特表 2024-539532 縮合環ヘテロアリール化合物およびその用途

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-10-29

(54)【発明の名称】縮合環ヘテロアリール化合物およびその用途

(51)【国際特許分類】

   C07D 401/14 20060101AFI20241022BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20241022BHJP

   A61P 29/02 20060101ALI20241022BHJP

   A61P 25/04 20060101ALI20241022BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20241022BHJP

   A61P 11/06 20060101ALI20241022BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20241022BHJP

   A61P 3/04 20060101ALI20241022BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20241022BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20241022BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20241022BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20241022BHJP

   A61P 1/14 20060101ALI20241022BHJP

   A61P 3/02 20060101ALI20241022BHJP

   A61K 31/4439 20060101ALI20241022BHJP

   A61K 31/444 20060101ALI20241022BHJP

   C07D 471/04 20060101ALI20241022BHJP

【ＦＩ】

C07D401/14 CSP

A61P43/00 111

A61P29/02

A61P25/04

A61P17/00

A61P11/06

A61P43/00 105

A61P9/00

A61P3/04

A61P3/10

A61P37/06

A61P35/00

A61P43/00 121

A61K45/00

A61P1/14

A61P3/02

A61K31/4439

A61K31/444

C07D471/04 106C

C07D471/04 106Z

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024508664

(86)(22)【出願日】2022-08-15

(85)【翻訳文提出日】2024-04-15

(86)【国際出願番号】 KR2022012150

(87)【国際公開番号】W WO2023018313

(87)【国際公開日】2023-02-16

(31)【優先権主張番号】63/232,808

(32)【優先日】2021-08-13

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】521325525

【氏名又は名称】ビシケム カンパニー リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＢＩＳＩＣＨＥＭ ＣＯ．， ＬＴＤ．

【住所又は居所原語表記】２－ｄｏｎｇ，７ｔｈ Ｆｌ．Ｐａｎｇｙｏ－ｒｏ ２８９ｂｅｏｎ－ｇｉｌ ２０，Ｂｕｎｄａｎｇ－ｇｕ，Ｓｅｏｎｇｎａｍ－ｓｉ，Ｇｙｅｏｎｇｇｉ－ｄｏ １３４８８，Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ

(74)【代理人】

【識別番号】110003971

【氏名又は名称】弁理士法人葛和国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ソ，ジョンボブ

(72)【発明者】

【氏名】ハン，チョルキュ

(72)【発明者】

【氏名】ユン，チョルファン

(72)【発明者】

【氏名】ヤン，インホ

(72)【発明者】

【氏名】キム，スンジュ

(72)【発明者】

【氏名】カン，ホンジュン

(72)【発明者】

【氏名】イ，ジョンウ

(72)【発明者】

【氏名】キム，ナムヒ

(72)【発明者】

【氏名】シン，ヨンド

(72)【発明者】

【氏名】カン，ビョンナム

(72)【発明者】

【氏名】イ，ジヌ

【テーマコード（参考）】

4C084

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C084AA19

4C084NA05

4C084ZA081

4C084ZA361

4C084ZA591

4C084ZA691

4C084ZA701

4C084ZA891

4C084ZB022

4C084ZB081

4C084ZB092

4C084ZB211

4C084ZB261

4C084ZC201

4C084ZC211

4C084ZC351

4C084ZC751

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086BC38

4C086CB05

4C086GA07

4C086GA08

4C086MA01

4C086MA02

4C086MA04

4C086NA05

4C086NA14

4C086ZA08

4C086ZA36

4C086ZA59

4C086ZA69

4C086ZA70

4C086ZA89

4C086ZB08

4C086ZB21

4C086ZB26

4C086ZC20

4C086ZC21

4C086ZC35

4C086ZC75

(57)【要約】

本発明は、化学式Ｉで表される新規の置換された異種環式化合物、またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグ、およびそのような化合物を含む組成物を提供する。提供される化合物はＡＬＫ５の阻害剤として使用することができ、慢性線維症、血管障害、肥満、糖尿病、自己免疫疾患および癌の治療に有用である。
【化１】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

化学式Ｉの化合物：

【化1】

［式中、
Ｒ^１は、Ｈ，Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＤ_３、ＣＨＦ_２、ＣＦ_３、－（Ｃ１－Ｃ６）ヒドロキシアルキル、または－ＳＯ_２アルキルであり；
Ｒ^２は、Ｈ，Ｍｅ、ＣＦ_３、ＮＯ_２、ハロゲン、アシル、Ｃ１－Ｃ６アルキル、置換されたＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ７シクロアルキル、アルキルカルボキシ、シアノ、またはアルコキシであり、；
Ｘ^１、Ｘ^２およびＸ^３はそれぞれ独立して、ＣＨまたはＮであり；
それぞれのＲ^３は水素、ハロゲン、ＣＦ_３、アシル、アミノ、置換されたアミノ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、置換されたＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ７シクロアルキル、アルキルカルボキシ、シアノ、ニトロ、またはアルコキシからなる群から独立して選択され；
それぞれのＲ^４は水素、ハロゲン、ＣＦ_３、アシル、アミノ、置換されたアミノ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、置換されたＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、アシルオキシ、またはアリールオキシからなる群から独立して選択され；
ｍは１、２、３または４であり；
ｎは１、２、３，４または５である］。

【請求項2】

化学式Ｉは、化学式ＩＩの化合物またはその塩を含む、請求項１に記載の化合物：

【化2】

［式中、
Ｒ^１は、Ｈ，Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＤ_３、ＣＨＦ_２、ＣＦ_３、－（Ｃ１－Ｃ６）ヒドロキシアルキル、または－ＳＯ_２アルキルであり；
それぞれのＲ^４は水素、ハロゲン、ＣＦ_３、アシル、アミノ、置換されたアミノ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、置換されたＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、アシルオキシ、またはアリールオキシからなる群から独立して選択され；
ｎは１、２、３，４または５である］。

【請求項3】

薬剤学的に有効な量の、請求項１に記載の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグ、および薬剤学的に許容可能な担体を含む、薬剤学的組成物。

【請求項4】

ＡＬＫ酵素の阻害のための薬剤学的組成物の製造において、請求項１に記載の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグの用途。

【請求項5】

ＡＬＫキナーゼ媒介の疾患または病態の治療のための薬剤学的組成物の製造において、請求項１に記載の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグの用途であって、前記疾患または病態が乳頭状甲状腺癌腫、膵臓癌、肺癌、結腸癌、乳癌腫、神経芽細胞腫、痛み、悪液質、皮膚炎または喘息である、用途。

【請求項6】

ＡＬＫ媒介の増殖性障害の治療のための薬剤学的組成物の製造において、請求項１に記載の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグの用途。

【請求項7】

前記ＡＬＫ媒介の増殖性障害は、慢性線維症、血管障害、肥満、糖尿病、自己免疫疾患および癌からなる群から選択される、請求項５に記載の用途。

【請求項8】

ＡＬＫ酵素の阻害方法であって、前記酵素を阻害するのに十分な量の、請求項１に記載の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグと前記ＡＬＫ酵素を接触させる段階を含む、方法。

【請求項9】

ＡＬＫ媒介の疾患または病態の治療方法であって、治療を必要とする個体に、請求項１に記載の化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグを含む有効量の組成物を投与する段階を含み、前記疾患または病態は、乳頭状甲状腺癌腫、膵臓癌、肺癌、結腸癌、乳癌腫、神経芽細胞腫、痛み、悪液質、皮膚炎または喘息である、方法。

【請求項10】

前記化合物を治療有効量の化学療法剤と併用して投与する、請求項９に記載の方法。

【請求項11】

前記化合物を、治療有効量のＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１阻害剤のような免疫チェックポイント阻害剤と併用して投与する、請求項９に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、転換成長因子－β（ＴＧＦ－β）タイプＩ受容体（アクチビン様キナーゼ５（Ａｃｔｉｖｉｎ Ｌｉｋｅ Ｋｉｎａｓｅ５））および／またはアクチビンタイプＩ受容体（ＡＬＫ４）の阻害剤であり、肥満、糖尿病、糸球体腎炎、糖尿病性腎臓病、ループス腎炎、高血圧－誘発腎臓病、腎間質性線維症、薬物暴露の合併症による腎線維症、ＨＩＶ関連腎臓病、移植腎臓病、すべての病因による肝線維症、感染による肝機能障害、アルコール誘発肝炎、ＮＡＳＨ（非アルコール性脂肪肝炎）、胆道系障害、肺線維症、急性肺損傷、成人呼吸困難症候群、特発性肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、感染性または毒性物質による肺疾患、梗塞後の心線維症、うっ血性心不全、拡張性心筋症、心筋炎、血管狭窄症、高血圧誘発血管再形成、肺動脈高血圧、冠状動脈再狭窄症、末梢再狭窄症、頸動脈再狭窄症、ステント誘発再狭窄症、アテローム性動脈硬化症、眼球瘢痕、角膜瘢痕、増殖性硝子体網膜症、外傷または外科的創傷による創傷治癒中に発生する真皮の過剰性または肥厚性瘢痕またはケロイド形成、腹膜および皮下癒着、経皮症、線維硬化症、進行性全身硬化症、皮膚筋炎、多発筋炎、関節炎、骨粗鬆症、潰瘍、神経機能損傷、男性勃起不全、ペイロニー病（Ｐｅｙｒｏｎｉｅ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、デュピュイトラン拘縮（Ｄｕｐｕｙｔｒｅｎ’ｓ ｃｏｎｔｒａｃｔｕｒｅ）、アルツハイマー病、レイノ症候群（Ｒａｙｎａｕｄ’ｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、線維性癌、腫瘍転移成長、放射線誘発線維症および血栓症の治療に有用な、一連の置換された異種環式化合物に関する。さらに、本発明は、本発明の化合物を含む薬剤学的組成物、医薬の製造における前記化合物の用途、および前記化合物を投与することによって哺乳動物、特にヒトにおける過増殖性疾患を治療する方法に関する。

【背景技術】

【0002】

転換成長因子－β（ＴＧＦ－β）は、アポトーシス、増殖および分化などの細胞過程を調節することにより、生理学的恒常性を維持する、よく発現される強力な多面性サイトカインである。
ＴＧＦ－βスーパーファミリーは、成長因子の様々なセットを表し、これは、受容体のセリン／スレオニンキナーゼを介して信号を伝達する。スーパーファミリーは、次の２つの部門に分けられる；ＴＧＦ－β／アクチビン部門および骨形成タンパク質（ＢＭＰ）／成長および分化因子（ＧＤＦ）部門。それぞれの部門は、序列類似性を基準に下位グループにさらに細分される。ＴＧＦ－β／アクチビン部門は、ＴＧＦ－β、アクチビン、インヒビン（Ｉｎｈｉｂｉｎ）、ノダル（Ｎｏｄａｌ）およびレフティ（Ｌｅｆｔｙ）リガンドを含む。ＢＭＰ／ＧＤＦ部門は、ＢＭＰ、ＧＤＦ、およびミュラー管抑制物質（Ｍｕｌｌｅｒｉａｎ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅ、ＭＩＳ）リガンドを含む。ほぼすべての細胞はＴＧＦ－βを分泌し、ＴＧＦ－β受容体を発現する。

【0003】

活性ＴＧＦ－βのＡＬＫ５およびタイプＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）受容体への結合時に、ＡＬＫ５はＴＧＦ－βＲＩＩによってリン酸化され活性化される。結局、ＡＬＫ５はＲ－Ｓｍａｄ、Ｓｍａｄ２およびＳｍａｄ３をリン酸化して活性化し、これはＳｍａｄ４と複合体を形成する。このような複合体は核に転位し、これは他の転写因子と共にＤＮＡを結合させ、一般転写機構と相互作用して約１００～３００個の標的遺伝子の発現を調節する。
実験的に制御されていないＴＧＦ－βファミリー信号伝達によって発生する多くの発達欠陥と一致して、ＴＧＦ－βファミリータンパク質機能の中等度の程度の変化は、発達症候群、および創傷治癒障害、慢性線維症、血管障害、肥満、糖尿病、自己免疫疾患、および癌を含む多くの疾患に関連している。

【0004】

ＴＧＦ－βは、様々な線維性疾患と非常に関連している（文献［Ｂｏｒｄｅｒ ＷＡ ｅｔ ａｌ，Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．３３１（１９）：１２８６－１２９２（１９９４）］）。線維症は、細胞外基質（ＥＣＭ）沈着および分解に不均衡があるときに発生する。多くのＴＧＦ－βリガンドは、ＥＣＭ沈着の強力な駆動者であり、さらにＥＣＭに対して自然親和性を持ち、損傷部位で濃縮したプロ繊維性因子のプール（ｐｏｏｌ）を生成する（文献［Ｋｅｌｌｙ Ｌ ｅｔ ａｌ，Ｆｒｏｎｔ ｉｎ Ｐｈａｒｍ ８：４６１（２０１７）］）。損傷に反応して、顆粒球、血小板、白血球および追加の実質細胞の流入は、創傷部位におけるＴＧＦ－βの存在を増加させる（文献［Ｂｒａｎｔｏｎ ＭＨ ｅｔ ａｌ，Ｍｉｃｒｏｂｅｓ Ｉｎｆｅｃｔ．１（１５）：１３４９－１３６５（１９９９）］；文献［Ｂｏｒｄｅｒ ＷＡ ｅｔ ａｌ，Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．３３１（１９）：１２８６－１２９２（１９９４）］）。次に、ＴＧＦ－βは、線維芽細胞増殖、筋線維芽細胞分化、および細胞外基質の再形成を誘導する（文献［Ｂｒａｎｔｏｎ ＭＨ ｅｔ ａｌ，Ｍｉｃｒｏｂｅｓ Ｉｎｆｅｃｔ．１（１５）：１３４９－１３６５（１９９９）］；文献［Ｂｏｒｄｅｒ ＷＡ ｅｔ ａｌ，Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．３３１（１９）：１２８６－１２９２（１９９４）］；文献［Ｘｉａｏ Ｌ ｅｔ ａｌ，Ｆｒｏｎｔ Ｂｉｏｓｃｉ．１７：２６６７－２６７４（２０１２）］；文献［Ｒｏｖｅｒｔｓ ＡＢ ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．８３（１２）：４１６７－４１７１（１９８６）］）。肥厚性瘢痕に由来する線維芽細胞は、ＴＧＦ－β信号伝達を変形させることが立証された。研究は、肥厚性瘢痕からＳｍａｄ２および／または３の発現およびリン酸化の増加を示唆した（文献［Ｘｉｅ ＪＬ ｅｔ ａｌ，Ｄｅｒｍａｔｏｌ ｓｕｒｇ．３４（９）：１２１６－１２２４（２００８）］；文献［Ｋｏｐｐ Ｊ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｂｉｏｌ ｃｈｅｍ．２８０（２２）：２１５７０－６（２００５）］）。Ｓｍａｄ２／３の活性化は、コラーゲン［ＣＯＬ１Ａ１，ＣＯＬ３Ａ１，ＣＯＬ５Ａ２，ＣＯＬ６Ａ１，ＣＯＬ６Ａ３，ＣＯＬ７Ａ１］（文献［Ｖｅｒｒｅｃｃｈｉａ Ｆ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｂｉｏｌ ｃｈｅｍ．２７６，１７０５８－１７０６２（２００１）］）、プラスミノゲン活性剤阻害剤－１（ＰＡＩ－１）（文献［Ｄｅｎｎｌｅｒ Ｓ ｅｔ ａｌ，ＥＭＢＯ Ｊ．１７：３０９１－３１００（１９９８）］；文献［Ｈｕａ Ｘ ｅｔ ａｌ，Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．１２：３０８４－３０９５（１９９８）］）、様々なプロテオグリカン（文献［Ｓｃｈｏｎｈｅｒｒ Ｅ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２６６：１７６４０－１７６４７（１９９１）］；文献［Ｒｏｍａｒｉｓ Ｍ ｅｔ ａｌ，Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ．３１０：７３－８１（１９９５）］；文献［Ｄａｄｌａｎｉ Ｈ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｂｉｏｌ ｃｈｅｍ．２８３：７８４４－７８５２（２００８）］）、インテグリン（文献［Ｍａｒｇａｄａｎｔ Ｃ ｅｔ ａｌ，ＥＭＢＯ Ｒｅｐ．１１：９７－１０５（２０１０）］）、結合組織成長因子（文献［Ｃｈｅｎ Ｙ ｅｔ ａｌ，Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ．６２：１１４９－１１５９（２００２）］、および基質金属タンパク質分解酵素（ＭＭＰ）（文献［Ｙｕａｎ Ｗ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２７６：３８５０２－３８５１０（２００１）］）を含むいくつかのプロ線維性遺伝子の発現を調節する。したがって、動物モデルにおけるＴＧＦ－βの無力化は肝線維症を阻害し、胆管癌の発症の危険性を減少させる（文献［Ｆａｎ Ｘ ｅｔ ａｌ，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ．８（１２）：８２１９０（２０１３）］；文献［Ｌｉｎｇ Ｈ ｅｔ ａｌ，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ．８（１）：ｅ５４４９９（２０１３）］）。ＡＬＫ５阻害剤は、細胞外基質の転写および沈着を阻害し、マウスにおける肝機能の悪化を改善させる（文献［Ｇｏｕｖｉｌｌｅ ＡＣ ｅｔ ａｌ，Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１４５（２）：１６６－７７（２００５）］）。以前の報告書を基準に、ＴＧＦ－β信号伝達は、線維性疾患の予防または治療のための潜在的な標的であるとみられた。したがって、ＡＬＫ５の直接阻害は、ＴＧＦ－βの有害なプロ線維性効果を予防する魅力的な方法を示す。最近説明されたＡＬＫ５の合成阻害剤は、細胞分析でＴＧＦ－β効果を遮断することが立証された（文献［Ｃａｌｌａｈａｎ ＪＦ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．４５：９９９－１００１（２００２）］；文献［Ｉｎｍａｎ Ｇ ｅｔ ａｌ，Ｍｏｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．６２：６５－７４（２００２）］；文献［Ｌａｐｉｎｇ Ｎ ｅｔ ａｌ，Ｍｏｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．６２：５８－６４（２００２）］；文献［Ｓａｗｙｅｒ ＪＳ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．４６：３９５３－３９５６（２００３）］）。

【0005】

ＴＧＦ－β信号伝達の間違った調節は、高血圧（文献［Ｃａｍｂｉｅｎ ｅｔ ａｌ，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ２８（５）：８８１－８８７（１９９６）］）、心臓肥大症（文献［Ｓｃｈｕｌｔｚ ｅｔ ａｌ，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｎｖ．１０９（６）：７８７－７９６（２００２）］）および心線維症（文献［Ｌｅａｓｋ Ａ，Ｃｉｒ Ｒｅｓ．１０６（１１）：１６７５－１６８０（２０１０）、Ｎｉｋｏｌ Ｓ ｅｔ ａｌ，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｎｖ．７０（４）：１５８２－１５９２（１９９２）］）およびアテローム性動脈硬化症（文献［Ｈａｒｒａｄｉｎｅ ｅｔ ａｌ，Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｍｅｄ．３８（６）：４０３－４１４（２００６），Ｂｏｂｉｋ ｅｔ ａｌ，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ９９（２２）：２８８３－２８９１（１９９９）］）を含む血管機能障害および疾患につながる。ＴＧＦ－βは、血管の発達および血管の再形成に直接的な影響を及ぼすことがあり、アテローム性動脈硬化症および再狭窄症、内皮細胞（ＥＣ）、平滑筋細胞（ＳＭＣ）、マクロファージ、Ｔ細胞、およびおそらく血管石灰化細胞反応の調節において重要な役割を果たす。ＡＬＫ５キナーゼ阻害剤ＳＢ４３１５４２によるＴＧＦ－β信号伝達の阻害は、網膜ＥＣ培養における透過性を増加させ、ＥＣ障壁特性を維持する（文献［Ａｎｔｏｎｏｖ ＡＳ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ．２２７（２）：７５９－７１（２０１２）］）。ＳＢ４３１５４２は、ＥＣ特異的成分のクラウディン（Ｃｌａｕｄｉｎ）－５の発現を増加させ、付着分子の発現を阻害する（文献［Ｗａｔａｂｅ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１６３（６）：１３０３－１１（２００３）］）。成体マウスにおけるＴＧＦ－βの全身阻害は、密着接合タンパク質ＺＯ－１とオクルジン（ｏｃｃｌｕｄｉｎ）との減少した結合により証明されるように、血管透過性を増加させた（文献［Ｗａｌｓｈｅ ｅｔ ａｌ，Ｐｌｏｓ Ｏｎｅ４（４）：ｅ５１４９（２００９）］）。ＳＢ４３１５４２によるＥＣ処理は、細胞骨格の再形成によりＴＧＦ－β誘発されたＥＣ構築を阻害した（文献［Ｂｉｒｕｋｏｖａ ｅｔ ａｌ，ＦＥＢＳ ｌｅｔｔｅｒ ５７９（１８）：４０３１－３７（２００５）］）。さらに、ＳＭ１６、経口活性ＡＬＫ５阻害剤は、ラット頸動脈バルーン損傷モデルにおける線維性過形成性血管反応を防止する（文献［Ｆｕ ｅｔ ａｌ，Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ，ａｎｄ Ｖａｓｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２８（４）：６６５－６７１（２００８）］）。ＡＬＫ５阻害剤は、血管障害における治療標的として有用であり得る。

【0006】

肥満および２型糖尿病の発症におけるＡＬＫ５を介したＴＧＦ－β信号伝達の役割に対する最近の発見は、代謝および脂肪症からその重要性を強調した。実際、病的肥満および糖尿病性神経障害のなかで、ヒト脂肪組織で上昇したＴＧＦ－βが既に報告されている。Ｓｍａｄ３－ノックダウン（Ｓｍａｄ３－／－）マウスを用いた研究に基づいて代謝におけるＴＧＦ－β信号伝達の役割に対する生体内発見。ＡＬＫ５を介したＴＧＦ－β信号伝達は、膵島β細胞でインスリン遺伝子転写を調節する一方（文献［Ｌｉｎ ＨＭ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２８４：１２２４６－１２２５７（２００９）］）、マウスにおけるＳｍａｄ３欠乏は高脂肪食餌－誘発された肥満中にインスリン抵抗性および２型糖尿病から保護する（文献［Ｔａｎ ＣＫ ｅｔ ａｌ，Ｄｉａｂｅｔｅｓ ６０：４６４－４７６（２０１１）］；文献［Ｙａｄａｖ Ｈ ｅｔ ａｌ，Ｃｅｌｌ Ｍｅｔａｂ．１４：６７－７９（２０１１）］）。このようなＳｍａｄ３－／－マウスは、改善された耐糖能およびインスリン感受性と共に減少した脂肪症を示した。さらに、このような突然変異マウスは、高脂肪食餌投与時に脂肪組織から増加したβ－酸化を示し、これにより異所性脂肪の蓄積を防止することによって、膵臓、骨格筋および肝臓の糖毒性および脂肪毒性を改善させた（文献［Ｔａｎ ＣＫ ｅｔ ａｌ，Ｄｉａｂｅｔｅｓ．６０：４６４－４７６（２０１１）］）。特に、ＴＧＦ－β信号伝達がＴＧＦ－β無力化抗体への処理によりＳｍａｄ３のリン酸化を遮断した場合、これは肥満および２型糖尿病からマウスを保護する（文献［Ｙａｄａｖ Ｈ ｅｔ ａｌ，Ｃｅｌｌ Ｍｅｔａｂ．１４：６７－７９（２０１１）］）。ＡＬＫ５を介したＴＧＦ－β信号伝達の小分子阻害剤は、ＮＯＤ－ｓｃｉｄ ＩＬ－２Ｒｇｎｕｌｌマウスに移植されたヒト島にてβ－細胞の複製を促進させる（文献［Ｄｈａｗａｎ Ｓ ｅｔ ａｌ，Ｄｉａｂｅｔｅｓ．６５（５）：１２０８－１２１８（２０１６）］）。このような発見は、Ｓｍａｄ３、ＴＧＦ－β／ＡＬＫ５の正式細胞内の媒介体が代謝恒常性の多角的調節者として役割を果たすことを示し、これにより肥満およびこれに関連する障害の治療における潜在的な標的として、ＡＬＫ５媒介されたＳｍａｄ３リン酸化を識別する。

【0007】

ＴＧＦβ１は、リンパ器官の主要同型体である（文献［Ｓｃｈｍｉｄ，Ｐ．ｅｔ ａｌ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ １１１，１１７（１９９１）］）。ＴＧＦβ１は強力な抗炎症機能を発揮し、免疫反応の主要な調節者である（文献［Ｌｉ ＭＯ ｅｔ ａｌ，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２４：９９－１４６（２００６）］）。しかしながら、表面的に免疫反応を悪化させるその逆説的役割、およびそれによるＴヘルパー１７細胞（Ｔｈ１７）に関連する自己免疫促進が長い間立証されている（文献［Ｗａｈｌ，Ｓ．Ｍ，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８０，１５８７－１５９０（１９９４）、Ｆａｖａ，Ｒ．Ａ．ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７３，１１２１－１１３２（１９９１）］）。活性化されたＴＧＦ－βは、Ｔ細胞機能に対して刺激Ｔヘルパー１７（Ｔｈ１７）および調節Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の両方が影響を及ぼす（文献［Ｃｈｅｎ Ｗ ｅｔ ａｌ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖ．２００３，１４：８５－８９，Ｗａｈｌ ＳＭ ｅｔ ａｌ，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ．２００３，２８：１６７－１７９］）。リウマチ関節炎または実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）などの自己免疫疾患の病理学を担当するＴｈ１７細胞の分化を駆動する上で、その必須役割（文献［Ｃｕａ，Ｄ．Ｊ．ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ ４２１，７４４－７４８（２００３），Ｎａｋａｅ，Ｓ．ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７１，６１７３－６１７７（２００３）］）。最近の研究は、Ｔｈ１７細胞およびその上流刺激者ＩＬ－２３、またはＩＬ－２３／Ｔｈ１７経路がリウマチ関節炎、炎症性腸疾患および乾癬などのいくつかの自己免疫疾患の発症において重要な役割を果たすことを示唆している（文献［Ｄｉ Ｃｅｓａｒｅ Ａ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｉｎｖｅｓｔ Ｄｅｒｍａｔｏｌ．２００９；１２９：１３３９－５０，Ａｎｎｕｎｚｉａｔｏ Ｆ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．２００９：３２５－３１，ｄｅ Ｃｉｄ Ｒ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔｉｃ．２００９；４１：２１１－５］）。

【0008】

リウマチ関節炎（ＲＡ）において、ＴＧＦ－βは、ＲＡ患者において高レベルで発現される（文献［Ｌｏｔｚ Ｍ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４４：４１８９（１９９０），Ｔａｋｅｔａｚｕ Ｆ ｅｔ ａｌ，Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．７０：６２０（１９９４）］）。ＴＧＦ－β１は、リウマチ関節炎（ＲＡ）および骨関節炎（ＯＡ）において炎症および関節破壊に寄与する。ＲＡ動物モデルにおいて、ＴＧＦ－βの潤滑膜への注入は、好中球が蓄積した炎症反応を誘発し、関節炎反応を悪化させた（文献［Ａｌｌｅｎ ＪＢ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．１７１：２３１－４７（１９９０），Ｆａｖａ ＲＡ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．１７３：１１２１－３２（１９９１）］）。ＴＧＦ－β１は、ＲＡ線維芽細胞－様潤滑膜細胞（ＦＬＳ）においてＩＬ－１β、ＴＮＦα、ＩＬ－８、ＭＩＰ－１αおよびＭＭＰ－１の発現を誘導または増加させ、他のプロ炎症性サイトカインと相乗効果を発揮した。ＴＧＦ－β１のプロ炎症抑制効果は、関節炎ＦＬＳに対して特異的であった（文献［Ｃｈｅｏｎ Ｈ ｅｔ ａｌ，Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ １２７：５４７－５５２（２００２）］）。さらに、ＲＡ潤滑膜線維芽細胞によるＴＧＦ－β誘導されたＩＬ－６および血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）の産生は、核因子－カッパＢ活性化と関連している。ＲＡ潤滑膜線維芽細胞に対するＴＧＦ－βのこのような効果は、ＡＬＫ５キナーゼ阻害剤ＨＴＳ４６６２８４によって阻害された（文献［Ｍｉｃｈｉｔｏｍｏ Ｓ ｅｔ ａｌ，Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９（２）：１１７－２６（２００７）］）。

【0009】

ＴＧＦ－β信号伝達の過発現および／またはその欠乏は、肺癌、膵臓癌、結腸癌、前立腺圧および乳癌を含む多くの癌に関連している（文献［Ｅｌｉｏｔｔ ＲＬ ｅｔ ａｌ，Ｊｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２３：２０７８－２０９３（２００５）］）。このような研究により、ＴＧＦ－βは腫瘍抑制剤および腫瘍促進剤の両方として機能できることが明らかになった（文献［Ａｋｈｕｒｓｔ ＲＪ ｅｔ ａｌ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１１（１１）：４４－５１（２０１１）］）。良性上皮および多数の初期段階の腫瘍において、ＴＧＦ－βは成長中止の強力な誘導者である。しかしながら、進行性腫瘍において、ＴＧＦ－β信号伝達経路は厳密に調節されない。ＴＧＦ－βは、発癌を阻害するよりは、後期段階で腫瘍の成長および進行を促進する（文献［Ａｋｈｕｒｓｔ ＲＪ ｅｔ ａｌ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１１（１１）：Ｓ４４－５１（２０１１）］；文献［Ｍａｓｓａｇｕｅ Ｊ ｅｔ ａｌ，Ｃｅｌｌ．１３４（２）：２１５－２３０（２００８）］；文献［Ｐａｄｕａ Ｄ ｅｔ ａｌ，Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ．１９（１）：８９－１０２（２００９）］；文献［Ｉｎｍａｎ ＧＪ ｅｔ ａｌ，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｇｅｎｅｔ Ｄｅｖ．２１（１）：９３－９９（２０１１）］；文献［Ｐａｓｃｈｅ Ｂ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉｏ．ｌ １８６（２）：１５３－１６８（２００１）］；文献［Ｌａｎｇｅｎｓｋｉｏｌｄ Ｍ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｓｕｒｇ Ｏｎｃｏｌ．９７（５）：４０９－４１５（２００８）］）。このような機能性スイッチは、ＴＧＦ－βパラドックスとして知られている。また、ＴＧＦβの腫瘍発生効果に対する腫瘍阻害剤は、細胞転換の時間的段階に関連し、および／またはそれに左右されるという証拠がある。例えば、Ｓｍａｄ２／３を結合させることができないＡＬＫ５突然変異の発現は、より大きく、より増殖し、分化の少ない乳房腫瘍を生成させる。しかし、非常に悪性の乳房細胞における同じ突然変異の発現は、肺に転移する能力を抑制させる（文献［Ｔｉａｎ Ｆ ｅｔ ａｌ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６４：４５２３－３０（２００４）］）。

【0010】

ＴＧＦ－βの多能性の性質は、その効果を無力化する機会と挑戦の両方を提供する。しかしながら、多くの癌は、しばしばＴＧＦ－β信号伝達構成要素の遺伝的損失により、またはより一般的には、他の統合信号伝達経路による下流攪乱によって、このような成長阻害に対して不応することになる。この期間中、免疫調節特性、血管新生誘導、および／または癌の移動および侵入を促進する上皮－中間葉転移（ＥＭＴ）の促進を含む、ＴＧＦ－βのプロ腫瘍形成作用が優勢であり得る。

【0011】

ＴＧＦ－βは、抗腫瘍免疫に対して悪影響を及ぼし、ホスト腫瘍免疫監視を有意に阻害する。ＴＧＦ－βは、ＴＧＦ－β１ ｎｕｌｌマウスで発生した総自己免疫性で証明されるように、免疫系の抑制において重要な役割を果たす（文献［Ｓｈｕｌｌ ＭＭ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ．３５９（６３９７）：６９３－６９９（１９９２）］）。興味深いことに、ＴＧＦ－β信号伝達のこのようなＴ細胞特異的遮断は、ＥＬ－４胸腺腫またはＢ１６－Ｆ１０黒色腫の腫瘍細胞で攻撃されたマウスから腫瘍を根絶することのできる腫瘍特異的細胞毒性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）の生成を許容する（文献［Ｔｈｏｍａｓ ＤＡ ｅｔ ａｌ，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ．８（５）：３６９－３８０（２００５）］）。選別的ＡＬＫ５阻害剤、ＴＥＷ－７１９７およびＬＹ－２１５７２９９を用いた経口治療は、向上した細胞毒性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）活性により、黒色腫の進行を抑制した。特に、ＡＬＫ５阻害の抗腫瘍効果は、主にＣＤ８＋Ｔ細胞によって左右される（文献［Ｙｏｏｎ ＪＨ ｅｔ ａｌ，ＥＭＢＯ Ｍｏｌ Ｍｅｌｄ．５（１１）：１７２０－１７３９（２０１３）］）。ＴＧＦ－βはまた、ＣＤ４＋Ｔ細胞分化および機能に対して有意な影響を及ぼし、高レベルのＴＧＦ－βを生成することが知られているＣＤ４＋ＣＤ２５＋調節Ｔ細胞によって部分的に調節されるＮＫ細胞増殖および機能を阻害する（文献［Ｎａｋａｍｕｒａ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．１９４（５）：６２９－６４４（２００１）］；文献［Ｇｈｉｒｉｎｇｈｅｌｌｉ Ｆ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．２０２（８）：１０７５－１０８５（２００５）］；文献［Ｓｈｅｖａｃｈ ＥＭ ｅｔ ａｌ，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．３０（５）：６３６－６４５ ２００９］）。遺伝的欠失および抗体無力化研究は、ＴＧＦβ阻害がＴ細胞およびＮＫ細胞分化および機能を向上させたことが立証された（文献［Ｍｏ ｅｔ ａｌ，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ２５（３）：４５５－４７１（２００６），Ｚｈｏｎｇ ｅｔ ａｌ，Ｃｌｉｎ Ｃａｎ Ｒｅｓ １６（４）：１１９１－１２０５（２０１０）］）。腫瘍細胞によって生成されたＴＧＦ－βは、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋調節Ｔ調節細胞（Ｔｒｅｇ）の拡張による免疫抑制を誘導する（文献［Ｂｉｅｒｉｅ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ ６（７）：５０６－２０（２００６）］）。ＡＬＫ５の全身遮断は恒常性増殖を向上させ、試験管内および生体内でＴｒｅｇ細胞個体群を誘導する（文献［Ｐｏｌａｎｃｚｙｋ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｔｒｎａｓ Ｍｅｄ １７（２１９）（２０１９）］）。神経芽細胞腫の免疫治療において、ジヌツキシマブ（ｄｉｎｕｔｕｘｉｍａｂ）（抗－ＧＤ２抗体）と併用されるガルニセルチブ（Ｇａｌｕｎｉｓｅｒｔｉｂ）（ＬＹ２１５７２９９一水和物）、ＡＬＫ５の小分子阻害剤は、養子転移された活性化ＮＫ細胞によりジヌツキシマブの抗神経芽細胞腫効果を向上させる（文献［Ｔｒａｎ ｅｔ ａｌ，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２３（３）：８０４－８１３（２０１７）］）。

【0012】

従来の研究は、血管新生においてＴＧＦ－β信号伝達の役割を示唆している。ＡＬＫ５を介したＴＧＦ－β信号伝達の阻害は、内皮細胞（ＥＣ）の移動および増殖を増加させ、これは血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）の存在下でさらに向上される（文献［Ｌｉｕ Ｚ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．１２２：３２９４－３３０２（２００９）］）。ＥＣは、２つの異なるＡＬＫ５およびＡＬＫ１を発現することが報告されている。ＴＧＦ－βによる血管発生を媒介するにおいて、このような２つの受容体の重要性は、ＡＬＫ１（文献［Ｏｈ ＳＰ ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ｓｃｉ ＵＳＡ．９７：２６２６－２６３１（２０００）］）またはＡＬＫ５（文献［Ｌａｒｓｓｏｎ Ｊ ｅｔ ａｌ，ＥＭＢＯ Ｊ．２０：１６６３－１６７３（２００１）］）ノックアウトマウスにおいて、それぞれＥ１１．５およびＥ１０．５日に観察された胚致死率によって立証される。正式ＳＭＡＤ２／３経路はＡＬＫ５によって活性化され、これはＰＡＩ－１およびフィブロネクチンの発現を誘導し、これによって血管新生を妨げる（文献［Ｇｏｕｍａｎｓ ＭＪ ｅｔ ａｌ，Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ．１２：８１７－８２８（２００３）］；文献［Ｇｏｕｍａｎｓ ＭＪ ｅｔ ａｌ，ＥＭＢＯ Ｊ．２１：１７４３－１７５３（２００２）］；文献［Ｗｕ Ｘ ｅｔ ａｌ，Ｍｉｃｒｏｖａｓｃ Ｒｅｓ．７１：１２－１９（２００６）］；文献［Ｏｔａ Ｔ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９３：２９９－３１８（２００２）］；文献［Ｓａｆｉｎａ Ａ ｅｔ ａｌ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ２６（１７）：２４０７－２２（２００７）］）。ＴＧＦ－βの癌－促進機能の大部分は、ＴＧＦ－βと転換腫瘍遺伝子、例えばＥｒｂＢ２／ＨＥＲ２／Ｎｅｕ、ポリオマウイルス中間Ｔ抗原（ＰｙＶｍＴ）およびＲａｓの間の協力によって発揮される。ＶＥＧＦ、ＴＧＦ－β－Ｓｍａｄ転写調節の標的は、有意に突然変異ＨＥＲ２で上向調節された。したがって、ＬＹ２１０９７６１、ＴＧＦ－β受容体阻害剤によるＴＧＦ－β信号伝達の阻害は、癌細胞増殖および腫瘍－誘導された血管新生を遮断した（文献［Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２９（２３）：３３３５－４８（２０１０）］）。

【0013】

ＴＧＦ－βは、腫瘍細胞の幹性およびＥＭＴ（上皮－中間葉転移）を調節することが知られている。ＥＭＴは、Ｅ－カドヘリンの損失、および中間葉タンパク質、例えば、ビメンチン、フィブロネクチン、およびＮ－カドヘリンの発現によって表示され、侵入過程を促進し、予後を悪化させる。癌細胞において、Ｅ－カドヘリンの抑制、およびビメンチン、基質－金属タンパク質分解酵素（ＭＭＰ）および他のプロ－ＥＭＴ因子の誘導は、ＴＧＦ－βによって駆動されることができる（文献［Ｌｅｅ ＪＭ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１７２（７）：９７３－９８１（２００６）］；文献［Ｚｈａｏ Ｙ ｅｔ ａｌ，Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｆｕｎｃｔ．２６（５）：５７１－５７７（２００８）］）。ＡＬＫ５の阻害は、ヒト癌細胞における細胞移動、侵入、ＶＥＧＦ分泌およびＥＭＴを含むＴＧＦ－βのプロ－腫瘍形成機能を弱める（文献［Ｈａｌｄｅｒ ｅｔ ａｌ，Ｎｅｏｐｌａｓｉａ ７（５）：５０９－５２１（２００５）］）。ＣＴＩ－８２、ＴＧＦ－β１によって誘導されたＥＭＴの新規のＡＬＫ５阻害剤は、様々なＥＭＴマーカーのｍＲＮＡおよびタンパク質レベルを阻害する（文献［Ｊｅｏｎｇ ｅｔ ａｌ，Ｂｉｏｌｏｇｙ ９（７）：１４３（２０２０）］）。バクトセルチブ（Ｖａｃｔｏｓｅｒｔｉｂ）（ＴＥＷ－７１９７）は、ＴＧＦ－β－または放射線誘導されたＥＭＴおよび乳癌幹細胞を介してヒト乳癌細胞の転移性特性を減少させた（文献［Ｐａｒｋ ｅｔ ａｌ，Ｅｕｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ４７（１７）：２６４２－５３（２０１１），Ｃｈｏｉ ｅｔ ａｌ，Ｒａｄｉｏｌ Ｏｎｃｏｌ ５６（２）：１８５－１９７（２０２２）］）。

【0014】

異種受容体複合体における近位事件として、ＴＧＦ－β媒介された、ＡＬＫ５依存性信号伝達およびＳｍａｄ２／Ｓｍａｄ３リン酸化に対する膨大な知識は、治療標的としてタイプＩ受容体キナーゼに対する初期薬物発見の努力に集中した（文献［Ｌａｐｉｎｇ ＮＪ ｅｔ ａｌ，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｈａｒｍ．３：２０４－２０８（２００３）］；文献［Ｓｉｎｇｈ Ｊ ｅｔ ａｌ，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃ Ｄｅｖ．７：４３７－４４５（２００４）］）。ＳＢ－５０５１２４、ＡＬＫ５のＡＴＰ－結合部位の競争的阻害剤は、Ｒｂが欠けたＫＲＡＳ－誘導された膵臓癌細胞で増殖を減少させる（文献［Ｇｏｒｅ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｃｌｉ Ｉｎｖｅｓｔ．１２４（１）：３３８－３５２（２０１４）］）。ガルニセルチブ（ＬＹ２１５７２９９）およびバクトセルチブは、臨床的薬動学および薬力学の研究により、癌治療において現在臨床試験中にある。Ｓｍａｄ２のリン酸化を特異的に下向調節するガルニセルチブ、ＡＬＫ５の経口小分子阻害剤は、正式経路の活性化を妨げる。ガルニセルチブは、進行性転移癌の治療において、現在、初期臨床試験中にある（文献［Ｈｅｒｂｅｒｔｚ ｅｔ ａｌ，Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ Ｄｅｖｅｌ Ｔｈｅｒ．１０（９）：４４７９－４４９９（２０１５）］）。ガルニセルチブは、膠芽腫、膵臓癌、および肝細胞癌腫などの未充足医学的要求が高い癌患者において、単独治療として、または標準抗腫瘍体系（ニボルマブ（ｎｉｖｏｌｕｍａｂ）を含む）と併用して研究されている（ＮＣＴ０１７４６００４、ＮＣＴ０１９６５８０８、ＮＣＴ０１５８２２６９、ＮＣＴ０１７２２８２５、ＮＣＴ０２００８３１８、ＮＣＴ０１２２０２７１、ＮＣＴ０１２４６９８６、ＮＣＴ０１３７３１６４、ＮＣＴ０１６８２１８７）。抗癌治療のためのバクトセルチブ、ＡＬＫ５の小分子阻害剤は、ＡＬＫ５－過発現腫瘍細胞類型において腫瘍成長を抑制する（文献［Ｌｅｅ ｈｏ－ｊａｅ，Ｊ Ｃａｎｃｅｒ Ｐｒｅｖ，２５（４）：２１３－２２２（２０２０）］）。非小細胞肺癌腫、膀胱尿路上皮癌腫および悪性固形腫瘍がバクトセルチブの臨床試験で研究中にある（ＮＣＴ０４１０３６４５、ＮＣＴ０３７２４８５１、ＮＣＴ０３７３２２７４、ＮＣＴ０３６９８８２５、ＮＣＴ０３０７４００６、ＮＣＴ０３１４３９８５、ＮＣＴ０３８０２０８４、ＮＣＴ０４０６４１９０、ＮＣＴ０４５１５９７９、ＮＣＴ０４２５８０７２）。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0015】

本発明が解決しようとする課題は、新規の化学式Ｉの化合物を提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0016】

本発明は、化学式Ｉの化合物、またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグを提供する。

【化1】

【0017】

式中、
Ｒ^１は、Ｈ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＤ_３、ＣＨＦ_２、ＣＦ_３、－（Ｃ１－Ｃ６）ヒドロキシアルキル、または－ＳＯ_２アルキルであり；
Ｒ^２は、Ｈ，Ｍｅ、ＣＦ_３、ＮＯ_２、ハロゲン、アシル、Ｃ１－Ｃ６アルキル、置換されたＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ７シクロアルキル、アルキルカルボキシ、シアノ、またはアルコキシであり；
Ｘ^１、Ｘ^２およびＸ^３はそれぞれ独立してＣＨまたはＮであり；
それぞれのＲ^３は、水素、ハロゲン、ＣＦ_３、アシル、アミノ、置換されたアミノ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、置換されたＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、Ｃ３－Ｃ７シクロアルキル、アルキルカルボキシ、シアノ、ニトロ、またはアルコキシからなる群から独立して選択され；

【0018】

それぞれのＲ^４は、水素、ハロゲン、ＣＦ_３、アシル、アミノ、置換されたアミノ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、置換されたＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、アシルオキシ、またはアリールオキシからなる群から独立して選択され；
ｍは１、２、３または４であり；
ｎは１、２、３，４または５である。
化学式Ｉの化合物は、化学式ＩＩの化合物の絶対配列、またはその塩をさらに含む。

【0019】

【化2】

【0020】

式中、
Ｒ^１はＨ，Ｃ１－Ｃ６アルキル、ＣＤ_３、ＣＨＦ_２、ＣＦ_３、－（Ｃ１－Ｃ６）ヒドロキシアルキル、または－ＳＯ_２アルキルであり；
それぞれのＲ^４は水素、ハロゲン、ＣＦ_３、アシル、アミノ、置換されたアミノ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、置換されたＣ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６ハロアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、アシルオキシ、またはアリールオキシからなる群から独立して選択され；
ｎは１、２、３，４または５である。
本発明の化合物は、転換成長因子－β（ＴＧＦ－β）タイプＩ受容体（ＡＬＫ５）および／またはアクチビンタイプＩ受容体（ＡＬＫ４）の阻害剤であり、したがって肺線維症、肥満、糖尿病、ＮＡＳＨ（非アルコール性脂肪肝炎）、癌、およびその他の炎症の治療に有用である。

【0021】

他の実施形態において、本発明は、有効量の化学式Ｉの化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグを含む薬剤学的組成物に関する。いくつかの実施形態において、薬剤学的組成物は、薬剤学的に許容可能な担体、補助剤および／または賦形剤をさらに含む。いくつかの実施形態において、そのような組成物は、保存剤、遅延吸収のための製剤、充填剤、結合剤、吸着剤、緩衝剤、崩解剤、可溶化剤および他の担体の少なくとも１つ、補助剤および／または賦形剤を不活性成分として含有してもよい。組成物は、当業界で周知の方法で剤型化することができる。

【0022】

いくつかの実施形態において、本発明は、化学式Ｉの化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグを含む治療有効量の組成物を、疾患に罹患している個体に投与する段階を含む、前記個体における前記疾患を治療する方法に関する。
他の実施形態において、本発明は、治療有効量の化学式Ｉの化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグを哺乳動物に投与する段階を含む、前記哺乳動物において障害を治療する方法に関する。

【0023】

他の実施形態において、本発明は、治療有効量の化学式Ｉの化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグをヒトに投与する段階を含む、前記ヒトにおいて障害を治療する方法に関する。
他の実施形態において、本発明は、治療有効量の化学式Ｉの化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、エステル、プロドラッグ、溶媒和物、例えば、水和物、多形体または互変異性質体を、ヒトを含む哺乳動物に投与する段階を含む、前記哺乳動物における肥満、糖尿病、ＮＡＳＨ（非アルコール性脂肪肝炎）、癌、すべての病因による肝線維症、腎腸間質性線維症、肺線維症、炎症、特定の感染性疾患、病態または障害を治療する方法に関する。

【0024】

他の実施形態において、本発明は、ヒトを含む哺乳動物において転換成長因子－β（ＴＧＦ－β）タイプＩ受容体（ＡＬＫ５）および／またはアクチビンタイプＩ受容体（ＡＬＫ４）連鎖反応によって調節される障害または病態の治療方法に関し、この方法は、一定量の化学式Ｉの化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、エステル、プロドラッグ、溶媒和物、例えば、水和物、多形体または互変異性質体を前記哺乳動物に投与して前記連鎖反応を調節する段階を含む。特定の患者に対して適した投与量は、当業者によって公知の方法に従って決定されることができる。

【0025】

他の実施形態において、本発明は、薬剤学的組成物の製造において、化学式Ｉの化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、エステル、プロドラッグ、溶媒和物、例えば、水和物、多形体または互変異性質体の用途に関する。薬剤学的組成物は、ヒトを含む哺乳動物においてＡＬＫ連鎖反応によって調節される障害または病態を治療するために使用されることができる。薬剤学的組成物は、肺線維症、肥満、糖尿病、癌および他の炎症を治療するのに有用である。
他の実施形態において、本発明は、化学式Ｉの化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグを含む薬剤学的組成物に関する。いくつかの実施形態において、薬剤学的組成物は経口投与に適した形態である。さらなるまたは追加の実施形態において、薬剤学的組成物は、錠剤、カプセル、錠剤、粉末、徐放型剤型、溶液および懸濁液の形態である。いくつかの実施形態において、薬剤学的組成物は、滅菌液、懸濁液、乳化液などの非経口注射に適した形態；軟膏またはクリームとして局所投与するのに適した形態、または坐剤として直腸投与に適した形態である。さらなるまたは追加の実施形態において、薬剤学的組成物は、正確な投与量で単一投与するのに適した単位投与量形態である。さらなるまたは追加の実施形態において、化学式Ｉの化合物の量は、約０．００１～約１０００ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。さらなるまたは追加の実施形態において、化学式Ｉの化合物の量は、約０．５～約５０ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。
他の実施形態において、本発明は、化学式Ｉの化合物またはその薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグの製造方法に関する。

【0026】

技術的課題
本発明が解決しようとする課題は、新規の化学式Ｉの化合物を提供することである。
本発明によって解決しようとする他の技術的課題は、ＡＬＫ酵素に対する阻害活性を有する新規の化学式Ｉの化合物を提供することである。
本発明によって解決しようとする他の技術的課題は、前記化合物、その薬剤学的に許容可能な塩、溶媒和物、多形体、エステル、互変異性質体またはプロドラッグおよびその塩を含む薬剤学的組成物を提供することである。
本発明によって解決しようとするまた他の技術的課題は、ＡＬＫに関連する疾患の予防および／または治療のための薬剤学的組成物を提供することである。

【0027】

問題に対する解決策
本発明の新規の特徴は、特に添付の特許請求の範囲に記載されている。本発明の特徴および利点は、本発明の原理が活用される例示的な実施形態が記載されている以下の詳細な説明を参照することによって、より理解されやすいのであろう。
本発明の好ましい実施形態が本明細書に図示および記述されているが、そのような実施形態は、例としてのみ提供される。本明細書に記載の本発明の実施形態に対する様々な代案が本発明の実施に使用できることを理解されたい。当業者にとって、様々な変形、変更および置換が、本発明から逸脱することなくできることが理解できる。
以下の特許請求の範囲は、本発明の態様の範囲を定義し、そのような特許請求の範囲およびその均等物の範囲内の方法および構造がそれに含まれることが意図される。
本明細書に使用されたセクションの表題は、構成の目的のためだけに使用され、記載された特許請求の範囲を制限するものと解釈されてはならない。特許、特許出願、記事、書籍、マニュアル、および論文を含むが、これらに制限されない、本出願で引用されたすべての文書または文書の一部は、いかなる目的であっても、その全体が本明細書に明示的に取り入られる。

【発明を実施するための形態】

【0028】

特定の化学用語
他に定義されない限り、本明細書で使用されたすべての技術的および科学的用語は、請求される請求の対象が属する当業界の熟練者により一般に理解されるのと同じ意味を有する。別段の記載がない限り、本明細書に開示内容の全体を通して言及される全ての特許、特許出願、公開された資料は、その全体が参照として取り入られる。本明細書において用語に対して複数の定義が存在する場合、本セクションにおける定義が優先する。ＵＲＬまたは他のそのような識別子またはアドレスが参照される場合、そのような識別子は変わることがあり、インターネット上の特定の情報が変動することがあるが、インターネットまたは他の適切な参照ソースを検索することによって同等の情報を見つけることができるものと理解される。これを参照すると、そのような情報の利用可能性および公開の普及が証明される。

【0029】

前記の一般的な説明および以下の詳細な説明は、単なる例示的かつ説明的なものであり、請求される任意の請求対象を制限しないものと理解されたい。本出願において、単数の用語は、特に断りのない限り、複数を含む。明細書および添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形は、文脈上、特に明確に示されない限り、複数の対象を含むことに留意されたい。さらに、特に明記しない限り、「または」の使用は「および／または」を意味するものと言及されるべきである。さらに、用語「始めとし」、「始めとする」、「を始め」などの異なる形態の使用は制限の意味ではない。同様に、用語「含み」、「含む」、「含まれ」、および「含まれる」などの異なる形態の使用は制限ではない。

【0030】

標準化学用語の定義は、文献［Ｃａｒｅｙ ａｎｄ Ｓｕｎｄｂｅｒｇ“ＡＤＶＡＮＣＥＤ ＯＲＧＡＮＩＣ ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ ４ＴＨ ＥＤ．”Ｖｏｌｓ．Ａ（２０００） ａｎｄ Ｂ（２００１）、Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ］を含む参考文献から見つけることができる。他に示さない限り、当業界の技術に属する質量分光法、ＮＭＲ、ＨＰＬＣ、ＩＲおよびＵＶ／Ｖｉｓ分光法および薬理学の通常の方法が使用される。特定の定義が提供されない場合、本明細書に記載の分析化学、合成有機化学、ならびに医薬および薬剤学的化学に関して使用された、命名法、ならびに実験室の手順および技術は当業界において公知である。化学合成、化学分析、薬剤学的製造、剤型、および患者への送達および治療に対する標準技術が使用されることができる。反応および精製技術は、例えば、製造者の仕様に従ってキットを使用するか、当業界で一般的に実施されるか、本明細書に記載のように行われてもよい。一般に、前記の技術および手順は、当業界で広く知られている通常の方法および本明細書の全体を通して引用および論じられた、一般的であり、より具体的な様々な参考文献に記載されているように実施されることができる。本明細書の全体を通して、基およびその置換基は、安定した部分および化合物を提供するように、当業者によって選択されることができる。

【0031】

置換基が左から右に記載された通常の化学式によって特定される場合、それらは右から左への構造を記載して生じる化学的に同じ置換基を同等に含む。非制限的な例として、ＣＨ_２ＯはＯＣＨ_２と同じである。
特に明記しない限り、「アルキル、」「アミン、」「アリール」と同様であるが、これらに限定されない一般的な化学用語の使用は、それらの選択的に置換された形態と同じである。例えば、本明細書で使用されるような「アルキル」は、選択的に置換されたアルキルを含む。

【0032】

本明細書で提示された化合物は、１つ以上の立体中心を有してもよく、それぞれの中心はＲまたはＳ配列、またはそれらの組み合わせで存在してもよい。同様に、本明細書に提示された化合物は、１つ以上の二重結合を有してもよく、それぞれはＥ（トランス）またはＺ（シス）配列、またはそれらの組み合わせで存在してもよい。１つの特定の立体異性質体、位置異性質体、部分立体異性質体、鏡像異性質体またはエピマーの提示は、できるだけ、すべての立体異性質体、位置異性質体、部分立体異性質体、鏡像異性質体またはエピマーおよびそれらの混合物を含むものと理解されるべきである。したがって、本明細書に提示された化合物は、全ての個別配列の立体異性質体、位置異性質体、部分立体異性質体、鏡像異性質体、およびエピマー形態だけでなく、それらの相応する混合物を含む。特定の立体中心を反転させるか、変更しないままにする技術、および立体異性質体の混合物を分離する技術は当業界で周知であり、特定の状況に適した方法を選択することは、当業者の能力に十分属する。例えば、文献［Ｆｕｍｉｓｓ ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．），ＶＯＧＥＬ’Ｓ ＥＮＣＹＣＬＯＰＥＤＩＡ ＯＦ ＰＲＡＣＴＩＣＡＬ ＯＲＧＡＮＩＣ ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ ５．ｓｕｐ．ＴＨ ＥＤ．，Ｌｏｎｇｍａｎ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｌｔｄ．，Ｅｓｓｅｘ，１９９１，８０９－８１６；ａｎｄ Ｈｅｌｌｅｒ，Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．１９９０，２３，１２８］を参照する。

【0033】

「結合」または「単一結合」という用語は、結合によって連結された原子がより大きな構造の一部であるとみなされる場合、２つの原子または２つの部分間の化学結合を指す。
「選択的」または「選択的に」という用語は、後続に記載される事件または状況が起こっても起こらなくてもよく、その説明が前記事件または状況が起こる場合およびそうでない場合を含むことを意味する。例えば、「選択的に置換されたアルキル」は、以下に定義されるように「アルキル」または「置換されたアルキル」を意味する。さらに、選択的に置換された基は、非置換された（例えば、ＣＨ_２ＣＨ_３）、完全置換された（例えば、ＣＦ_２ＣＦ_３）、一置換された（例えば、ＣＨ_２ＣＨ_２）Ｆ）、または完全置換と一置換の間の任意のレベルで置換された（例えば、ＣＨ_２ＣＨＦ_２、ＣＦ_２ＣＨ_３、ＣＦＨＣＨＦ_２など）であり得る。１つ以上の置換基を含有する任意の基に対して、当業者は、そのような基が立体的に非現実的であり／であるか、合成的に非現実的な任意の置換または置換パターンを導入すること（例えば、置換されたアルキルは選択的に置換されたシクロアルキル基を含み、これは結局、選択的に置換されたアルキル基を含むと定義され、潜在的に無限に可能である）を意図していないことが理解される。したがって、記載された任意の置換基は、一般に約１，０００ダルトン、より典型的には約５００ダルトン以下の最大分子量を有すると理解されるべきである（巨大分子置換基が明らかに意図されている場合を除く。例えばポリペプチド、多糖類、ポリエチレングリコール、ＤＮＡ、ＲＮＡなど）。

【0034】

本明細書で使用されるように、Ｃ_１－Ｃｎは、Ｃ_１－Ｃ_２、Ｃ_１－Ｃ_３、…Ｃ_１－Ｃｎを含む。一例として、「Ｃ_１－Ｃ_４」で示される基は、部分内に１～４個の炭素原子が存在することを示し、すなわち、１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子または４個の炭素原子を含有する基だけでなく、Ｃ_１－Ｃ_２およびＣ_１－Ｃ_３の範囲を表す。したがって、一例として、「Ｃ_１－Ｃ_４アルキル」は、アルキル基内に１～４個の炭素原子が存在することを表し、すなわち、アルキル基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチルおよびｔ－ブチルの中から選択される。「１～１０」のような数値範囲は、本明細書に現れるたびに与えられた範囲内のそれぞれの整数を指し；例えば、「１～１０個の炭素原子」は、該当基が１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子、４個の炭素原子、５個の炭素原子、６個の炭素原子、７個の炭素原子、８個の炭素原子、９個の炭素原子、または１０個の炭素原子を有し得ることを意味する。
本明細書で使用される「ヘテロ原子」または「ヘテロ」という用語は、単独でまたは組み合わせて、炭素および水素以外の原子を指す。ヘテロ原子は、酸素、窒素、硫黄、リン、ケイ素、セレニウムおよびスズの中から独立して選択されるが、このような原子に制限されない。２つ以上のヘテロ原子が存在する実施形態において、２つ以上のヘテロ原子は互いに同一であってもよく、２つ以上のヘテロ原子の一部または全部は、それぞれ異なってもよい。

【0035】

本明細書で使用される「アルキル」という用語は、単独でまたは組み合わせて、１～約１０個の炭素原子、より好ましくは１～６個の炭素原子を有する選択的に置換された直鎖、または選択的に置換された分岐状鎖飽和炭化水素モノラジカルを指す。例としては、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、２－メチル－１－プロピル、２－メチル－２－プロピル、２－メチル－１－ブチル、３－メチル－１－ブチル、２－メチル－３－ブチル、２，２－ジメチル－１－プロピル、２－メチル－１－ペンチル、３－メチル－１－ペンチル、４－メチル－１－ペンチル、２－メチル－２－ペンチル、３－メチル－２－ペンチル、４－メチル－２－ペンチル、２，２－ジメチル－１－ブチル、３，３－ジメチル－１－ブチル、２－エチル－１－ブチル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ－アミルおよびヘキシル、およびより長い長鎖アルキル基、例えばヘプチル、オクチルなどが含まれるが、これらに限定されない。「Ｃ_１－Ｃ_６アルキル」または「Ｃ_１－６アルキル」などの数値範囲は、本明細書に示されるたびに、アルキル基が１個の炭素原子_、２個の炭素原子、３個の炭素原子、４個の炭素原子、５個の炭素原子または６個の炭素原子からなることができることを意味するが、本定義はまた、数値範囲が示されていない用語「アルキル」の存在を包括する。

【0036】

本明細書で使用される「脂肪族」という用語は、単独でまたは組み合わせて、選択的に置換された直鎖または分岐状鎖、非環状、飽和、部分的に不飽和または完全不飽和の非芳香族炭化水素を指す。したがって、該当用語は、総括してアルキル、アルケニルおよびアルキニル基を含む。
本明細書で使用される「サイクル」、「環式」、「環」および「－員環」という用語は、単独でまたは組み合わせて、本明細書に記載のような脂環式、ヘテロ環式、芳香族、ヘテロ芳香族および多環式融合または非縮合環系を含む任意の共有的に密閉された構造を指す。環は選択的に置換されてもよい。環は縮合環系の一部を形成してもよい。「－員」という用語は、環を構成する骨格原子の数を表す意味である。したがって、一例として、シクロヘキサン、ピリジン、ピランおよびピリミジンは６員環であり、シクロペンタン、ピロール、テトラヒドロフランおよびチオフェンは５員環である。

【0037】

本明細書で使用される「シクロアルキル」という用語は、単独でまたは組み合わせて、３～約１５個の環炭素原子または３～約１０個の環炭素原子を含むが、追加の非環式炭素原子を置換基として含んでもよい（例えば、メチルシクロプロピル）、選択的に置換された飽和、炭化水素モノラジカル環を指す。
「シクロアルキル」の非制限的な例としては、アジニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ホモピペリジニル、オキセパニル、チエパニル、オキサゼピニル、ジアゼピニル、チアゼピニル、１、２，３，６－テトラヒドロピリジニル、２－ピロリニル、３－ピロリニル、インドリニル、２Ｈ－ピラニル、４Ｈ－ピラニル、ジオキサニル、１，３－ジオキソラニル、ピラゾリニル、ジチアニル、ジチオラニル、ジヒドロピラニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロフラニル、ピラゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキシル、３－アザビシクロ［４．１．０］ヘプチル、３Ｈ－インドリル、キノリジニルなどが含まれる。前記用語はまた、単糖類、二糖類およびオリゴ糖を含むが、これらに限定されない炭水化物の全ての環状を含む。

【0038】

本明細書で使用される「芳香族」という用語は、４ｎ＋２ｎ個（ｎは整数である）の電子を含む電子システムにおいて非偏在化された平面状、環式または多環式環の部分を指す。芳香族環は、５、６、７、８、９、または９個を超える原子によって形成されることができる。芳香族は選択的に置換されてもよく、単環式または縮合環の多環式であってもよい。「芳香族」という用語は、全て炭素を含有する環（例えば、フェニル）および１つ以上のヘテロ原子を含有する環（例えば、ピリジン）の両方を含む。

【0039】

特定の薬剤学的用語
本明細書で使用される「ＡＬＫ阻害剤」という用語は、本明細書に一般的に記載されたキナーゼ分析で測定した場合、ＡＬＫ活性に対して約１００μＭ以下または約５０μＭ以下のＩＣ_５０を示す化合物を指す。「ＩＣ_５０」は、酵素の活性を最大レベルの半分に低下させる阻害剤の濃度である。本明細書に記載の化合物は、ＡＬＫに対する阻害を示すことが明らかになった。本発明の化合物は、本明細書に記載のキナーゼ分析で測定される場合、好ましくはＡＬＫに対して約１０μＭ以下、より好ましくは約５μＭ以下、さらにより好ましくは約１μＭ以下、最も好ましくは約２００ｎＭ以下のＩＣ_５０を示す。
本明細書で使用される「選別的」、「選別的に」、または「選別性」という用語は、任意の他の酵素と比較する場合、その酵素がより低いＩＣ_５０値を有する本発明の化合物を指す（例えば、少なくとも２倍、５倍、１０倍低い）。
障害、病態などに罹患している個体に対して本明細書で使用される「対象体」、「患者」、または「個体」という用語は、哺乳動物および非哺乳動物を含む。哺乳動物の例としては、哺乳綱の任意の構成員：ヒト、非ヒト霊長類、例えばチンパンジーおよび他の類人猿およびサル種；農場動物、例えば、牛、馬、羊、ヤギ、豚；家畜、例えば、ウサギ、犬、および猫；げっ歯類を含む実験室動物、例えば、ラット、マウス、およびモルモットなどが含まれるが、これらに限定されない。非哺乳動物の例には、鳥類、魚類などが含まれるが、これらに限定されない。本明細書に提供された方法および組成物の一実施形態において、哺乳動物はヒトである。

【0040】

本明細書で使用される「治療する」、「治療し」または「治療」という用語および他の文法的等価物は、疾患または病態の症状の緩和、弱化または改善、さらなる症状の予防、症状の基底代謝の原因の改善または予防、疾患または病態の阻害、例えば疾患または病態の発症の阻止、疾患または病態の緩和、疾患または病態の抑制誘発、疾患または病態によって誘発された病態の緩和、または疾患または病態の症状の中断を含む。前記用語は、治療的利点および／または予防的利点を達成することをさらに含む。治療的利点とは、治療される基底障害の根絶または改善を意味する。さらに、患者が依然として基底障害に罹患している可能性があるが、基底障害に関連する生理学的症状のうち１つ以上が根絶または改善されて患者に改善が観察されると、治療的利点が達成される。予防的利点のために、疾患の診断が行われてなくても、特定の疾患が発症する危険性のある患者、または疾患の生理学的症状のうち１つ以上が報告された患者に前記組成物を投与することができる。

【0041】

本明細書で使用される「有効量」、「治療有効量」または「薬剤学的に有効な量」という用語は、治療される疾患または病態の症状のうち１つ以上がある程度緩和する、投与される少なくとも１つの製剤または化合物の十分量を意味する。結果は、疾患の徴候、症状または原因の減少および／または緩和、または生物学的システムの任意の他の好ましい変更であり得る。例えば、治療用途のための「有効量」は、疾患において臨床的に有意な減少を提供するのに必要な本明細書に開示されたような化合物を含む組成物の量である。任意の個体において適切な「有効」量は、用量増加研究のような技術を使用して決定されることができる。
本明細書で使用される「投与する」、「投与し」、「投与」などの用語は、所望の生物学的作用部位に、化合物または組成物を送達することを可能にするために使用され得る方法を指す。そのような方法には、経口経路、十二指腸内経路、非経口注射（静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、血管内または注入を含む）、局所および直腸投与が含まれるが、これらに限定されない。当業者は、例えば、文献［Ｇｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｇｉｌｍａｎ，Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ｃｕｒｒｅｎｔ ｅｄ．；Ｐｅｒｇａｍｏｎ］；および文献［Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（ｃｕｒｒｅｎｔ ｅｄｉｔｉｏｎ），Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．］に論議されたような、本明細書に記載の化合物および方法とともに使用され得る投与技術に親しい。好ましい実施形態において、本明細書に記載の化合物および組成物は経口投与される。
剤型、組成物または成分に関して本明細書で使用される「許容可能な」という用語は、治療される対象体の一般的な健康に対して持続的に有害な影響を及ぼさないことを意味する。

【0042】

本明細書で使用される「薬剤学的に許容可能な」という用語は、本明細書に記載の化合物の生物学的活性または特性を妨害せず、比較的非毒性の、担体または希釈剤などの物質を指し、すなわち前記物質は、望ましくない生物学的効果を引き起こすことなく、または組成物に含まれた任意の成分と有害な方式で相互作用することなく個体に投与されることができる。
本明細書で使用される「薬剤学的組成物」という用語は、担体、安定化剤、希釈剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤および／または賦形剤などであるが、これらに限定されない、少なくとも１つの薬剤学的に許容可能な化学的成分と選択的に混合される、生物学的に活性な化合物を指す。

【0043】

本明細書で使用される「担体」という用語は、細胞または組織への化合物の混入を促進する比較的非毒性の化合物または製剤を指す。
本明細書で使用される「作用剤」という用語は、他の分子の活性または受容体部位の活性を向上させる化合物、薬物、酵素活性剤またはホルモン調節剤などの分子を指す。

【0044】

本明細書で使用される「拮抗剤」という用語は、他の分子の作用または受容体部位の活性を減少または防止する化合物、薬物、酵素阻害剤またはホルモン調節剤などの分子を指す。

【0045】

本明細書で使用される「調節する」という用語は、一例として、標的の活性を向上させる、標的の活性を阻害する、標的の活性を制限する、または標的の活性を延長させることを含む、標的の活性を変更させるために、直接的または間接的に標的と相互作用することを意味する。

【0046】

本明細書で使用される「調節剤」という用語は、直接的または間接的に標的と相互作用する分子を指す。相互作用には、作用剤および拮抗剤の相互作用が含まれるが、これらに限定されない。

【0047】

本明細書で使用される「薬剤学的に許容可能な塩」という用語は、特定の化合物の遊離酸および塩基の生物学的効能を維持し、生物学的にまたは他に望ましくないものではない塩を指す。本明細書に記載の化合物は、酸性または塩基性基を有することができ、したがって任意の多数の無機または有機塩、ならびに無機および有機酸と反応して薬剤学的に許容可能な塩を形成することができる。このような塩は、本発明の化合物の最終単離および精製中に同一系で製造されることができるか、適切な有機または無機酸と遊離塩基の形態の精製された化合物とを別々に反応させ、これによって形成された塩を単離することで製造されることができる。薬剤学的に許容可能な塩の例には、ミネラルまたは有機酸または無機塩基と本明細書に記載の化合物との反応によって製造された塩、例えば、アセテート、アクリレート、アジペート、アルギネート、アスパラテート、ベンゾエート、ベンゼンスルホネート、ビサルフェート、ビサルファイト、ブロマイド、ブチレート、ブチン－１，４－ジオエート、カンフォレート、カンファースルホネート、カプリレート、クロロベンゾエート、クロライド、シトレート、シクロペンタンプロピオネート、デカノエート、ジグルコネート、ジヒドロゲンホスフェート、ジニトロベンゾエート、ドデシルサルフェート、エタンスルホネート、ホルメート、フマレート、グルコヘプタノエート、グリセロホスフェート、グリコレート、ヘミサルフェート、ヘプタノエート、ヘキサノエート、ヘキシン－１，６－ジオエート、ヒドロキシベンゾエート、ヒドロキシブチレート、ヒドロクロライド、ヒドロブロマイド、ヒドロアイオダイド、２－ヒドロキシエタンスルホネート、アイオダイド、イソブチレート、ラクテート、マレエート、マロネート、メタンスルホネート、マンデレート、メタホスフェート、メトキシベンゾエート、メチルベンゾエート、モノヒドロゲンホスフェート、１－ナフタレンスルホネート、２－ナフタレンスルホネート、ニコチネート、ニトレート、パルモエート、ペクチネート、ペルサルフェート、３－フェニルプロピオネート、ホスフェート、ピクレート、ピバレート、プロピオネート、ピロサルフェート、ピロホスフェート、プロピオレート、フタレート、フェニルアセテート、フェニルブチレート、プロパンスルホネート、サリシレート、スクシネート、サルフェート、サルファイト、スベレート、セバケート、スルホネート、タルトレート、チオシアネート、トシレート、ウンデコネートおよびキシレンスルホネートを含む塩が含まれる。シュウ酸のような他の酸は、それ自体が薬剤学的に許容可能ではないが、本発明の化合物およびその薬剤学的に許容可能な酸付加塩を収得するにおいて、中間体として有用な塩の製造に使用されることができる（例えば、文献［Ｂｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１９７７，６６，１－１９］を参照）。さらに、遊離酸基を含み得る本明細書に記載の化合物は、薬剤学的に許容可能な金属カチオンの水酸化物、炭酸塩または炭酸水素塩のような適切な塩基と、アンモニアと、または薬剤学的に許容可能な有機一級、二級または三級アミンと反応することができる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類塩には、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムおよびアルミニウム塩などが含まれる。塩基の例示的な例には、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化コリン、炭酸ナトリウムなどが含まれる。塩基付加塩の形成に有用な代表的な有機アミンには、エチルアミン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジンなどが含まれる。本明細書に記載の化合物はまた、含まれ得る任意の塩基性窒素含有基の４次化を含むものと理解されるべきである。水溶性または脂溶性または分散性生成物は、そのような４次化によって収得することができる。例えば、前記のＢｅｒｇｅらの文献を参照されたい。

【0048】

本明細書で使用される「溶媒和物」という用語は、溶媒和によって形成された本発明の化合物と溶媒分子の組み合わせを指す。いくつかの状況では、溶媒和物は水和物を指し、すなわち溶媒分子は水分子であり、本発明の化合物と水の組み合わせは水和物を形成する。

【0049】

本明細書で使用される「多形体」または「多型性」という用語は、様々な結晶格子形態で存在する本発明の化合物を指す。

【0050】

本明細書で使用される「エステル」という用語は、オキソ酸基およびヒドロキシル基に由来する本発明の化合物の誘導体を指し、オキソ酸基およびヒドロキシル基の少なくとも１つは本発明の化合物に存在し得る。
本明細書で使用される「互変異性質体」という用語は、例えば水素原子またはプロトンの移動により、本発明の化合物から直ちに相互変換される異性質体を指す。

【0051】

本明細書で使用される「薬剤学的に許容可能な誘導体またはプロドラッグ」という用語は、本発明の化合物の任意の薬剤学的に許容可能な塩、エステル、エステルの塩または他の誘導体を指し、これは受容者に投与されるとき、本発明の化合物またはその薬剤学的に活性な代謝産物または残渣を直接的または間接的に提供することができる。特に有利な誘導体またはプロドラッグは、そのような化合物が患者に投与されるとき（例えば、経口投与された化合物をより血液に吸収しやすくすることによって）、本発明の化合物の生体利用率を増加させるか、または親化合物の生物学的区画（例えば、脳またはリンパ系）への送達を向上するものである。
本明細書に記載の化合物の薬剤学的に許容可能なプロドラッグには、エステル、カーボネート、チオカーボネート、Ｎ－アシル誘導体、Ｎ－アシルオキシアルキル誘導体、３級アミンの４次誘導体、Ｎ－マンニヒ（Ｍａｎｎｉｃｈ）塩基、シフ（Ｓｃｈｉｆｆ）塩基、アミノ酸コンジュゲート、ホスフェートエステル、金属塩およびスルホネートエステルが含まれるが、これらに限定されない。様々な形態のプロドラッグが当業界で広く知られている。例えば、文献［Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ａ．Ｅｄ．，Ｅｌｓｅｖｉｅｗ，１９８５ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｗｉｄｄｅｒ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．，Ｅｄ．；Ａｃａｄｅｍｉｃ，１９８５，ｖｏｌ．４２，ｐ．３０９－３９６］；文献［Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｈ．“Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ” ｉｎ Ａ Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｋｒｏｓｇａａｒｄ－Ｌａｒｓｅｎ ａｎｄ Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｅｄ．，１９９１，Ｃｈａｐｔｅｒ ５，ｐ．１１３－１９１］；および文献［Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｈ．，Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖｉｅｗ，１９９２，８，１－３８］を参照し、これらのそれぞれは参照として本明細書に取り入られる。本明細書に記載のプロドラッグには、以下の基およびこれらの基の組み合わせ；アミン誘導されたプロドラッグが含まれるが、これらに限定されない。ヒドロキシプロドラッグには、アシルオキシアルキルエステル、アルコキシカルボニルオキシアルキルエステル、アルキルエステル、アリールエステルおよびエステル含有ジスルフィドが含まれるが、これらに限定されない。

【0052】

本明細書で使用される「向上する」または「向上し」という用語は、所望の効果の能力または持続期間のうち１つを増加または延長させることを意味する。したがって、治療剤の効果を向上させるにおいて、用語「向上させる」は、システムに対する他の治療剤の効果を、能力または持続期間の点で、増加または延長させる能力を指す。

【0053】

本明細書で使用される「向上させる有効量」は、所望のシステムにおける他の治療薬の効果を改善するのに適した量を指す。
本明細書で使用される用語「薬剤学的併用」、「追加の治療投与」、「追加の治療薬の投与」などは、１つより多い活性成分を混合または併用することにより生じた薬剤学的治療を指し、活性成分の固定および非－固定併用の両方を含む。「固定併用」という用語は、本明細書に記載の化合物の少なくとも１つ、および少なくとも１つの共同製剤の両方を、単一体または単一投与量の形態で同時に患者に投与することを意味する。「非－固定併用」という用語は、本明細書に記載の化合物の少なくとも１つ、および少なくとも１つの共同製剤を、様々な介入時間の制限を設けながら、同時に、一緒にまたは順次、別々の独立体として患者に投与することを意味し、そのような投与は、患者の体内で有効レベルの２つ以上の化合物を提供する。さらに、これはカクテル治療、例えば３つ以上の活性成分の投与にも当てはまる。

【0054】

本明細書で使用される用語「同時－投与」、「～と併用して投与」、およびそれらの文法的等価物などは、選択された治療剤の単一患者への投与を含むことを意味し、前記治療薬を同一または異なる投与経路によって、または同じまたは異なる時間に投与する治療体系を含むことにする。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の化合物は他の製剤と同時投与される。これらの用語は、２つ以上の製剤を動物に投与し、製剤および／またはその代謝産物のいずれもが同時に動物に存在することを含む。これらは、個別の組成物への同時投与、個別の組成物で異なる時間で投与、および／または両製剤が存在する組成物の投与を含む。したがって、いくつかの実施形態において、本発明の化合物および他の製剤は単一組成物として投与される。

【0055】

本明細書で使用される「代謝産物」という用語は、化合物が代謝されるときに形成される化合物の誘導体を指す。
本明細書で使用される「活性代謝産物」という用語は、化合物が代謝されるときに形成される化合物の生物学的に活性な誘導体を指す。

【0056】

本明細書で使用される「代謝される」という用語は、特定の物質が有機体によって変化する過程（加水分解反応および酵素によって触媒された反応が含まれるが、これらに限定されない）の総和を指す。したがって、酵素は化合物に対する特定の構造的変更を引き起こすことができる。例えば、サイトクロムＰ４５０は様々な酸化および還元反応を触媒する一方、ウリジンジホスフェートグルクロニルトランスフェラーゼは、活性化されたグルクロン酸分子の芳香族アルコール、脂肪族アルコール、カルボン酸、アミンおよび遊離スルフィドリル基への伝達を触媒する。代謝に関する追加情報は、文献［Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，９ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ（１９９６）］から入手することができる。

【0057】

３０℃で５ｍｍ ｏ．ｄ．チューブ（Ｎｏｒｅｌｌ，Ｉｎｃ．５０７－ＨＰ）中ＣＤＣｌ_３、ＤＭＳＯ－ｄ_６、またはＣＤ_３ＯＤ溶液でＮＭＲスペクトルを記録し、これを^１Ｈに対して４００ＭＨｚでＶａｒｉａｎ ＶＮＭＲＳ－４００で収集した。化学的移動（δ）はテトラメチルシラン（ＴＭＳ＝０．００ｐｐｍ）に対するものであり、ｐｐｍ単位で表される。ＥＳＩ（＋）イオン化モード；流量＝１．０ｍＬ／ｍｉｎで作動するＦＩＮＮＩＧＡＮ ＴｈｅｒｍｏまたはＩＳＱ ＥＣ，Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｕ３０００ ＲＳＬＣ（カラム：ＹＭＣ Ｈｙｄｒｏｓｐｈｅｒｅ（Ｃ１８，φ４．６ｘ５０ｍｍ，３μｍ，１２０Å，４０℃）のイオン－トラップ質量分光計上でＬＣ／ＭＳを測定した。移動相＝水またはＣＨ_３ＣＮ中の０．０１％ヘプタフルオロ酪酸（ＨＦＢＡ）および１．０％イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）。

【0058】

【化3】

室温でＤＣＭ（２０ｍＬ）中５－ブロモ－１Ｈ－インダゾール（１．００ｇ、５．０８ｍｍｏｌ）の溶液に３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン（１．３５ｍＬ、１４．７ｍｍｏｌ）およびｐ－ＴｓＯＨ－Ｈ_２Ｏ（０．１９３ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を３時間温度で撹拌した後、真空で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過して、真空で濃縮した。残渣をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝９：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、５－ブロモ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール（１．３０ｇ、９１％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ８．１０（１Ｈ，ｓ）、８．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ）、７．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ）、７．５３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．０Ｈｚ）、５．８６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．８，２．０Ｈｚ）、３．８８－３．７０（２Ｈ，ｍ）、２．０５－１．９３（２Ｈ，ｍ）、１．７７－１．４７（４Ｈ，ｍ）。

【0059】

【化4】

段階Ａ：５－ブロモ－３－フルオロ－１Ｈ－インダゾール
室温でＭｅＣＮ（１０ｍＬ）中５－ブロモ－１Ｈ－インダゾール（５００ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＣＮ（５．０ｍＬ）中のＳｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ（８９９ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）の溶液を滴加した。反応混合物を１６時間還流した後、真空で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝８：１～３：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色固体として５－ブロモ－３－フルオロ－１Ｈ－インダゾール（２２２ｍｇ、４１％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ７．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）、７．５７－７．５３（１Ｈ，ｍ）、７．４９－７．４６（１Ｈ，ｍ）。

【0060】

段階Ｂ：５－ブロモ－３－フルオロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール
室温でＤＣＭ（６０ｍＬ）中５－ブロモ－３－フルオロ－１Ｈ－インダゾール（２２２ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）とｐ－ＴｓＯＨ・Ｈ_２Ｏ（３９．０ｍｇ、０．２０６ｍｍｏｌ）の混合物溶液に３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン（０．２７０ｍＬ、２．９５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１５時間撹拌した後、真空で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝９：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色油として５－ブロモ－３－フルオロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール（２５５ｍｇ、８３％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ７．７７（１Ｈ，ｓ）、７．４７－７．３９（２Ｈ，ｍ）、５．５５（１Ｈ，ｓ）、３．９７（１Ｈ，ｓ）、３．７０（１Ｈ，ｓ）、２．４２（１Ｈ，ｓ）、２．０７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３１．６Ｈｚ）、１．７０（３Ｈ，ｓ）。

【0061】

【化5】

段階Ａ：５－ブロモ－３－クロロ－１Ｈ－インダゾール
室温でＭｅＣＮ（１８ｍＬ）中５－ブロモ－１Ｈ－インダゾール（５００ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）の溶液にＮ－クロロスクシンイミド（３７３ｍｇ、２．７９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を６０℃で１５時間加熱した後、真空で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、１ＮのＮａＯＨ水溶液および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して、淡黄色固体として５－ブロモ－３－クロロ－１Ｈ－インダゾール（５２８ｍｇ、９０％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ７．８８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）、７．５６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ）。

【0062】

段階Ｂ：５－ブロモ－３－クロロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール
室温でＤＣＭ（１０ｍＬ）中５－ブロモ－３－クロロ－１Ｈ－インダゾール５－ブロモ－３－クロロ－１Ｈ－インダゾール（５９２ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）およびｐ－ＴｓＯＨ・Ｈ_２Ｏ（９７．０ｍｇ、０．５１１ｍｍｏｌ）の溶液に３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン（０．６８０ｍＬ、７．４４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１５時間撹拌した後、真空で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝９：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色油として５－ブロモ－３－クロロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール（７６０ｍｇ、９４％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ７．６９（１Ｈ，ｓ）、７．３９－７．３３（２Ｈ，ｍ）、５．５３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，２．４Ｈｚ）、３．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ）、３．６６－３．６１（１Ｈ，ｍ）、２．４４－２．３５（１Ｈ，ｍ）、２．０６－１．９７（２Ｈ，ｍ）、１．７０－１．５８（３Ｈ，ｍ）。

【0063】

【化6】

【0064】

段階Ａ：５－ブロモ－３－ニトロ－１Ｈ－インダゾール
０℃で濃Ｈ_２ＳＯ_４（２．５０ｍＬ）中５－ブロモ－１Ｈ－インダゾール（５００ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）の攪拌された懸濁液にＨＮＯ_３とＨ_２ＳＯ_４（ｖ／ｖ＝１：１、２．５ｍＬ）の混合物を滴加した。反応混合物を３０分間０℃で撹拌し、氷水に注いだ。混合物をさらに１０分間撹拌した。沈殿した固体を濾過により集め、水で洗浄し、真空下で乾燥して白色固体として５－ブロモ－３－ニトロ－１Ｈ－インダゾール（５７７ｍｇ、９４％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ８．２８（１Ｈ，ｓ）、７．８８－７．８６（１Ｈ，ｍ）、７．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）。

【0065】

段階Ｂ：５－ブロモ－３－ニトロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール
室温でＤＣＭ（９．５ｍＬ）中５－ブロモ－３－ニトロ－１Ｈ－インダゾール５－ブロモ－３－ニトロ－１Ｈ－インダゾール（５７７ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）およびｐ－ＴｓＯＨ・Ｈ_２Ｏ（９１．０ｍｇ、０．４７７ｍｍｏｌ）の溶液に３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン（０．６３０ｍＬ、６．８８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１５時間撹拌した後、真空で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝９：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色油として５－ブロモ－３－ニトロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール（７２４ｍｇ、９３％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ８．３２（１Ｈ，ｓ）、８．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．２，０．８Ｈｚ）、７．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、６．００（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．８、２．４Ｈｚ）、４．０５－３．７４（２Ｈ，ｍ）、２．４０－２．３１（１Ｈ，ｍ）、２．０６－２．０１（２Ｈ，ｍ）、１．７７－１．５６（３Ｈ，ｍ）。

【0066】

【化7】

【0067】

段階Ａ：３，５－ジブロモ－１Ｈ－インダゾール
室温でＤＣＭ（２５ｍＬ）中５－ブロモ－１Ｈ－インダゾール（５００ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）の溶液にＮ－ブロモスクシンイミド（４６５ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１５時間撹拌した後、真空で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して、淡黄色固体として３，５－ジブロモ－１Ｈ－インダゾール（４４０ｍｇ、６３％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ７．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）、７．４８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，１．２Ｈｚ）、７．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ）。
段階Ｂ：３，５－ジブロモ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール
室温でＤＣＭ（９．０ｍＬ）中３，５－ジブロモ－１Ｈ－インダゾール（４４０ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ）の溶液に、３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン（０．４５０ｍＬ、４．９３ｍｍｏｌ）に続いてｐ－ＴｓＯＨ－Ｈ_２Ｏ（６１．０ｍｇ、０．３１９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１５時間撹拌した後、真空で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、水および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝５：１～１：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、粘性質の黄色油として３，５－ジブロモ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン）－２－イル）－１Ｈ－インダゾール（５００ｍｇ、８７％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ７．７６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．０，０．８０Ｈｚ）、７．５２－７．４６（２Ｈ，ｍ）、５．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．８Ｈｚ）、４．００－３．９６（１Ｈ，ｍ）、３．７５－３．６８（１Ｈ，ｍ）、２．５５－２．４５（１Ｈ，ｍ）、２．１７－２．０５（２Ｈ，ｍ）、１．７９－１．６４（３Ｈ，ｍ）。

【0068】

【化8】

室温でＤＭＦ（２８ｍＬ）中５－ブロモ－１Ｈ－インダゾール（２．００ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）の溶液にＣｓ_２ＣＯ_３（６．６１ｇ、２０．３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。ＭｅＩ（０．７４０ｍＬ、１１．９ｍｍｏｌ）を加えた後、反応混合物を室温で２時間撹拌した。水を加えた後、混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。混合物をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝４：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製して、オレンジ色の固体として５－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（１．４３ｇ、６６％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ８．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ）、７．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）、７．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、７．５０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８、２．０Ｈｚ）、４．０４（３Ｈ，ｓ）。

【0069】

【化9】

０℃でＴＨＦ（６０．０ｍＬ、３０ｍＬ／ｇ）中５－ブロモ－１Ｈ－インダゾール（２．００ｇ、１０．１５ｍｍｏｌ）の溶液にＮａＨ（鉱油中６０％分散液、３９５ｍｇ、１６．４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。０℃でＭｅＩ（１．８０ｍＬ、２２．３ｍｍｏｌ）を加えた後、反応混合物を室温で２時間撹拌した。飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液により反応を中止した後、混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝５：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色油として５－ブロモ－１－エチル－１Ｈ－インダゾール（１．０９ｇ、４７％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ７．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ）、７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）、７．４４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，１．６Ｈｚ）、７．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、４．４１（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、１．５０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）。

【0070】

【化10】

室温でＭｅＣＮ（１９．０ｍＬ）中５－ブロモ－１Ｈ－インダゾール（５００ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）の溶液にＫＦ（２９５ｍｇ、５．０８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を３０分間撹拌した。ジエチル（ブロモジフルオロメチル）－ホスホネート（０．４５０ｍＬ、２．５４ｍｍｏｌ）を加えた後、反応混合物を室温で２０時間撹拌した。ＥｔＯＡｃと水との間で分配した後、水性層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１０：１～４：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色ワックスとして５－ブロモ－１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール（４９６ｍｇ、７９％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ８．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ）、８．１５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５８．８Ｈｚ）、８．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．０，１．２Ｈｚ）、７．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ）、７．４７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，１．６Ｈｚ）。

【0071】

【化11】

０℃でＤＭＦ（１５ｍＬ）中５－ブロモ－１Ｈ－インダゾール（１．００ｇ、５．０８ｍｍｏｌ）の溶液にＮａＨ（鉱油中６０％分散液、３０４ｍｇ、７．６１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。０℃でメタンスルホニルクロライド（０．４５０ｍＬ、５．８１ｍｍｏｌ）を加えた後、反応混合物を室温で２時間撹拌し、続いて飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液により反応を中止した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝４：１～３：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、白色固体として５－ブロモ－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－インダゾール（５４５ｍｇ、３９％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ８．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）、８．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）、７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ）、７．７８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．４Ｈｚ）、３．５０（３Ｈ，ｓ）。

【0072】

【化12】

【0073】

０℃でＤＭＦ（７．０ｍＬ）中５－ブロモ－１Ｈ－インダゾール（５００ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）の溶液にＮａＨ（油中６０％分散液、１５２ｍｇ、３．８１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。０℃で２，２－ジメチルオキシラン（０．４６０ｍＬ、５．１０ｍｍｏｌ）を加えた後、反応混合物を室温で２１時間撹拌し、続いて飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液により反応を中止した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝４：１～１：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色ワックスとして２－（５－ブロモ－１Ｈ－インダゾール－１－イル）－２－メチルプロパン－１－オール（４９６ｍｇ、７９％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ８．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ）、７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）、７．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、７．４７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．０Ｈｚ）、４．３５（２Ｈ，ｓ）、１．２１（６Ｈ，ｓ）。

【0074】

【化13】

室温でＤＭＦ（７．５ｍＬ）中５－ブロモ－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン（５００ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）の溶液にＣｓ_２ＣＯ_３（１．６５ｇ、５．０６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。ＭｅＩ（０．２００ｍＬ、３．２２ｍｍｏｌ）を添加した後、反応混合物を室温で２時間撹拌した後、次いで水により反応を中止した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝４：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色固体として５－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン（４００ｍｇ、７５％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ８．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）、８．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）、７．９５（１Ｈ，ｓ）、４．１４（３Ｈ，ｓ）。

【0075】

【化14】

室温でＤＭＦ（７．５ｍＬ）中５－ブロモ－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｂ］ピリジン（５００ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）の溶液にＣｓ_２ＣＯ_３（１．６５ｇ、５．０６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。ＭｅＩ（０．２００ｍＬ、３．２２ｍｍｏｌ）を添加した後、反応混合物を室温で２時間撹拌した後、続いて水により反応を中止した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝４：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、淡黄色固体として５－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｂ］ピリジン（２６７ｍｇ、５０％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ８．０９（１Ｈ，ｓ）、７．８８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，０．８Ｈｚ）、７．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ）、４．２４（３Ｈ，ｓ）。

【0076】

【化15】

室温でＤＭＦ（７．５ｍＬ）中５－ブロモ－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｃ］ピリジン（５００ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）の溶液にＣｓ_２ＣＯ_３（１．６５ｇ、５．０６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。ＭｅＩ（０．２００ｍＬ、３．２２ｍｍｏｌ）を添加した後、反応混合物を室温で２時間撹拌した後、続いて水により反応を中止した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝４：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色固体として５－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｃ］ピリジン（３２０ｍｇ、６０％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ８．７３（１Ｈ，ｓ）、７．９８（１Ｈ，ｓ）、７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）、４．１８（３Ｈ，ｓ）。

【0077】

【化16】

室温でＤＣＭ（１０ｍＬ）中５－ブロモ－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン（５００ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）の溶液にｐ－ＴｓＯＨ・Ｈ_２Ｏ（９６．０ｍｇ、０．５０５ｍｍｏｌ）および３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン（０．６９３ｍＬ、７．５７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した。真空で濃縮した後、残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ヘキサンのみないしヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝５：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、無色油として５－ブロモ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン（７１２ｍｇ）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ８．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）、８．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）、８．０１（１Ｈ，ｓ）、６．０７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．２，２．４Ｈｚ）、３．８９－３．７２（２Ｈ，ｍ）、１．８２－１．７５（２Ｈ，ｍ）、１．５８－１．４９（４Ｈ，ｍ）。

【0078】

【化17】

室温でＤＭＦ（２１ｍＬ）中５－ブロモインダゾール（１．５０ｇ、７．６１ｍｍｏｌ）の溶液にＣｓ_２ＣＯ_３（４．９５ｇ、１５．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。ＣＤ_３Ｉ（０．５４０ｍＬ、８．６８ｍｍｏｌ）を添加した後、反応混合物を室温で２時間撹拌した後、続いて水により反応を中止した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝４：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、オレンジ色の固体として５－ブロモ－１－（メチル－ｄ_３）－１Ｈ－インダゾール（８５７ｍｇ、５３％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ）、７．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）、７．４５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，１．６Ｈｚ）、７．２８（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝８．４，０．８Ｈｚ）。

【0079】

【化18】

【0080】

【化19】

段階Ａ：２－ブロモ－１－（６－メチルピリジン－２－イル）エタン－１－オンヒドロブロマイド
０℃でＤＣＭ（４０ｍＬ）中１－（６－メチルピリジン－２－イル）エタン－１－オン（５．００ｇ、３７．０ｍｍｏｌ）の溶液にＨＢｒ（ＡｃＯＨ中３３％溶液、１２．２ｍＬ、７４．０ｍｍｏｌ）に次いで、Ｂｒ_２（１．９０ｍＬ、３７．０ｍｍｏｌ）を徐々に加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。ジエチルエーテルで希釈した後、混合物をさらに３０分間室温で撹拌した。沈殿した固体を濾過により集めた後、ジエチルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥し、黄色固体として２－ブロモ－１－（６－メチルピリジン－２－イル）エタン－１－オンヒドロブロマイド（１１．３ｇ、＞９９％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ８．５４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、８．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、３．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ）、３．７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ）、２．８７（３Ｈ，ｓ）。

【0081】

段階Ｂ：２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン
室温でＤＭＦ（９１ｍＬ）中２－ブロモ－１－（６－メチルピリジン－２－イル）エタン－１－オンヒドロブロマイド（１１．３ｇ、３８．４ｍｍｏｌ）の溶液にピリミジン－２－アミン（３．６５ｇ、３８．４ｍｍｏｌ）に続いてＫ_２ＣＯ_３（７．９６ｇ、５７．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を４時間５０℃（内部温度）で加熱した後、真空で濃縮した。残渣をＤＣＭと水の間で分配した。分離した水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＤＣＭおよびジエチルエーテルから凝固させ、淡褐色固体として２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（４．７９ｇ、２つの段階の間６２％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ８．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，２．０Ｈｚ）、８．５８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．０，１．６Ｈｚ）、８．３７（１Ｈ，ｓ）、７．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．７８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、７．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．０６（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝４．０Ｈｚ）、２．５８（３Ｈ，ｓ）。

【0082】

【化20】

【0083】

実施例

【化21】

【0084】

段階Ａ：２－（６－メチルピリジン－２－イル）－３－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン
ジオキサン（３．２ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、２００ｍｇ、０．９５１ｍｍｏｌ）、５－ブロモ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール（中間体１、２８１ｍｇ、０．９９９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（８．５４ｍｇ、０．０３８０ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（２０．０ｍｇ、０．０７６０ｍｍｏｌ）とＣｓ_２ＣＯ_３（３４１ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の混合物をパージにより脱気し、Ａｒで数回再充填した。反応混合物を４時間還流し、室温まで冷却した。ＤＣＭで希釈した後、混合物をセライト（Ｃｅｌｉｔｅ）パッドを通して濾過した。濾液をＤＣＭと水の間で分配した。分離した水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残留固体をＤＣＭおよびジエチルエーテルからの再結晶により精製し、褐色固体として２－（６－メチルピリジン－２－イル）－３－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（３４６ｍｇ、８９％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ８．６２－８．５９（２Ｈ，ｍ）、８．２０（１Ｈ，ｓ）、８．０８（１Ｈ，ｓ）、７．８６－７．８４（２Ｈ，ｍ）、７．７２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．６３－７．５５（２Ｈ，ｍ）、７．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．０３（１Ｈ，ｍ）、５．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、３．９４－３．７５（２Ｈ，ｍ）、２．２２（３Ｈ，ｓ）、２．０８－１．９９（２Ｈ，ｍ）、１．７８－１．６１（３Ｈ，ｍ）。

【0085】

段階Ｂ：５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
室温でＥｔＯＨ（２．８ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）－３－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（３４０ｍｇ、０．８２８ｍｍｏｌ）の溶液にヒドラジン水和物（０．２０１ｍＬ、０．８２８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間還流し、室温まで冷却した。ＭｅＯＨで洗浄しながらセライトパッドを通して濾過した後、濾液を真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９７：３）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、白色固体として５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ）－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２４０ｍｇ、７７％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１０．５（１Ｈ，ｂｒｓ）、８．１１（１Ｈ，ｍ）、７．９２（１Ｈ，ｓ）、７．７７－７．６４（１Ｈ，ｍ）、７．６２－７．５４（１Ｈ，ｍ）、７．４０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、６．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、５．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．６、２．４Ｈｚ）、５．３９（２Ｈ，ｂｒｓ）、３．９２－３．７２（２Ｈ，ｍ）、２．４６（３Ｈ，ｓ）、２．０６－１．９６（２Ｈ，ｍ）、１．８１－１．５８（４Ｈ，ｍ）。

【0086】

段階Ｃ：Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
室温でＭｅＯＨ（０．８９ｍＬ）中５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１００ｍｇ、０．２６７ｍｍｏｌ）の溶液に２－フルオロベンズアルデヒド（０．０８４０ｍＬ、０．８０１ｍｍｏｌ）に続いてＡｃＯＨ（７．６４μＬ、０．１３４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を３時間還流し、室温まで冷却した。室温でＬｉＢＨ_４（ＴＨＦ中２Ｍ溶液、０．２６７ｍＬ、０．５３４ｍｍｏｌ）を添加した後、反応混合物を室温で２時間撹拌し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液により反応を中止した。混合物をＤＣＭで抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９５：５）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１１８ｍｇ、９２％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０６および１０．８４（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．１０（１Ｈ，ｂｒｓ）、７．９３（１Ｈ，ｓ）、７．７７－７．６２（１Ｈ，ｍ）、７．５８－７．４０（３Ｈ，ｍ）、７．３１－７．２８（１Ｈ，ｍ）、７．２５－７．１５（２Ｈ，ｍ）、７．１０－７．００（１Ｈ，ｍ）、７．００－６．９０（１Ｈ，ｍ）、６．２０－６．１３（１Ｈ，ｍ）、５．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ）、４．５４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）、３．９２－３．７１（２Ｈ，ｍ）、２．４６－２．３１（３Ｈ，ｍ）、２．０５－１．５８（４Ｈ，ｍ）

【0087】

段階Ｄ：Ｎ－（２－フルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
ＤＣＭ（２．５ｍＬ）中Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１１８ｍｇ、０．２４５ｍｍｏｌ）とＴＦＡ（０．３７７ｍＬ、４．８９ｍｍｏｌ）の混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９７：３）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、Ｎ－（２－フルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（４０．０ｍｇ、４１％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ８．０４（１Ｈ，ｓ）、７．８８（１Ｈ，ｓ）、７．５５－７．４７（３Ｈ，ｍ）、７．３９（１Ｈ，ｂｒｓ）、７．３３－７．２７（１Ｈ，ｍ）、７．１８－６．９６（４Ｈ，ｍ）、４．６１（２Ｈ，ｓ）、２．４９（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：３９９．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0088】

【化22】

段階Ａ：３－（３－フルオロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インドール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ－［１，２－ａ］ピリミジン
室温で１，４－ジオキサン（２．７ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、１７１ｍｇ、０．８１２ｍｍｏｌ）および５－ブロモ－３－フルオロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール（中間体２、２５５ｍｇ、０．８５２ｍｍｏｌ）の溶液にＰＰｈ_３（３４．０ｍｇ、０．１３０ｍｍｏｌ）、Ｃｓ_２ＣＯ_３（２９１ｍｇ、０．８９３ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＡｃ）_２（１５．０ｍｇ、０．０６５ｍｍｏｌ）を添加した。パージにより脱気し、Ｎ_２で再充填した後、反応混合物を１６時間還流し、室温まで冷却し、次いでＤＣＭで洗浄しながらセライトパッドを通して濾過した。濾液を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１～ＥｔＯＡｃのみ）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色固体として３－（３－フルオロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インドール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ－［１，２－ａ］ピリミジン（３２２ｍｇ、９３％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ８．６０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）、８．３１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、７．９４（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ）、７．７０－７．４６（１１Ｈ，ｍ）、７．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、６．８６－６．８３（１Ｈ，ｍ）、５．６６（１Ｈ，ｓ）、４．０４（１Ｈ，ｓ）、３．７６（１Ｈ，ｓ）、２．５３－２．４９（２Ｈ，ｍ）、２．３６－２．３１（５Ｈ，ｍ）、２．１６－２．０５（５Ｈ，ｍ）、１．７７－１．６９（６Ｈ，ｍ）。

【0089】

段階Ｂ：４－（３－フルオロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
室温でＥｔＯＨ（２．８ｍＬ）中３－（３－フルオロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インドール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ－［１，２－ａ］ピリミジン（３２２ｍｇ、０．７４８ｍｍｏｌ）の溶液にヒドラジン一水和物（２０重量％、０．２０１ｍＬ、０．８２８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を４時間還流し、室温まで冷却した。ＭｅＯＨで洗浄しながらセライトパッドを通して濾過した後、濾液を真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９７：３）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色固体として４－（３－フルオロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１６２ｍｇ、５５％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１０．８４（２Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．９６（２Ｈ，ｓ）、７．７５－７．６９（３Ｈ，ｍ）、７．５８－７．５６（１Ｈ，ｍ）、７．４６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．０９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、６．９６－６．９１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、５．７９－５．７７（２Ｈ，ｍ）、５．７６（２Ｈ，ｓ）、５．４９（４Ｈ，ｓ，４Ｈ）、３．９１－３．８８（２Ｈ，ｍ）、３．７５－３．６９（２Ｈ，ｍ）、２．４７（６Ｈ，ｓ）、２．３５－２．２０（４Ｈ，ｍ）、２．０３－１．９３（５Ｈ，ｍ）、１．７８－１．６８（３Ｈ，ｍ）。

【0090】

段階Ｃ：４－（３－フルオロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（３－フルオロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１００ｍｇ、０．２５５ｍｍｏｌ）および２－フルオロベンズアルデヒド（０．０８１ｍＬ、０．７６４ｍｍｏｌ）から黄色固体として４－（３－フルオロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチル－ピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（８３．０ｍｇ、２つの段階の間６５％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１７－１０．７６（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．２４－７．９６（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．８９－７．６８（２Ｈ，ｍ）、７．６０－７．４６（３Ｈ，ｍ）、７．２９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ）、７．２１－７．１６（１Ｈ，ｍ）、７．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、６．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、６．２９－６．１９（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、５．７９－５．７７（１Ｈ，ｍ）、４．５４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）、３．９０－３．８８（１Ｈ，ｍ）、３．７５－３．６９（１Ｈ，ｍ）、２．４７（３Ｈ，ｓ）、２．３４－２．２５（１Ｈ，ｍ）、１．９９－１．９３（２Ｈ，ｍ）、１．７４－１．７０（１Ｈ，ｍ）、１．５７－１．５５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ）。ＭＳ：５０１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0091】

段階Ｄ：４－（３－フルオロ－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１に対する手順（段階Ｄ）に従って、４－（３－フルオロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（８３．０ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（０．２６０ｍＬ、３．３８ｍｍｏｌ）から黄色固体として４－（３－フルオロ－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２４．０ｍｇ、３５％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１１－１０．７０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０４（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７８－７．３８（４Ｈ，ｍ）、７．３３－７．２８（１Ｈ，ｍ）、７．２１－７．１６（２Ｈ，ｍ）、７．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、６．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、６．２３－６．１６（１Ｈ，ｍ）、４．５４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）、２．４６（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ：４１７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0092】

【化23】

【0093】

段階Ａ：３－（３－クロロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インドール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ－［１，２－ａ］ピリミジン
室温で１，４－ジオキサン（３．２ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、２００ｍｇ、０．９５１ｍｍｏｌ）および５－ブロモ－３－クロロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール（中間体３、３１５ｍｇ、０．９９９ｍｍｏｌ）の溶液にＰＰｈ_３（４０．０ｍｇ、０．１５２ｍｍｏｌ）、Ｃｓ_２ＣＯ_３（３４１ｍｇ、１．０４６ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＡｃ）_２（１７．０ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）を添加した。パージにより脱気し、Ｎ_２で再充填した後、反応混合物を１６時間還流し、室温まで冷却し、次いでＤＣＭで洗浄しながらセライトパッドを通して濾過した。濾液を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１～ＥｔＯＡｃのみ）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色固体として３－（３－クロロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インドール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ－［１，２－ａ］ピリミジン（２８５ｍｇ、６７％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ８．６０（１Ｈ，ｓ）、８．３３（１Ｈ，ｍ）、８．００－７．９４（２Ｈ，ｍ）、７．６９－７．４６（１２Ｈ，ｍ）、７．２６（５Ｈ，ｓ）、７．０２（１Ｈ，ｍ）、６．８４（１Ｈ，ｓ）、５．７４（１Ｈ，ｍ）、４．０４（１Ｈ，ｓ）、３．７７（１Ｈ，ｓ）、２．５９（１Ｈ，ｓ）、２．３２（４Ｈ，ｓ）、１．７４（４Ｈ，ｍ）。

【0094】

段階Ｂ：４－（３－クロロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
室温でＥｔＯＨ（２．１ｍＬ）中３－（３－クロロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インドール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ－［１，２－ａ］ピリミジン（２８５ｍｇ、０．６３８ｍｍｏｌ）の溶液にヒドラジン一水和物（２０重量％、０．１６０ｍＬ、０．６５８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２時間還流し、室温まで冷却した。ＭｅＯＨで洗浄しながらセライトパッドを通して濾過した後、濾液を真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９７：３）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色固体として４－（３－クロロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１７３ｍｇ、６６％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１０．８６（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．００（１Ｈ，ｓ）、７．７８－７．７１（１Ｈ，ｍ）、７．６４－７．５５（１Ｈ，ｍ）、７．４８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、６．９９－６．９５（１Ｈ，ｍ）、５．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，１．６Ｈｚ）、５．５０－５．３７（２Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、３．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ）、３．７９－３．７１（１Ｈ，ｍ）、２．４８（３Ｈ，ｓ）、２．４２－２．２９（３Ｈ，ｍ）、２．０４－１．９６（３Ｈ，ｍ）、１．７９－１．５２（４Ｈ，ｍ）。

【0095】

段階Ｃ：４－（３－クロロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（３－クロロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１００ｍｇ、０．２４５ｍｍｏｌ）および２－フルオロベンズアルデヒド（０．０７７ｍＬ、０．７３４ｍｍｏｌ）から黄色固体として４－（３－クロロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（５６．０ｍｇ、２つの段階の間４４％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．２１－１０．８０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．３２－８．００（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７８－７．７０（２Ｈ，ｍ）、７．６０－７．４７（２Ｈ，ｍ）、７．３０（１Ｈ，ｍ）、７．２１－７．１６（２Ｈ，ｍ）、７．１１（１Ｈ，ｍ）、６．９８（１Ｈ，ｍ）、６．２９－６．２３（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、５．８６－５．８３（１Ｈ，ｍ）、４．５６－４．５３（２Ｈ，ｍ）、３．９０（１Ｈ，ｍ）、３．７３（１Ｈ，ｍ）、２．４８（３Ｈ，ｓ）、２．３７－２．３２（１Ｈ，ｍ）、２．０４－１．９７（２Ｈ，ｍ）、１．７３（１Ｈ，ｍ）、１．５８（２Ｈ，ｍ）。ＭＳ：５１７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0096】

段階Ｄ：４－（３－クロロ－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１に対する手順（段階Ｄ）に従って、４－（３－クロロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（５６．０ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（０．１７０ｍＬ、２．２０ｍｍｏｌ）から黄色固体として４－（３－クロロ－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１３．０ｍｇ、２８％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１４－１０．７３（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．２６－７．９６（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．６９－７．４７（４Ｈ，ｍ）、７．３１－６．９６（５Ｈ，ｍ）、６．２１－６．１８（１Ｈ，ｓ）、４．５５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、２．４８（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：４３３．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0097】

【化24】

段階Ａ：２－（６－メチルピリジン－２－イル）－３－（３－ニトロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インドール－５－イル）イミダゾ－［１，２－ａ］ピリミジン
室温で１，４－ジオキサン（３．２０ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、２００ｍｇ、０．９５１ｍｍｏｌ）および５－ブロモ－３－フルオロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール（中間体４、３２６ｍｇ、０．９９９ｍｍｏｌ）の溶液にＰＰｈ_３（４０．０ｍｇ、０．１５２ｍｍｏｌ）、Ｃｓ_２ＣＯ_３（３４１ｍｇ、１．０４６ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＡｃ）_２（１７．０ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）を添加した。パージにより脱気し、Ｎ_２で再充填した後、反応混合物を１６時間還流し、室温まで冷却し、続いてＤＣＭで洗浄しながらセライトパッドを通して濾過した。濾液を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、褐色固体として２－（６－メチルピリジン－２－イル）－３－（３－ニトロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インドール－５－イル）イミダゾ－［１，２－ａ］ピリミジン（４０８ｍｇ、９４％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ８．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）、８．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）、８．１３－８．００（３Ｈ，ｍ）、７．６６（４Ｈ，ｍ）、７．５３－７．３９（７Ｈ，ｍ）、６．８６－６．８０（２Ｈ，ｍ）、５．８７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、４．００－３．９７（１Ｈ，ｍ）、３．７９－３．７４（１Ｈ，ｍ）、２．５６（１Ｈ，ｍ）、２．１６（２Ｈ，ｍ）、１．９９（３Ｈ，ｍ）、１．８０－１．６７（３Ｈ，ｍ）。

【0098】

段階Ｂ：５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（３－ニトロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
室温でＥｔＯＨ（３．０ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）－３－（３－ニトロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インドール－５－イル）イミダゾ－［１，２－ａ］ピリミジン（４０８ｍｇ、０．８９２ｍｍｏｌ）の溶液にヒドラジン一水和物（２０重量％、０．２２０ｍＬ、０．９０８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２時間還流し、室温まで冷却した。ＭｅＯＨで洗浄しながらセライトパッドを通して濾過した後、濾液を真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９７：３）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色固体として５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（３－ニトロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１６０ｍｇ、４３％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ８．３６（１Ｈ，ｓ）、７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、７．２８（６Ｈ，ｍ）、６．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、６．７４（１Ｈ，ｓ）、５．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、４．０３（１Ｈ，ｍ）、３．７９（１Ｈ，ｍ）、２．５２（５Ｈ，ｍ）、２．１６（２Ｈ，ｍ）、１．７９（３Ｈ，ｍ）。

【0099】

段階Ｃ：Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（３－ニトロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１に対する手順（段階Ｃ）に従って、５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（３－ニトロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（８０．０ｍｇ、０．１９１ｍｍｏｌ）および２－フルオロベンズアルデヒド（０．０６０ｍＬ、０．５７２ｍｍｏｌ）から褐色固体としてＮ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（３－ニトロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２８ｍｇ、２つの段階の間２８％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．３１－１０．９８（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．３４（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．５８－７．５１（２Ｈ，ｍ）、７．５０－７．４２（１Ｈ，ｍ）、７．３３－７．２８（１Ｈ，ｍ）、７．２２－７．１５（２Ｈ，ｍ）、６．９１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、６．５３－６．３０（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、６．０１－５．９８（１Ｈ，ｍ）、４．５３－４．４７（２Ｈ，ｍ）、３．９２－３．７５（２Ｈ，ｍ）、２．３７－２．３１（３Ｈ，ｍ）、２．０９－２．０２（２Ｈ，ｍ）、１．６４－１．５７（２Ｈ，ｍ）。ＭＳ：５２８．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0100】

段階Ｄ：Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（３－ニトロ－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
ＥｔＯＨ（０．５９ｍＬ）中Ｎ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（３－ニトロ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（５３．０ｍｇ、０．１００ｍｍｏｌ）の溶液にＨＣｌ（ＥｔＯＡｃ中１Ｍ溶液、０．２００ｍＬ、０．２００ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を７時間還流し、真空で濃縮した。残渣をｐＨ８になるまで飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で塩基性化した。混合物をＤＣＭで抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９７：３～９５：５）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色固体としてＮ－（２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２）－イル）－４－（３－ニトロ－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（３．００ｍｇ、６．７％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１０．９５（１Ｈ，ｍ）、８．３０（１Ｈ，ｍ）、７．８６（１Ｈ，ｍ）、７．５５－７．３９（３Ｈ，ｍ）、７．３４－７．２８（１Ｈ，ｍ）、７．２０－７．１５（２Ｈ，ｍ）、６．９２－６．８２（２Ｈ，ｍ）、６．４９－６．２５（１Ｈ，ｍ）、４．５２－４．４７（２Ｈ，ｍ）、２．３３（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ：４４４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0101】

【化25】

【0102】

【化26】

【0103】

段階Ａ：３－（３－ブロモ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン
ジオキサン（４．５ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、２９２ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）、５－ジブロモ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール（中間体５、５００ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（５８．０ｍｇ、０．２２２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（２５．０ｍｇ、０．１１１ｍｍｏｌ）とＣｓ_２ＣＯ_３（４９８ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）の混合物をパージにより脱気し、Ｎ_２で数回再充填した。反応混合物を１６時間還流し、室温まで冷却した。ＤＣＭで希釈した後、混合物をセライトパッドを通して濾過した。濾液をＤＣＭと水の間で分配した。分離した水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１～ＥｔＯＡｃのみ）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色フォーム（ｆｏａｍ）として３－（３－ブロモ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン）－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ－［１，２－ａ］ピリミジン（３１５ｍｇ、４６％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ８．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．０，２．４Ｈｚ）、８．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，２．４Ｈｚ）、７．９６－７．９４（２Ｈ，ｍ）、７．７０－７．６８（１Ｈ，ｍ）、７．６０－７．５７（２Ｈ，ｍ）、７．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、６．８５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，４．０Ｈｚ）、５．７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．８Ｈｚ）、４．０７－４．０４（１Ｈ，ｍ）、３．８０－３．７４（１Ｈ，ｍ）、２．６１－２．３４（１Ｈ，ｍ）、２．３２（３Ｈ，ｓ）、２．２０－２．１２（２Ｈ，ｍ）、１．８２－１．６８（３Ｈ，ｍ）、ＭＳ：４９０［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0104】

段階Ｂ：３－（３－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン
ＤＭＦ（６．２ｍＬ）中３－（３－ブロモ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（３１５ｍｇ、０．６４４ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）（４７．１ｍｇ、０．０６４０ｍｍｏｌ）、トリメチルボロキシン（０．４００ｍＬ、２．８６ｍｍｏｌ）とＫ_２ＣＯ_３（４４５ｍｇ、３．２２ｍｍｏｌ）の混合物溶液をパージにより脱気し、Ｎ_２で数回再充填した。反応混合物を密封された管で１５時間１１０℃で加熱し、室温まで冷却した。水で希釈した後、混合物をＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１～ＥｔＯＡｃのみ）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、淡褐色フォームとして３－（３－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（２３０ｍｇ、８４％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ８．５８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．０，２．４Ｈｚ）、８．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，１．６Ｈｚ）、７．９２（１Ｈ，ｓ）、７．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、７．６９－７．６７（１Ｈ，ｍ）、７．６０－７．５４（２Ｈ，ｍ）、６．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、６．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，４．０Ｈｚ）、５．６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０，２．０Ｈｚ）、４．１２－４．０９（１Ｈ，ｍ）、３．８１－３．７５（１Ｈ，ｍ）、２．６１－２．３４（１Ｈ，ｍ）、２．５７（３Ｈ，ｍ）、２．３３（３Ｈ，ｓ）、２．１７－２．１０（２Ｈ，ｍ）、１．８４－１．７０（３Ｈ，ｍ）。ＭＳ：４２５．２［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0105】

段階Ｃ：５－（３－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－４－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
室温でＥｔＯＨ（２．５ｍＬ）中３－（３－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチル－ピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（２３０ｍｇ、０．５４２ｍｍｏｌ）の溶液にヒドラジン一水和物（２０重量％、０．１３０ｍＬ、０．５４２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２時間還流し、室温まで冷却した。ＭｅＯＨで洗浄しながらセライトパッドを通して濾過した後、濾液を真空で濃縮した。残留固体をＭｅＯＨおよびジエチルエーテルから再結晶により精製し、褐色固体として５－（３－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－４－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２１０ｍｇ、＞９９％）を提供した。ＭＳ：３８９．２［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0106】

段階Ｄ：（Ｅ）－１－（２－フルオロフェニル）－Ｎ－（４－（３－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－イル）メタンイミン
室温でＭｅＯＨ（４．０ｍＬ）中５－（３－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－４－（６－メチル－ピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２１０ｍｇ、０．５４１ｍｍｏｌ）と２－フルオロベンズアルデヒド（０．２００ｍＬ、１．９０ｍｍｏｌ）の混合物にＡｃＯＨ（０．１００ｍＬ、１．７５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１５時間還流した後、真空で濃縮し、粗質茶色油として（Ｅ）－１－（２－フルオロフェニル）－Ｎ－（４－（３－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－イル）メタンイミンを提供し、これをさらに精製することなく次の反応で使用した。ＭＳ：４９５．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0107】

段階Ｅ：Ｎ－（２－フルオロベンジル）－４－（３－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
０℃でＭｅＯＨ（５．２ｍＬ）中の粗質（Ｅ）－１－（２－フルオロフェニル）－Ｎ－（４－（３－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－イル）メタンイミン（２６０ｍｇ、０．５２６ｍｍｏｌ）の溶液にＬｉＢＨ_４（ＴＨＦ中２．０Ｍ、０．５３０ｍＬ、１．０６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した後、水により反応を中止した。混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１～ＥｔＯＡｃのみ）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色油としてＮ－（２－フルオロベンジル）－４－（３－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１１３ｍｇ、４３％）を提供した。ＭＳ：４９７．２［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0108】

段階Ｆ：Ｎ－（２－フルオロベンジル）－４－（３－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
室温でＥｔＯＨ（２．０ｍＬ）中Ｎ－（２－フルオロベンジル）－４－（３－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１１３ｍｇ、０．２２８ｍｍｏｌ）の溶液にＨＣｌ（ＥｔＯＡｃ中１Ｍ溶液、０．４６０ｍＬ、０．４６０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を３時間還流した後、真空で濃縮した。残渣を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で中和した後、ＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をヘキサンおよびＤＣＭから凝固させて精製し、黄色固体としてＮ－（２－フルオロベンジル）－４－（３－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチル－ピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１８ｍｇ、１９％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０１－１０．５８（１Ｈ，ｍ）、８．２０－７．８８（１Ｈ，ｍ）、７．６３－７．２８（５Ｈ，ｍ）、７．２０－７．１６（２Ｈ，ｍ）、７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、６．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、６．１３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）、４．５４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）、２．４５（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：４１３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0109】

【化27】

段階Ａ：Ｎ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１に対する手順（段階Ｃ）に従って、５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２００ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）および３－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１７０ｍＬ、１．６０ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１１５ｍｇ、２つの段階の間４４％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．２９－１０．６５（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．１０－８．０９（１Ｈ，ｍ）、７．９３（１Ｈ，ｓ）、７．７７－７．５６（３Ｈ，ｍ）、７．４４－７．３５（２Ｈ，ｍ）、７．２４－７．２３（１Ｈ，ｍ）、７．０８－７．０４（２Ｈ，ｍ）、６．９７－６．９２（１Ｈ，ｍ）、６．３７－６．２６（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、５．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ）、４．５１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、３．９１－３．７３（２Ｈ，ｍ）、２．４７－２．３１（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．０５－１．９６（２Ｈ，ｍ）、１．８０－１．５８（４Ｈ，ｍ）。ＭＳ：４８３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋
段階Ｂ：Ｎ－（３－フルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例７に対する手順（段階Ｄ）に従って、Ｎ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２）－イル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１１５ｍｇ、０．２３８ｍｍｏｌ）から淡黄色固体としてＮ－（３－フルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（７４．０ｍｇ、７８％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０７－１０．６１（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０４（１Ｈ，ｍ）、８．０６－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．６７－７．０４（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．５７－７．３５（４Ｈ，ｍ）、７．２４－７．１９（２Ｈ，ｍ）、７．０８－７．０５（１Ｈ，ｍ）、６．９４－６．９１（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３２－６．２３（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５１－４．４７（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、２．４６－２．２８（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：３９９．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0110】

【化28】

段階Ａ：Ｎ－（３，４－ジクロロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１に対する手順（段階Ｃ）に従って、５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２００ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）および３，４－ジクロロ－ベンズアルデヒド（２８０ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３，４－ジクロロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１１５ｍｇ、２つの段階の間４４％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１６－１０．７１（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．１０－８．０８（１Ｈ，ｍ）、７．９２（１Ｈ，ｓ）、７．７０－７．５５（４Ｈ，ｍ）、７．４３－７．３８（２Ｈ，ｍ）、７．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、６．９５－６．９２（１Ｈ，ｍ）、６．４４－６．３２（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、５．８３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．６，２．０Ｈｚ）、４．４９－４．４４（２Ｈ，ｍ）、３．９１－３．７３（２Ｈ，ｍ）、２．４７－２．３０（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．０６－１．９５（２Ｈ，ｍ）、１．７７－１．５７（４Ｈ，ｍ）。ＭＳ：５３３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0111】

段階Ｂ：Ｎ－（３，４－ジクロロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例７に対する手順（段階Ｄ）に従って、Ｎ－（３，４－ジクロロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１６０ｍｇ、０．３００ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３，４－ジクロロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（８２．７ｍｇ、６１％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１２－１０．６６（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０４（１Ｈ，ｍ）、８．０６－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．６９－７．０４（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６８－７．６６（１Ｈ，ｍ）、７．６０－７．５８（１Ｈ，ｍ）、７．５５－７．３８（４Ｈ，ｍ）、６．９４－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．４０－６．２９（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．４８－４．４４（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、２．４６－２．２８（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４４９．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0112】

【化29】

段階Ａ：Ｎ－（２，３－ジフルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン

【0113】

実施例１に対する手順（段階Ｃ）に従って、５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２００ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）および２，３－ジフルオロ－ベンズアルデヒド（０．１８０ｍＬ、１．６４ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（２，３－ジフルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５３ｍｇ、２つの段階の間５７％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１０－１０．６７（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．１０－８．０９（１Ｈ，ｍ）、７．９２（１Ｈ，ｓ）、７．６９－７．５５（２Ｈ，ｍ）、７．４２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．３４－７．２８（２Ｈ，ｍ）、７．２１－７．１６（１Ｈ，ｍ）、７．０５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、６．９６－６．９３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３１－６．２４（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、５．８３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．６，２．０Ｈｚ）、４．９５－４．５５（２Ｈ，ｍ）、３．９１－３．７１（２Ｈ，ｍ）、２．４６－２．３０（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．０６－１．９５（２Ｈ，ｍ）、１．８０－１．５８（４Ｈ，ｍ）。ＭＳ：５０１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0114】

段階Ｂ：Ｎ－（２，３－ジフルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例７に対する手順（段階Ｄ）に従って、Ｎ－（２，３－ジフルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１３８ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（２，３－ジフルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１０８ｍｇ、８５％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０９－１０．６４（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０４（１Ｈ，ｍ）、８．０６－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．６７－７．０４（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．５８－７．２８（５Ｈ，ｍ）、７．２１－７．１６（１Ｈ，ｍ）、６．９４－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３０－６．２２（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５９－４．５５（２Ｈ，ｍ）、２．４６－２．２８（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４１７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0115】

【化30】

段階Ａ：Ｎ－（２，４－ジフルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン

【0116】

実施例１に対する手順（段階Ｃ）に従って、５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２００ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）および２，４－ジフルオロ－ベンズアルデヒド（０．１８０ｍＬ、１．６４ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（２，４－ジフルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１３８ｍｇ、２つの段階の間５１％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１０－１０．６４（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．１０－８．０９（１Ｈ，ｍ）、７．９３（１Ｈ，ｓ）、７．６９－７．５０（３Ｈ，ｍ）、７．４２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．２５－７．１９（１Ｈ，ｍ）、７．０９－７．０４（２Ｈ，ｍ）、６．９７－６．９２（１Ｈ，ｍ）、６．２５－６．１６（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、５．８３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．６，２．０Ｈｚ）、４．５０－４．４７（２Ｈ，ｍ）、３．９１－３．７１（２Ｈ，ｍ）、２．４６－２．３１（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．０６－１．９５（２Ｈ，ｍ）、１．８０－１．５８（４Ｈ，ｍ）。ＭＳ：５０１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0117】

段階Ｂ：Ｎ－（２，４－ジフルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例７に対する手順（段階Ｄ）に従って、Ｎ－（２，４－ジフルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１３８ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（２，４－ジフルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（９０ｍｇ、７８％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０８－１０．６１（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０７－８．０５（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０５－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．６７－７．０４（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．５８－７．３８（４Ｈ，ｍ）、７．２５－７．１９（１Ｈ，ｍ）、７．０９－７．０７（１Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９１（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．２２－６．１５（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５０－４．４７（２Ｈ，ｍ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４１７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0118】

【化31】

段階Ａ：Ｎ－（４－クロロ－２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１に対する手順（段階Ｃ）に従って、５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２００ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）および４－クロロ－２－フルオロ－ベンズアルデヒド（２５４ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（４－クロロ－２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１７０ｍｇ、２つの段階の間６１％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１０－１０．６７（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．１０－８．０９（１Ｈ，ｍ）、７．９２（１Ｈ，ｓ）、７．６９－７．４８（３Ｈ，ｍ）、７．４４－７．３９（２Ｈ，ｍ）、７．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．０Ｈｚ）、７．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、６．９６－６．９３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．２８－６．２０（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、５．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．６，２．４Ｈｚ）、４．５２－４．４８（２Ｈ，ｍ）、３．９２－３．７１（２Ｈ，ｍ）、２．４６－２．３０（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．０６－１．９６（２Ｈ，ｍ）、１．８０－１．５７（４Ｈ，ｍ）。ＭＳ：５１７．０［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0119】

段階Ｂ：Ｎ－（４－クロロ－２－フルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例７に対する手順（段階Ｄ）に従って、Ｎ－（４－クロロ－２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１７０ｍｇ、０．３２９ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（４－クロロ－２－フルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２２ｍｇ、８６％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０８－１０．６４（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０４（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０４－７．８９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．６７－７．０４（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．５７－７．３８（５Ｈ，ｍ）、７．３０－７．２７（１Ｈ，ｍ）、６．９４－６．９１（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．２６－６．１８（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５２－４．４８（２Ｈ，ｍ）、２．４６－２．２８（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４３３．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0120】

【化32】

段階Ａ：Ｎ－（３－クロロ－２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン

【0121】

実施例１に対する手順（段階Ｃ）に従って、５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２００ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）および３－クロロ－２－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１９０ｍＬ、１．６１ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３－クロロ－２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１７４ｍｇ、２つの段階の間６３％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１４－１０．６９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．１０－８．０８（１Ｈ，ｍ）、７．９２（１Ｈ，ｓ）、７．６８－７．４０（５Ｈ，ｍ）、７．２１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、６．９６－６．９３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３７－６．２７（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、５．８３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．６，２．０Ｈｚ）、４．５８－４．５４（２Ｈ，ｍ）、３．９１－３．７１（２Ｈ，ｍ）、２．４６－２．３０（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．０６－１．９５（２Ｈ，ｍ）、１．８０－１．５７（４Ｈ，ｍ）。ＭＳ：５１７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0122】

段階Ｂ：Ｎ－（３－クロロ－２－フルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例７に対する手順（段階Ｄ）に従って、Ｎ－（３－クロロ－２－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１７４ｍｇ、０．３３７ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３－クロロ－２－フルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１１５ｍｇ、７９％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１０－１０．６５（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０４（１Ｈ，ｍ）、８．０４－７．８９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．６７－７．０４（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．５４－７．３８（５Ｈ，ｍ）、７．２１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、６．９４－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３４－６．２４（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５８－４．５４（２Ｈ，ｍ）、２．４６－２．２８（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４３３．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0123】

【化33】

段階Ａ：Ｎ－（３，４－ジフルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン

【0124】

実施例１に対する手順（段階Ｃ）に従って、５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２００ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）および３，４－ジフルオロ－ベンズアルデヒド（０．１８０ｍＬ、１．６３ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３，４－ジフルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１６７ｍｇ、２つの段階の間６２％）合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０９－１０．６６（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．１０－８．０９（１Ｈ，ｍ）、７．９３（１Ｈ，ｓ）、７．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、７．５６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，１．６Ｈｚ）、７．４７－７．３７（３Ｈ，ｍ）、７．２８－７．２８（１Ｈ，ｍ）、７．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、６．９６－６．９３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３４－６．２５（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、５．８３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．４，２．４Ｈｚ）、４．４７－４．４４（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、３．９２－３．７１（２Ｈ，ｍ）、２．４７－２．０６（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．０６－１．９４（２Ｈ，ｍ）、１．７９－１．５６（４Ｈ，ｍ）。ＭＳ：５０１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0125】

段階Ｂ：Ｎ－（３，４－ジフルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例７に対する手順（段階Ｄ）に従って、Ｎ－（３，４－ジフルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１６７ｍｇ、０．３３４ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３，４－ジフルオロベンジル）－４－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１１３ｍｇ、８１％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０４－１０．６１（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０４（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０４－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．６７－７．０４（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．５８－７．３５（５Ｈ，ｍ）、７．２９－７．２３（１Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９１（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３０－６．２２（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．４７－４．４３（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、２．４６－２．２８（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４１７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化34】

【0126】

【化35】

【0127】

段階Ａ：３－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン
ジオキサン（２４ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、１．４２ｇ、６．７８ｍｍｏｌ）、５－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（中間体６、１．４３ｇ、６．７８ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（１２２ｍｇ、０．５４２ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（２８４ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）とＣｓ_２ＣＯ_３（２．４２ｇ、７．４５ｍｍｏｌ）の混合物をパージにより脱気し、Ａｒで数回再充填した。反応混合物を４時間還流し、室温まで冷却した。ＤＣＭで希釈した後、混合物をセライトパッドを通して濾過した。濾液をＤＣＭと水の間で分配した。分離した水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残留固体をＤＣＭおよびジエチルエーテルから再結晶化により精製し、淡褐色固体として３－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（２．３０ｇ、粗質）を提供した。ＭＳ：３４１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0128】

段階Ｂ：４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
室温でＥｔＯＨ（２８ｍＬ）中３－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（２．３０ｇ、粗質）の溶液にヒドラジン一水和物（２０重量％、１．７０ｍＬ、７．０１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間還流し、室温まで冷却した。ＭｅＯＨで洗浄しながらセライトパッドを通して濾過した後、濾液を真空で濃縮した。残渣をＥｔ_２ＯおよびＭｅＯＨから結晶化により精製し、黄色固体として４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１．０６ｇ、２つの段階の間５１％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１０．５１（１Ｈ，ｂｒｓ）、８．０１（１Ｈ，ｓ）、７．９２（１Ｈ，ｓ）、７．５８（２Ｈ，ｓ）、７．４１（１Ｈ，ｓ）、７．０７（１Ｈ，ｂｒｓ）、６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．４２（２Ｈ，ｂｒｓ）、４．０４（３Ｈ，ｓ）、２．４３（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：３０５．１［Ｍ＋Ｈ］^＋
段階Ｃ：Ｎ－（３－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
ＭｅＯＨ（４．０ｍＬ）中４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２００ｍｇ、０．６５７ｍｍｏｌ）、３－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．２１０ｍＬ、１．９８ｍｍｏｌ）と酢酸（０．０２００ｍＬ、０．３４９ｍｍｏｌ）の混合物を３時間還流し、室温まで冷却した。室温でＬｉＢＨ_４（ＴＨＦ中２Ｍ溶液、０．６６０ｍＬ、１．３２ｍｍｏｌ）を加えた後、反応混合物を室温で１時間撹拌し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液によって反応を中止した。混合物をＤＣＭで抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残渣をＮＨ－ＳｉＯ_２（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９５：５）上でカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色固体としてＮ－（３－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１３４ｍｇ、２つの段階の間４９％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０６－１０．６２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７３－７．０７（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６０－７．２０（６Ｈ，ｍ）、７．０４－７．０２（１Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３１－６．２３（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５１－４．４７（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、４．０４（３Ｈ，ｓ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４１３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0129】

【化36】

段階Ａ：Ｎ－（４－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン

【0130】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）および４－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１６０ｍＬ、１．５２ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（４－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１１６ｍｇ、２つの段階の間５７％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０５－１０．５８（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７３－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６０－７．３８（５Ｈ，ｍ）、７．１７－７．１３（２Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９１（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．２７－６．１６（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．４６－４．４３（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、４．０４－４．０３（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４１３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0131】

【化37】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１８０ｍｇ、０．４０５ｍｍｏｌ）および４－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１６０ｍＬ、１．５２ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチル－ピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１１１ｍｇ、２つの段階の間６０％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０９－１０．６７（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．８９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７３－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．５９－７．３８（５Ｈ，ｍ）、７．３１－７．２５（１Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３６－６．２８（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．４９－４．４６（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、４．０４－４．０３（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４４７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0132】

【化38】

段階Ａ：３－（１－エチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン
ジオキサン（２４．０ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、４６７ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ）、５－ブロモ－１－エチル－１Ｈ－インダゾール（中間体７、１．４３ｇ、６．７８ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（４０．０ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（９３．０ｍｇ、０．３５５ｍｍｏｌ）とＣｓ_２ＣＯ_３（７９６ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）の混合物をパージにより脱気し、Ａｒで数回再充填した。反応混合物を４時間還流し、室温まで冷却した。ＤＣＭで希釈した後、混合物をセライトパッドを通して濾過した。濾液をＤＣＭと水の間で分配した。分離した水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残留固体をＤＣＭおよびジエチルエーテルから再結晶化により精製し、淡褐色固体として３－（１－エチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（７９５ｍｇ）を提供した。ＭＳ：３５５．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0133】

段階Ｂ：４－（１－エチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１３に対する手順（段階Ｂ）に従って、３－（１－エチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（７８７ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ）から黄色固体として４－（１－エチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（４７０ｍｇ、２つの段階の間６７％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１０．９３－１０．４９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．８９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．８９－７．６４（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７５－７．０５（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）、７．４１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．３７－７．０６（１Ｈ，ｍ）、６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、５．４６－５．２８（２Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、４．４３（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、２．４９－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、１．４１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）。ＭＳ：３１９．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0134】

段階Ｃ：４－（１－エチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－Ｎ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－エチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４７１ｍｍｏｌ）および３－フルオロベンズアルデヒド（０．１５０ｍＬ、１．４１３ｍｍｏｌ）から黄色固体として４－（１－エチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－Ｎ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（８４ｍｇ、２つの段階の間４２％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０４－１０．６１（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０８－８．０３（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０４－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７２－７．０４（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．６３－７．３４（４Ｈ，ｍ）、７．２７－７．２０（２Ｈ，ｍ）、７．０７－７．０５（１Ｈ，ｍ）、６．９６－６．９１（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３１－６．２３（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５０－４．４７（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、４．４６－４．４０（２Ｈ，ｍ）、２．４６－２．３０（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、１．４２－１．３７（３Ｈ，ｍ）。ＭＳ：４２７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0135】

【化39】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）および２－フルオロ－３－メチル－ベンズアルデヒド（０．１８０ｍＬ、１．４８ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（２－フルオロ－３－メチルベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１０８ｍｇ、２つの段階の間５１％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０３－１０．５８（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．８９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７３－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６０－７．３８（３Ｈ，ｍ）、７．３４－７．２６（１Ｈ，ｍ）、７．１８－７．１５（１Ｈ，ｍ）、７．０７－７．０５（１Ｈ，ｍ）、６．９４－６．９１（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．１４－６．１１（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５２－４．５０（２Ｈ，ｍ）、４．０４－４．０３（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．４６－２．３０（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．２４（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：４２７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0136】

【化40】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）および２－フルオロ－４－メチル－ベンズアルデヒド（０．１４５ｍＬ、１．４８ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（２－フルオロ－４－メチルベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２５ｍｇ、２つの段階の間５９％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０４－１０．５７（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７３－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６０－７．３３（４Ｈ，ｍ）、７．０２－６．９０（３Ｈ，ｍ）、６．１２－６．０７（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．４８－４．４５（２Ｈ，ｍ）、４．０５－４．０３（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．４６－２．３０（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．２８（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：４２７．１［Ｍ＋Ｈ］

【0137】

【化41】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）および３－フルオロ－４－メチル－ベンズアルデヒド（０．１８０ｍＬ、１．４８ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３－フルオロ－４－メチルベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２３ｍｇ、２つの段階の間５８％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０４－１０．５９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０５－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７３－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６０－７．３８（３Ｈ，ｍ）、７．２５－７．１１（２Ｈ，ｍ）、６．９３－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．２７－６．１８（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．４５－４．４２（２Ｈ，ｍ）、４．０４－４．０３（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．１９（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：４２７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0138】

【化42】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）および２，３，４－トリフルオロ－ベンズアルデヒド（０．１７０ｍＬ、１．５０ｍｍｏｌ）から黄色固体として４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－Ｎ－（２，３，４－トリフルオロベンジル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１３０ｍｇ、２つの段階の間５８％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１３－１０．６９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．８９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７３－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６０－７．２６（５Ｈ，ｍ）、７．２５－７．１１（２Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３４－６．２５（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．４５－４．４１（２Ｈ，ｍ）、４．０４－４．０３（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４４９．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0139】

【化43】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）および３，４－ジフルオロ－ベンズアルデヒド（０．１７０ｍＬ、１．５４ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３，４－ジフルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（８６．０ｍｇ、２つの段階の間４０％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０８－１０．６５（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７３－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６０－７．２３（６Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３３－６．２４（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．４７－４．４３（２Ｈ，ｍ）、４．０４（３Ｈ，ｓ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４３１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0140】

【化44】

段階Ａ：２－（６－メチルピリジン－２－イル）－３－（１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン

【0141】

ジオキサン（１０．０ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、４１６ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ）、５－ブロモ－１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－インダゾール（中間体９、５４５ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（３６．０ｍｇ、０．１５８ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（８３．０ｍｇ、０．３１７ｍｍｏｌ）とＣｓ_２ＣＯ_３（７１０ｍｇ、２．１８ｍｍｏｌ）の混合物をパージにより脱気し、Ａｒで数回再充填した。反応混合物を４時間還流し、室温まで冷却した。ＤＣＭで希釈した後、混合物をセライトパッドを通して濾過した。濾液をＤＣＭと水の間で分配した。分離した水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残留固体をＤＣＭおよびジエチルエーテルから再結晶化により精製し、淡褐色固体として２－（６－メチルピリジン－２－イル）－３－（１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（８００ｍｇ）を提供し、これをさらに精製することなく次の反応に使用した。ＭＳ：４０５．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0142】

段階Ｂ：５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１３に対する手順（段階Ｂ）に従って、２－（６－メチルピリジン－２－イル）－３－（１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）イミダゾ－［１，２－ａ］ピリミジン（８００ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）から黄色固体として５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（３１０ｍｇ、２つの段階の間４２％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０６－１０．６６（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．６０（１Ｈ，ｓ）、８．１４（１Ｈ，ｓ）、７．９０－７．８５（２Ｈ，ｍ）、７．５１－７．４７（１Ｈ，ｍ）、７．２６－７．１０（１Ｈ，ｍ）、６．９７－６．９２（１Ｈ，ｍ）、５．５１（２Ｈ，ｂｒｓ）、３．４８（３Ｈ，ｓ）、２．４６－２．１８（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：３６９．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0143】

段階Ｃ：Ｎ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４０７ｍｍｏｌ）および３－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１３０ｍＬ、１．２２ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（メチルスルホニル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（５７．０ｍｇ、２つの段階の間３０％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１９－１０．８０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．６３－８．５９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．３０－８．１４（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．９９－７．１２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．９１－７．４７（３Ｈ，ｍ）、７．４０－７．３５（１Ｈ，ｍ）、７．２８－７．２０（２Ｈ，ｍ）、７．０８－７．０３（１Ｈ，ｍ）、６．９９－６．９７（１Ｈ，ｍ）、６．４４－６．３１（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５２－４．４８（２Ｈ，ｍ）、３．４６（３Ｈ，ｓ）、２．４７－２．３０（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４７７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0144】

【化45】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）および３－クロロ－２－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１７０ｍＬ、１．４６ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３－クロロ－２－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１３３ｍｇ、２つの段階の間６１％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１１－１０．６７（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．８９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７３－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６０－７．３８（５Ｈ，ｍ）、７．２３－７．１９（１Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３４－６．２５（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５８－４．５４（２Ｈ，ｍ）、４．０４－４．０３（３Ｈ，ｍ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４４７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0145】

【化46】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）および３，４－ジクロロ－ベンズアルデヒド（２５９ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３，４－ジクロロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１０７ｍｇ、６６％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１１－１０．６８（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．８９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７３－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．７０－７．３８（６Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．３９－６．３０（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．４８－４．４４（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、４．０４－４．０３（３Ｈ，ｍ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４６３．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0146】

【化47】

段階Ａ：３－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）－イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン

【0147】

ジオキサン（１０ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、４２２ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）、５－ブロモ－１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール（中間体８、４９６ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（３６．０ｍｇ、０．１５８ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（８３．０ｍｇ、０．３１７ｍｍｏｌ）とＣｓ_２ＣＯ_３（７１０ｍｇ、２．１８ｍｍｏｌ）の混合物をパージにより脱気し、Ａｒで数回再充填した。反応混合物を４時間還流し、室温まで冷却した。ＤＣＭで希釈した後、混合物をセライトパッドを通して濾過した。濾液をＤＣＭと水の間で分配した。分離した水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残留固体をＤＣＭおよびジエチルエーテルから再結晶化により精製し、淡褐色固体として３－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（７５６ｍｇ）を提供した。ＭＳ：３７７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0148】

段階Ｂ：４－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１３に対する手順（段階Ｂ）に従って、３－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（７５６ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）から黄色固体として４－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１．０６ｇ、２つの段階の間５１％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０２－１０．６０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．８３（１Ｈ，ｓ）、８．２７－７．９６（２Ｈ，ｍ）、７．６７－７．６５（１Ｈ，ｍ）、７．５６－７．５４（１Ｈ，ｍ）、７．４７－７．４１（１Ｈ，ｍ）、７．１２－７．１０（１Ｈ，ｍ）、６．９４－６．９２（１Ｈ，ｍ）、５．４８－５．４６（２Ｈ，ｍ）、３．４８（３Ｈ，ｓ）、２．４６－２．３１（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：３４１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0149】

段階Ｃ：４－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－Ｎ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４４１ｍｍｏｌ）および３－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１４０ｍＬ、１．３２ｍｍｏｌ）から黄色固体として４－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－Ｎ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１１１ｍｇ、２つの段階の間５６．１％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１４－１０．７３（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．８８－８．８３（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．２７－７．９７（２Ｈ，ｍ）、７．６６－７．６４（１Ｈ，ｍ）、７．５９－７．４７（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、７．５８－７．１２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．５５－７．５２（１Ｈ，ｍ）、７．４０－７．３５（１Ｈ，ｍ）、７．２７－７．２０（２Ｈ，ｍ）、７．０８－７．０３（１Ｈ，ｍ）、６．９８－６．９５（１Ｈ，ｍ）、６．４２－６．２８（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５１－４．４８（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、２．４７－２．３０（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４４９．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0150】

【化48】

段階Ａ：２－メチル－２－（５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１Ｈ－インダゾール－１－イル）プロパン－１－オール

【0151】

ジオキサン（８．３０ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、３５２ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）、２－（５－ブロモ－１Ｈ－インダゾール－１－イル）－２－メチルプロパン－１－オール（中間体１０、４５０ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（３０．０ｍｇ、０．１３４ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（７０．０ｍｇ、０．２６８ｍｍｏｌ）とＣｓ_２ＣＯ_３（６００ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）の混合物をパージにより脱気し、Ａｒで数回再充填した。反応混合物を４時間還流し、室温まで冷却した。ＤＣＭで希釈した後、混合物をセライトパッドを通して濾過した。濾液をＤＣＭと水の間で分配した。分離した水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残留固体をＤＣＭおよびジエチルエーテルから再結晶化により精製し、淡褐色固体として２－メチル－２－（５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１Ｈ－インダゾール－１－イル）プロパン－１－オール（６６６ｍｇ）を提供した。ＭＳ：３９９．１［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0152】

段階Ｂ：２－（５－（２－アミノ－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－１Ｈ－インダゾール－１－イル）－２－メチルプロパン－１－オール
実施例１３に対する手順（段階Ｂ）に従って、２－メチル－２－（５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１Ｈ－インダゾール－１－イル）プロパン－１－オール（６６６ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）から黄色固体として４－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（３４７ｍｇ、２つの段階の間５７％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１０．５１（１Ｈ，ｂｒｓ）、８．０１（１Ｈ，ｓ）、７．９２（１Ｈ，ｓ）、７．５８（２Ｈ，ｓ）、７．４１（１Ｈ，ｓ）、７．０７（１Ｈ，ｂｒｓ）、６．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、５．４２（２Ｈ，ｂｒｓ）、４．０４（３Ｈ，ｓ）、２．４３（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：３６３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0153】

段階Ｃ：２－（５－（２－（（３－フルオロベンジル）アミノ）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－１Ｈ－インダゾール－１－イル）－２－メチルプロパン－１－オール
実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、２－（５－（２－アミノ－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－１Ｈ－インダゾール－１－イル）－２－メチルプロパン－１－オール（１５０ｍｇ、０．４１４ｍｍｏｌ）および３－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１４０ｍＬ、１．３２ｍｍｏｌ）から黄色固体として２－（５－（２－（（３－フルオロベンジル）アミノ）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－１Ｈ－インダゾール－１－イル）－２－メチルプロパン－１－オール（１０７ｍｇ、２つの段階の間５５％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０４－１０．６１（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０８－８．０３（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０５－７．８９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７１－７．６４（１Ｈ，ｍ）、７．６１－７．０４（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．５８－７．３４（３Ｈ，ｍ）、７．２８－７．２０（２Ｈ，ｍ）、７．１０－７．０８（１Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９１（１Ｈ，ｍ）、６．３２－６．２４（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．６９（１Ｈ，ｓ）、４．５１－４．４７（２Ｈ，ｍ）、４．３０（２Ｈ，ｓ）、２．４８－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、１．１３（６Ｈ，ｓ）。ＭＳ：４７１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0154】

【化49】

実施例２５に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１００ｍｇ、０．２９４ｍｍｏｌ）および３－クロロ－２－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１００ｍＬ、０．８５８ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３－クロロ－２－フルオロベンジル）－４－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（９０．０ｍｇ、２つの段階の間６４％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．２４－１０．８０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．８７－８．８３（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．２７－７．９７（２Ｈ，ｍ）、７．６６－７．６３（１Ｈ，ｍ）、７．５９－７．１１（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．５８－７．４３（４Ｈ，ｍ）、７．２３－７．１９（１Ｈ，ｍ）、６．９８－６．９５（１Ｈ，ｍ）、６．４８－６．３２（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５８－４．５４（２Ｈ，ｍ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４８３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0155】

【化50】

実施例２５に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１００ｍｇ、０．２９４ｍｍｏｌ）および３，４－ジクロロ－ベンズアルデヒド（１５４ｍｇ、０．８８１ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３，４－ジクロロベンジル）－４－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（９３．０ｍｇ、２つの段階の間６３％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．２１－１０．８０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．８８－８．８３（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．２７－７．９６（２Ｈ，ｍ）、７．６９－７．５９（３Ｈ，ｍ）、７．５９－７．４７（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、７．５７－７．１１（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．５４－７．５１（１Ｈ，ｍ）、７．４３－７．３８（１Ｈ，ｍ）、６．９８－６．９５（１Ｈ，ｍ）、６．５１－６．３５（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．４８－４．４５（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、２．４７－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４９９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0156】

【化51】

実施例２５に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１００ｍｇ、０．２９４ｍｍｏｌ）および３，４－ジフルオロ－ベンズアルデヒド（０．１００ｍＬ、０．９０６ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３，４－ジフルオロベンジル）－４－（１－（ジフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（６５．０ｍｇ、２つの段階の間４８％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１９－１０．７７（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．８８－８．８３（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．２７－７．９７（２Ｈ，ｍ）、７．６６－７．６４（１Ｈ，ｍ）、７．５８－７．１１（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．５７－７．３６（４Ｈ，ｍ）、７．２８－７．２３（１Ｈ，ｍ）、６．９８－６．９５（１Ｈ，ｍ）、６．４５－６．３０（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．４７－４．４４（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４６７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0157】

【化52】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）および３－シアノ－ベンズアルデヒド（１９４ｍｇ、１．４７９ｍｍｏｌ）から黄色固体として３－（（（４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－イル）アミノ）メチル）－ベンゾニトリル（１４７ｍｇ、２つの段階の間７１％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１４－１０．７０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０５－８．０１（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．８９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．８７－７．８４（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７８－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．７６－７．７０（２Ｈ，ｍ）、７．６０－７．３９（４Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．４３－６．３２（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５４－４．５０（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、４．０４－４．０３（３Ｈ，ｍ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４２０．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0158】

【化53】

【0159】

段階Ａ：１－メチル－５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）－イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン
ジオキサン（７．５ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、４４６ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）、５－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン（中間体１１、４５０ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（３８．０ｍｇ、０．１７０ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（８９．０ｍｇ、０．３４０ｍｍｏｌ）とＣｓ_２ＣＯ_３（７６１ｍｇ、２．３３ｍｍｏｌ）の混合物をパージにより脱気し、Ａｒで数回再充填した。反応混合物を４時間還流し、室温まで冷却した。ＤＣＭで希釈した後、混合物をセライトパッドを通して濾過した。濾液をＤＣＭと水の間で分配した。分離した水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残留固体をＤＣＭおよびジエチルエーテルから再結晶化により精製し、淡褐色固体として１－メチル－５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）－イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン（７２４ｍｇ）を提供した。ＭＳ：３４２．０［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0160】

段階Ｂ：４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１３に対する手順（段階Ｂ）に従って、１－メチル－５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン（７２４ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）から黄色固体として４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（５００ｍｇ、２つの段階の間７７％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ８．６５（１Ｈ，ｓ）、８．３２（１Ｈ，ｓ）、８．０８（１Ｈ，ｓ）、７．５０－７．２７（３Ｈ，ｍ）、７．１２－６．９９（２Ｈ，ｍ）、４．１２（３Ｈ，ｓ）、２．４６（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：３０６．０［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0161】

段階Ｃ：Ｎ－（３－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン

【0162】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２０ｍｇ、０．３９３ｍｍｏｌ）および３－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１３０ｍＬ、１．２２ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（６５ｍｇ、２つの段階の間４１％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．２９－１０．９２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．８３－８．７２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、８．４６－８．４０（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、８．１６－８．１３（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．５９－７．０４（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．５０－７．０８（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、７．４０－７．３５（１Ｈ，ｍ）、７．２８－７．２０（２Ｈ，ｍ）、７．０８－７．０７（１Ｈ，ｍ）、６．９８－６．９６（１Ｈ，ｍ）、６．５８－６．４１（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５１－４．４７（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、４．０６（３Ｈ，ｓ）、２．４４－２．２４（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４１４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0163】

【化54】

【0164】

段階Ａ：１－メチル－５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｂ］ピリジン
ジオキサン（７．０ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、３１７ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）、５－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｂ］ピリジン（中間体１２、３２０ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（２７．０ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（６３．０ｍｇ、０．２４１ｍｍｏｌ）とＣｓ_２ＣＯ_３（５４１ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）の混合物をパージにより脱気し、Ａｒで数回再充填した。反応混合物を４時間還流し、室温まで冷却した。ＤＣＭで希釈した後、混合物をセライトパッドを通して濾過した。濾液をＤＣＭと水の間で分配した。分離した水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残留固体をＤＣＭおよびジエチルエーテルから再結晶化により精製し、淡褐色固体として１－メチル－５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｂ］ピリジン（５１５ｍｇ）を提供した。ＭＳ：３４２［Ｍ＋Ｈ］^＋

【0165】

段階Ｂ：４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｂ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン

【0166】

実施例１３に対する手順（段階Ｂ）に従って、１－メチル－５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｂ］ピリジン（５１５ｍｇ）から黄色固体として４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｂ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（３６３ｍｇ、２つの段階の間７９％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ８．１１（１Ｈ，ｓ）、７．９６（１Ｈ，ｂｒｓ）、７．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．６１（１Ｈ，ｂｒｓ）、７．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．１２（１Ｈ，ｂｒｓ）、４．１０（３Ｈ，ｓ）、２．５２（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：３０６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0167】

段階Ｃ：Ｎ－（３－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｂ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチル－ピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン

【0168】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｂ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２０ｍｇ、０．３９３ｍｍｏｌ）および３－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１３０ｍＬ、１．２２ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｂ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（３３．８ｍｇ、２つの段階の間２１％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０７－１０．７６（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．７６－８．１３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、８．４８－８．０４（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、８．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．９４－７．０１（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６９－７．６８（１Ｈ，ｍ）、７．５７－７．１１（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、７．４０－７．３５（１Ｈ，ｍ）、７．２７－７．２１（２Ｈ，ｍ）、７．０９－７．０４（１Ｈ，ｍ）、６．３２－６．２６（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）、４．０８－４．０６（３Ｈ，ｍ）、２．４７（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：４１４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0169】

【化55】

【0170】

段階Ａ：１－メチル－５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｃ］ピリジン

【0171】

ジオキサン（７．０ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、３１７ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）、５－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｃ］ピリジン（中間体１３、３２０ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（２７．０ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（６３．０ｍｇ、０．２４１ｍｍｏｌ）とＣｓ_２ＣＯ_３（５４１ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）の混合物をパージにより脱気し、Ａｒで数回再充填した。反応混合物を４時間還流し、室温まで冷却した。ＤＣＭで希釈した後、混合物をセライトパッドを通して濾過した。濾液をＤＣＭと水の間で分配した。分離した水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残留固体をＤＣＭおよびジエチルエーテルから再結晶化により精製し、淡褐色固体として１－メチル－５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｃ］ピリジン（５１５ｍｇ）を提供した。ＭＳ：３４２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0172】

段階Ｂ：４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｃ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン

【0173】

実施例１３に対する手順（段階Ｂ）に従って、１－メチル－５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｃ］ピリジン（５１５ｍｇ、粗質）から黄色固体として４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｃ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（３０５ｍｇ、２つの段階の間６６％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１０．８１－１０．５７（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、９．２５－９．１３（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．２７－６．８９（４Ｈ，ｍ）、５．５０－５．３８（２Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、４．２１－４．１８（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、２．５２－２．４１（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：３０６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0174】

段階Ｃ：Ｎ－（３－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｃ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチル－ピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｃ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２０ｍｇ、０．３９３ｍｍｏｌ）および３－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１３０ｍＬ、１．２２ｍｍｏｌ）から褐色固体としてＮ－（３－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｃ］ピリジン－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（３８ｍｇ、２つの段階の間２３％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１０．９８－１０．６２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、９．５２－９．１３（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．１９－８．１１（２Ｈ，ｍ）、７．７３－６．９７（７Ｈ，ｍ）、６．２８－６．１７（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、４．１８（３Ｈ，ｓ）、２．５３（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：４１４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0175】

【化56】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）および２－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１６０ｍＬ、１．５２ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（２－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（９８．０ｍｇ、２つの段階の間４８％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０３－１０．５９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０７－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７４－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６０－７．３８（４Ｈ，ｍ）、７．３３－７．２７（１Ｈ，ｍ）、７．２０－７．１６（２Ｈ，ｍ）、６．９４－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．１６－６．１３（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５５－４．５１（２Ｈ，ｍ）、４．０４－４．０３（３Ｈ，ｍ）、２．４６－２．３０（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４１３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0176】

【化57】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）および２，３－ジフルオロ－ベンズアルデヒド（０．１６０ｍＬ、１．４６ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（２，３－ジフルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１４０ｍｇ、２つの段階の間６６％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０９－１０．６５（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０７－８．０１（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０７－７．９３（３Ｈ，ｍ）、７．７４－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６０－７．３８（３Ｈ，ｍ）、７．３６－７．１６（３Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．２９－６．２２（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５９－４．５５（２Ｈ，ｍ）、４．０４－４．０３（３Ｈ，ｍ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４３１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0177】

【化58】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）および２，４－ジフルオロ－ベンズアルデヒド（０．１６０ｍＬ、１．４６ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（２，４－ジフルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１４１ｍｇ、２つの段階の間６７％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０５－１０．６１（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０７－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．９０（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７４－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６０－７．３８（４Ｈ，ｍ）、７．２５－７．１８（１Ｈ，ｍ）、７．０９－７．０５（１Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．１９－６．１４（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５１－４．４７（２Ｈ，ｍ）、４．０５－４．０３（３Ｈ，ｍ）、２．４６－２．３０（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４３１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0178】

【化59】

実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１５０ｍｇ、０．４９３ｍｍｏｌ）および４－クロロ－２－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．１９０ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（４－クロロ－２－フルオロベンジル）－４－（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１２９ｍｇ、２つの段階の間７３％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０９－１０．６５（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０７－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０３－７．８９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０７－７．９３（３Ｈ，ｍ）、７．７４－７．０３（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６０－７．３８（５Ｈ，ｍ）、７．３０－７．２７（１Ｈ，ｍ）、６．９５－６．９２（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、６．２５－６．１９（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５２－４．４８（２Ｈ，ｍ）、４．０４－４．０３（３Ｈ，ｍ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４４７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0179】

【化60】

【0180】

段階Ａ：５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン
ジオキサン（１７ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、５３１ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）、５－ブロモ－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール（中間体１４、７１２ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（４５．０ｍｇ、０．２０２ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（１０６ｍｇ、０．４０４ｍｍｏｌ）とＣｓ_２ＣＯ_３（９０４ｍｇ、２．７８ｍｍｏｌ）の混合物をパージにより脱気し、Ａｒで数回再充填した。反応混合物を４時間還流し、室温まで冷却した。ＤＣＭで希釈した後、混合物をセライトパッドを通して濾過した。濾液をＤＣＭと水の間で分配した。分離した水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残留固体をＤＣＭおよびジエチルエーテルから再結晶化により精製し、黄色油として５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン（１．４７ｇ）を提供した。

【0181】

段階Ｂ：５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
室温でＥｔＯＨ（１３ｍＬ）中５－（２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イル）－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン（１．０４ｇ、２．５２ｍｍｏｌ）の溶液にヒドラジン水和物（０．６２０ｍＬ、１０．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間還流し、真空で濃縮した。残渣をジエチルエーテルおよびＭｅＯＨから結晶化により精製し、黄色油として４－（６－メチルピリジン－２－イル）－５－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（６０ｍｇ、３つの工程の間６％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０９－１０．７６（１Ｈ，ｓ＋ｓ）、１０．８８－１０．５２（１Ｈ，ｓ＋ｓ）、８．８５－８．７５（１Ｈ，ｄ＋ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）、８．５４－８．４３（１Ｈ，ｄ＋ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）、８．２２－８．２０（１Ｈ，ｓ＋ｓ）、７．５８－７．５４（３Ｈ，ｍ）、７．４６（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝２０．０，８．０Ｈｚ）、７．３６－７．２４（３Ｈ，ｍ）、７．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、６．９６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、６．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、６．０４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．２，２．０Ｈｚ）、５．５４（２Ｈ，ｓ）、５．４５（２Ｈ，ｓ）、３．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ）、３．７４－３．６８（１Ｈ，ｍ）、２．４６－２．４５（６Ｈ，ｄ）、２．３３（１Ｈ，ｓ）、２．２７（１Ｈ，ｓ）、２．０５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、１．９４－１．９１（１Ｈ，ｍ）、１．８１－１．７９（１Ｈ，ｍ）、１．６５－１．５９（３Ｈ，ｍ）。

【0182】

段階Ｃ：Ｎ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１に対する手順（段階Ｃ）に従って、５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（６０ｍｇ、０．１６０ｍｍｏｌ）および３－フルオロベンズアルデヒド（０．０５０ｍＬ、０．４７９ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（６５ｍｇ、粗質）を合成した。

【0183】

段階Ｄ：Ｎ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例４に対する手順（段階Ｄ）に従って、Ｎ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（６５．０ｍｇ、０．１３４ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３－フルオロベンジル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－４－（１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｂ］ピリジン－５－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（４．９ｍｇ、３つの段階の間７％）を合成した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．１６－１０．８２（１Ｈ，ｓ＋ｓ）、８．８０－８．６８（１Ｈ，ｄ＋ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）、８．４５－８．３８（１Ｈ，ｄ＋ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）、８．１５－８．１２（１Ｈ，ｓ＋ｓ）、７．６０－７．４７（１Ｈ，ｍ）、７．３８（１Ｈ，ｍ）、７．２９－７．２１（２Ｈ，ｍ）、７．０８－７．０３（２Ｈ，ｍ）、６．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、６．４０（１Ｈ，ｔ＋ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）、４．５０（２Ｈ，ｄ＋ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）、２．４４（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：４００．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0184】

【化61】

段階Ａ：３－（１－（メチル－ｄ３）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン
ジオキサン（１５ｍＬ）中２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（中間体１６、８４２ｍｇ、４．００ｍｍｏｌ）、５－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－インダゾール（中間体１５、８５７ｍｇ、４．００ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（７２．０ｍｇ、０．３２０ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（１６８ｍｇ、０．６４１ｍｍｏｌ）とＣｓ_２ＣＯ_３（１．４３ｇ、４．４０ｍｍｏｌ）の混合物をパージにより脱気し、Ａｒで数回再充填した。反応混合物を４時間還流し、室温まで冷却した。ＤＣＭで希釈した後、混合物をセライトパッドを通して濾過した。濾液をＤＣＭと水の間で分配した。分離した水性層をＤＣＭで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮した。残留固体をＤＣＭおよびジエチルエーテルから再結晶化により精製し、淡褐色固体として３－（１－（メチル－ｄ_３）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－１）－イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン（１．３７ｇ）を提供した。ＭＳ：３４４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0185】

段階Ｂ：４－（１－（メチル－ｄ３）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
室温でＥｔＯＨ（１６ｍＬ）中３－（１－（メチル－ｄ_３）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－２－（６－メチルピリジン－２－イル）イミダゾ［１，２－ａ］－ピリミジン（１．３７ｇ、６．７６ｍｍｏｌ）の溶液にヒドラジン一水和物（２０重量％、１．００ｍＬ、４．１２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２時間還流し、室温まで冷却した。ＭｅＯＨで洗浄しながらセライトパッドを通して濾過した後、濾液を真空で濃縮した。残渣をＥｔ_２ＯおよびＭｅＯＨから結晶化により精製し、黄色固体として４－（１－（メチル－ｄ_３）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（５３８ｍｇ、２つの段階の間４３％）を提供した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１０．５６（１Ｈ，ｂｒｓ）、８．０２（１Ｈ，ｓ）、７．９２（１Ｈ，ｓ）、７．５９（２Ｈ，ｓ）、７．４２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．１１（１Ｈ，ｂｒｓ）、６．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、５．４６（２Ｈ，ｂｒｓ）、２．４３（３Ｈ，ｓ）。ＭＳ：３０８．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0186】

段階Ｃ：Ｎ－（３－フルオロベンジル）－４－（１－（メチル－ｄ３）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン
実施例１３に対する手順（段階Ｃ）に従って、４－（１－（メチル－ｄ_３）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（２００ｍｇ、０．６５１ｍｍｏｌ）および３－フルオロ－ベンズアルデヒド（０．２１０ｍＬ、１．９８ｍｍｏｌ）から黄色固体としてＮ－（３－フルオロベンジル）－４－（１－（メチル－ｄ３）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）－５－（６－メチルピリジン－２－イル）－１Ｈ－イミダゾール－２－アミン（１３１ｍｇ、２つの段階の間４９％）を合成した。^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．０５－１０．６２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０６－８．０２（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、８．０４－７．８９（１Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）、７．７３－７．０６（１Ｈ，ｄ＋ｄ）、７．６０－７．３５（４Ｈ，ｍ）、７．２７－７．２０（２Ｈ，ｍ）、７．０４－７．０２（１Ｈ，ｍ）、６．３１－６．２３（１Ｈ，ｔ＋ｔ）、４．５１－４．４７（２Ｈ，ｄ＋ｄ）、２．４６－２．２９（３Ｈ，ｂｒｓ＋ｂｒｓ）。ＭＳ：４１６．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0187】

生物学的活性
細胞培養
ヒト癌細胞株Ｈｓ５７８Ｔ（ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ－２２）細胞を、１０％ウシ胎児血清、およびペニシリンとストレプトマイシンの１％混合物が補充されたＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏの改変Ｅａｇｌｅ培地）（Ｇｉｂｃｏ）で成長させた。細胞を湿った５％ＣＯ_２雰囲気で３７℃に維持した。
ＡＬＫ５キナーゼ分析
キナーゼ緩衝剤で様々な濃度で三重に希釈された阻害剤化合物と共に、それぞれ２５ｎｇ、５０μＭおよび０．２μｇ／ｕｌの最終濃度の組換えＡＬＫ５タンパク質、ＡＴＰおよびＡＬＫ５基質（Ｐｒｏｍｅｇａ、米国マディソン）を５０μＭ ＤＴＴが補充された５０μｌのキナーゼ緩衝剤から９６ウェルプレートに分取した。阻害剤化合物が欠けた陽性対照群サンプルおよび組換えキナーゼが欠けた陰性対照群サンプルもまた三重で測定した。混合物を室温で１２０分間反応させた。５０μｌのＡＤＰ－Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加し、室温で４０分間培養した後、１００μｌのキナーゼ検出試薬を加え、室温で３０分間培養した。Ｖａｒｉｏｓｋａｎ ＬＵＸマルチモードマイクロプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、米国ウォルサム）によってキナーゼ活性を測定した。グラフを作成し、および様々なＨｉｌｌ係数を有するＳ字型用量反応による回帰分析のために、ＳｉｇｍａＰｌｏｔ（Ｓｙｓｔａｔ ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用した。

【0188】

ＡＬＫ５活性に対する細胞ベースのルシフェラーゼレポーター分析
ＢＳＣ－１２００の化合物の生物学的活性を、細胞レベルでＴＧＦ－β１刺激に対して反応するＳｍａｄ ２／３反応性促進剤によって選別的に阻害して決定した。２４ウェルプレートで３×１０^４／ウェルに細胞を播種し、これをリポフェクタミン（Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ）３０００試薬（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、米国ウォルサム）を使用して、５００ｎｇの（ＣＡＧＡ）－１２－ルシフェラーゼレポーター構造体および５ｎｇのｐＲＬ－ＴＫレニラ（Ｒｅｎｉｌｌａ）ルシフェラーゼベクター（Ｐｒｏｍｅｇａ、米国ウィスコンシン州マディソン）、形質感染効能に対する内部対照群として一時的に形質感染させた。２４時間形質感染の後、細胞を用量依存性方式にてＡＬＫ５阻害剤で前処理した。その後、細胞を２２ｎｇ／ｍｌの組換えＴＧＦ－β１で１２時間刺激させた。刺激後、二重－ルシフェラーゼレポーター分析（Ｄｕａｌ－Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ｒｅｐｏｔｅｒ Ａｓｓａｙ）（Ｐｒｏｍｅｇａ）によってホタルおよびレニラルシフェラーゼ活性を測定した。

【0189】

ホスホ－Ｓｍａｄ２／３免疫ブロッティング
Ｈｓ５７８Ｔ細胞において、ＴＧＦ－β誘導されたホスホ－Ｓｍａｄ２／３レベルを阻害する能力を測定することにより、ＢＳＣ－１２００の化合物の生物学的活性を決定した。細胞を１時間ＡＬＫ５阻害剤（１０、２０、５０、１００ｎＭ）で前処理し、無血清下で１時間ヒト組換え２ｎｇ／ｍｌ ＴＧＦ－β１で処理した。２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．６、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１％ ＮＰ４０、１％ソジウムデオキシコレート、０．１％ ＳＤＳ、およびプロテアーゼ阻害剤混合物を含有する緩衝剤（Ｂｉｍａｋｅ、米国ヒューストン）で細胞を溶解した。抽出物をＳＤＳ－ＰＡＧＥにより分離した後、ポリビニリデンジフルオリド（ＰＶＤＦ）膜に電気－伝達し、抗ホスホ－Ｓｍａｄ２ Ａｂ、抗ホスホ－Ｓｍａｄ３ Ａｂ、抗Ｓｍａｄ２／３ Ａｂおよびα－チューブリンに続いて、西洋ワサビ過酸化酵素－コンジュゲートされた抗ウサギ、抗マウスＩｇＧで探針し、ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌRＷｅｓｔ ｄｕｒａキット（Ｐｉｅｒｃｅ）を使用して示した。イメージ分析機（Ｉｍａｇｅｑｕａｎｔ ＬＡＳ５００；ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に膜を置き、イメージ生成を許容するコンピュータ（Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｍａｇｅ Ｒｅａｄｅｒ ＬＡＳ５００）に連結した。

【0190】

相対的なルシフェラーゼ活性：ＩＣ_５０値（ｎＭ）
Ａ：１０ｎＭ未満、Ｂ：１０～１００ｎＭ、Ｃ：１００ｎＭ超

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【表1-4】

【表1-5】

【表1-6】

【表1-7】

【表1-8】

【産業上の利用可能性】

【0191】

本発明は、ＡＬＫに関連する様々な疾患または障害の予防および／または治療のための薬剤学的組成物を開発するために使用されることができる。

【国際調査報告】