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▶ ユーシービー バイオファルマ エスピーアールエルの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-10-31
(54)【発明の名称】抗マラリア薬であるヘキサヒドロピリミジン誘導体
(51)【国際特許分類】
C07D 403/12 20060101AFI20241024BHJP
A61K 31/513 20060101ALI20241024BHJP
A61P 33/06 20060101ALI20241024BHJP
【ＦＩ】
C07D403/12 CSP
A61K31/513
A61P33/06
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024526544
(86)(22)【出願日】2022-10-31
(85)【翻訳文提出日】2024-06-17
(86)【国際出願番号】 EP2022080372
(87)【国際公開番号】W WO2023078837
(87)【国際公開日】2023-05-11
(31)【優先権主張番号】2115770.6
(32)【優先日】2021-11-03
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】514232085
【氏名又は名称】ユーシービー バイオファルマ エスアールエル
(74)【代理人】
【識別番号】110000855
【氏名又は名称】弁理士法人浅村特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】カルデナス アルメスト、アルバロ イエス
(72)【発明者】
【氏名】デ ハロ ガルシア、テレサ
(72)【発明者】
【氏名】ロウ、マーティン アレクサンダー
【テーマコード（参考）】
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086BC42
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZB38
(57)【要約】
ヒト血液中の熱帯熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）寄生生物の増殖及び繁殖の強力な阻害剤である、本明細書で定義される式（Ｉ）の化合物は、とくにマラリアの治療において医薬剤として有益である。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩：【化1】
ここで、Ｒ１はメチル又はメトキシを表す。
【請求項2】
式（ＩＡ）により表される請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。【化2】
【請求項3】
式（ＩＢ） により表される請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。【化3】
【請求項4】
化合物中に存在する３－置換４，４－ジフルオロシクロヘキサ－１－イル部分が、１Ｒ，３Ｒ又は１Ｓ，３Ｓ配置である、請求項１～３のいずれかに記載の化合物。
【請求項5】
前記３－置換４，４－ジフルオロ－シクロヘキサ－１－イル部分が１Ｒ，３Ｒ配置である、請求項４に記載の化合物。
【請求項6】
前記３－置換４，４－ジフルオロ－シクロヘキサ－１－イル部分が１Ｓ，３Ｓ配置である、請求項４に記載の化合物。
【請求項7】
Ｎ－（２－クロロ－３－｛（４Ｓ）－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキシル］－２－イミノ－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－４－イル｝フェニル）－３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボキサミド。
【請求項8】
Ｎ－（２－クロロ－３－｛（４Ｓ）－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキシル］－２－イミノ－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－４－イル｝フェニル）－３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボキサミドの塩酸塩。
【請求項9】
Ｎ－（２－クロロ－３－｛（４Ｓ）－１－［（１Ｓ＊，３Ｓ＊）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］－２－イミノ－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－４－イル｝フェニル）－３－（２，２，２－トリフルオロエチル）－イミダゾール－４－カルボキサミド。
【請求項10】
Ｎ－（２－クロロ－３－｛（４Ｓ）－１－［（１Ｓ＊，３Ｓ＊）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］－２－イミノ－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－４－イル｝フェニル）－３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボキサミドの塩酸塩。
【請求項11】
治療に用いるための、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項12】
マラリアの治療及び／又は予防に用いるための、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項13】
薬学的に許容される担体と会合した、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩を含む医薬組成物。
【請求項14】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩の、マラリアを治療及び／又は予防するための医薬を製造するための、使用。
【請求項15】
マラリアを治療及び／又は予防するための方法であって、有効量の請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩を、そのような治療を必要とする患者に投与することを含む、方法。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ある分類群の複素環式化合物、及び治療におけるそれらの使用に関する。より詳細には、本発明は、薬理学的に活性な置換ヘキサヒドロピリミジン誘導体に関する。これらの化合物は、ヒト血液中の熱帯熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）寄生生物の増殖及び繁殖の強力な阻害剤であり、そのためとくにマラリアの治療における医薬用薬剤として有益である。
【背景技術】
【0002】
マラリアは、マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）属の寄生生物によって引き起こされる蚊媒介性感染性疾患であり、壊滅的な被害をもたらす。２０１９年のデータに基づくと、毎年約２億２９００万件の症例が報告され、約４０９，０００人が死亡している。症例の約８０％は、サハラ以南のアフリカで、主に若年小児（５歳以下）に発生する。
【0003】
そのため、ヒト血液中の熱帯熱マラリア原虫（Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）寄生生物の増殖及び繁殖の強力な阻害剤である本発明による化合物は、マラリアの治療に有益である。本発明の化合物はまた、とくに有益な薬物動態学的特性及び薬力学的特性、並びに良性の毒性プロファイルを有し、これら全てにより、治療薬としての化合物としての高い優位性が付与される。
【0004】
国際公開第２０２１／０３２６８７号には、ヒト血液中の熱帯熱マラリア原虫（Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）寄生生物の増殖及び繁殖の強力な阻害剤であり、そのためマラリアの治療に有益であると述べられている、ある種の複素環式化合物が記載されている。
【発明の概要】
【0005】
本発明は、式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩を提供する。
Ｒ１は、メチル又はメトキシを表す。
【化1】
Ｒ１は、メチル又はメトキシを表す。
【0006】
本発明による化合物は、国際公開第２０２１／０３２６８７号の一般的な範囲内に包含される。しかしながら、上記で定義される式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩について、該刊行物に具体的な開示はない。
【0007】
本発明はまた、治療に用いるための、上記で定義される式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩を提供する。
【0008】
本発明はまた、マラリアの治療及び／又は予防に用いるための、上記で定義される式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩を提供する。
【0009】
本発明はまた、マラリアを治療及び／又は予防するための方法であって、有効量の上記で定義される式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩を、そのような治療を必要とする患者に投与することを含む方法を提供する。
【0010】
本発明はまた、上記で定義される式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩の、マラリアを治療及び／又は予防するための医薬を製造するための使用を提供する。
【0011】
医薬に用いる場合、式（Ｉ）の化合物の塩は、薬学的に許容される塩である。これに対し他の塩は、本発明における使用の化合物又は薬学的に許容されるその塩の調製において有用であり得る。薬学的に許容される塩の選択及び調製の基礎となる標準的な原理は、例えば、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅ、Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ＆Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ編、Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ、２００２年に記載されている。
【0012】
本発明による化合物のイミノ－テトラヒドロピリミジノン核中のキラル炭素原子の絶対立体化学配置は、上記の式（Ｉ）に示される通りである。一般に、本発明による化合物は、少なくとも５１％の鏡像異性的な純度を有する（enatiomerically pure）（当該化合物のサンプルが、混合物として、式（Ｉ）に示される鏡像異性体を５１％以上含有し、反対の対掌体を４９％以下含有する鏡像異性体の混合物を含むことを意味する）。典型的には、本発明による化合物は、少なくとも６０％鏡像異性的に純粋である（enatiomerically pure）。好適には、本発明による化合物は、少なくとも７５％鏡像異性的に純粋である。適宜に、本発明による化合物は、少なくとも８０％鏡像異性的に純粋である。より好適には、本発明による化合物は、少なくとも８５％鏡像異性的に純粋である。なおより好適には、本発明による化合物は、少なくとも９０％鏡像異性的に純粋である。さらにより好適には、本発明による化合物は、少なくとも９５％鏡像異性的に純粋である。好ましくは、本発明による化合物は、少なくとも９９％鏡像異性的に純粋である。理想的には、本発明による化合物は、少なくとも９９．９％鏡像異性的に純粋である。
【0013】
式（Ｉ）の化合物は２つのさらなる不斉中心を有するので、それに応じて鏡像異性体として存在し得る。本発明による化合物は２つのさらなる不斉中心を有するので、ジアステレオマーとしても存在し得る。本発明は、全てのそのような鏡像異性体及びジアステレオマーの使用、並びにラセミ体を含む任意の割合のそれらの混合物に及ぶと理解されるべきである。式（Ｉ）及び以下に示される式は、とくに明示又は示されない限り、全ての個々の立体異性体及びそれらの全ての可能な混合物を表すことが意図されている。さらに、式（Ｉ）の化合物は、互変異性体、例えばケト（ＣＨ２Ｃ＝Ｏ）←→エノール（ＣＨ＝ＣＨＯＨ）互変異性体又はアミド（ＮＨＣ＝Ｏ）←→ヒドロキシイミン（Ｎ＝ＣＯＨ）互変異性体又はイミド（ＮＨＣ＝ＮＨ）←→アミノイミン（Ｎ＝ＣＮＨ２）互変異性体として存在し得る。式（Ｉ）及び以下に示される式は、とくに明記又は示されない限り、全ての個々の互変異性体及びそれらの全ての可能な混合物を表すことが意図される。さらに、式（Ｉ）の化合物はアトロプ異性体として存在し得る。式（Ｉ）及び以下に示される式は、とくに明記又は示されない限り、全ての個々のアトロプ異性体及びそれらの全ての可能な混合物を表すことが意図される。
【0014】
好ましくは、上記の式（Ｉ）の化合物中に存在するＲ１置換４，４－ジフルオロシクロヘキサ－１－イル部分は、１Ｒ，３Ｒ又は１Ｓ，３Ｓ配置である。第１の態様では、Ｒ１置換４，４－ジフルオロシクロヘキサ－１－イル部分は１Ｒ，３Ｒ配置である。第２の態様では、Ｒ１置換４，４－ジフルオロシクロヘキサ－１－イル部分は１Ｓ，３Ｓ配置である。
【0015】
式（Ｉ）又は以下に示される式に存在する個々の原子は、実際には、その天然に存在する同位体のいずれの形態で存在してもよく、最も豊富な同位体が好ましいことを理解されたい。したがって、例として、式（Ｉ）又は以下に示される式に存在する個々の水素原子は、１Ｈ、２Ｈ（重水素、Ｄ）又は３Ｈ（トリチウム、Ｔ）原子、好ましくは１Ｈとして存在してもよい。同様に、例として、式（Ｉ）又は以下に示される式に存在する個々の炭素原子は、１２Ｃ、１３Ｃ又は１４Ｃ原子、好ましくは１２Ｃとして存在してもよい。
【0016】
第１の態様では、Ｒ１はメチルを表す。第２の態様では、Ｒ１はメトキシを表す。
【0017】
第１の側面では、本発明は、式（ＩＡ）の化合物：
又は薬学的に許容されるその塩を提供する。
【化2】
又は薬学的に許容されるその塩を提供する。
【0018】
好ましくは、上記の式（ＩＡ）の化合物中に存在する４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキサ－１－イル部分は、１Ｒ，３Ｒ又は１Ｓ，３Ｓ配置である。特定の態様では、４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキサ－１－イル部分は１Ｒ，３Ｒ配置である。別の態様では、４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキサ－１－イル部分は、１Ｓ，３Ｓ配置である。
【0019】
第２の側面では、本発明は、式（ＩＢ）の化合物：
又は薬学的に許容されるその塩を提供する。
【化3】
又は薬学的に許容されるその塩を提供する。
【0020】
好ましくは、上記の式（ＩＢ）の化合物中に存在する４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキサ－１－イル部分は、１Ｒ，３Ｒ又は１Ｓ，３Ｓ配置である。第１の態様では、４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキサ－１－イル部分は１Ｒ，３Ｒ配置である。第２の態様では、４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキサ－１－イル部分は１Ｓ，３Ｓ配置である。
【0021】
本発明による具体的な新規化合物には、その調製が添付の例に記載されている個々の化合物、及び薬学的に許容されるそれらの塩が含まれる。
【0022】
本発明はまた、上記の本発明による化合物又は薬学的に許容されるその塩を、１つ又は２つ以上の薬学的に許容される担体と組み合わせて含む医薬組成物を提供する。
【0023】
本発明による医薬組成物は、経口、頬側、非経口、経鼻、局所、眼もしくは直腸投与に適した形態、又は吸入もしくは吹送による投与に適した形態をとることができる。
【0024】
経口投与の場合、本医薬組成物は、例えば、結合剤（例えば、アルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドン又はヒドロキシプロピルメチルセルロース）充填剤（例えば、ラクトース、微結晶セルロース又はリン酸水素カルシウム）、潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク又はシリカ）、崩壊剤（例えば、ジャガイモデンプン又はナトリウムグリコラート）、又は湿潤剤（例えばラウリル硫酸ナトリウム）などの薬学的に許容される賦形剤を用いて従来の手段によって調製された錠剤、ロゼンジ又はカプセルの形態をとることができる。錠剤は、当技術分野で公知の方法によってコーティングされ得る。経口投与用の液体製剤は、例えば溶液、シロップもしくは懸濁液の形態をとることができ、又は使用前に水もしくは他の適切な媒体で構成するための乾燥製品として提供することができる。そのような液体製剤は、懸濁化剤、乳化剤、非水性媒体又は保存剤などの薬学的に許容される添加剤を用いて従来の手段によって調製され得る。製剤はまた、必要に応じて、緩衝塩、香味剤、着色剤又は甘味剤を含有し得る。
【0025】
経口投与のための製剤は、活性化合物の放出が制御されるように適切に製剤化され得る。
【0026】
バッカル投与の場合、本組成物は、従来の様式で製剤化された錠剤又はトローチ剤の形態をとることができる。
【0027】
式（Ｉ）の化合物は、注射による非経口投与用に、例えばボーラス注射又は注入による非経口投与のために、製剤化され得る。注射用製剤は、単位剤形、例えばガラスアンプル又は複数回投与容器、例えばガラスバイアルで提供され得る。注射用組成物は、油性又は水性媒体中の懸濁液、溶液又はエマルジョンなどの形態をとることができ、懸濁化剤、安定化剤、保存剤及び／又は分散剤などの製剤化剤を含有することができる。あるいは、活性成分は、使用前に適切な媒体、例えば滅菌パイロジェンフリー水で構成するための粉末形態であってもよい。
【0028】
上記の製剤に加えて、式（Ｉ）の化合物はデポー製剤として製剤化することもできる。そのような長時間作用性製剤は、注入又は筋肉内注射によって投与され得る。
【0029】
経鼻投与又は吸入による投与の場合、本発明による化合物は、適切な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、フルオロトリクロロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素又は他の適切なガスもしくはガスの混合物を使用して、加圧パック又はネブライザー用のエアロゾルスプレーの形態で問題なく適切に（conveniently）送達され得る。
【0030】
本組成物は、所望により、当該活性成分を含有する１つ又は２つ以上の単位剤形を含有し得るパック又はディスペンサー装置で提供され得る。パック又は分注装置は、投与のための指示書を伴うことができる。
【0031】
局所投与のためには、本発明による化合物は、１つ又は２つ以上の薬学的に許容される担体に懸濁又は溶解された活性成分を含有する適切な軟膏に問題なく適切に製剤化され得る。具体的な担体としては、例えば、鉱油、液体石油、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン、乳化ワックス及び水が挙げられる。あるいは、本発明による化合物は、１つ又は２つ以上の薬学的に許容される担体に懸濁又は溶解された活性成分を含有する適切なローションに製剤化され得る。具体的な担体としては、例えば、鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルバート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、ベンジルアルコール、２－オクチルドデカノール及び水が挙げられる。
【0032】
眼科的投与のためには、本発明による化合物は、殺菌剤又は殺真菌剤、例えば硝酸フェニル水銀、塩化ベンジルアルコニウム又は酢酸クロルヘキシジンなどの防腐剤を含むか又は含まない等張ｐＨ調整滅菌生理食塩水中の微粒子化懸濁液として問題なく適切に製剤化され得る。あるいは、眼投与のために、化合物をワセリンなどの軟膏に製剤化され得る。
【0033】
直腸投与のためには、本発明による化合物は、坐剤として問題なく適切に製剤化され得る。これらは、活性成分を、室温では固体であるが直腸温度では液体であり、したがって直腸内で融解して活性成分を放出する適切な非刺激性賦形剤と混合することによって調製することができる。そのような物質としては、例えば、カカオバター、蜜蝋及びポリエチレングリコールが挙げられる。
【0034】
具体的な状態の予防又は治療に必要な本発明による化合物の量は、選択される化合物及び治療される患者の状態に応じて変化する。しかしながら、一般に、１日投与量は、経口投与又は頬側投与の場合、約１０ｎｇ／ｋｇ～１０００ｍｇ／ｋｇ、典型的には１００ｎｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、例えば約０．０１ｍｇ／ｋｇ～４０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であり得、非経口投与の場合、約１０ｎｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であり得、経鼻投与又は吸入もしくは吹送による投与の場合、約０．０５ｍｇ～約１０００ｍｇ、例えば約０．５ｍｇ～約１０００ｍｇの範囲であり得る。
【0035】
上記で定義される式（Ｉ）の化合物の一般的な調製のための方法は、国際公開第２０２１／０３２６８７号に記載されている。
【0036】
本発明による化合物は、以下の工程を含む、方法により調製され得る：
（ｉ）３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボン酸を塩化オキサリル及びＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドで処理する工程、
（ｉｉ）それによって得られた酸塩化物誘導体を、式（ＩＩＩ）の化合物：
（式中、Ｒ１は上記で定義される通りであり、Ｒｐは水素又はＮ－保護基を表す）
と反応させ、その後、必要に応じて、Ｎ－保護基Ｒｐを除去する工程。
（ｉ）３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボン酸を塩化オキサリル及びＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドで処理する工程、
（ｉｉ）それによって得られた酸塩化物誘導体を、式（ＩＩＩ）の化合物：
【化4】
（式中、Ｒ１は上記で定義される通りであり、Ｒｐは水素又はＮ－保護基を表す）
と反応させ、その後、必要に応じて、Ｎ－保護基Ｒｐを除去する工程。
【0037】
工程（ｉ）は、適切な溶媒、例えばジクロロメタンなどの塩素化溶媒中、周囲温度で問題なく適切に達成される。
【0038】
工程（ｉｉ）は、塩基、例えばトリエチルアミンなどの有機塩基又はピリジンの存在下で問題なく適切に行われる。反応は、典型的には、適切な溶媒、例えばジクロロメタンなどの塩素化溶媒中、０℃～周囲温度で行われる。
【0039】
好適には、Ｎ－保護基Ｒｐはｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）である。
【0040】
Ｎ－保護基ＲｐがＢＯＣである場合、その後のＢＯＣ基の除去は、酸、例えば塩酸などの鉱酸、又はトリフルオロ酢酸などの有機酸での処理によって適切に達成することができる。該反応は、典型的には、適切な溶媒、例えばジクロロメタンなどの塩素化溶媒、又は１，４－ジオキサンなどの環状エーテル中、周囲温度で行われる。
【0041】
別法において、本発明による化合物は、３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボン酸を、カップリング剤の存在下で、上記で定義される式（ＩＩＩ）の化合物と反応させ、その後、必要に応じて、Ｎ－保護基Ｒｐを除去する方法によって調製され得る。
【0042】
好適なことを挙げるに、カップリング剤はクロロ－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスファートであってもよく、その場合、反応は一般に１－メチルイミダゾールの存在下で行われ得る。反応は、適切な溶媒、例えばアセトニトリルなどのニトリル溶媒中、周囲温度で問題なく適切に行われる。
【0043】
あるいは、カップリング剤は２，４，６－トリプロピル－１，３，５，２，４，６－トリオキサ－トリホスホリナン２，４，６－トリオキシドであってよく、この場合、反応は一般に、有機アミン、例えばＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンなどのトリアルキルアミン、又はピリジンなどの芳香族塩基を適切に含み得る塩基の存在下で行われ得る。反応は、適切な溶媒、例えばジクロロメタンなどの塩素化溶媒、又は酢酸エチルなどの有機エステル溶媒中、周囲温度又は高温で問題なく適切に行われる。
【0044】
あるいは、カップリング剤は、２－クロロ－１－メチルピリジニウムヨージドであってもよく、この場合、反応は、一般に、塩基、例えば、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンなどのトリアルキルアミンの存在下で行われ得る。反応は、適切な溶媒、例えばジクロロメタンなどの塩素化溶媒、又はアセトニトリルなどの有機ニトリル溶媒中、周囲温度又は高温で行うことは至便である。
【0045】
３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボン酸は、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｌｕｏｒｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２０００、１０６、１８９－１９７に記載されている調製方法と同様の方法によって適切に調製され得る。
【0046】
上記の式（ＩＩＩ）の中間体は、式（ＩＶ）の化合物 を、塩基を用いて処理し、その後、Ｎ－保護基Ｒｑを除去することにより調製され得る。
Ｒ１及びＲｐは上記で定義された通りであり、ＲｑはＮ－保護基を表し、ＲｗはＣ１～４アルキル、とくにメチルを表す。
【化5】
Ｒ１及びＲｐは上記で定義された通りであり、ＲｑはＮ－保護基を表し、ＲｗはＣ１～４アルキル、とくにメチルを表す。
【0047】
好適には、上記反応において用いる塩基は、Ｃ１～４アルコキシド塩、典型的にはカリウムｔｅｒｔ－ブトキシドなどのアルカリ金属アルコキシドである。反応は、適切な溶媒、例えばテトラヒドロフランなどの環状エーテル中、０℃～周囲温度で問題なく適切に達成される。
【0048】
好適には、Ｎ－保護基Ｒｑはベンジルオキシカルボニルである。
【0049】
Ｎ－保護基Ｒｑがベンジルオキシカルボニルである場合、その後のベンジルオキシカルボニル基の除去は、接触水素化によって適切に達成され得る。典型的には、これは、チャコール上のパラジウムなどの水素化触媒の存在下でのガス状水素による処理を含む。
【0050】
上記の式（ＩＶ）の中間体は、式（Ｖ）の化合物を式（ＶＩ）の化合物と反応させることにより調製され得る。
Ｒ１、Ｒｐ、Ｒｑ及びＲｗは上記で定義された通りである。
【化6】
Ｒ１、Ｒｐ、Ｒｑ及びＲｗは上記で定義された通りである。
【0051】
一般に、化合物（Ｖ）と（ＶＩ）との反応は、カップリング剤の存在下で行われる。適切なカップリング剤は、Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド（ＥＤＣＩ）である。好適には、反応は、塩基、典型的にはＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンなどの有機塩基の存在下で行われる。
【0052】
化合物（Ｖ）と（ＶＩ）との反応は、適切な溶媒、例えばＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドなどの双極性非プロトン性溶媒中、周囲温度で問題なく適切に達成される。
【0053】
これらの化合物を市販により入手できない場合、式（Ｖ）及び（ＶＩ）の出発物質は、添付の例に記載されているものと同様の方法によって、又は当技術分野で公知の標準的な方法によって調製してよい。
【0054】
生成物の混合物が本発明による化合物の調製のための上記のいずれかの方法から得られる場合、所望の生成物は、分取ＨＰＬＣ、又は例えば、適切な溶媒系と組み合わせてシリカ及び／もしくはアルミナを利用するカラムクロマトグラフィーなどの従来の方法によって任意の適切な段階で分離することができる。
【0055】
本発明による化合物を調製するための上記の方法が立体異性体の混合物を生じる場合、これらの異性体は通常の技術によって分離され得る。とくに、式（Ｉ）の化合物の特定の（particular）鏡像異性体を得ることが所望される場合、これは、鏡像異性体を分割するための任意の適切な従来の手順を使用して、鏡像異性体の対応する混合物から生成され得る。したがって、例えば、ジアステレオマー誘導体、例えば塩は、式（Ｉ）の鏡像異性体、例えばラセミ体と適切なキラル化合物、例えばキラル塩基との混合物の反応によって生成され得る。次いで、ジアステレオマーを、任意の用いやすい手段によって、例えば結晶化によって分離することができ、所望の鏡像異性体を、例えばジアステレオマーが塩である場合には酸による処理によって回収することができる。別の分割方法において、式（Ｉ）のラセミ体をキラルＨＰＬＣを使用して分離することができる。さらに、所望であれば、上記の方法の１つにおいて適切なキラル中間体を用いることによって、特定の（particular）鏡像異性体を得ることができる。あるいは、特定の（particular）鏡像異性体は、鏡像異性体特異的酵素生体内変換、例えばエステラーゼを使用したエステル加水分解を行い、次いで、鏡像異性的に純粋な加水分解された酸のみを未反応のエステル対掌体から精製することによって得ることができる。クロマトグラフィー、再結晶及び他の従来の分離手順は、本発明の特定の（particular）幾何異性体を得ることが望ましい中間体又は最終生成物と共に用いることもできる。
【0056】
上記の合成過程におけるあらゆる段階において、関係する分子のいずれかの感受性基又は反応性基を保護することが必要である場合及び／又は望ましい場合がある。このような場合については、Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ編、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、５ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ、２０１４に記載されているような従来の保護基によって対応することができる。前記保護基の除去は、当技術分野で公知の方法を利用して、後に続く適用しやすい任意のステージにおいて行ってよい。
【0057】
以下の例は、本発明による化合物の調製の例を示す。
【0058】
本発明の化合物は、ヒト血液中の熱帯熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）寄生生物の増殖及び繁殖の強力な阻害剤である。したがって、本発明の化合物は熱帯熱マラリア原虫（Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）３Ｄ７無性血液段階アッセイにおいて活性を示し、一般に５ｎＭより優れたＩＣ５０値を示す（当業者は、より低いＩＣ５０値がより活性な化合物を示すことを理解する）。
【0059】
無性血液段階アッセイ（Asexual Blood Stage Assay）
熱帯熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）３Ｄ７株の血流段階に対する試験化合物の効果を測定するために用いられるアッセイには、読み出し情報にＳＹＢＲグリーンが用いられる。これは、二本鎖デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）に結合して蛍光を増加させ、感染した赤血球中の熱帯熱マラリア原虫（Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）ＤＮＡの検出を可能にし、それによって寄生虫の増殖及び繁殖の尺度を提供する色素である。
熱帯熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）３Ｄ７株の血流段階に対する試験化合物の効果を測定するために用いられるアッセイには、読み出し情報にＳＹＢＲグリーンが用いられる。これは、二本鎖デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）に結合して蛍光を増加させ、感染した赤血球中の熱帯熱マラリア原虫（Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）ＤＮＡの検出を可能にし、それによって寄生虫の増殖及び繁殖の尺度を提供する色素である。
【0060】
熱帯熱マラリア原虫（Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）の培養の維持
赤血球（Ａ＋血液）を寄生生物培養及びアッセイの両方のために調製した。不完全培地（１リットルの培地中、１５．９ｇのＲＰＭＩ１６４０（２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、Ｌ－グルタミン）、１ｇのＮａＨＣＯ３、２ｇのグルコース、４００μＬのゲンタシン（５００ｍｇ／ｍＬ）、２ｍＬのヒポキサンチン溶液（０．１Ｍ ＮａＯＨ中１３．６ｇ／Ｌ、ｐＨ７．３））で４回洗浄することによって。細胞を１８００ｇで５分間遠心分離した後、上清をデカントし、新鮮な不完全培地に再懸濁した。最後の洗浄時に、細胞を完全培地（５ｇ／ＬのＡｌｂｕｍａｘＩＩを含む不完全培地）に再懸濁し、１８００ｇで３分間遠心分離した。この細胞沈殿物をヘマトクリット値１００％として処理した。
赤血球（Ａ＋血液）を寄生生物培養及びアッセイの両方のために調製した。不完全培地（１リットルの培地中、１５．９ｇのＲＰＭＩ１６４０（２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、Ｌ－グルタミン）、１ｇのＮａＨＣＯ３、２ｇのグルコース、４００μＬのゲンタシン（５００ｍｇ／ｍＬ）、２ｍＬのヒポキサンチン溶液（０．１Ｍ ＮａＯＨ中１３．６ｇ／Ｌ、ｐＨ７．３））で４回洗浄することによって。細胞を１８００ｇで５分間遠心分離した後、上清をデカントし、新鮮な不完全培地に再懸濁した。最後の洗浄時に、細胞を完全培地（５ｇ／ＬのＡｌｂｕｍａｘＩＩを含む不完全培地）に再懸濁し、１８００ｇで３分間遠心分離した。この細胞沈殿物をヘマトクリット値１００％として処理した。
【0061】
熱帯熱マラリア原虫（Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）３Ｄ７を、ヘマトクリット値５％での赤血球中、完全培地にて３７℃（１％Ｏ２、３％ＣＯ２、残りはＮ２）で培養した。培養液を毎週分割し、新鮮な培地中のヘマトクリット値５％で、赤血球中の寄生虫血症１％を達成した。培養培地を１日おきに（１週間に２回）新鮮な培地と交換する。
【0062】
アッセイの手順
１日目（day 1）に、Ｅｃｈｏ分注技術（１．５倍希釈及び２０点滴定）を使用して試験化合物をアッセイプレートに添加した。５０ｎＬの各化合物希釈物を５０μＬの培養液（ヘマトクリット５％、寄生虫血症０．５％）に添加し、３７℃（１％Ｏ２、３％ＣＯ２、残りはＮ２）で７２時間インキュベートした。試験化合物の最終濃度は、０．５％ＤＭＳＯ中、５０，０００ｎＭ～１５ｎＭの範囲であった。
１日目（day 1）に、Ｅｃｈｏ分注技術（１．５倍希釈及び２０点滴定）を使用して試験化合物をアッセイプレートに添加した。５０ｎＬの各化合物希釈物を５０μＬの培養液（ヘマトクリット５％、寄生虫血症０．５％）に添加し、３７℃（１％Ｏ２、３％ＣＯ２、残りはＮ２）で７２時間インキュベートした。試験化合物の最終濃度は、０．５％ＤＭＳＯ中、５０，０００ｎＭ～１５ｎＭの範囲であった。
【0063】
４日目（day 4）に、溶解緩衝液（２０ｍＭトリス、ｐＨ７．９、５％ＥＤＴＡ、０．１６％ｗ／ｖ、１．６％ＴＸ１００ ｖ／ｖ）で予め３倍濃度に希釈した１０μＬのＳＹＢＲグリーン（ＤＭＳＯ中１０，０００倍濃縮液として供給されるＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｓ７５６３）を培養液に添加し、暗所で一晩、室温でインキュベートした。
【0064】
５日目（day 5）に、ＢｉｏＴｅｋプレートリーダー（励起４８５ｎｍ、発光５２８ｎｍ）を使用して蛍光シグナルを測定した。ＩＤＢＳ ＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅを使用して全てのデータを処理した。生データを、高阻害対照（メフロキン）を１００％、阻害なし対照（ＤＭＳＯ）を０％に設定することによる線形回帰によって阻害率に変換した。合格プレートの品質管理基準は以下のとおり：Ｚ’＞０．５、Ｓ：Ｂ＞３、％ＣＶ（阻害なし対照）＜１５であった。Ｚ’を計算するために使用される式は、
である。上式中μは平均を表し、σは標準偏差を示し、ｐは陽性対照を示し、ｎは陰性対照を示す。
【数1】
である。上式中μは平均を表し、σは標準偏差を示し、ｐは陽性対照を示し、ｎは陰性対照を示す。
【0065】
全てのＥＣ５０カーブフィッティングは、ＸＬｆｉｔモデル３００（ＩＤＢＳ）を使用して、以下の二相性二部位用量応答：
を使用して行った。上式中、Ａ＝１００から上側曲線１の上部及び下側曲線の下部を引いた値、Ｂ＝ヒルスロープ、ｌｏｇ（Ｃ）＝下部部位のＩＣ５０濃度、ｌｏｇ（Ｄ）＝上部部位のＩＣ５０濃度、ｘ＝阻害剤濃度、ｙ＝％阻害率である。
【数2】
を使用して行った。上式中、Ａ＝１００から上側曲線１の上部及び下側曲線の下部を引いた値、Ｂ＝ヒルスロープ、ｌｏｇ（Ｃ）＝下部部位のＩＣ５０濃度、ｌｏｇ（Ｄ）＝上部部位のＩＣ５０濃度、ｘ＝阻害剤濃度、ｙ＝％阻害率である。
【0066】
上記のようにして熱帯熱マラリア原虫（Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）３Ｄ７無性血液段階アッセイによる試験を行い、下記の例（Examples）の項に示した化合物が、以下のＩＣ５０値を示すことが明らかになった。
【表1】
【0067】
例
略語
ＤＣＭ：ジクロロメタン ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＭｅＯＨ：メタノール ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＦＡＡ：トリフルオロ酢酸無水物 ＥｔＯＨ：エタノール
ＤＡＳＴ：ジエチルアミノ硫黄トリフルオリド ＤＥＡ：ジエチルアミン
ＴＢＡＦ：フッ化テトラ－ｎ－ブチルアンモニウム
ＥＤＣＩ：Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド
Ｔ３Ｐ（登録商標）：２，４，６－トリプロピル－１，３，５，２，４，６－トリオキサトリホスホリナン－２，４，６－トリオキシド溶液
ｈ：時間 Ｍ：質量
ｒ．ｔ．：室温 ＲＴ：保持時間
ＤＡＤ：ダイオードアレイ検出器
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー質量分析
ＥＳＩ：エレクトロスプレーイオン化
ＶＣＤ：振動円二色性
略語
ＤＣＭ：ジクロロメタン ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＭｅＯＨ：メタノール ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＦＡＡ：トリフルオロ酢酸無水物 ＥｔＯＨ：エタノール
ＤＡＳＴ：ジエチルアミノ硫黄トリフルオリド ＤＥＡ：ジエチルアミン
ＴＢＡＦ：フッ化テトラ－ｎ－ブチルアンモニウム
ＥＤＣＩ：Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド
Ｔ３Ｐ（登録商標）：２，４，６－トリプロピル－１，３，５，２，４，６－トリオキサトリホスホリナン－２，４，６－トリオキシド溶液
ｈ：時間 Ｍ：質量
ｒ．ｔ．：室温 ＲＴ：保持時間
ＤＡＤ：ダイオードアレイ検出器
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー質量分析
ＥＳＩ：エレクトロスプレーイオン化
ＶＣＤ：振動円二色性
【0068】
命名法
化合物は、Ｂｉｏｖｉａ Ｄｒａｗバージョン１９．１の助けを用いてＩＵＰＡＣガイドラインに従って命名した。
化合物は、Ｂｉｏｖｉａ Ｄｒａｗバージョン１９．１の助けを用いてＩＵＰＡＣガイドラインに従って命名した。
【0069】
アスタリスク（＊）、例えば、（１Ｓ＊，３Ｓ＊）と命名された化合物は、既知の相対立体化学であるが未知の絶対立体化学の化合物を示す。
【0070】
分析条件
方法１
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘ Ｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８、２．１×３０ｍｍ、２．５μｍ
注入容積 ５．０μＬ
流速 １．００ｍＬ／分
検出：
ＭＳ－ＥＳＩ＋ｍ／ｚ １５０～８００
ＵＶ－ＤＡＤ ２２０～４００ｎｍ
溶媒Ａ：水中５ｍＭギ酸アンモニウム＋０．１％アンモニア
溶媒Ｂ：アセトニトリル＋５％溶媒Ａ＋０．１％アンモニア
勾配プログラム：
５％Ｂから９５％Ｂまで４．０分；５．００分まで保持；
５．１０分でＢの濃度は５％；６．５分まで保持
方法１
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘ Ｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８、２．１×３０ｍｍ、２．５μｍ
注入容積 ５．０μＬ
流速 １．００ｍＬ／分
検出：
ＭＳ－ＥＳＩ＋ｍ／ｚ １５０～８００
ＵＶ－ＤＡＤ ２２０～４００ｎｍ
溶媒Ａ：水中５ｍＭギ酸アンモニウム＋０．１％アンモニア
溶媒Ｂ：アセトニトリル＋５％溶媒Ａ＋０．１％アンモニア
勾配プログラム：
５％Ｂから９５％Ｂまで４．０分；５．００分まで保持；
５．１０分でＢの濃度は５％；６．５分まで保持
【0071】
方法２
カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＵＰＬＣ Ｘ Ｂｒｉｄｇｅ ＢＥＨ（Ｃ１８、２．１×５０ｍｍ、２．５μｍ）
温度： ４５℃
注入容積： １．０μＬ
流速： １．００ｍＬ／分
検出：質量分析、同一ランでの＋／－検出
ＰＤＡ：２１０～４００ｎｍ
溶媒Ａ：水中１０ｍＭギ酸アンモニウム＋０．１％ギ酸
溶媒Ｂ：９５％アセトニトリル＋５％Ｈ２Ｏ＋０．１％ギ酸
時間 ％Ａ ％Ｂ
０ ９５ ５
０．１０ ９５ ５
２．１０ ５ ９５
２．３５ ５ ９５
２．８０ ９５ ５
カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＵＰＬＣ Ｘ Ｂｒｉｄｇｅ ＢＥＨ（Ｃ１８、２．１×５０ｍｍ、２．５μｍ）
温度： ４５℃
注入容積： １．０μＬ
流速： １．００ｍＬ／分
検出：質量分析、同一ランでの＋／－検出
ＰＤＡ：２１０～４００ｎｍ
溶媒Ａ：水中１０ｍＭギ酸アンモニウム＋０．１％ギ酸
溶媒Ｂ：９５％アセトニトリル＋５％Ｈ２Ｏ＋０．１％ギ酸
時間 ％Ａ ％Ｂ
０ ９５ ５
０．１０ ９５ ５
２．１０ ５ ９５
２．３５ ５ ９５
２．８０ ９５ ５
【0072】
中間体１
（８－オキソ－１，４－ジオキサスピロ［４．５］デカン－７－イル）アセタート
トルエン（１５０ｍＬ）中の１，４－ジオキサスピロ［４．５］デカン－８－オン（７．５０ｇ、４８．０ｍｍｏｌ）及び酢酸鉛（ＩＶ）（３１．９ｇ、７２．０ｍｍｏｌ）の混合物を１１０℃で１６時間加熱し、その後、反応混合物を室温に冷却し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過し、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中２０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（６．５６ｇ、６４％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 5.24 (dd, J 13.2, 6.8 Hz, 1H), 3.89-4.08 (m, 4H), 2.54-2.69 (m, 1H), 2.23-2.33 (m, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.93-2.01 (m, 2H).１つのプロトンシグナルが溶媒ピークと融合した。
（８－オキソ－１，４－ジオキサスピロ［４．５］デカン－７－イル）アセタート
トルエン（１５０ｍＬ）中の１，４－ジオキサスピロ［４．５］デカン－８－オン（７．５０ｇ、４８．０ｍｍｏｌ）及び酢酸鉛（ＩＶ）（３１．９ｇ、７２．０ｍｍｏｌ）の混合物を１１０℃で１６時間加熱し、その後、反応混合物を室温に冷却し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過し、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中２０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（６．５６ｇ、６４％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 5.24 (dd, J 13.2, 6.8 Hz, 1H), 3.89-4.08 (m, 4H), 2.54-2.69 (m, 1H), 2.23-2.33 (m, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.93-2.01 (m, 2H).１つのプロトンシグナルが溶媒ピークと融合した。
【0073】
中間体２
（８，８－ジフルオロ－１，４－ジオキサスピロ［４．５］デカン－７－イル）アセタート
乾燥ＤＣＭ（２７０ｍＬ）中の中間体１（１３．５ｇ、６３．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＡＳＴ（２０．８ｍＬ、１５８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、次いで、５０℃で５時間加熱し、その後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（４５０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（３×４００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中１５％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（９．５１ｇ、６４％）を無色の油状物として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 5.18-5.30 (m, 1H), 3.85-3.99 (m, 4H), 2.10-2.25 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 1.98-2.06 (m, 2H), 1.87-1.98 (m, 1H), 1.72-1.81 (m, 2H).
（８，８－ジフルオロ－１，４－ジオキサスピロ［４．５］デカン－７－イル）アセタート
乾燥ＤＣＭ（２７０ｍＬ）中の中間体１（１３．５ｇ、６３．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＡＳＴ（２０．８ｍＬ、１５８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌し、次いで、５０℃で５時間加熱し、その後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（４５０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（３×４００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中１５％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（９．５１ｇ、６４％）を無色の油状物として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 5.18-5.30 (m, 1H), 3.85-3.99 (m, 4H), 2.10-2.25 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 1.98-2.06 (m, 2H), 1.87-1.98 (m, 1H), 1.72-1.81 (m, 2H).
【0074】
中間体３
４，４－ジフルオロ－３－ヒドロキシシクロヘキサノン
ＴＨＦ（９５ｍＬ）中の中間体２（９．５０ｇ、４０．２ｍｍｏｌ）の溶液に、１０％ＨＣｌ水溶液（３８０ｍＬ）を室温でゆっくり添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（４５０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（３×４５０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２００ｍＬ）及びブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、粗表題化合物（４．５０ｇ）を無色の油状物として得て、これをさらに精製することなく利用した。δH (400 MHz, CDCl3) 4.22-4.33 (m, 1H), 3.74 (br s, 1H), 2.77-2.88 (m, 1H), 2.45-2.68 (m, 4H), 2.18-2.32 (m, 1H).
４，４－ジフルオロ－３－ヒドロキシシクロヘキサノン
ＴＨＦ（９５ｍＬ）中の中間体２（９．５０ｇ、４０．２ｍｍｏｌ）の溶液に、１０％ＨＣｌ水溶液（３８０ｍＬ）を室温でゆっくり添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（４５０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（３×４５０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２００ｍＬ）及びブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、粗表題化合物（４．５０ｇ）を無色の油状物として得て、これをさらに精製することなく利用した。δH (400 MHz, CDCl3) 4.22-4.33 (m, 1H), 3.74 (br s, 1H), 2.77-2.88 (m, 1H), 2.45-2.68 (m, 4H), 2.18-2.32 (m, 1H).
【0075】
中間体４
３－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシ－４，４－ジフルオロシクロヘキサノン
乾燥ＤＣＭ（９０ｍＬ）中の中間体３（４．５０ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）の溶液に、イミダゾール（５．１０ｇ、７４．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０℃に冷却し、次いで、ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルクロリド（１１．３ｇ、７４．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、１０％ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１５０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中３０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（７．００ｇ、８８％）を無色の油状物として得た。δH (400 MHz, CDCl3) 4.18-4.27 (m, 1H), 2.80 (d, J 14.6 Hz, 1H), 2.34-2.60 (m, 4H), 2.08-2.28 (m, 1H), 0.89 (s, 9H), 0.11 (s, 6H).
３－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシ－４，４－ジフルオロシクロヘキサノン
乾燥ＤＣＭ（９０ｍＬ）中の中間体３（４．５０ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）の溶液に、イミダゾール（５．１０ｇ、７４．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０℃に冷却し、次いで、ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルクロリド（１１．３ｇ、７４．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、１０％ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１５０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中３０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（７．００ｇ、８８％）を無色の油状物として得た。δH (400 MHz, CDCl3) 4.18-4.27 (m, 1H), 2.80 (d, J 14.6 Hz, 1H), 2.34-2.60 (m, 4H), 2.08-2.28 (m, 1H), 0.89 (s, 9H), 0.11 (s, 6H).
【0076】
中間体５
ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－Ｎ－ベンジル－３－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシ－４，４－ジフルオロシクロヘキサンアミン
イソプロパノール（７０ｍＬ）中の中間体４（７．００ｇ、２６．５ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下でベンジルアミン（４．３４ｍＬ、３９．７ｍｍｏｌ）及び酢酸（０．５０ｍＬ）を添加した。反応混合物を室温で８時間撹拌し、次いで、ＮａＢＨ４（２．５０ｇ、３９．７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、冷水（５００ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中３０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（８．００ｇ、７１％）を淡黄色油状物として得た。δH (400 MHz, CDCl3) 7.32-7.44 (m, 5H), 3.87 (s, 2H), 3.74-3.83 (m, 1H), 2.76-2.86 (m, 2H), 2.08-2.25 (m, 2H), 1.98-2.07 (m, 1H), 1.61-1.96 (m, 3H), 0.88 (s, 9H), 0.09 (s, 6H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：３５６．１０［ＭＨ］＋、ＲＴ２．５７分。
ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－Ｎ－ベンジル－３－［ｔｅｒｔ－ブチル（ジメチル）シリル］オキシ－４，４－ジフルオロシクロヘキサンアミン
イソプロパノール（７０ｍＬ）中の中間体４（７．００ｇ、２６．５ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下でベンジルアミン（４．３４ｍＬ、３９．７ｍｍｏｌ）及び酢酸（０．５０ｍＬ）を添加した。反応混合物を室温で８時間撹拌し、次いで、ＮａＢＨ４（２．５０ｇ、３９．７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、冷水（５００ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中３０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（８．００ｇ、７１％）を淡黄色油状物として得た。δH (400 MHz, CDCl3) 7.32-7.44 (m, 5H), 3.87 (s, 2H), 3.74-3.83 (m, 1H), 2.76-2.86 (m, 2H), 2.08-2.25 (m, 2H), 1.98-2.07 (m, 1H), 1.61-1.96 (m, 3H), 0.88 (s, 9H), 0.09 (s, 6H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：３５６．１０［ＭＨ］＋、ＲＴ２．５７分。
【0077】
中間体６
ｒａｃ－（１Ｒ，５Ｒ）－５－（ベンジルアミノ）－２，２－ジフルオロシクロヘキサノール
ＴＨＦ（６０ｍＬ）中の中間体５（４．００ｇ、９．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下、０℃でＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１Ｍ、１４．１ｍＬ）を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで、水（２００ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×３００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をコンビフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中４０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（１．９０ｇ、８４％）を無色の油状物として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 1.22-1.44 (m, 2H), 1.59-1.85 (m, 2H), 1.88-2.07 (m, 2H), 7.30 (q, J 7.66 Hz, 4H), 7.13-7.24 (m, 1H), 5.48-5.62 (m, 1H), 3.69 (s, 2H), 3.53-3.66 (m, 1H), 2.53-2.66 (m, 1H).１つの交換可能なプロトンシグナルはＮＭＲスペクトルで観察されなかった。
ｒａｃ－（１Ｒ，５Ｒ）－５－（ベンジルアミノ）－２，２－ジフルオロシクロヘキサノール
ＴＨＦ（６０ｍＬ）中の中間体５（４．００ｇ、９．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下、０℃でＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１Ｍ、１４．１ｍＬ）を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで、水（２００ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×３００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をコンビフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中４０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（１．９０ｇ、８４％）を無色の油状物として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 1.22-1.44 (m, 2H), 1.59-1.85 (m, 2H), 1.88-2.07 (m, 2H), 7.30 (q, J 7.66 Hz, 4H), 7.13-7.24 (m, 1H), 5.48-5.62 (m, 1H), 3.69 (s, 2H), 3.53-3.66 (m, 1H), 2.53-2.66 (m, 1H).１つの交換可能なプロトンシグナルはＮＭＲスペクトルで観察されなかった。
【0078】
中間体７
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－ベンジル－Ｎ－［ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－ヒドロキシシクロヘキシル］カルバマート
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の中間体６（１．９０ｇ、７．８７ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（２．２０ｍＬ、１５．７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１５分間撹拌し、次いで、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカルボナート（２．０６ｇ、９．４５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、ＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をコンビフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中２０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（１．８０ｇ、６７％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 7.28-7.37 (m, 2H), 7.17-7.27 (m, 3H), 5.37 (d, J 5.38 Hz, 1H), 4.34 (s, 2H), 3.92 4.07 (m, 1H), 3.55-3.75 (m, 1H), 1.89-2.02 (m, 1H), 1.40-1.84 (m, 5H), 1.34 (s, 9H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：２８６．００［ＭＨ］＋、ＲＴ２．１１分。
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－ベンジル－Ｎ－［ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－ヒドロキシシクロヘキシル］カルバマート
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の中間体６（１．９０ｇ、７．８７ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（２．２０ｍＬ、１５．７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１５分間撹拌し、次いで、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカルボナート（２．０６ｇ、９．４５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、ＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をコンビフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中２０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（１．８０ｇ、６７％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 7.28-7.37 (m, 2H), 7.17-7.27 (m, 3H), 5.37 (d, J 5.38 Hz, 1H), 4.34 (s, 2H), 3.92 4.07 (m, 1H), 3.55-3.75 (m, 1H), 1.89-2.02 (m, 1H), 1.40-1.84 (m, 5H), 1.34 (s, 9H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：２８６．００［ＭＨ］＋、ＲＴ２．１１分。
【0079】
中間体８
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－ベンジル－Ｎ－［ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］カルバマート
ＴＨＦ（３０ｍＬ）中の中間体７（１．５０ｇ、４．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下、０℃でＮａＨ（０．２６ｇ、６．５７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、次いで、ヨードメタン（０．９３ｇ、６．５７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで、水（１６０ｍＬ）に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃ（２×１６０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、粗表題化合物（１．７２ｇ）を淡黄色の半固体として得て、これをさらに精製することなく利用した。δH (400 MHz, CDCl3) 7.13-7.37 (m, 5H), 4.20-4.50 (m, 3H), 3.50 (s, 3H), 3.25-3.45 (m, 1H), 2.02-2.19 (m, 2H), 1.64-1.80 (m, 3H), 1.40 (s, 9H), 0.80-0.96 (m, 1H).
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－ベンジル－Ｎ－［ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］カルバマート
ＴＨＦ（３０ｍＬ）中の中間体７（１．５０ｇ、４．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下、０℃でＮａＨ（０．２６ｇ、６．５７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、次いで、ヨードメタン（０．９３ｇ、６．５７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで、水（１６０ｍＬ）に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃ（２×１６０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、粗表題化合物（１．７２ｇ）を淡黄色の半固体として得て、これをさらに精製することなく利用した。δH (400 MHz, CDCl3) 7.13-7.37 (m, 5H), 4.20-4.50 (m, 3H), 3.50 (s, 3H), 3.25-3.45 (m, 1H), 2.02-2.19 (m, 2H), 1.64-1.80 (m, 3H), 1.40 (s, 9H), 0.80-0.96 (m, 1H).
【0080】
中間体９
ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－Ｎ－ベンジル－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキサンアミン
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の中間体８（１．７０ｇ、４．７８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（１．１０ｍＬ、１４．３ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで、冷飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（８０ｍＬ）に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃ（３×８０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をコンビフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中４０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（１．１０ｇ、９０％）を無色の油状物として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 7.25-7.38 (m, 4H), 7.16-7.24 (m, 1H), 3.71 (s, 2H), 3.40-3.53 (m, 1H), 3.37 (s, 3H), 2.55-2.63 (m, 1H), 2.10-2.26 (m, 2H), 1.92-2.05 (m, 1H), 1.82-1.92 (m, 1H), 1.60-1.80 (m, 1H), 1.10-1.26 (m, 2H).
ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－Ｎ－ベンジル－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキサンアミン
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の中間体８（１．７０ｇ、４．７８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（１．１０ｍＬ、１４．３ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで、冷飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（８０ｍＬ）に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃ（３×８０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をコンビフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中４０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（１．１０ｇ、９０％）を無色の油状物として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 7.25-7.38 (m, 4H), 7.16-7.24 (m, 1H), 3.71 (s, 2H), 3.40-3.53 (m, 1H), 3.37 (s, 3H), 2.55-2.63 (m, 1H), 2.10-2.26 (m, 2H), 1.92-2.05 (m, 1H), 1.82-1.92 (m, 1H), 1.60-1.80 (m, 1H), 1.10-1.26 (m, 2H).
【0081】
中間体１０
ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシ－シクロヘキサンアミン
ＭｅＯＨ（２２ｍＬ）中の中間体９（１．１０ｇ、４．３１ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下で２０％Ｐｄ／Ｃ（０．２３ｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を水素圧下、室温で２時間撹拌し、次いで、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過し、ＭｅＯＨ（３×３０ｍＬ）で洗浄した。濾液を真空中で濃縮して、表題化合物（０．６７ｇ、９４％）を無色の油状物として得て、これをさらに精製することなく利用した。δH (400 MHz, DMSO-d6) 3.40-3.53 (m, 1H), 2.73 (t, J 10.76 Hz, 1H), 1.88-2.08 (m, 2H), 1.64-1.85 (m, 2H), 1.07-1.26 (m, 2H).３つのプロトンシグナルは溶媒ピークと融合し、２つの交換可能なプロトンシグナルはＮＭＲスペクトルでは観測されなかった。
ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシ－シクロヘキサンアミン
ＭｅＯＨ（２２ｍＬ）中の中間体９（１．１０ｇ、４．３１ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下で２０％Ｐｄ／Ｃ（０．２３ｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を水素圧下、室温で２時間撹拌し、次いで、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過し、ＭｅＯＨ（３×３０ｍＬ）で洗浄した。濾液を真空中で濃縮して、表題化合物（０．６７ｇ、９４％）を無色の油状物として得て、これをさらに精製することなく利用した。δH (400 MHz, DMSO-d6) 3.40-3.53 (m, 1H), 2.73 (t, J 10.76 Hz, 1H), 1.88-2.08 (m, 2H), 1.64-1.85 (m, 2H), 1.07-1.26 (m, 2H).３つのプロトンシグナルは溶媒ピークと融合し、２つの交換可能なプロトンシグナルはＮＭＲスペクトルでは観測されなかった。
【0082】
中間体１１
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－｛［ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］カルバモチオイル｝カルバマート
ＴＨＦ（８ｍＬ）中のＮ，Ｎ’－ビス－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルチオ尿素（１．０９ｇ、３．９４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（０．４７ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで、ＴＦＡＡ（０．８３ｍＬ、５．９０ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで、ＴＨＦ（２ｍＬ）中の中間体１０（０．６５ｇ、３．９４ｍｍｏｌ）の溶液を０℃で添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、水（７０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×７０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、ブライン（７０ｍＬ）で洗浄し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中２０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（１．１０ｇ、８５％）を淡黄色固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 10.58 (s, 1H), 10.20 (d, J 6.85 Hz, 1H), 4.40-4.52 (m, 1H), 3.59-3.70 (m, 1H), 3.40 (s, 3H), 1.70-2.15 (m, 6H), 1.44 (s, 9H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：３２５．１０［ＭＨ］＋、ＲＴ１．９８分。
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－｛［ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］カルバモチオイル｝カルバマート
ＴＨＦ（８ｍＬ）中のＮ，Ｎ’－ビス－ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルチオ尿素（１．０９ｇ、３．９４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（０．４７ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで、ＴＦＡＡ（０．８３ｍＬ、５．９０ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで、ＴＨＦ（２ｍＬ）中の中間体１０（０．６５ｇ、３．９４ｍｍｏｌ）の溶液を０℃で添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、水（７０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×７０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、ブライン（７０ｍＬ）で洗浄し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中２０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（１．１０ｇ、８５％）を淡黄色固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 10.58 (s, 1H), 10.20 (d, J 6.85 Hz, 1H), 4.40-4.52 (m, 1H), 3.59-3.70 (m, 1H), 3.40 (s, 3H), 1.70-2.15 (m, 6H), 1.44 (s, 9H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：３２５．１０［ＭＨ］＋、ＲＴ１．９８分。
【0083】
中間体１２
メチル（３Ｓ）－３－［３－ベンジルオキシカルボニルアミノ）－２－クロロフェニル］－３－（｛（Ｚ）－Ｎ’－ｔｅｒｔ－ブトキシ－カルボニル－Ｎ－［ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］カルバムイミドイル｝アミノ）－ブタノアート
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の中間体１１（１．１０ｇ、３．３６ｍｍｏｌ）及びメチル（３Ｓ）－３－アミノ－３－［３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）－２－クロロフェニル］ブタノアート（国際公開第２０２１／０３２６８７号、中間体５を参照）（１．３９ｇ、３．３６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＥＤＣＩ（０．９６ｇ、５．０３ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１．１７ｍＬ、６．７１ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、水（１４０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×７０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、粗表題化合物（２．８０ｇ）を淡黄色の固体として得て、これをさらに精製することなく利用した。ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：６６７．１０［ＭＨ］＋、ＲＴ２．３５分。
メチル（３Ｓ）－３－［３－ベンジルオキシカルボニルアミノ）－２－クロロフェニル］－３－（｛（Ｚ）－Ｎ’－ｔｅｒｔ－ブトキシ－カルボニル－Ｎ－［ｒａｃ－（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］カルバムイミドイル｝アミノ）－ブタノアート
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の中間体１１（１．１０ｇ、３．３６ｍｍｏｌ）及びメチル（３Ｓ）－３－アミノ－３－［３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）－２－クロロフェニル］ブタノアート（国際公開第２０２１／０３２６８７号、中間体５を参照）（１．３９ｇ、３．３６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＥＤＣＩ（０．９６ｇ、５．０３ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１．１７ｍＬ、６．７１ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで、水（１４０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×７０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮して、粗表題化合物（２．８０ｇ）を淡黄色の固体として得て、これをさらに精製することなく利用した。ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：６６７．１０［ＭＨ］＋、ＲＴ２．３５分。
【0084】
中間体１３
ｔｅｒｔ－ブチル（ＮＥ）－Ｎ－｛（４Ｓ）－４－［３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）－２－クロロフェニル］－１－［（１ＲＳ，３ＲＳ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－２－イリデン｝－カルバマート
乾燥ＴＨＦ（２８ｍＬ）中の中間体１２（２．８０ｇ、３．０８ｍｍｏｌ）の溶液に、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（ＴＨＦ中１Ｍ、３．０８ｍＬ）を０℃で添加した。反応混合物を０℃で１．５時間撹拌し、次いで、水（１５０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×８０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をコンビフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中２５％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（１．８８ｇ、９４％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 10.51 (d, J 2.45 Hz, 1H), 9.24 (s, 1H), 7.58 (d, J 7.82 Hz, 1H), 7.29-7.45 (m, 6H), 7.18 (d, J 4.40 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.45-4.63 (m, 1H), 3.59 (d, J 16.63 Hz, 1H), 3.36-3.53 (m, 1H), 3.26-3.35 (s, 3H), 2.16-2.43 (m, 2H), 1.83-2.05 (m, 2H), 1.76 (s, 3H), 1.56-1.70 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.26-1.35 (m, 1H), 0.95-1.07 (m, 1H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：６３５．０５［ＭＨ］＋、ＲＴ２．３６分。
ｔｅｒｔ－ブチル（ＮＥ）－Ｎ－｛（４Ｓ）－４－［３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）－２－クロロフェニル］－１－［（１ＲＳ，３ＲＳ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－２－イリデン｝－カルバマート
乾燥ＴＨＦ（２８ｍＬ）中の中間体１２（２．８０ｇ、３．０８ｍｍｏｌ）の溶液に、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（ＴＨＦ中１Ｍ、３．０８ｍＬ）を０℃で添加した。反応混合物を０℃で１．５時間撹拌し、次いで、水（１５０ｍＬ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×８０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣をコンビフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中２５％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（１．８８ｇ、９４％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 10.51 (d, J 2.45 Hz, 1H), 9.24 (s, 1H), 7.58 (d, J 7.82 Hz, 1H), 7.29-7.45 (m, 6H), 7.18 (d, J 4.40 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.45-4.63 (m, 1H), 3.59 (d, J 16.63 Hz, 1H), 3.36-3.53 (m, 1H), 3.26-3.35 (s, 3H), 2.16-2.43 (m, 2H), 1.83-2.05 (m, 2H), 1.76 (s, 3H), 1.56-1.70 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.26-1.35 (m, 1H), 0.95-1.07 (m, 1H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：６３５．０５［ＭＨ］＋、ＲＴ２．３６分。
【0085】
中間体１４
ｔｅｒｔ－ブチル（ＮＥ）－Ｎ－｛（４Ｓ）－４－（３－アミノ－２－クロロフェニル）－１－［（１ＲＳ，３ＲＳ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－２－イリデン｝カルバマート
ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中の中間体１３（１．８８ｇ、２．８８ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン雰囲気下で２０％Ｐｄ／Ｃ（０．２３ｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を水素圧下、室温で４５分間撹拌し、次いで、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過し、ＭｅＯＨ（４×４０ｍＬ）で洗浄した。濾液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をコンビフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中２０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（１．２１ｇ、７９％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 10.46 (s, 1H), 6.95-7.08 (m, 1H), 6.75-6.83 (m, 1H), 6.40-6.50 (m, 1H), 5.52 (s, 2H), 4.49-4.67 (m, 1H), 3.44-3.60 (m, 2H), 3.28-3.36 (s, 3H), 3.05-3.16 (m, 1H), 2.18-2.42 (m, 2H), 1.84-2.07 (m, 1H), 1.74-1.84 (m, 1H), 1.73 (s, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.21-1.31 (m, 1H), 0.81-0.91 (m, 1H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：５００．９５［ＭＨ］＋、ＲＴ２．０６分。
ｔｅｒｔ－ブチル（ＮＥ）－Ｎ－｛（４Ｓ）－４－（３－アミノ－２－クロロフェニル）－１－［（１ＲＳ，３ＲＳ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－２－イリデン｝カルバマート
ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中の中間体１３（１．８８ｇ、２．８８ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン雰囲気下で２０％Ｐｄ／Ｃ（０．２３ｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を水素圧下、室温で４５分間撹拌し、次いで、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過し、ＭｅＯＨ（４×４０ｍＬ）で洗浄した。濾液を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をコンビフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中２０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（１．２１ｇ、７９％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 10.46 (s, 1H), 6.95-7.08 (m, 1H), 6.75-6.83 (m, 1H), 6.40-6.50 (m, 1H), 5.52 (s, 2H), 4.49-4.67 (m, 1H), 3.44-3.60 (m, 2H), 3.28-3.36 (s, 3H), 3.05-3.16 (m, 1H), 2.18-2.42 (m, 2H), 1.84-2.07 (m, 1H), 1.74-1.84 (m, 1H), 1.73 (s, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.21-1.31 (m, 1H), 0.81-0.91 (m, 1H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：５００．９５［ＭＨ］＋、ＲＴ２．０６分。
【0086】
中間体１５及び１６
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－｛［（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキシル］カルバモチオイル｝カルバマート（中間体１５）
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－｛［（１Ｓ，３Ｓ）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキシル］カルバモチオイル｝カルバマート（中間体１６）
中間体１１について記載される手順に従って、（１Ｒ＊，３Ｒ＊）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキサンアミン塩酸塩（国際公開第２０２１／０３２６８７号、中間体３２を参照）（２．７０ｍｍｏｌ）から調製した。得られた物質（１．６０ｇ）をキラル分取ＨＰＬＣ（カラム：ＡＤ、移動相：ＥｔＯＨ １０％／ヘプタン９０％／ＤＥＡ０．１％、温度：３０℃、波長：２４０ｎｍ、流速：１．５ｍＬ／分）に供して、表題化合物（例１５、ＲＴ２．９４分、及び例１６、ＲＴ３．７０分）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 10.63-10.62 (br s, 1H), 9.69-9.68 (br s, 1H), 4.28-4.26 (m, 1H), 2.06-2.02 (m, 4H), 1.94-1.83 (m, 1H), 1.52-1.69 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.34-1.25 (m, 1H), 0.96 (d, 3H).
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－｛［（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキシル］カルバモチオイル｝カルバマート（中間体１５）
ｔｅｒｔ－ブチルＮ－｛［（１Ｓ，３Ｓ）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキシル］カルバモチオイル｝カルバマート（中間体１６）
中間体１１について記載される手順に従って、（１Ｒ＊，３Ｒ＊）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキサンアミン塩酸塩（国際公開第２０２１／０３２６８７号、中間体３２を参照）（２．７０ｍｍｏｌ）から調製した。得られた物質（１．６０ｇ）をキラル分取ＨＰＬＣ（カラム：ＡＤ、移動相：ＥｔＯＨ １０％／ヘプタン９０％／ＤＥＡ０．１％、温度：３０℃、波長：２４０ｎｍ、流速：１．５ｍＬ／分）に供して、表題化合物（例１５、ＲＴ２．９４分、及び例１６、ＲＴ３．７０分）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 10.63-10.62 (br s, 1H), 9.69-9.68 (br s, 1H), 4.28-4.26 (m, 1H), 2.06-2.02 (m, 4H), 1.94-1.83 (m, 1H), 1.52-1.69 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.34-1.25 (m, 1H), 0.96 (d, 3H).
【0087】
９８％の信頼水準でＶＣＤ分析を適用することによって、表題化合物の絶対立体化学配置を確認した。
【0088】
中間体１７
ｔｅｒｔ－ブチル（ＮＥ）－Ｎ－｛（４Ｓ）－４－［３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）－２－クロロフェニル］－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキシル］－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－２－イリデン｝カルバマート
中間体１２について記載される手順、続いて中間体１３について記載される手順に従って、中間体１５（２．５０ｇ、２．９９ｍｍｏｌ）から調製して、表題化合物（２．４０ｇ、８８％）をオフホワイト色の固体として得た。ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：６１９．４０［ＭＨ］＋、ＲＴ１．６８分。
ｔｅｒｔ－ブチル（ＮＥ）－Ｎ－｛（４Ｓ）－４－［３－（ベンジルオキシカルボニルアミノ）－２－クロロフェニル］－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキシル］－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－２－イリデン｝カルバマート
中間体１２について記載される手順、続いて中間体１３について記載される手順に従って、中間体１５（２．５０ｇ、２．９９ｍｍｏｌ）から調製して、表題化合物（２．４０ｇ、８８％）をオフホワイト色の固体として得た。ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：６１９．４０［ＭＨ］＋、ＲＴ１．６８分。
【0089】
中間体１８
ｔｅｒｔ－ブチル（ＮＥ）－Ｎ－｛（４Ｓ）－４－（３－アミノ－２－クロロフェニル）－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メチル－シクロヘキシル］－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－２－イリデン｝カルバマート
中間体１４について記載される手順に従って、中間体１７（２．４０ｇ、２．６０ｍｍｏｌ）から調製して、表題化合物（０．８４ｇ、５７％）をオフホワイト色の固体として得た。ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：４８５．２５［ＭＨ］＋、ＲＴ２．３５分。
ｔｅｒｔ－ブチル（ＮＥ）－Ｎ－｛（４Ｓ）－４－（３－アミノ－２－クロロフェニル）－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メチル－シクロヘキシル］－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－２－イリデン｝カルバマート
中間体１４について記載される手順に従って、中間体１７（２．４０ｇ、２．６０ｍｍｏｌ）から調製して、表題化合物（０．８４ｇ、５７％）をオフホワイト色の固体として得た。ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：４８５．２５［ＭＨ］＋、ＲＴ２．３５分。
【0090】
中間体１９
３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボニルクロリド
ＤＣＭ（５ｍＬ）及びＤＭＦ（０．０２ｍＬ）中の３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボン酸（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｌｕｏｒｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２０００、１０６、１８９～１９７）（０．１３ｇ、０．６４ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化オキサリル（０．０９ｍＬ、１．００ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で４時間撹拌し、次いで、２５℃で真空中で濃縮して、表題化合物をオフホワイト色半固体として得て、これをさらに精製することなく用いた。
３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボニルクロリド
ＤＣＭ（５ｍＬ）及びＤＭＦ（０．０２ｍＬ）中の３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボン酸（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｌｕｏｒｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２０００、１０６、１８９～１９７）（０．１３ｇ、０．６４ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化オキサリル（０．０９ｍＬ、１．００ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で４時間撹拌し、次いで、２５℃で真空中で濃縮して、表題化合物をオフホワイト色半固体として得て、これをさらに精製することなく用いた。
【0091】
中間体２０
ｔｅｒｔ－ブチル（ＮＥ）－Ｎ－｛（４Ｓ）－４－（２－クロロ－３－｛［３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボニル］－アミノ｝フェニル）－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキシル］－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロ－ピリミジン－２－イリデン｝カルバマート
乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の中間体１８（０．１３ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）及び中間体１９（０．１４ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）の溶液に、ピリジン（０．０６ｍＬ、０．７８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、次いで、水（５０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（２×１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中５０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（０．０９ｇ、４９％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 0.82 (d, J 5.38 Hz, 3H), 0.96-1.09 (m, 1H), 1.21-1.30 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.50-1.61 (m, 1H), 1.79 (s, 3H), 2.01-2.24 (m, 3H), 2.87-3.09 (m, 1H), 3.61 (d, J 15.65 Hz, 1H), 3.93-4.11 (m, 1H), 4.45-4.72 (m, 1H), 5.23-5.52 (m, 2H), 7.30 (d, J 6.36 Hz, 1H), 7.36-7.54 (m, 2H), 7.94 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 10.12 (s, 1H), 10.54 (s, 1H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：６６１．１５［ＭＨ］＋、ＲＴ２．２７分。
ｔｅｒｔ－ブチル（ＮＥ）－Ｎ－｛（４Ｓ）－４－（２－クロロ－３－｛［３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボニル］－アミノ｝フェニル）－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキシル］－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロ－ピリミジン－２－イリデン｝カルバマート
乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の中間体１８（０．１３ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）及び中間体１９（０．１４ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）の溶液に、ピリジン（０．０６ｍＬ、０．７８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、次いで、水（５０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（２×１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中５０％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、表題化合物（０．０９ｇ、４９％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 0.82 (d, J 5.38 Hz, 3H), 0.96-1.09 (m, 1H), 1.21-1.30 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.50-1.61 (m, 1H), 1.79 (s, 3H), 2.01-2.24 (m, 3H), 2.87-3.09 (m, 1H), 3.61 (d, J 15.65 Hz, 1H), 3.93-4.11 (m, 1H), 4.45-4.72 (m, 1H), 5.23-5.52 (m, 2H), 7.30 (d, J 6.36 Hz, 1H), 7.36-7.54 (m, 2H), 7.94 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 10.12 (s, 1H), 10.54 (s, 1H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：６６１．１５［ＭＨ］＋、ＲＴ２．２７分。
【0092】
中間体２１
ｔｅｒｔ－ブチル（ＮＥ）－Ｎ－｛（４Ｓ）－４－（２－クロロ－３－｛［３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボニル］－アミノ｝フェニル）－１－［（１Ｓ ＊ ，３Ｓ ＊ ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］－４－メチル－６－オキソ－ヘキサヒドロピリミジン－２－イリデン｝カルバマート
ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）中の中間体１４（０．３５ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）の溶液に、３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボン酸（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｌｕｏｒｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２０００、１０６、１８９～１９７）（０．２６ｇ、１．３２ｍｍｏｌ）、ピリジン（０．２７ｍＬ、３．２９ｍｍｏｌ）及びＴ３Ｐ（登録商標）（ＥｔＯＡｃ中５０％）（１．９６ｍＬ、３．２９ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物を６０℃で１６時間加熱し、次いで、冷水（６０ｍＬ）に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃ（２×６０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中４０％ＥｔＯＡｃ）によって精製した。得られた物質をキラル分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ－４、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ、移動相Ａ：ｎ－ヘキサン＋０．１％イソプロピルアミン、移動相Ｂ：ＥｔＯＨ／ＭｅＯＨ（５０：５０）、流速：１．０ｍＬ／分、均一溶媒：２０％Ｂ）に供して、表題化合物（０．０９５ｇ、２１％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 10.53 (s, 1H), 10.12 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.47-7.55 (m, 1H), 7.39-7.47 (m, 1H), 7.24-7.34 (m, 1H), 5.33-5.43 (m, 2H), 4.47-4.63 (m, 1H), 3.63 (d, J 16.14 Hz, 1H), 3.43-3.53 (m, 1H), 3.27 (s, 3H), 2.18-2.43 (m, 2H), 1.91-2.08 (m, 1H), 1.79 (s, 3H), 1.60-1.75 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.20-1.38 (m, 2H), 0.86 (t, J 6.36 Hz, 1H).キラルＨＰＬＣ：ＲＴ１１．７２分（反対のジアステレオマーについてはＲＴ：１３．８４分）。
ｔｅｒｔ－ブチル（ＮＥ）－Ｎ－｛（４Ｓ）－４－（２－クロロ－３－｛［３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボニル］－アミノ｝フェニル）－１－［（１Ｓ ＊ ，３Ｓ ＊ ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］－４－メチル－６－オキソ－ヘキサヒドロピリミジン－２－イリデン｝カルバマート
ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）中の中間体１４（０．３５ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）の溶液に、３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボン酸（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｌｕｏｒｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２０００、１０６、１８９～１９７）（０．２６ｇ、１．３２ｍｍｏｌ）、ピリジン（０．２７ｍＬ、３．２９ｍｍｏｌ）及びＴ３Ｐ（登録商標）（ＥｔＯＡｃ中５０％）（１．９６ｍＬ、３．２９ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物を６０℃で１６時間加熱し、次いで、冷水（６０ｍＬ）に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃ（２×６０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ、１００～２００メッシュ、ヘキサン中４０％ＥｔＯＡｃ）によって精製した。得られた物質をキラル分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ－４、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ、移動相Ａ：ｎ－ヘキサン＋０．１％イソプロピルアミン、移動相Ｂ：ＥｔＯＨ／ＭｅＯＨ（５０：５０）、流速：１．０ｍＬ／分、均一溶媒：２０％Ｂ）に供して、表題化合物（０．０９５ｇ、２１％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 10.53 (s, 1H), 10.12 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.47-7.55 (m, 1H), 7.39-7.47 (m, 1H), 7.24-7.34 (m, 1H), 5.33-5.43 (m, 2H), 4.47-4.63 (m, 1H), 3.63 (d, J 16.14 Hz, 1H), 3.43-3.53 (m, 1H), 3.27 (s, 3H), 2.18-2.43 (m, 2H), 1.91-2.08 (m, 1H), 1.79 (s, 3H), 1.60-1.75 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.20-1.38 (m, 2H), 0.86 (t, J 6.36 Hz, 1H).キラルＨＰＬＣ：ＲＴ１１．７２分（反対のジアステレオマーについてはＲＴ：１３．８４分）。
【0093】
例１
Ｎ－（２－クロロ－３－｛（４Ｓ）－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキシル］－２－イミノ－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－４－イル｝フェニル）－３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボキサミド
ＤＣＭ（８ｍＬ）中の中間体２０（０．０８５ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（０．１９ｍＬ、２．４２ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌し、次いで、真空中で濃縮した。残渣を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２×４０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、水（５０ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（０．０３８ｇ、５４％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 0.83 (d, J 6.36 Hz, 3H), 0.99-1.19 (m, 2H), 1.47-1.68 (m, 3H), 1.69-1.92 (m, 2H), 1.94-2.08 (m, 2H), 2.74-2.91 (m, 1H), 3.49-3.66 (m, 1H), 3.80-3.99 (m, 1H), 4.61-4.82 (m, 1H), 5.31-5.48 (m, 2H), 5.92-6.14 (m, 2H), 7.32-7.46 (m, 3H), 7.93 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 10.05 (s, 1H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：５６１．２０［ＭＨ］＋、ＲＴ１．８４分。
【化7】
Ｎ－（２－クロロ－３－｛（４Ｓ）－１－［（１Ｒ，３Ｒ）－４，４－ジフルオロ－３－メチルシクロヘキシル］－２－イミノ－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－４－イル｝フェニル）－３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾール－４－カルボキサミド
ＤＣＭ（８ｍＬ）中の中間体２０（０．０８５ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（０．１９ｍＬ、２．４２ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌し、次いで、真空中で濃縮した。残渣を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２×４０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、水（５０ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空中で濃縮した。粗残渣を分取ＨＰＬＣによって精製して、表題化合物（０．０３８ｇ、５４％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 0.83 (d, J 6.36 Hz, 3H), 0.99-1.19 (m, 2H), 1.47-1.68 (m, 3H), 1.69-1.92 (m, 2H), 1.94-2.08 (m, 2H), 2.74-2.91 (m, 1H), 3.49-3.66 (m, 1H), 3.80-3.99 (m, 1H), 4.61-4.82 (m, 1H), 5.31-5.48 (m, 2H), 5.92-6.14 (m, 2H), 7.32-7.46 (m, 3H), 7.93 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 10.05 (s, 1H).ＬＣＭＳ（方法１、ＥＳＩ）：５６１．２０［ＭＨ］＋、ＲＴ１．８４分。
【0094】
塩酸塩の調製
ＤＣＭ（８ｍＬ）中の例１（０．０３５ｇ、０．０６ｍｍｏｌ）の溶液に、１，４－ジオキサン中の４Ｍ ＨＣｌ（０．０３ｍＬ、０．１２ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で２０分間撹拌し、次いで、真空中で濃縮した。粗残渣をジエチルエーテル（２ｍＬ）及びペンタン（５ｍＬ）で洗浄し、次いで、真空中で乾燥させ、例１（塩酸塩）（０．０３ｇ、８２％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 0.77 (d, J 2.93 Hz, 3H), 0.82-0.93 (m, 2H), 1.77 (s, 3H), 1.82-2.07 (m, 5H), 2.22-2.37 (m, 1H), 3.24-3.37 (m, 1H), 3.86 (s, 1H), 5.29-5.50 (m, 2H), 7.23-7.37 (m, 1H), 7.38-7.48 (m, 1H), 7.48-7.58 (m, 1H), 7.94-8.36 (m, 2H), 8.66-9.22 (m, 2H), 10.21 (m, 1H), 10.62 (s, 1H).ＬＣＭＳ（方法２、ＥＳＩ）：５６１．２０［ＭＨ］＋、ＲＴ２．４４分。
ＤＣＭ（８ｍＬ）中の例１（０．０３５ｇ、０．０６ｍｍｏｌ）の溶液に、１，４－ジオキサン中の４Ｍ ＨＣｌ（０．０３ｍＬ、０．１２ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で２０分間撹拌し、次いで、真空中で濃縮した。粗残渣をジエチルエーテル（２ｍＬ）及びペンタン（５ｍＬ）で洗浄し、次いで、真空中で乾燥させ、例１（塩酸塩）（０．０３ｇ、８２％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 0.77 (d, J 2.93 Hz, 3H), 0.82-0.93 (m, 2H), 1.77 (s, 3H), 1.82-2.07 (m, 5H), 2.22-2.37 (m, 1H), 3.24-3.37 (m, 1H), 3.86 (s, 1H), 5.29-5.50 (m, 2H), 7.23-7.37 (m, 1H), 7.38-7.48 (m, 1H), 7.48-7.58 (m, 1H), 7.94-8.36 (m, 2H), 8.66-9.22 (m, 2H), 10.21 (m, 1H), 10.62 (s, 1H).ＬＣＭＳ（方法２、ＥＳＩ）：５６１．２０［ＭＨ］＋、ＲＴ２．４４分。
【0095】
例２
Ｎ－（２－クロロ－３－｛（４Ｓ）－１－［（１Ｓ ＊ ，３Ｓ ＊ ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］－２－イミノ－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－４－イル｝フェニル）－３－（２，２，２－トリフルオロエチル）－イミダゾール－４－カルボキサミド塩酸塩
１，４－ジオキサン（２ｍＬ）中の中間体２１（０．０９ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の溶液に、１，４－ジオキサン中の４Ｍ ＨＣｌ（１．６６ｍＬ、６．６３ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で５時間撹拌し、次いで、真空中で濃縮した。粗残渣をジエチルエーテル（４ｍＬ）及びｎ－ペンタン（６ｍＬ）で洗浄し、次いで、真空中で乾燥させ、表題化合物（０．０６７ｇ、８１％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 10.72 (s, 1H), 10.26 (s, 1H), 9.06 (br s, 2H), 8.26 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.51-7.58 (m, 1H), 7.40-7.50 (m, 1H), 7.35 (d, J 7.82 Hz, 1H), 5.37-5.51 (m, 2H), 3.66-3.76 (m, 1H), 3.39-3.49 (m, 2H), 3.33 (d, J 16.14 Hz, 1H), 3.24 (s, 3H), 2.19-2.38 (m, 1H), 1.93-2.08 (m, 2H), 1.81-1.92 (m, 1H), 1.78 (s, 3H), 1.15-1.27 (m, 1H).１つのプロトンシグナルが溶媒ピークに融合した。ＬＣＭＳ（方法２、ＥＳＩ）：５７７．００［ＭＨ］＋、ＲＴ２．０５分。
【化8】
Ｎ－（２－クロロ－３－｛（４Ｓ）－１－［（１Ｓ ＊ ，３Ｓ ＊ ）－４，４－ジフルオロ－３－メトキシシクロヘキシル］－２－イミノ－４－メチル－６－オキソヘキサヒドロピリミジン－４－イル｝フェニル）－３－（２，２，２－トリフルオロエチル）－イミダゾール－４－カルボキサミド塩酸塩
１，４－ジオキサン（２ｍＬ）中の中間体２１（０．０９ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の溶液に、１，４－ジオキサン中の４Ｍ ＨＣｌ（１．６６ｍＬ、６．６３ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。反応混合物を室温で５時間撹拌し、次いで、真空中で濃縮した。粗残渣をジエチルエーテル（４ｍＬ）及びｎ－ペンタン（６ｍＬ）で洗浄し、次いで、真空中で乾燥させ、表題化合物（０．０６７ｇ、８１％）をオフホワイト色の固体として得た。δH (400 MHz, DMSO-d6) 10.72 (s, 1H), 10.26 (s, 1H), 9.06 (br s, 2H), 8.26 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.51-7.58 (m, 1H), 7.40-7.50 (m, 1H), 7.35 (d, J 7.82 Hz, 1H), 5.37-5.51 (m, 2H), 3.66-3.76 (m, 1H), 3.39-3.49 (m, 2H), 3.33 (d, J 16.14 Hz, 1H), 3.24 (s, 3H), 2.19-2.38 (m, 1H), 1.93-2.08 (m, 2H), 1.81-1.92 (m, 1H), 1.78 (s, 3H), 1.15-1.27 (m, 1H).１つのプロトンシグナルが溶媒ピークに融合した。ＬＣＭＳ（方法２、ＥＳＩ）：５７７．００［ＭＨ］＋、ＲＴ２．０５分。
【国際調査報告】