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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-10-23
(54)【発明の名称】医薬用の、アミロライドの新規塩形態およびその誘導体
(51)【国際特許分類】
C07D 241/32 20060101AFI20241016BHJP
A61P 17/06 20060101ALI20241016BHJP
A61K 31/4965 20060101ALI20241016BHJP
A61K 8/49 20060101ALI20241016BHJP
A61Q 19/00 20060101ALI20241016BHJP
【ＦＩ】
C07D241/32 CSP
A61P17/06
A61K31/4965
A61K8/49
A61Q19/00
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024519570
(86)(22)【出願日】2022-09-28
(85)【翻訳文提出日】2024-05-27
(86)【国際出願番号】 EP2022077018
(87)【国際公開番号】W WO2023052449
(87)【国際公開日】2023-04-06
(31)【優先権主張番号】21199548.5
(32)【優先日】2021-09-28
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．テフロン
(71)【出願人】
【識別番号】524118351
【氏名又は名称】ソムリ、ホールディング、アクチボラグ
【氏名又は名称原語表記】ＰＳＯＭＲＩ Ｈｏｌｄｉｎｇ ＡＢ
(74)【代理人】
【識別番号】100120031
【弁理士】
【氏名又は名称】宮嶋 学
(74)【代理人】
【識別番号】100120617
【弁理士】
【氏名又は名称】浅野 真理
(74)【代理人】
【識別番号】100126099
【弁理士】
【氏名又は名称】反町 洋
(72)【発明者】
【氏名】ジョバンナ、ブランカテッリ
(72)【発明者】
【氏名】モルテン、ビンゲ
(72)【発明者】
【氏名】レベッカ、サフラン
(72)【発明者】
【氏名】イリヤ、バトルヤン
(72)【発明者】
【氏名】ブルーノ、エカワ
【テーマコード（参考）】
4C083
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C083AC851
4C083CC02
4C083DD08
4C083DD14
4C083DD15
4C083DD16
4C083DD17
4C083DD22
4C083DD23
4C083EE12
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086BC48
4C086GA13
4C086GA14
4C086GA15
4C086MA01
4C086MA04
4C086MA13
4C086MA16
4C086MA23
4C086MA28
4C086MA35
4C086MA37
4C086MA41
4C086MA43
4C086MA52
4C086MA55
4C086MA57
4C086MA63
4C086NA02
4C086NA03
4C086ZA89
(57)【要約】
本発明は、アミロライドの乳酸塩、酢酸塩、およびリン酸塩、並びに特定のアミロライド誘導体に関する。本発明はまた、医薬におけるかかる塩の使用、前記新規塩を含んでなる医薬組成物および化粧品組成物、並びに前記塩を用いた乾癬の治療方法に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）で表される遊離塩基化合物の塩；【化1】
【化2】
－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）３；
【化3】
【化4】
【化5】
【請求項2】
前記塩が乳酸塩である、請求項１に記載の塩。
【請求項3】
前記遊離塩基化合物がベンザミルである、請求項１または２に記載の塩。
【請求項4】
ただ１つの結晶形態を有する、請求項１～３いずれか一項に記載の塩。
【請求項5】
請求項１～４のいずれか一項に記載の塩と、任意で薬剤的および／または化粧品的に許容できる賦形剤とを含んでなる、医薬組成物または化粧品組成物。
【請求項6】
前記組成物が局所投与用に適合した、請求項５に記載の組成物。
【請求項7】
医薬における使用のための、請求項１～４のいずれか一項に記載の塩、または請求項５もしくは６に記載の医薬組成物。
【請求項8】
前記医薬における使用が、乾癬の治療方法における使用である、請求項７に記載の使用のための前記塩または組成物。
【請求項9】
前記乾癬が慢性乾癬またはプラーク乾癬である、請求項８に記載の使用のための前記塩または組成物。
【請求項10】
前記塩または組成物が局所的または全身的に投与される、請求項７～９のいずれか一項に記載の使用のための前記塩または組成物。
【請求項11】
乾癬の治療方法における使用のための医薬組成物の製造における、請求項１～４のいずれか一項に記載の塩の使用。
【請求項12】
乾癬の治療方法であって、その治療を必要とする個人に、請求項１～４のいずれか一項に記載の塩または請求項５～６のいずれか一項に記載の医薬組成物を有効量で投与することを含んでなる、方法。
【請求項13】
前記塩が局所投与される、請求項１２に記載の乾癬の治療方法。
【請求項14】
前記乾癬が慢性乾癬またはプラーク乾癬である、請求項１２または１３に記載の乾癬の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、薬物治療、特に、特定のアミロライド誘導体の新規塩を用いた薬物治療の分野に関する。
【背景技術】
【0002】
アミロライド（３，５－ジアミノ－６－クロロ－Ｎ－（ジアミノメチリデン）ピラジン－２－カルボキサミド、ＣＡＳ登録番号２６０９－４６－３）は一般的に、塩酸塩として、また、浮腫の治療におけるカリウム保持性利尿薬として、しばしばチアジド利尿薬と組み合わされて、用いられる。アミロライドは、ナトリウム／水素対向輸送体（ＮＨＥ）やナトリウム／カルシウム交換輸送体（ＮＣＸ）だけでなく、上皮性ナトリウムチャネル（ＥＮａＣ）や酸感受性イオンチャネルのタンパク質と相互作用することが、知られている。塩酸塩としてのアミロライドは、少なくとも１９７０年代初頭から、ヨーロッパで販売が承認されている。
【0003】
１つのアミロライド誘導体として、ベンザミル、即ちベンジルアミロライド（３，５－ジアミノ－Ｎ－（Ｎ’－ベンジルカルバミミドイル）－６－クロロピラジン－２－カルボキサミド、ＣＡＳ登録番号２８９８－７６－２）が挙げられる。国際公開第２０１５／１６８５７４号は、アミロライドおよびその誘導体であるベンザミル等の上皮性イオンチャネル遮断薬を乾癬の治療に使用することを提案している。国際公開第２０１５／１６８５７４号は、アミロライドおよびその誘導体の薬剤的に許容できる塩の使用を論じているが、具体的な塩や、具体的な塩の選び方については言及していない。米国特許出願公開第２０１３／１０９８５６号は、ベンザミルのトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）塩の調製方法を開示している。当業者は、ＴＦＡは薬剤のためには適切な対イオンではないと理解している。
【0004】
乾癬は、慢性的に繰り返し現れる免疫介在性皮膚疾患である。推定罹患率によれば、乾癬は、世界人口の１～２％が罹患し、男女に同様に分布している。乾癬は、一生の内いつでも現れる可能性があり、通常３０～３９才の間および６０～６９才の間にピークに達する。患者は、痒み、痛み、および／または乾癬関連の爪疾患および関節炎を経験することがある。かなりの病的状態が、個々人に社会心理的影響を及ぼす。乾癬患者はしばしば、その損なわれた皮膚を凝視する人々から非難される。患者は、自尊心が低下することがあり、人間関係や雇用では困難に直面し得る。乾癬はまた、循環器疾患、発作、およびがんのリスクの上昇にも関連している。
【0005】
乾癬プラークの組織学的評価は、不全角化を伴ったケラチノサイト過剰増殖、上皮伸長または乳頭間隆起、血管形成増加、ならびに、Ｔ細胞、好中球、大食細胞、および、樹状細胞（ＤＣ）を含めた炎症細胞の皮膚浸潤を示す。乾癬皮膚にしばしば観察される他の組織学的特徴としては、コゴイのミクロ膿疱、マンローのミクロ膿瘍、顆粒層の菲薄化または消失、乳頭板の菲薄化、および拡張表在血管を含む乳頭真皮が挙げられる。
【0006】
乾癬の病因は多因性である。心的外傷、ストレス、感染症、および薬物等の環境要因が、病気にかかりやすい個人において皮膚の過剰な炎症反応を活発化させる。乾癬は、ケラチノサイトの機能不全性増殖や分化による疾患であるが、免疫細胞の更なる補充、ケラチノサイト増殖、および持続性慢性炎症を促進する、炎症性サイトカインの放出を通して、Ｔ細胞が大きく関与している。これらのＴ細胞は、乾癬プラークの表皮で増殖する。
【0007】
乾癬皮膚プラークにおける自然免疫細胞およびその産生物の存在は、自然免疫のための役割を示している。自然免疫系の細胞としては、大食細胞、ＮＫおよびＮＫＴ細胞、ならびにＤＣが挙げられる。乾癬皮膚では、非病変皮膚と比較して、形質細胞様および骨髄性のＤＣの数が増加する。自然免疫の他の細胞要素もまた乾癬の発達に関与しており、例えば、ＩＬ－６、ＩＬ－１２、ＩＬ－２３、およびＴＮＦのそれぞれを分泌することのできる数多くの大食細胞が挙げられる。ケラチノサイトもまた皮膚において能力を有する常在性の抗原提示細胞（ＡＰＣ）である。刺激されると、それらは大量のサイトカイン（例えば、ＴＮＦ、ＩＬ－６、およびＩＬ－１８）、走化性のケモカイン（例えば、ＩＬ－８およびＣＣＬ２０）、および抗菌ペプチド（例えば、β－デフェンシンおよびＬＬ３７）を産生する。
【0008】
ゲノム全体の走査によれば、乾癬には少なくとも９つの染色体遺伝子座が連結されていることが報告されており、それらの中でＰＳＯＲＳ１遺伝子座がこの疾患の遺伝率の３５～５０％を占めている。ＰＳＯＲＳ１は、染色体６（６ｐ２１）の主要な組織複合体（ＭＨＣ）領域に位置し、それによって、この領域に含まれるいくつかの遺伝子、即ちＨＬＡ－Ｃｗ６、ＣＣＨＣＲ１（コイルドコイルｏらせん状ロッドタンパク質）、およびＣＤＳＮ（コルネオデスモシン）が、乾癬に関連している。他の感受性遺伝子座も特定されており、例えば、ケラチノサイト（ＬＣＥ３Ｂ（後期角化膜３Ｂ）およびＬＣＥ３Ｃ１（後期角化膜３Ｃ１））および免疫細胞（ＩＬ－１２Ｂ、ＩＬ２３Ｒ、およびＩＬ２３Ａ）に発現する遺伝子が挙げられる。このことは、病原体に対する表皮バリアと免疫応答の両方が乾癬病因に関係していることを示す。
【0009】
現在、軽度から中等度の乾癬の治療の最前線は、局所用剤の使用である。局所用治療が失敗した場合、次の段階の治療にはしばしば、光線療法、経口全身剤、および／または注射可能生物学的治療剤が含まれる。慢性プラーク乾癬の治療では、副腎皮質ステロイド、ビタミンＤ類似体、およびタザロテンが全て用いられる。しかしながら、局所用副腎皮質ステロイドに長期間暴露されると、皮膚萎縮症、持続性線条、および毛細血管拡張症につながるおそれがある。ビタミンＤ類似体（例えば、カルシトリオール、カルシポトリオール、およびタカルシトール）は効果的な乾癬治療剤ではあるが、過剰な使用は高カルシウム血症につながるおそれがある。治療成功の確率は、ビタミンＤ類似体を局所用副腎皮質ステロイドと組み合わせた場合に、ビタミンＤ類似体の単剤療法と比較して、上昇する。結果として、プラーク乾癬の最前線の導入治療としてしばしば推奨されるものは、ビタミンＤ類似体と局所用ステロイドの組み合わせとなる。
【0010】
他の局所用剤は、乾癬プラークの治療の場合、一般的に局所用副腎皮質ステロイドおよびビタミンＤ類似体と組み合わされる。サリチル酸は、皮膚の薄片を除去するために補助的に使用される局所用角質溶解薬であり、ケラチノサイト同士の結合を低減させ、水和を増加させ、皮膚ｐＨの減少により角質層を軟化させることで作用する。しかしながら、広い皮膚面積に対する長期間の使用後には、サリチル酸毒性が全身的に生じるおそれがある。乾癬によく用いられる他の治療剤であるレチノイドは、細胞の分化を仲介または誘発して増殖を正常化することで皮膚に作用する。全身レチノイド、例えばタザロテンは、催奇性、血清脂質上昇、粘膜皮膚毒性、骨格変化、および脱毛など、いくつかの悪影響に関連している。
【0011】
紫外線（ＵＶ）療法は、真皮および表皮の乾癬病変部にＴ－リンパ球アポトーシスを誘発する。経口８－メトキシソラレン－ＵＶ－Ａ（ＰＵＶＡ）および狭帯域ＵＶＢ（ＮＢ－ＵＶＢ）は、慢性プラーク乾癬に対して充分に確立された効果的治療法である。ＰＵＶＡは、反応率が、ＮＢ－ＵＶＢの７０％に対して約８０％であるが、プラークが非常に厚い場合を除いて、ＮＢ－ＵＶＢは、利便性がより高いために好適である。しばしば全身治療は、重度の乾癬患者のために、局所療法および光線療法と組み合わされて使用される。乾癬治療のための経口全身剤としては、メトトレキサート、シクロスポリン、およびアシトレチンが挙げられる。注射可能生物学的治療剤は、炎症経路において分子を標的とすることによる、乾癬治療の新興の手法である。それは、経口免疫抑制薬や光線療法に耐性を有する重度の乾癬患者のために考えられている。注射可能生物学的治療剤の２つ主要な薬効分類として、抗サイトカイン治療剤とＴ細胞標的治療剤がある。第１の分類は、注射可能免疫グロブリン（Ｉｇ）、インフリキシマブ、およびアダリムマブと、標的溶解性膜結合型のＴＮＦとからなる。他の抗サイトカイン治療剤としては、エタネルセプトおよびウステキヌマブが挙げられる。注射可能治療剤の第２薬効分類としては、Ｔ細胞に結合してＴ－細胞の活性化防ぐ剤、例えばアレファセプトおよびエファリズマブがある。
【0012】
皮膚科医および患者にとっては、乾癬に対する両方の新規治療剤、即ち局所送達可能なものと全身送達可能なものとが、有益であろう。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0013】
本発明者らは、アミロライド誘導体であるベンザミルの特定の塩が、ベンザミルの遊離塩基化合物や公知の塩と比べて、少なくとも安定性の改善、水溶性の向上、および／または多形性の低下の点で、性質を改善されていることを見出した。
【課題を解決するための手段】
【0014】
従って、本発明は、ベンザミル、アミロライド、および特定のアミロライド誘導体の、新規塩形態を提供する。
【0015】
本発明において有益な遊離塩基化合物は、式（Ｉ）のものである。
【0016】
【化1】
【0017】
式中、Ｒは以下から選択される。
【0018】
【化2】
【0019】
－Ｈ；
－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）３；
－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）３；
【0020】
【化3】
【0021】
【化4】
【0022】
【化5】
【0023】
第１の態様では、上記の遊離塩基の塩、即ち、乳酸塩、酢酸塩、またはリン酸塩が提供される。
【0024】
一実施形態では、前記塩は乳酸塩である。
【0025】
一実施形態では、前記遊離塩基化合物は、ベンザミルである。
【0026】
一実施形態では、前記塩は、ただ１つの結晶形態を有する。
【0027】
第２の態様では、本発明は、本発明の塩と、任意で薬剤的および／または化粧品的に許容できる賦形剤とを含んでなる医薬組成物または化粧品組成物に関する。
【0028】
一実施形態では、前記医薬組成物は、局所投与用に適合している。
【0029】
第３の態様では、本発明は、医薬における使用のための、第１の態様の塩または第２の態様の医薬組成物に関する。
【0030】
一実施形態では、本発明は、乾癬の治療方法における使用のための前記塩または医薬組成物に関する。
【0031】
一実施形態では、前記乾癬は、慢性乾癬またはプラーク乾癬である。
【0032】
一実施形態では、前記塩または組成物は、局所的または全身的に投与される。
【0033】
第４の態様では、本発明は、乾癬の治療方法における使用のための医薬組成物の製造における第１の態様の塩の使用に関する。
【0034】
一実施形態では、前記乾癬は、慢性乾癬またはプラーク乾癬である。
【0035】
一実施形態では、前記塩は、局所的または全身的に投与される。
【0036】
第５の態様では、本発明は、乾癬の治療方法であって、その治療を必要とする個人に、第１の態様の塩または第２の態様の医薬組成物を有効量で投与することを含んでなる方法に関する。
【0037】
一実施形態では、前記乾癬は、慢性乾癬またはプラーク乾癬である。
【0038】
一実施形態では、前記塩は、局所的または全身的に投与される。
【図面の簡単な説明】
【0039】
【発明を実施するための形態】
【0040】
定義
他に断りがなければ、本明細書で使用される全ての科学技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般的に理解されるのと同じ意味を有する。
他に断りがなければ、本明細書で使用される全ての科学技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般的に理解されるのと同じ意味を有する。
【0041】
治療に関連して用いられる用語「感受性」および「感受性の」は、治療中の疾患の症状を低減または軽減させるときの、治療化合物の有効度を指す相対語である。例えば、細胞または患者の治療に関連して用いられた用語「感受性の増加」とは、当技術分野で充分に認められたいずれかの方法を用いて測定された場合の、乾癬の症状を低減または軽減させるときの有効性における少なくとも５％以上の増加を指す。
【0042】
本明細書で用いられる場合、また、他に断りがなければ、化合物の「治療的有効量」という用語は、乾癬の治療または管理における治療的有用性を提供するため、または乾癬に関連した１つ以上の症状を遅らせたり最小化したりするために充分な量を指す。化合物の治療的有効量とは、単独で用いられるかまたは他の治療剤と組み合わされて、乾癬の治療または管理において治療的有用性をもたらす、治療剤の量を意味する。用語「治療的有効量」は、治療全体を改善したり、乾癬の症状または原因を軽減または回避したり、あるいは他の治療剤の治療効果を高めたりする量を包含し得る。
【0043】
用語「見込み」とは一般的に、事象の確率の上昇を指す。用語「見込み」は、患者反応の有効性に関連して用いられた場合は一般的に、乾癬の症状が低減または軽減されるであろう確率の上昇を考慮に入れている。
【0044】
用語「求める」、「測定」、「評価」、「判断」、および「アッセイ」は、本明細書で用いられた場合は一般的に、如何なる形式の測定をも指し、要素の有無を判断することを含む。これらの用語は、定量的および／または定性的決定の両方を含む。判断は、相対的でも絶対的でもよい。「有無を判断すること」は、有無を決定するだけでなく、存在する何かの量を測定することを含む。
【0045】
本明細書で用いられる場合、用語「サンプル」は、目的の１つ以上の成分を含有する、典型的には流体形態ではあるが必ずしもそうではない材料または材料混合物に関する。
【0046】
本明細書で用いられる「生物学的サンプル」は、生物学的対象から得られたサンプルを指し、例えば、インビボまたはインサイチュから得られたか、取られたか、または回収された生物学的組織または流体に由来するサンプルが挙げられる。生物学的サンプルにはまた、前がんまたはがんの細胞または組織を含む生物学的対象の領域に由来するサンプルも含める。そのようなサンプルとしては、哺乳動物から単離された器官、組織、断片、および細胞が挙げられるが、これらには限定されない。生物学的サンプルの例としては、細胞可溶化物、細胞培養液、細胞株、組織、口腔組織、胃腸組織、器官、小器官、体液、血液サンプル、尿サンプル、皮膚サンプル等が挙げられるが、これらには限定されない。生物学的サンプルの好適な例としては、全血、部分的精製血液、ＰＢＭＣ、組織検査サンプル等が挙げられるが、これらには限定されない。
【0047】
「第２の剤と組み合わされた第１の剤」という語句にあるような用語「組み合わせ」は、例えば、薬剤的に許容できる同じ担体に溶解または混合されていてもよい第１の剤と第２の剤を同時投与すること、第１剤の後に第２の剤を投与すること、または第２の剤の後に第１剤を投与することを包含する。従って、本発明は、併用療法および併用医薬組成物を含む。
【0048】
語句「並行療法」における「並行」という用語は、或る剤を第２の剤の存在下で投与することを包含する。並行療法は、第１、第２、第３、または更なる剤が同時投与される方法を包含する。並行療法はまた、例えば、第１または更なる剤を第２または更なる剤の存在下で投与する場合であって、その第２または更なる剤が先に投与された可能性のある場合を包含する。並行療法は、異なる実施者によって段階的に実行してもよい。例えば、或る実施者が対象に第１の剤を投与して、第２の実施者がその対象に第２の剤を投与してもよく、第１の剤（および更なる剤）の投与が第２の剤（および更なる剤）の存在下である限り、両方の剤の投与段階が同時、ほとんど同時、または別々の時でもよい。実施者と対象は同じ実体（例えば、ヒト）であってもよい。
【0049】
本明細書で用いられる用語「用量」は、対象に投与される物質の、例えば、ミリグラム（ｍｇ）での量を指す。一実施形態では、用量は一定用量であり、例えば、物質が投与される対象の重量に依存しない。他の一実施形態では、用量は相対的な、一定でない用量であり、例えば、物質が投与される対象の重量によるか、あるいは局所治療の場合は、用量は治療される表面積に関連して、例えば、皮膚ｍ２当たりの用量であってもよい。
【0050】
本明細書で用いられる用語「周期性」は、それが物質の投与に関連する場合、対象に物質を投与する（規則的）反復周期を指す。
【0051】
「周期性持続期間」とは、投与の反復周期が起こっている時間を指す。
【0052】
本明細書で用いられる用語「治療（ｔｒｅａｔ）」、「治療（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、および「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、他に断りがなければ、患者が乾癬にかかっている間に生じる作用を指し、その作用は、乾癬の重症度を低減し、乾癬の進行を妨げるかまたは遅らせるかし、あるいは治療目的を達成または維持する。「効果的な患者反応」とは、患者に対する治療的有用性の増加を指す。「効果的な患者乾癬反応」とは、乾癬の身体的症状が、例えば、５％、１０％、２５％、５０％、または１００％低下したことであり得る。
【0053】
本明細書で用いられる用語「キット」は、乾癬の治療のために本発明の新規塩形態と一緒に投与すべき成分を含んでなる、一まとめにされた製品を指す。好ましくは、キットは、キットの構成要素を保持する箱または容器を含んでなる。前記箱または容器は、ラベルや、食品薬品当局が承認した手順書を添付されていてもよい。前記箱または容器は、好ましくは、プラスチック、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン、またはプロピレン製の入れ物に入った本発明の構成要素を保持する。前記入れ物は、蓋の付いた管または瓶であってもよい。前記キットはまた、使用説明書を含んでもよい。
【0054】
本明細書で用いられる語句「薬剤的に許容できる」は、健全な医学的判断の範囲において、毒性、刺激、アレルギー性反応、または他の問題もしくは合併症を持った対象の組織と接触させて使用するのに適した、化合物、材料、組成物、および／または剤形であって、妥当な利益／リスク率に相応したものを指す。薬剤的に許容できる化合物、材料、組成物、および／または剤形はまた、化粧品的に許容できるとも考えられる。
【0055】
本明細書で用いられる語句「薬剤的に許容できる賦形剤」は、対象への投与のための任意に治療的な化合物の運搬または輸送に関与する、液体または固体のフィラー、希釈剤、担体、製造助剤（例えば、潤滑剤、タルク、マグネシウムや、カルシウムもしくは亜鉛のステアリン酸塩、または立体的な酸）、溶剤、または封入材等の、許容できる材料、組成物、または媒体を指す。各賦形剤は、製剤の他の成分に適合し、対象に有害でないとの意味で「許容できる」ものとする。薬剤的な賦形剤として供される材料のいくつかの例としては、エタノール；ラクトース、グルコース、およびスクロース等の糖；コーンスターチおよびジャガイモデンプン等のデンプン；カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、および酢酸セルロース等のセルロースおよびその誘導体；ゼラチン；タルク；ワックス；落花生油、綿実油、紅花油、ごま油、オリーブ油、コーン油、および大豆油等の油；エチレングリコールおよびプロピレングリコール等のグリコール；グリセリン、ソルビトール、マンニトール、およびポリエチレングリコール等のポリオール；オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル等のエステル；寒天；緩衝剤；水；等張食塩水；ｐＨ緩衝液；および医薬製剤に用いられる他の非毒性適合性物質が挙げられる。必要に応じて、特定の甘味料および／または香味料および／または着色剤を添加してもよい。薬剤的に許容できる賦形剤もまた、化粧品的に許容できる賦形剤と考えられる。
【0056】
本明細書で用いられる用語「化合物」は、塩形態の化合物だけでなく、遊離塩基形態の化合物も含む。
【0057】
ＰＳＭ００１、ベンジルアミロライド、およびベンザミルは互換的に用いられ、全て、３，５－ジアミノ－Ｎ－（Ｎ’－ベンジルカルバミミドイル）－６－クロロピラジン－２－カルボキサミド（ＣＡＳ登録番号２８９８－７６－２）を指すよう意図されている。
【0058】
発明の詳細な説明
本発明は、少なくとも安定性の改善、水溶性の向上、および／または多形性の低下の点で、性質が改善されているアミロライドの新規塩およびアミロライド誘導体の新規塩を提供する。
本発明は、少なくとも安定性の改善、水溶性の向上、および／または多形性の低下の点で、性質が改善されているアミロライドの新規塩およびアミロライド誘導体の新規塩を提供する。
【0059】
第１態様では、本発明は、式（Ｉ）で表される遊離塩基化合物の塩に関する。
【0060】
【化6】
【0061】
前記塩は、乳酸塩、酢酸塩、およびリン酸塩から選択される。
【0062】
本発明の塩は、先行技術の塩に比べて、水溶性が向上している場合がある。熟練した配合者は、水溶性の向上が、有効医薬成分（ＡＰＩ）製剤を調製する際に有利であることを理解している。例えば、製剤としてより高い用量を提供し得る、より高い濃度のＡＰＩを用いてもよい。かかる製剤は、局所用製剤であっても、全身送達用製剤であってもよい。
【0063】
一実施形態では、Ｒはベンジルであり、即ち、前記遊離塩基化合物はベンザミルである。
【0064】
一実施形態では、前記塩は乳酸塩である。医薬塩における対イオンとしての乳酸塩の利点は、それが内在性であり、例えば、ヒトの皮膚に存在することである。このことは、局所用製剤においては特に有利なことである。乳酸の別の利点は、それが角質溶解薬であることである。従って、前記塩が乳酸塩である実施形態では、遊離塩基と対イオンの両方が治療効果を有し得る。従って、乳酸塩を組み合わせて、式（Ｉ）の遊離塩基化合物を含んでなる製剤は、併用療法に適切な、併用効果を有する製剤を提供し得る。
【0065】
一実施形態では、前記塩は酢酸塩である。
【0066】
一実施形態では、前記塩はリン酸塩である。
【0067】
一実施形態では、前記塩は、ただ１つの結晶形態を有する。熟練した配合者は、単一多形体の存在がＡＰＩの製剤に有利であり得ることを理解する。例えば、多形が異なる複数のＡＰＩは、それぞれ放出速度が異なり得る。更に、製剤における異なる多形体の比率は、時間とともに変化し得る。これにより、２つ以上の多形を有する塩の製剤において、放出速度が時間とともに変化するおそれがある。
【0068】
一実施形態では、前記遊離塩基化合物はベンザミルであり、前記塩は前記乳酸塩であり、前記塩のＸ線粉末ディフラクトグラムは、図１に示されるような特性ピークを含んでなる。一実施形態では、前記遊離塩基化合物はベンザミルであり、前記塩は前記酢酸塩であり、前記塩のＸ線粉末ディフラクトグラムは、図３に示されるような特性ピークを含んでなる。一実施形態では、前記遊離塩基化合物はベンザミルであり、前記塩は前記酢酸塩であり、前記塩のＸ線粉末ディフラクトグラムは、図４に示されるような特性ピークを含んでなる。一実施形態では、前記遊離塩基化合物はベンザミルであり、前記塩は前記リン酸塩であり、前記塩のＸ線粉末ディフラクトグラムは、図6に示されるような特性ピークを含んでなる。
【0069】
一実施形態では、Ｒは水素である、即ち、前記遊離塩基化合物はアミロライドである。一実施形態では、前記塩は前記乳酸塩である。一実施形態では、前記塩は前記酢酸塩である。一実施形態では、前記塩は前記リン酸塩である。一実施形態では、前記塩は、ただ１つの結晶形態を有する。
【0070】
一実施形態では、Ｒは－Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）３である。一実施形態では、前記塩は前記乳酸塩である。一実施形態では、前記塩は前記酢酸塩である。一実施形態では、前記塩は前記リン酸塩である。一実施形態では、前記塩は、ただ１つの結晶形態を有する。
【0071】
一実施形態では、Ｒは次の通りである。
【0072】
【化7】
【0073】
一実施形態では、前記塩は前記乳酸塩である。一実施形態では、前記塩は前記酢酸塩である。一実施形態では、前記塩は前記リン酸塩である。一実施形態では、前記塩は、ただ１つの結晶形態を有する。
【0074】
一実施形態では、Ｒはフェニルである、即ち、前記遊離塩基化合物はフェナミルである。一実施形態では、前記塩は前記乳酸塩である。一実施形態では、前記塩は前記酢酸塩である。一実施形態では、前記塩は前記リン酸塩である。一実施形態では、前記塩は、ただ１つの結晶形態を有する。
【0075】
一実施形態では、Ｒは次の通りである。
【0076】
【化8】
【0077】
一実施形態では、前記塩は前記乳酸塩である。一実施形態では、前記塩は前記酢酸塩である。一実施形態では、前記塩は前記リン酸塩である。一実施形態では、前記塩は、ただ１つの結晶形態を有する。
【0078】
新規塩の医薬用途
カリウム保持性利尿薬としてのアミロライドの治療効果は充分に確立されている。乾癬に対するベンザミルの治療効果は、公開ＰＣＴ出願国際公開第２０１５１６８５７４の実施例に、妥当と思われるように示されている。尚、その出願は参照により本明細書に援用される。
カリウム保持性利尿薬としてのアミロライドの治療効果は充分に確立されている。乾癬に対するベンザミルの治療効果は、公開ＰＣＴ出願国際公開第２０１５１６８５７４の実施例に、妥当と思われるように示されている。尚、その出願は参照により本明細書に援用される。
【0079】
国際公開第２０１５１６８５７４号には更に、ベンザミルがヒト乾癬ケラチノサイトにおいて上皮性ナトリウムチャネル（ＥＮａＣ）およびナトリウム／カルシウム交換輸送体（ＮＣＸ１）を標的とすることが開示されている。本発明者らは、ＥＮａＣ、ＮＣＸ１、そしてまたＮａ＋／Ｈ＋交換輸送体ＮＨＥに対してベンザミルと同様の効力を持つ関連化合物が、ベンザミルと同様の有利な効果を提供する可能性のあることを認識した。かかる化合物は、先行技術（Kleyman et al (1988), J Membrane Biol, 105:1-21）に開示されており、本発明で用いられる遊離塩基化合物を含んでいる。治療効果が、国際公開第２０１５１６８５７４号で提供されている実験手順書を用いて、妥当と思われるように確立されている。
【0080】
従って、特定の態様における本発明は、ベンザミル、アミロライド、および或る特定の他のアミロライド誘導体の、医薬における使用のための新規塩に関する。
【0081】
特定の態様では、本発明は、ベンザミル、アミロライド、および他の特定のアミロライド誘導体の、乾癬の治療における使用のための新規塩に関する。実施形態では、治療される乾癬の形態は、以下で更に論じられるいずれかの形態である。
【0082】
慢性プラーク乾癬（尋常性乾癬とも称される）は、乾癬の最も一般的な形態である。慢性プラーク乾癬は、皮膚の赤く膨らんだ部分を特徴とし、硬貨大のものからもっと大きなものまである。慢性プラーク乾癬では、プラークは１つまたは複数であり得、大きさは、２、３ミリメートルから数センチメートルまでいろいろであり得る。そのプラークは通常、表面がうろこのようで赤く、優しく引っ掻くと、「銀色」効果を出して光を反射する。慢性プラーク乾癬による病変部（しばしば対称的である）は、全身に生じるが、膝、肘、腰仙部、頭皮、および爪を含め、伸筋表面に好発する。慢性プラーク乾癬は時に、陰茎、外陰、および弯曲部に生じるが、通常うろこ状とはならない。慢性プラーク乾癬にかかった患者の診断は通常、上述の臨床的特徴に基づく。特に、慢性プラーク乾癬の病変部の分布、色、および典型的銀色うろこは、慢性プラーク乾癬に特徴的である。
【0083】
滴状乾癬とは、特徴的な水滴の形をしたうろこ状のプラークを伴う、乾癬の一形態である。一般的に、滴状乾癬の発赤の後に、感染症、中でも最も注目すべきものとして連鎖球菌性咽喉感染が生じる。滴状乾癬の診断は通常、皮膚の外観と、最近の咽頭炎の履歴がしばしばあるという事実とに基づく。
【0084】
逆乾癬は乾癬の一形態であり、患者は、赤く炎症を起こした、滑らかで通常は湿った皮膚領域を有し、それはプラーク乾癬に関連するうろこ状のものとは異なる。逆乾癬はまた、間擦疹性乾癬または間擦疹型乾癬とも称される。逆乾癬は主に、腋窩、鼠径部、乳房の下に生じるほか、陰部および殿部の回りの皮膚のひだに生じ、その箇所に現れる結果、摩擦や発汗がその患部を刺激する。
【0085】
掌蹠乾癬とも称される膿疱性乾癬は、膿疱をいろいろな大きさでいろいろな箇所に引き起こすが、しばしば手と足に発生させる、乾癬の一形態である。膿疱は限局したり、身体の広範囲に広がったりすることがある。膿疱性乾癬は、圧痛性および有痛性であることがあり、発熱を生じることがある。
【0086】
乾癬性紅皮症は、しばしば身体表面のほとんどに発症する、特に炎症性の形態の乾癬である。それは、フォン・ツンブッシュ膿疱性乾癬に関連して生じ得る。それは、稀な型の乾癬で、乾癬を有する人々の３パーセントの人々の一生の間に１回以上起こる。それは一般的に、不安定なプラーク乾癬を有する人々に現れる。皮膚が広範囲に火のように赤くなり剥脱するのがこの形態の特徴である。この症状にはしばしば、重度の痒みおよび痛みが伴う。乾癬性紅皮症は、重度の疾病につながり得る、タンパク質や流体の喪失を引き起こす。浮腫（体液貯留による膨張）が、特に足首の回りで、感染症とともに発症し得る。乾癬性紅皮症はまた、肺炎やうっ血性心不全を起こし得る。重症の人はしばしば、入院が必要となる。乾癬性紅皮症は、乾癬の最初の兆候が見えると同時に急に発生することもあれば、プラーク乾癬を有する人に徐々に発生することもある。併用療法で、例えば、局所用薬物と１つまたは２つの全身用薬物がしばしば必要となる。
【0087】
従って、本発明はまた、本発明の少なくとも１つの塩を治療的有効量で含んでなる薬剤的に許容できる組成物に関し、また、それを利用するものであり、任意で、乾癬の治療のための１つ以上の更なる剤と組み合わされ、１つ以上の薬剤的に許容できる賦形剤と共に製剤化されるものである。有効成分および１つまたは複数の賦形剤を、当技術分野で公知の方法に従って組成物や剤形物に製剤化してもよい。本発明の医薬組成物は、例えば、皮膚に塗布するローション剤、クリーム剤、軟膏剤、噴霧剤、膏薬、マイクロニードルアレイ剤として局所的適用による投与のために製剤化してもよく、あるいは、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、舌に塗るペースト剤、水性もしくは非水性の溶液もしくは懸濁液、水薬、またはシロップ剤など、固体状、液体状、または半流動体状のものとして経口投与に適合するように製剤化してもよい。
【0088】
従って、本発明はまた、本発明の少なくとも１つの塩を或る量で含んでなる化粧品的に許容できる組成物に関し、また、それを利用するものであり、任意で、１つ以上の更なる剤と組み合わされ、１つ以上の許容できる賦形剤と共に製剤化されるものである。化粧品組成物は、対象の皮膚の外観または感触を改善するのに有用であり得るが、皮膚に対して治療的であると考えられる効果を有してはいない。前記塩および１つまたは複数の賦形剤を、当技術分野で公知の方法に従って組成物や剤形物に製剤化してもよい。本発明の化粧品組成物は、例えば、皮膚に塗布するローション剤、クリーム剤、軟膏剤、噴霧剤、膏薬、マイクロニードルアレイ剤として局所的適用による投与のために製剤化してもよく、あるいは、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、舌に塗るペースト剤、水性もしくは非水性の溶液もしくは懸濁液、水薬、またはシロップ剤など、固体状、液体状、または半流動体状のものとして経口投与に適合するように製剤化してもよい。
【0089】
本発明の医薬、医薬組成物、または治療剤の組み合わせは、ヒトおよび／または動物、好ましくは、幼児、子供、および成人も含めたヒトへの適用に適した如何なる形態であってもよく、当業者に公知の標準的手順によって作製することができる。医薬、（医薬）組成物、または治療剤の組み合わせは、当業者に公知の標準的手順、例えば、“Pharmaceutics: The Science of Dosage Forms”, Second Edition, Aulton, M.E. (ED. Churchill Livingstone, Edinburgh (2002); “Encyclopedia of Pharmaceutical Technology”, Second Edition, Swarbrick, J. and Boylan J.C. (Eds.), Marcel Dekker, Inc. New York (2002); “Modern Pharmaceutics”, Fourth Edition, Banker G.S. and Rhodes C.T. (Eds.) Marcel Dekker, Inc. New York 2002 y “The Theory and Practice of Industrial Pharmacy”, Lachman L., Lieberman H. And Kanig J. (Eds.), Lea & Febiger, Philadelphia (1986)の目次をもとに、作製することができる。それぞれの記載が参照によりここに援用され、本開示の一部を成す。
【0090】
本発明の塩の有効用量には、上に定義した通り、「治療的有効用量（ｄｏｓｅ）若しくは量（ａｍｏｕｎｔ）」または「予防的有効用量（ｄｏｓｅ）もしくは量（ａｍｏｕｎｔ）」を含め得る。治療的有効量は、個人の病状、年齢、性別、および重量、並びに個人に所望の反応を引き出すことができるか否か等の要因によって変わり得る。治療的有効用量／量はまた、それによって、如何なる有毒または有害な効果をも治療的に有益な効果が上回るものである。「予防的有効用量／量」は、所望の予防的結果を達成するのに必要な回数と期間投与される効果的な量を指す。典型的には、予防的用量は、疾患の前か疾患の早い段階で対象に使用されるため、予防的有効量は治療的有効量より少ないであろう。
【0091】
乾癬の治療は、治療中または治療後（例えば、少なくとも２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、もしくは６０週間、またはそれより長い期間）、０／１のＰＧＡスコアまたはＰＡＳＩ５０、ＰＡＳＩ７５、ＰＡＳＩ９０、もしくはＰＡＳＩ１００の反応スコアを達成または維持することを伴い得る。乾癬の治療はまた、健康関連の生活の質（ＨＲＱＯＬ）の結果を達成または維持することを伴い得る。ＨＲＱＯＬの結果としては、皮膚科生活質指標（ＤＬＱＩ）、Ｐｓ関連（ＶＡＳ－Ｐｓ）および乾癬性関節炎関連（ＶＡＳ－ＰｓＡ）の痛みの視覚的アナログスケール、ショート・フォーム３６健康調査の精神的（ＭＣＳ）および身体的（ＰＣＳ）側面概略スコア、および日常諸活動障害度（ＴＡＩ）スコアが挙げられる。
【0092】
乾癬の治療はまた、本明細書で提供されるＨＲＱＯＬ結果のいずれか、例えば、ＤＬＱＩ、ＶＡＳ－Ｐｓ、ＶＡＳ－ＰｓＡ、ＭＣＳ、ＰＣＳ、およびＴＡＩのいずれか１つまたはそれらの組み合わせにおいて、臨床的に重要な変化の最小量（ｍｉｎｉｍｕｍ ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ、ＭＣＩＤ）を達成または維持することを伴い得る。
【0093】
乾癬の治療はまた、本明細書で提供されるＨＲＱＯＬ結果のいずれか、例えば、ＤＬＱＩ、ＶＡＳ－Ｐｓ、ＶＡＳ－ＰｓＡ、ＭＣＳ、ＰＣＳ、およびＴＡＩのいずれか１つまたはそれらの組み合わせにおいて、臨床的に重要な変化の最小量（ＭＣＩＤ）の反応率を達成または維持することを伴い得る。乾癬の「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「治療（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」はまた、本明細書で提供されるＨＲＱＯＬ結果のいずれか、例えば、ＤＬＱＩ、ＶＡＳ－Ｐｓ、ＶＡＳ－ＰｓＡ、ＭＣＳ、ＰＣＳ、およびＴＡＩのいずれか１つまたはそれらの組み合わせにおける、臨床的に意味のある低減を達成または維持することを意味し得る。乾癬の「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「治療（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」はまた、治療中または治療後（例えば、少なくとも２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、もしくは６０週間、またはそれより長い期間）、爪乾癬重症度指標（ＮＡＰＳＩ）のスコアを達成または維持することを意味し得る。
【0094】
乾癬の治療はまた、対象の集団の或る特定のパーセンテージ（例えば、対象の集団の少なくとも約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または１００％）において、本明細書で提供される結果のいずれかを達成または維持することを伴い得る。
【0095】
投与計画は、最適の所望の反応（例えば、治療的または予防的反応）をもたらすように調整してもよい。例えば、単一用量を投与してもよく、いくつかの分割用量を時間をかけて投与してもよく、あるいは、治療状況の急迫事情が示すのに応じて用量を比例的に低減または増加させてもよい。用量は、皮膚疾患症状が出た時、または症状の発症前に、対象に投与してもよい。
【0096】
なお、用量の値は、緩和すべき状態の型および重症度に応じて変わり得る。更に、如何なる特定の対象にとっても、具体的な投与計画が、個人の必要性に従って、また、組成物の投与を実施または管理している人の専門的判断に従って、経時的に調整されるべきこと、および、本明細書に記載される用量範囲は例示に過ぎず、特許請求されている組成物の範囲または応用の限定を意図していないことを理解されたい。
【0097】
一実施形態では、用量は一定用量であり、例えば、物質が投与される対象の重量に依存しない。他の一実施形態では、用量は一定用量ではなく、例えば、物質が投与される対象の重量によるか、あるいは局所用治療の場合、用量は治療される表面積に関連して、例えば、皮膚ｍ２当たりの用量であってもよい。
【0098】
用量、例えば、成人の治療に使用するための一定用量の適例としては、約０．０１ｍｇ、約０．０５ｍｇ、約０．１ｍｇ、約０．５ｍｇ、約１ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約５００ｍｇ、またはそれ以上が挙げられる。
【0099】
用量、例えば、本発明の方法によって成人を治療する局所用途のための用量の適例としては、約０．０１ｍｇ／ｍ２表面積、約０．０５ｍｇ／ｍ２表面積、約０．１ｍｇ／ｍ２表面積、約０．５ｍｇ／ｍ２表面積、約１ｍｇ／ｍ２表面積、約５ｍｇ／ｍ２表面積、約１０ｍｇ／ｍ２表面積、約５０ｍｇ／ｍ２表面積、約１００ｍｇ／ｍ２表面積、約５００ｍｇ／ｍ２表面積、またはそれ以上が挙げられる。
【0100】
上に列挙した範囲同士の中間にある範囲もまた考慮に入れられている。例えば、これらの値のいずれかを上限または下限として有する、例えば、約０．０１ｍｇ～約１００ｍｇ、約１ｍｇ～約１０ｍｇ等の範囲もまた本発明の一部であることが考慮されている。
【0101】
組成物の投与は、対象に対する組成物の投与の反復周期を含んでなり得る。組成物の投与の周期性としては、約１週間に１回、２週間に１回、約３週間に１回、約４週間に１回、約５週間に１回、約６週間に１回、約７週間に１回、約８週間に１回、約９週間に１回、約１０週間に１回、約１１週間に１回、約１２週間に１回、約１３週間に１回、約１４週間に１回、約１５週間に１回、約１６週間に１回、約１７週間に１回、約１８週間に１回、約１９週間に１回、約２０週間に１回、約２１週間に１回、約２２週間に１回、約２３週間に１回、約２４週間に１回、約５～１０日間に１回、約１０～２０日間に１回、約１０～５０日間に１回、約１０～１００日間に１回、約１０～２００日間に１回、約２５～３５日間に１回、約２０～５０日間に１回、約２０～１００日間に１回、約２０～２００日間に１回、約３０～５０日間に１回、約３０～９０日間に１回、約３０～１００日間に１回、約３０～２００日間に１回、約５０～１５０日間に１回、約５０～２００日間に１回、約６０～１８０日間に１回、または約８０～１００日間に１回であってもよい。本発明は、上に列挙した期間同士の中間にある周期をもまた考慮に入れている。本発明は、上に列挙した範囲同士の中間にある範囲をもまた考慮に入れている。例えば、これらの値のいずれかを上限または下限として有する、例えば、約１１０日間～約１７０日間、約１６０日間～約２２０日間等の範囲もまた本発明の一部であることが考慮されている。
【0102】
物質投与の周期性持続期間としては、約４週間まで、約８週間まで、約１２週間まで、約１６週間以上まで、約２０週間まで、約２４週間まで、約２８週間まで、約３２週間以上までであって、その間投与の周期性が約１週間に１回であってもよい。例えば、周期性の持続期間が約６週間で、その間投与の周期性が約４週間に１回であってもよく、例えば、物質は、０週目および４週目に投与される。
【実施例】
【0103】
表１の略語が本開示を通して使用される。
【0104】
【表1】
【0105】
実施例１：新規塩の調製
ベンザミルの熱安定性を３つの溶媒系で評価した：アセトニトリル：水＝１：１、エタノール、および０．１ＭのＨＣｌ。ベンザミル（約０．５ｍｇ／ｍＬ）の溶液を、上記の選んだ溶媒で調製し、３つのバイアルに分注した。溶液を室温、５０℃、および８０℃で１時間撹拌し、次いでＵＰＬＣ ＭＳで分析した。５０℃および８０℃で１時間インキュベートした溶液で測定したベンザミルの化学純度を、初めに開始溶液で測定したものと比較した。ベンザミルは、エタノール中５０℃で１時間インキュベートしたときは安定しているように見えたが、８０℃でインキュベートした溶液では、いくらか化学分解が観察された。これらの結果に基づいて、更なる検討での最も高い適用温度を５０℃に設定した。
ベンザミルの熱安定性を３つの溶媒系で評価した：アセトニトリル：水＝１：１、エタノール、および０．１ＭのＨＣｌ。ベンザミル（約０．５ｍｇ／ｍＬ）の溶液を、上記の選んだ溶媒で調製し、３つのバイアルに分注した。溶液を室温、５０℃、および８０℃で１時間撹拌し、次いでＵＰＬＣ ＭＳで分析した。５０℃および８０℃で１時間インキュベートした溶液で測定したベンザミルの化学純度を、初めに開始溶液で測定したものと比較した。ベンザミルは、エタノール中５０℃で１時間インキュベートしたときは安定しているように見えたが、８０℃でインキュベートした溶液では、いくらか化学分解が観察された。これらの結果に基づいて、更なる検討での最も高い適用温度を５０℃に設定した。
【0106】
ベンザミル遊離塩基の溶解性を、エタノール、水、１，４－ジオキサン、１，２－ジメトキシエタン、アセトニトリル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル、ヘプタン、酢酸エチル、ＴＨＦ、およびメタノールにおいて定性的に評価した。溶媒のアリコートを、溶解が起こるまで、約５ｍｇのベンザミル遊離塩基に添加した。ベンザミルが約３ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解しなかった場合、懸濁液を５０℃で３０分間インキュベートして、溶解性に対する温度の影響を調査した。ベンザミルは、メタノールおよび１，２－ジメトキシエタンにわずかに可溶であった以外は、試験した溶媒の殆どに不溶であった。ＴＨＦでの懸濁液は５０℃で３０分間インキュベートしたとき薄くなったように見え、高温が溶解性をわずかに改善したことを示している。
【0107】
熱安定性および定性的溶解性の試験の結果に基づいて、塩形成実験を、メタノール（ＭｅＯＨ）、１，２－ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、およびＴＨＦにおけるスラリー変換によって実施した。
【0108】
ベンザミル遊離塩基の懸濁液を、３つの選択した溶媒で調製し、対イオンを、水溶液として１：０．５、１：１、および１：２（ｐＫａ差による）の関係で添加した。混合物を初めに５０℃で１時間加熱し、その後５℃まで冷却した。
【0109】
析出した固体を、ハイスループットＸ線粉末回折法（ＨＴＸＲＰＤ）によって分析した。液相（溶液および母液の両方）を周囲条件下で蒸発させ、残留固体をＨＴＸＲＰＤで分析した。
【0110】
２３の新規結晶相を（おそらくは単相で）特定した。少なくとも１つの結晶形態を、ベンザミルと、グルコン酸を除く各試験対象対イオンとの反応によって特定した。ＤＭＥおよびＴＨＦにおける、乳酸による塩形成は、同じ結晶相（「ＬＡＣ１」と表記）を作り出したが、ＭｅＯＨでは、非結晶材料が回収された。酢酸、安息香酸、酒石酸、硝酸、リン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、および硫酸との塩形成では、異なる溶媒から単離された固体において異なるＸＲＰＤパターンがしばしば特定されており、塩が多形であることを示唆していた。ベンザミルと、安息香酸、硝酸、およびｐ－トルエンスルホン酸との反応もまた、結晶相の混合を作り出すケースがいくつかあった。
【0111】
固体を４０℃／７５％相対湿度（ＲＨ）に２日間暴露し（加速劣化条件、ＡＡＣ）、新規に特定した相の物理的安定性を試験した。
【0112】
結果を表２に示す。表中、ベンザミルを「ＡＰＩ」と称すことがある。
【0113】
【表2】
【0114】
塩ＡＣＡ１、ＡＣＡ２、ＢＮＺ１、ＢＮＺ２、ＢＮＺ３、ジＨＣｌ１、ジＨＣｌ２、ＬＡＣ１、ＮＩＴ１、ＮＩＴ２、ＰＨＯ２、ＰＨＯ３、ＴＯＳ１、ＴＯＳ２ａ、ＴＯＳ３、ＴＯＳ４、ＴＯＳ５、ＳＵＬ１、ＳＵＬ３に対するＸＲＰＤパターンは良好な結晶化度を示したが、ＴＡＲ１、ＴＡＲ２、ＮＩＴ４、ＰＨＯ１、ＳＵＬ２、ＳＵＬ４、ＳＵＬ５、ＳＵＬ６に対するＸＲＰＤパターンは不良な結晶化度を示した。図１は、ベンザミルの乳酸塩の形態ＬＡＣ１のＨＲ－ＸＲＰＤパターンを示す。図２は、ベンザミルの酢酸塩の形態ＡＣＡ１およびＡＣＡ２のＨＲ－ＸＲＰＤパターンを示す。図３は、ベンザミルのリン酸塩の形態ＰＨＯ２のＨＲ－ＸＲＰＤパターンを示す。
【0115】
４０℃／７５％ＲＨで２日間実施した物理的安定性試験は、ＡＣＡ１、ＡＣＡ２、ＢＮＺ１、ＢＮＺ２、ＢＮＺ３、ＬＡＣ１、ＴＡＲ１、ＴＡＲ２、ＰＨＯ２、ＴＯＳ１、ＴＯＳ３、およびＳＵＬ１が物理的に安定な塩であることを示したが、ジＨＣｌ１、ジＨＣｌ２、ＮＩＴ１、ＮＩＴ２、ＮＩＴ４、ＰＨＯ１、ＰＨＯ３、ＴＯＳ２ａ、ＳＵＬ２、ＳＵＬ３、ＳＵＬ４、ＳＵＬ５、ＳＵＬ６は物理的に不安定な塩であった。
【0116】
メタノールおよびＤＭＥにおいてＨＣｌに対して得られた塩形態には、新規のＸＲＰＤパターンが識別された。その新規形態は、「ジＨＣｌ１」および「ジＨＣｌ２」と表した。ＡＡＣ（４０℃／７５％ＲＨ）に２日間暴露された両方の相は、モノＨＣｌ塩Ａ＋Ｂの混合物に部分的または全体的に変換された（「ＳＭ１」と表記）。したがって、ジＨＣｌ１およびジＨＣｌ２の両方は物理的に不安定であった。
【0117】
塩の水溶性を、溶媒アリコート添加法によって定性的に評価した。水のアリコートを、５００～６００μＬまで、約５ｍｇの塩に添加した。遊離塩基の溶解性もまた評価した。溶解性試験の結果を表３に示す。ＬＡＣ１は２６～５１ｍｇ／ｍＬの溶解性を示し；ＡＣＡ１およびＡＣＡ２はそれぞれ１５～１９および１２～１６ｍｇ／ｍＬの溶解性を示し；ＰＨＯ２は１２～１６ｍｇ／ｍＬの溶解性を示した。
【0118】
実験のその他は、懸濁液（約１０ｍｇ／ｍＬの濃度）として残存した。懸濁液を室温で２４時間平衡化状態にした。その後、固体を液相から分離した。液相をろ過し、ＨＰＬＣで分析して溶解性を測定した。溶液／母液のｐＨもまた測定した。ＢＮＺ１、ＢＮＺ２、ＢＮＺ３、ＳＵＬ１、ＴＡＲ１ｐｃ、ＴＯＳ１、およびＮＩＴ５は、２ｍｇ／ｍＬより低い溶解性を示した。ベンザミル遊離塩基は水に実質上不溶であった。
【0119】
【表3】
【0120】
２日間のＡＡＣ（４０℃／７５％ＲＨ）の後、物理的に不安定であったが、予めモノＨＣｌ塩（シグマアルドリッチ、製品番号Ｂ２４１７）に対して評価しておいた２～３ｍｇ／ｍＬの溶解性値と比較するために、ジＨＣｌ塩の水溶性もまた評価した。２つの塩の懸濁液を、水で９～１０ｍｇ／ｍＬの濃度に調製した。混合液を室温で２４時間平衡化状態にした。その後、固体を液相から分離した。液相をろ過し、ＨＰＬＣで分析して溶解性を測定した。母液のｐＨもまた測定した。両方の塩の溶解性は約３ｍｇ／ｍＬであるように見えたため、前記モノＨＣｌ塩の溶解性と類似していた。
【0121】
塩の吸湿性挙動を、４０～９５～０～４０％のＲＨプロフィール、２５℃、および０．００２のｄｍ／ｄｔで、動的水蒸気吸着（ＤＶＳ）測定によって評価した。吸湿性挙動の分類は、等温収着曲線の第１吸着周期における２５℃／８０％ＲＨでの水蒸気吸収に基づく。ＡＣＡ１およびＢＮＺ１は、０．１％の水蒸気を吸着したため、非吸湿性であった。ＢＮＺ２、ＬＡＣ１、ＰＨＯ２、ＴＯＳ１、およびＮＩＴ５は、０．２から０．９％の水蒸気を吸着したため、わずかに吸湿性であった。分析された塩は、変化するＲＨレベルに暴露されたとき、物理的に安定であった。というのは、それらのＸＲＰＤパターンがＤＶＳ測定後に不変であったためである。
【0122】
乳酸塩の多形は１つのみ見られた。
【0123】
要約すると、ベンザミルの乳酸塩、リン酸塩、および酢酸塩は、安定性の改善および水溶性の向上を示し、吸湿性がほんのわずかしかないか全くなく、多形性の低減を示した。
【0124】
実施例２：更なる新規塩の調製
結晶化度、安定性、および溶解性を試験するために、塩形成実験を更に実施して、３５の薬剤的に許容される対イオンに関連して、更なる塩を試験した。
結晶化度、安定性、および溶解性を試験するために、塩形成実験を更に実施して、３５の薬剤的に許容される対イオンに関連して、更なる塩を試験した。
【0125】
分析方法
以下の分析方法を、実施例２および３で用いた。
以下の分析方法を、実施例２および３で用いた。
【0126】
ハイスループットＸ線粉末回折法（ＨＴ－ＸＲＰＤ）
アルデナ社のＴ２ハイスループットＸＲＰＤを設定して用いて、ＸＲＰＤパターンを得た。強度および幾何学的変化について補正されたＶＡＮＴＥＣ－５００ガス面積検出器を備えた、ブルカー社の二次元検出回折システム（Ｇｅｎｅｒａｌ Ａｒｅａ Ｄｅｔｅｃｔｏｒ Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ：ＧＡＤＤＳ）にプレートを載せた。測定精度（ピーク位置）の校正をＮＩＳＴのＳＲＭ１９７６標準（コランダム）を用いて実施した。
アルデナ社のＴ２ハイスループットＸＲＰＤを設定して用いて、ＸＲＰＤパターンを得た。強度および幾何学的変化について補正されたＶＡＮＴＥＣ－５００ガス面積検出器を備えた、ブルカー社の二次元検出回折システム（Ｇｅｎｅｒａｌ Ａｒｅａ Ｄｅｔｅｃｔｏｒ Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ：ＧＡＤＤＳ）にプレートを載せた。測定精度（ピーク位置）の校正をＮＩＳＴのＳＲＭ１９７６標準（コランダム）を用いて実施した。
【0127】
データ収集は、ＸＲＰＤパターンの最も示差的な部分である、１．５°と４１．５°の間の２θ領域において、単色Ｃｕ Ｋα放射線を用いて室温で実施した。各ウェルの回折パターンを、２つの２θ範囲（１．５°≦２θ≦２１．５°の第１枠、１９．５°≦２θ≦４１．５°の第２枠）において、各枠の照射時間を９０秒として、回収した。バックグラウンド減算も曲線平滑化もＸＲＰＤパターンには適用しなかった。
【0128】
熱分析
ＴＧＡ／ＳＤＴＡおよびＴＧＭＳ分析：溶媒による質量損失または結晶からの水分損失をＴＧＡ／ＤＳＣによって測定した。ＴＧＡ／ＤＳＣ ３＋ ＳＴＡＲｅシステム（メトラートレドＧｍｂＨ、スイス）において加熱している間、サンプルの重量をモニターした結果、重量対温度曲線および熱流信号の測定点を得た。このＴＧＡ／ＤＳＣ ３＋は、インジウムおよびアルミニウムのサンプルで温度の校正をした。サンプル（約２ｍｇ）を、１００μＬのアルミニウム製るつぼに秤量し、密閉した。密閉部にピンホールを開け、るつぼを、ＴＧＡにおいて２５から３００℃まで１０℃ｍｉｎ－１の加熱速度で加熱した。乾燥Ｎ２ガスを用いてパージした。
ＴＧＡ／ＳＤＴＡおよびＴＧＭＳ分析：溶媒による質量損失または結晶からの水分損失をＴＧＡ／ＤＳＣによって測定した。ＴＧＡ／ＤＳＣ ３＋ ＳＴＡＲｅシステム（メトラートレドＧｍｂＨ、スイス）において加熱している間、サンプルの重量をモニターした結果、重量対温度曲線および熱流信号の測定点を得た。このＴＧＡ／ＤＳＣ ３＋は、インジウムおよびアルミニウムのサンプルで温度の校正をした。サンプル（約２ｍｇ）を、１００μＬのアルミニウム製るつぼに秤量し、密閉した。密閉部にピンホールを開け、るつぼを、ＴＧＡにおいて２５から３００℃まで１０℃ｍｉｎ－１の加熱速度で加熱した。乾燥Ｎ２ガスを用いてパージした。
【0129】
ＴＧＡサンプルから来るガスを、０～２００ａｍｕの温度範囲で質量を分析する四重極質量分析計である質量分析計Ｏｍｎｉｓｔａｒ ＧＳＤ３０１Ｔ２（ファイファーバキュームＧｍｂＨ、ドイツ）で分析した。
【0130】
ＤＳＣ分析：熱イベントをＤＳＣサーモグラムから視覚化し、熱流束ＤＳＣ ３＋ ＳＴＡＲｅシステム（メトラー・トレドＧｍｂＨ、スイス）で記録した。ＤＳＣ ３＋は、インジウム（ｍ．ｐ．＝１５６．６℃；δＨｆ＝２８．４５Ｊ／ｇ）および亜鉛（ｍ．ｐ．＝４１９．６℃；δＨｆ＝１０７．５Ｊ／ｇ）の小片で温度およびエンタルピーを校正した。サンプル（約２ｍｇ）を標準的な４０μＬアルミニウムパンの中に封入し、ピンホールを開け、ＤＳＣ中で１０℃／分の加熱速度で２５℃から３００℃まで加熱した。測定の間、５０ｍＬ／分の流量で乾燥Ｎ２ガスを用いてＤＳＣ機器をパージした。
【0131】
１Ｈ－ＮＭＲ分光法
１Ｈ－ＮＭＲ分光法によってＤＭＳＯ－ｄ６で、化合物の完全性の特性評価を行ない、適宜、塩および共結晶の化学量論比を求めた。５００ＭＨｚの計器（ブルカー・バイオスピンＧｍｂＨ）により、標準パルスシーケンスを用いて、室温（ＲＴ）でスペクトルを記録した。データを、ＡＣＤ ＬａｂｓのソフトであるＳｐｅｃｔｒｕｓ Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ ２０１６．２．２（アドバンスト・ケミストリー・ディベロップメントＩｎｃ．、カナダ）で処理した。
１Ｈ－ＮＭＲ分光法によってＤＭＳＯ－ｄ６で、化合物の完全性の特性評価を行ない、適宜、塩および共結晶の化学量論比を求めた。５００ＭＨｚの計器（ブルカー・バイオスピンＧｍｂＨ）により、標準パルスシーケンスを用いて、室温（ＲＴ）でスペクトルを記録した。データを、ＡＣＤ ＬａｂｓのソフトであるＳｐｅｃｔｒｕｓ Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ ２０１６．２．２（アドバンスト・ケミストリー・ディベロップメントＩｎｃ．、カナダ）で処理した。
【0132】
ＵＰＬＣ分析
ＵＰＬＣシステム：
ＵＰＬＣ：アジレント１２９０
検出器１：ダイオードアレイＵＶ検出器（２８６ｎｍに設定）
検出器２：ＭＳＤ ＸＴシングル四重極を陽性スキャンモード（Ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｓｃａｎ ｍｏｄｅ）で
ＵＰＬＣ条件：
オートサンプラー温度：室温
カラム：アジレントＥｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ１８ ＨＤ（５０×２．１ｍｍ；１．８μｍ）
カラム温度：４０℃
フローセル：１０ｍｍ流路
移動相Ａ：水に１０ｍＭ酢酸アンモニウム
移動相Ｂ：アセトニトリル
流量：０．６ｍｌ／分
グラジエント：時間［分］：溶出剤Ａ：溶出剤Ｂ：
０．００ ９５％ ５％
０．１０ ９５％ ５％
２．５０ １０％ ９０％
２．５５ １０％ ９０％
２．５６ ９５％ ５％
３．５０ ９５％ ５％
実施時間：３．５分
サンプル：
濃度：約１．０ｍｇ／ｍＬ
溶媒：ＭｅＣＮ
注入量：１μＬ
保持時間：１．２２分
ＭＳ：ｍ／ｚ ３２０
ＵＰＬＣシステム：
ＵＰＬＣ：アジレント１２９０
検出器１：ダイオードアレイＵＶ検出器（２８６ｎｍに設定）
検出器２：ＭＳＤ ＸＴシングル四重極を陽性スキャンモード（Ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｓｃａｎ ｍｏｄｅ）で
ＵＰＬＣ条件：
オートサンプラー温度：室温
カラム：アジレントＥｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ１８ ＨＤ（５０×２．１ｍｍ；１．８μｍ）
カラム温度：４０℃
フローセル：１０ｍｍ流路
移動相Ａ：水に１０ｍＭ酢酸アンモニウム
移動相Ｂ：アセトニトリル
流量：０．６ｍｌ／分
グラジエント：時間［分］：溶出剤Ａ：溶出剤Ｂ：
０．００ ９５％ ５％
０．１０ ９５％ ５％
２．５０ １０％ ９０％
２．５５ １０％ ９０％
２．５６ ９５％ ５％
３．５０ ９５％ ５％
実施時間：３．５分
サンプル：
濃度：約１．０ｍｇ／ｍＬ
溶媒：ＭｅＣＮ
注入量：１μＬ
保持時間：１．２２分
ＭＳ：ｍ／ｚ ３２０
【0133】
化合物完全性を、クロマトグラムにおける「注入ピーク」以外の各ピークの面積から算出されたピーク面積のパーセンテージで表現し、合計ピーク面積は次の通りとした：
【0134】
【数1】
【0135】
目的の化合物のピーク面積パーセンテージをサンプルにおける成分の純度指示として用いた。
【0136】
実験方法
材料
約３ｇの乳酸ベンザミル塩（バッチＳＢＯ－８４－４４）が、スウェーデン、セーデルテリエのアルデナ社から供給された。化学薬品は全て、フィッシャーサイエンティフィックまたはシグマ・アルドリッチから得た。使用した化学薬品は、研究グレードのものであり、純度が少なくとも９９％であった。
材料
約３ｇの乳酸ベンザミル塩（バッチＳＢＯ－８４－４４）が、スウェーデン、セーデルテリエのアルデナ社から供給された。化学薬品は全て、フィッシャーサイエンティフィックまたはシグマ・アルドリッチから得た。使用した化学薬品は、研究グレードのものであり、純度が少なくとも９９％であった。
【0137】
遊離塩基の調製：約５ｇの乳酸ベンジルを３２０ｍＬの水に溶解させた。溶液のｐＨは５．８であった。ＮａＯＨの１Ｍ水溶液を、ｐＨが１０．５で安定化するまで段階的に添加（合計１４ｍＬの１Ｍ ＮａＯＨを添加）すると、白い析出物が形成された。懸濁液を３０分間撹拌し、析出物をエージングした。析出物をブフナー漏斗でろ過し、２００ｍＬの水で２回洗浄した。得られた固体を、５０℃、５ｍｂａｒで一晩乾燥させた。収量＝３．６ｇ（９２％）。予めＨＴ－ＸＲＰＤ、ＵＰＬＣ－ＭＳ、ＴＧＭＳ（熱重量分析に質量分析を組み合わせたもの）、および１Ｈ－ＮＭＲによって固体の特性を評価し、塩のふるい分けのための出発材料として用いた。
【0138】
方法
塩ふるい分け実験を、メタノール（ＭｅＯＨ）、１，２－ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、およびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）で実施した。これら３つの溶媒で調製したベンザミル遊離塩基の懸濁液と対イオン溶液を、ベンザミル遊離塩基：対イオンのモル比が１：０．５５、１：１．１、および１：２．２となるように添加した。実験の対イオンを表４に列挙する。
塩ふるい分け実験を、メタノール（ＭｅＯＨ）、１，２－ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、およびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）で実施した。これら３つの溶媒で調製したベンザミル遊離塩基の懸濁液と対イオン溶液を、ベンザミル遊離塩基：対イオンのモル比が１：０．５５、１：１．１、および１：２．２となるように添加した。実験の対イオンを表４に列挙する。
【0139】
【表4】
【0140】
懸濁液を５０℃で１時間加熱し、その後１℃／時間で５℃まで冷却し、この温度で３日間エージングした。固体を遠心分離によって液相から分離し、一晩５０℃で真空乾燥させ、ＨＴ－ＸＲＰＤによって分析した。残存している母液および溶液から溶媒を周囲条件で蒸発させ（蒸発晶析実験）、残留固体をＨＴ－ＸＲＰＤによって分析した。固体を全て加速劣化条件（ＡＡＣ、４０℃／７５％ＲＨ）に２日間暴露し、ＨＴ－ＸＲＰＤによって再分析した。
【0141】
対イオン、適用ベンザミル：対イオン（ＡＰＩ：ＣＩ）比、および単離条件（結晶化方法および溶媒）を、特定した各塩形態ごとに報告し、結晶化度および物理的安定性の表示とともに、表５に報告している。
【0142】
結果
【0143】
【表5】
【0144】
エタン、Ｌ－アスコルビン酸、Ｌ－アスパラギン酸、およびガラクタル酸との塩は見られなかった。しかしながら、同じ対イオンに対して、異なるＸＲＰＤパターンが、異なる結晶化溶媒から単離された固体においてしばしば特定されており、問題の塩が多形であることを示唆している。
【0145】
１，５－ナフタリンジスルホン酸（ＮＤＳ１）、Ｌ－グルタミン酸（ＧＬＴ１）、ニコチン酸（ＮＩＣ）、シュウ酸（ＯＸＡ１）、ピバル酸（ＰＩＶ１）、コハク酸酸（ＳＵＣ１）、およびトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ１）の場合は、３つの結晶化溶媒全てからただ１つの塩多形が見られ、それらの形態全てが、ＡＣＣに暴露されても物理的に安定であった。
【0146】
２つの結晶塩形態が、ケイ皮酸（ＣＩＮ１～２）、クエン酸（ＣＩＴ１～２）、フマル酸（ＦＵＭ１～２）、グルタル酸（ＧＬＵ１～２）、馬尿酸（ＨＩＰ１～２）、Ｌ－リンゴ酸（ＭＡＬ１～２）、ステアリン酸（ＳＴＥ１およびＳＴＥ３）、アジピン酸（ＡＤＩ１およびＡＤＩ３）、および吉草酸（ＶＡＬ１～２）で単離された固体に認められた。３つの結晶塩形態が、ゲンチシン酸（ＧＥＮ１～３）、ベンゼンスルホン酸（ＢＥＳ１～３）、酪酸（ＢＵＴ１～３）、マレイン酸（ＭＡＥ１～３）、メタンスルホン酸（ＭＥＳ１～３）、オロト酸（ＯＲＯ１～３）、およびサリチル酸（ＳＡＬ１～３）で特定された。しかし、更に分析的特性評価を行なったところ、ＡＤＩ２およびＳＴＥ３がＡＰＩおよびＣＩの物理的混合物であることが分かった。
【0147】
いくつかの形態が、１，２－エタンジスルホン酸（ＥＤＹ１～６）、２－フロン酸（ＦＵＲ１～５）、エタンスルホン酸（ＥＳＹ１～４）、ギ酸（ＦＯＲ１～５）、臭化水素酸（ＨＢＲ１～１０）、マロン酸（ＭＡＯ１～４）、ナフタリン－２－スルホン酸（ＮＳＡ１～４）、パモン酸（ＰＡＭ１～４）、およびプロピオン酸（ＰＲＯ１～６）との塩形成によって特定された。
【0148】
塩形態ＥＤＹ１、ＥＤＹ２、ＥＤＹ３、ＥＤＹ４、ＥＤＹ６、ＮＤＳ１、ＦＵＲ１、ＦＵＲ２、ＦＵＲ３、ＡＤＩ１、ＡＤＩ３、ＢＥＳ１、ＢＥＳ２、ＢＥＳ３、ＢＵＴ１、ＣＩＮ２、ＣＩＴ２、ＥＳＹ１、ＦＯＲ１、ＦＯＲ３、ＦＯＲ４、ＦＯＲ５、ＦＵＭ１、ＦＵＭ２、ＨＩＰ１、ＨＢＲ６、ＨＢＲ７、ＨＢＲ８、ＭＡＬ１、ＭＡＥ１、ＭＡＥ２、ＭＡＯ１、ＭＡＯ４、ＭＥＳ１、ＮＳＡ１、ＮＩＣ１、ＯＲＯ１、ＯＲＯ２、ＰＩＶ１、ＰＲＯ１、ＳＡＬ１、ＳＵＣ１、ＴＦＡ１、およびＶＡＬ１は良好な結晶化度を示した。他の塩形態は、中等度または不良な結晶相を示したか、または純粋な形態としてではなく、混合物としてのみ単離されたため、結晶化度は評価されなかった。
【0149】
ＡＡＣ（４０℃／７５％ＲＨ）に２日間暴露すると、次の固体相のみが物理的に安定な塩であった：ＥＤＹ２、ＥＤＹ３、ＮＳＤ１、ＧＥＮ１、ＧＥＮ２、ＦＵＲ１、ＢＵＴ１、ＣＩＮ１、ＣＩＮ２、ＥＳＹ１、ＦＵＭ２、ＧＬＵ１、ＧＬＵ２、ＨＢＲ１、ＧＬＴ１、ＭＡＬ１、ＭＡＥ２、ＭＡＥ３、ＭＡＯ１、ＭＥＳ１、ＮＳＡ２、ＮＳＡ４、ＮＩＣ１、ＯＲＯ１、ＯＲＯ２、ＯＸＡ１、ＰＡＭ１、ＰＡＭ２、ＰＩＶ１、ＳＡＬ１、ＳＴＥ１、ＳＴＥ２、ＳＵＣ１、ＴＦＡ１、およびＶＡＬ１。
【0150】
結論として、ベンザミルは、物理的に安定な塩を形成する傾向を示した。
【0151】
塩の固体状態の特性評価
良好な結晶化度を有する、物理的に安定で、相が純粋な形態である塩の、物理化学的な特性評価を、ＵＰＬＣ、ＴＧＡ、ＤＳＣ、および１Ｈ－ＮＭＲによって行なった。４０℃／７５％ＲＨに１週間暴露された後に得られた塩もまた、ＴＧＭＳによって分析した。ＴＧＭＳによる分析により、サンプルを加熱したときに蒸発した溶媒の量および性質を求めた。
良好な結晶化度を有する、物理的に安定で、相が純粋な形態である塩の、物理化学的な特性評価を、ＵＰＬＣ、ＴＧＡ、ＤＳＣ、および１Ｈ－ＮＭＲによって行なった。４０℃／７５％ＲＨに１週間暴露された後に得られた塩もまた、ＴＧＭＳによって分析した。ＴＧＭＳによる分析により、サンプルを加熱したときに蒸発した溶媒の量および性質を求めた。
【0152】
結果
特定された新規塩におけるベンザミルの化学純度は、９８．７～９９．９％（面積％）であった。塩のいくつかには２つ以上の結晶相がみられ、無水多形体だけでなく水和物、半水和物、二水和物、溶媒和物、および水と溶媒の組み合わせも結晶格子状であった。
特定された新規塩におけるベンザミルの化学純度は、９８．７～９９．９％（面積％）であった。塩のいくつかには２つ以上の結晶相がみられ、無水多形体だけでなく水和物、半水和物、二水和物、溶媒和物、および水と溶媒の組み合わせも結晶格子状であった。
【0153】
【表6】
【0154】
通常、ＤＳＣ曲線は無水塩に対して、溶融および／または分解開始に相当している可能性のある１つのイベントを示す。水和／溶媒和形態の場合、結晶格子からの水および／または溶媒の蒸発に割り当てられる広い吸熱イベントが、最終溶融／分解開始の前に記録された。
【0155】
無水塩の中では、１，５－ナパジシル酸塩ＮＤＳ１が最も高い融点（２８０℃）を示し、それに、エシル酸塩ＥＳＹ１（２６０℃）、フマル酸塩ＦＵＭ１（２５３℃）、コハク酸塩ＳＵＣ１（２４１℃）、およびＴＦＡ塩ＴＦＡ１（２３９℃）が続いた。
【0156】
殆どの場合、塩形成を１Ｈ－ＮＭＲ分析によって確認した。ベンザミルの信号（特にＣＨ２基）が、塩のスペクトルにおいて移り変わっており、酸性対イオンから塩基性ベンザミルの遊離塩基へとプロトン移動が起こったことを示唆している。塩の化学量論比をプロトン信号積分によって算出した。
【0157】
塩形態の殆どは、ベンザミル（ＡＰＩ）と対イオンの化学量論比が１：０．５であったＭＡＬ１、ＦＵＭ１、およびＥＤＹ３を除けば、化学量論比がＡＰＩ：ＣＩで１：１であった。更に、ＣＩＴ１、ＨＢＲ１、ＯＸＡ１、およびＴＦＡ１の場合、対イオンが１Ｈ－ＮＭＲスペクトルに現れなかったか、または信号が水の信号と重なったために、化学量論比を求めることができなかった。
【0158】
いくつかの塩では、信号の移り変わりが現れなかった（ＢＵＴ１、ＣＩＮ１、ＣＩＮ２、ＧＬＵ１、ＰＩＶ１、およびＶＡＬ１）。表７に見られるように、それら塩形態の殆どが、ＤＳＣ図形において塩の溶融に相当している可能性が最もある単一のイベントを示したため、１Ｈ－ＮＭＲ分析で塩形成を確認できなかった場合でも、それらは塩に分類することができる。ＮＭＲ信号に動きが欠如していることは、それらのｐＫａ値の差が小さいことで説明できる。
【0159】
【表7】
【0160】
更に塩を分類するために、安定性検討後に見られた塩と同様に、無水および水和の塩形態についても、水溶性を測定した。ＧＥＮ１、ＣＩＴ１、ＦＯＲ１、ＨＩＰ１、ＯＲＯ２、およびＳＡＬ１の固体相に有機溶媒が存在することを考慮して、それらの塩は更に調べなかった。また、ＦＵＲ３、ＥＳＹ１、ＭＡＥ２、およびＰＡＭ２の固体がふるい分けで充分に回収されなかったので、これらの塩には更に検討を行うことができなかった。試験した塩に対して収集された物理化学的特性評価結果と、ふるい分けで見い出された結晶相との、概要を表８に示す。
【0161】
【表8】
【0162】
水溶性
安定性検討後に見られた塩と同様に、無水および水和の塩形態についても、水溶性を測定した。水のアリコートを、溶解が起こるまでか、または１６００μＬの水が添加されるまで、固体塩に添加した。溶解性の検討において、乳酸塩を基準として使用した。ＭＥＳ１、ＧＬＴ１、およびＢＵＴ１は、完全に溶解した。他の塩形態は全て、１６００μＬの水を添加した後も、充分には溶解せず、懸濁液のままであった。充分な溶解を促進するために、これら懸濁液を５０℃で１５分間加熱した。ＨＢＲ１、ＭＡＯ１、ＦＯＲ３、およびＰＲＯ２は、これらの条件下で溶解した。水で実施した溶解性測定の結果（塩形態同士の比較をしやすいようにするために、溶解した遊離塩基のｍｇ／ｍＬで）を表９に報告する。
安定性検討後に見られた塩と同様に、無水および水和の塩形態についても、水溶性を測定した。水のアリコートを、溶解が起こるまでか、または１６００μＬの水が添加されるまで、固体塩に添加した。溶解性の検討において、乳酸塩を基準として使用した。ＭＥＳ１、ＧＬＴ１、およびＢＵＴ１は、完全に溶解した。他の塩形態は全て、１６００μＬの水を添加した後も、充分には溶解せず、懸濁液のままであった。充分な溶解を促進するために、これら懸濁液を５０℃で１５分間加熱した。ＨＢＲ１、ＭＡＯ１、ＦＯＲ３、およびＰＲＯ２は、これらの条件下で溶解した。水で実施した溶解性測定の結果（塩形態同士の比較をしやすいようにするために、溶解した遊離塩基のｍｇ／ｍＬで）を表９に報告する。
【0163】
溶解性測定が完了したとき、残存固体を液相から分離し、風乾させた。乾燥した固体をＨＴ－ＸＲＰＤによって分析した。
【0164】
【表9】
【0165】
ＭＥＳ１だけが、出発材料（ＬＡＣ１）より良好な溶解性値を示した。しかし、充分な溶解の後に析出が観察された。水溶性測定を繰り返したが、今回は５０ｍｇ／ｍｌの濃度を目標にした。塩は室温で素早く溶解し、１５分後に再び白色固体として出てきた。
【0166】
実施例３：ベンザミルの乳酸塩およびトリフルオロ酢酸塩の比較検討
この実施例では、ベンザミルの乳酸塩とＴＦＡ塩を、物理化学的パラメーター、多形性、溶解性、および溶解速度の点で比較した。
この実施例では、ベンザミルの乳酸塩とＴＦＡ塩を、物理化学的パラメーター、多形性、溶解性、および溶解速度の点で比較した。
【0167】
材料
化学薬品は、フィッシャーサイエンティフィックまたはシグマ・アルドリッチから得た。使用した化学薬品は、研究グレードのものであり、純度が少なくとも９９％であった。プソムリ（Ｐｓｏｍｒｉ）より５グラムの乳酸塩ＰＳＭ００１（乳酸ベンザミル、バッチＳＢ０８４－４４）が供給された。乳酸ベンザミル（無水物形態ＬＡＣ１）を１Ｈ－ＮＭＲによって確認した。乳酸塩の対イオンが１Ｈ－ＮＭＲによって可視化され、塩の化学量論比が１：１であると確認した。ＵＰＬＣ分析によって、化学純度が９９．４％（面積％）であると確認した。
化学薬品は、フィッシャーサイエンティフィックまたはシグマ・アルドリッチから得た。使用した化学薬品は、研究グレードのものであり、純度が少なくとも９９％であった。プソムリ（Ｐｓｏｍｒｉ）より５グラムの乳酸塩ＰＳＭ００１（乳酸ベンザミル、バッチＳＢ０８４－４４）が供給された。乳酸ベンザミル（無水物形態ＬＡＣ１）を１Ｈ－ＮＭＲによって確認した。乳酸塩の対イオンが１Ｈ－ＮＭＲによって可視化され、塩の化学量論比が１：１であると確認した。ＵＰＬＣ分析によって、化学純度が９９．４％（面積％）であると確認した。
【0168】
実験方法
遊離塩基の調製：約２ｇの乳酸ベンザミルを１２８ｍＬの水に溶解させた。溶液のｐＨは５．８であった。ＮａＯＨの１Ｍ水溶液を、ｐＨが１０．５で安定化するまで段階的に添加（合計７ｍＬの１Ｍ ＮａＯＨを添加）すると、白い析出物が形成された。懸濁液を３０分間撹拌し、析出物をエージングした。析出物をブフナー漏斗でろ過し、室温で、２００ｍＬの水で２回洗浄した。得られた固体を、５０℃、５ｍｂａｒで一晩乾燥させた。収量が１．４ｇ（７２％）のベンザミル遊離塩基であった。固体をＨＴ－ＸＲＰＤおよび１Ｈ－ＮＭＲによって分析し、出発材料と比較して、遊離塩基の形成を確かめた。
遊離塩基の調製：約２ｇの乳酸ベンザミルを１２８ｍＬの水に溶解させた。溶液のｐＨは５．８であった。ＮａＯＨの１Ｍ水溶液を、ｐＨが１０．５で安定化するまで段階的に添加（合計７ｍＬの１Ｍ ＮａＯＨを添加）すると、白い析出物が形成された。懸濁液を３０分間撹拌し、析出物をエージングした。析出物をブフナー漏斗でろ過し、室温で、２００ｍＬの水で２回洗浄した。得られた固体を、５０℃、５ｍｂａｒで一晩乾燥させた。収量が１．４ｇ（７２％）のベンザミル遊離塩基であった。固体をＨＴ－ＸＲＰＤおよび１Ｈ－ＮＭＲによって分析し、出発材料と比較して、遊離塩基の形成を確かめた。
【0169】
ＴＦＡ塩の調製：遊離塩基（１．２グラム）の懸濁液を、室温で、ＴＨＦ（１４．７５ｍｌ）によって調製した。対イオン溶液（水の中に１Ｍ ＴＦＡ）を、ＡＰＩ：ＣＩ比が１：１．１に達するまで添加した。懸濁液を５０℃に加熱し、この温度で１時間保持し、続いて５℃まで冷却し、この温度で３日間保持した。エージング時間の完了後、固体を遠心分離によって液相から分離し、真空乾燥固体（サンプルＩＤ：ＧＥＮ８）としてＨＲ－ＸＲＰＤ、ＴＧＡ、ＤＳＣ、ＵＰＬＣ、および１Ｈ－ＮＭＲによって分析し、産生物がベンザミルＴＦＡ塩であることを確認した。
【0170】
非結晶乳酸ベンザミル塩の生成：約１０ｍｇのＡＰＩを、有機溶媒と水の混合物に溶解させた（表１０のリスト）。溶液を液体窒素中で凍結させ、フリーズ・ドライヤー（Ｃｈｒｉｓｔ Ａｌｐｈａ ２－４ＬＤ）で一晩乾燥させた。回収した固体をＨＴ－ＸＲＰＤによって分析した。
【0171】
ｔｅｒｔ－ブタノール／水（５０／５０）、１，４－ジオキサン／水（５０／５０）、テトラヒドロフラン／水（５０／５０）、アセトニトリル／水（５０／５０）、および２，２，２－トリフルオロエタノール／水（５０／５０）から非結晶固体を得た。非結晶固体をＴＧＭＳによって分析し、残留溶媒／水の含有量を求めた。実験の詳細と結果を表１０に報告している。
【0172】
ＡＰＩの濃度が溶液中で非常に高くなり得ることと、最終的な調製で残留溶媒の含有量が低くなることを考慮して、より大きい非結晶材料バッチを、実験ＩＤ ＧＥＮ３で適用した実験条件に従って調製した（１，４－ジオキサン／水（５０／５０）から）。得られた非結晶固体（実験ＩＤ ＧＥＮ９）を熱サイクリング実験に用いた。
【0173】
【表10】
【0174】
非結晶ベンザミルＴＦＡ塩の生成：約１０ｍｇのＴＦＡ塩（実験ＩＤ ＧＥＮ８から）を、有機溶媒と水の混合物に溶解させた（表１１のリスト）。溶液を液体窒素中で凍結させ、フリーズ・ドライヤー（Ｃｈｒｉｓｔ Ａｌｐｈａ ２－４ＬＤ）で一晩乾燥させた。回収した固体をＨＴ－ＸＲＰＤによって分析した。１，４－ジオキサン／水（７０／３０）、テトラヒドロフラン／水（５０／５０）、およびアセトニトリル／水（７０／３０）から非結晶固体を得た。非結晶固体をＴＧＭＳによって分析し、残留溶媒／水の含有量を求めた。実験の詳細と結果を表１１に報告している。
【0175】
ＡＰＩの濃度が溶液中で最も高くなることと、最終的な調製で残留溶媒の含有量が低くなることを考慮して、より大きい非結晶材料バッチを、実験ＩＤ ＧＥＮ１１で適用した実験条件に従って調製した（１，４－ジオキサン／水（７０／３０）から）得られた非結晶固体（実験ＩＤ ＧＥＮ１６）を熱サイクリング実験に用いた。
【0176】
【表11】
【0177】
多形状態
乳酸ベンザミル塩およびＴＦＡ塩の両方の多形状態を熱サイクリングによって評価した。非結晶固体（それぞれＧＥＮ９およびＧＥＮ１６）のスラリーを室温で、１５の溶媒によって調製した。懸濁液に、３つの加熱冷却サイクルを含む温度プロフィールを適用した。温度プロフィールの終わりに、固体を遠心分離で単離し、周囲条件および真空下５０℃で乾燥させた。結晶化実験全ての終了とともに、固体を全てＨＴ－ＸＲＰＤによって分析した。続いて、固体を全て加速劣化条件（ＡＡＣ、４０℃／７５％ＲＨ）に４８日間暴露してから、ＨＴ－ＸＲＰＤによって再分析した。
乳酸ベンザミル塩およびＴＦＡ塩の両方の多形状態を熱サイクリングによって評価した。非結晶固体（それぞれＧＥＮ９およびＧＥＮ１６）のスラリーを室温で、１５の溶媒によって調製した。懸濁液に、３つの加熱冷却サイクルを含む温度プロフィールを適用した。温度プロフィールの終わりに、固体を遠心分離で単離し、周囲条件および真空下５０℃で乾燥させた。結晶化実験全ての終了とともに、固体を全てＨＴ－ＸＲＰＤによって分析した。続いて、固体を全て加速劣化条件（ＡＡＣ、４０℃／７５％ＲＨ）に４８日間暴露してから、ＨＴ－ＸＲＰＤによって再分析した。
【0178】
結果
結果を、下の表１２および１３に示す。乳酸塩の多形は１つのみ見られたが（ＬＡＣ１）、ＴＦＡ塩は２つの形態が見られた（ＴＦＡ１およびＴＦＡ２）。
結果を、下の表１２および１３に示す。乳酸塩の多形は１つのみ見られたが（ＬＡＣ１）、ＴＦＡ塩は２つの形態が見られた（ＴＦＡ１およびＴＦＡ２）。
【0179】
【表12】
【0180】
【表13】
【0181】
乳酸塩については、ＬＡＣ１が、ふるい分けで用いられた全ての溶媒系から見つかった唯一の多形であった。ＬＡＣ１もまた、出発材料として供給された結晶相であった。結果に基づくと、乳酸ベンザミル塩は多形には見えなかった。ＬＡＣ１は、ストレス状況に暴露された際に物理的に安定していた。
【0182】
ＴＦＡ１（実施例２、表７参照）の次に、非結晶ＴＦＡ塩で開始した多形ふるい分けでは、ＴＦＡ２が回収された。ＴＦＡ２と、ＴＦＡ１＋ＴＦＡ２の混合物とは、それぞれ水とＭｅＯＨとから見られたに過ぎなかった。他の溶媒は全て、ＴＦＡ１において生じた。ＴＦＡ塩（ＴＦＡ１およびＴＦＡ２）は両方とも、ＡＡＣに暴露された際に物理的に安定していた（４０℃および７５％ＲＨで２日間ストレス状況に暴露された際、固体形態の変換は観察されなかった）。ベンザミルＴＦＡ塩は多形であると思われた。
【0183】
得られた３つの粉末パターン（ＬＡＣ１、ＴＦＡ１、およびＴＦＡ２）からなる各固体は更に、ＵＰＬＣ、１Ｈ－ＮＭＲ、ＤＳＣ、およびＴＧＭＳの各分析方法によって特性を評価した。
【0184】
固体状態の特性評価
ＬＡＣ１（実験ＩＤ ＴＣＰ２から）、ＴＦＡ１（実験ＩＤ ＴＣＰ１６から）、およびＴＦＡ２（実験ＩＤ ＴＣＰ２５から）の特性を、ＴＧＭＳ、ＤＳＣ、ＵＰＬＣ、および１Ｈ－ＮＭＲによって評価した。
ＬＡＣ１（実験ＩＤ ＴＣＰ２から）、ＴＦＡ１（実験ＩＤ ＴＣＰ１６から）、およびＴＦＡ２（実験ＩＤ ＴＣＰ２５から）の特性を、ＴＧＭＳ、ＤＳＣ、ＵＰＬＣ、および１Ｈ－ＮＭＲによって評価した。
【0185】
ＬＡＣ１の場合の１対１の化学量論比と同様に、１Ｈ－ＮＭＲ分析によって塩形成を確認した（ＴＦＡは１Ｈ－ＮＭＲで見られなかった）。熱分析は、ＬＡＣ１（残留溶媒含有量が０．５％）が無水および非溶媒和の性質を有していること、およびＴＦＡ１とＴＦＡ２の両方が非溶媒和で無水の形態であることを示していた。ＬＡＣ１、ＴＦＡ１、およびＴＦＡ２の溶融温度および化学純度を表１４に示す。
【0186】
【表14】
【0187】
更なる特性評価が実施できるようにＴＦＡ１の調製を更に試みた。しかし、その試みは全てＴＦＡ２となった。従って、ふるい分けで得られたＴＦＡ１塩を、溶解性と物理的および化学的安定性との継続検討、並びに固有溶解速度の検討のために用いた。大きい規模で調製したＴＦＡ２（実験ＩＤ ＧＥＮ８）を継続検討に用いた（最も高い溶融温度を有する無水物形態）。
【0188】
溶解性の検討
乳酸塩（ＬＡＣ１）およびＴＦＡ塩（ＴＦＡ１およびＴＦＡ２）の動力学的および熱力学溶解性を、連続電磁撹拌下３７℃で１時間および１８時間インキュベートして、水で測定した。
乳酸塩（ＬＡＣ１）およびＴＦＡ塩（ＴＦＡ１およびＴＦＡ２）の動力学的および熱力学溶解性を、連続電磁撹拌下３７℃で１時間および１８時間インキュベートして、水で測定した。
【0189】
ＬＡＣ１、ＴＦＡ１、およびＴＦＡ２の塩の３０ｍｇ／ｍｌの懸濁液を２セット、選択した媒体で調製した。懸濁液の第１セットは、連続撹拌下３７℃で１時間平衡化させ、第２セットは連続撹拌下３７℃で１８時間平衡化させた。１０分間インキュベートした後、ｐＨを測定し、平衡化時間の終了時にｐＨを再び測定した。ｐＨ値は、インキュベーションの間変化しなかった。平衡化時間終了後、液相を固体相から分離し、ろ過し、ＵＰＬＣによって分析して溶解性を測定した。水では、両方のインキュベーション時間（１時間および１８時間）に対して約０．７ｍｇ／ｍＬの溶解性が測定され、溶解性が３７℃で１時間後に既に最大に達していることを示している。両方のＴＦＡ塩の溶解性の結果を比較すると、ＴＦＡ１塩の溶解性が、ＴＦＡ２塩で測定されたものより低いことが明らかとなった。
【0190】
残留固体を採取し、両方とも大気および真空で乾燥（５ｍｂａｒ／２５℃）した固体として、ＨＴ－ＸＲＰＤによって分析した。溶解性測定結果を下の表１５に示す。
【0191】
【表15】
【0192】
固有溶解速度の検討
ＬＡＣ１（バッチＳＢ０８４－４４）、ＴＦＡ２（実験ＩＤ ＧＥＮ８）、およびＴＦＡ１（実験ＩＤ ＴＣＰ１７）の固有溶解速度を、水およびＦａＳＳＩＦ（絶食時模擬腸液）中で求めた。
ＬＡＣ１（バッチＳＢ０８４－４４）、ＴＦＡ２（実験ＩＤ ＧＥＮ８）、およびＴＦＡ１（実験ＩＤ ＴＣＰ１７）の固有溶解速度を、水およびＦａＳＳＩＦ（絶食時模擬腸液）中で求めた。
【0193】
材料と方法
それぞれダイオード領域に接続された６つの独立したグラスファイバープローブを備えたμＤｉｓｓ装置（パイオン社、米国）を用いて、回転円板式固有溶解測定を実施した。実験開始の前にプローブを、３６２ｎｍペン型水銀ランプのスペクトルを用いて校正した。円板は、ｍｉｎｉ－ＩＤＲプレス（ヒース・サイエンティフィック社、英国）を用いて、不動態化アルミニウムのダイで作製した。
それぞれダイオード領域に接続された６つの独立したグラスファイバープローブを備えたμＤｉｓｓ装置（パイオン社、米国）を用いて、回転円板式固有溶解測定を実施した。実験開始の前にプローブを、３６２ｎｍペン型水銀ランプのスペクトルを用いて校正した。円板は、ｍｉｎｉ－ＩＤＲプレス（ヒース・サイエンティフィック社、英国）を用いて、不動態化アルミニウムのダイで作製した。
【0194】
乳酸ベンザミル塩の希釈物を６つ、０～０．５ｍｇ／ｍＬの範囲で、溶解媒体で調製し、溶液を十字状の電磁撹拌機で撹拌した。これら希釈物を校正曲線に用い、その曲線を溶液中のベンザミル量の計算に用いた。更に、サンプルが測定される波長を選択し、正しい経路長を選択するために、その溶液を用いた。
【0195】
約６～１０ｍｇの異なる塩（ＬＡＣ１、ＴＦＡ１、ＴＦＡ２）を、４０トンの圧力で１分間、不動態化アルミニウムのダイ（標準化表面積が０．０７１ｃｍ２）の中に圧縮した。ダイをそれらのテフロンホルダー電磁撹拌機に入れ、２０ｍＬのガラスバイアルに入れた。サンプル測定前に、各媒体の素材をそれぞれのチャネルに取り入れた。実験を、予熱した溶解媒体の穏やかな添加で開始した。バイアルを、１００ｒｐｍで連続撹拌下、３７℃で最大４時間インキュベートした。ＵＶ吸収を規則的間隔でライン中のプローブで測定した。実験終了後、溶液のｐＨを求めた。溶液中のＡＰＩ濃度を、校正曲線を用いて算出し、時間に対してプロットした。溶解速度を、曲線の直線部分に対して算出した。溶解速度実験は全て三重に行なったが、ＴＦＡ１は、材料の不足により二重に行なった。
【0196】
結果
結果を、図８および下の表１６に示す。下の表１６から明らかなように、ＬＡＣ１の溶解速度は、ＴＦＡ２およびＴＦＡ１よりかなり速かった。ＬＡＣ１は、約５０分間、錠剤全体が溶解し、曲線は平坦となる（図８Ａ）。水中ベンザミルＬＡＣ１のＩＤＲは、１～３６分の範囲で算出して１．８７±０．０６ｍｇ／ｃｍ２／分であった。
結果を、図８および下の表１６に示す。下の表１６から明らかなように、ＬＡＣ１の溶解速度は、ＴＦＡ２およびＴＦＡ１よりかなり速かった。ＬＡＣ１は、約５０分間、錠剤全体が溶解し、曲線は平坦となる（図８Ａ）。水中ベンザミルＬＡＣ１のＩＤＲは、１～３６分の範囲で算出して１．８７±０．０６ｍｇ／ｃｍ２／分であった。
【0197】
ＴＦＡ２およびＴＦＡ１の溶解はより遅かった。約４時間後、錠剤はまだ完全には溶解していなかった（ＴＦＡ２：図８Ｂ；ＴＦＡ１：図示せず）。ベンザミルのＴＦＡ２およびＴＦＡ１のＩＤＲは、それぞれ０．１３±０．０１および０．０９±０．０１ｍｇ／ｃｍ２／分であった（１０～１００分の間で算出）。
【0198】
【表16】
【0199】
結論
水中おけるＬＡＣ１の固有溶解速度は、ＦａＳＳＩＦにおける速度よりも殆ど５倍速かった。ＴＦＡ１およびＴＦＡ２の場合、水中の固有溶解速度はＬＡＣ１のそれよりも１５～２０倍低く、ＦａＳＳＩＦ中においては、その差は約４倍であった。
水中おけるＬＡＣ１の固有溶解速度は、ＦａＳＳＩＦにおける速度よりも殆ど５倍速かった。ＴＦＡ１およびＴＦＡ２の場合、水中の固有溶解速度はＬＡＣ１のそれよりも１５～２０倍低く、ＦａＳＳＩＦ中においては、その差は約４倍であった。
【0200】
生理化学的安定性の検討
ベンザミルのＬＡＣ１（ＳＭ、バッチＳＢ０８４－４４）、ＴＦＡ２（実験ＩＤ ＧＥＮ８から）、およびＴＦＡ１（実験ＩＤ ＴＣＰ１６から）の塩の安定性の検討を２つのストレス条件下で行なった。
１．２５℃および６０％ＲＨで、開放容器で
２．４０℃および７５％ＲＨで、開放容器で
ベンザミルのＬＡＣ１（ＳＭ、バッチＳＢ０８４－４４）、ＴＦＡ２（実験ＩＤ ＧＥＮ８から）、およびＴＦＡ１（実験ＩＤ ＴＣＰ１６から）の塩の安定性の検討を２つのストレス条件下で行なった。
１．２５℃および６０％ＲＨで、開放容器で
２．４０℃および７５％ＲＨで、開放容器で
【0201】
材料と方法
ＬＡＣ１およびＴＦＡ２については、３日間、１週間、および３週間のストレス条件下のインキュベーションの後に、ＵＰＬＣ、ＴＧＭＳ、およびＨＴ－ＸＲＰＤによって固体を分析した。ＴＦＡ１については、固体を３日間および１週間後に分析した。
ＬＡＣ１およびＴＦＡ２については、３日間、１週間、および３週間のストレス条件下のインキュベーションの後に、ＵＰＬＣ、ＴＧＭＳ、およびＨＴ－ＸＲＰＤによって固体を分析した。ＴＦＡ１については、固体を３日間および１週間後に分析した。
【0202】
結果
分析データを表１７に示す。両方の条件での３週間のインキュベーションの後、いずれの塩にも固体形態変換が観察されず、両方の塩が、試験条件下で物理的に安定していたことを示唆している。
分析データを表１７に示す。両方の条件での３週間のインキュベーションの後、いずれの塩にも固体形態変換が観察されず、両方の塩が、試験条件下で物理的に安定していたことを示唆している。
【0203】
両方の条件で３日間、１週間、および３週間インキュベートされた固体に対してＵＰＬＣによって測定された化学純度は、開始（ｔ０）時の固体純度に類似していた。この結果は、試験条件下でいずれの塩にも化学分解が起こっていなかったことを示唆する。
【0204】
熱分析（ＴＧＭＳ）は、ｔ０および３日間のインキュベーションを１週間および３週間のインキュベーション（約１％～０．１％）と比較すると、小さな偏差を示した。この観察を、ＬＡＣ１およびＴＦＡ２の両方に行なった。これらの結果は、第１の２つのサンプル（ｔ０およびｔ３日間）の中のわずかな残留プロセス溶媒の存在によって説明でき、この溶媒は、２５℃／６０％ＲＨおよび４０℃／７５％ＲＨで１週間インキュベートした後にのみ、放出されるか、または水によって置換される。
【0205】
【表17】
【0206】
結論
塩ＬＡＣ１、ＴＦＡ１、およびＴＦＡ２は、２５℃／６０％ＲＨおよび４０℃／７５％ＲＨで３週間インキュベーションしたとき、物理的化学的に安定していると結論づけられた。
塩ＬＡＣ１、ＴＦＡ１、およびＴＦＡ２は、２５℃／６０％ＲＨおよび４０℃／７５％ＲＨで３週間インキュベーションしたとき、物理的化学的に安定していると結論づけられた。
【0207】
実施例３からの全体的結論
全体的に、ベンザミルの乳酸塩は、ＴＦＡ塩よりもかなり高い溶解性を有すると結論づけることができる。
全体的に、ベンザミルの乳酸塩は、ＴＦＡ塩よりもかなり高い溶解性を有すると結論づけることができる。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【国際調査報告】