特表2024-536895新規なベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物またはその薬学的に許容可能な塩
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-10-08
(54)【発明の名称】新規なベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物またはその薬学的に許容可能な塩
(51)【国際特許分類】
C07D 307/80 20060101AFI20241001BHJP
A61K 31/34 20060101ALI20241001BHJP
A61P 1/00 20060101ALI20241001BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20241001BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20241001BHJP
A61P 13/12 20060101ALI20241001BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20241001BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20241001BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20241001BHJP
【ＦＩ】
C07D307/80 CSP
A61K31/34
A61P1/00
A61P1/16
A61P11/00
A61P13/12
A61P43/00 111
A61P43/00 105
A61P35/00
A61P29/00
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024520722
(86)(22)【出願日】2022-10-07
(85)【翻訳文提出日】2024-04-04
(86)【国際出願番号】 KR2022015097
(87)【国際公開番号】W WO2023059121
(87)【国際公開日】2023-04-13
(31)【優先権主張番号】10-2021-0132806
(32)【優先日】2021-10-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．Ｗｉｔｅｐｓｏｌ
２．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】522117820
【氏名又は名称】イノボ テラピュティクス インク
【氏名又は名称原語表記】ＩＮＮＯＶＯ ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ ＩＮＣ．
【住所又は居所原語表記】５０７，３８，Ｍａｐｏ－ｄａｅｒｏ，Ｍａｐｏ－ｇｕ，Ｓｅｏｕｌ ０４１７４，Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ
(74)【代理人】
【識別番号】110000338
【氏名又は名称】弁理士法人 ＨＡＲＡＫＥＮＺＯ ＷＯＲＬＤ ＰＡＴＥＮＴ ＆ ＴＲＡＤＥＭＡＲＫ
(72)【発明者】
【氏名】イム，ドン チョル
(72)【発明者】
【氏名】パク，ジョン ギュ
(72)【発明者】
【氏名】チェ，セ ヒョン
【テーマコード（参考）】
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086AA04
4C086BA06
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZA59
4C086ZA66
4C086ZA75
4C086ZA81
4C086ZB11
4C086ZB21
4C086ZB26
4C086ZC41
(57)【要約】
本発明の特定の化学構造のベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、その薬学的に許容可能な塩を含むＨＳＰ４７抑制用の薬学組成物及びその製造方法を提供する。
本発明によるＨＳＰ４７抑制用の薬学組成物に含まれるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物は、医薬及び薬学分野で線維症、炎症性疾患及び癌の予防または治療などのＨＳＰ４７抑制用途として有用に使用可能である。
本発明によるＨＳＰ４７抑制用の薬学組成物に含まれるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物は、医薬及び薬学分野で線維症、炎症性疾患及び癌の予防または治療などのＨＳＰ４７抑制用途として有用に使用可能である。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物またはその薬学的に許容可能な塩。【化1】
前記式において、
Ｒ１及びＲ２がハロゲンであり、
Ｒ３が水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、
Ｒａ、Ｒｂ及びＲｄが独立的に、水素、Ｃ１－Ｃ３アルキルまたはハロゲンであり、
Ｒｃが水素Ｃ１－Ｃ３アルキル、ハロゲンまたはＣ１－Ｃ３ハロアルキルである。
【請求項2】
前記Ｒ１及びＲ２が、ブロモまたはヨードであることを特徴とする、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項3】
前記Ｒ３が、水素、メチル及びエチルからなる群より選択された置換基であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項4】
前記Ｒａが、水素、メチル、フルオロ及びクロロからなる群より選択された置換基であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項5】
前記Ｒｂが、水素、メチル、エチル及びブロモからなる群より選択された置換基であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項6】
前記Ｒｃが、水素、メチル、エチル、トリフルオロメチル、クロロ及びブロモからなる群より選択された置換基であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項7】
前記Ｒｄが、水素、メチル、エチル、フルオロ、クロロ及びブロモからなる群より選択された置換基であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項8】
前記化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物が、（４－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－５－メチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２，６－ジエチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－７－メチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（７－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（７－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－７－フルオロベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（２－エチル－５－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（５－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（２－エチル－６－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（６－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（６－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（２－エチル－７－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（７－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（７－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
ベンゾフラン－３－イル（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（６－ブロモ－２－メチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（５－ブロモ－２－メチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（６－クロロ－２－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２，５－ジエチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２，７－ジエチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－６－（トリフルオロメチル）ベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－４－メチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－４－フルオロベンゾフラン－３－イル）メタノンからなる群より選択されるいずれか一つの化合物であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項9】
請求項１から８のいずれか一項に記載のベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含む、ＨＳＰ４７抑制用の薬学組成物。
【請求項10】
前記ＨＳＰ４７抑制用が、線維症の予防または治療用であることを特徴とする、請求項９に記載のＨＳＰ４７抑制用の薬学組成物。
【請求項11】
前記線維症が、肝硬化、肺線維化、ケロイド、肥厚性瘢痕及び腎臓線維化（糸球体硬化）からなる群より選択された一つ以上であることを特徴とする、請求項１０に記載のＨＳＰ４７抑制用の薬学組成物。
【請求項12】
前記ＨＳＰ４７抑制用が、癌の予防または治療用であることを特徴とする、請求項９に記載のＨＳＰ４７抑制用の薬学組成物。
【請求項13】
前記癌が、乳がん、大腸がん及び癌関連の線維症からなる群より選択された一つ以上であることを特徴とする、請求項１２に記載のＨＳＰ４７抑制用の薬学組成物。
【請求項14】
前記ＨＳＰ４７抑制用が、炎症性疾患の予防または治療用であることを特徴とする、請求項９に記載のＨＳＰ４７抑制用の薬学組成物。
【請求項15】
前記炎症性疾患が、肝がん、前立腺がん、黒色腫、卵巣がん、神経炎症性疾患、動脈硬化症、臓器移植、皮膚炎、アトピー性皮膚炎、ぜんそく、結膜炎、歯周炎、鼻炎、中耳炎、咽喉頭炎、へんとう炎、肺炎、胃潰瘍、膵炎、胃炎、乾癬、腎症、重症筋無力症、クローン病、炎症性腸疾患、大腸炎、痛風、強直性脊椎炎、ループス、線維筋痛、リウマチ性関節炎、骨関節炎、骨粗しょう症、肝炎、膀胱炎、腎炎、シェーグレン症候群及び多発性硬化症からなる群より選択された一つ以上であることを特徴とする、請求項１４に記載のＨＳＰ４７抑制用の薬学組成物。
【請求項16】
下記化学式Ｉ－１の化合物から求核置換反応によって下記化学式Ｉ－２の化合物を製造する段階と、前記得られた化学式Ｉ－２の化合物を還元させて下記化学式Ｉ－３の化合物を製造する段階と、
前記得られた化学式Ｉ－３の化合物を４－アニソイルクロリドと反応させて下記化学式Ｉ－４の化合物を製造する段階と、
前記得られた化学式Ｉ－４の化合物のメトキシのメチルを除去してヒドロキシ置換基を有する下記化学式Ｉ－５の化合物を製造する段階と、
前記得られた化学式Ｉ－５の化合物から下記化学式Ｉの化合物を得る段階と、を含む、下記化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩の製造方法。
【化2】
前記化学式Ｉ、化学式Ｉ－１、化学式Ｉ－２、化学式Ｉ－３、化学式Ｉ－４及び化学式Ｉ－５において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ及びＲｄは、請求項１で定義したことと同一である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、新規なベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物に関し、より詳しくは、ベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体を含むＨＳＰ４７抑制用の薬学組成物及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【0002】
ＨＳＰ４７（Ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏｔｅｉｎ ４７）タンパク質は、ストレスによって誘発される小胞体に存在するタンパク質であって、コラーゲンの３次元構造の形成と細胞外分泌のためのシャペロンタンパク質として作用する。ＨＳＰ４７は、肝硬化、肺線維化、ケロイド（ｋｅｌｏｉｄ）、肥厚性瘢痕（ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｉｃ ｓｃａｒ）及び糸球体硬化のように多様な組織の線維症で発現が増加すると報告された。文献によれば、ＨＳＰ４７タンパク質を阻害すれば、コラーゲン分泌を起こす細胞におけるコラーゲン分泌が抑制されることが報告された。また、ＨＳＰ４７タンパク質の抑制は、コラーゲンを生成する細胞の細胞死滅を誘導すると報告された（Ｉｔｏ Ｓ ｅｔ．ａｌ．、２０１７）。このような結果からＨＳＰ４７タンパク質の阻害が線維化阻害治療において効果的かつ特異的な治療ターゲットであることが分かる。
【0003】
線維化または線維症（ｆｉｂｒｏｓｉｓ）は、多様な組織の構造及び機能を変化させる損傷または炎症によるコラーゲンの異常蓄積を意味する。線維症の発生位置にかかわらず、線維症の多くの病因学は、正常組織を代替するコラーゲンの過度な蓄積を含む。肝、肺または皮膚における進行性線維化は、現在まで特異的治療剤が存在しない、満たされていない医療ニーズの疾患である。
【0004】
ＨＳＰ４７の機能は、コラーゲン生成のみに限らず、癌細胞である膀胱がん細胞において炎症性メディエータータンパク質の一つであるＭＣＰ－１（Ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ－１）の発現を促進して炎症と新生血管を促進することが報告された（Ｍａ Ｗｅｎｌｏｎｇ ｅｔ．ａｌ．、２０２１）。
【0005】
また、ＨＳＰ４７は、癌細胞においても発現することが報告されており、ＨＳＰ４７の発現量の増加は、コラーゲンの発現有無とかかわらず多くの癌細胞の転移を容易にして、死亡率を高めるということが報告された。なお、遺伝学的な方法でＨＳＰ４７の発現を抑制したとき、癌の進行を抑制するということも報告されている（Ｐａｒｖｅｅｎ Ａ ｅｔ．ａｌ．、２０２０）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0006】
【特許文献1】ヨーロッパ特許公開 ＥＰ２１６５７０５Ａ１（２０１０．０３．２４）
【特許文献2】中国特許登録ＣＮ１０２７１８７３５Ｂ（２０１４．０４．２３）
【非特許文献】
【0007】
【非特許文献1】Ｂｅｎｚｏｆｕｒａｎｓ．ＸＸＸＩ．Ｒｅｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｔｏ ｕｒｉｃｏｓｕｒｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｃｅｒｔａｉｎ ｐ－ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ Ｂｙ：Ｄｅｌｂａｒｒｅ、Ｆｌｏｒｉａｎ；Ｄｅｌｔｏｕｒ、Ｇｕｙ；Ｒｏｓｅ、Ａｌａｉｎ；Ｏｌｉｖｉｅｒ、Ｊ． Ｌ．；、Ｂｉｎｏｎ、Ｆｅｒｎａｎｄ Ｃｈｉｍｉｃａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａ（１９６８）、３（６）、４７０－４｜Ｌａｎｇｕａｇｅ：Ｆｒｅｎｃｈ、Ｄａｔａｂａｓｅ：ＣＡｐｌｕｓ．
【非特許文献2】Ｉｔｏ Ｓ ｅｔ ａｌ．、Ａ ｓｍａｌｌ－ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ａ ｃｏｌｌａｇｅｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｈａｐｅｒｏｎｅ ａｎｄ ｃｏｕｌｄ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｒｅｍｅｄｙ ｆｏｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ．（２０１７）ＪＢＣ．
【非特許文献3】Ｔｈｏｍｓｏｎ ＣＡ ｅｔ ａｌ．、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｍａｌｌ Ｍｏｌｅｃｕｌｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｏｌｌａｇｅｎ－Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｃｈａｐｅｒｏｎｅ Ｈｓｐ４７．（２００５）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．
【非特許文献4】Ｍａ Ｗｅｎｌｏｎｇ ｅｔ．ａｌ．、ＨＳＰ４７ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ ｔｏ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ｂｙ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＣＣＬ２ ｉｎ ｂｌａｄｄｅｒ ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌ． ２０２１ ８５：１１００４４
【非特許文献5】Ｐａｒｖｅｅｎ Ａ ｅｔ ａｌ．、Ｍｕｔａｔｉｏｎａｌ ｈｏｔｓｐｏｔｓ ｏｆ ＨＳＰ４７ ａｎｄ ｉｔｓ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｒｏｌｅ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｂｏｎｅ－ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ． Ｇｅｎｏｍｉｃｓ．２０２０ Ｊａｎ；１１２（１）：５５２－５６６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0008】
本発明が解決しようとする課題は、ＨＳＰ４７とコラーゲンの過度な蓄積とは密接な関係があることを認識し、ＨＳＰ４７タンパク質を抑制することで線維症及び癌などのような疾患に対する治療効能を有するＨＳＰ４７阻害物質を提供することである。
【0009】
また、本発明が解決しようとする課題は、前記ベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物を有効成分として含むＨＳＰ４７関連疾患の予防または治療用の薬学組成物を提供することである。
【0010】
また、本発明が解決しようとする課題は、前記ベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を用いたＨＳＰ４７関連疾患の予防または治療方法を提供することである。
【0011】
また、本発明が解決しようとする課題は、前記ベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩のＨＳＰ４７関連疾患の予防または治療用途を提供することである。
【0012】
また、本発明が解決しようとする課題は、前記ベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩の製造方法を提供することである。
【0013】
一方、本発明が解決しようとする課題は、前述した課題に制限されず、言及していないさらに他の技術的課題は、下記の記載から本発明が属する技術分野における通常の知識を持つ者にとって明確に理解されるであろう。
【課題を解決するための手段】
【0014】
上記の課題を解決するために、本発明の一面によれば、下記化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩が提供される。
【0015】
【化1】
【0016】
前記式において、
Ｒ１及びＲ２はハロゲンであり、
Ｒ３は水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、
Ｒａ、Ｒｂ及びＲｄが独立的に、水素、Ｃ１－Ｃ３アルキルまたはハロゲンであり、
Ｒｃは、水素Ｃ１－Ｃ３アルキル、ハロゲンまたはＣ１－Ｃ３ハロアルキルである。
Ｒ１及びＲ２はハロゲンであり、
Ｒ３は水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、
Ｒａ、Ｒｂ及びＲｄが独立的に、水素、Ｃ１－Ｃ３アルキルまたはハロゲンであり、
Ｒｃは、水素Ｃ１－Ｃ３アルキル、ハロゲンまたはＣ１－Ｃ３ハロアルキルである。
【0017】
本発明の他面によれば、前記化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含むＨＳＰ４７関連疾患の予防または治療用の薬学組成物が提供される。
【0018】
本発明のさらに他面によれば、前記化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を用いたＨＳＰ４７関連疾患の予防または治療方法が提供される。
【0019】
本発明のさらに他面によれば、前記化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩のＨＳＰ４７関連疾患の予防または治療用途が提供される。
【0020】
本発明のさらに他面によれば、下記化学式Ｉ－１の化合物から求核置換反応によって下記化学式Ｉ－２の化合物を製造する段階と、前記得られた化学式Ｉ－２の化合物を還元させて下記化学式Ｉ－３の化合物を製造する段階と、前記得られた化学式Ｉ－３の化合物を４－アニソイルクロリドと反応させて下記化学式Ｉ－４の化合物を製造する段階と、前記得られた化学式Ｉ－４の化合物のメトキシのメチルを除去してヒドロキシ置換基を有する下記化学式Ｉ－５の化合物を製造する段階と、前記得られた化学式Ｉ－５の化合物から下記化学式Ｉの化合物を得る段階と、を含む、下記化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩の製造方法が提供される。
【0021】
【化2】
【0022】
前記化学式Ｉ、化学式Ｉ－１、化学式Ｉ－２、化学式Ｉ－３、化学式Ｉ－４及び化学式Ｉ－５において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ及びＲｄは、前述した定義と同一である。
【発明の効果】
【0023】
本発明によれば、化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物が、肝、肺、腎臓及び皮膚組織などでコラーゲンの蓄積を抑制し、病症状態でコラーゲンを過多に生成する細胞を死滅するなどのＨＳＰ４７抑制効果を示すことで、線維症及び癌の予防または治療などにおけるＨＳＰ４７抑制用途として使用可能であることが明かになった。
【0024】
したがって、本発明のベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物は、医薬及び薬学分野において線維症及び癌の予防または治療などのＨＳＰ４７抑制用途として有用に使用可能である。
【0025】
本発明の効果は上述した効果に制限されず、本発明の詳細な説明または特許請求範囲に記載の発明の構成から推測可能な全ての効果を含むことに理解されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【0026】
【図1】試験物質（化合物９）のＫＥＬ ＦＩＢ皮膚線維芽細胞の線維化抑制結果である。
【発明を実施するための形態】
【0027】
本発明は、下記化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【0028】
【化3】
【0029】
前記式において、
Ｒ１及びＲ２はハロゲンであり、
Ｒ３は水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、
Ｒａ、Ｒｂ及びＲｄが独立的に、水素、Ｃ１－Ｃ３アルキルまたはハロゲンであり、
Ｒｃは、水素Ｃ１－Ｃ３アルキル、ハロゲンまたはＣ１－Ｃ３ハロアルキルである。
Ｒ１及びＲ２はハロゲンであり、
Ｒ３は水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、
Ｒａ、Ｒｂ及びＲｄが独立的に、水素、Ｃ１－Ｃ３アルキルまたはハロゲンであり、
Ｒｃは、水素Ｃ１－Ｃ３アルキル、ハロゲンまたはＣ１－Ｃ３ハロアルキルである。
【0030】
一具現例において、前記Ｒ１及びＲ２は、ブロモまたはヨードであり得る。
【0031】
一具現例において、前記Ｒ３は、水素、メチル及びエチルからなる群より選択された置換基であり得る。
【0032】
一具現例において、前記Ｒａは、水素、メチル、フルオロ及びクロロからなる群より選択された置換基であり得る。
【0033】
一具現例において、前記Ｒｂは、水素、メチル、エチル及びブロモからなる群より選択された置換基であり得る。
【0034】
一具現例において、前記Ｒｃは、水素、メチル、エチル、トリフルオロメチル、クロロ及びブロモからなる群より選択された置換基であり得る。
【0035】
一具現例において、前記Ｒｄは、水素、メチル、エチル、フルオロ、クロロ及びブロモからなる群より選択された置換基であり得る。
【0036】
本発明において、前記化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物の望ましい例として、具体的な例は以下のとおりである。
【0037】
（４－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－５－メチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２，６－ジエチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－７－メチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（７－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（７－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－７－フルオロベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（２－エチル－５－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（５－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（２－エチル－６－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（６－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（６－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（２－エチル－７－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（７－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（７－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
ベンゾフラン－３－イル（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（６－ブロモ－２－メチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（５－ブロモ－２－メチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（６－クロロ－２－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２，５－ジエチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２，７－ジエチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒデ－ロックシペニル）（２－エチル－６－（トリフルオロメチル）ベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－４－メチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－４－フルオロベンゾフラン－３－イル）メタノン。
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－５－メチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２，６－ジエチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－７－メチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（７－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（７－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－７－フルオロベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（２－エチル－５－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（５－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（２－エチル－６－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（６－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（６－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（２－エチル－７－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（７－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（７－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
ベンゾフラン－３－イル（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（６－ブロモ－２－メチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（５－ブロモ－２－メチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン、
（６－クロロ－２－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２，５－ジエチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２，７－ジエチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒデ－ロックシペニル）（２－エチル－６－（トリフルオロメチル）ベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－４－メチルベンゾフラン－３－イル）メタノン、
（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－４－フルオロベンゾフラン－３－イル）メタノン。
【0038】
本明細書において化学式Ｉの化合物を定義することにおいては、特に言及しない限り、以下のような定義が適用される。
【0039】
本明細書で使用された用語「アルキル」は、直鎖状または分枝状の飽和炭化水素であって、Ｃ１－Ｃ１０アルキルが望ましい。例えば、前記アルキルは、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｉｓｏ－プロピル、ｎ－ブチル、ｉｓｏ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、ｉｓｏ－ペンチル、ｎ－ヘキシル、３－メチルヘキシル、２，２－ジメチルペンチル、２，３－ジメチルペンチル、ｎ－ヘプチル、ｎ－オクチル、ｎ－ノニル及びｎ－デシルなどを含むが、これらに限定されない。
【0040】
本明細書で使用された用語「ハロゲン」または「ハロ」は、フッ素／フルオロ（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、ブローム（Ｂｒ）またはヨード（Ｉ）を意味する。
【0041】
本願で使用されたように、「ハロアルキル」は、ハロゲン（例えば、モノ－ハロアルキル、ジ－ハロアルキル及びトリ－ハロアルキル）によって一つ以上の水素原子が代替されたアルキル基を指す。前記基は、非制限的に、クロロメチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、１－クロロ－２－フルオロメチル及び２－フルオロイソブテチルを含む。
【0042】
本発明による前記化学式Ｉで表される化合物は、生体内吸収を増進させるか、または溶解度を増加させるために、プロドラッグ、水和物、溶媒化物及び薬剤学的に許容される塩の形態で使用可能であるため、前記プロドラッグ、水和物、溶媒化物及び薬剤学的に許容される塩も、本発明の範囲に属する。
【0043】
用語「プロドラッグ（ｐｒｏｄｒｕｇ）」は、生体内で親薬物（ｐａｒｅｎｔ ｄｒｕｇ）に変形される物質を意味する。プロドラッグは、いくつかの場合において、親薬物よりも投与しやすいため、しばしば使用される。例えば、それらは口腔投与によって生物学的に利用可能になることに対し、親薬物はそうではないことがある。また、プロドラッグは、親薬物よりも製薬組成物において向上した溶解度を有し得る。例えば、プロドラッグは、本発明による化合物の生体内で加水分解可能なエステル及びその薬学上許容される塩であり得る。プロドラッグのさらに他の例は、ペプチドが活性部位を現すように物質代謝によって変換される酸基に結合している短いペプチド（ポリアミノ酸）であり得る。
【0044】
用語「水和物（ｈｙｄｒａｔｅ）」とは、非共有の分子間力（ｎｏｎ－ｃｏｖａｌｅｎｔ ｉｎｔｅｒｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｆｏｒｃｅ）によって結合した化学量論的（ｓｔｏｉｃｈｉｏｍｅｔｒｉｃ）または非化学量論的な（ｎｏｎ－ｓｔｏｉｃｈｉｏｍｅｔｒｉｃ）量の水を含む本発明の化合物またはその塩を意味する。
【0045】
用語「溶媒化物（ｓｏｌｖａｔｅ）」とは、非共有の分子間力によって結合した化学量論的または非化学量論的な量の溶媒を含んでいる本発明の化合物またはその塩を意味する。それに関わる望ましい溶媒としては、揮発性、非毒性及び／またはヒトへの投与に適した溶媒が挙げられる。
【0046】
用語「異性体（ｉｓｏｍｅｒ）」とは、同じ化学式または分子式を有するが、構造的または立体的に異なる本発明の化合物またはその塩を意味する。このような異性体には、互変異性体（ｔａｕｔｏｍｅｒ）などの構造異性体と、非対称の炭素中心を有するＲまたはＳ異性体、幾何異性体（トランス、シス）などの立体異性体が全て含まれる。これら全ての異性体及びその混合物も、本発明の範囲に含まれる。
【0047】
用語「薬学的に許容可能な塩」とは、化合物が投与される有機体に深刻な刺激を誘発することなく化合物の生物学的活性と物性を損傷させない化合物の塩の形態を意味する。前記薬学的塩は、薬剤学的に許容される陰イオンを含む無毒性酸付加塩を形成する酸、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸などのような無機酸、酒石酸、ギ酸、クエン酸、酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、グルコン酸、安息香酸、乳酸、フマル酸、マレイン酸、サリチル酸などのような有機カルボン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸などのようなスルホン酸などによって形成された酸付加塩が含まれる。例えば、薬剤学的に許容されるカルボキシル酸塩には、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどによって形成された金属塩またはアルカリ土類金属塩、リシン、アルギニン、グアニジンなどのアミノ酸塩、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ－メチル－Ｄ－グルカミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、ジエタノールアミン、コリン及びトリエチルアミンなどのような有機塩などが含まれる。本発明による化学式Ｉの化合物は、通常の方法によってその塩に転換させ得る。
【0048】
また、本発明は、前記化学式Ｉの製造方法を提供し、下記の段階を含む。
【0049】
（１）下記化学式Ｉ－１の化合物から求核置換反応によって下記化学式Ｉ－２の化合物を製造する段階
本段階は下記化学式Ｉ－１の化合物を炭酸カリウムの存在下にクロロアセトンと反応じてベンゾフラン環化合物を合成する反応である。この時に使用される溶媒は、求核置換反応（ｎｕｃｌｅｏｐｈｉｌｉｃ ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎ）に通常使用される溶媒、例えば、アセトン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドなどを使用してもよく、適切な温度（例えば、７０℃）で適切な反応時間（例えば、約６時間）の間に反応させることで化学式Ｉ－２の化合物を得ることができる。
本段階は下記化学式Ｉ－１の化合物を炭酸カリウムの存在下にクロロアセトンと反応じてベンゾフラン環化合物を合成する反応である。この時に使用される溶媒は、求核置換反応（ｎｕｃｌｅｏｐｈｉｌｉｃ ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎ）に通常使用される溶媒、例えば、アセトン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドなどを使用してもよく、適切な温度（例えば、７０℃）で適切な反応時間（例えば、約６時間）の間に反応させることで化学式Ｉ－２の化合物を得ることができる。
【0050】
（２）前記得られた化学式Ｉ－２の化合物を還元させて下記化学式Ｉ－３の化合物を製造する段階
本段階は、前記得られた化学式Ｉ－２の化合物のケトンをヒドラジンと水酸化カリウムを用いて還元する反応である。前記得られた化学式Ｉ－２の化合物をジエチレングリコールに溶解し、ヒドラジンを添加した後、高温で（例えば、約１５０℃）水酸化カリウムを徐々に添加して適切な反応時間（例えば、約１時間）の間に反応させることで化学式Ｉ－３の化合物を得ることができる。
本段階は、前記得られた化学式Ｉ－２の化合物のケトンをヒドラジンと水酸化カリウムを用いて還元する反応である。前記得られた化学式Ｉ－２の化合物をジエチレングリコールに溶解し、ヒドラジンを添加した後、高温で（例えば、約１５０℃）水酸化カリウムを徐々に添加して適切な反応時間（例えば、約１時間）の間に反応させることで化学式Ｉ－３の化合物を得ることができる。
【0051】
（３）前記得られた化学式Ｉ－３の化合物を、４－アニソイルクロリドと反応させて下記化学式Ｉ－４の化合物を製造する段階
本段階は、前記得られた化学式Ｉ－３のベンゾフラン化合物を４－アニソイルクロリド（４－メトキシベンゾイルクロリド）とルイス酸（Ｌｅｗｉｓ ａｃｉｄ）である四塩化スズ（ＳｎＣｌ４）と反応させて下記化学式Ｉ－４の化合物を得るフリーデル・クラフツアシル化反応である。このときに使用する溶媒は、フリーデル・クラフツアシル化反応に通常使用される溶媒、例えば、ジクロロメタン、二硫化炭素を使用し得る。
本段階は、前記得られた化学式Ｉ－３のベンゾフラン化合物を４－アニソイルクロリド（４－メトキシベンゾイルクロリド）とルイス酸（Ｌｅｗｉｓ ａｃｉｄ）である四塩化スズ（ＳｎＣｌ４）と反応させて下記化学式Ｉ－４の化合物を得るフリーデル・クラフツアシル化反応である。このときに使用する溶媒は、フリーデル・クラフツアシル化反応に通常使用される溶媒、例えば、ジクロロメタン、二硫化炭素を使用し得る。
【0052】
（４）前記得られた化学式Ｉ－４の化合物のメトキシのメチルを除去してヒドロキシ置換基を有する下記化学式Ｉ－５の化合物を製造する段階
本段階は、１）ソジウムエタンチオレートを使用して行う脱メチル反応であってもよく、又は、２）脱メチル反応をボロントリブロミドを使用して行い得る。１）のソジウムエタンチオレートを用いる反応は、主にＮ、Ｎ－ジメチルホルムアミド溶媒で行い得るが、これに限定されない。二番目の方法である２）のボロントリブロミドを用いる脱メチル反応は、主にジクロロメタン溶媒で行い得るが、これに限定されない。
本段階は、１）ソジウムエタンチオレートを使用して行う脱メチル反応であってもよく、又は、２）脱メチル反応をボロントリブロミドを使用して行い得る。１）のソジウムエタンチオレートを用いる反応は、主にＮ、Ｎ－ジメチルホルムアミド溶媒で行い得るが、これに限定されない。二番目の方法である２）のボロントリブロミドを用いる脱メチル反応は、主にジクロロメタン溶媒で行い得るが、これに限定されない。
【0053】
（５）前記得られた化学式Ｉ－５の化合物から下記化学式Ｉの化合物を得る段階
本段階は、前記得られた化学式Ｉ－５の化合物に二つのブロモグループまたはヨードグループを導入する反応である。１）ブロモグループを導入する反応は、下記化学式Ｉ－５の化合物に、ブロームまたはＮ－ブロモスクシンイミドを添加して行われる。このときに使用される溶媒は、ブローム化反応に通常使用される溶媒、例えば、ジクロロメタンまたはアセトンを使用して行う。２）ヨードグループを導入する反応は、下記化学式Ｉ－５の化合物を、ヨード、そして硝酸銀と反応させて得られる。このときに使用される溶媒は、エタノールなどのアルコール溶媒が主に使用され得るが、これに限定されない。
本段階は、前記得られた化学式Ｉ－５の化合物に二つのブロモグループまたはヨードグループを導入する反応である。１）ブロモグループを導入する反応は、下記化学式Ｉ－５の化合物に、ブロームまたはＮ－ブロモスクシンイミドを添加して行われる。このときに使用される溶媒は、ブローム化反応に通常使用される溶媒、例えば、ジクロロメタンまたはアセトンを使用して行う。２）ヨードグループを導入する反応は、下記化学式Ｉ－５の化合物を、ヨード、そして硝酸銀と反応させて得られる。このときに使用される溶媒は、エタノールなどのアルコール溶媒が主に使用され得るが、これに限定されない。
【0054】
【化4】
【0055】
前記化学式Ｉ、化学式Ｉ－１、化学式１－２、化学式Ｉ－３、化学式Ｉ－４及び化学式Ｉ－５において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ及びＲｄは、前記で定義したことと同一である。
【0056】
本発明の化学式Ｉの化合物の製造方法によって実施例の反応式１～２４を例示しており、このような反応式１～反応式２４の製造方法が本発明による化学式Ｉの化合物の製造方法を限定することではない。反応式１～２４の製造方法は例示であるだけであり、特定の置換体に応じて通常の技術者によって容易に変形可能であることは自明である。
【0057】
また、本発明は、前記化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含むＨＳＰ４７抑制用の薬学組成物を提供する。
【0058】
また、本発明は、前記化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を患者に治療容量で投与することを含む、ＨＳＰ４７抑制目的の関連疾患の予防または治療方法を提供する。
【0059】
また、本発明は、前記化学式Ｉで表されるベンゾフラニルヒドロキシフェニルメタノン誘導体化合物、またはその薬学的に許容可能な塩をＨＳＰ４７抑制目的として使用する用途を提供する。
【0060】
一具現例において、前記ＨＳＰ４７抑制用は、ＨＳＰ４７を抑制することで達成され得る線維症の予防または治療用であり得る。この場合、前記線維症は、肝硬化、肺線維化、ケロイド（ｋｅｌｏｉｄ）、肥厚性瘢痕（ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｉｃ ｓｃａｒ）及び腎臓線維化（糸球体硬化）からなる群より選択された一つ以上であり得る。
【0061】
一具現例において、前記ＨＳＰ４７抑制用は、ＨＳＰ４７を抑制することで達成可能な癌の予防または治療用であり得る。この場合、前記癌は、乳がん、大腸がん及び癌関連の線維症からなる群より選択された一つ以上であり得る。
【0062】
一具現例において、前記ＨＳＰ４７抑制用は、ＨＳＰ４７を抑制することで達成可能な炎症誘発物質分泌の抑制による炎症性疾患の治療用であり得る。この場合、前記炎症疾患はＭＣＰ－１の増加に関わる自己炎症性疾患と自己免疫疾患であり得る。
【0063】
一具現例において、前記炎症性疾患は、肝がん、前立腺がん、黒色腫、卵巣がん、神経炎症性疾患、動脈硬化症、臓器移植、皮膚炎、アトピー性皮膚炎、ぜんそく、結膜炎、歯周炎、鼻炎、中耳炎、咽喉頭炎、へんとう炎、肺炎、胃潰瘍、膵炎、胃炎、乾癬、腎症、重症筋無力症、クローン病、炎症性腸疾患、大腸炎、痛風、強直性脊椎炎、ループス、線維筋痛（ｆｉｂｒｏｍｙａｌｇｉａ）、リウマチ性関節炎、骨関節炎、骨粗しょう症、肝炎、膀胱炎、腎炎、シェーグレン症候群及び多発性硬化症からなる群より選択された一つ以上であることが望ましいが、これらに限定されない。
【0064】
本発明の前記化合物のＨＳＰ４７活性抑制可否について評価した結果、ＨＳＰ４７に対するＥＣ５０ １５．８９～１０４．５μＭを示すか、または化合物濃度１００μＭにおいてＨＳＰ４７抑制活性を示すことが確認された。組織細胞における線維化抑制可否に関わり、前記化合物は、肺上皮細胞及び肝星細胞の線維化抑制活性を示しており、皮膚線維芽細胞の線維化を抑制することが示された。また、肝線維化誘導の動物モデルで線維化による疾患症状と関わり、前記化合物は、肝線維化のバイオマーカーである血中ヒアルロン酸の数値を減少させており、肝組織中の４－ヒドロキシプロリンの含量を減少させて線維化によるコラーゲン沈着を減少させることが確認された。また、前記化合物は、組織染色学的に肝組織の線維化を抑制して肝線維化の面積を有意に減少させることが示された。
【0065】
本発明の前記化合物のＭＣＰ－１分泌抑制可否について評価した結果、ＭＣＰ－１に対するＥＣ５０ １．３７４～１７．１４μＭを示した。組織細胞におけるＭＣＰ－１分泌抑制可否に関わり、前記化合物は、肝星細胞のＭＣＰ－１の分泌を抑制することが示された。
【0066】
一具現例において、前記薬学組成物は、薬学的に許容可能な希釈剤または担体をさらに含み得る。
【0067】
具体的には、本発明の薬学組成物は、薬剤学的に許容可能な担体を含んでもよく、各々通常の方法によって、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ、エアロゾールなどの経口型剤形、外用剤、坐剤及び滅菌注射溶液の形態に製剤化され得る。前記薬剤学的に許容可能な担体は、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、でん粉、アカシアゴム、アルジネート、ゼラチン、カルシウムホスフェート、カルシウムシリケート、セルロース、メチルセルロース、微晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、水、メチルヒドロキシベンゾート、プロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、マグネシウムステアレート及び鉱物油などを含む。また、充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を含む。経口用の固形製剤は、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などを含み、このような固形製剤は、少なくとも一つ以上の賦形剤、例えば、でん粉、カルシウムカーボネート（ｃａｌｃｉｕｍ ｃａｒｂｏｎａｔｅ）、スクロース（ｓｕｃｒｏｓｅ）またはラクトース（ｌａｃｔｏｓｅ）、ゼラチンなどを含み、マグネシウムステアレート、タルクのような潤滑剤などを含み得る。経口用液状製剤は、懸濁剤、内溶液剤、乳剤、シロップ剤などを含み、水、リキッドパラフィンなどの希釈剤、湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などを含み得る。非経口用製剤は、滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、坐剤を含み、非水性溶剤、懸濁剤としては、プロピレングリコール（ｐｒｏｐｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ）、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物性油、エチルオレートのような注射可能なエステル類などを含む。坐剤の基剤としては、ウイテプソール（ｗｉｔｅｐｓｏｌ）、マクロゴール、ツイン（ｔｗｅｅｎ）６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロゼラチンなどが使用され得る。
【0068】
本発明の薬学組成物に含有される化学式Ｉの化合物の投与量は、患者の状態及び体重、疾病の程度、薬物形態、投与経路及び期間によって変わるが、関連分野における通常の技術者によって適切に選択され得る。例えば、前記化学式Ｉの化合物は１日に０．０００１～１０００ｍｇ／ｋｇ、望ましくは０．０１～１０００ｍｇ／ｋｇの容量で投与可能であり、前記投与は、一日に一回または数回に分けて投与し得る。また、本発明の薬学組成物は、組成物の総重量に対して前記化学式Ｉの化合物を０．００１～９０％の重量百分率で含み得る。
【0069】
本発明の薬学組成物は、レット、マウス、家畜、ヒトなどの哺乳動物に対して多様な経路で、例えば、経口、腹腔、直腸または静脈、筋肉、皮下、子宮内硬膜または脳室内（ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒｏｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ）に注射によって投与され得る。
【0070】
本発明の薬学組成物は、薬剤学的に許容可能な担体または希釈剤を含んでもよく、各々通常の方法によって、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ、エアロゾールなどの経口型剤形、外用剤、坐剤及び滅菌注射溶液の形態に製剤化され得る。前記薬剤学的に許容可能な担体は、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、でん粉、アカシアゴム、アルジネート、ゼラチン、カルシウムホスフェート、カルシウムシリケート、セルロース、メチルセルロース、微晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、水、メチルヒドロキシベンゾート、プロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、マグネシウムステアレート及び鉱物油などを含む。また、充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を含む。経口用の固形製剤は、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などを含み、このような固形製剤は、少なくとも一つ以上の賦形剤、例えば、でん粉、カルシウムカーボネート（ｃａｌｃｉｕｍ ｃａｒｂｏｎａｔｅ）、スクロース（ｓｕｃｒｏｓｅ）またはラクトース（ｌａｃｔｏｓｅ）、ゼラチンなどを含み、マグネシウムステアレート、タルクのような潤滑剤などを含み得る。経口用液状製剤は、懸濁剤、内溶液剤、乳剤、シロップ剤などを含み、水、リキッドパラフィンなどの希釈剤、湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などを含み得る。非経口用製剤は、滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、坐剤を含み、非水性溶剤、懸濁剤としては、プロピレングリコール（ｐｒｏｐｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ）、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物性油、エチルオレートのような注射可能なエステル類などを含む。坐剤の基剤としては、ウイテプソール（ｗｉｔｅｐｓｏｌ）、マクロゴ－ル、ツイン（ｔｗｅｅｎ）６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロゼラチンなどが使用され得る。
【0071】
本発明の薬学的組成物は、家畜、ヒトなどの哺乳動物に対して多様な経路で、例えば、経口、皮膚、皮下、筋肉、静脈内、腹腔内、子宮内硬膜または脳室内注射、局所的投与によって投与され得る。したがって、本発明の組成物は、錠剤、カプセル剤、水溶液剤または懸濁剤などの多様な形態で製剤化し得る。経口用精製の場合、ラクトース、トウモロコシでん粉などの担体及びマグネシウムステアレートのような潤滑剤が通常に添加され得る。経口投与用カプセル剤の場合、ラクトース及び／または乾燥トウモコロシでん粉が希釈剤として使用され得る。経口用の水性懸濁剤が必要な場合、活性成分を乳化剤及び／または懸濁化剤と結合させ得る。必要な場合、特定の甘味剤及び／または香味剤を添加し得る。筋肉内、腹腔内、皮下及び静脈内投与の場合、活性成分の滅菌溶液が通常製造され、溶液のｐＨを適切に調節して緩衝させる必要がある。静脈内投与の場合、溶質の総濃度は、製剤に等張性が付与されるように調節される必要がある。本発明による組成物は、ｐＨが７．４である塩水のような薬剤学的に許容される担体を含む水溶液剤の形態であり得る。前記溶液は、局所注射によって患者の筋肉内血流に導入され得る。
【0072】
本発明の薬学的組成物に含有される有効成分の投与量は、患者の状態及び体重、疾病の程度、有効成分の形態、投与経路及び期間によって変わり、患者に応じて適切に調節され得る。例えば、前記有効成分は、１日に０．０００１～１０００ｍｇ／ｋｇ、望ましくは０．０１～１００ｍｇ／ｋｇの容量で投与可能であり、前記投与は一日に一回または数回に分けて投与し得る。また、本発明の薬学的組成物は、組成物の総重量に対して前記有効成分を０．００１～９０％の重量百分率で含み得る。
【0073】
以下、本発明の実施例を挙げてより詳しく説明する。しかし、下記実施例は、本発明を例示するためのものであり、本発明の範囲がこれに制限されることではない。
【0074】
実施例１．（４－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン［（４－ｃｈｌｏｒｏ－２－ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0075】
【化5】
【0076】
段階Ａ：２－ヒドロキシ－４－クロロベンズアルデヒド２ｇと、カリウムカーボネート１．５当量と、無水アセトン２０ｍＬと、を含む反応フラスコに、１．２当量のクロロアセトンを１０分間滴加した後、反応溶液を３時間の間に還流撹拌した。反応完結後、固体をろ過して除去した後、ろ過された液体を無水硫酸マグネシウムで乾燥してろ過し、濃縮した後、カラム・クロマトグラフィーで分離することで２－アセチルベンゾフラン１－１（１．９９ｇ、７８％収率）を得た。
【0077】
段階Ｂ：化合物１－１（１．９９ｇ、０．０１１ｍｏｌ）に６当量の８０％ヒドラジン（一水和物）とジエチレングリコール４８ｍＬを加え、１５０℃で３０分間撹拌した後、３当量のカリウムヒドロキシドを１０分間徐々に滴加した。反応溶液を３時間の間に還流撹拌してから常温で冷却し、水１００ｍＬで希釈した後、エチルアセテート（１２０ｍＬ×３）で抽出した。エチルアセテート層を塩水１００ｍＬで洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥してからろ過し、ろ過液を濃縮した後、カラム・クロマトグラフィーで分離することで目的とする化合物１－２（１．３ｇ、７２％）を得た。
【0078】
段階Ｃ：化合物１－２（１．３ｇ、０．００８１ｍｏｌ）を無水ＣＳ２（２０ｖｏｌ）で溶かして０℃に冷却した後、４－メトキシベンゾイルクロリド１．５当量を添加して、５分間撹拌した。その反応溶液にｔｉｎ（ＩＶ）クロリド１．５当量を１０分間徐々に滴加した後、０℃で２時間撹拌した後、常温で２２時間撹拌した。反応完結後、反応液を水２００ｍＬで希釈し、ジクロロメタン（９０ｍＬ×２）で抽出した。抽出された有機層を、１Ｎの塩酸溶液５０ｍＬと、１Ｎの水酸化ナトリウム水溶液５０ｍＬと、塩水５０ｍＬと、を用いて順次に洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥してろ過した後、ろ過液を濃縮してカラム・クロマトグラフィーで分離することで目的とする化合物１－３）（１．９８ｇ、８３％）を得た。
【0079】
段階Ｄ：化合物１－３（１．９８ｇ、０．００６７ｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶かした後、２．５当量のソジウムエタンチオレート（ＮａＳＥｔ）を常温で添加し、反応溶液を１００℃で２時間撹拌した。反応完結後、塩化アンモニウム水溶液１００ｍＬを徐々に添加して希釈した後、ジクロロメタン（１００ｍＬ×２）で抽出した後、抽出液を塩水８０ｍＬで洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥してろ過した後に濃縮し、カラム・クロマトグラフィーで分離することで目的とする化合物１－４（１．６８ｇ、８９％）を得た。
【0080】
段階Ｅ：化合物１－４（１００ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を氷酢酸６ｍＬと水２ｍＬに溶かした後、氷酢酸１．５ｍＬと水０．５ｍＬで希釈した２．２当量のブロムを１５分間滴加した後、反応液を２０時間常温で撹拌した。反応完結後、反応液を濃縮し、カラム・クロマトグラフィーで分離することで目的とする化合物（１．８６ｍｇ、５５％収率）を得た。
【0081】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ７．９０（ｓ，３Ｈ）、７．６５（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．４０－７．２６（ｍ，２Ｈ）、２．７５－２．５８（ｍ，２Ｈ）、１．１７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【0082】
ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：Ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ［Ｍ＋Ｈ］＋：４５６．８８；ｆｏｕｎｄ：４５６．９。
【0083】
実施例２．（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－５－メチルベンゾフラン－３－イル）メタノン［（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）（２－ｅｔｈｙｌ－５－ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0084】
【化6】
【0085】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例１の段階Ａ～Ｅと類似の方法で化合物２を得た。
【0086】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ ＭＨｚ） δ ７．８０（ｓ，２Ｈ）、７．４５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．３３－６．９９（ｍ，２Ｈ）、２．７１（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）、２．３０（ｓ，３Ｈ）、１．２６－１．０９（ｍ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：Ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ［Ｍ＋Ｈ］＋：４３６．９３；ｆｏｕｎｄ：４３７．１。
ＭＳ（ＥＳＩ，ｍ／ｚ）：Ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ［Ｍ＋Ｈ］＋：４３６．９３；ｆｏｕｎｄ：４３７．１。
【0087】
実施例３．（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２，６－ジエチルベンゾフラン－３－イル）メタノン［（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）（２，６－ｄｉｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0088】
【化7】
【0089】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例１の段階Ａ～Ｅと類似の方法で化合物３を得た。
【0090】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ７．８８（ｓ，２Ｈ）、７．４６（ｓ，１Ｈ）、７．２６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．１０（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．７８－２．７２（ｍ，２Ｈ）、２．６８（ｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、１．２３－１．１７（ｍ，６Ｈ）。
【0091】
実施例４．（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－７－メチルベンゾフラン－３－イル）メタノン［（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）（２－ｅｔｈｙｌ－７－ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0092】
【化8】
【0093】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例１の段階Ａ～Ｅと類似の方法で化合物４を得た。
【0094】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ）７．９７（ｓ，２Ｈ）、７．１９（ｄｄ，Ｊ＝７．４，１．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．１４－７．０５（ｍ，２Ｈ）、６．３０（ｓ，１Ｈ）、２．９１（ｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．５４（ｓ，３Ｈ）、１．３６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【0095】
実施例５．（７－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン［（７－ｃｈｌｏｒｏ－２－ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0096】
【化9】
【0097】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例１の段階Ａ－Ｅと類似の方法で化合物５を得た。
【0098】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ７．９２（ｓ，２Ｈ）、 ７．４２（ｄｄ，Ｊ＝７．８，０．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．２５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．７８（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、１．２３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【0099】
実施例６．（７－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン［（７－ｂｒｏｍｏ－２－ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0100】
【化10】
【0101】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例１の段階Ａ－Ｅと類似の方法で化合物６を得た。
【0102】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ）７．９０（ｓ，２Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．５８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４７（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．７３（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ， ２Ｈ）、１．２１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【0103】
実施例７．（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－７－フルオロベンゾフラン－３－イル）メタノン［（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）（２－ｅｔｈｙｌ－７－ｆｌｕｏｒｏｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ） ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0104】
【化11】
【0105】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例１の段階Ａ～Ｅと類似の方法で化合物７を得た。
【0106】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ７．９３（ｓ，２Ｈ）、７．５９（ｄｄ，Ｊ＝７．０，６．２Ｈｚ，２Ｈ）、７．５３－７．４７（ｍ， １Ｈ），２．７７（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、１．２２（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ， ３Ｈ）。
【0107】
実施例８．（２－エチル－５－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン ［（２－ｅｔｈｙｌ－５－ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（４－ｈｙｄｒｏｘｙ－３，５－ｄｉｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0108】
【化12】
【0109】
段階Ａ～段階Ｄ：実施例１の段階Ａ～Ｄと類似の方法で化合物８－４を得た。
【0110】
段階Ｅ：化合物８－４（１００ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）をメタノール３ｍＬに溶かし、硝酸銀２．５当量を添加した後、ヨード２．５当量を添加して常温で２０時間撹拌した。反応完結後、固体をろ過し、ろ過液を濃縮してカラム・クロマトグラフィーで分離することで目的とする化合物８（１２１ｍｇ，６４％収率）を得た。
【0111】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ８．０７（ｓ，２Ｈ）、７．４８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．２６－７．１９（ｍ，１Ｈ）、７．１２（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．７１（ｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ， ２Ｈ），１．２１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【0112】
実施例９．（５－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン ［（５－ｂｒｏｍｏ－２－ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（４－ｈｙｄｒｏｘｙ－３，５－ｄｉｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0113】
【化13】
【0114】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例８の段階Ａ－Ｅと類似の方法で化合物９を得た。
【0115】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ８．１５（ｓ，２Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．４３－７．３５（ｍ，２Ｈ）、２．８３（ｄｔ，Ｊ＝７．７，６．６Ｈｚ，２Ｈ）、１．３４（ｔｄ，Ｊ＝７．５，１．９Ｈｚ，３Ｈ）。
【0116】
実施例１０．（２－エチル－６－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン［（２－ｅｔｈｙｌ－６－ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（４－ｈｙｄｒｏｘｙ－３，５－ｄｉｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0117】
【化14】
【0118】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例８の段階Ａ～Ｅと類似の方法で化合物１０を得た。
【0119】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ。
Ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ［Ｍ＋Ｈ］＋：５３２．９；ｆｏｕｎｄ：５３２．９。
Ｅｘａｃｔ ｍａｓｓ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ［Ｍ＋Ｈ］＋：５３２．９；ｆｏｕｎｄ：５３２．９。
【0120】
実施例１１．（６－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン［（６－ｂｒｏｍｏ－２－ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（４－ｈｙｄｒｏｘｙ－３，５－ｄｉｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0121】
【化15】
【0122】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例８の段階Ａ～Ｅと類似の方法で化合物１１を得た。
【0123】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ８．０７（ｓ，２Ｈ）、７．９５（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．４３（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３４（ｄ，J＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．７３（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、１．２２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【0124】
実施例１２．（６－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン［（６－ｃｈｌｏｒｏ－２－ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ） ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0125】
【化16】
【0126】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例８の段階Ａ～Ｅと類似の方法で化合物１２を得た。
【0127】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ８．１５（ｓ，２Ｈ）、７．５０（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．２２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．８６（ｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、１．３４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【0128】
実施例１３．（２－エチル－７－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン ［（２－ｅｔｈｙｌ－７－ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（４－ｈｙｄｒｏｘｙ－３，５－ｄｉｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0129】
【化17】
【0130】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例８の段階Ａ～Ｅと類似の方法で化合物１３を得た。
【0131】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ８．１７（ｓ，２Ｈ）、７．２１（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．１５－７．０５（ｍ，２Ｈ）、６．１６（ｓ，１Ｈ），２．９４－２．８５（ｍ，２Ｈ）、２．５４（ｓ，３Ｈ）、１．３６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【0132】
実施例１４．（７－クロロ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン［（７－ｃｈｌｏｒｏ－２－ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（４－ｈｙｄｒｏｘｙ－３，５－ｄｉｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0133】
【化18】
【0134】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例８の段階Ａ～Ｅと類似の方法で化合物１４を得た。
【0135】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ８．１５（ｓ，２Ｈ）、７．７７－６．９９（ｍ，３Ｈ）、３．２１－２．６９（ｍ，２Ｈ）、０．８５（ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，３Ｈ）。
実施例１５．（７－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン［（７－ｂｒｏｍｏ－２－ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（４－ｈｙｄｒｏｘｙ－３，５－ｄｉｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
実施例１５．（７－ブロモ－２－エチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン［（７－ｂｒｏｍｏ－２－ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（４－ｈｙｄｒｏｘｙ－３，５－ｄｉｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0136】
【化19】
【0137】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例８の段階Ａ～Ｅと類似の方法で化合物１５を得た。
【0138】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ８．１５（ｓ，２Ｈ）、７．４５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．４４－７．３１（ｍ，１Ｈ）、７．１７－７．０４（ｍ，１Ｈ）、３．１５－２．７９（ｍ，２Ｈ），１．６０（ｍ， ３Ｈ）。
【0139】
実施例１６．ベンゾフラン－３－イル（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン［ｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0140】
【化20】
【0141】
段階Ｃ～段階Ｅ：実施例８の段階Ｃ～Ｅと類似の方法で化合物１６を得た。
【0142】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ８．１５（ｓ，２Ｈ）、７．４５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．４４－７．３１（ｍ，１Ｈ）、７．１７－７．０４（ｍ，１Ｈ）、３．１５－２．７９（ｍ，２Ｈ）、１．６０（ｍ， ３Ｈ）。
【0143】
実施例１７．（６－ブロモ－２－メチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン［（６－ｂｒｏｍｏ－２－ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0144】
【化21】
【0145】
段階Ｆ：４－ブロモサリチルアルデヒド（５ｇ，３２ｍｍｏｌ）を無水アセトニトリル５０ｍＬに溶かし、１．５当量の炭酸カリウムを添加した後、１．５当量のメチル２－ブロモプロピオン酸を１０分間滴加した。反応溶液を常温で６時間撹拌して生成された固体をろ過し、ろ過液を濃縮した後、リチウムヒドロキシド水溶液（１Ｎ，３０ｍＬ）とテトラヒドフラン３０ｍＬを添加して５時間還流撹拌した。反応完結後、１Ｎの塩酸水溶液で中和してエチルアセテート（３×１５０ｍＬ）で抽出した。抽出液を水１００ｍＬで洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥してろ過し、ろ過液を濃縮して化合物１７－１（３．５０ｇ，４８％収率）を得た。
【0146】
段階Ｇ：化合物１７－１（３．５ｇ，１５．３ｍｍｏｌ）に、アセト酸ナトリウム５当量と、無水酢酸４０ｍＬと、氷酢酸２０ｍＬと、を添加して１５０℃で６時間撹拌した。反応完結後、常温に冷却して水１５０ｍＬで希釈し、エチルアセテート（３×１２０ｍＬ）で抽出した。抽出液を炭酸水素ナトリウム水溶液１００ｍＬ、塩水１００ｍＬで順次に洗浄した後、有機無水硫酸で乾燥してろ過し、ろ過液を濃縮してカラム・クロマトグラフィーで分離することで目的とする化合物１７－２（１．７７ｇ，５５％収率）を得た。
【0147】
段階Ｈ：化合物１７－２（１．７７ｇ，８．４４ｍｏｌ）を無水１，４－ジオキサン１８ｍＬに溶かし、４Ｍの塩酸１，４－ジオキサン溶液５当量を添加して１６時間還流撹拌した。反応完結後、反応液を水２００ｍＬに徐々に添加した後、エチルアセテート（１００ｍＬ×３）で抽出した。抽出液を炭酸水素ナトリウム水溶液１５０ｍＬで洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥してろ過し、ろ過液を濃縮してカラム・クロマトグラフィーで分離することで目的とする化合物１７－３（１．１６ｇ，８２％収率）を得た。
【0148】
段階Ｉ：化合物１７－３（１．１６ｇ，６．９ｍｍｏｌ）をメタノール１８ｍＬに溶かして０℃に冷却し、ソジウムボロハイドライド３当量を１５分間徐々に滴加した。反応溶液を常温で２時間撹拌し、冷水２０ｍＬを添加した後、ジクロロメタン（１００ｍＬ×２）で抽出した。抽出液を水５０ｍＬ、塩水５０ｍＬで順次に洗浄し、有機無水硫酸ナトリウムで乾燥してろ過した後、ろ過液を濃縮してカラム・クロマトグラフィーで分離して目的とする化合物１７－４（０．９１８ｇ）を得た。
【0149】
段階Ｊ：化合物１７－４（０．９１８ｇ）を１，４－ジオキサン１０ｍＬに溶かした後、塩酸１，４－ジオキサン溶液５当量を添加して６時間還流撹拌した。反応完結後、常温に冷却し、水３０ｍＬを添加して希釈してからエチルアセテート（３×１２０ｍＬ）で抽出した。抽出液を炭酸水素ナトリウム水溶液２０ｍＬで洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥してろ過した後、ろ過液を濃縮してカラム・クロマトグラフィーで分離することで目的とする化合物１７－５（０．６４１ｇ，６１％２段階の総収率）を得た。
【0150】
段階Ｋ：化合物１７－５（０．６４１ｇ，４．２ｍｍｏｌ）を無水ＣＳ２ １０ｍＬに溶かし、０℃に冷却した後、４－メトキシベンゾイルクロリド１．５当量を添加し、塩化スズ（ＩＶ）［ｔｉｎ（ＩＶ）ｃｈｌｏｒｉｄｅ］１．５当量を５分間滴加した。反応溶液を２４時間常温で撹拌した後、冷水２００ｍＬで希釈した後、できた固体をろ過して、水層をジクロロメタン（９０ｍＬ×２）で抽出した。抽出液を１モルの塩酸水溶液２０ｍＬと、１モルの水酸化ナトリウム水溶液２０ｍＬと、塩水３０ｍＬと、で順次に洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥してろ過した後、ろ過液を濃縮することでカラム・クロマトグラフィーで分離して目的とする化合物１７－６（０．９８６ｇ、７８％収率）を得た。
【0151】
段階Ｌ：化合物１７－６（０．９８６ｇ，３．２ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン１０ｍＬに溶かして－７８℃に冷却した後、ボロントリブロミド（１モルジクロロメタン溶液，５当量）を添加した。反応溶液を常温で２０時間撹拌した後、冷水１０ｍＬを徐々に添加し、ジクロロメタン（３０ｍＬ×２）で抽出した。抽出液を水３０ｍＬ、塩水３０ｍＬで順次に洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥してろ過した後、ろ過液を濃縮してカラム・クロマトグラフィーで分離することで目的とする化合物１７－７（０．８５６ｇ，９１％収率）を得た。
【0152】
段階Ｍ：化合物１７－７を用いて実施例２５の段階Ｅと類似の方法で目的とする化合物１７を得た。
【0153】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ）７．９４（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．８９（ｓ，２Ｈ）、７．４３（ｄｄ，Ｊ＝８．５，１．７Ｈｚ， １Ｈ）、７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．４４（ｓ，３Ｈ）。
【0154】
実施例１８．（５－ブロモ－２－メチルベンゾフラン－３－イル）（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）メタノン［（５－ｂｒｏｍｏ－２－ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0155】
【化22】
【0156】
段階Ｆ～段階Ｍ：実施例１７の段階Ｆ～Ｍと類似の方法で化合物１８を得た。
【0157】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ）７．９０（ｓ，２Ｈ）、７．５９（ｄｄ，Ｊ＝６．８，５．４Ｈｚ，２Ｈ）、７．４７（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．４３（ｓ，３Ｈ）。
【0158】
実施例１９．（６－クロロ－２－メチルベンゾフラン－３－イル）（４－ヒドロキシ－３，５－ジヨードフェニル）メタノン［（６－ｃｈｌｏｒｏ－２－ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）（４－ｈｙｄｒｏｘｙ－３，５－ｄｉｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0159】
【化23】
【0160】
段階Ｆ～段階Ｌ：実施例１７の段階Ｆ～Ｌと類似の方法で化合物１９－７を得た。
【0161】
段階Ｍ：化合物１９－７を使用して実施例８の段階Ｅと類似の方法で化合物１９を得た。
【0162】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ８．０７（ｓ，２Ｈ）、７．９４（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．４３（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．４３（ｓ，３Ｈ）。
【0163】
実施例２０．（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２，５－ジエチルベンゾフラン－３－イル）メタノン［（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）（２，５－ｄｉｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0164】
【化24】
【0165】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例１の段階Ａ－Ｅ段階と類似の方法で化合物２０を得た。
【0166】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ １１．４１（ｓ，１Ｈ）、８．００－７．９１（ｍ，２Ｈ）、７．７０（ｄｔ，Ｊ＝８．４，２．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．３６（ｓ，１Ｈ）、７．０９（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．７６（ｄｑ，Ｊ＝２０．２，７．５Ｈｚ，４Ｈ）、１．２４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ， ３Ｈ）、１．１４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【0167】
実施例２１．（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２，７－ジエチルベンゾフラン－３－イル）メタノン［（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）（２，７－ｄｉｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0168】
【化25】
【0169】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例１の段階Ａ－Ｅと類似の方法で化合物２１を得た。
【0170】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ １１．３９（ｓ，１Ｈ）、７．９３（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．６７（ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．４７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．１６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．０７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．０１（ｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．８２（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、１．２６（ｔｄ，Ｊ＝７．５，５．９Ｈｚ，６Ｈ）。
【0171】
実施例２２．（３，５－ジブロモ－４－ヒデ－ロックシペニル）（２－エチル－６－（トリフルオロメチル）ベンゾフラン－３－イル）メタノン ［（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）（２－ｅｔｈｙｌ－６－（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0172】
【化26】
【0173】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例１の段階Ａ～Ｅと類似の方法で化合物２２を得た。
【0174】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ ８．１６（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｓ，２Ｈ）、７．６９－７．６２（ｍ，２Ｈ）、２．８５（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、１．２９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【0175】
実施例２３．（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－４－メチルベンゾフラン－３－イル）メタノン［（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）（２－ｅｔｈｙｌ－４－ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0176】
【化27】
【0177】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例１の段階Ａ～Ｅと類似の方法で化合物２３を得た。
【0178】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ １１．５９（ｓ，１Ｈ）、８．００（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．６９（ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．５６（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．４８（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．０７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．６２（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．１６（ｓ，３Ｈ）、１．１７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【0179】
実施例２４．（３，５－ジブロモ－４－ヒドロキシフェニル）（２－エチル－４－フルオロベンゾフラン－３－イル）メタノン［（３，５－ｄｉｂｒｏｍｏ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）（２－ｅｔｈｙｌ－４－ｆｌｕｏｒｏｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－３－ｙｌ）ｍｅｔｈａｎｏｎｅ］
【0180】
【化28】
【0181】
段階Ａ～段階Ｅ：実施例１の段階Ａ～Ｅと類似の方法で化合物２４を得た。
【0182】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６，４００ＭＨｚ） δ １１．５９（ｓ，１Ｈ）、８．００（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．６９（ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．５６（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．４８（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．０７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．６２（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．１６（ｓ，３Ｈ）、１．１７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【0183】
＜実験例＞
１．試験物質評価
（１）ＨＳＰ４７の活性評価
酸性溶液に溶かしたコラーゲン（ｃｏｌｌａｇｅｎ ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ＵＫ）２０μｌにＰＢＳ（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ，ｐＨ７．４）溶液１８０μｌを添加してフィブリル（ｆｉｂｒｉｌ）を形成し、それを３４０ｎｍ波長で測定した。ＨＳＰ４７タンパク質（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ ＵＳ）を９．４５μｇ／ｍｌ濃度で添加してフィブリル形成を抑制する程度を以ってＨＳＰ４７活性を評価した。試験物質を１００μＭ～１μＭ濃度で含ませてＨＳＰ４７阻害程度を百分率またはＥＣ５０で表した。
１．試験物質評価
（１）ＨＳＰ４７の活性評価
酸性溶液に溶かしたコラーゲン（ｃｏｌｌａｇｅｎ ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ＵＫ）２０μｌにＰＢＳ（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ，ｐＨ７．４）溶液１８０μｌを添加してフィブリル（ｆｉｂｒｉｌ）を形成し、それを３４０ｎｍ波長で測定した。ＨＳＰ４７タンパク質（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ ＵＳ）を９．４５μｇ／ｍｌ濃度で添加してフィブリル形成を抑制する程度を以ってＨＳＰ４７活性を評価した。試験物質を１００μＭ～１μＭ濃度で含ませてＨＳＰ４７阻害程度を百分率またはＥＣ５０で表した。
【0184】
（２）シリウスレッド分析（Ｓｉｒｉｕｓ ｒｅｄ ａｓｓａｙ）
ヒトの肝相細胞（Ｌｉｖｅｒ ｓｔｅｌｌａｔｅ ＬＸ－２，Ｅｌａｂｓｃｉｅｎｃｅ，ＣＨ）、肺上皮細胞（Ａ５４９）または皮膚ＫＥＬ ＦＩＢ（ＡＴＣＣ，ＵＳ）細胞を２４－ｗｅｌｌ組織培養プレートに１８時間培養した後、ＴＧＦ－β １０ｎｇ／ｍｌ処理後に試験化合物と共に２４時間培養した。細胞をＰＢＳを用いて洗浄した後、 Ｂｏｕｉｎ’ｓ溶液で固定した後、蒸留によって２回洗浄した。固定された細胞を２時間の間にシリウスレッドで染色し、細胞の形態変化を観察した後、０．０１ＮのＨＣｌ溶液で洗浄して０．１ＮのＮａＯＨ溶液でコラーゲンと結合したシリウスレッドを抽出した後、５７０ｎｍ波長で定量した。各化合物のコラーゲン生成抑制効能を百分率またはＥＣ５０で表した。
ヒトの肝相細胞（Ｌｉｖｅｒ ｓｔｅｌｌａｔｅ ＬＸ－２，Ｅｌａｂｓｃｉｅｎｃｅ，ＣＨ）、肺上皮細胞（Ａ５４９）または皮膚ＫＥＬ ＦＩＢ（ＡＴＣＣ，ＵＳ）細胞を２４－ｗｅｌｌ組織培養プレートに１８時間培養した後、ＴＧＦ－β １０ｎｇ／ｍｌ処理後に試験化合物と共に２４時間培養した。細胞をＰＢＳを用いて洗浄した後、 Ｂｏｕｉｎ’ｓ溶液で固定した後、蒸留によって２回洗浄した。固定された細胞を２時間の間にシリウスレッドで染色し、細胞の形態変化を観察した後、０．０１ＮのＨＣｌ溶液で洗浄して０．１ＮのＮａＯＨ溶液でコラーゲンと結合したシリウスレッドを抽出した後、５７０ｎｍ波長で定量した。各化合物のコラーゲン生成抑制効能を百分率またはＥＣ５０で表した。
【0185】
（３）ＭＣＰ－１（Ｍｏｎｏｃｙｔｅ Ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ Ｐｒｏｔｅｉｎ－１）分泌抑制
肝星細胞株であるＬＸ－２細胞を２４－ｗｅｌｌ組織培養プレートに１８時間培養した後、１０ｎｇ／ｍｌのＴＧＦ－βを処理した後、試験物質３０～１μＭと共に２４時間培養した。細胞培養液に分泌されたＭＣＰ－１タンパク質をＥＬＩＳＡ試薬（ＲｎＤ，ＵＳＡ）を用いて定量した。各試験物質処理によるＭＣＰ－１定量値をｐｒｉｓｍ ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｇｒａｐｈｐａｄ，ｖｅｒ９．４,ＵＳＡ）を使用してＥＣ５０値を求めた。
肝星細胞株であるＬＸ－２細胞を２４－ｗｅｌｌ組織培養プレートに１８時間培養した後、１０ｎｇ／ｍｌのＴＧＦ－βを処理した後、試験物質３０～１μＭと共に２４時間培養した。細胞培養液に分泌されたＭＣＰ－１タンパク質をＥＬＩＳＡ試薬（ＲｎＤ，ＵＳＡ）を用いて定量した。各試験物質処理によるＭＣＰ－１定量値をｐｒｉｓｍ ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｇｒａｐｈｐａｄ，ｖｅｒ９．４,ＵＳＡ）を使用してＥＣ５０値を求めた。
【0186】
（４）統計学的分析
本実験の結果について資料の正規性を仮定し、パラメトリック多重比較（ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ）またはノンパラメトリック多重比較（ｎｏｎ－ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ）を用いて分析した。
本実験の結果について資料の正規性を仮定し、パラメトリック多重比較（ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ）またはノンパラメトリック多重比較（ｎｏｎ－ｐａｒａｍｅｔｒｉｃ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ）を用いて分析した。
【0187】
パラメトリック一元配置分散分析（Ｏｎｅ－ｗａｙ ＡＮＯＶＡ）結果が有意な場合、ダネットの検定（Ｄｕｎｎｅｔｔ’ｓ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｔｅｓｔ）を用いて事後検定を行い、ノンパラメトリッククラスカル・ウォリス検定（Ｋｒｕｓｋａｌ－Ｗａｌｌｉｓ’Ｈ－ｔｅｓｔ）の分析結果が有意な場合、ダンの検定（Ｄｕｎｎ’ｓ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｔｅｓｔ）を用いて事後検定を行った。
【0188】
統計学的分析は、Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて行っており、ｐ値が０．０５未満である場合、統計学的に有意であると判定した。
【0189】
２．結果
（１）ＨＳＰ４７タンパク質の機能阻害結果
下記の表１にＨＳＰ４７タンパク質の機能阻害結果を示した。
（１）ＨＳＰ４７タンパク質の機能阻害結果
下記の表１にＨＳＰ４７タンパク質の機能阻害結果を示した。
【0190】
【表1】
【0191】
（２）ＬＸ－２肝星細胞の線維化抑制結果
下記の表２に肝星細胞の線維化抑制結果を示した。
下記の表２に肝星細胞の線維化抑制結果を示した。
【0192】
【表2】
【0193】
（３）Ａ５４９肺上皮細胞の線維化抑制結果
下記の表３に肺上皮細胞の線維化抑制結果を示した。
下記の表３に肺上皮細胞の線維化抑制結果を示した。
【0194】
【表3】
【0195】
（４）ＫＥＬ ＦＩＢ皮膚線維芽細胞の線維化抑制結果
下記の表４に皮膚線維芽細胞の線維化抑制結果を示した。
下記の表４に皮膚線維芽細胞の線維化抑制結果を示した。
【0196】
【表4】
【0197】
（５）ＬＸ－２肝星細胞のＭＣＰ－１分泌抑制結果
下記の表５にＬＸ－２肝星細胞において試験物質処置によるＭＣＰ－１分泌抑制効果を示した。
下記の表５にＬＸ－２肝星細胞において試験物質処置によるＭＣＰ－１分泌抑制効果を示した。
【0198】
【表5】
【0199】
上述した本発明の説明は例示のためのものであり、本発明が属する技術分野における通常の知識を持つ者は、本発明の技術的思想や必須の特徴を変更することなく他の具体的な形態に容易に変形可能であるということを理解することができるであろう。したがって、上述した実施例は全ての面で例示的であり、限定的ではないことに理解せねばならない。例えば、単一型として説明されている各構成要素は分散して実施されることが可能であり、同様に、分散して説明されている構成要素も、結合した形態で実施され得る。
【0200】
本発明の範囲は後述する特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲の意味及び範囲、そしてその均等概念から導き出される全ての変更または変形は、本特許請求の範囲に含まれることに解釈されるものである。
【図1】
【国際調査報告】