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▶ イマティクス バイオテクノロジーズ ゲーエムベーハーの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-10-18
(54)【発明の名称】安定化したＭＨＣ分子
(51)【国際特許分類】
C07K 14/74 20060101AFI20241010BHJP
【ＦＩ】
C07K14/74 ZNA
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024523145
(86)(22)【出願日】2022-10-18
(85)【翻訳文提出日】2024-06-12
(86)【国際出願番号】 EP2022078967
(87)【国際公開番号】W WO2023066932
(87)【国際公開日】2023-04-27
(31)【優先権主張番号】21203254.4
(32)【優先日】2021-10-18
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(31)【優先権主張番号】63/256,965
(32)【優先日】2021-10-18
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】506258073
【氏名又は名称】イマティクス バイオテクノロジーズ ゲーエムベーハー
(74)【代理人】
【識別番号】100145403
【弁理士】
【氏名又は名称】山尾 憲人
(74)【代理人】
【識別番号】100122301
【弁理士】
【氏名又は名称】冨田 憲史
(74)【代理人】
【識別番号】100170520
【弁理士】
【氏名又は名称】笹倉 真奈美
(74)【代理人】
【識別番号】100221545
【弁理士】
【氏名又は名称】白江 雄介
(72)【発明者】
【氏名】トライバー，トーマス
(72)【発明者】
【氏名】シュパルト，シュテファニー
(72)【発明者】
【氏名】マウラー，ドミニク
【テーマコード（参考）】
4H045
【Ｆターム（参考）】
4H045AA10
4H045AA20
4H045AA30
4H045BA10
4H045CA40
4H045DA50
4H045EA54
4H045GA45
(57)【要約】
本発明は、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩を含む組成物に関する。本発明は、ＭＨＣタンパク質を安定化するための、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩の使用にさらに関する。本発明はまた、ＭＨＣタンパク質を安定化するための方法に関する。本発明はまた、ＭＨＣタンパク質、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩を含むキットに関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
（ｉ）主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質、および（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩
を含み、
Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである、組成物。
【請求項2】
前記ヒドロカルビルがＣ２～Ｃ２１－ヒドロカルビル、好ましくは直鎖Ｃ２～２１－アルキル、分岐Ｃ３～２１－アルキル、直鎖Ｃ２～２１－アルケニル、分岐Ｃ３～２１－アルケニル、直鎖Ｃ２～２１－アルキニル、または分岐Ｃ４～２１－アルキニルである、請求項１に記載の組成物。
【請求項3】
（ｉ）前記直鎖Ｃ２～２１－アルキルが直鎖Ｃ２～８－アルキルであり、（ｉｉ）前記分岐Ｃ３～２１－アルキルが分岐Ｃ３～８－アルキルであり、
（ｉｉｉ）前記直鎖Ｃ２～２１－アルケニルが直鎖Ｃ２～８－アルケニルであり、
（ｉｖ）前記分岐Ｃ３～２１－アルケニルが分岐Ｃ３～８－アルケニルであり、
（ｖ）前記直鎖Ｃ２～２１－アルキニルが直鎖Ｃ２～８－アルキニルであり、または
（ｖｉ）前記分岐Ｃ４～２１－アルキニルが分岐Ｃ４～８－アルキニルである、請求項２に記載の組成物。
【請求項4】
（ｉ）前記直鎖Ｃ２～２１－アルケニルまたは前記分岐Ｃ３～２１－アルケニルにおいて、二重結合が前記ヒドロカルビルのＣ１とＣ２原子との間またはＣ２とＣ３原子との間にあり、および／または（ｉｉ）前記直鎖Ｃ２～２１－アルキニルまたは前記分岐Ｃ４～２１－アルキニルにおいて、三重結合が前記ヒドロカルビルのＣ１とＣ２原子との間またはＣ２とＣ３原子との間にあり、および／または
（ｉｉｉ）前記ヒドロカルビルが、ハロゲン、特にＦ、Ｃｌ、もしくはＢｒ；－ＯＨ；－Ｏ－Ｒ４；＝Ｏ；－ＮＯ２；Ｒ２およびＲ３が独立してＨおよびヒドロカルビルから選択される－ＮＲ２Ｒ３；ならびにＲ４がＨおよびヒドロカルビルから選択される－ＮＨ－Ｒ４からなる群から選択される１つまたは複数の置換基で置換されており、および／または
（ｉｖ）前記Ｃ２～２１－アルキル－ＣＯＯＨが、プロパン酸、ｎ－ブタン酸、イソ－ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ウンデカン酸、ドデカン酸、トリデカン酸、テトラデカン酸、ペンタデカン酸、ヘキサデカン酸、ヘプタデカン酸、オクタデカン酸、ノナデカン酸、エイコサン酸、ヘンエイコサン酸、ドコサン酸、好ましくはプロパン酸、ｎ－ブタン酸、イソ－ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、およびノナン酸からなる群から選択される、請求項１～３のいずれかに記載の組成物。
【請求項5】
（ｉ）分岐Ｃ３～２１－アルキル－ＣＯＯＨが、イソブタン酸、イソペンタン酸、３－メチル－ペンタン酸、または４－メチル－ペンタン酸からなる群から選択され、および／または（ｉｉ）Ｃ２～２１－アルケニル－ＣＯＯＨが、２－ヘキセン酸、３－ヘキセン酸、および５－ヘキセン酸からなる群から選択される、請求項１～４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項6】
（ｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨの濃度が、約５ｍＭ～約１００ｍＭ、約１０ｍＭ～約８０ｍＭ、約１５ｍＭ～約７０ｍＭ、約２０ｍＭ～約６０ｍＭ、約２５ｍＭ～約５０ｍＭ、約３０ｍＭ～約４０ｍＭ、約３０ｍＭ～約３５ｍＭであり、および／または（ｉｉ）前記組成物が水溶液であり、および／または
（ｉｉｉ）前記組成物のｐＨが、ｐＨ６～ｐＨ８、ｐＨ６～ｐＨ７．５、またはｐＨ６．４～ｐＨ７．５の範囲であり、好ましくは、前記組成物が、ＡＣＥＳ、ＡＤＡ、ＢＥＳ、ビス－トリスプロパン、ＤＩＰＳＯ、ＥＰＰＳ、ＨＥＰＰＳＯ、イミダゾール、ＭＯＢＳ、ＭＥＳ、ビス－トリス、ＭＯＰＳ、トリス、ＭＯＰＳＯ、リン酸、ＰＩＰＥＳ、ＰＯＰＳＯ、ＴＡＰＳＯ、ＴＥＡ、ＴＥＳ、トリシン、またはＨＥＰＥＳ緩衝液からなる群から選択される緩衝物質を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項7】
前記Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩が、（ｉ）前記組成物中に含まれる前記ＭＨＣタンパク質を安定化し、および／または
（ｉｉ）前記組成物中に含まれる前記ＭＨＣタンパク質の融解温度を少なくとも０．５℃、１．０℃、１．５℃、２．０℃、２．５℃、３．０℃、３．５℃、４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、または６．０℃上昇させる濃度で前記組成物中に含まれる、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項8】
前記ＭＨＣが、ＭＨＣＩまたはＭＨＣＩＩ分子、好ましくはヒト白血球抗原（ＨＬＡ）またはＭＨＣＩ、ＭＨＣＩＩ、もしくはＨＬＡの多量体、例えば、二量体、三量体、もしくは四量体である、請求項１～７のいずれかに記載の組成物。
【請求項9】
前記ＭＨＣタンパク質が、好ましくは（ｉ）ＭＨＣＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの１アミノ酸とアルファ２ドメインの１アミノ酸との間、および／または
（ｉｉ）ＭＨＣＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの２つのアミノ酸の間、または
（ｉｉｉ）ＭＨＣＩＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインまたはベータ１ドメインの２つのアミノ酸の間、および／または
（ｉｖ）ＭＨＣＩＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの１アミノ酸とベータ１ドメインの１アミノ酸との間
の１つまたは複数の共有結合によって安定化されている、請求項１～８のいずれかに記載の組成物。
【請求項10】
前記共有結合が、（ｉ）α－ヘリックスの間、好ましくはＭＨＣＩのＩＭＧＴ８４位のシステインとＩＭＧＴ１３９位のシステインとの間、
（ｉｉ）ＭＨＣＩのアルファ１ドメインのα－ヘリックスとβ－シートとの間、好ましくはＭＨＣＩのＩＭＧＴ７１位のシステインとＩＭＧＴ２２位のシステインとの間、
（ｉｉｉ）好ましくはＭＨＣＩの５１位のアミノ酸およびＭＨＣＩの１７５位のアミノ酸をシステインに変異させることによって、α－ヘリックスの間、または
（ｉｖ）α－ヘリックスとβ－シートとの間、好ましくはＭＨＣＩのＩＭＧＴ７１位のシステインとＭＨＣＩのＩＭＧＴ２２位のシステインとの間、およびα－ヘリックスの間、好ましくはＭＨＣＩのＩＭＧＴ５１位のシステインとＭＨＣＩのＩＭＧＴ１７５位のシステインとの間
にある、請求項９に記載の組成物。
【請求項11】
（ｉ）前記ＭＨＣタンパク質が、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、ＨＬＡ－Ｇ、ＨＬＡ－Ｊ、ＨＬＡ－Ｋ、およびＨＬＡ－Ｌからなる群から選択され、好ましくはＨＬＡ－Ａが、ＨＬＡ－Ａ１、ＨＬＡ－Ａ２、ＨＬＡ－Ａ３、およびＨＬＡ－Ａ１１、より好ましくはＨＬＡ－Ａ＊０２、さらにより好ましくはＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ－Ａ＊０１：０１、またはＨＬＡ－Ａ＊０３：０１からなる群から選択され、好ましくはＨＬＡ－Ｂが、ＨＬＡ－Ｂ＊０７、ＨＬＡ－Ｂ＊０８、ＨＬＡ－Ｂ＊１５、ＨＬＡ－Ｂ＊３５、およびＨＬＡ－Ｂ＊４４、より好ましくはＨＬＡ－Ｂ＊０７：０２、ＨＬＡ－Ｂ＊０８：０１、ＨＬＡ－Ｂ＊１５：０１、ＨＬＡ－Ｂ＊３５：０１、およびＨＬＡ－Ｂ＊４４：０５からなる群から選択され、および／または（ｉｉ）１つまたは複数のＭＨＣタンパク質が複合体に含まれ、好ましくは、前記ＭＨＣタンパク質が、ビーズ、フィラメント、ナノ粒子、もしくはその他の担体に結合しており、および／または
（ｉｉｉ）前記組成物が、少なくとも１つのペプチド、好ましくは、グリシン－メチオニン（ＧＭ）、グリシン－チロシン（ＧＹ）、グリシン－ロイシン（ＧＬ）、およびグリシン－フェニルアラニン（ＧＦ）からなる群から選択されるローディングペプチドをさらに含み、より好ましくはローディングペプチドがＧＭである、請求項１～１０に記載の組成物。
【請求項12】
前記ＭＨＣタンパク質が配列番号１および配列番号２を含むか、またはそれらからなる、請求項１～１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項13】
ＭＨＣタンパク質を安定化するための、Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルであり、好ましくは、Ｒ１はＣ２～Ｃ２１－ヒドロカルビルである、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩の使用。
【請求項14】
ＭＨＣタンパク質、好ましくはＭＨＣＩまたはＭＨＣＩＩ、より好ましくはＨＬＡを安定化するための方法であって、以下の工程：（ｉ）前記ＭＨＣタンパク質を含む溶液を提供する工程、
（ｉｉ）前記溶液をＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩と接触させる工程
を含み、
Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルであり、
好ましくは、
（１）Ｒ１がＣ２～Ｃ２１－ヒドロカルビルであり、および／または
（２）前記方法が、ＭＨＣにペプチド、好ましくはＭＨＣ－ＩもしくはＭＨＣ－ＩＩペプチドをロードする工程をさらに含む、方法。
【請求項15】
（ｉ）ＭＨＣタンパク質、および（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨもしくはその塩、または
（ｉｉｉ）請求項１～１２のいずれか一項に記載の組成物、および
（ｉｉｉ）適宜ペプチド、好ましくはローディングペプチド、ＭＨＣＩペプチドおよび／またはＭＨＣＩＩペプチド
を含み、
Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルであり、好ましくはＲ１がＣ２～Ｃ２１－ヒドロカルビルである、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩を含む組成物に関する。本発明は、ＭＨＣタンパク質を安定化するための、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩の使用にさらに関する。本発明はまた、ＭＨＣタンパク質を安定化するための方法に関する。本発明はまた、ＭＨＣタンパク質、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩を含むキットに関する。
【背景技術】
【0002】
主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質クラスＩまたはクラスＩＩは、病原体または内在性タンパク質から得られたペプチドリガンドを、細胞傷害性Ｔ細胞による認識のために、抗原提示細胞の細胞表面上に提示する（Rodenko B. et al.:“Generation of peptide-MHC class I complexes through UV-mediated ligand exchange”; Nature Protocols; vol. 1, no.: 3, 1120-1132; 2006）。ネオ抗原などの腫瘍関連ペプチドを提示するＭＨＣクラスＩ複合体は、現在開発中のがん免疫療法アプローチの重要な標的であり、有効性および安全性スクリーニングのために重要となる。ペプチドリガンドがないと、ＭＨＣクラスＩ複合体は不安定ですぐに崩壊し、分析目的のための可溶性単量体の生産には多大な労力がかかる（Moritz A. et al.: “High-throughput peptide-MHC complex generation and kinetic screenings of TCRs with peptide-receptive HLA-A*02:01 molecules”; Science Immunology, 4, 2019）。ＭＨＣ分子の安定化は、人工ジスルフィド架橋をＭＨＣに導入することによって達成することができる（例えば、Moritz A.et al., 2019）。グリシンおよびメチオニンからなるジペプチドはさらに、例えば、ジペプチドの存在下でＭＨＣ分子をリフォールディングすることによって、ＭＨＣ分子を安定化することができる（Anjanappa R. et al.; “Structures of peptide-free and partially loaded MHC class I molecules reveal mechanism of peptide selection”, Nature Communications; 11:13141; 2020）。それにも関わらず、例えば、ほんの数例を挙げると、生物学的応用またはハイスループットスクリーニングアッセイのために、空のＭＨＣ分子またはそれらの組成物を安定化することが依然として必要とされている。
【0003】
目的の技術的問題は、本明細書で提供される本発明によって解決される。以下に記載したように、本発明はとりわけ、（ｉ）主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質、（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩を含む組成物に関し、Ｒ１は置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである。驚くべきことに、実施例において、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩がＭＨＣタンパク質を安定化することが示された。様々な長さのＲ１－ＣＯＯＨ（異なる数の炭素原子）がＭＨＣタンパク質を安定化したことが示された。さらに、実施例で示したように、直鎖、分岐、飽和、および不飽和Ｒ１－ＣＯＯＨがＨＬＡ分子を安定化した。実施例は、安定化は異なるＭＨＣタンパク質で観察されることをさらに立証した。さらに、予期せぬことに、Ｒ１－ＣＯＯＨは、グリシンおよびメチオニンからなるジペプチド「ＧＭ」に結合したＭＨＣタンパク質をさらにもっと安定化したことが示された。
【0004】
Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、通常研究室で容易に入手でき、上記のジペプチドと比較して安価である。したがって、本発明は、ＭＨＣタンパク質を安定化するための有利な手段およびその使用を提供する。本発明は特に、以下のさらなる利点を提供する：（ｉ）目的のペプチドを容易にロードすることができるＭＨＣタンパク質またはそれらの組成物、好ましくは、ＭＨＣタンパク質は、ペプチドを含んでいないか、または非常に短くて、容易に置き換わることが可能なペプチドがロードされている、（ｉｉ）ＭＨＣタンパク質またはそれらの組成物は、４℃で、または凍結して長期貯蔵しやすい、（ｉｉｉ）ＭＨＣタンパク質またはそれらの組成物は、Ｔ細胞、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、またはＴＣＲ様リガンド、すなわち、ペプチド－ＭＨＣ複合体を認識するリガンドのハイスループットスクリーニングに適している。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0005】
第１の態様では、本発明は、
（ｉ）主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質、および
（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩
を含む組成物に関し、Ｒ１は置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである。
（ｉ）主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質、および
（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩
を含む組成物に関し、Ｒ１は置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである。
【0006】
第２の態様では、本発明は、ＭＨＣタンパク質を安定化するために、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩の使用にさらに関し、Ｒ１は置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである。
【0007】
本発明の第３の態様は、ＭＨＣタンパク質を安定化するための方法であって、以下の工程：
（ｉ）ＭＨＣタンパク質を含む溶液を提供する工程、
（ｉｉ）前記溶液をＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩と接触させる工程
を含み、
Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである方法に関する。
（ｉ）ＭＨＣタンパク質を含む溶液を提供する工程、
（ｉｉ）前記溶液をＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩と接触させる工程
を含み、
Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである方法に関する。
【0008】
本発明の第４の態様は、
（ｉ）ＭＨＣタンパク質、および
（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩
を含むキットに関し、Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである。
（ｉ）ＭＨＣタンパク質、および
（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩
を含むキットに関し、Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである。
【0009】
以下に、本明細書に含まれる図面の内容が記載されている。これに関連して、上記および／または下記の本発明の詳細な説明も参照すること。
【図面の簡単な説明】
【0010】
【図1】サーマルシフトアッセイ（ＴＳＡ）によって測定されたＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１の融点。表３で指定した３３個の添加物および対照試料のデータ点がプロットされている。酪酸ナトリウムおよびＧＭジペプチド添加物の点が表示されている。
【図2】ＴＳＡによって測定された、指示した脂肪酸添加物を含むＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１の融点。値は、２回の測定値の平均である。
【図3】ＴＳＡによって測定された、直鎖および分岐鎖脂肪酸５０ｍＭを添加したＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１の融点。使用した化合物は：５Ｃ：吉草酸、イソ吉草酸；６Ｃ：ヘキサン酸、４－メチル－吉草酸である。値は、２回の測定値の平均である。
【図4】ＴＳＡにおいて測定された、指示した脂肪酸添加物５０ｍＭを含むＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１の融点。値は、２回の測定値の平均である。
【図5】ＴＳＡにおいて測定された、指示した脂肪酸添加物を含むＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１またはＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９の融点。値は、２回の測定値の平均である。
【図6】パネルＡは、ＨＬＡ＊Ａ０２：０１ ｄｓ２２－７１の融解曲線を示す。ＴＬＡによって測定された、温度勾配における蛍光の変化が示されている。脂肪酸およびＧｌｙ－Ｍｅｔ（ＧＭ）ジペプチド添加剤は、図自体の凡例に指示した試料中に含まれていた。示したデータは、３回の測定値の平均である。パネルＢは、Ａにおけるように測定されたＨＬＡ＊Ａ０２：０１ ｄｓ３９－１８４の融解曲線を示す。パネルＣは、パネルＡおよびＢで示したデータから得られたＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１またはＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９の融点の表である。
【図7】パネルＡは、ＴＳＡにおいて測定された、指示した脂肪酸およびジペプチド添加物を含むＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１の融点を示す。パネルＢは、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および指示したジペプチド添加物の融点を示す。値は、３回の測定値の平均である。
【図8】ＴＳＡにおいて測定された、図の下に指示したｐＨの最終濃度１００ｍＭの緩衝液を添加したＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１の融点。吉草酸５０ｍＭを添加した場合および添加しない場合の並行実験を示す。
【発明を実施するための形態】
【0011】
配列のリスト
【0012】
【表1】
【0013】
本発明を以下に詳細に説明する前に、本明細書で記載した特定の方法、手順、および試薬は変化し得るので、本発明はそれらに限定されるものではないことを理解されたい。本明細書で使用した用語は、特定の実施形態を説明する目的のためだけのものであり、本発明の範囲を限定することを意図するものではなく、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲によってのみ限定されることも理解されたい。別段の定義がない限り、本明細書で使用した技術用語および科学用語は全て、当業者によって一般的に理解されているのと同じ意味を有する。
【0014】
本明細書の本文全体を通じて、いくつかの文書が引用されている。本明細書で引用した文書（特許、特許出願、科学刊行物、製造業者の仕様書、説明書など全てを含む）のそれぞれは、上記または下記に関わらず、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書のいかなる部分も、先行発明を理由に、本発明がこのような開示に先行する権利がないことの承認として解釈されるべきではない。本明細書で引用した文書の一部は、「参照により組み込まれる」ものとして特徴付けられている。このような組み込まれた参考文献の定義または教示と本明細書に列挙されている定義または教示との間に矛盾がある場合には、本明細書の本文が優先する。
【0015】
以下では、本発明の要素を記載する。これらの要素は、特定の実施形態と共に列挙されているが、追加的な実施形態を作成するために、任意の方法および任意の数で組み合わせることができることを理解されたい。様々に記載された実施例および好ましい実施形態は、本発明を明示的に記載した実施形態のみに限定するものと解釈されるべきではない。この記載は、明示的に記載した実施形態と任意の数の開示されたおよび／または好ましい要素とを組み合わせた実施形態を支持して包含するものと理解されるべきである。さらに、本出願に記載されている全要素の任意の順列および組合せは、文脈が別段の指示をしない限り、本出願の説明によって開示されているとみなされるべきである。
【0016】
定義
本発明を実行するために、別段の指示のない限り、この分野の文献で説明されている化学、生化学、および組換えＤＮＡ技術の従来の方法が使用される（例えば、Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition, J. Sambrook et al. eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor 1989を参照のこと）。
本発明を実行するために、別段の指示のない限り、この分野の文献で説明されている化学、生化学、および組換えＤＮＡ技術の従来の方法が使用される（例えば、Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition, J. Sambrook et al. eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor 1989を参照のこと）。
【0017】
以下では、本出願で頻繁に使用される用語のいくつかの定義が示されている。これらの用語は、本出願の残りの部分において、その使用の場合それぞれにおいて、それぞれ定義された意味および好ましい意味を有することになる。
【0018】
本出願および添付した特許請求の範囲で使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」には、内容で明確に指示がない限り、複数の指示対象が含まれる。
【0019】
「約」という用語は、本発明の文脈において、および特定の記載した数値を参照して使用される場合、ある値を意味し、その値が記載した値から１０％以下、９．５％以下、９．０％、８．５％、８．０％、７．５％、７．０％、６．５％、６．０％、５％以下、４．５％以下、４．０％、３．５％、３．０％、２．５％、２．０％、１．５％、１．０％、または０．５％変化していてもよいことを意味する。例えば、本明細書で使用したように、「約１００」という表現は、９５および１０５およびその間の全ての値（例えば、９５．０、９５．５、９６．０、９６．５、９７．０、９７．５、９８．０、９８．５、９９．０、９９．５、１００．５、１０１．０、１０１．５、１０２．０、１０２．５、１０３．０、１０３．５、１０４．０、１０４．５、および１０５．０）を含む。
【0020】
用語「主要組織適合複合体」または「ＭＨＣタンパク質」または「ＭＨＣ分子」または「ＭＨＣ」は、本発明の文脈では交換可能に使用されており、一連の細胞表面タンパク質、すなわち、脊椎動物において変化した天然または外来タンパク質に対する獲得免疫の確立において必須の役割を有し、組織内の組織適合性を決定する細胞表面受容体を意味する。ＭＨＣ分子の主な機能は、変化したタンパク質または病原体由来の抗原に結合し、適切なＴ細胞による認識のためにそれらの抗原を細胞表面に提示することである。ヒトＭＨＣはまた、ＨＬＡ（ヒト白血球抗原）複合体またはＨＬＡと呼ばれる。ＭＨＣ遺伝子ファミリーは、３つの亜群：クラスＩ、クラスＩＩ、およびクラスＩＩＩに分かれる。ペプチドおよびＭＨＣクラスＩの複合体は、適切なＴＣＲを有するＣＤ８陽性Ｔ細胞によって認識され、一方ペプチドおよびＭＨＣクラスＩＩ分子の複合体は、適切なＴＣＲを有するＣＤ４陽性ヘルパーＴ細胞によって認識される。ＣＤ８およびＣＤ４依存性の両方の種類の応答は、Ｔ細胞依存性免疫、例えば、抗腫瘍効果に共同して相乗的に寄与し、したがって、特定のＭＣＨ－ペプチド複合体に結合するＴ細胞、またはそれらから単離された、もしくは得られたＴＣＲの同定および特徴付けは、Ｔ細胞またはＴＣＲをベースにした免疫療法の開発において重要である。本発明の文脈で使用した「ＭＨＣタンパク質」という用語は、完全長ＭＨＣおよびそれらのペプチド結合断片の両方を意味する。
【0021】
「ＭＨＣ－Ｉ」という用語は、本発明の文脈では、ＭＨＣクラスＩ分子またはＭＨＣ－Ｉタンパク質およびそれらのペプチド結合断片を意味する。ＭＨＣＩ分子は、ＭＨＣＩ重鎖とも称されるアルファ鎖およびベータ２ミクログロブリン分子を構成するベータ鎖からなる。アルファ鎖は、３つのアルファドメイン、すなわち、アルファ１ドメイン、アルファ２ドメイン、およびアルファ３ドメインを含む。アルファ１および２ドメインは主に、ペプチドリガンドＭＨＣ（ｐＭＨＣ）複合体を生成するためのペプチドポケットの形成に寄与する。ＭＨＣ－Ｉは通常、細胞質抗原タンパク質から得られ、ユビキチン化後にプロテアソームによって分解され、その後抗原プロセシング（ＴＡＰ）に関連した特定の輸送体によって細胞質から小胞体（ＥＲ）に輸送されるペプチドに結合する。ＭＨＣＩは通常、８～１２アミノ酸長のペプチドに結合する。
【0022】
「ＭＨＣ－ＩＩ」という用語は、本発明の文脈では、ＭＨＣクラスＩＩ分子またはＭＨＣ－ＩＩタンパク質およびそれらのペプチド結合断片を意味する。ＭＨＣ－ＩＩ分子はアルファ鎖およびベータ鎖からなり、アルファ鎖は２個のアルファドメイン、アルファ１ドメイン、アルファ２ドメインを含み、ベータ鎖は２個のベータドメイン、ベータ１ドメインおよびベータ２ドメインを含む。ＭＨＣＩＩは通常、ＥＲ内でインバリアント鎖と呼ばれるタンパク質と複合体を形成してフォールドされ、その後後期エンドソーム区画に輸送され、そこでインバリアント鎖はカテプシンプロテアーゼによって切断され、短い断片がＭＨＣＩＩのペプチド結合溝に結合したままになり、クラスＩＩ関連インバリアント鎖ペプチド（ＣＬＩＰ）と呼ばれる。次に、このプレースホルダーペプチドは通常、エンドサイトーシス区画で利用可能なタンパク質分解されたタンパク質から得られる、より親和性の高いペプチドと交換される。ＭＨＣ－ＩＩは通常、１０～３０アミノ酸長のペプチドまたは１３～２５アミノ酸長のペプチドに結合する。
【0023】
「ＨＬＡ」という用語は、本発明の文脈では、異なるヒトの間でアミノ酸配列が異なるヒトＭＨＣ分子を意味する。しかし、ＨＬＡは、ＨＬＡの国際的に承認された命名法、ＩＭＧＴ命名法によって特定され得る。例えば、ＨＬＡ－Ａへの分類は、配列アラインメントによって作成された各ＨＬＡの公式参照配列に対する所与のＨＬＡの同一性に基づいている。公式ＨＬＡ参照配列および分類システムについての情報は入手可能である：ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／ｉｐｄ／ｉｍｇｔ／ｈｌａ／ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ／ａｌｉｇｎｍｅｎｔｓ．ｈｔｍｌ。このウェブサイトは、任意の所与のＨＬＡ配列の分類方法に関する以下の情報を提供している：「作成されたアラインメントファイルは、以下の命名法および番号付け規則を使用する。これらの規則は、ヒト遺伝子変異について発表された推奨事項に基づいている。これらは、ヒト対立遺伝子変異体の配列に名前を付けて保存する方法を検討している命名法作業部会によって準備された。これらの推奨事項は、Antonarakis SE and the Nomenclature Working Group Recommendations for a Nomenclature System for Human Gene Mutations Human Mutation (1998) 11 1-3において見出すことができる」。したがって、本発明の文脈で使用したＨＬＡという用語は、天然に生じるＨＬＡタンパク質および改変ＨＬＡタンパク質全てを意味する。ＨＬＡ－Ａ遺伝子は６番染色体の短腕に位置し、ＨＬＡ－Ａのより大きなα鎖構成要素をコードしている。ＨＬＡ－Ａのα鎖の変動はＨＬＡ機能にとって重要である。この変動は、集団における遺伝的多様性を促進する。各ＨＬＡはある特定の構造のペプチドに異なる親和性を有するので、ＨＬＡの種類が多ければ多いほど、細胞表面に「提示される」抗原の種類が多いことを意味する。各個体は、両親から１つずつ、最高２つのタイプのＨＬＡ－Ａを発現することができる。一部の個体は、両親から同じＨＬＡ－Ａを受け継ぎ、個体のＨＬＡ多様性が低下している。しかし、大多数の個体はＨＬＡ－Ａの２つの異なるコピーを受け取る。同じパターンが全ＨＬＡ群に当てはまる。言い換えると、一人一人は、現在活性のある１７４０個のタンパク質をコードする２４３２個の公知のＨＬＡ－Ａ対立遺伝子のうちの１つまたは２つしか発現することができない。ＨＬＡ－Ａ＊０２は、特定のＨＬＡ対立遺伝子を表し、文字Ａは、対立遺伝子が属するＨＬＡ遺伝子を表し、接頭辞「＊０２接頭辞」はＡ２血清型を指示する。ＭＨＣクラスＩ依存性免疫反応では、ペプチドは、標的細胞、例えば、腫瘍細胞によって発現されたある特定のＭＨＣクラスＩ分子に結合しなければならないだけでなく、その後、特定のＴＣＲを有するＴ細胞によって認識されなければならない。ＭＨＣクラスＩ依存性免疫反応では、ペプチドは、腫瘍細胞によって発現されたある特定のＭＨＣクラスＩ分子に結合しなければならないだけでなく、その後、特定のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を有するＴ細胞によって認識されなければならない。
【0024】
本発明の文脈で使用した用語「ＭＨＣタンパク質のペプチド結合断片」は、ＭＨＣ分子またはＨＬＡ分子よりもアミノ酸長が短く、ＭＨＣタンパク質またはＨＬＡ分子のペプチドに結合する生物学的活性を保持している、ＭＨＣタンパク質またはＨＬＡタンパク質またはＨＬＡ分子の一部である。ＭＨＣタンパク質のペプチド結合断片は通常、Ｎおよび／またはＣ末端欠失、好ましくは、ＭＨＣの膜貫通ドメインの全部または一部を欠失しているＣ末端欠失を含む。後者は、発現のときに細胞の膜に挿入されないので、「可溶性ＭＨＣタンパク質」とも呼ばれる。ＭＨＣタンパク質のペプチド結合断片は、同じ条件下で、それぞれのペプチドに結合する元のＭＨＣタンパク質と同じまたは本質的に同じ能力を有する。あるいは、または追加的に、ＭＨＣタンパク質のペプチド結合断片は、１つまたは複数の非保存的アミノ酸置換を含むそれぞれのＭＨＣタンパク質のアミノ酸配列を含むことができる。この場合、非保存的アミノ酸置換は、ＭＨＣタンパク質のペプチド結合断片がペプチドに結合する能力を妨害したり阻害したりしないことが好ましい。
【0025】
用語「ペプチド」とは、本発明の文脈では、２～２６アミノ酸長のポリペプチドを意味する。ＭＨＣタンパク質に結合する予定であるか、またはＭＨＣタンパク質に結合しており機能的なペプチド－ＭＨＣ複合体を形成するペプチドは通常、ＭＨＣがタイプＩの場合、８～１２アミノ酸長であり（「ＭＨＣ－Ｉペプチド」とも呼ばれる）、ＭＨＣがタイプＩＩの場合、１３～２５アミノ酸長である（ＭＨＣ－ＩＩペプチドとも呼ばれる）。長さがより短い、例えば、２～７アミノ酸のペプチドはまた、フォールドされたＭＨＣ－ＩまたはＭＨＣ－ＩＩに結合することができ、予めロードしたＭＨＣＩまたはＩＩが適切な長さのペプチド、すなわち、ＭＨＣ－ＩペプチドまたはＭＨＣ－ＩＩペプチドと接触した場合、容易に置き換わることができる（これらのより短いペプチドは「ローディングペプチド」とも呼ばれる）。ローディングペプチドは、少なくとも２つのアミノ酸を含むことができ、７個より多いアミノ酸は含まない。ローディングペプチドの例は、グリシン－メチオニン（ＧＭ）、グリシン－チロシン（ＧＹ）、グリシン－ロイシン（ＧＬ）、またはグリシン－フェニルアラニン（ＧＦ）である。ペプチドがＭＨＣ－Ｉ分子またはＭＨＣ－ＩＩ分子に結合するかどうかは、ペプチドの天然起源によって、すなわち、細胞質で合成されて、プロテアソームでプロセシングされるか、またはエンドサイトーシスによって吸収された後にプロセシングされるかによって左右される。さらに、ＭＨＣ－ＩまたはＭＨＣ－ＩＩ分子の結合溝に結合するかどうかは、ペプチドの長さによって左右される。
【0026】
本発明の文脈で使用した用語「ローディング」とは、ローディングペプチド、ＭＨＣ－Ｉペプチド、またはＭＨＣ－ＩＩペプチドがＭＨＣタンパク質と接触して、ペプチドがＭＨＣタンパク質に結合できるようにすることを意味する。ペプチドのＭＨＣタンパク質への結合は、水素結合の形成を含む、非共有結合による結合を意味する。
【0027】
本発明の文脈で使用した用語「ヒドロカルビル」とは、炭素および水素原子だけからなる有機分子を意味し、用語「ヒドロカルビル」における「－イル」は、１個の水素が除去されて別の基に置き換わった、炭素および水素原子のみからなる１価の基を意味する。このような基はまた、「ラジカル」と呼ばれる。ヒドロカルビルの一例は、エチル、－ＣＨ２－ＣＨ３などのアルキルである。
【0028】
ヒドロカルビルは、分岐または非分岐であってもよく、飽和または不飽和であってもよく、すなわち、分岐飽和、分岐不飽和、非分岐飽和、および非分岐不飽和であってもよい。ヒドロカルビルは置換されていなくても置換されていてもよい。後者の場合、炭素および水素以外の原子は、ヒドロカルビルの炭素原子の１つまたは複数に共有的に結合している。炭素原子に共有的に結合することができる好ましい原子は、ハロゲン、特にＦ、Ｃｌ、またはＢｒ；－ＯＨ；－Ｏ－Ｒ４；＝Ｏ；－ＮＯ２；Ｒ２およびＲ３が独立してＨおよびヒドロカルビルから選択される－ＮＲ２Ｒ３；Ｒ４がＨおよびヒドロカルビルから選択される－Ｎ－Ｒ４である。
【0029】
本発明の文脈で使用した用語「塩」は、ヒドロカルビル－ＣＯＯＨのイオン性塩、特にカルボン酸と塩基との反応によって形成され、陽イオン、および陰イオンとして負に荷電したカルボキシ基を含むカルボン酸のイオン性塩に関する。カルボン酸のイオン性塩から構成される典型的な陽イオンは、リチウム、ナトリウム、カリウム、ルビジウム、セシウムまたはフランシウム、マグネシウム、カルシウムまたはアルミニウムである。
【0030】
本発明の文脈で使用した用語「緩衝物質」は、酸性を維持するために使用した弱酸または塩基に関し、すなわち、溶液、懸濁液および／またはエマルジョンのｐＨ値は、別の酸または塩基の添加後に選択された値に近づく。緩衝物質の機能は、酸または塩基を溶液、懸濁液、またはエマルジョンに添加したとき、ｐＨ値の急速な変化を防ぐことである。水溶液、懸濁液および／またはエマルジョンにおいて、緩衝は弱酸およびその共役塩基の混合物または弱塩基およびその共役酸の混合物中に存在している。緩衝物質の例は、限定はしないが以下：炭酸水素ナトリウム、酢酸もしくは酢酸塩（例えば、酢酸ナトリウム、酢酸亜鉛）、ホウ酸もしくはホウ酸塩、Ｎ－シクロヘキシル－２－アミノエタンスルホン酸（ＣＨＥＳ）もしくはその塩、３－［［１，３－ジヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロパン－２－イル］アミノ］プロパン－１－スルホン酸（ＴＡＰＳ）もしくはその塩、２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）およびその塩、ピペラジン－Ｎ，Ｎ’－ビス（２－エタンスルホン酸（ＰＩＰＥＳ）およびその塩、Ｎ－（２－アセトアミド）－２－アミノエタン－スルホン酸（ＡＣＥＳ）およびその塩、Ｎ－（２－アセトアミド）イミノ二酢酸、Ｎ－（カルバモイルメチル）イミノ二酢酸（ＡＤＡ）およびその塩、コラミン塩酸、Ｎ，Ｎ－ビス［２－ヒドロキシエチル］－２－アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）およびその塩、ビス（２－ヒドロキシエチル）アミノ－トリス（ヒドロキシメチル）メタン（ビストリス）およびその塩、２，２’－（プロパン－１，３－ジイルジイミノ）ビス［２－（ヒドロキシメチル）プロパン－１，３－ジオール］（ビス－トリスプロパン）およびその塩、－Ｎ－ビス－（ヒドロキシエチル）－アミノ－２－ヒドロキシ－プロパンスルホン酸（ＤＩＰＳＯ）およびその塩、Ｎ－２－ヒドロキシエチルピペラジン－Ｎ’－３－プロパンプロパンスルホン酸（ＨＥＰＰＳもしくはＥＰＰＳ）およびその塩、Ｎ－（ヒドロキシエチル）ピペラジン－Ｎ’－２－ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＨＥＰＰＳＯ）およびその塩、［２－［［１，３－ジヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）－プロパン－２－イル］アミノ］エタンスルホン酸（ＴＥＳ）およびその塩、２ ２－［４－（２－ヒドロキシエチル）ピペラジン－１－イル］エタン－１－スルホン酸（ＨＥＰＥＳ）およびその塩、アセトアミドグリシン、Ｎ－［２－ヒドロキシ－１、１－ビス（ヒドロキシメチル）エチル］グリシン（トリシン）、グリシンアミド、２－（ビス（２－ヒドロキシエチル）アミノ）酢酸（ビシン）およびその塩、プロピオン酸塩、３－［［１，３－ジヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロパン－２－イル］－アミノ］－２－ヒドロキシプロパン－１－スルホン酸（ＴＡＰＳＯ）およびその塩、２，２’，２’’－トリヒドロキシトリエチルアミン（ＴＥＡ）およびその塩、３－モルホリノプロパン－１－スルホン酸（ＭＯＰＳ）およびその塩、２－ヒドロキシ－３－（モルホリン－４－イル）プロパン－１－スルホン酸（ＭＯＰＳＯ）およびその塩、ピペラジン－Ｎ，Ｎ’－ビス（２－ヒドロキシプロパンスルホン酸）（ＰＯＰＳＯ）およびその塩、サリン－クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）緩衝液、２－アミノ－２－ヒドロキシメチル－プロパン－１，３－ジオール（異名：トリス、トリスアミン、ＴＨＡＭ、トロメタミン、トロメタモール、トロメタン）、イミダゾール、クエン酸もしくはクエン酸塩、例えば、クエン酸ナトリウム）、リン酸三ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸三カリウム、リン酸二カリウム、リン酸一カリウムおよび／または任意のその他のリン酸含有緩衝物質、例えば、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含む。アミノ酸（遊離の塩基性または酸性官能基、例えば、メチオニン、アルギニンを有する）、ペプチド、またはタンパク質（遊離の塩基性または酸性官能基を有する）も緩衝物質として使用され得る。
【0031】
実施形態
以下では、本発明の異なる態様をより詳細に明示する。このように明示した各態様は、明確に反対の指示がない限り、任意の他の態様または態様類と組み合わせることができる。特に、好ましいかまたは有利であることが示された特徴は、好ましいかまたは有利であることが示された他の特徴または特徴類と組み合わせることができる。
以下では、本発明の異なる態様をより詳細に明示する。このように明示した各態様は、明確に反対の指示がない限り、任意の他の態様または態様類と組み合わせることができる。特に、好ましいかまたは有利であることが示された特徴は、好ましいかまたは有利であることが示された他の特徴または特徴類と組み合わせることができる。
【0032】
第１の態様では、本発明は、
（ｉ）主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質、および
（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩
を含み、
Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである組成物に関する。
（ｉ）主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質、および
（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩
を含み、
Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである組成物に関する。
【0033】
本発明の第１の態様の一実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨ、すなわち、カルボキシル基で置換されたヒドロカルビル残基を含み、Ｒ１は置換されていない。一実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨ、すなわち、カルボキシル基で置換されたヒドロカルビル残基を含み、Ｒ１は置換されている。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、Ｒ１が置換されているＲ１－ＣＯＯＨ、およびローディングペプチド、前記ＭＨＣタンパク質に結合したＭＨＣ－Ｉペプチドおよび／またはＭＨＣ－ＩＩペプチドを含む。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、Ｒ１が置換されていないＲ１－ＣＯＯＨ、およびローディングペプチド、前記ＭＨＣに結合したＭＨＣ－Ｉペプチドおよび／またはＭＨＣ－ＩＩペプチドを含む。
【0034】
分子「Ｒ１－ＣＯＯＨ」は、カルボン酸部分または基によって置換されているヒドロカルビル残基（Ｒ１）を含み、すなわち、ヒドロカルビルの１水素原子がカルボキシル基、すなわち、－ＣＯＯＨに置き換わっている。したがって、炭化水素基はカルボキシル基に１価で結合している。一実施形態では、Ｒ１は、カルボキシ基に結合した飽和分岐および直鎖炭化水素、すなわち、アルキル基、ならびにアルケニルまたはアルキニル基などの分岐および直鎖不飽和炭化水素を含んでもよい。Ｒ１は、水素原子を除去することによってヒドロカルビルの１個または複数の炭素原子でさらに置換されていてもよい。Ｒ１が置換されている場合、Ｒ１はハロゲン、特に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩ；－ＯＨ；－Ｏ－Ｒ４；＝Ｏ；－ＮＯ２；Ｒ２およびＲ３がＨおよびヒドロカルビルから独立して選択される－ＮＲ２Ｒ３；ならびにＲ４がＨおよびヒドロカルビルから選択される－Ｎ－Ｒ４で置換されていることが好ましい。特に適切な置換基は、ハロゲン、例えば、Ｆ、Ｃｌ、またはＢｒである。Ｒ１－ＣＯＯＨはまた、塩、すなわち、カルボン酸基Ｒ１－ＣＯＯ－Ｍｅ＋のイオン性塩であってもよく、Ｍｅ＋は陽イオン、特にアルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、ＮＨ４
＋、またはホウ素族の金属イオンである。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質およびリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、アンモニウム、またはアルミニウムからなる群から選択されるＲ１－ＣＯＯＨの塩を含む。より好ましくは、Ｒ１－ＣＯＯＨの塩はナトリウム塩である。
【0035】
本発明の第１の態様の一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質およびＲ１がＣ２～Ｃ２１－ヒドロカルビルであるＲ１－ＣＯＯＨを含む。一実施形態では、Ｒ１は直鎖Ｃ２～Ｃ２１－アルキルである。別の実施形態では、Ｒ１は分岐Ｃ３～２１－アルキルである。別の実施形態では、Ｒ１は直鎖Ｃ２～２１－アルケニルである。別の実施形態では、Ｒ１は分岐Ｃ３～２１－アルケニルである。別の実施形態では、Ｒ１は直鎖Ｃ２～２１－アルキニルである。別の実施形態では、Ｒ１は分岐Ｃ４～２１－アルキニルである。Ｒ１は直鎖Ｃ２～Ｃ２１－アルキルであることが好ましい。別の好ましい実施形態では、Ｒ１は分岐Ｃ３～２１－アルキルである。別の好ましい実施形態では、Ｒ１は直鎖Ｃ２～２１－アルケニルである。別の好ましい実施形態では、Ｒ１は分岐Ｃ３～２１－アルケニルである。
【0036】
本発明の第１の態様の一実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１は直鎖Ｃ２～２１－アルキル、好ましくはＲ１は直鎖Ｃ２～８－アルキルまたはＣ２～７－アルキル、より好ましくはＲ１は直鎖Ｃ２～７－アルキルであるか、またはＲ１はＣ３～７－アルキルであり、さらにより好ましくはＲ１は直鎖Ｃ４～６－アルキルである。別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１は直鎖Ｃ２～２１－アルキルであり、好ましくはエチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、またはオクチルからなる群から選択される。より好ましくは、Ｒ１はブチル、ペンチル、またはヘキシルからなる群から選択される直鎖Ｃ２～２１－アルキルである。さらにより好ましくは、組成物はＭＨＣおよびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１は直鎖Ｃ２～２１－アルキル、ペンチルである。それぞれの場合において、直鎖Ｃ２～２１－アルキル、好ましくは直鎖Ｃ２～８－アルキルまたはＣ２～７－アルキル、より好ましくは直鎖Ｃ２～７－アルキルまたはＣ３～７－アルキル、さらにより好ましくは直鎖Ｃ４～６－アルキルは、置換されていなくても置換されていてもよく、好ましくは置換されていなくてもよい。
【0037】
別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１は分岐Ｃ３～２１－アルキルであり、好ましくはＲ１は分岐Ｃ３～８－アルキルであり、より好ましくはＲ１は分岐Ｃ３～７－アルキルであり、より好ましくはＲ１は分岐Ｃ４～６－アルキルである。一実施形態では、Ｒ１はイソ－プロピル、イソ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、１－メチル－ブチル、２－メチル－ブチル、３－メチル（ｔｈｌｙ）－ブチル、１，１－ジメチル－プロピル、２，２－ジメチル－プロピル、１－エチル－プロピル、１－メチル－ペンチル、２－メチル－ペンチル、３－メチル－ペンチル、４－メチル－ペンチル、１，１－ジメチル－ブチル、１，２－ジメチル－ブチル、１，３－ジメチル－ブチル、２，２－ジメチル－ブチル、２，３－ジメチル－ブチル、３，３－ジメチル－ブチル、１－エチル－ブチル、２－エチル－ブチル、１，１，２－トリメチル－プロピル、１，２，２、トリメチル－プロピル、１－エチル－２－メチル－プロピル、１－メチル－ヘキシル、２－メチル－ヘキシル、３－メチル－ヘキシル、４－メチル－ヘキシル、５－メチル－ヘキシル、１，１－ジメチル－ペンチル、１，２－ジメチル－ペンチル、１，３－ジメチル－ペンチル、１，４－ジメチル－ペンチル、２，２－ジメチル－ペンチル、２，３－ジメチル－ペンチル、２，４－ジメチル－ペンチル、３，３－ジメチル－ペンチル、３，４－ジメチル－ペンチル、１－エチル－ペンチル、２－エチル－ペンチル、３－エチル－ペンチル、１，１，２－トリメチル－ブチル、１，１，３－トリメチル－ブチル、１，２，３－トリメチル－ブチル、１，２，２－トリメチル－ブチル、２，２，３－トリメチル－ブチル、１－メチル－１－エチル－ブチル、１－エチル－２－メチル－ブチル、１－エチル－３－メチル－ブチル、１－メチル－２－エチル－ブチル、２－メチル－２－エチル－ブチル、１－プロピル（ｐｒｏｐｙ）－ブチル、１－メチル－ヘプチル、２－メチル－ヘプチル、３－メチル－ヘプチル、４－メチル－ヘプチル、５－メチル－ヘプチル、６－メチル－ヘプチル、１，１－ジメチル－ヘキシル、１，２－ジメチル－ヘキシル、１，３－ジメチル－ヘキシル、１，４－ジメチル－ヘキシル、１，５－ジメチル－ヘキシル、２，２－ジメチル－ヘキシル、２，３－ジメチル－ヘキシル、２，４－ジメチル－ヘキシル、２，５－ジメチル－ヘキシル、３，３－ジメチル－ヘキシル、３，４－ジメチル－ヘキシル、３，５－ジメチル－ヘキシル、４，４－ジメチル－ヘキシル、４，５－ジメチル－ヘキシル、５，５－ジメチル－ヘキシル、１－エチル－ヘキシル、２－エチル－ヘキシル、３－エチル－ヘキシルまたは４－エチル－ヘキシルからなる群から選択される。それぞれの場合において、分岐Ｃ３～２１－アルキル、好ましくは分岐Ｃ３～７－アルキル、より好ましくは分岐Ｃ４～６－アルキルは、置換されていなくても置換されていてもよく、好ましくは置換されていなくてもよい。Ｒ１は分岐Ｃ４－アルキルまたは分岐Ｃ５－アルキルであることが特に好ましい。
【0038】
別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１は直鎖Ｃ２～２１－アルケニルであり、好ましくはＲ１は直鎖Ｃ２～８－アルケニルまたは直鎖Ｃ２～７であり、より好ましくはＲ１は直鎖Ｃ３～７－アルケニルであり、最も好ましくはＲ１は直鎖Ｃ４～６－アルケニルである。一実施形態では、Ｒ１は、エテニル、１－プロペニル、２－プロペニル、１－ブテニル、２－ブテニル、３－ブテニル、１－ペンテニル、２－ペンテニル、３－ペンテニル、４－ペンテニル、１－ヘキセニル、２－ヘキセニル、３－ヘキセニル、４－ヘキセニル、５－ヘキセニル、１－ヘプテニル、２－ヘプテニル、１－ヘプテニル、４－ヘプテニル、５－ヘプテニル、６－ヘプテニル、１－オクテニル、２－オクテニル、３－オクテニル、４－オクテニル、５－オクテニル、６－オクテニル、または７－オクテニルからなる群から選択される。それぞれの場合において、直鎖Ｃ２～２１－アルケニル、好ましくは直鎖Ｃ２～８－アルケニルまたは直鎖Ｃ２－７、より好ましくは直鎖Ｃ３～７－アルケニル、最も好ましくはＣ４～６－アルケニルは、置換されていなくても置換されていてもよく、好ましくは置換されていなくてもよい。
【0039】
別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１は分岐Ｃ３～２１－アルケニルであり、好ましくはＲ１は分岐Ｃ３～８－アルケニルであり、より好ましくはＲ１は分岐Ｃ３～７－アルケニルであり、最も好ましくはＲ１は分岐Ｃ４～６－アルケニルである。一実施形態では、Ｒ１は１－メチル－エテニル、１－メチル－１－プロペニル、２－メチル－１－プロペニル、１－メチル－２－プロペニル、２－メチル－２－プロペニル、１－メチル－１－ブテニル、２－メチル－１－ブテニル、３－メチル－１－ブテニル、１－メチル－２－ブテニル、２－メチル－２－ブテニル、３－メチル－２－ブテニル、１－メチル－３－ブテニル、２－メチル－３－ブテニル、３－メチル－３－ブテニル、１，１－ジメチル－２－プロペニル、１，２－ジメチル－１－プロペニル、１，２－ジメチル－２－プロペニル、１－エチル－１－プロペニル、１－エチル－２－プロペニル、１－メチル－１－ペンテニル、２－メチル－１－ペンテニル、３－メチル－１－ペンテニル、４－メチル－１－ペンテニル、１－メチル－２－ペンテニル、２－メチル－２－ペンテニル、３－メチル－２－ペンテニル、４－メチル－２－ペンテニル、１－メチル－３－ペンテニル、２－メチル－３－ペンテニル、３－メチル－３－ペンテニル、４－メチル－３－ペンテニル、１－メチル－４－ペンテニル、２－メチル－４－ペンテニル、３－メチル－４－ペンテニル、４－メチル－４－ペンテニル、１，１－ジメチル－２－ブテニル、１，１－ジメチル－３－ブテニル、１，２－ジメチル－１－ブテニル、１，２－ジメチル－２－ブテニル、１，２－ジメチル－３－ブテニル、１，３－ジメチル－１－ブテニル、１，３－ジメチル－２－ブテニル、１，３－ジメチル－３－ブテニル、２，２－ジメチル－３－ブテニル、２，３－ジメチル－１－ブテニル、２，３－ジメチル－２－ブテニル、２，３－ジメチル－３－ブテニル、３，３－ジメチル－１－ブテニル、３，３－ジメチル－２－ブテニル、１－エチル－１－ブテニル、１－エチル－２－ブテニル、１－エチル－３－ブテニル、２－エチル－１－ブテニル、２－エチル－２－ブテニル、２－エチル－３－ブテニル、１，１，２－トリメチル－２－プロペニル、１－エチル－１－メチル－２－プロペニル、１－エチル－２－メチル－１－プロペニル、または１－エチル－２－メチル－２－プロペニルからなる群から選択される。それぞれの場合において、分岐Ｃ３～２１－アルケニル、好ましくは分岐Ｃ３～８－アルケニル、より好ましくは分岐Ｃ３～７－アルケニル、最も好ましくはＣ４～６－アルケニルは、置換されていなくても置換されていてもよく、好ましくは置換されていなくてもよい。
【0040】
一実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１は直鎖Ｃ２～２１－アルキニルであり、好ましくはＲ１は直鎖Ｃ２～８－アルキニルまたは直鎖Ｃ２～７－アルキニルであり、より好ましくはＲ１は直鎖Ｃ３～７－アルキニルであり、最も好ましくはＲ１が直鎖Ｃ４～６－アルキニルである。一実施形態では、Ｒ１は、エチニル、１－プロピニル、２－プロピニル、１－ブチニル、２－ブチニル、３－ブチニル、１－ペンチニル、２－ペンチニル、３－ペンチニル、４－ペンチニル、１－ヘキシニル、２－ヘキシニル、３－ヘキシニル、４－ヘキシニル、５－ヘキシニル、１－ヘプチニル、２－ヘプチニル、１－ヘプチニル、４－ヘプチニル、５－ヘプチニル、５－ヘプチニル、６－ヘプチニル、１－オクチニル、２－オクチニル、３－オクチニル、４－オクテニル、５－オクチニル、６－オクチニル、または７－オクチニルからなる群から選択される。それぞれの場合において、直鎖Ｃ２～２１－アルキニル、好ましくは直鎖Ｃ２～８－アルキニルまたは直鎖Ｃ２～７－アルキニル、より好ましくは直鎖Ｃ３～７－アルキニル、最も好ましくは直鎖Ｃ４～６－アルキニルは、置換されていなくても置換されていてもよく、好ましくは置換されていなくてもよい。
【0041】
一実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１は分岐Ｃ４～２１－アルキニルであり、好ましくはＲ１は分岐Ｃ４～８－アルキニルであり、より好ましくはＲ１は分岐Ｃ４～７－アルキニルであり、最も好ましくはＲ１は分岐Ｃ４～６－アルキニルである。一実施形態では、Ｒ１は、１－メチル－２－プロピニル、１－メチル－２－ブチニル、１－メチル－３－ブチニル、２－メチル－３－ブチニル、３－メチル－１－ブチニル、１，１－ジメチル－２－プロピニル、１－エチル－２－プロピニル、１－メチル－２－ペンチニル、１－メチル－３－ペンチニル、１－メチル－４－ペンチニル、２－メチル－３－ペンチニル、２－メチル－４－ペンチニル、３－メチル－１－ペンチニル、３－メチル－４－ペンチニル、４－メチル－１－ペンチニル、４－メチル－２－ペンチニル、１，１－ジメチル－２－ブチニル、１，１－ジメチル－３－ブチニル、１，２－ジメチル－３－ブチニル、２，２－ジメチル－３－ブチニル、３，３－ジメチル－１－ブチニル、１－エチル－２－ブチニル、１－エチル－３－ブチニル、２－エチル－３－ブチニル、または１－エチル－１－メチル－２－プロピニルからなる群から選択される。それぞれの場合において、分岐Ｃ４～２１－アルキニル、好ましくは直鎖Ｃ４～８－アルキニル、より好ましくは分岐Ｃ４～７－アルキニル、最も好ましくは分岐Ｃ４～６－アルキニルは、置換されていなくても置換されていてもよく、好ましくは置換されていなくてもよい。
【0042】
本発明の第１の態様の別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１はヒドロカルビルであり、二重もしくは三重結合はヒドロカルビルのＣ１とＣ２原子との間、または二重もしくは三重結合はＣ２とＣ３原子との間にある（番号付けは、ＣＯＯＨ基に結合したヒドロカルビルの炭素に対する）。
【0043】
好ましい例は、直鎖Ｃ２～２１－１－アルケニル、好ましくは直鎖Ｃ２～８－１－アルケニルもしくは直鎖Ｃ２～７－アルケニル、より好ましくは直鎖Ｃ３～７－１－アルケニル、最も好ましくはＣ４～６－１－アルケニル、またはＣ２～２１－２－アルケニル、好ましくは直鎖Ｃ２～８－２－アルケニルもしくは直鎖Ｃ２～７－２－アルケニル、より好ましくは直鎖Ｃ３～７－２－アルケニル、最も好ましくは直鎖Ｃ４～６－２－アルケニルである。
【0044】
好ましい例は、分岐Ｃ３～２１－１－アルケニル、好ましくは分岐Ｃ３～８－１－アルケニル、より好ましくは分岐Ｃ３～７－１－アルケニル、最も好ましくは分岐Ｃ４～６－１－アルケニル、または分岐Ｃ３～２１－２－アルケニル、好ましくは分岐Ｃ３～８－２－アルケニル、より好ましくは分岐Ｃ３～７－２－アルケニル、最も好ましくは分岐Ｃ４～６－２－アルケニルである。
【0045】
好ましい例は、直鎖Ｃ２～２１－１－アキニル、好ましくは直鎖Ｃ２～８－１－アルキニルもしくは直鎖Ｃ２～７－１－アルキニル、より好ましくは直鎖Ｃ３～７－１－アルキニル、最も好ましくはＣ４～６－１－アルキニル、または直鎖Ｃ２～２１－２－アルキニル、好ましくは直鎖Ｃ２～８－２－アルキニルもしくは直鎖Ｃ２～７－２－アルキニル、より好ましくは直鎖Ｃ３～７－２－アルキニル、最も好ましくは直鎖Ｃ４～６－２－アルキニルである。
【0046】
好ましい例は、分岐Ｃ３～２１－１－アルキニル、好ましくは分岐Ｃ３～８－１－アルキニル、より好ましくは分岐Ｃ３～７－１－アルキニル、最も好ましくは分岐Ｃ４～６－１－アルキニル、または分岐Ｃ３～２１－２－アルキニル、好ましくは分岐Ｃ３～８－２－アルキニル、より好ましくは分岐Ｃ３～７－２－アルキニル、最も好ましくは分岐Ｃ４～６－２－アルキニルである。
【0047】
したがって、特に好ましい直鎖アルケニルは、１－プロペニル、２－プロペニル、１－ブテニル、２－ブテニル、１－ペンテニル、２－ペンテニル、１－ヘキセニル、２－ヘキセニル、１－ヘプテニル、２－ヘプテニル、１－オクテニル、２－オクテニル、１－ノネイル（ｎｏｎｅｙｌ）、および２－ノネニルである。したがって、好ましい分岐アルケニルは、基本鎖として１－プロペニル、２－プロペニル、１－ブテニル、２－ブテニル、１－ペンテニル、２－ペンテニル、１－ヘキセニル、２－ヘキセニル、１－ヘプテニル、２－ヘプテニル、１－オクテニル、および２－オクテニル、ならびにメチル、エチル、またはプロピル分岐を含む。したがって、好ましい直鎖アルキニルは、１－プロピニル、２－プロピニル、１－ブチニル、２－ブチニル、１－ペンチニル、２－ペンチニル、１－ヘキシニル、２－ヘキシニル、１－ヘプチニル、２－ヘプチニル、１－オクチニル、２－オクチニル、１－ノニニル、および２－ノニニルである。したがって、好ましい分岐アルキニルは、基本鎖として１－ブチニル、２－ブチニル、１－ペンチニル、２－ペンチニル、１－ヘキシニル、２－ヘキシニル、１－ヘプチニル、２－ヘプチニル、１－オクチニル、および２－オクチニル、ならびにメチル、エチル、またはプロピル分岐を含む。それぞれの場合において、直鎖アルキニル、好ましくは直鎖Ｃ２～８－アルキニル、直鎖Ｃ２～７－アルキニル、より好ましくは直鎖Ｃ３～７－アルキニル、最も好ましくは直鎖Ｃ４～６－アルキニルは、置換されていなくても置換されていてもよく、好ましくは置換されていなくてもよい。
【0048】
一実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質ならびにＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１はヒドロカルビルであり、ヒドロカルビルはハロゲン、特に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩ；－ＯＨ；－Ｏ－Ｒ４；＝Ｏ；－ＮＯ２；Ｒ２およびＲ３がＨおよびヒドロカルビルから独立して選択される－ＮＲ２Ｒ３；ならびにＲ４がＨおよびヒドロカルビルから選択される－ＮＨ－Ｒ４から選択される１つまたは複数の置換基で置換されている。特に適切な置換基は、ハロゲン、例えば、Ｆ、Ｃｌ、またはＢｒである。一実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質ならびにＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１はヒドロカルビルであり、二重または三重結合はヒドロカルビルのＣ１とＣ２原子またはＣ２とＣ３原子との間にあり、ヒドロカルビルはハロゲン、特に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩ；－ＯＨ；－Ｏ－Ｒ４；＝Ｏ；－ＮＯ２；Ｒ２およびＲ３がＨおよびヒドロカルビルから独立して選択される－ＮＲ２Ｒ３；ならびにＲ４がＨおよびヒドロカルビルから選択される－ＮＨ－Ｒ４から選択される１つまたは複数の置換基で置換されている。特に適切な置換基は、ハロゲン、例えば、Ｆ、Ｃｌ、またはＢｒである。好ましい一実施形態では、Ｒ２およびＲ３がＨである場合、－ＮＲ２Ｒ３はＣ１炭素原子に結合していない（ヒドロカルビルにおける炭素原子の番号付けはＣＯＯＨ基に結合したヒドロカルビルの最初の炭素に対する）、すなわち、Ｒ１－ＣＯＯＨはα－アミノ酸ではないことが好ましい。好ましい一実施形態では、ヒドロカルビルは、ハロゲン、特に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩ；－ＯＨ；－Ｏ－Ｒ４；＝Ｏ；－ＮＯ２；Ｒ２およびＲ３がヒドロカルビルから独立して選択される－ＮＲ２Ｒ３；ならびにＲ４がヒドロカルビルである－ＮＨ－Ｒ４から選択される１つまたは複数の置換基で置換されている。好ましい一実施形態では、ヒドロカルビルは、ハロゲン、特に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩ；－ＯＨ；－Ｏ－Ｒ４；＝Ｏ；－ＮＯ２；Ｒ２およびＲ３がヒドロカルビルから独立して選択される－ＮＲ２Ｒ３；ならびにＲ４がヒドロカルビルである－ＮＨ－Ｒ４から選択される１つまたは複数の置換基で置換されている。好ましくは、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４はＣ１～８－アルキルから互いに独立して選択される。
【0049】
好ましい一実施形態では、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、モノ－カルボン酸である。
【0050】
本発明の第１の態様の好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨは、脂肪酸、好ましくは天然に存在する脂肪酸である。より好ましくは、脂肪酸は３～９個の炭素原子を含む。さらにより好ましくは、脂肪酸は３～８または４～８個の炭素原子を含む。最も好ましくは、脂肪酸は５～７個の炭素原子を含む。
【0051】
本発明の第１の態様の別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨは、Ｃ３～２１－アルキル、好ましくはプロパン酸、ｎ－ブタン酸、イソ－ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ウンデカン酸、ドデカン酸、トリデカン酸、テトラデカン酸、ペンタデカン酸、ヘキサデカン酸、ヘプタデカン酸、オクタデカン酸、ノナデカン酸、エイコサン酸、ヘンエイコサン酸、またはドコサン酸からなる群から選択されるＣ２～２１－アルキル－ＣＯＯＨである。好ましい実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質ならびにプロパン酸、ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、およびノナン酸からなる群から選択されるＣ２～２１－アルキル－ＣＯＯＨを含む。さらにより好ましい実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質ならびにプロパン酸、ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、およびオクタン酸からなる群から選択されるＣ２～２１－アルキル－ＣＯＯＨを含む。さらにより好ましい実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質およびペンタン酸、ヘキサン酸、またはヘプタン酸を含む。
【0052】
本発明の第１の態様の別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨは、イソブタン酸、イソペンタン酸、３－メチル－ペンタン酸、および４－メチル－ペンタン酸からなる群から選択される分岐Ｃ３～２１－アルキル－ＣＯＯＨである。好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨは、イソブタン酸、イソペンタン酸、および４－メチル－ペンタン酸からなる群から選択される分岐Ｃ３～２１－アルキル－ＣＯＯＨである。さらにより好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨはイソペンタン酸および４－メチル－ペンタン酸である。
【0053】
一実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨは、２－ヘキセン酸、３－ヘキセン酸、および５－ヘキセン酸からなる群から選択されるＣ２～２１－アルケニル－ＣＯＯＨである。好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＣ２～２１－アルケニル－ＣＯＯＨを含み、Ｃ２～２１－アルケニル－ＣＯＯＨは２－ヘキセン酸または３－ヘキセン酸である。
【0054】
以下の表２は、選択された化合物の異名を含む：
【0055】
【表2】
【0056】
Ｒ１－ＣＯＯＨのモル濃度はＭＨＣタンパク質のモル濃度を上回ることが想定される。本発明の第１の態様の別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨの濃度は、約５ｍＭ～約１００ｍＭ、約１０ｍＭ～約８０ｍＭ、約１５ｍＭ～約７０ｍＭ、約２０ｍＭ～約６０ｍＭ、約２５ｍＭ～約５０ｍＭ、約３０ｍＭ～約４０ｍＭ、または約３０ｍＭ～約３５ｍＭである。好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨの濃度は、約５ｍＭ～約１００ｍＭ、約１０ｍＭ～約８０ｍＭ、約１５ｍＭ～約７０ｍＭ、約２０ｍＭ～約６０ｍＭ、または約２５ｍＭ～約５０ｍＭである。最も好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨの濃度は約５０ｍＭである。
【0057】
別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨの濃度は、５ｍＭ～１００ｍＭ、１０ｍＭ～８０ｍＭ、１５ｍＭ～７０ｍＭ、２０ｍＭ～６０ｍＭ、２５ｍＭ～５０ｍＭ、３０ｍＭ～４０ｍＭ、または３０ｍＭ～３５ｍＭである。好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨの濃度は、５ｍＭ～１００ｍＭ、１０ｍＭ～８０ｍＭ、１５ｍＭ～７０ｍＭ、２０ｍＭ～６０ｍＭ、または２５ｍＭ～５０ｍＭである。最も好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨの濃度は５０ｍＭである。
【0058】
本発明の第１の態様の別の実施形態では、組成物は、乾燥した形態で、すなわち、溶液ではないが、例えば、粉末、例えば、凍結乾燥粉末として、ペプチド、好ましくはローディングペプチド、ＭＨＣ－ＩペプチドまたはＭＨＣ－ＩＩペプチドをロードする前に復元できる状態であるＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含む。好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、溶液、好ましくは水溶液である。さらなる実施形態では、組成物は溶液中に溶かしたＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含む。本発明の文脈で使用した用語「水性」とは、溶媒が水である溶液、および／または外部相が水である懸濁液、および／または分散相もしくは連続相が水であるエマルジョンを意味する。
【0059】
本発明の第１の態様の別の実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質および上述の実施形態のいずれか１つに記載されたＲ１－ＣＯＯＨを含み、組成物のｐＨは、約ｐＨ６～約ｐＨ９、約ｐＨ６～約ｐＨ８、約ｐＨ６～約ｐＨ７．５、または約ｐＨ６．４～約ｐＨ７．５の範囲内である。本発明の第１の態様の別の実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質および上述の実施形態のいずれか１つに記載されたＲ１－ＣＯＯＨを含み、組成物のｐＨは、ｐＨ６～ｐＨ９、ｐＨ６～ｐＨ８、ｐＨ６～ｐＨ７．５、またはｐＨ６．４～ｐＨ７．５の範囲内である。好ましい実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質および上述の実施形態のいずれか１つに記載されたＲ１－ＣＯＯＨを含み、組成物のｐＨは、ｐＨ６．４～ｐＨ７．５の範囲内である。さらにより好ましい実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質および上述の実施形態のいずれか１つに記載されたＲ１－ＣＯＯＨを含み、組成物のｐＨは、ｐＨ６～ｐＨ７．２の範囲内である。ＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩の組成物が指示したｐＨ値とは異なるｐＨを有する場合、それぞれの所望のｐＨは、ＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩に加えて、適切な量の緩衝液を添加することによって達成される。適切な緩衝物質は当業界では周知で、以下にもさらに記載されている。
【0060】
本発明の文脈で使用したように、ＭＨＣタンパク質はペプチドに結合していてもよい。したがって、組成物は、（ｉ）主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質、（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩を含んでもよく、Ｒ１は置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルであり、ペプチドは前記ＭＨＣタンパク質に結合している。さらに、キットは、（ｉ）ＭＨＣタンパク質、（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩、およびペプチドを含んでもよい。好ましい実施形態では、ＭＨＣタンパク質にはペプチドが結合していない。言い換えると、ＭＨＣタンパク質は本質的にペプチドを含まない。さらに好ましい実施形態では、ＭＨＣタンパク質はペプチドを含まない。
【0061】
本発明の第１の態様の別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、組成物は水溶液であり、ＡＣＥＳ、ＡＤＡ、ＢＥＳ、ビス－トリスプロパン、ＤＩＰＳＯ、ＥＰＰＳ、ＨＥＰＰＳＯ、イミダゾール、ＭＯＢＳ、ＭＥＳ、ビス－トリス、ＭＯＰＳ、トリス、ＭＯＰＳＯ、リン酸、ＰＩＰＥＳ、ＰＯＰＳＯ、ＴＡＰＳＯ、ＴＥＡ、ＴＥＳ、トリシン、またはＨＥＰＥＳ緩衝液からなる群から選択される緩衝物質を含む。好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣおよびＲ１－ＣＯＯＨを含み、組成物は水溶液であり、緩衝物質ＭＥＳ、ビス－トリス、ＭＯＰＳ、ＨＥＰＥＳ、またはトリスを含む。さらにより好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、組成物は水溶液であり、ＨＥＰＥＳ緩衝液を含む。
【0062】
本発明の第１の態様の別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は安定性が増大している。好ましくは、組成物は水溶液である。Ｒ１－ＣＯＯＨによって安定化したＭＨＣタンパク質を含む組成物は通常、Ｒ１－ＣＯＯＨを含まない前記ＭＨＣタンパク質を含む組成物と比較される。「増大した安定性」または「改善した安定性」または「安定化した」などの用語は、タンパク質の天然の状態（例えば、タンパク質の３次元構造）が改善され、および／または有利になるように、タンパク質の平衡状態を増大および／または改善する能力を意味する。安定化されたＭＨＣタンパク質は、リフォールディング、精製、滅菌、輸送、または貯蔵などの工程中を含むタンパク質の寿命中に、凝集が少なくなる可能性がある。したがって、本発明の第１の態様の組成物による安定化されたＭＨＣタンパク質は、より長い貯蔵寿命を実現することができる。特に好ましい実施形態では、本発明の第１の態様の組成物による安定化されたＭＨＣタンパク質は、融解温度（Ｔｍ）が高い。したがって、特に好ましい実施形態では、用語「ＭＨＣタンパク質の安定化」またはその文法的変化形は、融解温度（Ｔｍ）が高いＭＨＣタンパク質を意味する。
【0063】
ある特定の実施形態では、本発明の文脈で使用した用語「安定性」は、タンパク質の化学的および／または物理的安定性を意味することができる。いずれも、特に、溶媒、ｐＨ値、および／またはその他の賦形剤または界面活性剤などの添加物、組成物中の塩またはその他の低分子などのパラメータに左右される。ＭＨＣタンパク質は、言い換えると、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質の化学的および／または物理的安定性の増大をもたらすＲ１－ＣＯＯＨの添加によって安定化され得る。
【0064】
本発明の文脈で使用した「物理的安定性」とは、タンパク質の化学的組成を変化させないタンパク質の安定性に関し、変性、例えば、温度上昇、表面吸着、タンパク質の凝集および／または沈殿などの方法を含む。ある特定の実施形態では、Ｒ１－ＣＯＯＨによって安定化されたＭＨＣタンパク質は、リフォールディング、精製、滅菌、輸送、または貯蔵などの工程中を含むタンパク質の寿命中に、凝集が少なくなることが想定される。タンパク質凝集は、特に、目視または顕微鏡検査、例えば、蛍光顕微鏡、超遠心分離、質量分析、伝導率による粒子カウント（ｃｏｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙ－ｂａｓｅｄ ｐａｒｔｉｃｌｅ ｃｏｕｎｔ）、レーザー回折、サイズ排除クロマトグラフィー、または電気泳動によって測定され得る。したがって、Ｒ１－ＣＯＯＨによって安定化されたＭＨＣタンパク質を含む本発明の第１の態様の組成物は、ＭＨＣタンパク質の物理的安定性の増大を示す可能性があり、半減期の延長を示して貯蔵安定性の増大をもたらす可能性がある。貯蔵安定性は、例えば、４℃、室温、または４０℃で評価され得る。好ましくは、ＭＨＣタンパク質は、４℃で貯蔵安定性の増大を示す。
【0065】
本発明の文脈で使用したタンパク質の「化学的安定性」とは、直接的または間接的な効果としてタンパク質の化学構造の変化を意味することができる。化学的安定性の例は、ペプチド結合の加水分解、アミノ酸残基の脱アミド、例えば、溶液または固体状態のアスパラギン（Ｎ）残基の脱アミド、グルタミン（Ｑ）残基の脱アミド、スクシニミド形成、アミノ酸残基、例えば、アスパラギン酸（Ｄ）の異性化、アスパラギン酸（Ｄ）またはトリプトファン（Ｗ）の加水分解、ラセミ化、β－脱離および酸化であってもよい。ある特定の実施形態では、Ｒ１－ＣＯＯＨによって安定化されたＭＨＣタンパク質は、前記ＭＨＣタンパク質を含むがＲ１－ＣＯＯＨを含まない組成物と比較して化学的安定性の増大を示すことが想定される。
【0066】
別の実施形態では、Ｒ１－ＣＯＯＨによって安定化されたＭＨＣタンパク質を含む本発明の第１の態様の組成物は、化学的安定性の増大および物理的安定性、例えば、４℃での貯蔵安定性の増大を示す可能性がある。別の実施形態では、本発明の第１の態様の組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣタンパク質の融解温度（Ｔｍ）が少なくとも０．５℃、１．０℃、１．５℃、２．０℃、２．５℃、３．０℃、３．５℃、４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、または６．０℃上昇している。別の実施形態では、本発明の第１の態様の組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質はＲ１－ＣＯＯＨによって安定化されており、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質の融解温度は少なくとも０．５℃、１．０℃、１．５℃、２．０℃、２．５℃、３．０℃、３．５℃、４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、または６．０℃上昇している。好ましくは、Ｒ１－ＣＯＯＨは、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質の融解温度が少なくとも０．５℃、１．０℃、１．５℃、２．０℃、２．５℃、３．０℃、３．５℃、４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、または６．０℃上昇する濃度で、本発明の第１の態様の組成物中に含まれるか、または添加される。
【0067】
本発明の第１の態様の別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩を含み、組成物は水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は融解温度（Ｔｍ）が上昇しており、（ａ）による組成物中のＭＨＣタンパク質のＴｍが（ｂ）による組成物中のＭＨＣタンパク質のＴｍよりも高い場合、前記ＭＨＣタンパク質のＴｍは上昇している：
（ａ）ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなる水性組成物、
（ｂ）（ａ）と同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなる水性組成物。
（ａ）ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなる水性組成物、
（ｂ）（ａ）と同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなる水性組成物。
【0068】
本発明の第１の態様の好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩を含み、組成物は水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、ＭＨＣタンパク質の融解温度（Ｔｍ）が上昇する量で組成物中に含まれており、（ａ）による組成物中のＭＨＣタンパク質のＴｍが（ｂ）による組成物中のＭＨＣタンパク質のＴｍよりも高い場合、前記ＭＨＣタンパク質のＴｍは上昇している：
（ａ）ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなる水性組成物、
（ｂ）（ａ）と同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなる水性組成物。
（ａ）ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなる水性組成物、
（ｂ）（ａ）と同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなる水性組成物。
【0069】
両方の組成物（ａ）および（ｂ）におけるＭＨＣタンパク質は、ペプチド、例えば、ジペプチドに結合していない。したがって、ＭＨＣは本質的にペプチドを含まない。本発明の文脈で使用した「本質的にペプチドを含まない」とは、あったとしても残留量のペプチドがＭＨＣタンパク質に結合していることを意味する。本質的にペプチドを含まないＭＨＣタンパク質は、実施例で示したように、例えば、サイズ排除クロマトグラフィーによって、ペプチド（例えば、ジペプチド）を除去することによって得られ得る。Ｔｍはまた、以下の実施例に挙げた方法によって決定され得る。例えば、Ｔｍの上昇は、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ７５００リアルタイムＰＣＲ装置において、２０ｍＭトリスｐＨ８．０の緩衝液、または別の緩衝液、例えば、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、ＮａＣｌ １５０ｍＭおよびＲ１－ＣＯＯＨもしくはその塩中で、タンパク質濃度０．１ｍｇ／ｍｌで、Ｒ１－ＣＯＯＨもしくはその塩の代わりに水を含む同じ緩衝液と比較して決定され得る。この方法では、ＭＨＣを安定化するＲ１－ＣＯＯＨ、脂肪酸、グリセロール、ペプチドなどの添加物は溶液中に存在していない。以下のＴｍ上昇は、上述の方法によって決定され得る。本明細書では、組成物の融解温度は、少なくとも０．５℃、１．０℃、１．５℃、２．０℃、２．５℃、３．０℃、３．５℃、４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、または６．０℃上昇していることが好ましい。さらにより好ましい実施形態では、組成物の融解温度は、少なくとも０．５℃、１．０℃、１．５℃、２．０℃、２．５℃、３．０℃、３．５℃、４．０℃、４．５℃、または５．０℃上昇している。融解温度の上昇は、通常２つの試料の比較によって決定され、例えば、Ｔｍは、特に、ＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩を含む組成物を含む試料において決定され、特に、ＭＨＣタンパク質、好ましくは同一のＭＨＣタンパク質を含むが、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩を含まない組成物、または前述の（ｂ）による組成物を含む試料において決定されたＴｍと比較される。用語「融解温度（Ｔｍ）」は、本発明の文脈では、温度勾配において最大のタンパク質アンフォールディング率が観察される温度を意味する。Ｔｍを決定することができる方法の一例が実施例に記載されている。ポリペプチドまたはタンパク質がＴｍに達すると、タンパク質フォールディングまたはアンフォールディングの自由エネルギー変化ΔＧはゼロに等しくなる。この点で、ポリペプチドまたはタンパク質分子は、アモルファス状態に消滅し、タンパク質鎖はそれ自体でリフォールディングすることはできない。一般的な経験則では、Ｔｍの上昇は安定性の最大自由エネルギーデルタＧ（Ｔ＊）の増加に関連する。全般的に、Ｔｍが高いタンパク質またはポリペプチドは、Ｔｍ値が低いものよりも安定している。熱安定性の増大は、タンパク質変性の減少、したがって、例えば、前記タンパク質の貯蔵状態の改善をもたらす。実施例で示したように、サーマルシフトアッセイ（ＴＳＡ）は、タンパク質の熱安定性および安定化剤が結合したときのタンパク質融解温度（Ｔｍ）の上昇を測定するために使用することができる。このアッセイでは、タンパク質変性は、タンパク質がアンフォールドするときに露出する疎水性残基に結合する色素ＳＹＰＲＯ Ｏｒａｎｇｅの蛍光の増加を介して、温度勾配についてモニターされる。タンパク質に結合する安定化化合物は、安定性を増大させ、Ｔｍを上昇させる。例示的方法としてのＴＳＡは、本明細書では２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７．０においてＴｍを決定するための以下の添付の実施例において開示されている。好ましくは、Ｔｍは示差走査蛍光測定法（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｆｌｕｏｒｉｍｅｔｒｙ）（ＤＳＦ）を使用してＴＳＡによって決定される。特に、Ｔｍは、ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７．０において、加熱上昇速度０．５℃／分、タンパク質の濃度０．１ｍｇ／ｍｌで、ＤＳＦを使用したＴＳＡによって決定される。タンパク質安定性は、３０℃から７０℃の温度範囲にわたってモニターされた。蛍光色素ＳＹＰＲＯ ｏｒａｎｇｅ（Ｂｉｏｗｏｒｌｄ、５×濃度で使用した）の蛍光は、新たな温度で３０秒平衡化した後で測定された。分析したタンパク質のデルタＴｍ値は計算することができる。融解温度に関して互いに比較される組成物は、リガンドもしくは任意の安定化剤、安定化添加物、化合物もしくは補助因子などの融解温度を上昇させる効果に必須であると考えられる成分または分析物以外は、同一の成分を含むことが好ましい。例えば、ＭＨＣタンパク質を含むが、前記ＭＨＣタンパク質に結合したペプチドを含まない組成物は、前記ＭＨＣタンパク質に結合したペプチドもＲ１－ＣＯＯＨも含まないＭＨＣタンパク質と比較しなければならない。ＭＨＣタンパク質およびペプチド、好ましくは前記ＭＨＣタンパク質に結合したローディングペプチドを含む組成物は、前記ＭＨＣタンパク質に結合したペプチド、好ましくはローディングペプチドおよびＲ１－ＣＯＯＨを含むＭＨＣタンパク質と比較しなければならないことがさらに想定される。
【0070】
本発明の第１の態様の別の実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなる水溶液である組成物と比較して融解温度（Ｔｍ）が上昇しており、組成物の融解温度は、少なくとも０．５℃、１．０℃、１．５℃、２．０℃、２．５℃、３．０℃、３．５℃、４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、または６．０℃上昇している。好ましくは、Ｒ１－ＣＯＯＨは、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質の融解温度が少なくとも０．５℃、１．０℃、１．５℃、２．０℃、２．５℃、３．０℃、３．５℃、４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、または６．０℃上昇する濃度で、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液中に含まれる。
【0071】
一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較してＴｍが上昇しており、組成物の融解温度は、少なくとも０．５℃上昇している。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較してＴｍが上昇しており、組成物の融解温度は、少なくとも１．０℃上昇している。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較してＴｍが上昇しており、組成物のＴｍは、少なくとも１．５℃上昇している。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣは、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較してＴｍが上昇しており、組成物のＴｍは、少なくとも２．０℃上昇している。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較してＴｍが上昇しており、組成物のＴｍは、少なくとも２．５℃上昇している。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較してＴｍが上昇しており、組成物の融解温度は、少なくとも３．０℃上昇している。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較してＴｍが上昇しており、組成物のＴｍは、少なくとも３．５℃上昇している。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較してＴｍが上昇しており、組成物のＴｍは、少なくとも４．０℃上昇している。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較してＴｍが上昇しており、組成物のＴｍは、少なくとも４．５℃上昇している。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較してＴｍが上昇しており、組成物のＴｍは、少なくとも５．０℃上昇している。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較してＴｍが上昇しており、組成物のＴｍは、少なくとも５．５℃上昇している。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、同じＭＨＣおよび２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較してＴｍが上昇しており、組成物のＴｍは、少なくとも６．０℃上昇している。好ましい実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較してＴｍが上昇しており、組成物のＴｍは、少なくとも４．５℃または５．５℃上昇している。
【0072】
一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質が、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較して少なくとも０．５℃上昇したＴｍを有する量で、組成物中に含まれる。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質が、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較して少なくとも１．０℃上昇したＴｍを有する量で、組成物中に含まれる。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質が、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較して少なくとも１．５℃上昇したＴｍを有する量で、組成物中に含まれる。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質が、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較して少なくとも２．０℃上昇したＴｍを有する量で、組成物中に含まれる。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質が、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較して少なくとも２．５℃上昇したＴｍを有する量で、組成物中に含まれる。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質が、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較して少なくとも３．０℃上昇したＴｍを有する量で、組成物中に含まれる。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質が、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較して少なくとも３．５℃上昇したＴｍを有する量で、組成物中に含まれる。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質が、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較して少なくとも４．０℃上昇したＴｍを有する量で、組成物中に含まれる。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質が、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較して少なくとも４．５℃上昇したＴｍを有する量で、組成物中に含まれる。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質が、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較して少なくとも５．０℃増加したＴｍを有する量で、組成物中に含まれる。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質が、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較して少なくとも５．５℃上昇したＴｍを有する量で、組成物中に含まれる。一実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質が、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較して少なくとも６．０℃上昇したＴｍを有する量で、組成物中に含まれる。好ましい実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む水溶液であり、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩は、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質が、同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなるか、または含む水溶液である組成物と比較して少なくとも４．５℃または少なくとも５．５℃上昇したＴｍを有する量で、組成物中に含まれる。
【0073】
ＭＨＣタンパク質は、ペプチドが存在していなくても本発明の組成物において特に安定しているため、本発明の第１の態様のＭＨＣタンパク質は、好ましい一実施形態ではペプチドに結合していない。本発明の第１の態様の組成物におけるＭＨＣタンパク質は、適切にフォールドされており、ペプチド、好ましくはＭＨＣ－ＩペプチドまたはＭＨＣ－ＩＩペプチドの直接ローディングが可能である。
【0074】
驚くべきことに、本発明者らによって、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩の安定化効果が、ペプチドをＭＨＣにロードする安定化効果と組み合わさることが見出された。驚くべきことに、両方の効果はほぼ相加的であることが観察された。したがって、第１の態様の組成物のＭＨＣタンパク質はまた、ペプチドに結合していてもよい。このペプチドはローディングペプチド、および／または前記ＭＨＣタンパク質に結合したＭＨＣ－ＩまたはＭＨＣＩＩペプチドであってもよい。したがって、一実施形態では、本発明の第１の態様の組成物のＭＨＣタンパク質は、例えば、本発明の第１の態様の組成物におけるＭＨＣをさらに安定化するローディングペプチドに結合している。好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびジペプチドであるローディングペプチドを含む。さらにより好ましくは、組成物はＭＨＣタンパク質およびＧＭ、ＧＹ、ＧＬ、またはＧＦからなる群から選択されるローディングペプチドを含む。最も好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびローディングペプチドＧＭを含む。別の実施形態では、第一の発明の組成物はＭＨＣ－ＩまたはＭＨＣ－ＩＩペプチドを含む。別の実施形態では、組成物はローディングペプチドおよびＭＨＣ－ＩまたはＭＨＣ－ＩＩペプチドを含む。
【0075】
本発明の第１の態様のこの実施形態では、組成物は、ペプチドに結合した、好ましくはローディングペプチドに結合したＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含み、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質は同じＭＨＣタンパク質を含むか、またはそれからなる組成物と比較して融解温度（Ｔｍ）が上昇しており、組成物の融解温度は、４℃～１２℃、好ましくは少なくとも４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、６．０℃、６．５℃、７．０℃、７．５℃、８．０℃、８．５℃、９．０℃、９．５℃、１０．０℃、１０．５℃、１１．０℃、１１．５℃、または１２℃上昇している。好ましくは、Ｒ１－ＣＯＯＨは、組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質の融解温度を少なくとも４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、６．０℃、６．５℃、７．０℃、７．５℃、８．０℃、８．５℃、９．０℃、９．５℃、１０．０℃、１０．５℃、１１．０℃、１１．５℃、または１２℃上昇させる量で、ペプチド、好ましくはローディングペプチドに結合したＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなるか、または含む組成物中に含まれるか、または添加される。この文脈では、Ｒ１－ＣＯＯＨは、脂肪酸、好ましくは天然に存在する脂肪酸であることが好ましい。より好ましくは、脂肪酸は３～９個の炭素原子を含む。さらにより好ましくは、脂肪酸は３～８または４～８個の炭素原子を含む。最も好ましくは、脂肪酸は５～７個の炭素原子を含む。この文脈では、Ｒ１－ＣＯＯＨは、Ｃ３～Ｃ２１－アルキル、好ましくはプロパン酸、ｎ－ブタン酸、イソ－ブタン酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ウンデカン酸、ドデカン酸、トリデカン酸、テトラデカン酸、ペンタデカン酸、ヘキサデカン酸、ヘプタデカン酸、オクタデカン酸、ノナデカン酸、エイコサン酸、ヘンエイコサン酸、またはドコサン酸からなる群から選択されるＣ２～２１－アルキル－ＣＯＯＨであることも好ましい。好ましくは、Ｒ１－ＣＯＯＨ、好ましくは上述のＲ１－ＣＯＯＨの濃度は、約５ｍＭ～約１００ｍＭ、約１０ｍＭ～約８０ｍＭ、約１５ｍＭ～約７０ｍＭ、約２０ｍＭ～約６０ｍＭ、約２５ｍＭ～約５０ｍＭ、約３０ｍＭ～約４０ｍＭ、または約３０ｍＭ～約３５ｍＭである。好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨの濃度は、約５ｍＭ～約１００ｍＭ、約１０ｍＭ～約８０ｍＭ、約１５ｍＭ～約７０ｍＭ、約２０ｍＭ～約６０ｍＭ、または約２５ｍＭ～約５０ｍＭである。最も好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、Ｒ１－ＣＯＯＨの濃度は約５０ｍＭである。
【0076】
好ましくは、脂肪酸は、好ましくは約２０～６０ｍＭの濃度の、酪酸、吉草酸、ヘプタン酸、およびヘキサン酸からなる群から選択される少なくとも１つである。好ましくは、脂肪酸は、好ましくは約８０～１５０ｍＭの濃度のプロピオン酸である。好ましくは、脂肪酸は、好ましくは約５～６０ｍＭの濃度のオクタン酸である。
【0077】
別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣタンパク質はＭＨＣＩまたはＭＨＣＩＩである。好ましい実施形態では、ＭＨＣタンパク質はヒト白血球抗原（ＨＬＡ）である。別の好ましい実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣＩ、ＭＨＣＩＩ、またはＨＬＡの多量体である。ＭＨＣＩ多量体は、二量体、三量体、または四量体であることが好ましい。ＭＨＣＩＩ多量体は、二量体、三量体、または四量体であることが好ましい。ＨＬＡ多量体は、二量体、三量体、または四量体であることがさらにより好ましい。
【0078】
人工ジスルフィド架橋を含む安定化されたＭＨＣタンパク質については記載されたことがある（全体を本明細書に参考として組み込んだ国際公開第２０２０／０５３３９８号パンフレット）。驚くべきことに、人工ジスルフィド架橋によって安定化されたＭＨＣタンパク質はまた、本発明の第１の態様の組成物中に含まれるならば、さらに安定化されることが本発明の発明者らによって見出された。
【0079】
別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣＩの場合、ＭＨＣは、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの１アミノ酸とアルファ２ドメインの１アミノ酸との間で安定化されている。別の実施形態では、組成物はＭＨＣおよびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣＩの場合、ＭＨＣは、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの２アミノ酸の間で安定化されている。別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣＩの場合、ＭＨＣタンパク質は、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの１アミノ酸とアルファ２ドメインの１アミノ酸との間、およびＭＨＣＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの２アミノ酸の間で安定化されている。別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣＩＩの場合、ＭＨＣタンパク質は、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインまたはベータ１ドメインの２アミノ酸の間、およびＭＨＣＩＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの１アミノ酸の間とベータ１ドメインの１アミノ酸との間で安定化されている。
【0080】
好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣＩの場合、ＭＨＣタンパク質は、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの１アミノ酸とアルファ２ドメインの１アミノ酸との間の１つの共有結合によって安定化されている。別の好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣＩの場合、ＭＨＣタンパク質は、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの２アミノ酸の間の１つの共有結合によって安定化されている。別の好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣＩの場合、ＭＨＣタンパク質は、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの１アミノ酸とアルファ２ドメインの１アミノ酸との間の１つの共有結合によって、およびＭＨＣＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの２アミノ酸の間の１つの共有結合によって安定化されている。別の好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣＩＩの場合、ＭＨＣタンパク質は、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインまたはベータ１ドメインの２アミノ酸の間の１つの共有結合によって、およびＭＨＣＩＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの１アミノ酸とベータ１ドメインの１アミノ酸との間の１つの共有結合によって安定化されている。
【0081】
別の好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣタンパク質は、α－ヘリックス間の１つの共有結合によって安定化されている。より好ましくは、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣＩのＩＭＧＴ８４位のシステインとＩＭＧＴ１３９位のシステインとの間の１つの共有結合によって、またはＩＭＧＴ５１位のシステインとＩＭＧＴ１７５位のシステインとの間の１つの共有結合によって安定化されている。別の好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣＩのアルファドメインのα－ヘリックスとβ－シートとの間の１つの共有結合によって安定化されている。より好ましくは、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣタンパク質はＭＨＣＩのＩＭＧＴ７１位のシステインとＭＨＣＩのＩＭＧＴ２２位のシステインとの間の１つの共有結合によって安定化されている。別の好ましい実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣタンパク質は、α－ヘリックスとβ－シートと間の１つの共有結合によって安定化されている。より好ましくは、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣＩのＩＭＧＴ７１位のシステインとＭＨＣＩのＩＭＧＴ２２位のシステインとの間の１つの共有結合によって、およびＭＨＣＩのＩＭＧＴ５１位のシステインとＭＨＣＩのＩＭＧＴ１７５位のシステインとの間の１つの共有結合によって安定化されている。より好ましくは、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣＩのＩＭＧＴ７１位のシステインとＭＨＣＩのＩＭＧＴ２２位のシステインとの間の１つの共有結合によって安定化されているか、またはＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣＩのＩＭＧＴ８４位のシステインとＩＭＧＴ１３９位のシステインとの間の１つの共有結合によって安定化されている。本発明の第１の態様の別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、ＨＬＡ－Ｇ、ＨＬＡ－Ｊ、ＨＬＡ－Ｋ、およびＨＬＡ－Ｌからなる群から選択される。好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－ＡおよびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ１、ＨＬＡ－Ａ２、ＨＬＡ－Ａ３、およびＨＬＡ－Ａ１１からなる群から選択される。好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－ＡおよびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ＊０２、ＨＬＡ－Ａ＊０１、またはＨＬＡ－Ａ＊０３からなる群から選択される。さらにより好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－ＡおよびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ－Ａ＊０１：０１、またはＨＬＡ－Ａ＊０３：０１からなる群から選択される。最も好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびＲ１－ＣＯＯＨを含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－ＢおよびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＨＬＡ－Ｂは、ＨＬＡ－Ｂ＊０７、ＨＬＡ－Ｂ＊０８、ＨＬＡ－Ｂ＊１５、ＨＬＡ－Ｂ＊３５、およびＨＬＡ－Ｂ＊４４からなる群から選択される。より好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－ＢおよびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＨＬＡ－Ｂは、ＨＬＡ－Ｂ＊０７：０２、ＨＬＡ－Ｂ＊０８：０１、ＨＬＡ－Ｂ＊１５：０１、ＨＬＡ－Ｂ＊３５：０１、ＨＬＡ－Ｂ＊４４：０３、およびＨＬＡ－Ｂ＊４４：０５からなる群から選択される。
【0082】
本発明の第１の態様の別の実施形態では、組成物はＭＨＣタンパク質およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、１つまたは複数のＭＨＣタンパク質が複合体に含まれている。本発明の文脈において、用語「複合体」とは、二量体、三量体、四量体、または多量体などの高次のＭＨＣタンパク質を意味する。好ましい実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質四量体およびＲ１－ＣＯＯＨを含む。好ましい実施形態では、組成物は、ＭＨＣタンパク質四量体およびＲ１－ＣＯＯＨを含み、ＭＨＣタンパク質は、ビーズ、フィラメント、ナノ粒子、またはその他の担体に結合している。
【0083】
好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびプロピオン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および酪酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびペンタン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびヘキサン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびヘプタン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびオクタン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびノナン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および２－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびイソペンタン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩を含む。
【0084】
好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびプロピオン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および酪酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびペンタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびヘキサン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびヘプタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびオクタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびノナン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および２－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびイソペンタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。
【0085】
好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびプロピオン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および酪酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびヘキサン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびヘプタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびオクタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびノナン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および２－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびイソペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。実施例で示したように、ＭＯＰＳまたはＭＥＳなどのその他の緩衝液が本発明では使用され得る。さらに、緩衝液の濃度は変更可能で、当業者は実施例で記載したようなスクリーニング方法を考慮して緩衝液の濃度を適合させることができる。
【0086】
好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびプロピオン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および酪酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびヘキサン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびヘプタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびオクタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびノナン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および２－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。さらにより好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびイソペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別のより好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。
【0087】
好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および１００ｍＭプロピオン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および５０ｍＭ酪酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および５０ｍＭペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および５０ｍＭヘキサン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および２～５０ｍＭヘプタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および１０ｍＭオクタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および５ｍＭノナン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および２～５０ｍＭヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および５０ｍＭ ３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および５０ｍＭ ５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。さらにより好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および５０ｍＭイソペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別のより好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および５０ｍＭ ４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。
【0088】
用語「ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９」が使用される以下のそれぞれの場合では、これは配列番号１によるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＨＬＡを意味する。
【0089】
好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびプロピオン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および酪酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびペンタン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびヘキサン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびヘプタン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびオクタン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびノナン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および２－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびイソペンタン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩を含む。
【0090】
好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびプロピオン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および酪酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびペンタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびヘキサン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびヘプタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびオクタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびノナン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および２－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびイソペンタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。
【0091】
好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびプロピオン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および酪酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびヘキサン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびヘプタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびオクタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびノナン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および２－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびイソペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含む。
【0092】
好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびプロピオン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および酪酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびヘキサン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびヘプタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびオクタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびノナン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および２－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９およびイソペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。
【0093】
好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および１００ｍＭプロピオン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および５０ｍＭ酪酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および５０ｍＭペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および５０ｍＭヘキサン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および２～５０ｍＭヘプタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および１０ｍＭオクタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および５ｍＭノナン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および２～５０ｍＭヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および５０ｍＭ ３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および５０ｍＭ ５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。さらにより好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および５０ｍＭイソペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別のより好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９および５０ｍＭ ４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。
【0094】
用語「ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１」が使用される以下のそれぞれの場合では、これは配列番号２によるアミノ酸配列を含むかそれからなるＨＬＡを意味する。
【0095】
好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびプロピオン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および酪酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびペンタン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびヘキサン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびヘプタン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびオクタン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびノナン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および２－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびイソペンタン酸またはそのナトリウム塩を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩を含む。
【0096】
好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびプロピオン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および酪酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびペンタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびヘキサン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびヘプタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびオクタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびノナン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１および２－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびイソペンタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。別の好ましい実施形態では、組成物はＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩の水溶液を含む。
【0097】
好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびプロピオン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および酪酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびヘキサン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびヘプタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびオクタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびノナン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および２－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびイソペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなる。
【0098】
好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびプロピオン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および酪酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびヘキサン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびヘプタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびオクタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびノナン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および２－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１およびイソペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。
【0099】
好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および１００ｍＭプロピオン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および５０ｍＭ酪酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および５０ｍＭペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および５０ｍＭヘキサン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および２～５０ｍＭヘプタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および１０ｍＭオクタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および５ｍＭノナン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および２～５０ｍＭヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および５０ｍＭ ３－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別の好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および５０ｍＭ ５－ヘキセン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。さらにより好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および５０ｍＭイソペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。別のより好ましい実施形態では、組成物は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１および５０ｍＭ ４－メチルペンタン酸またはそのナトリウム塩および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液の水溶液を含むかまたはそれらからなり、溶液はｐＨ７である。
【0100】
第２の態様では、本発明は、ＭＨＣタンパク質を安定化するために、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩の使用にさらに関し、Ｒ１は置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである。好ましくは、Ｒ１は置換されておらず、本発明の第１の態様の組成物において安定化剤として使用される。本発明の第１の態様の組成物の文脈において具体的に開示された実施形態は全て、本発明の第２の態様によるＭＨＣタンパク質を安定化するために使用されていてもよく、または本発明の第２の態様の文脈において具体的に開示された任意の実施形態と組み合わせてもよい。
【0101】
本発明の第３の態様は、ＭＨＣタンパク質またはそのペプチド結合断片を安定化するための方法に関する。ある特定の実施形態では、この方法は、以下の工程：
（ｉ）ＭＨＣタンパク質またはそのペプチド結合断片を提供する工程、
（ｉｉ）前記ＭＨＣタンパク質をＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩と接触させる工程
を含み、
Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである。
（ｉ）ＭＨＣタンパク質またはそのペプチド結合断片を提供する工程、
（ｉｉ）前記ＭＨＣタンパク質をＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩と接触させる工程
を含み、
Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである。
【0102】
好ましい実施形態では、この方法は、
（ｉ）ＭＨＣタンパク質またはそのペプチド結合断片を含む溶液を提供すること、
（ｉｉ）前記溶液と前記Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩を接触させること
を含み、
Ｒ１は置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである。一実施形態では、ＭＨＣタンパク質またはそのペプチド結合断片を含む溶液は水溶液である。
（ｉ）ＭＨＣタンパク質またはそのペプチド結合断片を含む溶液を提供すること、
（ｉｉ）前記溶液と前記Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩を接触させること
を含み、
Ｒ１は置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである。一実施形態では、ＭＨＣタンパク質またはそのペプチド結合断片を含む溶液は水溶液である。
【0103】
ＭＨＣタンパク質またはそのペプチド結合断片はフォールドされていてもフォールドされていなくてもよい。したがって、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩も含めて、溶液中におけるＭＨＣタンパク質またはそのペプチド結合断片の正確なフォールディングを容易にしてもよく、ペプチド、例えば、ローディングペプチドがフォールディング反応に含まれていてもよい。好ましくは、溶液中におけるＭＨＣタンパク質またはそのペプチド結合断片はフォールドされていて、本質的にペプチドを含まない。一実施形態では、溶液中におけるＭＨＣタンパク質またはそのペプチド結合断片はペプチドを含まない。本発明の第１の態様の組成物の文脈において具体的に開示された実施形態は全て、本発明の第３の態様によるＭＨＣタンパク質またはそのペプチド結合断片を安定化するための方法において使用されてもよく、または本発明の第３の態様の文脈において具体的に開示された任意の実施形態と組み合わせてもよい。
【0104】
本発明の第４の態様では、
（ｉ）ＭＨＣタンパク質、および
（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨもしくはその塩であって、Ｒ１が置換されているかもしくは置換されていないヒドロカルビルである塩、または
（ｉｉｉ）本発明の第１の態様の組成物
を含むキットに関する。
（ｉ）ＭＨＣタンパク質、および
（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨもしくはその塩であって、Ｒ１が置換されているかもしくは置換されていないヒドロカルビルである塩、または
（ｉｉｉ）本発明の第１の態様の組成物
を含むキットに関する。
【0105】
好ましくは、Ｒ１は置換されていないヒドロカルビルである。キットは１つまたは複数のペプチドをさらに含んでいてもよい。本発明の第１の態様の組成物の文脈において具体的に開示された実施形態は全て、本発明の第４の態様によるキットに含まれていてもよく、または本発明の第４の態様の文脈において具体的に開示された任意の実施形態と組み合わせてもよい。
【0106】
上記で概説した実施形態によれば、本発明は好ましくは以下の項目に関する。
１．（ｉ）主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質、および
（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩、好ましくはナトリウム塩
を含み、
Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである組成物。
１．（ｉ）主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質、および
（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩、好ましくはナトリウム塩
を含み、
Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである組成物。
【0107】
２．ヒドロカルビルがＣ２～Ｃ２１－ヒドロカルビル、好ましくは直鎖Ｃ２～２１－アルキル、分岐Ｃ３～２１－アルキル、直鎖Ｃ２～２１－アルケニル、分岐Ｃ３～２１－アルケニル、直鎖Ｃ２～２１－アルキニル、または分岐Ｃ４～２１－アルキニルである、項目１に記載の組成物。
【0108】
３．（ｉ）直鎖Ｃ２～２１－アルキルが、直鎖Ｃ２～８－アルキル、Ｃ２～７－アルキル、Ｃ３～７－アルキル、またはＣ４～６－アルキル、好ましくはエチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、またはオクチルであり、
（ｉｉ）分岐Ｃ３～２１－アルキルが、分岐Ｃ３～８－アルキル、分岐Ｃ３～７－アルキル、分岐Ｃ４～６－アルキル、好ましくはイソ－プロピル、イソ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、１－メチル－ブチル、２－メチル－ブチル、３－メチル－ブチル、１，１－ジメチル－プロピル、２，２－ジメチル－プロピル、１－エチル－プロピル、１－メチル－ペンチル、２－メチル－ペンチル、３－メチル－ペンチル、４－メチル－ペンチル、１，１－ジメチル－ブチル、１，２－ジメチル－ブチル、１，３－ジメチル－ブチル、２，２－ジメチル－ブチル、２，３－ジメチル－ブチル、３，３－ジメチル－ブチル、１－エチル－ブチル、２－エチル－ブチル、１，１，２－トリメチル－プロピル、１，２，２、トリメチル－プロピル、１－エチル－２－メチル－プロピル、１－メチル－ヘキシル、２－メチル－ヘキシル、３－メチル－ヘキシル、４－メチル－ヘキシル、５－メチル－ヘキシル、１，１－ジメチル－ペンチル、１，２－ジメチル－ペンチル、１，３－ジメチル－ペンチル、１，４－ジメチル－ペンチル、２，２－ジメチル－ペンチル、２，３－ジメチル－ペンチル、２，４－ジメチル－ペンチル、３，３－ジメチル－ペンチル、３，４－ジメチル－ペンチル、１－エチル－ペンチル、２－エチル－ペンチル、３－エチル－ペンチル、１，１，２－トリメチル－ブチル、１，１，３－トリメチル－ブチル、１，２，３－トリメチル－ブチル、１，２，２－トリメチル－ブチル、２，２，３－トリメチル－ブチル、１－メチル－１－エチル－ブチル、１－エチル－２－メチル－ブチル、１－エチル－３－メチル－ブチル、１－メチル－２－エチル－ブチル、２－メチル－２－エチル－ブチル、１－プロピル－ブチル、１－メチル－ヘプチル、２－メチル－ヘプチル、３－メチル－ヘプチル、４－メチル－ヘプチル、５－メチル－ヘプチル、６－メチル－ヘプチル、１，１－ジメチル－ヘキシル、１，２－ジメチル－ヘキシル、１，３－ジメチル－ヘキシル、１，４－ジメチル－ヘキシル、１，５－ジメチル－ヘキシル、２，２－ジメチル－ヘキシル、２，３－ジメチル－ヘキシル、２，４－ジメチル－ヘキシル、２，５－ジメチル－ヘキシル、３，３－ジメチル－ヘキシル、３，４－ジメチル－ヘキシル、３，５－ジメチル－ヘキシル、４，４－ジメチル－ヘキシル、４，５－ジメチル－ヘキシル、５，５－ジメチル－ヘキシル、１－エチル－ヘキシル、２－エチル－ヘキシル、３－エチル－ヘキシルまたは４－エチル－ヘキシルであり、
（ｉｉｉ）直鎖Ｃ２～２１－アルケニルが、直鎖Ｃ２～８－アルケニル、直鎖Ｃ２～７－アルケニル、直鎖Ｃ３～７－アルケニル、直鎖Ｃ４～６－アルケニル、好ましくはエテニル、１－プロペニル、２－プロペニル、１－ブテニル、２－ブテニル、３－ブテニル、１－ペンテニル、２－ペンテニル、３－ペンテニル、４－ペンテニル、１－ヘキセニル、２－ヘキセニル、３－ヘキセニル、４－ヘキセニル、５－ヘキセニル、１－ヘプテニル、２－ヘプテニル、１－ヘプテニル、４－ヘプテニル、５－ヘプテニル、５－ヘプテニル、６－ヘプテニル、１－オクテニル、２－オクテニル、３－オクテニル、４－オクテニル、５－オクテニル、６－オクテニル、または７－オクテニルであり、
（ｉｖ）分岐Ｃ３～２１－アルケニルが、分岐Ｃ３～８－アルケニル、分岐Ｃ３～７－アルケニル、分岐Ｃ４～６－アルケニル、好ましくはメチルエテニル、１－メチル－１－プロペニル、２－メチル－１－プロペニル、１－メチル－２－プロペニル、２－メチル－２－プロペニル、１－メチル－１－ブテニル、２－メチル－１－ブテニル、３－メチル－１－ブテニル、１－メチル－２－ブテニル、２－メチル－２－ブテニル、３－メチル－２－ブテニル、１－メチル－３－ブテニル、２－メチル－３－ブテニル、３－メチル－３－ブテニル、１，１－ジメチル－２－プロペニル、１，２－ジメチル－１－プロペニル、１，２－ジメチル－２－プロペニル、１－エチル－１－プロペニル、１－エチル－２－プロペニル、１－メチル－１－ペンテニル、２－メチル－１－ペンテニル、３－メチル－１－ペンテニル、４－メチル－１－ペンテニル、１－メチル－２－ペンテニル、２－メチル－２－ペンテニル、３－メチル－２－ペンテニル、４－メチル－２－ペンテニル、１－メチル－３－ペンテニル、２－メチル－３－ペンテニル、３－メチル－３－ペンテニル、４－メチル－３－ペンテニル、１－メチル－４－ペンテニル、２－メチル－４－ペンテニル、３－メチル－４－ペンテニル、４－メチル－４－ペンテニル、１，１－ジメチル－２－ブテニル、１，１－ジメチル－３－ブテニル、１，２－ジメチル－１－ブテニル、１，２－ジメチル－２－ブテニル、１，２－ジメチル－３－ブテニル、１，３－ジメチル－１－ブテニル、１，３－ジメチル－２－ブテニル、１，３－ジメチル－３－ブテニル、２，２－ジメチル－３－ブテニル、２，３－ジメチル－１－ブテニル、２，３－ジメチル－２－ブテニル、２，３－ジメチル－３－ブテニル、３，３－ジメチル－１－ブテニル、３，３－ジメチル－２－ブテニル、１－エチル－１－ブテニル、１－エチル－２－ブテニル、１－エチル－３－ブテニル、２－エチル－１－ブテニル、２－エチル－２－ブテニル、２－エチル－３－ブテニル、１，１，２－トリメチル－２－プロペニル、１－エチル－１－メチル－２－プロペニル、１－エチル－２－メチル－１－プロペニル、または１－エチル－２－メチル－２－プロペニルであり、
（ｖ）直鎖Ｃ２～２１－アルキニルが、直鎖Ｃ２～８－アルキニル、直鎖Ｃ２～７－アルキニル、直鎖Ｃ３～７－アルキニル、直鎖Ｃ４～６－アルキニル、好ましくは、エチニル、１－プロピニル、２－プロピニル、１－ブチニル、２－ブチニル、３－ブチニル、１－ペンチニル、２－ペンチニル、３－ペンチニル、４－ペンチニル、１－ヘキシニル、２－ヘキシニル、３－ヘキシニル、４－ヘキシニル、５－ヘキシニル、１－ヘプチニル、２－ヘプチニル、１－ヘプチニル、４－ヘプチニル、５－ヘプチニル、５－ヘプチニル、６－ヘプチニル、１－オクチニル、２－オクチニル、３－オクチニル、４－オクテニル、５－オクチニル、６－オクチニル、または７－オクチニルであるか、あるいは
（ｖｉ）分岐Ｃ４～２１－アルキニルが、分岐Ｃ４～８－アルキニル、分岐Ｃ３～８－アルキニル、分岐Ｃ４～６－アルキニル、好ましくは１－メチル－２－プロピニル、１－メチル－２－ブチニル、１－メチル－３－ブチニル、２－メチル－３－ブチニル、３－メチル－１－ブチニル、１，１－ジメチル－２－プロピニル、１－エチル－２－プロピニル、１－メチル－２－ペンチニル、１－メチル－３－ペンチニル、１－メチル－４－ペンチニル、２－メチル－３－ペンチニル、２－メチル－４－ペンチニル、３－メチル－１－ペンチニル、３－メチル－４－ペンチニル、４－メチル－１－ペンチニル、４－メチル－２－ペンチニル、１，１－ジメチル－２－ブチニル、１，１－ジメチル－３－ブチニル、１，２－ジメチル－３－ブチニル、２，２－ジメチル－３－ブチニル、３，３－ジメチル－１－ブチニル、１－エチル－２－ブチニル、１－エチル－３－ブチニル、２－エチル－３－ブチニル、または１－エチル－１－メチル－２－プロピニルである、項目２に記載の組成物。
（ｉｉ）分岐Ｃ３～２１－アルキルが、分岐Ｃ３～８－アルキル、分岐Ｃ３～７－アルキル、分岐Ｃ４～６－アルキル、好ましくはイソ－プロピル、イソ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、１－メチル－ブチル、２－メチル－ブチル、３－メチル－ブチル、１，１－ジメチル－プロピル、２，２－ジメチル－プロピル、１－エチル－プロピル、１－メチル－ペンチル、２－メチル－ペンチル、３－メチル－ペンチル、４－メチル－ペンチル、１，１－ジメチル－ブチル、１，２－ジメチル－ブチル、１，３－ジメチル－ブチル、２，２－ジメチル－ブチル、２，３－ジメチル－ブチル、３，３－ジメチル－ブチル、１－エチル－ブチル、２－エチル－ブチル、１，１，２－トリメチル－プロピル、１，２，２、トリメチル－プロピル、１－エチル－２－メチル－プロピル、１－メチル－ヘキシル、２－メチル－ヘキシル、３－メチル－ヘキシル、４－メチル－ヘキシル、５－メチル－ヘキシル、１，１－ジメチル－ペンチル、１，２－ジメチル－ペンチル、１，３－ジメチル－ペンチル、１，４－ジメチル－ペンチル、２，２－ジメチル－ペンチル、２，３－ジメチル－ペンチル、２，４－ジメチル－ペンチル、３，３－ジメチル－ペンチル、３，４－ジメチル－ペンチル、１－エチル－ペンチル、２－エチル－ペンチル、３－エチル－ペンチル、１，１，２－トリメチル－ブチル、１，１，３－トリメチル－ブチル、１，２，３－トリメチル－ブチル、１，２，２－トリメチル－ブチル、２，２，３－トリメチル－ブチル、１－メチル－１－エチル－ブチル、１－エチル－２－メチル－ブチル、１－エチル－３－メチル－ブチル、１－メチル－２－エチル－ブチル、２－メチル－２－エチル－ブチル、１－プロピル－ブチル、１－メチル－ヘプチル、２－メチル－ヘプチル、３－メチル－ヘプチル、４－メチル－ヘプチル、５－メチル－ヘプチル、６－メチル－ヘプチル、１，１－ジメチル－ヘキシル、１，２－ジメチル－ヘキシル、１，３－ジメチル－ヘキシル、１，４－ジメチル－ヘキシル、１，５－ジメチル－ヘキシル、２，２－ジメチル－ヘキシル、２，３－ジメチル－ヘキシル、２，４－ジメチル－ヘキシル、２，５－ジメチル－ヘキシル、３，３－ジメチル－ヘキシル、３，４－ジメチル－ヘキシル、３，５－ジメチル－ヘキシル、４，４－ジメチル－ヘキシル、４，５－ジメチル－ヘキシル、５，５－ジメチル－ヘキシル、１－エチル－ヘキシル、２－エチル－ヘキシル、３－エチル－ヘキシルまたは４－エチル－ヘキシルであり、
（ｉｉｉ）直鎖Ｃ２～２１－アルケニルが、直鎖Ｃ２～８－アルケニル、直鎖Ｃ２～７－アルケニル、直鎖Ｃ３～７－アルケニル、直鎖Ｃ４～６－アルケニル、好ましくはエテニル、１－プロペニル、２－プロペニル、１－ブテニル、２－ブテニル、３－ブテニル、１－ペンテニル、２－ペンテニル、３－ペンテニル、４－ペンテニル、１－ヘキセニル、２－ヘキセニル、３－ヘキセニル、４－ヘキセニル、５－ヘキセニル、１－ヘプテニル、２－ヘプテニル、１－ヘプテニル、４－ヘプテニル、５－ヘプテニル、５－ヘプテニル、６－ヘプテニル、１－オクテニル、２－オクテニル、３－オクテニル、４－オクテニル、５－オクテニル、６－オクテニル、または７－オクテニルであり、
（ｉｖ）分岐Ｃ３～２１－アルケニルが、分岐Ｃ３～８－アルケニル、分岐Ｃ３～７－アルケニル、分岐Ｃ４～６－アルケニル、好ましくはメチルエテニル、１－メチル－１－プロペニル、２－メチル－１－プロペニル、１－メチル－２－プロペニル、２－メチル－２－プロペニル、１－メチル－１－ブテニル、２－メチル－１－ブテニル、３－メチル－１－ブテニル、１－メチル－２－ブテニル、２－メチル－２－ブテニル、３－メチル－２－ブテニル、１－メチル－３－ブテニル、２－メチル－３－ブテニル、３－メチル－３－ブテニル、１，１－ジメチル－２－プロペニル、１，２－ジメチル－１－プロペニル、１，２－ジメチル－２－プロペニル、１－エチル－１－プロペニル、１－エチル－２－プロペニル、１－メチル－１－ペンテニル、２－メチル－１－ペンテニル、３－メチル－１－ペンテニル、４－メチル－１－ペンテニル、１－メチル－２－ペンテニル、２－メチル－２－ペンテニル、３－メチル－２－ペンテニル、４－メチル－２－ペンテニル、１－メチル－３－ペンテニル、２－メチル－３－ペンテニル、３－メチル－３－ペンテニル、４－メチル－３－ペンテニル、１－メチル－４－ペンテニル、２－メチル－４－ペンテニル、３－メチル－４－ペンテニル、４－メチル－４－ペンテニル、１，１－ジメチル－２－ブテニル、１，１－ジメチル－３－ブテニル、１，２－ジメチル－１－ブテニル、１，２－ジメチル－２－ブテニル、１，２－ジメチル－３－ブテニル、１，３－ジメチル－１－ブテニル、１，３－ジメチル－２－ブテニル、１，３－ジメチル－３－ブテニル、２，２－ジメチル－３－ブテニル、２，３－ジメチル－１－ブテニル、２，３－ジメチル－２－ブテニル、２，３－ジメチル－３－ブテニル、３，３－ジメチル－１－ブテニル、３，３－ジメチル－２－ブテニル、１－エチル－１－ブテニル、１－エチル－２－ブテニル、１－エチル－３－ブテニル、２－エチル－１－ブテニル、２－エチル－２－ブテニル、２－エチル－３－ブテニル、１，１，２－トリメチル－２－プロペニル、１－エチル－１－メチル－２－プロペニル、１－エチル－２－メチル－１－プロペニル、または１－エチル－２－メチル－２－プロペニルであり、
（ｖ）直鎖Ｃ２～２１－アルキニルが、直鎖Ｃ２～８－アルキニル、直鎖Ｃ２～７－アルキニル、直鎖Ｃ３～７－アルキニル、直鎖Ｃ４～６－アルキニル、好ましくは、エチニル、１－プロピニル、２－プロピニル、１－ブチニル、２－ブチニル、３－ブチニル、１－ペンチニル、２－ペンチニル、３－ペンチニル、４－ペンチニル、１－ヘキシニル、２－ヘキシニル、３－ヘキシニル、４－ヘキシニル、５－ヘキシニル、１－ヘプチニル、２－ヘプチニル、１－ヘプチニル、４－ヘプチニル、５－ヘプチニル、５－ヘプチニル、６－ヘプチニル、１－オクチニル、２－オクチニル、３－オクチニル、４－オクテニル、５－オクチニル、６－オクチニル、または７－オクチニルであるか、あるいは
（ｖｉ）分岐Ｃ４～２１－アルキニルが、分岐Ｃ４～８－アルキニル、分岐Ｃ３～８－アルキニル、分岐Ｃ４～６－アルキニル、好ましくは１－メチル－２－プロピニル、１－メチル－２－ブチニル、１－メチル－３－ブチニル、２－メチル－３－ブチニル、３－メチル－１－ブチニル、１，１－ジメチル－２－プロピニル、１－エチル－２－プロピニル、１－メチル－２－ペンチニル、１－メチル－３－ペンチニル、１－メチル－４－ペンチニル、２－メチル－３－ペンチニル、２－メチル－４－ペンチニル、３－メチル－１－ペンチニル、３－メチル－４－ペンチニル、４－メチル－１－ペンチニル、４－メチル－２－ペンチニル、１，１－ジメチル－２－ブチニル、１，１－ジメチル－３－ブチニル、１，２－ジメチル－３－ブチニル、２，２－ジメチル－３－ブチニル、３，３－ジメチル－１－ブチニル、１－エチル－２－ブチニル、１－エチル－３－ブチニル、２－エチル－３－ブチニル、または１－エチル－１－メチル－２－プロピニルである、項目２に記載の組成物。
【0109】
４．（ｉ）直鎖Ｃ２～２１－アルケニルまたは分岐Ｃ３～２１－アルケニルにおいて、二重結合はヒドロカルビルのＣ１とＣ２原子との間またはＣ２とＣ３原子との間にあり、および／または
（ｉｉ）直鎖Ｃ２～２１－アルキニルまたは分岐Ｃ４～２１－アルキニルにおいて、三重結合はヒドロカルビルのＣ１とＣ２原子との間またはＣ２とＣ３原子との間にあり、および／または
（ｉｉｉ）ヒドロカルビルは、ハロゲン、特にＦ、Ｃｌ、またはＢｒ；－ＯＨ；－Ｏ－Ｒ４；＝Ｏ；－ＮＯ２；Ｒ２およびＲ３が独立してＨ、およびヒドロカルビルから選択される－ＮＲ２Ｒ３；Ｒ４がＨおよびヒドロカルビルから選択される－Ｎ－ＨＲ４からなる群から選択される１つまたは複数の置換基で置換されている、項目１～３のいずれかに記載の組成物。
（ｉｉ）直鎖Ｃ２～２１－アルキニルまたは分岐Ｃ４～２１－アルキニルにおいて、三重結合はヒドロカルビルのＣ１とＣ２原子との間またはＣ２とＣ３原子との間にあり、および／または
（ｉｉｉ）ヒドロカルビルは、ハロゲン、特にＦ、Ｃｌ、またはＢｒ；－ＯＨ；－Ｏ－Ｒ４；＝Ｏ；－ＮＯ２；Ｒ２およびＲ３が独立してＨ、およびヒドロカルビルから選択される－ＮＲ２Ｒ３；Ｒ４がＨおよびヒドロカルビルから選択される－Ｎ－ＨＲ４からなる群から選択される１つまたは複数の置換基で置換されている、項目１～３のいずれかに記載の組成物。
【0110】
５．Ｃ２～２１－アルキル－ＣＯＯＨが、プロパン酸、ｎ－ブタン酸、イソ－ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ウンデカン酸、ドデカン酸、トリデカン酸、テトラデカン酸、ペンタデカン酸、ヘキサデカン酸、ヘプタデカン酸、オクタデカン酸、ノナデカン酸、エイコサン酸、ヘンエイコサン酸、ドコサン酸、好ましくはプロパン酸、ｎ－ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、またはノナン酸からなる群から選択される、項目１～４のいずれか１項に記載の組成物。
【0111】
６．（ｉ）分岐Ｃ３～２１－アルキル－ＣＯＯＨが、イソブタン酸、イソペンタン酸、３－メチル－ペンタン酸、または４－メチル－ペンタン酸からなる群から選択され、
（ｉｉ）Ｃ２～２１－アルケニル－ＣＯＯＨが、２－ヘキセン酸、３－ヘキセン酸、および５－ヘキセン酸、好ましくは２－ヘキセン酸または３－ヘキセン酸からなる群から選択される、項目１～５のいずれか１項に記載の組成物。
（ｉｉ）Ｃ２～２１－アルケニル－ＣＯＯＨが、２－ヘキセン酸、３－ヘキセン酸、および５－ヘキセン酸、好ましくは２－ヘキセン酸または３－ヘキセン酸からなる群から選択される、項目１～５のいずれか１項に記載の組成物。
【0112】
７．Ｒ１－ＣＯＯＨの濃度が、約５ｍＭ～約１００ｍＭ、約１０ｍＭ～約８０ｍＭ、約１５ｍＭ～約７０ｍＭ、約２０ｍＭ～約６０ｍＭ、約２５ｍＭ～約５０ｍＭ、約３０ｍＭ～約４０ｍＭ、約３０ｍＭ～約３５ｍＭ、好ましくは約５０ｍＭである、項目１～６のいずれか１項に記載の組成物。
【0113】
８．組成物が水溶液である、項目１～７のいずれか１項に記載の組成物。
【0114】
９．組成物のｐＨが、ｐＨ６～ｐＨ８、ｐＨ６～ｐＨ７．５、またはｐＨ６．４～ｐＨ７．５、好ましくはｐＨ６．４～ｐＨ７．５、より好ましくはｐＨ６～７．２、または最も好ましくはｐＨ６．４～ｐＨ７．２の範囲内である、項目１～８のいずれか１項に記載の組成物。
【0115】
１０．ＡＣＥＳ、ＡＤＡ、ＢＥＳ、ビス－トリスプロパン、ＤＩＰＳＯ、ＥＰＰＳ、ＨＥＰＰＳＯ、イミダゾール、ＭＯＢＳ、ＭＥＳ、ビス－トリス、ＭＯＰＳ、トリス、ＭＯＰＳＯ、リン酸、ＰＩＰＥＳ、ＰＯＰＳＯ、ＴＡＰＳＯ、ＴＥＡ、ＴＥＳ、トリシン、またはＨＥＰＥＳ緩衝液、好ましくはＭＥＳ、ビス－トリス、ＭＯＰＳ、ＨＥＰＥＳ、またはＴＲＩＳからなる群から選択される緩衝物質を含む、項目８または９のいずれか１項に記載の組成物。
【0116】
１１．Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩が、
（ｉ）組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質を安定化し、および／または
（ｉｉ）組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質の融解温度を少なくとも０．５℃、１．０℃、１．５℃、２．０℃、２．５℃、３．０℃、３．５℃、４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、または６．０℃上昇させる濃度で組成物中に含まれる、項目８～１０のいずれか１項に記載の組成物。
（ｉ）組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質を安定化し、および／または
（ｉｉ）組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質の融解温度を少なくとも０．５℃、１．０℃、１．５℃、２．０℃、２．５℃、３．０℃、３．５℃、４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、または６．０℃上昇させる濃度で組成物中に含まれる、項目８～１０のいずれか１項に記載の組成物。
【0117】
１２．組成物中に含まれるＭＨＣの融解温度が、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩を欠如している同じ組成物中に含まれるＭＨＣと比較して上昇しており、好ましくは組成物の融解温度が、少なくとも０．５℃、１．０℃、１．５℃、２．０℃、２．５℃、３．０℃、３．５℃、４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、または６．０℃上昇している、項目８～１０のいずれかに記載の組成物。
【0118】
１３．組成物中に含まれるＭＨＣタンパク質の融解温度（Ｔｍ）が上昇しており、
（ａ）による組成物中のＭＨＣタンパク質のＴｍが（ｂ）による組成物中のＭＨＣタンパク質のＴｍよりも高い場合、前記ＭＨＣタンパク質のＴｍは上昇しており：
（ａ）ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなる水性組成物、
（ｂ）（ａ）と同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなる水性組成物、ならびに
好ましくは、組成物の融解温度が、少なくとも０．５℃、１．０℃、１．５℃、２．０℃、２．５℃、３．０℃、３．５℃、４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、または６．０℃上昇している、項目８～１０のいずれかに記載の組成物。
（ａ）による組成物中のＭＨＣタンパク質のＴｍが（ｂ）による組成物中のＭＨＣタンパク質のＴｍよりも高い場合、前記ＭＨＣタンパク質のＴｍは上昇しており：
（ａ）ＭＨＣタンパク質、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７、およびＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩からなる水性組成物、
（ｂ）（ａ）と同じＭＨＣタンパク質および２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液ｐＨ７からなる水性組成物、ならびに
好ましくは、組成物の融解温度が、少なくとも０．５℃、１．０℃、１．５℃、２．０℃、２．５℃、３．０℃、３．５℃、４．０℃、４．５℃、５．０℃、５．５℃、または６．０℃上昇している、項目８～１０のいずれかに記載の組成物。
【0119】
１４．ＭＨＣタンパク質が、ＭＨＣＩまたはＭＨＣＩＩ分子、好ましくはヒト白血球抗原（ＨＬＡ）またはＭＨＣＩ、ＭＨＣＩＩ、もしくはＨＬＡの多量体、例えば、二量体、三量体、もしくは四量体である、項目１～１３のいずれかに記載の組成物。
【0120】
１５．ＭＨＣタンパク質が、好ましくは
（ｉ）ＭＨＣＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの１アミノ酸とアルファ２ドメインの１アミノ酸との間、および／または
（ｉｉ）ＭＨＣＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの２つのアミノ酸の間、または
（ｉｉｉ）ＭＨＣＩＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインまたはベータ１ドメインの２つのアミノ酸の間、および／または
（ｉｖ）ＭＨＣＩＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの１アミノ酸とベータ１ドメインの１アミノ酸との間
の１つまたは複数の共有結合によって安定化されている、項目１～１４のいずれかに記載の組成物。
（ｉ）ＭＨＣＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの１アミノ酸とアルファ２ドメインの１アミノ酸との間、および／または
（ｉｉ）ＭＨＣＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの２つのアミノ酸の間、または
（ｉｉｉ）ＭＨＣＩＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインまたはベータ１ドメインの２つのアミノ酸の間、および／または
（ｉｖ）ＭＨＣＩＩの場合、前記安定化されたＭＨＣタンパク質のアルファ１ドメインの１アミノ酸とベータ１ドメインの１アミノ酸との間
の１つまたは複数の共有結合によって安定化されている、項目１～１４のいずれかに記載の組成物。
【0121】
１６．前記共有結合が、
（ｉ）α－ヘリックスの間、好ましくはＭＨＣＩのＩＭＧＴ８４位のシステインとＩＭＧＴ１３９位のシステインとの間、
（ｉｉ）ＭＨＣＩのアルファ１ドメインのα－ヘリックスとβ－シートとの間、好ましくはＭＨＣＩのＩＭＧＴ７１位のシステインとＭＨＣＩのＩＭＧＴ２２位のシステインとの間、
（ｉｉｉ）好ましくはＭＨＣＩの５１位のアミノ酸およびＭＨＣＩの１７５位のアミノ酸をシステインに変異させることによって、α－ヘリックスの間、または
（ｉｖ）α－ヘリックスとβ－シートとの間、好ましくはＭＨＣＩのＩＭＧＴ７１位のシステインとＭＨＣＩのＩＭＧＴ２２位のシステインとの間、およびα－ヘリックスの間、好ましくはＭＨＣＩのＩＭＧＴ５１位のシステインとＭＨＣＩのＩＭＧＴ１７５位のシステインとの間
にある、項目１５に記載の組成物。
（ｉ）α－ヘリックスの間、好ましくはＭＨＣＩのＩＭＧＴ８４位のシステインとＩＭＧＴ１３９位のシステインとの間、
（ｉｉ）ＭＨＣＩのアルファ１ドメインのα－ヘリックスとβ－シートとの間、好ましくはＭＨＣＩのＩＭＧＴ７１位のシステインとＭＨＣＩのＩＭＧＴ２２位のシステインとの間、
（ｉｉｉ）好ましくはＭＨＣＩの５１位のアミノ酸およびＭＨＣＩの１７５位のアミノ酸をシステインに変異させることによって、α－ヘリックスの間、または
（ｉｖ）α－ヘリックスとβ－シートとの間、好ましくはＭＨＣＩのＩＭＧＴ７１位のシステインとＭＨＣＩのＩＭＧＴ２２位のシステインとの間、およびα－ヘリックスの間、好ましくはＭＨＣＩのＩＭＧＴ５１位のシステインとＭＨＣＩのＩＭＧＴ１７５位のシステインとの間
にある、項目１５に記載の組成物。
【0122】
１７．ＭＨＣタンパク質が、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、ＨＬＡ－Ｇ、ＨＬＡ－Ｊ、ＨＬＡ－Ｋ、およびＨＬＡ－Ｌからなる群から選択され、好ましくはＨＬＡ－Ａが、ＨＬＡ－Ａ１、ＨＬＡ－Ａ２、ＨＬＡ－Ａ３、およびＨＬＡ－Ａ１１からなる群から選択され、より好ましくはＨＬＡ－Ａ＊０２であり、さらにより好ましくはＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ－Ａ＊０１：０１、またはＨＬＡ－Ａ＊０３：０１であり、好ましくはＨＬＡ－Ｂが、ＨＬＡ－Ｂ＊０７、ＨＬＡ－Ｂ＊０８、ＨＬＡ－Ｂ＊１５、ＨＬＡ－Ｂ＊３５、およびＨＬＡ－Ｂ＊４４、より好ましくはＨＬＡ－Ｂ＊０７：０２、ＨＬＡ－Ｂ＊０８：０１、ＨＬＡ－Ｂ＊１５：０１、ＨＬＡ－Ｂ＊３５：０１、およびＨＬＡ－Ｂ＊４４：０５からなる群から選択される、項目１～１６のいずれか１項に記載の組成物。
【0123】
１８．１つまたは複数のＭＨＣタンパク質が複合体に含まれ、好ましくは、ＭＨＣタンパク質が、ビーズ、フィラメント、ナノ粒子、またはその他の担体に結合している、項目１～１７のいずれか１項に記載の組成物。
【0124】
１９．組成物が少なくとも１つのペプチド、好ましくはグリシン－メチオニン（ＧＭ）、グリシン－チロシン（ＧＹ）、グリシン－ロイシン（ＧＬ）、およびグリシン－フェニルアラニン（ＧＦ）からなる群から選択されるローディングペプチドをさらに含み、より好ましくはローディングペプチドはＧＭである、項目１～１８のいずれか１項に記載の組成物。
【0125】
２０．ＭＨＣタンパク質が配列番号１および配列番号２を含むか、またはそれらからなる、項目１～１９のいずれか１項に記載の組成物。
【0126】
２１．ＭＨＣタンパク質を安定化するための、Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである、Ｒ１－ＣＯＯＨまたはその塩の使用。
【0127】
２２．Ｒ１がＣ２－Ｃ２１－ヒドロカルビルである、項目２１に記載の使用。
【0128】
２３．ＭＨＣタンパク質、好ましくはＭＨＣＩまたはＭＨＣＩＩ、より好ましくはＨＬＡを安定化するための方法であって、以下の工程：
（ｉ）前記ＭＨＣタンパク質を含む溶液を提供する工程、
（ｉｉ）前記溶液をＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩と接触させる工程
を含み、
Ｒ１が置換されたまたは置換されていないヒドロカルビルである方法。
（ｉ）前記ＭＨＣタンパク質を含む溶液を提供する工程、
（ｉｉ）前記溶液をＲ１－ＣＯＯＨまたはその塩と接触させる工程
を含み、
Ｒ１が置換されたまたは置換されていないヒドロカルビルである方法。
【0129】
２４．Ｒ１がＣ２－Ｃ２１－ヒドロカルビルである、項目２３に記載の方法。
【0130】
２５．ＭＨＣタンパク質にペプチド、好ましくはＭＨＣ－ＩペプチドまたはＭＨＣ－ＩＩペプチドをロードする工程をさらに含む、項目２３または２４に記載の方法。
【0131】
２６．（ｉ）ＭＨＣタンパク質、および
（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨもしくはその塩、好ましくはナトリウム塩、または
（ｉｉｉ）本発明の第１の態様の組成物、および
（ｉｖ）適宜ペプチド、好ましくはローディングペプチド、ＭＨＣＩペプチドおよび／またはＭＨＣＩＩペプチド
を含むキットであって、
Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである、キット。
（ｉｉ）Ｒ１－ＣＯＯＨもしくはその塩、好ましくはナトリウム塩、または
（ｉｉｉ）本発明の第１の態様の組成物、および
（ｉｖ）適宜ペプチド、好ましくはローディングペプチド、ＭＨＣＩペプチドおよび／またはＭＨＣＩＩペプチド
を含むキットであって、
Ｒ１が置換されているかまたは置換されていないヒドロカルビルである、キット。
【0132】
２７．Ｒ１がＣ２～Ｃ２１－ヒドロカルビルである、項目２６に記載のキット。
【0133】
本出願全体を通じて、「および／または」という用語は文法上の接続詞であり、それが接続する１つまたは複数の場合が生じる可能性があることを包含すると解釈されるべきである。例えば、「このような天然配列のタンパク質は、標準的な組換えおよび／または合成方法を使用して調製されていてもよい」という言い回しは、天然配列のタンパク質は標準的な組換えおよび合成方法を使用して調製されていてもよいか、または天然配列のタンパク質は標準的な組換え方法を使用して調製されていてもよいか、または天然配列のタンパク質は合成方法を使用して調製されていてもよいことを示す。
【0134】
さらに、本出願全体を通じて、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、具体的に言及された全特徴、および選択的、追加的、指定されていない特徴を包含すると解釈されるべきである。本明細書で使用したように、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」の使用はまた、具体的に言及された特徴以外の特徴が存在していない実施形態を開示する（すなわち、「構成されている（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」）。
【0135】
さらに、不定冠詞「ａ」または「ａｎ」は複数を排除するものではない。ある特定の手段が相互に異なる従属請求項に記載されているという事実だけで、これらの手段の組合せが有利に使用できないことを示すものではない。
【0136】
以下の実施例は、本発明を単に例示するものであり、添付された特許請求の範囲によって示される本発明の範囲を限定するものと決して解釈されるべきではない。
【実施例】
【0137】
［実施例１］
【0138】
以下の実験は全て、組換え体、ジスルフィド架橋安定化ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、２２位と７１位との間にジスルフィド結合が導入された、いわゆるＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１を用いて実施された。８４位と１３９位との間にジスルフィド結合が導入されたＨＬＡ分子ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９も試験された。タンパク質は、公開された手順（Garboczi et al.; “HLA-A2-peptide complexes: Refolding and crystallization of molecules expressed in Escherichia coli and complexed with single antigenic peptides”; PNAS, vol. 89, 3429-3433, 1992）にしたがって、１００ｍＭ ＨＥＰＥＳ、アルギニン４００ｍＭ、ＥＤＴＡ２ｍＭ、還元グルタチオン５ｍＭおよび酸化グルタチオン０．５ｍＭを含有する緩衝液中でリフォールドされた。ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ｄｓ８４－１３９については、Moritz et al.2019によって記載されたようなリフォールディング反応においてＧＭジペプチド１０ｍＭが含まれた。リフォールディング後、タンパク質は超遠心分離によって濃縮され、サイズ排除クロマトグラフィーによって精製された。脂肪酸は、水に溶解するか、または水で希釈し、ＮａＯＨで中和して、０．５Ｍ ｐＨ７の保存用液を得た。
【0139】
ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１安定化化合物のスクリーニング
ペプチドを含まない組換え体ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１調製に最適な貯蔵および取り扱い条件を見出すため、異なる化合物をサーマルシフトアッセイ（ＴＳＡ）でスクリーニングした。Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ７５００リアルタイムＰＣＲ装置において、２０ｍＭトリスｐＨ８．０、ＮａＣｌ １５０ｍＭの緩衝液中でタンパク質濃度０．１ｍｇ／ｍｌで測定を実施した。表３で示した添加物を添加するか、あるいは水を対照として添加した。生データをエクスポートし、融解温度の分析はＭｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌで実施した。タンパク質安定性は、３０℃～７０℃の温度範囲にわたってモニターした。温度は０．５℃段階で上昇させ、蛍光色素ＳＹＰＲＯ ｏｒａｎｇｅ（ｂｉｏ－ｗｏｒｌｄ、カタログ番号４１９００１９２－１、５倍濃度で使用した）の蛍光は、新たな温度で３０秒平衡化した後で測定した。以前の測定値と比較して蛍光の最大増加が観察された温度が、各組成物の融点と定義される。表３に挙げた３３化合物のうち以下の２つのみがタンパク質安定性の著しい増大を引き起こした（図１参照）：（ｉ）ＨＬＡ－Ａ＊０２０１ ｄｓ８４－１３９を安定化することが以前に記載されたジペプチドグリシン－メチオニン、および（ｉｉ）ジペプチドグリシン－メチオニンと比較して安定化効果の増大をさらに示した酪酸ナトリウム。脂肪酸によるＨＬＡ分子の安定化の増大は、安定化の増大が、グリセロール、アルギニン、またはトレハロースなどの周知のタンパク質安定化剤と比較して示されたので、驚くべきことであった。
ペプチドを含まない組換え体ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１調製に最適な貯蔵および取り扱い条件を見出すため、異なる化合物をサーマルシフトアッセイ（ＴＳＡ）でスクリーニングした。Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ７５００リアルタイムＰＣＲ装置において、２０ｍＭトリスｐＨ８．０、ＮａＣｌ １５０ｍＭの緩衝液中でタンパク質濃度０．１ｍｇ／ｍｌで測定を実施した。表３で示した添加物を添加するか、あるいは水を対照として添加した。生データをエクスポートし、融解温度の分析はＭｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌで実施した。タンパク質安定性は、３０℃～７０℃の温度範囲にわたってモニターした。温度は０．５℃段階で上昇させ、蛍光色素ＳＹＰＲＯ ｏｒａｎｇｅ（ｂｉｏ－ｗｏｒｌｄ、カタログ番号４１９００１９２－１、５倍濃度で使用した）の蛍光は、新たな温度で３０秒平衡化した後で測定した。以前の測定値と比較して蛍光の最大増加が観察された温度が、各組成物の融点と定義される。表３に挙げた３３化合物のうち以下の２つのみがタンパク質安定性の著しい増大を引き起こした（図１参照）：（ｉ）ＨＬＡ－Ａ＊０２０１ ｄｓ８４－１３９を安定化することが以前に記載されたジペプチドグリシン－メチオニン、および（ｉｉ）ジペプチドグリシン－メチオニンと比較して安定化効果の増大をさらに示した酪酸ナトリウム。脂肪酸によるＨＬＡ分子の安定化の増大は、安定化の増大が、グリセロール、アルギニン、またはトレハロースなどの周知のタンパク質安定化剤と比較して示されたので、驚くべきことであった。
【0140】
【表3】
【0141】
異なる脂肪酸の安定化効果の比較
その他の脂肪酸もＨＬＡ分子を安定化するかどうかを試験するために、異なる鎖長の脂肪酸を上述のＴＳＡでスクリーニングした。この実験において、タンパク質精製手順の最終ゲル濾過は、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．０中で行われ、タンパク質はこの緩衝液中で０．１ｍｇ／ｍｌの濃度で使用された。脂肪酸は、５～１００ｍＭの濃度範囲で添加されるか、または水が対照として添加された。各添加物の最適な濃度で観察された融点を図２に示す。試験した脂肪酸は全て、ＨＬＡ分子を安定化する。長さが３～８炭素原子の脂肪酸が強力な安定化特性を有する。安定化効果はさらに、長さが５～７炭素原子の脂肪酸によって増大する。鎖長が延長するにつれて、脂肪酸の最適な濃度は脂肪酸のより低い濃度レベルに向かって移動する。安定化は、分岐脂肪酸または不飽和脂肪酸にも当てはまることを示すために、直鎖、飽和脂肪酸の安定化を、分岐鎖を有する異性体または同じ鎖長の不飽和変異体と比較した。分岐鎖を有する脂肪酸（イソ吉草酸または４－メチル－吉草酸）は、ＨＬＡ分子を安定化する効果を示した（図３）。したがって、安定化はまた分岐脂肪酸についても観察されたが、測定された融点は、試験した直鎖がそれらの分岐異性体よりも強いＨＬＡ分子の安定化を示すことを示唆している（図３）。試験した不飽和変異体はまた、ＨＬＡ分子に対して安定化効果を示した。二重結合（Ｃ＝Ｃ）がカルボキシル基に近ければ近いほど、安定化効果は強かった（図４）。したがって、ヘキサン酸の不飽和脂肪酸はまた、ＨＬＡ分子に対して安定化効果を示した。したがって、直鎖、分岐、飽和、および不飽和脂肪酸はＨＬＡ分子を安定化した。
［実施例３］
その他の脂肪酸もＨＬＡ分子を安定化するかどうかを試験するために、異なる鎖長の脂肪酸を上述のＴＳＡでスクリーニングした。この実験において、タンパク質精製手順の最終ゲル濾過は、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．０中で行われ、タンパク質はこの緩衝液中で０．１ｍｇ／ｍｌの濃度で使用された。脂肪酸は、５～１００ｍＭの濃度範囲で添加されるか、または水が対照として添加された。各添加物の最適な濃度で観察された融点を図２に示す。試験した脂肪酸は全て、ＨＬＡ分子を安定化する。長さが３～８炭素原子の脂肪酸が強力な安定化特性を有する。安定化効果はさらに、長さが５～７炭素原子の脂肪酸によって増大する。鎖長が延長するにつれて、脂肪酸の最適な濃度は脂肪酸のより低い濃度レベルに向かって移動する。安定化は、分岐脂肪酸または不飽和脂肪酸にも当てはまることを示すために、直鎖、飽和脂肪酸の安定化を、分岐鎖を有する異性体または同じ鎖長の不飽和変異体と比較した。分岐鎖を有する脂肪酸（イソ吉草酸または４－メチル－吉草酸）は、ＨＬＡ分子を安定化する効果を示した（図３）。したがって、安定化はまた分岐脂肪酸についても観察されたが、測定された融点は、試験した直鎖がそれらの分岐異性体よりも強いＨＬＡ分子の安定化を示すことを示唆している（図３）。試験した不飽和変異体はまた、ＨＬＡ分子に対して安定化効果を示した。二重結合（Ｃ＝Ｃ）がカルボキシル基に近ければ近いほど、安定化効果は強かった（図４）。したがって、ヘキサン酸の不飽和脂肪酸はまた、ＨＬＡ分子に対して安定化効果を示した。したがって、直鎖、分岐、飽和、および不飽和脂肪酸はＨＬＡ分子を安定化した。
［実施例３］
【0142】
安定化は様々なｄｓ－ＨＬＡ構築物について観察される。
脂肪酸の安定化効果は、さらなるＨＬＡ分子、すなわち、８４位と１３９位との間にジスルフィド結合が導入されたＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９についても試験された。２２位と７１位との間にジスルフィド架橋を有する突然変異体は、いかなるペプチドも添加しなくてもリフォールドされ得るが、８４位と１３９位の間にジスルフィド結合を含有する変種はリフォールディングのためにジペプチドを必要とした。ジペプチドは、ＴＳＡ測定の前に２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．０中におけるゲル濾過によって除去された。実施例２で記載したようなＴＳＡ実験を使用して、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１に対する脂肪酸の安定化効果をＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９と比較して試験した（図５）。非常に短い鎖化合物（４および５炭素）の効果は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９と比較してＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１において増大していた。それにも関わらず、両タンパク質の融点は、対照条件と比較して５～６℃上昇した。したがって、脂肪酸は両方のＨＬＡ分子を安定化した。
［実施例４］
脂肪酸の安定化効果は、さらなるＨＬＡ分子、すなわち、８４位と１３９位との間にジスルフィド結合が導入されたＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９についても試験された。２２位と７１位との間にジスルフィド架橋を有する突然変異体は、いかなるペプチドも添加しなくてもリフォールドされ得るが、８４位と１３９位の間にジスルフィド結合を含有する変種はリフォールディングのためにジペプチドを必要とした。ジペプチドは、ＴＳＡ測定の前に２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．０中におけるゲル濾過によって除去された。実施例２で記載したようなＴＳＡ実験を使用して、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１に対する脂肪酸の安定化効果をＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９と比較して試験した（図５）。非常に短い鎖化合物（４および５炭素）の効果は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ８４－１３９と比較してＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ２２－７１において増大していた。それにも関わらず、両タンパク質の融点は、対照条件と比較して５～６℃上昇した。したがって、脂肪酸は両方のＨＬＡ分子を安定化した。
［実施例４］
【0143】
脂肪酸はさらに、ローディングペプチドに結合したＭＨＣ分子を安定化することができる。
ローディングペプチドおよび脂肪酸の組合せを使用して、前記で定義したようなＭＨＣ－ＩまたはＭＣＨ－ＩＩペプチドなどの抗原性ペプチドをその後ロードするためのＭＨＣタンパク質を安定化できるかどうかを試験するために、ＴＳＡを実施例１で記載したように実施した。ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ＿２２－７１＿およびＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ｄｓ＿８４－１３９はそれぞれ、脂肪酸、例えば、酪酸ナトリウム、吉草酸、またはヘキサン酸（最終濃度５０ｍＭ）、およびジペプチド（ＧＭ、最終濃度１０ｍＭ）を添加して、および添加せずに分析した。ＨＬＡタンパク質の安定化は、両添加物について観察された。両添加物を含有する試料中では、さらに強い安定化が観察され、脂肪酸がローディングペプチドに結合したＨＬＡ分子を安定化することができることを示していた。図５～７を参照すること。
［実施例５］
ローディングペプチドおよび脂肪酸の組合せを使用して、前記で定義したようなＭＨＣ－ＩまたはＭＣＨ－ＩＩペプチドなどの抗原性ペプチドをその後ロードするためのＭＨＣタンパク質を安定化できるかどうかを試験するために、ＴＳＡを実施例１で記載したように実施した。ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＿ｄｓ＿２２－７１＿およびＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ｄｓ＿８４－１３９はそれぞれ、脂肪酸、例えば、酪酸ナトリウム、吉草酸、またはヘキサン酸（最終濃度５０ｍＭ）、およびジペプチド（ＧＭ、最終濃度１０ｍＭ）を添加して、および添加せずに分析した。ＨＬＡタンパク質の安定化は、両添加物について観察された。両添加物を含有する試料中では、さらに強い安定化が観察され、脂肪酸がローディングペプチドに結合したＨＬＡ分子を安定化することができることを示していた。図５～７を参照すること。
［実施例５］
【0144】
異なるｐＨを有する緩衝液中における安定化
４０の異なる緩衝液条件（ＭＥＳ ｐＨ５．８～７．２；ビストリスｐＨ５．８～７．２；ＭＯＰＳ ｐＨ６．５～７．９；ＨＥＰＥＳ ｐＨ６．８～８．２；およびトリスｐＨ７．６～９．０）を用いた並行ＴＳＡスクリーニングでは、ｐＨ条件と組換えＨＬＡの安定性との間に明らかな関係が検出された。この実験では、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．０に溶かしたＨＬＡ－Ａ＊０２０１ ｄｓ２２－７１ ０．１ｍｇ／ｍｌの溶液に、各緩衝液の１Ｍ保存溶液０．１容量が補給された。
４０の異なる緩衝液条件（ＭＥＳ ｐＨ５．８～７．２；ビストリスｐＨ５．８～７．２；ＭＯＰＳ ｐＨ６．５～７．９；ＨＥＰＥＳ ｐＨ６．８～８．２；およびトリスｐＨ７．６～９．０）を用いた並行ＴＳＡスクリーニングでは、ｐＨ条件と組換えＨＬＡの安定性との間に明らかな関係が検出された。この実験では、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．０に溶かしたＨＬＡ－Ａ＊０２０１ ｄｓ２２－７１ ０．１ｍｇ／ｍｌの溶液に、各緩衝液の１Ｍ保存溶液０．１容量が補給された。
【0145】
試験した緩衝液系全てについて、６．４と７．０との間のｐＨ値が最も高いタンパク質安定性をもたらし、より塩基性または酸性の条件に向かうと安定性は徐々に低下した（図８）。このｐＨ範囲はまた、ＨＬＡ分子にロードされたペプチドについても最適であることが見出された。ＨＬＡが脂肪酸によって異なるｐＨ条件において安定化されるかどうかを試験するために、同じ４０の異なる緩衝液条件を用いたＴＳＡスクリーニングを上述のように実施した。吉草酸（５０ｍＭ）によって得られた安定化効果は、脂肪酸を用いない試験と比較して試験した全ｐＨ条件において増大した（図８）。安定化効果はｐＨ範囲６～７．２において特に増大した。したがって、ＨＬＡ分子に対する脂肪酸の安定化効果は、様々なｐＨ条件下で観察された。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【配列表】
【国際調査報告】