特表 2024-539141 筋ジストロフィーを治療するための組成物及び方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-10-28

(54)【発明の名称】筋ジストロフィーを治療するための組成物及び方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 45/00 20060101AFI20241018BHJP

   A61P 21/04 20060101ALI20241018BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20241018BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20241018BHJP

   A61K 31/7088 20060101ALI20241018BHJP

   A61K 31/7105 20060101ALI20241018BHJP

   C12N 15/115 20100101ALN20241018BHJP

   C12N 15/113 20100101ALN20241018BHJP

   C07K 16/18 20060101ALN20241018BHJP

   C12N 15/13 20060101ALN20241018BHJP

【ＦＩ】

A61K45/00

A61P21/04

A61K39/395 D

A61K39/395 N

A61K48/00

A61K31/7088

A61K31/7105

C12N15/115 Z ZNA

C12N15/113 Z

C07K16/18

C12N15/13

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024523627

(86)(22)【出願日】2022-10-21

(85)【翻訳文提出日】2024-04-26

(86)【国際出願番号】 US2022078510

(87)【国際公開番号】W WO2023070087

(87)【国際公開日】2023-04-27

(31)【優先権主張番号】63/270,352

(32)【優先日】2021-10-21

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】516008350

【氏名又は名称】アネクソン，インコーポレーテッド

(71)【出願人】

【識別番号】519295812

【氏名又は名称】ウニヴェルシタ デリ ストゥディ ディ トレント

(71)【出願人】

【識別番号】511262290

【氏名又は名称】フォンダツィオーネ テレトン イーティーエス

(74)【代理人】

【識別番号】110002572

【氏名又は名称】弁理士法人平木国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ビレッシ，ステファノ

(72)【発明者】

【氏名】フローリオ，フランチェスカ

(72)【発明者】

【氏名】アンドリューズ－ツヴィリング，ヤイサ

【テーマコード（参考）】

4C084

4C085

4C086

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C084AA13

4C084AA17

4C084NA14

4C084ZA94

4C085AA13

4C085AA14

4C085AA16

4C085BB11

4C085BB41

4C085BB43

4C086AA01

4C086AA02

4C086EA16

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA14

4C086ZA94

4H045AA11

4H045AA30

4H045BA10

4H045CA40

4H045DA76

4H045EA20

4H045FA74

(57)【要約】

本開示は、広義には、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー、肢帯型筋ジストロフィー（ＬＧＭＤ）、ＶＩ型コラーゲン関連障害、先天性筋ジストロフィー（ＣＭＤ）及び先天性ミオパチー、遠位型筋ジストロフィー／ミオパチーの予防、発症リスクの低減、または治療方法に関する。該方法は、対象に、Ｃ１複合体阻害剤、Ｃ１複合体阻害剤、Ｃ１ｑ阻害剤、Ｃ１ｓ阻害剤、またはＣ１ｒ阻害剤等の古典的補体経路の阻害剤を投与することを含む。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー、肢帯型筋ジストロフィー（ＬＧＭＤ）、ＶＩ型コラーゲン関連障害、先天性筋ジストロフィー（ＣＭＤ）もしくは先天性ミオパチー、または遠位型筋ジストロフィー／ミオパチーの予防、発症リスクの低減、進行の遅延もしくはブロック、または治療方法であって、古典的補体経路の阻害剤を対象に投与することを含む、前記方法。

【請求項2】

前記肢帯型筋ジストロフィー（ＬＧＭＤ）が、サルコグリカノパチー、ジストログリカノパチー、またはジスフェリノパチーである、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記ＶＩ型コラーゲン関連障害が、ベスレム型ミオパチーまたはウルリッヒ型先天性筋ジストロフィー（ＵＣＭＤ）である、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

前記遠位型筋ジストロフィー／ミオパチーが、三好型ミオパチーである、請求項１に記載の方法。

【請求項5】

前記古典的補体経路の前記阻害剤が、Ｃ１複合体阻害剤である、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項6】

前記Ｃ１複合体阻害剤が、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、小分子、遺伝子編集剤、塩基編集剤、またはエピジェネティック編集剤である、請求項５に記載の方法。

【請求項7】

前記核酸が、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｍｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ阻害剤、ｍＲＮＡ、アプタマー、またはアンチセンス核酸である、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

前記抗体が、抗Ｃ１複合体抗体である、請求項６に記載の方法。

【請求項9】

前記抗Ｃ１複合体抗体が、Ｃ１ｒもしくはＣ１ｓの活性化を阻害するか、またはＣ２もしくはＣ４に作用するそれらの能力を妨げる、請求項８に記載の方法。

【請求項10】

前記抗Ｃ１複合体抗体が、Ｃ１複合体内の組み合わせエピトープに結合し、前記組み合わせエピトープが、Ｃ１ｑ及びＣ１ｓの両方、Ｃ１ｑ及びＣ１ｒの両方、Ｃ１ｒ及びＣ１ｓの両方、またはＣ１ｑ、Ｃ１ｒ及びＣ１ｓのそれぞれのアミノ酸を含む、請求項８に記載の方法。

【請求項11】

前記古典的補体経路の前記阻害剤が、Ｃ１ｑ阻害剤である、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項12】

前記Ｃ１ｑ阻害剤が、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、小分子、遺伝子編集剤、塩基編集剤、またはエピジェネティック編集剤である、請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

前記核酸が、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｍｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ阻害剤、ｍＲＮＡ、アプタマー、またはアンチセンス核酸である、請求項１２に記載の方法。

【請求項14】

前記抗体が、抗Ｃ１ｑ抗体である、請求項１２に記載の方法。

【請求項15】

前記抗Ｃ１ｑ抗体が、Ｃ１ｑと自己抗体との間またはＣ１ｑとＣ１ｒとの間、またはＣ１ｑとＣ１ｓとの間の相互作用を阻害する、請求項１４に記載の方法。

【請求項16】

前記抗Ｃ１ｑ抗体が、循環または組織からのＣ１ｑのクリアランスを促進する、請求項１４に記載の方法。

【請求項17】

前記抗Ｃ１ｑ抗体が、１００ｎＭ～０．００５ｎＭまたは０．００５ｎＭ未満の範囲の解離定数（Ｋ_Ｄ）を有する、請求項１４～１６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項18】

前記抗Ｃ１ｑ抗体が、２０：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する、請求項１４～１７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項19】

前記抗体が、６：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する抗Ｃ１ｑ抗体である、請求項１８に記載の方法。

【請求項20】

前記抗体が、２．５：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する抗Ｃ１ｑ抗体である、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

前記抗体が、Ｃ１ｑに特異的に結合し、かつその生物学的活性を中和する、請求項１４～２０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項22】

前記生物学的活性が、（１）自己抗体に対するＣ１ｑ結合、（２）Ｃ１ｒに対するＣ１ｑ結合、（３）Ｃ１ｓに対するＣ１ｑ結合、（４）ＩｇＭに対するＣ１ｑ結合、（５）ホスファチジルセリンに対するＣ１ｑ結合、（６）ペントラキシン－３に対するＣ１ｑ結合、（７）Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）に対するＣ１ｑ結合、（８）球状Ｃ１ｑ受容体（ｇＣ１ｑＲ）に対するＣ１ｑ結合、（９）補体受容体１（ＣＲ１）に対するＣ１ｑ結合、（１０）ベータ－アミロイドに対するＣ１ｑ結合、（１１）カルレチキュリンに対するＣ１ｑ結合、（１２）アポトーシス細胞に対するＣ１ｑ結合、または（１３）Ｂ細胞に対するＣ１ｑ結合である、請求項２１に記載の方法。

【請求項23】

前記生物学的活性が、（１）古典的補体活性化経路の活性化、（２）抗体及び補体依存性細胞傷害の活性化、（３）ＣＨ５０溶血、（４）シナプス損失、（５）Ｂ細胞抗体産生、（６）樹状細胞成熟、（７）Ｔ細胞増殖、（８）サイトカイン産生、（９）ミクログリア活性化、（１０）免疫複合体形成、（１１）シナプスもしくは神経終末の食作用、（１２）補体受容体３（ＣＲ３／Ｃ３）発現細胞の活性化、または（１３）神経炎症である、請求項２１または２２に記載の抗体。

【請求項24】

前記ＣＨ５０溶血が、ヒトＣＨ５０溶血を含む、請求項２３に記載の方法。

【請求項25】

前記抗体が、前記ヒトＣＨ５０溶血の少なくとも約５０％～約１００％を中和することが可能である、請求項２３または２４に記載の方法。

【請求項26】

前記抗体が、１５０ｎｇ／ｍｌ未満、１００ｎｇ／ｍｌ未満、５０ｎｇ／ｍｌ未満、または２０ｎｇ／ｍｌ未満の用量で、前記ＣＨ５０溶血の少なくとも５０％を中和することが可能である、請求項２３～２５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項27】

前記抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、組換え抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、一価抗体、多重特異性抗体、抗体断片、またはその抗体誘導体である、請求項１４～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項28】

前記抗体が、抗体断片であり、前記抗体断片が、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディ、または一本鎖抗体分子である、請求項２７に記載の方法。

【請求項29】

前記抗体が、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１と、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２と、配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３と、を含む軽鎖可変ドメインを含む、請求項１４～２８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項30】

前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１と、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２と、配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３と、を含む重鎖可変ドメインを含む、請求項１４～２９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項31】

前記抗体が、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、前記軽鎖可変ドメインが、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１と、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２と、配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３と、を含む、請求項１４～３０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項32】

前記軽鎖可変ドメインが、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項３１に記載の方法。

【請求項33】

前記抗体が、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、前記重鎖可変ドメインが、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１と、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２と、配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３と、を含む、請求項１４～３２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項34】

前記重鎖可変ドメインが、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の方法。

【請求項35】

前記抗体が、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む抗体断片である、請求項１４～３４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項36】

前記古典的補体経路の前記阻害剤が、Ｃ１ｒ阻害剤である、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項37】

前記Ｃ１ｒ阻害剤が、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、小分子、遺伝子編集剤、塩基編集剤、またはエピジェネティック編集剤である、請求項３６に記載の方法。

【請求項38】

前記核酸が、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｍｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ阻害剤、ｍＲＮＡ、アプタマー、またはアンチセンス核酸である、請求項３７に記載の方法。

【請求項39】

前記抗体が、抗Ｃ１ｒ抗体である、請求項３７に記載の方法。

【請求項40】

前記抗Ｃ１ｒ抗体が、Ｃ１ｒとＣ１ｑとの間もしくはＣ１ｒとＣ１ｓとの間の相互作用を阻害するか、または前記抗Ｃ１ｒ抗体が、Ｃ１ｒの触媒活性を阻害するか、もしくはｐｒｏ－Ｃ１ｒの活性プロテアーゼへの処理を阻害する、請求項３９に記載の方法。

【請求項41】

前記抗体が、１００ｎＭ～０．００５ｎＭまたは０．００５ｎＭ未満の範囲の解離定数（Ｋ_Ｄ）を有する抗Ｃ１ｒ抗体である、請求項３９または４０に記載の方法。

【請求項42】

前記抗体が、２０：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｒに結合する抗Ｃ１ｒ抗体である、請求項３９～４１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項43】

前記抗体が、６：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｒに結合する抗Ｃ１ｒ抗体である、請求項４２に記載の方法。

【請求項44】

前記抗体が、２．５：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｒに結合する抗Ｃ１ｒ抗体である、請求項４３に記載の方法。

【請求項45】

前記抗Ｃ１ｒ抗体が、循環または組織からのＣ１ｒのクリアランスを促進する、請求項３９～４４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項46】

前記古典的補体経路の前記阻害剤が、Ｃ１ｓ阻害剤である、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項47】

前記Ｃ１ｓ阻害剤が、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、小分子、遺伝子編集剤、塩基編集剤、またはエピジェネティック編集剤である、請求項４６に記載の方法。

【請求項48】

前記核酸が、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｍｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ阻害剤、ｍＲＮＡ、アプタマー、またはアンチセンス核酸である、請求項４７に記載の方法。

【請求項49】

前記抗体が、抗Ｃ１ｓ抗体である、請求項４７に記載の方法。

【請求項50】

前記抗Ｃ１ｓ抗体が、Ｃ１ｓとＣ１ｑとの間またはＣ１ｓとＣ１ｒとの間またはＣ１ｓとＣ２もしくはＣ４との間の相互作用を阻害するか、あるいは前記抗Ｃ１ｓ抗体が、Ｃ１ｓの触媒活性を阻害するか、またはｐｒｏ－Ｃ１ｓの活性プロテアーゼへの処理を阻害するか、またはＣ１ｓの活性化形態に結合する、請求項４９に記載の方法。

【請求項51】

前記抗体が、１００ｎＭ～０．００５ｎＭまたは０．００５ｎＭ未満の範囲の解離定数（Ｋ_Ｄ）を有する抗Ｃ１ｓ抗体である、請求項４９または５０に記載の方法。

【請求項52】

前記抗体が、２０：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｓに結合する抗Ｃ１ｓ抗体である、請求項４９～５１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項53】

前記抗体が、６：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｓに結合する抗Ｃ１ｓ抗体である、請求項５２に記載の方法。

【請求項54】

前記抗体が、２．５：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｓに結合する抗Ｃ１ｓ抗体である、請求項５３に記載の方法。

【請求項55】

前記抗Ｃ１ｓ抗体が、循環または組織からのＣ１ｓのクリアランスを促進する、請求項４９～５４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項56】

デュシェンヌ型筋ジストロフィーの予防、発症リスクの低減、進行の遅延もしくはブロック、または治療方法であって、古典的補体経路の阻害剤を対象に投与することを含む、前記方法。

【請求項57】

対象に、Ｃ１ｑ阻害抗体を投与することを含む、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー、肢帯型筋ジストロフィー（ＬＧＭＤ）、ＶＩ型コラーゲン関連障害、先天性筋ジストロフィー（ＣＭＤ）もしくは先天性ミオパチー、または遠位型筋ジストロフィー／ミオパチーの予防、発症リスクの低減、進行の遅延もしくはブロック、または治療方法であって、前記抗体が、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１と、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２と、配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３と、を含む軽鎖可変ドメインと、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１と、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２と、配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３と、を含む重鎖可変ドメインと、を含む、前記方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願
本特許出願は、２０２１年１０月２１日に出願された米国仮特許出願第６３／２７０，３５２号の優先権を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【背景技術】

【0002】

筋ジストロフィーは、経時的に筋肉を弱くし、柔軟性を低下させる一連の疾患である。デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）が最も一般的なタイプである。それは、身体が筋肉を健康に保つのを制御する遺伝子の欠陥によって引き起こされる。

【0003】

デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）は、小児の最も一般的な遺伝性筋肉疾患である。通常の条件下では、筋幹細胞（衛星細胞）は非常に強力な再生応答を呈するが、ＤＭＤに罹患した患者では再生ポテンシャルが徐々に失われ、線維化組織が筋線維を徐々に置き換え、筋肉機能の障害を引き起こす。

【0004】

筋ジストロフィーに対処しようとしている世界中の研究者や医療専門家の努力にもかかわらず、またゲノムエンジニアリングアプローチによる可能性にもかかわらず、筋ジストロフィーのための安全で効果的な治療法を開発するための深刻な必要性が依然存在する。すなわち、筋ジストロフィーを予防し、発症リスクを低減し、治療するための新たな療法が必要とされている。

【0005】

筋ジストロフィーには、進行性の筋肉の消耗及び衰弱を特徴とする、遺伝性障害の不均一な群が含まれる。筋ジストロフィーでは、筋肉機能障害は、サルコレンマ、細胞外マトリックス、核膜、及び肉腫器官に関連するタンパク質を含む、異なる細胞成分をコードする遺伝子の突然変異から生じる。異なる形態のジストロフィーは、発症年齢、症候性進行の重症度、及び罹患した筋肉の分布の点で異なる。

【0006】

デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ、ＯＭＩＭ３１０２００）は、５，０００人の男性新生児のうち約１人の発生率を有する、最も頻度が高く、最も重篤な形態の筋ジストロフィーの１つである。ＤＭＤ患者は、通常、小児期に四肢筋、幹筋、及び横隔膜の進行性の衰弱を呈し、最終的に消耗、脊柱後弯症、及び重度の呼吸器疾患につながる。ベッカー筋ジストロフィー（ＢＭＤ、ＯＭＩＭ３００３７６）は、より稀な（２０，０００人の男性新生児のうち約１人）かつ臨床的に軽度の形態のジストロフィーであり、ＤＭＤと同じ原因対立遺伝子を有する。ＤＭＤ及びＢＭＤは、ジストロフィンをコードするＤＭＤ遺伝子の突然変異によって引き起こされる。

【0007】

ジストロフィンは、ジストロフィン糖タンパク質複合体（ＤＧＣ）と呼ばれる形質膜関連複合体の成分であり、細胞内細胞骨格を周囲の細胞外マトリックスに接続するためのフレームワークとして機能する。適切な筋肉機能及び完全性に対するＤＧＣの重要な役割は、ＤＭＤ／ＢＭＤとＤＧＣの他の構成要素をコードする遺伝子の突然変異によって引き起こされるいくつかのジストロフィー、すなわち、四肢帯型筋ジストロフィー（ＬＧＭＤ）（サルコグリカノパチー、ジストログリカノパチー及びデスフェリンパチーを含む）、ＶＩ型コラーゲン関連障害（ベスレム型ミオパチー及びウルリッヒ先天性筋ジストロフィー（ＵＣＭＤ）を含む）、先天性筋ジストロフィー（ＣＭＤ）及び先天性ミオパチー、遠位型筋ジストロフィー／ミオパチー（三好型ミオパチーを含む）、との間の病理学的特徴の重複によって実証される。

【0008】

筋緊張性筋ジストロフィー、顔面肩甲上腕部筋ジストロフィー、エメリー－ドライフス筋ジストロフィー、眼球咽頭筋ジストロフィーは、ＤＧＣの変化に起因しない分子病因を有するようであり、これは特定の病理学的側面によって反映される。特に、筋緊張性ジストロフィー（ＤＭ）は、最も一般的な成人の筋ジストロフィーであり、常染色体優性進行性ミオパチー、筋緊張及び多臓器関与を特徴とする。これまでに、次の２つの異なる形式、すなわち、ＤＭＰＫにおける（ＣＴＧ）ｎの拡大によって引き起こされる筋緊張性ジストロフィー１型（ＤＭ１、スタイネルト病）、及びＺＮＦ９／ＣＮＢＰにおける（ＣＣＴＧ）ｎの拡大によって引き起こされる筋緊張性ジストロフィー２型（ＤＭ２）、が特定されている。突然変異転写産物は、ＲＮＡ結合タンパク質を隔離する核病巣として凝集し、下流エフェクター遺伝子のスプライスオパチーをもたらす。

【発明の概要】

【0009】

本開示は、広義には、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー、四肢帯型筋ジストロフィー（ＬＧＭＤ）（サルコグリカノパチー、ジストログリカノパチー及びジスフェルリン病など）、ＶＩ型コラーゲン関連障害（ベスレム型ミオパチー及びウルリッヒ型先天性筋ジストロフィー（ＵＣＭＤ）など）、先天性筋ジストロフィー（ＣＭＤ）及び先天性ミオパチー、ならびに遠位型筋ジストロフィー／ミオパチー（三好型ミオパチーなど）の予防、発症リスクの低減、進行の遅延もしくはブロック、または治療方法に関する。該方法は、対象に、Ｃ１複合体阻害剤、Ｃ１ｑ阻害剤、Ｃ１ｓ阻害剤、またはＣ１ｒ阻害剤等の古典的補体経路の阻害剤を投与することを含み得る。いくつかの態様では、本明細書中で提供されるのは、デュシェンヌ型筋ジストロフィーの予防、発症リスクの低減、進行の遅延もしくはブロック、または治療方法である。該方法は、古典的補体経路の阻害剤を対象に投与することを含み得る。

【0010】

いくつかの実施形態では、古典的補体経路の阻害剤は、Ｃ１複合体阻害剤、例えば、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、小分子、遺伝子編集剤、塩基編集剤、またはエピジェネティック編集剤である。核酸は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｍｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ阻害剤、ｍＲＮＡ、アプタマー、またはアンチセンス核酸であり得る。抗体は、抗Ｃ１複合体抗体であり得、それは好ましくはＣ１ｒもしくはＣ１ｓ活性化を阻害するか、またはＣ２もしくはＣ４に作用するそれらの能力を妨げ、及び／またはＣ１複合体内の組み合わせエピトープに結合し、当該組み合わせエピトープは、Ｃ１ｑ及びＣ１ｓの両方、Ｃ１ｑ及びＣ１ｒの両方、Ｃ１ｒ及びＣ１ｓの両方、またはＣ１ｑ、Ｃ１ｒ及びＣ１ｓのそれぞれのアミノ酸を含む。

【0011】

いくつかの実施形態では、古典的補体経路の阻害剤は、Ｃ１ｑ阻害剤であり、例えば、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、小分子、遺伝子編集剤、塩基編集剤、またはエピジェネティック編集剤である。核酸は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｍｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ阻害剤、ｍＲＮＡ、アプタマー、またはアンチセンス核酸であり得る。抗体は、抗Ｃ１ｑ抗体であり得、それは好ましくはＣ１ｑと自己抗体との間、またはＣ１ｑとＣ１ｒとの間、またはＣ１ｑとＣ１ｓとの間の相互作用を阻害し、及び／または循環もしくは組織からのＣ１ｑのクリアランスを促進する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、１００ｎＭ～０．００５ｎＭまたは０．００５ｎＭ未満の範囲の解離定数（ＫＤ）を有し、２０：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合し、及び／または、６：１～１．０：１もしくは１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合し、２．５：１～１．０：１もしくは１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、（１）自己抗体に対するＣ１ｑ結合、（２）Ｃ１ｒに対するＣ１ｑ結合、（３）Ｃ１ｓに対するＣ１ｑ結合、（４）ＩｇＭに対するＣ１ｑ結合、（５）ホスファチジルセリンに対するＣ１ｑ結合、（６）ペントラキシン－３に対するＣ１ｑ結合、（７）Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）に対するＣ１ｑ結合、（８）球状Ｃ１ｑ受容体（ｇＣ１ｑＲ）に対するＣ１ｑ結合、（９）補体受容体１（ＣＲ１）に対するＣ１ｑ結合、（１０）ベータ－アミロイドに対するＣ１ｑ結合、（１１）カルレチキュリンに対するＣ１ｑ結合、（１２）アポトーシス細胞に対するＣ１ｑ結合、もしくは（１３）Ｂ細胞に対するＣ１ｑ結合、及び／または、（１）古典的補体活性化経路の活性化、（２）抗体及び補体依存的細胞毒性の活性化、（３）ＣＨ５０溶血、（４）シナプス損失、（５）Ｂ細胞抗体産生、（６）樹状細胞成熟、（７）Ｔ細胞増殖、（８）サイトカイン産生（９）ミクログリア活性化、（１０）免疫複合体形成、（１１）シナプスまたは神経末端のファゴサイトーシス、（１２）補体受容体３（ＣＲ３／Ｃ３）発現細胞の活性化または（１３）神経炎症など、Ｃ１ｑの生物学的活性に特異的に結合し、中和する。ＣＨ５０溶血は、ヒトＣＨ５０溶血を含み得る。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒトＣＨ５０溶血の少なくとも約５０％から約１００％まで中和することができ、及び／または、抗体は、ＣＨ５０溶血の少なくとも５０％を、１５０ｎｇ／ｍｌ未満、１００ｎｇ／ｍｌ未満、５０ｎｇ／ｍｌ未満または２０ｎｇ／ｍｌ未満の用量で中和することができる。抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、組換え抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、一価抗体、多重特異性抗体、抗体断片、またはそれらの抗体誘導体であり得る。いくつかの実施形態では、抗体は、抗体断片であり、抗体断片は、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディ、または一本鎖抗体分子である。

【0012】

いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１と、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２と、配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３とを含む軽鎖可変ドメインと、及び／または配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１と、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２と、配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３とを含む重鎖可変ドメインと、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、軽鎖可変ドメインは、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１と、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２と、配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３と、を含み、好ましくは軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、重鎖可変ドメインは、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１と、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２と、配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３と、を含み、好ましくは重鎖可変ドメインは、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む抗体断片である。

【0013】

いくつかの実施形態では、古典的補体経路の阻害剤は、Ｃ１ｒ阻害剤であり、例えば、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、小分子、遺伝子編集剤、塩基編集剤、またはエピジェネティック編集剤である。核酸は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｍｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ阻害剤、ｍＲＮＡ、アプタマー、またはアンチセンス核酸である。いくつかの実施形態では、抗体は抗Ｃ１ｒ抗体であり、それは好ましくはＣ１ｒとＣ１ｑとの間もしくはＣ１ｒとＣ１ｓとの間の相互作用を阻害するか、または抗Ｃ１ｒ抗体は、Ｃ１ｒの触媒活性を阻害するか、もしくはｐｒｏ－Ｃ１ｒの活性プロテアーゼへの処理を阻害する。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｎＭ～０．００５ｎＭまたは０．００５ｎＭ未満の範囲の解離定数（ＫＤ）を有する抗Ｃ１ｒ抗体であり、抗Ｃ１ｒ抗体は、２０：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｒに結合し、抗Ｃ１ｒ抗体は、６：１～１．０：１もしくは１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｒに結合し、及び／または、抗Ｃ１ｒ抗体は、２．５：１～１．０：１もしくは１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｒに結合する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｒ抗体は、循環または組織からのＣ１ｒのクリアランスを促進する。

【0014】

いくつかの実施形態では、古典的補体経路の阻害剤は、Ｃ１ｓ阻害剤であり、例えば、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、小分子、遺伝子編集剤、塩基編集剤、またはエピジェネティック編集剤である。核酸は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｍｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ阻害剤、ｍＲＮＡ、アプタマー、またはアンチセンス核酸であり得る。いくつかの実施形態では、抗体は抗Ｃ１ｓ抗体であり、それは好ましくはＣ１ｓとＣ１ｑとの間またはＣ１ｓとＣ１ｒとの間またはＣ１ｓとＣ２もしくはＣ４との間の相互作用を阻害するか、あるいは、抗Ｃ１ｓ抗体は、Ｃ１ｓの触媒活性を阻害するか、またはｐｒｏ－Ｃ１ｓの活性プロテアーゼへの処理を阻害するか、またはＣ１ｓの活性化形態に結合する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、１００ｎＭ～０．００５ｎＭまたは０．００５ｎＭ未満の範囲の解離定数（ＫＤ）を有し、抗Ｃ１ｓ抗体は、２０：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｓに結合し、抗Ｃ１ｓ抗体は、６：１～１．０：１もしくは１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｓに結合し、及び／または、抗Ｃ１ｓ抗体は、２．５：１～１．０：１もしくは１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｓに結合する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、循環または組織からのＣ１ｓのクリアランスを促進する。

【0015】

いくつかの態様では、本明細書で提供されるのは、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー、肢帯型筋ジストロフィー（ＬＧＭＤ）、ＶＩ型コラーゲン関連障害、先天性筋ジストロフィー（ＣＭＤ）もしくは先天性ミオパチー、または遠位型筋ジストロフィー／ミオパチーの予防、発症リスクの低減、進行の遅延もしくはブロック、または治療方法である。方法は、対象に、Ｃ１ｑ阻害抗体を投与することを含み得、抗体は、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン、ならびに配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメインを含む。

【図面の簡単な説明】

【0016】

【図1A】１歳の野生型、１歳のジストロフィー性、及び２歳の野生型の、筋肉における補体タンパク質レベルの評価を示す。古典的補体経路Ｃ１ｑ、Ｃ３、及びＣ３ｄのタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイである。約１歳の野生型（ＷＴ１ｙｏ）、約１歳のｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ１ｙｏ）及び約２歳の野生型（ＷＴ２ｙｏ）からの脛骨前部筋（ＴＡ）、横隔膜筋（ＤＩＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）を用いた。Ｎ＝３。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図1B】１歳の野生型、１歳のジストロフィー性、及び２歳の野生型の、筋肉における補体タンパク質レベルの評価を示す。古典的補体経路Ｃ１ｑ、Ｃ３、及びＣ３ｄのタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイである。約１歳の野生型（ＷＴ１ｙｏ）、約１歳のｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ１ｙｏ）及び約２歳の野生型（ＷＴ２ｙｏ）からの脛骨前部筋（ＴＡ）、横隔膜筋（ＤＩＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）を用いた。Ｎ＝３。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図1C】１歳の野生型、１歳のジストロフィー性、及び２歳の野生型の、筋肉における補体タンパク質レベルの評価を示す。古典的補体経路Ｃ１ｑ、Ｃ３、及びＣ３ｄのタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイである。約１歳の野生型（ＷＴ１ｙｏ）、約１歳のｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ１ｙｏ）及び約２歳の野生型（ＷＴ２ｙｏ）からの脛骨前部筋（ＴＡ）、横隔膜筋（ＤＩＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）を用いた。Ｎ＝３。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図1D】１歳の野生型、１歳のジストロフィー性、及び２歳の野生型の、筋肉における補体タンパク質レベルの評価を示す。古典的補体経路Ｃ１ｑ、Ｃ３、及びＣ３ｄのタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイである。約１歳の野生型（ＷＴ１ｙｏ）、約１歳のｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ１ｙｏ）及び約２歳の野生型（ＷＴ２ｙｏ）からの脛骨前部筋（ＴＡ）、横隔膜筋（ＤＩＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）を用いた。Ｎ＝３。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図1E】１歳の野生型、１歳のジストロフィー性、及び２歳の野生型の、筋肉における補体タンパク質レベルの評価を示す。古典的補体経路Ｃ１ｑ、Ｃ３、及びＣ３ｄのタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイである。約１歳の野生型（ＷＴ１ｙｏ）、約１歳のｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ１ｙｏ）及び約２歳の野生型（ＷＴ２ｙｏ）からの脛骨前部筋（ＴＡ）、横隔膜筋（ＤＩＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）を用いた。Ｎ＝３。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図1F】１歳の野生型、１歳のジストロフィー性、及び２歳の野生型の、筋肉における補体タンパク質レベルの評価を示す。古典的補体経路Ｃ１ｑ、Ｃ３、及びＣ３ｄのタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイである。約１歳の野生型（ＷＴ１ｙｏ）、約１歳のｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ１ｙｏ）及び約２歳の野生型（ＷＴ２ｙｏ）からの脛骨前部筋（ＴＡ）、横隔膜筋（ＤＩＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）を用いた。Ｎ＝３。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図1G】１歳の野生型、１歳のジストロフィー性、及び２歳の野生型の、筋肉における補体タンパク質レベルの評価を示す。古典的補体経路Ｃ１ｑ、Ｃ３、及びＣ３ｄのタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイである。約１歳の野生型（ＷＴ１ｙｏ）、約１歳のｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ１ｙｏ）及び約２歳の野生型（ＷＴ２ｙｏ）からの脛骨前部筋（ＴＡ）、横隔膜筋（ＤＩＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）を用いた。Ｎ＝３。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図1H】１歳の野生型、１歳のジストロフィー性、及び２歳の野生型の、筋肉における補体タンパク質レベルの評価を示す。古典的補体経路Ｃ１ｑ、Ｃ３、及びＣ３ｄのタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイである。約１歳の野生型（ＷＴ１ｙｏ）、約１歳のｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ１ｙｏ）及び約２歳の野生型（ＷＴ２ｙｏ）からの脛骨前部筋（ＴＡ）、横隔膜筋（ＤＩＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）を用いた。Ｎ＝３。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図1I】１歳の野生型、１歳のジストロフィー性、及び２歳の野生型の、筋肉における補体タンパク質レベルの評価を示す。古典的補体経路Ｃ１ｑ、Ｃ３、及びＣ３ｄのタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイである。約１歳の野生型（ＷＴ１ｙｏ）、約１歳のｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ１ｙｏ）及び約２歳の野生型（ＷＴ２ｙｏ）からの脛骨前部筋（ＴＡ）、横隔膜筋（ＤＩＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）を用いた。Ｎ＝３。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図1J】１歳の野生型、１歳のジストロフィー性、及び２歳の野生型の、筋肉における補体タンパク質レベルの評価を示す。古典的補体経路Ｃ１ｑ、Ｃ３、及びＣ３ｄのタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイである。約１歳の野生型（ＷＴ１ｙｏ）、約１歳のｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ１ｙｏ）及び約２歳の野生型（ＷＴ２ｙｏ）からの脛骨前部筋（ＴＡ）、横隔膜筋（ＤＩＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）を用いた。Ｎ＝３。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図1K】１歳の野生型、１歳のジストロフィー性、及び２歳の野生型の、筋肉における補体タンパク質レベルの評価を示す。古典的補体経路Ｃ１ｑ、Ｃ３、及びＣ３ｄのタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイである。約１歳の野生型（ＷＴ１ｙｏ）、約１歳のｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ１ｙｏ）及び約２歳の野生型（ＷＴ２ｙｏ）からの脛骨前部筋（ＴＡ）、横隔膜筋（ＤＩＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）を用いた。Ｎ＝３。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図1L】１歳の野生型、１歳のジストロフィー性、及び２歳の野生型の、筋肉における補体タンパク質レベルの評価を示す。古典的補体経路Ｃ１ｑ、Ｃ３、及びＣ３ｄのタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイである。約１歳の野生型（ＷＴ１ｙｏ）、約１歳のｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ１ｙｏ）及び約２歳の野生型（ＷＴ２ｙｏ）からの脛骨前部筋（ＴＡ）、横隔膜筋（ＤＩＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）を用いた。Ｎ＝３。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図2A】Ｃ１ｑ及びＣ１ｓ補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）～及び１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、前脛骨（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）におけるＣ１ｑタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図2B】Ｃ１ｑ及びＣ１ｓ補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）～及び１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、前脛骨（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）におけるＣ１ｑタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図2C】Ｃ１ｑ及びＣ１ｓ補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）～及び１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、前脛骨（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）におけるＣ１ｑタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図2D】Ｃ１ｑ及びＣ１ｓ補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）～及び１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、前脛骨（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）におけるＣ１ｑタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図2E】Ｃ１ｑ及びＣ１ｓ補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）～及び１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、前脛骨（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）におけるＣ１ｑタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図2F】Ｃ１ｑ及びＣ１ｓ補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）～及び１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、前脛骨（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）におけるＣ１ｑタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図2G】Ｃ１ｑ及びＣ１ｓ補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）～及び１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、前脛骨（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）におけるＣ１ｓタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図2H】Ｃ１ｑ及びＣ１ｓ補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）～及び１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、前脛骨（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）におけるＣ１ｓタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図2I】Ｃ１ｑ及びＣ１ｓ補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）～及び１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、前脛骨（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）におけるＣ１ｓタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図3A】Ｃ３、Ｃ３ｄ及びＣ４補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、脛骨前筋（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）の、Ｃ３タンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図3B】Ｃ３、Ｃ３ｄ及びＣ４補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、脛骨前筋（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）の、Ｃ３タンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図3C】Ｃ３、Ｃ３ｄ及びＣ４補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、脛骨前筋（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）の、Ｃ３タンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図3D】Ｃ３、Ｃ３ｄ及びＣ４補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、脛骨前筋（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）の、Ｃ３ｄタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図3E】Ｃ３、Ｃ３ｄ及びＣ４補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、脛骨前筋（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）の、Ｃ３ｄタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図3F】Ｃ３、Ｃ３ｄ及びＣ４補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、脛骨前筋（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）の、Ｃ３ｄタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図3G】Ｃ３、Ｃ３ｄ及びＣ４補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、脛骨前筋（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）の、Ｃ４タンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図3H】Ｃ３、Ｃ３ｄ及びＣ４補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、脛骨前筋（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）の、Ｃ４タンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図3I】Ｃ３、Ｃ３ｄ及びＣ４補体タンパク質レベルが、野生型と比較してジストロフィー性筋肉において増加することを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４ｃｖ（ＭＤＸ）マウスの横隔膜（ＤＩＡ）、脛骨前筋（ＴＡ）及び大腿四頭筋（Ｑ）の、Ｃ４タンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ（グラフに示す）。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図4A】野生型と比較して高いレベルの補体タンパク質を有するジストロフィー性マウスは、身体活動をすることができない／筋肉の衰弱を示す、ことを示す。（図４Ｂ～４Ｅ）に示される行動試験で使用される約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４Ｃｖ（ＭＤＸ）マウスのマウス体重（グラム）を示す。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。行動試験は、図２及び３と同じマウスで筋肉解剖及びＥＬＩＳＡ分析の前に行われたことに留意されたい。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図4B】野生型と比較して高いレベルの補体タンパク質を有するジストロフィー性マウスは、身体活動をすることができない／筋肉の衰弱を示す、ことを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４Ｃｖ（ＭＤＸ）マウスで実施したぶら下がり試験を示す。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。行動試験は、図２及び３と同じマウスで筋肉解剖及びＥＬＩＳＡ分析の前に行われたことに留意されたい。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図4C】野生型と比較して高いレベルの補体タンパク質を有するジストロフィー性マウスは、身体活動をすることができない／筋肉の衰弱を示す、ことを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４Ｃｖ（ＭＤＸ）マウスで実施したオープンフィールド試験を示す。動物の各群について、総距離（ｍ）を評価した。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。行動試験は、図２及び３と同じマウスで筋肉解剖及びＥＬＩＳＡ分析の前に行われたことに留意されたい。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図4D】野生型と比較して高いレベルの補体タンパク質を有するジストロフィー性マウスは、身体活動をすることができない／筋肉の衰弱を示す、ことを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４Ｃｖ（ＭＤＸ）マウスで実施したオープンフィールド試験を示す。動物の各群について、平均速度（ｍ／秒）を評価した。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。行動試験は、図２及び３と同じマウスで筋肉解剖及びＥＬＩＳＡ分析の前に行われたことに留意されたい。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図4E】野生型と比較して高いレベルの補体タンパク質を有するジストロフィー性マウスは、身体活動をすることができない／筋肉の衰弱を示す、ことを示す。約１ヶ月齢（１ヶ月）、約３ヶ月齢（３ヶ月）及び約１歳（１歳）の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４Ｃｖ（ＭＤＸ）マウスで実施したオープンフィールド試験を示す。動物の各群について、移動時間（秒）を評価した。Ｎ＝３（ＷＴ １ ｍｏ、ＷＴ ３ ｍｏ）、Ｎ＝４（ＷＴ １ ｙｏ、ＭＤＸ １ ｍｏ、ＭＤＸ ３ ｍｏ、ＭＤＸ １ｙｏ）。行動試験は、図２及び３と同じマウスで筋肉解剖及びＥＬＩＳＡ分析の前に行われたことに留意されたい。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図5】ジストロフィーマウスの抗Ｃ１ｑ治療の実験計画を示す。Ｃ１ｑ抗体処理は、１０週齢で開始し、１００ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与量（ｉ．ｐ．）で２回／週のレジメンでＰａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖ雄マウスに２週間インビボで投与した。血液試料は、薬理学的処理の開始時及び屠殺時に採取した。処理の開始及び終了時に、機能パラメータ（すなわち、疲労前の最大ぶら下がり時間、ならびに走行した総距離及び平均速度などの行動活動）を評価した。

【図6A】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスのバリデーションを示す。約３ヶ月齢のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｎ＝４）及び約３～１１ヶ月齢のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ、Ｎ＝７）の後肢筋からのＦＡＣＳ単離マクロファージ（ＣＤ４５＋Ｆ４／８０＋）におけるＣ１ｑａ発現のｑＰＣＲ分析を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図6B】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスのバリデーションを示す。約３ヶ月齢のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝６）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｎ＝５）、及び野生型（ＷＴ、Ｎ＝３）の横隔膜及び腓腹筋におけるＣ１ｑａ発現のｑＰＣＲ分析を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。一方向ａｎｏｖａ試験を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図6C】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスのバリデーションを示す。約３ヶ月齢のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝６）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｎ＝５）、及び野生型（ＷＴ、Ｎ＝３）の横隔膜及び腓腹筋におけるＣ１ｑａ発現のｑＰＣＲ分析を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。一方向ａｎｏｖａ試験を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図7A】１ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。約１ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ）及びＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ）のマウス体重（グラム）を示す。Ｎ＝９（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝８（ＣＮＴＲ）。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図7B】１ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図７Ａ）のように、マウスに対して実施されたぶら下がり試験（ＨＴ）を示す。総ぶら下がり時間を評価した。Ｎ＝９（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝８（ＣＮＴＲ）。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図7C】１ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図７Ａ）のように、マウスに対して実施されたぶら下がり試験（ＨＴ）を示す。マウス体重について正規化された総ぶら下がり時間を評価した。Ｎ＝９（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝８（ＣＮＴＲ）。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図7D】１ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図７Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。総距離（ｃｍ）を評価した。Ｎ＝９（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝８（ＣＮＴＲ）。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図7E】１ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図７Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。平均速度（ｃｍ／秒）を評価した。Ｎ＝９（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝８（ＣＮＴＲ）。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図7F】１ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図７Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。移動時間のパーセンテージを評価した。Ｎ＝９（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝８（ＣＮＴＲ）。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図8A】２ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。約２ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ）及びＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ）のマウス体重（グラム）を示す。Ｎ＝４。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図8B】２ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図８Ａ）のように、マウスに対して実施されたぶら下がり試験（ＨＴ）を示す。総ぶら下がり時間を評価した。Ｎ＝４。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図8C】２ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図８Ａ）のように、マウスに対して実施されたぶら下がり試験（ＨＴ）を示す。マウス体重について正規化された総ぶら下がり時間を評価した。Ｎ＝４。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図8D】２ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図８Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。総距離（ｃｍ）を評価した。Ｎ＝４。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図8E】２ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図８Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。平均速度（ｃｍ／秒）を評価した。Ｎ＝４。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図8F】２ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図８Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。移動時間のパーセンテージを評価した。Ｎ＝４。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図9A】３ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ）及びＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ）のマウス体重（グラム）を示す。Ｎ＝９（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（ＣＮＴＲ）。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図9B】３ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図９Ａ）のように、マウスに対して実施されたぶら下がり試験（ＨＴ）を示す。総ぶら下がり時間を評価した。Ｎ＝９（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（ＣＮＴＲ）。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図9C】３ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図９Ａ）のように、マウスに対して実施されたぶら下がり試験（ＨＴ）を示す。マウス体重について正規化された総ぶら下がり時間を評価した。Ｎ＝９（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（ＣＮＴＲ）。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図9D】３ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図９Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。総距離（ｃｍ）を評価した。Ｎ＝９（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（ＣＮＴＲ）。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図9E】３ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図９Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。平均速度（ｃｍ／秒）を評価した。Ｎ＝９（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（ＣＮＴＲ）。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図9F】３ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図９Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。移動時間のパーセンテージを評価した。Ｎ＝９（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（ＣＮＴＲ）。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図10A】抗Ｃ１ｑ抗体で処理した３ヶ月齢のジストロフィーマウスにおける行動試験を示す。処理の前（プレ）及び後（ポスト）に、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理したＰａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスのマウス重量（グラム）を示す。Ｎ＝６。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊。

【図10B】抗Ｃ１ｑ抗体で処理した３ヶ月齢のジストロフィーマウスにおける行動試験を示す。（図１０Ａ）のように、マウスに対して実施されたぶら下がり試験（ＨＴ）を示す。総ぶら下がり時間を評価した。Ｎ＝６。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊。

【図10C】抗Ｃ１ｑ抗体で処理した３ヶ月齢のジストロフィーマウスにおける行動試験を示す。（図１０Ａ）のように、マウスに対して実施されたぶら下がり試験（ＨＴ）を示す。マウス体重について正規化された総ぶら下がり時間を評価した。Ｎ＝６。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊。

【図10D】抗Ｃ１ｑ抗体で処理した３ヶ月齢のジストロフィーマウスにおける行動試験を示す。（図１０Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。総距離（ｃｍ）を評価した。Ｎ＝６。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊。

【図10E】抗Ｃ１ｑ抗体で処理した３ヶ月齢のジストロフィーマウスにおける行動試験を示す。（図１０Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。平均速度（ｃｍ／秒）を評価した。Ｎ＝６。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊。

【図10F】抗Ｃ１ｑ抗体で処理した３ヶ月齢のジストロフィーマウスにおける行動試験を示す。（図１０Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。移動時間のパーセンテージを評価した。Ｎ＝６。試験を１日おきに３回繰り返した。各試験の３日間の平均値を示す。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊。

【図11A】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの横隔膜における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの横隔膜のＴｇｆβ遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図11B】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの横隔膜における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの横隔膜のＬｇｒ５遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図11C】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの横隔膜における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの横隔膜のコラーゲン１ａ１遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図11D】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの横隔膜における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの横隔膜のコラーゲン３ａ１遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図11E】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの横隔膜における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの横隔膜のフィブロネクチン遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図12A】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの腓腹筋における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの腓腹筋のＴｇｆβ遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図12B】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの腓腹筋における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの腓腹筋のＬｇｒ５遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図12C】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの腓腹筋における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの腓腹筋のコラーゲン１ａ１遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図12D】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの腓腹筋における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの腓腹筋のコラーゲン３ａ１遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図12E】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの腓腹筋における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの腓腹筋のフィブロネクチン遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図13A】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの線維／脂肪原性前駆細胞における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの線維／脂肪原性前駆細胞のＴｇｆβ遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図13B】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの線維／脂肪原性前駆細胞における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの線維／脂肪原性前駆細胞のＬｇｒ５遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図13C】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの線維／脂肪原性前駆細胞における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの線維／脂肪原性前駆細胞のＡｘｉｎ２遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図13D】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの線維／脂肪原性前駆細胞における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの線維／脂肪原性前駆細胞のコラーゲン１ａ１遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図13E】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの線維／脂肪原性前駆細胞における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの線維／脂肪原性前駆細胞のコラーゲン３ａ１遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図13F】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの線維／脂肪原性前駆細胞における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの線維／脂肪原性前駆細胞のフィブロネクチン遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図14A】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの衛生細胞における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの衛生細胞のＴｇｆβ遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図14B】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの衛生細胞における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの衛生細胞のＬｇｒ５遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図14C】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの衛生細胞における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの衛生細胞のＡｘｉｎ２遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図14D】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの衛生細胞における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの衛生細胞のコラーゲン１ａ１遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図14E】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの衛生細胞における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの衛生細胞のコラーゲン３ａ１遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図14F】Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑ抗体で処理されたジストロフィーマウスの衛生細胞における正規のＷｎｔシグナル伝達及び線維原性関連遺伝子の発現を示す。約３ヶ月のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））、野生型（ＷＴ）、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの衛生細胞のフィブロネクチン遺伝子のｑＰＣＲ分析では、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理した。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図15A】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したジストロフィー性Ｃ１ｑａＫＯマウス及びジストロフィー性マウス由来の血清におけるクレアチンキナーゼ試験を示す。約３ヶ月齢Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ（Ｃｒｅ＋））、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋））及び野生型（ＷＴ）から採取した血清試料中で測定したＣＫ活性（ｎｍｏｌ／ｍｉｎ／ｍＬ）を示す。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。一方向ＡＮＯＶＡ試験を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図15B】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したジストロフィー性Ｃ１ｑａＫＯマウス及びジストロフィー性マウス由来の血清におけるクレアチンキナーゼ試験を示す。Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスから採取された血清試料中で測定されたＣＫ活性（ｎｍｏｌ／ｍｉｎ／ｍＬ）を、Ｃ１ｑブロッキング抗体（抗Ｃ１ｑ）または対照抗体（Ｃｎｔｒ）で処理する前（プレ）及び後（ポスト）について示す。Ｎ＝６（ＣＮＴＲ（Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ、Ｃｎｔｒ、抗Ｃ１ｑ）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。一方向ＡＮＯＶＡ試験を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図16A】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスから採取した血漿中の補体レベルの評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、及びＣ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。血漿試料を、以下の動物から採取した：処理の前（プレ）及び後（ポスト）に抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（グラフ内でＢとして示す）で処理したマウス、処理の前（プレ）及び後（ポスト）に対照抗体（グラフ内でＡとして示す）で処理したマウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び３ヶ月齢の野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図16B】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスから採取した血漿中の補体レベルの評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、及びＣ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。血漿試料を、以下の動物から採取した：処理の前（プレ）及び後（ポスト）に抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（グラフ内でＢとして示す）で処理したマウス、処理の前（プレ）及び後（ポスト）に対照抗体（グラフ内でＡとして示す）で処理したマウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び３ヶ月齢の野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図16C】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスから採取した血漿中の補体レベルの評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、及びＣ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。血漿試料を、以下の動物から採取した：処理の前（プレ）及び後（ポスト）に抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（グラフ内でＢとして示す）で処理したマウス、処理の前（プレ）及び後（ポスト）に対照抗体（グラフ内でＡとして示す）で処理したマウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び３ヶ月齢の野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図16D】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスから採取した血漿中の補体レベルの評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、及びＣ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。血漿試料を、以下の動物から採取した：処理の前（プレ）及び後（ポスト）に抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（グラフ内でＢとして示す）で処理したマウス、処理の前（プレ）及び後（ポスト）に対照抗体（グラフ内でＡとして示す）で処理したマウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び３ヶ月齢の野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図16E】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスから採取した血漿中の補体レベルの評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、及びＣ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。血漿試料を、以下の動物から採取した：処理の前（プレ）及び後（ポスト）に抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（グラフ内でＢとして示す）で処理したマウス、処理の前（プレ）及び後（ポスト）に対照抗体（グラフ内でＡとして示す）で処理したマウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び３ヶ月齢の野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図16F】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスから採取した血漿中の補体レベルの評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、及びＣ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。血漿試料を、以下の動物から採取した：処理の前（プレ）及び後（ポスト）に抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（グラフ内でＢとして示す）で処理したマウス、処理の前（プレ）及び後（ポスト）に対照抗体（グラフ内でＡとして示す）で処理したマウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、１ヶ月齢及び屠殺（３ヶ月齢）のＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び３ヶ月齢の野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図17A】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図17B】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図17C】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図17D】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図17E】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図17F】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図17G】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図18A】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図18B】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図18C】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図18D】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図18E】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図18F】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図18G】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図18H】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図18I】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの横隔膜における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から横隔膜を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝４（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋、Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－、ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図19A】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図19B】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図19C】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図19D】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図19E】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図19F】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図19G】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図20A】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図20B】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図20C】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図20D】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図20E】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図20F】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図20G】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図20H】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図20I】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図20J】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図20K】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図20L】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図20M】抗Ｃ１ｑ抗体（総タンパク補正済）で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの腓腹筋における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。全てのデータを、タンパク質（またはタンパク質複合体）／総タンパク質比として表す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から腓腹筋を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。各試料は、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して試料の測定値で割ることによって、総タンパク質レベルに正規化される。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図21A】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの肝臓における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から肝臓を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図21B】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの肝臓における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から肝臓を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図21C】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの肝臓における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から肝臓を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図21D】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの肝臓における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から肝臓を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図21E】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの肝臓における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から肝臓を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図21F】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの肝臓における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から肝臓を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図21G】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスの肝臓における補体レベル評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。屠殺（３ヶ月齢）時点で、以下の動物から肝臓を採取した：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（グラフ中Ｂとして示す）、対照抗体で処理したマウス（グラフ中Ａとして示す）、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）マウス、Ｌｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４ＣｖまたはＬｙｚ^{Ｃｒｅ－／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）マウス、及び野生型（ＷＴ）。Ｎ＝５（Ａ、Ｂ、Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝４（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ－）、Ｎ＝６（Ｃｎｔｒ Ｃｒｅ＋）、Ｎ＝３（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図22A】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したジストロフィーマウスの心臓における補体レベルの評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。心臓を、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（グラフではＢとして示す）で処理したマウス及び対照抗体（グラフではＡとして示す）で処理したマウスから、屠殺（３ヶ月齢）時点で採取した；Ｎ＝５。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図22B】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したジストロフィーマウスの心臓における補体レベルの評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。心臓を、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（グラフではＢとして示す）で処理したマウス及び対照抗体（グラフではＡとして示す）で処理したマウスから、屠殺（３ヶ月齢）時点で採取した；Ｎ＝５。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図22C】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したジストロフィーマウスの心臓における補体レベルの評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。心臓を、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（グラフではＢとして示す）で処理したマウス及び対照抗体（グラフではＡとして示す）で処理したマウスから、屠殺（３ヶ月齢）時点で採取した；Ｎ＝５。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図22D】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したジストロフィーマウスの心臓における補体レベルの評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。心臓を、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（グラフではＢとして示す）で処理したマウス及び対照抗体（グラフではＡとして示す）で処理したマウスから、屠殺（３ヶ月齢）時点で採取した；Ｎ＝５。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図22E】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したジストロフィーマウスの心臓における補体レベルの評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。心臓を、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（グラフではＢとして示す）で処理したマウス及び対照抗体（グラフではＡとして示す）で処理したマウスから、屠殺（３ヶ月齢）時点で採取した；Ｎ＝５。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図22F】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したジストロフィーマウスの心臓における補体レベルの評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。心臓を、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（グラフではＢとして示す）で処理したマウス及び対照抗体（グラフではＡとして示す）で処理したマウスから、屠殺（３ヶ月齢）時点で採取した；Ｎ＝５。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図22G】抗Ｃ１ｑ抗体で処理したジストロフィーマウスの心臓における補体レベルの評価を示す。古典的補体経路（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）、Ｃ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）、及びアルブミン（Ａｌｂ）のタンパク質のＥＬＩＳＡアッセイ。ＰＫは、試料中のＣ１ｑブロッキング抗体の量を示す。心臓を、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（グラフではＢとして示す）で処理したマウス及び対照抗体（グラフではＡとして示す）で処理したマウスから、屠殺（３ヶ月齢）時点で採取した；Ｎ＝５。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。

【図23】Ｃ１複合体成分の発現がジストロフィー性筋肉において増強されることを示す。約１歳の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘＣｖ（Ｍｄｘ）マウスの後肢筋におけるＣ１複合体サブユニットＣ１ｑａ、Ｃ１ｑｂ、Ｃ１ｑｃ、Ｃ１ｒ、Ｃ１ｓのｍＲＮＡ発現。Ｎ＝３。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図24A】Ｃ１ｑサブユニットが、ジストロフィーマウスの骨格筋内にマクロファージを浸潤させることによって発現されることを示す。約１歳の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｍｄｘ）の後肢筋肉から単離した衛星細胞（ＳＣ）、マクロファージ（ＭＡＣ）及び線維性／脂肪原性前駆細胞（ＦＡＰ）におけるＣ１ｑａ発現のｑＰＣＲ分析を示す。Ｎ＝３。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図24B】Ｃ１ｑサブユニットが、ジストロフィーマウスの骨格筋内にマクロファージを浸潤させることによって発現されることを示す。約１歳の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｍｄｘ）の後肢筋肉から単離した衛星細胞（ＳＣ）、マクロファージ（ＭＡＣ）及び線維性／脂肪原性前駆細胞（ＦＡＰ）におけるＣ１ｑｂ発現のｑＰＣＲ分析を示す。Ｎ＝３。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図24C】Ｃ１ｑサブユニットが、ジストロフィーマウスの骨格筋内にマクロファージを浸潤させることによって発現されることを示す。約１歳の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｍｄｘ）マウスの後肢筋における１ｍｇ当たりの組織当たりのマクロファージの数を示す。Ｎ＝３。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊；ｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図25A】約１歳のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。約１歳のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ）及びＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ）のマウス体重（グラム）を示す。Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（Ｃｎｔｒ）、Ｎ＝２（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図25B】約１歳のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図２５Ａ）のように、マウスに対して実施されたぶら下がり試験（ＨＴ）を示す。総ぶら下がり時間を評価した。Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（Ｃｎｔｒ）、Ｎ＝２（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図25C】約１歳のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図２５Ａ）のように、マウスに対して実施されたぶら下がり試験（ＨＴ）を示す。マウス体重について正規化された総ぶら下がり時間を評価した。Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（Ｃｎｔｒ）、Ｎ＝２（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図25D】約１歳のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図２５Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。総距離（ｃｍ）を評価した。Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（Ｃｎｔｒ）、Ｎ＝２（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図25E】約１歳のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図２５Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。平均速度（ｃｍ／秒）を評価した。Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（Ｃｎｔｒ）、Ｎ＝２（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図25F】約１歳のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図２５Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。移動時間のパーセンテージを評価した。Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（Ｃｎｔｒ）、Ｎ＝２（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図25G】約１歳のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図２５Ａ）のように、マウスに対して行われた２つの脚のグリップ試験を示す。マウス体重に対して正規化された最大強度を評価した。Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（Ｃｎｔｒ）、Ｎ＝２（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図25H】約１歳のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図２５Ａ）のように、マウスに対して行われた２つの脚のグリップ試験を示す。マウス体重に対して正規化された総グリップ時間を評価した。Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（Ｃｎｔｒ）、Ｎ＝２（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図25I】約１歳のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。（図２５Ａ）のように、マウスで実施されたロータロッド試験を示す。マウス体重について正規化された総歩行時間を評価した。Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（Ｃｎｔｒ）、Ｎ＝２（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【図26】Ｃ１複合体成分の発現がジストロフィー性筋肉において増強したことを示す。Ｃ１複合体サブユニットＣ１ｑａ、Ｃ１ｑｂ、Ｃ１ｑｃ、Ｃ１ｒ、Ｃ１ｓのｍＲＮＡ発現を、約１歳の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４Ｃｖ（ＭＤＸ）マウス（Ｎ＝３）の後肢筋肉で評価した。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１。

【図27】抗Ｃ１ｑ、抗Ａｘｉｎ２抗体、及びＨｏｅｃｈｓｔで染色した約１歳のｍｄｘ^４Ｃｖの腓腹筋の代表的な免疫蛍光を示す。スケールバー（上部画像）：５０μｍ、スケールバー（下部画像）：１０μｍ。各領域におけるＣ１ｑとＡｘｉｎ２強度値との間の正の相関を示す。Ｎ＝３。スピアマン係数：ｒ。

【発明を実施するための形態】

【0017】

概要
本開示は、広義には、デュシェンヌ型筋ジストロフィー（「ＤＭＤ」）、ベッカー型筋ジストロフィー（「ＢＭＤ」）、肢帯型筋ジストロフィー（ＬＧＭＤ）（サルコグリカノパチー、ジストログリカノパチー及びジスフェルリンパチーを含む）、ＶＩ型コラーゲン関連障害（ベスレム型ミオパチー及びウルリッヒ型先天性筋ジストロフィー（ＵＣＭＤ）を含む）、先天性筋ジストロフィー（ＣＭＤ）及び先天性ミオパチー、ならびに遠位性筋ジストロフィー／ミオパチー（三好型ミオパチーを含む）の予防、発症リスクの低減、進行の遅延もしくはブロック、または治療方法に関する。該方法は、Ｃ１複合体阻害剤、Ｃ１ｑ阻害剤、Ｃ１ｓ阻害剤、Ｃ１ｒ阻害剤、またはＣ１複合体阻害剤（例えば、抗Ｃ１複合体抗体）等の古典的補体経路の阻害剤を対象に投与することを含む。阻害剤は、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、小分子、遺伝子編集剤、塩基編集剤、またはエピジェネティック編集剤であり得る。核酸は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｍｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ阻害剤、ｍＲＮＡ、アプタマー、またはアンチセンス核酸であり得る。阻害剤は、標的生体分子の活性または発現を減少させることによるものかどうかにかかわらず、標的生体分子の生物学的機能を阻害する能力を有する化合物を指し得る。

【0018】

補体系は、ＤＭＤの進行中に筋線維に発生する壊死プロセスに関与し、代替の補体系経路は組織再生に直接関与する可能性がある。しかしながら、ＤＭＤの進行における古典的な補体経路の役割はあまり理解されておらず、今日まで筋肉再生へのその関与は知られていない。補体タンパク質の血清レベルの変化は、損なわれた骨格筋（すなわち、老化及び筋疾患）で報告されているが、骨格筋における補体成分の局所的な産生は、生理学的状態でも病理学的状態でも広範囲に調査されていない。

【0019】

ＷＮＴシグナル伝達の上昇は、再生過程において有害な役割を果たし、ジストロフィー性筋肉における線維化組織の蓄積を促進することが示されている。しかしながら、このプロセスに関与する分子及び細胞経路は、特徴解析が不十分である。先天性免疫におけるその役割に加えて、古典的な補体成分Ｃ１ｑは、正準的なＷＮＴシグナル伝達を活性化し得る。いくつかの実施形態では、開示される筋ジストロフィーを治療する方法は、部分的には、補体Ｃ１ｑがＤＭＤにおけるＷＮＴシグナル伝達経路の活性の増強と相関しているという発見に基づいている（図２７）。

【0020】

Ｃ１ｑ－Ｗｎｔ阻害は、デュシェンヌ型筋ジストロフィーのマウスモデルにおけるジストロフィー表現型をインビボで効果的に改善する。

【0021】

補体のＣ１複合体のＲＮＡ及びタンパク質レベルは、早ければ生後１ヶ月で１０倍増加し、健常な対照と比較して、ジストロフィー性ｍｄｘ^４Ｃｖ筋において１歳まで上昇したままである。本明細書の実施例に記載の研究で使用した抗Ｃ１ｑブロッキング抗体レジメンは、標的骨格筋（すなわち、横隔膜及び腓腹筋）におけるＣ１ｑ発現を効果的に阻害した。抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で治療したジストロフィーマウスは、対照抗体で治療したジストロフィーマウスと比較して、疲労前の最大ぶら下がり時間が増加した。Ｃ１ｑａ遺伝的に除去されたジストロフィー性マウス（すなわち、Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖ）において、約１ヶ月及び約２ヶ月齢で試験した対照と比較して、疲労前の最大ぶら下がり時間の改善を示唆する同様の傾向が観察された。この改善は、１ヶ月後には明らかではなく、Ｃ１ｑの遺伝的焼灼によって及ぼされる可能性のある一過性の効果を示唆している。１歳のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖは、対照と比較してグリップ試験を実施することにより多くの時間に抵抗し、対照と比較して疲労前の最大ぶら下がり時間の増加に向かう、傾向を示した。全体として、正準ＷＮＴ標的遺伝子及び線維原性遺伝子の遺伝子発現は、Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスにおいても、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で治療したジストロフィー性マウスにおいても低下しなかった。対照と比較したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖ血清におけるクレアチンキナーゼ（ＣＫ）活性の低下を示唆する傾向が観察された。しかしながら、対照と比較して、抗Ｃ１ｑ抗体で治療したジストロフィー性マウスにおいて、ＣＫ活性レベルの差は観察されなかった。

【0022】

第１に、補体レベル、具体的には古典的補体経路の構成要素の発現を、ジストロフィー性及び野生型マウスの筋肉において評価し、補体タンパク質レベルは、健康な対照と比較して、早ければ生後１ヶ月で増加し、ジストロフィー性ｍｄｘ^４Ｃｖ筋において１歳まで上昇したままであることが見出された。

【0023】

抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で治療したジストロフィー性マウスから採取した組織（すなわち、横隔膜、腓腹筋及び肝臓）で実施したＥＬＩＳＡ分析は、採用したレジメンが、Ｃ１ｑの発現を、Ｃ１ｑａ遺伝的に除去したマウス組織（すなわち、Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖ）におけるＣ１ｑレベルと同様のレベルまで強く低下させたことを示した。したがって、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスを、１０週齢で始まる抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で２週間、１００ｍｇ／ｋｇの投薬量で２回／週のレジメンで腹腔内（ｉ．ｐ．）で治療することは、Ｃ１ｑ骨格筋及び肝臓発現を枯渇させる効果的な方法である。

【0024】

抗Ｃ１ｑブロッキング抗体レジメンが、ジストロフィー性骨格筋におけるＣ１ｑ発現を効果的に枯渇させたと評価した後、本発明者らは、マウスの機能パラメータ、正準ＷＮＴ標的遺伝子及び線維原性関連遺伝子の遺伝子発現、ならびにクレアチンキナーゼ活性レベルに対するＣ１ｑ枯渇の効果を評価した。

【0025】

約１ヶ月齢及び約２ヶ月齢の両方で、４肢ハンギングワイヤー試験において、対照と比較してＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスで身体活動の改善を観察した。しかしながら、この傾向は一過性にしか現れず、マウスを生後約３ヶ月で試験したときにはもはや観察されなかった。抗Ｃ１ｑ抗体で処理したジストロフィー性マウスは、４肢ハンギングワイヤー試験で対照抗体で処理したマウスと比較して、高い身体的活動を生じさせた。

【0026】

定義
本明細書で使用される場合、「ａ」または「ａｎ」は、１つ以上を意味し得る。本明細書において請求項（複数可）で使用される場合、用語「含む」と併せて使用される場合、用語「ａ」または「ａｎ」は、１つまたは複数を意味し得る。例えば、「抗体」に対する言及は、１つから多くの抗体の言及である。本明細書で使用される場合、「別の」は、少なくとも第２のまたはそれ以上を意味し得る。

【0027】

本明細書で使用される場合、別の化合物または組成物と「併せた」投与は、同時投与及び／または異なる時点での投与を含む。併せた投与はまた、異なる投薬頻度または間隔、及び同じ投与経路または異なる投与経路を使用することを含む、共製剤としての投与または別々の組成物としての投与を包含する。

【0028】

用語「免疫グロブリン」（Ｉｇ）は、本明細書で「抗体」と互換的に使用される。本明細書における用語「抗体」は、最も広義に使用され、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、少なくとも２つのインタクトな抗体から形成される多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、生物学的活性を示す場合に限り抗体断片、及び抗体誘導体を具体的に包含する。

【0029】

「単離された」分子または細胞は、それが生成された環境において通常関連する少なくとも１つの混入分子または細胞から同定及び分離された分子または細胞である。好ましくは、単離された分子または細胞は、生成環境に関連する全ての成分と会合しない。単離された分子または細胞は、天然に見られる形態または状況以外の形態である。そのため、単離された分子は、細胞に天然に存在する分子とは区別され；単離された細胞は、組織、器官、または個体に天然に存在する細胞とは区別される。いくつかの実施形態では、単離された分子は、本開示の抗Ｃ１ｓ、抗Ｃ１ｑ、または抗Ｃ１ｒ抗体である。他の実施形態では、単離された細胞は、本開示の抗Ｃ１ｓ、抗Ｃ１ｑ、または抗Ｃ１ｒ抗体を生成する宿主細胞またはハイブリドーマ細胞である。

【0030】

「単離された」抗体は、その生成環境（例えば、天然または組換え）の成分から同定、分離、及び／または回収されたものである。好ましくは、単離されたポリペプチドは、その生成環境からの全ての他の混入成分と会合しない。組換えトランスフェクション細胞に起因するものなどのその生成環境からの混入成分は、抗体の研究、診断的または治療的使用を典型的に妨げるであろう物質であり、これには酵素、ホルモン、及び他のタンパク質性または非タンパク質性の溶質が含まれ得る。ある特定の好ましい実施形態では、ポリペプチドは、（１）例えば、ローリー法によって決定される、抗体の９５重量％超、いくつかの実施形態では、９９重量％超になるまで、（２）スピニングカップシークエネーターを使用して、Ｎ末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５個の残基を得るのに十分な程度まで、または（３）クマシーブルー、または好ましくはシルバー染色を使用して、非還元または還元条件下でＳＤＳ－ＰＡＧＥによって均質性が得られるまで、精製されるであろう。単離された抗体には、抗体の天然環境の少なくとも１つの成分が存在しないため、組換えＴ細胞内でｉｎ ｓｉｔｕの抗体が含まれる。しかしながら、通常、単離されたポリペプチドまたは抗体は、少なくとも１つの精製工程を含むプロセスによって調製される。

【0031】

抗体の「可変領域」または「可変ドメイン」は、抗体の重鎖または軽鎖のアミノ末端ドメインを指す。重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、それぞれ「Ｖ_Ｈ」及び「Ｖ_Ｌ」と称され得る。これらのドメインは通常、抗体の最も可変性の高い部分であり（同じクラスの他の抗体と比べて）、抗原結合部位を含有する。

【0032】

用語「可変」は、可変ドメインのある特定のセグメントが、抗体によって配列が大幅に異なるという事実を指す。Ｖドメインは、抗原結合を媒介し、特定の抗体の、その特定の抗原に対する特異性を定義する。しかしながら、可変性は、可変ドメイン全体に均等に分布しているわけではない。むしろ、それは、軽鎖及び重鎖の両方の可変ドメインの両方において、超可変領域（ＨＶＲ）と呼ばれる３つのセグメントに集中している。可変ドメインのより高度に保存された部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然重鎖及び軽鎖の可変ドメインはそれぞれ、ベータ－シート構造を接続し、いくつかの場合では、ベータ－シート構造の一部を形成するループを形成する３つのＨＶＲによって接続されたベータ－シート立体配置を大いに採用する４つのＦＲ領域を含む。各鎖内のＨＶＲは、ＦＲ領域によって近接して互いに結び付いており、他方の鎖のＨＶＲとともに、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）を参照されたい）。定常ドメインは、抗原に対する抗体の結合に直接的に関与しないが、様々なエフェクター機能、例えば、抗体依存性細胞毒性における抗体の関与を示す。

【0033】

本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」は、重鎖及び軽鎖の両方のポリペプチドの可変領域内に見られる非連続的抗原結合部位を意味することが意図されている。ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９－６６１６（１９７７）、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９９１）（本明細書ではＫａｂａｔ １９９１とも称される）、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）（本明細書ではＣｈｏｔｈｉａ １９８７とも称される）、及びＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６）（定義には、互いに対して比較した場合にアミノ酸残基の重複またはサブセットが含まれる）に記載されている。それにもかかわらず、抗体もしくはグラフト抗体またはそのバリアントのＣＤＲを指すためのいずれの定義の適用も、本明細書で定義及び使用される用語の範囲内であることが意図されている。

【0034】

本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ－Ｌ１」、「ＣＤＲ－Ｌ２」、及び「ＣＤＲ－Ｌ３」は、それぞれ、軽鎖可変領域における第１、第２、及び第３ＣＤＲを指す。本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ－Ｈ１」、「ＣＤＲ－Ｈ２」、及び「ＣＤＲ－Ｈ３」は、それぞれ、重鎖可変領域における第１、第２、及び第３ＣＤＲを指す。本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ－１」、「ＣＤＲ－２」、及び「ＣＤＲ－３」は、それぞれ、いずれかの鎖の可変領域の第１、第２及び第３ＣＤＲを指す。

【0035】

用語「モノクローナル抗体」は、本明細書で使用される場合、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、その集団の個々の抗体は、微量で存在し得る天然に存在する突然変異及び／または翻訳後修飾（例えば、異性体化、アミド化）を除き、同一である。モノクローナル抗体は、高度に特異的であり、単一の抗原部位に対して仕向けられている。異なる決定基（エピトープ）に対して仕向けられた異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して仕向けられている。それらの特異性に加え、モノクローナル抗体は、典型的にはハイブリドーマ培養によって合成され、他の免疫グロブリンが混入されていないので有利である。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体集団として得られるという抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の生成を必要とするものと解釈されるべきではない。例えば、本開示に従って使用されるモノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ法（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５－９７（１９７５）、Ｈｏｎｇｏ ｅｔ ａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ，１４（３）：２５３－２６０（１９９５），Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２ｄ ｅｄ．１９８８）、Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ５６３－６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１））、組換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照されたい）、ファージディスプレイ技術（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４－６２８（１９９１）、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）、Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）、Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７－４７２（２００４）、及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４））、及びヒト免疫グロブリン遺伝子座もしくはヒト免疫グロブリン配列をコードする遺伝子の一部もしくは全てを有する動物においてヒトまたはヒト様抗体を産生するための技術（例えば、ＷＯ１９９８／２４８９３、ＷＯ１９９６／３４０９６、ＷＯ１９９６／３３７３５、ＷＯ１９９１／１０７４１、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０：２５５１（１９９３）、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６２：２５５－２５８（１９９３）、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３（１９９３）、米国特許第５，５４５，８０７号、同第５，５４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，６２５，１２６号、同第５，６３３，４２５号、及び同第５，６６１，０１６号、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９－７８３（１９９２）、Ｌｏｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６－８５９（１９９４）、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８１２－８１３（１９９４）、Ｆｉｓｈｗｉｌｄ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５－８５１（１９９６）、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８２６（１９９６）、ならびにＬｏｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５－９３（１９９５）を参照されたい）を含む様々な技術によって生成され得る。

【0036】

「全長抗体」は通常、２つの同一の軽（Ｌ）鎖及び２つの同一の重（Ｈ）鎖を含む約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。各軽鎖は、１つの共有ジスルフィド結合によって重鎖に連結されている一方で、ジスルフィド結合の数は、異なる免疫グロブリンアイソタイプの重鎖間で異なる。各重鎖及び軽鎖は、規則的間隔の鎖内ジスルフィド架橋も有する。各重鎖は、一端に可変ドメイン（Ｖ_Ｈ）と、それに続くいくつかの定常ドメインを有する。各軽鎖は、一端に可変ドメイン（Ｖ_Ｌ）を有し、その他端に定常ドメインを有し、軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１の定常ドメインと整列し、軽鎖の可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと整列している。特定のアミノ酸残基が軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間に界面を形成すると考えられている。用語「全長抗体」、「インタクトな抗体」及び「完全抗体」は、抗体断片または抗体誘導体とは対照的に、実質的にインタクトな形態の抗体を指すために互換的に使用される。具体的には、完全抗体は、Ｆｃ領域を含む重鎖及び軽鎖を有するものを含む。定常ドメインは、天然配列定常ドメイン（例えば、ヒト天然配列定常ドメイン）またはそのアミノ酸配列バリアントであり得る。いくつかの場合では、インタクトな抗体は、１つ以上のエフェクター機能を有し得る。

【0037】

抗体の「抗体断片」または「抗原結合断片」または「機能的断片」は、インタクトな抗体の一部、好ましくはインタクトな抗体の抗原結合及び／または可変領域または改変されたＦｃＲ結合能力を保持するまたは有する抗体のＦ領域を含む。抗体断片の例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２及びＦｖ断片；ダイアボディ；及び線状抗体が含まれる（米国特許第５，６４１，８７０号、実施例２；Ｚａｐａｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．８（１０）：１０５７－１０６２（１９９５）を参照されたい）。抗体断片の追加の例には、抗体誘導体、例えば、抗体断片から形成される一本鎖抗体分子、一価抗体及び多重特異性抗体が含まれる。

【0038】

「抗体誘導体」は、抗体の抗原結合領域を含む任意のコンストラクトである。抗体誘導体の例には、抗体断片から形成される一本鎖抗体分子、一価抗体及び多重特異性抗体が含まれる。

【0039】

抗体のパパイン消化により、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる２つの同一の抗原結合断片と、容易に結晶化する能力を反映して表記される１つの残留「Ｆｃ」断片とが生成される。Ｆａｂフラグメントは、Ｌ鎖全体に加えて、Ｈ鎖の可変領域ドメイン（Ｖ_Ｈ）、ならびに１つの重鎖の第１の定常ドメイン（Ｃ_Ｈ１）からなる。各Ｆａｂフラグメントは、抗原結合に関しては一価である、すなわち、単一の抗原結合部位を有する。抗体のペプシン処理は、単一の大型Ｆ（ａｂ’）_２断片をもたらし、これは、異なる抗原結合活性を有する２つのジスルフィド結合したＦａｂ断片にほぼ対応し、依然として抗原を架橋することができる。Ｆａｂ’断片は、Ｃ_Ｈ１ドメインのカルボキシ末端に、抗体ヒンジ領域からの１つ以上のシステインを含む、いくつかの更なる残基を有することにより、Ｆａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’－ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離チオール基を持つＦａｂ’の本明細書における呼称である。Ｆ（ａｂ’）_２抗体断片は、元来、間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として生成された。抗体フラグメントの他の化学的カップリングも既知である。

【0040】

Ｆｃフラグメントは、ジスルフィドによって一緒に保持された両方のＨ鎖のカルボキシ末端部分を含む。抗体のエフェクター機能は、Ｆｃ領域における配列によって決定され、この領域はまた、ある特定の細胞型に見られるＦｃ受容体（ＦｃＲ）によって認識される。

【0041】

本明細書における「Ｆｃ領域」という用語は、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用され、天然配列のＦｃ領域及びバリアントＦｃ領域が含まれる。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は様々であり得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は通常、Ｃｙｓ２２６位のアミノ酸残基から、またはＰｒｏ２３０から、そのカルボキシル末端まで伸びると定義される。Ｆｃ領域のＣ末端リジン（ＥＵ番号付けシステムによると残基４４７）は、例えば、抗体の生成もしくは精製の間に、または抗体の重鎖をコードする核酸を組換え操作することによって、除去されてもよい。したがって、インタクトな抗体の組成物は、全Ｋ４４７残基が除去された抗体母集団、除去されたＫ４４７残基がない抗体母集団、及びＫ４４７残基を有する抗体と有しない抗体との混合物を有する抗体母集団を含んでもよい。本開示の抗体における使用に好適な天然配列のＦｃ領域には、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４が含まれる。

【0042】

「天然配列Ｆｃ領域」は、天然で見られるＦｃ領域のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。天然配列ヒトＦｃ領域には、天然配列ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域（非Ａ及びＡアロタイプ）、天然配列ヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域、天然配列ヒトＩｇＧ３ Ｆｃ領域、及び天然配列ヒトＩｇＧ４ Ｆｃ領域、ならびにそれらの天然に存在するバリアントが含まれる。

【0043】

「バリアントＦｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸改変、好ましくは１つ以上のアミノ酸置換（複数可）によって天然配列Ｆｃ領域のものとは異なるアミノ酸配列を含む。好ましくは、バリアントＦｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して少なくとも１つのアミノ酸置換、例えば、天然配列Ｆｃ領域中または親ポリペプチドのＦｃ領域中に約１～約１０個のアミノ酸置換、及び好ましくは約１～約５個のアミノ酸置換を有する。本明細書におけるバリアントＦｃ領域は、好ましくは、天然配列Ｆｃ領域及び／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の相同性、ならびに最も好ましくは、それらと少なくとも約９０％の相同性、より好ましくは、それらと少なくとも約９５％の相同性を保有する。

【0044】

「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を表す。好ましいＦｃＲは、天然配列ヒトＦｃＲである。更に、好ましいＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（ガンマ受容体）と結合し、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体を含み、これらの受容体の対立遺伝子バリアント及び選択的スプライシング形態を含むものであり、ＦｃγＲＩＩ受容体には、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）が含まれ、これらは主にその細胞質性ドメインが異なる類似のアミノ酸配列を有する。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質ドメインに免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（「ＩＴＡＭ」）を含む。阻害受容体ＦｃγＲＩＩＢは、免疫受容体チロシンベース阻害モチーフ（「ＩＴＩＭ」）をその細胞質性ドメインに含有する。（例えば、Ｍ．Ｄａｅｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３－２３４（１９９７）を参照されたい）。ＦｃＲは、Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７－９２（１９９１）、Ｃａｐｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ ４：２５－３４（１９９４）、及びｄｅ Ｈａａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３０－４１（１９９５）において検討されている。将来特定されるものを含む他のＦｃＲは、本明細書における「ＦｃＲ」という用語に包含される。ＦｃＲは、抗体の血清半減期を増加させ得る。

【0045】

ヒトＦｃＲｎ高親和性結合ポリペプチドのインビボでのＦｃＲｎへの結合及び血清中半減期は、例えば、ヒトＦｃＲｎを発現するトランスジェニックマウスもしくはトランスフェクトヒト細胞株において、またはバリアントＦｃ領域を有するポリペプチドが投与される霊長類においてアッセイすることができる。ＷＯ２００４／４２０７２（Ｐｒｅｓｔａ）は、ＦｃＲへの結合が改善また低減された抗体バリアントについて記載している。また、例えば、Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１－６６０４（２００１）を参照されたい。

【0046】

「Ｆｖ」は、完全な抗原認識部位及び抗原結合部位を含有する最小の抗体フラグメントである。このフラグメントは、１つの重鎖可変領域ドメインと１つの軽鎖可変領域ドメインが、非共有結合で緊密に結合した二量体からなる。これらの２つのドメインの折り畳みにより、抗原結合のためのアミノ酸残基を提供し、抗原結合特異性を抗体に与える、６つの超可変ループ（Ｈ鎖及びＬ鎖からそれぞれ３つのループ）が生じる。しかしながら、全結合部位よりも低い親和性であるが、単一の可変ドメイン（または抗原に特異的なＨＶＲを３つしか含まないＦｖの半分）でさえも、抗原を認識し、それに結合する能力を有する。

【0047】

「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」とも短縮される「一本鎖Ｆｖ」は、単一のポリペプチド鎖に結合されるＶＨ及びＶＬ抗体ドメインを含む抗体断片である。好ましくは、ｓＦｖポリペプチドは、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌドメイン間にポリペプチドリンカーを更に含んでおり、ｓＦｖが抗原結合に所望される構造を形成することを可能にする。ｓＦｖの概説については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９－３１５（１９９４）を参照されたい。

【0048】

「ダイアボディ」という用語は、鎖内ではなく鎖間のＶドメイン対合を達成し、それによって二価フラグメント、すなわち、２つの抗原結合部位を有するフラグメントが得られるように、Ｖ_ＨドメインとＶ_Ｌドメインとの間に短いリンカー（約５～１０個の残基）を用いてｓＦｖフラグメント（前の段落を参照されたい）を構築することによって調製された小さな抗体フラグメントを指す。二重特異性ダイアボディは、２つの抗体のＶ_Ｈ及びＶ_Ｌドメインが異なるポリペプチド鎖に存在している、２つの「交差」ｓＦｖフラグメントのヘテロ二量体である。ダイアボディは、例えば、ＥＰ４０４，０９７、ＷＯ１９９３／０１１１６１、ＷＯ／２００９／１２１９４８、ＷＯ／２０１４／１９１４９３、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０：６４４４－４８（１９９３）においてより詳細に記載されている。

【0049】

本明細書で使用される場合、「キメラ抗体」は、重鎖及び／または軽鎖の一部が、特定の種に由来するか、または特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体内の対応する配列と同一または相同である一方で、鎖（複数可）の残りが、別の種に由来するか、または別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または相同である抗体（免疫グロブリン）、ならびにそのような抗体の断片を指し、これは、それらが所望される生物学的活性を呈する限りにおいてである（米国特許第４，８１６，５６７号、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１－５５（１９８４））。本明細書における対象となるキメラ抗体には、ＰＲＩＭＡＴＩＺＥＤ（登録商標）抗体が含まれ、ここで、この抗体の抗原結合領域は、例えば、マカクザルに目的の抗原で免疫付与を行うことによって生成される抗体に由来する。本明細書で使用される場合、「ヒト化抗体」は、「キメラ抗体」のサブセットである。

【0050】

非ヒト（例えば、マウス）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含むキメラ抗体である。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、レシピエントのＨＶＲからの残基が、所望される特異性、親和性、及び／または能力を有するマウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）のＨＶＲからの残基で置き換えられている、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの例では、ヒト免疫グロブリンのＦＲ残基は、対応する非ヒト残基に置き換えられる。更に、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にもドナー抗体にも見られない残基を含み得る。これらの改変は、結合親和性などの抗体の性能を更に改良するために行われ得る。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含むことになり、ここで、超可変ループの全てまたは実質的に全てが、非ヒト免疫グロブリン配列のものに対応し、ＦＲ領域の全てまたは実質的に全てが、ヒト免疫グロブリン配列のものであるが、ＦＲ領域には、結合親和性、異性体化、免疫原性などの抗体の性能を向上させる１つ以上の個々のＦＲ残基置換が含まれてもよい。ＦＲにおけるこれらのアミノ酸置換の数は典型的には、Ｈ鎖では６以下、及びＬ鎖では３以下である。ヒト化抗体はまた、任意に、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンのものを含む。更なる詳細については、例えば、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）、及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９９２）を参照されたい。また、例えば、Ｖａｓｗａｎｉ ａｎｄ Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ ＆ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５－１１５（１９９８）、Ｈａｒｒｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ ２３：１０３５－１０３８（１９９５）、Ｈｕｒｌｅ ａｎｄ Ｇｒｏｓｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８－４３３（１９９４）、ならびに米国特許第６，９８２，３２１号及び第７，０８７，４０９号を参照されたい。

【0051】

「ヒト抗体」は、ヒトによって生成された抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体、及び／または本明細書に開示されるヒト抗体を作製する技術のうちの任意のものを用いて作製されたものである。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を具体的に除外する。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリを含む当該技術分野で既知の種々の技術を使用して生成され得る。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１（１９９１）、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１（１９９１）。Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７（１９８５）、Ｂｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６－９５（１９９１）に記載の方法も、ヒトモノクローナル抗体の調製に利用可能である。また、ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８－７４（２００１）を参照されたい。ヒト抗体は、抗原攻撃に応答してそのような抗体を生成するように改変されているが、その内因性遺伝子座が無効化されているトランスジェニック動物、例えば、免疫化異種マウス（ｘｅｎｏｍｉｃｅ）に抗原を投与することにより調製され得る（例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術に関しては、米国特許第６，０７５，１８１号及び同第６，１５０，５８４号を参照されたい）。例えば、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術により生成されるヒト抗体についても、Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７－３５６２（２００６）を参照されたい。

【0052】

本明細書で使用される場合、「超可変領域」、「ＨＶＲ」、または「ＨＶ」という用語は、配列が超可変性であり、及び／または構造的に定義されたループを形成する抗体可変ドメインの領域を指す。概して、抗体は、６つのＨＶＲを含み、３つがＶＨにあり（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）、３つがＶＬにある（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）。天然抗体において、Ｈ３及びＬ３は、これらの６つのＨＶＲのうちで最も高い多様性を呈し、特にＨ３が、抗体に優れた特異性を与える上で特有の役割を果たすと考えられている。例えば、Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １３：３７－４５（２０００）、Ｊｏｈｎｓｏｎ ａｎｄ Ｗｕ ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１－２５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３））を参照されたい。実際には、重鎖のみからなる天然に存在するラクダ科抗体は、軽鎖の不在下で機能的であり、安定している。例えば、Ｈａｍｅｒｓ－Ｃａｓｔｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６３：４４６－４４８（１９９３）及びＳｈｅｒｉｆｆ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．３：７３３－７３６（１９９６）を参照されたい。

【0053】

いくつかのＨＶＲ描写が本明細書で使用され、本明細書に包含される。Ｋａｂａｔ相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＨＶＲは、配列可変性に基づくものであり、最も一般的に使用されている（上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．）。Ｃｈｏｔｈｉａは、そうではなく、構造的ループの位置を指す（Ｃｈｏｔｈｉａ及びＬｅｓｋ Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７））。ＡｂＭ ＨＶＲは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａ構造的ループとの間の妥協案を示し、Ｏｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアにより使用される。「接触」ＨＶＲは、利用可能な複合体結晶構造の分析に基づく。これらのＨＶＲの各々由来の残基が以下に記載される。

【表1】

【0054】

ＨＶＲは、以下のように「伸長ＨＶＲ」を含み得る：ＶＬにおける２４～３６または２４～３４（Ｌ１）、４６～５６または５０～５６（Ｌ２）、及び８９～９７または８９～９６（Ｌ３）、ならびにＶＨにおける２６～３５（Ｈ１）、５０～６５または４９～６５（好ましい実施形態）（Ｈ２）、及び９３～１０２、９４～１０２、または９５～１０２（Ｈ３）。可変ドメイン残基は、これらの伸長ＨＶＲの定義の各々について上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．に従って番号付けされる。

【0055】

「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、本明細書に定義されるＨＶＲ残基以外の可変ドメイン残基である。

【0056】

「Ｋａｂａｔにあるような可変ドメイン残基番号付け」または「Ｋａｂａｔにあるようなアミノ酸位置番号付け」という語句、及びそれらの変形は、上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．における抗体の編集物の重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインに使用される番号付けシステムを指す。この番号付けシステムを使用して、実際の直鎖状アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲもしくはＨＶＲの短縮、またはそれへの挿入に対応するより少ないアミノ酸または追加のアミノ酸を含有し得る。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２後に単一のアミノ酸挿入（Ｋａｂａｔに従って残基５２ａ）を、また重鎖ＦＲ残基８２後に挿入された残基（例えば、Ｋａｂａｔに従って残基８２ａ、８２ｂ、及び８２ｃ等）を含んでもよい。残基のＫａｂａｔ番号付けは、所与の抗体に対して、抗体の配列と「標準の」Ｋａｂａｔによって番号付けされた配列との相同領域での整合によって決定され得る。

【0057】

Ｋａｂａｔナンバリングシステムは、一般に、可変ドメイン内の残基（大体、軽鎖の１～１０７残基及び重鎖の１～１１３残基）に言及する際に使用される（例えば、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））。「ＥＵ番号付けシステム」または「ＥＵ指標」は、一般に、免疫グロブリン重鎖定常領域内の残基に言及する際に使用される（例えば、上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．で報告されているＥＵ指標）。「ＫａｂａｔにあるようなＥＵ指標」は、ヒトＩｇＧ１ ＥＵ抗体の残基番号付けを指す。本明細書に別途述べられない限り、抗体の可変ドメインにおける残基番号への言及は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムによる残基番号付けを意味する。本明細書で別途述べられない限り、抗体の定常ドメインにおける残基番号への言及は、ＥＵ番号付けシステムによる残基番号付けを意味する（例えば、米国特許公開第２０１０－２８０２２７号を参照されたい）。

【0058】

指定された位置における「アミノ酸改変」は、指定された残基の置換もしくは欠失、または指定された残基に隣接する少なくとも１個のアミノ酸残基の挿入を指す。指定された残基に「隣接する」挿入は、その１～２個の残基内への挿入を意味する。挿入は、指定された残基のＮ末端側またはＣ末端側であり得る。本明細書における好ましいアミノ酸改変は、置換である。

【0059】

「親和性成熟」抗体は、その１つ以上のＨＶＲに１つ以上の変化を有し、これらの変化が、それらの変化（複数可）を有しない親抗体と比較して、抗原に対する抗体の親和性の向上をもたらすものである。いくつかの実施形態では、親和性成熟抗体は、標的抗原に対するナノモルまたは更にはピコモルの親和性を有する。親和性成熟抗体は、当該技術分野で公知の手順によって生成される。例えば、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９－７８３（１９９２）は、ＶＨ及びＶＬドメインシャッフリングによる親和性成熟について記載している。ＨＶＲ及び／またはフレームワーク残基のランダム変異誘発は、例えば、Ｂａｒｂａｓ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９１：３８０９－３８１３（１９９４）、Ｓｃｈｉｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｅ １６９：１４７－１５５（１９９５）、Ｙｅｌｔｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：１９９４－２００４（１９９５）、Ｊａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４（７）：３３１０－９（１９９５）、及びＨａｗｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２６：８８９－８９６（１９９２）に記載されている。

【0060】

本明細書で使用される場合、用語「特異的に認識する」または「特異的に結合する」は、生物学的分子を含む分子の異種集団の存在下で標的の存在を決定する、標的と抗体との間の引力または結合などの測定可能な及び再生可能な相互作用を指す。例えば、標的またはエピトープに特異的または優先的に結合する抗体は、他の標的または標的の他のエピトープに結合する場合よりも高い親和性、アビディティで、より容易に、及び／またはより長い持続時間でこの標的またはエピトープに結合する抗体である。例えば、第１の標的に特異的または優先的に結合する抗体（または部位）は、第２の標的に特異的または優先的に結合する場合があり、または結合しない場合があることも理解される。このように、「特異的結合」または「優先的結合」は、排他的な結合を（含み得るが）必ずしも必要とするわけではない。標的に特異的に結合する抗体は、少なくとも約１０^３Ｍ^－１または１０^４Ｍ^－１、時に約１０^５Ｍ^－１または１０^６Ｍ^－１、他の例では約１０^６Ｍ^－１または１０^７Ｍ^－１、約１０^８Ｍ^－１～１０^９Ｍ^－１、または約１０^１０Ｍ^－１～１０^１１Ｍ^－１またはそれ以上の結合定数を有し得る。特定のタンパク質と特異的免疫反応性の抗体を選択するために多様なイムノアッセイ形式が使用され得る。例えば、固相ＥＬＩＳＡイムノアッセイは、タンパク質と特異的免疫反応性のモノクローナル抗体を選択するために日常的に使用される。特異的免疫反応性を決定するために使用され得るイムノアッセイ形式及び条件の説明については、例えば、Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照されたい。

【0061】

「同一性」は、本明細書で使用される場合、アライメントされた配列における任意の特定の位置でアミノ酸残基が配列間で同一であることを示す。「類似性」は、本明細書で使用される場合、アライメントされた配列における任意の特定の位置でアミノ酸残基が配列間で類似するタイプのものであることを示す。例えば、ロイシンは、イソロイシンまたはバリンの代わりに用いられ得る。しばしば互いに置換され得る他のアミノ酸には、以下が含まれるがこれらに限定されない：
－フェニルアラニン、チロシン及びトリプトファン（芳香族側鎖を有するアミノ酸）；
－リジン、アルギニン及びヒスチジン（塩基性側鎖を有するアミノ酸）；
－アスパルテート及びグルタメート（酸性側鎖を有するアミノ酸）；
－アスパラギン及びグルタミン（アミド側鎖を有するアミノ酸）；及び
－システイン及びメチオニン（硫黄含有側鎖を有するアミノ酸）

【0062】

同一性及び類似性の度合いは、容易に計算できる。（例えば、Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｌｅｓｋ，Ａ．Ｍ．，ｅｄ．，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８８、Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ．Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｅ Ｐｒｏｊｅｃｔｓ，Ｓｍｉｔｈ，Ｄ．Ｗ．，ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９３、Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｄａｔａ，Ｐａｒｔ １，Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ａ．Ｍ．，ａｎｄ Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ｈ．Ｇ．，ｅｄｓ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ，１９９４、Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｎ Ｈｅｉｎｊｅ，Ｇ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９８７、及びＳｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｐｒｉｍｅｒ，Ｇｒｉｂｓｋｏｖ，Ｍ．ａｎｄ Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，Ｊ．，ｅｄｓ．，Ｍ Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９１を参照されたい）。

【0063】

本明細書で使用される場合、補体タンパク質と第２のタンパク質との間の「相互作用」は、限定されないが、タンパク質－タンパク質相互作用、物理的相互作用、化学的相互作用、結合、共有結合、及びイオン結合を包含する。本明細書で使用される場合、抗体が２つのタンパク質間の相互作用を破壊し、減少させ、または完全に排除する場合、抗体は、２つのタンパク質間の「相互作用を阻害する」。抗体またはその断片が２つのタンパク質のうちの１つに結合する場合、本開示の抗体、またはその断片は、２つのタンパク質間の「相互作用を阻害する」。

【0064】

「遮断」抗体、「アンタゴニスト」抗体、「阻害」抗体、または「中和」抗体は、それが結合する抗原の１つ以上の生物学的活性、例えば、１つ以上のタンパク質との相互作用を阻害または減少させる抗体である。いくつかの実施形態では、遮断抗体、アンタゴニスト抗体、阻害抗体、または「中和」抗体は、抗原の１つ以上の生物学的活性または相互作用を実質的にまたは完全に阻害する。

【0065】

用語「阻害剤」は、標的生体分子の活性または発現を減少させることによるものかどうかにかかわらず、標的生体分子、例えば、ｍＲＮＡまたはタンパク質の生物学的機能を阻害する能力を有する化合物を指す。阻害剤は、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、小分子、遺伝子編集剤、塩基編集剤、またはエピジェネティック編集剤であり得る。核酸は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｍｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ阻害剤、ｍＲＮＡ、アプタマー、またはアンチセンス核酸であり得る。用語「アンタゴニスト」は、受容体に結合し、受容体の生物学的反応を阻止または減衰させる化合物を指す。用語「阻害剤」はまた、「アンタゴニスト」を指し得る。

【0066】

抗体「エフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域（天然配列Ｆｃ領域またはアミノ酸配列バリアントＦｃ領域）に起因するそれらの生物学的活性を指し、抗体アイソタイプによって異なる。

【0067】

本明細書で使用される場合、用語「親和性」は、２つの物質（例えば、抗体及び抗原）の可逆的結合についての平衡定数を指し、解離定数（ＫＤ）として表される。親和性は、非関連アミノ酸配列に対する抗体の親和性よりも少なくとも１倍高く、少なくとも２倍高く、少なくとも３倍高く、少なくとも４倍高く、少なくとも５倍高く、少なくとも６倍高く、少なくとも７倍高く、少なくとも８倍高く、少なくとも９倍高く、少なくとも１０倍高く、少なくとも２０倍高く、少なくとも３０倍高く、少なくとも４０倍高く、少なくとも５０倍高く、少なくとも６０倍高く、少なくとも７０倍高く、少なくとも８０倍高く、少なくとも９０倍高く、少なくとも１００倍高く、または少なくとも１，０００倍高く、またはそれ以上であり得る。標的タンパク質に対する抗体の親和性は、例えば、約１００ナノモル濃度（ｎＭ）～約０．１ｎＭ、約１００ｎＭ～約１ピコモル濃度（ｐＭ）、または約１００ｎＭ～約１フェムトモル濃度（ｆＭ）またはそれ以上であり得る。本明細書で使用される場合、用語「アビディティ」は、２つ以上の物質の複合体が希釈後に解離することに対する抵抗性を指す。用語「免疫反応性」及び「優先的に結合する」は、抗体及び／または抗原結合断片に関して本明細書で互換的に使用される。

【0068】

用語「結合」は、例えば、塩架橋及び水架橋などの相互作用を含む、共有結合性、静電気性、疎水性、及びイオン性及び／または水素結合相互作用による、２つの分子間の直接的会合を指す。例えば、対象抗Ｃ１ｓ抗体は、補体Ｃ１ｓタンパク質内のエピトープに特異的に結合する。「特異的結合」は、少なくとも約１０^－７Ｍ以上、例えば、５×１０^－７Ｍ、１０^－８Ｍ、５×１０^－８Ｍ、及びそれ以上の親和性での結合を指す。「非特異的結合」は、約１０^－７Ｍ未満の親和性、例えば、１０^－６Ｍ、１０^－５Ｍ、１０^－４Ｍ等の親和性での結合を指す。

【0069】

用語「ｋ_ｏｎ」は、本明細書で使用される場合、抗原に対する抗体の会合についての速度定数を指すことが意図されている。

【0070】

用語「ｋ_ｏｆｆ」は、本明細書で使用される場合、抗体／抗原複合体からの抗体の解離についての速度定数を指すことが意図されている。

【0071】

用語「Ｋ_Ｄ」は、本明細書で使用される場合、抗体－抗原相互作用の平衡解離定数を指すことが意図されている。

【0072】

本明細書で使用される場合、ペプチド、ポリペプチド、または抗体配列に関して、「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」及び「相同性」は、配列同一性最大パーセントを達成するために、配列を整合させ、必要に応じてギャップを導入した後の、配列同一性の一部としていずれの保存的置換も考慮しない、特定のペプチドもしくはポリペプチド配列におけるアミノ酸残基と同一である、候補配列におけるアミノ酸残基の割合を指す。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的のためのアライメントは、例えば、公共に利用可能なコンピュータソフトウェア、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮまたはＭＥＧＡＬＩＧＮ（商標）（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを使用して、当該技術分野における技術内の様々な方法で達成され得る。当業者は、比較される配列の全長にわたって最大のアライメントを達成するのに必要な当該技術分野で知られている任意のアルゴリズムを含む、アライメントを測定するための適切なパラメータを決定し得る。

【0073】

「生物学的サンプル」は、個体から得られる多様なサンプルタイプを包含し、診断またはモニタリングアッセイにおいて使用され得る。その定義は、血液及び生物学的起源の他の液体サンプル、固体組織サンプル、例えば、生検試料または組織培養物またはそれに由来する細胞及びその子孫を包含する。その定義にはまた、それらの調達後に任意の方法で、例えば、ポリヌクレオチドなどのある特定の成分について試薬での処置、可溶化、または濃縮によって操作されたサンプルが含まれる。用語「生物学的サンプル」は、臨床サンプルを包含し、培養細胞、細胞上清、細胞ライセート、血清、血漿、生体液、及び組織サンプルも含む。用語「生物学的サンプル」には、尿、唾液、脳脊髄液、間質液、眼液、滑液、血液分画、例えば、血漿及び血清などが含まれる。用語「生物学的サンプル」にはまた、固体組織サンプル、組織培養サンプル、及び細胞サンプルが含まれる。

【0074】

「単離された」核酸分子は、それが生成された環境において通常関連する少なくとも１つの混入核酸分子から同定及び分離された核酸分子である。好ましくは、単離された核酸は、生成環境に関連する全ての成分と会合しない。本明細書におけるポリペプチド及び抗体をコードする単離された核酸分子は、天然に見られる形態または状況以外の形態である。そのため、単離された核酸分子は、細胞において天然に存在する本明細書における任意のポリペプチド及び抗体をコードする核酸とは区別される。

【0075】

用語「ベクター」は、本明細書で使用される場合は、それが連結された別の核酸を輸送することが可能な核酸分子を指すことが意図されている。ベクターの１つのタイプは、「プラスミド」であり、これは、追加のＤＮＡセグメントがライゲーションされ得る環状二本鎖ＤＮＡを指す。ベクターの別のタイプは、ファージベクターである。ベクターの別のタイプは、ウイルスベクターであり、この場合、追加のＤＮＡセグメントがウイルスゲノム内にライゲーションされ得る。ある特定のベクターは、それらが導入される宿主細胞において自己複製が可能である（例えば、細菌の複製起点を有する細菌ベクター及びエピソーム哺乳動物ベクター）。他のベクター（例えば、非エピソーム哺乳動物ベクター）は、宿主細胞に導入すると宿主細胞のゲノムに組み込まれ得、それにより宿主ゲノムとともに複製される。更に、ある特定のベクターは、それらが機能可能に連結された遺伝子の発現を指示することが可能である。そのようなベクターは、本明細書で「組換え発現ベクター」、または単純に「発現ベクター」と称される。通常、組換えＤＮＡ技術において有用な発現ベクターはしばしば、プラスミドの形態である。本明細書において、「プラスミド」及び「ベクター」は、プラスミドが最も一般的に使用される形態のベクターであるため互換的に使用され得る。

【0076】

本明細書で互換的に使用される「ポリヌクレオチド」、または「核酸」は、任意の長さのヌクレオチドのポリマーを指し、ＤＮＡ及びＲＮＡを含む。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、改変ヌクレオチドまたは塩基、及び／またはそれらのアナログ、またはＤＮＡもしくはＲＮＡポリメラーゼによってまたは合成反応によってポリマーに組み込まれ得る任意の基質であり得る。ポリヌクレオチドは、改変ヌクレオチド、例えば、メチル化ヌクレオチド及びそれらのアナログを含み得る。存在する場合、ヌクレオチド構造に対する改変は、ポリマーのアセンブリの前または後に付与され得る。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド成分によって隔てられていてもよい。ポリヌクレオチドは、合成後に生成される改変（複数可）、例えば、標識へのコンジュゲーションを含み得る。他のタイプの改変には、例えば、天然に存在するヌクレオチドのうちの１つ以上をアナログと置換する「キャップ」、ヌクレオチド間改変、例えば、非電荷性結合（例えば、メチルホスホン酸塩、ホスホトリエステル、ホスホアミデート、カルバメートなど）によるもの、及び電荷性結合（例えば、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエートなど）によるもの、例えば、タンパク質（例えば、ヌクレアーゼ、毒素、抗体、シグナルペプチド、ポリ－Ｌ－リジンなど）などの懸垂部位を含むもの、挿入剤（例えば、アクリジン、ソラーレンなど）によるもの、キレート剤（例えば、金属、放射活性金属、ホウ素、酸化金属など）を含むもの、アルキル化剤を含むもの、改変結合（例えば、アルファアノマー核酸など）によるもの、ならびにポリヌクレオチド（複数可）の未改変形態が含まれる。更に、糖内に通常存在するヒドロキシル基のうちのいずれかは、例えば、ホスホン酸基、リン酸基により置き換えられるか、標準的な保護基により保護されるか、もしくは活性化されて追加のヌクレオチドへの追加の結合を生成してもよく、または固体もしくは半固体支持体にコンジュゲーションされてもよい。５’及び３’末端ＯＨは、リン酸化され、またはアミンもしくは１～２０個の炭素原子の有機キャッピング基部位と置換され得る。他のヒドロキシルもまた、標準的な保護基に誘導体化され得る。ポリヌクレオチドは、例えば、２’－Ｏ－メチル－、２’－Ｏ－アリル、２’－フルオロ－または２’－アジド－リボース、炭素環糖アナログ、α－アノマー糖、エピマー糖、例えば、アラビノース、キシロースまたはリキソース、ピラノース糖、フラノース糖、セドヘプツロース、アクリル酸アナログ、及び塩基性ヌクレオシドアナログ、例えば、メチルリボシドを含む、当該技術分野において一般的に知られているリボースまたはデオキシリボース糖のアナログ形態を含み得る。１つ以上のホスホジエステル結合は、代替連結基によって置き換えられ得る。これらの代替連結基には、ホスフェートがＰ（Ｏ）Ｓ（「チオエート」）、Ｐ（Ｓ）Ｓ（「ジチオエート」）、（Ｏ）ＮＲ_２（「アミデート」）、Ｐ（Ｏ）Ｒ、Ｐ（Ｏ）ＯＲ’、ＣＯ、またはＣＨ_２（「ホルムアセタール」）（式中、各ＲまたはＲ’は、独立して、Ｈ、またはエーテル（－Ｏ－）結合を任意に含有する置換もしくは非置換アルキル（１～２０Ｃ）、アリール、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニルまたはアラルキルである）によって置き換えられた実施形態が含まれるがこれらに限定されない。ポリヌクレオチドにおける全ての結合が同一である必要はない。先述の記載は、ＲＮＡ及びＤＮＡを含む、本明細書で言及される全てのポリヌクレオチドに適用される。

【0077】

本明細書で使用される「担体」には、用いられる投薬量及び濃度でそれに曝露されている細胞または哺乳動物に対して非毒性の薬学的に許容可能な担体、賦形剤、または安定化剤が含まれる。しばしば、生理的に許容可能な担体は、水性ｐＨ緩衝液である。生理的に許容可能な担体の例には、緩衝液、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸；アスコルビン酸を含む抗酸化剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、またはリジン；グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む単糖、二糖、及び他の炭水化物；キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；糖アルコール、例えば、マンニトールまたはソルビトール；塩形成対イオン、例えば、ナトリウム；及び／または非イオン性界面活性剤、例えば、ＴＷＥＥＮ（商標）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及びＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）が含まれる。

【0078】

「遺伝子編集剤」は、本明細書で使用される場合、その代表例として、Ｃａｓ９及びＣｐｆｌ ｇＲＮＡ等のＣＲＩＳＰＲ関連ヌクレアーゼ、エンドヌクレアーゼのＡｒｇｏｎａｕｔｅファミリー、クラスター化された規則的に間隔が空いた短い回文反復（ＣＲＩＳＰＲ）ヌクレアーゼ、亜鉛フィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、メガヌクレアーゼ、他のエンドヌクレアーゼ及び／またはエキソヌクレアーゼが挙げられる、遺伝子編集剤として定義される。Ｓｃｈｉｆｆｅｒ，２０１２，Ｊ Ｖｉｒｏｌ ８８（１７）：８９２０－８９３６（参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい。

【0079】

本明細書で使用される「ＲＮＡ干渉剤」は、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）によって標的バイオマーカー遺伝子の発現を妨害または阻害する任意の薬剤として定義される。そのようなＲＮＡ干渉剤には、本発明の標的バイオマーカー遺伝子に相同なＲＮＡ分子またはその断片、小分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、及びＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）による標的バイオマーカー核酸の発現を妨げるかまたは阻害する小分子を含む核酸分子が含まれるが、これらに限定されない。

【0080】

「ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）」は、標的バイオマーカー核酸と同一もしくは非常に類似の配列のＲＮＡの発現または導入が、その標的遺伝子から転写されたメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）の配列特異的分解または特異的転写後遺伝子サイレンシング（ＰＴＧＳ）（Ｃｏｂｕｒｎ，Ｇ．ａｎｄ Ｃｕｌｌｅｎ，Ｂ．（２００２）Ｊ．ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ７６（１８）：９２２５を参照されたい）をもたらし、それによって標的バイオマーカー核酸の発現を阻害する、進化的に保存されたプロセスである。一実施形態では、ＲＮＡは、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）である。このプロセスは、植物、無脊椎動物、及び哺乳動物細胞に記載されている。自然界では、ＲＮＡｉは、ｄｓＲＮＡ特異的エンドヌクレアーゼＤｉｃｅｒによって開始され、これは、ｓｉＲＮＡと呼ばれる二本鎖断片への長いｄｓＲＮＡのプロセッシブな切断を促進する。ｓｉＲＮＡは、標的ｍＲＮＡを認識し、切断するタンパク質複合体に組み込まれる。ＲＮＡｉはまた、標的バイオマーカー核酸の発現を阻害するかまたはサイレンシングするために、核酸分子、例えば、合成ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、または他のＲＮＡ干渉剤を導入することによって開始され得る。本明細書で使用される場合、「標的バイオマーカー核酸発現の阻害」または「マーカー遺伝子発現の阻害」は、標的バイオマーカー核酸によってコードされる標的バイオマーカー核酸もしくはタンパク質の発現またはタンパク質活性またはレベルのいずれかの減少を含む。減少は、標的バイオマーカー核酸の発現、またはＲＮＡ干渉剤によって標的化されていない標的バイオマーカー核酸によってコードされるタンパク質の活性もしくはレベルと比較して、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または９９％以上であってよい。

【0081】

ＲＮＡｉに加えて、ゲノム編集は、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、及び／またはＣ１ｓ等の補体経路成分等の、対象となるバイオマーカーの構成的または誘発されるノックアウトまたは突然変異等の、対象となるバイオマーカーのコピー数または遺伝子配列を調節するために使用され得る。例えば、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系は、ゲノム核酸の正確な編集のために（例えば、非機能的またはヌル変異を作製するために）使用され得る。そのような実施形態では、ＣＲＩＳＰＲガイドＲＮＡ及び／またはＣａｓ酵素が、発現されてもよい。例えば、ガイドＲＮＡのみを含有するベクターは、Ｃａｓ９酵素トランスジェニック動物または細胞に投与することができる。同様の戦略が使用され得る（例えば、デザイナー亜鉛フィンガー、転写活性化因子様エフェクター（ＴＡＬＥ）またはホーミングメガヌクレアーゼ）。そのようなシステムは、当該技術分野において周知である（例えば、米国特許第８，６９７，３５９号、Ｓａｎｄｅｒ ａｎｄ Ｊｏｕｎｇ（２０１４）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．３２：３４７－３５５、Ｈａｌｅ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｃｅｌｌ １３９：９４５－９５６、Ｋａｒｇｉｎｏｖ ａｎｄ Ｈａｎｎｏｎ（２０１０）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ ３７：７、米国特許公開第２０１４／００８７４２６号及び同第２０１２／０１７８１６９号、Ｂｏｃｈ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２９：１３５－１３６、Ｂｏｃｈ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２６：１５０９－１５１２、Ｍｏｓｃｏｕ ａｎｄ Ｂｏｇｄａｎｏｖｅ（２００９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２６：１５０１、Ｗｅｂｅｒ ｅｔ ａｌ．（２０１１）ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ６：ｅ１９７２２、Ｌｉ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．３９：６３１５－６３２５、Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２９：１４９－１５３、Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２９：１４３－１４８、Ｌｉｎ ｅｔ ａｌ．（２０１４）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．４２：ｅ４７を参照されたい）。そのような遺伝子戦略は、当該技術分野でよく知られている方法に従って、構成的発現系または誘発性発現系を使用することができる。

【0082】

「Ｐｉｗｉ相互作用ＲＮＡ（ｐｉＲＮＡ）」は、非コードＲＮＡ小分子の最大のクラスである。ｐｉＲＮＡは、ｐｉｗｉタンパク質との相互作用を通じてＲＮＡ－タンパク質複合体を形成する。これらのｐｉＲＮＡ複合体は、生殖系細胞、特に精子形成における生殖系細胞におけるレトロトランスポゾン及び他の遺伝子要素のエピジェネティック遺伝子サイレンシング及び転写後遺伝子サイレンシングの両方に関連している。これらは、サイズ（２１～２４ｎｔではなく２６～３１ｎｔ）、配列保存性が欠如している、及び複雑性が増加している点でマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）とは異なる。しかしながら、他の小分子ＲＮＡと同様に、ｐｉＲＮＡは、遺伝子サイレンシング、具体的にはトランスポゾンのサイレンシングに関与していると考えられている。ｐｉＲＮＡの大部分は、トランスポゾン配列に対してアンチセンスであり、これは、トランスポゾンがｐｉＲＮＡ標的であることを示唆している。哺乳動物では、トランスポゾンサイレンシングにおけるｐｉＲＮＡの活性は、胚の発達の間に最も重要であるようであり、Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ及びヒトの両方において、ｐｉＲＮＡは、精子形成に必要である。ｐｉＲＮＡは、ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）の形成を介したＲＮＡサイレンシングにおける役割を有する。

【0083】

「アプタマー」は、特定の標的分子に結合するオリゴヌクレオチドまたはペプチド分子である。「核酸アプタマー」は、インビトロ選択の反復ラウンドを通じて、または等価的に、ＳＥＬＥＸ（指数関数的濃縮によるリガンドの系統的進化）を通じて操作されて、小分子、タンパク質、核酸、更には細胞、組織及び生物等の様々な分子標的に結合する核酸種である。「ペプチドアプタマー」は、特定の標的分子に結合するように選択または操作される人工タンパク質である。これらのタンパク質は、タンパク質骨格によって示される可変配列の１つ以上のペプチドループからなる。これらは、典型的には、組み合わせライブラリから単離され、多くの場合、その後、定向変異または可変領域変異誘発及び選択のラウンドによって改善される。ペプチドアプタマーの進化である「アフィマータンパク質」は、特定の標的タンパク質に対して高親和性結合面を提供するペプチドループを示すように操作された、高度に安定した小タンパク質である。シスタチンのシステインプロテアーゼ阻害剤ファミリーに由来する、低分子量１２～１４ｋＤａのタンパク質である。アプタマーは、バイオテクノロジー及び治療用途に有用であり、一般的に使用される生体分子である抗体に匹敵する分子認識特性を提供する。それらの識別認識に加え、アプタマーは、試験管内で完全に操作することができ、化学合成によって容易に生成され、所望の貯蔵特性を有し、治療用途において免疫原性がほとんどまたはまったく誘発されないので、抗体よりも利点がある。

【0084】

本明細書で「低分子干渉ＲＮＡ」とも称される「短鎖干渉ＲＮＡ」（ｓｉＲＮＡ）は、例えば、ＲＮＡｉによる標的バイオマーカー核酸の発現を阻害するように機能する薬剤として定義される。ｓｉＲＮＡは、化学的に合成されてもよく、インビトロ転写によって産生されてもよいし、宿主細胞内で産生されてもよい。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、約１５～約４０ヌクレオチド長、好ましくは約１５～約２８ヌクレオチド長、より好ましくは約１９～約２５ヌクレオチド長、及びより好ましくは約１９、２０、２１、または２２ヌクレオチド長の二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）分子であり、約０、１、２、３、４、または５ヌクレオチドの長さを有する各鎖上に３’及び／または５’オーバーハングを含有してもよい。オーバーハングの長さは、２本の鎖間で独立しており、すなわち、１つの鎖上のオーバーハングの長さは、第２の鎖上のオーバーハングの長さに依存しない。好ましくは、ｓｉＲＮＡは、標的メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）の分解または特異的転写後遺伝子サイレンシング（ＰＴＧＳ）を通じて、ＲＮＡ干渉を促進することが可能である。

【0085】

「予防すること」という用語は、当該技術分野で認識されており、筋ジストロフィー等の状態に関連して使用される場合、当該技術分野で十分に理解されており、組成物を投与されない対象と比較して、対象における医学的状態の１つ以上の症状の頻度もしくは重症度を低下させるか、またはその発症を遅らせるための組成物の投与を含む。したがって、筋ジストロフィーの予防は、例えば、例えば、統計的及び／または臨床的に有意な量によって、治療を受けなかった対照集団と比較して、治療を受けた患者の集団における筋力を保持することを含む。同様に、筋ジストロフィーの予防は、治療を受けていない患者に対して、治療を受けている患者が筋ジストロフィーまたは関連する症状を発症する可能性を低減することを含む。

【0086】

本明細書で使用される「進行を遅延またはブロックする」という用語は、筋ジストロフィーなどの状態の速度を遅くするか、または進行を停止させることを指す。疾患の進行は、疾患の自然経過を記述し、一定期間にわたって機能的転帰を測定及びモニターすることによって評価される。例えば、疾患が進行するにつれて、筋力低下及び消耗（萎縮）が進行する。本明細書に記載される組成物の投与は、筋肉の衰弱及び消耗の進行を遅延させ、またはブロックすることができる。

【0087】

用語「対象」は、本明細書で使用される場合、生存している哺乳動物を指し、用語「患者」と互換的に使用され得る。哺乳動物の例には、哺乳動物クラスの任意のメンバー：ヒト、非ヒト霊長類、例えば、チンパンジー、及び他の類人猿及びサル種；牧場動物、例えば、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタ；家庭動物、例えば、ウサギ、イヌ、及びネコ；齧歯類、例えば、ラット、マウス及びモルモットを含む実験動物などが含まれるがこれらに限定されない。その用語は、特定の年齢または性別を示さない。

【0088】

本明細書で使用される場合、用語「処置すること」または「処置」は、病態の症状、臨床的兆候、または根底にある病理を減少、停止、または逆行させて、対象の病態を安定化または改善することまたは対象の病態が対象が処置を受けなかった場合と同じ程度悪化する可能性を低下させることを含む。

【0089】

対象の処置方法に関して化合物の「治療的有効量」という用語は、（哺乳動物、好ましくはヒトに対する）所望の投薬レジメンの一部として投与される場合、例えば、任意の医学的処置に適用可能な妥当な利益／リスク比で、疾患または病態が処置されるために、または化粧品目的のために臨床的に許容可能な標準に従う、症状を軽減する、病態を改善する、または疾患病態の発症を遅らせる調製物における化合物（複数可）の量を指す。本明細書における治療的有効量は、患者の疾患状態、年齢、性別、及び体重、ならびに個体において所望の反応を引き起こすための抗体の能力などの要因に応じて変わり得る。

【0090】

本明細書で使用される場合、特定の疾患、障害、または病態を発症する「リスクのある」個体は、検出可能な疾患または疾患の症状を示してもいなくてもよく、また、本明細書に記載の処置方法の前に検出可能な疾患または疾患の症状を示してもいなくてもよい。「リスクのある」は、個体が、当該技術分野で知られているように、特定の疾患、障害、または病態の発症と相関する測定可能なパラメータである、１つ以上のリスク要因を有することを意味する。これらのリスク要因のうちの１つ以上を有する個体は、これらのリスク要因のうちの１つ以上を有さない個体よりも特定の疾患、障害、または病態を発症する可能性が高い。

【0091】

「慢性」投与は、初期の治療効果（活性）を長期間維持するように、急性様式とは対照的に連続した医薬品（複数可）の投与を指す。「間欠的」投与は、中断することなく連続的に投与されるのではなく、事実上周期的／定期的である処置を指す。

【0092】

本明細書で使用される場合、別の化合物または組成物と「併せた」投与は、同時投与及び／または異なる時点での投与を含む。併せた投与はまた、異なる投薬頻度または間隔、及び同じ投与経路または異なる投与経路を使用することを含む、共製剤としての投与または別々の組成物としての投与を包含する。

【0093】

別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する当業者が一般に理解する意味と同一の意味を有する。本明細書に記載のものと類似または同等の任意の方法及び物質も本発明の実践または試験において使用され得るが、好ましい方法及び物質をこれより説明する。本明細書に言及される全ての刊行物は、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ ３ｄ ｅｄｉｔｉｏｎ（２００１）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌ，ｅｔ ａｌ．ｅｄｓ．，（２００３））、ｔｈｅ ｓｅｒｉｅｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）：ＰＣＲ ２：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｍ．Ｊ．ＭａｃＰｈｅｒｓｏｎ，Ｂ．Ｄ．Ｈａｍｅｓ ａｎｄ Ｇ．Ｒ．Ｔａｙｌｏｒ ｅｄｓ．（１９９５）），Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ，ｅｄｓ．（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，ａｎｄ Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，ｅｄ．（１９８７））、Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ，ｅｄ．，１９８４）、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ；Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｎｏｔｅｂｏｏｋ（Ｊ．Ｅ．Ｃｅｌｌｉｓ，ｅｄ．，１９９８）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ），ｅｄ．，１９８７）、Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｊ．Ｐ．Ｍａｔｈｅｒ ａｎｄ Ｐ．Ｅ．Ｒｏｂｅｒｔｓ，１９９８）Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ、Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（Ａ．Ｄｏｙｌｅ，Ｊ．Ｂ．Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，ａｎｄ Ｄ．Ｇ．Ｎｅｗｅｌｌ，ｅｄｓ．，１９９３－８）Ｊ．Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．Ｗｅｉｒ ａｎｄ Ｃ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ，ｅｄｓ．）、Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ Ｖｅｃｔｏｒｓ ｆｏｒ Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｃｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．Ｍｉｌｌｅｒ ａｎｄ Ｍ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ，ｅｄｓ．，１９８７）、ＰＣＲ：Ｔｈｅ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ，（Ｍｕｌｌｉｓ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，１９９４）、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，１９９１）、Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９９９）、Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃ．Ａ．Ｊａｎｅｗａｙ ａｎｄ Ｐ．Ｔｒａｖｅｒｓ，１９９７）、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｐ．Ｆｉｎｃｈ，１９９７）、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｄ．Ｃａｔｔｙ．，ｅｄ．，ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ，１９８８－１９８９）、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐ．Ｓｈｅｐｈｅｒｄ ａｎｄ Ｃ．Ｄｅａｎ，ｅｄｓ．，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，２０００）、Ｕｓｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（Ｅ．Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｄ．Ｌａｎｅ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，１９９９）、Ｔｈｅ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｍ．Ｚａｎｅｔｔｉ ａｎｄ Ｊ．Ｄ．Ｃａｐｒａ，ｅｄｓ．，Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９９５）、及びＣａｎｃｅｒ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ（Ｖ．Ｔ．ＤｅＶｉｔａ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｊ．Ｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９３）に記載される広く利用されている方法論等、これらの刊行物が引用されるものに関連して、方法及び／または材料を開示及び説明するために、参照により本明細書に組み込まれる。

【0094】

古典的補体阻害剤
本開示は、広義には、デュシェンヌ型筋ジストロフィー（「ＤＭＤ」）、ベッカー型筋ジストロフィー（「ＢＭＤ」）、肢帯型筋ジストロフィー（ＬＧＭＤ）（サルコグリカノパチー、ジストログリカノパチー及びジスフェルリンパチーを含む）、ＶＩ型コラーゲン関連障害（ベスレム型ミオパチー及びウルリッヒ型先天性筋ジストロフィー（ＵＣＭＤ）を含む）、先天性筋ジストロフィー（ＣＭＤ）及び先天性ミオパチー、ならびに遠位性筋ジストロフィー／ミオパチー（三好型ミオパチーを含む）の予防、発症リスクの低減、進行の遅延もしくはブロック、または治療方法に関する。方法は、対象に、Ｃ１複合体阻害剤、Ｃ１ｑ阻害剤、Ｃ１ｓ阻害剤、Ｃ１ｒ阻害剤、またはＣ１複合体阻害剤等の古典的補体経路の阻害剤を投与することを含む。阻害剤は、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、小分子、遺伝子編集剤、塩基編集剤、またはエピジェネティック編集剤であり得る。核酸は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｍｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ阻害剤、ｍＲＮＡ、アプタマー、またはアンチセンス核酸であり得る。阻害剤は、標的生体分子の活性または発現を減少させることによるものかどうかにかかわらず、標的生体分子の生物学的機能を阻害する能力を有する化合物を指し得る。

【0095】

阻害剤は、補体カスケードの活性化を阻止し得、特定の補体タンパク質の発現を阻止し得、補体活性化を誘導するシグナル伝達分子を妨害し得、補体阻害剤の発現を上方制御し得、また、そうでなければ補体の役割を妨害する。

【0096】

Ｃ１複合体、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、もしくはＣ１ｓ、または抗Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、もしくはＣ１ｓ抗体の可変領域の分子構造に基づいて、分子モデリング及び合理的分子設計が使用されて、抗体の結合領域の分子構造を模倣し、及び／またはＣ１複合体、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、もしくはＣ１ｓの活性を阻害する小分子が生成され、スクリーニングされ得る。これらの小分子は、ペプチド、ペプチド模倣物、オリゴヌクレオチド、または有機化合物であり得る。模倣分子は、補体活性化の阻害剤として使用することができる。代替的には、コンビナトリアル化合物のライブラリから好適な小分子を単離するためにその分野で一般的に使用される大規模スクリーニング手順が使用され得る。

【0097】

補体の活性を阻害するいくつかの分子が知られている。既知の化合物に加えて、好適な阻害剤は、本明細書に記載の方法によってスクリーニングすることができる。上述のように、正常細胞は、補体活性をブロックするタンパク質、例えば、ＣＤ５９、Ｃ１阻害剤等を産生することができる。本開示のいくつかの実施形態では、補体は、かかるポリペプチドをコードする遺伝子の発現を上方制御することによって阻害される。

【0098】

補体活性化を阻止する分子の修飾も当該技術分野で知られている。例えば、そのような分子には、可溶性ＣＲ１等の修飾された補体受容体が含まれるが、これらに限定されない。ＣＲ１の最も一般的なアロタイプの成熟タンパク質は、１９９８個のアミノ酸残基：１９３０個の残基の細胞外ドメイン、２５個の残基の膜貫通領域、及び４３個の残基の細胞質ドメインを含有する。細胞外ドメイン全体は、短いコンセンサス反復（ＳＣＲ）または補体制御タンパク質反復（ＣＣＰＲ）と称される３０個の反復単位から構成され、それぞれが６０～７０個のアミノ酸残基からなる。最近のデータは、Ｃ１ｑがヒトＣＲ１に特異的に結合することを示す。したがって、ＣＲ１は、３つ全ての補体オプソニン、すなわちＣ３ｂ、Ｃ４ｂ、及びＣ１ｑを認識する。膜貫通ドメイン及び細胞質ドメインを欠く組換えヒトＣＲ１（ｓＣＲ１）の可溶性バージョンが産生され、天然ＣＲ１の全ての既知の機能を保持することが示されている。いくつかのタイプのヒトＣ１ｑ受容体（Ｃ１ｑＲ）が記載されている。これらには、Ｃ１ｑのコラーゲン様ドメインに結合するため、ｃＣ１ｑＲと称される、遍在的に分布する６０～６７ｋＤａ受容体が含まれる。このＣ１ｑＲバリアントは、単球貧食作用を調節する１２６ｋＤａ受容体であるカルレチキュリンであることが示された。ｇＣ１ｑＲは、膜結合分子ではなく、Ｃ１ｑの球状領域に対する親和性を有する分泌型可溶性タンパク質であり、補体活性化の流体相調整因子として機能し得る。

【0099】

崩壊促進因子（ＤＡＦ）（ＣＤ５５）は、４つのＳＣＲ、及び広範囲のＯ－結合型グリコシル化が可能なセリン／トレオニン濃縮ドメインから構成される。ＤＡＦは、グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）アンカーによって細胞膜に結合され、Ｃ４ｂ及びＣ３ｂに結合するその能力を通じて、Ｃ３及びＣ５変換酵素を解離することによって作用する。可溶性バージョンのＤＡＦ（ｓＤＡＦ）は、補体活性化を阻害することが示されている。

【0100】

セリンプロテアーゼ阻害剤の「セルピン」ファミリーのメンバーであるＣ１阻害剤は、流体相Ｃ１活性化を防止する重グリコシル化血漿タンパク質である。Ｃ１阻害剤は、Ｃ１ｒ及びＣ１ｓの活性部位を遮断し、それらをＣ１ｑから解離することによって、補体活性化の古典的経路を調節する。

【0101】

補体活性化のペプチド阻害剤としては、Ｃ５ａが挙げられ、他の阻害分子としては、フカンが挙げられる。

【0102】

本開示で挙げられる全ての配列は、米国特許第１０，３１６，０８１号、米国特許出願第１４／８９０，８１１号、米国特許第８，８７７，１９７号、米国特許第９，７０８，３９４号、米国特許第１０，７２３，７８８号、米国特許第９，５６２，１０６号、米国特許第１０，４５０，３８２号、米国特許第１０，４５７，７４５号、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１８／０２２４６２号（これらの各々は、それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。

【0103】

抗Ｃ１複合体抗体
他の実施形態では、古典的補体経路の阻害剤は、抗Ｃ１複合体抗体であり得、任意選択的に、抗Ｃ１複合体抗体は、Ｃ１ｒもしくはＣ１ｓ活性化を阻害するか、またはＣ２もしくはＣ４に作用するそれらの能力を妨げ、例えば、抗Ｃ１複合体抗体は、Ｃ１複合体内の組み合わせエピトープに結合し、当該組み合わせエピトープは、Ｃ１ｑ及びＣ１ｓの両方、Ｃ１ｑ及びＣ１ｒの両方、Ｃ１ｒ及びＣ１ｓの両方、またはＣ１ｑ、Ｃ１ｒ及びＣ１ｓのそれぞれのアミノ酸を含む。抗体は、モノクローナル抗体であり得る。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｃ４の切断を阻害し、かつＣ２の切断を阻害しないか、またはＣ２の切断を阻害し、かつＣ４の切断を阻害しない。

【0104】

いくつかの実施形態では、抗体は、哺乳動物Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、もしくはＣ１ｓに結合するか、またはヒトＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、もしくはＣ１ｓに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、哺乳動物Ｃ１複合体に結合する。

【0105】

抗補体Ｃ１ｑ抗体
本明細書で開示される抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑの強力な阻害剤であり、任意の期間にわたってＣ１ｑ機能の継続的阻害のために投薬され、次いでその活性が重要であり得る時点で正常なＣ１ｑ機能の回復を可能にするために任意選択的に停止される。動物研究において本明細書に開示される抗Ｃ１ｑ抗体で得られた結果は、ヒト化またはヒト抗体、ならびにその断片及び／または誘導体を用いて臨床に容易に進展させることができる。

【0106】

Ｃ１ｑは、１８個のポリペプチド鎖（６個のＣ１ｑのＡ鎖、６個のＣ１ｑのＢ鎖、及び６個のＣ１ｑのＣ鎖）からなる４６０ｋＤａの大型多量体タンパク質である。Ｃ１ｒ及びＣ１ｓ補体タンパク質は、Ｃ１ｑ尾部領域に結合してＣ１複合体（Ｃ１ｑｒ_２ｓ_２）を形成する。

【0107】

本開示の抗Ｃ１ｑ抗体は、古典的補体活性化経路のＣ１複合体における補体因子Ｃ１ｑ及び／またはＣ１ｑを特異的に認識する。結合した補体因子は、限定されないが、任意の哺乳動物生物、例えば、ヒト、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ラクダ、ヒツジ、ヤギ、またはブタを含む補体系を有する任意の生物に由来し得る。

【0108】

本明細書で使用される場合、「Ｃ１複合体」は、限定されないが、１つのＣ１ｑタンパク質、２つのＣ１ｒタンパク質、及び２つのＣ１ｓタンパク質を含み得るタンパク質複合体（例えば、Ｃ１ｑｒ^２ｓ^２）を指す。

【0109】

本明細書に開示される抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１複合体形成を阻害し得る。

【0110】

本明細書で使用される場合、「補体因子Ｃ１ｑ」は、野生型配列及び天然に存在するバリアント配列の両方を指す。

【0111】

本開示の抗体によって認識される補体因子Ｃ１ｑの非限定的な例は、３つのポリペプチド鎖Ａ、Ｂ、及びＣを含むヒトＣ１ｑである：
Ｃ１ｑ、鎖Ａ（ホモサピエンス）、アクセッション番号 タンパク質
データベース：ＮＰ＿０５７０７５．１；ＧｅｎＢａｎｋ番号：ＮＭ＿０１５９９１：
＞ｇｉ｜７７０５７５３｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿０５７０７５．１｜補体Ｃ１ｑ
サブコンポーネントサブユニットＡ前駆体［ホモサピエンス］
（配列番号１）
ＭＥＧＰＲＧＷＬＶＬＣＶＬＡＩＳＬＡＳＭＶＴＥＤＬＣＲＡＰＤＧＫＫＧＥＡＧＲＰＧＲＲＧＲＰＧＬＫＧＥＱＧＥＰＧＡＰＧＩＲＴＧＩＱＧＬＫＧＤＱＧＥＰＧＰＳＧＮＰＧＫＶＧＹＰＧＰＳＧＰＬＧＡＲＧＩＰＧＩＫＧＴＫＧＳＰＧＮＩＫＤＱＰＲＰＡＦＳＡＩＲＲＮＰＰＭＧＧＮＶＶＩＦＤＴＶＩＴＮＱＥＥＰＹＱＮＨＳＧＲＦＶＣＴＶＰＧＹＹＹＦＴＦＱＶＬＳＱＷＥＩＣＬＳＩＶＳＳＳＲＧＱＶＲＲＳＬＧＦＣＤＴＴＮＫＧＬＦＱＶＶＳＧＧＭＶＬＱＬＱＱＧＤＱＶＷＶＥＫＤＰＫＫＧＨＩＹＱＧＳＥＡＤＳＶＦＳＧＦＬＩＦＰＳＡ。

【0112】

Ｃ１ｑ、鎖Ｂ（ホモサピエンス）、アクセッション番号 タンパク質
データベース：ＮＰ＿０００４８２．３；ＧｅｎＢａｎｋ Ｎｏ．：ＮＭ＿０００４９１．３：
＞ｇｉ｜８７２９８８２８｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿０００４８２．３｜補体Ｃｌｑ
サブコンポーネントサブユニットＢ前駆体［ホモサピエンス］
（配列番号２）
ＭＭＭＫＩＰＷＧＳＩＰＶＬＭＬＬＬＬＬＧＬＩＤＩＳＱＡＱＬＳＣＴＧＰＰＡＩＰＧＩＰＧＩＰＧＴＰＧＰＤＧＱＰＧＴＰＧＩＫＧＥＫＧＬＰＧＬＡＧＤＨＧＥＦＧＥＫＧＤＰＧＩＰＧＮＰＧＫＶＧＰＫＧＰＭＧＰＫＧＧＰＧＡＰＧＡＰＧＰＫＧＥＳＧＤＹＫＡＴＱＫＩＡＦＳＡＴＲＴＩＮＶＰＬＲＲＤＱＴＩＲＦＤＨＶＩＴＮＭＮＮＮＹＥＰＲＳＧＫＦＴＣＫＶＰＧＬＹＹＦＴＹＨＡＳＳＲＧＮＬＣＶＮＬＭＲＧＲＥＲＡＱＫＶＶＴＦＣＤＹＡＹＮＴＦＱＶＴＴＧＧＭＶＬＫＬＥＱＧＥＮＶＦＬＱＡＴＤＫＮＳＬＬＧＭＥＧＡＮＳＩＦＳＧＦＬＬＦＰＤＭＥＡ。

【0113】

Ｃ１ｑ、鎖Ｃ（ホモサピエンス）、アクセッション番号 タンパク質
データベース：ＮＰ＿００１１０７５７３．１；ＧｅｎＢａｎｋ番号：
ＮＭ＿００１１１４１０１．１：
＞ｇｉ｜１６６２３５９０３｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿００１１０７５７３．１｜補体Ｃ１ｑ
サブコンポーネントサブユニットＣ前駆体［ホモサピエンス］
（配列番号３）
ＭＤＶＧＰＳＳＬＰＨＬＧＬＫＬＬＬＬＬＬＬＬＰＬＲＧＱＡＮＴＧＣＹＧＩＰＧＭＰＧＬＰＧＡＰＧＫＤＧＹＤＧＬＰＧＰＫＧＥＰＧＩＰＡＩＰＧＩＲＧＰＫＧＱＫＧＥＰＧＬＰＧＨＰＧＫＮＧＰＭＧＰＰＧＭＰＧＶＰＧＰＭＧＩＰＧＥＰＧＥＥＧＲＹＫＱＫＦＱＳＶＦＴＶＴＲＱＴＨＱＰＰＡＰＮＳＬＩＲＦＮＡＶＬＴＮＰＱＧＤＹＤＴＳＴＧＫＦＴＣＫＶＰＧＬＹＹＦＶＹＨＡＳＨＴＡＮＬＣＶＬＬＹＲＳＧＶＫＶＶＴＦＣＧＨＴＳＫＴＮＱＶＮＳＧＧＶＬＬＲＬＱＶＧＥＥＶＷＬＡＶＮＤＹＹＤＭＶＧＩＱＧＳＤＳＶＦＳＧＦＬＬＦＰＤ．

【0114】

したがって、本開示の抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑタンパク質のポリペプチド鎖Ａ、ポリペプチド鎖Ｂ、及び／またはポリペプチド鎖Ｃに結合し得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗Ｃ１ｑ抗体は、ヒトＣ１ｑまたはそのホモログ、例えば、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ラクダ、ヒツジ、ヤギ、またはブタＣ１ｑのポリペプチド鎖Ａ、ポリペプチド鎖Ｂ、及び／またはポリペプチド鎖Ｃに結合する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、またはその断片またはその誘導体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｆａｂ断片などの抗体断片である。

【0115】

抗体Ｍ１の軽鎖及び重鎖可変ドメイン配列
抗体Ｍ１に関連して言及される全ての配列は、米国特許第９，７０８，３９４号（それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。

【0116】

標準的な技術を使用して、抗体Ｍ１の軽鎖可変及び重鎖可変ドメインをコードする核酸及びアミノ酸配列を決定した。抗体Ｍ１の軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列は、以下である：

【0117】

【0118】

軽鎖可変ドメインの超可変領域（ＨＶＲ）を、太字かつ下線の文字で示す。いくつかの実施形態では、Ｍ１軽鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｌ１は配列ＲＡＳＫＳＩＮＫＹＬＡ（配列番号５）を有し、Ｍ１軽鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｌ２は配列ＳＧＳＴＬＱＳ（配列番号６）を有し、Ｍ１軽鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｌ３は配列ＱＱＨＮＥＹＰＬＴ（配列番号７）を有する。

【0119】

抗体Ｍ１の重鎖可変ドメインのアミノ酸配列は、以下である：

【0120】

【0121】

重鎖可変ドメインの超可変領域（ＨＶＲ）を、太字かつ下線の文字で示す。いくつかの実施形態では、Ｍ１重鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｈ１は配列ＧＹＨＦＴＳＹＷＭＨ（配列番号９）を有し、Ｍ１重鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｈ２は配列ＶＩＨＰＮＳＧＳＩＮＹＮＥＫＦＥＳ（配列番号１０）を有し、Ｍ１重鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｈ３は配列ＥＲＤＳＴＥＶＬＰＭＤＹ（配列番号１１）を有する。

【0122】

軽鎖可変ドメインをコードする核酸配列は、以下であることが決定された：
ＧＡＴＧＴＣＣＡＧＡＴＡＡＣＣＣＡＧＴＣＴＣＣＡＴＣＴＴＡＴＣＴＴＧＣＴＧＣＡＴＣＴＣＣＴＧＧＡＧＡＡＡＣＣＡＴＴＡＣＴＡＴＴＡＡＴＴＧＣＡＧＧＧＣＡＡＧＴＡＡＧＡＧＣＡＴＴＡＡＣＡＡＡＴＡＴＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＴＣＡＡＧＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＡＡＡＣＴＡＡＴＡＡＧＣＴＴＣＴＴＡＴＣＴＡＣＴＣＴＧＧＡＴＣＣＡＣＴＴＴＧＣＡＡＴＣＴＧＧＡＡＴＴＣＣＡＴＣＡＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＴＡＣＡＧＡＴＴＴＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＴＡＧＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＡＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＡＣＡＡＣＡＴＡＡＴＧＡＡＴＡＣＣＣＧＣＴＣＡＣＧＴＴＣＧＧＴＧＣＴＧＧＧＡＣＣＡＡＧＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＡＡ（配列番号１２）。

【0123】

重鎖可変ドメインをコードする核酸配列は、以下であることが決定された：
ＣＡＧＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＧＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＡＡＧＣＣＴＧＧＧＧＣＴＴＣＡＧＴＧＡＡＧＴＴＧＴＣＣＴＧＣＡＡＧＴＣＴＴＣＴＧＧＣＴＡＣＣＡＴＴＴＣＡＣＣＡＧＣＴＡＣＴＧＧＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＣＡＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＣＡＡＧＧＣＣＴＴＧＡＧＴＧＧＡＴＴＧＧＡＧＴＧＡＴＴＣＡＴＣＣＴＡＡＴＡＧＴＧＧＴＡＧＴＡＴＴＡＡＣＴＡＣＡＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＣＧＡＧＡＧＣＡＡＧＧＣＣＡＣＡＣＴＧＡＣＴＧＴＡＧＡＣＡＡＡＴＣＣＴＣＣＡＧＣＡＣＡＧＣＣＴＡＣＡＴＧＣＡＡＣＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＡＣＡＴＣＴＧＡＧＧＡＣＴＣＧＧＣＧＧＴＣＴＡＴＴＡＴＴＧＴＧＣＡＧＧＡＧＡＧＡＧＡＧＡＴＴＣＴＡＣＧＧＡＧＧＴＴＣＴＣＣＣＴＡＴＧＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＴＣＡＡＧＧＡＡＣＣＴＣＡＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡ（配列番号１３）。

【0124】

物質の寄託
以下の物質は、ブダペスト条約に従ってＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，ＡＴＣＣ Ｐａｔｅｎｔ Ｄｅｐｏｓｉｔｏｒｙ，１０８０１ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｌｖｄ．，Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖａ．２０１１０－２２０９，ＵＳＡ（ＡＴＣＣ）に寄託された：

【表2】

【0125】

培養物の入手が、特許出願の係属中及び３０年間、または最新の請求から５年後、または特許の有効期間のうち長い方まで、利用可能となることを保証する条件下で、Ｍ１抗体を生成するハイブリドーマ細胞株（マウスハイブリドーマＣ１ｑＭ１ ７７８８－１（Ｍ）０５１６１３）がＡＴＣＣに寄託されている。寄託物は、その期間中に生存できなくなった場合に置き換えられる。寄託物は、本出願の対応出願、またはその子孫が出願された国における外国特許法によって要求されるように利用可能である。しかしながら、寄託物の利用可能性は、政府の措置によって付与された特許権を逸脱して本発明を実施するためのライセンスを構成するものではないことが理解されるべきである。

【0126】

いくつかの実施形態では、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインのアミノ酸配列は、ＨＶＲ－Ｌ１の配列番号５、ＨＶＲ－Ｌ２の配列番号６、ＨＶＲ－Ｌ３の配列番号７、ＨＶＲ－Ｈ１の配列番号９、ＨＶＲ－Ｈ２の配列番号１０、及びＨＶＲ－Ｈ３の配列番号１１のうちの１つ以上を含む。

【0127】

抗体は、好ましくはＨＶＲ－Ｌ１ ＲＡＳＫＳＩＮＫＹＬＡ（配列番号５）、ＨＶＲ－Ｌ２ ＳＧＳＴＬＱＳ（配列番号６）、及びＨＶＲ－Ｌ３ ＱＱＨＮＥＹＰＬＴ（配列番号７）を保持しつつ、配列番号４と少なくとも８５％、９０％、または９５％同一の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列を含み得る。抗体は、好ましくはＨＶＲ－Ｈ１ ＧＹＨＦＴＳＹＷＭＨ（配列番号９）、ＨＶＲ－Ｈ２ ＶＩＨＰＮＳＧＳＩＮＹＮＥＫＦＥＳ（配列番号１０）、及びＨＶＲ－Ｈ３ ＥＲＤＳＴＥＶＬＰＭＤＹ（配列番号１１）を保持しつつ、配列番号８と少なくとも８５％、９０％、または９５％同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含み得る。

【0128】

ヒト化抗補体Ｃ１ｑ抗体
本開示のヒト化抗体は、古典的補体経路のＣ１複合体における補体因子Ｃ１ｑ及び／またはＣ１ｑタンパク質に特異的に結合する。ヒト化抗Ｃ１ｑ抗体は、ヒトＣ１ｑ、ヒト及びマウスＣ１ｑ、ラットＣ１ｑ、またはヒトＣ１ｑ、マウスＣ１ｑ、及びラットＣ１ｑに特異的に結合し得る。

【0129】

ヒト化抗Ｃ１ｑ抗体に関連して言及される全ての配列は、米国特許第１０，３１６，０８１号（それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。

【0130】

いくつかの実施形態では、ヒト重鎖定常領域は、配列番号４７のアミノ酸配列、または配列番号４７と少なくとも７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含むヒトＩｇＧ４重鎖定常領域である。ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域は、Ｋａｂａｔ番号付けに従って１つ以上の改変及び／またはアミノ酸置換を有するＦｃ領域を含み得る。そのような場合では、Ｆｃ領域は、位置２４８におけるロイシンからグルタメートへのアミノ酸置換を含み、そのような置換は、Ｆｃ領域がＦｃ受容体と相互作用することを阻害する。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、位置２４１におけるセリンからプロリンへのアミノ酸置換を含み、そのような置換は、抗体におけるアームスイッチを防止する。

【0131】

ヒトＩｇＧ４（Ｓ２４１Ｐ Ｌ２４８Ｅ）重鎖定常ドメインのアミノ酸配列は、以下である：ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＥＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号４７）。

【0132】

抗体は、重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含み得、重鎖可変ドメインは、配列番号３１～３４のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列、または配列番号３１～３４のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含む。ある特定のそのような実施形態では、軽鎖可変ドメインは、配列番号３５～３８のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列、または配列番号３５～３８のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含む。

【0133】

重鎖可変ドメインバリアント１（ＶＨ１）のアミノ酸配列は、以下である：

【0134】

ＶＨ１の超可変領域（ＨＶＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。

【0135】

重鎖可変ドメインバリアント２（ＶＨ２）のアミノ酸配列は、以下である：

【0136】

ＶＨ２の超可変領域（ＨＶＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。

【0137】

重鎖可変ドメインバリアント３（ＶＨ３）のアミノ酸配列は、以下である：

【0138】

ＶＨ３の超可変領域（ＨＶＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。

【0139】

重鎖可変ドメインバリアント４（ＶＨ４）のアミノ酸配列は、以下である：

【0140】

ＶＨ４の超可変領域（ＨＶＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。

【0141】

カッパ軽鎖可変ドメインバリアント１（Ｖκ１）のアミノ酸配列は、以下である：

【0142】

Ｖκ１の超可変領域（ＨＶＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。

【0143】

カッパ軽鎖可変ドメインバリアント２（Ｖκ２）のアミノ酸配列は、以下である：

【0144】

Ｖκ２の超可変領域（ＨＶＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。

【0145】

カッパ軽鎖可変ドメインバリアント３（Ｖκ３）のアミノ酸配列は、以下である：

【0146】

Ｖκ３の超可変領域（ＨＶＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。

【0147】

カッパ軽鎖可変ドメインバリアント４（Ｖκ４）のアミノ酸配列は、以下である：

【0148】

Ｖκ４の超可変領域（ＨＶＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。

【0149】

抗体は、ＨＶＲ－Ｌ１ ＲＡＳＫＳＩＮＫＹＬＡ（配列番号５）、ＨＶＲ－Ｌ２ ＳＧＳＴＬＱＳ（配列番号６）、及びＨＶＲ－Ｌ３ ＱＱＨＮＥＹＰＬＴ（配列番号７）を保持しつつ、配列番号３５～３８と少なくとも８５％、９０％、または９５％同一の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列を含み得る。抗体は、好ましくはＨＶＲ－Ｈ１ ＧＹＨＦＴＳＹＷＭＨ（配列番号９）、ＨＶＲ－Ｈ２ ＶＩＨＰＮＳＧＳＩＮＹＮＥＫＦＥＳ（配列番号１０）、及びＨＶＲ－Ｈ３ ＥＲＤＳＴＥＶＬＰＭＤＹ（配列番号１１）を保持しつつ、配列番号３１～３４と少なくとも８５％、９０％、または９５％同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含み得る。

【0150】

いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３５の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列及び配列番号３１の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列及び配列番号３２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列及び配列番号３３の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３８の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列及び配列番号３４の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。

【0151】

いくつかの実施形態では、本開示のヒト化抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｆａｂ領域を含有する重鎖可変領域及びＦｃ領域を含有する重鎖定常領域を含み、Ｆａｂ領域は本開示のＣ１ｑタンパク質に特異的に結合するが、Ｆｃ領域はＣ１ｑタンパク質に結合することが不可能である。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプに由来する。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、補体活性を誘導することが不可能であり、及び／または抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導することが不可能である。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、限定されないが、アミノ酸置換を含む、１つ以上の改変を含む。ある特定の実施形態では、本開示のヒト化抗Ｃ１ｑ抗体のＦｃ領域は、Ｋａｂａｔ番号付け慣例に従う位置２４８またはＫａｂａｔ番号付け慣例に従う位置２４８に対応する位置で、及び／またはＫａｂａｔ番号付け慣例に従う位置２４１またはＫａｂａｔ番号付け慣例に従う位置２４１に対応する位置でアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、位置２４８または位置２４８に対応する位置でのアミノ酸置換は、Ｆｃ領域がＦｃ受容体と相互作用することを阻害する。いくつかの実施形態では、位置２４８または位置２４８に対応する位置でのアミノ酸置換は、ロイシンからグルタメートへのアミノ酸置換である。いくつかの実施形態では、位置２４１または位置２４１に対応する位置でのアミノ酸置換は、抗体におけるアームスイッチを防止する。いくつかの実施形態では、位置２４１または位置２４１に対応する位置でのアミノ酸置換は、セリンからプロリンへのアミノ酸置換である。ある特定の実施形態では、本開示のヒト化抗Ｃ１ｑ抗体のＦｃ領域は、配列番号４７のアミノ酸配列、または配列番号４７のアミノ酸配列と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む。

【0152】

抗Ｃ１ｑ Ｆａｂ断片
組換えＤＮＡ技術の出現の前は、抗体分子の構造を切断し、分子のどの部分がその様々な機能を担っているのかを決定するために、ポリペプチド配列を切断するタンパク質分解酵素（プロテアーゼ）が使用されていた。プロテアーゼパパインでの限定消化は、抗体分子を３つの断片に切断する。Ｆａｂ断片として知られている２つの断片は同一であり、抗原結合活性を含有する。Ｆａｂ断片は、抗体分子の２つの同一の腕部に対応し、その各々は、重鎖のＶ_Ｈ及びＣ_Ｈ１ドメインと対合した完全軽鎖からなる。他の断片は、抗原結合活性を含まないが、容易に結晶化することが当初観察され、この理由からＦｃ断片（結晶化可能断片）と名付けられた。Ｆａｂ分子をＩｇＧ分子と比較した場合、Ｆａｂは、それらのより高い移動性及び組織浸透能力、それらの減少した循環半減期、抗体エフェクター機能を媒介することなく一価で抗原に結合するそれらの能力、ならびにそれらのより低い免疫原性のため、ある特定のインビボ用途についてＩｇＧよりも優れていることが見出された。

【0153】

Ｆａｂ分子は、定常ドメインＣ_Ｈ２及びＣ_Ｈ３によって短縮された重鎖を有するＩｇ分子の人工の約５０ｋＤａの断片である。２つの異好性（Ｖ_Ｌ－Ｖ_Ｈ及びＣ_Ｌ－Ｃ_Ｈ１）ドメイン相互作用は、Ｆａｂ分子の２つの鎖の構造の基礎にあり、これはＣ_ＬとＣ_Ｈ１との間のジスルフィド架橋によって更に安定化される。Ｆａｂ及びＩｇＧは、６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（３つはそれぞれＶ_Ｌ及びＶ_Ｈに由来する（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３及びＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３））によって形成される同一の抗原結合部位を有する。ＣＤＲは、抗体の超可変抗原結合部位を画定する。最も高い配列バリエーションは、ＬＣＤＲ３及びＨＣＤＲ３に見られ、これは天然免疫系では、それぞれＶ_Ｌ及びＪ_Ｌ遺伝子またはＶ_Ｈ、Ｄ_Ｈ及びＪ_Ｈ遺伝子の再編成によって生成される。ＬＣＤＲ３及びＨＣＤＲ３は典型的には、抗原結合部位のコアを形成する。６つのＣＤＲを接続し、提示する保存領域は、フレームワーク領域と称される。可変ドメインの三次元構造において、フレームワーク領域は、外側では超可変ＣＤＲループによって及び内側では保存ジスルフィド架橋によって連結された２つの対向する逆平行β－シートのサンドイッチを形成する。Ｆａｂ及びＩｇＧの抗原結合部位の安定性及び汎用性のこの独自の組み合わせは、疾患の診断、モニタリング、予防、及び処置のための臨床業務においてその成功を強調する。

【0154】

全ての抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片配列は、米国特許第１０，７２３，７８８号（それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。

【0155】

ある特定の実施形態では、本開示は、重鎖（Ｖ_Ｈ／Ｃ_Ｈ１）及び軽鎖（Ｖ_Ｌ／Ｃ_Ｌ）を含むＣ１ｑタンパク質に結合する抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片であって、抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片は、６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（３つはそれぞれＶ_Ｌ及びＶ_Ｈに由来する）（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、及びＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）を有する、抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片を提供する。抗体Ｆａｂ断片の重鎖は、ＩｇＧ１の第１の重鎖ドメインの後で切断され（配列番号３９）、以下のアミノ酸配列を含む：

【0156】

[外１１]

【0157】

配列番号１の相補性決定領域（ＣＤＲ）を、太字かつ下線の文字で示す。

【0158】

抗体Ｆａｂ断片の軽鎖ドメインは、以下のアミノ酸配列（配列番号４０）を含む：

【0159】

[外１２]

【0160】

配列番号２の相補性決定領域（ＣＤＲ）を、太字かつ下線の文字で示す。

【0161】

抗補体Ｃ１ｓ抗体
好適な阻害剤には、補体Ｃ１ｓタンパク質に結合する抗体（すなわち、本明細書で抗Ｃ１ｓ抗体及びＣ１ｓ抗体とも称される抗補体Ｃ１ｓ抗体）及びそのような抗体をコードする核酸分子が含まれる。補体Ｃ１ｓは、補体カスケードにおいて上流にあり、狭い範囲の基質特異性を有するので魅力的な標的である。更に、活性化形態のＣ１ｓに特異的に結合する抗体（例えば、限定されないが、モノクローナル抗体）を得ることが可能である。

【0162】

抗Ｃ１ｓ抗体の例は、米国特許出願第１４／８９０，８１１号及び米国特許第８，８７７，１９７号に開示されており、それが開示する抗体及び関連する組成物について、参照により本明細書に組み込まれる。

【0163】

ある特定の態様では、本明細書では、抗Ｃ１ｓ抗体を投与する方法が開示される。抗体は、マウス抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体であり得る。いくつかの実施形態では、軽鎖可変ドメインは、ＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３を含み、重鎖は、５／１５／２０１３にＡＴＣＣに寄託されたハイブリドーマ細胞株またはその子孫（ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ－１２０３５１）によって生成されるマウス抗ヒトＣ１ｓモノクローナル抗体５Ａ１のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３を含む。他の実施形態では、軽鎖可変ドメインは、ＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３を含み、重鎖可変ドメインは、５／１５／２０１３にＡＴＣＣに寄託されたハイブリドーマ細胞株またはその子孫（ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ－１２０３５２）によって生成されるマウス抗ヒトＣ１ｓモノクローナル抗体５Ｃ１２のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３を含む。

【0164】

核酸、ベクター及び宿主細胞
本開示の方法において使用するのに好適な抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されているように、組換え方法及び組成物を使用して生成され得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗体のいずれかをコードするヌクレオチド配列を有する単離された核酸が提供される。そのような核酸は、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒまたは抗Ｃ１ｓ抗体のＶ_Ｌ／Ｃ_Ｌを含有するアミノ酸配列及び／またはＶ_Ｈ／Ｃ_Ｈ１を含有するアミノ酸配列をコードし得る。いくつかの実施形態では、そのような核酸を含有する１つ以上のベクター（例えば、発現ベクター）が提供される。そのような核酸を含有する宿主細胞も提供され得る。宿主細胞は、（１）抗体のＶ_Ｌ／Ｃ_Ｌを含有するアミノ酸配列及び抗体のＶ_Ｈ／Ｃ_Ｈ１を含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有するベクター、または（２）抗体のＶ_Ｌ／Ｃ_Ｌを含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第１のベクター及び抗体のＶ_Ｈ／Ｃ_Ｈ１を含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第２のベクターを含有し得る（例えば、形質導入されている）。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、真核、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはリンパ細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、Ｅ．ｃｏｌｉなどの細菌である。

【0165】

抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒまたは抗Ｃ１ｓ抗体を作製する方法が本明細書に開示される。方法は、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒまたは抗Ｃ１ｓ抗体をコードする核酸を含有する本開示の宿主細胞を、抗体の発現に好適な条件下で培養することを含む。いくつかの実施形態では、抗体はその後、宿主細胞（または宿主細胞培地）から回収される。

【0166】

抗体スクリーニング
候補抗体は、補体活性化を調整する能力についてスクリーニングされ得る。そのようなスクリーニングは、インビトロモデル、遺伝子変化した細胞もしくは動物、または精製タンパク質を使用して実施され得る。インビトロ培養システムなどの多様なアッセイがこの目的のために使用され得る。

【0167】

候補抗体はまた、結合アッセイなどによってコンピュータベースのモデリングを使用して同定され得る。抗体が結合するかどうか、またはそうでなければ補体活性に影響を及ぼすかどうかを決定するために、様々なインビトロモデルが使用され得る。かかる候補抗体は、健康ドナーからの血漿を接触させ、補体活性化を（例えば、抗原Ｃ３ｃ捕捉ＥＬＩＳＡによって）決定することによって試験され得る。

【0168】

通常、複数のアッセイの混合は、様々な濃度に対する異なった反応を得るために異なる抗体濃度で並行して実行される。典型的には、これらの濃度のうちの１つは、陰性対照、すなわち、ゼロ濃度または検出レベル未満として機能する。

【0169】

薬学的組成物及び投与
本開示の補体阻害剤（例えば、抗体、抗体断片及び／または抗体誘導体）は、薬学的組成物の形態で投与され得る。

【0170】

本開示の阻害剤（例えば、抗体、抗体断片及び／または抗体誘導体）の治療製剤は、所望の純度を有する阻害剤を任意の薬学的に許容可能な担体、賦形剤または安定化剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．［１９８０］）と混合することによって保存のために凍結乾燥製剤または水溶液の形態で調製され得る。許容可能な担体、賦形剤、または安定化剤は、用いられる投薬量及び濃度でレシピエントに対して非毒性であり、これには緩衝液、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（例えば、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えば、メチルまたはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；及びｍ－クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、またはリジン；グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む単糖、二糖、及び他の炭水化物；キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；糖類、例えば、スクロース、マンニトール、トレハロースまたはソルビトール；塩形成対イオン、例えば、ナトリウム；金属複合体（例えば、Ｚｎ－タンパク質複合体）；及び／または非イオン性界面活性剤、例えば、ＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）が含まれる。

【0171】

阻害剤はまた、例えば、コアセルベーション技術によって、または界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチンマイクロカプセル及びポリ－（メチルメタクリレート）マイクロカプセル内に、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロ乳濁液、ナノ粒子、及びナノカプセル）中、またはマクロ乳濁液中に取り込まれ得る。そのような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に開示されている。

【0172】

投与のために使用される製剤は無菌であり得る。これは、滅菌濾過膜を介する濾過によって容易に達成される。

【0173】

本開示の抗体、抗体断片及び／または抗体誘導体ならびに組成物は典型的には、局所、非経口、皮下、腹腔内、肺内、鼻腔内、及び病巣内投与を含むがこれらに限定されない様々な経路によって投与される。非経口投与経路には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、髄腔内、または皮下投与が含まれる。

【0174】

薬学的組成物はまた、所望の製剤に応じて、動物またはヒト投与のための薬学的組成物を製剤化するために一般的に使用されるビヒクルとして定義される、希釈剤の薬学的に許容可能な非毒性担体を含み得る。希釈剤は、組み合わせの生物学的活性に影響を及ぼさないように選択される。そのような希釈剤の例は、蒸留水、緩衝水、生理的生理食塩水、ＰＢＳ、リンゲル液、デキストロース溶液、及びハンクス溶液である。加えて、薬学的組成物または製剤は、他の担体、アジュバント、または非毒性、非治療性、非免疫原性安定化剤、賦形剤などを含み得る。組成物はまた、おおよその生理的条件のための追加の物質、例えば、ｐＨ調整及び緩衝剤、毒性調整剤、湿潤剤及び洗浄剤を含み得る。

【0175】

組成物はまた、例えば、抗酸化剤などの多様な安定化剤のいずれかを含み得る。薬学的組成物がポリペプチドを含む場合、ポリペプチドは、ポリペプチドのインビボ安定性を向上させるか、またはそうでなければその薬理学的特性を向上させる（例えば、ポリペプチドの半減期を増加させる、その毒性を低下させる、他の薬物動態及び／または薬力学的特性を向上させる、または溶解性もしくは取り込みを向上させる）様々なよく知られている化合物と複合体化され得る。

【0176】

活性成分の毒性及び治療的有効性は、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％に対して致死的な用量）及びＥＤ５０（集団の５０％において治療的に有効な用量）を決定することを含む、細胞培養及び／または実験動物における標準的な薬学的手順に従って決定され得る。毒性と治療効果との間の用量比は治療指数であり、それは比ＬＤ５０／ＥＤ５０として表され得る。高い治療指数を示す化合物が好ましい。

【0177】

本明細書に記載の薬学的組成物は、多様な異なる方法で投与され得る。例には、経口、鼻腔内、直腸、局所、腹腔内、静脈内、筋肉内、皮下、真皮下、経皮、髄腔内、及び頭蓋内方法を介して薬学的に許容可能な担体を含有する組成物を投与することが含まれる。

【0178】

非経口投与に好適な製剤には、抗酸化剤、緩衝液、静菌剤、及び製剤を意図されるレシピエントの血液と等張にする溶質を含有し得る水性及び非水性の等張性滅菌注射溶液、ならびに懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定化剤、及び防腐剤を含み得る水性及び非水性滅菌懸濁液が含まれる。

【0179】

薬学的組成物を製剤化するために使用される成分は、好ましくは、高純度のものであり、潜在的に有害な混入物質を実質的に含まない（例えば、少なくとも国の食品（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｏｄ（ＮＦ））グレード、通常は少なくとも分析グレード、より典型的には少なくとも薬学的グレード）。更に、非経口的使用のために意図される組成物は通常、無菌である。所与の化合物が使用前に合成されなければならない限り、得られる生成物は、合成または精製プロセスの間に存在し得る任意の潜在的に毒性の物質、特に任意のエンドトキシンは典型的には実質的に含まれない。非経口投与のための組成物もまた、典型的には実質的に等張性であり、ＧＭＰ条件下で生成される。

【0180】

特定の患者に与えられる治療組成物の有効量は、多様な要素に依存し得、そのいくつかは患者毎に異なり得る。適任の臨床医は、患者に投与するための治療剤の有効量を決定することができる。薬剤の投薬量は、治療、投与経路、治療剤の特質、患者の治療剤に対する感受性などに依存する。ＬＤ５０動物データ及び他の情報を利用して、臨床医は、投与経路に応じて、個体のための最大安全用量を決定し得る。通常の技術を利用して、適任の臨床医は、日常的な臨床試験の過程で特定の治療組成物の投薬量を最適化することができる。組成物は、一連の複数回の投与で対象に投与され得る。治療組成物に関して、定期的な周期的投与が時に必要とされる場合があり、または望ましい場合がある。治療レジメンは薬剤に応じて変わる；例えば、いくつかの薬剤は、１日１回または１日２回のベースで長期間摂取され得る一方で、より選択的な薬剤は、例えば、１、２、３日またはそれ以上、１週以上、１ヶ月以上などのより規定された期間で１日１回、１日２回、週２回、週１回などで摂取されるように投与され得る。

【0181】

処置方法
本開示は、広義には、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、ベッカー型筋ジストロフィー、肢帯型筋ジストロフィー（ＬＧＭＤ）（サルコグリカノパチー、ジストログリカノパチー及びジスフェルリンパチーを含む）、ＶＩ型コラーゲン関連障害（ベスレム型ミオパチー及びウルリッヒ型先天性筋ジストロフィー（ＵＣＭＤ）を含む）、先天性筋ジストロフィー（ＣＭＤ）及び先天性ミオパチー、ならびに遠位性筋ジストロフィー／ミオパチー（三好型ミオパチーを含む）の予防、発症リスクの低減、進行の遅延もしくはブロック、または治療方法に関する。該方法は、対象に、Ｃ１複合体阻害剤、Ｃ１ｑ阻害剤、Ｃ１ｓ阻害剤、またはＣ１ｒ阻害剤等の古典的補体経路の阻害剤を投与することを含む。阻害剤は、抗体、ペプチド、タンパク質、核酸、小分子、遺伝子編集剤、塩基編集剤、またはエピジェネティック編集剤であり得る。核酸は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｍｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ阻害剤、ｍＲＮＡ、アプタマー、またはアンチセンス核酸であり得る。阻害剤は、標的生体分子の活性または発現を減少させることによるものかどうかにかかわらず、標的生体分子の生物学的機能を阻害する能力を有する化合物を指し得る。かかる方法は、Ｃ１ｑ阻害剤を対象に投与することを含む。本明細書に記載の本発明の任意の態様に適用され得る多数の実施形態が更に提供される。例えば、いくつかの実施形態では、Ｃ１ｑ阻害剤は、抗体、アプタマー、アンチセンス核酸または遺伝子編集剤である。いくつかの実施形態では、阻害剤は、抗Ｃ１ｑ抗体である。抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑと自己抗体との間またはＣ１ｑとＣ１ｒとの間、またはＣ１ｑとＣ１ｓとの間の相互作用を阻害し得、または循環もしくは組織からのＣ１ｑのクリアランスを促進し得る。

【0182】

組成物は、インビボ使用のために医師の指導の下で得られ、使用され得ることが企図される。治療製剤の投薬量は、疾患の特質、投与の頻度、投与の様式、宿主からの薬剤のクリアランスなどに応じて広く変わり得る。

【実施例】

【0183】

実施例１：材料及び方法
特に明記しない限り、本実施例１に記載の方法及び材料を、本明細書に記載の実施例において使用した。

【0184】

マウス
動物の、餌料及び水に対する自由摂取の状態を維持し、１２：１２時間の明／暗サイクルで、一定の温度（１９～２２℃）で維持した。Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を野生型（ＷＴ）動物として用いた。Ｂ６Ｒｏｓ．Ｃｇ－Ｄ^{ｍｄｍｄｘ－４Ｃｖ／Ｊ} マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、本明細書ではｍｄｘ^４Ｃｖと称される）をＭＤＸマウスとして使用した。抗Ｃ１ｑブロッキング抗体（マウス抗体）を用いた実験のために、Ｐａｘ７－ＣｒｅＥＲ^ｔｍ雄をＲ２６Ｒ^{ＹＦＰ／ＹＦＰ}雌（Ｔｈｅ Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）に交配して、Ｐａｘ７Ｃｒｅ^{ＥＲ／ＷＴ}；Ｒ２６Ｒ^{ＹＦＰ／ＷＴ}雄を得た。これらのブリーダーを、雌のｍｄｘ^{４Ｃｖ／４Ｃｖ}に交配して、雄の実験動物（Ｐａｘ７Ｃｒｅ^{ＥＲ／ＷＴ}；Ｒ２６Ｒ^{ＹＦＰ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ）を得た。タモキシフェン（Ｔ５６４８ Ｓｉｇｍａ）を５０ｍｇ／ｍｌで９２．５％のトウモロコシ油／７．５％のエタノールに溶解させ、２．５ｍｇを５４日齢の実験マウスに毎日８日間腹腔内投与した。Ｌｙｚ２Ｃｒｅ^＋／－；Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ世代については、Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}（Ｔｈｅ Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）雄をＣ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^{４Ｃｖ／４Ｃｖ}雌に交配して、Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ雄を得た。これらの雄を、Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^{４Ｃｖ／４Ｃｖ}雌に交配して、Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＷＴ}；ｍｄｘ^{４Ｃｖ／４Ｃｖ}雌を得、それをＣ１ｑａ^{ＦＬ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ雄に交配して、Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^{４Ｃｖ／４Ｃｖ}雌を得た。Ｌｙｚ２Ｃｒｅ^＋／＋（Ｔｈｅ Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）雄をＬｙｚ２Ｃｒｅ^－／－；ｍｄｘ^{４Ｃｖ／４Ｃｖ}雌に交配して、Ｌｙｚ２Ｃｒｅ^＋／－；ｍｄｘ^４Ｃｖ雄を得た。これらのブリーダーをＣ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^{４Ｃｖ／４Ｃｖ}雌に交配して、Ｌｙｚ２Ｃｒｅ^＋／－；Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ雄を得た。最後に、Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^{４Ｃｖ／４Ｃｖ}雌をＬｙｚ２Ｃｒｅ^＋／－；Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ雄に交配して、雄実験動物（Ｌｙｚ２Ｃｒｅ^＋／－；Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ、本明細書ではＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスと称される）を得た。ゲノタイピングは、表１に列挙するプライマーを用いて行った。

【表3】

【0185】

行動試験
行動試験の前に、マウスを、ストレスレベルを制限するために、同じオペレータによる定期的な処理に供した。試験は、マウスの暗期時間中の同じ時間に一貫して実施した。全ての行動試験は盲検で実施した。

【0186】

四肢ぶら下がり試験
四肢ぶら下がり試験プロトコルは、Ｔｒｅａｔ－ＮＤＭ Ｎｅｕｒｏｍｕｓｃｕｌａｒ Ｎｅｔｗｏｒｋ ＳＯＰ ＤＭＤ＿Ｍ２．２．１．００５から適合した。試験の前に、マウスを秤量して、体重による正規化を行った。４０ｃｍ×３０ｃｍの金属グリッドを、十分な床敷（すなわち、紙及び木材チップ）を備えた机の４０ｃｍ上に配置して、ソフトランディングを確実にした。マウスをグリッド上に配置し、３～５秒間この環境に順応させた後、グリッドを反転させ、４０ｃｍの高さで保持した。所定の時間制限（９００秒）より前にマウスがグリッドから外れた場合、それらは直ちに更に２回試行された。合計ぶら下がり時間を記録した。試験を１日おきに３回繰り返した。

【0187】

両肢グリップ試験
両肢グリップ強度試験プロトコルは、Ｔｒｅａｔ－ＮＭＤ Ｎｅｕｒｏｍｕｓｃｕｌａｒ Ｎｅｔｗｏｒｋ ＳＯＰ ＤＭＤ＿Ｍ２．２．００１から適合させた。試験の前に、マウスを秤量して、体重による正規化を行った。マウスの前肢のみを、力トランスデューサーと電子ユニット（４７２００－グリップ強度メーター－Ｕｇｏ Ｂａｓｉｌｅ）に接続された金属製の台形に取り付けた。マウスの尻尾をやさしく引っ張った。最大グリップ強度及び試験の合計時間（すなわち、マウスが台形に取り付けられた合計時間）を４回記録し、これらの測定値の平均値を計算した。試験を６回（Ｃ１ｑａＫＯ Ｃｎｔｒマウス：３日間連続して３回の試験、次いで５日間交互に３回の更なる試験）または３回（交互にＷＴマウス）繰り返した。

【0188】

オープンフィールド試験
オープンフィールド試験プロトコルは、Ｔｒｅａｔ－ＮＤＭ Ｎｅｕｒｏｍｕｓｃｕｌａｒ Ｎｅｔｗｏｒｋ ＳＯＰ ＤＭＤ＿Ｍ２．２．１．００２から適合させた。四肢ぶら下がり試験の直後に、マウスを４０ｃｍ×４０ｃｍのアリーナに入れ、自由に移動させ、５分または６分間探索させた。試験を記録し、ＡＮＹ－ｍａｚｅソフトウェアまたはＥｔｈｏＶｉｓｉｏｎ ＸＴソフトウェアを使用して動作データを解析した。試験を１日おきに３回繰り返した。

【0189】

ロータロッド試験
ロータロッド試験は、ＬＥ８２０５ Ｐａｎｌａｂ Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓを使用して行った。試験の前に、マウスを秤量して、体重による正規化を行った。ロータロッドの速度を６ｒｐｍの一定値に設定した。１時間後、速度を１２ｒｐｍの一定値に増加させた。マウスがロッドから落ちた場合、それらをすぐに更に３回試験した。総歩行時間を記録した。試験を６日間繰り返した（３日連続して３回の試験、次いで５日後、隔日に３回の更なる試験）。

【0190】

血漿及び血清の採取及び調製
マウスをランプの下で数分間加熱して血流を増加させた。顎下静脈の領域を針先で貫通し、頬からの血流を試験管に採取した。血液試料を室温で１時間インキュベートし、２．０００ｇで４℃で１０分間遠心分離した。上清（血清）を回収した。あるいは、血液をＥＤＴＡ治療チューブに採取した。試料を２．０００ｇで４℃で１０分間遠心分離し、上清（血漿）を回収した。

【0191】

筋単細胞の単離
野生型及びジストロフィー性マウス由来の後肢筋（すなわち、腓腹筋、ＥＤＬ、前脛骨筋及び大腿四頭筋）を解剖し、前述のように処理して、単核細胞を得た。筋肉を洗浄培地（１０％ＦＢＳ、１％Ｌ－グルタミン、及び１％ペニシリン－ストレプトマイシンを補充したＨａｍ’ｓ Ｆ－１０）で洗浄し、筋肉解離緩衝液（１％Ｌ－グルタミン及び１％ペニシリン－ストレプトマイシンを補充したＨａｍ’ｓ Ｆ－１０で調製された７００～８００Ｕ／ｍｌのコラゲナーゼＩＩ（Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ））（１６ｍｌ／後肢、８ｍｌ／ダイアフラム）に加え、はさみで挽き、３７℃の水浴中で撹拌（７０ｒｐｍ）しながら４０分間インキュベートした。インキュベーション試料を５００ｇで５分間遠心分離した後、ディスパーゼ（１１Ｕ／ｍｌ、ＧＩＢＣＯ）及びコラゲナーゼＩＩ（２３５Ｕ／ｍｇ）（１．５ｍｌ／後肢、０．５ｍｌ／ダイアフラム）を添加して酵素消化を誘導し、ペレットを再懸濁し、１０ｍｌの血清用ピペットで粉砕した。試料を３７℃の水浴中で２０分間撹拌（７０ｒｐｍ）した後、１０ｍｌのシリンジを使用して１８及び１９ゲージの針に通し、細胞懸濁液を単一細胞に機械的に解離した。試料を４℃で５００ｇで１０分間遠心分離し、ペレットを再懸濁し、４０μｍのナイロンセルストレーナー（Ｅｕｒｏｃｌｏｎｅ）を通して濾過し、遠心分離し（５００ｇ、４℃で１０分間）、次いで洗浄培地中で再懸濁した。細胞を回転ホイール（１０ｒｐｍ）上で４５分間、４℃で一次抗体とともにインキュベートして、マクロファージ、線維脂質産生前駆細胞及び衛星細胞を標識した。使用した一次抗体のリストを、表２にまとめる。試料を洗浄し、ＡＰＣストレプトアビジン（１：１００、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）を添加し、試料を回転ホイール（１０ｒｐｍ）上で４℃で２０分間インキュベートし、次いで洗浄し、選別緩衝液（洗浄培地＋（１．５ｍＭのＥＤＴＡ、２％ＢＳＡ、１％Ｌ－グルタミン、及び１％ペニシリン－ストレプトマイシンを有するＰＢＳ、１：１の比）中に再懸濁させた。試料を細胞ストレーナーキャップチューブ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を通して最終的に濾過した。

【表4】

【0192】

ＦＡＣＳ ＡＲＩＡ（商標）ＩＩ細胞選別機（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、細胞集団を分離した。前方散乱（ＦＳＣ）及び側方散乱（ＳＳＣ）としての物理的パラメータを、細胞塊、破片、死細胞を除外し、単一細胞を単離するために使用した。衛星細胞を、抗ＣＤ３１、抗ＣＤ４５、抗Ｓｃａ１抗体を用いた陰性選択及び抗Ｖｃａｍ抗体を用いた陽性選択によって精製し、線維性脂肪原性前駆体を、抗ＣＤ３１及び抗ＣＤ４５抗体を用いた陰性選択及び抗Ｓｃａ１抗体を用いた陽性選択によって精製し、マクロファージを、抗ＣＤ４５及び抗Ｆ４／８０抗体を用いた陽性選択によって精製した。Ｐａｘ７ＣｒｅＥＲ／ＷＴ；Ｒ２６ＲＹＦＰ／ＷＴ；ｍｄｘ４Ｃｖマウスから採取した試料において、衛星細胞を、ＹＦＰ＋ｖｅ細胞集団を単離することによって精製した。ソーティング後、細胞をＲＮＡ抽出及びＲＴ－ＰＣＲのために処理した。

【0193】

リアルタイムＰＣＲ
ＲＮＡ抽出の前に、筋肉を解剖し、瞬間冷凍した。瞬間凍結した筋肉を、液体窒素下でドライアイス上でモルタルとペストルを使用してホモジナイズした。総ＲＮＡを、ＴＲＩｚｏｌ（登録商標）試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を製造業者の指示に従って使用して、筋肉及びＦＡＣＳ単離細胞から抽出した。ＲＮＡを、ＮａｎｏＤｒｏｐ分光光度計を使用して定量化し、製造業者の指示に従って、Ｈｉｇｈ Ｃａｐａｃｉｔｙ ｃＤＮＡ Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ Ｋｉｔ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して逆転写した。遺伝子発現を、ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）及びＣ１０００ Ｔｏｕｃｈ ｔｈｅｒｍｏｃｙｃｌｅｒ－ＣＦＸ９６ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｂｉｏｒａｄ）を使用して定量的ＲＴ－ＰＣＲによって測定した。ＲＴ－ＰＣＲに使用されるサーモプロトコルを表３に示す。エクソン－エクソン接合部にまたがるプライマーを使用した（表４）。標準物質としてマウスＨＰＲＴ（ヒポキサンチン－グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ）ｍＲＮＡレベルを使用して、各転写産物のレベルを測定した。

【表5】

【表6】

【0194】

クレアチンキナーゼ試験
生後約３ヶ月のＣ１ｑａＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖ及びＰａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスから採取した血清試料に対して、屠殺前にクレアチンキナーゼ試験を行った。クレアチンキナーゼ活性アッセイキット（比色法）（Ａｂｃａｍ，１５５９０１）を、製造業者の指示に従って分析に使用した。

【0195】

免疫蛍光
筋肉切片を、当該技術分野で知られるように、免疫蛍光のために処理した。手短に言えば、解剖した筋肉を０．５％のパラホルムアルデヒドを用いて４時間固定した後、一晩３０％のスクロースに移し、最適切削温度化合物（ＯＣＴ）中で凍結させ、８μｍで凍結切除した。この取得作業は、モノクロカメラ（ＡｘｉｏＣａｍ ５０３ ｍｏｎｏ Ｄ）を備えたＺｅｉｓｓ Ａｘｉｏ Ｏｂｓｅｒｖｅｒ Ｚ１光学顕微鏡を使用して行った。抗アキシン２（ａｂ３２１９７、１：２０）及び抗Ｃ１ｑ（ａｂ１１８６１、１：５０）を一次抗体として使用した。Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４８８／５９４（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を二次抗体として用いた。

【0196】

Ｚｅｎ２ソフトウェア（Ｚｅｉｓｓ）を免疫蛍光解析に使用した。筋肉の再生領域内の１０１７μｍ^２の１０６以上のランダムに選択された領域における各生物学的複製について、Ｃ１ｑ及びアキシン２の平均画素強度を測定した。二次抗体でのみ染色した切片で測定した背景ピクセル強度を差し引いた。正規または非正規のデータセット分布、スピアマン（ｒ）、及びピアソン係数（ｒ）を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して決定した。

【0197】

統計分析
特に明記しない限り、本明細書に提示された実験を少なくとも３回繰り返した。特に明記しない限り、データは平均値±ＳＥＭとして提示する。統計解析は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ８を使用して行った。多重比較のために一元配置分散分析（ｏｎｅ－ｗａｙ ＡＮＯＶＡ）検定を実施し、２つの群間の比較のためにパラメトリックスチューデントｔ検定を実施した。生物学的複製の数及び特定の試験の使用を、各図の凡例で示す。統計的有意性をｐ値（ｐ）で表した：ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【0198】

組織の溶解
（嗅球及び小脳を含まない）脳を、１：１０ｗ／ｖのＢｕｐＨ（商標）トリス緩衝生理食塩水（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ２８３７９）＋プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ａ３２９６３）＋１０ｍＭ ＥＤＴＡ）中で、Ｑｉａｇｅｎ ＴｉｓｓｕｅＬｙｓｅｒ中の７ｍｍのスチールビーズで２分間、３０Ｈｚでホモジナイズすることによって溶解させた。次いで、溶解物を１７，０００×ｇで２０分間スパニングした。上清をＥＬＩＳＡアッセイに使用した。総タンパク質を、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）ＢＣＡタンパク質アッセイキット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ２３２２５）を使用して測定した。

【0199】

ＰＫ及び補体の分析
遊離抗Ｃ１ｑブロッキングマウス抗体、遊離Ｃ１ｑ、総Ｃ１ｑ、Ｃ１ｓ、Ｃ４、Ｃ２、Ｃ３、及び活性化マーカーＣ１ｑ－Ｃ３ｄ複合体、Ｃ１ｓ－Ｃ１ｉｎｈ複合体、及びＣ３ｄのレベルを、サンドイッチＥＬＩＳＡを使用して、血漿及び組織溶解物中で測定した。黒色の９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ＃３９２５）を、重炭酸緩衝液（ｐＨ９．４）中の７５μＬのそれぞれの捕捉抗体（表５）で４Ｃで一晩被覆した。翌日、プレートをｄＰＢＳ ｐＨ７．４（ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水）で洗浄し、次いで３％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含有するｄＰＢＳ緩衝液でブロッキングした。アッセイ緩衝液（０．３％ＢＳＡ、０．１％Ｔｗｅｅｎ２０、１０ｍＭ ＥＤＴＡを含有するｄＰＢＳ）中の精製タンパク質で標準曲線を作成した。試験用の血清または血漿サンプルをそれぞれの希釈でアッセイ緩衝液中で調製した。ブロッキング緩衝液をタッピングによってプレートから除去した。標準及びサンプルを１ウェル当たり７５μＬで二連で添加し、ＰＫ測定のために３００ｒｐｍで室温で１時間振盪しながらインキュベーションし、その後、他のアッセイのために４Ｃで一晩インキュベーションした。プレートを洗浄緩衝液（０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含有するｄＰＢＳ）で３回洗浄し、７５μＬのアルカリホスファターゼコンジュゲート二次抗体（表５）を全てのウェルに添加した。プレートを室温で振盪しながら１時間インキュベーションした。プレートを洗浄緩衝液で３回洗浄し、７５μＬのアルカリホスファターゼ基質（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｔ２２１４）を使用して発色させた。室温で２０分後、プレートをルミノメーターを使用して読み取った。標準を４ＰＬロジスティックフィットを使用してフィッティングし、未知の濃度を決定した。分析物レベルを希釈について補正し、次いでＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍを使用してプロットした。

【表7】

【0200】

実施例２：野生型、ジストロフィー型及び高齢野生型マウスの骨格筋における補体レベルの評価
古典的補体タンパク質Ｃ１ｑ、Ｃ３及びＣ３ｄのレベルを、約１歳の野生型、約２歳の野生型及び約１歳のｍｄｘ^４Ｃｖマウスの横隔膜、大腿四頭筋及び前脛骨でＥＬＩＳＡを通して評価した。

【0201】

図１：年齢適合対照（約１歳）と比較して、ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの脛骨前部において、Ｃ１ｑ、Ｃ３及びＣ３ｄのレベルの増加が観察され、約１歳の野生型と比較して、約２歳のマウスの脛骨前部において、Ｃ１ｑのレベルの増加が観察された。年齢適合対照（約１歳）と比較して、ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの横隔膜においてＣ１ｑ、Ｃ３及びＣ３ｄのレベルの増加を示唆する傾向が観察された。Ｃ１ｑレベルは、年齢マッチングされた対照（約１歳）と比較して、ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの大腿四頭筋で増加し、Ｃ３及びＣ３ｄレベルの両方が同様の傾向を示している。最後に、Ｃ１ｑ及びＣ３レベルの増加を示唆する傾向が、約１歳の野生型と比較して、約２歳のマウスの大腿四頭筋において観察された。

【0202】

古典的補体タンパク質Ｃ１ｑ、Ｃ１ｓ、Ｃ３、Ｃ３ｄ及びＣ４のレベルを、約１ヶ月、約３ヶ月及び約１歳の野生型ならびにｍｄｘ^４Ｃｖの横隔膜、大腿四頭筋及び脛骨前部におけるＥＬＩＳＡを通して評価した。重要なことに、評価を筋肉に限定し、血清タンパク質成分を分析から除外することを目的として、筋肉解離及びＥＬＩＳＡの前に、マウスにＰＢＳを灌流した。Ｃ１ｑ、Ｃ１ｓ、Ｃ３、Ｃ３ｄ及びＣ４は、分析した全ての野生型及びｍｄｘ^４Ｃｖ筋肉で発現した。

【0203】

図２及び３：Ｃ１ｑ、Ｃ１ｓ、Ｃ３及びＣ３ｄタンパク質発現は、横隔膜、大腿四頭筋及び前脛骨における野生型と比較して、約１ヶ月、約３ヶ月及び約１歳のジストロフィー性筋肉においてより高く、ほとんどの場合において統計的有意性に達した。Ｃ４タンパク質の発現は、野生型と比較して約１ヶ月齢のマウスのジストロフィー性脛骨前部及び大腿四頭筋において、野生型と比較して約３ヶ月齢のジストロフィー性マウスの横隔膜において、及び野生型と比較して約１歳のジストロフィー性マウスの脛骨前部において、より高かった。

【0204】

実施例３：野生型及びジストロフィー性マウスにおける行動試験
行動試験は、補体タンパク質発現について分析した同じ野生型及びジストロフィー性の約１ヶ月、約３ヶ月及び約１歳のマウスで実施した（図２及び３）。以下の機能パラメータを評価した：１）疲労前の最大ぶら下がり時間、４肢ぶら下がりワイヤー試験によって評価；
２）移動した総距離、平均速度、及び移動時間のパーセンテージを、オープンフィールド試験によって評価。

【0205】

図４：野生型及びジストロフィー性マウスは、健康な対照と比較してｍｄｘマウスで発生する報告された運動障害と一致して、筋肉解離の前に実施された行動試験及びＥＬＩＳＡにおいて、示差的な筋抵抗を示した。ジストロフィー性マウスは、約３ヶ月及び約１歳での年齢適合野生型と比較して、４肢ぶら下げワイヤー試験における抵抗性が低かった。オープンフィールド試験では、約３ヶ月齢のジストロフィー性マウスは、野生型と比較して、より低い速度で短い距離を歩き、より多くの不動時間を費やしたが、約１ヶ月齢及び約１歳のジストロフィー性マウスと年齢適合野生型と比較して、差は観察されなかった。

【0206】

実施例４：インビボでの抗Ｃ１ｑブロッキング抗体の有効性の評価
Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスを抗Ｃ１ｑブロッキング抗体または対照抗体で処理した。機能パラメータ（すなわち、疲労及び運動活動の前の最大時間）を評価するために、処理の前後に行動試験を実施した。補体レベル及びクレアチンキナーゼレベルを評価するために、処理の前後に血液試料を採取した。屠殺の後、補体レベル及び遺伝子発現解析を行うために、組織（すなわち、後肢筋肉、横隔膜、肝臓及び心臓）を採取した。抗Ｃ１ｑブロッキング抗体処理のために用いた実験計画を図５に示す。

【0207】

行動試験及び試料（すなわち、血液及び組織）採取を、Ｃ１ｑａの発現が骨髄細胞株において条件的に除去されるＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスでも実施した。Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの検証を図６に示す。

【0208】

実施例５：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスにおける行動試験
約１ヶ月、約２ヶ月及び約３ヶ月齢のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスに対して、疲労前の最大ぶら下がり時間（４本の四肢ぶら下がりワイヤー試験を介して）、走行した総距離、平均速度、及び移動時間のパーセンテージ（オープンフィールド試験を介して）を評価するために、行動試験を行った。

【0209】

同じ行動試験を、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスに対して、処理の前後に抗Ｃ１ｑブロッキング抗体または対照抗体で処理した。

【0210】

図７～１０：生後約１ヶ月（すなわち、生後３１日目～３６日目の試験の初日）で、４肢ぶら下がりワイヤー試験の対照と比較して、Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスにおける物理的抵抗の改善を示唆する傾向を観察した。同じ傾向が約２ヶ月齢（すなわち、生後６７～６９日目の試験の初日）で観察されたが、マウスが約３ヶ月齢（すなわち、生後７９～８１日目の試験の初日）で試験されたときには、もはや観察されなかった。試験した時点（すなわち、約１ヶ月、約２ヶ月及び約３ヶ月）のいずれにおいても、オープンフィールド試験における対照と比較して、Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスにおいて差異的な運動活性は観察されなかった。

【0211】

抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したジストロフィー性マウスは、４肢ぶら下がりワイヤー試験で対照抗体で処理したマウスと比較して、高い身体的抵抗性を生じさせた。対照と比較して、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したジストロフィー性マウスにおいて、オープンフィールド試験パラメータ（すなわち、総距離、平均速度、及び移動時間のパーセンテージ）において差は観察されなかった。注目すべきことに、行動試験は、処理前及び処理後の生後約２．５ヶ月（すなわち、生後６７日目の試験の初日）及び生後約３ヶ月（すなわち、生後８１日目の試験の初日）に、これらの動物でそれぞれ実施した（図５）。

【0212】

実施例６：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィー性マウスにおける正準Ｗｎｔ標的遺伝子及び線維原性遺伝子の遺伝子発現評価
本実施例では、Ｃ１ｑ枯渇が正規のＷｎｔ経路の発現の低下をもたらしたかどうか及び／または線維化レベルの低下をもたらしたかどうかを評価するために、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びＰａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスから単離された筋肉及び単一細胞における遺伝子発現分析を行った。正規のＷｎｔ標的遺伝子（すなわち、Ｔｇｆβ２、Ｌｇｒ５及びＡｘｉｎ２）及び線維原性遺伝子（すなわち、コラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１及びフィブロネクチン）のｍＲＮＡレベルを、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理されたＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びＰａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの筋肉（すなわち、腓腹筋及び横隔膜）ならびに単離された単一細胞（すなわち、線維性／脂肪原性前駆細胞及び衛星細胞）で評価した。

【0213】

図１１～１４：全体として、対照と比較して、Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖ筋及び単一細胞におけるＷｎｔ標的遺伝子（すなわち、Ｔｇｆβ２、Ｌｇｒ５及びＡｘｉｎ２）または線維原性遺伝子（すなわち、コラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１及びフィブロネクチン）のいずれかの低下した発現は観察されなかった。

【0214】

また、対照と比較して、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理されたＰａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスの筋肉及び単一細胞において、Ｗｎｔ標的遺伝子（すなわち、Ｔｇｆβ２、Ｌｇｒ５及びＡｘｉｎ２）または線維原性遺伝子（すなわち、コラーゲン１ａ１、コラーゲン３ａ１及びフィブロネクチン）のいずれかの低下した発現は観察されなかった。

【0215】

図２７は、抗Ｃ１ｑ、抗Ａｘｉｎ２抗体、及びＨｏｅｃｈｓｔで染色した約１歳のｍｄｘ^４Ｃｖの腓腹筋の代表的な免疫蛍光を示す。スケールバー（上部画像）。各領域におけるＣ１ｑとＡｘｉｎ２強度値との間の正の相関を示した。

【0216】

実施例７：Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス由来、及び抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したジストロフィー性マウス由来の血清におけるクレアチンキナーゼ試験
血清クレアチンキナーゼ（ＣＫ）レベルは、ジストロフィーマウスにおける筋肉損傷の指標として、及びＤＭＤの診断バイオマーカーとして一般的に使用される。Ｃ１ｑの枯渇がＣＫレベルの低下をもたらしたかどうかを評価するために、Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びＰａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスにおいて、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したＣＫ活性を測定した。ＣＫ試験は、屠殺（約３ヶ月齢）後に採取された血清サンプルを使用して、両方のケースで実施した。

【0217】

図１５：対照と比較して、Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖ血清におけるＣＫ活性の低下を示唆する傾向を観察した。

【0218】

本実施例では、Ｃ１ｑブロッキング抗体及び対照抗体で処理した後のＰａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４ＣｖマウスにおけるＣＫ活性の低下を示唆する傾向を観察した。しかしながら、処理前に同じ試料で測定された異なるＣＫ活性レベル（図１５ＢのＣｎｔｒ（プレ）及び抗Ｃ１ｑ（プレ）、おそらく同様）は、生物学的変動性を示唆する。

【0219】

実施例８：Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したジストロフィーマウスから採取した血漿及び筋肉における補体レベル評価
Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で治療したジストロフィー性マウスから採取した血漿中及び組織中の補体レベルを評価するために、ＥＬＩＳＡアッセイを行った。古典的補体タンパク質（すなわち、Ｃ１ｑ、Ｃ３ｄ及びＣ１ｓ）、Ｃ１ｑ－Ｃ３ｄ免疫複合体（ＩＣ）及びＣ１ｓ－Ｃ１阻害剤複合体（Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）のレベルを、Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスから採取した血漿、横隔膜、腓腹筋及び肝臓、ならびに抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で治療したジストロフィー性マウスから評価した。抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したジストロフィー性マウスから採取した試料において、試料中に存在する薬物レベルも評価した（ＰＫ）。更に、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したジストロフィーマウスから採取した心臓試料中で、前述のタンパク質のレベルを全て評価した。

【0220】

図１６～２２：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体処理に関して、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したマウス（すなわち、血漿、横隔膜、腓腹筋、肝臓及び心臓）から採取した全ての試料中に見出される薬物レベルは、対照抗体で処理したマウスと比較して増加した。分析した試料中では、腓腹筋は薬物量が最も多い筋肉であり、心臓は薬物量が最も少ない筋肉であった。Ｃ１ｑタンパク質のレベルは、全ての分析された試料において、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体による処理後に低下した。特に、Ｃ１ｑ枯渇は、横隔膜、腓腹筋、及び肝臓において強く効果があり、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理されたマウスから採取された試料中のＣ１ｑレベルは、Ｃ１ｑ遺伝的に切除されたマウス（すなわち、Ｃ１ｑ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖ）から採取された試料中で検出されたレベルと同様であった。

【0221】

全体的に、他の試験されたタンパク質（すなわち、Ｃ３ｄ、Ｃ１ｓ）及びタンパク質複合体（すなわち、ＩＣ、Ｃ１ｓＣ１ｉｎｈ）のレベルにおいて、対照と比較して、抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したジストロフィー性マウスから採取した試料において、及びＣ１ｑ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖ試料において、対照と比較して、差は観察されなかった。

【0222】

実施例９：野生型及びジストロフィーの骨格筋における補体レベルの評価
Ｃ１複合体サブユニットのレベル：Ｃ１ｑａ、Ｃ１ｑｂ、Ｃ１ｑｃ、Ｃ１ｒ、及びＣ１ｓを、約１歳の野生型及びｍｄｘ^４Ｃｖ後肢筋肉のｍＲＮＡ発現を測定することによって評価した。Ｃ１ｑａ及びＣ１ｑｂの発現は、約１歳の野生型及びｍｄｘ^Ｃｖ後肢筋から単離されたマクロファージにおいて測定された。

【0223】

図２３及び２６：Ｃ１複合体成分の発現は、ジストロフィー性筋肉において増強される。Ｃ１複合体サブユニットＣ１ｑａ、Ｃ１ｑｂ、Ｃ１ｑｃ、Ｃ１ｒ、Ｃ１ｓのｍＲＮＡ発現は、約１歳の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｍｄｘ）マウスの後肢筋において測定した。

【0224】

図２４Ａ～２４Ｃ：Ｃ１ｑサブユニットは、ジストロフィーマウスの骨格筋内にマクロファージを浸潤させることによって発現される。図２４Ａ～２４Ｂは、約１歳の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘＣｖ（Ｍｄｘ）の後肢筋肉から単離した衛星細胞（ＳＣ）、マクロファージ（ＭＡＣ）及び線維性／脂肪原性前駆細胞（ＦＡＰ）におけるＣ１ｑａ（Ａ）及びＣ１ｑｂ（Ｂ）発現のｑＰＣＲ分析を示す。図２４Ｃは、約１歳の野生型（ＷＴ）及びｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｍｄｘ）マウスの後肢筋における１ｍｇ当たりの組織当たりのマクロファージの数を示す。

【0225】

実施例１０：抗Ｃ１ｑブロッキング抗体で処理したＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及びジストロフィーマウスにおける行動試験
Ｃ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスについて、約１ヶ月、約２ヶ月及び約３ヶ月齢で行動試験を実施して、疲労前の最大ぶら下がり時間（４肢ぶら下がりワイヤー試験を通じて）、走行した総距離、平均速度、移動時間のパーセンテージ（オープンフィールド試験を通じて）、２肢の握力、及び回転ロッドの速度を評価した。

【0226】

同じ行動試験を、Ｐａｘ７^{ＣｒｅＥＲ}；Ｒ２６Ｒ^ＹＦＰ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウスに対して、処理の前後に抗Ｃ１ｑブロッキング抗体または対照抗体で処理した。

【0227】

図２５Ａ～２５Ｉは、約１歳のＣ１ｑａ^ＫＯ；ｍｄｘ^４Ｃｖマウス及び対照における行動試験を示す。図２５Ａは、約１歳のＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＦＬ／ＦＬ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（Ｃ１ｑａＫＯ）及びＬｙｚ^{Ｃｒｅ＋／－}Ｃ１ｑａ^{ＷＴ／ＷＴ}；ｍｄｘ^４Ｃｖ（ＣＮＴＲ）のマウス体重（グラム）を示す。図２５Ｂ、２５Ｃは、（図２５Ａ）のように、マウスに対して実施されたぶら下がり試験（ＨＴ）を示す。総ぶら下がり時間（図２５Ｂ）及びマウス体重について正規化された総ぶら下がり時間（図２５Ｃ）を評価した。図２５Ｄ～２５Ｆは、（図２５Ａ）のように、マウスに対して実施されたオープンフィールド（ＯＦ）試験を示す。総距離（ｃｍ）（図２５Ｄ）、平均速度（ｃｍ／秒）（図２５Ｅ）及び移動時間のパーセンテージ（図２５Ｆ）を評価した。図２５Ｇ、２５Ｈは、（図２５Ａ）のように、マウスに対して行われた２つの脚のグリップ試験を示す。マウス体重に対して正規化された最大強度（図２５Ｇ）及びマウス体重に対して正規化された総グリップ時間（図２５Ｈ）を評価した。図２５Ｉは、（図２５Ａ）のように、マウスで実施されたロータロッド試験を示す。マウス体重について正規化された総歩行時間を評価した。Ｎ＝５（Ｃ１ｑａＫＯ）、Ｎ＝７（ＣＮＴＲ）、Ｎ＝２（ＷＴ）。データを、ＳＥＭを用いて平均として表す。両側非対合ｔ検定を適用した。ｐ＞０．０５：ｎｓ；ｐ≦０．０５：＊；ｐ≦０．０１：＊＊；ｐ≦０．００１：＊＊＊及びｐ≦０．０００１：＊＊＊＊。

【0228】

参照による組み込み
本明細書で引用される特許、公開された特許出願、及び非特許文献の各々は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0229】

均等物
当業者らは、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態に対する多くの均等物を認識するか、または単なる通常の実験のみを使用して確認することができるであろう。そのような均等物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図されている。

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図1D】

【図1E】

【図1F】

【図1G】

【図1H】

【図1I】

【図1J】

【図1K】

【図1L】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図2D】

【図2E】

【図2F】

【図2G】

【図2H】

【図2I】

【図3A】

【図3B】

【図3C】

【図3D】

【図3E】

【図3F】

【図3G】

【図3H】

【図3I】

【図4A】

【図4B】

【図4C】

【図4D】

【図4E】

【図5】

【図6A】

【図6B】

【図6C】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図7D】

【図7E】

【図7F】

【図8A】

【図8B】

【図8C】

【図8D】

【図8E】

【図8F】

【図9A】

【図9B】

【図9C】

【図9D】

【図9E】

【図9F】

【図10A】

【図10B】

【図10C】

【図10D】

【図10E】

【図10F】

【図11A】

【図11B】

【図11C】

【図11D】

【図11E】

【図12A】

【図12B】

【図12C】

【図12D】

【図12E】

【図13A】

【図13B】

【図13C】

【図13D】

【図13E】

【図13F】

【図14A】

【図14B】

【図14C】

【図14D】

【図14E】

【図14F】

【図15A】

【図15B】

【図16A】

【図16B】

【図16C】

【図16D】

【図16E】

【図16F】

【図17A】

【図17B】

【図17C】

【図17D】

【図17E】

【図17F】

【図17G】

【図18A】

【図18B】

【図18C】

【図18D】

【図18E】

【図18F】

【図18G】

【図18H】

【図18I】

【図19A】

【図19B】

【図19C】

【図19D】

【図19E】

【図19F】

【図19G】

【図20A】

【図20B】

【図20C】

【図20D】

【図20E】

【図20F】

【図20G】

【図20H】

【図20I】

【図20J】

【図20K】

【図20L】

【図20M】

【図21A】

【図21B】

【図21C】

【図21D】

【図21E】

【図21F】

【図21G】

【図22A】

【図22B】

【図22C】

【図22D】

【図22E】

【図22F】

【図22G】

【図23】

【図24A】

【図24B】

【図24C】

【図25A】

【図25B】

【図25C】

【図25D】

【図25E】

【図25F】

【図25G】

【図25H】

【図25I】

【図26】

【図27】

【配列表】

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【国際調査報告】