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特表2024-540320骨髄腫を処置する際に使用するための、Ｂ細胞成熟抗原に特異的なキメラ抗原受容体
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-10-31
(54)【発明の名称】骨髄腫を処置する際に使用するための、Ｂ細胞成熟抗原に特異的なキメラ抗原受容体
(51)【国際特許分類】
A61K 35/17 20150101AFI20241024BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20241024BHJP
A61K 38/06 20060101ALI20241024BHJP
A61K 31/198 20060101ALI20241024BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20241024BHJP
A61K 31/454 20060101ALI20241024BHJP
A61K 31/675 20060101ALI20241024BHJP
A61K 31/704 20060101ALI20241024BHJP
C07K 19/00 20060101ALI20241024BHJP
C12N 5/10 20060101ALI20241024BHJP
C12N 5/0783 20100101ALI20241024BHJP
C07K 14/705 20060101ALN20241024BHJP
【ＦＩ】
A61K35/17
A61K45/00
A61K38/06
A61K31/198
A61P35/00
A61K31/454
A61K31/675
A61K31/704
C07K19/00
C12N5/10
C12N5/0783
C07K14/705 ZNA
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024526671
(86)(22)【出願日】2022-11-02
(85)【翻訳文提出日】2024-06-18
(86)【国際出願番号】 US2022079190
(87)【国際公開番号】W WO2023081735
(87)【国際公開日】2023-05-11
(31)【優先権主張番号】63/275,414
(32)【優先日】2021-11-03
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/287,904
(32)【優先日】2021-12-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】508027464
【氏名又は名称】セルジーン コーポレーション
【氏名又は名称原語表記】ＣＥＬＧＥＮＥ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
(74)【代理人】
【識別番号】100145403
【弁理士】
【氏名又は名称】山尾 憲人
(74)【代理人】
【識別番号】100162684
【弁理士】
【氏名又は名称】呉 英燦
(74)【代理人】
【識別番号】100221523
【弁理士】
【氏名又は名称】佐藤 渉
(74)【代理人】
【識別番号】100126778
【弁理士】
【氏名又は名称】品川 永敏
(72)【発明者】
【氏名】ロウ，エバートン デック
(72)【発明者】
【氏名】キャンベル，ティモシー
(72)【発明者】
【氏名】マーティン，ネイサン トーマス
(72)【発明者】
【氏名】カイザー，シャリ
(72)【発明者】
【氏名】ヒージ，クリステン
【テーマコード（参考）】
4B065
4C084
4C086
4C087
4C206
4H045
【Ｆターム（参考）】
4B065AA94X
4B065AB01
4B065AC14
4B065CA24
4B065CA44
4C084AA02
4C084AA19
4C084BA01
4C084BA10
4C084BA15
4C084BA23
4C084BA31
4C084NA05
4C084ZB072
4C084ZB261
4C084ZB262
4C084ZC752
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC22
4C086DA38
4C086EA10
4C086GA07
4C086MA02
4C086MA04
4C086NA05
4C086ZB07
4C086ZB26
4C086ZC75
4C087AA01
4C087AA02
4C087BB37
4C087BB65
4C087CA04
4C087CA12
4C087NA05
4C087NA14
4C087ZB26
4C206AA01
4C206AA02
4C206FA53
4C206MA02
4C206MA04
4C206NA05
4C206ZB26
4C206ZC75
4H045BA10
4H045BA41
4H045CA40
4H045DA50
4H045EA20
4H045FA74
(57)【要約】
ある特定の形質細胞悪性病変を含む疾患および状態を処置するための、遺伝子操作された細胞の投与を伴う養子細胞療法の方法が本明細書に提供される。細胞は一般に、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に特異的なキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）等の組換え受容体を発現する。一部の実施形態では、方法は、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を選択および処置するためのものである。
【選択図】図１
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、（ａ）対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
を決定することと、
（ｂ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することと
を含む方法。
【請求項2】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、ヒトＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
が事前に決定された対象に投与することを含む方法。
【請求項3】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、（ａ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置について、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
が事前に決定された対象を選択することと、
（ｂ）Ｔ細胞療法を対象に投与することと
を含む方法。
【請求項4】
遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置について、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を選択する方法であって、対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
を決定することを含み、
ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有する場合、対象が、ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による投与について選択される方法。
【請求項5】
ヒトＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置に対する、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象の応答を予測する方法であって、対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
を決定することを含み、
ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有する場合、対象が、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成すると予測され、
処置が、遺伝子操作されたＴ細胞の用量の対象への投与を含む、方法。
【請求項6】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、（ａ）対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することと、
（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと、
（ｃ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することと
を含む方法。
【請求項7】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、ヒトＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、（ａ）対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病の存在を有すること
が事前に決定され；
（ｂ）（１）対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭがデバルキングされた、方法。
【請求項8】
デバルキングについて、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を選択する方法であって、対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すること
を決定することを含み、
ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定される場合、対象が、ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法の対象への投与の前のＭＭのデバルキングについて選択される方法。
【請求項9】
ヒトＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置に対する、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象の応答を予測する方法であって、対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すること
を決定することを含み、
ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有する場合、対象が、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成しないことが予測され、
処置が、遺伝子操作されたＴ細胞の用量の対象への投与を含む、方法。
【請求項10】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、（ａ）対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することと；
（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；
（ｃ）対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することと；
（ｄ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することと
を含む方法。
【請求項11】
対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高いかもしくは低い血清ｓＢＣＭＡレベルもしくはデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないこと
を決定することをさらに含む、請求項２、３、または７に記載の方法。
【請求項12】
対象が、約６００ｎｇ／より高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルまたはデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項13】
対象が、約５９０ｎｇ／ｍｌ、約５８０ｎｇ／ｍｌ、約５７０ｎｇ／ｍｌＬ、約５６６ｎｇ／ｍｌ、約５６０ｎｇ／ｍｌ、約５５０ｎｇ／ｍｌ、約５４０ｎｇ／ｍｌ、約５３０ｎｇ／ｍｌ、約５２０ｎｇ／ｍｌ、約５１０ｎｇ／ｍｌ、もしくは約５００ｎｇ／ｍｌより高いかもしくは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含み；および／または対象が、約５９０ｎｇ／ｍｌ、約５８０ｎｇ／ｍｌ、約５７０ｎｇ／ｍｌＬ、約５６６ｎｇ／ｍｌ、約５６０ｎｇ／ｍｌ、約５５０ｎｇ／ｍｌ、約５４０ｎｇ／ｍｌ、約５３０ｎｇ／ｍｌ、約５２０ｎｇ／ｍｌ、約５１０ｎｇ／ｍｌ、もしくは約５００ｎｇ／ｍｌより高いかもしくは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項14】
対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことを決定することを含む、請求項１～９および１１～１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項15】
対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有することを決定することが、対象の血清および／または尿中のＩｇＧを検出することを含む、請求項１～９および１１～１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項16】
血清ｓＢＣＭＡレベルの決定が、（ｉ）対象へのＴ細胞療法の投与の、または（ｉｉ）遺伝子操作されたＣＡＲ Ｔ細胞の用量の細胞が対象から得られる約３カ月前、約２カ月前、約１カ月前、約３週間前、約２週間前、または約１週間前に実行される、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項17】
対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことの決定が、（ｉ）対象へのＴ細胞療法の投与、または（ｉｉ）遺伝子操作されたＣＡＲ Ｔ細胞の用量の細胞が対象から得られる前の約３カ月、約２カ月、約１カ月、約３週間、約２週間、または約１週間の間に実行される、請求項１～９および１１～１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項18】
遺伝子操作された細胞の用量を対象に投与することをさらに含む、請求項４、５、８、９および１２～１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項19】
（ｉ）対象がＣＲまたはｓＣＲを達成すると予測される場合、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することをさらに含む；または（ｉｉ）対象がＣＲまたはｓＣＲを達成しないと予測される場合、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量の対象への投与の前に、ＭＭのデバルキングについて対象を選択することをさらに含む、請求項５、９および１２～１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項20】
対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の後に、対象が完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成する、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項21】
対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の後に、対象がＣＲを達成する、請求項１～２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項22】
対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の後に、対象がｓＣＲを達成する、請求項１～２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項23】
デバルキングが、対象に化学療法、放射線、および／または免疫調節剤を投与することを含む、請求項６～８、１０および１２～２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項24】
化学療法が、メルファラン、ドキソルビシン、またはシクロホスファミド化学療法を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項25】
免疫調節剤が、サリドマイド、レナリドマイド、またはポマリドマイドである、請求項２３または請求項２４に記載の方法。
【請求項26】
免疫調節剤が、チェックポイント阻害剤である、請求項２３～２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項27】
デバルキングが、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３カ月以内、約２カ月以内、約１カ月以内、約３週間以内、約２週間以内、または約１週間以内に実行される、請求項６～８、１０および１２～２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項28】
対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の前に、対象が、フルダラビンを、対象の体表面積１ｍ２当たり２０～４０ｍｇもしくは約２０～４０ｍｇで、適宜３０ｍｇ／ｍ２もしくは約３０ｍｇ／ｍ２で毎日２～４日間投与すること、および／またはシクロホスファミドを、対象の体表面積１ｍ２当たり２００～４００ｍｇもしくは約２００～４００ｍｇで、適宜３００ｍｇ／ｍ２もしくは約３００ｍｇ／ｍ２で毎日２～４日間投与することを含むリンパ球枯渇療法を受けている、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項29】
対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の前に、対象が、フルダラビンを、対象の体表面積１ｍ２当たり３０ｍｇもしくは約３０ｍｇで毎日、シクロホスファミドを、対象の体表面積１ｍ２当たり３００ｍｇもしくは約３００ｍｇで毎日、３日間投与することを含むリンパ球枯渇療法を受けている、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項30】
デバルキングがリンパ球枯渇療法前に実行される、請求項２８または請求項２９に記載の方法。
【請求項31】
デバルキングがリンパ球枯渇療法後に実行される、請求項２８～３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項32】
ＭＭが高リスクＭＭならびに／または再発したおよび／もしくは不応性の（ｒ／ｒ）ＭＭである、請求項１～３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項33】
ＭＭが高リスクＭＭである、請求項１～３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項34】
ＭＭが再発したおよび／または不応性の（ｒ／ｒ）ＭＭである、請求項１～３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項35】
対象が１８歳以上である、請求項１～３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項36】
対象が、ＭＭに対して３以上の事前治療ラインを以前に受けたことがある、請求項１～３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項37】
３以上の事前治療ラインのそれぞれが、進行性疾患（ＰＤ；最終用量後６０日以内の進行）がその治療ラインに対する最良の応答でない限り、２回の連続サイクルを含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項38】
３以上の事前治療ラインが、プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤、および抗ＣＤ３８抗体を含む、請求項３６または請求項３７に記載の方法。
【請求項39】
対象が、３以上の事前治療ラインのうちの最後に対して不応性である、請求項３６～３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項40】
対象が、０または１の米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータスを有する、請求項１～３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項41】
対象が、遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与時に測定可能な疾患を有する、請求項１～４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項42】
測定可能な疾患が、（ｉ）血清Ｍタンパク質 １．０ｇ／ｄＬ以上；
（ｉｉ）尿Ｍタンパク質 ２００ｍｇ／２４時間以上；および／または
（ｉｉｉ）血清遊離軽鎖（ＦＬＣ）比が異常である場合、罹病血清ＦＬＣレベル １０ｍｇ／ｄＬ以上
を含む、請求項４１に記載の方法。
【請求項43】
対象が、（ｉ）中枢神経系（ＣＮＳ）病変；および／または
（ｉｉ）臨床的に関連するＣＮＳ病態の病歴もしくは存在
を有さない、請求項１～４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項44】
対象が、活動性の形質細胞白血病（ＰＣＬ）またはＰＣＬの病歴を有さない、請求項１～４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項45】
ＣＡＲが、ＢＣＭＡに結合する細胞外抗原結合性ドメイン、膜貫通ドメイン、および細胞内シグナル伝達領域を含む、請求項１～４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項46】
細胞外抗原結合性ドメインが、可変重鎖（ＶＨ）領域、および適宜、可変軽鎖（ＶＬ）領域を含む、請求項４５に記載の方法。
【請求項47】
ＶＨ領域が、配列番号１８９、１９０および１９１にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２およびＣＤＲ－Ｈ３を含み；ＶＬ領域が、配列番号１９２、１９３および１９４にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２およびＣＤＲ－Ｌ３を含み；またはＶＨ領域が、配列番号１７３、１７４および１７５にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２およびＣＤＲ－Ｈ３を含み；ＶＬ領域が、配列番号１８３、１８４および１８５にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２およびＣＤＲ－Ｌ３を含む、請求項４６に記載の方法。
【請求項48】
ＶＨ領域が、配列番号１８に記載されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ領域が、配列番号１９に記載されるアミノ酸配列を含み；またはＶＨ領域が、配列番号２４に記載されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ領域が、配列番号２５に記載されるアミノ酸配列を含む、請求項４６または請求項４７に記載の方法。
【請求項49】
細胞外抗原結合性ドメインが、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、請求項４５～４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項50】
ｓｃＦｖが、配列番号２１３または配列番号１８８に記載のアミノ酸配列を含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項51】
細胞内シグナル伝達領域が、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、請求項４５～５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項52】
共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、もしくはＩＣＯＳの細胞内シグナル伝達ドメイン、またはそのシグナル伝達部分を含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項53】
共刺激シグナル伝達ドメインが、膜貫通ドメインと、ＣＤ３－ゼータ（ＣＤ３ζ）鎖の細胞質シグナル伝達ドメインとの間にある、請求項５１または請求項５２に記載の方法。
【請求項54】
膜貫通ドメインが、ＣＤ２８またはＣＤ８、適宜ヒトＣＤ２８またはＣＤ８由来の膜貫通ドメインであるか、またはそれを含む、請求項４５～５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項55】
ＣＡＲが、抗原結合性ドメインと膜貫通ドメインとの間に細胞外スペーサーをさらに含む、請求項４５～５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項56】
スペーサーがＣＤ８由来であり、適宜スペーサーがＣＤ８αヒンジである、請求項５５に記載の方法。
【請求項57】
膜貫通ドメインおよびスペーサーがＣＤ８由来である、請求項５５または請求項５６に記載の方法。
【請求項58】
ＣＡＲが、配列番号１１６または配列番号１２４に記載されるアミノ酸配列を含む、請求項４５～５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項59】
ＣＡＲが、配列番号２１４に記載されるポリヌクレオチド配列によってコードされる、請求項４５～５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項60】
ＣＡＲがＡＢＥＣＭＡ（著作権）である、請求項１～５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項61】
遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、イデカブタゲン・ビクルユーセル細胞；ｂｂ２１２１７細胞；オルバカブタゲン・オートルユーセル細胞；ＣＴ１０３Ａ細胞；シルタカブタゲン・オートルユーセル細胞；ＫＩＴＥ５８５細胞；ＣＴ０５３細胞；ＢＣＭＡ－ＣＳ１ ｃＣＡＲ（ＢＣ１ｃＣＡＲ）細胞；Ｐ－ＢＣＭＡ－１０１細胞；Ｐ－ＢＣＭＡ－ＡＬＬＯ１細胞；Ｃ－ＣＡＲ０８８細胞；Ｄｅｓｃａｒｔｅｓ－０８細胞；ＰＢＣＡＲ２６９Ａ細胞；ＡＬＬＯ－７１５細胞；ＰＨＥ８８５細胞；ＡＵＴＯ８細胞；ＣＴＸ１２０細胞；ＣＢ－０１１細胞；ＡＬＬＯ－６０５（ＴｕｂｏＣＡＲ／ＭＭ）細胞；ｐＣＤＣＡＲ１（ＴｒｉＣＡＲ－Ｚ１３６）細胞、またはＧＣ０１２Ｆ細胞を含む、請求項１～６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項62】
遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、イデカブタゲン・ビクルユーセル細胞を含む、請求項１～６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項63】
遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、ＣＤ３＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞を含む、請求項１～６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項64】
遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、ＣＤ４＋ Ｔ細胞およびＣＤ８＋ Ｔ細胞の組合せならびに／またはＣＤ４＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞およびＣＤ８＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞の組合せを含む、請求項１～６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項65】
ＣＤ４＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞対ＣＤ８＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞および／またはＣＤ４＋ Ｔ細胞対ＣＤ８＋ Ｔ細胞の比が、１：１もしくはおよそ１：１であるかまたは１：３もしくはおよそ１：３～３：１もしくはおよそ３：１の間である、請求項６４に記載の方法。
【請求項66】
ナイーブ様Ｔ細胞および／もしくはセントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージが、用量中の合計の遺伝子操作されたＴ細胞の６０％を超えるかもしくはその概数を超え、適宜６５％、７０％、８０％、９０％、もしくは９５％を超えるかもしくはその概数を超え；ナイーブ様Ｔ細胞および／もしくはセントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージが、用量中の合計のＣＤ４＋の遺伝子操作されたＴ細胞の４０％を超えるかもしくはその概数を超え、適宜５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、もしくは９５％を超えるかもしくはその概数を超え；または
ナイーブ様Ｔ細胞および／もしくはセントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージが、用量中の合計のＣＤ８＋の遺伝子操作されたＴ細胞の４０％を超えるかもしくはその概数を超え、適宜５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、もしくは９５％を超えるかもしくはその概数を超える、請求項１～６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項67】
ナイーブ様Ｔ細胞が、ＣＣＲ７＋ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＤ２７＋ＣＣＲ７＋、またはＣＤ６２Ｌ－ＣＣＲ７＋である、請求項６６に記載の方法。
【請求項68】
遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、約０．５×１０６～約６００×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含む、請求項１～６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項69】
遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、約１００×１０６～約６００×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含む、請求項１～６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項70】
遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、約１５０×１０６～約４５０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含む、請求項１～６９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項71】
遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、約１５０×１０６、３００×１０６、または約４５０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含む、請求項１～７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項72】
遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、約０．５×１０６～約１０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含む、実施形態１～６８のいずれか１つに記載の方法。
【請求項73】
遺伝子操作されたＣＡＲ Ｔ細胞の用量の細胞が対象から得られた、請求項１～７２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項74】
遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、対象にとって自家である、請求項１～７３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項75】
遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、対象にとって同種異系である、請求項１～７２のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願に対する相互参照
本出願は、「Ｂ細胞成熟抗原に特異的なキメラ抗原受容体を使用する処置のための方法（ＭＥＴＨＯＤＳ ＦＯＲ ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ ＵＳＩＮＧ ＣＨＩＭＥＲＩＣ ＡＮＴＩＧＥＮ ＲＥＣＥＰＴＯＲＳ ＳＰＥＣＩＦＩＣ ＦＯＲ Ｂ－ＣＥＬＬ ＭＡＴＵＲＡＴＩＯＮ ＡＮＴＩＧＥＮ）」と題する２０２１年１１月３日に出願された米国仮出願第６３／２７５，４１４号および「Ｂ細胞成熟抗原に特異的なキメラ抗原受容体を使用する処置のための方法（ＭＥＴＨＯＤＳ ＦＯＲ ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ ＵＳＩＮＧ ＣＨＩＭＥＲＩＣ ＡＮＴＩＧＥＮ ＲＥＣＥＰＴＯＲＳ ＳＰＥＣＩＦＩＣ ＦＯＲ Ｂ－ＣＥＬＬ ＭＡＴＵＲＡＴＩＯＮ ＡＮＴＩＧＥＮ ）」と題する２０２１年１２月９日に出願された米国仮出願第６３／２８７，９０４号からの優先権を主張する。その内容は、その全体が参照により組み込まれる。
本出願は、「Ｂ細胞成熟抗原に特異的なキメラ抗原受容体を使用する処置のための方法（ＭＥＴＨＯＤＳ ＦＯＲ ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ ＵＳＩＮＧ ＣＨＩＭＥＲＩＣ ＡＮＴＩＧＥＮ ＲＥＣＥＰＴＯＲＳ ＳＰＥＣＩＦＩＣ ＦＯＲ Ｂ－ＣＥＬＬ ＭＡＴＵＲＡＴＩＯＮ ＡＮＴＩＧＥＮ）」と題する２０２１年１１月３日に出願された米国仮出願第６３／２７５，４１４号および「Ｂ細胞成熟抗原に特異的なキメラ抗原受容体を使用する処置のための方法（ＭＥＴＨＯＤＳ ＦＯＲ ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ ＵＳＩＮＧ ＣＨＩＭＥＲＩＣ ＡＮＴＩＧＥＮ ＲＥＣＥＰＴＯＲＳ ＳＰＥＣＩＦＩＣ ＦＯＲ Ｂ－ＣＥＬＬ ＭＡＴＵＲＡＴＩＯＮ ＡＮＴＩＧＥＮ ）」と題する２０２１年１２月９日に出願された米国仮出願第６３／２８７，９０４号からの優先権を主張する。その内容は、その全体が参照により組み込まれる。
【0002】
配列表の参照による組み込み
本出願は、電子形式の配列表と共に提出される。配列表は、２０２２年１１月２日に作成された６８３７７２００１４４０ＳｅｑＬｉｓｔ．ＸＭＬと題するファイルとして提供され、そのサイズは３４９，６５５バイトである。配列表の電子形式の情報は、その全体が参照により組み込まれる。
本出願は、電子形式の配列表と共に提出される。配列表は、２０２２年１１月２日に作成された６８３７７２００１４４０ＳｅｑＬｉｓｔ．ＸＭＬと題するファイルとして提供され、そのサイズは３４９，６５５バイトである。配列表の電子形式の情報は、その全体が参照により組み込まれる。
【0003】
本開示は、一部の態様では、多発性骨髄腫（ＭＭ）を処置するための、遺伝子操作された細胞の投与を伴う養子細胞療法に関する。細胞は一般に、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に特異的なキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）等の組換え受容体を発現する。一部の実施形態では、本開示は、ＣＡＲ発現細胞による処置についてＭＭを有する対象を選択し、それによる処置に対する対象の応答を予測するための方法にも関する。
【背景技術】
【0004】
Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）は成熟Ｂリンパ球で発現する膜貫通タイプＩＩＩのタンパク質である。ＢＣＭＡがそのリガンドであるＴＮＦファミリーのＢ細胞（ＢＡＦＦ）または増殖誘導リガンド（ＡＰＲＩＬ）と結合した後、細胞生存を促進するシグナルがＢ細胞に送達され、これが形質細胞の生存に必要であることが判明している。ＢＣＭＡの発現は、がん、自己免疫傷害および感染性疾患を含むいくつかの疾患と関連している。がんを含む様々な疾患および状態におけるＢＣＭＡの役割により、ＢＣＭＡは治療標的となっている。様々なＢＣＭＡ結合キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、およびそのようなＣＡＲを発現する細胞が利用可能である。しかしながら、ＢＣＭＡ結合ＣＡＲおよび操作されたＢＣＭＡ－ＣＡＲ発現標的細胞、例えば養子細胞療法における使用のために、対象を選択する方法、およびそれを用いて患者を処置する方法を改善するニーズが依然として存在する。本明細書に提供されるのは、そのようなニーズを満たす実施形態である。
【発明の概要】
【0005】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、（ａ）対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないことを決定することと、（ｂ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含有するＴ細胞療法を対象に投与することとを含む方法が本明細書に提供される。
【0006】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有するかまたは有することが疑われる対象を処置する方法であって、ヒトＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含有するＴ細胞療法を、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること、および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないことが事前に決定された対象に投与することを含む方法も本明細書に提供される。
【0007】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、（ａ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含有するＴ細胞療法による処置について、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること、および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないことが事前に決定された対象を選択することと、（ｂ）Ｔ細胞療法を対象に投与することとを含む方法も本明細書に提供される。
【0008】
遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含有するＴ細胞療法による処置について、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を選択する方法であって、対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないことを決定することを含み、ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有することが決定される場合、対象が、ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含有するＴ細胞療法による投与について選択される方法も本明細書に提供される。
【0009】
ヒトＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含有するＴ細胞療法による処置に対する、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象の応答を予測する方法であって、対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること、および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないことを決定することを含み、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有する場合、対象は完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成すると予測され、処置が、対象へのその用量の遺伝子操作されたＴ細胞の投与を含む、方法も本明細書に提供される。
【0010】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること、および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）が存在することを決定することと、（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと、（ｃ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含有するＴ細胞療法を対象に投与することとを含む方法も本明細書に提供される。
【0011】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、ヒトＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含有するＴ細胞療法を対象に投与することを含み、（ａ）対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること、および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することが事前に決定され、（ｂ）（１）対象が、（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭがデバルキングされた、方法も本明細書に提供される。
【0012】
デバルキングについて、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を選択する方法であって、対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することを含み、ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有することが決定される場合、対象が、ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含有するＴ細胞療法の対象への投与の前に、ＭＭのデバルキングについて選択される方法も本明細書に提供される。
【0013】
ヒトＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含有するＴ細胞療法による処置に対する多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象の応答を予測する方法であって、対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること、および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することを含み、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有する場合、対象は完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成しないと予測され、処置が、対象へのその用量の遺伝子操作されたＴ細胞の投与を含む方法も本明細書に提供される。
【0014】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、（ａ）対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することと、（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと、（ｃ）対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することと、（ｄ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含有するＴ細胞療法を対象に投与することとを含む方法が本明細書に提供される。
【0015】
一部の実施形態では、対象はヒトである。
【0016】
一部の実施形態では、方法は、対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高いかもしくは低い血清ｓＢＣＭＡレベルもしくはデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すること；および／または（ｉｉ）ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことを決定することをさらに含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルまたはデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。
【0017】
一部の実施形態では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないことを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること、およびＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないことを決定することを含む。
【0018】
一部の実施形態では、対象は、約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないと決定される。一部の実施形態では、対象は、約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有し、かつＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないと決定される。
【0019】
一部の実施形態では、方法は、対象が、約５９０ｎｇ／ｍＬ、約５８０ｎｇ／ｍＬ、約５７０ｎｇ／ｍＬ、約５６０ｎｇ／ｍＬ、約５５０ｎｇ／ｍＬ、約５４０ｎｇ／ｍＬ、約５３０ｎｇ／ｍＬ、約５２０ｎｇ／ｍＬ、約５１０ｎｇ／ｍＬ、または約５００ｎｇ／ｍＬより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、対象は、約５９０ｎｇ／ｍＬ、約５８０ｎｇ／ｍＬ、約５７０ｎｇ／ｍＬ、約５６０ｎｇ／ｍＬ、約５５０ｎｇ／ｍＬ、約５４０ｎｇ／ｍＬ、約５３０ｎｇ／ｍＬ、約５２０ｎｇ／ｍＬ、約５１０ｎｇ／ｍＬ、または約５００ｎｇ／ｍＬより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。
【0020】
一部の実施形態では、方法は、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、対象は、約５６６ｎｇ／ｍＬより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有することを決定することは、対象の血清中のＩｇＧを検出することを含む。一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有することを決定することは、対象の尿中のＩｇＧを検出することを含む。
【0021】
一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルの決定は、（ｉ）対象へのＴ細胞療法の投与の、または（ｉｉ）遺伝子操作されたＣＡＲ Ｔ細胞の用量の細胞が対象から得られる約３カ月前、約２カ月前、約１カ月前、約３週間前、約２週間前、または約１週間前に実行される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の約３カ月前、約２カ月前、約１カ月前、約３週間前、約２週間前、または約１週間前に実行される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルの決定は、遺伝子操作されたＣＡＲ Ｔ細胞の用量の細胞が対象から得られる約３カ月前、約２カ月前、約１カ月前、約３週間前、約２週間前、または約１週間前に実行される。
【0022】
一部の実施形態では、方法は、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことを決定することを含む。一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有することを決定することは、対象の血清および／または尿中のＩｇＧを検出することを含む。
【0023】
一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことの決定は、（ｉ）対象へのＴ細胞療法の投与、または（ｉｉ）遺伝子操作されたＣＡＲ Ｔ細胞の用量の細胞が対象から得られる前の約３カ月、約２カ月、約１カ月、約３週間、約２週間、または約１週間の間に実行される。一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３カ月、約２カ月、約１カ月、約３週間、約２週間、または約１週間の間に実行される。一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことの決定は、遺伝子操作されたＣＡＲ Ｔ細胞の用量の細胞が対象から得られる前の約３カ月、約２カ月、約１カ月、約３週間、約２週間、または約１週間の間に実行される。
【0024】
一部の実施形態では、方法は、遺伝子操作された細胞の用量を対象に投与することを含む。
【0025】
一部の実施形態では、対象がＣＲまたはｓＣＲを達成すると予測される場合、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することをさらに含む。
【0026】
一部の実施形態では、対象がＣＲまたはｓＣＲを達成しないと予測される場合、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量の対象への投与の前に、ＭＭのデバルキングについて対象を選択することをさらに含む。
【0027】
一部の実施形態では、対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の後に、対象は完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成する。一部の実施形態では、対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の後に、対象はＣＲを達成する。一部の実施形態では、対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の後に、対象はｓＣＲを達成する。
【0028】
一部の実施形態では、デバルキングは、対象に化学療法、放射線、および／または免疫調節剤を投与することを含む。一部の実施形態では、デバルキングは、対象に化学療法を投与することを含む。一部の実施形態では、デバルキングは、対象に放射線を投与することを含む。一部の実施形態では、デバルキングは、対象に免疫調節剤を投与することを含む。一部の実施形態では、デバルキングは、対象に化学療法および放射線を投与することを含む。一部の実施形態では、デバルキングは、対象に化学療法および免疫調節剤を投与することを含む。一部の実施形態では、デバルキングは、対象に放射線および免疫調節剤を投与することを含む。一部の実施形態では、デバルキングは、対象に化学療法、放射線、および免疫調節剤を投与することを含む。
【0029】
一部の実施形態では、化学療法は、メルファラン、ドキソルビシン、またはシクロホスファミド化学療法であるかまたはそれを含む。一部の実施形態では、化学療法は、メルファランであるかまたはそれを含む。一部の実施形態では、化学療法は、ドキソルビシンであるかまたはそれを含む。一部の実施形態では、化学療法は、シクロホスファミド化学療法であるかまたはそれを含む。一部の実施形態では、免疫調節剤は、サリドマイド、レナリドマイド、またはポマリドマイドである。一部の実施形態では、免疫調節剤はサリドマイドである。一部の実施形態では、免疫調節剤はレナリドミドである。一部の実施形態では、免疫調節剤はポマリドマイドである。一部の実施形態では、免疫調節剤はチェックポイント阻害剤である。
【0030】
一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３カ月以内、約２カ月以内、約１カ月以内、約３週間以内、約２週間以内、または約１週間以内に実行される。
【0031】
一部の実施形態では、対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の前に、対象は、フルダラビンを、対象の体表面積１ｍ２当たり２０～４０ｍｇもしくは約２０～４０ｍｇで、適宜３０ｍｇ／ｍ２もしくは約３０ｍｇ／ｍ２で毎日２～４日間投与すること、および／またはシクロホスファミドを、対象の体表面積１ｍ２当たり２００～４００ｍｇもしくは約２００～４００ｍｇで、適宜３００ｍｇ／ｍ２もしくは約３００ｍｇ／ｍ２で毎日２～４日間投与することを含むリンパ球枯渇療法を受けている。一部の実施形態では、対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の前に、対象は、フルダラビンを、対象の体表面積１ｍ２当たり３０ｍｇもしくは約３０ｍｇ／ｍ２で毎日、シクロホスファミドを、対象の体表面積１ｍ２当たり３００ｍｇもしくは約３００ｍｇ／ｍ２で毎日、３日間投与することを含むリンパ球枯渇療法を受けている。
【0032】
一部の実施形態では、デバルキングはリンパ球枯渇療法前に実行される。一部の実施形態では、デバルキングはリンパ球枯渇療法後に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、リンパ球枯渇療法前およびリンパ球枯渇療法後に実行される。一部の実施形態では、対象は、遺伝子操作されたＴ細胞の用量の対象への投与の前に、ガンマセクレターゼ阻害剤で処置される。
【0033】
一部の実施形態では、ＭＭは、高リスクＭＭ、または再発したおよび／もしくは不応性の（ｒ／ｒ）ＭＭである。一部の実施形態では、ＭＭは、高リスクＭＭ、または再発したおよび不応性の（ｒ／ｒ）ＭＭである。一部の実施形態では、ＭＭは高リスクＭＭである。一部の実施形態では、ＭＭは再発したおよび不応性の（ｒ／ｒ）ＭＭである。一部の実施形態では、ＭＭは再発したまたは不応性の（ｒ／ｒ）ＭＭである。一部の実施形態では、ＭＭは高リスクＭＭならびに再発したおよび不応性の（ｒ／ｒ）ＭＭである。
【0034】
一部の実施形態では、対象は１８歳以上である。一部の実施形態では、対象は、ＭＭに対して３以上の事前治療ラインを以前に受けたことがある。一部の実施形態では、３以上の事前治療ラインの各々は、進行性疾患がその治療ラインに対して最良の応答を示さない限り、２回の連続サイクルを含んだ。一部の実施形態では、進行性疾患とは、治療ラインの最終投与後６０日以内の進行である。一部の実施形態では、３以上の事前治療ラインは、プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤、および抗ＣＤ３８抗体を含む。一部の実施形態では、対象は、３以上の事前治療ラインのうちの最後に対して不応性である。一部の実施形態では、対象は、０または１の米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータスを有する。一部の実施形態では、対象は０の米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータスを有する。一部の実施形態では、対象は１の米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータスを有する。
【0035】
一部の実施形態では、対象は、遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与時に測定可能な疾患を有する。一部の実施形態では、測定可能な疾患は、（ｉ）血清Ｍタンパク質 １．０ｇ／ｄＬ以上；（ｉｉ）尿Ｍタンパク質 ２００ｍｇ以上／２４時間；および／または（ｉｉｉ）血清遊離軽鎖（ＦＬＣ）比が異常である場合、罹病血清ＦＬＣレベル １０ｍｇ／ｄＬ以上を含む。一部の実施形態では、測定可能な疾患は、血清Ｍタンパク質 １．０ｇ／ｄＬ以上を含む。一部の実施形態では、測定可能な疾患は、尿Ｍタンパク質 ２００ｍｇ以上／２４時間を含む。一部の実施形態では、測定可能な疾患は、血清遊離軽鎖（ＦＬＣ）比が異常である場合、罹病血清ＦＬＣレベル １０ｍｇ／ｄＬ以上を含む。一部の実施形態では、測定可能な疾患は、（ｉ）血清Ｍタンパク質 １．０ｇ／ｄＬ以上；および（ｉｉ）尿Ｍタンパク質 ２００ｍｇ以上／２４時間を含む。一部の実施形態では、測定可能な疾患は、（ｉ）血清Ｍタンパク質 １．０ｇ以上；および（ｉｉ）血清遊離軽鎖ＦＬＣ比が異常である場合、罹病血清（ＦＬＣ）レベル １０ｍｇ／ｄＬ以上を含む。一部の実施形態では、測定可能な疾患は、（ｉ）尿Ｍタンパク質 ２００ｍｇ以上／２４時間；および（ｉｉ）血清遊離軽鎖（ＦＬＣ）比が異常である場合、罹病血清ＦＬＣレベル １０ｍｇ／ｄＬ以上を含む。一部の実施形態では、測定可能な疾患は、（ｉ）血清Ｍタンパク質 １．０ｇ以上；（ｉｉ）尿Ｍタンパク質 ２００ｍｇ以上／２４時間；および（ｉｉｉ）血清遊離軽鎖（ＦＬＣ）比が異常である場合、罹病血清ＦＬＣレベル １０ｍｇ／ｄＬ以上を含む。
【0036】
一部の実施形態では、対象は、（ｉ）中枢神経系（ＣＮＳ）病変；および／または
（ｉｉ）臨床的に関連するＣＮＳ病態の病歴もしくは存在
を有さない。一部の実施形態では、対象は、中枢神経系（ＣＮＳ）病変を有さない。一部の実施形態では、対象は、臨床的に関連するＣＮＳ病態の病歴または存在を有さない。一部の実施形態では、対象は、（ｉ）中枢神経系（ＣＮＳ）病変；または
（ｉｉ）臨床的に関連するＣＮＳ病態の病歴もしくは存在
を有さない。一部の実施形態では、対象は、活動性の形質細胞白血病（ＰＣＬ）またはその病歴を有さない。
（ｉｉ）臨床的に関連するＣＮＳ病態の病歴もしくは存在
を有さない。一部の実施形態では、対象は、中枢神経系（ＣＮＳ）病変を有さない。一部の実施形態では、対象は、臨床的に関連するＣＮＳ病態の病歴または存在を有さない。一部の実施形態では、対象は、（ｉ）中枢神経系（ＣＮＳ）病変；または
（ｉｉ）臨床的に関連するＣＮＳ病態の病歴もしくは存在
を有さない。一部の実施形態では、対象は、活動性の形質細胞白血病（ＰＣＬ）またはその病歴を有さない。
【0037】
一部の実施形態では、ＣＡＲは、ＢＣＭＡに結合する細胞外抗原結合性ドメイン、膜貫通ドメイン、および細胞内シグナル伝達領域を含有する。
【0038】
一部の実施形態では、細胞外抗原結合性ドメインは可変重鎖（ＶＨ）領域を含有する。一部の実施形態では、細胞外抗原結合性ドメインは、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）を含有するか、またはそれらからなる。一部の実施形態では、ｓｄＡｂは可変重鎖（ＶＨ）領域である。一部の実施形態では、細胞外抗原結合性ドメインは、２つのｓｄＡｂを含有するか、またはそれらからなる。一部の実施形態では、２つのｓｄＡｂの各々は可変重鎖（ＶＨ）領域である。一部の実施形態では、２つのｓｄＡｂｓの各々は、ＢＣＭＡの異なるエピトープに結合する。一部の実施形態では、２つのｓｄＡｂｓの各々は、ＢＣＭＡの同じエピトープに結合する。
【0039】
一部の実施形態では、細胞外抗原結合性ドメインは、可変重鎖（ＶＨ）領域および可変軽鎖（ＶＬ）領域を含む。一部の実施形態では、ＶＨ領域は、配列番号１８９、１９０および１９１にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含有するＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２およびＣＤＲ－Ｈ３を含有し；ならびにＶＬ領域は、配列番号１９２、１９３および１９４にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含有するＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２およびＣＤＲ－Ｌ３を含有するか：またはＶＨ領域は、配列番号１７３、１７４および１７５にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含有するＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２およびＣＤＲ－Ｈ３を含有し；ならびにＶＬ領域は、配列番号１８３、１８４および１８５にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含有するＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２およびＣＤＲ－Ｌ３を含有する。一部の実施形態では、ＶＨ領域は、配列番号１８９、１９０および１９１にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含有するＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２およびＣＤＲ－Ｈ３を含有し；ならびにＶＬ領域は、配列番号１９２、１９３および１９４にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含有するＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２およびＣＤＲ－Ｌ３を含有する。一部の実施形態では、ＶＨ領域は、配列番号１７３、１７４および１７５にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含有するＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２およびＣＤＲ－Ｈ３を含有し；ならびにＶＬ領域は、配列番号１８３、１８４および１８５にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含有するＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２およびＣＤＲ－Ｌ３を含有する。一部の実施形態では、ＶＨ領域は、配列番号１８に記載されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ領域は、配列番号１９に記載されるアミノ酸配列を含むか；またはＶＨ領域は、配列番号２４に記載されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ領域は、配列番号２５に記載されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＶＨ領域は、配列番号１８に記載されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ領域は、配列番号１９に記載されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＶＨ領域は、配列番号２４に記載されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ領域は、配列番号２５に記載されるアミノ酸配列を含む。
【0040】
一部の実施形態では、細胞外抗原結合性ドメインは、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号２１３または配列番号１８８に記載のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号１８８に記載されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号２１６～２４７のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む。
【0041】
一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達領域は、ＣＤ３－ゼータ（ＣＤ３ζ）鎖の細胞質シグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達領域は、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、もしくはＩＣＯＳの細胞内シグナル伝達ドメイン、またはそのシグナル伝達部分を含む。一部の実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２８の細胞内シグナル伝達ドメイン、またはそのシグナル伝達部分を含む。一部の実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、４－１ＢＢの細胞内シグナル伝達ドメイン、またはそのシグナル伝達部分を含む。一部の実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、ＩＣＯＳの細胞内シグナル伝達ドメイン、またはそのシグナル伝達部分を含む。
【0042】
一部の実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、膜貫通ドメインと、ＣＤ３－ゼータ（ＣＤ３ζ）鎖の細胞質シグナル伝達ドメインとの間にある。一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８またはＣＤ８由来の膜貫通ドメインであるか、またはそれを含有する。一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８由来の膜貫通ドメインであるか、またはそれを含有する。一部の実施形態では、ＣＤ２８はヒトＣＤ２８である。一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ８由来の膜貫通ドメインであるか、またはそれを含有する。一部の実施形態では、ＣＤ８はヒトＣＤ８である。
【0043】
一部の実施形態では、ＣＡＲは、細胞外抗原結合性ドメインと膜貫通ドメインとの間に細胞外スペーサーをさらに含有する。一部の実施形態では、スペーサーはＣＤ８由来である。一部の実施形態では、スペーサーはＣＤ８αヒンジである。
【0044】
一部の実施形態では、ＣＡＲは、配列番号９０～１４１のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、配列番号１１６または配列番号１２４に記載されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、配列番号１１６に記載されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、配列番号１２４に記載されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、配列番号２１４に記載されるポリペプチド配列によってコードされる。
【0045】
一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は：イデカブタゲン・ビクルユーセル細胞（例えば、ＡＢＥＣＭＡ（登録商標）細胞等）；ｂｂ２１２１７細胞；オルバカブタゲン・オートルユーセル（ｏｒｖａｃａｂｔａｇｅｎｅ ａｕｔｏｌｅｕｃｅｌ）細胞；ＣＴ１０３Ａ細胞；シルタカブタゲン・オートルユーセル細胞；ＫＩＴＥ５８５細胞；ＣＴ０５３細胞；ＢＣＭＡ－ＣＳ１ ｃＣＡＲ（ＢＣ１ｃＣＡＲ）細胞；Ｐ－ＢＣＭＡ－１０１細胞；Ｐ－ＢＣＭＡ－ＡＬＬＯ１細胞；Ｃ－ＣＡＲ０８８細胞；Ｄｅｓｃａｒｔｅｓ－０８細胞；ＰＢＣＡＲ２６９Ａ細胞；ＡＬＬＯ－７１５細胞；ＰＨＥ８８５細胞；ＡＵＴＯ８細胞；ＣＴＸ１２０細胞；ＣＢ－０１１細胞；ＡＬＬＯ－６０５（ＴｕｂｏＣＡＲ／ＭＭ）細胞；ｐＣＤＣＡＲ１（ＴｒｉＣＡＲ－Ｚ１３６）細胞、またはＧＣ０１２Ｆ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、イデカブタゲン・ビクルユーセル細胞（例えば、ＡＢＥＣＭＡ（登録商標）細胞等）を含有する。
【0046】
一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、ＣＤ３＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、ＣＤ４＋ Ｔ細胞またはＣＤ８＋ Ｔ細胞の組合せを含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、ＣＤ４＋ Ｔ細胞およびＣＤ８＋ Ｔ細胞の組合せを含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、ＣＤ４＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞またはＣＤ８＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞の組合せを含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、ＣＤ４＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞およびＣＤ８＋ＣＡＲ発現Ｔ細胞の組合せを含有する。一部の実施形態では、ＣＤ４＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞対ＣＤ８＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞の比は、１：１またはおよそ１：１である。一部の実施形態では、ＣＤ４＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞対ＣＤ８＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞の比は、１：３またはおよそ１：３～３：１またはおよそ３：１の間である。一部の実施形態では、ＣＤ４＋ Ｔ細胞対ＣＤ８＋ Ｔ細胞の比は、１：１またはおよそ１：１である。一部の実施形態では、ＣＤ４＋ Ｔ細胞対ＣＤ８＋ Ｔ細胞の比は、１：３またはおよそ１：３～３：１またはおよそ３：１の間である。
【0047】
一部の実施形態では、ナイーブ様Ｔ細胞のパーセンテージは、用量中の合計の遺伝子操作されたＴ細胞の６０％を超えるかまたはその概数を超え、適宜６５％、７０％、８０％、９０％、または９５％を超えるかまたはその概数を超える。一部の実施形態では、ナイーブ様Ｔ細胞のパーセンテージは、用量中の合計のＣＤ４＋の遺伝子操作されたＴ細胞の４０％を超えるかまたはその概数を超え、適宜５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％を超えるかまたはその概数を超える。一部の実施形態では、ナイーブ様Ｔ細胞のパーセンテージは、用量中の合計のＣＤ８＋の遺伝子操作されたＴ細胞の４０％を超えるかまたはその概数を超え、適宜５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％を超えるかまたはその概数を超える。一部の実施形態では、ナイーブ様Ｔ細胞は、ＣＣＲ７＋ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＤ２７＋ＣＣＲ７＋、またはＣＤ６２Ｌ－ＣＣＲ７＋である。一部の実施形態では、ナイーブ様Ｔ細胞は、ＣＣＲ７＋ＣＤ４５ＲＡ＋である。一部の実施形態では、ナイーブ様Ｔ細胞は、ＣＤ２７＋ＣＣＲ７＋である。一部の実施形態では、ナイーブ様Ｔ細胞は、ＣＤ６２Ｌ－ＣＣＲ７＋である。
【0048】
一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージは、用量中の合計の遺伝子操作されたＴ細胞の６０％を超えるかまたはその概数を超え、適宜６５％、７０％、８０％、９０％、または９５％を超えるかまたはその概数を超える。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージは、用量中の合計のＣＤ４＋の遺伝子操作されたＴ細胞の４０％を超えるかまたはその概数を超え、適宜５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％を超えるかまたはその概数を超える。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージは、用量中の合計のＣＤ８＋の遺伝子操作されたＴ細胞の４０％を超えるかまたはその概数を超え、適宜５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％を超えるかまたはその概数を超える。
【0049】
一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約０．５×１０６～約６００×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約０．５×１０６～約１００×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約０．５×１０６～約１０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約１×１０６～約１０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約０．５×１０６～約１×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約０．５×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約０．７５×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約１．０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約２．５×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約５．０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約７．５×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約１０．０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約５０×１０６～約１０００×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約１００×１０６～約６００×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約１５０×１０６～約４５０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約１５０×１０６、３００×１０６、または約４５０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約１５０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約３００×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、約４５０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含有する。
【0050】
一部の実施形態では、遺伝子操作されたＣＡＲ Ｔ細胞の用量の細胞は、対象から得られた。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＣＡＲ Ｔ細胞の用量の細胞は、例えば遺伝子操作のために、対象から得られる。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、対象にとって自家である。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、対象にとって同種異系である。
【図面の簡単な説明】
【0051】
【図1】ベースラインの特徴とＣＲ／ｓＣＲの可能性の増大（右側）または非ＣＲ／ｓＣＲの可能性の増大（左側）との相関を、重要度別にランク付けして示す（各ドットは個々の患者を表す；濃い灰色：高レベルまたは存在レベル；薄い灰色：低レベルまたは非存在レベル；ＣＲ：完全奏効；ｓＣＲ：厳格な完全奏効）。ａ患者の実験室測定値より。
【図2A】図２Ａは、可溶性ＢＣＭＡ（ｓＢＣＭＡ）のベースライン値と臨床応答（ＣＲ：完全奏効；ｓＣＲ：厳格な完全奏効；ＶＧＰＲ：最良部分奏効；ＰＲ：部分奏効）との関連を示す。箱は、Ｑ１、Ｑ３、および中央値を表す。ひげは、Ｑ１－１．５＊ＩＱＲより大きい最小値とＱ３＋１．５＊ＩＱＲより小さい最大値を表す。
【発明を実施するための形態】
【0052】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象をＴ細胞療法、例えば、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含む等、ＢＣＭＡを標的とするＴ細胞療法で処置する方法であって、対象が、約６００ｎｇ／ｍｌより低い血清可溶性ＢＣＭＡ（ｓＢＣＭＡ）レベルを有する、および／またはＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないことを決定される方法が本明細書に提供される。一部の実施形態では、対象は、Ｔ細胞療法の投与について選択される。
【0053】
多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象をＴ細胞療法、例えば、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含む等、ＢＣＭＡを標的とするＴ細胞療法で処置する方法であって、対象が、約６００ｎｇ／ｍｌより高い血清可溶性ＢＣＭＡ（ｓＢＣＭＡ）レベルを有する、および／またはＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定される方法も本明細書に提供される。一部の実施形態では、対象は、ＭＭのデバルキングおよびＴ細胞療法の投与について選択される。一部の実施形態では、対象は、ＭＭのデバルキングについて選択される。一部の実施形態では、ＭＭは、Ｔ細胞療法の投与前にデバルキングされる。
【0054】
一部の実施形態では、Ｔ細胞療法の投与のために患者を選択する方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い等の特定の閾値より低いｓＢＣＭＡの血清レベルを有する、および／またはＩｇＧ重鎖病の存在を有さないことを決定することに基づく。一部の実施形態では、ＭＭのデバルキングのために患者を選択する方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い等の特定の閾値より高いｓＢＣＭＡの血清レベルを有する、および／またはＩｇＧ重鎖病の存在を有することを決定することに基づく。
【0055】
対象が、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置に応答する可能性を予測する方法も本明細書に提供される。一部の実施形態では、応答は、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）である。一部の実施形態では、対象がＴ細胞療法による処置に対してＣＲまたはｓＣＲを示す可能性は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い等の特定の閾値より低い可溶性ＢＣＭＡの血清レベルを有する、および／またはＩｇＧ重鎖病の存在を有さないことを決定することに基づく。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い等の特定の閾値より低い可溶性ＢＣＭＡの血清レベルを有する、および／またはＩｇＧ重鎖病の存在を有さないことを決定することに基づいて、対象は、Ｔ細胞療法による治療に応答してＣＲまたはｓＣＲを達成すると予測される。一部の実施形態では、対象が、特定の閾値より高い、例えば約６００ｎｇ／ｍＬより高い可溶性ＢＣＭＡの血清レベルを有する、および／またはＩｇＧ重鎖病の存在を有することを決定することに基づいて、対象は、Ｔ細胞療法による処置に応答してＣＲまたはｓＣＲを達成しないと予測される。
【0056】
提供される実施形態の中でも、ＢＣＭＡおよびＢＣＭＡ発現細胞（即ち、多発性骨髄腫）を標的化または指向するものを含む方法、組成物、製造品、方法および使用が特に挙げられる。ＢＣＭＡが、例えば、あらゆる再発したまたは新たに診断された骨髄腫患者等に由来する悪性形質細胞において発現され、正常組織における発現がほとんどないことが観察される。提供される実施形態の中でも、多発性骨髄腫を有する対象の処置に有用なアプローチ、およびＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞を含むＴ細胞療法による処置についての多発性骨髄腫を有する対象の選択、ならびにそれらを含む組成物および製造品が特に挙げられる。ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞は、一般に、ＢＣＭＡに特異的な抗体（重鎖可変（ＶＨ）領域、単一ドメイン抗体断片および単鎖断片（ｓｃＦｖ）を含む）等の抗原結合性抗体断片を含む細胞外抗原結合性ドメインを含む。一部の実施形態では、ｓｃＦｖを含む抗原結合性抗体断片は、ＶＨおよび軽鎖可変（ＶＬ）領域を含む。そのような抗ＢＣＭＡ ＣＡＲを発現する、および／またはそのような抗ＢＣＭＡ ＣＡＲをコードする核酸を含有する、操作された細胞または組換え細胞等の細胞、ならびにそのような細胞を含有する組成物および製造品および治療用量も提供される。
【0057】
ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞を含むＴ細胞療法の投与の前に、多発性骨髄腫を有する対象を、ＭＭのデバルキングについて選択する方法も提供される。一部の事例では、対象が、特定の閾値を上回る、例えば約６００ｎｇ／ｍＬを上回る血清可溶性ＢＣＭＡ（ｓＢＣＭＡ）レベルを有する、および／またはＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すると決定される場合に、対象は、デバルキングについて選択される。
【0058】
多発性骨髄腫を有する対象へのＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞を含むＴ細胞療法の投与の後に、対象が、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成するかどうかを予測する方法も提供される。一部の事例では、予測する方法は、Ｔ細胞療法の投与の前に患者から得られた試料中等の、血清可溶性ＢＣＭＡ（ｓＢＣＭＡ）レベル、および／またはＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在の有無に基づく。
【0059】
養子細胞療法（多発性骨髄腫の処置のためのＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞の投与を含むもの、ならびにその他の養子免疫細胞療法および養子Ｔ細胞療法）は、がんならびに他の疾患および障害の処置に有効であり得る。しかし、ある特定の状況では、養子細胞療法に利用できるアプローチは、必ずしも完全に満足のいくものとなるとは限らない場合がある。
【0060】
一部の態様では、多発性骨髄腫（例えば、再発したおよび不応性のＭＭ）の処置に対する利用可能なアプローチは複雑であり、必ずしも完全に満足のいくものとなるとは限らない場合がある。再発したまたは不応性のＭＭを有する患者の転帰は、現在利用可能な治療法では不良である。再発したおよび不応性のＭＭは、さらなる処置に応答しないことが多く、通常２～４カ月以内に進行する。（Chari et al., N Engl J Med (2019) 381:727-38およびLonial et al., Lancet Oncol (2020) 21:207-21）。一部の態様では、処置レジメンの選択は、薬物の利用可能性、前治療に対する応答、再発の病原力、自家幹細胞移植（ＡＳＣＴ）に対する適格性、および再発が治療中または治療外で発生したかどうかを含む多数の要因に依存し得る。一部の態様では、ＭＭは再発と寛解を繰り返すため、既存のレジメンでは、一部の事例では、再発および／または処置による毒性が生じる可能性がある。一部の事例では、様々な治療後に疾患が持続または再発した対象、高い腫瘍負荷等の高い疾患負荷を有する対象、および／または高リスク疾患（即ち、高リスク細胞遺伝学）を有する対象等の、特に高悪性の疾患を有する対象は、処置するのが特に困難である可能性があり、これらの対象におけるある特定の処置に対する奏効は不良であるか、または持続期間が短い可能性がある。場合によっては、前処置の多い対象、例えば、数回の異なる前治療ラインの後に再発した対象は、低い奏効率および／または高い有害事象の発生率を示す可能性がある。
【0061】
特に、免疫調節剤、プロテアソーム阻害剤（ＰＩ）、および抗ＣＤ３８抗体に以前に曝露したことのある再発したおよび／または不応性の多発性骨髄腫（Ｒ／Ｒ ＭＭ）を有する患者の転帰は不良である。（Chari et al., N Engl J Med (2019) 381:727-38；Lonial et al., Poster presentation at the European Hematology Association (EHA) Virtual Meeting 2021: Abstract EP970；およびRichardson et al., J Clin Oncol (2021) 39:757-67）。さらに、どの患者がＣＡＲ Ｔ細胞処置に対して深い応答を達成するかを予測することは、現在のところ困難である。一部の態様では、提供される実施形態は、提供される実施形態に従った対象の治療または処置に対する対象の選択が、事前治療ライン（例えば、免疫調節剤、プロテアソーム阻害剤（ＰＩ）、および抗ＣＤ３８抗体）に曝露されたことのある対象を含めて、高い奏効率（即ち、ＣＲまたはｓＣＲ）をもたらすという観察に基づく。特に、提供される実施形態は、対象が特定の閾値未満（例えば、５００、５６６、または６００ｎｇ／ｍＬ未満）の血清ｓＢＣＭＡレベルを有する場合、および／または対象がＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さない場合、対象がＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞による処置に応答してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性がより高いか、または達成することが予測されるという観察に基づく。逆に、対象が特定の閾値を上回る（例えば、５００、５６６、または６００ｎｇ／ｍＬを上回る）血清ｓＢＣＭＡレベルを有する場合、および／または対象がＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有する場合、対象がＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞による処置に応答してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性が低いか、または達成しないと予測されることが、本明細書において観察される。これらの観察に基づき、特定の閾値を上回る（例えば、５００、５６６、または６００ｎｇ／ｍＬを上回る）の血清ｓＢＣＭＡレベルを有する、および／またはＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有する対象は、Ｔ細胞療法の投与の前に、ＭＭのデバルキングについて選択され得る、および／またはデバルキングに供され得ることが意図される。一部の事例では、Ｔ細胞療法の投与の前のＭＭのデバルキングにより、対象の血清ｓＢＣＭＡレベルが特定の閾値より低くなる（例えば、５００、５６６、または６００ｎｇ／ｍＬより低い）。一部の事例では、デバルキング後に、対象はＴ細胞療法を投与される。
【0062】
提供される実施形態は、一部の状況では、本明細書に記載のもの等のＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞の投与が、３以上の事前治療ラインを受けた再発したおよび不応性の対象を含む、血清ｓＢＣＭＡレベルがより低い、および／またはＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さない対象において、より高いＣＲ率またはｓＣＲ率をもたらすという、臨床研究からの観察に基づく。一部の態様では、提供される方法、使用、および細胞は、高いＣＲ率またはｓＣＲ率をもたらす。一部の態様では、そのような高い奏効は、特定の閾値未満（例えば、５００、５６６、または６００ｎｇ／ｍＬ未満）の血清ｓＢＣＭＡレベルを有する、および／またはＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないと決定された対象をＴ細胞療法の投与について選択することから達成され得る。さらに、そのような高い奏効は、特定の閾値を上回る（例えば、５００、５６６、または６００ｎｇ／ｍＬを上回る）の血清ｓＢＣＭＡレベル、および／またはＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すると決定された対象を、Ｔ細胞療法の投与の前にＭＭのデバルキングについて選択することから達成され得る。一部の態様では、提供される実施形態に従った、高リスクおよび／または再発したおよび不応性のＭＭを有する対象（例えば、前処置の多い対象、腫瘍負荷の高い対象、および／または細胞遺伝学的に高リスクの対象）の処置は、ＣＲまたはｓＣＲをもたらすような、有効かつ持続的な処置を提供することが観察された。
【0063】
様々な態様では、提供される方法は、高リスクおよび／またはＲ／Ｒ ＭＭを有する対象の選択および／または処置を可能にし、そのような対象において、細胞療法に対する至適奏効を低下させ得るある特定の制限を克服または打ち消すことができる。一部の状況では、提供される方法および操作された細胞または操作された細胞を含む組成物の使用は、対象を処置する際に、試験された様々な異なる用量レベルで高いＣＲ率またはｓＣＲ率をもたらす利点を提供することが観察されている。さらに、提供される方法および操作された細胞または操作された細胞を含む組成物の使用は、疾患のための多数の異なる事前処置に対して再発し不応性である対象を含む、特に高リスクおよび／またはＲ／Ｒ疾患を有する対象を処置する際に利点をもたらすことが観察されている。
【0064】
本出願で参照されている特許文書、科学論文およびデータベースを含むあらゆる刊行物は、あたかも個々の刊行物のそれぞれが個々に参照により本明細書に組み込まれるのと同じ程度まで、あらゆる目的のためにそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に示される定義が、参照により本明細書に組み込まれる特許、出願、公開された出願および他の刊行物に示される定義に反するかさもなければ不一致である場合、本明細書に示される定義が、参照により本明細書に組み込まれる定義よりも優先する。
【0065】
本明細書で使用されるセクションの見出しは、単に体系化を目的とするものであり、記載されている主題を限定するものとして解釈されるべきではない。
【0066】
Ｉ．バイオマーカーを評価し、Ｔ細胞療法による処置について対象を選択し、それに対する応答を予測する方法
提供される方法および使用の中には、Ｔ細胞療法による処置について対象を選択する方法があり、これは、対象からの試料等において、Ｔ細胞療法による処置に対する応答転帰（例えば、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ））に関連するバイオマーカーまたはパラメーターを評価または検出することを含み得る。また、提供される方法および使用の中には、デバルキング処置について対象を選択する方法、およびＴ細胞療法による処置に対する対象の応答を予測する方法があり、これらは、対象からの試料等において、Ｔ細胞療法による処置に対する応答転帰（例えば、完全応答（ＣＲ）または厳格な完全応答（ｓＣＲ））に関連するバイオマーカーまたはパラメーターを評価または検出することを含み得る。提供される方法および使用の中には、対象がＴ細胞療法による処置に対して応答転帰を示すかどうかを予測する方法があり、これは、対象からの試料等において、Ｔ細胞療法による処置に対する応答転帰（例えば、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ））に関連するバイオマーカーまたはパラメーターを評価または検出することを含み得る。
提供される方法および使用の中には、Ｔ細胞療法による処置について対象を選択する方法があり、これは、対象からの試料等において、Ｔ細胞療法による処置に対する応答転帰（例えば、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ））に関連するバイオマーカーまたはパラメーターを評価または検出することを含み得る。また、提供される方法および使用の中には、デバルキング処置について対象を選択する方法、およびＴ細胞療法による処置に対する対象の応答を予測する方法があり、これらは、対象からの試料等において、Ｔ細胞療法による処置に対する応答転帰（例えば、完全応答（ＣＲ）または厳格な完全応答（ｓＣＲ））に関連するバイオマーカーまたはパラメーターを評価または検出することを含み得る。提供される方法および使用の中には、対象がＴ細胞療法による処置に対して応答転帰を示すかどうかを予測する方法があり、これは、対象からの試料等において、Ｔ細胞療法による処置に対する応答転帰（例えば、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ））に関連するバイオマーカーまたはパラメーターを評価または検出することを含み得る。
【0067】
完全奏効（ＣＲ）および厳格な完全奏効（ｓＣＲ）は、以下の表１に示されている国際骨髄腫作業部会（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｍｙｅｌｏｍａ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ）（ＩＭＷＧ）標準応答基準（Kumar et al., Lancet Oncol (2016) 17(8):e328-46）によって定義されている。
【0068】
【表1】
††免疫組織化学検査におけるクローン性細胞の存在/非存在は、κ/λ/L比に基づいている。免疫組織化学によるκ/λ比の異常は、分析に最低100個の形質細胞を必要とする。異常クローンの存在を反映する異常比率はκ/λが4:1を超えるかまたは1:2未満である。
【0069】
いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象から得られた試料等において、血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）のレベルを評価することを含む。一部の実施形態では、試料は血清試料である。いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象が約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有するかどうかを決定することを含む。いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有するかどうかを決定することを含む。いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象が約５６６ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有するかどうかを決定することを含む。いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有するかどうかを決定することを含む。いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象が約５００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有するかどうかを決定することを含む。いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有するかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料からの血清ｓＢＣＭＡのレベル、量または濃度を閾値レベルと個別に比較し、それにより、対象がＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性を決定することを含む。一部の態様では、閾値レベルは、Ｔ細胞療法を受ける前の対象のグループから得られた生体試料における、血清ｓＢＣＭＡのレベル、量または濃度の平均値または中央値、および平均値または中央値の範囲または標準偏差内の値に基づいて決定され、グループの対象の各々は、ＣＲまたはｓＣＲを示すようになるか、またはＣＲまたはｓＣＲを示すようにならなかった。
【0070】
いずれかの実施形態の一部では、方法は、患者がＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有するかどうかを、対象から得られた試料等において評価することを含む。一部の実施形態では、試料は、血清試料または尿試料である。いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかどうかを決定することを含む。いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さないかどうかを決定することを含む。
【0071】
いずれかの実施形態の一部では、方法は、操作された細胞の用量中のベクターのコピー数を評価することを含む。一部の実施形態では、ベクターは、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を含むかまたはそれをコードする。一部の実施形態では、方法は、操作された細胞の用量中のベクターのコピー数を閾値レベルと比較し、それにより、対象がＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性を決定することを含む。
【0072】
いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象から得られた試料等において、β－２ミクログロブリンレベルを評価することを含む。一部の実施形態では、試料は血液試料である。一部の実施形態では、試料は尿試料である。一部の実施形態では、試料は脳脊髄液（ＣＳＦ）試料である。一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料からのβ－２ミクログロブリンのレベル、量または濃度を閾値レベルと個別に比較し、それにより、対象がＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性を決定することを含む。
【0073】
いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象から得られた試料等において、Ｄ－二量体レベルを評価することを含む。一部の実施形態では、試料は血液試料である。一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料からのＤ－二量体のレベル、量または濃度を閾値レベルと個別に比較し、それにより、対象がＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性を決定することを含む。
【0074】
いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象から得られた試料等において、フェリチンレベルを評価することを含む。一部の実施形態では、試料は血液試料である。一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料からのフェリチンのレベル、量または濃度を閾値レベルと個別に比較し、それにより、対象がＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性を決定することを含む。
【0075】
いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象から得られた試料等において、ナトリウムレベルを評価することを含む。一部の実施形態では、試料は血液試料である。一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料からのナトリウムのレベル、量または濃度を閾値レベルと個別に比較し、それにより、対象がＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性を決定することを含む。
【0076】
いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象から得られた試料等において、プロトロンビン時間－国際標準化比（ＰＴ－ＩＮＲ）を評価することを含む。一部の実施形態では、試料は血液試料である。一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料からのＰＴ－ＩＮＲを閾値ＰＴ－ＩＮＲと比較し、それにより、対象がＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性を決定することを含む。
【0077】
一部の実施形態では、Ｔ細胞療法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する操作された細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含む。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡのレベル、および／またはＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無は、再発したおよび不応性の（ＲＲ）多発性骨髄腫等の多発性骨髄腫を有する対象から、または対象から得られた試料において評価される。一部の実施形態では、対象は、Ｔ細胞療法による処置の候補であり、および／またはＴ細胞療法による処置を受けたことがある。一部の実施形態では、提供される方法は、Ｔ細胞療法に応答する可能性が高い対象を同定または選択するため；および／または、デバルキング等のＴ細胞療法の投与の前に、特定の処置について対象を選択するために使用することができる。
【0078】
一部の態様では、方法は、提供される実施形態に従って決定される応答の可能性に基づき、例えば、血清ｓＢＣＭＡおよび／またはＩｇＧ ＨＣＤの評価によって、応答の可能性について対象をさらにモニタリングすることを含む。
【0079】
一部の実施形態では、方法は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無、および／または血清ｓＢＣＭＡの濃度、量、もしくはレベルを評価または検出することを含む。一部の事例では、方法は、血清ｓＢＣＭＡの濃度、量、またはレベルを、閾値レベル等の特定の基準値、例えば、ＣＲおよび／またはｓＣＲ等の特定の応答と関連する基準値と比較することを含み得る。一部の実施形態では、方法は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無の評価、および／または血清ｓＢＣＭＡの、血清ｓＢＣＭＡの基準値もしくは閾値レベルとの比較に基づいて、Ｔ細胞療法による処置について対象を選択することも含む。
【0080】
一部の態様では、生体試料、例えば対象からの血清または尿試料は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無を検出するために得ることができる。一部の態様では、血清ｓＢＣＭＡの濃度、量、またはレベルを検出するために、生体試料、例えば、対象からの血液または血清試料を得ることができる。
【0081】
一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤおよび／または血清ｓＢＣＭＡレベルは、客観的に測定可能な特性、または細胞を含む生体試料によって、またはその中で発現される分子であり、治療転帰または疾患状態等の特定の状態または現象を示すことができるか、またはそれに関連し得る。一部の態様では、ＩｇＧ ＨＣＤおよび／または血清ｓＢＣＭＡを測定または検出することができる。例えば、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無を検出することができる。一部の態様では、血清ｓＢＣＭＡの濃度、量、またはレベル等のパラメーターを測定または検出することができる。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無、および／または血清ｓＢＣＭＡの濃度、量、もしくはレベルは、対象の特定の治療転帰または状態等の特定の状態に関連付けること、それと相関すること、それを示すこと、および／またはそれを予測することができる。一部の態様では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無、および／または血清ｓＢＣＭＡの濃度、量、もしくはレベルは、応答転帰を含む特定の治療転帰等の特定の転帰または状態の可能性を評価するために使用することができる。一部の実施形態では、応答転帰は、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）である。一部の実施形態では、応答転帰はＣＲである。一部の実施形態では、応答転帰はｓＣＲである。よって、一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無、および／または血清ｓＢＣＭＡの濃度、量、もしくはレベルは、対象がＴ細胞療法の投与の後にＣＲまたはｓＣＲを示す可能性を評価するために使用することができる。
【0082】
一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無は、血清ｓＢＣＭＡの濃度、量、またはレベルと単独で、または組み合わせて使用することができる。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡの濃度、量、またはレベルは、単独で、またはＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無と組み合わせて使用することができる。
【0083】
一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無および／または血清ｓＢＣＭＡのレベルは、生体試料から決定される。一部の態様では、生体試料は、体液または組織である。一部のそのような実施形態では、生体試料、例えば、体液は、全血、血清または血漿であるか、またはそれを含有する。一部のそのような実施形態では、生体試料、例えば、体液は、血清であるかまたはそれを含有する。一部のそのような実施形態では、生体試料、例えば、体液は、尿であるかまたはそれを含有する。
【0084】
一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無および／または血清ｓＢＣＭＡのレベルは、Ｔ細胞療法の投与の前（例えば、注入前）に決定され、例えば、Ｔ細胞療法の投与開始の１日前まで、２日前まで、７日前まで、１４日前まで、２１日前まで、２８日前まで、３５日前まで、４０日前まで、２カ月前まで、または３カ月前までに得られる。
【0085】
一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無は、Ｔ細胞療法の投与の前（例えば、注入前）に決定され、例えば、Ｔ細胞療法の投与開始の１日前まで、２日前まで、７日前まで、１４日前まで、２１日前まで、２８日前まで、３５日前まで、４０日前まで、２カ月前まで、または３カ月前までに得られる。一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３カ月、約２カ月、約１カ月、約３週間、約２週間、または約１週間の間に実行される。一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３カ月の間に実行される。一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約２カ月の間に実行される。一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３週間の間に実行される。一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約２週間の間に実行される。一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約１週間の間に実行される。一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことの決定は、白血球アフェレーシスの前に実行される。一部の実施形態では、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことの決定は、対象へのリンパ球枯渇療法の投与の前に実行される。
【0086】
一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡのレベルは、Ｔ細胞療法の投与の前（例えば、注入前）に決定され、例えば、Ｔ細胞療法の投与開始の１日前まで、２日前まで、７日前まで、１４日前まで、２１日前まで、２８日前まで、３５日前まで、４０日前まで、２カ月前まで、または３カ月前までに得られる。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡの第１のレベルは、Ｔ細胞療法の投与の前（例えば、注入前）に決定され、例えば、Ｔ細胞療法の投与開始の１日前まで、２日前まで、７日前まで、１４日前まで、２１日前まで、２８日前まで、３５日前まで、４０日前まで、２カ月前まで、または３カ月前までに得られる。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡのデバルキング後のレベルは、Ｔ細胞療法の投与の前（例えば、注入前）に決定され、例えば、Ｔ細胞療法の投与開始の１日前まで、２日前まで、７日前まで、１４日前まで、２１日前まで、２８日前まで、３５日前まで、４０日前まで、２カ月前まで、または３カ月前までに得られる。
【0087】
一部の実施形態では、対象へのＴ細胞療法の投与の約３カ月前、約２カ月前、約１カ月前、約３週間前、約２週間前、または約１週間前に実行される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の約３カ月前に実行される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の約２カ月前に実行される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の約１カ月前に実行される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の約３週間前に実行される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の約２週間前に実行される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルの決定は、対象へのＴ細胞療法の投与の約１週間前に実行される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルの決定は、白血球アフェレーシスの前に実行される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルの決定は、対象へのリンパ球枯渇療法の投与の前に実行される。
【0088】
一部の実施形態では、生体試料は、細胞療法の投与の前（例えば、注入前）に対象から得られ、例えば、Ｔ細胞療法の投与開始の１日前まで、２日前まで、７日前まで、１４日前まで、２１日前まで、２８日前まで、３５日前まで、４０日前まで、２カ月前まで、または３カ月前までに得られる。一部の実施形態では、生体試料は、白血球アフェレーシスの前に対象から得られる。一部の実施形態では、生体試料は、対象へのリンパ球枯渇療法の投与の前に対象から得られる。
【0089】
一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡのレベルは、生体試料において決定される。一部の実施形態では、生体試料は、血液、血清または血漿試料である。一部の実施形態では、生体試料は血液試料である。一部の実施形態では、生体試料はアフェレーシスまたは白血球アフェレーシス試料である。一部の実施形態では、生体試料は血清試料である。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡのレベルは、対象からの血清試料において決定される。
【0090】
一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無は、生体試料において決定される。一部の実施形態では、生体試料は、血液試料、血清試料、血漿試料または尿試料である。一部の実施形態では、生体試料は血液試料である。一部の実施形態では、生体試料はアフェレーシスまたは白血球アフェレーシス試料である。一部の実施形態では、生体試料は血清試料である。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無は、対象からの血清試料において決定される。一部の実施形態では、生体試料は尿試料である。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無は、対象からの尿試料において決定される。
【0091】
一部の実施形態では、試薬は、診断目的、対象を同定するためおよび／または処置の転帰の評価のために、Ｔ細胞療法の投与の前またはＴ細胞療法の投与の後に使用することができる。
【0092】
一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無および／または血清ｓＢＣＭＡのレベルの決定は、インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）アッセイを実施することを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無の決定は、インビトロアッセイを実施することを含む。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡのレベルの決定は、インビトロアッセイを実施することを含む。一部の態様では、インビトロアッセイは、イムノアッセイ、アプタマーベースのアッセイ、組織学的もしくは細胞学的アッセイ、またはｍＲＮＡ発現レベルアッセイである。一部の実施形態では、決定することは、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、免疫ブロッティング、免疫沈降、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、免疫染色、フローサイトメトリーアッセイ、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）、ケミルミネッセンスアッセイ、ラテラルフローイムノアッセイ、阻害アッセイまたはアビディティーアッセイによって測定することを含む。一部の事例では、決定することは、ＩｇＧに特異的に結合する結合試薬を使用することを含む。一部の態様では、決定することは、ＢＣＭＡ、例えばｓＢＣＭＡに特異的に結合する結合試薬を使用することを含む。一部の態様では、結合試薬は、抗体またはその抗原結合性断片、アプタマーまたは核酸プローブである。
【0093】
一部の実施形態では、腫瘍関連ＢＣＭＡ発現は、骨髄生検から評価される。一部の実施形態では、腫瘍関連ＢＣＭＡ発現は、細胞内ＢＣＭＡエピトープに対して指向するモノクローナル抗体等の抗体を使用して免疫組織化学的に評価される。一部の実施形態では、腫瘍細胞表面ＢＣＭＡ発現は、Ｑｕａｎｔｉｂｒｉｔｅ（商標）ビーズを使用する等のフローサイトメトリーにより、新鮮な骨髄吸引液で定量される。一部の実施形態では、可溶性ＢＣＭＡは、Ｌｕｍｉｎｅｘ（登録商標）イムノアッセイを使用する等して、血清中で評価される。一部の実施形態では、可溶性ＢＣＭＡは、血清中で縦断的に（例えば、連続した日、または一定の間隔で）評価される。血清ＢＣＭＡを含む可溶性ＢＣＭＡを測定するための方法は、当技術分野で公知であり、Munshi et al., N Engl J Med (2021) 384:705-16に記載される任意の方法を含むことができる。ｓＢＣＭＡレベルは、ＯＮＣＯｔｒａｃｋｅｒアッセイ（ｏｎｃｏｔｒａｃｋｅｒ．ｃｏｍ／ｓｂｃｍａ－ｂｉｏｍａｒｋｅｒ／）により決定されてもよい。
【0094】
一部の実施形態では、ＩｇＧ重鎖病は、血清または尿免疫固定法を含む、当技術分野で公知の任意の方法によって決定される。
【0095】
Ａ．血清可溶性ＢＣＭＡ
ｉ．処置および／またはデバルキングについての選択
一部の実施形態では、方法は、ＭＭを有する対象から得られた試料における血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを決定することを含む。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルに基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与および／またはＭＭのデバルキングについて選択される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルに基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与について選択される。一部の実施形態では、対象は、血清ｓＢＣＭＡレベルに基づいて、ＭＭのデバルキングについて選択される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルに基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与およびＭＭのデバルキングについて選択される。
ｉ．処置および／またはデバルキングについての選択
一部の実施形態では、方法は、ＭＭを有する対象から得られた試料における血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを決定することを含む。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルに基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与および／またはＭＭのデバルキングについて選択される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルに基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与について選択される。一部の実施形態では、対象は、血清ｓＢＣＭＡレベルに基づいて、ＭＭのデバルキングについて選択される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルに基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与およびＭＭのデバルキングについて選択される。
【0096】
一部の実施形態では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い、例えば約５６６ｎｇ／ｍＬまたは５００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有するかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い、例えば、約５６６ｎｇ／ｍＬまたは５００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法を投与される。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い、例えば、約５６６ｎｇ／ｍＬまたは５００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法の投与について選択される。
【0097】
一部の実施形態では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い、例えば約５００ｎｇ／ｍＬまたは５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有するかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い、例えば、約５００ｎｇ／ｍＬまたは５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法を投与される。
【0098】
よって、一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が約６００ｎｇ／ｍｌより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することと；（ｂ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、方法は、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、対象は、血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルが約６００ｎｇ／ｍｌより低いと事前に決定された。一部の実施形態では、方法は、遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置について多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を選択することを含み、対象が約６００ｎｇ／ｍｌより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すると決定することを含み、対象が約６００ｎｇ／ｍｌより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象はＴ細胞療法による投与について選択される。
【0099】
一部の実施形態では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い、例えば約５００ｎｇ／ｍＬまたは５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有するかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い、例えば、約５００ｎｇ／ｍＬまたは５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、多発性骨髄腫は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法の投与の前にデバルキングされる。一部の実施形態では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い、例えば約５００ｎｇ／ｍＬまたは５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有するかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い、例えば、約５００ｎｇ／ｍＬまたは５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法の投与の前に、多発性骨髄腫のデバルキングについて選択される。
【0100】
よって、一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が約６００ｎｇ／ｍｌより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、ここで、（ａ）対象は、約６００ｎｇ／ｍｌより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すると事前に決定され；（ｂ）（１）対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの間に、ＭＭは以前にデバルキングされた。一部の実施形態では、方法は、対象が約６００ｎｇ／ｍｌより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することを含み、対象が約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法の対象への投与の前に、ＭＭのデバルキングについて選択される。一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することと；（ｄ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。
【0101】
一部の実施形態では、デバルキングは、セクションＩＩ．Ｂに記載されているように実行される。
【0102】
一部の実施形態では、デバルキングは、対象への化学療法、放射線、または免疫調節剤の投与を含む。一部の実施形態では、デバルキングは、対象への化学療法の投与を含む。一部の実施形態では、化学療法は、メルファラン、ドキソルビシン、またはシクロホスファミド化学療法を含む。一部の実施形態では、対象への放射線の投与を含む。一部の実施形態では、免疫調節剤は、サリドマイド、レナリドマイド、またはポマリドマイドである。一部の実施形態では、対象への免疫調節剤の投与を含む。一部の実施形態では、免疫調節剤はチェックポイント阻害剤である。
【0103】
一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３カ月以内、約２カ月以内、約１カ月以内、約３週間以内、約２週間以内、または約１週間以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３カ月以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約２カ月以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約１カ月以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３週間以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約２週間以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約１週間以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのリンパ球枯渇療法の投与の前に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのリンパ球枯渇療法の投与の後に実行される。一部の実施形態では、対象は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、ガンマセクレターゼ阻害剤で処置される。
【0104】
一部の実施形態では、方法は、対象が、約５９０ｎｇ／ｍｌ、約５８０ｎｇ／ｍｌ、約５７０ｎｇ／ｍｌ、約５６０ｎｇ／ｍｌ、約５５０ｎｇ／ｍｌ、約５４０ｎｇ／ｍｌ、約５３０ｎｇ／ｍｌ、約５２０ｎｇ／ｍｌ、約５１０ｎｇ／ｍｌ、または約５００ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５９０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５８０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５７０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５６６ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５６０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５５０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５４０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５３０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５２０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５１０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５００ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。
【0105】
一部の実施形態では、対象は、約５９０ｎｇ／ｍｌ、約５８０ｎｇ／ｍｌ、約５７０ｎｇ／ｍｌ、約５６０ｎｇ／ｍｌ、約５５０ｎｇ／ｍｌ、約５４０ｎｇ／ｍｌ、約５３０ｎｇ／ｍｌ、約５２０ｎｇ／ｍｌ、約５１０ｎｇ／ｍｌ、または約５００ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５９０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５８０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５７０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５６６ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５６０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５５０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５４０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５３０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５２０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５１０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５００ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。
【0106】
ｉｉ．応答
一部の実施形態では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高いかまたは低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有するかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料における血清ｓＢＣＭＡのレベルを決定することを含む。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡのレベルが、特定の閾値、例えば５６６または６００ｎｇ／ｍＬより低いことに基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを達成すると予測される。
一部の実施形態では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高いかまたは低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有するかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料における血清ｓＢＣＭＡのレベルを決定することを含む。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡのレベルが、特定の閾値、例えば５６６または６００ｎｇ／ｍＬより低いことに基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを達成すると予測される。
【0107】
一部の実施形態では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い、例えば約５６６ｎｇ／ｍＬまたは５００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有するかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い、例えば、約５６６ｎｇ／ｍＬまたは５００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを示すと予測される。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、血清ｓＢＣＭＡレベルが約６００ｎｇ／ｍＬより高く、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性が約１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または約１０倍高い。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、血清ｓＢＣＭＡレベルが約６００ｎｇ／ｍＬより高く、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性が約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％高い。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、血清ｓＢＣＭＡレベルが約５６６ｎｇ／ｍＬより高く、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性が約１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または約１０倍高い。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、血清ｓＢＣＭＡレベルが約５６６ｎｇ／ｍＬより高く、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性が約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％高い。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、血清ｓＢＣＭＡレベルが約５００ｎｇ／ｍＬより高く、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性が約１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または約１０倍高い。
【0108】
一部の実施形態では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い、例えば約５００ｎｇ／ｍＬまたは５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有するかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い、例えば、約５００ｎｇ／ｍＬまたは５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを示さないことが予測される。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、血清ｓＢＣＭＡレベルが約６００ｎｇ／ｍＬより低く、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを達成しない可能性が約１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または約１０倍高い。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、血清ｓＢＣＭＡレベルが約６００ｎｇ／ｍＬより低く、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを達成しない可能性が約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％高い。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、血清ｓＢＣＭＡレベルが約５６６ｎｇ／ｍＬより低く、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを達成しない可能性が約１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または約１０倍高い。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、血清ｓＢＣＭＡレベルが約５６６ｎｇ／ｍＬより低く、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを達成しない可能性が約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％高い。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、血清ｓＢＣＭＡレベルが約５００ｎｇ／ｍＬより低く、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを達成しない可能性が約１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または約１０倍高い。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、血清ｓＢＣＭＡレベルが約５００ｎｇ／ｍＬより低く、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与後にＣＲまたはｓＣＲを達成しない可能性が約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％高い。
【0109】
よって、一部の実施形態では、方法は、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象の、遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置に対する応答を予測することを含み、対象が、約６００ｎｇ／ｍｌより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することを含み、対象が約６００ｎｇ／ｍｌより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有する場合、対象は、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成することが予測される。
【0110】
一部の実施形態では、方法は、対象が、約５９０ｎｇ／ｍｌ、約５８０ｎｇ／ｍｌ、約５７０ｎｇ／ｍｌ、約５６０ｎｇ／ｍｌ、約５５０ｎｇ／ｍｌ、約５４０ｎｇ／ｍｌ、約５３０ｎｇ／ｍｌ、約５２０ｎｇ／ｍｌ、約５１０ｎｇ／ｍｌ、または約５００ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５９０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５８０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５７０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５６６ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５６０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５５０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５４０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５３０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５２０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５１０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５００ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。
【0111】
一部の実施形態では、対象は、約５９０ｎｇ／ｍｌ、約５８０ｎｇ／ｍｌ、約５７０ｎｇ／ｍｌ、約５６０ｎｇ／ｍｌ、約５５０ｎｇ／ｍｌ、約５４０ｎｇ／ｍｌ、約５３０ｎｇ／ｍｌ、約５２０ｎｇ／ｍｌ、約５１０ｎｇ／ｍｌ、または約５００ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５９０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５８０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５７０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５６６ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５６０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５５０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５４０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５３０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５２０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５１０ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、対象は、約５００ｎｇ／ｍｌより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。
【0112】
Ｂ．重鎖病
ｉ．処置および／またはデバルキングについての選択
一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料中のＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在の有無を決定することを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無に基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与および／またはＭＭのデバルキングについて選択される。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無に基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与について選択される。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無に基づいて、対象は、ＭＭのデバルキングについて選択される。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無に基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与およびＭＭのデバルキングについて選択される。
ｉ．処置および／またはデバルキングについての選択
一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料中のＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在の有無を決定することを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無に基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与および／またはＭＭのデバルキングについて選択される。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無に基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与について選択される。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無に基づいて、対象は、ＭＭのデバルキングについて選択される。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在の有無に基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与およびＭＭのデバルキングについて選択される。
【0113】
一部の実施形態では、方法は、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さないかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、対象が、重鎖病を有さないと決定される場合、対象は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法を投与される。一部の実施形態では、対象が、重鎖病を有さないと決定される場合、対象は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法の投与について選択される。
【0114】
一部の実施形態では、方法は、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有すると決定される場合、対象は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法を投与されない。
【0115】
よって、一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象がＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないことを決定することと；（ｂ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、方法は、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、対象は、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないと事前に決定された。一部の実施形態では、方法は、遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置について多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を選択することを含み、対象が、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないことを決定することを含み、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さないと決定される場合、対象はＴ細胞療法による投与について選択される。
【0116】
一部の実施形態では、方法は、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有すると決定される場合、多発性骨髄腫は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法の投与の前にデバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有すると決定される場合、対象は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法の投与の前に多発性骨髄腫のデバルキングについて選択される。一部の実施形態では、デバルキングは、上記のセクションまたはセクションＩＩ．Ｂに記載されているように実行される。
【0117】
一部の実施形態では、デバルキングは、対象への化学療法、放射線、または免疫調節剤の投与を含む。一部の実施形態では、デバルキングは、対象への化学療法の投与を含む。一部の実施形態では、化学療法は、メルファラン、ドキソルビシン、またはシクロホスファミド化学療法を含む。一部の実施形態では、対象への放射線の投与を含む。一部の実施形態では、免疫調節剤は、サリドマイド、レナリドマイド、またはポマリドマイドである。一部の実施形態では、対象への免疫調節剤の投与を含む。一部の実施形態では、免疫調節剤はチェックポイント阻害剤である。
【0118】
一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３カ月以内、約２カ月以内、約１カ月以内、約３週間以内、約２週間以内、または約１週間以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３カ月以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約２カ月以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約１カ月以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３週間以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約２週間以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約１週間以内に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのリンパ球枯渇療法の投与の前に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのリンパ球枯渇療法の投与の後に実行される。一部の実施形態では、対象は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、ガンマセクレターゼ阻害剤で処置される。
【0119】
ｉｉ．応答
一部の実施形態では、方法は、対象が、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないことを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料中のＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在の有無を決定することを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの非存在に基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与の後にＣＲまたはｓＣＲを達成することが予測される。逆に、一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在に基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与の後にＣＲまたはｓＣＲを達成しないことが予測される。
一部の実施形態では、方法は、対象が、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないことを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料中のＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在の有無を決定することを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの非存在に基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与の後にＣＲまたはｓＣＲを達成することが予測される。逆に、一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの存在に基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与の後にＣＲまたはｓＣＲを達成しないことが予測される。
【0120】
一部の実施形態では、方法は、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さないかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さないと決定される場合、対象は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法の投与の後にＣＲまたはｓＣＲを示すことが予測される。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さないと決定される場合、対象は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有し、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与の後にＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性が約１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または約１０倍高い。
【0121】
一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さないと決定される場合、対象は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有し、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与の後にＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性が約８倍、９倍、１０倍、１１倍、または１２倍高い。一部の実施形態では、方法は、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかどうかを決定することを含む。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有すると決定される場合、対象は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞（即ち、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の用量を含むＴ細胞療法の投与の後にＣＲまたはｓＣＲを示さないことが予測される。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有すると決定される場合、対象は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さず、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与の後にＣＲまたはｓＣＲを達成しない可能性が約１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、または約１０倍高い。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有すると決定される場合、対象は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さず、かつＴ細胞療法を投与された対象と比較して、Ｔ細胞療法の投与の後にＣＲまたはｓＣＲを達成しない可能性が約８倍、９倍、１０倍、１１倍、または１２倍高い。
【0122】
よって、一部の実施形態では、方法は、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象の、遺伝子操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置に対する応答を予測することを含み、対象が、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないことを決定することを含み、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さない場合、対象は、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成することが予測される。一部の実施形態では、方法は、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象の、遺伝子操作された細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置に対する応答を予測することを含み、対象が、ＩｇＧ 重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することを含み、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する場合、対象は、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成しないことが予測される。
【0123】
Ｃ．他のバイオマーカー
いずれかの実施形態の一部では、方法は、操作された細胞の用量中のベクターのコピー数を評価することを含む。一部の実施形態では、操作された細胞の用量中のベクターのコピー数に基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与の後にＣＲもしくはｓＣＲを達成すると予測されるか、またはＴ細胞療法の投与の後にＣＲもしくはｓＣＲを達成しないと予測される。
いずれかの実施形態の一部では、方法は、操作された細胞の用量中のベクターのコピー数を評価することを含む。一部の実施形態では、操作された細胞の用量中のベクターのコピー数に基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与の後にＣＲもしくはｓＣＲを達成すると予測されるか、またはＴ細胞療法の投与の後にＣＲもしくはｓＣＲを達成しないと予測される。
【0124】
一部の実施形態では、方法は、操作された細胞の用量中のベクターのコピー数を閾値レベルと比較し、それにより、対象がＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性を決定することを含む。一部の態様では、閾値レベルは、対象のグループに提供された操作された細胞の用量中のベクターのコピー数の平均値または中央値、および平均値または中央値の範囲または標準偏差内の値に基づいて決定され、ここで、グループの対象の各々は、操作された細胞の用量を受けた後にＣＲまたはｓＣＲを示すようになるか、またはＣＲまたはｓＣＲを示すようにならなかった。一部の実施形態では、対象に提供される操作された細胞の用量中のベクターのコピー数が閾値レベルよりも低い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示さないと予測される。一部の実施形態では、対象に提供される操作された細胞の用量中のベクターのコピー数が閾値レベルよりも高い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示すと予測される。
【0125】
いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象から得られた試料等において、β－２ミクログロブリンレベルを評価することを含む。一部の実施形態では、対象から得られた試料中のβ－２ミクログロブリンレベルに基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与の後にＣＲもしくはｓＣＲを達成すると予測されるか、またはＴ細胞療法の投与の後にＣＲもしくはｓＣＲを達成しないと予測される。
【0126】
一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料からのβ－２ミクログロブリンのレベル、量または濃度を閾値レベルと個別に比較し、それにより、対象がＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性を決定することを含む。一部の態様では、閾値レベルは、Ｔ細胞療法を受ける前の対象のグループから得られた生体試料における、β－２ミクログロブリンのレベル、量または濃度の平均値または中央値、および平均値または中央値の範囲または標準偏差内の値に基づいて決定され、グループの対象の各々は、ＣＲまたはｓＣＲを示すようになるか、またはＣＲまたはｓＣＲを示すようにならなかった。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のβ－２ミクログロブリンのレベル、量または濃度が閾値レベルよりも高い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示さないと予測される。一部の実施形態では、閾値レベルは、約５．５ｍｇ／ｍＬである。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のβ－２ミクログロブリンのレベル、量または濃度が約５．５ｍｇ／ｍＬよりも高い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示さないと予測される。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のβ－２ミクログロブリンのレベル、量または濃度が閾値レベルよりも低い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示すと予測される。一部の実施形態では、閾値レベルは、約３．５ｍｇ／ｍＬである。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のβ－２ミクログロブリンのレベル、量または濃度が約３．５ｍｇ／ｍＬよりも低い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示すと予測される。
【0127】
いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象から得られた試料等において、Ｄ－二量体レベルを評価することを含む。一部の実施形態では、試料は血液試料である。一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料からのＤ－二量体のレベル、量または濃度を閾値レベルと個別に比較し、それにより、対象がＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性を決定することを含む。一部の態様では、閾値レベルは、Ｔ細胞療法を受ける前の対象のグループから得られた生体試料における、Ｄ－二量体のレベル、量または濃度の平均値または中央値、および平均値または中央値の範囲または標準偏差内の値に基づいて決定され、グループの対象の各々は、ＣＲまたはｓＣＲを示すようになるか、またはＣＲまたはｓＣＲを示すようにならなかった。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のＤ－二量体のレベル、量または濃度が閾値レベルよりも高い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示さないと予測される。一部の実施形態では、閾値レベルは、約０．８ｍｇ／Ｌ、約０．９ｍｇ／Ｌ、約１．０ｍｇ／Ｌ、約１．１ｍｇ／Ｌ、約１．２ｍｇ／Ｌ、または約１．３ｍｇ／Ｌである。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のＤ－二量体のレベル、量または濃度が、約０．８ｍｇ／Ｌ、約０．９ｍｇ／Ｌ、約１．０ｍｇ／Ｌ、約１．１ｍｇ／Ｌ、約１．２ｍｇ／Ｌ、または約１．３ｍｇ／Ｌよりも高い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示さないと予測される。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のＤ－二量体のレベル、量または濃度が閾値レベルよりも低い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示すと予測される。一部の実施形態では、閾値レベルは、約０．８ｍｇ／Ｌ、約０．７ｍｇ／Ｌ、約０．６ｍｇ／Ｌ、約０．５ｍｇ／Ｌ、約０．４ｍｇ／Ｌ、または約０．３ｍｇ／Ｌである。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のＤ－二量体のレベル、量または濃度が、約０．８ｍｇ／Ｌ、約０．７ｍｇ／Ｌ、約０．６ｍｇ／Ｌ、約０．５ｍｇ／Ｌ、約０．４ｍｇ／Ｌ、または約０．３ｍｇ／Ｌよりも低い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示すと予測される。
【0128】
いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象から得られた試料等において、フェリチンレベルを評価することを含む。一部の実施形態では、対象から得られた試料中のフェリチンレベルに基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与の後にＣＲもしくはｓＣＲを達成すると予測されるか、またはＴ細胞療法の投与の後にＣＲもしくはｓＣＲを達成しないと予測される。
【0129】
一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料からのフェリチンのレベル、量または濃度を閾値レベルと個別に比較し、それにより、対象がＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性を決定することを含む。一部の態様では、閾値レベルは、Ｔ細胞療法を受ける前の対象のグループから得られた生体試料における、フェリチンのレベル、量または濃度の平均値または中央値、および平均値または中央値の範囲または標準偏差内の値に基づいて決定され、グループの対象の各々は、ＣＲまたはｓＣＲを示すようになるか、またはＣＲまたはｓＣＲを示すようにならなかった。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のフェリチンのレベル、量または濃度が閾値レベルよりも高い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示さないと予測される。一部の実施形態では、閾値レベルは、約３５０μｇ／Ｌ、約４００μｇ／Ｌ、約４５０μｇ／Ｌ、約５００μｇ／Ｌ、約５５０μｇ／Ｌ、または約６００μｇ／Ｌである。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のフェリチンのレベル、量または濃度が、約３５０μｇ／Ｌ、約４００μｇ／Ｌ、約４５０μｇ／Ｌ、約５００μｇ／Ｌ、約５５０μｇ／Ｌ、または約６００μｇ／Ｌよりも高い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示さないと予測される。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のフェリチンのレベル、量または濃度が閾値レベルよりも低い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示すと予測される。一部の実施形態では、閾値レベルは、約３００μｇ／Ｌ、約２５０μｇ／Ｌ、約２００μｇ／Ｌ、約１５０μｇ／Ｌ、約１００μｇ／Ｌ、または約５０μｇ／Ｌである。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のフェリチンのレベル、量または濃度が、約３００μｇ／Ｌ、約２５０μｇ／Ｌ、約２００μｇ／Ｌ、約１５０μｇ／Ｌ、約１００μｇ／Ｌ、または約５０μｇ／Ｌよりも低い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示すと予測される。
【0130】
いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象から得られた試料等において、ナトリウムレベルを評価することを含む。一部の実施形態では、対象からの試料中のナトリウムレベルに基づいて、対象は、Ｔ細胞療法の投与の後にＣＲもしくはｓＣＲを達成すると予測されるか、またはＴ細胞療法の投与の後にＣＲもしくはｓＣＲを達成しないと予測される。
【0131】
一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料からのナトリウムのレベル、量または濃度を閾値レベルと個別に比較し、それにより、対象がＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性を決定することを含む。一部の態様では、閾値レベルは、Ｔ細胞療法を受ける前の対象のグループから得られた生体試料における、ナトリウムのレベル、量または濃度の平均値または中央値、および平均値または中央値の範囲または標準偏差内の値に基づいて決定され、グループの対象の各々は、ＣＲまたはｓＣＲを示すようになるか、またはＣＲまたはｓＣＲを示すようにならなかった。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のナトリウムのレベル、量または濃度が閾値レベルよりも低い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示さないと予測される。一部の実施形態では、閾値レベルは、約１４０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１３９ｍｍｏｌ／Ｌ、約１３８ｍｍｏｌ／Ｌ、約１３７ｍｍｏｌ／Ｌ、約１３６ｍｍｏｌ／Ｌ、または約１３５ｍｍｏｌ／Ｌである。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のナトリウムのレベル、量または濃度が、約１４０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１３９ｍｍｏｌ／Ｌ、約１３８ｍｍｏｌ／Ｌ、約１３７ｍｍｏｌ／Ｌ、約１３６ｍｍｏｌ／Ｌ、または約１３５ｍｍｏｌ／Ｌよりも低い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示さないと予測される。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のナトリウムのレベル、量または濃度が閾値レベルよりも高い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示すと予測される。一部の実施形態では、閾値レベルは、約１４０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１４１ｍｍｏｌ／Ｌ、約１４２ｍｍｏｌ／Ｌ、約１４３ｍｍｏｌ／Ｌ、約１４４ｍｍｏｌ／Ｌ、または約１４５ｍｍｏｌ／Ｌである。一部の実施形態では、対象から得られた試料由来のナトリウムのレベル、量または濃度が、約１４０ｍｍｏｌ／Ｌ、約１４１ｍｍｏｌ／Ｌ、約１４２ｍｍｏｌ／Ｌ、約１４３ｍｍｏｌ／Ｌ、約１４４ｍｍｏｌ／Ｌ、または約１４５ｍｍｏｌ／Ｌよりも高い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示すと予測される。いずれかの実施形態の一部では、方法は、対象から得られた試料等において、プロトロンビン時間－国際標準化比（ＰＴ－ＩＮＲ）を評価することを含む。一部の実施形態では、試料は血液試料である。一部の実施形態では、方法は、対象から得られた試料からのＰＴ－ＩＮＲを閾値ＰＴ－ＩＮＲと比較し、それにより、対象がＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを達成する可能性を決定することを含む。一部の態様では、閾値ＰＴ－ＩＮＲは、Ｔ細胞療法を受ける前の対象のグループから得られた生体試料における、ＰＴ－ＩＮＲの平均値または中央値、および平均値または中央値の範囲または標準偏差内の値に基づいて決定され、グループの対象の各々は、ＣＲまたはｓＣＲを示すようになるか、またはＣＲまたはｓＣＲを示すようにならなかった。一部の実施形態では、対象から得られた試料のＰＴ－ＩＮＲが閾値ＰＴ－ＩＮＲよりも高い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示さないと予測される。一部の実施形態では、対象から得られた試料のＰＴ－ＩＮＲが閾値ＰＴ－ＩＮＲよりも高い場合、対象は、試料が閾値ＰＴ－ＩＮＲのＰＴ－ＩＮＲを有するかまたは閾値ＰＴ－ＩＮＲよりも低いＰＴ－ＩＮＲを有する対象と比較して、Ｔ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示す可能性が約１００分の１倍、１５０分の１倍、２００分の１倍、２５０分の１倍、または３００分の１倍低い。一部の実施形態では、対象から得られた試料のＰＴ－ＩＮＲが閾値ＰＴ－ＩＮＲよりも低い場合、対象はＴ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示すと予測される。一部の実施形態では、対象から得られた試料のＰＴ－ＩＮＲが閾値ＰＴ－ＩＮＲよりも低い場合、対象は、試料が閾値ＰＴ－ＩＮＲのＰＴ－ＩＮＲを有するかまたは閾値ＰＴ－ＩＮＲよりも高いＰＴ－ＩＮＲを有する対象と比較して、Ｔ細胞療法に対してＣＲまたはｓＣＲを示す可能性が約１００倍、１５０倍、２００倍、２５０倍、または３００倍高い。
【0132】
ＩＩ．処置および使用の方法
多発性骨髄腫の処置、および／または検出、選択、診断、および予後予測方法等における、ＢＣＭＡ結合分子、組換え受容体、操作された細胞、ならびにそれらの医薬組成物および製剤を使用する方法およびその使用も本明細書に提供される。そのような方法、例えば処置および使用の方法の中には、提供された抗ＢＣＭＡ組換え受容体を発現する、操作された細胞、例えば複数の操作された細胞（例えば、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）を対象に投与することを含むものがある。
多発性骨髄腫の処置、および／または検出、選択、診断、および予後予測方法等における、ＢＣＭＡ結合分子、組換え受容体、操作された細胞、ならびにそれらの医薬組成物および製剤を使用する方法およびその使用も本明細書に提供される。そのような方法、例えば処置および使用の方法の中には、提供された抗ＢＣＭＡ組換え受容体を発現する、操作された細胞、例えば複数の操作された細胞（例えば、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）を対象に投与することを含むものがある。
【0133】
Ａ．対象および使用方法
抗ＢＣＭＡ組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）、組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）を発現する操作された細胞、受容体を発現する複数の操作された細胞、および／またはこれらを含む組成物を投与する方法およびその使用、例えば療法の使用も提供される。そのような方法および使用は、療法の方法および使用を含み、例えば、分子（例えば、組換え受容体）、細胞（例えば、操作された細胞）、またはそれを含有する組成物の、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象への投与を含む。一部の実施形態では、分子、細胞、および／または組成物は、ＭＭの処置をもたらす有効量で投与される。そのような方法および処置における組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）、および細胞（例えば、操作された細胞）の使用、ならびにそのような療法の方法を実行するための医薬の調製における使用が本明細書に提供される。一部の実施形態では、方法は、結合分子もしくは細胞、またはこれを含む組成物を、ＭＭを有する対象に投与することによって実行される。一部の実施形態では、方法は、それによって対象におけるＭＭを処置する。処置レジメンにおける使用等、多発性骨髄腫（ＭＭ）の処置のための、本明細書において提供される医薬組成物等の組成物のいずれかの使用も本明細書に提供される。
抗ＢＣＭＡ組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）、組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）を発現する操作された細胞、受容体を発現する複数の操作された細胞、および／またはこれらを含む組成物を投与する方法およびその使用、例えば療法の使用も提供される。そのような方法および使用は、療法の方法および使用を含み、例えば、分子（例えば、組換え受容体）、細胞（例えば、操作された細胞）、またはそれを含有する組成物の、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象への投与を含む。一部の実施形態では、分子、細胞、および／または組成物は、ＭＭの処置をもたらす有効量で投与される。そのような方法および処置における組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）、および細胞（例えば、操作された細胞）の使用、ならびにそのような療法の方法を実行するための医薬の調製における使用が本明細書に提供される。一部の実施形態では、方法は、結合分子もしくは細胞、またはこれを含む組成物を、ＭＭを有する対象に投与することによって実行される。一部の実施形態では、方法は、それによって対象におけるＭＭを処置する。処置レジメンにおける使用等、多発性骨髄腫（ＭＭ）の処置のための、本明細書において提供される医薬組成物等の組成物のいずれかの使用も本明細書に提供される。
【0134】
本明細書で使用される場合、「処置」（および「処置する」または「処置すること」等のそれらの文法的変形）は、疾患もしくは状態もしくは障害、またはそれらと関連付けられる症状、有害効果もしくは転帰、もしくは表現型の完全または部分的な緩解あるいは低減を指す。処置の望ましい効果として、疾患の再発の防止、症状の軽減、任意の直接的もしくは間接的な病理学的帰結の減少、転移の防止、疾患進行の割合の減少、疾患状態の緩解または緩和、および軽減または予後の改善が挙げられるが、これらに限定されない。この用語は、疾患の完全な治癒、または任意の症状の完全な排除、または全ての症状もしくは転帰に対する効果（複数可）を意味しない。
【0135】
本明細書で使用される場合、「疾患の発症の遅延」は、疾患（例えば、がん）の発症を先送り、妨害し、減速し、遅延し、安定化し、抑制し、および／または先延ばしすることを意味する。この遅延は、処置される疾患および／または対象の病歴に応じて、様々な長さの時間であり得る。十分なまたはかなりの遅延は、対象が疾患を発症しないという点で、事実上、防止を包含し得る。例えば、後期のがん、例えば転移の発症は遅延され得る。
【0136】
「防止すること」は、本明細書で使用される場合、疾患にかかりやすい素因があり得るが、いまだ疾患とは診断されていない対象における疾患の発生または再発に関して予防を提供することを含む。一部の実施形態では、提供される分子および組成物は、疾患の発症を遅延させるか、または疾患の進行を遅らせるのに使用される。
【0137】
本明細書で使用される場合、機能または活性を「抑制する」は、目的の条件もしくはパラメーターを除いて他の状況では同じ条件と比較した場合に、あるいは、別の条件と比較した場合に、機能または活性を低減することである。例えば、腫瘍成長を抑制する抗体または組成物または細胞は、抗体または組成物または細胞の非存在下の腫瘍の成長速度と比較して、腫瘍の成長速度を低減させる。
【0138】
薬剤、例えば医薬製剤、結合分子、抗体、細胞、または組成物の「有効量」は、投与の状況では、所望の結果、例えば治療的または予防的結果を達成するのに必要な投薬量／量で、また必要な期間で有効な量を指す。
【0139】
薬剤、例えば医薬製剤、結合分子、抗体、細胞、または組成物の「治療有効量」は、所望の治療結果を達成するのに、例えば疾患、状態もしくは障害の処置、および／または処置の薬物動態的もしくは薬力学的効果のために、必要な投薬量でかつ必要な期間で有効な量を指す。治療有効量は、対象の疾患状態、年齢、性別および体重、ならびに投与される細胞の集団等の因子に従って多様であり得る。一部の実施形態では、提供される方法は、分子、抗体、細胞、および／または組成物を有効量で、例えば治療有効量で投与することを伴う。
【0140】
「予防有効量」は、所望の予防的結果を達成するのに必要な投薬量でかつ必要な期間で有効な量を指す。予防的用量は、疾患のより初期段階の前に、またはより初期段階で対象において使用されるため、通常、予防有効量は、治療有効量未満であるが、必ずしもそうとは限らない。
【0141】
本明細書で使用される場合、「対象」または「個体」は、ヒトである。
【0142】
養子細胞療法のための細胞の投与のための方法は公知であり、提供される方法および組成物と併せて使用され得る。例えば、養子Ｔ細胞療法の方法は、例えば、Gruenberg et alの米国特許出願公開第２００３／０１７０２３８号；Rosenbergの米国特許第４，６９０，９１５号；Rosenberg (2011) Nat Rev Clin Oncol. 8(10):577-85に記載されている。例えば、Themeli et al. (2013) Nat Biotechnol. 31(10): 928-933；Tsukahara et al. (2013) Biochem Biophys Res Commun 438(1): 84-9；Davila et al. (2013) PLoS ONE 8(4): e61338を参照されたい。
【0143】
処置される疾患の中で、ＢＣＭＡ発現に関連するのは多発性骨髄腫（ＭＭ）である。ＢＣＭＡの総説については、Coquery et al., Crit Rev Immunol., 2012, 32(4):287-305を参照されたい。ＢＣＭＡは、腫瘍細胞生存の媒介に関係付けられてきたため、がん療法のための潜在的な標的である。マウス抗ヒトＢＣＭＡ抗体を含有するキメラ抗原受容体、およびそのようなキメラ受容体を発現する細胞は、以前に記載された。Carpenter et al., Clin Cancer Res., 2013, 19(8):2048-2060を参照されたい。
【0144】
一部の実施形態では、多発性骨髄腫（ＭＭ）は、高リスクＭＭ、または再発したおよび／もしくは不応性の多発性骨髄腫である。一部の実施形態では、多発性骨髄腫（ＭＭ）は高リスクＭＭである。一部の実施形態では、高リスクＭＭは、ＩＭＷＧ高リスク細胞遺伝学を含む。いずれかの実施形態の一部では、細胞療法の投与の時点で、対象はＩＭＷＧ高リスク細胞遺伝学を有する。一部の実施形態では、高リスク細胞遺伝学は、ｄｅｌ（１７ｐ）、ｔ（４：１４）およびｔ（１４；１６）を含む。一部の実施形態では、多発性骨髄腫（ＭＭ）は、再発したおよび／もしくは不応性の多発性骨髄腫である。一部の実施形態では、多発性骨髄腫（ＭＭ）は、再発したおよび不応性の多発性骨髄腫（ｒ／ｒ ＭＭ）である。いずれかの実施形態の一部では、投与の時点で、対象はＲ／Ｒ ＭＭを有する。一部の実施形態では、方法は、多発性骨髄腫を有するか、それを有することが疑われるか、またはそれを発症するリスクがある対象を同定することができる。したがって、多発性骨髄腫を有する対象を同定し、本明細書に記載のＢＣＭＡ結合組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）、またはこれを発現する操作された細胞のいずれかでの処置について対象を選択するおよび／またはそれらのいずれかを対象に投与するための方法が本明細書に提供される。
【0145】
一部の実施形態では、対象は、約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有する。一部の実施形態では、方法は、対象が約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、対象は、約５６６ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有する。一部の実施形態では、方法は、対象が約５６６ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、対象は、約５００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有する。一部の実施形態では、方法は、対象が約５００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルは、対象へのリンパ球枯渇療法の投与の前に、白血球アフェレーシスの前に、および／または対象へのＴ細胞療法の投与の前に決定される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルは、対象へのリンパ球枯渇療法の投与の前に決定される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡレベルの決定は、白血球アフェレーシスの前に実行される。一部の実施形態では、血清ｓＢＣＭＡは、対象へのＴ細胞療法の投与の前に決定される。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法による処置について対象を選択するための方法が提供される。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は処置について選択される。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は処置について選択されない。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は処置について選択される。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は処置について選択されない。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は処置について選択される。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は処置について選択されない。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、多発性骨髄腫のデバルキングについて選択される。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、多発性骨髄腫のデバルキングについて選択される。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、多発性骨髄腫のデバルキングについて選択される。
【0146】
一部の実施形態では、対象は、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さない。一部の実施形態では、方法は、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さないことを決定することを含む。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの非存在は、対象へのリンパ球枯渇療法の投与の前に、白血球アフェレーシスの前に、および／または対象へのＴ細胞療法の投与の前に決定される。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの非存在は、対象へのリンパ球枯渇療法の投与の前に決定される。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの非存在は、白血球アフェレーシスの前に決定される。一部の実施形態では、ＩｇＧ ＨＣＤの非存在は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に決定される。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法による処置について対象を選択するための方法が提供される。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さないと決定される場合、対象は処置について選択される。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有すると決定される場合、対象は処置について選択されない。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有すると決定される場合、対象は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、多発性骨髄腫のデバルキングについて選択される。
【0147】
一部の実施形態では、対象は、事前治療ラインによる処置に続いて、持続性のまたは再発した疾患を有する。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法の投与の前に、対象は、１種または複数の前の療法を受けている。一部の実施形態では、対象は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０種以上の前の療法を受けている。一部の実施形態では、対象は、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０種以上の前の療法を受けている。一部の実施形態では、対象は、３種以上の前の療法を受けている。
【0148】
一部の実施形態では、３以上の事前治療ラインの各々は、２回の連続したサイクルを含んだ。一部の実施形態では、３以上の事前治療ラインの各々は、進行性疾患がその治療ラインに対する最良の応答でない限り、２回の連続サイクルを含んだ。一部の実施形態では、進行性疾患とは、治療ラインの最終投与後６０日以内の進行である。一部の実施形態では、対象は、３以上の事前治療ラインのうちの最後に対して不応性である。一部の実施形態では、３以上の事前治療ラインは、プロテアソーム阻害剤（ＰＩ）、免疫調節剤、および抗ＣＤ３８抗体を含む。
【0149】
いずれかの実施形態の一部では、免疫調節剤は、サリドマイド、レナリドマイド、またはポマリドマイドの中から選択される。いずれかの実施形態の一部では、プロテアソーム阻害剤は、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブおよびイキサゾミブの中から選択される。いずれかの実施形態の一部では、抗ＣＤ３８抗体は、ダラツムマブであるか、またはそれを含む。
【0150】
一部の実施形態では、多発性骨髄腫のための測定可能な疾患の判断基準は、（１）血清Ｍタンパク質 １ｇ／ｄＬ以上；（２）尿Ｍタンパク質 ２００ｍｇ以上／２４時間；（３）罹病血清遊離軽鎖（ｓＦＬＣ）レベル １０ｍｇ／ｄＬ以上と異常κ対λ比を含むことができる。一部の事例では、軽鎖疾患は、血清または尿中に測定可能な疾患を伴わない対象のみに許容される。一部の実施形態では、対象は、Ｔ細胞療法の投与時に測定可能な疾患を有する。一部の実施形態では、測定可能な疾患は、（ｉ）血清Ｍタンパク質 １．０ｇ／ｄＬ以上；（ｉｉ）尿Ｍタンパク質 ２００ｍｇ以上／２４時間；および／または（ｉｉｉ）血清遊離軽鎖（ＦＬＣ）比が異常である場合、罹病血清ＦＬＣレベル １０ｍｇ／ｄＬ以上を含む。一部の実施形態では、測定可能な疾患は、血清Ｍタンパク質 １．０ｇ／ｄＬ以上を含む。一部の実施形態では、測定可能な疾患は、尿Ｍタンパク質 ２００ｍｇ以上／２４時間を含む。一部の実施形態では、測定可能な疾患は、血清遊離軽鎖（ＦＬＣ）比が異常である場合、罹病血清ＦＬＣレベル １０ｍｇ／ｄＬ以上を含む。一部の実施形態では、測定可能な疾患は、（ｉ）血清Ｍタンパク質 １．０ｇ以上；（ｉｉ）尿Ｍタンパク質 ２００ｍｇ以上／２４時間；および（ｉｉｉ）血清遊離軽鎖（ＦＬＣ）比が異常である場合、罹病血清ＦＬＣレベル １０ｍｇ／ｄＬ以上を含む。Kumar et al., Lancet Oncol (2016) 17(8):e328-46を参照されたい。
【0151】
一部の実施形態では、対象は適切な臓器機能を有する。
【0152】
一部の実施形態では、対象は１８歳以上である。
【0153】
一部の実施形態では、方法は、特定の判断基準、診断または指標に基づき、Ｔ細胞療法による処置について特定の対象を算入または除外することを伴うことができる。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法または処置前のリンパ球枯渇化学療法の投与の時点で、対象は中枢神経系（ＣＮＳ）の骨髄腫との関与を知らなかった。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法または処置前のリンパ球枯渇化学療法の投与の時点で、対象は臨床的に関連するＣＮＳ病理の病歴または存在を有さない。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法または処置前のリンパ球枯渇化学療法の投与の時点で、対象は、血漿細胞白血病（ＰＣＬ）の活動性または病歴を有さなかった。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法または処置前のリンパ球枯渇化学療法の投与の時点で、対象は、測定可能な疾患の他の証拠を伴わない孤立性形質細胞腫または非分泌性骨髄腫を有していない。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法または処置前のリンパ球枯渇化学療法の投与の時点で、対象は同種造血幹細胞移植の病歴がない。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法または処置前のリンパ球枯渇化学療法の投与の時点で、対象は、がんに対する遺伝子療法に基づく治療薬による処置歴がない。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法または処置前のリンパ球枯渇化学療法の投与の時点で、対象は、がんに対する治験細胞療法による処置歴がない。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法または処置前のリンパ球枯渇化学療法の投与の時点で、対象はＢＣＭＡ標的療法による処置歴がない。
【0154】
一部の実施形態では、判断基準、診断または指標の評価は、提供される方法に従った処置の適格性または適合性について対象をスクリーニングする時点で、処置レジメンの様々な工程において、リンパ球枯渇療法を受ける時点で、および／または操作された細胞もしくはその組成物の投与の開始の時点でもしくはその直前に、行うことができる。
【0155】
よって、提供される方法および使用は、養子細胞療法のための方法および使用を含む。一部の実施形態では、方法は、対象、組織、または細胞、例えば、多発性骨髄腫を有するか、そのリスクを有するか、またはそれを有することが疑われるものを含有する細胞または組成物の投与を含む。一部の実施形態では、細胞、集団、および組成物は、例えば養子細胞療法、例えば養子Ｔ細胞療法により、多発性骨髄腫を有する対象に投与される。一部の実施形態では、細胞または組成物は、対象、例えば多発性骨髄腫を有するか、またはそのリスクを有する対象に投与される。一部の態様では、方法はそれによって、腫瘍負担を低下させること等により、多発性骨髄腫の１種または複数の症状を処置、例えば緩解する。
【0156】
養子細胞療法のための細胞の投与のための方法は公知であり、提供される方法および組成物と併せて使用され得る。例えば、養子Ｔ細胞療法の方法は、例えば、Gruenberg et alの米国特許出願公開第２００３／０１７０２３８号；Rosenbergの米国特許第４，６９０，９１５号；Rosenberg (2011) Nat Rev Clin Oncol. 8(10):577-85に記載されている。例えば、Themeli et al. (2013) Nat Biotechnol. 31(10): 928-933；Tsukahara et al. (2013) Biochem Biophys Res Commun 438(1): 84-9；Davila et al. (2013) PLoS ONE 8(4): e61338を参照されたい。
【0157】
一部の実施形態では、Ｔ細胞療法、例えば養子細胞療法、例えば養子Ｔ細胞療法は、自家移入によって実行され、それによると、細胞は、Ｔ細胞療法を受けることになっている対象から、またはそのような対象に由来する試料から単離されるおよび／または他の仕方で調製される。よって、一部の態様では、細胞は、処置を必要とする対象、例えば、患者に由来し、細胞は、単離および加工処理の後に、同じ対象に投与される。
【0158】
一部の実施形態では、Ｔ細胞療法、例えば養子細胞療法、例えば養子Ｔ細胞療法は、同種異系移入によって実行され、それによると、細胞は、細胞療法を受けることになっているまたは最終的に受ける対象以外の対象、例えば、第１の対象から単離されるおよび／または他の仕方で調製される。そのような実施形態では、細胞は次いで、同じ種の異なる対象、例えば、第２の対象に投与される。一部の実施形態では、第１および第２の対象は、遺伝的に同一である。一部の実施形態では、第１および第２の対象は、遺伝的に同様である。一部の実施形態では、第２の対象は、第１の対象と同じＨＬＡクラスまたはスーパータイプ（ｓｕｐｅｒｔｙｐｅ）を発現する。
【0159】
対象は、男性または女性であり得、乳児、若年期、青年期、成体および老齢期の対象を含むいずれかの適した年齢であり得る。一部の実施形態では、対象は成人（１８歳以上で）ある。
【0160】
一部の実施形態では、用量および／または投与頻度は、有効性および／または応答に基づいて決定される。一部の実施形態では、有効性は、疾患状態を評価することによって決定される。疾患状態を評価するための例示的な方法は、電気泳動および免疫固定法による血液および／または尿等の生体液中のＭタンパク質の測定；血液中のｓＦＬＣ（κおよびλ）の定量化；骨格検査；ならびに髄外性疾患を有する対象における陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）／コンピュータ断層撮影（ＣＴ）によるイメージングを含む。一部の実施形態では、疾患状態は、骨髄試験によって評価することができる。一部の例では、用量および／または投与頻度は、血液および／または骨髄中の組換え受容体または細胞の増大化および持続性によって決定される。一部の実施形態では、用量および／または投与頻度は、組換え受容体または操作された細胞の抗腫瘍活性に基づき決定される。一部の実施形態では、抗腫瘍活性は、全奏効率（ＯＲＲ）および／または国際骨髄腫作業部会（International Myeloma Working Group）（ＩＭＷＧ）統一応答基準（Kumar et al. (2016) Lancet Oncol 17(8):e328-346を参照）によって決定される。一部の実施形態では、応答は、微小残存疾患（ＭＲＤ）評価を使用して評価される。一部の実施形態では、ＭＲＤは、フローサイトメトリーおよびハイスループット配列決定、例えば、ディープ配列決定等の方法によって評価することができる。一部の実施形態では、応答は、組換え受容体または細胞の投与に続く応答の持続時間に基づき評価される。一部の例では、用量および／または投与頻度は、毒性に基づく可能性がある。一部の実施形態では、用量および／または頻度は、組換え受容体および／または細胞が投与される対象の健康関連ＱＯＬ（ＨＲＱｏＬ）に基づいて決定することができる。一部の実施形態では、用量および／または投与頻度は、上記の判断基準のいずれかに基づいて変更、即ち、増加または減少させることができる。
【0161】
一部の実施形態では、米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータス指標を使用して、処置について対象、例えば、前の療法から不十分な成績を有した対象を評価または選択することができる（例えば、Oken et al. (1982) Am J Clin Oncol. 5:649-655参照されたい）。パフォーマンスステータスのＥＣＯＧスケールは、その自己管理能力、日々の活動および身体能力（例えば、歩行、作業等）の観点から機能の患者のレベルについて記載する。一部の実施形態では、０のＥＣＯＧパフォーマンスステータスは、対象が、正常な活動を行うことができることを指し示す。一部の態様では、１のＥＣＯＧパフォーマンスステータスを有する対象は、身体活動にある程度の制限を示すが、対象は完全に歩行可能である。一部の態様では、２のＥＣＯＧパフォーマンスステータスを有する患者は、５０％を超えて歩行可能である。一部の事例では、２のＥＣＯＧパフォーマンスステータスを有する対象は、セルフケアが可能となることもできる；例えば、Sorensen et al., (1993) Br J Cancer 67(4) 773-775を参照されたい。一部の実施形態では、本明細書に提供される方法または処置レジメンに従って投与されるべき対象は、０または１のＥＣＯＧパフォーマンスステータスを有する対象を含む。一部の実施形態では、対象は、０または１の米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）のパフォーマンスステータスを有する。一部の実施形態では、対象は０の米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）のパフォーマンスステータスを有する。一部の実施形態では、対象は１の米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）のパフォーマンスステータスを有する。
【0162】
一部の実施形態では、対象が別の療法に対して抵抗性になっているにもかかわらず、投与は、対象を処置することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の実施形態に従って対象に投与された場合、用量または組成物は、投与された対象の少なくとも２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、または７０％において厳格な完全奏効（ｓＣＲ）または完全奏効（ＣＲ）を達成することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の実施形態に従って対象に投与された場合、用量または組成物は、投与された対象の少なくとも２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、または７０％において厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の実施形態に従って対象に投与された場合、用量または組成物は、投与された対象の少なくとも２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、または７０％において完全奏効（ＣＲ）を達成することができる。一部の態様では、例えば、本明細書に提供される方法に従った処置に対する特定の応答は、国際骨髄腫作業部会（ＩＭＷＧ）統一応答基準（Kumar et al. (2016) Lancet Oncol 17(8):e328-346を参照されたい）に基づき評価することができる。
【0163】
一部の実施形態では、処置の毒性および／または副作用をモニターし、組換え受容体、例えばＣＡＲ、細胞、および／または組成物の用量および／または投与頻度を調整するために使用することができる。例えば、有害事象および臨床検査値異常をモニターし、用量および／または投与頻度の調整に使用することができる。有害事象には、注入反応、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、神経毒性、マクロファージ活性化症候群、および腫瘍溶解症候群（ＴＬＳ）が含まれる。そのような事象のいずれかが用量制限毒性を確立し、用量の減少および／または処置の中止を正当化する可能性がある。用量および／または投与頻度を確立するためのガイドラインとして使用することができる他の副作用または有害事象には、非血液学的有害事象が含まれ、これには、疲労、発熱または発熱性好中球減少症、一定期間（例えば、２週間以下または７日以下）のトランスアミナーゼの増加、頭痛、骨痛、低血圧、低酸素症、悪寒、下痢、吐き気／嘔吐、神経毒性（例えば、錯乱、失語症、痙攣、嗜眠、および／または異常な精神状態）、播種性血管内凝固、電解質異常等の他の無症候性非血液学的臨床検査値異常が含まれる。用量および／または投与頻度を確立するためのガイドラインとして使用することができる他の副作用または有害事象には、血液学的有害事象が含まれ、これには好中球減少症、白血球減少症、血小板減少症、動物、および／またはＢ細胞形成不全および低ガンマグロビン血症が含まれるが、これらに限定されない。
【0164】
一部の実施形態では、提供される方法に従う処置は、例えば他の療法の投与と比較して、より低い毒性の割合および／またはより低い毒性の程度、毒性の転帰または症状、毒性促進プロファイル、因子、または特性、例えばサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）または神経毒性、例えば重篤なＣＲＳまたは重篤な神経毒性と関連するか、またはそれを示す症状または転帰をもたらし得る。
【0165】
一部の実施形態では、対象は、白血球除去療法後、およびリンパ球枯渇化学療法の前に、橋渡し療法を受けることができる。治療医は、提供された組成物または細胞の製造中に、例えば疾患制御のために橋渡し療法が必要かどうかを決定することができる。一部の実施形態では、橋渡し療法は、リンパ球枯渇の開始前に中止される。一部の実施形態では、橋渡し療法は、リンパ球枯渇の１日前、２日前、３日前、４日前、５日前、７日前、１０日前、１４日前、２１日前、２８日前、４５日前、または６０日前に中止される。
【0166】
細胞が哺乳動物（例えば、ヒト）に投与されると、一部の態様では、操作された細胞集団および／または抗体の生物活性が、多数の公知の方法のいずれかによって測定される。評価するためのパラメーターとして、インビボで、例えばイメージングによる、またはエクスビボで、例えばＥＬＩＳＡもしくはフローサイトメトリーによる、操作されたか、もしくは天然のＴ細胞または他の免疫細胞の、抗原への特異的結合が挙げられる。ある特定の実施形態では、標的細胞を破壊する操作された細胞の能力は、例えば、Kochenderfer et al., J. Immunotherapy, 32(7): 689-702 (2009)、およびHerman et al. J. Immunological Methods, 285(1): 25-40 (2004)に記載されている細胞傷害性アッセイ等の、当技術分野で公知のいずれかの適した方法を使用して測定することができる。ある特定の実施形態では、細胞の生物活性は、ＣＤ１０７ａ、ＩＦＮγ、ＩＬ－２およびＴＮＦ等のある特定のサイトカインの発現および／または分泌をアッセイすることによって測定される。一部の態様では、生物活性は、腫瘍負荷または負荷量の低減等の臨床の転帰を評価することによって測定される。
【0167】
ある特定の実施形態では、操作された細胞は、その治療的または予防的有効性が増加するように、いくつもの方法で改変される。例えば、一部の実施形態では、細胞によって発現される操作されたＣＡＲは、リンカーを介して直接的または間接的に標的部分にコンジュゲートされる。化合物、例えばＣＡＲを標的部分にコンジュゲートするという実線は、当技術分野で公知である。例えば、Wadwa et al., J. Drug Targeting, 3(2):111 (1995)、および米国特許第５，０８７，６１６号を参照されたい。
【0168】
Ｂ．腫瘍デバルキング
本明細書に提供される方法の一部の実施形態では、方法は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、多発性骨髄腫（ＭＭ）をデバルキングすることを含む。本明細書に提供される方法の一部の実施形態では、方法は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、ＭＭをデバルキングするための対象を選択することを含む。
本明細書に提供される方法の一部の実施形態では、方法は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、多発性骨髄腫（ＭＭ）をデバルキングすることを含む。本明細書に提供される方法の一部の実施形態では、方法は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、ＭＭをデバルキングするための対象を選択することを含む。
【0169】
一部の実施形態では、方法は、対象が、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すること、および／または約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すること、および／または約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すること、および／または約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、対象は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および／または約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、対象は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および／または約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、対象は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および／または約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。
【0170】
一部の実施形態では、方法は、対象が、約５９０ｎｇ／ｍＬ、約５８０ｎｇ／ｍＬ、約５７０ｎｇ／ｍＬ、約５６０ｎｇ／ｍＬ、約５５０ｎｇ／ｍＬ、約５４０ｎｇ／ｍＬ、約５３０ｎｇ／ｍＬ、約５２０ｎｇ／ｍＬ、約５１０ｎｇ／ｍＬ、または約５００ｎｇ／ｍＬより高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、対象は、約５９０ｎｇ／ｍＬ、約５８０ｎｇ／ｍＬ、約５７０ｎｇ／ｍＬ、約５６０ｎｇ／ｍＬ、約５５０ｎｇ／ｍＬ、約５４０ｎｇ／ｍＬ、約５３０ｎｇ／ｍＬ、約５２０ｎｇ／ｍＬ、約５１０ｎｇ／ｍＬ、または約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、対象は、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される。
【0171】
一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および／または約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、ＭＭをデバルキングすることを含む。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および／または約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、ＭＭをデバルキングすることを含む。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および／または約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、ＭＭをデバルキングすることを含む。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および／または約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、ＭＭはデバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および／または約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、ＭＭは、デバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および／または約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、ＭＭは、デバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および／または約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、デバルキングについて選択される。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および／または約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、デバルキングについて選択される。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および／または約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、デバルキングについて選択される。
【0172】
一部の実施形態では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、対象は、約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、対象は、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、対象は、約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、ＭＭをデバルキングすることを含む。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、ＭＭをデバルキングすることを含む。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、ＭＭをデバルキングすることを含む。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、ＭＭは、デバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、ＭＭは、デバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、ＭＭは、デバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、デバルキングについて選択される。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、デバルキングについて選択される。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、デバルキングについて選択される。
【0173】
一部の実施形態では、方法は、対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有することを決定することを含む。一部の実施形態では、対象は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有すると決定されている。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有すると決定される場合、方法は、ＭＭをデバルキングすることを含む。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有すると決定される場合、ＭＭは、デバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有すると決定される場合、対象は、デバルキングについて選択される。
【0174】
一部の実施形態では、方法は、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、対象は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、対象は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、対象は、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、ＭＭをデバルキングすることを含む。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、ＭＭをデバルキングすることを含む。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、ＭＭをデバルキングすることを含む。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、ＭＭはデバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、ＭＭは、デバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、ＭＭは、デバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、デバルキングについて選択される。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、デバルキングについて選択される。一部の実施形態では、対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有する、および約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、デバルキングについて選択される。
【0175】
一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること、および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が約６００ｎｇ／ｍｌより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することと；（ｃ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象がＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること、および（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。
【0176】
一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が、（ｉ）約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること、および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が約５６６ｎｇ／ｍｌより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することと；（ｃ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象がＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が、（ｉ）約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること、および（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。
【0177】
一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が、（ｉ）約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること、および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が約５００ｎｇ／ｍｌより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することと；（ｃ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象がＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が、（ｉ）約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること、および（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。
【0178】
一部の実施形態では、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、ここで、（ａ）対象は、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有する；および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すると事前に決定され；（ｂ）（１）対象が、（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭはデバルキングされた。一部の実施形態では、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、ここで、（ａ）対象は、約６００ｎｇ／ｍｌより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すると事前に決定され；（ｂ）（１）対象が、（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭはデバルキングされた。一部の実施形態では、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、ここで、（ａ）対象は、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すると事前に決定され；（ｂ）（１）対象が、（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭはデバルキングされた。一部の実施形態では、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、ここで、（ａ）対象は、（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有する；および（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すると事前に決定され；（ｂ）（１）対象が、（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭはデバルキングされた。
【0179】
一部の実施形態では、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、ここで、（ａ）対象は、（ｉ）約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有する；および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すると事前に決定され；（ｂ）（１）対象が、（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭはデバルキングされた。一部の実施形態では、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、ここで、（ａ）対象は、約５６６ｎｇ／ｍｌより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すると事前に決定され；（ｂ）（１）対象が、（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭはデバルキングされた。一部の実施形態では、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、ここで、（ａ）対象は、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すると事前に決定され；（ｂ）（１）対象が、（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭはデバルキングされた。一部の実施形態では、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、ここで、（ａ）対象は、（ｉ）約５６６ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有する；および（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すると事前に決定され；（ｂ）（１）対象が、（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭはデバルキングされた。
【0180】
一部の実施形態では、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、ここで、（ａ）対象は、（ｉ）約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有する；および／または（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すると事前に決定され；（ｂ）（１）対象が、（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭはデバルキングされた。一部の実施形態では、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、ここで、（ａ）対象は、約５００ｎｇ／ｍｌより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すると事前に決定され；および（ｂ）（１）対象が、（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭはデバルキングされた。一部の実施形態では、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、ここで、（ａ）対象は、ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すると事前に決定され；（ｂ）（１）対象が、（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭはデバルキングされた。一部の実施形態では、方法は、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、ここで、（ａ）対象は、（ｉ）約５００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有する；および（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すると事前に決定され；（ｂ）（１）対象が、（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭはデバルキングされた。
【0181】
一部の実施形態では、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、方法は、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、対象は、約６００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、対象は、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、対象は、約５００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、ＭＭをデバルキングすることを含む。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、ＭＭをデバルキングすることを含む。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、ＭＭをデバルキングすることを含む。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、ＭＭは、デバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、ＭＭは、デバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、ＭＭは、デバルキングされる。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、デバルキングについて選択される。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、デバルキングについて選択される。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、対象は、デバルキングについて選択される。
【0182】
一部の実施形態では、デバルキングの後に、方法は、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、デバルキングの後に、方法は、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、デバルキングの後に、方法は、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することを含む。一部の実施形態では、デバルキングの後に、対象は、約６００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、デバルキングの後に、対象は、約５６６ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、デバルキングの後に、対象は、約５００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定されている。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、Ｔ細胞療法を対象に投与することを含む。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、Ｔ細胞療法を対象に投与することを含む。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、方法は、Ｔ細胞療法を対象に投与することを含む。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、Ｔ細胞療法は対象に投与される。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、Ｔ細胞療法は対象に投与される。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、Ｔ細胞療法は対象に投与される。
【0183】
一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することと；（ｄ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、Ｔ細胞療法は対象に投与されない。
【0184】
一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することと；（ｄ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより高いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、Ｔ細胞療法は対象に投与されない。
【0185】
一部の実施形態では、方法は、（ａ）対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することと；（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；（ｃ）対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することと；（ｄ）ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む。一部の実施形態では、対象が、約５００ｎｇ／ｍＬより高いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される場合、Ｔ細胞療法は対象に投与されない。
【0186】
一部の実施形態では、対象が、（ｉ）約５９０ｎｇ／ｍＬ、約５８０ｎｇ／ｍＬ、約５７０ｎｇ／ｍＬ、約５６０ｎｇ／ｍＬ、約５５０ｎｇ／ｍＬ、約５４０ｎｇ／ｍＬ、約５３０ｎｇ／ｍＬ、約５２０ｎｇ／ｍＬ、約５１０ｎｇ／ｍＬ、または約５００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡを有する；および／または（ｉｉ）ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さない場合、ＭＭは、デバルキングされない。一部の実施形態では、対象が、約５９０ｎｇ／ｍＬ、約５８０ｎｇ／ｍＬ、約５７０ｎｇ／ｍＬ、約５６０ｎｇ／ｍＬ、約５５０ｎｇ／ｍＬ、約５４０ｎｇ／ｍＬ、約５３０ｎｇ／ｍＬ、約５２０ｎｇ／ｍＬ、約５１０ｎｇ／ｍＬ、または約５００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡを有する場合、ＭＭは、デバルキングされない。一部の実施形態では、対象が、（ｉ）約５９０ｎｇ／ｍＬ、約５８０ｎｇ／ｍＬ、約５７０ｎｇ／ｍＬ、約５６０ｎｇ／ｍＬ、約５５０ｎｇ／ｍＬ、約５４０ｎｇ／ｍＬ、約５３０ｎｇ／ｍＬ、約５２０ｎｇ／ｍＬ、約５１０ｎｇ／ｍＬ、または約５００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡを有する；および／または（ｉｉ）ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有さない場合、対象は、デバルキングについて選択されない。一部の実施形態では、対象が、約５９０ｎｇ／ｍＬ、約５８０ｎｇ／ｍＬ、約５７０ｎｇ／ｍＬ、約５６０ｎｇ／ｍＬ、約５５０ｎｇ／ｍＬ、約５４０ｎｇ／ｍＬ、約５３０ｎｇ／ｍＬ、約５２０ｎｇ／ｍＬ、約５１０ｎｇ／ｍＬ、または約５００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡを有する場合、対象は、デバルキングについて選択されない。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有する場合、ＭＭは、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、デバルキングされない。一部の実施形態では、対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有する場合、対象は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、デバルキングについて選択されない。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有する場合、ＭＭは、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、デバルキングされない。一部の実施形態では、対象が、約５６６ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有する場合、対象は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、デバルキングについて選択されない。
【0187】
一部の実施形態では、デバルキングは、対象への化学療法、放射線、または免疫調節剤の投与を含む。一部の実施形態では、デバルキングは、対象への化学療法の投与を含む。一部の実施形態では、化学療法は、メルファラン、ドキソルビシン、またはシクロホスファミド化学療法を含む。一部の実施形態では、対象への放射線の投与を含む。一部の実施形態では、免疫調節剤は、サリドマイド、レナリドマイド、またはポマリドマイドである。一部の実施形態では、対象への免疫調節剤の投与を含む。一部の実施形態では、免疫調節剤はチェックポイント阻害剤である。
【0188】
提供される実施形態のいずれかの一部では、デバルキングは、対象へのＴ細胞療法の投与の前に実行される。
【0189】
一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３カ月以内、約２カ月以内、約１カ月以内、約３週間以内、約２週間以内、または約１週間以内に実行される。一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３カ月以内に実行される。一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約２カ月以内に実行される。一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約１カ月以内に実行される。一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３週間以内に実行される。一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約２週間以内に実行される。一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約１週間以内に実行される。
【0190】
一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の約３カ月前、約２カ月前、約１カ月前、約３週間前、約２週間前、または約１週間前に実行される。一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の約３カ月前に実行される。一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の約２カ月前に実行される。一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の約１カ月前に実行される。一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の約３週間前に実行される。一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の約２週間前に実行される。一部の実施形態では、ＭＭをデバルキングすることは、対象へのＴ細胞療法の投与の約１週間前に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのリンパ球枯渇療法の投与の前に実行される。一部の実施形態では、デバルキングは、対象へのリンパ球枯渇療法の投与の後に実行される。一部の実施形態では、対象は、対象へのＴ細胞療法の投与の前に、ガンマセクレターゼ阻害剤で処置される。
【0191】
Ｃ．Ｔ細胞療法の投薬量および投与
本明細書に提供される方法、組成物、組合せ、キットおよび使用の一部の実施形態では、処置は、Ｔ細胞療法（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）を対象に投与することを含む。例えば、Ｔ細胞療法は、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞療法である。
本明細書に提供される方法、組成物、組合せ、キットおよび使用の一部の実施形態では、処置は、Ｔ細胞療法（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）を対象に投与することを含む。例えば、Ｔ細胞療法は、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞療法である。
【0192】
一部の実施形態では、提供される方法における使用のためのまたはそれに関係して投与される細胞は、操作された受容体、例えば、操作された抗原受容体、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）またはＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を含有するかまたはそれを含有するように操作される。組成物の中でも、養子細胞療法のため等、投与のための医薬組成物および製剤が特に挙げられる。提供される方法に合わせておよび／または提供される製造品もしくは組成物を用いて、対象、例えば、患者に細胞および組成物を投与するための療法の方法も提供される。
【0193】
一部の実施形態では、細胞に基づく療法は、腫瘍またはがん等の病変の表面に発現される分子を標的化する、細胞、例えば、免疫細胞、例えば、Ｔ細胞またはＮＫ細胞の投与であるかまたはそれを含む。一部の実施形態では、細胞は、抗原に特異的に結合する細胞外リガンド結合性ドメインを含有する組換え受容体、例えば、ＣＡＲを発現する。一部の実施形態では、組換え受容体は、ＢＣＭＡに特異的に結合する細胞外抗原認識ドメインを含有するＣＡＲである。一部の実施形態では、免疫細胞は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）等の組換え受容体を発現する。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するように操作されたＴ細胞を投与することを含む。特定の実施形態では、細胞療法、例えば、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞療法は、多発性骨髄腫、例えば、再発した、および不応性の（Ｒ／Ｒ多発性骨髄腫）を処置するためのものである。一部の実施形態では、細胞は、対象にとって自家である。一部の実施形態では、細胞は、対象にとって同種異系である。提供される方法において細胞療法として投与するための例示的な操作された細胞は、セクションＩＶに記載されている。
【0194】
養子細胞療法のための細胞の投与のための方法は、知られており、提供される方法、組成物および製造品およびキットに関連して使用することができる。例えば、養子Ｔ細胞療法の方法は、例えば、Gruenberg et alの米国特許出願公開第２００３／０１７０２３８号；Rosenbergの米国特許第４，６９０，９１５号；Rosenberg (2011) Nat Rev Clin Oncol. 8(10):577-85)に記載されている。例えば、Themeli et al. (2013) Nat Biotechnol. 31(10): 928-933；Tsukahara et al. (2013) Biochem Biophys Res Commun 438(1): 84-9；Davila et al. (2013) PLoS ONE 8(4): e61338を参照されたい。
【0195】
一部の実施形態では、細胞療法、例えば、養子Ｔ細胞療法は、自家移入によって実行され、それによると、細胞は、細胞療法を受けることになっている対象からまたはそのような対象に由来する試料から単離されるおよび／または他の仕方で調製される。よって、一部の態様では、細胞は、処置を必要とする対象、例えば、患者に由来し、細胞は、単離および加工処理の後に、同じ対象に投与される。
【0196】
一部の実施形態では、細胞療法、例えば、養子Ｔ細胞療法は、同種異系移入によって実行され、それによると、細胞は、細胞療法を受けることになっているまたは最終的に受ける対象以外の対象、例えば、第１の対象から単離されるおよび／または他の仕方で調製される。そのような実施形態では、細胞は次いで、同じ種の異なる対象、例えば、第２の対象に投与される。一部の実施形態では、第１および第２の対象は、遺伝的に同一である。一部の実施形態では、第１および第２の対象は、遺伝的に同様である。一部の実施形態では、第２の対象は、第１の対象と同じＨＬＡクラスまたはスーパータイプ（ｓｕｐｅｒｔｙｐｅ）を発現する。
【0197】
Ｔ細胞療法の細胞は、投与のために製剤化された組成物において、またはその代わりに、別々の投与のために製剤化された２種以上の組成物（例えば、２種の組成物）において投与することができる。細胞の用量（複数可）は、特定の数もしくは相対数の細胞もしくは操作された細胞、および／またはＣＤ４＋ ｖｓ ＣＤ８＋ Ｔ細胞等の組成物内の定義された比もしくは組成の２種以上のサブタイプを含むことができる。
【0198】
細胞は、いずれか適した手段によって、例えば、ボーラス注入によって、注射、例えば、静脈内もしくは皮下注射、眼内注射、眼周囲注射、網膜下注射、硝子体内注射、経中隔注射、強膜下注射、脈絡膜内注射、前房内注射、結膜下（ｓｕｂｃｏｎｊｅｃｔｖａｌ）注射、結膜下（ｓｕｂｃｏｎｊｕｎｔｉｖａｌ）注射、テノン嚢下（ｓｕｂ－Ｔｅｎｏｎ）注射、眼球後注射、眼球周囲注射、または強膜近傍後側（ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ ｊｕｘｔａｓｃｌｅｒａｌ）デリバリーによって投与することができる。一部の実施形態では、細胞は、非経口、肺内および鼻腔内、また、局所的処置に望まれる場合は、病巣内投与によって投与される。非経口注入は、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内または皮下投与を含む。一部の実施形態では、所与の用量は、細胞の単一ボーラス投与によって投与される。一部の実施形態では、所与の用量は、例えば３日間以下の期間にわたる細胞の複数ボーラス投与によって、または細胞の継続注入投与によって投与される。一部の実施形態では、細胞用量またはいずれか追加の療法、例えば、リンパ球枯渇療法、介入療法および／または併用療法の投与は、外来デリバリーにより実行される。
【0199】
疾患の処置のため、適切な投薬量は、処置されるべき疾患の型、細胞または組換え受容体の型、疾患の重症度および経過、以前の療法、対象の臨床歴および細胞に対する応答、ならびに担当医の裁量に依存し得る。組成物および細胞は、一部の実施形態では、一度にまたは一連の処置にわたり、対象に適切に投与される。
【0200】
ある特定の実施形態では、細胞、または細胞のサブタイプの個々の集団は、約１００万～約１０００億個の細胞の範囲で、および／または体重１キログラム当たりの当該量の細胞で、例えば、１００万～約５００億個の細胞（例えば、約５００万個の細胞、約２５００万個の細胞、約５億個の細胞、約１０億個の細胞、約５０億個の細胞、約２００億個の細胞、約３００億個の細胞、約４００億個の細胞、または前述の値のうちいずれか２つによって定義される範囲）、例えば、約１０００万～約１０００億個の細胞（例えば、約２０００万個の細胞、約３０００万個の細胞、約４０００万個の細胞、約６０００万個の細胞、約７０００万個の細胞、約８０００万個の細胞、約９０００万個の細胞、約１００億個の細胞、約２５０億個の細胞、約５００億個の細胞、約７５０億個の細胞、約９００億個の細胞、または前述の値のうちいずれか２つによって定義される範囲）、また、一部の事例では、約１億個の細胞～約５００億個の細胞（例えば、約１億２０００万個の細胞、約２億５０００万個の細胞、約３億５０００万個の細胞、約４億５０００万個の細胞、約６億５０００万個の細胞、約８億個の細胞、約９億個の細胞、約３０億個の細胞、約３００億個の細胞、約４５０億個の細胞）、またはこれらの範囲の間のいずれかの値、および／または体重１キログラム当たりのいずれかの値で対象に投与される。投薬量は、疾患または障害および／または患者および／または他の処置に特有の特質に応じて変動し得る。
【0201】
一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、約１×１０８個未満の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）例えば、約１×１０６～１×１０８個のそのような細胞の範囲で、例えば、２×１０６、５×１０６、１×１０７、５×１０７もしくは１×１０８個のそのような総細胞、または前述の値のうちいずれか２つの間の範囲を含む。一部の実施形態では、用量は、約５×１０８個未満の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、例えば、約１×１０８～５×１０８個のそのような細胞の範囲で、例えば、１．５×１０８、３×１０８、もしくは４．５×１０８個のそのような総細胞、または前述の値のうちいずれか２つの間の範囲を含む。
【0202】
細胞は、いずれか適した手段によって投与することができる。細胞は、腫瘍負荷の低減等の治療効果を達成するための投薬レジメンにおいて投与される。投薬および投与は、Ｔ細胞療法の投与の開始の前に実行される、デバルキングの投与のスケジュールに部分的に依存し得る。Ｔ細胞療法の様々な投薬スケジュールは、単一または様々な時点にわたる複数投与、ボーラス投与、およびパルス注入を含むがこれらに限定されない。
【0203】
免疫枯渇（例えば、リンパ球枯渇）療法による対象のプレコンディショニングは、一部の態様では、養子細胞療法（ＡＣＴ）の効果を改善することができる。
【0204】
よって、一部の実施形態では、方法は、シクロホスファミド、フルダラビンまたはこれらの組合せ等のリンパ球枯渇または化学療法剤等のプレコンディショニング剤を、細胞療法の開始の前に対象に投与することを含む。例えば、対象は、細胞療法の開始の少なくとも２日前に、例えば、少なくとも３、４、５、６または７日前に、プレコンディショニング剤を投与することができる。一部の実施形態では、対象は、細胞療法の開始の７日以下前に、例えば、６、５、４、３または２日以下前にプレコンディショニング剤を投与される。
【0205】
一部の実施形態では、対象は、セクションＩＩ．Ｄに記載されているように、プレコンディショニング剤（リンパ球枯渇処置）を投与される。
【0206】
細胞の投与後に、操作された細胞集団の生物活性は、一部の実施形態では、例えば、多数の公知方法のいずれかによって測定される。評価するためのパラメーターは、インビボにおける、例えば、イメージングによる、またはエクスビボにおける、例えば、ＥＬＩＳＡもしくはフローサイトメトリーによる、抗原への操作されたまたは天然のＴ細胞または他の免疫細胞の特異的結合を含む。ある特定の実施形態では、標的細胞を破壊する操作された細胞の能力は、例えば、Kochenderfer et al., J. Immunotherapy, 32(7): 689-702 (2009)およびHerman et al. J. Immunological Methods, 285(1): 25-40 (2004)に記載されている細胞傷害性アッセイ等、いずれか適した公知方法を使用して測定することができる。ある特定の実施形態では、細胞の生物活性は、ＣＤ１０７ａ、ＩＦＮγ、ＩＬ－２およびＴＮＦ等の１種または複数のサイトカインの発現および／または分泌をアッセイすることにより測定される。一部の態様では、生物活性は、腫瘍負荷または負荷量の低減等の臨床の転帰を評価することにより測定される。
【0207】
一部の実施形態では、細胞の用量は、提供されるＴ細胞療法の方法に合わせて対象に投与される。一部の実施形態では、用量のサイズまたはタイミングは、対象における特定の疾患または状態の関数として決定される。提供される説明を考慮して、特定の疾患のための用量のサイズまたはタイミングを経験的に決定することができる。
【0208】
一部の実施形態では、細胞、または細胞のサブタイプの個々の集団は、約１０万～約１０００億個の細胞の範囲で、および／または対象の体重１キログラム当たりの当該量の細胞で、例えば、１０万～約５００億個の細胞（例えば、約５００万個の細胞、約２５００万個の細胞、約５億個の細胞、約１０億個の細胞、約５０億個の細胞、約２００億個の細胞、約３００億個の細胞、約４００億個の細胞、または前述の値のうちいずれか２つによって定義される範囲）、例えば、１０００万～約５００億個の細胞（例えば、約５００万個の細胞、約２５００万個の細胞、約５億個の細胞、約１０億個の細胞、約５０億個の細胞、約２００億個の細胞、約３００億個の細胞、約４００億個の細胞、または前述の値のうちいずれか２つによって定義される範囲）、例えば、約１０００万～約１０００億個の細胞（例えば、約２０００万個の細胞、約３０００万個の細胞、約４０００万個の細胞、約６０００万個の細胞、約７０００万個の細胞、約８０００万個の細胞、約９０００万個の細胞、約１００億個の細胞、約２５０億個の細胞、約５００億個の細胞、約７５０億個の細胞、約９００億個の細胞、または前述の値のうちいずれか２つによって定義される範囲）、および一部の事例では、約１億個の細胞～約５００億個の細胞（例えば、約１億２０００万個の細胞、約１億５０００万個の細胞、約２億５０００万個の細胞、約３億５０００万個の細胞、約４億５０００万個の細胞、約６億５０００万個の細胞、約８億個の細胞、約９億個の細胞、約３０億個の細胞、約３００億個の細胞、約４５０億個の細胞）またはこれらの範囲の間のいずれかの値、および／または体重１キログラム当たりのいずれかの値で対象に投与される。投薬量は、疾患または障害および／または患者および／または他の処置に特定の特質に応じて変動し得る。一部の実施形態では、そのような値は、組換え受容体発現細胞の数を指し；他の実施形態では、これは、投与されたＴ細胞またはＰＢＭＣまたは総細胞の数を指す。
【0209】
一部の実施形態では、細胞療法は、少なくとももしくは少なくとも約０．１×１０６細胞／ｋｇ（対象の体重）、０．２×１１０６細胞／ｋｇ、０．３×１０６細胞／ｋｇ、０．４×１０６細胞／ｋｇ、０．５×１０６細胞／ｋｇ、１×１０６細胞／ｋｇ、２．０×１０６細胞／ｋｇ、３×１０６細胞／ｋｇもしくは５×１０６細胞／ｋｇであるかまたはその値もしくはその概数である細胞の数を含む用量の投与を含む。
【0210】
一部の実施形態では、細胞療法は、一部の実施形態では、細胞療法は、０．１×１０６細胞／ｋｇ（対象の体重）～１．０×１０７細胞／ｋｇの間もしくはその概数の間、０．５×１０６細胞／ｋｇ～５×１０６細胞／ｋｇの間もしくはその概数の間、０．５×１０６細胞／ｋｇ～３×１０６細胞／ｋｇの間もしくはその概数の間、０．５×１０６細胞／ｋｇ～２×１０６細胞／ｋｇの間もしくはその概数の間、０．５×１０６細胞／ｋｇ～１×１０６細胞／ｋｇの間もしくはその概数の間、１．０×１０６細胞／ｋｇ（対象の体重）～５×１０６細胞／ｋｇの間もしくはその概数の間、１．０×１０６細胞／ｋｇ～３×１０６細胞／ｋｇの間もしくはその概数の間、１．０×１０６細胞／ｋｇ～２×１０６細胞／ｋｇの間もしくはその概数の間、２．０×１０６細胞／ｋｇ（対象の体重）～５×１０６細胞／ｋｇの間もしくはその概数の間、２．０×１０６細胞／ｋｇ～３×１０６細胞／ｋｇの間もしくはその概数の間、または３．０×１０６細胞／ｋｇ（対象の体重）～５×１０６細胞／ｋｇの間もしくはその概数の間（それぞれ両端を含む）の細胞の数を含む用量の投与を含む。
【0211】
一部の実施形態では、細胞の用量は、２×１０５個またはその概数の細胞／ｋｇ～２×１０６個またはその概数の細胞／ｋｇの間、例えば、４×１０５個もしくはその概数の細胞／ｋｇ～１×１０６個もしくはその概数の細胞／ｋｇの間または６×１０５個もしくはその概数の細胞／ｋｇ～８×１０５個もしくはその概数の細胞／ｋｇの間を含む。一部の実施形態では、細胞の用量は、対象体重１キログラム当たり２×１０５個以下の細胞（例えば、抗原発現、例えば、ＣＡＲ発現細胞）（細胞／ｋｇ）、例えば、３×１０５細胞／ｋｇもしくはその概数以下、４×１０５細胞／ｋｇもしくはその概数以下、５×１０５細胞／ｋｇもしくはその概数以下、６×１０５細胞／ｋｇもしくはその概数以下、７×１０５細胞／ｋｇもしくはその概数以下、８×１０５細胞／ｋｇもしくはその概数以下、９×１０５細胞／ｋｇもしくはその概数以下、１×１０６細胞／ｋｇもしくはその概数以下、または２×１０６細胞／ｋｇもしくはその概数以下を含む。一部の実施形態では、細胞の用量は、対象体重１キログラム当たり少なくとももしくは少なくとも約２×１０５個またはその値もしくはその概数の細胞（例えば、抗原発現、例えば、ＣＡＲ発現細胞）（細胞／ｋｇ）、例えば、少なくとももしくは少なくとも約３×１０５細胞／ｋｇまたはその値もしくはその概数、少なくとももしくは少なくとも約４×１０５細胞／ｋｇまたはその値もしくはその概数、少なくとももしくは少なくとも約５×１０５細胞／ｋｇまたはその値もしくはその概数、少なくとももしくは少なくとも約６×１０５細胞／ｋｇまたはその値もしくはその概数、少なくとももしくは少なくとも約７×１０５細胞／ｋｇまたはその値もしくはその概数、少なくとももしくは少なくとも約８×１０５細胞／ｋｇまたはその値もしくはその概数、少なくとももしくは少なくとも約９×１０５細胞／ｋｇまたはその値もしくはその概数、少なくとももしくは少なくとも約１×１０６細胞／ｋｇまたはその値もしくはその概数、あるいは少なくとももしくは少なくとも約２×１０６細胞／ｋｇまたはその値もしくはその概数を含む。
【0212】
一部の実施形態では、細胞の用量は、細胞の用量が対象の体表面積または体重に関係しないかまたはそれに基づかないように、細胞の平坦用量または細胞の固定用量である。
【0213】
一部の実施形態では、細胞療法は、１×１０５～２×１０９個もしくはその概数の総組換え受容体発現細胞、総Ｔ細胞もしくは総末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、５×１０５～１×１０９個もしくはその概数の総組換え受容体発現細胞、総Ｔ細胞もしくは総末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、または１×１０６～１×１０９個もしくはその概数の総組換え受容体発現細胞、総Ｔ細胞もしくは総末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）（それぞれ両端を含む）の細胞の数を含む用量の投与を含む。一部の実施形態では、細胞療法は、少なくともまたは約少なくとも１×１０５個の総組換え受容体発現細胞、総Ｔ細胞または総末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、例えば、少なくともまたは約少なくとも１×１０６、少なくともまたは約少なくとも１×１０７、少なくともまたは約少なくとも１×１０８、少なくともまたは約少なくとも１×１０９個のそのような細胞の、細胞の数を含む細胞の用量の投与を含む。
【0214】
一部の実施形態では、遺伝子操作された細胞の用量は、少なくとももしくは少なくとも約１×１０５個のＣＡＲ発現細胞、少なくとももしくは少なくとも約２．５×１０５個のＣＡＲ発現細胞、少なくとももしくは少なくとも約５×１０５個のＣＡＲ発現細胞、少なくとももしくは少なくとも約１×１０６６個のＣＡＲ発現細胞、少なくとももしくは少なくとも約２．５×１０６個のＣＡＲ発現細胞、少なくとももしくは少なくとも約５×１０６個のＣＡＲ発現細胞、少なくとももしくは少なくとも約１×１０７個のＣＡＲ発現細胞、少なくとももしくは少なくとも約２．５×１０７個のＣＡＲ発現細胞、少なくとももしくは少なくとも約５×１０７個のＣＡＲ発現細胞、少なくとももしくは少なくとも約１×１０８個のＣＡＲ発現細胞、少なくとももしくは少なくとも約２．５×１０８個のＣＡＲ発現細胞、または少なくとももしくは少なくとも約５×１０８個のＣＡＲ発現細胞を含む。
【0215】
一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、１×１０６個またはその概数を超える総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現（ＣＡＲ＋）細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）かつ２×１０９個またはその概数よりも少ない総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、例えば、１．０×１０７個またはその概数～１．２×１０９個またはその概数のそのような細胞の範囲で、例えば、１．０×１０７、１．５×１０７、２．０×１０７、２．５×１０７、５×１０７、１．５×１０８、３×１０８、４．５×１０８、６×１０８、８×１０８もしくは１．２×１０９個またはその概数のそのような総細胞、あるいは前述の値のうちいずれか２つの間の範囲を含む。一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、１×１０６個またはその概数を超える総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現（ＣＡＲ＋）細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）かつ２×１０９個またはその概数よりも少ない総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、例えば、２．５×１０７個またはその概数～１．２×１０９個またはその概数のそのような細胞の範囲で、例えば、２．５×１０７、５×１０７、１．５×１０８、３×１０８、４．５×１０８、６×１０８、８×１０８もしくは１．２×１０９個またはその概数のそのような総細胞、あるいは前述の値のうちいずれか２つの間の範囲を含む。一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、１．０×１０７個またはその概数の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む。一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、１．５×１０７個またはその概数の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む。一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、２．０×１０７個またはその概数の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む。一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、２．５×１０７個またはその概数の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む。一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、５×１０７個またはその概数の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む。一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、１．５×１０８個またはその概数の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む。一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、３×１０８個またはその概数の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む。一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、４．５×１０８個のまたはその概数の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む。一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、６×１０８個またはその概数の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む。一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、８×１０８個またはその概数の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む。一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量は、１．２×１０９個またはその概数の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を含む。
【0216】
一部の実施形態では、遺伝子操作された細胞の用量は、１×１０５個もしくはその概数～２×１０９個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現（ＣＡＲ＋）Ｔ細胞、１×１０５個もしくはその概数～５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０５個もしくはその概数～２．５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０５個もしくはその概数～１×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０５個もしくはその概数～５×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０５個もしくはその概数～２．５×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０５個もしくはその概数～１×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０５個もしくはその概数～５×１０６個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０５個もしくはその概数～２．５×１０６個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０５個もしくはその概数～１×１０６個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０６個もしくはその概数～５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０６個もしくはその概数～２．５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０６個もしくはその概数～１×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０６個もしくはその概数～５×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０６個もしくはその概数～２．５×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０６個もしくはその概数～１×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０６個もしくはその概数～５×１０６個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０６個もしくはその概数～２．５×１０６個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、２．５×１０６個もしくはその概数～５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、２．５×１０６個もしくはその概数～２．５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、２．５×１０６個もしくはその概数～１×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、２．５×１０６個もしくはその概数～５×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、２．５×１０６個もしくはその概数～２．５×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、２．５×１０６個もしくはその概数～１×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、２．５×１０６個もしくはその概数～５×１０６個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、５×１０６個もしくはその概数～５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、５×１０６個もしくはその概数～２．５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、５×１０６個もしくはその概数～１×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、５×１０６個もしくはその概数～５×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、５×１０６個もしくはその概数～２．５×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、５×１０６個もしくはその概数～１×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０７個もしくはその概数～５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０７個もしくはその概数～２．５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０７個もしくはその概数～１×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０７個もしくはその概数～５×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０７個もしくはその概数～２．５×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、２．５×１０７個もしくはその概数～５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、２．５×１０７個もしくはその概数～２．５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、２．５×１０７個もしくはその概数～１×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、２．５×１０７個もしくはその概数～５×１０７個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、５×１０７個もしくはその概数～５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、５×１０７個もしくはその概数～２．５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、５×１０７個もしくはその概数～１×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０８個もしくはその概数～５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、１×１０８個もしくはその概数～２．５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞、または２．５×１０８個もしくはその概数～５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞を含む。一部の実施形態では、遺伝子操作された細胞の用量は、１．０×１０７個もしくはその概数～８×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ発現（ＣＡＲ＋）Ｔ細胞、１．０×１０７個もしくはその概数～６．５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ＋Ｔ細胞、１．５×１０７個もしくはその概数～６．５×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ＋Ｔ細胞、１．５×１０７個もしくはその概数～６．０×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ＋Ｔ細胞、２．５×１０７個もしくはその概数～６．０×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ＋Ｔ細胞、または５．０×１０７個もしくはその概数～６．０×１０８個もしくはその概数の総ＣＡＲ＋Ｔ細胞を含む。
【0217】
一部の実施形態では、遺伝子操作された細胞の用量は、２．５×１０７個またはその概数のＣＡＲ発現（ＣＡＲ＋）Ｔ細胞、総Ｔ細胞もしくは総末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）～１．２×１０９個またはその概数のＣＡＲ発現Ｔ細胞、総Ｔ細胞もしくは総ＰＢＭＣの間、５．０×１０７個またはその概数のＣＡＲ発現Ｔ細胞、総Ｔ細胞もしくは総末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）～６．０×１０８個またはその概数のＣＡＲ発現Ｔ細胞、総Ｔ細胞もしくは総ＰＢＭＣの間、５．０×１０７個またはその概数のＣＡＲ発現Ｔ細胞～４．５×１０８個またはその概数のＣＡＲ発現Ｔ細胞、総Ｔ細胞もしくは総末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の間、１．５×１０８個またはその概数のＣＡＲ発現Ｔ細胞～３．０×１０８個またはその概数のＣＡＲ発現Ｔ細胞、総Ｔ細胞もしくは総ＰＢＭＣの間（それぞれ両端を含む）を含む。一部の実施形態では、数は、ＣＤ３＋またはＣＤ８＋、一部の事例では、同様に、ＣＡＲ発現（例えば、ＣＡＲ＋）細胞の総数を参照する。一部の実施形態では、用量は、２．５×１０７個またはその概数～１．２×１０９個またはその概数のＣＤ３＋もしくはＣＤ８＋総Ｔ細胞またはＣＤ３＋もしくはＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞、５．０×１０７個またはその概数～６．０×１０８個またはその概数のＣＤ３＋もしくはＣＤ８＋総Ｔ細胞またはＣＤ３＋もしくはＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞、５．０×１０７個またはその概数～４．５×１０８個またはその概数のＣＤ３＋もしくはＣＤ８＋総Ｔ細胞またはＣＤ３＋もしくはＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞、あるいは１．５×１０８個またはその概数～３．０×１０８個またはその概数のＣＤ３＋もしくはＣＤ８＋総Ｔ細胞またはＣＤ３＋もしくはＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞（それぞれ両端を含む）の細胞の数を含む。
【0218】
一部の実施形態では、用量は、１．０×１０７個のＣＤ３＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、１．５×１０７個のＣＤ３＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、２．０×１０７個のＣＤ３＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、２．５×１０７個のＣＤ３＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、５×１０７個のＣＤ３＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、１．５×１０８個のＣＤ３＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、３×１０８個のＣＤ３＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、４．５×１０８個のＣＤ３＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、６×１０８個のＣＤ３＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、８×１０８個のＣＤ３＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、１．２×１０９個のＣＤ３＋ＣＡＲ発現細胞である。
【0219】
一部の実施形態では、遺伝子操作された細胞の用量は、ＣＤ３＋ＣＡＲ発現（ＣＡＲ＋）またはＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現（ＣＡＲ＋）細胞の総数を参照する。一部の実施形態では、用量は、１．０×１０７個またはその概数～１．２×１０９個またはその概数のＣＤ３＋もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋総Ｔ細胞またはＣＤ３＋ＣＡＲ発現もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞、１．５×１０７個またはその概数～１．２×１０９個またはその概数のＣＤ３＋もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋総Ｔ細胞またはＣＤ３＋ＣＡＲ発現もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞、２．０×１０７個またはその概数～１．２×１０９個またはその概数のＣＤ３＋もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋総Ｔ細胞またはＣＤ３＋ＣＡＲ発現もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞、２．５×１０７個またはその概数～１．２×１０９個またはその概数のＣＤ３＋もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋総Ｔ細胞またはＣＤ３＋ＣＡＲ発現もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞、５．０×１０７個またはその概数～６．０×１０８個またはその概数のＣＤ３＋もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋総Ｔ細胞またはＣＤ３＋ＣＡＲ発現もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞、５．０×１０７個またはその概数～４．５×１０８個またはその概数のＣＤ３＋もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋総Ｔ細胞またはＣＤ３＋ＣＡＲ発現もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞、あるいは１．５×１０８個またはその概数～３．０×１０８個またはその概数のＣＤ３＋もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋総Ｔ細胞またはＣＤ３＋ＣＡＲ発現もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞（それぞれ両端を含む）の遺伝子操作された細胞の数を含む。一部の実施形態では、用量は、１．０×１０７、１．５×１０７、２．０×１０７、２．５×１０７、５×１０７、１．５×１０８、３×１０８、４．５×１０８、６×１０８、８×１０８もしくは１．２×１０９個またはその概数のＣＤ３＋もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋総Ｔ細胞またはＣＤ３＋ＣＡＲ発現もしくはＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞を含む。一部の実施形態では、用量は、２．５×１０７、５×１０７、１．５×１０８、３×１０８、４．５×１０８、６×１０８、８×１０８もしくは１．２×１０９個またはその概数のＣＤ３＋ＣＡＲ発現細胞を含む。一部の実施形態では、用量は、１．０×１０７、１．５×１０７、２．０×１０７、２．５×１０７、５×１０７、１．５×１０８、３×１０８、４．５×１０８、６×１０８、８×１０８もしくは１．２×１０９個またはその概数のＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞を含む。
【0220】
一部の実施形態では、用量は、１．０×１０７個またはその概数のＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、１．５×１０７個またはその概数のＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、２．０×１０７個またはその概数のＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、２．５×１０７個またはその概数のＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、５×１０７個またはその概数のＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、１．５×１０８個またはその概数のＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、３×１０８個またはその概数のＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、４．５×１０８個またはその概数のＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、６×１０８個またはその概数のＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、８×１０８個またはその概数のＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、１．２×１０９個またはその概数のＣＤ４＋／ＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、２．５×１０７個またはその概数のＣＤ４＋またはＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、５×１０７個またはその概数のＣＤ４＋またはＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、１．５×１０８個またはその概数のＣＤ４＋またはＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、３×１０８個またはその概数のＣＤ４＋またはＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、４．５×１０８個またはその概数のＣＤ４＋またはＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、６×１０８個またはその概数のＣＤ４＋またはＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、６．５×１０８個またはその概数のＣＤ４＋またはＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、８×１０８個またはその概数のＣＤ４＋またはＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。一部の実施形態では、用量は、１．２×１０９個またはその概数のＣＤ４＋またはＣＤ８＋ＣＡＲ発現細胞である。
【0221】
一部の実施形態では、用量のＴ細胞は、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、またはＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞を含む。一部の実施形態では、用量のＴ細胞は、ＣＤ４＋Ｔ細胞を含む。一部の実施形態では、用量のＴ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞を含む。一部の実施形態では、用量のＴ細胞は、ＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋Ｔ細胞を含む。一部の実施形態では、用量のＴ細胞は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞を含む。
【0222】
一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、用量のＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞の総計は、１×１０６個またはその概数～２×１０９個またはその概数の間の総ＣＡＲ発現ＣＤ４＋細胞およびＣＡＲ発現ＣＤ８＋細胞、例えば、２．５×１０７個またはその概数～１．２×１０９個またはその概数のそのような細胞の範囲で、例えば、５×１０７個またはその概数～４．５×１０８個またはその概数のそのような細胞の範囲で；例えば、１．０×１０７個もしくはその概数、２．５×１０７個もしくはその概数、２．０×１０７個もしくはその概数、２．５×１０７個もしくはその概数、５×１０７個もしくはその概数、１．５×１０８個もしくはその概数、３×１０８個もしくはその概数、４．５×１０８個もしくはその概数、６×１０８個もしくはその概数、６．５×１０８個もしくはその概数、８×１０８個もしくはその概数または１．２×１０９個もしくはその概数のそのような総細胞、あるいは前述の値のうちいずれか２つの間の範囲を含む。一部の実施形態では、例えば、対象がヒトである場合、ＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞を含む用量中を含む用量のＣＤ８＋Ｔ細胞は、１×１０６個またはその概数～２×１０９個またはその概数の間の総組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現ＣＤ８＋細胞、例えば、２．５×１０７個またはその概数～１．２×１０９個またはその概数のそのような細胞の範囲で、例えば、５×１０７個またはその概数～４．５×１０８個またはその概数のそのような細胞の範囲で；例えば、２．５×１０７個もしくはその概数、５×１０７個もしくはその概数、１．５×１０８個もしくはその概数、３×１０８個もしくはその概数、４．５×１０８個もしくはその概数、６×１０８個もしくはその概数、８×１０８個もしくはその概数または１．２×１０９個もしくはその概数のそのような総細胞、あるいは前述の値のうちいずれか２つの間の範囲を含む。
【0223】
一部の実施形態では、細胞、例えば、組換え受容体発現Ｔ細胞の用量は、単一用量として対象に投与されるか、または２週間、１カ月間、３カ月間、６カ月間、１年間以上の期間内に１回のみ投与される。一部の実施形態では、患者は、複数用量を投与され、用量のそれぞれまたは総用量は、前述の値のいずれかの内であり得る。一部の実施形態では、投与のための操作された細胞または投与のための操作された細胞の組成物は、細胞の健康を指し示すかまたはそれと一貫した特性を示す。一部の実施形態では、そのような用量の７０、７５、８０、８５もしくは９０％またはその概数または少なくともその値もしくはその概数のＣＡＲ＋細胞は、アポトーシスマーカーの発現の非存在等、細胞の健康または生物学的に活性があるＣＡＲ細胞を指し示す１種または複数の特性または表現型を示す。
【0224】
特定の実施形態では、表現型は、アポトーシスの非存在および／または細胞がアポトーシス過程を起こしていることの指標の非存在であるかまたはそれを含む。アポトーシスは、小疱形成、細胞収縮、核断片化、クロマチン凝縮、染色体ＤＮＡ断片化および全般的なｍＲＮＡ崩壊を含む、特徴的な細胞の変化および死亡を生じる、一連のステレオタイプの形態学的および生化学的事象を含むプログラム細胞死の過程である。一部の態様では、アポトーシスの初期ステージは、ある特定のカスパーゼ、例えば、２、８、９および１０の活性化によって指し示され得る。一部の態様では、アポトーシスの中期～後期ステージは、膜統合性のさらなる喪失、クロマチン凝縮およびＤＮＡ断片化によって特徴付けされ、カスパーゼ３、６および７の活性化等の生化学的事象を含む。
【0225】
特定の実施形態では、表現型は、プログラム細胞死に関連する１種または複数の因子、例えば、アポトーシスを開始することが知られているアポトーシス促進性因子、例えば、デスレセプター経路のメンバー、ミトコンドリア（内在的）経路の活性化メンバー、例えば、Ｂｃｌ－２ファミリーメンバー、例えば、Ｂａｘ、ＢａｄおよびＢｉｄ、ならびにカスパーゼの陰性発現である。ある特定の実施形態では、表現型は、指標、例えば、アネキシンＶ分子の非存在であるか、または細胞組成物とインキュベートもしくは接触されたときにアポトーシスを起こしている細胞に優先的に結合するであろうＴＵＮＥＬ染色による。一部の実施形態では、表現型は、細胞におけるアポトーシス状態を指し示す１種または複数のマーカーの発現であるかまたはそれを含む。一部の実施形態では、表現型は、カスパーゼ、例えば、カスパーゼ３の発現および／または活性化の欠如である。一部の態様では、カスパーゼ－３の活性化は、アポトーシスの増加または復活を指し示す。ある特定の実施形態では、カスパーゼ活性化は、知られている方法によって検出することができる。一部の実施形態では、活性化されたカスパーゼに特異的に結合する（即ち、切断されたポリペプチドに特異的に結合する）抗体を使用して、カスパーゼ活性化を検出することができる。特定の実施形態では、表現型は、活性カスパーゼ３であるかまたはそれを含む。一部の実施形態では、アポトーシスのマーカーは、アポトーシスに関連する細胞における特色を検出する試薬である。ある特定の実施形態では、試薬は、アネキシンＶ分子である。
【0226】
一部の実施形態では、投与のための操作された細胞を含有する組成物は、細胞の健康を指し示すかまたはそれと一貫した表現型を示す、ある特定の数または量の細胞を含有する。いずれかの実施形態の一部では、操作されたＴ細胞の用量におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞の約２５％、２０％、１５％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％または１％未満が、アポトーシスのマーカー、適宜、アネキシンＶまたは活性カスパーゼ３を発現する。いずれかの実施形態の一部では、操作されたＴ細胞の用量におけるＣＡＲ発現Ｔ細胞の５％、４％、３％、２％または１％未満が、アネキシンＶまたは活性カスパーゼ３を発現する。
【0227】
養子細胞療法の状況において、細胞の所与の「用量」の投与は、単一の組成物および／または単一の中断されない投与としての、例えば、単一の注射または継続注入としての所与の量または数の細胞の投与を包含し、また、３日間以下である指定の期間にわたる複数の個々の組成物または注入において提供される分割用量としての所与の量または数の細胞の投与も包含する。よって、一部の状況では、用量は、単一の時点で与えられるまたは開始される指定の数の細胞の単一のまたは継続的な投与である。しかし、一部の状況では、用量は、１日１回を３日間もしくは２日間、または１日間の期間にわたる複数の注入による等、３日間以下の期間にわたる複数の注射もしくは注入において投与される。
【0228】
よって、一部の態様では、用量の細胞は、単一の医薬組成物において投与される。一部の実施形態では、用量の細胞は、用量の細胞を合計して含有する複数の組成物において投与される。
【0229】
用語「分割用量」は、１日間を超えて投与されるように分割された用量を指す。この型の投薬は、本方法によって包含され、単一の用量であると考慮される。一部の実施形態では、分割用量の細胞は、３日間以下の期間にわたり、用量の細胞を合計して含む複数の組成物において投与される。
【0230】
よって、細胞の用量は、分割用量として投与することができる。例えば、一部の実施形態では、用量は、２日間または３日間にわたり対象に投与することができる。分割投薬のための例示的な方法は、１日目に用量の２５％を投与し、２日目に用量の残っている７５％を投与する工程を含む。他の実施形態では、用量の３３％を１日目に投与し、残っている６７％を２日目に投与することができる。一部の態様では、用量の１０％は１日目に投与され、用量の３０％は２日目に投与され、用量の６０％は３日目に投与される。一部の実施形態では、分割用量は、３日間を超えて広がらない。
【0231】
一部の実施形態では、細胞の用量は一般に、疾患負荷の低減において有効となるために十分なほど大きい。
【0232】
一部の実施形態では、細胞は、一部の態様では、細胞もしくは細胞型（複数可）の所望の用量もしくは数および／または細胞型の所望の比を含む、所望の投薬量で投与される。よって、細胞の投薬量は、一部の実施形態では、細胞の総数（または体重１ｋｇ当たりの数）および個々の集団またはサブタイプの所望の比、例えば、ＣＤ４＋対ＣＤ８＋の比に基づく。一部の実施形態では、細胞の投薬量は、個々の集団における細胞のまたは個々の細胞型の所望の総数（または体重１ｋｇ当たりの数）に基づく。一部の実施形態では、投薬量は、総細胞の所望の数、所望の比、および個々の集団における細胞の所望の総数等、そのような特色の組合せに基づく。
【0233】
一部の実施形態では、ＣＤ８＋およびＣＤ４＋Ｔ細胞等、細胞の集団またはサブタイプは、Ｔ細胞の所望の用量等の総細胞の所望の用量でまたはその許容される差の内で投与される。一部の態様では、所望の用量は、細胞の所望の数、または細胞が投与される対象の体重の単位当たりの細胞の所望の数、例えば、細胞／ｋｇである。一部の態様では、所望の用量は、細胞の最小数または体重の単位当たりの細胞の最小数であるかまたはそれを上回る。一部の態様では、所望の用量で投与される総細胞の中で、個々の集団またはサブタイプは、所望の出力比（ＣＤ４＋対ＣＤ８＋の比等）でまたはその付近で、例えば、そのような比のある特定の許容される差または誤差の内で存在する。
【0234】
一部の実施形態では、細胞は、ＣＤ４＋細胞の所望の用量および／またはＣＤ８＋細胞の所望の用量等、細胞の個々の集団またはサブタイプのうち１種または複数の所望の用量でまたはその許容される差の内で投与される。一部の態様では、所望の用量は、サブタイプもしくは集団の細胞の所望の数、または細胞が投与される対象の体重の単位当たりのそのような細胞の所望の数、例えば、細胞／ｋｇである。一部の態様では、所望の用量は、集団もしくはサブタイプの細胞の最小数、または体重の単位当たりの集団もしくはサブタイプの細胞の最小数であるかまたはそれを上回る。
【0235】
よって、一部の実施形態では、投薬量は、総細胞の所望の固定用量および所望の比に基づく、ならびに／または個々のサブタイプもしくは亜集団の１種または複数の、例えば、それぞれの所望の固定用量に基づく。よって、一部の実施形態では、投薬量は、Ｔ細胞の所望の固定もしくは最小用量およびＣＤ４＋対ＣＤ８＋細胞の所望の比に基づく、ならびに／またはＣＤ４＋および／もしくはＣＤ８＋細胞の所望の固定もしくは最小用量に基づく。
【0236】
一部の実施形態では、細胞は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞またはサブタイプ等、複数の細胞集団またはサブタイプの所望の出力比でまたはその許容される範囲内で投与される。一部の態様では、所望の比は、具体的な比であり得るか、または比の範囲であり得る。例えば、一部の実施形態では、所望の比（例えば、ＣＤ４＋対ＣＤ８＋細胞の比）は、５：１もしくはその概数～５：１もしくはその概数（または約１：５超～約５：１未満）の間、または１：３もしくはその概数～３：１もしくはその概数（または約１：３超～約３：１未満）の間、例えば、２：１もしくはその概数～１：５もしくはその概数（または約１：５超～約２：１未満）の間、例えば、５：１、４．５：１、４：１、３．５：１、３：１、２．５：１、２：１、１．９：１、１．８：１、１．７：１、１．６：１、１．５：１、１．４：１、１．３：１、１．２：１、１．１：１、１：１、１：１．１、１：１．２、１：１．３、１：１．４、１：１．５、１：１．６、１：１．７、１：１．８、１：１．９、１：２、１：２．５、１：３、１：３．５、１：４、１：４．５もしくは１：５またはその概数である。一部の態様では、許容される差は、所望の比の約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％以内であり、これらの範囲の間にあるいずれかの値を含む。
【0237】
一部の実施形態では、細胞の用量または組成物は、およそ１：１であるかまたはおよそ１：３～およそ３：１の間である、例えば、およそ１：１である、組換え受容体を発現するＣＤ４＋細胞対組換え受容体を発現するＣＤ８＋細胞のおよび／またはＣＤ４＋細胞対ＣＤ８＋細胞の、定義されたまたは標的の比を含む。一部の実施形態では、細胞の用量または組成物は、およそ１：１である、組換え受容体を発現するＣＤ４＋細胞対組換え受容体を発現するＣＤ８＋細胞のおよび／またはＣＤ４＋細胞対ＣＤ８＋細胞の、定義されたまたは標的の比を含む。一部の実施形態では、細胞の用量または組成物は、およそ１：３～およそ３：１の間である、組換え受容体を発現するＣＤ４＋細胞対組換え受容体を発現するＣＤ８＋細胞のおよび／またはＣＤ４＋細胞対ＣＤ８＋細胞の、定義されたまたは標的の比を含む。
【0238】
特定の実施形態では、細胞の数および／または濃度は、組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞の数を指す。他の実施形態では、細胞の数および／または濃度は、投与された全細胞、Ｔ細胞または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の数または濃度を指す。
【0239】
一部の態様では、用量のサイズは、前の処置、例えば、化学療法に対する対象の応答、対象における疾患負荷、例えば、腫瘍負荷量、容積、サイズもしくは程度、転移の度合いもしくは型、ステージ、ならびに／または対象が、投与されている細胞および／もしくは組換え受容体に対して毒性の転帰、例えば、ＣＲＳ、マクロファージ活性化症候群、腫瘍溶解症候群、神経毒性および／もしくは宿主免疫応答を発症する見込みもしくは発生率等の１種または複数の判断基準に基づき決定される。
【0240】
一部の実施形態では、例えば、用量は、５．０×１０６～２．２５×１０７、５．０×１０６～２．０×１０７、５．０×１０６～１．５×１０７、５．０×１０６～１．０×１０７、５．０×１０６～７．５×１０６、７．５×１０６～２．２５×１０７、７．５×１０６～２．０×１０７、７．５×１０６～１．５×１０７、７．５×１０６～１．０×１０７、１．０×１０７～２．２５×１０７、１．０×１０７～２．０×１０７、１．０×１０７～１．５×１０７、１．５×１０７～２．２５×１０７、１．５×１０７～２．０×１０７、２．０×１０７～２．２５×１０７個の間またはそれらの概数の間の組換え受容体発現細胞を含有する。一部の実施形態では、細胞の用量は、約１．５×１０８個の組換え受容体発現細胞、約３．０×１０８個の組換え受容体発現細胞、または約４．５×１０８個の組換え受容体発現細胞、例えばＣＤ３＋である組換え受容体発現細胞である細胞の数を含有する。一部の実施形態では、細胞の用量は、少なくともまたは少なくとも約５×１０６、６×１０６、７×１０６、８×１０６、９×１０６、１０×１０６～約１５×１０６個の組換え受容体発現細胞、例えば、ＣＤ８＋である組換え受容体発現細胞の間である細胞の数を含有する。一部の実施形態では、そのような用量、例えば、そのような標的数の細胞は、投与される組成物における総組換え受容体発現細胞を指す。
【0241】
一部の実施形態では、例えば、より低い用量は、対象体重１キログラム当たり約５×１０６個未満の細胞、組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）発現細胞、Ｔ細胞および／またはＰＢＭＣ、例えば、対象体重１キログラム当たり約４．５×１０６、４×１０６、３．５×１０６、３×１０６、２．５×１０６、２×１０６、１．５×１０６、１×１０６、５×１０５、２．５×１０５または１×１０５個未満のそのような細胞を含有する。一部の実施形態では、より低い用量は、対象体重１キログラム当たり約１×１０５、２×１０５、５×１０５または１×１０６個未満のそのような細胞、または前述の値のうちいずれか２つの間の範囲内の値を含有する。一部の実施形態では、そのような値は、組換え受容体発現細胞の数を指し；他の実施形態では、投与されたＴ細胞またはＰＢＭＣまたは総細胞の数を指す。
【0242】
一部の実施形態では、対象は、細胞の複数の用量、例えば、２以上の用量または複数の連続用量を受ける。一部の実施形態では、２用量が対象に投与される。一部の実施形態では、対象は、連続用量を受け、例えば、第２の用量は、第１の用量のおよそ４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０または２１日後に投与される。一部の実施形態では、連続用量の投与に続いて追加の用量（単数または複数）が投与されるように、第１の用量に続いて複数の連続用量が投与される。一部の態様では、追加の用量において対象に投与される細胞の数は、第１の用量および／または連続用量と同じまたは同様である。一部の実施形態では、追加の用量（単数または複数）は、前の用量よりも大きい。一部の実施形態では、細胞の１または複数の後続用量を対象に投与することができる。一部の実施形態では、細胞の後続用量は、細胞の第１の用量の投与の開始から約７日、１４日、２１日、２８日もしくは３５日後を超えてまたはその概数を超えて投与される。細胞の後続用量は、第１の用量を超える、それとほぼ同じまたはそれ未満であり得る。一部の実施形態では、細胞の第１および／または第２の用量の投与等、Ｔ細胞療法の投与は反復されてよい。
【0243】
Ｄ．リンパ球枯渇処置
一部の態様では、提供される方法は、Ｔ細胞療法の投与の開始の前等に、１種または複数のリンパ球枯渇療法を投与することをさらに含むことができる。一部の実施形態では、リンパ球枯渇療法は、シクロホスファミド等のホスファミドの投与を含む。一部の実施形態では、リンパ球枯渇療法は、フルダラビンの投与を含むことができる。
一部の態様では、提供される方法は、Ｔ細胞療法の投与の開始の前等に、１種または複数のリンパ球枯渇療法を投与することをさらに含むことができる。一部の実施形態では、リンパ球枯渇療法は、シクロホスファミド等のホスファミドの投与を含む。一部の実施形態では、リンパ球枯渇療法は、フルダラビンの投与を含むことができる。
【0244】
一部の態様では、免疫枯渇（例えば、リンパ球枯渇）療法による対象のプレコンディショニングは、養子細胞療法（ＡＣＴ）の効果を改善することができる。シクロスポリンおよびフルダラビンの組合せを含むリンパ球枯渇剤によるプレコンディショニングは、移入された細胞の応答および／または持続を改善することを含む、細胞療法における移入された腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）細胞の有効性の改善において有効であった。例えば、Dudley et al., Science, 298, 850-54 (2002)；Rosenberg et al., Clin Cancer Res, 17(13):4550-4557 (2011)を参照されたい。同様に、ＣＡＲ＋Ｔ細胞の文脈において、いくつかの研究は、リンパ球枯渇剤、最も一般的には、シクロホスファミド、フルダラビン、ベンダムスチンまたはこれらの組合せを、時として低線量照射を伴って、取り込んだ。Han et al. Journal of Hematology & Oncology, 6:47 (2013)；Kochenderfer et al., Blood, 119: 2709-2720 (2012)；Kalos et al., Sci Transl Med, 3(95):95ra73 (2011)；Clinical Trial Study Record Nos.: NCT02315612; NCT01822652を参照されたい。
【0245】
そのようなプレコンディショニングは、療法の有効性を減衰し得る様々な転帰のうち１種または複数のリスクを低減させるという目標をもって実行することができる。そのようなものとして、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞が、ＩＬ－２、ＩＬ－７および／またはＩＬ－１５等の恒常性および活性化サイトカインについてＴＩＬと競合する、「サイトカインシンク」として知られている現象；調節性Ｔ細胞、ＮＫ細胞または免疫系の他の細胞によるＴＩＬの抑制；腫瘍微小環境における負の制御因子の影響が挙げられる。Muranski et al., Nat Clin Pract Oncol. December; 3(12): 668-681 (2006)。
【0246】
よって、一部の実施形態では、提供される方法は、対象にリンパ球枯渇療法を投与することがさらに関与する。一部の実施形態では、方法は、細胞の用量の投与の前に、対象にリンパ球枯渇療法を投与する工程を伴う。一部の実施形態では、リンパ球枯渇療法は、フルダラビンおよび／またはシクロホスファミド等の化学療法剤を含有する。一部の実施形態では、細胞および／またはリンパ球枯渇療法の投与は、外来デリバリーにより実行される。
【0247】
一部の実施形態では、方法は、細胞の用量の投与の前に、シクロホスファミド、フルダラビンまたはこれらの組合せ等のリンパ球枯渇または化学療法剤等のプレコンディショニング剤を対象に投与することを含む。例えば、対象は、第１のまたは後続の用量の少なくとも２日前、例えば、少なくとも３、４、５、６または７日前に、プレコンディショニング剤を投与することができる。一部の実施形態では、対象は、細胞の用量の投与の７日以下前に、例えば、６、５、４、３または２日以下前に、プレコンディショニング剤を投与される。
【0248】
一部の実施形態では、対象は、２０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇの間またはそれらの概数の間、例えば、４０ｍｇ／ｋｇ～８０ｍｇ／ｋｇの間またはそれらの概数の間の用量のシクロホスファミドでプレコンディショニングされる。一部の態様では、対象は、６０ｍｇ／ｋｇまたは約６０ｍｇ／ｋｇのシクロホスファミドによりプレコンディショニングされる。一部の実施形態では、フルダラビンは、単一用量で投与することができるか、または複数の用量で投与することができる、例えば、毎日、１日置きにまたは３日毎に与えることができる。一部の実施形態では、シクロホスファミドは、１または２日間にわたり１日１回投与される。
【0249】
一部の実施形態では、リンパ球枯渇剤が、フルダラビンを含む場合、対象は、１ｍｇ／ｍ２～１００ｍｇ／ｍ２の間またはそれらの概数の間、例えば１０ｍｇ／ｍ２～７５ｍｇ／ｍ２、１５ｍｇ／ｍ２～５０ｍｇ／ｍ２２０ｍｇ／ｍ２～３０ｍｇ／ｍ２の、もしくは２４ｍｇ／ｍ２～２６ｍｇ／ｍ２の間またはそれらの概数の間の用量のフルダラビンを投与される。一部の実例では、対象は、２５ｍｇ／ｍ２のフルダラビンを投与される。一部の実施形態では、フルダラビンは、単一の用量において投与することができる、または毎日、１日置きにもしくは３日毎に与える等、複数の用量において投与することができる。一部の実施形態では、フルダラビンは、１～５日間、例えば、３～５日間等にわたり、毎日投与される。
【0250】
一部の実施形態では、リンパ球枯渇剤は、シクロホスファミドおよびフルダラビンの組合せ等、薬剤の組合せを含む。よって、薬剤の組合せは、上に記載されているもの等のいずれかの用量または投与スケジュールのシクロホスファミド、および上に記載されているもの等のいずれかの用量または投与スケジュールのフルダラビンを含むことができる。例えば、一部の態様では、対象は、６０ｍｇ／ｋｇ（ほぼ２ｇ／ｍ２）のシクロホスファミドおよび３～５用量の２５ｍｇ／ｍ２フルダラビンを、細胞の用量の前に投与される。
【0251】
一部の実施形態では、細胞の用量の注入の前であるプレコンディショニング剤の投与は、処置の転帰を改善する。例えば、一部の態様では、プレコンディショニングは、用量による処置の有効性を改善するか、または対象における組換え受容体発現細胞（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞等、ＣＡＲ発現細胞）の持続を増加させる。一部の実施形態では、プレコンディショニング処置は、細胞の用量に続く所与の期間の後に生きており、微小残存または分子的に検出可能な疾患を示さない対象のパーセント等、無病生存を増加させる。一部の実施形態では、無病生存中央値までの時間は、増加される。
【0252】
細胞が対象（例えば、ヒト）に投与されると、操作された細胞集団の生物活性は、一部の態様では、多数の公知方法のいずれかによって測定される。評価するためのパラメーターは、インビボにおける、例えば、イメージングによる、またはエクスビボにおける、例えば、ＥＬＩＳＡもしくはフローサイトメトリーによる、抗原への操作されたまたは天然のＴ細胞または他の免疫細胞の特異的結合を含む。ある特定の実施形態では、標的細胞を破壊する操作された細胞の能力は、例えば、Kochenderfer et al., J. Immunotherapy, 32(7): 689-702 (2009)およびHerman et al. J. Immunological Methods, 285(1): 25-40 (2004)に記載されている細胞傷害性アッセイ等、当技術分野で知られているいずれか適した方法を使用して測定することができる。ある特定の実施形態では、細胞の生物活性は、ＣＤ１０７ａ、ＩＦＮγ、ＩＬ－２およびＴＮＦ等のある特定のサイトカインの発現および／または分泌をアッセイすることにより測定することもできる。一部の態様では、生物活性は、腫瘍負荷または負荷量の低減等の臨床の転帰を評価することにより測定される。一部の態様では、毒性の転帰、細胞の持続および／もしくは増大、ならびに／または宿主免疫応答の存在もしくは非存在が評価される。
【0253】
一部の実施形態では、細胞の用量の注入の前にプレコンディショニング剤の投与は、用量による処置の有効性を改善すること等により、処置の転帰を改善するか、または対象における組換え受容体発現細胞（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞等のＣＡＲ発現細胞）の持続性を増加させる。
【0254】
ＩＩＩ．例示的な処置の転帰およびそれを評価するための方法
本明細書に提供される方法、使用、キットおよび製造品の一部の実施形態では、提供されるＴ細胞療法は、１種または複数の処置の転帰、例えば、以下で記載するような、療法または処置と関連付けられるパラメーターのいずれか１種または複数と関連付けられる特徴をもたらす。一部の実施形態では、当該方法は、がん細胞に対するＴ細胞、例えば、Ｔ細胞に基づく療法のために投与されるＴ細胞の細胞傷害性の評価を含む。一部の実施形態では、当該方法は、Ｔ細胞、例えばＴ細胞に基づく療法のために投与されたＴ細胞の曝露、持続および増殖の評価を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される方法における細胞、例えば免疫療法、例えばＴ細胞療法のために投与される細胞の、細胞の曝露、もしくは長期の増大および／もしくは持続、ならびに／または細胞表現型の変化もしくは細胞の機能的活性は、インビボまたはエクスビボでＴ細胞の特性を評価することによって測定することができる。一部の実施形態では、そのようなアッセイを使用して、本明細書に提供されるＴ細胞療法を投与する前、投与中、または投与した後にＴ細胞、例えばＴ細胞療法の機能を決定または確認することができる。
本明細書に提供される方法、使用、キットおよび製造品の一部の実施形態では、提供されるＴ細胞療法は、１種または複数の処置の転帰、例えば、以下で記載するような、療法または処置と関連付けられるパラメーターのいずれか１種または複数と関連付けられる特徴をもたらす。一部の実施形態では、当該方法は、がん細胞に対するＴ細胞、例えば、Ｔ細胞に基づく療法のために投与されるＴ細胞の細胞傷害性の評価を含む。一部の実施形態では、当該方法は、Ｔ細胞、例えばＴ細胞に基づく療法のために投与されたＴ細胞の曝露、持続および増殖の評価を含む。一部の実施形態では、本明細書に提供される方法における細胞、例えば免疫療法、例えばＴ細胞療法のために投与される細胞の、細胞の曝露、もしくは長期の増大および／もしくは持続、ならびに／または細胞表現型の変化もしくは細胞の機能的活性は、インビボまたはエクスビボでＴ細胞の特性を評価することによって測定することができる。一部の実施形態では、そのようなアッセイを使用して、本明細書に提供されるＴ細胞療法を投与する前、投与中、または投与した後にＴ細胞、例えばＴ細胞療法の機能を決定または確認することができる。
【0255】
一部の実施形態では、Ｔ細胞療法は、Ｔ細胞療法を用いた処置について対象を同定するための、および／もしくはＴ細胞療法を継続する１種もしくは複数のスクリーニング工程、ならびに／または処置の転帰の評価のための、および／もしくは処置の転帰をモニタリングする工程をさらに含み得る。一部の実施形態では、処置の評価のための工程は、処置を評価するための、および／またはモニタリングするための、および／または療法のさらなるもしくは残りの工程の投与に関しておよび／または反復療法に関して対象を同定するための工程を含み得る。一部の実施形態では、処置の転帰のスクリーニング工程および／または評価を使用して、本明細書に提供されるＴ細胞療法の用量、頻度、持続時間、タイミングおよび／または順序を決定することができる。
【0256】
一部の実施形態では、本明細書に記載の処置の転帰のスクリーニング工程および／または評価のいずれかは、提供されるＴ細胞療法（例えば、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の１種または複数の工程の投与の前に、その間に、その過程中に、またはそれに続いて使用することができる。一部の実施形態では、評価は、本明細書に提供される方法のいずれかの実施の前に、その間に、その過程中に、またはその後に行われる。一部の実施形態では、評価は、本明細書に提供される方法の実施の前に行われる。一部の実施形態では、評価は、本明細書に提供される方法の１種または複数の工程の実施後に行われる。一部の実施形態では、評価は、例えばＴ細胞療法を受けるのに適しており、および／またはＴ細胞療法を受けやすい患者をスクリーニングおよび同定するために、提供されるＴ細胞療法の１種または複数の工程の投与の前に実施される。一部の実施形態では、評価は、例えば、中間のもしくは最終的な処置の転帰を評価するため、例えば処置の有効性を決定するため、および／または処置を継続もしくは反復するかどうかを決定するため、および／またはＴ細胞療法の残りの工程を投与するかどうかを決定するために、提供されるＴ細胞療法の１種または複数の工程の投与の間に、その過程中に、またはそれに続いて実施される。
【0257】
一部の実施形態では、処置の転帰は、免疫機能、例えば細胞に基づく療法のために投与されたＴ細胞の、および／または身体における内因性Ｔ細胞の免疫機能の改善を含む。一部の実施形態では、例示的な処置の転帰として、Ｔ細胞増殖の増強、Ｔ細胞機能的活性の増強、免疫細胞表現型マーカー発現の変化が挙げられるが、これらに限定されず、例えば、そのような特徴は、対象に投与された操作されたＴ細胞、例えばＣＡＲ－Ｔ細胞と関連付けられる。一部の実施形態では、例示的な処置の転帰として、疾患負荷、例えば腫瘍負荷の減少、臨床転帰の改善および／または療法の有効性の増強が挙げられる。
【0258】
一部の実施形態では、処置の転帰のスクリーニング工程および／または評価は、細胞に基づく療法のために投与されたＴ細胞の生存および／または機能を評価することを含む。一部の実施形態では、スクリーニング工程および／または転帰の処置の評価は、サイトカインまたは増殖因子のレベルを評価することを含む。一部の実施形態では、スクリーニング工程および／または処置の転帰の評価は、疾患負荷および／または改善を評価すること、例えば、腫瘍負荷および／または臨床転帰を評価することを含む。一部の実施形態では、処置の転帰のスクリーニング工程および／または評価のいずれかは、本明細書に記載され、および／または当技術分野で公知の評価方法および／またはアッセイのいずれかを含んでもよく、１回または複数回、例えば、Ｔ細胞療法の１種または複数の工程の投与の前に、その間に、その過程中に、またはそれに続いて実施され得る。本明細書に提供される方法の一部の実施形態で評価することができる処置の転帰と関連付けられる例示的なパラメーターセットとして、末梢血免疫細胞集団プロファイルおよび／または腫瘍負荷が挙げられる。
【0259】
一部の実施形態では、方法は、対象における細胞療法の有効性に影響を与える。一部の実施形態では、デバルキングを有する方法における細胞の用量の投与後の細胞における組換え受容体発現、例えばＣＡＲ発現細胞の細胞傷害性は、デバルキングを有さない方法により達成されるものと比較して高い。一部の実施形態では、約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有する、および／またはＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないとして対象が処置について選択される方法における細胞の用量の投与後の組換え受容体発現、例えばＣＡＲ発現細胞の細胞傷害性は、対象を選択しない方法により達成されたものと比較して高い。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法、例えばＣＡＲ発現Ｔ細胞を投与された対象における細胞傷害性は、Ｔ細胞療法が処置について選択されていない対象に投与された方法と比較して評価される。一部の実施形態では、この方法により、Ｔ細胞療法が処置について選択されていない対象に投与された方法と比較して、投与されたＴ細胞が対象における細胞傷害性の増加または延長を示す結果をもたらす。
【0260】
一部の実施形態では、Ｔ細胞療法による処置前の腫瘍のデバルキングは、腫瘍が処置前にデバルキングされていない方法と比較して、対象における疾患負荷、例えば腫瘍負荷を減少する。一部の実施形態では、処置について対象を選択することは、対象が処置について選択されていない方法と比較して、対象における疾患負荷、例えば腫瘍負荷を減少する。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法による処置の前の腫瘍のデバルキングは、腫瘍が処置の前にデバルキングされていない方法と比較して、臨床転帰、例えば客観的奏効率（ＯＲＲ）、無進行生存（ＰＦＳ）および全生存期間（ＯＳ）の改善をもたらす。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法による処置について対象を選択することは、対象が処置について選択されていない方法と比較して、臨床転帰、例えば客観的奏効率（ＯＲＲ）、無進行生存（ＰＦＳ）および全生存期間（ＯＳ）の改善をもたらす。
【0261】
一部の実施形態では、対象は、Ｔ細胞療法の１種または複数の工程の投与の前にスクリーニングされ得る。例えば、対象は、Ｔ細胞療法の投与に対する適合性、応答性および／または感受性を決定するために、Ｔ細胞療法の投与の前に、疾患および／または疾患負荷、例えば腫瘍負荷の特性に関してスクリーニングすることができる。例えば、Ｔ細胞療法の投与に対する適合性、応答性および／または感受性を決定するために、Ｔ細胞療法の投与の前に、疾患の特性に関してスクリーニングすることができる。一部の実施形態では、処置の転帰のスクリーニング工程および／または評価を使用して、本明細書に提供されるＴ細胞療法の用量、頻度、持続時間、タイミングおよび／または順序を決定することができる。
【0262】
一部の実施形態では、対象は、Ｔ細胞療法の残りの工程を受けるために対象を決定および同定するため、ならびに／または療法の有効性をモニターするために、Ｔ細胞療法の工程の１つの投与後にスクリーニングすることができる。一部の実施形態では、投与されたＴ細胞の数、レベルもしくは量ならびに／または投与されたＴ細胞の増殖および／もしくは活性は、操作されたＴ細胞の投与後に評価される。
【0263】
一部の実施形態では、評価の異なる時点、異なる条件、参照時点および／または異なる対象における同じパラメーターもしくは転帰のレベル、値または測定値と比較した、パラメーターもしくは転帰のレベル、値または測定値における変化および／または変更、例えば増加、上昇、減少または低減が、決定または評価される。一部の実施形態では、２種以上のパラメーターのレベル、値または測定値が決定され、相対レベルが比較される。一部の実施形態では、パラメーターの決定されたレベル、値または測定値は、対照試料または未処置の試料由来のレベル、値または測定値と比較される。一部の実施形態では、パラメーターの決定されたレベル、値または測定値は、同じ対象由来であるが、異なる時点の試料のレベルと比較される。個々のパラメーターの定量化で得られた値は、例えばマルチパラメトリック解析を使用することによってパラメーターのレベル、値または測定値に関して算術または論理演算を成すことによって、疾患評価の目的で組み合わせることができる。一部の実施形態では、２種以上の特定パラメーターの比が算出され得る。
【0264】
Ｔ細胞の健康、機能、活性、および／または転帰、例えば応答、有効性および／または毒性の転帰に関連するパラメーターの評価および決定は、様々な時点で評価され得る。一部の態様では、評価は、複数回、例えば、細胞の製造前、製造中、および／または製造後に、Ｔ細胞療法の投与開始前、投与中、および／または投与開始後に実施することができる。
【0265】
一部の実施形態では、投与された細胞および／または細胞組成物の機能的属性には、薬物動態学（ＰＫ）および薬力学パラメーター、細胞の増大および持続性、細胞機能アッセイ（例えば、細胞毒性アッセイ、サイトカイン分泌アッセイおよびインビボアッセイ等、本明細書に記載される任意のもの）、高次元Ｔ細胞シグナル伝達評価、ならびにＴ細胞の消耗表現型および／またはシグネチャーの評価が含まれる。
【0266】
一部の実施形態では、処置の転帰のスクリーニング工程および／もしくは評価のため、ならびに／または処置の転帰をモニタリングするために評価され得るパラメーターを含む、療法または処置の転帰と関連付けられるパラメーターとして、腫瘍または疾患負荷が挙げられる。Ｔ細胞療法（例えば、ＣＡＲ発現Ｔ細胞）等の免疫療法の投与は、対象における疾患または状態の増大または負荷を低減または防止することができる。例えば、疾患または状態が腫瘍である場合、当該方法は概して、腫瘍サイズ、バルク、転移、骨髄における芽球のパーセンテージまたは分子的に検出可能ながんを低減し、および／または腫瘍負荷と関連付けられる予後もしくは生存もしくは他の症状を改善する。
【0267】
一部の実施形態では、提供される方法は、Ｔ細胞療法（例えば、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）が処置の前の腫瘍のデバルキングなしで与えられる代替方法と比較して、処置された対象において腫瘍負荷の減少をもたらす。一部の実施形態では、提供される方法は、Ｔ細胞療法（例えば、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）が処置についての対象の選択なしで与えられる代替方法と比較して、処置された対象において腫瘍負荷の減少をもたらす。
【0268】
腫瘍負荷は実際には、Ｔ細胞療法を受ける対象全てを低減させる必要はなく、例えば臨床データに基づいて、処置された対象において平均して低減される必要はなく、ここで、腫瘍負荷は、そのようなＴ細胞療法で処置された対象の大部分が腫瘍負荷の低減を示し、例えばＴ細胞療法で処置された対象の少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％以上の対象が腫瘍負荷の低減を示す。
【0269】
疾患負荷は、対象における、または対象の臓器、組織もしくは体液、例えば、腫瘍もしくは例えば転移を示す別の位置の臓器もしくは組織における疾患の総細胞数を包含し得る。例えば、腫瘍細胞は、ある特定の血液学的悪性病変の状況で、血液、リンパもしくは骨髄において検出および／または定量化され得る。疾患負荷は、一部の実施形態では、腫瘍量、転移の数もしくは程度および／または骨髄中に存在する芽球のパーセンテージを含み得る。
【0270】
ＭＭの場合、疾患負荷の程度を評価するための例示的なパラメーターとして、クローン形質細胞の数（例えば、骨髄生検査で１０％を超える、または他の組織由来の生検で任意の量で；形質細胞腫）、血清または尿のいずれかにおけるモノクローナルタンパク質（パラプロテイン）の存在、形質細胞障害に関連すると感じられる末端臓器損傷のエビデンス（例えば、高カルシウム血症（２．７５ｍｍｏｌ／ｌを超える補正カルシウム）；骨髄腫に起因する腎不全；貧血（１０ｇ／ｄｌ未満のヘモグロビン）；および／または骨病変（圧迫骨折を伴う溶解性病変または骨粗鬆症））等のパラメーターを含む。
【0271】
疾患状態または疾患負荷を評価するための例示的な方法は、電気泳動および免疫固定法による血液および／または尿等の生体液中のＭタンパク質の測定；血液中のｓＦＬＣ（κおよびλ）の定量化；骨格検査；ならびに髄外性疾患を有する対象における陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）／コンピュータ断層撮影（ＣＴ）によるイメージングを含む。一部の実施形態では、疾患状態は、骨髄試験によって評価することができる。一部の例では、対象へのその投与に続くＴ細胞療法の有効性は、血液および／または骨髄中のＴ細胞（例えば、ＢＣＭＡＣＡＲＴ細胞）の増大化および持続性によって決定される。一部の実施形態では、Ｔ細胞療法の有効性は、投与された細胞（例えば、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の抗腫瘍活性に基づき決定される。一部の実施形態では、抗腫瘍活性は、全奏効率（ＯＲＲ）および／または国際骨髄腫作業部会（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｍｙｅｌｏｍａ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ）（ＩＭＷＧ）統一応答基準（Kumar et al. (2016) Lancet Oncol 17(8):e328-346を参照されたい）によって決定される。一部の実施形態では、応答は、微小残存疾患（ＭＲＤ）評価を使用して評価される。一部の実施形態では、ＭＲＤは、フローサイトメトリーおよびハイスループット配列決定、例えば、ディープ配列決定等の方法によって評価することができる。一部の態様では、ＭＲＤ陰性疾患を有する対象は、フローサイトメトリー（次世代フローサイトメトリー；ＮＧＦ）またはハイスループット配列決定、例えば、ディープ配列決定もしくは次世代配列決定（ＮＧＳ）等、１０５個以上の有核細胞における１個の最小感度（即ち、１０－５感度）を有するアッセイによって除外される、骨髄吸引液における異常クローナル形質細胞の非存在を示す対象を含む。
【0272】
一部の態様では、持続性ＭＲＤ陰性は、最小で１年間置いて確認された、骨髄における（ＮＧＦもしくはＮＧＳまたはその両方）かつ下に定義されるイメージングによるＭＲＤ陰性を示す対象を含む。後続の評価を使用して、陰性の持続時間をさらに指定することができる（例えば、５年目のＭＲＤ陰性）。一部の態様では、フローＭＲＤ陰性は、１０５個以上の有核細胞における１個の最小感度を有する多発性骨髄腫におけるＭＲＤ検出のためのＥｕｒｏＦｌｏｗ標準操作手順（または検証された等価方法）を使用した、骨髄吸引液におけるＮＧＦによる表現型的に異常なクローナル形質細胞の非存在を示す対象を含む。一部の態様では、配列決定ＭＲＤ陰性は、骨髄吸引液におけるＮＧＳによるクローナル形質細胞の非存在を示す対象を含み、この場合、クローンの存在は、１０５個以上の有核細胞における１個の最小感度を有するＬｙｍｐｈｏＳＩＧＨＴプラットフォーム（または検証された等価方法）を使用した、骨髄吸引液のＤＮＡ配列決定後に得られる２個未満の同一配列決定リードとして定義される。一部の態様では、イメージングプラスＭＲＤ陰性は、ＮＧＦまたはＮＧＳ、プラス、ベースラインもしくは先行するＰＥＴ／ＣＴで見出された増加したトレーサー取込みの全区域の消失またはより少ない縦隔（mediastinal）血液プールＳＵＶへの減少または周囲の正常組織未満への減少によって評価されるＭＲＤ陰性を示す対象を含む（Kumar et al. (2016) Lancet Oncol 17(8):e328-346を参照）。
【0273】
一部の態様では、対象の生存、ある特定の期間内の生存、生存の度合い、無事象もしくは無症状生存または無再発生存の存在または持続時間が評価される。一部の実施形態では、疾患または状態のいずれかの症状が評価される。一部の実施形態では、腫瘍負荷の尺度が指定される。一部の実施形態では、決定のための例示的なパラメーターは、腫瘍における緩解または改善を指し示す特定の臨床転帰を含む。そのようなパラメーターは、客観的奏効（ＯＲ）、完全奏効（ＣＲ）、厳格な完全奏効（ｓＣＲ）、最良部分奏効（ＶＧＰＲ）、部分奏効（ＰＲ）、最小の応答（ＭＲ）、安定疾患（ＳＤ）、進行性疾患（ＰＤ）または再発（例えば、国際骨髄腫作業部会（ＩＭＷＧ）統一応答基準を参照；Kumar et al. (2016) Lancet Oncol 17(8):e328-346を参照）を含む疾患制御の持続時間、客観的奏効率（ＯＲＲ）、無進行生存（ＰＦＳ）および全生存（ＯＳ）を含む。一部の実施形態では、応答は、微小残存疾患（ＭＲＤ）評価を使用して評価される。一部の実施形態では、応答は、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）評価を使用して評価される。一部の実施形態では、応答は、完全奏効（ＣＲ）評価を使用して評価される。一部の実施形態では、応答は、厳格なＣＲ評価を使用して評価される。パラメーターのための具体的な閾値を設定して、本明細書に提供される方法の有効性を決定することができる。一部の実施形態では、処置されるべき疾患または障害は、多発性骨髄腫である。一部の実施形態では、多発性骨髄腫のための測定可能な疾患の判断基準は、（１）血清Ｍタンパク質 １ｇ／ｄＬ以上；（２）尿Ｍタンパク質 ２００ｍｇ以上／２４時間；（３）罹病血清遊離軽鎖（ｓＦＬＣ）レベル １０ｍｇ／ｄＬ以上と異常κ対λ比を含むことができる。一部の事例では、軽鎖疾患は、血清または尿中に測定可能な疾患を伴わない対象のみに許容される。
【0274】
一部の実施形態では、応答は、Ｔ細胞療法、例えば、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞の投与に続く応答の持続時間に基づき評価される。一部の態様では、例えば、提供される実施形態に従った療法に対する応答は、Ｔ細胞療法の投与の開始後の指定の時点に測定することができる。一部の実施形態では、指定の時点は、投与の開始の１、２、３、６、９、１２、１８、２４、３０もしくは３６カ月後またはその概数、あるいは前述のいずれかによって定義される範囲内である。一部の実施形態では、指定の時点は、投与の開始の４、８、１２、１６、２０、２４、２８、３２、３６、４８もしくは５２週間後または数カ月後、あるいは前述のいずれかによって定義される範囲内である。一部の実施形態では、指定の時点は、投与の開始の１カ月後またはその概数である。一部の実施形態では、指定の時点は、投与の開始の３カ月後またはその概数である。一部の実施形態では、指定の時点は、投与の開始の６カ月後またはその概数である。一部の実施形態では、指定の時点は、投与の開始の９カ月後またはその概数である。一部の実施形態では、指定の時点は、投与の開始の１２カ月後またはその概数である。一部の実施形態では、応答はＣＲまたはｓＣＲである。一部の実施形態では、応答はＣＲである。一部の実施形態では、応答はｓＣＲである。
【0275】
一部の実施形態では、指定の時点の３、６、９または１２カ月後またはその概数に決定される応答または転帰は、初期の指定の時点に決定される応答または転帰に等しいまたはそれと比較して改善される。例えば、一部の態様では、初期の指定の時点に決定される応答または転帰が、安定疾患（ＳＤ）、進行性疾患（ＰＤ）または再発である場合、提供される実施形態に従って処置された対象は、初期の指定の時点の応答または転帰に等しいか、または客観的奏効（ＯＲ）、完全奏効（ＣＲ）、厳格な完全奏効（ｓＣＲ）、最良部分奏効（ＶＧＰＲ）もしくは部分奏効（ＰＲ）である応答もしくは転帰である、初期の指定の時点の３、６、９または１２カ月後またはその概数に、後続の時点における等しいまたは改善された応答または転帰を示すことができる（例えば、国際骨髄腫作業部会（ＩＭＷＧ）統一応答基準に従ったより良い応答転帰を示す；Kumar et al. (2016) Lancet Oncol 17(8):e328-346を参照されたい）。一部の実施形態では、応答はＣＲまたはｓＣＲである。一部の実施形態では、応答はＣＲである。一部の実施形態では、応答はｓＣＲである。一部の態様では、提供される実施形態に従って処置された対象は、２つの決定時点の間で改善された応答または転帰を示すことができる。一部の態様では、対象は、評価のための初期の指定の時点において、例えば、投与の開始の４週間後にＰＲまたはＶＧＰＲを示し、次いで、より後の時点において、例えば、投与の開始の１２週間後にＣＲまたはｓＣＲ等の改善された応答を示すことができる。一部の態様では、無進行生存（ＰＦＳ）は、対象が疾患を伴って生存するが、悪化しないがん等の疾患の処置中および処置後の期間として記載される。一部の態様では、客観的奏効（ＯＲ）は、測定可能な奏効として記載される。一部の態様では、客観的奏効率（ＯＲＲ；一部の事例では、全奏効率としても知られている）は、ＣＲまたはＰＲを達成した患者の割合として記載されている。一部の態様では、全生存（ＯＳ）は、疾患と診断された対象が依然として生きている、がん等の疾患の診断日または処置の開始日からの時間の長さとして記載されている。一部の態様では、無イベント生存（ＥＦＳ）は、対象が、処置が防止または遅延させると意図されたある特定の合併症またはイベントないままである、がんに対する処置が終了した後の期間として記載されている。これらのイベントは、がんの再発またはある特定の症状の開始、例えば、骨に伝播したがん由来の骨痛、あるいは死亡を含み得る。
【0276】
一部の実施形態では、奏効の持続時間（ＤＯＲ）の測定は、疾患進行に対する腫瘍奏効の文書化からの時間を含む。一部の実施形態では、奏効を評価するためのパラメーターは、持続的な奏効、例えば、療法の開始からのある期間後に持続する奏効を含み得る。一部の実施形態では、持続的な奏効は、療法の開始のおよそ１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１８または２４カ月後の奏効率によって示される。一部の実施形態では、応答または転帰は、３、６、９または１２カ月間またはその概数を超えて耐久性がある。
【0277】
一部の実施形態では、米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータス指標を使用して、処置について対象、例えば、前の療法から不十分な成績を有した対象を評価または選択することができる（例えば、Oken et al. (1982) Am J Clin Oncol. 5:649-655を参照）。パフォーマンスステータスのＥＣＯＧスケールは、その自己管理能力、日々の活動および身体能力（例えば、歩行、作業等）の観点から機能の患者のレベルについて記載する。一部の実施形態では、０のＥＣＯＧパフォーマンスステータスは、対象が、正常な活動を行うことができることを指し示す。一部の態様では、１のＥＣＯＧパフォーマンスステータスを有する対象は、身体活動にある程度の制限を示すが、対象は完全に歩行可能である。一部の態様では、２のＥＣＯＧパフォーマンスステータスを有する患者は、５０％を超えて歩行可能である。一部の事例では、２のＥＣＯＧパフォーマンスステータスを有する対象は、セルフケアが可能となることもできる；例えば、Sorensen et al., (1993) Br J Cancer 67(4) 773-775を参照されたい。一部の実施形態では、本明細書に提供される方法または処置レジメンに従って投与されるべき対象は、０または１のＥＣＯＧパフォーマンスステータスを有する対象を含む。
【0278】
一部の実施形態では、Ｔ細胞療法（例えば、ＢＣＭＡ ＣＡＲ Ｔ細胞）の方法および／または投与は、Ｔ細胞療法の投与の直前の時点の疾患負荷と比較して、疾患負荷を減少させる。
【0279】
一部の態様では、Ｔ細胞療法の投与は、疾患負荷の増加を防止する可能性があり、これは、疾患負荷の変化がないことによって明らかであり得る。
【0280】
一部の実施形態では、当該方法は、代替的療法、例えば、対象が、処置の前の腫瘍のデバルキングの非存在下で、および／または対象が処置の前に選択されなかった際にＴ細胞療法を受けるものを使用した匹敵する方法で観察されるであろう低減と比較した場合に、より大きな度合いでおよび／またはより長い期間、疾患または症状の負荷、例えば、腫瘍細胞の数、腫瘍のサイズ、患者の生存または無イベント生存の持続時間を低減させる。一部の実施形態では、疾患負荷は、処置の前の腫瘍のデバルキングなしで、および／または処置についての患者の選択なしでもたらされる低減と比較して、Ｔ細胞療法の投与に続いて、より大きな程度で、またはより長い持続時間、低減される。
【0281】
一部の実施形態では、対象における疾患または状態の負荷は、検出、評価または測定される。疾患負荷は、一部の態様では、対象における、または対象の臓器、組織、もしくは体液、例えば血液または血清における疾患または疾患関連細胞、例えば腫瘍細胞の総数を検出することによって検出され得る。一部の実施形態では、疾患負荷、例えば、腫瘍負荷は、固形腫瘍の質量および／または転移の数もしくは度合いを測定することにより評価される。一部の態様では、対象の生存、ある特定の期間内の生存、生存の度合い、無事象もしくは無症状生存または無再発生存の存在または持続時間が評価される。一部の実施形態では、疾患または状態のいずれかの症状が評価される。一部の実施形態では、疾患または状態の負荷の尺度が指定される。一部の実施形態では、決定のための例示的なパラメーターとして、疾患もしくは状態、例えば腫瘍の緩解または改善を示す特定の臨床転帰が挙げられる。そのようなパラメーターとして、完全奏効（ＣＲ）、部分奏効（ＰＲ）または安定疾患（ＳＤ）（例えば、Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｃｒｉｔｅｒｉａ Ｉｎ Ｓｏｌｉｄ Ｔｕｍｏｒｓ（ＲＥＣＩＳＴ）ガイドラインを参照）、客観的奏効率（ＯＲＲ）、無進行生存（ＰＦＳ）および全生存（ＯＳ）を含む疾患制御の持続時間が挙げられる。一部の実施形態では、パラメーターはＣＲまたはｓＣＲである。一部の実施形態では、パラメーターはＣＲである。一部の実施形態では、パラメーターはｓＣＲである。パラメーターに関する具体的な閾値は、本明細書に提供されるＴ細胞療法の方法の有効性を決定するよう設定され得る。
【0282】
一部の実施形態では、方法に従って処置された対象は、より耐久性のある応答を達成する。一部の事例では、応答の持続時間（ＤＯＲ）の尺度は、腫瘍応答の文書化から疾患進行までの時間を含む。一部の実施形態では、応答を評価するためのパラメーターは、耐久性のある応答、例えば、療法の開始からの期間後に持続する応答を含むことができる。一部の実施形態では、耐久性のある応答は、療法の開始のおよそ１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１８または２４カ月後の奏効率によって指し示される。一部の実施形態では、応答は、３カ月間を超えて、６カ月間を超えてまたは１２カ月間を超えて耐久性がある。一部の特定の実施形態では、方法に従って処置された対象は、対象が遺伝子操作された細胞の投与に応答した寛解に続いて以前に再発した後に、より耐久性のある応答を達成する。
【0283】
一部の態様では、デバルキングの投与の前に、Ｔ細胞療法の投与の前に、および／またはデバルキングの後であるがＴ細胞療法の投与の前に、疾患負荷は、測定または検出される。Ｔ細胞療法の１種または複数の工程の多重投与の状況で、疾患負荷は、一部の実施形態では、投与の工程、用量および／もしくはサイクルのいずれかの投与の前に、もしくは投与に続いて、または投与の工程、用量および／もしくはサイクルのいずれかの投与間の時点で測定され得る。
【0284】
一部の実施形態では、負荷は、Ｔ細胞療法の投与の直前と比較して、提供される方法によって、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、もしくは１００パーセント分、またはその概数分、あるいは少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、もしくは１００パーセント分、または少なくともその概数分減少される。一部の実施形態では、疾患負荷、腫瘍サイズ、腫瘍体積、腫瘍質量、および／または腫瘍量もしくはバルクは、Ｔ細胞療法の投与および／またはデバルキングの直前のものと比較して、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０％分以上、または少なくともその概数分、Ｔ細胞療法の投与およびデバルキングに続いて低減される。
【0285】
一部の実施形態では、当該方法による疾患負荷の低減は、例えば、Ｔ細胞療法の投与、例えばその開始後１カ月、２カ月、３カ月、または３カ月以上で評価した場合に形態学的完全寛解の誘導を含む。
【0286】
一部の態様では、最小残留疾患に関するアッセイは、例えばマルチパラメトリックフローサイトメトリーによって測定される場合に陰性であるか、または最小残留疾患のレベルは、約０．３％未満、約０．２％未満、約０．１％未満、または０．０５％未満である。
【0287】
一部の実施形態では、対象の無イベント生存率または全生存率は、他の方法と比較した場合に、当該方法によって改善される。例えば、一部の実施形態では、本明細書に提供されるＴ細胞療法の当該方法に続いて６カ月で当該方法によって処置された対象に関する無イベント生存率または蓋然性は、約４０％より高いか、約５０％より高いか、約６０％より高いか、約７０％より高いか、約８０％より高いか、約９０％より高いか、または約９５％より高い。一部の態様では、全生存率は、約４０％より高いか、約５０％より高いか、約６０％より高いか、約７０％より高いか、約８０％より高いか、約９０％より高いか、または約９５％より高い。一部の実施形態では、当該方法で処置された対象は、少なくとも６カ月、または少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０年に至る無イベント生存、無再発生存、または生存を示す。一部の実施形態では、進行までの時間、例えば６カ月もしくは、または少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０年より長い、あるいはその概数より長い進行までの時間が改善される。
【0288】
一部の実施形態では、当該方法による処置に続いて、再発の蓋然性は、他の方法と比較した場合に低減される。例えば、一部の実施形態では、Ｔ細胞療法の当該方法の６カ月後の再発の蓋然性は、約８０％未満、約７０％未満、約６０％未満、約５０％未満、約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、または約１０％未満である。
【0289】
一部の実施形態では、対象が別の療法に対して抵抗性になっているにもかかわらず、投与は、対象を処置することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の実施形態に従って対象に投与された場合、用量または組成物は、投与された対象の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％または少なくとも９５％において完全奏効（ＣＲ）または厳格なＣＲ（ｓＣＲ）を達成することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の実施形態に従って対象に投与された場合、用量または組成物は、投与された対象の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％において完全奏効（ＣＲ）を達成することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の実施形態に従って対象に投与された場合、用量または組成物は、投与された対象の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％において厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載されている実施形態に従って対象に投与された場合、用量または組成物は、投与された対象の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％または少なくとも９５％において客観的奏効（ＯＲ）を達成することができる。一部の実施形態では、ＯＲは、厳格な完全奏効（ｓＣＲ）、完全奏効（ＣＲ）、最良部分奏効（ＶＧＰＲ）、部分奏効（ＰＲ）および最小の応答（ＭＲ）を達成する対象を含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されている実施形態に従って対象に投与された場合、用量または組成物は、投与された対象の少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％または８５％において厳格な完全奏効（ｓＣＲ）、完全奏効（ＣＲ）、最良部分奏効（ＶＧＰＲ）または部分奏効（ＰＲ）を達成することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載されている実施形態に従って対象に投与された場合、用量または組成物は、投与された対象の少なくとも２０％、３０％、４０％、５０％、６０％または７０％において厳格な完全奏効（ｓＣＲ）または完全奏効（ＣＲ）を達成することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の実施形態に従って対象に投与された場合、用量または組成物は、投与された対象の少なくとも２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、または７０％において厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載の実施形態に従って対象に投与された場合、用量または組成物は、投与された対象の少なくとも２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、または７０％において完全奏効（ＣＲ）を達成することができる。一部の実施形態では、例示的な用量は、約１．０×１０７、１．５×１０７、２．０×１０７、２．５×１０７、５．０×１０７、１．５×１０８、３．０×１０８、４．５×１０８、６．０×１０８、または８×１０８個のＣＡＲ発現（ＣＡＲ＋）Ｔ細胞を含む。一部の態様では、例えば、本明細書に提供される方法に従った処置に対する特定の応答は、国際骨髄腫作業部会（ＩＭＷＧ）統一応答基準（Kumar et al. (2016) Lancet Oncol 17(8):e328-346を参照）に基づき評価することができる。
【0290】
ＩＶ．ＢＣＭＡ標的療法および操作された細胞
ＢＣＭＡ標的療法も本明細書に提供される。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的療法は、多発性骨髄腫を有する対象に提供される。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的療法は、抗体、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）、またはＴ細胞エンゲージャーである。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的療法は抗体である。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的療法は、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）である。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的療法はＴ細胞エンゲージャー（ＴＣＥ）である。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的療法は、Ｔ細胞の活性を刺激することができるＴ細胞エンゲージャーである。一部の実施形態では、ＢＣＭ標的療法は、二特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）療法である。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的化は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）療法、内因性Ｔ細胞療法、自然殺（ＮＫ）細胞療法、トランスジェニックＴＣＲ療法、および組換え受容体発現細胞療法の中から選択される細胞療法であり、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現細胞療法であってもよい。一部の実施形態では、細胞療法は、組換え受容体発現細胞療法である。一部の実施形態では、細胞療法は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現細胞療法である。本明細書に提供される実施形態のいずれかでは、ＢＣＭＡ標的療法は、多発性骨髄腫を有する対象に投与される。
ＢＣＭＡ標的療法も本明細書に提供される。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的療法は、多発性骨髄腫を有する対象に提供される。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的療法は、抗体、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）、またはＴ細胞エンゲージャーである。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的療法は抗体である。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的療法は、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）である。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的療法はＴ細胞エンゲージャー（ＴＣＥ）である。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的療法は、Ｔ細胞の活性を刺激することができるＴ細胞エンゲージャーである。一部の実施形態では、ＢＣＭ標的療法は、二特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）療法である。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ標的化は、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）療法、内因性Ｔ細胞療法、自然殺（ＮＫ）細胞療法、トランスジェニックＴＣＲ療法、および組換え受容体発現細胞療法の中から選択される細胞療法であり、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現細胞療法であってもよい。一部の実施形態では、細胞療法は、組換え受容体発現細胞療法である。一部の実施形態では、細胞療法は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現細胞療法である。本明細書に提供される実施形態のいずれかでは、ＢＣＭＡ標的療法は、多発性骨髄腫を有する対象に投与される。
【0291】
本明細書に記載されている抗体または断片等の抗ＢＣＭＡ結合部分を含む細胞外ドメインを含有するもの等の組換え受容体（例えば、キメラ抗原受容体）を含有する操作された細胞等の細胞も本明細書に提供される。ＢＣＭＡ結合分子を発現する細胞が、組成物中の全細胞またはＰＢＭＣ、Ｔ細胞もしくはＣＤ３＋、ＣＤ８＋、もしくはＣＤ４＋細胞等のある特定の型の細胞の少なくとも５０、６０、７０、８０、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、またはそれを超えるパーセント分を構成するそのような細胞の集団、そのような細胞を含有する組成物、および／またはそのような細胞を濃縮した組成物も提供される。
【0292】
組成物の中でも、養子細胞療法のため等、投与のための医薬組成物および製剤が特に挙げられる。対象、例えば、患者に細胞および組成物を投与するための療法の方法も提供される。
【0293】
よって、抗体を含有する組換え受容体を発現する遺伝子操作された細胞、例えば、ＣＡＲを含有する細胞も提供される。細胞は概して、哺乳動物細胞等の真核細胞であり、通常、ヒト細胞である。一部の実施形態では、細胞は、血液、骨髄、リンパ、またはリンパ器官に由来し、リンパ球、通常はＴ細胞および／またはＮＫ細胞を含む、自然免疫もしくは適応免疫の細胞、例えば骨髄系またはリンパ系細胞等の免疫系の細胞である。他の例示的な細胞として、人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含む多分化能性および多能性幹細胞等の幹細胞が挙げられる。細胞は通常、対象から直接単離され、および／または対象から単離されて凍結されたもの等の初代細胞である。一部の実施形態では、細胞は、Ｔ細胞または他の細胞型の１種または複数のサブセット、例えば全Ｔ細胞集団、ＣＤ４＋細胞、ＣＤ８＋細胞、およびそれらの亜集団、例えば、機能、活性化状態、成熟度、分化能、増大、再循環、局在化、および／または持続能、抗原特異性、抗原受容体の型、特定の臓器もしくはコンパートメントにおける存在、マーカーもしくはサイトカイン分泌プロファイル、および／または分化度によって規定されるものを含む。処置されるべき対象に関して、細胞は、同種異系および／または自家であり得る。方法の中には、市販の方法が含まれる。一部の態様では、例えば市販の技術に関して、細胞は、多能性および／または多分化能性の、例えば幹細胞、例えば人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）である。一部の実施形態では、方法は、細胞を対象から単離すること、それらを調製すること、加工処理すること、培養すること、および／または操作すること、ならびに凍結保存前もしくは後にそれらを同じ患者に再度導入することを含む。
【0294】
Ｔ細胞ならびに／またはＣＤ４＋および／もしくはＣＤ８＋Ｔ細胞のサブタイプおよび亜集団の中には、ナイーブＴ（ＴＮ）細胞、エフェクターＴ細胞（ＴＥＦＦ）、メモリーＴ細胞およびそれらのサブタイプ、例えば幹細胞メモリーＴ（ＴＳＣＭ）、セントラルメモリーＴ（ＴＣＭ）、エフェクターメモリーＴ（ＴＥＭ）、または高分化型エフェクターメモリーＴ細胞、細胞浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、未熟Ｔ細胞、成熟Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、粘膜関連インバリアントＴ（ＭＡＩＴ）細胞、天然に存在する適応制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞、ヘルパーＴ細胞、例えばＴＨ１細胞、ＴＨ２細胞、ＴＨ３細胞、ＴＨ１７細胞、ＴＨ９細胞、ＴＨ２２細胞、濾胞性ヘルパーＴ細胞、アルファ／ベータＴ細胞、およびデルタ／ガンマＴ細胞が存在する。
【0295】
一部の実施形態では、細胞は、ナチュナルキラー（ＮＫ）細胞である。一部の実施形態では、細胞は、単球または顆粒細胞、例えば骨髄性細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、マスト細胞、好酸球、および／または好塩基球である。
【0296】
一部の実施形態では、細胞は、遺伝子操作により導入された１種または複数のポリヌクレオチドを含み、それによりそのようなポリヌクレオチドの組換えまたは遺伝子操作された産物を発現する。一部の実施形態では、ポリヌクレオチドは、異種、即ち、通常、細胞または細胞から得られた試料中に存在しないものであり、例えば、操作される細胞および／またはこのような細胞が由来する生物中に通常見られない、別の生物または細胞から得られたもの等である。一部の実施形態では、ポリヌクレオチドは、複数の異なる細胞型由来の様々なドメインをコードするポリヌクレオチドのキメラ組合せを含むものを含む、天然に存在しない、例えば自然界に見られないポリヌクレオチドである。一部の実施形態では、細胞（例えば、操作された細胞）は、本明細書に記載されているベクター（例えば、ウイルスベクター、発現ベクター等）、例えば、本明細書に記載の組換え受容体をコードする核酸を含むベクターを含む。
【0297】
一部の実施形態では、提供される方法に合わせて使用するためのＴ細胞療法は、多発性骨髄腫、例えば再発したおよび不応性の（Ｒ／Ｒ）多発性骨髄腫（ＭＭ）に関連する分子（例えば、ＢＣＭＡ）を認識し、および／またはこれに特異的に結合するように設計された組換え受容体を発現する操作されたＴ細胞を投与することを含む。一部の実施形態では、抗原への結合は、そのような分子への結合後に、そのような分子に対する免疫応答等の応答をもたらす。一部の実施形態では、細胞は、操作された受容体、例えば、操作された抗原受容体、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）またはＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を含有するかまたはそれを含有するように操作される。ＣＡＲ等の組換え受容体は一般に、一部の態様ではリンカーおよび／または膜貫通ドメイン（複数可）を介して１個または複数の細胞内シグナル伝達構成成分に連結された、ＢＣＭＡを指向する細胞外抗原（またはリガンド）結合性ドメインを含む。一部の態様では、操作された細胞は、養子細胞療法等のための、対象への投与に適した医薬組成物および製剤として提供される。対象、例えば、患者に細胞および組成物を投与するための療法の方法も提供される。
【0298】
一部の実施形態では、細胞は、遺伝子操作により導入された１種または複数の核酸を含み、これにより、そのような核酸の組換えまたは遺伝子操作された産物を発現する。一部の実施形態では、遺伝子移入は、まず、細胞を刺激することにより、例えば、これを、例えば、サイトカインまたは活性化マーカーの発現によって測定される、増殖、生存および／または活性化等の応答を誘導する刺激と組み合わせ、続いて、活性化された細胞を形質導入し、培養において、臨床適用に十分な数まで増大させることにより達成される。
【0299】
Ａ．組換え受容体、例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）
細胞は概して、機能的な非ＴＣＲ抗原受容体、例えばキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、トランスジェニックＴ細胞受容体（ＴＣＲ）等の他の抗原結合性受容体を含む抗原受容体等の組換え受容体を発現する。また、受容体の中には他のキメラ受容体も存在する。
細胞は概して、機能的な非ＴＣＲ抗原受容体、例えばキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、トランスジェニックＴ細胞受容体（ＴＣＲ）等の他の抗原結合性受容体を含む抗原受容体等の組換え受容体を発現する。また、受容体の中には他のキメラ受容体も存在する。
【0300】
提供される方法および使用の一部の実施形態では、Ｔ細胞等の操作された細胞は、所望の抗原（例えば、腫瘍抗原）に対する特異性を提供するリガンド結合性ドメイン（例えば、抗体または抗体断片）を、細胞内シグナル伝達ドメインと組み合わせる１個または複数のドメインを含有する、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）等のキメラ受容体を発現する。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、一次活性化シグナルを提供する、Ｔ細胞活性化ドメイン等の活性化細胞内ドメイン部分である。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、エフェクター機能を容易にするための共刺激シグナル伝達ドメインを含有するかまたはその上含有する。分子、例えば、抗原への特異的結合後に、受容体は一般に、ＩＴＡＭ伝達シグナル等の免疫刺激シグナルを細胞に送達し、これにより、疾患または状態に標的化された免疫応答を促進する。一部の実施形態では、キメラ受容体は、免疫細胞へと遺伝子操作された場合、Ｔ細胞活性をモジュレートすることができ、一部の事例では、Ｔ細胞分化または恒常性をモジュレートし、これにより、養子細胞療法の方法における使用等のための、インビボにおける改善された長寿命、生存および／または持続性を有する遺伝子操作された細胞をもたらすことができる。
【0301】
一部の実施形態では、ＣＡＲは、養子療法によって標的化されるべき特定の細胞型において発現される抗原等の特定の抗原（またはマーカーもしくはリガンド）、例えば、がんマーカー、および／または正常もしくは非罹患細胞型において発現される抗原等、減衰性応答を誘導することが意図される抗原に対する特異性をもって構築される。よって、ＣＡＲは典型的に、その細胞外部分に、１個または複数の抗原結合性分子、例えば、１個もしくは複数の抗原結合性断片、ドメインもしくは部分、または１個もしくは複数の抗体可変ドメインおよび／もしくは抗体分子を含む。
【0302】
本明細書における「抗体」という用語は、最も広い意味で使用されており、抗原結合性断片（Ｆａｂ）断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、Ｆｖ断片、組換えＩｇＧ（ｒＩｇＧ）断片、抗原に特異的に結合することができる重鎖可変（ＶＨ）領域、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む単鎖抗体断片、および単一ドメイン抗体（例えば、ｓｄＡｂ、ｓｄＦｖ、ナノボディ、ＶＨＨ）断片を含む、無傷抗体および機能的（抗原結合性）抗体断片を含むポリクローナルおよびモノクローナル抗体を含む。この用語は、遺伝子操作されたおよび／または他の仕方で改変された形態の免疫グロブリン、例えば、イントラボディ、ペプチボディ、キメラ抗体、完全にヒト抗体、ヒト化抗体、およびヘテロコンジュゲート抗体、多特異性、例えば、二特異性または三特異性（trispecific）抗体、ダイアボディ（diabody）、トリアボディ（triabody）およびテトラボディ（tetrabody）、タンデムジ－ｓｃＦｖ、タンデムトリ－ｓｃＦｖを包含する。他に記述がなければ、「抗体」という用語は、本明細書で「抗原結合性断片」とも称される、その機能的抗体断片を包含するものと理解されたい。この用語は、ＩｇＧおよびそのサブクラス、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、ならびにＩｇＤを含む、いずれかのクラスまたはサブクラスの抗体を含む、無傷または全長抗体も包含する。
【0303】
「高頻度可変領域」または「ＨＶＲ」と同義の「相補性決定領域」および「ＣＤＲ」という用語は、抗原特異性および／または結合親和性を付与する、抗体可変領域内のアミノ酸の連続していない配列を指すことが当技術分野で知られている。一般に、各重鎖可変領域における３個のＣＤＲ（ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３）および各軽鎖可変領域における３個のＣＤＲ（ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３）が存在する。「フレームワーク領域」および「ＦＲ」は、重鎖および軽鎖の可変領域の非ＣＤＲ部分を指すことが当技術分野で知られている。一般に、各全長重鎖可変領域における４個のＦＲ（ＦＲ－Ｈ１、ＦＲ－Ｈ２、ＦＲ－Ｈ３およびＦＲ－Ｈ４）および各全長軽鎖可変領域における４個のＦＲ（ＦＲ－Ｌ１、ＦＲ－Ｌ２、ＦＲ－Ｌ３およびＦＲ－Ｌ４）が存在する。
【0304】
所与のＣＤＲまたはＦＲの正確なアミノ酸配列境界は、Kabat et al. (1991), "Sequences of Proteins of Immunological Interest," 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD（「Ｋａｂａｔ」ナンバリングスキーム）；Al-Lazikani et al., (1997) JMB 273,927-948（「Ｃｈｏｔｈｉａ」ナンバリングスキーム）；MacCallum et al., J. Mol. Biol. 262:732-745 (1996), "Antibody-antigen interactions: Contact analysis and binding site topography," J. Mol. Biol. 262, 732-745."（「接触」ナンバリングスキーム）；Lefranc MP et al., "IMGT unique numbering for immunoglobulin and T cell receptor variable domains and Ig superfamily V-like domains," Dev Comp Immunol, 2003 Jan;27(1):55-77（「ＩＭＧＴ」ナンバリングスキーム）；Honegger A and Plueckthun A, "Yet another numbering scheme for immunoglobulin variable domains: an automatic modeling and analysis tool," J Mol Biol, 2001 Jun 8;309(3):657-70（「Ａｈｏ」ナンバリングスキーム）；およびMartin et al., "Modeling antibody hypervariable loops: a combined algorithm," PNAS, 1989, 86(23):9268-9272（「ＡｂＭ」ナンバリングスキーム）によって記載されている境界を含む、多くのよく知られているスキームのいずれかを使用して容易に決定することができる。
【0305】
所与のＣＤＲまたはＦＲの境界は、同定に使用されるスキームに応じて変動し得る。例えば、Ｋａｂａｔスキームは、構造アラインメントに基づき、一方、Ｃｈｏｔｈｉａスキームは、構造情報に基づく。ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａスキームの両方のためのナンバリングは、最も一般的な抗体領域配列の長さに基づき、挿入は、挿入文字、例えば、「３０ａ」によって調整され、欠失は、一部の抗体に出現する。この２種のスキームは、ある特定の挿入および欠失（「インデル」）を異なる位置に置き、差次的ナンバリングをもたらす。接触スキームは、複合体結晶構造の解析に基づき、多くの点で、Ｃｈｏｔｈｉａナンバリングスキームと同様である。ＡｂＭスキームは、Ｏｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデル化ソフトウェアによって使用されるものに基づく、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａ定義の間の妥協である。
【0306】
下の表２は、それぞれＫａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭおよび接触スキームによって同定される、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３およびＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３の例示的な位置境界を収載する。ＣＤＲ－Ｈ１について、残基ナンバリングは、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａナンバリングスキームの両方を使用して収載されている。ＦＲは、ＣＤＲ間に配置されており、例えば、ＦＲ－Ｌ１は、ＣＤＲ－Ｌ１の前に配置され、ＦＲ－Ｌ２は、ＣＤＲ－Ｌ１およびＣＤＲ－Ｌ２の間に配置され、ＦＲ－Ｌ３は、ＣＤＲ－Ｌ２およびＣＤＲ－Ｌ３の間に配置される、等々。示されているＫａｂａｔナンバリングスキームは、Ｈ３５ＡおよびＨ３５Ｂに挿入を置くため、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲ－Ｈ１ループの終わりは、示されているＫａｂａｔナンバリング慣例を使用してナンバリングされた場合、ループの長さに応じてＨ３２およびＨ３４の間で変動することに留意されたい。
【0307】
【表2】
【0308】
よって、他に指定がなければ、所与の抗体またはその領域、例えば、その可変領域の「ＣＤＲ」または「相補性（complementary）決定領域」または個々の指定のＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３）は、上述のスキームのいずれかまたは他の知られているスキームによって定義される通りに、ある（または特異的な）相補性（complementary）決定領域を包含することを理解されたい。例えば、特定のＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ３）が、所与のＶＨまたはＶＬ領域アミノ酸配列における対応するＣＤＲのアミノ酸配列を含有することが記述される場合、そのようなＣＤＲが、上述のスキームのいずれかまたは他の知られているスキームによって定義される通りに、可変領域内の対応するＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ－Ｈ３）の配列を有することが理解される。一部の実施形態では、特異的なＣＤＲ配列は指定されている。提供される抗体の例示的なＣＤＲ配列は、様々なナンバリングスキームを使用して記載されるが、提供される抗体が、他の上述のナンバリングスキームのいずれかまたは当業者に知られている他のナンバリングスキームに従って記載されるＣＤＲを含むことができることが理解される。
【0309】
同様に、他に指定がなければ、所与の抗体またはその領域、例えば、その可変領域のＦＲまたは個々の指定のＦＲ（複数可）（例えば、ＦＲ－Ｈ１、ＦＲ－Ｈ２、ＦＲ－Ｈ３、ＦＲ－Ｈ４）は、知られているスキームのいずれかによって定義される通りに、ある（または特異的な）フレームワーク領域を包含することを理解されたい。一部の実例では、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＡｂＭ、ＩＭＧＴもしくは接触方法または他の知られているスキームによって定義されるＣＤＲ等、特定のＣＤＲ、ＦＲまたは複数のＦＲまたは複数のＣＤＲの同定のためのスキームが指定されている。他の事例では、ＣＤＲまたはＦＲの特定のアミノ酸配列が与えられる。
【0310】
「可変領域」または「可変ドメイン」という用語は、抗原に抗体を結合させることに関与する抗体重鎖または軽鎖のドメインを指す。ネイティブ抗体の重鎖および軽鎖の可変領域（それぞれＶＨおよびＶＬ）は一般に、４個の保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）および３個のＣＤＲを含む各ドメインを有する同様の構造を有する（例えば、Kindt et al. Kuby Immunology, 6th ed., W.H. Freeman and Co., page 91 (2007)を参照）。単一のＶＨまたはＶＬドメインは、抗原結合特異性を付与するのに十分となり得る。さらに、それぞれ相補的なＶＬまたはＶＨドメインのライブラリーをスクリーニングするために、抗原に結合する抗体由来のＶＨまたはＶＬドメインを使用して、特定の抗原に結合する抗体を単離することができる。例えば、Portolano et al., J. Immunol. 150:880-887 (1993)；Clarkson et al., Nature 352:624-628 (1991)を参照されたい。
【0311】
ＣＡＲに含まれる抗原結合性ドメインの中でも、抗体断片が特に挙げられる。「抗体断片」または「抗原結合性断片」は、無傷抗体が結合する抗原に結合する無傷抗体の部分を含む、無傷抗体以外の分子を指す。抗体断片の例は、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２；ダイアボディ；線形抗体；重鎖可変（ＶＨ）領域、単鎖抗体分子、例えば、ｓｃＦｖ、およびＶＨ領域のみを含む単一ドメイン抗体；ならびに抗体断片から形成された多特異性抗体を含むがこれらに限定されない。特定の実施形態では、抗体は、ｓｃＦｖ等、重鎖可変（ＶＨ）領域および／または軽鎖可変（ＶＬ）領域を含む単鎖抗体断片である。
【0312】
単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）は、抗体の重鎖可変領域の全てもしくは部分または軽鎖可変領域の全てもしくは部分を含む抗体断片である。ある特定の実施形態では、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である。ある特定の実施形態では、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である。一部の実施形態では、ＣＡＲは、ＢＣＭＡに特異的に結合する抗体重鎖ドメインを含む。
【0313】
抗体断片は、無傷抗体のタンパク質分解による消化や、組換え宿主細胞による産生を含むがこれらに限定されない、様々な技法によって作製することができる。一部の実施形態では、抗体は、合成リンカー、例えば、ペプチドリンカーによって連接された２個以上の抗体領域もしくは鎖を有する断片および／または天然に存在する無傷抗体の酵素消化によって産生され得ない断片等、天然には存在しない配置を含む断片等、組換えにより産生された断片である。一部の態様では、抗体断片は、ｓｃＦｖである。
【0314】
一部の実施形態では、ＣＡＲは、ｓｄＦｖ、ナノボディ、ＶＨＨおよびＶＮＡＲ等、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）または単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）の可変重（ＶＨ）および可変軽（ＶＬ）鎖に由来する単鎖抗体断片（ｓｃＦｖ）等、抗体分子の抗原結合性部分（単数または複数）を含む。一部の実施形態では、抗原結合性断片は、可動性リンカーによって連接された抗体可変領域を含む。
【0315】
一部の実施形態では、抗体またはその抗原結合性断片は、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）またはダイアボディまたは単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）等の単鎖抗体断片である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、ＶＨ領域のみを含む単一ドメイン抗体である。一部の実施形態では、ＣＡＲは、ｓｄＡｂを含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、２個のｓｄＡｂを含む。一部の実施形態では、２つのｓｄＡｂの各々はＶＨドメインである。一部の実施形態では、２つのｓｄＡｂの各々は、ＢＣＭＡの異なるエピトープに結合する。一部の実施形態では、２つのｓｄＡｂの各々は、ＢＣＭＡの同じエピトープに結合する。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性ドメインは、重鎖可変（ＶＨ）領域および軽鎖可変（ＶＬ）領域を含むｓｃＦｖである。
【0316】
「ヒト化」抗体は、全てのまたは実質的に全てのＣＤＲアミノ酸残基が非ヒトＣＤＲに由来し、全てのまたは実質的に全てのＦＲアミノ酸残基がヒトＦＲに由来する、抗体である。ヒト化抗体は、ヒト抗体に由来する抗体定常領域の少なくとも一部分を含んでいてもよい。非ヒト抗体の「ヒト化形態」は、典型的に、親非ヒト抗体の特異性および親和性を保持しつつ、ヒトに対する免疫原性を低減させるために、ヒト化を経た非ヒト抗体の変異体を指す。一部の実施形態では、ヒト化抗体におけるいくつかのＦＲ残基は、例えば、抗体特異性または親和性を回復または改善するために、非ヒト抗体（例えば、ＣＤＲ残基が派生される抗体）由来の対応する残基に置換されている。
【0317】
提供されるＣＡＲに含まれる抗ＢＣＭＡ抗体の中でも、マウス抗体が特に挙げられる。「マウス抗体」は、マウスもしくはマウス細胞、またはマウス抗体ライブラリーを含むマウス抗体レパートリーもしくは他のマウス抗体コード配列を利用する非マウス供給源によって産生される抗体の配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体である。
【0318】
提供されるＣＡＲに含まれる抗ＢＣＭＡ抗体の中でも、ヒト抗体が特に挙げられる。「ヒト抗体」は、ヒトもしくはヒト細胞、またはヒト抗体ライブラリーを含むヒト抗体レパートリーもしくは他のヒト抗体コード配列を利用する非ヒト供給源によって産生される抗体の配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体である。この用語は、全てのまたは実質的に全てのＣＤＲが非ヒトであるもの等、非ヒト抗原結合性領域を含む非ヒト抗体のヒト化形態を除外する。この用語は、ヒト抗体の抗原結合性断片を含む。
【0319】
ヒト抗体は、抗原の曝露に応答してヒト可変領域を有する無傷ヒト抗体または無傷抗体を産生するように改変されたトランスジェニック動物に免疫原を投与することにより調製することができる。そのような動物は典型的に、内因性免疫グロブリン遺伝子座に置き換わるかまたは染色体外に存在するかまたは動物の染色体にランダムに組み込まれる、ヒト免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは部分を含有する。そのようなトランスジェニック動物において、内因性免疫グロブリン遺伝子座は一般に、不活性化されている。ヒト抗体は、ヒトレパートリーに由来する抗体コード配列を含有する、ファージディスプレイおよび無細胞ライブラリーを含むヒト抗体ライブラリーに由来することもできる。
【0320】
提供されるＣＡＲに含まれる抗体の中でも、モノクローナル抗体断片を含むモノクローナル抗体である抗体が特に挙げられる。「モノクローナル抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、実質的に均一な抗体の集団から得られるまたはその内にある抗体を指し、即ち、集団を構成する個々の抗体は、天然に存在する突然変異を含有するかまたはモノクローナル抗体調製物の産生中に生じる、可能な変異体を除いて同一であり、そのような変異体は一般に、微量で存在する。異なるエピトープを指向する異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原における単一のエピトープを指向する。この用語は、いずれか特定の方法による抗体の産生を要求するものとして解釈されるべきではない。モノクローナル抗体は、ハイブリドーマからの生成、組換えＤＮＡ方法、ファージディスプレイおよび他の抗体ディスプレイ方法を含むがこれらに限定されない、種々の技法によって作製することができる。
【0321】
よって、一部の実施形態では、ＴＣＲ様ＣＡＲを含むキメラ抗原受容体は、抗体または抗体断片を含む細胞外部分を含む。一部の実施形態では、抗体または断片は、ｓｃＦｖを含む。一部の実施形態では、抗体またはその抗原結合性断片は、単鎖抗体断片、例えば、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）またはダイアボディまたは単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、ＶＨ領域のみを含む単一ドメイン抗体である。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性ドメインは、重鎖可変（ＶＨ）領域および軽鎖可変（ＶＬ）領域を含むｓｃＦｖである。
【0322】
一部の実施形態では、抗体は、重鎖可変（ＶＨ）領域および軽鎖可変（ＶＬ）領域等の２つの抗体ドメインまたは領域を連接する１種または複数のリンカーを含む、ｓｃＦｖ等の抗原結合性断片である。リンカーは典型的に、ペプチドリンカー、例えば、可動性および／または可溶性ペプチドリンカーである。リンカーの中でも、グリシンおよびセリンならびに／または一部の事例では、スレオニンがリッチなリンカーが特に挙げられる。一部の実施形態では、リンカーは、溶解性を改善することができるリシンおよび／またはグルタミン酸等の荷電残基をさらに含む。一部の実施形態では、リンカーは、１個または複数のプロリンをさらに含む。一部の態様では、グリシンおよびセリン（および／またはスレオニン）がリッチなリンカーは、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％のそのようなアミノ酸（複数可）を含む。一部の実施形態では、これは、少なくともまたは約５０％、５５％、６０％、７０％もしくは７５％のグリシン、セリンおよび／またはスレオニンを含む。一部の実施形態では、リンカーは、グリシン、セリンおよび／またはスレオニンで実質的に全体的に構成される。リンカーは一般に、約５～約５０の間のアミノ酸の長さ、典型的に、１０または約１０から３０または約３０までの間、例えば、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９または３０、および一部の例では、１０～２５の間のアミノ酸の長さである。例示的なリンカーは、配列ＧＧＧＧＳ（４ＧＳ；配列番号２６）またはＧＧＧＳ（３ＧＳ；配列番号２７）の様々な数のリピート、例えば、そのような配列の２、３、４～５個の間のリピートを有するリンカーを含む。例示的なリンカーは、配列番号２８（ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ）、配列番号２９（ＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧ）、配列番号３０（ＳＲＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＬＥＭＡ）、または配列番号３８（ＡＳＧＧＧＧＳＧＧＲＡＳＧＧＧＧＳ）に記載される配列を有するかまたはそれからなるリンカーを含む。一部の実施形態では、リンカーは、配列番号２９に記載される配列であるかまたはそれを含む。
【0323】
一部の実施形態では、ＣＡＲは、抗体の重鎖可変（ＶＨ）領域および／または軽鎖可変（ＶＬ）領域、例えば、ｓｃＦｖ抗体断片等、抗体分子のＢＣＭＡ結合部分（単数または複数）を含む。ＣＡＲ等のキメラ受容体は一般に、抗体分子の部分、一般に、抗体の可変重（ＶＨ）鎖領域および／または可変軽（ＶＬ）鎖領域、例えば、ｓｃＦｖ抗体断片等の細胞外抗原結合性ドメインを含む。一部の実施形態では、提供されるＢＣＭＡ結合ＣＡＲは、提供されるＣＡＲのＢＣＭＡ結合特性を付与する、抗ＢＣＭＡ抗体またはその抗原結合性断片等の抗体を含有する。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性ドメインは、記載されているいずれかの抗ＢＣＭＡ抗体であり得るか、または記載されているいずれかの抗ＢＣＭＡ抗体に由来し得る。例えば、Carpenter et al., Clin. Cancer Res., 2013, 19(8):2048-2060；Feng et al., Scand. J. Immunol. (2020) 92:e12910;米国特許第９，０３４，３２４号、米国特許第９，７６５，３４２号；米国特許公開番号ＵＳ２０１６／００４６７２４、ＵＳ２０１７０１８３４１８；および国際公開ＰＣＴ出願番号ＷＯ２０１６０９０３２０、ＷＯ２０１６０９０３２７、ＷＯ２０１６０９４３０４、ＷＯ２０１６０１４５６５、ＷＯ１０６０１４７８９、ＷＯ２０１０１０４９４９、ＷＯ２０１７／０２５０３８またはＷＯ２０１７１７３２５６、ＷＯ２０１８０８５６９０またはＷＯ２０２１０９１９７８を参照されたい。そのような抗ＢＣＭＡ抗体または抗原結合性断片のいずれかを、提供されるＣＡＲにおいて使用することができる。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、１種または複数の単一ドメイン抗ＢＣＭＡ抗体を含有する。一部の実施形態では、１種または複数の単一ドメイン抗ＢＣＭＡ抗体は、ＷＯ２０１７０２５０３８またはＷＯ２０１８０２８６４７に記載の抗体に由来する。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、２種の単一ドメイン抗ＢＣＭＡ抗体を含有する。一部の実施形態では、２種の単一ドメイン抗ＢＣＭＡ抗体は、ＷＯ２０１７０２５０３８またはＷＯ２０１８０２８６４７に記載の１種または複数の抗体（シグナルペプチドを含むかまたは含まない）に由来する。一部の実施形態では、ＢＣＭＡ結合ドメインは、ＷＯ２０１７０２５０３８またはＷＯ２０１８０２８６４７に記載の、および例えば、ＷＯ２０１７０２５０３８またはＷＯ２０１８０２８６４７の配列番号３００、３０１および３０２に提供されるＡ３７３５３－Ｇ４Ｓ－Ａ３７９１７（Ｇ４Ｓは、２つの結合ドメイン間のリンカーである）を含むかまたはそれからなる。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、可変重（ＶＨ）領域および／または可変軽（ＶＬ）領域を含有するｓｃＦｖである抗原結合性ドメインを含有する。一部の実施形態では、可変重（ＶＨ）領域および／または可変軽（ＶＬ）領域を含有するｓｃＦｖは、ＷＯ２０１６０９０３２０またはＷＯ２０１６０９０３２７に記載の抗体に由来する。一部の実施形態では、可変重（ＶＨ）領域および／または可変軽（ＶＬ）領域を含有するｓｃＦｖは、ＷＯ２０１９／０９０００３に記載の抗体に由来する。一部の実施形態では、可変重（ＶＨ）領域および／または可変軽（ＶＬ）領域を含有するｓｃＦｖは、ＷＯ２０１６０９４３０４またはＷＯ２０２１０９１９７８に記載の抗体に由来する。一部の実施形態では、可変重（ＶＨ）領域および／または可変軽（ＶＬ）領域を含有するｓｃＦｖは、ＷＯ２０１８１３３８７７に記載の抗体に由来する。一部の実施形態では、可変重（ＶＨ）領域および／または可変軽（ＶＬ）領域を含有するｓｃＦｖは、ＷＯ２０１９１４９２６９に記載の抗体に由来する。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、ＷＯ２０１９１７３６３６またはＷＯ２０２００５１３７４Ａに記載されているいずれかである。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、ＷＯ２０１８１０２７５２に記載されているいずれかである。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、ＷＯ２０２０１１２７９６またはＷＯ２０２１１７３６３０に記載されているいずれかである。
【0324】
一部の実施形態では、抗体、例えば、抗ＢＣＭＡ抗体または抗原結合性断片は、記載されている通りの重および／もしくは軽鎖可変（ＶＨまたはＶＬ）領域配列、またはその十分な抗原結合性部分を含有する。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体、例えば、抗原結合性断片は、記載されている通りのＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２および／またはＣＤＲ－Ｈ３を含有する、ＶＨ領域配列またはその十分な抗原結合性部分を含有する。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体、例えば、抗原結合性断片は、記載されている通りのＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２および／またはＣＤＲ－Ｌ３を含有する、ＶＬ領域配列または十分な抗原結合性部分を含有する。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ抗体、例えば、抗原結合性断片は、記載されている通りのＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２および／またはＣＤＲ－Ｈ３を含有するＶＨ領域配列を含有し、記載されている通りのＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２および／またはＣＤＲ－Ｌ３を含有するＶＬ領域配列を含有する。抗体の中でも、そのような配列と少なくともまたは約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％同一な配列を有する抗体も特に挙げられる。
【0325】
一部の実施形態では、抗体は、上に記載されているＶＨ配列（例えば、ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３および／またはＣＤＲ－Ｈ４）のいずれか等のＶＨ領域配列またはその十分な抗原結合性部分のみを含む単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）である。
【0326】
一部の実施形態では、ＶＨ領域を含む本明細書に提供される抗体（例えば、抗ＢＣＭＡ抗体）またはその抗原結合性断片は、軽鎖またはその十分な抗原結合性部分をさらに含む。例えば、一部の実施形態では、抗体またはその抗原結合性断片は、ＶＨ領域およびＶＬ領域、またはＶＨおよびＶＬ領域の十分な抗原結合性部分を含有する。そのような実施形態では、ＶＨ領域配列は、上に記載されているＶＨ配列のいずれかであり得る。一部のそのような実施形態では、抗体は、ＦａｂまたはｓｃＦｖ等の抗原結合性断片である。一部のそのような実施形態では、抗体は、定常領域も含有する全長抗体である。
【0327】
一部の実施形態では、ＣＡＲは、ＢＣＭＡ、例えば、ヒトＢＣＭＡに特異的な抗ＢＣＭＡ ＣＡＲである。マウス抗ヒトＢＣＭＡ抗体およびヒト抗ヒトＢＣＭＡ抗体を含む抗ＢＣＭＡ抗体を含有するキメラ抗原受容体、ならびにそのようなキメラ受容体を発現する細胞は、以前に記載されている。Carpenter et al., Clin Cancer Res., 2013, 19(8):2048-2060、ＵＳ９，７６５，３４２、ＷＯ２０１６／０９０３２０、ＷＯ２０１６０９０３２７、ＷＯ２０１０１０４９４９Ａ２、ＷＯ２０１６／００４６７２４、ＷＯ２０１６／０１４７８９、ＷＯ２０１６／０９４３０４、ＷＯ２０１７／０２５０３８およびＷＯ２０１７１７３２５６を参照されたい。
【0328】
一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、ＷＯ２０１６０９４３０４またはＷＯ２０２１０９１９７８に記載の抗体に由来する可変重（ＶＨ）領域および／または可変軽（ＶＬ）領域を含有するｓｃＦｖ等の抗原結合性ドメインを含有する。一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、可変重鎖（ＶＨ）領域および可変軽鎖（ＶＬ）領域を含有する抗体断片である。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、ＷＯ２０１６／０９０３２０またはＷＯ２０１６０９０３２７に記載の抗体に由来する可変重（ＶＨ）領域および／または可変軽（ＶＬ）領域を含有するｓｃＦｖ等の抗原結合性ドメインを含有する。
【0329】
一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、可変重鎖（ＶＨ）領域および可変軽鎖（ＶＬ）領域を含有する抗体断片である。一部の態様では、ＶＨ領域は、配列番号１８、２０、２２、２４、３２、３４、３６、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、１４５、１４７、１４９および１５１のいずれかに記載されるＶＨ領域アミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％配列同一性を有するアミノ酸配列であるもしくはこれを含む；ならびに／またはＶＬ領域は、配列番号１９、２１、２３、２５、３３、３５、３７、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、１４６、１４８、１５０および１５２のいずれかに記載されるＶＬ領域アミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％配列同一性を有するアミノ酸配列であるもしくはこれを含む。
【0330】
一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号１８に記載されるＶＨおよび配列番号１９に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号２０に記載されるＶＨおよび配列番号２１に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号２２に記載されるＶＨおよび配列番号２３に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号２４に記載されるＶＨおよび配列番号２５に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号３２に記載されるＶＨおよび配列番号３３に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号３４に記載されるＶＨおよび配列番号３５に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号３６に記載されるＶＨおよび配列番号３７に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号４１に記載されるＶＨおよび配列番号４２に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号４３に記載されるＶＨおよび配列番号４４に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号４５に記載されるＶＨおよび配列番号４６に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号４７に記載されるＶＨおよび配列番号４８に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号４９に記載されるＶＨおよび配列番号５０に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号５１に記載されるＶＨおよび配列番号５２に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号５３に記載されるＶＨおよび配列番号５４に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号５５に記載されるＶＨおよび配列番号５６に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号５７に記載されるＶＨおよび配列番号５８に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号５９に記載されるＶＨおよび配列番号６０に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号６１に記載されるＶＨおよび配列番号６２に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号６３に記載されるＶＨおよび配列番号６４に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号６５に記載されるＶＨおよび配列番号６６に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号６７に記載されるＶＨおよび配列番号６８に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号６９に記載されるＶＨおよび配列番号７０に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号７１に記載されるＶＨおよび配列番号７２に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号７３に記載されるＶＨおよび配列番号７４に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号７５に記載されるＶＨおよび配列番号７６に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号１４５に記載されるＶＨおよび配列番号１４６に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号１４７に記載されるＶＨおよび配列番号１４８に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号１４９に記載されるＶＨおよび配列番号１５０に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ｓｃＦｖ等、抗原結合性ドメインは、配列番号１５１に記載されるＶＨおよび配列番号１５２に記載されるＶＬを含有する。一部の実施形態では、ＶＨまたはＶＬは、前述のＶＨまたはＶＬ配列のいずれかに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を有し、ＢＣＭＡへの結合を保持する。一部の実施形態では、ＶＨ領域は、ＶＬ領域に対してアミノ末端である。一部の実施形態では、ＶＨ領域は、ＶＬ領域に対してカルボキシ末端である。一部の実施形態では、可変重鎖および可変軽鎖は、リンカーによって接続される。一部の実施形態では、リンカーは、配列番号２８、２９、３０、または３８に記載される。
【0331】
提供される抗ＢＣＭＡ ＣＡＲの中でも、抗体または抗原結合性断片が、配列番号１８に記載される配列、または配列番号１８に対して少なくとも９０％もしくは約９０％、９１％もしくは約９１％、９２％もしくは約９２％、９３％もしくは約９３％、９４％もしくは約９４％、９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、９７％もしくは約９７％、９８％もしくは約９８％、または９９％もしくは約９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含有し、および配列番号１９に記載される配列、または配列番号１９に対して少なくとも９０％もしくは約９０％、９１％もしくは約９１％、９２％もしくは約９２％、９３％もしくは約９３％、９４％もしくは約９４％、９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、９７％もしくは約９７％、９８％もしくは約９８％、または９９％もしくは約９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含有するＣＡＲが特に挙げられる。一部の実施形態では、提供されるＣＡＲの抗体または抗原結合性断片は、それぞれ配列番号１８９、１９０、および１９１のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、およびＣＤＲＨ３を有するＶＨ領域、ならびにそれぞれ配列番号１９２、１９３、および１９４のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、およびＣＤＲＬ３を有するＶＬ領域を含有する一部の実施形態では、提供されるＣＡＲの抗体または抗原結合性断片は、それぞれ配列番号１９５、１９６、および１９７のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、およびＣＤＲＨ３を有するＶＨ領域、ならびにそれぞれ配列番号１９８、１９９、および２００のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、およびＣＤＲＬ３を有するＶＬ領域を含有する一部の実施形態では、提供されるＣＡＲの抗体または抗原結合性断片は、それぞれ配列番号２０１、２０２、および２０３のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、およびＣＤＲＨ３を有するＶＨ領域、ならびにそれぞれ配列番号２０４、２０５、および２０６のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、およびＣＤＲＬ３を有するＶＬ領域を含有する一部の実施形態では、提供されるＣＡＲの抗体または抗原結合性断片は、それぞれ配列番号２０７、２０８、および２０９のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、およびＣＤＲＨ３を有するＶＨ領域、ならびにそれぞれ配列番号２１０、２１１、および２１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、およびＣＤＲＬ３を有するＶＬ領域を含有する一部の実施形態では、ＶＨ領域は、配列番号１８に記載される配列を含み、ＶＬ領域は、配列番号１９に記載される配列を含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、ｓｃＦｖ等の単鎖抗体断片である。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号２１３に記載されるアミノ酸の配列または配列番号２１３に対して少なくとも９０％もしくは約９０％、９１％もしくは約９１％、９２％もしくは約９２％、９３％もしくは約９３％、９４％もしくは約９４％、９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、９７％もしくは約９７％、９８％もしくは約９８％、または９９％もしくは約９９％の同一性のアミノ酸の配列を含む。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、配列番号１１６に記載されるアミノ酸の配列または配列番号１１６に対して少なくとも９０％もしくは約９０％、９１％もしくは約９１％、９２％もしくは約９２％、９３％もしくは約９３％、９４％もしくは約９４％、９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、９７％もしくは約９７％、９８％もしくは約９８％、または９９％もしくは約９９％の同一性のアミノ酸の配列を含む。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、配列番号２１４に記載されるポリヌクレオチド配列または配列番号２１４に対して少なくとも９０％もしくは約９０％、９１％もしくは約９１％、９２％もしくは約９２％、９３％もしくは約９３％、９４％もしくは約９４％、９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、９７％もしくは約９７％、９８％もしくは約９８％、または９９％もしくは約９９％の同一性のポリヌクレオチド配列によってコードされる。
【0332】
提供される抗ＢＣＭＡ ＣＡＲの中でも、抗体または抗原結合性断片が、配列番号２４に記載される配列、または配列番号２４に対して少なくとも９０％もしくは約９０％、９１％もしくは約９１％、９２％もしくは約９２％、９３％もしくは約９３％、９４％もしくは約９４％、９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、９７％もしくは約９７％、９８％もしくは約９８％、または９９％もしくは約９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含有し、および配列番号２５に記載される配列、または配列番号２５に対して少なくとも９０％もしくは約９０％、９１％もしくは約９１％、９２％もしくは約９２％、９３％もしくは約９３％、９４％もしくは約９４％、９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、９７％もしくは約９７％、９８％もしくは約９８％、または９９％もしくは約９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含有するＣＡＲが特に挙げられる。一部の実施形態では、提供されるＣＡＲの抗体または抗原結合性断片は、それぞれ配列番号１７３、１７４、および１７５のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、およびＣＤＲＨ３を有するＶＨ領域、ならびにそれぞれ配列番号１８３、１８４、および１８５のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、およびＣＤＲＬ３を有するＶＬ領域を含有する。一部の実施形態では、提供されるＣＡＲの抗体または抗原結合性断片は、それぞれ配列番号１７６、１７７、および１７５のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、およびＣＤＲＨ３を有するＶＨ領域、ならびにそれぞれ配列番号１８３、１８４、および１８５のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、およびＣＤＲＬ３を有するＶＬ領域を含有する。一部の実施形態では、提供されるＣＡＲの抗体または抗原結合性断片は、それぞれ配列番号１７８、１７９、および１７５のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、およびＣＤＲＨ３を有するＶＨ領域、ならびにそれぞれ配列番号１８３、１８４、および１８５のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、およびＣＤＲＬ３を有するＶＬ領域を含有する。一部の実施形態では、提供されるＣＡＲの抗体または抗原結合性断片は、それぞれ配列番号１８０、１８１、および１８２のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、およびＣＤＲＨ３を有するＶＨ領域、ならびにそれぞれ配列番号１８６、１８７、および１８５のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、およびＣＤＲＬ３を有するＶＬ領域を含有する。一部の実施形態では、ＶＨ領域は、配列番号２４に記載される配列を含み、ＶＬ領域は、配列番号２５に記載される配列を含む。一部の実施形態では、抗体または抗原結合性断片は、ｓｃＦｖ等の単鎖抗体断片である。一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号１８８に記載されるアミノ酸の配列または配列番号１８８に対して少なくとも９０％もしくは約９０％、９１％もしくは約９１％、９２％もしくは約９２％、９３％もしくは約９３％、９４％もしくは約９４％、９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、９７％もしくは約９７％、９８％もしくは約９８％、または９９％もしくは約９９％の同一性のアミノ酸の配列を含む。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、配列番号１２４に記載されるアミノ酸の配列または配列番号１２４に対して少なくとも９０％もしくは約９０％、９１％もしくは約９１％、９２％もしくは約９２％、９３％もしくは約９３％、９４％もしくは約９４％、９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、９７％もしくは約９７％、９８％もしくは約９８％、または９９％もしくは約９９％の同一性のアミノ酸の配列を含む。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、配列番号１２５に記載されるアミノ酸の配列または配列番号１２５に対して少なくとも９０％もしくは約９０％、９１％もしくは約９１％、９２％もしくは約９２％、９３％もしくは約９３％、９４％もしくは約９４％、９５％もしくは約９５％、９６％もしくは約９６％、９７％もしくは約９７％、９８％もしくは約９８％、または９９％もしくは約９９％の同一性のアミノ酸の配列を含む。
【0333】
一部の実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号２１６～２４７のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列または配列番号２１６～２４７のいずれか１つに記載される配列に対して少なくとも９０、９５、９６、９７、９８、９９または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【0334】
一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、ｓｄＡｂを含む。一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、配列番号７７に記載される配列を含有する。一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、配列番号７７に記載される配列に対して少なくともまたは約５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９または１００％同一な配列を含む。
【0335】
一部の実施形態では、ＣＡＲは、配列番号９０～１４１のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列、または配列番号１９０～１４１のいずれか１つに記載される配列に対して少なくとも、９５、９６、９７、９８、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【0336】
一部の実施形態では、提供されるＣＡＲにおけるそのような抗体または抗原結合性ドメインの中でも、多数の公知の方法のいずれかによって測定されるように、ヒトＢＣＭＡタンパク質等のＢＣＭＡタンパク質と少なくともある特定の親和性で結合することができる抗体が特に挙げられる。一部の実施形態では、親和性は平衡解離定数（ＫＤ）で表され；一部の実施形態では、親和性はＥＣ５０で表される。
【0337】
結合親和性を評価する、および／または結合分子（例えば、抗体またはその断片）が特定のリガンド（例えば、ＢＣＭＡタンパク質等の抗原）に特異的に結合するかどうかを決定するための様々なアッセイが知られている。抗原、例えばＢＣＭＡに対する結合分子、例えば抗体の結合親和性を決定することは、当業者のレベルの範囲内である。例えば、一部の実施形態では、ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）機器を使用して、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）解析（例えば、Scatchard et al., Ann. N.Y. Acad. Sci. 51:660, 1949；Wilson, Science 295:2103, 2002；Wolff et al., Cancer Res. 53:2560, 1993；および米国特許第５，２８３，１７３号、同第５，４６８，６１４号、またはこれらに相当するものを参照のこと）を使用して、２つのタンパク質（例えば、抗体またはその断片、および抗原、例えば、ＢＣＭＡ細胞表面タンパク質、可溶性ＢＣＭＡタンパク質）間の複合体の結合動態および定数を決定することができる。
【0338】
ＳＰＲは、分子がセンサー表面に結合するか、または表面から解離する際の、センサー表面における分子濃度の変化を測定する。ＳＰＲシグナルの変化は、表面近傍の質量濃度変化に正比例するため、２分子間の結合動態の測定を可能にする。複合体の解離定数は、緩衝液がチップ上を通過する際の時間に対する屈折率の変化をモニターすることによって決定することができる。あるタンパク質と別のタンパク質との結合を測定するための他の適切なアッセイには、例えば、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）および放射免疫アッセイ（ＲＩＡ）等の免疫アッセイ、または蛍光、ＵＶ吸収、円二色性、または核磁気共鳴（ＮＭＲ）を通してタンパク質の分光学的または光学的特性の変化をモニターすることによる結合の決定が含まれる。他の例示的なアッセイには、ウェスタンブロット、ＥＬＩＳＡ、解析的超遠心分離、分光法、フローサイトメトリー、配列決定、および発現ポリヌクレオチドの検出またはタンパク質の結合のための他の方法が含まれるが、これらに限定されない。
【0339】
一部の実施形態では、結合分子、例えば、ＣＡＲの抗体もしくはその断片または抗原結合性ドメインは、１０５Ｍ－１以上である親和性またはＫＡ（即ち、１／Ｍの単位を有する特定の結合相互作用の平衡解離定数；二分子相互作用を仮定した場合、この会合反応の結合速度［ｋｏｎまたはｋａ］対解離速度［ｋｏｆｆまたはｋｄ］の比に等しい）で、抗原、例えば、細胞表面ＢＣＭＡタンパク質もしくは可溶性ＢＣＭＡタンパク質またはその中のエピトープと結合、例えば特異的に結合する。一部の実施形態では、ＣＡＲの抗体もしくはその断片または抗原結合性ドメインは、１０－５Ｍ以下のＫＤ（即ち、Ｍの単位を有する特定の結合相互作用の平衡解離定数；二分子相互作用を仮定した場合、この会合反応の解離速度［ｋｏｆｆまたはｋｄ］対結合速度［ｋｏｎまたはｋａ］の比に等しい）でのペプチドエピトープに対する結合親和性を示す。例えば、平衡解離定数ＫＤは、１０－５Ｍ～１０－１３Ｍ、例えば１０－７Ｍ～１０－１１Ｍ、１０－８Ｍから１０－１０Ｍ、または１０－９Ｍから１０－１０Ｍの範囲である。結合速度（会合速度定数；ｋｏｎ、またはｋａ；単位は１／Ｍｓ）および解離速度（解離速度定数；ｋｏｆｆ、またはｋｄ；単位は１／ｓ）は、当該技術分野で公知のアッセイ法のいずれか、例えば表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を使用して決定することができる。
【0340】
一部の実施形態では、ヒトＢＣＭＡタンパク質等のＢＣＭＡタンパク質に対するＣＡＲの抗体（例えば抗原結合性断片）または抗原結合性ドメインの結合親和性（ＥＣ５０）および／または解離定数は、０．０１ｎＭもしくはその概数～約５００ｎＭ、０．０１ｎＭもしくはその概数～約４００ｎＭ、０．０１ｎＭもしくはその概数～約１００ｎＭ、０．０１ｎＭもしくはその概数～約５０ｎＭ、０．０１ｎＭもしくはその概数～約１０ｎＭ、０．０１ｎＭもしくはその概数～約１ｎＭ、０．０１ｎＭもしくはその概数～約０．１ｎＭであり、０．１ｎＭもしくはその概数～約５００ｎＭ、０．１ｎＭもしくはその概数～約４００ｎＭ、０．１ｎＭもしくはその概数～約１００ｎＭ、０．１ｎＭもしくはその概数～約５０ｎＭ、０．１ｎＭもしくはその概数～約１０ｎＭ、０．１ｎＭもしくはその概数～約１ｎＭ、０．５ｎＭもしくはその概数～約２００ｎＭ、１ｎＭもしくはその概数～約５００ｎＭ、１ｎＭもしくはその概数～約１００ｎＭ、１ｎＭもしくはその概数～約５０ｎＭ、１ｎＭもしくはその概数～約１０ｎＭ、２ｎＭもしくはその概数～約５０ｎＭ、１０ｎＭもしくはその概数～約５００ｎＭ、１０ｎＭもしくはその概数～約１００ｎＭ、１０ｎＭもしくはその概数～約５０ｎＭ、５０ｎＭもしくはその概数～約５００ｎＭ、５０ｎＭもしくはその概数～約１００ｎＭまたは１００ｎＭもしくはその概数～約５００ｎＭである。ある特定の実施形態では、ヒトＢＣＭＡタンパク質等のＢＣＭＡタンパク質に対する抗体の結合親和性（ＥＣ５０）および／または平衡解離定数ＫＤは、４００ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、３００ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、２００ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、１００ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、５０ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、４０ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、３０ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、２５ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、２０ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、１９ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、１８ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、１７ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、１６ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、１５ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、１４ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、１３ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、１２ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、１１ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、１０ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、９ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、８ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、７ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、６ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、５ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、４ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、３ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、２ｎＭもしくはそれ未満もしくはその概数、または１ｎＭ以下である。一部の実施形態では、抗体は、ナノモル以下の結合親和性、例えば約１ｎＭ未満、例えば約０．９ｎＭ未満、約０．８ｎＭ未満、約０．７ｎＭ未満、約０．６ｎＭ未満、約０．５ｎＭ未満、約０．４ｎＭ未満、約０．３ｎＭ未満、約０．２ｎＭ未満または約０．１ｎＭ以下の結合親和性で、ヒトＢＣＭＡタンパク質等のＢＣＭＡタンパク質に結合する。
【0341】
一部の実施形態では、結合親和性は、高親和性または低親和性に分類され得る。一部の事例では、低～中程度の親和性結合を示すＣＡＲの結合分子（例えば、抗体またはその断片）または抗原結合性ドメインは、最大１０７Ｍ－１、最大１０６Ｍ－１、最大１０５Ｍ－１のＫＡを示す。一部の事例では、特定のエピトープに対して高親和性結合を示す結合分子（例えば、抗体またはその断片）は、そのようなエピトープと少なくとも１０７Ｍ－１、少なくとも１０８Ｍ－１、少なくとも１０９Ｍ－１、少なくとも１０１０Ｍ－１、少なくとも１０１１Ｍ－１、少なくとも１０１２Ｍ－１、または少なくとも１０１３Ｍ－１のＫＡで相互作用する。一部の実施形態では、結合分子、例えばＣＡＲの抗ＢＣＭＡ抗体もしくはその断片もしくは抗原結合性ドメインのＢＣＭＡタンパク質に対する結合親和性（ＥＣ５０）および／または平衡解離定数ＫＤは、０．０１ｎＭもしくはその概数～約１μＭ、０．１ｎＭ～１μＭ、１ｎＭ～１μＭ、１ｎＭ～５００ｎＭ、１ｎＭ～１００ｎＭ、１ｎＭ～５０ｎＭ、１ｎＭ～１０ｎＭ、１０ｎＭ～５００ｎＭ、１０ｎＭ～１００ｎＭ、１０ｎＭ～５０ｎＭ、５０ｎＭ～５００ｎＭ、５０ｎＭ～１００ｎＭまたは１００ｎＭ～５００ｎＭである。ある特定の実施形態では、結合分子、例えばＣＡＲの抗ＢＣＭＡ抗体またはその断片または抗原結合性ドメインのＢＣＭＡタンパク質に対する結合親和性（ＥＣ５０）および／または平衡解離定数の解離定数ＫＤは、１μＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、５００ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、１００ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、５０ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、４０ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、３０ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、２５ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、２０ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、１９ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、１８ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、１７ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、１６ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、１５ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、１４ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、１３ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、１２ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、１１ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、１０ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、９ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、８ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、７ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、６ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、５ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、４ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、３ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、２ｎＭもしくはその概数もしくはそれ未満もしくはその概数未満、または１ｎＭ以下である。特定の抗体の親和性の程度は、参照抗体（例えば、抗ＢＣＭＡ参照抗体）等の公知の抗体の親和性と比較することができる。
【0342】
一部の実施形態では、特定の形態またはトポロジー型に対する優先的結合または相対的親和性を決定するために、異なる形態またはトポロジー型の抗原、例えば、膜結合ＢＣＭＡに対する結合親和性と比較した可溶性または脱落性ＢＣＭＡタンパク質に対するＣＡＲの抗ＢＣＭＡ抗体または抗原結合性ドメインの結合親和性。例えば、一部の態様では、ＣＡＲの抗ＢＣＭＡ抗体または抗原結合性ドメインは、可溶性または脱落性ＢＣＭＡと比較して、膜結合ＢＣＭＡに対する優先的結合を示すことができ、および／または可溶性または脱落性ＢＣＭＡと比較して、膜結合ＢＣＭＡに対するより大きな結合親和性を示すことができる。一部の実施形態では、異なる形態またはトポロジー型のＢＣＭＡタンパク質に対する平衡解離定数ＫＤは、優先的結合または相対的結合の親和性を決定するために比較され得る。一部の実施形態では、可溶性または脱落性のＢＣＭＡと比較して、膜結合ＢＣＭＡへの優先的結合または相対的親和性は、高くなり得る。例えば、一部の事例では、可溶性または脱落性のＢＣＭＡに対するＫＤと膜結合ＢＣＭＡに対するＫＤの比は、１０を超えるか、１５を超えるか、２０を超えるか、２５を超えるか、３０を超えるか、４０を超えるか、５０を超えるか、６０を超えるか、７０を超えるか、８０を超えるか、９０を超えるか、１００を超えるか、２００を超えるか、５００を超えるか、１０００を超えるか、２０００以上であり、抗体または抗原結合性ドメインは、膜結合ＢＣＭＡに対して優先的に結合するか、またはより高い結合親和性を有する。一部の事例では、膜結合ＢＣＭＡに対するＫＡと可溶性または脱落性のＢＣＭＡに対するＫＡの比は、１０を超えるか、１５を超えるか、２０を超えるか、２５を超えるか、３０を超えるか、４０を超えるか、５０を超えるか、６０を超えるか、７０を超えるか、８０を超えるか、９０を超えるか、１００を超えるか、２００を超えるか、５００を超えるか、１０００を超えるか、２０００以上であり、抗体または抗原結合性ドメインは、膜結合ＢＣＭＡに対して優先的に結合するか、またはより高い結合親和性を有する。一部の事例では、ＣＡＲの抗体または抗原結合性ドメインは、可溶性または脱落性のＢＣＭＡと膜結合ＢＣＭＡとに同程度に結合し、例えば、可溶性ＢＣＭＡに対するＫＤと膜結合ＢＣＭＡに対するＫＤとの比は１であるか、または約１である。一部の事例では、ＣＡＲの抗体または抗原結合性ドメインは、可溶性または脱落性のＢＣＭＡと膜結合ＢＣＭＡとに同程度に結合し、例えば、可溶性ＢＣＭＡに対するＫＡと膜結合ＢＣＭＡに対するＫＡとの比は１であるか、または約１である。膜結合ＢＣＭＡまたは可溶性もしくは脱落性のＢＣＭＡに対する優先的結合または相対的親和性の程度は、参照抗体（例えば、参照抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ）等の既知の抗体のものと比較することができる。一部の実施形態では、参照抗体（例えば、参照抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ）は、膜結合型および可溶性または脱落性のＢＣＭＡタンパク質に結合する。
【0343】
一部の態様では、キメラ抗原受容体は、抗体または断片を含有する細胞外部分、および細胞内シグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達領域は、細胞内シグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、一次シグナル伝達ドメイン、Ｔ細胞において一次活性化シグナルを誘導することができるシグナル伝達ドメイン、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）成分のシグナル伝達ドメイン、および／または免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含むシグナル伝達ドメインであるか、またはそれを含む。
【0344】
一部の実施形態では、組換え受容体、例えば、ＣＡＲの抗体部分は、ヒンジ領域、例えば、ＩｇＧ４ヒンジ領域、ＩｇＧ１ヒンジ領域、ＣＨ１／ＣＬおよび／またはＦｃ領域等、免疫グロブリン定常領域またはその変異体もしくは修飾バージョンの少なくとも部分であり得るかまたはそれを含むことができる、スペーサーをさらに含む。一部の実施形態では、組換え受容体は、スペーサーおよび／またはヒンジ領域をさらに含む。一部の実施形態では、定常領域または部分は、ヒトＩｇＧ、例えば、ＩｇＧ４またはＩｇＧ１の定常領域または部分である。一部の態様では、定常領域の部分は、抗原認識構成成分、例えば、ｓｃＦｖおよび膜貫通ドメインの間のスペーサー領域として機能する。
【0345】
一部の態様では、キメラ抗原受容体は、抗体または断片を含有する細胞外部分、および細胞内シグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達領域は、細胞内シグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、一次シグナル伝達ドメイン、Ｔ細胞において一次活性化シグナルを誘導することができるシグナル伝達ドメイン、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）成分のシグナル伝達ドメイン、および／または免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含むシグナル伝達ドメインであるか、またはそれを含む。
【0346】
一部の実施形態では、組換え受容体、例えば、ＣＡＲの抗体部分は、ヒンジ領域、例えば、ＩｇＧ４ヒンジ領域、ＩｇＧ１ヒンジ領域、ＣＨ１／ＣＬおよび／またはＦｃ領域等、免疫グロブリン定常領域またはその変異体もしくは修飾バージョンの少なくとも部分であり得るかまたはそれを含むことができる、スペーサーをさらに含む。一部の実施形態では、組換え受容体は、スペーサーおよび／またはヒンジ領域をさらに含む。一部の実施形態では、定常領域または部分は、ヒトＩｇＧ、例えば、ＩｇＧ４またはＩｇＧ１の定常領域または部分である。一部の態様では、定常領域の部分は、抗原認識構成成分、例えば、ｓｃＦｖおよび膜貫通ドメインの間のスペーサー領域として機能する。
【0347】
スペーサーは、スペーサーの非存在下と比較して、抗原結合後の細胞の応答性増加をもたらす長さのものであり得る。例示的なスペーサー、例えば、ヒンジ領域は、国際特許出願公開番号ＷＯ２０１４０３１６８７に記載されているものを含む。一部の例では、スペーサーは、１２アミノ酸の長さであるまたは約１２アミノ酸の長さであるまたは１２以下のアミノ酸の長さである。例示的なスペーサーは、少なくとも約１０～２２９アミノ酸、約１０～２００アミノ酸、約１０～１７５アミノ酸、約１０～１５０アミノ酸、約１０～１２５アミノ酸、約１０～１００アミノ酸、約１０～７５アミノ酸、約１０～５０アミノ酸、約１０～４０アミノ酸、約１０～３０アミノ酸、約１０～２０アミノ酸または約１０～１５アミノ酸を有し、収載されている範囲のいずれかの終点の間のいずれかの整数を含むスペーサーを含む。一部の実施形態では、スペーサー領域は、約１２アミノ酸以下、約１１９アミノ酸以下または約２２９アミノ酸以下を有する。一部の実施形態では、スペーサーは、少なくとも１１０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０または２５０アミノ酸の長さ等、少なくとも１００アミノ酸である長さを有する等、少なくとも特定の長さを有するスペーサーである。例示的なスペーサーは、ＩｇＧ４ヒンジ単独、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインに連結されたＩｇＧ４ヒンジ、またはＣＨ３ドメインに連結されたＩｇＧ４ヒンジを含む。例示的なスペーサーは、ＩｇＧ４ヒンジ単独、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインに連結されたＩｇＧ４ヒンジ、またはＣＨ３ドメインに連結されたＩｇＧ４ヒンジを含む。例示的なスペーサーは、ＩｇＧ４ヒンジ単独、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインに連結されたＩｇＧ４ヒンジ、またはＣＨ３ドメインに連結されたＩｇＧ４ヒンジを含む。例示的なスペーサーは、Hudecek et al., Clin. Cancer Res., 19:3153 (2013)、Hudecek et al. (2015) Cancer Immunol Res. 3(2): 125-135、国際特許出願公開番号ＷＯ２０１４０３１６８７、米国特許第８，８２２，６４７号または公開出願番号ＵＳ２０１４／０２７１６３５に記載されているものを含むがこれらに限定されない。一部の実施形態では、スペーサーは、免疫グロブリンヒンジ領域、ＣＨ２およびＣＨ３領域の配列を含む。一部の実施形態では、ヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３のうち１種または複数（ｏｎｅ ｏｆ ｍｏｒｅ）は、全てまたは部分的に、ＩｇＧ４またはＩｇＧ２に由来する。一部の事例では、ヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３は、ＩｇＧ４に由来する。一部の態様では、ヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３のうち１種または複数は、キメラであり、ＩｇＧ４およびＩｇＧ２に由来する配列を含有する。一部の例では、スペーサーは、ＩｇＧ４／２キメラヒンジ、ＩｇＧ２／４ ＣＨ２およびＩｇＧ４ ＣＨ３領域を含有する。
【0348】
一部の実施形態では、スペーサーは、ＩｇＧ４および／またはＩｇＧ２に全てまたは部分的に由来し得、１個または複数のドメインに１個または複数の単一アミノ酸突然変異等の突然変異を含有することができる。一部の例では、アミノ酸改変は、ＩｇＧ４のヒンジ領域におけるセリン（Ｓ）に代わるプロリン（Ｐ）への置換である。一部の実施形態では、アミノ酸修飾は、全長ＩｇＧ４ Ｆｃ配列のＣＨ２領域における１７７位におけるＮ１７７Ｑ突然変異または全長ＩｇＧ４ Ｆｃ配列のＣＨ２領域における１７６位におけるＮ１７６Ｑ等、グリコシル化不均一性を低減させるための、アスパラギン（Ｎ）に代えたグルタミン（Ｑ）の置換である。
【0349】
一部の実施形態では、スペーサーは、配列ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰ（配列番号１に記載される）を有し、配列番号２に記載される配列によってコードされる。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号３に記載される配列を有する。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号４に記載される配列を有する。一部の実施形態では、コードされたスペーサーは、配列番号３１に記載される配列であるかまたはそれを含有する。一部の実施形態では、定常領域または部分は、ＩｇＤの定常領域または部分である。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号５に記載される配列を有する。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号８９に記載される配列を有する。
【0350】
他の例示的なスペーサー領域は、ＣＤ８ａ、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ４、ＰＤ－１またはＦｃγＲＩＩＩａに由来するヒンジ領域を含む。一部の実施形態では、スペーサーは、ＣＤ８ａ、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ４、ＰＤ－１またはＦｃγＲＩＩＩａの切断された細胞外ドメインまたはヒンジ領域を含有する。一部の実施形態では、スペーサーは、切断型ＣＤ２８ヒンジ領域である。一部の実施形態では、短いオリゴまたはポリペプチドリンカー、例えば、２～１０アミノ酸の間の長さのリンカー、例えば、アラニンまたはアラニンおよびアルギニン、例えば、アラニントリプレット（ＡＡＡ）またはＲＡＡＡ（配列番号１４４）を含有するリンカーが存在し、ＣＡＲのｓｃＦｖおよびスペーサー領域の間に連結を形成する。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号７８に記載される配列を有する。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号８０に記載される配列を有する。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号８１～８３のいずれかに記載される配列を有する。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号８４に記載される配列を有する。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号８６に記載される配列を有する。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号８８に記載される配列を有する。
【0351】
一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号１、３、４、５、３１、７８、８０、８１、８２、８３、８４、８６、８８、または８９のいずれかに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を有する。
【0352】
一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号１５７～１６５に記載される配列を有する。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号１５７～１６５のいずれかに対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を有する。
【0353】
この抗原認識ドメインは一般に、ＣＡＲの場合は、ＴＣＲ複合体等の抗原受容体複合体を介した刺激および／もしくは活性化、ならびに／または別の細胞表面受容体経由のシグナルを模倣するシグナル伝達構成成分等の１個または複数の細胞内シグナル伝達構成成分に連結される。よって、一部の実施形態では、抗原結合性構成成分（例えば、抗体）は、１個または複数の膜貫通および細胞内シグナル伝達ドメインに連結される。一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、細胞外ドメインおよび細胞内シグナル伝達ドメインを連結する膜貫通ドメインを含む。一部の態様では、膜貫通ドメインは、細胞外ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）と細胞内シグナル伝達ドメインの間に連結または融合される等、細胞外ドメインに融合されている。一実施形態では、受容体、例えば、ＣＡＲにおけるドメインの１種と天然で会合する膜貫通ドメインが使用される。一部の実例では、膜貫通ドメインは、受容体複合体の他のメンバーとの相互作用を最小化するために、同じまたは異なる表面膜タンパク質の膜貫通ドメインへのそのようなドメインの結合を回避するように選択されるか、またはそうなるようにアミノ酸置換によって修飾される。
【0354】
膜貫通ドメインは、一部の実施形態では、天然または合成供給源のいずれかに由来する。供給源が天然である場合、ドメインは、一部の態様では、いずれかの膜結合または膜貫通タンパク質に由来する。膜貫通領域は、Ｔ細胞受容体、ＣＤ２８、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ８ａ、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７（４－１ＢＢ）、ＣＤ１５４、ＣＴＬＡ－４またはＰＤ－１のアルファ、ベータまたはゼータ鎖に由来する膜貫通領域を含む（即ち、その少なくとも膜貫通領域（複数可）を含む）。あるいは、膜貫通ドメインは、一部の実施形態では、合成である。一部の態様では、合成膜貫通ドメインは、ロイシンおよびバリン等の疎水性残基を優勢に含む。一部の態様では、フェニルアラニン、トリプトファンおよびバリンのトリプレットは、合成膜貫通ドメインの各末端に見い出されるであろう。一部の実施形態では、連結は、リンカー、スペーサーおよび／または膜貫通ドメイン（複数可）による。一部の態様では、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８の膜貫通ドメインを含有する。膜貫通ドメインの例示的な配列は、配列番号８、７９、８５、８７、１４２、または１４３に記載される配列であるかまたはそれを含む。細胞内シグナル伝達ドメインの中でも、天然の抗原受容体を介したシグナル、共刺激受容体と組み合わせたそのような受容体を介したシグナルおよび／または共刺激受容体単独を介したシグナルを模倣するまたはそれに近似する細胞内シグナル伝達ドメインが特に挙げられる。一部の実施形態では、短いオリゴまたはポリペプチドリンカー、例えば、２～１０の間のアミノ酸の長さのリンカー、例えば、グリシンおよびセリン、例えば、グリシン－セリンダブレットを含有するリンカーが存在し、ＣＡＲの膜貫通ドメインおよび細胞質シグナル伝達ドメインの間に連結を形成する。
【0355】
受容体、例えば、ＣＡＲは一般に、少なくとも１個の細胞内シグナル伝達構成成分（単数または複数）を含む。一部の態様では、ＣＡＲは、ＴＣＲ複合体の一次活性化を調節する一次細胞質シグナル伝達配列を含む。刺激様式で作用する一次細胞質シグナル伝達配列は、免疫受容体活性化チロシンモチーフまたはＩＴＡＭとして知られているシグナル伝達モチーフを含有することができる。一次細胞質シグナル伝達配列を含有するＩＴＡＭの例は、Ｔ細胞刺激および／または活性化および細胞傷害性を媒介するＴＣＲ ＣＤ３鎖、例えば、ＣＤ３ゼータ鎖、ＣＤ３ガンマ、ＣＤ３デルタ、ＣＤ３イプシロン、ＦｃＲガンマ、ＦｃＲベータ、ＣＤＳ、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂおよびＣＤ６６ｄに由来するＩＴＡＭを含む。一次細胞質シグナル伝達配列を含有するＩＴＡＭの一部の例は、ＣＤ３ゼータ鎖、ＦｃＲガンマ、ＣＤ３ガンマ、ＣＤ３デルタおよびＣＤ３イプシロンに由来するものを含む。一部の実施形態では、ＣＡＲにおける細胞質シグナル伝達分子は、細胞質シグナル伝達ドメイン、その部分、またはＣＤ３ゼータに由来する配列を含有する。
【0356】
一部の実施形態では、受容体は、Ｔ細胞刺激および／または活性化ならびに細胞傷害性を媒介するＴＣＲ ＣＤ３鎖、例えば、ＣＤ３ゼータ鎖等、ＴＣＲ複合体の細胞内構成成分を含む。よって、一部の態様では、抗原結合性部分は、１個または複数の細胞シグナル伝達モジュールに連結される。一部の実施形態では、細胞シグナル伝達モジュールは、ＣＤ３膜貫通ドメイン、ＣＤ３細胞内シグナル伝達ドメインおよび／または他のＣＤ膜貫通ドメインを含む。一部の実施形態では、受容体、例えば、ＣＡＲは、Ｆｃ受容体γ、ＣＤ８、ＣＤ４、ＣＤ２５またはＣＤ１６等の１種または複数の追加の分子の部分をさらに含む。例えば、一部の態様では、ＣＡＲまたは他のキメラ受容体は、ＣＤ３－ゼータ（ＣＤ３－ζ）またはＦｃ受容体γと、ＣＤ８、ＣＤ４、ＣＤ２５またはＣＤ１６との間のキメラ分子を含む。
【0357】
一部の実施形態では、ＣＡＲまたは他のキメラ受容体のライゲーションの際に、受容体の細胞質ドメインまたは細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＡＲを発現するように操作された免疫細胞、例えば、Ｔ細胞の正常なエフェクター機能または応答の少なくとも１種を刺激および／または活性化する。例えば、一部の状況では、ＣＡＲは、サイトカインまたは他の因子の分泌等、細胞溶解活性またはＴ－ヘルパー活性等、Ｔ細胞の機能を誘導する。一部の実施形態では、例えば、エフェクター機能シグナルを伝達するのであれば、抗原受容体構成成分または共刺激分子の細胞内シグナル伝達ドメインの切断された部分が、無傷免疫刺激鎖の代わりに使用される。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメイン（単数または複数）は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）の細胞質配列、一部の態様では、また、天然の状況において、そのような受容体と協調して作用して、抗原受容体係合後にシグナル伝達を開始する共受容体の細胞質配列、および／またはそのような分子のいずれかの誘導体もしくは変異体、および／または同じ機能的能力を有するいずれかの合成配列を含む。
【0358】
天然のＴＣＲの状況において、完全活性化は一般に、ＴＣＲを介したシグナル伝達のみならず、共刺激シグナルも要求する。よって、一部の実施形態では、完全活性化を促進するために、二次または共刺激シグナルを生成するための構成成分もまた、ＣＡＲに含まれる。他の実施形態では、ＣＡＲは、共刺激シグナルを生成するための構成成分を含まない。一部の態様では、追加のＣＡＲが同じ細胞において発現され、二次または共刺激シグナルを生成するための構成成分を提供する。
【0359】
Ｔ細胞刺激および／または活性化は、一部の態様では、２つのクラスの細胞質シグナル伝達配列によって媒介されるものとして記載されている：ＴＣＲを介して抗原依存性一次刺激および／または活性化を開始するクラス（一次細胞質シグナル伝達領域、ドメインまたは配列）、ならびに抗原非依存性様式で作用して、二次または共刺激シグナルを提供するクラス（二次細胞質シグナル伝達領域、ドメインまたは配列）。一部の態様では、ＣＡＲは、そのようなシグナル伝達構成成分の一方または両方を含む。
【0360】
一部の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、ＣＤ２７、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＩＣＯＳおよび／または他の共刺激受容体等の共刺激受容体のシグナル伝達領域および／または膜貫通部分を含む。一部の態様では、同じＣＡＲが、一次細胞質シグナル伝達領域および共刺激シグナル伝達構成成分の両方を含む。一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、膜貫通ドメインおよび細胞内シグナル伝達ドメインの間等に、Ｔ細胞共刺激分子またはその機能性変異体に由来する細胞内ドメインを含有する。一部の態様では、Ｔ細胞共刺激分子は、ＣＤ２８または４－１ＢＢである。
【0361】
一部の実施形態では、１種または複数の異なる組換え受容体は、１種または複数の異なる細胞内シグナル伝達領域（複数可）またはドメイン（複数可）を含有することができる。一部の実施形態では、一次細胞質シグナル伝達領域は、ある１つのＣＡＲ内に含まれ、一方、共刺激構成成分は、別の抗原を認識する別の受容体、例えば、別のＣＡＲによって提供される。一部の実施形態では、ＣＡＲは、活性化または刺激ＣＡＲと、共刺激ＣＡＲとを含み、両者は同じ細胞の表面に発現される（ＷＯ２０１４／０５５６６８を参照）。
【0362】
一部の態様では、細胞は、１種または複数の刺激もしくは活性化ＣＡＲおよび／または共刺激ＣＡＲを含む。一部の実施形態では、細胞は、阻害ＣＡＲ（ｉＣＡＲ、Fedorov et al., Sci. Transl. Medicine, 5(215) (2013)を参照）、例えば、疾患または状態に関連するおよび／またはそれに特異的である抗原以外の抗原を認識するＣＡＲをさらに含み、それによって、疾患標的化ＣＡＲを介して送達される活性化シグナルは、そのリガンドへの阻害ＣＡＲの結合によって減少または阻害され、例えば、オフターゲット効果を低減させる。
【0363】
一部の実施形態では、２つの受容体はそれぞれ、活性化および阻害性シグナルを細胞に誘導し、受容体の一方をその抗原にライゲーションすると細胞が活性化されるか、または応答が誘導されるが、第２の阻害性受容体をその抗原にライゲーションすると、その応答を抑制または減衰させるシグナルが誘導される。活性化ＣＡＲと阻害性ＣＡＲ（ｉＣＡＲ）の組合せが例である。そのような戦略は、例えば、活性化ＣＡＲが疾患または状態において発現し、正常細胞にも発現している抗原に結合し、阻害性受容体が正常細胞には発現しているが疾患または状態の細胞には発現していない別々の抗原に結合するような状況で、オフターゲット効果の可能性を低減するために使用することができる。
【0364】
一部の態様では、キメラ受容体は阻害性ＣＡＲ（例えば、ｉＣＡＲ）であるか、またはそれを含み、細胞内のＩＴＡＭおよび／または共刺激因子によって促進される応答等の免疫応答を減衰または抑制する細胞内成分を含む。そのような細胞内シグナル伝達成分の例としては、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ４、ＬＡＧ３、ＢＴＬＡ、ＯＸ２Ｒ、ＴＩＭ－３、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ－１、ＰＧＥ２受容体、Ａ２ＡＲを含むＥＰ２／４アデノシン受容体を含む免疫チェックポイント分子に見られるものがある。一部の態様では、操作された細胞は、例えば、活性化および／または共刺激ＣＡＲによって誘導される細胞の応答を減衰させる役割を果たすような、そのような阻害分子のシグナル伝達ドメインを含むか、そのような阻害分子由来の阻害性ＣＡＲを含む。
【0365】
ある特定の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３（例えば、ＣＤ３－ゼータ）細胞内ドメインに連結されたＣＤ２８膜貫通およびシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ゼータ細胞内ドメインに連結されたキメラＣＤ２８およびＣＤ１３７（４－１ＢＢ、ＴＮＦＲＳＦ９）共刺激ドメインを含む。
【0366】
一部の実施形態では、ＣＡＲは、細胞質部分において１個または複数、例えば、２個以上の共刺激ドメインおよび一次細胞質シグナル伝達領域を包含する。例示的なＣＡＲは、ＣＤ３－ゼータ、ＣＤ２８、ＣＤ１３７（４－１ＢＢ）、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、ＣＤ２７、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＮＫＧ２Ｄおよび／またはＩＣＯＳの細胞内シグナル伝達領域（複数可）またはドメイン（複数可）等の細胞内構成成分を含む。一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ１３７（４－１ＢＢ）、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、ＣＤ２７、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＮＫＧ２Ｄおよび／またはＩＣＯＳに由来するＴ細胞共刺激分子の細胞内シグナル伝達領域またはドメインを、一部の事例では、膜貫通ドメインおよび細胞内シグナル伝達領域またはドメインの間に含有する。一部の態様では、Ｔ細胞共刺激分子は、ＣＤ２８、ＣＤ１３７（４－１ＢＢ）、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、ＣＤ２７、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＮＫＧ２Ｄおよび／またはＩＣＯＳのうち１種または複数である。
【0367】
一部の事例では、ＣＡＲは、第一、第二および／または第三世代ＣＡＲと称される。一部の態様では、第一世代ＣＡＲは、抗原結合時にＣＤ３鎖誘導性シグナルを単に提供するＣＡＲである；一部の態様では、第二世代ＣＡＲは、そのようなシグナルおよび共刺激シグナルを提供するＣＡＲ、例えば、ＣＤ２８またはＣＤ１３７等の共刺激受容体由来の細胞内シグナル伝達ドメインを含むＣＡＲである；一部の態様では、第三世代ＣＡＲは、異なる共刺激受容体の複数の共刺激ドメインを含むＣＡＲである。
【0368】
一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、抗体または抗体断片を含有する細胞外部分を含む。一部の態様では、キメラ抗原受容体は、抗体または断片を含有する細胞外部分、および細胞内シグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、抗体または断片は、ｓｃＦｖを含み、細胞内ドメインは、ＩＴＡＭを含有する。一部の態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３－ゼータ（ＣＤ３ζ）鎖のゼータ鎖のシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、細胞外ドメインおよび細胞内シグナル伝達ドメインを連結する膜貫通ドメインを含む。一部の態様では、膜貫通ドメインは、ＣＤ２８の膜貫通部分を含有する。一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、Ｔ細胞共刺激分子の細胞内ドメインを含有する。細胞外ドメインおよび膜貫通ドメインは、直接的にまたは間接的に連結され得る。一部の実施形態では、細胞外ドメインおよび膜貫通は、本明細書に記載されているいずれか等のスペーサーによって連結される。一部の実施形態では、受容体は、ＣＤ２８細胞外部分等、膜貫通ドメインが由来する分子の細胞外部分を含有する。一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、膜貫通ドメインおよび細胞内シグナル伝達ドメインの間等に、Ｔ細胞共刺激分子またはその機能性変異体に由来する細胞内ドメインを含有する。一部の態様では、Ｔ細胞共刺激分子は、ＣＤ２８または４－１ＢＢである。
【0369】
一部の実施形態では、ＣＡＲは、抗体、例えば、抗体断片と、ＣＤ２８の膜貫通部分またはその機能性変異体であるかまたはそれを含有する膜貫通ドメインと、ＣＤ２８のシグナル伝達部分またはその機能性変異体およびＣＤ３ゼータのシグナル伝達部分またはその機能性変異体を含有する細胞内シグナル伝達ドメインとを含有する。一部の実施形態では、ＣＡＲは、抗体、例えば、抗体断片と、ＣＤ２８の膜貫通部分またはその機能性変異体であるかまたはそれを含有する膜貫通ドメインと、４－１ＢＢのシグナル伝達部分またはその機能性変異体およびＣＤ３ゼータのシグナル伝達部分またはその機能性変異体を含有する細胞内シグナル伝達ドメインとを含有する。一部のそのような実施形態では、受容体は、ヒンジのみのスペーサー等、Ｉｇヒンジ、例えば、ＩｇＧ４ヒンジ等、ヒトＩｇ分子等のＩｇ分子の部分を含有するスペーサーをさらに含む。
【0370】
一部の実施形態では、組換え受容体、例えば、ＣＡＲの膜貫通ドメインは、ヒトＣＤ２８（例えば、受託番号Ｐ１０７４７．１）もしくはＣＤ８ａ（受託番号Ｐ０１７３２．１）の膜貫通ドメインまたはそれらの変異体、例えば、配列番号８、７９、１４２もしくは１４３に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号８、７９、１４２もしくは１４３に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む膜貫通ドメインであるかまたはこれを含む。一部の実施形態では、組換え受容体の部分を含有する膜貫通ドメインは、配列番号９に記載されるアミノ酸の配列、またはそれに対して少なくともまたは約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を有するアミノ酸の配列を含む。
【0371】
一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ８α由来の膜貫通ドメインである。一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、Milone et al., Mol. Ther. (2009) 12(9):1453-64に記載されているいずれかである。一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、配列番号１４３に記載される配列であるかまたはそれを含む。
【0372】
一部の実施形態では、組換え受容体、例えば、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達構成成分（複数可）は、ヒトＣＤ２８の細胞内共刺激シグナル伝達ドメインまたはその機能性変異体もしくは部分、例えば、天然ＣＤ２８タンパク質の１８６～１８７位にＬＬからＧＧへの置換を有するドメインを含有する。例えば、細胞内シグナル伝達ドメインは、配列番号１０もしくは１１に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号１０もしくは１１に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含むことができる。一部の実施形態では、細胞内ドメインは、配列番号１２に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号１２に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列等、４－１ＢＢ（例えば、受託番号Ｑ０７０１１．１）またはその機能的変異体もしくは部分の細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを含む。
【0373】
一部の実施形態では、細胞内ドメインは、４－１ＢＢの細胞内共刺激シグナル伝達ドメインを含み、一部の実施形態では、４－１ＢＢ共刺激分子は、Milone et al., Mol. Ther. (2009) 12(9):1453-64に記載されているいずれかである。一部の実施形態では、共刺激分子は、配列番号１２に記載される配列を有する。
【0374】
一部の実施形態では、組換え受容体、例えば、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ヒトＣＤ３ゼータ刺激シグナル伝達ドメインもしくはその機能性変異体、例えば、ヒトＣＤ３ζのアイソフォーム３の１１２ ＡＡ細胞質ドメイン（受託番号Ｐ２０９６３．２）、または米国特許第７，４４６，１９０号もしくは米国特許第８，９１１，９９３号に記載されているＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインを含む。例えば、一部の実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは、配列番号１３、１４もしくは１５に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号１３、１４もしくは１５に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む。一部の実施形態では、ＣＤ３－ゼータドメインは、Milone et al., Mol. Ther. (2009) 12(9):1453-64に記載されているいずれかである。一部の実施形態では、ＣＤ３－ゼータは、配列番号１３に記載される配列であるかまたはそれを含む。
【0375】
一部の態様では、スペーサーは、ＩｇＧのヒンジ領域のみ、例えば、ＩｇＧ４またはＩｇＧ１のヒンジのみ、例えば、配列番号１または配列番号８９に記載されるヒンジのみのスペーサーを含有する。他の実施形態では、スペーサーは、ＣＨ２および／またはＣＨ３ドメインに連結されてもよい、Ｉｇヒンジ、例えば、ＩｇＧ４由来ヒンジであるかまたはそれを含有する。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号４に記載される等、ＣＨ２およびＣＨ３ドメインに連結された、Ｉｇヒンジ、例えば、ＩｇＧ４ヒンジである。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号３に記載される等、ＣＨ３ドメインのみに連結された、Ｉｇヒンジ、例えば、ＩｇＧ４ヒンジである。一部の実施形態では、スペーサーは、グリシン－セリンリッチ配列または他の可動性リンカー、例えば、公知可動性リンカーであるかまたはそれを含む。一部の実施形態では、スペーサーは、配列番号８１～８３のいずれかに記載される等、ＣＤ８ａヒンジ、配列番号８８に記載される等、ＦｃγＲＩＩＩａヒンジ、配列番号８４に記載される等、ＣＴＬＡ４ヒンジ、または配列番号８６に記載される等、ＰＤ－１ヒンジである。一部の実施形態ではスペーサーはＣＤ８に由来する。一部の実施形態では、スペーサーはＣＤヒンジである。一部の実施形態では、ヒンジ配列は、Milone et al., Mol. Ther. (2009) 12(9):1453-64に記載されているいずれかである。一部の実施形態では、ヒンジは、配列番号８２に記載される配列であるかまたはそれを含む。
【0376】
例えば、一部の実施形態では、ＣＡＲは、ｓｃＦｖを含む、抗体断片等の抗体と、Ｉｇヒンジ含有スペーサー等、重鎖分子のヒンジ領域および／または１個もしくは複数の定常領域等、免疫グロブリン分子の部分を含有するスペーサー等のスペーサーと、ＣＤ２８由来膜貫通ドメインの全てまたは部分を含有する膜貫通ドメインと、ＣＤ２８由来細胞内シグナル伝達ドメインと、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインとを含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、ｓｃＦｖ等の抗体または断片と、Ｉｇヒンジ含有スペーサーのいずれか等のスペーサーと、ＣＤ２８由来膜貫通ドメインと、４－１ＢＢ由来細胞内シグナル伝達ドメインと、ＣＤ３ゼータ由来シグナル伝達ドメインとを含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、抗体または断片、例えば、ｓｃＦｖと、スペーサー、例えば、Ｉｇヒンジ含有スペーサーいずれか、ＣＤ８由来膜貫通ドメインと、４－１ＢＢ由来細胞内シグナル伝達ドメインと、ＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインとを含む。
【0377】
一部の実施形態では、抗原受容体はマーカーをさらに含み、および／または、ＣＡＲまたは他の抗原受容体を発現する細胞は、細胞表面マーカー等のサロゲートマーカーをさらに含み、このマーカーは、受容体を発現する細胞の形質導入または操作を確認するために使用され得る。一部の実施形態では、マーカーは、Ｔ細胞上に天然には見出されない分子、例えば細胞表面タンパク質、またはＴ細胞の表面上に天然には見出されない分子、またはその一部である。一部の実施形態では、分子は非自己分子、例えば、非自己タンパク質、即ち、細胞が養子移入される宿主の免疫系によって「自己」として認識されないものである。一部の実施形態では、マーカーは治療的機能を果たさず、かつ／または遺伝子工学のためのマーカーとして使用されること、例えば、操作成功した細胞を選択すること以外の効果をもたらさない。他の実施形態では、マーカーは治療用分子、またはインビボで遭遇する細胞に対するリガンド、例えば養子移入およびリガンドとの遭遇時に細胞の応答を増強および／または減衰させるための共刺激または免疫チェックポイント分子等、何らかの所望の効果を発揮する分子であってもよい。一部の態様では、マーカーは、ＣＤ３４、ＮＧＦＲ、または上皮増殖因子受容体、例えばそのような細胞表面受容体の切断型（例えば、ｔＥＧＦＲ）の全てまたは一部（例えば、切断型）を含む。一部の実施形態では、マーカーをコードする核酸は、切断可能なリンカー配列、例えばＴ２Ａ等のリンカー配列をコードするポリヌクレオチドに作動可能に連結される。例えば、マーカー、および適宜リンカー配列は、公開された特許出願ＷＯ２０１４０３１６８７に開示されているいずれかであり得る。例えば、マーカーは切断型ＥＧＦＲ（ｔＥＧＦＲ）であり、Ｔ２Ａ切断型リンカー配列等のリンカー配列に連結されていてもよい。一部の実施形態では、そのようなＣＡＲコンストラクトは、例えば、ＣＡＲの下流に、Ｔ２Ａリボソームスキップエレメントおよび／またはｔＥＧＦＲ配列をさらに含む。
【0378】
切断型ＥＧＦＲ（例えば、ｔＥＧＦＲ）に関する例示的なポリペプチドは、配列番号７もしくは１６６に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号７もしくは１６６に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む。例示的なＴ２Ａリンカー配列は、配列番号６もしくは１６７に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号６もしくは１６７に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む。
【0379】
一部の実施形態では、そのようなＣＡＲ構築物をコードする核酸分子は、例えばＣＡＲをコードする配列の下流に、Ｔ２Ａリボソームスキップエレメントをコードする配列および／またはｔＥＧＦＲ配列をさらに含む。一部の実施形態では、配列は、配列番号６もしくは１６７に記載されるＴ２Ａリボソームスキップエレメント、または配列番号６もしくは１６７に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列をコードする。一部の実施形態では、抗原受容体（例えば、ＣＡＲ）を発現するＴ細胞はまた、続いてそのような細胞を検出するためにマーカーとして使用され得る非免疫原性選択エピトープとしての切断型ＥＧＦＲ（ＥＧＦＲｔ）を発現するように（例えば、同じ構築物由来の２つのタンパク質を発現するようにＴ２Ａリボソームスイッチによって分離されるＣＡＲおよびＥＧＦＲｔをコードする構築物の導入によって）生成され得る（例えば、米国特許第８，８０２，３７４号を参照されたい）。一部の実施形態では、配列は、配列番号７もしくは１６６に記載されるｔＥＧＦＲ配列、または配列番号７もしくは１６６に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列をコードする。
【0380】
一部の実施形態では、コードされたＣＡＲ配列は、ＣＡＲが発現されている細胞の表面にＣＡＲを方向付けるまたは送達するシグナル配列またはシグナルペプチドをさらに含むことができる。一部の実施形態では、シグナルペプチドは、膜貫通タンパク質に由来する。一部の例では、シグナルペプチドは、ＣＤ８ａ、ＣＤ３３またはＩｇＧに由来する。例示的なシグナルペプチドは、配列番号３９、４０および１５３に記載される配列を含む。一部の例では、シグナルペプチドはＣＤ８αに由来する。一部の実施形態では、シグナルペプチドは、受託番号ＮＭ＿００１７６８に記載される配列である。一部の実施形態では、シグナルペプチドは、配列番号３９に記載される配列を含む。
【0381】
一部の実施形態では、ＣＡＲは、本明細書に記載のｓｄＡｂおよびｓｃＦｖを含む抗ヒトＢＣＭＡ抗体のいずれか等の抗ＢＣＭＡ抗体または断片、本明細書に記載のＩｇヒンジ含有スペーサーまたは他のスペーサーのいずれか等のスペーサー、ＣＤ２８膜貫通ドメイン、ＣＤ２８細胞内シグナル伝達ドメイン、およびＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、本明細書に記載のｓｄＡｂおよびｓｃＦｖを含む抗ヒトＢＣＭＡ抗体のいずれか等の抗ＢＣＭＡ抗体または断片、本明細書に記載のＩｇヒンジ含有スペーサーまたは他のスペーサーのいずれか等のスペーサー、ＣＤ２８膜貫通ドメイン、４－１ＢＢ細胞内シグナル伝達ドメイン、およびＣＤ３ゼータシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、このようなＣＡＲ構築物は、Ｔ２Ａリボソームスキップエレメントおよび／またはｔＥＧＦＲ配列を、例えば、ＣＡＲの下流にさらに含む。
【0382】
対象に投与される細胞によって発現されるＣＡＲ等の組換え受容体は一般に、処置されている疾患もしくは状態またはその細胞において発現される、それに関連するおよび／またはそれに特異的な分子を認識するか、またはそれに特異的に結合する。分子、例えば、抗原への特異的結合時に、受容体は一般に、ＩＴＡＭ伝達シグナル等の免疫刺激シグナルを細胞内に送達し、これにより、疾患または状態に標的化された免疫応答を促進する。例えば、一部の実施形態では、細胞は、疾患もしくは状態のまたは疾患もしくは状態に関連する細胞または組織によって発現された抗原に特異的に結合するＣＡＲを発現する。一部の実施形態では、ＣＡＲは、ヒトＢＣＭＡ等のＢＣＭＡに特異的に結合し、記載されているような抗ヒトＢＣＭＡ抗体または断片を含む。抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ配列を含む非限定的な例示的なＣＡＲ配列は、配列番号９０～１４１に記載される。一部の実施形態では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、配列番号９０～１４１のいずれかに記載されるアミノ酸配列、または配列番号９０～１４１のいずれか１つに対して少なくともまたは約９０％、少なくともまたは約９１％、少なくともまたは約９２％、少なくともまたは約９３％、少なくともまたは約９４％、少なくともまたは約９５％、少なくともまたは約９６％、少なくともまたは約９７％、少なくともまたは約９８％、少なくともまたは約９９％の配列同一性を示すアミノ酸配列を含み、ＣＡＲは、ＢＣＭＡ、例えば、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合。
【0383】
一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、イデカブタゲン・ビクルユーセル細胞（例えば、ＡＢＥＣＭＡ（著作権）細胞等）；ｂｂ２１２１７細胞；オルバカブタゲン・オートルユーセル細胞；ＣＴ１０３Ａ細胞；シルタカブタゲン・オートルユーセル細胞；ＫＩＴＥ５８５細胞；ＣＴ０５３細胞；ＢＣＭＡ－ＣＳ１ ｃＣＡＲ（ＢＣ１ｃＣＡＲ）細胞；Ｐ－ＢＣＭＡ－１０１細胞；Ｐ－ＢＣＭＡ－ＡＬＬＯ１細胞；Ｃ－ＣＡＲ０８８細胞；Ｄｅｓｃａｒｔｅｓ－０８細胞；ＰＢＣＡＲ２６９Ａ細胞；ＡＬＬＯ－７１５細胞；ＰＨＥ８８５細胞；ＡＵＴＯ８細胞；ＣＴＸ１２０細胞；ＣＢ－０１１細胞；ＡＬＬＯ－６０５（ＴｕｂｏＣＡＲ／ＭＭ）細胞；ｐＣＤＣＡＲ１（ＴｒｉＣＡＲ－Ｚ１３６）細胞、またはＧＣ０１２Ｆ細胞を含む。一部の実施形態では、遺伝子操作されたＴ細胞の用量は、イデカブタゲン・ビクルユーセル細胞（例えば、ＡＢＥＣＭＡ（著作権）細胞等）を含む。
【0384】
Ｂ．遺伝子操作のための細胞および細胞の調製
受容体を発現し、提供される方法によって投与される細胞の中には、操作された細胞がある。遺伝子操作は概して、例えばレトロウイルス形質導入、トランスフェクション、または形質転換による細胞を含有する組成物への、組換えまたは操作された構成成分をコードする核酸の導入を伴う。
受容体を発現し、提供される方法によって投与される細胞の中には、操作された細胞がある。遺伝子操作は概して、例えばレトロウイルス形質導入、トランスフェクション、または形質転換による細胞を含有する組成物への、組換えまたは操作された構成成分をコードする核酸の導入を伴う。
【0385】
一部の実施形態では、核酸は、異種であり、即ち、例えば、操作されている細胞では通常見い出されない別の生物または細胞、および／またはそのような細胞が由来されない生物から得られたもの等の細胞または細胞から得られた試料中には通常存在しない。一部の実施形態では、核酸は、天然に存在せず、例えば、多種多様な細胞型由来の各種ドメインをコードする核酸のキメラ組合せを含むものを含む、天然に存在しない核酸である。
【0386】
細胞は概して、哺乳動物細胞等の真核細胞であり、通常、ヒト細胞である。一部の実施形態では、細胞は、血液、骨髄、リンパ、またはリンパ器官に由来し、リンパ球、通常はＴ細胞および／またはＮＫ細胞を含む、自然免疫もしくは適応免疫の細胞、例えば骨髄系またはリンパ系細胞等の免疫系の細胞である。他の例示的な細胞として、人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含む多分化能性および多能性幹細胞等の幹細胞が挙げられる。細胞は通常、対象から直接単離され、および／対象から単離されて凍結されたもの等の初代細胞である。一部の実施形態では、細胞は、Ｔ細胞または他の細胞型の１種または複数のサブセット、例えば全Ｔ細胞集団、ＣＤ４＋細胞、ＣＤ８＋細胞、およびそれらの亜集団、例えば、機能、活性化状態、成熟度、分化能、増大、再循環、局在化、および／または持続能、抗原特異性、抗原受容体の型、特定の臓器もしくはコンパートメントにおける存在、マーカーもしくはサイトカイン分泌プロファイル、および／または分化度によって規定されるものを含む。処置されるべき対象に関して、細胞は、同種異系および／または自家であり得る。方法の中には、市販の方法が含まれる。一部の態様では、例えば市販の技術に関して、細胞は、多能性および／または多分化能性の、例えば幹細胞、例えば人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）である。一部の実施形態では、方法は、細胞を対象から単離すること、それらを調製すること、加工処理すること、培養すること、および／または操作すること、ならびに凍結保存前もしくは後にそれらを同じ対象に再度導入することを含む。
【0387】
Ｔ細胞ならびに／またはＣＤ４＋および／もしくはＣＤ８＋Ｔ細胞のサブタイプおよび亜集団の中には、ナイーブＴ（ＴＮ）細胞、エフェクターＴ細胞（ＴＥＦＦ）、メモリーＴ細胞およびそれらのサブタイプ、例えば幹細胞メモリーＴ（ＴＳＣＭ）、セントラルメモリーＴ（ＴＣＭ）、エフェクターメモリーＴ（ＴＥＭ）、または高分化型エフェクターメモリーＴ細胞、細胞浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、未熟Ｔ細胞、成熟Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、粘膜関連インバリアントＴ（ＭＡＩＴ）細胞、天然に存在する適応制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞、ヘルパーＴ細胞、例えばＴＨ１細胞、ＴＨ２細胞、ＴＨ３細胞、ＴＨ１７細胞、ＴＨ９細胞、ＴＨ２２細胞、濾胞性ヘルパーＴ細胞、アルファ／ベータＴ細胞、およびデルタ／ガンマＴ細胞が存在する。
【0388】
一部の実施形態では、細胞は、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である。一部の実施形態では、細胞は、単球または顆粒細胞、例えば骨髄性細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、マスト細胞、好酸球、および／または好塩基球である。
【0389】
一部の実施形態では、細胞は、遺伝子操作を介して導入された１種または複数の核酸を含み、それにより、そのような核酸の組換えまたは遺伝子操作された産物を発現する。一部の実施形態では、核酸は、異種であり、即ち、例えば、操作されている細胞では通常見い出されない別の生物または細胞、および／またはそのような細胞が由来されない生物から得られたもの等の細胞または細胞から得られた試料中には通常存在しない。一部の実施形態では、核酸は、天然に存在せず、例えば、多種多様な細胞型由来の各種ドメインをコードする核酸のキメラ組合せを含むものを含む、天然に存在しない核酸である。
【0390】
一部の実施形態では、操作された細胞の調製は、１種または複数の培養および／または調製工程を含む。ＣＡＲ等のトランスジェニック受容体をコードする核酸の導入用の細胞は、試料、例えば生体試料、例えば対象から得られたか、または対象に由来するものから単離され得る。一部の実施形態では、細胞が単離される対象は、疾患もしくは状態を有するもの、または細胞療法を必要とするもの、または細胞療法が投与されるであろうものである。対象は、一部の実施形態では、細胞が単離、加工処理、および／または操作される養子細胞療法等の特定の治療介入を必要とするヒトである。
【0391】
したがって、細胞は、一部の実施形態では、初代細胞、例えば初代ヒト細胞である。試料として、組織、液体、および対象から直接採取した他の試料、ならびに分離、遠心分離、遺伝子操作（例えば、ウイルスベクターを用いた形質導入）、洗浄、および／またはインキュベーション等の１種または複数の加工処理工程から生じる試料が挙げられる。生体試料は、生物学的供給源から直接得られた試料または加工処理された試料であり得る。生体試料として、体液、例えば血液、血漿、血清、脳脊髄液、滑液、尿および汗、組織および臓器試料（それらに由来する加工処理された試料を含む）が挙げられるが、これらに限定されない。
【0392】
一部の態様では、細胞が由来するか、または単離される試料は、血液または血液由来試料であるか、あるいはアフェレーシスもしくは白血球アフェレーシス産物であるか、またはそれに由来する。例示的な試料として、全血、末梢血単球（ＰＢＭＣ）、白血球、骨髄、胸腺、組織バイオプシー、腫瘍、白血病、リンパ腫、リンパ節、腸管関連リンパ系組織、粘膜関連リンパ系組織、脾臓、他のリンパ系組織、肝臓、肺、胃、腸、結腸、腎臓、膵臓、胸部、骨、前立腺、子宮頸部、精巣、卵巣、扁桃腺、もしくは他の臓器、および／またはそれらに由来する細胞が挙げられる。試料は、細胞療法、例えば養子細胞療法の状況では、自家および同種供給源由来の試料を含む。
【0393】
一部の実施形態では、細胞は、細胞株、例えばＴ細胞株に由来される。細胞は、一部の実施形態では、異種供給源から、例えば、マウス、ラット、非ヒト霊長類、およびブタから得られる。
【0394】
一部の実施形態では、細胞の単離は、１種または複数の調製および／または非親和性ベースの細胞分離工程を含む。一部の例では、細胞は、洗浄され、遠心分離され、および／または１種または複数の試薬の存在下でインキュベートされ、例えば、望ましくない構成成分を除去し、所望の構成成分を富化して、特定の試薬に対して感度が高い細胞を溶解または除去する。一部の例では、細胞は、１種または複数の特性、例えば、密度、接着特性、サイズ、特定の構成成分に対する感度および／または耐性に基づいて単離される。
【0395】
一部の例では、対象の循環血液由来の細胞は、例えば、アフェレーシスまたは白血球アフェレーシスによって得られる。試料は、一部の態様では、Ｔ細胞を含むリンパ球、単球、顆粒細胞、Ｂ細胞、他の有核白血球細胞、赤血球細胞、および／または血小板を含有し、一部の態様では、赤血球細胞および血小板以外の細胞を含有する。
【0396】
一部の実施形態では、対象から収集された血液細胞は洗浄されて、例えば血漿分画を除去し、続く加工処理工程用に適切なバッファーまたは培地中に細胞を配置する。一部の実施形態では、細胞は、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で洗浄される。一部の実施形態では、洗浄溶液は、カルシウムおよび／またはマグネシウムおよび／または多くのもしくは全ての二価カチオンを欠如している。一部の態様では、洗浄工程は、製造業者の使用説明書に従って半自動「フロースルー」遠心分離機（例えば、Ｃｏｂｅ ２９９１細胞プロセッサー、Ｂａｘｔｅｒ）で遂行される。一部の態様では、洗浄工程は、製造業者の使用説明書に従ってタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）によって遂行される。一部の態様では、細胞は、例えばＣａ＋＋／Ｍｇ＋＋を含まないＰＢＳ等の洗浄後の様々な生物適合性バッファー中に再懸濁される。ある特定の実施形態では、血液細胞試料の構成成分が除去され、細胞は、培養培地中に直接的に再懸濁される。
【0397】
一部の実施形態では、方法は、赤血球細胞を溶解することと、ＰｅｒｃｏｌｌまたはＦｉｃｏｌｌ勾配による遠心分離とによる、末梢血からの白血球細胞の調製等の密度ベースの細胞分離方法を含む。
【0398】
一部の実施形態では、単離方法は、１種または複数の特異的分子、例えば表面マーカー、例えば表面タンパク質、細胞内マーカー、もしくは核酸の細胞における発現または存在に基づく異なる細胞型の分離を含む。一部の実施形態では、そのようなマーカーに基づく分離に関する任意の公知の方法が使用され得る。一部の実施形態では、分離は、親和性または免疫親和性ベースの分離である。例えば、単離は、一部の態様では、例えばそのようなマーカーに特異的に結合する抗体または結合パートナーとのインキュベーション、続く一般的に洗浄工程および抗体または結合パートナーが結合された細胞の分離による、１種または複数のマーカー、通常は細胞表面マーカーの細胞の発現または発現レベルに基づく細胞および細胞集団の、抗体または結合パートナーに結合されていない細胞との分離を含む。
【0399】
そのような分離工程は、試薬が結合された細胞がさらなる使用のために保持されるポジティブ選択、および／または抗体もしくは結合パートナーに結合されていない細胞が保持されるネガティブ選択に基づき得る。一部の例では、両方の分画がさらなる使用のために保持される。一部の態様では、ネガティブ選択は、分離が所望の集団以外の細胞によって発現されるマーカーに基づいて最良に実行されるように、異種集団において細胞型を特異的に同定する抗体が利用可能でない場合に特に有用である。
【0400】
分離は、特定の細胞集団もしくは特定のマーカーを発現する細胞の１００％富化または除去をもたらす必要はない。例えば、特定の型の細胞、例えばマーカーを発現するものに関するもののポジティブ選択またはそれらに関する富化は、そのような細胞の数またはパーセンテージを増加することを指すが、マーカーを発現しない細胞の完全な非存在をもたらす必要はない。同様に、特定の型の細胞、例えばマーカーを発現するもののネガティブ選択、除去または欠失は、そのような細胞の数またはパーセンテージを減少することを指すが、全てのそのような細胞の完全な除去をもたらす必要はない。
【0401】
一部の例では、多重の一連の分離工程が実行され、ここで、１つの工程由来のポジティブまたはネガティブ選択された分画は、続くポジティブまたはネガティブ選択等の別の分離工程に付される。一部の例では、単一の分離工程が、例えば、細胞を、それぞれがネガティブ選択に関して標的化されるマーカーに特異的である複数の抗体または結合パートナーとともにインキュベートすることによって、多重マーカーを発現する細胞を同時に枯渇させることができる。同様に、多重細胞型は、細胞を、各種細胞型上で発現される複数の抗体または結合パートナーとともにインキュベートすることによって同時にポジティブ選択され得る。
【0402】
例えば、一部の態様では、Ｔ細胞、１種または複数の表面マーカーにポジティブであるか、または高レベルのそれらを発現する細胞等のＴ細胞の特異的亜集団、例えば、ＣＤ２８＋、ＣＤ６２Ｌ＋、ＣＣＲ７＋、ＣＤ２７＋、ＣＤ１２７＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、および／またはＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ細胞は、ポジティブまたはネガティブ選択技法によって単離される。
【0403】
例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ２８＋Ｔは、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８コンジュゲート磁気ビーズ（例えば、ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）Ｍ－４５０ ＣＤ３／ＣＤ２８ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｅｘｐａｎｄｅｒ）を使用してポジティブ選択され得る。
【0404】
一部の実施形態では、単離は、ポジティブ選択による特定の細胞集団に関する富化、またはネガティブ選択による特定の細胞集団の枯渇によって実行される。一部の実施形態では、ポジティブまたはネガティブ選択は、細胞を、それぞれ、ポジティブもしくはネガティブ選択された細胞上で発現される（マーカー＋）か、または比較的高レベルで発現される（マーカー高）１種または複数の表面マーカーに特異的に結合する１種または複数の抗体または他の結合剤とともにインキュベートすることによって遂行される。
【0405】
一部の実施形態では、Ｔ細胞は、非Ｔ細胞、例えばＢ細胞、単球、または他の白血球細胞上で発現されるマーカー、例えばＣＤ１４のネガティブ選択によってＰＢＭＣ試料から分離される。一部の態様では、ＣＤ４＋またはＣＤ８＋選択工程は、ＣＤ４＋ヘルパーおよびＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞を分離するのに使用される。そのようなＣＤ４＋およびＣＤ８＋集団は、１種または複数のナイーブ、メモリー、および／またはエフェクターＴ細胞亜集団上で発現されるか、もしくは比較的高度に発現されるマーカーに関するポジティブまたはネガティブ選択によって、亜集団にさらに選別され得る。
【0406】
一部の実施形態では、ＣＤ８＋細胞は、例えば各々の亜集団と関連付けられる表面抗原に基づくポジティブまたはネガティブ選択によって、ナイーブ、セントラルメモリー、エフェクターメモリー、および／またはセントラルメモリー幹細胞に関してさらに富化または枯渇される。一部の実施形態では、セントラルメモリーＴ（ＴＣＭ）細胞に関する富化は、有効性を高めるために、例えば投与に続いて長期生存、増大、および／または生着を改善するために実行され、それは、一部の態様では、そのような亜集団において特に頑強である。Terakura et al., Blood.1:72-82(2012)；Wang et al., J Immunother. 35(9):689-701(2012)を参照されたい。一部の実施形態では、ＴＣＭが富化されたＣＤ８＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋Ｔ細胞を組み合わせることで、有効性をさらに増強させる。
【0407】
ある実施形態では、メモリーＴ細胞は、ＣＤ８＋末梢血リンパ球のＣＤ６２Ｌ＋およびＣＤ６２－サブセットの両方に存在する。ＰＢＭＣは、例えば抗ＣＤ８および抗ＣＤ６２Ｌ抗体を使用して、ＣＤ６２Ｌ－ＣＤ８＋および／またはＣＤ６２Ｌ＋ＣＤ８＋分画に関して富化され得るか、または枯渇され得る。
【0408】
一部の実施形態では、セントラルメモリー（ＴＣＭ）細胞に関する富化は、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ６２Ｌ、ＣＣＲ７、ＣＤ２８、ＣＤ３、および／またはＣＤ１２７のポジティブまたは高表面発現に基づき、一部の態様では、セントラルメモリー（ＴＣＭ）細胞に関する富化は、ＣＤ４５ＲＡおよび／またはグランザイムＢを発現するか、または高度に発現する細胞に関するネガティブ選択に基づく。一部の態様では、ＴＣＭ細胞に関して富化されたＣＤ８＋集団の単離は、ＣＤ４、ＣＤ１４、ＣＤ４５ＲＡを発現する細胞の枯渇、およびＣＤ６２Ｌを発現する細胞に関するポジティブ選択または富化によって実行される。一態様では、セントラルメモリー（ＴＣＭ）細胞に関する富化は、ＣＤ４発現に基づいて選択される細胞のネガティブ分画に始まって実行され、これは、ＣＤ１４およびＣＤ４５ＲＡの発現に基づくネガティブ選択、およびＣＤ６２Ｌに基づくポジティブ選択に付される。そのような選択は、一部の態様では、同時に実行され、他の態様では、いずれかの順序で順次実行される。一部の態様では、ＣＤ４ベースの分離からのポジティブおよびネガティブ分画の両方が保持され、当該方法の続く工程、適宜続く１種または複数のさらなるポジティブまたはネガティブ選択工程で使用されるように、ＣＤ８＋細胞集団または亜集団を調製する際に使用される同じＣＤ４発現ベースの選択工程が、同様にＣＤ４＋細胞集団または亜集団を生成するのにも使用される。
【0409】
特定の例では、ＰＢＭＣの試料または他の白血球細胞試料は、ＣＤ４＋細胞の選択に付され、そこで、ネガティブおよびポジティブ分画が保持される。次に、ネガティブ分画は、ＣＤ１４およびＣＤ４５ＲＡまたはＣＤ１９の発現に基づくネガティブ選択、およびセントラルメモリーＴ細胞の特徴的なマーカー、例えばＣＤ６２ＬまたはＣＣＲ７に基づくポジティブ選択に付され、ここで、ポジティブおよびネガティブ選択は、いずれかの順序で実行される。
【0410】
ＣＤ４＋Ｔヘルパー細胞は、細胞表面抗原を有する細胞集団を同定することによって、ナイーブ、セントラルメモリー、およびエフェクター細胞に分類される。ＣＤ４＋リンパ球は、標準的な方法によって得ることができる。一部の実施形態では、ナイーブＣＤ４＋Ｔリンパ球は、ＣＤ４５ＲＯ－、ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＤ６２Ｌ＋、ＣＤ４＋Ｔ細胞である。一部の実施形態では、セントラルメモリーＣＤ４＋細胞は、ＣＤ６２Ｌ＋およびＣＤ４５ＲＯ＋である。一部の実施形態では、エフェクターＣＤ４＋細胞は、ＣＤ６２Ｌ－およびＣＤ４５ＲＯ－である。
【0411】
一例では、ネガティブ選択によってＣＤ４＋細胞を富化するために、モノクローナル抗体カクテルは通常、ＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ－ＤＲ、およびＣＤ８に対する抗体を含む。一部の実施形態では、抗体または結合パートナーは、固体支持体またはマトリックス、例えば磁気ビーズまたは常磁性ビーズに結合されて、ポジティブおよび／またはネガティブ選択に関する細胞の分離を可能にする。例えば、一部の実施形態では、細胞および細胞集団は、免疫磁気（または親和性磁気）分離技法を使用して分離または単離される（Ｓ． Ａ． Ｂｒｏｏｋｓ ａｎｄ Ｕ． Ｓｃｈｕｍａｃｈｅｒ（著作権）Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．、トトワ、ニュージャージー州に編集されたMethods in Molecular Medicine, vol. 58: Metastasis Research Protocols, Vol. 2: Cell Behavior In vitro and In vulivulo, p 17-25に概説されている）。
【0412】
一部の態様では、分離されるべき細胞の試料または組成物は、小さな磁化可能な、または磁気的応答性の材料、例えば磁気的応答性の粒子または微粒子、例えば常磁性ビーズ（例えば、ＤｙｎａｌｂｅａｄｓまたはＭＡＣＳビーズ等）とともにインキュベートされる。磁気的応答性の材料、例えば、粒子は概して、分離するのが所望の、例えばネガティブもしくはポジティブ選択するのが所望の細胞（単数）、細胞（複数）、または細胞の集団上に存在する分子、例えば表面マーカーに特異的に結合する結合パートナー、例えば抗体に直接的にまたは間接的に結合される。
【0413】
一部の実施形態では、磁気粒子またはビーズは、特異的な結合パートナー、例えば抗体または他の結合パートナーに結合された磁気的応答性の材料を含む。磁気的分離方法で使用される周知の磁気的応答性の材料が多く存在している。適切な磁気粒子として、Ｍｏｌｄａｙの米国特許第４，４５２，７７３号、および欧州特許明細書ＥＰ ４５２３４２ Ｂ号に記載されているものが挙げられ、それらは、これにより参照により本明細書に組み込まれる。例えばＯｗｅｎの米国特許第４，７９５，６９８号およびＬｉｂｅｒｔｉらの米国特許第５，２００，０８４号に記載されるもの等のコロイドサイズの粒子は他の例である。
【0414】
インキュベーションは概して、磁気粒子もしくはビーズに結合されている、抗体もしくは結合パートナー、またはそのような抗体もしくは結合パートナーに特異的に結合する分子、例えば二次抗体または他の試薬が、試料内の細胞上に存在する場合に、細胞表面分子特異的に結合する条件下で実行される。
【0415】
一部の態様では、試料は、磁場に置かれ、結合された磁気的応答性の、または磁化可能な粒子を有する細胞は、磁石に結合され、非標識細胞と分離される。ポジティブ選択に関して、磁石に結合されている細胞が保持され、ネガティブ選択に関して、結合されていない細胞（非標識細胞）が保持される。一部の態様では、ポジティブおよびネガティブ選択の組合せは、同じ選択工程中に実施され、ここで、ポジティブおよびネガティブ分画は、保持されて、さらに加工処理されて、さらなる分離工程に付される。
【0416】
ある特定の実施形態では、磁気的応答性の粒子は、一次抗体または他の結合パートナー、二次抗体、レクチン、酵素、またはストレプトアビジンでコーティングされる。ある特定の実施形態では、磁気粒子は、１種または複数のマーカーに特異的な一次抗体のコーティングを介して細胞に結合される。ある特定の実施形態では、ビーズではなく細胞が、一次抗体または結合パートナーで標識され、次に、細胞型特異的な二次抗体または他の結合パートナー（例えば、ストレプトアビジン）でコーティングされた磁気粒子が付加される。ある特定の実施形態では、ストレプトアビジンでコーティングされた磁気粒子は、ビオチン化された一次または二次抗体と併せて使用される。
【0417】
一部の実施形態では、磁気的応答性の粒子は、続いてインキュベートされ、培養され、および／または操作されるべき細胞に結合されたまままであり、一部の態様では、粒子は、患者への投与用の細胞に結合されまままである。一部の実施形態では、磁化可能な、または磁気的応答性粒子は、細胞から除去される。磁化可能な粒子を細胞から除去する方法は公知であり、例えば、非標識抗体、および切断可能なリンカーにコンジュケートされた磁化可能な粒子または抗体の競合の使用を含む。一部の実施形態では、磁化可能な粒子は、生分解性である。
【0418】
一部の実施形態では、親和性ベースの選択は、磁気活性化細胞選別（ＭＡＣＳ）（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ、オーバーン、カリフォルニア州）を介する。磁気活性化細胞選別（ＭＡＣＳ）システムは、磁化可能な粒子が結合された細胞の高純度選択が可能である。ある特定の実施形態では、ＭＡＣＳは、非標的および標的種が順次、外部磁場の印加後に溶出される様式で作動する。即ち、磁化された粒子に結合された細胞は、所定の位置に維持される一方で、結合されていない種は溶出される。次に、この第１の溶出工程が完了した後、磁場に捕捉され、溶出するのを防止された種は、それらが溶出されて、回収され得るように一部の様式で遊離される。ある特定の実施形態では、非標的細胞は、標識されて、細胞の異種集団から枯渇される。
【0419】
一部の実施形態では、単離または分離は、当該方法の単離、細胞調製、分離、加工処理、インキュベーション、培養、および／または製剤化工程の１種または複数を実行するシステム、デバイス、または装置を使用して実行される。一部の態様では、システムは、閉鎖または滅菌環境でこれらの工程それぞれを実行するのに、例えば、誤差、使用者の取扱いおよび／または混入を最小限に抑えるのに使用される。一例では、システムは、ＰＣＴ国際公開ＷＯ２００９／０７２００３号、またはＵＳ ２０１１０００３３８０ Ａ１号に記載されるシステムである。
【0420】
一部の実施形態では、システムまたは装置は、統合型もしくは自己完結型のシステムにおいて、および／または自動もしくはブログラム可能様式で、１種または複数、例えば全ての単離、加工処理、操作、および製剤化工程を実行する。一部の態様では、システムまたは装置は、システムまたは装置と通信したコンピュータおよび／またはコンピュータプログラムを含み、これにより使用者は、加工処理、単離、操作、および製剤化工程の転帰をプログラミングし、制御し、評価し、および／またはそれらの各種態様を調整することが可能になる。
【0421】
一部の実施形態では、分離および／または他の工程は、例えば閉鎖および滅菌系における臨床スケールレベルでの細胞の自動分離のためにＣｌｉｎｉＭＡＣＳシステム（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を使用して実行される。構成成分は、統合マイクロコンピュータ、磁気分離ユニット、蠕動ポンプ、および各種ピンチ弁を含み得る。統合コンピュータは、一部の態様では、機器の全ての構成成分を制御し、システムが、標準化された順序において反復手順を実施するよう誘導する。磁気分離ユニットは、一部の態様では、選択カラム用の可動永続マグネットおよびホルダーを含む。蠕動ポンプは、チューブセット全体にわたって流速を制御し、ピンチ弁とともに、システムから流れるバッファーの制御された流れおよび細胞の断続的な懸濁を保証する。
【0422】
ＣｌｉｎｉＭＡＣＳシステムは、一部の態様では、滅菌性の非発熱性溶液中に供給される抗体とカップリングされた磁化可能な粒子を使用する。一部の実施形態では、磁気粒子による細胞の標識後に、細胞は洗浄されて、過剰な粒子を除去する。次に、細胞調製バッグは、チューブセットに接続され、それは続いて、バッファーを含有するバッグおよび細胞収集バッグに接続される。チューブセットは、プレカラムおよび分離カラムを含むアセンブル済みの滅菌チューブからなり、単回の使用のみ用である。分離プログラムの開始後に、システムは自動で細胞試料を分離カラム上に適用する。標識された細胞は、カラム内に保持される一方で、非標識細胞は、一連の洗浄工程によって除去される。一部の実施形態では、本明細書に記載されている方法を用いた使用のための細胞集団は、非標識であり、カラム中に保持されない。一部の実施形態では、本明細書に記載されている方法を用いた使用のための細胞集団は、標識されており、カラム中に保持される。一部の実施形態では、本明細書に記載されている方法を用いた使用のための細胞集団は、磁場の除去後にカラムから溶出され、細胞収集バッグ内に収集される。
【0423】
ある特定の実施形態では、分離および／または他の工程は、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ Ｐｒｏｄｉｇｙシステム（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を使用して実行される。ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ Ｐｒｏｄｉｇｙシステムは、一部の態様では、遠心分離による細胞の自動洗浄および分画を可能にする細胞加工処理ユニティが装備されている。ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ Ｐｒｏｄｉｇｙシステムはまた、供給源細胞産物の巨視的な層を識別することによって最適な細胞分画エンドポイントを決定する内蔵カメラおよび画像認識ソフトウェアを含み得る。例えば、末梢血は、赤血球、白血球細胞および血漿層に自動的に分離される。ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ Ｐｒｏｄｉｇｙシステムはまた、例えば細胞分化および増大、抗原負荷、および長期細胞培養等の細胞培養プロトコールを遂行する統合細胞培養チャンバーを含み得る。入力ポートは、培地の滅菌除去および補充を可能にすることができ、細胞は、統合顕微鏡を使用してモニタリングすることができる。例えば、Klebanoff et al., J Immunother. 35(9): 651-660(2012)、Terakura et al., Blood.1:72-82(2012)、およびWang et al., J Immunother. 35(9):689-701(2012)を参照されたい。
【0424】
一部の実施形態では、本明細書に記載されている細胞集団は、フローサイトメトリーを介して収集および富化（または枯渇）され、そこで、多重細胞表面マーカーに関して染色された細胞が流動ストリームで運搬される。一部の実施形態では、本明細書に記載されている細胞集団は、分取スケール（ＦＡＣＳ）選別を介して収集および富化（または枯渇）される。ある特定の実施形態では、本明細書中記載される細胞集団は、ＦＡＣＳベースの検出システムと組み合わせて微小電気機械システム（ＭＥＭＳ）チップを用いて収集および富化（または枯渇）される（例えば、ＷＯ２０１０／０３３１４０号、Cho et al., Lab Chip 10, 1567-1573(2010)；およびGodin et al., J Biophoton. 1(5):355-376(2008)を参照）。両方の場合で、細胞は、多重マーカーで標識することができ、高純度での明確に定められたＴ細胞サブセットの単離を可能にする。
【0425】
一部の実施形態では、抗体または結合パートナーは、ポジティブおよび／またはネガティブ選択に関して分離を促進するために、１種または複数の検出可能なマーカーで標識される。例えば、分離は、蛍光標識された抗体への結合に基づき得る。一部の例では、１種または複数の細胞表面マーカーに特異的な抗体または他の結合パートナーの結合に基づく細胞の分離は、例えば、フローサイトメトリー検出システムと組み合わせて、例えば、分取スケール（ＦＡＣＳ）および／または微小電気機械システム（ＭＥＭＳ）チップを含む蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）によって流動ストリーム中で運搬される。そのような方法は、同時に多重マーカーに基づくポジティブおよびネガティブ選択を可能にする。
【0426】
一部の実施形態では、調製方法は、単離、インキュベーション、および／または操作前または後のいずれかに、細胞を凍結すること、例えば凍結保存することに関する工程を含む。一部の実施形態では、凍結、続く解凍工程は、細胞集団における顆粒細胞、およびある程度は単球を除去する。一部の実施形態では、細胞は、例えば、血漿および血小板を除去するための洗浄工程に続いて、凍結溶液中に懸濁される。様々な公知の凍結溶液およびパラメーターのいずれかは、一部の態様では使用され得る。一例は、２０％ＤＭＳＯおよび８％ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を含有するＰＢＳ、または他の適切な細胞凍結培地を伴う。次に、これは培地で１：１に希釈され、その結果、ＤＭＳＯおよびＨＳＡの最終濃度は、それぞれ１０％および４％である。次に、細胞は一般的に、１分当たり１℃の速度で－８０℃に凍結され、液体窒素保管タンクの気相中に保管される。
【0427】
一部の実施形態では、細胞は、遺伝子操作の前に、もしくは遺伝子操作と関連してインキュベートされ、および／または培養される。インキュベーション工程は、培養、栽培、刺激、活性化、および／または伝播を含み得る。インキュベーションおよび／または操作は、ユニット、チャンバー、ウェル、カラム、管、チューブセット、バルブ、バイアル、培養皿、バッグ、または細胞を培養もしくは栽培するための他の容器等の培養容器中で実行され得る。一部の実施形態では、組成物または細胞は、刺激条件または刺激剤の存在下でインキュベートされる。そのような条件は、集団において細胞の増殖、増大、活性化、および／または生存を誘導するように、抗原曝露を模倣するように、および／または遺伝子操作のために、例えば組換え抗原受容体の導入のために細胞をプライミングするように設計されたものを含む。
【0428】
条件は、特定の培地、温度、酸素含有量、二酸化炭素含有量、時間、薬剤、例えば栄養分、アミノ酸、抗生物質、イオン、および／または刺激因子、例えばサイトカイン、ケモカイン、抗原、結合パートナー、融合タンパク質、組換え可溶性受容体、および細胞を活性化するよう設計された任意の他の薬剤の１種または複数を含み得る。
【0429】
一部の実施形態では、刺激条件または薬剤は、ＴＣＲ複合体の細胞内シグナル伝達ドメインを活性化することが可能な、１種または複数の薬剤、例えば、リガンドを含む。一部の態様では、薬剤は、Ｔ細胞においてＴＣＲ／ＣＤ３細胞内シグナル伝達カスケードを作動させるか、またはそれを開始させる。そのような薬剤は、抗体、例えばＴＣＲに特異的なもの、例えば抗ＣＤ３を含み得る。一部の実施形態では、刺激条件は、共刺激受容体を刺激することが可能な１種または複数の薬剤、例えばリガンド、例えば抗ＣＤ２８を含む。一部の実施形態では、そのような薬剤および／またはリガンドは、ビーズ等の固体支持体、および／または１種または複数のサイトカインに結合されてもよい。適宜、増大方法は、抗ＣＤ３および／または抗ＣＤ２８抗体を培養培地に添加する（例えば、少なくとも約０．５ｎｇ／ｍｌの濃度で）工程をさらに含み得る。一部の実施形態では、刺激剤として、ＩＬ－２、ＩＬ－１５および／またはＩＬ－７が挙げられる。一部の態様では、ＩＬ－２濃度は、少なくとも約１０ユニット／ｍＬである。
【0430】
一部の態様では、インキュベーションは、Ｒｉｄｄｅｌｌらの米国特許第６，０４０，１７７号、Klebanoff et al., J Immunother. 35(9): 651-660(2012)、Terakura et al., Blood.1:72-82(2012)、および／またはWang et al., J Immunother. 35(9):689-701(2012)に記載されるもの等の技法に従って実行される。
【0431】
一部の実施形態では、Ｔ細胞は、培養開始組成物にフィーダー細胞、例えば非分裂性末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を添加すること（例えば、得られた細胞集団が、増大されるべき初期集団における各Ｔリンパ球に関して少なくとも約５、１０、２０、もしくは４０個以上のＰＢＭＣフィーダー細胞を含有するように）と；培養物をインキュベートすること（例えば、Ｔ細胞の数を増大するのに十分な時間）とによって増大される。一部の態様では、非分裂性フィーダー細胞は、ガンマ線を照射したＰＢＭＣフィーダー細胞を含み得る。一部の実施形態では、ＰＢＭＣは、細胞分裂を防止するように約３０００～３６００ｒａｄの範囲のガンマ線で照射される。一部の態様では、フィーダー細胞は、Ｔ細胞の集団の添加の前に培養培地に添加される。
【0432】
一部の実施形態では、刺激条件は、ヒトＴリンパ球の成長に適した温度、例えば少なくとも約セ氏２５度、一般的には少なくとも約セ氏３０度、および一般的にはセ氏３７度または約セ氏３７度を含む。適宜、インキュベーションは、フィーダー細胞として非分裂性ＥＢＶで形質転換したリンパ芽球様細胞（ＬＣＬ）を添加することをさらに含み得る。ＬＣＬは、約６０００～１０，０００ｒａｄの範囲のガンマ線で照射され得る。ＬＣＬフィーダー細胞は、一部の態様では、任意の適切な量で、例えば、ＬＣＬフィーダー細胞対初期Ｔリンパ球の比が少なくとも約１０：１で提供される。
【0433】
ある実施形態では、抗原特異的なＴ細胞、例えば抗原特異的なＣＤ４＋および／またはＣＤ８＋Ｔ細胞は、ナイーブまたは抗原特異的なＴリンパ球を抗原で刺激することによって得られる。例えば、抗原特異的なＴ細胞株またはクローンは、Ｔ細胞を感染対象から単離することと、細胞をインビトロで同じ抗原で刺激することとによってサイトメガロウイルス抗原に対して生成され得る。
【0434】
Ｃ．核酸、ベクターおよび遺伝子操作に関する方法
ある実施形態では、細胞、例えば、Ｔ細胞は、組換え受容体を発現するように遺伝子操作されている。一部の実施形態では、操作は、組換え受容体をコードする核酸分子を導入することによって実行される。また、組換え受容体をコードする核酸分子、およびそのような核酸および／または核酸分子を含有するベクターまたは構築物が提供される。
ある実施形態では、細胞、例えば、Ｔ細胞は、組換え受容体を発現するように遺伝子操作されている。一部の実施形態では、操作は、組換え受容体をコードする核酸分子を導入することによって実行される。また、組換え受容体をコードする核酸分子、およびそのような核酸および／または核酸分子を含有するベクターまたは構築物が提供される。
【0435】
一部の事例では、組換え受容体、例えばキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする核酸配列は、シグナルペプチドをコードするシグナル配列を含有する。一部の態様では、シグナル配列は、天然ポリペプチドに由来するシグナルペプチドをコードし得る。他の態様では、シグナル配列は、異種または非天然シグナルペプチドをコードし得る。一部の実施形態では、シグナルペプチドは、膜貫通タンパク質に由来する。一部の例では、シグナルペプチドは、ＣＤ８ａ、ＣＤ３３、またはＩｇＧに由来する。シグナルペプチドの非限定的な例示的な例として、例えば、配列番号１５３に記載されるＣＤ３３シグナルペプチド、配列番号１５４に記載されるＣＤ８ａシグナルペプチド、もしくは配列番号３９に記載されるシグナルペプチドまたはそれらの改変変異体が挙げられる。一部の実施形態では、シグナルペプチドは、受託番号ＮＭ＿００１７６８に記載されるＣＤ８ａシグナルペプチドである。
【0436】
一部の実施形態では、組換え受容体をコードする核酸分子は、組換え受容体の発現を制御するように作動可能に連結した少なくとも１つのプロモーターを含有する。一部の例では、核酸分子は、組換え受容体の発現を制御するように作動可能に連結した２種、３種、以上のプロモーターを含有する。一部の実施形態では、核酸分子は、必要に応じて核酸分子が導入されるべき宿主（例えば、細菌、真菌、植物、または動物）の型に特異的であり、核酸分子がＤＮＡまたはＲＮＡベースであるかどうかを考慮して調節性配列、例えば転写および翻訳の開始および終止コドンを含有することができる。一部の実施形態では、核酸分子は、調節性／制御エレメント、例えば、プロモーター、エンハンサー、イントロン、ポリアデニル化シグナル、コザックコンセンサス配列、およびスプライスアクセプターまたはドナーを含有し得る。一部の実施形態では、核酸分子は、組換え受容体および／または１種または複数のさらなるポリペプチド（複数可）をコードするヌクレオチド配列に作動可能に連結した非天然プロモーターを含有し得る。一部の実施形態では、プロモーターは、ＲＮＡ ｐｏｌ Ｉ、ｐｏｌ ＩＩまたはｐｏｌ ＩＩＩプロモーターの中から選択される。一部の実施形態では、プロモーターは、ＲＮＡポリメラーゼＩＩ（例えば、ＣＭＶ、ＳＶ４０初期領域またはアデノウイルス主要後期プロモーター）によって認識される。別の実施形態では、プロモーターは、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩ（例えば、Ｕ６またはＨ１プロモーター）によって認識される。一部の実施形態では、プロモーターは、非ウイルスプロモーターまたはウイルスプロモーター、例えばサイトメガロ（ＣＭＶ）プロモーター、ＳＶ４０プロモーター、ＲＳＶプロモーター、およびマウス幹細胞ウイルスの長い末端配列に見い出されるプロモーターであり得る。他の公知のプロモーターもまた意図される。
【0437】
一部の実施形態では、プロモーターは、構成的プロモーターであるか、またはそれを含む。例示的な構成的プロモーターとして、例えば、サルウイルス４０初期プロモーター（ＳＶ４０）、サイトメガロウイルス最初期プロモーター（ＣＭＶ）、ヒトユビキチンＣプロモーター（ＵＢＣ）、ヒト伸長因子１αプロモーター（ＥＦ１α）、マウスホスホグリセリン酸キナーゼＩプロモーター（ＰＧＫ）、およびＣＭＶ初期エンハンサーとカップリングしたニワトリβ－アクチンプロモーター（ＣＡＧＧ）が挙げられる。一部の実施形態では、構成的プロモーターは、合成または改変プロモーターである。一部の実施形態では、プロモーターは、ＭＮＤプロモーター、骨髄増殖性肉腫ウイルスエンハンサーとともに改変ＭｏＭｕＬＶ ＬＴＲのＵ３領域を含有する合成プロモーターであるか、またはそれを含む（Challita et al.(1995) J. Virol. 69(2):748-755を参照）。一部の実施形態では、プロモーターは、組織特異的プロモーターである。別の実施形態では、プロモーターは、ウイルスプロモーターである。別の実施形態では、プロモーターは、非ウイルスプロモーターである。
【0438】
別の実施形態では、プロモーターは、調節プロモーター（例えば、誘導性プロモーター）である。一部の実施形態では、プロモーターは、誘導性プロモーターまたは抑制プロモーターである。一部の実施形態では、プロモーターは、Ｌａｃオペレーター配列、テトラサイクリンオペレーター配列、ガラクトースオペレーター配列またはドキシサイクリンオペレーター配列を含むか、あるいはそれらのアナログであるか、あるいはＬａｃリプレッサーもしくはテトラサイクリンリプレッサー、またはそれらのアナログによって結合されるか、またはそれによって認識されることが可能である。一部の実施形態では、核酸分子は、調節性エレメント、例えばプロモーターを含まない。
【0439】
一部の実施形態では、組換え受容体、例えばＣＡＲまたは他の抗原受容体をコードする核酸分子は、マーカーをコードする核酸配列をさらに含み、および／またはＣＡＲもしくは他の抗原受容体を発現する細胞は、マーカー、例えば、サロゲートマーカー、例えば受容体、例えば細胞表面受容体の切断形態、例えば切断型ＥＧＦＲ（ｔＥＧＦＲ）を発現するための細胞の形質導入または操作を確認するのに使用され得るサロゲートマーカー、例えば細胞表面マーカーを含む。一部の実施形態では、１種または複数のマーカー（複数可）は、形質導入マーカー、サロゲートマーカーおよび／または選択マーカーである。
【0440】
一部の実施形態では、マーカーは、形質導入マーカーまたはサロゲートマーカーである。形質導入マーカーまたはサロゲートマーカーは、核酸分子、例えば組換え受容体をコードする核酸分子が導入された細胞を検出するのに使用され得る。一部の実施形態では、形質導入マーカーは、細胞の改変を示し得るか、またはそれを確認し得る。一部の実施形態では、サロゲートマーカーは、組換え受容体、例えばＣＡＲとともに細胞表面上で共発現されるよう作製されたタンパク質である。特定の実施形態では、そのようなサロゲートマーカーは、ほとんどまたは全く活性を持たないよう改変された表面タンパク質である。ある特定の実施形態では、サロゲートマーカーは、組換え受容体をコードする同じ核酸分子上でコードされる。一部の実施形態では、組換え受容体をコードする核酸配列は、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、または自己切断性ペプチドもしくはリボソームスキッピングを引き起こすペプチド、例えばＴ２Ａ、Ｐ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ等の２Ａ配列をコードする核酸によって分離されてもよい、マーカーをコードする核酸配列に作動可能に連結されている。外因性マーカー遺伝子は、一部の事例では、細胞の検出または選択を可能にするよう、また一部の事例では細胞自殺を促進するよう操作された細胞と関連して利用され得る。
【0441】
例示的なサロゲートマーカーとして、細胞表面ポリペプチドの切断形態、例えば非機能的であり、細胞表面ポリペプチドの、シグナルもしくはその完全長形態によって通常形質導入されるシグナルを形質導入しないか、または形質導入することが不可能であり、および／または内部移行しないか、もしくは内部移行することが不可能である切断形態が挙げられ得る。例示的な切断型細胞表面ポリペプチドとして、増殖因子または他の受容体の切断形態、例えば、切断型ヒト上皮増殖因子受容体２（ｔＨＥＲ２）、切断型上皮増殖因子受容体（ｔＥＧＦＲ、配列番号７または１６６に記載される例示的なｔＥＧＦＲ配列）もしくは前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）またはそれらの改変形態が挙げられる。ｔＥＧＦＲは、抗体セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））または他の治療用抗ＥＧＦＲ抗体または結合性分子によって認識されるエピトープを含有してもよく、それらはｔＥＧＦＲ構築物で操作された細胞およびコードされた外因性タンパク質を同定または選択するのに、および／またはコードされた外因性タンパク質を発現する細胞を排除もしくは分離するのに使用され得る。米国特許第８，８０２，３７４号およびLiu et al., Nature Biotech. 2016 April; 34(4): 430-434を参照されたい。一部の態様では、マーカー、例えばサロゲートマーカーは、ＣＤ３４、ＮＧＦＲ、ＣＤ１９または切断型ＣＤ１９の全てまたは一部（例えば、切断形態）、例えば、切断型非ヒトＣＤ１９、または上皮増殖因子受容体（例えば、ｔＥＧＦＲ）を含む。一部の実施形態では、マーカーは、蛍光タンパク質、例えば、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、高感度緑色蛍光タンパク質（ＥＧＦＰ）、例えばスーパーフォールドＧＦＰ（ｓｆＧＦＰ）、赤色蛍光タンパク質（ＲＦＰ）、例えばｔｄＴｏｍａｔｏ、ｍＣｈｅｒｒｙ、ｍＳｔｒａｗｂｅｒｒｙ、ＡｓＲｅｄ２、ＤｓＲｅｄまたはＤｓＲｅｄ２、シアン蛍光タンパク質（ＣＦＰ）、青緑色蛍光タンパク質（ＢＦＰ）、高感度青色蛍光タンパク質（ＥＢＦＰ）、および黄色蛍光タンパク質（ＹＦＰ）、ならびに蛍光タンパク質の種変異体、単量体変異体、およびコドン最適化および／または増強変異体を含む、それらの変異体であるか、またはそれらを含む。一部の実施形態では、マーカーは、ルシフェラーゼ、大腸菌（Ｅ． ｃｏｌｉ）由来のｌａｃＺ遺伝子、アルカリホスファターゼ、分泌された胚アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）等の酵素であるか、またはそれらを含む。例示的な発光受容体遺伝子として、ルシフェラーゼ（ｌｕｃ）、β－ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）、β－グルクロニダーゼ（ＧＵＳ）またはそれらの変異体が挙げられる。
【0442】
一部の実施形態では、マーカーは、選択マーカーである。一部の実施形態では、選択マーカーは、外因性薬剤もしくは薬物に対して耐性を付与するポリペプチドであるか、またはそれを含む。一部の実施形態では、選択マーカーは、抗生物質耐性遺伝子である。一部の実施形態では、選択マーカーは、哺乳動物細胞に抗生物質耐性を付与する抗生物質耐性遺伝子である。一部の実施形態では、選択マーカーは、ピューロマイシン耐性遺伝子、ハイグロマイシン耐性遺伝子、ブラストサイジン耐性遺伝子、ネオマイシン耐性遺伝子、ジェネティシン耐性遺伝子もしくはゼオシン耐性遺伝子またはそれらの改変形態であるか、またはそれらを含む。
【0443】
一部の態様では、マーカー、例えばサロゲートマーカーは、ＣＤ３４、ＮＧＦＲ、または上皮増殖因子受容体（例えば、ｔＦＧＦＲ）の全てまたは一部（例えば、切断形態）を含む。一部の実施形態では、マーカーをコードする核酸は、リンカー配列、例えば切断可能なリンカー配列、例えばＴ２Ａをコードするポリヌクレオチド配列に作動可能に連結されている。例えば、マーカー、および適宜リンカー配列は、ＰＣＴ国際公開ＷＯ２０１４０３１６８７号において開示されるいずれかであり得る。例えば、マーカーは、リンカー配列、例えばＴ２Ａ切断可能リンカー配列に連結されてもよい切断型ＥＧＦＲ（ｔＥＧＦＲ）であり得る。切断型ＥＧＦＲ（例えば、ｔＥＧＦＲ）に関する例示的なポリペプチドは、配列番号７もしくは１６６に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号７もしくは１６６に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む。例示的なＴ２Ａリンカー配列は、配列番号６もしくは１６７に記載されるアミノ酸の配列、または配列番号６もしくは１６７に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列を含む。
【0444】
一部の実施形態では、このようなＣＡＲ構築物をコードする核酸分子は、Ｔ２Ａリボソームスキップエレメントおよび／またはｔＥＧＦＲ配列を、例えば、ＣＡＲをコードする配列の下流にコードする配列をさらに含む。一部の実施形態では、配列は、配列番号６もしくは１６７に記載されるＴ２Ａリボソームスキップエレメント、または配列番号６もしくは１６７に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列をコードする。一部の実施形態では、抗原受容体（例えば、ＣＡＲ）を発現するＴ細胞はまた、続いてそのような細胞を検出するためにマーカーとして使用され得る非免疫原性選択エピトープとしての切断型ＥＧＦＲ（ＥＧＦＲｔ）を発現するように（例えば、同じ構築物由来の２つのタンパク質を発現するようにＴ２Ａリボソームスイッチによって分離されるＣＡＲおよびＥＧＦＲｔをコードする構築物の導入によって）生成され得る（例えば、米国特許第８，８０２，３７４号を参照されたい）。一部の実施形態では、配列は、配列番号７もしくは１６６に記載されるｔＥＧＦＲ配列、または配列番号７もしくは１６６に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上の配列同一性を示すアミノ酸の配列をコードする。
【0445】
一部の実施形態では、単一プロモーターは、単一オープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）において、自己切断ペプチド（例えば、２Ａ配列）またはプロテアーゼ認識部位（例えば、フューリン）をコードする配列によって互いに分離される２つまたは３つの遺伝子（例えば、代謝経路をモジュレートするのに関与する分子をコードし、また組換え受容体をコードする）を含有するＲＮＡの発現を誘導し得る。したがって、ＯＲＦは、翻訳中（２Ａの場合）または翻訳後のいずれかで、個々のタンパク質にプロセシングされる単一ポリペプチドをコードする。一部の事例では、Ｔ２Ａ等のペプチドは、リボソームに、２ＡエレメントのＣ末端でのペプチド結合の合成をスキップさせることができ（リボソームスキッピング）、２Ａ配列の末端と、下流にある次のペプチドとの間の分離を引き起こす（例えば、de Felipe. Genetic Vaccines and Ther. 2:13(2004) and deFelipe et al. Traffic 5:616-626(2004)を参照）。多くの２Ａエレメントが当技術分野で公知である。本明細書に開示される方法および核酸において使用することができる２Ａ配列の例として、限定されずに、米国特許出願公開第２００７０１１６６９０号に記載されるような口蹄疫ウイルス由来の２Ａ配列（Ｆ２Ａ、例えば、配列番号１７２）、ウマ鼻炎Ａウイルス（Ｅ２Ａ、例えば配列番号１７０）、ゾセア・アシグナ（Ｔｈｏｓｅａ ａｓｉｇｎａ）ウイルス（Ｔ２Ａ、例えば配列番号６または１６７）、およびブタテッショウウイルス－１（Ｐ２Ａ、例えば配列番号１６８または１６９）が挙げられる。
【0446】
一部の実施形態では、マーカーは、Ｔ細胞上では天然で見い出されないか、もしくはＴ細胞の表面上では天然で見い出されない分子、例えば細胞表面タンパク質、またはその一部である。一部の実施形態では、分子は、非自己分子、非自己タンパク質、即ち、細胞が養子移入されるであろう宿主の免疫系によって「自己」と認識されないものである。
【0447】
一部の態様では、マーカーは、治療的機能を果たさず、および／または例えば首尾よく操作された細胞を選択するために、遺伝子操作用のマーカーとして使用される以外の効果を生じない。他の実施形態では、マーカーは、治療的分子または他の場合ではいくつかの所望の効果を発揮する分子、例えば、インビボで細胞が遭遇されるリガンド、例えば養子移入およびリガンドとの遭遇時に細胞の応答を増強し、および／または弱める共刺激性または免疫チェックポイント分子であってもよい。
【0448】
細胞における組換え受容体をコードする核酸分子の導入は、多数の公知のベクターのいずれかを使用して実行され得る。そのようなベクターとして、レンチウイルスおよびガンマレトロウイルス系、ならびにＰｉｇｇｙＢａｃまたはＳｌｅｅｐｉｎｇ Ｂｅａｕｔｙベースの遺伝子移入系等のトランスポゾンベースの系を含むウイルス系および非ウイルス系が挙げられる。例示的な方法として、ウイルス、例えばレトロウイルスまたはレンチウイルス形質導入、トランスポゾン、および電気穿孔を含む、受容体をコードする核酸の移入方法が挙げられる。
【0449】
一部の実施形態では、遺伝子移入は、まず細胞を、例えばそれを、サイトカインまたは活性化マーカーの発現によって測定される場合の増殖、生存、および／または活性化等の応答を誘導する刺激と組み合わせることによって刺激すること、続く活性化された細胞の形質導入、および臨床用途に十分な数への培養での増大によって遂行される。
【0450】
一部の状況では、刺激性因子（例えば、リンホカインまたはサイトカイン）の過剰発現は、対象にとって毒性であり得る。したがって、一部の状況では、操作された細胞は、例えば養子免疫療法を投与した際に、細胞がインビボでのネガティブ選択を受けやすくさせる遺伝子セグメントを含む。例えば、一部の態様では、細胞は、それらが投与される患者のインビボでの状態の変化の結果としてそれらが排除され得るように操作される。ネガティブ選択可能な表現型は、投与される薬剤、例えば化合物に対して感度を付与する遺伝子の挿入に起因し得る。ネガティブ選択可能な遺伝子として、ガンシクロビル感度を付与する単純ヘルペスウイルスＩ型チミジンキナーゼ（ＨＳＶ－Ｉ ＴＫ）遺伝子（Wigler et al., Cell 2:223, 1977）；細胞ヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＰＲＴ）遺伝子、細胞アデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＡＰＲＴ）遺伝子、細菌シトシンデアミナーゼ(Mullen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 89:33(1992))が挙げられる。
【0451】
一部の実施形態では、組換え核酸は、例えばサルウイルス４０（ＳＶ４０）、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）に由来するベクター等の組換え感染性ウイルス粒子を使用して、細胞へ移入される。一部の実施形態では、組換え核酸は、組換えレンチウイルスベクターまたはレトロウイルスベクター、例えばガンマレトロウイルスベクターを使用してＴ細胞へ移入される（例えば、Koste et al.(2014) Gene Therapy 2014 Apr 3. doi: 10.1038/gt.2014.25；Carlens et al.(2000) Exp Hematol 28(10): 1137-46；Alonso-Camino et al.(2013) Mol Ther Nucl Acids 2, e93；Park et al., Trends Biotechnol. 2011 November 29(11): 550-557を参照）。
【0452】
一部の実施形態では、レトロウイルスベクターは、長い反復配列（ＬＴＲ）、例えばモロニーマウス白血病ウイルス（ＭｏＭＬＶ）、骨髄増殖性肉腫ウイルス（ＭＰＳＶ）、マウス胚幹細胞ウイルス（ＭＥＳＶ）、マウス幹細胞ウイルス（ＭＳＣＶ）、脾フォーカス形成ウイルス（ＳＦＦＶ）、またはアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）に由来するレトロウイルスベクターを有する。ほとんどのレトロウイルスベクターは、マウスレトロウイルスベクターに由来する。一部の実施形態では、レトロウイルスは、任意の鳥類または哺乳動物細胞供給源に由来するものを含む。レトロウイルスベクターは通常、アンホトロピックであり、それらがヒトを含む数種の宿主細胞を感染することが可能であることを意味する。一実施形態では、発現されるべき遺伝子は、レトロウイルスｇａｇ、ｐｏｌおよび／またはｅｎｖ配列を置き換える。多数の説明的なレトロウイルス系が記載されている（例えば、米国特許第５，２１９，７４０号；同第６，２０７，４５３号；同第５，２１９，７４０号；Miller and Rosman (1989) BioTechniques 7:980-990；Miller, A.D.(1990) Human Gene Therapy 1:5-14；Scarpa et al.(1991) Virology 180:849-852；Burns et al.(1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:8033-8037；およびBoris-Lawrie and Temin (1993) Cur. Opin. Genet. Develop. 3:102-109）。
【0453】
レンチウイルス形質導入の方法は公知である。例示的な方法は、例えば、Wang et al.(2012) J. Immunother. 35(9): 689-701；Cooper et al.(2003) Blood. 101:1637-1644；Verhoeyen et al.(2009) Methods Mol Biol. 506: 97-114；およびCavalieri et al. (2003) Blood. 102(2): 497-505に記載されている。
【0454】
一部の態様では、組換え核酸は、電気穿孔を介してＴ細胞に移入される（例えば、Chicaybam et al,(2013) PLoS ONE 8(3): e60298およびVan Tedeloo et al.(2000) Gene Therapy 7(16): 1431-1437を参照）。一部の実施形態では、組換え核酸は、転位を介してＴ細胞に移入される（例えば、Manuri et al.(2010) Hum Gene Ther 21(4): 427-437；Sharma et al.(2013) Molec Ther Nucl Acids 2, e74；およびHuang et al.(2009) Methods Mol Biol 506: 115-126を参照）。免疫細胞において遺伝子材料を導入および発現する他の方法として、リン酸カルシウムトランスフェクション（例えば、Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York. N.Y.に記載されている）、プロトプラスト融合、カチオン性リポソーム媒介性トランスフェクション；タングステン粒子促進微粒子衝撃（Johnston, Nature, 346: 776-777 (1990)）；およびリン酸ストロンチウムＤＮＡ共沈殿（Brash et al., Mol. Cell Biol., 7: 2031-2034 (1987)）が挙げられる。
【0455】
組換え産物をコードする核酸の移入のための他のアプローチおよびベクターは、例えば、国際特許出願公開ＷＯ２０１４０５５６６８号、および米国特許第７，４４６，１９０号に記載されるものである。
【0456】
一部の実施形態では、細胞、例えばＴ細胞は、増大中または後のいずれかに、例えばＴ細胞受容体（ＴＣＲ）またはキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）でトランスフェクトされ得る。所望の受容体の遺伝子の導入のためのこのトランスフェクションは、例えば、任意の適切なレトロウイルスベクターを用いて実行され得る。次に、遺伝子改変された細胞集団は、初期刺激（例えば、ＣＤ３／ＣＤ２８刺激）から解放され、続いて例えばデノボで導入された受容体を介して第２の型の刺激で刺激され得る。この第２の型の刺激は、ペプチド／ＭＨＣ分子、遺伝子導入された受容体の同族（架橋）リガンド（例えば、ＣＡＲの天然リガンド）または新たな受容体のフレームワーク内で直接結合する（例えば、受容体内の定常領域を認識することによって）任意のリガンド（例えば、抗体）の形態の抗原刺激を含み得る。例えば、Cheadle et al, "Chimeric antigen receptors for T-cell based therapy" Methods Mol Biol. 2012; 907:645-66またはBarrett et al., Chimeric Antigen Receptor Therapy for Cancer Annual Review of Medicine Vol. 65: 333-347 (2014)を参照されたい。
【0457】
一部の事例では、細胞、例えばＴ細胞が活性化されることを求めないベクターが使用され得る。一部のそのような場合では、細胞は、活性化の前に選択および／または形質導入され得る。したがって、細胞は、細胞の培養の前に、またはそれに続いて、一部の事例では、培養と同時に、または培養の少なくとも一部中に操作され得る。
【0458】
一部の態様では、細胞はさらに、サイトカインまたは他の因子の発現を促進するように操作される。さらなる核酸、例えば、導入用の遺伝子の中には、例えば移入された細胞の生存度および／または機能を促進することによって、療法の有効性を改善するもの；例えばインビボでの生存または局在化を評価するための細胞の選択および／または評価用の遺伝子マーカーを提供する遺伝子；例えば、Lupton S. D. et al., Mol. and Cell Biol., 11:6(1991)；およびRiddell et al., Human Gene Therapy 3:319-338(1992)によって記載されるように細胞をネガティブ選択を受けやすくさせることによって安全性を改善する遺伝子がある；同様に、ドミナントポジティブ選択可能マーカーとネガティブ選択可能マーカーとの融合に由来する二官能性選択可能融合遺伝子の使用について記載するＬｕｐｔｏｎらによるＰＣＴ／ＵＳ９１／０８４４２号およびＰＣＴ／ＵＳ９４／０５６０１号の刊行物も参照されたい。例えば、Ｒｉｄｄｅｌｌら、米国特許第６，０４０，１７７号の欄１４～１７を参照されたい。
【0459】
Ｖ．組成物および製剤
医薬組成物および製剤を含む、ＢＣＭＡ組換え受容体、および操作された細胞を含む組成物も提供される。このような組成物の中には、提供される抗ＢＣＭＡ組換え受容体（例えばＣＡＲ）を発現する複数の操作された細胞等の操作された細胞を含むものがある。一部の態様では、提供される方法および使用、例えば治療方法および使用において使用するための組成物、例えば細胞組成物も提供される。一部の実施形態では、提供される組成物は、疾患または障害、例えば、多発性骨髄腫を有する対象に投与された場合に、ある特定の治療の転帰、例えば、応答または安全性の結果を達成することが可能である。
医薬組成物および製剤を含む、ＢＣＭＡ組換え受容体、および操作された細胞を含む組成物も提供される。このような組成物の中には、提供される抗ＢＣＭＡ組換え受容体（例えばＣＡＲ）を発現する複数の操作された細胞等の操作された細胞を含むものがある。一部の態様では、提供される方法および使用、例えば治療方法および使用において使用するための組成物、例えば細胞組成物も提供される。一部の実施形態では、提供される組成物は、疾患または障害、例えば、多発性骨髄腫を有する対象に投与された場合に、ある特定の治療の転帰、例えば、応答または安全性の結果を達成することが可能である。
【0460】
ＢＣＭＡ結合組換えキメラ抗原受容体または前記受容体を発現する操作された細胞、前記受容体を発現する複数の操作された細胞、および／または併用処置または療法のための追加の薬剤を含む医薬製剤が提供される。医薬組成物および製剤は、一般に、１種または複数の任意の薬学的に許容される担体または賦形剤を含む。一部の実施形態では、組成物は少なくとも１種の追加の治療剤を含む。
【0461】
「医薬製剤」という用語は、中に含有される有効成分の生物活性が有効になるのを可能にするような形態で存在し、また製剤が投与される対象にとって許容されないほど毒性であるさらなる構成成分を含有しない調製物を指す。
【0462】
「薬学的に許容される担体」は、対象にとって無毒性である有効成分以外の医薬製剤中の成分を指す。薬学的に許容される担体として、バッファー、賦形剤、安定剤、または防腐剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【0463】
一部の態様では、担体の選択は、一部には、特定の細胞、結合分子、および／もしくは抗体によっておよび／または投与の方法によって決定される。したがって、種々の適した製剤が存在する。例えば、医薬組成物は、保存料を含有することができる。適した保存料は、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸ナトリウムおよび塩化ベンザルコニウムを含むことができる。一部の態様では、２種以上の保存料の混合物が使用される。保存料またはその混合物は典型的に、総組成物の重量で約０．０００１％～約２％の量で存在する。担体は、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)によって記載されている。薬学的に許容される担体は一般に、用いられる投薬量および濃度ではレシピエントにとって無毒性であり、リン酸塩、クエン酸塩および他の有機酸等のバッファー；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；保存料（オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；メチルまたはプロピルパラベン等のアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；およびｍ－クレゾール等）；低分子量（約１０残基未満の）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチンもしくは免疫グロブリン等のタンパク質；ポリビニルピロリドン等の親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニンもしくはリシン等のアミノ酸；グルコース、マンノースもしくはデキストリンを含む単糖、二糖および他の炭水化物；ＥＤＴＡ等のキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトール等の糖；ナトリウム等の塩形成対イオン；金属錯体（例えば、Ｚｎ－タンパク質錯体）；ならびに／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の非イオン性界面活性物質を含むがこれらに限定されない。
【0464】
緩衝剤が、一部の態様では、組成物中に含まれる。適した緩衝剤は、例えば、クエン酸、クエン酸ナトリウム、リン酸、リン酸カリウム、ならびに様々な他の酸および塩を含む。一部の態様では、２種以上の緩衝剤の混合物が使用される。緩衝剤またはその混合物は典型的に、総組成物の重量で約０．００１％～約４％の量で存在する。投与可能な（ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｂｌｅ）医薬組成物を調製するための方法が知られている。例示的な方法は、例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott Williams & Wilkins; 21st ed. (May 1, 2005)に、より詳細に記載されている。
【0465】
本明細書に記載の抗体の製剤には、凍結乾燥製剤および水溶液が含まれ得る。
【0466】
製剤または組成物は、結合分子または細胞により処置されている特定の適応症、疾患または状態に有用な２種以上の有効成分、好ましくは結合分子または細胞に対して相補的な活性を有するものを含有することもでき、この場合、それぞれの活性は、互いに有害に影響しない。そのような活性成分は、組合せにおいて、意図される目的に有効な量で適切に存在する。よって、一部の実施形態では、医薬組成物は、化学療法剤、例えば、アスパラギナーゼ、ブスルファン、カルボプラチン、シスプラチン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メトトレキセート、パクリタキセル、リツキシマブ、ビンブラスチン、ビンクリスチン等、他の薬学的に活性な薬剤または薬物をさらに含む。一部の実施形態では、細胞または抗体は、塩、例えば薬学的に許容される塩の形態で投与される。適した薬学的に許容される酸付加塩は、鉱酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸および硫酸、ならびに有機酸、例えば、酒石酸、酢酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、安息香酸、グリコール酸、グルコン酸、コハク酸およびアリールスルホン酸、例えば、ｐ－トルエンスルホン酸に由来する酸付加塩を含む。
【0467】
活性成分は、マイクロカプセル中、コロイド薬物デリバリーシステム（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルション、ナノ粒子およびナノカプセル）中またはマクロエマルション中に捕捉することができる。ある特定の実施形態では、医薬組成物は、シクロデキストリン封入複合体等の封入複合体として、またはリポソームとして製剤化される。リポソームは、特定の組織に宿主細胞（例えば、Ｔ－細胞またはＮＫ細胞）を標的化するために機能することができる。例えば、Szoka et al., Ann. Rev. Biophys. Bioeng., 9: 467 (1980)ならびに米国特許第４，２３５，８７１号、同第４，５０１，７２８号、同第４，８３７，０２８号および同第５，０１９，３６９号に記載されている方法等、リポソームを調製するために多くの方法が利用できる。
【0468】
医薬組成物は、一部の態様では、処置されるべき部位の感作の前にかつそれを引き起こすのに十分な時間で組成物のデリバリーが起こるように、時限放出（ｔｉｍｅ－ｒｅｌｅａｓｅｄ）、遅延放出および持続放出デリバリーシステムを用いることができる。多くの型の放出デリバリーシステムが利用でき、知られている。そのようなシステムは、組成物の反復投与を回避し、これにより、対象および医師にとっての利便性を増加させることができる。
【0469】
医薬組成物は、一部の実施形態では、治療有効または予防有効量等、疾患または状態を処置または防止するのに有効な量で結合分子および／または細胞を含有する。治療または予防有効性は、一部の実施形態では、処置された対象の定期的評価によってモニターされる。数日間またはそれよりも長い期間にわたる反復投与のために、状態に応じて、疾患症状の所望の抑制が起こるまで、処置は反復される。しかし、他の投薬量レジメンが有用となる場合があり、これを決定することができる。所望の投薬量は、組成物の単一ボーラス投与によって、組成物の複数ボーラス投与によってまたは組成物の継続注入投与によって送達することができる。
【0470】
ある特定の実施形態では、結合分子、例えば、ＣＡＲを含有する遺伝子操作された細胞の文脈において、対象は、１００万個またはその概数～約１０００億個またはその概数の範囲で、例えば、１００万個またはその概数～約５００億個またはその概数等（例えば、５００万個もしくはその概数、２，５００万個もしくはその概数、５，０００万個もしくはその概数、５億個もしくはその概数、１０億個もしくはその概数、５０億個もしくはその概数、２００億個もしくはその概数、３００億個もしくはその概数、４００億個もしくはその概数、または前述の値のうちいずれか２つによって定義される範囲）、例えば、１，０００万個またはその概数～約１，０００億個またはその概数（例えば、２，０００万個もしくはその概数、３，０００万個もしくはその概数、４，０００万個もしくはその概数、６，０００万個もしくはその概数、７，０００個もしくはその概数、８，０００万個もしくはその概数、９，０００万個もしくはその概数、１００億個もしくはその概数、２５０億個もしくはその概数、５００億個もしくはその概数、７５０億個もしくはその概数、９００億個もしくはその概数、または前述の値のうちいずれか２つによって定義される範囲）、および一部の事例では、１億個またはその概数～５００億個またはその概数（例えば、１億個またはその概数、１億２千万個またはその概数、１億５千万個またはその概数、２億５千万個またはその概数、３億個またはその概数、３億５千万個またはその概数、４億５千万個またはその概数、６億５千万個またはその概数、８億個またはその概数、９億個またはその概数、１２億個またはその概数、３０億個またはその概数、３００億個またはその概数、４５０億個またはその概数）、またはこれらの範囲の間のいずれかの値、および／または対象の体重１ｋｇ当たりのそのような細胞数である。一部の態様では、結合分子、例えばＣＡＲを発現する遺伝子操作された細胞の文脈において、組成物は、細胞療法の用量に対する投与のための細胞数を少なくとも含有することができ、例えば、本明細書に記載の投与のための細胞数の概数または少なくともその数（例えば、セクションＩＩ．Ｃ．における）を含有することができる。
【0471】
細胞は、標準投与技法、製剤および／またはデバイスを使用して投与することができる。組成物の貯蔵および投与のために、シリンジおよびバイアル等の製剤およびデバイスが提供される。細胞の投与は、自家または異種であってもよい。例えば、免疫応答性細胞または前駆体は、ある対象から得ることができ、同じ対象または異なる適合性対象に投与される。末梢血由来免疫応答性細胞またはその後代（例えば、インビボ、エクスビボまたはインビトロ由来）は、カテーテル投与を含む局在化注射、全身性注射、局在化注射、静脈内注射または非経口投与により投与することができる。治療用組成物（例えば、遺伝子改変された免疫応答性細胞を含有する医薬組成物）を投与する場合、これは一般に、単位投薬量注射可能形態（溶液、懸濁液、エマルション）で製剤化されるであろう。
【0472】
製剤は、経口、静脈内、腹腔内、皮下、肺、経皮、筋肉内、鼻腔内、頬側、舌下または坐薬投与のための製剤を含む。一部の実施形態では、細胞集団は、非経口投与される。用語「非経口」は、本明細書で使用される場合、静脈内、筋肉内、皮下、直腸、腟、頭蓋内、胸腔内、および腹腔内投与を含む。一部の実施形態では、細胞集団は、静脈内、腹腔内または皮下注射による末梢全身性デリバリーを使用して対象に投与される。
【0473】
組成物は、一部の実施形態では、一部の態様では、選択されたｐＨに緩衝され得る、滅菌液体調製物、例えば、等張性水溶液、懸濁液、エマルション、分散または粘稠性組成物として提供される。液体調製物は通常、ゲル、他の粘稠性組成物および固体組成物よりも調製が容易である。その上、液体組成物は若干、特に注射による投与がより簡便である。粘稠性組成物は、他方では、適切な粘性範囲内で製剤化して、特異的な組織とのより長い接触期間を提供することができる。液体または粘稠性組成物は、例えば、水、食塩水、リン酸緩衝食塩水、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコール）およびこれらの適した混合物を含有する溶媒または分散媒となり得る担体を含むことができる。
【0474】
滅菌注射可能溶液は、滅菌水、生理食塩水、グルコース、デキストロースその他等の適した担体、希釈剤または賦形剤との混合物等の溶媒中に結合分子を取り込むことにより調製することができる。組成物は、凍結乾燥されていてもよい。組成物は、所望の投与経路および調製物に応じて、湿潤、分散または乳化剤（例えば、メチルセルロース）、ｐＨ緩衝剤、ゲル化または粘性増強添加物、保存料、調味剤、着色その他等の補助的物質を含有することができる。標準テキストを、一部の態様では、適した調製物を調製するために参考にすることができる。
【0475】
抗菌保存料、抗酸化剤、キレート剤およびバッファーを含む、組成物の安定性および滅菌性を増強する様々な添加物を添加することができる。微生物の作用の防止は、様々な抗細菌および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸その他によって確実となり得る。注射可能医薬品形態の吸収延長は、吸収を遅延する薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンの使用によってもたらすことができる。
【0476】
持続放出調製物を調製することができる。持続放出調製物の適した例は、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスを含み、このマトリックスは、造形品、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの形態である。
【0477】
インビボ投与のために使用されるべき製剤は一般に、滅菌されている。滅菌性は、例えば、滅菌濾過膜を通した濾過によって容易に達成することができる。
【0478】
ＶＩ．製造品およびキット
提供される組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）、遺伝子組換え細胞、および／またはそれらを含む組成物を含む製造品またはキットも提供される。製造品は、容器および容器上もしくは容器と関連付けられるラベルまたは添付文書を含み得る。適切な容器として、例えば、瓶、バイアル、シリンジ、試験管、ＩＶ溶液バッグ等が挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチック等の様々な材料から形成され得る。一部の実施形態では、容器は、滅菌アクセスポートを有する。例示的な容器として、静脈内溶液バッグ、バイアル（注射用の針によって突き刺すことが可能な栓を含むバイアルを含む）が挙げられる。製造品またはキットは、組成物が本明細書に記載の状態（例えば、多発性骨髄腫）等の特定の状態を処置するために使用され得ることを示す添付文書をさらに含み得る。代替的に、または追加的に、製造品またはキットは、薬学的に許容される緩衝剤を含む別の容器または同じ容器をさらに含み得る。製造品は、他のバッファー、希釈剤、フィルター、針、および／またはシリンジ等の他の材料をさらに含み得る。
提供される組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）、遺伝子組換え細胞、および／またはそれらを含む組成物を含む製造品またはキットも提供される。製造品は、容器および容器上もしくは容器と関連付けられるラベルまたは添付文書を含み得る。適切な容器として、例えば、瓶、バイアル、シリンジ、試験管、ＩＶ溶液バッグ等が挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチック等の様々な材料から形成され得る。一部の実施形態では、容器は、滅菌アクセスポートを有する。例示的な容器として、静脈内溶液バッグ、バイアル（注射用の針によって突き刺すことが可能な栓を含むバイアルを含む）が挙げられる。製造品またはキットは、組成物が本明細書に記載の状態（例えば、多発性骨髄腫）等の特定の状態を処置するために使用され得ることを示す添付文書をさらに含み得る。代替的に、または追加的に、製造品またはキットは、薬学的に許容される緩衝剤を含む別の容器または同じ容器をさらに含み得る。製造品は、他のバッファー、希釈剤、フィルター、針、および／またはシリンジ等の他の材料をさらに含み得る。
【0479】
ラベルまたは添付文書は、組成物が、個体におけるＢＣＭＡ発現またはＢＣＭＡ関連疾患、障害または状態を処置するのに使用されることを示し得る。ラベルまたは添付文書は、組成物が再発したおよび不応性の多発性骨髄腫等の多発性骨髄腫を処置するために使用されることを示し得る。容器上または容器と関連付けられるラベルまたは添付文書は、製剤の再構成および／または使用に関する指示を示し得る。ラベルまたは添付文書は、製剤が、個体における再発したおよび不応性の多発性骨髄腫等の多発性骨髄腫を処置または防止するための皮下投与、静脈内投与、または他の投与様式に有用であるか、またはそれが意図されていることをさらに示し得る。ラベルまたは添付文書は、製剤が、再発したおよび不応性の多発性骨髄腫を含む多発性骨髄腫を処置または防止するための皮下投与、静脈内投与、または他の投与様式に有用であるか、またはそれが意図されていることをさらに示し得る。
【0480】
容器は、一部の実施形態では、それ単独で存在するか、あるいは多発性骨髄腫を処置、防止および／または診断するのに有効な別の組成物と組み合わせられる組成物を保持する。製造品またはキットは、（ａ）その中に組成物が含有された第１の容器（即ち、第１の医薬）であって、組成物が、抗体（例えば、抗ＢＣＭＡ抗体）またはその抗原結合性断片または組換え受容体（例えば、ＣＡＲ）を含む、第１の容器；および（ｂ）その中に組成物が含有された第２の容器（即ち、第２の医薬）であって、組成物が、さらなる薬剤、例えば、細胞傷害性またはその他の治療剤を含む、第２の容器を含み、対象を有効量の第２の医薬で処置するためのラベルまたは添付文書をさらに含む。
【0481】
対象において得られた試料中の血清ｓＢＣＭＡのレベルおよび／またはＩｇＧの存在を決定するための１種または複数の試薬を含有する製造品またはキットも提供される。一部の実施形態では、キットは、試料中の血清ｓＢＣＭＡのレベルおよび／またはＩｇＧの存在を決定するために１種または複数の試薬を使用するための説明書をさらに含む。
【0482】
ＶＩＩ．定義
本明細書で使用される場合、抗体の「対応する形態」への言及は、２つの抗体の特性または活性を比較する場合、抗体の同じ形態を使用して特性を比較することを意味する。例えば、ある抗体が第１の抗体の対応する形態の活性と比較してより高い活性を有すると記載されている場合、その抗体のｓｃＦｖのような特定の形態が第１の抗体のｓｃＦｖ形態と比較してより高い活性を有することを意味する。
本明細書で使用される場合、抗体の「対応する形態」への言及は、２つの抗体の特性または活性を比較する場合、抗体の同じ形態を使用して特性を比較することを意味する。例えば、ある抗体が第１の抗体の対応する形態の活性と比較してより高い活性を有すると記載されている場合、その抗体のｓｃＦｖのような特定の形態が第１の抗体のｓｃＦｖ形態と比較してより高い活性を有することを意味する。
【0483】
「ヒトＢＣＭＡ」とは、ヒト対象において見出され、例えば配列番号２１５を有するＢＣＭＡを指す。
【0484】
本明細書において「Ｆｃ領域」という用語は、定常領域の少なくとも一部を含有する免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用される。この用語は、ネイティブ配列Ｆｃ領域および変異体Ｆｃ領域を含む。一実施形態では、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６から、またはＰｒｏ２３０から、重鎖のカルボキシル末端まで伸長する。しかしながら、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）は、存在してもしなくてもよい。本明細書において特に指定しない限り、Ｆｃ領域または定数領域におけるアミノ酸残基のナンバリングは、Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1991に記載されているＥＵインデックスとも呼ばれるＥＵナンバリングシステムに従う。
【0485】
「全長抗体」、「インタクト抗体」、および「全抗体」という用語は、ネイティブ抗体構造と実質的に類似した構造を有する抗体、または本明細書で定義するＦｃ領域を含有する重鎖を有する抗体を指すために本明細書で互換的に使用される。
【0486】
「単離された」抗体とは、その自然環境の成分から分離された抗体である。一部の実施形態では、抗体は、例えば、電気泳動（例えば、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、等電点集束（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動）またはクロマトグラフィー（例えば、イオン交換または逆相ＨＰＬＣ）によって決定されるように、９５％または９９％を超える純度まで精製される。抗体の純度を評価するための方法については、例えば、Flatman et al., J. Chromatogr. B 848:79-87 (2007)を参照されたい。
【0487】
「単離された」核酸とは、その自然環境の成分から分離された核酸分子を指す。単離された核酸には、通常は核酸分子を含有する細胞内に含有される核酸分子が含まれるが、核酸分子は染色体外に、または本来の染色体位置とは異なる染色体位置に存在する。
【0488】
「抗ＢＣＭＡ抗体をコードする単離された核酸」とは、抗体の重鎖および軽鎖（またはその断片）をコードする１種または複数の核酸分子を指し、単一ベクターまたは別々のベクター中にそのような核酸分子を含み、そのような核酸分子は宿主細胞中の１つまたは複数の位置に存在する。
【0489】
「宿主細胞」、「宿主細胞株」および「宿主細胞培養物」という用語は、言い換え可能に使用され、そのような細胞の子孫を含む外因性核酸が導入された細胞を指す。宿主細胞は、「形質転換体」および「形質転換細胞」を含み、それらは、継代数に関係なく、初代形質転換細胞およびそれに由来する子孫を含む。子孫は、親細胞に対して、核酸内容が完全に一致していなくてもよく、突然変異を含有してもよい。元の形質転換細胞に関してスクリーニングもしくは選択される場合に同じ機能または生物活性を有する突然変異子孫は、本発明に含まれる。
【0490】
「ポリペプチド」および「タンパク質」という用語は、アミノ酸残基のポリマーを指すために互換的に使用され、最小の長さに限定されない。抗体および抗体鎖ならびに他のペプチド、例えばリンカーおよびＢＣＭＡ結合ペプチドを含むポリペプチドは、天然および／または非天然アミノ酸残基を含むアミノ酸残基を含み得る。用語はまた、ポリペプチドの発現後修飾、例えば、グリコシル化、シアリル化、アセチル化、リン酸化等も含む。一部の態様では、ポリペプチドは、タンパク質が所望の活性を維持する限り、ネイティブまたは天然配列に関して修飾を含有してもよい。これらの修飾は、部位特異的突然変異誘発によるような意図的なものであってもよく、タンパク質を産生する宿主の突然変異またはＰＣＲ増幅によるエラーのような偶発的なものであってもよい。
【0491】
本明細書で使用される場合、アミノ酸配列（参照ポリペプチド配列）に関して使用される場合の「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」および「パーセント同一性」および「配列同一性」は、配列をアラインし、必要に応じてギャップを導入して最大パーセント配列同一性を達成し、保存的置換を配列同一性の一部として考慮しない後の、参照ポリペプチド配列中のアミノ酸残基と同一である候補配列（例えば、対象抗体または断片）中のアミノ酸残基のパーセントとして定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定する目的のためのアラインメントは、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェア等の公的に利用可能なコンピュータソフトウェアを使用して、当業者の技術の範囲内にある様々な方法で達成され得る。当業者は、比較される配列の全長にわたって最大のアラインメントを達成するために必要なアルゴリズムを含む、配列をアラインするための適切なパラメーターを決定することができる。
【0492】
アミノ酸置換は、ポリペプチド中の１つのアミノ酸を、別のアミノ酸で置き換えることを含み得る。アミノ酸置換は、目的の結合性分子、例えば抗体に導入されてもよく、産物は、所望の活性、例えば抗原結合の保持／改善、または免疫原性の減少に関してスクリーニングされ得る。
【0493】
アミノ酸は一般に、次の共通側鎖特性に従ってグループ化することができる：
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖の配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖の配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【0494】
非保存的アミノ酸置換は、これらの種類の１つの成員を、別の種類で交換することを伴い得る。
【0495】
「ベクター」という用語は、本明細書で使用される場合、ベクターが連結される別の核酸を伝播することが可能な核酸分子を指す。この用語は、自己複製核酸構造としてのベクターならびにベクターが導入された宿主細胞のゲノムに取り込まれるベクターを含む。ある特定のベクターは、それらが作動可能に連結した核酸の発現を誘導することが可能である。そのようなベクターは、「発現ベクター」として本明細書で言及される。
【0496】
「添付文書」という用語は、市販の治療用製品のパッケージに慣例的に添付されている説明書で、そのような治療用製品の使用に関する適応症、用法、用量、投与、Ｔ細胞療法、禁忌および／または警告に関する情報が記載されているものを指す。
【0497】
本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに他の状況を指示しない限り、複数形を含む。例えば、「ａ」または「ａｎ」は、「少なくとも１つ」または「１種または複数」を意味する。本明細書中に記載される態様、実施形態および変形は、態様、実施形態および変形「からなる」および／または「から本質的になる」ことを含むと理解されよう。
【0498】
本開示全体にわたって、特許請求される主題の各種態様は、範囲形式で提示される。範囲形式での説明は、単に利便性および簡潔さのためであると理解されるべきであり、特許請求される主題の範囲に対する融通の利かない限定と解釈されるべきではない。したがって、範囲の説明は、考え得る部分範囲ならびにその範囲内の個々の数値全てを具体的に開示したとみなされるべきである。例えば、値の範囲が提供される場合、その範囲の上限と下限の間に介在する値それぞれ、およびその記載範囲における任意の他の記載値または介在値が特許請求される主題内に包含されることが理解されよう。これらのより小さな範囲の上限および下限は独立して、より小さな範囲に含まれてもよく、また記載範囲において任意の具体的に排除される限界を受けて、特許請求される主題内に包含される。記載範囲が限界の一方または両方を含む場合、それらの含まれる限界の一方または両方を排除する範囲もまた、特許請求される主題に含まれる。このことは、範囲の幅にかかわらず適用される。
【0499】
「約」という用語は、本明細書で使用される場合、この技術分野で当業者に容易に知られている各々値に関する通常の誤差範囲を指す。本明細書中の「約」の値またはパラメーターについての言及は、それ自体がその値またはパラメーターを対象とする実施形態を含む（および記載する）。例えば、「約Ｘ」に言及する説明は、「Ｘ」の説明を含む。
【0500】
本明細書で使用される場合、「組成物」は、２つ以上の、細胞を含む産物、物質、または化合物の任意の混合物を指す。組成物は、溶液、懸濁液、液体、粉末、ペースト、水性、非水性またはそれらの任意の組合せであり得る。
【0501】
本明細書で使用される場合、細胞または細胞の集団が、特定のマーカーに関して「陽性である」という記載は、特定のマーカー、通常は表面マーカーの細胞上または細胞中での検出可能な存在を指す。表面マーカーに言及する場合、当該用語は、フローサイトメトリーによって、例えばマーカーに特異的に結合する抗体を染色することと、前記抗体を検出することとによって検出される場合の表面発現マーカーの存在を指し、ここで、染色は、他の状況では同一条件下でアイソタイプ適合制御を用いて同じ手順を実行する、検出される染色を実質的に上回るレベルで、および／またはマーカーに関して陽性であることが公知の細胞に関するレベルと実質的に同様のレベルで、および／またはマーカーに関して陰性であることが公知の細胞に関するレベルより実質的に高いレベルで、フローサイトメトリーによって検出可能である。
【0502】
本明細書で使用される場合、細胞または細胞の集団が特定のマーカーに関して「陰性である」という記載は、特定のマーカー、通常は表面マーカーの細胞上または細胞中での実質的に検出可能な存在の非存在を指す。表面マーカーに言及する場合、当該用語は、フローサイトメトリーによって、例えば、マーカーに特異的に結合する抗体で染色することと、前記抗体を検出することとによって、検出される場合の表面発現の非存在を指し、ここで、染色は、他の状況では同一条件下でアイソタイプ適合性制御を用いて同じ手順を実行する、検出される染色を実質的に上回るレベルで、および／またはマーカーに関して陽性であることが公知の細胞に関するレベルより実質的に低いレベルで、および／またはマーカーに関して陰性であることが公知の細胞に関するレベルと比較した場合に実質的に同様のレベルで、フローサイトメトリーによって、検出されない。
【0503】
別記されない限り、本明細書で使用される技術分野の用語、表記法ならびに他の技術および化学用語または用語法は全て、特許請求される主題が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有すると意図される。一部の事例では、一般に理解される意味を有する用語は、明瞭のために、および／またはすぐに参照するために本明細書で定義されており、本明細書中にそのような定義を包含することは、当技術分野で一般に理解されるものと実質的な差を表すと必ずしも解釈されるべきではない。
【0504】
ＶＩＩＩ．例示的な実施形態
提供される実施形態の中でも、次のものを特に挙げる：
提供される実施形態の中でも、次のものを特に挙げる：
【0505】
１．多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、
（ａ）対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
を決定することと、
（ｂ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することと
を含む方法。
（ａ）対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
を決定することと、
（ｂ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することと
を含む方法。
【0506】
２．多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、ヒトＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
が事前に決定された対象に投与することを含む、方法。
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
が事前に決定された対象に投与することを含む、方法。
【0507】
３．多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、
（ａ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置について、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
が事前に決定された対象を選択することと、
（ｂ）Ｔ細胞療法を対象に投与することと
を含む方法。
（ａ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置について、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
が事前に決定された対象を選択することと、
（ｂ）Ｔ細胞療法を対象に投与することと
を含む方法。
【0508】
４．遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置について、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を選択する方法であって、対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
を決定することを含み、
ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有することが決定される場合、対象が、ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による投与について選択される方法。
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
を決定することを含み、
ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有することが決定される場合、対象が、ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による投与について選択される方法。
【0509】
５．ヒトＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置に対する、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象の方法を予測する方法であって、対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
を決定することを含み、
ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有する場合、対象が、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成すると予測され、
処置が、遺伝子操作されたＴ細胞の用量の対象への投与を含む、方法。
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより低い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有さないこと
を決定することを含み、
ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有する場合、対象が、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成すると予測され、
処置が、遺伝子操作されたＴ細胞の用量の対象への投与を含む、方法。
【0510】
６．多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、
（ａ）対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することと、
（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと、
（ｃ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することと
を含む方法。
（ａ）対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有することを決定することと、
（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと、
（ｃ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することと
を含む方法。
【0511】
７．多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、ヒトＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することを含み、
（ａ）対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病の存在を有すること
が事前に決定され；
（ｂ）（１）対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭがデバルキングされた、方法。
（ａ）対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病の存在を有すること
が事前に決定され；
（ｂ）（１）対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定されてから（２）対象がＴ細胞療法を投与されるまでの時点で、ＭＭがデバルキングされた、方法。
【0512】
８．デバルキングについて、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を選択する方法であって、対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すること
を決定することを含み、
ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定される場合、対象が、ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法の対象への投与の前のＭＭのデバルキングについて選択される方法。
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すること
を決定することを含み、
ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有すると決定される場合、対象が、ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法の対象への投与の前のＭＭのデバルキングについて選択される方法。
【0513】
９．ヒトＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法による処置に対する、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象の応答を予測する方法であって、対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すること
を決定することを含み、
ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有する場合、対象が、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成しないことが予測され、
処置が、遺伝子操作されたＴ細胞の用量の対象への投与を含む、方法。
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高い血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ重鎖病（ＨＣＤ）の存在を有すること
を決定することを含み、
ここで、対象が（ｉ）および／または（ｉｉ）を有する場合、対象が、完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成しないことが予測され、
処置が、遺伝子操作されたＴ細胞の用量の対象への投与を含む、方法。
【0514】
１０．多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する対象を処置する方法であって、
（ａ）対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することと；
（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；
（ｃ）対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することと；
（ｄ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む方法。
（ａ）対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより高い第１の血清可溶性Ｂ細胞成熟抗原（ｓＢＣＭＡ）レベルを有することを決定することと；
（ｂ）ＭＭをデバルキングすることと；
（ｃ）対象が、約６００ｎｇ／ｍＬより低いデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することと；
（ｄ）ヒトＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することとを含む方法。
【0515】
１１．対象が、
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高いかもしくは低い血清ｓＢＣＭＡレベルもしくはデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことを決定することをさらに含む、実施形態２、３、または７に記載の方法。
（ｉ）約６００ｎｇ／ｍＬより高いかもしくは低い血清ｓＢＣＭＡレベルもしくはデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有すること；および／または
（ｉｉ）ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことを決定することをさらに含む、実施形態２、３、または７に記載の方法。
【0516】
１２．対象が、約６００ｎｇ／より高いかまたは低い血清ｓＢＣＭＡレベルまたはデバルキング後の血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含む、実施形態１～１１のいずれか１つに記載の方法。
【0517】
１３．対象が、約５９０ｎｇ／ｍｌ、約５８０ｎｇ／ｍｌ、約５７０ｎｇ／ｍｌＬ、約５６６ｎｇ／ｍｌ、約５６０ｎｇ／ｍｌ、約５５０ｎｇ／ｍｌ、約５４０ｎｇ／ｍｌ、約５３０ｎｇ／ｍｌ、約５２０ｎｇ／ｍｌ、約５１０ｎｇ／ｍｌ、もしくは約５００ｎｇ／ｍｌより高いかもしくは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有することを決定することを含み；および／または
対象が、約５９０ｎｇ／ｍｌ、約５８０ｎｇ／ｍｌ、約５７０ｎｇ／ｍｌＬ、約５６６ｎｇ／ｍｌ、約５６０ｎｇ／ｍｌ、約５５０ｎｇ／ｍｌ、約５４０ｎｇ／ｍｌ、約５３０ｎｇ／ｍｌ、約５２０ｎｇ／ｍｌ、約５１０ｎｇ／ｍｌ、もしくは約５００ｎｇ／ｍｌより高いかもしくは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される、実施形態１～１２のいずれか１つに記載の方法。
対象が、約５９０ｎｇ／ｍｌ、約５８０ｎｇ／ｍｌ、約５７０ｎｇ／ｍｌＬ、約５６６ｎｇ／ｍｌ、約５６０ｎｇ／ｍｌ、約５５０ｎｇ／ｍｌ、約５４０ｎｇ／ｍｌ、約５３０ｎｇ／ｍｌ、約５２０ｎｇ／ｍｌ、約５１０ｎｇ／ｍｌ、もしくは約５００ｎｇ／ｍｌより高いかもしくは低い血清ｓＢＣＭＡレベルを有すると決定される、実施形態１～１２のいずれか１つに記載の方法。
【0518】
１４．対象が、ＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことを決定することを含む、実施形態１～９および１１～１３のいずれか１つに記載の方法。
【0519】
１５．対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有することを決定することが、対象の血清および／または尿中のＩｇＧを検出することを含む、実施形態１～９および１１～１４のいずれか１つに記載の方法。
【0520】
１６．血清ｓＢＣＭＡレベルの決定が、（ｉ）対象へのＴ細胞療法の投与の、または（ｉｉ）遺伝子操作されたＣＡＲ Ｔ細胞の用量の細胞が対象から得られる約３カ月前、約２カ月前、約１カ月前、約３週間前、約２週間前、または約１週間前に実行される、実施形態１～１５のいずれか１つに記載の方法。
【0521】
１７．対象がＩｇＧ ＨＣＤの存在を有するかまたは有さないことの決定が、（ｉ）対象へのＴ細胞療法の投与、または（ｉｉ）遺伝子操作されたＣＡＲ Ｔ細胞の用量の細胞が対象から得られる前の約３カ月、約２カ月、約１カ月、約３週間、約２週間、または約１週間の間に実行される、実施形態１～９および１１～１６のいずれか１つに記載の方法。
【0522】
１８．遺伝子操作された細胞の用量を対象に投与することをさらに含む、実施形態４、５、８、９および１２～１７のいずれか１つに記載の方法。
【0523】
１９．（ｉ）対象がＣＲまたはｓＣＲを達成すると予測される場合、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量を含むＴ細胞療法を対象に投与することをさらに含む；または
（ｉｉ）対象がＣＲまたはｓＣＲを達成しないと予測される場合、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量の対象への投与の前に、ＭＭのデバルキングについて対象を選択することをさらに含む、実施形態５、９および１２～１８のいずれか１つに記載の方法。
（ｉｉ）対象がＣＲまたはｓＣＲを達成しないと予測される場合、ＢＣＭＡに結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する遺伝子操作されたＴ細胞の用量の対象への投与の前に、ＭＭのデバルキングについて対象を選択することをさらに含む、実施形態５、９および１２～１８のいずれか１つに記載の方法。
【0524】
２０．対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の後に、対象が完全奏効（ＣＲ）または厳格な完全奏効（ｓＣＲ）を達成する、実施形態１～１９のいずれか１つに記載の方法。
【0525】
２１．対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の後に、対象がＣＲを達成する、実施形態１～２０のいずれか１つに記載の方法。
【0526】
２２．対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の後に、対象がｓＣＲを達成する、実施形態１～２０のいずれか１つに記載の方法。
【0527】
２３．デバルキングが、対象に化学療法、放射線、および／または免疫調節剤を投与することを含む、実施形態６～８、１０および１２～２２のいずれか１つに記載の方法。
【0528】
２４．化学療法が、メルファラン、ドキソルビシン、またはシクロホスファミド化学療法を含む、実施形態２３に記載の方法。
【0529】
２５．免疫調節剤が、サリドマイド、レナリドマイド、またはポマリドマイドである、実施形態２３または実施形態２４に記載の方法。
【0530】
２６．免疫調節剤がチェックポイント阻害剤である、実施形態２３～２５のいずれか１つに記載の方法。
【0531】
２７．デバルキングが、対象へのＴ細胞療法の投与の前の約３カ月以内、約２カ月以内、約１カ月以内、約３週間以内、約２週間以内、または約１週間以内に実行される、実施形態６～８、１０および１２～２６のいずれか１つに記載の方法。
【0532】
２８．対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の前に、対象が、フルダラビンを、対象の体表面積１ｍ２当たり２０～４０ｍｇもしくは約２０～４０ｍｇで、適宜３０ｍｇ／ｍ２もしくは約３０ｍｇ／ｍ２で毎日２～４日間投与すること、および／またはシクロホスファミドを、対象の体表面積１ｍ２当たり２００～４００ｍｇもしくは約２００～４００ｍｇで、適宜３００ｍｇ／ｍ２もしくは３００ｍｇ／ｍ２で毎日２～４日間投与することを含むリンパ球枯渇療法を受けている、実施形態１～２７のいずれか１つに記載の方法。
【0533】
２９．対象への遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与の前に、対象が、フルダラビンを、対象の体表面積１ｍ２当たり３０ｍｇもしくは約３０ｍｇ／ｍ２で毎日、シクロホスファミドを、対象の体表面積１ｍ２当たり３００ｍｇもしくは約３００ｍｇ／ｍ２で毎日、３日間投与することを含むリンパ球枯渇療法を受けている、実施形態１～２８のいずれか１つに記載の方法。
【0534】
３０．デバルキングがリンパ球枯渇療法前に実行される、実施形態２８または実施形態２９に記載の方法。
【0535】
３１．デバルキングがリンパ球枯渇療法後に実行される、実施形態２８～３０のいずれか１つに記載の方法。
【0536】
３２．ＭＭが高リスクＭＭならびに／または再発したおよび／もしくは不応性の（ｒ／ｒ）ＭＭである、実施形態１～３１のいずれか１つに記載の方法。
【0537】
３３．ＭＭが高リスクＭＭである、実施形態１～３２のいずれか１つに記載の方法。
【0538】
３４．ＭＭが再発したおよび／もしくは不応性の（ｒ／ｒ）ＭＭである、実施形態１～３３のいずれか１つに記載の方法。
【0539】
３５．対象が１８歳以上である、実施形態１～３４のいずれか１つに記載の方法。
【0540】
３６．対象が、ＭＭに対して３以上の事前治療ラインを以前に受けたことがある、実施形態１～３５のいずれか１つに記載の方法。
【0541】
３７．３以上の事前治療ラインの各々が、進行性疾患（ＰＤ；最終用量後６０日以内の進行）がその治療ラインに対する最良の応答でない限り、２回の連続サイクルを含む、実施形態３６に記載の方法。
【0542】
３８．３以上の事前治療ラインが、プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤、および抗ＣＤ３８抗体を含む、実施形態３６または実施形態３７に記載の方法。
【0543】
３９．対象が、３以上の事前治療ラインのうちの最後に対して不応性である、実施形態３６～３８のいずれか１つに記載の方法。
【0544】
４０．対象が、０または１の米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータスを有する、実施形態１～３９のいずれか１つに記載の方法。
【0545】
４１．対象が、遺伝子操作されたＴ細胞の用量の投与時に測定可能な疾患を有する、実施形態１～４０のいずれか１つに記載の方法。
【0546】
４２．測定可能な疾患が、
（ｉ）血清Ｍタンパク質 １．０ｇｇ／ｄＬ以上；
（ｉｉ）尿Ｍタンパク質 ２００ｍｇ／２４時間以上；および／または
（ｉｉｉ）血清遊離軽鎖（ＦＬＣ）比が異常である場合、罹病血清ＦＬＣレベル １０ｍｇ／ｄＬ以上
を含む、実施形態４１に記載の方法。
（ｉ）血清Ｍタンパク質 １．０ｇｇ／ｄＬ以上；
（ｉｉ）尿Ｍタンパク質 ２００ｍｇ／２４時間以上；および／または
（ｉｉｉ）血清遊離軽鎖（ＦＬＣ）比が異常である場合、罹病血清ＦＬＣレベル １０ｍｇ／ｄＬ以上
を含む、実施形態４１に記載の方法。
【0547】
４３．対象が、
（ｉ）中枢神経系（ＣＮＳ）病変；および／または
（ｉｉ）臨床的に関連するＣＮＳ病態の病歴もしくは存在
を有さない、実施形態１～４２のいずれか１つに記載の方法。
（ｉ）中枢神経系（ＣＮＳ）病変；および／または
（ｉｉ）臨床的に関連するＣＮＳ病態の病歴もしくは存在
を有さない、実施形態１～４２のいずれか１つに記載の方法。
【0548】
４４．対象が、活動性の形質細胞白血病（ＰＣＬ）またはその病歴を有さない、実施形態１～４３のいずれか１つに記載の方法。
【0549】
４５．ＣＡＲが、ＢＣＭＡに結合する細胞外抗原結合性ドメイン、膜貫通ドメイン、および細胞内シグナル伝達領域を含む、実施形態１～４４のいずれか１つに記載の方法。
【0550】
４６．細胞外抗原結合性ドメインが、可変重鎖（ＶＨ）領域、および適宜可変軽鎖（ＶＬ）領域を含む、実施形態４５に記載の方法。
【0551】
４７．ＶＨ領域が、配列番号１８９、１９０および１９１にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２およびＣＤＲ－Ｈ３を含み；ＶＬ領域が、配列番号１９２、１９３および１９４にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２およびＣＤＲ－Ｌ３を含み；または
ＶＨ領域が、配列番号１７３、１７４および１７５にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２およびＣＤＲ－Ｈ３を含み；ＶＬ領域が、配列番号１８３、１８４および１８５にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２およびＣＤＲ－Ｌ３を含む、実施形態４６に記載の方法。
ＶＨ領域が、配列番号１７３、１７４および１７５にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２およびＣＤＲ－Ｈ３を含み；ＶＬ領域が、配列番号１８３、１８４および１８５にそれぞれ記載されるアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２およびＣＤＲ－Ｌ３を含む、実施形態４６に記載の方法。
【0552】
４８．ＶＨ領域が、配列番号１８に記載されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ領域が、配列番号１９に記載されるアミノ酸配列を含み；
またはＶＨ領域が、配列番号２４に記載されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ領域が、配列番号２５に記載されるアミノ酸配列を含む、実施形態４６または実施形態４７に記載の方法。
またはＶＨ領域が、配列番号２４に記載されるアミノ酸配列を含み、ＶＬ領域が、配列番号２５に記載されるアミノ酸配列を含む、実施形態４６または実施形態４７に記載の方法。
【0553】
４９．細胞外抗原結合性ドメインが、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である、実施形態４５～４８のいずれか１つに記載の方法。
【0554】
５０．ｓｃＦｖが、配列番号２１３または配列番号１８８に記載のアミノ酸配列を含む、実施形態４９に記載の方法。
【0555】
５１．細胞内シグナル伝達領域が、共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、実施形態４５～５０のいずれか１つに記載の方法。
【0556】
５２．共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、もしくはＩＣＯＳの細胞内シグナル伝達ドメイン、またはそのシグナル伝達部分を含む、実施形態５１に記載の方法。
【0557】
５３．共刺激シグナル伝達ドメインが、膜貫通ドメインと、ＣＤ３－ゼータ（ＣＤ３ζ）鎖の細胞質シグナル伝達ドメインとの間にある、実施形態５１または実施形態５２に記載の方法。
【0558】
５４．膜貫通ドメインが、ＣＤ２８またはＣＤ８、適宜ヒトＣＤ２８またはＣＤ８由来の膜貫通ドメインであるか、またはそれを含む、実施形態４５～５３のいずれか１つに記載の方法。
【0559】
５５．ＣＡＲが、抗原結合性ドメインと膜貫通ドメインとの間に細胞外スペーサーをさらに含む、実施形態４５～５４のいずれか１つに記載の方法。
【0560】
５６．スペーサーがＣＤ８由来であり、適宜スペーサーがＣＤ８αヒンジである、実施形態５５に記載の方法。
【0561】
５７．膜貫通ドメインおよびスペーサーがＣＤ８由来である、実施形態５５または実施形態５６に記載の方法。
【0562】
５８．ＣＡＲが、配列番号１１６または配列番号１２４に記載されるアミノ酸配列を含む、実施形態４５～５７のいずれか１つに記載の方法。
【0563】
５９．ＣＡＲが、配列番号２１４に記載されるポリヌクレオチド配列によってコードされる、実施形態４５～５８のいずれか１つに記載の方法。
【0564】
６０．ＣＡＲがＡＢＥＣＭＡ（著作権）である、実施形態１～５９のいずれか１つに記載の方法。
【0565】
６１．遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、イデカブタゲン・ビクルユーセル細胞；ｂｂ２１２１７細胞；オルバカブタゲン・オートルユーセル細胞；ＣＴ１０３Ａ細胞；シルタカブタゲン・オートルユーセル細胞；ＫＩＴＥ５８５細胞；ＣＴ０５３細胞；ＢＣＭＡ－ＣＳ１ ｃＣＡＲ（ＢＣ１ｃＣＡＲ）細胞；Ｐ－ＢＣＭＡ－１０１細胞；Ｐ－ＢＣＭＡ－ＡＬＬＯ１細胞；Ｃ－ＣＡＲ０８８細胞；Ｄｅｓｃａｒｔｅｓ－０８細胞；ＰＢＣＡＲ２６９Ａ細胞；ＡＬＬＯ－７１５細胞；ＰＨＥ８８５細胞；ＡＵＴＯ８細胞；ＣＴＸ１２０細胞；ＣＢ－０１１細胞；ＡＬＬＯ－６０５（ＴｕｂｏＣＡＲ／ＭＭ）細胞；ｐＣＤＣＡＲ１（ＴｒｉＣＡＲ－Ｚ１３６）細胞、またはＧＣ０１２Ｆ細胞を含む、実施形態１～６０のいずれか１つに記載の方法。
【0566】
６２．遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、イデカブタゲン・ビクルユーセル細胞を含む、実施形態１～６１のいずれか１つに記載の方法。
【0567】
６３．遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、ＣＤ３＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞を含む、実施形態１～６２のいずれか１つに記載の方法。
【0568】
６４．遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、ＣＤ４＋ Ｔ細胞およびＣＤ８＋ Ｔ細胞の組合せならびに／またはＣＤ４＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞およびＣＤ８＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞の組合せを含む、実施形態１～６３のいずれか１つに記載の方法。
【0569】
６５．ＣＤ４＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞対ＣＤ８＋ ＣＡＲ発現Ｔ細胞および／またはＣＤ４＋ Ｔ細胞対ＣＤ８＋ Ｔ細胞の比が、１：１もしくはおよそ１：１であるかまたは１：３もしくはおよそ１：３～３：１もしくはおよそ３：１の間である、実施形態６４に記載の方法。
【0570】
６６．ナイーブ様Ｔ細胞および／もしくはセントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージが、用量中の合計の遺伝子操作されたＴ細胞の６０％を超えるかもしくはその概数を超え、適宜６５％、７０％、８０％、９０％、または９５％を超えるかもしくはその概数を超え；
ナイーブ様Ｔ細胞および／もしくはセントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージが、用量中の合計のＣＤ４＋の遺伝子操作されたＴ細胞の４０％を超えるかもしくはその概数を超え、適宜５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、もしくは９５％を超えるかもしくはその概数を超え；または
ナイーブ様Ｔ細胞および／もしくはセントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージが、用量中の合計のＣＤ８＋の遺伝子操作されたＴ細胞の４０％を超えるかもしくはその概数を超え、適宜５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、もしくは９５％を超えるかもしくはその概数を超える、実施形態１～６５のいずれか１つに記載の方法。
ナイーブ様Ｔ細胞および／もしくはセントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージが、用量中の合計のＣＤ４＋の遺伝子操作されたＴ細胞の４０％を超えるかもしくはその概数を超え、適宜５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、もしくは９５％を超えるかもしくはその概数を超え；または
ナイーブ様Ｔ細胞および／もしくはセントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージが、用量中の合計のＣＤ８＋の遺伝子操作されたＴ細胞の４０％を超えるかもしくはその概数を超え、適宜５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、もしくは９５％を超えるかもしくはその概数を超える、実施形態１～６５のいずれか１つに記載の方法。
【0571】
６７．ナイーブ様Ｔ細胞が、ＣＣＲ７＋ＣＤ４５ＲＡ＋、ＣＤ２７＋ＣＣＲ７＋、またはＣＤ６２Ｌ－ＣＣＲ７＋である、実施形態６６に記載の方法。
【0572】
６８．遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、約０．５×１０６～約６００×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含む、実施形態１～６７のいずれか１つに記載の方法。
【0573】
６９．遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、約１００×１０６～約６００×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含む、実施形態１～６８のいずれか１つに記載の方法。
【0574】
７０．遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、約１５０×１０６～約４５０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含む、実施形態１～６９のいずれか１つに記載の方法。
【0575】
７１．遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、約１５０×１０６、３００×１０６、または約４５０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含む、実施形態１～７０のいずれか１つに記載の方法。
【0576】
７２．遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、約０．５×１０６～約１０×１０６個のＣＡＲ陽性Ｔ細胞を含む、実施形態１～６８のいずれか１つに記載の方法。
【0577】
７３．遺伝子操作されたＣＡＲ Ｔ細胞の用量の細胞が対象から得られた、実施形態１～７２のいずれか１つに記載の方法。
【0578】
７４．遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、対象にとって自家である、実施形態１～７３のいずれか１つに記載の方法。
【0579】
７５．遺伝子操作されたＴ細胞の用量が、対象にとって同種異系である、実施形態１～７２のいずれか１つに記載の方法。
【実施例】
【0580】
ＩＸ．実施例
下記実施例は、単に例示的な目的で含まれており、本発明の範囲を限定するものと意図されない。
［実施例１］
下記実施例は、単に例示的な目的で含まれており、本発明の範囲を限定するものと意図されない。
［実施例１］
【0581】
再発したおよび不応性の多発性骨髄腫を有する患者におけるＢＣＭＡ指向性ＣＡＲ療法に対する応答
Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に特異的なＣＡＲを発現する自家Ｔ細胞を含有するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞組成物を、再発したおよび不応性の（Ｒ／Ｒ）多発性骨髄腫（ＭＭ）のヒト対象に投与した。
Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に特異的なＣＡＲを発現する自家Ｔ細胞を含有するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞組成物を、再発したおよび不応性の（Ｒ／Ｒ）多発性骨髄腫（ＭＭ）のヒト対象に投与した。
【0582】
Ａ．対象および処置
例示的な抗ＢＣＭＡ ＣＡＲを発現するように操作された自家Ｔ細胞を含有する組成物を、国際骨髄腫作業部会（ＩＭＷＧ）の基準に従って、３種類以上の事前治療ライン（免疫調節剤、プロテアソーム阻害剤（ＰＩ）、抗ＣＤ３８抗体を含む３種類以上の事前治療ライン）を受け、事前治療ラインに対して不応性のＲ／Ｒ ＭＭを有する成人ヒト対象に投与した。
例示的な抗ＢＣＭＡ ＣＡＲを発現するように操作された自家Ｔ細胞を含有する組成物を、国際骨髄腫作業部会（ＩＭＷＧ）の基準に従って、３種類以上の事前治療ライン（免疫調節剤、プロテアソーム阻害剤（ＰＩ）、抗ＣＤ３８抗体を含む３種類以上の事前治療ライン）を受け、事前治療ラインに対して不応性のＲ／Ｒ ＭＭを有する成人ヒト対象に投与した。
【0583】
投与されたＴ細胞組成物は、ＭＭを有する個々の対象からの白血球採取試料から末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を取得し、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体でＰＢＭＣを刺激し、例示的な抗ＢＣＭＡ ＣＡＲを含有するレンチウイルスベクターを細胞に形質導入し、凍結保存の前に１０日間細胞を増大させることによって生成した。例示的なＣＡＲは、抗ＢＣＭＡ ｓｃＦｖ、ＣＤ８αからのヒンジおよび膜貫通ドメイン、ならびにＣＤ１３７（４－１ＢＢ）共刺激ドメインとそれに続く、ＣＤ３ζ鎖の細胞内シグナル伝達ドメインを含有した。例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲのポリヌクレオチド配列は配列番号２１４に記載されており、例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲのポリペプチド配列は配列番号１１６に記載されている。
【0584】
対象はフルダラビン（ｆｌｕ、３０ｍｇ／ｍ２／日）とシクロホスファミド（ｃｙ、３００ｍｇ／ｍ２／日）によるリンパ球枯渇化学療法（ＬＤＣ）を３日間連続で受け、ＬＤＣはＣＡＲ Ｔ細胞注入の２日前に終了した。ＣＡＲ Ｔ細胞製造中は橋渡し療法が許可されたが、ＬＤＣの少なくとも１４日前には中止した。凍結保存された細胞組成物は静脈内投与前にベッドサイドで解凍され、対象には１５０～４５０×１０６（例えば、１５０、３００、４５０×１０６）個の総ＣＡＲ発現Ｔ細胞の用量が投与された。
【0585】
Ｂ．帰結および解析
要評価項目は全奏効率（ＯＲＲ）であり、完全奏効／厳格な完全奏効（ＣＲ／ｓＣＲ）率は重要な副次評価項目であった。完全奏効は、血液および尿中の骨髄腫タンパクが消失し、骨髄中の骨髄腫細胞が５％未満と定義された。その他の副次評価項目には、安全性、奏効期間（ＤＯＲ）、無増悪生存期間（ＰＦＳ）、全生存期間（ＯＳ）、薬物動態（ＰＫ）、最小残存病変（ＭＲＤ；次世代シークエンシングにより評価）、生活の質（ＱＯＬ）、医療経済学的アウトカム研究（ＨＥＯＲ）が含まれた。ベースライン特性はリンパ球枯渇前に収集され、一部のバイオマーカーについては１日目に収集された。単変量および多変量ロジスティック回帰モデルを使用して、ＣＲ／ｓＣＲ達成の可能性と相関するベースライン特性を同定した。
要評価項目は全奏効率（ＯＲＲ）であり、完全奏効／厳格な完全奏効（ＣＲ／ｓＣＲ）率は重要な副次評価項目であった。完全奏効は、血液および尿中の骨髄腫タンパクが消失し、骨髄中の骨髄腫細胞が５％未満と定義された。その他の副次評価項目には、安全性、奏効期間（ＤＯＲ）、無増悪生存期間（ＰＦＳ）、全生存期間（ＯＳ）、薬物動態（ＰＫ）、最小残存病変（ＭＲＤ；次世代シークエンシングにより評価）、生活の質（ＱＯＬ）、医療経済学的アウトカム研究（ＨＥＯＲ）が含まれた。ベースライン特性はリンパ球枯渇前に収集され、一部のバイオマーカーについては１日目に収集された。単変量および多変量ロジスティック回帰モデルを使用して、ＣＲ／ｓＣＲ達成の可能性と相関するベースライン特性を同定した。
【0586】
この例に描かれた結果が得られた時点で、１４０名の患者中１２８名がＣＡＲ Ｔ細胞の注入を受けていた。４２名の患者がＣＲ／ｓＣＲを達成し、８６名が非ＣＲ／ｓＣＲ（最良部分奏効［ＶＧＰＲ］、部分奏効［ＰＲ］、または応答なし）を示した。ＣＲ／ｓＣＲを有した対象のうち、３２名（７６％）が最小残存病変（ＭＲＤ）陰性（感度レベル＜１０～５個の有核細胞）であり、これらの患者のうち１９名は１２カ月の追跡調査でもＭＲＤ陰性が維持された（表Ｅ１）。
【0587】
【表3】
a MRD陰性は<10-5個の有核細胞と定義される。
【0588】
ベースラインの人口統計学的特性および疾患特性は、ＣＲ／ｓＣＲ患者と非ＣＲ／ｓＣＲ患者で概ね均衡がとれていた。注目すべき例外は、改訂国際病期分類（ＩＳＳ）のステージＩＩＩの疾患、免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）重鎖型疾患の存在、ＣＤ１３８＋形質細胞のパーセンテージ、およびβ－２－ミクログロブリン値であった（表Ｅ２）。
【0589】
【表4】
【0590】
ベースライン特性によるＣＲ／ｓＣＲの単変量解析では、ＩｇＧ重鎖対その他の重鎖タイプ（オッズ比［ＯＲ］：０．１６２、Ｐ＜０．０００１）、高可溶性ＢＣＭＡ（ｓＢＣＭＡ）（ＯＲ：０．６４６、Ｐ＝０．０００７）、β－２－ミクログロブリン（≧５．５対＜３．５ｍｇ／Ｌ、ＯＲ：０．２０１、Ｐ＝０．００７２）、髄外疾患の存在（ＯＲ：０．４２８、Ｐ＝０．０３９４）はＣＲ／ｓＣＲと負の相関を示したが、薬物製品中のベクターコピー数が多いことはＣＲ／ｓＣＲと正の相関を示した（ＯＲ：１．２９０、Ｐ＝０．０２８７）（表Ｅ３）。ＣＲ／ｓＣＲの多変量解析では、ＩｇＧ重鎖対他の重鎖タイプ（ＯＲ：０．１００、Ｐ＜０．０００１）、高ｓＢＣＭＡ（ＯＲ：０．６３７、Ｐ＝０．０１１０）、プロトロンビン時間－国際標準化比（ＰＴ－ＩＮＲ）検査の上昇（ＯＲ：０．００５，Ｐ＝０．０３６５）がＣＲ／ｓＣＲの負の相関因子として、薬物製品剤中のベクターコピー数が多いこと（ＯＲ：１．４８６、Ｐ＝０．０１６８）がＣＲ／ｓＣＲの正の相関因子として認められた（表Ｅ３）。記述的解析により、ＣＲ／ｓＣＲ患者と非ＣＲ／ｓＣＲ患者ではベースラインのｓＢＣＭＡが低いことが示された。
【0591】
【表5】
【0592】
両グループとも、ｓＢＣＭＡレベルはスクリーニングからベースラインまでの間に上昇した（表Ｅ４）。表Ｅ２のベースラインの数値を選択グループに分けた表Ｅ５に示されているように、ＣＲ／ｓＣＲを示した対象のうち、ベースラインのｓＢＣＭＡ値が５５６ｎｇ／ｍＬを超えたのはわずか５％であったのに対し、ＣＲ／ｓＣＲを示さなかった対象のうち、ベースラインのｓＢＣＭＡ値が５５６ｎｇ／ｍＬを超えたのは３１．３３％であった。
【0593】
【表6】
【0594】
【表7】
【0595】
ＣＲ／ｓＣＲのさらなる相関を同定するため、多変量ＸＧＢｏｏｓｔモデリングとＳＨＡＰ解析を実施した。１２８名の患者から、９８名の患者レベル変数および検査変数、ならびにバイオマーカーおよび薬物製品の特性からなる統合データセットが収集された。このデータセットをさらに前処理し、変換し、相関性の高い特徴を除去してから、６０変数の最終データで多変量ＸＧＢｏｏｓｔモデルを学習させた。クロスバリデーションとハイパーパラメーターチューニングを使用して、最適なモデルを選択し、最適なパラメーターでフルモデルを学習させた。最も予測された特徴量とＣＲ／ｓＣＲ予測への寄与が、Ｓｈａｐｌｅｙ加法説明（ＳＨＡＰ）解析を使用して同定され、次に個々に従属変数との整合性と関連性を評価した。ＣＲ／ｓＣＲグループと非ＣＲ／ｓＣＲグループの間で中央値に一変量差のない特徴量は、分布の違いや他の特徴量との相互作用に基づいてモデル内で同定することができた。
【0596】
図１は、ベースラインの特徴を重要度別にランク付けしたもので、濃い灰色は高いまたは存在するレベルを示し、薄い灰色は低いまたは存在しないレベルを示す。ＣＲ／ｓＣＲの可能性の増加と相関する特徴をグラフの右側に示し、非ＣＲ／ｓＣＲの可能性の増加と相関する特徴をグラフの左側に示す。より狭い多変量回帰モデルと一致して、ＩｇＧ重鎖病の存在とｓＢＣＭＡのより高値はＣＲ／ｓＣＲと負の相関を示し、ベクターコピー数のより高値はＣＲ／ｓＣＲと正の相関を示すことが判明した。ＸＧＢｏｏｓｔモデルで同定されたＣＲ／ｓＣＲと負の相関を示した追加の特徴には、Ｄ－二量体のより高値、フェリチンのより高値、ナトリウムのより低値が含まれた。
【0597】
ＸＧＢｏｏｓｔモデルの結果に基づいて、ＣＲ／ｓＣＲ、ＶＧＰＲ／ＰＲ、または応答なしと相関するベースライン因子を同定するために、さらに選択的な単変量解析を実施した。ベースラインのｓＢＣＭＡレベルが低いほど、より深い臨床的奏効と関連し（図２Ａ）、β－２－ミクログロブリンレベルが高いほど、奏効の欠如との相関が示唆された（図２Ｂ）。ベースラインのｓＢＣＭＡレベルが３００ｎｇ／ｍＬ以下であれば、ＣＲ／ｓＣＲを有するほとんどの患者とその他の奏効を有する患者とが区別された。
【0598】
ベースライン時にＩｇＧ重鎖病変を有さないことも、ＣＲ／ｓＣＲと相関することが観察され（図２Ｃ）；ＩｇＧ重鎖病変を有する患者の１８％のみがＣＲ／ｓＣＲを示したのに対し、別の鎖型の重鎖病変を有する患者または重鎖病変が検出されなかった患者では５７％であった。ＰＦＳ中央値は、ＩｇＧ重鎖病を有する患者において８．１カ月（９５％信頼区間、４．９－１１．０）であったのに対し、別の重鎖病を有する患者または重鎖病が検出されなかった患者では１１．９カ月（９５％信頼区間、４．９～１６．２）であった。このＣＲ／ｓＣＲの差は、非ＩｇＧ重鎖または軽鎖に対してＩｇＧ抗体で報告された半減期が長く、ＣＲ／ｓＣＲに到達するまでの期間がより長いことが影響している可能性がある。
【0599】
炎症の指標を含む臨床ベースラインの検査値を測定したところ、Ｄ－二量体とフェリチンのレベルはＣＲ／ｓＣＲを有さない患者に対してＣＲ／ｓＣＲを有する患者で有意に低かったが、ナトリウムレベルはＣＲ／ｓＣＲを有する患者に対してＣＲ／ｓＣＲを有さない患者で有意に低かった（図２Ｄ）。
【0600】
奏効の相関としての血清ｓＢＣＭＡレベルをさらに評価するため、ＣＲ／ｓＣＲを有する患者対ＣＲ／ｓＣＲを有さない患者において、橋渡し治療によるスクリーニング時およびベースライン時のｓＢＣＭＡレベルを評価した。橋渡し治療を受けた１１２名の患者のうち、３７名がＣＲ／ｓＣＲを示し、７５名がＣＲ／ｓＣＲを示さなかった。ベースラインのｓＢＣＭＡレベルは、ＣＲ／ｓＣＲを有する患者ではＣＲ／ｓＣＲを有さない患者よりも、橋渡し治療を受けたか否かにかかわらず低かった（表Ｅ６）。さらに、ＣＲ／ｓＣＲに至らなかった患者では、スクリーニングからＣＡＲ Ｔ細胞注入直前までの間に、血清ＢＣＭＡレベルのより大きな上昇が観察された。
【0601】
【表8】
【0602】
まとめると、その結果により、ＩｇＧ、ｓＢＣＭＡ、およびＰＴ－ＩＮＲ検査がＣＲ／ｓＣＲの負の相関因子であり、薬物製品中のベクターコピー数がＣＲ／ｓＣＲの正の相関因子であることが特定された。ｓＢＣＭＡは腫瘍負担の指標であり、ＢＣＭＡを標的とする治療に影響を及ぼす可能性があるため、ＣＲ／ｓＣＲを達成するためには、腫瘍負担の少ない患者を選択し、製造中または橋渡し治療中に腫瘍負担を制御することが重要であり得る。
［実施例２］
［実施例２］
【0603】
フロントライン自家幹細胞移植に対する適切な応答による臨床的高リスク多発性骨髄腫を有する患者における抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞による処置
Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に特異的なＣＡＲを発現する自家Ｔ細胞を含有するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞組成物を、自家幹細胞移植（ＡＳＣＴ）によるフロントライン治療後に応答不十分となった多発性骨髄腫（ＭＭ）を有するヒト対象に投与した。
Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に特異的なＣＡＲを発現する自家Ｔ細胞を含有するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞組成物を、自家幹細胞移植（ＡＳＣＴ）によるフロントライン治療後に応答不十分となった多発性骨髄腫（ＭＭ）を有するヒト対象に投与した。
【0604】
投与されたＴ細胞組成物は、処置される個々の対象からの白血球採取試料から末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を取得し、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体でＰＢＭＣを刺激し、例示的な抗ＢＣＭＡ ＣＡＲを含有するレンチウイルスベクターを細胞に形質導入し、凍結保存の前に１０日間細胞を増大させることによって生成した。例示的なＣＡＲは、抗ＢＣＭＡ ｓｃＦｖ、ＣＤ８αからのヒンジおよび膜貫通ドメイン、ならびにＣＤ１３７（４－１ＢＢ）共刺激ドメインとそれに続く、ＣＤ３ζ鎖の細胞内シグナル伝達ドメインを含有した。例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲを超えるポリヌクレオチド配列は配列番号２１４に記載されており、例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲのポリペプチド配列は配列番号１１６に記載されている。
【0605】
Ａ．適格な対象および処置
適格な対象は、３サイクル以上の誘導療法（プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤、およびデキサメタゾンを含む）、およびＡＳＣＴ（単回またはタンデム）を受けたＭＭを有する成人患者であったが、最後のＡＳＣＴの７０～１１０日後の時点で最良部分奏効（ＶＧＰＲ）未満と定義されるＡＳＣＴに対する不十分な奏効を示し、地固めまたは維持療法を使用しなかった患者であった。患者は、米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータス（ＰＳ）が１以下であった。
適格な対象は、３サイクル以上の誘導療法（プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤、およびデキサメタゾンを含む）、およびＡＳＣＴ（単回またはタンデム）を受けたＭＭを有する成人患者であったが、最後のＡＳＣＴの７０～１１０日後の時点で最良部分奏効（ＶＧＰＲ）未満と定義されるＡＳＣＴに対する不十分な奏効を示し、地固めまたは維持療法を使用しなかった患者であった。患者は、米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータス（ＰＳ）が１以下であった。
【0606】
適格な対象は、フルダラビン（ｆｌｕ、３０ｍｇ／ｍ２／日）とシクロホスファミド（ｃｙ、３００ｍｇ／ｍ２／日）によるリンパ球枯渇化学療法（ＬＤＣ）を３日間連続で受けた。患者は１５０～４５０×１０６個のＣＡＲ＋ Ｔ細胞の用量範囲で抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞の単回注入を受けた。ある特定の患者は抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入後、レナリドミドによる維持療法を受けた。
【0607】
有効性の主要評価項目は国際骨髄腫作業部会（ＩＭＷＧ）統一奏効基準に基づく完全奏効率（ＣＲＲ；ＣＲおよび厳格なＣＲ）であった。副次評価項目は、全奏効率（ＯＲＲ；部分奏効以上）、最良部分奏効率（ＶＧＰＲＲ）、奏効までの期間（ＴＴＲ）、奏効期間（ＤＯＲ）、無増悪生存期間（ＰＦＳ）、全生存期間（ＯＳ）、安全性、薬物動態（ＰＫ）を含んだ。探索的評価項目は、次世代シークエンシングによる可溶性ＢＣＭＡ（ｓＢＣＭＡ）レベルと最小残存病変陰性（ＭＲＤ－）の評価、およびデータポイントの欠落／不確定を減らすための補間によるＥｕｒｏＦｌｏｗ（１０－５個未満の有核細胞）データを含んだ。有効性と安全性は、ＣＡＲ－Ｔ細胞を受けた全ての対象で解析された。ＰＫ、ｓＢＣＭＡ、ＭＲＤは、評価可能な対象において解析した。
【0608】
抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞が製造され、３１／３２名の対象に注入された。対象の年齢中央値は６４歳であった。対象の６７．７％はＥＣＯＧ ＰＳが０であった。研究参加時に適格であった対象のうち、４１．９％の対象が改訂国際病期分類（Ｒ－ＩＳＳ）のステージ１を有し、１６．１％の対象がＲ－ＩＳＳステージＩＩを有し、Ｒ－ＩＳＳステージＩＩＩを有する対象はなく、３．２％が骨髄生検により決定された高腫瘍負荷を有し（骨髄ＣＤ１３８＋形質細胞が５０％以上）；６．５％が髄外病変を有した。さらに、対象は抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入時のベースライン腫瘍負荷が低い。
【0609】
解析時の追跡期間中央値は２７．５カ月（範囲２２～３１）であった。ＣＲＲは７４．２％（９５％ＣＩ ５５．４～８８．１）、ＯＲＲは８７．１％（９５％ＣＩ ７０．２～９６．４）であった（表Ｅ７）。ＴＴＲ中央値は１カ月（範囲０．９～２．８）であった。
【0610】
タイムトゥーイベント評価項目の結果を表Ｅ７に示す。ＢＣＭＡに特異的なＣＡＲを発現する自家Ｔ細胞を含有するＣＡＲ発現Ｔ細胞組成物の注入時または注入後に、グレード３～４の有害事象（ＡＥ）が２９名の対象（９３．５％）で報告され、最も多かったのは好中球減少症の２５名（８０．６％）の対象、白血球減少症の９名（２９．０％）、および貧血の７名（２２．６％）であった。グレード５のＡＥは報告されなかった。
【0611】
グレード１のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）は１４名の対象（４５．２％）に発生し、４名の対象（１２．９％）がグレード２の事象を有し、０名の対象がグレード３事象を有した。さらに、治験責任医師が特定した神経毒性（ＮＴ）は２名の対象（６．５％）に発現した。１名はグレード１のＮＴを有したが、もう１名はグレード３のＮＴを有した。
【0612】
【表9】
1Clopper-Pearson信頼区間。
【0613】
ｓＢＣＭＡレベル（注入時の範囲６．５～１５４．０ｎｇ／ｍＬ、ｎ＝３０）で評価すると、腫瘍負荷が低いにもかかわらず、３１名の評価可能な対象（表Ｅ８に示す）で頑強な細胞増大が観察された。細胞の増大は、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ注入によりＣＲ以上となった対象とＣＲ未満となった対象でより高かった（表Ｅ８）。
【0614】
【表10】
12022年1月15日がカットオフ日。
2データは幾何平均として表す。
【0615】
抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入後２カ月以内にｓＢＣＭＡが消失したのは、評価可能な対象の２４／３１名（７７．４％）であり、うち２２名はＣＲ以上であった。ｓＢＣＭＡが低いことは、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞処置でＣＲを達成する完全奏効を達成するのに有利である。ＣＲ以上であった２３名のうち、１６名（６９．６％；９５％ＣＩ、４９．１～８４．４）は抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入後６カ月でＭＲＤ－であった。１２カ月後のＭＲＤ－は、ＣＲの状態にかかわらず、評価可能な１７／２７名の対象（６２．９％；９５％ＣＩ ４４．２～７８．５）で認められ、ＣＲ以上であった評価可能な１６／２３名の対象（６９．６％；９５％ＣＩ ４９．１～８４．４）で認められた。注目すべきは、１６名人の対象のうち、１１名が２４カ月目にＭＲＤ－を維持し、２人は２４カ月目のデータが得られず、３名はデータが不確定であったことである。
【0616】
抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞による処置は、ＡＳＣＴによるフロントライン治療後に適切な応答を経験した対象において、頻繁に深い持続的な奏効を示した。抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞処置後、ＣＲ以上の対象において腫瘍の早期深部クリアランスが観察され、２年後の時点でも持続していた。これらの対象では、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞処置を受けた対象と比較して、ＣＲＳおよびＮＴの発生率が低かった。総合すると、ＮＤＭＭ対象における抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞処置の良好な臨床的リスクベネフィットプロファイルが支持される。
［実施例３］
［実施例３］
【0617】
フロントライン自家幹細胞移植後の早期再発による臨床的高リスク多発性骨髄腫を有する患者における抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞による処置
Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に特異的なＣＡＲを発現する自家Ｔ細胞を含有するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞組成物を、自家幹細胞移植（ＡＳＣＴ）によるフロントライン治療後に早期再発または応答不十分となった多発性骨髄腫（ＭＭ）を有するヒト対象に投与した。
Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に特異的なＣＡＲを発現する自家Ｔ細胞を含有するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞組成物を、自家幹細胞移植（ＡＳＣＴ）によるフロントライン治療後に早期再発または応答不十分となった多発性骨髄腫（ＭＭ）を有するヒト対象に投与した。
【0618】
投与されたＴ細胞組成物は、処置される個々の対象からの白血球採取試料から末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を取得し、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体でＰＢＭＣを刺激し、例示的な抗ＢＣＭＡ ＣＡＲを含有するレンチウイルスベクターを細胞に形質導入し、凍結保存の前に１０日間細胞を増大させることによって生成した。例示的なＣＡＲは、抗ＢＣＭＡ ｓｃＦｖ、ＣＤ８αからのヒンジおよび膜貫通ドメイン、ならびにＣＤ１３７（４－１ＢＢ）共刺激ドメインとそれに続く、ＣＤ３ζ鎖の細胞内シグナル伝達ドメインを含有した。例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲを超えるポリヌクレオチド配列は配列番号２１４に記載されており、例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲのポリペプチド配列は配列番号１１６に記載されている。
【0619】
Ａ．適格な対象および処置
適格な対象は、導入療法（プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤、およびデキサメタゾンを含む導入療法を３サイクル以上）、ＡＳＣＴ（単回またはタンデム）、レナリドミドを含有する維持を含むフロントライン処置を受けたが、フロントライン治療開始から１８カ月を経過した時点で進行性疾患（ＰＤ）と定義される早期再発を示した成人ヒト対象である。
適格な対象は、導入療法（プロテアソーム阻害剤、免疫調節剤、およびデキサメタゾンを含む導入療法を３サイクル以上）、ＡＳＣＴ（単回またはタンデム）、レナリドミドを含有する維持を含むフロントライン処置を受けたが、フロントライン治療開始から１８カ月を経過した時点で進行性疾患（ＰＤ）と定義される早期再発を示した成人ヒト対象である。
【0620】
適格な対象は、フルダラビン（ｆｌｕ、３０ｍｇ／ｍ２／日）とシクロホスファミド（ｃｙ、３００ｍｇ／ｍ２／日）によるリンパ球枯渇化学療法（ＬＤＣ）を３日間連続で受けた。患者は１５０～４５０×１０６個のＣＡＲ＋ Ｔ細胞の用量範囲で抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞の単回注入を受けた。一部の患者は、ＣＡＲ－Ｔ細胞注入の前に橋渡し治療（コルチコステロイド、アルキル化剤、免疫調節剤、プロテアソーム阻害剤［ＰＩ］、および／または抗ＣＤ３８抗体）も受けた。
【0621】
有効性の主要評価項目は国際骨髄腫作業部会（ＩＭＷＧ）統一奏効基準に基づく完全奏効率（ＣＲＲ；ＣＲおよび厳格なＣＲ）であった。副次評価項目は、全奏効率（ＯＲＲ；部分奏効以上）、最良部分奏効率（ＶＧＰＲＲ）、奏効までの期間（ＴＴＲ）、奏効期間（ＤＯＲ）、無増悪生存期間（ＰＦＳ）、全生存期間（ＯＳ）、安全性、薬物動態（ＰＫ）を含んだ。探索的評価項目は、次世代シークエンシングによる可溶性ＢＣＭＡ（ｓＢＣＭＡ）レベルと最小残存病変陰性（ＭＲＤ－）の評価、およびデータポイントの欠落／不確定を減らすための補間によるＥｕｒｏＦｌｏｗ（１０－５個未満の有核細胞）データを含んだ。有効性と安全性は、ＣＡＲ－Ｔ細胞を受けた全ての対象で解析された。ＰＫ、ｓＢＣＭＡ、ＭＲＤは、評価可能な対象において解析した。
【0622】
抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞が製造され、３７／３９名の対象に注入された。対象の年齢の中央値は５７歳、診断からの期間の中央値は１．６年であった。対象の６２．２％が米国東海岸癌臨床試験グループ（ＥＣＯＧ）ＰＳ ０であり、対象の７０．３％がＭＭに対する橋渡し治療を受けていた。試験参加時に適格であった対象のうち、１３．５％が改訂国際病期分類（Ｒ－ＩＳＳ）ステージＩ、５１．４％がＲ－ＩＳＳステージＩＩ、５．４％がＲ－ＩＳＳステージＩＩＩ、３２．４％が高リスク細胞遺伝学、１８．９％が骨髄生検で高腫瘍負荷（５０％以上の骨髄ＣＤ１３８＋形質細胞が）、８．１％が髄外病変であった。ほとんどの患者は免疫調節剤（８６．５％）またはプロテアソーム阻害剤（ＰＩ；８９．２％）に対して不応性の疾患を有し、８６．５％は二重不応性疾患を示した。
【0623】
解析時の追跡期間中央値は２１．５カ月（範囲２～３１）であった。ＣＲＲは４５．９％（９５％ＣＩ ２９．５～６３．１）、ＯＲＲは８３．８％（９５％ＣＩ ６８．０～９３．８）であった（表Ｅ９）。抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入後６カ月では、１１／１３例（８５％；９５％ＣＩ ５７．８～９５．７）の対象においてＭＲＤ－が観察された。抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入後１２カ月では、７／１０例（７０％；９５％ＣＩ ３９．７～８９．２）の対象においてＭＲＤ－が観察された。７名の対象のうち、１名は２０．８カ月でＰＤを示し、５名は１８カ月以上でＭＲＤ－を持続し、１名は１２カ月を超えるとデータが得られなかった。ＴＴＲ中央値は１カ月（範囲０．９～２．９）であった。ＤＯＲ中央値は１５．７カ月（９５％ＣＩ ７．６２～１９．８１）であった。ＰＦＳ中央値は１１．４カ月（９５％ＣＩ ５．５５～１９．５８）であり、ＯＳの中央値には達しなかった。ＤＯＲ、ＰＦＳ、およびＯＳのまでのタイムトゥーイベント評価項目を表Ｅ９に示す。
【0624】
抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入時または注入後のグレード（Ｇｒ）３～４の有害事象（ＡＥ）は全対象者に発現し、最も多かったのは好中球減少症３５例（９４．６％）、貧血１７例（４５．９％）、血小板減少症１４例（３７．８％）であった。肺炎と偽性敗血症により２名が死亡した。グレード１／２のサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）は３０名の対象（８１．１％）に発生し、１名の対象（２．７％）にグレード３の事象が発生した（表Ｅ１）。グレード１および２の治験責任医師が特定した神経毒性（ＮＴ）は８例（２１．６％）に発現した。グレード３以上のＮＴを示した対象はいなかった。
【0625】
【表11】
1Clopper-Pearson信頼区間。
【0626】
３６名の評価可能な対象において、頑強な細胞増大が認められた（表Ｅ４）。抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞の細胞増大レベルは、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入によりＣＲ未満となった対象とＣＲ以上となった対象で高かった（表Ｅ１０）。ｓＢＣＭＡ（注入時の範囲１５．０～７３７．０ｎｇ／ｍＬ、ｎ＝３６）は、ＣＲ以上となった全ての対象を含む２５／３７名（６７．６％）の対象において、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞注入後２カ月以内に消失した。
【0627】
【表12】
12022年1月15日がカットオフ日。
2データは幾何平均として表す。
【0628】
抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞による処置は、ＡＳＣＴによるフロントライン治療後に早期再発を経験した対象において、頻繁に深い奏効を示した。ＭＲＤ－は１８カ月より長く対象のサブセットにおいて持続した。理論に拘束されることを望まないが、ＡＳＣＴ後のレナリドミドによる維持療法は、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞の応答における持続性を増強する可能性がある。ＣＲＳとＮＴの発生率は、これらの対象と後の治療ラインで抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞により処置された対象とでは同程度であった。これらの結果を総合すると、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ－Ｔ細胞療法の良好な臨床的ベネフィット・リスクプロファイルと、早期処置ラインでの使用の可能性が支持される。
【0629】
本発明は、例えば本発明の各種態様を説明するために提供される特定の開示される実施形態に範囲が限定されると意図されない。記載される組成物および方法に対する各種変更は、本明細書中の説明および教示から明らかとなる。そのような変形は、本開示の真の範囲および主旨を逸脱することなく実施されてよく、本開示の範囲内に収まると意図される。
【0630】
【表13】
【表14】
【表15】
【表16】
【表17】
【表18】
【表19】
【表20】
【表21】
【表22】
【表23】
【表24】
【表25】
【表26】
【表27】
【表28】
【表29】
【表30】
【表31】
【表32】
【表33】
【表34】
【表35】
【図1】
【図2A】
【図2B】
【図2C】
【図2D】
【配列表】
【国際調査報告】