▶ ザ・ジョンズ・ホプキンス・ユニバーシティの特許一覧 ▶ イユーダ セラピューティクス インコーポレイテッドの特許一覧
特表2024-536839非移植ＣＤ８除去同種ドナーリンパ球輸注の有効性を高め、毒性を低減する方法および組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-10-08
(54)【発明の名称】非移植ＣＤ８除去同種ドナーリンパ球輸注の有効性を高め、毒性を低減する方法および組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 35/15 20150101AFI20241001BHJP
C12N 5/10 20060101ALI20241001BHJP
C12N 5/0783 20100101ALI20241001BHJP
C12N 5/078 20100101ALI20241001BHJP
C12N 15/113 20100101ALI20241001BHJP
C12N 15/09 20060101ALI20241001BHJP
A61K 35/17 20150101ALI20241001BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20241001BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20241001BHJP
A61P 37/04 20060101ALI20241001BHJP
A61P 37/02 20060101ALI20241001BHJP
A61P 37/06 20060101ALI20241001BHJP
A61P 7/00 20060101ALI20241001BHJP
A61P 35/02 20060101ALI20241001BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20241001BHJP
A61K 45/06 20060101ALI20241001BHJP
A61K 31/675 20060101ALI20241001BHJP
A61K 31/7076 20060101ALI20241001BHJP
A61K 31/7056 20060101ALI20241001BHJP
A61P 15/00 20060101ALI20241001BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20241001BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20241001BHJP
【ＦＩ】
A61K35/15
C12N5/10
C12N5/0783
C12N5/078
C12N15/113 Z
C12N15/113 130Z
C12N15/113 120Z
C12N15/113 140Z
C12N15/09 110
C12N15/09 100
A61K35/17
A61P35/00
A61P43/00 121
A61P43/00 111
A61P37/04
A61P37/02
A61P37/06
A61P7/00
A61P35/02
A61K45/00
A61K45/06
A61K31/675
A61K31/7076
A61K31/7056
A61P15/00
A61P11/00
A61K39/395 U
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024518590
(86)(22)【出願日】2022-09-29
(85)【翻訳文提出日】2024-05-21
(86)【国際出願番号】 US2022045241
(87)【国際公開番号】W WO2023055942
(87)【国際公開日】2023-04-06
(31)【優先権主張番号】63/250,061
(32)【優先日】2021-09-29
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/287,890
(32)【優先日】2021-12-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/332,616
(32)【優先日】2022-04-19
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】501335771
【氏名又は名称】ザ・ジョンズ・ホプキンス・ユニバーシティ
(71)【出願人】
【識別番号】524110621
【氏名又は名称】イユーダ セラピューティクス インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100147485
【弁理士】
【氏名又は名称】杉村 憲司
(74)【代理人】
【識別番号】230118913
【弁護士】
【氏名又は名称】杉村 光嗣
(74)【代理人】
【識別番号】100174001
【弁理士】
【氏名又は名称】結城 仁美
(72)【発明者】
【氏名】エフライム フックス
(72)【発明者】
【氏名】ロバート イー テナント
【テーマコード（参考）】
4B065
4C084
4C085
4C086
4C087
【Ｆターム（参考）】
4B065AA94X
4B065AB01
4B065AC12
4B065AC20
4B065BA01
4B065CA44
4C084AA19
4C084AA22
4C084AA23
4C084MA02
4C084NA05
4C084NA06
4C084NA07
4C084ZA511
4C084ZA512
4C084ZA591
4C084ZA592
4C084ZA811
4C084ZA812
4C084ZB071
4C084ZB072
4C084ZB081
4C084ZB082
4C084ZB091
4C084ZB092
4C084ZB261
4C084ZB262
4C084ZB271
4C084ZB272
4C084ZC412
4C084ZC75
4C085AA14
4C085BB11
4C085EE03
4C086AA01
4C086AA02
4C086DA38
4C086EA11
4C086EA18
4C086MA02
4C086MA03
4C086NA05
4C086NA06
4C086NA07
4C086ZA51
4C086ZA59
4C086ZA81
4C086ZB07
4C086ZB08
4C086ZB09
4C086ZB26
4C086ZB27
4C086ZC41
4C086ZC75
4C087AA01
4C087AA02
4C087AA03
4C087BB37
4C087BB64
4C087BB65
4C087MA02
4C087NA05
4C087NA06
4C087NA07
4C087ZA51
4C087ZA59
4C087ZA81
4C087ZB07
4C087ZB08
4C087ZB09
4C087ZB26
4C087ZB27
4C087ZC41
4C087ZC75
(57)【要約】
本明細書で提供されるのは、非移植ＣＤ８除去同種ドナーリンパ球輸注の有効性を増強し、毒性を低減する方法および組成物である。組成物は、（ｉ）レシピエント対象に対するドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、少なくとも１つのヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチについてレシピエント対象とミスマッチしているか、または（ｉｉ）レシピエント対象に対するドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で少なくとも１つのヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチについてミスマッチし、少なくとも１つのヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩＩ対立遺伝子についてレシピエントとマッチし、レシピエント対象に存在する抗原に対しＣＤ４＋Ｔ細胞免疫を有する、ドナー対象から得られた単離された白血球を含んでいる。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ドナー対象から得られ、レシピエント対象に対するドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、少なくとも１つのヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩＩ対立遺伝子についてレシピエント対象とミスマッチしている複数の単離された白血球を含んでいる医薬組成物であって、前記白血球は、ＣＤ８＋Ｔ細胞が、未除去の白血球と比較して約１０分の１以上除去されており、
前記白血球は、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、インターロイキン２誘導性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）、ホスホイノシチド３キナーゼのデルタアイソフォーム（ＰＩ３Ｋδ）、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αまたはそれらの組み合わせを抑制するように改変されている、医薬組成物。
【請求項2】
同種ドナー対象から得られた複数の単離された白血球を含んでいる医薬組成物であって、前記ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞が、レシピエント対象に存在する抗原によりｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで刺激されており、前記ドナー対象は、前記レシピエントに対して少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチを含んでおり、前記白血球は、ＣＤ８＋Ｔ細胞が、未除去の白血球と比較して約１０分の１以上除去されており、
前記白血球は、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、インターロイキン２誘導性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）、ホスホイノシチド３キナーゼのデルタアイソフォーム（ＰＩ３Ｋδ）、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αまたはそれらの組み合わせを抑制するように改変されている、医薬組成物。
【請求項3】
ドナー対象から得られ、（ｉ）レシピエント対象に対するドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチについてレシピエント対象とミスマッチしており、（ｉｉ）前記ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞が、レシピエント対象に存在する抗原によってｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで刺激されており、前記ドナー対象は、前記レシピエントに対して少なくとも１つのヒト白血球ＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチを含んでいる、複数の単離された白血球を含んでいる医薬組成物であって、前記白血球は、ＣＤ８＋Ｔ細胞が、未除去の白血球と比較して約１０分の１以上除去されており、
前記ＣＤ４＋Ｔ細胞の少なくとも一部は、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、インターロイキン２誘導性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）、ホスホイノシチド３－キナーゼのΔアイソフォーム（ＰＩ３Ｋδ）、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２またはそれらの組み合わせの活性を阻害するように改変されている、医薬組成物。
【請求項4】
前記Ｔ細胞の少なくとも一部が、Ｔｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞に分化している、請求項１～３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項5】
前記Ｔ細胞が、ＢＴＫの阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏っている、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項6】
前記Ｔ細胞が、ＩＴＫの阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏っている、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項7】
前記Ｔ細胞が、ＰＩ３Ｋδの阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏っている、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項8】
前記Ｔ細胞が、Ｆｏｘｐ３の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏っている、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項9】
前記Ｔ細胞が、ＧＡＴＡ３の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏っている、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項10】
前記Ｔ細胞が、ＳＴＡＴ３の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏っている、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項11】
前記Ｔ細胞が、ＣＤ２５の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏っている、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項12】
前記Ｔ細胞が、Ｅｚｈ２の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏っている、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項13】
前記Ｔ細胞が、ＢＴＫおよびＩＴＫの両方の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏っている、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項14】
前記Ｔ細胞が、ＢＴＫおよびＰＩ３Ｋδの両方の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏り、制御性Ｔ細胞分化に逆らっている、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項15】
前記Ｔ細胞が、ＩＴＫおよびＰＩ３Ｋδの両方の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏り、制御性Ｔ細胞分化に逆らっている、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項16】
前記Ｔ細胞が、ＢＴＫ、ＩＴＫおよびＰＩ３Ｋδの阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏り、制御性Ｔ細胞分化に逆らっている、請求項３～７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項17】
ＢＴＫ、ＩＴＫおよびＰＩ３Ｋδ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ｆｏｘｐ３またはＥｚｈ２が、阻害剤または遺伝子改変によって阻害されている、請求項１～１６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項18】
前記ＢＴＫの阻害剤がアカラブルチニブ、ザヌブルチニブ、ＬＦＭ－Ａ１３、ダサチニブまたはＡＶＬ－２９２である、請求項１～５、１３、１４、１６または１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項19】
前記ＢＴＫの阻害剤がイブルチニブではない、請求項１～５、１３、１４、１６または１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項20】
前記ＩＴＫの阻害剤がアミノチアゾール、アミノベンズイミダゾール、インドール、ピリジンまたはｐｒｎ６９４である、請求項１～４、６、１３または１５～１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項21】
前記ＰＩ３Ｋδの阻害剤がイデラリシブ、コパンリシブ、デュベリシブ、ウンブラリシブ、ＭＥ－４４０１、ＲＰ６５０３、ペリホシン、ブパリシブまたはダクトリシブである、請求項１～４、７または１４～１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項22】
前記ＩＴＫの阻害剤、ＢＴＫの阻害剤、ＰＩ３Ｋδの阻害剤、Ｈｅｌｉｏｓの阻害剤、Ｂｌｉｍｐ１の阻害剤、ＳＯＣＳ１の阻害剤、Ｆｏｘｐ３の阻害剤、ＴＧＦ－β受容体ＩＩの阻害剤、ＬＡＧ－３の阻害剤、ＰＤ－１の阻害剤、ＴＮＦ－αの阻害剤、ＧＡＴＡ３の阻害剤、ＩＬ－１０の阻害剤、ＳＴＡＴ３の阻害剤、ＣＤ２５の阻害剤、Ｅｚｈ２の阻害剤またはＴＯＸの阻害剤が、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）である、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項23】
ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ＳＴＡＴ３、Ｅｚｈ２、ＣＤ２５またはＴＯＸが、ＢＴＫ遺伝子、ＩＴＫ遺伝子、ＰＩ３Ｋδ遺伝子、Ｈｅｌｉｏｓ遺伝子、Ｂｌｉｍｐ１遺伝子、ＳＯＣＳ１遺伝子、Ｆｏｘｐ３遺伝子、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ遺伝子、ＬＡＧ－３遺伝子、ＰＤ－１遺伝子、ＴＮＦ－α遺伝子、ＧＡＴＡ３遺伝子、ＩＬ－１０遺伝子、ＳＴＡＴ３遺伝子、Ｅｚｈ２遺伝子、ＣＤ２５遺伝子またはＴＯＸ遺伝子をゲノムから欠失させることによって阻害される、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項24】
前記ＢＴＫ遺伝子、ＩＴＫ遺伝子、ＰＩ３Ｋδ遺伝子、Ｈｅｌｉｏｓ遺伝子、Ｂｌｉｍｐ１遺伝子、ＳＯＣＳ１遺伝子、Ｆｏｘｐ３遺伝子、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ遺伝子、ＬＡＧ－３遺伝子、ＰＤ－１遺伝子、ＴＮＦ－α遺伝子、ＧＡＴＡ３遺伝子、ＩＬ－１０遺伝子、ＳＴＡＴ３遺伝子、Ｅｚｈ２遺伝子、ＣＤ２５遺伝子またはＴＯＸ遺伝子が、ＣＲＩＳＰＲまたはＴＡＬＥＮを用いてゲノムから欠失される、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項25】
前記Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化が、阻害剤または遺伝子改変によって減弱される、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項26】
前記Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化が、ＰＩ３Ｋδ、Ｆｏｘｐ３、ＣＤ２５またはＥｚｈ２の阻害によって減弱される、請求項２５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項27】
ＰＩ３Ｋδ、Ｆｏｘｐ３、ＣＤ２５またはＥｚｈ２が、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、Ｆｏｘｐ３阻害剤、ＣＤ２５阻害剤もしくはＥｚｈ２阻害剤または遺伝子改変によって阻害される、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項28】
前記ＰＩ３Ｋδ阻害剤がイデラリシブ、コパンリシブ、デュベリシブ、ウンブラリシブ、ＭＥ－４４０１、ＲＰ６５０３、ペリホシン、ブパリシブまたはダクトリシブである、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項29】
前記遺伝子改変が、ＰＩ３Ｋδ遺伝子、Ｆｏｘｐ３遺伝子、ＣＤ２５遺伝子またはＥｚｈ２遺伝子の欠失を含んでいる、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項30】
前記Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化または制御性Ｔ細胞の機能が、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、Ｅｚｈ２、ＣＤ２５またはＴＯＸに対する低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）を用いて減弱される、請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項31】
前記Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化または制御性Ｔ細胞の機能が、前記ドナー対象から得られた単離された白血球をドミナントネガティブなトランスフォーミング増殖因子βＲＩＩ受容体を発現するように改変することにより減弱される、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項32】
前記Ｔ細胞のＴｈ２細胞への分化またはＴｈ２細胞としての機能が、阻害剤または遺伝子改変によって減弱される、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項33】
前記Ｔ細胞のＴｈ２細胞への分化またはＴｈ２細胞としての機能が、ＧＡＴＡ３の阻害によって減弱される、請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項34】
前記Ｔ細胞のＴｈ１７細胞への分化またはＴｈ１７細胞としての機能が、ＳＴＡＴ３の阻害によって減弱される、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項35】
前記ＨＬＡクラスＩＩマッチが、ＨＬＡ－ＤＲＢ１対立遺伝子、ＨＬＡ－ＤＱＢ１対立遺伝子またはＨＬＡ－ＤＰＢ１対立遺伝子である、請求項２～３４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項36】
骨髄系細胞の活性化が阻害されている、請求項１～３５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項37】
骨髄系細胞の活性化が、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３またはＴＯＸの阻害によって阻害されている、請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項38】
ＢＴＫが、ＣＤ４＋Ｔ細胞において、ＢＴＫの基底活性と比較して少なくとも約５０％阻害されている、請求項１～５、１３、１４、１６～１９または２２～２４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項39】
ＣＤ４＋Ｔ細胞におけるＩＴＫが、ＩＴＫの基底活性と比較して少なくとも約５０％阻害されている、請求項１～４、６、１３、１５～１７、２０または２２～２４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項40】
ＰＩ３Ｋδが、ＰＩ３Ｋδの基底活性と比較して少なくとも約５０％阻害されている、請求項１～４、７、１４～１７または２１～２４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項41】
阻害されたＩＴＫ、ＢＴＫ、またはＰＩ３Ｋδの量がウェスタンブロットにより測定される、請求項３８～４０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項42】
ＩＦＮγまたはＩＬ－１２の発現が、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、Ｅｚｈ２またはＴＯＸを抑制するように改変されていない白血球と比較して、少なくとも約１０倍増加する、請求項１～４１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項43】
ＴＧＦβまたはＩＬ－１０の発現が、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、Ｅｘｈ２またはＴＯＸを抑制するように改変されていない白血球と比較して、少なくとも約１０分の１に減少する、請求項１～４２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項44】
ａ）（ｉ）レシピエント対象に対するドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子についてレシピエント対象とミスマッチしており、（ｉｉ）レシピエント対象に存在する抗原に対しＣＤ４＋Ｔ細胞免疫を有する末梢血液細胞組成物を得ることであって、前記ドナー対象は前記レシピエントに対して少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチを含んでいる、ことと、ｂ）前記末梢血液細胞組成物から白血球を単離することと、
ｃ）前記白血球中のＣＤ８＋Ｔ細胞の数を、未除去の白血球と比較して少なくとも１０分の１以上除去することと、
ｄ）ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、インターロイキン２誘導性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）、ホスホイノシチド３キナーゼのデルタアイソフォーム（ＰＩ３Ｋδ）、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２またはそれらの組み合わせを抑制することとを含む、同種リンパ球組成物を製造する方法。
【請求項45】
Ｔ細胞の少なくとも一部のＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞への分化を促進する、またはＣＤ４＋ Ｔｈ１細胞を分化状態に維持するための処理をさらに含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項46】
前記白血球をｉｎ ｖｉｔｒｏで培養することをさらに含む、請求項４４または４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項47】
前記白血球をｅｘ ｖｉｖｏで培養することをさらに含む、請求項４４または４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項48】
１つまたは複数の追加のサイトカインを加えることをさらに含む、請求項４４～４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項49】
前記１つまたは複数の追加のサイトカインがＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８、ＩＦＮγまたはＩＬ－２１である、請求項４８に記載の方法。
【請求項50】
１つまたは複数の抗体を加えることをさらに含む、請求項４４～４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項51】
前記１つまたは複数の抗体が抗ＩＬ３抗体、抗ＩＬ－４抗体、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２００抗体または抗ＣＤ２８抗体である、請求項５０に記載の方法。
【請求項52】
前記Ｔ細胞が、ＢＴＫの阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏る、請求項４４～５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項53】
前記Ｔ細胞が、ＩＴＫの阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏る、請求項４４～５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項54】
前記Ｔ細胞が、ＰＩ３Ｋδの阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏る、請求項４４～５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項55】
前記Ｔ細胞が、ＢＴＫとＩＴＫの両方の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏る、請求項４４～５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項56】
前記Ｔ細胞が、ＢＴＫおよびＰＩ３Ｋδの両方の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏る、請求項４４～５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項57】
前記Ｔ細胞が、ＩＴＫおよびＰＩ３Ｋδの両方の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏る、請求項４４～５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項58】
前記Ｔ細胞が、ＢＴＫ、ＩＴＫおよびＰＩ３Ｋδの阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏る、請求項４４～５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項59】
前記Ｔ細胞が、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸまたはそれらの組み合わせの阻害によって、Ｔｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏る、請求項４４～５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項60】
ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ＴＯＸまたはそれらの組み合わせが、阻害剤または遺伝子改変によって阻害される、請求項４４～５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項61】
前記ＢＴＫの阻害剤がアカラブルチニブ、ザヌブルチニブ、ＬＦＭ－Ａ１３、ダサチニブまたはＡＶＬ－２９２である、請求項４４～５２、５５、５６、５８または５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項62】
前記ＢＴＫの阻害剤がイブルチニブではない、請求項４４～５２、５５、５６、５８、５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項63】
前記ＩＴＫの阻害剤がアミノチアゾール、アミノベンズイミダゾール、インドール、ピリジンまたはｐｒｎ６９４である、請求項４４～５１、５３、５５、５７、５８または５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項64】
前記ＰＩ３Ｋδの阻害剤がイデラリシブ、コパンリシブ、デュベリシブ、ウンブラリシブ、ＭＥ－４４０１、ＲＰ６５０３、ペリホシン、ブパリシブまたはダクトリシブである、請求項４４～５１、５４、５５、５６、５７、５８または５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項65】
前記ＩＴＫの阻害剤、ＢＴＫの阻害剤、ＰＩ３Ｋδの阻害剤、Ｈｅｌｉｏｓの阻害剤、Ｂｌｉｍｐ１の阻害剤、ＳＯＣＳ１の阻害剤、Ｆｏｘｐ３の阻害剤、ＧＡＴＡ３の阻害剤、ＩＬ－１０の阻害剤、ＳＴＡＴ３の阻害剤、ＣＤ２５の阻害剤、Ｅｚｈ２の阻害剤、ＴＧＦ受容体の阻害剤、ＬＡＧ－３の阻害剤、ＰＤ－１の阻害剤、ＴＮＦ－αの阻害剤、ＴＯＸの阻害剤またはそれらの組み合わせが、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）である、請求項４４～６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項66】
ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、Ｅｚｈ２またはＴＯＸが、ＢＴＫ遺伝子、ＩＴＫ遺伝子、ＰＩ３Ｋδ遺伝子、Ｈｅｌｉｏｓ遺伝子、Ｂｌｉｍｐ１遺伝子、ＳＯＣＳ１遺伝子、Ｆｏｘｐ３遺伝子、ＧＡＴＡ３遺伝子、ＩＬ－１０遺伝子、ＳＴＡＴ３遺伝子、ＴＯＸ遺伝子、ＣＤ２５遺伝子、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ遺伝子、ＬＡＧ－３遺伝子、ＰＤ－１遺伝子、ＴＮＦ－α遺伝子またはＥｚｈ２遺伝子をゲノムから欠失させることによって阻害される、請求項４４～６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項67】
前記ＢＴＫ遺伝子、ＩＴＫ遺伝子、ＰＩ３Ｋδ遺伝子、Ｈｅｌｉｏｓ遺伝子、Ｂｌｉｍｐ１遺伝子、ＳＯＣＳ１遺伝子、Ｆｏｘｐ３遺伝子、ＧＡＴＡ３遺伝子、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ遺伝子、ＬＡＧ－３遺伝子、ＰＤ－１遺伝子、ＴＮＦ－α遺伝子、ＩＬ－１０遺伝子、ＳＴＡＴ３遺伝子、ＴＯＸ遺伝子、ＣＤ２５遺伝子またはＥｚｈ２遺伝子が、ＣＲＩＳＰＲまたはＴＡＬＥＮを用いてゲノムから欠失される、請求項６６に記載の方法。
【請求項68】
前記Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化または制御性Ｔ細胞としての機能が減弱される、請求項４４～６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項69】
前記Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化または制御性Ｔ細胞としての機能が、阻害剤または遺伝子改変によって減弱される、請求項６８に記載の方法。
【請求項70】
前記Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化または制御性Ｔ細胞としての機能が、ＰＩ３Ｋδの阻害によって減弱される、請求項６８または６９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項71】
ＰＩ３Ｋδが、ＰＩ３Ｋδ阻害剤または遺伝子改変によって阻害される、請求項７０に記載の方法。
【請求項72】
前記ＰＩ３Ｋδ阻害剤がイデラリシブ、コパンリシブ、デュベリシブ、ウンブラリシブ、ＭＥ－４４０１、ＲＰ６５０３、ペリホシン、ブパリシブまたはダクトリシブである、請求項７１に記載の方法。
【請求項73】
前記遺伝子改変が、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３またはＥｚｈ２の遺伝子の欠失を含んでいる、請求項６９に記載の方法。
【請求項74】
前記Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化または制御性Ｔ細胞としての機能が、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３またはＥｚｈ２に対する低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）によって減弱される、請求項６９に記載の方法。
【請求項75】
前記ドナー対象から得られた単離された白血球をドミナントネガティブなトランスフォーミング増殖因子βＲＩＩ受容体を発現するように改変することにより、前記Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化または制御性Ｔ細胞としての機能が減弱される、請求項６９に記載の方法。
【請求項76】
前記ＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチが、ドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向でＨＬＡ－ＤＲＢ１対立遺伝子、ＨＬＡ－ＤＱＢ１対立遺伝子またはＨＬＡ－ＤＰＢ１対立遺伝子である、請求項４４～７５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項77】
前記ＨＬＡクラスＩＩマッチが、ＨＬＡ－ＤＲＢ１対立遺伝子、ＨＬＡ－ＤＱＢ１対立遺伝子またはＨＬＡ－ＤＰＢ１対立遺伝子である、請求項４４～７５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項78】
骨髄系細胞の活性化が阻害される、請求項４４～７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項79】
骨髄系細胞の活性化が、ＢＴＫ、ＩＴＫまたはＰＩ３Ｋδの阻害によって阻害される、請求項７８に記載の方法。
【請求項80】
ＢＴＫが、ＣＤ４＋Ｔ細胞において、ＢＴＫの基底活性と比較して少なくとも約５０％阻害される、請求項４４～５２、５５、５６、５８、５９、６１、６２または６５～６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項81】
ＣＤ４＋Ｔ細胞におけるＩＴＫが、ＩＴＫの基底活性と比較して少なくとも約５０％阻害される、請求項４４～５１、５３、５５、５７、５８、５９、６３または６５～６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項82】
ＰＩ３Ｋδが、ＰＩ３Ｋδの基底活性と比較して少なくとも約５０％阻害される、請求項４４～５１、５３、５５、５７、５８、５９、６４、６５～６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項83】
阻害されたＩＴＫ、ＢＴＫまたはＰＩ３Ｋδの量がウェスタンブロットにより測定される、請求項８０～８２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項84】
ＩＦＮγまたはＩＬ－１２の発現が、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ＴＯＸまたはそれらの組み合わせを抑制するように改変されていない白血球と比較して、少なくとも約１０倍増加する、請求項４４～８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項85】
ＴＧＦβまたはＩＬ－１０の発現が、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ＴＯＸまたはそれらの組み合わせを抑制するように改変されていない白血球と比較して、少なくとも約１０分の１に減少する、請求項４４～８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項86】
ＩＦＮγ、ＩＬ－１２、ＴＧＦβまたはＩＬ－１０の量が、細胞内サイトカイン染色またはＥＬＩＳＡによって測定される、請求項８４～８５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項87】
前記Ｔ細胞のＴｈ２細胞への分化またはＴ細胞のＴｈ２細胞としての機能が、阻害剤または遺伝子改変によって減弱される、請求項４５に記載の方法。
【請求項88】
前記Ｔ細胞のＴｈ２細胞への分化またはＴ細胞のＴｈ２細胞としての機能が、ＧＡＴＡ３の阻害によって減弱される、請求項８７に記載の方法。
【請求項89】
前記Ｔ細胞のＴｈ１７細胞への分化またはＴ細胞のＴｈ１７細胞としての機能が、ＳＴＡＴ３の阻害によって減弱される、請求項４５に記載の方法。
【請求項90】
前記Ｔ細胞が、Ｆｏｘｐ３の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏る、請求項４５に記載の方法。
【請求項91】
前記Ｔ細胞が、ＧＡＴＡ３の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏る、請求項４５に記載の方法。
【請求項92】
前記Ｔ細胞が、ＳＴＡＴ３の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏る、請求項４５に記載の方法。
【請求項93】
前記Ｔ細胞が、ＣＤ２５の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏る、請求項４５に記載の方法。
【請求項94】
前記Ｔ細胞が、Ｅｚｈ２の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏る、請求項４５に記載の方法。
【請求項95】
がんを治療する方法であって、それを必要とする対象に有効量の（ｉ）リンパ球除去剤と（ｉｉ）請求項１～４４のいずれか一項に記載の医薬組成物とを投与することを含む、方法。
【請求項96】
がんを治療する方法であって、それを必要とする対象に有効量の（ｉ）リンパ球除去剤と、（ｉｉ）ＮＬＲファミリーパイリンドメイン含有３（ＮＬＲＰ３）の阻害剤と、（ｉｉｉ）請求項１～４４のいずれか一項に記載の医薬組成物とを投与することを含む、方法。
【請求項97】
がんを治療する方法であって、それを必要とする対象に有効量の（ｉ）リンパ球除去剤と、（ｉｉ）Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化を阻害するか、または制御性Ｔ細胞の機能を阻害する薬剤と、（ｉｉｉ）請求項１～４４のいずれか一項に記載の医薬組成物とを投与することを含む、方法。
【請求項98】
がんを有する対象において抗腫瘍免疫を増強する方法であって、それを必要とする対象に有効量の（ｉ）リンパ球除去剤と、（ｉｉ）請求項１～４４のいずれか一項に記載の医薬組成物とを投与することを含む、方法。
【請求項99】
前記リンパ除去剤が細胞還元剤である、請求項９５～９８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項100】
前記細胞還元剤が、アルキル化剤、アルキルスルホネート、ニトロソウレア、トリアゼン、代謝拮抗剤、ピリミジンアナログ、プリンアナログ、ビンカアルカロイド、エピポドフィロトキシン、抗生物質、ジブロモマンニトール、デオキシスペルグアリン、ジメチルミレランまたはチオテパである、請求項９９に記載の方法。
【請求項101】
前記アルキル化剤がシクロホスファミドである、請求項１００に記載の方法。
【請求項102】
前記プリンアナログがフルダラビン、クラドリビンまたはペントスタチンである、請求項１００に記載の方法。
【請求項103】
前記がんが血液がんである、請求項９５～９８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項104】
前記がんが固形がんである、請求項９５～９８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項105】
前記血液がんが、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群または骨髄増殖性疾患である、請求項１０３に記載の方法。
【請求項106】
前記白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群または骨髄増殖性疾患が、非ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病、小リンパ球性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、毛様細胞白血病、エイズ関連リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、菌状息肉症、原発性中枢神経系リンパ腫、セザリー症候群、Ｔ細胞リンパ腫、ワルデンストレーム・マクログロブリン血症、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄単球性白血病、真性多血症、本態性血小板血症または特発性骨髄線維症である、請求項１０５に記載の方法。
【請求項107】
前記固形がんが、肉腫、がん腫、神経線維腫、結腸がん、肺がん、卵巣がん、膵臓がんまたは乳がんである、請求項１０４に記載の方法。
【請求項108】
それを必要とする対象に追加の治療剤を投与することをさらに含む、請求項９５～１０７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項109】
前記追加の治療剤が、化学療法剤、放射線療法、免疫療法剤、Ｔ細胞アゴニストサイトカイン、ＣＡＲ－Ｔ、ＣＡＲ－ＮＫ、二重特異性もしくは三重特異性のＴ細胞もしくはＮＫ細胞エンゲージャー、ナチュラルキラー細胞、ガンマデルタＴ細胞、抗体薬物複合体、抗体、免疫チェックポイント阻害剤、低分子阻害剤または腫瘍溶解性ウイルス療法である、請求項１０８に記載の方法。
【請求項110】
前記抗体が、リツキシマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、ペルツズマブ、ブレンツキシマブベドチン、ゲムツズマブ、トラスツズマブエムタンシン、イノツズマブオゾガマイシン、グレムバツムマブベドチン、ロルボツズマブメルタンシン、カントツズマブメルタンシンまたはミラツズマブドキソルビシンである、請求項１０９に記載の方法。
【請求項111】
前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＬＡＧ－３、ＴＩＧＩＴまたはＴＩＭ－３の阻害剤または抗体である、請求項１０９に記載の方法。
【請求項112】
前記低分子阻害剤が、ダサチニブ、ニロチニブ、ポナチニブ、イマチニブ、ボスチニブ、アスシミニブ、ラパチニブまたはビスモデギブである、請求項１０９に記載の方法。
【請求項113】
前記医薬組成物が前記リンパ球除去剤の後に投与される、請求項９５～１１２のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【関連出願との相互参照】
【0001】
本出願は、米国特許法第１１９（ｅ）条の下、２０２１年９月２９日に出願された米国仮出願シリアル番号６３／２５０，０６１号；２０２１年１２月９日に出願された同６３／２８７，８９０；および２０２２年４月１９日に出願された同６３／３３２，６１６の優先権の利益を主張する。先行出願の開示は、その全体が本出願の開示の一部とみなされ、参照により本明細書に組み込まれるものとする。
【技術分野】
【0002】
本開示は、一般に同種リンパ球組成物に関し、より具体的には、非移植ＣＤ８除去同種ドナーリンパ球輸注の有効性を高め、毒性を低減する方法におけるかかる組成物の使用に関する。
【背景技術】
【0003】
がん免疫療法は有望ながん治療法として現れた。がん免疫療法の目標は、正常組織を傷つけずに、がん細胞を選択的に破壊するために免疫系を利用することである。
【0004】
細胞傷害性ＣＤ８＋Ｔ細胞は、腫瘍細胞を制御し除去する免疫細胞の主要な集団である。Zhang et al., (2020), Front. Cell Dev. Biol., 8:17。しかし、Ｔ細胞はがんに対して期待されたほど有効ではない。免疫寛容および免疫抑制機構のために、ＣＤ８＋Ｔ細胞はしばしば最適なプライミングがなされないことがあり、このような理由およびその他の理由により効果を発揮できなかったり、またはＴ細胞の疲弊として知られる機能不全状態に陥ったりする。Ｔ細胞の疲弊は、細胞傷害性ＣＤ８＋Ｔ細胞のがん細胞殺傷能力が低下し、腫瘍の進行につながるエフェクター機能の減弱につながる。
【0005】
抗腫瘍免疫反応を回復させるために、疲弊したＴ細胞を復活させる、または置換する方法の開発に大きな関心が寄せられている。しかし、疲弊したＴ細胞を復活させる効果的な方法を開発するには、まだ課題が残っている。
【0006】
同種Ｔ細胞療法はがん免疫療法の一形態であり、健康なドナーの末梢血または骨髄からリンパ球を採取し、がん患者に注入する。この治療は通常、同種幹細胞移植の形で行われ、患者は高度免疫抑制条件付けを受けた後、成熟Ｔ細胞の非選択集団を含む幹細胞移植片を輸注される。同種幹細胞移植の目的は、ドナー細胞の持続的生着を得ることであるが、正常組織に対する免疫学的攻撃である移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を含む重大な毒性を伴い、この治療法は固形腫瘍悪性病変の治療に有効であるとは証明されていない。国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１３／０３２１２９には、非移植ドナーリンパ球輸注と呼ばれるアプローチが記載されており、このアプローチでは、患者をリンパ球除去化学療法で治療した後、健常な、部分的または完全にヒト白血球抗原（ＨＬＡ）がミスマッチしているドナーからＣＤ８＋細胞を除去した末梢血細胞を輸注する。ミスマッチＣＤ８除去ドナーリンパ球輸注（ＤＬＩ）の治療機序として提案されているのは、アロ反応性のドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞がサイトカインを分泌し、レシピエント抗原提示細胞（ＡＰＣ）を介してシグナルを送り、レシピエント由来の腫瘍特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を逆転させるというものである。この治療法は血液悪性腫瘍に対する抗腫瘍反応を誘導することができるが、固形腫瘍に対する有効性は、おそらく腫瘍特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞が疲弊した状態に戻ることによって制限されている。
【0007】
そのため、持続的な生着および移植片対宿主病のリスクを軽減しながら、疲弊したＴ細胞を効率的かつ持続的に覚醒させ、腫瘍の退縮を誘導する方法に対するアンメットニーズが存在し続けている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0008】
本開示は、非移植ＣＤ８除去同種リンパ球輸注の有効性を高め、毒性を低減するための同種リンパ球組成物および方法に関する。
【0009】
本開示は、ＣＤ８＋Ｔ細胞を除去し、ｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍活性を増強するために改変されたＣＤ４＋Ｔ細胞を含む同種リンパ球組成物を提供する。特定の機序にコミットするわけではないが、改変は、インターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）を分泌し、レシピエントのＣＤ８＋Ｔ細胞に最適な援助を提供するタイプ１、つまりＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の頻度を増加させるか、またはＣＤ４＋Ｔ細胞を疲弊または活性の抑制に対してより抵抗性を持たせることができる。同種リンパ球組成物は、ドナーのＣＤ８＋Ｔ細胞の除去が持続的な生着および移植片対宿主病のリスクを低減する一方で、対象のＴ細胞の疲弊を逆転させるＣＤ４＋Ｔ細胞の援助の供給源を提供することができる。疲弊したＣＤ８＋Ｔ細胞の復活を助けることに加えて、ドナーＴｈ１細胞は、移植片対宿主病の毒性を抑制しながら、腫瘍微小環境を再プログラムして免疫刺激性とし、ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を逆転させることができる。
【0010】
本開示は、レシピエント対象に対するドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、少なくとも１つのヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩＩ対立遺伝子についてレシピエント対象とミスマッチしている複数の単離された白血球を含んでいる医薬組成物に関する。単離された白血球は、ドナー対象から得ることができる。単離された白血球は、細胞株または臍帯血などの他の供給源から得ることもできる。白血球は、ＣＤ８＋Ｔ細胞が、未除去の白血球と比較して約１０分の１以上除去されている。白血球はさらに、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、インターロイキン２誘導性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）、ホスホイノシチド３キナーゼのデルタアイソフォーム（ＰＩ３Ｋδ）、ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、またはそれらの組み合わせを抑制するように改変することができる。
【0011】
本開示はまた、同種ドナー対象から得られた複数の単離された白血球を含んでいる医薬組成物に関する。ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞は、レシピエント対象に存在する抗原によりｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで刺激されており、ドナーのリンパ球は、レシピエントに対して少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチを含んでいる。あるいは、ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞は、レシピエントに存在しない抗原によってｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで刺激されており、ドナーのリンパ球は、レシピエントに対して少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチを含んでおり、抗原とドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞の両方がレシピエントに導入される。複数の単離された白血球は、例えば細胞株または臍帯血などの他の供給源から得ることもできる。白血球は、ＣＤ８＋Ｔ細胞が、未除去の白血球と比較して約１０分の１以上除去されている。白血球は、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、インターロイキン２誘導性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）、ホスホイノシチド３キナーゼのデルタアイソフォーム（ＰＩ３Ｋδ）、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはそれらの組み合わせを抑制するように改変されている。
【0012】
本開示はまた、ドナー対象から得られ、（ｉ）レシピエント対象に対するドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子についてレシピエント対象とミスマッチしており、（ｉｉ）ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞が、レシピエント対象に存在する抗原によってｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで刺激されており、ドナー対象は、レシピエントに対して少なくとも１つのヒト白血球ＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチを含んでいる、複数の単離された白血球を含んでいる医薬組成物に関する。あるいは、ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞は、（ｉ）レシピエント対象に対するドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチについてレシピエント対象とミスマッチしており、（ｉｉ）ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞は、レシピエント対象に存在しない抗原によりｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで刺激されており、ドナー対象は、レシピエントに対して少なくとも１つのヒト白血球ＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチを含んでおり、（ｉｉｉ）抗原およびドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞の両方がレシピエントに導入される。複数の単離された白血球は、細胞株または臍帯血などの他の供給源から得ることもできる。白血球は、未除去の白血球と比較してＣＤ８＋Ｔ細胞が約１０分の１以上除去されている。ＣＤ４＋Ｔ細胞の少なくとも一部は、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、インターロイキン－２誘導性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）、ホスホイノシチド３－キナーゼのδアイソフォーム（ＰＩ３Ｋδ）、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはそれらの組み合わせの活性を阻害するように改変されている。
【0013】
本開示はまた、（ｉ）レシピエント対象に対するドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子についてレシピエント対象とミスマッチしており、（ｉｉ）レシピエント対象に存在する抗原に対するＣＤ４＋Ｔ細胞免疫を有する末梢血細胞組成物を得ることを含む同種リンパ球組成物を製造する方法に関し、ドナー対象はレシピエントに対して少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチを含んでいる。あるいは、ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞は、（ｉ）レシピエント対象に対するドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチについてレシピエント対象とミスマッチしており、（ｉｉ）ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞は、レシピエント対象に存在しない抗原によりｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで刺激されており、ドナー対象は、レシピエントに対して少なくとも１つのヒト白血球ＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチを含んでおり、（ｉｉｉ）抗原およびドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞の両方がレシピエントに導入される。本方法はさらに、末梢血細胞組成物から白血球を単離し、白血球中のＣＤ８＋Ｔ細胞数を、未除去の白血球と比較して少なくとも１０分の１以上除去することを含む。次に、本方法は、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、インターロイキン－２誘導性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）、ホスホイノシチド３－キナーゼのデルタアイソフォーム（ＰＩ３Ｋδ）、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳＩ、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはそれらの組み合わせを抑制することを含む。本方法はさらに、Ｔ細胞の少なくとも一部のＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞への分化を促進する処理、ＣＤ４＋Ｔｈ１細胞を分化状態に維持する処理、またはＣＤ４＋Ｔ細胞の疲弊もしくは抑制を防止する処理を含む。本方法は、白血球をｉｎ ｖｉｔｒｏで培養することをさらに含むことができる。本方法は、白血球ｅｘ ｖｉｖｏで培養することをさらに含むことができる。
【0014】
同種リンパ球組成物を製造する方法は、１つまたは複数のサイトカインを加えることをさらに含む。１つまたは複数のサイトカインは、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８、ＩＦＮγ、またはＩＬ－２１である。本方法は、１つまたは複数の抗体を加えることをさらに含み得る。１つまたは複数の抗体は、抗ＩＬ３抗体、抗ＩＬ－４抗体、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２００抗体または抗ＣＤ２８抗体であり得る。
【0015】
医薬組成物中のＴ細胞の一部は、Ｔｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞に分化させることができる。Ｔ細胞の一部は、ＢＴＫの阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせることができる。Ｔ細胞は、ＩＴＫの阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏る。
【0016】
Ｔ細胞は、ＰＩ３Ｋδの阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせる、Ｔｈ１分化状態に維持する、または疲弊もしくは機能抑制に対し抵抗性を持たせることができる。Ｔ細胞は、Ｆｏｘｐ３の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせる、Ｔｈ１分化状態に維持する、または疲弊もしくは機能抑制に対し抵抗性を持たせることができる。Ｔ細胞は、ＧＡＴＡ３の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせる、Ｔｈ１分化状態に維持する、または疲弊もしくは機能抑制に抵抗性を持たせることができる。Ｔ細胞は、ＳＴＡＴ３の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせる、Ｔｈ１分化状態に維持する、または疲弊もしくは機能抑制に抵抗性を持たせることができる。Ｔ細胞は、ＣＤ２５の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせる、Ｔｈ１分化状態に維持する、または疲弊もしくは機能抑制に抵抗性を持たせることができる。Ｔ細胞は、Ｅｚｈ２の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせる、Ｔｈ１分化状態に維持する、または疲弊もしくは機能抑制に抵抗性を持たせることができる。Ｔ細胞は、ＢＴＫおよびＩＴＫの阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせる、Ｔｈ１分化状態に維持する、または疲弊もしくは機能抑制に抵抗性を持たせることができる。Ｔ細胞は、ＢＴＫとＰＩ３Ｋδの両方の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせ、制御性Ｔ細胞分化に逆らわせることができる。Ｔ細胞は、ＩＴＫとＰＩ３Ｋδの両方の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせ、制御性Ｔ細胞分化に逆らわせることができる。Ｔ細胞は、ＢＴＫ、ＩＴＫおよびＰＩ３Ｋδの阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせ、制御性Ｔ細胞分化に逆らわせることができる。Ｔ細胞は、ＴＧＦ－β受容体ＩＩの阻害によって、Ｔｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせ、Ｔｈ１分化状態に維持し、または疲弊もしくは機能抑制に抵抗性を持たせることができる。Ｔ細胞は、ＬＡＧ－３の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせ、Ｔｈ１分化状態に維持し、または疲弊もしくは機能抑制に抵抗性を持たせることができる。Ｔ細胞は、ＰＤ－１の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞分化に偏らせ、Ｔｈ１分化状態に維持し、または疲弊もしくは機能抑制に抵抗性を持たせることができる。
【0017】
ＢＴＫ、ＩＴＫおよびＰＩ３Ｋδ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはＥｚｈ２は、阻害剤または遺伝子改変によって阻害することができる。ＢＴＫ阻害剤は、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブ、ＬＦＭ－Ａ１３、ダサチニブまたはＡＶＬ－２９２であり得る。実施形態において、ＢＴＫ阻害剤はイブルチニブではない。ＩＴＫ阻害剤は、アミノチアゾール、アミノベンズイミダゾール、インドール、ピリジンまたはｐｒｎ６９４であり得る。ＰＩ３Ｋδ阻害剤は、イデラリシブ、コパンリシブ、デュベリシブ、ウンブラリシブ、ＭＥ－４４０１、ＲＰ６５０３、ペリホシン、ブパールリシブ、またはダクトリシブであり得る。
【0018】
ＩＴＫ阻害剤、ＢＴＫ阻害剤、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、Ｈｅｌｉｏｓ阻害剤、Ｂｌｉｍｐ１阻害剤、ＳＯＣＳ１阻害剤、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ阻害剤、ＬＡＧ－３阻害剤、ＰＤ－１阻害剤、ＴＮＦ－α阻害剤、Ｆｏｘｐ３阻害剤、ＧＡＴＡ３阻害剤、ＩＬ－１０阻害剤、ＳＴＡＴ３阻害剤、ＣＤ２５阻害剤、Ｅｚｈ２阻害剤、またはＴＯＸ阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。
【0019】
ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、Ｅｚｈ２、ＣＤ２５、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはＴＯＸは、ＢＴＫ遺伝子、ＩＴＫ遺伝子、ＰＩ３Ｋδ遺伝子、Ｈｅｌｉｏｓ遺伝子、Ｂｌｉｍｐ１遺伝子、ＳＯＣＳ１遺伝子、Ｆｏｘｐ３遺伝子、ＧＡＴＡ３遺伝子、ＩＬ－１０遺伝子、ＳＴＡＴ３遺伝子、Ｅｚｈ２遺伝子、ＣＤ２５遺伝子、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ遺伝子、ＬＡＧ－３遺伝子、ＰＤ－１遺伝子、ＴＮＦ－α遺伝子、またはＴＯＸ遺伝子をゲノムから欠失させることによって阻害することができる。ＢＴＫ遺伝子、ＩＴＫ遺伝子、ＰＩ３Ｋδ遺伝子、Ｈｅｌｉｏｓ遺伝子、Ｂｌｉｍｐ１遺伝子、ＳＯＣＳ１遺伝子、Ｆｏｘｐ３遺伝子、ＧＡＴＡ３遺伝子、ＩＬ－１０遺伝子、ＳＴＡＴ３遺伝子、Ｅｚｈ２遺伝子、ＣＤ２５遺伝子、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ遺伝子、ＬＡＧ－３遺伝子、ＰＤ－１遺伝子、ＴＮＦ－α遺伝子、またはＴＯＸ遺伝子は、ＣＲＩＳＰＲまたはＴＡＬＥＮを用いてゲノムから欠失させることができる。
【0020】
Ｔ細胞のＴ制御性細胞への分化は、阻害剤または遺伝子改変によって減弱することができる。Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化は、ＰＩ３Ｋδ、Ｆｏｘｐ３、ＣＤ２５、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、またはＥｚｈ２の阻害によって減弱することができる。ＰＩ３Ｋδ、Ｆｏｘｐ３、ＣＤ２５、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、またはＥｚｈ２は、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、Ｆｏｘｐ３阻害剤、ＣＤ２５阻害剤、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ阻害剤、ＬＡＧ－３阻害剤、ＰＤ－１阻害剤もしくはＥｚｈ２阻害剤を用いて、または遺伝子改変によって減弱することができる。ＰＩ３Ｋδ阻害剤は、イデラリシブ、コパンリシブ、デュベリシブ、ウンブラリシブ、ＭＥ－４４０１、ＲＰ６５０３、ペリホシン、ブパールリシブ、またはダクトリシブであり得る。遺伝子改変は、ＰＩ３Ｋδ遺伝子、Ｆｏｘｐ３遺伝子、ＣＤ２５遺伝子、またはＥｚｈ２遺伝子の欠失を含み得る。
【0021】
Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化または制御性Ｔ細胞の機能は、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、Ｅｚｈ２、ＣＤ２５、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１またはＴＯＸに対する低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）を用いて減弱させることができる。Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化または制御性Ｔ細胞の機能は、ドナー対象から得た単離白血球をドミナントネガティブなトランスフォーミング増殖因子βＲＩＩ受容体を発現するように改変することによって減弱させることができる。
【0022】
Ｔ細胞のＴｈ２細胞への分化またはＴｈ２細胞としての機能は、阻害剤または遺伝子改変によって減弱させることができる。Ｔ細胞のＴｈ２細胞への分化またはＴｈ２細胞としての機能は、ＧＡＴＡ３の阻害によって減弱させることができる。Ｔ細胞のＴｈ１７細胞への分化またはＴｈ１７細胞としての機能は、ＳＴＡＴ３の阻害によって減弱させることができる。
【0023】
ＨＬＡクラスＩＩのマッチは、ＨＬＡ－ＤＲＢ１対立遺伝子、ＨＬＡ－ＤＱＢ１対立遺伝子、またはＨＬＡ－ＤＰＢ１対立遺伝子であり得る。
【0024】
医薬組成物中の骨髄系細胞の活性化は、阻害することができる。骨髄系細胞の活性化は、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはＴＯＸの阻害によって阻害され得る。ＢＴＫは、ＣＤ４＋Ｔ細胞において、ＢＴＫの基底活性と比較して少なくとも約５０％阻害され得る。ＣＤ４＋Ｔ細胞におけるＩＴＫは、ＩＴＫの基底活性と比較して少なくとも約５０％阻害され得る。ＰＩ３Ｋδは、ＰＩ３Ｋδの基底活性と比較して少なくとも約５０％阻害され得る。阻害されたＩＴＫ、ＢＴＫ、またはＰＩ３Ｋδの量は、ウェスタンブロットにより測定することができる。
【0025】
ＩＦＮγまたはＩＬ－１２の発現は、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはＴＯＸを抑制するように改変されていない白血球と比較して、少なくとも約１０倍増加する。ＴＧＦβまたはＩＬ－１０の発現は、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、Ｅｘｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αまたはＴＯＸを抑制するように改変されていない白血球と比較して、少なくとも約１０分の１に減少する。
【0026】
ＩＦＮγ、ＩＬ－１２、ＴＧＦβまたはＩＬ－１０の量は、細胞内サイトカイン染色またはＥＬＩＳＡによって測定することができる。
【0027】
ＩＦＮγまたはＩＬ－１２の発現は、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはそれらの組み合わせを抑制するように改変されていない白血球と比較して、少なくとも約１０倍増加し得る。ＴＧＦβまたはＩＬ－１０の発現は、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはそれらの組み合わせを抑制するように改変されていない白血球と比較して、少なくとも約１０分の１に減少し得る。
【0028】
Ｔ細胞のＴｈ２細胞への分化またはＴｈ２細胞としての機能は、阻害剤または遺伝子改変によって減弱させることができる。Ｔ細胞のＴｈ２細胞への分化またはＴｈ２細胞としてのＴ細胞の機能は、ＧＡＴＡ３の阻害によって減弱させることができる。
【0029】
ＳＴＡＴ３の阻害によって、Ｔ細胞のＴｈ１７細胞への分化またはＴｈ１７細胞としての機能を減弱させることができる。Ｔ細胞は、Ｆｏｘｐ３の阻害によって、Ｔｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏らせることができる。Ｔ細胞は、ＧＡＴＡ３の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏らせることができる。Ｔ細胞は、ＳＴＡＴ３の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏らせることができる。Ｔ細胞は、ＣＤ２５の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏らせることができる。Ｔ細胞は、Ｅｚｈ２の阻害によってＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化または機能に偏らせることができる。
【0030】
本開示はさらに、がんを治療する方法であって、それを必要とする対象に、有効量の（ｉ）リンパ球除去剤および（ｉｉ）本明細書に開示される医薬組成物を投与することを含む、方法に関する。
【0031】
本明細書に開示されるのは、がんを治療するための方法であって、それを必要とする対象に、有効量の（ｉ）リンパ球除去剤と、（ｉｉ）ＮＬＲファミリーパイリンドメイン含有３（ＮＬＲＰ３）の阻害剤と、（ｉｉｉ）本明細書に開示される医薬組成物とを投与することを含む方法である。
【0032】
本明細書に開示されるのは、がんを治療するための方法であって、それを必要とする対象に、有効量の（ｉ）リンパ球除去剤と、（ｉｉ）Ｔ細胞の制御性Ｔ細胞への分化を阻害する薬剤、または制御性Ｔ細胞の機能を阻害する薬剤と、（ｉｉｉ）本明細書に開示される医薬組成物とを投与することを含む方法である。
【0033】
本明細書において開示されるのは、がんを有する対象において抗腫瘍免疫を増強する方法であって、それを必要とする対象に、有効量の（ｉ）リンパ球除去剤と、（ｉｉ）本明細書において開示される医薬組成物とを投与することを含む方法である。
【0034】
リンパ球除去剤は細胞還元剤であり得る。細胞還元剤は、アルキル化剤、アルキルスルホネート、ニトロソウレア、トリアゼン、代謝拮抗剤、ピリミジンアナログ、プリンアナログ、ビンカアルカロイド、エピポドフィロトキシン、抗生物質、ジブロモマンニトール、デオキシスペルグアリン、ジメチルミレランまたはチオテパであり得る。アルキル化剤は、シクロホスファミドであり得る。プリンアナログは、フルアラビン、クラドリビン、またはペントスタチンであり得る。がんは血液がんであってもよい。がんは固形がんであってもよい。血液がんは、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、または骨髄増殖性疾患であり得る。
【0035】
白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群または骨髄増殖性疾患は、非ホジキンリンパ腫、慢性リンパ性白血病、小リンパ球性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、毛様細胞白血病、エイズ関連リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、菌状息肉症、原発性中枢神経系リンパ腫、セザリー症候群、Ｔ細胞リンパ腫、ワルデンストレーム・マクログロブリン血症、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄単球性白血病、真性多血症、本態性血小板血症または特発性骨髄線維症であり得る。
【0036】
固形がんは、肉腫、がん腫、神経線維腫、結腸がん、肺がん、卵巣がん、膵臓がんまたは乳がんであり得る。
【0037】
本明細書に開示される方法は、それを必要とする対象に追加の治療剤を投与することをさらに含み得る。追加の治療剤は、化学療法剤、放射線療法、免疫療法剤、Ｔ細胞アゴニストサイトカイン、ＣＡＲ－Ｔ、ＣＡＲ－ＮＫ、ナチュラルキラー細胞、ガンマデルタＴ細胞、抗体薬物複合体、抗体、二重特異性もしくは三重特異性のＴ細胞もしくはＮＫ細胞エンゲージャー、免疫チェックポイント阻害剤、低分子阻害剤、または腫瘍溶解性ウイルス療法またはワクチンである。
【0038】
抗体は、リツキシマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、ペルツズマブ、ブレンツキシマブベドチン、ゲムツズマブ、トラスツズマブエムタンシン、イノツズマブオゾガマイシン、グレムバツムマブベドチン、ロルボツズマブメルタンシン、カントツズマブメルタンシンまたはミラツズマブドキソルビシンであり得る。
【0039】
免疫チェックポイント阻害剤は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＬＡＧ－３、ＴＩＧＩＴまたはＴＩＭ－３の阻害剤または抗体であり得る。
【0040】
低分子阻害剤は、ダサチニブ、ニロチニブ、ポナチニブ、イマチニブ、ボスチニブ、アスシミニブ、ラパチニブまたはビスモデギブであり得る。
【0041】
医薬組成物は、リンパ球除去剤の後に投与することができる。
【図面の簡単な説明】
【0042】
【図2】図２Ａは、ＭＨＣハプロタイプ一致Ｃ５７ＢＬ／６ｘＣ３Ｈ（Ｂ６Ｃ３ Ｆ１）マウスにおける腫瘍接種後数日間の無腫瘍生存率を示すグラフである。ワクチン非接種のドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞（四角）対ワクチン接種したドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞（丸）のＴＣ１－ｌｕｃｉ保有レシピエントの無腫瘍生存率を示している。図２Ｂは、ＭＨＣハプロタイプ一致Ｃ５７ＢＬ／６ｘＣ３Ｈ（Ｂ６Ｃ３ Ｆ１）マウスにおける腫瘍接種後数日間の無腫瘍生存率を示すグラフである。Ｃａｓ９試薬でヌクレオフェクトしたｐＢＩ－１１ワクチン接種ドナー細胞（四角）対Ｃａｓ９ヌクレオフェクションなしのｐＢＩ－１１ワクチン接種ドナー細胞（丸）の無腫瘍生存率を示している。図２Ｃは、ＭＨＣハプロタイプ一致Ｃ５７ＢＬ／６ｘＣ３Ｈ（Ｂ６Ｃ３ Ｆ１）マウスにおける腫瘍接種後数日間の無腫瘍生存率を示すグラフである。ワクチン未接種のドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞（三角）、ｐＢＩ－１１をワクチン接種しＣａｓ９をヌクレオフェクトしたドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞（四角）およびＩＴＫ遺伝子欠失を有するｐＢＩ－１１ワクチン接種したドナー細胞（丸）の無腫瘍生存率を示している。図２Ｄは、ＭＨＣハプロタイプ一致Ｃ５７ＢＬ／６ｘＣ３Ｈ（Ｂ６Ｃ３ Ｆ１）マウスにおける腫瘍接種後数日間の無腫瘍生存率を示すグラフである。Ｆｏｘｐ３遺伝子欠失（白四角）、トランスフォーミング増殖因子β受容体２型（ＴＧＦＢＲ２）遺伝子欠失（白丸）、ＳＯＣＳ１遺伝子欠失（丸）、ＩＴＫ遺伝子欠失（四角）またはＰＤ１遺伝子欠失（三角）を有するｐＢＩ－１１ワクチン接種ドナー細胞の無腫瘍生存率を示している。
【発明を実施するための形態】
【0043】
本開示は、非移植ＣＤ８除去同種リンパ球輸注の有効性を高め、毒性を低減するための同種リンパ球組成物および方法に関する。
【0044】
本発明者らは、ＣＤ４＋Ｔｈ１細胞を濃縮し、ＣＤ８＋Ｔ細胞を除去した同種リンパ球組成物を開発した。理論または機序に縛られることなく、本発明者らは、この同種リンパ球組成物が、免疫抑制を減少させる、および／または免疫系活性化を増加させる、および／または注入時のＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を逆転させるシグナルを提供し、内因性抗腫瘍反応を復活させると同時に、持続的な生着および移植片対宿主病のリスクを最小化することができるＣＤ４＋Ｔ細胞の供給源を提供することができると考えている。
【0045】
本明細書に開示される同種リンパ球組成物は、ドナー対象または臍帯血もしくは細胞株などの別の供給源から得ることができる複数の単離白血球を含んでいる。白血球は、レシピエント対象に対するドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、少なくとも１つのヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩＩ対立遺伝子についてレシピエントとミスマッチしていてよい。あるいは、ドナーは、ドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、レシピエントに対し少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチと、レシピエントに対し少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチを含み得る。ＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子のミスマッチまたはマッチは、ＨＬＡ－ＤＲＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、またはＨＬＡ－ＤＰＢ１に見られ得る。本治療法の目的上、低発現のＨＬＡクラスＩＩ分子、例えばＨＬＡ－ＤＰＡ１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１ならびにＨＬＡ－ＤＲＢ３、－ＤＲＢ４および－ＤＲＢ５は考慮されない場合がある。一部の例では、本明細書に開示される同種組成物は、細胞株または臍帯血から得られ、特定の標的を標的とするように改変された、または改変されていない複数の単離白血球を含み得る。細胞株は、対象に対しＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチ、部分マッチ、またはミスマッチであり得る。
【0046】
白血球は、ＣＤ８＋Ｔ細胞が、未除去の白血球と比較して約１０分の１以上除去されていてもよい。白血球はさらに、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、インターロイキン２誘導性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）、ホスファチジルイノシトール３キナーゼデルタアイソフォーム（ＰＩ３Ｋδ）、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはそれらの組み合わせを抑制するように改変することができる。理論または機序に縛られることを望むものではないが、本発明者らは、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはそれらの組み合わせの抑制が、ナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞が、タイプ１（Ｔｈ１）ＣＤ４＋Ｔ細胞など、抗腫瘍もしくは抗ウイルス免疫のエフェクター細胞を助けるのに有利な状態へ分化することを促進するか、または、ポストナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞が、抗腫瘍もしくは抗ウイルス免疫に最適でないヘルパー活性を有する細胞へ転換されることを防ぐことができると考えている。例えば、Ｔ細胞の一部は、ＣＤ４＋Ｔ細胞のサブタイプ（例えばＴｈ１）に優先的に分化させることができる。ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αまたはその組み合わせの抑制により、ナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞が、Ｔｈ２、Ｔｈ１７もしくは制御性Ｔ細胞など抗腫瘍もしくは抗ウイルス免疫を促進するのに最適でない状態に分化するのを防ぐこともでき、またはＣＤ４＋Ｔ細胞が疲弊すること、もしくは抗腫瘍もしくは抗ウイルス活性を媒介するのを他の細胞によって抑制されるのを防ぐこともできる。
【0047】
特定の例示的で好ましい実施形態を、本明細書においてさらに詳細に説明する。本明細書内の実施形態は、本開示の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。
【0048】
Ａ．同種リンパ球の組成
本開示は同種リンパ球組成物に関する。同種リンパ球組成物は、ドナーから得られた単離された白血球を含んでいる。ドナーは、ドナー対レシピエント（移植片対宿主、またはＧＶＨ）方向で、レシピエントに対して少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチを含み得る。ＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチは、ＨＬＡ－ＤＲＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、またはＨＬＡ－ＤＰＢ１で見られ得る。
本開示は同種リンパ球組成物に関する。同種リンパ球組成物は、ドナーから得られた単離された白血球を含んでいる。ドナーは、ドナー対レシピエント（移植片対宿主、またはＧＶＨ）方向で、レシピエントに対して少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチを含み得る。ＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチは、ＨＬＡ－ＤＲＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、またはＨＬＡ－ＤＰＢ１で見られ得る。
【0049】
ネオ抗原を含む１つまたは複数の腫瘍特異的抗原に対してワクチン接種を受けていないドナーは、一般的に腫瘍特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞の頻度が低い。免疫系が１つまたは複数の腫瘍特異的抗原に対してワクチン接種を受けていないドナーを使用する場合、内因性の抗腫瘍免疫を復活させる能力は、アロ反応性ＣＤ４＋Ｔ細胞の活性に基づくため、ドナーとレシピエント間でＨＬＡクラスＩＩのマッチングは必要ない。
【0050】
腫瘍特異的抗原に対してドナーをワクチン接種する場合、または腫瘍特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞をｅｘ ｖｉｖｏで増殖させる場合、ある程度のＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチングが必要である。なぜなら、増殖させた腫瘍特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞はドナーのＨＬＡクラスＩＩ分子に制限され、レシピエントがドナーに共有される少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ分子を発現していない限り、レシピエントにおいて助けを提供する効果がないと予測されるからである。ＨＬＡクラスＩＩ分子の中で、共有に好ましい分子は高発現分子ＨＬＡ－ＤＲＢ１＞ＨＬＡ－ＤＰＢ１＞ＨＬＡ－ＤＱＢ１＞＞＞ＨＬＡＤＲＢ３，４，５＝ＨＬＡ－ＤＱＡ１である。
【0051】
ドナーは、ドナーの抗レシピエント（ＧＶＨ）方向のＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子、例えばＨＬＡ－ＤＲＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１およびＨＬＡ－ＤＰＢ１において部分的または完全にミスマッチし得る。ドナーは、ＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子、例えばＨＬＡ－ＤＲＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１およびＨＬＡ－ＤＰＢ１において部分的または完全にミスマッチし、クラスＩ対立遺伝子については完全にマッチし得る。ドナーは、同種幹細胞移植のドナー候補であるレシピエントの第一度近親者の非共有ＨＬＡと完全にミスマッチし得る。
【0052】
腫瘍抗原またはウイルス抗原に応答して増殖および／またはＩＦＮγを分泌するＣＤ４＋Ｔ細胞の頻度を、刺激されていない白血球と比較して増加させるために、ドナーの白血球をｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで刺激してもよい。この刺激は、腫瘍抗原またはウイルス抗原に対するドナーの意図的なｉｎ ｖｉｖｏでのワクチン接種からなっていてもよい。あるいは、またはそれに加えて、ＣＤ４＋Ｔ細胞を含むドナーの白血球を、ＣＤ４＋Ｔ細胞を極性化するサイトカインの存在下または非存在下で、腫瘍抗原またはウイルス抗原でパルスした樹状細胞などの抗原提示細胞（ＡＰＣ）を用いてｅｘ ｖｉｖｏで刺激することができる。腫瘍抗原またはウイルス抗原は、レシピエントに存在し得る。ドナーが免疫されるか、またはドナー細胞が抗原でパルスされたＡＰＣでｅｘ ｖｉｖｏで刺激される場合、ドナーはレシピエントに対して少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチを含まなければならない。ＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチは、ＨＬＡ－ＤＲＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、またはＨＬＡ－ＤＰＢ１に見られ得る。実施形態では、免疫されたドナーは、ドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、レシピエントに対して少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチを有し得、レシピエントに対して少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチを有し得る。ドナーの白血球が腫瘍特異的またはウイルス特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞の頻度を増加させるように刺激されていない場合、ドナーのＨＬＡクラスＩＩ分子ＨＬＡ－ＤＲＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、およびＨＬＡ－ＤＰＢ１は、ドナーの抗レシピエント（ＧＶＨ）方向で、レシピエントに対して完全にミスマッチしている場合がある。
【0053】
実施形態において、同種リンパ球組成物は、細胞株または臍帯血から得られた白血球を含み得る。
【0054】
ドナー試料は臍帯血バンクから得ることができる。ドナー試料が臍帯血バンクから得られる場合、対象が非頻発および／または稀なＨＬＡ対立遺伝子型に対する血清抗体を含む可能性が低いため、望ましい試料は非頻発および／または稀なＨＬＡ対立遺伝子を含む可能性がある。例示的な希少対立遺伝子としては、Ａ＊２４：４１、Ｂ＊０７：０２：２８、Ｂ＊３５：０３：０３、Ｂ＊３９：４０Ｎ、ＤＲＢ１＊１３：２３、ＤＲＢ１＊１４：１１１、Ｂ＊４４：１６およびＤＲＢ１＊０１：３１、Ｃ＊０６：４９Ｎ、Ｂ＊３７：０３Ｎ、Ａ＊２４：３１２ＮならびにＡ＊３０：７６Ｎが挙げられるが、これらに限定されない。
【0055】
実施形態において、レシピエントは、ドナーのＨＬＡに対して反応性の検出可能な抗体を有しない場合がある。検出可能な抗体は、当業者にとって既知の従来の方法を用いて決定することができる。例えば、レシピエントは、陽性結果が望ましくないため、フローサイトメトリークロスマッチアッセイでは、補体依存性細胞毒性により検出可能なドナーのＨＬＡ分子に対する抗体を有してはならず、または固相イムノアッセイでは３０００以上の平均蛍光強度（ＭＦＩ）は許容されない。
【0056】
同種組成物中のナチュラルキラー細胞数は、末梢血組成物中のナチュラルキラー細胞数以下であり得る。
【0057】
実施形態において、組成物中に存在するＣＤ４＋Ｔ細胞は、ｅｘ ｖｉｖｏでは活性化されない。
【0058】
同種組成物中に存在する白血球は、ＣＤ８＋Ｔ細胞が除去されている。ＣＤ８＋Ｔ細胞は任意の既知の方法で除去することができる。例えば、磁気ビーズセルソーターまたはフローサイトメトリーを用いてＣＤ８＋Ｔ細胞を除去することができる。ＣＤ８＋Ｔ細胞の減少には、磁性粒子と結合した抗ＣＤ８＋抗体、または抗ＣＤ８＋抗体＋補体の使用を伴い得る。
【0059】
白血球は、未除去の白血球と比較して、約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約６分の１、約７分の１、約８分の１、約９分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約２００分の１、約３００分の１、約４００分の１、約５００分の１、約６００分の１、約７００分の１、約８００分の１、約９００分の１、約１，０００分の１、またはそれ以上にＣＤ８＋Ｔ細胞が除去されている。
【0060】
本明細書に開示される同種リンパ球組成物の白血球は、ＢＴＫ、ＩＴＫ、またはＰＩ３Ｋδ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはそれらの組み合わせの活性を抑制するようにさらに改変されている。理論または機序に拘束されることを望むものではないが、本発明者らは、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはそれらの組み合わせの抑制が、ナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞が、タイプ１（Ｔｈ１）ＣＤ４＋Ｔ細胞など、抗腫瘍もしくは抗ウイルス免疫のエフェクター細胞を助けるのに有利な状態へ分化することを促進するか、または、ポストナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞が、抗腫瘍もしくは抗ウイルス免疫に最適でないヘルパー活性を有する細胞へ転換されることを防ぐことができると考えている。例えば、Ｔ細胞の一部は、Ｔｈ１などのＣＤ４＋Ｔ細胞サブタイプに優先的に分化させることができる。あるいは、別のＣＤ４＋Ｔ細胞サブタイプ（例えば、Ｔｈ２またはＴｒｅｇ）へのＴ細胞の分化が抑制され得る。理論または機序に拘束されることを望むものではないが、本発明者らはまた、白血球（例えば、ドナー白血球）におけるＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはそれらの組み合わせの抑制により、その有効性を高め、非移植同種ドナーリンパ球輸注の毒性を減少させることができるとも考えている。
【0061】
ＣＤ４＋Ｔ細胞は、クラスＩＩ主要組織適合複合体（ＭＨＣＩＩ）分子の文脈で提示されるペプチド抗原を認識するＴ細胞受容体を発現するＴリンパ球である。Tay et. al. (2021), Cancer Gene Therapy, 28:5-17。ＣＤ４＋Ｔ細胞は、文脈に依存したシグナルに応答して、いくつかの多様な機能的サブタイプのいずれかに分化することができ、その結果、免疫応答の中心的コーディネーターとしての主要な役割において、適切なエフェクター免疫細胞に「助け」を提供することができる。ＣＤ４＋Ｔ細胞は、主に、ＣＤ８＋Ｔ細胞および抗体応答への支援、マクロファージの殺腫瘍能力の誘導、ＩＦＮγおよび腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ－α）などのエフェクターサイトカインの分泌、ならびに特定の状況下では腫瘍細胞に対する直接的な細胞傷害性によって、抗腫瘍免疫を媒介する。
【0062】
ＣＤ４＋Ｔ細胞は、ＩＦＮγおよびＴＮＦ－αを発現するＴｈ１細胞、ＩＬ－４、ＩＬ－５およびＩＬ－１３を発現するＴｈ２細胞；ＩＬ－９およびＩＬ－２１を発現するＴｈ９細胞；ＩＬ－１７を発現するＴｈ１７細胞；ＩＬ－６およびＩＬ－２１を発現するＴＦＨ細胞；ならびにＴＧＦβおよびＩＬ－１０を発現するＴｒｅｇ細胞に分化することができる。Tay et. al. (2021), Cancer Gene Therapy, 28:5-17。
【0063】
本明細書で開示される白血球組成物は、腫瘍浸潤リンパ球（「ＴＩＬ」）、キメラ受容体Ｔ細胞（「ＣＡＲ－Ｔ」）、またはＴ細胞受容体（「ＴＣＲ」）導入Ｔ細胞を含み得る。例えば、白血球組成物はＴＩＬを含み得る。例えば、白血球組成物はＣＡＲ－Ｔ細胞を含み得る。例えば、白血球組成物はＴＣＲ導入Ｔ細胞を含み得る。
【0064】
上記に開示されるように、本明細書に開示される同種リンパ球組成物の白血球は、ＢＴＫ、ＩＴＫ、またはＰＩ３Ｋδ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、またはそれらの組み合わせを阻害するように改変されている。ＢＴＫ経路は、単独で、またはＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδもしくはそれらの組み合わせとともに阻害され得る。ＩＴＫ経路は、単独で、またはＢＴＫ、ＰＩ３Ｋδもしくはそれらの組み合わせとともに阻害され得る。ＰＩ３Ｋδ経路は、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫもしくはそれらの組み合わせとともに阻害され得る。ある例では、ＢＴＫ、ＩＴＫまたはＰＩ３Ｋδ経路のそれぞれが阻害される。ｈｅｌｉｏｓは、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫもしくはＰＩ３Ｋδ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αもしくはＴＯＸと組み合わせて阻害され得る。Ｂｌｉｍｐ１は、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、Ｅｚｈ２、ＳＯＣＳ１、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αもしくはＴＯＸと組み合わせて阻害され得る。ＳＯＣＳ１は、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｂｌｉｍｐ１、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αもしくはＴＯＸと組み合わせて阻害され得る。ＴＧＦ－β受容体ＩＩは、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｂｌｉｍｐ１、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、Ｅｚｈ２、ＳＯＣＳ１、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αもしくはＴＯＸと組み合わせて阻害され得る。ＬＡＧ－３は、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｂｌｉｍｐ１、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＳＯＣＳ１、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αもしくはＴＯＸと組み合わせて阻害され得る。ＰＤ－１は、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｂｌｉｍｐ１、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＳＯＣＳ１、ＴＮＦ－αもしくはＴＯＸと組み合わせて阻害され得る。ＴＮＦ－αは、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｂｌｉｍｐ１、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＳＯＣＳ１もしくはＴＯＸと組み合わせて阻害され得る。Ｆｏｘｐ３は、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、Ｅｚｈ２もしくはＴＯＸと組み合わせて阻害され得る。ＧＡＴＡ３は、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫもしくはＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、Ｅｚｈ２もしくはＴＯＸとともに阻害され得る。ＧＡＴＡ３は、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫもしくはＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αもしくはＴＯＸとともに阻害され得る。ＩＬ－１０は、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ＳＴＡＴ３もしくはＴＯＸとともに阻害され得る。ＳＴＡＴ３は、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫもしくはＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＣＤ２５、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、Ｅｚｈ２もしくはＴＯＸと組み合わせて阻害され得る。ＴＯＸは、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＣＤ２５、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、Ｅｚｈ２もしくはＳＴＡＴ３とともに阻害され得る。ＣＤ２５は、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫもしくはＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＧＡＴＡ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αもしくはＴＯＸとともに阻害され得る。ＩＬ－１０は、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫもしくはＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＳＴＡＴ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αもしくはＴＯＸとともに阻害され得る。Ｅｚｈ２は、単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＣＤ２５、ＧＡＴＡ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αもしくはＴＯＸとともに阻害され得る。ＩＬ－１０は単独で、またはＢＴＫ、ＩＴＫもしくはＰＩ３Ｋδ、Ｈｅｌｉｏｓ、Ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、Ｆｏｘｐ３、ＧＡＴＡ３、ＳＴＡＴ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αもしくはＴＯＸとともに阻害され得る。
【0065】
同種リンパ球組成物は、ＢＴＫを阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ＩＴＫを阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ＰＩ３Ｋδを阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ＢＴＫおよびＰＩ３Ｋδを阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ＢＴＫおよびＩＴＫを阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ＩＴＫおよびＰＩ３Ｋδを阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ＢＴＫ、ＩＴＫおよびＰＩ３Ｋδを阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ｈｅｌｉｏｓを阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ｂｌｉｍｐ１を阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ＳＯＣＳ１を阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ＴＧＦ－β受容体ＩＩを阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ＬＡＧ－３を阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ＰＤ－１を阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ＴＮＦ－αを阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、ＧＡＴＡ３を阻害するように改変され得る。同種異系リンパ球組成物は、ＩＬ－１０を阻害するように改変され得る。同種異系リンパ球組成物は、ＳＴＡＴ３を阻害するように改変され得る。同種異系リンパ球組成物は、ＴＯＸを阻害するように改変され得る。同種異系リンパ球組成物は、ＣＤ２５を阻害するように改変され得る。同種異系リンパ球組成物は、ｆｏｘｐ３を阻害するように改変され得る。同種リンパ球組成物は、Ｅｚｈ２を阻害するように改変され得る。
【0066】
同種リンパ球組成物は、ＣＤ４＋Ｔ細胞のＴ制御（Ｔｒｅｇ）細胞への分化を抑制するか、またはＣＤ４＋Ｔｒｅｇ機能を阻害するように改変され得る。ＰＩ３Ｋδの抑制により、Ｔｒｅｇ細胞への分化またはＴｒｅｇ機能を減弱させることができる。Ｆｏｘｐ３の抑制により、Ｔｒｅｇ細胞への分化を抑制することができる。ＣＤ２５の抑制はＴｒｅｇ細胞への分化を抑制することができる。Ｅｚｈ２の抑制により、Ｔｒｅｇ細胞への分化を抑制することができる。
【0067】
Ｔ細胞のＴｒｅｇ細胞への分化は、単離された白血球をドミナントネガティブなトランスフォーミング増殖因子βＲＩＩ受容体を発現するように改変することで抑制することができる。Liu et al., Nature, 2020, 587(7832):115-120。
【0068】
ＢＴＫ、ＩＴＫまたはＰＩ３Ｋδ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２またはそれらの組み合わせは、薬理作用のある薬剤を用いて抑制（例えば、阻害）することができる。あるいは、ＢＴＫ、ＩＴＫまたはＰＩ３Ｋδ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２またはそれらの組み合わせは、遺伝子改変によって阻害することができる。
【0069】
Ｔｈ１が介在する事象は、マクロファージおよび好中球などの自然免疫細胞への影響を介して、サイトカイン放出症候群（Imus et al., Biol Blood Marrow Transplant, (2019), 25(12):2431-2437）または肝毒性（Guan et al., Cell Death Dis., (2021), 12(5):431.）を含む免疫療法の毒性の一因となる可能性がある。理論または機序に拘束されることを望むものではないが、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αまたはそれらの組み合わせの阻害は、サイトカイン放出症候群を軽減または予防することもできる。ＢＴＫ、ＩＴＫ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αまたはそれらの組み合わせの抑制により、骨髄系細胞の活性化の抑制を通じてサイトカイン放出症候群を軽減または予防することができる。
【0070】
白血球中のＣＤ４＋Ｔ細胞は、当業者に既知の従来の方法論、例えばフローサイトメトリーを用いて測定することができる。ＣＤ４＋Ｔ細胞により発現されるサイトカインの発現レベルは、当業者により従来の方法論、例えばＥＬＩＳＡまたは細胞内サイトカイン染色とそれに続く細胞表面染色およびフローサイトメトリーを用いて測定することができる。
【0071】
ｉ．ＢＴＫ
ＢＴＫは、ＰＨドメイン、ＴＨドメイン、ＳＨ３ドメイン、ＳＨ２ドメインおよび触媒ドメインからなる非受容体型チロシンキナーゼのＴｅｃファミリーのメンバーである。ＢＴＫは、成長因子受容体、サイトカイン受容体、Ｇタンパク質共役受容体、抗原受容体およびインテグリンを含む複数の受容体のシグナル伝達に関与している。ＢＴＫは次に、細胞の遊走、接着、生存および増殖を制御する多くの主要な下流シグナル伝達経路を活性化する。
ＢＴＫは、ＰＨドメイン、ＴＨドメイン、ＳＨ３ドメイン、ＳＨ２ドメインおよび触媒ドメインからなる非受容体型チロシンキナーゼのＴｅｃファミリーのメンバーである。ＢＴＫは、成長因子受容体、サイトカイン受容体、Ｇタンパク質共役受容体、抗原受容体およびインテグリンを含む複数の受容体のシグナル伝達に関与している。ＢＴＫは次に、細胞の遊走、接着、生存および増殖を制御する多くの主要な下流シグナル伝達経路を活性化する。
【0072】
ＢＴＫは、薬理作用のある薬剤または遺伝子組換えによって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＢＴＫの阻害剤であり得る。ＢＴＫの適切な阻害剤としては、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブ、チラブルチニブ、エボブルチニブ、トレブルチニブ、リルザブルチニブ、レミブルチニブ、チラブルチニブ、ブラネブルチニブ、オレラブルチニブ、ＢＩＩＢ０９１、ＡＣ００５８、ＰＲＮ４７３ＬＦＭ－Ａ１３、ダサチニブ、ＧＤ－４０５９またはＡＶＬ－２９２が挙げられるが、これらに限定されない。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。実施形態において、本明細書で使用されるＢＴＫ阻害剤は、イブルチニブではない。ＢＴＫ阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0073】
ＴＫは、ゲノムからＢＴＫ遺伝子を欠失、すなわち「ノックアウト」することによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、ＢＴＫ遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＢＴＫ遺伝子に変異を生じさせることで、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ＢＴＫを抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ＢＴＫの抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。例えば、プレクストリン相同ドメイン、プロリンリッチＴＥＣ相同（ＴＨ）ドメインまたはＳＲＣ相同ドメイン（ＳＨ２またはＳＨ３）に変異を生じさせることができる。
【0074】
ＢＴＫの抑制により、白血球中のＴｈ２極性化Ｔ細胞の数または頻度を減少させることができる。ＢＴＫの抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞の数または頻度を増加させることができる。ＢＴＫの抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。ＢＴＫの抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４またはＩＬ－１３の発現を減少させることができる。ＢＴＫの抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。ＢＴＫの抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0075】
ＢＴＫの抑制により、ＢＴＫが抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。ＢＴＫの抑制により、ＢＴＫが抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ２の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0076】
ＢＴＫの抑制により、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。ＢＴＫの抑制により、ＢＴＫが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌ、またはそれらの任意の組合せが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＢＴＫの抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、ＢＴＫの抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、ＢＴＫの抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0077】
ＢＴＫの抑制により、１つまたは複数のＴｈ２細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ＢＴＫの抑制により、ＢＴＫが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ２細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｈ２関連マーカーには、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＤ４、ＣＤ３０、ＣＤ８１、ＣＤ１８４、ＣＤ２７８、ｃ－ｍａｆ、ＣＲＴＨ２、Ｇａｔａ－３、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ ｙＲ、ＩｇＤ、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５、ＳＴ２Ｌ／Ｔ１、Ｔｉｍ－１、またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ２関連マーカーには、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＢＴＫの抑制により、ＩＬ－４の発現を減少させることができる。例えば、ＢＴＫの抑制により、ＩＬ－５の発現を減少させることができる。例えば、ＢＴＫの抑制により、ＩＬ－６の発現を減少させることができる。例えば、ＢＴＫの抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。例えば、ＢＴＫの抑制により、ＩＬ－１３の発現を減少させることができる。例えば、ＢＴＫの抑制により、ＩＬ－１５の発現を減少させることができる。
【0078】
ＢＴＫの抑制により、Ｔｈ２ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0079】
ＢＴＫの抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｈ２ Ｔ細胞の比率を、約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0080】
サイトカイン放出症候群は、キメラ抗原受容体修飾（ＣＡＲ）Ｔ細胞による、またはＴ細胞充満、ＨＬＡハプロタイプ一致血液もしくは骨髄移植を用いた血液悪性腫瘍の治療の合併症として知られている。実施形態では、ＢＴＫの阻害によって、非移植ＣＤ８除去リンパ球輸注後のサイトカイン放出症候群が軽減され得る。
【0081】
サイトカイン放出症候群は０から５のスケールで評価される。ＢＴＫの抑制によりサイトカイン放出症候群のスコアは０、１、２、３、４に減少し得る。
【0082】
ＢＴＫの抑制により、ＢＴＫが抑制されていない白血球と比較して、ＩＬ－１βの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0083】
ＢＴＫの抑制により、ＢＴＫが抑制されていない白血球と比較して、全白血球中のピロトーシスを起こした白血球の割合を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0084】
ＢＴＫの活性は、例えばその基質の１つ（１－ホスファチジルイノシトール－４，５－ビスホスフェートホスホジエステラーゼガンマ－２；ＰＬＣ－γ２など）のリン酸化によって測定されるが、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制することができる。
【0085】
ｉｉ．ＩＴＫ
インターロイキン－２（ＩＬ－２）誘導性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）は、Ｔ細胞系譜に高発現する非受容体型チロシンキナーゼであり、主にＴ細胞受容体の下流での機能を通して、Ｔ細胞の発生と機能の様々な側面を制御している。
インターロイキン－２（ＩＬ－２）誘導性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）は、Ｔ細胞系譜に高発現する非受容体型チロシンキナーゼであり、主にＴ細胞受容体の下流での機能を通して、Ｔ細胞の発生と機能の様々な側面を制御している。
【0086】
ＩＴＫは、薬理作用のある薬剤または遺伝子組換えによって抑制（すなわち、阻害または減弱）することができる。薬理作用のある薬剤はＩＴＫの阻害剤であり得る。ＩＴＫの適切な阻害剤としては、アミノチアゾール、アミノベンゾイミダゾール、インドール、ピリジンまたはｐｒｎ６９４が挙げられるが、これらに限定されない。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＩＴＫ阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0087】
ＩＴＫは、ゲノムからＩＴＫ遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、ＩＴＫ遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＩＴＫ遺伝子に変異を生じさせることで、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ＩＴＫを抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ＩＴＫの抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、ＩＴＫの１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0088】
ＩＴＫの抑制により、白血球中のＴｈ２極性化Ｔ細胞数を減少させることができる。ＩＴＫの抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。ＩＴＫの抑制の抑制によりＴ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。ＩＴＫの抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４またはＩＬ－１３の発現を減少させることができる。ＩＴＫの抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。ＩＴＫの抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0089】
ＩＴＫの抑制により、ＩＴＫが抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。ＩＴＫの抑制により、ＩＴＫが抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ２の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0090】
ＩＴＫの抑制により、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。ＩＴＫの抑制により、ＩＴＫが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－ａ、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせ含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＩＴＫの抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、ＩＴＫの抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、ＩＴＫの抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0091】
ＩＴＫの抑制により、１つまたは複数のＴｈ２細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ＩＴＫの抑制により、ＩＴＫが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ２細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｈ２関連マーカーには、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＤ４、ＣＤ３０、ＣＤ８１、ＣＤ１８４、ＣＤ２７８、ｃ－ｍａｆ、ＣＲＴＨ２、Ｇａｔａ－３、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ ｙＲ、ＩｇＤ、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５、ＳＴ２Ｌ／Ｔ１、Ｔｉｍ－１またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ２関連マーカーには、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＩＴＫの抑制により、ＩＬ－４の発現を減少させることができる。例えば、ＩＴＫの抑制により、ＩＬ－５の発現を減少させることができる。例えば、ＩＴＫの抑制により、ＩＬ－６の発現を減少させることができる。例えば、ＩＴＫの抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。例えば、ＩＴＫの抑制により、ＩＬ－１３の発現を減少させることができる。例えば、ＩＴＫの抑制により、ＩＬ－１５の発現を減少させることができる。
【0092】
ＩＴＫの抑制により、Ｔｈ２ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を、約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上に増加させることができる。
【0093】
ＩＴＫの抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｈ２ Ｔ細胞の比率を、約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0094】
ＩＴＫの活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0095】
ｉｉｉ．ＰＩ３Ｋδ
ＰＩ３Ｋδは、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害または減弱）することができる。薬理作用のある薬剤はＰＩ３Ｋδの阻害剤であり得る。ＰＩ３Ｋδの適切な阻害剤としては、イデラリシブ、コパンリシブ、デュベリシブ、ウンブラリシブ、ＭＥ－４４０１、ＲＰ６５０３、ペリホシン、ブパールリシブまたはダクトリシブが挙げられるが、これらに限定されない。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＰＩ３Ｋδ阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
ＰＩ３Ｋδは、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害または減弱）することができる。薬理作用のある薬剤はＰＩ３Ｋδの阻害剤であり得る。ＰＩ３Ｋδの適切な阻害剤としては、イデラリシブ、コパンリシブ、デュベリシブ、ウンブラリシブ、ＭＥ－４４０１、ＲＰ６５０３、ペリホシン、ブパールリシブまたはダクトリシブが挙げられるが、これらに限定されない。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＰＩ３Ｋδ阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0096】
ＰＩ３Ｋδは、ゲノムからＰＩ３Ｋδ遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における既知の遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡは、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３またはＥｚｈ２に対するものであり得る。コンディショナルノックアウト法は、ＰＩ３Ｋδ遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＰＩ３Ｋδ遺伝子に変異を生じさせることにより、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ＰＩ３Ｋδを抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ＰＩ３Ｋδの抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。あるいは、変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0097】
ＰＩ３Ｋδの遺伝子組換えは、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３またはＥｚｈ２の遺伝子を欠失させることを含み得る。
【0098】
ＰＩ３Ｋδの抑制により、白血球中のＣＤ４＋ＣＤ２５＋ｆｏｘｐ３＋制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の数または機能を減少させることができる。ＰＩ３Ｋδの抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。ＰＩ３Ｋδの抑制によりＴ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。ＰＩ３Ｋδの抑制により、白血球におけるＴＧＦβやＩＬ－１０の発現を減少させることができる。ＰＩ３Ｋδの抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。ＰＩ３Ｋδの抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0099】
ＰＩ３Ｋδの抑制により、ＰＩ３Ｋδが抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。ＰＩ３Ｋδの抑制により、ＰＩ３Ｋδが抑制されていない白血球と比較して、Ｔｒｅｇ細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0100】
ＰＩ３Ｋδの抑制により、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。ＰＩ３Ｋδの抑制により、ＰＩ３Ｋδが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＰＩ３Ｋδの抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、ＰＩ３Ｋδの抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、ＰＩ３Ｋδの抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0101】
ＰＩ３Ｋδの抑制により、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ＰＩ３Ｋδの抑制により、Ｔｒｅｇが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｒｅｇ関連マーカーには、ＴＧＦβまたはＩＬ－１０またはそれらの組み合わせが含まれ得る。例えば、ＰＩ３Ｋδの抑制によりＴＧＦβの発現を減少させることができる。例えば、ＰＩ３Ｋδの抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。
【0102】
ＰＩ３Ｋδの抑制により、Ｔｒｅｇ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を、約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0103】
ＰＩ３Ｋδの抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｒｅｇ Ｔ細胞の比率を、約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0104】
ＰＩ３Ｋδの活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0105】
ｉｖ．ＧＡＴＡ３
ＧＡＴＡ３は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害または減弱）することができる。薬理作用のある薬剤は、ＧＡＴＡ３の阻害剤であり得る。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＧＡＴＡ３阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
ＧＡＴＡ３は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害または減弱）することができる。薬理作用のある薬剤は、ＧＡＴＡ３の阻害剤であり得る。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＧＡＴＡ３阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0106】
ＧＡＴＡ３は、ゲノムからＧＡＴＡ３遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト方法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、ＧＡＴＡ３遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＧＡＴＡ３遺伝子に変異を生じさせることにより、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ＧＡＴＡ３を抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ＧＡＴＡ３の抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0107】
ＧＡＴＡ３の抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。ＧＡＴＡ３の抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。ＧＡＴＡ３の抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４またはＩＬ－１３の発現を減少させることができる。ＧＡＴＡ３の抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。ＧＡＴＡ３の抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。ＧＡＴＡ３の抑制により、白血球中のＴｈ２極性化Ｔ細胞数を減少させることができる。
【0108】
ＧＡＴＡ３の抑制により、ＧＡＴＡ３が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。ＧＡＴＡ３の抑制により、ＧＡＴＡ３が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ２の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0109】
ＧＡＴＡ３の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。ＧＡＴＡ３の抑制により、ＧＡＴＡ３が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＧＡＴＡ３の抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、ＧＡＴＡ３の抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、ＧＡＴＡ３の抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0110】
ＧＡＴＡ３の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ２細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ＧＡＴＡ３の抑制により、ＧＡＴＡ３が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ２細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｈ２関連マーカーには、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＤ４、ＣＤ３０、ＣＤ８１、ＣＤ１８４、ＣＤ２７８、ｃ－ｍａｆ、ＣＲＴＨ２、Ｇａｔａ－３、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ ｙＲ、ＩｇＤ、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５、ＳＴ２Ｌ／Ｔ１、Ｔｉｍ－１またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ２関連マーカーには、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＧＡＴＡ３の抑制により、ＩＬ－４の発現を減少させることができる。例えば、ＧＡＴＡ３の抑制により、ＩＬ－５の発現を減少させることができる。例えば、ＧＡＴＡ３の抑制により、ＩＬ－６の発現を減少させることができる。例えば、ＧＡＴＡ３の抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。例えば、ＧＡＴＡ３の抑制により、ＩＬ－１３の発現を減少させることができる。例えば、ＧＡＴＡ３の抑制により、ＩＬ－１５の発現を減少させることができる。
【0111】
ＧＡＴＡ３の抑制により、Ｔｈ２ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を、約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0112】
ＧＡＴＡ３の抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｈ２ Ｔ細胞の比率を約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0113】
サイトカイン放出症候群は、キメラ抗原受容体改変（ＣＡＲ）Ｔ細胞による、またはＴ細胞充満、ＨＬＡハプロタイプ一致血液もしくは骨髄移植による血液悪性腫瘍の治療の合併症として知られている。実施形態では、ＧＡＴＡ３の阻害によって、非移植ＣＤ８除去ドナーリンパ球輸注後のサイトカイン放出症候群が軽減され得る。ＧＡＴＡ３の抑制により、ＧＡＴＡ３を抑制しない場合の活性と比較して、サイトカイン放出症候群を約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％またはそれ以上減少させることができる。
【0114】
ＧＡＴＡ３の抑制により、ＧＡＴＡ３が抑制されていない白血球と比較して、ＩＬ－１βの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0115】
ＧＡＴＡ３の抑制により、ＧＡＴＡ３が抑制されていない白血球と比較して、パイロプトーシスの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0116】
ＧＡＴＡ３の活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0117】
ｖ．ＳＴＡＴ３
ＳＴＡＴ３は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤は、ＳＴＡＴ３の阻害剤であり得る。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＳＴＡＴ３阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
ＳＴＡＴ３は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤は、ＳＴＡＴ３の阻害剤であり得る。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＳＴＡＴ３阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0118】
ＳＴＡＴ３は、ゲノムからＳＴＡＴ３遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、ＳＴＡＴ３遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＳＴＡＴ３遺伝子に変異を生じさせることにより、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ＳＴＡＴ３を抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ＳＴＡＴ３の抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0119】
ＳＴＡＴ３の抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。ＳＴＡＴ３の抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。ＳＴＡＴ３の抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４、またはＩＬ－１３の発現を減少させることができる。ＳＴＡＴ３の抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。ＳＴＡＴ３の抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。ＳＴＡＴ３の抑制により、白血球中のＴｈ１７極性化Ｔ細胞またはＴｆｈ極性化Ｔ細胞の数を減少させることができる。
【0120】
ＳＴＡＴ３の抑制により、ＳＴＡＴ３が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。ＳＴＡＴ３の抑制により、ＳＴＡＴ３が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１７細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。ＳＴＡＴ３の抑制により、ＳＴＡＴ３が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｆｈ細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0121】
ＳＴＡＴ３の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。ＳＴＡＴ３の抑制により、ＳＴＡＴ３が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＳＴＡＴ３の抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、ＳＴＡＴ３の抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、ＳＴＡＴ３の抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0122】
ＳＴＡＴ３の抑制により、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ＳＴＡＴ３の抑制により、Ｔｒｅｇが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｒｅｇ関連マーカーには、ＴＧＦβもしくはＩＬ－１０またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＳＴＡＴ３の抑制により、ＴＧＦβ発現を減少させることができる。例えば、ＳＴＡＴ３の抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。
【0123】
ＳＴＡＴ３の抑制により、１つまたは複数のＴｆｈ細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ＳＴＡＴ３の抑制により、Ｔｆｈが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｆｈ細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｆｈ関連マーカーには、ＩＬ－２１、ＩＬ－４またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＳＴＡＴ３の抑制により、ＩＬ－２１発現を減少させることができる。例えば、ＳＴＡＴ３の抑制により、ＩＬ－４の発現を減少させることができる。
【0124】
ＳＴＡＴ３の抑制により、Ｔｒｅｇ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0125】
ＳＴＡＴ３の抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｒｅｇ Ｔ細胞の比率を約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0126】
ＳＴＡＴ３の抑制により、Ｔｆｈ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0127】
ＳＴＡＴ３の抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｆｈ Ｔ細胞の比率を、約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0128】
ＳＴＡＴ３の活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0129】
ｖｉ．ｆｏｘ３
ｆｏｘｐ３は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤は、ｆｏｘｐ３の阻害剤であり得る。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ｆｏｘｐ３阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
ｆｏｘｐ３は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤は、ｆｏｘｐ３の阻害剤であり得る。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ｆｏｘｐ３阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0130】
ｆｏｘｐ３は、ゲノムからＦＯＸＰ３遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、ＦＯＸＰ３遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＦＯＸＰ３遺伝子に変異を生じさせることにより、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ｆｏｘｐ３を抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ｆｏｘｐ３の抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0131】
ｆｏｘｐ３の抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。ｆｏｘｐ３の抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。ｆｏｘｐ３の抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４、またはＩＬ－１３の発現を減少させることができる。ｆｏｘｐ３の抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。ｆｏｘｐ３の抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。ｆｏｘｐ３の抑制により、白血球中のＴｒｅｇ極性化Ｔ細胞数を減少させることができる。
【0132】
ｆｏｘｐ３の抑制により、ｆｏｘｐ３が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。ｆｏｘｐ３の抑制により、ｆｏｘｐ３が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｒｅｇ細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0133】
ｆｏｘｐ３の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。ｆｏｘｐ３の抑制により、ｆｏｘｐ３が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ｆｏｘｐ３の抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、ｆｏｘｐ３の抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、ｆｏｘｐ３の抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0134】
ｆｏｘｐ３の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ｆｏｘｐ３の抑制により、ｆｏｘｐ３が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｒｅｇ関連マーカーには、ＴＧＦβもしくはＩＬ－１０またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ｆｏｘｐ３の抑制により、ＴＧＦβの発現を減少させることができる。例えば、ｆｏｘｐ３の抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。
【0135】
ｆｏｘｐ３の抑制により、Ｔｒｅｇ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0136】
ｆｏｘｐ３の抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｒｅｇ Ｔ細胞の比率を約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0137】
ｆｏｘｐ３の活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0138】
ｖｉｉ．ＣＤ２５
ＣＤ２５は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＣＤ２５の阻害剤であり得る。阻害剤は低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＣＤ２５阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
ＣＤ２５は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＣＤ２５の阻害剤であり得る。阻害剤は低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＣＤ２５阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0139】
ＣＤ２５は、ゲノムからＣＤ２５遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、ＣＤ２５遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＣＤ２５遺伝子に変異を生じさせることで遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ＣＤ２５を抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ＣＤ２５の抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0140】
ＣＤ２５の抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。ＣＤ２５の抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。ＣＤ２５の抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４またはＩＬ－１３の発現を減少させることができる。ＣＤ２５の抑制により、白血球中のＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。ＣＤ２５の抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。ＣＤ２５の抑制により、白血球中のＴｒｅｇ極性化Ｔ細胞数を減少させることができる。
【0141】
ＣＤ２５の抑制により、ＣＤ２５が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。ＣＤ２５の抑制により、ＣＤ２５が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｒｅｇ細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0142】
ＣＤ２５の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。ＣＤ２５の抑制により、ＣＤ２５が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＣＤ２５の抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、ＣＤ２５の抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、ＣＤ２５の抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0143】
ＣＤ２５の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ＣＤ２５の抑制により、ＣＤ２５が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｒｅｇ関連マーカーには、ＴＧＦβもしくはＩＬ－１０またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＣＤ２５の抑制によりＴＧＦβの発現を減少させることができる。例えば、ＣＤ２５の抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。
【0144】
ＣＤ２５の抑制により、Ｔｒｅｇ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を、約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0145】
ＣＤ２５の抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｒｅｇ Ｔ細胞の比率を、約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１または以上に減少させることができる。
【0146】
ＣＤ２５の活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0147】
ｖｉｉｉ．Ｅｚｈ２
Ｅｚｈ２は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＥｚｈ２の阻害剤であり得る。阻害剤は低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。Ｅｚｈ２阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
Ｅｚｈ２は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＥｚｈ２の阻害剤であり得る。阻害剤は低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。Ｅｚｈ２阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0148】
Ｅｚｈ２は、ゲノムからＥｚｈ２遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、Ｅｚｈ２遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、Ｅｚｈ２遺伝子に変異を生じさせることにより、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。Ｅｚｈ２を抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。Ｅｚｈ２の抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0149】
Ｅｚｈ２の抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。Ｅｚｈ２の抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。Ｅｚｈ２の抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４、ＩＬ－１３の発現を減少させることができる。Ｅｚｈ２の抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。Ｅｚｈ２の抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。Ｅｚｈ２の抑制により、白血球中のＴｒｅｇ極性化Ｔ細胞数を減少させることができる。
【0150】
Ｅｚｈ２の抑制により、Ｅｚｈ２が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。Ｅｚｈ２の抑制により、Ｅｚｈ２が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｒｅｇ細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0151】
Ｅｚｈ２の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。Ｅｚｈ２の抑制により、Ｅｚｈ２が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、Ｅｚｈ２の抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、Ｅｚｈ２の抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、Ｅｚｈ２の抑制により、Ｅｚｈ２の発現を増加させることができる。
【0152】
Ｅｚｈ２の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。Ｅｚｈ２の抑制により、Ｅｚｈ２が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｒｅｇ関連マーカーには、ＴＧＦβもしくはＩＬ－１０またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、Ｅｚｈ２の抑制により、ＴＧＦβの発現を減少させることができる。例えば、Ｅｚｈ２の抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。
【0153】
Ｅｚｈ２の抑制により、Ｔｒｅｇ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0154】
Ｅｚｈ２の抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｒｅｇ Ｔ細胞の比率を約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0155】
Ｅｚｈ２の活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0156】
ｉｘ．Ｈｅｌｉｏｓ
Ｈｅｌｉｏｓは、薬理作用のある薬剤または遺伝子組換えによって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＨｅｌｉｏｓの阻害剤であり得る。阻害剤は低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。Ｈｅｌｉｏｓの阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
Ｈｅｌｉｏｓは、薬理作用のある薬剤または遺伝子組換えによって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＨｅｌｉｏｓの阻害剤であり得る。阻害剤は低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。Ｈｅｌｉｏｓの阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0157】
Ｈｅｌｉｏｓは、ゲノムからＩＫＺＦ２遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、ＩＫＺＦ２遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＩＫＺＦ２遺伝子に変異を生じさせることにより、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。Ｈｅｌｉｏｓを抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。Ｈｅｌｉｏｓの抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0158】
Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４、またはＩＬ－１３の発現を減少させることができる。Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、白血球中のＴｒｅｇ極性化Ｔ細胞数を減少させることができる。
【0159】
Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、Ｈｅｌｉｏｓが抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、Ｈｅｌｉｏｓが抑制されていない白血球と比較して、Ｔｒｅｇの集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0160】
Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、Ｈｅｌｉｏｓが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0161】
Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、１つまたは複数の関連するＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、Ｈｅｌｉｏｓが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｒｅｇ関連マーカーには、ＴＧＦβもしくはＩＬ－１０またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、Ｈｅｌｉｏｓの抑制によりＴＧＦβの発現を減少させることができる。例えば、Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。
【0162】
Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、Ｔｒｅｇ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0163】
Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｒｅｇ Ｔ細胞の比率を約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0164】
Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を軽減することができる。Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、Ｈｅｌｉｏｓを抑制しない場合の活性と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％またはそれ以上減少させることができる。
【0165】
Ｈｅｌｉｏｓの抑制により、Ｈｅｌｉｏｓが抑制されていない白血球と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0166】
Ｈｅｌｉｏｓの活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0167】
ｘ．Ｂｌｉｍｐ１
Ｂｌｉｍｐ１は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち阻害）することができる。薬理作用のある薬剤は、Ｂｌｉｍｐ１の阻害剤であり得る。Ｂｌｉｍｐ１阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。Ｂｌｉｍｐ１の阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
Ｂｌｉｍｐ１は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち阻害）することができる。薬理作用のある薬剤は、Ｂｌｉｍｐ１の阻害剤であり得る。Ｂｌｉｍｐ１阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。Ｂｌｉｍｐ１の阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0168】
Ｂｌｉｍｐ１はＰＲＤＭ１遺伝子をゲノムからノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、ＰＲＤＭ１遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＰＲＤＭ１遺伝子に変異を生じさせることにより、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。Ｂｌｉｍｐ１を抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。Ｂｌｉｍｐ１の抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0169】
Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞が増加させることができる。Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、白血球中のＩＬ－１０、ＩＬ－４、ＩＬ－１３の発現を減少させることができる。Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、白血球中のＴｒｅｇ極性化Ｔ細胞数を減少させることができる。
【0170】
Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、Ｂｌｉｍｐ１が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、Ｂｌｉｍｐ１が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｒｅｇの集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0171】
Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、Ｂｌｉｍｐ１が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0172】
Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、Ｂｌｉｍｐ１が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｒｅｇ関連マーカーには、ＴＧＦβもしくはＩＬ－１０またはそれらの組み合わせが含まれ得る。例えば、Ｂｌｉｍｐ１の抑制によりＴＧＦβの発現を減少させることができる。例えば、Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。
【0173】
Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、Ｔｒｅｇ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0174】
Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｒｅｇ Ｔ細胞の比率を約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0175】
Ｂｌｉｍｐ１の抑制によりＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を軽減することができる。Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、Ｂｌｉｍｐ１を抑制しない場合の活性と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％またはそれ以上減少させることができる。
【0176】
Ｂｌｉｍｐ１の抑制により、Ｂｌｉｍｐが抑制されていない白血球と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0177】
Ｂｌｉｍｐ１の活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち阻害）することができる。
【0178】
ｘｉ．ＴＯＸ
ＴＯＸ（胸腺細胞選択関連ＨＭＧ ＢＯＸ）は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＴＯＸの阻害剤であり得る。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＴＯＸの阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
ＴＯＸ（胸腺細胞選択関連ＨＭＧ ＢＯＸ）は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＴＯＸの阻害剤であり得る。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＴＯＸの阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0179】
ＴＯＸは、ゲノムからＴＯＸ遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、ＴＯＸ遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＴＯＸ遺伝子に変異を生じさせることにより、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ＴＯＸを抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ＴＯＸの抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0180】
ＴＯＸの抑制によりＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を軽減することができる。ＴＯＸの抑制により、ＴＯＸを抑制しない場合の活性と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％またはそれ以上減少させることができる。
【0181】
ＴＯＸの抑制により、ＴＯＸが抑制されていない白血球と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0182】
ｘｉｉ．ＩＬ－１０
ＩＬ－１０は、薬理作用のある薬剤または遺伝子組換えによって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＩＬ－１０の阻害剤であり得る。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＩＬ－１０の阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
ＩＬ－１０は、薬理作用のある薬剤または遺伝子組換えによって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＩＬ－１０の阻害剤であり得る。阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＩＬ－１０の阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0183】
ＩＬ－１０は、ゲノムからＩＬ－１０遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法はＩＬ－１０遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＩＬ－１０遺伝子に変異を生じさせることにより、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ＩＬ－１０を抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ＩＬ－１０の抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、タンパク質ドメインの１つまたはそれ以上に生じさせることができる。
【0184】
ＩＬ－１０の抑制により、白血球中のＴｈ２極性化Ｔ細胞数を減少させることができる。ＩＬ－１０の抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。ＩＬ－１０の抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。ＩＬ－１０の抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４、またはＩＬ－１３の発現を減少させることができる。ＩＬ－１０の抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。ＩＬ－１０の抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0185】
ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１０が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１０が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ２の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0186】
ＩＬ－１０の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１０が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＩＬ－１０の抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0187】
ＩＬ－１０の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ２細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１０が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ２細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｈ２関連マーカーには、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＤ４、ＣＤ３０、ＣＤ８１、ＣＤ１８４、ＣＤ２７８、ｃ－ｍａｆ、ＣＲＴＨ２、Ｇａｔａ－３、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ ｙＲ、ＩｇＤ、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５、ＳＴ２Ｌ／Ｔ１、Ｔｉｍ－１またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ２関連マーカーには、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－４の発現を減少させることができる。例えば、ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－５の発現を減少させることができる。例えば、ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－６の発現を減少させることができる。例えば、ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。例えば、ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１３の発現を減少させることができる。例えば、ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１５の発現を減少させることができる。
【0188】
ＩＬ－１０の抑制により、Ｔｈ２ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を、約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍、またはそれ以上に増加させることができる。
【0189】
ＩＬ－１０の抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｈ２ Ｔ細胞の比率を約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0190】
ＩＬ－１０の活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0191】
ＩＬ－１０の抑制により、他のＴ細胞における炎症と炎症性サイトカインの産生を促進することができる。ＩＬ－１０の抑制によりＩＬ－１、ＩＬ－１２、ＩＬ－１８、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、またはＧＭ－ＣＳＦの発現を増加させることができる。
【0192】
ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１０が抑制されていない白血球と比較して、ＩＬ－１の発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0193】
ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１０が抑制されていない白血球と比較して、ＩＬ－１２の発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0194】
ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１８の発現を、ＩＬ－１０が抑制されていない白血球と比較して、約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0195】
ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１０が抑制されていない白血球と比較して、ＴＦＮ－αの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0196】
ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１０が抑制されていない白血球と比較して、Ｉの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0197】
ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１０が抑制されていない白血球と比較して、ＩＬ－１８の発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0198】
ＩＬ－１０の抑制により、ＩＬ－１０が抑制されていない白血球と比較して、ＧＭ－ＣＦＳの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0199】
ｘｉｉｉ．ＳＯＣＳ１
ＳＯＣＳ１は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤は、ＳＯＣＳ１の阻害剤であり得る。ＳＯＣＳ１阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＳＯＣＳ１阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
ＳＯＣＳ１は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤は、ＳＯＣＳ１の阻害剤であり得る。ＳＯＣＳ１阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＳＯＣＳ１阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0200】
ＳＯＣＳ１は、ゲノムからＳＯＣＳ１遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、ＳＯＣＳ１遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＳＯＣＳ１遺伝子に変異を生じさせることにより、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ＳＯＣＳ１を抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ＳＯＣＳ１の抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0201】
ＳＯＣＳ１の抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。ＳＯＣＳ１の抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。ＳＯＣＳ１の抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４、またはＩＬ－１３の発現を減少させることができる。ＳＯＣＳ１の抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。ＳＯＣＳ１の抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。ＳＯＣＳ１の抑制により、白血球中のＴｒｅｇ極性化Ｔ細胞数を減少させることができる。
【0202】
ＳＯＣＳ１の抑制により、ＳＯＣＳ１が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。ＳＯＣＳ１の抑制により、ＳＯＣＳ１が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｒｅｇの集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0203】
ＳＯＣＳ１の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。ＳＯＣＳ１の抑制により、ＳＯＣＳ１が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＳＯＣＳ１の抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、ＳＯＣＳ１の抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、ＳＯＣＳ１の抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0204】
ＳＯＣＳ１の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ＳＯＣＳ１の抑制により、ＳＯＣＳ１が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｒｅｇ関連マーカーには、ＴＧＦβもしくはＩＬ－１０またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＳＯＣＳ１の抑制により、ＴＧＦβ発現を減少させることができる。例えば、ＳＯＣＳ１の抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。
【0205】
ＳＯＣＳ１の抑制により、Ｔｒｅｇ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0206】
ＳＯＣＳ１の抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｒｅｇ Ｔ細胞の比率を約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0207】
ＳＯＣＳ１の抑制により、ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を軽減することができる。ＳＯＣＳ１の抑制により、ＳＯＣＳ１を抑制しない場合の活性と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％またはそれ以上減少させることができる。
【0208】
ＳＯＣＳ１の抑制により、ＳＯＣＳ１が抑制されていない白血球と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0209】
ＳＯＣＳ１の活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0210】
ｘｉｖ．ＰＤ－１
ＰＤ－１は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＰＤ－１の阻害剤であり得る。ＰＤ－１阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＰＤ－１阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
ＰＤ－１は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＰＤ－１の阻害剤であり得る。ＰＤ－１阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＰＤ－１阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0211】
ＰＤ－１は、ゲノムからＰＤ－１遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、ＰＤ－１遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＰＤ－１遺伝子に変異を生じさせることにより、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ＰＤ－１を抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ＰＤ－１の抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0212】
ＰＤ－１の抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。ＰＤ－１の抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。ＰＤ－１の抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４またはＩＬ－１３の発現を減少させることができる。ＰＤ－１の抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。ＰＤ－１の抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。ＰＤ－１の抑制により、白血球中のＴｒｅｇ極性化Ｔ細胞数を減少させることができる。
【0213】
ＰＤ－１の抑制により、ＰＤ－１が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。ＰＤ－１の抑制により、ＰＤ－１が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｒｅｇの集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0214】
ＰＤ－１の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。ＰＤ－１の抑制により、ＰＤ－１が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組合せが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＰＤ－１の抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、ＰＤ－１の抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、ＰＤ－１の抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0215】
ＰＤ－１の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ＰＤ－１の抑制により、ＰＤ－１が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｒｅｇ関連マーカーには、ＴＧＦβもしくはＩＬ－１０またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＰＤ－１の抑制により、ＴＧＦβの発現を減少させることができる。例えば、ＰＤ－１の抑制によりＩＬ－１０の発現を減少させることができる。
【0216】
ＰＤ－１の抑制により、Ｔｒｅｇ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0217】
ＰＤ－１の抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｒｅｇ Ｔ細胞の比率を約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0218】
ＰＤ－１の抑制により、ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を軽減することができる。ＰＤ－１の抑制により、ＰＤ－１を抑制しない場合の活性と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％またはそれ以上減少させることができる。
【0219】
ＰＤ－１の抑制により、ＰＤ－１が抑制されていない白血球と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0220】
ＰＤ－１の活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0221】
ｘｖ．ＬＡＧ－３
ＬＡＧ－３は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＬＡＧ－３の阻害剤であり得る。阻害剤は低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＬＡＧ－３阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有することができる。
ＬＡＧ－３は、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＬＡＧ－３の阻害剤であり得る。阻害剤は低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＬＡＧ－３阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有することができる。
【0222】
ＬＡＧ－３はゲノムからＬＡＧ－３遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法はＬＡＧ－３遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＬＡＧ－３遺伝子に変異を生じさせることにより、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ＬＡＧ－３を抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ＬＡＧ－３の抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質のドメインに生じさせることができる。
【0223】
ＬＡＧ－３の抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。ＬＡＧ－３の抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。ＬＡＧ－３の抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４、またはＩＬ－１３の発現を減少させることができる。ＬＡＧ－３の抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。ＬＡＧ－３の抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。ＬＡＧ－３の抑制により、白血球中のＴｒｅｇ極性化Ｔ細胞数を減少させることができる。
【0224】
ＬＡＧ－３の抑制により、ＬＡＧ－３が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。ＬＡＧ－３の抑制により、ＬＡＧ－３が抑制されていない白血球と比較して、Ｔｒｅｇ細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0225】
ＬＡＧ－３の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。ＬＡＧ－３の抑制により、ＬＡＧ－３が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＬＡＧ－３の抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、ＬＡＧ－３の抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、ＬＡＧ－３の抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0226】
ＬＡＧ－３の抑制により、１つまたは複数の関連するＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ＬＡＧ－３の抑制により、ＬＡＧ－３が抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｒｅｇ関連マーカーには、ＴＧＦβもしくはＩＬ－１０またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＬＡＧ－３の抑制により、ＴＧＦβの発現を減少させることができる。例えば、ＬＡＧ－３の抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。
【0227】
ＬＡＧ－３の抑制により、Ｔｒｅｇ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0228】
ＬＡＧ－３の抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｒｅｇ Ｔ細胞の比率を約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0229】
ＬＡＧ－３の活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0230】
ｘｖｉ．ＴＮＦ－α
ＴＮＦ－αは、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤は、ＴＮＦ－αの阻害剤であり得る。ＴＮＦ－α阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＴＮＦ－α阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
ＴＮＦ－αは、薬理作用のある薬剤または遺伝子改変によって抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤は、ＴＮＦ－αの阻害剤であり得る。ＴＮＦ－α阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＴＮＦ－α阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0231】
ＴＮＦ－αは、ゲノムからＴＮＦ－α遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、ＴＮＦ－α遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＴＮＦ－α遺伝子に変異を生じさせることにより、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ＴＮＦ－αを抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ＴＮＦ－αの抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0232】
ＴＮＦ－αの抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。ＴＮＦ－αの抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。ＴＮＦ－αの抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４、またはＩＬ－１３の発現を減少させることができる。ＴＮＦ－αの抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。ＴＮＦ－αの抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。ＴＮＦ－αの抑制により、白血球中のＴｒｅｇ極性化Ｔ細胞数を減少させることができる。
【0233】
ＴＮＦ－αの抑制により、ＴＮＦ－αが抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。ＴＮＦ－αの抑制により、ＴＮＦ－αが抑制されていない白血球と比較して、Ｔｒｅｇの集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0234】
ＴＮＦ－αの抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。ＴＮＦ－αの抑制により、ＴＮＦ－αが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＴＮＦ－αの抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、ＴＮＦ－αの抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、ＴＮＦ－αの抑制はＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0235】
ＴＮＦ－αの抑制により、１つまたは複数の関連するＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ＴＮＦ－αの抑制により、ＴＮＦ－αが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｒｅｇ関連マーカーには、ＴＧＦβもしくはＩＬ－１０またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＴＮＦ－αの抑制により、ＴＧＦβの発現を減少させることができる。例えば、ＴＮＦ－αの抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。
【0236】
ＴＮＦ－αの抑制により、Ｔｒｅｇ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍以上増加させることができる。
【0237】
ＴＮＦ－αの抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｒｅｇ Ｔ細胞の比率を、約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0238】
ＴＮＦ－αの抑制により、ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を軽減することができる。ＴＮＦ－αの抑制により、ＴＮＦ－αを抑制しない場合の活性と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％またはそれ以上減少させることができる。
【0239】
ＴＮＦ－αの抑制により、ＴＮＦ－αが抑制されていない白血球と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0240】
ＴＮＦ－αの活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0241】
サイトカイン放出症候群は、キメラ抗原受容体修飾（ＣＡＲ）Ｔ細胞による、またはＴ細胞充満、ＨＬＡハプロタイプ一致血液もしくは骨髄移植による血液悪性腫瘍の治療の合併症として知られている。実施形態では、ＴＮＦ－αの阻害によって、非移植ＣＤ８除去ドナーリンパ球輸注後のサイトカイン放出症候群が軽減され得る。
【0242】
サイトカイン放出症候群は０から５のスケールで評価される。ＴＮＦ－αの抑制によりサイトカイン放出症候群のスコアは０、１、２、３、４に減少し得る。
【0243】
ＴＮＦ－αの抑制により、ＴＮＦ－αが抑制されていない白血球と比較して、ＩＬ－１βの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0244】
ＴＮＦ－αの抑制により、ＴＮＦ－αが抑制されていない白血球と比較して、全白血球中のピロトーシスを起こした白血球の割合を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0245】
ＴＮＦ－αの活性は、例えばその基質（１－ホスファチジルイノシトール－４，５－ビスホスフェートホスホジエステラーゼガンマ－２；ＰＬＣ－γ２など）のリン酸化によって測定されるが、基底活性と比較して、約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制することができる。
【0246】
ｘｖｉｉ．ＴＧＦ－β受容体ＩＩ
ＴＧＦ－β受容体ＩＩは、薬理作用のある薬剤または遺伝子組換えにより抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＴＧＦ－β受容体ＩＩの阻害剤であり得る。ＴＧＦ－β受容体ＩＩ阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＴＧＦ－β受容体ＩＩ阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
ＴＧＦ－β受容体ＩＩは、薬理作用のある薬剤または遺伝子組換えにより抑制（すなわち、阻害）することができる。薬理作用のある薬剤はＴＧＦ－β受容体ＩＩの阻害剤であり得る。ＴＧＦ－β受容体ＩＩ阻害剤は、低分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）またはショートヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）であり得る。ＴＧＦ－β受容体ＩＩ阻害剤は、約１０００ｎＭ未満、約９００ｎＭ未満、約８００ｍＭ未満、約７００ｎＭ未満、約６００ｎＭ未満、約５００ｎＭ未満、約４００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満の半数阻害濃度を有し得る。
【0247】
ＴＧＦ－β受容体ＩＩは、ゲノムからＴＧＦ－β受容体ＩＩ遺伝子をノックアウトすることによって抑制することができる。遺伝子をノックアウトする技術は当業者に知られている。当技術分野における遺伝子ノックアウト法としては、遺伝子サイレンシング、コンディショナルノックアウト、相同組換え、遺伝子編集および突然変異によるノックアウトが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子サイレンシングは、例えば、ＲＮＡ干渉、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡを用いて達成することができる。コンディショナルノックアウト法は、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ遺伝子を不活性化するために用いることができる。機能喪失変異は、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ遺伝子に変異を生じさせることで、遺伝子機能を抑制するのに役立ち得る。ＴＧＦ－β受容体ＩＩを抑制するために採用され得る遺伝子編集技術としては、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼおよびＣＲＩＳＰＲベースのシステム（例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９）が挙げられるが、これらに限定されない。ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制には商業的に利用可能なキットを利用することもできる。変異は、１つまたは複数のタンパク質ドメインに生じさせることができる。
【0248】
ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、白血球中のＴｈ１極性化Ｔ細胞数を増加させることができる。ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、Ｔ細胞のＴｈ１への分化を促進することができる。ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、白血球におけるＩＬ－１０、ＩＬ－４またはＩＬ－１３の発現を減少させることができる。ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、白血球におけるＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、白血球におけるＩＬ－１２の発現を増加させることができる。ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、白血球中のＴｒｅｇ極性化Ｔ細胞数を減少させることができる。
【0249】
ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、ＴＧＦ－β受容体ＩＩが抑制されていない白血球と比較して、Ｔｈ１細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、ＴＧＦ－β受容体ＩＩが抑制されていない白血球と比較して、Ｔｒｅｇの集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。
【0250】
ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、１つまたは複数の関連するＴｈ１細胞関連マーカーの発現を増加させることができる。ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、ＴＧＦ－β受容体ＩＩが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｈ１細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＣＣＲ１、ＣＤ４、ＣＤ２６、ＣＤ９４、ＣＤ１１９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９５、ＣＤ２１２、ＧＭ－ＣＳＦ、グランザイムＢ、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－２７、ＩＬ－２７Ｒ、リンパ毒素、パーフォリン、ｔ－ｂｅｔ、Ｔｉｍ－３、ＴＮＦ－ａ、ＴＲＡＮＣＥ、ｓＣＤ４０Ｌまたはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。特に、１つまたは複数のＴｈ１関連マーカーには、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１２またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、ＩＦＮ－γの発現を増加させることができる。例えば、ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、ＩＬ－２を増加させることができる。例えば、ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、ＩＬ－１２の発現を増加させることができる。
【0251】
ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、１つまたは複数の関連するＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を減少させることができる。ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、ＴＧＦ－β受容体ＩＩが抑制されていない白血球と比較して、１つまたは複数のＴｒｅｇ細胞関連マーカーの発現を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上減少させることができる。１つまたは複数のＴｒｅｇ関連マーカーには、ＴＧＦβもしくはＩＬ－１０またはそれらの任意の組み合わせが含まれ得る。例えば、ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、ＴＧＦβの発現を減少させることができる。例えば、ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、ＩＬ－１０の発現を減少させることができる。
【0252】
ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、Ｔｒｅｇ Ｔ細胞に対するＴｈ１ Ｔ細胞の比率を、約５倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約３５倍、約４０倍、約４５倍、約５０倍、約５５倍、約６０倍、約６５倍、約７０倍、約７５倍、約８０倍、約８５倍、約９０倍、約９５倍、約１００倍、約１５０倍、約２００倍、約２５０倍、約３００倍、約３５０倍、約４００倍、約４５０倍、約５００倍、約５５０倍、約６００倍、約６５０倍、約７００倍、約７５０倍、約８００倍、約８５０倍、約９００倍、約９５０倍、約１０００倍またはそれ以上増加させることができる。
【0253】
ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、Ｔｈ１ Ｔ細胞に対するＴｒｅｇ Ｔ細胞の比率を、約１分の１、約２分の１、約３分の１、約４分の１、約５分の１、約１０分の１、約１５分の１、約２０分の１、約２５分の１、約３０分の１、約３５分の１、約４０分の１、約４５分の１、約５０分の１、約５５分の１、約６０分の１、約６５分の１、約７０分の１、約７５分の１、約８０分の１、約８５分の１、約９０分の１、約９５分の１、約１００分の１、約１５０分の１、約２００分の１、約２５０分の１、約３００分の１、約３５０分の１、約４００分の１、約４５０分の１、約５００分の１、約５５０分の１、約６００分の１、約６５０分の１、約７００分の１、約７５０分の１、約８００分の１、約８５０分の１、約９００分の１、約９５０分の１、約１０００分の１またはそれ以上減少させることができる。
【0254】
ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を軽減することができる。ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、ＴＧＦ－β受容体ＩＩを抑制しない場合の活性と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の疲弊を約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％またはそれ以上減少させることができる。
【0255】
ＴＧＦ－β受容体ＩＩの抑制により、ＴＧＦ－β受容体ＩＩが抑制されていない白血球と比較して、ＣＤ８＋Ｔ細胞の集団を約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上増加させることができる。
【0256】
ＴＧＦ－β受容体ＩＩの活性は、基底活性と比較して約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはそれ以上抑制（すなわち、阻害）することができる。
【0257】
治療応用
本開示はまた、がんなどの疾患または状態を治療するための方法に関する。本方法は、それを必要とする対象に、リンパ球除去剤および／または免疫刺激剤を投与することと、本明細書に記載の同種リンパ球組成物を投与することとを含む。
本開示はまた、がんなどの疾患または状態を治療するための方法に関する。本方法は、それを必要とする対象に、リンパ球除去剤および／または免疫刺激剤を投与することと、本明細書に記載の同種リンパ球組成物を投与することとを含む。
【0258】
リンパ球除去剤は、細胞還元剤であり得る。例示的な細胞還元剤としては、アルキル化剤、アルキルスルホネート、ニトロソウレア、トリアゼン、代謝拮抗剤、ピリミジンアナログ、プリンアナログ、ビンカアルカロイド、エピオドフィロトキシン、抗生物質、ジルブロマンニトール、デオキシスペルグアリン、ジメチルミレランおよびチオテパが挙げられるが、これらに限定されない。
【0259】
リンパ球除去剤は、化学療法剤または生物学的薬剤であり得る。例示的な化学療法剤および／または生物学的薬剤としては、抗体、Ｂ細胞受容体経路阻害剤、Ｔ細胞受容体阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＩＡＰ阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、放射免疫療法剤、ＤＮＡ損傷剤、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤、プロテインキナーゼ阻害剤、ヘッジホッグ阻害剤、Ｈｓｐ９０阻害剤、テロメラーゼ阻害剤、Ｊａｋｌ／２阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、ＩＲＡＫ阻害剤、ＰＫＣ阻害剤、ＰＡＲＰ阻害剤、ＣＹＰ３ Ａ４阻害剤、ＡＫＴ阻害剤、Ｅｒｋ阻害剤、プロテオソーム阻害剤、アルキル化剤、代謝拮抗剤、植物アルカロイド、テルペノイド、細胞毒素、トポイソメラーゼ阻害剤、ＣＤ７９Ａ阻害剤、ＣＤ７９Ｂ阻害剤、ＣＤ１９阻害剤、Ｌｙｎ阻害剤、Ｓｙｋ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｂｌｎｋ阻害剤、ＰＬＣｙ阻害剤、ＰＫＣＰ阻害剤、ＣＤ２２阻害剤、Ｂｃｌ－２阻害剤、ＩＲＡＫ １／４阻害剤、ＪＡＫ阻害剤（例えば、ルキソリチニブ、バリシチニブ、ＣＹＴ３８７、レスタウリチニブ、パクリチニブ、ＴＧ１０１３４８、ＳＡＲ３０２５０３、トファシチニブ（ゼルヤンツ）、エタネルセプト（エンブレル）、ＧＬＰＧ０６３４、Ｒ２５６）、微小管阻害剤、ＴｏｐｏＩＩ阻害剤、抗ＴＷＥＡＫ抗体、抗ＩＬ１７二重特異性抗体、ＣＫ２阻害剤、未分化リンパ腫キナーゼ（ＡＬＫ）およびｃ－Ｍｅｔ阻害剤、脱メチル化酵素阻害剤（脱メチル化酵素、ＨＤＭ、ＬＳＤＩおよびＫＤＭなど）、脂肪酸合成酵素阻害剤（スピロ環状ピペリジン誘導体など）、グルココルチコステロイド受容体アゴニスト、融合抗ＣＤ１９－細胞傷害性薬剤結合体、代謝拮抗剤、ｐ７０Ｓ６Ｋ阻害剤、免疫調節剤、ＡＫＴ／ＰＫＢ阻害剤、プロカスパーゼ－３活性化剤ＰＡＣ－１、ＢＲＡＦ阻害剤、乳酸脱水素酵素Ａ（ＬＤＨ－Ａ）阻害剤、ＣＣＲ２阻害剤、ＣＸＣＲ４阻害剤、ケモカイン受容体アンタゴニスト、ＤＮＡ二本鎖切断修復阻害剤、ＮＯＲ２０２、ＧＡ－１０１、ＴＬＲ２阻害剤、ムロモナブ－ＣＤ３、リツキシマブ（リツキサン）、カルフィルゾミブ、フルダラビン、シクロホスファミド、ビンクリスチン、クロラムブシル、イホスファミド、ドキソルビシン、メサラジン、サリドマイド、レブリミド、レナリドミド、テムシロリムス、エベロリムス、ホスタマチニブ、パクリタキセル、ドセタキセル、オファツムマブ、デキサメタゾン、ベンダムスチン、ＣＡＬ－１０１、イブリツモマブ、トシツモマブ、ボルテゾミブ、ペントスタチン、エンドスタチン、リトナビル、ケトコナゾール、抗ＶＥＧＦ抗体、ハーセプチン、セツキシマブ、シスプラチン、カルボプラチン、ドセタキセル、エルロチニブ、エトピシド、５－フルオロウラシル、ゲムシタビン、イホスファミド、メシル酸イマチニブ（グリベック）、ゲフィチニブ、エルロチニブ、プロカルバジン、イリノテカン、ロイコボリン、メクロレタミン、メトトレキサート、オキサリプラチン、パクリタキセル、ソラフェニブ、スニチニブ、トポテカン、ビンブラスチン、ＧＡ－１１０１、ダサチニブ、シプレウセル－Ｔ、ジスルフィラム、エピガロカテキン－３－ガレート、サリノスポラミドＡ、ＯＮＸ０９１２、ＣＥＰ－１８７７０、ＭＬＮ９７０８、Ｒ－４０６、レナリノミド、スピロ環状ピペリジン誘導体、キナゾリンカルボキサミドアゼチジン化合物、チオテパ、ＤＷＡ２１１４Ｒ、ＮＫ１２１、ＩＳ ３ ２９５、２５４－Ｓ、アルキルスルホン酸塩（ブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファンなど）、アジリジン類（ベンゾデパ、カルボクオン、メツレデパおよびウレデパなど）、エチレンイミン、メチルメラミン類（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミドおよびトリメチルメラミンなど）、クロルナファジン、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、オキシド塩酸塩、ノボビオシン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード、ニトロソウレア（カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチンなど）、抗生物質（アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アントラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カリチアマイシン、カルビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マーセロマイシン、マイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシンなど）、代謝拮抗薬（メトトレキサートおよび５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）など）、葉酸類似体（デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなど）、プリン類似体（フルダラビン、６－メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなど）、ピリミジン類似体（アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンなど）、アンドロゲン（カルステロン、ドロモスタノロンプロピオネート、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなど）、抗副腎剤（アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなど）、葉酸補充剤（フォリン酸など）、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、アムサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、エダトレキセート、デホスファミド、デメコルシン、ジアジコン、エフルニチン、酢酸エリプチニウム、エトグルシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシ尿素、レンチナン、ロニダミン、ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダモール、ニトラクリン、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ポドフィリン酸、２－エチルヒドラジド、プロカルバジン、多糖類－Ｋ、ラゾキサン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム、テヌアゾン酸、トリアジキオン、２，２’，２’’－トリクロロトリエチルアミン、ウレタン、ビンデシン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール、ピポブロマン、ガクトシン、シトシンアラビノシド、タキソイド、例えばパクリタキセルおよびドセタキセル、６－チオグアニン、メルカプトプリン、メトトレキサート、白金類似体、白金、エトポシド（ＶＰ－１６）、イホスファミド、マイトマイシンＣ、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ナベルビン、ノバントロン、テニポシド、ダウノマイシン、アミノプテリン、ゼローダ、イバンドロネート、ＣＰＴ１ １、トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００、ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）、レチノイン酸、エスペラマイシン、カペシタビンおよびその薬学的に許容される塩、酸または誘導体、抗エストロゲン剤などの抗ホルモン剤（例えばタモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼ阻害４（５）－イミダゾール、４－ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストンおよびトレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ）など）、抗アンドロゲン剤（フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、リュープロリドおよびゴセレリンなど）、ＡＣＫ阻害剤（ＡＶＬ－２６３（Avila Therapeutics/Celgene Corporation）、ＡＶＬ－２９２（Avila Therapeutics/Celgene Corporation）、ＡＶＬ－２９１（Avila Therapeutics/Celgene Corporation）、ＢＭＳ－４８８５１６（Bristol-Myers Squibb）、ＢＭＳ－５０９７４４（Bristol-Myers Squibb）、ＣＧＩ－１７４６（CGI Pharma/Gilead Sciences）、ＣＴＡ－０５６、ＧＤＣ－０８３４（Genentech）、ＨＹ－１１０６６（また、ＣＴＫ４Ｉ７８９１、ＨＭＳ３２６５Ｇ２１、ＨＭＳ３２６５Ｇ２２、ＨＭＳ３２６５Ｈ２１、ＨＭＳ３２６５Ｈ２２、４３９５７４－６１－５、ＡＧ－Ｆ－５４９３０）、ＯＮＯ－４０５９（小野薬品工業株式会社）、ＯＮＯ－ＷＧ３７（小野薬品工業株式会社）、ＰＬＳ－１２３（北京大学）、ＲＮ４８６（Hoffmann-La Roche）、ＨＭ７１２２４（Hanmi Pharmaceutical Company Limited））、またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【0260】
本明細書に開示される組成物および方法は、任意の適切ながんに使用することができ、前記がんとしては以下が挙げられるが、これらに限定されない：膀胱がん、脳がん、乳がん、結腸直腸がん、子宮頸がん、胃腸がん、泌尿生殖器がん、頭頸部がん、肺がん、卵巣がん、前立腺がん、腎がん、皮膚がん、精巣がん、心臓がん（例えば肉腫、例えば、血管肉腫、線維肉腫、横紋筋肉腫、および脂肪肉腫）、粘液腫、横紋筋肉腫、線維腫、脂肪腫、奇形腫、肺がん（例えば、気管支原性がん、例えば、扁平細胞、未分化小細胞がん、未分化大細胞、および腺がん、肺胞および中皮腫）、消化器がん（例えば、食道のがん、例えば、扁平上皮がん、腺がん、平滑筋肉腫およびリンパ腫）、胃のがん（例えば、細胞腫、リンパ腫および平滑筋肉腫）、膵臓のがん（例えば、管状腺がん、インスリノーマ、グルカゴノーマ、ガストリノーマ、カルチノイド腫瘍およびバイポーマ）、小腸のがん（例えば、腺がん、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポジ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫、神経線維腫および線維腫）、大腸のがん（例えば、腺がん、管状腺腫、絨毛腺腫、過誤腫、および平滑筋腫）、泌尿生殖器のがん（例えば、腎臓のがん、例えば腺がん、ウィルム腫瘍（腎芽細胞腫）、リンパ腫および白血病）、膀胱および尿道のがん（例えば、扁平上皮がん、移行細胞がんおよび腺がん）、前立腺のがん（例えば、腺がんおよび肉腫）、精巣のがん（例えば、セミノーマ、奇形腫、胚性がん腫、奇形がん腫、絨毛がん、肉腫、間質細胞がん、線維腫、線維腺腫、腺腫様腫瘍および辺縁腫）、肝臓のがん（例えば、肝細胞腫、例えば、肝細胞がん、胆管がん、肝芽腫、血管肉腫、肝細胞腺腫および血管腫）、骨がん（例えば、骨原性肉腫（骨肉腫）、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性リンパ腫（細網細胞肉腫）、多発性骨髄腫、悪性巨細胞腫脊索腫、骨軟骨腫（骨軟骨外骨腫）、良性軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫、骨様骨腫および巨細胞腫）、神経系がん（例えば、頭蓋骨のがん、例えば、骨腫、血管腫、肉芽腫、黄色腫、および離断性骨炎）、髄膜のがん（例えば髄膜腫、髄膜肉腫および神経膠腫症）、脳のがん（例えばアストロサイトーマ、髄芽腫、神経膠腫、上衣腫、胚芽腫（松果体腫）、多形膠芽腫、乏突起膠腫、神経鞘腫、網膜芽細胞腫および先天性腫瘍）、脊髄のがん（例えば、神経線維腫、髄膜腫、神経膠腫および肉腫）、婦人科がん（例えば子宮のがん、例えば子宮内膜がん、子宮頸部のがん、例えば子宮頸がん、および前腫瘍性子宮頸部異形成、卵巣のがん、例えば、以下を含むを卵巣がん：漿液性嚢胞腺がん、粘液性嚢胞腺がん、未分類のがん、顆粒膜包膜細胞腫瘍、セルトリライディッヒ細胞腫瘍、異形成細胞腫および悪性奇形腫、外陰部のがん、例えば扁平上皮がん、上皮内がん、腺がん、線維肉腫および黒色腫、膣のがん、例えば、明細胞がん、扁平上皮がん、ボトリオイド肉腫および胚性横紋筋肉腫、および卵管のがん、例えば、細胞腫）、血液がん（例えば、血液のがん、例えば、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病、骨髄増殖性疾患、多発性骨髄腫および骨髄異形成症候群、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（悪性リンパ腫）およびワルデンシュトレーム・マクログロブリン血症）、皮膚がん（例えば悪性黒色腫、基底細胞がん、扁平上皮がん、カポジ肉腫、ほくろ形成不全性母斑、脂肪腫、血管腫、皮膚線維腫、ケロイド、乾癬）ならびに副腎がん（例えば神経芽細胞腫を含む）。特定の実施形態において、疾患ががんである場合、それは、例えば、肺がん腫瘍、乳がん腫瘍、前立腺がん腫瘍、脳がん腫瘍または皮膚がん腫瘍を含み得る。
【0261】
対象は固形腫瘍を有し得る。いくつかの実施形態において、対象は、肉腫、がん腫、または神経線維腫を有し得る。いくつかの実施形態において、対象は結腸がんを有し得る。いくつかの実施形態において、対象は肺がんを有し得る。いくつかの実施形態において、対象は卵巣がんを有し得る。いくつかの実施形態において、対象は膵臓がんを有し得る。いくつかの実施形態において、対象は前立腺がんを有し得る。いくつかの実施形態において、対象は、近位胆管がんまたは遠位胆管がんを有し得る。いくつかの実施形態において、対象は乳がんを有し得る。いくつかの実施形態において、対象は、ＨＥＲ２陽性乳がんを有し得る。いくつかの実施形態において、対象は、ＨＥＲ２陰性乳がんを有し得る。いくつかの実施形態において、対象は、固形腫瘍の治療を受けており、本方法は、補助療法として対象を治療するために適用される、すなわち、本方法は、がんの再発を予防するように、がんが完全寛解状態にあるときに対象に適用される。
【0262】
対象は血液がんを有し得る。いくつかの実施形態では、がんは、白血病、リンパ腫、骨髄腫、骨髄異形成症候群または骨髄増殖性新生物である。いくつかの実施形態では、がんは非ホジキンリンパ腫である。いくつかの実施形態では、がんはホジキンリンパ腫である。いくつかの実施形態では、がんはＢ細胞悪性腫瘍である。いくつかの実施形態では、Ｂ細胞悪性腫瘍は、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、活性化Ｂ細胞びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＡＢＣ－ＤＬＢＣＬ）、胚中心性びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＧＣＢ ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＬ）、バーキットリンパ腫、免疫芽球性大細胞型リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、Ｂ細胞性リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、ワルデンシュトレーム・マクログロブリン血症、脾縁縁帯リンパ腫、形質細胞性骨髄腫、形質細胞腫、節外辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、結節辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出液リンパ腫またはリンパ腫様肉芽腫症である。いくつかの実施形態では、がんはＴ細胞悪性腫瘍である。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞悪性腫瘍は、他に特定されない末梢Ｔ細胞リンパ腫（ＰＴＣＬ－ＮＯＳ）、未分化大細胞リンパ腫、血管免疫芽球性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫（ＡＴＬＬ）、芽球性ＮＫ細胞リンパ腫、腸症型Ｔ細胞リンパ腫、血球脾腫性γδＴ細胞リンパ腫、リンパ芽球性リンパ腫、鼻ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫または治療関連Ｔ細胞リンパ腫である。いくつかの実施形態では、対象は多発性骨髄腫を有し得る。
【0263】
対象者は再発または難治性のがんを有し得る。
【0264】
本明細書に開示される方法は、さらに、がんを治療するための１つまたは複数の追加の薬剤、例えば、化学療法剤（例えば、アドリアマイシン、セルビジン、ブレオマイシン、アルケラン、ベルバン、オンコビン、フルオロウラシル、チオテパ、メトトレキサート、ビサントレン、ノアントロン、チグアニン、シタリビン、プロカラビジン）、免疫腫瘍剤（例えば、抗ＰＤ－Ｌ１、抗ＣＴＬＡ４、抗ＰＤ－１、抗ＣＤ４７、抗ＧＤ２）、細胞療法（例えば、ＣＡＲ－Ｔ、Ｔ細胞療法、ナチュラルキラー細胞療法、ガンマデルタＴ細胞療法）および腫瘍溶解性ウイルスなどを投与することを伴い得る。
【0265】
がんを治療するための追加の薬剤の非限定的な例としては、アシビシン、アクラルビシン、アコダゾール塩酸塩、アクロニン、アドゼレシン、アルデスロイキン、アルトレタミン、アンボマイシン、酢酸アメタントロン、アミノグルテチミド、アムサクリン、アナストロゾール、アントラマイシン、アスパラギナーゼ、アスペルリン、アザシチジン、アゼテパ、アゾトマイシン、バチマスタット、ベンゾデパ、ビカルタミド、ビスアントレン塩酸塩、ビスナフィドジメシル酸塩、ビゼレシン、ブレオマイシン硫酸塩、ブレキナルナトリウム、ブロピリミン、ブスルファン、カクチノマイシン、カルステロン、カラセミド、カルベチマー、カルボプラチン、カルムスチン、カルビシン塩酸塩、カルゼレシン、セデフィンゴル、クロラムブシル、シロールマイシン、シスプラチン、クラドリビン、メシル酸クリスナトール、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン塩酸塩、デシタビン、デキソルマプラチン、デザグアニン、メシル酸デザグアニン、ジアジコン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ドキソルビシン塩酸塩、ドロロキシフェン、ドロロキシフェンクエン酸塩、プロピオン酸ドロモスタノロン、デュアゾマイシン、エダトレキセート、エフルニチン塩酸塩、エルサミトルシン、エンロプラチン、エンプロメート、エピプロピジン、エピルビシン塩酸塩、エルブロゾール、エソルビシン塩酸塩、エストラムスチン、エストラムスチンリン酸ナトリウム、エタニダゾール、エトポシド、エトポシドリン酸塩、エトプリン、ファドロゾール塩酸塩、ファザラビン、フェンレチニド、フロクスリジン、フルダラビンリン酸塩、フルオロウラシル、フルロシタビン、ホスキドン、フォストリエシンナトリウム、ゲムシタビン、ゲムシタビン塩酸塩、ヒドロキシウレア、イダルビシン塩酸塩、イホスファミド、イルモホシン、インターロイキンＩＩ（遺伝子組換えインターロイキンＩＩ、ｒＩＬ２を含む）、インターフェロンα－２ａ、インターフェロンα－２ｂ、インターフェロンα－ｎｌ、インターフェロンα－ｎ３、インターフェロンβ－Ｉａ、インターフェロンγ－Ｉｂ、イプロプラチン、イリノテカン塩酸塩、ランレオチド酢酸塩、レトロゾール、リュープロリド酢酸塩、リラオゾール塩酸塩、ロメトレキソールナトリウム、ロムスチン、ロソキサントロン塩酸塩、マソプロコール、メイタンシン、メクロレタミン塩酸塩、酢酸メゲストロール、酢酸メレンゲストロール、メルファラン、メノガリル、メルカプトプリン、メトトレキサート、メトトレキサートナトリウム、メトプリン、メトレデパ、ミチンドミド、マイトカルシン、マイトクロミン、マイトギリン、マイトマルシン、マイトマイシン、マイトスパー、マイトタン、マイトキサントロン塩酸塩、ミコフェノール酸、ノコダゾール、ノガマイシン、オルマプラチン、オキシスラン、パクリタキセル、ペガスパガーゼ、ペリオマイシン、ペンタムスチン、ペプロマイシン硫酸塩、ペルホスファミド、ピボブロマン、ピポスルファン、ピロキサントロン塩酸塩、プリカマイシン、プロメスタン、ポルフィマーナトリウム、ポルフィロマイシン、プレドニムスチン、プロカルバジン塩酸塩、ピューロマイシン、ピューロマイシン塩酸塩、ピラゾフリン、リボプリン、ログレチミド、サフィンゴール、サフィンゴール塩酸塩、セムスチン、シムトラゼン、スパーホサートナトリウム、スパーソマイシン、スピロゲルマニウム塩酸塩、スピロムスチン、スピロプラチン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、スロフェヌール、タリソマイシン、テコガランナトリウム、テガフール、テロキサントロン塩酸塩、テモポルフィン、テニポシド、テロキシロン、テストラクトン、チアミプリン、チオグアニン、チオテパ、チアゾフリン、チラパザミン、トレミフェンクエン酸塩、トレストロンアセタート、トリシリビンリン酸塩、トリメトレキサート、トリメトレキサートグルクロン酸塩、トリプトレリン、ツブロゾール塩酸塩、ウラシルマスタード、ウレデパ、バプレオチド、ベルテポルフィン、ビンブラスチン硫酸塩、ビンクリスチン硫酸塩、ビンデシン、ビンデシン硫酸塩、ビネピジン硫酸塩、ビニルシネート硫酸塩、ビンロウロシン硫酸塩、ビノレルビン酒石酸塩、ビンゾリジン硫酸塩、ビンゾリジン硫酸塩、ボロゾール、ゼニプラチン、ジノスタチン、ゾルビシン塩酸塩が挙げられる。
【0266】
本明細書に開示される方法は、抗腫瘍抗体／薬物結合体の投与をさらに含むことができる。抗腫瘍抗体／薬物結合体としては、リツキシマブ、セツキシマブ、トラスツズマブ、およびペルツズマブ、ブレンツキシマブベドチン、ゲムツズマブオゾガマイシン、トラスツズマブエムタンシン、イノツズマブオゾガマイシン、グレンバツムマブベドチン、ロルボツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシンまたはミラツズマブドキソルビシンが挙げられるが、これらに限定されない。
【0267】
本明細書に開示される方法は、抗ウイルス剤を投与することをさらに含み得る。例示的な抗ウイルス剤としては、アシクロビル、ファムシクロビル、ガンシクロビル、ペンシクロビル、バラシクロビル、バルガンシクロビル、イドクスウリジン、トリフルリジン、ブリブジン、シドホビル、ドコサノール、フォミビルセン、フォスカルネット、トロマンタジン、イミキモド、ポドフィロトキシン、エンテカビル、ラミブジン、テルビブジン、クレブジン、アデホビル、テノホビル、ボセプレビル、テラプレビル、プレコナリル、アルビドール、アマンタジン、リマンタジン、オセルタミビル、ザナミビル、ペラミビル、イノシン、インターフェロン（例えば、インターフェロンα－２ｂ、ペグインターフェロンα－２ａ）、リバビリン／タリバビリン、アバカビル、エムトリシタビン、ラミブジン、ジダノシン、ジドブジン、アプリシタビン、スタミジン、エルブシタビン、ラシビル、アムドキソビル、スタブジン、ザルシタビン、テノホビル、エファビレンツ、ネビラピン、エトラビリン、リルピビリン、ロビリド、デラビルジン、アタザナビル、ホスアンプレナビル、ロピナビル、ダルナビル、ネルフマビル、リトナビル、サキナビル、ティプラナビル、アンプレナビル、インジナビル、エンフビルチド、マラビロク、ビクリビロク、ＰＲＯ１４０、イバリズマブ、ラルテグラビル、エルビテグラビル、ベビリマットおよびビベコンが挙げられるが、これらに限定されない。
【0268】
本明細書に開示される組成物は、典型的には、例えば静脈内注射または静脈内注入により全身投与される。他の投与経路、例えば、経口投与、非経口投与、静脈内投与、関節内投与、腹腔内投与、筋肉内投与、皮下投与、腔内投与、経皮投与、肝内投与、頭蓋内投与、ネブライゼーション／吸入、気管支鏡による設置、または腫瘍内投与が使用され得る。
【0269】
投与量は、主治医および他の臨床的要因によって決定される。一人の患者に対する投与量は、患者の体格、体表面積、年齢、性別、投与する特定の化合物、投与時間と投与経路、治療の種類、全身の健康状態および同時に投与する他の薬物など、多くの要因によって異なる。「有効量」とは、疾患の経過および重症度に影響を及ぼし、そのような病態の軽減または寛解をもたらすのに十分な有効成分の量を指し、既知の方法を用いて決定することができる。
【0270】
Ｃ．調製方法
本開示はまた、本明細書に開示される同種リンパ球組成物を調製する方法に関する。本方法は、レシピエント対象に対して同種であるドナー対象から、または細胞株もしくは臍帯血から末梢血細胞組成物を得ることを含む。末梢血球組成物は、全血製剤またはアフェレーシス製剤であり得る。末梢血球組成物は、例えば静脈穿刺など、当技術分野で既知の手段を用いて得ることができる。末梢血球組成物は、ＣＤ８＋Ｔ細胞とＣＤ４＋Ｔ細胞の両方を含んでいる。末梢血球組成物は、ヒトまたは非ヒト対象から得ることができる。優先的には、末梢血球組成物はヒトから得られる。
本開示はまた、本明細書に開示される同種リンパ球組成物を調製する方法に関する。本方法は、レシピエント対象に対して同種であるドナー対象から、または細胞株もしくは臍帯血から末梢血細胞組成物を得ることを含む。末梢血球組成物は、全血製剤またはアフェレーシス製剤であり得る。末梢血球組成物は、例えば静脈穿刺など、当技術分野で既知の手段を用いて得ることができる。末梢血球組成物は、ＣＤ８＋Ｔ細胞とＣＤ４＋Ｔ細胞の両方を含んでいる。末梢血球組成物は、ヒトまたは非ヒト対象から得ることができる。優先的には、末梢血球組成物はヒトから得られる。
【0271】
ドナー対象からの白血球は、レシピエント対象に対するドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチについてレシピエント対象とミスマッチし得る。あるいは、ドナーは、ドナー対レシピエント（移植片対宿主）方向で、レシピエントに対して少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子ミスマッチを有し得、レシピエントに対して少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子マッチを有し得る。ＨＬＡクラスＩＩ対立遺伝子のミスマッチまたはマッチは、ＨＬＡ－ＤＲＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１またはＨＬＡ－ＤＰＢ１であり得る。
【0272】
ドナーおよびレシピエントがＡＢＯ血液型不適合であり、同種白血球組成物が多数の赤血球を含んでいる場合、同種リンパ球組成物を作製することは、赤血球の数を減少させることをさらに含み得る。本明細書で使用する「ＡＢＯ血液型不適合」とは、レシピエントがドナーに対して主要なＡＢＯ赤血球不適合を有する場合、例えば、レシピエントが血液型Ｏ型であり、ドナーが血液型Ａ、ＢもしくはＡＢ型である場合、レシピエントが血液型Ａ型であり、ドナーが血液型ＢもしくはＡＢ型である場合、またはレシピエントが血液型Ｂ型であり、ドナーが血液型ＡもしくはＡＢ型である場合を指す。赤血球の数は、充填体積で約５０ｍＬ以下、例えば、充填体積で約５０ｍＬ以下、好ましくは充填体積で約３０ｍＬ以下を構成し得、さらに「充填体積」は定義されるべきであり、例えば、リンパ球組成物の遠心分離により充填体積５０ｍＬ以下の赤血球が得られ、リンパ球組成物の測定体積サンプルはまた、スクリーニングされて、充填血球の比例的に代表する体積を提供し得る。
【0273】
次に、単核球を末梢血細胞組成物から、例えばフィコールハイパック勾配分離によって単離する。次に、白血球中のＣＤ８＋細胞数を減少させることができる。白血球中のＣＤ８＋細胞数は、未除去の白血球と比較して、約１分の1、約２分の1、約３分の1、約４分の1、約５分の1、約６分の1、約７分の1、約８分の1、約９分の1、約１０分の1、約１５分の1、約２０分の1、約２５分の1、約３０分の1、約３５分の1、約４０分の1、約４５分の1、約５０分の1、約５５分の1、約６０分の1、約６５分の1、約７０分の1、約７５分の1、約８０分の1、約８５分の1、約９０分の1、約９５分の1、約１００分の1、約２００分の1、約３００分の1、約４００分の1、約５００分の1、約６００分の1、約７００分の1、約８００分の1、約９００分の1、約１，０００分の1またはそれ以上に除去することができる。
【0274】
白血球はさらに、ＢＴＫ、ＩＴＫ、またはＰＩ３Ｋδ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αまたはそれらの組み合わせを抑制するように改変される。理論または機序に拘束されることを望むものではないが、本発明者らは、ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αまたはそれらの組み合わせの抑制が、ナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞が、タイプ１（Ｔｈ１）ＣＤ４＋Ｔ細胞など、抗腫瘍免疫もしくは抗ウイルス免疫のエフェクター細胞を助けるのに有利な状態へ分化することを促進するか、または、ポストナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞が、抗腫瘍免疫もしくは抗ウイルス免疫に最適でないヘルパー活性を有する細胞へ転換されることを防ぐことができると考えている。例えば、Ｔ細胞の一部は、ＣＤ４＋Ｔ細胞のサブタイプ、特にＴｈ１に優先的に分化することができる。
【0275】
本方法は、Ｔ細胞の少なくとも一部がＴｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞へ分化するのを促進することを含み得る。ＢＴＫ、ＩＴＫ、ＰＩ３Ｋδ、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－αまたはそれらの組み合わせの抑制により、Ｔｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞へのＴ細胞の一部の分化は促進され得る。
【0276】
この方法は、白血球をｉｎ ｖｉｔｒｏで培養することを含む。
【0277】
同種組成物を製造する方法は、抗原ペプチドでパルスした抗原提示細胞で組成物中の抗原特異的リンパ球を刺激することをさらに含み得る。
【0278】
同種組成物を製造する方法は、サイトカインまたは抗体などの１つまたは複数の追加薬剤を加えることをさらに含み得る。
【0279】
追加薬剤はサイトカインであり得る。追加可能な例示的なサイトカインとしては、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８、ＩＦＮγ、ＩＬ－２１、ＣＣＤＣ１３４、ＧＭ－ＣＳＦまたはＬＹＧ１が挙げられる。
【0280】
追加薬剤は抗体であり得る。例示的な抗体としては、抗ＩＬ３抗体、抗ＩＬ－４抗体、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２００抗体または抗ＣＤ２８抗体が挙げられる。
【0281】
追加の薬剤は阻害剤であり得る。例示的な阻害剤としては、ＭＥＫ１／２、ＥＲＫ、ｐ３８、Ｃｏｘ－２、Ｐｉ１３ｋ、ｃ５ｌ２、ｓｅｔｄｂ１またはＧｏｔ１の阻害剤が挙げられる。
【0282】
他の例示的な薬剤としては、受容体アゴニスト（例えば、ＲＡＲαもしくはＴＬＲ）、転写因子（例えば、Ｔ－ｂｅｔおよびＴｂｘ２１）、リポアラビノマンナンまたはＢＣＧ細胞体由来のリポマンナンなどが挙げられるが、これらに限定されない
【0283】
Ｄ．定義
本明細書および特許請求の範囲を通して、本明細書の態様に関連する様々な用語が使用されている。このような用語は、特に指示がない限り、当該技術分野における通常の意味を与えられるべきである。他の具体的に定義された用語は、本明細書で提供される定義と一致する方法で解釈されるべきである。本明細書において記載または参照される技術および手順は、一般的によく理解され、当業者によって、従来の方法論、例えば、Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual 4th ed. (2012）Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NYに記載されている、広く利用されている分子クローニング方法論などを使用して一般的に利用されるものである。適宜、商業的に利用可能なキットおよび試薬の使用を伴う手順は、特に断りのない限り、一般に製造者が定義したプロトコルおよび条件に従って実施される。
本明細書および特許請求の範囲を通して、本明細書の態様に関連する様々な用語が使用されている。このような用語は、特に指示がない限り、当該技術分野における通常の意味を与えられるべきである。他の具体的に定義された用語は、本明細書で提供される定義と一致する方法で解釈されるべきである。本明細書において記載または参照される技術および手順は、一般的によく理解され、当業者によって、従来の方法論、例えば、Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual 4th ed. (2012）Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NYに記載されている、広く利用されている分子クローニング方法論などを使用して一般的に利用されるものである。適宜、商業的に利用可能なキットおよび試薬の使用を伴う手順は、特に断りのない限り、一般に製造者が定義したプロトコルおよび条件に従って実施される。
【0284】
本明細書で使用される場合、単数形「１つ（ａ）」、「１つ（ａｎ）」、および「前記（ｔｈｅ）」は、文脈上明確にそうでないことが示されない限り複数形を含む。用語「含む」および「～のような」などは、特に断りのない限り、限定することなく含めることを意図している。
【0285】
特に断らない限り、一連の要素または範囲の前にある「少なくとも」、「未満」および「約」、または同様の用語は、一連の要素または範囲内のすべての要素を指すと理解されるべきである。当業者であれば、本明細書に記載された本発明の特定の実施形態に対する多くの等価物を認識するか、または日常的な実験以上のことを行わずに確認することができるであろう。このような等価物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図される。
【0286】
「がん」という用語は、細胞の集団が制御不能な増殖、不死性、転移可能性、急速な成長および増殖速度、および／または特定の形態学的特徴を特徴とする哺乳類における生理学的状態を指す。多くの場合、がんは腫瘍または腫瘤の形態をとり得るが、対象体内に単独で存在する場合もあり、白血病細胞またはリンパ腫細胞のように独立した細胞として血流中を循環する場合もある。がんという用語には、血液悪性腫瘍、固形腫瘍、肉腫、がん腫ならびに他の固形および非固形腫瘍など、あらゆる種類のがんおよび転移が含まれる。がんの例としては、がん腫、リンパ腫、胚腫、肉腫および白血病が挙げられるが、これらに限定されない。このようながんのより具体的な例としては、扁平上皮がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺腺がん、肺扁平上皮がん、腹膜がん、肝細胞がん、胃腸がん、膵臓がん、膠芽腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、肝腫瘍、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）、骨肉腫、黒色腫、結腸がん、大腸がん、子宮内膜がん（例えば、漿液性）または子宮がん、唾液腺がん、腎臓がん、肝臓がん、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肝がんおよびさまざまなタイプの頭頸部がんが挙げられる。トリプルネガティブ乳がんとは、エストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）およびＨｅｒ２／ｎｅｕの遺伝子の発現が陰性である乳がんを指す。
【0287】
本明細書で使用する場合、「Ｔ細胞の疲弊」という用語は、エフェクター機能（ＩＬ－２、ＴＮＦ－αおよびＩＦＮ－γ産生の喪失、またはＴ細胞の同族抗原を発現する細胞を殺傷できないこと）ならびにＰＤ－１、Ｔ細胞免疫グロブリンドメインおよびムチンドメイン含有タンパク質３（Ｔｉｍ－３）、ＣＴＬＡ－４、リンパ球活性化遺伝子３（ＬＡＧ－３）およびＣＤ１６０などの、機能的なエフェクターＴ細胞またはメモリーＴ細胞とは異なる転写プログラムを持つ抑制性受容体の持続的発現が漸進的に失われることを指す。
【0288】
本明細書において「対象」という用語は、任意の動物、例えば、ヒト、非ヒト霊長類およびげっ歯類などを含むがこれらに限定されない任意の哺乳動物を指す。いくつかの実施形態では、哺乳動物はマウスである。いくつかの実施形態では、哺乳動物はヒトである。
【0289】
本明細書で使用される場合、「治療上有効な量」という用語は、投与条件下で所望の薬理学的または生理学的効果を達成するのに十分な、本明細書に記載の化合物（すなわち、同種リンパ球組成物）の量を指す。例えば、「治療上有効な量」は、疾患または状態（例えば、腫瘍）の徴候または症状を軽減するのに十分な量であり得る。当業者は、対象に何らかの利益が提供される限り、治療効果が完全または治癒的である必要はないことを理解するであろう。医薬組成物の治療上有効な量は、個体の疾患状態、年齢、性別および体重などの因子、ならびに個体において望まれる応答を引き出す医薬組成物の能力に応じて変化し得る。通常の熟練した臨床医は、これらおよび他の考慮事項に基づいて、所望の治療的利益を達成するために投与する適切な量を決定することができる。
【0290】
等価物
当業者には、本明細書に記載された本発明の方法の他の好適な改変および適応が明らかであり、本開示または実施形態の範囲から逸脱することなく、好適な等価物を用いてなされ得ることが容易に明らかであろう。ここまで特定の化合物および方法について詳細に説明したが、以下の例を参照することにより、同じことがより明確に理解されるであろう。ただし、以下の例は説明のために導入されるものであり、限定することを意図したものではない。
当業者には、本明細書に記載された本発明の方法の他の好適な改変および適応が明らかであり、本開示または実施形態の範囲から逸脱することなく、好適な等価物を用いてなされ得ることが容易に明らかであろう。ここまで特定の化合物および方法について詳細に説明したが、以下の例を参照することにより、同じことがより明確に理解されるであろう。ただし、以下の例は説明のために導入されるものであり、限定することを意図したものではない。
【0291】
本発明は、以下の例によってさらに説明されるが、これらはいかなる意味においても限定を意図するものではない。
【実施例】
【0292】
実施例１．Ｅ７発現頭頸部がんモデルマウスにおける、ドナーのＥ７プライミング、ｅｘ ｖｉｖｏ増殖、およびＴｈ１極性化の抗腫瘍効果の検証
【0293】
実験の目的は、ＨＰＶ関連頭頸部がんのマウスモデルにおいて、内因性抗腫瘍エフェクターに対する外因性ＣＤ４＋Ｔ細胞ヘルプの有効性を検証することである。表１に、この研究のための薬剤と治療プロトコルを示す。
【0294】
【表1】
【0295】
ＣＤ８－はＣＤ８＋Ｔ細胞の除去を指す。ＣＤ８＋の除去はＭｉｌｔｅｎｙｉ ＣＤ８除去カラムを用いて行われる。
【0296】
ｅｘ ｖｉｖｏでの増殖には、マウス樹状細胞（ＤＣ）を、マウス汎樹状細胞分離キット（Miltenyi Biotech）を用いて濃縮する。２ｍｍｏｌ／ＬのＬ－グルタミン、１００Ｕ／ｍＬのペニシリン、１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシンおよび１０％の熱不活性化ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０（完全培地）中で、ＤＣをＨＰＶ１６ Ｅ６およびＥ７ペプチド（JPT Peptide Technologies）各１μｇ／ｍＬで２時間パルスする。その後、Ｅ６／Ｅ７パルスＤＣを、マウス脾細胞（混合前に１μｍのＩＴＫ阻害剤で１時間処理）を含むフラスコに、２５Ｕ／ｍＬの組換えマウスＩＬ－２と２０ｎｇ／ｍＬの組換えマウスＧＭＣＳＦを含む完全培地と１：２０の割合で移し、５日間培養する。その後、細胞を洗浄し、再刺激の前に完全培地＋ＩＬ－２およびＧＭ－ＣＳＦにおいて２日間休ませる。
【0297】
ＩＴＫサンプル（すなわちグループ９と１０）は、ペプチドパルス樹状細胞とサイトカインと共に培養する前に、１μＭのＩＴＫ阻害剤にｅｘ ｖｉｖｏで１時間暴露する。
【0298】
ＩＣＢとは免疫チェックポイント阻害を指す。ＩＣＢは、指示された２日目に、ＨＢＳＳ１００ｍＬ中のＲＭＰ１－１４（抗ＰＤ１；ＢｉｏＸＣｅｌｌ）１００ｍｇのＩＰと、ＨＢＳＳ１００ｍＬ中の１０Ｆ．９Ｇ２（抗ＰＤ－Ｌ１；ＢｉｏＸＣｅｌｌ）１００ｍｇのＩＰを用いて実施される。
【0299】
実施例２．ＣＤ４＋Ｔ細胞のＴｈ１表現型を優先するようにデザインされた条件下での、ｅｘ ｖｉｖｏで増殖させたＥ７プライミングドナーＴ細胞の運命と有効性の特徴づけ
我々は以前、シンジェニックな細胞移植モデルにおいて、プライミングされた全脾臓は治癒的であったが、プライミングされたＣＤ８除去脾臓は何の利益ももたらさなかったことを示した。我々は、Ｅ７プライミングＣＤ４＋Ｔ細胞は、輸注後、Ｔｈ２またはＴｒｅｇのような代替（すなわち非Ｔｈ１）ＣＤ４＋表現型に再プログラムされたと仮定する。さらに、我々は、Ｔｈ１条件下でｅｘ ｖｉｖｏでＥ７特異的Ｔ細胞を増殖させ、ｉｎ ｖｉｖｏでのＴｈ１表現型の保持を促進する手段としてＩＴＫを欠失させることで、シンジェニックモデルにおける輸注の抗腫瘍効果が増強されるという仮説を立てた。輸注されたＣＤ４＋Ｔ細胞のうちＴｈ１表現型を促進することで、これらの操作がＣＤ４＋Ｔ細胞のＴｒｅｇへの転換を防ぐという仮説を立てた。
我々は以前、シンジェニックな細胞移植モデルにおいて、プライミングされた全脾臓は治癒的であったが、プライミングされたＣＤ８除去脾臓は何の利益ももたらさなかったことを示した。我々は、Ｅ７プライミングＣＤ４＋Ｔ細胞は、輸注後、Ｔｈ２またはＴｒｅｇのような代替（すなわち非Ｔｈ１）ＣＤ４＋表現型に再プログラムされたと仮定する。さらに、我々は、Ｔｈ１条件下でｅｘ ｖｉｖｏでＥ７特異的Ｔ細胞を増殖させ、ｉｎ ｖｉｖｏでのＴｈ１表現型の保持を促進する手段としてＩＴＫを欠失させることで、シンジェニックモデルにおける輸注の抗腫瘍効果が増強されるという仮説を立てた。輸注されたＣＤ４＋Ｔ細胞のうちＴｈ１表現型を促進することで、これらの操作がＣＤ４＋Ｔ細胞のＴｒｅｇへの転換を防ぐという仮説を立てた。
【0300】
この研究の目的は、ＣＤ４＋Ｔ細胞のＴｈ１表現型を有利にするように設計された条件下でｅｘ ｖｉｖｏで増殖させたＥ７プライミングドナーＴ細胞の運命と有効性を特徴付けることである。表２に、この研究のための薬剤と治療プロトコルを示す。
【0301】
【表2】
【0302】
ＤＬＩ後１、２、３週目に、１グループにつき３匹のマウスを殺処分にする。脾臓細胞を、Ｅ７の重複ペンタデカペプチド（ＪＰＴペプチド）でパルスした樹状細胞で刺激する。Ｅ７特異的なドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞の状態は、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４、ＩＬ－１７Ａまたはｆｏｘｐ３の細胞内染色、およびＣＤ４とＣＤ４５．１の細胞外染色によって特徴付けられ、その後フローサイトメトリーが行われる。
【0303】
プライミングされたＥ７特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞は疲弊していくか、または代替のＣＤ４表現型（例えば、Ｔｈ２、Ｔｈ１７、Ｔｒｅｇ）に変化していくと考えられている。シンジェニックモデルでは、ドナー細胞を追跡することができ、輸注後間隔をおいてマウスの一部を殺処分し、Ｅ７特異的Ｔ細胞の数と機能を検査することができる。
【0304】
ＣＢ６ Ｆ１ドナーとＢ６Ｃ３ Ｆ１レシピエントを用いて同じ実験を繰り返す。
【0305】
実施例３．非移植ドナーリンパ球輸注用免疫原としての異なるＥ７ワクチンの比較
実験の目的は、Ｅ６／Ｅ７特異的Ｔｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞を誘発し、ＣＤ８除去ドナーリンパ球輸注の抗腫瘍効果を増強するための最適なワクチンを決定することである。
実験の目的は、Ｅ６／Ｅ７特異的Ｔｈ１ ＣＤ４＋Ｔ細胞を誘発し、ＣＤ８除去ドナーリンパ球輸注の抗腫瘍効果を増強するための最適なワクチンを決定することである。
【0306】
まず、ヒトパピローマウイルス１６型（ＨＰＶ１６）のＥ６／Ｅ７抗原に対するＣＤ４＋Ｔ細胞反応に対するワクチンの１回、２回、３回の投与の効果を特徴づけする。
【0307】
各グループ９匹のＢＡＬＢ／ｃ ｘ Ｂ６マウスに、ＲＮＡ－ＬＰＸ ｍＲＮＡワクチン、ＰＤＳ０１０１またはＰａｐｉＶａｘ ＤＮＡワクチンのいずれかを毎週１回、２回、または３回接種する。各ワクチン接種の１週間後、各グループ３匹のマウスを殺処分する。脾細胞またはワクチン流入領域リンパ節細胞のいずれかを、ＨＰＶ１６のＥ６の重複ペプチド（ＪＰＴペプチド、ドイツ）またはＥ７の重複ペプチドのいずれかで刺激する。刺激から６時間後、細胞外のＣＤ４とＣＤ８および細胞内のインターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）と腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ－ａ）を染色し、フローサイトメトリーで分析する。表３に本試験の薬剤と治療プロトコルを示す。
【0308】
【表3】
【0309】
次に、ＲＮＡ－ＬＰＸ、ＰＤＳ０１０１またはＰａｐｉＶａｘワクチンのいずれかを接種したドナーを用いて、非移植細胞療法の抗腫瘍効果を評価する。表４に本試験の薬剤と治療プロトコルを示す。
【0310】
【表4】
【0311】
マウスは毎週撮影し、生存期間を追跡する。
【0312】
最適なワクチンが特定されれば、レシピエントへのワクチン接種をドナーへのワクチン接種に追加するかどうかを判断する。表５にこの研究の薬剤と治療プロトコルを示す。
【0313】
【表5】
【0314】
実施例４．ＣＲＩＳＰＲを介したドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞における選択遺伝子の切除
本研究の目的は、ｉｎ ｖｉｖｏでの制御性Ｔ細胞への転換を阻止してＴｈ１経路に極性化し、非移植ドナーリンパ球輸注の抗腫瘍効果を増強する手段として、ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞における選択遺伝子のＣＲＩＳＰＲを介した切除を試験することである。表６にこの研究の薬剤と治療プロトコルを示す。
本研究の目的は、ｉｎ ｖｉｖｏでの制御性Ｔ細胞への転換を阻止してＴｈ１経路に極性化し、非移植ドナーリンパ球輸注の抗腫瘍効果を増強する手段として、ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞における選択遺伝子のＣＲＩＳＰＲを介した切除を試験することである。表６にこの研究の薬剤と治療プロトコルを示す。
【0315】
【表6】
【0316】
グループ２～７のそれぞれについて、ＣＤ３／ＣＤ２８刺激後のホスホ－ＢＴＫまたはホスホ－ＩＴＫタンパク質の量を測定することにより、阻害後のＢＴＫおよびＩＴＫの活性をアッセイする（J. Dubovsky et al. Blood 122: 2539, 2013を参照のこと）。ＩＬ－４対ＩＦＮ－γ産生ＣＤ４＋Ｔ細胞の頻度は、細胞内サイトカイン染色とフローサイトメトリーにより測定する。
【0317】
実施例５．Ｅ７特異的ＣＤ４＋Ｔｈ１細胞を生成および増殖させ、非移植ドナーリンパ球輸注の抗腫瘍効果を増強するために、ｅｘ ｖｉｖｏ再刺激を伴う、または伴わないＥ７に対するｉｎ ｖｉｖｏプライミングを、純粋なｅｘ ｖｉｖｏプライミングおよび再刺激と比較する
この研究の目的は、ドナーへのワクチン接種をプロトコルから排除できるかどうかを判断することである。
この研究の目的は、ドナーへのワクチン接種をプロトコルから排除できるかどうかを判断することである。
【0318】
Ａ．ドナー細胞の調製
ＣＢ６ Ｆ１ドナーマウスまたは脾細胞を、以下の表７に示すように処理する。
ＣＢ６ Ｆ１ドナーマウスまたは脾細胞を、以下の表７に示すように処理する。
【0319】
【表7】
【0320】
ｉｎ ｖｉｖｏでのプライミングまたはブーストは、２５μｇのｐｃＤＮＡ３－ＣＲＴ／Ｅ７を筋肉内に投与する。
【0321】
Ｂ．ｅｘ ｖｉｖｏでのプライミングまたはブースティング
マウスの樹状細胞（ＤＣ）を、マウス汎樹状細胞分離キット（Miltenyi Biotech）を用いて濃縮する。２ｍｍｏｌ／ＬのＬ－グルタミン、１００Ｕ／ｍＬのペニシリン、１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシンおよび１０％の熱不活性化ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０（完全培地）中で、ＤＣを１μｇ／ｍＬのＥ７ペプチド（JPT Peptide Technologies）で２時間パルスする。その後、Ｅ７パルスＤＣをマウス脾細胞（混合前に１μｍのＩＴＫ阻害剤で１時間処理）を含むフラスコに、２５Ｕ／ｍＬの組換えマウスＩＬ－２と２０ｎｇ／ｍＬの組換えマウスＧＭＣＳＦを含む完全培地と１：２０の割合で移し、５日間培養する。その後、細胞は洗浄され、再刺激の前に完全培地＋ＩＬ－２およびＧＭ－ＣＳＦで２日間休ませる。表８に本試験の薬剤と治療プロトコルを示す。
マウスの樹状細胞（ＤＣ）を、マウス汎樹状細胞分離キット（Miltenyi Biotech）を用いて濃縮する。２ｍｍｏｌ／ＬのＬ－グルタミン、１００Ｕ／ｍＬのペニシリン、１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシンおよび１０％の熱不活性化ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０（完全培地）中で、ＤＣを１μｇ／ｍＬのＥ７ペプチド（JPT Peptide Technologies）で２時間パルスする。その後、Ｅ７パルスＤＣをマウス脾細胞（混合前に１μｍのＩＴＫ阻害剤で１時間処理）を含むフラスコに、２５Ｕ／ｍＬの組換えマウスＩＬ－２と２０ｎｇ／ｍＬの組換えマウスＧＭＣＳＦを含む完全培地と１：２０の割合で移し、５日間培養する。その後、細胞は洗浄され、再刺激の前に完全培地＋ＩＬ－２およびＧＭ－ＣＳＦで２日間休ませる。表８に本試験の薬剤と治療プロトコルを示す。
【0322】
【表8】
【0323】
１５日目に、２－７グループの全ドナー細胞中のＥ７特異的Ｔｈ１細胞の頻度を細胞内サイトカイン染色とフローサイトメトリーによりもとめる。マウス脾細胞を、完全培地中、１μｇ／ｍＬのＥ７ペプチドと５μｇ／ｍＬのＢｒｅｆｅｌｄｉｎ Ａを用いて、または用いないで５時間刺激する。その後、細胞を洗浄し、ＣＤ４およびＣＤ８とともにＩＦＮ－γおよびＴＮＦ－αで染色する。
【0324】
実施例６．ＣＤ８除去ドナーリンパ球輸注の抗リンパ腫効果に対する、ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞におけるＩＴＫ欠失の単独またはＢＴＫ欠失との併用効果
本研究の目的は、ドナー系統およびそのＴｈ１（例えば、Ｃ５７ＢＬ／６）またはＴｈ２（例えば、ＢＡＬＢ／ｃ）への偏りが、ＣＤ８除去ＤＬＩの抗腫瘍免疫に影響するかどうか、およびドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞におけるＢＴＫまたはＩＴＫ欠失によるその増強に影響するかどうかを検証することである。表９に、本試験における腫瘍の種類、由来系統およびドナー系統を示す。
本研究の目的は、ドナー系統およびそのＴｈ１（例えば、Ｃ５７ＢＬ／６）またはＴｈ２（例えば、ＢＡＬＢ／ｃ）への偏りが、ＣＤ８除去ＤＬＩの抗腫瘍免疫に影響するかどうか、およびドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞におけるＢＴＫまたはＩＴＫ欠失によるその増強に影響するかどうかを検証することである。表９に、本試験における腫瘍の種類、由来系統およびドナー系統を示す。
【0325】
【表9】
【0326】
実験のデザインは３つの腫瘍型すべてについて同じで、違いは腫瘍の用量とドナーとレシピエントの系統だけである。表１０にこの研究の治療プロトコルを示す。
【0327】
【表10】
【0328】
実施例７．一般的な悪性腫瘍（肺、乳房、卵巣）に対する非移植ドナーリンパ球輸注の有効性
この研究の目的は、非移植ＤＬＩが一般的な悪性腫瘍の治療に組み込まれ、チェックポイント阻害との相乗効果が得られるかどうかを検証することである。肺がん、乳がん、卵巣がんが研究対象となる。
この研究の目的は、非移植ＤＬＩが一般的な悪性腫瘍の治療に組み込まれ、チェックポイント阻害との相乗効果が得られるかどうかを検証することである。肺がん、乳がん、卵巣がんが研究対象となる。
【0329】
Ａ．肺がん
【0330】
表１１と１２は、肺がんでの研究の治療プロトコルを示している。
【0331】
【表11】
【0332】
【表12】
【0333】
Ｂ．乳がん
表１３は、乳がんでの研究の治療プロトコルを示している。
表１３は、乳がんでの研究の治療プロトコルを示している。
【0334】
【表13】
【0335】
Ｃ．卵巣がん
表１４は、乳がんでの研究の治療プロトコルを示している。
表１４は、乳がんでの研究の治療プロトコルを示している。
【0336】
【表14】
【0337】
実施例８．新抗原（neoantigen）を発現する腫瘍に対するＣＤ８除去非移植ＤＬＩの抗腫瘍効力に対するドナー新抗原ワクチン接種の効果
この研究の目的は、腫瘍新抗原に対するワクチン接種を通じて、散発性腫瘍の治療にドナーワクチン戦略を採用できるかどうかを検証することである。
この研究の目的は、腫瘍新抗原に対するワクチン接種を通じて、散発性腫瘍の治療にドナーワクチン戦略を採用できるかどうかを検証することである。
【0338】
この実験では、ＣＤ８除去ＮＥＤＬＩにおけるｎｅｏＡｇ特異的ＣＤ４＋Ｔ細胞の頻度を増加させるための以下の２つの方法を検証する：１）ＣＤ４＋Ｔ細胞ネオエピトープを用いたｉｎ ｖｉｖｏでのワクチン接種（その後のネオペプチド（neopeptide）刺激なし、またはあり）；または２）ＣＤ４＋Ｔ細胞をネオペプチド＋ＤＣで連続刺激することを用いたｉｎ ｖｉｔｒｏでの「プライミング」。実験のデザインを以下の表１５に示す。
【0339】
【表15】
【0340】
Ｃ５７ＢＬ／６（Ｂ６；Ｈ－２ｂ）由来のＢ１６－Ｆ１０黒色腫を、Ｆ１ハイブリッド中で増殖する；免疫原性ＣＤ４＋ネオエピトープは同定されている（参考文献４参照）。１）Ｂ６ ｘ Ｃ３Ｈ（Ｂ６Ｃ３；Ｈ－２ｂｘｋ）Ｆ１またはＭＨＣ－ｈａｐｌｏｉｄｅｎｔｉｃａｌ ＢＡＬＢ／ｃ ｘ Ｂ６（ＣＢ６；Ｈ－２ｂｘｄ）Ｆ１マウスに、キネシンファミリーメンバー１８ｂ遺伝子（Ｋｉｆ１８ｂ）からコードされる変異型ネオエピトープＭ３０（グループ２，６）または対応する野生型ペプチド（グループ１，５）のいずれかをワクチン接種し、体積２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水中に１００μｇの合成ペプチドと５０μｇのポリ（Ｉ：Ｃ）を含むワクチンを、側腹部に注射する。ワクチン接種の有効性と応答細胞の表現型（ＣＤ４対ＣＤ８）は、参考文献５に記載されているように、フローサイトメトリーおよびインターフェロンガンマ（ＩＦＮ＝γ）または腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ－α）の細胞内サイトカイン染色（ＩＣＳ）によって検査する。ワクチン接種の２週間後、安楽死させたドナーマウスの脾臓細胞からＣＤ８＋細胞を除去し、輸注の前日にＣｙで処置したＢ１６－Ｆ１０担持Ｂ６Ｃ３マウスに輸注する。
【0341】
あるいは、免疫化ドナーのＣＤ８除去細胞を、輸注前に５日間Ｍ３０パルスしたドナーＤＣと５日間培養し（グループ３、７）；２）ナイーブＢ６Ｃ３またはＣＢ６ Ｆ１マウスの脾臓細胞を、Ｍ３０パルスした自己樹状細胞＋２０Ｕ／ｍＬのＩＬ－２で週２回刺激する（グループ４、８）。Ｍ３０特異的なＩＦＮγ＋ＣＤ４＋Ｔ細胞の頻度を、ｅｘ ｖｉｖｏ刺激の前後にＩＣＳで測定する。ＮｅｏＡｇ特異的なＣＤ４＋Ｔ細胞は、ＩＦＮγ捕捉アッセイ（Miltenyi Biotec）を用いて精製し、抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８でコーティングしたビーズを用いてさらに増殖させることができる。
【0342】
参考文献
1. Williams R, Lee DW, Elzey BD, Anderson ME, Hostager BS, Lee JH. Preclinical models of HPV+ and HPV- HNSCC in mice: an immune clearance of HPV+ HNSCC. Head & Neck: Journal for the Sciences and Specialties of the Head and Neck. 2009;31(7):911-918.
2. Ahrends T, Babala N, Xiao Y, Yagita H, van Eenennaam H, Borst J. CD27 Agonism Plus PD-1 Blockade Recapitulates CD4+ T-cell Help in Therapeutic Anticancer Vaccination. Cancer Res. 2016;76(10):2921-2931.
3. Minard-Colin V, Xiu Y, Poe JC, et al. Lymphoma depletion during CD20 immunotherapy in mice is mediated by macrophage FcγRI, FcγRIII, and FcγRIV. Blood. 2008;112(4):1205-1213.
4. Castle JC, Kreiter S, Diekmann J, Lower M, Roemer N, Graaf J. Exploiting the mutanome for tumor vaccination. Cancer Res. 2012;72.
5. Kreiter S, Vormehr M, van de Roemer N, et al. Mutant MHC class II epitopes drive therapeutic immune responses to cancer. Nature. 2015;520(7549):692-696.
1. Williams R, Lee DW, Elzey BD, Anderson ME, Hostager BS, Lee JH. Preclinical models of HPV+ and HPV- HNSCC in mice: an immune clearance of HPV+ HNSCC. Head & Neck: Journal for the Sciences and Specialties of the Head and Neck. 2009;31(7):911-918.
2. Ahrends T, Babala N, Xiao Y, Yagita H, van Eenennaam H, Borst J. CD27 Agonism Plus PD-1 Blockade Recapitulates CD4+ T-cell Help in Therapeutic Anticancer Vaccination. Cancer Res. 2016;76(10):2921-2931.
3. Minard-Colin V, Xiu Y, Poe JC, et al. Lymphoma depletion during CD20 immunotherapy in mice is mediated by macrophage FcγRI, FcγRIII, and FcγRIV. Blood. 2008;112(4):1205-1213.
4. Castle JC, Kreiter S, Diekmann J, Lower M, Roemer N, Graaf J. Exploiting the mutanome for tumor vaccination. Cancer Res. 2012;72.
5. Kreiter S, Vormehr M, van de Roemer N, et al. Mutant MHC class II epitopes drive therapeutic immune responses to cancer. Nature. 2015;520(7549):692-696.
【0343】
実施例９．ＣＤ８＋Ｔ細胞の除去
ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ（登録商標）ＣＤ８試薬を用いたＣｌｉｎｉＭＡＣＳシステムを用いてヒト血液製剤から除去する。ＣＤ８＋Ｔ細胞は超常磁性粒子に結合したモノクローナル抗体で標識されて、標識細胞を除去するために強力な永久磁石と強磁性マトリックスを有する分離カラムを組み込んだＣｌｉｎｉＭＡＣＳシステムを通過させることにより血液製剤から除去される。
ＣＤ８＋Ｔ細胞は、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ（登録商標）ＣＤ８試薬を用いたＣｌｉｎｉＭＡＣＳシステムを用いてヒト血液製剤から除去する。ＣＤ８＋Ｔ細胞は超常磁性粒子に結合したモノクローナル抗体で標識されて、標識細胞を除去するために強力な永久磁石と強磁性マトリックスを有する分離カラムを組み込んだＣｌｉｎｉＭＡＣＳシステムを通過させることにより血液製剤から除去される。
【0344】
実施例１０．腫瘍抗原に対してワクチン接種したＭＨＣハプロタイプ一致ドナー由来のＣＤ４＋Ｔ細胞の抗腫瘍効果に対する単一遺伝子欠失の差異効果
以前の実験では、腫瘍抗原（ヒトパピローマウイルス１６型［ＨＰＶ１６］のＥ７）に対する健常ドナーの事前のワクチン接種が、進行したＥ７発現腫瘍を有するＭＨＣハプロタイプ一致レシピエントのシクロホスファミド治療後に輸注されるドナーのＣＤ８除去リンパ球の抗腫瘍効力を増強することが立証された。ワクチン接種されたドナーからのＣＤ４＋Ｔ細胞は、腫瘍を有するレシピエントの生存をわずかに延長させたが、全てのレシピエントは最終的に進行性の腫瘍に屈した。米国、公開番号：２０２２／０１６３９９７を参照。
以前の実験では、腫瘍抗原（ヒトパピローマウイルス１６型［ＨＰＶ１６］のＥ７）に対する健常ドナーの事前のワクチン接種が、進行したＥ７発現腫瘍を有するＭＨＣハプロタイプ一致レシピエントのシクロホスファミド治療後に輸注されるドナーのＣＤ８除去リンパ球の抗腫瘍効力を増強することが立証された。ワクチン接種されたドナーからのＣＤ４＋Ｔ細胞は、腫瘍を有するレシピエントの生存をわずかに延長させたが、全てのレシピエントは最終的に進行性の腫瘍に屈した。米国、公開番号：２０２２／０１６３９９７を参照。
【0345】
成長する腫瘍は、最終的に輸注されたＣＤ４＋Ｔ細胞を極性化させて、抗腫瘍免疫の手助けをする効果がなくなるが、ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化／極性化に関与する主要遺伝子を欠失させることで、ＣＤ４＋Ｔ細胞ヘルプが失われるのを防ぎ、それにより抗腫瘍免疫反応を持続させることができるという仮説がある。
【0346】
この仮説を検証するため、ＢＡＬＢ／ｃ ｘ Ｃ５７ＢＬ／６（ＣＢ６ Ｆ１）ドナーを、ＨＰＶ１６のＥ６およびＥ７抗原をコードするＤＮＡワクチンであるｐＢＩ－１１を２５マイクログラム筋肉内注射し、週３回ワクチン接種した。３回目のワクチン接種の１週間後、ＣＤ４＋Ｔ細胞を免疫磁性ビーズを用いて純度近くまで濃縮し、未処理のままか、Ｃａｓ９核タンパク質をトランスフェクトするか、またはＣａｓ９核タンパク質とガイドＲＮＡをトランスフェクトして、単一遺伝子：インターロイキン２誘導性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）、フォークヘッドボックスｐ３（ＦＯＸＰ３）、トランスフォーミング増殖因子β受容体ＩＩ型（ＴＧＦＢＲ２）、サイトカインシグナル伝達抑制因子－１（ＳＯＣＳ１）もしくはプログラム死分子－１（ＰＤＣＤ１）を不活性化した。細胞を一晩休ませた後、２５００万個のワクチン未接種のＣＤ４＋Ｔ細胞、ワクチン接種を受けたがヌクレオフェクションを受けなかったＣＤ４＋Ｔ細胞、ワクチン接種を受けＣａｓ９ヌクレオフェクションを受けたＣＤ４＋Ｔ細胞、または単一遺伝子欠損ＣＤ４＋Ｔ細胞を、５００万個のシンジェニックな（ＣＢ６ Ｆ１）ＣＤ３除去脾臓細胞と共に、輸注１４日前に５０，０００個のＴＣ－１腫瘍細胞（ＨＰＶ１６のＥ６およびＥ７を発現）を投与し、輸注前日にシクロホスファミド２００ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与したＭＨＣハプロタイプ一致Ｃ５７ＢＬ／６ ｘ Ｃ３Ｈ（Ｂ６Ｃ３ Ｆ１）マウスに共注入した。図１を参照。
【0347】
ＨＰＶ Ｅ７に対するドナーワクチン接種は、シクロホスファミドＣＤ８除去、ＭＨＣハプロタイプ一致ドナーリンパ球輸注の抗腫瘍効果を増強し、ワクチン接種を受けていないドナー細胞のＴＣ１－ｌｕｃｉ担持レシピエントとワクチン接種を受けたドナー細胞のＴＣ１－ｌｕｃｉ担持レシピエントの無腫瘍生存率の差は、腫瘍接種後４２日目までに統計学的有意差に近づいた（ｐ＝０．０９６；図２Ａ）。Ｃａｓ９試薬によるヌクレオフェクションを行ったが、遺伝子ノックアウトを行わなかった場合、ドナーリンパ球輸注レシピエントの無腫瘍生存率に有意な影響はなかった（図２Ｂ；ｐ＝０．９９）。対照的に、ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞におけるＩＴＫ遺伝子のＣＲＩＳＰＲを介した欠失は、ＩＴＫ欠失のないワクチン接種ＣＤ４＋Ｔ細胞のレシピエント（ｐ＝０．１７）またはワクチン未接種ドナーからのＣＤ４＋Ｔ細胞のレシピエント（ｐ～０．０７；図２Ｃ）と比較して、無腫瘍生存率をさらに増大させた。Ｅ６／Ｅ７ワクチン接種ドナーのＣＤ４＋Ｔ細胞における異なる単一遺伝子の欠失は、ＤＬＩ誘発抗腫瘍免疫に異なる影響を及ぼした（図２Ｄ）。興味深いことに、ＰＤ－１またはＴＧＦβＲ２のいずれかの欠失を含むワクチン接種ＣＤ４＋Ｔ細胞の担がんレシピエントは、遺伝的にＣＤ４＋Ｔ細胞が未修飾のレシピエントよりも無腫瘍生存率がわずかに低く、ＩＴＫまたはｆｏｘｐ３のいずれかの欠失を有する細胞のレシピエントよりも全生存率が有意に悪かった（図２Ｄおよび表１６）。
【0348】
【表16】
【0349】
これらの結果は、ＣＤ４＋Ｔ細胞の分化と機能に関与する遺伝子のＣＲＩＳＰＲを介した欠失が、腫瘍抗原に対してワクチン接種した健康なドナーからの細胞療法の抗腫瘍効果に影響を与える可能性があることを示している。－ＩＴＫまたはＦＯＸＰ３の欠失は有益であるように見えるが、ＰＤＣＤ１またはＴＧＦＢＲ２の欠失は、遺伝子的に修飾されていないＣＤ４＋Ｔ細胞と比較して、無腫瘍生存率が低くなる。
【0350】
実施例１１．腫瘍抗原に対してワクチン接種したＭＨＣハプロタイプ一致ドナーからのＣＤ４＋Ｔ細胞の抗腫瘍効果に関する追加の遺伝子欠失
ＢＡＬＢ／ｃ ｘ Ｃ５７ＢＬ／６（ＣＢ６ Ｆ１）ドナーに、ＨＰＶ１６のＥ６およびＥ７抗原をコードするＤＮＡワクチンであるｐＢＩ－１１ ２５マイクログラムの筋肉内注射をすることで週３回ワクチン接種する。３回目のワクチン接種の１週間後、ＣＤ４＋Ｔ細胞を免疫磁気ビーズを用いて純度に近い状態に濃縮し、未処理のままか、Ｃａｓ９核タンパク質をトランスフェクトするか、またはＣａｓ９核タンパク質と単一遺伝子：ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、ホスホイノシチド３キナーゼのデルタアイソフォーム（ＰＩ３Ｋδ）、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、Ｅｚｈ２、ＬＡＧ－３、ＴＮＦ－α、またはそれらの組み合わせを不活性化するためのガイドＲＮＡでトランスフェクトする。細胞を一晩休ませた後、３００万個のワクチン未接種のＣＤ４＋Ｔ細胞、ワクチン接種を受けたがヌクレオフェクションされなかったＣＤ４＋Ｔ細胞、ワクチン接種を受けＣａｓ９ヌクレオフェクション設けたＣＤ４＋Ｔ細胞、または単一遺伝子欠損ＣＤ４＋Ｔ細胞を、５００万個のシンジェニック（ＣＢ６ Ｆ１）なＣＤ３欠失脾臓細胞と共に、輸注の１４日前に５０，０００個のＴＣ－１腫瘍細胞（ＨＰＶ１６のＥ６およびＥ７を発現）を投与し、輸注前日にシクロホスファミド２００ｍｇ／ｋｇを腹腔内に投与したＭＨＣハプロタイプ一致Ｃ５７ＢＬ／６ ｘ Ｃ３Ｈ（Ｂ６Ｃ３ Ｆ１）マウスに共注入する。
ＢＡＬＢ／ｃ ｘ Ｃ５７ＢＬ／６（ＣＢ６ Ｆ１）ドナーに、ＨＰＶ１６のＥ６およびＥ７抗原をコードするＤＮＡワクチンであるｐＢＩ－１１ ２５マイクログラムの筋肉内注射をすることで週３回ワクチン接種する。３回目のワクチン接種の１週間後、ＣＤ４＋Ｔ細胞を免疫磁気ビーズを用いて純度に近い状態に濃縮し、未処理のままか、Ｃａｓ９核タンパク質をトランスフェクトするか、またはＣａｓ９核タンパク質と単一遺伝子：ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、ホスホイノシチド３キナーゼのデルタアイソフォーム（ＰＩ３Ｋδ）、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＯＸ、ＣＤ２５、Ｅｚｈ２、ＬＡＧ－３、ＴＮＦ－α、またはそれらの組み合わせを不活性化するためのガイドＲＮＡでトランスフェクトする。細胞を一晩休ませた後、３００万個のワクチン未接種のＣＤ４＋Ｔ細胞、ワクチン接種を受けたがヌクレオフェクションされなかったＣＤ４＋Ｔ細胞、ワクチン接種を受けＣａｓ９ヌクレオフェクション設けたＣＤ４＋Ｔ細胞、または単一遺伝子欠損ＣＤ４＋Ｔ細胞を、５００万個のシンジェニック（ＣＢ６ Ｆ１）なＣＤ３欠失脾臓細胞と共に、輸注の１４日前に５０，０００個のＴＣ－１腫瘍細胞（ＨＰＶ１６のＥ６およびＥ７を発現）を投与し、輸注前日にシクロホスファミド２００ｍｇ／ｋｇを腹腔内に投与したＭＨＣハプロタイプ一致Ｃ５７ＢＬ／６ ｘ Ｃ３Ｈ（Ｂ６Ｃ３ Ｆ１）マウスに共注入する。
【0351】
実施例１２．腫瘍抗原に対してワクチン接種したＭＨＣハプロタイプ一致ドナー由来のＣＤ４＋Ｔ細胞の抗腫瘍効果における遺伝子欠失の組み合わせ
【0352】
ＢＡＬＢ／ｃ ｘ Ｃ５７ＢＬ／６（ＣＢ６ Ｆ１）ドナーに、ＨＰＶ１６のＥ６およびＥ７抗原をコードするＤＮＡワクチンであるｐＢＩ－１１ ２５マイクログラムの筋肉内注射を用いて週３回ワクチン接種する。３回目のワクチン接種の１週間後、ＣＤ４＋Ｔ細胞を免疫磁気ビーズを用いて純度に近い状態に濃縮し、未処理のままか、Ｃａｓ９核タンパク質をトランスフェクトするか、またはＣａｓ９核タンパク質とガイドＲＮＡをトランスフェクトして、２つ以上の遺伝子の組み合わせ：ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、インターロイキン２誘導性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）、ホスホイノシチド３キナーゼデルタアイソフォーム（ＰＩ３Ｋδ）、ｈｅｌｉｏｓ、ｂｌｉｍｐ１、ＳＯＣＳ１、ＧＡＴＡ３、ＩＬ－１０、ＳＴＡＴ３、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ、ＬＡＧ－３、ＰＤ－１、ＴＮＦ－α、ＴＯＸ、ＣＤ２５、ｆｏｘｐ３、Ｅｚｈ２を不活性化する。細胞を一晩休ませた後、３００万個のワクチン未接種のＣＤ４＋Ｔ細胞、ワクチン接種を受けたがヌクレオフェクションを受けなかったＣＤ４＋Ｔ細胞、ワクチン接種を受けＣａｓ９ヌクレオフェクションを受けたＣＤ４＋Ｔ細胞、または単一遺伝子欠損ＣＤ４＋Ｔ細胞を、５００万個のシンジェニックな（ＣＢ６ Ｆ１）ＣＤ３欠失脾臓細胞と共に、輸注の１４日前に５０，０００個のＴＣ－１腫瘍細胞（ＨＰＶ１６のＥ６およびＥ７を発現）を投与され、輸注前日にシクロホスファミド２００ｍｇ／ｋｇを腹腔内に投与されたＭＨＣハプロタイプ一致Ｃ５７ＢＬ／６ ｘ Ｃ３Ｈ（Ｂ６Ｃ３ Ｆ１）マウスに供注入する。
【0353】
本発明を上記の実施例を参照して説明したが、本発明の精神および範囲内に修正および変形が包含されることは理解されるであろう。従って、本発明は以下の特許請求の範囲によってのみ限定される。
【図1】
【図2-1】
【図2-2】
【国際調査報告】