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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-10-31
(54)【発明の名称】サルベコウイルスに対するモノクローナル抗体の中和
(51)【国際特許分類】
C07K 16/10 20060101AFI20241024BHJP
C12N 15/63 20060101ALI20241024BHJP
C12P 21/08 20060101ALI20241024BHJP
C12N 5/10 20060101ALI20241024BHJP
C12N 1/19 20060101ALI20241024BHJP
C12N 1/21 20060101ALI20241024BHJP
C12N 1/15 20060101ALI20241024BHJP
C07K 16/46 20060101ALI20241024BHJP
C12N 15/62 20060101ALI20241024BHJP
C12N 5/12 20060101ALI20241024BHJP
C12N 15/13 20060101ALI20241024BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20241024BHJP
A61P 31/14 20060101ALI20241024BHJP
G01N 33/569 20060101ALI20241024BHJP
G01N 33/531 20060101ALI20241024BHJP
【ＦＩ】
C07K16/10 ZNA
C12N15/63 Z
C12P21/08
C12N5/10
C12N1/19
C12N1/21
C12N1/15
C07K16/46
C12N15/62 Z
C12N5/12
C12N15/13
A61K39/395 S
A61P31/14
G01N33/569 L
G01N33/531 A
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024525544
(86)(22)【出願日】2022-07-20
(85)【翻訳文提出日】2024-06-26
(86)【国際出願番号】 IB2022056706
(87)【国際公開番号】W WO2023073441
(87)【国際公開日】2023-05-04
(31)【優先権主張番号】21205626.1
(32)【優先日】2021-10-29
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】514194370
【氏名又は名称】オスペダーレ サン ラファエレ エス．アール．エル
(74)【代理人】
【識別番号】110001519
【氏名又は名称】弁理士法人太陽国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】マンチーニ、ニカシオ
(72)【発明者】
【氏名】クレメンティ、ニコラ
(72)【発明者】
【氏名】クレメンティ、マッシモ
(72)【発明者】
【氏名】クリスクオロ、エレナ
(72)【発明者】
【氏名】システィ、ソフィア
(72)【発明者】
【氏名】リベラ、マルティーナ
【テーマコード（参考）】
4B064
4B065
4C085
4H045
【Ｆターム（参考）】
4B064AG27
4B064CA19
4B064CC24
4B064DA01
4B064DA13
4B065AA26X
4B065AA57X
4B065AA72X
4B065AA93X
4B065AB01
4B065BA02
4B065CA25
4B065CA44
4B065CA46
4C085AA14
4C085BA71
4C085BB36
4C085CC23
4C085DD62
4C085EE01
4C085GG02
4C085GG03
4C085GG04
4H045AA11
4H045AA20
4H045AA30
4H045BA10
4H045BA41
4H045BA72
4H045DA76
4H045EA20
4H045EA53
4H045FA74
(57)【要約】
本発明は、重症急性呼吸器症候群－コロナウイルス－２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＣＯＶＩＤ－１９などのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）などのサルベコウイルスのスパイクタンパク質を標的とする中和モノクローナル抗体を提供する。本発明のモノクローナル抗体は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性を阻害又は中和することができ、好都合には、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２変異株間のそれらの有意な交差反応性のために、ヒトにおけるＣＯＶＩＤ－１９感染を治療、予防又は診断するために使用され得る。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
サルベコウイルス（Sarbecovirus）のスパイクタンパク質の保存領域に結合する抗体又は抗体断片であって、ａ）
ｉ）配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４及び配列番号９３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、
ｉｉ）配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８及び配列番号９４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、
ｉｉｉ）配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２及び配列番号９５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
を含む重鎖可変配列、
及び／又は
ｂ）
ｉ）配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６及び配列番号９６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、
ｉｉ）ＧＡＳ、ＡＡＳ及びＤＡＳからなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、
ｉｉｉ）配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４及び配列番号９７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
を含む軽鎖可変配列、
を含む抗原結合部位を特徴とする、抗体又は抗体断片。
【請求項2】
前記重鎖可変配列が、１）配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８及び配列番号９８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ１）、
２）配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２及び配列番号９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ２）、
３）配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６及び配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ３）、
４）配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０及び配列番号１０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ４）、
をさらに含む、及び／又は
前記軽鎖可変配列が、
５）配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５及び配列番号１０２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ１）、
６）配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０及び配列番号１０３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ２）、
７）配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５及び配列番号１０４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ３）、
８）配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９及び配列番号１０５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ４）、
をさらに含む、
請求項１に記載の抗体又は抗体断片。
【請求項3】
前記重鎖可変配列及び／又は軽鎖配列が以下：ａ）重鎖可変配列については、配列番号１のアミノ酸配列を含むか又は配列番号１のアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むか又は配列番号５のアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、配列番号９のアミノ酸配列を含むか又は配列番号９のアミノ酸配列からなるＣＤＲ３、軽鎖可変配列については、配列番号１３のアミノ酸配列を含むか又は配列番号１３のアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＳを含むか又はＧＡＳからなるＣＤＲ２、配列番号２０のアミノ酸配列を含むか又は配列番号２０のアミノ酸配列からなるＣＤＲ３、
ｂ）重鎖可変配列については配列番号１のアミノ酸配列を含むか又は配列番号１のアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むか又は配列番号５のアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、配列番号９のアミノ酸配列を含むか又は配列番号９のアミノ酸配列からなるＣＤＲ３、軽鎖可変配列については、配列番号１３のアミノ酸配列を含むか又は配列番号１３のアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、アミノ酸配列ＧＡＳを含むか又はＧＡＳからなるＣＤＲ２、配列番号２１のアミノ酸配列を含むか又は配列番号２１のアミノ酸配列からなるＣＤＲ３、
ｃ）重鎖可変配列については、配列番号２のアミノ酸配列を含むか又は配列番号２のアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を含むか又は配列番号６のアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、配列番号１０のアミノ酸配列を含むか又は配列番号１０のアミノ酸配列からなるＣＤＲ３、軽鎖可変配列については、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＡＳを含むＣＤＲ２、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、
ｄ）重鎖可変配列については、配列番号３のアミノ酸配列を含むか又は配列番号３のアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号７のアミノ酸配列を含むか又は配列番号７のアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、配列番号１１のアミノ酸配列を含むか又は配列番号１１のアミノ酸配列からなるＣＤＲ３、軽鎖可変配列については、配列番号１５のアミノ酸配列を含むか又は配列番号１５のアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＡＳを含むか又はそれからなるＣＤＲ２、配列番号２３のアミノ酸配列を含むか又は配列番号２３のアミノ酸配列からなるＣＤＲ３、
ｅ）重鎖可変配列については、配列番号４のアミノ酸配列を含むか又は配列番号４のアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を含むか又は配列番号８のアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、配列番号１２のアミノ酸配列を含むか又は配列番号１２のアミノ酸配列からなるＣＤＲ３、軽鎖可変配列については、配列番号１６のアミノ酸配列を含むか又は配列番号１６のアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、アミノ酸配列ＤＡＳを含むか又はＤＡＳからなるＣＤＲ２、配列番号２４のアミノ酸配列を含むか又は配列番号２４のアミノ酸配列からなるＣＤＲ３、
ｆ）重鎖可変配列については、配列番号９３のアミノ酸配列を含むか又は配列番号９３のアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号９４のアミノ酸配列を含むか又は配列番号９４のアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、配列番号９５のアミノ酸配列を含むか又は配列番号９５のアミノ酸配列からなるＣＤＲ３、軽鎖可変配列については、配列番号９６のアミノ酸配列を含むか又は配列番号９６のアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＡＳを含むか又はＡＡＳからなるＣＤＲ２、配列番号９７のアミノ酸配列を含むか又は配列番号９７のアミノ酸配列からなるＣＤＲ３、
のＣＤＲの組合せを含む、請求項１又は請求項２に記載の抗体又は抗体断片。
【請求項4】
前記重鎖可変配列及び／又は前記軽鎖可変配列が、以下：ａ）重鎖可変配列については、配列番号２５を含むか又は配列番号２５からなるＦＲ１、配列番号２９を含むか又は配列番号２９からなるＦＲ２、配列番号３３を含むか又は配列番号３３からなるＦＲ３、及び配列番号３７を含むか又は配列番号３７からなるＦＲ４、軽鎖可変配列については、配列番号４１を含むか又は配列番号４１からなるＦＲ１、配列番号４６を含むか又は配列番号４６からなるＦＲ２、配列番号５１を含むか又は配列番号５１からなるＦＲ３、及び配列番号５６を含むか又は配列番号５６からなるフレームワーク領域ＦＲ４、
ｂ）重鎖可変配列については、配列番号２５を含むか又は配列番号２５からなるＦＲ１、配列番号２９を含むか又は配列番号２９からなるＦＲ２、配列番号３３を含むか又は配列番号３３からなるＦＲ３、及び配列番号３８を含むか又は配列番号３８からなるＦＲ４、軽鎖可変配列については、配列番号４２を含むか又は配列番号４２からなるＦＲ１、配列番号４７を含むか又は配列番号４７からなるＦＲ２、配列番号５２を含むか又は配列番号５２からなるＦＲ３、及び配列番号５７を含むか又は配列番号５７からなるＦＲ４、
ｃ）重鎖可変配列については、配列番号２６を含むか又は配列番号２６からなるＦＲ１、配列番号３０を含むか又は配列番号３０からなるＦＲ２、配列番号３４を含むか又は配列番号３４からなるＦＲ３、及び配列番号３９を含むか又は配列番号３９からなるＦＲ４、軽鎖可変配列については、配列番号４３を含むか又は配列番号４３からなるＦＲ１、配列番号４８を含むか又は配列番号４８からなるＦＲ２、配列番号５３を含むか又は配列番号５３からなるＦＲ３、及び配列番号５８を含むか又は列番号５８からなるＦＲ４、
ｄ）重鎖可変配列については、配列番号２７を含むか又は配列番号２７からなるＦＲ１、配列番号３１を含むか又は配列番号３１からなるＦＲ２、配列番号３５を含むか又は配列番号３５からなるＦＲ３、及び配列番号４０を含むか又は配列番号４０からなるＦＲ４、軽鎖可変配列については、配列番号４４を含むか又は配列番号４４からなるＦＲ１、配列番号４９を含むか又は配列番号４９からなるＦＲ２、配列番号５４を含むか又は配列番号５４からなるＦＲ３、及び配列番号５６を含むか又は配列番号５６からなるＦＲ４、
ｅ）重鎖可変配列については、配列番号２８を含むか又は配列番号２８からなるＦＲ１、配列番号３２を含むか又は配列番号３２からなるＦＲ２、配列番号３６を含むか又は配列番号３６からなるＦＲ３、配列番号３９を含むか又は配列番号３９からなるＦＲ４、軽鎖可変配列については、配列番号４５を含むか又は配列番号４５からなるＦＲ１、配列番号５０を含むか又は配列番号５０からなるＦＲ２、配列番号５５を含むか又は配列番号５５からなるＦＲ３、及び配列番号５９を含むか又は配列番号５９からなるＦＲ４、
ｆ）重鎖可変配列については、配列番号９８を含むか又はそれ配列番号９８からなるＦＲ１、配列番号９９を含むか又は配列番号９９からなるＦＲ２、配列番号１００を含むか又は配列番号１００からなるＦＲ３、配列番号１０１を含むか又は配列番号１０１からなるＦＲ４、軽鎖可変配列については、配列番号１０２を含むか又は配列番号１０２からなるＦＲ１、配列番号１０３を含むか又は配列番号１０３からなるＦＲ２、配列番号１０４を含むか又は配列番号１０４からなるＦＲ３、及び配列番号１０５を含むか又は配列番号１０５からなるＦＲ４、
のＦＲの組合せをさらに含む、請求項３に記載の抗体又は抗体断片。
【請求項5】
請求項１～請求項４のいずれか一項に記載の抗体又は抗体断片であって、ａ）配列番号６０のアミノ酸配列を含むか又は配列番号６０のアミノ酸配列からなる重鎖可変配列、及び／又は、配列番号６１のアミノ酸配列を含むか又は配列番号６１のアミノ酸配列からなる軽鎖可変配列、
又は
ｂ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むか又は配列番号６２のアミノ酸配列からなる重鎖可変配列、及び／又は、配列番号６３のアミノ酸配列を含むか又は配列番号６３のアミノ酸配列からなる軽鎖可変配列、
ｃ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むか又は配列番号６４のアミノ酸配列からなる重鎖可変配列、及び／又は、配列番号６５のアミノ酸配列を含むか又は配列番号６５のアミノ酸配列からなる軽鎖可変配列、
ｄ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むか又は配列番号６６のアミノ酸配列からなる重鎖可変配列、及び／又は、配列番号６７のアミノ酸配列を含むか又は配列番号６７のアミノ酸配列からなる軽鎖可変配列、
ｅ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むか又は配列番号６８のアミノ酸配列からなる重鎖可変配列、及び／又は、配列番号６９のアミノ酸配列を含むか又は配列番号６９のアミノ酸配列からなる軽鎖可変配列、
ｆ）配列番号７０のアミノ酸配列を含むか又は配列番号７０のアミノ酸配列からなる重鎖可変配列、及び／又は、配列番号７１のアミノ酸配列を含むか又は配列番号７１のアミノ酸配列からなる軽鎖可変配列、
を含むか又はそれらからなる抗体又は抗体断片。
【請求項6】
モノクローナル抗体、好ましくはヒトモノクローナル抗体である、請求項１～請求項４のいずれか一項に記載の抗体又は抗体断片。
【請求項7】
ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択されるＩｇＧ、Ｆａｂ断片、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、二重特異性抗体であり、任意に（optionally）薬物又は標識とコンジュゲートしている、請求項１～請求項５のいずれか一項に記載の抗体又は抗体断片。
【請求項8】
請求項１～請求項７のいずれか一項に記載の抗体又は抗体断片の重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列。
【請求項9】
請求項８に記載のヌクレオチド配列を少なくとも１つ含む発現ベクター。
【請求項10】
請求項９に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項11】
請求項１～請求項７のいずれか一項に記載の抗体又は抗体断片を産生するための、請求項８に記載のヌクレオチド配列を少なくとも１つ含むハイブリドーマ。
【請求項12】
請求項８又は請求項９に記載のヌクレオチド配列又は発現ベクターの少なくとも１つを、１又は複数の医薬的に許容される製剤添加剤（excipient）及び／又はアジュバントと共に含む、分子／ベクターに基づく受動免疫予防のための製剤。
【請求項13】
対象におけるサルベコウイルス媒介性疾患、特にＳＡＲＳ ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２及びそれらの懸念される変異株（variants of concern）によって媒介される重症急性呼吸器症候群の治療及び／又は予防のための医療分野における使用のための、請求項１～請求項７のいずれか一項に記載の抗体又は抗体断片。
【請求項14】
前記懸念される変異株が、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のアルファ（Ｂ．１．１．７）、ベータ（Ｂ．１．３５１）、ガンマ（Ｐ．１）、デルタ（Ｂ．１．６１７．２）、Ｄ６１４ Ｇ（パヴィア大学）、オミクロン（Ｂ．１．１．５２９）変異株を含む群から選択される、請求項１３に記載の使用のための抗体又は抗体断片。
【請求項15】
治療される対象が、免疫不全患者、心血管疾患及び／又は呼吸器疾患の病歴を有する患者、高齢患者又はワクチンを忌避する対象である、請求項１３又は請求項１４に記載の使用のための抗体又は抗体断片。
【請求項16】
第１の抗体又は抗体断片が単独で、又はスパイクタンパク質の異なる保存領域に対する第２の抗体又は抗体断片と組み合わせて使用される、請求項１３～請求項１５のいずれか一項に記載の使用のための抗体又は抗体断片。
【請求項17】
本発明の抗体又は抗体断片の少なくとも１つを有効成分として、１又は複数の医薬的に許容される製剤添加剤（excipient）及び／又はアジュバントと共に含む医薬組成物。
【請求項18】
静脈内、筋肉内又は皮下投与に適している、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項19】
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質中の標的とする保存領域に結合する第１の抗体又は抗体断片、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質中の第１の抗体とは異なる標的とする保存領域に結合する第２の抗体又は抗体断片を含む、サルベコウイルス媒介性疾患、特にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって媒介される重症急性呼吸器症候群に罹患している対象における同時、個別又は逐次投与のための、組成物、又はパーツからなるキット。
【請求項20】
生物学的試料中のサルベコウイルス、好ましくはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の存在を検出するための、請求項１～請求項７のいずれか一項に記載の抗体又は抗体断片の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
コロナウイルス科ファミリーは、さらに４つの属に分類される多数のウイルス種を含む。
【背景技術】
【0002】
７つの種がヒトに注目されており、適応、病原性及び拡散に関して高度に多様である。実際、４つの種は風土性であり、ヒトに高度に適応しており（ＨＣｏＶ－２２９Ｅ、ＨＣｏＶ－ＮＬ６３、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３及びＨＣｏＶ－ＨＫＵ１）、２つは流行性であり（ＭＥＲＳ－ＣｏＶ及び絶滅したＳＡＲＳ－ＣｏＶ）、１つは汎流行性であり、最近出現し、現在流行しているＳＡＲＳ－ＣｏＶ及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、同じ属（ベータコロナウイルス）及び亜属（サルベコウイルス）に属するが、系統発生的に異なり、感染性及び臨床徴候に関して著しく異なる特徴を有する。これらの態様は、効果的な監視プログラムを実施するために必要なコロナウイルス科ファミリー全体を完全にサンプリングすることの困難性を実証し、したがってＣｏＶに対して広範な活性を有する治療戦略を有する必要性を強調する。
【0003】
一般に、ウイルス複製を阻害するための理想的な標的は、細胞感染を防止するので、侵入を媒介するタンパク質によって表される。したがって、侵入阻害剤は、有効な治療薬として、及び長い半減期を有するかどうかにかかわらず、予防に使用することができる。ウイルス侵入を阻害することの関連性は、自然感染又はワクチン接種によって誘発されるほとんどの中和抗体が、侵入に関与するウイルスタンパク質の基本領域を認識するという事実によって実証される。
【0004】
また、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は半減期が長いため、予防におけるそれらの使用が可能になる。免疫化は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を制限し、場合によっては根絶するための最も効果的なアプローチであるが、中和ｍＡｂ（ｎＡｂ）の同定は、遅延応答、非応答者の割合、及び免疫不全の個体にワクチン接種することができないことに関するワクチン固有の制限に対処するために不可欠である。また、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する長期持続性体液性免疫、及び長期的にはワクチン接種の有効性を部分的に妨害する可能性がある、継続的に出現する変異株の効果に関するいくつかの未解決の問題がある。まとめると、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する中和ｍＡｂは、基本的な治療的及び予防的ツールであり、今後そうなるであろうし、多様なｍＡｂのパネルの利用可能性は、新たな変異株の出現に対処するのに役立つであろう。さらには、少数のｍＡｂが自然にＳＡＲＳ－ＣｏＶ及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を交差中和し、最近、いくつかのサルベコウイルスを中和するインビトロの成熟ｍＡｂ（ＡＤＧ－２と呼ばれる）が記載されているので、交差反応性ｍＡｂを同定する可能性がある。
【0005】
全てのＣｏＶの宿主細胞への侵入プロセス全体は、ウイルスエンベロープから突出する大きな膜貫通糖タンパク質であるスパイク（Ｓ）によって媒介される。スパイクは、各モノマーが、宿主プロテアーゼによってＳ１及びＳ２サブユニットに切断される単一のタンパク質（Ｓ０）として産生されるホモ三量体である。Ｓ１は頂端に位置し、受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）を含有するため、宿主タンパク質と相互作用することによって付着相を媒介する。Ｓ２は、融合ペプチド、膜貫通ドメイン、及びヘプタッドリピート（ＨＲ１及びＨＲ２）を含むスパイクストークを形成し、これらは全て、ウイルスエンベロープを宿主膜に融合させるのに必要である。
【0006】
ＣｏＶ侵入は、各スパイク三量体中における３つ全てのＲＢＤの受容体結合、少なくとも１つの特異的スパイク部位のタンパク質分解的切断、及びその後の融合を含む多段階プロセスである。
【0007】
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ及びいくつかの動物ＣｏＶと同様に、アンジオテンシン変換酵素２（ＡＣＥ２）に特異的に結合する。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ Ｓは、ウイルス侵入部位も特異的に決定する宿主プロテアーゼによって処理される必要があるので、結合事象は侵入を媒介するのに必要であるが、十分ではない。実際、スパイクがフーリン及びＴＭＰＲＳＳ２によって切断される場合、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２融合は原形質膜で起こり、逆に、スパイクはエンドソーム区画から入り、そこでカテプシンによって切断される。スパイクが完全に結合して切断されると、Ｓ１はＳ２から解離し、融合ペプチドの露出と宿主膜への挿入を可能にする。融合をもたらす最終的な分子事象は、サブユニット全体を含むＳ２の劇的な立体配座変化であり、ＨＲ１及びＨＲ２のリフォールディングによって駆動される。注目すべきことに、結合から融合までの全ての事象は、有意な構造再編成を必要とするため、潜在的に中和ｎＡｂの標的であり得る。
【0008】
ＣｏＶのスパイクタンパク質は、ビリオン表面に露出した最も顕著なタンパク質であり、体液性応答の主な標的である。
【0009】
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染個体からの血清の特徴付けにより、その機能に不可欠なドメインと重複するか、又は付着及び融合を媒介するのに必要な立体配座変化を間接的に阻害するスパイクタンパク質上に位置するいくつかの中和エピトープが同定されている。
【0010】
これまでに同定された中和エピトープの大部分は立体配座であって、ＲＢＤに位置しており、それに結合する全てのｎＡｂは、異なる作用様式を特徴とする４つのクラスに分類することができる。クラス１及びクラス２抗体は、ＲＢＤ中の同じサブドメイン、いわゆる受容体結合モチーフ（ＲＢＭ）を認識することによって、ＡＣＥ２とスパイクとの間の相互作用を直接的に妨害し、クラス３及び４は、正しいＲＢＭ露出又は融合に必要な下流の立体配座変化を間接的に遮断する潜在性エピトープに結合する。
【0011】
広域中和ｍＡｂであるＡＤＧ－２は、固有の結合様式を有するにもかかわらず、クラス１ ｎＡｂと部分的に共有されるエピトープを認識し、関与する残基及びアプローチ角に関して、わずかな違いであってもｎＡｂの生物学的活性に劇的に影響し得ることを強調している。より低い頻度では、他のエピトープを認識するｎＡｂも同様に同定されている。実際、侵入に直接関与しないＳ１の領域（Ｎ末端ドメイン－ＮＴＤ）に結合するｍＡｂに対する強力な中和が報告されている。
【0012】
また、ＲＢＤの下流に位置するか、又は融合ペプチドと重複する線状エピトープを認識する中和抗体が患者血清中に存在することが同定されている。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する代表的なヒト中和モノクローナル抗体（ｎＡｂ）及び相対的な標的抗原（すなわち、ＲＢＤ、ＮＴＤなど）を要約した、Ｌａｎｙｉｎｇ Ｄｕら、２０２１［１］の表１を参照のこと。
【0013】
全体として、患者血清における中和応答はＲＢＤに特異的な抗体によって支配されるが、いくつかの他のスパイクドメインを効果的に標的化することができる。言及する価値があるものとして、ＲＢＤ及びＳ１は、一般に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２変異株が継続的に出現していること、同じ亜属に属するＣｏＶの間で出現していることの両方を考慮すると、スパイクの最も可変的なドメインである。
【0014】
したがって、保存されたスパイクタンパク質ドメインを標的とするｎＡｂは、より広いスペクトルの中和可能な単離物／種を合理的に有するので、緊急に必要とされており、非常に興味深い。
【0015】
ＣＯＶＩＤ－１９治療のための治療用ｍＡｂは加速的に開発されており、そのペースはいかなる疾患についても前例のないものである。
【0016】
現在、８つのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＲＢＤ特異的な強力なｎＡｂが、重症疾患のリスクが高い入院していないＣＯＶＩＤ－１９患者を治療するために、緊急使用許可（ＥＵＡ）の下で米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって承認されている。
【0017】
以下のＣＯＶＩＤ－１９ ｍＡｂが臨床使用されている：バムラニビマブ（ＬＹ－ＣｏＶ５５５）［２］、Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ社のバムラニビマブ（ＬＹ－ＣｏＶ５５５）とエテセビマブ（ＬＹ－ＣｏＶ０１６又はＪＳ０１６）との組合せ［３］、Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ社のカシリビマブ（ＲＥＧＮ１０９３３）とイムデビマブ（ＲＥＧＮ１０９８７）との組合せ［４］（ＲＥＧＥＮ－ＣＯＶ）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ社のシルガビマブ（ＣＯＶ２－２１３０又はＡＺＤ１０６１）とチキサゲビマブ（ＣＯＶ２－２１９６又はＡＺＤ８９５５）との組合せ［５］、ＧＳＫ社及びＶｉｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社の単剤療法ベースのｎＡｂであるソトロビマブ（ＶＩＲ－７８３１）［６］、及びＣｅｌｌｔｒｉｏｎ社のレグダンビマブ（ＣＴ－Ｐ５９）［７］。Ｎａｂベースの別の単剤療法及び併用療法のセットが第ＩＩＩ相試験中である：ＡｂｂＶｉｅ社の２Ｂ０４［８］及び４７Ｄ１１［９］、Ｂｒｉｉ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社のＢＲＩＩ－１９６及びＢＲＩＩ－１９８［１０］、Ｔｙｃｈａｎ社のＴＹ０２７も第ＩＩＩ相試験中である［１０］。
【0018】
現在、第Ｉ相、第ＩＩ相、及び第ＩＩＩ相試験中であり、かつ臨床中であるｎＡｂの包括的なリストは、Ｋｕｍａｒ Ｓら、２０２１［１１］の図２Ａに要約されており、参照として本明細書に含まれている。
【0019】
いくつかのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２変異株が、世界の異なる地域から報告されている。世界保健機関（ＷＨＯ）によれば、新たな変異の獲得によってウイルス伝播が増加し、死亡率が増加し、治療及びワクチンの有効性が有意に低下する場合、認識された変異は「懸念される変異株（variants of concern）」（ＶＯＣ）に格上げされる。「注目すべき変異株（variants of interest）」（ＶＯＩ）は、疾患重症度、伝播性、免疫回避及び診断回避に影響を及ぼす可能性のある新たな変異を有する変異株である。
【0020】
現在の懸念される変異株は、アルファ（Ｂ．１．１．７、英国で同定）［１２］、ベータ（Ｂ．１．３５１、南アフリカで同定）［１３］、ガンマ（Ｐ．１、ブラジルで同定）［１４］、デルタ（Ｂ．１．６１７．２、インドで同定）［１５］、及びオミクロンの亜系統及び子孫系統（オミクロン（Ｂ．１．１．５２９）［１６］、オミクロンＢＡ．２（Ｂ．１．１．５２９＋ＢＡ．２）オミクロンＢＡ．４（Ｂ．１．１．５２９＋ＢＡ．４）及びオミクロンＢＡ．５．２（Ｂ．１．１．５２９＋ＢＡ．５））である。現在の注目すべき変異株は、イータ（Ｂ．１．５２５、英国／ナイジェリアで同定）、イオタ（Ｂ．１．５２６、米国で同定）［１７］、カッパ（Ｂ．１．６１７．１、インドで同定）［１５］、及びラムダ（Ｃ．３７、ペルーで同定）［１８］である。参照については、現在のＳＡＲＳ－Ｃｏｖ－２ ＶＯＣ及びＶＯＩに存在する変異の網羅的なリストを提供するＫｕｍａｒ Ｓら、２０２１［１１］の図２Ｂを参照されたい。
【0021】
理想的には、有効な抗ウイルス治療戦略は、既存の複数のウイルス株／変異株に対する幅を同時に維持しながら、新たな変異株による感染／疾患を予防する能力を有するべきである。最近の研究では、多くのＮＴＤ特異的ＮＡｂは、全ての新生変異株に対して比較的有効性が低いが、ＲＢＤ特異的ＮＡｂは、新生変異株及びＶＯＣに対して可変的に有効であることが報告されている。単剤療法としての強力な治療用ｎＡｂの大部分は、Ｅ４８４Ｋ／Ｑ又はＬ４５２Ｒ変異を含有するＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２新生変異株に対して、中和活性の完全な抑止又は低減を示した。
【0022】
例えば、バムラニビマブ（ＬＹ－ＣｏＶ５５５）は、全てのＶＯＣに対して無効であったため、ＥＵＡについてもはや考慮されなかった。
【0023】
現在、ＲＢＤ上の異なる非重複エピトープを標的とするｎＡｂのカクテルを含む併用療法は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２及びその変異株に対する防御の非常に優れた効力及び有望な相関を実証している。参考文献を参照のこと。さらに、単剤療法として新たに同定されたＲＢＤコア結合ｎＡｂであるＳＡＲＳ２－３８及びＬＹ－ＣｏＶ１４０４は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の全ての懸念される変異株を強力に中和する。
【0024】
本発明の著者らは、現在までに知られている全てのＶＯＣ及びＶＯＩにおいてＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって引き起こされる疾患負荷に取り組むために単独で又は組み合わせて使用される有望で魅力的な治療候補として、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質の保存領域を標的とする中和抗体を同定した。
【発明の概要】
【0025】
したがって、本発明の目的は、以下：
ａ）
ｉ）配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４及び配列番号９３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、
ｉｉ）配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８及び配列番号９４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、
ｉｉｉ）配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２及び配列番号９５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む重鎖可変配列、
及び／又は
ｂ）
ｉ）配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６及び配列番号９６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、
ｉｉ）ＧＡＳ、ＡＡＳ及びＤＡＳからなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、
ｉｉｉ）配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４及び配列番号９７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む軽鎖可変配列、
を含む抗原結合部位を特徴とする、サルベコウイルスのスパイクタンパク質の保存領域に結合する単離された抗体又は抗体断片である。
ａ）
ｉ）配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４及び配列番号９３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、
ｉｉ）配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８及び配列番号９４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、
ｉｉｉ）配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２及び配列番号９５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む重鎖可変配列、
及び／又は
ｂ）
ｉ）配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６及び配列番号９６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、
ｉｉ）ＧＡＳ、ＡＡＳ及びＤＡＳからなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、
ｉｉｉ）配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４及び配列番号９７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む軽鎖可変配列、
を含む抗原結合部位を特徴とする、サルベコウイルスのスパイクタンパク質の保存領域に結合する単離された抗体又は抗体断片である。
【0026】
本発明の単離された抗体又は抗体断片の配列を特徴付ける重鎖領域及び定常領域の可変ドメインの相補性決定領域（ＣＤＲ；ＣＤＲ１－ＣＤＲ３）並びにフレームワーク領域（ＦＲ；ＦＲ１－ＦＲ４）は、ＩＭＧＴ命名法に従って決定されている。
【0027】
好ましい実施形態によれば、本発明の抗体又は抗体断片の重鎖可変配列は、さらに以下：
ａ）配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８及び配列番号９８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ１）、
ｂ）配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２及び配列番号９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ２）、
ｃ）配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６及び配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ３）、
ｄ）配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０及び配列番号１０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ４）、を含み、
及び／又は
軽鎖可変配列は、さらに以下：
ａ）配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５及び配列番号１０２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ１）、
ｂ）配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０及び配列番号１０３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ２）、
ｃ）配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５及び配列番号１０４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ３）、
ｄ）配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９及び配列番号１０５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ４）、を含む。
ａ）配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８及び配列番号９８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ１）、
ｂ）配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２及び配列番号９９からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ２）、
ｃ）配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６及び配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ３）、
ｄ）配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０及び配列番号１０１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ４）、を含み、
及び／又は
軽鎖可変配列は、さらに以下：
ａ）配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５及び配列番号１０２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ１）、
ｂ）配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０及び配列番号１０３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ２）、
ｃ）配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５及び配列番号１０４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ３）、
ｄ）配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９及び配列番号１０５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むフレームワーク領域（ＦＲ４）、を含む。
【0028】
本発明の好ましい実施形態によれば、抗体又は抗体断片は、以下：
ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む重鎖可変配列、
及び／又は
配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、ＧＡＳのアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む軽鎖可変配列、を含む、抗原結合部位を特徴とする。別の好ましい実施形態によれば、前記重鎖可変配列は、配列番号２５を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号２９を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号３３を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号３７を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、前記軽鎖可変配列は、配列番号４１を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号４６を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号５１を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号５６を含むフレームワーク領域ＦＲ４、をさらに含んでよく、
ｂ）重鎖可変配列は、配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、
及び／又は
軽鎖可変配列は、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、ＧＡＳのアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。別の好ましい実施形態によれば、前記重鎖可変配列は、配列番号２５を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号２９を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号３３を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号３８を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、前記軽鎖可変配列は、配列番号４２を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号４７を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号５２を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号５７を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、
ｃ）重鎖可変配列は、配列番号２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、
及び／又は
軽鎖可変配列は、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、ＡＡＳのアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。別の好ましい実施形態によれば、前記重鎖可変配列は、配列番号２６からなるフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号３０からなるフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号３４を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号３９を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、前記軽鎖可変配列は、配列番号４３を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号４８を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号５３を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号５８を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、
ｄ）重鎖可変配列は、配列番号３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、
及び／又は
軽鎖可変配列は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、ＡＡＳのアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。別の好ましい実施形態によれば、前記重鎖可変配列は、配列番号２７を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号３１を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号３５を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号４０からなるフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、前記軽鎖可変配列は、配列番号４４を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号４９を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号５４を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号５６を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、
ｅ）重鎖可変配列は、配列番号４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、
及び／又は
軽鎖可変配列は、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、ＤＡＳのアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号２４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。別の好ましい実施形態によれば、前記重鎖可変配列は、配列番号２８を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号３２を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号３６を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号３９を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、前記軽鎖可変配列は、配列番号４５を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号５０を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号５５を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号５９を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、
ｆ）重鎖可変配列は、配列番号９３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号９５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、
及び／又は
軽鎖可変配列は、配列番号９６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、ＡＡＳのアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号９７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。別の好ましい実施形態によれば、前記重鎖可変配列は、配列番号９８を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号９９を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号１００を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号１０１を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、前記軽鎖可変配列は、配列番号１０２を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号１０３を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号１０４を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号１０５を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよい。
ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む重鎖可変配列、
及び／又は
配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、ＧＡＳのアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３、を含む軽鎖可変配列、を含む、抗原結合部位を特徴とする。別の好ましい実施形態によれば、前記重鎖可変配列は、配列番号２５を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号２９を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号３３を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号３７を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、前記軽鎖可変配列は、配列番号４１を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号４６を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号５１を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号５６を含むフレームワーク領域ＦＲ４、をさらに含んでよく、
ｂ）重鎖可変配列は、配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、
及び／又は
軽鎖可変配列は、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、ＧＡＳのアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。別の好ましい実施形態によれば、前記重鎖可変配列は、配列番号２５を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号２９を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号３３を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号３８を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、前記軽鎖可変配列は、配列番号４２を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号４７を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号５２を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号５７を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、
ｃ）重鎖可変配列は、配列番号２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、
及び／又は
軽鎖可変配列は、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、ＡＡＳのアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。別の好ましい実施形態によれば、前記重鎖可変配列は、配列番号２６からなるフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号３０からなるフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号３４を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号３９を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、前記軽鎖可変配列は、配列番号４３を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号４８を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号５３を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号５８を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、
ｄ）重鎖可変配列は、配列番号３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、
及び／又は
軽鎖可変配列は、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、ＡＡＳのアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。別の好ましい実施形態によれば、前記重鎖可変配列は、配列番号２７を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号３１を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号３５を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号４０からなるフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、前記軽鎖可変配列は、配列番号４４を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号４９を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号５４を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号５６を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、
ｅ）重鎖可変配列は、配列番号４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、
及び／又は
軽鎖可変配列は、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、ＤＡＳのアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号２４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。別の好ましい実施形態によれば、前記重鎖可変配列は、配列番号２８を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号３２を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号３６を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号３９を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、前記軽鎖可変配列は、配列番号４５を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号５０を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号５５を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号５９を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、
ｆ）重鎖可変配列は、配列番号９３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号９４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号９５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含み、
及び／又は
軽鎖可変配列は、配列番号９６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、ＡＡＳのアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、配列番号９７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む。別の好ましい実施形態によれば、前記重鎖可変配列は、配列番号９８を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号９９を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号１００を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号１０１を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよく、前記軽鎖可変配列は、配列番号１０２を含むフレームワーク領域ＦＲ１、配列番号１０３を含むフレームワーク領域ＦＲ２、配列番号１０４を含むフレームワーク領域ＦＲ３、及び配列番号１０５を含むフレームワーク領域ＦＲ４をさらに含んでよい。
【0029】
本発明の好ましい実施形態によれば、本発明の抗体又は抗体断片（クローンＦａｂ ５＃）は、
ＬＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＦＮＴＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＳＳＹＩＤＮＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＹＲＤＮＡＫＫＳＬＹＬＲＭＩＧＬＲＶＥＤＳＧＶＹＹＣＴＲＶＮＰＱＡＫＧＳＤＷＬＤＰＰＩＮＱＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号６０）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変配列、及び／又は
ＥＬＴＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＳＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６１）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変配列、を含む。
ＬＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＦＮＴＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＳＳＹＩＤＮＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＹＲＤＮＡＫＫＳＬＹＬＲＭＩＧＬＲＶＥＤＳＧＶＹＹＣＴＲＶＮＰＱＡＫＧＳＤＷＬＤＰＰＩＮＱＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号６０）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変配列、及び／又は
ＥＬＴＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＳＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６１）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変配列、を含む。
【0030】
別の好ましい実施形態では、本発明の抗体又は抗体断片（クローンＦａｂ ＢＵ．２）は、
ＬＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＦＮＴＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＳＳＹＩＤＮＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＹＲＤＮＡＫＫＳＬＹＬＲＭＩＧＬＲＶＥＤＳＧＶＹＹＣＴＲＶＮＰＱＡＫＧＳＤＷＬＤＰＰＩＮＱＹＹＧＭＤＶＷＧＱＲＤＨＧＨＲＳＰ（配列番号６２）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変配列、及び／又は
ＥＬＴＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＤＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＨＫＰＧＱＰＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＡＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＶＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ★（配列番号６３）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変配列、を含む。
ＬＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＦＮＴＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＳＳＹＩＤＮＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＹＲＤＮＡＫＫＳＬＹＬＲＭＩＧＬＲＶＥＤＳＧＶＹＹＣＴＲＶＮＰＱＡＫＧＳＤＷＬＤＰＰＩＮＱＹＹＧＭＤＶＷＧＱＲＤＨＧＨＲＳＰ（配列番号６２）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変配列、及び／又は
ＥＬＴＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＤＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＨＫＰＧＱＰＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＡＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＶＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ★（配列番号６３）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変配列、を含む。
【0031】
本発明の別の好ましい代替実施形態によれば、本発明の単離された抗体又は抗体断片（クローンＦａｂ ＢＵ．７）は、
ＬＥＷＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＳＳＩＮＹＹＷＶＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＮＩＮＹＳＧＴＴＮＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＱＴＹＹＹＤＲＲＧＹＹＲＰＥＰＩＥＨＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号６４）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変配列、及び／又は
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＲＳＦＬＨＷＹＱＱＲＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＭＶＳＳＥＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＥＴＤＦＴＬＴＩＤＧＬＱＰＥＤＶＡＴＹＦＣＱＱＴＹＤＴＰＬＴＦＧＧＧＴＡＶＤＩＫ（配列番号６５）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変配列、を含む。
ＬＥＷＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＳＳＩＮＹＹＷＶＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＮＩＮＹＳＧＴＴＮＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＱＴＹＹＹＤＲＲＧＹＹＲＰＥＰＩＥＨＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号６４）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変配列、及び／又は
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＲＳＦＬＨＷＹＱＱＲＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＭＶＳＳＥＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＥＴＤＦＴＬＴＩＤＧＬＱＰＥＤＶＡＴＹＦＣＱＱＴＹＤＴＰＬＴＦＧＧＧＴＡＶＤＩＫ（配列番号６５）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変配列、を含む。
【0032】
本発明の別の実施形態では、本発明の単離された抗体又は抗体断片（クローンＦａｂ ＢＵ．１１）は、
ＬＥＳＧＰＧＬＬＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＡＩＳＧＤＳＶＳＲＲＳＶＡＷＮＷＩＲＱＳＰＳＲＧＬＥＷＬＧＲＴＹＹＲＳＫＷＦＳＥＹＧＶＳＶＲＧＲＩＴＩＳＰＤＴＴＫＮＱＦＳＬＱＬＮＳＶＴＰＥＤＴＡＶＹＹＣＲＫＳＫＧＲＱＱＬＡＥＳＴＳＳＶＷＴＷＧＱＧＴＴＶＩＶＹＳ（配列番号６６）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変配列、及び／又は
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＦＶＧＤＲＶＴＬＴＣＲＡＳＱＧＩＲＮＤＬＮＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＡＡＳＡＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＬＱＤＹＮＦＰＲＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６７）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変配列、を含む。
ＬＥＳＧＰＧＬＬＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＡＩＳＧＤＳＶＳＲＲＳＶＡＷＮＷＩＲＱＳＰＳＲＧＬＥＷＬＧＲＴＹＹＲＳＫＷＦＳＥＹＧＶＳＶＲＧＲＩＴＩＳＰＤＴＴＫＮＱＦＳＬＱＬＮＳＶＴＰＥＤＴＡＶＹＹＣＲＫＳＫＧＲＱＱＬＡＥＳＴＳＳＶＷＴＷＧＱＧＴＴＶＩＶＹＳ（配列番号６６）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変配列、及び／又は
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＦＶＧＤＲＶＴＬＴＣＲＡＳＱＧＩＲＮＤＬＮＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＡＡＳＡＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＬＱＤＹＮＦＰＲＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６７）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変配列、を含む。
【0033】
本発明のさらに別の代替的な好ましい実施形態では、本発明の単離された抗体又は抗体断片ト（クローンＦａｂ ＢＵ．５４）は、
ＬＥＷＧＰＧＬＶＫＡＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＳＳＲＮＦＹＷＳＷＩＲＱＰＧＧＫＧＬＥＷＩＧＲＩＹＴＳＧＳＴＮＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＬＤＴＳＫＳＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＴＦＹＹＤＲＳＧＮＧＲＬＤＰＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ（配列番号６８）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変配列、及び／又は
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＮＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＧＴＨＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＨＤＮＬＶＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６９）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変配列、を含む。
ＬＥＷＧＰＧＬＶＫＡＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＳＳＲＮＦＹＷＳＷＩＲＱＰＧＧＫＧＬＥＷＩＧＲＩＹＴＳＧＳＴＮＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＬＤＴＳＫＳＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＴＦＹＹＤＲＳＧＮＧＲＬＤＰＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ（配列番号６８）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変配列、及び／又は
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＮＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＧＴＨＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＨＤＮＬＶＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６９）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変配列、を含む。
【0034】
本発明の最後の好ましい代替実施形態によれば、本発明の単離された抗体又は抗体断片（クローンＦａｂ ＢＳ．７０）は、
ＬＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＴＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＮＮＦＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＭＩＳＹＥＧＳＫＤＦＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＫＤＨＡＲＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＥＹＹＣＡＫＤＫＡＩＦＭＩＳＡＧＲＴＬＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号７０）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変配列、及び／又は
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＮＩＧＩＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＮＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＴＬＱＰＥＤＦＡＴＹＷＣＱＱＧＹＳＴＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＲ（配列番号７１）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変配列、を含む。
ＬＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＴＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＮＮＦＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＭＩＳＹＥＧＳＫＤＦＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＫＤＨＡＲＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＥＹＹＣＡＫＤＫＡＩＦＭＩＳＡＧＲＴＬＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号７０）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変配列、及び／又は
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＮＩＧＩＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＮＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＴＬＱＰＥＤＦＡＴＹＷＣＱＱＧＹＳＴＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＲ（配列番号７１）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変配列、を含む。
【0035】
本発明のさらなる目的は、上に列挙した本発明の抗体又は抗体断片の重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列である。
【0036】
好ましい実施形態では、本発明のヌクレオチド配列は、以下からなる群から選択される：
【0037】
重鎖（クローンＦａｂ＃５）：
ｃｔｃｇａｇｔｃｔｇｇｇｇｇａｇｇｃｃｔｇｇｔｃａａｇｃｃｔｇｇｇｇｇｇｔｃｃｃｔｇａｇａｃｔｃｔｃｃｔｇｔｇｃａｇｃｃｔｃｔｇｇａｔｔｃａａｃｔｔｃａａｔａｃｃｔａｔａｃｃａｔｇａａｃｔｇｇｇｔｃｃｇｃｃａｇｇｃｔｃｃａｇｇｇａａｇｇｇｇｃｔｇｇａｇｔｇｇｇｔｃｔｃａｔｃｃａｔｔａｇｔａｇｔａｇｔａｇｔａｇｔｔａｃａｔａｇａｃａａｃｇｃａｇａｃｔｃａｇｔｇａａｇｇｇｃｃｇａｔｔｃａｃｃａｔｃｔａｃａｇａｇａｃａａｃｇｃｃａａｇａａｇｔｃａｃｔｇｔａｔｃｔｇｃｇａａｔｇａｔｃｇｇｃｃｔｇａｇａｇｔｃｇａｇｇａｃｔｃｃｇｇｔｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔａｃｇｃｇａｇｔｇａａｃｃｃｃｃａｇｇｃｃａａａｇｇｇｔｃｇｇａｃｔｇｇｔｔｇｇａｔｃｃｃｃｃｃａｔｃａａｃｃａａｔａｃｔａｃｇｇｔａｔｇｇａｃｇｔｃｔｇｇｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａｃｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａ（配列番号７２）
ｃｔｃｇａｇｔｃｔｇｇｇｇｇａｇｇｃｃｔｇｇｔｃａａｇｃｃｔｇｇｇｇｇｇｔｃｃｃｔｇａｇａｃｔｃｔｃｃｔｇｔｇｃａｇｃｃｔｃｔｇｇａｔｔｃａａｃｔｔｃａａｔａｃｃｔａｔａｃｃａｔｇａａｃｔｇｇｇｔｃｃｇｃｃａｇｇｃｔｃｃａｇｇｇａａｇｇｇｇｃｔｇｇａｇｔｇｇｇｔｃｔｃａｔｃｃａｔｔａｇｔａｇｔａｇｔａｇｔａｇｔｔａｃａｔａｇａｃａａｃｇｃａｇａｃｔｃａｇｔｇａａｇｇｇｃｃｇａｔｔｃａｃｃａｔｃｔａｃａｇａｇａｃａａｃｇｃｃａａｇａａｇｔｃａｃｔｇｔａｔｃｔｇｃｇａａｔｇａｔｃｇｇｃｃｔｇａｇａｇｔｃｇａｇｇａｃｔｃｃｇｇｔｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔａｃｇｃｇａｇｔｇａａｃｃｃｃｃａｇｇｃｃａａａｇｇｇｔｃｇｇａｃｔｇｇｔｔｇｇａｔｃｃｃｃｃｃａｔｃａａｃｃａａｔａｃｔａｃｇｇｔａｔｇｇａｃｇｔｃｔｇｇｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａｃｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａ（配列番号７２）
【0038】
軽鎖（Ｆａｂ＃５）：
ｇａｇｃｔｃａｃａｃｔｃａｃｇｃａｇｔｃｔｃｃａｇｇｃａｃｃｃｔｇｔｃｔｔｔｇｔｃｔｃｃａｇｇｇｇａａａｇａｇｃｃａｃｃｃｔｃｔｃｃｔｇｃａｇｇｇｃｃａｇｔｃａｇａｇｔｇｔｔａｇｃａｇｃａｇｃｔａｔｔｔａｇｃｃｔｇｇｔａｃｃａｇｃａｇａａａｃｃｔｇｇｃｃａｇｇｃｔｃｃｃａｇｇｃｔｃｃｔｃａｔｃｔａｔｇｇｔｇｃａｔｃｃａｇｃａｇｇｇｃｃａｃｔｇｇｃａｔｃｃｃａｇａｃａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｃｔｇｇｇａｃａｇａｃｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｇａｃｔｇｇａｇｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔｃａｇｃａｇｔａｔｇｇｔａｇｃｔｃａｃｃｇｔｇｇａｃｇｔｔｃｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｔｇａａａｔｃａａａ（配列番号７３）
ｇａｇｃｔｃａｃａｃｔｃａｃｇｃａｇｔｃｔｃｃａｇｇｃａｃｃｃｔｇｔｃｔｔｔｇｔｃｔｃｃａｇｇｇｇａａａｇａｇｃｃａｃｃｃｔｃｔｃｃｔｇｃａｇｇｇｃｃａｇｔｃａｇａｇｔｇｔｔａｇｃａｇｃａｇｃｔａｔｔｔａｇｃｃｔｇｇｔａｃｃａｇｃａｇａａａｃｃｔｇｇｃｃａｇｇｃｔｃｃｃａｇｇｃｔｃｃｔｃａｔｃｔａｔｇｇｔｇｃａｔｃｃａｇｃａｇｇｇｃｃａｃｔｇｇｃａｔｃｃｃａｇａｃａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｃｔｇｇｇａｃａｇａｃｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｇａｃｔｇｇａｇｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔｃａｇｃａｇｔａｔｇｇｔａｇｃｔｃａｃｃｇｔｇｇａｃｇｔｔｃｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｔｇａａａｔｃａａａ（配列番号７３）
【0039】
重鎖（Ｆａｂ ＢＵ．２）
ｃｔｃｇａｇｔｃｔｇｇｇｇｇａｇｇｃｃｔｇｇｔｃａａｇｃｃｔｇｇｇｇｇｇｔｃｃｃｔｇａｇａｃｔｃｔｃｃｔｇｔｇｃａｇｃｃｔｃｔｇｇａｔｔｃａａｃｔｔｃａａｔａｃｃｔａｔａｃｃａｔｇａａｃｔｇｇｇｔｃｃｇｃｃａｇｇｃｔｃｃａｇｇｇａａｇｇｇｇｃｔｇｇａｇｔｇｇｇｔｃｔｃａｔｃｃａｔｔａｇｔａｇｔａｇｔａｇｔａｇｔｔａｃａｔａｇａｃａａｃｇｃａｇａｃｔｃａｇｔｇａａｇｇｇｃｃｇａｔｔｃａｃｃａｔｃｔａｃａｇａｇａｃａａｃｇｃｃａａｇａａｇｔｃａｃｔｇｔａｔｃｔｇｃｇａａｔｇａｔｃｇｇｃｃｔｇａｇａｇｔｃｇａｇｇａｃｔｃｃｇｇｔｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔａｃｇｃｇａｇｔｇａａｃｃｃｃｃａｇｇｃｃａａａｇｇｇｔｃｇｇａｃｔｇｇｔｔｇｇａｔｃｃｃｃｃｃａｔｃａａｃｃａａｔａｃｔａｃｇｇｔａｔｇｇａｃｇｔｃｔｇｇｇｇｃｃａａａｇｇｇａｃｃａｃｇｇｔｃａｃｃｇｇｔｃｔｃｃｔ
（配列番号７４）
ｃｔｃｇａｇｔｃｔｇｇｇｇｇａｇｇｃｃｔｇｇｔｃａａｇｃｃｔｇｇｇｇｇｇｔｃｃｃｔｇａｇａｃｔｃｔｃｃｔｇｔｇｃａｇｃｃｔｃｔｇｇａｔｔｃａａｃｔｔｃａａｔａｃｃｔａｔａｃｃａｔｇａａｃｔｇｇｇｔｃｃｇｃｃａｇｇｃｔｃｃａｇｇｇａａｇｇｇｇｃｔｇｇａｇｔｇｇｇｔｃｔｃａｔｃｃａｔｔａｇｔａｇｔａｇｔａｇｔａｇｔｔａｃａｔａｇａｃａａｃｇｃａｇａｃｔｃａｇｔｇａａｇｇｇｃｃｇａｔｔｃａｃｃａｔｃｔａｃａｇａｇａｃａａｃｇｃｃａａｇａａｇｔｃａｃｔｇｔａｔｃｔｇｃｇａａｔｇａｔｃｇｇｃｃｔｇａｇａｇｔｃｇａｇｇａｃｔｃｃｇｇｔｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔａｃｇｃｇａｇｔｇａａｃｃｃｃｃａｇｇｃｃａａａｇｇｇｔｃｇｇａｃｔｇｇｔｔｇｇａｔｃｃｃｃｃｃａｔｃａａｃｃａａｔａｃｔａｃｇｇｔａｔｇｇａｃｇｔｃｔｇｇｇｇｃｃａａａｇｇｇａｃｃａｃｇｇｔｃａｃｃｇｇｔｃｔｃｃｔ
（配列番号７４）
【0040】
軽鎖（Ｆａｂ ＢＵ．２）
ｇａｇｃｔｃａｃａｃｔｃａｃｇｃａｇｔｃｔｃｃａｇｃｃａｃｃｃｔｇｔｃｔｔｔｇｔｃｔｃｃａｇｇｇｇａｔａｇａｇｃｃａｃｃｃｔｃｔｃｃｔｇｃａｇｇｇｃｃａｇｔｃａｇａｇｔｇｔｔａｇｃａｇｃａｇｔｔａｃｔｔａｇｃｃｔｇｇｔａｃｃａｇｃａｃａａａｃｃｔｇｇｃｃａｇｃｃｃｃｃｃａｇｇｃｔｃｃｔｃａｔｃｔａｔｇｇｔｇｃａｔｃｃａｇｃａｇｇｇｃｃｇｃｃｇｇｃａｔｃｃｃａｇａｃａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｃｔｇｇｇａｃａｇａｃｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｇａｃｔｇｇａｇｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔｃａｇｃａｇｔａｃｇｔｃａｃｔｔｔｃｇｇｃｃｃｔｇｇｇａｃｃａａａｇｔｇｇａｔａｔｃａａａ（配列番号７５）
ｇａｇｃｔｃａｃａｃｔｃａｃｇｃａｇｔｃｔｃｃａｇｃｃａｃｃｃｔｇｔｃｔｔｔｇｔｃｔｃｃａｇｇｇｇａｔａｇａｇｃｃａｃｃｃｔｃｔｃｃｔｇｃａｇｇｇｃｃａｇｔｃａｇａｇｔｇｔｔａｇｃａｇｃａｇｔｔａｃｔｔａｇｃｃｔｇｇｔａｃｃａｇｃａｃａａａｃｃｔｇｇｃｃａｇｃｃｃｃｃｃａｇｇｃｔｃｃｔｃａｔｃｔａｔｇｇｔｇｃａｔｃｃａｇｃａｇｇｇｃｃｇｃｃｇｇｃａｔｃｃｃａｇａｃａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｃｔｇｇｇａｃａｇａｃｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｇａｃｔｇｇａｇｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔｃａｇｃａｇｔａｃｇｔｃａｃｔｔｔｃｇｇｃｃｃｔｇｇｇａｃｃａａａｇｔｇｇａｔａｔｃａａａ（配列番号７５）
【0041】
重鎖（Ｆａｂ ＢＵ．７）
ｃｔｃｇａｇｔｇｇｇｇｃｃｃａｇｇａｃｔｇｇｔｇａａｇｃｃｔｔｃｇｇａｇａｃｃｃｔｇｔｃｃｃｔｃａｃｃｔｇｃａｃｔｇｔｃｔｃｔｇｇｔｇｇｃｔｃｃａｔｃａｇｃａｇｃａｔａａａｔｔａｃｔａｃｔｇｇｇｔｃｔｇｇａｔｔｃｇｃｃａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａａｇｇｇｇｃｔｇｇａｇｔｇｇａｔｔｇｇｇａａｔａｔｃａａｔｔａｃａｇｔｇｇｇａｃｃａｃｃａａｃｔａｃａａｃｃｃｇｔｃｃｃｔｃａａｇａｇｔｃｇａｇｔｃａｃｃａｔａｔｃｃｇｔｇｇａｃａｃｇｔｃｃａａｇａａｃｃａｇｔｔｃｔｃｃｃｔｇａａｇｃｔｇａｇｃｔｃｔｇｔｇａｃｃｇｃｃｇｃａｇａｃａｃｇｇｃｔｇｔｃｔａｔｔａｃｔｇｔｇｃｇａｇａｃａａａｃｇｔａｔｔａｃｔａｔｇａｔａｇｇｃｇｔｇｇｔｔａｔｔａｃｃｇｃｃｃｇｇａｇｃｃｃａｔｔｇａｇｃａｃｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇａａｃｃｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａ（配列番号７６）
ｃｔｃｇａｇｔｇｇｇｇｃｃｃａｇｇａｃｔｇｇｔｇａａｇｃｃｔｔｃｇｇａｇａｃｃｃｔｇｔｃｃｃｔｃａｃｃｔｇｃａｃｔｇｔｃｔｃｔｇｇｔｇｇｃｔｃｃａｔｃａｇｃａｇｃａｔａａａｔｔａｃｔａｃｔｇｇｇｔｃｔｇｇａｔｔｃｇｃｃａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａａｇｇｇｇｃｔｇｇａｇｔｇｇａｔｔｇｇｇａａｔａｔｃａａｔｔａｃａｇｔｇｇｇａｃｃａｃｃａａｃｔａｃａａｃｃｃｇｔｃｃｃｔｃａａｇａｇｔｃｇａｇｔｃａｃｃａｔａｔｃｃｇｔｇｇａｃａｃｇｔｃｃａａｇａａｃｃａｇｔｔｃｔｃｃｃｔｇａａｇｃｔｇａｇｃｔｃｔｇｔｇａｃｃｇｃｃｇｃａｇａｃａｃｇｇｃｔｇｔｃｔａｔｔａｃｔｇｔｇｃｇａｇａｃａａａｃｇｔａｔｔａｃｔａｔｇａｔａｇｇｃｇｔｇｇｔｔａｔｔａｃｃｇｃｃｃｇｇａｇｃｃｃａｔｔｇａｇｃａｃｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇａａｃｃｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａ（配列番号７６）
【0042】
軽鎖（Ｆａｂ ＢＵ．７）
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｔｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｃｔｇｔａｇｇａｇａｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｃａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃａａｇｔｃａａｇａｔｇｔｔａｇａａｇｔｔｔｔｔｔａｃａｔｔｇｇｔａｔｃａａｃａａａｇａｃｃａｇｇｇａａａｇｃｃｃｃｔａａｇｔｔｇｔｔｇａｔｃｔａｔｇｃｔｇｃａｔｃｃａｔｇｇｔｇｔｃｇａｇｔｇａｇｇｔｃｃｃｇｔｃａａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇａｔｃｔｇａｇａｃａｇａｔｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃｇａｃｇｇｔｃｔｇｃａａｃｃｔｇａａｇａｔｇｔｔｇｃａａｃｔｔａｃｔｔｃｔｇｔｃａａｃａｇａｃｔｔａｃｇａｃａｃｇｃｃｇｃｔｃａｃｃｔｔｃｇｇｃｇｇｃｇｇｇａｃｃｇｃｇｇｔｔｇａｃａｔｃａａａ（配列番号７７）
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｔｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｃｔｇｔａｇｇａｇａｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｃａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃａａｇｔｃａａｇａｔｇｔｔａｇａａｇｔｔｔｔｔｔａｃａｔｔｇｇｔａｔｃａａｃａａａｇａｃｃａｇｇｇａａａｇｃｃｃｃｔａａｇｔｔｇｔｔｇａｔｃｔａｔｇｃｔｇｃａｔｃｃａｔｇｇｔｇｔｃｇａｇｔｇａｇｇｔｃｃｃｇｔｃａａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇａｔｃｔｇａｇａｃａｇａｔｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃｇａｃｇｇｔｃｔｇｃａａｃｃｔｇａａｇａｔｇｔｔｇｃａａｃｔｔａｃｔｔｃｔｇｔｃａａｃａｇａｃｔｔａｃｇａｃａｃｇｃｃｇｃｔｃａｃｃｔｔｃｇｇｃｇｇｃｇｇｇａｃｃｇｃｇｇｔｔｇａｃａｔｃａａａ（配列番号７７）
【0043】
重鎖（Ｆａｂ ＢＵ．１１）
ｃｔｃｇａｇｔｃａｇｇｔｃｃａｇｇａｃｔｇｃｔｇａａｇｃｃｃｔｃｇｃａｇａｇｃｃｔｃｔｃａｃｔｃａｃｃｔｇｔｇｃｃａｔｃｔｃｃｇｇａｇａｃａｇｔｇｔｃｔｃｔａｇｇａｇａａｇｔｇｔｔｇｃｔｔｇｇａａｃｔｇｇａｔｃａｇａｃａｇｔｃｃｃｃａｔｃｇａｇａｇｇｃｃｔｔｇａｇｔｇｇｃｔｇｇｇａａｇｇａｃａｔａｃｔａｃａｇｇｔｃｃａａｇｔｇｇｔｔｔｔｃｔｇａｇｔａｔｇｇｃｇｔａｔｃｔｇｔｇａｇａｇｇｔｃｇａａｔａａｃｃａｔｃａｇｔｃｃａｇａｃａｃａａｃｃａａｇａａｃｃａｇｔｔｃｔｃｃｃｔｇｃａｇｃｔｇａａｃｔｃｃｇｔｇａｃｔｃｃｃｇａｇｇａｃａｃｇｇｃｔｇｔｃｔａｔｔａｃｔｇｔｃｇａａａｇｔｃｇａａａｇｇｇａｇｇｃａｇｃａｇｔｔｇｇｃａｇａｇｔｃｔａｃｇａｇｔｔｃｇｇｔａｔｇｇａｃｇｔｇｇｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａｃｇｇｔｃａｔｃｇｔｃｔａｃｔｃａ（配列番号７８）
ｃｔｃｇａｇｔｃａｇｇｔｃｃａｇｇａｃｔｇｃｔｇａａｇｃｃｃｔｃｇｃａｇａｇｃｃｔｃｔｃａｃｔｃａｃｃｔｇｔｇｃｃａｔｃｔｃｃｇｇａｇａｃａｇｔｇｔｃｔｃｔａｇｇａｇａａｇｔｇｔｔｇｃｔｔｇｇａａｃｔｇｇａｔｃａｇａｃａｇｔｃｃｃｃａｔｃｇａｇａｇｇｃｃｔｔｇａｇｔｇｇｃｔｇｇｇａａｇｇａｃａｔａｃｔａｃａｇｇｔｃｃａａｇｔｇｇｔｔｔｔｃｔｇａｇｔａｔｇｇｃｇｔａｔｃｔｇｔｇａｇａｇｇｔｃｇａａｔａａｃｃａｔｃａｇｔｃｃａｇａｃａｃａａｃｃａａｇａａｃｃａｇｔｔｃｔｃｃｃｔｇｃａｇｃｔｇａａｃｔｃｃｇｔｇａｃｔｃｃｃｇａｇｇａｃａｃｇｇｃｔｇｔｃｔａｔｔａｃｔｇｔｃｇａａａｇｔｃｇａａａｇｇｇａｇｇｃａｇｃａｇｔｔｇｇｃａｇａｇｔｃｔａｃｇａｇｔｔｃｇｇｔａｔｇｇａｃｇｔｇｇｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａｃｇｇｔｃａｔｃｇｔｃｔａｃｔｃａ（配列番号７８）
【0044】
軽鎖（Ｆａｂ ＢＵ．１１）
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｔｔｇｔｇｇｇａｇａｔａｇａｇｔｃａｃｃｃｔｃａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃａａｇｔｃａｇｇｇｃａｔｔａｇａａａｔｇａｔｔｔａａａｃｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａａｃｃａｇｇｇｃａａｃｃｃｃｃｔａａａｃｔｃｃｔｇａｔｃｔａｔｇｃｔｇｃａｔｃｃｇｃｔｔｔａｃａａａｇｔｇｇｃｇｔｃｃｃａｔｃａａｇｇｔｔｃａｇｃｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｔｔｇｇｃａｃａｇａｔｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｇｃｃｔｇａａｇａｔａｔｔｇｃａａｃｔｔａｔｔａｃｔｇｔｃｔａｃａａｇａｔｔａｃａａｔｔｔｃｃｃｔｃｇｇａｃｇｔｔｃｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｇｇａａａｔｃａａａ
（配列番号７９）
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｔｔｇｔｇｇｇａｇａｔａｇａｇｔｃａｃｃｃｔｃａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃａａｇｔｃａｇｇｇｃａｔｔａｇａａａｔｇａｔｔｔａａａｃｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａａｃｃａｇｇｇｃａａｃｃｃｃｃｔａａａｃｔｃｃｔｇａｔｃｔａｔｇｃｔｇｃａｔｃｃｇｃｔｔｔａｃａａａｇｔｇｇｃｇｔｃｃｃａｔｃａａｇｇｔｔｃａｇｃｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｔｔｇｇｃａｃａｇａｔｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｇｃｃｔｇａａｇａｔａｔｔｇｃａａｃｔｔａｔｔａｃｔｇｔｃｔａｃａａｇａｔｔａｃａａｔｔｔｃｃｃｔｃｇｇａｃｇｔｔｃｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｇｇａａａｔｃａａａ
（配列番号７９）
【0045】
重鎖（Ｆａｂ ＢＵ．５４）
ｃｔｃｇａｇｔｇｇｇｇｃｃｃａｇｇａｃｔｇｇｔｇａａｇｇｃｔｔｃａｃａｇａｃｃｃｔｇｔｃｃｃｔｃａｃｃｔｇｃａｃｔｇｔｃｔｃｔｇｇｔｇｇｃｔｃｃａｔｃａｇｃａｇｔａｇｇａａｔｔｔｃｔａｔｔｇｇａｇｔｔｇｇａｔｃｃｇｇｃａｇｃｃｃｇｇｃｇｇｇａａｇｇｇａｃｔｇｇａｇｔｇｇａｔｔｇｇｇｃｇｔａｔｃｔａｔａｃａａｇｔｇｇｇａｇｃａｃｃａａｔｔａｃａａｔｃｃｃｔｃｃｃｔｃａａｇａｇｔｃｇａｇｔｃａｃｔａｔａｔｃａｔｔａｇａｃａｃｇｔｃｃａａｇａｇｔｃａｇｔｔｃｔｃｃｃｔｇａａｇｃｔｇａｇｃｔｃｔｇｔｇａｃｃｇｃｃｇｃａｇａｃａｃｇｇｃｃｇｔｇｔａｔｔａｔｔｇｔｇｃｇａｇａｇｇｇａｃｇｔｔｔｔａｔｔａｔｇａｔａｇｇａｇｔｇｇｔａａｔｇｇｔｃｇａｔｔａｇａｔｃｃｇｃｔｔｇａｃｔａｃｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇａａｃｃｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａ（配列番号８０）
ｃｔｃｇａｇｔｇｇｇｇｃｃｃａｇｇａｃｔｇｇｔｇａａｇｇｃｔｔｃａｃａｇａｃｃｃｔｇｔｃｃｃｔｃａｃｃｔｇｃａｃｔｇｔｃｔｃｔｇｇｔｇｇｃｔｃｃａｔｃａｇｃａｇｔａｇｇａａｔｔｔｃｔａｔｔｇｇａｇｔｔｇｇａｔｃｃｇｇｃａｇｃｃｃｇｇｃｇｇｇａａｇｇｇａｃｔｇｇａｇｔｇｇａｔｔｇｇｇｃｇｔａｔｃｔａｔａｃａａｇｔｇｇｇａｇｃａｃｃａａｔｔａｃａａｔｃｃｃｔｃｃｃｔｃａａｇａｇｔｃｇａｇｔｃａｃｔａｔａｔｃａｔｔａｇａｃａｃｇｔｃｃａａｇａｇｔｃａｇｔｔｃｔｃｃｃｔｇａａｇｃｔｇａｇｃｔｃｔｇｔｇａｃｃｇｃｃｇｃａｇａｃａｃｇｇｃｃｇｔｇｔａｔｔａｔｔｇｔｇｃｇａｇａｇｇｇａｃｇｔｔｔｔａｔｔａｔｇａｔａｇｇａｇｔｇｇｔａａｔｇｇｔｃｇａｔｔａｇａｔｃｃｇｃｔｔｇａｃｔａｃｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇａａｃｃｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａ（配列番号８０）
【0046】
軽鎖（Ｆａｂ ＢＵ．５４）
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｃｔｇｔａｇｇａｇａｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｃａｃｔｔｇｃｃａｇｇｃｇａｇｔｃａｇｇａｃａｔｔａｇｃａａｃｔａｔｔｔａａａｔｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａａｃｃａｇｇｇａａａｇｃｃｃｃｔａａｇｃｔｃｃｔｇａｔｃｔａｃｇａｔｇｃａｔｃｃａａｔｔｔｇｇａａａｃａｇｇｇｇｔｃｃｃａｔｃａａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇａａｇｔｇｇａｔｔｔｇｇｇａｃａｃａｔｔｔｔａｃｇｔｔａａｃｃａｔｃａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｇｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａａｃａｔａｔｔａｃｔｇｔｃａａｃａｇｃａｔｇａｔａａｔｃｔｃｇｔｃａｃｔｔｔｃｇｇｃｇｇａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｇｇａｇａｔｃａａａ（配列番号８１）
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｃｔｇｔａｇｇａｇａｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｃａｃｔｔｇｃｃａｇｇｃｇａｇｔｃａｇｇａｃａｔｔａｇｃａａｃｔａｔｔｔａａａｔｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａａｃｃａｇｇｇａａａｇｃｃｃｃｔａａｇｃｔｃｃｔｇａｔｃｔａｃｇａｔｇｃａｔｃｃａａｔｔｔｇｇａａａｃａｇｇｇｇｔｃｃｃａｔｃａａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇａａｇｔｇｇａｔｔｔｇｇｇａｃａｃａｔｔｔｔａｃｇｔｔａａｃｃａｔｃａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｇｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａａｃａｔａｔｔａｃｔｇｔｃａａｃａｇｃａｔｇａｔａａｔｃｔｃｇｔｃａｃｔｔｔｃｇｇｃｇｇａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｇｇａｇａｔｃａａａ（配列番号８１）
【0047】
重鎖（ＢＳ．７０）：
ｃｔｃｇａｇｔｃｔｇｇｇｇｇａｇｇｃｇｔｇｇｔｃｃａｇｃｃｔｇｇｇａｃｇｔｃｃｃｔｇａｇａｃｔｃｔｃｃｔｇｔｇｃｇｇｃｃｔｃｔｇｇａｔｔｃａｃｃｔｔｃａａｔａａｔｔｔｔｇｇｇａｔｇｃａｃｔｇｇｇｔｃｃｇｃｃａｇｇｃｔｃｃａｇｇｃａａｇｇｇｔｃｔｇｇａｇｔｇｇｇｔｇｇｃａａｔｇａｔｃｔｃａｔａｔｇａａｇｇａａｇｔａａｇｇａｔｔｔｃｔａｔｇｃａｇａｃｔｃｃｇｔｇａａｇｇｇｃｃｇａｔｔｃａｃｃａｔｃｔｃｃａａａｇａｃｃａｔｇｃｃａｇｇａａｔａｃｇｇｔｃｔａｔｃｔｇｃａａａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｇａｇｃｔｇａｇｇａｃａｃｇｇｃａｇａａｔａｔｔａｃｔｇｔｇｃｇａａａｇａｔａａｇｇｃｔａｔａｔｔｔａｔｇａｔｔｔｃｔｇｃｃｇｇａｃｇｇａｃｔｔｔｇｇａｃｔｔｃｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇａａｃｃｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａｇ（配列番号８２）
ｃｔｃｇａｇｔｃｔｇｇｇｇｇａｇｇｃｇｔｇｇｔｃｃａｇｃｃｔｇｇｇａｃｇｔｃｃｃｔｇａｇａｃｔｃｔｃｃｔｇｔｇｃｇｇｃｃｔｃｔｇｇａｔｔｃａｃｃｔｔｃａａｔａａｔｔｔｔｇｇｇａｔｇｃａｃｔｇｇｇｔｃｃｇｃｃａｇｇｃｔｃｃａｇｇｃａａｇｇｇｔｃｔｇｇａｇｔｇｇｇｔｇｇｃａａｔｇａｔｃｔｃａｔａｔｇａａｇｇａａｇｔａａｇｇａｔｔｔｃｔａｔｇｃａｇａｃｔｃｃｇｔｇａａｇｇｇｃｃｇａｔｔｃａｃｃａｔｃｔｃｃａａａｇａｃｃａｔｇｃｃａｇｇａａｔａｃｇｇｔｃｔａｔｃｔｇｃａａａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｇａｇｃｔｇａｇｇａｃａｃｇｇｃａｇａａｔａｔｔａｃｔｇｔｇｃｇａａａｇａｔａａｇｇｃｔａｔａｔｔｔａｔｇａｔｔｔｃｔｇｃｃｇｇａｃｇｇａｃｔｔｔｇｇａｃｔｔｃｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇａａｃｃｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａｇ（配列番号８２）
【0048】
軽鎖（Ｆａｂ ＢＳ．７０）：
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｃｔｇｔａｇｇａｇａｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｔａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃａａｇｔｃａｇａａｃａｔｔｇｇｃａｔｃｔａｔｔｔｇａａｔｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａａｃｃｔｇｇｇａａａｇｃｃｃｃａａａｇｃｔｃｃｔｇａｔｃｔａｔｇｃｔｇｃａｔｃｃａｇｔｔｔｇｃａａａａｔｇｇｇｇｔｃｃｃａｔｃｇａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇａｔｃｔｇｇｇａｃａｇａｃｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｃｔｃｔｇｃａａｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａａｃｔｔａｃｔｇｇｔｇｔｃａａｃａｇｇｇｔｔａｃａｇｔａｃｃｃｃａｃｔｃａｃｔｔｔｃｇｇｃｇｇａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔａｇａｇａｔｃａｇａｃ（配列番号８３）
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｃｔｇｔａｇｇａｇａｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｔａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃａａｇｔｃａｇａａｃａｔｔｇｇｃａｔｃｔａｔｔｔｇａａｔｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａａｃｃｔｇｇｇａａａｇｃｃｃｃａａａｇｃｔｃｃｔｇａｔｃｔａｔｇｃｔｇｃａｔｃｃａｇｔｔｔｇｃａａａａｔｇｇｇｇｔｃｃｃａｔｃｇａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇａｔｃｔｇｇｇａｃａｇａｃｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｃｔｃｔｇｃａａｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａａｃｔｔａｃｔｇｇｔｇｔｃａａｃａｇｇｇｔｔａｃａｇｔａｃｃｃｃａｃｔｃａｃｔｔｔｃｇｇｃｇｇａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔａｇａｇａｔｃａｇａｃ（配列番号８３）
【0049】
さらに、本発明は、本発明の抗体又は抗体断片の重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を少なくとも１つ含む発現ベクターに関する。
【0050】
本発明のさらなる目的は、上に概説したベクターを含む宿主細胞を企図する。
【0051】
本発明の別の目的は、本発明の抗体又は抗体断片の重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を少なくとも１つ含むハイブリドーマである。
【0052】
さらに、本発明は、本発明のヌクレオチド配列又は発現ベクターの少なくとも１つを、１又は複数の医薬的に許容される製剤添加剤（excipient）及び／又はアジュバントと共に含む分子／ベクターに基づく受動免疫予防のための製剤を企図する。ワクチン製剤は、対象におけるサルベコウイルス媒介性疾患、特にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって媒介される重症急性呼吸器症候群の予防において有利に使用され得る。
【0053】
好ましくは、本発明の抗体又は抗体断片はモノクローナル抗体である。別の好ましい実施形態では、抗体断片はＦａｂ断片である。
【0054】
さらにより好ましくは、本発明の抗体又は抗体断片はヒト抗体である。
【0055】
好ましくは、抗体又は抗体断片は、ヒトＩｇＧ又はＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択されるＩｇＧ断片、若しくはそれらの結合活性及び中和活性又は全てのＦｃ媒介性免疫機能を改善するために変異したＦｃ部分を含む組換えＩｇＧである。
【0056】
代替実施形態では、本発明の抗体又は抗体断片は、それらの薬物動態及び／又はそれらの送達に影響を及ぼす薬物及び／又は分子とコンジュゲートした一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、ナノボディ、二重特異性抗体、モノクローナル抗体を含む群の中から選択される形式である。
【0057】
さらなる実施形態によれば、本発明の抗体又は抗体断片は、マーカーで標識されるか、又は薬物とコンジュゲートされる。
【0058】
一例として、抗腫瘍活性は、抗体結合及び内在化後に細胞死を達成する異なるエフェクター分子と抗体とをコンジュゲートすることによって達成される。そのようなエフェクター分子としては、細胞傷害剤［１９、２０］、細菌タンパク質毒素又は植物タンパク質毒素（免疫毒素）［２１、２２］、及び放射性医薬品［２３］が挙げられる。
【0059】
本発明のさらなる目的は、生物学的試料中のサルベコウイルス、好ましくはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の存在を検出するための本発明の抗体又は抗体断片の使用である。
【0060】
本発明はさらに、対象におけるサルベコウイルス媒介性疾患、特にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって媒介される重症急性呼吸器症候群の治療及び／又は予防のための医療分野における使用のための本発明の抗体又は抗体断片を企図する。
【0061】
「ＳＡＲＳ－Ｃｏｖ－２」という用語は、これまでに知られている懸念される変異株（variants of concern)（ＶＯＣ）であるアルファ（Ｂ．１．１．７）、ベータ（Ｂ．１．３５１）、ガンマ（Ｐ．１）、デルタ（Ｂ．１．６１７．２）、Ｄ６１４ Ｇ（パヴィア大学）及びオミクロン（Ｂ．１．１．５２９）、又は注目すべき変異株（variants of interest）（ＶＯＩ）であるイータ（Ｂ．１．５２５）、イオタ（Ｂ．１．５２６）、カッパ（Ｂ．１．６１７．１）及びラムダ（Ｃ．３７）のいずれかを包含する。
【0062】
本発明の抗体又は抗体断片は、単独で、又はスパイクタンパク質の異なる保存領域に対する別の抗体又は抗体断片と組み合わせて使用することができる。本発明の抗体又は抗体断片の併用は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の異なるＶＯＣに対する治療的処置の交差反応性を高める。第２の抗体はまた、特許請求される抗体とは異なる抗体であってもよい。異なるエピトープを標的とする抗体の組合せは、治療効果の向上、すなわち、既に承認された分子の薬物関連副作用の克服、又は可能性のある新規循環変異株の薬物耐性の排除につながり得る。
【0063】
好ましい実施形態によれば、対象は、免疫不全患者又は心血管疾患及び／又は呼吸器疾患の病歴を有する患者である。あるいは、患者は、高齢患者（７０歳を超える）又はワクチンを忌避する対象であり得る。
【0064】
本発明による抗体又は抗体断片は、組合せ抗体カクテル中でもヒトにおいて有利に治療的に投与され得る。
【0065】
好ましくは、本発明の抗体又は抗体断片は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の発生から５～１０日後に投与される。
【0066】
本発明の目的は、本発明の抗体又は抗体断片の少なくとも１つを有効成分として、１又は複数の医薬的に許容される製剤添加剤（excpient）及び／又はアジュバントと共に含む医薬組成物である。好ましい実施形態において、抗体又は抗体断片は、静脈内経路による全身投与に適合される。あるいは、本発明は、筋肉内又は皮下の投与経路を企図する。
【0067】
本発明はさらに、対象におけるサルベコウイルス媒介性疾患、特にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって媒介される重症急性呼吸器症候群の治療又は予防において使用するための本発明の抗体又は抗体断片の少なくとも１つを含む医薬組成物に関する。
【0068】
本発明のさらなる目的は、本発明のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質中の標的とする保存領域に結合する第１の抗体又は抗体断片、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質中の第１の抗体とは異なる標的とする保存領域に結合する第２の抗体又は抗体断片を含む、サルベコウイルス媒介性疾患、特にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって媒介される重症急性呼吸器症候群に罹患している対象における同時、個別又は逐次投与のための、組成物、又はパーツからなるキットである。好ましくは、第１の抗体又は抗体断片、及び第２の抗体又は抗体断片は、別々の容器に入っている。
【0069】
ここで、本発明を、非限定的な例示目的で、その好ましい実施形態に従って、添付の図を特に参照して説明する。
【図面の簡単な説明】
【0070】
【図1】ナイーブ組換え抗体ライブラリーの調製及び選択のための一般的スキームを示す図である。この図は、ファージディスプレイライブラリーからの組換え抗体の構築及び選択に関与する一般的な工程を示す。Ｂリンパ球は、最初にドナーの血液から単離される。単離されたリンパ球細胞から全ｍＲＮＡが抽出され、相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）に逆転写される。可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）抗体遺伝子は、遺伝子特異的プライマーを用いたポリメラーゼ連鎖反応によって増幅され、ファージディスプレイベクターにクローニングする前にアセンブルされる。得られたファージは、その表面に抗体断片を提示する。選択中、繊維状ファージディスプレイライブラリーは、固相上に固定化された抗原と共にインキュベートされる。抗原結合ファージは抗原に結合したままであるが、未結合のファージは洗い流される。次いで、結合したファージは溶出し、細菌細胞による感染によって増幅する。発現宿主を非サプレッサー細菌株に変更することにより、可溶性抗体断片を発現させ、培地に分泌させることができる。
【図2A】フレームワーク領域ＦＲ１～ＦＲ４及び相補性決定領域ＣＤＲ１～ＣＤＲ３の両方を特定する、各クローンにおける重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の全アミノ酸（パネルＡ）及びヌクレオチド配列（パネルＢ）を示す図である。
【図2B】フレームワーク領域ＦＲ１～ＦＲ４及び相補性決定領域ＣＤＲ１～ＣＤＲ３の両方を特定する、各クローンにおける重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の全アミノ酸（パネルＡ）及びヌクレオチド配列（パネルＢ）を示す図である。
【図2C】フレームワーク領域ＦＲ１～ＦＲ４及び相補性決定領域ＣＤＲ１～ＣＤＲ３の両方を特定する、各クローンにおける重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の全アミノ酸（パネルＡ）及びヌクレオチド配列（パネルＢ）を示す図である。
【図3-1】選択されたクローン（＃５、ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４、ＢＳ．７０）の結合活性を、ＥＬＩＳＡアッセイによって評価されたＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方として示す図である。選択されたＦａｂ及びＩｇＧを、異なるＶＯＣの組換えタンパク質へのそれらの結合について試験した。
【図3-2】選択されたクローン（＃５、ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４、ＢＳ．７０）の結合活性を、ＥＬＩＳＡアッセイによって評価されたＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方として示す図である。選択されたＦａｂ及びＩｇＧを、異なるＶＯＣの組換えタンパク質へのそれらの結合について試験した。
【図3-3】選択されたクローン（＃５、ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４、ＢＳ．７０）の結合活性を、ＥＬＩＳＡアッセイによって評価されたＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方として示す図である。選択されたＦａｂ及びＩｇＧを、異なるＶＯＣの組換えタンパク質へのそれらの結合について試験した。
【図3-4】選択されたクローン（＃５、ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４、ＢＳ．７０）の結合活性を、ＥＬＩＳＡアッセイによって評価されたＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方として示す図である。選択されたＦａｂ及びＩｇＧを、異なるＶＯＣの組換えタンパク質へのそれらの結合について試験した。
【図4-1】選択されたクローンの結合活性の免疫蛍光分析の結果を、Ｆａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方として示す図である。選択されたＦａｂは、Ｄ６１４Ｇ、アルファ＿Ｂ．１．１．７、ベータ＿Ｂ．１．１３５、ガンマ Ｐ．１、デルタ＿Ｂ．１．６１７．１、オミクロン＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．１）、オミクロン＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．２）、オミクロン＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．４）及びＯｍｉｃｒｏｎ＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．５）ウイルス変異株に感染したＶｅｒｏＥ６細胞を検出することができる。
【図4-2】選択されたクローンの結合活性の免疫蛍光分析の結果を、Ｆａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方として示す図である。選択されたＦａｂは、Ｄ６１４Ｇ、アルファ＿Ｂ．１．１．７、ベータ＿Ｂ．１．１３５、ガンマ Ｐ．１、デルタ＿Ｂ．１．６１７．１、オミクロン＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．１）、オミクロン＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．２）、オミクロン＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．４）及びＯｍｉｃｒｏｎ＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．５）ウイルス変異株に感染したＶｅｒｏＥ６細胞を検出することができる。
【図4-3】選択されたクローンの結合活性の免疫蛍光分析の結果を、Ｆａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方として示す図である。選択されたＦａｂは、Ｄ６１４Ｇ、アルファ＿Ｂ．１．１．７、ベータ＿Ｂ．１．１３５、ガンマ Ｐ．１、デルタ＿Ｂ．１．６１７．１、オミクロン＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．１）、オミクロン＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．２）、オミクロン＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．４）及びＯｍｉｃｒｏｎ＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．５）ウイルス変異株に感染したＶｅｒｏＥ６細胞を検出することができる。
【図4-4】選択されたクローンの結合活性の免疫蛍光分析の結果を、Ｆａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方として示す図である。選択されたＦａｂは、Ｄ６１４Ｇ、アルファ＿Ｂ．１．１．７、ベータ＿Ｂ．１．１３５、ガンマ Ｐ．１、デルタ＿Ｂ．１．６１７．１、オミクロン＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．１）、オミクロン＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．２）、オミクロン＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．４）及びＯｍｉｃｒｏｎ＿Ｂ．１．５２９（ＢＡ．５）ウイルス変異株に感染したＶｅｒｏＥ６細胞を検出することができる。
【図5A】試験したＶＯＣ（Ｄ６１４Ｇ、Ｂ．１．１．７、Ｐ．１及びＢ．１．１３５）に対するＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方としてのクローンＦａｂ＃５の中和活性（パネルＡ）、並びに試験したＶＯＣ（Ｄ６１４Ｇ、アルファ＿Ｂ．１．１．７、ベータ＿Ｂ．１．１３５、デルタ Ｂ．１．６１７．１、ガンマ＿Ｐ．１、オミクロン Ｂ．１．１．５２９（ＢＡ．１）、オミクロン Ｂ．１．１．５２９（ＢＡ．２））に対するＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方としてのクローンＦａｂ ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４及びＢＳ．７０の中和活性（パネルＢ）を示す図である。
【図5B-1】試験したＶＯＣ（Ｄ６１４Ｇ、Ｂ．１．１．７、Ｐ．１及びＢ．１．１３５）に対するＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方としてのクローンＦａｂ＃５の中和活性（パネルＡ）、並びに試験したＶＯＣ（Ｄ６１４Ｇ、アルファ＿Ｂ．１．１．７、ベータ＿Ｂ．１．１３５、デルタ Ｂ．１．６１７．１、ガンマ＿Ｐ．１、オミクロン Ｂ．１．１．５２９（ＢＡ．１）、オミクロン Ｂ．１．１．５２９（ＢＡ．２））に対するＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方としてのクローンＦａｂ ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４及びＢＳ．７０の中和活性（パネルＢ）を示す図である。
【図5B-2】試験したＶＯＣ（Ｄ６１４Ｇ、Ｂ．１．１．７、Ｐ．１及びＢ．１．１３５）に対するＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方としてのクローンＦａｂ＃５の中和活性（パネルＡ）、並びに試験したＶＯＣ（Ｄ６１４Ｇ、アルファ＿Ｂ．１．１．７、ベータ＿Ｂ．１．１３５、デルタ Ｂ．１．６１７．１、ガンマ＿Ｐ．１、オミクロン Ｂ．１．１．５２９（ＢＡ．１）、オミクロン Ｂ．１．１．５２９（ＢＡ．２））に対するＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方としてのクローンＦａｂ ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４及びＢＳ．７０の中和活性（パネルＢ）を示す図である。
【図5B-3】試験したＶＯＣ（Ｄ６１４Ｇ、Ｂ．１．１．７、Ｐ．１及びＢ．１．１３５）に対するＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方としてのクローンＦａｂ＃５の中和活性（パネルＡ）、並びに試験したＶＯＣ（Ｄ６１４Ｇ、アルファ＿Ｂ．１．１．７、ベータ＿Ｂ．１．１３５、デルタ Ｂ．１．６１７．１、ガンマ＿Ｐ．１、オミクロン Ｂ．１．１．５２９（ＢＡ．１）、オミクロン Ｂ．１．１．５２９（ＢＡ．２））に対するＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方としてのクローンＦａｂ ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４及びＢＳ．７０の中和活性（パネルＢ）を示す図である。
【図5B-4】試験したＶＯＣ（Ｄ６１４Ｇ、Ｂ．１．１．７、Ｐ．１及びＢ．１．１３５）に対するＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方としてのクローンＦａｂ＃５の中和活性（パネルＡ）、並びに試験したＶＯＣ（Ｄ６１４Ｇ、アルファ＿Ｂ．１．１．７、ベータ＿Ｂ．１．１３５、デルタ Ｂ．１．６１７．１、ガンマ＿Ｐ．１、オミクロン Ｂ．１．１．５２９（ＢＡ．１）、オミクロン Ｂ．１．１．５２９（ＢＡ．２））に対するＦａｂ及びＩｇＧ１フォーマットの両方としてのクローンＦａｂ ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４及びＢＳ．７０の中和活性（パネルＢ）を示す図である。
【図6】ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のオミクロンＶＯＣに対するクローンＦａｂ ＢＵ．７及びＢＵ．５４の疑似ウイルスを使用した中和活性を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【0071】
本発明をよりよく説明する目的で、以下の実施例がここで提供されるが、これらはその例示的かつ非限定的な実施例と見なされるべきである。本発明の中和ｎＡｂは、以下の実施例に記載されるように、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ１及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイク又は特異的ドメインに対する結合親和性に基づいて同定され、中和活性及びエピトープ特異性に関して特徴付けられている。これらの態様は、最も有望なｎＡｂを、これまでに知られているか又は将来出現するＳＡＲＳ－Ｃｏｖ－２の全てのＶＯＩ及びＶＯＩｃに対して有効な潜在的な交差反応性処置を決定する主なパラメータである、最も高い効力をもたらすもの及び／又は保存されたスパイクエピトープを認識するものとして選択するための基礎である。
【0072】
（実施例１）：新たなヒト抗体ファージディスプレイライブラリーの作製、及びバイオパニング手順によるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクタンパク質に高親和性で結合することができる抗体の選択
【0073】
材料及び方法
ファージディスプレイ技術
この技術は、ペプチド又は抗体変異株のライブラリーの構築に焦点を当てており、それらは次いで、ファージ－コートタンパク質に融合されているので、目的の標的に対するそれらの親和性について選択される（参照として図１を参照のこと）。
ファージディスプレイ技術
この技術は、ペプチド又は抗体変異株のライブラリーの構築に焦点を当てており、それらは次いで、ファージ－コートタンパク質に融合されているので、目的の標的に対するそれらの親和性について選択される（参照として図１を参照のこと）。
【0074】
バクテリオファージの全ての表面タンパク質は、ディスプレイのために操作され得るが、最も使用されるのは、Ｍ１３繊維状ファージ由来のｐＶＩＩＩ及びｐＩＩＩである。各ビリオンは、その質量のほぼ８７％に相当する前者のタンパク質の約２７００コピーを含有し、それらは環境に半分露出しており、したがって、ビリオン構造に起因して短い配列のペプチドのみの効率的なディスプレイが可能となる。一方、ｐＩＩＩは、抗体の「機能的部分」などのより大きなペプチドに使用することができ、少数の場合において感染性のわずかな損失のみを生じる。各ライブラリーは、目的のペプチドに融合されたファージコートタンパク質の配列のみを含むファージミドベクターによって構成されるため、感染性でありかつ改変されたコーティングタンパク質によって構成されるファージの集団を得るためには、パッケージング効率が低下したヘルパーファージが必要とされる。次いで、バイオパニング手順を行い、目的の抗原に結合する能力についてファージを選択する。ファージ上に露出した分子のライブラリーの可変性、標的立体配座、親和性、及びアビディティなど、多くの因子を考慮しなければならない。述べられたように、ファージディスプレイは、病原体、特にｍＡｂに対する新規の治療薬を見出すために広く使用されている。
【0075】
これは、膜受容体（Ｓタンパク質）などの特異的分子標的を使用するか、又は全ウイルス若しくは感染細胞を使用するという２つの異なるバイオパニング戦略によって可能となった。しかしながら、表面抗原は、多くの場合、非中和ｍＡｂを誘発し、宿主免疫応答を回避することができるモチーフを提示するため、バイオパニングの結果のスクリーニング手順は、目的の抗原を選択的に標的化することができる少数の有効な分子のみを同定するために適切に行われなければならない。
【0076】
新たなヒト抗体ファージディスプレイライブラリーの作製
末梢（Ｆａｂ＃５の場合）及び骨髄（Ｆａｂ ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４の場合）の血液試料を、以前にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染し、その後ＣＯＶＩＤ－１９ワクチン（Ｐｆｉｚｅｒ社のコミナティ２回分）を接種した対象から採取し、それぞれＰＢＭＣ及びＢ細胞前駆体の採取に使用した。
末梢（Ｆａｂ＃５の場合）及び骨髄（Ｆａｂ ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４の場合）の血液試料を、以前にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染し、その後ＣＯＶＩＤ－１９ワクチン（Ｐｆｉｚｅｒ社のコミナティ２回分）を接種した対象から採取し、それぞれＰＢＭＣ及びＢ細胞前駆体の採取に使用した。
【0077】
ＰＢＭＣの抽出は、Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ（登録商標）－１０７７（ＳＩＧＭＡ－ＡＬＤＲＩＣＨ社）のプロトコルに従って実施した。手順の最後に、Ｔｒｉｚｏｌ Ｒｅａｇｅｎｔ（ＳＩＧＭＡ－ＡＬＤＲＩＣＨ社）を使用して１０６個の細胞を溶解し、その後ＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ社）を使用して細胞ＲＮＡを抽出した。抗体ファージミドＩｇＧライブラリーを、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ（商標）ＩＶ逆転写酵素（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）を使用してｃＤＮＡへのＢ細胞－ｍＲＮＡ逆転写によって生成した。得られたｃＤＮＡからＰＦＵ Ｎａｔｉｖｅ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ酵素（Ａｇｉｌｅｎｔ社）及び下記表に記載のプライマー対を使用して、重鎖と軽鎖を増幅した。
【0078】
【表1】
次いで、重可変抗体鎖及び軽可変抗体鎖の両方をファージミドベクターｐＣｏｍｂ３ＸＳＳ（ＰＶＴ１０５７２、ＤＢＡ社）にクローニングした。
【0079】
次いで、ファージミドライブラリーを、性線毛を発現するエレクトロコンピテントグラム陰性細胞（ＸＬ１－Ｂｌｕｅ、Ａｇｉｌｅｎｔ社）を形質転換し、それらをヘルパーファージ（Ｍ１３Ｋ０７、ＮＥＢ社）で重複感染させることによって、ファージライブラリーに変換した。
【0080】
Ｆａｂフォーマットにおける交差反応性抗体（より多くのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２臨床分離株を認識する抗体）の選択を最大化する目的で、異なるバイオパニング手順を使用することによって新たなライブラリーをスクリーニングした。
【0081】
異なるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２変異株の組換えスパイク（Ｓ）タンパク質を使用した：Ｆａｂ＃５においてはＤ６１４Ｇ（パヴィア大学）、及びＦａｂ ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４においてはＢ．１．１．７（４０５８９－Ｖ０８Ｂ６、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ社）、Ｐ．１（４０５８９－Ｖ０８Ｂ１０、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ社）又はＢ．１．１３５（４０５８９－Ｖ０８Ｂ７、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ社）。
【0082】
ファージディスプレイ抗体ライブラリーの５ラウンドのバイオパニングを、それらの全長フォーマットで発現された組換えスパイクタンパク質について行った。異なる抗原の逐次使用に基づく交差選択戦略を実施した。
【0083】
バイオパニングによって選択されたモノクローナル抗体（Ｆａｂ断片として発現される）をそのカプシド上に担持するバクテリオファージを使用して、その表面上に発現される抗体をコードするＤＮＡを得た。
【0084】
ファージ表面に存在する可変抗体領域をコードするＤＮＡを配列決定し、大腸菌発現系（ＸＬ１－Ｂｌｕｅ、Ａｇｉｌｅｎｔ社）及び免疫アフィニティークロマトグラフィー（ＨｉＴｒａｐ（登録商標）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｌ、Ｍｅｒｃｋ社）を使用するタンパク質精製に使用した。Ｆａｂ＃５（ＩｇＧ＃５）のＩｇＧ１フォーマットは、ハイスループット抗体産生サービス（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ社）を通じてＧｅｎｓｃｒｉｐｔ社から入手した。
【0085】
結果
５つの異なるクローンである、Ｆａｂ＃５及びＦａｂ ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４を同定した。
５つの異なるクローンである、Ｆａｂ＃５及びＦａｂ ＢＵ．２、ＢＵ．７、ＢＵ．１１、ＢＵ．５４を同定した。
【0086】
重鎖可変領域及び軽鎖可変領域のアミノ酸配列は以下の通りである。
【0087】
１．Ｆａｂ＃５
Ｈｃ：
ＬＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＦＮＴＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＳＳＹＩＤＮＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＹＲＤＮＡＫＫＳＬＹＬＲＭＩＧＬＲＶＥＤＳＧＶＹＹＣＴＲＶＮＰＱＡＫＧＳＤＷＬＤＰＰＩＮＱＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号６０）
Ｈｃ：
ＬＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＦＮＴＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＳＳＹＩＤＮＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＹＲＤＮＡＫＫＳＬＹＬＲＭＩＧＬＲＶＥＤＳＧＶＹＹＣＴＲＶＮＰＱＡＫＧＳＤＷＬＤＰＰＩＮＱＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号６０）
【0088】
Ｌｃ：
ＥＬＴＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＳＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６１）
ＥＬＴＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＳＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６１）
【0089】
２．Ｆａｂ ＢＵ．２
Ｈｃ：
ＬＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＦＮＴＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＳＳＹＩＤＮＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＹＲＤＮＡＫＫＳＬＹＬＲＭＩＧＬＲＶＥＤＳＧＶＹＹＣＴＲＶＮＰＱＡＫＧＳＤＷＬＤＰＰＩＮＱＹＹＧＭＤＶＷＧＱＲＤＨＧＨＲＳＰ（配列番号６２）
Ｈｃ：
ＬＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＦＮＴＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＳＳＹＩＤＮＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＹＲＤＮＡＫＫＳＬＹＬＲＭＩＧＬＲＶＥＤＳＧＶＹＹＣＴＲＶＮＰＱＡＫＧＳＤＷＬＤＰＰＩＮＱＹＹＧＭＤＶＷＧＱＲＤＨＧＨＲＳＰ（配列番号６２）
【0090】
Ｌｃ：
ＥＬＴＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＤＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＨＫＰＧＱＰＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＡＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＶＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ（配列番号６３）
ＥＬＴＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＤＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＨＫＰＧＱＰＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＡＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＶＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ（配列番号６３）
【0091】
３．Ｆａｂ ＢＵ．７
Ｈｃ：
ＬＥＷＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＳＳＩＮＹＹＷＶＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＮＩＮＹＳＧＴＴＮＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＱＴＹＹＹＤＲＲＧＹＹＲＰＥＰＩＥＨＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号６４）
Ｈｃ：
ＬＥＷＧＰＧＬＶＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＳＳＩＮＹＹＷＶＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＮＩＮＹＳＧＴＴＮＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＱＴＹＹＹＤＲＲＧＹＹＲＰＥＰＩＥＨＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号６４）
【0092】
Ｌｃ：
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＲＳＦＬＨＷＹＱＱＲＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＭＶＳＳＥＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＥＴＤＦＴＬＴＩＤＧＬＱＰＥＤＶＡＴＹＦＣＱＱＴＹＤＴＰＬＴＦＧＧＧＴＡＶＤＩＫ（配列番号６５）
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＲＳＦＬＨＷＹＱＱＲＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＭＶＳＳＥＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＥＴＤＦＴＬＴＩＤＧＬＱＰＥＤＶＡＴＹＦＣＱＱＴＹＤＴＰＬＴＦＧＧＧＴＡＶＤＩＫ（配列番号６５）
【0093】
４．Ｆａｂ ＢＵ．１１
Ｈｃ：
ＬＥＳＧＰＧＬＬＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＡＩＳＧＤＳＶＳＲＲＳＶＡＷＮＷＩＲＱＳＰＳＲＧＬＥＷＬＧＲＴＹＹＲＳＫＷＦＳＥＹＧＶＳＶＲＧＲＩＴＩＳＰＤＴＴＫＮＱＦＳＬＱＬＮＳＶＴＰＥＤＴＡＶＹＹＣＲＫＳＫＧＲＱＱＬＡＥＳＴＳＳＶＷＴＷＧＱＧＴＴＶＩＶＹＳ（配列番号６６）
Ｈｃ：
ＬＥＳＧＰＧＬＬＫＰＳＱＳＬＳＬＴＣＡＩＳＧＤＳＶＳＲＲＳＶＡＷＮＷＩＲＱＳＰＳＲＧＬＥＷＬＧＲＴＹＹＲＳＫＷＦＳＥＹＧＶＳＶＲＧＲＩＴＩＳＰＤＴＴＫＮＱＦＳＬＱＬＮＳＶＴＰＥＤＴＡＶＹＹＣＲＫＳＫＧＲＱＱＬＡＥＳＴＳＳＶＷＴＷＧＱＧＴＴＶＩＶＹＳ（配列番号６６）
【0094】
Ｌｃ：
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＦＶＧＤＲＶＴＬＴＣＲＡＳＱＧＩＲＮＤＬＮＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＡＡＳＡＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＬＱＤＹＮＦＰＲＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６７）
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＦＶＧＤＲＶＴＬＴＣＲＡＳＱＧＩＲＮＤＬＮＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＡＡＳＡＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＬＱＤＹＮＦＰＲＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６７）
【0095】
５．Ｆａｂ ＢＵ．５４
Ｈｃ：
ＬＥＷＧＰＧＬＶＫＡＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＳＳＲＮＦＹＷＳＷＩＲＱＰＧＧＫＧＬＥＷＩＧＲＩＹＴＳＧＳＴＮＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＬＤＴＳＫＳＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＴＦＹＹＤＲＳＧＮＧＲＬＤＰＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号６８）
Ｈｃ：
ＬＥＷＧＰＧＬＶＫＡＳＱＴＬＳＬＴＣＴＶＳＧＧＳＩＳＳＲＮＦＹＷＳＷＩＲＱＰＧＧＫＧＬＥＷＩＧＲＩＹＴＳＧＳＴＮＹＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＬＤＴＳＫＳＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＴＦＹＹＤＲＳＧＮＧＲＬＤＰＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号６８）
【0096】
Ｌｃ：
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＮＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＧＴＨＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＨＤＮＬＶＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６９）
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＮＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＧＴＨＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＨＤＮＬＶＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号６９）
【0097】
６．Ｆａｂ ＢＳ．７０
Ｈｃ：
ＬＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＴＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＮＮＦＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＭＩＳＹＥＧＳＫＤＦＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＫＤＨＡＲＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＥＹＹＣＡＫＤＫＡＩＦＭＩＳＡＧＲＴＬＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号７０）
Ｈｃ：
ＬＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＴＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＮＮＦＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＭＩＳＹＥＧＳＫＤＦＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＫＤＨＡＲＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＥＹＹＣＡＫＤＫＡＩＦＭＩＳＡＧＲＴＬＤＦＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号７０）
【0098】
Ｌｃ：
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＮＩＧＩＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＮＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＴＬＱＰＥＤＦＡＴＹＷＣＱＱＧＹＳＴＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＲ（配列番号７１）
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＮＩＧＩＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＮＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＴＬＱＰＥＤＦＡＴＹＷＣＱＱＧＹＳＴＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＲ（配列番号７１）
【0099】
これをコードするヌクレオチド配列は以下の通りである。
【0100】
１．Ｆａｂ＃５
Ｈｃ：
ｃｔｃｇａｇｔｃｔｇｇｇｇｇａｇｇｃｃｔｇｇｔｃａａｇｃｃｔｇｇｇｇｇｇｔｃｃｃｔｇａｇａｃｔｃｔｃｃｔｇｔｇｃａｇｃｃｔｃｔｇｇａｔｔｃａａｃｔｔｃａａｔａｃｃｔａｔａｃｃａｔｇａａｃｔｇｇｇｔｃｃｇｃｃａｇｇｃｔｃｃａｇｇｇａａｇｇｇｇｃｔｇｇａｇｔｇｇｇｔｃｔｃａｔｃｃａｔｔａｇｔａｇｔａｇｔａｇｔａｇｔｔａｃａｔａｇａｃａａｃｇｃａｇａｃｔｃａｇｔｇａａｇｇｇｃｃｇａｔｔｃａｃｃａｔｃｔａｃａｇａｇａｃａａｃｇｃｃａａｇａａｇｔｃａｃｔｇｔａｔｃｔｇｃｇａａｔｇａｔｃｇｇｃｃｔｇａｇａｇｔｃｇａｇｇａｃｔｃｃｇｇｔｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔａｃｇｃｇａｇｔｇａａｃｃｃｃｃａｇｇｃｃａａａｇｇｇｔｃｇｇａｃｔｇｇｔｔｇｇａｔｃｃｃｃｃｃａｔｃａａｃｃａａｔａｃｔａｃｇｇｔａｔｇｇａｃｇｔｃｔｇｇｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａｃｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａ
（配列番号７２）
Ｈｃ：
ｃｔｃｇａｇｔｃｔｇｇｇｇｇａｇｇｃｃｔｇｇｔｃａａｇｃｃｔｇｇｇｇｇｇｔｃｃｃｔｇａｇａｃｔｃｔｃｃｔｇｔｇｃａｇｃｃｔｃｔｇｇａｔｔｃａａｃｔｔｃａａｔａｃｃｔａｔａｃｃａｔｇａａｃｔｇｇｇｔｃｃｇｃｃａｇｇｃｔｃｃａｇｇｇａａｇｇｇｇｃｔｇｇａｇｔｇｇｇｔｃｔｃａｔｃｃａｔｔａｇｔａｇｔａｇｔａｇｔａｇｔｔａｃａｔａｇａｃａａｃｇｃａｇａｃｔｃａｇｔｇａａｇｇｇｃｃｇａｔｔｃａｃｃａｔｃｔａｃａｇａｇａｃａａｃｇｃｃａａｇａａｇｔｃａｃｔｇｔａｔｃｔｇｃｇａａｔｇａｔｃｇｇｃｃｔｇａｇａｇｔｃｇａｇｇａｃｔｃｃｇｇｔｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔａｃｇｃｇａｇｔｇａａｃｃｃｃｃａｇｇｃｃａａａｇｇｇｔｃｇｇａｃｔｇｇｔｔｇｇａｔｃｃｃｃｃｃａｔｃａａｃｃａａｔａｃｔａｃｇｇｔａｔｇｇａｃｇｔｃｔｇｇｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａｃｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａ
（配列番号７２）
【0101】
Ｌｃ：
ｇａｇｃｔｃａｃａｃｔｃａｃｇｃａｇｔｃｔｃｃａｇｇｃａｃｃｃｔｇｔｃｔｔｔｇｔｃｔｃｃａｇｇｇｇａａａｇａｇｃｃａｃｃｃｔｃｔｃｃｔｇｃａｇｇｇｃｃａｇｔｃａｇａｇｔｇｔｔａｇｃａｇｃａｇｃｔａｔｔｔａｇｃｃｔｇｇｔａｃｃａｇｃａｇａａａｃｃｔｇｇｃｃａｇｇｃｔｃｃｃａｇｇｃｔｃｃｔｃａｔｃｔａｔｇｇｔｇｃａｔｃｃａｇｃａｇｇｇｃｃａｃｔｇｇｃａｔｃｃｃａｇａｃａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｃｔｇｇｇａｃａｇａｃｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｇａｃｔｇｇａｇｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔｃａｇｃａｇｔａｔｇｇｔａｇｃｔｃａｃｃｇｔｇｇａｃｇｔｔｃｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｔｇａａａｔｃａａａ（配列番号７３）
ｇａｇｃｔｃａｃａｃｔｃａｃｇｃａｇｔｃｔｃｃａｇｇｃａｃｃｃｔｇｔｃｔｔｔｇｔｃｔｃｃａｇｇｇｇａａａｇａｇｃｃａｃｃｃｔｃｔｃｃｔｇｃａｇｇｇｃｃａｇｔｃａｇａｇｔｇｔｔａｇｃａｇｃａｇｃｔａｔｔｔａｇｃｃｔｇｇｔａｃｃａｇｃａｇａａａｃｃｔｇｇｃｃａｇｇｃｔｃｃｃａｇｇｃｔｃｃｔｃａｔｃｔａｔｇｇｔｇｃａｔｃｃａｇｃａｇｇｇｃｃａｃｔｇｇｃａｔｃｃｃａｇａｃａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｃｔｇｇｇａｃａｇａｃｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｇａｃｔｇｇａｇｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔｃａｇｃａｇｔａｔｇｇｔａｇｃｔｃａｃｃｇｔｇｇａｃｇｔｔｃｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｔｇａａａｔｃａａａ（配列番号７３）
【0102】
２．Ｆａｂ ＢＵ．２
Ｈｃ：
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（配列番号７４）
Ｈｃ：
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（配列番号７４）
【0103】
Ｌｃ：
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（配列番号７５）
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（配列番号７５）
【0104】
３．Ｆａｂ ＢＵ．７
Ｈｃ：
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Ｈｃ：
ｃｔｃｇａｇｔｇｇｇｇｃｃｃａｇｇａｃｔｇｇｔｇａａｇｃｃｔｔｃｇｇａｇａｃｃｃｔｇｔｃｃｃｔｃａｃｃｔｇｃａｃｔｇｔｃｔｃｔｇｇｔｇｇｃｔｃｃａｔｃａｇｃａｇｃａｔａａａｔｔａｃｔａｃｔｇｇｇｔｃｔｇｇａｔｔｃｇｃｃａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａａｇｇｇｇｃｔｇｇａｇｔｇｇａｔｔｇｇｇａａｔａｔｃａａｔｔａｃａｇｔｇｇｇａｃｃａｃｃａａｃｔａｃａａｃｃｃｇｔｃｃｃｔｃａａｇａｇｔｃｇａｇｔｃａｃｃａｔａｔｃｃｇｔｇｇａｃａｃｇｔｃｃａａｇａａｃｃａｇｔｔｃｔｃｃｃｔｇａａｇｃｔｇａｇｃｔｃｔｇｔｇａｃｃｇｃｃｇｃａｇａｃａｃｇｇｃｔｇｔｃｔａｔｔａｃｔｇｔｇｃｇａｇａｃａａａｃｇｔａｔｔａｃｔａｔｇａｔａｇｇｃｇｔｇｇｔｔａｔｔａｃｃｇｃｃｃｇｇａｇｃｃｃａｔｔｇａｇｃａｃｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇａａｃｃｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａ（配列番号７６）
【0105】
Ｌｃ：
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｔｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｃｔｇｔａｇｇａｇａｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｃａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃａａｇｔｃａａｇａｔｇｔｔａｇａａｇｔｔｔｔｔｔａｃａｔｔｇｇｔａｔｃａａｃａａａｇａｃｃａｇｇｇａａａｇｃｃｃｃｔａａｇｔｔｇｔｔｇａｔｃｔａｔｇｃｔｇｃａｔｃｃａｔｇｇｔｇｔｃｇａｇｔｇａｇｇｔｃｃｃｇｔｃａａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇａｔｃｔｇａｇａｃａｇａｔｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃｇａｃｇｇｔｃｔｇｃａａｃｃｔｇａａｇａｔｇｔｔｇｃａａｃｔｔａｃｔｔｃｔｇｔｃａａｃａｇａｃｔｔａｃｇａｃａｃｇｃｃｇｃｔｃａｃｃｔｔｃｇｇｃｇｇｃｇｇｇａｃｃｇｃｇｇｔｔｇａｃａｔｃａａａ（配列番号７７）
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｔｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｃｔｇｔａｇｇａｇａｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｃａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃａａｇｔｃａａｇａｔｇｔｔａｇａａｇｔｔｔｔｔｔａｃａｔｔｇｇｔａｔｃａａｃａａａｇａｃｃａｇｇｇａａａｇｃｃｃｃｔａａｇｔｔｇｔｔｇａｔｃｔａｔｇｃｔｇｃａｔｃｃａｔｇｇｔｇｔｃｇａｇｔｇａｇｇｔｃｃｃｇｔｃａａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇａｔｃｔｇａｇａｃａｇａｔｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃｇａｃｇｇｔｃｔｇｃａａｃｃｔｇａａｇａｔｇｔｔｇｃａａｃｔｔａｃｔｔｃｔｇｔｃａａｃａｇａｃｔｔａｃｇａｃａｃｇｃｃｇｃｔｃａｃｃｔｔｃｇｇｃｇｇｃｇｇｇａｃｃｇｃｇｇｔｔｇａｃａｔｃａａａ（配列番号７７）
【0106】
４．Ｆａｂ ＢＵ．１１
Ｈｃ：
ｃｔｃｇａｇｔｃａｇｇｔｃｃａｇｇａｃｔｇｃｔｇａａｇｃｃｃｔｃｇｃａｇａｇｃｃｔｃｔｃａｃｔｃａｃｃｔｇｔｇｃｃａｔｃｔｃｃｇｇａｇａｃａｇｔｇｔｃｔｃｔａｇｇａｇａａｇｔｇｔｔｇｃｔｔｇｇａａｃｔｇｇａｔｃａｇａｃａｇｔｃｃｃｃａｔｃｇａｇａｇｇｃｃｔｔｇａｇｔｇｇｃｔｇｇｇａａｇｇａｃａｔａｃｔａｃａｇｇｔｃｃａａｇｔｇｇｔｔｔｔｃｔｇａｇｔａｔｇｇｃｇｔａｔｃｔｇｔｇａｇａｇｇｔｃｇａａｔａａｃｃａｔｃａｇｔｃｃａｇａｃａｃａａｃｃａａｇａａｃｃａｇｔｔｃｔｃｃｃｔｇｃａｇｃｔｇａａｃｔｃｃｇｔｇａｃｔｃｃｃｇａｇｇａｃａｃｇｇｃｔｇｔｃｔａｔｔａｃｔｇｔｃｇａａａｇｔｃｇａａａｇｇｇａｇｇｃａｇｃａｇｔｔｇｇｃａｇａｇｔｃｔａｃｇａｇｔｔｃｇｇｔａｔｇｇａｃｇｔｇｇｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａｃｇｇｔｃａｔｃｇｔｃｔａｃｔｃａ（配列番号７８）
Ｈｃ：
ｃｔｃｇａｇｔｃａｇｇｔｃｃａｇｇａｃｔｇｃｔｇａａｇｃｃｃｔｃｇｃａｇａｇｃｃｔｃｔｃａｃｔｃａｃｃｔｇｔｇｃｃａｔｃｔｃｃｇｇａｇａｃａｇｔｇｔｃｔｃｔａｇｇａｇａａｇｔｇｔｔｇｃｔｔｇｇａａｃｔｇｇａｔｃａｇａｃａｇｔｃｃｃｃａｔｃｇａｇａｇｇｃｃｔｔｇａｇｔｇｇｃｔｇｇｇａａｇｇａｃａｔａｃｔａｃａｇｇｔｃｃａａｇｔｇｇｔｔｔｔｃｔｇａｇｔａｔｇｇｃｇｔａｔｃｔｇｔｇａｇａｇｇｔｃｇａａｔａａｃｃａｔｃａｇｔｃｃａｇａｃａｃａａｃｃａａｇａａｃｃａｇｔｔｃｔｃｃｃｔｇｃａｇｃｔｇａａｃｔｃｃｇｔｇａｃｔｃｃｃｇａｇｇａｃａｃｇｇｃｔｇｔｃｔａｔｔａｃｔｇｔｃｇａａａｇｔｃｇａａａｇｇｇａｇｇｃａｇｃａｇｔｔｇｇｃａｇａｇｔｃｔａｃｇａｇｔｔｃｇｇｔａｔｇｇａｃｇｔｇｇｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａｃｇｇｔｃａｔｃｇｔｃｔａｃｔｃａ（配列番号７８）
【0107】
Ｌｃ：
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｔｔｇｔｇｇｇａｇａｔａｇａｇｔｃａｃｃｃｔｃａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃａａｇｔｃａｇｇｇｃａｔｔａｇａａａｔｇａｔｔｔａａａｃｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａａｃｃａｇｇｇｃａａｃｃｃｃｃｔａａａｃｔｃｃｔｇａｔｃｔａｔｇｃｔｇｃａｔｃｃｇｃｔｔｔａｃａａａｇｔｇｇｃｇｔｃｃｃａｔｃａａｇｇｔｔｃａｇｃｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｔｔｇｇｃａｃａｇａｔｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｇｃｃｔｇａａｇａｔａｔｔｇｃａａｃｔｔａｔｔａｃｔｇｔｃｔａｃａａｇａｔｔａｃａａｔｔｔｃｃｃｔｃｇｇａｃｇｔｔｃｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｇｇａａａｔｃａａａ（配列番号７９）
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｔｔｇｔｇｇｇａｇａｔａｇａｇｔｃａｃｃｃｔｃａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃａａｇｔｃａｇｇｇｃａｔｔａｇａａａｔｇａｔｔｔａａａｃｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａａｃｃａｇｇｇｃａａｃｃｃｃｃｔａａａｃｔｃｃｔｇａｔｃｔａｔｇｃｔｇｃａｔｃｃｇｃｔｔｔａｃａａａｇｔｇｇｃｇｔｃｃｃａｔｃａａｇｇｔｔｃａｇｃｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｔｔｇｇｃａｃａｇａｔｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｇｃｃｔｇａａｇａｔａｔｔｇｃａａｃｔｔａｔｔａｃｔｇｔｃｔａｃａａｇａｔｔａｃａａｔｔｔｃｃｃｔｃｇｇａｃｇｔｔｃｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｇｇａａａｔｃａａａ（配列番号７９）
【0108】
５．Ｆａｂ ＢＵ．５４
Ｈｃ：
ｃｔｃｇａｇｔｇｇｇｇｃｃｃａｇｇａｃｔｇｇｔｇａａｇｇｃｔｔｃａｃａｇａｃｃｃｔｇｔｃｃｃｔｃａｃｃｔｇｃａｃｔｇｔｃｔｃｔｇｇｔｇｇｃｔｃｃａｔｃａｇｃａｇｔａｇｇａａｔｔｔｃｔａｔｔｇｇａｇｔｔｇｇａｔｃｃｇｇｃａｇｃｃｃｇｇｃｇｇｇａａｇｇｇａｃｔｇｇａｇｔｇｇａｔｔｇｇｇｃｇｔａｔｃｔａｔａｃａａｇｔｇｇｇａｇｃａｃｃａａｔｔａｃａａｔｃｃｃｔｃｃｃｔｃａａｇａｇｔｃｇａｇｔｃａｃｔａｔａｔｃａｔｔａｇａｃａｃｇｔｃｃａａｇａｇｔｃａｇｔｔｃｔｃｃｃｔｇａａｇｃｔｇａｇｃｔｃｔｇｔｇａｃｃｇｃｃｇｃａｇａｃａｃｇｇｃｃｇｔｇｔａｔｔａｔｔｇｔｇｃｇａｇａｇｇｇａｃｇｔｔｔｔａｔｔａｔｇａｔａｇｇａｇｔｇｇｔａａｔｇｇｔｃｇａｔｔａｇａｔｃｃｇｃｔｔｇａｃｔａｃｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇａａｃｃｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａ（配列番号８０）
Ｈｃ：
ｃｔｃｇａｇｔｇｇｇｇｃｃｃａｇｇａｃｔｇｇｔｇａａｇｇｃｔｔｃａｃａｇａｃｃｃｔｇｔｃｃｃｔｃａｃｃｔｇｃａｃｔｇｔｃｔｃｔｇｇｔｇｇｃｔｃｃａｔｃａｇｃａｇｔａｇｇａａｔｔｔｃｔａｔｔｇｇａｇｔｔｇｇａｔｃｃｇｇｃａｇｃｃｃｇｇｃｇｇｇａａｇｇｇａｃｔｇｇａｇｔｇｇａｔｔｇｇｇｃｇｔａｔｃｔａｔａｃａａｇｔｇｇｇａｇｃａｃｃａａｔｔａｃａａｔｃｃｃｔｃｃｃｔｃａａｇａｇｔｃｇａｇｔｃａｃｔａｔａｔｃａｔｔａｇａｃａｃｇｔｃｃａａｇａｇｔｃａｇｔｔｃｔｃｃｃｔｇａａｇｃｔｇａｇｃｔｃｔｇｔｇａｃｃｇｃｃｇｃａｇａｃａｃｇｇｃｃｇｔｇｔａｔｔａｔｔｇｔｇｃｇａｇａｇｇｇａｃｇｔｔｔｔａｔｔａｔｇａｔａｇｇａｇｔｇｇｔａａｔｇｇｔｃｇａｔｔａｇａｔｃｃｇｃｔｔｇａｃｔａｃｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇａａｃｃｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａ（配列番号８０）
【0109】
Ｌｃ：
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｃｔｇｔａｇｇａｇａｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｃａｃｔｔｇｃｃａｇｇｃｇａｇｔｃａｇｇａｃａｔｔａｇｃａａｃｔａｔｔｔａａａｔｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａａｃｃａｇｇｇａａａｇｃｃｃｃｔａａｇｃｔｃｃｔｇａｔｃｔａｃｇａｔｇｃａｔｃｃａａｔｔｔｇｇａａａｃａｇｇｇｇｔｃｃｃａｔｃａａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇａａｇｔｇｇａｔｔｔｇｇｇａｃａｃａｔｔｔｔａｃｇｔｔａａｃｃａｔｃａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｇｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａａｃａｔａｔｔａｃｔｇｔｃａａｃａｇｃａｔｇａｔａａｔｃｔｃｇｔｃａｃｔｔｔｃｇｇｃｇｇａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｇｇａｇａｔｃａａａ（配列番号８１）
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【0110】
６．Ｆａｂ ＢＳ．７０
【0111】
Ｈｃ：
ｃｔｃｇａｇｔｃｔｇｇｇｇｇａｇｇｃｇｔｇｇｔｃｃａｇｃｃｔｇｇｇａｃｇｔｃｃｃｔｇａｇａｃｔｃｔｃｃｔｇｔｇｃｇｇｃｃｔｃｔｇｇａｔｔｃａｃｃｔｔｃａａｔａａｔｔｔｔｇｇｇａｔｇｃａｃｔｇｇｇｔｃｃｇｃｃａｇｇｃｔｃｃａｇｇｃａａｇｇｇｔｃｔｇｇａｇｔｇｇｇｔｇｇｃａａｔｇａｔｃｔｃａｔａｔｇａａｇｇａａｇｔａａｇｇａｔｔｔｃｔａｔｇｃａｇａｃｔｃｃｇｔｇａａｇｇｇｃｃｇａｔｔｃａｃｃａｔｃｔｃｃａａａｇａｃｃａｔｇｃｃａｇｇａａｔａｃｇｇｔｃｔａｔｃｔｇｃａａａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｇａｇｃｔｇａｇｇａｃａｃｇｇｃａｇａａｔａｔｔａｃｔｇｔｇｃｇａａａｇａｔａａｇｇｃｔａｔａｔｔｔａｔｇａｔｔｔｃｔｇｃｃｇｇａｃｇｇａｃｔｔｔｇｇａｃｔｔｃｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇａａｃｃｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａｇ（配列番号８２）
ｃｔｃｇａｇｔｃｔｇｇｇｇｇａｇｇｃｇｔｇｇｔｃｃａｇｃｃｔｇｇｇａｃｇｔｃｃｃｔｇａｇａｃｔｃｔｃｃｔｇｔｇｃｇｇｃｃｔｃｔｇｇａｔｔｃａｃｃｔｔｃａａｔａａｔｔｔｔｇｇｇａｔｇｃａｃｔｇｇｇｔｃｃｇｃｃａｇｇｃｔｃｃａｇｇｃａａｇｇｇｔｃｔｇｇａｇｔｇｇｇｔｇｇｃａａｔｇａｔｃｔｃａｔａｔｇａａｇｇａａｇｔａａｇｇａｔｔｔｃｔａｔｇｃａｇａｃｔｃｃｇｔｇａａｇｇｇｃｃｇａｔｔｃａｃｃａｔｃｔｃｃａａａｇａｃｃａｔｇｃｃａｇｇａａｔａｃｇｇｔｃｔａｔｃｔｇｃａａａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｇａｇｃｔｇａｇｇａｃａｃｇｇｃａｇａａｔａｔｔａｃｔｇｔｇｃｇａａａｇａｔａａｇｇｃｔａｔａｔｔｔａｔｇａｔｔｔｃｔｇｃｃｇｇａｃｇｇａｃｔｔｔｇｇａｃｔｔｃｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇａａｃｃｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａｇ（配列番号８２）
【0112】
Ｌｃ：
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｃｔｇｔａｇｇａｇａｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｔａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃａａｇｔｃａｇａａｃａｔｔｇｇｃａｔｃｔａｔｔｔｇａａｔｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａａｃｃｔｇｇｇａａａｇｃｃｃｃａａａｇｃｔｃｃｔｇａｔｃｔａｔｇｃｔｇｃａｔｃｃａｇｔｔｔｇｃａａａａｔｇｇｇｇｔｃｃｃａｔｃｇａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇａｔｃｔｇｇｇａｃａｇａｃｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｃｔｃｔｇｃａａｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａａｃｔｔａｃｔｇｇｔｇｔｃａａｃａｇｇｇｔｔａｃａｇｔａｃｃｃｃａｃｔｃａｃｔｔｔｃｇｇｃｇｇａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔａｇａｇａｔｃａｇａｃ（配列番号８３）
ｇａｇｃｔｃｇｔｇａｔｇａｃａｃａｇｔｃｔｃｃａｔｃｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｃｔｇｔａｇｇａｇａｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｔａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃａａｇｔｃａｇａａｃａｔｔｇｇｃａｔｃｔａｔｔｔｇａａｔｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａａｃｃｔｇｇｇａａａｇｃｃｃｃａａａｇｃｔｃｃｔｇａｔｃｔａｔｇｃｔｇｃａｔｃｃａｇｔｔｔｇｃａａａａｔｇｇｇｇｔｃｃｃａｔｃｇａｇｇｔｔｃａｇｔｇｇｃａｇｔｇｇａｔｃｔｇｇｇａｃａｇａｃｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｃｔｃｔｇｃａａｃｃｔｇａａｇａｔｔｔｔｇｃａａｃｔｔａｃｔｇｇｔｇｔｃａａｃａｇｇｇｔｔａｃａｇｔａｃｃｃｃａｃｔｃａｃｔｔｔｃｇｇｃｇｇａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔａｇａｇａｔｃａｇａｃ（配列番号８３）
【0113】
図２は、フレームワーク領域ＦＲ１～ＦＲ４及び相補性決定領域ＣＤＲ１～ＣＤＲ３の両方を特定する、各クローンにおける重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の全アミノ酸及びヌクレオチド配列を示す。
【0114】
（実施例２）：本発明の中和ｍＡｂの結合活性に関する研究
Ｆａｂの結合評価
ａ）酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）
ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、Ｆａｂの結合効率を試験した。
Ｆａｂの結合評価
ａ）酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）
ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、Ｆａｂの結合効率を試験した。
【0115】
１００ｎｇの組換えスパイクタンパク質Ｄ６１４Ｇ（パヴィア大学）、Ｂ．１．１．７（４０５８９－Ｖ０８Ｂ６、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ社）、Ｐ．１（４０５８９－Ｖ０８Ｂ１０、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ社）、又はＢ．１．１３５（４０５８９－Ｖ０８Ｂ７、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ社）をＥＬＩＳＡプレート（ＣＬＳ３６９０－１００ＥＡ、Ｍｅｒｃｋ社）にコーティングし、４℃で一晩インキュベートした。ＰＢＳ中の１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社）溶液を非特異的反応性対照として添加した。翌日、プレートをＰＢＳ中の１％ＢＳＡ溶液でブロッキングしてウェルへの非特異的結合を防止し、異なる希釈のＦａｂを抗原と共に３７℃で１時間インキュベートした。ＰＢＳ溶液中の０．１％Ｔｗｅｅｎ２０（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社）で洗浄した後、ヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｆａｂ特異的）－ペルオキシダーゼ抗体（Ａ０２９３、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社）、コーティング対照として抗Ｈｉｓ６－ペルオキシダーゼ抗体（１１ ２４１６００１、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社）を有するＨｉｓ標識タンパク質、及びＰｉｅｒｃｅ ＴＭＢ基質キット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）を使用して、Ｆａｂを検出した。Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ ＧＯ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）を使用して、ＯＤ４５０を測定した。
【0116】
結果
・Ｆａｂ＃５は、アルファ、ガンマ及びオミクロンのＳタンパク質に結合する
・ＩｇＧ＃５は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、オミクロン、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１のＳタンパク質に結合する
・Ｆａｂ ＢＵ．２は、アルファのＳタンパク質に結合する
・Ｆａｂ ＢＵ．７は、アルファ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１のＳタンパク質と結合するが、ガンマ、オミクロンはあまり結合しない
・ＩｇＧ ＢＵ．７は、オミクロンのＳタンパク質にほとんど結合しない
・Ｆａｂ ＢＵ．１１は、アルファのＳタンパク質に結合する
・ＩｇＧ ＢＵ．５４は、アルファ、デルタ、オミクロン、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１のＳタンパク質に結合する
・Ｆａｂ ＢＳ．７０は、アルファ、デルタ、オミクロン、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１のＳタンパク質に結合する
・Ｆａｂ＃５は、アルファ、ガンマ及びオミクロンのＳタンパク質に結合する
・ＩｇＧ＃５は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、オミクロン、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１のＳタンパク質に結合する
・Ｆａｂ ＢＵ．２は、アルファのＳタンパク質に結合する
・Ｆａｂ ＢＵ．７は、アルファ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１のＳタンパク質と結合するが、ガンマ、オミクロンはあまり結合しない
・ＩｇＧ ＢＵ．７は、オミクロンのＳタンパク質にほとんど結合しない
・Ｆａｂ ＢＵ．１１は、アルファのＳタンパク質に結合する
・ＩｇＧ ＢＵ．５４は、アルファ、デルタ、オミクロン、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１のＳタンパク質に結合する
・Ｆａｂ ＢＳ．７０は、アルファ、デルタ、オミクロン、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１のＳタンパク質に結合する
【0117】
結果を図３に示す。データは、Ｆａｂ＃５が低濃度で使用された場合でもＢ．１．１．７組換えタンパク質を認識することができるが、高濃度で使用された場合にはＰ．１スパイクも認識することができることを示した。ＩｇＧ＃５は、試験した全てのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２変異株（Ｄ６１４Ｇ、Ｂ．１．１．７、Ｂ．１．３５１、Ｐ．１、Ｂ．１．１．５２９、Ｂ．１．６１７．１）の組換えスパイクによく結合する。ＢＵ．７は、Ｐ．１タンパク質に結合し、Ｂ．１．１．７スパイクタンパク質にさらによく結合する。そのＩｇＧフォーマットは、Ｂ．１．６１７．１及びＢ．１．１．５２９タンパク質に対しても弱い結合活性を示す。さらに、Ｂ．１．１．７スパイクは、ＢＵ．１１及びＢＵ．２ Ｆａｂによってもよく認識されており、ＩｇＧ ＢＵ．５４は、Ｂ．１１．７、Ｂ．１．６１７．１、Ｐ．１、Ｂ．１．１．５２９及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１組換えタンパク質をよく認識する。Ｆａｂ ＢＳ．７０は、低濃度のＢ．１．１．７、Ｂ．１．６１７．１、Ｂ．１．１．５２９タンパク質にも結合する。最後に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１スパイクタンパク質は、Ｆａｂ及びＩｇＧフォーマットの両方で、ＩｇＧ＃５、ＢＵ．７、ＩｇＧ ＢＵ．５４、及びＦａｂ ＢＳ．７０によって非常によく認識されている。
【0118】
ｂ）免疫蛍光分析
ウイルス及び細胞
Ｖｅｒｏ Ｅ６（Ｖｅｒｏ Ｃ１００８、クローンＥ６－ＣＲＬ－１５８６、ＡＴＣＣ社）細胞を、非必須アミノ酸（ＮＥＡＡ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｐ／Ｓ）、Ｈｅｐｅｓ緩衝液、及び１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を補充したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で培養した。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の４つの臨床分離株を得て、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞で増殖させた：Ｄ６１４Ｇ（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＵｎｉＳＲ１／２０２０、ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿４１３４８９）、Ｂ．１．１．７（アルファ）（１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ７／２０２１、ＧＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１９２４８８０）、Ｃ．３６＿３（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎＩＮＳＵ／２０２１、ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１５０９９２３）、Ｂ．１．３５１（ベータ）（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ６／２０２１、ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１５９９１８０）、Ｐ．１（ガンマ）（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ８／２０２１、ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１９２５３２３）デルタ（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ１２／２０２１、ＧＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿４１９８５０５）、オミクロンＢＡ．１（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ１４／２０２１、ＧＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１２１８８０６１）、オミクロンＢＡ．２（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ１５／２０２２．ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１３２８５４４５）、オミクロンＢＡ．４（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ１７／２０２２．ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１３８７８３２８）、及びオミクロンＢＡ．５．２（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ１６／２０２２．ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１３８７８３２６）。
ウイルス及び細胞
Ｖｅｒｏ Ｅ６（Ｖｅｒｏ Ｃ１００８、クローンＥ６－ＣＲＬ－１５８６、ＡＴＣＣ社）細胞を、非必須アミノ酸（ＮＥＡＡ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｐ／Ｓ）、Ｈｅｐｅｓ緩衝液、及び１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を補充したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で培養した。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の４つの臨床分離株を得て、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞で増殖させた：Ｄ６１４Ｇ（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＵｎｉＳＲ１／２０２０、ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿４１３４８９）、Ｂ．１．１．７（アルファ）（１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ７／２０２１、ＧＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１９２４８８０）、Ｃ．３６＿３（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎＩＮＳＵ／２０２１、ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１５０９９２３）、Ｂ．１．３５１（ベータ）（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ６／２０２１、ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１５９９１８０）、Ｐ．１（ガンマ）（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ８／２０２１、ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１９２５３２３）デルタ（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ１２／２０２１、ＧＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿４１９８５０５）、オミクロンＢＡ．１（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ１４／２０２１、ＧＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１２１８８０６１）、オミクロンＢＡ．２（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ１５／２０２２．ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１３２８５４４５）、オミクロンＢＡ．４（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ１７／２０２２．ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１３８７８３２８）、及びオミクロンＢＡ．５．２（ｈＣｏＶ－１９／イタリア／ＬＯＭ－ＵｎｉＳＲ１６／２０２２．ＧＩＳＡＩＤアクセッションＩＤ：ＥＰＩ＿ＩＳＬ＿１３８７８３２６）。
【0119】
ウイルス滴定
プラーク減少アッセイ（ＰＲＡ、ＰＦＵ／ｍｌ）及びエンドポイント希釈アッセイ（ＥＤＡ、ＴＣＩＤ５０／ｍｌ）の両方を使用してウイルスストックを滴定した。ＰＲＡにおいて、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞のコンフルエントな単層を、ウイルスストックの８つの１０倍希釈物に感染させた。３７℃で１時間吸着させた後、セルフリーウイルスを除去した。次いで、細胞を、２％ＦＢＳ及び０．５％アガロースを含有するＤＭＥＭ中で４８時間インキュベートした。細胞を固定し、染色し、ウイルスプラークを計数した。ＥＤＡでは、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を９６ウェルプレートに播種し、９５％の細胞占有面積率で、ウイルスストックのベース１０希釈物で感染させた。３７℃で１時間吸着させた後、セルフリーウイルスを除去し、細胞をＰＢＳで１回洗浄し、完全培地を細胞に添加した。４８時間後、細胞を観察して細胞変性効果（ＣＰＥ）の存在を評価した。次いで、ＴＣＩＤ５０／ｍｌのウイルスストックを、Ｒｅｅｄ－Ｍｕｅｎｃｈ式を適用することによって決定した。
プラーク減少アッセイ（ＰＲＡ、ＰＦＵ／ｍｌ）及びエンドポイント希釈アッセイ（ＥＤＡ、ＴＣＩＤ５０／ｍｌ）の両方を使用してウイルスストックを滴定した。ＰＲＡにおいて、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞のコンフルエントな単層を、ウイルスストックの８つの１０倍希釈物に感染させた。３７℃で１時間吸着させた後、セルフリーウイルスを除去した。次いで、細胞を、２％ＦＢＳ及び０．５％アガロースを含有するＤＭＥＭ中で４８時間インキュベートした。細胞を固定し、染色し、ウイルスプラークを計数した。ＥＤＡでは、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を９６ウェルプレートに播種し、９５％の細胞占有面積率で、ウイルスストックのベース１０希釈物で感染させた。３７℃で１時間吸着させた後、セルフリーウイルスを除去し、細胞をＰＢＳで１回洗浄し、完全培地を細胞に添加した。４８時間後、細胞を観察して細胞変性効果（ＣＰＥ）の存在を評価した。次いで、ＴＣＩＤ５０／ｍｌのウイルスストックを、Ｒｅｅｄ－Ｍｕｅｎｃｈ式を適用することによって決定した。
【0120】
免疫蛍光アッセイ
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を９６ウェルプレートに播種し、各ウェルについて９５％の細胞占有面積率で実験を行う２４時間前に、０．０１の感染多重度（ＭＯＩ）でＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に３７℃で１時間感染させた。次いで、細胞をＰＢＳで１回洗浄し、セルフリーウイルス粒子及びウイルス含有混合物を除去し、対照を２％ＦＢＳを補充した完全ＤＭＥＭと交換した。プレートをＣＯ２の存在下、３７℃で７２時間インキュベートした。次いで、ＰＢＳで１回洗浄し、ＭｅＯＨ：Ａｃ（１：１）で１５分間固定し、－２０℃で保存した。細胞をＰＢＳ（１回洗浄）で２回すすいだ後、選択されたＦａｂ（１：２００希釈）を一次抗体として細胞に適用した。抗スパイク抗体（０１５０－Ｒ００７、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ社）を対照として添加した。ＰＢＳで１回洗浄した後、ヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）交差吸着二次抗体Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４８８（Ａ－１１００８、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｃ社）を用いてＦａｂを検出した。Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３２５８（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社）を核染色に使用した。
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を９６ウェルプレートに播種し、各ウェルについて９５％の細胞占有面積率で実験を行う２４時間前に、０．０１の感染多重度（ＭＯＩ）でＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に３７℃で１時間感染させた。次いで、細胞をＰＢＳで１回洗浄し、セルフリーウイルス粒子及びウイルス含有混合物を除去し、対照を２％ＦＢＳを補充した完全ＤＭＥＭと交換した。プレートをＣＯ２の存在下、３７℃で７２時間インキュベートした。次いで、ＰＢＳで１回洗浄し、ＭｅＯＨ：Ａｃ（１：１）で１５分間固定し、－２０℃で保存した。細胞をＰＢＳ（１回洗浄）で２回すすいだ後、選択されたＦａｂ（１：２００希釈）を一次抗体として細胞に適用した。抗スパイク抗体（０１５０－Ｒ００７、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ社）を対照として添加した。ＰＢＳで１回洗浄した後、ヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）交差吸着二次抗体Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４８８（Ａ－１１００８、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｃ社）を用いてＦａｂを検出した。Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３２５８（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社）を核染色に使用した。
【0121】
結果
選択された全てのＦａｂが感染細胞を検出し、試験したＶＯＣ間でわずかな差があった（図４）。
選択された全てのＦａｂが感染細胞を検出し、試験したＶＯＣ間でわずかな差があった（図４）。
【0122】
・Ｆａｂ＃５は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、オミクロン（ＢＡ．１）、及びオミクロン（ＢＡ．２）に感染した細胞に結合する
・ＩｇＧ＃５は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、オミクロン（ＢＡ．１）、オミクロン（ＢＡ．２）、オミクロン（ＢＡ．５）に感染した細胞に結合するが、オミクロン（ＢＡ．４）にはあまり結合しない
・Ｆａｂ ＢＵ．２は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ガンマ、デルタ、オミクロン（ＢＡ．２）に感染した細胞に結合するが、ベータにはあまり結合せず、オミクロン（ＢＡ．１）には結合しない
・Ｆａｂ ＢＵ．７は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、オミクロン（ＢＡ．１）、及びオミクロン（ＢＡ．２）に感染した細胞に結合する
・ＩｇＧ ＢＵ．７は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、オミクロン（ＢＡ．１）、オミクロン（ＢＡ．２）、オミクロン（ＢＡ．５）、及びオミクロン（ＢＡ．４）に感染した細胞に結合する
・Ｆａｂ ＢＵ．１１は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ガンマ、デルタ、ベータに感染した細胞に結合するが、オミクロン（ＢＡ．２）にはあまり結合せず、オミクロン（ＢＡ．１）には結合しない
・ＩｇＧ ＢＵ．５４は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、オミクロン（ＢＡ．１）、オミクロン（ＢＡ．２）、オミクロン（ＢＡ．５）に感染した細胞に結合するが、オミクロン（ＢＡ．４）にはあまり結合しない
・Ｆａｂ ＢＳ．７０は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、オミクロン（ＢＡ．１）、及びオミクロン（ＢＡ．２）、（ＢＡ．４）に感染した細胞に結合するが、（ＢＡ．５）にはあまり結合しない
・ＩｇＧ＃５は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、オミクロン（ＢＡ．１）、オミクロン（ＢＡ．２）、オミクロン（ＢＡ．５）に感染した細胞に結合するが、オミクロン（ＢＡ．４）にはあまり結合しない
・Ｆａｂ ＢＵ．２は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ガンマ、デルタ、オミクロン（ＢＡ．２）に感染した細胞に結合するが、ベータにはあまり結合せず、オミクロン（ＢＡ．１）には結合しない
・Ｆａｂ ＢＵ．７は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、オミクロン（ＢＡ．１）、及びオミクロン（ＢＡ．２）に感染した細胞に結合する
・ＩｇＧ ＢＵ．７は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、オミクロン（ＢＡ．１）、オミクロン（ＢＡ．２）、オミクロン（ＢＡ．５）、及びオミクロン（ＢＡ．４）に感染した細胞に結合する
・Ｆａｂ ＢＵ．１１は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ガンマ、デルタ、ベータに感染した細胞に結合するが、オミクロン（ＢＡ．２）にはあまり結合せず、オミクロン（ＢＡ．１）には結合しない
・ＩｇＧ ＢＵ．５４は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、オミクロン（ＢＡ．１）、オミクロン（ＢＡ．２）、オミクロン（ＢＡ．５）に感染した細胞に結合するが、オミクロン（ＢＡ．４）にはあまり結合しない
・Ｆａｂ ＢＳ．７０は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、オミクロン（ＢＡ．１）、及びオミクロン（ＢＡ．２）、（ＢＡ．４）に感染した細胞に結合するが、（ＢＡ．５）にはあまり結合しない
【0123】
Ｂ．１．１．７変異株は、Ｆａｂ＃５、ＢＵ．２、ＢＵ．１１及びＩｇＧ ＢＵ．５４によってより良好に認識されるが、ＢＳ．７０及びＢＵ．７ Ｆａｂによってあまり認識されない。しかしながら、ＢＵ．７のＩｇＧフォーマットは、この変異株に対して改善された結合活性を示す。Ｂ．１．１３５変異株は、Ｆａｂ及びＩｇＧフォーマットの両方、ＩｇＧ ＢＵ．７、ＩｇＧ ＢＵ．５４、及びＦａｂ ＢＳ．７０のクローン＃５によってのみよく認識されるが、他のＦａｂを使用するとわずかな緑色のシグナルのみが観察される。Ｐ．１変異株への結合は、試験した全てのＦａｂでよく観察されるが、Ｆａｂ＃５シグナルの強度が最も低かった。デルタ変異株は、試験した全てのＦａｂ及びＩｇＧによってよく認識されるが、オミクロン（ＢＡ．１）は、ＢＵ．２及びＢＵ．１１ Ｆａｂによってのみでは認識されない。最後に、Ｆａｂ ＢＵ．１１以外の全てによって、ＢＡ．１よりも弱いシグナルではあるが、オミクロン（ＢＡ．２）が認識される。Ｆａｂ ＢＳ．７０は、試験した全ての変異株に対して最も強い結合シグナルを示すクローンであり、ＩｇＧ＃５、ＩｇＧ ＢＵ．７、ＩｇＧ ＢＵ．５４がこれに続く。オミクロンＢＡ．４及びＢＡ．５の両方は、感染細胞上のＩｇＧＢＵ．７によってよく認識される。ＩｇＧ＃５及びＩｇＧ ＢＵ．５４は、オミクロンＢＡ．５サブ系統を強く認識し、より低い結合シグナルでＢＡ．４を認識する。
【0124】
（実施例３）：中和活性評価
微量中和実験
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を、各ウェルについて９５％の細胞占有面積率で実験を行う２４時間前に９６ウェルプレートに播種した。選択されたクローンの２倍段階希釈物を、３７℃で１時間、０．０１のＭＯＩでＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２と共にインキュベートした。細胞をＰＢＳで１回洗浄した後、ウイルス－血清混合物及び陽性感染対照をＶｅｒｏ Ｅ６単層に適用し、ウイルス吸着を３７℃で１時間実施した。次いで、細胞をＰＢＳで１回洗浄し、セルフリーウイルス粒子及びウイルス含有混合物を除去し、対照を２％ＦＢＳを補充した完全ＤＭＥＭと交換した。プレートをＣＯ２の存在下、３７℃で７２時間インキュベートした。実験は３回行った。ウイルス－血清混合物の存在下で検出された細胞変性効果（ＣＰＥ）の存在を陽性感染対照と比較することによって、中和活性を評価した。
微量中和実験
Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を、各ウェルについて９５％の細胞占有面積率で実験を行う２４時間前に９６ウェルプレートに播種した。選択されたクローンの２倍段階希釈物を、３７℃で１時間、０．０１のＭＯＩでＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２と共にインキュベートした。細胞をＰＢＳで１回洗浄した後、ウイルス－血清混合物及び陽性感染対照をＶｅｒｏ Ｅ６単層に適用し、ウイルス吸着を３７℃で１時間実施した。次いで、細胞をＰＢＳで１回洗浄し、セルフリーウイルス粒子及びウイルス含有混合物を除去し、対照を２％ＦＢＳを補充した完全ＤＭＥＭと交換した。プレートをＣＯ２の存在下、３７℃で７２時間インキュベートした。実験は３回行った。ウイルス－血清混合物の存在下で検出された細胞変性効果（ＣＰＥ）の存在を陽性感染対照と比較することによって、中和活性を評価した。
【0125】
結果
クローン＃５は、Ｆａｂフォーマット及びＩｇＧ１の両方として、Ｄ６１４Ｇ変異株に対して重要な中和活性を示した。しかしながら、ＩｇＧ１は、Ｂ．１．１３５変異株を除いて、Ｆａｂ断片と比較して、他の試験したＶＯＣに対して増強された活性を示した（図５Ａ）。全ての試験したＢＵクローンは効率的にＤ６１４Ｇを阻害することができるが、ＢＵ．７のみが全ての試験したＶＯＣに対してその活性を保持する。Ｆａｂ ＢＵ．２は他の２つよりも良好にＢ．１．１．７変異株を中和することができるが、ＢＵ．１１はＰ．１に対して有意な活性を示した（図５Ｂ）。
クローン＃５は、Ｆａｂフォーマット及びＩｇＧ１の両方として、Ｄ６１４Ｇ変異株に対して重要な中和活性を示した。しかしながら、ＩｇＧ１は、Ｂ．１．１３５変異株を除いて、Ｆａｂ断片と比較して、他の試験したＶＯＣに対して増強された活性を示した（図５Ａ）。全ての試験したＢＵクローンは効率的にＤ６１４Ｇを阻害することができるが、ＢＵ．７のみが全ての試験したＶＯＣに対してその活性を保持する。Ｆａｂ ＢＵ．２は他の２つよりも良好にＢ．１．１．７変異株を中和することができるが、ＢＵ．１１はＰ．１に対して有意な活性を示した（図５Ｂ）。
【0126】
詳細には、
・Ｆａｂ＃５はＤ６１４Ｇを中和し、より少ない程度でアルファ及びガンマを中和する
・ＩｇＧ＃５はＤ６１４Ｇ、アルファ、ガンマを中和し、より少なくベータを中和する
・Ｆａｂ ＢＵ．２はＤ６１４Ｇ、アルファ、デルタを中和し、より少なくガンマ及びベータを中和する
・Ｆａｂ ＢＵ．７は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ガンマ、ベータ、デルタを中和し、より少なくオミクロンを中和する
・ＩｇＧ ＢＵ．７は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ガンマ、ベータ、デルタ、オミクロン、及びオミクロン（ＢＡ．２）を中和する
・Ｆａｂ ＢＵ．１１はＤ６１４Ｇを中和し、より少なくアルファ及びガンマを中和する
・ＩｇＧ ＢＵ．５４は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ガンマ、ベータ、デルタ、オミクロン、及びオミクロン（ＢＡ．２）を中和する
・Ｆａｂ ＢＳ．７０はガンマを中和し、より少なくオミクロンを中和する
・Ｆａｂ＃５はＤ６１４Ｇを中和し、より少ない程度でアルファ及びガンマを中和する
・ＩｇＧ＃５はＤ６１４Ｇ、アルファ、ガンマを中和し、より少なくベータを中和する
・Ｆａｂ ＢＵ．２はＤ６１４Ｇ、アルファ、デルタを中和し、より少なくガンマ及びベータを中和する
・Ｆａｂ ＢＵ．７は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ガンマ、ベータ、デルタを中和し、より少なくオミクロンを中和する
・ＩｇＧ ＢＵ．７は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ガンマ、ベータ、デルタ、オミクロン、及びオミクロン（ＢＡ．２）を中和する
・Ｆａｂ ＢＵ．１１はＤ６１４Ｇを中和し、より少なくアルファ及びガンマを中和する
・ＩｇＧ ＢＵ．５４は、Ｄ６１４Ｇ、アルファ、ガンマ、ベータ、デルタ、オミクロン、及びオミクロン（ＢＡ．２）を中和する
・Ｆａｂ ＢＳ．７０はガンマを中和し、より少なくオミクロンを中和する
【0127】
以下の表２－３－４は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の異なるＶＯＣに対する、選択されたクローンＦａｂ＃５、ＩｇＧ＃５、Ｆａｂ ＢＵ．２、Ｆａｂ ＢＵ．７、Ｆａｂ ＢＵ．１１、Ｆａｂ ＢＳ．７０、ＩｇＧ ＢＵ．７、ＩｇＧ ＢＵ．５４によって示されるＩＣ５０μｇ／ｍｌとして表される中和活性を要約している。
【0128】
【表2】
【表3】
【表4】
【0129】
（実施例４）：疑似ウイルスを使用する中和アッセイ
方法
ＳＥＲＳ－ＣｏＶ－２－疑似型粒子を作製し、滴定した。
方法
ＳＥＲＳ－ＣｏＶ－２－疑似型粒子を作製し、滴定した。
【0130】
簡潔に言えば、ＨＥＫ２９３ Ｔを、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ オミクロンのいずれか由来のＳプラスミド、ＨＩＶ ｇａｇ－ｐｏｌ及びＬｕｃ－レポータープラスミドで同時トランスフェクトした。
【0131】
トランスフェクションの７２時間後に上清を回収し、清澄化し、濾過した。ウイルス力価を、ＨＥＫ２９３Ｔ ＡＣＥ２－ＴＭＰＲＳＳ２細胞上で、２倍段階希釈物の疑似ウイルスストックを用いて評価した。４８時間後（５％ＣＯ２の存在下、３７℃）、ルシフェラーゼ発現を定量化した。力価をＲＬＵ／ｍｌとして計算した。
【0132】
代理中和アッセイ
１ウェル当たり１０４個のＨＥＫ ２９３Ｔ－ＡＣＥ２－ＴＭＰＲＳＳ２細胞の中和混合物を添加する前に、疑似ウイルス（１０６ ＲＬＵ）をモノクローナル抗体のエンドポイント２倍段階希釈物と共に１時間インキュベートする（５％ＣＯ２の存在下で３７℃）ことによって、中和アッセイを行った。感染の７２時間後（３７℃）、ルシフェラーゼ活性を定量化した。
１ウェル当たり１０４個のＨＥＫ ２９３Ｔ－ＡＣＥ２－ＴＭＰＲＳＳ２細胞の中和混合物を添加する前に、疑似ウイルス（１０６ ＲＬＵ）をモノクローナル抗体のエンドポイント２倍段階希釈物と共に１時間インキュベートする（５％ＣＯ２の存在下で３７℃）ことによって、中和アッセイを行った。感染の７２時間後（３７℃）、ルシフェラーゼ活性を定量化した。
【0133】
結果
この代替戦略による中和アッセイは、本発明のモノクローナル抗体ＩｇＧ ＢＵ．７及びＩｇＧ ＢＵ．５４がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１及びＳＡＲＳ ＣｏＶ－２のオミクロン変異株を中和することを示す。図６は、疑似ウイルスを使用した中和アッセイの結果を示す。
この代替戦略による中和アッセイは、本発明のモノクローナル抗体ＩｇＧ ＢＵ．７及びＩｇＧ ＢＵ．５４がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１及びＳＡＲＳ ＣｏＶ－２のオミクロン変異株を中和することを示す。図６は、疑似ウイルスを使用した中和アッセイの結果を示す。
【0134】
以下の表５は、選択されたクローンＩｇＧ ＢＵ．７及びＩｇＧ ＢＵ．５４によって示されるＩＣ５０μｇ／ｍｌとして表される、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１及びＳＡＲＳ ＣｏＶ－２のオミクロン変異株に対する中和活性をまとめたものである。
【0135】
【表5】
【0136】
参考文献
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８．Ａｌｓｏｕｓｓｉ ＷＢ、Ｔｕｒｎｅｒ ＪＳ、Ｃａｓｅ ＪＢ、Ｚｈａｏ Ｈ、Ｓｃｈｍｉｔｚ ＡＪ、Ｚｈｏｕ ＪＱら、Ａ Ｐｏｔｅｎｔｌｙ Ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｔｅｃｔｓ Ｍｉｃｅ ａｇａｉｎｓｔ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ。Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ。２０２０年８月１５日；２０５（４）：９１５－２２。ｄｏｉ：１０．４０４９／ｊｉｍｍｕｎｏｌ．２０００５８３
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１０．Ｔｚｏｕ ＰＬ、Ｔａｏ Ｋ、Ｎｏｕｈｉｎ Ｊ、Ｒｈｅｅ Ｓ－Ｙ、Ｈｕ ＢＤ、Ｐａｉ Ｓら、Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄａｔａｂａｓｅ（ＣｏＶ－ＲＤＢ）：Ａｎ Ｏｎｌｉｎｅ Ｄａｔａｂａｓｅ Ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｔｏ Ｆａｃｉｌｉｔａｔｅ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｃａｎｄｉｄａｔｅ Ａｎｔｉ－Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ。Ｖｉｒｕｓｅｓ。２０２０年９月；１２（９）：１００６。ｄｏｉ：１０．３３９０／ｖ１２０９１００６
１１．Ｋｕｍａｒ Ｓら（２０２１）、Ｃｕｒｒｅｎｔ ｓｔａｔｕｓ ｏｆ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２。ＰＬｏＳ Ｐａｔｈｏｇ １７（９）：ｅ１００９８８５。ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｐａｔ．１００９８８５
１２．Ｆｒａｍｐｔｏｎ Ｄ、Ｒａｍｐｌｉｎｇ Ｔ、Ｃｒｏｓｓ Ａ、Ｂａｉｌｅｙ Ｈ、Ｈｅａｎｅｙ Ｊ、Ｂｙｏｔｔ Ｍら、Ｇｅｎｏｍｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅ ｅｍｅｒｇｅｎｔ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ Ｂ．１．１．７ ｌｉｎｅａｇｅ ｉｎ Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫ：ａ ｗｈｏｌｅ－ｇｅｎｏｍｅ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ａｎｄ ｈｏｓｐｉｔａｌ－ｂａｓｅｄ ｃｏｈｏｒｔ ｓｔｕｄｙ。Ｌａｎｃｅｔ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ．２０２１年９月；２１（９）：１２４６－１２５６。ｄｏｉ：１０．１０１６／Ｓ１４７３－３０９９（２１）００１７０－５。
１３．Ｔｅｇａｌｌｙ Ｈ、Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ Ｅ、Ｇｉｏｖａｎｅｔｔｉ Ｍ、Ｉｒａｎｚａｄｅｈ Ａ、Ｆｏｎｓｅｃａ Ｖ、Ｇｉａｎｄｈａｒｉ Ｊら、Ｅｍｅｒｇｅｎｃｅ ａｎｄ ｒａｐｉｄ ｓｐｒｅａｄ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｓｅｖｅｒｅ ａｃｕｔｅ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ－ｒｅｌａｔｅｄ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）ｌｉｎｅａｇｅ ｗｉｔｈ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｐｉｋｅ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｓｏｕｔｈ Ａｆｒｉｃａ。ｍｅｄＲｘｉｖ；ｄｏｉ：１０．１１０１／２０２０．１２．２１．２０２４８６４０
１４．Ｖｏｌｏｃｈ ＣＭ、ｄａ Ｓｉｌｖａ ＦＲ、ｄｅ Ａｌｍｅｉｄａ ＬＧＰ、Ｃａｒｄｏｓｏ ＣＣ、Ｂｒｕｓｔｏｌｉｎｉ ＯＪ、Ｇｅｒｂｅｒ ＡＬら、Ｇｅｎｏｍｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｌｉｎｅａｇｅ ｆｒｏｍ Ｒｉｏ ｄｅ Ｊａｎｅｉｒｏ，Ｂｒａｚｉｌ。Ｊ Ｖｉｒｏｌ。２０２１年３月１日。ｄｏｉ：１０．１１２８／ＪＶＩ．００１１９－２１
１５．Ｓｉｎｇｈ Ｊ、Ｒａｈｍａｎ ＳＡ、Ｅｈｔｅｓｈａｍ ＮＺ、Ｈｉｒａ Ｓ、Ｈａｓｎａｉｎ ＳＥ。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｖａｒｉａｎｔｓ ｏｆ ｃｏｎｃｅｒｎ ａｒｅ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｉｎ Ｉｎｄｉａ．Ｎａｔ Ｍｅｄ。２０２１年７月；２７（７）：１１３１－３。ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓ４１５９１－０２１－０１３９７－４
１６．Ｗａｎｇ Ｌ、Ｃｈｅｎｇ Ｇ。Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｖａｒｉａｎｔ Ｏｍｉｃｒｏｎ ｉｎ Ｓｏｕｔｈ Ａｆｒｉｃａ。Ｊ Ｍｅｄ Ｖｉｒｏｌ。２０２２年４月；９４（４）：１７２８－１７３３。ｄｏｉ：１０．１００２／ｊｍｖ．２７５１６。Ｅｐｕｂ ２０２１年１２月２７日。ＰＭＩＤ：３４８９７７５２。
１７．Ｗｅｓｔ ＡＰ、Ｗｅｒｔｈｅｉｍ ＪＯ、Ｗａｎｇ ＪＣ、Ｖａｓｙｌｙｅｖａ ＴＩ、Ｈａｖｅｎｓ ＪＬ、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ ＭＡら、Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ．１．５２６ ｉｎ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ。ｂｉｏＲｘｉｖ。ｄｏｉ：１０．１１０１／２０２１．０２．１４．４３１０４３
１８．Ｗｉｎｋ ＰＬ、Ｖｏｌｐａｔｏ ＦＣＺ、Ｍｏｎｔｅｉｒｏ ＦＬ、Ｗｉｌｌｉｇ ＪＢ、Ｚａｖａｓｃｋｉ ＡＰ、Ｂａｒｔｈ ＡＬら、Ｆｉｒｓｔ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ Ｌａｍｂｄａ（Ｃ．３７）ｖａｒｉａｎｔ ｉｎ Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｒａｚｉｌ。ｍｅｄＲｘｉｖ。ｄｏｉ：１０．１１０１／２０２１．０６．２１．２１２５９２４１
１９．Ｙｏｕｎｅｓ Ａ、Ｂａｒｔｌｅｔｔ ＮＬ、Ｌｅｏｎａｒｄ ＪＰら、Ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ（ＳＧＮ－３５）ｆｏｒ ｒｅｌａｐｓｅｄ ＣＤ３０－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｌｙｍｐｈｏｍａ。Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１０；３６３：１８１２－２１。Ｄｏｉ：１０．１０５６／ＮＥＪＭｏａ１００２９６５
２０．Ｐｅｔｅｒｓｄｏｒｆ ＳＨ、Ｋｏｐｅｃｋｙ ＫＪ、Ｓｌｏｖａｋ Ｍ、Ｗｉｌｌｍａｎ Ｃ、Ｎｅｖｉｌｌ Ｔ、Ｂｒａｎｄｗｅｉｎ Ｊ、Ｌａｒｓｏｎ ＲＡ、Ｅｒｂａ ＨＰ、Ｓｔｉｆｆ ＰＪ、Ｓｔｕａｒｔ ＲＫ、Ｗａｌｔｅｒ ＲＢ、Ｔａｌｌｍａｎ ＭＳ、Ｓｔｅｎｋｅ Ｌ、Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＦＲ。Ａ ｐｈａｓｅ ３ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ ｄｕｒｉｎｇ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｏｓｔｃｏｎｓｏｌｉｄａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｙｏｕｎｇｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ。Ｂｌｏｏｄ。２０１３年６月１３日；１２１（２４）：４８５４－６０。ｄｏｉ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ－２０１３－０１－４６６７０６。
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１４．Ｖｏｌｏｃｈ ＣＭ、ｄａ Ｓｉｌｖａ ＦＲ、ｄｅ Ａｌｍｅｉｄａ ＬＧＰ、Ｃａｒｄｏｓｏ ＣＣ、Ｂｒｕｓｔｏｌｉｎｉ ＯＪ、Ｇｅｒｂｅｒ ＡＬら、Ｇｅｎｏｍｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｌｉｎｅａｇｅ ｆｒｏｍ Ｒｉｏ ｄｅ Ｊａｎｅｉｒｏ，Ｂｒａｚｉｌ。Ｊ Ｖｉｒｏｌ。２０２１年３月１日。ｄｏｉ：１０．１１２８／ＪＶＩ．００１１９－２１
１５．Ｓｉｎｇｈ Ｊ、Ｒａｈｍａｎ ＳＡ、Ｅｈｔｅｓｈａｍ ＮＺ、Ｈｉｒａ Ｓ、Ｈａｓｎａｉｎ ＳＥ。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｖａｒｉａｎｔｓ ｏｆ ｃｏｎｃｅｒｎ ａｒｅ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｉｎ Ｉｎｄｉａ．Ｎａｔ Ｍｅｄ。２０２１年７月；２７（７）：１１３１－３。ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓ４１５９１－０２１－０１３９７－４
１６．Ｗａｎｇ Ｌ、Ｃｈｅｎｇ Ｇ。Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｖａｒｉａｎｔ Ｏｍｉｃｒｏｎ ｉｎ Ｓｏｕｔｈ Ａｆｒｉｃａ。Ｊ Ｍｅｄ Ｖｉｒｏｌ。２０２２年４月；９４（４）：１７２８－１７３３。ｄｏｉ：１０．１００２／ｊｍｖ．２７５１６。Ｅｐｕｂ ２０２１年１２月２７日。ＰＭＩＤ：３４８９７７５２。
１７．Ｗｅｓｔ ＡＰ、Ｗｅｒｔｈｅｉｍ ＪＯ、Ｗａｎｇ ＪＣ、Ｖａｓｙｌｙｅｖａ ＴＩ、Ｈａｖｅｎｓ ＪＬ、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ ＭＡら、Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ．１．５２６ ｉｎ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ。ｂｉｏＲｘｉｖ。ｄｏｉ：１０．１１０１／２０２１．０２．１４．４３１０４３
１８．Ｗｉｎｋ ＰＬ、Ｖｏｌｐａｔｏ ＦＣＺ、Ｍｏｎｔｅｉｒｏ ＦＬ、Ｗｉｌｌｉｇ ＪＢ、Ｚａｖａｓｃｋｉ ＡＰ、Ｂａｒｔｈ ＡＬら、Ｆｉｒｓｔ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ Ｌａｍｂｄａ（Ｃ．３７）ｖａｒｉａｎｔ ｉｎ Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｒａｚｉｌ。ｍｅｄＲｘｉｖ。ｄｏｉ：１０．１１０１／２０２１．０６．２１．２１２５９２４１
１９．Ｙｏｕｎｅｓ Ａ、Ｂａｒｔｌｅｔｔ ＮＬ、Ｌｅｏｎａｒｄ ＪＰら、Ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ（ＳＧＮ－３５）ｆｏｒ ｒｅｌａｐｓｅｄ ＣＤ３０－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｌｙｍｐｈｏｍａ。Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１０；３６３：１８１２－２１。Ｄｏｉ：１０．１０５６／ＮＥＪＭｏａ１００２９６５
２０．Ｐｅｔｅｒｓｄｏｒｆ ＳＨ、Ｋｏｐｅｃｋｙ ＫＪ、Ｓｌｏｖａｋ Ｍ、Ｗｉｌｌｍａｎ Ｃ、Ｎｅｖｉｌｌ Ｔ、Ｂｒａｎｄｗｅｉｎ Ｊ、Ｌａｒｓｏｎ ＲＡ、Ｅｒｂａ ＨＰ、Ｓｔｉｆｆ ＰＪ、Ｓｔｕａｒｔ ＲＫ、Ｗａｌｔｅｒ ＲＢ、Ｔａｌｌｍａｎ ＭＳ、Ｓｔｅｎｋｅ Ｌ、Ａｐｐｅｌｂａｕｍ ＦＲ。Ａ ｐｈａｓｅ ３ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ ｄｕｒｉｎｇ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｏｓｔｃｏｎｓｏｌｉｄａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｙｏｕｎｇｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ。Ｂｌｏｏｄ。２０１３年６月１３日；１２１（２４）：４８５４－６０。ｄｏｉ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ－２０１３－０１－４６６７０６。
２１．Ｏｌｓｅｎ Ｅ、Ｄｕｖｉｃ Ｍ、Ｆｒａｎｋｅｌ Ａら、Ｐｉｖｏｔａｌ ｐｈａｓｅ ＩＩＩ ｔｒｉａｌ ｏｆ ｔｗｏ ｄｏｓｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｄｅｎｉｌｅｕｋｉｎ ｄｉｆｔｉｔｏｘ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｃｕｔａｎｅｏｕｓ Ｔ－ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ。Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２００１；１９：３７６－８８。ｄｏｉ：１０．１２００／ＪＣＯ．２００１．１９．２．３７６
２２．Ｋｒｅｉｔｍａｎ ＲＪ、Ｔａｌｌｍａｎ ＭＳ、Ｒｏｂａｋ Ｔら、Ｐｈａｓｅ Ｉ ｔｒｉａｌ ｏｆ ａｎｔｉ－ＣＤ２２ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｉｍｍｕｎｏｔｏｘｉｎ ｍｏｘｅｔｕｍｏｍａｂ ｐａｓｕｄｏｔｏｘ（ＣＡＴ－８０１５ ｏｒ ＨＡ２２）ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｈａｉｒｙ ｃｅｌｌ ｌｅｕｋｅｍｉａ。Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２０１２；３０：１８２２－２８。Ｄｏｉ：１０．１２００／ＪＣＯ．２０１１．３８．１７５６
２３．Ｐｒｕｓｚｙｎｓｋｉ Ｍ、Ｋｏｕｍａｒｉａｎｏｕ Ｅ、Ｖａｉｄｙａｎａｔｈａｎ Ｇ、Ｒｅｖｅｔｓ Ｈ、Ｄｅｖｏｏｇｄｔ Ｎ、Ｌａｈｏｕｔｔｅ Ｔら。Ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｔｕｍｏｒ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆ ａｎｔｉ－ＨＥＲ２ ｎａｎｏｂｏｄｙ ｔｈｒｏｕｇｈ Ｎ－Ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ ４－Ｇｕａｎｉｄｉｎｏｍｅｔｈｙｌ－３－ｉｏｄｏｂｅｎｚｏａｔｅ ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｉｎｇ。Ｊ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄ ２０１４；５５：６５０－６。ｄｏｉ：１０．２９６７／ｊｎｕｍｅｄ．１１３．１２７１００
【図1】
【図2A】
【図2B】
【図2C】
【図3-1】
【図3-2】
【図3-3】
【図3-4】
【図4-1】
【図4-2】
【図4-3】
【図4-4】
【図5A】
【図5B-1】
【図5B-2】
【図5B-3】
【図5B-4】
【図6】
【配列表】
【国際調査報告】