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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-10-23
(54)【発明の名称】タウホスホペプチドコンジュゲートの安全な投与の方法
(51)【国際特許分類】
A61K 39/00 20060101AFI20241016BHJP
A61K 47/62 20170101ALI20241016BHJP
A61K 47/60 20170101ALI20241016BHJP
A61P 37/04 20060101ALI20241016BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20241016BHJP
A61K 38/10 20060101ALI20241016BHJP
A61K 39/39 20060101ALI20241016BHJP
C07K 16/18 20060101ALN20241016BHJP
【ＦＩ】
A61K39/00 H
A61K47/62 ZNA
A61K47/60
A61P37/04
A61P25/28
A61K38/10
A61K39/39
C07K16/18
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024519447
(86)(22)【出願日】2022-09-29
(85)【翻訳文提出日】2024-05-23
(86)【国際出願番号】 US2022077279
(87)【国際公開番号】W WO2023056369
(87)【国際公開日】2023-04-06
(31)【優先権主張番号】63/261,793
(32)【優先日】2021-09-29
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
２．ＰＬＵＲＯＮＩＣ
(71)【出願人】
【識別番号】514010601
【氏名又は名称】ヤンセン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド
(71)【出願人】
【識別番号】513022966
【氏名又は名称】エーシー イミューン エス．エー．
(74)【代理人】
【識別番号】100092783
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 浩
(74)【代理人】
【識別番号】100095360
【弁理士】
【氏名又は名称】片山 英二
(74)【代理人】
【識別番号】100093676
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 純子
(74)【代理人】
【識別番号】100120134
【弁理士】
【氏名又は名称】大森 規雄
(74)【代理人】
【識別番号】100149010
【弁理士】
【氏名又は名称】星川 亮
(72)【発明者】
【氏名】フェイファー，アンドレア
(72)【発明者】
【氏名】ラムスバーグ，エリザベス アン
【テーマコード（参考）】
4C076
4C084
4C085
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C076AA95
4C076BB15
4C076BB16
4C076CC01
4C076CC41
4C076EE59
4C084AA02
4C084BA01
4C084BA02
4C084BA18
4C084BA41
4C084BA42
4C084BA44
4C084CA04
4C084CA59
4C084MA66
4C084NA05
4C084NA14
4C084ZA151
4C084ZA152
4C084ZA161
4C084ZA162
4C084ZB051
4C084ZB052
4C084ZB091
4C084ZB092
4C085AA03
4C085AA38
4C085BB11
4C085DD59
4C085EE01
4C085EE03
4C085FF02
4C085FF14
4C085FF21
4C085FF24
4C085GG03
4C085GG04
4H045AA10
4H045AA11
4H045AA30
4H045BA10
4H045CA40
4H045DA75
4H045DA76
4H045EA20
(57)【要約】
抗リン酸化タウ抗体を、重篤な有害事象を誘発せずに、ヒトにおいて誘導するための方法が記載される。方法は、免疫原性担体とコンジュゲートされたタウホスホペプチドを含有する有効量の組成物を対象に投与することを含む。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
タウ、好ましくはリン酸化タウおよび濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）のうちの少なくとも１つに対する抗体を、それを必要とするヒト対象において誘導する方法であって、薬学的に許容される担体と、１用量当たり５μｇ～２００μｇのコンジュゲートとを含む組成物を、前記ヒト対象に投与することを含み、コンジュゲートは、式（Ｉ）：【化1】
式（ＩＩ）：
【化2】
（式中、
ｘは、０～１０、好ましくは２～６、最も好ましくは３の整数であり、
ｎは、３～１５、好ましくは３～１２の整数である）
担体は、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、破傷風トキソイド、ＣＲＭ１９７および髄膜炎菌（N. meningitidis）由来の外膜タンパク質混合物（ＯＭＰ）、またはそれらの誘導体からなる群から選択される免疫原性担体を表し、
タウペプチドは、配列番号１～配列番号３および配列番号５～配列番号１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するタウホスホペプチドを表す、方法。
【請求項2】
前記担体がＣＲＭ１９７である、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記タウホスホペプチドが、配列番号２のアミノ酸配列を有する、請求項２に記載の方法。
【請求項4】
前記コンジュゲートが、【化3】
の構造を有する、請求項３に記載の方法。
【請求項5】
前記組成物が、少なくとも１つのアジュバントをさらに含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項6】
前記少なくとも１つのアジュバントが、ＴＬＲ９アゴニストを含む、請求項５に記載の方法。
【請求項7】
前記ＴＬＲ９アゴニストが、配列番号１４～配列番号１８からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチドである、請求項６に記載の方法。
【請求項8】
前記ＣｐＧオリゴヌクレオチドが、配列番号１４のヌクレオチド配列を有する、請求項７に記載の方法。
【請求項9】
前記少なくとも１つのアジュバントが、水酸化アルミニウムを含む、請求項５から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項10】
リン酸化タウおよび濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）のうちの少なくとも１つに対する抗体を、それを必要とするヒト対象において誘導する方法であって、薬学的に許容される担体と、配列番号１４のヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチドと、１用量当たり５μｇ～２００μｇのコンジュゲートとを含む組成物を前記対象に投与することを含み、コンジュゲートは、【化4】
の構造を有する、方法。
【請求項11】
前記組成物が、水酸化アルミニウムをさらに含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項12】
１用量当たり５μｇ、１０μｇ、１５μｇ、２０μｇ、２５μｇ、３０μｇ、３５μｇ、４０μｇ、４５μｇ、５０μｇ、６０μｇ、７０μｇ、８０μｇ、９０μｇ、１００μｇ、１１０μｇ、１２０μｇ、１３０μｇ、１４０μｇ、１５０μｇ、１６０μｇ、１７０μｇ、１８０μｇ、１９０μｇ、またはそれらの間の任意の値のコンジュゲートを含む前記組成物を前記ヒト対象に投与することを含む、請求項１から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項13】
１用量当たり１５μｇのコンジュゲートを含む前記組成物を前記ヒト対象に投与することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項14】
１用量当たり４５～６０μｇ、例えば４５μｇ、５０μｇ、５５μｇ、６０μｇ、またはそれらの間の任意の値のコンジュゲートを含む前記組成物を前記ヒト対象に投与することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項15】
１用量当たり１２０～１５０μｇ、例えば１２０μｇ、１２５μｇ、１３０μｇ、１３５μｇ、１４０μｇ、１４５μｇ、１５０μｇ、またはそれらの間の任意の値のコンジュゲートを含む前記組成物を前記ヒト対象に投与することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項16】
前記組成物が筋肉内投与される、請求項１から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項17】
前記組成物が皮下投与される、請求項１から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項18】
前記抗体が、好ましくはプラセボ対照のものよりも少なくとも５０、６０、７０、８０、９０、１００倍またはそれ以上の高さの抗ｐタウＩｇＧ力価を有する、前記リン酸化タウ（ｐタウ）に対するＩｇＧ抗体を含む、請求項１から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項19】
前記抗体が、好ましくはプラセボ対照のものよりも少なくとも５０、６０、７０、８０、９０、１００倍またはそれ以上の高さの抗タウＩｇＧ力価を有する、非リン酸化タウに対するＩｇＧ抗体を含む、請求項１から１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項20】
前記抗体が、好ましくはプラセボ対照のものよりも少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０倍またはそれ以上の高さの抗濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）ＩｇＧ力価を有する、ｅＰＨＦに対するＩｇＧ抗体を含む、請求項１から１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項21】
薬学的に許容される担体と、１用量当たり５μｇ～２００μｇ、例えば１５μｇまたは６０μｇの前記コンジュゲートとを含む第２の用量の前記組成物を、前記組成物の初回投与の４～１２週間後、例えば８週間後に前記対象に投与することをさらに含む、請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項22】
前記組成物の前記第２の用量の投与が、前記組成物によって誘導される抗体応答、例えば抗ｐタウＩｇＧ応答および／または抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ応答を含む抗体応答をブーストすることができ、好ましくは前記抗体応答が、前記第２の用量の前記組成物の投与の少なくとも２週間後に測定した場合に、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する、請求項２１に記載の方法。
【請求項23】
薬学的に許容される担体と、１用量当たり５μｇ～２００μｇ、例えば１５μｇまたは６０μｇの前記コンジュゲートとを含む第３の用量の前記組成物を、前記組成物の初回投与の２０～２８週間後、例えば２４週間後に前記対象に投与することをさらに含む、請求項２１または２２に記載の方法。
【請求項24】
前記第３の用量の前記組成物の投与が、前記組成物によって誘導される抗体応答、例えば抗ｐタウＩｇＧ応答および／または抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ応答を含む抗体応答をブーストすることができ、好ましくは前記抗体応答が、前記第３の用量の前記組成物の投与の少なくとも２週間後に測定した場合に、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する、請求項２３に記載の方法。
【請求項25】
薬学的に許容される担体と、１用量当たり５μｇ～２００μｇ、例えば１５μｇまたは６０μｇのコンジュゲートとを含む第４の用量の前記組成物を、前記組成物の初回投与の４４～５２週間後、例えば４８週間後に前記対象に投与することをさらに含む、請求項２３または２４に記載の方法。
【請求項26】
前記組成物の前記第４の用量の投与が、前記組成物によって誘導される抗体応答、例えば抗ｐタウＩｇＧ応答および／または抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ応答を含む抗体応答をブーストすることができ、好ましくは前記抗体応答が、前記第４の用量の前記組成物の投与の少なくとも２週間後に測定した場合に、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する、請求項２５に記載の方法。
【請求項27】
リン酸化タウタンパク質（ｐタウ）に対する持続的な免疫応答を、それを必要とするヒト対象において誘導する方法であって、ｉ．有効量のコンジュゲートを含むプライミングワクチンを前記対象に筋肉内投与すること、および
ｉｉ．前記プライミングワクチンの投与の６～１０週間後に、前記有効量のコンジュゲートを含む第１のブースターワクチンを前記対象に筋肉内投与すること
を含み、
前記持続的な免疫応答が、前記プライミングワクチンの投与後に少なくとも約２０週間持続し、
前記コンジュゲートが、式（Ｉ）：
【化5】
【化6】
（式中、
ｘは、０～１０、好ましくは２～６、最も好ましくは３の整数であり、
ｎは、３～１５、好ましくは３～１２の整数である）
担体は、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、破傷風トキソイド、ＣＲＭ１９７および髄膜炎菌由来の外膜タンパク質混合物（ＯＭＰ）、またはそれらの誘導体からなる群から選択される免疫原性担体を表し、
タウペプチドは、配列番号１～配列番号３および配列番号５～配列番号１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するタウホスホペプチドを表し、
前記有効量のコンジュゲートが、１用量当たり５μｇ～２００μｇの前記コンジュゲートを含む、方法。
【請求項28】
前記担体がＣＲＭ１９７である、請求項２７に記載の方法。
【請求項29】
前記タウホスホペプチドが、配列番号２のアミノ酸配列を有する、請求項２７または２８に記載の方法。
【請求項30】
前記コンジュゲートが、【化7】
ｎは３～７の整数であり、ＶＹＫＳ（ｐ）ＰＶＶＳＧＤＴＳ（ｐ）ＰＲＨＬ－ＣＯＮＨ２は配列番号２のホスホ－タウペプチドを含む）
の構造を有する、請求項２９に記載の方法。
【請求項31】
前記組成物が少なくとも１つのアジュバントをさらに含む、請求項２７から３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項32】
前記少なくとも１つのアジュバントがＴＬＲ９アゴニストを含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項33】
前記ＴＬＲ９アゴニストが、配列番号１４～配列番号１８からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチドである、請求項３２に記載の方法。
【請求項34】
前記ＣｐＧオリゴヌクレオチドが、配列番号１４のヌクレオチド配列を有する、請求項３３に記載の方法。
【請求項35】
前記少なくとも１つのアジュバントが水酸化アルミニウムを含む、請求項３１から３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項36】
前記有効量のコンジュゲートが、１用量当たり１５μｇの前記コンジュゲートを含む、請求項２７から３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項37】
前記有効量のコンジュゲートが、１用量当たり６０μｇの前記コンジュゲートを含む、請求項２７から３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項38】
前記有効量のコンジュゲートを含む第２のブースターワクチン組成物を、前記プライミングワクチンの投与の２０～２６週間後に前記対象に筋肉内投与することをさらに含み、前記持続的な免疫応答が、前記プライミングワクチンの投与後に少なくとも約３６週間持続する、請求項２７から３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項39】
前記第２のブースターワクチン組成物が前記プライミングワクチンの投与の２４週間後に投与され、前記持続的な免疫応答が前記プライミングワクチンの投与後に少なくとも約４８週間持続する、請求項３８に記載の方法。
【請求項40】
前記有効量のコンジュゲートを含む第３のブースターワクチン組成物を、前記プライミングワクチンの投与の４５～５０週間後に前記対象に筋肉内投与することをさらに含み、前記持続的な免疫応答が、前記プライミングワクチンの投与後に少なくとも約６７週間持続する、請求項３８または３９に記載の方法。
【請求項41】
前記第３のブースターワクチン組成物が前記プライミングワクチンの投与の４８週間後に投与され、前記持続的な免疫応答が前記プライミングワクチンの投与後に少なくとも約７４週間持続する、請求項４０に記載の方法。
【請求項42】
前記持続的な免疫応答が、好ましくはプラセボ対照のものよりも少なくとも５０、６０、７０、８０、９０、１００倍またはそれ以上の高さの抗ｐタウＩｇＧ力価を有する、リン酸化タウ（ｐタウ）に対するＩｇＧ応答を含む、請求項２７から４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項43】
前記持続的な免疫応答が、好ましくはプラセボ対照のものよりも少なくとも５０、６０、７０、８０、９０、１００倍またはそれ以上の高さの抗タウＩｇＧ力価を有する、非リン酸化タウに対するＩｇＧ応答を含む、請求項２７から４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項44】
前記持続的な免疫応答が、好ましくはプラセボ対照のものよりも少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０倍またはそれ以上の高さの抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価を有する、濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）に対するＩｇＧ応答を含む、請求項２７から４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項45】
前記対象がタウの凝集体の排除を必要とする、請求項１から４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項46】
前記対象が、神経原線維病変の形成によって引き起こされるかまたはそれと関連する神経変性疾患または障害の処置を必要とする、請求項１から４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項47】
前記対象がアルツハイマー病の処置を必要とする、請求項４６に記載の方法。
【請求項48】
前記対象が、早期アルツハイマー病、またはアルツハイマー病に起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）の処置を必要とする、請求項４７に記載の方法。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年９月２９日に出願された米国仮特許出願第６３／２６１，７９３号の優先権を主張する国際出願であり、その開示はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２１年９月２９日に出願された米国仮特許出願第６３／２６１，７９３号の優先権を主張する国際出願であり、その開示はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
電子配列表の参照
電子配列表（０６５７９４＿８ＷＯ１．ｘｍｌ；サイズ：３５，７００バイト；および作成日：２０２２年８月２９日）の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
電子配列表（０６５７９４＿８ＷＯ１．ｘｍｌ；サイズ：３５，７００バイト；および作成日：２０２２年８月２９日）の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0003】
発明の分野
本出願は医学の分野におけるものである。本出願は詳細には、神経変性疾患、障害または状態に罹患している対象において、免疫原性担体とコンジュゲートされたリン酸化タウ（ｐタウ）ペプチドを含む組成物を用いて、タウタンパク質に対する免疫応答を誘導するための方法に関する。
本出願は医学の分野におけるものである。本出願は詳細には、神経変性疾患、障害または状態に罹患している対象において、免疫原性担体とコンジュゲートされたリン酸化タウ（ｐタウ）ペプチドを含む組成物を用いて、タウタンパク質に対する免疫応答を誘導するための方法に関する。
【0004】
背景
アルツハイマー病（ＡＤ）は、世界中で推定４４００万人が患う進行性衰弱性神経変性疾患である（Alzheimers.net）。現在商業化されているＡＤ療法は、臨床症状に作用することを目的としているが、疾患の根底にある発病過程（疾患修飾効果）を標的としていない。残念なことに、現在の療法は最小限度で有効であるに過ぎず、したがって追加の防止および治療措置を開発して試験する緊急の必要性が存在する。
アルツハイマー病（ＡＤ）は、世界中で推定４４００万人が患う進行性衰弱性神経変性疾患である（Alzheimers.net）。現在商業化されているＡＤ療法は、臨床症状に作用することを目的としているが、疾患の根底にある発病過程（疾患修飾効果）を標的としていない。残念なことに、現在の療法は最小限度で有効であるに過ぎず、したがって追加の防止および治療措置を開発して試験する緊急の必要性が存在する。
【0005】
アルツハイマー病に特徴的な病態は、著しく凝集したアミロイドベータタンパク質を含む細胞外プラークの蓄積、および過剰リン酸化タウタンパク質の細胞内「濃縮体（tangle）」または凝集である。これらのタンパク質の蓄積を引き起こす分子事象は特徴付けが不十分である。アミロイドに関しては、アミロイド前駆体タンパク質の異常な切断がアミノ酸１～４２を含む易凝集性断片の蓄積を引き起こすと仮定されている。タウに関しては、キナーゼ、ホスファターゼ、またはその両方の調節不全がタウの異常なリン酸化を引き起こすと仮定されている。タウは、過剰リン酸化すると、微小管と効果的に結合してそれを安定化させる能力を喪失し、代わりに影響を受けたニューロンの細胞質に蓄積する。未結合過剰リン酸化タウは、初めにオリゴマー、次いでより高次の凝集体を形成するようであり、これらの存在は、それらが形成されるニューロンの機能に、おそらくは正常な軸索輸送の中断を介して、負の影響を及ぼすと考えられる。
【0006】
先進諸国では、アルツハイマー病または他の認知症性タウオパチーと診断された個体は、一般的にコリンエステラーゼ阻害薬（例えばＡｒｉｃｅｐｔ（登録商標））またはメマンチン（例えばＮａｍｅｎｄａ（商標））を用いて処置される。これらの薬物は、適度に良好な忍容性を示すが、非常にわずかな有効性を有する。例えば、Ａｒｉｃｅｐｔ（登録商標）は、処置された個体のうちのおよそ５０％において、症状の悪化を６～１２か月遅延させる。残りの処置は、非薬理的であり、患者の認知能力が低下する一方で患者が日々の課題をより処理できるようにすることに焦点を当てている。
【0007】
ＡＤの防止および処置のための免疫療法は現在開発中である。ＡＤと関連がある抗原を用いる能動免疫化は、ＡＤに対する抗体性免疫と細胞性免疫の両方の応答を潜在的に賦活化することができる。しかし、最初の広く試験されたヒト抗アミロイドベータワクチンの評価は２００２年に停止された。致死的となり得る中枢神経系炎症の一種である髄膜脳炎は、Ａβを標的とする能動免疫療法剤ＡＮ－１７９２のＡＤ患者における臨床研究において観察された（Orgogozo et al., 2003）。ＡＮ－１７９２に曝露された患者のうちの６％に生じた脳炎反応は、望まないＡβ特異的Ｔ細胞活性化によって誘導されたと考えられる。
【0008】
今日まで、タウ病態を特異的に標的とする薬剤を用いて行われた研究はほとんど存在しない。現在、タウ免疫療法は臨床試験に移行しているが、この分野は依然として初期の段階にあり、様々な手法の有効性および安全性の機構的理解は十分に確立していない（Sigurdsson, Neurodegener Dis. 2016; 16(0): 34-38）。脳炎、すなわち脳の炎症は、全長タウタンパク質に対して免疫化されたマウスにおいても報告されている。しかし、有害作用は、ＣＮＳ炎症誘発性環境下でリン酸化タウペプチドの単回注射を用いて免疫化された動物からは報告されなかった（Rosenmann H., 2013. Curr. Alzheimer Res. 10, 217-228）。
【0009】
軽度から中等度のアルツハイマー病を有するヒト患者における非タウホスホペプチドワクチン（ＡＡＤｖａｃ１）の長期安全性プロファイルが公開されている（Novak et al., Alzheimer's Research & Therapy (2018) 10:108）。このワクチンは、Ｎ末端システインを介してキーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）とカップリングしたタウ配列のアミノ酸２９４～３０５に由来する合成ペプチドを含有する。このワクチンは、０．３ｍｌのリン酸緩衝液容量中、ＫＬＨとカップリングした４０μｇの用量のペプチド（ＣＫＤＮＩＫＨＶＰＧＧＧＳ、配列番号１３）において水酸化アルミニウムアジュバント（０．５ｍｇのＡｌ３＋を含有する）と共に投与された。研究に登録され、第１相研究（ＦＵＮＤＡＭＡＮＴ研究）においてＡＡＤｖａｃ１処置と関連付けられた２６名の患者から観察された有害事象（ＡＥ）は、注射部位反応（紅斑、腫脹、熱感、掻痒、疼痛、小結節）であった。これらのＡＥのうちの１つまたは複数が、ＡＡＤｖａｃ１処置の患者のうちの５０％に観察された。注射部位反応は可逆的であり、発現においては主に軽度であった。６つの重篤な有害事象（ＳＡＥ）が観察された（腹部絞扼性ヘルニア、脱水、急性精神病、認知症の行動および精神症状、第２度房室ブロック、ならびに洞性徐脈）。ＳＡＥのいずれも、研究者によってＡＡＤｖａｃ１処置と関連があるとは判断されなかった。アレルギー反応もアナフィラキシー反応も観察されなかった。安全性シグナルは、臨床検査評価（凝固、血液生化学、血液学、および尿検査）においても、バイタルサイン評価においても、または神経学的および身体的検査においても出現しなかった。安全性シグナルは、ＭＲＩ評価によって検出されなかった。浮腫状変化は生じなかった。髄膜変化および髄膜脳炎は観察されなかった。新たな微小出血が１名のＡｐｏＥ４ホモ接合体において観察され、脳表ヘモジデリンが１名のＡｐｏＥ４ヘテロ接合体において検出され、両事象は臨床的に無症状であった。このことは、ＡＤ患者集団におけるそのような病変の背景発生率と矛盾しないと考えられた。
【0010】
しかし、ヒト患者におけるタウホスホペプチドコンジュゲートの安全性プロファイルは報告されていない。アルツハイマー病等のニューロン変性疾患に対する安全かつ効果的な処置の必要性が存在する。
【発明の概要】
【0011】
全般的な一態様では、本出願は、タウ、好ましくはリン酸化タウおよび濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）のうちの少なくとも１つに対する抗体を、それを必要とするヒト対象において誘導する方法であって、１用量当たり５μｇ～２００μｇのコンジュゲートを含む組成物をヒト対象に投与することを含み、コンジュゲートは、式（Ｉ）：
【0012】
【化1】
【0013】
【化2】
（式中、
ｘは、０～１０、好ましくは２～６、最も好ましくは３の整数であり、
ｎは、３～１５、好ましくは３～１２の整数である）
担体は、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、破傷風トキソイド、ＣＲＭ１９７および髄膜炎菌（N. meningitidis）由来の外膜タンパク質混合物（ＯＭＰ）、またはそれらの誘導体からなる群から選択される免疫原性担体を表し、
タウペプチドは、配列番号１～配列番号３および配列番号５～配列番号１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するタウホスホペプチドを表す、方法に関する。
【0014】
全般的な一態様では、本出願は、タウ、好ましくはリン酸化タウおよび濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）のうちの少なくとも１つに対する抗体を、それを必要とするヒト対象において誘導するための組成物であって、１用量当たり５μｇ～２００μｇのコンジュゲートを含み、コンジュゲートは、式（Ｉ）：
【0015】
【化3】
【0016】
【化4】
（式中、
ｘは、０～１０、好ましくは２～６、最も好ましくは３の整数であり、
ｎは、３～１５、好ましくは３～１２の整数である）
担体は、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、破傷風トキソイド、ＣＲＭ１９７および髄膜炎菌由来の外膜タンパク質混合物（ＯＭＰ）、またはそれらの誘導体からなる群から選択される免疫原性担体を表し、
タウペプチドは、配列番号１～配列番号３および配列番号５～配列番号１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するタウホスホペプチドを表す、組成物に関する。
【0017】
一実施形態では、組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。
【0018】
本出願の一実施形態では、コンジュゲートは、リンカーを介してＣＲＭ１９７とコンジュゲートされた、配列番号１～配列番号３または配列番号５～配列番号１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するタウホスホペプチドを含む。好ましくは、タウペプチドは、配列番号２のアミノ酸配列を有するタウホスホペプチドである。複数のタウホスホペプチド、例えば２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれ以上のタウホスホペプチドを、１つの担体タンパク質とコンジュゲートさせることができる。より好ましくは、コンジュゲートは、
【0019】
【化5】
ｎは３～７の整数であり、ＶＹＫＳ（ｐ）ＰＶＶＳＧＤＴＳ（ｐ）ＰＲＨＬ－ＣＯＮＨ２は配列番号２のホスホ－タウペプチドを含む）
の構造を有する。
【0020】
本出願の実施形態において、組成物は、少なくとも１つのアジュバントをさらに含む。例えば、少なくとも１つのアジュバントは、ＴＬＲ９アゴニスト、例えば配列番号１４～配列番号１８からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチドを含み得る。一実施形態では、組成物は、配列番号１４のヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチドをさらに含む。別の実施形態では、組成物は、水酸化アルミニウムをさらに含む。さらに別の実施形態では、組成物は、配列番号１４～配列番号１８からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチド、および水酸化アルミニウムをさらに含む。
【0021】
本出願の実施形態において、タウ、好ましくはリン酸化タウおよび対らせん状細線維（ＰＨＦ）のうちの少なくとも１つに対する抗体を、それを必要とするヒト対象において誘導する方法は、薬学的に許容される担体と、水酸化アルミニウムと、配列番号１４のヌクレオチド配列を有するＣｐＧオリゴヌクレオチドと、１用量当たり５μｇ～２００μｇのコンジュゲートとを含む組成物を、ヒト対象に投与することを含み、コンジュゲートは、
【0022】
【化6】
の構造を有する。
【0023】
ある特定の実施形態では、本出願の方法は、１用量当たり５μｇ、１０μｇ、１５μｇ、２０μｇ、２５μｇ、３０μｇ、３５μｇ、４０μｇ、４５μｇ、５０μｇ、６０μｇ、７０μｇ、８０μｇ、９０μｇ、１００μｇ、１１０μｇ、１２０μｇ、１３０μｇ、１４０μｇ、１５０μｇ、１６０μｇ、１７０μｇ、１８０μｇ、１９０μｇ、２００μｇ、またはそれらの間の任意の値の本明細書に記載されるコンジュゲートを含む組成物を、ヒト対象に投与することを含む。
【0024】
ある特定の実施形態では、組成物は筋肉内投与される。他の実施形態では、組成物は皮下投与される。
【0025】
ある特定の実施形態では、抗体は、好ましくはプラセボ対照のものよりも少なくとも５０、６０、７０、８０、９０、１００倍またはそれ以上の高さの抗ｐタウＩｇＧ力価を有する、リン酸化タウ（ｐタウ）に対するＩｇＧ抗体を含む。
【0026】
ある特定の実施形態では、抗体は、好ましくはプラセボ対照のものよりも少なくとも５０、６０、７０、８０、９０、１００倍またはそれ以上の高さの抗タウＩｇＧ力価を有する、非リン酸化タウに対するＩｇＧ抗体を含む。
【0027】
ある特定の実施形態では、抗体は、好ましくはプラセボ対照のものよりも少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０倍またはそれ以上の高さの抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価を有する、濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）に対するＩｇＧ抗体を含む。
【0028】
ある特定の実施形態では、本出願の方法は、薬学的に許容される担体と、１用量当たり５μｇ～２００μｇ、例えば１５μｇまたは６０μｇのコンジュゲートとを含む第２の用量の組成物を、組成物の初回投与の４～１２週間後、例えば８週間後に対象に投与することをさらに含む。
【0029】
ある特定の実施形態では、第２の用量の組成物の投与は、組成物によって誘導される抗体応答、例えば抗ｐタウＩｇＧ応答および／または抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ応答を含む抗体応答をブーストすることができ、好ましくは抗体応答は、第２の用量の組成物の投与の少なくとも２週間後に測定した場合に、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する。
【0030】
ある特定の実施形態では、本出願の方法は、薬学的に許容される担体と、１用量当たり５μｇ～２００μｇ、例えば１５μｇまたは６０μｇのコンジュゲートとを含む第３の用量の組成物を、組成物の初回投与の２０～２８週間後、例えば２４週間後に対象に投与することをさらに含む。
【0031】
ある特定の実施形態では、第３の用量の組成物の投与は、組成物によって誘導される抗体応答、例えば抗ｐタウＩｇＧ応答および／または抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ応答を含む抗体応答をブーストすることができ、好ましくは抗体応答は、第３の用量の組成物の投与の少なくとも２週間後に測定した場合に、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する。
【0032】
ある特定の実施形態では、本出願の方法は、薬学的に許容される担体と、１用量当たり５μｇ～２００μｇ、例えば１５μｇまたは６０μｇのコンジュゲートとを含む第４の用量の組成物を、組成物の初回投与の４４～５２週間後、例えば４８週間後に対象に投与することをさらに含む。
【0033】
ある特定の実施形態では、第４の用量の組成物は、組成物によって誘導される抗体応答、例えば抗ｐタウＩｇＧ応答および／または抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ応答を含む抗体応答をブーストすることができ、好ましくは抗体応答は、第４の用量の組成物の投与の少なくとも２週間後に測定した場合に、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％またはそれ以上増加する。
【0034】
全般的な一態様では、本出願は、リン酸化タウタンパク質（ｐタウ）に対する持続的な免疫応答を、それを必要とするヒト対象において誘導する方法であって、
ｉ．有効量のコンジュゲートを含むプライミングワクチンを対象に筋肉内投与すること、および
ｉｉ．プライミングワクチンの投与の６～１０週間後に、有効量のコンジュゲートを含む第１のブースターワクチンを対象に筋肉内投与すること
を含み、
持続的な免疫応答が、プライミングワクチンの投与後に少なくとも約２０週間持続し、
コンジュゲートが、式（Ｉ）：
ｉ．有効量のコンジュゲートを含むプライミングワクチンを対象に筋肉内投与すること、および
ｉｉ．プライミングワクチンの投与の６～１０週間後に、有効量のコンジュゲートを含む第１のブースターワクチンを対象に筋肉内投与すること
を含み、
持続的な免疫応答が、プライミングワクチンの投与後に少なくとも約２０週間持続し、
コンジュゲートが、式（Ｉ）：
【0035】
【化7】
【0036】
【化8】
（式中、
ｘは、０～１０、好ましくは２～６、最も好ましくは３の整数であり、
ｎは、３～１５、好ましくは３～１２の整数である）
担体は、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、破傷風トキソイド、ＣＲＭ１９７および髄膜炎菌由来の外膜タンパク質混合物（ＯＭＰ）、またはそれらの誘導体からなる群から選択される免疫原性担体を表し、
タウペプチドは、配列番号１～配列番号３および配列番号５～配列番号１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するタウホスホペプチドを表し、
有効量のコンジュゲートが、１用量当たり５μｇ～２００μｇのコンジュゲートを含む、方法に関する。
【0037】
ある特定の実施形態では、担体はＣＲＭ１９７である。
【0038】
ある特定の実施形態では、有効量のコンジュゲートは、１用量当たり１５μｇのコンジュゲートを含む。
【0039】
ある特定の実施形態では、有効量のコンジュゲートは、１用量当たり６０μｇのコンジュゲートを含む。
【0040】
ある特定の実施形態では、本出願の方法は、有効量のコンジュゲートを含む第２のブースターワクチン組成物を、プライミングワクチンの投与の２０～２６週間後に対象に筋肉内投与することをさらに含み、持続的な免疫応答は、プライミングワクチンの投与後に少なくとも約３６週間持続する。
【0041】
ある特定の実施形態では、第２のブースターワクチン組成物は、プライミングワクチンの投与の２４週間後に投与され、持続的な免疫応答は、プライミングワクチンの投与後に少なくとも約４８週間持続する。
【0042】
ある特定の実施形態では、本出願の方法は、有効量のコンジュゲートを含む第３のブースターワクチン組成物を、プライミングワクチンの投与の４５～５０週間後に対象に筋肉内投与することをさらに含み、持続的な免疫応答は、プライミングワクチンの投与後に少なくとも約６７週間持続する。
【0043】
ある特定の実施形態では、第３のブースターワクチン組成物は、プライミングワクチンの投与の４８週間後に投与され、持続的な免疫応答は、プライミングワクチンの投与後に少なくとも約７４週間持続する。
【0044】
ある特定の実施形態では、持続的な免疫応答は、好ましくはプラセボ対照のものよりも少なくとも５０、６０、７０、８０、９０、１００倍またはそれ以上の高さの抗ｐタウＩｇＧ力価を有する、リン酸化タウ（ｐタウ）に対するＩｇＧ応答を含む。
【0045】
ある特定の実施形態では、持続的な免疫応答は、好ましくはプラセボ対照のものよりも少なくとも５０、６０、７０、８０、９０、１００倍またはそれ以上の高さの抗タウＩｇＧ力価を有する、非リン酸化タウに対するＩｇＧ応答を含む。
【0046】
ある特定の実施形態では、持続的な免疫応答は、好ましくはプラセボ対照のものよりも少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０倍またはそれ以上の高さの抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価を有する、濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）に対するＩｇＧ応答を含む。
【0047】
ある特定の実施形態では、対象は、タウの凝集体の排除を必要とする。
【0048】
ある特定の実施形態では、対象は、神経原線維病変の形成によって引き起こされるかまたはそれと関連する神経変性疾患または障害の処置を必要とする。好ましくは、ヒト対象は、アルツハイマー病、例えば早期アルツハイマー病、アルツハイマー病に起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）、軽度アルツハイマー病、または軽度から中等度のアルツハイマー病の処置を必要とする。ある特定の実施形態では、対象は、脳においてアミロイド陽性であるが、顕著な認知障害をまだ示していない。他の実施形態では、対象は、ＡＤ病態と矛盾しない脳脊髄液（ＣＳＦ）Ａベータアミロイド４２（Ａβ４２）の異常レベルを有する。別の実施形態では、対象は、神経原線維病変の形成によって引き起こされるかまたはそれと関連する神経変性疾患または障害の処置を必要とする。
【0049】
本発明のさらなる態様、特色、および利点は、本発明の以下の詳細な説明および特許請求の範囲を読むことでより良好に理解されるだろう。
【図面の簡単な説明】
【0050】
本発明の前述の概要および以下の詳細な説明は、添付の図面と併せて読む場合、より良好に理解されるだろう。本発明を説明する目的で、現在好ましい実施形態が図面に示されている。しかし、本発明は図面に示される正確な実施形態に限定されないことが理解されるべきである。
【0051】
【図1】ＪＡＣＩ－３５．０５４（１５μｇまたは６０μｇ）またはプラセボ（ＩＴＴ分析セット）のいずれかを用いた処置後のサブコホート２．１における、リン酸化タウペプチド（ｐタウ）を対象にする経時的な抗ｐタウＩｇＧ応答の幾何平均（±９５％信頼区間）のグラフである。
【図2】ＪＡＣＩ－３５．０５４（１５μｇまたは６０μｇ）またはプラセボ（ＩＴＴ分析セット）のいずれかによる処置後のサブコホート２．１における、非リン酸化タウペプチドを対象とする経時的な抗タウＩｇＧ応答の幾何平均（±９５％信頼区間）のグラフである。
【図3】ＪＡＣＩ－３５．０５４（１５μｇまたは６０μｇ）またはプラセボ（ＩＴＴ分析セット）のいずれかによる処置後のサブコホート２．１における、経時的な抗ｅＰＨＦ（濃縮対らせん状細線維）ＩｇＧ力価の幾何平均（±９５％信頼区間）のグラフである。
【図4-1】ホスホ－ペプチドＴ３．３０（配列番号１９）およびＴ３．８５（配列番号２１）ならびに非ホスホ－ペプチドＴ３．５６（配列番号２０）およびＴ３．８６（配列番号２２）をカバー範囲とする短い８－ｍｅｒ重複ペプチドに関するエピトープマッピングＥＬＩＳＡによって決定された、ＪＡＣＩ－３５．０５４（１５μｇ）を用いたワクチン接種によって誘導された８名のＡＤ患者における抗体のエピトープ認識プロファイルのグラフである。図４Ａは、サブコホート２．１における抗リン酸化タウ抗体のエピトープ認識プロファイルを示す。図４Ｂは、サブコホート２．１における抗タウ抗体のエピトープ認識プロファイルを示す。Ｏ．Ｄ．＝光学密度。
【図4-2】（上記の通り。）
【0052】
発明の詳細な記述
様々な刊行物、論文、特許および特許出願が背景技術および本明細書全体にわたって引用または記載されるが、これらの参考文献のそれぞれはその全体が参照によって本明細書に組み込まれる。本明細書に含まれている文書、行為、材料、デバイス、物品等に関する考察は、本発明のための文脈を提供することを目的とする。そのような考察は、開示または特許請求されるいかなる発明に関しても、これらの事項のいずれかまたは全てが先行技術の一部を形成することを承認するものではない。
様々な刊行物、論文、特許および特許出願が背景技術および本明細書全体にわたって引用または記載されるが、これらの参考文献のそれぞれはその全体が参照によって本明細書に組み込まれる。本明細書に含まれている文書、行為、材料、デバイス、物品等に関する考察は、本発明のための文脈を提供することを目的とする。そのような考察は、開示または特許請求されるいかなる発明に関しても、これらの事項のいずれかまたは全てが先行技術の一部を形成することを承認するものではない。
【0053】
別段の定義がない限り、本明細書で使用する全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般的に理解されるものと同じ意味を有する。その他の場合、本明細書で使用するある特定の用語は本明細書に記載される意味を有する。
【0054】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用する場合、単数形の「１つの（a）」、「１つの（an）」、および「その（the）」は、文脈上別段の指示が明確にない限り、複数の指示対象を含むことに留意しなければならない。
【0055】
別段の記述がない限り、本明細書に記載されるあらゆる数値、例えば濃度または濃度範囲は、全ての場合において「約」という用語によって修飾されていると理解されるべきである。したがって、数値は典型的には示された値の±１０％を含む。例えば、１ｍｇ／ｍＬの濃度は０．９ｍｇ／ｍＬ～１．１ｍｇ／ｍＬを含む。同様に、１％～１０％（ｗ／ｖ）の濃度範囲は０．９％（ｗ／ｖ）～１１％（ｗ／ｖ）を含む。本明細書で使用する場合、数値範囲の使用は、文脈上別段の指示が明確にない限り、全ての可能な部分範囲、すなわち、そのような範囲内の整数およびその値の小数部を含むその範囲内の全ての個々の数値を明白に含む。
【0056】
別段の指示がない限り、一連の要素に先行する「少なくとも」という用語は、その一連のあらゆる要素を指すと理解されるべきである。当業者は、単に慣例的な実験を使用して、本明細書に記載される本発明の具体的な実施形態の多くの均等物を認識するかまたは確かめることができるだろう。そのような均等物は本発明によって包含されると意図される。
【0057】
本明細書で使用する場合、「含む（comprises）」、「含む（comprising）」、「含む（includes）」、「含む（including）」、「有する（has）」、「有する（having）」、「含有する（contains）」、もしくは「含有する（containing）」という用語、またはそれらの任意の他の変化形は、述べられた整数または整数群を含むがいかなる他の整数も整数群も除外するものではないということを含意すると理解することができ、非排他的または非限定的であると意図される。例えば、リストの要素を含む組成物、混合物、工程、方法、物品、または装置は、必ずしもそれらの要素のみに限定されず、明示的に列挙されていないかまたはそのような組成物、混合物、工程、方法、物品、もしくは装置に固有の他の要素を含むことができる。さらに、反対のことが明示的に述べられていない限り、「または」は、排他的な「または」ではなく、非排他的な「または」を指す。例えば、条件１または２は、以下：１が真である（または存在する）かつ２が偽である（または存在しない）、１が偽である（または存在しない）かつ２が真である（または存在する）、および１と２の両方が真である（または存在する）のうちのいずれか１つによって満たされる。
【0058】
好ましい発明の構成成分の寸法または特徴に言及する場合に本明細書で使用する「約」、「およそ」、「全般的に」、「実質的に」という用語、および同様の用語が、記載された寸法／特徴は、当業者によって理解され得るように、厳密な境界でもパラメータでもなく、機能的に同じであるかまたは類似するそこからのわずかな変動を除外しないことを示すということもまた理解されるべきである。少なくとも、数値パラメータを含むような指示対象は、当技術分野で受け入れられている数学的および工業的原理（例えば、丸め、測定または他の系統誤差、製作公差等）を使用する、最下位桁を変えることのない変動を含み得る。
【0059】
本発明は、タウ、好ましくはリン酸化タウおよび濃縮対らせん状細線維（ｅＰＨＦ）のうちの少なくとも１つに対する抗体を、脳炎等の重篤な有害事象を誘発せずに、それを必要とするヒト対象において誘導する方法を提供する。特定の実施形態では、方法は、直接的にまたはリンカーを介して免疫原性担体と共有結合により連結されたタウホスホペプチドを含む有効量のコンジュゲートを対象に投与することを含む。
【0060】
本明細書で使用する場合、「抗リン酸化タウ抗体」という用語は、タウのアミノ酸配列の１つまたは複数の位置のアミノ酸残基がリン酸化されているタウに結合する抗体を指す。リン酸化されるアミノ酸残基は例えば、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、またはチロシン（Ｔｙｒ）であり得る。抗リン酸化タウ抗体が結合するリン酸化タウの部位は好ましくは、アルツハイマー病等の神経変性疾患において特異的にリン酸化される部位である。抗リン酸化タウ抗体が結合するリン酸化タウの部位の例としては、例えば、Ｔｙｒ１８、Ｓｅｒ１９９、Ｓｅｒ２０２、Ｔｈｒ２０５、Ｔｈｒ２１２、Ｓｅｒ２１４、Ｓｅｒ３９６、Ｓｅｒ４０４、Ｓｅｒ４０９、Ｓｅｒ４２２、Ｔｈｒ４２７が挙げられる。本出願全体にわたって使用する場合、アミノ酸位は、アミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００５９０１．２に表されるヒト微小管関連タンパク質タウアイソフォーム２の配列を参照して得られる。
【0061】
投与時に抗リン酸化タウ抗体を誘導できるかどうかは、対象由来の生体試料（例えば、血液、血漿、血清、ＰＢＭＣ、尿、唾液、糞便、間質液（ＩＳＦ）、ＣＳＦまたはリンパ液）を、医薬組成物において投与された免疫原性タウペプチドを対象とする抗体、例えば、ＩｇＧまたはＩｇＭ抗体の存在に関して試験することによって決定することができる（例えば、Harlow, 1989, Antibodies, Cold Spring Harbor Pressを参照のこと）。例えば、免疫原を提供する組成物の投与に応答して産生される抗体の力価は、酵素連結免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、他のＥＬＩＳＡに基づくアッセイ（例えば、ＭＳＤ－Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）、ドットブロット、ＳＤＳ－ＰＡＧＥゲル、ＥＬＩＳＰＯＴ、または抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）アッセイによって測定することができる。
【0062】
本明細書で使用する場合、「有害事象」（ＡＥ）という用語は、医薬製剤が投与された患者における、処置との因果関係を必ずしも有しないあらゆる好ましくない医療上の出来事を指す。本発明の実施形態において、ＡＥは以下の定義を使用する、重症度が増加する３段階の尺度により評価される：軽度（グレード１）、対象によって容易に耐えられ、最小の不快感を引き起こし、日常活動を妨害しないＡＥを指す；中等度（グレード２）、正常な日常活動を妨害するほど十分に不快であり、介入が必要となる場合があるＡＥを指す；重度（グレード３）、正常な日常活動を妨げ、処置または他の介入が通例必要であるＡＥを指す。重篤なＡＥ（ＳＡＥ）とは、以下の転帰のいずれかをもたらす任意の用量において生じるいかなるＡＥであってもよい：事象ではなく転帰である死亡；事象の発現時点で患者が死亡のリスクにさらされているある事象を指す、生命を脅かすもの；生命を脅かすものは、仮により重度であった場合に死亡を引き起こした可能性がある事象を指さない；治療のための入院、例えば、計画外の一晩の入院、または現行の入院の延長；正常な生活機能を遂行する能力の、永続的もしくは顕著な機能不全または実質的な破壊；先天異常／先天性欠損；患者を危険にさらすおそれがあるか、または上に列挙した他の転帰のうちの１つを防止するための医学的もしくは外科的介入を必要とし得る重要な医学的事象（研究者によって判断される）（例えば、アレルギー性気管支痙攣のための緊急治療室もしくは自宅での集中処置、または入院に至らない血液疾患もしくは痙攣）。入院とは、病院への公式な受け入れである。入院または入院の延長は、ＡＥが重篤となる基準を構成するが、それ自体はＳＡＥとは見なされない。ＡＥの非存在下では、入院または入院の延長は、参加している研究者によってＳＡＥとして報告されるべきではない。これは、以下の状況において当てはまり得る：入院もしくは入院の延長がプロトコルによって必要とされる手順に必要である；または入院もしくは入院の延長が、中央施設が従う慣例的な手順（例えば外科処置後のステント除去）の一部である。このことは、研究ファイルに記録されるべきである。研究中に悪化しなかった既存の状態の待機的処置のための入院は、ＡＥとは見なされない。
【0063】
入院中に生じる合併症はＡＥである。合併症が入院を延長させるか、または他のＳＡＥ基準のいずれかを満たす場合、その事象はＳＡＥである。
【0064】
本明細書で使用する場合、「脳炎」という用語は、感染性および非感染性の原因に起因し得る脳の炎症を指す。本明細書で使用する場合、「髄膜脳炎」という用語は、脳髄膜および脳の感染症または炎症によって特徴付けられる状態を指す。脳炎または髄膜脳炎の診断は、本開示を考慮すると、当業者に公知の技法によって、例えば、臨床的、神経学的、および精神医学的検査、血液およびＣＳＦ試料採取を含む生体試料採取、ＭＲＩ走査法、ならびに脳波記録法（ＥＥＧ）によって決定することができる。
【0065】
本明細書で使用する場合、微小管関連タンパク質タウ、ＭＡＰＴ、神経原線維濃縮体タンパク質、対らせん状細線維－タウ、ＰＨＦ－タウ、ＭＡＰＴＬ、ＭＴＢＴ１としても公知である「タウ」または「タウタンパク質」という用語は、複数のアイソフォームを有する豊富に存在する中枢および末梢神経系タンパク質を指す。ヒト中枢神経系（ＣＮＳ）では、３５２～４４１アミノ酸長のサイズの範囲の６種類の主要なタウアイソフォームが選択的スプライシングのために存在する（Hanger et al., Trends Mol Med. 15:112-9, 2009）。タウの例としては、これらに限定されないが、ＣＮＳにおけるタウアイソフォーム、例えば４つの反復配列と２つの挿入断片とを有する、微小管関連タンパク質タウアイソフォーム２とも命名される４４１アミノ酸の最も長いタウアイソフォーム（４Ｒ２Ｎ）、例えばアミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００５９０１．２に表されるヒトタウアイソフォーム２が挙げられる。タウの他の例としては、３つの反復配列を有し、挿入断片を有しない、微小管関連タンパク質タウアイソフォーム４とも命名される３５２アミノ酸の長さの最も短い（胎児型）アイソフォーム（３Ｒ０Ｎ）、例えばアミノ酸配列がＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿０５８５２５．１に表されるヒトタウアイソフォーム４が挙げられる。タウの例としてはまた、３００の追加の残基（エクソン４ａ）を含有する、末梢神経に発現する「大型タウ」アイソフォームが挙げられる。Friedhoff et al., Biochimica et Biophysica Acta 1502 (2000) 122-132。タウの例としては、６７６２ヌクレオチドの長さのｍＲＮＡ転写物（ＮＭ＿０１６８３５．４）によってコードされる７５８アミノ酸の長さのタンパク質であるヒト大型タウ、またはそのアイソフォームが挙げられる。例示されるヒト大型タウのアミノ酸配列はＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿０５８５１９．３に表される。本明細書で使用する場合、「タウ」という用語には、ヒト以外の種、例えば、カニクイザル（Macaca Fascicularis）（カニクイザル）、リーサスザル、またはチンパンジー（Pan troglodytes）（チンパンジー）由来のタウの相同体が含まれる。本明細書で使用する場合、「タウ」という用語には、全長野生型タウの変異、例えば点変異、断片、挿入、欠失、およびスプライスバリアントを含むタンパク質が含まれる。「タウ」という用語にはまた、タウアミノ酸配列の翻訳後修飾が包含される。翻訳後修飾としては、これに限定されないが、リン酸化が挙げられる。
【0066】
本明細書で使用する場合、「ペプチド」または「ポリペプチド」という用語は、ペプチド結合を介して連結した、アミノ酸残基から構成されるポリマー、関連する天然に存在する構造バリアント、およびその天然に存在しない合成アナログを指す。この用語は、任意のサイズ、構造、または機能のペプチドを指す。典型的には、ペプチドは少なくとも３アミノ酸の長さである。ペプチドは、天然に存在するペプチド、組換えペプチド、もしくは合成ペプチド、またはそれらの任意の組合せであり得る。合成ペプチドは、例えば全自動ポリペプチド合成装置を使用して合成することができる。タウペプチドの例としては、約５～約３０アミノ酸長、好ましくは約１０～約２５アミノ酸長、より好ましくは約１６～約２１アミノ酸長のタウタンパク質の任意のペプチドが挙げられる。本開示では、ペプチドは、リン酸残基が「ｐ」で示される標準的な３または１文字アミノ酸略記法を使用してＮ末端からＣ末端へと列挙される。本発明に有用なタウペプチドの例としては、これらに限定されないが、配列番号１～１２のいずれかのアミノ酸配列を含むタウペプチド、または配列番号１～１２のいずれかのアミノ酸配列と少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一のアミノ酸配列を有するタウペプチドが挙げられる。
【0067】
抗体のアビディティは、本開示を考慮すると、当技術分野で公知の方法を使用してアビディティ指数によって測定することができる。特定の抗原に対する抗体の力価は、コーティングされた抗原の２つの異なる濃度で測定される：一方は全ての抗体が抗原に結合することができる飽和濃度であり、もう一方は非常に高い結合能を有する抗体のみが抗原に結合することができる低濃度である。本明細書で使用する場合、「アビディティ指数」は、抗原の低密度コーティングおよび高密度コーティングで測定される抗体力価のレベルの比を指す。例えば、抗原、例えばｅＰＨＦまたはｐタウに対する抗体のアビディティを、１回の免疫化の後もしくは複数の免疫化の後に複数の異なる時点で測定して、アビディティ（アビディティ指数によって測定した場合）が経時的に増加するか否かを評価することができる。本明細書で使用する場合、抗原に対する「アビディティの増加」または「結合アビディティの増加」を有する抗体は、処置または免疫化の過程において経時的に、抗原に対するアビディティ指数の増加を有する抗体を指す。アビディティの増加は、抗体の親和性成熟の可能性があることを示唆する。
【0068】
本明細書で使用される場合、「ホスホペプチド」または「ホスホ－エピトープ」という用語は、１つまたは複数のアミノ酸残基においてリン酸化されているペプチドを指す。タウホスホペプチドの例としては、１つまたは複数のリン酸化アミノ酸残基を含む任意のタウペプチドが挙げられる。当業者に公知の任意の好適なタウホスホペプチドは、本開示を考慮すると、コンジュゲートに使用することができる。特定の実施形態において、１つまたは複数のタウホスホペプチドは、配列番号１～３もしくは５～１２のうちの１つのアミノ酸配列、または配列番号１～３もしくは５～１２のうちの１つのアミノ酸配列と少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、もしくは９５％同一のアミノ酸配列を含み、１つまたは複数の示されたアミノ酸残基はリン酸化されている。好ましくは、タウホスホペプチドは、配列番号１～３のうちの１つのアミノ酸配列を含む。異常なリン酸化タウは、容易に凝集して不溶なオリゴマーとなり、これは神経毒性を有し、神経変性の一因となる（Goedert et al, 1991）。オリゴマーは、いわゆる対らせん状細線維（ＰＨＦ）の濃縮体（tangle）へと進行する（Alonso et al., 2001）。神経原線維濃縮体病態の程度は、ＡＤ対象における認知症の程度と相関することが一貫して示されている（Bierer et al, 1995; Braak and Braak, 1991; Delacourte, 2001）。
【0069】
本発明に有用なタウペプチドは、固相ペプチド合成または組換え発現系によって合成することができる。自動ペプチド合成装置は数多くの供給業者、例えばＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ、Ｃａｌｉｆ．）から市販されている。組換え発現系としては、細菌、例えば大腸菌（E. coli）、酵母、昆虫細胞、または哺乳動物細胞を挙げることができる。組換え発現の手順は、Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (C.S.H.P. Press, NY 2d ed., 1989)によって記載されている。
【0070】
コンジュゲート
本発明に有用なコンジュゲートの例としては、これらに限定されないが、米国特許出願公開第２０１９／０１１９３４１号明細書に記載されているタウホスホペプチドコンジュゲートが挙げられ、それぞれの開示は、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる。
本発明に有用なコンジュゲートの例としては、これらに限定されないが、米国特許出願公開第２０１９／０１１９３４１号明細書に記載されているタウホスホペプチドコンジュゲートが挙げられ、それぞれの開示は、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる。
【0071】
特定の態様において、コンジュゲートは、以下の構造：
【0072】
【化9】
【0073】
【化10】
（式中、
ｘは、０～１０の整数であり、
ｎは、２～１５、好ましくは３～１１の整数である）
担体は、免疫原性担体を表し、
タウペプチドは、タウホスホペプチドを表す。
【0074】
本明細書で使用される場合、「免疫原性担体」という用語は、タウペプチドとカップリングさせることができる免疫原性物質を指す。タウペプチドとカップリングされた免疫原性部分は、免疫応答を誘導して、タウペプチドに特異的に結合することができる抗体の産生を誘発することができる。免疫原性部分は、外来性と認識され、それによって宿主からの免疫学的応答を誘発させる、タンパク質、ポリペプチド、糖タンパク質、複合多糖、粒子、核酸、ポリヌクレオチド等を含む作動部分である。当業者に公知の任意の好適な免疫原性担体は、本開示を考慮すると、本発明に使用することができる。特定の実施形態において、免疫原性担体は、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、破傷風トキソイド、ＣＲＭ１９７（ジフテリア毒素の非毒性形態）、髄膜炎菌由来の外膜タンパク質混合物（ＯＭＰ）、またはそれらの誘導体である。特定の実施形態において、免疫原性担体はＣＲＭ１９７である。
【0075】
特定の実施形態において、タウペプチドは、リンカーを介して免疫原性担体とコンジュゲートされる。本明細書で使用される場合、「リンカー」という用語は、免疫原性担体をタウペプチドとつなぐ化学部分を指す。当業者に公知の任意の好適なリンカーは、本開示を考慮すると、本発明に使用することができる。リンカーは例えば、単一の共有結合、置換もしくは非置換アルキル、置換もしくは非置換ヘテロアルキル部分、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）リンカー、ペプチドリンカー、糖ベースのリンカー、もしくは切断可能なリンカー、例えばジスルフィド連結もしくはプロテアーゼ切断部位、もしくはアミノ酸、またはそれらの組合せであり得る。リンカーの例としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、スクシンイミジル３－（ブロモアセトアミド）プロピオネート（ＳＢＡＰ）、ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミジルエステル（ＭＢＳ）、または１つもしくは複数のアミノ酸、例えばＣｙｓ、Ｌｙｓもしくは時にはＳｅｒもしくはＴｈｒ、あるいはそれらの組合せのうちの１つまたは複数を挙げることができる。
【0076】
特定の実施形態において、ｘは、１～１０、２～９、２～８、２～７、２～６、２～５、２～４、または２～３の整数である。特定の実施形態において、ｘは３である。
【0077】
特定の実施形態において、複数のタウホスホペプチドが、１つの免疫原性担体とコンジュゲートされ得る。一部の実施形態では、ｎは、２～１５、３～１１、３～９、３～８、または３～７である。
【0078】
特定の実施形態において、コンジュゲートは、１つまたは複数のタウペプチドを含む。特定の実施形態において、コンジュゲートのタウペプチドは同じであることもでき、または異なることもできる。
【0079】
特定の実施形態において、タウホスホペプチドは、配列番号１～３のうちの１つのアミノ酸配列からなる。
【0080】
特定の実施形態において、リンカーは、（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｘ－システイン－アセトアミドプロピオンアミドまたはｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル－システイン－（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｘを含み、ここでｘは、０～１０の整数、例えば０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である。
【0081】
特定の実施形態において、担体は、リンカーを介して、タウホスホペプチドのＮ末端と共有結合により連結される。
【0082】
他の特定の実施形態において、担体は、リンカーを介して、タウペプチドのＣ末端と共有結合により連結される。
【0083】
特定の実施形態において、コンジュゲートは、
【0084】
【化11】
ｎは、２～１５の整数、好ましくは３～１１、より好ましくは３～７であり、ＶＹＫＳ（ｐ）ＰＶＶＳＧＤＴＳ（ｐ）ＰＲＨＬ－ＣＯＮＨ２は配列番号２のホスホ－タウペプチドを含む）
の構造を有する。
【0085】
本発明のコンジュゲートは、本開示を考慮すると、当技術分野で公知の方法によって作製することができる。例えば、上記のコンジュゲートは、スクシンイミジル－３－（ブロモアセトアミド）プロピオネート（ＳＢＡＰ）：
【0086】
【化12】
【0087】
医薬組成物
本発明に有用な有効量のコンジュゲートを、薬学的に許容される賦形剤および／または担体と共に含む医薬組成物は、本開示を考慮すると、当技術分野で公知の方法を使用して作製することができる。組成物中の各構成成分の最適な比は、本開示を考慮すると、当業者に周知の技法によって決定することができる。
本発明に有用な有効量のコンジュゲートを、薬学的に許容される賦形剤および／または担体と共に含む医薬組成物は、本開示を考慮すると、当技術分野で公知の方法を使用して作製することができる。組成物中の各構成成分の最適な比は、本開示を考慮すると、当業者に周知の技法によって決定することができる。
【0088】
薬学的に許容される賦形剤および／または担体は当技術分野で周知である（Remington's Pharmaceutical Science (15th ed.), Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1980を参照のこと）。医薬組成物の好ましい製法は、所期の投与方法および治療用途に依存する。組成物は、動物またはヒト投与のための医薬組成物を製剤化するために一般的に使用されるビヒクルとして定義される、薬学的に許容される非毒性の担体または希釈剤を含むことができる。希釈剤は、組合せ体の生物活性に影響を及ぼさないように選択される。そのような希釈剤の例は、蒸留水、生理学的リン酸緩衝食塩水、リンガー液、デキストロース溶液、およびハンクス液である。加えて、医薬組成物または製剤はまた、他の担体、アジュバント、または非毒性、非治療性、および非免疫原性安定剤等を含んでもよい。担体、賦形剤、または希釈剤の特徴は特定の用途のための投与経路に依存し得ることが理解されるだろう。
【0089】
医薬組成物は、コンジュゲートと同じ免疫原性タウペプチドとの混合物を含有することができる。あるいは、医薬組成物は、コンジュゲートと本発明の異なる免疫原性タウペプチドとの混合物を含有することもできる。
【0090】
特定の実施形態において、コンジュゲートは、対象において所望の免疫応答を達成するために、好適なアジュバントと組み合わせて投与することができる。好適なアジュバントは、本発明のコンジュゲートの投与の前、後、または同時に投与することができる。好ましいアジュバントは、応答の質的な形式に影響を及ぼす免疫原の立体構造変化を引き起こさずに、免疫原に対する固有の応答を増大させる。
【0091】
一実施形態では、本出願の方法に有用なアジュバントは、アルミニウム塩（アラム）、例えば水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム、および硫酸アルミニウムである。
【0092】
別の実施形態では、本出願の方法に有用なアジュバントは、ＴＬＲアゴニスト、例えばＣｐＧオリゴヌクレオチドである。本明細書で使用する場合、「ＣｐＧオリゴヌクレオチド」、「ＣｐＧオリゴデオキシヌクレオチド」、または「ＣｐＧ ＯＤＮ」という用語は、少なくとも１つのＣｐＧモチーフを含むオリゴヌクレオチドを指す。本明細書で使用する場合、「オリゴヌクレオチド」、「オリゴデオキシヌクレオチド」または「ＯＤＮ」とは、複数の連結したヌクレオチド単位から形成されるポリヌクレオチドを指す。そのようなオリゴヌクレオチドは、現存する核酸源から取得することができるか、または合成法によって生産することができる。本明細書で使用する場合、「ＣｐＧモチーフ」という用語は、リン酸結合またはホスホジエステル骨格または他のヌクレオチド間連結、例えばホスホロチオエート（ｐｓ）、ホスホロジチオエート（ｐｓ２）、メチルホスホネート（ｍｐ）、またはメチルホスホロチオエート（ｒｐ）によって連結した非メチル化シトシン－リン酸－グアニン（ＣｐＧ）ジヌクレオチド（すなわち、シトシン（Ｃ）の次にグアニン（Ｇ）が続く）を含有するヌクレオチド配列を指す。ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、メチルホスホネートおよびメチルホスホロチオエートは、安定化性ヌクレオチド間連結であり、一方、ホスホジエステルは天然に存在するヌクレオチド間連結である。オリゴヌクレオチドホスホロチオエートは典型的にはＲｐおよびＳｐホスホロチオエート連結の無作為なラセミ混合物として合成される。本開示を考慮すると、当業者に公知のいかなる好適なＣｐＧオリゴヌクレオチドも本発明に使用することができる。そのようなＣｐＧオリゴヌクレオチドの例としては、これらに限定されないが、ＣｐＧ２００６（ＣｐＧ ７９０９としても公知）、ＣｐＧ １０１８、ＣｐＧ２３９５、ＣｐＧ２２１６またはＣｐＧ２３３６が挙げられる。
【0093】
特定の実施形態において、ＣｐＧオリゴヌクレオチドは脂質化、すなわち、脂質部分とコンジュゲート（共有結合により連結）している。本明細書で使用する場合、「脂質部分」とは、親油性構造を含有する部分を指す。脂質部分、例えば、アルキル基、脂肪酸、トリグリセリド、ジグリセリド、ステロイド、スフィンゴ脂質、糖脂質、またはリン脂質、特にコレステロール等のステロールまたは脂肪酸は、高度に親水性の分子、例えば核酸に結合する場合、血漿タンパク結合、および結果として親水性分子の循環半減期を実質的に向上させることができる。加えて、ある特定の血漿タンパク質、例えばリポタンパク質に結合することは、対応するリポタンパク質受容体（例えば、ＬＤＬ受容体、ＨＤＬ受容体、またはスカベンジャー受容体ＳＲ－Ｂ１）を発現する特定の組織への取込みを増加させることが示されている。特に、ホスホペプチドおよび／またはＣｐＧオリゴヌクレオチドとコンジュゲートした脂質部分は、前記ペプチドおよび／またはオリゴヌクレオチドをリポソームの膜に疎水性部分を介して固定することを可能にする。
【0094】
そのようなアジュバントは、他の特異的免疫賦活剤、例えば、ＭＰＬＡ類（３脱－Ｏ－アシル化モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ（商標））、モノホスホリルヘキサアシルリピドＡ ３－脱アシル合成（３Ｄ－（６－ａｃｙｌ）ＰＨＡＤ（登録商標）、ＰＨＡＤ（商標）、ＰＨＡＤ（登録商標）－５０４、３Ｄ－ＰＨＡＤ（登録商標））リピドＡ）、ポリマーもしくはモノマーアミノ酸、例えばポリグルタミン酸もしくはポリリジンと共にまたはこれらを伴わずに使用することができる。そのようなアジュバントは、他の特異的免疫賦活剤、例えば、ムラミルペプチド（例えば、Ｎ－アセチルムラミル－Ｌ－スレオニル－Ｄ－イソグルタミン（ｔｈｒ－ＭＤＰ）、Ｎ－アセチル－ノルムラミル－Ｌ－アラニル－Ｄ－イソグルタミン（ｎｏｒ－ＭＤＰ）、Ｎ－アセチルムラミル－Ｌ－アラニル－Ｄ－イソグルタミニル－Ｌ－アラニン－２－（１’－２’ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ヒドロキシホスホリルオキシ）－エチルアミン（ＭＴＰ－ＰＥ）、Ｎ－アセチルグルコサミニル－Ｎ－アセチルムラミル－Ｌ－Ａｌ－Ｄ－ｉｓｏｇｌｕ－Ｌ－Ａｌａ－ジパルミトキシプロピルアミド（ＤＴＰ－ＤＰＰ）Ｔｈｅｒａｍｉｄｅ（商標））、もしくは他の細菌細胞壁構成成分と共にまたはこれらを伴わずに使用することができる。水中油型エマルションとしては、マイクロ流動化装置を使用してマイクロメートル未満の粒子に製剤化される、５％スクアレン、０．５％Ｔｗｅｅｎ８０、および０．５％Ｓｐａｎ８５を含有する（任意選択で、様々な量のＭＴＰ－ＰＥを含有する）ＭＦ５９（国際公開第９０／１４８３７号パンフレットを参照のこと）；マイクロメートル未満のエマルションにマイクロ流動化されるかまたはより大きな粒径のエマルションを生成するためにボルテックスされる、１０％スクアレン、０．４％Ｔｗｅｅｎ８０、５％ｐｌｕｒｏｎｉｃブロックポリマーＬ１２１、およびｔｈｒ－ＭＤＰを含有するＳＡＦ；ならびにＲｉｂｉ（商標）アジュバントシステム（ＲＡＳ）（Ｒｉｂｉ ＩｍｍｕｎｏＣｈｅｍ、Ｈａｍｉｌｔｏｎ、Ｍｏｎｔ．）０．２％Ｔｗｅｅｎ８０、および、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ（商標））、トレハロースジミコール酸（ＴＤＭ）、および細胞壁骨格（ＣＷＳ）、好ましくはＭＰＬ（商標）＋ＣＷＳ（Ｄｅｔｏｘ（商標））からなる群から選択される１つまたは複数の細菌細胞壁構成成分が挙げられる。他のアジュバントとしては、完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）、ならびにサイトカイン、例えば、インターロイキン（ＩＬ－１、ＩＬ－２、およびＩＬ－１２）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）、および腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）が挙げられる。
【0095】
ある特定の実施形態では、本出願の方法に有用な医薬組成物は、本明細書に記載される１つまたは複数の好適なアジュバント、例えばアルミニウム塩、例えば、水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム、および／もしくは硫酸アルミニウム、ならびに／またはａＣｐＧ、例えば、ＣｐＧ２００６（ＣｐＧ ７９０９としても公知）、ＣｐＧ １０１８、ｐＧ２３９５、ＣｐＧ２２１６もしくはＣｐＧ２３３６をさらに含む。一実施形態では、医薬組成物は、薬学的に許容される担体、水酸化アルミニウム、ＣｐＧ ７９０９、およびリンカーを介して共有結合によりＣＲＭ１９７と連結されたタウホスホペプチドのコンジュゲートを含む。
【0096】
他の実施形態では、医薬組成物は、本明細書に記載されるコンジュゲート、１つもしくは複数のアジュバント、１つもしくは複数のアミノ酸、例えばヒスチジンもしくはグリシンを含む緩衝液、１つもしくは複数の炭水化物、例えばグルコースもしくはスクロースと、および／または界面活性剤、例えばポリソルベート８０、ポリソルベート２０などを含む。
【0097】
使用方法
本出願の全般的な一態様は、神経変性疾患、障害、または状態に罹患したヒト対象においてタウタンパク質に対する免疫応答を安全に誘導する方法であって、有効量のリン酸化タウコンジュゲートを含む医薬組成物を対象に投与することを含む方法に関する。特定の態様において、免疫応答は、タウタンパク質、好ましくはリン酸化タウタンパク質、より好ましくはｅＰＨＦに対して誘導される。
本出願の全般的な一態様は、神経変性疾患、障害、または状態に罹患したヒト対象においてタウタンパク質に対する免疫応答を安全に誘導する方法であって、有効量のリン酸化タウコンジュゲートを含む医薬組成物を対象に投与することを含む方法に関する。特定の態様において、免疫応答は、タウタンパク質、好ましくはリン酸化タウタンパク質、より好ましくはｅＰＨＦに対して誘導される。
【0098】
本明細書で使用する場合、「有効量」という用語は、対象において所望の生物学的または医学的応答を誘発する有効成分または構成成分の量を指す。特定の有効用量の選択は、処置または防止される疾患、関係している症状、患者の体重、患者の免疫状況、および当業者によって公知の他の因子を含むいくつかの因子の考慮に基づいて、当業者によって（例えば臨床試験を介して）決定することができる。製剤に用いられる正確な用量は、投与方法、投与経路、標的部位、患者の生理状態、投与される他の医薬、および疾患の重症度にも依存し得、実施者の判断および各患者の状況に従って決定されるべきである。例えば、免疫原性担体タンパク質とコンジュゲートされたタウホスホペプチドの有効量は、アジュバントもまた投与されるか否かにも依存し、アジュバントの非存在下ではより高い投薬量が必要とされる。有効用量は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたは動物モデル試験系に由来する用量応答曲線から外挿することができる。
【0099】
１つまたは複数のタウホスホペプチドに免疫原性担体をコンジュゲートさせることができるため、有効量のコンジュゲートは、免疫原性担体タンパク質の総重量、それとコンジュゲートされた１つまたは複数のタウホスホペプチド、およびコンジュゲート中の１つまたは複数のリンカー（使用される場合）を含む。本出願の実施形態において、コンジュゲートの有効量は、１用量当たり約５μｇ～約２００μｇ、好ましくは１用量当たり約１５μｇ～約１５０μｇ、例えば１用量当たり５μｇ、１０μｇ、１５μｇ、２０μｇ、２５μｇ、３０μｇ、３５μｇ、４０μｇ、４５μｇ、５０μｇ、６０μｇ、７０μｇ、８０μｇ、９０μｇ、１００μｇ、１１０μｇ、１２０μｇ、１３０μｇ、１４０μｇ、１５０μｇ、１７５μｇ、２００μｇ、またはそれらの間の任意の値の免疫原性担体である。好ましくは、有効用量は、１用量当たり１５μｇ、最大で６０μｇ、例えば４５μｇ、５０μｇ、５５μｇ、６０μｇ、もしくはそれらの間の任意の値であるか、または最大で１５０μｇ、例えば１２０μｇ、１２５μｇ、１３０μｇ、１３５μｇ、１４０μｇ、１４５μｇ、１５０μｇ、もしくはそれらの間の任意の値である。
【0100】
本明細書で使用する場合、「誘導する」および「賦活化する」という用語ならびにそれらの変化形は、細胞活性の任意の測定可能な上昇を指す。免疫応答の誘導としては、例えば、免疫細胞の集団の活性化、増殖、もしくは成熟、サイトカインの産生を増加させること、および／または免疫機能の増加の別の指標を挙げることができる。ある特定の実施形態では、免疫応答の誘導としては、Ｂ細胞の増殖を高めること、抗原特異的抗体を産生させること、抗原特異的Ｔ細胞の増殖を高めること、樹状細胞抗原提示を向上すること、ならびに／またはある特定のサイトカイン、ケモカイン、および共刺激マーカーの発現を増加させることを挙げることができる。
【0101】
動物またはヒト生物体における投与時に抗タウ免疫応答を誘導または賦活化する能力は、当技術分野で標準的な種々のアッセイを使用して、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏのいずれかで評価することができる。免疫応答の開始および活性化を評価するために利用可能な技法の一般的な記載については、例えば、Coligan et al.（1992 and 1994, Current Protocols in Immunology; ed. J Wiley & Sons Inc, National Institute of Health）を参照のこと。細胞性免疫の測定は、当技術分野で既知の方法によって、例えば、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋ Ｔ細胞に由来するものを含む活性化エフェクター細胞によって分泌されるサイトカインプロファイルの測定（例えば、ＥＬＩＳＰＯＴによるＩＬ－４またはＩＦＮγ産生細胞の定量化）によって、免疫エフェクター細胞の活性化状態の決定（例えば、古典的［３Ｈ］チミジン取り込みによるＴ細胞増殖アッセイ）によって、感作された対象において抗原特異的Ｔリンパ球に関してアッセイすること（例えば、細胞傷害性アッセイにおけるペプチド特異的溶解等）によって、容易に行うことができる。
【0102】
細胞性および／または液性応答を賦活する能力は、対象由来の生体試料（例えば、血液、血漿、血清、ＰＢＭＣ、尿、唾液、糞便、ＣＳＦ、またはリンパ液）を、医薬組成物において投与された免疫原性タウペプチドを対象とする抗体の存在に関して試験することによって決定することができる（例えば、Harlow, 1989, Antibodies, Cold Spring Harbor Pressを参照のこと）。例えば、免疫原を提供する組成物の投与に応答して産生される抗体の力価は、酵素連結免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ドットブロット、ＳＤＳ－ＰＡＧＥゲル、ＥＬＩＳＰＯＴ、または抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）アッセイによって測定することができる。
【0103】
コンジュゲート組成物は、防止および／または治療処置のために、非経口的、局所的、静脈内、経口、皮下、動脈内、頭蓋内、腹腔内、皮内、鼻腔内、または筋肉内手段によって投与することができる。免疫原性物質の最も典型的な投与経路は、皮下または筋肉内注射である。この後者のタイプの注射は、最も典型的には、腕または脚の筋肉において実施される。
【0104】
プライミングおよびブースティング投与に関するレジメンが投与後に測定される免疫応答に基づいて調整できることは当業者によって容易に理解される。例えば、ブースティング組成物は全般的に、プライミング組成物の投与の数週間もしくは数か月後、例えば、約１週間、もしくは２週間、もしくは３週間、もしくは４週間、もしくは８週間、もしくは１６週間、もしくは２０週間、もしくは２４週間、もしくは２８週間、もしくは３２週間、もしくは３６週間、もしくは４０週間、もしくは４４週間、もしくは４８週間、もしくは５２週間、もしくは５６週間、もしくは６０週間、もしくは６４週間、もしくは６８週間、もしくは７２週間、もしくは７６週間、またはプライミング組成物の投与の１～２年後に投与される。
【0105】
特定の態様において、１回または複数回の追加免疫が投与され得る。それぞれのプライミングおよびブースティング組成物における抗原は、いかに多くのブースティング組成物が用いられるとしても、同一である必要はなく、共通の抗原決定基を有するかまたは互いに実質的に類似するべきである。
【0106】
当業者には公知であるように、免疫原性、ブースト可能性および持続可能性は、ワクチンの有効性にとって重要な考慮事項である。本明細書に記載される有効量のコンジュゲートの投与は、ｐタウに対する強力な抗体応答を、それを必要とする患者、例えば、アルツハイマー病（例えば、軽度から中等度のアルツハイマー病または早期アルツハイマー病）またはアルツハイマー病に起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）を処置することを必要とする患者において誘導することができることが、本発明において発見された。抗体応答は持続可能であり、例えば、少なくとも６週間持続する。抗体応答はまた、１回または複数回の後続のブースティング投与によって、ブーストもされる。本明細書で使用する場合、抗体応答の文脈における「ブーストされる」は、後続投与の投与の少なくとも２週間後に測定した場合に、後続の投与の後に維持または強化される抗体応答を指す。例えば、後続投与の２週間後に測定した場合の抗体力価が後続投与の前の抗体力価と比較して増加している場合には、抗体応答は、後続投与によって「ブーストされる」。
【0107】
特定の実施形態において、ヒト対象は、神経変性疾患、障害、または状態の処置を必要とする。
【0108】
本明細書で使用する場合、「神経変性疾患、障害、または状態」には、本開示を考慮すると、当業者に公知のあらゆる神経変性疾患、障害、または状態が含まれる。神経変性疾患、障害、または状態の例としては、神経原線維病変の形成によって引き起こされるかまたはそれと関連する神経変性疾患または障害、例えばタウオパチーと称されるタウ関連疾患、障害、または状態が挙げられる。特定の実施形態において、神経変性疾患、障害、または状態としては、アルツハイマー病、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、ボクサー認知症、ダウン症候群、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、筋萎縮性側索硬化症、グアム島のパーキンソン認知症複合、神経原線維濃縮体を伴う非グアム型運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、レビー認知症を伴う筋萎縮性側索硬化症（Dementia Lewy Amyotrophic Lateral sclerosis）、石灰化を伴うびまん性神経原線維濃縮体、前頭側頭型認知症、好ましくは第１７染色体と連鎖するパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症（ＦＴＤＰ－１７）、前頭側頭葉型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、濃縮体型認知症（Tangle only dementia）、脳炎後パーキンソン症候群、筋強直性ジストロフィー、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、原発性年齢関連タウオパチー（ＰＡＲＴ）、脳血管症、またはレビー小体型認知症（ＬＢＤ）を含むがこれらに限定されない、タウとアミロイド病理との共存を示す任意の疾患または障害が挙げられる。特定の実施形態において、神経変性疾患、障害、または状態は、アルツハイマー病または別のタウオパチーである。好ましい実施形態において、神経変性疾患、障害、または状態は、アルツハイマー病である。
【0109】
アルツハイマー病の臨床経過は、認知および機能障害の進行パターンにより複数の段階に分けることができる。段階は、例えばＮＩＡ－ＡＡ研究枠組みを含む当技術分野で公知の評価尺度（例えば、Dubois et al., Alzheimer's & Dementia 12 (2016) 292-323, Dubois et al., Lancet Neurol 2014; 13: 614-29, Jack et al., Alzheimer's & Dementia 14 (2018) 535-562を参照のこと）および臨床的認知症評価尺度（ＣＤＲ）（例えば、Berg L. Clinical Dementia Rating (CDR). Psychopharmacol Bull. 1988;24(4):637-639を参照のこと）を使用して定義することができ、それぞれの内容の全体は参照によって本明細書に組み込まれる。
【0110】
例えば、米国立老化研究所－アルツハイマー協会（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｎ Ａｇｉｎｇ－Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）（ＮＩＡ－ＡＡ）研究枠組みは、ＡＤを神経病理学的変化またはバイオマーカーによって生物学的に定義しており、認知機能障害を疾患の定義ではなく疾患の症状／徴候として扱っている（例えば、Clifford RJ, NIA-AA Research Framework: Toward a biological definition of Alzheimer's disease. Alzheimer's & Dementia 14 (2018) 535-562を参照、その内容は参照によって本明細書に組み込まれる）。ＮＩＡ－ＡＡの定義によれば、Ａβ沈着のみのバイオマーカーの初見（異常なアミロイドＰＥＴスキャン、またはＣＳＦ中のＡβ４２もしくはＡβ４２／Ａβ４０比が低い）を有し、病的タウのバイオマーカーが正常である個人には「アルツハイマー病的変化」というラベルが割り当てられ、Ａβおよび病的タウの両方のバイオマーカーの初見が存在する場合には、「アルツハイマー病」という用語が適用される。ＮＩＡ－ＡＡはまた、ＡＤの重症度を段階分けするためのシステムも開発した。特に、ＮＩＡ－ＡＡの定義（Clifford RJ, 2018、前記のText Box 2から転載）では、以下の通りである：
定義
Ａ：Ａβバイオマーカーは、個体がアルツハイマー連続体にあるか否かを決定する。
Ｔ：病的タウバイオマーカーは、アルツハイマー連続体にある者がアルツハイマー病を有するか否かを決定する。
重症度の段階分け：
（Ｎ）：神経変性／神経細胞損傷バイオマーカー
（Ｃ）：認知症状
ＡおよびＴはアルツハイマー病を定義する特異的な神経病理学的変化を示すが、（Ｎ）および（Ｃ）はアルツハイマー病に特異的ではなく、そのため、括弧内に入れてある。
定義
Ａ：Ａβバイオマーカーは、個体がアルツハイマー連続体にあるか否かを決定する。
Ｔ：病的タウバイオマーカーは、アルツハイマー連続体にある者がアルツハイマー病を有するか否かを決定する。
重症度の段階分け：
（Ｎ）：神経変性／神経細胞損傷バイオマーカー
（Ｃ）：認知症状
ＡおよびＴはアルツハイマー病を定義する特異的な神経病理学的変化を示すが、（Ｎ）および（Ｃ）はアルツハイマー病に特異的ではなく、そのため、括弧内に入れてある。
【0111】
好ましい実施形態において、神経変性疾患、障害、または状態は、早期アルツハイマー病、アルツハイマー病に起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）または軽度アルツハイマー病である。
【0112】
一部の実施形態では、神経変性疾患、障害、または状態は、軽度から中等度のアルツハイマー病である。
【0113】
一部の実施形態では、処置を必要とする対象は、脳においてアミロイド陽性であるが、顕著な認知障害をまだ示していない。脳におけるアミロイド沈着は、当技術分野で公知の方法、例えば、ＰＥＴ走査、免疫沈降質量分析、または他の方法を使用して（例えば、ＣＳＦバイオマーカーの使用）、検出することができる（Clifford RJ, NIA-AA Research Framework: Toward a biological definition of Alzheimer's disease. Alzheimer's & Dementia 14 (2018) 535-562）。
【0114】
他の実施形態では、処置を必要とするヒト対象は、ＡＤ病態と矛盾しない異常レベルのＣＳＦ Ａベータアミロイド４２（Ａβ４２）を有する。例えば、対象は、ＡＤ病態と矛盾しない低いレベルのＣＳＦ Ａβ４２または低いＡβ４２／Ａβ４０比を有し得る（例えば、Clifford RJ, 2018、前記およびその中の参考文献を参照、そのそれぞれの内容はその全体が参照によって本明細書に組み込まれる）。
【0115】
特定の態様において、１つまたは複数の追加の処置を、タウホスホペプチドコンジュゲートと組み合わせて施すことができる。追加の処置は、コンジュゲートの投与の前、後または同時のタウ抗原の投与を含み得る。追加の組成物中の抗原は、同一である必要はないが、コンジュゲートのタウホスホペプチドと共有の抗原決定基を有するかまたは互いに実質的に類似するべきである。
【0116】
したがって、ある特定の実施形態では、本出願の方法は、リポソームの表面に提示されているタウホスホペプチドを含むリポソームを対象に投与することをさらに含む。本発明に有用なタウリポソームの例としては、これらに限定されないが、米国特許第８，６４７，６３１号および同第９，６８７，４４７号、ならびに米国特許出願公開第２０１９／０１１９３４１号明細書に記載されているタウリポソームが挙げられ、それぞれの開示は、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる。例えば、本出願に有用なリポソームは、タウホスホペプチド；ヘルパーＴ細胞エピトープ；脂質化ＣｐＧオリゴヌクレオチド；およびｔｏｌｌ様受容体４リガンドを含有するアジュバントを含むことができ、タウホスホペプチドはリポソームの表面に提示される。
【0117】
ある特定の実施形態では、本出願の有効量のコンジュゲートの対象への投与は、少なくとも２０週間、例えば少なくとも２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９または３０週間にわたって抗ｐタウＩｇＧまたは抗タウＩｇＧ（非リン酸化タウペプチド）応答をもたらす。他の実施形態では、本出願の有効量のコンジュゲートの対象への投与は、ヒトＡＤ脳に由来する病的ｅＰＨＦタウを認識するＩｇＧ応答をもたらし、応答は、少なくとも２０週間、例えば少なくとも２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９または３０週間にわたって持続する。
【0118】
本明細書で使用する場合、２つまたはそれ以上の治療薬の対象への投与の文脈における「組み合わせて」は、複数の療法の使用を指す。「組合せにおいて」という用語の使用は、療法が対象に投与される順番を制限しない。
【0119】
組成物は、所望される場合、有効成分を含有する１つまたは複数の単位剤形を含有することができるキット、容器、または分注装置において提供することができる。キットは、例えば、ブリスターパックのように金属またはプラスチック箔を含むことができる。キット、容器、または分注装置には投与のための説明書を添付することができる。
【0120】
特定の実施形態において、キットは、本発明の実施形態におけるリポソームを含む医薬組成物、および本発明の実施形態におけるコンジュゲートを含む医薬組成物のうちの少なくとも１つを含む。
【実施例】
【0121】
[実施例１]
コンジュゲートワクチンの調製
ペプチドおよびアジュバント
本研究において使用されるタウホスホペプチド（配列番号２）は、合成中にホスホ－残基を付加して合成的に生産された（Ｐｅｐｓｃａｎ、ＮＬ）。リンカーを介して共有結合によりＣＲＭ担体と連結された配列番号２のアミノ酸配列を有するタウホスホペプチドを含むコンジュゲートは、本明細書においてＪＡＣＩ－３５．０５４と称される。
コンジュゲートワクチンの調製
ペプチドおよびアジュバント
本研究において使用されるタウホスホペプチド（配列番号２）は、合成中にホスホ－残基を付加して合成的に生産された（Ｐｅｐｓｃａｎ、ＮＬ）。リンカーを介して共有結合によりＣＲＭ担体と連結された配列番号２のアミノ酸配列を有するタウホスホペプチドを含むコンジュゲートは、本明細書においてＪＡＣＩ－３５．０５４と称される。
【0122】
ワクチンペプチドを、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）－システイン－アセトアミドプロピオンアミドリンカーを介して担体タンパク質ＣＲＭ１９７とコンジュゲートさせた。配列番号２のアミノ酸配列を有するタウホスホペプチドは、合成中にホスホ残基およびＰＥＧ３スペーサーを付加して合成的に生産された（Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ ＳＡＳ）。ＪＡＣＩ－３５．０５４は、スクシンイミジル３－（ブロモアセトアミド）プロピオネート（ＳＢＡＰ）リンカーを介して担体タンパク質ＣＲＭ１９７をペプチドのＮ末端上のシステインとコンジュゲートさせることによって製造された。ＳＢＡＰを、ＮＨＳエステル反応化学を介してＣＲＭ１９７タンパク質第一級アミン（－ＮＨ２）と連結した。過剰なＳＢＡＰリンカーは、限外濾過および透析濾過（ＵＦ／ＤＦ）を使用して除去した。ＣＲＭ１９７－ＳＢＡＰ中間体をタウホスホペプチドとコンジュゲートさせて、反応が完了したところで過剰量のＬ－シスチンを添加することによって反応を停止させ、コンジュゲーション反応を終了させた。粗ＣＲＭ１９７－ペプチドがコンジュゲートされた生成物をＣａｐｔｏ Ｑ ＩｍｐＲｅｓ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）クロマトグラフィーカラムを使用して精製し、塩均一濃度法を使用して溶出させた。続いて、精製されたＣＲＭ１９７－ペプチド生成物を、ＵＦ／ＤＦを使用して、ｐＨ ８．１の、トリスおよびスクロース、例えば、２０ｍＭトリス、２５０ｍＭスクロースを含有する緩衝液中で製剤化した。ポリソルベート８０（ＰＳ８０）ストック緩衝液、例えば１０％ ＰＳ８０ストック緩衝液を添加することによって０．０１％ ＰＳ８０の最終濃度に達するようにして、ＣＲＭ１９７－タウペプチド原薬（ＤＳ）ストック溶液を生成した。この溶液を濾過の前に十分に混合した。注射の前に、ストック溶液を、ＰＢＳおよびＣｐＧ／アラムで、例えば、ＣＲＭ１９７－タウペプチドの第１濃度０．８ｍｇ／ｍＬまで希釈し、続いて注射のためにＰＢＳおよびＣｐＧ／アラムで、ＣＲＭ１９７－タウペプチドの最終濃度３０ｕｇ／ｍＬまでさらに希釈した。あるいは、ＣＲＭ１９７－タウペプチドストック溶液を、１０ｍＭ ＰＢＳ（ｐＨ ７．３）中で３．１ｍｇ／ｍＬの濃度に維持し、所望の作業濃度に達するまでＰＢＳでさらに希釈した。続いて、ＣｐＧオリゴヌクレオチド、アラムおよびＰＢＳを添加してＣＲＭ１９７－ｐタウペプチドベースで３０ｕｇ／ｍＬの最終濃度に到達させて、最終的な製剤を注射の前に十分に混合した。
【0123】
活性ワクチンを用いてＣＮＳ抗原を標的化する上での１つの懸念は、非特異的なまたは標的外の炎症が望ましくない神経病理学的変化を引き起こす可能性があることである。このことについて調べるために、コンジュゲート組成物を用いて免疫化したマウスから全脳から採取し、血管周囲または他の細胞浸潤を可視化するために染色した。いずれの免疫化マウスにおいても、神経炎症、細胞浸潤、および他の望ましくない神経病理学的変化の徴候は全く認められなかった（データは示されず）。このことは、ワクチンにより誘導された抗体、およびワクチン接種に対する自然免疫応答が、マウスにおいて神経病理学的変化を引き起こさなかったことを示唆した。
【0124】
[実施例２]
アカゲザルにおけるＪＡＣＩ－３５．０５４の６か月間筋肉内毒性研究
目的
研究全体の目的は、ナイーブ雄性および雌性アカゲザルにおよそ６か月間にわたり投与した７回の筋肉内（ｉ．ｍ．）注射の後のＪＡＣＩ－３５．０５４（ＪＡＣＩ－３５．０５４）の毒性を決定すること、および４週間の回復期間後の変化の可逆性を評価することであった。
アカゲザルにおけるＪＡＣＩ－３５．０５４の６か月間筋肉内毒性研究
目的
研究全体の目的は、ナイーブ雄性および雌性アカゲザルにおよそ６か月間にわたり投与した７回の筋肉内（ｉ．ｍ．）注射の後のＪＡＣＩ－３５．０５４（ＪＡＣＩ－３５．０５４）の毒性を決定すること、および４週間の回復期間後の変化の可逆性を評価することであった。
【0125】
被験物質および参照物質をｉ．ｍ注射によって投与した。対照動物には、最終製剤中の活性部分を除去した化合物を投与される投薬群と同じ処置スケジュールで投薬した。
【0126】
デザイン
適用した研究プロトコルは、以下の通りであった（表１）。
適用した研究プロトコルは、以下の通りであった（表１）。
【0127】
【表1】
【0128】
被験物質ＪＡＣＩ－３５．０５４組成物（１５、５０および１５０μｇのＪＡＣＩ－３５．０５４をそれぞれ低用量、中用量および高用量レベルで、ならびに５００μｇのＣｐＧ７９０９および５６２．５μｇの水酸化アルミニウム懸濁液を含有する）および参照物質を、１、２９、５７、８５、１１３、１４１および１６９日目に筋肉内注射によって投与した。対照群には、トリス緩衝液（活性部分の代わりに）、ＣｐＧ７９０９および水酸化アルミニウム懸濁液の組合せである参照物質を投与した。
【0129】
体重を、順化期間から研究終了時まで毎週評価した。検眼鏡検査を、試験前に１回、ならびに４回目の投与および最終投与の５日後に実施した。心電図（四肢および増高導出）は、試験前に１回、ならびに４回目の投与および最終投与の後に各動物について記録した。血液および尿の試料を、臨床病理学（血液学、凝固、臨床化学および尿検査）のために全動物から、処置前に１回、９０日目および１７４日目（主研究および回復研究）、ならびに全生存動物について２０７日目（回復研究）に採取した。ＥＬＩＳＡ法による抗ｐタウ、抗ＣＲＭ１９７の決定のための血清に関する血液試料を、－１４、８、２２、３６、５０、６４、７８、９２、９９、１０６、１２０、１３４、１４８、１６２、１７６、１８３日目（主研究および回復研究）ならびに１９０、２０４および２１１日目（回復研究）に採取した。ＣＳＦは投薬前に１回および剖検前に採取した。免疫表現型検査用の血液は、投薬前、１６９日目および２１１日目（回復研究終了時）に採取した。ＰＭＢＣは、－１４日目および１８３日目（主研究および回復研究）ならびに２１１日目（回復研究）に採取した（Ｔ細胞応答に関するＥＬＩＳｐｏｔ）。ＪＡＣＩ－３５．０５４によって誘導された抗体（１５０μｇを投薬した動物の試験前および１８３日目に試料採取された血清）の、血縁関係のない３名の個体由来の４２件のヒト凍結組織のパネルに対する潜在的な結合活性を、免疫組織化学（ＩＨＣ）を使用して評価した。６か月間の投薬期間および４週間の回復研究期間の終了後に、主研究および回復研究の動物を安楽死させて剖検に供し、臓器重量および肉眼的観察初見を記録した。主研究および回復研究の全動物の脳、注射部位およびリンパ節について組織病理学的検査を実施した。
【0130】
ＪＡＣＩ－３５．０５４は、試験した全用量（１５、５０および１５０ｕｇ／ｍＬ）で、処置された全サルにおいて抗ｐタウＩｇＧ力価を誘導した。
【0131】
結果
監査付き報告書案からの結果は、１、２９、５７、８５、１１３、１４１および１６９日目の７回のｉ．ｍ．注射の後に、全ての用量レベルのＪＡＣＩ－３５．０５４がアカゲザルによって良好に忍容され、予期せぬ死亡は認められず、体重、眼科学、心電図検査、免疫表現型検査、臨床病理学または脳脊髄液パラメータ、臓器重量ならびに肉眼的／顕微鏡的所見のいずれについてもＪＡＣＩ－３５．０５４関連の臨床的徴候または影響は認められなかったことを示す。
監査付き報告書案からの結果は、１、２９、５７、８５、１１３、１４１および１６９日目の７回のｉ．ｍ．注射の後に、全ての用量レベルのＪＡＣＩ－３５．０５４がアカゲザルによって良好に忍容され、予期せぬ死亡は認められず、体重、眼科学、心電図検査、免疫表現型検査、臨床病理学または脳脊髄液パラメータ、臓器重量ならびに肉眼的／顕微鏡的所見のいずれについてもＪＡＣＩ－３５．０５４関連の臨床的徴候または影響は認められなかったことを示す。
【0132】
試験した全ての抗体パネルについて、研究群間で免疫細胞集団のサイズに顕著な差は認められなかった。被験物質処置群（第２群から第４群）で測定された種々の目的の細胞集団の濃度は対照群と同等であり、免疫細胞集団のサイズの変動はほとんどの集団で生物学的変動の範囲内に収まった。
【0133】
ＪＡＣＩ－３５．０５４で処置された一部の動物で観察された所見は、ごく軽度から中等度の皮膚感受性（紅斑および浮腫）に限られた。しかし、所見の性質が一過性であること、ならびに持続性および用量相関性の欠如から、ＪＡＣＩ－３５．０５４に対する明白な皮膚感受性の傾向は示唆されなかった。全ての肉眼的／顕微鏡的変化はアジュバントに関連し、実験手順による交絡を受けると考えられ、注射用量中のＪＡＣＩ－３５．０５４の存在によるものではないと考えられた。回復相における顕微鏡的変化の発生率がわずかに低く、それらが筋層に限定される傾向があることは、４週間の回復期間の後に炎症および変性／壊死プロセスがある程度消失したことを示唆する可能性がある。
【0134】
血縁関係のない３名の個体由来の４２件のヒト凍結組織に対して行われた免疫組織化学的検討により、１／３００および１／１００希釈で検査したＪＡＣＩ－３５．０５４により誘導されるサル抗体は、試験組織のいずれにおいても標的外染色を生じなかったことが明確に示された。
結論
結論
【0135】
総合すると、１、２９、５７、８５、１１３、１４１および１６９日目の７回の筋肉内注射の後に被験物質に関連した明らかな変化が存在しなかったことから、ＪＡＣＩ－３５．０５４の最大用量レベル（１５０μｇ）は本研究についての無影響量（ＮＯＥＬ）と考えられた。
【0136】
[実施例３]
マウスにおける３か月間反復皮下投与毒性研究
目的
本研究の目的は、被験物質ＣＲＭ１９７－ｐタウおよびＣｐＧ－７９０９、ならびにアジュバントとしての水酸化アルミニウムを用いて製剤化されたアジュバントワクチンであるＪＡＣＩ－３５．０５４組成物のＣＤ１マウスへの３か月間にわたる７回の皮下（ＳＣ）注射後の潜在的毒性を評価することであった。処置期間の終了後に、最終注射の２週間後（早期安楽死）またはさらなる２週間の無処置期間の後（後期安楽死）に指定動物を安楽死させ、所見の回復性または潜在的な遅発性影響について評価した。
デザイン
マウスにおける３か月間反復皮下投与毒性研究
目的
本研究の目的は、被験物質ＣＲＭ１９７－ｐタウおよびＣｐＧ－７９０９、ならびにアジュバントとしての水酸化アルミニウムを用いて製剤化されたアジュバントワクチンであるＪＡＣＩ－３５．０５４組成物のＣＤ１マウスへの３か月間にわたる７回の皮下（ＳＣ）注射後の潜在的毒性を評価することであった。処置期間の終了後に、最終注射の２週間後（早期安楽死）またはさらなる２週間の無処置期間の後（後期安楽死）に指定動物を安楽死させ、所見の回復性または潜在的な遅発性影響について評価した。
デザイン
【0137】
適用した研究プロトコルは、以下の通りであった（表２）。
【0138】
【表2】
【0139】
実験デザインは、ＪＡＣＩ－３５．０５４（１．７、５および１５μｇ／用量；ＣＲＭ１９７－ｐタウの用量として表される［第２、３および４群］）またはプラセボ／対照物質（トリス緩衝液、ならびにＣｐＧ７９０９および水酸化アルミニウムアジュバント［第１群］））を肩甲骨間領域（１、１５、２９、４３、５７、７１および８５日目）にＳＣ注射する、４群に割り当てたＳｗｉｓｓ ＣＤ１マウス（雄性６０匹および雌性６０匹）からなった。処置期間の終了時に、最終投与の２週間後に、最初に入手可能であった１２匹／性別／群を安楽死させ（早期安楽死）、第１群および第４群の最後の６匹／性別を、２週間の無処置期間の後（すなわち、被験物または対照物の最終注射から４週間後）に安楽死させた。評価した毒性パラメータおよび評価項目には、罹患率／死亡率、臨床観察所見、局所注射反応、体重、摂食量、眼科学、血液学、血液生化学および解剖学的な病理学的評価（臓器重量を含む）が含まれた。全動物について完全な剖検を実施し、全組織について肉眼的異常を記録し、顕微鏡検査を行った（処置期間終了時に安楽死させた第１群、第２群、第３群および第４群の動物ならびに無処置投与期間の終了時に安楽死させた群の潜在的な標的臓器を含む）。抗ＣＲＭ１９７ ＩｇＧおよび抗ｐタウＩｇＧの生成によって測定される免疫原性の決定のために、処置前、処置中および無処置期間中に全動物から血液を採取した。
【0140】
結果
被験物質ＪＡＣＩ－３５．０５４（１．７、５、および１５μｇ／用量）およびプラセボは、研究期間を通じて忍容性が概ね良好であり、ＳＣ投与後の大多数の動物において、体重、摂食量、眼科学、血液学および臓器重量に対する注目すべき臨床的徴候および影響は観察されなかった。研究中に２匹の動物の死亡が認められた（７８日目［１２週目］に第１群（対照）の雌１匹、および４３日目（７週目）に第３群（５μｇ）の雄１匹）。これらの死亡は、１匹の動物が対照群に属し、第３群の死亡した雄には特有の臨床観察所見、生存中の所見および顕微鏡的所見がいずれも関連付けられず同定もされなかったことから、偶発的であってＪＡＣＩ－３５．０５４投与とは無関係であると考えられた。さらに、ＪＡＣＩ－３５．０５４処置群の他の動物は、研究中に死亡もせず、人道的理由による安楽死も受けなかった。
被験物質ＪＡＣＩ－３５．０５４（１．７、５、および１５μｇ／用量）およびプラセボは、研究期間を通じて忍容性が概ね良好であり、ＳＣ投与後の大多数の動物において、体重、摂食量、眼科学、血液学および臓器重量に対する注目すべき臨床的徴候および影響は観察されなかった。研究中に２匹の動物の死亡が認められた（７８日目［１２週目］に第１群（対照）の雌１匹、および４３日目（７週目）に第３群（５μｇ）の雄１匹）。これらの死亡は、１匹の動物が対照群に属し、第３群の死亡した雄には特有の臨床観察所見、生存中の所見および顕微鏡的所見がいずれも関連付けられず同定もされなかったことから、偶発的であってＪＡＣＩ－３５．０５４投与とは無関係であると考えられた。さらに、ＪＡＣＩ－３５．０５４処置群の他の動物は、研究中に死亡もせず、人道的理由による安楽死も受けなかった。
【0141】
ＪＡＣＩ－３５．０５４投与の後に、抗ｐタウＩｇＧ力価は概ね用量依存的に増加したことから予期されたワクチン関連の免疫原性が確認され、抗ＣＲＭ１９７ ＩｇＧ力価も誘導された。処置終了時のさらなるＣＲＭ１９７－ｐタウ関連変化には、５μｇ／用量またはそれ以上を投与された雌および雄での中等度（グレード３）の肉芽腫性炎症の発生率の増加、ならびに総タンパク濃度の軽度上昇（＋３．６％～＋８．１％）、グロブリンに対するアルブミンの比の中等度低下（Ａ／Ｇ；－７．９％～－２１．２％）が含まれ、これらは抗原刺激に起因してＣＲＭ１９７－ｐタウにより誘導されるグロブリン濃度の上昇を反映すると考えられた。
【0142】
ＪＡＣＩ－３５．０５４の全処置群および対照群における、一般的なＳＣ注射手順または同時投与したアジュバント（特に水酸化アルミニウム懸濁液）に関連するさらなる注目すべき所見には、以下が含まれた：１）研究中の少なくとも１回の紅斑、肥厚および／または腫脹の臨床観察所見（一般にＪＡＣＩ－３５．０５４で処置された動物では、対照と比較してより高い頻度および／または重症度で観察され、用量依存的な傾向があった）、２）大多数の動物において剖検時の肥厚および白色腫瘤は、注射部位での壊死性／乾酪性中心を伴う肉芽腫および／または炎症性偽嚢胞によって特徴付けられる肉芽腫性炎症の顕微鏡観察としばしば相関した、ならびに３）腋窩リンパ節におけるリンパ球過形成および泡沫状マクロファージの浸潤。
【0143】
回復期間の後に、肥厚および腫脹の臨床的徴候は１．７μｇ／匹以上において、肉芽腫性炎症は５μｇ／匹以上において完全に可逆的であった。雌ではＡ／Ｇの低下が依然として認められ、いずれの群でも注射部位での回復はみられなかった。腋窩リンパ節におけるアジュバント関連所見（泡沫状マクロファージの発生率／重症度の低下）には部分的な回復がみられた。
【0144】
結論
以上の結論として、ＣｐＧ７９０９および水酸化アルミニウムを伴うＣＲＭ１９７－ｐタウのアジュバントワクチンとして製剤化されたＪＡＣＩ－３５．０５４（１．７、５および１５μｇ／用量）のＣＤ１マウスに対する２週間毎の７回のＳＣ投与は、忍容性が良好であった。予期された免疫原性と一致して、ＪＡＣＩ－３５．０５４に関連する抗ｐタウＩｇＧ力価および抗ＣＲＭ１９７ ＩｇＧ力価は、概ね用量依存的に誘導された。他のＣＲＭ１９７－ｐタウ関連所見は、５μｇ／匹／投与以上での完全に可逆的であった肉芽腫性炎症、総タンパク濃度の軽度上昇、および部分的に可逆的であったグロブリンに対するアルブミンの比の中等度低下に限られた。全ての所見が非有害性と考えられたことから、ＪＡＣＩ－３５．０５４の最大用量レベルである１５μｇが、本研究についての無毒性量（ＮＯＡＥＬ）と考えられた。
以上の結論として、ＣｐＧ７９０９および水酸化アルミニウムを伴うＣＲＭ１９７－ｐタウのアジュバントワクチンとして製剤化されたＪＡＣＩ－３５．０５４（１．７、５および１５μｇ／用量）のＣＤ１マウスに対する２週間毎の７回のＳＣ投与は、忍容性が良好であった。予期された免疫原性と一致して、ＪＡＣＩ－３５．０５４に関連する抗ｐタウＩｇＧ力価および抗ＣＲＭ１９７ ＩｇＧ力価は、概ね用量依存的に誘導された。他のＣＲＭ１９７－ｐタウ関連所見は、５μｇ／匹／投与以上での完全に可逆的であった肉芽腫性炎症、総タンパク濃度の軽度上昇、および部分的に可逆的であったグロブリンに対するアルブミンの比の中等度低下に限られた。全ての所見が非有害性と考えられたことから、ＪＡＣＩ－３５．０５４の最大用量レベルである１５μｇが、本研究についての無毒性量（ＮＯＡＥＬ）と考えられた。
【0145】
[実施例４]
ヒトにおけるＪＡＣＩ－３５．０５４の安全性および有効性
早期アルツハイマー病の対象における、５０週間（すなわち、１２か月）にわたるタウ標的ワクチンによる処置をプラセボと比較して評価するための多施設前向きプラセボ対照二重盲検ランダム化研究。研究集団は、米国立老化研究所－アルツハイマー協会（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｎ Ａｇｉｎｇ－Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）（ＮＩＡ－ＡＡ）の基準に従って軽度ＡＤまたはＡＤに起因するＭＣＩと診断された５０歳～７５歳の者（男性および女性）である。免疫化は０か月目（０週目）、２か月目（８週目）、６か月目（２４週目）および１２か月目（４８週目）に実施する。安全性および免疫原性の結果に基づいて、追加のレジメンを試験するためにプロトコルを改訂することができる。
ヒトにおけるＪＡＣＩ－３５．０５４の安全性および有効性
早期アルツハイマー病の対象における、５０週間（すなわち、１２か月）にわたるタウ標的ワクチンによる処置をプラセボと比較して評価するための多施設前向きプラセボ対照二重盲検ランダム化研究。研究集団は、米国立老化研究所－アルツハイマー協会（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｎ Ａｇｉｎｇ－Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）（ＮＩＡ－ＡＡ）の基準に従って軽度ＡＤまたはＡＤに起因するＭＣＩと診断された５０歳～７５歳の者（男性および女性）である。免疫化は０か月目（０週目）、２か月目（８週目）、６か月目（２４週目）および１２か月目（４８週目）に実施する。安全性および免疫原性の結果に基づいて、追加のレジメンを試験するためにプロトコルを改訂することができる。
【0146】
目的
主目的：研究ワクチンの安全性および忍容性を評価すること；ならびに研究ワクチンの免疫原性（血清中のｐタウに対するＩｇＧ力価の誘導）を評価すること。
主目的：研究ワクチンの安全性および忍容性を評価すること；ならびに研究ワクチンの免疫原性（血清中のｐタウに対するＩｇＧ力価の誘導）を評価すること。
【0147】
副次的目的：研究ワクチンの免疫原性（血清中のタウに対するＩｇＧ力価ならびにｐタウおよびタウに対するＩｇＭ力価の誘導）をさらに評価すること；および免疫化によって誘発される抗体のアビディティを評価すること。
【0148】
探索的目的：ＡＤの進行の推定バイオマーカー、すなわち、総タウおよびｐタウタンパク質の血中および／またはＣＳＦ中濃度に対する研究ワクチンの効果を調べること；血中のＴ細胞の活性化に対する研究ワクチンの効果を調べること；血中の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ－１Ｂ、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＦＮ－γ、およびＴＮＦ－α）に対する研究ワクチンの活性を調べること；免疫応答（例えば、ワクチン成分に対する抗体、ワクチンにより誘導される抗体の機能的能力）に対する研究ワクチンの効果をさらに調べること；ならびに行動、認知および機能的活動に対する研究ワクチンの効果を調べること。
【0149】
処置
筋肉内経路によって最大３種の用量レベルで投与されたＪＡＣＩ－３５．０５４を、最大３つのサブコホートで試験する。本研究は現在進行中であり、２．１のサブコホートにおいて試験されている。
筋肉内経路によって最大３種の用量レベルで投与されたＪＡＣＩ－３５．０５４を、最大３つのサブコホートで試験する。本研究は現在進行中であり、２．１のサブコホートにおいて試験されている。
【0150】
サブコホート２．１（８名の対象）：ＪＡＣＩ－３５．０５４を１５μｇ／用量で６名の対象に投与し、プラセボを２名の対象に投与した。サブコホート２．１において全ての対象が２回目の注射を受けた後の安全性および忍容性データから、データ安全性モニタリング委員会（ＤＳＭＢ）による検討を経て、用量漸増が可能となっている。
【0151】
サブコホート２．２（８名の対象）（任意選択）：ＪＡＣＩ－３５．０５４を６０μｇ／用量で６名の対象に投与し、プラセボを２名の対象に投与した。このサブコホートは、サブコホート２．１で観察された良好な安全性および忍容性に基づいて、ならびにこの以前のサブコホートにおける抗体応答が６０μｇの用量で最適化されると予期されることに基づいて、現在実施されている。
【0152】
サブコホート２．３（８名の対象）（任意選択）：ＪＡＣＩ－３５．０５４を最大で１５０μｇ／用量で６名の対象に投与することができ、プラセボを２名の対象に投与することができる。このサブコホートは任意選択的であり、サブコホート２．２で観察された良好な安全性および忍容性に基づいて、ならびにこの以前のサブコホートにおける抗体応答がより高用量で最適化されると予期される場合に実施することができる。
【0153】
サブコホート拡大：各コホートの所与のサブコホートにおいて、最大１６名の追加の対象（実薬処置が１２名およびプラセボが４名）の任意選択的な追加募集を考慮することができる。目標は、免疫原性、安全性および忍容性の点で最も好ましいプロファイルを示すと予期される用量で追加データを収集することである。所与のサブコホートを拡大することの決定は、各々のコホートから得られる安全性／忍容性および免疫原性の累積データに基づく。
【0154】
ワクチンまたはプラセボを０、８、２４および４８週目にそれぞれ４回投与し、例えば、各投薬の間隔を８、１６および２４週間とする。処置期間は５０週間（１２か月）と予期され、その後に２４週間（６か月）の安全性追跡期間が続く。対象全体の参加期間は、最初のスクリーニング評価から最後の安全性追跡来院までの最長約８０週間とする。
【0155】
安全性追跡
全ての対象は、研究ワクチンの１回目の投与後の２４時間、およびその後の研究ワクチンの投与後の４時間にわたり臨床観察下に置かれる。その後の安全性評価も、各免疫化の４８～７２時間後に全ての対象について電話で行う。各サブコホートにおいて、最初の４名の対象の１回目の投薬は、前の対象の４８～７２時間での安全性評価を実施した後に実施されるべきである。安全性試験用試料を、ベースライン、各注射の前および各注射の２～４週間後に採取する。処置された全ての対象は、処置期間の終了後に２４週間（６か月）の安全性追跡期間を有する。この期間中、対象は、最終投与から１９週間後の１回目の追跡来院と、追跡期間の終了時（最終投与の２６週間後）の最終来院とをするように求められる。参加者の安全性は、データ安全性モニタリング委員会（ＤＳＭＢ）による安全性データの定期的な検討によって研究全体にわたってモニタリングする。
全ての対象は、研究ワクチンの１回目の投与後の２４時間、およびその後の研究ワクチンの投与後の４時間にわたり臨床観察下に置かれる。その後の安全性評価も、各免疫化の４８～７２時間後に全ての対象について電話で行う。各サブコホートにおいて、最初の４名の対象の１回目の投薬は、前の対象の４８～７２時間での安全性評価を実施した後に実施されるべきである。安全性試験用試料を、ベースライン、各注射の前および各注射の２～４週間後に採取する。処置された全ての対象は、処置期間の終了後に２４週間（６か月）の安全性追跡期間を有する。この期間中、対象は、最終投与から１９週間後の１回目の追跡来院と、追跡期間の終了時（最終投与の２６週間後）の最終来院とをするように求められる。参加者の安全性は、データ安全性モニタリング委員会（ＤＳＭＢ）による安全性データの定期的な検討によって研究全体にわたってモニタリングする。
【0156】
中間分析（ＩＡ）
安全性、忍容性および免疫原性データの中間分析を、各サブコホートにおいて以下の通りに行うことができる：
－ サブコホートにおける全ての対象が４回目の来院（１０週目）を完了してから、すなわち、２回目の注射から２～４週間後に
－ サブコホートにおける全ての対象が６回目の来院（２６週目）を完了してから、すなわち、３回目の注射から２～４週間後に
－ サブコホートにおける全ての対象が９回目の来院（５０週目）を完了してから、すなわち、４８週目の最終の注射から２～４週間後に
－ サブコホートにおける全ての対象が１１回目の来院（７４週目）を完了してから、すなわち、安全性の終了時に。
安全性、忍容性および免疫原性データの中間分析を、各サブコホートにおいて以下の通りに行うことができる：
－ サブコホートにおける全ての対象が４回目の来院（１０週目）を完了してから、すなわち、２回目の注射から２～４週間後に
－ サブコホートにおける全ての対象が６回目の来院（２６週目）を完了してから、すなわち、３回目の注射から２～４週間後に
－ サブコホートにおける全ての対象が９回目の来院（５０週目）を完了してから、すなわち、４８週目の最終の注射から２～４週間後に
－ サブコホートにおける全ての対象が１１回目の来院（７４週目）を完了してから、すなわち、安全性の終了時に。
【0157】
追跡期間
利用可能なバイオマーカーデータを、これらのＩＡのいずれかの間に検討することもできる。上記のＩＡを、拡大されたサブコホートに対して実施することもできる。
利用可能なバイオマーカーデータを、これらのＩＡのいずれかの間に検討することもできる。上記のＩＡを、拡大されたサブコホートに対して実施することもできる。
【0158】
免疫応答データの持続可能性を検討するための追加のＩＡを、２６～５０週目の間および５０～７４週目の間に行うことができる。
【0159】
研究集団
研究集団は、米国立老化研究所－アルツハイマー協会（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｎ Ａｇｉｎｇ－Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）（ＮＩＡ－ＡＡ）基準に従って軽度ＡＤまたはＡＤに起因するＭＣＩと診断され、臨床的認知症評価尺度（ＣＤＲ）グローバルスコアが０．５または１である５０～７５歳（男性および女性）である。
研究集団は、米国立老化研究所－アルツハイマー協会（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｎ Ａｇｉｎｇ－Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）（ＮＩＡ－ＡＡ）基準に従って軽度ＡＤまたはＡＤに起因するＭＣＩと診断され、臨床的認知症評価尺度（ＣＤＲ）グローバルスコアが０．５または１である５０～７５歳（男性および女性）である。
【0160】
選択基準は以下の通りである：
１．５０歳から７５歳までの男性または女性。
２．ＮＩＡ－ＡＡ基準に従ったＡＤに起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）または軽度ＡＤ、かつそれぞれ０．５または１の臨床的認知症評価尺度（ＣＤＲ）グローバルスコア。
３．２２それ以上のミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）スコア。
４．ＡＤ病態と矛盾しないスクリーニング時のＣＳＦ Ａベータアミロイド４２（Ａβ４２）の異常レベル。
・ＣＳＦ Ａβ４２レベルに関して境界である症例では、アミロイド陽性を決定するのに役立つ他の結果、例えばＡβ４２／Ａβ４０比、および症例ごとの陽性アミロイドＰＥＴ走査または陽性ＣＳＦ Ａβ４２レベルの病歴を考慮してもよい。
・スクリーニング前６か月以内に実施したＣＳＦ試料採取の結果は、それらがアミロイド病理の存在と矛盾せず、かつ対応するＣＳＦ試料を検査のために研究に使用することができるという条件で、症例ごとに許容される。
５．ベースライン前の少なくとも３か月間に、販売されているＡＤのためのいかなる処置も受けていないか、または安定用量のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬および／もしくはメマンチンを受けている対象。
６．服薬遵守を保証し、臨床評価を支援し、安全性問題を報告する信頼できる情報提供者または介護者によって介護されている対象。
７．女性は閉経後少なくとも１年経過していなければならない、および／または外科的に不妊となっていなければならない。出産の可能性があるかまたは閉経後ではない女性は、スクリーニング時（ベースラインの－１４日前から－３日前までの採血）に陰性の血液妊娠検査を有し、かつスクリーニング来院から参加の終了まで高度に効果的な避妊方法を使用する意思を有していなければならない。尿妊娠検査を処置期間の全体にわたって実施して、対象が研究ワクチンの受け続けることができるかどうかを決定する。出産の可能性がある女性パートナーを有する試験の男性参加者は、研究期間全体を通じて、女性パートナーによって使用される避妊措置に加えて、バリアー避妊法（殺精子剤入りコンドーム）を使用することが求められる。
８．研究者の見解において、書面によるインフォームドコンセントを理解して同意することができる対象。
９．対象および情報提供者または介護者は、研究の言語のうちの１つが流暢であり、腰椎穿刺を含む全ての研究手順に従うことができなければならない。
１．５０歳から７５歳までの男性または女性。
２．ＮＩＡ－ＡＡ基準に従ったＡＤに起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）または軽度ＡＤ、かつそれぞれ０．５または１の臨床的認知症評価尺度（ＣＤＲ）グローバルスコア。
３．２２それ以上のミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）スコア。
４．ＡＤ病態と矛盾しないスクリーニング時のＣＳＦ Ａベータアミロイド４２（Ａβ４２）の異常レベル。
・ＣＳＦ Ａβ４２レベルに関して境界である症例では、アミロイド陽性を決定するのに役立つ他の結果、例えばＡβ４２／Ａβ４０比、および症例ごとの陽性アミロイドＰＥＴ走査または陽性ＣＳＦ Ａβ４２レベルの病歴を考慮してもよい。
・スクリーニング前６か月以内に実施したＣＳＦ試料採取の結果は、それらがアミロイド病理の存在と矛盾せず、かつ対応するＣＳＦ試料を検査のために研究に使用することができるという条件で、症例ごとに許容される。
５．ベースライン前の少なくとも３か月間に、販売されているＡＤのためのいかなる処置も受けていないか、または安定用量のアセチルコリンエステラーゼ阻害薬および／もしくはメマンチンを受けている対象。
６．服薬遵守を保証し、臨床評価を支援し、安全性問題を報告する信頼できる情報提供者または介護者によって介護されている対象。
７．女性は閉経後少なくとも１年経過していなければならない、および／または外科的に不妊となっていなければならない。出産の可能性があるかまたは閉経後ではない女性は、スクリーニング時（ベースラインの－１４日前から－３日前までの採血）に陰性の血液妊娠検査を有し、かつスクリーニング来院から参加の終了まで高度に効果的な避妊方法を使用する意思を有していなければならない。尿妊娠検査を処置期間の全体にわたって実施して、対象が研究ワクチンの受け続けることができるかどうかを決定する。出産の可能性がある女性パートナーを有する試験の男性参加者は、研究期間全体を通じて、女性パートナーによって使用される避妊措置に加えて、バリアー避妊法（殺精子剤入りコンドーム）を使用することが求められる。
８．研究者の見解において、書面によるインフォームドコンセントを理解して同意することができる対象。
９．対象および情報提供者または介護者は、研究の言語のうちの１つが流暢であり、腰椎穿刺を含む全ての研究手順に従うことができなければならない。
【0161】
除外基準は以下の通りである：
１．対象がプラセボのみを用いて処置され、プラセボワクチンがいかなる特異的免疫反応も誘導すると予期されないという文書化された証拠が存在する場合を除く、能動免疫化を使用したＡＤおよび／または神経障害に関する以前の臨床試験への参加。
２．対象がプラセボのみを用いて処置され、プラセボがいかなる特異的免疫応答も誘導すると予期されないという文書化された証拠が存在する場合を除く、任意の受動的免疫化を使用したＡＤおよび／または神経障害に関する以前の臨床試験へのスクリーニング前過去１２か月以内の参加。
３．ＢＡＣＥ－１阻害薬を含む任意の低分子薬を使用したＡＤおよび／または神経障害に関する以前の臨床試験へのスクリーニング前過去３か月以内の参加。
４．実験的または承認された医薬または療法を使用する任意の他の臨床試験への同時参加。
５．自己免疫疾患の臨床症状を有しない対象における少なくとも１：１６０の希釈度での陽性抗核抗体（ＡＮＡ）力価の存在。
６．自己免疫疾患、または自己免疫疾患の存在と矛盾しない臨床症状の現在または過去の病歴。
７．スクリーニング前に３か月を超えて一時的に処方されている場合を除く、免疫抑制薬または全身性ステロイドの使用を含むがこれに限定されない免疫抑制。
８．以前のワクチンおよび／または医薬に対する重度のアレルギー反応を含むがこれに限定されない重度のアレルギー反応（例えばアナフィラキシー）の病歴。
９．臨床的に重大な低血糖エピソードの前歴。
１０．精神障害の診断・統計マニュアルＶ（ＤＳＭ－Ｖ）基準に従って現在満たされているかまたは過去５年以内に満たされていた薬物またはアルコール乱用または依存。
１１．研究処置の安全性および忍容性の評価、ならびに／または全研究来院予定の遵守を妨害する可能性が高い任意の臨床的に有意な医学的状態。
１２．免疫系に影響を与える可能性が高い任意の臨床的に重大な医学的状態（例えば、後天性または自然免疫系障害の任意の病歴）。
１３．ヒドララジン、プロカインアミド、キニジン、イソニアジド、ＴＮＦ阻害薬、ミノサイクリンのスクリーニング直前１２か月以内の使用。
１４．安定用量の場合を除く、スクリーニング前の少なくとも３か月間のジルチアゼムの使用。
１５．コロンビア自殺重症度評価尺度を使用して、対象が自殺念慮質問４もしくは５に「はい」と回答するかまたは過去１２か月以内の自殺行動に「はい」と回答することとして定義される、顕しい自殺のリスク。
１６．ＡＤと関連があると考えられるもの以外の併発している精神または神経性障害（例えば、意識喪失を伴う頭部損傷、症候性脳卒中、パーキンソン病、重度の頸動脈閉塞性疾患、ＴＩＡ）。
１７．コントロール不良のてんかん発作の病歴または存在。てんかん発作の病歴の場合、てんかん発作は、発作の発生がスクリーニング前の２年以内に存在しないように良好にコントロールされていなければならない。抗てんかん薬の使用は、スクリーニング前の少なくとも３か月間安定用量である場合に容認される。
１８．スクリーニング前過去１０年以内の髄膜脳炎の病歴。
１９．出血性および／または非出血性脳卒中の病歴を有する対象。
２０．末梢神経障害の存在または病歴。
２１．ＣＮＳ関与の可能性を有する炎症性神経障害の病歴。
２２．対象の症状を引き起こし得るＡＤと矛盾する代替病態の構造的証拠を示すスクリーニングＭＲＩ走査。１ｃｍ未満の直径の良性髄膜腫、３つ以上のラクナ梗塞もしくは直径１ｃｍ超のただ１つの梗塞、または脳表ヘモジデリン沈着症の任意の単一の領域以外の空間占有性病変の証拠、あるいは１０ｍｍ以上の以前の大出血の証拠。Ｔ２＊ＭＲＩにおける微小出血は、部位にかかわらず最大で１０まで認められる。
２３．ＭＲＩ検査を、ＭＲＩ研究が禁忌である金属インプラントおよび／または重度の閉所恐怖症を含むがこれらに限定されない何らかの理由のために行うことができない。
２４．顕著な聴力もしくは視力障害、またはプロトコルに従うことおよびアウトカム測定を実施することを妨げることに関連すると研究者によって判断される他の問題。
２５．スクリーニング前３か月以内の臨床的に有意な感染症または大きな外科手術。研究への参加中に行われることが予想される計画された外科処置は、スクリーニング時に医療監視者によって検討および承認されなければならない。
２６．インフルエンザワクチンを含む、スクリーニング前の過去２週間以内に投与された任意のワクチン。
２７．スクリーニング時のＥＣＧにおける臨床的に有意な不整脈または他の臨床的に有意な異常。
２８．ベースライン前１年以内の心筋梗塞、不安定狭心症、または重大な冠動脈疾患。
２９．過去５年以内の、処置された扁平上皮癌腫、基底細胞癌腫、および表皮内黒色腫、または完全に除去され、治療されたと考えられる非浸潤性前立腺癌もしくは非浸潤性乳癌以外の癌の病歴。
３０．研究者の見解における、血液学的パラメータ、肝機能検査、および他の生化学的検査値に関する、臨床的に重大と判断される正常値からの臨床的に重大な逸脱。
３１．スクリーニング時の血液検査によって妊娠が確認された者か、または妊娠を計画しているかもしくは授乳中の対象。
３２．毎日１００ｍｇまたはそれ未満の用量のアスピリンを除く任意の抗凝固薬または抗血小板薬を受けている者（予定されているかまたは予定されていない腰椎穿刺中の出血のリスクを避けるため）。
３３．不眠症の処置のための安定低用量の場合を除く、抗精神病薬を受けている者。
３４．スクリーニング前３０日間に血液もしくは血液製剤を提供したか、または研究に参加している間に血液を提供することを計画している者。
３５．スクリーニング時の活動性梅毒と矛盾しない陽性の性病研究所（Ｖｅｎｅｒｅａｌ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）（ＶＤＲＬ）値。
３６．スクリーニング時の陽性のＨＩＶ検査。
３７．スクリーニング時に活動性Ｂ型および／またはＣ型肝炎の臨床検査的または臨床的証拠。
３８．正常の上限の１．５倍超の血清クレアチニン、異常な甲状腺機能検査結果、または血清Ｂ１２もしくは葉酸レベルの臨床的に重大な低下（注：甲状腺補充剤、Ｂ１２または葉酸の全ての経口用量は、スクリーニング前の少なくとも３か月間安定でなければならない）。
１．対象がプラセボのみを用いて処置され、プラセボワクチンがいかなる特異的免疫反応も誘導すると予期されないという文書化された証拠が存在する場合を除く、能動免疫化を使用したＡＤおよび／または神経障害に関する以前の臨床試験への参加。
２．対象がプラセボのみを用いて処置され、プラセボがいかなる特異的免疫応答も誘導すると予期されないという文書化された証拠が存在する場合を除く、任意の受動的免疫化を使用したＡＤおよび／または神経障害に関する以前の臨床試験へのスクリーニング前過去１２か月以内の参加。
３．ＢＡＣＥ－１阻害薬を含む任意の低分子薬を使用したＡＤおよび／または神経障害に関する以前の臨床試験へのスクリーニング前過去３か月以内の参加。
４．実験的または承認された医薬または療法を使用する任意の他の臨床試験への同時参加。
５．自己免疫疾患の臨床症状を有しない対象における少なくとも１：１６０の希釈度での陽性抗核抗体（ＡＮＡ）力価の存在。
６．自己免疫疾患、または自己免疫疾患の存在と矛盾しない臨床症状の現在または過去の病歴。
７．スクリーニング前に３か月を超えて一時的に処方されている場合を除く、免疫抑制薬または全身性ステロイドの使用を含むがこれに限定されない免疫抑制。
８．以前のワクチンおよび／または医薬に対する重度のアレルギー反応を含むがこれに限定されない重度のアレルギー反応（例えばアナフィラキシー）の病歴。
９．臨床的に重大な低血糖エピソードの前歴。
１０．精神障害の診断・統計マニュアルＶ（ＤＳＭ－Ｖ）基準に従って現在満たされているかまたは過去５年以内に満たされていた薬物またはアルコール乱用または依存。
１１．研究処置の安全性および忍容性の評価、ならびに／または全研究来院予定の遵守を妨害する可能性が高い任意の臨床的に有意な医学的状態。
１２．免疫系に影響を与える可能性が高い任意の臨床的に重大な医学的状態（例えば、後天性または自然免疫系障害の任意の病歴）。
１３．ヒドララジン、プロカインアミド、キニジン、イソニアジド、ＴＮＦ阻害薬、ミノサイクリンのスクリーニング直前１２か月以内の使用。
１４．安定用量の場合を除く、スクリーニング前の少なくとも３か月間のジルチアゼムの使用。
１５．コロンビア自殺重症度評価尺度を使用して、対象が自殺念慮質問４もしくは５に「はい」と回答するかまたは過去１２か月以内の自殺行動に「はい」と回答することとして定義される、顕しい自殺のリスク。
１６．ＡＤと関連があると考えられるもの以外の併発している精神または神経性障害（例えば、意識喪失を伴う頭部損傷、症候性脳卒中、パーキンソン病、重度の頸動脈閉塞性疾患、ＴＩＡ）。
１７．コントロール不良のてんかん発作の病歴または存在。てんかん発作の病歴の場合、てんかん発作は、発作の発生がスクリーニング前の２年以内に存在しないように良好にコントロールされていなければならない。抗てんかん薬の使用は、スクリーニング前の少なくとも３か月間安定用量である場合に容認される。
１８．スクリーニング前過去１０年以内の髄膜脳炎の病歴。
１９．出血性および／または非出血性脳卒中の病歴を有する対象。
２０．末梢神経障害の存在または病歴。
２１．ＣＮＳ関与の可能性を有する炎症性神経障害の病歴。
２２．対象の症状を引き起こし得るＡＤと矛盾する代替病態の構造的証拠を示すスクリーニングＭＲＩ走査。１ｃｍ未満の直径の良性髄膜腫、３つ以上のラクナ梗塞もしくは直径１ｃｍ超のただ１つの梗塞、または脳表ヘモジデリン沈着症の任意の単一の領域以外の空間占有性病変の証拠、あるいは１０ｍｍ以上の以前の大出血の証拠。Ｔ２＊ＭＲＩにおける微小出血は、部位にかかわらず最大で１０まで認められる。
２３．ＭＲＩ検査を、ＭＲＩ研究が禁忌である金属インプラントおよび／または重度の閉所恐怖症を含むがこれらに限定されない何らかの理由のために行うことができない。
２４．顕著な聴力もしくは視力障害、またはプロトコルに従うことおよびアウトカム測定を実施することを妨げることに関連すると研究者によって判断される他の問題。
２５．スクリーニング前３か月以内の臨床的に有意な感染症または大きな外科手術。研究への参加中に行われることが予想される計画された外科処置は、スクリーニング時に医療監視者によって検討および承認されなければならない。
２６．インフルエンザワクチンを含む、スクリーニング前の過去２週間以内に投与された任意のワクチン。
２７．スクリーニング時のＥＣＧにおける臨床的に有意な不整脈または他の臨床的に有意な異常。
２８．ベースライン前１年以内の心筋梗塞、不安定狭心症、または重大な冠動脈疾患。
２９．過去５年以内の、処置された扁平上皮癌腫、基底細胞癌腫、および表皮内黒色腫、または完全に除去され、治療されたと考えられる非浸潤性前立腺癌もしくは非浸潤性乳癌以外の癌の病歴。
３０．研究者の見解における、血液学的パラメータ、肝機能検査、および他の生化学的検査値に関する、臨床的に重大と判断される正常値からの臨床的に重大な逸脱。
３１．スクリーニング時の血液検査によって妊娠が確認された者か、または妊娠を計画しているかもしくは授乳中の対象。
３２．毎日１００ｍｇまたはそれ未満の用量のアスピリンを除く任意の抗凝固薬または抗血小板薬を受けている者（予定されているかまたは予定されていない腰椎穿刺中の出血のリスクを避けるため）。
３３．不眠症の処置のための安定低用量の場合を除く、抗精神病薬を受けている者。
３４．スクリーニング前３０日間に血液もしくは血液製剤を提供したか、または研究に参加している間に血液を提供することを計画している者。
３５．スクリーニング時の活動性梅毒と矛盾しない陽性の性病研究所（Ｖｅｎｅｒｅａｌ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）（ＶＤＲＬ）値。
３６．スクリーニング時の陽性のＨＩＶ検査。
３７．スクリーニング時に活動性Ｂ型および／またはＣ型肝炎の臨床検査的または臨床的証拠。
３８．正常の上限の１．５倍超の血清クレアチニン、異常な甲状腺機能検査結果、または血清Ｂ１２もしくは葉酸レベルの臨床的に重大な低下（注：甲状腺補充剤、Ｂ１２または葉酸の全ての経口用量は、スクリーニング前の少なくとも３か月間安定でなければならない）。
【0162】
研究評価項目
安全性および忍容性に関する以下の主要評価項目を評価する：有害事象、即時および遅発反応原性（例えば、アナフィラキシー、免疫複合体疾患を含む局所および全身性反応原性）；自殺念慮（Ｃ－ＳＳＲＳ）；行動（ＮＰＩ）；安全性を評価するための認知および機能評価（ＲＢＡＮＳ、ＣＤＲ－ＳＢ）；バイタルサイン；ＭＲＩ画像診断；心電図；血液および尿における慣例的な血液学および生化学評価；血液における抗ｄｓＤＮＡ抗体を含む自己免疫抗体の評価；血中およびＣＳＦ中の炎症性マーカー。
安全性および忍容性に関する以下の主要評価項目を評価する：有害事象、即時および遅発反応原性（例えば、アナフィラキシー、免疫複合体疾患を含む局所および全身性反応原性）；自殺念慮（Ｃ－ＳＳＲＳ）；行動（ＮＰＩ）；安全性を評価するための認知および機能評価（ＲＢＡＮＳ、ＣＤＲ－ＳＢ）；バイタルサイン；ＭＲＩ画像診断；心電図；血液および尿における慣例的な血液学および生化学評価；血液における抗ｄｓＤＮＡ抗体を含む自己免疫抗体の評価；血中およびＣＳＦ中の炎症性マーカー。
【0163】
免疫応答（すなわち、免疫原性）に関する以下の主要評価項目も評価する：血清中の抗ｐタウＩｇＧ力価（幾何平均、ベースラインからの変化、応答者率、ピークおよび曲線下面積）。
【0164】
免疫応答（すなわち、免疫原性）に関する以下の副次的評価項目を評価する：血清中の抗タウ ＩｇＧ、抗ｐタウ、抗ｅＰＨＦ ＩｇＧおよび抗タウ ＩｇＭ力価（幾何平均、ベースラインからの変化、応答者率、ピークおよび曲線下面積）、アビディティ検査によるＩｇＧ応答プロファイルの決定。
【0165】
以下の探索的評価項目を評価する：血中および／またはＣＳＦ中の推定的ＡＤバイオマーカーの力価のベースラインからの変化（例えば、総タウ、ｐタウ）、血中の測定されたＴ細胞活性化レベルのベースラインからの変化、血中の炎症性サイトカイン力価のベースラインからの変化、血中の抗体価のベースラインからの変化、行動（ＮＰＩ）、認知的および機能的活動（ＲＢＡＮＳ、ＣＤＲ－ＳＢ）スコアのベースラインからの変化。
【0166】
結果／結論：
以下の主要評価項目を評価した／評価する：
・安全性および忍容性－有害事象、即時および遅延型反応原性（例えばアナフィラキシー、疼痛、発赤、免疫複合体疾患、腫脹、発熱を含む局所および全身性反応原性）；忍容性の総合評価；自殺念慮（Ｃ－ＳＳＲＳ）；行動（ＮＰＩ）；安全性を評価するための認知および機能評価（ＲＢＡＮＳ、ＣＤＲ－ＳＢ）；バイタルサイン；ＭＲＩ画像診断；心電図；血液および尿における慣例的な血液学および生化学評価；血液における抗ＤＮＡ抗体を含む自己免疫抗体の評価；血中およびＣＳＦ中の炎症性マーカー。
・免疫応答－血清中の抗ｐタウＩｇＧ力価（幾何平均、ベースラインからの変化、応答者率、ピーク、および曲線下面積）。
以下の主要評価項目を評価した／評価する：
・安全性および忍容性－有害事象、即時および遅延型反応原性（例えばアナフィラキシー、疼痛、発赤、免疫複合体疾患、腫脹、発熱を含む局所および全身性反応原性）；忍容性の総合評価；自殺念慮（Ｃ－ＳＳＲＳ）；行動（ＮＰＩ）；安全性を評価するための認知および機能評価（ＲＢＡＮＳ、ＣＤＲ－ＳＢ）；バイタルサイン；ＭＲＩ画像診断；心電図；血液および尿における慣例的な血液学および生化学評価；血液における抗ＤＮＡ抗体を含む自己免疫抗体の評価；血中およびＣＳＦ中の炎症性マーカー。
・免疫応答－血清中の抗ｐタウＩｇＧ力価（幾何平均、ベースラインからの変化、応答者率、ピーク、および曲線下面積）。
【0167】
以下の副次的評価項目を評価した／評価する：
・免疫応答：血清中の抗タウＩｇＧ、抗ｐタウ、抗ｅＰＨＦ ＩｇＧおよび抗タウＩｇＭ力価（幾何平均、ベースラインからの変化、応答者率、ピークおよび曲線下面積）、アビディティ検査によるＩｇＧ応答プロファイルの決定。
・免疫応答：血清中の抗タウＩｇＧ、抗ｐタウ、抗ｅＰＨＦ ＩｇＧおよび抗タウＩｇＭ力価（幾何平均、ベースラインからの変化、応答者率、ピークおよび曲線下面積）、アビディティ検査によるＩｇＧ応答プロファイルの決定。
【0168】
以下の探索的評価項目を評価した／評価する：
・血中および／またはＣＳＦ中のバイオマーカー力価のベースラインからの変化（例えば総タウおよびｐタウタンパク質）、血中のＴ細胞活性化レベルのベースラインからの変化、血中の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ－１Ｂ、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＦＮ－γ、およびＴＮＦ－α）力価のベースラインからの変化、自殺念慮（Ｃ－ＳＳＲＳ）、行動（ＮＰＩ）、認知的および機能的活動（ＲＢＡＮＳ、ＣＤＲ－ＳＢ）スコアのベースラインからの変化。
・血中および／またはＣＳＦ中のバイオマーカー力価のベースラインからの変化（例えば総タウおよびｐタウタンパク質）、血中のＴ細胞活性化レベルのベースラインからの変化、血中の炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ－１Ｂ、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＦＮ－γ、およびＴＮＦ－α）力価のベースラインからの変化、自殺念慮（Ｃ－ＳＳＲＳ）、行動（ＮＰＩ）、認知的および機能的活動（ＲＢＡＮＳ、ＣＤＲ－ＳＢ）スコアのベースラインからの変化。
【0169】
研究は進行中である。現在までのところ、１つのサブコホートは、表３におけるように、１５μｇのコンジュゲートの投薬量レベルでのＪＡＣＩ－３５．０５４（「１５μｇ用量」）、およびプラセボ（リン酸緩衝生理食塩液（ＰＢＳ））を受けた。サブコホート２．２における研究対象は、６０μｇのコンジュゲートの投薬量レベルでのＪＡＣＩ－３５．０５４（「６０μｇ用量」を投与されている。
【0170】
【表3】
【0171】
１５μｇ用量について７４週目（４回目の注射の２週間後）まで、および６０μｇ用量について２６週目（３回目の注射の２週間後）までの中間結果から、ＪＡＣＩ－３５．０５４は安全かつ忍容性良好であることが示されており、研究ワクチンに関連する臨床的に関連のある安全性上の懸念は観察されなかった。ベースラインに比しての抗ｐタウ特異的ＩｇＧ力価の増加が、１０週目のＪＡＣＩ－３５．０５４の１５μｇ用量での２回目の投与の後に全て応答者であり、後の２４、２６、３６、４８、５０、６７および７４週目でもそうであった、実薬で処置された対象の血清において観察された。ベースラインに比しての抗ｐタウ特異的ＩｇＧ力価の増加は、１０週目のＪＡＣＩ－３５．０５４の６０μｇ用量での２回目の投与の後に同じく全て応答者であり、後の１５、２０、２４および２６週目でもそうであった、実薬で処置された対象の血清において観察された。抗タウ特異的ＩｇＧ力価（配列番号４のアミノ酸配列を含む非ホスホペプチドタウペプチドに対する応答）の増加は、１５μｇ用量で１０、２４、２６、３６、４８、５０、６７および７４週目に全て応答者であった実薬で処置された全ての研究対象、ならびに６０μｇ用量で１０、１５、２０、２４および２６週目に全て応答者であった実薬で処置された全ての研究対象においても観察された。実薬で処置された早期ＡＤ対象において病理的なｐタウに対する抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価の増加が観察され、そのうちの８３．３％は１５μｇ用量で２６、３６および５０週目に応答者であり、６０μｇ用量ではそのうちの８３．３％および１００％がそれぞれ１０および２６週目に応答者であった。プラセボを受けた対象では抗体応答は観察されなかった。
【0172】
ヒトにおけるＪＡＣＩ－３５．０５４の抗ｐタウＩｇＧ応答
表３のサブコホートにおいてＪＡＣＩ－３５．０５４ワクチンによって誘導されたリン酸化タウペプチド（ｐタウ）を対象とする特異的ＩｇＧ抗体応答を、ＭＳＤによって測定した。図１は、１５μｇおよび６０μｇ用量のＪＡＣＩ－３５．０５４、またはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｐタウＩｇＧ力価を示す。図１の結果によって示されるように、１５μｇまたは６０μｇ用量のいずれかのＪＡＣＩ－３５．０５４による免疫化は、配列番号２のアミノ酸配列を含むリン酸化タウペプチドのＮ末端に連結されたビオチンを含有する、配列番号１９のアミノ酸配列を有するビオチン化リン酸化タウペプチドに対する強力な抗ｐタウＩｇＧ応答を誘導した。
表３のサブコホートにおいてＪＡＣＩ－３５．０５４ワクチンによって誘導されたリン酸化タウペプチド（ｐタウ）を対象とする特異的ＩｇＧ抗体応答を、ＭＳＤによって測定した。図１は、１５μｇおよび６０μｇ用量のＪＡＣＩ－３５．０５４、またはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｐタウＩｇＧ力価を示す。図１の結果によって示されるように、１５μｇまたは６０μｇ用量のいずれかのＪＡＣＩ－３５．０５４による免疫化は、配列番号２のアミノ酸配列を含むリン酸化タウペプチドのＮ末端に連結されたビオチンを含有する、配列番号１９のアミノ酸配列を有するビオチン化リン酸化タウペプチドに対する強力な抗ｐタウＩｇＧ応答を誘導した。
【0173】
８週目、２４週目および４８週目の１５μｇ用量レベルでの免疫化は、２週間後の１０週目、２６週目および５０週目にそれぞれ測定した場合に、抗ｐタウＩｇＧ応答のブースティングをもたらす。同様に、８週目および２４週目の６０μｇ用量レベルでの免疫化は、２週間後の１０週目および２６週目にそれぞれ測定した場合に、抗ｐタウＩｇＧ応答のブースティングをもたらす。
【0174】
表４は、１５μｇ用量、６０μｇ用量のＪＡＣＩ－３５．０５４、またはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｐタウＩｇＧ応答者率（ＩＴＴ集団）を示す。
【0175】
【表4】
【0176】
表４における結果によって示されるように、１５μｇ用量レベルでＪＡＣＩ－３５．０５４を用いて処置された対象のうちの５０％が２週目に応答者であり、６６．７％が８週目に応答者であった。１５μｇ用量レベルでＪＡＣＩ－３５．０５４を用いて処置された全ての対象が、１０週目から７４週目まで応答者であった。表４における結果によって示されるように、６０μｇ用量レベルでＪＡＣＩ－３５．０５４を用いて処置された対象のうちの６６．７％が２週目で応答者であり、８３．３％が８週目で応答者であった。６０μｇ用量レベルでＪＡＣＩ－３５．０５４を用いて処置された全ての対象が、１０週目から少なくとも２６週目まで応答者であった。プラセボを用いて処置された対象で、抗ｐタウＩｇＧ応答が生じた者はなかった。
【0177】
ヒトにおけるＪＡＣＩ－３５．０５４の抗タウＩｇＧ応答
表３のサブコホートにおいてＪＡＣＩ－３５．０５４ワクチンによって誘導された非リン酸化タウペプチドを対象とする特異的ＩｇＧ抗体応答を、ＭＳＤによって測定した。図２は、１５μｇもしくは６０μｇの用量のＪＡＣＩ－３５．０５４、またはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗タウＩｇＧ力価を示す。図２の結果によって示されるように、１５μｇまたは６０μｇの用量のいずれかでのＪＡＣＩ－３５．０５４を用いた免疫化は、配列番号４のアミノ酸配列を含む非リン酸化タウペプチドのＮ末端に連結されたビオチンを含有する、配列番号２０のアミノ酸配列を有するビオチン化非ｐタウペプチドに対するＩｇＧ抗体応答を誘導した。したがって、１５μｇまたは６０μｇ用量でのＪＡＣＩ－３５．０５４を用いた免疫化は、配列番号２のアミノ酸配列を有するｐタウペプチドに加えて、配列番号４のアミノ酸配列を有する非ｐタウペプチドも認識するＩｇＧ抗体応答を誘導した。
表３のサブコホートにおいてＪＡＣＩ－３５．０５４ワクチンによって誘導された非リン酸化タウペプチドを対象とする特異的ＩｇＧ抗体応答を、ＭＳＤによって測定した。図２は、１５μｇもしくは６０μｇの用量のＪＡＣＩ－３５．０５４、またはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗タウＩｇＧ力価を示す。図２の結果によって示されるように、１５μｇまたは６０μｇの用量のいずれかでのＪＡＣＩ－３５．０５４を用いた免疫化は、配列番号４のアミノ酸配列を含む非リン酸化タウペプチドのＮ末端に連結されたビオチンを含有する、配列番号２０のアミノ酸配列を有するビオチン化非ｐタウペプチドに対するＩｇＧ抗体応答を誘導した。したがって、１５μｇまたは６０μｇ用量でのＪＡＣＩ－３５．０５４を用いた免疫化は、配列番号２のアミノ酸配列を有するｐタウペプチドに加えて、配列番号４のアミノ酸配列を有する非ｐタウペプチドも認識するＩｇＧ抗体応答を誘導した。
【0178】
８週目、２４週目および４８週目の１５μｇ用量レベルでの免疫化は、２週間後の１０週目、２６週目および５０週目にそれぞれ測定した場合に、抗タウＩｇＧ応答のブースティングをもたらした。８週目および２４週目の６０μｇ用量レベルでの免疫化は、２週間後の１０週目および２６週目にそれぞれ測定した場合に、抗タウＩｇＧ応答のブースティングをもたらした。
【0179】
表５は、１５μｇもしくは６０μｇの用量でのＪＡＣＩ－３５．０５４またはプラセボのいずれかによる免疫化の後の抗タウＩｇＧ応答者率（ＩＴＴ集団）を示す。表５における結果によって示されるように、１５μｇ用量レベルでＪＡＣＩ－３５．０５４を用いて処置された対象のうちの６６．７％が２週目で応答者であり、８３．３％が８週目で応答者であった。１５μｇ用量レベルでＪＡＣＩ－３５．０５４を用いて処置された全ての対象が、１０週目から７４週目まで応答者であった。６０μｇ用量レベルでＪＡＣＩ－３５．０５４を用いて処置された対象のうちの６６．７％が、２週目および８週目に応答者であった。６０μｇ用量レベルでＪＡＣＩ－３５．０５４を用いて処置された全ての対象が、１０週目から少なくとも２６週目まで応答者であった。プラセボを用いて処置された対象で、抗タウＩｇＧ応答を生じた者はなかった。
【0180】
【表5】
【0181】
ヒトＡＤ脳に由来する病理的なｐタウ（濃縮対らせん状細線維－ｅＰＨＦ）の認識
表３のサブコホートにおいてＪＡＣＩ－３５．０５４を用いた免疫化によって誘導されたＩｇＧポリクローナル抗体が、ヒトＡＤ脳に由来するｅＰＨＦに結合する能力を、ＭＳＤによって経時的に測定した。図３は、１５μｇもしくは６０μｇ用量のＪＡＣＩ－３５．０５４またはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価（ＩＴＴ集団）を示す。図３の結果から、１５μｇまたは６０μｇ用量でＪＡＣＩ－３５．０５４を用いた免疫化が、ヒトＡＤ脳に由来する病理的なｅＰＨＦタウを認識するＩｇＧ抗体応答を誘導することが示された。
表３のサブコホートにおいてＪＡＣＩ－３５．０５４を用いた免疫化によって誘導されたＩｇＧポリクローナル抗体が、ヒトＡＤ脳に由来するｅＰＨＦに結合する能力を、ＭＳＤによって経時的に測定した。図３は、１５μｇもしくは６０μｇ用量のＪＡＣＩ－３５．０５４またはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ力価（ＩＴＴ集団）を示す。図３の結果から、１５μｇまたは６０μｇ用量でＪＡＣＩ－３５．０５４を用いた免疫化が、ヒトＡＤ脳に由来する病理的なｅＰＨＦタウを認識するＩｇＧ抗体応答を誘導することが示された。
【0182】
８週目、２４週目および４８週目の１５μｇ用量レベルでの免疫化は、２週間後の１０週目、２６週目および５０週目にそれぞれ測定した場合に、抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ応答のブースティングをもたらした。同様に、８週目および２４週目の６０μｇ用量レベルでの免疫化は、２週間後の１０週目および２６週目にそれぞれ測定した場合に、抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ応答のブースティングをもたらした。
【0183】
表６は、１５μｇもしくは６０μｇ用量レベルでのＪＡＣＩ－３５．０５４またはプラセボのいずれかを用いた免疫化の後の抗ｅＰＨＦ ＩｇＧ応答者率（ＩＴＴ集団）を示す。１５μｇ用量でＪＡＣＩ－３５．０５４を用いて処置された６名の対象における抗ｅＰＨＦ ＩｇＧの応答者率は、２週目（すなわち、１回目の注射の２週間後）の０％から２６週目（すなわち、３回目の注射の２週間後）には８３．３％に増加し、その後の応答者率は６６．７％（４８、６７および７４週目）から８３．３％（３６週目および５０週目）の間であった。６０μｇ用量でＪＡＣＩ－３５．０５４を用いて処置された６名の対象における抗ｅＰＨＦ ＩｇＧの応答者率は、２週目の１６．７％（すなわち、１回目の注射の２週間後）から２６週目（すなわち、３回目の注射の２週間後）には１００％に増加した。
【0184】
【表6】
【0185】
本明細書に記載された実施例および実施形態は例示のみを目的としていること、ならびにその広範な発明概念から逸脱することなく上記の実施形態に変更を加え得ることが理解される。したがって、本発明は開示されている特定の実施形態に限定されるものではなく、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の趣旨および範囲内にある変更をカバー範囲に含むことを意図していることが理解される。
【0186】
[実施例５]
ＪＡＣＩ－３５．０５４を用いたワクチン接種は、エピトープ認識において高度の不均一性を有する抗体を誘導する
病理的なｐタウに対する幅広さおよび選択性について抗体応答をさらにプロファイリングするために、短いｐタウおよび非ｐタウアミノ酸配列を有するヒト対象の血清に対してエピトープマッピングを実施した。ヒト対象においてＪＡＣＩ－３５．０５４によって誘導される抗体のエピトープ認識プロファイルを決定するための研究を行った。８名のＡＤ患者に対して、０、８、２４、および４８週目に１用量当たり１５ｕｇのＪＡＣＩ－３５．０５４またはプラセボを用いて筋肉内免疫化を行った。抗体のエピトープ認識プロファイルを、第１の免疫化の前（Ｖ１、０週目）および第３の免疫化の後（Ｖ６、２６週目）に、１アミノ酸のシフトを有し、ホスホ－タウペプチドＴ３．３０（配列番号１９）の全配列ならびにタウペプチドＴ３．５６（配列番号２０）の配列をカバーするＮ末端ビオチン化８－ｍｅｒペプチドのライブラリーを使用するエピトープマッピングＥＬＩＳＡによって決定した。加えて、全長ホスホタウペプチドＴ３．３０（配列番号１９）およびタウペプチドＴ３．５６（配列番号２０）、ならびにホスホタウペプチドＴ３．８５（配列番号２１）およびタウペプチドＴ３．８６（配列番号２２）（追加のＣ末端アミノ酸を有する）への抗体の結合も決定した。
ＪＡＣＩ－３５．０５４を用いたワクチン接種は、エピトープ認識において高度の不均一性を有する抗体を誘導する
病理的なｐタウに対する幅広さおよび選択性について抗体応答をさらにプロファイリングするために、短いｐタウおよび非ｐタウアミノ酸配列を有するヒト対象の血清に対してエピトープマッピングを実施した。ヒト対象においてＪＡＣＩ－３５．０５４によって誘導される抗体のエピトープ認識プロファイルを決定するための研究を行った。８名のＡＤ患者に対して、０、８、２４、および４８週目に１用量当たり１５ｕｇのＪＡＣＩ－３５．０５４またはプラセボを用いて筋肉内免疫化を行った。抗体のエピトープ認識プロファイルを、第１の免疫化の前（Ｖ１、０週目）および第３の免疫化の後（Ｖ６、２６週目）に、１アミノ酸のシフトを有し、ホスホ－タウペプチドＴ３．３０（配列番号１９）の全配列ならびにタウペプチドＴ３．５６（配列番号２０）の配列をカバーするＮ末端ビオチン化８－ｍｅｒペプチドのライブラリーを使用するエピトープマッピングＥＬＩＳＡによって決定した。加えて、全長ホスホタウペプチドＴ３．３０（配列番号１９）およびタウペプチドＴ３．５６（配列番号２０）、ならびにホスホタウペプチドＴ３．８５（配列番号２１）およびタウペプチドＴ３．８６（配列番号２２）（追加のＣ末端アミノ酸を有する）への抗体の結合も決定した。
【0187】
データは、各ペプチドおよび各患者について、処理前のものを減算した光学密度（Ｏ．Ｄ．）値（初回免疫化の前に得られたＯ．Ｄ．（Ｖ１：０週目）を第３の免疫化の後に得られたＯ．Ｄ．（Ｖ６、２６週目）から減算したもの）として表される。減算後の負の値は０．０００に設定した。
【0188】
表７、表８および図４は、ホスホペプチドＴ３．３０（配列番号１９）および非ホスホペプチドＴ３．５６（配列番号２０）をカバー範囲とする短い８－ｍｅｒ重複ペプチド上のエピトープマッピングＥＬＩＳＡによって決定された、ＪＡＣＩ－３５．０５４を用いたワクチン接種によって誘導された抗体のエピトープ認識プロファイルを示す。
【0189】
【表7】
【0190】
表７および図４Ａは、２名のＡＤ患者がホスホタウペプチドＴ３．３０（配列番号１９）およびＴ３．８５（配列番号２１）の配列に対するＩｇＧ抗体を産生しなかったことを示す（患者＃１および＃２）。６名のＡＤ患者は、ホスホタウペプチドＴ３．３０（配列番号１９）およびＴ３．８５（配列番号２１）の配列に対するＩｇＧ抗体を生じ、少なくとも４名のＡＤ患者ではホスホタウペプチドＴ３．８５（配列番号２１）の配列に対する結合が全体的に低かった。８－ｍｅｒペプチドで得られたＯ．Ｄ．値は、６名の全てのＡＤ患者において、３回の免疫化の後に誘導されたＩｇＧ抗体が、ホスホタウペプチドＴ３．３０（配列番号１９）の配列のＣ末端部分に結合したことを示す。加えて、４名のＡＤ患者において、ホスホタウペプチドＴ３．３０（配列番号１９）の配列のＮ末端部分へのある程度の結合が見出された。
【0191】
【表8】
【0192】
表８および図４Ｂは、２名のＡＤ患者が、タウペプチドＴ３．５６（配列番号２０）およびＴ３．８６（配列番号２２）の配列に対するＩｇＧ抗体を産生しなかったことを示す（患者＃１および＃２）。６名のＡＤ患者は、タウペプチドＴ３．５６（配列番号２０）およびＴ３．８６（配列番号２２）の配列に対するＩｇＧ抗体を生じ、タウペプチドＴ３．８６（配列番号２２）の配列への結合は全体的に低かった。８－ｍｅｒペプチドで得られたＯ．Ｄ．値は、６名の全てのＡＤ患者において、３回の免疫化の後に誘導されたＩｇＧ抗体が、タウペプチドＴ３．５６（配列番号２０）の配列のＣ末端部分に結合したことを示す。加えて、３名のＡＤ患者において、タウペプチドタウ３９３～４００およびタウ３９６～４０３への結合が見出された。
【0193】
結果は、ＪＡＣＩ－３５．０５４を用いてワクチン接種された対象が、タウ抗原配列のＣ末端部分の強い認識を有し、リン酸化タウおよび非リン酸化タウペプチドに類似の様式で抗体が結合する抗体応答を実証したことを示す。
【0194】
参考文献
【0195】
【表9】
【0196】
配列表
【0197】
【化13-1】
【0198】
【化13-2】
【0199】
【化13-3】
【図1】
【図2】
【図3】
【図4-1】
【図4-2】
【配列表】
【国際調査報告】