知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
▶ ユーシービー ビオファルマ ソシエタ ア レスポンサビリタ リミタータの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-10-28
(54)【発明の名称】製剤
(51)【国際特許分類】
A61K 39/395 20060101AFI20241018BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20241018BHJP
A61P 21/00 20060101ALI20241018BHJP
A61P 25/16 20060101ALI20241018BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20241018BHJP
A61P 25/14 20060101ALI20241018BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20241018BHJP
A61P 37/06 20060101ALI20241018BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20241018BHJP
A61P 9/00 20060101ALI20241018BHJP
A61P 9/10 20060101ALI20241018BHJP
A61P 17/06 20060101ALI20241018BHJP
A61P 1/04 20060101ALI20241018BHJP
A61P 27/02 20060101ALI20241018BHJP
A61P 17/02 20060101ALI20241018BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20241018BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20241018BHJP
A61K 47/18 20170101ALI20241018BHJP
A61K 47/02 20060101ALI20241018BHJP
A61K 47/12 20060101ALI20241018BHJP
A61K 47/26 20060101ALI20241018BHJP
C07K 16/40 20060101ALI20241018BHJP
C12N 15/13 20060101ALN20241018BHJP
【ＦＩ】
A61K39/395 N
A61P35/00
A61P21/00
A61P25/16
A61P25/28
A61P25/14
A61P25/00
A61P37/06
A61P29/00
A61P9/00
A61P9/10
A61P17/06
A61P1/04
A61P27/02
A61P17/02
A61P43/00 111
A61K39/395 D
A61K9/08
A61K47/18
A61K47/02
A61K47/12
A61K47/26
C07K16/40
C12N15/13 ZNA
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024524494
(86)(22)【出願日】2022-10-20
(85)【翻訳文提出日】2024-06-17
(86)【国際出願番号】 EP2022079182
(87)【国際公開番号】W WO2023067049
(87)【国際公開日】2023-04-27
(31)【優先権主張番号】2115121.2
(32)【優先日】2021-10-21
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】524150476
【氏名又は名称】ユーシービー ビオファルマ ソシエタ ア レスポンサビリタ リミタータ
【氏名又は名称原語表記】ＵＣＢ ＢＩＯＰＨＡＲＭＡ ＳＲＬ
(74)【代理人】
【識別番号】100123788
【弁理士】
【氏名又は名称】宮崎 昭夫
(74)【代理人】
【識別番号】100127454
【弁理士】
【氏名又は名称】緒方 雅昭
(72)【発明者】
【氏名】ピアボーム、 クラウデ
(72)【発明者】
【氏名】ボーネン、 ミカエル ジョゼフ エデュアルド
【テーマコード（参考）】
4C076
4C085
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C076AA12
4C076BB11
4C076CC07
4C076DD23Z
4C076DD43Z
4C076DD51Z
4C076EE23
4C076FF15
4C076FF61
4C076FF63
4C085AA13
4C085AA14
4C085BB11
4C085EE01
4C085GG01
4H045AA11
4H045BA10
4H045CA40
4H045DA76
4H045EA20
4H045FA74
(57)【要約】
製剤。本発明は、医薬製剤の分野に関する。より詳細には、抗ＴＧ２抗体を含む液体製剤及びそのような製剤の製造方法に関する。本発明による液体製剤は、約２～２５℃の温度で適切な期間保存すると安定である。
【選択図】なし
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
抗ＴＧ２抗体、ｐＨを約５．０～７．０に保つ緩衝液及びグリシン又はＮａＣｌからなる群から選択される安定化剤を含む安定な液体製剤。
【請求項2】
前記緩衝液は、ヒスチジン又はクエン酸緩衝液である、請求項１に記載の安定な液体製剤。
【請求項3】
前記ヒスチジン緩衝液は、ｐＨを５．５若しくは約５．５±０．２に保つ又は前記クエン酸緩衝液がｐＨを６．５若しくは約６．５±０．２に保つ、請求項２に記載の安定な液体製剤。
【請求項4】
前記緩衝液の濃度は、１０若しくは約１０～１００ｍＭ、好ましくは、２０～８０ｍＭ、さらに好ましくは、４０～６０ｍＭである、前記請求項の何れかに記載の安定な液体製剤。
【請求項5】
前記安定化剤は、グリシンであり、約１５０ｍＭ～３５０ｍＭ、好ましくは、２００～３００ｍＭ、さらに好ましくは、２２０～２８０ｍＭの量である、前記請求項の何れかに記載の安定な液体製剤。
【請求項6】
前記安定化剤は、ＮａＣｌであり、約１００ｍＭ～２００ｍＭ、好ましくは、１２５～１７５ｍＭの量である、前記請求項の何れかに記載の安定な液体製剤。
【請求項7】
さらに任意選択で、ポリソルベ－ト界面活性剤を含む、前記請求項の何れかに記載の安定な液体製剤。
【請求項8】
前記ポリソルベ－ト界面活性剤の濃度は、０．０１若しくは約０．０１～０．５ｍｇ／ｍＬである、請求項７に記載の安定な液体製剤。
【請求項9】
前記抗ＴＧ２抗体の濃度は、約１０ｍｇ／ｍＬ～約２００ｍｇ／ｍＬ、好ましくは、約３０ｍｇ／ｍＬ～約１８０ｍｇ／ｍＬ又は好ましくは、約５０ｍｇ／ｍＬ～約１５０ｍｇ／ｍＬである、前記請求項の何れか１項に記載の安定な液体製剤。
【請求項10】
前記製剤は、約１００ｍｇ／ｍＬの抗ＴＧ２抗体、ｐＨを５．５若しくは約５．５に保つ約５０ｍＭのヒスチジン緩衝液、約２５０ｍＭのグリシン又は約１５０ｍＭのＮａＣｌ及び任意選択で、約０．０２～０．０６ｍｇ／ｍＬのポリソルベ－トを含む、前記請求項の何れか１項に記載の安定な液体製剤。
【請求項11】
前記製剤は、約１００ｍｇ／ｍＬの抗ＴＧ２抗体、ｐＨを６．５若しくは約６．５に保つ約５０ｍＭのクエン酸緩衝液、約２５０ｍＭのグリシン又は約１５０ｍＭのＮａＣｌ及び任意選択で、約０．０２～０．０６ｍｇ／ｍＬのポリソルベ－トを含む、請求項１～９の何れか１項に記載の安定な液体製剤。
【請求項12】
前記抗ＴＧ２抗体は、以下を含む、前記請求項の何れかに記載の安定な液体製剤：１）配列番号ＮＯ：１に定義される配列を有する軽鎖可変ドメイン及び配列番号ＮＯ：２に定義される配列を有する重鎖可変ドメイン、
２）配列番号ＮＯ：１で定義される配列と少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する軽鎖可変ドメイン及び配列番号ＮＯ：２で定義される配列と少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する重鎖可変ドメイン、
３）配列番号ＮＯ：３で定義される配列を有する軽鎖及び配列番号ＮＯ：４で定義される配列を有する重鎖、又は、
４）配列番号ＮＯ：３で定義される配列と少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する軽鎖及び配列番号ＮＯ：４で定義される配列と少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する重鎖。
【請求項13】
抗ＴＧ２抗体と、１）ヒスチジン又はクエン酸緩衝液、２）グリシン又はＮａＣｌ、及び、任意選択で、３）ポリソルベ－ト界面活性剤との混合物を形成する工程を含む、前記請求項の何れかに記載の安定な液体製剤の製造方法。
【請求項14】
請求項１から１２の何れか１項に記載の安定な液体製剤を含む容器を含む製造物品。
【請求項15】
治療に使用するための、請求項１～１２の何れか１項に記載の安定な液体製剤。
【請求項16】
請求項１～１２の何れか１項に記載の安定な液状製剤を投与することによる、疾患又は疾病の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、医薬製剤（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ）の分野に関する。より詳細には、抗ＴＧ２抗体を含む液体製剤及びそのような製剤の製造方法に関する。本発明に係る液体製剤は、約２～２５℃の温度で適切な期間保存すると安定である。
【背景技術】
【0002】
組織トランスグルタミナ－ゼ（Ｔｉｓｓｕｅ ｔｒａｎｓｇｌｕｔａｍｉｎａｓｅ）（ＴＧ２）は、イプシロン（ガンマ－グルタミル）リジン架橋を介してタンパク質間に架橋を形成する酵素である。ＴＧ２の高発現は、異常なタンパク質架橋を引き起こし、様々なタイプの組織瘢痕化、いくつかの脳疾患における神経原線維のもつれの形成、いくつかの癌における化学療法への抵抗性等、いくつかの病態に関連している。低分子、サイレンシングＲＮＡ又は抗体等の様々なＴＧ２阻害剤（例えば、特許文献１、特許文献２又は特許文献３）が、ＴＧ２が介在する疾病（ｄｉｓｏｒｄｅｒ）の可能性のある治療のために開示されている。
ＴＧ２に対する抗体は文献に記載されているが、安定な製剤は今のところ提案されていない。抗体等の生理活性タンパク質を含む医薬組成物を調製する場合、当該組成物は、タンパク質が適切な期間安定であるように製剤化されなければならない。タンパク質の活性／安定性の低下は、特に変性、凝集、酸化によるタンパク質の化学的又は物理的不安定性から生じ得る。そのため、得られた生成物は、薬学的に許容できない可能性がある。賦形剤の使用は所与のタンパク質の安定性を高めることが知られているが、これらの賦形剤の安定化効果は、賦形剤の性質及び生物活性タンパク質自体に大きく依存する。
抗ＴＧ２抗体を有効成分として含有する液体製剤であって、当該製剤が適切な期間安定であり、静脈注射又は皮下注射等の注射に使用するのに適している液体製剤に対する必要性が残っている。当該製剤は、ＴＧ２が介在する疾病又は疾患の治療における投与に有用であろう。
ＴＧ２に対する抗体は文献に記載されているが、安定な製剤は今のところ提案されていない。抗体等の生理活性タンパク質を含む医薬組成物を調製する場合、当該組成物は、タンパク質が適切な期間安定であるように製剤化されなければならない。タンパク質の活性／安定性の低下は、特に変性、凝集、酸化によるタンパク質の化学的又は物理的不安定性から生じ得る。そのため、得られた生成物は、薬学的に許容できない可能性がある。賦形剤の使用は所与のタンパク質の安定性を高めることが知られているが、これらの賦形剤の安定化効果は、賦形剤の性質及び生物活性タンパク質自体に大きく依存する。
抗ＴＧ２抗体を有効成分として含有する液体製剤であって、当該製剤が適切な期間安定であり、静脈注射又は皮下注射等の注射に使用するのに適している液体製剤に対する必要性が残っている。当該製剤は、ＴＧ２が介在する疾病又は疾患の治療における投与に有用であろう。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0003】
【特許文献1】国際公開第２００６／１００６７９号
【特許文献2】国際公開第２０１２／１４６９０１号
【特許文献3】国際公開第２０１３／１７５２２９号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0004】
本発明の目的は、抗ＴＧ２抗体を含む新規製剤を提供することである。より詳細には、前記製剤は、抗ＴＧ２抗体を含む安定な液体製剤である。本発明はまた、本発明に係る液体製剤を調製する方法も提供する。本明細書に記載の液体製剤は、ＴＧ２が介在する疾病又は疾患の治療における投与に有用である。
【課題を解決するための手段】
【0005】
第１の態様において、本発明は、抗ＴＧ２抗体、ｐＨを５．０若しくは約５．０～７．０若しくは約７．０に保つ緩衝液、安定化剤（アミノ酸又は塩等）及び任意選択で、ポリソルベ－ト界面活性剤を含む、又はそれらからなる安定な液体製剤を提供する。好ましい実施形態では、前記緩衝液は、ヒスチジン又はクエン酸緩衝液であり、前記安定化剤は、アミノ酸、好ましくはグリシン、又は、塩、好ましくはＮａＣｌの何れかである。さらに好ましい実施形態では、前記緩衝液は、ｐＨを５．５若しくは約５．５～６．５若しくは約６．５に保つ。さらに好ましい実施形態では、前記抗ＴＧ２抗体は、１０若しくは約１０ｍｇ／ｍＬ～２００若しくは約２００ｍｇ／ｍＬの量である。好ましくは、前記抗ＴＧ２抗体は、配列番号ＮＯ：１で定義される軽鎖可変領域（ｌｉｇｈｔ ｃｈａｉｎ ｖａｒｉａｂｌｅ ｒｅｇｉｏｎ）及び配列番号ＮＯ：２で定義される重鎖可変領域（ｈｅａｖｙ ｃｈａｉｎ ｖａｒｉａｂｌｅ ｒｅｇｉｏｎ）を含む。
【0006】
第２の態様において、本発明は、抗ＴＧ２抗体と、緩衝液、安定化剤（アミノ酸又は塩等）、及び任意選択で、ポリソルベ－ト界面活性剤とともに混合物を形成する工程を含む、安定な液体製剤の製造方法を提供する。好ましい実施形態では、前記緩衝液は、ヒスチジン又はクエン酸緩衝液であり、前記安定化剤は、アミノ酸、好ましくはグリシン、又は、塩、好ましくはＮａＣｌの何れかである。好ましい実施形態では、前記緩衝液は、ｐＨを、５．０若しくは約５．０～７．０若しくは約７．０、より詳細には５．５若しくは約５．５～６．５若しくは６．５に保つ。好ましくは、前記抗ＴＧ２抗体は、配列番号ＮＯ：１で定義される軽鎖可変領域及び配列番号ＮＯ：２で定義される重鎖可変領域を含む。
【0007】
第３の態様において、本発明に係る安定な液体製剤を含む容器を含む、医薬用又は獣医学用の製造物品が提供される。
【0008】
第４の態様において、本発明は、治療に使用するための、本発明に係る安定な液体製剤を提供する。
【0009】
第５の態様において、本発明は、本発明に係る安定な液体製剤を投与することにより、疾患又は疾病を治療する方法を提供する。
【0010】
定義：
－ 用語「約（ａｂｏｕｔ）」は、およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）、又は、ほぼ（ｎｅａｒｌｙ）を意味し、本明細書に記載される数値の文脈では、好ましくは、言及される（ｒｅｃｉｔｅｄ）又は特許請求される数値を中心に±１０％を意味する。
－ 値の範囲が言及される又は特許請求される場合、その範囲は言及されている値を含むことを意図している。
－ 用語「約（ａｂｏｕｔ）」は、およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）、又は、ほぼ（ｎｅａｒｌｙ）を意味し、本明細書に記載される数値の文脈では、好ましくは、言及される（ｒｅｃｉｔｅｄ）又は特許請求される数値を中心に±１０％を意味する。
－ 値の範囲が言及される又は特許請求される場合、その範囲は言及されている値を含むことを意図している。
【0011】
－ 本明細書で使用する場合、「抗ＴＧ２抗体」という用語は、イプシロン（ガンマ－グルタミル）リジン架橋を介してタンパク質間に架橋を形成する酵素である組織トランスグルタミナ－ゼ（ＴＧ２）タンパク質と結合する抗体分子を意図している。このような抗体の例は、国際公開第２０１３／１７５２２９号に記載されている。限定はしないが、本発明に従って使用できる抗ＴＧ２抗体は、例えば、配列番号ＮＯ：１で定義される軽鎖可変領域及び配列番号ＮＯ：２で定義される重鎖可変領域を含む。
【0012】
－ 本明細書で使用する「抗体」という用語には、モノクロ－ナル抗体、ポリクロ－ナル抗体及び当技術分野で知られているような組換え技術によって生成される組換え抗体が含まれるが、これらに限定されるものではない。「抗体」には、あらゆる種の抗体、特に哺乳類の抗体、例えば、あらゆるアイソタイプ（ｉｓｏｔｙｐｅ）のヒト抗体、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＥ、ＩｇＤ、及び、ＩｇＧＡ１、ＩｇＧＡ２又はＩｇＭのような５量体並びにそれらの修飾バリアントを含むこれらの基本構造の２量体として産生される抗体；非ヒト霊長類抗体、例えば、チンパンジ－、ヒヒ、アカゲザル又はシノモルガン猿由来の抗体；げっ歯類抗体、例えば、マウス又はラット由来の抗体；ウサギ又はヤギ又はウマ抗体；ラクダ類抗体（例えば、Ｎａｎｏｂｏｄｉｅｓ（登録商標）のようなラクダ又はラマ由来の抗体）及びその誘導体；ニワトリ抗体のような鳥類種の抗体；又はサメ抗体のような魚類種の抗体、が含まれる。「抗体」という用語は、少なくとも１つの重鎖及び／又は軽鎖抗体配列の第１部分（ｆｉｒｓｔ ｐｏｒｔｉｏｎ）が第１種（ｆｉｒｓｔ ｓｐｅｃｉｅｓ）由来で、前記重鎖及び／又は軽鎖抗体配列の第２部分（ｓｅｃｏｎｄ ｐｏｒｔｉｏｎ）が第２種（ｓｅｃｏｎｄ ｓｐｅｃｉｅｓ）由来である「キメラ」抗体も指す。本明細書で関心のあるキメラ抗体には、非ヒト霊長類（例えば、ヒヒ、アカゲザル又はカニクイザル等の旧世界サル）由来の可変ドメイン抗原結合配列及びヒト定常領域配列を含む「霊長類化（ｐｒｉｍａｔｉｚｅｄ）」抗体が含まれる。「ヒト化」抗体は、非ヒト抗体由来の配列を含むキメラ抗体である。ほとんどの場合、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域の残基を、マウス、ラット、ウサギ、ニワトリ、非ヒト霊長類等の非ヒト種（ドナ－抗体）の超可変領域［又は相補性決定領域（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｉｔｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎ）（ＣＤＲ）］の残基で置換したヒト抗体（レシピエント抗体）であり、所望の特異性、親和性及び活性を有する。ほとんどの場合、ＣＤＲの外側、すなわちフレ－ムワ－ク領域（ＦＲ）のヒト（レシピエント）抗体の残基は、対応する非ヒト残基でさらに置換される。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にもドナ－抗体にもない残基を含むことがある。これらの修飾は、抗体の特性をさらに洗練させるために行われる。ヒト化によって、ヒト以外の抗体のヒトにおける免疫原性が低下するため、ヒトの疾患治療への抗体の応用が容易になる。ヒト化抗体とその生成技術は当技術分野でよく知られている。また、「抗体」という用語は、ヒト化の代替として生成できるヒト抗体も指す。例えば、内在性マウス抗体の産生がなくても、免疫によりヒト抗体の全レパ－トリ－を産生できるトランスジェニック動物（例えばマウス）を作製することは可能である。ヒト抗体／抗体フラグメントをインビトロで得るための他の方法は、ファ－ジディスプレイ（ｐｈａｇｅ ｄｉｓｐｌａｙ）やリボソ－ムディスプレイ技術（ｒｉｂｏｓｏｍｅ ｄｉｓｐｌａｙ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）等のディスプレイ技術に基づくもので、少なくとも部分的に人工的に生成された、あるいはドナ－の免疫グロブリン可変（Ｖ）ドメイン遺伝子レパ－トリ－から生成された組み換えＤＮＡライブラリ－が使用される。ヒト抗体を生成するためのファ－ジ及びリボソ－ムディスプレイ技術は当技術分野でよく知られている。ヒト抗体はまた、目的の抗原でエクスビボ免疫した単離ヒトＢ細胞から生成することもでき、その後融合させてハイブリド－マを作製し、最適なヒト抗体をスクリ－ニングすることができる。「抗体」という用語は、グリコシル化抗体及びアグリコシル化抗体の両方を指す。さらに、本明細書で使用する「抗体」という用語は、完全長抗体だけでなく、抗体フラグメント、より詳細にはその抗原結合フラグメントも指す。抗体フラグメントは、当該技術分野で知られているように、少なくとも１つの重鎖又は軽鎖免疫グロブリンドメインを含み、１つ又は複数の抗原に結合する。本発明に係る抗体フラグメントの例には、Ｆａｂ、修飾Ｆａｂ、Ｆａｂ’、修飾Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆａｂ－Ｆｖ、Ｆａｂ－ｄｓＦｖ、Ｆａｂ－Ｆｖ－Ｆｖ、ｓｃＦｖ及びＢｉｓ－ｓｃＦｖフラグメントが含まれる。前記フラグメントは、ダイアボディ、トライボディ、トリアボディ、テトラボディ、ミニボディ、ｓｄＡｂ、ＶＬ、ＶＨ、ＶＨＨ又はラクダ科抗体（例えば、Ｎａｎｏｂｏｄｙ（登録商標）のようなラクダ又はラマ由来）のようなシングルドメイン抗体（ｄＡｂ）及びＶＮＡＲフラグメントであることもできる。本発明に係る抗原結合フラグメントはまた、１つ又は２つのｓｃＦｖ又はｄｓｓｃＦｖに連結されたＦａｂを含むことができ、各ｓｃＦｖ又はｄｓｓｃＦｖは、同一又は異なる標的（例えば、治療標的を結合する１つのｓｃＦｖ又はｄｓｓｃＦｖと、例えばアルブミンを結合することによって半減期を増加させる１つのｓｃＦｖ又はｄｓｓｃＦｖ）を結合する。このような抗体フラグメントの例としては、ＦａｂｄｓｓｃＦｖ（ＢＹｂｅ（登録商標）とも呼ばれる）又はＦａｂ－（ｄｓｓｃＦｖ）２（ＴｒＹｂｅ（登録商標）とも呼ばれ、例えば国際公開第２０１５／１９７７７２号を参照）が挙げられる。上記で定義した抗体分子は、その抗原結合フラグメントを含め、当技術分野で知られている。
【0013】
－ 「安定性（ｓｔａｂｉｌｉｔｙ）」という用語は、本明細書で使用する場合、本発明に係る抗ＴＧ２抗体製剤の物理的、化学的及びコンフォメ－ション安定性（生物学的効力の維持を含む）を指す。前記抗体製剤の不安定性は、高次ポリマ－を形成するための抗体の化学的分解又は凝集、脱グリコシル化、グリコシル化の修飾、酸化又は抗体の少なくとも１つの生物学的活性を低下させる他の構造修飾によって引き起こされ得る。
【0014】
－ 「安定な製剤（ｓｔａｂｌｅ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）」という用語は、目的のタンパク質（ここでは抗ＴＧ２抗体）が保存時に、その物理的、化学的及び生物学的特性を本質的に保持する製剤を指す。製剤中の抗体の安定性を測定するために、様々な分析法が当業者の知識の範囲内にある（実施例のセクションでのいくつかの例を参照されたい）。安定性は通常、選択された温度（例えば、－７０℃、２～８℃、２５℃、３５℃以上）で、選択された期間（例えば、３ヶ月、６ヶ月、１２ヶ月以上）評価される。一旦製剤化された抗体は、患者に投与される前に、典型的には冷蔵庫（典型的には２～８℃）又は室温（典型的には１５～２５℃）で保存されるため、本明細書において、例えば、２～８℃及び２５℃と示されるように、前記製剤化された抗体が少なくとも２～２５℃の温度範囲で経時的に安定であることが重要である。所与の期間にわたる安定性について結論付けるために、例えば、以下のような様々な値を使用することができる（これらに限定されない）：１）抗体の単量体型が９０％以下、２）抗体の単量体型の変化が１０％以下（初期デ－タとの比較において）、３）高分子量種（ＨＭＷ又はＨＭＷＳ；本明細書では凝集体ともいう）が５％以下、又は、４）ｐＨの変動が±０．２単位以下（初期デ－タとの比較において）。
【0015】
－ 「安定化剤（ｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇ ａｇｅｎｔ）」、「安定化剤（ｓｔａｂｉｌｉｚｅｒ）」又は「等張化剤（ｉｓｏｔｏｎｉｃｉｔｙ ａｇｅｎｔ）」という用語は、本明細書で使用される場合、生理学的に許容され、製剤に適切な安定性／張り（ｔｏｎｉｃｉｔｙ）を付与する化合物である。製剤と接触している細胞膜を通過する水の正味の流れを顕著に防ぐ。このような目的には、グリセリン等の化合物がよく使われる。他の適切な安定化剤としては、アミノ酸又はタンパク質（例えばグリシン又はアルブミン）、塩（例えば塩化ナトリウム）、及び糖（例えばデキストロ－ス、マンニト－ル、スクロ－ス及びラクト－ス）が挙げられるが、これらに限定されない。
【0016】
－ 「緩衝液（ｂｕｆｆｅｒ）」という用語は、本明細書で使用する場合、医薬用又は獣医用製剤において安全であることが知られており、製剤のｐＨを製剤に望まれるｐＨ範囲に維持又は制御する効果を有する化合物の溶液を指す。中程度の酸性ｐＨから中程度の塩基性ｐＨでｐＨを制御するために許容される緩衝液としては、リン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、アルギニン、ヒスチジン及びＴＲＩＳ（２－アミノ－２－ヒドロキシメチル－１，３，－プロパンジオ－ル、この用語は薬学的に許容されるその塩を含む）緩衝液が挙げられるが、これらに限定されない。
【0017】
－ 「界面活性剤」という用語は、本明細書で使用する場合、疎水性、油性物質の水溶性を高めるため、あるいは疎水性の異なる２つの物質の混和性を高めるために特に使用できる可溶性化合物を指す。このため、これらのポリマ－は、工業用途、化粧品、医薬品によく使われている。また、特に薬物の吸収や標的組織への送達を変化させるために、薬物送達アプリケ－ションのモデル系としても使用される。よく知られている界面活性剤には、ポリソルベ－ト（ポリオキシエチレン誘導体；Ｔｗｅｅｎ）及びポロキサマ－（すなわち、エチレンオキシド及びプロピレンオキシドをベ－スとするコポリマ－で、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ（登録商標）としても知られている）が挙げられる。
【0018】
－ 「バイアル（ｖｉａｌ）」又は「容器（ｃｏｎｔａｉｎｅｒ）」という用語は、本明細書で使用する場合、抗ＴＧ２抗体製剤を液状で保持するのに適したリザ－バ－を広く指す。本発明で使用できるバイアルの例としては、アンプル、チュ－ブ、ボトル、注射器（ｓｙｒｉｎｇｅ）（充填済み注射器（ｐｒｅ－ｆｉｌｌｅｄ ｓｙｒｉｎｇｅ）等）、カ－トリッジ、注射、好ましくは静脈内注射又は皮下注射により抗ＴＧ２抗体製剤を患者に送達するのに適した他のリザ－バ－が挙げられる。
【0019】
－ 「溶媒」という用語は、本明細書で使用する場合、水性又は非水性の液体溶媒を指す。溶媒の選択は、当該溶媒に対する薬剤化合物の溶解度と投与様式に特に依存する。水性溶媒は、水のみからなる場合もあれば、水と１つ又は複数の混和性溶媒からなる場合もあり、糖、緩衝液、塩、その他の賦形剤等の溶解溶質を含む場合もある。より一般的に使用される非水溶媒は、メタノ－ル、エタノ－ル、プロパノ－ル等の短鎖有機アルコ－ル、アセトン等の短鎖ケトン、グリセロ－ル等の多価アルコ－ルである。本発明によれば、好ましい溶媒は、水又は生理食塩水のような水性溶媒である。
【0020】
－ 疾患状態の「治療（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」又は「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」という用語には、以下のものが含まれる：（ｉ）疾患状態を抑制すること、すなわち疾患状態又はその臨床症状の発症を阻止すること、又は、（ｉｉ）疾患状態を緩和すること、すなわち疾患状態又はその臨床症状を一時的又は永続的に退行させること。
【0021】
－ 疾患状態の「予防（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」又は「防止（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）」という用語には、疾患状態に曝される可能性がある 又は疾患状態にかかりやすい可能性があるが、まだ病態の症状を経験又は示していない対象において、病態の臨床症状を発症させないようにすることが含まれる。
－ 本発明の全ての実施形態において、「医薬組成物（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）」は、何ら区別することなく「安定な医薬組成物（ｓｔａｂｌｅ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）」とも称することができる。
－ 本発明の全ての実施形態において、「医薬組成物（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）」は、何ら区別することなく「安定な医薬組成物（ｓｔａｂｌｅ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）」とも称することができる。
【0022】
発明の詳細な説明：
本発明は、グリシン又はＮａＣｌからなる群から選択される安定化剤と、ｐＨを５．０～７．０に保つヒスチジン又はクエン酸緩衝液等の緩衝液との組み合わせに基づいており、医薬組成物の加工性及び抗体の長期安定性に影響を与えることなく、抗ＴＧ２抗体のヒトへの使用に適した医薬組成物を調製することができる。本発明者らは、本発明に係る医薬組成物は、実施例のセクションの２～８℃及び２５℃で示されているように、特に約２～２５℃で保存した場合に、経時的に安定しているという知見を得た。
本発明は、グリシン又はＮａＣｌからなる群から選択される安定化剤と、ｐＨを５．０～７．０に保つヒスチジン又はクエン酸緩衝液等の緩衝液との組み合わせに基づいており、医薬組成物の加工性及び抗体の長期安定性に影響を与えることなく、抗ＴＧ２抗体のヒトへの使用に適した医薬組成物を調製することができる。本発明者らは、本発明に係る医薬組成物は、実施例のセクションの２～８℃及び２５℃で示されているように、特に約２～２５℃で保存した場合に、経時的に安定しているという知見を得た。
【0023】
本発明の主な目的は、抗ＴＧ２抗体、ｐＨを約５．０～約７．０に保つ緩衝液、及び安定化剤を含むか又はそれらからなる安定な液体製剤である。好ましい実施形態において、前記緩衝液は、ヒスチジン緩衝液又はクエン酸緩衝液であり、安定化剤はグリシン又はＮａＣｌからなる群から選択される。任意選択で、前記製剤は、ポリソルベ－ト界面活性剤等の界面活性剤をさらに含んでもよい。
【0024】
本発明はさらに、抗ＴＧ２抗体の本明細書に記載の安定な液体製剤の何れかを製造するための方法を提供し、この方法は、抗ＴＧ２抗体を、緩衝液、安定化剤、及び任意選択で、界面活性剤、例えばポリソルベ－ト界面活性剤と組み合わせる工程を含む。前記ステップは、通常、従来の手順に従って緩衝液交換によって行われる。一例として、適切な安定な製剤を調製するために、所定量の抗ＴＧ２抗体を、１）ｐＨを５．０～７．０又は約５．０～７．０に保つクエン酸緩衝液又はヒスチジン緩衝液、２）安定化剤（好ましくはグリシン又はＮａＣｌからなる群から選択される）と緩衝液交換する。前記製剤が界面活性剤を含む場合、好ましくは緩衝液交換工程の後に添加する。緩衝液交換後、前記製剤をろ過する（最終ろ過）。抗体の目標濃度によっては、緩衝液交換の工程と最終ろ過の間に製剤を濃縮することができる。これらの化合物（すなわち、抗ＴＧ２抗体、緩衝液、安定化剤、及び任意選択で、界面活性剤）はそれぞれ、本明細書に記載の濃度、ｐＨ、及び／又は比率に従って使用することができる。得られた混合物はバイアルに分注される。このプロセスのバリエ－ションは、当業者であれば認識できるであろう。
【0025】
本発明はまた、医薬用又は獣医学用の製造物品であって、本明細書に記載された安定な液体製剤の何れかを含む容器からなり、前記製剤は、抗ＴＧ２抗体、緩衝液、安定化剤、及び任意選択で、界面活性剤を含むか、又はこれらからなる、製造物品を提供する。これらの化合物（すなわち、抗ＴＧ２抗体、緩衝液、安定化剤及び任意選択で、界面活性剤）はそれぞれ、本明細書に記載の濃度、ｐＨ、及び／又は比率に従って使用することができる。
【0026】
また、使用説明書を提供する包装材も記載する。
好ましくは、本発明に従って使用される抗ＴＧ２抗体は、全体として以下を含む（表Ａも参照されたい）：
１）配列番号ＮＯ：１で定義される配列を有する軽鎖可変ドメイン及び配列番号ＮＯ：２で定義される配列を有する重鎖可変ドメイン、
２）配列番号ＮＯ：１で定義される配列と少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する軽鎖可変ドメイン、及び配列番号ＮＯ：２で定義される配列と少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する重鎖可変ドメイン、
３）配列番号ＮＯ：３で定義される配列を有する軽鎖及び配列番号ＮＯ：４で定義される配列を有する重鎖；又は
４）配列番号ＮＯ：３で定義される配列と少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する軽鎖、及び配列番号ＮＯ：４で定義される配列と少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する重鎖。
好ましくは、本発明に従って使用される抗ＴＧ２抗体は、全体として以下を含む（表Ａも参照されたい）：
１）配列番号ＮＯ：１で定義される配列を有する軽鎖可変ドメイン及び配列番号ＮＯ：２で定義される配列を有する重鎖可変ドメイン、
２）配列番号ＮＯ：１で定義される配列と少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する軽鎖可変ドメイン、及び配列番号ＮＯ：２で定義される配列と少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する重鎖可変ドメイン、
３）配列番号ＮＯ：３で定義される配列を有する軽鎖及び配列番号ＮＯ：４で定義される配列を有する重鎖；又は
４）配列番号ＮＯ：３で定義される配列と少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する軽鎖、及び配列番号ＮＯ：４で定義される配列と少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する重鎖。
【0027】
【表A】
【0028】
本発明全体の文脈において、製剤中の抗ＴＧ２抗体の量は、好ましくは、１０若しくは約１０～２００若しくは約２００ｍｇ／ｍＬ、好ましくは、３０若しくは約３０ｍｇ／ｍＬ～１８０若しくは約１８０ｍｇ／ｍＬ、又は、好ましくは、５０若しくは約５０ｍｇ／ｍＬ～１５０若しくは約１５０ｍｇ／ｍＬ、例えば、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５又は１５０ｍｇ／ｍＬである。あるいは、抗ＴＧ２抗体は、１００ｍＬあたりの重量％（％ｗ／ｖ）で表される量でタンパク質製剤中に存在する。このような場合、全体として本発明に係る製剤中に含まれる抗ＴＧ２抗体は、約１～２０若しくは約２０％ｗ／ｖの量で、好ましくは約３～１８若しくは約１８％ｗ／ｖの量で、又は、好ましくは約５～１５若しくは約１５％ｗ／ｖの量で、例えば、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０、１０．５、１１．０、１１．５、１２．０、１２．５、１３．０、１３．５、１４．０、１４．５又は１５．０％ｗ／ｖで存在する。
【0029】
前記抗ＴＧ２抗体は、例えば、配列番号ＮＯ：１で定義される軽鎖可変領域及び配列番号ＮＯ：２で定義される重鎖可変領域を含んでいてもよい（ただし、これらに限定されない）。
【0030】
本発明に係る好ましい緩衝液は、全体としてヒスチジン（好ましくはＬ－ヒスチジン）又はクエン酸緩衝液であり、約５．０～約７．０で構成される、好ましくは、約５．２～約６．０で構成される、例えば、ヒスチジン緩衝液では、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９及び６．０で構成される、好ましくは、約６．２～約７．０で構成される、例えば、クエン酸緩衝液では、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９及び７．０で構成される、ｐＨに保つ。さらに好ましくは、ｐＨは、ヒスチジン緩衝液では、５．５若しくは約５．５、クエン酸緩衝液では、６．５若しくは約６．５である。本発明のすべての実施形態において、特に指示がない限り、ｐＨ値は、室温で測定され、好ましくは、目標とするｐＨ単位の±０．１又は±０．２以内である（例えば、ヒスチジン緩衝液の場合は、５．５±０．１又は５．５±０．２であり、クエン酸緩衝液の場合は、６．５若しくは約６．５±０．１又は６．５若しくは約６．５±０．２である）。
【0031】
本発明全体の文脈では、緩衝液濃度は、好ましくは、１０若しくは約１０～１００若しくは約１００ｍＭである。好ましい実施形態では、前記緩衝液の濃度は、２０若しくは約２０～８０若しくは約８０、さらに好ましくは約４０～約６０ｍＭ、例えば４０、４５、５０、５５又は６０ｍＭである。好ましくは、緩衝液の濃度は５０又は約５０ｍＭである。
【0032】
本発明全体の文脈において、前記安定化剤は、グリシン（好ましくはＬ－グリシン）又はＮａＣｌからなる群から選択される。前記安定化剤がグリシンである場合、その濃度は、好ましくは、１５０若しくは約１５０ｍＭ～３５０若しくは約３５０ｍＭ、好ましくは、２００若しくは約２００～３００若しくは約３００ｍＭ、さらに好ましくは、２２０若しくは約２２０～２８０若しくは約２８０ｍＭ、例えば２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０又は２８０ｍＭである。前記安定化剤がＮａＣｌである場合、その濃度は、好ましくは、１００若しくは約１００ｍＭ～２００若しくは約２００ｍＭ、より好ましくは、１２５若しくは約１２５～１７５若しくは約１７５ｍＭ、例えば１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０及び１７５ｍＭである。
【0033】
本発明全体の文脈では、界面活性剤を任意選択で、存在させることができる。界面活性剤が存在する場合、好ましくは、ポリソルベ－ト２０（ＰＳ２０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０としても知られる）又はポリソルベ－ト８０（ＰＳ８０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０としても知られる）等のポリソルベ－ト界面活性剤である。好ましくは、前記界面活性剤は、製剤中に０．０１若しくは約０．０１～５若しくは約５ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは０．０１若しくは約０．０１～１若しくは約１ｍｇ／ｍＬ、より特に０．１若しくは約０．１～０．６若しくは約０．６ｍｇ／ｍＬ、例えば、０．１、０．１５、０．２、０．２５、０．３、０．３５、０．４、０．４５、０．５、０．５５又は０．６ｍｇ／ｍＬの量で存在する。あるいは、前記ポリソルベ－ト界面活性剤は、好ましくは、１００ｍＬあたりの重量％（％ｗ／ｖ）で表される量でタンパク質製剤中に存在する。このような場合、全体として本発明に係る製剤中に含まれるポリソルベ－ト界面活性剤は、０．００１～０．５％ｗ／ｖ、好ましくは０．０１～０．１％ｗ／ｖ、さらに好ましくは０．０１～０．０６％ｗ／ｖ、例えば、０．０１、０．０１５、０．０２、０．０２５、０．０３、０．０３５、０．０４、０．０４５、０．０４５、０．０５、０．０５５又は０．０６％ｗ／ｖである。
【0034】
好ましい実施形態において、本発明に係る安定な液体製剤は、全体として、５０若しくは約５０～２００若しくは約２００ｍｇ／ｍＬの抗ＴＧ２抗体、ｐＨ約５．５で約１０～約１００ｍＭのヒスチジン（又はｐＨ約６．５で約１０～約１００ｍＭのクエン酸緩衝液）、約１５０～約３５０ｍＭのグリシン又は約１００～約２００ｍＭのＮａＣｌ、及び、任意選択で、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約０．５ｍｇ／ｍＬの界面活性剤（ポリソルベ－ト界面活性剤等）を含むか、又はそれらからなる。あるいは、安定な液体製剤は、約５．０～約２０％ｗ／ｖの抗ＴＧ２抗体、ｐＨ約５．５で約１０～約１００ｍＭのヒスチジン（又はｐＨ約６．５で約１０～約１００ｍＭのクエン酸緩衝液）、約１５０～約３５０ｍＭのグリシン又は約１００～約２００ｍＭのＮａＣｌ、及び任意選択で、０．００１～０．５％ｗ／ｖの界面活性剤（ポリソルベ－ト界面活性剤等）を含むか、又はそれらからなる。具体的な例として（ただし、これらに限定されない）、約１００ｍｇ／ｍＬの抗ＴＧ２抗体、ｐＨを約５．５に保つ約５０ｍＭのヒスチジン緩衝液、約２５０ｍＭのグリシン、及び、任意選択で、約０．０２～０．０６％ｗ／ｖのＰＳ８０を含むか、又はこれらからなる安定な液体製剤が提供される。さらなる具体例として（ただし、これらに限定されない）、約１００ｍｇ／ｍＬの抗ＴＧ２抗体、ｐＨを５．５若しくは約５．５に保つ約５０ｍＭのヒスチジン緩衝液、約１５０ｍＭのＮａＣｌ、及び、任意選択で、約０．０２～０．０６％ｗ／ｖのＰＳ８０を含むか、又はこれらからなる安定な液体製剤が提供される。さらなる例（ただし、これらに限定されない）では、約１００ｍｇ／ｍＬの抗ＴＧ２抗体、ｐＨを約５．５に保つ約５０ｍＭのクエン酸緩衝液、約２５０ｍＭのグリシン、任意選択で、約０．０２～０．０６％ｗ／ｖのＰＳ８０を含むか、又はこれらからなる安定な液体製剤が提供される。前記抗ＴＧ２抗体は、例えば、配列番号ＮＯ：１で定義される軽鎖可変領域及び配列番号ＮＯ：２で定義される重鎖可変領域を含んでいてもよい。
【0035】
好ましくは、本発明の製剤は、少なくとも１２ヶ月、好ましくは少なくとも２４ヶ月、さらに好ましくは少なくとも３６ヶ月、さらに一層好ましくは少なくとも４８ヶ月（最初の使用前）の期間にわたって、製剤化及び／又は包装時の抗ＴＧ２抗体の生物学的活性の少なくとも８０％を保持する。抗ＴＧ２抗体活性は、Ｅｌｉｓａ又はセルベ－スアッセイ（ｃｅｌｌ－ｂａｓｅｄ ａｓｓａｙｓ）等の日常的な方法に従って測定することができる。
【0036】
本発明に係る医薬組成物内で使用するための追加の賦形剤としては、粘度増強剤、増量剤、可溶化剤又はそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【0037】
本発明はまた、本発明に係る医薬組成物を含む容器を提供する。特に、容器は、制限なく、医薬組成物を含むバイアル、アンプル、チュ－ブ、ボトル又は注射器（充填済み注射器等）であり得る。
【0038】
前記容器は、本発明に係る医薬組成物を含む１つ又は複数の容器と、注射器、充填済み注射器、自動注射器、無針デバイス、インプラント又はパッチ等の送達装置、又は他の親投与用装置及び使用説明書からなるキットオブパ－ツ（ｋｉｔ－ｏｆ－ｐａｒｔｓ）の一部であってもよい。
【0039】
本発明の液体製剤は、少なくとも約１２ヵ月から約４８ヵ月間保存することができる。好ましい保存条件下では、最初の使用前に、製剤は明るい光を避け（好ましくは暗所に）、約２～２５℃の温度、例えば室温（２５若しくは約２５℃）又は２～８℃で保存される（以下の実施例を参照されたい）。前記製剤は、活性原理、すなわち抗ＴＧ２抗体の損失を最小限に抑える。また、前記製剤は酸性化しにくく、タンパク質の凝集体の形成等の分解を受けにくいことも判明している。
【0040】
本発明は、治療に使用する抗ＴＧ２抗体の安定な液体製剤を提供する。例えば、本明細書に記載された抗ＴＧ２抗体の安定な液体製剤は、医薬用又は獣医用に適する。本発明はまた、抗ＴＧ２抗体の安定な液体製剤を投与することにより、疾患又は疾病を治療する方法を提供する。
【0041】
本発明に係る抗ＴＧ２抗体を含む安定な液体製剤は、ＴＧ２を介する疾病又は疾患を改善又は治療するために投与することができる。このようなＴＧ２が介在する疾病又は疾患は、例えば、セリアック病、創傷治癒異常、瘢痕形成、ケロイド及び肥厚性瘢痕、眼の瘢痕形成、炎症性腸疾患、黄斑変性症、グレ－ブ眼症、薬剤誘発性エルゴチズム、乾癬、線維性疾患又は線維症関連疾患、アテロ－ム性動脈硬化症、再狭窄、炎症性疾患、自己免疫疾患、神経変性／神経疾患（例えば、ハンチントン病、アルツハイマ－病、パ－キンソン病、多発性グルタミン病、脊髄球性筋萎縮症、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、脊髄小脳失調症１、２、３、６、７及び１２、赤核淡蒼球萎縮症、脊髄小脳麻痺）及び／又はがん（例えば、リ・フラウメニ症候群の神経膠芽腫及び散発性神経膠芽腫等の神経膠芽腫、悪性黒色腫、膵管腺癌、骨髄性白血病、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、骨髄増殖症候群、婦人科癌、カポジ肉腫、ハンセン病、膠原病性大腸炎）からなる群から選択され得る。
【0042】
本発明に係る医薬組成物は、治療上有効な量（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｌｙ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ａｍｏｕｎｔ）で投与することができる。本明細書で使用する「治療上有効な量」という用語は、ＴＧ２が介在する疾病若しくは疾患を、治療、改善若しくは予防するために、又は検出可能な治療効果、薬理効果もしくは予防効果を示すために必要な治療薬（すなわち抗体）の量を指す。どの抗体についても、治療上有効な量は、細胞培養アッセイ又は動物モデル（通常はげっ歯類、ウサギ、イヌ、ブタ、霊長類）の何れかで最初に推定することができる。前記動物モデルは、適切な濃度範囲及び投与経路を決定するためにも使用できる。このような情報は、ヒトへの投与に有用な用量や投与経路を決定するために利用できる。
【0043】
上記の疾患及び／又は疾病の治療において、適切な投与量は、例えば、採用する特定の抗体、治療対象、投与様式、治療する病態の性質及び重症度によって異なる。特定の実施形態において、本発明に係る医薬組成物は、静脈内又は皮下経路により投与される。静脈注射で投与する場合は、ボ－ラス注射でも持続点滴でもよい。本発明の何れかの実施形態による医薬組成物はまた、筋肉内注射によって投与され得る。投与様式によっては、本明細書に記載の製剤は、使用前に溶媒（ＮａＣｌ等）で希釈することができる。医薬組成物は、注射器、自動注射器等の注射装置、無針装置、インプラント及びパッチを使用して注射することができる。本発明の液体医薬製剤は、一度に又は一連の治療にわたって患者に好適に投与され、診断以降いつでも患者に投与することができ；唯一の治療として、又は、本明細書に前述したような状態の治療に有用な他の薬物又は治療と併用して投与することができる。
【0044】
抗ＴＧ２抗体は、液体医薬製剤中の唯一の有効成分であってもよい。あるいは、抗体は、１つ又は複数の他の治療活性成分と、例えば、同時、順次又は別々に、組み合わせて投与することもできる。本明細書で使用される有効成分とは、適切な用量で治療効果等の薬理学的効果を有する成分を指す。いくつかの実施形態では、医薬組成物中の抗体は、他の炎症性又は自己免疫疾患を治療するために、同じ投与経路又は異なる投与経路で投与される、他の抗体又は非抗体成分を含む他の活性成分を伴うことができる。一実施形態では、対象には、抗ＴＮＦ抗体等の他の抗体成分又は低分子薬剤分子等の非抗体成分が、同時又は順次（前及び／又は後に）投与される。
【0045】
以下の実施例は、本発明の製剤及び組成物の調製をさらに説明するために提供される。本発明の範囲は、単に以下の実施例からなるものと解釈してはならない。
【実施例】
【0046】
材料：
抗ＴＧ２抗体：
以下の実施例で使用した抗ＴＧ２モノクロ－ナル抗体（ｍＡｂ）は、配列番号ＮＯ：１で定義される軽鎖可変領域及び配列番号ＮＯ：２で定義される重鎖可変領域を含む。以下の実施例ではｍＡｂ１と命名される。
抗ＴＧ２抗体：
以下の実施例で使用した抗ＴＧ２モノクロ－ナル抗体（ｍＡｂ）は、配列番号ＮＯ：１で定義される軽鎖可変領域及び配列番号ＮＯ：２で定義される重鎖可変領域を含む。以下の実施例ではｍＡｂ１と命名される。
【0047】
方法：
タンパク質濃度：
タンパク質濃度は、紫外可視分光法を用い、以下の式で求めた。
濃度（ｍｇ／ｍＬ）＝［（Ａ２８０）／ａ×ｂ］
ここで、Ａ２８０＝２８０ｎｍにおける吸光度（ＡＵ）、ａ＝質量消衰係数（１．３４ｍＬ ｍｇ－１ ｃｍ－１）、ｂ＝経路長（１ｃｍ）である。
タンパク質濃度：
タンパク質濃度は、紫外可視分光法を用い、以下の式で求めた。
濃度（ｍｇ／ｍＬ）＝［（Ａ２８０）／ａ×ｂ］
ここで、Ａ２８０＝２８０ｎｍにおける吸光度（ＡＵ）、ａ＝質量消衰係数（１．３４ｍＬ ｍｇ－１ ｃｍ－１）、ｂ＝経路長（１ｃｍ）である。
【0048】
熱安定性：
タンパク質は、特定の温度範囲で展開（ｕｎｆｏｌｄｅｄ）できる。この温度は、融解温度（Ｔｍ）とも呼ばれ、タンパク質の熱安定性を表す固有のパラメ－タ－である。Ｔｍは、タンパク質の展開時のピ－ク温度である。キャピラリ－示差走査熱量計（ＤＳＣ）を用いてｍＡｂ１のＴｍを決定した。オ－トサンプラ－を使用して、ウェル（ｗｅｌｌ）にそれぞれ約３００μＬの緩衝液及びｍＡｂ１サンプルを満たした。参考ウェルは、緩衝液のみで満たした。ＤＳＣスキャンは、ＭｉｃｒｏＣａｌ Ｏｒｉｇｉｎ（登録商標）ソフトウェアを使って分析した。それぞれの緩衝液スキャンを差し引いた後、タンパク質スキャンをタンパク質濃度に対して正規化した。Ｔｍ値は、ＭｉｃｒｏＣａｌ Ｏｒｉｇｉｎ（登録商標）ソフトウェアの「Ｐｉｃｋ Ｐｅａｋ」ツ－ルを使って決定した。
タンパク質は、特定の温度範囲で展開（ｕｎｆｏｌｄｅｄ）できる。この温度は、融解温度（Ｔｍ）とも呼ばれ、タンパク質の熱安定性を表す固有のパラメ－タ－である。Ｔｍは、タンパク質の展開時のピ－ク温度である。キャピラリ－示差走査熱量計（ＤＳＣ）を用いてｍＡｂ１のＴｍを決定した。オ－トサンプラ－を使用して、ウェル（ｗｅｌｌ）にそれぞれ約３００μＬの緩衝液及びｍＡｂ１サンプルを満たした。参考ウェルは、緩衝液のみで満たした。ＤＳＣスキャンは、ＭｉｃｒｏＣａｌ Ｏｒｉｇｉｎ（登録商標）ソフトウェアを使って分析した。それぞれの緩衝液スキャンを差し引いた後、タンパク質スキャンをタンパク質濃度に対して正規化した。Ｔｍ値は、ＭｉｃｒｏＣａｌ Ｏｒｉｇｉｎ（登録商標）ソフトウェアの「Ｐｉｃｋ Ｐｅａｋ」ツ－ルを使って決定した。
【0049】
拡散挙動：
標準的な方法に従って、動的光散乱（ＤＬＳ）をその目的に使用した。評価した様々なパラメ－タ－のうち、メイン種のピ－ク径と幅：各ピ－クは、明確で分離可能な種又は粒子の集団を表す。ピ－ク径は、分離された化学種の流体力学的直径（ｎｍ単位で表示）を表す。ピ－ク幅は、ピ－ク中の粒子集団の多分散性の尺度である。「ピ－ク１」は主要種のピ－クとみなされ、一般的にタンパク質の非凝集型に対応する。
標準的な方法に従って、動的光散乱（ＤＬＳ）をその目的に使用した。評価した様々なパラメ－タ－のうち、メイン種のピ－ク径と幅：各ピ－クは、明確で分離可能な種又は粒子の集団を表す。ピ－ク径は、分離された化学種の流体力学的直径（ｎｍ単位で表示）を表す。ピ－ク幅は、ピ－ク中の粒子集団の多分散性の尺度である。「ピ－ク１」は主要種のピ－クとみなされ、一般的にタンパク質の非凝集型に対応する。
【0050】
凝集とフラグメント化：
サイズ排除クロマトグラフィ－（ＳＥＣ）、例えばサイズ排除高速液体クロマトグラフィ－（ＳＥ－ＨＰＬＣ）を標準的な方法に従って使用した。メイン種と、メイン種の前後に溶出する種、それぞれ高分子量（ＨＭＷ）及び低分子量（ＬＭＷ）と呼ぶ、のピ－ク面積のパ－センテ－ジ値を評価した。
サイズ排除クロマトグラフィ－（ＳＥＣ）、例えばサイズ排除高速液体クロマトグラフィ－（ＳＥ－ＨＰＬＣ）を標準的な方法に従って使用した。メイン種と、メイン種の前後に溶出する種、それぞれ高分子量（ＨＭＷ）及び低分子量（ＬＭＷ）と呼ぶ、のピ－ク面積のパ－センテ－ジ値を評価した。
【0051】
還元又は非還元条件下での純度：
還元又は非還元条件下での純度（ＩｇＧモノマ－）は、キャピラリ－ゲル電気泳動（ＣＧＥ）又はオンチップベ－スの電気泳動（Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ）を用いて、標準的な方法（変性条件下での流体力学的サイズの違いに基づくタンパク質の分離）に従って評価した。様々なｍＡｂ１種が２２０ｎｍのフォトダイオ－ドアレイ（ＰＤＡ）検出器によって検出された。
還元又は非還元条件下での純度（ＩｇＧモノマ－）は、キャピラリ－ゲル電気泳動（ＣＧＥ）又はオンチップベ－スの電気泳動（Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ）を用いて、標準的な方法（変性条件下での流体力学的サイズの違いに基づくタンパク質の分離）に従って評価した。様々なｍＡｂ１種が２２０ｎｍのフォトダイオ－ドアレイ（ＰＤＡ）検出器によって検出された。
【0052】
酸性種及び塩基性種：
酸性種及び塩基性種の存在は、標準的なｉＣＥ法（電荷の違いに基づいてタンパク質を分離する）に従って、等電点キャピラリ－電気泳動（ｉＣＥ）を用いて評価した。通常、メインピ－クの前に溶出するピ－クは酸性種、メインピ－クの後に溶出するピ－クは塩基性種としてラベル付けする。
浸透圧：
浸透圧は、脱イオン水（０ｍＯｓｍ／ｋｇ）、１００ｍＯｓｍ／ｋｇ、５００ｍＯｓｍ／ｋｇ及び１５００ｍＯｓｍ／ｋｇの標準溶液で校正したＯｓｍｅｔｔｅ ＸＬ ５００７浸透圧計を用いて、ｍＡｂ１サンプルの分析前に標準的な方法に従って評価した。
ｐＨ：
温度補償電極を備えたｐＨメ－タ－を用い、標準的な方法に従ってｐＨを評価した。
酸性種及び塩基性種の存在は、標準的なｉＣＥ法（電荷の違いに基づいてタンパク質を分離する）に従って、等電点キャピラリ－電気泳動（ｉＣＥ）を用いて評価した。通常、メインピ－クの前に溶出するピ－クは酸性種、メインピ－クの後に溶出するピ－クは塩基性種としてラベル付けする。
浸透圧：
浸透圧は、脱イオン水（０ｍＯｓｍ／ｋｇ）、１００ｍＯｓｍ／ｋｇ、５００ｍＯｓｍ／ｋｇ及び１５００ｍＯｓｍ／ｋｇの標準溶液で校正したＯｓｍｅｔｔｅ ＸＬ ５００７浸透圧計を用いて、ｍＡｂ１サンプルの分析前に標準的な方法に従って評価した。
ｐＨ：
温度補償電極を備えたｐＨメ－タ－を用い、標準的な方法に従ってｐＨを評価した。
【0053】
粘度：
粘度測定は、標準的な方法に従い、Ｒｈｅｏｓｅｎｓｅ ＭｉｃｒｏＶｉｓｃ（登録商標）を用いて行った。粘度測定は４回に分けて行い、平均した動的粘度の結果を報告する。
粘度測定は、標準的な方法に従い、Ｒｈｅｏｓｅｎｓｅ ＭｉｃｒｏＶｉｓｃ（登録商標）を用いて行った。粘度測定は４回に分けて行い、平均した動的粘度の結果を報告する。
【0054】
実施例１－予備スクリ－ニング
１．１．緩衝液及びｐＨスクリ－ニング
ｍＡｂ１の熱安定性と物理的安定性に対する影響について、それぞれ２～３種類のｐＨの異なる５種類の緩衝液を評価した。ｍＡｂ１サンプルは、標準的な方法に従って、表１に示す緩衝液に緩衝液交換した。この予備スクリ－ニングの標的タンパク質濃度は２ｍｇ／ｍＬであった。調製されたサンプルは、ｐＨ、タンパク質濃度、熱安定性、コンフォメ－ション安定性について分析した。各サンプルのｐＨは、緩衝液交換工程後に測定した。各サンプルのｐＨは、目標ｐＨ値から０．２ｐＨ単位以内であった（デ－タは示さず）。各サンプルのｍＡｂ１濃度は、ＵＶ分光法を用いて測定した（表１参照）。全体として、回収率は５２％から１２７％であった。これらの結果のばらつきを考慮すると、明確な傾向は見られなかった。
１．１．緩衝液及びｐＨスクリ－ニング
ｍＡｂ１の熱安定性と物理的安定性に対する影響について、それぞれ２～３種類のｐＨの異なる５種類の緩衝液を評価した。ｍＡｂ１サンプルは、標準的な方法に従って、表１に示す緩衝液に緩衝液交換した。この予備スクリ－ニングの標的タンパク質濃度は２ｍｇ／ｍＬであった。調製されたサンプルは、ｐＨ、タンパク質濃度、熱安定性、コンフォメ－ション安定性について分析した。各サンプルのｐＨは、緩衝液交換工程後に測定した。各サンプルのｐＨは、目標ｐＨ値から０．２ｐＨ単位以内であった（デ－タは示さず）。各サンプルのｍＡｂ１濃度は、ＵＶ分光法を用いて測定した（表１参照）。全体として、回収率は５２％から１２７％であった。これらの結果のばらつきを考慮すると、明確な傾向は見られなかった。
【0055】
【表1】
【0056】
その後、ｍＡｂ１サンプルを拡散挙動についてはＤＬＳで、凝集種についてはＤＳＣで分析した（デ－タは示していない）。製剤サンプルのＴｍは、７５．３℃から７７．６℃と比較的類似していたが、オンセット温度はより有益であった。ｐＨ＜５．５の製剤は、オンセット温度≦５３℃を示した。さらに、ｐＨ＜５．５の製剤は、すべて３つの熱転移を示したが、その他の製剤では２つの熱転移しか示さなかった。デ－タから見て、ｐＨ≧５．５の緩衝系がより最適と思われる。これらの結果に基づき、リン酸緩衝液は、他の緩衝系と比較して利点がないこと、凍結融解の潜在的な問題があることから、今後の評価から除外した。さらに、ＤＳＣデ－タに基づいて、賦形剤スクリ－ニングのためにｐＨ５．５を選択した。
【0057】
１．２．賦形剤スクリ－ニング
緩衝液及びｐＨのスクリ－ニング結果に基づき、ｐＨ５．５の４つの緩衝液と様々な賦形剤（表２参照）を組み合わせて評価し、ｍＡｂ１に安定性を与える能力を測定した。ｍＡｂ１サンプルは、標準的な方法に従って、表６に示した緩衝液に緩衝液交換した。標的ｍＡｂ１濃度は２ｍｇ／ｍＬであった。各ｍＡｂ１サンプルのｐＨ及び回収率を測定し、様々な緩衝液中でのｍＡｂ１の熱安定性及びコンフォメ－ション安定性を測定した（ＤＳＣ及びＤＬＳを使用、デ－タは示さず。）
緩衝液及びｐＨのスクリ－ニング結果に基づき、ｐＨ５．５の４つの緩衝液と様々な賦形剤（表２参照）を組み合わせて評価し、ｍＡｂ１に安定性を与える能力を測定した。ｍＡｂ１サンプルは、標準的な方法に従って、表６に示した緩衝液に緩衝液交換した。標的ｍＡｂ１濃度は２ｍｇ／ｍＬであった。各ｍＡｂ１サンプルのｐＨ及び回収率を測定し、様々な緩衝液中でのｍＡｂ１の熱安定性及びコンフォメ－ション安定性を測定した（ＤＳＣ及びＤＬＳを使用、デ－タは示さず。）
【0058】
【表2】
【0059】
各サンプルのｐＨは、緩衝液交換工程後に測定した。３つの製剤（グリシン、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）又はソルビト－ルの何れかを添加した酢酸緩衝液）を除き、各ｐＨは目標ｐＨである５．５の０．２単位以内であった（デ－タは示さず）。グリシン、ＮａＣｌ及びソルビト－ルを加えた酢酸緩衝液のｐＨは、それぞれ５．８、５．８、５．９であった。
【0060】
各サンプルのｍＡｂ１濃度は、ＵＶ分光法を用いて測定した（表２参照）。３つのサンプル（酢酸／アルギニン、ヒスチジン／アルギニン及びヒスチジン／ソルビト－ル）は、回収率が≦６０％と悪かった。残りの製剤は、≧８４％と妥当な回収率であった。これらの製剤間のばらつきは、明確な傾向を示唆するものではなかった。次にｍＡｂ１サンプルをＤＬＳで分析した（デ－タは示していない）。スクロ－スを含むすべてのサンプルは、スクロ－ス特有の不純物ピ－クを示し、観測を妨げた。全体的には、明確な傾向は見られなかった。コハク酸／ソルビト－ルサンプルは、ソルビト－ルを含む他の製剤では観察されなかった凝集種を示したことが注目される。さらに、コハク酸／ＮａＣｌサンプルは、他のすべてのサンプルと比較して、モノマ－幅が最も高かった。ＤＳＣの結果を表３に示す。どのような緩衝系であっても、グリシンを用いた製剤は、アルギニンを用いた製剤よりも高いオンセット温度及びＴｍファイナル温度を示した。ＮａＣｌを含む製剤は、ヒスチジンを除くすべての製剤でアルギニンよりも高いオンセット温度を示した。ソルビト－ル及びスクロ－スのオンセット温度は同等で、互いに１℃以内であった。
【0061】
【表3】
【0062】
まとめると、ＤＳＣデ－タは、グリシン及びＮａＣｌは、アルギニンよりも好ましいことを示していた。したがって、アルギニンは、今後の評価から除外した。ＤＬＳ及びＤＳＣのデ－タは、いずれも、スクロ－スとソルビト－ルが同等であることを示していた。しかし、特徴的なスクロ－ス不純物のピ－クが、タンパク質の凝集の検出を難しくしていた。そのため、ソルビト－ルが好ましく、スクロ－スはさらなる評価には選ばなかった。最後に、コハク酸／ソルビト－ルサンプルには、他のソルビト－ルサンプルでは観察されなかった凝集種が含まれていたため、コハク酸はさらなる評価には選ばなかった。
【0063】
１．３．溶解度試験：
ｍＡｂ１の溶解性は、表４に示した緩衝液中で、濃度を変えて評価した。
ｍＡｂ１の溶解性は、表４に示した緩衝液中で、濃度を変えて評価した。
【0064】
【表4】
【0065】
ｍＡｂ１サンプルは、標準的な方法に従って適切な緩衝液に緩衝液交換した。この試験では、体積減少に基づいて３つのｍＡｂ１濃度：１００ｍｇ／ｍＬ、１５０ｍｇ／ｍＬ及び２００ｍｇ／ｍＬを目標とした。各サンプルの濃度、回収率、目視観察結果を表５に示す。
【0066】
回収率は、直近の評価で測定した濃度に基づいて計算した。この溶解度評価の範囲では、目視観察による「透明（ｃｌｅａｒ）」という呼称は、「無色透明（ｃｌｅａｒ，ｃｏｌｏｕｒｌｅｓｓ）」と同等とみなす。すべての製剤は、目標濃度の１００ｍｇ／ｍＬ及び１５０ｍｇ／ｍｌを達成し、回収率はそれぞれ５４％～７９％及び５９％～９８％であった。すべてのサンプルは、無色透明（ＣＣ）であることを確認した。すべてのサンプルは、さらに目標の２００ｍｇ／ｍＬまで濃縮した。酢酸／グリシン及び酢酸／ソルビト－ルサンプルは、それぞれ１７８ｍｇ／ｍＬ及び１６２ｍｇ／ｍＬに達した。その他のサンプルはすべて、回収率＞８０％で濃度＞１８０ｍｇ／ｍＬを達成した。これらの高濃度では、ヒスチジン／ＮａＣｌサンプルが透明で粘性（ＣＶ）を示した以外は、すべてのサンプルが透明でゲル状（ＣＧ）であることが観察された。全体的に、回収率はすべての濃度にわたって明確な傾向を示さなかった。
【0067】
【表5】
【0068】
実施例２－ＤＯＥ（実験計画法）試験：
実施例１に従って行った予備的試験に基づき、緩衝液の種類（より有望であったヒスチジン及びクエン酸緩衝液に注目）、緩衝液の強度、ｐＨ及び賦形剤を評価するＤＯＥを準備した（表６参照）。
実施例１に従って行った予備的試験に基づき、緩衝液の種類（より有望であったヒスチジン及びクエン酸緩衝液に注目）、緩衝液の強度、ｐＨ及び賦形剤を評価するＤＯＥを準備した（表６参照）。
【0069】
【表6-1】
【表6-2】
【0070】
タンパク質サンプルは、標準的な方法に従って、緩衝液／賦形剤の組み合わせ（表６参照）に緩衝液交換した。必要に応じて、緩衝液交換後、ＰＳ８０界面活性剤を指定濃度で適切なサンプルに添加した（ｓｐｉｋｅｄ ｉｎｔｏ）。各製剤のバイアルは５℃又は３７℃に置き、４週間及び７週間のインキュベ－ションを行った。
浸透圧：
Ｔ０での浸透圧は、すべてのサンプルで予想される範囲内（３４０～３８０ｍＯｓｍ／ｋｇ）（デ－タは示さず）であった。
浸透圧：
Ｔ０での浸透圧は、すべてのサンプルで予想される範囲内（３４０～３８０ｍＯｓｍ／ｋｇ）（デ－タは示さず）であった。
【0071】
粘度：
粘度は、すべてのサンプルで許容範囲内（Ｔ０で２．５～４．０）（デ－タは示さず）であった。
ｐＨ：
すべてのサンプルのｐＨ値は、サンプル＃２１を除き、緩衝液のｐＨの０．２ｐＨ単位以内であり、サンプル＃２１は、Ｔ０、５℃で４週、３７℃で４週、５℃で７週の時点でｐＨが６．２（デ－タは示さず）であった。
粘度は、すべてのサンプルで許容範囲内（Ｔ０で２．５～４．０）（デ－タは示さず）であった。
ｐＨ：
すべてのサンプルのｐＨ値は、サンプル＃２１を除き、緩衝液のｐＨの０．２ｐＨ単位以内であり、サンプル＃２１は、Ｔ０、５℃で４週、３７℃で４週、５℃で７週の時点でｐＨが６．２（デ－タは示さず）であった。
【0072】
目視観察：
Ｔ０、４週（５℃、３７℃）、７週（５℃、３７℃）の各サンプルの外観を評価した（デ－タは示さず）。すべてのサンプルは、Ｔ０では、無色透明の液体で、目に見える微粒子はなかった。５℃で４週間保存したサンプルは、サンプル１、２及び４を除き、すべて無色透明な液体で、目に見える微粒子はないことが観察され、サンプル１、２及び４は、わずかに黄色がかった透明の液体であり、目に見える粒子はなかった。３７℃で４週間保存したサンプルは、サンプル１２、２２、２８、３０、３２、３５及び３６を除き、すべて微粒子を含まないわずかに黄色がかった透明な液体であることが観察され、サンプル１２、２２、２８、３０、３２、３５及び３６は、無色透明の液体であった（目に見える粒子はない）。５℃で７週間保存したサンプルはすべて、目に見える微粒子を含まない無色透明の液体であることが観察された。３７℃で７週間保存したサンプルはすべて、わずかに黄色がかった透明な液体（目に見える微粒子はない）であることが観察された。
Ｔ０、４週（５℃、３７℃）、７週（５℃、３７℃）の各サンプルの外観を評価した（デ－タは示さず）。すべてのサンプルは、Ｔ０では、無色透明の液体で、目に見える微粒子はなかった。５℃で４週間保存したサンプルは、サンプル１、２及び４を除き、すべて無色透明な液体で、目に見える微粒子はないことが観察され、サンプル１、２及び４は、わずかに黄色がかった透明の液体であり、目に見える粒子はなかった。３７℃で４週間保存したサンプルは、サンプル１２、２２、２８、３０、３２、３５及び３６を除き、すべて微粒子を含まないわずかに黄色がかった透明な液体であることが観察され、サンプル１２、２２、２８、３０、３２、３５及び３６は、無色透明の液体であった（目に見える粒子はない）。５℃で７週間保存したサンプルはすべて、目に見える微粒子を含まない無色透明の液体であることが観察された。３７℃で７週間保存したサンプルはすべて、わずかに黄色がかった透明な液体（目に見える微粒子はない）であることが観察された。
【0073】
ＤＳＣ：
Ｔ０時点におけるＤＳＣ結果を表７に示す。試料８－２３のサ－モグラムは、より広いピ－クを示し、予想より低いシグナルを示した。
Ｔ０時点におけるＤＳＣ結果を表７に示す。試料８－２３のサ－モグラムは、より広いピ－クを示し、予想より低いシグナルを示した。
【0074】
【表7】
【0075】
ＳＥＣ：
４週間（５℃、３７℃）及び７週間（５℃、３７℃）の時点におけるＳＥＣ結果を表８に示す。
４週間（５℃、３７℃）及び７週間（５℃、３７℃）の時点におけるＳＥＣ結果を表８に示す。
【0076】
【表8-1】
【表8-2】
【0077】
ｃＩＥＦ：
４及び７週目（５℃、３７℃）の時点におけるｃＩＥＦ（毛細管等電点集束法）の結果を表９に示す。
４及び７週目（５℃、３７℃）の時点におけるｃＩＥＦ（毛細管等電点集束法）の結果を表９に示す。
【0078】
【表9-1】
【表9-2】
【0079】
実施例１及び２に示したプレ製剤開発試験の主な目的は、抗ＴＧ２抗体の最適な化学的及び物理的安定性をもたらす製剤成分を同定することであった。利用可能なデ－タを総合すると、ｐＨ５．５～６．５の範囲のクエン酸又はヒスチジン緩衝液と、２５０ｍＭのグリシン又は１５０ｍＭのＮａＣｌの組み合わせが最適であることが示された。
ＤｏＥ試験で得られたＳＥＣ及びｉＣＥの結果は、ＪＭＰソフトウェアを用いて再解析した（デ－タは示していない）。各デ－タセットからＪＭＰが推奨する好ましい配合の比較を実施した（ＳＥＣデ－タセットは、５℃及び３７℃の両方で、モノマ－の割合、ＨＭＷＳの割合、ＬＭＷＳの割合について、ｉＣＥデ－タセットは、５℃及び３７℃の両方で、メインピ－クの割合、酸性種の割合、塩基性種の割合について）。全体として、この統計分析から以下のことが判明した：
－ クエン酸塩及びヒスチジンの両方が非常に優れた緩衝特性を持ち、ヒスチジンの方がわずかに好ましい。
－ 緩衝液としてのクエン酸塩のｐＨは６．５、ヒスチジンのｐＨは５．０～５．５が好ましい。
－ ５０ｍＭの緩衝液強度が最も望ましい、
－ ＮａＣｌ及びグリシンも良い結果をもたらした、
－ 界面活性剤を添加する利点は明確ではなかった。
ＤｏＥ試験で得られたＳＥＣ及びｉＣＥの結果は、ＪＭＰソフトウェアを用いて再解析した（デ－タは示していない）。各デ－タセットからＪＭＰが推奨する好ましい配合の比較を実施した（ＳＥＣデ－タセットは、５℃及び３７℃の両方で、モノマ－の割合、ＨＭＷＳの割合、ＬＭＷＳの割合について、ｉＣＥデ－タセットは、５℃及び３７℃の両方で、メインピ－クの割合、酸性種の割合、塩基性種の割合について）。全体として、この統計分析から以下のことが判明した：
－ クエン酸塩及びヒスチジンの両方が非常に優れた緩衝特性を持ち、ヒスチジンの方がわずかに好ましい。
－ 緩衝液としてのクエン酸塩のｐＨは６．５、ヒスチジンのｐＨは５．０～５．５が好ましい。
－ ５０ｍＭの緩衝液強度が最も望ましい、
－ ＮａＣｌ及びグリシンも良い結果をもたらした、
－ 界面活性剤を添加する利点は明確ではなかった。
【0080】
実施例３－選択した製剤の長期（１２ヶ月）安定性試験：
上記の実施例に基づき、以下の４つの製剤を長期試験用に選択した（いずれも抗ＴＧ２抗体ｍＡｂ１を１００ｍｇ／ｍｌ含有する）：
－ Ｆ１：５０ｍＭヒスチジン、２５０ｍＭグリシン、ｐＨ５．５、
－ Ｆ２：５０ｍＭクエン酸塩、２５０ｍＭグリシン、０．０６％ ｗ／ｖ ＰＳ８０、ｐＨ５．６、
－ Ｆ３：５０ｍＭヒスチジン、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ５．０、
－ Ｆ４：５０ｍＭヒスチジン、２５０ｍＭグリシン、０．０５％ ｗ／ｖ ＰＳ８０、ｐＨ５．５。
－６０℃（デ－タは示さず）、２～８℃、２５℃及び４０℃の４つの保存条件で試験した。
上記の実施例に基づき、以下の４つの製剤を長期試験用に選択した（いずれも抗ＴＧ２抗体ｍＡｂ１を１００ｍｇ／ｍｌ含有する）：
－ Ｆ１：５０ｍＭヒスチジン、２５０ｍＭグリシン、ｐＨ５．５、
－ Ｆ２：５０ｍＭクエン酸塩、２５０ｍＭグリシン、０．０６％ ｗ／ｖ ＰＳ８０、ｐＨ５．６、
－ Ｆ３：５０ｍＭヒスチジン、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ５．０、
－ Ｆ４：５０ｍＭヒスチジン、２５０ｍＭグリシン、０．０５％ ｗ／ｖ ＰＳ８０、ｐＨ５．５。
－６０℃（デ－タは示さず）、２～８℃、２５℃及び４０℃の４つの保存条件で試験した。
【0081】
外観：
試験中、経時的な著しい外観変化（粒子、沈殿物、色・・・）は、観察されなかった。わずかに観察されたのは、４０℃と２５℃での安定性に沿って、液剤がゆっくりとわずかに黄色に変色したことだけであった。≦－６０℃の保存状態から解凍したサンプルは、懸濁する微小気泡のためにごくわずかに濁って見えることがある。
試験中、経時的な著しい外観変化（粒子、沈殿物、色・・・）は、観察されなかった。わずかに観察されたのは、４０℃と２５℃での安定性に沿って、液剤がゆっくりとわずかに黄色に変色したことだけであった。≦－６０℃の保存状態から解凍したサンプルは、懸濁する微小気泡のためにごくわずかに濁って見えることがある。
【0082】
タンパク質濃度及びｐＨ（デ－タは示さず）：
試験中、濃度に有意な変動は認められなかった。同様に、試験中、製剤間で安定したｐＨが観察された。
試験中、濃度に有意な変動は認められなかった。同様に、試験中、製剤間で安定したｐＨが観察された。
【0083】
粘度及び浸透圧：
粘度及び浸透圧は、ともに許容範囲内であり、それぞれ２．３～３．５ｃＰ、３３５～３８５ｍＯｓｍ／ｋｇ水であった（デ－タは示さず）。
粘度及び浸透圧は、ともに許容範囲内であり、それぞれ２．３～３．５ｃＰ、３３５～３８５ｍＯｓｍ／ｋｇ水であった（デ－タは示さず）。
【0084】
ＳＥＣの結果：
≦６０℃で保存したサンプルのＨＭＷＳ％に有意な変化は観察されなかった。表１０～１５に示すように、サンプルを２～８℃、２５℃／６０％ＲＨ及び４０℃／７５％ＲＨで保存した場合、経時的なＨＭＷＳ％の増加は３ヵ月まで直線的であった。この３ヵ月後、ＨＭＷＳ％は、安定する傾向にある。四半期ごとのＨＭＷＳ％率（勾配×３）は、２～８℃、２５℃／６０％ＲＨ及び４０℃／７５％ＲＨで保存したサンプルについて、最初の３ヵ月で測定した結果の勾配（率／月）に基づいて算出した（デ－タは示さず）。要約すると、２～８℃及び２５℃／６０％ＲＨでは、ヒスチジン緩衝液製剤が経時的に最も安定であった。ヒスチジン／グリシン又はヒスチジン／ＮａＣｌの製剤間に有意差は認められなかった。ヒスチジン／グリシン製剤にＰＳ８０を添加しても、分子の安定性に明らかな付加価値は見られなかった。４０℃／７５％ＲＨでは、クエン酸緩衝液製剤が最も安定であった。
≦６０℃で保存したサンプルのＨＭＷＳ％に有意な変化は観察されなかった。表１０～１５に示すように、サンプルを２～８℃、２５℃／６０％ＲＨ及び４０℃／７５％ＲＨで保存した場合、経時的なＨＭＷＳ％の増加は３ヵ月まで直線的であった。この３ヵ月後、ＨＭＷＳ％は、安定する傾向にある。四半期ごとのＨＭＷＳ％率（勾配×３）は、２～８℃、２５℃／６０％ＲＨ及び４０℃／７５％ＲＨで保存したサンプルについて、最初の３ヵ月で測定した結果の勾配（率／月）に基づいて算出した（デ－タは示さず）。要約すると、２～８℃及び２５℃／６０％ＲＨでは、ヒスチジン緩衝液製剤が経時的に最も安定であった。ヒスチジン／グリシン又はヒスチジン／ＮａＣｌの製剤間に有意差は認められなかった。ヒスチジン／グリシン製剤にＰＳ８０を添加しても、分子の安定性に明らかな付加価値は見られなかった。４０℃／７５％ＲＨでは、クエン酸緩衝液製剤が最も安定であった。
【0085】
【表10】
【0086】
【表11】
【0087】
【表12】
【0088】
ｉＣＥの結果：試料を≦６０℃及び２～８℃で保存した場合、主要な化学種の有意な変化は観察されなかった。２５℃／６０％ＲＨ及び４０℃／７５°ＲＨでは、ヒスチジン緩衝液製剤が最も安定であり、ＰＳ８０の添加は製剤の安定性に付加価値を示さなかった。
【0089】
【表13】
【0090】
【表14】
【0091】
【表15】
【0092】
実施例４－追加の長期（１２～４８ヶ月）安定性試験：
実施例３の結果に基づき、試験した４つの製剤は非常に安定であったが、Ｆ１の２～８℃での長期保存（最長４年）が試験された。安定性はさらに、浸透圧、電荷の変化（charge variants）、凝集体（aggregates）、及び、フラグメント化（fragmentation）に基づいて評価された。
実施例３の結果に基づき、試験した４つの製剤は非常に安定であったが、Ｆ１の２～８℃での長期保存（最長４年）が試験された。安定性はさらに、浸透圧、電荷の変化（charge variants）、凝集体（aggregates）、及び、フラグメント化（fragmentation）に基づいて評価された。
【0093】
【表16】
【0094】
デ－タは、選択された製剤（Ｆ１）が２～８℃の温度で３６ヶ月以上（４８ヶ月まで）経時的に安定であったことを示している。
【0095】
全体的な結論：
驚くべきことに、抗ＴＧ２抗体はグリシン又はＮａＣｌの存在下で安定化することが示されている。１０％の抗ＴＧ２抗体を含む最も安定な製剤は、１）Ｆ１：５０ｍＭヒスチジン、２５０ｍＭグリシン、ｐＨ５．５、及び、２）Ｆ２：５０ｍＭクエン酸塩、２５０ｍＭグリシン、０．０６％ ｗ／ｖ ＰＳ８０、ｐＨ６．５又は５．６であった。２５０ｍＭグリシンの代わりに１５０ｍＭ ＮａＣｌを含む製剤も非常に有望であった。製剤Ｆ１は長期にわたって試験された。特に、２～８℃の温度範囲で、３６～４８ヶ月間、経時的に非常に安定していることが示された。この製剤の２５℃における１２ヶ月間の有望な結果を鑑みると、この安定性はより長期間に及ぶことが予想される。Ｆ２からＦ４も良い選択肢になるだろう。
驚くべきことに、抗ＴＧ２抗体はグリシン又はＮａＣｌの存在下で安定化することが示されている。１０％の抗ＴＧ２抗体を含む最も安定な製剤は、１）Ｆ１：５０ｍＭヒスチジン、２５０ｍＭグリシン、ｐＨ５．５、及び、２）Ｆ２：５０ｍＭクエン酸塩、２５０ｍＭグリシン、０．０６％ ｗ／ｖ ＰＳ８０、ｐＨ６．５又は５．６であった。２５０ｍＭグリシンの代わりに１５０ｍＭ ＮａＣｌを含む製剤も非常に有望であった。製剤Ｆ１は長期にわたって試験された。特に、２～８℃の温度範囲で、３６～４８ヶ月間、経時的に非常に安定していることが示された。この製剤の２５℃における１２ヶ月間の有望な結果を鑑みると、この安定性はより長期間に及ぶことが予想される。Ｆ２からＦ４も良い選択肢になるだろう。
【0096】
参考文献：
１）国際公開第２００６１００６７９号
２）国際公開第２０１２１４６９０１号
３）国際公開第２０１３１７５２２９号
１）国際公開第２００６１００６７９号
２）国際公開第２０１２１４６９０１号
３）国際公開第２０１３１７５２２９号
【配列表】
【国際調査報告】