特表 2024-537897 分解可能な近赤外光増感剤、並びにその調製方法および使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-10-16

(54)【発明の名称】分解可能な近赤外光増感剤、並びにその調製方法および使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 33/40 20060101AFI20241008BHJP

   A61K 41/00 20200101ALI20241008BHJP

   A61K 31/555 20060101ALI20241008BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20241008BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20241008BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20241008BHJP

   A61P 31/04 20060101ALI20241008BHJP

【ＦＩ】

A61K33/40

A61K41/00

A61K31/555

A61P43/00 111

A61P35/00

A61P17/00

A61P31/04

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024522688

(86)(22)【出願日】2022-10-13

(85)【翻訳文提出日】2024-04-30

(86)【国際出願番号】 CN2022124995

(87)【国際公開番号】W WO2023020631

(87)【国際公開日】2023-02-23

(31)【優先権主張番号】202111196449.6

(32)【優先日】2021-10-14

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

(71)【出願人】

【識別番号】524141854

【氏名又は名称】北京▲協▼同▲創▼新研究院

(71)【出願人】

【識別番号】524141865

【氏名又は名称】广▲東▼粤港澳大湾区▲協▼同▲創▼新研究院

(74)【代理人】

【識別番号】110000659

【氏名又は名称】弁理士法人広江アソシエイツ特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】▲張▼俊▲龍▼

(72)【発明者】

【氏名】朱孟良

(72)【発明者】

【氏名】▲張▼航

(72)【発明者】

【氏名】▲楊▼字舒

(72)【発明者】

【氏名】王炳武

【テーマコード（参考）】

4C084

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C084AA11

4C084NA06

4C084NA20

4C084ZB26

4C084ZB35

4C084ZC02

4C086AA01

4C086AA02

4C086DA31

4C086HA22

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA06

4C086NA20

4C086ZA89

4C086ZB26

4C086ZB35

(57)【要約】

本発明は、分解可能な近赤外光増感剤、その調製方法および応用を開示しており、光増感剤の技術分野に属する。上記分解可能な近赤外光増感剤は、ポルフィリン系化合物、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、非共有結合複合体、錯体、およびプロドラッグから選択されるいずれか１種であり、上記ポルフィリン化合物の構造は、式１に示す通りである。本発明は、上記の分解可能な近赤外光増感剤の調製方法および応用を開示している。本発明の分解可能な近赤外光増感剤によれば、光照射により活性酸素を生成するとともに分解され、光照射終了後、光増感剤が光活性を有しない低毒性物質に完全転化され、従来技術における光増感剤の残存問題が効果的に解決される。
【化１】

【選択図】図１３

【特許請求の範囲】

【請求項1】

分解可能な近赤外光増感剤であって、ポルフィリン系化合物、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、非共有結合複合体、錯体、およびプロドラッグから選択されるいずれか１種であり、前記ポルフィリン化合物の構造は、式１に示す通りであり、

【化1】

式中、

【化2】

はそれぞれ独立して、

【化3】

から選択されるいずれか１種であり、
Ａｒ_１およびＡｒ_２とも置換又は未置換されたフェニル基であり、
Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７、およびＲ_８は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ニトロ基、ヒドロキシル基、アミノ基、スルファニル基、カルボキシル基、スルホン酸基、リン酸基、シアノ基、アミド基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル基で置換されたアミノ基、置換又は未置換されたＣ_１－Ｃ_８アルキル基、置換又は未置換されたＣ_１－８アルコキシ基、置換されたメルカプト基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルリン酸基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルカルボキシル基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルスルホン酸基、Ｃ_３－Ｃ_６アルケニルアルキル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニルアルキル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニルオキシ基、およびＣ_２－Ｃ_６アルキニルオキシ基から選択されるいずれか１種であり、
Ｍは金属イオンであって、Ｍｇ、Ｃｒ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｃｄ、Ｇａ、Ａｌ、Ｐｄ、およびＰｔから選択されるいずれか１種であることを特徴とする、分解可能な近赤外光増感剤。

【請求項2】

前記Ａｒ_１および前記Ａｒ_２は、それぞれ独立して、

【化4】

であり、
式中、Ｒ_９、Ｒ_１０、Ｒ_１１、Ｒ_１２、およびＲ_１３は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ニトロ基、ヒドロキシル基、アミノ基、スルファニル基、カルボキシル基、スルホン酸基、リン酸基、シアノ基、アミド基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル基で置換されたアミノ基、置換又は未置換されたＣ_１－Ｃ_８アルキル基、置換又は未置換されたＣ_１－Ｃ_８アルコキシ基、置換されたメルカプト基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルリン酸基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルカルボキシル基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルスルホン酸基、Ｃ_３－Ｃ_６アルケニルアルキル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニルアルキル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニルオキシ基、およびＣ_２－Ｃ_６アルキニルオキシ基から選択されるいずれか１種であることを特徴とする、請求項１に記載の分解可能な近赤外光増感剤。

【請求項3】

前記金属イオンは、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｃｄ、Ａｌ、およびＧａから選択されるいずれか１種であることを特徴とする、請求項１に記載の分解可能な近赤外光増感剤。

【請求項4】

前記ポルフィリン化合物の具体的な構造は、

【化5】

から選択されるいずれか１種であることを特徴とする、請求項１～３のいずれか一項に記載の分解可能な近赤外光増感剤。

【請求項5】

請求項１～４のいずれか一項に記載の分解可能な近赤外光増感剤の調製方法であって、下記の手順１～３を含み、
第１中間生成物を調製する手順１において、水熱反応釜の中で、ポルフォジラクトン１００ｍｇと、前記ポルフォジラクトンに対して３０～５０倍当量に相当するアルカリとを、５ｍＬ～２０ｍＬの第１溶媒に溶解させ、８０℃～２００℃で２４ｈ～７２ｈ反応させて、第１中間生成物を得て、反応式は以下に示す通りであり、

【化6】

第２中間生成物を調製する手順２において、手順１で得られた第１中間生成物１００ｍｇを、５ｍＬ～５０ｍＬの第２溶媒の中で水溶性修飾反応を行わせ、第２中間生成物を得て、反応式は以下に示す通りであり、

【化7】

目標生成物を調製する手順３において、手順２で得られた第２中間生成物１００ｍｇと、前記第２中間生成物に対して１０倍当量に相当する金属塩とを、２０～１００ｍＬの第３溶媒に溶解させ、２０℃～８０℃で２ｈ～１６ｈ反応して、式１に示す目標生成物を得て、反応方程式は以下に示す通りである、

【化8】

ことを特徴とする、分解可能な近赤外光増感剤の調製方法。

【請求項6】

手順１において、
前記アルカリは、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、ナトリウムメトキシド、およびカリウムｔｅｒｔ－ブトキシドから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物であり、
前記第１溶媒は、水、メタノール、エタノール、アセトニトリル、アセトン、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、およびテトラヒドロフランから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物であり、
前記反応温度を１００℃～１５０℃とし、反応時間を４８ｈ～７２ｈとすることを特徴とする、請求項５に記載の分解可能な近赤外光増感剤の調製方法。

【請求項7】

前記第２溶媒は、ジメチルスルホキシド、Ｎ,Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、リン酸トリメチル、リン酸トリエチル、およびヘキサノールから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物であることを特徴とする、請求項５に記載の分解可能な近赤外光増感剤の調製方法。

【請求項8】

前記金属塩は、マグネシウム塩、クロム塩、マンガン塩、鉄塩、コバルト塩、ニッケル塩、銅塩、亜鉛塩、カドミウム塩、ガリウム塩、アルミニウム塩、パラジウム塩、および鉛塩から選択されるいずれか１種であり、
前記第３溶媒は、水、メタノール、エタノール、アセトニトリル、アセトン、ジメチルスルホキシド、Ｎ,Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、クロロホルム、およびジクロロメタンから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物であり、
前記反応の温度を２０℃～６０℃とし、反応時間を３ｈ～５ｈとすることを特徴とする、請求項５に記載の分解可能な近赤外光増感剤の調製方法。

【請求項9】

前記金属塩は、マグネシウム塩、亜鉛塩、カドミウム塩、ガリウム塩、およびアルミニウム塩から選択されるいずれか１種であることを特徴とする、請求項８に記載の分解可能な近赤外光増感剤の調製方法。

【請求項10】

光動力治療薬の調製における、活性成分としての請求項１～４のいずれか１項に記載の分解可能な近赤外光増感剤の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、分解可能な近赤外光増感剤、並びにその調製方法および使用に関し、光増感剤の技術分野に属する。

【背景技術】

【0002】

がんは人間の健康を深刻に脅かす疾患の一つとして、致死率が極めて高く、人間の命の安全に危害を及ぼす「最強の殺し屋」となっている。例えば、手術による切除、放射線療法および化学療法などの現在がん治療の主要方法に比較して、光動力療法（Ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃｔｈｅｒａｐｙ、ＰＤＴと略記する）は、非侵襲的治療法の一種として、治療時間、治療効果、薬剤耐性、および毒性や副作用等の点から有利であり、がん、腫瘍、皮膚疾患、抗菌等の分野において大きな潜在力を示している。光動力療法の作用メカニズムは、生体内に光増感剤を注入し、血液循環によって光増感剤を病巣まで到達させた後、病巣に累積させ、病巣領域に特定の波長の光を局所的に照射することで、光増感剤を励起し、活性酸素種（Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｏｘｙｇｅｎ Ｓｐｅｃｉｅｓ、ＲＯＳと略記する）を放出させ、病変組織血管の直接損傷、破壊および免疫ストレスを引き起すなどの手段により病変細胞を殺し、治療の目的を達成する。光動力療法は、活性酸素種の生成メカニズムの違いによってＩ型又はＩＩ型に分類され、電子又はプロトンの移動によって光増感剤からラジカルを生成し、高活性なラジカルと分子状酸素との相互作用を経て、スーパーオキシアニオンを生成し、さらに反応してヒドロキシラジカル、過酸化水素などの活性酸素を生成するものをＩ型光動力反応とし、これによる損傷を第Ｉ類損傷と呼び、光増感剤が励起状態のエネルギを周囲の酸素分子に伝達してそれが一重項酸素になるようにするものをＩＩ型光動力反応と呼び、これによる損傷をＩＩ類損傷と呼ぶ。

【0003】

光動力療法の効果は主に光増感剤の性質に依存する。光増感剤は強い光毒性を持ちながら生体に毒性や副作用のないものである。近年、光増感剤の種類は次第に増え、現在まで既に３世代がある。第１世代の光増感剤は、主にポルフィリン系混合物であり、第２世代の光増感剤は、異なる構造タイプを有するポルフィリン誘導体単量体と、活性分子に結合する合成化合物とを指し、第３世代の光増感剤は、光増感剤と、モノクローナル抗体又はステロイド、脂質、ペプチド、ヌクレオシド、ヌクレオチドなどの他の小さな生体活性分子とが結合して得られる、標的機能を有する光増感剤である。しかしながら、光動力治療の臨床応用の範囲は、依然として限度があり、これは、主に、（１）ほとんどの光増感剤はまだ短波長による励起を必要とするが、短波長の光は透過深度が不十分であり、深層病巣への有効な照射が困難であること、（２）酸素依存性が高いため、酸素欠乏実体腫瘍に対する光動力治療の効果に限界があること、（３）水溶性が乏しくて、体内で凝集が起こりやすく、かつ特異性に欠けること、（４）光増感剤の構造が安定で、体内での分解代謝が遅いことためである。

【0004】

従来の光増感剤は、治療深度に限界があり、酸素依存性が高く、腫瘍への標的性が乏しい等の欠点があるため、光動力療法の臨床応用における治療効果を強く制限している。また、光動力治療を受けた後、体内に残存する光増感剤は完全に代謝されるまでに長い時間を要することが多い。残存する光増感剤は、光に暴露されると、依然として活性酸素種を生成し続け、強い光毒性を示して、組織や細胞へある程度の損傷を与えられることから、患者に対して治療を受けた後長期間にわたって光を避けるよう要求しているが、数ヶ月にわたってずっと暗闇と恐怖の中で生活することにより、患者の心身の健康に深刻な影響を及ぼす可能性がある。したがって、光動力治療を実施した後、光増感剤を適時に無効化して、光増感剤の残存による安全性の問題を回避することは、光動力療法の臨床応用における難点となっている。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

これに鑑みて、従来技術の不足を補うためには、新たな分解可能な近赤外光増感剤、その調製方法及び応用を提供する必要がある。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本発明は、第１の目的として、分解可能な近赤外光増感剤を提供する。

【0007】

上記技術的課題を解決するための本発明の構成は以下の通りである。

【0008】

分解可能な近赤外光増感剤であって、ポルフィリン系化合物、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、非共有結合複合体、錯体、およびプロドラッグから選択されるいずれか１種であり、上記ポルフィリン化合物の構造は、式１に示す通りであり、

【化1】

式中、

【化2】

は、それぞれ独立して、

【化3】

から選択されるいずれか１種であり、
Ａｒ_１およびＡｒ_２とも置換又は未置換されたフェニル基であり、
Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７、およびＲ_８は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ニトロ基、ヒドロキシル基、アミノ基、スルファニル基、カルボキシル基、スルホン酸基、リン酸基、シアノ基、アミド基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル基で置換されたアミノ基、置換又は未置換されたＣ_１－Ｃ_８アルキル基、置換又は未置換されたＣ_１－８アルコキシ基、置換されたメルカプト基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルリン酸基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルカルボキシル基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルスルホン酸基、Ｃ_３－Ｃ_６アルケニルアルキル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニルアルキル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニルオキシ基、およびＣ_２－Ｃ_６アルキニルオキシ基から選択されるいずれか１種であり、
Ｍは金属イオンであって、Ｍｇ、Ｃｒ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｃｄ、Ｇａ、Ａｌ、Ｐｄ、およびＰｔから選択されるいずれか１種である。

【0009】

本発明の分解可能な近赤外光増感剤のメカニズムを説明すると、以下の通りである。

【0010】

本発明は、ポルフィリン系化合物の構造を修飾することで、化合物の光物理的および光化学的性質を調整し、光増感剤分子の近赤外吸收、発光特性、並びにＩ型およびＩＩ型光動力治療上の効力を実現し、光増感剤の分子構造におけるラクトン単位は、活性酸素物種と反応可能であり、光照射で活性化すると、光活性を有しない低毒性物質に転化し、次第に光増感剤が分解される。

【0011】

本発明の分解可能な近赤外光増感剤による有利な効果としては、以下の通りである。

【0012】

１、本発明の分解可能な近赤外光増感剤は、光照射により活性酸素を生成するとともに分解され、光照射終了後、光活性を有しない低毒性物質に完全転化することで、従来技術における光増感剤の残存問題を効果的に解決できる。
２、本発明の分解可能な近赤外光増感剤は、吸収スペクトルが近赤外域（７００ｎｍ～９００ｎｍ）にあり、且つ消衰係数が大きく、励起光の組織への透過深度がより大きいことから、光源による組織への損傷を減少するのに有用である。
３、本発明の分解可能な近赤外光増感剤は、強い蛍光を有することから、蛍光標識に用いられて光増感剤の分解程度をリアルタイムでモニタリングすることができる。
４、本発明の分解可能な近赤外光増感剤は、細胞および生体レベルで高い光毒性を示していることから、活性成分として光動力治療薬の調製に用いられる。

【0013】

本発明は、上記の構成を基にして、以下のように改善することもできる。

【0014】

さらに、上記Ａｒ_１および上記Ａｒ_２は、それぞれ独立して、

【化4】

であり、
式中、Ｒ_９、Ｒ_１０、Ｒ_１１、Ｒ_１２、およびＲ_１３は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ニトロ基、ヒドロキシル基、アミノ基、スルファニル基、カルボキシル基、スルホン酸基、リン酸基、シアノ基、アミド基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル基で置換されたアミノ基、置換又は未置換されたＣ_１－Ｃ_８アルキル基、置換又は未置換されたＣ_１－Ｃ_８アルコキシ基、置換されたチオ基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルリン酸基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルカルボキシル基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルスルホン酸基、Ｃ_３－Ｃ_６アルケニルアルキル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニルアルキル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニルオキシ基およびＣ_２－Ｃ_６アルキニルオキシ基から選択されるいずれか１種である。

【0015】

上記のさらなる構成による有利な効果としては、異なる応用ニーズに対応できるように、異なる置換基によって光増感剤の溶解度と反応性を調整し、生体適合性の修飾と機能の変化を実現できる。

【0016】

さらに、上記金属イオンは、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｃｄ、ＡｌおよびＧａから選択されるいずれか１種である。

【0017】

上記の更なる構成による有利な効果としては、蛍光や活性酸素を生成する光増感剤の効力を制御し、光増感剤の安定性を向上させ、光増感剤の暗毒性をさらに低下させることで、生物安全性を向上させる。

【0018】

また更に、上記ポルフィリン化合物の具体な構造は、

【化5】

から選択されるいずれか１種である。

【0019】

本発明は、第２の目的として、上記分解可能な近赤外光増感剤の調製方法を提供する。

【0020】

上記技術的課題を解決するための本発明の構成は以下の通りである。上記分解可能な近赤外光増感剤の調製方法であって、下記の手順１～３を含み、
第１中間生成物を調製する手順１において、水熱反応釜の中で、ポルフォジラクトン１００ｍｇと、前記ポルフォジラクトンに対して３０～５０倍当量に相当するアルカリとを、５ｍＬ～２０ｍＬの第１溶媒に溶解させ、８０℃～２００℃で２４ｈ～７２ｈ反応させて、第１中間生成物を得て、反応式は以下に示す通りであり、

【化6】

第２中間生成物を調製する手順２において、手順１で得られた第１中間生成物１００ｍｇを、５ｍＬ～５０ｍＬの第２溶媒の中で水溶性修飾反応を行わせて、第２中間生成物を得て、反応式は以下に示す通りであり、

【化7】

目標生成物を調製する手順３において、手順２で得られた第２中間生成物１００ｍｇと、前記第２中間生成物に対して１０倍当量に相当する金属塩とを、２０～１００ｍＬの第３溶媒に溶解させ、２０℃～８０℃で２ｈ～１６ｈ反応させて、式１に示す目標生成物を得て、反応式は以下に示す通りである。

【化8】

【0021】

本発明の分解可能な近赤外光増感剤の調製方法のメカニズムを説明すると、以下の通りである。

【0022】

本発明の手順１において、ポルフォジラクトンを基質とし、アルカリ性条件下で一つのラクトン基を環状共役構造に転化して、共役度を増大させる。ポルフォジラクトンにおけるフェニル基のオルト位のフッ素は、求核置換反応が発生可能であり、ラクトン基の開環した後の２つのヒドロキシル基は、アルカリ性条件下で、隣接するフッ素を攻撃して２つの新しい五員環を形成し、大環の剛性構造を安定させることができる。かかる化学反応式は、

【化9】

である。

【0023】

本発明の手順２において、ベンゼン環上の置換反応によって、Ｒ_１～Ｒ_１３にアミノ基、ヒドロキシル基、シアノ基、およびメルカプト基などの活性基を導入し、さらなる反応修飾を経て、第４級アンモニウム基、スルホン酸基、カルボキシル基、およびグリコシル基などの構造を有する水溶性分子が得られる。

【0024】

本発明の手順３において、第１中間生成物および第２中間生成物は、大環状テトラピロール配位子として良好な配位機能を有することで、様々な金属イオンをキレート化することができ、異なる金属イオンを選択することにより、加熱条件下で、中心金属の異なる目標生成物が得られる。

【0025】

本発明の分解可能な近赤外光増感剤の調製方法による有利な効果としては、以下の通りである。

【0026】

１、本発明は、全体的な合成経路が簡潔で、収率が高く、再結晶法で精制するため、さらに簡便である。
２、本発明は、反応条件が温和で、反応安全性が高く、有害物質の流出がなく、汚染が減少する。
３、本発明は、コストが安く、操作が容易で、市場の見込みが広く、規模化や応用拡大に適する。

【0027】

本発明は、上記の構成を基にして、以下のように改善することもできる。

【0028】

さらに、手順１において、上記アルカリは、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、ナトリウムメトキシド、およびカリウムｔｅｒｔ－ブトキシドから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物である。

【0029】

上記の更なる構成による有利な効果としては、強アルカリの使用を避け、反応操作の安全性を向上させる。

【0030】

また更に、上記アルカリは、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、トリエチルアミン、およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物である。

【0031】

更に、手順１において、上記第１溶媒は、水、メタノール、エタノール、アセトニトリル、アセトン、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、およびテトラヒドロフランから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物である。

【0032】

更に、上記第１溶媒は、水と、アセトニトリルとを体積比１：（２～１０）で混合した溶媒、又は水と、テトラヒドロフランとを体積比１：（２～１０）で混合した溶媒である。

【0033】

上記の更なる構成による有利な効果としては、上記パラメータを採用することにより、反応の収率が向上できる。

【0034】

また更に、上記第１溶媒は、水と、アセトニトリルとを体積比１：（５－１０）で混合した溶媒、又は水と、テトラヒドロフランとを体積比１：（５－１０）で混合した溶媒である。

【0035】

更に、手順１において、上記反応温度を１００℃～１５０℃とし、反応時間を４８ｈ～７２ｈとする。

【0036】

上記の更なる構成による有利な効果としては、上記の反応パラメータを採用することにより、副反応の発生が減少し、後処理が容易となり、反応の収率が向上できる。

【0037】

更に、手順２において、上記第２溶媒は、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、リン酸トリメチル、リン酸トリエチル、およびヘキサノールから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物である。

【0038】

上記の更なる構成による有利な効果としては、第２溶媒として上記のようなものを採用することにより、後処理が容易となり、反応の収率が向上する。

【0039】

更に、上記第２溶媒は、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、およびリン酸トリメチルから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物である。

【0040】

更に、手順３において、上記金属塩は、マグネシウム塩、クロム塩、マンガン塩、鉄塩、コバルト塩、ニッケル塩、銅塩、亜鉛塩、カドミウム塩、ガリウム塩、アルミニウム塩、パラジウム塩、および鉛塩から選択されるいずれか１種である。

【0041】

上記の更なる構成による有利な効果としては、上記のような第３溶媒への金属塩の溶解度が良く、得られる目標生成物の構造が安定である。

【0042】

また更に、上記金属塩は、マグネシウム塩、亜鉛塩、カドミウム塩、ガリウム塩、およびアルミニウム塩から選択されるいずれか１種である。

【0043】

また更に、上記金属塩は、醋酸塩、塩化塩、硫酸塩、硝酸塩、およびリン酸塩から選択されるいずれか１種である。

【0044】

また更に、上記金属塩は、醋酸塩、塩化塩、および硝酸塩から選択されるいずれか１種である。

【0045】

更に、手順３において、上記第３溶媒は、水、メタノール、エタノール、アセトニトリル、アセトン、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、クロロホルム、およびジクロロメタンから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物である。

【0046】

上記の更なる構成による有利な効果としては、溶媒への金属塩の溶解度を高め、溶媒の使用量を低減し、反応の後処理を簡潔化する。

【0047】

また更に、上記第３溶媒は、メタノール、エタノール、アセトニトリル、およびアセトンから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物である。

【0048】

また更に、上記第３溶媒は、メタノール又はエタノールである。

【0049】

更に、手順３において、上記反応の温度を２０℃～６０℃とし、反応時間を３ｈ～５ｈとする。

【0050】

上記の更なる構成による有利な効果としては、反応時間を短縮し、反応の転化率を向上させる。

【0051】

本発明は、第３の目的として、上記分解可能な近赤外光増感剤の応用を提供する。

【0052】

上記技術的課題を解決するための本発明の構成は以下の通りである。

【0053】

光動力治療薬の調製における、活性成分としての上記分解可能な近赤外光増感剤の応用である。

【0054】

本発明の分解可能な近赤外光増感剤の応用による有利な効果としては、上記の分解性近赤外光増感剤が持つ分解性特性により、光増感薬物の新しい代謝モデルが開拓されて、新しい光動力治療モデルの実現が期待され、薬学的および社会的な面から積極的な意義がある。

【0055】

本発明は、上記の構成を基にして、以下のように改善することもできる。

【0056】

更に、上記光動力治療薬は、上記分解可能な近赤外光増感剤と、薬学的に許容される補助剤とを含み、剤形は粉剤、注射剤、エマルションから選択されるいずれか１種である。

【0057】

上記の更なる構成による有利な効果としては、光動力治療薬を様々な剤形の薬物に製造でき、様々な投与経路に適用する。光動力治療薬における分解可能な近赤外光増感剤は、拡散、循環又は標的投与により罹患部位に集まり、薬効が迅速で、薬の用量が正確で、作用が確実である。

【0058】

投与経路は、注射投与および外用投与が好ましい。注射投与は、皮内、皮下、筋内、局所又は静脈内投与であってもよく、外用投与は、湿布、塗擦又は塗布などの手段で罹患部位に投与することを含む。

【0059】

また更に、上記補助剤は、溶媒、乳化剤、等張化剤、界面活性剤、および酸化防止剤から選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物である。

【0060】

上記の更なる構成による有効な効果としては、上記補助剤を採用して様々な剤形の薬物を製造でき、光動力治療薬の安定性を高め、光動力治療薬としての作用を調整して生体適合性を改善できる。上記補助剤は、いずれとも投与経路又は投与方式に適合し、人体に毒作用のない不活性成分であるべきである。

【0061】

また更に、上記溶媒は、エタノール、プロピレングリコール、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、およびジメチルスルホキシドから選択されるいずれか１種である。

【0062】

上記のまた更なる構成による有利な効果としては、異なる剤形への薬物の溶解度を促進し、光動力治療薬の単位剤形あたりの、活性成分の用量を０．０１ｍｇ～２０ｇとする。

【0063】

また更に、上記界面活性剤は、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポロシャム、ステアリン酸ナトリウム、およびＴｗｅｅｎ－８０から選択されるいずれか１種である。

【0064】

上記のまた更なる構成による有利な効果としては、上記界面活性剤を採用することで、乳化および湿潤作用を発揮し、活性成分の剤形への溶解度と安定性を高め、浸透機能を高める。

【図面の簡単な説明】

【0065】

【図1】本発明の実施例１で調製して得られた第１中間生成物のプロトン核磁気共鳴スペクトル（Ｈ１－ＮＭＲ）である。

【図2】本発明の実施例２で調製して得られた第２中間生成物のプロトン核磁気共鳴スペクトルである。

【図3】本発明の実施例３で調製して得られた目標生成物のプロトン核磁気共鳴スペクトルである。

【図4】本発明の実施例４で調製して得られた参照化合物のプロトン核磁気共鳴スペクトルである。

【図5】本発明の実施例５で調製して得られたマグネシウム錯体のプロトン核磁気共鳴スペクトルである。

【図6】本発明の実施例５で調製して得られたカドミウム錯体のプロトン核磁気共鳴スペクトルである。

【図7】本発明の実験例６において、実施例３で調製して得られた目標生成物の紫外可視吸収スペクトルである。

【図8】本発明の実験例６において、実施例３で調製して得られた目標生成物の蛍光発光スペクトルである。

【図9】本発明の実験例７において、実施例３で調製して得られた目標生成物が存在する場合、ジヒドロエチジウム（ＤＨＥ）の発光スペクトルの光照射時間による変化を表す図である。

【図10】は本発明の実験例７において、ジヒドロエチジウム（ＤＨＥ）の特徴的発光強度の光照射時間による変化を表す図である。

【図11】本発明の実験例７において、実施例３で調製して得られた目標生成物が存在する場合、１，３－ジフェニルベンゾフラン（ＤＰＢＦ）の吸収スペクトルの光照射時間による変化を表す図である。

【図12】本発明の実験例７において、実施例３で調製して得られた目標生成物の１，３－ジフェニルベンゾフラン（ＤＰＢＦ）に対する分解速度を表すグラフである。

【図13】本発明の実験例８において、実施例３で調製して得られた目標生成物および１，３－ジフェニルベンゾフラン（ＤＰＢＦ）の吸収スペクトルの光照射時間による変化を表す図である。

【図14】本発明の実験例８において、実施例３で調製して得られた目標生成物のパワー強度による光分解速度の変化を表す図である。

【図15】本発明の実験例８において、実施例３で調製して得られた目標生成物の光分解過程を表す高速液体クロマトグラフである。

【図16】本発明の実験例９において、実施例３で調製して得られた目標生成物の細胞光毒性を検出した図である。

【図17】本発明の実験例９において、実施例３で調製して得られた分解生成物の細胞光毒性を検出した図である。

【図18】本発明の実験例１０において、リソソームプローブの蛍光信号を表す図である。

【図19】本発明の実験例１０において、実施例３で調製して得られた目標生成物の蛍光信号を表す図である。

【図20】本発明の実験例１０において、リソソームプローブと目標生成物との重ね合わせた蛍光信号を表す図である。

【図21】本発明の実験例１１において、実施例３で調製して得られた目標生成物の深度１ｍｍにおける生体蛍光イメージングを表す図である。

【図22】本発明の実験例１１において、実施例３で調製して得られた目標生成物の深度４ｍｍにおける生体蛍光イメージングを表す図である。

【図23】本発明の実験例１１において、実施例３で調製して得られた目標生成物の深度７ｍｍにおける生体蛍光イメージングを表す図である。

【図24】本発明の実験例１１において、実施例３で調製して得られた目標生成物の深度１０ｍｍにおける生体蛍光イメージングを表す図である。

【図25】本発明の実験例１２において、実施例３で調製して得られた目標生成物および光対照群のマウスの腫瘍体積変化を表す図である。

【図26】本発明の実験例１２において、実施例３で調製して得られた目標生成物および光対照群のマウスの体重変化を表す図である。

【図27】本発明の実験例１２において、実施例３で調製して得られた分解生成物群のマウス腫瘍体積変化を表す図である。

【図28】本発明の実験例１２において、実施例３で調製して得られた分解生成物群のマウス体重変化を表す図である。

【図29】本発明の比較例１において、実施例３で調製して得られた目標生成物の連続光照射下での紫外可視吸収スペクトルである。

【図30】本発明の比較例１において、実施例３で調製して得られた目標生成物の連続光照射下での蛍光発光スペクトルである。

【図31】本発明の比較例１において、実施例４で調製して得られた参照化合物の連続光照射下での紫外可視吸収スペクトルである。

【図32】本発明の比較例１において、実施例４で調製して得られた参照化合物の連続光照射下での蛍光発光スペクトルである。

【図33】本発明の比較例２において、実施例３で調製して得られた目標生成物の光照射０ｍｉｎでの細胞イメージングを表す図である。

【図34】本発明の比較例２において、実施例３で調製して得られた目標生成物の光照射５ｍｉｎでの細胞イメージングを表す図である。

【図35】本発明の比較例２において、実施例３で調製して得られた目標生成物の光照射１０ｍｉｎでの細胞イメージングを表す図である。

【図36】本発明の比較例２において、実施例４で調製して得られた参照化合物の光照射０ｍｉｎでの細胞イメージングを表す図である。

【図37】本発明の比較例２において、実施例４で調製して得られた参照化合物の光照射５ｍｉｎでの細胞イメージングを表す図である。

【図38】本発明の比較例２において、実施例４で調製して得られた参照化合物の光照射１０ｍｉｎでの細胞イメージングを表す図である。

【図39】本発明の比較例３において、実施例３で調製して得られた目標生成物の光照射０ｍｉｎでの生体蛍光イメージングを表す図である。

【図40】本発明の比較例３において、実施例３で調製して得られた目標生成物の光照射５ｍｉｎでの生体蛍光イメージングを表す図である。

【図41】本発明の比較例３において、実施例３で調製して得られた目標生成物の光照射１０ｍｉｎでの生体蛍光イメージングを表す図である。

【図42】本発明の比較例３において、実施例４で調製して得られた参照化合物の光照射０ｍｉｎでの生体蛍光イメージングを表す図である。

【図43】本発明の比較例３において、実施例４で調製して得られた参照化合物の光照射５ｍｉｎでの生体蛍光イメージングを表す図である。

【図44】本発明の比較例３において、実施例４で調製して得られた参照化合物の光照射１０ｍｉｎでの生体蛍光イメージングを表す図である。

【図45】本発明の比較例４において、実施例３で調製して得られた目標生成物により処理されたマウスの爪の写真である。

【図46】本発明の比較例４において、光対照群のマウスの爪の写真である。

【図47】本発明の比較例４において、実施例３で調製して得られた目標生成物により処理されたマウスのサーモイメージングの写真である。

【図48】本発明の比較例４において、光対照群のマウスに対するサーモイメージングの写真である。

【図49】本発明の比較例４において、実施例４で調製して得られた参照化合物により処理されたマウスの爪の写真である。

【図50】本発明の比較例４において、実施例４で調製して得られた参照化合物により処理されたマウスのサーモイメージングの写真である。

【発明を実施するための形態】

【0066】

以下では、図面を参照しながら本発明の原理と特徴を説明するが、ここで挙げられる例は単に本発明を説明するためのものであり、本発明の範囲を限定するためのものではない。

【実施例】

【0067】

実施例１：第１中間生成物の調製

【化10】

【0068】

反応釜にテトラキス（ペンタフルオロフェニル）ポルフォジラクトン（３０３ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１．２４ｇ、９ｍｍｏｌ）を加え、テトラヒドロフラン７ｍＬおよび水１ｍＬを添加して溶解させ、８０℃で２４ｈ反応した後、加熱を停止して室温まで自然冷却し、反応溶媒を蒸発させて乾燥し、ジクロロメタンに溶解させ、珪藻土（２００メッシュ）で濾過し、アセトン／石油エーテルで再結晶化し、濾過し、真空乾燥させ（－０．１Ｍｐａ、１０ｈ）、緑色固体の生成物である第１中間生成物１８０ｍｇを得た。

【0069】

第１中間生成物のプロトン核磁気共鳴スペクトルは、図１に示す通りであった。特徴付けられたデータは、以下の通りであった。

【0070】

^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）：δ９．６２（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），９．３９（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），８．６９（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），８．５３（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），－０．６３（ｓ，１Ｈ），－０．８９（ｓ，１Ｈ）．^１９ＦＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４７１ＭＨｚ）：δ－５８．４７（ｄｄ，Ｊ＝１９．７Ｈｚ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｆ），－５９．３９（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｆ），－５９．４４（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｆ），－５９．６０（ｄｄ，Ｊ＝１９．７Ｈｚ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｆ），－６１．２０（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｆ），－６１．２５（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｆ），－７２．４８（ｔ，Ｊ＝２１．２Ｈｚ，１Ｆ），－７３．６１（ｔ，Ｊ＝２０．１Ｈｚ，１Ｆ），－７５．９０（ｔ，Ｊ＝２０．２Ｈｚ，１Ｆ），－７７．５５（ｔ，Ｊ＝２０．２Ｈｚ，１Ｆ），－８２．０１（ｄｄ，Ｊ＝１９．７Ｈｚ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｆ），－８２．７８ないし－８２．９２（ｍ，３Ｆ），－８３．３６（ｔ，Ｊ＝２０．２Ｈｚ，１Ｆ），－８３．６６ないし－８３．８２（ｍ，３Ｆ）．ＨＲ－ＭＳ（ＥＳＩ^＋）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］^＋：算出値：Ｃ_４１Ｈ_７Ｆ_１８Ｎ_４Ｏ_４ ９６１．０１７４、実測値：９６１．０１５２。

【0071】

実施例２：第２中間生成物の調製

【化11】

【0072】

Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド５ｍＬに第１中間生成物（９４ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）およびジメチルアミン塩酸塩（１．６ｇ、２０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を還流して３６ｈ反応させた後、室温まで冷却し、脱イオン水５０ｍＬを加えて沈殿させ、濾過し、真空乾燥させ（－０．１Ｍｐａ、１０ｈ）、窒素ガスの保護下で、リン酸トリメチル５ｍＬに上記生成物８０ｍｇおよびトリフルオロメタンスルホン酸メチル０．５ｍＬを加え、混合物を室温で２４ｈ反応させ、ジクロロメタン５０ｍＬを加えて沈殿させ、遠心分離し（４０００ｒ、１０ｍｉｎ）、固体をジクロロメタン２０ｍＬで洗浄し、真空乾燥させ（－０．１Ｍｐａ、１０ｈ）、紫色固体の生成物である第２中間生成物１００ｍｇを得た。

【0073】

第２中間生成物のプロトン核磁気共鳴スペクトルは図２に示す通りであった。特徴付けられたデータは以下の通りであった。

【0074】

^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ９．７４（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），９．４５（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），９．１３（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），８．８３（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１９（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，３６Ｈ）．^１９ＦＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，４７１ＭＨｚ）：δ－１３５．２５（ｔ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，１Ｆ），－１３６．１２（ｄｄ，Ｊ＝２６．３Ｈｚ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，２Ｆ），－１３６．８８（ｔ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ，１Ｆ），－１３７．５６（ｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ，１Ｆ），－１３７．６２（ｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，１Ｆ），－１３８．０１（ｔ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，１Ｆ），－１３８．３１（ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，２Ｆ），－１３９．３２（ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，２Ｆ），－１４０．６２（ｔ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｆ），－１４１．４９（ｔ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｆ）．ＨＲ－ＭＳ（ＥＳＩ^＋）ｍ／ｚ［Ｍ］４^＋：算出値：Ｃ_５３Ｈ_４２Ｆ_１４Ｎ_８Ｏ_４ ^４＋ ２８０．０７７１、実測値：２８０．０７６７。

【0075】

実施例３：目標生成物の調製

【化12】

【0076】

第２中間生成物（１１０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）および酢酸亜鉛（２００ｍｇ、１ｍｍｏｌ）をメタノール２０ｍＬに溶解させた。混合物を室温で一晩撹拌し、蒸発して乾燥させた。アセトニトリル５ｍＬに溶解させ、遠心分離し（４０００ｒ、５ｍｉｎ）、上澄み液を収集し、ジクロロメタン５０ｍＬを加えて沈殿させ、遠心分離し（４０００ｒ、１０ｍｉｎ）、真空乾燥させ（－０．１Ｍｐａ、１０ｈ）、緑色固体の生成物である目標生成物－－分解可能な近赤外光増感剤分子１１０ｍｇを得た。

【0077】

目標生成物のプロトン核磁気共鳴スペクトルは図３に示す通りであった。特徴付けられたデータは以下の通りであった。

【0078】

^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ９．５１（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），９．３２（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），８．８５（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），８．６５（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），４．１８（ｓ，３６Ｈ）．^１９ＦＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，４７１ＭＨｚ）：δ－１３６．３９（ｄｄ，Ｊ＝２７．７Ｈｚ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，２Ｆ），－１３６．７１（ｔ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｆ），－１３７．１３（ｔ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，１Ｆ），－１３７．９５（ｄｄ，Ｊ＝２８．２Ｈｚ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，２Ｆ），－１３８．７８（ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，２Ｆ），－１３８．９０（ｓ，１Ｆ），－１３８．９９（ｓ，１Ｆ），－１４０．０３（ｄ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ，２Ｆ），－１４１．２８（ｔ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｆ），－１４２．０４（ｔ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，１Ｆ）．ＨＲ－ＭＳ（ＥＳＩ^＋）ｍ／ｚ［Ｍ］４^＋：算出値：Ｃ_５３Ｈ_４０Ｆ_１４Ｎ_８Ｏ_４Ｚｎ^４＋ ２９５．５５５５、実測値：２９５．５５５７。

【0079】

実施例４：参照化合物の調製
テトラキス（ペンタフルオロフェニル）ポルフォラクトン（２９８ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）を出発反応物とした以外、他の手順は実施例１～３と同様にして、参照化合物－－分解不可な光増感剤を調製した。

【化13】

【0080】

参照化合物のプロトン核磁気共鳴スペクトルは図４に示す通りであった。特徴付けられたデータは以下の通りであった。

【0081】

^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ９．２１（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，２Ｈ），８．６４（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，２Ｈ），８．２４（ｓ，２Ｈ），４．１６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，３６Ｈ）．^１９ＦＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，４７１ＭＨｚ）：δ?１３７．１５（ｄｄ，Ｊ＝３４．８Ｈｚ，Ｊ＝１６．９Ｈｚ，４Ｆ），－１３８．８２（ｔ，Ｊ＝２０．７Ｈｚ，２Ｆ），－１３９．４９（ｄ，Ｊ＝２０．２Ｈｚ，４Ｆ），－１３９．６４（ｓ，２Ｆ），－１４２．３６（ｔ，Ｊ＝１４．６Ｈｚ，２Ｆ）．ＨＲ－ＭＳ（ＥＳＩ^＋）ｍ／ｚ［Ｍ］４^＋：算出値：Ｃ_５４Ｈ_４２Ｆ_１４Ｎ_８Ｏ_２Ｚｎ^４＋ ２９１．０６１９、実測値：２９１．０６２０。

【0082】

実施例５：中心金属の異なる錯体の調製

【化14】

【0083】

第１中間生成物（１１０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）および酢酸マグネシウム／酢酸カドミウム／酢酸銅／酢酸マンガン（１０ｅｑ．）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド１０ｍＬに溶解させた。混合物を１５０℃で８ｈ反応させた後、加熱を停止して室温まで自然冷却し、反応溶媒を蒸発させて乾燥し、ジクロロメタンに溶解させ、珪藻土（２００目）で濾過し、アセトン／石油エーテルで再結晶化して、中心金属がそれぞれマグネシウム、カドミウム、銅、マンガンである錯体を得た。

【0084】

マグネシウム錯体のプロトン核磁気共鳴スペクトルは図５に示す通りであった。特徴付けられたデータは以下の通りであった。

【0085】

^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）：δ９．４７（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），９．２９（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），８．４８（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），８．３８（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ）．ＨＲ－ＭＳ（ＥＳＩ^＋）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］^＋：算出値：Ｃ_４１Ｈ_５Ｆ_１８ＭｇＮ_４Ｏ_４ ９８２．９８６８、実測値：９８２．９８８７。

【0086】

カドミウム錯体のプロトン核磁気共鳴スペクトルは図６に示す通りであった。特徴付けられたデータは以下の通りであった。

【0087】

^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）：δ９．６１（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），９．４８（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），８．６７（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），８．６０（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ）．ＨＲ－ＭＳ（ＥＳＩ^＋）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］^＋：算出値：Ｃ_４１Ｈ_５ＣｄＦ_１８Ｎ_４Ｏ_４ １０７２．９０６３、実測値：１０７２．９０７７。

【0088】

銅錯体：ＨＲ－ＭＳ（ＥＳＩ^＋）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］^＋：算出値：Ｃ_４１Ｈ_５ＣｕＦ_１８Ｎ_４Ｏ_４ １０２１．９３１４、実測値：１０２１．９２９９。

【0089】

マンガン錯体：ＨＲ－ＭＳ（ＥＳＩ^＋）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］^＋：算出値：Ｃ_４１Ｈ_５Ｆ_１８ＭｎＮ_４Ｏ_４ １０１３．９３９８、実測値：１０１３．９４１０。

【0090】

実験例６：光物理性質の検出
実施例３で調製して得られた目標生成物について、紫外可視吸収スペクトルおよび発光スペクトルの走査を行った結果、図７および図８に示す通りであった。図７より、目標生成物の吸収スペクトルは可視域と近赤外域をカバーでき、６００ｎｍ～７５０ｎｍの赤－近赤外域で強い吸收を有することが分かった。図８より、目標生成物について光励起を行った結果、蛍光スペクトルも近赤外域に位置することが分かった。これにより、目標生成物は光動力治療又は生体蛍光イメージングにおいて組織への透過深度が深いことが分かった。

【0091】

実験例７：活性酸素物種の検出
空気雰囲気で、実施例３で調製して得られた目標生成物の水溶液（１０μＭ）にスーパーオキシドアニオンラジカルプローブとしてジヒドロエチジウム（ＤＨＥ）を加え、光照射条件を７００ｎｍの発光ダイオードランプ、１．２５ｍＷ／ｃｍ^２とした場合、ジヒドロエチジウムがスーパーオキシドラジカルにより酸化されて生成した酸素化エチジウムの蛍光が検出され、蛍光強度は光照射時間の延長につれて強くなった。その結果、図９および図１０に示すように、目標生成物は光照射下でスーパーオキシドアニオンラジカルを生成する効力を有することを示唆している。

【0092】

一重項酸素の燐光発光は水分子により容易にクエンチされ、目標生成物より生成された一重項酸素は化学捕捉による分光光度法で測定した。１，３－ジフェニルベンゾフラン（ＤＰＢＦ）は最も一般的な一重項酸素捕捉剤であり、１，３－ジフェニルベンゾフラン（ＤＰＢＦ）は一重項酸素と迅速に反応して無色の物質を生成でき、紫外可視吸収スペクトルよりその特徴吸収ピーク（４１６ｎｍ）における吸光度の変化を測定することで、一重項酸素の含有量を反映する。光照射条件を７００ｎｍの発光ダイオードランプ、１．２５ｍＷ／ｃｍ^２とした場合、１，３－ジフェニルベンゾフラン（ＤＰＢＦ）の４１６ｎｍにおける特徴吸収は次第に弱くなり、その結果、図１１および図１２に示すように、目標生成物は光照射下で一重項酸素を生成する効力を有することを示唆している。

【0093】

実験例８：自己分解のモニタリング
実験例７のテストにおいて、光照射条件を７００ｎｍの発光ダイオードランプ、１．２５ｍＷ／ｃｍ^２、０～２ｍｉｎとした場合で、１，３－ジフェニルベンゾフラン（ＤＰＢＦ）の４１６ｎｍにおける特徴吸収は次第に弱くなる。光照射強度を増加し、照射時間を延長して、光照射条件を７００ｎｍ発光ダイオードランプ、１０ｍＷ／ｃｍ^２、２～４ｍｉｎとした場合、目標生成物の４４０ｎｍ、７１０ｎｍおける特徴吸収は顕著に減少し、その結果、図１３に示すように、光照射により目標生成物が分解されたことを示唆している。また、図１４に示すように、分解速度は光照射強度の増加につれて顕著に速くなった。

【0094】

ＨＰＬＣによって光分解過程をさらにモニタリングしたところ、光照射条件を７００ｎｍの発光ダイオードランプ、２．５ｍＷ／ｃｍ^２、０～１０ｍｉｎとした場合、目標生成物の特徴ピークは照射時間の延長につれて次第に低くなり、５ｍｉｎの時点に生成された新たな特徴ピーク（分解生成物）は次第に増強し、分解生成物を収集した結果、図１５に示すように、目標生成物は光照射下で自己分解され、分解生成物に転化されることを示唆している。

【0095】

実験例９：細胞光毒性
実験に用いた細胞はＨｅＬａヒト子宮頸がん細胞であった。細胞は１０％不活化ウシ胎児血清（碩華から購入、５００ｍＬ）と１％ペニシリン－ストレプトマイシン（コーニングから購入、１００ｍＬ）を添加したＤＭＥＭ完全培地（源葉から購入、５００ｍＬ）で培養し、培養温度を３７℃とし、培養雰囲気を５％二酸化炭素とした。

【0096】

継代培養したＨｅＬａ細胞をトリプシンで消化した後、培地中に適切な濃度で分散させた。分散させたＨｅＬａ細胞を平底９６ウェルプレートに接種し、１ウェルあたりの培地を２００μＬとし、細胞数を約１０４個とし、ブランク対照群とし細胞の無い培地１群を確保した。暗環境下で細胞を２４ｈ培養した後、培地を除去し、新鮮な培地１００μＬおよび予め調製された目標生成物の混合液１００μＬ、或いは、新鮮な培地１００μＬおよび実施例３で調製された分解生成物の混合液１００μＬを加え、サンプルの濃度勾配が０～４μＭとなるように希釈した。暗環境下で２４ｈ培養を続けた後、培地を除去し、各ウェルをｐＨ７．４のＰＢＳ緩衝液で３回洗った。各ウェルにＰＢＳ緩衝液１００μＬを入れ、光照射条件を７００ｎｍ発光ダイオードランプ、２．５ｍＷ／ｃｍ^２、１０ｍｉｎとした。各ウェルからＰＢＳ緩衝液を除去し、新鮮な培地２００μＬを入れ替え、２４ｈ培養を続けた。培養完了後、培地を除去し、各ウェルをＰＢＳ緩衝液で３回洗う。その後、培地で調製された１０％のＣＣＫ－８試薬（Ｃｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ－８）１００μＬを各ウェルに入れ、２ｈ培養した。この過程で、ＣＣＫ－８試薬中の２－（２－メトキシ－４－ニトロフェニル）－３－（４－ニトロフェニル）－５－（２，４－ジスルホフェニル）－２Ｈ－テトラゾリウムモノナトリウム塩（ＷＳＴ－８）は電子結合試薬の補助下で生細胞より還元されて水溶性の黄色ホルマザン生成物となり、これにより溶液の４５０ｎｍにおける吸光度を変化させ、その変化値は生細胞数に正比例する。酵素結合免疫吸着アッセイを用いて各ウェルの４５０ｎｍにおける吸収変化を測定し、下式により各インキュベート濃度での細胞生存率を計算した：

【0097】

ＣＶ＝（Ａｓ－Ａｂ）／（Ａｃ－Ａｂ）×１００％。

【0098】

ここで、ＣＶは細胞生存率を指し、Ａｓ、ＡｃおよびＡｂはそれぞれインキュベート用化合物群の細胞の吸光度、ブランク群の細胞の吸光度およびブランク対照群の吸光度を指す。

【0099】

各インキュベート濃度での細胞生存率からＨｅＬａ細胞株における目標生成物の半数致死濃度ＩＣ５０を計算したところ、１．０μＭであった。図１６に示すように、目標生成物の細胞光毒性を検出した図において、目標生成物は光照射下で強い光毒性を有する。図１７に示すように、分解生成物の細胞光毒性を検出した図において、その分解生成物は光毒性を有していない。

【0100】

実験例１０：細胞蛍光イメージング
継代培養したＨｅＬａ細胞をトリプシンで消化した後、培地中に適切な濃度で分散させた。分散させたＨｅＬａ細胞を共焦点シャーレに接種し、細胞を２４ｈ培養した後、予め調製された目標生成物の培地溶液１００μＬを加え、サンプルが１０μＭの濃度となるようにする希釈した。１２ｈインキュベートした後、リソソーム緑色蛍光プローブを加え、１５ｍｉｎ共インキュベートした後、培地を除去し、ｐＨ７．４のＰＢＳ緩衝液を用いて３回洗った。ＩＳＳ集積レーザー走査型共焦点蛍光寿命イメージングシステムで蛍光イメージングを行い、超連続レーザーを使用して７００ｎｍにおいて励起し、７１５ｎｍハイパスフィルタにより、目標生成物の蛍光信号を収集し、レーザー機器を使用して４８８ｎｍにおいて励起し、５２５／５０ｎｍバンドパスフィルタにより、リソソームプローブの蛍光信号を収集した。

【0101】

図１８に示すように、リソソームプローブの蛍光信号を表す図において、リソソームプローブは緑色チャンネルにおいて強い蛍光信号を示した。

【0102】

図１９に示すように、目標生成物の蛍光信号を表す図において、目標生成物は近赤外域において強い蛍光信号を示した。

【0103】

図２０に示すように、リソソームプローブと目標生成物との重ね合わせた蛍光信号を表す図において、目標生成物の近赤外蛍光と、リソソームプローブの緑色蛍光とはよく重ね合わせられ、目標生成物は近赤外生細胞蛍光イメージングプローブとしての潜在力を持ち、リソソームに位置していることを示唆している。

【0104】

実験例１１：生体蛍光イメージングの深度
生体実験におけるすべての動物実験は中国の動物実験実施規則を厳守して行われ、マウスは、５週齢、オス、体重１６～２５ｇのＢＡＬＢ／Ｃヌードマウスを使用した。マウスの腹部皮下に目標生成物のＰＢＳ溶液１００μＬ（０．２ｍｇ／ｍＬ）を注射し、投与量は０．２ｍｇ／ｋｇとした。投与してから３０ｍｉｎ後、マウスをイメージング装置に入れ、２Ｌ／ｍｉｎの酸素ガスと２％イソフルランとの混合ガスの雰囲気内で麻酔させた。目標生成物の励起波長は７１０ｎｍとし、画像の採集波長は７５０ｎｍとした。注射部位にマウスの皮（１ｍｍ／層）を重ね、信号が消えるまで蛍光信号の強度変化をモニタリングした。

【0105】

図２１に示すように、目標生成物の深度１ｍｍにおける生体蛍光イメージングを表す図において、目標生成物はウス皮下で強い蛍光信号を示した。

【0106】

図２２に示すように、目標生成物の深度４ｍｍにおける生体蛍光イメージングを表す図において、検出される目標生成物の蛍光信号はやや弱くなっている。

【0107】

図２３に示すように、目標生成物の深度７ｍｍにおける生体蛍光イメージングを表す図において、検出される目標生成物の蛍光信号はイメージングの深度増加につれてにさらに弱くなっている。

【0108】

図２４に示すように、目標生成物の深度１０ｍｍにおける生体蛍光イメージングを表す図において、目標生成物の蛍光信号はその蛍光信号が深度１０ｍｍにおいても効果的に検出可能であることを示唆している。

【0109】

実験例１２：動物レベルにおける薬物光治療の例
生体実験におけるすべての動物実験は中国の動物実験実施規則を厳守して行われ、マウスは、５週齢、オス、体重１６～２５ｇのＢＡＬＢ／Ｃヌードマウスを使用した。各マウスの右後肢皮下にＨｅＬａヒト子宮頸がん細胞１００μＬ（５×１０^６）を接種し、腫瘍モデルを構築し、２週間後に実験を行った。

【0110】

マウスを番号によってランダムに群分けし、実験は、群ごとに６匹ずつ、光対照群（光照射）、暗対照群（目標生成物、分解生成物）および実験群（目標生成物＋光照射、分解生成物＋光照射）に分けた。暗対照群および実験群はそれぞれインサイチュ（ｉｎ ｓｉｔｕ）注射で投与した。投与量を０．２ｍｇ／ｋｇとし、インサイチュ注射で目標生成物または分解生成物のＰＢＳ溶液２０μＬ（０．２ｍｇ／ｍＬ）を投与した。投与してから３０ｍｉｎ後、光対照群および実験群に対して照射治療を行い、光照射条件を７００ｎｍ発光ダイオードランプ、１００ｍＷ／ｃｍ^２とし、１匹当たり１０ｍｉｎ光照射した。治療完了後、マウスに対して遮光処理をせずに飼育かごに入れて飼育を続け、２日おきにノギスで腫瘍の体積を測定し、体重を量った。２週間治療した。

【0111】

図２５に示すように、目標生成物および光対照群のマウスの腫瘍体積変化を表す図において、目標生成物は一回の光照射条件下で皮下腫瘍の成長を効果的に抑制できるが、目標生成物を投与しなった光対照群、および目標生成物を投与した暗対照群におけるマウスの腫瘍成長は迅速であった。

【0112】

図２６に示すように、目標生成物および光対照群のマウスの体重変化を表す図において、実験群および対照群におけるマウスの体重は両方とも明らかに減少しなかった。

【0113】

図２７に示すように、分解生成物群のマウスの腫瘍体積変化を表す図において、分解生成物は光照射および暗対照条件下で腫瘍の成長を抑制しておらず、分解生成物は光活性がなく、細胞や組織に損傷を与えないことを示唆している。

【0114】

図２８に示すように、分解生成物群のマウスの体重変化を表す図において、分解生成物群の照射群および暗対照群におけるマウスの体重は明らかに減少せず、分解生成物は生体に明らかな副作用がないことを示唆している。

【0115】

比較例１：溶液における光増感剤の光分解過程の例
実施例３で得られた目標生成物を発光ダイオードランプの下に置いて照射し、光照射条件を７００ｎｍ、１０ｍＷ／ｃｍ^２とし、光照射過程で目標生成物の紫外可視吸収スペクトルおよび発光スペクトルを記録した。図２９に示すように、目標生成物の４４０ｎｍ、７１０ｎｍにおける特徴吸収は明らかに低下し、図３０に示すように、目標生成物の７４０ｎｍにおける特徴放出も次第に弱くなっている。その結果、光照射により目標生成物が分解されたことを示唆している。

【0116】

対照として、実施例４で調制された参照化合物を発光ダイオードランプの下に置いて照射し、光照射条件を６４０ｎｍ、１０ｍＷ／ｃｍ^２とし、光照射過程で参照化合物の紫外可視吸収スペクトルおよび発光スペクトルを記録した。

【0117】

図３１に示すように、参照化合物の連続光照射下での紫外可視吸収スペクトルにおいて、連続的な光照射条件下で、参照化合物の吸収スペクトルに変化が認められなかった。

【0118】

図３２に示すように、参照化合物の連続光照射下での蛍光発光スペクトルにおいて、参照化合物の蛍光発光強度に明らかな変化が認められず、参照化合物は光照射条件下で分解しないことを示唆している。

【0119】

比較例２：細胞における光増感剤の光分解過程の例
ＨｅＬａ細胞を共焦点シャーレに接種し、細胞を２４時間培養した後、予め調製された目標生成物または参照化合物の培地溶液１００μＬを加え、サンプルが１０μＭの濃度となるように希釈した。１２ｈインキュベートした後、ｐＨ７．４のＰＢＳ緩衝液を用いて３回洗った。ＩＳＳ集積レーザー走査型共焦点蛍光寿命イメージングシステムで蛍光イメージングを行い、４０５ｎｍにおいて励起し、７１５ｎｍハイパスフィルタにより、目標生成物の蛍光信号を収集し、４０５ｎｍにおいて励起し、６７０／５０ｎｍバンドパスフィルタにより、参照化合物の蛍光信号を収集した。

【0120】

図３３に示すように、目標生成物の光照射０ｍｉｎでの細胞イメージングを表す図において、目標生成物は近赤外域で強い蛍光信号を有する。シャーレを発光ダイオードランプの下に置いて照射し、光照射条件を７００ｎｍ、１０ｍＷ／ｃｍ^２とし、５ｍｉｎごとに１回イメージングを行った。

【0121】

図３４に示すように、目標生成物の光照射５ｍｉｎでの細胞イメージングを表す図において、光照射してから５ｍｉｎ後、目的物の蛍光信号は明らかに弱くなった。

【0122】

図３５に示すように、目標生成物の光照射１０ｍｉｎでの細胞イメージングを表す図において、光照射してから１０ｍｉｎ後、目標生成物の蛍光信号はほとんどクエンチされ、細胞内の目標生成物は光照射下で自己分解されたことを示唆している。

【0123】

対照として、図３６に示すように、参照化合物の光照射０ｍｉｎでの細胞イメージングを表す図において、参照化合物は強い蛍光信号を示した。シャーレを発光ダイオードランプの下に置いて照射し、光照射条件を６４０ｎｍ、１０ｍＷ／ｃｍ^２とし、５ｍｉｎごとに１回イメージングを行った。

【0124】

図３７に示すように、参照化合物の光照射５ｍｉｎでの細胞イメージングを表す図において、光照射してから５ｍｉｎ後、参照化合物の蛍光信号は弱まっていない。

【0125】

図３８に示すように、参照化合物の光照射１０ｍｉｎでの細胞イメージングを表す図において、光照射してから１０ｍｉｎ後、参照化合物の蛍光信号の強度には明らかな変化が認められなかった。

【0126】

比較例３：動物レベルにおける光増感剤光の分解過程の例
生体実験におけるすべての動物実験は中国の動物実験実施規則を厳守して行われ、マウスは、５週齢、オス、体重１６～２５ｇのＢＡＬＢ／Ｃヌードマウスを使用した。各マウスの右後肢皮下にＨｅＬａヒト子宮頸がん細胞１００μＬ（５×１０^６）を接種し、腫瘍モデルを構築し、２週間後に実験を行った。

【0127】

マウス腫瘍内にインサイチュ注射で目標生成物又は参照化合物のＰＢＳ溶液２０μＬ（０．２ｍｇ／ｍＬ）を投与し、投与量を０．２ｍｇ／ｋｇとした。投与してから３０ｍｉｎ後、マウスをイメージング装置に入れ、２Ｌ／ｍｉｎの酸素ガスと２％イソフルランとの混合ガスの雰囲気内で麻酔させた。目標生成物の励起波長を７１０ｎｍとし、図像採集の波長を７５０ｎｍとした。参照化合物の励起波長を６５０ｎｍとし、図像採集の波長を６９０ｎｍとした。

【0128】

図３９に示すように、目標生成物の光照射０ｍｉｎでの生体蛍光イメージングを表す図において、目標生成物はマウス腫瘍の内で強い蛍光信号を示した。マウスの腫瘍部を発光ダイオードランプの下において照射し、光照射条件を７００ｎｍ、１００ｍＷ／ｃｍ^２とし、５ｍｉｎごとに１回イメージングを行った。

【0129】

図４０に示すように、目標生成物の光照射５ｍｉｎでの生体蛍光イメージングを表す図において、光照射してから５ｍｉｎ後、マウス腫瘍内の蛍光信号は明らかに弱くなり、目標生成物は光照射治療に伴い自己分解されることを示唆している。

【0130】

図４１に示すように、目標生成物の光照射１０ｍｉｎでの生体蛍光イメージングを表す図において、光照射してから１０ｍｉｎ後、マウス腫瘍内の蛍光信号は完全クエンチされ、目標生成物は、治療の完了に伴い、光活性を有しない分解生成物に完全転化された。

【0131】

対照として、図４２に示すように、参照化合物の光照射０ｍｉｎでの生体蛍光イメージングを表す図において、参照化合物はマウス腫瘍内で強い蛍光信号を示した。マウスの腫瘍部を発光ダイオードランプの下において照射し、光照射条件を６４０ｎｍ、１００ｍＷ／ｃｍ^２とし、５ｍｉｎごとに１回イメージングを行った。

【0132】

図４３に示すように、参照化合物の光照射５ｍｉｎでの生体蛍光イメージングを表す図において、光照射してから５ｍｉｎ後、マウス腫瘍内の蛍光信号は弱まっていない。

【0133】

図４４に示すように、参照化合物の光照射１０ｍｉｎでの生体蛍光イメージングを表す図において、光照射してから１０ｍｉｎ後、マウス腫瘍内の蛍光信号の強度には明らかな変化が認められず、参照化合物は光分解性能を有していないことを示唆している。

【0134】

比較例４：動物レベルにおける光増感剤の光増感副反応の例
生体実験におけるすべての動物実験は中国の動物実験実施規則を厳守して行われ、マウスは、５週齢、オス、体重１６～２５ｇのＢＡＬＢ／Ｃヌードマウスを使用した。マウスを番号によってランダムに群分けし、実験は、群ごとに３匹ずつ、目標生成物群、参照化合物群および光対照群に分けた。マウスの腹部皮下にそれぞれ目標生成物、参照化合物の溶液又はＰＢＳ溶液２０μＬ（０．２ｍｇ／ｍＬ）を注射し、投与量を０．２ｍｇ／ｋｇとした。注射した後、投与部位を照射し、目標生成物に対して光照射条件を７００ｎｍ発光ダイオードランプとし、参照化合物に対する光照射条件を６４０ｎｍ発光ダイオードランプ、１００ｍＷ／ｃｍ^２とし、１匹あたりに１０ｍｉｎ光照射を行い、光対照群に対しては処理をしなった。マウス状態を観察し、サーモイメージング装置でマウスの体温を記録した。その後、三群のマウスを擬似自然光に暴露し、１０ｍＷ／ｃｍ^２で、１時間光照射した。

【0135】

目標生成物群および光対照群のマウスは自然光の照射を受けた場合、異常な反応を示さず、図４５、４６に示すように、マウスの四肢は力強く、爪の状態は正常であり、図４７、４８に示すように、体温に明らかな変化が認められなかった。

【0136】

参照化合物群のマウスは自然光の照射を受けた場合、明らかな光増感副反応を起こし、図４９に示すように、運動能力の低下と筋肉の無力、爪の明らかなカールが現れ、図５０に示すように、マウスの体温も明らかに低下した。

【0137】

ポルフィリン系化合物の水／エタノール／アセトニトリルなどの溶媒和物、タンパク質との非共有結合複合体およびプロドラッグについて、実施例６～１２と同様な実験によって検証したところ、これらの物質にも実施例３の化合物と類似する効果が有していることが認められ、実施例３と異なる置換基を有する化合物については、周辺のベンゼン環上の置換基が大環本体の電子構造に及ぼす影響は無視でき、光増感剤分子は分解過程で構造中のラクトン単位に依存して光活性化により生成された活性酸素種と反応し、実施例６～１２と同様な実験によって検証した結果、これらの物質も実施例３の化合物と類似の効果を有することが認められた。

【0138】

結論として、本発明の分解可能な近赤外光増感剤は、吸収スペクトルが近赤外域にあり、かつ消衰係数が大きく、参照化合物と比較すると、光照射により活性酸素を生成するとともに分解され、光照射終了後、光活性を有しない低毒性物質に完全転化される。従って、本発明の分解可能な近赤外光増感剤は細胞と生体レベルの両方で高い光毒性を示し、それが持つ強い蛍光は、蛍光標識に用いられて自身の分解程度をリアルタイムでモニタリングすることができる。

【0139】

上記の内容は単に本発明の好ましい実施例であり、本発明を限定するものではなく、本発明の精神と原則の範囲内で行われたいかなる修正、同等の置換、改良などは、すべて本発明の保護範囲に含まれるべきである。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27】

【図28】

【図29】

【図30】

【図31】

【図32】

【図33】

【図34】

【図35】

【図36】

【図37】

【図38】

【図39】

【図40】

【図41】

【図42】

【図43】

【図44】

【図45】

【図46】

【図47】

【図48】

【図49】

【図50】

【手続補正書】

【提出日】2024-04-30

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

分解可能な近赤外光増感剤であって、ポルフィリン系化合物、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、非共有結合複合体、錯体、およびプロドラッグから選択されるいずれか１種であり、前記ポルフィリン化合物の構造は、式１に示す通りであり、

【化1】

式中、

【化2】

はそれぞれ独立して、

【化3】

から選択されるいずれか１種であり、
Ａｒ_１およびＡｒ_２とも置換又は未置換されたフェニル基であり、
Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７、およびＲ_８は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ニトロ基、ヒドロキシル基、アミノ基、スルファニル基、カルボキシル基、スルホン酸基、リン酸基、シアノ基、アミド基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル基で置換されたアミノ基、置換又は未置換されたＣ_１－Ｃ_８アルキル基、置換又は未置換されたＣ_１－８アルコキシ基、置換されたメルカプト基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルリン酸基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルカルボキシル基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルスルホン酸基、Ｃ_３－Ｃ_６アルケニルアルキル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニルアルキル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニルオキシ基、およびＣ_２－Ｃ_６アルキニルオキシ基から選択されるいずれか１種であり、
Ｍは金属イオンであって、Ｍｇ、Ｃｒ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｃｄ、Ｇａ、Ａｌ、Ｐｄ、およびＰｔから選択されるいずれか１種であることを特徴とする、分解可能な近赤外光増感剤。

【請求項2】

前記Ａｒ_１および前記Ａｒ_２は、それぞれ独立して、

【化4】

であり、
式中、Ｒ_９、Ｒ_１０、Ｒ_１１、Ｒ_１２、およびＲ_１３は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ニトロ基、ヒドロキシル基、アミノ基、スルファニル基、カルボキシル基、スルホン酸基、リン酸基、シアノ基、アミド基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキル基で置換されたアミノ基、置換又は未置換されたＣ_１－Ｃ_８アルキル基、置換又は未置換されたＣ_１－Ｃ_８アルコキシ基、置換されたメルカプト基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルリン酸基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルカルボキシル基、Ｃ_１－Ｃ_８アルキルスルホン酸基、Ｃ_３－Ｃ_６アルケニルアルキル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニルアルキル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニルオキシ基、およびＣ_２－Ｃ_６アルキニルオキシ基から選択されるいずれか１種であることを特徴とする、請求項１に記載の分解可能な近赤外光増感剤。

【請求項3】

前記金属イオンは、Ｍｇ、Ｚｎ、Ｃｄ、Ａｌ、およびＧａから選択されるいずれか１種であることを特徴とする、請求項１に記載の分解可能な近赤外光増感剤。

【請求項4】

前記ポルフィリン化合物の具体的な構造は、

【化5】

から選択されるいずれか１種であることを特徴とする、請求項１に記載の分解可能な近赤外光増感剤。

【請求項5】

請求項１～４のいずれか一項に記載の分解可能な近赤外光増感剤の調製方法であって、下記の手順１～３を含み、
第１中間生成物を調製する手順１において、水熱反応釜の中で、ポルフォジラクトン１００ｍｇと、前記ポルフォジラクトンに対して３０～５０倍当量に相当するアルカリとを、５ｍＬ～２０ｍＬの第１溶媒に溶解させ、８０℃～２００℃で２４ｈ～７２ｈ反応させて、第１中間生成物を得て、反応式は以下に示す通りであり、

【化6】

第２中間生成物を調製する手順２において、手順１で得られた第１中間生成物１００ｍｇを、５ｍＬ～５０ｍＬの第２溶媒の中で水溶性修飾反応を行わせ、第２中間生成物を得て、反応式は以下に示す通りであり、

【化7】

目標生成物を調製する手順３において、手順２で得られた第２中間生成物１００ｍｇと、前記第２中間生成物に対して１０倍当量に相当する金属塩とを、２０～１００ｍＬの第３溶媒に溶解させ、２０℃～８０℃で２ｈ～１６ｈ反応して、式１に示す目標生成物を得て、反応方程式は以下に示す通りである、

【化8】

ことを特徴とする、分解可能な近赤外光増感剤の調製方法。

【請求項6】

手順１において、
前記アルカリは、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、ナトリウムメトキシド、およびカリウムｔｅｒｔ－ブトキシドから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物であり、
前記第１溶媒は、水、メタノール、エタノール、アセトニトリル、アセトン、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、およびテトラヒドロフランから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物であり、
前記反応温度を１００℃～１５０℃とし、反応時間を４８ｈ～７２ｈとすることを特徴とする、請求項５に記載の分解可能な近赤外光増感剤の調製方法。

【請求項7】

前記第２溶媒は、ジメチルスルホキシド、Ｎ,Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、リン酸トリメチル、リン酸トリエチル、およびヘキサノールから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物であることを特徴とする、請求項５に記載の分解可能な近赤外光増感剤の調製方法。

【請求項8】

前記金属塩は、マグネシウム塩、クロム塩、マンガン塩、鉄塩、コバルト塩、ニッケル塩、銅塩、亜鉛塩、カドミウム塩、ガリウム塩、アルミニウム塩、パラジウム塩、および鉛塩から選択されるいずれか１種であり、
前記第３溶媒は、水、メタノール、エタノール、アセトニトリル、アセトン、ジメチルスルホキシド、Ｎ,Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、クロロホルム、およびジクロロメタンから選択されるいずれか１種又は２種以上の混合物であり、
前記反応の温度を２０℃～６０℃とし、反応時間を３ｈ～５ｈとすることを特徴とする、請求項５に記載の分解可能な近赤外光増感剤の調製方法。

【請求項9】

前記金属塩は、マグネシウム塩、亜鉛塩、カドミウム塩、ガリウム塩、およびアルミニウム塩から選択されるいずれか１種であることを特徴とする、請求項８に記載の分解可能な近赤外光増感剤の調製方法。

【請求項10】

光動力治療薬の調製における、活性成分としての請求項１～４のいずれか１項に記載の分解可能な近赤外光増感剤の使用。

【国際調査報告】