特表 2024-537318 ビタミンＫ２及びヒドロキシステアリン酸を含むパーソナルケア組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-10-10

(54)【発明の名称】ビタミンＫ２及びヒドロキシステアリン酸を含むパーソナルケア組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 8/365 20060101AFI20241003BHJP

   A61Q 19/00 20060101ALI20241003BHJP

   A61K 8/67 20060101ALI20241003BHJP

   A61K 8/11 20060101ALI20241003BHJP

   A61Q 17/04 20060101ALI20241003BHJP

【ＦＩ】

A61K8/365

A61Q19/00

A61K8/67

A61K8/11

A61Q17/04

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024522028

(86)(22)【出願日】2022-10-10

(85)【翻訳文提出日】2024-06-03

(86)【国際出願番号】 EP2022078160

(87)【国際公開番号】W WO2023061962

(87)【国際公開日】2023-04-20

(31)【優先権主張番号】PCT/CN2021/123468

(32)【優先日】2021-10-13

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(31)【優先権主張番号】21210941.7

(32)【優先日】2021-11-29

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】521042714

【氏名又は名称】ユニリーバー・アイピー・ホールディングス・ベスローテン・ヴェンノーツハップ

(74)【代理人】

【識別番号】100114188

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 誠

(74)【代理人】

【識別番号】100119253

【弁理士】

【氏名又は名称】金山 賢教

(74)【代理人】

【識別番号】100124855

【弁理士】

【氏名又は名称】坪倉 道明

(74)【代理人】

【識別番号】100129713

【弁理士】

【氏名又は名称】重森 一輝

(74)【代理人】

【識別番号】100137213

【弁理士】

【氏名又は名称】安藤 健司

(74)【代理人】

【識別番号】100183519

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻田 芳恵

(74)【代理人】

【識別番号】100196483

【弁理士】

【氏名又は名称】川嵜 洋祐

(74)【代理人】

【識別番号】100160749

【弁理士】

【氏名又は名称】飯野 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100160255

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 祐輔

(74)【代理人】

【識別番号】100219265

【弁理士】

【氏名又は名称】鈴木 崇大

(74)【代理人】

【識別番号】100228980

【弁理士】

【氏名又は名称】副島 由加里

(74)【代理人】

【識別番号】100151448

【弁理士】

【氏名又は名称】青木 孝博

(74)【代理人】

【識別番号】100146318

【弁理士】

【氏名又は名称】岩瀬 吉和

(74)【代理人】

【識別番号】100127812

【弁理士】

【氏名又は名称】城山 康文

(72)【発明者】

【氏名】ボーセ，ペルミタ

(72)【発明者】

【氏名】ダモダラン，アニタ

(72)【発明者】

【氏名】グ，シュエラン

(72)【発明者】

【氏名】ヴェンカテシュ，サティシュ・クマール

(72)【発明者】

【氏名】クマリ，アンヌ

(72)【発明者】

【氏名】ミ，ティンヤン

(72)【発明者】

【氏名】ナイル，ニルマラ・サントシュ

(72)【発明者】

【氏名】サダワルテ，アシュヴィニ

【テーマコード（参考）】

4C083

【Ｆターム（参考）】

4C083AB032

4C083AC072

4C083AC111

4C083AC121

4C083AC122

4C083AC131

4C083AC212

4C083AC241

4C083AC242

4C083AC301

4C083AC302

4C083AC342

4C083AC352

4C083AD152

4C083AD631

4C083AD632

4C083AD671

4C083AD672

4C083CC04

4C083CC05

4C083CC19

4C083DD14

4C083DD22

4C083DD23

4C083DD31

4C083DD41

4C083EE16

4C083EE17

(57)【要約】

本発明は、皮膚を美白するパーソナルケア組成物に関する。より詳細には、本発明は、特に目の下の領域における過剰色素沈着に対して効果的な局所用組成物に関する。これは、局所用組成物にビタミンＫ２とヒドロキシステアリン酸（ＨＳＡ）を含めることによって実現される。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ビタミンＫ２及びヒドロキシステアリン酸（ＨＳＡ）を含む、皮膚に明るさを与えるためのパーソナルケア組成物であって、前記ヒドロキシステアリン酸が１０－ヒドロキシステアリン酸、１２－ヒドロキシステアリン酸又は９，１０，１３－トリヒドロキシステアリン酸であるパーソナルケア組成物。

【請求項2】

前記ビタミンＫ２が、ＭＫ４～ＭＫ７から選択される１以上、好ましくはＭＫ７である、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

前記ビタミンＫ２がカプセル化されている、請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項4】

前記ヒドロキシステアリン酸が１２－ＨＳＡである、請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項5】

０．０００１～１重量％のビタミンＫ２を含む、請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項6】

０．０１～５重量％のＨＳＡを含む、請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項7】

別の皮膚美白剤、好ましくはナイアシンアミドを含む、請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項8】

前記ビタミンＫ２対ＨＳＡの重量比が１：５０～１：５００、好ましくは１：８０～１：４００である、請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項9】

クリーム、ローション又はゲルの形態、好ましくはクリームの形態である、請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項10】

前記クリームが、３～２５重量％の脂肪酸及び０．１～１０重量％の石鹸を含む、請求項９に記載の組成物。

【請求項11】

グリセリン、１，３－ブチレングリコール、プロピレングリコール、１，３－プロパンジオール、ペンチレングリコール、ヘキシレングリコール、及びソルビトールのうちの１以上から選択される多価アルコールを含む、請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項12】

ＵＶＡ日焼け止め剤及びＵＶＢ日焼け止め剤の一方又は両方から選択される有機日焼け止め剤をさらに含む、請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項13】

皮膚、好ましくは目の下の部分に明るさを与える方法であって、請求項１又は２に記載の組成物を皮膚に適用する段階を含む方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、皮膚を美白するパーソナルケア組成物に関する。より詳細には、本発明は、特に目の下の領域における過剰色素沈着に対して効果的な局所用組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

ほとんどの人は、特に顔の肌の外観を自分自身の美しさ及び健康の重要な指標の一つと考えている。したがって、明るくシミのない均一な肌の色調を持つことが多くの人に望まれている。皮膚の色素沈着の程度と均一性は、年齢、ホルモンの変化、ニキビの発生、及び日光や大気汚染などの要因によって影響される。これらは、シミやそばかす、皮膚の一定の局所的領域の過剰色素沈着、さらには目の下のクマを引き起こす可能性がある。多くの人は、水分補給（消費される水の量）、食べ物の種類、睡眠の量と質などの特定のライフスタイル要因も、目の下のクマなどの肌の外観に影響を与えると信じている。人々は、より健康的なライフスタイルを送るなどの変化には、肌の外観を均一にするのに長い時間がかかることを知っているため、肌のシミを一時的に解決する美容的解決法に頼っている。彼らはまた、日光への曝露によって引き起こされる皮膚の黒ずみを軽減するためのそのような製品も求めている。このニーズを満たすために、メラニン細胞での色素産生を減らす製品を開発するために多くの試みがなされてきた。

【0003】

本発明者らは、この分野で長年研究しており、いくつかの特許出願も出願し、さまざまな化粧品を製造して市場に出している。本発明において、本発明者らは特に、露出した皮膚表面に使用できる、均一で明るい肌の色合いを与える一般的な化粧品としても使用できる、目の下のクマの問題に対する費用対効果の高い解決策を具体的に探していた。

【0004】

本願人は、肌の外観を均一で明るいものにするために、局所用組成物に含まれる成分として各種ビタミンが提案されていることを認識している。ビタミンＢ３を含む様々な組成物が、同様の利点について本出願人によって特許取得されている。本願人らは、ビタミンＫが特に目の下のシミにそのような効果があると示唆されていることを認識している。

【0005】

ＷＯ０３／１０１４１５（ＴｈｅＢｏｏｔｓ Ｃｏ．）は、有効成分としてビタミンＫを含む組成物を開示しており、ビタミンＫはシクロデキストリンとの複合体として存在する。シクロデキストリンは、最も好ましくはβ－シクロデキストリンであり、ビタミンＫは、最も好ましくはビタミンＫ１である。その組成物は、治療的な意味又は単に美容的な意味で、例えば皮膚の外観の改善、又は皮膚の下の変色物質の沈着に関連する打撲及び他の皮膚状態の治療において、皮膚に一般に有益な効果を有し得る。その組成物の一つの特定の用途は、目の周囲の皮膚の外観を改善するためのものであり、特に目の周囲の暗い領域（「影」）の美容上の処置のための方法である。

【0006】

ＦＲ２８８５８０３（Ｌ’Ｏｒａｌ， ２００６）は、生理的に許容される媒体中に、（ａ）少なくとも一つのビタミンＫ、その誘導体若しくは前駆体の一つ、又はそれを含む抽出物、（ｂ）ＵＶフィルター、及び（ｃ）ソフトフォーカスフィラー、蛍光剤、蛍光増白剤、ゴニオクロマチック顔料、反射粒子及びそれらの混合物から選択される少なくとも一つの薬剤を含む、皮膚又は唇への局所適用を意図した組成物を開示している。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0007】

【特許文献1】ＷＯ０３／１０１４１５

【特許文献2】ＦＲ２８８５８０３

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

本発明者らは、ビタミンＫは非常に高価であり、所望の効果を得るためにそれをスキンケア製品に含めると、製品が非常に高価になり、ほとんどの消費者の手の届かないものになってしまうことに気づいた。そこで本発明者らは、最小限の量のビタミンＫを使用し、特定の添加物が相乗的に相互作用して、再現可能で人口の大部分が認識できる望ましい最終利益を消費者に提供できるように、どのようにしてその特定の添加物を使用するかという問題の解決に着手した。まったく驚いたことに、本発明者らは、ごく少量のビタミンＫ２と組み合わせた場合に相乗的に相互作用して有効性を高めた、非常に広く入手可能な脂肪酸である非常に選択的な薬剤、即ちヒドロキシステアリン酸（ＨＳＡ）を発見した。本願人は、皮膚美白効果を得るために、１２－ＨＳＡとナイアシンアミドのような他の薬剤との組み合わせの特許を取得していた（ＥＰ２２８５３４２）。しかしながら、今回の場合、この利点を提供することが知られている他の多くの同様の薬剤について試みたが、驚くべきことにＨＳＡだけがビタミンＫ２と相乗的に相互作用することができ、その結果、ビタミンＫ２をごく少量で使用して所望の効果を得ることができる費用効果の高い解決策を提供することができた。

【0009】

したがって、本発明の目的は、過剰色素沈着及び不均一な皮膚外観の問題に対する解決策を提供することである。

【0010】

本発明の別の目的は、具体的に目の下のクマに対するそのような解決策を提供することである。

【0011】

本発明のさらに別の目的は、費用効果の高いそのような解決策を提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0012】

本発明の第１の態様は、ビタミンＫ２及びヒドロキシステアリン酸（ＨＳＡ）を含む、皮膚に明るさを与えるためのパーソナルケア組成物に関する。

【0013】

本発明の別の態様は、第１の態様の組成物を皮膚に適用する段階を含む、皮膚、好ましくは目の下の部分に明るさを与える方法に関する。

【発明を実施するための形態】

【0014】

これら及び他の態様、特徴及び利点は、以下の詳細な説明及び添付の特許請求の範囲を読むことにより、当業者には明らかとなるであろう。疑義を避けるために、本発明の１態様の任意の特徴は、本発明の他の任意の態様において利用することができる。表現「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、「含んでいる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」を意味するが、必ずしも「からなる」（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ）又は「構成されている」（ｃｏｍｐｏｓｅｄ ｏｆ）を意味するわけではないということが意図される。言い換えれば、記載されている段階又はオプションは、包括的である必要はない。以下に記載されている実施例は、本発明を明確にすることを意図しており、本発明をそれらの実施例自体に限定することを意図するものではないことは留意されたい。同様に、別途示されていない限り、全てのパーセンテージは、重量／重量パーセントである。実施例及び比較実施例における場合を除いて、又は、明示的に示されている場合を除いて、本「詳細な説明」及び「特許請求の範囲」において材料の量又は反応の条件、材料の物理的特性及び／若しくは使用について示している全ての数字は、「約」という単語によって修飾されているものとして理解されるべきである。「ｘからｙまで」の形式で表される数値範囲は、ｘとｙを含むものと理解される。特定の特徴について、複数の好ましい範囲が「ｘからｙまで」の形式で記述されている場合、異なるエンドポイントを組み合わせたすべての範囲も考慮されることは理解される。

【0015】

本発明の局所組成物は、パーソナルケア又は美容用途に使用されることを意図しており、パーソナルケア組成物又は化粧品組成物と呼ぶこともできると考えられる。本明細書で使用される場合の「パーソナルケア組成物」は、局所適用、すなわちヒトの皮膚及び／又は毛髪の外表面への適用のための組成物を含むことを意味する。そのような組成物は、リーブオン又はリンスオフと分類され得るものであり、外観改善、クレンジング、臭気抑制又は全身美容のためにヒト身体に適用される製品を含む。その組成物は好ましくはリーブオンタイプのものである。本発明の組成物は、液体、ローション、クリーム、フォーム、スティック、セラム、エッセンス又はジェルの形態とすることができる。好ましい組成物には、リーブオンゲル、ローション、セラム、エッセンス又はクリームなどがあり、好ましくはローション又はクリームの形態である。最も好ましいのはクリーム形態である。

【0016】

本明細書で使用される「皮膚」は、顔及び身体（例えば、首、胸、背中、腕、脇の下、手、足及び頭皮）の皮膚、特にはそれの露出部分を含むものである。最も好ましい部分は目の下領域である。

【0017】

本発明の組成物はヒドロキシステアリン酸を含む。ヒドロキシステアリン酸が、１０－ヒドロキシステアリン酸、１２－ヒドロキシステアリン酸若しくはトリヒドロキシステアリン酸（例えば、９，１０，１３－トリヒドロキシステアリン酸）若しくはトリヒドロキシステアリン、又はそれらの分解時にヒドロキシステアリン酸若しくはヒドロキシステアリン酸化合物の１以上の分子を生成する化合物、例えばグリセロールとヒドロキシステアリン酸のモノ、ジ、トリエステルであることが好ましい。これらのうち、１０－ヒドロキシステアリン酸、１２－ヒドロキシステアリン酸及び９，１０，１３－トリヒドロキシステアリン酸がより好ましく、１２－ヒドロキシステアリン酸（１２－ＨＳＡ）が最も好ましい。１２－ＨＳＡは下記のような構造を有する。

【化1】

【0018】

ヒドロキシステアリン酸は、組成物の０．０１～５重量％、より好ましくは０．１～３重量％、さらにより好ましくは０．２５～２重量％で含まれる。
本発明の組成物はビタミンＫ２を含む。Ｋ類のビタミン３種類がよく知られている。ビタミンＫ１はフィロキノンとして知られ、ビタミンＫ２はメナキノンとして知られ、ビタミンＫ３はメナジオンとして知られる。本発明者らは、ＨＳＡと組み合わせての相乗作用がビタミンＫ２でのみ認められ、他のＫ型ビタミンでは見られないことを見出した。
ビタミンＫ２は下記のような化学構造を有する。

【化2】

【0019】

自然界には１０種類の異なるビタミンＫ２が存在し、それらはイソプレニル側鎖の長さに応じてＭＫ－４～ＭＫ－１３と呼ばれる。本発明者らは、本発明に関してのビタミンＫ２の活性が、脂肪族側鎖の長さが増加するにつれて高くなることを見出した。これらのうち、本発明者らは、ビタミンＫ２がＭＫ４～ＭＫ７、好ましくはＭＫ７であることが好ましいことを見出した。本発明で使用されるビタミンＫ２をカプセル化することがさらに好ましい。ビタミンＫ２は、好ましくは組成物の０．０００１～１重量％、より好ましくは０．０００１～０．１重量％で含まれる。

【0020】

本発明者らは、ビタミンＫ２及びＨＳＡが、特定の重量比で含まれる場合に、より効果的であることを見出した。ビタミンＫ２とＨＳＡの重量比は、１：５０～１：５００の範囲が好ましく、好ましくは１：８０～１：４００であり、さらにより好ましくは１：１００～１：２００の範囲である。

【0021】

当該組成物は、好ましくは皮膚美白化合物を含み、それは好ましくはビタミンＢ３化合物、より好ましくはナイアシンアミドである。ニコチンアミド及びピリジン－３－カルボキサミドとしても知られるナイアシンアミドは、活性な水溶性型のビタミンＢ３である。本発明の組成物に含まれる場合、本発明の組成物は、有効量のナイアシンアミドを、代表的には組成物の０．００１～１０重量％、好ましくは少なくとも０．０１重量％、より好ましくは少なくとも０．１重量％、さらにより好ましくは少なくとも１重量％の濃度で含む。ナイアシンアミドは、組成物の好ましくは９重量％以下、より好ましくは８重量％以下、さらにより好ましくは７重量％以下、さらにより好ましくは６重量％以下、又はさらには５重量％以下である。

【0022】

当該組成物は、ＵＶＡ日焼け止め剤及びＵＶＢ日焼け止め剤の一方又は両方から選択される有機日焼け止め剤を含んでもよい。日焼け止めには、紫外線を遮断するために一般的に使用される材料が含まれている。例示的な化合物は、ＰＡＢＡ、桂皮酸及びサリチル酸の誘導体である。例えば、アボベンゾフェノン（Ｐａｒｓｏｌ １７８９（登録商標））メトキシケイ皮酸オクチル及び２－ヒドロキシ－４－メトキシベンゾフェノン（オキシベンゾンとしても知られる）を使用することができる。メトキシケイ皮酸オクチル及び２－ヒドロキシ－４－メトキシベンゾフェノンは、それぞれＰａｒｓｏｌ ＭＣＸ及びＢｅｎｚｏｐｈｅｎｏｎｅ－３の商標名で市販されている。組成物中に使用される日焼け止めの正確な量は、太陽の紫外線からの望まれる保護の程度に応じて変わり得る。太陽光線を反射又は散乱する添加剤も使用することができる。これらの添加剤には、酸化亜鉛や二酸化チタンのような酸化物などがある。

【0023】

本発明の組成物はさらに、組成物で使用される活性物質のための希釈剤、分散剤及び／又は担体として作用して、組成物が皮膚に適用されるときにそれらの分布を容易にするすることができる化粧品として許容されるビヒクルを含んでもよい。本発明での使用に適した化粧品として許容されるビヒクルは、水性、非水性又は乳濁液；水性又は乳濁液であることができ、特には油中水型又は水中油型乳濁液が最も好ましい。水が存在する場合、代表的には、その水は組成物の残りを構成するものである。好ましくは、水は、組成物の５～９９重量％、より好ましくは２０～８０重量％、さらにより好ましくは４０～８０重量％の濃度で存在する。

【0024】

本発明の組成物は、クリーム、ローション又はゲルの形態で、好ましくはクリームの形態で送達することができる。固体形態の組成物に好ましい形態はクリームであり、さらにより好ましくはバニシングクリームベースを有するものである。バニシングクリームベースは、３～２５重量％の脂肪酸を含むものである。バニシングクリームを調製するのに使用される脂肪酸は、本発明における必須成分として含まれるヒドロキシステアリン酸に加えて添加される。任意に、当該組成物は０．１～１０重量％の石鹸を含んでもよい。脂肪酸が含まれる場合、それは好ましくはＣ１０～Ｃ２２の脂肪酸であり、より好ましくはＣ１６～Ｃ１８の脂肪酸である。最も好ましくは、脂肪酸はステアリン酸若しくはパルミチン酸、又はそれらの混合物であり、石鹸は好ましくは脂肪酸混合物のカリウム塩である。その脂肪酸は多くの場合、実質的に（一般に約９０～９５％）４５％のステアリン酸と５５％のパルミチン酸の混合物であるヒストリン酸（ｈｙｓｔｒｉｃ ａｃｉｄ）である。最も好ましいクリームは、３～２５重量％の脂肪酸と０．１～１０重量％の石鹸を含むものである。

【0025】

好ましくは、組成物は皮膚軟化剤を含む。リーブオン組成物に使用され得る皮膚軟化剤の例には、ステアリルアルコール、モノリシノール酸グリセリル、ミンク油、イソステアリン酸イソプロピル、パルミチン酸イソブチル、ステアリン酸イソセチル、オレイルアルコール、ラウリン酸イソプロピル、ラウリン酸ヘキシル、オレイン酸デシル、オクタデカン－２－オール、イソセチルアルコール、エイコサニルアルコール、ベヘニルアルコール、パルミチン酸セチル、ジメチルポリシロキサンなどのシリコーンオイル、セバシン酸ジｎ－ブチル、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ポリエチレングリコール、トリエチレングリコール、ラノリン、ココアバター、コーン油、綿実油、オリーブ油、パーム核油、菜種油、ベニバナ種子油、月見草油、大豆油、ヒマワリ種子油、アボカド油、ゴマ油、ヤシ油、落花生油、ヒマシ油、アセチル化ラノリンアルコール、ワセリン、鉱油、ミリスチン酸ブチル、リノール酸イソプロピル、乳酸ラウリル、乳酸ミリスチル、オレイン酸デシル、ミリスチン酸ミリスチル及びそれらの混合物などがある。

【0026】

好ましくは、当該組成物は溶媒を含む。当該組成物に使用できる溶媒の例としては、エチルアルコール、イソプロパノール、アセトン、エチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル及びそれらの混合物などがある。当該組成物は、グリセリン、１，３－ブチレングリコール、プロピレングリコール、１，３－プロパンジオール、ペンチレングリコール、ヘキシレングリコール、及びソルビトールの１以上から選択され得る多価アルコールを含むことができる。

【0027】

好ましくは、当該組成物は粉末を含む。本組成物に使用できる粉末の例としては、チョーク、タルク、フラー土、カオリン、デンプン、ガム、コロイダルシリカ、ポリアクリル酸ナトリウム、テトラアルキル及び／又はトリアルキルアリールアンモニウムスメクタイト、化学修飾されたケイ酸マグネシウムアルミニウム、有機修飾されたモンモリロナイト粘土、水和ケイ酸アルミニウム、ヒュームドシリカ、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、モノステアリン酸エチレングリコール及びそれらの混合物などがある。

【0028】

好ましくは、当該組成物は、潜在的に有害な微生物の増殖を防ぐために防腐剤を含む。本組成物中の防腐剤として使用できる成分の例には、パラ－ヒドロキシ安息香酸のアルキルエステル、ヒダントイン誘導体、プロピオン酸塩、及びさまざまな第四級アンモニウム化合物などがある。より好ましくは、本組成物中で防腐剤として使用され得る成分は、安息香酸ナトリウム、ヨードプロピニルブチルカルバメート、メチルイソチアゾリノン、ヨードプロピニルブチルカルバメート、フェノキシエタノール、メチルパラベン、プロピルパラベン、イミダゾリジニル尿素、デヒドロ酢酸ナトリウム、エチルヘキシルグリセリン、ベンジルアルコール、アルカンジオール及びそれらの混合物などがある。組成物中に存在する場合、防腐剤は、好ましくは０．００１～５重量％、より好ましくは０．０１～３重量％、最も好ましくは０．０２～２重量％、さらに最も好ましくは０．２５～１．５％の量で添加される。

【0029】

好ましくは、当該組成物は、酸化防止剤、結合剤、緩衝剤、着色剤、収斂剤、香料、乳白剤、コンディショナー、角質除去剤、ｐＨ調節剤、皮膚感覚剤、皮膚緩和剤、及び皮膚治癒剤を含む広範囲の他の任意成分を含む。

【0030】

本発明の組成物の包装は、パッチ、瓶、チューブ、ロールボールアプリケータ、噴射剤駆動エアゾール装置、圧搾容器又は蓋付きジャーであることができる。

【0031】

第２の態様において、本発明は、皮膚の美白のための本発明による組成物の使用に関する。

【0032】

第３の態様において、本発明は、ヒトの皮膚を明るくする方法であって、本発明による組成物を前記皮膚上に適用する段階を含む方法に関する。

【0033】

ここで、本発明を以下の非限定的な実施例によって説明する。

【実施例】

【0034】

実施例Ａ～Ｄ、１：メラノサイトにおけるメラニン阻害率
１２ＨＳＡ、４－ＨＲ（４－ヘキシルレゾルシノール）、及びＥｎｃａｐ ＭＫ７（ＭＫ－７型のカプセル化ビタミンＫ２）のような活性物質の効果を、個別に又は組み合わせて調べた。イン・ビトロアッセイのプロトコールを以下に要約する。

【0035】

正常なヒト表皮メラノサイト（ＮＨＥＭ）（Ｂｉｏｃｅｌｌ， Ｘｉ′ａｎ， Ｃｈｉｎａ）を、ヒトメラノサイト増殖サプリメントを含むメラノサイト増殖培地（ＭＧＭ）（両方ともＰｒｏｍｏｃｅｌｌ，Ｇｅｒｍａｎｙ）中で増殖させた。ＮＨＥＭ細胞を６ウェルプレートの２ｍＬ ＭＧＭ／ウェルに７×１０^４細胞の密度で蒔き、３７℃の５％ＣＯ_２のインキュベーター内で２４時間インキュベートした。５０％集密度に達したら、細胞に１４ｍＪ／ｃｍ^２のＵＶＢを照射し、ＵＶ照射後、培地を、試験物質を含む新鮮な培地と交換した。その後の７２時間の２４時間ごとに、細胞に再度ＵＶＢを照射し、処理を新鮮なものに交換した。

【0036】

７２時間のインキュベーション期間終了後、Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ法を使用して細胞生存率を測定した。すなわち、細胞をリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）溶液で２回洗浄した。調製したばかりの１０％Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ作業溶液を、細胞を含まないブランク対照ウェルを含めて各ウェルに添加した。プレートをＣＯ_２インキュベーター内で３７℃で１時間インキュベートした。次に、Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ溶液を９６ウェルプレートに移して、蛍光プレートリーダーを使用してＥｘ／Ｅｍ５３０ｎｍ／５９０ｎｍでの蛍光強度を調べた。

【0037】

細胞生存率の評価後、細胞をさらにＰＢＳで２回洗浄し、０．２５％トリプシンで細胞を剥離させ、遠心して回収した。細胞ペレットに混合溶液（Ｈ_２Ｏ：ＥｔＯＨ：Ｅｔ_２Ｏ＝２：５：５体積比）を混合し、混合物を渦攪拌し、３０分間静置した。次いで、混合物を１０００ｒ／分で１０分間遠心した。下部画分を回収し、１０％（体積比）ＤＭＳＯ及び１Ｍ ＮａＯＨを含む溶液でさらに抽出し、水浴中８０℃で４０分間インキュベートした。同様に市販のメラニンに同じＤＭＳＯ／ＮａＯＨ混合溶液を加えることでメラニン標準溶液を調製し、８０℃で４０分間インキュベートした。抽出したメラニンと連続希釈したメラニン標準溶液を９６ウェルプレートに移し、プレートリーダーを用いて４０５ｎｍでの吸光度を検出した。メラニン含有量をメラニン標準曲線から計算した。次に、メラニン濃度（μｇ／ｍＬ）を相対細胞生存率に対して正規化した。メラニン抑制率を下記等式を用いて計算した算出した。
メラニン阻害率（％）＝（正規化メラニン含有量（_ＵＶ対照）－正規化メラニン含有量（_{試験サンプル}）／（正規化メラニン含有量（_ＵＶ対照））×１００％

【0038】

メラニン阻害率に関する結果を以下の表１にまとめている。

【0039】

表－１ メラニン阻害率

【表1】

【0040】

上の表のデータは、１２ＨＳＡがビタミンＫ２の有効性を高めることができるのに対し、４－ＨＲはそうでないことを示している。

【0041】

実施例－Ｅ，２：バニシングクリームベース中の対照サンプルと比較した、本発明による活性物質の含有の効果
以下の表２に示した組成物を調製した。３Ｄ生体皮膚等価物における皮膚の色を、次のプロトコールを用いて測定した。

【0042】

Ｂｉｏｃｅｌｌ（Ｘｉ′ａｎ， Ｃｈｉｎａ）が供給する再構成ヒト有色生体皮膚等価物（ｐＬＳＥ）モデルであるＭｅｌａＫｕｉｔｓ（登録商標）を使用して、プロトタイプの皮膚美白効果を評価した。第４日にサンプルを２ｍｇ／ｃｍ^２で局所塗布し、７日目までモデル上に放置した。第７日に、ＤＳＭ ＩＩ ＣｏｌｏｒＭｅｔｅｒ（Ｃｏｒｔｅｘ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ＡｐＳ， Ｄｅｎｍａｒｋ）を使用して各モデルのＬ^＊を測定した。
Ｌ^＊値とそれぞれのＰ値（スチューデントｔ－検定に基づく）を以下の表に示している。

【0043】

表－２

【表2】

【0044】

上記の表２のデータは、本発明による組成物（実施例２）が、３Ｄ生体細胞実験で測定された場合に有意に明るい色を提供することを示している。

【国際調査報告】