特表 2024-536106 骨形成不全症の治療における抗スクレロスチン抗体の使用方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-10-04

(54)【発明の名称】骨形成不全症の治療における抗スクレロスチン抗体の使用方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20240927BHJP

   A61P 19/08 20060101ALI20240927BHJP

   C07K 16/18 20060101ALI20240927BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 N

A61K39/395 Y

A61P19/08

C07K16/18 ZNA

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024518919

(86)(22)【出願日】2022-09-29

(85)【翻訳文提出日】2024-04-26

(86)【国際出願番号】 US2022077259

(87)【国際公開番号】W WO2023056355

(87)【国際公開日】2023-04-06

(31)【優先権主張番号】63/374,982

(32)【優先日】2022-09-08

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/250,918

(32)【優先日】2021-09-30

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】516052375

【氏名又は名称】メレオ バイオファーマ ３ リミテッド

(71)【出願人】

【識別番号】513252910

【氏名又は名称】ウルトラジェニックス ファーマシューティカル インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100079108

【弁理士】

【氏名又は名称】稲葉 良幸

(74)【代理人】

【識別番号】100109346

【弁理士】

【氏名又は名称】大貫 敏史

(74)【代理人】

【識別番号】100117189

【弁理士】

【氏名又は名称】江口 昭彦

(74)【代理人】

【識別番号】100134120

【弁理士】

【氏名又は名称】内藤 和彦

(72)【発明者】

【氏名】マキノン，アラステア

(72)【発明者】

【氏名】ミストリー，アルン

(72)【発明者】

【氏名】カッキス，エミル

(72)【発明者】

【氏名】オミンスキー，マイケル，エス．

【テーマコード（参考）】

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C085AA14

4C085CC23

4C085DD62

4C085EE01

4H045AA11

4H045AA30

4H045CA40

4H045DA76

4H045EA20

4H045FA74

4H045GA26

(57)【要約】

【課題】骨形成不全症（ＯＩ）は、骨の脆弱性と骨量の減少を特徴とする結合組織の稀な遺伝性障害である。ＯＩには、常にではないが主にＩ型コラーゲンをコードする遺伝子の変異から生じる一群の遺伝性障害が含まれる。症例の約８５％は、Ｉ型コラーゲンをコードする２つの遺伝子（ＣＯＬ１Ａ１及びＣＯＬ１Ａ２）のいずれかの変異に関連している。臨床的に、ＯＩは、外傷を伴わずに簡単に骨折してしまう骨の脆弱性を特徴とする。
【解決手段】治療有効量の抗スクレロスチン抗体を患者に投与することを含む、骨形成不全症患者の治療方法及び投与計画を開示する。本発明はまた、特定の投与計画に従って治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、骨形成不全症の治療に使用するための抗スクレロスチン抗体を提供する。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ヒト患者に治療有効量の抗スクレロスチン抗体を少なくとも連続１３か月間にわたって各月に投与することを含む、前記ヒト患者における骨形成不全症（ＯＩ）の治療方法。

【請求項2】

前記抗スクレロスチン抗体が、
（ａ） 配列番号７０のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有する重鎖可変領域（ＶＨ）ポリペプチド配列、及び／または
（ｂ） 配列番号８１のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有する軽鎖可変領域（ＶＬ）ポリペプチド配列
を含む、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記抗スクレロスチン抗体が、配列番号７０に記載のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列、及び配列番号８１に記載のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む、請求項２に記載の方法。

【請求項4】

前記抗スクレロスチン抗体が、
（ａ） 配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、
（ｂ） 配列番号１５のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、
（ｃ） 配列番号２６のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、
（ｄ） 配列番号３７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、
（ｅ） 配列番号４８のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、及び
（ｆ） 配列番号５９のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３
を含む、請求項１に記載の方法。

【請求項5】

前記抗スクレロスチン抗体が、
（ａ） 配列番号１７８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、
（ｂ） 配列番号１７９のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、
（ｃ） 配列番号２６のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、
（ｄ） 配列番号３７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、
（ｅ） 配列番号１８０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、及び
（ｆ） 配列番号１８１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３
を含む、請求項１に記載の方法。

【請求項6】

前記抗スクレロスチン抗体が、
（ａ） 配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、
（ｂ） 配列番号１７９のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、
（ｃ） 配列番号２６のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、
（ｄ） 配列番号３７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、
（ｅ） 配列番号１８０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、及び
（ｆ） 配列番号１８１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３
を含む、請求項１に記載の方法。

【請求項7】

前記抗スクレロスチン抗体が、
（ａ） 配列番号１９８のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＨポリペプチド配列、及び／または
（ｂ） 配列番号１９９のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＬポリペプチド配列
を含む、請求項１に記載の方法。

【請求項8】

前記抗スクレロスチン抗体が、配列番号１９８のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列、及び配列番号１９９のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む、請求項７に記載の方法。

【請求項9】

前記抗スクレロスチン抗体が、
（ａ） 配列番号２０２のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＨポリペプチド配列、及び／または
（ｂ） 配列番号２０３のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＬポリペプチド配列
を含む、請求項１に記載の方法。

【請求項10】

前記抗スクレロスチン抗体が、配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列、及び配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む、請求項９に記載の方法。

【請求項11】

前記抗スクレロスチン抗体がセトルスマブである、請求項１に記載の方法。

【請求項12】

前記抗スクレロスチン抗体がロモソズマブである、請求項１に記載の方法。

【請求項13】

前記抗スクレロスチン抗体がブロソズマブである、請求項１に記載の方法。

【請求項14】

前記治療有効量の抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続１８か月の期間にわたって毎月投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項15】

前記治療有効量の抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続２４か月の期間にわたって毎月投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項16】

前記治療有効量の抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続３０か月の期間にわたって毎月投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項17】

前記治療有効量の抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続３６か月の期間にわたって毎月投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項18】

前記抗スクレロスチン抗体を、最長１８年間にわたって毎月投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項19】

前記治療有効量の前記抗スクレロスチン抗体の投与により、前記ヒト患者の１２か月の治療後に小柱の骨塩量（ＢＭＤ）が増加する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項20】

前記治療有効量の前記抗スクレロスチン抗体の投与により、前記ヒト患者の１２か月の治療後に腰椎の骨塩量（ＢＭＤ）が５％以上増加する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項21】

前記ＯＩが、Ｉ型ＯＩ、ＩＩＩ型ＯＩ、またはＩＶ型ＯＩである、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項22】

前記ヒト患者が、ＣＯＬ１Ａ１遺伝子及び／またはＣＯＬ１Ａ２遺伝子に１つ以上の変異を有する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項23】

前記ヒト患者の年齢が０～１７歳である、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項24】

前記ヒト患者が０～１７歳の小児であり、前記抗スクレロスチン抗体を２０～５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎月投与する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。

【請求項25】

請求項１～２４のいずれか１項に記載の治療方法で使用するための、請求項１～１３のいずれか１項で定義される抗スクレロスチン抗体、請求項１～１３のいずれか１項で定義される前記抗体を交差遮断する抗スクレロスチン抗体、または請求項１～１３のいずれか１項で定義される前記抗体と同じエピトープに結合する抗スクレロスチン抗体。

【請求項26】

前記抗スクレロスチン抗体が、請求項１～１３のいずれか１項で定義される前記抗体を交差遮断するか、または請求項１～１３のいずれか１項で定義される前記抗体と同じエピトープに結合する、請求項１～２４のいずれかに記載の治療方法。

【請求項27】

ヒト患者に治療有効量の抗スクレロスチン抗体を投与することを含む、前記ヒト患者における骨形成不全症（ＯＩ）の治療方法であって、前記方法が、１２か月以上の初期投与期間中、第１の用量を毎月投与し、その後、維持用量で定期的に投与することを含む、前記治療方法。

【請求項28】

前記第１の用量が、毎月投与される２０～５０ｍｇ／ｋｇの前記抗スクレロスチン抗体を含む、請求項２７に記載の方法。

【請求項29】

前記第１の用量が、毎月投与される２０～４０ｍｇ／ｋｇの前記抗スクレロスチン抗体を含む、請求項２７～２８のいずれかに記載の方法。

【請求項30】

前記第１の用量が、毎月投与される２０ｍｇ／ｋｇの前記抗スクレロスチン抗体を含む、請求項２７～２９のいずれかに記載の方法。

【請求項31】

前記維持用量が、毎月、２か月ごと、３か月ごと、４か月ごと、６か月ごと、または１２か月ごとの前記抗スクレロスチン抗体の投与を含む、請求項２７～３０のいずれかに記載の方法。

【請求項32】

前記維持用量が、前記初期投与期間中に投与する量と等量またはそれより低い量の前記抗スクレロスチン抗体を投与することを含む、請求項２７～３１のいずれかに記載の方法。

【請求項33】

前記維持用量が、２０ｍｇ／ｋｇ以下の前記抗スクレロスチン抗体を含む、請求項２７～３２のいずれかに記載の方法。

【請求項34】

前記抗スクレロスチン抗体を、前記初期投与期間中、１２か月以上の期間にわたって２０ｍｇ／ｋｇで毎月投与し、その後、２０ｍｇ／ｋｇ以下の維持用量を２か月ごとに投与する、請求項２７～３３のいずれかに記載の方法。

【請求項35】

前記抗スクレロスチン抗体を、前記初期投与期間中、１２か月以上の期間にわたって２０ｍｇ／ｋｇで毎月投与し、その後、２０ｍｇ／ｋｇの維持用量を２か月ごとに投与する、請求項２７～３４のいずれかに記載の方法。

【請求項36】

前記抗スクレロスチン抗体を、前記初期投与期間中、１２か月の期間にわたって２０ｍｇ／ｋｇで毎月投与し、その後、２０ｍｇ／ｋｇ未満の維持用量を各月に投与する、請求項２７～３４のいずれかに記載の方法。

【請求項37】

前記維持用量を最大１８年の期間にわたって投与する、請求項２７～３６のいずれかに記載の方法。

【請求項38】

実質的に本明細書に記載される治療方法、または実質的に本明細書に記載される治療方法で使用するための抗スクレロスチン抗体。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年９月３０日に出願された米国仮特許出願第６３／２５０，９１８号、及び２０２２年９月８日に出願された米国仮特許出願第６３／３７４，９８２号に対する優先権及び利益を主張し、これらはその全体が参照により本明細書に援用される。

【0002】

配列表
本出願は、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介してＸＭＬ形式で提出された配列表を含む。「ＵＬＧ－５００６ＰＣ＿１２２６２６－５００６＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｌｉｓｔｉｎｇ」という名称のＸＭＬコピーの内容は、２０２２年９月２２日に作成され、サイズが２２７，０００バイトであり、その内容の全体が参照により本明細書に援用される。

【0003】

本発明は、抗体及び投与計画、ならびに医薬組成物としてのそれらの使用、より具体的には、骨形成不全症の治療における抗スクレロスチン抗体の長期使用に関する。

【背景技術】

【0004】

骨形成不全症（ＯＩ）は、骨の脆弱性と骨量の減少を特徴とする結合組織の稀な遺伝性障害である。ＯＩには、常にではないが主にＩ型コラーゲンをコードする遺伝子の変異から生じる一群の遺伝性障害が含まれる。症例の約８５％は、Ｉ型コラーゲンをコードする２つの遺伝子（ＣＯＬ１Ａ１及びＣＯＬ１Ａ２）のいずれかの変異に関連している。臨床的に、ＯＩは、外傷を伴わずに簡単に骨折してしまう骨の脆弱性を特徴とする。

【0005】

臨床分類システムでは、ＯＩをＩ型からＶ型に分類する。Ｉ型ＯＩ患者は通常、ＣＯＬ１Ａ１の早期終止コドンに関連する軽度の非変形疾患を患っている。この欠陥により、Ｉ型コラーゲンの産生速度が低下し、骨内のコラーゲンの量が減少する。ＩＩ型ＯＩ患者は通常、胸郭を含む複数の重度の骨折による呼吸不全の結果として周産期に死亡する。ＩＩＩ型及びＩＶ型ＯＩは、ＣＯＬ１Ａ１及びＣＯＬ１Ａ２のグリシン置換を伴うことが多く、これはＩ型コラーゲンの３つのポリペプチド鎖が適切に絡み合って正常な三重αらせん構造を形成することを妨げる質的欠陥である。ＩＩＩ型ＯＩが乳児期を生き延びる罹患小児におけるＯＩの最も重篤な形態であるのに対し、ＩＶ型患者は軽度～中程度の骨変形を示す。

【0006】

骨関連疾患の治療に有用な治療薬としては、抗スクレロスチン抗体が挙げられる。高親和性、中和性の完全ヒト抗スクレロスチンモノクローナル抗体（総称して「ヒト抗スクレロスチンモノクローナル抗体」）及びその強力なｉｎ ｖｉｔｒｏ活性及びｉｎ ｖｉｖｏ活性は、例えば米国特許第７，８７９，３２２号、第８，２４６，９５３号、及び第８，４８６，６６１号に開示されており、これらはその全体が参照により本明細書に援用される。抗スクレロスチン抗体を用いたＯＩの治療は、ＷＯ２０１８／１１５８７９Ａ１及びＷＯ２０１８／１１５８８０Ａ１に開示されており、これらはその全体が参照により本明細書に援用される。追加の抗スクレロスチン抗体としては、例えば、ＷＯ２０１３／０１９９５４Ａ１、米国特許第８，００３，１０８号、第７，５９２，４２９号、及び第８，０１７，１２０号、ならびに米国特許出願公開第２０１１００４４９７８Ａ１号に記載されている抗体が挙げられ、これらはその全体が参照により本明細書に援用される。そのような抗体の製剤は、例えば、ＷＯ２０２１／０３０１７９Ａ１に開示されており、その全体が参照により本明細書に援用される。

【0007】

さらなる抗スクレロスチン抗体としては、例えば、その全体が参照により本明細書に援用されるＷＯ２００８／１１５７３２Ａ２に記載されている抗体が挙げられる。

【0008】

さらなる抗スクレロスチン抗体としては、例えば、その全体が参照により本明細書に援用される米国特許第１０，４４９，２５０号に記載されている抗体が挙げられる。

【0009】

さらなる抗スクレロスチン抗体としては、例えば、その全体が参照により本明細書に援用されるＷＯ２０１５／０８７１８７Ａ１に記載されている抗体が挙げられる。

【0010】

ＯＩに対するさらなる改善された治療選択肢が依然として必要とされている。

【発明の概要】

【0011】

実施例で報告される研究の結果は、驚くべきことに、抗スクレロスチン抗体によってヒトＯＩ患者を長期間、成功裏に治療できることを示唆している。これらの結果は、骨代謝回転バイオマーカーに対する抗スクレロスチン抗体の効果が、治療開始から最初の１か月後にピークに達し、その後減弱するものの、骨塩量（ＢＭＤ）に対する効果は継続的な改善を示す（バイオマーカー応答の減衰を大幅に超えている）ことを示した。

【0012】

したがって、一態様では、本発明は、抗スクレロスチン抗体を用いた骨形成不全症（ＯＩ）の長期または慢性治療のための方法を提供する。

【0013】

いくつかの実施形態では、本開示は、ヒト患者に治療有効量の抗スクレロスチン抗体を少なくとも連続１３か月間にわたって各月に投与することを含む、ヒト患者における骨形成不全症（ＯＩ）の治療方法を提供する。

【0014】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号７０に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＨポリペプチド配列、及び／または（ｂ）配列番号８１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＬポリペプチド配列を含む。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号７０に記載のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列、及び配列番号８１に記載のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む。

【0015】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号１９８に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＨポリペプチド配列、及び／または（ｂ）配列番号１９９に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＬポリペプチド配列を含む。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号１９８に記載のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列、及び配列番号１９９に記載のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む。

【0016】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号２０２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＨポリペプチド配列、及び／または（ｂ）配列番号２０３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＬポリペプチド配列を含む。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号２０２に記載のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列、及び配列番号２０３に記載のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む。

【0017】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｅ）配列番号４８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び（ｆ）配列番号５９に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。

【0018】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号１７８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８０に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び（ｆ）配列番号１８１に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。

【0019】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８０に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び（ｆ）配列番号１８１に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。

【0020】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、米国特許第７，８７９，３２２号、第８，２４６，９５３号、第８，４８６，６６１号、第８，００３，１０８号、第７，５９２，４２９号、第８，０１７，１２０号、もしくは第１０，４４９，２５０号、ＷＯ２０１８／１１５８７９Ａ１、ＷＯ２０１８／１１５８８０Ａ１、ＷＯ２０１３／０１９９５４Ａ１、ＷＯ２００８／１１５７３２Ａ２、もしくはＷＯ２０１５／０８７１８７Ａ１、または米国特許出願公開第２０１１００４４９７８Ａ１号に記載されている抗体であり、これらはその全体が参照により本明細書に援用される。

【0021】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、セトルスマブ、ロモソズマブ、及びブロソズマブから選択される。

【0022】

いくつかの実施形態では、治療有効量の抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続１３か月間にわたって各月に、すなわち毎月、患者に投与する。一実施形態では、治療有効量の抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続１８か月間にわたって各月に、すなわち毎月、患者に投与する。別の実施形態では、治療有効量の抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続２４か月間にわたって各月に、すなわち毎月、患者に投与する。さらに別の実施形態では、治療有効量の抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続３０か月間にわたって各月に、すなわち毎月、患者に投与する。さらに別の実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続３６か月間にわたって毎月投与する。さらに別の実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、最大１８年間にわたって毎月投与する。

【0023】

いくつかの実施形態では、治療有効量の抗スクレロスチン抗体の投与により、ヒト患者の１２か月の治療後に小柱の骨塩量（ＢＭＤ）が増加する。関連する実施形態では、治療有効量の抗スクレロスチン抗体の投与により、ヒト患者の１２か月の治療後に腰椎のＢＭＤが５％以上増加する。ＢＭＤは、二重エネルギーＸ線吸光測定法（ＤＸＡ）によって測定してもよい。いくつかの実施形態では、治療有効量の抗スクレロスチン抗体の投与により、ヒト患者の１２か月の治療後に腰椎の骨塩量（ＢＭＤ）が５％以上増加する。

【0024】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される慢性または長期の投与計画は、ＯＩなどの慢性投与から恩恵を受ける骨折または衰弱をもたらす任意の骨の遺伝性疾患の治療に有効である。いくつかの実施形態では、ＯＩは、Ｉ型ＯＩ、ＩＩＩ型ＯＩ、またはＩＶ型ＯＩである。いくつかの実施形態では、ヒト患者は、ＣＯＬ１Ａ１及び／またはＣＯＬ１Ａ２遺伝子に１つ以上の変異を有する。

【0025】

いくつかの実施形態では、ヒト患者は小児患者である。いくつかの実施形態では、ヒト患者は成人患者である。いくつかの実施形態では、ヒト患者は０～１７歳の小児であり、抗スクレロスチン抗体を２０～５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。

【0026】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、１０～５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎月投与する。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、及び５０ｍｇ／ｋｇから選択される用量で毎月投与する。別の実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、１０ｍｇ／ｋｇの用量で毎月投与する。さらに別の実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、２０ｍｇ／ｋｇの用量で毎月投与する。さらに別の実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、４０ｍｇ／ｋｇの用量で毎月投与する。

【0027】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、静脈内投与または皮下投与する。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を静脈内投与する。

【図面の簡単な説明】

【0028】

【図1】臨床試験の設計を示す。

【図2】以下の血清レベルのベースラインからの平均変化を示すグラフを示す：Ａは、骨形成バイオマーカーであるＰ１ＮＰ（プロコラーゲン１のインタクトなＮ末端プロペプチド）を示す。Ｂは、骨吸収バイオマーカーであるＣＴＸ－１（Ｃ末端テロペプチド）を示す。

【図3】１２か月間のセトルスマブ８ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇの月次投与を比較した、腰椎ＢＭＤデータ（ＤＸＡにより測定）のベースラインからの平均変化を示すグラフを示す。

【図4】ゾレドロン酸療法の存在下または非存在下での１２か月後のＢＭＤに対するセトルスマブ中止の影響を示すグラフを示す。Ａは、中止後の腰椎ＢＭＤを示す。Ｂは、中止後の股関節ＢＭＤを示す。Ｃは、中止後の橈骨全領域体積ＢＭＤを示す。Ｄは、中止後の脛骨全領域体積ＢＭＤを示す。

【図5】ゾレドロン酸療法の存在下または非存在下での１２か月後の骨代謝回転バイオマーカーに対するセトルスマブ中止の影響を示すグラフを示す。Ａは、セトルスマブ中止後の血清Ｐ１ＮＰレベルを示す。Ｂは、セトルスマブ中止後の血清ＣＴＸ－１（すなわち、「ＣＴｘ」）レベルを示す。

【発明を実施するための形態】

【0029】

本発明は、骨関連疾患（骨形成不全症；ＯＩ）を有するヒト患者において、骨代謝回転を測定するために日常的に使用されるバイオマーカーが、セトルスマブ療法の開始直後にＢＭＤを減衰させるものの、セトルスマブが継続的な増加をもたらし、その増加はバイオマーカーによって衰えることがないという予期せぬ驚くべき発見に基づいている。セトルスマブを１年間毎月投与して治療されたヒトＯＩ患者は、治療期間を通じてＢＭＤの継続的な増加を示し、最初の６か月の増加は、次の６か月の増加と同様であった（実施例１）。対照的に、骨代謝回転バイオマーカー応答は１か月後にピークに達し、その後低下し、６か月の治療後にはベースラインと統計的に有意差のないレベルに戻った。他の骨疾患に対する抗スクレロスチン抗体に基づく治療は時間の経過とともに効果が失われ、１年後には中止しなければならないことが示されているが、今回の発見は、抗スクレロスチン抗体による長期治療が、１２か月の治療後、ＯＩの治療に継続的な効力を提供できることを示している。

【0030】

背景として、スクレロスチンは天然のタンパク質であり、ヒトではＳＯＳＴ遺伝子によってコードされている。スクレロスチンは、Ｃ末端システインノット様（ＣＴＣＫ）ドメインを有し、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）アンタゴニストのＤＡＮ（神経芽腫におけるディファレンシャルスクリーニング選択遺伝子異常）ファミリーとの配列類似性を有する分泌型糖タンパク質である。

【0031】

抗スクレロスチン抗体は、骨の形成と密度を高め、骨粗鬆症及びＯＩを含むヒトの骨関連障害の治療に薬効をもたらすことが示されている。抗スクレロスチン抗体の１つ（ロモソズマブ、ＥＶＥＮＩＴＹ（商標）として販売）は、骨折のリスクが高い閉経後の女性の骨粗鬆症の治療薬としてＦＤＡによって承認されている。しかし、ＥＶＥＮＩＴＹ（商標）のアナボリック効果は、１２か月の月次治療後に減退する（ＥＶＥＮＩＴＹ（商標）処方情報－「適応症及び使用法」セクション、２０２０年４月改訂版を参照のこと）。したがって、ＥＶＥＮＩＴＹ（商標）の使用期間は１２か月の月次投与に制限されており、その後も骨粗鬆症の治療が必要な場合には抗吸収剤による治療を継続することが推奨される。

【0032】

本実施例は、ＢＭＤに対する抗スクレロスチン抗体の効果が、ＯＩの治療のために１２か月の月次投与した後も衰えないことを示す。骨代謝回転バイオマーカーの応答は、抗スクレロスチン抗体治療のわずか１か月後にピークに達し、その後、骨代謝回転バイオマーカーの応答は急速に減衰したため、この結果は特に驚くべきものである。バイオマーカー応答がかなり早期に低下した場合でも、１２か月の治療後もＢＭＤが増加し続けていることは、抗スクレロスチン抗体治療がＯＩの長期治療に特に適していることを示唆している。したがって、毎月の抗スクレロスチン抗体療法は、抗体の効果が薄れたために治療を中止する必要がなく、ＯＩの治療が長期化されるという利点をもたらす。したがって、抗スクレロスチン抗体療法の臨床的有用性には、予想外にも、ヒトの骨折または衰弱を引き起こす骨の遺伝性疾患、例えばＯＩの慢性的または長期的な治療が含まれる。

【0033】

したがって、本発明は、ＯＩなどの骨折または衰弱を引き起こす骨の遺伝性疾患の慢性治療における抗スクレロスチン抗体の使用方法に関する。一態様では、本発明は、少なくとも連続１３か月間の抗スクレロスチン抗体の毎月の投与によるＯＩの治療に関する。

【0034】

骨代謝回転バイオマーカーの応答は１か月後にピークに達し、その後減衰するにもかかわらず、ＯＩ患者の毎月の治療によって１２か月にわたってＢＭＤが継続的に増加するため、本発明における抗スクレロスチン抗体の方法及び使用は、予想外で驚くべきものであった。

【0035】

定義
本発明をより容易に理解するために、特定の用語を最初に定義する。さらなる定義は、詳細な説明の全体を通して記載されている。

【0036】

用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」及び「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ）」を包含し、例えば、Ｘを「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」組成物は、Ｘのみからなってもよく、または何か追加のものを含んでもよい（例えばＸ＋Ｙ）。

【0037】

数値ｘに関する用語「約」とは、例えばｘ±１０％を意味する。

【0038】

用語「スクレロスチン」とは、配列番号１５５（ＭＱＬＰＬＡＬＣＬＶＣＬＬＶＨＴＡＦＲＶＶＥＧＱＧＷＱＡＦＫＮＤＡＴＥＩＩＰＥＬＧＥＹＰＥＰＰＰＥＬＥＮＮＫＴＭＮＲＡＥＮＧＧＲＰＰＨＨＰＦＥＴＫＤＶＳＥＹＳＣＲＥＬＨＦＴＲＹＶＴＤＧＰＣＲＳＡＫＰＶＴＥＬＶＣＳＧＱＣＧＰＡＲＬＬＰＮＡＩＧＲＧＫＷＷＲＰＳＧＰＤＦＲＣＩＰＤＲＹＲＡＱＲＶＱＬＬＣＰＧＧＥＡＰＲＡＲＫＶＲＬＶＡＳＣＫＣＫＲＬＴＲＦＨＮＱＳＥＬＫＤＦＧＴＥＡＡＲＰＱＫＧＲＫＰＲＰＲＡＲＳＡＫＡＮＱＡＥＬＥＮＡＹ）で定義されるヒトスクレロスチンを指す。組換えヒトスクレロスチンは、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，Ｍｉｎｎ．，ＵＳＡ；２００６ カタログ番号１４０６－ＳＴ－０２５）から入手することができる。さらに、組換えマウススクレロスチン／ＳＯＳＴは、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，Ｍｉｎｎ．，ＵＳＡ；２００６カタログ番号１５８９－ＳＴ－０２５）から市販されている。米国特許第６，３９５，５１１号及び第６，８０３，４５３号、ならびに米国特許公開２００４０００９５３５及び２００５０１０６６８３は、一般に抗スクレロスチン抗体について言及している。

【0039】

本明細書で使用される用語「抗体」は、全抗体、及びそれらの任意の抗原結合断片（すなわち、「抗原結合部分」）またはその一本鎖を含む。天然の「抗体」は、ジスルフィド結合によって相互接続された少なくとも２つの重（Ｈ）鎖と２つの軽（Ｌ）鎖を含む糖タンパク質である。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書でＶＨと略記される）及び重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、３つのドメインＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書でＶＬと略記される）及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、１つのドメインＣＬを含む。ＶＨ及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と称されるより保存された領域を間に含む、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される超可変性の領域に、さらに細分することができる。各ＶＨ及びＶＬは、３つのＣＤＲ及び４つのＦＲからなり、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって、以下の順序で配列される：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４。重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。抗体の定常領域は、免疫グロブリンの、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典的補体系の第一成分（Ｃ１ｑ）を含む宿主組織または因子への結合を媒介し得る。一実施形態では、本明細書における抗体への言及は、単離されたモノクローナル抗体、ヒトモノクローナル抗体、及びヒト化モノクローナル抗体を包含する。

【0040】

本明細書で使用される場合、抗体の「抗原結合部分」という用語は、抗原（例えば、スクレロスチン）に特異的に結合する能力を保持する、抗体の全長または１つ以上の断片を指す。抗体の抗原結合機能は、全長抗体の断片によって行われ得ることが示されている。抗体の「抗原結合部分」という用語に包含される結合断片の例としては、Ｆａｂ断片、すなわち、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインからなる一価の断片、Ｆ（ａｂ）_２断片、すなわち、ヒンジ領域においてジスルフィド架橋によって連結される２つのＦａｂ断片を含む二価の断片、ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片、抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，１９８９ Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４－５４６）、ならびに単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。

【0041】

さらに、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬ及びＶＨは、別個の遺伝子によってコードされるが、それらは、ＶＬ及びＶＨ領域が対合して一価の分子を形成する単一のタンパク質鎖（一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られる；例えば、Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｌ．，１９８８ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３－４２６、及びＨｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：５８７９－５８８３を参照のこと）としてそれらが作製されることを可能にする合成リンカーによる組換え法を使用して接合され得る。そのような一本鎖抗体もまた、抗体の「抗原結合部分」という用語に包含されることが意図される。これらの抗体断片は、当業者に公知の従来の技術を使用して得られ、これらの断片は、有用性について、インタクトな抗体と同じ様式でスクリーニングされる。

【0042】

本明細書で使用される場合、「単離された抗体」とは、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指す（例えば、スクレロスチンに特異的に結合する単離された抗体は、スクレロスチン以外の抗原に特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。しかしながら、スクレロスチンに特異的に結合する単離された抗体は、他の種に由来するスクレロスチン分子などの他の抗原に対して交差反応性を有する場合がある。さらに、単離された抗体は、他の細胞物質及び／または化学物質を実質的に含まない場合がある。一実施形態では、本明細書における抗体への言及は、単離された抗体を意味する。

【0043】

本明細書で使用される用語「モノクローナル抗体」または「モノクローナル抗体組成物」とは、単一分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対して単一結合特異性及び親和性を示す。

【0044】

本明細書で使用される場合、用語「ヒト抗体」は、フレームワーク領域とＣＤＲ領域の両方がヒト起源の配列に由来する可変領域を有する抗体を含むことを意図する。さらに、ヒト抗体が定常領域を含む場合、その定常領域もまた、そのようなヒト配列、例えば、ヒト生殖系列配列もしくはヒト生殖系列配列の変異型に由来するか、またはＫｎａｐｐｉｋ ｅｔ ａｌ．（２０００．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２９６，５７－８６）に記載されるヒトフレームワーク配列に由来するコンセンサスフレームワーク配列を含む抗体に由来する。

【0045】

ヒト抗体は、ヒト配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのランダムもしくは部位特異的変異誘発、またはｉｎ ｖｉｖｏでの体細胞変異によって導入される変異）を含み得る。しかしながら、本明細書で使用される場合、用語「ヒト抗体」とは、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖系列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に移植されている抗体を含むことを意図しない。

【0046】

用語「ヒトモノクローナル抗体」とは、フレームワーク領域とＣＤＲ領域の両方がヒト配列に由来する可変領域を有する単一の結合特異性を示す抗体を指す。一実施形態では、ヒトモノクローナル抗体は、不死化細胞に融合された、ヒト重鎖導入遺伝子及び軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック非ヒト動物、例えばトランスジェニックマウスから得られたＢ細胞を含むハイブリドーマによって産生される。

【0047】

本明細書で使用される場合、用語「組換えヒト抗体」には、組換え手段によって調製、発現、作製、または単離されたすべてのヒト抗体、例えば、ヒト免疫グロブリン遺伝子またはそれから調製されたハイブリドーマのトランスジェニック動物または染色体導入動物（例えば、マウス）から単離された抗体、ヒト抗体を発現するように形質転換された宿主細胞、例えばトランスフェクトーマから単離された抗体、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリから単離された抗体、及びヒト免疫グロブリン遺伝子の全部または一部の配列を他のＤＮＡ配列にスプライシングすることを含む任意の他の手段によって調製、発現、作製、または単離された抗体が含まれる。そのような組換えヒト抗体は、フレームワーク領域及びＣＤＲ領域がヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する。しかしながら、特定の実施形態では、そのような組換えヒト抗体を、ｉｎ ｖｉｔｒｏ変異誘発（または、ヒトＩｇ配列のトランスジェニック動物を使用する場合には、ｉｎ ｖｉｖｏ体細胞変異誘発）に供してもよく、したがって、組換え抗体のＶＨ領域及びＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖系列ＶＨ及びＶＬ配列に由来し、関連している一方で、ｉｎ ｖｉｖｏではヒト抗体生殖系列レパートリー内に天然には存在しない可能性がある配列である。

【0048】

一実施形態では、本明細書で使用される場合、スクレロスチンに結合する抗体（例えば、抗スクレロスチン抗体）は、スクレロスチンポリペプチドに特異的に結合することを意味する。「スクレロスチンポリペプチドに特異的に結合する」とは、１×１０^－８Ｍ以下、１×１０^－９Ｍ以下、または１×１０^－１０Ｍ以下のＫ_Ｄでスクレロスチンポリペプチドに結合する抗体を指すことを意味する。本明細書で使用される場合、用語「Ｋ_Ｄ」は、解離定数を指すように意図されており、この定数は、Ｋ_ａに対するＫ_ｄの比率（すなわちＫ_ｄ／Ｋ_ａ）から得られ、モル濃度（Ｍ）として表される。抗体のＫ_Ｄ値は、当技術分野で十分に確立された方法を用いて求めることができる。抗体のＫ_Ｄを求める方法は、表面プラズモン共鳴を用いることによる方法、またはＢｉａｃｏｒｅ（登録商標）システムのようなバイオセンサーシステムを用いることによる方法である。

【0049】

様々な種のスクレロスチンに対する抗体の結合能力を評価するための標準的なアッセイは、当技術分野で公知であり、例えばＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロット、及びＲＩＡが挙げられる。好適なアッセイは、ＷＯ２００９／０４７３５６に詳細に記載されている。また、抗体の結合動態（例えば、結合親和性）は、Ｂｉａｃｏｒｅ分析など、当技術分野で公知の標準的なアッセイによって評価することができる。スクレロスチンの機能的特性（例えば、受容体結合、骨溶解の予防または改善）に対する抗体の効果を評価するためのアッセイは、ＷＯ２００９／０４７３５６にさらに詳細に記載されている。

【0050】

本明細書で使用される場合、２つの配列間の同一性の割合は、２つの配列の最適な整列のために導入する必要があるギャップの数、及び各ギャップの長さを考慮した、配列によって共有される同一の位置の数の関数である（すなわち、同一性（％）＝同一位置の数／位置の合計数×１００）。以下の非限定的な実施例に記載されているように、配列の比較及び２つの配列間の同一性の割合の決定は、数学的アルゴリズムを使用して達成され得る。

【0051】

２つのアミノ酸配列間の同一性の割合は、ＰＡＭ１２０重み付け残基表、１２のギャップ長ペナルティ、及び４のギャップペナルティを用いて、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれているＥ．Ｍｅｙｅｒｓ ａｎｄ Ｗ．Ｍｉｌｌｅｒ（Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．，４：１１－１７，１９８８）のアルゴリズムを使用して決定することができる。さらに、２つのアミノ酸配列間の同一性の割合を、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍで入手可能）のＧＡＰプログラムに組み込まれているＮｅｅｄｌｅｍａｎ ａｎｄ Ｗｕｎｓｃｈ（Ｊ．Ｍｏｌ，Ｂｉｏｌ．４８：４４４－４５３，１９７０）アルゴリズムを使用し、Ｂｌｏｓｓｏｍ６２マトリックスまたはＰＡＭ２５０マトリックスのいずれか、ならびに１６、１４、１２、１０、８、６、または４のギャップウェイト、及び１、２、３、４、５、または６の長さウェイトを使用して決定することができる。

【0052】

さらに、または代わりに、本発明のタンパク質配列は、例えば関連する配列を同定するために公共データベースに対して検索を実行するための「クエリ配列」としてさらに使用することができる。そのような検索は、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，１９９０ Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－１０のＢＬＡＳＴＸプログラム（バージョン２．０）を用いて実施することができる。ＢＬＡＳＴタンパク質検索を、ＢＬＡＳＴＸプログラム、スコア＝５０、ワード長＝３を用いて実施して、本発明の抗体分子に相同なアミノ酸配列を得てもよい。比較目的のためのギャップアライメントを得るために、Ｇａｐｐｅｄ ＢＬＡＳＴを、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，１９９７ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２５（１７）：３３８９－３４０２に記載されているように利用することができる。ＢＬＡＳＴ及びＧａｐｐｅｄ ＢＬＡＳＴプログラムを利用する場合、それぞれのプログラムのデフォルトパラメータ（例えば、ＢＬＡＳＴＸ及びＢＬＡＳＴＮ）を使用することができる。ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖを参照のこと。

【0053】

用語「交差遮断」、「交差遮断された」、及び「交差遮断すること」は、本明細書では同じ意味で使用され、標準競合結合アッセイ中のスクレロスチンへの他の抗体または結合剤の結合を妨害する抗体または他の結合剤の能力を意味する。抗体または他の結合剤が別の抗体または結合分子のスクレロスチンへの結合を妨害できる能力または程度、したがってそれが本発明によって交差遮断していると言えるかどうかは、標準的な競合結合アッセイを使用して決定することができる。好適なアッセイの１つは、Ｂｉａｃｏｒｅ技術の使用（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ３０００機器（Ｂｉａｃｏｒｅ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）を使用することによる）が挙げられ、この技術では、表面プラズモン共鳴技術を使用して相互作用の程度を測定することができる。交差遮断を測定するための別のアッセイは、ＥＬＩＳＡベースのアプローチを使用する。両方の方法に関するさらなる詳細は、ＷＯ２００９／０４７３５６に記載されており、具体的に参照により本明細書に援用される。

【0054】

本明細書で使用される場合、「毎月」投与、または「各月」投与は、連続した月の所与の期間を通じて、月１回、ある用量の抗スクレロスチン抗体を投与することを指す。

【0055】

本発明の様々な態様を、以下のサブセクションでさらに詳細に説明する。

【0056】

骨形成不全症
実施例の結果は、驚くべきことに、抗スクレロスチン療法が、骨代謝回転バイオマーカーに対する効果が衰えるか、または減弱した後も長期間にわたって、ＯＩ患者のＢＭＤを継続的に増加させることを示した。したがって、抗スクレロスチン抗体療法は、驚くべきことに、骨の弱体化または骨折発生率の増加をもたらすＯＩなどの骨関連遺伝性疾患の長期的または慢性的な治療に適している。

【0057】

一態様では、本発明は、ＯＩなどの骨関連遺伝性疾患を有する患者の治療方法に関する。本明細書で使用される場合、用語「患者」とは、ヒト患者を意味する。

【0058】

一態様では、本発明は、骨形成不全症の治療用の薬剤を製造するための抗スクレロスチン抗体の使用を提供する。本明細書で説明される他の態様／実施形態はすべて、本発明のこの特定の態様に等しく適用される。

【0059】

別の態様では、本発明は、骨形成不全症の治療に使用するための抗スクレロスチン抗体を提供する。本明細書で説明される他の態様／実施形態はすべて、本発明のこの特定の態様に等しく適用される。

【0060】

実施例は、ＯＩ患者における抗スクレロスチン抗体療法の試験を報告し、ＯＩ患者が毎月の抗スクレロスチン抗体療法に応答することを示している。したがって、一実施形態では、本明細書に記載の方法及び使用は、本明細書に記載の抗スクレロスチン抗体を使用して骨形成不全症（ＯＩ）を治療するためのものである。

【0061】

ＯＩは遺伝学と疾患の重症度によって分類され、Ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ Ｓｉｌｌｅｎｃｅ（２０１４，Ａｍ Ｊ Ｍｅｄ Ｇｅｎｅｔ Ｐａｒｔ Ａ １６４Ａ：１４７０－１４８１ ａｎｄ Ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ Ｓｉｌｌｅｎｃｅ，２０１４，Ａｍ Ｊ Ｍｅｄ Ｇｅｎｅｔ Ｐａｒｔ Ａ １６７Ａ：１１７８；これらはその全体が参照により本明細書に援用される）の分類に従って、Ｉ型ＯＩ、ＩＩ型ＯＩ、ＩＩＩ型ＯＩ、ＩＶ型ＯＩ、またはＶ型ＯＩに分類することができる。分類は、臨床評価／診断、生化学分析、及び分子遺伝学的検査の組み合わせに依存しており、当業者にとって日常的なものである。本明細書で使用されるＯＩの命名法／分類は、上記の刊行物で参照されているように、Ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ Ｓｉｌｌｅｎｃｅによって提案されたものである。試験参加者は、Ｉ型、ＩＩＩ型、またはＩＶ型のＯＩを患っており、すべてのＯＩ型がセトルスマブ療法に応答した。したがって、特定の実施形態では、骨関連疾患は、Ｉ型ＯＩ、ＩＩＩ型ＯＩ、またはＩＶ型ＯＩである。

【0062】

ＯＩに罹患している人々の８０％～９０％において、ＯＩは、Ｉ型コラーゲンのα１鎖とα２鎖をコードするＣＯＬ１Ａ１遺伝子とＣＯＬ１Ａ２遺伝子（それぞれ１７ｑ２１．３３及び７ｑ２２．３）内の変異によって引き起こされる。１，０００を超える既知の変異の包括的なデータベースが、遺伝子型と表現型の相関関係とともに公開されている（ｏｉ．ｇｅｎｅ．ｌｅ．ａｃ．ｕｋ／ｈｏｍｅ．ｐｈｐ；２０２１年９月２９日にアクセス）。ＣＲＴＡＰ、ＬＥＰＲＥ１、またはＰＰＩＢなどの他の遺伝子内の変異も知られている。ＣＯＬ１Ａ１及びＣＯＬ１Ａ２遺伝子内の変異についての分子遺伝学的検査が知られており、当業者にとって日常的である。一例として、Ｋｏｒｋｋｏ ｅｔ ａｌ．（１９９８）は、ＣＯＬ１Ａ１遺伝子及びＣＯＬ１Ａ２遺伝子のＰＣＲ増幅とそれに続くコンフォメーション高感度ゲル電気泳動（ＣＳＧＥ）による変異スキャンについて記載している（Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．６２：９８－１１０，１９９８）。ｖａｎ Ｄｉｊｋ ｅｔ ａｌ．（２０１０）は、多重ライゲーション依存性プローブ増幅（ＭＬＰＡ）法によるＣＯＬ１Ａ１変異検出について記載している（Ｇｅｎｅｔ Ｍｅｄ １２（１１）：７３６－７４１）。より最近では、Ａｒｖａｉ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．（２０１６）が、次世代配列決定法について説明している（Ｓｃｉ．Ｒｅｐ．６，２８４１７）。これらの参考文献は、参照により本明細書に援用される。

【0063】

したがって、一実施形態では、本明細書に記載の方法及び使用は、Ｉ型コラーゲンの欠乏、例えば、Ｉ型～ＩＶ型ＯＩを示す患者を治療するためのものである。結果として、コラーゲン原線維とヒドロキシアパタイト結晶からなる骨の正常な構造が変化し、脆性が生じる。一実施形態では、本明細書の方法及び使用は、ＣＯＬ１Ａ１及び／またはＣＯＬ１Ａ２における１つ以上の変異を特徴とするヒトＯＩ患者を治療するためのものである。

【0064】

一実施形態では、本明細書に記載の方法及び使用は、Ｉ型、ＩＩＩ型、及び／またはＩＶ型ＯＩを治療するためのものである。一実施形態では、Ｉ型、ＩＩＩ型、及びＩＶ型ＯＩを、ＤＮＡ検査、すなわちＣＯＬ１Ａ１／ＣＯＬ１Ａ２変異の検出によって確認する。したがって、一実施形態では、本明細書の方法及び使用は、ＣＯＬ１Ａ１及び／またはＣＯＬ１Ａ２における１つ以上の変異を特徴とするＩ型、ＩＩＩ型、及び／またはＩＶ型ＯＩを治療するためのものである。

【0065】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体の方法及び使用は、軽度～中程度の形態のＯＩを治療するためのものである。抗スクレロスチン抗体の方法及び使用の他の実施形態では、治療中の患者は、Ｉ型ＯＩ、ＩＩ型ＯＩ、ＩＩＩ型ＯＩ、またはＩＶ型ＯＩを有する。

【0066】

特定の実施形態では、本発明は、少なくとも連続３０か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に治療有効量のセトルスマブを３００～１５００ｍｇの用量で各月に投与することを含む、ヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供する。

【0067】

小児への投与
抗スクレロスチン抗体の方法及び使用のいくつかの実施形態では、ＯＩ患者は、１８歳以上の成人患者である。抗スクレロスチン抗体の方法及び使用のさらに他の実施形態では、ＯＩ患者は小児患者である。本明細書で定義される小児患者には、０～１７歳の小児、例えば２～１７歳、３～１７歳、４～１７歳、または５～１７歳などの小児が含まれる。

【0068】

体重または体表面積と比較した薬物クリアランス率は、成人よりも小児（特に幼児）の方が高いため、効果を発揮するのに十分な高用量の薬を小児が確実に摂取できるようにするために、例えば、ｍｇ／ｋｇで表される小児用量を、一般に同等の成人用量に比べて高くする必要がある。好適な小児用量は、式１に示す、小児と成人の体重の比の０．７乗から推定することができる（Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ － Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｉｎ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，２^ｎｄ Ｅｄ．，Ｙａｆｆｅ ａｎｄ Ａｒａｎｄａ）。
式：小児用量の換算

【数1】

【0069】

この計算式を適用すると、成人患者（７０ｋｇ）における２０ｍｇ／ｋｇの用量は、７ｋｇの小児（約６か月齢）における４０ｍｇ／ｋｇの用量に相当する。したがって、最小の患者では、セトルスマブを２０ｍｇ／ｋｇ投与した成人と同様の治療結果を達成するために、最大４０ｍｇ／ｋｇの用量が必要となる場合がある。したがって、成人におけるｍｇ／ｋｇ用量がより高くなる場合、小児患者ではさらに高い用量を必要とするであろう。したがって、一実施形態では、患者の年齢は０～１７歳であり、抗スクレロスチン抗体を各月に２０～５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。特定の実施形態では、患者の年齢は０～１７歳であり、抗スクレロスチン抗体を各月に２０～４０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。

【0070】

したがって、特定の実施形態では、本発明は、少なくとも連続１３か月、例えば、少なくとも連続１８か月、少なくとも連続２４か月、または少なくとも連続３０か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に２０～５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することを含む、０～１７歳のヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供する。

【0071】

したがって、特定の実施形態では、本発明は、少なくとも連続１３か月、例えば、少なくとも連続１８か月、少なくとも連続２４か月、または少なくとも連続３０か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に２０～５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することを含む、０～１７歳のヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供する。

【0072】

本明細書全体を通じて、抗スクレロスチン抗体の用量などの特定の量について数値範囲が提供される。これらの範囲は、開示される範囲内及び範囲間の各整数を含む、端点及びその中のすべての部分範囲を含むことが理解されるべきである。したがって、「２０～５０」の範囲には、その中のすべての可能な範囲（例えば、２１～４９、２２～４８、２３～４７など）と、２０～５０の個々の整数（例えば、２０、２１、２２、２３、２４など）が含まれる。範囲が、分数、百分率、小数などの形式で提供される場合、そのような範囲には、同様に、その中のすべての可能な部分範囲、及び開示される範囲内及び範囲間の個々の分数、百分率、小数などが含まれる。例えば、範囲「０．１～１．０」には、その中のすべての可能な範囲（例えば、０．２～０．９など）、及び０．１～１．０の個々の１／１０の小数（例えば、０．１、０．２、０．３、０．４など）が含まれる。したがって、２０～５０ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体の用量には、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、及び５０ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体の用量が含まれる。

【0073】

投与計画
本発明は、骨代謝回転バイオマーカーが治療開始後すぐに減弱するにもかかわらず、抗スクレロスチン抗体療法を長期間使用できるという発見に基づいている。したがって、本発明は、少なくとも１３か月間の抗スクレロスチン抗体の毎月の投与に関する。投与計画を調整して、最適な所望の応答（例えば、治療応答）を提供する。例えば、治療状況の緊急性に応じて用量を増減させてもよい。

【0074】

抗スクレロスチン抗体の投与の場合、用量は、患者の体重１キログラム当たり前記抗体約８ミリグラム（本出願全体を通じて「ｍｇ／ｋｇ」と称する）～５０ｍｇ／ｋｇ、より一般的には約２０～４０ｍｇ／ｋｇの範囲である。例えば、用量は、約２０ｍｇ／ｋｇ体重、約３０ｍｇ／ｋｇ体重、約４０ｍｇ／ｋｇ体重、または約５０ｍｇ／ｋｇ体重であり得る。別の実施形態では、月次用量は約２０～３０ｍｇ／ｋｇである。

【0075】

一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、患者の体重１ｋｇ当たり２０ｍｇの用量で、または２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０ｍｇ／ｋｇで投与する。

【0076】

表２は、本実施例の試験における患者の体重が、１９．９～１２０．７ｋｇの範囲であったことを報告している。したがって、関連する実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、１５０～３０００ｍｇ、例えば１５０～２５００ｍｇの用量で投与する。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、２００～２５００ｍｇ、４００～２５００ｍｇ、１５０～２０００ｍｇ、２００～２０００ｍｇ、４００～２０００ｍｇ、１５０～１５００ｍｇ、２００～１５００ｍｇ、４００～１５００ｍｇで投与する。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、２００～２５００ｍｇの用量で投与する。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、４００～２５００ｍｇの用量で投与する。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、１５０～２０００ｍｇの用量で投与する。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、２００～２０００ｍｇの用量で投与する。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、４００～２０００ｍｇの用量で投与する。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、１５０～１５００ｍｇの用量で投与する。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、２００～１５００ｍｇの用量で投与する。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、４００～１５００ｍｇの用量で投与する。

【0077】

一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、２００ｍｇ、または２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１０５０、１１００、１１５０、１２００、１２５０、１３００、１３５０、１４００、１４５０、１５００、１５５０、１６００、１６５０、１７００、１７５０、１８００、１８５０、１９００、１９５０、２０００、２０５０、２１００、２１５０、２２００、２２５０、２３００、２３５０、２４００、または２４５０ｍｇの用量で投与する。

【0078】

本発明は、長期治療に対する抗スクレロスチン抗体の驚くべき適合性に関する。したがって、本発明の方法によれば、抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続１３か月間毎月投与する。いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続１８か月の期間にわたって毎月投与する。いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続２４か月の期間にわたって毎月投与する。いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続３０か月の期間にわたって毎月投与する。いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続３６か月の期間にわたって毎月投与する。

【0079】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、最長１８年の期間にわたって毎月投与し、これは、抗スクレロスチン抗体を各月に投与する期間が１８年を超えて続かないことを意味する。したがって、一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続１３か月、最長１８年の期間にわたって毎月投与する。関連する実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続１８か月、最長１８年の期間にわたって毎月投与する。関連する実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続２４か月、最長１８年の期間にわたって毎月投与する。関連する実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続３０か月、最長１８年の期間にわたって毎月投与する。関連する実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続３６か月、最長１８年の期間にわたって毎月投与する。

【0080】

例示的な治療計画は、少なくとも連続１３か月、最長１８年の期間、月１回の投与スケジュールで、約１５０～３０００ｍｇの範囲の複数回用量（同じ用量であってもよい）の投与を伴う。いくつかの実施形態では、治療は、少なくとも連続１８か月間の毎月の投与を伴う。いくつかの実施形態では、治療は、少なくとも連続２４か月間の毎月の投与を伴う。いくつかの実施形態では、治療は、少なくとも連続３０か月間の毎月の投与を伴う。いくつかの実施形態では、治療は、少なくとも連続３６か月間の毎月の投与を伴う。

【0081】

特定の実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続３０か月、最長１８年の期間、１５０～２５００ｍｇの用量で毎月投与する。

【0082】

別の例示的な治療計画は、少なくとも連続１３か月間から、患者において治療目標が達成されるか到達するまで、月１回の投与スケジュールの下、約１５０～３０００ｍｇの範囲の複数回用量（同じ用量であってもよい）の投与を伴う。治療目標は、一定回数の投与後に達成または到達される。治療目標は、骨塩量の完全な正常化、骨塩量の部分的な正常化、または骨折の発生頻度の低下である。したがって、一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を毎月投与すると、連続１２か月の治療後に腰椎の骨塩量（ＢＭＤ）が５％以上増加する。

【0083】

別の実施形態では、本発明は、ＯＩの治療に使用するための抗スクレロスチン抗体を提供し、抗スクレロスチン抗体は、対照患者／患者集団と比較して、患者／患者集団における骨折率を低下させる。好ましくは、抗スクレロスチン抗体は、骨折率を少なくとも１０、２０、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、または９０パーセント減少させる。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、骨折率を少なくとも３０パーセント減少させる。一実施形態では、骨折は、放射線検査（複数可）によって確認される、末梢骨折または椎骨骨折（すべての主要な骨折、軽度の骨折、及び脊椎の臨床的骨折を含み、臨床症状を伴わず検査によってのみ検出される骨折は含まれない）として定義される。一実施形態では、骨折率は、患者集団に属する。患者集団及び対照患者集団は、統計的に有意な比較を可能にする規模であることが好ましい。

【0084】

抗スクレロスチン抗体は静脈内に投与する。特定の実施形態では、投与を、注入により静脈内に実施する。

【0085】

標的の測定は当技術分野で公知である。例えば、骨塩量（ＢＭＤ）を、二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＸＡ）、単一エネルギーＸ線吸収測定法（ＳＸＡ）、定量的コンピュータ断層撮影法（ＣＴ）、超音波、及び高解像度の末梢定量的コンピュータ断層撮影法（ＨＲ－ｐＱＣＴ）によって測定してもよい。ＤＸＡは、当技術分野で骨密度を測定するための標準となっているＸ線技術である。任意の骨格部位の測定に使用することができるが、臨床的な判断は通常、腰椎及び臀部で行われる。かかと（踵骨）、前腕（橈骨及び尺骨）、または指（指節骨）を測定するポータブルＤＸＡマシンが開発されており、ＤＸＡは体組成の測定にも使用することができる。その結果、個体の結果を人種と性別が一致する若年層の集団の結果と比較するＴスコアを使用して結果を「正常な」値に関連付けることが標準的な手法となっている。あるいは、Ｚスコアは、個体の結果を年齢が一致し、人種と性別も一致する集団の結果と比較する。したがって、例えば、Ｚスコアが－１（年齢の平均より１ＳＤ低い）の６０歳の女性は、Ｔスコアが－２．５（若年層の対照群の平均より２．５ＳＤ低い）になり得る。

【0086】

半径方向の骨の強度は、マイクロ有限要素解析（ｍｉｃｒｏＦＥＡ）によって測定してもよい。

【0087】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体の実際の用量レベルは、患者にとって有毒とならずに、特定の患者、組成物、及び投与様式に対して所望の治療応答を達成するのに有効な抗スクレロスチン抗体の量が得られるように変更してもよい。選択される用量レベルは、用いられる特定の組成物、投与経路、投与時間、用いられている特定の抗スクレロスチン抗体の排泄率、治療の持続期間、用いる特定の組成物と併用する他の薬物、化合物、及び／または物質を含む、多様な薬物動態学的要因、治療されている患者の年齢、性別、体重、状態、全般的な健康状態及び既往歴、ならびに医療分野において周知の同様の要因に依存するであろう。

【0088】

抗スクレロスチン抗体の「治療有効量」は、疾患症状の重症度の減少、疾患症状のない期間の頻度及び期間の増加、または疾患罹患による機能障害または能力障害の予防をもたらし得る。したがって、一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を毎月投与すると、１２か月の治療後に腰椎の骨塩量（ＢＭＤ）が５％以上増加する。

【0089】

特定の投与計画
他の態様では、本発明は、治療を必要とするヒト患者に治療有効量の抗スクレロスチン抗体を投与することを含む、ヒト患者における骨形成不全症（ＯＩ）の治療方法を提供し、この方法は、初期投与期間中に第１の用量を投与し、その後維持用量を投与することを伴う。いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、１２か月以上の初期投与期間にわたって毎月投与し、続いて維持用量で定期的に投与する。

【0090】

いくつかの実施形態では、初期投与期間と維持投与期間との間に休薬日を設けることなく、維持用量を初期投与期間の直後に続ける。いくつかの実施形態では、維持用量は、初期投与期間中に投与する投与計画とは異なる投与計画を含み、すなわち、維持用量は、初期投与期間中に投与するものとは異なる頻度及び／または用量で抗スクレロスチン抗体を投与することを含む。

【0091】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、初期投与期間中に２０～５０ｍｇ／ｋｇ、２０～４０ｍｇ／ｋｇ、または２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。特定の実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、初期投与期間中に２０ｍｇ／ｋｇの用量で毎月投与する。

【0092】

維持用量は、毎月、約２か月ごと、約３か月ごと、約４か月ごと、約６か月ごと、または約１２か月ごとに投与する抗スクレロスチン抗体の用量であってもよい。維持用量は、初期投与期間中に投与する量と同じ量（例えば、約２０ｍｇ／ｋｇ）であってもよく、または初期投与期間中に投与する量より低い量（例えば、２０ｍｇ／ｋｇ未満）であってもよい。

【0093】

いくつかの実施形態では、維持用量を、初期投与期間後、連続で少なくとも２か月、少なくとも４か月、少なくとも６か月、少なくとも８か月、少なくとも１０か月、または少なくとも１２か月の期間にわたって定期的に投与する。いくつかの実施形態では、維持用量を、初期投与期間後、少なくとも連続１８か月の期間にわたって投与する。いくつかの実施形態では、維持用量を、初期投与期間後、少なくとも連続２４か月の期間にわたって投与する。いくつかの実施形態では、維持用量を、初期投与期間後、少なくとも連続３０か月の期間にわたって投与する。いくつかの実施形態では、維持用量を、初期投与期間後、少なくとも連続３６か月の期間にわたって投与する。いくつかの実施形態では、維持用量を、初期投与期間後、最長１８年の期間にわたって投与する。

【0094】

したがって、一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、１２ヶ月以上の期間にわたって毎月投与し、その後、例えば最長１８年間にわたって隔月投与する。特定の実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、初期投与期間中に２０ｍｇ／ｋｇの用量で毎月投与し、その後、２０ｍｇ／ｋｇの維持用量を、隔月、３か月ごと、４か月ごと、６か月ごと、または１２か月ごとに投与する。特定の実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、初期投与期間中に２０ｍｇ／ｋｇの用量で毎月投与し、その後、２０ｍｇ／ｋｇの維持用量を隔月で投与する。別の実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、約２０ｍｇ／ｋｇの用量で１２か月以上毎月投与し、その後、例えば最長１８年間にわたって２０ｍｇ／ｋｇ未満の用量で毎月投与する。特定の実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、初期投与期間中に２０ｍｇ／ｋｇの用量で毎月投与し、その後、２０ｍｇ／ｋｇ未満の維持用量を毎月投与する。２０ｍｇ／ｋｇ未満の抗スクレロスチン抗体の維持用量は、２～２０ｍｇ／ｋｇ、５～２０ｍｇ／ｋｇ、８～２０ｍｇ／ｋｇ、１０～２０ｍｇ／ｋｇ、１５～２０ｍｇ／ｋｇ、２～１９ｍｇ／ｋｇ、５～１９ｍｇ／ｋｇ、８～１９ｍｇ／ｋｇ、１０～１９ｍｇ／ｋｇ、１５～１９ｍｇ／ｋｇ、２～１５ｍｇ／ｋｇ、５～１５ｍｇ／ｋｇ、８～１５ｍｇ／ｋｇ、１０～１５ｍｇ／ｋｇ、２～１０ｍｇ／ｋｇ、５～１０ｍｇ／ｋｇ、８～１０ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇ未満または約１９ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ未満または約１５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ未満または約１０ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ未満または約８ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ未満または約２ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１１ｍｇ／ｋｇ、約１２ｍｇ／ｋｇ、約１３ｍｇ／ｋｇ、約１４ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇ、約１６ｍｇ／ｋｇ、約１７ｍｇ／ｋｇ、約１８ｍｇ／ｋｇ、約１９ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体であってよい。

【0095】

維持用量は、初期投与期間後に患者においてＢＭＤ及び／または安定した骨代謝回転バイオマーカーレベルを維持するのに十分な用量であり得る。いくつかの実施形態では、維持用量は、初期投与期間後の患者におけるＢＭＤの増加（または増加速度）を維持するのに十分な用量である。維持用量は、初期投与期間に患者に投与する用量より低くてもよい。例えば、維持用量は、約５０ｍｇ／ｋｇ未満の抗スクレロスチン抗体、約４０ｍｇ／ｋｇ未満の抗スクレロスチン抗体、約３０ｍｇ／ｋｇ未満の抗スクレロスチン抗体、約２０ｍｇ／ｋｇ未満の抗スクレロスチン抗体、約１０ｍｇ／ｋｇ未満の抗スクレロスチン抗体、約８ｍｇ／ｋｇ未満の抗スクレロスチン抗体、または約２ｍｇ／ｋｇ未満の抗スクレロスチン抗体であってもよい。いくつかの実施形態では、維持用量は、約２ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体、約８ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体、約１０ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体、約１１ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体、約１２ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体、約１３ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体、約１４ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体、約１５ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体、約１６ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体、約１７ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体、約１８ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体、約１９ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体、または約２０ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体である。

【0096】

上記のように、抗スクレロスチン抗体の用量について本明細書に提供されるような範囲は、開示される範囲内及び範囲間の各整数を含む、端点及びその中のすべての部分範囲を含むことが理解されるべきである。したがって、「２０～５０」の範囲には、その中のすべての可能な範囲（例えば、２１～４９、２２～４８、２３～４７など）と、２０～５０の個々の整数（例えば、２０、２１、２２、２３、２４など）が含まれる。したがって、２０～５０ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体の用量には、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、及び５０ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体の用量が含まれる。２０ｍｇ／ｋｇ未満の抗スクレロスチン抗体の用量には、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、及び１ｍｇ／ｋｇの抗スクレロスチン抗体の用量が含まれる。

【0097】

抗スクレロスチン抗体
本発明は、抗スクレロスチン抗体を用いた骨関連疾患の治療に関する。いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号７０のＶＨ配列のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含むＶＨ、ならびに配列番号８１のＶＬ配列のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含むＶＬを含む。

【0098】

一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号４のアミノ酸配列（ＧＦＴＦＲＳＨＷＬＳ）を有するＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１５のアミノ酸配列（ＷＶＳＮＩＮＹＤＧＳＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ）を有するＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２６のアミノ酸配列（ＤＴＹＬＨＦＤＹ）を有するＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３７のアミノ酸配列（ＴＧＴＳＳＤＶＧＤＩＮＤＶＳ）を有するＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号４８のアミノ酸配列（ＬＭＩＹＤＶＮＮＲＰＳ）を有するＬＣＤＲ２、及び（ｆ）配列番号５９のアミノ酸配列（ＱＳＹＡＧＳＹＬＳＥ）を有するＬＣＤＲ３を含む。

【0099】

ＶＨまたはＶＬ配列内のＣＤＲは、様々な分類及び付番系によって記述され得る。したがって、ＣＤＲは、ＩＭＧＴ、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、Ｃｏｎｔａｃｔ、これらの系の組み合わせ、または別の系によって参照される場合がある。例えば、Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．，１９９１ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２）；Ｃｈｏｔｈｉａ（Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ １９６：９０１－１７）；ＩＭＧＴ（Ｌｅｆｆａｎｃ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｄｅｖ Ｃｏｍｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２７：５５－７７）；ＡｂＭ（Ｍａｒｔｉｎ ａｎｄ Ｔｈｏｒｎｔｏｎ Ｊ Ｂｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２６３：８００－１５，１９９６）；及びＣｏｎｔａｃｔ（ＭａｃＣａｌｌｕｍ，Ｒ．Ｍ．，Ｍａｒｔｉｎ，Ａ．Ｃ．Ｒ．ａｎｄ Ｔｈｏｒｎｔｏｎ，Ｊ．Ｔ．“Ａｎｔｉｂｏｄｙ－ａｎｔｉｇｅｎ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ：Ｃｏｎｔａｃｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ ｔｏｐｏｇｒａｐｈｙ”Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５）を参照のこと。これらの分類系間の重複及び相違点が記載されている（例えば、Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｄｅｖ Ｃｏｍｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２７：５５－７７；Ｈｏｎｅｇｇｅｒ ａｎｄ Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ（２００１）３０９：６５７－７０；Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）データベース；ウェブ資料、ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇを参照のこと）。当業者は、当技術分野の方法を使用して、ＶＨ及びＶＬ配列内のＣＤＲを同定することができる。例えば、ＣＤＲを、ａｂＹｓｉｓ（ｗｗｗ．ａｂｙｓｉｓ．ｏｒｇ；Ｓｗｉｎｄｅｌｌｓ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２０１７ Ｆｅｂ ３；４２９（３）：３５６－６４）などの利用可能なプログラムを使用して記述することができる。

【0100】

表１は、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＩＭＧＴ、ＡｂＭ、及びＣｏｎｔａｃｔ系に従って定義されるセトルスマブ（配列番号７０のＶＨ及び配列番号８１のＶＬを有する抗体）のＣＤＲ配列のアミノ酸配列を示す。

【表1】

【0101】

一実施形態では、セトルスマブのＣＤＲは、Ｋａｂａｔによって記述される。したがって、一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号１７８のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７９のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２６のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、及び（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。

【0102】

別の実施形態では、セトルスマブのＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａによって記述される。したがって、一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号１８２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１８３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２６のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、及び（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。

【0103】

別の実施形態では、抗スクレロスチン抗体のセトルスマブＣＤＲは、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの両方によって定義されるＣＤＲを包含するように定義される。したがって、各ＣＤＲ配列は、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａで定義されるＣＤＲの最もＮ末端の残基から、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａで定義されるＣＤＲの最もＣ末端の残基までの配列に及ぶ。したがって、一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７９のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２６のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、及び（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。

【0104】

一実施形態では、セトルスマブのＣＤＲは、ＩＭＧＴによって記述される。したがって、一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号１８４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１８５のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１８６のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１８７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８８のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、及び（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。

【0105】

一実施形態では、セトルスマブのＣＤＲは、ＡｂＭによって記述される。したがって、一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１８９のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２６のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８０のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、及び（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。

【0106】

一実施形態では、セトルスマブのＣＤＲは、Ｃｏｎｔａｃｔによって記述される。したがって、一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号１９０のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１９１のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、（ｃ）配列番号１９２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、（ｄ）配列番号１９３のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１９４のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、及び（ｆ）配列番号５９のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む。

【0107】

特定の実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号７０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５パーセントの同一性を有するＶＨポリペプチドアミノ酸配列を含む。

【0108】

特定の実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号８１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５パーセントの同一性を有するＶＬポリペプチドアミノ酸配列を含む。

【0109】

特定の実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号７０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５パーセントの同一性を有するＶＨポリペプチドアミノ酸配列、及び配列番号８１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５パーセントの同一性を有するＶＬポリペプチドアミノ酸配列を含む。

【0110】

特定の実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号７０のＶＨポリペプチドアミノ酸配列、及び配列番号８１のＶＬポリペプチドアミノ酸配列を含む。

【0111】

特定の実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号１１４（ＭＡＷＶＷＴＬＰＦＬＭＡＡＡＱＳＶＱＡＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＲＳＨＷＬＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＮＩＮＹＤＧＳＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＴＹＬＨＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＮＦＧＴＱＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＴＶＥＲＫＣＣＶＥＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＦＲＶＶＳＶＬＴＶＶＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＴＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＭＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ）または配列番号１７２の重鎖ポリペプチドアミノ酸配列、及び配列番号１２５（ＭＳＶＬＴＱＶＬＡＬＬＬＬＷＬＴＧＴＲＣＤＩＡＬＴＱＰＡＳＶＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩＳＣＴＧＴＳＳＤＶＧＤＩＮＤＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＹＤＶＮＮＲＰＳＧＶＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＱＳＹＡＧＳＹＬＳＥＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧＱＰＫＡＡＰＳＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥＣＳ）または配列番号１７３の軽鎖ポリペプチドアミノ酸配列を含む。

【0112】

一実施形態では、本発明の抗スクレロスチン抗体は、モノクローナル抗スクレロスチン抗体である。一実施形態では、本発明の抗スクレロスチン抗体は、ヒトまたはヒト化モノクローナル抗スクレロスチン抗体である。あるいは、抗体は、例えばキメラ抗体であり得る。

【0113】

好ましい実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、ヒト抗スクレロスチンモノクローナル抗体であるセトルスマブ抗体である。セトルスマブのＶＨ及びＶＬ配列は、配列番号７０のＶＨポリペプチドアミノ酸配列及び配列番号８１のＶＬポリペプチドアミノ酸配列を含む。セトルスマブの重鎖及び軽鎖配列は、配列番号１７２の重鎖ポリペプチドアミノ酸配列及び配列番号１７３の軽鎖ポリペプチドアミノ酸配列を含む。

【0114】

セトルスマブＶＨの配列（配列番号７０）：
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＲＳＨＷＬＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＮＩＮＹＤＧＳＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＴＹＬＨＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ

【0115】

セトルスマブＶＬの配列（配列番号８１）：
ＤＩＡＬＴＱＰＡＳＶＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩＳＣＴＧＴＳＳＤＶＧＤＩＮＤＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＹＤＶＮＮＲＰＳＧＶＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＱＳＹＡＧＳＹＬＳＥＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬ

【0116】

セトルスマブＨ鎖の配列（配列番号１７２）：
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＲＳＨＷＬＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＮＩＮＹＤＧＳＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＴＹＬＨＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＮＦＧＴＱＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＴＶＥＲＫＣＣＶＥＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＦＲＶＶＳＶＬＴＶＶＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＴＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＭＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ

【0117】

セトルスマブＬ鎖の配列（配列番号１７３）：
ＤＩＡＬＴＱＰＡＳＶＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩＳＣＴＧＴＳＳＤＶＧＤＩＮＤＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＹＤＶＮＮＲＰＳＧＶＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＱＳＹＡＧＳＹＬＳＥＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧＱＰＫＡＡＰＳＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥＣＳ

【0118】

関連する実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号７０のＶＨポリペプチドアミノ酸配列及び配列番号１９５のＶＬポリペプチドアミノ酸配列（ＤＩＡＬＴＱＰＡＳＶＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩＳＣＴＧＴＳＳＤＶＧＤＩＮＤＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＹＤＶＮＮＲＰＳＧＶＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＱＳＹＡＧＳＹＬＳＥＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧＱ）を含む。配列番号８１のＶＬポリペプチドアミノ酸配列は、Ｋａｂａｔ系に従って記述される。１９５のＶＬポリペプチドアミノ酸配列は、ＶＬドメインの別の記述であり、Ｋａｂａｔによる配列を包含するが、追加の２つのアミノ酸も含む。

【0119】

セトルスマブなど、本発明で使用される抗スクレロスチン抗体のさらなる特徴は、ＷＯ２００９／０４７３５６に記載されており、その開示、考察、及びデータは、参照により本明細書に援用される。単なる例として、抗体は、以下の機能的特性のうちの少なくとも１つを示し得る：抗体は、細胞ベースのｗｎｔシグナル伝達アッセイにおいてスクレロスチンの阻害効果を遮断し、抗体は、細胞ベースの石灰化アッセイにおいてスクレロスチンの阻害効果を遮断し、抗体は、Ｓｍａｄ１リン酸化アッセイにおけるスクレロスチンの阻害効果を遮断し、抗体は、ＬＲＰ－６へのスクレロスチンの結合を阻害し、抗体は、骨形成ならびに骨量及び密度を増加させる。上記のように、これらの特性は、ＷＯ２００９／０４７３５６に詳細に記載されている。

【0120】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号１９８に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＨポリペプチド配列、及び／または（ｂ）配列番号１９９に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＬポリペプチド配列を含む。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号１９８に記載のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列、及び配列番号１９９に記載のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号１９６に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有する重鎖（ＨＣ）ポリペプチド配列、及び／または配列番号１９７に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有する軽鎖（ＬＣ）ポリペプチド配列を含む。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号１９６に記載のアミノ酸配列を含むＨＣポリペプチド配列、及び配列番号１９７に記載のアミノ酸配列を含むＬＣポリペプチド配列を含む。

【0121】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号２０２に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＨポリペプチド配列、及び／または（ｂ）配列番号２０３に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有するＶＬポリペプチド配列を含む。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号２０２に記載のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列、及び配列番号２０３に記載のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号２００に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有する重鎖（ＨＣ）ポリペプチド配列、及び／または配列番号２０１に記載のアミノ酸配列に対して少なくとも９０パーセントの配列同一性を有する軽鎖（ＬＣ）ポリペプチド配列を含む。一実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、配列番号２００に記載のアミノ酸配列を含むＨＣポリペプチド配列、及び配列番号２０１に記載のアミノ酸配列を含むＬＣポリペプチド配列を含む。

【0122】

様々な抗スクレロスチン抗体のポリペプチド配列を以下に記載する：

【0123】

ＨＣポリペプチド配列：ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＮＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＮＰＮＳＧＧＡＧＹＮＱＫＦＫＧＲＶＴＭＴＴＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＲＳＬＲＳＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＬＧＹＤＤＩＹＤＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＮＦＧＴＱＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＴＶＥＲＫＣＣＶＥＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＦＲＶＶＳＶＬＴＶＶＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＴＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＭＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１９６）

【0124】

ＬＣポリペプチド配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＬＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＤＴＬＰＹＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１９７）

【0125】

ＶＨポリペプチド配列：ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＮＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＮＰＮＳＧＧＡＧＹＮＱＫＦＫＧＲＶＴＭＴＴＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＲＳＬＲＳＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＬＧＹＤＤＩＹＤＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１９８）

【0126】

ＶＬポリペプチド配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＬＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＤＴＬＰＹＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶ（配列番号１９９）

【0127】

ＨＣポリペプチド配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＶＳＧＦＰＩＫＤＴＦＱＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＧＷＳＤＰＥＩＧＤＴＥＹＡＳＫＦＱＧＲＶＴＭＴＥＤＴＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＴＧＤＴＴＹＫＦＤＦＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧ（配列番号２００）

【0128】

ＬＣポリペプチド配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＨＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＷＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＳＤＹＰＷＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号２０１）

【0129】

ＶＨポリペプチド配列：ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＶＳＧＦＰＩＫＤＴＦＱＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＧＷＳＤＰＥＩＧＤＴＥＹＡＳＫＦＱＧＲＶＴＭＴＥＤＴＳＴＤＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＴＧＤＴＴＹＫＦＤＦＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号２０２）

【0130】

ＶＬポリペプチド配列：ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＨＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＷＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＳＤＹＰＷＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶ（配列番号２０３）

【0131】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｅ）配列番号４８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び（ｆ）配列番号５９に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。

【0132】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号１７８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８０に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び（ｆ）配列番号１８１に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。

【0133】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、（ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１７９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、（ｃ）配列番号２６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、（ｄ）配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、（ｅ）配列番号１８０に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び（ｆ）配列番号１８１に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。

【0134】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、米国特許第７，８７９，３２２号、第８，２４６，９５３号、第８，４８６，６６１号、第８，００３，１０８号、第７，５９２，４２９号、第８，０１７，１２０号、もしくは第１０，４４９，２５０号、国際特許出願第ＷＯ２０１８／１１５８７９Ａ１号、第ＷＯ２０１８／１１５８８０Ａ１号、第ＷＯ２０１３／０１９９５４Ａ１号、第ＷＯ２００８／１１５７３２Ａ２号、もしくは第ＷＯ２０１５／０８７１８７Ａ１号、または米国特許出願公開第２０１１００４４９７８Ａ１号に記載されている抗体であり、これらはその全体が参照により本明細書に援用される。

【0135】

いくつかの実施形態では、抗スクレロスチン抗体は、セトルスマブ、ロモソズマブ、及びブロソズマブから選択される。

【0136】

「細胞ベースのｗｎｔシグナル伝達アッセイにおいてスクレロスチンの阻害効果を遮断する」抗体に関して、これは、細胞ベースのスーパートップフラッシュ（ＳＴＦ）アッセイにおいて、スクレロスチンの存在下、１ｍＭ未満、１００ｎＭ未満、２０ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、またはそれ未満のＩＣ５０でｗｎｔ誘導性シグナル伝達を回復させる抗体を指すことを意図している。ＷＯ２００９／０４７３５６には、前記ｗｎｔ ＳＴＦアッセイが記載されている。

【0137】

「細胞ベースの石灰化アッセイにおいてスクレロスチンの阻害効果を遮断する」抗体に関して、これは、細胞ベースのアッセイにおいて、スクレロスチンの存在下、１ｍＭ未満、５００ｎＭ未満、１００ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、１ｎＭ未満、またはそれ未満のＩＣ５０で、ＢＭＰ２誘導性石灰化を回復させる抗体を指すことを意図している。

【0138】

「Ｓｍａｄ１リン酸化アッセイにおけるスクレロスチンの阻害効果を遮断する」抗体に関して、これは、細胞ベースのアッセイにおいて、スクレロスチンの存在下、１ｍＭ未満、５００ｎＭ未満、１００ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、１ｎＭ未満、またはそれ未満のＩＣ５０で、ＢＭＰ６誘導性のＳｍａｄ１リン酸化を回復させる抗体を指すことを意図している。

【0139】

「ＬＲＰ－６へのスクレロスチンの結合を阻害する」抗体に関して、これは、１ｍＭ未満、５００ｎＭ未満、１００ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、３ｎＭ未満、１ｎＭ未満、またはそれ未満のＩＣ５０でＬＲＰ－６へのスクレロスチンの結合を阻害する抗体を指すことを意図している。

【0140】

「骨形成、質量及び密度を増加させる」抗体に関して、これは、高同化用量のＰＴＨによる連日の断続的な処置、例えば、１００μｇ／ｋｇのｈＰＴＨによる連日の断続的な処置のレベルで、骨形成、質量及び密度に達することができる抗体を指すことを意図している。

【0141】

一実施形態では、本発明の抗スクレロスチン抗体は、骨形成を増加させ、及び／または骨吸収を減少させる。

【0142】

一態様では、本発明は、治療有効量の抗スクレロスチン抗体を少なくとも連続１３か月間、各月にヒト患者に投与することを含む、ヒト患者における骨関連疾患の治療方法を提供し、この抗体は、配列番号７０のＶＨ配列のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３ドメインを含むＶＨ、ならびに配列番号８１のＶＬ配列のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３ドメインを含むＶＬを含む抗スクレロスチン抗体を交差遮断する。

【0143】

別の態様では、本発明は、骨関連疾患の治療に使用するための抗スクレロスチン抗体を提供し、その場合、治療有効量の抗スクレロスチン抗体を少なくとも連続１３か月間、各月に投与し、この抗体は、配列番号７０のＶＨ配列のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３ドメインを含むＶＨ、ならびに配列番号８１のＶＬ配列のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３ドメインを含むＶＬを含む抗スクレロスチン抗体を交差遮断する。

【0144】

別の態様では、本発明は、骨関連疾患を治療するための薬剤を製造するための抗スクレロスチン抗体の使用を提供し、その場合、治療は、治療有効量の抗スクレロスチン抗体を少なくとも連続１３か月間、各月に投与することを含み、この抗体は、配列番号７０のＶＨ配列のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３ドメインを含むＶＨ、ならびに配列番号８１のＶＬ配列のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３ドメインを含むＶＬを含む抗スクレロスチン抗体を交差遮断する。

【0145】

一実施形態では、本発明に従って使用される抗スクレロスチン抗体は、１０^－１１Ｍ以下の親和性（Ｂｉａｃｏｒｅにより測定される）でスクレロスチンに結合し、配列番号７０のＶＨ配列のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３ドメインを含むＶＨ、ならびに配列番号８１のＶＬ配列のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３ドメインを含むＶＬを含む抗スクレロスチン抗体を交差遮断する。

【0146】

本発明によれば、抗体または結合剤の組み合わせ（混合物）の記録される結合が、２つの抗体または結合剤の組み合わせの理論的最大結合（上記で定義したような）の８０％～０．１％（例えば８０％～４％）、特に理論的最大結合の７５％～０．１％（例えば７５％～４％）、より具体的には７０％～０．１％（例えば、７０％～４％）、より具体的には理論的最大結合の６５％～０．１％（例えば、６５％～４％）であるように、本発明による交差遮断抗体または他の結合剤は、以下に記載されるＢｉａｃｏｒｅ交差遮断アッセイにおいてスクレロスチンに結合する。

【0147】

以下に、抗体または他の結合剤が本発明による抗体を交差遮断するか、または交差遮断することができるかを判定するための好適なＢｉａｃｏｒｅアッセイについて概説する。このアッセイは、本明細書に記載のスクレロスチン結合抗体のいずれかと共に使用することができることが理解されるであろう。

【0148】

Ｂｉａｃｏｒｅマシン（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ３０００）は、製造業者の推奨に従って操作される。

【0149】

スクレロスチンを、日常的に使用されるアミンカップリング化学、例えばＥＤＣ－ＮＨＳアミンカップリングによって、例えばＣＭ５ Ｂｉａｃｏｒｅチップにカップリングして、スクレロスチンでコーティングされた表面を作出してもよい。測定可能なレベルの結合を得るために、通常、２００～８００共鳴単位のスクレロスチンをチップに結合してもよい（この量は、測定可能なレベルの結合を与えると同時に、使用する検査試薬の濃度によって容易に飽和可能である）。

【0150】

スクレロスチンをＢｉａｃｏｒｅチップに取り付ける別の方法は、スクレロスチンの「タグ付き」バージョン、例えばＮ末端またはＣ末端Ｈｉｓタグ付きスクレロスチンを使用することである。この形式では、抗Ｈｉｓ抗体をＢｉａｃｏｒｅチップにカップリングし、次いでこのチップ表面にＨｉｓタグ付きスクレロスチンを通過させ、抗Ｈｉｓ抗体で捕捉する。

【0151】

相互に交差遮断する能力について評価される２つの抗体を、結合部位の化学量論量、例えば１対１のモル比で、好適な緩衝液中で混合して、被験混合物を作製する。使用する緩衝液は一般的に、タンパク質化学において通常使用される緩衝液、例えば、ＰＢＳ（１３６ｍＭ ＮａＣｌ、２．７ｍＭ ＫＣｌ、１０ｍＭ Ｎａ_２ＨＰＯ_４、１．７６ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４、ｐＨ７．４）である。結合部位に基づいて濃度を計算する場合、抗体の分子量は、抗体の総分子量をその抗体上の標的（すなわち、スクレロスチン）結合部位の数で割ったものであると仮定される。

【0152】

被験混合物中の各抗体の濃度は、Ｂｉａｃｏｒｅチップ上に結合しているスクレロスチン分子上のその抗体の結合部位が確実に飽和するのに十分な高さであるべきである。混合物中の抗体は、同じモル濃度（結合ベース）であり、その濃度は通常、１．０ｍＭ～１．５ｍＭ（結合部位ベース）であろう。

【0153】

別々の抗体自体を含有する別々の溶液も調製する。これらの別々の溶液に使用する緩衝液は、被験混合物に使用した緩衝液と同じ緩衝液かつ同じ濃度であるべきである。

【0154】

スクレロスチンでコーティングしたＢｉａｃｏｒｅチップ上に被験混合物を通過させ、結合を記録する。その後、結合した抗体を、例えば３０ｍＭ ＨＣｌなどの酸でチップを約１分間処理することによって除去する。チップに結合しているスクレロスチン分子が損傷を受けないことが重要である。次いで、スクレロスチンでコーティングされた表面上に第１の抗体のみの溶液を通過させ、結合を記録する。その後、例えば上述の酸処理によってチップを処理して、チップに結合したスクレロスチンを損傷させることなく、結合した抗体をすべて除去する。次いで、スクレロスチンでコーティングされた表面上に第２の抗体のみの溶液を通過させ、結合量を記録する。

【0155】

理論的最大結合は、スクレロスチンへの各抗体の結合の合計として個別に定義することができる。次いで、これを、測定した抗体混合物の実際の結合と比較する。実際の結合が理論的結合よりも低い場合、２つの抗体は相互に交差遮断している。

【0156】

液相の抗スクレロスチン抗体の非存在下（すなわち、陽性対照ウェル）で得られるスクレロスチン検出シグナルと比較して、液相の抗スクレロスチン抗体が、スクレロスチン検出シグナル（すなわち、コーティングされた抗体が結合したスクレロスチンの量）の６０％～１００％、具体的には７０％～１００％、より具体的には８０％～１００％の減少を生じ得る場合、抗体は、以下に説明するように、ＥＬＩＳＡアッセイにおいて交差遮断として定義される。

【0157】

抗スクレロスチン抗体または別のスクレロスチン結合剤の交差遮断も、ＥＬＩＳＡアッセイを使用して検出してよい。ＥＬＩＳＡアッセイの一般原理には、ＥＬＩＳＡプレートのウェル上に抗スクレロスチン抗体をコーティングすることが含まれる。次いで、過剰量の第２の潜在的に交差遮断性の抗スクレロスチン抗体を溶液中に添加する（すなわち、ＥＬＩＳＡプレートに結合しない）。次いで、限定的な量のスクレロスチンをウェルに添加する。

【0158】

ウェル上にコーティングされた抗体と溶液中の抗体は、限定された数のスクレロスチン分子の結合をめぐって競合する。次いで、プレートを洗浄して、コーティングされた抗体に結合しなかったスクレロスチンを除去し、第２の液相抗体及び第２の液相抗体とスクレロスチンとの間に形成された複合体も除去する。次いで、適切なスクレロスチン検出試薬を使用して、結合したスクレロスチンの量を測定する。コーティングされた抗体を交差遮断することができる溶液中の抗体は、コーティングされた抗体が第２の液相抗体の非存在下で結合することができるスクレロスチン分子の数と比較して、コーティングされた抗体が結合することができるスクレロスチン分子の数を減少させることができる。

【0159】

Ａｂ－Ｘ及びＡｂ－Ｙと呼ばれる２つの抗体について、このアッセイを以下でさらに詳細に説明する。固定化抗体としてＡｂ－Ｘを選択する場合、これをＥＬＩＳＡプレートのウェルにコーティングし、その後、プレートを好適なブロッキング溶液でブロッキングして、その後に添加される試薬の非特異的結合を最小限に抑える。次いで、ウェル当たりのＡｂ－Ｙスクレロスチン結合部位のモル数が、ＥＬＩＳＡプレートのコーティング中に使用したウェルあたりのＡｂ－Ｘスクレロスチン結合部位のモル数より少なくとも１０倍高くなるように、過剰量のＡｂ－ＹをＥＬＩＳＡプレートに添加する。次いで、ウェル当たりに添加されるスクレロスチンのモル数が、各ウェルのコーティングに使用したＡｂ－Ｘスクレロスチン結合部位のモル数より少なくとも２５倍低くなるように、スクレロスチンを添加する。好適なインキュベーション期間の後、ＥＬＩＳＡプレートを洗浄し、スクレロスチン検出試薬を添加して、コーティングした抗スクレロスチン抗体（この場合はＡｂ－Ｘ）が特異的に結合するスクレロスチンの量を測定する。アッセイのバックグラウンドシグナルは、コーティングした抗体（この場合はＡｂ－Ｘ）、第２の液相抗体（この場合はＡｂ－Ｙ）、スクレロスチン緩衝液のみ（すなわち、スクレロスチンなし）、及びスクレロスチン検出試薬を含有するウェルで得られるシグナルとして定義される。アッセイの陽性対照シグナルは、コーティングした抗体（この場合はＡｂ－Ｘ）、第２の液相抗体緩衝液のみ（すなわち、第２の液相抗体なし）、スクレロスチン及びスクレロスチン検出試薬を含有するウェルで得られるシグナルとして定義される。ＥＬＩＳＡアッセイは、陽性対照シグナルがバックグラウンドシグナルの少なくとも６倍となるような方法で実行する必要がある。

【0160】

どの抗体をコーティング抗体として使用し、どの抗体を第２の（競合）抗体として使用するかの選択に起因するアーチファクト（例えば、スクレロスチンに対するＡｂ－ＸとＡｂ－Ｙの有意に異なる親和性）を回避するために、交差遮断アッセイを２つの形式で実行する必要があり、１）形式１では、Ａｂ－ＸがＥＬＩＳＡプレート上にコーティングする抗体であり、Ａｂ－Ｙが溶液中の競合抗体であり、２）形式２では、Ａｂ－ＹがＥＬＩＳＡプレート上にコーティングする抗体であり、Ａｂ－Ｘが溶液中の競合抗体である。

【0161】

別の態様では、本発明は、治療有効量の抗スクレロスチン抗体を少なくとも連続１３か月間、各月にヒト患者に投与することを含む、ヒト患者における骨関連疾患の治療方法を提供し、この抗体は、配列番号７０のＶＨ配列のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３ドメインを含むＶＨ、ならびに配列番号８１のＶＬ配列のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３ドメインを含むＶＬを含む抗スクレロスチン抗体と同じエピトープに結合する。

【0162】

別の態様では、本発明は、骨関連疾患の治療に使用するための抗スクレロスチン抗体を提供し、その場合、治療有効量の抗スクレロスチン抗体を少なくとも連続１３か月間、各月に投与し、この抗体は、配列番号７０のＶＨ配列のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３ドメインを含むＶＨ、ならびに配列番号８１のＶＬ配列のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３ドメインを含むＶＬを含む抗スクレロスチン抗体と同じエピトープに結合する。

【0163】

別の態様では、本発明は、骨関連疾患を治療するための薬剤を製造するための抗スクレロスチン抗体の使用を提供し、その場合、治療は、治療有効量の抗スクレロスチン抗体を少なくとも連続１３か月間、各月に投与することを含み、この抗体は、配列番号７０のＶＨ配列のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３ドメインを含むＶＨ、ならびに配列番号８１のＶＬ配列のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３ドメインを含むＶＬを含む抗スクレロスチン抗体と同じエピトープに結合する。

【0164】

一実施形態では、本発明に従って使用される抗スクレロスチン抗体は、１０^－１１Ｍ以下の親和性（Ｂｉａｃｏｒｅにより測定される）でスクレロスチンに結合し、配列番号７０のＶＨ配列のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３ドメインを含むＶＨ、ならびに配列番号８１のＶＬ配列のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３ドメインを含むＶＬを含む抗スクレロスチン抗体と同じエピトープに結合する。

【0165】

抗体のエピトープを決定するための標準的なアッセイは、当技術分野で公知であり、例えば、Ｘ線結晶構造解析、核磁気共鳴（ＮＭＲ）、質量分析と組み合わせた水素－重水素交換、ペプチドベースのアプローチ、または変異誘発ベースのアプローチが挙げられる（すべて、Ａｂｂｏｔｔ ｅｔ ａｌ．“Ｃｕｒｒｅｎｔ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｆｉｎｅ ｍａｐｐｉｎｇ ｏｆ ａｎｔｉｇｅｎ－ａｎｔｉｂｏｄｙ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ．”Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ｖｏｌ．１４２，４（２０１４）：５２６－３５、及びその参考文献において論じられている）。

【0166】

医薬組成物
一実施形態では、抗スクレロスチン抗体を、医薬組成物として提供する。医薬組成物は、薬学的に許容される担体と共に製剤化してもよい。したがって、一態様では、本発明は、本明細書で定義される抗スクレロスチン抗体と、骨関連疾患の治療に使用するための薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を提供し、その場合、治療有効量の抗スクレロスチン抗体を、少なくとも連続１３か月間、各月に投与する。医薬組成物のいくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７０のＶＨ配列のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３ドメインを含むＶＨ、ならびに配列番号８１のＶＬ配列のＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３ドメインを含むＶＬを含む。薬学的に許容される担体には、滅菌水溶液が含まれる。

【0167】

特定の実施形態
一実施形態では、本発明は、少なくとも連続１３か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に１５０～２５００ｍｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、ヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供する。

【0168】

関連する実施形態では、本発明は、少なくとも連続３０か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に１５０～２５００ｍｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、ヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供する。

【0169】

別の実施形態では、本発明は、少なくとも連続１３か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に２０～４０ｍｇ／ｋｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、０～１７歳のヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供する。

【0170】

関連する実施形態では、本発明は、少なくとも連続３０か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に２０～４０ｍｇ／ｋｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、０～１７歳のヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供する。

【0171】

一実施形態では、本発明は、少なくとも連続１３か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に１５０～２５００ｍｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、ヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供し、その場合、抗スクレロスチン抗体は、配列番号７０のアミノ酸配列を有するＶＨポリペプチド配列及び配列番号８１のアミノ酸配列を有するＶＬポリペプチド配列を含む。

【0172】

関連する実施形態では、本発明は、少なくとも連続３０か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に１５０～２５００ｍｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、ヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供し、その場合、抗スクレロスチン抗体は、配列番号７０のアミノ酸配列を有するＶＨポリペプチド配列及び配列番号８１のアミノ酸配列を有するＶＬポリペプチド配列を含む。

【0173】

別の実施形態では、本発明は、少なくとも連続１３か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に２０～４０ｍｇ／ｋｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、０～１７歳のヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供し、その場合、抗スクレロスチン抗体は、配列番号７０のアミノ酸配列を有するＶＨポリペプチド配列及び配列番号８１のアミノ酸配列を有するＶＬポリペプチド配列を含む。

【0174】

関連する実施形態では、本発明は、少なくとも連続３０か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に２０～４０ｍｇ／ｋｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、０～１７歳のヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供し、その場合、抗スクレロスチン抗体は、配列番号７０のアミノ酸配列を有するＶＨポリペプチド配列及び配列番号８１のアミノ酸配列を有するＶＬポリペプチド配列を含む。

【0175】

一実施形態では、本発明は、少なくとも連続１３か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に１５０～２５００ｍｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、ヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供し、その場合、抗スクレロスチン抗体は、配列番号１９８のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列及び配列番号１９９のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む。

【0176】

関連する実施形態では、本発明は、少なくとも連続３０か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に１５０～２５００ｍｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、ヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供し、その場合、抗スクレロスチン抗体は、配列番号１９８のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列及び配列番号１９９のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む。

【0177】

別の実施形態では、本発明は、少なくとも連続１３か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に２０～４０ｍｇ／ｋｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、０～１７歳のヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供し、その場合、抗スクレロスチン抗体は、配列番号１９８のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列及び配列番号１９９のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む。

【0178】

関連する実施形態では、本発明は、少なくとも連続３０か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に２０～４０ｍｇ／ｋｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、０～１７歳のヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供し、その場合、抗スクレロスチン抗体は、配列番号１９８のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列及び配列番号１９９のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む。

【0179】

一実施形態では、本発明は、少なくとも連続１３か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に１５０～２５００ｍｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、ヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供し、その場合、抗スクレロスチン抗体は、配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列及び配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む。

【0180】

関連する実施形態では、本発明は、少なくとも連続３０か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に１５０～２５００ｍｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、ヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供し、その場合、抗スクレロスチン抗体は、配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列及び配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む。

【0181】

別の実施形態では、本発明は、少なくとも連続１３か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に２０～４０ｍｇ／ｋｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、０～１７歳のヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供し、その場合、抗スクレロスチン抗体は、配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列及び配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む。

【0182】

関連する実施形態では、本発明は、少なくとも連続３０か月、最長１８年の期間にわたって、ヒト患者に２０～４０ｍｇ／ｋｇの治療有効量の抗スクレロスチン抗体を各月に投与することを含む、０～１７歳のヒト患者におけるＯＩの治療方法を提供し、その場合、抗スクレロスチン抗体は、配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチド配列及び配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチド配列を含む。

【実施例】

【0183】

実施例１
本実施例では、Ｉ型、ＩＩＩ型、またはＩＶ型の骨形成不全症（ＯＩ）と診断され、ＣＯＬ１Ａ１／ＣＯＬ１Ａ２変異が確認され、過去５年間に骨折があった成人６０人を対象とした、１２か月の無作為化二重盲検第２ｂ相臨床試験について記載する。患者に、８ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇの用量のセトルスマブを１２か月間、各月に投与した。セトルスマブは、注入により静脈内投与した。試験では、ＤＸＡで測定した腰椎の面骨塩量（ＢＭＤ）について、６か月後及び１２か月後のベースラインからの変化率を測定した。また、骨形成のバイオマーカーであるプロコラーゲンＩのＮ末端プロペプチド（ＰＩＮＰ）、及び骨吸収のバイオマーカーであるＣ末端テロペプチド（ＣＴＸ－１）を、１、３、６、９、及び１２か月後に測定した。

【0184】

セトルスマブ治療群に無作為に割り付けられた６０人の患者のうち、２９人に８ｍｇ／ｋｇを毎月投与して治療し、３１人に２０ｍｇ／ｋｇを毎月投与して治療した。これらの患者のベースライン患者特徴（表２）及び病歴（表３）は、治療群間で同等であった。

【表2】

【表3】

【0185】

結果
試験における骨代謝バイオマーカーのアッセイ結果を図２Ａ及び図２Ｂに示す。結果は、セトルスマブ療法によって、骨代謝回転の血清バイオマーカーがベースラインから用量依存的に改善したことを示す。驚くべきことに、両方のバイオマーカーは、最初の１か月でピークの応答を示し、その後応答は減衰し、治療開始から６～９か月以内にバイオマーカーレベルはベースラインレベルと有意に変わらないレベルに戻った。

【0186】

骨形成バイオマーカー（Ｐ１ＮＰ）のレベルは、毎月２０ｍｇ／ｋｇでのセトルスマブ療法の最初の６か月間、及び毎月８ｍｇ／ｋｇでの治療の最初の１か月間では、ベースラインレベルを統計的に有意に上回っていた（図２Ａ）。ベースライン値、治療群、及びＯＩ型を共変量としてＡＮＣＯＶＡモデルを使用して統計的有意性を試験した（^＊＊ｐ＜０．０１；^＊＊＊ｐ＜０．００１）。どちらの用量のセトルスマブでも、Ｐ１ＮＰレベルは最初の１か月でピークに達し、その後１１か月の治療期間中に減少した。

【0187】

骨吸収マーカー（ＣＴＸ－１）のレベルは、毎月２０ｍｇ／ｋｇでのセトルスマブ療法の最初の３か月間、及び毎月８ｍｇ／ｋｇでの治療の最初の１か月間では、ベースラインレベルを有意に下回っていた（図２Ｂ）。ベースライン値、治療群、及びＯＩ型を共変量としてＡＮＣＯＶＡモデルを使用して統計的有意性を試験した（^＊＊ｐ＜０．０１；^＊＊＊ｐ＜０．００１）。どちらの用量のセトルスマブでも、ＣＴＸ－１レベルは最初の１か月で最低値に達し、その後の１１か月の治療期間中に再び上昇した。

【0188】

対照的に、図３は、ベースラインを上回る腰椎ＢＭＤの改善がセトルスマブ療法によって継続されたことを示している。２０ｍｇ／ｋｇのセトルスマブを毎月投与した群では、腰椎ＢＭＤ（ＤＸＡで測定）が６か月後に約４％、１２か月後には８．５％増加した。同様に、８ｍｇ／ｋｇのセトルスマブを毎月投与した群では、腰椎ＢＭＤ（ＤＸＡで測定）が６か月後に約４．７％、１２か月後には６．８％増加した。これらの増加は、ベースライン値、治療群、ＯＩ型を共変量としたＡＮＣＯＶＡモデルに基づき、ベースラインと比較して統計的に有意であった（^＊＊＊ｐ＜０．００１）。そのため、治療初期にバイオマーカーが減少したにもかかわらず、毎月のセトルスマブ療法の最初の６か月間と後半の６か月間で同様のＢＭＤの増加が観察された。

【0189】

さらに、試験では、抗スクレロスチン抗体が成人ＯＩ患者において安全で忍容性が高いことが示された。試験治療下で発現した重篤な有害事象（ＴＥＡＥ）は、治療期間中、群全体でほとんど認められなかった。有害事象（ＡＥ）による中止は、好中球減少症と頭痛の２件のみであった。患者の安全を損なわせる血液学的、臨床化学、尿検査、ＥＣＧ、またはバイタルサインデータの臨床的に重大な異常はなかった。

【0190】

臨床試験の結果によると、長期使用によりセトルスマブの効果が薄れることがバイオマーカーによって示されているにもかかわらず、セトルスマブはＯＩ患者のＢＭＤを継続的に増加させる。驚くべきことに、これらの結果は、バイオマーカーによって分析された応答がＢＭＤに対する効果とは別個であったことを示している。ＢＭＤにおいて観察された改善は継続的であり、治療の最初の６か月と後半の６か月で同等の改善が達成された。対照的に、バイオマーカーには一時的な変化が観察され、バイオマーカーの応答はセトルスマブ治療の最初の１か月間でピークに達し、その後は、治療を継続したにもかかわらず急速に減衰した。したがって、これらの結果は、たとえ骨代謝回転バイオマーカーのレベルで観察された応答が治療初期に減退したとしても、セトルスマブが長期使用によって臨床的に関連する効果、すなわちＢＭＤの増加を継続することを示している。これらの驚くべき結果により、セトルスマブは長期（または慢性）治療に使用することができ、セトルスマブ療法には休薬期間は必要ないという結論につながった。

【0191】

実施例２
１２か月間のセトルスマブ療法後、セトルスマブを中止し、２４か月目までＢＭＤをモニタリングした。患者のサブセットに１２か月目及び／または１８か月目にゾレドロン酸療法（「任意のＺＯＬ」）を施し、別のサブセットにはセトルスマブ中止後にゾレドロン酸療法を施さなかった（「ＺＯＬなし」）。この１年間にわたって、腰椎ＢＭＤ（図４Ａ）、股関節ＢＭＤ（図４Ｂ）、橈骨全領域体積ＢＭＤ（図４Ｃ）、及び脛骨全領域体積ＢＭＤ（図４Ｄ）を評価した。セトルスマブ療法に起因する初期のＢＭＤの増加は、セトルスマブ療法の中止後１年間にわたって減少した。末梢骨格において大きなＢＭＤの損失が観察され、一方、脊椎及び股関節において中程度のＢＭＤの損失が観察された。ゾレドロン酸（ＺＯＬ）の投与により、脊椎及び股関節におけるＢＭＤ損失が予防されたが、橈骨遠位端及び脛骨では予防されなかった。

【0192】

セトルスマブ（２０ｍｇ／ｋｇ）による１２か月の治療期間中、及び治療後１８か月目まで（セトルスマブ治療後合計６か月）の間、患者の血清中で骨代謝回転マーカーＰ１ＮＰ及びＣＴｘを評価した。医師の推奨に従って、患者にゾレドロン酸を投与するか、または投与しなかった。ゾレドロン酸（ＺＯＬ）による治療に関係なく、患者において血清Ｐ１ＮＰ（骨形成の指標）は低下した（図５Ａ）。一方、ゾレドロン酸を投与していない患者では、血清ＣＴｘ（骨吸収を示す）が増加した。

【0193】

最初の１２か月の投与期間後の追跡期間中に、有害事象についても患者を評価した。追跡期間における安全性の所見は予想された転帰と一致しており、骨折率は変動していたが、最初の１２か月の治療期間中の骨折率を有意に超えることはなかった。２年間の試験全体を通じて、重大な有害な心血管事象は発生しなかった。

【0194】

これらの結果は、セトルスマブ療法に起因するＢＭＤ増加が、骨代謝回転バイオマーカーによって示唆された減少後も十分に継続するだけでなく（実施例１）、ゾレドロン酸単独などの骨吸収抑制療法ではセトルスマブによる初期の増加を維持するには不十分であることも示している。さらに、セトルスマブ療法による骨代謝回転バイオマーカーに認められる初期の山と谷は、セトルスマブによる治療期間中に徐々に平準化されるが、セトルスマブを中止すると、安定した維持レベルにあったものがベースラインから急速に変化するものへと切り替わる。Ｐ１ＮＰ（骨形成）の場合、セトルスマブを中止すると、ゾレドロン酸治療に関係なく減少が生じる。ＣＴｘ（骨吸収）の場合、セトルスマブを中止すると、急速な増加が生じる。したがって、セトルスマブ療法の中止後のＢＭＤの減少及び骨代謝回転バイオマーカーの変化は、１２か月後の治療継続の必要性を裏付けている。

【0195】

本明細書で引用されるすべての特許、公開出願、及び参考文献の教示は、あらゆる目的のためにその全体が参照により援用される。本明細書に列挙される特許及び刊行物は、当技術分野の一般的な技術を説明するものである。引用文献と本明細書との間に矛盾がある場合、本明細書が優先するものとする。本出願の実施形態を説明する際、明確にするために特定の用語が使用される。しかしながら、本発明は、そのように選択された特定の用語に限定されることを意図するものではない。本明細書におけるいずれの記載も本発明の範囲を限定するものと見なされてはならない。提示される全ての実施例は、代表的であり、非限定的である。上記の実施形態は、本発明から逸脱することなく、上記の教示に照らして当業者によって理解されるように修正または変更され得る。したがって、特許請求の範囲及びその均等物の範囲内で、本発明は、具体的に記載される方法とは別の方法で実施され得ることを理解されたい。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【配列表】

2024536106000001.xml

【国際調査報告】