特表 2024-535834 抗ＣＤ４０抗体及びその用途

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-10-02

(54)【発明の名称】抗ＣＤ４０抗体及びその用途

(51)【国際特許分類】

   C07K 16/28 20060101AFI20240925BHJP

   C12N 15/13 20060101ALI20240925BHJP

   C12N 15/63 20060101ALI20240925BHJP

   C12N 1/15 20060101ALI20240925BHJP

   C12N 1/19 20060101ALI20240925BHJP

   C12N 1/21 20060101ALI20240925BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20240925BHJP

   C07K 19/00 20060101ALI20240925BHJP

   C07K 16/46 20060101ALI20240925BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 37/02 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 37/08 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 19/08 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 19/02 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 11/06 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 9/10 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 1/02 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 5/00 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 13/12 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 5/16 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 5/14 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 7/06 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 7/00 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 21/04 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 17/06 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 27/04 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20240925BHJP

   A61P 1/04 20060101ALI20240925BHJP

【ＦＩ】

C07K16/28 ZNA

C12N15/13

C12N15/63 Z

C12N1/15

C12N1/19

C12N1/21

C12N5/10

C07K19/00

C07K16/46

A61K39/395 N

A61P37/02

A61P29/00

A61P37/08

A61P37/06

A61P19/08

A61P19/02

A61P11/06

A61P9/10 101

A61P9/10

A61P1/16

A61P1/02

A61P3/10

A61P5/00

A61P13/12

A61P5/16

A61P5/14

A61P7/06

A61P7/00

A61P17/00

A61P25/00

A61P21/04

A61P17/06

A61P27/04

A61P9/00

A61P1/04

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024516611

(86)(22)【出願日】2022-09-23

(85)【翻訳文提出日】2024-05-13

(86)【国際出願番号】 CN2022120689

(87)【国際公開番号】W WO2023046037

(87)【国際公開日】2023-03-30

(31)【優先権主張番号】202111123163.5

(32)【優先日】2021-09-24

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

(71)【出願人】

【識別番号】516089784

【氏名又は名称】チア タイ ティエンチン ファーマシューティカル グループ カンパニー リミテッド

【氏名又は名称原語表記】Ｃｈｉａ Ｔａｉ Ｔｉａｎｑｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｇｒｏｕｐ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ．３６９ Ｙｕｚｈｏｕ Ｓｏｕｔｈ Ｒｄ．，Ｌｉａｎｙｕｎｇａｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ ２２２０６２ Ｃｈｉｎａ

(74)【代理人】

【識別番号】100115794

【弁理士】

【氏名又は名称】今下 勝博

(74)【代理人】

【識別番号】100119677

【弁理士】

【氏名又は名称】岡田 賢治

(74)【代理人】

【識別番号】100160495

【弁理士】

【氏名又は名称】畑 雅明

(74)【代理人】

【識別番号】100173716

【弁理士】

【氏名又は名称】田中 真理

(72)【発明者】

【氏名】ルー、ゼンゼン

(72)【発明者】

【氏名】ワン、ユジエ

(72)【発明者】

【氏名】ヂャン、ゼンピン

(72)【発明者】

【氏名】シュ、ホンジアン

(72)【発明者】

【氏名】ザオ、ウェイ

【テーマコード（参考）】

4B065

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B065AA01X

4B065AA01Y

4B065AA57X

4B065AA57Y

4B065AA72X

4B065AA72Y

4B065AA83X

4B065AA83Y

4B065AA90X

4B065AA90Y

4B065AB01

4B065AC14

4B065BA02

4B065CA44

4B065CA46

4C085AA14

4C085BB11

4C085BB31

4C085DD62

4C085EE01

4H045AA10

4H045AA30

4H045BA09

4H045BA41

4H045CA40

4H045DA76

4H045EA20

4H045EA50

4H045FA74

(57)【要約】

抗ＣＤ４０抗体、例えば、ＣＤ４０と特異的に結合するマウス、ヒト、キメラ又はヒト化抗体又はその抗原結合断片、及びその用途を提供し、また、前記抗体及びその抗原結合断片をコードする核酸分子、及び前記抗体又はその抗原結合断片を発現するための発現ベクター及び宿主細胞を提供する。さらに、前記抗体及びその抗原結合断片の作製方法、及び免疫疾患の治療と予防を含む使用方法を提供する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

単離された抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片であって、
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）重鎖ＣＤＲ１は配列番号９における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号９における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号９における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖ＣＤＲ１は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（８）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（９）重鎖ＣＤＲ１は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、若しくは
（１０）重鎖ＣＤＲ１は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、及び／又は
（ｉｉ）軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（２）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（３）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（４）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（５）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（６）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（７）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（８）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、若しくは
（９）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む、前記抗体又はその抗原結合断片。

【請求項2】

（ｉ）重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、２、５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、２、５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、３、５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、３、５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、４、５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、４、５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１８、１９、２０で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１８、１９、２０で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２４、２５、２６で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２４、２５、２６で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号３２、３３、３４で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３２、３３、３４で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４０、４１、４２で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４０、４１、４２で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（８）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４６、４７、４８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４６、４７、４８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、及び／又は
（ｉｉ）軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（２）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２１、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２１、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（３）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（４）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（５）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（６）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項3】

重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３と、軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）重鎖ＣＤＲ１は配列番号９における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号９における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号９における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（８）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（９）重鎖ＣＤＲ１は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（１０）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（１１）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（１２）重鎖ＣＤＲ１は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、又は
（１３）重鎖ＣＤＲ１は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項4】

重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３と、軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、２、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、２、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、３、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、３、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、４、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、４、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１８、１９、２０、２１、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１８、１９、２０、２１、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２４、２５、２６、２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２４、２５、２６、２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号３２、３３、３４、３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３２、３３、３４、３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４０、４１、４２、４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４０、４１、４２、４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は
（８）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４６、４７、４８、４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４６、４７、４８、４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項5】

（ｉ）重鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域は、９、１０、１１、１２、１３、２２、３０、３８、４４若しくは５２で示されるアミノ酸配列、又は配列番号９、１０、１１、１２、１３、２２、３０、３８、４４若しくは５２で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、及び／又は
（ｉｉ）軽鎖可変領域を含み、前記軽鎖可変領域は配列番号１４、１５、１６、１７、２３、３１、３９、４５若しくは５３で示されるアミノ酸配列、又は配列番号１４、１５、１６、１７、２３、３１、３９、４５若しくは５３で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１～４のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項6】

重鎖可変領域と、軽鎖可変領域とを含み、ただし、
（１）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号９、１４で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号９、１４で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１０、１５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１０、１５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１１、１５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１１、１５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１０、１６で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１０、１６で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１１、１６で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１１、１６で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１０、１７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１０、１７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１２、１７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１２、１７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（８）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１３、１７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１３、１７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（９）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号２２、２３で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２２、２３で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（１０）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号３０、３１で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３０、３１で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（１１）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号３８、３９で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３８、３９で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（１２）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号４４、４５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４４、４５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は
（１３）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号５２、５３で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号５２、５３で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項7】

重鎖定常領域と、軽鎖定常領域とをさらに含み、前記重鎖定常領域は、配列番号５４、５５若しくは５６で示されるアミノ酸配列又は配列番号５４、５５若しくは５６で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖定常領域は、配列番号５７で示されるアミノ酸配列又は配列番号５７で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項8】

（ａ）ヒトＣＤ４０と結合し、（ｂ）サルＣＤ４０と結合し、（ｃ）ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌの相互作用を遮断し、及び／又は（ｄ）ＣＤ４０活性を阻害する、請求項１～７のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項9】

キメラ又はヒト化されたものであり、
任意に、前記抗体又はその抗原結合断片が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４アイソタイプであり、
任意に、前記抗体又はその抗原結合断片が、モノクローナル抗体、単特異性抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体、多重特異性抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）_２断片、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、ｄＡｂ断片、単離されたＣＤＲ領域、単鎖Ｆｖ分子又はそれらの組み合わせから選ばれる、請求項１～８のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項10】

請求項１～９のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片をコードする、単離された核酸分子。

【請求項11】

請求項１０に記載の核酸分子を含む、発現ベクター。

【請求項12】

請求項１０に記載の核酸分子又は請求項１１に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。

【請求項13】

請求項１～９のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片を含む、組換えポリペプチド又は融合タンパク質。

【請求項14】

請求項１～９のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片と、１種又は複数種の薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。

【請求項15】

必要とする被験者で免疫疾患を治療又は予防する方法であって、前記被験者に治療有効量の請求項１～９のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片、又は請求項１４に記載の医薬組成物を投与することを含み、
任意に、前記免疫疾患は、炎症性疾患、アレルギー反応、自己免疫疾患又は移植関連疾患を含み、ただしそれらに限定されず、
任意に、前記免疫疾患は、アレルギー反応、アジソン病、強直性脊椎炎、脊椎関節炎、喘息、アテローム性動脈硬化症、冠状動脈性心疾患、自己免疫性肝炎、自己免疫性耳下腺炎、Ｉ型糖尿病、精巣上体炎、腎炎、ライター症候群、甲状腺炎、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本病、溶血性貧血、特発性血小板減少症、全身性エリテマトーデス、亜急性皮膚エリテマトーデス、多発性硬化症、重症筋無力症、乾癬、強皮症、関節炎、サルコイドーシス、シェーグレン症候群、ドライアイ、化膿性汗腺炎、移植関連疾患、血管炎及び／又は炎症性腸疾患を含み、ただしそれらに限定されず、
任意に、治療有効量の第２治療剤を投与することをさらに含み、
任意に、前記第２治療剤は、非ステロイド性抗炎症薬、サリチル酸塩、ヒドロキシクロロキン、スルファサラジン、コルチコステロイド、細胞傷害性薬物、又は免疫抑制薬及び／若しくは抗体を含む、前記方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、バイオテクノロジーの分野に属し、具体的には、ＣＤ４０と特異的に結合する抗体及びその抗原結合断片に関し、また、そのような抗体及び抗原結合断片の使用方法に関する。

【背景技術】

【0002】

ＣＤ４０は、Ｉ型膜貫通糖タンパク質であり、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリーのメンバーである。ＣＤ４０は、抗原提示細胞（樹状細胞、Ｂ細胞、マクロファージを含む）に構成的に発現され、非造血細胞、例えば、上皮細胞、内皮細胞、平滑筋細胞、線維芽細胞、ケラチノサイトなどにも少量に発現される。また、ＣＤ４０は、様々な腫瘍細胞、例えば、Ｂリンパ腫細胞にも発現される。ＣＤ４０の主なリガンドであるＣＤ４０Ｌ（ＣＤ１５４）はＩＩ型膜貫通糖タンパク質であり、ＣＤ４０Ｌは、主に活性化ＣＤ４^＋Ｔリンパ球、活性化Ｂ細胞、メモリーＴ細胞、活性化ＮＫ細胞及び活性化血小板の中で発現される。

【0003】

ＣＤ４０／ＣＤ４０Ｌシグナル伝達経路は、体の体液性免疫応答及び細胞性免疫応答に関与し、Ｂ細胞の活性化、増殖及び分化、抗体の産生、抗体のクラススイッチなどのＴ細胞依存性抗体免疫応答及び炎症反応で重要な調節的役割を果たす。自己免疫疾患患者の組織及び器官で自己抗原に対する多数のＴ細胞及びＢ細胞が浸潤され、且つ、ＣＤ４０及び／又はＣＤ４０Ｌの持続的な高発現として示されるということが研究で明らかになった。原発性シェーグレン症候群患者のＩＨＣ染色結果が、ＣＤ４０は唾液腺上皮細胞に豊富に存在し、且つ、血清中の抗ＳＳＡなどの自己抗体と共に増加するということを示した。また、炎症性腸疾患におけるＣＤ４０／ＣＤ４０Ｌシグナル伝達経路の重要な役割は、既にマウスなどの動物モデルで確認されている。

【0004】

したがって、ＣＤ４０と特異的に結合しＣＤ４０／ＣＤ４０Ｌシグナル伝達経路を阻害する抗体は、免疫疾患、例えば、炎症性疾患及び自己免疫疾患の治療に潜在的な臨床的価値がある。例えば、ノバルティス（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）社によって開発された抗ＣＤ４０抗体イスカリマブ（Ｉｓｃａｌｉｍａｂ、ＣＦＺ５３３）は、現在、ＣＤ４０媒介性免疫疾患の治療の臨床試験に用いられており、結果は、イスカリマブ（Ｉｓｃａｌｉｍａｂ）を１０ｍｇ／ｋｇの静脈内注射用量で原発性シェーグレン症候群患者に投与した場合に（組入れ条件は、血清自己抗体陽性である）、６２％（１３／２１）の患者がＥＳＳＤＡＩ疾患活動性スコアは５分未満であり、治療効果はプラセボ群の３６％（４／１１）より顕著に優れているということを示した。現在、世界で膨大な数の免疫疾患患者がいるため、より良い薬剤特性を有するより多くの抗ＣＤ４０抗体を開発することが急務となっている。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0005】

一態様で、本開示は、ＣＤ４０と結合する単離された抗体又はその抗原結合断片を提供する。いくつかの実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、ネズミ抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体又はヒト抗体である。いくつかの実施形態では、抗体又はその抗原結合断片は、モノクローナル抗体、単特異性抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体、多重特異性抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）_２断片、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、ｄＡｂ、単離されたＣＤＲ、単鎖Ｆｖ分子、組換えポリペプチド、融合タンパク質、二重特異性分子又はそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、本開示の抗体又はその抗原結合断片はヒトＣＤ４０と結合する。また、いくつかの実施形態では、本開示の抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０（例えば、ヒトＣＤ４０、カニクイザル（ｃｙｎｏｍｏｌｇｏｕｓ）ＣＤ４０）と結合する。いくつかの実施形態では、本開示の抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０とＣＤ４０Ｌの相互作用を遮断する。いくつかの実施形態では、本開示の抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０活性を阻害する。

【0006】

いくつかの実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）と、重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）と、重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）とを含み、ただし、（１）重鎖ＣＤＲ１は配列番号９における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号９における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号９における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（２）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（３）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（４）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（５）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（６）重鎖ＣＤＲ１は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（７）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（８）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（９）重鎖ＣＤＲ１は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、又は（１０）重鎖ＣＤＲ１は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。

【0007】

いくつかの実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、（１）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、２、５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、２、５で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（２）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、３、５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、３、５で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（３）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、４、５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、４、５で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（４）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１８、１９、２０で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１８、１９、２０で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（５）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２４、２５、２６で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２４、２５、２６で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（６）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号３２、３３、３４で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３２、３３、３４で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（７）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４０、４１、４２で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４０、４１、４２で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は（８）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４６、４７、４８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４６、４７、４８で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0008】

一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）と、軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）と、軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）とを含み、ただし、（１）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（２）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（３）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（４）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（５）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（６）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（７）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（８）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、又は（９）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。

【0009】

いくつかの実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、（１）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（２）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２１、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２１、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（３）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（４）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（５）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は（６）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0010】

いくつかの実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３と、軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、（１）重鎖ＣＤＲ１は配列番号９における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号９における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号９における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（２）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（３）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（４）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（５）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（６）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（７）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（８）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（９）重鎖ＣＤＲ１は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（１０）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（１１）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、（１２）重鎖ＣＤＲ１は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、又は（１３）重鎖ＣＤＲ１は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。

【0011】

いくつかの実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３と、軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、（１）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、２、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、２、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（２）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、３、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、３、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（３）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、４、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、４、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（４）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１８、１９、２０、２１、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１８、１９、２０、２１、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（５）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２４、２５、２６、２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２４、２５、２６、２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（６）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号３２、３３、３４、３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３２、３３、３４、３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（７）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４０、４１、４２、４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４０、４１、４２、４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は（８）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４６、４７、４８、４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４６、４７、４８、４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0012】

いくつかの実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、重鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域は、配列番号９、１０、１１、１２、１３、２２、３０、３８、４４若しくは５２で示されるアミノ酸配列、又は配列番号９、１０、１１、１２、１３、２２、３０、３８、４４若しくは５２で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0013】

いくつかの実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、軽鎖可変領域を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１４、１５、１６、１７、２３、３１、３９、４５若しくは５３で示されるアミノ酸配列、又は配列番号１４、１５、１６、１７、２３、３１、３９、４５若しくは５３で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0014】

いくつかの実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、重鎖可変領域と、軽鎖可変領域とを含み、ただし、（１）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号９、１４で示されるアミノ酸配列又は配列番号９、１４で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（２）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１０、１５で示されるアミノ酸配列又は配列番号１０、１５で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（３）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１１、１５で示されるアミノ酸配列又は配列番号１１、１５で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（４）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１０、１６で示されるアミノ酸配列又は配列番号１０、１６で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（５）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１１、１６で示されるアミノ酸配列又は配列番号１１、１６で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（６）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１０、１７で示されるアミノ酸配列又は配列番号１０、１７で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（７）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１２、１７で示されるアミノ酸配列又は配列番号１２、１７で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（８）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１３、１７で示されるアミノ酸配列又は配列番号１３、１７で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（９）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号２２、２３で示されるアミノ酸配列又は配列番号２２、２３で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（１０）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号３０、３１で示されるアミノ酸配列又は配列番号３０、３１で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（１１）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号３８、３９で示されるアミノ酸配列又は配列番号３８、３９で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、（１２）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号４４、４５で示されるアミノ酸配列又は配列番号４４、４５で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は（１３）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号５２、５３で示されるアミノ酸配列又は配列番号５２、５３で示されるアミノ酸配列と少なくとも、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0015】

いくつかの実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、重鎖と、軽鎖とを含み、前記重鎖は、重鎖可変領域と、重鎖定常領域とを含み、前記軽鎖は、軽鎖可変領域と、軽鎖定常領域とを含み、ただし、重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、上記の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域のアミノ酸配列を含み、重鎖定常領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４の定常領域を含み、好ましくはＩｇＧ１及びＩｇＧ４の定常領域であり、軽鎖定常領域は、ヒトκ定常領域又はヒトλ定常領域を含む。いくつかの具体的な実施形態では、前記重鎖定常領域は、配列番号５４、５５若しくは５６で示されるアミノ酸配列又は配列番号５４、５５若しくは５６で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖定常領域は、配列番号５７で示されるアミノ酸配列又は配列番号５７で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含む。

【0016】

いくつかの実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、重鎖と、軽鎖とを含み、ただし、（１）重鎖は配列番号９及び５４で示されるアミノ酸配列を含み、そして軽鎖は配列番号１４及び５７で示されるアミノ酸配列を含み、（２）重鎖は配列番号１０及び５４で示されるアミノ酸配列を含み、そして軽鎖は配列番号１５及び５７で示されるアミノ酸配列を含み、（３）重鎖は配列番号１１及び５４で示されるアミノ酸配列を含み、そして軽鎖は配列番号１５及び５７で示されるアミノ酸配列を含み、（４）重鎖は配列番号１０及び５４で示されるアミノ酸配列を含み、そして軽鎖は配列番号１６及び５７で示されるアミノ酸配列を含み、（５）重鎖は配列番号１１及び５４で示されるアミノ酸配列を含み、そして軽鎖は配列番号１６及び５７で示されるアミノ酸配列を含み、（６）重鎖は配列番号１０及び５４で示されるアミノ酸配列を含み、そして軽鎖は配列番号１７及び５７で示されるアミノ酸配列を含み、（７）重鎖は配列番号１２及び５４で示されるアミノ酸配列を含み、そして軽鎖は配列番号１７及び５７で示されるアミノ酸配列を含み、（８）重鎖は配列番号１３及び５４で示されるアミノ酸配列を含み、そして軽鎖は配列番号１７及び５７で示されるアミノ酸配列を含み、（９）重鎖は配列番号２２及び５４で示されるアミノ酸配列を含み、そして軽鎖は配列番号２３及び５７で示されるアミノ酸配列を含み、（１０）重鎖は配列番号３０及び５４で示されるアミノ酸配列を含み、そして軽鎖は配列番号３１及び５７で示されるアミノ酸配列を含み、（１１）重鎖は配列番号３８及び５４で示されるアミノ酸配列を含み、そして軽鎖は配列番号３９及び５７で示されるアミノ酸配列を含み、（１２）重鎖は配列番号４４及び５４で示されるアミノ酸配列を含み、そして軽鎖は配列番号４５及び５７で示されるアミノ酸配列を含み、又は（１３）重鎖は配列番号５２及び５４で示されるアミノ酸配列を含み、そして軽鎖は配列番号５３及び５７で示されるアミノ酸配列を含む。

【0017】

いくつかの実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、２つの重鎖（Ｈ）と、２つの軽鎖（Ｌ）とを含み、又は２つの重鎖と、２つの軽鎖とからなり、重鎖と軽鎖はジスルフィド結合によって互いに接続され、ただし各重鎖は上記の重鎖可変領域（ＶＨ）と、重鎖定常領域とを含み、ただし重鎖可変領域（ＶＨ）はフレームワーク領域（ＦＲ）と、上記の重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）とを含み、各軽鎖は上記の軽鎖可変領域（ＶＬ）と、軽鎖定常領域とを含み、ただし軽鎖可変領域（ＶＬ）はＦＲと、上記の軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）とを含み、ただし重鎖可変領域のＣ末端は重鎖定常領域のＮ末端に接続され、軽鎖可変領域のＣ末端は軽鎖定常領域のＮ末端に接続される。本開示の抗体は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４アイソタイプの全長抗体であってもよい。また、いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、又は抗体断片、例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）_２断片、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、ｄＡｂ又は単離されたＣＤＲであってもよい。

【0018】

一態様で、本開示は、ＣＤ４０と結合する単離された抗体又はその抗原結合断片を提供し、前記抗体又はその抗原結合断片はハイブリドーマによって産生され、前記ハイブリドーマは本明細書でＡ０１、Ａ０２、Ａ０３、Ｂ０１、Ｂ０２及びＢ０３と呼ばれるハイブリドーマからなる群から選ばれる。したがって、本開示は、さらに、ハイブリドーマＡ０１、Ａ０２、Ａ０３、Ｂ０１、Ｂ０２、Ｂ０３及び本明細書に開示されている抗体を産生するハイブリドーマのいずれかによって産生される抗体又はその抗原結合断片を含む。

【0019】

一態様で、本開示は、本開示の例示的な抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片のいずれかとＣＤ４０上の同じエピトープと結合する抗体又はその抗原結合断片を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、本開示の例示的な抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片のいずれかと競合的にＣＤ４０と結合する抗体又はその抗原結合断片を提供する。

【0020】

別の態様で、本開示は、また、１種又は複数種の本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片と、少なくとも１種の他の機能性断片とを含む組換えポリペプチド又は融合タンパク質を提供し、前記他の機能性断片は、別のペプチド、タンパク質、サイトカイン又は受容体リガンドを含み、ただしそれらに限定されない。これらの組換えポリペプチド又は融合タンパク質は、遺伝子組み換え、化学的方法などで作製されてもよい。本開示では、用語「融合タンパク質」とは、一般的に、２つ又はそれ以上の同じ又は異なるポリペプチド配列が接続して得られた新しいポリペプチド配列を指し、特に、組換えで得た、天然には接続していない１つ又は複数の同じ又は異なるポリペプチド配列を含むポリペプチド配列を指す。

【0021】

別の態様で、本開示は、また、１種又は複数種の本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片と、本開示の抗体又は抗原結合断片の特異性と異なる少なくともいくつかの他の機能部分（例えば、別の抗体又はその抗原結合断片）とを含む、二重特異性分子を提供し、前記二重特異性分子は少なくとも２つの異なる結合部位又は標的と結合することができる。本明細書で使用される「二重特異性分子」は、２種（即ち、二重特異性分子）、３種（即ち、三重特異性分子）、４種（即ち、四重特異性分子）又はそれ以上の特異性を有する分子をカバーしている。これらの二重特異性分子は遺伝子組み換え、化学的方法などで作製されてもよい。

【0022】

別の態様で、本開示は、また、本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合部分を含み、ただし本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合部分が治療剤（例えば、細胞傷害性薬物又は造影剤など）に接続された免疫複合体、例えば、抗体－薬物複合体（ＡＤＣ）を提供する。本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合部分はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）の一部であってもよい。本開示は、また、前記キメラ抗原受容体を含む免疫細胞、例えば、Ｔ細胞（即ち、ＣＡＲ－Ｔ細胞）を提供する。また、本開示は、遺伝子ベクターを提供し、前記遺伝子ベクターは、本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合部分をコードする遺伝子を含み、且つ、前記遺伝子を哺乳動物細胞（好ましくはヒト細胞）に入れて、その中で発現させることができる。これらの遺伝子ベクターは、ネイキッドプラスミドベクター、酵母ベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、レトロウイルスベクター、ポックスウイルスベクター、ラブドウイルスベクター又はバキュロウイルスベクターを含み、ただしそれらに限定されない。ＤＮＡをこれらの遺伝子ベクターに挿入するための技術は当業者に熟知されている。

【0023】

別の態様で、本開示は、また、本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片と、１種又は複数種の薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。また、いくつかの実施形態では、本開示は、また、本開示の組換えポリペプチド、融合タンパク質、二重特異性分子、免疫複合体、キメラ抗原受容体又は遺伝子ベクターと、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。

【0024】

別の態様で、本開示は、また、本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片をコードする単離された核酸を提供する。本開示は、また、前記核酸を含む発現ベクター、及び、前記発現ベクターを含む宿主細胞を提供する。

【0025】

別の態様で、本開示は、また、（ｉ）宿主細胞において抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片を発現するステップと、（ｉｉ）宿主細胞又はその細胞培養物から抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片を単離するステップとを含む、抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片の作製方法を提供する。

【0026】

他の態様で、本開示は、被験者で免疫疾患を治療又は予防するための方法を提供し、前記方法は、被験者に治療有効量の本開示の抗ＣＤ４０抗体若しくはその抗原結合部分、コードする核酸、医薬組成物、組換えポリペプチド、融合タンパク質、二重特異性分子、免疫複合体、キメラ抗原受容体又は遺伝子ベクターを投与することを含む。いくつかの実施形態では、被験者はヒトである。

【0027】

いくつかの実施形態では、前記免疫疾患は、炎症性疾患、アレルギー反応、自己免疫疾患又は移植関連疾患を含み、ただしそれらに限定されない。いくつかの具体的な実施形態では、前記免疫疾患は、アレルギー反応、アジソン病（Ａｄｄｉｓｏｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、強直性脊椎炎、脊椎関節炎、喘息、アテローム性動脈硬化症、冠状動脈性心疾患、自己免疫性肝炎、自己免疫性耳下腺炎、Ｉ型糖尿病、精巣上体炎、腎炎、ライター症候群、甲状腺炎、グレーブス病（Ｇｒａｖｅｓ’ ｄｉｓｅａｓｅ）、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）、橋本病、溶血性貧血、特発性血小板減少症、全身性エリテマトーデス、亜急性皮膚エリテマトーデス、多発性硬化症、重症筋無力症、乾癬、強皮症、関節炎、サルコイドーシス、シェーグレン症候群、ドライアイ、化膿性汗腺炎、移植関連疾患、血管炎及び／又は炎症性腸疾患を含み、ただしそれらに限定されない。

【0028】

いくつかの実施形態では、前記方法はさらに第２治療剤を投与することを含み、前記第２治療剤は、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、サリチル酸塩、ヒドロキシクロロキン、スルファサラジン、コルチコステロイド、細胞傷害性薬物、又は免疫抑制薬及び／若しくは抗体を含む。

【0029】

下記の具体的な記述及び実施例から、当該開示の内容及び他の特徴と利点が一層明瞭になるだろうが、具体的な記述及び実施例を限定的なものと捉えるべきではない。本開示で引用される全ての文献、Ｇｅｎｂａｎｋの記録、特許及び開示済みの特許出願の内容は、引用の方式で本明細書に明確に含まれる。

【図面の簡単な説明】

【0030】

【図1A】図１Ａは、精製されたマウス抗ＣＤ４０抗体のＣＤ４０Ｌタンパク質に対する２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞の結合を遮断する活性を示す。

【図1B】図１Ｂは、精製されたマウス抗ＣＤ４０抗体のＣＤ４０Ｌタンパク質に対する２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞の結合を遮断する活性を示す。

【図2】図２は、ＣＤ４０Ｌ及びＩＬ－４によって誘導されたＲａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対する精製されたマウス抗ＣＤ４０抗体の阻害活性を示す。

【図3】図３は、ＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０細胞に対するキメラ抗ＣＤ４０抗体のＣｈｉ－Ａ０１、Ｃｈｉ－Ａ０２及びＣｈｉ－Ａ０３の結合活性を示す。

【図4】図４は、Ｒａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対するキメラ抗ＣＤ４０抗体のＣｈｉ－Ａ０１、Ｃｈｉ－Ａ０２、Ｃｈｉ－Ａ０３、Ｃｈｉ－Ｂ０１、Ｃｈｉ－Ｂ０２及びＣｈｉ－Ｂ０３の作動活性を示し、Ｒａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対するＣＰ－８７０８９３の作動活性は陽性対照として示される。

【図5】図５は、２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞に対するヒト化抗ＣＤ４０抗体のｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４の結合活性を示す。

【図6】図６は、ヒト化抗ＣＤ４０抗体のｈｚＡ０１－１．１、ｈｚＡ０１－２．１、ｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４のＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０Ｌ細胞に対する２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞の結合を遮断する活性を示す。

【図7】図７は、ＣＤ４０Ｌ及びＩＬ－４によって誘導されたＲａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対するヒト化抗ＣＤ４０抗体のｈｚＡ０１－１．１、ｈｚＡ０１－２．１、ｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４の阻害活性を示す。

【図8】図８は、Ｒａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対するヒト化抗ＣＤ４０抗体のｈｚＡ０１－１．１、ｈｚＡ０１－２．１、ｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４の作動活性を示し、Ｒａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対するＣＰ－８７０８９３の作動活性は陽性対照として示される。

【図9】図９は、ＣＤ４０Ｌによって誘導されたヒト末梢血Ｂリンパ球共刺激分子ＣＤ８６の発現に対するヒト化抗ＣＤ４０抗体のｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４の阻害活性を示す。

【図10】図１０は、ＣＤ４０Ｌ及びＩＬ－４によって誘導されたヒト末梢血Ｂリンパ球の増殖に対するヒト化抗ＣＤ４０抗体のｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４の阻害活性を示す。

【図11】図１１は、ヒト化抗ＣＤ４０抗体のｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４のヒト末梢血Ｂリンパ球の増殖を誘導する作動活性を示し、ＣＰ－８７０８９３のヒト末梢血Ｂリンパ球の増殖を誘導する作動活性は陽性対照として示される。

【図12】図１２は、ＭＬＲ反応でヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３に応答するＩＦＮγの放出量を示し、ただし、抗ＣＤ４０抗体及びＩｇＧ４アイソタイプ対照抗体を加えなかったｍＤＣ及びＤＣ（分化培養はしていない）群は、陰性対照として示される。

【図13】図１３は、ｉｍＤＣ細胞の成熟に対するヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３の作動活性を示し、ｉｍＤＣ細胞の成熟に対するＣＰ－８７０８９３の作動活性は陽性対照として示される。

【図14】図１４は、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３によって媒介されるＡＤＣＣ効果を示し、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）によって媒介されるＡＤＣＣ活性は陽性対照として示される。

【図15】図１５は、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３によって媒介されるＣＤＣ効果を示し、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）によって媒介されるＣＤＣ活性は陽性対照として示される。

【図16A】図１６Ａは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のＮＤＧマウスの血清中のヒト抗マウスＩｇＭ抗体の濃度を示す。

【図16B】図１６Ｂは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のＮＤＧマウスの血清中のヒト抗マウスＩｇＧ抗体の濃度を示す。

【図17A】図１７Ａは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のマウスの脾臓内に浸潤されたヒトＣＤ４^＋Ｔ細胞の含有量を示し、ただし、ｔ検定によってＩｇＧ４アイソタイプ対照群と比較し、＊はＰ≦０．０５を表し、＊＊はＰ＜０．０１を表し、＊＊＊はＰ＜０．００１を表す。

【図17B】図１７Ｂは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のマウスの脾臓内に浸潤されたヒトＣＤ１９^＋Ｂ細胞の含有量を示し、ただし、ｔ検定によってＩｇＧ４アイソタイプ対照群と比較し、＊はＰ≦０．０５を表し、＊＊はＰ＜０．０１を表し、＊＊＊はＰ＜０．００１を表す。

【図18】図１８は、シェーグレン症候群モデルのマウスの体重に対するヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３の影響を示す。

【図19】図１９は、シェーグレン症候群モデルのマウスの唾液流量率に対するヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３の影響を示す。

【図20A】図２０Ａは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のシェーグレン症候群モデルのマウスの顎下腺指数を示し、ただし、ｔ検定を利用し（ブランク対照群とモデル群を比較し、ｈｚＡ０１－３．３投与群とモデル群を比較し）、＊はＰ≦０．０５を表し、＊＊はＰ＜０．０１を表し、＊＊＊はＰ＜０．００１を表す。

【図20B】図２０Ｂは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のシェーグレン症候群モデルのマウスの顎下腺中のＩＬ－６の含有量を示し、ただし、ｔ検定を利用し（ブランク対照群とモデル群を比較し、ｈｚＡ０１－３．３投与群とモデル群を比較し）、＊はＰ≦０．０５を表し、＊＊はＰ＜０．０１を表し、＊＊＊はＰ＜０．００１を表す。

【図20C】図２０Ｃは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のシェーグレン症候群モデルのマウスの顎下腺の病理学的スコアを示し、ただし、ｔ検定を利用し（ブランク対照群とモデル群を比較し、ｈｚＡ０１－３．３投与群とモデル群を比較し）、＊はＰ≦０．０５を表し、＊＊はＰ＜０．０１を表し、＊＊＊はＰ＜０．００１を表す。

【図21A】図２１Ａは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のシェーグレン症候群モデルのマウスの血液中のＣＤ３^＋Ｔ細胞の生細胞のＣＤ４５^＋生細胞に占めるパーセンテージを示す。

【図21B】図２１Ｂは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のシェーグレン症候群モデルのマウスの血液中のＣＤ４^＋Ｔ細胞の生細胞のＣＤ４５^＋生細胞に占めるパーセンテージを示す。

【図21C】図２１Ｃは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のシェーグレン症候群モデルのマウスの血液中のＣＤ８^＋Ｔ細胞の生細胞のＣＤ４５^＋生細胞に占めるパーセンテージを示す。

【図21D】図２１Ｄは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のシェーグレン症候群モデルのマウスの血液中のＣＤ１９^＋Ｂ細胞の生細胞のＣＤ４５^＋生細胞に占めるパーセンテージを示す。

【図21E】図２１Ｅは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のシェーグレン症候群モデルのマウスの脾臓中のＣＤ３^＋Ｔ細胞の生細胞のＣＤ４５^＋生細胞に占めるパーセンテージを示す。

【図21F】図２１Ｆは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のシェーグレン症候群モデルのマウスの脾臓中のＣＤ４^＋Ｔ細胞の生細胞のＣＤ４５^＋生細胞に占めるパーセンテージを示す。

【図21G】図２１Ｇは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のシェーグレン症候群モデルのマウスの脾臓中のＣＤ８^＋Ｔ細胞の生細胞のＣＤ４５^＋生細胞に占めるパーセンテージを示す。

【図21H】図２１Ｈは、ヒト化抗ＣＤ４０抗体ｈｚＡ０１－３．３治療後のシェーグレン症候群モデルのマウスの脾臓中のＣＤ１９^＋Ｂ細胞の生細胞のＣＤ４５^＋生細胞に占めるパーセンテージを示す。

【発明を実施するための形態】

【0031】

（発明の詳細な説明）
本明細書で使用される用語は、具体的な実施例を記述するためのものに過ぎず、限定をするためではないということが理解されたい。特に定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語の意味は、本開示の属する分野の当業者が理解している一般的な意味と同じである。

【0032】

用語「ＣＤ４０」には、ＣＤ４０バリアント、ホモログ、オルソログ、パラログが含まれる。例えば、いくつかの実施例では、ヒトＣＤ４０タンパク質に特異的な抗体は場合によって別の種（例えば、サル）のＣＤ４０タンパク質と交差反応を起こすことができる。また、いくつかの実施形態では、ヒトＣＤ４０タンパク質に特異的な抗体は完全にヒトＣＤ４０タンパク質に特異的であり、他の種又は他のタイプのタンパク質と交差反応を起こさず、又は他の種の全体ではなくいくつかの他の種のＣＤ４０タンパク質だけと交差反応を起こす。

【0033】

ＣＤ４０は、知られているもので、且つ、Ｂ細胞表面抗原ＣＤ４０、Ｂｐ５０、ＣＤ４０Ｌ受容体、ＣＤＷ４０、ＭＧＣ９０１３、ｐ５０及び腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーのメンバー５（ＴＮＦＲＳＦ５）と呼ばれてもよい。「ヒトＣＤ４０」と「ｈＣＤ４０」は本明細書で入れ替えてもよく、ヒトＣＤ４０アミノ酸配列を有するタンパク質を指し、例えば、配列番号６２で示されるアミノ酸配列を含むＣＤ４０タンパク質である。用語「サルＣＤ４０」と「ｃｙｎｏＣＤ４０」などは本明細書で入れ替えてもよく、サルＣＤ４０アミノ酸配列を有するタンパク質を指し、例えば、配列番号６３で示されるアミノ酸配列を含むＣＤ４０タンパク質である。

【0034】

本明細書で使用される用語「抗体」とは、少なくとも１つの抗原（例えば、ＣＤ４０）結合ドメインを有する結合タンパク質を指す。本開示の抗体又はその抗原結合断片は、抗体全体又はそのいずれかの断片であってもよく、モノクローナル抗体又はその断片及び抗体バリアント又はその断片を含む。抗体又はその抗原結合断片の例は、単特異性、二重特異性、三重特異性又は多重特異性の抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）_２断片、Ｆｖ断片、単離されたＣＤＲ領域、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）及び当分野で知られている他の抗体断片のいずれかを含む。本明細書に開示されている抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４アイソタイプであってもよい。用語「アイソタイプ」とは、重鎖定常領域遺伝子によってコードされる抗体のクラスを指す。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されている抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、ＩｇＧ１及びＩｇＧ４アイソタイプである。本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、マウス、ラット、ウサギ、霊長類動物、ラマ、ヒトを含み、ただしそれらに限定されないいずれかの種から誘導されてもよい。本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、ネズミ抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体又はヒト抗体であってもよい。特に説明がない限り、本開示の「抗体」には全長抗体及びそのいずれかの抗原結合部分（即ち、「抗原結合断片」）又は単鎖が含まれる。一般的に、全長抗体は２つの重（Ｈ）鎖及び２つの軽（Ｌ）鎖を含む糖タンパク質であり、ただし重鎖と軽鎖はジスルフィド結合によって接続される。各重鎖は重鎖可変領域（ＶＨ）と重鎖定常領域とからなる。重鎖定常領域は３つのドメイン、即ちＣＨ１と、ＣＨ２と、ＣＨ３とからなる。各軽鎖は軽鎖可変領域（ＶＬ）と軽鎖定常領域とからなる。軽鎖定常領域は１つのドメインＣＬからなる。ＶＨ及びＶＬ領域はさらに超可変領域（即ち、相補性決定領域（ＣＤＲ））及び配列が保存的なフレームワーク領域（ＦＲ）に分けられてもよい。各ＶＨ及びＶＬは、アミノ末端からカルボキシ末端までＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順に配置される、３つのＣＤＲと４つのＦＲとからなる。抗体の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。抗体の定常領域は、免疫グロブリンと宿主組織又は因子の結合を媒介することができ、前記宿主組織又は因子は、様々な免疫系細胞（例えば、エフェクター細胞）、補体の古典的経路の最初の成分（Ｃ１ｑ）を含む。また、当業者が知っているように、特殊な「全長抗体」、例えば、ナノボディは、重（Ｈ）鎖だけを有し、軽（Ｌ）鎖を持たない。

【0035】

抗体の「抗原結合断片」又は「抗体結合部分」とは、抗原（例えば、ＣＤ４０タンパク質）と特異的に結合する機能が保持されている抗体の１つ又は複数の断片を指す。抗体の抗原結合機能は、全長抗体の断片で実施できるということが確認されている。用語抗体の「抗原結合部分／断片」のカバーしている例には、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる一価断片であるＦａｂ断片、（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって接続された２つのＦａｂ断片を含む二価断片であるＦ（ａｂ’）_２断片、（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片、（ｉｖ）抗体シングルアームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．３４１：５４４－５４６（１９８９）を参照する）、（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）、そして（ｖｉｉ）１つの可変ドメイン及び２つの定常ドメインを含む重鎖可変領域であるナノボディが含まれる。また、Ｆｖ断片の２つのドメインＶＬ及びＶＨは異なる遺伝子によってコードされるが、組換えの方法でリンカーによってＶＨとＶＬを単一タンパク質鎖として接続させてもよく、そのうちＶＬとＶＨがマッチして形成された一価分子は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）と呼ばれ、Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．２４２：４２３－４２６（１９８８）、Ｈｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：５８７９－５８８３（１９８８）を参照し、これらの単鎖抗体も用語抗原結合部分／断片によってカバーされている。また、当該抗原結合部分／断片を含む組換えポリペプチド、融合タンパク質及び二重特異性分子も、用語抗原結合部分／断片によってカバーされている。これらの抗体断片は、当業者の知っている通常の技術で得ることができ、且つ、断片に対して全長抗体と同じ方法で機能のスクリーニングを行うことができる。

【0036】

「マウス抗体」又は「ネズミ抗体」とは、可変領域でフレームワーク領域及びＣＤＲ領域がいずれもマウス生殖系列免疫グロブリン配列に由来する抗体を指す。また、抗体が定常領域を含む場合に、定常領域もマウス生殖系列免疫グロブリン配列に由来する。本開示のマウス抗体は、マウス生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、インビトロのランダム変異又は点変異又はインビボの体細胞変異によって導入された変異）を含んでもよく、ただし「マウス抗体」は、マウスフレームワーク配列に他の哺乳動物に由来する生殖系列ＣＤＲ配列が挿入された抗体を含まない。

【0037】

「キメラ抗体」とは、非ヒト由来の遺伝物質とヒト由来の遺伝物質を組み合わせてできた抗体を指す。又は、より概略的に言えば、キメラ抗体とは、１つの種に由来する遺伝物質及び別の種に由来する遺伝物質を有する抗体を指す。例えば、軽鎖及び重鎖の可変領域はいずれも１つの動物種（例えば、マウス、ラットなど）の抗体の可変領域に由来してもよく、定常部分は別の種（例えば、ヒト）に由来する抗体配列と相同であってもよい。例えば、キメラ抗体を得るために、非ヒトＢ細胞又はハイブリドーマ細胞を利用して可変領域を産生させてもよいが、それと組み合わせる定常領域はヒトに由来する。本開示では、キメラ抗体は「Ｃｈｉ」とも表記される。

【0038】

「ヒト化抗体」は、非ヒト抗体から誘導された相補性決定領域（ＣＤＲ）、ヒト抗体から誘導されたフレームワーク領域及び定常領域を含有する抗体である。例えば、本明細書によって提供されるＣＤ４０と結合するヒト化抗体は、１種又は複数種のネズミ抗体から誘導されたＣＤＲ及びヒトフレームワーク領域、ヒト定常領域を含んでもよい。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書によって提供されるヒト化抗体は前記抗体のＣＤＲから誘導されたネズミ抗体とＣＤ４０上の同じエピトープと結合する。本明細書は例示的なヒト化抗体を提供する。本明細書によって提供される重鎖ＣＤＲ及び軽鎖ＣＤＲを含む他のＣＤ４０と結合するヒト化抗体又はそのバリアントはヒトフレームワーク配列のいずれかを使用して産生してもよく、且つそれも本開示に含まれる。いくつかの実施形態では、本開示での使用に適するフレームワーク配列は、本明細書によって提供されるフレームワーク配列と構造的に類似するそれらのフレームワーク配列を含む。フレームワーク領域で他の修飾を行って本明細書によって提供される抗体の特性を変更してもよい。このような他のフレームワーク修飾は、化学修飾、免疫原性を低下させ若しくはＴ細胞エピトープを除去する点変異、又は元の生殖系列配列中の残基への復帰変異を含んでもよい。いくつかの実施形態では、このような修飾は、生殖系列配列に対する復帰変異など、本明細書の例示的な変異に対応するそれらの修飾を含む。例えば、いくつかの実施形態では、本明細書によって提供されるヒト化抗体のＶＨ及び／又はＶＬのヒトフレームワーク領域で１つ又は複数のアミノ酸が親ネズミ抗体の対応するアミノ酸に復帰変異される。本開示では、ヒト化抗体は「ｈｚ」とも表記される。

【0039】

用語「Ｆｃドメイン」又は「Ｆｃ領域」とは、Ｋａｂａｔ番号付けシステムによって定義されるＣＨ２及びＣＨ３定常ドメインを含む抗体配列を指す。Ｆｃ領域はヒトＩｇＧに由来してもよい。例えば、Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４のＦｃ領域に由来してもよい。

【0040】

本明細書で「誘導された」と記載される場合は、参照抗体又はタンパク質と結合する他の分子若しくはポリペプチドに対して使用するものであれば、参照抗体又は他の結合タンパク質と、同じエピトープと特異的に結合することができる分子又はポリペプチドを意味する。

【0041】

「単離された」とはすでに自然環境から単離されている目的化合物（例えば、抗体、抗原結合断片又は核酸）を指す。

【0042】

「抗原と特異的に結合する抗体」及び「抗原に特異的な抗体」は、本明細書で用語「抗原に対して特異的に結合する抗体」と入れ替えて使用されてもよい。「ヒトＣＤ４０と特異的に結合する」抗体とは、ヒトＣＤ４０（他の非ヒト種のＣＤ４０でもよい）と結合するが非ＣＤ４０と実質的に結合しない抗体を指す。好ましくは、抗体はヒトＣＤ４０と「高い親和性」で結合し、即ち、Ｋ_Ｄは、５．０×１０^－８Ｍ又はそれ以下、１．０×１０^－８Ｍ又はそれ以下であり、好ましくは、５．０×１０^－９Ｍ又はそれ以下であり、より好ましくは、１．０×１０^－９Ｍ又はそれ以下である。

【0043】

用語タンパク質又は細胞と「実質的に結合しない」とは、タンパク質若しくは細胞と結合せず、又はそれと高い親和性で結合しないことを指し、即ち、タンパク質又は細胞と結合するＫ_Ｄは、１．０×１０^－６Ｍ又はそれ以上であり、好ましくは、１．０×１０^－５Ｍ又はそれ以上、１．０×１０^－４Ｍ又はそれ以上であり、より好ましくは、１．０×１０^－３Ｍ又はそれ以上、１．０×１０^－２Ｍ又はそれ以上である。

【0044】

用語「高い親和性」は、ＩｇＧに対していう場合に、抗原と結合するＫ_Ｄは、５．０×１０^－８Ｍ又はそれ以下、１．０×１０^－８Ｍ又はそれ以下であり、好ましくは、５．０×１０^－９Ｍ又はそれ以下であり、より好ましくは、１．０×１０^－９Ｍ又はそれ以下であることを指す。しかし他の抗体アイソタイプの場合は、「高い親和性」で結合することは、異なることである可能性がある。例えば、ＩｇＭアイソタイプの場合に「高い親和性」で結合することとは、抗原と結合するＫ_Ｄは、１．０×１０^－６Ｍ又はそれ以下であり、好ましくは、１．０×１０^－７Ｍ又はそれ以下であり、より好ましくは、１．０×１０^－８Ｍ又はそれ以下であることを指す。

【0045】

「同一性」とは、２つ若しくはそれ以上の核酸配列の間又は２つ若しくはそれ以上のポリペプチド配列の間の類似性を指す。本開示の配列同一性は、少なくとも、８５％、９０％又は９５％であり、好ましくは、少なくとも９５％である。非限定的な実施例は、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、１００％を含む。２つの配列の間の配列比較及び同一性パーセンテージの測定は、アメリカ国立生物工学情報センター（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ Ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）のウェブサイト上のＢＬＡＳＴＮ／ＢＬＡＳＴＰアルゴリズムのデフォルト設定で行ってもよい。

【0046】

「競合的に結合する」抗体は、他の抗体を部分的に又は完全に遮断して標的と結合する抗体である。２種の抗体は互いに標的と競合的に結合するかどうかは、即ち、１つの抗体が別の抗体を遮断して標的と結合するかどうか且つその程度はどのくらいかということであり、当分野で知られている競合実験、例えば、固相法による直接的又は間接的放射免疫測定（ＲＩＡ）、固相法による直接的又は間接的酵素免疫測定法（ＥＩＡ）、サンドイッチ法による競合測定などを利用して決定してもよい。いくつかの実施形態では、抗体は別の抗体と競合的に標的と結合し、且つ標的に対する別の抗体の結合を少なくとも、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％遮断する。

【0047】

２種の又はそれ以上の抗体が「同じエピトープと結合する」ことは、所定の方法で測定されたように、抗体がアミノ酸残基の同じセクションと結合することを意味する。抗体が本明細書に記載の抗体と「ＣＤ４０上の同じエピトープ」と結合するかどうかを決定するための技術は、例えば、エピトープマッピング法を含み、例えば、抗原－抗体複合体の結晶のＸ線分析、水素重水素交換質量分析法（ＨＤＸ－ＭＳ）である。

【0048】

用語「ＥＣ_５０」は、半数有効濃度とも呼ばれ、特定の曝露時間後、５０％の最大効果に達することができる抗体濃度を指す。用語「ＩＣ_５０」は、半数阻害濃度とも呼ばれ、抗体が存在しない場合に対して、特異的な生物学的又は生化学的機能を５０％阻害する抗体濃度を指す。ＥＣ_５０及びＩＣ_５０の両者はいずれもＥＬＩＳＡ又はＦＡＣＳ解析又は当分野で知られている他の方法のいずれかで計測することができる。

【0049】

「Ｋ_Ｄ」とは平衡解離定数を指し、Ｋ_ｄとＫ_ａの比（即ち、Ｋ_ｄ／Ｋ_ａ）として取得され、且つモル濃度（Ｍ）で表される。抗体のＫ_Ｄ値は当分野で充分に確立されている方法で測定することができる。抗体のＫ_Ｄを測定するための好ましい方法は表面プラズモン共鳴技術であり、好ましくは、バイオセンサーシステム、例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）表面プラズモン共鳴システムを利用して分析する。

【0050】

「架橋」とは、抗ＣＤ４０抗体のＦｃγＲ（例えば、シス又はトランスのＦｃγＲＩＩｂ）によって誘導された細胞のＣＤ４０に結合される高次多量体化により、ＣＤ４０の作動活性が誘導されることを指す。

【0051】

「患者」又は「被験者」は、ヒト又は非ヒト動物のいずれかを含む。用語「非ヒト動物」は、全ての脊椎動物、例えば、哺乳動物及び非哺乳動物を含み、好ましくは、哺乳動物、例えば、非ヒト霊長類動物、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマである。

【0052】

「有効用量」又は「有効量」とは、所望の効果を実現し又は少なくとも部分的に実現するために十分な量を指す。薬物又は治療剤の治療「有効量」又は「有効用量」とは、単独で又は別の治療剤と組み合わせて使用される場合に、疾患又は病状の関連症状を防止又は改善するのに十分な量、好ましくは疾患の症状の重症度の低下、無症状期間の頻度及び持続時間の増加を引き起こし、又は疾患によって引き起こされる損傷若しくは機能障害を防止する量を指す。治療有効量は、治療される疾患に関係しており、ただし当業者は、実際の有効量を容易に決定することができる。

【0053】

特に断りがない限り、本開示で「約」とは、所定の具体的な数値範囲±５％の範囲内で変動すること、好ましくは、±２％の範囲内で変動すること、より好ましくは、±１％の範囲内で変動することを指す。例えば、ｐＨが約５．５であることは、ｐＨは５．５±５％であること、好ましくは、ｐＨは５．５±２％であること、より好ましくは、ｐＨは５．５±１％であることを表す。特に説明がない限り、単数形で使用する場合に、複数形が含まれる。

【0054】

特に説明がない限り、用語「１つ」又は「１種」は、「少なくとも１つ」又は「少なくとも１種」を意味し、用語「少なくとも１つ」の意味は、「１つ又は複数」の意味と同じであり、「及び／又は」は、「及び」又は「又は」の意味で使用される。

【0055】

特に断りがない限り、本明細書に記載のパーセンテージ範囲、比率範囲又は整数範囲のいずれにも、列挙された範囲内の整数の値のいずれもが含まれるように理解されるべきである。

【0056】

本明細書では、文脈で規定がない限り、用語「含み」、「含む」及び「含有」は、前記ステップ又は要素又は一連のステップ若しくは要素を含むが、他のステップ又は要素又は一連のステップ若しくは要素のいずれも除外されないことを表すように理解される。「……からなる」は、語句「……からなる」の後の内容を含み、且つそれらに限られることを表す。したがって、語句「……からなる」は、挙げられた要素は必要又は必須であり、且つ他の要素が存在しないことを表す。「実質的に……からなる」は、この語句の後に挙げた要素のいずれかを含み、且つ挙げられた要素の、本開示で詳細に記述した活性又は作用を妨げず又はそれに寄与する他の要素に限られるということを表す。したがって、語句「実質的に……からなる」は、挙げられた要素は必要又は必須であるが、他の要素は任意であり、且つ、挙げられた要素の活性又は作用に影響を与えるかどうかによってそれが存在してもよいし又は存在しなくてもよいということを表す。

【0057】

以下、本開示の複数の態様をより具体的に記述する。

【0058】

本開示の例示的な抗体又はその抗原結合断片の重鎖可変領域、軽鎖可変領域及びＣＤＲのアミノ酸配列ＩＤ（配列番号）は次の表１に提供される。いくつかの抗体は同じＣＤＲを有し、いくつかの抗体は同じＶＨ又はＶＬを有する。抗体の重鎖定常領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４の定常領域であってもよく、好ましくは、ＩｇＧ１及びＩｇＧ４の定常領域であり、例えば、配列番号５４、５５若しくは５６で示されるアミノ酸配列又は配列番号５４、５５若しくは５６で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含む。抗体の軽鎖定常領域は、ヒトκ定常領域又はヒトλ定常領域であってもよく、例えば、配列番号５７で示されるアミノ酸配列又は配列番号５７で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含む。これらの抗体は、マウスＩｇＧ１又はＩｇＧ４重鎖定常領域及び／又はマウスκ定常領域又はλ定常領域を含んでもよい。

【表1】

【0059】

抗体可変領域のアミノ酸配列により、当業者は、通常の方法でどちらの残基が特定のＣＤＲを構成するかを決定することができる。当業者の周知のように、様々な方法で抗体のＣＤＲを定義することができ、例えば、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＩＭＧＴ、ＡｂＭ若しくはＣｏｎｔａｃｔなどの番号付けシステム／方法で定義し、又はＫａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＩＭＧＴ、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔなどの番号付けシステム／方法のうちの２つ若しくはそれ以上の組み合わせで定義し（例えば、ＨＣＤＲ１はＡｂＭで定義し、ＨＣＤＲ２はＫａｂａｔ又はＡｂＭで定義し、ＨＣＤＲ３はＩＭＧＴ又はＫａｂａｔで定義し、そしてＬＣＤＲ１～３はＫａｂａｔで定義する）、また、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａを含むＣｏｍｂｉｎｅｄ番号付けシステムで定義してもよく、そのうちＣｏｍｂｉｎｅｄ番号付けシステムは、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ定義の範囲を合わせることで、より大きな範囲が得られるものである（例えば、Ｋａｂａｔによって定義されたＨＣＤＲ１がＨ３１～Ｈ３５であり、Ｃｈｏｔｈｉａによって定義されたＨＣＤＲ１がＨ２６～Ｈ３２である場合に、Ｃｏｍｂｉｎｅｄによって定義されたＨＣＤＲ１はＨ２６～Ｈ３５である）。番号付けシステムによって、ＣＤＲの正確な番号及び配置は異なる。当業者が理解できることだろうが、特に規定がない限り、用語所定の抗体又はその領域（例えば、可変領域）の「ＣＤＲ」又は「相補性決定領域」は、知られている方法のいずれかで確定した相補性決定領域をカバーしているものと理解すべきである。

【0060】

本開示で保護を主張するＣＤＲは、表１及び表１０で示される配列に基づくが、他のＣＤＲ定義のルールに対応するアミノ酸配列も、本開示の保護範囲に入る。例えば、Ｋａｂａｔ定義のルールでＣＤＲを定義する場合に、マウス、キメラ及びヒト化Ａ０１のＨＣＤＲ１のアミノ酸配列はＴＳＧＶＨ（配列番号７９）であり、マウス、キメラＡ０１及びｈｚＡ０１－３．４のＨＣＤＲ２のアミノ酸配列はＶＩＷＡＧＧＤＴＮＹＮＳＡＬＭＳ（配列番号２）であり、ｈｚＡ０１－１．１、ｈｚＡ０１－２．１及びｈｚＡ０１－３．１のＨＣＤＲ２のアミノ酸配列はＶＩＷＡＧＧＤＴＮＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号８０）であり、ｈｚＡ０１－１．２及びｈｚＡ０１－２．２のＨＣＤＲ２のアミノ酸配列はＶＩＷＡＧＧＤＴＮＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号８１）であり、ｈｚＡ０１－３．３のＨＣＤＲ２のアミノ酸配列はＶＩＷＡＧＧＤＴＮＹＮＳＡＬＫＳ（配列番号４）であり、マウス、キメラ及びヒト化Ａ０１のＨＣＤＲ３のアミノ酸配列はＨＧＨＦＤＶ（配列番号８２）であり、マウス、キメラ及びヒト化Ａ０１のＬＣＤＲ１のアミノ酸配列はＲＳＳＱＳＬＶＨＳＳＧＮＴＹＬＱ（配列番号６）であり、マウス、キメラ及びヒト化Ａ０１のＬＣＤＲ２のアミノ酸配列はＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号７）であり、マウス、キメラ及びヒト化Ａ０１のＬＣＤＲ３のアミノ酸配列はＳＱＴＴＨＶＰＷＴ（配列番号８）である。

【0061】

ヒトＣＤ４０と結合する他の抗ＣＤ４０抗体のＶＨ及び／又はＶＬ配列（又はＣＤＲ配列）は、本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合部分のＶＨ及び／又はＶＬ配列（又はＣＤＲ配列）と「ミックス・アンド・マッチ」することができる。好ましくは、ＶＨ及びＶＬ鎖（又はそのＣＤＲ）がミックス・アンド・マッチする場合に、特定のＶＨ／ＶＬ対におけるＶＨ配列は構造的に類似するＶＨ配列によって置換されてもよい。同様に、好ましくは、特定のＶＨ／ＶＬ対におけるＶＬ配列が構造的に類似するＶＬ配列に置換される。

【0062】

したがって、一実施形態では、本開示の抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）表１及び表１０に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、
（ｂ）表１及び表１０に記載のアミノ酸配列、又は別の抗ＣＤ４０抗体のＶＬを含む軽鎖可変領域とを含み、ただし、当該抗体又はその抗原結合部分はヒトＣＤ４０と特異的に結合する。

【0063】

別の実施形態では、本開示の抗体又はその抗原結合断片は、
（ａ）表１及び表１０に記載のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３と、
（ｂ）表１及び表１０に記載のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３、又は別の抗ＣＤ４０抗体の軽鎖可変領域ＣＤＲとを含み、ただし、当該抗体又はその抗原結合部分はヒトＣＤ４０と特異的に結合する。

【0064】

別の実施形態では、本開示の抗体又はその抗原結合断片は、表１及び表１０に記載のＨＣＤＲ２と、他の抗ＣＤ４０抗体のＣＤＲ、例えば、他の抗ＣＤ４０抗体のＨＣＤＲ１及び／又はＨＣＤＲ３、及び／又は他の抗ＣＤ４０抗体のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及び／又はＬＣＤＲ３とを含む。

【0065】

また、当分野で周知のように、ＣＤＲ３ドメインはＣＤＲ１及び／又はＣＤＲ２ドメインから独立しており、同じ抗原に対する抗体の結合特異性を単独で決定することができ、また、当該ＣＤＲ３配列から同じ結合特異性を有する複数種の抗体を産生できることが予測できる。

【0066】

別の実施形態では、本開示の抗体又はその抗原結合断片は、表１及び表１０に記載のＨＣＤＲ２と、表１及び表１０に記載のＨＣＤＲ３及び／若しくは表１に記載のＬＣＤＲ３、又は別の抗ＣＤ４０抗体のＨＣＤＲ３及び／若しくはＬＣＤＲ３とを含み、ただし、当該抗体又はその抗原結合部分はヒトＣＤ４０と特異的に結合する。好ましくは、これらの抗体は、本開示の抗ＣＤ４０抗体と、（ａ）競合的にＣＤ４０と結合し、（ｂ）機能特徴が保持され、（ｃ）同じエピトープと結合し、及び／又は（ｄ）類似する結合親和性を有する。別の実施形態では、本開示の抗体又はその抗原結合部分は、表１及び表１０に記載のＬＣＤＲ２、又は別の抗ＣＤ４０抗体のＬＣＤＲ２をさらに含み、ただし、当該抗体又はその抗原結合部分はヒトＣＤ４０と特異的に結合する。別の実施形態では、本開示の抗体又はその抗原結合部分は表１及び表１０に記載のＨＣＤＲ１及び／若しくは表１及び表１０に記載のＬＣＤＲ１、又は別の抗ＣＤ４０抗体のＨＣＤＲ１及び／若しくはＬＣＤＲ１をさらに含み、ただし、当該抗体又はその抗原結合部分はヒトＣＤ４０と特異的に結合する。

【0067】

別の実施形態では、本開示の抗体又はその抗原結合部分の重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域又はＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列は、１つ又は複数の保存的な修飾を含んでもよい。当分野で理解できることだろうが、いくつかの保存的な配列修飾があっても抗原結合特異性は消えない。

【0068】

したがって、一実施形態では、本開示の抗体又はその抗原結合部分は、重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域を含み、重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３を含み、ただし、
（ａ）ＨＣＤＲ１配列は、表１及び表１０に記載の配列、及び／若しくはその保存的な修飾を含み、及び／又は
（ｂ）ＨＣＤＲ２配列は、表１及び表１０に記載の配列、及び／若しくはその保存的な修飾を含み、及び／又は
（ｃ）ＨＣＤＲ３配列は、表１及び表１０に記載の配列、及び／若しくはその保存的な修飾を含み、及び／又は
（ｄ）ＬＣＤＲ１及び／又はＬＣＤＲ２及び／又はＬＣＤＲ３配列は、表１及び表１０に記載の配列、及び／又はその保存的な修飾を含み、且つ
（ｅ）抗体又はその抗原結合部分は、ヒトＣＤ４０と特異的に結合する。

【0069】

本明細書で使用される用語「保存的な配列修飾」とは、抗体の結合特性を顕著に影響又は変更しないアミノ酸修飾を指す。このような保存的な修飾は、アミノ酸の置換、付加及び欠失を含む。当分野で知られている標準的な技術、例えば、点変異、ＰＣＲによって媒介される変異で本開示の抗体に修飾を導入することができる。保存的なアミノ酸置換とは、アミノ酸残基が、類似する構造又は化学的特性（例えば、類似する側鎖）を有するアミノ酸残基によって置換されるものを指す。類似する側鎖を有するアミノ酸残基ファミリーは、当分野で知られている。これらのアミノ酸残基ファミリーは、塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非電荷極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、β分岐側鎖（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）及び芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を有するアミノ酸を含む。したがって、本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合部分のＣＤＲ領域で１つ又は複数のアミノ酸残基は、同じ側鎖ファミリーの他のアミノ酸残基によって置換されてもよく、且つ得られた抗体に対して、本明細書に記載の機能アッセイでその機能をテストすることができる。

【0070】

本開示の抗体又はその抗原結合断片は、可変領域（ＣＤＲ領域及び／若しくはフレームワーク領域を含む）の修飾を含み、又は、本開示の抗体若しくはその抗原結合部分は、さらに、Ｆｃ修飾、例えば、抗体のエフェクター機能を変更するものを含んでもよい。したがって、本開示の一実施形態によって提供される単離された抗ＣＤ４０モノクローナル抗体又はその抗原結合断片は、重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域を含み、重鎖可変領域は、本開示の上記の配列のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含み、軽鎖可変領域は、本開示の上記の配列のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含み、しかも本開示の上記の配列のフレームワーク配列と異なるフレームワークを含む。このようなフレームワーク配列は、生殖系列抗体遺伝子配列を含む公開ＤＮＡデータベース又は公開参照文献から得ることができる。このようなフレームワーク配列は、本開示の抗ＣＤ４０抗体で使用されるフレームワーク配列と構造的に類似するものであることが好ましい。ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列を当該フレームワーク配列の生殖系列免疫グロブリン遺伝子と同じ配列を有するフレームワーク領域に移植してもよいし、又はＣＤＲ配列を生殖系列配列と比べて１つ又は複数の変異を有するフレームワーク領域に移植してもよい。例えば、場合によっては、フレームワーク領域における残基に対する変異は、抗体の抗原結合能力を維持又は増強することができると役立てるものである（例えば、米国特許第５，５３０，１０１号、第５，５８５，０８９号、第５，６９３，７６２号、第６，１８０，３７０号を参照する）。

【0071】

別のタイプの可変領域修飾は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及び／又はＣＤＲ３領域内のアミノ酸残基を変異させることにより、目的抗体の１種又は複数種の特性（例えば、親和性、物理化学的性質）を改善することである。点変異又はＰＣＲによって媒介される変異で変異を導入することができ、当分野で知られているインビトロ又はインビボ測定で抗体結合又は他の機能特性に対する変異の影響を評価することができる。アミノ酸の置換、付加又は欠失であってもよく、好ましくは、置換である。また、一般的に、各ＣＤＲ領域内の１個、２個、３個、４個又は５個以下の残基を変更する。

【0072】

一実施形態では、本開示によって提供される抗体又はその抗原結合断片は、重鎖可変領域と、軽鎖可変領域とを含み、前記重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、（ａ）本開示の配列、又は１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加を有するアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域と、（ｂ）本開示の配列、又は１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加を有するアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域と、（ｃ）本開示の配列、又は１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加を有するアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域と、（ｄ）本開示の配列、又は１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加を有するアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域と、（ｅ）本開示の配列、又は１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加を有するアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域と、（ｆ）本開示の配列、又は１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失若しくは付加を有するアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域とを含む。

【0073】

本開示の抗体又はその抗原結合断片は、抗体の特性を改善するＶＨ及び／又はＶＬのフレームワーク領域修飾を含む。一般的に、このようなフレームワーク領域修飾は、抗体の免疫原性を低下させることができる。例えば、１つ又は複数のフレームワーク残基を対応する生殖系列配列に「復帰変異」させる。これらの残基は、抗体フレームワーク配列を、抗体の由来となる生殖系列配列と比較して認識することができる。

【0074】

別のタイプのフレームワーク修飾は、Ｔ細胞エピトープを除去することによって、抗体が引き起こし得る免疫原性を減少させるための、フレームワーク領域、又は１つ若しくは複数のＣＤＲ領域の１つ若しくは複数の残基に対する変異を含む。当該方法は、「脱免疫化」とも呼ばれ、米国特許開示第２００３０１５３０４３号で詳細に記述されている。

【0075】

また、本開示の抗体又はその抗原結合断片は、Ｆｃ修飾を含み、Ｆｃ修飾は、アミノ酸の挿入、欠失又は置換であってもよく、一般的に、抗体の１種又は複数種の機能特性、例えば、血中濃度半減期、補体結合、Ｆｃ受容体結合及び／又は抗原依存性細胞傷害性を変更する。

【0076】

また、本開示の抗体又はその抗原結合断片に対して、化学修飾（例えば、１つ又は複数の化学官能基の接続）、又は、抗体の１種若しくは複数種の機能特性を変更するためのそのグリコシル化を変更する修飾を行ってもよい。他の実施形態では、ペグ化（例えば、抗体又はその断片をポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と反応させること）によって、Ｆｃ領域を修飾する。

【0077】

別の実施形態では、本開示の抗体又はその抗原結合断片のグリコシル化を変更する。このようなグリコシル化修飾は、例えば、抗体配列中の１つ又は複数のグリコシル化部位を変更することによって実現できる。例えば、１つ又は複数のアミノ酸を置き換えて、１つ又は複数の可変領域のフレームワーク領域のグリコシル化部位を消去することにより、当該部位のグリコシル化を消去することができる。このような脱グリコシル化は、抗原に対する抗体の親和性を増加させることができる。例えば、米国特許第５，７１４，３５０号、第６，３５０，８６１号を参照する。

【0078】

本開示によって提供される抗体又はその抗原結合断片は、ＣＤ４０と結合することによって、ＣＤ４０活性を阻害する。「ＣＤ４０活性」は、Ｂ細胞の活性化、例えば、Ｂ細胞の増殖、抗体の産生、抗体アイソタイプのクラススイッチ又は形質細胞への分化；Ｔ細胞の活性化、例えば、Ｔ細胞の増殖又はサイトカイン分泌；樹状細胞の活性化、例えば、樹状細胞の増殖、分化及び成熟；マクロファージの活性化を含み、ただしそれらに限定されない。他の分子との相互作用によってＣＤ４０活性を阻害してもよい。また、「ＣＤ４０活性」は、腫瘍細胞の成長及び／又は増殖の阻害、腫瘍細胞のアポトーシスの誘導などをさらに含む。

【0079】

一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０と結合し、これによってＢ細胞の活性化は阻害される。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０と結合し、これによってＢ細胞の増殖は阻害される。

【0080】

一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０と結合し、これによってＴ細胞の活性化は阻害される。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０と結合し、これによってＴ細胞の増殖及び／又はサイトカインの産生は阻害される。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０と結合し、これによってＩＬ－２、ＩＦＮγ、ＴＮＦ、ＩＬ－１、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－１７及びＧＭ－ＣＳＦからなる群から選ばれる１種又は複数種のサイトカインの産生は阻害される。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０と結合し、これによってサイトカインＩＦＮγの産生は阻害される。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０と結合し、これによってサイトカインＩＬ－６の産生は阻害される。

【0081】

したがって、一態様で、本開示は、Ｔ細胞及び抗原提示細胞を本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片と接触させることを含む、免疫応答の調節方法を提供する。一実施形態では、混合リンパ球反応（ＭＬＲ）において、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片の免疫応答に対する調節を計測することができる。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＭＬＲでリンパ球のサイトカインの産生を阻害する。別の実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＭＬＲでサイトカインＩＦＮγの産生を阻害する。

【0082】

一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０と結合し、これによって樹状細胞の活性化は阻害される。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０と結合し、これによって樹状細胞の分化及び成熟は阻害される。

【0083】

一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０と結合し、これによって腫瘍細胞のアポトーシスは阻害される。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０と結合し、これによってＲａｍｏｓ細胞のアポトーシスは阻害される。

【0084】

本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＣＤ４０と結合する時に明らかな作動活性がない。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は腫瘍細胞のアポトーシスに明らかな作動活性がない。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＲａｍｏｓ細胞のアポトーシスに明らかな作動活性がない。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＢ細胞の活性化に明らかな作動活性がない。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片はＢ細胞の増殖に明らかな作動活性がない。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は樹状細胞の活性化に明らかな作動活性がない。一実施形態では、本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は樹状細胞の分化及び成熟に明らかな作動活性がない。「明らかな作動活性のない」物質には、試験で検出された作動活性は天然物又は陰性対照によって誘導された作動活性の約２５％以下であり、好ましくは、約２０％以下、約１５％以下、約１０％以下、約５％以下、約１％以下、約０．５％以下若しくは約０．１％以下であり、又は試験で検出された作動活性は陽性対照によって誘導された作動活性より少なくとも、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％又は１００％低いことが示される。一実施形態では、ＣＤ４０と結合しない非特異的な免疫グロブリン、例えば、ＩｇＧ４アイソタイプ対照抗体を陰性対照とする。一実施形態では、作動性抗ＣＤ４０抗体、例えば、ＣＰ－８７０８９３を陽性対照とする。

【0085】

本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、良好な安全性を有する。本開示によって提供される抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片は、シェーグレン症候群に良好な治療効果を有する。

【0086】

別の態様で、本開示は、１種又は複数種の本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片と薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。本明細書で使用される場合に、「薬学的に許容される担体」は、生理学的に適合するいずれか又は全ての溶媒、分散媒、塗料、抗菌剤、等張剤及びそれらの組み合わせを含む。適切な「薬学的に許容される担体」の選択及び使用については、Ｇｅｎｎａｒｏ，ｅｄ．，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ Ｅｄ．（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ ２００３）に教示がある。

【0087】

適切な方法又は経路のいずれかで抗体又は医薬組成物を投与することができる。投与経路は、例えば、静脈内、筋肉内、皮下、非経口、髄腔内又は表皮投与（例えば、注射又は注入）を含む。投与経路によって、酸及びそれを不活性化させ得る他の自然条件の影響を受けないよう、有効成分を材料でコーティングしてもよい。本明細書で使用される用語「非経口投与」とは、経腸及び局所投与以外の投与方式を指し、一般的に、注射を利用し、且つ、静脈内、筋肉内、動脈内、髄内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、くも膜下、脊髄内、硬膜外及び胸骨内の注射及び注入を含み、ただしそれらに限定されない。又は、医薬組成物は、経口経路によって、例えば、局所、表皮又は粘膜経路によって投与されてもよく、例えば、鼻腔内、経口、経膣、経直腸、舌下又は局所で投与される。

【0088】

抗体の投与について、用量は、約０．０００１～１００ｍｇ／ｋｇの宿主の体重の範囲内であってもよい。

【0089】

本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合部分には、免疫疾患の診断、治療及び／又は予防に関する様々なインビトロ及びインビボでの使用がある。「治療」とは、症状、病状、経過を軽減及び／若しくは安定化させ、疾患の進行を遅延及び／若しくは阻止し、及び／又は疾患の重症度を軽減させる方法を指す。本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合部分、コードする核酸、医薬組成物、組換えポリペプチド、融合タンパク質、二重特異性分子、免疫複合体、キメラ抗原受容体又は遺伝子ベクターは、前記被験者の免疫疾患を治療するために、ヒト被験者に投与されてもよい。

【0090】

別の態様で、本開示は、前記被験者に治療有効量の本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合部分、コードする核酸、医薬組成物、組換えポリペプチド、融合タンパク質、二重特異性分子、免疫複合体、キメラ抗原受容体又は遺伝子ベクターを投与することを含む、被験者で免疫疾患を治療又は予防する方法を提供する。いくつかの実施形態では、前記被験者はヒトである。

【0091】

「免疫疾患」とは、個体における免疫応答の進行に関連する疾患のいずれかを指し、細胞性及び／又は体液性の免疫応答を含む。いくつかの具体的な実施形態では、前記使用及び方法において、前記免疫疾患は、炎症性疾患、アレルギー反応、自己免疫疾患又は移植関連疾患を含み、ただしそれらに限定されない。炎症性疾患とは、過剰な又は制御不能な炎症応答によって引き起こされる過剰な炎症症状、宿主の組織損傷又は機能喪失による疾患、障害又は症状のいずれかを指し、皮膚、腎臓、消化器及び呼吸器のアレルギー性炎症、乾癬、腎炎、精巣上体炎、炎症性腸疾患、喘息などを含む。自己免疫疾患とは、免疫系の過剰な活性化によって引き起こされる体が自身の組織を攻撃し及び損傷する疾患、障害又は症状のいずれかを指し、例えば、多発性硬化症、関節炎、重症筋無力症、乾癬、強皮症、自己免疫性肝炎、自己免疫性耳下腺炎、Ｉ型糖尿病などである。

【0092】

いくつかの具体的な実施形態では、前記使用及び方法において、前記免疫疾患は、アレルギー反応、アジソン病（Ａｄｄｉｓｏｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、強直性脊椎炎、脊椎関節炎、喘息、アテローム性動脈硬化症、冠状動脈性心疾患、自己免疫性肝炎、自己免疫性耳下腺炎、Ｉ型糖尿病、精巣上体炎、腎炎、ライター症候群、甲状腺炎、グレーブス病（Ｇｒａｖｅｓ’ ｄｉｓｅａｓｅ）、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）、橋本病、溶血性貧血、特発性血小板減少症、全身性エリテマトーデス、亜急性皮膚エリテマトーデス、多発性硬化症、重症筋無力症、乾癬、強皮症、関節炎、サルコイドーシス、シェーグレン症候群、ドライアイ、化膿性汗腺炎、移植関連疾患、血管炎及び／又は炎症性腸疾患を含み、ただしそれらに限定されない。

【0093】

いくつかの実施形態では、移植関連疾患の例は、移植片拒絶反応、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を含み、ただしそれらに限定されない。

【0094】

いくつかの実施形態では、炎症性腸疾患の例は、クローン病、潰瘍性大腸炎を含み、ただしそれらに限定されない。

【0095】

いくつかの実施形態では、関節炎の例は、関節リウマチ、若年性関節炎、乾癬性関節炎を含み、ただしそれらに限定されない。

【0096】

いくつかの実施形態では、腎炎の例は、ループス腎炎を含み、ただしそれらに限定されない。

【0097】

いくつかの実施形態では、乾癬の例は、尋常性乾癬、膿疱性乾癬（例えば、掌蹠膿疱症、膿疱性乾癬（汎発型））、乾癬性紅皮症、乾癬性関節炎を含み、ただしそれらに限定されない。

【0098】

前記使用及び方法において、本開示の抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合部分は、単独で投与されてもよいし、又は第２治療剤と併用して投与されてもよい。いくつかの実施形態では、前記第２治療剤は、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、サリチル酸塩、ヒドロキシクロロキン、スルファサラジン、コルチコステロイド、細胞傷害性薬物、又は免疫抑制薬及び／若しくは抗体を含む。非ステロイド性抗炎症薬は、イブプロフェン、ナプロキセン、ジクロフェナク、インドメタシン、ケトロラク、メロキシカム、ピロキシカム、チアプロフェン酸、スリンダクを含み、ただしそれらに限定されない。免疫抑制薬及び／又は抗体は、シクロスポリン、タクロリムス（Ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ）、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、ＣＴＬＡ４－Ｉｇ融合体、抗Ｂリンパ球活性化抗体、抗Ｔ細胞抗体（例えば、抗ＣＤ－３）を含み、ただしそれらに限定されない。細胞傷害性薬物は、メトトレキサート、シクロホスファミドを含み、ただしそれらに限定されない。本明細書で検討される治療剤の併用は、薬学的に許容される担体中の単一の組成物として同時に投与されてもよいし、又は別々の組成物として同時に投与されてもよく、ただし各薬剤は薬学的に許容される担体に含まれる。別の実施形態では、治療剤の併用は順次投与することであってもよい。

【0099】

また、複数回の併用療法で投与し、且つ薬剤を順次投与する場合に、各時点での順次投与の順番は逆にしてもよいし又はそのままでもよく、順次投与は、同時投与又はその組み合わせのいずれかと共に行ってもよい。

【0100】

明瞭に理解されるために、例での説明及び実施例で上記の発明を詳細に記述しているが、本開示の教示によれば、特許請求の範囲の趣旨及び範囲から逸脱することなく他にも本開示にいくつかの変更及び補正を行ってもよいということが当業者に自明である。限定をするためではないが、本開示を下記の実施例でさらに説明する。また、当業者は、様々な重要でないパラメータを認識しやすいはずであり、前記パラメータを変更又は補正して実質的に類似している結果を得ることができる。

【0101】

特に断りがない限り、本開示を実施するにあたり、当分野の技術範囲内にあるタンパク質化学、生化学、組換えＤＮＡ技術及び薬理学の通常の方法を用いる。

【0102】

本開示は、また、下記のいくつかの具体的な実施形態を提供し、ただし本開示の保護範囲はそれらに限らない。
（実施形態１）単離された抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片であって、
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）重鎖ＣＤＲ１は配列番号９における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号９における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号９における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖ＣＤＲ１は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（８）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（９）重鎖ＣＤＲ１は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、若しくは
（１０）重鎖ＣＤＲ１は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、及び／又は
（ｉｉ）軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（２）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（３）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（４）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（５）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（６）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（７）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（８）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、若しくは
（９）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む、前記抗体又はその抗原結合断片。

【0103】

（実施形態２）前記抗体又はその抗原結合断片が、
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、２、５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、２、５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、３、５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、３、５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、４、５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、４、５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１８、１９、２０で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１８、１９、２０で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２４、２５、２６で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２４、２５、２６で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号３２、３３、３４で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３２、３３、３４で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４０、４１、４２で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４０、４１、４２で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（８）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４６、４７、４８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４６、４７、４８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、及び／又は
（ｉｉ）軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（２）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２１、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２１、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（３）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（４）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（５）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（６）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【0104】

（実施形態３）前記抗体又はその抗原結合断片が、
重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３と、軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）重鎖ＣＤＲ１は配列番号９における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号９における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号９における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（８）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（９）重鎖ＣＤＲ１は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（１０）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（１１）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（１２）重鎖ＣＤＲ１は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、又は
（１３）重鎖ＣＤＲ１は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む、実施形態１に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【0105】

（実施形態４）前記抗体又はその抗原結合断片が、
重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３と、軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、２、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、２、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、３、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、３、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、４、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、４、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１８、１９、２０、２１、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１８、１９、２０、２１、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２４、２５、２６、２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２４、２５、２６、２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号３２、３３、３４、３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３２、３３、３４、３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４０、４１、４２、４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４０、４１、４２、４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は
（８）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４６、４７、４８、４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４６、４７、４８、４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１～３のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【0106】

（実施形態５）前記抗体又はその抗原結合断片が、
（ｉ）重鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域は、９、１０、１１、１２、１３、２２、３０、３８、４４若しくは５２で示されるアミノ酸配列、又は配列番号９、１０、１１、１２、１３、２２、３０、３８、４４若しくは５２で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、及び／又は
（ｉｉ）軽鎖可変領域を含み、前記軽鎖可変領域は、配列番号１４、１５、１６、１７、２３、３１、３９、４５若しくは５３で示されるアミノ酸配列、又は配列番号１４、１５、１６、１７、２３、３１、３９、４５若しくは５３で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１～４のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【0107】

（実施形態６）前記抗体又はその抗原結合断片が、重鎖可変領域と、軽鎖可変領域とを含み、ただし、
（１）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号９、１４で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号９、１４で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１０、１５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１０、１５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１１、１５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１１、１５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１０、１６で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１０、１６で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１１、１６で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１１、１６で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１０、１７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１０、１７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１２、１７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１２、１７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（８）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１３、１７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１３、１７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（９）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号２２、２３で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２２、２３で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（１０）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号３０、３１で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３０、３１で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（１１）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号３８、３９で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３８、３９で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（１２）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号４４、４５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４４、４５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は
（１３）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号５２、５３で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号５２、５３で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１～５のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【0108】

（実施形態７）前記抗体又はその抗原結合断片が、重鎖定常領域と、軽鎖定常領域とをさらに含み、前記重鎖定常領域は、配列番号５４、５５若しくは５６で示されるアミノ酸配列又は配列番号５４、５５若しくは５６で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖定常領域は、配列番号５７で示されるアミノ酸配列又は配列番号５７で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含む、実施形態１～６のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【0109】

（実施形態８）前記抗体又はその抗原結合断片が、（ａ）ヒトＣＤ４０と結合し、（ｂ）サルＣＤ４０と結合し、（ｃ）ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌの相互作用を遮断し、及び／又は（ｄ）ＣＤ４０活性を阻害する、実施形態１～７のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【0110】

（実施形態９）前記抗体又はその抗原結合断片が、キメラ又はヒト化されたものである、実施形態１～８のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【0111】

（実施形態１０）前記抗体又はその抗原結合断片が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４アイソタイプである、実施形態１～９のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【0112】

（実施形態１１）前記抗体又はその抗原結合断片が、モノクローナル抗体、単特異性抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体、多重特異性抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）_２断片、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、ｄＡｂ断片、単離されたＣＤＲ領域、単鎖Ｆｖ分子又はそれらの組み合わせから選ばれる、実施形態１～１０のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【0113】

（実施形態１２）実施形態１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片と同じエピトープと結合する、単離された抗体又はその抗原結合断片。

【0114】

（実施形態１３）実施形態１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片と競合的にＣＤ４０と結合する、単離された抗体又はその抗原結合断片。

【0115】

（実施形態１４）実施形態１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片をコードする、単離された核酸分子。

【0116】

（実施形態１５）実施形態１４に記載の核酸分子を含む、発現ベクター。

【0117】

（実施形態１６）実施形態１４に記載の核酸分子又は実施形態１５に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。

【0118】

（実施形態１７）実施形態１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片を含む、組換えポリペプチド又は融合タンパク質。

【0119】

（実施形態１８）実施形態１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片を含む、二重特異性分子。

【0120】

（実施形態１９）実施形態１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片と、それに接続された治療剤、例えば、細胞傷害性薬物又は造影剤とを含む、免疫複合体。

【0121】

（実施形態２０）実施形態１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片と、１種又は複数種の薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。

【0122】

（実施形態２１）前記被験者に治療有効量の実施形態１～１１のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片、又は実施形態２０に記載の医薬組成物を投与することを含む、必要とする被験者で免疫疾患を治療又は予防する方法。

【0123】

（実施形態２２）前記免疫疾患は、炎症性疾患、アレルギー反応、自己免疫疾患又は移植関連疾患を含み、ただしそれらに限定されない、実施形態２１に記載の方法。

【0124】

（実施形態２３）前記免疫疾患は、アレルギー反応、アジソン病、強直性脊椎炎、脊椎関節炎、喘息、アテローム性動脈硬化症、冠状動脈性心疾患、自己免疫性肝炎、自己免疫性耳下腺炎、Ｉ型糖尿病、精巣上体炎、腎炎、ライター症候群、甲状腺炎、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本病、溶血性貧血、特発性血小板減少症、全身性エリテマトーデス、亜急性皮膚エリテマトーデス、多発性硬化症、重症筋無力症、乾癬、強皮症、関節炎、サルコイドーシス、シェーグレン症候群、ドライアイ、化膿性汗腺炎、移植関連疾患、血管炎及び／又は炎症性腸疾患を含み、ただしそれらに限定されない、実施形態２１に記載の方法。

【0125】

（実施形態２４）前記方法が、治療有効量の第２治療剤を投与することをさらに含む、実施形態２１～２３のいずれか一項に記載の方法。

【0126】

（実施形態２５）前記第２治療剤は、非ステロイド性抗炎症薬、サリチル酸塩、ヒドロキシクロロキン、スルファサラジン、コルチコステロイド、細胞傷害性薬物、又は免疫抑制薬及び／若しくは抗体を含む、実施形態２４に記載の方法。

【実施例】

【0127】

上記で一般的な説明及び具体的な実施形態を用いて本開示を詳細に記述しているが、本開示に対して、さらにいくつかの補正又は改良を行ってもよく、これは当業者に自明なことである。したがって、本開示の趣旨から逸脱することなく補正又は改良を行った場合に、そのいずれも本開示の保護を主張する範囲に属する。

【0128】

実施例１：マウス抗ＣＤ４０モノクローナル抗体の作製
組換えタンパク質の作製：
人工遺伝子合成により、マウス抗体の重鎖Ｆｃを含むヒトＣＤ４０組換えタンパク質（ｈＣＤ４０－ｍＦｃ、配列番号６４）及びサルＣＤ４０組換えタンパク質（ｃｙｎｏＣＤ４０－ｍＦｃ、配列番号６５）をコードするｃＤＮＡを得て、それぞれ、発現ベクターｐｃＤＮＡ３．１（＋）にサブクローニングし、ＣＨＯ細胞にトランスフェクトして一過性発現を行った。細胞培養上清を回収し、ＭａｂＳｅｌｅｃｔ Ｓｕｒｅ ＬＸ精製カラム（ＧＥ）を使用して組換えタンパク質ｈＣＤ４０－ｍＦｃ及びｃｙｎｏＣＤ４０－ｍＦｃを精製した。

【0129】

安定細胞株の構築：
人工遺伝子合成により、全長ｈＣＤ４０（配列番号６２）及びｃｙｎｏＣＤ４０（配列番号６３）をコードするｃＤＮＡをそれぞれ得て、次に発現ベクターｐｃＤＮＡ３．１（＋）にサブクローニングして、ｐｃＤＮＡ３．１－ｈＣＤ４０及びｐｃＤＮＡ３．１－ｃｙｎｏＣＤ４０組換えプラスミドを得た。次にＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎ３０００トランスフェクション試薬（Ｔｈｅｒｍｏ、カタログ番号Ｌ３００００１５）の取扱説明書に従って、２つの組換えプラスミドをそれぞれＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトして、安定細胞株ＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０及びＣＨＯ－Ｋ１－ｃｙｎｏＣＤ４０を得た。

【0130】

人工遺伝子合成により、全長ｈＣＤ４０Ｌ（配列番号６６）及びｃｙｎｏＣＤ４０Ｌ（配列番号６７）をコードするｃＤＮＡをそれぞれ得て、次に発現ベクターｐｃＤＮＡ３．１（＋）にサブクローニングして、ｐｃＤＮＡ３．１－ｈＣＤ４０Ｌ及びｐｃＤＮＡ３．１－ｃｙｎｏＣＤ４０Ｌ組換えプラスミドを得た。次にＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎ３０００トランスフェクション試薬（Ｔｈｅｒｍｏ、カタログ番号Ｌ３００００１５）の取扱説明書に従って、２つの組換えプラスミドをそれぞれＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトして、それぞれ、安定細胞株ＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０Ｌ及びＣＨＯ－Ｋ１－ｃｙｎｏＣＤ４０Ｌを得た。

【0131】

ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎ３０００トランスフェクション試薬（Ｔｈｅｒｍｏ、カタログ番号Ｌ３００００１５）の取扱説明書に従って、プラスミドｐＧＬ４．３２［ｌｕｃ２Ｐ／ＮＦ－κＢ－ＲＥ／Ｈｙｇｒｏ］Ｖｅｃｔｏｒ（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｅ８４９１）をＨＥＫ２９３Ｔ細胞にトランスフェクトして、安定細胞株２９３Ｔ－ＮＦκＢを得た。次に、さらにｐｃＤＮＡ３．１／Ｚｅｏ（＋）ベクターのＢａｍＨＩ及びＸｈｏＩ部位を全長ｈＣＤ４０（配列番号６２）のコード配列に挿入して、組換えプラスミドｐｃＤＮＡ３．１／Ｚｅｏ（＋）－ｈＣＤ４０を得た。ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎ３０００トランスフェクション試薬（Ｔｈｅｒｍｏ、カタログ番号Ｌ３００００１５）の取扱説明書に従って、組換えプラスミドｐｃＤＮＡ３．１／Ｚｅｏ（＋）－ｈＣＤ４０を２９３Ｔ－ＮＦκＢ細胞にトランスフェクトして、２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ安定細胞株を得た。

【0132】

マウスの免疫：
精製された組換えタンパク質ｈＣＤ４０－ｍＦｃ（配列番号６４）を抗原として、ｈＣＤ４０－ｍＦｃと完全フロイントアジュバント（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｆ５８８１－１０×１０ｍＬ）を体積比１：１で充分に混合して乳化し、皮下注射でマウスを免疫化した。初回免疫の２～４週間後、ｈＣＤ４０－ｍＦｃ又はｃｙｎｏＣＤ４０－ｍＦｃとアラム（Ａｌｕｍ）アジュバント（Ｔｈｅｒｍｏ、カタログ番号７７１６１）を体積比１：１の比率で充分に混合して乳化し、皮下注射と筋肉注射の交互の方式で２週間ごとに１回の追加免疫を行い、免疫は合計で６週間であった。免疫終了後、各マウスの血清を回収して抗ＣＤ４０特異的抗体の血清力価を検出した。後の脾細胞融合に備えて血清力価の高いマウスを選択した。

【0133】

ハイブリドーマの作製及びスクリーニング：
融合３～４日前に、ｈＣＤ４０－ｍＦｃの腹腔内注射で、マウスに対する融合前の急速免疫を行った。融合の当日に、無菌状態でマウスの脾臓を摘出し、研磨して赤血球を溶解し、次に電気融合緩衝液（ＢＴＸ、カタログ番号４７－０００１）で再懸濁させて、単細胞懸濁液を得て、細胞数２：１の比率で対数増殖期の骨髄腫細胞ＳＰ２／０と混合し、電気融合装置（ＢＴＸ）を用いて細胞融合を完了した。融合後の細胞を、１×ＨＡＴを含有しているハイブリドーマ培地（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１２０４５－０７６）と均一に混合して、３７℃、５％のＣＯ_２の条件で７日間培養した後にハイブリドーマ細胞を得た。マウス抗体のスクリーニングに備えて、ハイブリドーマ細胞培養上清を回収した。

【0134】

ＥＬＩＳＡ及びＦＡＣＳによりｈＣＤ４０結合活性を有すると検出したハイブリドーマ細胞を選択して増幅培養を行い、細胞が所定の数に達したら限界希釈法でサブクローニングを行った。次にサブクローニングされたハイブリドーマ細胞を３７℃、５％のＣＯ_２で７日間インキュベートした後、マウス抗体の更なるスクリーニングに備えて、サブクローニングされたハイブリドーマ細胞培養上清を回収した。

【0135】

マウス抗体の発現及び精製：
スクリーニングされたハイブリドーマ細胞を１０日間培養した後、遠心分離して細胞培養上清を回収し、次に細胞培養上清をプロテインＧカラム（Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ、カタログ番号Ｌ００２０９－１０）にロードして、ＰＢＳ緩衝液でプロテインＧカラムを溶出し、さらに１００ｍＭのグリシン（ｐＨ２．８）でプロテインＧカラムと結合した抗体を溶離し、直ちに１ＭのＴｒｉｓ－ＨＣで溶離液を中和した。次に、限外濾過法を用いてマウス抗体をＰＢＳ緩衝液に置換した。

【0136】

実施例２：マウス抗ＣＤ４０抗体の特性評価
ＥＬＩＳＡによる抗ＣＤ４０抗体の結合活性の測定：
ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）でｈＣＤ４０－Ｈｉｓタンパク質（Ａｃｒｏ、カタログ番号ＣＤ０－Ｈ５２２８）を０．１μｇ／ｍＬの濃度に希釈して、１００μＬ／ウェルで９６ウェルプレートにコーティングし、４℃で一晩インキュベートした。ＰＢＳＴ（０．５％のＴｗｅｅｎ－２０を含むＰＢＳ）で９６ウェルプレートを洗浄し、次に２００μＬ／ウェルでブロッキング溶液（１％のＢＳＡを含むＰＢＳＴ）を加え、室温で２時間ブロックした。ブロッキング溶液を捨て、１００μＬ／ウェルでハイブリドーマ細胞培養上清を加え、室温で２時間インキュベートした。ＰＢＳＴで９６ウェルプレートを洗浄した後、体積比１：１００００で希釈したＨＲＰ結合ヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏ、カタログ番号１１５－０３５－０６２）を加え、室温で１時間インキュベートした。ＰＢＳＴで９６ウェルプレートを洗浄した後、１００μＬ／ウェルでＴＭＢ溶液を加え、室温で暗所５分間インキュベートして、０．５ＭのＨ_２ＳＯ_４で反応を停止させた。Ｂｉｏ－ｒａｄ ｉＭａｒｋマイクロプレートリーダーを使用してＯＤ４５０値を読み取った。

【0137】

ＦＡＣＳによる抗ＣＤ４０抗体の結合活性の検出：
細胞濃度が５×１０^５個／ｍＬであるＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０細胞懸濁液を１００μＬ／ウェルで９６ウェルＵ底プレートに加え、次に１００μＬ／ウェルでハイブリドーマ細胞培養上清を加え、均一に混合した後に４℃で１時間インキュベートした。２％のＦＢＳを含むＰＢＳで細胞を洗浄した後、体積比１：５００で希釈したＰＥ結合ヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体（Ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ９７０４１）を加え、４℃で１時間インキュベートした。２％のＦＢＳを含むＰＢＳで細胞を洗浄し、次に細胞を２％のＦＢＳを含むＰＢＳに再懸濁させて、フローサイトメーター（ＢＤ ＡｃｃｕｒｉＣ６）を使用して染色の平均蛍光強度（ＭＦＩ）を検出することでＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０細胞に対する抗ＣＤ４０抗体の結合を分析した。

【0138】

抗ＣＤ４０抗体のＣＤ４０Ｌに対する２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞の結合を遮断する活性：
２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞上のｈＣＤ４０がＣＤ４０Ｌと相互作用すると、蛍光シグナルの発現の上方制御が誘導された。具体的には、対数増殖期の２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞を、２％のＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地に再懸濁させて、細胞濃度を５×１０^５個／ｍＬに調整し、次に１０μＬ／ウェルで３８４ウェル白色プレートに加え、ハイブリドーマ細胞培養上清又は勾配希釈された精製マウス抗ＣＤ４０抗体（抗体の最終濃度の範囲は０．０６４～５０００ｎｇ／ｍＬであり、５倍の勾配で希釈した）を加え、３７℃で振盪しながら２０分間インキュベートした。次に各ウェルに最終濃度が１０μｇ／ｍＬである１０μＬのヒトＣＤ４０Ｌタンパク質（Ａｃｒｏ、カタログ番号ＣＤＬ－Ｈ５２Ｄｂ）を加え、３７℃で振盪しながら２０分間インキュベートした後に３８４ウェルプレートを３７℃、５％のＣＯ_２の条件に移して静置しながら５～６時間インキュベートした。インキュベートした後にホタルルシフェラーゼキット（ｖａｚｙｍｅ、カタログ番号ＤＤ１２０１－０３）の取扱説明書に従って検出試薬を加え、マイクロプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｖａｒｉｏｓｋａｎ Ｆｌａｓｈ）を使用して蛍光シグナルを読み取り、相対蛍光強度（ＲＬＵ）でＣＤ４０Ｌによって媒介される２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞蛍光シグナルの上方制御に対する抗ＣＤ４０抗体の遮断活性を分析し、Ｇｒａｐｈｐａｄ ＰｒｉｓｍでＩＣ_５０値を計算した。図１Ａ及び図１Ｂに示すように、複数の精製されたマウス抗ＣＤ４０抗体は、ＣＤ４０Ｌに対する２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞の結合を遮断する活性を有する。

【0139】

Ｒａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対する抗ＣＤ４０抗体の阻害活性：
ＣＤ４０／ＣＤ４０Ｌによって媒介されるＭＡＰＫ活性化経路は、腫瘍細胞の増殖を阻害し腫瘍細胞のアポトーシスを誘導する潜在的なメカニズムである。ＣＤ４０を内因的に発現するヒトＢリンパ腫細胞Ｒａｍｏｓ（バーキット（Ｂｕｒｋｉｔｔ）リンパ腫細胞）をモデルとして、Ｒａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対する抗ＣＤ４０抗体の阻害活性を検出した。具体的には、細胞濃度が１×１０^６個／ｍＬであるＲａｍｏｓ細胞懸濁液を５０μＬ／ウェルで９６ウェルＵ底プレートに加え、勾配希釈された精製マウス抗ＣＤ４０抗体（最終濃度の範囲は０．０２～２０００ｎｇ／ｍＬであり、１０倍の勾配で希釈した）を加え、最終濃度が２μｇ／ｍＬであるヒトＣＤ４０Ｌタンパク質（Ａｃｒｏ、カタログ番号ＣＤＬ－Ｈ５２Ｄｂ）及び最終濃度が６０ｎｇ／ｍＬである組換えヒトＩＬ－４（Ａｃｒｏ、カタログ番号ＩＬ４－Ｈ４２１８）を加えた。均一に混合した後に３７℃、５％のＣＯ_２の条件で一晩インキュベートして、２％のＦＢＳを含むＰＢＳで細胞を洗浄し、次にＰＥ結合マウス抗ヒトＣＤ９５抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号３０５６０８）を加え、均一に混合した後に４℃で３０分間インキュベートした。細胞を洗浄した後に２％のＦＢＳを含むＰＢＳで細胞を再懸濁させ、フローサイトメーター（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ＩＱｕｅ３）を用いて蛍光シグナルを検出し、染色の平均蛍光強度（ＭＦＩ）で腫瘍細胞アポトーシス分子ＣＤ９５の発現状況を分析し、Ｇｒａｐｈｐａｄ ＰｒｉｓｍでＩＣ_５０値を計算した。図２に示すように、複数の精製されたマウス抗ＣＤ４０抗体は、ＣＤ４０Ｌ及びＩＬ－４によって誘導されたＲａｍｏｓ細胞のアポトーシスを阻害する活性を有する。

【0140】

実施例３：キメラ抗ＣＤ４０抗体の作製
キメラ抗体の構築：
実施例２でスクリーニングしたハイブリドーマ細胞（例えば、Ａ０１、Ａ０２、Ａ０３、Ｂ０１、Ｂ０２、Ｂ０３など）に対して、ＲＮＡ抽出キット（Ｔａｋａｒａ、カタログ番号９７６７）の取扱説明書に従って細胞からトータルＲＮＡを単離し、逆転写キット（Ｔｈｅｒｍｏ、カタログ番号Ｋ１６５２）によって第１鎖ｃＤＮＡを合成させた。第１鎖ｃＤＮＡを鋳型として、それぞれ、マウスＩｇＧプライマー及びＫａｐｐａプライマーと混合し、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）技術を用いてクローニングし配列決定を行って、マウスＩｇＧ抗体可変領域配列を得た。

【0141】

化学合成法を用いて、マウス抗体のＶＨ及びＶＬのＤＮＡ配列をそれぞれヒトＩｇＧ４（配列番号５４）重鎖定常領域及びＫａｐｐａ軽鎖定常領域（配列番号５７）のＤＮＡ配列に接続させ、次にｐｃＤＮＡ３．１（＋）ベクターにクローニングして組換えヒト－マウスキメラ抗体を構築した。これらのキメラ抗体を、それぞれ、Ｃｈｉ－Ａ０１、Ｃｈｉ－Ａ０２、Ｃｈｉ－Ａ０３、Ｃｈｉ－Ｂ０１、Ｃｈｉ－Ｂ０２及びＣｈｉ－Ｂ０３と命名した。

【0142】

参照抗体の構築：
イスカリマブ（Ｉｓｃａｌｉｍａｂ、ＣＦＺ５３３）を参照抗体として選択し、米国特許ＵＳ９２２１９１３Ｂ２に記載のアミノ酸配列に基づいて、化学合成法を用いて抗体の重鎖及び軽鎖のＤＮＡ配列を得て、ｐｃＤＮＡ３．１（＋）ベクターにクローニングして参照抗体を構築し（重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列は、本開示の配列番号５８及び５９を参照し、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は下線の部分で示す）、参照抗体は、本明細書でＢＭとも呼ばれる（即ち、Ｂｅｎｃｈｍａｒｋの略記）。

【0143】

キメラ抗体及び参照抗体の発現及び精製：
キメラ抗体及び参照抗体は、ｅｘｐｉＣＨＯシステム（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号Ａ２９１２９）を用いてそのトランスフェクションキットの取扱説明書に従って一過性トランスフェクション発現を行い、トランスフェクトした後に細胞を３７℃、８％のＣＯ_２の条件で振盪しながら６日間培養した。遠心分離して細胞培養上清を回収し、次に細胞培養上清をプロテインＡカラム（Ｇ．Ｅ．Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、カタログ番号１７－５４７４）にロードして、カラム１０個分のＰＢＳ緩衝液でプロテインＡカラムを洗浄し、さらに酢酸緩衝液（３００ｍＭの酢酸、ｐＨ３．６）でプロテインＡカラムと結合した抗体を溶離し、直ちに１ＭのＴｒｉｓ－ＨＣｌで溶離液を中和した。次に、限外濾過でキメラ抗体をＰＢＳ緩衝液に置換した。

【0144】

実施例４：キメラ抗ＣＤ４０抗体の特性評価
ＦＡＣＳによる抗ＣＤ４０抗体の結合活性の検出：
具体的な方法は、実施例２を参照し、いくつか変更があった。勾配希釈されたキメラ抗ＣＤ４０抗体及びＢＭ（最終濃度の範囲は０．０６４～５０００ｎｇ／ｍＬであり、５倍の勾配で希釈した）でハイブリドーマ細胞培養上清を置き換え、ＰＥ結合ロバ抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）（Ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ１０２４３９）でＰＥ結合ヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体を置き換えた。

【0145】

図３は、ＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０細胞に対するキメラ抗体の結合活性を示し、そのうち、Ｃｈｉ－Ａ０１及びＣｈｉ－Ａ０２のＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０細胞と結合するＥＣ_５０はＢＭと同等であった。

【0146】

Ｒａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対する抗ＣＤ４０抗体の阻害活性：
具体的な方法は、実施例２を参照し、いくつか変更があった。勾配希釈されたキメラ抗ＣＤ４０抗体、ＢＭ及びＩｇＧ４アイソタイプ対照抗体（最終濃度の範囲は０．０６４～１０００ｎｇ／ｍＬであり、５倍の勾配で希釈した）で勾配希釈された精製マウス抗体（最終濃度の範囲は０．０２～２０００ｎｇ／ｍＬであり、１０倍の勾配で希釈した）を置き換えた。

【0147】

表２及び表３は、ＣＤ４０Ｌ及びＩＬ－４によって誘導されたＲａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対するキメラ抗体の阻害活性を示し、そのうち、Ｃｈｉ－Ａ０１及びＣｈｉ－Ａ０２のＣＤ４０Ｌ及びＩＬ－４によって誘導された腫瘍細胞のアポトーシスを５０％阻害する濃度（ＩＣ_５０）は約５ｐＭであり、ＢＭのＩＣ_５０は１８．３２ｐＭ（Ｃｈｉ－Ａ０１及びＣｈｉ－Ａ０２の約３～４倍）であったことから、Ｃｈｉ－Ａ０１及びＣｈｉ－Ａ０２のＲａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対する阻害活性はＢＭより優れていることが示された。

【0148】

式：阻害％＝（ＣＤ４０Ｌ及びＩＬ－４とインキュベートした後にＲａｍｏｓがアポトーシスを誘導するＭＦＩ－ＣＤ４０Ｌ、ＩＬ－４及び抗ＣＤ４０抗体とインキュベートした後にＲａｍｏｓがアポトーシスを誘導するＭＦＩ）／（ＣＤ４０Ｌ及びＩＬ－４とインキュベートした後にＲａｍｏｓがアポトーシスを誘導するＭＦＩ－Ｒａｍｏｓを培地だけとインキュベートした後に自然にアポトーシスするＭＦＩ）×１００％で計算したところ、Ｃｈｉ－Ａ０１及びＣｈｉ－Ａ０２の平均最大阻害率はＢＭと同等であることが分かった。

【表2】

【表3】

【0149】

Ｒａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対する抗ＣＤ４０抗体の作動活性：
作動性抗ＣＤ４０抗体ＣＰ－８７０８９３（社内で調製したものであり、重鎖及び軽鎖の配列は本開示の配列番号６０及び６１を参照する）はＲａｍｏｓ細胞と結合するとＲａｍｏｓのアポトーシスを誘導する刺激シグナルを生じることができるということが知られている。Ｒａｍｏｓ細胞を用いてキメラ抗ＣＤ４０抗体の作動活性を検出し、具体的には、細胞濃度が５×１０^５個／ｍＬであるＲａｍｏｓ細胞懸濁液を１００μＬ／ウェルで９６ウェルＵ底プレートに加え、勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体（最終濃度の範囲は０．０１～１００００ｎｇ／ｍＬであり、１０倍の勾配で希釈した）を加え、均一に混合した後に３７℃、５％のＣＯ_２の培養条件で一晩インキュベートした。２％のＦＢＳを含むＰＢＳで細胞を洗浄し、次にＰＥ結合マウス抗ヒトＣＤ９５抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号３０５６０８）を加え、混合した後に４℃で３０分間インキュベートした。細胞を洗浄した後に２％のＦＢＳを含むＰＢＳで細胞を再懸濁させ、フローサイトメーター（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ＩＱｕｅ３）を用いて蛍光シグナルを検出し、染色の平均蛍光強度（ＭＦＩ）で腫瘍細胞アポトーシス分子ＣＤ９５の発現状況を分析した。図４の結果に示すように、キメラ抗体のＣｈｉ－Ａ０２、Ｃｈｉ－Ｂ０２及びＣｈｉ－Ｂ０３は、Ｒａｍｏｓ細胞のアポトーシスに弱い作動活性を有するが、キメラ抗体のＣｈｉ－Ａ０１、Ｃｈｉ－Ａ０３、Ｃｈｉ－Ｂ０１及びＢＭは、Ｒａｍｏｓ細胞のアポトーシスに作動活性を生じなかった。

【0150】

実施例５：ヒト化抗ＣＤ４０抗体の設計及び作製
ヒト化抗体の設計：
ＣＤＲ－ｇｒａｆｔ法を用いて、マウス抗体Ａ０１の重鎖可変領域配列及び軽鎖可変領域配列に対してタンパク質データベースで比較分析することで、最も高い配列相同性を有するヒト生殖系列抗体配列をスクリーニングした。マウス抗体の相補性決定領域（ＣＤＲ）をスクリーニングされたヒト生殖系列抗体配列のフレームワークにグラフトし、さらに、より多くの可変領域配列候補を得るためにＣＤＲ及び／又はフレームワーク中のアミノ酸残基を変異させた。

【0151】

軽鎖ＶＬとして、ヒト生殖系列フレームワーク配列ＩＧＫＶ１－３９＊０１とＩＧＫＪ１＊０１の組み合わせをヒト化配列の設計に用いて、軽鎖バリアントｈｚＡ０１Ｌ１（配列番号１５）を構築した。ヒト生殖系列フレームワーク配列ＩＧＫＶ３－２０＊０１とＩＧＫＪ１＊０１の組み合わせをヒト化配列の設計に用いて、軽鎖バリアントｈｚＡ０１Ｌ２（配列番号１６）を構築した。ヒト生殖系列フレームワーク配列ＩＧＫＶ２－３０＊０２とＩＧＫＪ２＊０２の組み合わせをヒト化配列の設計に用いて、軽鎖バリアントｈｚＡ０１Ｌ３（配列番号１７）を構築した。

【0152】

重鎖ＶＨとして、ヒト生殖系列フレームワーク配列ＩＧＨＶ４－４＊０８とＩＧＨＪ３＊０１の組み合わせをヒト化配列の設計に用いて、重鎖バリアントｈｚＡ０１Ｈ１、ｈｚＡ０１Ｈ３及びｈｚＡ０１Ｈ４（それぞれ、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１３を参照する）を構築した。ヒト生殖系列フレームワーク配列ＩＧＨＶ３－３３＊０１とＩＧＨＪ３＊０１の組み合わせをヒト化配列の設計に用いて、重鎖バリアントｈｚＡ０１Ｈ２（配列番号１１）を構築した。

【0153】

ヒト化抗体の構築：
化学合成法を用いて、上記のヒト化抗体のＶＨ及びＶＬのＤＮＡ配列をそれぞれヒトＩｇＧ４（配列番号５４）重鎖定常領域及びＫａｐｐａ軽鎖定常領域（配列番号５７）のＤＮＡ配列に接続させ、次にｐｃＤＮＡ３．１（＋）ベクターにクローニングして組換えヒト化抗体を構築した。表４は、ヒト化抗体のＶＨ及びＶＬ配列のマッチを示す。

【表4】

【0154】

ヒト化抗体の発現及び精製：
ヒト化抗体は、ｅｘｐｉＣＨＯ発現システム（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号Ａ２９１２９）を用いてそのトランスフェクションキットの取扱説明書に従って一過性トランスフェクションを行い、トランスフェクトした後に細胞を３７℃、８％のＣＯ_２の条件で振盪しながら６日間培養した。遠心分離して細胞培養上清を回収し、次に細胞培養上清とプロテインＡ磁気ビーズ（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ、カタログ番号Ｌ００２７３）を室温で振盪しながら２時間インキュベートし、ＰＢＳ溶液で洗浄した後、さらに酢酸緩衝液（３００ｍＭの酢酸、ｐＨ３．６）でプロテインＡ磁気ビーズと結合した抗体を溶離し、直ちに１ＭのＴｒｉｓ－ＨＣｌで溶離液を中和した。次に、限外濾過法を用いてヒト化抗体をＰＢＳ緩衝液に置換した。

【0155】

実施例６：ヒト化抗ＣＤ４０抗体の特性評価
抗ＣＤ４０抗体の親和性の測定：
ＦｏｒｔｅＢｉｏ生体分子間相互作用解析装置でｈＣＤ４０－Ｈｉｓタンパク質（Ａｃｒｏ、カタログ番号ＣＤ０－Ｈ５２２８）及びＣｙｎｏＣＤ４０－Ｈｉｓタンパク質（Ａｃｒｏ、カタログ番号ＣＤ０－Ｃ５２Ｈ６）に対するヒト化抗ＣＤ４０抗体の親和性を検出した。最初に、ＡＨＣバイオセンサー（Ｆｏｒｔｅｂｉｏ、カタログ番号１８－５０６０）を活性化させ、次にＡＨＣバイオセンサーを最終濃度が５μｇ／ｍＬである抗ＣＤ４０抗体溶液に浸漬して、抗体を捕捉した。さらにＡＨＣバイオセンサーを、勾配希釈された（最終濃度の範囲は１．５６～１００ｎＭであり、２倍の勾配で希釈した）ｈＣＤ４０－Ｈｉｓタンパク質及びＣｙｎｏＣＤ４０－Ｈｉｓタンパク質とそれぞれ結合させた。Ｆｏｒｔｅｂｉｏ生体分子間相互作用解析装置（Ｆｏｒｔｅｂｉｏ Ｏｃｔｅｔ ＲＥＤ９６ｅ）を用いて反応シグナルをリアルタイムに検出することによって結合及び解離曲線を得た。各サイクルの解離完了後、ＡＨＣバイオセンサーを再生させ、続いて次の捕捉を行い、サイクルを繰り返して異なる抗体のＣＤ４０に対する親和性の測定を完了した。ソフトウェアＦｏｒｔｅｂｉｏ Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｓｉｓ １１．０で１：１（Ｌａｎｇｍｕｉｒ）結合モデルでデータを分析し、Ｋ_ａ（Ｋ_ｏｎ）及びＫ_ｄ（Ｋ_ｄｉｓ）を測定し、Ｋ_Ｄ＝Ｋ_ｄ／Ｋ_ａで解離定数Ｋ_Ｄを計算し、より詳細な検出方法及び関連情報は、ｗｗｗ．ｆｏｒｔｅｂｉｏ．ｃｏｍを参照する。表５の結果に示すように、ヒト又はカニクイザルＣＤ４０抗原に対するヒト化抗体のｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４の結合親和性Ｋ_Ｄは０．１～１ｎＭであり、キメラＣｈｉ－Ａ０１の親和性と同等であった。

【表5】

【0156】

ＦＡＣＳによる抗ＣＤ４０抗体の結合活性の検出：
具体的な方法は、実施例２を参照し、いくつか変更があった。２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞でＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０細胞を置き換え、勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体（最終濃度の範囲は０．００６～１０００ｎｇ／ｍＬであり、３倍の勾配で希釈した）でハイブリドーマ細胞培養上清を置き換え、ＰＥ結合ロバ抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体（Ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ１０２４３９）でＰＥ結合ヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体を置き換え、フローサイトメーター（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ＩＱｕｅ３）でフローサイトメーター（ＢＤ Ａｃｃｕｒｉ Ｃ６）を置き換えた。

【0157】

図５の結果に示すように、１０～１００ｎｇ／ｍＬの濃度範囲内で、ヒト化抗体のｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４の２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞に対する結合が飽和に達しており、且つ飽和濃度に対応するＭＦＩ値はＢＭと同じレベルであった。

【0158】

抗ＣＤ４０抗体のＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０Ｌ細胞とｈＣＤ４０－ｍＦｃ、ＣＨＯ－Ｋ１－ＣｙｎｏＣＤ４０Ｌ細胞とｃｙｎｏＣＤ４０－ｍＦｃの結合を遮断する活性：
細胞濃度が３×１０^５個／ｍＬであるＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０Ｌ細胞懸濁液及びＣＨＯ－Ｋ１－ＣｙｎｏＣＤ４０Ｌ細胞懸濁液をそれぞれ１００μＬ／ウェルでそれぞれ９６ウェルＵ底プレートに加え、これに応じて最終濃度が２μｇ／ｍＬであるｈＣＤ４０－ｍＦｃタンパク質（社内で調製したもの、配列番号６４）又は最終濃度が２μｇ／ｍＬであるｃｙｎｏＣＤ４０－ｍＦｃタンパク質（社内で調製したもの、配列番号６５）を加え、次に勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体（最終濃度の範囲は３１２．５～４００００ｎｇ／ｍＬであり、２倍の勾配で希釈した）を加え、均一に混合した後に４℃で１時間インキュベートした。２％のＦＢＳを含むＰＢＳで細胞を洗浄し、体積比１：５００で希釈したＰＥ結合ヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体（Ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ９７０４１）を加え、４℃で３０分間インキュベートした。２％のＦＢＳを含むＰＢＳで細胞を洗浄し、次に細胞を２％のＦＢＳを含むＰＢＳに再懸濁させて、フローサイトメーター（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ＩＱｕｅ３）を使用して蛍光シグナルを検出し、染色の平均蛍光強度（ＭＦＩ）で抗ＣＤ４０抗体のｈＣＤ４０－ｍＦｃタンパク質、ＣＨＯ－Ｋ１－ｃｙｎｏＣＤ４０Ｌ細胞及びｃｙｎｏＣＤ４０－ｍＦｃタンパク質に対するＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０Ｌ細胞の結合を遮断する活性を分析し、ソフトウェアＧｒａｐｈＰａｄ ＰｒｉｓｍでＩＣ_５０値を計算した。表６の結果に示すように、ヒト化抗体のｈｚＡ０１－３．１及びｈｚＡ０１－３．４は、細胞レベルで遮断するＩＣ_５０がＢＭと同等であった。

【表6】

【0159】

抗ＣＤ４０抗体の２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞とＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０Ｌ細胞の結合を遮断する活性：
細胞濃度が２．５×１０^５個／ｍＬである２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞希懸濁液を２０μＬ／ウェルで９６ウェルプレートに加え、次に勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体（最終濃度の範囲は０．００７～２０００ｎｇ／ｍＬであり、６倍の勾配で希釈した）を加え、同時に細胞数１：１の比率でＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０Ｌ細胞懸濁液を加え、均一に混合した後に室温で２０分間インキュベートした。次に９６ウェルプレートを３７℃、５％のＣＯ_２の条件に移して静置しながら５～６時間インキュベートした。インキュベートした後にホタルルシフェラーゼキット（ｖａｚｙｍｅ、カタログ番号ＤＤ１２０１－０３）の取扱説明書に従って検出試薬を加え、マイクロプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｖａｒｉｏｓｋａｎ Ｆｌａｓｈ）を使用して細胞蛍光シグナルを検出し、相対蛍光強度（ＲＬＵ）でＣＤ４０Ｌによって媒介される２９３Ｔ－ｈＣＤ４０－ＮＦκＢ細胞蛍光シグナルの上方制御に対する抗ＣＤ４０抗体の遮断活性を分析した。図６の結果に示すように、０～２μｇ／ｍＬの濃度範囲内で、ヒト化抗体のｈｚＡ０１－１．１、ｈｚＡ０１－２．１、ｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４は、いずれも顕著な遮断活性を示した。

【0160】

Ｒａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対する抗ＣＤ４０抗体の阻害活性：
具体的な方法は、実施例２を参照し、いくつか変更があった。勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体（最終濃度の範囲は０．００７～２０００ｎｇ／ｍＬであり、６倍の勾配で希釈した）で勾配希釈された精製マウス抗ＣＤ４０抗体（最終濃度の範囲は０．０２～２０００ｎｇ／ｍＬであり、１０倍の勾配で希釈した）を置き換えた。

【0161】

図７の結果に示すように、０～２μｇ／ｍＬの濃度範囲内で、ヒト化抗体のｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４はいずれも持続的な阻害活性を示しており、その阻害ＩＣ_５０がＢＭより３～４倍低かった。

【0162】

Ｒａｍｏｓ細胞のアポトーシスに対する抗ＣＤ４０抗体の作動活性：
具体的な方法は、実施例４を参照し、いくつか変更があった。勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体（最終濃度の範囲は０．０１～２０００ｎＭであり、５倍の勾配で希釈した）で勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体（最終濃度の範囲は０．０１～１００００ｎｇ／ｍＬであり、１０倍の勾配で希釈した）を置き換えた。

【0163】

図８の結果に示すように、ヒト化抗体のｈｚＡ０１－１．１及びｈｚＡ０１－２．１は弱い作動活性を有し、ヒト化抗体のｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４は０．０１～２０００ｎＭの濃度範囲内でいずれもＢＭより顕著な作動活性を生じなかった。

【0164】

末梢血Ｂリンパ球の活性化に対する抗ＣＤ４０抗体の阻害活性：
ヒト末梢血に由来するＢリンパ球（ＰＢＭＣ－Ｂ）において発現されたＣＤ４０は、ＣＤ４０Ｌと結合して、Ｂ細胞の活性化を誘導することにより、細胞表面の活性化シグナルの上方制御（例えば、ＣＤ８６）を引き起こすことができる。ヒトＢリンパ球精製キット（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ、カタログ番号１７９５４）を用いて健常者のＰＢＭＣに由来するＢリンパ球を単離及び精製し、細胞濃度が１×１０^６個／ｍＬである末梢血Ｂリンパ球懸濁液を５０μＬ／ウェルで９６ウェルＵ底プレートに加え、勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体（最終濃度の範囲は０．００２～２０００ｎｇ／ｍＬであり、１０倍の勾配で希釈した）を加え、次に細胞数１：１の比率でＣＨＯ－Ｋ１－ｈＣＤ４０Ｌ細胞懸濁液を加えた。３７℃、５％のＣＯ_２の条件で一晩インキュベートした。２％のＦＢＳを含むＰＢＳ溶液で細胞を洗浄し、次にＰＥ結合マウス抗ヒトＣＤ８６抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号３０５４３８）を加え、細胞と均一に混合した後に４℃で３０分間インキュベートした。２％のＦＢＳを含むＰＢＳ溶液で細胞を洗浄して再懸濁させ、フローサイトメーター（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ＩＱｕｅ３）を用いてＢ細胞によって発現された共刺激分子ＣＤ８６の平均蛍光強度（ＭＦＩ）を検出し、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍで分析してＩＣ_５０値を計算した。図９の結果に示すように、ヒト化抗体のｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４はいずれもＣＤ４０Ｌによって誘導されたヒト末梢血Ｂリンパ球ＣＤ８６の発現に対する阻害活性を示しており、且つＩＣ_５０がＢＭより約２～４倍低かった。

【0165】

末梢血Ｂリンパ球の増殖に対する抗ＣＤ４０抗体の阻害活性：
ヒト末梢血に由来するＢリンパ球（ＰＢＭＣ－Ｂ）において発現されたＣＤ４０は、ＣＤ４０Ｌとして結合、Ｂ細胞の増殖を誘導することができる。細胞濃度が１×１０^６個／ｍＬであるヒト末梢血Ｂリンパ球懸濁液を５０μＬ／ウェルで９６ウェルＵ底プレートに加え、勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体（最終濃度の範囲は０．００００３５～３５ｎＭであり、１０倍の勾配で希釈した）を加え、最終濃度が２μｇ／ｍＬであるヒトＣＤ４０Ｌタンパク質（Ａｃｒｏ、カタログ番号ＣＤＬ－Ｈ５２Ｄｂ）及び最終濃度が６０ｎｇ／ｍＬである組換えヒトＩＬ－４タンパク質（Ａｃｒｏ、カタログ番号ＩＬ４－Ｈ４２１８）を加えた。均一に混合した後に３７℃、５％のＣＯ_２の条件で５日間インキュベートした。細胞を回収して、ＰＢＳ緩衝液で細胞を洗浄して再懸濁させ、次にＣｅｌｌＴｉｔｅｒ Ｇｌｏルシフェラーゼ細胞活性検出試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ７５７２）を加え、蛍光マイクロプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｖａｒｉｏｓｋａｎ Ｆｌａｓｈ）で細胞蛍光シグナルを検出し、相対蛍光強度（ＲＬＵ）でヒト末梢血Ｂリンパ球の増殖を分析し、Ｇｒａｐｈｐａｄ ＰｒｉｓｍでＩＣ_５０値を計算した。図１０の結果に示すように、ヒト化抗体のｈｚＡ０１－３．１、ｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４のＣＤ４０Ｌ及びＩＬ－４によって誘導されたヒト末梢血Ｂリンパ球の増殖を阻害するＩＣ_５０は、ＢＭより約３～６倍低かった。

【0166】

抗ＣＤ４０抗体の末梢血Ｂリンパ球の増殖を誘導する活性：
細胞濃度が１×１０^６個／ｍＬである健常者の末梢血Ｂリンパ球懸濁液を５０μＬ／ウェルで９６ウェルＵ底プレートに加え、勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体（最終濃度の範囲は０．０００３５～３５０ｎＭであり、１０倍の勾配で希釈した）を加え、３７℃、５％のＣＯ_２の条件で５日間インキュベートした。細胞を回収して、ＰＢＳ緩衝液で細胞を洗浄して再懸濁させ、次にＣｅｌｌＴｉｔｅｒ Ｇｌｏルシフェラーゼ細胞活性検出試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ７５７２）を加え、蛍光マイクロプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｖａｒｉｏｓｋａｎ Ｆｌａｓｈ）を用いて細胞蛍光シグナルを検出し、相対蛍光強度（ＲＬＵ）で末梢血Ｂリンパ球の増殖を分析した。図１１の結果に示すように、ヒト化抗体ｈｚＡ０１－３．１は、高濃度（３５０ｎＭ）の場合にわずかな増殖を誘導し、ヒト化抗体のｈｚＡ０１－３．３及びｈｚＡ０１－３．４は０～３５０ｎＭの濃度範囲内でいずれもＢＭより顕著な作動活性を生じなかった。

【0167】

混合リンパ球反応（ＭＬＲ）に対する抗ＣＤ４０抗体の阻害効果：
単球単離キット（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ、カタログ番号１９３５９）の取扱説明書に従って健常者のＰＢＭＣから単球を単離し、次に細胞濃度を１×１０^６個／ｍＬに調整した。ＤＣ細胞培養キット（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ、カタログ番号１０９８５）の取扱説明書に従ってＤＣ細胞分化誘導剤を加え、３７℃、５％のＣＯ_２の培養条件で５日間インキュベートし、さらにＤＣ細胞成熟促進剤を加え、引き続き２日間培養して、単球を完全成熟したＤＣ細胞（ｍＤＣ）に分化させた。

【0168】

ＥａｓｙＳｅｐ（商標）ＣＤ４陽性Ｔ細胞単離キット（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ、カタログ番号１７９５２）の取扱説明書に従って健常者のＰＢＭＣからＣＤ４^＋Ｔ細胞を単離し、次に細胞濃度を２×１０^６個／ｍＬに調整した。ｍＤＣ細胞を１×１０^４個／ウェルで９６ウェルＵ底プレートに加え、勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体又はＩｇＧ４アイソタイプ対照抗体（最終濃度の範囲は１０～１００００ｎｇ／ｍＬであり、１０倍の勾配で希釈した）を加え、均一に混合した後に室温で３０分間インキュベートし、続いてｍＤＣとＣＤ４^＋Ｔの細胞数１：２０の比率でＣＤ４^＋Ｔ細胞懸濁液を加え、均一に混合した後に３７℃、５％のＣＯ_２の条件で９６時間培養し、遠心分離して培養上清を回収した。

【0169】

ＩＦＮγ検出キット（Ｒ＆Ｄ、カタログ番号ＤＹ２８５Ｂ）の取扱説明書に従って、ＥＬＩＳＡにより培養上清中のＩＦＮγを検出し、マイクロプレートリーダー（Ｂｉｏ－ｒａｄ ｉＭａｒｋ）を使用してＯＤ４５０吸光度を読み取り、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍでの計算によりＩＦＮγ濃度を分析した。図１２の結果に示すように、ヒト化抗体ｈｚＡ０１－３．３は、１０～１００００ｎｇ／ｍＬの濃度範囲内で混合リンパ球反応を濃度依存的に阻害し、且つ飽和濃度（１０００～１００００ｎｇ／ｍＬ）におけるＩＦＮγの放出量がＢＭより少なく、これは飽和濃度では混合リンパ球反応に対するｈｚＡ０１－３．３の阻害能力はＢＭより優れていることを示した。

【0170】

樹状細胞の成熟に対する抗ＣＤ４０抗体の作動活性：
単球単離キット（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ、カタログ番号１９３５９）の取扱説明書に従ってＰＢＭＣから単球を単離し、ＤＣ細胞分化誘導剤（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ、カタログ番号１０９８８）で５日間誘導培養して、成熟不完全のＤＣ細胞（ｉｍＤＣ）を回収し、細胞濃度を１×１０^６個／ｍＬに調整した。ｉｍＤＣ細胞懸濁液を５０μＬ／ウェルで９６ウェルプレートに加え、次に勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体又はＩｇＧ４アイソタイプ対照抗体（最終濃度の範囲は１００～１００００ｎｇ／ｍＬであり、１０倍の勾配で希釈した）を加え、３７℃、５％のＣＯ_２の条件で一晩インキュベートした。細胞を回収し、２％のＦＢＳを含むＰＢＳで細胞を洗浄して再懸濁させ、ＡＰＣ結合マウス抗ヒトＣＤ８３抗体（ＢＤ、カタログ番号５５１０７３）を加え、均一に混合した後に４℃で３０分間インキュベートし、２％のＦＢＳを含むＰＢＳで細胞を洗浄して再懸濁させ、フローサイトメーター（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ＩＱｕｅ３）を用いて細胞蛍光シグナルを検出し、染色の平均蛍光強度（ＭＦＩ）で細胞表面のＣＤ８３の発現状況を分析した。ＣＤ８３の発現は成熟ＤＣ細胞の特異的なマーカーであり、図１３の結果に示すように、ＣＰ－８７０８９３は、ｉｍＤＣ細胞の成熟を明らかに促進する効果を有するが、ヒト化抗体ｈｚＡ０１－３．３及びＢＭはいずれもｉｍＤＣ細胞の成熟に対して明らかな作動活性を生じなかった。

【0171】

実施例７：抗ＣＤ４０抗体のＦｃ効果
ヒトＢ細胞、ＤＣ細胞、ＰＢＭＣなどの細胞の表面にＦｃ受容体（ＦｃＲ）が発現され、抗ＣＤ４０抗体はＦｃ末端がＦｃＲと結合すると、抗体Ｆｃ架橋結合（Ｆｃ Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ）を媒介して作動活性を生じるか、又は抗体依存性細胞傷害活性（ＡＤＣＣ）若しくは補体依存性細胞傷害活性（ＣＤＣ）を媒介してＢ細胞の枯渇を引き起こすことがある。

【0172】

細胞濃度が１×１０^６個／ｍＬであるＲａｍｏｓ細胞懸濁液を５０μＬ／ウェルで９６ウェルＵ底プレートに加え、抗ＣＤ４０抗体（最終濃度の範囲は１～１０μｇ／ｍＬであり、１０倍の勾配で希釈した）を加え、均一に混合した後に室温で２０分間インキュベートした。次に最終濃度が２μｇ／ｍＬである抗ヒトＩｇＧ Ｆｃγ抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏ、カタログ番号１０９－００５－１９０）を加え、均一に混合した後に３７℃、５％のＣＯ_２の条件で一晩インキュベートした。遠心分離して細胞を回収し、２％のＦＢＳを含むＰＢＳで洗浄して細胞を再懸濁させ、フローサイトメーター（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ＩＱｕｅ３）を用いて細胞蛍光シグナルを検出し、染色の平均蛍光強度（ＭＦＩ）でＲａｍｏｓ細胞上のアポトーシス分子ＣＤ９５の発現状況を分析した。表７の結果に示すように、１～１０μｇ／ｍＬの濃度範囲内で、ヒト化抗体ｈｚＡ０１－３．３は、ＢＭより顕著に高い架橋結合刺激活性を生じておらず、且つ架橋結合作動活性がＣＰ－８７０８９３をはるかに下回った。

【表7】

【0173】

Ｒａｍｏｓ細胞を標的細胞として、Ｊｕｒｋａｔ－ＮＦＡＴ－Ｌｕｃ細胞（Ｐｒｏｍｅｇａ）をエフェクター細胞として、抗ＣＤ４０抗体によって媒介されるＡＤＣＣ効果を評価した。具体的には、細胞濃度が１×１０^６個／ｍＬであるＲａｍｏｓ細胞懸濁液を５０μＬ／ウェルで９６ウェルプレートに加え、勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体又はリツキシマブ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）（最終濃度の範囲は０．４６～１０００ｎｇ／ｍＬであり、３倍の勾配で希釈した）を加え、均一に混合した後に室温で２０分間インキュベートした。次に細胞濃度が５×１０^６個／ｍＬであるＪｕｒｋａｔ－ＮＦＡＴ－Ｌｕｃ細胞懸濁液を１００μＬ／ウェルで９６ウェルプレートに加え、ただし、標的細胞数とエフェクター細胞数の比率は１：１０であり、均一に混合した後に３７℃で５時間インキュベートした。遠心分離して細胞を回収し、ＰＢＳで洗浄した後、Ｌｕｃ蛍光検出試薬（蘇州瑞安、カタログ番号ＲＡ－ＧＬ０３）を加え、蛍光マイクロプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｖａｒｉｏｓｋａｎ Ｆｌａｓｈ）を用いて細胞蛍光シグナルを検出し、相対蛍光シグナル（ＲＬＵ）の値で抗ＣＤ４０抗体によって媒介されるＡＤＣＣ効果を分析した。図１４の結果に示すように、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）は顕著なＡＤＣＣ効果を有するが、ヒト化抗体ｈｚＡ０１－３．３及びＢＭはいずれもＡＤＣＣ活性を示さなかった。

【0174】

細胞濃度が１×１０^６個／ｍＬであるＲａｍｏｓ細胞懸濁液を５０μＬ／ウェルで９６ウェルプレートに加え、５０μＬ／ウェルで勾配希釈された抗ＣＤ４０抗体又はリツキシマブ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）（最終濃度の範囲は２．４～４００００ｎｇ／ｍＬであり、４倍の勾配で希釈した）を加え、同時に２５μＬ／ウェルでヒト血清補体タンパク質（Ｑｕｉｄｅｌ、カタログ番号Ａ１１２）を加え、均一に混合した後に３７℃、５％のＣＯ_２の培養条件で一晩インキュベートした。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ Ｇｌｏルシフェラーゼ細胞活性検出キット（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ７５７２）の取扱説明書に従って検出試薬を加え、蛍光マイクロプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｖａｒｉｏｓｋａｎ Ｆｌａｓｈ）を用いて細胞蛍光シグナルを検出し、相対蛍光シグナル（ＲＬＵ）で生存細胞を分析した。結果から分かるように、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）は顕著なＣＤＣ殺傷活性を有するが、ヒト化抗体ｈｚＡ０１－３．３はＢＭと同じで、いずれもＣＤＣ殺傷効果を示しておらず（図１５）、ＣＤＣ殺傷率％＝（標的細胞の蛍光値－抗体群の蛍光値）÷（標的細胞の蛍光値－検出試薬で処理した標的細胞の蛍光値）×１００％であった。

【0175】

実施例８：ヒト化抗ＣＤ４０抗体のインビボ薬力学
健常者のＰＢＭＣ細胞をＮＤＧ免疫不全マウスの体内に移植して免疫を再構築して、ヒト抗体を産生するマウスモデルを構築した。一方では、ヒトＰＢＭＣはマウス抗原に応答して、ヒト抗マウスＩｇＧ抗体及びヒト抗マウスＩｇＭ抗体を産生し、他方では、マウスの体内のヒトＰＢＭＣ細胞はＫＬＨなどの外来タンパク質の刺激を受けると抗ＫＬＨ特異的抗体を産生する。ヒト抗体を産生するマウスモデルの構築方法は次のとおりであった。６～８週齢の雌のＮＤＧ免疫不全マウスを選択し（百奥賽図より購入）、０日目に、各マウスに１×１０^７個の健常者のＰＢＭＣ細胞を尾静脈注射し、０～５日目に、毎日に各マウスに１０μｇの組換えヒトＩＬ－４（Ａｃｒｏ、カタログ番号ＩＬ４－Ｈ４２１８）を腹腔内注射し、０日目及び７日目に、各マウスに５０μｇのＫＬＨタンパク質（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｈ７０１７－２０ＭＧ）を腹腔内注射した。表８のとおりにマウスを群分けし、０日目から、各マウスに対して週１回投与の頻度で、連続３回で抗体薬物を腹腔内注射した。

【0176】

８日目、１４日目及び２１日目に、各マウスの血液サンプルを採取して血清を単離した。ヒトＩｇＧ ＥＬＩＳＡ検出キット（Ｔｈｅｒｍｏ、カタログ番号ＢＭＳ２０９１）及びヒトＩｇＭ ＥＬＩＳＡ検出キット（Ｎｏｖｕｓ、カタログ番号ＮＢＰ２－６０４７７）の取扱説明書に従って、それぞれ、マウス血清中のヒト抗マウスＩｇＧ抗体及びヒト抗マウスＩｇＭ抗体の濃度を検出した。マイクロプレートリーダー（Ｂｉｏ－ｒａｄ ｉＭａｒｋ）を使用してＯＤ４５０吸光度を読み取り、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍでの計算により血清中のヒト抗マウスＩｇＧ抗体及びヒト抗マウスＩｇＭ抗体の濃度を分析した。また、次の方法を用いてマウス血清中の抗ＫＬＨ抗体の力価を検出した。濃度が２μｇ／ｍＬであるＫＬＨタンパク質（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｈ７０１７－２０ＭＧ）を１００μＬ／ウェルで９６ウェルプレートに加え、４℃で一晩インキュベートした。ＰＢＳＴで９６ウェルプレートを洗浄した後、２００μＬ／ウェルでブロッキング溶液（１％のＢＳＡを含むＰＢＳＴ）を加え、室温で２時間ブロックした。ブロッキング溶液を捨て、次に１００μＬ／ウェルで勾配希釈されたマウス血清を加え、室温で２時間インキュベートした。ＰＢＳＴで９６ウェルプレートを洗浄した後、体積比１：１００００で希釈したＨＲＰ結合ヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏ、カタログ番号１０９－０３５－０８８）を加え、室温で１時間インキュベートした。ＰＢＳＴで９６ウェルプレートを洗浄した後、１００μＬ／ウェルでＴＭＢ溶液を加え、室温で暗所５分間インキュベートして、０．５ＭのＨ_２ＳＯ_４で反応を停止させ、Ｂｉｏ－ｒａｄ ｉＭａｒｋマイクロプレートリーダーにおいて４５０ｎＭの吸光度を読み取った。結果から分かるように、ＩｇＧ４アイソタイプ群と比べて、ヒト化抗体ｈｚＡ０１－３．３はヒト抗マウスＩｇＧ抗体及びヒト抗マウスＩｇＭ抗体の産生を顕著に阻害することができ（図１６Ａ及び図１６Ｂ）、且つｈｚＡ０１－３．３治療群はＫＬＨに対して特異的抗体を生じなかった（データは不記載）。

【0177】

２２日目に、マウスを殺した後に脾臓を摘出し、重量を量って各群のマウスの脾臓係数（脾臓係数＝脾臓の重量／マウスの体重×１０００）を分析した。結果は表８を参照し、ＩｇＧ４アイソタイプ対照群でマウスの脾臓は明らかに腫大し且つ脾臓係数は明らかに高くなったが、ｈｚＡ０１－３．３（０．５ｍｇ／ｋｇ）群及びｈｚＡ０１－３．３（５ｍｇ／ｋｇ）群でマウスの脾臓腫大は明らかに緩和され、ｈｚＡ０１－３．３はマウスの脾臓係数を用量依存的に低下させ、ｈｚＡ０１－３．３（５ｍｇ／ｋｇ）群とＢＭ（５ｍｇ／ｋｇ）群のマウスの脾臓係数は同等であった。

【表8】

【0178】

また、フローサイトメトリーを用いて各群のマウスの脾臓内に浸潤されたヒトＴリンパ球及びＢリンパ球の含有量を分析し、具体的には、マウスの脾臓を摘出して単細胞懸濁液を調製し、細胞濃度を１×１０^６個／ｍＬに調整して、１００μＬ／ウェルで９６ウェルＵ底プレートに加え、それぞれ、ＰＥ結合マウス抗ヒトＣＤ４抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号９８０８０４）、ＡＰＣ結合マウス抗ヒトＣＤ１９抗体（ＢＤ、カタログ番号５５５４１５）を加え、均一に混合した後に４℃で３０分間インキュベートし、２％のＦＢＳを含むＰＢＳで洗浄して細胞を再懸濁させ、フローサイトメーター（Ｔｈｅｒｍｏ Ａｔｔｕｎｅ Ｎｘｔ）を用いて細胞蛍光シグナルを検出し、染色細胞数のパーセンテージ（％）でマウスの脾臓内に浸潤されたヒトＣＤ４^＋Ｔ細胞及びＣＤ１９^＋Ｂ細胞の含有量を分析した。結果（図１７）から分かるように、２２日目に、ＩｇＧ４アイソタイプ対照群でマウスの脾臓に大量のヒトＣＤ４^＋Ｔ細胞及びヒトＣＤ１９^＋Ｂ細胞が浸潤されたが、ｈｚＡ０１－３．３（０．５ｍｇ／ｋｇ）及びｈｚＡ０１－３．３（５ｍｇ／ｋｇ）群でマウスの脾臓内に浸潤されたＴ細胞及びＢ細胞はＩｇＧ４アイソタイプ群を顕著に下回り、ｈｚＡ０１－３．３はヒトＴ細胞及びＢ細胞の浸潤含有量を用量依存的に低下させた。

【0179】

実施例９：顎下腺タンパク質によって誘導されたｈＣＤ４０／ｈＣＤ４０Ｌ遺伝子組み替えマウスのシェーグレン症候群モデルにおける抗ＣＤ４０抗体の薬力学評価
次の方法で抗原を作製した。Ｃ５７ＢＬ／６マウスを２０匹（６～８週齢、雌、百奥賽図医薬科技股▼フン▲有限公司提供）を用い、顎下腺を採取して、被膜及び結合組織を単離し、４℃でＰＢＳ（Ｓｅｒｖｉｃｅｂｉｏ、カタログ番号Ｇ４２０２－５００ＭＬ）を用いて洗浄した。低温環境で、機械的にホモジナイズし、その後、遠心分離して上清を取り出して、顎下腺タンパク質を得て、顎下腺タンパク質を抗原とした。

【0180】

次の方法でｈＣＤ４０／ｈＣＤ４０Ｌマウスのシェーグレン症候群モデルを構築した。０日目及び７日目に、抗原と完全フロイントアジュバント（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｆ５８８１）を１：１（ｖ／ｖ）混合して顎下腺タンパク質エマルジョンを作り、ｈＣＤ４０／ｈＣＤ４０Ｌマウス（北京維通利華実験動物技術有限公司）の背部に２箇所皮下注射し、全量は２００μＬであった。１４日目に、抗原と不完全フロイントアジュバント（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｆ５５０６）を１：１（ｖ／ｖ）混合して顎下腺タンパク質エマルジョンを作り、ｈＣＤ４０／ｈＣＤ４０Ｌマウスの背部に２箇所皮下注射し、全量は２００μＬであった。

【0181】

ｈＣＤ４０／ｈＣＤ４０Ｌマウスを初期唾液量の平均値で５群に分け、０日目から、週２回投与し、合計で１０回（それぞれ、０日目に、４日目に、７日目に、１１日目に、１４日目に、１８日目に、２１日目に、２５日目に、２８日目に、及び３２日目に）投与し、３５日目に試験を終了し、期間中に２週ごとに１回重量を量った。群分け及び投与計画は表９に示すとおりであった。

【表9】

【0182】

唾液流量率の計測、顎下腺指数の計算、顎下腺ＩＬ－６の検出、血液及び脾臓のフローサイトメトリー検出及び顎下腺のＨＥ病理染色検査でｈｚＡ０１－３．３の薬力学評価を行い、具体的な方法は次のとおりであった。
－３日目に、６日目に、１３日目に、１９日目に、２７日目に、及び３４日目に、１％のペントバルビタールナトリウム溶液を用いて６０ｍｇ／ｋｇの用量でマウスを麻酔して、ピロカルピン（Ａｌａｄｄｉｎ、カタログ番号Ｐ１２９６１４）を１．２５ｍｇ／ｋｇで腹腔内注射し、注射後１５分間内の唾液を回収して、唾液流量率＝［綿球の湿重量（ｍｇ）－綿球の乾燥重量（ｍｇ）］／１５分で唾液流量率を計算し、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍで唾液流量率データに対するＴ検定（Ｔ－ｔｅｓｔ）分析を行った。

【0183】

３５日目に、各マウスから１００μＬの血液サンプルを採取した。血液サンプルにＰＥで標識した抗マウスＣＤ４５抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１０３１０６）、Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ Ｖｉｏｌｅｔ ５１０（商標）で標識した抗マウスＣＤ３抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１００２３４）、ＦＩＴＣで標識した抗マウスＣＤ４抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１００５１０）、ＰＥ／Ｃｙａｎｉｎｅ７で標識した抗マウスＣＤ８ａ抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１００７２２）及びＡＰＣで標識した抗マウスＣＤ１９抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１１５５１２）を加え、４℃で暗所３０分間インキュベートした。次に赤血球溶解液（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号４２０３０１）を加え、室温で暗所３０分間溶解した。その後、ＰＢＳで洗浄して細胞を再懸濁させ、フローサイトメーターを用いて蛍光シグナルを検出した。

【0184】

３５日目に、マウスの脾臓を摘出してそれを単細胞懸濁液として調製し、細胞密度を１×１０^８個／ｍＬに調整して、１００μＬ取り出して赤血球溶解液（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号４２０３０１）を加えて暗所で３０分間溶解し、ＰＢＳで洗浄した後にＰＥで標識した抗マウスＣＤ４５抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１０３１０６）、Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ Ｖｉｏｌｅｔ ５１０（商標）で標識した抗マウスＣＤ３抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１００２３４）、ＦＩＴＣで標識した抗マウスＣＤ４抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１００５１０）、ＰＥ／Ｃｙａｎｉｎｅ７で標識した抗マウスＣＤ８ａ抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１００７２２）及びＡＰＣで標識した抗マウスＣＤ１９抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１１５５１２）を加え、４℃で暗所３０分間インキュベートした。その後、ＰＢＳで洗浄して細胞を再懸濁させ、フローサイトメーターを用いて蛍光シグナルを検出した。

【0185】

３５日目に、マウスの顎下腺を摘出して、重量を量り、顎下腺指数＝顎下腺の重量（ｍｇ）／マウスの体重（ｇ）で顎下腺指数を計算した。顎下腺の一部を１０％の中性ホルマリンで固定して、病理学的ＨＥ染色を行い、顎下腺の病理学的スコアに対して、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍを用いて顎下腺の病理学的スコアデータに対するＴ検定（Ｔ－ｔｅｓｔ）分析を行った。もう一部の顎下腺を低温で機械的にホモジナイズし、低温で遠心分離して上清を取り出して、マウスＩＬ－６ＥＬＩＳＡキット（Ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ２２２５０３）の取扱説明書に従って上清中のＩＬ－６の含有量を検出した。

【0186】

体重変化の結果（図１８）は、各群の動物の体重増加はブランク対照群と同等であることを示し、ｈｚＡ０１－３．３は各用量でいずれも明らかな毒性又は副作用がないということを明らかにした。

【0187】

唾液流量率の結果（図１９）は、ｈｚＡ０１－３．３（５ｍｇ／ｋｇ）群及びｈｚＡ０１－３．３（２５ｍｇ／ｋｇ）群の唾液流量率がいずれも回復する傾向を見せ、モデル群と比べて、ｈｚＡ０１－３．３（２５ｍｇ／ｋｇ）群は２７日目及び３４日目の唾液流量率が顕著に上昇した（Ｐ＜０．０５）ことを示し、ｈｚＡ０１－３．３はマウスの唾液流量率を改善できるということを明らかにした。

【0188】

顎下腺指数、顎下腺のＩＬ－６含有量、及び顎下腺の病理学的スコアの結果（図２０Ａ～図２０Ｃ）は、ｈｚＡ０１－３．３（１ｍｇ／ｋｇ）群、ｈｚＡ０１－３．３（５ｍｇ／ｋｇ）群及びｈｚＡ０１－３．３（２５ｍｇ／ｋｇ）群のマウスの各指標がいずれも低下する傾向を見せ、モデル群と比べて、ｈｚＡ０１－３．３（５ｍｇ／ｋｇ）群及びｈｚＡ０１－３．３（２５ｍｇ／ｋｇ）群のマウスの各指標はいずれも顕著に低下したことを示し、ｈｚＡ０１－３．３は顎下腺指数を改善し、顎下腺中のＩＬ－６の分泌を阻害し顎下腺の病理学的スコアを低下させることができるということを明らかにした。

【0189】

血液及び脾臓のフローサイトメトリー検出の結果（図２１Ａ～図２１Ｈ）は、ｈｚＡ０１－３．３投与群の動物の血液及び脾臓中のＣＤ３^＋Ｔ細胞、ＣＤ４^＋Ｔ細胞、ＣＤ８^＋Ｔ細胞及びＣＤ１９^＋Ｂ細胞のパーセンテージはブランク対照群と比べていずれも顕著に変化しなかったことを示し、ｈｚＡ０１－３．３は上記の細胞の数の変化に特異的な効果がないということを明らかにした。ｈｚＡ０１－３．３は離床上、良好な安全性又は／及び良好な治療効果を示すことができることが予想される。

【0190】

本開示の配列情報を表１０にまとめている。

【表10-1】

【表10-2】

【表10-3】

【表10-4】

【表10-5】

【表10-6】

【表10-7】

【図1A】

【図1B】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16A】

【図16B】

【図17A】

【図17B】

【図18】

【図19】

【図20A】

【図20B】

【図20C】

【図21A】

【図21B】

【図21C】

【図21D】

【図21E】

【図21F】

【図21G】

【図21H】

【配列表】

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【手続補正書】

【提出日】2024-05-27

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

単離された抗ＣＤ４０抗体又はその抗原結合断片であって、
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）重鎖ＣＤＲ１は配列番号９における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号９における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号９における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖ＣＤＲ１は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（８）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（９）重鎖ＣＤＲ１は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、若しくは
（１０）重鎖ＣＤＲ１は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして重鎖ＣＤＲ３は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、及び／又は
（ｉｉ）軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（２）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（３）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（４）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（５）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（６）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（７）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（８）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、若しくは
（９）軽鎖ＣＤＲ１は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む、前記抗体又はその抗原結合断片。

【請求項2】

（ｉ）重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、２、５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、２、５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、３、５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、３、５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、４、５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、４、５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１８、１９、２０で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１８、１９、２０で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２４、２５、２６で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２４、２５、２６で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号３２、３３、３４で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３２、３３、３４で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４０、４１、４２で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４０、４１、４２で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（８）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４６、４７、４８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４６、４７、４８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、及び／又は
（ｉｉ）軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（２）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２１、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２１、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（３）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（４）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（５）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、若しくは
（６）軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項3】

重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３と、軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）重鎖ＣＤＲ１は配列番号９における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号９における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号９における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１４における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１１における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１６における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（８）重鎖ＣＤＲ１は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号１３における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１７における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（９）重鎖ＣＤＲ１は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号２２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号２３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（１０）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号３０における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３１における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（１１）重鎖ＣＤＲ１は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号３８における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３９における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
（１２）重鎖ＣＤＲ１は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号４４における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号４５における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、又は
（１３）重鎖ＣＤＲ１は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３は配列番号５２における重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ２のアミノ酸配列を含み、そして軽鎖ＣＤＲ３は配列番号５３における軽鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項4】

重鎖ＣＤＲ１と、重鎖ＣＤＲ２と、重鎖ＣＤＲ３と、軽鎖ＣＤＲ１と、軽鎖ＣＤＲ２と、軽鎖ＣＤＲ３とを含み、ただし、
（１）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、２、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、２、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、３、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、３、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１、４、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１、４、５、６、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号１８、１９、２０、２１、７、８で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１８、１９、２０、２１、７、８で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号２４、２５、２６、２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２４、２５、２６、２７、２８、２９で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号３２、３３、３４、３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３２、３３、３４、３５、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４０、４１、４２、４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４０、４１、４２、４３、３６、３７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は
（８）重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２、重鎖ＣＤＲ３、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２、軽鎖ＣＤＲ３は、それぞれ、配列番号４６、４７、４８、４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４６、４７、４８、４９、５０、５１で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項5】

（ｉ）重鎖可変領域を含み、前記重鎖可変領域は、９、１０、１１、１２、１３、２２、３０、３８、４４若しくは５２で示されるアミノ酸配列、又は配列番号９、１０、１１、１２、１３、２２、３０、３８、４４若しくは５２で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、及び／又は
（ｉｉ）軽鎖可変領域を含み、前記軽鎖可変領域は配列番号１４、１５、１６、１７、２３、３１、３９、４５若しくは５３で示されるアミノ酸配列、又は配列番号１４、１５、１６、１７、２３、３１、３９、４５若しくは５３で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項6】

重鎖可変領域と、軽鎖可変領域とを含み、ただし、
（１）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号９、１４で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号９、１４で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（２）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１０、１５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１０、１５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（３）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１１、１５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１１、１５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（４）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１０、１６で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１０、１６で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（５）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１１、１６で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１１、１６で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（６）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１０、１７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１０、１７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（７）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１２、１７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１２、１７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（８）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１３、１７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１３、１７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（９）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号２２、２３で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号２２、２３で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（１０）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号３０、３１で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３０、３１で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（１１）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号３８、３９で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号３８、３９で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
（１２）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号４４、４５で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号４４、４５で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、又は
（１３）重鎖可変領域、軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号５２、５３で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号５２、５３で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含み、
任意に、前記重鎖可変領域及び前記軽鎖可変領域は、それぞれ、配列番号１２、１７で示されるアミノ酸配列若しくは配列番号１２、１７で示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項7】

重鎖定常領域と、軽鎖定常領域とをさらに含み、前記重鎖定常領域は、配列番号５４、５５若しくは５６で示されるアミノ酸配列又は配列番号５４、５５若しくは５６で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖定常領域は、配列番号５７で示されるアミノ酸配列又は配列番号５７で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項8】

重鎖定常領域と、軽鎖定常領域とをさらに含み、前記重鎖定常領域は、配列番号５４、５５若しくは５６で示されるアミノ酸配列又は配列番号５４、５５若しくは５６で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖定常領域は、配列番号５７で示されるアミノ酸配列又は配列番号５７で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含む、請求項６に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項9】

重鎖定常領域と、軽鎖定常領域とをさらに含み、前記重鎖定常領域は、配列番号５４で示されるアミノ酸配列又は配列番号５４で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含み、前記軽鎖定常領域は、配列番号５７で示されるアミノ酸配列又は配列番号５７で示されるアミノ酸配列と比べて１個、２個、３個、４個若しくは５個のアミノ酸の置換、欠失及び付加を有するアミノ酸配列を含む、請求項６に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項10】

（ａ）ヒトＣＤ４０と結合し、（ｂ）サルＣＤ４０と結合し、（ｃ）ＣＤ４０とＣＤ４０Ｌの相互作用を遮断し、及び／又は（ｄ）ＣＤ４０活性を阻害する、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項11】

キメラ又はヒト化されたものであり、
任意に、前記抗体又はその抗原結合断片が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４アイソタイプであり、
任意に、前記抗体又はその抗原結合断片が、モノクローナル抗体、単特異性抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体、多重特異性抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）_２断片、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、ｄＡｂ断片、単離されたＣＤＲ領域、単鎖Ｆｖ分子又はそれらの組み合わせから選ばれる、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合断片。

【請求項12】

請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片をコードする、単離された核酸分子。

【請求項13】

請求項１２に記載の核酸分子を含む、発現ベクター。

【請求項14】

請求項１２に記載の核酸分子又は請求項１２に記載の核酸分子を含む発現ベクターを含む、宿主細胞。

【請求項15】

請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片を含む、組換えポリペプチド又は融合タンパク質。

【請求項16】

請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合断片と、１種又は複数種の薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。

【請求項17】

免疫疾患の治療又は予防における、前記被験者に治療有効量の請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体若しくはその抗原結合断片、又は前記抗体若しくはその抗原結合断片を含む医薬組成物の使用であって、
任意に、前記免疫疾患は、炎症性疾患、アレルギー反応、自己免疫疾患又は移植関連疾患を含み、
任意に、前記免疫疾患は、アレルギー反応、アジソン病、強直性脊椎炎、脊椎関節炎、喘息、アテローム性動脈硬化症、冠状動脈性心疾患、自己免疫性肝炎、自己免疫性耳下腺炎、Ｉ型糖尿病、精巣上体炎、腎炎、ライター症候群、甲状腺炎、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本病、溶血性貧血、特発性血小板減少症、全身性エリテマトーデス、亜急性皮膚エリテマトーデス、多発性硬化症、重症筋無力症、乾癬、強皮症、関節炎、サルコイドーシス、シェーグレン症候群、ドライアイ、化膿性汗腺炎、移植関連疾患、血管炎及び／又は炎症性腸疾患を含み、
任意に、前記抗体若しくはその抗原結合断片、またはその医薬組成物は第２治療剤と組み合わせて使用し、
任意に、前記第２治療剤は、非ステロイド性抗炎症薬、サリチル酸塩、ヒドロキシクロロキン、スルファサラジン、コルチコステロイド、細胞傷害性薬物、又は免疫抑制薬及び／若しくは抗体を含む、前記使用。

【国際調査報告】