキソプロパン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物１６）
ジクロロメタン（４．０ｍＬ）中の化合物Ｌ３（０．４ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１．２ｍＬ、３．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣を逆相カラムクロマトグラフィーで精製し、化合物１６を白色固体として得た（０．１ｇ、収率２９％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 3.80 (m, 2H), 4.27 (m, 1H), 4.85 (s, 2h), 5.60 (t, 1H), 6.12 (q, 2H), 7.07 (m, 5H), 7.44 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.18 (d, 2H)
LCMS: 497.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．５２分において、純度９１．６％
ジクロロメタン（４．０ｍＬ）中の化合物Ｌ３（０．４ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１．２ｍＬ、３．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣を逆相カラムクロマトグラフィーで精製し、化合物１６を白色固体として得た（０．１ｇ、収率２９％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 3.80 (m, 2H), 4.27 (m, 1H), 4.85 (s, 2h), 5.60 (t, 1H), 6.12 (q, 2H), 7.07 (m, 5H), 7.44 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.18 (d, 2H)
LCMS: 497.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．５２分において、純度９１．６％
【0193】
［実施例１５］３－カルボキシ－１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－１－オキソプロパン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物１７）の調製
【化56】
【0194】
（工程１）４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－４－オキソブタン酸（化合物Ｍ２）
ジオキサン：水（７：３、２０ｍＬ）中のＬ－アスパラギン酸４－ｔｅｒｔ－ブチルエステル（化合物Ｍ１；２．０ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＯＨ（０．８４ｇ、２１．１ｍｍｏｌ）、次いでジ－ｔｅｒｔ－ブチル ピロカーボネート（３．６４ｍＬ、１５．８５ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を１．５Ｎ ＨＣｌ酸溶液でｐＨ３まで慎重に酸性化した。生成物を酢酸エチルで抽出し、抽出物を真空中で乾燥および蒸発させて、化合物Ｍ２を白色固体として得た（２．５ｇ、収率８１％）。
ジオキサン：水（７：３、２０ｍＬ）中のＬ－アスパラギン酸４－ｔｅｒｔ－ブチルエステル（化合物Ｍ１；２．０ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＯＨ（０．８４ｇ、２１．１ｍｍｏｌ）、次いでジ－ｔｅｒｔ－ブチル ピロカーボネート（３．６４ｍＬ、１５．８５ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を１．５Ｎ ＨＣｌ酸溶液でｐＨ３まで慎重に酸性化した。生成物を酢酸エチルで抽出し、抽出物を真空中で乾燥および蒸発させて、化合物Ｍ２を白色固体として得た（２．５ｇ、収率８１％）。
【0195】
（工程２）ｔｅｒｔ－ブチル １－［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝ブタンジオエート（化合物Ｍ３）
ＴＨＦ（１８ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｍ２（０．８８ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｍ３を白色固体として得た（０．４５ｇ、収率５４％）。
ＴＨＦ（１８ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｍ２（０．８８ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．６２ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。反応混合物に化合物２（０．５ｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｍ３を白色固体として得た（０．４５ｇ、収率５４％）。
【0196】
（工程３）３－カルボキシ－１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－１－オキソプロパン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物１７）
ジクロロメタン（４．５ｍＬ）中の化合物Ｍ３（０．４５ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（０．９ｍＬ、２．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で６時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣を逆相カラムクロマトグラフィーで精製し、化合物１７を白色固体として得た（０．１２ｇ、収率２８％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.85 (m, 2H), 4.41 (m, 1H), 4.84 (s, 2h), 6.12 (dd, 2H), 6.12 (q, 2H), 7.45 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.18 (d, 2H)
LCMS: 525.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．２９分において、純度９４．２％
ジクロロメタン（４．５ｍＬ）中の化合物Ｍ３（０．４５ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（０．９ｍＬ、２．０ｖｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で６時間撹拌した。反応混合物を濃縮してジクロロメタンを除去した。得られた残渣を逆相カラムクロマトグラフィーで精製し、化合物１７を白色固体として得た（０．１２ｇ、収率２８％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.85 (m, 2H), 4.41 (m, 1H), 4.84 (s, 2h), 6.12 (dd, 2H), 6.12 (q, 2H), 7.45 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.18 (d, 2H)
LCMS: 525.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．２９分において、純度９４．２％
【0197】
［実施例１６］［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２－アザニウミル－３－フェニルプロパンアミド］アセテート クロリド（化合物１８）の調製
【化57】
【0198】
（工程２）２－［（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－フェニルプロパンアミド］酢酸メチル（Ｎ２）の調製
ＤＣＭ（５２ｍＬ、２０Ｖ）中の（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－フェニルプロパン酸（上記のように合成したＪ１；２．６ｇ、９．８ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でＤＣＣ（２．４２ｇ、１１．７６ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１１９ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．７１ｍＬ、１９．６ｍｍｏｌ）を加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に２－アミノ酢酸メチル塩酸塩（化合物Ｎ１）（１．６ｇ、１２．７４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物をろ過して副生成物（尿素）を除去し、ろ液を濃縮し、シリカゲル（６０～１２０メッシュ）カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｎ２をオフホワイトの固体として得た（２．７３ｇ、収率８３％）。
ＤＣＭ（５２ｍＬ、２０Ｖ）中の（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－フェニルプロパン酸（上記のように合成したＪ１；２．６ｇ、９．８ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でＤＣＣ（２．４２ｇ、１１．７６ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１１９ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．７１ｍＬ、１９．６ｍｍｏｌ）を加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に２－アミノ酢酸メチル塩酸塩（化合物Ｎ１）（１．６ｇ、１２．７４ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物をろ過して副生成物（尿素）を除去し、ろ液を濃縮し、シリカゲル（６０～１２０メッシュ）カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｎ２をオフホワイトの固体として得た（２．７３ｇ、収率８３％）。
【0199】
（工程３）２－［（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－フェニルプロパンアミド］酢酸（化合物Ｎ３）の調製
メタノール（３０ｍＬ、１０Ｖ）中の化合物Ｎ２（３．０ｇ、８．９１ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃で２Ｍ ＮａＯＨ溶液（１２ｍＬ、４Ｖ）を加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物を濃縮して揮発物を除去し、水（５０ｍＬ）で希釈し、ＭＴＢＥ（１００ｍＬ）で洗浄した。水層を１．５Ｎ ＨＣｌ溶液でｐＨ４～５に慎重に酸性化し、酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた残渣をヘキサン（５０ｍＬ×２）で洗浄し、化合物Ｎ３を白色固体として得た（１．６ｇ、収率５６％）。
メタノール（３０ｍＬ、１０Ｖ）中の化合物Ｎ２（３．０ｇ、８．９１ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃で２Ｍ ＮａＯＨ溶液（１２ｍＬ、４Ｖ）を加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物を濃縮して揮発物を除去し、水（５０ｍＬ）で希釈し、ＭＴＢＥ（１００ｍＬ）で洗浄した。水層を１．５Ｎ ＨＣｌ溶液でｐＨ４～５に慎重に酸性化し、酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。得られた残渣をヘキサン（５０ｍＬ×２）で洗浄し、化合物Ｎ３を白色固体として得た（１．６ｇ、収率５６％）。
【0200】
（工程４）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－フェニルプロパンアミド］アセテート（化合物Ｎ４）の調製
ＴＨＦ（３２ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｎ３（１．６ｇ、４．９６ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＣＣ（１．５３ｇ、７．４５ｍｍｏｌ）、次いでＤＭＡＰ（０．３ｇ、２．４８ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。得られた反応混合物に４－クロロ－Ｎ－｛２－［（４－クロロフェニル）メチル］－４－（ヒドロキシメチル）－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－５－イリデン｝ベンズアミド ６（１．４２ｇ、３．４７ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｎ４を白色固体として得た（３５４ｍｇ、収率１０％）。
ＴＨＦ（３２ｍＬ、２０Ｖ）中の化合物Ｎ３（１．６ｇ、４．９６ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＣＣ（１．５３ｇ、７．４５ｍｍｏｌ）、次いでＤＭＡＰ（０．３ｇ、２．４８ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。得られた反応混合物に４－クロロ－Ｎ－｛２－［（４－クロロフェニル）メチル］－４－（ヒドロキシメチル）－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－５－イリデン｝ベンズアミド ６（１．４２ｇ、３．４７ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｎ４を白色固体として得た（３５４ｍｇ、収率１０％）。
【0201】
（工程５）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２－アザニウミル－３－フェニルプロパンアミド］アセテート クロリド（化合物１８）の調製
ＴＨＦ（１．０ｍＬ、５ｖｏｌ）中の化合物Ｎ４（０．２ｇ、０．２７９ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ジエチルエーテル中（４．０ｍＬ、２０ｖｏｌ）の塩酸を０～５℃で加え、反応混合物を同じ温度で２０分間撹拌した。反応物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして、化合物１８を白色固体として得た（１５０ｍｇ、収率８３％）。
1H NMR (300 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.94 (m, 1H), 3.15 (m, 1H), 4.05 (m, 3h), 4.84 (s, 2H), 6.07 (s, 2H), 7.27 (m, 5H), 7.42 (q, 4H), 7.62 (d, 2H), 8.17 (m, 2H), 8,23 (br, 2h, NH), ), 9.14 (t, 1H, NH)
LCMS: 614.31 [M+H]
ＨＰＬＣ：１１．８２分において、純度９７．３５％
ＴＨＦ（１．０ｍＬ、５ｖｏｌ）中の化合物Ｎ４（０．２ｇ、０．２７９ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ジエチルエーテル中（４．０ｍＬ、２０ｖｏｌ）の塩酸を０～５℃で加え、反応混合物を同じ温度で２０分間撹拌した。反応物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして、化合物１８を白色固体として得た（１５０ｍｇ、収率８３％）。
1H NMR (300 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.94 (m, 1H), 3.15 (m, 1H), 4.05 (m, 3h), 4.84 (s, 2H), 6.07 (s, 2H), 7.27 (m, 5H), 7.42 (q, 4H), 7.62 (d, 2H), 8.17 (m, 2H), 8,23 (br, 2h, NH), ), 9.14 (t, 1H, NH)
LCMS: 614.31 [M+H]
ＨＰＬＣ：１１．８２分において、純度９７．３５％
【0202】
［実施例１７］［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｓ）－２－［（２Ｓ）－２－アザニウミル－３－メチルブタンアミド］－３－メチルブタノエート クロリド（化合物１９）の調製
【化58】
【0203】
（工程１）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－メチルブタノエート（化合物Ｏ２）の調製
ＴＨＦ（６０ｍＬ、２０Ｖ）中の（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－メチルブタノン酸（Ｏ１；３．０ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．８４ｇ、６．９１ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（４．２７ｇ、２０．７３ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に化合物２（２．８３ｇ、６．９１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、得られた反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物をジクロロメタン（２００ｍＬ）で希釈し、水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で濃縮して化合物Ｏ２を白色固体として得た（６．０ｇ、７７％）。
ＴＨＦ（６０ｍＬ、２０Ｖ）中の（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－メチルブタノン酸（Ｏ１；３．０ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．８４ｇ、６．９１ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（４．２７ｇ、２０．７３ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に化合物２（２．８３ｇ、６．９１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、得られた反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物をジクロロメタン（２００ｍＬ）で希釈し、水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で濃縮して化合物Ｏ２を白色固体として得た（６．０ｇ、７７％）。
【0204】
注：粗化合物Ｏ２は精製することなく次の工程に進めた。
【0205】
（工程２）（２Ｓ）－１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－３－メチル－１－オキソブタン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物Ｏ３）の調製
ジクロロメタン（２５ｍＬ）中の［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－メチルブタノエート（化合物Ｏ２；６．０ｇ、９．８５ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（２４ｍＬ、４．０ｖｏｌ）を加え、周囲温度（２５～３０℃）で４時間撹拌した。反応混合物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をエーテルで粉末にし、真空下でろ過して、化合物Ｏ３を白色固体として得た（１．５ｇ、収率２４％）。
ジクロロメタン（２５ｍＬ）中の［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－メチルブタノエート（化合物Ｏ２；６．０ｇ、９．８５ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（２４ｍＬ、４．０ｖｏｌ）を加え、周囲温度（２５～３０℃）で４時間撹拌した。反応混合物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をエーテルで粉末にし、真空下でろ過して、化合物Ｏ３を白色固体として得た（１．５ｇ、収率２４％）。
【0206】
（工程３）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｓ）－２－（２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－メチルブタンアミド）－３－メチルブタノエート（化合物Ｏ４）の調製
ＴＨＦ（３０ｍＬ、２０Ｖ）中の（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－メチルブタン酸（化合物Ｏ１；１．３０ｇ、６．０２ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０８８ｇ、０．７２ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（１．３９ｇ、６．７５ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に（２Ｓ）－１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－３－メチル－１－オキソブタン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物Ｏ３；１．５ｇ、２．４１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｏ４を白色固体として得た（０．６５ｇ、収率３７％）。
ＴＨＦ（３０ｍＬ、２０Ｖ）中の（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－メチルブタン酸（化合物Ｏ１；１．３０ｇ、６．０２ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０８８ｇ、０．７２ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（１．３９ｇ、６．７５ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に（２Ｓ）－１－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－３－メチル－１－オキソブタン－２－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物Ｏ３；１．５ｇ、２．４１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｏ４を白色固体として得た（０．６５ｇ、収率３７％）。
【0207】
（工程４）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｓ）－２－［（２Ｓ）－２－アザニウミル－３－メチルブタンアミド］－３－メチルブタノエート トリフルオロアセテート（化合物Ｏ５）の調製
ジクロロメタン（２５ｍＬ）中の［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｓ）－２－（２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－メチルブタンアミド）－３－メチルブタノエート（化合物Ｏ４；０．６６ｇ、０．９３ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１．９８ｍＬ、３．０ｖｏｌ）を加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で４時間撹拌した。反応混合物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をエーテルで粉末にし、真空下でろ過して、化合物Ｏ５を白色固体として得た（０．４５ｇ、収率６７％）。
ジクロロメタン（２５ｍＬ）中の［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｓ）－２－（２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－メチルブタンアミド）－３－メチルブタノエート（化合物Ｏ４；０．６６ｇ、０．９３ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１．９８ｍＬ、３．０ｖｏｌ）を加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で４時間撹拌した。反応混合物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をエーテルで粉末にし、真空下でろ過して、化合物Ｏ５を白色固体として得た（０．４５ｇ、収率６７％）。
【0208】
（工程５）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｓ）－２－［（２Ｓ）－２－アザニウミル－３－メチルブタンアミド］－３－メチルブタノエート クロリド（化合物１９）の調製
ＴＨＦ（２．２５ｍＬ、５．０ｖｏｌ）中の［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｓ）－２－［（２Ｓ）－２－アザニウミル－３－メチルブタンアミド］－３－メチルブタノエート トリフルオロアセテート（化合物Ｏ５；０．４５ｇ、０．６２ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ジエチルエーテル（９．０ｍＬ、２０ｖｏｌ）中のＨＣｌを０～５℃で加え、反応混合物を同じ温度で２０分間撹拌した。反応物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして化合物１９を白色固体として得た（２４０ｍｇ、収率６０％）。
1H NMR (300 MHz, DMSO) δ (ppm): 0.8-0.9 (bm, 12H, -CH3), 2,07 (m, 2H), 3.7 (dd, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.84 (s, 2h), 5.97 (dd, 1H), 6.11 (q, 1H), 7.43 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.15 (m, 2K), 8.19 (m, 3H, NH3+), 8.6 (m, 1H, NH)
LCMS: 608.53 [M+H]
ＨＰＬＣ：１１．１２５分において純度７９．５％および１１．９７分において純度１７．３％（回転異性体）
ＴＨＦ（２．２５ｍＬ、５．０ｖｏｌ）中の［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｓ）－２－［（２Ｓ）－２－アザニウミル－３－メチルブタンアミド］－３－メチルブタノエート トリフルオロアセテート（化合物Ｏ５；０．４５ｇ、０．６２ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ジエチルエーテル（９．０ｍＬ、２０ｖｏｌ）中のＨＣｌを０～５℃で加え、反応混合物を同じ温度で２０分間撹拌した。反応物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして化合物１９を白色固体として得た（２４０ｍｇ、収率６０％）。
1H NMR (300 MHz, DMSO) δ (ppm): 0.8-0.9 (bm, 12H, -CH3), 2,07 (m, 2H), 3.7 (dd, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.84 (s, 2h), 5.97 (dd, 1H), 6.11 (q, 1H), 7.43 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.15 (m, 2K), 8.19 (m, 3H, NH3+), 8.6 (m, 1H, NH)
LCMS: 608.53 [M+H]
ＨＰＬＣ：１１．１２５分において純度７９．５％および１１．９７分において純度１７．３％（回転異性体）
【0209】
［実施例１８］［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル （２Ｒ）－２－［（２Ｒ）－２－アザニウミル－３－メチルブタンアミド］－３－メチルブタノエート クロリド（化合物２０）の調製
【化59】
【0210】
使用した方法は、実施例１７の化合物１９の調製について記載した方法に類似しており、（２Ｒ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－メチルブタン酸から出発して、化合物２０を白色固体として得た（３００ｍｇ、収率８８％）。
1H NMR (300 MHz, DMSO) δ (ppm): 0.8-0.9 (bm, 12H, -CH3), 2,07 (m, 2H), 3.69 (dd, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.84 (s, 2h), 5.97 (dd, 1H), 6.11 (q, 1H), 7.43 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.15 (m, 2K), 8.19 (m, 3H, NH3+), 8.6 (m, 1H, NH)
LCMS: 608.53 [M+H]
ＨＰＬＣ：１３．４３分において純度７５．９３％および１４．５分において純度２２．４５％（回転異性体）
1H NMR (300 MHz, DMSO) δ (ppm): 0.8-0.9 (bm, 12H, -CH3), 2,07 (m, 2H), 3.69 (dd, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.84 (s, 2h), 5.97 (dd, 1H), 6.11 (q, 1H), 7.43 (dd, 4H), 7.63 (d, 2H), 8.15 (m, 2K), 8.19 (m, 3H, NH3+), 8.6 (m, 1H, NH)
LCMS: 608.53 [M+H]
ＨＰＬＣ：１３．４３分において純度７５．９３％および１４．５分において純度２２．４５％（回転異性体）
【0211】
［実施例１９］［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２，６－ジアザニウミルヘキサンアミド］アセテート ジクロリド（化合物２１）の調製
【化60】
【0212】
（工程１）２－［（２Ｓ）－２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサンアミド］酢酸メチル（化合物Ｐ２）の調製
ＤＣＭ（５２ｍＬ、２０Ｖ）中の（２Ｓ）－２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサン酸（化合物Ｂ１；２．６ｇ、７．５１ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でＤＣＣ（３．８６ｇ、１８．７８ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２７５ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．０７ｍＬ、１５．０２ｍｍｏｌ）を加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に２－アミノ酢酸メチル塩酸塩Ｐ１（９３９ｍｇ、７．５１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、さらに周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物をろ過して副生成物（尿素）を除去し、ろ液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物Ｐ２を無色液体として得た（１．８１ｇ、収率５８％）。
ＤＣＭ（５２ｍＬ、２０Ｖ）中の（２Ｓ）－２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサン酸（化合物Ｂ１；２．６ｇ、７．５１ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でＤＣＣ（３．８６ｇ、１８．７８ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２７５ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．０７ｍＬ、１５．０２ｍｍｏｌ）を加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に２－アミノ酢酸メチル塩酸塩Ｐ１（９３９ｍｇ、７．５１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、さらに周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物をろ過して副生成物（尿素）を除去し、ろ液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物Ｐ２を無色液体として得た（１．８１ｇ、収率５８％）。
【0213】
（工程２）２－［（２Ｓ）－２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサンアミド］酢酸（化合物Ｐ３）の調製
メタノール（３０ｍＬ、１０Ｖ）中の２－［（２Ｓ）－２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサンアミド］酢酸メチル（化合物Ｐ２；３．０ｇ、７．１９ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃で２Ｍ ＮａＯＨ溶液（１２ｍＬ、４Ｖ）を加えた。得られた反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物を濃縮してメタノールを除去し、水（５０ｍＬ）で希釈し、ＭＴＢＥ（５０ｍＬ×２）で洗浄した。水層を１．５Ｎ ＨＣｌ水溶液でｐＨ４～５に慎重に酸性化し、酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をヘキサンで洗浄し、化合物Ｐ３を無色液体として得た（２．７５ｇ、収率９５％）。
メタノール（３０ｍＬ、１０Ｖ）中の２－［（２Ｓ）－２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサンアミド］酢酸メチル（化合物Ｐ２；３．０ｇ、７．１９ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃で２Ｍ ＮａＯＨ溶液（１２ｍＬ、４Ｖ）を加えた。得られた反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物を濃縮してメタノールを除去し、水（５０ｍＬ）で希釈し、ＭＴＢＥ（５０ｍＬ×２）で洗浄した。水層を１．５Ｎ ＨＣｌ水溶液でｐＨ４～５に慎重に酸性化し、酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をヘキサンで洗浄し、化合物Ｐ３を無色液体として得た（２．７５ｇ、収率９５％）。
【0214】
（工程３）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサンアミド］アセテート（化合物Ｐ４）の調製
ＴＨＦ（３５ｍＬ、２０Ｖ）中の（２－［（２Ｓ）－２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサンアミド］酢酸（化合物Ｐ３；１．７５ｇ、４．３４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．２６ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）、次いでＥＤＣ．ＨＣｌ（１．２４ｇ、６．５１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。上記の反応物に化合物２（０．８９ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物をジクロロメタン（２００ｍＬ）で希釈し、水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で濃縮した。溶媒を蒸発させて得られた残渣を逆相カラムクロマトグラフィーで精製し、化合物Ｐ４を白色固体として得た（０．３ｇ、収率１２％）。
ＴＨＦ（３５ｍＬ、２０Ｖ）中の（２－［（２Ｓ）－２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサンアミド］酢酸（化合物Ｐ３；１．７５ｇ、４．３４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．２６ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）、次いでＥＤＣ．ＨＣｌ（１．２４ｇ、６．５１ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。上記の反応物に化合物２（０．８９ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物をジクロロメタン（２００ｍＬ）で希釈し、水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で濃縮した。溶媒を蒸発させて得られた残渣を逆相カラムクロマトグラフィーで精製し、化合物Ｐ４を白色固体として得た（０．３ｇ、収率１２％）。
【0215】
（工程４）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２，６－ジアザニウミルヘキサンアミド］アセテート ジ－トリフルオロアセテート（化合物Ｐ５）の調製
ジクロロメタン（４．５ｍＬ、１５Ｖ）中の［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサンアミド］アセテート（化合物Ｐ４；０．３ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１．２ｍＬ、４ｖｏｌ）を加え、周囲温度（２５～３０℃）で４時間撹拌した。反応混合物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をエーテルで洗浄し、ろ過し、真空下で乾燥させて、化合物Ｐ５を白色固体として得た（０．２５ｇ、収率９６％）。
ジクロロメタン（４．５ｍＬ、１５Ｖ）中の［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２，６－ビス（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝）ヘキサンアミド］アセテート（化合物Ｐ４；０．３ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（１．２ｍＬ、４ｖｏｌ）を加え、周囲温度（２５～３０℃）で４時間撹拌した。反応混合物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をエーテルで洗浄し、ろ過し、真空下で乾燥させて、化合物Ｐ５を白色固体として得た（０．２５ｇ、収率９６％）。
【0216】
（工程５）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２，６－ジアザニウミルヘキサンアミド］アセテート ジクロリド（化合物２１）の調製
ＴＨＦ（０．５ｍＬ、５．０ｖｏｌ）中の［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２，６－ジアザニウミルヘキサンアミド］アセテート ジ－トリフルオロアセテート（化合物Ｐ５；０．１１ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ジエチルエーテル（２．２ｍＬ、２０ｖｏｌ）中のＨＣｌを０～５℃で加え、反応混合物を同じ温度で２０分間撹拌した。反応物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして、化合物２１を白色固体として得た（９０ｍｇ、収率９０％）。
1H NMR (300 MHz, DMSO) δ (ppm): 1,44 (br, 2H), 1.60 (br, 2H), 1,75 (br, 2H), 2.78 (br, 2H), 3.87 (br, 1H), 4.04 (m, 2h), 4.86 (s, 2H), 6.05 (s, 2H), 7.45 (m, 4H), 7.65 (d, 2H), 8.00 (br, 3H, NH3+), 8.18 (d, 2H). 8.35 (br, 3H, NH3+), 9.14 (br, 1H, NH)
LCMS: 595.49 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．６８分において、純度９４．０９％
ＴＨＦ（０．５ｍＬ、５．０ｖｏｌ）中の［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２，６－ジアザニウミルヘキサンアミド］アセテート ジ－トリフルオロアセテート（化合物Ｐ５；０．１１ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ジエチルエーテル（２．２ｍＬ、２０ｖｏｌ）中のＨＣｌを０～５℃で加え、反応混合物を同じ温度で２０分間撹拌した。反応物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして、化合物２１を白色固体として得た（９０ｍｇ、収率９０％）。
1H NMR (300 MHz, DMSO) δ (ppm): 1,44 (br, 2H), 1.60 (br, 2H), 1,75 (br, 2H), 2.78 (br, 2H), 3.87 (br, 1H), 4.04 (m, 2h), 4.86 (s, 2H), 6.05 (s, 2H), 7.45 (m, 4H), 7.65 (d, 2H), 8.00 (br, 3H, NH3+), 8.18 (d, 2H). 8.35 (br, 3H, NH3+), 9.14 (br, 1H, NH)
LCMS: 595.49 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．６８分において、純度９４．０９％
【0217】
［実施例２０］（１Ｓ）－２－カルボキシ－１－［（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）カルバモイル］エタン－１－アミニウム クロリド（化合物２２）の調製
【化61】
【0218】
（工程１）２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝酢酸ベンジル（化合物Ｑ２）の調製
ＤＣＭ（４０ｍＬ、２０Ｖ）中の２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝酢酸（化合物Ｅ１；２．０ｇ、１１．４２ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でＤＭＡＰ（１３０ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）、次いでＥＤＣ．ＨＣｌ（２．６５ｇ、１７．１２ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を５分間撹拌した。上記の反応混合物にフェニルメタノール（Ｑ１；１．３５ｇ、１２．５５ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。
ＤＣＭ（４０ｍＬ、２０Ｖ）中の２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝酢酸（化合物Ｅ１；２．０ｇ、１１．４２ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でＤＭＡＰ（１３０ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）、次いでＥＤＣ．ＨＣｌ（２．６５ｇ、１７．１２ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を５分間撹拌した。上記の反応混合物にフェニルメタノール（Ｑ１；１．３５ｇ、１２．５５ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。
【0219】
反応生成物をジクロロメタン（２００ｍＬ）で希釈し、水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で濃縮した。溶媒を蒸発させて得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物Ｑ２を白色固体として得た（２ｇ、収率６６％）。
【0220】
（工程２）２－アミノ酢酸ベンジル（化合物Ｑ３）の調製
ジクロロメタン（３０ｍＬ、１５Ｖ）中の２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝酢酸ベンジル（化合物Ｑ２；２ｇ、７．５４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（４ｍＬ、２Ｖ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で３時間撹拌した。反応物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして、化合物Ｑ３を白色固体として得た（１．８ｇ、収率８５％）。
ジクロロメタン（３０ｍＬ、１５Ｖ）中の２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝酢酸ベンジル（化合物Ｑ２；２ｇ、７．５４ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（４ｍＬ、２Ｖ）を加えた。反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で３時間撹拌した。反応物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして、化合物Ｑ３を白色固体として得た（１．８ｇ、収率８５％）。
【0221】
（工程３）（３Ｓ）－３－｛［２－（ベンジルオキシ）－２－オキソエチル］カルバモイル｝－３－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル（化合物Ｑ５）の調製
ＤＣＭ（２０ｍＬ、２０Ｖ）中の（２Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－４－オキソブタン酸（化合物Ｑ４；４．３７ｇ、１５．１ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でＤＭＡＰ（１４０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）、次いでＥＤＣ．ＨＣｌ（３．２３ｇ、１６．９５ｍｍｏｌ）を加え、５分間撹拌した。上記の反応混合物に、２－アミノ酢酸ベンジル（化合物Ｑ３；１．０ｇ、６．０５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．９６ｍＬ、１８．１６ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物をジクロロメタン（４００ｍＬ）で希釈し、水（２×２００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で濃縮した。溶媒を蒸発させて得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物Ｑ５を淡黄色ワックスとして得た（１ｇ、収率６４％）。
ＤＣＭ（２０ｍＬ、２０Ｖ）中の（２Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－４－オキソブタン酸（化合物Ｑ４；４．３７ｇ、１５．１ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でＤＭＡＰ（１４０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）、次いでＥＤＣ．ＨＣｌ（３．２３ｇ、１６．９５ｍｍｏｌ）を加え、５分間撹拌した。上記の反応混合物に、２－アミノ酢酸ベンジル（化合物Ｑ３；１．０ｇ、６．０５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．９６ｍＬ、１８．１６ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物をジクロロメタン（４００ｍＬ）で希釈し、水（２×２００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で濃縮した。溶媒を蒸発させて得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物Ｑ５を淡黄色ワックスとして得た（１ｇ、収率６４％）。
【0222】
（工程４）２－［（２Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－４－オキソブタンアミド］酢酸（化合物Ｑ６）の調製
酢酸エチル（３０ｍＬ、３０Ｖ）中の（３Ｓ）－３－｛［２－（ベンジルオキシ）－２－オキソエチル］カルバモイル｝－３－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル（化合物Ｑ５；１．０ｇ、２．２９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（０．１ｇ、１０％ｗ／ｗ）を加え、得られた塊をｐａｒｒ装置（５ｋｇ Ｈ２圧力）で３時間、水素添加した。反応生成物をceliteパッドでろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物Ｑ６を白色固体として得た（０．６７ｇ、収率８４％）。
酢酸エチル（３０ｍＬ、３０Ｖ）中の（３Ｓ）－３－｛［２－（ベンジルオキシ）－２－オキソエチル］カルバモイル｝－３－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝プロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル（化合物Ｑ５；１．０ｇ、２．２９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（０．１ｇ、１０％ｗ／ｗ）を加え、得られた塊をｐａｒｒ装置（５ｋｇ Ｈ２圧力）で３時間、水素添加した。反応生成物をceliteパッドでろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にし、化合物Ｑ６を白色固体として得た（０．６７ｇ、収率８４％）。
【0223】
（工程５）（３Ｓ）－３－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－［（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）カルバモイル］プロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル（化合物Ｑ７）の調製
ＴＨＦ（７ｍＬ、２０Ｖ）中の２－［（２Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－４－オキソブタンアミド］酢酸（化合物Ｑ６；０．６４ｇ、１．８７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＡＰ（０．０５２ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．４３ｇ、２．１３ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に化合物２（０．３５ｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｑ７を白色固体として得た（０．５ｇ、収率７９％）。
ＴＨＦ（７ｍＬ、２０Ｖ）中の２－［（２Ｓ）－４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－４－オキソブタンアミド］酢酸（化合物Ｑ６；０．６４ｇ、１．８７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＡＰ（０．０５２ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．４３ｇ、２．１３ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に化合物２（０．３５ｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｑ７を白色固体として得た（０．５ｇ、収率７９％）。
【0224】
（工程６）（１Ｓ）－２－カルボキシ－１－［（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）カルバモイル］エタン－１－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物Ｑ８）の調製
ジクロロメタン（７．５ｍＬ）中の（３Ｓ）－３－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－［（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）カルバモイル］プロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル（化合物Ｑ７；０．５ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（２ｍＬ、４．０ｖｏｌ）を加え、周囲温度（２５～３０℃）で４時間撹拌した。反応生成物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして、化合物Ｑ８を白色固体として得た（０．２５ｇ、収率５３％）。
ジクロロメタン（７．５ｍＬ）中の（３Ｓ）－３－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－［（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）カルバモイル］プロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル（化合物Ｑ７；０．５ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でトリフルオロ酢酸（２ｍＬ、４．０ｖｏｌ）を加え、周囲温度（２５～３０℃）で４時間撹拌した。反応生成物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして、化合物Ｑ８を白色固体として得た（０．２５ｇ、収率５３％）。
【0225】
（工程７）（１Ｓ）－２－カルボキシ－１－［（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）カルバモイル］エタン－１－アミニウム クロリド（化合物２２）の調製
ＴＨＦ（１．２５ｍＬ、５．０ｖｏｌ）中の（１Ｓ）－２－カルボキシ－１－［（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）カルバモイル］エタン－１－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物Ｑ８；０．２５ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ジエチルエーテル（５．０ｍＬ、２０ｖｏｌ）中のＨＣｌを０～５℃で加え、反応混合物を同じ温度で２０分間撹拌した。反応物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして化合物２２を白色固体として得た（２００ｍｇ、収率９０％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.85 (m, 2H), 4.07 (m, 3H), 4.83 (s, 2h), 6.04 (s, 2H), 7.44 (m, 4H), 7.65 (d, 2H), 7.63 (d, 2H), 8.14 (d, 2H), 8.25 (br, 3H, NH3+), 9.01 (s, 1H), 12-14 (br, 1H, -COOH)
LCMS: 582.3 M+H]
ＨＰＬＣ：１１．４３分において、純度９５．２６％
ＴＨＦ（１．２５ｍＬ、５．０ｖｏｌ）中の（１Ｓ）－２－カルボキシ－１－［（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）カルバモイル］エタン－１－アミニウム トリフルオロアセテート（化合物Ｑ８；０．２５ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ジエチルエーテル（５．０ｍＬ、２０ｖｏｌ）中のＨＣｌを０～５℃で加え、反応混合物を同じ温度で２０分間撹拌した。反応物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして化合物２２を白色固体として得た（２００ｍｇ、収率９０％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm): 2.85 (m, 2H), 4.07 (m, 3H), 4.83 (s, 2h), 6.04 (s, 2H), 7.44 (m, 4H), 7.65 (d, 2H), 7.63 (d, 2H), 8.14 (d, 2H), 8.25 (br, 3H, NH3+), 9.01 (s, 1H), 12-14 (br, 1H, -COOH)
LCMS: 582.3 M+H]
ＨＰＬＣ：１１．４３分において、純度９５．２６％
【0226】
［実施例２１］［アザニウミル（｛［（４Ｓ）－４－アザニウミル－４－［（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）カルバモイル］ブチル］アミノ｝）メチリデン］アザニウム トリクロリド（化合物２３）の調製
【化62】
【0227】
（工程１）（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－５－｛［（１Ｅ）－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］イミノ｝）メチル］アミノ｝ペンタン酸（化合物Ｒ２）の調製
ｔ－ブタノール（１５８ｍＬ、１８Ｖ）および水（１５８ｍＬ、１８Ｖ）中の（２Ｓ）－２－アミノ－５－カルバムイミドアミドペンタン酸（化合物Ｒ１；８．８ｇ、５０．５１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＯＨ（７．０７ｇ、１７６．８０ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（４６．４２ｍＬ、２０２．０６ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応物を周囲温度（２５～３０℃）で４８時間撹拌した。反応生成物から揮発物を蒸発させ、飽和クエン酸溶液でｐＨ３～４に慎重に酸性化した。生成物を酢酸エチルで抽出し、抽出物をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、真空中で蒸発させ、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｒ２を白色固体として得た（３．７ｇ、収率１５％）。
ｔ－ブタノール（１５８ｍＬ、１８Ｖ）および水（１５８ｍＬ、１８Ｖ）中の（２Ｓ）－２－アミノ－５－カルバムイミドアミドペンタン酸（化合物Ｒ１；８．８ｇ、５０．５１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＯＨ（７．０７ｇ、１７６．８０ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（４６．４２ｍＬ、２０２．０６ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。反応物を周囲温度（２５～３０℃）で４８時間撹拌した。反応生成物から揮発物を蒸発させ、飽和クエン酸溶液でｐＨ３～４に慎重に酸性化した。生成物を酢酸エチルで抽出し、抽出物をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、真空中で蒸発させ、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｒ２を白色固体として得た（３．７ｇ、収率１５％）。
【0228】
（工程２）２－［（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－５－｛［（１Ｅ）－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］イミノ｝）メチル］アミノ｝ペンタンアミド］酢酸ベンジル（化合物Ｒ３）の調製
ＴＨＦ（８ｍＬ、２０Ｖ）中の（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－５－｛［（１Ｅ）－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］イミノ｝）メチル］アミノ｝ペンタン酸（化合物Ｒ２；１．３３ｇ、２．１５ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でＤＭＡＰ（０．０５２ｇ、０．４３ｍｍｏｌ）、次いでＥＤＣ．ＨＣｌ（０．５４ｇ、２．８６ｍｍｏｌ）を加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に、ＴＥＡ（０．６ｍＬ、４．３０ｍｍｏｌ）中のアミノ酢酸ベンジル（化合物Ｑ３；０．４ｇ、１．４３ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物を水（１００ｍＬ）で希釈し、生成物をジクロロメタン（２００ｍＬ）で抽出し、抽出物を乾燥させ、真空中で蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物Ｒ３を白色固体として得た（０．６ｇ、収率６７％）。
ＴＨＦ（８ｍＬ、２０Ｖ）中の（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－５－｛［（１Ｅ）－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］イミノ｝）メチル］アミノ｝ペンタン酸（化合物Ｒ２；１．３３ｇ、２．１５ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、０～５℃でＤＭＡＰ（０．０５２ｇ、０．４３ｍｍｏｌ）、次いでＥＤＣ．ＨＣｌ（０．５４ｇ、２．８６ｍｍｏｌ）を加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に、ＴＥＡ（０．６ｍＬ、４．３０ｍｍｏｌ）中のアミノ酢酸ベンジル（化合物Ｑ３；０．４ｇ、１．４３ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、反応混合物を周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応生成物を水（１００ｍＬ）で希釈し、生成物をジクロロメタン（２００ｍＬ）で抽出し、抽出物を乾燥させ、真空中で蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物Ｒ３を白色固体として得た（０．６ｇ、収率６７％）。
【0229】
（工程３）２－［（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－５－｛［（１Ｅ）－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］イミノ｝）メチル］アミノ｝ペンタンアミド］酢酸（化合物Ｒ４）の調製
酢酸エチル（６ｍＬ、１０Ｖ）中の２－［（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－５－｛［（１Ｅ）－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］イミノ｝）メチル］アミノ｝ペンタンアミド］酢酸ベンジル（化合物Ｒ３；０．６ｇ、０．９６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（０．０６ｇ、１０％ｗ／ｗ）を加え、ｐａｒｒ装置（５ｋｇ Ｈ２圧力）で３時間、水素添加した。反応生成物をcelite床でろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。残渣をエーテルで洗浄し、化合物Ｒ４をオフホワイトの固体として得た（０．４３ｇ、収率８４％）。
酢酸エチル（６ｍＬ、１０Ｖ）中の２－［（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－５－｛［（１Ｅ）－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］イミノ｝）メチル］アミノ｝ペンタンアミド］酢酸ベンジル（化合物Ｒ３；０．６ｇ、０．９６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（０．０６ｇ、１０％ｗ／ｗ）を加え、ｐａｒｒ装置（５ｋｇ Ｈ２圧力）で３時間、水素添加した。反応生成物をcelite床でろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。残渣をエーテルで洗浄し、化合物Ｒ４をオフホワイトの固体として得た（０．４３ｇ、収率８４％）。
【0230】
（工程４）［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－５－｛［（１Ｅ）－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］イミノ｝）メチル］アミノ｝ペンタンアミド］アセテート（化合物Ｒ５）の調製
ＴＨＦ（３．２ｍＬ、２０Ｖ）中の２－［（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－５－｛［（１Ｅ）－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］イミノ｝）メチル］アミノ｝ペンタンアミド］酢酸（化合物Ｒ４；０．４１ｇ、０．７７ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０１４ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．１８ｇ、０．８９ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に化合物２（０．１６ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、さらに周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｒ５を白色固体として得た（０．２５ｇ、収率６９％）。
ＴＨＦ（３．２ｍＬ、２０Ｖ）中の２－［（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－５－｛［（１Ｅ）－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］イミノ｝）メチル］アミノ｝ペンタンアミド］酢酸（化合物Ｒ４；０．４１ｇ、０．７７ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ＤＭＡＰ（０．０１４ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、次いでＤＣＣ（０．１８ｇ、０．８９ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、２０分間撹拌した。上記の反応混合物に化合物２（０．１６ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）を０～５℃で加え、さらに周囲温度（２５～３０℃）で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物Ｒ５を白色固体として得た（０．２５ｇ、収率６９％）。
【0231】
（工程５）［アザニウミル（｛［（４Ｓ）－４－アザニウミル－４－［（２－｛［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メトキシ｝－２－オキソエチル）カルバモイル］ブチル］アミノ｝）メチリデン］アザニウム トリクロリド（化合物２３）の調製
ＴＨＦ（１．０ｍＬ、５．０ｖｏｌ）中の［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－５－｛［（１Ｅ）－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］イミノ｝）メチル］アミノ｝ペンタンアミド］アセテート（化合物Ｒ５；０．２ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ジエチルエーテル（４．０ｍＬ、２０ｖｏｌ）中のＨＣｌを０～５℃で加え、反応混合物を同じ温度で４時間撹拌した。反応物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして、化合物２３を白色固体として得た（９０ｍｇ、収率６０％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm):1.45 (br, 3H), 1.78 (br, 4H), 3.14 (m, 2H), 3.88 (m, 1H), 4.05 (m, 2H), 4.84 (s, 2H), 6.04 (s, 2H), 7.45 (q, 5H), 7.65 (dd, 2H), 7.83 (t, 1H), 8.18 (d, 2H), 8.35 (br, 4H), 9.20 (t, 1H)
LCMS: 623.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．５２分において、純度９２．０７％
ＴＨＦ（１．０ｍＬ、５．０ｖｏｌ）中の［５－（４－クロロベンズアミド）－２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾリジン－４－イル］メチル ２－［（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－５－｛［（１Ｅ）－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝（｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］イミノ｝）メチル］アミノ｝ペンタンアミド］アセテート（化合物Ｒ５；０．２ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の撹拌している溶液に、ジエチルエーテル（４．０ｍＬ、２０ｖｏｌ）中のＨＣｌを０～５℃で加え、反応混合物を同じ温度で４時間撹拌した。反応物を濃縮して揮発物を除去し、得られた残渣をジエチルエーテルで粉末にして、化合物２３を白色固体として得た（９０ｍｇ、収率６０％）。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ (ppm):1.45 (br, 3H), 1.78 (br, 4H), 3.14 (m, 2H), 3.88 (m, 1H), 4.05 (m, 2H), 4.84 (s, 2H), 6.04 (s, 2H), 7.45 (q, 5H), 7.65 (dd, 2H), 7.83 (t, 1H), 8.18 (d, 2H), 8.35 (br, 4H), 9.20 (t, 1H)
LCMS: 623.3 [M+H]
ＨＰＬＣ：８．５２分において、純度９２．０７％
【0232】
［実施例２２］化合物の安定性
ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ：１．２０）中の化合物１および化合物４（すなわち、化合物３のクエン酸塩）の５μＭ溶液を、５ｍＭ ＤＭＳＯ原液によって調製した。当該溶液を、サーモミキサーを使用して４００ｒｐｍで振とうしながら、３７℃で１２０分間インキュベートした。
ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ：１．２０）中の化合物１および化合物４（すなわち、化合物３のクエン酸塩）の５μＭ溶液を、５ｍＭ ＤＭＳＯ原液によって調製した。当該溶液を、サーモミキサーを使用して４００ｒｐｍで振とうしながら、３７℃で１２０分間インキュベートした。
【0233】
０分、１５分、３０分、６０分、および１２０分間隔で、十分な量の化合物溶液のアリコートを取り、希釈し、酸性溶液中での化合物１および３の安定性を測定するために分析した。
【0234】
（結果）
安定性実験の結果を以下の表３に示す。
安定性実験の結果を以下の表３に示す。
【0235】
その結果、化合物３は酸性溶液（すなわち、ｐＨ＝１．２）において化合物１よりも高い安定性を有することがわかった。
【0236】
【表2】
【0237】
［実施例２３］ＡＭＰＫの活性化
（ＩＮＳ－１Ｅインスリノーマ細胞の培養および化合物処理）
ＩＮＳ－１Ｅ細胞は、Steneberg et al., JCI Insight. 2018;3(12):e99114. https://doi.org/10.1172/jci.insight.99114に記載されるように培養し、処理のためにプレーティングするときに１０％ウシ胎児血清の代わりに５％ウシ胎児血清を使用した。
（ＩＮＳ－１Ｅインスリノーマ細胞の培養および化合物処理）
ＩＮＳ－１Ｅ細胞は、Steneberg et al., JCI Insight. 2018;3(12):e99114. https://doi.org/10.1172/jci.insight.99114に記載されるように培養し、処理のためにプレーティングするときに１０％ウシ胎児血清の代わりに５％ウシ胎児血清を使用した。
【0238】
化合物３をＤＭＳＯに１０ｍＭで溶解し、－２０℃で凍結させた。
【0239】
Steneberg et al., JCI Insight. 2018;3(12):e99114. https://doi.org/10.1172/jci.insight.99114に記載される方法に従って、化合物３の用量を増加させながら４時間、ＩＮＳ－１Ｅ細胞を無血清培地中で処理した。
【0240】
［ウェスタンブロット分析］
ＩＮＳ－１Ｅ細胞のウェスタンブロット分析は、Steneberg et. al., JCI Insight. 2018;3(12):e99114. https://doi.org/10.1172/jci.insight.99114に記載されるように実施した。細胞溶解物を３０ゲージの針に通し、約８回、＋４℃で１０分間、１４０００ｒｐｍで遠心した。ＡＭＰＫα、およびリン酸化－Ｔ１７２ ＡＭＰＫαの定量値は、β－アクチンの定量値に対して正規化した。
ＩＮＳ－１Ｅ細胞のウェスタンブロット分析は、Steneberg et. al., JCI Insight. 2018;3(12):e99114. https://doi.org/10.1172/jci.insight.99114に記載されるように実施した。細胞溶解物を３０ゲージの針に通し、約８回、＋４℃で１０分間、１４０００ｒｐｍで遠心した。ＡＭＰＫα、およびリン酸化－Ｔ１７２ ＡＭＰＫαの定量値は、β－アクチンの定量値に対して正規化した。
【0241】
（結果）
ウェスタンブロット分析の結果を以下の表４に表し、図１にグラフで示した。
ウェスタンブロット分析の結果を以下の表４に表し、図１にグラフで示した。
【0242】
その結果、培養ＩＮＳ－１Ｅ細胞において、化合物３がリン酸化－Ｔ１７２ ＡＭＰＫを用量依存的に増加させることが示された。したがって、化合物３はＡＭＰＫのアゴニストである。
【0243】
【表3】
【0244】
［実施例２４］Sprague Dawleyラットにおける化合物１および３の単回経口投与薬物動態試験
（化合物１の製剤）
リン酸緩衝液（ｐＨ７．５）中の２％ｗ／ｖメチルセルロース溶液１０．０ｍＬを、１ｇの２ｍｍガラスビーズとともに１００ｍＬコニカルフラスコに加えた。溶液をマグネチックスターラーで激しく撹拌した。１００ｍｇの化合物１をゆっくりと溶液に加え、当該溶液を約１時間激しく撹拌した。製剤のｐＨを測定したところ７．４９であった。各製剤は動物に投与する前に新たに調製した。製剤中の化合物１の最終濃度は１０ｍｇ／ｍＬであった。製剤は５ｍＬ／ｋｇ体重で投与した。
（化合物１の製剤）
リン酸緩衝液（ｐＨ７．５）中の２％ｗ／ｖメチルセルロース溶液１０．０ｍＬを、１ｇの２ｍｍガラスビーズとともに１００ｍＬコニカルフラスコに加えた。溶液をマグネチックスターラーで激しく撹拌した。１００ｍｇの化合物１をゆっくりと溶液に加え、当該溶液を約１時間激しく撹拌した。製剤のｐＨを測定したところ７．４９であった。各製剤は動物に投与する前に新たに調製した。製剤中の化合物１の最終濃度は１０ｍｇ／ｍＬであった。製剤は５ｍＬ／ｋｇ体重で投与した。
【0245】
（化合物３の製剤）
リン酸緩衝液（ｐＨ７．５）中の２％ｗ／ｖメチルセルロース溶液６ｍＬを、１ｇの２ｍｍガラスビーズとともに２５ｍＬのコニカルフラスコに加えた。溶液をマグネチックスターラーで激しく撹拌した。７８ｍｇの化合物３をゆっくりと溶液に加え、溶液を約１時間激しく撹拌した。製剤のｐＨを測定したところ７．４１であった。各製剤は動物に投与する前に新たに調製した。製剤中の化合物３の最終濃度は１３ｍｇ／ｍＬであり、これは化合物１の１０ｍｇ／ｍＬに相当する。製剤は５ｍＬ／ｋｇ体重で投与した。
リン酸緩衝液（ｐＨ７．５）中の２％ｗ／ｖメチルセルロース溶液６ｍＬを、１ｇの２ｍｍガラスビーズとともに２５ｍＬのコニカルフラスコに加えた。溶液をマグネチックスターラーで激しく撹拌した。７８ｍｇの化合物３をゆっくりと溶液に加え、溶液を約１時間激しく撹拌した。製剤のｐＨを測定したところ７．４１であった。各製剤は動物に投与する前に新たに調製した。製剤中の化合物３の最終濃度は１３ｍｇ／ｍＬであり、これは化合物１の１０ｍｇ／ｍＬに相当する。製剤は５ｍＬ／ｋｇ体重で投与した。
【0246】
（用量の選択および選択の正当性）
等モル用量の比較のために、化合物１および化合物３についてそれぞれ、５０ｍｇ／ｋｇおよび６５ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．の用量を選択した。
等モル用量の比較のために、化合物１および化合物３についてそれぞれ、５０ｍｇ／ｋｇおよび６５ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．の用量を選択した。
【0247】
（投与）
８～１０週齢の健康な成体Sprague Dawley雄ラットを、最低３日間の順化後に実験に使用した。摂食状態の動物に、化合物１または化合物３の製剤を、それぞれ５０ｍｇ／ｋｇまたは６５ｍｇ／ｋｇ体重の用量で胃管栄養法によって経口投与した。
８～１０週齢の健康な成体Sprague Dawley雄ラットを、最低３日間の順化後に実験に使用した。摂食状態の動物に、化合物１または化合物３の製剤を、それぞれ５０ｍｇ／ｋｇまたは６５ｍｇ／ｋｇ体重の用量で胃管栄養法によって経口投与した。
【0248】
（採血）
穏やかなイソフルラン麻酔下で、キャピラリーチューブを使用した眼窩後穿刺法により、投与後７２時間の間に、抗凝固剤（Ｋ２ＥＤＴＡ：２ｍｇ／ｍＬ血液）を含む予め標識されたチューブに血液検体を採取し、詳細を表６に示す。複数の時点で血液を採取する場合は、右目と左目を交互に使用した。採取した血液検体を６０００ｒｐｍ、４℃で１０分間遠心分離し、血漿サンプルを分離して分析まで－８０℃で保存した。
穏やかなイソフルラン麻酔下で、キャピラリーチューブを使用した眼窩後穿刺法により、投与後７２時間の間に、抗凝固剤（Ｋ２ＥＤＴＡ：２ｍｇ／ｍＬ血液）を含む予め標識されたチューブに血液検体を採取し、詳細を表６に示す。複数の時点で血液を採取する場合は、右目と左目を交互に使用した。採取した血液検体を６０００ｒｐｍ、４℃で１０分間遠心分離し、血漿サンプルを分離して分析まで－８０℃で保存した。
【0249】
（結果）
ラットにおける単回経口投与薬物動態試験の結果を以下の表５および表６に示し、図２にグラフで示した。表５において、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、ＡＵＣｌａｓｔ、ＡＵＣｉｎｆ、ＡＵＣｅｘｔｒａｐ、Ｔ１／２およびＭＲＴｌａｓｔの値は、化合物１および化合物３の両方の投与後に検出された４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミド（化合物１）に関するものである。
ラットにおける単回経口投与薬物動態試験の結果を以下の表５および表６に示し、図２にグラフで示した。表５において、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、ＡＵＣｌａｓｔ、ＡＵＣｉｎｆ、ＡＵＣｅｘｔｒａｐ、Ｔ１／２およびＭＲＴｌａｓｔの値は、化合物１および化合物３の両方の投与後に検出された４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミド（化合物１）に関するものである。
【0250】
その結果、化合物３を投与したとき、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドの全身曝露量は、化合物１と比較して、驚くべきことに１０倍増加した（化合物１投与後のＣｍａｘは１ｍＬあたり１９．６０μｇの化合物１であったのに対し、化合物３を投与したときは１ｍＬあたり２０７．００μｇの化合物１であった）。したがって、４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドの全身曝露は、本発明の化合物の形態でその化合物を投与することにより増加する。
【0251】
【表4】
【0252】
【表5】
【0253】
［実施例２５］Sprague Dawleyラットにおける化合物５、６、７、９、１０、１３、１４、１６の単回経口投与薬物動態試験
（化合物の製剤）
製剤は実施例１９に記載した方法に従って調製した。
（化合物の製剤）
製剤は実施例１９に記載した方法に従って調製した。
【0254】
（投与量の選択および選択の正当性）
等モル用量の比較のために、化合物１の５０ｍｇ／ｋｇに相当する用量が選択された。
等モル用量の比較のために、化合物１の５０ｍｇ／ｋｇに相当する用量が選択された。
【0255】
（投与および採血）
投与および採血は実施例１９に記載したように実施した。
投与および採血は実施例１９に記載したように実施した。
【0256】
（結果）
ラットにおける単回経口投与薬物動態試験の結果を表７および以下に示し、図３にグラフで示した。表７において、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、ＡＵＣｌａｓｔ、ＡＵＣｉｎｆ、ＡＵＣｅｘｔｒａｐおよびＴ１／２の値は、化合物投与後に検出された４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミド（化合物１）の値である。
ラットにおける単回経口投与薬物動態試験の結果を表７および以下に示し、図３にグラフで示した。表７において、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、ＡＵＣｌａｓｔ、ＡＵＣｉｎｆ、ＡＵＣｅｘｔｒａｐおよびＴ１／２の値は、化合物投与後に検出された４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミド（化合物１）の値である。
【0257】
その結果、化合物５、６、７、９、１０、１３、１４、１６および１７の投与により、７１～１３７μｇ／ｍＬの範囲の４－クロロ－Ｎ－［２－［（４－クロロフェニル）メチル］－３－オキソ－１，２，４－チアジアゾール－５－イル］ベンズアミドの平均血漿中最大濃度（Ｃｍａｘ）が得られることが示された。
【0258】
【表6】
【0259】
【表7】
【0260】
［実施例２６］化合物１７の安定性
化合物１７の安定性はｐＨ１．２０、７．４０、および９．２０の緩衝液で評価した。ｐＨ１．２０の試験はＨＣｌ緩衝液を使用して行った。ｐＨ７．４０の培地にはリン酸緩衝液を使用し、ｐＨ９．２０の培地にはアルカリ性ホウ酸緩衝液を使用した。
化合物１７の安定性はｐＨ１．２０、７．４０、および９．２０の緩衝液で評価した。ｐＨ１．２０の試験はＨＣｌ緩衝液を使用して行った。ｐＨ７．４０の培地にはリン酸緩衝液を使用し、ｐＨ９．２０の培地にはアルカリ性ホウ酸緩衝液を使用した。
【0261】
（ＨＣｌ緩衝液）
塩化カリウム（１．４９１ｇ）を１００ｍＬの超純水ｔｙｐｅ－１に溶解し、０．２Ｍ ＫＣｌ溶液を得た。約５０ｍＬの０．２Ｍ ＫＣｌをビーカーに取り、０．２Ｍ ＨＣｌ溶液を用いてｐＨを１．２０に調整した。超純水ｔｙｐｅ－１を使用して最終容量を２００ｍＬにし、室温（２２±３℃）で保存した。
塩化カリウム（１．４９１ｇ）を１００ｍＬの超純水ｔｙｐｅ－１に溶解し、０．２Ｍ ＫＣｌ溶液を得た。約５０ｍＬの０．２Ｍ ＫＣｌをビーカーに取り、０．２Ｍ ＨＣｌ溶液を用いてｐＨを１．２０に調整した。超純水ｔｙｐｅ－１を使用して最終容量を２００ｍＬにし、室温（２２±３℃）で保存した。
【0262】
（リン酸緩衝液）
リン酸一塩基性カリウム（２．７２２ｇ）を１００ｍＬの超純水ｔｙｐｅ－１に溶解し、０．２Ｍ溶液を得た。約５０ｍＬの０．２Ｍ溶液をビーカーに取り、０．２Ｍ ＮａＯＨ溶液を用いてｐＨを７．４０に調整した。超純水ｔｙｐｅ－１を使用して最終容量を２００ｍＬにし、室温（２２±３℃）で保存した。
リン酸一塩基性カリウム（２．７２２ｇ）を１００ｍＬの超純水ｔｙｐｅ－１に溶解し、０．２Ｍ溶液を得た。約５０ｍＬの０．２Ｍ溶液をビーカーに取り、０．２Ｍ ＮａＯＨ溶液を用いてｐＨを７．４０に調整した。超純水ｔｙｐｅ－１を使用して最終容量を２００ｍＬにし、室温（２２±３℃）で保存した。
【0263】
（アルカリホウ酸緩衝液）
ホウ酸（１．２３７ｇ）および塩化カリウム（１．４９１ｇ）を１００ｍＬの超純水ｔｙｐｅ－１に溶解し、０．２Ｍ溶液を得た。約５０ｍＬの０．２Ｍ溶液をビーカーに取り、０．２Ｍ ＮａＯＨ溶液を使用してｐＨを９．２０に調整した。超純水ｔｙｐｅ－１を使用して最終容量を２００ｍＬにし、室温（２２±３℃）で保存した。
ホウ酸（１．２３７ｇ）および塩化カリウム（１．４９１ｇ）を１００ｍＬの超純水ｔｙｐｅ－１に溶解し、０．２Ｍ溶液を得た。約５０ｍＬの０．２Ｍ溶液をビーカーに取り、０．２Ｍ ＮａＯＨ溶液を使用してｐＨを９．２０に調整した。超純水ｔｙｐｅ－１を使用して最終容量を２００ｍＬにし、室温（２２±３℃）で保存した。
【0264】
各緩衝液中の化合物１７の５μＭ溶液は、５ｍＭ ＤＭＳＯ原液を使用して調製した。当該溶液を、サーモミキサーを用いて４００ｒｐｍで振とうさせながら、２２±３℃で１２０分間インキュベートした。
【0265】
０分、１５分、３０分、６０分、および１２０分間隔で、十分な量の化合物溶液のアリコートを取り、希釈して分析し、各溶液中の化合物１７の安定性および化合物１の存在量を測定した。存在する化合物１の量は、化合物１７から化合物１への完全変換を仮定して予想される量と比較した。
【0266】
（結果）
安定性実験の結果を以下の表９に示す。
安定性実験の結果を以下の表９に示す。
【0267】
【表8】
【0268】
その結果、化合物１７は低ｐＨ環境（ｐＨ＝１．２）では最大の安定性を有するが、ｐＨ７．４０以上では急速に分解することがわかった。
【0269】
［実施例２７］追加の安定性結果
化合物３、６、９、２０および２３の安定性を、化合物１７について上述したのと同じ方法で試験した。１５分および３０分の時点で残存した各化合物の量を表１０に示す。
化合物３、６、９、２０および２３の安定性を、化合物１７について上述したのと同じ方法で試験した。１５分および３０分の時点で残存した各化合物の量を表１０に示す。
【0270】
【表9】
【0271】
化合物１７および２３はｐＨ７．４０で急速に分解し、ｐＨ１．２では比較的安定であることが分かった。これらのデータから、アミノ酸の側鎖が親油性（例えばアルキル、化合物２０参照）のとき、ｐＨ７．４での安定性はむしろ高いことが示唆される。側鎖がＨまたは－ＮＨ２を含む側鎖（グリシンまたはリジンベース）のとき、安定性が低かった。アスパラギン酸を使用したとき（化合物１７）、ｐＨが高くなると安定性が非常に低くなった。当該化合物は胃内では無傷のままであろうが、腸内では加水分解される可能性がある。
【図面の簡単な説明】
【0272】
【図1】化合物３が用量依存的にＡＭＰＫのリン酸化を増加させることを示すウェスタンブロット画像である。
【図2】化合物１および化合物３を使用した、経口薬物動態試験の比較結果である。
【図3】化合物５、６、７、９、１０、１３、１４、１６および１７を使用した、経口薬物動態試験の比較結果である。
【図1】
【図2】
【図3】
【国際調査報告】