特表 2024-537840 ＮＫＧ２Ａを標的化する癌療法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-10-16

(54)【発明の名称】ＮＫＧ２Ａを標的化する癌療法

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20241008BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20241008BHJP

   C07K 16/28 20060101ALI20241008BHJP

   C07K 16/46 20060101ALI20241008BHJP

   C12N 15/13 20060101ALN20241008BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 N ZNA

A61P35/00

C07K16/28

C07K16/46

C12N15/13

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024520011

(86)(22)【出願日】2022-10-03

(85)【翻訳文提出日】2024-05-30

(86)【国際出願番号】 EP2022077455

(87)【国際公開番号】W WO2023057381

(87)【国際公開日】2023-04-13

(31)【優先権主張番号】21306386.0

(32)【優先日】2021-10-04

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＲＩＴＯＮ

(71)【出願人】

【識別番号】500287019

【氏名又は名称】レ ラボラトワール セルヴィエ

【氏名又は名称原語表記】Ｌｅｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ Ｓｅｒｖｉｅｒ

(74)【代理人】

【識別番号】110001508

【氏名又は名称】弁理士法人 津国

(72)【発明者】

【氏名】アンデルセン，ダニエル

(72)【発明者】

【氏名】ロージェル，ブリュノ

(72)【発明者】

【氏名】メランデル，エヴァ・マリア・カールセン

(72)【発明者】

【氏名】ナンシー－ポ－トボア，ヴァネッサ

(72)【発明者】

【氏名】オカニャ・フェルナンデス，アルベルト

(72)【発明者】

【氏名】ピエラ，マリー－ジャンヌ

(72)【発明者】

【氏名】ウーレンブロック，フランチスカ・カタリーナ

【テーマコード（参考）】

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C085AA14

4C085BB11

4C085CC23

4C085EE03

4H045AA11

4H045AA30

4H045BA10

4H045DA76

4H045EA20

4H045FA74

(57)【要約】

本発明は、場合により抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体及び／又は抗ＥＧＦＲ若しくは抗ＨＥＲ２抗体と組み合わせた、抗ＮＫＧ２Ａ抗体、並びにそれを必要とする患者における免疫の増強において及び癌の処置において、前記抗体又は抗体の組み合わせを使用する方法に関する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

患者に、
ａ）それぞれ配列番号９及び１０又はそれぞれ配列番号１９及び２０の重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を含む抗体と、ヒトＮＫＧ２Ａへの結合について競合若しくは交差競合するか、又はヒトＮＫＧ２Ａのそれと同じエピトープに結合する、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；並びに、場合により、
ｂ）抗ＰＤ－１抗体又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体、或いはその抗原結合部分；並びに、場合により、
ｃ）１つ若しくは２つの抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分、又は抗ＨＥＲ２抗体を含む、抗ＥＧＦＲ抗体成分
を投与することを含む、それを必要とするヒト患者において免疫を増強する方法。

【請求項2】

前記方法が、患者に、
ａ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｃ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；
ｄ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｅ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｆ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分
を投与することを含む、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

抗ＮＫＧ２Ａ抗体の重鎖相補性決定領域（Ｈ－ＣＤＲ）１～３及び軽鎖相補性決定領域（Ｌ－ＣＤＲ）１～３が、
ａ）それぞれ配列番号１～６；又は
ｂ）それぞれ配列番号１１～１６
のアミノ酸配列を含む、請求項１又は２に記載の方法。

【請求項4】

抗ＮＫＧ２Ａ抗体の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）が、
ａ）それぞれ配列番号７及び８；又は
ｂ）それぞれ配列番号１７及び１８
のアミノ酸配列を含む、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

抗ＮＫＧ２Ａ抗体の重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）が、
ａ）それぞれ配列番号９及び１０；又は
ｂ）それぞれ配列番号１９及び２０
のアミノ酸配列を含む、請求項４に記載の方法。

【請求項6】

抗ＰＤ－１抗体の重鎖相補性決定領域（Ｈ－ＣＤＲ）１～３及び軽鎖相補性決定領域（Ｌ－ＣＤＲ）１～３が、
ａ）それぞれ配列番号２１～２６；
ｂ）それぞれ配列番号３１～３６；
ｃ）それぞれ配列番号４１～４６；
ｄ）それぞれ配列番号５１～５６；
ｅ）それぞれ配列番号６１～６６；又は
ｆ）それぞれ配列番号７１～７６
のアミノ酸配列を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】

抗ＰＤ－１抗体の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）が、
ａ）それぞれ配列番号２７及び２８；
ｂ）それぞれ配列番号３７及び３８；
ｃ）それぞれ配列番号４７及び４８；
ｄ）それぞれ配列番号５７及び５８；
ｅ）それぞれ配列番号６７及び６８；又は
ｆ）それぞれ配列番号７７及び７８
のアミノ酸配列を含む、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

抗ＰＤ－１抗体の重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）が、
ａ）それぞれ配列番号２９及び３０；
ｂ）それぞれ配列番号３９及び４０；
ｃ）それぞれ配列番号４９及び５０；
ｄ）それぞれ配列番号５９及び６０；
ｅ）それぞれ配列番号６９及び７０；又は
ｆ）それぞれ、配列番号７９及び８０
のアミノ酸配列を含む、請求項７に記載の方法。

【請求項9】

抗ＰＤ－１抗体が、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、又はレチファンリマブである、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項10】

抗ＰＤ－Ｌ１抗体の重鎖相補性決定領域（Ｈ－ＣＤＲ）１～３及び軽鎖相補性決定領域（Ｌ－ＣＤＲ）１～３が、
ａ）それぞれ配列番号８１～８６；
ｂ）それぞれ配列番号９１～９６；又は
ｃ）それぞれ配列番号１０１～１０６
のアミノ酸配列を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項11】

抗ＰＤ－Ｌ１抗体の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）が、
ａ）それぞれ配列番号８７及び８８；
ｂ）それぞれ配列番号９７及び９８；又は
ｃ）それぞれ配列番号１０７及び１０８
のアミノ酸配列を含む、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

抗ＰＤ－Ｌ１抗体の重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）が、
ａ）それぞれ配列番号８９及び９０；
ｂ）それぞれ配列番号９９及び１００；又は
ｃ）それぞれ配列番号１０９及び１１０
のアミノ酸配列を含む、請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ、アベルマブ、又はデュルバルマブである、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項14】

抗ＥＧＦＲ成分が、
ａ）それぞれ配列番号１１１～１１６；
ｂ）それぞれ配列番号１２１～１２６；
ｃ）それぞれ配列番号１３１～１３６；又は
ｄ）それぞれ配列番号１４１～１４６
のアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域（Ｈ－ＣＤＲ）１～３及び軽鎖相補性決定領域（Ｌ－ＣＤＲ）１～３を有する抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項15】

抗ＥＧＦＲ成分が、
ａ）それぞれ配列番号１１７及び１１８；
ｂ）それぞれ配列番号１２７及び１２８；
ｃ）それぞれ配列番号１３７及び１３８；又は
ｄ）それぞれ配列番号１４７及び１４８
のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を有する抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、請求項１４に記載の方法。

【請求項16】

抗ＥＧＦＲ成分が、
ａ）それぞれ配列番号１１９及び１２０；
ｂ）それぞれ配列番号１２９及び１３０；
ｃ）それぞれ配列番号１３９及び１４０；又は
ｄ）それぞれ配列番号１４９及び１５０
のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を有する抗ＥＧＦＲ抗体を含む、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

抗ＥＧＦＲ成分が、それぞれ配列番号１３１～１３６のアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域（Ｈ－ＣＤＲ）１～３及び軽鎖相補性決定領域（Ｌ－ＣＤＲ）１～３を有する抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分、並びにそれぞれ配列番号１４１～１４６のアミノ酸配列を含むＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３を有する抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項18】

抗ＥＧＦＲ成分が、それぞれ配列番号１３７及び１３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を有する抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分、並びにそれぞれ配列番号１４７及び１４８のアミノ酸配列を含むＶＨ及びＶＬを有する抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、請求書１７に記載の方法。

【請求項19】

抗ＥＧＦＲ成分が、それぞれ配列番号１３９及び１４０のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を有する抗ＥＧＦＲ抗体並びにそれぞれ配列番号１４９及び１５０のアミノ酸配列を含むＨＣ及びＬＣを有する抗ＥＧＦＲ抗体を含む、請求項１８に記載の方法。

【請求項20】

抗ＥＧＦＲ成分が、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、モドツキシマブ、又はフツキシマブ＋モドツキシマブである、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項21】

抗ＨＥＲ２抗体の重鎖相補性決定領域（Ｈ－ＣＤＲ）１～３及び軽鎖相補性決定領域（Ｌ－ＣＤＲ）１～３が、
ａ）それぞれ配列番号１５１～１５６；又は
ｂ）それぞれ配列番号１６１～１６６
のアミノ酸配列を含む、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項22】

抗ＨＥＲ２抗体の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）が、
ａ）それぞれ配列番号１５７及び１５８；又は
ｂ）それぞれ配列番号１６７及び１６８
のアミノ酸配列を含む、請求項２１に記載の方法。

【請求項23】

抗ＨＥＲ２抗体の重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）が、
ａ）それぞれ配列番号１５９及び１６０；又は
ｂ）それぞれ配列番号１６９及び１７０
のアミノ酸配列を含む、請求項２２に記載の方法。

【請求項24】

抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合部分が、ＤＸｄ又はＤＭ１にコンジュゲートされている、請求項２１～２３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項25】

抗ＨＥＲ２抗体が、トラスツズマブ、マルゲツキシマブ、トラスツズマブ デルクステカン（trastuzumab dexrutecan）、又はトラスツズマブ エムタンシンである、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項26】

患者に、
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号３１～３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号３７及び３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；並びにそれぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体を投与することを含む、請求項１に記載の方法。

【請求項27】

患者に、
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；
それぞれ配列番号６１～６６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに
それぞれ配列番号１３１～１３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分並びにそれぞれ配列番号１４１～１４６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲ成分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；
それぞれ配列番号６７及び６８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに
それぞれ配列番号１３７及び１３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分並びにそれぞれ配列番号１４７及び１４８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；
それぞれ配列番号６９及び７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに
それぞれ配列番号１３９及び１４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体並びにそれぞれ配列番号１４９及び１５０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体を含む、抗ＥＧＦＲ成分
を投与することを含む、請求項１に記載の方法。

【請求項28】

患者に、
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号６１～６６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１６１～１６６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号６７及び６８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１６７及び１６８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号６９及び７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１６９及び１７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体
を投与することを含む、請求項１に記載の方法。

【請求項29】

患者に、
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号７１～７６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１６１～１６６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号７７及び７８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１６７及び１６８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号７９及び８０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１６９及び１７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体
を投与することを含む、請求項１に記載の方法。

【請求項30】

患者に、
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３１～３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１５１～１５６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３７及び３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１５７及び１５８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１５９及び１６０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体
を投与することを含む、請求項１に記載の方法。

【請求項31】

患者に、
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；
それぞれ配列番号３１～３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；及び
それぞれ配列番号１３１～１３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分並びにそれぞれ配列番号１４１～１４６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲ成分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；
それぞれ配列番号３７及び３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに
それぞれ配列番号１３７及び１３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分並びにそれぞれ配列番号１４７及び１４８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；
それぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに
それぞれ配列番号１３９及び１４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体並びにそれぞれ配列番号１４９及び１５０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体を含む、抗ＥＧＦＲ成分
を投与することを含む、請求項１に記載の方法。

【請求項32】

患者に、
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３１～３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１１１～１１６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３７及び３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１１７及び１１８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１１９及び１２０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体
を投与することを含む、請求項１に記載の方法。

【請求項33】

前記抗体又は抗原結合部分が患者に同時に投与される、請求項１～３２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項34】

前記抗体又は抗原結合部分が逐次的に患者に投与される、請求項１～３２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項35】

前記患者が癌を有する、請求項１～３４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項36】

前記癌が血液学的悪性病変である、請求項３５に記載の方法。

【請求項37】

前記癌が固形腫瘍である、請求項３５に記載の方法。

【請求項38】

前記癌が、結腸直腸癌、胃癌、又は胃食道癌である、請求項３７に記載の方法。

【請求項39】

抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分が、８、２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で投与され、場合により、前記抗体又は部分が、２週間又は３週間毎に投与される、請求項１～３８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項40】

抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合部分が、２００mgの用量で投与され、場合により、前記抗体又は部分が、２週間又は３週間毎に投与される、請求項１～３９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項41】

抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分が、２１日サイクル又は２８日サイクル中で投与される、請求項１～４０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項42】

抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合部分が、抗ＮＫＧ２Ａ抗体と同時に又は抗ＮＫＧ２Ａ抗体の１サイクル後に、投与される、請求項１～４１に記載の方法。

【請求項43】

抗ＥＧＦＲ成分が、６mg/kg、９mg/kgの用量で、又は９mg/kgそれに続く６mg/kgの負荷用量で、投与され、場合により、前記成分が、毎週又は２週間毎に投与される、請求項１～４２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項44】

抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分が、１５mg/kgの用量で投与され、場合により、前記抗体又は部分が、３週間毎又は４週間毎に投与される、請求項１～４２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項45】

前記抗体又は抗原結合部分が静脈内注入用に製剤化される、請求項１～４４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項46】

それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体を患者に投与することを含む、患者において進行性の固形腫瘍悪性病変を処置する方法であって、前記抗体が、８、２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で２週間毎にＩＶ注入により投与される、方法。

【請求項47】

患者に、
ａ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；並びに
ｂ）それぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体
を投与することを含む、患者において進行性の固形腫瘍悪性病変を処置する方法であって、
抗ＮＫＧ２Ａ抗体が、３週間毎に２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量でＩＶ注入により投与され、及び
抗ＮＫＧ２Ａ抗体投与の２１日サイクルを完了した後、抗ＰＤ－１抗体が、３週間毎に２００mgの用量でＩＶ注入により投与される、方法。

【請求項48】

患者に、
ａ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；
ｂ）それぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに
ｃ）それぞれ配列番号１５９及び１６０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体
を投与することを含む、患者において転移性ＨＥＲ２^＋胃癌を処置する方法であって、
場合により、前記癌が局所的に進行している及び／又は切除不能である、並びに
場合により、前記患者が、第一選択の標準治療療法に失敗している、方法。

【請求項49】

抗ＮＫＧ２Ａ抗体が、２週間毎に２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で投与され、
抗ＮＫＧ２Ａ抗体投与の２１日サイクルを完了した後、抗ＰＤ－１抗体が、３週間毎に２００mgの用量で投与され、
抗ＨＥＲ２抗体が、３～４週間毎に１５mg/kgで投与され、
前記抗体が、ＩＶ注入を介して投与される、請求項４８に記載の方法。

【請求項50】

患者に、
ａ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；
ｂ）それぞれ配列番号６９及び７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；及び
ｃ）それぞれ配列番号１３９及び１４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体並びにそれぞれ配列番号１４９及び１５０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体を含む、抗ＥＧＦＲ成分
を投与することを含む、患者において転移性結腸直腸癌を処置する方法であって、
場合により、前記患者は、低いマイクロサテライト不安定性状態を有し、及び
場合により、前記患者は、（ｉ）以下のコドン：エクソン２中のコドン１２及び１３、エクソン３中のコドン５９及び６１、エクソン４中のコドン１１７及び１４６のいずれかにおいてＲＡＳ変異を伴わず；並びに／或いは（ｉｉ）ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ変異を伴わない、方法。

【請求項51】

抗ＮＫＧ２Ａ抗体が、２週間毎に２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で投与され、
抗ＮＫＧ２Ａ抗体投与の２８日サイクルを完了した後、抗ＰＤ－１抗体が、２週間毎に２００mgの用量で投与され、
抗ＥＧＦＲ成分が、９mg/kgの負荷用量、それに続く１又は２週間毎の６mg/kgの用量で投与され、
前記抗体が、ＩＶ注入により投与される、請求項５０に記載の方法。

【請求項52】

前記患者に、放射線療法、又は化学療法剤、抗腫瘍剤及び抗血管新生剤の少なくとも１つ、を投与することを更に含む、請求項１～５１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項53】

前記処置が、以下：
ａ）改善された客観的応答率；
ｂ）改善された臨床利益率；
ｃ）改善された応答の持続時間；
ｄ）増加した無増悪生存期間；及び
ｅ）増加した全生存期間
のうちの１つ以上をもたらす、請求項３５～５２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項54】

ａ）ヒトＮＫＧ２Ａ及びヒトＰＤ－１；
ｂ）ヒトＮＫＧ２Ａ及びヒトＰＤ－Ｌ１；
ｃ）ヒトＮＫＧ２Ａ、ヒトＰＤ－１、及びヒトＥＧＦＲ；
ｄ）ヒトＮＫＧ２Ａ、ヒトＰＤ－１、及びヒトＨＥＲ２；
ｅ）ヒトＮＫＧ２Ａ、ヒトＰＤ－Ｌ１、及びヒトＥＧＦＲ；又は
ｆ）ヒトＮＫＧ２Ａ、ヒトＰＤ－Ｌ１、及びヒトＨＥＲ２
に特異的に結合する、多重特異的抗体。

【請求項55】

ａ）請求項１～５のいずれか一項において定義される抗ＮＫＧ２Ａ抗体の抗原結合ドメイン、及び請求項６～９のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－１抗体の抗原結合ドメイン；
ｂ）請求項１～５のいずれか一項において定義される抗ＮＫＧ２Ａ抗体の抗原結合ドメイン、及び請求項１０～１３のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－Ｌ１抗体の抗原結合ドメイン；
ｃ）請求項１～５のいずれか一項において定義される抗ＮＫＧ２Ａ抗体の抗原結合ドメイン、請求項６～９のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－１抗体の抗原結合ドメイン、及び請求項１４～１７のいずれか一項において定義される１つ若しくは２つの抗ＥＧＦＲ抗体の抗原結合部分；
ｄ）請求項１～５のいずれか一項において定義される抗ＮＫＧ２Ａ抗体の抗原結合ドメイン、請求項６～９のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－１抗体の抗原結合ドメイン、及び請求項２１～２５のいずれか一項において定義される抗ＨＥＲ２抗体の抗原結合部分；
ｅ）請求項１～５のいずれか一項において定義される抗ＮＫＧ２Ａ抗体の抗原結合ドメイン、請求項１０～１３のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－Ｌ１抗体の抗原結合ドメイン、及び請求項１４～１７のいずれか一項において定義される１つ若しくは２つの抗ＥＧＦＲ抗体の抗原結合部分；又は
ｆ）請求項１～５のいずれか一項において定義される抗ＮＫＧ２Ａ抗体の抗原結合ドメイン、請求項１０～１３のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－Ｌ１抗体の抗原結合ドメイン、及び請求項２１～２５のいずれか一項において定義される抗ＨＥＲ２抗体の抗原結合部分
を含む、請求項５４に記載の多重特異的抗体。

【請求項56】

請求項１～５のいずれか一項において定義される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、医薬組成物であって、更に：
ａ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｃ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；
ｄ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｅ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｆ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
並びに医薬的に許容可能な賦形剤
を含む、医薬組成物。

【請求項57】

抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分が、請求項６～９のいずれか一項において定義されるとおりである、請求項５６に記載の医薬組成物。

【請求項58】

抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分が、請求項１０～１３のいずれか一項において定義されるとおりである、請求項５６に記載の医薬組成物。

【請求項59】

抗ＥＧＦＲ成分が、請求項１４～２０のいずれか一項において定義されるとおりである、請求項５６～５８のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項60】

抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分が、請求項２１～２５のいずれか一項において定義されるとおりである、請求項５６～５８のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項61】

請求項１～５３のいずれか一項に記載の方法の抗体を含む、医薬組成物。

【請求項62】

請求項１～５３のいずれか一項に記載の方法におけるヒト患者の処置において使用するための、請求項５６～６１のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項63】

ａ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｃ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；
ｄ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｅ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｆ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分
と組み合わせて、それを必要とするヒト患者における免疫の増強に使用するための、請求項１～５のいずれか一項において定義される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分。

【請求項64】

抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分が、請求項６～９のいずれか一項において定義されるとおりである、請求項６３に記載の使用のための抗ＮＫＧ２Ａ抗体又は抗原結合部分。

【請求項65】

抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分が、請求項１０～１３のいずれか一項において定義されるとおりである、請求項６３に記載の使用のための抗ＮＫＧ２Ａ抗体又は抗原結合部分。

【請求項66】

抗ＥＧＦＲ成分が、請求項１４～２０のいずれか一項において定義されるとおりである、請求項６３～６５のいずれか一項に記載の使用のための抗ＮＫＧ２Ａ抗体又は抗原結合部分。

【請求項67】

抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分が、請求項２１～２５のいずれか一項において定義されるとおりである、請求項６３～６５のいずれか一項に記載の使用のための抗ＮＫＧ２Ａ抗体又は抗原結合部分。

【請求項68】

請求項１～５３のいずれか一項に記載の方法におけるヒト患者の処置において使用するための、
ａ）請求項６～９のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）請求項１０～１３のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｃ）請求項６～９のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び請求項１４～２０のいずれか一項において定義される抗ＥＧＦＲ成分；
ｂ）請求項６～９のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び請求項２１～２５のいずれか一項において定義される抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｃ）請求項１０～１３のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び請求項１４～２０のいずれか一項において定義される抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｄ）請求項１０～１３のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び請求項２１～２５のいずれか一項において定義される抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分
と組み合わせた、請求項１～５のいずれか一項に記載の抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分。

【請求項69】

それを必要とするヒト患者において免疫を増強するための医薬の製造のための、
ａ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｃ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；
ｄ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｅ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｆ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分
と組み合わせた、請求項１～５のいずれか一項において定義される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分の使用。

【請求項70】

抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分が、請求項６～９のいずれか一項において定義されるとおりである、請求項６９に記載の使用。

【請求項71】

抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分が、請求項１０～１３のいずれか一項において定義されるとおりである、請求項６９に記載の使用。

【請求項72】

抗ＥＧＦＲ成分が、請求項１４～２０のいずれか一項において定義されるとおりである、請求項６９～７１のいずれか一項に記載の使用。

【請求項73】

抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分が、請求項２１～２５のいずれか一項において定義されるとおりである、請求項６９～７１のいずれか一項に記載の使用。

【請求項74】

請求項１～５３のいずれか一項に記載の方法においてヒト患者を処置するための医薬の製造のための、
ａ）請求項６～９のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）請求項１０～１３のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｃ）請求項６～９のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び請求項１４～２０のいずれか一項において定義される抗ＥＧＦＲ成分；
ｄ）請求項６～９のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び請求項２１～２５のいずれか一項において定義される抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｅ）請求項１０～１３のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び請求項１４～２０のいずれか一項において定義される抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｆ）請求項１０～１３のいずれか一項において定義される抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び請求項２１～２５のいずれか一項において定義される抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分
と組み合わせた、請求項１～５のいずれか一項において定義される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

発明の背景
癌は、世界のすべての国において死亡の主要な原因及び平均余命を増加させることに対する重要な障壁としてランク付けされている。２０１９年の世界保健機関（ＷＨＯ）の推計によると、癌は１８３ヶ国中１１２ヶ国において年齢７０歳前での死亡の第一又は第二の原因となっており、更に２３ヶ国において第三又は第四にランク付けされている。

【0002】

ＨＥＲ２過剰発現胃癌は、限定された治療選択肢を有するアンメットメディカルニーズの領域である。ＨＥＲ２（また、ＥＲＢＢ２として公知）癌遺伝子の増幅及びＨＥＲ２タンパク質の過剰発現は、胃癌を有する患者の約１７～２０%において生じる。ＨＥＲ２過剰発現胃癌を有する患者は、第一選択におけるシスプラチン及び５ＦＵ又はカペシタビンとの組み合わせにおける抗ＨＥＲ２抗体トラスツズマブを用いた処置から利益を得る；しかし、トラスツズマブベースの治療での進行後、選択肢は、ＨＥＲ２＋進行胃癌を処置するために限定されている。

【0003】

転移性結腸直腸癌（ｍＣＲＣ）のための処置は、遺伝子発現に重く依存しており、多くの薬物が特定の腫瘍プロファイルについてだけ処方されている。抗ＰＤ－１薬剤、例えばニボルマブ及びペムブロリズマブなどは、マイクロサテライト不安定性高／欠損性ミスマッチ修復（ＭＳＩ－Ｈ／ｄＭＭＲ）ｍＣＲＣにおける初期の成功を見ているが、これらは患者の１５%だけを含む。ＲＡＳ／ＢＲＡＦ野生型（ＷＴ）及びＥＧＦＲ陽性の腫瘍は、最も一般的な遺伝子発現プロファイルの間にあり、ＣＲＣの約４０%を占める。

【0004】

ＮＫＧ２Ａ（ＣＤ１５９ａ）は、ＣＤ９４とヘテロ二量体化し、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ＮＫＴ細胞、ガンマデルタ（γδ）Ｔ細胞及び細胞傷害性Ｔ細胞のサブセット上で発現される免疫阻害性受容体を作るＣ型レクチンである（Borrego et al., Immunol Res（2006）35(3):263-78；Vivier et al., Nat Rev Immunol.（2004）4(3):190-8）。そのリガンドであるヒト白血球抗原（ＨＬＡ）－Ｅへのライゲーション時に、ＮＫＧ２Ａ／ＣＤ９４は、その細胞質尾部中の２つの免疫チロシンベースの阻害モチーフを介した阻害シグナル及びＳＨＰ－１チロシンホスはターゼの動員を伝達する（Carotta et al., Front Immunol.（2016）7:152）。この機構は、ＮＫ細胞による自然な自己認識／寛容の一部である。しかし、癌細胞は、ＨＬＡ－Ｅを過剰発現することによりこのシステムを利用し、それにより、ＮＫ細胞及びＴ細胞媒介性の死滅に対して自らを保護する。患者では、ＮＫＧ２Ａ発現は腫瘍浸潤ＮＫ細胞及びＴ細胞上で増加し、免疫抑制因子、例えばＴＧＦ－β及びアデノシンなどにより誘導されることができる（Platonova et al., Cancer Res.（2011）71(16):5412-22；Sheu et al., Cancer Res.（2005）65(7):2921-9）。実際に、ＮＫＧ２Ａ及びＨＬＡ－Ｅの高い腫瘍内発現によって、肝癌（ＨＣＣ）を有する患者についての不良な予後が予測される（Sun et al., Oncoimmunology(2017)6(1):e1264562）。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

癌におけるＮＫＧ２Ａ、ＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１、ＨＥＲ２、及びＥＧＦＲの決定的な役割を考慮すると、癌を処置するためにこれらの受容体を標的化する（例、組み合わせにおいて）、新たな改善された治療についての必要性がある。

【課題を解決するための手段】

【0006】

発明の概要
本発明は、例えば、本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体、場合により、例えば、本明細書中に記載されるＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１を標的化する抗体及び／又はＥＧＦＲ若しくはＨＥＲ２を標的化する抗体を含む、免疫を増強するための治療に基づく。一部の実施形態では、治療は、癌を処置するためである。また、提供されるのは、治療の成分を含む医薬組成物、及び患者において免疫を増強する（例、癌を処置する）ための治療の使用である。本明細書中に記載される治療は、患者において免疫を増強する（例、癌を処置する）ための方法において使用してもよい；患者において免疫を増強する（例、癌を処置する）ための医薬の製造のために使用してもよい；又は患者において免疫を増強する（例、癌を処置する）ために使用してもよい。抗体処置を含む、現在利用可能な処置（例、癌のため）と比較して、本明細書中に記載される治療は、優れた臨床応答を提供しうることが企図される。

【0007】

一部の実施形態では、本開示は、それを必要とするヒト患者において免疫を増強する方法を提供し、患者に以下を投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号９及び１０、又はそれぞれ配列番号１９及び２０の重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を含む抗体と、ヒトＮＫＧ２Ａへの結合について競合若しくは交差競合する、又はそれと同じヒトＮＫＧ２Ａのエピトープに結合する抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；並びに、場合により
ｂ）抗ＰＤ－１抗体又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体、或いはその抗原結合部分；並びに、場合により
ｃ）１つ若しくは２つの抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分、又は抗ＨＥＲ２抗体を含む、抗ＥＧＦＲ抗体成分（「抗ＥＧＦＲ成分」）。

【0008】

特定の実施形態では、方法は、以下を投与することを含む：
ａ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｃ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；
ｄ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｅ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｆ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分。

【0009】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体の重鎖相補性決定領域（Ｈ－ＣＤＲ）１～３及び軽鎖相補性決定領域（Ｌ－ＣＤＲ）１～３は、それぞれ配列番号１～６；又はそれぞれ配列番号１１～１６のアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）は、それぞれ配列番号７及び８；又はそれぞれ配列番号１７及び１８のアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体の重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）は、それぞれ配列番号９及び１０；又はそれぞれ配列番号１９及び２０のアミノ酸配列を含む。

【0010】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３は、以下のアミノ酸配列を含む：
ａ）それぞれ配列番号２１～２６；
ｂ）それぞれ配列番号３１～３６；
ｃ）それぞれ配列番号４１～４６；
ｄ）それぞれ配列番号５１～５６；
ｅ）それぞれ配列番号６１～６６；又は
ｆ）それぞれ配列番号７１～７６。

【0011】

特定の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体のＶＨ及びＶＬは、以下のアミノ酸配列を含む：
ａ）それぞれ配列番号２７及び２８；
ｂ）それぞれ配列番号３７及び３８；
ｃ）それぞれ配列番号４７及び４８；
ｄ）それぞれ配列番号５７及び５８；
ｅ）それぞれ配列番号６７及び６８；又は
ｆ）それぞれ配列番号７７及び７８。

【0012】

特定の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体のＨＣ及びＬＣは、以下のアミノ酸配列を含む：
ａ）それぞれ配列番号２９及び３０；
ｂ）それぞれ配列番号３９及び４０；
ｃ）それぞれ配列番号４９及び５０；
ｄ）それぞれ配列番号５９及び６０；
ｅ）それぞれ配列番号６９及び７０；又は
ｆ）それぞれ、配列番号７９及び８０。

【0013】

抗ＰＤ－１抗体は、例えば、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、又はレチファンリマブであり得る。

【0014】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３は、以下のアミノ酸配列を含む：
ａ）それぞれ配列番号８１～８６；
ｂ）それぞれ配列番号９１～９６；又は
ｃ）それぞれ配列番号１０１～１０６。

【0015】

特定の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体のＶＨ及びＶＬは、以下のアミノ酸配列を含む：
ａ）それぞれ配列番号８７及び８８；
ｂ）それぞれ配列番号９７及び９８；又は
ｃ）それぞれ配列番号１０７及び１０８。

【0016】

特定の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体のＨＣ及びＬＣは、以下のアミノ酸配列を含む：
ａ）それぞれ配列番号８９及び９０；
ｂ）それぞれ配列番号９９及び１００；又は
ｃ）それぞれ配列番号１０９及び１１０。

【0017】

抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、例えば、アテゾリズマブ、アベルマブ、又はデュルバルマブであり得る。

【0018】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ成分は、以下のアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域（Ｈ－ＣＤＲ）１～３及び軽鎖相補性決定領域（Ｌ－ＣＤＲ）１～３を有する抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む：
ａ）それぞれ配列番号１１１～１１６；
ｂ）それぞれ配列番号１２１～１２６；
ｃ）それぞれ配列番号１３１～１３６；又は
ｄ）それぞれ配列番号１４１～１４６。

【0019】

特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分は、以下のアミノ酸配列を含むＶＨ及びＶＬを含む：
ａ）それぞれ配列番号１１７及び１１８；
ｂ）それぞれ配列番号１２７及び１２８；
ｃ）それぞれ配列番号１３７及び１３８；又は
ｄ）それぞれ配列番号１４７及び１４８。

【0020】

特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、以下のアミノ酸配列を含むＨＣ及びＬＣを含む：
ａ）それぞれ配列番号１１９及び１２０；
ｂ）それぞれ配列番号１２９及び１３０；
ｃ）それぞれ配列番号１３９及び１４０；又は
ｄ）それぞれ配列番号１４９及び１５０。

【0021】

抗ＥＧＦＲ抗体は、例えば、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、又はモドツキシマブであり得る。

【0022】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ成分は、それぞれ配列番号１３１～１３６のアミノ酸配列を含むＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３を有する抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分並びにそれぞれ配列番号１４１～１４６のアミノ酸配列を含むＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３を有する抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む。特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲ成分は、それぞれ配列番号１３７及び１３８のアミノ酸配列を含むＶＨ及びＶＬを有する抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分並びにそれぞれ配列番号１４７及び１４８のアミノ酸配列を含むＶＨ及びＶＬを有する抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む。特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲ成分は、それぞれ配列番号１３９及び１４０のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を有する抗ＥＧＦＲ抗体並びにそれぞれ配列番号１４９及び１５０のアミノ酸配列を含むＨＣ及びＬＣを有する抗ＥＧＦＲ抗体を含む。抗ＥＧＦＲ成分は、例えば、フツキシマブ＋モドツキシマブ（例、１：１比率において）であり得る。

【0023】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３は、それぞれ配列番号１５１～１５６又はそれぞれ配列番号１６１～１６６のアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体のＶＨ及びＶＬは、それぞれ配列番号１５７及び１５８又はそれぞれ配列番号１６７及び１６８のアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体のＨＣ及びＬＣは、それぞれ配列番号１５９及び１６０又はそれぞれ配列番号１６９及び１７０のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体若しくは抗原結合部分は、部分、例えばＤＸｄ又はＤＭ１などにコンジュゲートされ得る。抗ＨＥＲ２抗体は、例えば、トラスツズマブ、マルゲツキシマブ、トラスツズマブ デルクステカン（trastuzumab dexrutecan）、又はトラスツズマブ エムタンシンであり得る。

【0024】

一部の実施形態では、方法は、患者に以下を投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号６１～６６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号６７及び６８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；並びにそれぞれ配列番号６９及び７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体。

【0025】

一部の実施形態では、方法は、患者に以下を投与することを含む：
それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；
それぞれ配列番号６１～６６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；及び
それぞれ配列番号１３１～１３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分並びにそれぞれ配列番号１４１～１４６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲ成分；
それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；
それぞれ配列番号６７及び６８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに
それぞれ配列番号１３７及び１３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分並びにそれぞれ配列番号１４７及び１４８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲ成分；又は
それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；
それぞれ配列番号６９及び７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに
それぞれ配列番号１３９及び１４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体並びにそれぞれ配列番号１４９及び１５０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体を含む、抗ＥＧＦＲ成分。

【0026】

一部の実施形態では、方法は、患者に以下を投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号６１～６６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１６１～１６６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号６７及び６８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１６７及び１６８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号６９及び７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１６９及び１７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体。

【0027】

一部の実施形態では、方法は、患者に以下を投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号７１～７６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１６１～１６６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号７７及び７８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１６７及び１６８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号７９及び８０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１６９及び１７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体。

【0028】

一部の実施形態では、方法は、患者に以下を投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３１～３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１５１～１５６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３７及び３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１５７及び１５８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１５９及び１６０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体。

【0029】

一部の実施形態では、方法は、患者に以下を投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号２１～２６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１５１～１５６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号２７及び２８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１５７及び１５８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号２９及び３０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１５９及び１６０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体。

【0030】

一部の実施形態では、方法は、患者に以下を投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；
それぞれ配列番号３１～３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに
それぞれ配列番号１３１～１３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分並びにそれぞれ配列番号１４１～１４６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲ成分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；
それぞれ配列番号３７及び３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに
それぞれ配列番号１３７及び１３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分並びにそれぞれ配列番号１４７及び１４８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；
それぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに
それぞれ配列番号１３９及び１４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体並びに配列番号１４９及び１５０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体を含む、抗ＥＧＦＲ成分。

【0031】

一部の実施形態では、方法は、患者に以下を投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；
それぞれ配列番号２１～２６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに
それぞれ配列番号１３１～１３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分並びにそれぞれ配列番号１４１～１４６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲ成分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；
それぞれ配列番号２７及び２８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに
それぞれ配列番号１３７及び１３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分並びにそれぞれ配列番号１４７及び１４８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；
それぞれ配列番号２９及び３０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに
それぞれ配列番号１３９及び１４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体並びに配列番号１４９及び１５０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体を含む、抗ＥＧＦＲ成分。

【0032】

一部の実施形態では、方法は、患者に以下を投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３１～３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１１１～１１６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３７及び３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１１７及び１１８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１１９及び１２０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体。

【0033】

一部の実施形態では、方法は、患者に以下を投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号２１～２６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１１１～１１６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号２７及び２８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１１７及び１１８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分；又は
ｃ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号２９及び３０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１１９及び１２０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体。

【0034】

上の方法のいずれにおいても、抗体若しくは抗原結合部分は、同時に又は逐次的に患者に投与され得る。

【0035】

一部の実施形態では、患者は、癌、例えば血液学的悪性病変又は固形腫瘍を有する。特定の実施形態では、癌は結腸直腸癌又は胃癌である。

【0036】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分は、８、２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で投与される（例、２週間毎）。抗体若しくは抗原結合部分は、２８日サイクルにおいて投与され得る。一部の実施形態では、抗ＰＤ－１又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体、或いはその抗原結合部分は、２００mgの用量で投与され（例、２週間毎）、一部の場合では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくは抗原結合部分の１サイクル後に投与されてもよい。一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ成分は、６mg/kg、９mg/kgの用量で、又は９mg/kg、それに続く６mg/kgの負荷用量で投与される（例、毎週又は２週間毎）。一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分は、１５mg/kgの用量で投与される（例、３週間毎又は４週間毎）。特定の実施形態では、抗体若しくは抗原結合部分は、静脈内投与（例、静脈内注入）用に製剤化される。

【0037】

本開示は、それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体を患者に投与することを含む、患者において進行性の固形腫瘍悪性病変を処置する方法を提供し、例えば、それにおいて、抗体は、８、２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で２週間毎にＩＶ注入により投与される。

【0038】

更に、本開示は、患者において進行性の固形腫瘍悪性病変を処置する方法を提供し、以下を患者に投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；並びに
ｂ）それぞれ配列番号６９及び７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体、
例えば、それにおいて、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、ＩＶ注入により２週間毎に２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で投与され、それにおいて、抗ＮＫＧ２Ａ抗体投与の２８日サイクルを完了した後、抗ＰＤ－１抗体が、ＩＶ注入により２週間毎に２００mgの用量で投与される。

【0039】

更に、本開示は、患者において進行性の固形腫瘍悪性病変を処置する方法を提供し、以下を患者に投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；並びに
ｂ）それぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体、
例えば、それにおいて、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、ＩＶ注入により２週間毎に２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で投与され、それにおいて、抗ＮＫＧ２Ａ抗体投与の２８日サイクルを完了した後、抗ＰＤ－１抗体は、ＩＶ注入により２週間毎に２００mgの用量で投与される。

【0040】

更に、本開示は、患者の進行性の固形腫瘍悪性病変を処置する方法を提供し、以下を患者に投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；並びに
ｂ）それぞれ配列番号２９及び３０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体、
例えば、それにおいて、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、ＩＶ注入により２週間毎に２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で投与され、それにおいて、抗ＮＫＧ２Ａ抗体投与の２８日サイクルを完了した後、抗ＰＤ－１抗体は、ＩＶ注入により２週間毎に２００mgの用量で投与される。

【0041】

本開示はまた、患者において転移性ＨＥＲ２^＋胃癌を処置する方法を提供し、以下を患者に投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；
ｂ）それぞれ配列番号６９及び７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに
ｃ）それぞれ配列番号１６９及び１７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体。

【0042】

一部の実施形態では、癌は局所進行性及び／又は切除不能である。一部の実施形態では、患者は第一選択の標準治療療法に失敗している。特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、２週間毎に２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で投与される；抗ＮＫＧ２Ａ抗体投与の２８日サイクルを完了した後、抗ＰＤ－１抗体が、２週間毎に２００mgの用量で投与される；及び抗ＨＥＲ２抗体が、３又は４週間毎に１５mg/kgで投与され、それにおいて、抗体はＩＶ注入を介して投与される。

【0043】

本開示はまた、患者において転移性ＨＥＲ２^＋胃癌を処置する方法を提供し、以下を患者に投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；
ｂ）それぞれ配列番号７９及び８０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに
ｃ）それぞれ配列番号１６９及び１７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体。

【0044】

一部の実施形態では、癌は局所進行性及び／又は切除不能である。一部の実施形態では、患者は第一選択の標準治療療法に失敗している。特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、２週間毎に２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で投与される；抗ＮＫＧ２Ａ抗体投与の２８日サイクルを完了した後、抗ＰＤ－１抗体が、２週間毎に２００mgの用量で投与される；及び抗ＨＥＲ２抗体が、３又は４週間毎に１５mg/kgで投与され、それにおいて、抗体は、ＩＶ注入を介して投与される。

【0045】

本開示はまた、患者において転移性結腸直腸癌を処置する方法を提供し、以下を患者に投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；
ｂ）それぞれ配列番号６９及び７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに
ｃ）それぞれ配列番号１３９及び１４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体並びに配列番号１４９及び１５０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体を含む、抗ＥＧＦＲ成分。

【0046】

一部の実施形態では、患者は、低いマイクロサテライト不安定性状態を有する。一部の実施形態では、患者は、（ｉ）以下のコドンのいずれかにおいてＲＡＳ変異を伴わない：エクソン２中のコドン１２及び１３、エクソン３中のコドン５９及び６１、並びにエクソン４中のコドン１１７及び１４６；及び／又は（ｉｉ）ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ変異を伴わない。特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、２週間毎に２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で投与される；抗ＮＫＧ２Ａ抗体投与の２８日サイクルを完了した後、抗ＰＤ－１抗体は、２週間毎に２００mgの用量で投与される；及び抗ＥＧＦＲ成分は、９mg/kgの負荷用量、それに続く１又は２週間毎の６mg/kgの用量で投与され、それにおいて、抗体はＩＶ注入を介して投与される。

【0047】

本開示はまた、患者において転移性結腸直腸癌を処置する方法を提供し、以下を患者に投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；
ｂ）それぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに
ｃ）それぞれ配列番号１３９及び１４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体並びにそれぞれ配列番号１４９及び１５０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体を含む、抗ＥＧＦＲ成分。

【0048】

一部の実施形態では、患者は、低いマイクロサテライト不安定性状態を有する。一部の実施形態では、患者は、（ｉ）以下のコドンのいずれかにおいてＲＡＳ変異を伴わない：エクソン２中のコドン１２及び１３、エクソン３中のコドン５９及び６１、並びにエクソン４中のコドン１１７及び１４６；及び／又は（ｉｉ）ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ変異を伴わない。特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、２週間毎に２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で投与される；抗ＮＫＧ２Ａ抗体投与の２８日サイクルを完了した後、抗ＰＤ－１抗体は、２週間毎に２００mgの用量で投与される；及び抗ＥＧＦＲ成分は、９mg/kgの負荷用量、それに続く１又は２週間毎の６mg/kgの用量で投与され、それにおいて、抗体はＩＶ注入を介して投与される。

【0049】

本開示はまた、患者において転移性結腸直腸癌を処置する方法を提供し、以下を患者に投与することを含む：
ａ）それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；
ｂ）それぞれ配列番号２９及び３０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに
ｃ）それぞれ配列番号１３９及び１４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体並びに配列番号１４９及び１５０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体を含む、抗ＥＧＦＲ成分。

【0050】

一部の実施形態では、患者は、低いマイクロサテライト不安定性状態を有する。一部の実施形態では、患者は、（ｉ）以下のコドンのいずれかにおいてＲＡＳ変異を伴わない：エクソン２中のコドン１２及び１３、エクソン３中のコドン５９及び６１、並びにエクソン４中のコドン１１７及び１４６；及び／又は（ｉｉ）ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ変異を伴わない。特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、２週間毎に２０、１００、３００、７５０、又は１５００mgの用量で投与される；抗ＮＫＧ２Ａ抗体投与の２８日サイクルを完了した後、抗ＰＤ－１抗体は、２週間毎に２００mgの用量で投与される；及び抗ＥＧＦＲ成分は、９mg/kgの負荷用量、それに続く１又は２週間毎の６mg/kgの用量で投与され、それにおいて、抗体はＩＶ注入を介して投与される。

【0051】

一部の実施形態では、本開示の方法は、放射線療法、又は化学療法剤、抗腫瘍剤、及び抗血管新生剤の少なくとも１つを患者に投与することを更に含む。

【0052】

本開示の方法による処置は、腫瘍退行、腫瘍進行の遅延、癌進行の阻害、癌転移の阻害、癌再発若しくは残存疾患の予防、及び／又は延長した生存期間をもたらし得る。一部の実施形態では、本開示の方法による処置は、例えば、未処置患者との比較において、改善された客観的応答率、改善された臨床利益率、改善された応答の持続時間、増加した無増悪生存期間、増加した全生存期間、又はそれらの任意の組み合わせをもたらす。

【0053】

本開示はまた、以下に特異的に結合する多重特異的抗体を提供する：
ａ）ヒトＮＫＧ２Ａ及びヒトＰＤ－１；
ｂ）ヒトＮＫＧ２Ａ及びヒトＰＤ－Ｌ１；
ｃ）ヒトＮＫＧ２Ａ、ヒトＰＤ－１、及びヒトＥＧＦＲ；
ｄ）ヒトＮＫＧ２Ａ、ヒトＰＤ－１、及びヒトＨＥＲ２；
ｅ）ヒトＮＫＧ２Ａ、ヒトＰＤ－Ｌ１、及びヒトＥＧＦＲ；又は
ｆ）ヒトＮＫＧ２Ａ、ヒトＰＤ－Ｌ１、及びヒトＨＥＲ２。

【0054】

一部の実施形態では、多重特異的抗体は以下を含む：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体の抗原結合ドメイン、及び本明細書中に記載される抗ＰＤ－１抗体の抗原結合ドメイン；
ｂ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体の抗原結合ドメイン、及び本明細書中に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体の抗原結合ドメイン；
ｃ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体の抗原結合ドメイン、本明細書中に記載される抗ＰＤ－１抗体の抗原結合ドメイン、及び本明細書中に記載される１つ若しくは２つの抗ＥＧＦＲ抗体の抗原結合部分；
ｄ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体の抗原結合ドメイン、本明細書中に記載される抗ＰＤ－１抗体の抗原結合ドメイン、及び本明細書中に記載される抗ＨＥＲ２抗体の抗原結合部分；
ｅ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体の抗原結合ドメイン、本明細書中に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体の抗原結合ドメイン、及び本明細書中に記載される１つ若しくは２つの抗ＥＧＦＲ抗体の抗原結合部分；又は
ｆ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体の抗原結合ドメイン、本明細書中に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体の抗原結合ドメイン、及び本明細書中に記載される抗ＨＥＲ２抗体の抗原結合部分。

【0055】

本開示はまた、本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分を含み、更に以下を含む医薬組成物を提供する：
ａ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｃ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；
ｄ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｅ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｆ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
並びに医薬的に許容可能な賦形剤。抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＥＧＦＲ成分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分は、例えば、本明細書中に記載されるとおりであり得る。特定の実施形態では、医薬組成物は、本明細書中に記載される方法のいずれかの抗体又は抗原結合部分を含み得る、及び本明細書中に記載される方法のいずれかにおけるヒト患者の処置において使用するためであり得る。

【0056】

本開示はまた、以下との組み合わせにおいて、それを必要とするヒト患者において免疫を増強する際での使用のための、本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分を提供する：
ａ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｃ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；
ｄ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｅ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｆ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分。

【0057】

抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＥＧＦＲ成分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分は、例えば、本明細書中に記載のとおりであり得る。一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分は、本明細書中に記載される方法におけるヒト患者の処置において使用するためである。

【0058】

本開示はまた、以下との組み合わせにおける、本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分の使用を提供する：
ａ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｂ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分；
ｃ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；
ｄ）抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
ｅ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ成分；又は
ｆ）抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分。
それを必要とするヒト患者において免疫を増強するための医薬の製造のため。抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＥＧＦＲ成分、及び抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分は、例えば、本明細書中に記載されるとおりであり得る。一部の実施形態では、医薬は、本明細書中に記載される方法においてヒト患者を処置するためである。

【0059】

本発明の他の特色、目的、及び利点は、続く詳細な説明において明らかである。しかし、詳細な説明は、本発明の実施形態及び態様を示している一方で、限定ではなく、例証だけにより与えられていることを理解すべきである。本発明の範囲内の種々の変更及び修正は、詳細な説明から当業者に明らかとなるであろう。

【図面の簡単な説明】

【0060】

【図1】図１は、６つの異なる腫瘍細胞株の表面での内因性ＨＬＡ－Ｅの発現（パネルＡ）及びこれら６つの腫瘍細胞株のＮＫ媒介性死滅に対するｍＡｂ１の効果（パネルＢ）を示す一対のグラフである。

【図2】図２は、インビトロでのモナリズマブ類似体（パネルＡ）及びＢＭＳ抗ＮＫＧ２Ａ ｍＡｂの類似体（パネルＢ）と比較した、ｍＡｂ１によるγδＴ細胞媒介性腫瘍細胞死滅を示す一対のグラフである。１人の代表的なドナーが描写されている；結果は、ｎ＝３のドナーを使用して検証された。データは平均値±ＳＥＭとして提示されている。

【図3】図３は、単独で、又はｍＡｂ１、モナリズマブ類似体、若しくはイソタイプコントロールとの組み合わせにおいて、用量依存的な様式において滴定されたセツキシマブによる、ＦａＤｕ細胞（ＨＬＡ－Ｅ＋／ＥＧＦＲ＋）の特異的溶解パーセンテージを示す一連のグラフである。

【図4A】図４Ａは、２人のヒトドナー（Ｄ１及びＤ２）における、抗ＥＧＦＲ抗体セツキシマブとの組み合わせにおける、Ａ４３１腫瘍細胞のＮＫ細胞媒介性死滅のｍＡｂ１誘導性増強を示す一対のグラフである。データは平均値±ＳＥＭとして提示されている。

【図4B】図４Ｂは、２人のヒトドナー（Ｄ１及びＤ２）における、抗ＥＧＦＲ抗体併用フツキシマブ／モドツキシマブ（「Ｆｕｔｕｘ／Ｍｏｄｏ」）との組み合わせにおける、Ａ４３１腫瘍細胞のＮＫ細胞媒介性死滅のｍＡｂ１誘導性増強を示す一対のグラフである。データは平均値±ＳＥＭとして提示されている。

【図5】図５は、単独で、又は抗ＥＧＦＲ抗体セツキシマブ（「ｃｅｔｕｘ」）（パネルＡ）又は抗ＥＧＦＲ抗体併用フツキシマブ／モドツキシマブ（「ｆｕｔｕｘ／ｍｏｄｏ」）（パネルＢ）との組み合わせにおける、ｍＡｂ１により影響されるＮＫ細胞活性化（ＣＤ１３７発現により評価される）を示す一対のグラフである。各々のデータポイントはドナーを表す。

【図6】図６は、Ａ４３１細胞、ＩＬ－２、及び示される抗体又は抗体の組み合わせの存在におけるインビトロでの初代ＮＫ細胞によるＩＦＮγの分泌を示すグラフである。各々のデータポイントはドナーを表す。

【図7】図７は、２人のヒトドナー（Ｄ１及びＤ２）における、抗ＰＤ－Ｌ１抗体アベルマブとの組み合わせにおける、Ａ４３１又はＭＤＡ－ＭＢ－２３１腫瘍細胞のＮＫ細胞媒介性死滅のｍＡｂ１誘導性増強を示す一対のグラフである。データは平均値±ＳＥＭとして提示されている。

【図8】図８は、ＮＫ細胞活性化（ＣＤ１３７）（パネルＡ）及びＩＦＮγ分泌（パネルＢ）の誘導に対する、アベルマブ（「Ａｖｅ」）との組み合わせにおけるｍＡｂ１の効果を示す一対のグラフである。

【図9A】図９Ａは、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１ヒト乳房腫瘍細胞を用いて皮下移植されたＣＤ３４ヒト化マウスにおける腫瘍成長を示すグラフである。灰色領域は処置期間を示す。データは平均値±ＳＥＭとして提示されている。＊ｐ＜０．０５。

【図9B】図９Ｂは、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１腫瘍浸潤リンパ球のフローサイトメトリー分析を示す一連のグラフである。ヒトＣＤ４５＋及びＣＤ３＋細胞のパーセンテージ並びにＣＤ８／ＣＤ４ Ｔ細胞の比率が、溶媒と比較して、示された抗体又は抗体の組み合わせを用いて処置された腫瘍について示されている。数字は、生細胞（ＣＤ４５＋）、ヒトＣＤ４５＋細胞（ＣＤ３＋）のパーセンテージ、又は比率（ＣＤ４及びＣＤ８）として提示されている。

【図10】図１０は、ｍＡｂ１単独療法及び併用療法の臨床試験のデザインを示す図である。

【図11】図１１は、ＭＣ３８－ＨＬＡＥマウス腫瘍細胞を用いて皮下移植されたｈＮＫＧ２Ａ／ｈＣＤ９４ ＫＩマウスにおける腫瘍根絶のパーセントを示す。マウスは週３回、合計９用量を用いて処置された。腫瘍体積は週３回測定された。灰色領域は処置期間を示す。データは平均値±ＳＥＭとして提示されている。

【図12】図１２は、ＭＩＰ－１βのトラスツズマブ及びｍＡｂ１誘導性ＮＫ細胞分泌を示す。健康な個人からのヒト初代ＮＫＧ２Ａ^＋ＮＫ細胞を、ＨＬＡ－Ｅ形質導入Ｎ８７、ＢｘＰＣ３、ＳＫＯＶ３、Ａ３７５、Ａ５４９及びＪＩＭＴ－１標的細胞と４８時間にわたり１０ng/mL ＩＬ－２の存在において共培養した。共培養上清中のＭＩＰ－１βの分泌をＥＬＩＳＡにより定量化した。

【図13】図１３は、３人の健康なドナー（Ａ、Ｂ及びＣ）から単離された末梢血リンパ球（ＰＢＬ）に対する二重ＰＤ－１及びＮＫＧ２Ａ遮断の併用効果を示す一連のグラフである。ＰＢＬを、ＨＬＡ－Ｅ並びにＰＤ－Ｌ１を過剰発現するＨＥＲ２陽性ＳＫＯＶ３細胞と共培養し、トラスツズマブ又はトラスツズマブ＋ゾレドロネートを用いて活性化した。

【図14】図１４は、結腸直腸癌の処置におけるｍＡｂ１＋ペムブロリズマブの臨床試験のデザインを示す図である。

【図15】図１５は、胃癌の処置におけるｍＡｂ１＋ペムブロリズマブ＋トラスツズマブの臨床試験のデザインを示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0061】

発明の詳細な説明
本開示は、ヒトＮＫＧ２Ａを標的化する新たな単剤療法及び組成物、並びにヒトＮＫＧ２Ａ；ヒトＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１；及び／又はヒトＥＧＦＲ若しくはＨＥＲ２を、これらの標的に結合する抗体を使用することにより標的化する新たな併用療法及び組成物を提供する。治療（即ち、単剤療法及び併用療法）及び組成物は、ヒト患者において癌を処置するために使用することができる。他に記述されない限り、本明細書中で使用される「ＮＫＧ２Ａ」、「ＰＤ－１」、「ＰＤ－Ｌ１」、「ＥＧＦＲ」、及び「ＨＥＲ２」は、それらの標的のヒト形態を指す。ヒトＮＫＧ２Ａポリペプチド配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ受託番号Ｐ２６７１５（配列番号１７１）の下で入手可能である。ヒトＰＤ－１ポリペプチド配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ受託番号Ｑ１５１１６（配列番号１７２）の下で入手可能である。ヒトＰＤ－Ｌ１ポリペプチド配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ受託番号Ｑ９ＮＺＱ７（配列番号１７３）の下で入手可能である。ヒトＥＧＦＲポリペプチド配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ受託番号Ｐ００５３３（配列番号１７４）の下で入手可能である。ヒトＨＥＲ２ポリペプチド配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ受託番号Ｐ０４６２６（配列番号１７５）の下で入手可能である。これらの配列を表４中に示す。

【0062】

用語「抗体」（Ａｂ）又は「免疫グロブリン」（Ｉｇ）は、本明細書中で使用されるように、ジスルフィド結合により相互に接続されている、２つの重（Ｈ）鎖（約５０～７０kDa）及び２つの軽（Ｌ）鎖（約２５kDa）を含む四量体を指す。各々の重鎖は、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び重鎖定常領域（ＣＨ）で構成される。各々の軽鎖は、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）及び軽鎖定常領域（ＣＬ）で構成される。ＶＨ及びＶＬドメインは、「フレームワーク領域」（ＦＲ）と呼ばれる、より保存された領域が散在する「相補性決定領域」（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域中に更に細分することができる。各々のＶＨ及びＶＬは、３つのＣＤＲ（Ｈ－ＣＤＲは、本明細書中では、重鎖からのＣＤＲを命名し；及びＬ－ＣＤＲは、本明細書中では、軽鎖からのＣＤＲを命名する）及び４つのＦＲで構成され、アミノ末端からカルボキシル末端に以下の順序において配置されている：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４。重鎖又は軽鎖におけるアミノ酸番号の、並びにＦＲ及びＣＤＲ領域の割り当ては、IMGT（登録商標）の定義（Lefranc et al., Dev Comp Immunol(2003)27(1):55-77)；ＥＵナンバリング；又は、Kabat, Sequences of Proteins of Immunological Interest(National Institutes of Health, Bethesda, MD(1987 and 1991))の定義；Chothia & Lesk, J. Mol. Biol.(1987)196:901-17；Chothia et al., Nature(1989)342:878-83；MacCallum et al., J. Mol. Biol.(1996)262:732-45；又はHonegger and Pluckthun, J. Mol. Biol.(2001)309(3):657-70に従ってよい。

【0063】

用語「組換え抗体」は、抗体をコードするヌクレオチド配列を含む細胞又は細胞株から発現される抗体を指し、それにおいて、当該ヌクレオチド配列は、天然には細胞に関連付けられない。

【0064】

用語「単離タンパク質」「単離ポリペプチド」又は「単離抗体」は、その起源又は派生の供給源（１）のために、その天然状態においてそれに付随する天然に関連付けられる成分と会合していない、（２）同じ種からの他のタンパク質を含まない、（３）異なる種からの細胞から発現される、及び／又は（４）自然において生じないタンパク質、ポリペプチド又は抗体を指す。このように、化学的に合成された、又はそれが天然に由来する細胞とは異なる細胞系において合成されたポリペプチドは、その天然に関連付けられる成分から「単離」される。タンパク質はまた、当技術分野において周知のタンパク質精製技術を使用して、単離により、天然に関連付けられる成分を実質的に含まないようにすることもできる。

【0065】

用語「親和性」は、抗原と抗体の間の引力の尺度を指す。抗原についての抗体の固有の引力は、典型的には、特定の抗体－抗原相互作用の結合親和平衡定数（Ｋ_Ｄ）として表現される。抗体は、結合についてのＫ_Ｄが≦１μM、例えば、≦１００nM又は≦１０nMである場合、抗原に特異的に結合すると言われる。Ｋ_Ｄ結合親和定数は、例えば、IBIS TechnologiesからのIBIS MX96 SPRシステム又はCarterra LSA SPRプラットフォームを使用する表面プラズモン共鳴（BIAcore（商標））により、又は、例えば、ForteBioからのOctet（商標）システムを使用したバイオレイヤー干渉法により測定することができる。

【0066】

本明細書中で使用される用語「エピトープ」は、抗体又は関連分子、例えば二重特異的結合分子などに特異的に結合する抗原の一部（決定基）を指す。エピトープ決定基は、一般的に、分子、例えばアミノ酸又は炭水化物又は糖側鎖などの化学的に活性な表面基からなり、一般的に特定の三次元構造特徴、並びに特定の電荷特徴を有する。エピトープは「線状」又は「立体構造的」であり得る。線状エピトープでは、タンパク質（例えば抗原など）と相互作用分子（例えば抗体など）の間での相互作用の点の全てが、タンパク質の一次アミノ酸配列に沿って直線的に生じる。立体構造エピトープでは、相互作用の点が、一次アミノ酸配列中で互いに分離されているタンパク質上のアミノ酸残基にわたって生じる。一度、抗原上の所望のエピトープが決定されると、当技術分野において周知の技術を使用して、そのエピトープに対する抗体を生成することが可能である。例えば、線状エピトープに対する抗体は、例えば、線状エピトープのアミノ酸残基を有するペプチドを用いて動物を免疫化することにより生成され得る。立体構造的エピトープに対する抗体は、例えば、立体構造的エピトープの関連アミノ酸残基を含むミニドメインを用いて動物を免疫化することにより生成され得る。特定のエピトープに対する抗体はまた、例えば、目的の標的分子又はその関連部分を用いて動物を免疫化し、次にエピトープへの結合についてスクリーニングすることにより生成することができる。

【0067】

抗体が、本明細書中に記載される抗体と同じエピトープに結合する、又は抗体との結合について競合するか否かは、限定されないが、競合アッセイ、エピトープビニング、及びアラニンスキャニングを含む、当技術分野において公知の方法を使用することにより決定することができる。一部の実施形態では、本開示の抗体を、飽和条件下でその標的に結合させ、次に、標的に結合する試験抗体の能力を測定することを可能にする。試験抗体が、参照抗体と同時に標的に結合することができる場合、次に、試験抗体は参照抗体とは異なるエピトープに結合する。しかし、試験抗体が同時に標的に結合することできない場合、次に、試験抗体は、同じエピトープ、重複するエピトープ、又は本開示の抗体により結合されるエピトープに近接するエピトープに結合する。この実験は、例えば、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、BIACORE（商標）、ＳＰＲ、バイオレイヤー干渉法、又はフローサイトメトリーを使用して実施することができる。抗体が別の抗体と交差競合するか否かを試験するために、上に記載される競合方法を２つの方向、即ち、公知の抗体が、試験抗体を遮断するか否かを決定する、又はその逆において使用してもよい。そのような相互競合実験は、例えば、IBIS MX96又はCarterra LSA SPR機器又はOctet（商標）システムを使用して実施してもよい。

【0068】

本明細書中で使用される抗体の用語「抗原結合部分」（又は単に「抗体部分」）は、抗原に特異的に結合する能力を保持する抗体の１つ又は複数の部分又は断片を指す。全長抗体の特定の断片が、抗体の抗原結合機能を遂行することができることが示されている。用語「抗原結合部分」内に包含される結合断片の例は、（ｉ）Ｆａｂ断片：ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる一価の断片；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片：ヒンジ領域でジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片；並びに（ｖｉ）抗原に特異的に結合することが可能な、単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）。更に、Ｆｖ断片の２つのドメインであるＶＬ及びＶＨは別々の遺伝子によりコードされているが、それらは、組換え方法を使用して、ＶＬ及びＶＨドメインが対合して一価分子（一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として公知）を形成する単一のタンパク質鎖としてそれらを作製することを可能にする合成リンカーにより連結することができる。また、本開示内にあるのは、ＶＨ及び／又はＶＬを含む抗原結合分子である。ＶＨの場合では、分子はまた、ＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、又はＣＨ３領域の１つ又は複数を含み得る。そのような一本鎖抗体がまた、抗体の用語「抗原結合部分」内に包含されることが意図される。他の形態の一本鎖抗体、例えばダイアボディなどがまた、包含される。ダイアボディは、二価の二重特異性抗体であり、それにおいて、ＶＨ及びＶＬドメインが単一のポリペプチド鎖上で発現されるが、しかし、同じ鎖上の２つのドメイン間での対合を可能にするには短過ぎるリンカーを使用しており、それにより、ドメインが、別の鎖の相補的ドメインと対合することを強制し、２つの抗原結合部位を作製する。

【0069】

抗体部分、例えばＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片などは、従来の技術、例えば抗体全体のパパイン又はペプシン消化などを使用して抗体全体から調製することができる。更に、抗体、抗体部分及びイムノアドヘシン分子は、例えば、本明細書中に記載されるような標準的な組換えＤＮＡ技術を使用して得ることができる。

【0070】

抗体のクラス（アイソタイプ）及びサブクラスは、当技術分野において公知の任意の方法により決定され得る。一般的に、抗体のクラス及びサブクラスは、抗体の特定のクラス及びサブクラスについて特異的な抗体を使用して決定され得る。そのような抗体は、商業的に入手可能である。クラス及びサブクラスは、ＥＬＩＳＡ又はウェスタンブロット並びに他の技術により決定することができる。或いは、クラス及びサブクラスは、抗体の重鎖及び／又は軽鎖の定常領域の全て又は一部を配列決定すること、それらのアミノ酸配列を、免疫グロブリンの種々のクラス及びサブクラスの公知のアミノ酸配列と比較すること、並びに抗体のクラス及びサブクラスを決定する。

【0071】

他に示さない限り、本開示中で言及される全ての抗体アミノ酸残基番号は、IMGT（登録商標）ナンバリングスキームの下の残基番号である。

【0072】

抗ＮＫＧ２Ａ抗体
一部の実施形態では、本明細書中に記載される治療（例、単独療法又は併用療法）又は組成物は、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分を含む。特定の実施形態において、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、本明細書中で抗体ｍＡｂ１若しくはｍＡｂ２として言及される抗体、又はこれらのいずれかのバリアントであり、ここで、バリアントは、抗体の抗原結合特異性を失うことなく、例えば、当該抗体と比べて特定の最小アミノ酸変化（例、フレームワーク領域中にあり得る１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０のアミノ酸変化）を含む。ｍＡｂ１は、それぞれ配列番号９及び１０の重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を含む。ｍＡｂ２は、それぞれ配列番号１９及び２０の重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を含む。

【0073】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、ヒトＮＫＧ２Ａへの結合について、抗体ｍＡｂ１又はｍＡｂ２と競合又は交差競合する、或いはそれと同じ、ヒトＮＫＧ２Ａのエピトープに結合する。

【0074】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、それぞれ配列番号１～３又は１１～１３のアミノ酸配列を含むＨ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0075】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、配列番号７又は１７のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）であるＶＨを有する。特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、配列番号７又は１７のアミノ酸配列を含むＶＨを有する。

【0076】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、配列番号９又は１９のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）であるＨＣを有する。特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、配列番号９又は１９のアミノ酸配列を含むＨＣを有する。

【0077】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、それぞれ配列番号４～６又は１４～１６のアミノ酸配列を含むＬ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0078】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、配列番号８又は１８のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＬを有する。特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、配列番号８又は１８のアミノ酸配列を含むＶＬを有する。

【0079】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、配列番号１０又は２０のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）であるＬＣを有する。特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、配列番号１０又は２０のアミノ酸配列を含むＬＣを有する。

【0080】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、上の重鎖配列のいずれか及び上の軽鎖配列のいずれかを含む。

【0081】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、以下のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む：
ａ）それぞれ配列番号１～６；又は
ｂ）それぞれ配列番号１１～１６。

【0082】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、以下のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨ及びＶＬを含む：
ａ）それぞれ配列番号７及び８；又は
ｂ）それぞれ配列番号１７及び１８。

【0083】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、以下のアミノ酸配列を含むＶＨ及びＶＬを含む：
ａ）それぞれ配列番号７及び８；又は
ｂ）それぞれ配列番号１７及び１８。

【0084】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、以下のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨ及びＶＬを含む：
ａ）それぞれ配列番号９及び１０；又は
ｂ）それぞれ配列番号１９及び２０。

【0085】

一部の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体は、以下のアミノ酸配列を含むＨＣ及びＬＣを含む：
ａ）それぞれ配列番号９及び１０；又は
ｂ）それぞれ配列番号１９及び２０。

【0086】

一部の実施形態では、本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分は、米国仮特許出願第６３／１９５，４７０号において記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくは抗原結合部分であり、それは、その全体において参照により本明細書中に援用される。

【0087】

抗ＰＤ－１抗体
一部の実施形態では、本明細書中に記載される併用療法又は組成物は、抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分を含む。特定の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、ｍＡｂ３（それぞれ配列番号６９及び７０の重及び軽鎖アミノ酸配列を含む）、レチファンリマブ、又はこれらのいずれかのバリアントであり、ここで、バリアントは、例えば、抗体の抗原結合特異性を失うことなく、当該抗体と比べて特定の最小限のアミノ酸変化（例、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０のアミノ酸変化、それは、例えば、フレームワーク領域中にあり得る）を含み得る。

【0088】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ヒトＰＤ－１への結合について、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、ｍＡｂ３、又はレチファンリマブと競合又は交差競合する、或いはそれらと同じ、ヒトＰＤ－１のエピトープに結合する。

【0089】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、ｍＡｂ３、又はレチファンリマブのＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0090】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、ｍＡｂ３、又はレチファンリマブのＶＨ及びＶＬと少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一のＶＨ及びＶＬを含む。

【0091】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、ｍＡｂ３、又はレチファンリマブのＶＨ及びＶＬを含む。

【0092】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、ｍＡｂ３、又はレチファンリマブのＨＣ及びＬＣと少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣ及びＬＣを含む。

【0093】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、ｍＡｂ３、又はレチファンリマブのＨＣ及びＬＣを含む。

【0094】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、それぞれ配列番号２１～２３、３１～３３、４１～４３、５１～５３、６１～６３、又は７１～７３のアミノ酸配列を含むＨ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0095】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号２７、３７、４７、５７、６７、又は７７のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨを有する。特定の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号２７、３７、４７、５７、６７、又は７７のアミノ酸配列を含むＶＨを有する。

【0096】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号２９、３９、４９、５９、６９、又は７９のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣを有する。特定の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号２９、３９、４９、５９、６９、又は７９のアミノ酸配列を含むＨＣを有する。

【0097】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、それぞれ配列番号２４～２６、３４～３６、４４～４６、５４～５６、６４～６６、又は７４～７６のアミノ酸配列を含むＬ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0098】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号２８、３８、４８、５８、６８、又は７８のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＬを有する。特定の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号２８、３８、４８、５８、６８、又は７８のアミノ酸配列を含むＶＬを有する。

【0099】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号３０、４０、５０、６０、７０、又は８０のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＬＣを有する。特定の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号３０、４０、５０、６０、７０、又は８０のアミノ酸配列を含むＬＣを有する。

【0100】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、上の重鎖配列のいずれか及び上の軽鎖配列のいずれかを含む。

【0101】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、以下のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む：
ａ）それぞれ配列番号２１～２６；
ｂ）それぞれ配列番号３１～３６；
ｃ）それぞれ配列番号４１～４６；
ｄ）それぞれ配列番号５１～５６；
ｅ）それぞれ配列番号６１～６６；又は
ｆ）それぞれ配列番号７１～７６。

【0102】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、以下のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例えば、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨ及びＶＬを含む：
ａ）それぞれ配列番号２７及び２８；
ｂ）それぞれ配列番号３７及び３８；
ｃ）それぞれ配列番号４７及び４８；
ｄ）それぞれ配列番号５７及び５８；
ｅ）それぞれ配列番号６７及び６８；又は
ｆ）それぞれ配列番号７７及び７８。

【0103】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、以下のアミノ酸配列を含むＶＨ及びＶＬを含む：
ａ）それぞれ配列番号２７及び２８；
ｂ）それぞれ配列番号３７及び３８；
ｃ）それぞれ配列番号４７及び４８；
ｄ）それぞれ配列番号５７及び５８；
ｅ）それぞれ配列番号６７及び６８；又は
ｆ）それぞれ配列番号７７及び７８。

【0104】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、以下のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例えば、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣ及びＬＣを含む：
ａ）それぞれ配列番号２９及び３０；
ｂ）それぞれ配列番号３９及び４０；
ｃ）それぞれ配列番号４９及び５０；
ｄ）それぞれ配列番号５９及び６０；
ｅ）それぞれ配列番号６９及び７０；又は
ｆ）それぞれ、配列番号７９及び８０。

【0105】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、以下のアミノ酸配列を含むＨＣ及びＬＣを含む：
ａ）それぞれ配列番号２９及び３０；
ｂ）それぞれ配列番号３９及び４０；
ｃ）それぞれ配列番号４９及び５０；
ｄ）それぞれ配列番号５９及び６０；
ｅ）それぞれ配列番号６９及び７０；又は
ｆ）それぞれ、配列番号７９及び８０。

【0106】

一部の実施形態では、本明細書中に記載される抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分は、国際公開第２０１７／０５５５４７号において記載されている抗ＰＤ－１抗体若しくは抗原結合部分であり、それは、参照により、その全体において本明細書中に援用される。

【0107】

抗ＰＤ－Ｌ１抗体
一部の実施形態では、本明細書中に記載される併用療法又は組成物は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分を含む。特定の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、又はこれらのいずれかのバリアントであり、ここで、バリアントは、例えば、抗体の抗原結合特異性を失うことなく、当該抗体と比べて特定の最小アミノ酸変化（例、１、２、、３、４、５、６、７、８、９、又は１０のアミノ酸変化、それは、例えば、フレームワーク領域中にあり得る）を含む。

【0108】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ヒトＰＤ－Ｌ１への結合について、アテゾリズマブ、アベルマブ又はデュルバルマブと競合又は交差競合する、或いはそれと同じ、ヒトＰＤ－Ｌ１のエピトープに結合する。

【0109】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、アベルマブ、又はデュルバルマブのＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0110】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、アベルマブ、又はデュルバルマブのＶＨ及びＶＬと少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨ及びＶＬを含む。

【0111】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、アベルマブ、又はデュルバルマブのＶＨ及びＶＬを含む。

【0112】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、アベルマブ、又はデュルバルマブのＨＣ及びＬＣと少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣ及びＬＣを含む。

【0113】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブ、アベルマブ、又はデュルバルマブのＨＣ及びＬＣを含む。

【0114】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、それぞれ配列番号８１～８３、９１～９３、又は１０１～１０３のアミノ酸配列を含むＨ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0115】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８７、９７、又は１０７のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨを有する。特定の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８７、９７、又は１０７のアミノ酸配列を含むＶＨを有する。

【0116】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９、９９、又は１０９のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣを有する。特定の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９、９９、又は１０９のアミノ酸配列を含むＨＣを有する。

【0117】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、それぞれ配列番号８４～８６、９４～９６、又は１０４～１０６のアミノ酸配列を含むＬ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0118】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８８、９８、又は１０８のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）のＶＬを有する。特定の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８８、９８、又は１０８のアミノ酸配列を含むＶＬを有する。

【0119】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号９０、１００、又は１１０のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例えば、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＬＣを有する。特定の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号９０、１００、又は１１０のアミノ酸配列を含むＬＣを有する。

【0120】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、上の重鎖配列のいずれか及び上の軽鎖配列のいずれかを含む。

【0121】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、以下のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む：
ａ）それぞれ配列番号８１～８６；
ｂ）それぞれ配列番号９１～９６；又は
ｃ）それぞれ配列番号１０１～１０６。

【0122】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、以下のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例えば、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨ及びＶＬを含む：
ａ）それぞれ配列番号８７及び８８；
ｂ）それぞれ配列番号９７及び９８；又は
ｃ）それぞれ配列番号１０７及び１０８。

【0123】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、以下のアミノ酸配列を含むＶＨ及びＶＬを含む：
ａ）それぞれ配列番号８７及び８８；
ｂ）それぞれ配列番号９７及び９８；又は
ｃ）それぞれ配列番号１０７及び１０８。

【0124】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、以下のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例えば、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣ及びＬＣを含む：
ａ）それぞれ配列番号８９及び９０；
ｂ）それぞれ配列番号９９及び１００；又は
ｃ）それぞれ配列番号１０９及び１１０。

【0125】

一部の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、以下のアミノ酸配列を含むＨＣ及びＬＣを含む：
ａ）それぞれ配列番号８９及び９０；
ｂ）それぞれ配列番号９９及び１００；又は
ｃ）それぞれ配列番号１０９及び１１０。

【0126】

抗ＥＧＦＲ抗体
一部の実施形態では、本明細書中に記載される併用療法又は組成物は、抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分を含む。特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、モドツキシマブ、又はこれらのいずれかのバリアントであり、ここで、バリアントは、例えば、抗体の抗原結合特異性を失うことなく、当該抗体と比べて特定の最小アミノ酸変化（例、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０のアミノ酸変化、それは、例えば、フレームワーク領域中にあり得る）を含む。

【0127】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、ヒトＥＧＦＲへの結合について、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、又はモドツキシマブと競合又は交差競合する、或いはそれらと同じ、ヒトＥＧＦＲのエピトープに結合する。

【0128】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、又はモドツキシマブのＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0129】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、又はモドツキシマブのＶＨ及びＶＬと少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨ及びＶＬを含む。

【0130】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、又はモドツキシマブのＶＨ及びＶＬを含む。

【0131】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、又はモドツキシマブのＨＣ及びＬＣと少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣ及びＬＣを含む。

【0132】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、又はモドツキシマブのＨＣ及びＬＣを含む。

【0133】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、それぞれ配列番号１１１～１１３、１２１～１２３、１３１～１３３、又は１４１～１４３のアミノ酸配列を含むＨ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0134】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、配列番号１１７、１２７、１３７、又は１４７のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨを有する。特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、配列番号１１７、１２７、１３７、又は１４７のアミノ酸配列を含むＶＨを有する。

【0135】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、配列番号１１９、１２９、１３９、又は１４９のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣを有する。特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、配列番号１１９、１２９、１３９、又は１４９のアミノ酸配列を含むＨＣを有する。

【0136】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、それぞれ配列番号１１４～１１６、１２４～１２６、１３４～１３６、又は１４４～１４６のアミノ酸配列を含むＬ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0137】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、配列番号１１８、１２８、１３８、又は１４８のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＬを有する。特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、配列番号１１８、１２８、１３８、又は１４８のアミノ酸配列を含むＶＬを有する。

【0138】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、配列番号１２０、１３０、１４０、又は１５０のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるのＬＣを有する。特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、配列番号１２０、１３０、１４０、又は１５０のアミノ酸配列を含むＬＣを有する。

【0139】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、上の重鎖配列のいずれか及び上の軽鎖配列のいずれかを含む。

【0140】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、以下のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む：
ａ）それぞれ配列番号１１１～１１６；
ｂ）それぞれ配列番号１２１～１２６；
ｃ）それぞれ配列番号１３１～１３６；又は
ｄ）それぞれ配列番号１４１～１４６。

【0141】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、以下のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるのＶＨ及びＶＬを含む：
ａ）それぞれ配列番号１１７及び１１８；
ｂ）それぞれ配列番号１２７及び１２８；
ｃ）それぞれ配列番号１３７及び１３８；又は
ｄ）それぞれ配列番号１４７及び１４８。

【0142】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、以下のアミノ酸配列を含むＶＨ及びＶＬを含む：
ａ）それぞれ配列番号１１７及び１１８；
ｂ）それぞれ配列番号１２７及び１２８；
ｃ）それぞれ配列番号１３７及び１３８；又は
ｄ）それぞれ配列番号１４７及び１４８。

【0143】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、以下のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣ及びＬＣを含む：
ａ）それぞれ配列番号１１９及び１２０；
ｂ）それぞれ配列番号１２９及び１３０；
ｃ）それぞれ配列番号１３９及び１４０；又は
ｄ）それぞれ配列番号１４９及び１５０。

【0144】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体は、以下のアミノ酸配列を含むＨＣ及びＬＣを含む：
ａ）それぞれ配列番号１１９及び１２０；
ｂ）それぞれ配列番号１２９及び１３０；
ｃ）それぞれ配列番号１３９及び１４０；又は
ｄ）それぞれ配列番号１４９及び１５０。

【0145】

一部の実施形態では、フツキシマブ及びモドツキシマブの抗ＥＧＦＲの組み合わせ（anti-EGFR combination）（例、１：１の比率）、又は一方若しくは両方の抗体のバリアントを含む組み合わせが、本開示の併用療法又は組成物が「抗ＥＧＦＲ抗体」を要求する場合に使用され得る。一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体又は抗ＥＧＦＲの組み合わせは、「抗ＥＧＦＲ成分」として言及される。

【0146】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、ヒトＥＧＦＲへの結合について、それぞれフツキシマブ及びモドツキシマブと競合又は交差競合する、或いはそれらと同じ、ヒトＥＧＦＲのエピトープに結合する第一及び第二の抗体を含む。

【0147】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、それぞれフツキシマブ及びモドツキシマブのＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３を含む第一及び第二の抗体を含む。

【0148】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、それぞれフツキシマブ及びモドツキシマブのＶＨ及びＶＬと少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨ及びＶＬを含む第一及び第二の抗体を含む。

【0149】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、それぞれフツキシマブ及びモドツキシマブのＶＨ及びＶＬを含む第一及び第二の抗体を含む。

【0150】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、それぞれフツキシマブ及びモドツキシマブのＨＣ及びＬＣと少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣ及びＬＣを含む第一及び第二の抗体を含む。

【0151】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、それぞれフツキシマブ及びモドツキシマブのＨＣ及びＬＣを含む第一及び第二の抗体を含む。

【0152】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、それぞれ配列番号１３１～１３３及び配列番号１４１～１４３のアミノ酸配列を含むＨ－ＣＤＲ１～３を有する第一及び第二の抗体を含む。

【0153】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、配列番号１３７のアミノ酸配列及び配列番号１４７のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨをそれぞれ含む第一及び第二の抗体を含む。特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＶＨを有する第一の抗体、及び配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＶＨを有する第二の抗体を含む。

【0154】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、配列番号１３９のアミノ酸配列及び配列番号１４９のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣをそれぞれ含む第一及び第二の抗体を含む。特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、配列番号１３９のアミノ酸配列を含むＨＣを有する第一の抗体、及び配列番号１４９のアミノ酸配列を含むＨＣを有する第二の抗体を含む。

【0155】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、それぞれ配列番号１３４～１３６及び配列番号１４４～１４６のアミノ酸配列をそれぞれ含むＬ－ＣＤＲ１～３を有する第一及び第二の抗体を含む。

【0156】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、配列番号１３８のアミノ酸配列及び配列番号１４８のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＬをそれぞれ含む第一及び第二の抗体を含む。特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、配列番号１３８のアミノ酸配列を含むＶＬを有する第一の抗体、及び配列番号１４８のアミノ酸配列を含むＶＬを有する第二の抗体を含む。

【0157】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、配列番号１４０のアミノ酸配列及び配列番号１５０のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＬＣをそれぞれ含む第一及び第二の抗体を含む。特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＬＣを有する第一の抗体及び配列番号１５０のアミノ酸配列を含むＬＣを有する第二の抗体を含む。

【0158】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、それぞれ第一及び第二の抗体について上の重鎖配列のいずれか及び上の軽鎖配列のいずれかを有する第一及び第二の抗体を含む。

【0159】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、以下を含む：
ａ）それぞれ配列番号１３１～１３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む第一の抗体；並びに
ｂ）それぞれ配列番号１４１～１４６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む第二の抗体。

【0160】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、以下を含む：
ａ）それぞれ配列番号１３７及び１３８のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨ及びＶＬを含む第一の抗体；並びに
ｂ）それぞれ配列番号１４７及び１４８のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨ及びＶＬを含む第二の抗体。

【0161】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、以下を含む：
ａ）それぞれ配列番号１３７及び１３８のアミノ酸配列を含むＶＨ及びＶＬを含む第一の抗体；並びに
ｂ）それぞれ配列番号１４７及び１４８のアミノ酸配列を含むＶＨ及びＶＬを含む第二の抗体。

【0162】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、以下を含む：
ａ）それぞれ配列番号１３９及び１４０のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣ及びＬＣを含む第一の抗体；並びに
ｂ）それぞれ配列番号１４９及び１５０のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣ及びＬＣを含む第二の抗体。

【0163】

一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲの組み合わせは、以下を含む：
ａ）それぞれ配列番号１３９及び１４０のアミノ酸配列を含むＨＣ及びＬＣを含む第一の抗体；並びに
ｂ）それぞれ配列番号１４９及び１５０のアミノ酸配列を含むＨＣ及びＬＣを含む第二の抗体。

【0164】

［０００１］ 一部の実施形態では、本明細書中に記載される抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分又は抗ＥＧＦＲの組み合わせは、国際公開第２００８／１０４１８３号において記載されている抗ＥＧＦＲ抗体若しくは抗原結合部分又は組み合わせであり、それは、参照によりその全体において本明細書中に援用される。

【0165】

抗ＨＥＲ２抗体
一部の実施形態では、本明細書中に記載される併用療法又は組成物は、抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分を含む。特定の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、トラスツズマブ若しくはマルゲツキシマブ、又はこれらのいずれかのバリアントであり、ここで、バリアントは、例えば、抗体の抗原結合特異性を失うことなく、当該抗体と比べて、特定の最小アミノ酸変化（例、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０のアミノ酸の変化、それは、例えば、フレームワーク領域中にあり得る）を含み得る。

【0166】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、ヒトＨＥＲ２への結合について、トラスツズマブ若しくはマルゲツキシマブと競合又は交差競合する、或いはそれと同じ、ヒトＨＥＲ２のエピトープに結合する。

【0167】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、トラスツズマブ又はマルゲツキシマブのＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0168】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、トラスツズマブ又はマルゲツキシマブのＶＨ及びＶＬと少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨ及びＶＬを含む。

【0169】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、トラスツズマブ又はマルゲツキシマブのＶＨ及びＶＬを含む。

【0170】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、トラスツズマブ又はマルゲツキシマブのＨＣ及びＬＣと少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一のＨＣ及びＬＣを含む。

【0171】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、トラスツズマブ又はマルゲツキシマブのＨＣ及びＬＣを含む。

【0172】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、それぞれ配列番号１５１～１５３又は１６１～１６３のアミノ酸配列を含むＨ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0173】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号１５７又は１６７のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨを有する。特定の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号１５７又は１６７のアミノ酸配列を含むＶＨを有する。

【0174】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号１５９又は１６９のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣを有する。特定の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号１５９又は１６９のアミノ酸配列を含むＨＣを有する。

【0175】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、それぞれ配列番号１５４～１５６又は１６４～１６６のアミノ酸配列を含むＬ－ＣＤＲ１～３を含む。

【0176】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号１５８又は１６８のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＬを有する。特定の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号１５８又は１６８のアミノ酸配列を含むＶＬを有する。

【0177】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号１６０又は１７０のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＬＣを有する。特定の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、配列番号１６０又は１７０のアミノ酸配列を含むＬＣを有する。

【0178】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、上の重鎖配列のいずれか及び上の軽鎖配列のいずれかを含む。

【0179】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、以下のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む：
ａ）それぞれ配列番号１５１～１５６；又は
ｂ）それぞれ配列番号１６１～１６６。

【0180】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、以下のアミノ酸配列と少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＶＨ及びＶＬを含む：
ａ）それぞれ配列番号１５７及び１５８；又は
ｂ）それぞれ配列番号１６７及び１６８。

【0181】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、以下のアミノ酸配列を含むＶＨ及びＶＬを含む：
ａ）それぞれ配列番号１５７及び１５８；又は
ｂ）それぞれ配列番号１６７及び１６８。

【0182】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、少なくとも９０%（例、少なくとも９２%、少なくとも９５%、少なくとも９６%、少なくとも９７%、少なくとも９８%、又は少なくとも９９%）同一であるＨＣ及びＬＣを含む：
ａ）それぞれ配列番号１５９及び１６０；又は
ｂ）それぞれ配列番号１６９及び１７０。

【0183】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体は、以下のアミノ酸配列を含むＨＣ及びＬＣを含む：
ａ）それぞれ配列番号１５９及び１６０；又は
ｂ）それぞれ配列番号１６９及び１７０。

【0184】

一部の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体薬物複合体（ＡＤＣ）を、本開示の併用療法又は組成物が「抗ＨＥＲ２抗体」を必要とする場合に使用してもよい。特定の実施形態では、ＡＤＣは、本明細書中に記載される抗ＨＥＲ２抗体及びＤＸｄ又はＤＭ１を含む。特定の実施形態では、ＡＤＣはトラスツズマブ デルクステカン（trastuzumab dexrutecan）又はトラスツズマブ エムタンシンである。

【0185】

本明細書中に記載される抗体のクラスは、別のクラス又はサブクラスに変化され得る又は切り替えられ得る。本開示の一部の実施形態では、ＶＬ又はＶＨをコードする核酸分子は、それが、それぞれＣＬ又はＣＨをコードする核酸配列を含まないように、当技術分野において周知の方法を使用して単離される。ＶＬ又はＶＨをコードする核酸分子は次に、異なるクラスの免疫グロブリン分子からの、それぞれＣＬ又はＣＨをコードする核酸配列に作動可能に連結される。これは、上に記載されるように、ＣＬ又はＣＨ配列を含むベクター又は核酸分子を使用して達成され得る。例えば、本来はＩｇＭであった抗体がＩｇＧにクラススイッチされ得る。更に、クラススイッチを使用して、１つのＩｇＧサブクラスが別のサブクラスに、例えば、ＩｇＧ_１からＩｇＧ_２に変換され得る。κ軽鎖定常領域は、例えば、λ軽鎖定常領域に、又はその逆に変化させることができる。所望のＩｇアイソタイプを有する、本明細書中に記載される抗体を産生するための例示的な方法は、抗体の重鎖をコードする核酸分子及び抗体の軽鎖をコードする核酸分子を単離する、重鎖の可変ドメインを得る、重鎖の可変ドメインについてのコード配列を、所望のアイソタイプの重鎖の定常領域についてのコード配列と連結させる、連結された配列によりコードされる軽鎖及び重鎖を細胞中で発現させる、並びに所望のアイソタイプを有する抗体を収集する工程を含む。

【0186】

本明細書中に記載される抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、又はＩｇＤ分子であり得るが、しかし、典型的には、ＩｇＧアイソタイプ、例えば、ＩｇＧサブクラスＩｇＧ_１、ＩｇＧ_２ａ又はＩｇＧ_２ｂ、ＩｇＧ_３又はＩｇＧ_４である。一部の実施形態では、抗体はアイソタイプサブクラスＩｇＧ_１である。

【0187】

一部の実施形態では、抗体は、Ｆｃ領域中に少なくとも１つの変異を含み得る。多くの異なるＦｃ 変異が公知であり、ここで、これらの変異によって、抗体のエフェクター機能が変化する。例えば、一部の実施形態では、抗体は、エフェクター機能を低下させる少なくとも１つの変異、例えば、位置２２８、２３３、２３４及び２３５の１つ又は複数での変異をＦｃ領域中に含み、ここで、アミノ酸位置はＥｕナンバリングに従って番号付けされる。

【0188】

一部の実施形態では、例えば、抗体がＩｇＧ_１サブクラスである場合、位置２３４及び２３５でのアミノ酸残基の１つ又は両方が、例えば、ＬｅｕからＡｌａ（Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）に変異され得る。これらの変異は、ＩｇＧ_１抗体のＦｃ領域のエフェクター機能を低下させる。アミノ酸位置は、Ｅｕナンバリングスキームに従って番号付けされる。

【0189】

一部の実施形態では、例えば、抗体がＩｇＧ_４サブクラスである場合、それは変異Ｓ２２８Ｐを含んでもよく、ここで、アミノ酸位置はＥｕナンバリングスキームに従って番号付けされる。この変異は、望ましくないＦａｂアーム交換を低下させることが公知である。

【0190】

特定の実施形態では、本明細書中に記載される抗体若しくはその抗原結合部分は、抗体又は抗体部分と１つ又は複数の他のタンパク質又はペプチドとの共有結合的又は非共有結合的な会合により形成される、より大きなイムノアドヘシン分子の一部であり得る。そのようなイムノアドヘシン分子の例は、四量体ｓｃＦｖ分子を作製するためのストレプトアビジンコア領域の使用（Kipriyanov et al., Human Antibodies and Hybridomas(1995)6: 93-101）並びに二価及びビオチン化ｓｃＦｖ分子を作製するためのシステイン残基、マーカーペプチド及びＣ末端ポリヒスチジンタグの使用（Kipriyanov et al., Mol. Immunol.(1994)31:1047-58）を含む。他の例は、抗体からの１つ又は複数のＣＤＲが、共有結合的又は非共有結合的のいずれかで分子中に組み入れられて、それを、目的の抗原に特異的に結合するイムノアドヘシンにする場合を含む。そのような実施形態では、ＣＤＲは、より大きなポリペプチド鎖の一部として組み入れられてもよく、別のポリペプチド鎖に共有結合的に連結されてもよく、又は非共有結合的に組み入れられてもよい。

【0191】

別の態様では、別のポリペプチドに連結された、本明細書中に記載される抗体の全部又は一部を含む融合抗体又はイムノアドヘシンが作製され得る。特定の実施形態では、抗体の可変ドメインだけが、ポリペプチドに連結される。特定の実施形態では、抗体のＶＨドメインが、第一のポリペプチドに連結される一方で、抗体のＶＬドメインは、ＶＨ及びＶＬドメインが互いに相互作用して抗原結合部位を形成することができるような様式において、第一のポリペプチドと会合する第二のポリペプチドに連結される。一部の実施形態では、ＶＨドメインは、ＶＨ及びＶＬドメインが互いに相互作用することができるように、リンカーによりＶＬドメインから分離されている（例、一本鎖抗体）。ＶＨ－リンカー－ＶＬ抗体が次に、目的のポリペプチドに連結される。また、２つ（又はそれ以上）の一本鎖抗体が互いに連結された融合抗体を作製することができる。これは、単一のポリペプチド鎖上に二価若しくは多価抗体を作製したい場合、又は二重特異性抗体を作製したい場合に有用である。

【0192】

一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）を作製するために、ＶＨ及びＶＬをコードするＤＮＡ断片は、例えば、アミノ酸配列（Ｇｌｙ_４－Ｓｅｒ）_３（配列番号１７６）をコードする、柔軟なリンカーをコードする別の断片に作動可能に連結され、ＶＨ及びＶＬ配列が、柔軟なリンカーにより連結されたＶＬ及びＶＨドメインを有する、近接した一本鎖タンパク質として発現させることができる。例えば、Bird et al., Science(1988)242:423 6；Huston et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA(1988)85:5879 83；及びMcCafferty et al., Nature(1990)348: 552-4を参照のこと。一本鎖抗体は、単一のＶＨ及びＶＬだけが使用される場合には一価；２つのＶＨ及びＶＬが使用される場合には二価；又は２を上回るＶＨ及びＶＬが使用される場合は多価であり得る。例えば、本明細書中に記載される標的に特異的に結合する多重特異的又は多価抗体が生成され得る。

【0193】

他の実施形態では、他の修飾抗体を、抗体コード核酸分子を使用して調製してもよい。例えば、「カッパボディ」（Ill et al., Protein Eng.(1997)10:949-57）、「ミニボディ」（Martin et al., EMBO J.(1994)13:5303-9）、「ダイアボディ」（Holliger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA(1993)90:6444-8）、又は「Ｊａｎｕｓｉｎｓ」（Traunecker et al., EMBO J.(1991)10:3655-9及びTraunecker et al., Int. J. Cancer(Suppl.)(1992)7:51-2）が、本明細書の教示に従って標準的な分子生物学的技術を使用して調製され得る。

【0194】

本明細書中に記載される抗体若しくは抗原結合部分は、誘導体化する、又は別の分子（例、別のペプチド又はタンパク質）に連結することができる。一般的に、抗体又はその部分は、標的結合が誘導体化又は標識により有害に影響されないように誘導体化される。したがって、本開示の抗体及び抗体部分は、本明細書中に記載される抗体のインタクトな形態及び修飾された形態の両方を含むことが意図される。例えば、本開示の抗体又は抗体部分は、１つ又は複数の他の分子実体、例えば別の抗体（例、二重特異性抗体又はダイアボディ）、検出薬剤、医薬的薬剤、及び／又は抗体若しくは抗体部分と別の分子（例えばストレプトアビジンコア領域又はポリヒスチジンタグなど）との会合を媒介することができるタンパク質若しくはペプチドに（化学的カップリング、遺伝子融合、非共有結合的な会合又は他の方法により）機能的に連結することができる。

【0195】

誘導体化抗体の１つの種類は、２つ又はそれ以上の抗体（同じ種類の又は異なる種類の、例えば二重特異性抗体を作製するため）を架橋することにより産生される。適切な架橋剤は、適したスペーサーにより分離された２つの異なる反応性基を有するヘテロ二官能性（例、ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル）又はホモ二官能性（例、スベリン酸ジスクシンイミジル）である架橋剤を含む。そのようなリンカーは、例えば、Pierce Chemical Company（イリノイ州ロックフォード）から入手可能である。

【0196】

抗体若しくは抗原結合部分はまた、化学基、例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、メチル基若しくはエチル基、又は炭水化物基などを用いて誘導体化することもできる。これらの基は、抗体の生物学的特徴を改善する（例、血清半減期を増加させる）ために有用であり得る。

【0197】

本明細書中に記載される抗体若しくは抗原結合部分がまた、標識され得る。本明細書中で使用される場合、用語「標識」又は「標識された」は、抗体中での別の分子の組み入れを指す。一部の実施形態では、標識は、検出可能なマーカーであり、例えば、放射性標識アミノ酸の組み入れ、又は標識アビジンにより検出することができるビオチニル部分の、ポリペプチドへの付着である（例、蛍光マーカーを含むストレプトアビジン、又は光学的若しくは比色的方法により検出することができる酵素活性）。一部の実施形態では、標識又はマーカーは、治療用、例えば、薬物複合体又は毒素であり得る。ポリペプチド及び糖タンパク質を標識する種々の方法が、当技術分野において公知であり、使用され得る。
ポリペプチドの標識の例は、限定されないが、以下を含む：放射性同位体又は放射性核種（例、３Ｈ、１４Ｃ、１５Ｎ、３５Ｓ、９０Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１３１Ｉ）、蛍光標識（例、ＦＩＴＣ、ローダミン、ランタニド蛍光体）、酵素標識（例、西洋ワサビペルオキシダーゼ、βガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスはターゼ）、化学発光マーカー、ビオチニル基、二次レポーターにより認識される所定のポリペプチドエピトープ（例、ロイシンジッパーペア配列、二次抗体についての結合部位、金属結合ドメイン、エピトープタグ）、磁性物質、例えばガドリニウムキレートなど、毒素、例えば百日咳毒素など、タキソール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１－デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、及びピューロマイシン、並びにそれらの類似体又はホモログ。一部の実施形態では、標識を種々の長さのスペーサーアームにより付着させて、潜在的な立体障害を低下させる。

【0198】

一部の実施形態では、本明細書中に記載される抗体若しくは抗原結合部分は、細胞傷害性薬剤とコンジュゲートされて免疫複合体を形成し得る。一部の実施形態では、本開示による抗体若しくは抗原結合部分は、放射性同位体に結合され得る。

【0199】

特定の実施形態では、本明細書中に記載される抗体は、中性形態（両性イオン形態を含む）において、又は正若しくは負に荷電した種として存在し得る。一部の実施形態では、抗体は対イオンとコンジュゲートされ、医薬的に許容可能な塩を形成し得る。

【0200】

併用療法
抗ＮＫＧ２Ａ抗体を含む単剤療法に加えて、本開示は、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分を、（１）抗ＰＤ－１抗体、（２）抗ＰＤ－Ｌ１抗体、（３）抗ＥＧＦＲ抗体、（４）抗ＨＥＲ２抗体、又は（５）それらの任意の組み合わせとの組み合わせにおいて含む併用療法を提供する。特定の実施形態では、併用療法は以下を含む：
ａ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、及び
ｂ）抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合部分。

【0201】

特定の実施形態では、併用療法は以下を含む：
ａ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、及び
ｂ）抗ＥＧＦＲ抗体若しくは抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分。

【0202】

特定の実施形態では、併用療法は以下を含む：
ａ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、
ｂ）抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合部分、及び
ｃ）抗ＥＧＦＲ抗体又は抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分。

【0203】

抗ＮＫＧ２Ａ抗体、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、及び／又は抗ＨＥＲ２抗体は、本明細書中に記載される前記標的に対する抗体であり得る。併用療法は、例えば、前記抗体若しくは抗原結合部分、又は前記抗体若しくは抗原結合部分を含む医薬組成物を使用する治療方法の形態をとり得る。

【0204】

一部の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、及び
ｂ）本明細書中に記載される抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分（例、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、ｍＡｂ３、又はレチファンリマブ）。

【0205】

一部の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、
ｂ）本明細書中に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分（例、アテゾリズマブ、アベルマブ、又はデュルバルマブ）。

【0206】

一部の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、
ｂ）本明細書中に記載される抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分（例、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、モドツキシマブ、又はフツキシマブ＋モドツキシマブ）。
一部の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、
ｂ）本明細書中に記載される抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分（例、トラスツズマブ、マルゲツキシマブ、トラスツズマブ デルクステカン（trastuzumab dexrutecan）、又はトラスツズマブ エムタンシン）。

【0207】

一部の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、
ｂ）本明細書中に記載される抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分（例、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、ｍＡｂ３、又はレチファンリマブ）、及び
ｃ）本明細書中に記載される抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分（例、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、モドツキシマブ、又はフツキシマブ＋モドツキシマブ）。

【0208】

一部の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、
ｂ）本明細書中に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分（例、アテゾリズマブ、アベルマブ、又はデュルバルマブ）、及び
ｃ）本明細書中に記載される抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分（例、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、モドツキシマブ、又はフツキシマブ＋モドツキシマブ）。

【0209】

一部の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、
ｂ）本明細書中に記載される抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分（例、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、ｍＡｂ３、又はレチファンリマブ）、及び
ｃ）本明細書中に記載される抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分（例、トラスツズマブ、マルゲツキシマブ、トラスツズマブ デルクステカン（trastuzumab dexrutecan）、又はトラスツズマブ エムタンシン）。

【0210】

一部の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、
ｂ）本明細書中に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分（例、アテゾリズマブ、アベルマブ、又はデュルバルマブ）、及び
ｃ）本明細書中に記載される抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分（例、トラスツズマブ、マルゲツキシマブ、トラスツズマブ デルクステカン（trastuzumab dexrutecan）、又はトラスツズマブ エムタンシン）。

【0211】

一部の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
（１）ｍＡｂ１、及び（２）ｍＡｂ３；
（１）ｍＡｂ１、及び（２）ペムブロリズマブ；
（１）ｍＡｂ１、及び（２）セツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、及び（２）フツキシマブ＋モドツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、及び（２）アベルマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ｍＡｂ３、及び（３）フツキシマブ＋モドツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ｍＡｂ３、及び（３）マルゲツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）レチファンリマブ、及び（３）マルゲツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ペムブロリズマブ、及び（３）トラスツズマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ニボルマブ、及び（３）トラスツズマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ペムブロリズマブ、及び（３）フツキシマブ＋モドツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ニボルマブ、及び（３）フツキシマブ＋モドツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ニボルマブ、及び（３）セツキシマブ；又は
（１）ｍＡｂ１、（２）ペムブロリズマブ、及び（３）セツキシマブ。

【0212】

一部の実施形態では、併用療法又は組成物は、当該抗体の６つのＣＤＲ、ＶＨ及びＶＬ、又はＨＣ及びＬＣを有する抗体若しくは抗原結合部分を含む。

【0213】

上で参照した抗体についての配列は、例えば、表４中に見出されるものであり得る。これらの配列についての配列番号は、下の表１中に示すように割り当てられる。

【表1】

【0214】

特定の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
－ それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号６１～６６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに、それぞれ配列番号１３１～１３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗体若しくはその抗原結合部分、並びにそれぞれ配列番号１４１～１４６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲの組み合わせ；
－ それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号６７及び６８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに、それぞれ配列番号１３７及び１３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗体若しくはその抗原結合部分、並びにそれぞれ配列番号１４７及び１４８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲの組み合わせ；又は
－ それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号６９及び７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに、それぞれ配列番号１３９及び１４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗体、並びにそれぞれ配列番号１４９及び１５０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗体を含む、抗ＥＧＦＲの組み合わせ。

【0215】

特定の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
－ それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号６１～６６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１６１～１６６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
－ それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号６７及び６８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１６７及び１６８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；又は
－ それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号６９及び７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１６９及び１７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体。

【0216】

特定の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
－ それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号７１～７６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１６１～１６６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
－ それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号７７及び７８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１６７及び１６８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；又は
－ それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号７９及び８０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１６９及び１７０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体。

【0217】

特定の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
－ それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号３１～３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；
－ それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号３７及び３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；又は
－ それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；並びにそれぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体。

【0218】

特定の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
－ それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３１～３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１５１～１５６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
－ それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３７及び３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１５７及び１５８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；又は
－ それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１５９及び１６０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体。

【0219】

特定の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
－ それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号２１～２６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１５１～１５６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；
－ それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号２７及び２８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１５７及び１５８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；又は
－ それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号２９及び３０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１５９及び１６０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＨＥＲ２抗体。

【0220】

特定の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
－ それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３１～３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに、それぞれ配列番号１３１～１３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗体若しくはその抗原結合部分、並びにそれぞれ配列番号１４１～１４６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲの組み合わせ；
－ それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３７及び３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに、それぞれ配列番号１３７及び１３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗体若しくはその抗原結合部分、並びにそれぞれ配列番号１４７及び１４８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲの組み合わせ；又は
－ それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに、それぞれ配列番号１３９及び１４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗体、並びにそれぞれ配列番号１４９及び１５０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗体を含む、抗ＥＧＦＲの組み合わせ。

【0221】

特定の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
－ それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号２１～２６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに、それぞれ配列番号１３１～１３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗体若しくはその抗原結合部分、並びにそれぞれ配列番号１４１～１４６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲの組み合わせ；
－ それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号２７及び２８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びに、それぞれ配列番号１３７及び１３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗体若しくはその抗原結合部分、並びにそれぞれ配列番号１４７及び１４８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗体若しくはその抗原結合部分を含む、抗ＥＧＦＲの組み合わせ；又は
－ それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号２９及び３０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びに、それぞれ配列番号１３９及び１４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗体、並びにそれぞれ配列番号１４９及び１５０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗体を含む、抗ＥＧＦＲの組み合わせ。

【0222】

特定の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
－ それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３１～３６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１１１～１１６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分；
－ それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号３７及び３８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１１７及び１１８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分；又は
－ それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号３９及び４０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１１９及び１２０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体。

【0223】

特定の実施形態では、本開示の併用療法又は組成物は、以下を含む：
－ それぞれ配列番号１～６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号２１～２６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１１１～１１６のＨ－ＣＤＲ１～３及びＬ－ＣＤＲ１～３アミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分；
－ それぞれ配列番号７及び８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；それぞれ配列番号２７及び２８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分；並びにそれぞれ配列番号１１７及び１１８のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分；又は
－ それぞれ配列番号９及び１０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＮＫＧ２Ａ抗体；それぞれ配列番号２９及び３０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＰＤ－１抗体；並びにそれぞれ配列番号１１９及び１２０のＨＣ及びＬＣアミノ酸配列を含む抗ＥＧＦＲ抗体。

【0224】

多重特異的結合分子
さらなる態様では、本開示は、（１）抗ＰＤ－１抗体、（２）抗ＰＤ－Ｌ１抗体、（３）抗ＥＧＦＲ抗体、（４）抗ＨＥＲ２抗体、又は（５）それらの任意の組み合わせの結合特異性との組み合わせにおける、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分の結合特異性を有する（例、抗原結合部分、例えば６つのＣＤＲを含む抗原結合ドメインなどを含む）多重特異的結合分子を提供する。特定の実施形態では、多重特異的結合分子は、以下の結合特異性を有する（例、抗原結合部分、例えば６つのＣＤＲを含む抗原結合ドメインなどを含む）：
ａ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、及び
ｂ）抗ＰＤ－１又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体、或いはその抗原結合部分。

【0225】

特定の実施形態では、多重特異的結合分子は、以下の結合特異性を有する（例、抗原結合部分、例えば６つのＣＤＲを含む抗原結合ドメインなどを含む）：
ａ）抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、
ｂ）抗ＰＤ－１又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体、或いはその抗原結合部分、及び
ｃ）抗ＥＧＦＲ又は抗ＨＥＲ２抗体、或いはその抗原結合部分。
抗ＮＫＧ２Ａ抗体、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、及び／又は抗ＨＥＲ２抗体は、本明細書中に記載される当該標的に対する抗体であり得る。

【0226】

一部の実施形態では、多重特異的結合分子は、以下の結合特異性を有する（例、抗原結合部分、例えば６つのＣＤＲを含む抗原結合ドメインなどを含む）：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、及び
ｂ）本明細書中に記載される抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分（例、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、ｍＡｂ３、又はレチファンリマブ）。

【0227】

一部の実施形態では、多重特異的結合分子は、以下の結合特異性を有する（例、抗原結合部分、例えば６つのＣＤＲを含む抗原結合ドメインなどを含む）：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、及び
ｂ）本明細書中に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分（例、アテゾリズマブ、アベルマブ、又はデュルバルマブ）。

【0228】

一部の実施形態では、多重特異的結合分子は、以下の結合特異性を有する（例、抗原結合部分、例えば６つのＣＤＲを含む抗原結合ドメインなどを含む）：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、
ｂ）本明細書中に記載される抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分（例、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、ｍＡｂ３、又はレチファンリマブ）、及び
ｃ）本明細書中に記載される抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分（例、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、モドツキシマブ、又はフツキシマブ＋モドツキシマブ）。

【0229】

一部の実施形態では、多重特異的結合分子は、以下の結合特異性を有する（例、抗原結合部分、例えば６つのＣＤＲを含む抗原結合ドメインなどを含む）：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、
ｂ）本明細書中に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分（例、アテゾリズマブ、アベルマブ、又はデュルバルマブ）、及び
ｃ）本明細書中に記載される抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分（例、セツキシマブ、パニツムマブ、フツキシマブ、モドツキシマブ、又はフツキシマブ＋モドツキシマブ）。

【0230】

一部の実施形態では、多重特異的結合分子は、以下の結合特異性を有する（例、抗原結合部分、例えば６つのＣＤＲを含む抗原結合ドメインなどを含む）：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、
ｂ）本明細書中に記載される抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分（例、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、ｍＡｂ３、又はレチファンリマブ）、及び
ｃ）本明細書中に記載される抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分（例、トラスツズマブ、マルゲツキシマブ、トラスツズマブ デルクステカン（trastuzumab dexrutecan）、又はトラスツズマブ エムタンシン）。

【0231】

一部の実施形態では、多重特異的結合分子は、以下の結合特異性を有する（例、抗原結合部分、例えば６つのＣＤＲを含む抗原結合ドメインなどを含む）：
ａ）本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分（例、ｍＡｂ１又はｍＡｂ２）、
ｂ）本明細書中に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分（例、アテゾリズマブ、アベルマブ、又はデュルバルマブ）、及び
ｃ）本明細書中に記載される抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分（例、トラスツズマブ、マルゲツキシマブ、トラスツズマブ デルクステカン（trastuzumab dexrutecan）、又はトラスツズマブ エムタンシン）。

【0232】

［０００２］ 一部の実施形態では、多重特異的結合分子は、以下の結合特異性を有する（例、抗原結合部分、例えば６つのＣＤＲ又はＶＨ及びＶＬを含む抗原結合ドメインなどを含む）：
（１）ｍＡｂ１、及び（２）ｍＡｂ３；
（１）ｍＡｂ１、及びペムブロリズマブ；
（１）ｍＡｂ１、及び（２）セツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、及び（２）フツキシマブ＋モドツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、及び（２）アベルマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ｍＡｂ３、及び（３）フツキシマブ＋モドツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ｍＡｂ３、及び（３）マルゲツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）レチファンリマブ、及び（３）マルゲツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ペムブロリズマブ、及び（３）トラスツズマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ニボルマブ、及び（３）トラスツズマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ペムブロリズマブ、及び（３）フツキシマブ＋モドツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ニボルマブ、及び（３）フツキシマブ＋モドツキシマブ；
（１）ｍＡｂ１、（２）ニボルマブ、及び（３）セツキシマブ、又は
（１）ｍＡｂ１、（２）ペムブロリズマブ、及び（３）セツキシマブ。

【0233】

多重特異的結合分子は当技術分野において公知であり、異なる種類の多重特異的結合分子の例が、本明細書中の他の箇所に与えられている。そのような多重特異的（例、二重特異的又は三重特異的）結合分子は、本開示の治療により包含される。

【0234】

核酸分子及びベクター
また、記載されるのは、本明細書中に記載される核酸分子及び配列、抗体若しくはその抗原結合部分である。一部の実施形態では、異なる核酸分子が、抗体若しくは抗原結合部分の重鎖及び軽鎖アミノ酸配列をコードする。他の実施形態では、同じ核酸分子が、抗体若しくは抗原結合部分の重鎖及び軽鎖アミノ酸配列をコードする。

【0235】

ヌクレオチド配列への参照は、他に特定されない限り、その補体を包含する。このように、特定の配列を有する核酸への参照は、その相補配列を有する、その相補鎖を包含すると理解すべきである。本明細書中で言及される用語「ポリヌクレオチド」は、リボヌクレオチド若しくはデオキシヌクレオチドのいずれか、又はいずれかの種類のヌクレオチドの修飾型である、少なくとも１０塩基長のヌクレオチドのポリマー形態を意味する。この用語は、一及び二本鎖形態を含む。

【0236】

一部の実施形態では、本開示は、本明細書中に記載される抗体若しくはその抗原結合部分の重鎖若しくはその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列、又は軽鎖若しくはその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列、或いはそれらの両方を含む核酸分子を提供する。

【0237】

本開示はまた、配列番号７～１０、１７～２０、２７～３０、３７～４０、４７～５０、５７～６０、６７～７０、７７～８０、８７～９０、９７～１００、１０７～１１０、１１７～１２０、１２７～１３０、１３７～１４０、１４７～１５０、１５７～１６０、又は１６７～１７０からなる群より選択されるアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列と少なくとも７０%、７５%、８０%、８５%、９０%、９５%、９７%、９８%、又は９９%同一であるヌクレオチド配列を提供する。核酸配列の文脈における用語「配列同一性パーセント」は、最大の対応のために整列させた場合に同一である２つの配列中の残基を指す。配列同一性の比較の長さは、少なくとも約９ヌクレオチド、通常には少なくとも約１８ヌクレオチド、より通常には少なくとも約２４ヌクレオチド、典型的には少なくとも約２８ヌクレオチド、より典型的には少なくとも約３２ヌクレオチド、好ましくは少なくとも約３６、４８又はそれ以上のヌクレオチドのストレッチにわたり得る。ヌクレオチド配列の同一性を測定するために使用することができる、当技術分野において公知の多数の異なるアルゴリズムがある。例えば、ポリヌクレオチド配列は、ＦＡＳＴＡ、Ｇａｐ又はＢｅｓｔｆｉｔを使用して比較することができ、それらは、Wisconsin Package Version 10.0Genetics Computer Group（ＧＣＧ）（ウィスコンシン州マディソン）におけるプログラムである。ＦＡＳＴＡは、例えば、プログラムＦＡＳＴＡ２及びＦＡＳＴＡ３を含み、クエリ配列と検索配列の間での最良の重複の領域のアラインメント及び配列同一性パーセントを提供する（例えば、Pearson, Methods Enzymol.(1990)183:63-98；Pearson, Methods Mol. Biol.(2000)132:185-219；Pearson, Methods Enzymol.(1996)266:227-58；及びPearson, J. Mol. Biol.(1998)276:71-84を参照のこと；参照により本明細書中に援用される）。他に特定されない限り、特定のプログラム又はルゴリズムについてのデフォルトパラメータが使用される。例えば、核酸配列間の配列同一性パーセントは、ＦＡＳＴＡを、そのデフォルトパラメータ（６のワードサイズ及びスコアリングマトリックスについてのＮＯＰＡＭ係数）と使用して、又はＧａｐを、参照により本明細書中に援用されるＧＣＧバージョン６．１において提供されるそのデフォルトパラメータと使用して決定することができる。

【0238】

上の実施形態のいずれにおいても、核酸分子は単離され得る。本明細書中で「単離された」又は「精製された」として言及される核酸分子は、（１）それらの起源のゲノムＤＮＡ若しくは細胞ＲＮＡの核酸から分離された；及び／又は（２）自然において生じない核酸である。

【0239】

さらなる態様では、本開示は、本明細書中に記載される抗体若しくはその抗原結合部分の鎖の１つ又は両方を発現するために適切なベクターを提供する。本明細書中で使用される用語「ベクター」は、それが連結されている別の核酸を輸送することが可能な核酸分子を意味する。一部の実施形態では、ベクターはプラスミド、即ち、追加のＤＮＡセグメントが連結され得るＤＮＡの環状二本鎖片である。更に、特定のベクターは、それらが作動可能に連結されている遺伝子の発現を向けることが可能である。そのようなベクターは、本明細書中で「組換え発現ベクター」（又は単純に「発現ベクター」）として言及される。

【0240】

本開示は、本明細書中に記載される抗体若しくはその抗原結合部分の重鎖、軽鎖、又は重鎖及び軽鎖の両方をコードする核酸分子を含むベクターを提供する。特定の実施形態では、本開示のベクターは、本明細書中に記載される核酸分子を含む。本開示は更に、融合タンパク質、修飾抗体、抗体断片、及びそれらのプローブをコードする核酸分子を含むベクターを提供する。ベクターは更に、発現制御配列を含み得る。

【0241】

本明細書中で使用される用語「発現制御配列」は、それらが連結されるコード配列の発現及びプロセシングに影響を及ぼすために必要であるポリヌクレオチド配列を意味する。発現制御配列は、適した転写開始、終結、プロモーター及びエンハンサー配列；効率的なＲＮＡプロセシングシグナル、例えばスプライシング及びポリアデニル化シグナルなど；細胞質ｍＲＮＡを安定化する配列；翻訳効率を増強する配列（即ち、コザックコンセンサス配列）；タンパク質の安定性を増強する配列；及び、望ましい場合、タンパク質分泌を増強する配列を含む。そのような制御配列の性質は宿主生物に依存して異なる；原核生物において、そのような制御配列は、一般的に、プロモーター、リボソーム結合部位、及び転写終結配列を含む；真核生物において、一般的に、そのような制御配列はプロモーター及び転写終結配列を含む。用語「制御配列」は、最低限、その存在が発現及びプロセシングに必須である全ての成分を含むことを意図しており、また、その存在が有利である追加の成分、例えば、リーダー配列及び融合パートナー配列を含むことができる。

【0242】

一部の実施形態では、本明細書中に記載される核酸分子は、任意の供給源からの重鎖定常領域をコードするヌクレオチド配列にインフレームで連結された、本明細書中に記載される抗体若しくは抗原結合部分からのＶＨドメインをコードするヌクレオチド配列を含む。同様に、本明細書中に記載される核酸分子は、任意の供給源からの軽鎖定常領域をコードするヌクレオチド配列にインフレームで連結された、本明細書中に記載される抗体若しくは抗原結合部分からのＶＬドメインをコードするヌクレオチド配列を含むことができる。

【0243】

本開示のさらなる態様では、ＶＨ及び／又はＶＬをコードする核酸分子は、全長抗体遺伝子に「変換」され得る。一部の実施形態では、ＶＨ又はＶＬドメインをコードする核酸分子は、それぞれ重鎖定常（ＣＨ）領域又は軽鎖定常（ＣＬ）領域を既にコードしている発現ベクター中への挿入により全長抗体遺伝子に変換され、ＶＨセグメントがベクター内のＣＨセグメントに作動可能に連結され、及び／又はＶＬセグメントがベクター内のＣＬセグメントに作動可能に連結される。別の態様では、ＶＨ及び／又はＶＬドメインをコードする核酸分子は、標準的な分子生物学的手法を使用して、ＶＨ及び／又はＶＬドメインをコードする核酸分子を、ＣＨ及び／又はＣＬ領域をコードする核酸分子に連結する、例えば、ライゲーションすることにより全長抗体遺伝子に変換される。全長重鎖及び／又は軽鎖をコードする核酸分子を次に、それらが導入された細胞から発現させ、抗体を単離することができる。

【0244】

一部の実施形態では、フレームワーク領域は、結果として得られるフレームワーク領域が、対応する生殖系列遺伝子のアミノ酸配列を有するように変異される。変異をフレームワーク領域又は定常領域中に作製して、例えば、抗体の半減期を増加させる。例えば、国際公開第００／０９５６０号を参照のこと。フレームワーク領域又は定常領域中の変異をまた作製して、抗体の免疫原性を変化させる、及び／又は別の分子への共有結合的な又は非共有結合的な結合のための部位を提供することができる。本開示によれば、抗体は、可変ドメインのＣＤＲ若しくはフレームワーク領域のいずれか１つ又は複数において、又は定常領域において変異を有し得る。

【0245】

宿主細胞並びに抗体及び抗体組成物産生の方法
また、記載されるのは、本開示の併用療法（例、組成物）を産生する方法である。一実施形態は、本明細書中に記載される抗体を産生する方法であって、抗体を発現することが可能な組換え宿主細胞を提供すること、抗体の発現のために適切な条件下で当該宿主細胞を培養すること、及び結果として得られた抗体を単離することを含む。そのような組換え宿主細胞におけるそのような発現により産生される抗体を、本明細書中では「組換え抗体」として言及する。また、記載されるのは、そのような宿主細胞の子孫細胞、及び同により産生される抗体である。

【0246】

用語「組換え宿主細胞」（又は単純に「宿主細胞」）は、本明細書中で使用されるように、組換え発現ベクターが導入された細胞を意味する。定義により、組換え宿主細胞は自然において生じない。本開示は、例えば、本明細書中に記載されるベクターを含み得る宿主細胞を提供する。本開示はまた、本明細書中に記載される抗体若しくはその抗原結合部分の重鎖若しくはその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列、軽鎖若しくはその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列、又はそれらの両方を含む宿主細胞を提供する。「組換え宿主細胞」及び「宿主細胞」は、特定の対象細胞だけでなく、また、そのような細胞の子孫を意味することを理解すべきである。特定の修飾が、変異又は環境の影響のいずれかに起因して、後続の世代において生じ得るため、そのような子孫は、実際には、親細胞と同一ではないであろうが、しかし、依然として、本明細書中で使用される用語「宿主細胞」の範囲内に含まれる。

【0247】

本明細書中に記載される抗体若しくはその抗原結合部分をコードする核酸分子、及びこれらの核酸分子を含むベクターは、適切な哺乳動物、植物、細菌又は酵母宿主細胞のトランスフェクションのために使用することができる。形質転換は、ポリヌクレオチドを宿主細胞中に導入するための任意の公知の方法によることができる。哺乳動物細胞中への異種ポリヌクレオチドの導入のための方法は、当技術分野において周知であり、デキストラン媒介トランスフェクション、リン酸カルシウム沈殿、ポリブレン媒介トランスフェクション、プロトプラスト融合、エレクトロポレーション、リポソーム中でのポリヌクレオチドのカプセル化、及び核中へのＤＮＡの直接マイクロインジェクションを含む。また、核酸分子は、ウイルスベクターにより哺乳動物細胞中に導入され得る。

【0248】

異なる細胞株により又はトランスジェニック動物において発現される抗体は、互いに異なるグリコシル化パターンを有する可能性が高い。しかし、本明細書中に提供される核酸分子によりコードされる、又は本明細書中に提供されるアミノ酸配列を含む、全ての抗体が、抗体のグリコシル化状態に関係なく、より一般的には、翻訳後修飾の存在又は非存在に関係なく、本開示の部分である。

【0249】

一部の実施形態では、本開示は、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分及び抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合部分を含む抗体組成物を産生するための方法に関し、この方法は以下を含む：
－ 第一及び第二の宿主細胞を提供することであって、それにおいて、第一の宿主細胞は、本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分を発現することが可能であり、第二の宿主細胞は、本明細書中に記載される抗ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分を発現することが可能であり、
－ 第一及び第二並びに宿主細胞を、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、及び抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合部分の発現のために適切な条件下で培養すること、及び
－ 結果として得られた抗体を単離すること。

【0250】

一部の実施形態では、本開示は、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ又は抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分を含む抗体組成物の産生するための方法に関し、方法は以下を含む：
－ 第一、第二、及び第三の宿主細胞を提供することであって、第一の宿主細胞は、本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分を発現することが可能であり、第二の宿主細胞は、抗ＰＤ－１抗体若しくはその抗原結合部分を発現することが可能であり、及び第三の宿主細胞は、本明細書中に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分を発現することが可能であり、
－ 第一、第二、及び第三の宿主細胞を、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合部分、及び抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分の発現のために適切な条件下で培養すること、並びに
－ 結果として得られた抗体を単離すること。

【0251】

本開示はまた、以下を含む宿主細胞を提供する：
－ 本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくは抗原結合部分の重鎖若しくはその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列、軽鎖若しくはその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列、又はそれらの両方、及び本明細書中に記載される抗ＰＤ－１若しくはＰＤ－Ｌ１抗体の重鎖若しくはその抗原結合部分、軽鎖若しくはその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列、又はその両方；或いは
－ 本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくは抗原結合部分の重鎖若しくはその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列、軽鎖若しくはその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列、又はそれらの両方；本明細書中に記載される抗ＰＤ－１抗体又はＰＤ－Ｌ１抗体の重鎖若しくはその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列、軽鎖若しくはその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列、又はそれらの両方；本明細書中に記載される抗ＥＧＦＲ若しくは抗ＨＥＲ２抗体の重鎖若しくはその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列、軽鎖若しくはその抗原結合部分をコードするヌクレオチド配列、又はそれらの両方。

【0252】

医薬組成物
本開示の別の態様は、有効成分として（例、唯一の有効成分として）以下を含む医薬組成物である：
－ 本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分；
－ 本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、及び本明細書中に記載される抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合部分；
－ 本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、及び本明細書中に記載される抗ＥＧＦＲ又は抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分；或いは
－ 本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、本明細書中に記載される抗ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１抗体若しくはその抗原結合部分、及び本明細書中に記載される抗ＥＧＦＲ又は抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分。

【0253】

一部の態様では、医薬組成物は、多重特異的結合分子（例、本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体及び本明細書中に記載される抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体；又は本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体、抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体、及び抗ＥＧＦＲ若しくは抗ＨＥＲ２抗体の結合特異性を有する多重特異的結合分子）を含む。

【0254】

本開示の別の態様は、有効成分として（又は唯一の有効成分として）、本開示の単独療法又は併用療法を含む医薬組成物である。医薬組成物は、加えて、医薬的に許容可能な賦形剤を含み得る。一部の実施形態では、医薬組成物は、癌、例えば本明細書中に記載される癌の寛解、予防、及び／又は処置について意図される。特定の実施形態では、癌は、組織、例えば皮膚、肺、腸、結腸、卵巣、脳、前立腺、腎臓、軟組織、造血系、頭頸部、肝臓、骨、膀胱、乳房、胃、子宮、子宮頸部、及び膵臓などの中にある。

【0255】

本開示の医薬組成物は、本明細書中に記載される１つ又は複数の抗体、抗原結合部分、抗体組成物、又は多重特異的結合分子を含むであろう。一部の実施形態では、組成物は、本明細書中に記載される２つの抗体若しくはそれらの抗原結合部分を含む。一部の実施形態では、組成物は、本明細書中に記載される３つの抗体若しくはそれらの抗原結合部分を含む。一部の実施形態では、組成物は、本明細書中に記載される単独療法又は併用療法を含む。

【0256】

一部の実施形態では、医薬組成物は、本開示の単独療法又は併用療法、並びに、例えば、免疫刺激剤、ワクチン、化学療法剤、抗腫瘍剤、抗血管新生剤、及びチロシンキナーゼ阻害剤より選択される１つ又は複数の追加の薬剤を含み得る。

【0257】

一部の実施形態では、医薬組成物は、ＮＫＧ２Ａ、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、又はそれらの任意の組み合わせの調節により、その進行を改善する、又は遅らせる、障害、疾患、又は状態の寛解、予防、及び／又は処置について意図される。一部の実施形態では、医薬組成物は、癌の寛解、予防、及び／又は処置について意図される。一部の実施形態では、医薬組成物は、免疫系の活性化について意図される。

【0258】

一般的に、本開示の治療及び組成物は、例えば、以下において記載するように、１つ又は複数の医薬的に許容可能な賦形剤との組み合わせにおける１つ又は複数の製剤として投与するために適切である。

【0259】

用語「賦形剤」は、本明細書中では、本開示の化合物以外の任意の成分を記載するために使用される。賦形剤の選択は、要因、例えば特定の投与の様式、溶解度及び安定性に対する賦形剤の効果、及び投薬形態の性質などに、大きな範囲まで依存する。本明細書中で使用される場合、「医薬的に許容可能な賦形剤」は、生理学的に適合性のある任意の及び全ての溶剤、分散媒、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤、並びに同様のものを含む。医薬的に許容可能な賦形剤の一部の例は、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、ブドウ糖、グリセロール、エタノール及び同様のもの、並びにそれらの組み合わせである。多くの場合では、組成物中に等張剤、例えば、糖、多価アルコール、例えばマンニトール、ソルビトールなど、又は塩化ナトリウムを含めることが好ましいであろう。医薬的に許容可能な物質の追加の例は、湿潤剤又は少量の補助物質、例えば湿潤剤若しくは乳化剤、保存剤若しくは緩衝剤などであり、それらは、抗体の有効期間又は有効性を増強する。

【0260】

本開示の医薬組成物及びそれらの調製のための方法は、当業者には容易に明らかであろう。そのような組成物及びそれらの調製のための方法は、例えば、Remington’s Pharmaceutical Sciences, 19th Edition（Mack Publishing Company, 1995）において見出され得る。医薬組成物は、好ましくは、ＧＭＰ（適正製造基準）条件下で製造される。

【0261】

本開示の医薬組成物は、単一の単位用量として、又は複数の単一の単位用量として、バルクで調製、包装、又は販売され得る。本明細書中で使用される場合、「単位用量」は、所定量の活性成分を含む医薬組成物の個別量である。活性成分の量は、一般的に、対象に投与され得る活性成分の投与量、或いはそのような投与量の便利な画分、例えば、そのような投与量の２分の１又は３分の１に等しい。

【0262】

非経口投与のための適切な医薬組成物の製剤は、典型的には、医薬的に許容可能な担体、例えば滅菌水又は滅菌等張食塩水などと併用した活性成分を含む。そのような製剤は、ボーラス投与のために又は継続投与のために適切な形態において調製、包装、又は販売され得る。注射用製剤は、単位投薬形態中、例えば保存剤を含むアンプル中又は複数用量容器中などで調製、包装、又は販売され得る。非経口投与用の製剤は、限定されないが、懸濁液、溶液、油性又は水性溶媒中の乳濁液、ペースト、及び同様のものを含む。そのような製剤は、限定されないが、懸濁剤、安定化剤、又は分散剤を含む、１つ又は複数の追加成分を更に含んでもよい。非経口投与用の製剤の一部の実施形態では、活性成分は、再構成された組成物の非経口投与前に、適切な溶媒（例、無菌のパイロジェンフリー水）を用いた再構成のための乾燥（即ち、粉末又は顆粒）形態において提供される。非経口製剤はまた、賦形剤、例えば塩、炭水化物、緩衝剤など（好ましくは３～９のｐＨ）を含み得る水溶液を含むが、しかし、一部の適用については、それらは、無菌の非水溶液として又は適切な溶媒、例えば無菌のパイロジェンフリー水などとの組み合わせにおいて使用される乾燥形態としてより適切に製剤化され得る。例示的な非経口投与形態は、滅菌水溶液、例えば、プロピレングリコール又はブドウ糖水溶液中の溶液又は懸濁液を含む。そのような投薬形態は、望ましい場合に適切に緩衝化することができる。有用である他の非経口投与可能な製剤は、微結晶形態中に、又はリポソーム調製物中に活性成分を含むものを含む。

【0263】

本開示の抗体及び組成物の治療的使用
一部の実施形態では、本開示の治療及び組成物は、それを必要とする患者（例、哺乳動物、例えばヒトなど）において免疫系を増強又は活性化するために使用される。特定の実施形態では、患者は免疫抑制されている。特定の実施形態では、医師は、本明細書中に記載される治療又は組成物を投与することにより、患者自身の免疫系の抗癌活性をブーストすることができる。例えば、医師は、本開示の治療又は組成物を単独で、又は他の治療剤との組み合わせにおいて（逐次的に又は同時に）投与することにより、患者において抗腫瘍活性をブーストすることができる。

【0264】

特定の実施形態では、本開示の治療又は組成物は、癌の処置において使用するためである。癌は、１つ又は複数の組織、例えば皮膚、肺、腸、結腸、卵巣、脳、前立腺、腎臓、軟部組織、造血系、頭頸部、肝臓、骨、膀胱、乳房、胃、子宮、子宮頸部、及び膵臓などの中であり得る。

【0265】

一部の実施形態では、本開示の治療及び組成物により処置される癌は、例えば、黒色腫（例、進行性又は転移性黒色腫）、皮膚基底細胞癌、神経膠芽腫、神経膠腫、神経膠肉腫、星細胞腫、髄膜腫、神経芽腫、副腎皮質癌、頭頸部扁平上皮癌、口腔癌、唾液腺癌、上咽頭癌、乳癌、肺癌（例、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞肺癌、及び扁平上皮肺癌）、食道癌、胃食道接合部癌、胃癌、消化器癌、原発性腹膜癌、肝臓癌、肝細胞癌、胆道癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、卵巣癌、卵管癌、膀胱癌、上部尿路癌、尿路上皮癌、腎細胞癌、腎臓癌、泌尿生殖器癌、子宮頸癌、前立腺癌、線維肉腫、脂肪肉腫、横紋筋肉腫、骨肉腫、組織球腫、膵臓癌、子宮内膜癌、虫垂癌、進行メルケル細胞癌、多発性骨髄腫、肉腫、絨毛癌、赤白血病、急性リンパ性白血病、急性単球性白血病、急性前骨髄性白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、急性リンパ性白血病、肥満細胞性白血病、小リンパ球性リンパ腫、バーキットリンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、単球性リンパ腫、ＨＴＬＶ関連Ｔ細胞白血病／リンパ腫、中皮腫、及び固形腫瘍を含み得る。癌は、例えば、初期、中期、後期、局所進行期、進行期、又は転移期にあり得る、再発し得る、並びに他の治療法（例、癌のための治療又は組成物の１つ又は複数の標的、チェックポイント阻害剤、又は標準治療に向けられる他の治療法）に対して難治性及び／又は不耐容性であり得る、或いは利用可能な標準治療がないであろう。一部の実施形態では、癌は、医学的禁忌又は腫瘍の切除不能のいずれかにより、外科的介入を受けられないであろう。

【0266】

一部の実施形態では、本開示の治療及び組成物により処置される状態は、例えば、胃癌及び結腸直腸癌を含み得る。一部の実施形態では、胃癌又は結腸直腸癌は、転移性、局所進行性、又は切除不能である。

【0267】

一部の実施形態では、胃癌は、（１）切除不能、（２）局所進行性若しくは転移性、（３）ＨＥＲ２^＋、又は（４）（１）～（３）の任意の組み合わせ（例、全て）である。加えて又は代わりに、胃癌患者は、第一選択の標準療法（例、細胞傷害性化学療法、トラスツズマブ、及び／又はペムブロリズマブ）を用いた処置を受けていたであろう。特定の実施形態では、本開示の治療又は組成物（例、ＮＫＧ２Ａ、ＰＤ－１、及びＨＥＲ２を標的化する、例えばｍＡｂ１＋ｍＡｂ３＋マルゲツキシマブなど）は、局所進行性切除不能又は転移性ＨＥＲ２^＋胃癌を処置するために使用され得るが、例えば、ここで、第一選択の標準治療、例えば細胞傷害性化学療法、トラスツズマブ、及び／又はペムブロリズマブなどは失敗している。

【0268】

一部の実施形態では、本開示の治療又は組成物（例、ＮＫＧ２Ａ、ＰＤ－１、及びＨＥＲ２を標的化する、例えばｍＡｂ１＋ペムブロリズマブ＋トラスツズマブなど）は、局所進行性切除不能又は転移性ＨＥＲ２^＋胃食道接合部（ＧＥＪ）及び胃腺腺癌（ＧＡ）を処置するために使用され得るが、ここで、例えば、第一選択の標準治療、例えば細胞傷害性化学療法、トラスツズマブ、及び／又はペムブロリズマブなどが失敗している。

【0269】

一部の実施形態では、結腸直腸癌は、（１）転移性である、（２）医学的禁忌又は腫瘍の切除不能のいずれかに起因して外科的介入を受けない、（３）施設のガイドライン又はアメリカ病理医協会のガイドラインに従ってマイクロサテライト不安定性ステータスが低い（例、ＭＳＩ－Ｈ癌）、（４）（１）～（３）の任意の組み合わせ（例、全て）である。加えて又は代わりに、結腸直腸癌を有する患者は、（ｉ）以下のコドンのいずれかにおいてＲＡＳ（ＫＲＡＳ及びＮＲＡＳ）変異を伴わない：エクソン２中のコドン１２及び１３、エクソン３中のコドン５９及び６１、並びにエクソン４中の１１７及び１４６；及び／又は（ｉｉ）ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ変異を伴わないであろう。特定の実施形態では、本開示の治療又は組成物（例、ＮＫＧ２Ａ、ＰＤ－１、及びＥＧＦＲを標的化する、例えばｍＡｂ１＋ｍＡｂ３＋フツキシマブ＋モドツキシマブなど）は、転移性結腸直腸癌を処置するために使用され得る。特定の実施形態では、ｍＡｂ１及びペムブロリズマブの治療又は組成物は、結腸直腸癌、具体的にはＭＳＩ－Ｈ／ｄＭＭＲ局所進行性切除不能又は転移性結腸直腸癌（ｍＣＲＣ）を処置するために使用され得る。

【0270】

一部の実施形態では、本開示の治療又は組成物は、実施例１０において記載されているように、患者集団を処置するために使用され得る。

【0271】

一部の実施形態では、本明細書中に記載される治療又は組成物は、インビボで腫瘍成長を阻害する及び／又は腫瘍成長退縮を誘導し得る。一部の実施形態では、本明細書中に記載される治療又は組成物は、癌患者において転移を遅らせる又は逆転させ得る。一部の実施形態では、本明細書中に記載される治療又は組成物は、癌患者の生存を延長させ得る。上の特性の任意の組み合わせも企図される。

【0272】

一部の実施形態では、本開示の治療又は組成物は、免疫障害の処置において使用され得る。

【0273】

一部の実施形態では、本開示の治療又は組成物は、免疫無防備状態（例、化学療法又は放射線療法に起因する）にある、又はそのリスクがある患者を処置するために使用され得る。一部の実施形態では、治療又は組成物は、幹細胞移植後の患者において幹細胞を増殖させるために使用され得る。

【0274】

一部の実施形態では、治療又は組成物は、例えば、病原体が宿主免疫応答を阻害する場合に、ウイルス及び／又は寄生虫感染を処置する際での使用のためである。病原体は、例えば、ＨＩＶ、肝炎（Ａ、Ｂ、又はＣ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）、アデノウイルス、フラビウイルス、エコーウイルス、ライノウイルス、コクサッキーウイルス、コロナウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、ムンプスウイルス、ロタウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、パルボウイルス、ワクシニアウイルス、ヒトＴ細胞リンパ球増殖性ウイルス（ＨＴＬＶ）、ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）、デング熱ウイルス、軟属腫ウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、ジョン・カニンガム（ＪＣ）ウイルス、アルボウイルス脳炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）、インフルエンザ、ヘルペス、ジアルジア、マラリア、リーシュマニア、黄色ブドウ球菌、又は緑膿菌であり得る。

【0275】

「処置する」、「処置すること」、及び「処置」は、生物学的障害及び／又はそれに付随する症状の少なくとも１つを軽減又は抑止する方法を指す。本明細書中で使用される場合、疾患、障害又は状態を「軽減する」は、疾患、障害又は状態の症状の重症度及び／又は発生頻度を低下させることを意味する。更に、本明細書中での「処置」への言及は、治癒的、緩和的、及び予防的処置への言及を含む。

【0276】

「治療有効量」は、処置されている疾患の症状の１つ又は複数をある程度まで軽減する、投与されている治療剤の量を指す。治療有効量の抗癌治療剤は、例えば、遅延した腫瘍成長、腫瘍縮小、増加した生存期間、癌細胞の排除、遅くなった又は減少した疾患進行、転移の逆転、又は医療専門家により望まれる他の臨床エンドポイントをもたらし得る。一部の実施形態では、本開示の治療又は組成物の治療有効量は、例えば、未処置の患者との比較において、改善された客観的応答率、改善された臨床利益率、改善された応答の持続時間、増加した無増悪生存期間、及び増加した全生存期間をもたらす。

【0277】

一部の実施形態では、本明細書中に記載される治療は、単一の組成物中で投与される。他の実施形態では、治療（例、併用療法）は、１を上回る組成物中で投与される。例えば、抗ＮＫＧ２Ａ抗体、抗ＰＤ－１又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体、及び抗ＥＧＦＲ又は抗ＨＥＲ２抗体を含む併用療法は、全ての３つの抗体を含む単一の組成物、抗体の２つを含む組成物及び抗体の１つを含む組成物、又は各抗体について別々の組成物の投与を含み得る。１を上回る組成物がある場合では、組成物は、同時に、逐次的に、別々に、又はそれらの任意の組み合わせで投与することができる。

【0278】

本開示の治療又は組成物は、追加の治療処置を伴わずに、即ち、単独治療（単独療法）として投与され得る。或いは、治療又は組み合わせを伴う処置は、少なくとも１つの追加の治療処置、例えば、別の免疫刺激剤、抗癌剤（例、化学療法剤、抗腫瘍剤、抗血管新生剤、又はチロシンキナーゼ阻害剤）、又はワクチン（例、腫瘍ワクチン）を含み得る。

【0279】

一部の実施形態では、治療又は組成物は、癌の処置のための別の医薬／薬物と同時投与又は製剤化され得る。追加の治療処置は、例えば、免疫刺激剤、ワクチン、化学療法剤、抗腫瘍剤、抗血管新生剤、チロシンキナーゼ阻害剤、及び／又は放射線療法を含み得る。一部の実施形態では、追加の治療処置は、異なる抗癌抗体を含み得る。

【0280】

本明細書中に記載される治療又は組成物及び少なくとも１つの他の薬剤（例、化学療法剤、抗腫瘍剤、又は抗血管新生剤）を含む医薬製品が、癌療法における同時、別々、又は連続投与のための併用処置として使用され得る。他の薬剤は、問題の特定の癌の処置のために適切な任意の薬剤、例えば、アルキル化剤、例えば、白金誘導体、例えばシスプラチン、カルボプラチン及び／又はオキサリプラチンなど；植物アルコイド、例えば、パクリタキセル、ドセタキセル及び／又はイリノテカン；抗腫瘍抗生物質、例えば、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシンミトキサントロン、ダクチノマイシン、ブレオマイシン、アクチノマイシン、ルテオマイシン、及び／又はマイトマイシン；トポイソメラーゼ阻害剤、例えばトポテカンなど；代謝拮抗物質、例えば、フルオロウラシル及び／又は他のフルオロピリミジン；ＦＯＬＦＯＸ；オシメルチニブ；シクロホスはミド；アントラサイクリン；ダカルバジン；ゲムシタビン；或いはそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される薬剤であり得る。一部の実施形態では、本明細書中に記載される治療又は組成物は、他の薬剤への応答性を再確立する。

【0281】

本開示の治療又は組成物はまた、他の抗癌療法、例えばワクチン、サイトカイン、酵素阻害剤、免疫刺激化合物、及びＴ細胞治療などとの組み合わせにおいて使用され得る。ワクチンの場合では、それは、例えば、処置されている癌について関連する１つ又は複数の抗原を含むタンパク質、ペプチド、若しくはＤＮＡワクチン、又は抗原とともに樹状細胞を含むワクチンであり得る。適切なサイトカインは、例えば、ＩＬ－２、ＩＦＮ－ガンマ及びＧＭ－ＣＳＦを含む。抗癌活性を有する酵素阻害剤の種類の例は、インドールアミン－２，３－ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）阻害剤、例えば、１－メチル－Ｄ－トリプトはン（１－Ｄ－ＭＴ）である。また、企図されるのは、養子Ｔ細胞治療であって、それは、患者自身のＴ細胞を増殖又は操作して腫瘍を認識及び攻撃することを含む、種々の免疫療法技術を指す。

【0282】

また、本開示の治療又は組成物は、チロシンキナーゼ阻害剤との関連において補助治療において使用され得ることが企図される。これらは、合成的な、主にキナゾリン由来の低分子量分子であり、それらは、受容体の細胞内チロシンキナーゼドメインと相互作用し、例えば、細胞内Ｍｇ－ＡＴＰ結合部位について競合することにより、リガンド誘導性の受容体リン酸化を阻害する。

【0283】

一部の実施形態では、治療又は組成物は、限定されないが、Ａ２ＡＲ、Ａ１ＡＲ、Ａ２ＢＲ、Ａ３ＡＲ、ＡＤＡ、ＡＬＰ、ＡＸＬ、ＢＴＬＡ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＣＴＬＡ－４、ＣＤ１１６、ＣＤ１２３、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３９、ＣＤ４０、ＣＤ４７、ＣＤ５５、ＣＤ７３、ＣＤ１２２、ＣＤ１３７、ＣＤ１６０、ＣＧＥＮ－１５０４９、ＣＨＫ１、ＣＨＫ２、ＣＴＬＡ－３、ＣＥＡＣＡＭ（例、ＣＥＡＣＡＭ－１及び／又はＣＥＡＣＡＭ－５）、ＥＧＦＲ、ＦＬＴ３、ＨＥＲ２、ＮＫＧ２ＡＬ、ＧＡＬ９、ＧＩＴＲ、ＨＶＥＭ、ＬＡＧ－３、ＬＩＬＲＢ１、ＬＹ１０８、ＬＡＩＲ１、ＭＥＴ、ＮＫＧ２Ａ、ＩＣＯＳ、ＩＤＯ、ＩＬ２Ｒ、ＩＬ４Ｒ、ＫＩＲ、ＬＡＩＲ１、ＰＡＰ、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－Ｌ２、ＯＸ４０、ＳＴＩＮＧ、ＴＩＧＩＴ、ＴＩＭ－３、ＴＧＦＲ－β、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９及びＴＬＲ１０、ＴＮＦＲ２、ＶＥＧＦＲ、ＶＥＧＦ、ＶＩＳＴＡ、ＬＩＬＲＢ２、ＣＭＴＭ６及び／又は２Ｂ４の発現又は活性を調節する薬剤を含む、免疫系活性化を媒介する医薬／薬物との組み合わせにおいて使用され得る。特定の実施形態では、薬剤は小分子阻害剤である。特定の実施形態では、薬剤は、上の分子の１つに結合する抗体又はその抗原結合断片である。また、本開示の治療又は組成物は、サイトカイン（例、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５又はＩＬ－２１）、ＥＧＦＲ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤などとの組み合わせにおいて使用され得ることが企図される。

【0284】

本明細書中で使用される場合、用語「同時投与」、「同時投与される」、及び「との組み合わせにおいて」は、１つ又は複数の他の治療剤を伴う、本開示の治療及び組成物を指し、以下を意味することを意図しており、実際に以下を指す及び含む：
ａ）そのような成分が、当該成分を実質的に同時に当該患者に放出する単一投薬形態中に一緒に製剤化される場合での、処置を必要とする患者への、本開示のそのような治療／組成物及び治療剤の同時投与、
ｂ）そのような成分が、互いに離れて別々の投薬形態中に製剤化され、それが、実質的に同時に当該患者により摂取される場合での、治療を必要とする患者への、本開示のそのような治療／組成物及び治療剤の実質的に同時の投与であって、その時、当該成分が、実質的に同時に当該患者に放出され、
ｃ）そのような成分が、互いに離れて別々の投薬形態中に製剤化され、それが、各投与間に有意な時間間隔を伴って、当該患者により連続時間で摂取される場合での、処置を必要とする患者への本開示のそのような治療／組成物及び治療剤の連続投与であって、その時、当該成分は、実質的に異なる時間で当該患者に放出される；及び
ｄ）そのような成分が、制御された様式において当該成分を放出する単一の投薬形態中に一緒に製剤化される場合での、処置を必要とする患者への本開示のそのような治療／組成物及び治療剤の連続的投与であって、その時、それらは、同じ及び／又は異なる時間に当該患者に同時に、継続的に、及び／又は重複して放出され、ここで、各部分は、同じ又は異なる経路のいずれかにより投与され得る。

【0285】

本開示の治療及び組成物は、本明細書中に記載される処置の方法において使用され得る、本明細書中に記載される処置において使用するためであり得る、及び／又は本明細書中に記載される処置のための医薬の製造における使用のためであり得ることが理解される。

【0286】

用量及び投与の経路
本開示の治療及び組成物は、問題の状態の処置のための有効量、即ち、所望の結果を達成するために必要な投与量及び期間で投与され得る。治療有効量は、要因、例えば処置されている特定の状態、患者の年齢、性別、及び体重、抗体が、単独の処置として、或いは１つ又は複数の追加の抗癌処置との組み合わせにおいて投与されるか否か、などに従って変動し得る。

【0287】

投与レジメンは、最適な望ましい応答が提供されるように調整され得る。例えば、単一ボーラスを投与してもよく、いくつかの分割用量を経時的に投与してもよく、或いは、用量を、治療状況の緊急性により示されるように、比例的に低下又は増加させてもよい。非経口組成物を、投与の容易さ及び投与量の均一性のために、投薬単位形態において製剤化することが特に有利である。投薬単位形態は、本明細書中で使用される場合、処置される患者／対象のための単位投与量として適した物理的に分離した単位を指し；各単位は、要求される医薬的担体との関連において所望の治療効果を産生するように計算された所定量の活性化合物を含む。本開示の投薬単位形態のための仕様は、一般的に、（ａ）治療剤の固有の特徴及び達成されるべき特定の治療効果又は予防効果、並びに（ｂ）個人における感受性の処置のためにそのような活性化合物を配合する当該技術分野において固有の限度により指示され、それに直接的に依存的である。

【0288】

このように、当業者は、本明細書中に提供される開示に基づいて、用量及び投薬レジメンが、治療分野において周知の方法に従って調整されることを理解するであろう。すなわち、最大耐用量を容易に確立することができ、患者に検出可能な治療的利益を提供するための有効量がまた、患者に検出可能な治療的利益を提供するために各々の薬剤を投与するための時間的要件と同様に、決定することができる。したがって、特定の用量及び投与レジメンが本明細書中に例示されているが、これらの例は、本開示を実施する際に患者に提供され得る用量及び投与レジメンを決して限定しない。

【0289】

投与量の値は、軽減すべき状態の種類及び重症度で変動し得る、単一又は複数用量を含み得ることに注意すべきである。任意の特定の対象について、特定の投与レジメンは、個々の必要性及び組成物を投与する又は組成物の投与を監督する人の専門的判断に従って経時的に調整されるべきであること、並びに本明細書中に示される投与量範囲は例示だけであり、具体化された組成物の範囲又は実践を限定することを意図しないことを更に理解すべきである。更に、本開示の組成物を用いた投与レジメンは、疾患の種類、患者の年齢、体重、性別、医学的状態、状態の重症度、投与の経路、及び用いられる特定の抗体を含む、様々な要因に基づき得る。このように、投与レジメンは広く変動し得るが、しかし、標準的な方法を使用してルーチン的に決定することができる。例えば、用量は、臨床効果、例えば毒性効果及び／又は臨床検査値などを含み得る、薬物動態学的又は薬力学的パラメーターに基づいて調整され得る。このように、本開示は、当業者により決定される患者内の用量漸増を包含する。適した投与量及びレジメンを決定することは、関連技術分野において周知であり、一度、本明細書中に開示される教示が提供されれば、包含されることが当業者により理解されるであろう。

【0290】

腫瘍治療のための有効量は、患者において疾患進行を安定化する及び／又は症状を寛解させる能力、好ましくは例えば、腫瘍サイズを低下させることにより疾患進行を逆転させるその能力により測定され得る。癌を阻害する、本開示の治療又は組成物の能力は、例えば、実施例において記載されるようなインビトロアッセイにより、並びにヒト腫瘍における効力の予測的である適切な動物モデルにおいて評価され得る。適切な投与レジメンは、各々の特定の状況において最適な治療応答を提供するために選択され、例えば、単一ボーラス又は連続注入として投与され、各々の症例の緊急性により示される投与量の可能な調整を伴う。

【0291】

本開示の治療及び組成物は、当技術分野において許容されるペプチド、タンパク質又は抗体を投与するための任意の方法により投与され得るが、典型的には非経口投与のために適切である。本明細書中で使用される場合、「非経口投与」は、対象の組織の物理的破壊及び組織の破壊を通じた投与により特徴付けられる任意の投与の経路を含み、このように、一般的に、血流中、筋肉中、又は内臓中への直接投与がもたらされる。非経口投与は、このように、限定されないが、注射による、外科的切開を通じた適用による、組織貫通非外科的創傷を通じた適用、及び同様のものによる投与を含む。特に、非経口投与は、限定されないが、皮下、腹腔内、筋肉内、胸骨内、大槽内、静脈内、動脈内、くも膜下腔内、尿道内、頭蓋内、腫瘍内、及び滑膜内注射又は注入を含むことが企図される。特定の実施形態は、静脈内経路及び皮下経路を含む。一部の実施形態では、投与はＩＶ注射、例えば、ＩＶ注入である。

【0292】

一部の実施形態では、本開示の治療及び組成物は、例えば、記載される臨床試験のパート１ａ、１ｂ、２ａ、及び２ｂに関して、実施例１０において記載される例示的な投薬レジメンに従って投与され得る。

【0293】

例えば、特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくは抗原結合部分は、８、２０、１００、３００、７５０、若しくは１５００mgの用量で、又は８～２０、２０～１００、１００～３００、３００～７５０、若しくは７５０～１５００mg（例、本明細書中に記載されるように、単剤療法として、又は併用療法の一部として）の用量で投与され得る。特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくは抗原結合部分は、１、２、３、４、５、又は６週間毎に投与される。更に、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくは抗原結合部分は、７、１４、２８、４２、５６、７０、又は８４日のサイクルにおいて投与され得る。

【0294】

特定の実施形態では、抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合部分は、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、又は５００mgの用量で、或いは５０～１００、１００～１５０、１５０～２００、２００～２５０、２５０～３００、３００～３５０、３５０～４００、４００～４５０、又は４５０～５００mgの用量で（例、本明細書中に記載される併用療法の一部として）投与され得る。特定の実施形態では、抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体又は抗原結合部分は、１、２、３、４、５、又は６週間毎に投与され、特定の実施形態では、抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分の１、２、３、又は４サイクルの後に投与され得る。

【0295】

特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分（例、２つの抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分の組み合わせ）は、１、３、６、９、１２、１５、又は１８mg/kgの用量で（例、本明細書中に記載される併用療法の一部として）投与され得る。一部の実施形態では、抗ＥＧＦＲ若しくはその抗原結合部分は、当該用量の１つで、負荷用量として、当該用量の異なる用量で、維持用量として、例えば、９mg/kgの負荷用量、それに続く６mg/kgの維持用量として投与され得る。特定の実施形態では、抗ＥＧＦＲ抗体若しくはその抗原結合部分は、１、２、３、又は４週間毎に投与される。

【0296】

特定の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分は、５、１０、１５、２０、２５、又は３０mg/kgの用量で（例、本明細書中に記載される併用療法の一部として）投与され得る。特定の実施形態では、抗ＨＥＲ２抗体若しくはその抗原結合部分は、１、２、３、４、５、６、７、又は８週間毎に投与される。

【0297】

製造品及びキット
本開示はまた、本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、並びに、場合により、本明細書中に記載される抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合部分並びに／或いは本明細書中に記載される抗ＥＧＦＲ若しくは抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合部分を含む製造品を提供する。例えば、製造品は、本明細書中に記載される任意の治療の抗体を含み得る、及び本明細書中に記載される任意の処置方法における使用のためであり得る。また、提供されるのは、当該物品を製造するための方法である。

【0298】

本開示はまた、本明細書中に記載される抗ＮＫＧ２Ａ抗体若しくはその抗原結合部分、並びに、場合により、本明細書中に記載される抗ＰＤ－１若しくは抗ＰＤ－Ｌ１抗体又はその抗原結合部分並びに／或いは本明細書中に記載される抗ＥＧＦＲ若しくは抗ＨＥＲ２抗体又は抗原結合部分を含むキットを提供する。例えば、キットは、本明細書中に記載される任意の治療の抗体を含み得る、及び本明細書中に記載される任意の処置方法における使用のためであり得る。

【0299】

本開示はまた、本明細書中に記載される治療又は組成物、場合により、追加の生物学的活性分子（例、別の治療剤）を含む１つ又は複数の容器（例、単一使用又は複数使用の容器）、及び使用のための説明書を含む製造品及びキットを提供する。治療又は組成物の抗体若しくは抗原結合部分、及び、オプションの追加の生物学的に活性な分子は、適切な包装、例えば非反応性ガラス又はプラスチックから作製されたバイアル又はアンプルなどの中に別々に又は任意の組み合わせにおいて一緒に包装することができる。特定の実施形態では、バイアル又はアンプルは、抗体若しくは抗原結合部分及び／又は生物学的に活性な分子の濃縮ストック（例、２×、５×、１０×又はそれ以上）を保持する。特定の実施形態では、製造品及びキットは、治療若しくは組成物及び／又は追加の生物学的に活性な分子を投与するための医療デバイス（例、注射器及び針）；並びに／或いは適した希釈剤（例、滅菌水及び生理食塩水）を含む。

【0300】

本明細書中で他に定義されない限り、本開示との関連において使用される科学用語及び技術用語は、当業者により一般に理解される意味を有するものとする。例示的な方法及び材料を以下に記載しているが、本明細書中に記載されるものと類似又は等価の方法及び材料がまた、本開示の実施又は試験において使用されることができる。矛盾の場合では、本明細書が、定義を含め、優先される。

【0301】

一般的に、本明細書中に記載される細胞及び組織培養、分子生物学、免疫学、微生物学、遺伝学、分析化学、薬品及び医薬品化学、並びにタンパク質及び核酸の化学及びハイブリダイゼーションとの関連において使用される命名法及びそれらの技術は、周知であり、当技術分野において一般に使用される。酵素反応及び精製技術は、当技術分野において一般に達成されるように、又は本明細書中に記載されるように、製造業者の仕様書に従って実施される。

【0302】

更に、文脈により他に要求されない限り、単数形の用語は、複数形を含むものとし、複数形の用語は、単数形を含むものとする。本明細書及び実施形態を通じて、用語「有する（ｈａｖｅ）」及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、又は変形、例えば「有する（ｈａｓ）」、「有している（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、又は「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などは、記述される整数又は整数の群の包含を意味するが、しかし、任意の他の整数又は整数の群の除外を意味しないことが理解されるであろう。

【0303】

本明細書中で言及される全ての刊行物及び他の参考文献は、それらの全体において参照により援用される。多数の文書が本明細書中で引用されているが、この引用は、これらの文書のいずれかが当技術分野における共通の一般的な知識の一部を形成することの承認を構成しない。

【0304】

本開示がより良く理解され得るように、以下の実施例を示す。これらの例は、例証だけの目的のためであり、任意の様式において本開示の範囲を限定しているとして解釈されるべきではない。

【0305】

略語
本明細書中で使用される略語を以下に示す：
ＡＤＣＣ：抗体依存的細胞傷害性
ＡＥ：有害事象
ＡＬＴ：アラニンアミノトランスフェラーゼ
ＡＮＣ：絶対好中球数
ＡＳＴ：アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ
ＡＵＣ：血漿中濃度－時間曲線下面積
ＢＯＩＮ：ベイズ最適区間
ＣＢＲ：臨床利益率
Ｃｍａｘ：最大血漿濃度
ＣＮＳ：中枢神経系
ＣＰＩ：チェックポイント阻害剤
ＣＰＳ：複合陽性スコア
ＣＲ：完了応答
ＣＲＣ：結腸直腸癌
ＣＴＣＡＥ：有害事象共通用語規準
ＤＬＴ：用量制限毒性
ＤＯＲ：応答の持続時間
ＥＣＧ：心電図
ＥＣＯＧ：米国東海岸癌臨床試験グループ
ＥＧＦＲ：上皮成長因子受容体
ＨＣＣ：肝細胞癌
ＨＥＲ：ヒト上皮成長因子受容体
ＨＬＡ：ヒト白血球抗原
ＩＨＣ：免疫組織化学
ＩＭＰ：治験医薬品
ＩＮＲ：国際標準比
ＩＲＲ：注入関連反応
ＩＳ：含まれるセット
ＩＳＨ：ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション
ＩＶ：静脈内
ＬＶＥＦ：左室駆出率
ＭＡＤ：最大投与用量
ＭＳＩ：マイクロサテライト不安定性
ＭＴＤ：最大耐用量
ＮＣＩ：国立癌研究所
ＮＥ：評価可能ではない。
ＮＫ：ナチュラルキラー（細胞）
ＮＹＨＡ：ニューヨーク心臓協会
ＯＲＲ：客観的応答率
ＯＳ：全生存期間
ＰＢＭＣ：末梢血単核球
ＰＤ：進行性疾患
ＰＦＳ：無増悪生存期間
ＰＫ：薬物動態
ＰＲ：部分応答
ＲＥＣＩＳＴ：固形腫瘍における応答評価基準
ＳＤ：安定疾患
ＳＲＣ：安全検討委員会
ＵＬＮ：基準値上限
ＶＰＣ：視覚的な予測チェック
ＷＨＯ：世界保健機関
ＷＴ：野生型

【実施例】

【0306】

実施例１：内因性ＨＬＡ－Ｅを発現する、選択された細胞株においてｍＡｂ１により誘導されるＮＫ細胞媒介性死滅
本実施例は、腫瘍細胞株（ＨＴ－２９、ＣＣＲＦ－ＣＥＭ、Ａ２５３、Ｄｅｔｒｏｉｔ ５６２、ＣＡＬ－１２０、ＦａＤｕ）の表面上での内因性ＨＬＡ－Ｅの発現、及びインビトロでのこれらの腫瘍細胞株のＮＫ細胞媒介性死滅に対するｍＡｂ１の効果を記載する。

【0307】

材料及び方法
６つの異なる細胞株（ＨＴ－２９、ＣＣＲＦ－ＣＥＭ、Ａ２５３、Ｄｅｔｒｏｉｔ ５６２、ＣＡＬ－１２０、及びＦａＤｕ）における内因性 ＨＬＡ－Ｅの発現をフローサイトメトリーにより調べた。健康な人からの単離ヒト初代ＮＫ細胞を、内因性ＨＬＡ－Ｅ（ＨＬＡ－Ｂ^＊０７０１ペプチドを負荷）を発現する６つの異なるカルセイン標識標的細胞と１０：１の比率において共培養し、単一濃度のｍＡｂ１又はアイソタイプ コントロール（ＩｇＧ１ ＬＡＬＡ）で処理した。カルセインの放出を１．５時間後に測定し、%特異的溶解を計算した。

【0308】

結果
全ての６つのヒト腫瘍細胞株が、表面上に内因性ＨＬＡ－Ｅを発現することが示された（図１、パネルＡ）。ｍＡｂ１での処理は、ＩｇＧ１ ＬＡＬＡ処理と比較して、これらの腫瘍細胞株のＮＫ媒介性死滅を誘導した（図１、パネルＢ）。

【0309】

実施例２：ＢＭＳ抗ＮＫＧ２Ａ抗体類似体及びモナリズマブ類似体との比較におけるｍＡｂ１の滴定
本実施例は、γδＴ細胞細胞傷害性アッセイにおけるモナリズマブ類似体及びＢＭＳ抗ＮＫＧＡ抗体類似体の両方との比較におけるｍＡｂ１の活性を記載する。健康な個人から由来する初代、増殖ヒトγδＴ細胞を、ＨＬＡ－Ｅ発現標的細胞（Ｋ５６２－ＨＬＡ－Ｅ）と共培養し、モナリズマブ類似体であるｍＡｂ１、ＢＭＳ抗ＮＫＧ２Ａ．９の類似体（ＩｇＧ１．３ｆ）、ＢＭＳ抗ＮＫＧ２Ａ．１１（ＩｇＧ１．３ｆ）、又はイソタイプ コントロール（ＩｇＧ１－ＬＡＬＡ）で処理した。

【0310】

材料及び方法
Ｋ５６２－ＨＬＡ－Ｅ細胞を、一晩、ＨＬＡ－Ｂ^＊０７０１ペプチド負荷した。翌日、健康な個人から由来し、増殖させたヒト初代γδＴ細胞を単離し、５０μg/mLから開始した、示された抗体の２倍滴定でインキュベーションし、カルセイン負荷Ｋ５６２－ＨＬＡ－Ｅ標的の添加及び３時間にわたるインキュベーションが続いた。γδＴ細胞の死滅能力が、上清へのカルセイン放出により測定された。特異的溶解が、自発的溶解（カルセイン負荷５６２－ＨＬＡ－Ｅ細胞だけ）を差し引き、最大溶解（カルセイン負荷 Ｋ５６２－ＨＬＡＥ細胞のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００溶解）に対して標準化することにより計算された。

【0311】

結果
モナリズマブ類似体（図２Ａ）又はＢＭＳ抗ＮＫＧＡ抗体類似体（ＮＫＧ２Ａ．９及びＮＫＧ２Ａ．１１）（図２Ｂ）のいずれかとの直接比較は、ｍＡｂ１の優れた機能活性を示した。

【0312】

実施例３：ｍＡｂ１は、ＦａＤｕ細胞におけるセツキシマブ誘導性ＡＤＣＣを強化する
本実施例は、ＨＬＡ－Ｅ及びＥＧＦＲの両方を内因的に発現する標的細胞を使用したＮＫ細胞細胞傷害性アッセイにおいて、ＥＧＦＲ標的抗体により誘導されるＡＤＣＣを増強するｍＡｂ１の能力を記載している。固定濃度のアイソタイプコントロール抗体、ｍＡｂ１、又はモナリズマブ類似体との組み合わせにおけるセツキシマブの滴定が、最初に試験された。

【0313】

材料及び方法
ＦａＤｕ細胞を、一晩、ＨＬＡ－Ｂ^＊０７０１ペプチド負荷した。翌日、健康な個人から由来し、増殖させたヒト初代ＮＫＧ２Ａ＋γδＴ細胞を、ＦａＤｕ細胞（Ｅ：Ｔ比１：１０）と共培養し、２５ｕg/mLでの示した抗体との組み合わせにおける、１μg/mLから開始した、セツキシマブの２倍滴定を用いてインキュベートした。９０分後、初代ＮＫ細胞の殺傷能力を、上清へのカルセイン放出により測定した。特異的溶解は、自発的溶解（カルセイン負荷５６２－ＨＬＡ－Ｅ細胞だけ）を差し引き、最大溶解（カルセイン負荷 Ｋ５６２－ＨＬＡ－Ｅ細胞のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００溶解）に対して標準化することにより計算された。

【0314】

結果
図３中に示すように、ｍＡＢ１は、セツキシマブ誘導性の細胞毒性を実質的に増強した。より穏やかな効果が、セツキシマブをモナリズマブ類似体と組み合わせる場合に観察された。これらのデータは、ｍＡｂ１が、ＡＤＣＣ誘導抗体により媒介されるＮＫ細胞の細胞傷害活性を強化することができることを裏付ける。

【0315】

実施例４：ｍＡｂ１は、Ａ４３１細胞におけるセツキシマブ及びフツキシマブ／モドツキシマブ誘導性ＡＤＣＣを強化する
本実施例は、初代ＮＫ細胞と共培養された場合での、腫瘍細胞株の死滅に対する、ｍＡｂ１及びＡＤＣＣ誘導性モノクローナル抗ＥＧＦＲ抗体処置セツキシマブ又はフツキシマブ／モドツキシマブの組み合わせの効果を記載する。

【0316】

材料及び方法
２人の健康なヒト個人からのヒト初代ＮＫＧ２Ａ＋ＮＫ細胞を、カルセイン標識標的細胞（ＨＬＡ－Ｂ^＊０７０１ペプチドで負荷されたＡ４３１ ＨＬＡ－Ｅ^＋／ＥＧＦＲ^＋）と共培養し、ｍＡｂ１を伴う又は伴わないセツキシマブ又はフツキシマブ及びモドツキシマブの組み合わせで処理した。カルセインの放出を約３時間後に測定し、特異的溶解（%）を計算した。

【0317】

結果
セツキシマブ（図４Ａ）又はフツキシマブ及びモドツキシマブの組み合わせ（図４Ｂ）のいずれかとの組み合わせにおいて、ｍＡｂ１は、セツキシマブ若しくはフツキシマブ／モドツキシマブ処置単独又はセツキシマブ＋ＩｇＧ１ ＬＡＬＡ若しくはフツキシマブ／モドツキシマブ＋ＩｇＧ１ ＬＡＬＡを上回って、腫瘍細胞株Ａ４３１の死滅を強化した。

【0318】

実施例５：ｍＡｂ１単独、又はセツキシマブ及びフツキシマブ／モドツキシマブとの組み合わせは、ＮＫ細胞活性化（ＣＤ１３７発現）を誘導した
本実施例は、インビトロでの初代ＮＫ細胞の活性化の誘導することに対する、単独、又はセツキシマブ若しくはフツキシマブ／モドツキシマブのいずれかとの組み合わせにおいて、１用量で試験されたｍＡｂ１の効果を記載する。ＮＫ細胞上での、それらの活性化状態のマーカーとしてのＣＤ１３７の発現が、フローサイトメトリーにより調べられた。

【0319】

材料及び方法
Ａ４３１細胞（ＨＬＡ－Ｅ^＋／ＥＧＦＲ^＋）を、一晩、ＨＬＡ－Ｂ^＊０７０１ペプチド負荷した。翌日、ＮＫＧ２Ａ＋ＮＫ細胞を、３人の健康なドナーからの新鮮なＰＢＭＣから単離し、１０ng/mLのＩＬ－２及び図５中に示す抗体又は抗体の組み合わせの存在において１０：１の比率でＡ４３１細胞と共培養した。４８時間の培養後、細胞を 、Zombie Dye Live/Dead染色及び抗ＦｃＲ抗体を用いて染色し、抗ＣＤ３ ＡＰＣ－Ｈ７（ＳＫ７、BD Biosciences）、抗ＣＤ５６ ＢＶ６５０（ＮＣＡＭ－１６．２、BD Biosciences）、抗ＣＤ１６ ＰＥ（Ｂ７３．１、BD Biosciences）、及び抗ＣＤ１３７ ＢＶ４２１（Ｂ３、BD Biosciences）抗体を使用した表面染色が続き、FACScelestaを使用したフローサイトメトリーにより分析した。

【0320】

結果
図５中に示すように、ｍＡｂ１並びにセツキシマブ又はフツキシマブ／モドツキシマブは、ＮＫ細胞活性化を単独で誘導したが、しかし、ＣＤ１３７の発現は、ｍＡｂ１とセツキシマブ又はフツキシマブ／モドツキシマブとの組み合わせにおいて更に誘導された。

【0321】

実施例６：ｍＡｂ１は、単独で又はフツキシマブ／モドツキシマブとの組み合わせにおいて、ＮＫ細胞によるＩＦＮγの分泌を誘導した
本実施例は、インビトロでの初代ＮＫ細胞によりＩＦＮγの分泌を誘導することに対する、単独で又はフツキシマブ／モドツキシマブとの組み合わせにおいて、１用量で試験されたｍＡｂ１の効果を記載する。上清を、処理した共培養物からの回収し、ＩＦＮγの分泌についてＥＬＩＳＡにより分析した。

【0322】

材料及び方法
Ａ４３１細胞（ＨＬＡ－Ｅ^＋／ＥＧＦＲ^＋）を、一晩、ＨＬＡ－Ｂ^＊０７０１ペプチドを用いてパルスした。翌日、ＮＫＧ２Ａ^＋ＮＫ細胞を、３人の健康なドナーからの新鮮なＰＢＭＣから単離し、１０ng/mL ＩＬ－２及び抗ＮＫＧ２Ａ抗体の存在において、Ａ４３１細胞と１０：１の比率で共培養した。４８時間の培養後、細胞上清を回収し、ＩＦＮγの濃度をＥＬＩＳＡ（Invitrogen、８８－７３１６－８８）により定量化した。

【0323】

結果
ｍＡｂ１及びフツキシマブ／モドツキシマブ処理は、各々が、ＩＦＮγ単独の分泌を刺激したが、しかし、ＩＦＮγ分泌は、２つが併用された場合に更に誘導された（図６）。

【0324】

実施例７：ｍＡｂ１は、Ａ４３１及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１腫瘍細胞株におけるアベルマブ誘導性ＡＤＣＣを強化する
本実施例は、初代ＮＫ細胞と共培養された場合での腫瘍細胞株の死滅に対する、ｍＡｂ１とＡＤＣＣ誘導性モノクローナル抗ＰＤ－Ｌ１抗体アベルマブの組み合わせの効果を記載する。

【0325】

材料及び方法
２人の健康なヒトからのヒト初代ＮＫＧ２Ａ^＋ＮＫ細胞を、カルセイン標識Ａ４３１及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１腫瘍細胞（両方ともＨＬＡ－Ｂ^＊０７０１ペプチドで負荷されたＨＬＡ－Ｅ＋／ＰＤ－Ｌ１＋）と共培養した。カルセインの放出を約３時間後に測定し、特異的溶解（%）を計算した。

【0326】

結果
アベルマブとの組み合わせにおいて、ｍＡｂ１は、アベルマブ処置単独又はベルマブ＋ＩｇＧ１ ＬＡＬＡと比較して、両方のドナーにおいて２つの腫瘍細胞株Ａ４３１及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１の死滅を強化した。

【0327】

実施例８：アベルマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１は、ＮＫ細胞活性化（ＣＤ１３７）及びＩＦＮγ分泌を誘導した
本実施例は、インビトロでの初代ＮＫ細胞によるＣＤ１３７発現並びにＩＦＮγの分泌を誘導することに対する、ｍＡｂ１単独又はベルマブとの組み合わせにおける、単一用量の効果を記載する。

【0328】

材料及び方法
Ａ４３１細胞（ＨＬＡ－Ｅ^＋／ＥＧＦＲ^＋）を、一晩、ＨＬＡ－Ｂ^＊０７０１ペプチドを用いてパルスした。翌日、ＮＫＧ２Ａ^＋ＮＫ細胞を、健康なドナーからの新鮮な ＰＢＭＣから単離し、１０ng/mLのＩＬ－２及びｍＡｂ１、アベルマブ、コントロール抗体ＩｇＧ１、ｍＡｂ１及びアベルマブの組み合わせ、又はベルマブ及びコントロールＩｇＧ１ ＬＡＬＡの組み合わせの存在において、Ａ４３１細胞と１０：１の比率で共培養した。４８時間の培養後、細胞を、Zombie Dye Live/Dead染色及び抗ＦｃＲ抗体を用いて染色し、抗ＣＤ３ ＡＰＣ－Ｈ７（ＳＫ７、BD Biosciences）、抗ＣＤ５６ ＢＶ６５０（ＮＣＡＭ－１６．２、BD Biosciences）、抗ＣＤ１６ ＰＥ（Ｂ７３．１、BD Biosciences）及び抗ＣＤ１３７ ＢＶ４２１（Ｂ３、BD Biosciences）抗体を使用した表面染色が続き、FACScelestaを使用したフローサイトメトリーにより分析した。また、細胞培養物からの上清を回収し、ＩＦＮγの濃度をＥＬＩＳＡ（Invitrogen、８８－７３１６－８８）により定量化した。

【0329】

結果
ＮＫ細胞活性化（ＣＤ１３７発現により評価される）は、ｍＡｂ１単独により誘導されたが、しかし、ｍＡｂ１及びアベルマブの組み合わせにより更に誘導された（図８Ａ）。また、ＩＦＮγ分泌は、ｍＡｂ１単独により誘導されたが、しかし、アベルマブ処置単独と比較して、ｍＡｂ１及びアベルマブの組み合わせにより更に誘導された（図８Ｂ）。

【0330】

実施例９：アベルマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１によるインビボ腫瘍成長阻害
本実施例は、ＣＤ３４ヒト化ＮＯＧマウスにおけるＭＤＡ－ＭＢ－２３１腫瘍成長に対する、アベルマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１のインビボ有効性を実証する。

【0331】

材料及び方法
ヒト乳腺癌細胞株ＭＤＡ－ＭＢ－２３１を、ヒトＣＤ３４^＋臍帯血幹細胞を用いてヒト化したヒトＩＬ１５ブーストＮＯＧマウス上に皮下移植した。腫瘍を週３回、ノギスにより二次元において測定し、腫瘍体積（mm³）を式：（幅）２×長さ×０．５に従って計算した。処置は、腫瘍体積平均６５mm³で開始された。マウスは、溶媒、ｍＡｂ１（１０mg/kg）、アベルマブ（１０mg/kg）、又はｍＡｂ１及びアベルマブの組み合わせ（抗体当たり１０mg/kg）の腹腔内注射により、週３回、合計９回の処置にわたり処置された。ボンフェローニの多重比較検定を使用した二元配置分散分析を適用して、処置群間の各々の時間点での腫瘍体積を比較した。統計分析を、GraphPad Prismバージョン９．１．０（GraphPad Software, Inc.）を使用して実施した。試験終了時に、腫瘍が回収され、フローサイトメトリーにより分析された。細胞を抗ＣＤ４５－ＰＥ－Ｃｙ７、抗ＣＤ３－ＦＩＴＣ、抗ＣＤ４－ＰＥ、及び抗ＣＤ８－ＡＰＣ－Ｃｙ７抗体を用いて染色し、Zombie Aquaを生細胞／死細胞の判別のために使用した。細胞を、FACSVerseフローサイトメーター及びFacsDivaソフトウェアを使用して分析した。データ分析を、GraphPad Prismバージョン９．１．０（GraphPad Software, Inc.）を使用して実施した。

【0332】

結果
図９Ａ中に示すように、アベルマブと組み合わせたｍＡｂ１は、ＣＤ３４ヒト化マウスにおいて移植されたＭＤＡ－ＭＢ－２３１異種移植片腫瘍に対する抗腫瘍効果を実証した。処置によって、腫瘍成長の有意な低下が誘導された（Ｐ＜０．０５ ｖｓ．溶媒コントロール）。腫瘍のフローサイトメーター分析によって、アベルマブ並びにｍＡｂ１及びアベルマブの組み合わせで処置されたマウスにおいて、ＣＤ４^＋細胞と比較して、ＣＤ８^＋細胞のより高い割合を伴うＣＤ３^＋細胞の浸潤における増加が明らかになった（図９Ｂ）。

【0333】

実施例１０：ｍＡｂ１単独療法及び併用療法の第１ａ／１ｂ相臨床プロトコール
本実施例は、進行性の固形腫瘍悪性病変患者において、単独療法として、及びｍＡｂ３（抗ＰＤ－１）との組み合わせにおけるｍＡｂ１（抗ＮＫＧ２Ａ）の安全性、耐容性、及び予備的な抗腫瘍活性を調べる第１ａ／１ｂ相、非盲検、多施設共同研究のための臨床治験プロトコールを記載する。本試験はまた、転移性胃癌又は結腸直腸癌を有する患者における、ｍＡｂ１及びｍＡｂ３並びに抗ＨＥＲ２ ｍＡｂ又は抗ＥＧＦＲ ｍＡｂ（例、フツキシマブ／モドツキシマブ）の三重の組み合わせを伴う拡張部分を含む。

【0334】

各々の参加患者についての最大試験期間：各患者は、疾患進行の確認、追跡不能、中止に導く有害事象、試験プロトコールへの重大な不遵守、同意の撤回、試験の終了、又は任意の原因からの死亡まで試験に参加する。全ての患者について、処置期間の最大期間は、確認されたＣＲを有する患者については１年、確認されたＰＲを有する患者については２年を超えない。より長い処置期間が、治験責任医師の判断に従って及び治験依頼者との相談後に、患者の利益がリスクを上回る場合には許可され得る。

【0335】

試験デザイン
臨床試験の４群の各々を、以下に記載する。

【0336】

Ａ．パート１ａ－ｍＡｂ１単独療法
最初の主目的は、単一薬剤としてのｍＡｂ１の安全性と耐容性を評価することである。対応する主要評価項目は：
－ ＡＥの発生率、重症度、及び関連性；
－ 用量中断、変更遅延、及び永久的な処置中止に導くＡＥ；
－ 安全性臨床検査値、バイタルサイン及びＥＣＧ測定値におけるベースラインから試験の終了までの変化。

【0337】

第二の主目的は、単一薬剤としてのｍＡｂ１の最大耐用量（ＭＴＤ）（又は最大投与用量［ＭＡＤ］）を決定することである。対応する主要評価項目は：
－サイクル１の間での用量限定毒性（ＤＬＴ）の発生率、及び
－ 有害事象（ＡＥ）の発生率及び重症度。

【0338】

第一の二次目的は、固形腫瘍における応答評価基準（ＲＥＣＩＳＴ）ｖ１．１を使用した治験責任医師の評価に従って、サイクル１において投与された ｍＡｂ１、それに続くその後のｍＡｂ３の予備的な抗腫瘍活性を評価することである。対応する副次的評価項目は：
－ 抗腫瘍活性の治験責任医師の評価によるＯＲＲ（ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１を使用する）；
－ 臨床利益率（ＣＢＲ）（ＣＲ＋ＰＲ＋安定疾患（ＳＤ）≧６ヶ月）；
－ 応答の持続時間（ＤＯＲ）；
－ 無増悪生存期間（ＰＦＳ）；及び
－ 全生存期間（ＯＳ）。

【0339】

第二の二次目的は、ｍＡｂ１の免疫原性を評価することである。対応する副次的評価項目は、抗ｍＡｂ１抗体の形成である。

【0340】

第三の二次目的は、ｍＡｂ１の薬物動態（ＰＫ）プロファイルを特徴付けることである。対応する副次的評価項目は、限定されないが、血漿濃度－時間曲線下面積（ＡＵＣ）、Ｔ_ｍａｘ、最大血漿濃度（Ｃ_ｍａｘ）、及びＣ_{ｔｒｏｕｇｈ}を含むｍＡｂ１ ＰＫパラメーターである。

【0341】

第一の探索的目的は、腫瘍生検（処置前及び後）及び／又は末梢血における活性の潜在的な薬力学（ＰＤ）バイオマーカーを探索することである。対応する探索的評価項目は：
－ 腫瘍生検及び／又は末梢血における用量レベルによるＮＫＧ２Ａ受容体占有率；
－ 腫瘍生検及び／又は末梢血における遺伝子発現プロファイル、免疫細胞サブセット及び活性化状態における変化；
－ 腫瘍生検及び／又は末梢血におけるＨＬＡ－Ｅ及びＮＫＧ２Ａ発現における変化；並びに
－ 可溶性 ＨＬＡ－Ｅ及び潜在的な他の可溶性因子の血漿濃度における変化。

【0342】

第二の探索的目的は、集団モデリングを介して潜在的なＰＫ／ＰＤ関係を探索することである。対応する探索的評価項目は、ＰＫ／ＰＤモデルにおけるｍＡｂ１ ＰＫ及びＰＤパラメーターとシミュレーション転帰の間での関係である。

【0343】

第三の探索的目的は、ベースライン腫瘍及び／又は末梢血サンプルからのｍＡｂ１に対する、応答の潜在的な予測バイオマーカーを評価することである。対応する探索的評価項目は：
－ 腫瘍生検におけるＨＬＡ－Ｅ発現及びＮＫＧ２Ａ陽性免疫浸潤；
－ 可溶性ＨＬＡ－Ｅ又は潜在的な他の可溶性因子の血漿濃度；及び
－ 免疫調節剤に関連付けられる、又は抗ＮＫＧ２Ａ作用機構に特異的な腫瘍生検における他の潜在的な予測バイオマーカー。

【0344】

Ｂ．パート１ｂ－ｍＡｂ１＋ｍＡｂ３併用療法
第一の主目的は、ｍＡｂ３との組み合わせにおいて投与された場合でのｍＡｂ１の安全性及び耐容性を評価することである。対応する主要評価項目は：
－ ＡＥの発生率、重症度、及び関係；
－ 用量中断、変更、遅延、及び永久的な処置中止に導く有害事象；並びに
－ 安全性臨床検査値、バイタルサイン及びＥＣＧ測定値におけるベースラインから試験の終了までの変化。

【0345】

第二の主目的は、ｍＡｂ３との組み合わせにおいて投与された場合でのｍＡｂ１のＭＴＤ又はＭＡＤ及び／又はＲＰ２Ｄを決定することである。対応する主要評価項目は：
－サイクル１の間でのＤＬＴの発生率；並びに
－ ＡＥの発生率及び重症度。

【0346】

第一の二次目的は、ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１を使用した治験責任医師の評価に従って、ｍＡｂ３との組み合わせにおけるｍＡｂ１の予備的な抗腫瘍活性を評価することである。対応する副次的評価項目は：
－ 抗腫瘍活性の治験責任医師の評価によるＯＲＲ（ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１を使用）；
－ 臨床利益率（ＣＢＲ）（ＣＲ＋ＰＲ＋ＳＤ≧６ヶ月）；
－ ＤＯＲ；
－ ＰＦＳ；及び
－ ＯＳ。

【0347】

第二の二次目的は、ｍＡｂ１単独で又はｍＡｂ３との組み合わせにおいて免疫原性を評価することである。対応する二次目標は：
－ 抗ｍＡｂ１抗体の形成；及び
－ 抗ｍＡｂ３抗体の形成。

【0348】

第三の二次目的は、ｍＡｂ３との組み合わせにおけるｍＡｂ１のＰＫプロファイルを特徴付け、ｍＡｂ１とｍＡｂ３の間での潜在的なＰＫ相互作用を調べることである。対応する副次的評価項目は：
－ 限定されないが、ＡＵＣ、Ｔ_ｍａｘ、Ｃ_ｍａｘ、及びＣ_{ｔｒｏｕｇｈ}を含むｍＡｂ１ ＰＫパラメーター；並びに
－ 内部集団ＰＫモデルを使用して、ｍＡｂ３の個々の濃度に対して実施される外部視覚的予測チェック（ＶＰＣ）。

【0349】

第一の探索的目的は、腫瘍生検（処置前及び後）及び末梢血におけるｍＡｂ３との組み合わせにおける活性の潜在的なＰＤバイオマーカーを探索することである。対応する探索的評価項目は：
－ 腫瘍生検及び／又は末梢血における用量レベルによるＮＫＧ２Ａ受容体占有率；
－ 腫瘍生検及び／又は末梢血における遺伝子発現プロファイル、免疫細胞サブセット及び活性化状態における変化；
－ 腫瘍生検及び／又は末梢血におけるＨＬＡ－Ｅ及びＮＫＧ２Ａ発現における変化；並びに
－ 可溶性ＨＬＡ－Ｅ及び潜在的な他の可溶性因子の血漿濃度における変化。

【0350】

第二の探索的目的は、ＰＤ－Ｌ１腫瘍状態（ＣＰＳ）と応答の間での関係を探索することである。対応する探索的評価項目は：
－ 腫瘍生検におけるＰＤ－Ｌ１発現；及び
－ 腫瘍生検におけるＰＤ－Ｌ１発現と患者の応答の間での関係。

【0351】

第三の探索的目的は、ＲＰ２Ｄの選択を支持し得る集団モデリングを介して、任意の潜在的なＰＫ／ＰＤ関係を探索することである。対応する探索的評価項目は、ＰＫ／ＰＤモデルにおけるｍＡｂ１ ＰＫ及びＰＤパラメーターとシミュレーション転帰の間での関係である。

【0352】

４つの探索的目的は、ベースライン腫瘍及び末梢血サンプルからのｍＡｂ３との組み合わせにおけるｍＡｂ１に対する応答の潜在的な予測バイオマーカーを評価することである。対応する探索的評価項目は：
－ 腫瘍生検におけるＨＬＡ－Ｅ発現及びＮＫＧ２Ａ陽性免疫浸潤；
－ 可溶性 ＨＬＡ－Ｅ又は他の潜在的な可溶性因子の血漿濃度；並びに
－ 免疫調節剤に関連付けられる、又は腫瘍生検における抗ＮＫＧ２Ａ 作用機構に特異的な、他の潜在的な予測バイオマーカー。

【0353】

Ｃ．パート２ａ－ｍＡｂ１＋ｍＡｂ３＋マルゲツキシマブ三重併用
この群では、マルゲツキシマブ、抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体が、併用療法に加えられる。主目的は、局所進行性切除不能又は転移性胃癌を有するＨＥＲ２陽性患者における三重併用（ｍＡｂ１＋ｍＡｂ３＋マルゲツキシマブ）の抗腫瘍活性及び有効性を評価することである。対応する主要評価項目は、ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１を使用した抗腫瘍活性の治験責任医師の評価によるＯＲＲである。

【0354】

第一の二次目的は、ｍＡｂ３及びマルゲツキシマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１の安全性及び耐容性プロファイルを評価することである。対応する副次的評価項目は：
－ ＡＥの発生率及び重症度；
－ 用量中断、変更、遅延、及び永久的な処置中止に導く有害事象；並びに
－ 安全性臨床検査値、バイタルサイン、及びＥＣＧ測定値におけるベースラインから試験の終了までの変化。

【0355】

第二の二次目的は、ｍＡｂ３及びマルゲツキシマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１のＲＰ２Ｄを確認することである。対応する二次評価項目は、全体的な安全性プロファイル、ＰＫプロファイル、及び曝露とＰＤの間での関係（即ち、安全性、有効性、及びバイオマーカー）である。

【0356】

第三の二次目的は、ｍＡｂ３及びマルゲツキシマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１の抗腫瘍活性を評価するための追加の有効性パラメーターを評価することである。対応する副次的評価項目は、ＣＢＲ、ＤＯＲ、ＰＦＳ、及びＯＳである。

【0357】

第四の二次目的は、ｍＡｂ３及びマルゲツキシマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１のＰＫプロファイルを特徴付け、ｍＡｂ１、ｍＡｂ３及びマルゲツキシマブの間での潜在的なＰＫ相互作用を調べることである。対応する副次的評価項目は：
－ 限定されないが、ＡＵＣ、Ｔ_ｍａｘ、Ｃ_ｍａｘ、及びＣ_{ｔｒｏｕｇｈ}を含むｍＡｂ１ ＰＫパラメーター；
－ 内部集団ＰＫモデルを使用して、ｍＡｂ３の個々の濃度に対して実施される外部ＶＰＣ；並びに
－ 文献集団ＰＫモデルを使用して、マルゲツキシマブの個々の濃度に対して実施される外部ＶＰＣ。

【0358】

第五の二次目的は、ｍＡｂ３及びマルゲツキシマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１の免疫原性を評価することである。対応する副次的評価項目は：
－ 抗ｍＡｂ１抗体の形成；
－ 抗ｍＡｂ３抗体の形成；及び
－ 抗マルゲツキシマブ抗体の形成。

【0359】

第六の二次目的は、ＰＤ－Ｌ１（ＣＰＳ）又はＨＥＲ２腫瘍状態と応答の間での関係を探索することである。対応する副次的評価項目は：
－ 腫瘍生検におけるＰＤ－Ｌ１及びＨＥＲ２状態；
－ 腫瘍生検におけるＰＤ－Ｌ１発現と患者の応答の間での関係；並びに
－ 腫瘍生検におけるＨＥＲ２発現／増幅状態と患者の応答の間での相関関係。

【0360】

第一の探索的目的は、ｍＡｂ３及びマルゲツキシマブとの組み合わせにおける活性の潜在的なＰＤバイオマーカー、並びにＰＫ及び／又は抗腫瘍活性とのそれらの関係を更に探索することである。対応する探索的評価項目は：
－ 腫瘍生検及び／又は末梢血におけるＮＫＧ２Ａ受容体の占有率；
－ 腫瘍生検及び／又は末梢血における遺伝子発現プロファイル、免疫細胞サブセット及び活性化状態における変化；
－ 腫瘍生検及び／又は末梢血におけるＨＬＡ－Ｅ及びＮＫＧ２Ａ発現における変化；
－ 可溶性 ＨＬＡ－Ｅ及び潜在的な他の可溶性因子の血漿濃度；並びに
－ ＰＤバイオマーカーとＰＫ及び／又は患者の応答の間での相関関係。

【0361】

第二の探索的目的は、ベースライン腫瘍及び末梢血サンプルからのｍＡｂ３及びマルゲツキシマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１に対する応答の予測バイオマーカー、並びに抗腫瘍活性とのそれらの関係を評価することである。対応する探索的評価項目は：
－ 腫瘍生検におけるＨＬＡ－Ｅ発現及びＮＫＧ２Ａ陽性免疫浸潤；
－ 可溶性ＨＬＡ－Ｅ又は潜在的な他の可溶性因子の血漿濃度；
－ 免疫調節剤に関連付けられる、又は腫瘍生検における抗ＮＫＧ２Ａ作用機構に特異的な、他の潜在的な予測バイオマーカー；並びに
－ 潜在的な予測バイオマーカーと患者の応答の間での相関関係。

【0362】

Ｄ．パート２ｂ－ｍＡｂ１＋ｍＡｂ３＋フツキシマブ／モドツキシマブ三重併用
主目的は、転移性結腸直腸癌患者における三重併用（ｍＡｂ１＋ｍＡｂ３＋フツキシマブ／モドツキシマブ）の抗腫瘍活性と有効性を評価することである。対応する主要評価項目は、ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１を使用した抗腫瘍活性の治験責任医師の評価によるＯＲＲである。

【0363】

第一の二次目的は、ｍＡｂ３及びフツキシマブ／モドツキシマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１の安全性及び耐容性プロファイルを評価することである。対応する副次的評価項目は：
－ ＡＥの発生率及び重症度；
－ 用量中断、変更、遅延、及び永久的な処置中止に導く有害事象；並びに
－ 安全性臨床検査値、バイタルサイン、及びＥＣＧ測定値におけるベースラインから試験の終了までの変化。

【0364】

第二の二次目的は、ｍＡｂ３及びフツキシマブ／モドツキシマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１のＲＰ２Ｄを確認することである。対応する二次評価項目は、全体的な安全性プロファイル、ＰＫプロファイル、及び曝露とＰＤの間での関係（即ち、安全性、有効性、及びバイオマーカー）である。

【0365】

第三の二次目的は、ｍＡｂ３及びフツキシマブ／モドツキシマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１の抗腫瘍活性を評価するための追加の有効性パラメーターを評価することである。対応する副次的評価項目は、ＣＢＲ、ＤＯＲ、ＰＦＳ、及びＯＳである。

【0366】

第四の二次目的は、ｍＡｂ３及びフツキシマブ／モドツキシマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１のＰＫプロファイルを特徴付け、ｍＡｂ１、ｍＡｂ３及びフツキシマブ／モドツキシマブの間での潜在的なＰＫ相互作用を調べることである。対応する副次的評価項目は：
－ 限定されないが、ＡＵＣ、Ｔ_ｍａｘ、Ｃ_ｍａｘ、及びＣ_{ｔｒｏｕｇｈ}を含むｍＡｂ１ ＰＫパラメーター；
－ 内部集団ＰＫモデルを使用して、ｍＡｂ３の個々の濃度に対して実施される外部 ＶＰＣ；並びに
－ 内部集団ＰＫモデルを使用して、フツキシマブ／モドツキシマブＰＫの個々の濃度に対して実施される外部ＶＰＣ。

【0367】

第五の二次目的は、ｍＡｂ３及びフツキシマブ／モドツキシマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１の免疫原性を評価することである。対応する副次的評価項目は：
－ 抗ｍＡｂ１抗体の形成；
－ 抗ｍＡｂ３抗体の形成；及び
－ 抗フツキシマブ／モドツキシマブ抗体の形成。

【0368】

第六の二次目的は、ＰＤ－Ｌ１腫瘍状態（ＣＰＳ）と応答の間での関係を探索することである。対応する副次的評価項目は：
－ 腫瘍生検におけるＰＤ－Ｌ１状態；及び
－ 腫瘍生検におけるＰＤ－Ｌ１発現と患者の応答の間での相関関係。

【0369】

第一の探索的目的は、ｍＡｂ３及びフツキシマブ／モドツキシマブとの組み合わせにおける活性の潜在的なＰＤバイオマーカー、並びにＰＫ及び／又は抗腫瘍活性とのそれらの関係を更に探索することである。対応する探索的評価項目は：
－ 腫瘍生検及び／又は末梢血におけるＮＫＧ２Ａ受容体の占有率；
－ 腫瘍生検及び／又は末梢血における遺伝子発現プロファイルにおける変化；
－ 腫瘍生検及び末梢血における免疫細胞サブセット及び活性化状態における変化；
－ 腫瘍生検及び／又は末梢血におけるＨＬＡ－Ｅ及びＮＫＧ２Ａ発現における変化；
－ 可溶性 ＨＬＡ－Ｅ及び潜在的な他の可溶性因子の血漿濃度；並びに
－ ＰＤバイオマーカーとＰＫ及び／又は患者の応答の間での相関関係。

【0370】

第二の探索的目的は、ベースライン腫瘍及び末梢血サンプルからのｍＡｂ３及びフツキシマブ／モドツキシマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１への応答の予測バイオマーカー、並びに抗腫瘍活性とのそれらの関係を評価することである。対応する探索的評価項目は：
－ 腫瘍生検におけるＨＬＡ－Ｅ発現及びＮＫＧ２Ａ陽性免疫浸潤；
－ 可溶性ＨＬＡ－Ｅ又は潜在的な他の可溶性因子の血漿濃度；
－ 免疫調節剤に関連付けられる、又は腫瘍生検における抗ＮＫＧ２Ａ作用機構に特異的な、他の潜在的な予測バイオマーカー；並びに
－ 潜在的な予測バイオマーカーと患者の応答の間での相関関係。

【0371】

方法論
本試験は、進行性の固形腫瘍悪性病変患者におけるｍＡｂ３（抗ＰＤ１）との組み合わせ（パート１）における、及び２つの疾患特異的コホートにおけるマルゲツキシマブ又はフツキシマブ／モドツキシマブとの三重併用（パート２）におけるｍＡｂ１（抗ＮＫＧ２Ａ）の安全性及び抗腫瘍活性を決定する。

【0372】

ｍＡｂ１単独及びｍＡｂ３との組み合わせにおけるＭＴＤ又はＭＡＤを確立するために、ｍＡｂ１単独療法の安全性が、最初にパート１ａにおいて、次にパート１ｂにおけるｍＡｂ３との組み合わせにおいて評価される。パート１ｂにおいて定義された ＲＰ２Ｄは、用量拡大パート（パート２）においてマルゲツキシマブ又はフツキシマブ／モドツキシマブとの組み合わせにおいて使用される。ＲＰ２Ｄは、ＭＴＤが特徴付けられるか否かを問わず、ＰＫ／ＰＤを含む全体的な安全性プロファイルに基づいて、パート１ｂの間の任意の時間に選ばれ得る。ＲＰ２Ｄは、ＭＴＤを超えない（特徴付けされている場合）。

【0373】

この治験は、２０mg用量で開始するｍＡｂ１単独療法の用量漸増を伴って始まる（パート１ａ）。ＤＬＴ観察期間は２８日間（サイクル１）である。第二用量レベル（１００mg）でのＤＬＴ評価期間の完了時、安全性評価委員会（ＳＲＣ）により安全であると見なされた場合、パート１ｂの併用ｍＡｂ１（１００mgで開始）＋ｍＡｂ３（２００mg）用量漸増が開始される。この後、パート１ａにおける次のｍＡｂ１単独療法の用量レベル（３００mg）以降への漸増は、パート１ｂにおける併用用量の漸増と同時に実行される。単独療法の用量漸増についての５つの計画用量レベル（２０、１００、３００、７５０、１５００mg）に加えて、必要な場合、８mgの用量漸減レベルがある。併用の用量漸増についての４つの計画用量レベル（１００、３００、７５０、１５００mg）に加えて、必要な場合、２０mgの用量漸減レベルがある。ｍＡｂ３は、パート１ｂの併用の用量漸増において２００mgの固定用量として使用される（表２を参照のこと）。

【表2】

【0374】

パート１ａのｍＡｂ１単独療法の用量漸増コホートにおける全ての患者が、ｍＡｂ１の１サイクルを完了し、ＤＬＴ評価期間を終了した後、ｍＡｂ３（２００mg）単独療法を受ける。これらの患者は、疾患進行、許容できない毒性の確認まで、或いはＣＲの確認後１２ヶ月又はＰＲの確認後２４ヶ月まで、ｍＡｂ３単独療法を受け続ける。

【0375】

三重併用は、アンメットメディカルニーズ（即ち、転移性結腸直腸癌及び局所進行性切除不能又は転移性ＨＥＲ２^＋胃癌）を伴う及びｍＡｂ１、例えばＡＤＣＣを誘導するモノクローナル抗体（例、抗ＨＥＲ２マルゲツキシマブ又は他の抗ＨＥＲ２ ｍＡｂ及び抗ＥＧＦＲ ｍＡｂフツキシマブ／モドツキシマブ）などにより潜在的に増強される化合物を伴う適応症において二重（ｍＡｂ１＋ｍＡｂ３）のＲＰ２Ｄを使用して、拡大コホートとして開始される（パート２ａ及び２ｂ）。ｍＡｂ１＋ｍＡｂ３併用のＲＰ２Ｄは、マルゲツキシマブ（パート２ａ）又は抗ＥＧＦＲ（フツキシマブ／モドツキシマブ）（パート２ｂ）と併用される。

【0376】

パート１（用量漸増）
パート１ａは、単一患者の用量漸増（加速漸増）を伴って開始する。加速滴定デザインは、患者がｍＡｂ１関連のグレード２ＡＥ又はＤＬＴを経験した場合、ベイジアン最適間隔（ＢＯＩＮ）デザインに切り替えられる。最大３人の患者をバックフィル患者として募集し、ＲＰ２Ｄ及びＰＫ／ＰＤ関係を更に定義する／特徴付けるための追加データを生成することができ得る。バックフィル患者に投与されるｍＡｂ１の用量は、ＳＲＣとの合意において治験依頼者により決定され、ＭＴＤよりも高くない；これらのコホートは、パート１ａの処置スケジュールに従い、ＤＬＴウィンドウに供されない。バックフィル患者からのデータは、ＤＬＴ分析には役立たず、全体的な安全性分析において考慮される。

【0377】

パート１ｂでは、２０mg ｍＡｂ１又は中間用量レベル並びにより高い用量レベルへの漸減が、探索され得る。各々のｍＡｂ１用量レベルの患者は、ｍＡｂ３（２００mg）との組み合わせにおいてｍＡｂ１用量を受ける。

【0378】

パート１の間で、投薬は、各々の用量レベルにおける全ての患者の間で、少なくとも ２４時間だけずらす。各々の用量レベルにおいて投薬された第一の患者は、安全性について２４時間にわたり観察される。即ち、安全性に問題が記述されない場合、次に第二の患者が同じ用量レベルにおいて、第三の患者が別の２４時間の安全観察後に登録される。パート１ａ及び１ｂにおいて登録された全ての患者が、進行性又は転移性疾患を有していなければならない。

【0379】

試験の他の目的は、ｍＡｂ３との組み合わせにおけるｍＡｂ１の抗腫瘍活性の予備評価、免疫原性の評価、単独で及びｍＡｂ３との組み合わせにおけるｍＡｂ１のＰＫプロファイルの特徴付け、並びに血液及び腫瘍組織の両方における機構の証拠を支持する潜在的な薬力学マーカー及び他の予測バイオマーカーの評価を含む（腫瘍生検は、バックフィル患者を例外とし、パート１ａにおいてはオプションであり、パート１ｂにおいては必須である）。

【0380】

パート２（用量拡大）
パート２は、２つの拡大コホートにおいて行われる（図１０）：（ｉ）第三の要素である抗ＨＥＲ２治療（マルゲツキシマブ）の追加を伴うＨＥＲ２陽性転移性胃癌を有する患者におけるパート２ａ；（ｉｉ）第三の要素である抗ＥＧＦＲ治療（フツキシマブ／モドツキシマブ）の追加を有する転移性結腸直腸癌を有する患者におけるパート２ｂ。

【0381】

パート２ａは、細胞傷害性化学療法並びにトラスツズマブ及びペムブロリズマブを含む第一選択の標準治療が失敗し、第二選択を開始するのに適したＨＥＲ－２陽性胃癌患者において行われる。結腸直腸癌を有する患者（パート２ｂ）では、第三及び第四の治療が、患者が以前に標準治療を受けていた場合に許可される。

【0382】

パートＩ スクリーニング基準
患者は、≧１８歳の年齢の男性又は女性患者である。医学的及び治療的基準は以下を含む：
－ 組織学的又は細胞学的に確認された切除不能な局所進行性又は転移性固形腫瘍悪性病変を有する患者；
－ 医学的禁忌又は腫瘍の切除不能性のいずれかに起因して、現在外科的介入を受け入れられない悪性病変を有する患者；
－ ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１に従って測定可能な疾患を伴い、試験エントリー前に以前の治療での進行の放射線学的評価を受けていたに違いない患者；
－ 臨床的な利益を提供することが公知である、又は標準治療と考えられる既存の治療に抵抗性又は不耐容性の患者；
－ 推定余命≧１２週間。
－ ＥＣＯＧ（米国東海岸癌臨床試験グループ）のパフォーマンスステータス０又は１；及び
－ 以前の治療ラインでの記録された放射線学的な進行。

【0383】

組み入れ基準は以下を含む：
－ 最初の治験医薬品（ＩＭＰ）投与前の７日以内に実施された最後の評価に基づく十分な血液学的機能であって、以下のように定義される：絶対好中球数（ＡＮＣ）≧１．５×１０⁹/L；ヘモグロビン≧８g/dL（輸血の場合では、ヘモグロビン評価は、輸血後２週間又はそれ以上に実施しなければならない）；血小板数≧７５×１０⁹/L；全ての患者について十分な凝固機能（抗凝固治療（血小板抗凝集剤を除く）を受けている患者については、ＩＮＲの十分な治療レベルが確認されるべきである）；
－ 最初のＩＭＰ投与前の７日以内に実施された最後の評価に基づく十分な腎機能であって、以下のように定義される：クレアチニンクリアランス≧４０mL/分、Ｃｏｃｋｃｒｏｆｔ＆Ｇａｕｌｔ式を使用して評価；及び
－ 最初のＩＭＰ投与前の７日以内に実施された最後の評価に基づく十分な肝機能であって、以下のように定義される：総血清ビリルビン≦１．５×正常上限（ＵＬＮ）（ギルバート病が確認されていない場合）、及びアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）≦３×ＵＬＮ（肝機能異常が基礎的な肝転移に起因しない限り、ＡＳＴ及びＡＬＴ≦５×ＵＬＮ）。

【0384】

除外基準は以下を含む：
－ ホルモン補充治療により十分に管理されている、持続性グレード２の脱毛症又は白斑、末梢神経障害及び／又は内分泌末端器官不全の例外を伴い、以前の抗腫瘍治療に関連付けられる任意の他の未消散のグレード＞１毒性を有する患者；
－ 最初のＩＭＰ投与前の４週間以内に大手術、又は手術の副作用から回復していない患者。
－ 最初のＩＭＰ投与前の２週間以内に、任意の他の重篤／活動性／制御できない感染症、非経口抗生物質を要求する感染症を有する患者；
－ ＨＢｓＡｇ陽性として決定された活動性Ｂ型肝炎ウイルス感染、又は高感度定量分子方法により血清若しくは血漿中のＨＣＶ ＲＮＡの検出として決定された活動性Ｃ型肝炎ウイルス感染；
－ ＨＩＶ抗体の保有者（制御されたＨＩＶ ＲＮＡを有する患者は、薬物療法で安定であり、標準的な管理により検出不可能である場合は許可される）；
－ 臓器移植（例、幹細胞移植又は固形臓器移植）の病歴を有する患者；
－ 最初のＩＭＰ投与前の４週間以内に活動性血栓症、又は深部静脈血栓症若しくは肺塞栓症の病歴を有する患者であって、十分に処置され、治験責任医師により安定的であると考えられていない場合；
－ 活動性の制御不能な出血又は既知の出血素因を有する患者；
－ 既知の臨床的に有意な心血管疾患又は状態を有する患者であって、以下を含む：心室性不整脈又は他の制御不能な不整脈のための抗不整脈薬物治療についての必要性（組み入れ前の＞３０日間にわたる制御不能な心房細動（心拍数＜９０）を有する患者）；重度の伝導障害（例、３度心ブロック）；制御不能な高血圧；現在治療を要求するうっ血性心不全；ニューヨーク心臓協会（ＮＹＨＡ）の機能分類に従ったクラスＩＩＩ又は静脈内（ＩＶ）心血管疾患；６ヶ月以内での急性冠症候群の病歴（心筋梗塞及び不安定狭心症を含む）、冠動脈形成術、ステント留置術、又はバイパス移植術の病歴；
－ 組み入れ後２８日以内での胃腸穿孔又は腹腔内膿瘍の病歴；肝硬変の病歴（チャイルド・ピューＢ又はＣの既知の診断として定義される）又は慢性肝疾患の病歴；肺線維症又は関連する制御不能な慢性肺状態の病歴；身体の任意の部分での治癒していない傷を有する患者；
－ 以前に以下を受けている患者：低分子阻害剤、及び／又は他の類似の治験薬：≦２週間又は５半減期のいずれか短い方、化学療法、他のモノクローナル抗体、抗体－薬物複合体、又は他の類似の実験的治療≦３週間又は５半減期のいずれか短い方、又は放射性免疫複合体若しくは他の類似の実験的治療≦６週間又は５半減期のいずれか短い方；
－ 患者は、（以前の抗癌剤治療からの）ＡＥから、有害事象共通用語規準（ＣＴＣＡＥ）Ｖ５．０グレード１又はそれ以下まで回復していなければならず、グレード２の神経障害は許容可能である（以前のＡＥに起因する補充ホルモン治療を受けている患者は、関連付けられるＡＥが、試験での最初の投与前に補充治療を用いてグレード１まで回復した場合には、本試験における参加から除外されない；
－ 過去において抗ＮＫＧ２Ａ ｍＡｂを受けた患者；
－ 既知の、未処置の中枢神経系（ＣＮＳ）転移若しくは軟髄膜転移、又は脊髄圧迫を有する患者；以前の手術又は放射線療法により制御されていない、これらのいずれかを有する患者、又は処置が要求されるＣＮＳ関与を示唆する症状を有する患者（臨床的及び放射線学的に４週間にわたり安定なＣＮＳ転移を有する、並びに低コルチコステロイド処置を有する患者だけが、参加することが許される（≦１０mg/日プレドニゾン又は等価品が、４週間にわたり投与される場合には許可される）；
－ 根治的に処置され、スクリーニング時での寛解期間が ５年未満である悪性病変を含む、他の悪性病変。この最小限で要求される寛解期間についての除外は、十分な処置により治癒されると見なされる子宮頸部上皮内癌及び基底細胞皮膚癌について適用され得る；
－ 全身免疫抑制治療を用いた処置（予防的設定において又は慢性的な低用量［プレドニゾン換算≦１０mg/日］で与えられるステロイドを除く）、吸入、鼻腔内、眼内、局所＆関節内注射が許される；
－ 症状緩和だけのための短いコースとして提供される場合を除き、最初のＩＭＰ投与前４週間以内に完了した場合での事前の放射線療法；
－ 免疫刺激剤を受けた場合に悪化し得る活動性の自己免疫疾患（免疫抑制処置を要求しないＩ型糖尿病、白斑、乾癬、甲状腺機能低下症又は亢進症を有する患者が適格となる）；
－ 組み入れ前の２８日以内での生ワクチンの投与；及び
－ モノクローナル抗体への既知の重度の過敏症反応を含む、治験製品又はそれらの製剤中の任意の成分への既知の重度の過敏症（ＮＣＩ ＣＴＣＡＥ ｖ． ５．０グレード≧ ３）。

【0385】

パート２ａ スクリーニング基準
医学的及び治療的基準は以下を含む：
－ ＩＨＣにより３＋又はＩＨＣ及びスクリーニング時に収集された腫瘍生検中でのｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（ＩＳＨ－）増幅（≧２．０）により２＋と決定された、組織学的に証明された切除不能な局所進行性又は転移性ＨＥＲ２^＋癌を有する患者；
－ 患者は、第二選択について適格であり、細胞傷害性化学療法並びにトラスツズマブ及びペムブロリズマブを含む、第一選択の標準治療を用いた処置を受けていなければならない；
－ 過去６ヶ月間中にチェックポイント阻害剤（ＣＰＩ）処置を受けた患者は、試験エントリー前にｉＲＥＣＩＳＴによる、確認された放射線学的な進行を記録していなければならない；
－ ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１に従った、測定可能な疾患を有する患者は、試験エントリー前に以前の治療での進行の放射線学的評価を有していなければならない；
－ 推定余命≧１２週間。
－ ＥＣＯＧパフォーマンスステータス０又は１。

【0386】

組み入れ基準は以下を含む：
－ 最初のＩＭＰ投与前７日以内に実施された最後の評価に基づく十分な血液学的機能であって、以下のように定義される：ＡＮＣ≧１．５×１０⁹/L、ヘモグロビン≧ ８g/dL、血小板数≧７５×１０⁹/L、全ての患者について十分な凝固機能（ＩＮＲレベルに影響を及ぼす抗凝固治療（血小板抗凝集薬を除く）を受けている患者については、ＩＮＲの十分な治療レベルを確認すべきである）；
－ クレアチニンクリアランス≧３０mL/分として定義される、最初のＩＭＰ投与前の７日以内に実施された最後の評価に基づく十分な腎機能であって、Ｃｏｃｋｃｒｏｆｔ＆Ｇａｕｌｔ式を使用して評価される；及び
－ 最初のＩＭＰ投与前の７日以内に実施された最後の評価に基づく十分な肝機能であって、以下のとおりに定義される：総血清ビリルビン＜１．５×ＵＬＮ（ギルバート病が確認されていない場合）、ＡＳＴ及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）≦ ２．５×ＵＬＮ（肝機能異常が、基礎となる肝転移、ＡＳＴ及びＡＬＴ≦５×ＵＬＮに起因しない場合）。

【0387】

除外基準は、上のパート１に列挙されているものに加えて、以下を含む：
－ 心エコー図又はマルチゲート収集スキャンによる左心室駆出率（ＬＶＥＦ）＜５０%；及び
－ マルゲツキシマブ処方情報において存在する任意の禁忌。

【0388】

パート２ｂ スクリーニング基準
医学的及び治療的基準は以下を含む：
－ 患者は、転移性結腸直腸癌（ｍＣＲＣ）の組織学的又は細胞学的に確認された腺癌を有していなければならず（全ての他の組織型は除外される）、医学的禁忌又は腫瘍の切除不能のいずれかに起因して外科的介入を受け入れることができず、施設ガイドライン又は米国病理学者協会からのガイドラインに従って低いマイクロサテライト不安定状態を有する；
－ ｃｔＤＮＡスクリーニング血液検査分析に基づき、患者は以下であるべきである：（ｉ）以下のコドンのいずれかにおいてＲＡＳ（ＫＲＡＳ及びＮＲＡＳ）変異を伴わない：エクソン２中のコドン１２及び１３、エクソン３中のコドン５９及び６１、並びにエクソン４中のコドン１１７及び１４６、及び（ｉｉ）ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ変異を伴わない；
－ 過去６ヶ月間中にチェックポイント阻害剤（ＣＰＩ）処置を受けた患者は、試験エントリー前にｉＲＥＣＩＳＴに従って、確認された放射線学的な進行を文書化していなければならない；
－ ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１に従って測定可能な疾患を有する患者は、試験エントリー前に以前の治療での進行の放射線学的評価を受けていなければならない；
－ 推定余命≧１２週間；及び
－ ＥＣＯＧパフォーマンスステータス０又は１。

【0389】

組み入れ基準は以下を含む：
－ 最初のＩＭＰ投与前の７日以内に実施された最後の評価に基づく十分な血液学的機能であって、以下のように定義される：ＡＮＣ≧１．５×１０⁹/L、ヘモグロビン≧８g/dL（輸血の場合では、ヘモグロビン評価を、輸血後の２週間又はそれ以上に実施しなければならない）、血小板数≧７５×１０⁹/L、及び全ての患者についての十分な凝固機能（抗凝固治療（血小板抗凝集剤を除く）を受けている患者について、ＩＮＲの十分な治療レベルを確認すべきである）；
－ クレアチニンクリアランス≧３０mL/分として定義される、最初のＩＭＰ投与前の７日以内に実施された最後の評価に基づく十分な腎機能であって、Ｃｏｃｋｃｒｏｆｔ＆Ｇａｕｌｔ式を使用して評価される；
－ 最初のＩＭＰ投与前の７日以内に実施された最後の評価に基づく十分な肝機能であって、以下のように定義される：総血清ビリルビン＜１．５×ＵＬＮ（ギルバート病が確認されていない場合）、並びにＡＳＴ及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）≦３．０×ＵＬＮ（肝機能異常が基礎的な肝転移に起因しない場合、ＡＳＴ及びＡＬＴ≦５×ＵＬＮ）；並びに
－ 最初のＩＭＰ投与前の７日以内に実施された最後の評価に基づく、補給を伴う又は伴わない、正常限度内の血清カリウム、血清リン酸塩、血清マグネシウム。

【0390】

除外基準は以下を含む。
－ 有意な胃腸異常を有する患者であって、以下を含む：組み入れ時点でグレード＞１の下痢及び栄養補給についての必要性；
－ 組み入れ時点で以前の抗ＥＧＦＲからのグレード＞１の皮膚発疹、又は治験責任医師の判断に従って、試験における参加を妨げる任意の他の皮膚毒性を有する患者；並びに
－ 製剤化されたフツキシマブ／モドツキシマブ、セツキシマブ又はパニツムマブの賦形剤のいずれかに対する既知の又は疑われる過敏症（セツキシマブ又はパニツムマブのいずれかを用いた以前の治療の間でのグレード３又は４の過敏症反応）。

【0391】

試験薬物
本臨床試験において試験された薬剤を、以下の表３中に示す：

【表3】

【0392】

パート１ 薬物
ｍＡｂ１は、上の表２中に示される投与量で投与される、又は必要とされる場合には調整される。投与は、２週間毎（Ｑ２Ｗ）（±１日）、各々の２８日サイクルの１日目とＤ１５にＩＶ注入を介する。この４週間（２８日間）の期間が、１つの処置サイクルを構成する。ｍＡｂ１は約３０分間にわたり注入される。注入の持続時間は、注入関連反応（ＩＲＲ）の事象において示された場合、３０分又はそれより長く延長され得る。患者が、任意のサイクルの間にＩＲＲを経験した場合、観察期間を、そのサイクル及びその患者についてのその後の全てのサイクルの間に２時間まで延長すべきである。

【0393】

ｍＡｂ３は、パート１ａ中ではＣ２Ｄ１から、又はパート１ｂ中ではＣ１Ｄ１から、２週間毎にＩＶ注入として２００mgの用量で投与される。パート１ｂ中にｍＡｂ１と同時投与される場合、ｍＡｂ１が最初に投与される。

【0394】

パート２ 薬物
ｍＡｂ１及びｍＡｂ３の投与は、パート１について上で考察されるとおりである。

【0395】

パート２ａについては、マルゲツキシマブは、初回用量については１２０分（２時間）のＩＶ注入として３週間毎に１５mg/kgで、次に全てのその後の用量について最低３０分間にわたり投与される。マルゲツキシマブは、ＩＶプッシュ又はボーラスとして投与すべきではない。投与は、滅菌、非発熱性、低タンパク質結合ポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）０．２ミクロンのインライン又はアドオンフィルターを含むＩＶラインを通じてである。最初の１２週間後、治験責任医師は、Ｑ４週スケジュールでマルゲツキシマブを投与することを決定し得る。

【0396】

パート２ｂについては、フツキシマブ／モドツキシマブは、サイクル１の１日目（Ｃ１Ｄ１）（負荷用量）に９mg/kgの用量で、次にその後の全ての投与についてはＣ１Ｄ８に開始して毎週（±２日）６mg/kgの用量（維持用量）で、ＩＶ注入により投与される。用量調整は、投薬サイクル（ＣｘＤ１）の開始時に測定されるように、顕著な体重変化（±１０%）の事象において作るべきである。最初の１２週間後、治験責任医師は、フツキシマブ／モドツキシマブを Ｑ２Ｗスケジュールで投与することを決定し得る。

【0397】

評価のための基準
標準応答基準が、疾患評価及び応答評価について適用される（ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１及びｉＲＥＣＩＳＴ ｖ１）。評価は、調査スケジュールにおいて指定された間隔で、及び疑われる進行性疾患の事象において実施すべきである。同じ疾患評価方法及び同じ技術を、試験全体を通じてベースラインとして使用すべきである。応答は、治験責任医師又は有資格の被指名者により評価され、各々の評価点でＣＲ、ＰＲ、ＳＤ、ＰＤ、又は評価不能（ＮＥ）として記述される。疾患評価は、ベースラインで、サイクル２の終了時に、及びその後の偶数サイクルの終了時に（遅延が、投薬における遅延に起因して要求されない限り、約８週間毎）並びに疾患の進行時に実施される。

【0398】

ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１に従い、応答を、応答が最初に記録された日から４週間以内に画像評価を反復することにより確認すべきである。応答を確認するためのスキャンは、最初の応答の記録から最も早期には４週間後に、又は次の予定されたスキャン（最後のスキャンから８週間間隔）のいずれか臨床的に示された方で実施され得る。

【0399】

ｉＲＥＣＩＳＴは、ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１に従って、最初の放射線学的な進行後の腫瘍応答及び進行を評価するために治験責任医師により使用される；処置の決定が、それに応じて行われ得る。

【0400】

治験責任医師は、処置を継続するか否かを決定する前に、反復イメージングで腫瘍量を評価する際に、全ての病変（標的及び非標的）を考慮すべきである。患者は、免疫関連の偽進行が起こり得るため、その後に（進行の初回評価から少なくとも４週間後に）その進行の放射線学的な確認まで（臨床的に不安定でない限り）処置を継続する。臨床的に不安定である患者は、進行性疾患の確認のために反復イメージングを受けることを要求されない。

【0401】

ＡＥは、ＮＣＩ ＣＴＣＡＥバージョン５．０を使用して段階分けされる。ＤＬＴは、２８日間のＤＬＴ観察期間の間に生じ、疾患進行、併発する病気、又は併用薬若しくは他の病因とは無関係として評価され、ＩＭＰに関連すると考えられるＡＥとして定義される。

【0402】

薬物動態測定は以下を含む：個々のＰＫパラメーター、例えばＡＵＣ又はＣｍａｘ などは、集団ＰＫモデリングアプローチを使用して導出される；及び、有効性又は安全性についての個々のＰＫパラメーターとＰＤエンドポイントの間の関係の探索的評価が実施され得る。

【0403】

薬力学的評価は以下である：末梢におけるＮＫＧ２Ａ受容体占有率評価及び免疫表現型検査、末梢における標的関与の遺伝子発現シグネチャー、可溶性ＨＬＡ－Ｅ及び潜在的な他の可溶性因子、並びに薬力学及び予測バイオマーカー評価のための腫瘍生検。

【0404】

実施例１１：ｈＮＫＧ２Ａ／ｈＣＤ９４ ＫＩマウスにおける同系ＭＣ３８－ＨＬＡＥ腫瘍モデルにおける抗ＰＤ１との組み合わせにおけるｍＡｂ１のインビボ有効性
本実施例は、マウスＭＣ３８－ＨＬＡＥ結腸癌細胞で移植されたｈＮＫＧ２Ａ／ｈＣＤ９４ ＫＩマウス（Biocytogen、中国）における抗ＰＤ１ ｍＡｂ３との組み合わせにおけるｍＡｂ１のインビボ有効性を実証する。

【0405】

材料及び方法
マウスＭＣ３８－ＨＬＡＥ結腸癌細胞株をヒトＮＫＧ２Ａ／ＣＤ９４ダブルノックインマウスモデル（Biocytogen、中国）中に皮下移植した。処置は、腫瘍体積６０mm³で開始し、マウスは週３回、溶媒緩衝液、ｍＡｂ１、抗ＰＤ１ ｍＡｂ３、又はｍＡｂ１及び抗ＰＤ１ ｍＡｂ３の組み合わせの腹腔内注射により合計９回の処置を伴って処置された（ｎ＝１０／群）。全てのｍＡｂが１０mg/kgで投薬された。腫瘍を週３回、ノギスにより二次元において測定し、腫瘍体積（mm³）を式：（幅）２×長さ×０．５に従って計算した。

【0406】

ボンフェローニの多重比較検定を用いた二元配置分散分析を適用して、処置群間の各々の時間点での腫瘍体積を比較した。

【0407】

結果
図１１中に示すように、ｍＡｂ１及び抗ＰＤ１ ｍＡｂ３を用いた併用療法は、抗ＰＤ１ ｍＡｂ３の単一処置と比較して、より多くの、より早期の腫瘍根絶を誘導した。

【0408】

実施例１２：ＭＩＰ－１ｂを使用したトラスツズマブの滴定
本実施例は、インビトロでの初代ＮＫ細胞の炎症促進性サイトカインＭＩＰ－１βの発現に対する、滴定されたトラスツズマブへのｍＡｂ１の添加の効果を記載する。

【0409】

材料及び材料
ＷＴ ＳＫＯＶ３細胞を、一晩、ＨＬＡ－Ｂ^＊０７０１ペプチドを用いてパルスした。翌日、これらの細胞を、１０ng/mlのＩＬ－２及び抗ＮＫＧ２Ａ抗体の存在において、新鮮なＰＢＭＣから単離したＮＫＧ２Ａ^＋ＮＫ細胞と１０：１比率で共培養した。データは、単一のドナーとの共培養におけるＭＩＰ－１βレベルを示す。同様に、ＨＬＡ－Ｅの安定な表面発現のためにＨＬＡ－Ｅを形質導入した Ｎ８７、ＢｘＰＣ３、ＳＫＯＶ３、Ａ３７５、Ａ５４９及びＪＩＭＴ－１細胞を、１０ng/ml ＩＬ－２及び抗ＮＫＧ２Ａ及び／又は抗ＨＥＲ２抗体又はコントロール抗体の存在において、新鮮なＰＢＭＣから単離した ＮＫＧ２Ａ^＋ＮＫ細胞と１０：１比率で共培養した。データは、単一のドナーとの共培養におけるＭＩＰ－１βレベルを示す。４８時間の培養後、上清を収集し、ＭＩＰ－１βの濃度をＥＬＩＳＡ（Invitrogen、８８－７０３４－８８）により定量化した。

【0410】

結果
２５μg/mLのｍＡｂ１は、ＨＬＡ－Ｅ＋癌細胞と共培養した場合、ＮＫ細胞のＭＩＰ－１β分泌を誘導した。ＩｇＧ１ ＬＡＬＡ（アイソタイプコントロール）抗体への滴定トラスツズマブの添加は、ＭＩＰ－１β分泌の用量依存的な誘導を誘導し、この効果は、滴定トラスツズマブをｍＡｂ１と組み合わせた場合に増加した（図１２Ａ）。ＨＬＡ－Ｅで形質導入された全ての６つの細胞株について、コントロール抗体ＩｇＧ１ ＬＡＬＡと比較して、低濃度でさえ、トラスツズマブとｍＡｂ１を組み合わせる場合に、ＭＩＰ－１βにおけるトラスツズマブ用量依存的な増加がある（図１２Ｂ）。

【0411】

実施例１３：末梢血リンパ球に対する二重のＰＤ－１及びＮＫＧ２Ａ遮断の併用効果
材料及び方法
３人の健康なドナーからの末梢血リンパ球（ＰＢＬ）は、末梢血単核球からＣＤ１４＋細胞を枯渇させることにより単離された。５０，０００個のＰＢＬを、ＨＬＡ－Ｅ及びＰＤ－Ｌ１を過剰発現するレンチウイルスベクターで形質導入され、トラスツズマブ１μg/mL又はトラスツズマブ１μg/mLに加えて、ゾレドロネート１μMで活性化された５，０００個のＳＫＯＶ３細胞と、丸底９６ウェルプレート中に播種した。また、ＰＢＬはまた、ｍＡｂ１（１０μg/mL）、ペムブロリズマブ（１０μg/mL）、ｍＡｂ１（１０μg/mL）及びペムブロリズマブ（１０μg/mL）の組み合わせを用いて、或いはそれぞれのアイソタイプコントロールＩｇＧ１ ＬＡＬＡ（１０μg/mL）、ＩｇＧ_４（１０μg/mL）、又は両方の組み合わせを用いて処理された。上清を、３日間のインキュベーション後に収集し、可溶性メディエーターの濃度を、Meso QuickPlex SQ120プレートリーダー（Mesoscale Discovery）上のマルチサイトカインパネルU-Plexキット（Ｋ１５１ＡＥＬ－４、Mesoscale Discovery）を用いた電気化学発光により測定した。

【0412】

結果
ＰＢＬは、ＨＬＡ－Ｅ及びＰＤ－Ｌ１を過剰発現するように操作されたＨＥＲ２陽性ＳＫＯＶ３細胞の存在において、トラスツズマブ単独により、又はトラスツズマブ、及びゾレドロネートの添加によりＳＫＯＶ３細胞の表面上で上方調節されたリン酸化抗原により活性化された。ＰＤ－１及びＮＫＧ２Ａ チェックポイント阻害の効果は、ＩＦＮ－γ（複数の抗腫瘍活性を有するサイトカイン）；グランザイムＢ（直接的な細胞毒性を媒介する）；ＭＩＰ－１β／ＣＣＬ４（炎症誘発性ケモカイン）の分泌を測定することにより、両方の活性化状況において個別に又は組み合わせにおいて評価された。トラスツズマブ活性化は、単独で、又はｍＡｂ１若しくはペムブロリズマブ単一薬剤と組み合わせて、可溶性メディエーターの分泌をほとんど又はまったく誘発しなかった。しかし、ドナー１の場合では、トラスツズマブ、ｍＡｂ１、及びペムブロリズマブの三重併用によって、ＩＦＮ－γ、グランザイムＢ、及びＭＩＰ－１βの分泌における劇的な増加がもたらされた（図１３Ａ）。ＰＢＬがトラスツズマブ及びゾレドロン酸誘導性リン酸化抗原の両方により活性化された場合、ｍＡｂ１による単一のＮＫＧ２Ａ遮断は、一般的に、可溶性メディエーターの増加分泌をもたらしたのに対し、単一のＰＤ－１遮断は、対応する単一アイソタイプコントロールと比較して全く、又はほとんど効果を有さなかった。また、ｍＡｂ１及びペムブロリズマブの両方の併用は、ｍＡｂ１単一処置との比較において、並びにＩｇＧ１－ＬＡＬＡ及びＩｇＧ４アイソタイプコントロールの組み合わせと比較して、全てのドナーにおいてＩＦＮ－γ、グランザイムＢ、及びＭＩＰ－１β分泌における増加をもたらした。これらの結果は、トラスツズマブ刺激との関連におけるＮＫＧ２Ａ／ＰＤ－１二重遮断の併用効果を示す。

【0413】

実施例１４：ｍＡｂ１併用療法のための第１ｂ／２相臨床プロトコール
本実施例は、ＭＳＩ Ｈ／ｄＭＭＲ局所進行性切除不能又は転移性結腸直腸癌（ｍＣＲＣ）におけるペムブロリズマブとの併用並びにＨＥＲ２陽性の局所進行性切除不能又は転移性胃食道接合部（ＧＥＪ）及び胃腺癌（ＧＡ）におけるｍＡｂ１、ペムブロリズマブ、及びトラスツズマブの三重併用におけるｍＡｂ１の安全性、耐容性、及び抗腫瘍活性を調べる非盲検、非無作為化、多群、多施設、第１ｂ／２相試験を記載する。

【0414】

各々の参加患者の最大試験期間：各々の患者が、試験に参加し、約４ヶ月間の処置に加えて、３ヶ月間の安全性追跡調査を有する。全ての患者について、処置の最大持続期間は２年を超えない。

【0415】

試験デザイン
臨床試験の２群、ｍＡｂ１＋ペムブロリズマブ（図１４）及びｍＡｂ１＋ペムブロリズマブ＋トラスツズマブ（図１５）の各々を、以下に記載する。

【0416】

第一の主目的は、固形腫瘍における応答評価基準（ＲＥＣＩＳＴ）ｖ１．１を使用した中央評価により全応答率（ＯＲＲ）を評価することにより、ＭＳＩ－Ｈ／ｄＭＭＲ（ミスマッチ修復不全）結腸直腸癌（ＣＲＣ）を有する患者におけるｍＡｂ１及びペムブロリズマブの組み合わせの抗腫瘍活性及び有効性並びにＨＥＲ２陽性の胃食道接合部（ＧＥＪ）及び胃腺癌（ＧＡ）を有する患者におけるｍＡｂ１、ペムブロリズマブ、及びトラスツズマブの組み合わせの予備的な有効性を評価することである。

【0417】

第二の主目的は、ＭＳＩ－Ｈ／ｄＭＭＲ ＣＲＣ患者におけるｍＡｂ１及びペムブロリズマブの組み合わせの安全性及び耐容性プロファイル、並びにＨＥＲ２陽性の胃食道接合部（ＧＥＪ）及び胃腺癌（ＧＡ）におけるＳ０９５０２９、ペムブロリズマブ、及びトラスツズマブの三重併用の安全性及び耐容性を評価することである。

【0418】

第一の二次目的は、ＣＲＣを有する患者におけるペムブロリズマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１の薬物動態（ＰＫ）プロファイル、並びにＨＥＲ２陽性を有する患者におけるペムブロリズマブ及びトラスツズマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１のＰＫプロファイルを特徴付けることである。

【0419】

第二の二次目的は、胃食道癌及び胃癌におけるｍＡｂ１、ペムブロリズマブ及びトラスツズマブの間での、並びに結腸直腸癌におけるｍＡｂ１及びペムブロリズマブの間での潜在的なＰＫ／ＰＤ相互作用を調べることである。

【0420】

第三の二次目的は、ＰＫ／ＰＤプロファイルの評価を継続し、各々の組み合わせの推奨される第２相用量（ＲＰ２Ｄ）を更に特徴付けることである。

【0421】

第四の二次目的は、抗薬物抗体（ＡＤＡ）形成についての潜在能の評価により、組み合わせにおける各々の抗体の免疫原性を評価することである。

【0422】

第五の二次目的は、追加の有効性パラメーターを評価し、各々の組み合わせの抗腫瘍活性を評価することである。

【0423】

方法論
本試験は、ＭＳＩ－Ｈ／ｄＭＭＲ局所進行性切除不能又はｍＣＲＣにおけるペムブロリズマブとの組み合わせにおけるｍＡｂ１、並びにＨＥＲ２陽性の局所進行性切除不能胃食道癌及び胃癌におけるｍＡｂ１、ペムブロリズマブ、及びトラスツズマブの三重併用の安全性、耐容性、及び抗腫瘍活性を決定する。

【0424】

ｍＡｂ１＋ペムブロリズマブ
拡大第２相コホートについて、患者は、各々の２１日サイクルの１日目に３週間毎のＩＶ注入を介してＲＰ２ＤでＳ０９５０２９、各々の２１日サイクルの１日目に３週間毎のＩＶ注入を介してペムブロリズマブ２００mgを用いて処置される。

【0425】

スクリーニング基準
患者は≧１８歳の男性又は女性である。医学的及び治療的基準は以下を含む：
－ 患者は、組織学的又は細胞学的に確認された局所進行性の切除不能な腺癌又はｍＣＲＣを有していなければならない；
－ 患者は、施設のガイドラインに従って、又は米国病理学者協会に従って、診断時にマイクロサテライト不安定性高ステータス（ＭＳＩ－Ｈ）又はＤＮＡミスマッチ修復不全（ｄＭＭＲ）を有していなければならない；
－ 患者は、イピリムマブとの組み合わせにおけるペムブロリズマブ又はニボルマブなどの承認済み抗ＰＤ（Ｌ）－１薬剤、及びオキサリプラチン又はイリノテカン薬剤を伴うフルオロピリミジンに基づく標準治療化学療法レジメンを含む、少なくとも２つの以前のラインで進行していなければならない；
－ ＢＲＡＦ（Ｖ６００Ｅ）変異を有する患者を含めることができ、二次選択においてＢＲＡＦ阻害剤であるエンコラフェニブを用いて処置することができたであろう；
－ ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１に従って測定可能な疾患を有する患者；
－ 患者は、適したアーカイブ又は新たに収集された腫瘍生検を提供しなければならない；
－ 推定余命≧１２週間；
－ ＥＣＯＧパフォーマンスステータス０又は１。

【0426】

組み入れ基準は以下を含む：
－ 最初のＩＭＰ投与前の７日以内に実施された最後の評価に基づく十分な血液学的機能であって、以下のように定義される：ＡＮＣ≧１．５×１０⁹/L、ヘモグロビン≧８g/dL。輸血の場合では、血小板数≧７５×１０⁹/L、全ての患者について十分な凝固機能；
－ クレアチニンクリアランス≧３０mL/分として定義される、最終評価に基づく十分な腎機能；
－ 十分な肝機能であって、以下のように定義される：総血清ビリルビン＜１．５×ＵＬＮ（ギルバート病が確認された場合を除く＜３×ＵＬＮ）、ＡＳＴ及びＡＬＴ≦３．０×ＵＬＮ；
－ 最後の評価に基づく、補給を伴う又は伴わない、正常限度内の血清カリウム、血清リン酸塩、血清マグネシウム。

【0427】

除外基準は以下を含む：
－ 最初のＩＭＰ投与前の４週間以内の大手術；
－ 他の重篤な／活動性／制御不能な感染症を有する患者；
－ 活動性Ｂ型肝炎ウイルス感染症；
－ ＨＩＶ抗体の保因者；
－ 臓器移植の病歴を有する患者；
－ 活動性血栓症、又は深部静脈血栓症若しくは肺塞栓症の病歴を有する患者；
－ 活動性の制御不能な出血を有する患者；
－ 身体の任意の部分に治癒していない傷を有する患者；
－ 過去において抗ＮＫＧ２Ａ ｍＡｂを受けた患者；
－ 既知の、未処置の中枢神経系（ＣＮＳ）を有する患者；
－ 全身免疫抑制治療を用いた処置；
－ 最初のＩＭＰ投与前の４週間以内に完了した場合には、以前の放射線療法；
－ 免疫刺激剤を受けた場合により悪化し得る、活動性の自己免疫疾患；
－ 組み込む前の２８日以内での生ワクチンの投与；
－ 治験製品又はそれらの製剤中の任意の成分への既知の重度の過敏症；
－ ペムブロリズマブ処方情報において存在する任意の禁忌。

【0428】

ｍＡｂ１＋ペムブロリズマブ＋トラスツズマブ
コホートの先頭にいる患者は、各々の２１日サイクルの１日目に３週間毎にＩＶ点滴を介した推奨第２相用量（ＲＰ２Ｄ）のｍＡｂ１、サイクル１の１日目にＩＶ注入を介した８mg/kg負荷用量、その後３週間毎の６mg/kgのトラスツズマブ、及び３週間毎のＩＶ注入を介したペムブロリズマブ２００mgを用いて処置した。拡大第２相コホートについては、患者は、各々の２１日サイクルの１日目に３週間毎にＩＶ点滴を介したＲＰ２ＤのｍＡｂ１、サイクル１の１日目にＩＶ注入を介した８mg/kg負荷用量、その後３週間毎の６mg/kgのトラスツズマブ、及び３週間毎のＩＶ注入を介したペムブロリズマブ２００mgを用いて処置した。

【0429】

スクリーニング基準
患者は≧１８歳の男性又は女性である。医学的及び治療的基準は以下を含む：
－ 局所進行した切除不能又は転移性胃食道癌及び胃癌を有する患者；
－ 組織学的に証明された切除不能な局所進行性又は転移性ＨＥＲ２＋癌を有する患者；
－ペムブロリズマブを伴う又は伴わないトラスツズマブを含む、フルオロピリミジン及びプラチナベースの組み合わせを伴う第一選択並びに第二選択の標準治療レジメンを含む、２つの以前の処置ラインで進行した患者；
－ ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１に従って測定可能な疾患を有する患者；
－ 推定余命≧１２週間；
－ ＥＣＯＧパフォーマンスステータス０又は１。

【0430】

組み入れ基準は以下を含む：
－ 最初の治験医薬品（ＩＭＰ）投与前の７日以内に実施された最後の評価に基づく十分な血液学的機能であって、以下のように定義される：絶対好中球数（ＡＮＣ）≧１．５×１０⁹/L、ヘモグロビン≧８g/dL、血小板数≧７５×１０⁹/L；
－ 全ての患者について十分な凝固機能；
－ 最初のＩＭＰ投与前の７日以内に実施された最後の評価に基づく十分な腎機能であって、以下のように定義される：クレアチニンクリアランス≧３０mL/分；
－ 最初のＩＭＰ投与前の７日以内に実施された最後の評価に基づく十分な肝機能であって、以下のように定義される：血清総ビリルビン≦１．５×正常上限（ＵＬＮ）；アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）及びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）≦３×ＵＬＮ。

【0431】

除外基準は以下を含む：
－ 心エコー図による左心室駆出率（ＬＶＥＦ）＜５０%；
－ トラスツズマブ又はペムブロリズマブにおいて存在する任意の禁忌；
－ 最初のＩＭＰ投与前の４週間以内での大手術；
－ 任意の他の重篤な／活動性／制御不能な感染症を有する患者；
－ 活動性Ｂ型肝炎ウイルス感染症；
－ ＨＩＶ抗体の保因者；
－ 臓器移植の病歴を有する患者；
－ 活動性血栓症、又は深部静脈血栓症若しくは肺塞栓症の病歴を有する患者；
－ 活動性の制御不能な出血を有する患者；
－ 既知の臨床的に有意な心血管疾患を有する患者；
－ 胃腸穿孔又は腹腔内膿瘍の病歴；
－ 肝硬変又は慢性肝疾患の病歴；
－ 肺線維症又は関連する制御不能な慢性肺疾患の病歴；
－ 身体の任意の部分に治癒していない傷を有する患者；
－ 過去に抗ＮＫＧ２Ａ ｍＡｂを受けた患者；
－ 既知の未治療の中枢神経系（ＣＮＳ）を有する患者；
－ 全身免疫抑制治療を用いた処置；
－ 最初のＩＭＰ投与前の４週間以内に完了した場合は、以前の放射線療法；
－ 活動性の自己免疫疾患。

【0432】

評価のための基準。

【0433】

両方の群について、腫瘍評価は、医用画像診断により９週間（＋／－７日）毎に実施され、応答の場合では、確認が、少なくとも４週間後に要求される。患者は、疾患進行後の生存状態の評価のために、９０日（＋／－７日）毎に追跡調査される。生存の追跡調査期間は２年間まで続く。

【表4】

【図1】

【図2】

【図3】

【図4A】

【図4B】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9A】

【図9B】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【配列表】

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【国際調査報告】