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特表2024-540643タンパク質発現および細胞分化のための方法および組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-10-31
(54)【発明の名称】タンパク質発現および細胞分化のための方法および組成物
(51)【国際特許分類】
C12N 15/11 20060101AFI20241024BHJP
C12N 15/113 20100101ALI20241024BHJP
C12N 15/12 20060101ALI20241024BHJP
C12N 15/88 20060101ALI20241024BHJP
C12N 5/10 20060101ALI20241024BHJP
C12N 15/16 20060101ALI20241024BHJP
A23L 33/18 20160101ALI20241024BHJP
C12N 5/07 20100101ALI20241024BHJP
C12N 5/071 20100101ALI20241024BHJP
A61K 48/00 20060101ALI20241024BHJP
A61K 31/7105 20060101ALI20241024BHJP
A61K 31/713 20060101ALI20241024BHJP
A61K 47/36 20060101ALI20241024BHJP
A61K 47/26 20060101ALI20241024BHJP
A61K 9/48 20060101ALI20241024BHJP
A61K 47/38 20060101ALI20241024BHJP
A61K 47/42 20170101ALI20241024BHJP
A61K 47/44 20170101ALI20241024BHJP
A61K 47/30 20060101ALI20241024BHJP
C08L 1/26 20060101ALI20241024BHJP
C08L 99/00 20060101ALI20241024BHJP
C08L 89/00 20060101ALI20241024BHJP
C08L 1/00 20060101ALI20241024BHJP
【ＦＩ】
C12N15/11 Z
C12N15/113 Z
C12N15/12
C12N15/88 Z
C12N5/10
C12N15/16
A23L33/18
C12N5/07
C12N5/071
A61K48/00
A61K31/7105
A61K31/713
A61K47/36
A61K47/26
A61K9/48
A61K47/38
A61K47/42
A61K47/44
A61K47/30
C08L1/26
C08L99/00
C08L89/00
C08L1/00
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024530492
(86)(22)【出願日】2022-11-22
(85)【翻訳文提出日】2024-07-05
(86)【国際出願番号】 GB2022052953
(87)【国際公開番号】W WO2023094801
(87)【国際公開日】2023-06-01
(31)【優先権主張番号】2116867.9
(32)【優先日】2021-11-23
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】522480458
【氏名又は名称】アンコモン バイオ リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100078282
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 秀策
(74)【代理人】
【識別番号】100113413
【弁理士】
【氏名又は名称】森下 夏樹
(74)【代理人】
【識別番号】100181674
【弁理士】
【氏名又は名称】飯田 貴敏
(74)【代理人】
【識別番号】100181641
【弁理士】
【氏名又は名称】石川 大輔
(74)【代理人】
【識別番号】230113332
【弁護士】
【氏名又は名称】山本 健策
(72)【発明者】
【氏名】ファラム， ルース ヘレン
(72)【発明者】
【氏名】ニグマトゥーリン， リナト
【テーマコード（参考）】
4B018
4B065
4C076
4C084
4C086
4J002
【Ｆターム（参考）】
4B018MD20
4B065AA90X
4B065AA90Y
4B065AB01
4B065AC14
4B065BA04
4B065BC46
4B065BD06
4B065BD35
4B065BD43
4B065CA24
4B065CA41
4B065CA44
4C076AA53
4C076DD66
4C076EE01
4C076EE30
4C076EE30H
4C076EE31H
4C076EE32
4C076EE36
4C076EE36H
4C076EE37
4C076EE38
4C076EE38H
4C076EE41H
4C076EE51
4C076FF68
4C084AA13
4C084MA37
4C084NA10
4C086AA01
4C086AA02
4C086EA16
4C086MA03
4C086MA05
4C086MA37
4C086NA10
4J002AB011
4J002AB031
4J002AB051
4J002AD001
4J002AJ001
4J002GE00
(57)【要約】
細胞分化または治療用医薬製品としての使用のためのバイオ医薬品に関連するタンパク質もしくは操作された細胞の産生を生じ得るタンパク質発現の変更のための方法および組成物が、本明細書で提供される。組成物は、糖、核酸分子および／またはポリマー性材料を含み得る。組成物および方法は、細胞による核酸の取り込みを促進しまたは容易にし得る。組成物および方法は、細胞の分化を促進しまたは容易にし得る。ある態様では、組成物は、糖、および細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている核酸分子、および細胞をカプセル封入するまたはそれに接着するように構成されているポリマー性材料を含む。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
糖、および細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている核酸分子；および前記細胞をカプセル封入するまたは前記細胞に接着するように構成されているポリマー性材料を含む組成物。
【請求項2】
前記ポリマー性材料がポリマーを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項3】
前記ポリマーが、多糖ベースのポリマー、ポリペプチドベースのポリマー、脂質ベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項4】
前記多糖ベースのポリマーが、アルジネートベースのポリマー、ジェランガムベースのポリマー、キャッサバベースのポリマー、トウモロコシベースのポリマー、コーンスターチベースのポリマー、キサンタンガムベースのポリマー、ローカストビーンベースのポリマー、プルランベースのポリマー、デキストランベースのポリマー、セルロースベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項5】
前記ポリマー性材料が、前記細胞をカプセル封入するように構成されている、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項6】
前記ポリマー性材料がヒドロゲルを含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項7】
前記ポリマー性材料が２次元ポリマーを含む、請求項６に記載の組成物。
【請求項8】
前記ポリマーが３次元ポリマーを含む、請求項６に記載の組成物。
【請求項9】
前記ポリマー性材料が、生分解性であるように構成されている、請求項１から８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項10】
細胞内でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されているリボ核酸（ＲＮＡ）を含む核酸分子および糖を含む組成物。
【請求項11】
前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化が、中胚葉系統、内胚葉系統または外胚葉系統への前記細胞の分化を容易にする、請求項１０に記載の組成物。
【請求項12】
前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化が、前記細胞の脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎または網膜分化を容易にする、請求項１１に記載の組成物。
【請求項13】
前記細胞の前記分化が、前記細胞の分化転換または前記細胞の指向性分化を含む、請求項１２に記載の組成物。
【請求項14】
前記細胞が、体細胞またはナイーブ細胞を含む、請求項１０から１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項15】
前記細胞が、脂肪細胞、血管細胞、心細胞、軟骨細胞、内皮細胞、上皮細胞、造血細胞、肝細胞、筋肉細胞、ニューロンまたは骨原性細胞を含む、請求項１から１４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項16】
前記細胞が前記筋肉細胞を含む、請求項１５に記載の組成物。
【請求項17】
前記筋肉細胞が、筋線維、筋管、筋細胞、筋芽細胞、筋原性スフェロイドまたは筋肉細胞前駆体を含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項18】
細胞内でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されている糖および核酸分子を含む組成物であって、前記細胞が、胚性幹細胞、不死化幹細胞、間葉系幹細胞、筋肉前駆細胞または誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含む幹細胞である、組成物。
【請求項19】
前記細胞が前記ｉＰＳＣを含む、請求項１８に記載の組成物。
【請求項20】
前記核酸分子がリボ核酸（ＲＮＡ）を含む、請求項１から９および１８から１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項21】
前記ＲＮＡが、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む、請求項１０から１７および２０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項22】
前記ＲＮＡが、前記ｍＲＮＡ、前記ｓａＲＮＡ、前記ｅＲＮＡ、前記ｔａ－ＲＮＡ、またはそれらの組合せを含む、請求項２１に記載の組成物。
【請求項23】
前記ＲＮＡが、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする、請求項２２または請求項２３に記載の組成物。
【請求項24】
前記ＲＮＡがモノシストロン性である、請求項２１から２３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項25】
前記ＲＮＡがポリシストロン性である、請求項２１から２３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項26】
前記核酸分子が前記ｍＲＮＡを含む、請求項２１から２５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項27】
前記核酸分子が前記ｓａＲＮＡを含む、請求項２１から２５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項28】
前記核酸分子が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡを含む、請求項２１から２７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項29】
前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡが、前記細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む、請求項２８に記載の組成物。
【請求項30】
前記細胞の多能性の前記低減が、前記細胞の前記分化を容易にする、請求項２９に記載の組成物。
【請求項31】
前記ポリヌクレオチド配列が、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む、請求項２９または請求項３０に記載の組成物。
【請求項32】
前記核酸分子が、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、前記第１の核酸分子が、前記ｍＲＮＡまたは前記ｓａＲＮＡであり、前記第２の核酸が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡである、請求項２１から３１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項33】
核酸分子および修飾糖を含む組成物であって、前記核酸分子が、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含み；前記修飾糖が、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含み；前記核酸または前記修飾糖が、細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている、組成物。
【請求項34】
前記修飾糖が、キトサン、ヒアルロン酸、プルラン、ヘパリン、アルジネート、またはそれらの組合せもしくは誘導体を含む、請求項３３に記載の組成物。
【請求項35】
前記修飾糖が修飾キトサンを含む、請求項３４に記載の組成物。
【請求項36】
前記修飾糖が、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、糖 フェノール修飾糖、またはそれらの組合せを含む、請求項３３から３５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項37】
前記脂肪族アルデヒド修飾糖が、ヘキサナールアルデヒド修飾糖、ヘプタナールアルデヒド修飾糖、オクタナールアルデヒド修飾糖、ノナナールアルデヒド修飾糖またはデカナールアルデヒド修飾糖を含む、請求項３３から３６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項38】
前記脂肪族アルデヒド修飾糖が、デカナールアルデヒド修飾糖を含む、請求項３６または請求項３７に記載の組成物。
【請求項39】
前記芳香族アルデヒド修飾糖が、ベンズアルデヒド修飾糖またはシンナムアルデヒド修飾糖を含む、請求項３３から３８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項40】
前記ポリアミン誘導体化糖が、スペルミン修飾糖、スペルミジン修飾糖、プトレシン修飾糖、ジエチルエチルアミン修飾糖、ジメチルエチルアミン修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖またはアルギニン修飾糖を含む、請求項３３から３９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項41】
前記脂質付加物を有する前記糖が、レシチンを有する糖またはホスファチジルコリンを有する糖を含む、請求項３３から４０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項42】
前記糖修飾糖が単糖修飾糖を含む、請求項３３から４１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項43】
前記単糖修飾糖が、ラクトース修飾糖、マンノース修飾糖、グルコース修飾糖、ガラクトース修飾糖、グルコサミン修飾糖、スクロース修飾糖、キシロース修飾糖、リボース修飾糖、フルクトース修飾糖またはグリセルアルデヒド修飾糖を含む、請求項４２に記載の組成物。
【請求項44】
前記糖修飾糖が多糖修飾糖を含む、請求項３３から４１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項45】
前記多糖修飾糖が、アニオン性多糖修飾糖、マルトース修飾糖、還元多糖修飾糖、またはそれらの組合せを含む、請求項４４に記載の組成物。
【請求項46】
前記アニオン性多糖修飾糖が、アルジネート修飾糖、カルボキシメチル化セルロース修飾糖、ヒアルロン酸修飾糖、ペクチン修飾糖、プルラン修飾糖、デンプン修飾糖またはキサンタンガム修飾糖を含む、請求項４５に記載の組成物。
【請求項47】
前記還元多糖修飾糖が、マルトデキストリン修飾糖またはセロビオース修飾糖を含む、請求項４５または請求項４６に記載の組成物。
【請求項48】
前記還元多糖修飾糖がカチオン性脂質付加物を含む、請求項４５から４７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項49】
前記フェノール修飾糖が、クロロゲン酸修飾糖、フェルラ酸修飾糖、コーヒー酸修飾糖、没食子酸修飾糖、またはそれらの組合せを含む、請求項３６から４８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項50】
前記核酸分子が、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする、請求項３３から４９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項51】
前記核酸分子がモノシストロン性である、請求項３３から５０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項52】
前記核酸分子がポリシストロン性である、請求項３３から５０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項53】
マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）またはサイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）をさらに含む、請求項３３から５２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項54】
前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡが、前記細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む、請求項５３に記載の組成物。
【請求項55】
前記細胞の多能性における前記低減が、前記細胞の前記分化を容易にする、請求項５４に記載の組成物。
【請求項56】
前記ポリヌクレオチド配列が、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む、請求項５５に記載の組成物。
【請求項57】
前記核酸分子が、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、前記第１の核酸分子が、前記ｍＲＮＡまたは前記ｓａＲＮＡであり、前記第２の核酸が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡである、請求項５３から５６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項58】
前記細胞内での前記タンパク質発現における前記変化が、前記細胞の分化を容易にする、請求項１から５７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項59】
脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む、請求項１から５８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項60】
前記糖が、水性溶液中または中性溶液中でカチオン性である、請求項１から５９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項61】
前記糖のカチオン性部分のカチオン性電荷が、前記糖１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む、請求項１から６０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項62】
前記糖の前記カチオン性部分の前記カチオン性電荷が、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む、請求項１から６１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項63】
前記糖が、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む、請求項１から６２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項64】
前記糖が、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む、請求項１から６３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項65】
前記糖が多糖を含む、請求項１から６４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項66】
前記糖および前記核酸分子が、互いに自己アセンブルするように構成されている、請求項１から６５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項67】
前記糖および前記核酸分子が、ポリプレックスを形成するように構成されている、請求項１から６６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項68】
前記核酸分子が、前記ポリプレックスの表面またはその近傍にある、請求項６７に記載の組成物。
【請求項69】
前記核酸分子が、前記ポリプレックス内にカプセル封入される、請求項６７に記載の組成物。
【請求項70】
前記ポリプレックスが、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である、請求項６７から６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項71】
前記ポリプレックスが、球状または直鎖状である、請求項６７から６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項72】
前記ポリプレックスの見掛けの直径が、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である、請求項６７から７１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項73】
前記ポリプレックスの見掛けの直径が、前記ＤＬＳまたは前記顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである、請求項６７から７２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項74】
前記ポリプレックスが、ナノ粒子をさらに含む、請求項６７から７３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項75】
前記核酸分子がＲＮＡ調節エレメントを含む、請求項１から７４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項76】
前記ＲＮＡ調節エレメントが、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む、請求項７５に記載の組成物。
【請求項77】
前記ＲＮＡ調節エレメントが、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む、請求項７５に記載の組成物。
【請求項78】
前記糖が、前記核酸分子を安定化する、請求項１から７７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項79】
前記糖が、前記核酸分子の分解を阻害または低減する、請求項１から７８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項80】
前記糖が、前記核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減する、請求項１から７９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項81】
前記核酸分子が化学的修飾を含む、請求項１から８０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項82】
前記核酸分子がアンロックド核酸を含む、請求項１から８１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項83】
前記核酸分子が、少なくとも２つの型の核酸を含む、請求項１から８２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項84】
前記細胞が、哺乳動物細胞、鳥類細胞、魚類細胞、軟体動物細胞または両生類細胞を含む、請求項１から８３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項85】
前記哺乳動物細胞が、ブタ細胞、ウシ細胞、スイギュウ類細胞、ヒツジ細胞、ヤギ細胞、シカ類細胞、バイソン類細胞、ラクダ類細胞、アカシカ類細胞またはウサギ細胞を含む、請求項８４に記載の組成物。
【請求項86】
前記哺乳動物細胞が前記ブタ細胞を含む、請求項８５に記載の組成物。
【請求項87】
前記ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、前記ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比が、少なくとも約１である、請求項１から８６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項88】
前記ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、前記ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比が、最大で約６０である、請求項１から８７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項89】
前記組成物が、前記核酸、前記ポリマー性材料および前記脂質を含み、前記ポリマー性材料の前記核酸に対する第１の質量比が、１：１以上であり、前記脂質の前記ポリマー性材料に対する第２の質量比が、１：１以上である、請求項５９から８８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項90】
前記第１の質量比が２：１以上であり、前記第２の質量比が２：１以上である、請求項８９に記載の組成物。
【請求項91】
前記第１の質量比が１００：１以上である、請求項９０に記載の組成物。
【請求項92】
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法であって、（ａ）細胞を、
ｉ．糖、および
ｉｉ．核酸分子
を含む組成物と接触させるステップ；
（ｂ）ポリマー性材料を使用して、前記細胞および前記組成物をカプセル封入するまたは接着させるステップ
を含み、それにより、前記細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にする、方法。
【請求項93】
前記ポリマー性材料がポリマーを含む、請求項９２に記載の方法。
【請求項94】
前記ポリマーが、多糖ベースのポリマー、ポリペプチドベースのポリマー、脂質ベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む、請求項９３に記載の方法。
【請求項95】
前記多糖ベースのポリマーが、アルジネートベースのポリマー、ジェランガムベースのポリマー、キャッサバベースのポリマー、トウモロコシベースのポリマー、コーンスターチベースのポリマー、キサンタンガムベースのポリマー、ローカストビーンベースのポリマー、プルランベースのポリマー、デキストランベースのポリマー、セルロースベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む、請求項９４に記載の方法。
【請求項96】
前記ポリマー性材料が、前記細胞をカプセル封入するように構成されている、請求項９２から９５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項97】
前記ポリマー性材料がヒドロゲルを含む、請求項９２から９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項98】
前記ポリマー性材料が２次元ポリマーを含む、請求項９７に記載の方法。
【請求項99】
前記ポリマーが３次元ポリマーを含む、請求項９８に記載の方法。
【請求項100】
前記ポリマー性材料が、生分解性であるように構成されている、請求項９２から９９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項101】
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法であって、前記細胞を、
ｉ．糖、および
ｉｉ．リボ核酸（ＲＮＡ）を含む核酸分子
を含む組成物と、前記細胞が前記組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップ
を含み、それにより、前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化を容易にする、方法。
【請求項102】
前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化が、中胚葉系統、内胚葉系統または外胚葉系統への前記細胞の分化を容易にする、請求項１０１に記載の方法。
【請求項103】
前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化が、前記細胞の脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎または網膜分化を容易にする、請求項１０２に記載の方法。
【請求項104】
前記細胞の前記分化が、前記細胞の分化転換または前記細胞の指向性分化を含む、請求項１０１から１０３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項105】
前記細胞が、体細胞またはナイーブ細胞を含む、請求項１０１から１０４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項106】
前記細胞が、脂肪細胞、血管細胞、心細胞、軟骨細胞、内皮細胞、上皮細胞、造血細胞、肝細胞、筋肉細胞、ニューロンまたは骨原性細胞を含む、請求項１０１から１０５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項107】
前記細胞が前記筋肉細胞を含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項108】
前記筋肉細胞が、筋線維、筋管、筋細胞、筋芽細胞、筋原性スフェロイドまたは筋肉細胞前駆体を含む、請求項１０７に記載の方法。
【請求項109】
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法であって、前記細胞を、
ｉ．糖、および
ｉｉ．核酸分子
を含む組成物と、前記細胞が前記組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップ
を含み、前記細胞が、胚性幹細胞、不死化幹細胞、間葉系幹細胞、筋肉前駆細胞または誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含む幹細胞を含み、それにより、前記幹細胞中での前記タンパク質発現における前記変化を容易にする、方法。
【請求項110】
前記細胞が前記ｉＰＳＣを含む、請求項１０９に記載の方法。
【請求項111】
前記核酸分子がリボ核酸（ＲＮＡ）を含む、請求項９２から１００および１０９から１１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項112】
前記ＲＮＡが、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む、請求項１０１から１０８および１１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項113】
前記ＲＮＡが、前記ｍＲＮＡ、前記ｓａＲＮＡ、前記ｅＲＮＡ、前記ｔａ－ＲＮＡ、またはそれらの組合せを含む、請求項１１２に記載の方法。
【請求項114】
前記ＲＮＡが、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする、請求項１１２または請求項１１３に記載の方法。
【請求項115】
前記ＲＮＡがモノシストロン性である、請求項１１２に記載の方法。
【請求項116】
前記ＲＮＡがポリシストロン性である、請求項１１２に記載の方法。
【請求項117】
前記核酸分子が前記ｍＲＮＡを含む、請求項１１２から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項118】
前記核酸分子が前記ｓａＲＮＡを含む、請求項１１２から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項119】
前記核酸分子が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡを含む、請求項１１２から１１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項120】
前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡが、前記細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む、請求項１１９に記載の方法。
【請求項121】
前記細胞の多能性における前記低減が、前記細胞の前記分化を容易にする、請求項１２０に記載の方法。
【請求項122】
前記ポリヌクレオチド配列が、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む、請求項１２０または請求項１２１に記載の方法。
【請求項123】
前記核酸分子が、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、前記第１の核酸分子が、前記ｍＲＮＡまたは前記ｓａＲＮＡであり、前記第２の核酸が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡである、請求項１１２から１２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項124】
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法であって、前記細胞を、
ｉ．脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含む修飾糖、ならびに
ｉｉ．メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、およびそれらの組合せを含む核酸分子
を含む組成物と、前記細胞が前記組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップ
を含み、それにより、前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化を容易にする、方法。
【請求項125】
前記修飾糖が、キトサン、ヒアルロン酸、プルラン、ヘパリン、アルジネート、またはそれらの組合せもしくは誘導体を含む、請求項１２４に記載の方法。
【請求項126】
前記修飾糖が修飾キトサンを含む、請求項１２５に記載の方法。
【請求項127】
前記修飾糖が、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、糖 フェノール修飾糖、またはそれらの組合せを含む、請求項１２４から１２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項128】
前記脂肪族アルデヒド修飾糖が、ヘキサナールアルデヒド修飾糖、ヘプタナールアルデヒド修飾糖、オクタナールアルデヒド修飾糖、ノナナールアルデヒド修飾糖またはデカナールアルデヒド修飾糖を含む、請求項１２４から１２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項129】
前記脂肪族アルデヒド修飾糖が、デカナールアルデヒド修飾糖を含む、請求項１２７または請求項１２８に記載の方法。
【請求項130】
前記芳香族アルデヒド修飾糖が、ベンズアルデヒド修飾糖またはシンナムアルデヒド修飾糖を含む、請求項１２４から１２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項131】
前記ポリアミン誘導体化糖が、スペルミン修飾糖、スペルミジン修飾糖、プトレシン修飾糖、ジエチルエチルアミン修飾糖、ジメチルエチルアミン修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖またはアルギニン修飾糖を含む、請求項１２４から１３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項132】
前記脂質付加物を有する前記糖が、レシチンを有する糖またはホスファチジルコリンを有する糖を含む、請求項１２４から１３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項133】
前記糖修飾糖が単糖修飾糖を含む、請求項１２４から１３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項134】
前記単糖修飾糖が、ラクトース修飾糖、マンノース修飾糖、グルコース修飾糖、ガラクトース修飾糖、グルコサミン修飾糖、スクロース修飾糖、キシロース修飾糖、リボース修飾糖、フルクトース修飾糖またはグリセルアルデヒド修飾糖を含む、請求項１３３に記載の方法。
【請求項135】
前記糖修飾糖が多糖修飾糖を含む、請求項１２４から１３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項136】
前記多糖修飾糖が、アニオン性多糖修飾糖、マルトース修飾糖、還元多糖修飾糖、またはそれらの組合せを含む、請求項１３５に記載の方法。
【請求項137】
前記アニオン性多糖修飾糖が、アルジネート修飾糖、カルボキシメチル化セルロース修飾糖、ヒアルロン酸修飾糖、ペクチン修飾糖、プルラン修飾糖、デンプン修飾糖またはキサンタンガム修飾糖を含む、請求項１３６に記載の方法。
【請求項138】
前記還元多糖修飾糖が、マルトデキストリン修飾糖またはセロビオース修飾糖を含む、請求項１３６または請求項１３７に記載の方法。
【請求項139】
前記還元多糖修飾糖がカチオン性脂質付加物を含む、請求項１３６から１３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項140】
前記フェノール修飾糖が、クロロゲン酸修飾糖、フェルラ酸修飾糖、コーヒー酸修飾糖、没食子酸修飾糖、またはそれらの組合せを含む、請求項１２７から１３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項141】
前記核酸分子が、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする、請求項１２４から１４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項142】
前記核酸分子がモノシストロン性である、請求項１２４から１４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項143】
前記核酸分子がポリシストロン性である、請求項１２４から１４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項144】
前記組成物が、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）またはサイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）をさらに含む、請求項１２４から１４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項145】
前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡが、前記細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む、請求項１４４に記載の方法。
【請求項146】
前記細胞の多能性における前記低減が、前記細胞の前記分化を容易にする、請求項１４５に記載の方法。
【請求項147】
前記ポリヌクレオチド配列が、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む、請求項１４６に記載の方法。
【請求項148】
前記核酸分子が、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、前記第１の核酸分子が、前記ｍＲＮＡまたは前記ｓａＲＮＡであり、前記第２の核酸が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡである、請求項１４４から１４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項149】
前記細胞内での前記タンパク質発現における前記変化が、前記細胞の分化を容易にする、請求項９２から１４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項150】
前記組成物が、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む、請求項９２から１４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項151】
前記糖が、水性溶液中または中性溶液中でカチオン性であるように構成されている、請求項９２から１５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項152】
前記糖のカチオン性部分のカチオン性電荷が、前記糖１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む、請求項９２から１５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項153】
前記糖の前記カチオン性部分の前記カチオン性電荷が、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む、請求項９２から１５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項154】
前記糖が、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む、請求項９２から１５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項155】
前記糖が、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む、請求項９２から１５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項156】
前記糖が多糖を含む、請求項９２から１５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項157】
前記糖および前記核酸分子が、互いに自己アセンブルするように構成されている、請求項９２から１５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項158】
前記糖および前記核酸分子が、ポリプレックスを形成するように構成されている、請求項９２から１５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項159】
前記核酸分子が、前記ポリプレックスの表面またはその近傍にある、請求項１５８に記載の方法。
【請求項160】
前記核酸分子が、前記ポリプレックス内にカプセル封入される、請求項１５８に記載の方法。
【請求項161】
前記ポリプレックスが、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である、請求項１５８から１６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項162】
前記ポリプレックスが、球状または直鎖状である、請求項１５８から１６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項163】
前記ポリプレックスの見掛けの直径が、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である、請求項１５８から１６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項164】
前記ポリプレックスの見掛けの直径が、前記ＤＬＳまたは前記顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである、請求項１５８から１６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項165】
前記ポリプレックスが、ナノ粒子をさらに含む、請求項１５８から１６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項166】
前記核酸分子がＲＮＡ調節エレメントを含む、請求項９２から１６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項167】
前記ＲＮＡ調節エレメントが、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む、請求項１６６に記載の方法。
【請求項168】
前記ＲＮＡ調節エレメントが、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む、請求項１６６に記載の方法。
【請求項169】
前記糖が、前記核酸分子を安定化するように構成されている、請求項９２から１６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項170】
前記糖が、前記核酸分子の分解を阻害または低減するように構成されている、請求項９２から１６９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項171】
前記糖が、前記核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている、請求項９２から１７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項172】
前記核酸分子が化学的修飾を含む、請求項９２から１７１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項173】
前記核酸分子がアンロックド核酸を含む、請求項９２から１７２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項174】
前記核酸分子が、少なくとも２つの型の核酸を含む、請求項９２から１７３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項175】
前記細胞が、哺乳動物細胞、鳥類細胞、魚類細胞、軟体動物細胞または両生類細胞を含む、請求項９２から１７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項176】
前記哺乳動物細胞が、ブタ細胞、ウシ細胞、スイギュウ類細胞、ヒツジ細胞、ヤギ細胞、シカ類細胞、バイソン類細胞、ラクダ類細胞、アカシカ類細胞またはウサギ細胞を含む、請求項１７５に記載の方法。
【請求項177】
前記哺乳動物細胞が前記ブタ細胞を含む、請求項１７６に記載の方法。
【請求項178】
前記ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、前記ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比が、少なくとも約１である、請求項９２から１７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項179】
前記ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、前記ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比が、最大で約６０である、請求項９２から１７８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項180】
前記組成物が、前記核酸、前記ポリマー性材料および前記脂質を含み、前記ポリマー性材料の前記核酸に対する第１の質量比が、１：１以上であり、前記脂質の前記ポリマー性材料に対する第２の質量比が、１：１以上である、請求項９２から１７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項181】
前記第１の質量比が２：１以上であり、前記第２の質量比が２：１以上である、請求項１８０に記載の方法。
【請求項182】
前記第１の質量比が１００：１以上である、請求項１８１に記載の方法。
【請求項183】
前記接触させるステップにおける前記核酸分子および前記細胞の比が、１００００細胞当たり少なくとも約０．００１ｎｇである、請求項９２から１８２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項184】
前記接触させるステップにおける前記核酸分子および前記細胞の比が、１００００細胞当たり少なくとも約０．０１ｎｇである、請求項１８３に記載の方法。
【請求項185】
前記接触させるステップにおける前記核酸分子および前記細胞の比が、１００００細胞当たり少なくとも約０．１ｎｇである、請求項１８４に記載の方法。
【請求項186】
前記細胞内でのタンパク質発現の前記変化が、前記細胞内の前記核酸分子によってコードされる転写物の増加した発現を含む、請求項９２から１８５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項187】
前記細胞内の前記核酸分子によってコードされる前記転写物が、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＱＲＴ－ＰＣＲ）によって測定した場合に、（１）前記糖と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；（２）前記核酸分子と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；または（３）それらの組合せよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、５０％、１００％、１５０％、２倍、５倍、１０倍、１００倍または１０００倍高い、請求項１８６に記載の方法。
【請求項188】
前記細胞内でのタンパク質発現の前記変化が、前記細胞内の前記核酸分子によってコードされない転写物の増加した発現を含む、請求項９２から１８５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項189】
前記細胞内の前記核酸分子によってコードされない前記転写物が、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＱＲＴ－ＰＣＲ）によって測定した場合に、（１）前記糖と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；（２）前記核酸分子と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；または（３）それらの組合せよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、５０％、１００％、１５０％、２倍、５倍、１０倍、１００倍または１０００倍高い、請求項１８８に記載の方法。
【請求項190】
前記細胞内でのタンパク質発現の前記変化が、前記細胞内の前記核酸分子によってコードされない転写物の減少した発現を含む、請求項９２から１８５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項191】
前記細胞内の前記核酸分子によってコードされない前記転写物が、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＱＲＴ－ＰＣＲ）によって測定した場合に、（１）前記糖と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；（２）前記核酸分子と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；または（３）それらの組合せよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％ ５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または９９％低い、請求項１８８に記載の方法。
【請求項192】
請求項９２から１９１のいずれか一項に記載の方法によって調製された食用製品。
【請求項193】
請求項９２から１９１のいずれか一項に記載の方法によって調製された医薬品活性成分。
【請求項194】
請求項９２から１９１のいずれか一項に記載の方法によって調製された組織。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
相互参照
本出願は、全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０２１年１１月２３日出願の英国特許出願第２１１６８６７．９号に基づく利益を主張する。
本出願は、全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０２１年１１月２３日出願の英国特許出願第２１１６８６７．９号に基づく利益を主張する。
【背景技術】
【0002】
背景
トランスフェクションは、核酸分子を真核生物細胞中に導入することができる。細胞中にトランスフェクトされている核酸分子は、トランスフェクトされた細胞またはその子孫の構造的および／または機能的特性における変化を促進し得る。異なる構造的および／または機能的特性を有する細胞は、食物生産、診断薬の生産、生物学的薬物生産、細胞療法、ウイルス生産、バイオセンサー、組織操作または創薬が含まれるがこれらに限定されない広範な種々の目的において使用され得る。現在利用可能なトランスフェクション法は、有効性、拡張可能性または信頼性の欠如に起因して制限され得る。現在利用可能なトランスフェクション法は、産業規模または製造規模では適用可能でない場合がある。現在利用可能なトランスフェクション法は、ウイルスまたは非ウイルス性の方法として分類され得る。非ウイルスベクターを使用する（例えば、化学物質または脂質ベースの）非ウイルス性トランスフェクション法は、高い細胞毒性および高いパーセンテージの細胞喪失を生じ得る。非ウイルス性トランスフェクション法は、実施のための高いコストを必然的に伴い得る。非ウイルスベクターは、細胞中に導入されている核酸の低いトランスフェクション効率および望ましくない遺伝子発現に悩まされ得る。さらに、非ウイルス性トランスフェクション法は、動物由来構成要素とは対照的に、トランスフェクション効率を制限するトランスフェクション複合体形成のための狭い範囲の生理化学的条件を必然的に伴い得る。非ウイルス性トランスフェクションはまた、生分解性でも生体適合性でもない担体を使用し得る。ウイルスベクターを使用するウイルス性の方法は、ウイルスベクターに対する免疫原性応答を生成し得る。ウイルスベクターは、発癌性であり得る。ウイルスベクターはまた、小さいペイロード（例えば、トランスフェクトされた核酸のサイズ）のみを可能にし得、および／または製造のための高いコストを必然的に伴い得る。したがって、ウイルスまたは非ウイルスベースの現行のトランスフェクション法は、それらの広範なまたは産業規模の適用に関して制限される。
トランスフェクションは、核酸分子を真核生物細胞中に導入することができる。細胞中にトランスフェクトされている核酸分子は、トランスフェクトされた細胞またはその子孫の構造的および／または機能的特性における変化を促進し得る。異なる構造的および／または機能的特性を有する細胞は、食物生産、診断薬の生産、生物学的薬物生産、細胞療法、ウイルス生産、バイオセンサー、組織操作または創薬が含まれるがこれらに限定されない広範な種々の目的において使用され得る。現在利用可能なトランスフェクション法は、有効性、拡張可能性または信頼性の欠如に起因して制限され得る。現在利用可能なトランスフェクション法は、産業規模または製造規模では適用可能でない場合がある。現在利用可能なトランスフェクション法は、ウイルスまたは非ウイルス性の方法として分類され得る。非ウイルスベクターを使用する（例えば、化学物質または脂質ベースの）非ウイルス性トランスフェクション法は、高い細胞毒性および高いパーセンテージの細胞喪失を生じ得る。非ウイルス性トランスフェクション法は、実施のための高いコストを必然的に伴い得る。非ウイルスベクターは、細胞中に導入されている核酸の低いトランスフェクション効率および望ましくない遺伝子発現に悩まされ得る。さらに、非ウイルス性トランスフェクション法は、動物由来構成要素とは対照的に、トランスフェクション効率を制限するトランスフェクション複合体形成のための狭い範囲の生理化学的条件を必然的に伴い得る。非ウイルス性トランスフェクションはまた、生分解性でも生体適合性でもない担体を使用し得る。ウイルスベクターを使用するウイルス性の方法は、ウイルスベクターに対する免疫原性応答を生成し得る。ウイルスベクターは、発癌性であり得る。ウイルスベクターはまた、小さいペイロード（例えば、トランスフェクトされた核酸のサイズ）のみを可能にし得、および／または製造のための高いコストを必然的に伴い得る。したがって、ウイルスまたは非ウイルスベースの現行のトランスフェクション法は、それらの広範なまたは産業規模の適用に関して制限される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0003】
要旨
食物生産、診断薬の生産、生物学的薬物生産、細胞療法、ウイルス生産、バイオセンサー、組織操作または創薬が含まれるがこれらに限定されない種々の目的のための細胞の広範なまたは産業規模の適用は、細胞中への核酸の効率的なトランスフェクションを必然的に伴う。方法、組成物またはキットを使用して生成される細胞は、トランスフェクトされた核酸の望ましい発現レベルを有し得る。高度に効率的であり、高く安定な遺伝子発現を産生することができるトランスフェクションのための方法、組成物および／またはキットが、本明細書で提供される。本明細書で開示される方法、組成物またはキットは、動物由来材料または遺伝子改変の使用を必要とすることなしに、広範な種々の目的、細胞型および／または条件に広く適用可能であり得る。本明細書で開示される方法、組成物またはキットはまた、免疫原性反応および／またはがんを引き起こすことを回避し得る。本明細書で開示される方法、組成物またはキットは、低い細胞毒性を有し得る。本明細書で開示される方法、組成物またはキットは、動物由来製品を使用しない場合があるが、高いトランスフェクション効率をなおも提供し得る。本明細書で開示される方法、組成物またはキットは、生分解性または生体適合性である担体を使用し得る。本明細書で開示される方法、組成物またはキットは、大きいペイロード（例えば、トランスフェクトされた核酸のサイズ）を可能にし得、および／または実施／製造のための低いコストを必然的に伴い得る。したがって、これらの方法、組成物またはキットは、現在利用可能なウイルスまたは非ウイルス性トランスフェクションによって課される制限を克服し、かつ細胞のトランスフェクションの広範なまたは産業規模の適用を容易にし得る。
食物生産、診断薬の生産、生物学的薬物生産、細胞療法、ウイルス生産、バイオセンサー、組織操作または創薬が含まれるがこれらに限定されない種々の目的のための細胞の広範なまたは産業規模の適用は、細胞中への核酸の効率的なトランスフェクションを必然的に伴う。方法、組成物またはキットを使用して生成される細胞は、トランスフェクトされた核酸の望ましい発現レベルを有し得る。高度に効率的であり、高く安定な遺伝子発現を産生することができるトランスフェクションのための方法、組成物および／またはキットが、本明細書で提供される。本明細書で開示される方法、組成物またはキットは、動物由来材料または遺伝子改変の使用を必要とすることなしに、広範な種々の目的、細胞型および／または条件に広く適用可能であり得る。本明細書で開示される方法、組成物またはキットはまた、免疫原性反応および／またはがんを引き起こすことを回避し得る。本明細書で開示される方法、組成物またはキットは、低い細胞毒性を有し得る。本明細書で開示される方法、組成物またはキットは、動物由来製品を使用しない場合があるが、高いトランスフェクション効率をなおも提供し得る。本明細書で開示される方法、組成物またはキットは、生分解性または生体適合性である担体を使用し得る。本明細書で開示される方法、組成物またはキットは、大きいペイロード（例えば、トランスフェクトされた核酸のサイズ）を可能にし得、および／または実施／製造のための低いコストを必然的に伴い得る。したがって、これらの方法、組成物またはキットは、現在利用可能なウイルスまたは非ウイルス性トランスフェクションによって課される制限を克服し、かつ細胞のトランスフェクションの広範なまたは産業規模の適用を容易にし得る。
【課題を解決するための手段】
【0004】
組成物が本明細書で提供される。ある態様では、組成物は、糖、および細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている核酸分子、および細胞をカプセル封入するまたはそれに接着するように構成されているポリマー性材料を含む。一部の実施形態では、ポリマー性材料は、ポリマーを含む。一部の実施形態では、ポリマーは、多糖ベースのポリマー、ポリペプチドベースのポリマー、脂質ベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、多糖ベースのポリマーは、アルジネートベースのポリマー、ジェランガムベースのポリマー、キャッサバベースのポリマー、トウモロコシベースのポリマー、コーンスターチベースのポリマー、キサンタンガムベースのポリマー、ローカストビーンベースのポリマー、プルランベースのポリマー、デキストランベースのポリマー、セルロースベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ポリマー性材料は、細胞をカプセル封入するように構成されている。一部の実施形態では、ポリマー性材料は、ヒドロゲルを含む。一部の実施形態では、ポリマー性材料は、２次元ポリマーを含む。一部の実施形態では、ポリマーは、３次元ポリマーを含む。一部の実施形態では、ポリマー性材料は、生分解性であるように構成されている。
【0005】
組成物が本明細書で提供される。ある態様では、組成物は、細胞内でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されているリボ核酸（ＲＮＡ）を含む核酸分子および糖を含む。一部の実施形態では、細胞内でのタンパク質発現における変化は、中胚葉系統、内胚葉系統または外胚葉系統への細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、細胞内でのタンパク質発現における変化は、細胞の脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎または網膜分化を容易にする。一部の実施形態では、細胞の分化は、細胞の分化転換または細胞の指向性分化を含む。一部の実施形態では、細胞は、体細胞またはナイーブ細胞を含む。一部の実施形態では、細胞は、脂肪細胞、血管細胞、心細胞、軟骨細胞、内皮細胞、上皮細胞、造血細胞、肝細胞、筋肉細胞、ニューロンまたは骨原性細胞を含む。一部の実施形態では、細胞は、筋肉細胞を含む。一部の実施形態では、筋肉細胞は、筋線維、筋管、筋細胞、筋芽細胞、筋原性スフェロイドまたは筋肉細胞前駆体を含む。
【0006】
組成物が本明細書で提供される。ある態様では、組成物は、細胞内でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されている糖および核酸分子を含み、細胞は、胚性幹細胞、不死化幹細胞、間葉系幹細胞、筋肉前駆細胞または誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含む幹細胞である。
【0007】
一部の実施形態では、細胞は、ｉＰＳＣを含む。一部の実施形態では、核酸分子は、リボ核酸（ＲＮＡ）を含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ｍＲＮＡ、ｓａＲＮＡ、ｅＲＮＡ、ｔａ－ＲＮＡ、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする。一部の実施形態では、ＲＮＡは、モノシストロン性である。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ポリシストロン性である。一部の実施形態では、核酸分子は、ｍＲＮＡを含む。一部の実施形態では、核酸分子は、ｓａＲＮＡを含む。一部の実施形態では、核酸分子は、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、細胞の多能性の低減は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、第１の核酸分子は、ｍＲＮＡまたはｓａＲＮＡであり、第２の核酸は、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡである。
【0008】
組成物が本明細書で提供される。ある態様では、組成物は、核酸分子および修飾糖を含み、核酸分子は、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含み；修飾糖は、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含み；核酸または修飾糖は、細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている。
【0009】
一部の実施形態では、修飾糖は、キトサン、ヒアルロン酸、プルラン、ヘパリン、アルジネート、またはそれらの組合せもしくは誘導体を含む。一部の実施形態では、修飾糖は、修飾キトサンを含む。一部の実施形態では、修飾糖は、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、糖 フェノール修飾糖、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、ヘキサナールアルデヒド修飾糖、ヘプタナールアルデヒド修飾糖、オクタナールアルデヒド修飾糖、ノナナールアルデヒド修飾糖またはデカナールアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、デカナールアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、芳香族アルデヒド修飾糖は、ベンズアルデヒド修飾糖またはシンナムアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、ポリアミン誘導体化糖は、スペルミン修飾糖、スペルミジン修飾糖、プトレシン修飾糖、ジエチルエチルアミン修飾糖、ジメチルエチルアミン修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖またはアルギニン修飾糖を含む。一部の実施形態では、脂質付加物を有する糖は、レシチンを有する糖またはホスファチジルコリンを有する糖を含む。一部の実施形態では、糖修飾糖は、単糖修飾糖を含む。一部の実施形態では、単糖修飾糖は、ラクトース修飾糖、マンノース修飾糖、グルコース修飾糖、ガラクトース修飾糖、グルコサミン修飾糖、スクロース修飾糖、キシロース修飾糖、リボース修飾糖、フルクトース修飾糖またはグリセルアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、糖修飾糖は、多糖修飾糖を含む。一部の実施形態では、多糖修飾糖は、アニオン性多糖修飾糖、マルトース修飾糖、還元多糖修飾糖、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、アニオン性多糖修飾糖は、アルジネート修飾糖、カルボキシメチル化セルロース修飾糖、ヒアルロン酸修飾糖、ペクチン修飾糖、プルラン修飾糖、デンプン修飾糖またはキサンタンガム修飾糖を含む。一部の実施形態では、還元多糖修飾糖は、マルトデキストリン修飾糖またはセロビオース修飾糖を含む。一部の実施形態では、還元多糖修飾糖は、カチオン性脂質付加物を含む。一部の実施形態では、フェノール修飾糖は、クロロゲン酸修飾糖、フェルラ酸修飾糖、コーヒー酸修飾糖、没食子酸修飾糖、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、核酸分子は、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする。一部の実施形態では、核酸分子は、モノシストロン性である。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリシストロン性である。一部の実施形態では、組成物は、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）またはサイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）をさらに含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、細胞の多能性における低減は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、第１の核酸分子は、ｍＲＮＡまたはｓａＲＮＡであり、第２の核酸は、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡである。
【0010】
一部の実施形態では、細胞内でのタンパク質発現における変化は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、組成物は、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む。一部の実施形態では、糖は、水性溶液中または中性溶液中でカチオン性である。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、糖１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックスの表面またはその近傍にある。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックス内にカプセル封入される。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子をさらに含む。一部の実施形態では、核酸分子は、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、糖は、核酸分子を安定化する。一部の実施形態では、糖は、核酸分子の分解を阻害または低減する。一部の実施形態では、糖は、核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減する。一部の実施形態では、核酸分子は、化学的修飾を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、細胞は、哺乳動物細胞、鳥類細胞、魚類細胞、軟体動物細胞または両生類細胞を含む。一部の実施形態では、哺乳動物細胞は、ブタ細胞、ウシ細胞、スイギュウ類（ｂｕｂａｌｉｎｅ）細胞、ヒツジ細胞、ヤギ細胞、シカ類（ｃｅｒｖｉｎｅ）細胞、バイソン類（ｂｉｓｏｎｔｉｎｅ）細胞、ラクダ類（ｃａｍｅｌｉｎｅ）細胞、アカシカ類（ｅｌａｐｈｉｎｅ）細胞またはウサギ（ｌａｐｉｎｅ）細胞を含む。一部の実施形態では、哺乳動物細胞は、ブタ細胞を含む。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、少なくとも約１である。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、最大で約６０である。一部の実施形態では、組成物は、核酸、ポリマー性材料および脂質を含む。一部の実施形態では、第１の質量比は、２：１以上であり、第２の質量比は、２：１以上である。一部の実施形態では、第１の質量比は、１００：１以上である。
【0011】
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法が、本明細書で提供される。ある態様では、細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法は、（ａ）細胞を、ｉ．糖およびｉｉ．核酸分子を含む組成物と接触させるステップ；（ｂ）ポリマー性材料を使用して、細胞および組成物をカプセル封入するまたは接着させるステップ、を含み、それにより、細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にする。
【0012】
一部の実施形態では、ポリマー性材料は、ポリマーを含む。一部の実施形態では、ポリマーは、多糖ベースのポリマー、ポリペプチドベースのポリマー、脂質ベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、多糖ベースのポリマーは、アルジネートベースのポリマー、ジェランガムベースのポリマー、キャッサバベースのポリマー、トウモロコシベースのポリマー、コーンスターチベースのポリマー、キサンタンガムベースのポリマー、ローカストビーンベースのポリマー、プルランベースのポリマー、デキストランベースのポリマー、セルロースベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ポリマー性材料は、細胞をカプセル封入するように構成されている。一部の実施形態では、ポリマー性材料は、ヒドロゲルを含む。一部の実施形態では、ポリマー性材料は、２次元ポリマーを含む。一部の実施形態では、ポリマーは、３次元ポリマーを含む。一部の実施形態では、ポリマー性材料は、生分解性であるように構成されている。
【0013】
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法が、本明細書で提供される。ある態様では、細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法は、細胞を、ｉ．糖およびｉｉ．リボ核酸（ＲＮＡ）を含む核酸分子を含む組成物と、細胞が組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップを含み、それにより、細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にする。
【0014】
一部の実施形態では、細胞内でのタンパク質発現における変化は、中胚葉系統、内胚葉系統または外胚葉系統への細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、細胞内でのタンパク質発現における変化は、細胞の脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎または網膜分化を容易にする。一部の実施形態では、細胞の分化は、細胞の分化転換または細胞の指向性分化を含む。一部の実施形態では、細胞は、体細胞またはナイーブ細胞を含む。一部の実施形態では、細胞は、脂肪細胞、血管細胞、心細胞、軟骨細胞、内皮細胞、上皮細胞、造血細胞、肝細胞、筋肉細胞、ニューロンまたは骨原性細胞を含む。一部の実施形態では、細胞は、筋肉細胞を含む。一部の実施形態では、筋肉細胞は、筋線維、筋管、筋細胞、筋芽細胞、筋原性スフェロイドまたは筋肉細胞前駆体を含む。
【0015】
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法が、本明細書で提供される。ある態様では、細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法は、細胞を、ｉ．糖およびｉｉ．核酸分子を含む組成物と、細胞が組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップを含み、細胞は、胚性幹細胞、不死化幹細胞、間葉系幹細胞、筋肉前駆細胞または誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含む幹細胞を含み、それにより、幹細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にする。
【0016】
一部の実施形態では、細胞は、ｉＰＳＣを含む。一部の実施形態では、核酸分子は、リボ核酸（ＲＮＡ）を含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ｍＲＮＡ、ｓａＲＮＡ、ｅＲＮＡ、ｔａ－ＲＮＡ、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする。一部の実施形態では、ＲＮＡは、モノシストロン性である。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ポリシストロン性である。一部の実施形態では、核酸分子は、ｍＲＮＡを含む。一部の実施形態では、核酸分子は、ｓａＲＮＡを含む。一部の実施形態では、核酸分子は、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、細胞の多能性における低減は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、第１の核酸分子は、ｍＲＮＡまたはｓａＲＮＡであり、第２の核酸は、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡである。
【0017】
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法が、本明細書で提供される。ある態様では、細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法は、細胞を、ｉ．脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含む修飾糖、ならびにｉｉ．メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、およびそれらの組合せを含む核酸分子を含む組成物と、細胞が組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップを含み、それにより、細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にする。
【0018】
一部の実施形態では、修飾糖は、キトサン、ヒアルロン酸、プルラン、ヘパリン、アルジネート、またはそれらの組合せもしくは誘導体を含む。一部の実施形態では、修飾糖は、修飾キトサンを含む。一部の実施形態では、修飾糖は、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、糖 フェノール修飾糖、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、ヘキサナールアルデヒド修飾糖、ヘプタナールアルデヒド修飾糖、オクタナールアルデヒド修飾糖、ノナナールアルデヒド修飾糖またはデカナールアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、デカナールアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、芳香族アルデヒド修飾糖は、ベンズアルデヒド修飾糖またはシンナムアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、ポリアミン誘導体化糖は、スペルミン修飾糖、スペルミジン修飾糖、プトレシン修飾糖、ジエチルエチルアミン修飾糖、ジメチルエチルアミン修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖またはアルギニン修飾糖を含む。一部の実施形態では、脂質付加物を有する糖は、レシチンを有する糖またはホスファチジルコリンを有する糖を含む。一部の実施形態では、糖修飾糖は、単糖修飾糖を含む。一部の実施形態では、単糖修飾糖は、ラクトース修飾糖、マンノース修飾糖、グルコース修飾糖、ガラクトース修飾糖、グルコサミン修飾糖、スクロース修飾糖、キシロース修飾糖、リボース修飾糖、フルクトース修飾糖またはグリセルアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、糖修飾糖は、多糖修飾糖を含む。一部の実施形態では、多糖修飾糖は、アニオン性多糖修飾糖、マルトース修飾糖、還元多糖修飾糖、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、アニオン性多糖修飾糖は、アルジネート修飾糖、カルボキシメチル化セルロース修飾糖、ヒアルロン酸修飾糖、ペクチン修飾糖、プルラン修飾糖、デンプン修飾糖またはキサンタンガム修飾糖を含む。一部の実施形態では、還元多糖修飾糖は、マルトデキストリン修飾糖またはセロビオース修飾糖を含む。一部の実施形態では、還元多糖修飾糖は、カチオン性脂質付加物を含む。一部の実施形態では、フェノール修飾糖は、クロロゲン酸修飾糖、フェルラ酸修飾糖、コーヒー酸修飾糖、没食子酸修飾糖、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、核酸分子は、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする。一部の実施形態では、核酸分子は、モノシストロン性である。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリシストロン性である。一部の実施形態では、組成物は、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）またはサイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）をさらに含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、細胞の多能性における低減は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、第１の核酸分子は、ｍＲＮＡまたはｓａＲＮＡであり、第２の核酸は、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡである。
【0019】
一部の実施形態では、細胞内でのタンパク質発現における変化は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、組成物は、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む。一部の実施形態では、糖は、水性溶液中または中性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、糖１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックスの表面またはその近傍にある。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックス内にカプセル封入される。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子をさらに含む。一部の実施形態では、核酸分子は、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、糖は、核酸分子を安定化するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子の分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、化学的修飾を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、細胞は、哺乳動物細胞、鳥類細胞、魚類細胞、軟体動物細胞または両生類細胞を含む。一部の実施形態では、哺乳動物細胞は、ブタ細胞、ウシ細胞、スイギュウ類細胞、ヒツジ細胞、ヤギ細胞、シカ類細胞、バイソン類細胞、ラクダ類細胞、アカシカ類細胞またはウサギ細胞を含む。一部の実施形態では、哺乳動物細胞は、ブタ細胞を含む。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、少なくとも約１である。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、最大で約６０である。一部の実施形態では、組成物は、核酸、ポリマー性材料および脂質を含む。一部の実施形態では、第１の質量比は、２：１以上であり、第２の質量比は、２：１以上である。一部の実施形態では、第１の質量比は、１００：１以上である。一部の実施形態では、接触させるステップにおける核酸分子および細胞の比は、１００００細胞当たり少なくとも約０．００１ｎｇである。一部の実施形態では、接触させるステップにおける核酸分子および細胞の比は、１００００細胞当たり少なくとも約０．０１ｎｇである。一部の実施形態では、接触させるステップにおける核酸分子および細胞の比は、１００００細胞当たり少なくとも約０．１ｎｇである。一部の実施形態では、細胞内でのタンパク質発現の変化は、細胞内の核酸分子によってコードされる転写物の増加した発現を含む。一部の実施形態では、細胞内の核酸分子によってコードされる転写物は、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＱＲＴ－ＰＣＲ）によって測定した場合に、（１）糖と接触されていない細胞内の転写物のレベル；（２）核酸分子と接触されていない細胞内の転写物のレベル；または（３）それらの組合せよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、５０％、１００％、１５０％、２倍、５倍、１０倍、１００倍または１０００倍高い。一部の実施形態では、細胞内でのタンパク質発現の変化は、細胞内の核酸分子によってコードされない転写物の増加した発現を含む。一部の実施形態では、細胞内の核酸分子によってコードされない転写物は、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＱＲＴ－ＰＣＲ）によって測定した場合に、（１）糖と接触されていない細胞内の転写物のレベル；（２）核酸分子と接触されていない細胞内の転写物のレベル；または（３）それらの組合せよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、５０％、１００％、１５０％、２倍、５倍、１０倍、１００倍または１０００倍高い。一部の実施形態では、細胞内でのタンパク質発現の変化は、細胞内の核酸分子によってコードされない転写物の減少した発現を含む。一部の実施形態では、細胞内の核酸分子によってコードされない転写物は、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＱＲＴ－ＰＣＲ）によって測定した場合に、（１）糖と接触されていない細胞内の転写物のレベル；（２）核酸分子と接触されていない細胞内の転写物のレベル；または（３）それらの組合せよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または９９％低い。
【0020】
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための本明細書で開示される方法のいずれかによって調製された食用製品が、本明細書で提供される。
【0021】
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための本明細書で開示される方法のいずれかによって調製された薬学的に活性な薬剤が、本明細書で提供される。
【0022】
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための本明細書で開示される方法のいずれかによって調製された組織が、本明細書で提供される。
【0023】
組成物が本明細書で提供される。ある態様では、組成物は、糖および核酸分子ならびにポリマー性材料を含み、糖または核酸分子は、細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成され、ポリマー性材料は、細胞をカプセル封入する、自己アセンブルする、またはそれに接着するように構成されている。
【0024】
組成物が本明細書で提供される。ある態様では、組成物は、糖および核酸分子ならびにポリマー性材料を含み、糖または核酸分子は、細胞の分化を促進するように構成され、ポリマー性材料は、細胞をカプセル封入する、自己アセンブルする、またはそれに接着するように構成されている。
【0025】
一部の実施形態では、ポリマー性材料は、ポリマーを含む。一部の実施形態では、ポリマーは、多糖ベースのポリマー、ポリペプチドベースのポリマー、脂質ベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、多糖ベースのポリマーは、アルジネートベースのポリマー、ジェランガムベースのポリマー、キャッサバベースのポリマー、トウモロコシベースのポリマー、コーンスターチベースのポリマー、キサンタンガムベースのポリマー、ローカストビーンベースのポリマー、プルランベースのポリマー、デキストランベースのポリマー、セルロースベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ポリマー性材料は、細胞をカプセル封入するように構成されている。一部の実施形態では、ポリマーは、ヒドロゲルを含む。一部の実施形態では、ポリマーは、２次元ポリマーを含む。一部の実施形態では、ポリマーは、３次元ポリマーを含む。一部の実施形態では、ポリマーは、生分解性であるように構成されている。
【0026】
一部の実施形態では、細胞中でのタンパク質発現における変化は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、組成物は、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む。一部の実施形態では、糖は、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、ポリマー１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。
【0027】
一部の実施形態では、糖および核酸分子は、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックスの表面に吸着されるように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含む。一部の実施形態では、糖は、核酸分子を安定化するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子の分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、ポリマー性材料は、細胞をカプセル封入するように構成されている。
【0028】
一部の実施形態では、核酸分子は、ＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、モノシストロン性またはポリシストロン性である。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、核酸分子は、ｍＲＮＡ、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、化学的に修飾される。一部の実施形態では、核酸分子は、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、少なくとも約１である。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、最大で約６０である。
【0029】
組成物が本明細書で提供される。ある態様では、組成物は、細胞中でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されているＲＮＡを含む核酸分子および糖を含む。
【0030】
組成物が本明細書で提供される。ある態様では、組成物は、以下：細胞の脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎または網膜分化のような中胚葉、内胚葉および外胚葉系統を促進するように構成されているｍＲＮＡを含む核酸分子および糖を含む。
【0031】
一部の実施形態では、細胞中でのタンパク質発現における変化は、以下：細胞の脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎または網膜分化のような中胚葉、内胚葉および外胚葉系統を容易にする。一部の実施形態では、分化は、細胞の分化転換または細胞の指向性分化を含む。一部の実施形態では、細胞は、体細胞またはナイーブ細胞を含む。一部の実施形態では、細胞は、脂肪細胞、血管細胞、心細胞、軟骨細胞、内皮細胞、上皮細胞、造血細胞、肝細胞、筋肉細胞、ニューロンまたは骨原性細胞を含む。一部の実施形態では、筋肉細胞は、筋線維、筋管、筋細胞、筋芽細胞、筋原性スフェロイドまたは筋肉細胞前駆体を含む。一部の実施形態では、細胞は、動物細胞を含む。一部の実施形態では、動物細胞は、哺乳動物細胞、鳥類細胞、魚類細胞、軟体動物細胞または両生類細胞を含む。一部の実施形態では、哺乳動物細胞は、ブタ細胞、ウシ細胞、スイギュウ類細胞、ヒツジ細胞、ヤギ細胞、シカ類細胞、バイソン類細胞、ラクダ類細胞、アカシカ類細胞またはウサギ細胞を含む。一部の実施形態では、鳥類細胞は、カモ類（ａｎａｔｉｎｅ）細胞、ニワトリ類（ｇａｌｌｉｎｅ）細胞、ガン類（ａｎｓｅｒｉｎｅ）細胞、シチメンチョウ類（ｍｅｌｅａｇｒｉｎｅ）細胞、ダチョウ類（ｓｔｒｕｔｈｉｏｎｉｎｅ）細胞またはキジ類（ｐｈａｓｉａｎｉｎｅ）細胞を含む。
【0032】
一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする。一部の実施形態では、組成物は、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、モノシストロン性またはポリシストロン性である。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ｍＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、細胞の多能性における低減は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む。
【0033】
一部の実施形態では、糖は、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、糖は、中性水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、ポリマー１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。
【0034】
一部の実施形態では、糖およびＲＮＡは、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖およびＲＮＡは、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ポリプレックスの表面に吸着されるように構成されている。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含む。
【0035】
一部の実施形態では、糖は、ＲＮＡを安定化するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、ＲＮＡの分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、ＲＮＡのヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、ＲＮＡは、化学的に修飾される。一部の実施形態では、ＲＮＡは、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、糖のＲＮＡに対するモル比は、少なくとも約１である。一部の実施形態では、糖のＲＮＡに対するモル比は、最大で約６０である。
【0036】
組成物が本明細書で提供される。ある態様では、組成物は、幹細胞中でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されている糖および核酸分子を含み、幹細胞は、胚性幹細胞、不死化幹細胞、間葉系幹細胞、筋肉前駆細胞または誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含み、それにより、幹細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にする。
【0037】
組成物が本明細書で提供される。ある態様では、組成物は、誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）の分化を集合的に促進するように構成されている糖および核酸分子を含み、それにより、ｉＰＳＣ中でのタンパク質発現における変化を容易にする。
【0038】
一部の実施形態では、幹細胞は、ｉＰＳＣを含む。一部の実施形態では、幹細胞中でのタンパク質発現における変化は、幹細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、動物幹細胞は、哺乳動物幹細胞、鳥類幹細胞、魚類幹細胞、軟体動物幹細胞または両生類幹細胞を含む。一部の実施形態では、哺乳動物幹細胞は、ブタ幹細胞、ウシ幹細胞、スイギュウ類幹細胞、ヒツジ幹細胞、ヤギ幹細胞、シカ類幹細胞、バイソン類幹細胞、ラクダ類幹細胞、アカシカ類幹細胞またはウサギ幹細胞を含む。一部の実施形態では、哺乳動物幹細胞は、ブタ幹細胞を含む。一部の実施形態では、鳥類幹細胞は、カモ類幹細胞、ニワトリ類幹細胞、ガン類幹細胞、シチメンチョウ類幹細胞、ダチョウ類幹細胞またはキジ類幹細胞を含む。一部の実施形態では、組成物は、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む。
【0039】
一部の実施形態では、糖は、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、ポリマー１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。
【0040】
一部の実施形態では、糖および核酸分子は、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックスの表面に吸着されるように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含む。一部の実施形態では、糖は、核酸分子を安定化するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子の分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている。
【0041】
一部の実施形態では、核酸分子は、ＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、モノシストロン性またはポリシストロン性である。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、核酸分子は、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、幹細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。
【0042】
一部の実施形態では、核酸分子は、化学的に修飾される。一部の実施形態では、核酸分子は、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、少なくとも約１または約最大で６０である。一部の実施形態では、核酸分子は、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）を含む。
【0043】
組成物が本明細書で提供される。ある態様では、組成物は、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）を含む核酸分子、および脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含む修飾糖を含み、核酸または修飾糖は、細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている。
【0044】
組成物が本明細書で提供される。ある態様では、組成物は、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）を含む核酸分子、および脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含む修飾糖を含み、核酸または修飾糖は、細胞の分化を促進するように構成されている。
【0045】
一部の実施形態では、修飾糖は、キトサン、ヒアルロン酸、プルラン、ヘパリン、アルジネート、またはそれらの組合せもしくは誘導体を含む。一部の実施形態では、修飾糖は、修飾キトサンを含む。一部の実施形態では、修飾糖は、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、糖 フェノール修飾糖、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、ヘキサナールアルデヒド修飾糖、ヘプタナールアルデヒド修飾糖、オクタナールアルデヒド修飾糖、ノナナールアルデヒド修飾糖またはデカナールアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、デカナールアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、芳香族アルデヒド修飾糖は、ベンズアルデヒド修飾糖またはシンナムアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、ポリアミン誘導体化糖は、スペルミン修飾糖、スペルミジン修飾糖、プトレシン修飾糖、ジエチルエチルアミン修飾糖、ジメチルエチルアミン修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖またはアルギニン修飾糖を含む。一部の実施形態では、脂質付加物を有する糖は、レシチンを有する糖またはホスファチジルコリンを有する糖を含む。一部の実施形態では、糖修飾糖は、単糖修飾糖または多糖修飾糖を含む。一部の実施形態では、単糖修飾糖は、ラクトース修飾糖、マンノース修飾糖、グルコース修飾糖、ガラクトース修飾糖、グルコサミン修飾糖、スクロース修飾糖、マルトース修飾糖、キシロース修飾糖、リボース修飾糖、フルクトース修飾糖またはグリセルアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、多糖修飾糖は、アニオン性多糖修飾糖または還元多糖修飾糖を含む。一部の実施形態では、アニオン性多糖修飾糖は、アルジネート修飾糖、カルボキシメチル化セルロース修飾糖、ヒアルロン酸修飾糖、ペクチン修飾糖、プルラン修飾糖、デンプン修飾糖またはキサンタンガム修飾糖を含む。一部の実施形態では、還元多糖修飾糖は、マルトデキストリン修飾糖またはセロビオース修飾糖を含む。一部の実施形態では、還元多糖修飾糖は、カチオン性脂質付加物を含む。一部の実施形態では、フェノール修飾糖は、クロロゲン酸修飾糖、フェルラ酸修飾糖、コーヒー酸修飾糖、没食子酸修飾糖、またはそれらの組合せを含む。
【0046】
一部の実施形態では、細胞中でのタンパク質発現における変化は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、糖は、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、糖は、中性水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、ポリマー１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。
【0047】
一部の実施形態では、糖およびｍＲＮＡは、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖およびｍＲＮＡは、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、ポリプレックスの表面に吸着されるように構成されている。一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含む。一部の実施形態では、糖は、ｍＲＮＡを安定化するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、ｍＲＮＡの分解を阻害または低減するように構成されている。
【0048】
一部の実施形態では、糖は、ｍＲＮＡのヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、モノシストロン性またはポリシストロン性である。一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、非コード配列を含む。一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、組成物は、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せをさらに含む。一部の実施形態では、組成物は、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡをさらに含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。
【0049】
一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、化学的に修飾される。一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、糖のｍＲＮＡに対するモル比は、少なくとも約１である。一部の実施形態では、糖のｍＲＮＡに対するモル比は、最大で約６０である。
【0050】
細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法が、本明細書で提供される。ある態様では、細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法は、（ａ）細胞を、（ｉ）糖および（ｉｉ）核酸分子を含む組成物と接触させるステップ；（ｂ）ポリマー性材料を使用して、細胞および組成物をカプセル封入する、自己アセンブルする、またはそれに接着するステップを含み、それにより、細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にする。
【0051】
細胞を分化させるための方法が、本明細書で提供される。ある態様では、細胞を分化させるための方法は、（ａ）細胞を、（ｉ）糖および（ｉｉ）核酸分子を含む組成物と接触させるステップ；（ｂ）ポリマー性材料を使用して、細胞および組成物をカプセル封入する、自己アセンブルする、またはそれに接着するステップを含み、それにより、細胞の分化を容易にする。
【0052】
一部の実施形態では、ポリマー性材料は、ポリマーを含む。一部の実施形態では、ポリマーは、多糖ベースのポリマー、ポリペプチドベースのポリマー、脂質ベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、多糖ベースのポリマーは、アルジネートベースのポリマー、ジェランガムベースのポリマー、キャッサバベースのポリマー、トウモロコシベースのポリマー、コーンスターチベースのポリマー、キサンタンガムベースのポリマー、ローカストビーンベースのポリマー、プルランベースのポリマー、デキストランベースのポリマー、セルロースベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、（ｂ）は、ポリマー性材料を使用して、細胞をカプセル封入するステップを含む。一部の実施形態では、ポリマーは、ヒドロゲルを含む。一部の実施形態では、ポリマーは、２次元ポリマーを含む。一部の実施形態では、ポリマーは、３次元ポリマーを含む。一部の実施形態では、ポリマーは、生分解性であるように構成されている。一部の実施形態では、細胞中でのタンパク質発現における変化は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、組成物は、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む。
【0053】
一部の実施形態では、糖は、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、ポリマー１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックスの表面に吸着されるように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含む。一部の実施形態では、糖は、核酸分子を安定化するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子の分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、（ｂ）は、ポリマー性材料を使用して、細胞および組成物をカプセル封入するステップを含む。
【0054】
一部の実施形態では、核酸分子は、ＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、モノシストロン性またはポリシストロン性である。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、核酸分子は、ｍＲＮＡ、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。
【0055】
一部の実施形態では、核酸分子は、化学的に修飾される。一部の実施形態では、核酸分子は、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、少なくとも約１である。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、最大で約６０である。
【0056】
細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法が、本明細書で提供される。ある態様では、細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法は、細胞を、（ｉ）糖および（ｉｉ）ＲＮＡを含む核酸分子を含む組成物と、細胞が組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップを含み、それにより、細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にする。
【0057】
以下：細胞の脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎または網膜分化のような中胚葉、内胚葉および外胚葉系統を容易にするための方法であって、細胞を、（ｉ）糖および（ｉｉ）ｍＲＮＡを含む核酸分子を含む組成物と、細胞が組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップを含み、それにより、細胞の脂肪生成、血管新生、心、セメント質形成性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性または網膜分化を容易にする方法が、本明細書で提供される。
【0058】
一部の実施形態では、タンパク質発現における変化は、以下：細胞の脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎または網膜分化のような中胚葉、内胚葉および外胚葉系統を容易にする。一部の実施形態では、分化は、細胞の分化転換または細胞の指向性分化を含む。一部の実施形態では、細胞は、体細胞またはナイーブ細胞を含む。一部の実施形態では、細胞は、脂肪細胞、血管細胞、心細胞、軟骨細胞、内皮細胞、上皮細胞、造血細胞、肝細胞、筋肉細胞、ニューロンまたは骨原性細胞を含む。一部の実施形態では、細胞は、筋肉細胞を含む。一部の実施形態では、筋肉細胞は、筋線維、筋管、筋細胞、筋芽細胞、筋原性スフェロイドまたは筋肉細胞前駆体を含む。一部の実施形態では、細胞は、動物細胞を含む。一部の実施形態では、動物細胞は、哺乳動物細胞、鳥類細胞、魚類細胞、軟体動物細胞または両生類細胞を含む。一部の実施形態では、哺乳動物細胞は、ブタ細胞、ウシ細胞、スイギュウ類細胞、ヒツジ細胞、ヤギ細胞、シカ類細胞、バイソン類細胞、ラクダ類細胞、アカシカ類細胞またはウサギ細胞を含む。一部の実施形態では、鳥類細胞は、カモ類細胞、ニワトリ類細胞、ガン類細胞、シチメンチョウ類細胞、ダチョウ類細胞またはキジ類細胞を含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ｍＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする。
【0059】
一部の実施形態では、組成物は、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、モノシストロン性またはポリシストロン性である。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、リボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、ポリヌクレオチド配列は、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、糖は、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、糖は、中性水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、ポリマー１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。一部の実施形態では、糖およびＲＮＡは、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖およびＲＮＡは、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ポリプレックスの表面に吸着されるように構成されている。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含む。一部の実施形態では、糖は、ＲＮＡを安定化するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、ＲＮＡの分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、ＲＮＡのヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている。
【0060】
一部の実施形態では、ＲＮＡは、化学的に修飾される。一部の実施形態では、ＲＮＡは、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、糖のＲＮＡに対するモル比は、少なくとも約１である。一部の実施形態では、糖のＲＮＡに対するモル比は、最大で約６０である。
【0061】
細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法が、本明細書で提供される。ある態様では、細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法は、幹細胞を、（ｉ）糖および（ｉｉ）核酸分子を含む組成物と、細胞が組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップを含み、幹細胞は、胚性幹細胞、不死化幹細胞、間葉系幹細胞、筋肉前駆細胞または誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含み、それにより、幹細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にする。
【0062】
誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を分化させるための方法が、本明細書で提供される。ある態様では、ｉＰＳＣ中でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法は、ｉＰＳＣを、（ｉ）糖および（ｉｉ）核酸分子を含む組成物と、ｉＰＳＣが組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップを含み、それにより、ｉＰＳＣの分化を容易にする。
【0063】
一部の実施形態では、糖および核酸分子は、幹細胞中でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にする。一部の実施形態では、幹細胞中でのタンパク質発現における変化は、幹細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、幹細胞は、動物幹細胞を含む。一部の実施形態では、動物幹細胞は、哺乳動物幹細胞、鳥類幹細胞、魚類幹細胞、軟体動物幹細胞または両生類幹細胞を含む。一部の実施形態では、哺乳動物幹細胞は、ブタ幹細胞、ウシ幹細胞、スイギュウ類幹細胞、ヒツジ幹細胞、ヤギ幹細胞、シカ類幹細胞、バイソン類幹細胞、ラクダ類幹細胞、アカシカ類幹細胞またはウサギ幹細胞を含む。一部の実施形態では、鳥類幹細胞は、カモ類幹細胞、ニワトリ類幹細胞、ガン類幹細胞、シチメンチョウ類幹細胞、ダチョウ類幹細胞またはキジ類幹細胞を含む。一部の実施形態では、組成物は、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む。
【0064】
一部の実施形態では、糖は、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、ポリマー１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックスの表面に吸着されるように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含む。一部の実施形態では、糖は、核酸分子を安定化するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子の分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている。
【0065】
一部の実施形態では、核酸分子は、ＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、モノシストロン性またはポリシストロン性である。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’ＵＴＲ、３’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、核酸分子は、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、幹細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。
【0066】
一部の実施形態では、核酸分子は、化学的に修飾される。一部の実施形態では、核酸分子は、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、少なくとも約１または最大で約６０である。一部の実施形態では、核酸分子は、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）を含む。
【0067】
細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法が、本明細書で提供される。ある態様では、細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法は、細胞を、（ｉ）脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含む修飾糖、および（ｉｉ）ｍＲＮＡを含む核酸分子を含む組成物と、細胞が組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップを含み、それにより、細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にする。
【0068】
細胞の分化を容易にするための方法が、本明細書で提供される。ある態様では、細胞の分化を容易にするための方法は、細胞を、（ｉ）脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含む修飾糖、および（ｉｉ）ｍＲＮＡを含む核酸分子を含む組成物と、細胞が組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップを含み、それにより、細胞の分化を容易にする。
【0069】
一部の実施形態では、修飾糖は、キトサン、ヒアルロン酸、プルラン、ヘパリン、アルジネート、またはそれらの組合せもしくは誘導体を含む。一部の実施形態では、修飾糖は、修飾キトサンを含む。一部の実施形態では、修飾糖は、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質修飾糖、フェノール修飾糖、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、ヘキサナールアルデヒド修飾糖、ヘプタナールアルデヒド修飾糖、オクタナールアルデヒド修飾糖、ノナナールアルデヒド修飾糖またはデカナールアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、デカナールアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、芳香族アルデヒド修飾糖は、ベンズアルデヒド修飾糖またはシンナムアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、ポリアミン誘導体化糖は、スペルミン修飾糖、スペルミジン修飾糖、プトレシン修飾糖、ジエチルエチルアミン修飾糖、ジメチルエチルアミン修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖またはアルギニン修飾糖を含む。一部の実施形態では、脂質付加物を有する糖は、レシチンを有する糖またはホスファチジルコリンを有する糖を含む。一部の実施形態では、糖修飾糖は、単糖修飾糖または多糖修飾糖を含む。一部の実施形態では、単糖修飾糖は、ラクトース修飾糖、マンノース修飾糖、グルコース修飾糖、ガラクトース修飾糖、グルコサミン修飾糖、スクロース修飾糖、マルトース修飾糖、キシロース修飾糖、リボース修飾糖、フルクトース修飾糖またはグリセルアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、多糖修飾糖は、アニオン性多糖修飾糖または還元多糖修飾糖を含む。一部の実施形態では、アニオン性多糖修飾糖は、アルジネート修飾糖、カルボキシメチル化セルロース修飾糖、ヒアルロン酸修飾糖、ペクチン修飾糖、プルラン修飾糖、デンプン修飾糖またはキサンタンガム修飾糖を含む。一部の実施形態では、還元多糖修飾糖は、マルトデキストリン修飾糖またはセロビオース修飾糖を含む。一部の実施形態では、還元多糖修飾糖は、カチオン性脂質付加物を含む。一部の実施形態では、フェノール修飾糖は、クロロゲン酸修飾糖、フェルラ酸修飾糖、コーヒー酸修飾糖、没食子酸修飾糖、またはそれらの組合せを含む。
【0070】
一部の実施形態では、細胞中でのタンパク質発現における変化は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、修飾糖は、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、修飾糖は、中性水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、ポリマー１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、修飾糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、修飾糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、修飾糖は、修飾多糖を含む。
【0071】
一部の実施形態では、修飾糖およびｍＲＮＡは、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、修飾糖およびｍＲＮＡは、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、ポリプレックスの表面に吸着されるように構成されている。一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含む。一部の実施形態では、修飾糖は、ｍＲＮＡを安定化するように構成されている。一部の実施形態では、修飾糖は、ｍＲＮＡの分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、修飾糖は、ｍＲＮＡのヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている。
【0072】
一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、モノシストロン性またはポリシストロン性である。一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、非コード配列を含む。一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、組成物は、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せをさらに含む。一部の実施形態では、組成物は、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡをさらに含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。
【0073】
一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、化学的に修飾される。一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、糖のｍＲＮＡに対するモル比は、少なくとも約１である。一部の実施形態では、糖のｍＲＮＡに対するモル比は、最大で約６０である。
【0074】
プロセスによって調製された食用製品が、本明細書で提供される。ある態様では、プロセスによって調製された食用製品は、細胞を、糖または核酸分子を含む組成物と接触させることを含み、糖または核酸分子は、細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている。
【0075】
別の態様では、プロセスによって調製された食用製品は、細胞を、糖または核酸分子を含む組成物と接触させることを含み、糖または核酸分子は、細胞の分化を容易にするように構成されている。
【0076】
一部の実施形態では、細胞中でのタンパク質発現における変化は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、糖は、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、組成物は、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、ポリマー１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックスの表面に吸着されるように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含む。一部の実施形態では、糖は、核酸分子を安定化するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子の分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている。
【0077】
一部の実施形態では、核酸分子は、ＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、モノシストロン性またはポリシストロン性である。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ｍＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。
【0078】
一部の実施形態では、核酸分子は、化学的に修飾される。一部の実施形態では、核酸分子は、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、少なくとも約１または最大で約６０である。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、細胞中でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されている。
【0079】
プロセスによって調製された医薬品活性成分が、本明細書で提供される。ある態様では、プロセスによって調製された医薬品活性成分は、糖および核酸分子を使用することを含み、糖または核酸分子は、細胞中でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されている。
【0080】
別の態様では、プロセスによって調製された医薬品活性成分は、糖および核酸分子を使用することを含み、糖または核酸分子は、細胞の分化を集合的に容易にするように構成されている。
【0081】
一部の実施形態では、医薬品活性成分は、原薬、薬物製品または薬として製剤化される。一部の実施形態では、細胞中でのタンパク質発現における変化は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、糖は、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、プロセスは、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せを使用することをさらに含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、ポリマー１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックスの表面に吸着されるように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含む。一部の実施形態では、糖は、核酸分子を安定化するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子の分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている。
【0082】
一部の実施形態では、核酸分子は、ＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、モノシストロン性またはポリシストロン性である。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ｍＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、化学的に修飾される。一部の実施形態では、核酸分子は、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、少なくとも約１または最大で約６０である。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、細胞中でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されている。
【0083】
プロセスによって調製された医薬品活性成分が、本明細書で提供される。ある態様では、プロセスによって調製された医薬品活性成分は、糖および核酸分子を使用することを含み、糖は、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含み；核酸または修飾糖は、細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている。
【0084】
プロセスによって調製された医薬品活性成分が、本明細書で提供される。ある態様では、プロセスによって調製された医薬品活性成分は、糖および核酸分子を使用することを含み、糖は、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含み；核酸または修飾糖は、細胞の分化を容易にするように構成されている。
【0085】
一部の実施形態では、医薬品活性成分は、原薬、薬物製品または薬として製剤化される。一部の実施形態では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、ヘキサナールアルデヒド修飾糖、ヘプタナールアルデヒド修飾糖、オクタナールアルデヒド修飾糖、ノナナールアルデヒド修飾糖またはデカナールアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、デカナールアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、芳香族アルデヒド修飾糖は、ベンズアルデヒド修飾糖またはシンナムアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、ポリアミン誘導体化糖は、スペルミン修飾糖、スペルミジン修飾糖、プトレシン修飾糖またはアルギニン修飾糖を含む。一部の実施形態では、脂質付加物を有する糖は、レシチンを有する糖またはホスファチジルコリンを有する糖を含む。一部の実施形態では、糖修飾糖は、単糖修飾糖または多糖修飾糖を含む。一部の実施形態では、単糖修飾糖は、ラクトース修飾糖、マンノース修飾糖、グルコース修飾糖、ガラクトース修飾糖、グルコサミン修飾糖、スクロース修飾糖、マルトース修飾糖、キシロース修飾糖、リボース修飾糖、フルクトース修飾糖またはグリセルアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、多糖修飾糖は、アニオン性多糖修飾糖または還元多糖修飾糖を含む。一部の実施形態では、アニオン性多糖修飾糖は、アルジネート修飾糖、カルボキシメチル化セルロース修飾糖、ヒアルロン酸修飾糖、ペクチン修飾糖、プルラン修飾糖、デンプン修飾糖またはキサンタンガム修飾糖を含む。一部の実施形態では、還元多糖修飾糖は、マルトデキストリン修飾糖またはセロビオース修飾糖を含む。一部の実施形態では、還元多糖修飾糖は、カチオン性脂質付加物を含む。一部の実施形態では、フェノール修飾糖は、クロロゲン酸修飾糖、フェルラ酸修飾糖、コーヒー酸修飾糖、没食子酸修飾糖、またはそれらの組合せを含む。
【0086】
一部の実施形態では、糖または核酸分子は、細胞中でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されている。一部の実施形態では、糖は、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、ポリマー１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックスの表面に吸着されるように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含む。一部の実施形態では、糖は、核酸分子を安定化するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子の分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている。
【0087】
一部の実施形態では、核酸分子は、ＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、モノシストロン性またはポリシストロン性である。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ｍＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、化学的に修飾される。一部の実施形態では、核酸分子は、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、少なくとも約１である。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、最大で約６０である。
【0088】
プロセスによって調製された組織が、本明細書で提供される。ある態様では、プロセスによって調製された組織は、糖および核酸分子を使用することを含み、糖または核酸分子は、細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている。
【0089】
別の態様では、プロセスによって調製された組織は、糖および核酸分子を使用することを含み、糖または核酸分子は、細胞の分化を容易にするように構成されている。
【0090】
一部の実施形態では、組織は、臓器、オルガノイド、またはそれらのモデルを含む。一部の実施形態では、モデルは、組織、臓器またはオルガノイドの生体模倣モデルを含む。
【0091】
一部の実施形態では、細胞中でのタンパク質発現における変化は、細胞の分化を容易にする。一部の実施形態では、プロセスは、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せを使用することをさらに含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、ポリマー１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックスの表面に吸着されるように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含む。一部の実施形態では、糖は、核酸分子を安定化するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子の分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている。
【0092】
一部の実施形態では、核酸分子は、ＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、モノシストロン性またはポリシストロン性である。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ｍＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、化学的に修飾される。一部の実施形態では、核酸分子は、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、少なくとも約１または最大で約６０である。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、細胞中でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されている。
【0093】
プロセスによって調製された医薬品活性成分が、本明細書で提供される。ある態様では、プロセスによって調製された医薬品活性成分は、糖および核酸分子を使用することを含み、糖は、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含み；核酸または修飾糖は、細胞中でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている。
【0094】
別の態様では、プロセスによって調製された医薬品活性成分は、糖および核酸分子を使用することを含み、糖は、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含み；核酸または修飾糖は、細胞の分化を容易にするように構成されている。
【0095】
一部の実施形態では、組織は、臓器、オルガノイド、またはそれらのモデルを含む。一部の実施形態では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、ヘキサナールアルデヒド修飾糖、ヘプタナールアルデヒド修飾糖、オクタナールアルデヒド修飾糖、ノナナールアルデヒド修飾糖またはデカナールアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、デカナールアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、芳香族アルデヒド修飾糖は、ベンズアルデヒド修飾糖またはシンナムアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、ポリアミン誘導体化糖は、スペルミン修飾糖、スペルミジン修飾糖、プトレシン修飾糖またはアルギニン修飾糖を含む。一部の実施形態では、脂質付加物を有する糖は、レシチンを有する糖またはホスファチジルコリンを有する糖を含む。一部の実施形態では、糖修飾糖は、単糖修飾糖または多糖修飾糖を含む。一部の実施形態では、単糖修飾糖は、ラクトース修飾糖、マンノース修飾糖、グルコース修飾糖、ガラクトース修飾糖、グルコサミン修飾糖、スクロース修飾糖、マルトース修飾糖、キシロース修飾糖、リボース修飾糖、フルクトース修飾糖またはグリセルアルデヒド修飾糖を含む。一部の実施形態では、多糖修飾糖は、アニオン性多糖修飾糖または還元多糖修飾糖を含む。一部の実施形態では、アニオン性多糖修飾糖は、アルジネート修飾糖、カルボキシメチル化セルロース修飾糖、ヒアルロン酸修飾糖、ペクチン修飾糖、プルラン修飾糖、デンプン修飾糖またはキサンタンガム修飾糖を含む。一部の実施形態では、還元多糖修飾糖は、マルトデキストリン修飾糖またはセロビオース修飾糖を含む。一部の実施形態では、還元多糖修飾糖は、カチオン性脂質付加物を含む。一部の実施形態では、フェノール修飾糖は、クロロゲン酸修飾糖、フェルラ酸修飾糖、コーヒー酸修飾糖、没食子酸修飾糖、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、モデルは、組織、臓器またはオルガノイドの生体模倣モデルを含む。
【0096】
一部の実施形態では、糖および核酸分子は、細胞中でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されている。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、ポリマー１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む。一部の実施形態では、糖のカチオン性部分のカチオン性電荷は、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む。一部の実施形態では、糖は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む。一部の実施形態では、糖は、多糖を含む。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の実施形態では、糖および核酸分子は、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックスの表面に吸着されるように構成されている。一部の実施形態では、核酸分子は、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。一部の実施形態では、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の実施形態では、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である。一部の実施形態では、ポリプレックスの見掛けの直径は、ＤＬＳまたは顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである。一部の実施形態では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含む。一部の実施形態では、糖は、核酸分子を安定化するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子の分解を阻害または低減するように構成されている。一部の実施形態では、糖は、核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている。
【0097】
一部の実施形態では、核酸分子は、ＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、モノシストロン性またはポリシストロン性である。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む。一部の実施形態では、ＲＮＡは、ｍＲＮＡを含む。一部の実施形態では、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、化学的に修飾される。一部の実施形態では、核酸分子は、アンロックド核酸を含む。一部の実施形態では、核酸分子は、少なくとも２つの型の核酸を含む。一部の実施形態では、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比は、少なくとも約１または最大で約６０である。一部の実施形態では、糖は、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。
【0098】
本開示のさらなる態様および利点は、本開示の例示的な実施形態のみが示され記載された以下の詳細な説明から、当業者に容易に明らかになる。理解されるように、本開示は、他のおよび異なる実施形態が可能であり、そのいくつかの詳細は、全て本開示から逸脱することなしに、種々の明らかな点で修飾が可能である。したがって、図面および説明は、限定的ではなく、事実上例示とみなすべきである。
参照による組み込み
参照による組み込み
【0099】
本明細書で言及される全ての刊行物、特許および特許出願は、各個々の刊行物、特許または特許出願が参照により組み込まれると具体的かつ個々に示されたのと同じ程度まで、本明細書で参照により組み込まれる。参照により組み込まれる刊行物および特許または特許出願が本明細書中に含まれる開示と矛盾する範囲では、本明細書は、任意のかかる矛盾する材料に取って代わり、および／またはそれより優先することが意図される。
【0100】
本開示の新規特色は、添付の特許請求の範囲に特に示される。本開示の特色および利点のより良い理解は、本開示の原理が利用される例示的な実施形態を示す以下の詳細な説明、および添付の図面（本明細書で「図（Ｆｉｇｕｒｅ）」および「図（ＦＩＧ．）」とも）を参照して得られる。
【図面の簡単な説明】
【0101】
【0102】
【0103】
【0104】
【発明を実施するための形態】
【0105】
詳細な説明
本開示のさまざまな実施形態を本明細書に示し、記載しているが、そのような実施形態が例としてのみ提供されることは当業者には自明であろう。多くの変形形態、変更および置換は、本開示から逸脱することなく、当業者に思い当たり得る。本明細書に記載される本開示の実施形態に対するさまざまな代替が用いられ得ることが理解されるべきである。
本開示のさまざまな実施形態を本明細書に示し、記載しているが、そのような実施形態が例としてのみ提供されることは当業者には自明であろう。多くの変形形態、変更および置換は、本開示から逸脱することなく、当業者に思い当たり得る。本明細書に記載される本開示の実施形態に対するさまざまな代替が用いられ得ることが理解されるべきである。
【0106】
細胞のタンパク質発現を変更するための方法および組成物が、本明細書で提供される。細胞の分化のための方法および組成物が、本明細書で提供される。医薬的および経済的に重要なタンパク質（単数または複数）を細胞が産生することを容易にするための方法および組成物が、本明細書で提供される。方法は、細胞を組成物と接触させるステップを含み得る。一部の場合には、組成物は、糖および核酸分子を含み得る。核酸を取り入れる細胞は、分化を生じる、タンパク質発現における変更を受け得る。従来の方法を使用して細胞が核酸分子を取り入れる効率は、低い場合がある。細胞が核酸を取り入れる低い効率は、細胞を分化させるための方法および組成物の適用可能性を制限し得る。従来の方法において使用される非ウイルスベクターの生分解性の欠如は、タンパク質発現を変更するおよび／または変化させるための方法および組成物の適用可能性を制限し得、細胞分化を制限し得る。本開示は、トランスフェクション効率を増加させ、それにより、核酸分子、細胞、または細胞を核酸分子でトランスフェクトするための他の試薬の量を低減させるための、方法および組成物を提供する。
【0107】
トランスフェクトされた細胞は、タンパク質または遺伝子発現を変更し得る。トランスフェクトされた細胞は、分化を受け得る。分化した細胞は、分化していない細胞とは異なる構造的および／または機能的特徴を有し得る。一部の場合には、異なる構造的および／または機能的特徴を有する細胞は、広範な種々の目的において使用され得る。一部の場合には、異なる構造的および／または機能的特徴を有する細胞は、食用であり得る。一部の場合には、異なる構造的および／または機能的特徴を有する細胞は、食用肉製品を産生するために使用され得る。本明細書で提供される組成物は、ポリマー性材料をさらに含み得る。本明細書で提供されるポリマー性材料は、本明細書で提供される核酸分子および糖のいずれかと接触した細胞の分化を容易にし得る。
【0108】
本明細書に記載される組成物の糖または脂質は、生分解性であり得る。生分解性の糖または脂質は、あらゆる毒性、免疫原性および／または発癌性を最小化するために、種々の酵素（例えば、エステラーゼ、ペプチダーゼ）によって代謝され得る。
定義
定義
【0109】
用語「約」または「およそ」は、測定可能な値、例えば、量または濃度などに言及して本明細書で使用される場合、特定された量の２０％、１０％、５％、１％、０．５％、またはさらには０．１％の変動を包含する意味である。例えば、「約」は、当該分野における実務に従って、プラスまたはマイナス１０％を意味し得る。あるいは、「約」は、所与の値のプラスもしくはマイナス２０％、プラスもしくはマイナス１０％、プラスもしくはマイナス５％、またはプラスもしくはマイナス１％の範囲を意味し得る。あるいは、特に、生物学的システムまたはプロセスに関して、用語は、ある値の一桁以内、最大で５倍または最大で２倍を意味し得る。特定の値が本出願および特許請求の範囲において記載され得る場合、特記しない限り、用語「約」は、特定の値についての許容可能な誤差範囲を包含するとみなされ得る。また、値の範囲、部分範囲、またはその両方が提供され得る場合、範囲または部分範囲は、範囲または部分範囲の終点を含み得る。用語「実質的に」、「実質的にない」、「実質的に含まない」および「およそ」は、大きさ、位置またはその両方を記述する場合、記載された値が、値の合理的な予期された範囲までであり得ることを示すために、使用され得る。例えば、数値は、述べられた値（または値の範囲）の＋／－０．１％、述べられた値（または値の範囲）の＋／－１％、述べられた値（または値の範囲）の＋／－２％、述べられた値（または値の範囲）の＋／－５％、述べられた値（または値の範囲）の＋／－１０％などであり得る値を有し得る。本明細書で列挙される任意の数的範囲は、その中に包含される全ての部分範囲を含むことが意図され得る。
【0110】
値が範囲として記載される場合、かかる開示が、特定の数的値または特定の部分範囲が明示的に述べられているかどうかにかかわらず、かかる範囲内の全ての可能な部分範囲、ならびにかかる範囲内に入る特定の数的値の開示を含むことが、理解され得る。
【0111】
「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「有する（ｈａｖｅ）」および「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」という用語は、オープンエンドな連結動詞である。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「有する（ｈａｓ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」および「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などの１つまたは複数のこれら動詞の任意の形態または時制も、オープンエンドである。例えば、１つまたは複数のステップを「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「有する（ｈａｓ）」または「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」任意の方法は、これらの１つまたは複数のステップのみを持つことに限定されず、他の列挙されていないステップも包含する。
トランスフェクションのための組成物および方法
トランスフェクションのための組成物および方法
【0112】
本開示は、細胞のタンパク質発現を変更するための、細胞の分化を生じ得る組成物を提供する。一部の場合には、組成物は、細胞と接触するために使用され得る。一部の場合には、組成物は、細胞を核酸分子でトランスフェクトするために使用され得る。一部の例では、組成物は、糖を含み得る。一部の場合には、組成物は、核酸分子を含み得る。一部の場合には、組成物は、ポリマー性材料を含み得る。一部の場合には、組成物は、糖、核酸分子、ポリマー性材料、またはそれらの任意の組合せを含み得る。一部の例では、組成物は、糖および核酸分子を含み得る。一部の例では、組成物は、糖、核酸分子およびポリマー性材料を含み得る。本明細書で開示される組成物は、脂質、アニオン性ポリマー、ナノ粒子、またはそれらの組合せをさらに含み得る。本明細書で提供される糖は、修飾され得る。本明細書で提供される糖は、官能化または誘導体化され得る。官能化または誘導体化は、本明細書に記載される化学的部分を糖にカップリングし得る。修飾糖は、未修飾糖とは異なる特性を有し得る。糖の修飾は、核酸分子が細胞によって取り入れられることを容易にし得る。修飾は、未修飾糖と比較して、糖の正味の正のまたはカチオン性電荷を増加させ得る。
【0113】
本開示は、本明細書に記載される組成物を使用するための方法もまた提供する。方法は、細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にし得る。一部の場合には、方法は、細胞を分化させるための方法を含み得る。一部の場合には、方法は、細胞を、糖を含む組成物と接触させるステップを含み得る。一部の場合には、方法は、細胞を、核酸分子を含む組成物と接触させるステップを含み得る。一部の場合には、方法は、前記細胞をポリマー性材料でカプセル封入するステップを含み得る。一部の場合には、細胞を分化させるための方法は、ある条件下で細胞を組成物と接触させるステップを含み得る。一部の場合には、条件は、前記組成物を取り込むのに十分であり得る。一部の場合には、細胞による組成物の取り込みは、細胞の分化を容易にし得る。
【0114】
本明細書に記載される組成物は、本明細書に記載される任意の糖、核酸分子、脂質、ナノ粒子、ポリプレックス、またはそれらの組合せを含み得る。本明細書に記載される方法は、本明細書に記載される任意の組成物を使用し得る。
糖
糖
【0115】
一部の例では、糖は、炭水化物を含み得る。一部の例では、糖は、炭水化物部分を含み得る。糖は、糖（sugar）であり得る。糖は、糖（sugar）部分を含み得る。糖は、炭水化物モノマーまたは単糖を含み得る。一部の場合には、糖は、単糖のポリマー性形態を含み得る。糖のポリマー性形態の単糖は、グリコシド結合によって連結され得る。一部の場合には、糖のポリマー性形態は、二糖、オリゴ糖、多糖、またはそれらの組合せを含み得る。一部の場合には、糖は、少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、６０００、７０００、８０００、９０００、１００００個またはそれよりも多くの炭水化物部分を含み得る。一部の場合には、糖は、最大で約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、６０００、７０００、８０００、９０００、１００００または１０００００個の炭水化物部分を含み得る。一部の場合には、糖は、少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、６０００、７０００、８０００、９０００、１００００個またはそれよりも多くの単糖を含み得る。一部の場合には、糖は、最大で約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、６０００、７０００、８０００、９０００、１００００または１０００００個の単糖を含み得る。
【0116】
一部の例では、糖は、種々の部分で官能化または誘導体化され得る。糖またはその誘導体は、カチオン性部分を有し得る。用語「誘導体」または文法的に等価な用語は、糖に言及する場合、種々の化学的部分による糖の官能化または誘導体化を介して修飾された修飾糖を指す。カチオン性部分の対応するカチオン性電荷密度は、糖分子１グラム当たりのｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基で測定され得る。一部の場合には、カチオン性部分のカチオン性電荷密度は、高分子電解質滴定法、電気伝導度滴定および／または酸／塩基滴定によって決定され得る。一部の場合には、糖またはその誘導体のカチオン性部分の対応するカチオン性電荷密度は、少なくとも約０．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１ｍ当量／ｇ、少なくとも約１．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約２ｍ当量／ｇ、少なくとも約２．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約３ｍ当量／ｇ、少なくとも約３．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約４ｍ当量／ｇ、少なくとも約４．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約５ｍ当量／ｇ、少なくとも約５．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約６ｍ当量／ｇ、少なくとも約６．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約７ｍ当量／ｇ、少なくとも約７．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約８ｍ当量／ｇ、少なくとも約８．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約９ｍ当量／ｇ、少なくとも約９．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１０ｍ当量／ｇ、少なくとも約１０．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１１ｍ当量／ｇ、少なくとも約１１．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１２ｍ当量／ｇ、少なくとも約１２．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１３ｍ当量／ｇ、少なくとも約１３．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１４ｍ当量／ｇ、少なくとも約１４．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１５．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１６ｍ当量／ｇ、少なくとも約１６．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１７ｍ当量／ｇ、少なくとも約１７．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１８ｍ当量／ｇ、少なくとも約１８．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１９ｍ当量／ｇ、少なくとも約１９．５ｍ当量／ｇまたは少なくとも約２０ｍ当量／ｇであり得る。一部の場合には、糖またはその誘導体のカチオン性部分の対応するカチオン性電荷密度は、最大で約０．５ｍ当量／ｇ、最大で約１ｍ当量／ｇ、最大で約１．５ｍ当量／ｇ、最大で約２ｍ当量／ｇ、最大で約２．５ｍ当量／ｇ、最大で約３ｍ当量／ｇ、最大で約３．５ｍ当量／ｇ、最大で約４ｍ当量／ｇ、最大で約４．５ｍ当量／ｇ、最大で約５ｍ当量／ｇ、最大で約５．５ｍ当量／ｇ、最大で約６ｍ当量／ｇ、最大で約６．５ｍ当量／ｇ、最大で約７ｍ当量／ｇ、最大で約７．５ｍ当量／ｇ、最大で約８ｍ当量／ｇ、最大で約８．５ｍ当量／ｇ、最大で約９ｍ当量／ｇ、最大で約９．５ｍ当量／ｇ、最大で約１０ｍ当量／ｇ、最大で約１０．５ｍ当量／ｇ、最大で約１１ｍ当量／ｇ、最大で約１１．５ｍ当量／ｇ、最大で約１２ｍ当量／ｇ、最大で約１２．５ｍ当量／ｇ、最大で約１３ｍ当量／ｇ、最大で約１３．５ｍ当量／ｇ、最大で約１４ｍ当量／ｇ、最大で約１４．５ｍ当量／ｇ、最大で約１５ｍ当量／ｇ、最大で約１５．５ｍ当量／ｇ、最大で約１６ｍ当量／ｇ、最大で約１６．５ｍ当量／ｇ、最大で約１７ｍ当量／ｇ、最大で約１７．５ｍ当量／ｇ、最大で約１８ｍ当量／ｇ、最大で約１８．５ｍ当量／ｇ、最大で約１９ｍ当量／ｇ、最大で約１９．５ｍ当量／ｇまたは最大で約２０ｍ当量／ｇであり得る。一部の場合には、糖またはその誘導体のカチオン性部分の対応するカチオン性電荷密度は、０．００５～２０００ｍ当量／ｇであり得る。一部の場合には、糖またはその誘導体のカチオン性部分の対応するカチオン性電荷密度は、０．０５～２００ｍ当量／ｇであり得る。一部の場合には、糖またはその誘導体のカチオン性部分の対応するカチオン性電荷密度は、０．５～２０ｍ当量／ｇであり得る。一部の場合には、キトサンまたはその誘導体のカチオン性部分の対応するカチオン性電荷密度は、少なくとも約０．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１ｍ当量／ｇ、少なくとも約１．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約２ｍ当量／ｇ、少なくとも約２．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約３ｍ当量／ｇ、少なくとも約３．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約４ｍ当量／ｇ、少なくとも約４．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約５ｍ当量／ｇ、少なくとも約５．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約６ｍ当量／ｇ、少なくとも約６．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約７ｍ当量／ｇ、少なくとも約７．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約８ｍ当量／ｇ、少なくとも約８．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約９ｍ当量／ｇ、少なくとも約９．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１０ｍ当量／ｇ、少なくとも約１０．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１１ｍ当量／ｇ、少なくとも約１１．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１２ｍ当量／ｇ、少なくとも約１２．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１３ｍ当量／ｇ、少なくとも約１３．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１４ｍ当量／ｇ、少なくとも約１４．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１５．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１６ｍ当量／ｇ、少なくとも約１６．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１７ｍ当量／ｇ、少なくとも約１７．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１８ｍ当量／ｇ、少なくとも約１８．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１９ｍ当量／ｇ、少なくとも約１９．５ｍ当量／ｇまたは少なくとも約２０ｍ当量／ｇであり得る。一部の場合には、キトサンまたはその誘導体のカチオン性部分の対応するカチオン性電荷密度は、最大で約０．５ｍ当量／ｇ、最大で約１ｍ当量／ｇ、最大で約１．５ｍ当量／ｇ、最大で約２ｍ当量／ｇ、最大で約２．５ｍ当量／ｇ、最大で約３ｍ当量／ｇ、最大で約３．５ｍ当量／ｇ、最大で約４ｍ当量／ｇ、最大で約４．５ｍ当量／ｇ、最大で約５ｍ当量／ｇ、最大で約５．５ｍ当量／ｇ、最大で約６ｍ当量／ｇ、最大で約６．５ｍ当量／ｇ、最大で約７ｍ当量／ｇ、最大で約７．５ｍ当量／ｇ、最大で約８ｍ当量／ｇ、最大で約８．５ｍ当量／ｇ、最大で約９ｍ当量／ｇ、最大で約９．５ｍ当量／ｇ、最大で約１０ｍ当量／ｇ、最大で約１０．５ｍ当量／ｇ、最大で約１１ｍ当量／ｇ、最大で約１１．５ｍ当量／ｇ、最大で約１２ｍ当量／ｇ、最大で約１２．５ｍ当量／ｇ、最大で約１３ｍ当量／ｇ、最大で約１３．５ｍ当量／ｇ、最大で約１４ｍ当量／ｇ、最大で約１４．５ｍ当量／ｇ、最大で約１５ｍ当量／ｇ、最大で約１５．５ｍ当量／ｇ、最大で約１６ｍ当量／ｇ、最大で約１６．５ｍ当量／ｇ、最大で約１７ｍ当量／ｇ、最大で約１７．５ｍ当量／ｇ、最大で約１８ｍ当量／ｇ、最大で約１８．５ｍ当量／ｇ、最大で約１９ｍ当量／ｇ、最大で約１９．５ｍ当量／ｇまたは最大で約２０ｍ当量／ｇであり得る。一部の場合には、キトサンまたはその誘導体のカチオン性部分の対応するカチオン性電荷密度は、０．００５～２０００ｍ当量／ｇであり得る。一部の場合には、キトサンまたはその誘導体のカチオン性部分の対応するカチオン性電荷密度は、０．０５～２００ｍ当量／ｇであり得る。一部の場合には、キトサンまたはその誘導体のカチオン性部分の対応するカチオン性電荷密度は、０．５～２０ｍ当量／ｇであり得る。
【0117】
一部の例では、糖またはその誘導体は、完全にアセチル化された糖またはその誘導体と比較して、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％または１００％の脱アセチル化を含み得る。一部の例では、糖またはその誘導体は、完全にアセチル化された糖またはその誘導体と比較して、最大で約９５％、最大で約９０％、最大で約８５％、最大で約８０％、最大で約７５％、最大で約７０％、最大で約６５％、最大で約６０％、最大で約５５％または最大で約５０％の脱アセチル化を含み得る。脱アセチル化のパーセンテージは、１Ｈ ＮＭＲ分光法によって測定され得る。脱アセチル化のパーセンテージは、電気伝導度滴定または電位差滴定によって測定され得る。糖（または本明細書に記載される他の分子実体）の脱アセチル化のパーセンテージは、脱アセチル化が測定されている糖（または本明細書に記載される他の分子実体）と比較した、完全にアセチル化された糖（または本明細書に記載される他の分子実体）の比を含み得る。例えば、糖の脱アセチル化のパーセンテージは、脱アセチル化が測定されている糖が含有するものと比較した、完全にアセチル化された場合に糖が含有するアセチル化された基の数の比を含み得る。
【0118】
一部の例では、糖またはその誘導体は、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含み得る。一部の例では、糖またはその誘導体は、少なくとも約１００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、糖またはその誘導体は、少なくとも約３００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、糖またはその誘導体は、少なくとも約１０００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、糖またはその誘導体は、少なくとも約３０００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、糖またはその誘導体は、少なくとも約２０ｋＤａ、少なくとも約３０ｋＤａ、少なくとも約４０ｋＤａ、少なくとも約５０ｋＤａ、少なくとも約６０ｋＤａ、少なくとも約８０ｋＤａ、少なくとも約１００ｋＤａ、少なくとも約１２０ｋＤａ、少なくとも約１４０ｋＤａ、少なくとも約１６０ｋＤａ、少なくとも約１８０ｋＤａ、少なくとも約２００ｋＤａ、少なくとも約２２０ｋＤａ、少なくとも約２４０ｋＤａ、少なくとも約２６０ｋＤａ、少なくとも約２８０ｋＤａ、少なくとも約３００ｋＤａ、少なくとも約３５０ｋＤａ、少なくとも約４００ｋＤａ、少なくとも約４５０ｋＤａ、少なくとも約５００ｋＤａ、少なくとも約５５０ｋＤａ、少なくとも約６００ｋＤａ、少なくとも約６５０ｋＤａ、少なくとも約７００ｋＤａ、少なくとも約７５０ｋＤａ、少なくとも約８００ｋＤａ、少なくとも約８５０ｋＤａ、少なくとも約９００ｋＤａ、少なくとも約９５０ｋＤａ、少なくとも約１０００ｋＤａ、少なくとも約１１００ｋＤａ、少なくとも約１２００ｋＤａ、少なくとも約１３００ｋＤａ、少なくとも約１４００ｋＤａ、少なくとも約１５００ｋＤａ、少なくとも約１６００ｋＤａ、少なくとも約１７００ｋＤａ、少なくとも約１８００ｋＤａ、少なくとも約１９００ｋＤａまたは少なくとも約２０００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、糖またはその誘導体は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、糖またはその誘導体は、最大で約１５００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、糖またはその誘導体は、最大で約５００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、糖またはその誘導体は、最大で約２００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、糖またはその誘導体は、最大で約２０００ｋＤａ、最大で約１９００ｋＤａ、最大で約１８００ｋＤａ、最大で約１７００ｋＤａ、最大で約１６００ｋＤａ、最大で約１５００ｋＤａ、最大で約１４００ｋＤａ、最大で約１３００ｋＤａ、最大で約１２００ｋＤａ、最大で約１１００ｋＤａ、最大で約１０００ｋＤａ、最大で約９００ｋＤａ、最大で約８００ｋＤａ、最大で約７００ｋＤａ、最大で約６００ｋＤａ、最大で約５００ｋＤａ、最大で約４００ｋＤａ、最大で約３００ｋＤａ、最大で約２００ｋＤａ、最大で約１００ｋＤａ、最大で約８０ｋＤａ、最大で約６０ｋＤａ、最大で約４０ｋＤａまたは最大で約２０ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の場合には、糖またはその誘導体は、０．２ｋＤａ～２０００００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の場合には、糖またはその誘導体は、２ｋＤａ～２００００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の場合には、糖またはその誘導体は、２０ｋＤａ～２０００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、糖またはその誘導体は、オリゴ糖または多糖を含み得る。
【0119】
本明細書に記載される糖は、組成物内に、少なくとも約１ピコモル（ｐＭ）、２ｐＭ、５ｐＭ、１０ｐＭ、２０ｐＭ、５０ｐＭ、１００ｐＭ、２００ｐＭ、５００ｐＭ、１ナノモル（ｎＭ）、２ｎＭ、５ｎＭ、１０ｎＭ、２０ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭ、２００ｎＭ、５００ｎＭ、１マイクロモル（μＭ）、２μＭ、５μＭ、１０μＭ、２０μＭ、５０μＭ、１００μＭ、２００μＭ、５００μＭ、１ミリモル（ｍＭ）、２ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２００ｍＭ、５００ｍＭ、１モル（Ｍ）またはそれよりも高い濃度で存在し得る。本明細書に記載される糖は、組成物内に、最大で約１ｐＭ、２ｐＭ、５ｐＭ、１０ｐＭ、２０ｐＭ、５０ｐＭ、１００ｐＭ、２００ｐＭ、５００ｐＭ、１ｎＭ、２ｎＭ、５ｎＭ、１０ｎＭ、２０ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭ、２００ｎＭ、５００ｎＭ、１μＭ、２μＭ、５μＭ、１０μＭ、２０μＭ、５０μＭ、１００μＭ、２００μＭ、５００μＭ、１ｍＭ、２ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２００ｍＭ、５００ｍＭまたは１Ｍの濃度で存在し得る。
【0120】
一部の例では、還元オリゴ糖修飾糖は、マルトデキストリン修飾糖またはセロビオース修飾糖を含み得る。一部の例では、修飾糖は、カチオン性脂質、親水性化した脂質、またはそれらの組合せとの混合物を含み得る。一部の場合には、カチオン性脂質は、親水性脂質アンカー、リンカー基、正に荷電したヘッド基、またはそれらの組合せであり得る。一部の場合には、カチオン性脂質は、親水性脂質アンカー、リンカー基、正に荷電したヘッド基、またはそれらの組合せであり得る。一部の場合には、カチオン性脂質は、親水性脂質アンカー、リンカー基、正に荷電したヘッド基、またはそれらの組合せであり得る。脂質アンカーは、脂質二重層の物理的特性（例えば、柔軟性および脂質交換の速度）を決定し得る脂肪鎖（例えば、オレイン酸またはミリスチン酸に由来する）またはコレステロール基を含み得る。
【0121】
生分解性脂質は、あらゆる毒性を最小化するために、種々の酵素（例えば、エステラーゼ、ペプチダーゼ）によって代謝され得る。リンカーはまた、標的化、取り込みおよび輸送を増強するための新規側鎖の導入のための部位を提供し得る。カチオン性脂質上の正に荷電したヘッド基は、負に荷電した核酸（または核酸の負に荷電した部分）と相互作用し得る。ヘッド基は、第１級、第２級、第３級および／または第４級アミンとして、単独でまたは倍数的に荷電され得る。「Ｔ型」構成での多価ヘッド基、例えばスペルミンは、細胞による核酸分子の取り込みを促進するために効率的であり得る。一部の場合には、リンカー長さにおける増加は、細胞による核酸分子の取り込みを増加させ得る。
【0122】
一部の例では、糖は、修飾糖を含み得る。一部の例では、修飾糖は、脂肪族アルデヒド修飾糖を含み得る。一部の例では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、ヘキサナールアルデヒド修飾糖、ヘプタナールアルデヒド修飾糖、オクタナールアルデヒド修飾糖、ノナナールアルデヒド修飾糖またはデカナールアルデヒド修飾糖を含み得る。一部の例では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、デカナールアルデヒド修飾糖を含み得る。一部の例では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、ヘキサナールアルデヒド修飾糖を含み得る。一部の例では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、ヘプタナールアルデヒド修飾糖を含み得る。一部の例では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、オクタナールアルデヒド修飾糖を含み得る。一部の例では、脂肪族アルデヒド修飾糖は、ノナナールアルデヒド修飾糖を含み得る。
【0123】
一部の例では、修飾糖は、芳香族アルデヒド修飾糖を含み得る。一部の例では、芳香族アルデヒド修飾糖は、ベンズアルデヒド修飾糖またはシンナムアルデヒド修飾糖を含み得る。一部の例では、芳香族アルデヒド修飾糖は、ベンズアルデヒド修飾糖を含み得る。一部の例では、芳香族アルデヒド修飾糖は、シンナムアルデヒド修飾糖を含み得る。
【0124】
一部の例では、修飾糖は、ポリアミン誘導体化糖を含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化糖は、スペルミン修飾糖、スペルミジン修飾糖、プトレシン修飾糖、ジエチルエチルアミン修飾糖、ジメチルエチルアミン修飾糖またはアルギニン修飾糖を含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化糖は、スペルミン修飾糖を含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化糖は、スペルミジン修飾糖を含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化糖は、プトレシン修飾糖を含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化糖は、ジエチルエチルアミン修飾糖を含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化糖は、ジメチルエチルアミン修飾糖を含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化糖は、アルギニン修飾糖を含み得る。
【0125】
一部の例では、糖は、脂質付加物を含み得る。一部の場合には、糖は、アニオンポリマー付加物を含み得る。一部の場合には、糖は、脂質および／またはアニオンポリマー付加物を含み得る。一部の例では、脂質および／またはアニオンポリマー付加物は、ホスファチジルコリンまたはレシチンを含み得る。
【0126】
一部の場合には、糖は、キトサン、デンプン、アミロース、アミロペクチン、デキストラン、デキストリン、セルロース、ヘミセルロース、ガラクトマンナン、ヒアルロン酸、プルラン、ヘパリン、アルジネート、カラギーナン、キサンタンガム、ジェランガム、アガロース、またはそれらの組合せもしくは誘導体を含み得る。化学的化合物の誘導体は、化学的化合物の化学反応によって形成された異なる化学的化合物を含み得る。化学物質の誘導体は、化学物質の類似の化学的、物理的または機能的特徴を有し得る。一部の例では、糖は、キトサンまたはその誘導体を含み得る。一部の場合には、糖は、フルクトース、ガラクトース、グルコサミン、グルコース、グリセルアルデヒド、ラクトース、マルトース、マンノース、リボース、スクロース、キシロース、セルロース、ペクチン、デンプン、キサンタン、マルトデキストリン、セロビオース、またはそれらの組合せもしくは誘導体もまた含み得る。
【0127】
一部の例では、キトサンは、グルコサミンを含み得る。一部の場合には、キトサンは、グルコサミンのピラノースモノマーのポリマーを含み得る。一部の場合には、キトサンは、グルコサミンのピラノースモノマーのβ－１，４連結によって連結され得る。一部の場合には、キトサンは、グルコサミンの少なくとも約１０、５０、１００、５００、１０００、１５００、２０００、２５００、３０００、３５００、４０００、４５００、５０００、５５００、６０００、６５００、７０００、７５００、８０００、８５００、９０００、９５００、１００００個またはそれよりも多くのモノマーを含み得る。一部の場合には、キトサンは、グルコサミンの最大で約１０、５０、１００、５００、１０００、１５００、２０００、２５００、３０００、３５００、４０００、４５００、５０００、５５００、６０００、６５００、７０００、７５００、８０００、８５００、９０００、９５００、１００００または１０００００個のモノマーを含み得る。一部の場合には、キトサンは、キチンまたはその誘導体を含み得る。一部の場合には、キトサンは、ポリ－Ｎ－アセチル－Ｄ－グルコサミンを含み得る。一部の場合には、キトサンは、ポリ－グルコサミンを含み得る。一部の場合には、キトサンは、グルコサミンのオリゴマーを含み得る。キトサンは、脱アセチル化され得る。例えば、キトサンのＮ－アセチル基は、加水分解を介して除去され得る。一部の場合には、加水分解酵素が、キトサンオリゴ糖を修飾するために使用され得る。他の場合では、キトサナーゼが、キトサンオリゴ糖を修飾するために使用され得る。キトサンは、アセチル化もされ得る。一部の場合には、キトサンは、（１→４）連結された２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコース（ＧｌｃＮＡｃ、Ａ－ユニット）および２－アミノ－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコース（ＧｌｃＮ；Ｄ－ユニット）から構成されている二成分ヘテロ－多糖であり得る。
【0128】
一部の場合には、キトサンは、キトサンの誘導体を含み得る。キトサンの誘導体は、キトサンの硝酸塩、リン酸塩、硫酸塩、塩酸塩、グルタミン酸塩、乳酸塩または酢酸塩を含み得る。一部の場合には、キトサンは、エステル基を含み得る。キトサンは、エーテル基を含み得る。キトサンは、アシルおよび／またはアルキル基のＯＨ基との結合によって形成され得る。キトサンは、アシルおよび／またはアルキル基のＮＨ２基との結合によっては形成されない場合がある。例えば、キトサンは、キトサンのＯ－アルキルエーテルおよびキトサンのＯ－アシルエステルを含み得る。
【0129】
一部の例では、キトサンは、甲殻類の殻からもしくは真菌から、または他の方法で単離され得る。他の場合では、キトサンは、甲殻類の殻または真菌から単離されたキトサンの類似の分子構造を有し得る。一部の場合には、キトサンは、抗菌性であり得る。キトサンは、抗細菌薬、抗真菌薬、抗寄生生物薬、またはそれらの任意の組合せであり得る。
【0130】
一部の例では、キトサンは、キチンを含み得る。一部の場合には、キチンは、甲殻類の殻または真菌から単離され得る。他の場合では、キチンは、甲殻類の殻または真菌から単離されたキチンの同じ分子構造的を有し得る。キチンは、β－１，４連結されたＮ－アセチル－グルコサミンを含み得る。キチンは、β－１，４連結されたＮ－アセチル－グルコサミンの直鎖状ホモポリマーを含み得る。一部の場合には、キチンは、キトサンのアルカリ脱アセチル化に由来し得る。一部の場合には、β－１，４連結されたＮ－アセチル－グルコサミンから生じたキチンは、グルコサミンおよび／またはＮ－アセチル－グルコサミンモノマーから構成されている多糖を含み得る。グルコサミンおよびＮ－アセチル－グルコサミンモノマーは、β－１，４グリコシド結合によって連結され得る。
【0131】
一部の例では、糖は、カチオン性であり得る。一部の場合には、糖は、正の電荷を有し得る。一部の場合には、糖のアミン基は、酸性条件中でプロトン化され得る。一部の例では、糖は、カチオンであり得る。一部の場合には、糖は、ポリカチオンであり得る。一部の場合には、カチオン性糖は、第１級、もしくは第２級、もしくは第３級、もしくは第４級アミン基、またはそれらの組合せを導入するための化学的修飾によって調製される。一部の例では、カチオン性多糖は、キトサンであり得る。一部の場合には、キトサンは、正の電荷を有し得る。一部の場合には、キトサンのアミン基は、酸性条件中でプロトン化され得る。一部の例では、キトサンは、カチオンであり得る。一部の場合には、キトサンは、ポリカチオンであり得る。
【0132】
一部の例では、キトサンは、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の例では、キトサンは、中性水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の例では、糖は、水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。一部の例では、糖は、中性水性溶液中でカチオン性であるように構成されている。
【0133】
一部の例では、キトサンまたはその誘導体は、完全にアセチル化されたキトサンまたはその誘導体と比較して、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％または１００％の脱アセチル化を含み得る。一部の例では、キトサンまたはその誘導体は、完全にアセチル化されたキトサンまたはその誘導体と比較して、最大で約９５％、最大で約９０％、最大で約８５％、最大で約８０％、最大で約７５％、最大で約７０％、最大で約６５％、最大で約６０％、最大で約５５％または最大で約５０％の脱アセチル化を含み得る。
【0134】
一部の例では、キトサンまたはその誘導体は、少なくとも約２００キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含み得る。一部の例では、キトサンまたはその誘導体は、少なくとも約３００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、キトサンまたはその誘導体は、少なくとも約１０００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、キトサンまたはその誘導体は、少なくとも約３０００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、キトサンまたはその誘導体は、少なくとも約６０ｋＤａ、少なくとも約８０ｋＤａ、少なくとも約１００ｋＤａ、少なくとも約１２０ｋＤａ、少なくとも約１４０ｋＤａ、少なくとも約１６０ｋＤａ、少なくとも約１８０ｋＤａ、少なくとも約２００ｋＤａ、少なくとも約２２０ｋＤａ、少なくとも約２４０ｋＤａ、少なくとも約２６０ｋＤａ、少なくとも約２８０ｋＤａ、少なくとも約３００ｋＤａ、少なくとも約３５０ｋＤａ、少なくとも約４００ｋＤａ、少なくとも約４５０ｋＤａ、少なくとも約５００ｋＤａ、少なくとも約５５０ｋＤａ、少なくとも約６００ｋＤａ、少なくとも約６５０ｋＤａ、少なくとも約７００ｋＤａ、少なくとも約７５０ｋＤａ、少なくとも約８００ｋＤａ、少なくとも約８５０ｋＤａ、少なくとも約９００ｋＤａ、少なくとも約９５０ｋＤａ、少なくとも約１０００ｋＤａ、少なくとも約１１００ｋＤａ、少なくとも約１２００ｋＤａ、少なくとも約１３００ｋＤａ、少なくとも約１４００ｋＤａ、少なくとも約１５００ｋＤａ、少なくとも約１６００ｋＤａ、少なくとも約１７００ｋＤａ、少なくとも約１８００ｋＤａ、少なくとも約１９００ｋＤａ、少なくとも約２０００ｋＤａ、少なくとも約２１００ｋＤａ、少なくとも約２２００ｋＤａ、少なくとも約２３００ｋＤａ、少なくとも約２４００ｋＤａ、少なくとも約２５００ｋＤａ、少なくとも約２６００ｋＤａ、少なくとも約２７００ｋＤａ、少なくとも約２８００ｋＤａ、少なくとも約２９００ｋＤａ、少なくとも約３０００ｋＤａ、少なくとも約３１００ｋＤａ、少なくとも約３２００ｋＤａ、少なくとも約３３００ｋＤａ、少なくとも約３４００ｋＤａまたは少なくとも約３５００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、キトサンまたはその誘導体は、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、キトサンまたはその誘導体は、最大で約１５００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、キトサンまたはその誘導体は、最大で約５００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、キトサンまたはその誘導体は、最大で約２００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、キトサンまたはその誘導体は、最大で約３５００ｋＤａ、最大で約３４００ｋＤａ、最大で約３３００ｋＤａ、最大で約３２００ｋＤａ、最大で約３１００ｋＤａ、最大で約３０００ｋＤａ、最大で約２９００ｋＤａ、最大で約２８００ｋＤａ、最大で約２７００ｋＤａ、最大で約２６００ｋＤａ、最大で約２５００ｋＤａ、最大で約２４００ｋＤａ、最大で約２３００ｋＤａ、最大で約２２００ｋＤａ、最大で約２１００ｋＤａ、最大で約２０００ｋＤａ、最大で約１９００ｋＤａ、最大で約１８００ｋＤａ、最大で約１７００ｋＤａ、最大で約１６００ｋＤａ、最大で約１５００ｋＤａ、最大で約１４００ｋＤａ、最大で約１３００ｋＤａ、最大で約１２００ｋＤａ、最大で約１１００ｋＤａ、最大で約１０００ｋＤａ、最大で約９００ｋＤａ、最大で約８００ｋＤａ、最大で約７００ｋＤａ、最大で約６００ｋＤａ、最大で約５００ｋＤａ、最大で約４００ｋＤａ、最大で約３００ｋＤａ、最大で約２００ｋＤａまたは最大で約１００ｋＤａの平均分子質量を含み得る。一部の例では、キトサンまたはその誘導体は、オリゴマー性キトサンまたはポリマー性キトサンを含み得る。
【0135】
一部の例では、キトサンは、修飾キトサンを含み得る。一部の例では、修飾キトサンは、脂肪族アルデヒド修飾キトサンを含み得る。一部の例では、脂肪族アルデヒド修飾キトサンは、ヘキサナールアルデヒド修飾キトサン、ヘプタナールアルデヒド修飾キトサン、オクタナールアルデヒド修飾キトサン、ノナナールアルデヒド修飾キトサンまたはデカナールアルデヒド修飾キトサンを含み得る。一部の例では、脂肪族アルデヒド修飾キトサンは、デカナールアルデヒド修飾キトサンを含み得る。一部の例では、脂肪族アルデヒド修飾キトサンは、ヘキサナールアルデヒド修飾キトサンを含み得る。一部の例では、脂肪族アルデヒド修飾キトサンは、ヘプタナールアルデヒド修飾キトサンを含み得る。一部の例では、脂肪族アルデヒド修飾キトサンは、オクタナールアルデヒド修飾キトサンを含み得る。一部の例では、脂肪族アルデヒド修飾キトサンは、ノナナールアルデヒド修飾キトサンを含み得る。
【0136】
一部の例では、修飾キトサンは、芳香族アルデヒド修飾キトサンを含み得る。一部の例では、芳香族アルデヒド修飾キトサンは、ベンズアルデヒド修飾キトサンまたはシンナムアルデヒド修飾キトサンを含み得る。一部の例では、芳香族アルデヒド修飾キトサンは、ベンズアルデヒド修飾キトサンを含み得る。一部の例では、芳香族アルデヒド修飾キトサンは、シンナムアルデヒド修飾キトサンを含み得る。
【0137】
一部の例では、修飾キトサンは、ポリアミン誘導体化キトサンを含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化キトサンは、スペルミン修飾キトサン、スペルミジン修飾キトサン、プトレシン修飾キトサン、ジエチルエチルアミン修飾キトサン、ジメチルエチルアミン修飾キトサンまたはアルギニン修飾キトサンを含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化キトサンは、スペルミン修飾キトサンを含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化キトサンは、スペルミジン修飾キトサンを含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化キトサンは、プトレシン修飾キトサンを含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化キトサンは、ジエチルエチルアミン修飾キトサンを含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化キトサンは、ジメチルエチルアミン修飾キトサンを含み得る。一部の例では、ポリアミン誘導体化キトサンは、アルギニン修飾キトサンを含み得る。
【0138】
一部の例では、キトサンは、脂質付加物を含み得る。一部の場合には、キトサンは、アニオン性ポリマー付加物を含み得る。一部の場合には、キトサンは、脂質および／またはアニオンポリマー付加物を含み得る。一部の例では、脂質および／またはアニオンポリマー付加物は、ホスファチジルコリンまたはレシチンを含み得る。
【0139】
一部の例では、修飾キトサンは、糖修飾キトサンを含み得る。一部の例では、糖修飾キトサンは、単糖修飾キトサンまたは多糖修飾キトサンを含み得る。一部の例では、単糖修飾キトサンは、ラクトース修飾キトサン、マンノース修飾キトサン、グルコース修飾キトサン、ガラクトース修飾キトサン、グルコサミン修飾キトサン、スクロース修飾キトサン、マルトース修飾キトサン、キシロース修飾キトサン、リボース修飾キトサン、フルクトース修飾キトサンまたはグリセルアルデヒド修飾キトサンを含み得る。一部の例では、単糖修飾キトサンは、ラクトース修飾キトサンを含み得る。一部の例では、単糖修飾キトサンは、マンノース修飾キトサンを含み得る。一部の例では、単糖修飾キトサンは、グルコース修飾キトサンを含み得る。一部の例では、単糖修飾キトサンは、ガラクトース修飾キトサンを含み得る。一部の例では、単糖修飾キトサンは、グルコサミン修飾キトサンを含み得る。一部の例では、単糖修飾キトサンは、スクロース修飾キトサンを含み得る。一部の例では、単糖修飾キトサンは、マルトース修飾キトサンを含み得る。一部の例では、単糖修飾キトサンは、キシロース修飾キトサンを含み得る。一部の例では、単糖修飾キトサンは、リボース修飾キトサンを含み得る。一部の例では、単糖修飾キトサンは、フルクトース修飾キトサンを含み得る。一部の例では、単糖修飾キトサンは、グリセルアルデヒド修飾キトサンを含み得る。
【0140】
一部の例では、多糖修飾キトサンは、アニオン性多糖修飾キトサンまたは還元多糖修飾キトサンを含み得る。一部の例では、多糖修飾キトサンは、アニオン性多糖修飾キトサンを含み得る。一部の例では、多糖修飾キトサンは、還元多糖修飾キトサンを含み得る。一部の例では、修飾糖は、アニオン性多糖との混合物を含み得る。一部の例では、修飾糖は、アニオン性多糖修飾キトサンとの混合物を含み得る。一部の例では、修飾糖／アニオン性多糖混合物は、修飾糖およびアルジネート、カルボキシメチル化セルロース、ヒアルロン酸、ペクチン、カルボキシメチル化キトサンを含み得る。一部の例では、アニオン性多糖修飾キトサンは、アルジネート修飾キトサン、カルボキシメチル化セルロース修飾キトサン、ヒアルロン酸修飾キトサン、ペクチン修飾キトサン、プルラン修飾キトサン、デンプン修飾キトサンまたはキサンタンガム修飾キトサンを含み得る。一部の例では、アニオン性多糖修飾キトサンは、アルジネート修飾キトサンを含み得る。一部の例では、アニオン性多糖修飾キトサンは、カルボキシメチル化セルロース修飾キトサンを含み得る。一部の例では、アニオン性多糖修飾キトサンは、ヒアルロン酸修飾キトサンを含み得る。一部の例では、アニオン性多糖修飾キトサンは、ペクチン修飾キトサンを含み得る。一部の例では、アニオン性多糖修飾キトサンは、プルラン修飾キトサンを含み得る。一部の例では、アニオン性多糖修飾キトサンは、デンプン修飾キトサンを含み得る。一部の例では、アニオン性多糖修飾キトサンは、キサンタンガム修飾キトサンを含み得る。一部の例では、修飾キトサンは、フェノール修飾キトサンを含み得る。フェノールは、天然フェノールを含み得る。天然フェノールは、クロロゲン酸、フェルラ酸、コーヒー酸、没食子酸、またはそれらの組合せを含み得る。
核酸
核酸
【0141】
一部の例では、核酸は、核酸分子であり得る。一部の場合には、核酸は、ある種／型の核酸であり得る。ある種または型の核酸は、共通の生物学的機能、作用機構、構造的特徴、またはそれらの組合せを共有し得る。ある種または型の核酸は、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、ＤＮＡ、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、長鎖非コードＲＮＡ（ｌｎｃＲＮＡ）、リボソームリボ核酸（ｒＲＮＡ）、核内低分子ＲＮＡ（ｓｎＲＮＡ）、ｐｉｗｉ相互作用性ＲＮＡ（ｐｉＲＮＡ）、核小体低分子ＲＮＡ（ｓｎｏＲＮＡ）、細胞外ＲＮＡ（ｅｘＲＮＡ）、小分子カハール体特異的（ｓｍａｌｌ ｃａｊａｌ ｂｏｄｙ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ）ＲＮＡ（ｓｃａＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、ＹＲＮＡ（小分子非コードＲＮＡ）、ヘテロ核ＲＮＡ（ＨｎＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、相補ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）、トランスファーＲＮＡ（ｔＲＮＡ）、リボソームＲＮＡ、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）またはリボザイムであり得る。核酸分子は、１つまたは複数の修飾ヌクレオチド、例えば、メチル化されたヌクレオチドおよびヌクレオチドアナログを含み得る。一部の場合には、核酸分子は、ヌクレオチドのポリマー性形態を含み得る。一部の場合には、核酸分子は、ポリヌクレオチドを含み得る。一部の場合には、核酸分子は、修飾ポリヌクレオチドを含み得る。一部の場合には、核酸分子は、カノニカルまたは非カノニカルヌクレオチドを含み得る。カノニカルヌクレオチドは、アデノシン（Ａ）、シトシン（Ｃ）、グアニン（Ｇ）、チミン（Ｔ）、ウラシル（Ｕ）、またはそれらのバリアントを含み得る。一部の場合には、核酸は、一本鎖、二本鎖または三本鎖であり得る。一部の場合には、核酸は、一本鎖であり得る。一部の場合には、核酸は、二本鎖であり得る。一部の場合には、核酸は、一本鎖および二本鎖であり得る。
【0142】
一部の場合には、核酸分子は、直鎖状または閉鎖直鎖状二本鎖であり得る（例えば、ｄｏｇｇｙｂｏｎｅ ＤＮＡ）。一部の場合には、核酸分子は、環状であり得る。一部の場合には、核酸分子は、分岐状であり得る。核酸分子は、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）またはリボ核酸（ＲＮＡ）を含み得る。核酸分子は、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、アンロックド核酸（ＵＮＡ）、ロックド核酸（ＬＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡを含み得る。ＬＮＡは、構造的に柔軟性のない修飾（例えば、２’－Ｏ，４’－Ｃメチレン架橋）を含み得る。ＵＮＡは、柔軟性のある修飾を含み得る。修飾は、リボフラノース環の柔軟性を制限し、構造を、柔軟性のない二環式構成にロックし得る。ＬＮＡは、未修飾の核酸と比較して増加した熱安定性およびハイブリダイゼーション特異性を有し得る。ＵＮＡは、構造的に柔軟性のある修飾を有し得る（例えば、リボース環のＣ２’原子とＣ３’原子との間の結合が切断されている、ＲＮＡの非環式アナログ）。ＵＮＡは、Ｃ２’－Ｃ４’結合を欠如し得る。ＰＮＡは、デオキシリボースリン酸骨格またはリボースリン酸骨格が、核酸塩基が連結されるシュード－ペプチドポリマーによって置き換えられた、核酸の合成模倣物を含み得る。核酸分子は、コード配列を含み得る。核酸分子は、非コード配列を含み得る。核酸分子は、遺伝子もしくは遺伝子断片のコードもしくは非コード領域、連鎖分析から定義される遺伝子座、エクソン、イントロン、インテイン、またはそれらの任意の組合せを含み得る。
【0143】
一部の例では、核酸分子は、モノシストロン性であり得る。一部の場合には、核酸分子は、ポリシストロン性であり得る。モノシストロン性核酸分子は、１つのコード配列を含み得、コード配列は、翻訳のためにリボソームによって認識されるように構成されている。ポリシストロン性核酸分子は、少なくとも２つのコード配列を含み得、各コード配列は、コード配列の翻訳のためにリボソームによって認識されるように構成されている。一部の場合には、核酸分子は、ヒト遺伝子の配列を含み得る。一部の場合には、核酸分子は、非ヒト遺伝子の配列を含み得る。
【0144】
一部の例では、核酸分子は、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、ＤＮＡ、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、長鎖非コードＲＮＡ（ｌｎｃＲＮＡ）、リボソームリボ核酸（ｒＲＮＡ）、核内低分子ＲＮＡ（ｓｎＲＮＡ）、ｐｉｗｉ相互作用性ＲＮＡ（ｐｉＲＮＡ）、核小体低分子ＲＮＡ（ｓｎｏＲＮＡ）、細胞外ＲＮＡ（ｅｘＲＮＡ）、小分子カハール体特異的ＲＮＡ（ｓｃａＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、ＹＲＮＡ（小分子非コードＲＮＡ）、ヘテロ核ＲＮＡ（ＨｎＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、相補ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）またはそれらの組合せを含み得る。一部の例では、核酸分子は、トランスファーＲＮＡ（ｔＲＮＡ）、リボソームＲＮＡ、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、リボザイム、組換え核酸、分岐状核酸、プラスミド、ベクター、単離されたＤＮＡ、単離されたＲＮＡ、またはそれらの任意の組合せもまた含み得る。一部の例では、核酸分子は、ｍＲＮＡ、ｔａ－ＲＮＡ、ｓａＲＮＡ、ｅＲＮＡ、またはそれらの組合せを含み得る。核酸分子は、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ＹＲＮＡ、またはそれらの組合せを含み得る。核酸分子は、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、またはそれらの組合せを含み得る。
【0145】
一部の例では、核酸分子は、ｍＲＮＡを含み得る。ｍＲＮＡは、一本鎖であり得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、細胞中にトランスフェクトされた場合、細胞のリボソームが、ｍＲＮＡのコード配列を翻訳し、ｍＲＮＡのコード配列に基づいてタンパク質を合成することを可能にし得る。
【0146】
一部の例では、ｍＲＮＡは、細胞型特異的遺伝子配列を含み得る。細胞型特異的遺伝子配列は、細胞型の、発現されるまたは特異的に発現される遺伝子の配列を含み得る。細胞型は、外胚葉、内胚葉または中胚葉を含み得る。細胞型は、脂肪生成、血管新生、心原性、免疫原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎、網膜細胞もまた含み得る。一部の場合には、細胞は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、好中球、好酸球、好塩基球、マスト細胞、単球、マクロファージまたは樹状細胞を含み得る。細胞型は、任意の体細胞、幹細胞または不死化細胞もまた含み得る。幹細胞または不死化細胞は、誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）、胚性幹細胞（ＥＳＣ）、間葉系幹細胞（ＭＳＣ）、サテライト細胞、線維芽細胞を含み得る。
【0147】
一部の例では、ｍＲＮＡは、脂肪生成、血管新生、心原性、免疫原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎、網膜遺伝子配列、またはそれらの組合せを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、外胚葉、内胚葉または中胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、外胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、内胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、中胚葉遺伝子配列を含み得る。
【0148】
一部の場合には、ｍＲＮＡは、筋原性遺伝子配列を含み得る。他の場合では、ｍＲＮＡは、ＭＹＯＤ１を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＭＹＯＧを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＭＹＦ５を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＭＹＦ６を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＰＡＸ３を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＰＡＸ７を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、それらの断片、またはそれらのバリアントを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも２つを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも３つを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも４つを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも５つを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３およびＰＡＸ７を含み得る。
【0149】
一部の場合には、ＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡは、５’非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’ＵＴＲ、および／またはポリＡ－テイルの長さにおいて、少なくとも約１つの核酸修飾を含み得る。一部の場合には、少なくとも約１つの修飾は、ｍＲＮＡから翻訳される最終的なアミノ酸配列に対して影響を有さない。一部の場合には、ＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡは、遺伝子最適化される。一部の場合には、ＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡは、コドン最適化される。遺伝子最適化は、当該分野で周知の任意の方法によって実施され得る。遺伝子最適化は、安定性を増加させ、分解を低減または阻害し得る。コドン最適化は、当該分野で周知の任意の方法によって実施され得る。コドン最適化は、ｍＲＮＡの翻訳を促進し得る。一部の場合には、ＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡは、ヒトＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡである。一部の場合には、ＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡは、非ヒト哺乳動物ＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡ（例えば、ウシ、バッファロー、ブタ、ヒツジ、シカなど）、鳥類ＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡ（例えば、ニワトリ、カモ、ダチョウ、シチメンチョウ、キジなど）、魚類ＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡ（例えば、メカジキ、サケ、マグロ、シーバス、マス、ナマズなど）、無脊椎動物ＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡ（例えば、ロブスター、カニ、エビ、アサリ、カキ、イガイ、ウニなど）、爬虫類ＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡ（例えば、ヘビ、アリゲーター、カメなど）または両生類ＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡ（例えば、カエル）である。一部の場合には、ＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡは、ブタＭＹＯＤ１ ｍＲＮＡである。
【0150】
一部の場合には、ｍＲＮＡは、脂肪生成遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、またはそれらの任意の組合せを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＰＰＡＲＹをコードする。一部の場合には、ｍＲＮＡは、アディポネクチンをコードする。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＦＡＴＰ１～６をコードする。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＦＡＢＰ４をコードする。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＧＬＵＴ４をコードする。一部の場合には、ｍＲＮＡは、レプチンをコードする。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＡｄｉｐｏＲ１～２を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＣＤ１３７をコードする。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも２つを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも３つを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも４つを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも５つを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも６つを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも７つを含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２およびＣＤ１３７を含み得る。
【0151】
一部の場合には、ｍＲＮＡは、血管新生遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、心原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、軟骨形成遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、内皮遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、上皮遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、造血遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、肝性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、神経原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、骨原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、実質遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、腎遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、網膜遺伝子配列を含み得る。
【0152】
一部の例では、ｍＲＮＡは、モノシストロン性であり得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、ポリシストロン性であり得る。モノシストロン性ｍＲＮＡは、１つのコード配列を含み得、コード配列は、翻訳のためにリボソームによって認識されるように構成されている。ポリシストロン性ｍＲＮＡは、少なくとも２つのコード配列を含み得、各コード配列は、コード配列の翻訳のためにリボソームによって認識されるように構成されている。一部の例では、ｍＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントを含み得る。一部の場合には、ＲＮＡ調節エレメントを含むｍＲＮＡは、ＲＮＡ調節エレメントなしのｍＲＮＡと比較して、ｍＲＮＡの分解を、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％または少なくとも約９５％低減または阻害し得る。
【0153】
一部の場合には、ＲＮＡ調節エレメントは、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含み得る。一部の場合には、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’ＵＴＲ、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含み得る。一部の場合には、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップを含み得る。一部の場合には、ＲＮＡ調節エレメントは、５’ＵＴＲを含み得る。一部の場合には、ＲＮＡ調節エレメントは、３’－ＵＴＲを含み得る。一部の場合には、ＲＮＡ調節エレメントは、ポリＡテイル修飾を含み得る。一部の場合には、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’ＵＴＲ、３’－ＵＴＲまたはポリＡテイル修飾のうちの少なくとも２つを含み得る。一部の場合には、ＲＮＡ調節エレメントは、５’－キャップ、５’ＵＴＲ、３’－ＵＴＲおよびポリＡテイル修飾を含み得る。他のＲＮＡ調節エレメントは、イントロン配列、停止コドン配列、翻訳開始部位、ＲＮＡ－局在化配列、またはそれらの任意の組合せを含み得る。
【0154】
一部の例では、核酸分子は、ｃＤＮＡを含み得る。一部の例では、ｃＤＮＡは、脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎、網膜遺伝子配列、またはそれらの組合せを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、外胚葉、内胚葉または中胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、外胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、内胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、中胚葉遺伝子配列を含み得る。
【0155】
一部の場合には、ｃＤＮＡは、筋原性遺伝子配列を含み得る。他の場合では、ｃＤＮＡは、ＭＹＯＤ１を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＭＹＯＧを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＭＹＦ５を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＭＹＦ６を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＰＡＸ３を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＰＡＸ７を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、それらの断片、またはそれらのバリアントを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも２つを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも３つを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも４つを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも５つを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３およびＰＡＸ７を含み得る。
【0156】
一部の場合には、ｃＤＮＡは、脂肪生成遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、またはそれらの任意の組合せを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＰＰＡＲＹをコードする。一部の場合には、ｃＤＮＡは、アディポネクチンをコードする。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＦＡＴＰ１～６をコードする。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＦＡＢＰ４をコードする。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＧＬＵＴ４をコードする。一部の場合には、ｃＤＮＡは、レプチンをコードする。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＡｄｉｐｏＲ１～２を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＣＤ１３７をコードする。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも２つを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも３つを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも４つを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも５つを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも６つを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも７つを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２およびＣＤ１３７を含み得る。
【0157】
一部の場合には、ｃＤＮＡは、血管新生遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、心原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、軟骨形成遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、内皮遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、上皮遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、造血遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、肝性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、神経原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、骨原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、実質遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、腎遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、網膜遺伝子配列を含み得る。
【0158】
一部の例では、核酸分子は、ｓａＲＮＡを含み得る。一部の例では、ｓａＲＮＡは、脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎、網膜遺伝子配列、またはそれらの組合せを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、外胚葉、内胚葉または中胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、外胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、内胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、中胚葉遺伝子配列を含み得る。
【0159】
一部の場合には、ｓａＲＮＡは、筋原性遺伝子配列を含み得る。他の場合では、ｓａＲＮＡは、ＭＹＯＤ１を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＭＹＯＧを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＭＹＦ５を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＭＹＦ６を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＰＡＸ３を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＰＡＸ７を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、それらの断片、またはそれらのバリアントを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも２つを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも３つを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも４つを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも５つを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３およびＰＡＸ７を含み得る。
【0160】
一部の場合には、ｓａＲＮＡは、脂肪生成遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、またはそれらの任意の組合せを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＰＰＡＲＹをコードする。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、アディポネクチンをコードする。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＦＡＴＰ１～６をコードする。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＦＡＢＰ４をコードする。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＧＬＵＴ４をコードする。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、レプチンをコードする。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＡｄｉｐｏＲ１～２を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＣＤ１３７をコードする。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも２つを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも３つを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも４つを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも５つを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも６つを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも７つを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２およびＣＤ１３７を含み得る。
【0161】
一部の場合には、ｓａＲＮＡは、血管新生遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、心原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、軟骨形成遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、内皮遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、上皮遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、造血遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、肝性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、神経原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、骨原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、実質遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、腎遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、網膜遺伝子配列を含み得る。
【0162】
一部の例では、核酸分子は、ｅＲＮＡを含み得る。一部の例では、ｅＲＮＡは、脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎、網膜遺伝子配列、またはそれらの組合せを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、外胚葉、内胚葉または中胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、外胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、内胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、中胚葉遺伝子配列を含み得る。
【0163】
一部の場合には、ｅＲＮＡは、筋原性遺伝子配列を含み得る。他の場合では、ｅＲＮＡは、ＭＹＯＤ１を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＭＹＯＧを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＭＹＦ５を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＭＹＦ６を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＰＡＸ３を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＰＡＸ７を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、それらの断片、またはそれらのバリアントを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも２つを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも３つを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも４つを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも５つを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３およびＰＡＸ７を含み得る。
【0164】
一部の場合には、ｅＲＮＡは、脂肪生成遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、またはそれらの任意の組合せを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＰＰＡＲＹをコードする。一部の場合には、ｅＲＮＡは、アディポネクチンをコードする。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＦＡＴＰ１～６をコードする。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＦＡＢＰ４をコードする。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＧＬＵＴ４をコードする。一部の場合には、ｅＲＮＡは、レプチンをコードする。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＡｄｉｐｏＲ１～２を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＣＤ１３７をコードする。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも２つを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも３つを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも４つを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも５つを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも６つを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも７つを含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２およびＣＤ１３７を含み得る。
【0165】
一部の場合には、ｅＲＮＡは、血管新生遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、心原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、軟骨形成遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、内皮遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、上皮遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、造血遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、肝性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、神経原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、骨原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、実質遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、腎遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｅＲＮＡは、網膜遺伝子配列を含み得る。
【0166】
一部の例では、核酸分子は、ｔａ－ＲＮＡを含み得る。一部の例では、ｔａ－ＲＮＡは、脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎、網膜遺伝子配列、またはそれらの組合せを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、外胚葉、内胚葉または中胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、外胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、内胚葉遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、中胚葉遺伝子配列を含み得る。
【0167】
一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、筋原性遺伝子配列を含み得る。他の場合では、ｔａ－ＲＮＡは、ＭＹＯＤ１を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＭＹＯＧを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＭＹＦ５を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＭＹＦ６を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＰＡＸ３を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＰＡＸ７を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、それらの断片、またはそれらのバリアントを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも２つを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも３つを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも４つを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７のうちの少なくとも５つを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３およびＰＡＸ７を含み得る。
【0168】
一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、脂肪生成遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、またはそれらの任意の組合せを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＰＰＡＲＹをコードする。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、アディポネクチンをコードする。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＦＡＴＰ１～６をコードする。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＦＡＢＰ４をコードする。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＧＬＵＴ４をコードする。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、レプチンをコードする。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＡｄｉｐｏＲ１～２を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＣＤ１３７をコードする。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも２つを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも３つを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも４つを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも５つを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも６つを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７のうちの少なくとも７つを含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２およびＣＤ１３７を含み得る。
【0169】
一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、血管新生遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、心原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、軟骨形成遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、内皮遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、上皮遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、造血遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、肝性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、神経原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、骨原性遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、実質遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、腎遺伝子配列を含み得る。一部の場合には、ｔａ－ＲＮＡは、網膜遺伝子配列を含み得る。
【0170】
一部の例では、核酸分子は、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡを含み得る。一部の例では、核酸分子は、ｍｉＲＮＡを含み得る。一部の例では、核酸分子は、ｓｉＲＮＡを含み得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含み得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡまたはｓｉＲＮＡは、細胞の多能性を低減させることによって分化を容易にするポリヌクレオチド配列を含み得る。一部の場合には、ポリヌクレオチド配列は、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列による細胞の多能性のノックダウン／低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含み得る。
【0171】
一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、相補ヌクレオチド配列によって特定の遺伝子の発現を妨害し得る、短い二本鎖ＲＮＡ非コードＲＮＡ分子のクラスであり得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、転写後にｍＲＮＡを分解することまたは翻訳を防止することによって、遺伝子発現を妨害し得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、リン酸化された５’末端およびヒドロキシル化された３’末端を有する、１０～３０塩基対長であり得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、分解のために相補ｍＲＮＡを標的化し、そうして翻訳を防止し得る。
【0172】
一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４および／またはＴＲＡ－１－６０の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、ＳＯＸ２の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、ｎａｎｏｇの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、ＳＳＥＡ－４の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、ＫＬＦ４の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、ＴＲＡ－１－６０の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４またはＴＲＡ－１－６０のうちの少なくとも２つの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４またはＴＲＡ－１－６０のうちの少なくとも３つの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４またはＴＲＡ－１－６０のうちの少なくとも４つの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４およびＴＲＡ－１－６０の配列または相補配列を含み得る。
【0173】
ｓｈＲＮＡは、一部の場合には、細胞によってｓｉＲＮＡに変換され得る。一部の場合には、核酸分子は、ｓｈＲＮＡを含み得る。一部の場合には、ｓｈＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４および／またはＴＲＡ－１－６０の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｈＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｈＲＮＡは、ＳＯＸ２の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｈＲＮＡは、ｎａｎｏｇの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｈＲＮＡは、ＳＳＥＡ－４の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｈＲＮＡは、ＫＬＦ４の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｈＲＮＡは、ＴＲＡ－１－６０の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｈＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４またはＴＲＡ－１－６０のうちの少なくとも２つの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｈＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４またはＴＲＡ－１－６０のうちの少なくとも３つの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｈＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４またはＴＲＡ－１－６０のうちの少なくとも４つの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓｈＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４およびＴＲＡ－１－６０の配列または相補配列を含み得る。
【0174】
ｍｉＲＮＡは、遺伝子発現のＲＮＡサイレンシングおよび転写後調節において機能する小分子非コードＲＮＡ分子であり得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、ｍＲＮＡ分子内の相補配列と塩基対合し、ｍＲＮＡ分子をサイレンシングする。一部の場合には、サイレンシングは、２つの断片へのｍＲＮＡ鎖の切断を介した標的ｍＲＮＡの３’ＵＴＲへのｍｉＲＮＡの結合により、ポリＡテイルを短縮することを介したｍＲＮＡの不安定化により、またはリボソームによるタンパク質へのｍＲＮＡの非効率的な翻訳を介して、達成され得る。一部の場合には、筋原性遺伝子発現のモジュレーションは、ｍｉＲＮＡを介して生じ得る。筋原性遺伝子発現をモジュレートし得るｍｉＲＮＡは、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－２４、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２７ｂ、ｍｉＲ－２９ｂ／ｃ、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１３３、ｍｉＲ－１８１、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２０８ｂ／４９９、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２２１／２２２、ｍｉＲ－３２２／４２４、ｍｉ４８６またはｍｉＲ－５０３を含み得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、細胞型において発現され得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、細胞型において特異的に発現され得る。ｍｉＲＮＡは、筋原性転写因子ＳＲＦ、ＭｙｏＤまたはＭＥＦ２の制御下で心筋および骨格筋において特異的に発現され得、この場所で、これらは、骨格筋形成のプロセス、例えば、筋芽細胞／サテライト細胞の増殖および分化を調節し得る。
【0175】
一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４および／またはＴＲＡ－１－６０の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、ＳＯＸ２の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、ｎａｎｏｇの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、ＳＳＥＡ－４の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、ＫＬＦ４の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、ＴＲＡ－１－６０の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４またはＴＲＡ－１－６０のうちの少なくとも２つの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４またはＴＲＡ－１－６０のうちの少なくとも３つの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４またはＴＲＡ－１－６０のうちの少なくとも４つの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、ＰＯＵ５Ｆ１（ＯＣＴ３／４）、ＳＯＸ２、ｎａｎｏｇ、ＳＳＥＡ－４、ＫＬＦ４およびＴＲＡ－１－６０の配列または相補配列を含み得る。
【0176】
一部の場合には、核酸分子は、ｓａＲＮＡを含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、Ｍｒｆ４、Ｐａｘ７、ＰＡＸ３、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５もしくはＭＹＦ６、またはそれらの組合せの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、Ｍｒｆ４の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、Ｐａｘ７の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＰＡＸ３の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＭＹＯＧの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＭＹＦ５の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、ＭＹＦ６の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、Ｍｒｆ４、Ｐａｘ７、ＰＡＸ３、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５またはＭＹＦ６のうちの少なくとも２つの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、Ｍｒｆ４、Ｐａｘ７、ＰＡＸ３、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５またはＭＹＦ６のうちの少なくとも３つの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、Ｍｒｆ４、Ｐａｘ７、ＰＡＸ３、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５またはＭＹＦ６のうちの少なくとも４つの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、Ｍｒｆ４、Ｐａｘ７、ＰＡＸ３、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５またはＭＹＦ６のうちの少なくとも５つの配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、ｓａＲＮＡは、Ｍｒｆ４、Ｐａｘ７、ＰＡＸ３、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５およびＭＹＦ６の配列または相補配列を含み得る。一部の場合には、核酸分子は、２つまたはそれよりも多くの異なる型の核酸分子を含み得る。一部の場合には、２つまたはそれよりも多くの異なる型の核酸分子は、ｍＲＮＡおよびｓｉＲＮＡを含み得る。一部の場合には、２つまたはそれよりも多くの異なる型の核酸分子は、ｍＲＮＡおよびｍｉＲＮＡを含み得る。一部の場合には、２つまたはそれよりも多くの異なる型の核酸分子は、異なる配列の複数のｍＲＮＡを含み得る。一部の場合には、各々がコード配列および／または非コード配列を含む複数の配列は、１つのｓａＲＮＡ構築物内にコードされ得る。ｍＲＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、またはそれらの任意の組合せもしくはバリアントのうちのいずれか１つの配列を含み得る。ｍＲＮＡは、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２およびＣＤ１３７のうちのいずれか１つの配列を含み得る。
【0177】
一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４．）、ＫＬＦ４、ＳＯＸ２、またはそれらの任意の組合せもしくはバリアントを標的化し得る。一部の場合には、２つまたはそれよりも多くの異なる型の核酸分子は、ｃＤＮＡおよびｓｉＲＮＡを含み得る。一部の場合には、ｃＤＮＡは、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、またはそれらの任意の組合せもしくはバリアントを含み得る。一部の場合には、２つまたはそれよりも多くの異なる核酸は、ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ、ｍｉＲＮＡ、トランスファーＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、アンロックドＲＮＡ（ｕＲＮＡ）、ＳａＲＮＡ、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの任意のバリアント、組合せもしくはアナログを含み得る。
【0178】
一部の場合には、１つまたは複数の遺伝子は、１つ、２つまたは複数の核酸分子を用いて、標的化およびモジュレートされ得る。一部の場合には、１つまたは複数の遺伝子は、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個もしくはそれよりも多くの遺伝子よりも多くのまたはそれと等しい遺伝子を含み得る。一部の場合には、細胞中の１つまたは複数の遺伝子の発現をモジュレートすることは、少なくとも約２つの遺伝子のうちの第１の遺伝子の発現を増強し、少なくとも約２つの遺伝子のうちの第２の遺伝子の発現を阻害することを含み得る。
【0179】
一部の例では、核酸分子は、修飾され得る。一部の場合には、核酸分子は、化学的に修飾され得る（即ち、核酸分子は、化学的修飾を含み得る）。一部の例では、化学的に修飾された核酸分子は、化学的に修飾されていない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％またはそれよりも大きく低減または阻害し得る。
【0180】
一部の場合には、化学的に修飾された核酸分子は、ＵＮＡまたはＬＮＡを含み得る。一部の例では、ＬＮＡは、構造的に柔軟性のない修飾を有し得る。一部の場合には、ＵＮＡは、構造的に柔軟性のある修飾を有し得る。一部の場合には、ＵＮＡは、リボース環のＣ２’原子とＣ３’原子との間の結合が切断されている、ＲＮＡの非環式アナログを含み得る。一部の場合には、ＬＮＡは、２’酸素と４’炭素とを接続する余分な架橋でリボース部分が修飾された修飾核酸分子を含み得る。一部の場合には、核酸分子は、ｕＲＮＡを含み得る。
【0181】
一部の例では、核酸は、少なくとも約５ヌクレオチド、１０ヌクレオチド、５０ヌクレオチド、１００ヌクレオチド、５００ヌクレオチド、１０００ヌクレオチド、５０００ヌクレオチド、１００００ヌクレオチドまたはそれよりも大きい長さを有し得る。一部の例では、核酸は、最大で約５ヌクレオチド、１０ヌクレオチド、５０ヌクレオチド、１００ヌクレオチド、５００ヌクレオチド、１０００ヌクレオチド、５０００ヌクレオチドまたは１００００ヌクレオチドの長さを有し得る。
ポリプレックス
ポリプレックス
【0182】
一部の例では、糖またはポリプレックスは、細胞による核酸の取り込みを容易にし得る。一部の場合には、正の電荷を含む糖またはポリプレックスは、核酸分子とイオン結合を形成し得る。糖が結合したまたはポリプレックスへと会合した核酸分子は、低減された負の電荷を有し得る。糖が結合したまたはポリプレックスへと会合した核酸分子は、中性電荷を有し得る。糖が結合したまたはポリプレックスへと会合した核酸分子は、正の電荷を有し得る。核酸分子（および糖またはポリプレックス）の低減された負の電荷、中性電荷または正の電荷は、細胞によるその取り込みを容易にし得る。一部の場合には、糖は、コアセルベーションを介して核酸に結合し得る。例えば、（１）核酸分子の糖との結合または会合；（２）核酸分子および糖からのポリプレックスの形成；（３）それらの組合せ、を介して、核酸分子を含む組成物の正味の負の電荷を低減させることは、原形質膜が負の電荷を有し得る細胞による核酸分子の取り込みを容易にし得る。核酸分子の糖との会合または核酸分子および糖からのポリプレックスの形成は、糖もポリプレックスの形成もなしに細胞と接触するために使用される核酸分子の量と比較して、（細胞が核酸分子を取り込むのを可能にするために）細胞と接触するために使用される核酸分子の量（数、重量、または質量）を低減し得る。
【0183】
本明細書に記載される核酸分子は、組成物内に、少なくとも約１ピコモル（ｐＭ）、２ｐＭ、５ｐＭ、１０ｐＭ、２０ｐＭ、５０ｐＭ、１００ｐＭ、２００ｐＭ、５００ｐＭ、１ナノモル（ｎＭ）、２ｎＭ、５ｎＭ、１０ｎＭ、２０ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭ、２００ｎＭ、５００ｎＭ、１マイクロモル（μＭ）、２μＭ、５μＭ、１０μＭ、２０μＭ、５０μＭ、１００μＭ、２００μＭ、５００μＭ、１ミリモル（ｍＭ）、２ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２００ｍＭ、５００ｍＭ、１モル（Ｍ）またはそれよりも高い濃度で存在し得る。本明細書に記載される核酸分子は、組成物内に、最大で約１ｐＭ、２ｐＭ、５ｐＭ、１０ｐＭ、２０ｐＭ、５０ｐＭ、１００ｐＭ、２００ｐＭ、５００ｐＭ、１ｎＭ、２ｎＭ、５ｎＭ、１０ｎＭ、２０ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭ、２００ｎＭ、５００ｎＭ、１μＭ、２μＭ、５μＭ、１０μＭ、２０μＭ、５０μＭ、１００μＭ、２００μＭ、５００μＭ、１ｍＭ、２ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭ、５０ｍＭ、１００ｍＭ、２００ｍＭ、５００ｍＭまたは１Ｍの濃度で存在し得る。
【0184】
一部の例では、糖および核酸分子は、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の場合には、糖および核酸分子は、互いに会合するように構成されている。一部の場合には、糖は、核酸分子を結合し得る。一部の場合には、糖および核酸分子は、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の場合には、ポリプレックスの糖は、修飾糖またはその記載される脂質および／もしくはアニオンポリマー付加物を含み得る。一部の例では、糖およびｍＲＮＡは、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の場合には、糖およびｍＲＮＡは、互いに会合するように構成されている。一部の場合には、糖は、ｍＲＮＡを結合し得る。一部の場合には、糖およびｍＲＮＡは、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の場合には、糖およびｍＲＮＡは、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の例では、糖およびｍｉＲＮＡは、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の場合には、糖およびｍｉＲＮＡは、互いに会合するように構成されている。一部の場合には、糖は、ｍｉＲＮＡを結合し得る。一部の場合には、糖およびｍｉＲＮＡは、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の例では、糖およびｓｉＲＮＡは、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の場合には、糖およびｓｉＲＮＡは、互いに会合するように構成されている。一部の場合には、糖は、ｓｉＲＮＡを結合し得る。一部の場合には、糖およびｓｉＲＮＡは、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の例では、キトサンおよび核酸分子は、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の例では、キトサンおよび核酸分子は、互いに会合するように構成されている。一部の場合には、キトサンは、核酸分子を結合し得る。一部の場合には、キトサンおよび核酸分子は、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の例では、キトサンおよびｍＲＮＡは、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の場合には、キトサンおよびｍＲＮＡは、互いに会合するように構成されている。一部の場合には、キトサンは、ｍＲＮＡを結合し得る。一部の場合には、キトサンおよびｍＲＮＡは、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の場合には、キトサンおよびｍＲＮＡは、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の例では、キトサンおよびｍｉＲＮＡは、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の場合には、キトサンおよびｍｉＲＮＡは、互いに会合するように構成されている。一部の場合には、キトサンは、ｍｉＲＮＡを結合し得る。一部の場合には、キトサンおよびｍｉＲＮＡは、ポリプレックスを形成するように構成されている。一部の例では、キトサンおよびｓｉＲＮＡは、互いに自己アセンブルするように構成されている。一部の場合には、キトサンおよびｓｉＲＮＡは、互いに会合するように構成されている。一部の場合には、キトサンは、ｓｉＲＮＡを結合し得る。一部の場合には、キトサンおよびｓｉＲＮＡは、ポリプレックスを形成するように構成されている。
【0185】
２つの分子実体の自己アセンブリは、他の分子実体（例えば、触媒）の補助なしの、２つの分子実体からの別個の分子実体の開始および形成を含み得る。一部の場合には、核酸分子および糖は、それらの間での静電相互作用に少なくとも基づいて、互いに会合し得る。例えば、核酸分子は、アニオン性であり得、糖は、カチオン性であり得る。核酸分子のアニオン性電荷と糖のカチオン性電荷との間の静電相互作用は、核酸分子および糖の、複合体への自己アセンブリを容易にし得る。核酸分子のアニオン性電荷と糖のカチオン性電荷との間の静電相互作用は、核酸分子および糖のポリプレックスの形成を容易にし得る。（例えば、糖の修飾、官能化または誘導体化を介して）糖の電荷を調整することは、糖と核酸分子との間での会合、自己アセンブリ、および／またはポリプレックスの形成を制御し得る。
【0186】
一部の場合には、核酸分子は、ポリプレックスの表面またはその近傍にあるように構成されている。核酸分子は、ポリプレックスの表面またはその近傍にある。核酸分子は、ポリプレックスの糖の表面上に吸着されるように構成されている。核酸分子は、ポリプレックスの表面の糖上に吸着され得る。一部の場合には、核酸分子は、ポリプレックス内にカプセル封入されるように構成されている。核酸分子は、ポリプレックス内にカプセル封入され得る。一部の場合には、核酸分子は、ポリプレックスの内側に存在する。一部の場合には、核酸分子は、ポリプレックスの外側に存在する。一部の場合には、核酸分子は、ポリプレックスの内側および外側に存在する。核酸分子にはまた、ポリプレックスの他の分子、例えば糖が間に介在し得る。ポリプレックスの核酸分子および糖の構成は、ランダムであり得る。ポリプレックスの核酸分子および糖の構成は、秩序付けられ得る。例えば、ポリプレックスの核酸分子および糖は、核酸分子と糖との間での静電相互作用に基づいて秩序付けられた構成を取り得る。一部の場合には、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状、球状、直鎖状または分岐状である。一部の場合には、ポリプレックスは、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である。一部の場合には、ポリプレックスは、規則的な形状である。一部の場合には、ポリプレックスは、不規則な形状である。一部の場合には、ポリプレックスは、分岐状である。一部の場合には、ポリプレックスは、球状または直鎖状である。一部の場合には、ポリプレックスは、球状である。一部の場合には、ポリプレックスは、直鎖状である。規則的な形状は、任意の直交形状を含み得る。規則的な形状は、任意の多角形形状（３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれよりも多くの辺を含む）を含み得る。不規則な形状は、規則的な形状でない形状を含み得る。
【0187】
一部の例では、ポリプレックスのサイズは、ポリプレックスの直径によって測定され得る。一部の場合には、ポリプレックスの直径は、ポリプレックスの見掛けの直径を含み得る。一部の場合には、ポリプレックスの見掛けの直径は、複数のポリプレックスの直径の分布の平均（ａｖｅｒａｇｅ）直径を含み得る。一部の場合には、ポリプレックスの見掛けの直径は、複数のポリプレックスの代表的直径を含み得る。一部の場合には、ポリプレックスの見掛けの直径は、複数のポリプレックスの平均（ｍｅａｎ）直径を含み得る。一部の場合には、ポリプレックスの見掛けの直径は、複数のポリプレックスの中央値直径を含み得る。一部の場合には、ポリプレックスの見掛けの直径は、複数のポリプレックスの最頻値直径を含み得る。代表的直径は、複数のポリプレックスの分位直径または範囲直径もまた含み得る。代表的直径は、複数のポリプレックスの複数の直径の分布としても記載され得る。
【0188】
一部の場合には、ポリプレックスの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）、ゲル濾過クロマトグラフィー、分析的超遠心分離または顕微鏡によって測定され得る。一部の場合には、組成物中に形成されたポリプレックスの直径は、動的光散乱（ＤＬＳ）によって測定され得る。ＤＬＳは、分子を含有する懸濁液または溶液から散乱された光の強度におけるランダム変化を測定することによって、分子（例えば、ポリプレックス）のサイズを決定し得る。ＤＬＳは、粒子のブラウン運動を感知することによって、粒子サイズを測定し得る。ブラウン運動の速度は、粒子が小さいほど高いので、散乱された光のドップラースペクトルの広がりは、サイズ依存的であり得る。ＤＬＳは、約０．０１ナノメートル（ｎｍ）、０．１ｎｍまたは１ｎｍの分解能を有し得る。他の例では、形成されたポリプレックスは、低温電子顕微鏡によって観察および／または測定される。一部の場合には、ポリプレックスは、格子上に薄いメンブレンの形態で積載され、－８０℃、－９０℃、－１００℃、－１１０℃、－１２０℃、－１３０℃、－１４０℃、－１５０℃、－１６０℃、－１７０℃、－１８０℃、－１９０℃、－２００℃またはそれよりも低い温度で凍結され得る。
【0189】
ポリプレックスは、緩衝液中に維持され得る。緩衝液は、少なくとも約５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、８．６、８．７、８．８、８．９、９またはそれよりも高いｐＨを有し得る。緩衝液は、最大で約５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、８．６、８．７、８．８、８．９または９のｐＨを有し得る。緩衝液は、食塩水を含み得る。緩衝液は、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）を含み得る。緩衝液は、ＨＥＰＥＳまたはＴｒｉｓ－緩衝食塩水（ＴＢＳ）もまた含み得る。
【0190】
核酸、糖、脂質、またはそれらの組合せは、ポリプレックスを形成するために、約－８０℃、－５０℃、－２０℃、－１０℃、－９℃、－８℃、－７℃、－６℃、－５℃、－４℃、－３℃、－２℃、－１℃、０℃、１℃、２℃、３℃、４℃、５℃、６℃、７℃、８℃、９℃、１０℃、１１℃、１２℃、１３℃、１４℃、１５℃、１６℃、１７℃、１８℃、１９℃、２０℃、２１℃、２２℃、２３℃、２４℃、２５℃、２６℃、２７℃、２８℃、２９℃、３０℃、３１℃、３２℃、３３℃、３４℃、３５℃、３６℃、３７℃またはそれよりも高い温度でインキュベートされ得る。核酸、糖、脂質、またはそれらの組合せは、ポリプレックスを形成するために、約１分間、２分間、３分間、４分間、５分間、６分間、７分間、８分間、９分間、１０分間、１１分間、１２分間、１３分間、１４分間、１５分間、１６分間、１７分間、１８分間、１９分間、２０分間、２１分間、２２分間、２３分間、２４分間、２５分間、２６分間、２７分間、２８分間、２９分間、３０分間、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間またはそれよりも長くインキュベートされ得る。
【0191】
一部の例では、ポリプレックスの見掛けの直径は、少なくとも約５．０ナノメートル（ｎｍ）である。一部の例では、ポリプレックスの見掛けの直径は、少なくとも約１０．０ｎｍである。一部の例では、ポリプレックスの見掛けの直径は、少なくとも約１．０ｎｍ、少なくとも約１．５ｎｍ、少なくとも約２．０ｎｍ、少なくとも約２．５ｎｍ、少なくとも約３．０ｎｍ、少なくとも約３．５ｎｍ、少なくとも約４．０ｎｍ、少なくとも約４．５ｎｍ、少なくとも約５．０ｎｍ、少なくとも約５．５ｎｍ、少なくとも約６．０ｎｍ、少なくとも約６．５ｎｍ、少なくとも約７．０ｎｍ、少なくとも約７．５ｎｍ、少なくとも約８．０ｎｍ、少なくとも約８．５ｎｍ、少なくとも約９．０、少なくとも約９．５ｎｍ、少なくとも約１０．０ｎｍ、少なくとも約１０．５ｎｍ、少なくとも約１１．０ｎｍ、少なくとも約１１．５ｎｍ、少なくとも約１２．０またはそれよりも大きい。一部の例では、ポリプレックスの見掛けの直径は、最大で約５０００ｎｍである。一部の例では、ポリプレックスの見掛けの直径は、最大で約８００ｎｍである。一部の例では、ポリプレックスの見掛けの直径は、最大で約６００ｎｍである。一部の例では、ポリプレックスの見掛けの直径は、最大で約７０００ｎｍ、最大で約６０００ｎｍ、最大で約５０００ｎｍ、最大で約４０００ｎｍ、最大で約３０００ｎｍ、最大で約２０００ｎｍ、最大で約１０００ｎｍ、最大で約９００ｎｍ、最大で約８００ｎｍ、最大で約７００ｎｍ、最大で約６００ｎｍ、最大で約５００ｎｍ、最大で約４００ｎｍ、最大で約３００ｎｍ、最大で約２００ｎｍまたは最大で約１００ｎｍである。
【0192】
一部の例では、本明細書に記載される組成物は、ナノ粒子を含み得る。ナノ粒子は、金粒子、リン酸カルシウムナノ粒子、酸化鉄粒子、脂質ナノ粒子、またはそれらの組合せを含み得る。一部の場合には、リン酸カルシウム（ＣａＰ）ナノ粒子は、シリカシェル、ＰＥＩ（ポリ（エチレンイミン））シェル、またはそれらの組合せを含み得る。一部の場合には、リン酸カルシウムナノ粒子は、三重シェルリン酸カルシウムナノ粒子（ＣａＰ－核酸－ＣａＰ－ＰＥＩ）、シリカシェルを有するリン酸カルシウムナノ粒子（ＣａＰ－核酸－ＰＥＩ－ＳｉＯ２－ＳＨ）、単一シェルＣａＰ－ＰＥＩを有するリン酸カルシウム、またはそれらの組合せを含み得る（例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Neuhaus B et al., RSV Adv., 2016, 6, 18102を参照されたい）。
【0193】
一部の例では、ポリプレックスは、ナノ粒子を含み得る。一部の場合には、ナノ粒子は、少なくとも約５．０ｎｍであり得る。一部の場合には、ナノ粒子は、少なくとも約１０．０ｎｍであり得る。一部の場合には、ナノ粒子は、少なくとも約１．０ｎｍ、少なくとも約１．５ｎｍ、少なくとも約２．０ｎｍ、少なくとも約２．５ｎｍ、少なくとも約３．０ｎｍ、少なくとも約３．５ｎｍ、少なくとも約４．０ｎｍ、少なくとも約４．５ｎｍ、少なくとも約５．０ｎｍ、少なくとも約５．５ｎｍ、少なくとも約６．０ｎｍ、少なくとも約６．５ｎｍ、少なくとも約７．０ｎｍ、少なくとも約７．５ｎｍ、少なくとも約８．０ｎｍ、少なくとも約８．５ｎｍ、少なくとも約９．０、少なくとも約９．５ｎｍ、少なくとも約１０．０ｎｍ、少なくとも約１０．５ｎｍ、少なくとも約１１．０ｎｍ、少なくとも約１１．５ｎｍ、少なくとも約１２．０またはそれよりも大きくあり得る。一部の場合には、ナノ粒子は、最大で約１０．０ｎｍであり得る。一部の場合には、ナノ粒子は、最大で約１．０ｎｍ、最大で約１．５ｎｍ、最大で約２．０ｎｍ、最大で約２．５ｎｍ、最大で約３．０ｎｍ、最大で約３．５ｎｍ、最大で約４．０ｎｍ、最大で約４．５ｎｍ、最大で約５．０ｎｍ、最大で約５．５ｎｍ、最大で約６．０ｎｍ、最大で約６．５ｎｍ、最大で約７．０ｎｍ、最大で約７．５ｎｍ、最大で約８．０ｎｍ、最大で約８．５ｎｍ、最大で約９．０、最大で約９．５ｎｍ、最大で約１０．０ｎｍ、最大で約１０．５ｎｍ、最大で約１１．０ｎｍ、最大で約１１．５ｎｍまたは最大で約１２．０であり得る。
【0194】
一部の場合には、ナノ粒子は、コロイド状ナノ粒子であり得る。本明細書で使用されるコロイド状脂質粒子は、対象または細胞にとって少なくとも実質的に非毒性であり得る。一部の場合には、脂質粒子は、約４０ｎｍ～約１５０ｎｍの平均直径を有する。一部の場合には、直径は、約５０ｎｍ～約１４０ｎｍ、約６０ｎｍ～約１３０ｎｍまたは～約７０ｎｍ～約１２０ｎｍである。一部の場合には、コロイド状ナノ粒子は、最大で約５０００ｎｍであり得る。一部の場合には、コロイド状ナノ粒子は、最大で約８００ｎｍであり得る。一部の場合には、コロイド状ナノ粒子は、最大で約６００ｎｍであり得る。一部の場合には、コロイド状ナノ粒子は、最大で約７０００ｎｍ、最大で約６０００ｎｍ、最大で約５０００ｎｍ、最大で約４０００ｎｍ、最大で約３０００ｎｍ、最大で約２０００ｎｍ、最大で約１０００ｎｍ、最大で約９００ｎｍ、最大で約８００ｎｍ、最大で約７００ｎｍ、最大で約６００ｎｍ、最大で約５００ｎｍ、最大で約４００ｎｍ、最大で約３００ｎｍ、最大で約２００ｎｍまたは最大で約１００ｎｍであり得る。一部の場合には、コロイド状ナノ粒子は、少なくとも約６００ｎｍであり得る。一部の場合には、コロイド状ナノ粒子は、少なくとも約７０００ｎｍ、少なくとも約６０００ｎｍ、少なくとも約５０００ｎｍ、少なくとも約４０００ｎｍ、少なくとも約３０００ｎｍ、少なくとも約２０００ｎｍ、少なくとも約１０００ｎｍ、少なくとも約９００ｎｍ、少なくとも約８００ｎｍ、少なくとも約７００ｎｍ、少なくとも約６００ｎｍ、少なくとも約５００ｎｍ、少なくとも約４００ｎｍ、少なくとも約３００ｎｍ、少なくとも約２００ｎｍまたは少なくとも約１００ｎｍであり得る。
【0195】
一部の場合には、本明細書に記載されるナノ粒子の対応するカチオン性電荷密度は、少なくとも約０．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１ｍ当量／ｇ、少なくとも約１．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約２ｍ当量／ｇ、少なくとも約２．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約３ｍ当量／ｇ、少なくとも約３．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約４ｍ当量／ｇ、少なくとも約４．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約５ｍ当量／ｇ、少なくとも約５．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約６ｍ当量／ｇ、少なくとも約６．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約７ｍ当量／ｇ、少なくとも約７．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約８ｍ当量／ｇ、少なくとも約８．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約９ｍ当量／ｇ、少なくとも約９．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１０ｍ当量／ｇ、少なくとも約１０．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１１ｍ当量／ｇ、少なくとも約１１．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１２ｍ当量／ｇ、少なくとも約１２．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１３ｍ当量／ｇ、少なくとも約１３．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１４ｍ当量／ｇ、少なくとも約１４．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１５．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１６ｍ当量／ｇ、少なくとも約１６．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１７ｍ当量／ｇ、少なくとも約１７．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１８ｍ当量／ｇ、少なくとも約１８．５ｍ当量／ｇ、少なくとも約１９ｍ当量／ｇ、少なくとも約１９．５ｍ当量／ｇまたは少なくとも約２０ｍ当量／ｇであり得る。一部の場合には、本明細書に記載されるナノ粒子の対応するカチオン性電荷密度は、最大で約０．５ｍ当量／ｇ、最大で約１ｍ当量／ｇ、最大で約１．５ｍ当量／ｇ、最大で約２ｍ当量／ｇ、最大で約２．５ｍ当量／ｇ、最大で約３ｍ当量／ｇ、最大で約３．５ｍ当量／ｇ、最大で約４ｍ当量／ｇ、最大で約４．５ｍ当量／ｇ、最大で約５ｍ当量／ｇ、最大で約５．５ｍ当量／ｇ、最大で約６ｍ当量／ｇ、最大で約６．５ｍ当量／ｇ、最大で約７ｍ当量／ｇ、最大で約７．５ｍ当量／ｇ、最大で約８ｍ当量／ｇ、最大で約８．５ｍ当量／ｇ、最大で約９ｍ当量／ｇ、最大で約９．５ｍ当量／ｇ、最大で約１０ｍ当量／ｇ、最大で約１０．５ｍ当量／ｇ、最大で約１１ｍ当量／ｇ、最大で約１１．５ｍ当量／ｇ、最大で約１２ｍ当量／ｇ、最大で約１２．５ｍ当量／ｇ、最大で約１３ｍ当量／ｇ、最大で約１３．５ｍ当量／ｇ、最大で約１４ｍ当量／ｇ、最大で約１４．５ｍ当量／ｇ、最大で約１５ｍ当量／ｇ、最大で約１５．５ｍ当量／ｇ、最大で約１６ｍ当量／ｇ、最大で約１６．５ｍ当量／ｇ、最大で約１７ｍ当量／ｇ、最大で約１７．５ｍ当量／ｇ、最大で約１８ｍ当量／ｇ、最大で約１８．５ｍ当量／ｇ、最大で約１９ｍ当量／ｇ、最大で約１９．５ｍ当量／ｇまたは最大で約２０ｍ当量／ｇであり得る。一部の場合には、本明細書に記載されるナノ粒子の対応するカチオン性電荷密度は、０．００５～２０００ｍ当量／ｇであり得る。一部の場合には、本明細書に記載されるナノ粒子の対応するカチオン性電荷密度は、０．０５～２００ｍ当量／ｇであり得る。一部の場合には、本明細書に記載されるナノ粒子の対応するカチオン性電荷密度は、０．５～２０ｍ当量／ｇであり得る。
【0196】
一部の例では、ポリプレックスのモル比が測定され得る。一部の場合には、ポリプレックスのモル比は、ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比であり得る。一部の場合には、ポリプレックスのモル比は、少なくとも約１、少なくとも約２、少なくとも約３、少なくとも約４、少なくとも約５、少なくとも約６、少なくとも約７、少なくとも約８、少なくとも約９、少なくとも約１０、少なくとも約１５、少なくとも約２０、少なくとも約２５、少なくとも約３０、少なくとも約３５、少なくとも約４０、少なくとも約４５、少なくとも約５０、少なくとも約５１、少なくとも約５２、少なくとも約５３、少なくとも約５４、少なくとも約５５、少なくとも約５６、少なくとも約５７、少なくとも約５８、少なくとも約５９または少なくとも約６０である。一部の場合には、ポリプレックスのモル比は、最大で約１、最大で約２、最大で約３、最大で約４、最大で約５、最大で約６、最大で約７、最大で約８、最大で約９、最大で約１０、最大で約１５、最大で約２０、最大で約２５、最大で約３０、最大で約３５、最大で約４０、最大で約４５、最大で約５０、最大で約５１、最大で約５２、最大で約５３、最大で約５４、最大で約５５、最大で約５６、最大で約５７、最大で約５８、最大で約５９または最大で約６０である。一部の場合には、ポリプレックスのモル比は、少なくとも約１である。一部の場合には、ポリプレックスのモル比は、最大で約６０である。一部の場合には、ポリプレックスのモル比は、約１～約６０である。
【0197】
一部の場合には、ナノ粒子は、約４℃で貯蔵され得る。一部の場合には、ナノ粒子は、約－１９６℃、－１５０℃、－８０℃、－５０℃、－２０℃、－１５℃、－１０℃、－５℃、０℃、１℃、２℃、３℃、４℃、５℃、６℃、７℃、８℃、９℃、１０℃、１５℃、２０℃、２５℃、３０℃、３７℃、４０℃またはそれよりも高い温度で貯蔵され得る。一部の場合には、ナノ粒子は、約７～約１４日間貯蔵され得る。一部の場合には、ナノ粒子は、約１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、１か月間、６か月間、１年間または５年間貯蔵され得る。一部の場合には、ナノ粒子は、凍結乾燥され得る。
【0198】
一部の例では、糖またはポリプレックスは、核酸分子の分解を阻害または低減または阻害するように構成されている。一部の例では、糖またはポリプレックスは、核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている。一部の場合には、糖（またはポリプレックス内の糖）は、ヌクレアーゼによる切断に対して核酸を保護するために、核酸分子に結合し得る。一部の場合には、ヌクレアーゼは、エキソヌクレアーゼまたはエンドヌクレアーゼを含み得る。一部の例では、ヌクレアーゼは、デオキシリボヌクレアーゼまたはリボヌクレアーゼを含み得る。一部の場合には、ヌクレアーゼは、トポイソメラーゼ、リコンビナーゼ、リボザイムおよびＲＮＡスプライシング酵素を含み得る。一部の場合には、分解に対する核酸分子の保護は、細胞と接触するまたは細胞によって取り入れられるために利用可能な核酸分子の量を増加させる。
【0199】
一部の場合には、糖またはポリプレックスは、糖が結合していないまたはポリプレックスと会合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を少なくとも約１０％低減または阻害し得る。一部の場合には、糖またはポリプレックスは、糖が結合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を少なくとも約５０％低減または阻害し得る。一部の場合には、糖は、糖が結合していないまたはポリプレックスと会合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を少なくとも約９０％低減または阻害し得る。一部の場合には、糖またはポリプレックスは、糖が結合していないまたはポリプレックスと会合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％または少なくとも約９５％低減または阻害し得る。一部の場合には、糖またはポリプレックスは、糖が結合していないまたはポリプレックスと会合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を最大で約１０％低減または阻害し得る。一部の場合には、糖またはポリプレックスは、糖が結合していないまたはポリプレックスと会合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を最大で約５０％低減または阻害し得る。一部の場合には、糖またはポリプレックスは、糖が結合していないまたはポリプレックスと会合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を最大で約９０％低減または阻害し得る。一部の場合には、糖またはポリプレックスは、糖が結合していないまたはポリプレックスと会合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を、最大で約５％、最大で約１０％、最大で約１５％、最大で約２０％、最大で約２５％、最大で約３０％、最大で約３５％、最大で約４０％、最大で約４５％、最大で約５０％、最大で約５５％、最大で約６０％、最大で約６５％、最大で約７０％、最大で約７５％、最大で約８０％、最大で約８５％、最大で約９０％、最大で約９５％または１００％低減または阻害し得る。核酸分子の分解の低減または阻害は、存在する／存在しない核酸分子の量によって、または核酸分子が分解されるのにかかる時間の量によって、測定され得る。
【0200】
一部の場合には、キトサンは、核酸分子の分解を低減または阻害し得る。一部の場合には、キトサンは、核酸分子を安定化するように構成され得る。一部の例では、キトサンの分子量、または鎖上のアミン基は、低い速度の酵素分解を生じ得る。一部の場合には、キトサン中のアミン基は、核酸のヌクレアーゼ分解を阻害し得る。一部の場合には、キトサンの分子量は、核酸のヌクレアーゼ分解を阻害し得る。一部の場合には、脱アセチル化されたキトサンは、核酸のヌクレアーゼ分解を阻害し得る。
【0201】
一部の場合には、キトサンは、キトサンが結合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を少なくとも約１０％低減または阻害し得る。一部の場合には、キトサンは、キトサンが結合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を少なくとも約５０％低減または阻害し得る。一部の場合には、キトサンは、キトサンが結合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を少なくとも約９０％低減または阻害し得る。一部の場合には、キトサンは、キトサンが結合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％または少なくとも約９５％低減または阻害し得る。一部の場合には、キトサンは、キトサンが結合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を最大で約１０％低減または阻害し得る。一部の場合には、キトサンは、キトサンが結合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を最大で約５０％低減または阻害し得る。一部の場合には、キトサンは、キトサンが結合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を最大で約９０％低減または阻害し得る。一部の場合には、キトサンは、キトサンが結合していない核酸分子と比較して、核酸分子の分解を、最大で約５％、最大で約１０％、最大で約１５％、最大で約２０％、最大で約２５％、最大で約３０％、最大で約３５％、最大で約４０％、最大で約４５％、最大で約５０％、最大で約５５％、最大で約６０％、最大で約６５％、最大で約７０％、最大で約７５％、最大で約８０％、最大で約８５％、最大で約９０％、最大で約９５％または１００％低減または阻害し得る。
脂質
脂質
【0202】
一部の場合には、本明細書で開示される組成物は、脂質を含み得る。一部の例では、糖またはキトサンは、脂質と会合し（即ち、脂質で官能化または誘導体化され）得る。一部の場合には、糖またはキトサンは、コンジュゲーションまたは化学的結合によって脂質に連結され得る。
【0203】
脂質は、細胞による核酸分子の取り込みを容易にし得る。脂質のカチオン性電荷は、核酸分子および／または細胞の原形質膜のアニオン性電荷を低減または中和して、核酸分子および細胞の原形質膜の静電反発力を低減し得る。一部の場合には、脂質はまた、細胞による核酸分子のエンドサイトーシスを容易にし得る。
【0204】
一部の場合には、ナノ粒子は、脂質を含み得る。一部の例では、脂質は、細胞による核酸の取り込みを容易にし得る。一部の場合には、脂質は、リポソームを含み得る。一部の場合には、ナノ粒子は、リポソーム、ポリマーナノ粒子および脂質－ナノ粒子を含み得る。一部の場合には、リポソームは、細胞または組織への核酸の引き続く送達のために、会合した核酸と複合体化される。一部の場合には、リポソームは、コレステロールを含み得る。一部の場合には、脂質ナノ粒子は、種々の核酸分子を細胞に濃縮および送達し得る。一部の例では、ナノ粒子は、固体脂質（即ち、室温および体温において固体のままである脂質）または液体脂質（即ち、室温および体温において液体のままである油、例えば、植物油、またはヒト脂肪組織から抽出された脂質）を含み得る。一部の例では、ナノ粒子は、核酸－カチオン性脂質が捕捉されるナノ粒子コアを封入する脂質層（例えば、脂質単層）を含み得る。一部の場合には、脂質層は、約２～１０ｎｍであり得る。一部の場合には、脂質層は、約５ｎｍであり得る。一部の例では、脂質層は、脂質単層であり得る。一部の場合には、脂質層は、２つまたはそれよりも多くの脂質層を含み得る。一部の例では、脂質層は、リン脂質、例えば、レシチン、（Ｌ－α－ホスファチジルコリン）、または飽和および不飽和脂肪酸を有するホスファチジルコリンから選択され得る。一部の場合には、脂質層は、他のリン脂質、例えば、ホスファチジン酸、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、カルジオリピン、またはそれらの組合せもまた含み得る。一部の場合には、脂質層は、種々の分子量のＰＥＧとの脂質－ＰＥＧ（脂質－ポリエチレングリコール）コンジュゲートを含み得る。
【0205】
一部の場合には、ナノ粒子は、固体脂質ナノ粒子であり得る。一部の場合には、固体脂質ナノ粒子は、ナノ粒子コアを封入する脂質層を含み得、固体脂質は、核酸－カチオン性脂質コンジュゲートと共にナノ粒子コア中に配置され得る。一部の例では、固体脂質は、動物または細胞の体温において固体のままである脂質であり得、したがって、固体脂質は、動物または細胞に基づいて選択され得る。一部の例では、固体脂質は、以下の群から選択され得る：モノグリセリド（例えば、モノステアリン酸グリセロール）、ジグリセリド（例えば、ベヘン酸グリセロール）、トリグリセリド（例えば、トリステアリン、トリミリスチン、トリラウリン）、ワックス（例えば、アセチルパルミテート）、脂肪酸（例えば、ステアリン酸、パルミチン酸）、ステロイド（例えば、コレステロール）、およびそれらの組合せ。
【0206】
一部の場合には、脂質粒子は、ＰＥＧ－脂質をさらに含み得る。ＰＥＧ－脂質は、粒子の凝集を防止し得る。ＰＥＧは、２つの末端ヒドロキシル基を有するエチレンＰＥＧ反復ユニットの直鎖状水可溶性ポリマーを含み得、それらの分子量によって分類される。一部の実施形態では、ＰＥＧ－脂質のＰＥＧ部分は、約６００～約５，０００Ｄａの平均分子量を含み得る。一部の場合には、平均分子量は、２，０００Ｄａである。一部の場合には、平均分子量は、７５０Ｄａである。一部の例では、ＰＥＧ－脂質は、以下のうちの１つまたは複数から選択される：ＰＥＧ－マレイミド、ＰＥＧ－ＰＤＰ、ＰＥＧ－ビオチン、ＰＥＧ－アミン、ＰＥＧ－ＤＢＣＯ、ＰＥＧ－アジド、ＰＥＧ－シアヌル（Ｃｙａｎｕｒ）、ＰＥＧ－スクシニル、ＰＥＧ－フォレートおよび／またはＰＥＧ－カルボン酸。一部の例では、ＰＥＧ－脂質は、１，２－ＤＭＧ ＰＥＧ ２０００（１，２ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［メトキシ－（ポリエチレングリコール）－２０００である。一部の例では、ＰＥＧ－脂質は、必要に応じて、９７：３の比の、１，２－ＤＭＧ ＰＥＧ２０００と１，３－ＤＭＧ ＰＥＧ２０００（１，３－ＤＭＧ ＰＥＧ２０００（１，３ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［メトキシ－（ポリエチレングリコール）－２０００）との組合せである。一部の例では、ＰＥＧ－脂質は、１，２－ＤＭＧ ＰＥＧ １０００（１，２ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［メトキシ－（ポリエチレングリコール）－１０００］である。一部の例では、ＰＥＧ－脂質は、１，２－ＤＭＧ ＰＥＧ ３０００（１，２ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［メトキシ－（ポリエチレングリコール）－３０００］である。一部の例では、ＰＥＧ－脂質は、粒子中に存在する総脂質の約１％～約１０％を構成し得る。一部の場合には、ステロールは、粒子中に存在する総脂質の約１％～約５％、１％～約３％、約１％～約２％、約１％～１．５％を構成し得る。一部の場合には、ＰＥＧ－脂質は、存在する総脂質の２％を構成し得る。一部の場合には、ＰＥＧ－脂質は、存在する総脂質の１．５％を構成し得る。他の場合では、ＰＥＧ－脂質は、粒子中に存在する総脂質の約１％～約５％を構成し得る。一部の場合には、ＰＥＧ－脂質は、１，２－ＤＭＧ ＰＥＧ ２０００（１，２ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［メトキシ－（ポリエチレングリコール）－２０００であり、存在する総脂質の約１％～約２％を構成し得る。一部の例では、ＰＥＧ－脂質は、１，２－ＤＭＧ ＰＥＧ２０００と１，３－ＤＭＧ ＰＥＧ２０００（１，３－ＤＭＧ ＰＥＧ２０００（１，３ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［メトキシ－（ポリエチレングリコール）－２０００）との組合せであり、存在する総脂質の約１％～約２％を構成し得る。一部の例では、ＰＥＧ－脂質は、１，２－ＤＭＧ ＰＥＧ １０００（１，２ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［メトキシ－（ポリエチレングリコール）－１０００］であり、存在する総脂質の約１ｍｏｌ％～約２ｍｏｌ％を構成し得る。一部の例では、ＰＥＧ－脂質は、１，２－ＤＭＧ ＰＥＧ ３０００（１，２ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［メトキシ－（ポリエチレングリコール）－３０００］であり、存在する総脂質の約１％～約２％を構成し得る。一部の例では、脂質粒子は、ステロールをさらに含み得る。
【0207】
一部の例では、ステロールは、コレステロールまたはその誘導体であり得る。コレステロール誘導体の例は、コレスタノール、コレスタノン、コレステノン、コプロスタノール、コレステリル－２’－ヒドロキシエチルエーテル、コレステリル－４’－ヒドロキシブチルエーテル、およびそれらの混合物を含み得る。一部の場合には、ステロールは、粒子中に存在する総脂質の約１０％～約５０ｍｏｌ％を構成し得る。一部の場合には、ステロールは、粒子中に存在する総脂質の約１０％～約２０％、約１０％～約１５％、約３０％～約４０％を構成し得る。一部の場合には、ステロールは、存在する総脂質の約３８％を構成し得る。他の場合では、ステロールは、粒子中に存在する総脂質の約３０ｍｏｌ％～約４０ｍｏｌ％を構成し得る。一部の場合には、ステロールは、コレステロールまたはその誘導体であり得、存在する総脂質の約３０％～約４０％を構成し得る。一部の場合には、脂質粒子は、１つまたは複数の安定化剤をさらに含み得る。安定化剤は、脂質混合物の完全性を確実にする。一部の場合には、１つまたは複数の安定化剤は、ポリエチレングリコール－脂質である。適切なポリエチレングリコール－脂質には、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン、ＰＥＧ修飾ホスファチジン酸、ＰＥＧ修飾セラミド（例えば、ＰＥＧ－ＣｅｒＣ１４またはＰＥＧ－ＣｅｒＣ２０）、ＰＥＧ修飾ジアルキルアミン、ＰＥＧ修飾ジアシルグリセロール、ＰＥＧ修飾アルキルグリセロールが含まれる。代表的なポリエチレングリコール－脂質には、ＰＥＧ－ｃ－ＤＯＭＧ、ＰＥＧ－ｃ－ＤＭＡおよびＰＥＧ－ｓ－ＤＭＧが含まれる。一実施形態では、ポリエチレングリコール－脂質は、Ｎ－［（メトキシポリ（エチレングリコール）２０００）カルバミル］－１，２－ジミリスチルオキシプロピル（dimyristyloxlpropyl）－３－アミン（ＰＥＧ－ｃ－ＤＭＡ）であり得る。
【0208】
一部の場合には、ポリプレックスは、カチオン性脂質を含み得る。他の場合では、ポリプレックスは、カチオン性脂質を含み得るが、糖は含まなくてもよい。一部の場合には、ポリプレックスはまた、カチオン性脂質および糖の両方を含み得る。
【0209】
一部の場合には、カチオン性脂質は、以下のうちの１つまたは複数から選択される：１，２－ジリノレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎＤＭＡ）、１，２－ジリノレニルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｅｎＤＭＡ）、ジリノレイル－４－（２－ジメチルアミノエチル）－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－Ｋ－Ｃ２－ＤＭＡ；「ＸＴＣ２」）、２，２－ジリノレイル－４－（３－ジメチルアミノプロピル）－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－Ｋ－Ｃ３－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－（４－ジメチルアミノブチル）－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－Ｋ－Ｃ４－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－５－ジメチルアミノメチル－［１，３］－ジオキサン（ＤＬｉｎ－Ｋ６－ＤＭＡ）、２，２－ジリノレイル－４－Ｎメチルペピアジノ（Nmethylpepiazino）－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－Ｋ－ＭＰＺ）、２，２－ジリノレイル－４－ジメチルアミノメチル－［１，３］－ジオキソラン（ＤＬｉｎ－ＫＤＭＡ）、１，２－ジリノレイルカルバモイルオキシ－３－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎ－Ｃ－ＡＰ）、１，２－ジリノレイルオキシ（dilinoleyoxy）－３－（ジメチルアミノアセトキシプロパン（ＤＬｉｎ－ＤＡＣ）、１，２－ジリノレイルオキシ－３－モルホリノプロパン（ＤＬｉｎ－ＭＡ）、１，２－ジリノレオイル－３－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎＤＡＰ）、１，２－ジリノレイルチオ－３－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎ－Ｓ－ＤＭＡ）、１－リノレオイル－２－リノレイルオキシ－３－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎ－２－ＤＭＡＰ）、１，２－ジリノレイルオキシ－３－トリメチルアミノプロパン塩化物塩（ＤＬｉｎ－ＴＭＡ．Ｃｌ）、１，２－ジリノレオイル－３－トリメチルアミノプロパン塩化物塩（ＤＬｉｎ－ＴＡＰ．Ｃｌ）、１，２－ジリノレイルオキシ－３－（Ｎ－メチルピペラジノ）プロパン（ＤＬｉｎ－ＭＰＺ）、３－（Ｎ，Ｎジリノレイルアミノ）－１，２－プロパンジオール（ＤＬｉｎＡＰ）、３－（Ｎ，Ｎジオレイルアミノ）－１，２－プロパンジオール（propanedio）（ＤＯＡＰ）、１，２－ジリノレイルオキソ－３－（２－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノ）エトキシプロパン（ＤＬｉｎ－ＥＧ－ＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ－ジオレイル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＤＡＣ）、１，２－ジオレイルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＯＤＭＡ）、１，２－ジステアリルオキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロパン（ＤＳＤＭＡ）、Ｎ－（１－（２，３－ジオレイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチル（trimethy）アンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）、Ｎ，Ｎ－ジステアリル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムブロミド（ＤＤＡＢ）、Ｎ－（１－（２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウム（trimethylanunonium）クロリド（ＤＯＴＡＰ）、３－（Ｎ Ｎ’，Ｎ’ジメチルアミノエタン）－カルバモイル）コレステロール（ＤＣ－Ｃｈｏｌ）、Ｎ－（１，２－ジミリスチルオキシプロパ－３－イル）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－Ｎ－ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＭＲＩＥ）、２，３－ジオレイルオキシ－Ｎ－［２（スペルミン－カルボキサミド）エチル］－Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－プロパナミニウムトリフルオロアセテート（propanaminiumtrifiuoroacetate）（ＤＯＳＰＡ）、ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン（ＤＯＧＳ）、３－ジメチルアミノ－２－（コレスト－５－エン－３－ベータ－オキシブタン－４－オキシ）－１－（シス，シス－９，１２－オクタデカジエンオキシ）プロパン（ＣＬｉｎＤＭＡ）、２－［５’－（コレスト－５－エン－３－ベータ－オキシ）－３’－オキサペントキシ）－３－ジメチル－１－（シス，シス－９’１－２’－オクタデカジエンオキシ）プロパン（ＣｐＬｉｎＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ－ジメチル－３，４－ジオレイルオキシベンジルアミン（ＤＭＯＢＡ）、１，２－Ｎ，Ｎ’ジオレイルカルバミル－３－ジメチルアミノプロパン（ＤＯｃａｒｂＤＡＰ）、１，２－Ｎ，Ｎ’－ジリノレイルカルバミル－３－ジメチルアミノプロパン（ＤＬｉｎｃａｒｂＤＡＰ）、またはそれらの混合物。一部の場合には、カチオン性脂質は、ＤＯＴＡＰ（ＤＯＴＡＰメトサルフェート、Ｎ－（２，３－ジオレオイルオキシ－１－プロピル）トリメチルアンモニウムメチルサルフェート）、ＤＤＡ（ジメチルジオクタデシルアンモニウム（臭化物塩））、ＤＬｉｎ－ＫＣ２－ＤＭＡ（ＫＣ２）（２－［２，２－ビス［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエニル］－１，３－ジオキソラン－４－イル］－Ｎ，Ｎ－ジメチルエタンアミン）、ＤＬｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ（ＭＣ３）（（６Ｚ，９Ｚ，２８Ｚ，３１Ｚ）－ヘプタトリアコンタ－６，９，２８，３１－テトラエン－１９－イル ４－（ジメチルアミノ）ブタノエート）、ｃＫＫ－Ｅ１２（３，６－ビス（４－（ビス（２－ヒドロキシドデシル）アミノ）ブチル）ピペラジン－２，５－ジオン）および／またはＣ１２－２００（．１，１‘－（（２－（４－（２－（（２－（ビス（２－ヒドロキシドデシル）アミノ）エチル）（２－ヒドロキシドデシル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）エチル）アザンジイル）ビス（ドデカン－２－オール）のうちの１つまたは複数から選択される。一部の場合には、カチオン性脂質は、１，２－ジオレイルオキシ（diolelyloxy）－３－（トリメチルアミノ）プロパン（ＤＯＴＡＰ）；Ｎ－［１－（２，３，－ジテトラデシルオキシ）プロピル］－Ｎ，Ｎ－ジメチル－Ｎ－ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＭＲＩＥ）；Ｎ－［１－（２，３，－ジオレイルオキシ）プロピル］－Ｎ，Ｎ－ジメチル－Ｎ－ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＯＲＩＥ）；Ｎ－［１－（２，３－ジオレイルオキシ）プロピル］－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）；３β［Ｎ－（Ｎ’，Ｎ’－ジメチルアミノエタン）カルバモイル（carbamoly）］コレステロール（ＤＣ－Ｃｈｏｌ）；およびジメチルジオクタデシルアンモニウム（ＤＤＡＢ）のうちの１つまたは複数から選択される。一部の場合には、カチオン性脂質は、中性カチオン性脂質、即ち、７．４の生理的ｐＨでは、優勢に、例えば、５０％よりも多くが電荷が中性であるが、生理的ｐＨ未満の選択されたｐＨ値では正の電荷を有する傾向がある脂質であり得る。
【0210】
一部の例では、カチオン性脂質はＤＯＴＡＰであり、存在する総脂質の４０モル％（ｍｏｌ％）～５０ｍｏｌ％を構成し得、構造的脂質は、（１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホリルコリン）、ＳＱＤＧ（糖脂質）、ＭＧＤＧ（モノガラクトシルジアシルグリセロール））（ＤＳＰＣ）であり、存在する総脂質の１０ｍｏｌを構成し得、脂質粒子は、存在する総脂質の３０ｍｏｌ％～４０ｍｏｌ％のコレステロールおよび存在する総脂質の１ｍｏｌ～２ｍｏｌ％の１つまたは複数のＰＥＧ－脂質をさらに含み得る。一部の例では、カチオン性脂質はＤＯＴＭＡであり、存在する総脂質の４０ｍｏｌ％～５０ｍｏｌ％を構成し得、構造的脂質はＤＳＰＣであり、存在する総脂質の１０ｍｏｌ％を構成し得、脂質粒子は、存在する総脂質の３０ｍｏｌ％～４０ｍｏｌ％のコレステロールおよび存在する総脂質の１ｍｏｌ％～２ｍｏｌ％の１つまたは複数のＰＥＧ－脂質をさらに含み得る。
条件
条件
【0211】
一部の場合には、方法は、細胞を、細胞が核酸分子、糖またはポリマー性材料を取り込むのに十分な条件において、核酸分子、糖またはポリマー性材料と接触させるステップを含み得る。一部の場合には、十分な条件は、２Ｄまたは３Ｄ培養物または環境中で細胞を成長させることを含み得る。一部の場合には、細胞は、足場なしに培養物中で成長させられ得る。他の場合では、細胞はまた、足場ありで培養物中で成長させられ得る。一部の場合には、細胞は、生存可能であり得る。細胞はまた、健康であり得る。一部の場合には、十分な条件は、接触させるステップの前の生存細胞の集団を含み得る。細胞の集団は、少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９９％またはそれよりも多くの生存細胞を含み得る。細胞の集団はまた、約８０％～約９０％の生存細胞を含み得る。細胞の集団は、最大で約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％の生存細胞を含み得る。
【0212】
一部の場合には、ポリプレックスは、接触させるステップの直前に調製され得る。一部の場合には、ポリプレックスは、接触させるステップの最大で約５時間、４時間、３時間、２時間、１時間、４５分、３０分、１５分または５分前に調製され得る。一部の場合には、核酸分子は、ポリプレックスの形成前に、最大で約－１９６℃、－１５０℃、－８０℃、－５０℃、－２０℃、－１５℃、－１０℃、－５℃、０℃、１℃、２℃、３℃、４℃、５℃、６℃、７℃、８℃、９℃、１０℃の温度で維持され得る。
【0213】
一部の場合には、十分な条件は、細胞を、少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４時間またはそれよりも長く、核酸分子、糖、またはそれらの組合せと接触させることを含み得る。一部の場合には、十分な条件は、細胞を、少なくとも約１、２、３、４、５日間またはそれよりも長く、核酸分子、糖、またはそれらの組合せと接触させることを含み得る。一部の場合には、接触させることは、２Ｄまたは３Ｄ培養条件において実施され得る。一部の場合には、細胞は、接触させることの後に、少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３または２４時間、第１の培地中で培養され得る。一部の場合には、細胞は、接触させることの後に、少なくとも約１、２、３、４、５日間、第１の培地中で培養され得る。一部の場合には、細胞は、細胞が第１の培地中で培養された後に、少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３または２４時間、第２の培地中で培養され得る。一部の場合には、細胞は、細胞が第１の培地中で培養された後に、少なくとも約１、２、３、４、５日間、第２の培地中で培養され得る。一部の場合には、細胞は、少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６時間またはそれよりも長く、第２の培地中で培養され得る。一部の場合には、細胞は、少なくとも約５、６、７、８、９、１０日間またはそれよりも長く、第２の培地中で培養され得る。一部の場合には、第１の培地は、第２の培地と同じであり得る。一部の場合には、第１の培地は、第２の培地とは異なり得る。一部の場合には、第１または第２の培地は、本明細書に記載される任意の培地であり得る。
【0214】
十分な条件は、最大で約２５％、２４％、２３％、２２％、２１％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％またはそれよりも低い大気酸素で、細胞、糖、核酸分子、ポリマー性材料、またはそれらの組合せを接触またはインキュベートすることを含み得る。十分な条件は、少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％またはそれよりも高い大気酸素で、細胞、糖、核酸分子、ポリマー性材料、またはそれらの組合せを接触またはインキュベートすることを含み得る。
【0215】
十分な条件は、最大で約１％、１．５％、２％、２．５％、３％、３．５％、４％、４．５％、５％、５．５％、６％、６．５％、７％、７．５％、８％、８．５％、９％、９．５％、１０％、１０．５％、１１％、１１．５％、１２％、１２．５％、１３％、１３．５％、１４％、１４．５％または１５％の大気二酸化炭素（ＣＯ２）で、細胞、糖、核酸分子、ポリマー性材料、またはそれらの組合せを接触またはインキュベートすることを含み得る。
【0216】
本明細書で提供される方法は、細胞培養容器内で、細胞、糖、核酸分子、ポリマー性材料、またはそれらの組合せを接触またはインキュベートするステップを含み得る。細胞培養容器は、３５ｍｍ培養ディッシュ、６０ｍｍ培養ディッシュ、１００ｍｍ培養ディッシュ、１５０ｍｍ培養ディッシュ、６ウェル培養プレート、１２ウェル培養プレート、２４ウェル培養プレート、４８ウェル培養プレート、９６ウェル培養プレート、Ｔ－２５フラスコ、Ｔ－７５フラスコ、Ｔ－１７５フラスコまたはＴ－２２５フラスコを含み得る。
【0217】
細胞培養容器は、細胞成長表面積を有し得る。細胞成長表面積は、約０．１平方センチメートル（ｃｍ＾２）、０．２ｃｍ＾２、０．３ｃｍ＾２、０．４ｃｍ＾２、０．５ｃｍ＾２、０．６ｃｍ＾２、０．７ｃｍ＾２、０．８ｃｍ＾２、０．９ｃｍ＾２、１ｃｍ＾２、１．１ｃｍ＾２、１．２ｃｍ＾２、１．３ｃｍ＾２、１．４ｃｍ＾２、１．５ｃｍ＾２、１．６ｃｍ＾２、１．７ｃｍ＾２、１．８ｃｍ＾２、１．９ｃｍ＾２、２ｃｍ＾２、２．１ｃｍ＾２、２．２ｃｍ＾２、２．３ｃｍ＾２、２．４ｃｍ＾２、２．５ｃｍ＾２、２．６ｃｍ＾２、２．７ｃｍ＾２、２．８ｃｍ＾２、２．９ｃｍ＾２、３ｃｍ＾２、３．１ｃｍ＾２、３．２ｃｍ＾２、３．３ｃｍ＾２、３．４ｃｍ＾２、３．５ｃｍ＾２、３．６ｃｍ＾２、３．７ｃｍ＾２、３．８ｃｍ＾２、３．９ｃｍ＾２、４ｃｍ＾２、４．１ｃｍ＾２、４．２ｃｍ＾２、４．３ｃｍ＾２、４．４ｃｍ＾２、４．５ｃｍ＾２、４．６ｃｍ＾２、４．７ｃｍ＾２、４．８ｃｍ＾２、４．９ｃｍ＾２、５ｃｍ＾２、６ｃｍ＾２、７ｃｍ＾２、８ｃｍ＾２、９ｃｍ＾２、１０ｃｍ＾２、２０ｃｍ＾２、３０ｃｍ＾２、４０ｃｍ＾２、５０ｃｍ＾２、６０ｃｍ＾２、７０ｃｍ＾２、８０ｃｍ＾２、９０ｃｍ＾２、１００ｃｍ＾２、１１０ｃｍ＾２、１２０ｃｍ＾２、１３０ｃｍ＾２、１４０ｃｍ＾２、１５０ｃｍ＾２、２００ｃｍ＾２、５００ｃｍ＾２、１０００ｃｍ＾２またはそれよりも大きい面積を有し得る。
【0218】
本明細書で提供される方法は、細胞集団を、核酸分子、糖、ポリマー性材料、またはそれらの組合せと接触させるステップを含み得る。細胞集団は、少なくとも約１×１０＾３細胞、２×１０＾３細胞、３×１０＾３細胞、４×１０＾３細胞、５×１０＾３細胞、６×１０＾３細胞、７×１０＾３細胞、８×１０＾３細胞、９×１０＾３細胞、１×１０＾４細胞、２×１０＾４細胞、３×１０＾４細胞、４×１０＾４細胞、５×１０＾４細胞、６×１０＾４細胞、７×１０＾４細胞、８×１０＾４細胞、９×１０＾４細胞、１×１０＾５細胞、２×１０＾５細胞、３×１０＾５細胞、４×１０＾５細胞、５×１０＾５細胞、６×１０＾５細胞、７×１０＾５細胞、８×１０＾５細胞、９×１０＾５細胞、１×１０＾６細胞、２×１０＾６細胞、３×１０＾６細胞、４×１０＾６細胞、５×１０＾６細胞、６×１０＾６細胞、７×１０＾６細胞、８×１０＾６細胞、９×１０＾６細胞、１×１０＾７細胞、２×１０＾７細胞、３×１０＾７細胞、４×１０＾７細胞、５×１０＾７細胞、６×１０＾７細胞、７×１０＾７細胞、８×１０＾７細胞、９×１０＾７細胞、１×１０＾８細胞、２×１０＾８細胞、３×１０＾８細胞、４×１０＾８細胞、５×１０＾８細胞、６×１０＾８細胞、７×１０＾８細胞、８×１０＾８細胞、９×１０＾８細胞またはそれよりも多くを含み得る。細胞集団は、最大で約１×１０＾３細胞、２×１０＾３細胞、３×１０＾３細胞、４×１０＾３細胞、５×１０＾３細胞、６×１０＾３細胞、７×１０＾３細胞、８×１０＾３細胞、９×１０＾３細胞、１×１０＾４細胞、２×１０＾４細胞、３×１０＾４細胞、４×１０＾４細胞、５×１０＾４細胞、６×１０＾４細胞、７×１０＾４細胞、８×１０＾４細胞、９×１０＾４細胞、１×１０＾５細胞、２×１０＾５細胞、３×１０＾５細胞、４×１０＾５細胞、５×１０＾５細胞、６×１０＾５細胞、７×１０＾５細胞、８×１０＾５細胞、９×１０＾５細胞、１×１０＾６細胞、２×１０＾６細胞、３×１０＾６細胞、４×１０＾６細胞、５×１０＾６細胞、６×１０＾６細胞、７×１０＾６細胞、８×１０＾６細胞、９×１０＾６細胞、１×１０＾７細胞、２×１０＾７細胞、３×１０＾７細胞、４×１０＾７細胞、５×１０＾７細胞、６×１０＾７細胞、７×１０＾７細胞、８×１０＾７細胞、９×１０＾７細胞、１×１０＾８細胞、２×１０＾８細胞、３×１０＾８細胞、４×１０＾８細胞、５×１０＾８細胞、６×１０＾８細胞、７×１０＾８細胞、８×１０＾８細胞または９×１０＾８細胞を含み得る。
【0219】
本明細書で提供される方法のための十分な条件は、望ましい細胞密度を含み得る。望ましい細胞密度は、少なくともｃｍ＾２細胞成長面積当たり約１×１０＾２細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾２細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾２細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり１×１０＾３細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾３細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾３細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり１×１０＾４細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾４細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾４細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり１×１０＾５細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾５細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾５細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり１×１０＾６細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾６細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾６細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり１×１０＾７細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾７細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾７細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり１×１０＾８細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾８細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾８細胞またはそれよりも多くであり得る。望ましい細胞密度は、最大でｃｍ＾２細胞成長面積当たり約１×１０＾２細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾２細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾２細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり１×１０＾３細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾３細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾３細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり１×１０＾４細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾４細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾４細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり１×１０＾５細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾５細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾５細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり１×１０＾６細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾６細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾６細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり１×１０＾７細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾７細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾７細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり１×１０＾８細胞、ｃｍ＾２細胞成長面積当たり２．５×１０＾８細胞またはｃｍ＾２細胞成長面積当たり５×１０＾８細胞であり得る。
【0220】
一部の場合には、核酸および糖は、細胞と接触するまたは細胞をトランスフェクトするために使用される場合、少なくとも約１００００：１、５０００：１、２０００：１、１０００：１、５００：１、２００：１、１００：１、５０：１、２０：１、１０：１、５：１、２：１、１：１、１：２、１：５、１：１０、１：２０、１：５０、１：１００、１：２００、１：５００、１：１０００、１：２０００、１：５０００または１：１００００の質量比を有し得る。一部の場合には、核酸および糖は、細胞と接触するまたは細胞をトランスフェクトするために使用される場合、最大で約１００００：１、５０００：１、２０００：１、１０００：１、５００：１、２００：１、１００：１、５０：１、２０：１、１０：１、５：１、２：１、１：１、１：２、１：５、１：１０、１：２０、１：５０、１：１００、１：２００、１：５００、１：１０００、１：２０００、１：５０００または１：１００００の質量比を有し得る。一部の場合には、核酸および脂質は、細胞と接触するまたは細胞をトランスフェクトするために使用される場合、少なくとも約１００００：１、５０００：１、２０００：１、１０００：１、５００：１、２００：１、１００：１、５０：１、２０：１、１０：１、５：１、２：１、１：１、１：２、１：５、１：１０、１：２０、１：５０、１：１００、１：２００、１：５００、１：１０００、１：２０００、１：５０００または１：１００００の質量比を有し得る。一部の場合には、核酸および脂質は、細胞と接触するまたは細胞をトランスフェクトするために使用される場合、最大で約１００００：１、５０００：１、２０００：１、１０００：１、５００：１、２００：１、１００：１、５０：１、２０：１、１０：１、５：１、２：１、１：１、１：２、１：５、１：１０、１：２０、１：５０、１：１００、１：２００、１：５００、１：１０００、１：２０００、１：５０００または１：１００００の質量比を有し得る。一部の場合には、核酸、糖および脂質は、細胞と接触するまたは細胞をトランスフェクトするために使用される場合、約１：２：１、１：２：２、１：２：３、１：２：４、１：２：５、１：２：１０、１：２：２０、１：４：４、１：１０：１０、１：１０：１００、１：１００：１００、１：３００：３００、１：３５０：３００、１：４００：３００、１：４５０：３００、１：５００：３００；１：５５０：３００、１：６００：３００、１：６５０：３００、１：７００：３００、１：１０００：３００、５：１０：１００、５：１００：１００、５：３００：３００、５：３５０：３００、５：４００：３００、５：４５０：３００、５：５００：３００；５：５５０：３００、５：６００：３００、５：６５０：３００、５：７００：３００、５：１０００：３００、１０：１０：１００、１０：１００：１００、１０：３００：３００、１０：３５０：３００、１０：４００：３００、１０：４５０：３００、１０：５００：３００；１０：５５０：３００、１０：６００：３００、１０：６５０：３００、１０：７００：３００、１０：１０００：３００、１：５００：１、１：５００：１０、１：５００：１００、１：５００：１５０、１：５００：２００、１：５００：２５０、１：５００：３００、１：５００：３５０、１：５００：４００、１：５００：４５０または１：５００：５００の質量比を有し得る。
【0221】
一部の場合には、核酸は、細胞と接触するまたは細胞をトランスフェクトするために使用される場合、少なくとも約０．００１ｎｇ／１００００細胞、０．００２ｎｇ／１００００細胞、０．００５ｎｇ／１００００細胞、０．０１ｎｇ／１００００細胞、０．０２ｎｇ／１００００細胞、０．０５ｎｇ／１００００細胞、０．１ｎｇ／１００００細胞、０．２ｎｇ／１００００細胞、０．５ｎｇ／１００００細胞、１ｎｇ／１００００細胞、２ｎｇ／１００００細胞、５ｎｇ／１００００細胞、１０ｎｇ／１００００細胞、２０ｎｇ／１００００細胞、５０ｎｇ／１００００細胞、１００ｎｇ／１００００細胞、２００ｎｇ／１００００細胞、５００ｎｇ／１００００細胞、１０００ｎｇ／１００００細胞、５０００ｎｇ／１００００細胞、１００００ｎｇ／１００００細胞またはそれよりも多くであり得る。一部の場合には、核酸は、細胞と接触するまたは細胞をトランスフェクトするために使用される場合、最大で約０．００１ｎｇ／１００００細胞、０．００２ｎｇ／１００００細胞、０．００５ｎｇ／１００００細胞、０．０１ｎｇ／１００００細胞、０．０２ｎｇ／１００００細胞、０．０５ｎｇ／１００００細胞、０．１ｎｇ／１００００細胞、０．２ｎｇ／１００００細胞、０．５ｎｇ／１００００細胞、１ｎｇ／１００００細胞、２ｎｇ／１００００細胞、５ｎｇ／１００００細胞、１０ｎｇ／１００００細胞、２０ｎｇ／１００００細胞、５０ｎｇ／１００００細胞、１００ｎｇ／１００００細胞、２００ｎｇ／１００００細胞、５００ｎｇ／１００００細胞、１０００ｎｇ／１００００細胞、５０００ｎｇ／１００００細胞または１００００ｎｇ／１００００細胞であり得る。
【0222】
一部の場合には、糖は、細胞と接触するまたは細胞をトランスフェクトするために使用される場合、少なくとも約０．００１ｎｇ／１００００細胞、０．００２ｎｇ／１００００細胞、０．００５ｎｇ／１００００細胞、０．０１ｎｇ／１００００細胞、０．０２ｎｇ／１００００細胞、０．０５ｎｇ／１００００細胞、０．１ｎｇ／１００００細胞、０．２ｎｇ／１００００細胞、０．５ｎｇ／１００００細胞、１ｎｇ／１００００細胞、２ｎｇ／１００００細胞、５ｎｇ／１００００細胞、１０ｎｇ／１００００細胞、２０ｎｇ／１００００細胞、５０ｎｇ／１００００細胞、１００ｎｇ／１００００細胞、２００ｎｇ／１００００細胞、５００ｎｇ／１００００細胞、１０００ｎｇ／１００００細胞、２０００ｎｇ／１００００細胞、５０００ｎｇ／１００００細胞、１００００ｎｇ／１００００細胞、２０μｇ／１００００細胞、５０μｇ／１００００細胞、１００μｇ／１００００細胞、２００μｇ／１００００細胞、５００μｇ／１００００細胞、１０００μｇ／１００００細胞、２０００μｇ／１００００細胞、５０００μｇ／１００００細胞、１００００μｇ／１００００細胞またはそれよりも多くであり得る。一部の場合には、糖は、細胞と接触するまたは細胞をトランスフェクトするために使用される場合、最大で約０．００１ｎｇ／１００００細胞、０．００２ｎｇ／１００００細胞、０．００５ｎｇ／１００００細胞、０．０１ｎｇ／１００００細胞、０．０２ｎｇ／１００００細胞、０．０５ｎｇ／１００００細胞、０．１ｎｇ／１００００細胞、０．２ｎｇ／１００００細胞、０．５ｎｇ／１００００細胞、１ｎｇ／１００００細胞、２ｎｇ／１００００細胞、５ｎｇ／１００００細胞、１０ｎｇ／１００００細胞、２０ｎｇ／１００００細胞、５０ｎｇ／１００００細胞、１００ｎｇ／１００００細胞、２００ｎｇ／１００００細胞、５００ｎｇ／１００００細胞、１０００ｎｇ／１００００細胞、２０００ｎｇ／１００００細胞、５０００ｎｇ／１００００細胞、１００００ｎｇ／１００００細胞、２０μｇ／１００００細胞、５０μｇ／１００００細胞、１００μｇ／１００００細胞、２００μｇ／１００００細胞、５００μｇ／１００００細胞、１０００μｇ／１００００細胞、２０００μｇ／１００００細胞、５０００μｇ／１００００細胞または１００００μｇ／１００００細胞であり得る。
【0223】
一部の場合には、脂質は、細胞と接触するまたは細胞をトランスフェクトするために使用される場合、少なくとも約０．００１ｎｇ／１００００細胞、０．００２ｎｇ／１００００細胞、０．００５ｎｇ／１００００細胞、０．０１ｎｇ／１００００細胞、０．０２ｎｇ／１００００細胞、０．０５ｎｇ／１００００細胞、０．１ｎｇ／１００００細胞、０．２ｎｇ／１００００細胞、０．５ｎｇ／１００００細胞、１ｎｇ／１００００細胞、２ｎｇ／１００００細胞、５ｎｇ／１００００細胞、１０ｎｇ／１００００細胞、２０ｎｇ／１００００細胞、５０ｎｇ／１００００細胞、１００ｎｇ／１００００細胞、２００ｎｇ／１００００細胞、５００ｎｇ／１００００細胞、１０００ｎｇ／１００００細胞、２０００ｎｇ／１００００細胞、５０００ｎｇ／１００００細胞、１００００ｎｇ／１００００細胞、２０μｇ／１００００細胞、５０μｇ／１００００細胞、１００μｇ／１００００細胞、２００μｇ／１００００細胞、５００μｇ／１００００細胞、１０００μｇ／１００００細胞、２０００μｇ／１００００細胞、５０００μｇ／１００００細胞、１００００μｇ／１００００細胞またはそれよりも多くであり得る。一部の場合には、脂質は、細胞と接触するまたは細胞をトランスフェクトするために使用される場合、最大で約０．００１ｎｇ／１００００細胞、０．００２ｎｇ／１００００細胞、０．００５ｎｇ／１００００細胞、０．０１ｎｇ／１００００細胞、０．０２ｎｇ／１００００細胞、０．０５ｎｇ／１００００細胞、０．１ｎｇ／１００００細胞、０．２ｎｇ／１００００細胞、０．５ｎｇ／１００００細胞、１ｎｇ／１００００細胞、２ｎｇ／１００００細胞、５ｎｇ／１００００細胞、１０ｎｇ／１００００細胞、２０ｎｇ／１００００細胞、５０ｎｇ／１００００細胞、１００ｎｇ／１００００細胞、２００ｎｇ／１００００細胞、５００ｎｇ／１００００細胞、１０００ｎｇ／１００００細胞、２０００ｎｇ／１００００細胞、５０００ｎｇ／１００００細胞、１００００ｎｇ／１００００細胞、２０μｇ／１００００細胞、５０μｇ／１００００細胞、１００μｇ／１００００細胞、２００μｇ／１００００細胞、５００μｇ／１００００細胞、１０００μｇ／１００００細胞、２０００μｇ／１００００細胞、５０００μｇ／１００００細胞または１００００μｇ／１００００細胞であり得る。
【0224】
本明細書の任意の組成物は、生分解性であり得る。本明細書の任意の組成物は、それが接触する細胞と生体適合性であり得る。本明細書に記載される組成物、糖、脂質、核酸分子、ポリプレックス、ポリマー性材料、またはそれらの組合せは、生分解性または細胞と生体適合性であり得る。生体適合性の組成物、糖、キトサン、脂質、核酸分子、ポリプレックス、ポリマー性材料、またはそれらの組合せは、有益であり得る。生体適合性材料は、免疫刺激活性、抗凝固活性、創傷治癒特性、抗菌特性、またはそれらの組合せを有し得る。一部の場合には、生体適合性の組成物、糖、キトサン、脂質、核酸分子、ポリプレックス、ポリマー性材料、またはそれらの組合せは、非毒性、非溶血性、非免疫原性、緩徐に生分解性、および／またはヌクレアーゼ抵抗性であり得る。一部の場合には、糖またはキトサンは、経細胞輸送および傍細胞輸送を増加させ得る。したがって、本明細書に記載される任意の生体適合性材料を使用することは、非生体適合性材料を使用する場合と比較して、本明細書に記載されるポリマー性材料によってカプセル封入された本明細書に記載される任意の核酸、またはそれらの組合せを取り入れた細胞の数を増加させ得る。
【0225】
生分解性の組成物、糖、キトサン、脂質、核酸分子、ポリプレックス、ポリマー性材料、またはそれらの組合せは、有益であり得る。例えば、生分解性材料が、細胞に対する望ましくない効果（細胞毒性、発癌活性、免疫原活性、またはそれらの組合せ）を有し得る場合であっても、材料は生分解性であるので、材料によって生成される望ましくない効果は、非生分解性対応物と比較して、最小化される。生分解性は、細胞の種々の酵素によって媒介され得る。
タンパク質発現または分化
タンパク質発現または分化
【0226】
一部の例では、糖、核酸分子、またはそれらの組合せは、細胞のタンパク質発現を容易にするように構成され得る。糖、核酸分子、またはそれらの組合せは、細胞のタンパク質発現の変更を容易にし得る。核酸分子、またはそれらの組合せは、細胞のタンパク質発現を変更し得る。一部の例では、核酸分子、またはそれらの組合せは、細胞のタンパク質発現を変更するように構成され得る。一部の例では、核酸分子、またはそれらの組合せは、細胞の分化を促進するように構成され得る。一部の例では、核酸分子、またはそれらの組合せは、細胞の分化を容易にするように構成され得る。一部の例では、糖および核酸分子は、細胞のタンパク質発現を容易にするもしくは変更するように、分化を促進するように、またはそれらの組合せを行うように構成されている（即ち、糖および核酸分子は、細胞のタンパク質発現を容易にするもしくは変更するように、分化を促進するように、またはそれらの組合せを行うように集合的に構成されている）。用語「集合的に」または文法的等価物は、細胞性プロセスに対する分子実体の群の影響を指すために本明細書で使用される場合（例えば、分子実体の群は、細胞性プロセスに集合的に影響を与える）、分子実体の群によって生成された影響を指す。
【0227】
一部の例では、ポリマー性材料は、細胞をカプセル封入するように構成され得る。細胞のカプセル封入は、一部の場合には、細胞の分化を容易にしおよび／または促進し得る。細胞のカプセル封入はまた、一部の場合には、細胞のタンパク質発現の変更を容易にしまたは促進し得る。
【0228】
一部の例では、細胞内でのタンパク質発現における変更は、ある細胞型の別の細胞型への変換のプロセスを開始させまたは容易にし得る。細胞内でのタンパク質発現の開始または変更は、細胞の共有された構造的または機能的特徴を変更し、ある細胞型の別の細胞型への変換をもたらし得る。一部の場合には、細胞内でのタンパク質発現における変化は、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の例では、タンパク質発現は、分化転換を含み得る分化を生じ得る。一部の場合には、分化転換は、分化プロセスの間に多能性細胞状態に達することのない、ある細胞型の別の細胞型への分化を含み得る。一部の例では、分化は、体細胞の分化転換またはナイーブ細胞の指向性分化を含み得る。
【0229】
ある態様では、本開示は、細胞分化を生じ得る細胞のタンパク質発現を変更するための方法を提供する。一部の例では、方法は、細胞を、糖または核酸分子を含む組成物と接触させるステップ、ならびにポリマー性材料を使用して、細胞および組成物をカプセル封入するステップを含み得、それにより、細胞の分化を容易にする。一部の場合には、ポリマー性材料は、細胞のカプセル封入を容易にし得る。一部の場合には、ポリマー性材料は、細胞をカプセル封入し、自己アセンブルし、かつ／またはそれに接着し得る。一部の場合には、ポリマー性材料は、細胞をカプセル封入し、自己アセンブルし、またはそれに接着し得る。一部の場合には、ポリマー性材料は、細胞をカプセル封入し得る。一部の場合には、ポリマー性材料は、細胞を直接カプセル封入し得る。一部の場合には、ポリマー性材料はまた、細胞を間接的にカプセル封入し得る。一部の場合には、ポリマー性材料および細胞は、自己アセンブルし得る。一部の場合には、細胞は、ポリマー性材料に接着し得る。
【0230】
一部の例では、核酸分子は、細胞のタンパク質発現を変更し得、細胞の分化を促進しまたは容易にし得る。一部の例では、糖は、細胞の分化を促進しまたは容易にし得る。一部の例では、カチオン性糖は、細胞の分化を促進しまたは容易にし得る。一部の例では、脂質は、細胞の分化を促進しまたは容易にし得る。一部の例では、ナノ粒子は、細胞の分化を促進しまたは容易にし得る。一部の例では、キトサンは、細胞の分化を促進し得る。
【0231】
用語「促進する」、「促進」、「容易にする」、「容易化」または文法的等価物は、細胞性プロセス（例えば、タンパク質発現または分化）を指して本明細書で使用される場合、閾値を低下させることまたは細胞性プロセスの発生を増加させることを指す。一部の場合には、分子実体または分子実体の群が細胞の細胞性プロセスを容易にする場合、細胞性プロセスは、分子実体の分子実体の群も含まない細胞と比較して、分子実体または分子実体の群を含む細胞において、発生する増加した確率を有する。例えば、分子実体または分子実体の群が細胞の細胞性プロセスを容易にする場合、細胞性プロセスは、分子実体も分子実体の群も含まない細胞と比較して、分子実体または分子実体の群を含む細胞において発生する可能性が、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、５０倍、１００倍、１０００倍またはそれよりも大きく高い場合がある。
【0232】
一部の場合には、分子実体または分子実体の群が、細胞の群の細胞性プロセスを容易にする場合、細胞性プロセスは、分子実体も分子実体の群も含まない細胞の群と比較して、分子実体または分子実体の群を含む細胞の群において、発生する増加した確率、または細胞性プロセスの発生を有する細胞の増加した数を有する。例えば、分子実体または分子実体の群が、細胞の群の細胞性プロセスを容易にする場合、細胞性プロセスは、分子実体も分子実体の群も含まない細胞の群と比較して、分子実体または分子実体の群を含む細胞の群において発生する可能性が、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、５０倍、１００倍、１０００倍またはそれよりも大きく高い場合がある。他の場合では、分子実体または分子実体の群が、細胞の群の細胞性プロセスを容易にする場合、細胞性プロセスは、分子実体も分子実体の群も含まない細胞の群と比較して、分子実体または分子実体の群を含む細胞の群中の、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、５０倍、１００倍、１０００倍またはそれよりも多くの細胞において発生し得る。
【0233】
核酸分子によって容易にされるまたは促進される細胞内でのタンパク質発現は、核酸分子によってコードされるポリペプチドまたはタンパク質を含み得る。一部の場合には、細胞によって取り入れられた核酸分子は、他のタンパク質の発現を変更し得る。例えば、細胞と接触する核酸分子は、細胞によってポリペプチドまたはタンパク質へと翻訳され得る。ポリペプチドまたはタンパク質は、他の細胞性構成要素と相互作用し、他のタンパク質、転写物、核酸および／または他の代謝産物の発現の変更を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、細胞と接触する核酸分子は、細胞によってタンパク質にもポリペプチドにも翻訳されない場合がある。核酸分子は、それ自体がタンパク質にもポリペプチドにも翻訳されることなしに、他の細胞性タンパク質の発現を容易にしまたは促進し得る。核酸分子は、他の細胞性構成要素との相互作用に影響し、他のタンパク質、転写物、核酸および／または他の代謝産物の発現の変更を容易にしまたは促進し得る。
【0234】
一部の場合には、本明細書に記載される核酸分子による、細胞内でのタンパク質の発現の変更の容易化または促進は、転写レベル（例えば、タンパク質をコードする遺伝子の転写の変更）、転写後レベル（例えば、タンパク質をコードする転写物の、転写物安定性、輸送、ＲＮＡ修飾、またはそれらの組合せの変更）、翻訳レベル（例えば、タンパク質をコードする転写物の翻訳の変更）、翻訳後レベル（例えば、タンパク質の翻訳後修飾の変更）、またはそれらの組合せで発生し得る。
【0235】
一部の例では、細胞中でのタンパク質の発現を促進するまたは容易にすることは、タンパク質の発現レベルにおける増加を含み得る。用語「細胞（複数可）」、「細胞集団（複数可）」または「細胞の集団（複数可）」または任意の文法的に等価な用語は、相互交換可能に使用され得る。一部の場合には、タンパク質の発現レベルにおける増加は、増加なしのタンパク質の発現レベルよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、５０倍、１００倍、１０００倍またはそれよりも大きい場合がある。一部の例では、細胞中でのタンパク質の発現を促進するまたは容易にすることは、タンパク質を発現し得る細胞の集団中の細胞の数における増加を含み得る。本開示の組成物または方法の助けによる、タンパク質を発現した細胞の数における増加は、本開示の組成物または方法の非存在下でタンパク質を発現した細胞の数よりも、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、５０倍大きい場合がある。一部の例では、細胞中でのタンパク質の発現の変更を促進するまたは容易にすることは、タンパク質の発現レベルにおける減少を含み得る。一部の場合には、タンパク質の発現レベルにおける減少は、減少なしのタンパク質の発現レベルよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％またはそれよりも低い場合がある。一部の例では、細胞中でのタンパク質の発現を促進するまたは容易にすることは、タンパク質を発現し得る細胞の集団中の細胞の数における減少を含み得る。本開示の組成物または方法の助けによる、タンパク質を発現した細胞の数における減少は、本開示の組成物または方法の非存在下でタンパク質を発現した細胞の数よりも、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％またはそれよりも低い場合がある。
【0236】
核酸分子を含む本明細書で提供される組成物と接触した細胞、または細胞に由来する子孫は、組成物と接触していない細胞またはその子孫と比較して、少なくとも１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、５０倍、１００倍、１０００倍またはそれよりも多くの、核酸分子、核酸分子の転写物もしくは誘導体、核酸分子によってコードされるタンパク質もしくはポリペプチド、またはそれらの組合せを発現し得る。核酸分子を含む本明細書で提供される組成物と接触した細胞の集団、または細胞の集団に由来する子孫は、組成物と接触していない細胞の集団またはその子孫と比較して、少なくとも１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、５０倍、１００倍、１０００倍またはそれよりも多くの、第１の核酸分子、第２の核酸分子の転写物もしくは誘導体、第２の核酸分子によってコードされるタンパク質もしくはポリペプチド、またはそれらの組合せを発現する細胞を有し得る。
【0237】
第１の核酸分子を含む本明細書で提供される組成物と接触した細胞、または細胞に由来する子孫は、組成物と接触していない細胞またはその子孫と比較して、少なくとも１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、５０倍、１００倍、１０００倍またはそれよりも多くの、第１の核酸分子とは異なる第２の核酸分子、第２の核酸分子の転写物もしくは誘導体、第２の核酸分子によってコードされるタンパク質もしくはポリペプチド、またはそれらの組合せを発現し得る。第１の核酸分子を含む本明細書で提供される組成物と接触した細胞の集団、または細胞の集団に由来する子孫は、組成物と接触していない細胞の集団またはその子孫と比較して、少なくとも１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、５０倍、１００倍、１０００倍またはそれよりも多くの、第１の核酸分子とは異なる第２の核酸分子、第２の核酸分子の転写物もしくは誘導体、第２の核酸分子によってコードされるタンパク質もしくはポリペプチド、またはそれらの組合せを発現する細胞を有し得る。第１の核酸分子を含む本明細書で提供される組成物と接触した細胞、または細胞に由来する子孫は、組成物と接触していない細胞またはその子孫と比較して、少なくとも１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％またはそれよりも低い、第１の核酸分子とは異なる第２の核酸分子、第２の核酸分子の転写物もしくは誘導体、第２の核酸分子によってコードされるタンパク質もしくはポリペプチド、またはそれらの組合せを発現し得る。第１の核酸分子を含む本明細書で提供される組成物と接触した細胞の集団、または細胞の集団に由来する子孫は、組成物と接触していない細胞の集団またはその子孫と比較して、少なくとも１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％またはそれよりも低い、第１の核酸分子とは異なる第２の核酸分子、第２の核酸分子の転写物もしくは誘導体、第２の核酸分子によってコードされるタンパク質もしくはポリペプチド、またはそれらの組合せを発現する細胞を有し得る。
【0238】
第１の核酸分子を含む本明細書で提供される組成物と接触した細胞、または細胞に由来する子孫は、本明細書に記載される組成物の他の構成要素なしに第１の核酸分子のみと接触した細胞またはその子孫と比較して、少なくとも１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、５０倍、１００倍、１０００倍またはそれよりも多くの、第１の核酸分子とは異なる第２の核酸分子、第２の核酸分子の転写物もしくは誘導体、第２の核酸分子によってコードされるタンパク質もしくはポリペプチド、またはそれらの組合せを発現し得る。第１の核酸分子を含む本明細書で提供される組成物と接触した細胞の集団、または細胞の集団に由来する子孫は、本明細書に記載される組成物の他の構成要素なしに第１の核酸分子のみと接触した細胞の集団またはその子孫と比較して、少なくとも１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、５０倍、１００倍、１０００倍またはそれよりも多くの、第１の核酸分子とは異なる第２の核酸分子、第２の核酸分子の転写物もしくは誘導体、第２の核酸分子によってコードされるタンパク質もしくはポリペプチド、またはそれらの組合せを発現する細胞を有し得る。
【0239】
第１の核酸分子を含む本明細書で提供される組成物と接触した細胞、または細胞に由来する子孫は、本明細書に記載される組成物の他の構成要素なしに第１の核酸分子のみと接触した細胞またはその子孫と比較して、少なくとも１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％またはそれよりも低い、第１の核酸分子とは異なる第２の核酸分子、第２の核酸分子の転写物もしくは誘導体、第２の核酸分子によってコードされるタンパク質もしくはポリペプチド、またはそれらの組合せを発現し得る。第１の核酸分子を含む本明細書で提供される組成物と接触した細胞の集団、または細胞の集団に由来する子孫は、本明細書に記載される組成物の他の構成要素なしに第１の核酸分子のみと接触した細胞の集団またはその子孫と比較して、少なくとも１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％またはそれよりも低い、第１の核酸分子とは異なる第２の核酸分子、第２の核酸分子の転写物もしくは誘導体、第２の核酸分子によってコードされるタンパク質もしくはポリペプチド、またはそれらの組合せを発現する細胞を有し得る。
【0240】
タンパク質発現の変更は、細胞を核酸、糖、もしくはそれらの組合せ、またはそれらの対照と接触させて、少なくとも約１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、２４時間、２５時間、２６時間、２７時間、２８時間、２９時間、３０時間、３１時間、３２時間、３３時間、３４時間、３５時間、３６時間、３７時間、３８時間、３９時間、４０時間、４１時間、４２時間、４３時間、４４時間、４５時間、４６時間、４７時間、４８時間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、１週間、２週間、３週間、４週間またはそれよりも長い時間の後に、測定され得る。タンパク質発現の増加または減少は、細胞を核酸、糖、もしくはそれらの組合せ、またはそれらの対照と接触させて、最大で約１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、２４時間、２５時間、２６時間、２７時間、２８時間、２９時間、３０時間、３１時間、３２時間、３３時間、３４時間、３５時間、３６時間、３７時間、３８時間、３９時間、４０時間、４１時間、４２時間、４３時間、４４時間、４５時間、４６時間、４７時間、４８時間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、１週間、２週間、３週間または４週間後に測定され得る。
【0241】
一部の場合には、細胞のタンパク質発現の変更は、発現された（または発現されていない）タンパク質の差異または所定のレベルで発現されたタンパク質の差異を含み得る。細胞のタンパク質発現の変更は、少なくとも約１、５、１０、５０、１００、５００、１０００、５０００、１００００またはそれよりも多くの、発現されたまたは発現されていないタンパク質を含み得る。細胞のタンパク質発現の変更は、少なくとも約１、５、１０、５０、１００、５００、１０００、５０００、１００００またはそれよりも多くの、所定のレベルで発現されたまたは発現されていないタンパク質を含み得る。所定のレベルは、所定の対照タンパク質と比較したレベルであり得る。対照タンパク質は、種々の細胞状態または培養条件にある細胞によって一定レベルで発現されるタンパク質であり得る。対照タンパク質は、ハウスキーピング遺伝子によって発現されるタンパク質であり得る。対照タンパク質のレベルは、２つの別個の細胞状態または培養条件にある細胞において測定した場合に、最大で約１％、２％、３％、４％、５％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％または３０％以内であり得る。タンパク質の発現レベルは、タンパク質をコードする遺伝子産物（例えば、ｍＲＮＡ）の定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応、核酸配列決定、蛍光ハイブリダイゼーション、またはそれらの組合せによって測定され得る。タンパク質の発現レベルは、タンパク質のウエスタンブロット、フローサイトメトリー、質量分析、免疫蛍光、蛍光タグ／標識、またはそれらの組合せによって測定され得る。
【0242】
本明細書に記載されるタンパク質の発現の変更は、タンパク質レベルで測定され得る。例えば、ウエスタンブロット、イースタンブロット、免疫蛍光、抗体染色、質量分析、ゲル電気泳動、タンパク質の発現を反映するレポーターの使用、またはそれらの任意の組合せが、タンパク質の発現を測定するために使用され得る。本明細書に記載されるタンパク質の発現の変更は、細胞集団レベルで測定され得る。例えば、フローサイトメトリー、タンパク質を発現する細胞の計数（レポーターまたは免疫蛍光）、またはそれらの組合せが、タンパク質の発現を測定するために使用され得る。本明細書に記載されるタンパク質の発現の変更は、転写物レベルで測定され得る。例えば、定量的リアルタイムＰＣＲ（ＱＲＴ－ＰＣＲ）、逆転写ＰＣＲ、ノザンブロット、ＲＮＡ－配列決定、蛍光ハイブリダイゼーション、またはそれらの組合せが、タンパク質の発現を測定するために使用され得る。
【0243】
一部の例では、細胞の分化を促進するまたは容易にすることは、細胞の集団中の、分化を受け得る細胞の数の増加を含み得る。本開示の組成物または方法の助けによる、分化を受ける細胞の数の増加は、本開示の組成物または方法の非存在下で分化を受ける細胞の数よりも、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１倍、１．５倍、２倍、２．５倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、５０倍高い場合がある。
【0244】
一部の例では、糖、核酸、ポリプレックスまたはそれらの組合せを取り入れた細胞は、細胞内プロセスにおける変化を有し得る。一部の場合には、細胞内プロセスにおける変化は、（例えば、核酸分子の助けによるまたは核酸分子の存在に起因する）細胞中での１つまたは複数のタンパク質の発現における変化（増加または減少）を含み得る。一部の例では、２つまたはそれよりも多くの核酸分子は、タンパク質発現を促進するまたは細胞の分化を容易にするために、集合的に使用され得る。２つまたはそれよりも多くの核酸分子の各々は、細胞中での所与のタンパク質または遺伝子の発現に影響する（例えば、発現を増強または抑制する）ように構成され得る。２つまたはそれよりも多くの核酸分子は、同じタンパク質もしくは遺伝子または異なるタンパク質もしくは遺伝子の発現に影響し得る。２つまたはそれよりも多くの核酸分子は、同じタンパク質、遺伝子または異なるタンパク質もしくは遺伝子の発現に集合的に影響し得る。少なくとも２つの核酸分子が集合的に、タンパク質発現を容易にするまたは細胞の分化を促進する場合、各核酸分子によって影響される発現を有する遺伝子（またはタンパク質もしくは核酸）の重複は、変更された遺伝子発現を有する遺伝子の、約０％、１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％を構成し得る。
【0245】
一部の例では、核酸および糖は、細胞の脂肪生成分化を集合的に促進するように構成されている。一部の例では、核酸および糖は、細胞の血管新生分化を集合的に促進するように構成されている。一部の例では、核酸および糖は、細胞の心原性分化を集合的に促進するように構成されている。一部の例では、核酸および糖は、細胞の軟骨形成分化を集合的に促進するように構成されている。一部の例では、核酸および糖は、細胞の内皮分化を集合的に促進するように構成されている。一部の例では、核酸および糖は、細胞の上皮分化を集合的に促進するように構成されている。一部の例では、核酸および糖は、細胞の造血分化を集合的に促進するように構成されている。一部の例では、核酸および糖は、細胞の肝性分化を集合的に促進するように構成されている。一部の例では、核酸および糖は、細胞の筋原性分化を集合的に促進するように構成されている。一部の例では、核酸および糖は、細胞の神経原性分化を集合的に促進するように構成されている。一部の例では、核酸および糖は、細胞の骨原性分化を集合的に促進するように構成されている。一部の例では、核酸および糖は、細胞の実質分化を集合的に促進するように構成されている。一部の例では、核酸および糖は、細胞の腎分化を集合的に促進するように構成されている。一部の例では、核酸および糖は、細胞の網膜分化を集合的に促進するように構成されている。
【0246】
一部の場合には、糖は、細胞による核酸分子の取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、キトサンは、細胞による核酸分子の取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、脂質は、細胞による核酸分子の取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、ナノ粒子は、細胞による核酸分子の取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。
【0247】
一部の場合には、糖は、細胞によるｍＲＮＡの取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、キトサンは、細胞によるｍＲＮＡの取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、脂質は、細胞によるｍＲＮＡの取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、ナノ粒子は、細胞によるｍＲＮＡの取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、ｍＲＮＡは、細胞による別の核酸分子の取り込みを増強することによって、分化を容易にしまたは促進し得る。
【0248】
一部の場合には、糖は、細胞によるｓｉＲＮＡの取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、キトサンは、細胞によるｓｉＲＮＡの取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、脂質は、細胞によるｓｉＲＮＡの取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、ナノ粒子は、細胞によるｓｉＲＮＡの取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、ｓｉＲＮＡは、細胞による別の核酸分子の取り込みを増強することによって、分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、糖は、細胞によるｍｉＲＮＡの取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、キトサンは、細胞によるｍｉＲＮＡの取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、脂質は、細胞によるｍｉＲＮＡの取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、ナノ粒子は、細胞によるｍｉＲＮＡの取り込みを増強することによって、細胞の分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、細胞による別の核酸分子の取り込みを増強することによって、分化を容易にしまたは促進し得る。
【0249】
一部の場合には、核酸分子は、細胞による別の核酸分子の取り込みを増強することによって、分化を容易にしまたは促進し得る。例えば、ｓｉＲＮＡは、細胞によるｍＲＮＡの取り込みを増強することによって、分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、ｍｉＲＮＡは、細胞によるｍＲＮＡの取り込みを増強することによって、分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、キトサンおよびｓｉＲＮＡは、細胞によるｍＲＮＡの取り込みを増強することによって、分化を容易にしまたは促進し得る。一部の場合には、キトサンおよびｍｉＲＮＡは、細胞によるｍＲＮＡの取り込みを増強することによって、分化を容易にしまたは促進し得る。
【0250】
一部の場合には、細胞をカプセル封入するためのポリマー性材料は、ポリマーを含み得る。一部の場合には、ポリマーは、多糖ベースのポリマー、ポリペプチドベースのポリマー、またはそれらの組合せを含み得る。一部の場合には、ポリマーは、多糖ベースのポリマーを含み得る。一部の場合には、ポリマーは、ポリペプチドベースのポリマーを含み得る。一部の場合には、多糖ベースのポリマーは、アルジネートベースのポリマー、ジェランガムベースのポリマー、キャッサバベースのポリマー、トウモロコシベースのポリマー、コーンスターチベースのポリマー、キサンタンガムベースのポリマー、ローカストビーンベースのポリマー、プルランベースのポリマー、デキストランベースのポリマー、セルロースベースのポリマー、またはそれらの組合せを含み得る。一部の場合には、多糖ベースのポリマーは、アルジネートベースのポリマーを含み得る。一部の場合には、多糖ベースのポリマーは、ジェランガムベースのポリマーを含み得る。一部の場合には、多糖ベースのポリマーは、キャッサバベースのポリマーを含み得る。一部の場合には、多糖ベースのポリマーは、トウモロコシベースのポリマーを含み得る。一部の場合には、多糖ベースのポリマーは、コーンスターチベースのポリマーを含み得る。一部の場合には、多糖ベースのポリマーは、キサンタンガムベースのポリマーを含み得る。一部の場合には、多糖ベースのポリマーは、ローカストビーンベースのポリマーを含み得る。一部の場合には、多糖ベースのポリマーは、プルランベースのポリマーを含み得る。一部の場合には、多糖ベースのポリマーは、デキストランベースのポリマーを含み得る。一部の場合には、多糖ベースのポリマーは、セルロースベースのポリマーを含み得る。一部の例では、ポリペプチドベースのポリマーは、植物タンパク質ベースのポリマーを含み得る。
【0251】
一部の例では、ポリマーは、ヒドロゲルを含み得る。一部の場合には、ヒドロゲルは、ヒアルロン酸（ＨＡ）－コラーゲンヒドロゲルからＤＮＡ複合体を送達するための基材媒介性戦略を含み得る。一部の場合には、ヒドロゲルは、ＨＡをポリ（エチレングリコール）ジグリシジルエーテルで架橋結合することによって形成される。一部の場合には、ヒドロゲルのトポグラフィーは、パターン転写を使用して導入される。一部の場合には、種々のサイズの核酸分子が、ヒドロゲル基材に固定化される。別の例では、ポリマーは、コラーゲンヒドロゲルを含み得る。一部の場合には、ヒドロゲルは、官能基を有するように修飾された二官能性クロスリンカーまたはポリリンカーに共有結合することを可能にする官能基を含有する、または含有するように化学的に修飾され得る。一部の場合には、ヒドロゲルは、高度に水和される合成ポリマーまたはバイオポリマーマトリックスであり得る（例えば、ヒドロゲルの少なくとも約５０重量％は、水を構成し得る）。一部の場合には、ヒドロゲルは、構造的に安定であり得る。ヒドロゲルは、ポリアクリルアミドまたはポロクサマーを含み得る。ヒドロゲルは、天然に存在するポリマー、例えばコラーゲンもまた含み得る。一部の場合には、ヒドロゲルは、フリーズドライされたコラーゲンマトリックスを含み得る。
【0252】
ヒドロゲルは、アルジネートを含み得る。アルジネートベースのヒドロゲルは、カルシウムの存在下で不溶性凝集体を形成し得る。一部の場合には、ヒドロゲル先駆体混合物は、ポリカチオンを含み得る。一部の場合には、ポリカチオンは、例えば、ポリリシン、ポリアルギニン、ポリオルニチン（polyomithine）、ポリヒスチジン、ミエリン塩基性タンパク質、低分子量糖ペプチド、反復配列を有するカチオン性両親媒性アルファ－らせんオリゴペプチド、ヒストン、ガラクトシル化ヒストン、ポリブレン、スペルミン、スペルミジン、プロラミン、ポリエチレンイミン、プトレシン、カダベリンおよびヘキサミンからなる群から選択され得る。
【0253】
一部の例では、ポリマーは、２次元ポリマーを含み得る。他の場合では、ポリマーは、３次元ポリマーを含み得る。一部の例では、ポリマーは、生分解性であるように構成されている。種々のポリマーの中でも、ポリマーは、核酸と共に高分子電解質複合体を形成し、かつ／または種々の酵素から核酸分子を保護し得る。一部の場合には、ポリマーは、合成および天然ポリマーを含み得る。一部の場合には、ポリマーは、ポリアミンベースのポリマーを含み得る。一部の場合には、ポリマーは、カチオン性脂質、ポリアミンベースのポリマー、キトサンベースのポリマー、デンドリマーおよびポリエチレンイミン（ＰＥＩ）を含み得る。一部の場合には、ポリマーは、ヘパリン－ポリエチレンイミン（ＨＰＥＩ）ナノゲルを含み得る。一部の場合には、ポリマーは、分岐状ＰＥＧをポリ［（ε－カプロラクトン）－ｃｏ－グリコリド］（ＣＧ）上にグラフトすることによって調製されるミセルを含み得る。一部の場合には、プルラン（マルトトリオースユニットからなる多糖ポリマー）修飾ＰＥＩは、生分解性であり得る。一部の場合には、ポリマーは、カチオン性アミノ基および加水分解可能なエステル連結を含む生分解性ポリマーの群であるポリ－β－アミノエステル（ＰＢＡＥ）を含み得る。一部の場合には、ポリマーは、ラクトンの、ジアリルジエステルおよびアミノジオールとの酵素触媒される共重合によって産生されるポリアミン（ｃｏ－エステル）を含み得る。一部の場合には、ポリマーは、カチオン性ペプチドであるポリ－Ｌ－リシン（ＰＬＬ）を含み得る。一部の場合には、ポリマーは、天然生分解性ポリマーを含み得る。一部の場合には、天然生分解性ポリマーは、キトサン、プルラン、デキストランおよびヒアルロン酸（ＨＡ）を含み得る。
細胞
細胞
【0254】
一部の場合には、細胞型は、遺伝子、核酸分子および／もしくはタンパク質の特定のプロファイルまたは群を発現する細胞を含み得る。一部の場合には、細胞型の細胞は、遺伝子、核酸分子および／またはタンパク質の共通の発現プロファイルまたは群を有し得る。一部の場合には、細胞型の細胞は、少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、５０、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、２０００、５０００、１００００またはそれよりも多くの同一な遺伝子、核酸分子および／またはタンパク質を発現し得る。一部の場合には、細胞型の細胞は、最大で約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、５０、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、２０００、５０００、１００００、２００００または３００００の同一な遺伝子、核酸分子および／またはタンパク質を発現し得る。細胞型の細胞は、共有された構造的または機能的特徴を有し得る。
【0255】
細胞は、細胞または細胞集団を含み得る。細胞は、細胞または細胞集団の子孫を含み得る。細胞は、単一の細胞の子孫を含み得る。
【0256】
一部の例では、細胞は、脂肪細胞、血管細胞、心細胞、軟骨細胞、内皮細胞、上皮細胞、造血細胞、肝細胞、筋肉細胞、ニューロンまたは骨原性細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、脂肪細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、血管細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、心細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、軟骨細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、内皮細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、上皮細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、造血細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、肝細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、筋肉細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、ニューロンを含み得る。一部の場合には、細胞は、骨原性細胞を含み得る。一部の例では、細胞は、脂肪細胞、血管細胞、心細胞、軟骨細胞、内皮細胞、上皮細胞、造血細胞、肝細胞、筋肉細胞、ニューロンおよび骨原性細胞のうちの少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０または１１種を含み得る。一部の場合には、セメント質形成性細胞は、歯を形成するまたはその一部であり得る細胞を含む。一部の場合には、内皮細胞は、内皮を形成するまたはその一部であり得る細胞を含む。一部の場合には、上皮細胞は、上皮を形成するまたはその一部であり得る細胞を含む。一部の場合には、脂肪細胞は、脂肪組織を形成するまたはその一部であり得る細胞を含み得る。一部の場合には、造血細胞は、血液もしくは造血組織を形成するまたはその一部であり得る細胞を含み得る。一部の場合には、肝細胞は、肝もしくは肝臓組織を形成するまたはその一部であり得る細胞を含み得る。一部の場合には、筋肉細胞は、筋肉組織を形成するまたはその一部であり得る細胞を含み得る。一部の場合には、ニューロンは、神経系を形成するまたはその一部であり得る細胞を含み得る。一部の場合には、腎細胞は、腎臓組織を形成するまたはその一部であり得る細胞を含み得る。一部の場合には、網膜細胞は、眼性もしくは眼組織を形成するまたはその一部であり得る細胞を含み得る。一部の場合には、骨原性細胞は、骨組織を形成するまたはその一部であり得る細胞を含み得る。一部の場合には、血管細胞または血管新生細胞は、血管もしくは脈管組織を形成するまたはその一部であり得る細胞を含み得る。一部の場合には、心細胞は、心臓もしくは心組織を形成するまたはその一部であり得る細胞を含み得る。一部の場合には、軟骨細胞は、軟骨組織を形成するまたはその一部であり得る細胞を含み得る。
【0257】
一部の場合には、脂肪細胞（ｆａｔ ｃｅｌｌ）は、脂肪細胞（ａｄｉｐｏｃｙｔｅ）であり得る。一部の場合には、脂肪細胞（ｆａｔ ｃｅｌｌ）は、種々のサイズの脂肪滴または顆粒を含有し得る。一部の場合には、脂肪細胞（ｆａｔ ｃｅｌｌ）は、白色脂肪細胞（ａｄｉｐｏｓｅ ｃｅｌｌ）または褐色脂肪細胞（ａｄｉｐｏｓｅ ｃｅｌｌ）を含み得る。一部の場合には、白色脂肪細胞（ａｄｉｐｏｓｅ ｃｅｌｌ）は、大きい脂肪滴または顆粒および少量の細胞質を含有し得る。一部の場合には、褐色脂肪細胞（ａｄｉｐｏｓｅ ｃｅｌｌ）は、大量の細胞質および多数のミトコンドリアを含有し得る。一部の場合には、脂肪細胞（ａｄｉｐｏｃｙｔｅ）は、エネルギーを合成し、脂肪としてそれを貯蔵することに特化した、脂肪組織から主に構成されている細胞であり得る。脂肪細胞（ａｄｉｐｏｃｙｔｅ）は、脂肪生成を介して、誘導多能性幹細胞および／または間葉系幹細胞から誘導され得る。脂肪細胞（ａｄｉｐｏｃｙｔｅ）は、単一の大きい脂質滴としてエネルギーを貯蔵し、重要な内分泌機能を有する白色脂肪細胞（ａｄｉｐｏｃｙｔｅ）、および複数の小さい脂質滴中にエネルギーを貯蔵するが、体の熱を生成するための燃料として特に使用される、褐色脂肪細胞（ａｄｉｐｏｃｙｔｅ）であり得る。
【0258】
一部の場合には、筋肉細胞は、筋肉収縮およびエネルギー代謝に特化した筋形質、筋小胞体、筋粒体または筋鞘を発達させ得る。一部の場合には、筋肉細胞は、筋原線維およびミオグロビンを含有し得る。一部の場合には、筋肉細胞は、高い量のグリコーゲンを含有し得る。一部の場合には、筋肉細胞はまた、筋細胞を含み得る。一部の場合には、筋肉細胞は、筋芽細胞から発生し得る。一部の場合には、筋肉細胞は、心筋細胞、平滑筋細胞または骨格筋細胞であり得る。一部の例では、筋肉細胞は、筋線維、筋管、筋細胞、筋芽細胞、スフェロイドまたは筋肉細胞前駆体を含み得る。
【0259】
一部の例では、細胞は、動物細胞を含み得る。動物細胞は、動物界の生物から単離または誘導された細胞を含み得る。動物細胞は、動物から単離され得る。細胞は、そのゲノムの最も近縁の対応物が動物または動物細胞由来である場合もまた、動物細胞であり得る。
【0260】
一部の例では、動物細胞は、哺乳動物細胞、鳥類細胞、または魚類細胞、軟体動物細胞、または両生類細胞を含み得る。一部の例では、動物細胞は、軟体動物細胞を含み得る。一部の例では、動物細胞は、両生類細胞を含み得る。一部の例では、動物細胞は、軟体動物細胞を含み得る。
【0261】
一部の例では、動物細胞は、哺乳動物細胞を含み得る。一部の例では、動物細胞は、鳥類細胞を含み得る。一部の例では、動物細胞は、魚類細胞を含み得る。
【0262】
一部の例では、哺乳動物細胞は、ブタ細胞、ウシ細胞、スイギュウ類細胞、ヒツジ細胞、ヤギ細胞、シカ類細胞、バイソン類細胞、ラクダ類細胞、アカシカ類細胞またはウサギ細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、ブタ細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、ウシ細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、スイギュウ類細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、ヒツジ細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、ヤギ細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、シカ類細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、バイソン類細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、ラクダ類細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、アカシカ類細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、ウサギ細胞を含み得る。
【0263】
一部の例では、鳥類細胞は、カモ類細胞、ニワトリ類細胞、ガン類細胞、シチメンチョウ類細胞、ダチョウ類細胞またはキジ類細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、カモ類細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、ニワトリ類細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、ガン類細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、シチメンチョウ類細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、ダチョウ類細胞を含み得る。一部の場合には、細胞は、キジ類細胞を含み得る。
【0264】
一部の例では、分化した細胞は、自己再生を受け得る。他の場合では、分化した細胞は、自己再生を受けなくてもよい。一部の場合には、最終分化した細胞は、自己再生を受けなくてもよい。一部の場合には、分化した細胞は、多能性細胞状態になくてもよい。
【0265】
一部の場合には、分化を受け得る細胞は、幹細胞を含み得る。他の場合では、幹細胞は、全能性細胞状態にあり得る。一部の場合には、幹細胞は、多能性細胞状態にあり得る。他の場合では、幹細胞は、多分化能性細胞状態にあり得る。他の場合では、幹細胞は、全分化性（ｏｍｎｉｐｏｔｅｎｔ）細胞状態にあり得る。他の場合では、幹細胞は、単能性細胞状態にあり得る。一部の場合には、幹細胞は、ｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、幹細胞は、胚性幹細胞、不死化幹細胞、間葉系幹細胞および／または筋肉前駆細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、胚性幹細胞、不死化幹細胞、間葉系幹細胞、ｉＰＳＣおよび／または筋肉前駆細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、胚性幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、不死化幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、間葉系幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、筋肉前駆細胞を含み得る。
【0266】
幹細胞は、再プログラミングされた細胞を含み得る。細胞の再プログラミングは、細胞または細胞の集団（例えば、体細胞）の発生的潜在力を逆転させるプロセスであり得る。再プログラミングは、細胞を、より高い発生的潜在力を有する状態へと駆動する、例えば、細胞を、あまり分化していない状態へと逆に駆動するプロセスであり得る。再プログラミングされる細胞は、再プログラミングの前に、部分的に分化され得るか最終分化され得るかのいずれかである。再プログラミングは、細胞が、胚性幹細胞の発生的潜在力、例えば、胚性幹細胞表現型を有するように、体細胞を多能性状態へと駆動する、分化状態の完全なまたは部分的な逆転、例えば、多能性状態を有する細胞のものへの、細胞の発生的潜在力における増加を暗示し得、あるいは、多分化能性状態への、細胞、例えば、体細胞もしくは単能性細胞の、分化状態の部分的逆転または発生的潜在力の部分的増加、を包含し得る。再プログラミングは、細胞の分化状態の、さらなる操作に供された場合に多能性状態への完全な再プログラミングに対して細胞をより感受性にする状態への、部分的逆転もまた包含し得る。
【0267】
一部の例では、幹細胞は、動物幹細胞を含み得る。一部の例では、動物幹細胞は、哺乳動物幹細胞、鳥類幹細胞、または魚類幹細胞、軟体動物幹細胞、または両生類幹細胞を含み得る。一部の例では、動物幹細胞は、軟体動物幹細胞を含み得る。一部の例では、動物幹細胞は、両生類幹細胞を含み得る。一部の例では、動物幹細胞は、軟体動物幹細胞を含み得る。一部の場合には、哺乳動物幹細胞は、ブタ幹細胞、ウシ幹細胞、スイギュウ類幹細胞、ヒツジ幹細胞、ヤギ幹細胞、シカ類幹細胞、バイソン類幹細胞、ラクダ類幹細胞、アカシカ類幹細胞またはウサギ幹細胞を含み得る。一部の場合には、哺乳動物幹細胞は、ブタ幹細胞を含み得る。一部の場合には、鳥類幹細胞は、カモ類幹細胞、ニワトリ類幹細胞、ガン類幹細胞、シチメンチョウ類幹細胞、ダチョウ類幹細胞またはキジ類幹細胞を含み得る。一部の例では、動物幹細胞は、哺乳動物幹細胞を含み得る。一部の例では、動物幹細胞は、鳥類幹細胞を含み得る。一部の例では、動物幹細胞は、魚類幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、ブタ幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、ウシ幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、スイギュウ類幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、ヒツジ幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、ヤギ幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、シカ類幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、バイソン類幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、ラクダ類幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、アカシカ類幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、ウサギ幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、カモ類幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、ニワトリ類幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、ガン類幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、シチメンチョウ類幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、ダチョウ類幹細胞を含み得る。一部の場合には、幹細胞は、キジ類幹細胞を含み得る。
【0268】
一部の例では、ｉＰＳＣは、動物ｉＰＳＣを含み得る。一部の例では、動物ｉＰＳＣは、哺乳動物ｉＰＳＣ、鳥類ｉＰＳＣ、または魚類ｉＰＳＣ、軟体動物ｉＰＳＣ、または両生類ｉＰＳＣを含み得る。一部の例では、動物ｉＰＳＣは、軟体動物ｉＰＳＣを含み得る。一部の例では、動物ｉＰＳＣは、両生類ｉＰＳＣを含み得る。一部の例では、動物ｉＰＳＣは、軟体動物ｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、哺乳動物ｉＰＳＣは、ブタｉＰＳＣ、ウシｉＰＳＣ、スイギュウ類ｉＰＳＣ、ヒツジｉＰＳＣ、ヤギｉＰＳＣ、シカ類ｉＰＳＣ、バイソン類ｉＰＳＣ、ラクダ類ｉＰＳＣ、アカシカ類ｉＰＳＣまたはウサギｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、哺乳動物ｉＰＳＣは、ブタｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、鳥類ｉＰＳＣは、カモ類ｉＰＳＣ、ニワトリ類ｉＰＳＣ、ガン類ｉＰＳＣ、シチメンチョウ類ｉＰＳＣ、ダチョウ類ｉＰＳＣまたはキジ類ｉＰＳＣを含み得る。一部の例では、動物ｉＰＳＣは、哺乳動物ｉＰＳＣを含み得る。一部の例では、動物ｉＰＳＣは、鳥類ｉＰＳＣを含み得る。一部の例では、動物ｉＰＳＣは、魚類ｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、ブタｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、ウシｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、スイギュウ類ｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、ヒツジｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、ヤギｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、シカ類ｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、バイソン類ｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、ラクダ類ｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、アカシカ類ｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、ウサギｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、カモ類ｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、ニワトリ類ｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、ガン類ｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、シチメンチョウ類ｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、ダチョウ類ｉＰＳＣを含み得る。一部の場合には、ｉＰＳＣは、キジ類ｉＰＳＣを含み得る。
【0269】
一部の場合には、ｉＰＳＣは、成体体細胞の再プログラミングによって得られた、多能性が付与された任意の細胞を含み得、細胞は、３つの胚性胚細胞層：内胚葉、外胚葉および中胚葉へと分化することが可能である。かかる成体細胞は、任意の成体体組織（例えば、皮膚線維芽細胞または血球）から得られ、幹細胞様の特徴を獲得するように細胞をリセットする組込み的遺伝子操作または非組込み的タンパク質発現方法による再プログラミングを受け得る。ｉＰＳＣは、細胞または細胞の集団（例えば、体細胞）の発生を逆転させてナイーブ細胞型を生じるようなプロセスを介して、形成され得る。ｉＰＳＣは、細胞を、より高い発生的および増殖潜在力を有するナイーブ状態へと駆動するプロセスを受けた細胞、例えば、あまり分化していない状態へとリセットされた細胞であり得る。体細胞は、ｉＰＳＣへの誘導の前には、部分的に分化しているか最終分化しているかのいずれかであり得る。分化状態の完全なまたは部分的な逆転、即ち、多能性状態を有する細胞のものへの、細胞の発生的潜在力における増加が存在し得る。細胞が、胚性幹細胞表現型と類似の、胚性幹細胞の発生的潜在力を有するように、体細胞は、多能性状態へと駆動され得る。体細胞の誘導は、多分化能性状態への、細胞、例えば、体細胞または単能性細胞の、分化状態の部分的逆転または発生的潜在力の部分的増加もまた包含し得る。誘導は、細胞の分化状態の、さらなる操作に供された場合に多能性状態への完全な誘導に対して細胞をより感受性にする状態への、部分的逆転もまた包含し得る。
治療用製品または食用製品
治療用製品または食用製品
【0270】
一部の例では、組成物と接触した細胞または核酸分子を取り入れた細胞は、培養され得る。その細胞の一部または全ては、培養細胞を生成するために引き続いて培養され得、この培養細胞は、最終分化した細胞を生成するように分化され得る。一部の場合には、核酸分子を含む細胞は、治療用製品を産生するために使用され得る。一部の場合には、核酸分子を含む細胞は、組織を産生するために使用され得る。一部の場合には、核酸分子を含む細胞は、食用肉製品を産生するために使用され得る。最終分化した細胞は、食用肉製品を産生するために使用され得る。
【0271】
一部の場合には、治療用製品は、投与された場合に治療効果を有し得る。治療効果は、疾患状態の阻害、寛解、軽減、処置および／または予防を含み得る。一部の場合には、治療用製品は、細胞療法において使用される細胞を含み得る。一部の場合には、治療用製品は、細胞、ワクチン、臓器、細胞によって産生される産物を含み得る。細胞によって産生される産物は、タンパク質、核酸分子、化学的化合物、またはそれらの組合せを含み得る。一部の場合には、タンパク質は、抗体、酵素、シグナル伝達分子、酵素阻害剤、ホルモン、サイトカイン、増殖因子またはそれらの組合せを含み得る。治療用製品として使用される核酸分子は、本開示の他の箇所に記載される任意の核酸分子を含み得る。一部の場合には、化学的化合物は、有機または無機化合物を含み得る。一部の場合には、化合物は、栄養素を含み得る。一部の場合には、治療用製品として使用される細胞は、本開示の他の箇所に記載される任意の細胞を含み得る。一部の場合には、治療用製品は、ヒトまたは非ヒトの細胞、タンパク質、核酸分子、化学的化合物、またはそれらの組合せを含み得る。一部の場合には、細胞によって産生される産物は、抗菌性分子を含み得る。抗菌性分子は、抗細菌性、抗真菌性または抗寄生生物性分子であり得る。
【0272】
治療用製品は、薬を含み得る。薬は、投与された場合に治療効果を有する化学物質または化学物質の収集物および／もしくは混合物を含み得る。一部の場合には、治療用製品は、薬物製品を含み得る。一部の場合には、薬物製品は、投薬形態での治療用製品であり得る。一部の場合には、治療用製品は、薬学的に活性な成分を含み得る。薬学的に活性な成分は、疾患状態の阻害、寛解、軽減、処置および／もしくは予防に寄与するならびに／またはそれを担う直接的な医薬品活性を有する化学物質ならびに／または細胞を含み得る。一部の場合には、治療用製品は、原薬を含み得る。一部の場合には、原薬は、純粋な形態の薬学的に活性な成分を含み得る。一部の場合には、原薬を含む試料は、試料中の原薬の体積、重量、および／または分子の数で、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％を構成し得る。
【0273】
組織は、細胞の収集物を含み得る。組織の細胞は、１つの細胞型由来であり得る。組織の細胞は、１つよりも多くの細胞型由来であり得る。一部の場合には、組織、または細胞の群は、臓器を形成し得る。一部の場合には、臓器の組織または細胞の群は、動物中で見出され得る。一部の場合には、臓器由来の組織または細胞は、生理学的機能または細胞性機能を集合的に実施し得る。一部の場合には、臓器由来の組織または細胞は、構造的および／または機能的特徴を共有し得る。一部の場合には、臓器は、膀胱、血管、骨、脳、気管支、軟骨、横隔膜、ファロピウス管、鰓、毛髪、心臓、視床下部、腸、腎臓、喉頭、靱帯、肝臓、肺、リンパ節、筋肉、爪、神経、卵巣、膵臓、副甲状腺、陰茎、咽頭、松果体、脳下垂体、前立腺、鱗、皮膚、脊髄、脾臓、胃、腱、精巣、胸腺、甲状腺、扁桃腺、歯、気管、尿管、尿道、腟、精管、外陰部、またはそれらの組合せを含み得る。一部の場合には、組織、または細胞の群は、オルガノイドを形成し得る。一部の場合には、オルガノイドは、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏ培養物中で形成され得る。一部の場合には、オルガノイドは、３Ｄであり得る。一部の場合には、オルガノイド由来の組織または細胞は、生理学的機能または細胞性機能を集合的に実施し得る。一部の場合には、オルガノイド由来の組織または細胞は、構造的および／または機能的特徴を共有し得る。一部の場合には、モデルは、細胞または細胞の収集物を含み得る。一部の場合には、細胞または細胞の収集物を含むモデルは、臓器、オルガノイド、組織、またはそれらの組合せのモデルであり得る。一部の場合には、細胞または細胞の収集物を含むモデルは、臓器のモデルであり得る。一部の場合には、細胞または細胞の収集物を含むモデルは、オルガノイドのモデルであり得る。一部の場合には、細胞または細胞の収集物を含むモデルは、組織のモデルであり得る。一部の場合には、モデルは、細胞、細胞の収集物、組織、臓器、オルガノイド、またはそれらの組合せの少なくとも１つの機能的および／または構造的特徴を有し得る。一部の場合には、モデルは、有機または無機材料を含み得る。一部の場合には、モデルは、細胞、組織、臓器もしくはオルガノイド；またはそれらに由来する構成要素を含み得る。一部の場合には、モデルは、生体模倣モデルであり得る。
【0274】
食用製品もまた、細胞の群を含み得る。食用製品は、動物由来の組織の細胞型の集団を有する細胞の群もまた含み得る。食用製品は、いずれかの種によって摂取され、害を引き起こさない場合、食用であり得る。かかる害は、中毒、汚染または感染を含み得る。食用製品は、食用肉製品を含み得る。肉の食用性は、肉の型または特性に依存し得る。例えば、肉は、食用になるように加工または調理され得る。一部の場合には、肉は、焼かれ、蒸され、茹でられ（ｐｏａｃｈ）、茹でられ（ｂｏｉｌ）、グリルされ、乾燥され、燻製され、揚げられ、加熱され、漬けられ、発酵され、熟成され、またはそれらの任意の組合せがされ得る。一部の肉、例えば、魚類由来の肉は、調理なしに食用であり得る。肉の食用性は、毒素および汚染性生物のレベルに依存し得る。一部の場合には、肉の食用性は、個人の食欲にも依存し得る。
【0275】
一部の場合には、培養細胞は、細胞が培養の間に付着し得る足場から、ある程度の構造的完全性を受け取り得る。細胞は、細胞懸濁液中でも培養され得る。一部の場合には、細胞は、接着性であり得る。他の場合では、細胞は、接着性でなくてもよい。一部の場合には、非接着性細胞は、付着のための基材または表面を必要としてもしなくてもよい。一部の場合には、細胞は、接着基材を必要としないように選択、進化、修飾または操作されていてもよい。一部の場合には、培養細胞は、支持体構造、例えば、２次元（２Ｄ）もしくは３次元（３Ｄ）足場または支持体構造に付着され得る培養組織を形成するように成長または構成され得る。一部の場合には、培養細胞は、種々の形状を形成するように構成され得、または３次元プリンターによって形成する。一部の場合には、培養細胞は、２次元支持体構造、例えば、組織－培養プレート上で成長させられ得、この場所で、培養細胞は、摂取のために剥がされまたは加工され得る数層の細胞を形成し得る。一部の場合には、２次元支持体構造は、メンブレンの一方の側の培養培地から細胞が付着する他方の側への栄養素の拡散を可能にする多孔性メンブレンを含み得る。かかる組成では、細胞のさらなる層が、培地灌流が十分である限り、例えば、細胞をメンブレンの両方の側から培養培地に曝露させることによって、達成され得る。一部の場合には、細胞は、メンブレンの一方の側からの、およびまた、メンブレン上で成長している細胞を覆う培養培地からの拡散を介して、栄養素を受け取り得る。培養培地は、不用な代謝産物の増加を防止するために、２次元組織培養環境中に補給され得る。
【0276】
一部の場合には、培養細胞は、３次元支持体構造の上、その周囲またはその内側で成長させられ得る。一部の場合には、支持体構造は、培養細胞が成長し、異なる型の組織、例えば、ステーキ、テンダーロイン、すね肉、ニワトリ胸肉、ドラムスティック、ラムチョップ、魚の三枚おろしまたはロブスターの尾と似るための形状および形態を提供するために、異なるサイズ、形状および／または形態へと造形され得る。支持体構造は、天然または合成生体材料であり得る。一部の場合には、生体材料は、生体適合性の様式で、例えば、許容可能な生物学的応答のレベルを伴って、任意の組織、臓器または機能を評価、処置、強化または置き換えるために、生物学的システムと調和することが意図された任意の物質を含み得る。一部の場合には、生体材料は、細胞および組織と受動的に相互作用し得、または特定のおよび意図した生物学的応答を誘導する生物活性材料を含み得る。一部の場合には、生体材料は、単独でまたは複雑なシステムの一部として、生物系の構成要素との相互作用の制御によって方向付けるために使用される形態を取るように操作された基材を含み得る。一部の場合には、生体材料は、天然、合成、またはそれらの一部の組合せであり得る。足場は、１つの材料または１つもしくは複数の異なる材料から構成され得る。一部の場合には、足場は、非毒性かつ食用であり得、そのため摂取された場合に有害でない可能性があり、最終食物製品に、さらなる栄養、テクスチャー、風味または形態を提供し得る。一部の場合には、足場は、ヒドロゲル、生体材料、例えば、細胞外マトリックス分子（ＥＣＭ）、セルロース、または生体適合性合成材料を含み得る。ＥＣＭ分子は、プロテオグリカン、非プロテオグリカン多糖またはタンパク質を含み得る。一部の場合には、微小足場は、巨視的構造および／または形状を細胞集団に提供し得る従来の組織培養足場よりも小さい場合がある。一部の場合には、微小足場は、微小足場自体が懸濁液中にある場合であっても、接着性細胞が付着する表面を提供し得る。一部の場合には、微小足場は、撹拌により懸濁液中に残留するのに十分に小さいままでありながら、接着性細胞が付着するシードまたはコア構造を提供し得る。微小足場の使用は、接着性細胞の大規模産生を可能にし得る懸濁培養での接着性細胞の培養を可能にする。一部の場合には、培養細胞は、凝集体、スフェロイドまたは胚様体で成長させられ得る。ＥＣＭ分子は、細胞間に形成して、細胞が成長しそれに接着し続ける天然に存在する組織培養足場を提供する。
【0277】
分解可能な足場は、ポリマー性材料を含み得る。ポリマー性材料は、天然ポリマー性材料または合成ポリマー性材料を含み得る。生体材料は、コラーゲン、ゼラチン、フィブリン、アルジネート、寒天、キャッサバ、トウモロコシ、キトサン、ジェランガム、コーンスターチ、キチン、セルロース、チア（Ｓａｌｖｉａ ｈｉｓｐａｎｉｃａ）、組換えシルク、脱細胞化組織（植物または動物）、ヒアルロン酸、フィブロネクチン、ラミニン、ヘミセルロース、グルコマンナン、テクスチャー加工した植物性タンパク質、ヘパラン硫酸、コンドロイチン硫酸、テンペ、ケラタン硫酸、またはそれらの任意の組合せを含み得る。植物ベースの足場は、３Ｄ培養のために使用され得る。植物ベースの足場は、植物、例えば、リンゴ、海藻またはジャックフルーツから得られた足場を含み得る。植物ベースの足場は、少なくとも約１つの植物ベースの材料、例えば、セルロース、ヘミセルロース、ペクチン、リグニン、アルジネート、またはそれらの任意の組合せを含み得る。テクスチャー加工した植物性タンパク質（ＴＶＰ）、例えば、テクスチャー加工したダイズタンパク質（ＴＳＰ）は、高いパーセンテージのダイズタンパク質、ダイズ粉またはダイズ濃縮物を含み得る。ＴＶＰおよびＴＳＰは、肉様テクスチャーおよび堅さを肉製品に提供するために使用され得る。合成生体材料は、ヒドロキシアパタイト、ポリエチレンテレフタレート、アクリレート、ポリエチレングリコール、ポリグリコール酸、ポリカプロラクトン、ポリ乳酸、それらのコポリマー、またはそれらの任意の組合せを含み得る。
【0278】
一部の例では、方法は、細胞を拡大増殖または培養するステップを含み得る。一部の例では、拡大増殖または培養するステップは、維持培地、分化培地、脂肪性培地または増殖培地を含み得る。一部の場合には、培地は、細胞の培養または拡大増殖を促進するように構成され得る。一部の場合には、培地中の気体平衡は、約２１％～約９５％空気飽和の酸素、約０％～約１０％の二酸化炭素分圧（ｍｍＨｇ）の混合物を含み得る。例えば、ｐＨを制御して３７℃で維持した約８０％の酸素、約５％の二酸化炭素の培地の混合物が、提供され得る。一部の場合には、完全トランスフェクション培地は、３７℃および５％ＣＯ２で一晩平衡化され、ｐＨ調整が実施される。ある特定の場合では、最終分化は、複数の実質的に未分化の多能性細胞を、少なくとも約１つの増殖因子を含む第１の限定培地中で培養または維持するステップ、および複数の細胞において分化を促進するのに十分な第２の限定培地中で細胞をインキュベートするステップの、逐次的ステップを含み得る。一部の態様では、複数の多能性細胞は、内胚葉、外胚葉または中胚葉細胞ＨＰＣに分化される。ある特定の態様では、第２の限定培地は、ＦＧＦ２、ＩＧＦ－１を含み得る。ある特定の態様では、第２の限定培地は、ＧＳＫ－３阻害剤を含み得る。一部の場合には、第１の限定培地は、ＩＧＦ－１、ＮＲＧ－１、ＴＧＦ－Ｂ、ＬＩＦおよびＦＧＦ２をさらに含み得る。一部の場合には、第２の限定培地は、ＦＧＦ２をさらに含み得る。一部の場合には、方法は、２５％未満の酸素、例えば、２４％、２３％、２２％、２１％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１０％、５％または０％未満の酸素の大気圧で細胞を培養するステップを含み得る。
【0279】
一部の場合には、維持培地は、多能性培地を含み得る。一部の場合には、細胞は、トランスフェクションの前に、高用量（５０ｎｇ／ｍＬ）ブタ－ＦＧＦ２で４８時間処置される。一部の例では、培地は、７２時間後に第２の限定培地に交換される。一部の例では、拡大増殖または培養するステップの少なくとも約一部分は、単純なバッチ培養以外の成長モードを使用して実施される。細胞を培養するために本明細書で使用される場合、細胞をｉｎ ｖｉｔｒｏで培養するステップは、細胞、細胞の群または組織を、ｅｘ ｖｉｖｏで、または生物もしくは宿主の外側で、培養するステップもまた含み得る。細胞培養は、一部の場合には、細胞の分化（または脱分化）の維持または誘導もまた含み得る。他の場合では、細胞培養物は、成長培地中で維持され得る。細胞培養物は、一部の場合には、２次元（２Ｄ）または３次元（３Ｄ）であり得る。一部の場合には、成長培地は、栄養素、または細胞の成長のために必要な他の構成要素を含み得る。一部の場合には、細胞培養物のための培地および栄養素の型は、培養されている細胞、または培養細胞の目的に依存し得る。
【実施例】
【0280】
これらの実施例は、例示目的のためにのみ提供され、本明細書で提供される特許請求の範囲を限定しない。
【0281】
（実施例１）
糖および核酸分子を用いた細胞中へのＲＮＡのトランスフェクション
糖および核酸分子を用いた細胞中へのＲＮＡのトランスフェクション
【0282】
核酸分子および糖を含む組成物で細胞をトランスフェクトするための種々の糖、核酸分子、脂質およびポリプレックス組合せが、ここで提供される。
【0283】
カチオン化されたデンプン（糖）および脂質を有するｅ－ＧＦＰ ｍＲＮＡ（核酸分子；ＴｒｉＬｉｎｋ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、製品番号Ｌ－７６０１）のポリプレックスを、個々の構成要素のストック溶液のアリコートを、１／２／４の核酸分子／糖／脂質質量比でｐＨ７．２のＰＢＳ中で混合することによって形成した。ポリプレックスを、室温で２０分間形成させ、２４ウェルプレート（１ウェル当たり１５０００細胞の播種密度）中で２４時間成長させたブタｉＰＳＣを処置するために使用した。１ウェル当たりのｍＲＮＡ投薬量０．５μｇ。プレートを、３７℃、５％大気ＣＯ２で２０時間インキュベートした。図１Ａ、図１Ｂおよび図１Ｃはそれぞれ、カチオン化されたデンプンに基づくｅＧＦＰ－ｍＲＮポリプレックスで処置したブタｉＰＳＣの、透過光画像、緑色蛍光、組合せ画像を示す。図１Ａ～Ｃから示されるように、細胞の大部分が、ｅＧＦＰでトランスフェクトされ、ｅＧＦＰを発現した。
【0284】
二重官能化されたキトサンを、第４級アンモニウム基を導入し、マルトデキストリンとコンジュゲートすることによって調製した。二重官能化されたキトサン（糖）および脂質を有するｓａＲＮＡ（核酸分子；ＭｙｏＤ、ＭｙｏＧおよびＭｙｆ６をコードする配列を有する）のポリプレックスを、個々の構成要素のストック溶液のアリコートを、１／３００～６００／３００の核酸分子／糖／脂質質量比でｐＨ７．２のＰＢＳ中で混合することによって形成した。ポリプレックスを、室温で２０分間形成させ、２４ウェルプレート（１ウェル当たり１５０００細胞の播種密度）中で２４時間成長させたブタｉＰＳＣを処置するために使用した。１ウェル当たりのｓａＲＮＡ投薬量０．２ｎｇ。プレートを、３７℃、５％大気ＣＯ２で２０時間インキュベートした。図２は、二重官能化されたキトサンに基づくポリプレックスによって送達されたｓａＲＮＡでトランスフェクトしたブタｉＰＳＣにおける遺伝子発現を示す。製剤１は、脂質なしのトランスフェクション組成物である；製剤２～４は、漸増量の糖を有するトランスフェクション複合体である；製剤５は、脂質をアニオン性多糖で置き換えた陰性対照トランスフェクション複合体である；製剤６は、ＪｅｔＭＥＳＳＥＮＧＥＲ（登録商標）（Ｐｏｌｙｐｌｕｓ）に由来するトランスフェクション複合体を有する陽性対照である。他の陰性対照は、ｓａＲＮＡと接触していないｉＰＳＣまたはｓａＲＮＡと接触しているが糖とも脂質とも接触していない細胞を含む。３つの遺伝子の発現を、トランスフェクションの２４時間後に、ＱＲＴ－ＰＣＲでアッセイした。糖および脂質の含有は、ネイキッドｓａＲＮＡまたは未処置の細胞を使用する陰性対照と比較して、トランスフェクトされた遺伝子の発現を、約１００００倍～１０００００００倍有意に増加させる。ＪｅｔＭＥＳＳＥＮＧＥＲ（登録商標）システムを使用するトランスフェクションと比較して、糖および脂質を使用する本明細書に記載される方法を使用するトランスフェクション効率の改善は、約２～５０倍である（図２）。
【0285】
カチオン化されたデンプンおよび脂質を有するｓａＲＮＡ（核酸分子；ＭｙｏＤ、ＭｙｏＧ、Ｍｙｆ５およびＭｙｆ６をコードする配列を有する）のポリプレックスを、個々の構成要素のストック溶液のアリコートを、質量比１／３００～６００／３００の核酸分子／糖／脂質質量比でｐＨ７．２のＰＢＳ中で混合することによって形成した。ポリプレックスを、室温で２０分間形成させ、２４ウェルプレート（１ウェル当たり１５０００細胞の播種密度）中で２４時間成長させたブタｉＰＳＣを処置するために使用した。１ウェル当たりのｍＲＮＡ投薬量０．２ｎｇ。プレートを、３７℃、５％大気ＣＯ２で２０時間インキュベートした。図３は、カチオン化されたデンプンに基づくポリプレックスによって送達されたｓａＲＮＡでトランスフェクトしたブタｉＰＳＣにおける遺伝子発現を示す。製剤１は、脂質なしのトランスフェクション組成物である；製剤２～４は、漸増量の糖を有するトランスフェクション複合体である；製剤５は、脂質をアニオン性多糖で置き換えた陰性対照トランスフェクション複合体である；製剤６は、ＪｅｔＭＥＳＳＥＮＧＥＲ（登録商標）（Ｐｏｌｙｐｌｕｓ）に由来するトランスフェクション複合体を有する陽性対照である。他の陰性対照は、ｓａＲＮＡと接触していないｉＰＳＣまたはｓａＲＮＡと接触しているが糖とも脂質とも接触していない細胞を含む。３つの遺伝子の発現を、トランスフェクションの２４時間後に、ＱＲＴ－ＰＣＲでアッセイした。糖および脂質の含有は、ネイキッドｓａＲＮＡまたは未処置の細胞を使用する陰性対照と比較して、トランスフェクトされた遺伝子の発現を、約１００倍～１０００倍有意に増加させる。糖および脂質を使用する本明細書に記載される方法を使用するトランスフェクション効率を、ＪｅｔＭＥＳＳＥＮＧＥＲ（登録商標）システムを使用するトランスフェクション効率と比較する（図３）。
【0286】
カチオン化されたデンプンまたは二重官能化されたキトサンは、本開示に記載される他の糖で置換することができる。ｓａＲＮＡまたはｍＲＮＡは、本開示に記載される他の核酸分子で置換することができる。
【0287】
（実施例２）
糖および核酸分子を使用するタンパク質発現、細胞分化または細胞変換の誘導
糖および核酸分子を使用するタンパク質発現、細胞分化または細胞変換の誘導
【0288】
本開示に記載される組成物／方法を使用してタンパク質発現、細胞分化および／細胞変換を容易にするための方法が、本明細書で提供される。
【0289】
図４は、本明細書に記載される方法のワークフローを示す。ステップ４０１は、糖（例えば、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含む修飾糖）および核酸（例えば、ＲＮＡ、ｍＲＮＡまたはｓａＲＮＡ）を混合して、組成物を生成することを含む。ステップ４０２は、細胞集団（例えば、幹細胞、胚性幹細胞、不死化幹細胞、間葉系幹細胞、筋肉前駆細胞またはｉＰＳＣ）を組成物と接触させることを含む。ステップ４０３は、ポリマー性材料を使用して、細胞集団および組成物をカプセル封入する、自己アセンブルする、またはそれに接着することを含む。ステップ４０４は、細胞集団の細胞を、細胞の少なくともサブセットが核酸分子の核酸分子を取り入れるのに十分な条件に供することを含む。ステップ４０５は、トランスフェクトされた細胞がそのタンパク質発現を変更することを容易にすることを含む。必要に応じて、ステップ４０６は、トランスフェクトされた細胞の分化を容易にすることを含む。必要に応じて、ステップ４０７は、トランスフェクトされた細胞を、医薬品活性成分、組織または食用製品に変換することを含む。
【0290】
数ミリグラムの修飾糖、２ｍｇのチアミンピロリン酸および０．５ｍｇの硫酸プロタミンを、１ｍＬの無菌蒸留水中に個々に溶解させる。各溶液を、０．２２μｍフィルターを介して濾過する。標的化核酸を、無菌蒸留水中１ｍｇ／ｍＬの最終濃度になるように溶解させる。ＰＥＧ－脂質を、３０ｍｇに達する総ＰＥＧ－脂質重量で１ｍＬのエタノール中に溶解させ、その後、０．２２μｍフィルターを介して濾過する。核酸溶液を、プロタミン溶液と混合してプレ複合体を形成させ、次いで、水可溶性糖溶液、チアミンピロリン酸溶液およびＰＥＧ－脂質溶液と混合して、ポリプレックスを含有する組成物を調製する。
【0291】
細胞（表１に列挙した）を、１～７日の間、種々の糖および核酸分子（それぞれ、表２および３に列挙した）で毎日トランスフェクトする。ＧＦＰ／ＲＦＰ／ＹＦＰ ｍＲＮＡまたはスクランブルｓｉＲＮＡを、トランスフェクション対照として使用する。トランスフェクションを、最適なコロイド状ナノ粒子法の対照として、従来の化学物質ベースの方法（例えば、Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｏｎ）または非化学的方法（例えば、電気穿孔またはヌクレオフェクション）のいずれかを使用して実施する。ヌクレオチド長さの差異、二本鎖対一本鎖核酸、およびヌクレオチドの用量範囲において見ることができるようなヌクレオチドの多様な性質が、選択された送達方法に影響する：サイレンシングＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）：２０～４０ｂｐ、二本鎖ＲＮＡ分子、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）：５００ｂｐ～２～４ｋｂｐの範囲、一本鎖ＲＮＡ分子。ヌクレオチドの用量範囲：ヌクレオチド（ＤＮＡ、ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ｓａＲＮＡ）について０．５μｇ／ｍＬ～５０μｇ／ｍＬ。例えば、ｍＲＮＡおよびｓｉＲＮＡを、ナノ粒子トランスフェクション選択肢を使用して、一緒にカプセル封入することもできる。
表1. 細胞型の例
表2. 修飾糖の例
表3. 核酸の例
表1. 細胞型の例
【表1】
【表2】
【表3】
【0292】
（実施例３）
食用肉製品を培養する
食用肉製品を培養する
【0293】
細胞を、問題の細胞株に必要な増殖因子を補充した第１の成長培地中で維持および拡大増殖する。細胞を、２Ｄ接着性表面上で、または凝集体として３Ｄで、成長させる。タンパク質発現を促進するために、細胞を、選択された送達剤と自己アセンブルした核酸を含有するポリプレックスで、２４時間処置する。トランスフェクションを、２Ｄ（生体材料ありまたはなし）または３Ｄ（生体材料ありまたはなしの、スフェロイド、胚様体、懸濁液または接着剤が含まれるがこれらに限定されない）培養条件で実施する。培地を、２４時間後に交換することもできる。細胞を、必要とされる所望の結果に依存して、第２の成長培地中で７～５０＋（最小～最大、またはそれらの間のどこでも）日間、維持する。培養物の成熟を、例えば、筋原性線維の成熟を促進するために、生体材料ありもしくはなしで、または電気刺激もしくは収縮張力ありもしくはなしで、記載された２Ｄまたは３Ｄ条件で実施する。必要な対照を、実験的一貫性のために実施する。分析は、ｑＰＣＲ、免疫組織化学またはフローサイトメトリーを使用して、任意の段階で実施することができる。任意の核酸を、この方法論に対する変形において使用することもできる。実験的変更は、同じ材料および方法を使用し得るが、異なる化合物が導入され得る。細胞（例えば、関連する筋原性マーカーを発現する筋肉細胞、関連する脂肪生成マーカーを発現する脂肪細胞）の必要とされる成長の後、細胞を収穫し、食品加工を開始する。簡潔に述べると、細胞を、問題の最終産物に依存する必要な量になるように、植物ベースの成分とブレンドする。１～９９％（最小～最大）の間（またはそれらの間のどこでも）の細胞質量を、最終１００％製剤において使用することもできる。製剤を、所望の形状および構造に形成し、スライスし、調理し、冷凍する。
番号付き実施形態
１
糖、および細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている核酸分子；および前記細胞をカプセル封入するまたは前記細胞に接着するように構成されているポリマー性材料を含む組成物。
２
前記ポリマー性材料がポリマーを含む、実施形態１に記載の組成物。
３
前記ポリマーが、多糖ベースのポリマー、ポリペプチドベースのポリマー、脂質ベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む、実施形態２に記載の組成物。
４
前記多糖ベースのポリマーが、アルジネートベースのポリマー、ジェランガムベースのポリマー、キャッサバベースのポリマー、トウモロコシベースのポリマー、コーンスターチベースのポリマー、キサンタンガムベースのポリマー、ローカストビーンベースのポリマー、プルランベースのポリマー、デキストランベースのポリマー、セルロースベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む、実施形態３に記載の組成物。
５
前記ポリマー性材料が、前記細胞をカプセル封入するように構成されている、実施形態１から４のいずれか一項に記載の組成物。
６
前記ポリマー性材料がヒドロゲルを含む、実施形態１から５のいずれか一項に記載の組成物。
７
前記ポリマー性材料が２次元ポリマーを含む、実施形態６に記載の組成物。
８
前記ポリマーが３次元ポリマーを含む、実施形態６に記載の組成物。
９
前記ポリマー性材料が、生分解性であるように構成されている、実施形態１から８のいずれか一項に記載の組成物。
１０
細胞内でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されているリボ核酸（ＲＮＡ）を含む核酸分子および糖を含む組成物。
１１
前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化が、中胚葉系統、内胚葉系統または外胚葉系統への前記細胞の分化を容易にする、実施形態１０に記載の組成物。
１２
前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化が、前記細胞の脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎または網膜分化を容易にする、実施形態１１に記載の組成物。
１３
前記細胞の前記分化が、前記細胞の分化転換または前記細胞の指向性分化を含む、実施形態１２に記載の組成物。
１４
前記細胞が、体細胞またはナイーブ細胞を含む、実施形態１０から１３のいずれか一項に記載の組成物。
１５
前記細胞が、脂肪細胞、血管細胞、心細胞、軟骨細胞、内皮細胞、上皮細胞、造血細胞、肝細胞、筋肉細胞、ニューロンまたは骨原性細胞を含む、実施形態１から１４のいずれか一項に記載の組成物。
１６
前記細胞が前記筋肉細胞を含む、実施形態１５に記載の組成物。
１７
前記筋肉細胞が、筋線維、筋管、筋細胞、筋芽細胞、筋原性スフェロイドまたは筋肉細胞前駆体を含む、実施形態１６に記載の組成物。
１８
細胞内でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されている糖および核酸分子を含む組成物であって、前記細胞が、胚性幹細胞、不死化幹細胞、間葉系幹細胞、筋肉前駆細胞または誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含む幹細胞である、組成物。
１９
前記細胞が前記ｉＰＳＣを含む、実施形態１８に記載の組成物。
２０
前記核酸分子がリボ核酸（ＲＮＡ）を含む、実施形態１から９および１８から１９のいずれか一項に記載の組成物。
２１
前記ＲＮＡが、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む、実施形態１０から１７および２０のいずれか一項に記載の組成物。
２２
前記ＲＮＡが、前記ｍＲＮＡ、前記ｓａＲＮＡ、前記ｅＲＮＡ、前記ｔａ－ＲＮＡ、またはそれらの組合せを含む、実施形態２１に記載の組成物。
２３
前記ＲＮＡが、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする、実施形態２２または実施形態２３に記載の組成物。
２４
前記ＲＮＡがモノシストロン性である、実施形態２１から２３のいずれか一項に記載の組成物。
２５
前記ＲＮＡがポリシストロン性である、実施形態２１から２３のいずれか一項に記載の組成物。
２６
前記核酸分子が前記ｍＲＮＡを含む、実施形態２１から２５のいずれか一項に記載の組成物。
２７
前記核酸分子が前記ｓａＲＮＡを含む、実施形態２１から２５のいずれか一項に記載の組成物。
２８
前記核酸分子が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡを含む、実施形態２１から２７のいずれか一項に記載の組成物。
２９
前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡが、前記細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む、実施形態２８に記載の組成物。
３０
前記細胞の多能性の前記低減が、前記細胞の前記分化を容易にする、実施形態２９に記載の組成物。
３１
前記ポリヌクレオチド配列が、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む、実施形態２９または実施形態３０に記載の組成物。
３２
前記核酸分子が、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、前記第１の核酸分子が、前記ｍＲＮＡまたは前記ｓａＲＮＡであり、前記第２の核酸が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡである、実施形態２１から３１のいずれか一項に記載の組成物。
３３
核酸分子および修飾糖を含む組成物であって、前記核酸分子が、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含み；前記修飾糖が、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含み；前記核酸または前記修飾糖が、細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている、組成物。
３４
前記修飾糖が、キトサン、ヒアルロン酸、プルラン、ヘパリン、アルジネート、またはそれらの組合せもしくは誘導体を含む、実施形態３３に記載の組成物。
３５
前記修飾糖が修飾キトサンを含む、実施形態３４に記載の組成物。
３６
前記修飾糖が、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、糖 フェノール修飾糖、またはそれらの組合せを含む、実施形態３３から３５のいずれか一項に記載の組成物。
３７
前記脂肪族アルデヒド修飾糖が、ヘキサナールアルデヒド修飾糖、ヘプタナールアルデヒド修飾糖、オクタナールアルデヒド修飾糖、ノナナールアルデヒド修飾糖またはデカナールアルデヒド修飾糖を含む、実施形態３３から３６のいずれか一項に記載の組成物。
３８
前記脂肪族アルデヒド修飾糖が、デカナールアルデヒド修飾糖を含む、実施形態３６または実施形態３７に記載の組成物。
３９
前記芳香族アルデヒド修飾糖が、ベンズアルデヒド修飾糖またはシンナムアルデヒド修飾糖を含む、実施形態３３から３８のいずれか一項に記載の組成物。
４０
前記ポリアミン誘導体化糖が、スペルミン修飾糖、スペルミジン修飾糖、プトレシン修飾糖、ジエチルエチルアミン修飾糖、ジメチルエチルアミン修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖またはアルギニン修飾糖を含む、実施形態３３から３９のいずれか一項に記載の組成物。
４１
前記脂質付加物を有する前記糖が、レシチンを有する糖またはホスファチジルコリンを有する糖を含む、実施形態３３から４０のいずれか一項に記載の組成物。
４２
前記糖修飾糖が単糖修飾糖を含む、実施形態３３から４１のいずれか一項に記載の組成物。
４３
前記単糖修飾糖が、ラクトース修飾糖、マンノース修飾糖、グルコース修飾糖、ガラクトース修飾糖、グルコサミン修飾糖、スクロース修飾糖、キシロース修飾糖、リボース修飾糖、フルクトース修飾糖またはグリセルアルデヒド修飾糖を含む、実施形態４２に記載の組成物。
４４
前記糖修飾糖が多糖修飾糖を含む、実施形態３３から４１のいずれか一項に記載の組成物。
４５
前記多糖修飾糖が、アニオン性多糖修飾糖、マルトース修飾糖、還元多糖修飾糖、またはそれらの組合せを含む、実施形態４４に記載の組成物。
４６
前記アニオン性多糖修飾糖が、アルジネート修飾糖、カルボキシメチル化セルロース修飾糖、ヒアルロン酸修飾糖、ペクチン修飾糖、プルラン修飾糖、デンプン修飾糖またはキサンタンガム修飾糖を含む、実施形態４５に記載の組成物。
４７
前記還元多糖修飾糖が、マルトデキストリン修飾糖またはセロビオース修飾糖を含む、実施形態４５または実施形態４６に記載の組成物。
４８
前記還元多糖修飾糖がカチオン性脂質付加物を含む、実施形態４５から４７のいずれか一項に記載の組成物。
４９
前記フェノール修飾糖が、クロロゲン酸修飾糖、フェルラ酸修飾糖、コーヒー酸修飾糖、没食子酸修飾糖、またはそれらの組合せを含む、実施形態３６から４８のいずれか一項に記載の組成物。
５０
前記核酸分子が、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする、実施形態３３から４９のいずれか一項に記載の組成物。
５１
前記核酸分子がモノシストロン性である、実施形態３３から５０のいずれか一項に記載の組成物。
５２
前記核酸分子がポリシストロン性である、実施形態３３から５０のいずれか一項に記載の組成物。
５３
マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）またはサイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）をさらに含む、実施形態３３から５２のいずれか一項に記載の組成物。
５４
前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡが、前記細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む、実施形態５３に記載の組成物。
５５
前記細胞の多能性における前記低減が、前記細胞の前記分化を容易にする、実施形態５４に記載の組成物。
５６
前記ポリヌクレオチド配列が、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む、実施形態５５に記載の組成物。
５７
前記核酸分子が、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、前記第１の核酸分子が、前記ｍＲＮＡまたは前記ｓａＲＮＡであり、前記第２の核酸が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡである、実施形態５３から５６のいずれか一項に記載の組成物。
５８
前記細胞内での前記タンパク質発現における前記変化が、前記細胞の分化を容易にする、実施形態１から５７のいずれか一項に記載の組成物。
５９
脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む、実施形態１から５８のいずれか一項に記載の組成物。
６０
前記糖が、水性溶液中または中性溶液中でカチオン性である、実施形態１から５９のいずれか一項に記載の組成物。
６１
前記糖のカチオン性部分のカチオン性電荷が、前記糖１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む、実施形態１から６０のいずれか一項に記載の組成物。
６２
前記糖の前記カチオン性部分の前記カチオン性電荷が、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む、実施形態１から６１のいずれか一項に記載の組成物。
６３
前記糖が、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む、実施形態１から６２のいずれか一項に記載の組成物。
６４
前記糖が、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む、実施形態１から６３のいずれか一項に記載の組成物。
６５
前記糖が多糖を含む、実施形態１から６４のいずれか一項に記載の組成物。
６６
前記糖および前記核酸分子が、互いに自己アセンブルするように構成されている、実施形態１から６５のいずれか一項に記載の組成物。
６７
前記糖および前記核酸分子が、ポリプレックスを形成するように構成されている、実施形態１から６６のいずれか一項に記載の組成物。
６８
前記核酸分子が、前記ポリプレックスの表面またはその近傍にある、実施形態６７に記載の組成物。
６９
前記核酸分子が、前記ポリプレックス内にカプセル封入される、実施形態６７に記載の組成物。
７０
前記ポリプレックスが、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である、実施形態６７から６９のいずれか一項に記載の組成物。
７１
前記ポリプレックスが、球状または直鎖状である、実施形態６７から６９のいずれか一項に記載の組成物。
７２
前記ポリプレックスの見掛けの直径が、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である、実施形態６７から７１のいずれか一項に記載の組成物。
７３
前記ポリプレックスの見掛けの直径が、前記ＤＬＳまたは前記顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである、実施形態６７から７２のいずれか一項に記載の組成物。
７４
前記ポリプレックスが、ナノ粒子をさらに含む、実施形態６７から７３のいずれか一項に記載の組成物。
７５
前記核酸分子がＲＮＡ調節エレメントを含む、実施形態１から７４のいずれか一項に記載の組成物。
７６
前記ＲＮＡ調節エレメントが、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む、実施形態７５に記載の組成物。
７７
前記ＲＮＡ調節エレメントが、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む、実施形態７５に記載の組成物。
７８
前記糖が、前記核酸分子を安定化する、実施形態１から７７のいずれか一項に記載の組成物。
７９
前記糖が、前記核酸分子の分解を阻害または低減する、実施形態１から７８のいずれか一項に記載の組成物。
８０
前記糖が、前記核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減する、実施形態１から７９のいずれか一項に記載の組成物。
８１
前記核酸分子が化学的修飾を含む、実施形態１から８０のいずれか一項に記載の組成物。
８２
前記核酸分子がアンロックド核酸を含む、実施形態１から８１のいずれか一項に記載の組成物。
８３
前記核酸分子が、少なくとも２つの型の核酸を含む、実施形態１から８２のいずれか一項に記載の組成物。
８４
前記細胞が、哺乳動物細胞、鳥類細胞、魚類細胞、軟体動物細胞または両生類細胞を含む、実施形態１から８３のいずれか一項に記載の組成物。
８５
前記哺乳動物細胞が、ブタ細胞、ウシ細胞、スイギュウ類細胞、ヒツジ細胞、ヤギ細胞、シカ類細胞、バイソン類細胞、ラクダ類細胞、アカシカ類細胞またはウサギ細胞を含む、実施形態８４に記載の組成物。
８６
前記哺乳動物細胞が前記ブタ細胞を含む、実施形態８５に記載の組成物。
８７
前記ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、前記ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比が、少なくとも約１である、実施形態１から８６のいずれか一項に記載の組成物。
８８
前記ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、前記ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比が、最大で約６０である、実施形態１から８７のいずれか一項に記載の組成物。
８９
前記組成物が、前記核酸、前記ポリマー性材料および前記脂質を含み、前記ポリマー性材料の前記核酸に対する第１の質量比が、１：１以上であり、前記脂質の前記ポリマー性材料に対する第２の質量比が、１：１以上である、実施形態５９から８８のいずれか一項に記載の組成物。
９０
前記第１の質量比が２：１以上であり、前記第２の質量比が２：１以上である、実施形態８９に記載の組成物。
９１
前記第１の質量比が１００：１以上である、実施形態９０に記載の組成物。
９２
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法であって、
（ａ）細胞を、
ｉ．糖、および
ｉｉ．核酸分子
を含む組成物と接触させるステップ；
（ｂ）ポリマー性材料を使用して、前記細胞および前記組成物をカプセル封入するまたは接着させるステップ
を含み、それにより、前記細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にする、方法。
９３
前記ポリマー性材料がポリマーを含む、実施形態９２に記載の方法。
９４
前記ポリマーが、多糖ベースのポリマー、ポリペプチドベースのポリマー、脂質ベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む、実施形態９３に記載の方法。
９５
前記多糖ベースのポリマーが、アルジネートベースのポリマー、ジェランガムベースのポリマー、キャッサバベースのポリマー、トウモロコシベースのポリマー、コーンスターチベースのポリマー、キサンタンガムベースのポリマー、ローカストビーンベースのポリマー、プルランベースのポリマー、デキストランベースのポリマー、セルロースベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む、実施形態９４に記載の方法。
９６
前記ポリマー性材料が、前記細胞をカプセル封入するように構成されている、実施形態９２から９５のいずれか一項に記載の方法。
９７
前記ポリマー性材料がヒドロゲルを含む、実施形態９２から９６のいずれか一項に記載の方法。
９８
前記ポリマー性材料が２次元ポリマーを含む、実施形態９７に記載の方法。
９９
前記ポリマーが３次元ポリマーを含む、実施形態９８に記載の方法。
１００
前記ポリマー性材料が、生分解性であるように構成されている、実施形態９２から９９のいずれか一項に記載の方法。
１０１
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法であって、
前記細胞を、
ｉ．糖、および
ｉｉ．リボ核酸（ＲＮＡ）を含む核酸分子
を含む組成物と、前記細胞が前記組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップ
を含み、それにより、前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化を容易にする、方法。
１０２
前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化が、中胚葉系統、内胚葉系統または外胚葉系統への前記細胞の分化を容易にする、実施形態１０１に記載の方法。
１０３
前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化が、前記細胞の脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎または網膜分化を容易にする、実施形態１０２に記載の方法。
１０４
前記細胞の前記分化が、前記細胞の分化転換または前記細胞の指向性分化を含む、実施形態１０１から１０３のいずれか一項に記載の方法。
１０５
前記細胞が、体細胞またはナイーブ細胞を含む、実施形態１０１から１０４のいずれか一項に記載の方法。
１０６
前記細胞が、脂肪細胞、血管細胞、心細胞、軟骨細胞、内皮細胞、上皮細胞、造血細胞、肝細胞、筋肉細胞、ニューロンまたは骨原性細胞を含む、実施形態１０１から１０５のいずれか一項に記載の方法。
１０７
前記細胞が前記筋肉細胞を含む、実施形態１０６に記載の方法。
１０８
前記筋肉細胞が、筋線維、筋管、筋細胞、筋芽細胞、筋原性スフェロイドまたは筋肉細胞前駆体を含む、実施形態１０７に記載の方法。
１０９
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法であって、
前記細胞を、
ｉ．糖、および
ｉｉ．核酸分子
を含む組成物と、前記細胞が前記組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップ
を含み、前記細胞が、胚性幹細胞、不死化幹細胞、間葉系幹細胞、筋肉前駆細胞または誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含む幹細胞を含み、それにより、前記幹細胞中での前記タンパク質発現における前記変化を容易にする、方法。
１１０
前記細胞が前記ｉＰＳＣを含む、実施形態１０９に記載の方法。
１１１
前記核酸分子がリボ核酸（ＲＮＡ）を含む、実施形態９２から１００および１０９から１１０のいずれか一項に記載の方法。
１１２
前記ＲＮＡが、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む、実施形態１０１から１０８および１１１のいずれか一項に記載の方法。
１１３
前記ＲＮＡが、前記ｍＲＮＡ、前記ｓａＲＮＡ、前記ｅＲＮＡ、前記ｔａ－ＲＮＡ、またはそれらの組合せを含む、実施形態１１２に記載の方法。
１１４
前記ＲＮＡが、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする、実施形態１１２または実施形態１１３に記載の方法。
１１５
前記ＲＮＡがモノシストロン性である、実施形態１１２に記載の方法。
１１６
前記ＲＮＡがポリシストロン性である、実施形態１１２に記載の方法。
１１７
前記核酸分子が前記ｍＲＮＡを含む、実施形態１１２から１１６のいずれか一項に記載の方法。
１１８
前記核酸分子が前記ｓａＲＮＡを含む、実施形態１１２から１１６のいずれか一項に記載の方法。
１１９
前記核酸分子が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡを含む、実施形態１１２から１１８のいずれか一項に記載の方法。
１２０
前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡが、前記細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む、実施形態１１９に記載の方法。
１２１
前記細胞の多能性における前記低減が、前記細胞の前記分化を容易にする、実施形態１２０に記載の方法。
１２２
前記ポリヌクレオチド配列が、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む、実施形態１２０または実施形態１２１に記載の方法。
１２３
前記核酸分子が、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、前記第１の核酸分子が、前記ｍＲＮＡまたは前記ｓａＲＮＡであり、前記第２の核酸が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡである、実施形態１１２から１２２のいずれか一項に記載の方法。
１２４
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法であって、
前記細胞を、
ｉ．脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含む修飾糖、ならびに
ｉｉ．メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、およびそれらの組合せを含む核酸分子
を含む組成物と、前記細胞が前記組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップ
を含み、それにより、前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化を容易にする、方法。
１２５
前記修飾糖が、キトサン、ヒアルロン酸、プルラン、ヘパリン、アルジネート、またはそれらの組合せもしくは誘導体を含む、実施形態１２４に記載の方法。
１２６
前記修飾糖が修飾キトサンを含む、実施形態１２５に記載の方法。
１２７
前記修飾糖が、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、糖 フェノール修飾糖、またはそれらの組合せを含む、実施形態１２４から１２６のいずれか一項に記載の方法。
１２８
前記脂肪族アルデヒド修飾糖が、ヘキサナールアルデヒド修飾糖、ヘプタナールアルデヒド修飾糖、オクタナールアルデヒド修飾糖、ノナナールアルデヒド修飾糖またはデカナールアルデヒド修飾糖を含む、実施形態１２４から１２７のいずれか一項に記載の方法。
１２９
前記脂肪族アルデヒド修飾糖が、デカナールアルデヒド修飾糖を含む、実施形態１２７または実施形態１２８に記載の方法。
１３０
前記芳香族アルデヒド修飾糖が、ベンズアルデヒド修飾糖またはシンナムアルデヒド修飾糖を含む、実施形態１２４から１２９のいずれか一項に記載の方法。
１３１
前記ポリアミン誘導体化糖が、スペルミン修飾糖、スペルミジン修飾糖、プトレシン修飾糖、ジエチルエチルアミン修飾糖、ジメチルエチルアミン修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖またはアルギニン修飾糖を含む、実施形態１２４から１３０のいずれか一項に記載の方法。
１３２
前記脂質付加物を有する前記糖が、レシチンを有する糖またはホスファチジルコリンを有する糖を含む、実施形態１２４から１３１のいずれか一項に記載の方法。
１３３
前記糖修飾糖が単糖修飾糖を含む、実施形態１２４から１３２のいずれか一項に記載の方法。
１３４
前記単糖修飾糖が、ラクトース修飾糖、マンノース修飾糖、グルコース修飾糖、ガラクトース修飾糖、グルコサミン修飾糖、スクロース修飾糖、キシロース修飾糖、リボース修飾糖、フルクトース修飾糖またはグリセルアルデヒド修飾糖を含む、実施形態１３３に記載の方法。
１３５
前記糖修飾糖が多糖修飾糖を含む、実施形態１２４から１３４のいずれか一項に記載の方法。
１３６
前記多糖修飾糖が、アニオン性多糖修飾糖、マルトース修飾糖、還元多糖修飾糖、またはそれらの組合せを含む、実施形態１３５に記載の方法。
１３７
前記アニオン性多糖修飾糖が、アルジネート修飾糖、カルボキシメチル化セルロース修飾糖、ヒアルロン酸修飾糖、ペクチン修飾糖、プルラン修飾糖、デンプン修飾糖またはキサンタンガム修飾糖を含む、実施形態１３６に記載の方法。
１３８
前記還元多糖修飾糖が、マルトデキストリン修飾糖またはセロビオース修飾糖を含む、実施形態１３６または実施形態１３７に記載の方法。
１３９
前記還元多糖修飾糖がカチオン性脂質付加物を含む、実施形態１３６から１３８のいずれか一項に記載の方法。
１４０
前記フェノール修飾糖が、クロロゲン酸修飾糖、フェルラ酸修飾糖、コーヒー酸修飾糖、没食子酸修飾糖、またはそれらの組合せを含む、実施形態１２７から１３９のいずれか一項に記載の方法。
１４１
前記核酸分子が、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする、実施形態１２４から１４０のいずれか一項に記載の方法。
１４２
前記核酸分子がモノシストロン性である、実施形態１２４から１４１のいずれか一項に記載の方法。
１４３
前記核酸分子がポリシストロン性である、実施形態１２４から１４１のいずれか一項に記載の方法。
１４４
前記組成物が、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）またはサイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）をさらに含む、実施形態１２４から１４３のいずれか一項に記載の方法。
１４５
前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡが、前記細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む、実施形態１４４に記載の方法。
１４６
前記細胞の多能性における前記低減が、前記細胞の前記分化を容易にする、実施形態１４５に記載の方法。
１４７
前記ポリヌクレオチド配列が、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む、実施形態１４６に記載の方法。
１４８
前記核酸分子が、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、前記第１の核酸分子が、前記ｍＲＮＡまたは前記ｓａＲＮＡであり、前記第２の核酸が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡである、実施形態１４４から１４７のいずれか一項に記載の方法。
１４９
前記細胞内での前記タンパク質発現における前記変化が、前記細胞の分化を容易にする、実施形態９２から１４８のいずれか一項に記載の方法。
１５０
前記組成物が、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む、実施形態９２から１４９のいずれか一項に記載の方法。
１５１
前記糖が、水性溶液中または中性溶液中でカチオン性であるように構成されている、実施形態９２から１５０のいずれか一項に記載の方法。
１５２
前記糖のカチオン性部分のカチオン性電荷が、前記糖１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む、実施形態９２から１５１のいずれか一項に記載の方法。
１５３
前記糖の前記カチオン性部分の前記カチオン性電荷が、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む、実施形態９２から１５２のいずれか一項に記載の方法。
１５４
前記糖が、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む、実施形態９２から１５３のいずれか一項に記載の方法。
１５５
前記糖が、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む、実施形態９２から１５４のいずれか一項に記載の方法。
１５６
前記糖が多糖を含む、実施形態９２から１５５のいずれか一項に記載の方法。
１５７
前記糖および前記核酸分子が、互いに自己アセンブルするように構成されている、実施形態９２から１５６のいずれか一項に記載の方法。
１５８
前記糖および前記核酸分子が、ポリプレックスを形成するように構成されている、実施形態９２から１５７のいずれか一項に記載の方法。
１５９
前記核酸分子が、前記ポリプレックスの表面またはその近傍にある、実施形態１５８に記載の方法。
１６０
前記核酸分子が、前記ポリプレックス内にカプセル封入される、実施形態１５８に記載の方法。
１６１
前記ポリプレックスが、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である、実施形態１５８から１６０のいずれか一項に記載の方法。
１６２
前記ポリプレックスが、球状または直鎖状である、実施形態１５８から１６０のいずれか一項に記載の方法。
１６３
前記ポリプレックスの見掛けの直径が、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である、実施形態１５８から１６２のいずれか一項に記載の方法。
１６４
前記ポリプレックスの見掛けの直径が、前記ＤＬＳまたは前記顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである、実施形態１５８から１６３のいずれか一項に記載の方法。
１６５
前記ポリプレックスが、ナノ粒子をさらに含む、実施形態１５８から１６４のいずれか一項に記載の方法。
１６６
前記核酸分子がＲＮＡ調節エレメントを含む、実施形態９２から１６５のいずれか一項に記載の方法。
１６７
前記ＲＮＡ調節エレメントが、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む、実施形態１６６に記載の方法。
１６８
前記ＲＮＡ調節エレメントが、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む、実施形態１６６に記載の方法。
１６９
前記糖が、前記核酸分子を安定化するように構成されている、実施形態９２から１６８のいずれか一項に記載の方法。
１７０
前記糖が、前記核酸分子の分解を阻害または低減するように構成されている、実施形態９２から１６９のいずれか一項に記載の方法。
１７１
前記糖が、前記核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている、実施形態９２から１７０のいずれか一項に記載の方法。
１７２
前記核酸分子が化学的修飾を含む、実施形態９２から１７１のいずれか一項に記載の方法。
１７３
前記核酸分子がアンロックド核酸を含む、実施形態９２から１７２のいずれか一項に記載の方法。
１７４
前記核酸分子が、少なくとも２つの型の核酸を含む、実施形態９２から１７３のいずれか一項に記載の方法。
１７５
前記細胞が、哺乳動物細胞、鳥類細胞、魚類細胞、軟体動物細胞または両生類細胞を含む、実施形態９２から１７４のいずれか一項に記載の方法。
１７６
前記哺乳動物細胞が、ブタ細胞、ウシ細胞、スイギュウ類細胞、ヒツジ細胞、ヤギ細胞、シカ類細胞、バイソン類細胞、ラクダ類細胞、アカシカ類細胞またはウサギ細胞を含む、実施形態１７５に記載の方法。
１７７
前記哺乳動物細胞が前記ブタ細胞を含む、実施形態１７６に記載の方法。
１７８
前記ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、前記ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比が、少なくとも約１である、実施形態９２から１７７のいずれか一項に記載の方法。
１７９
前記ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、前記ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比が、最大で約６０である、実施形態９２から１７８のいずれか一項に記載の方法。
１８０
前記組成物が、前記核酸、前記ポリマー性材料および前記脂質を含み、前記ポリマー性材料の前記核酸に対する第１の質量比が、１：１以上であり、前記脂質の前記ポリマー性材料に対する第２の質量比が、１：１以上である、実施形態９２から１７９のいずれか一項に記載の方法。
１８１
前記第１の質量比が２：１以上であり、前記第２の質量比が２：１以上である、実施形態１８０に記載の方法。
１８２
前記第１の質量比が１００：１以上である、実施形態１８１に記載の方法。
１８３
前記接触させるステップにおける前記核酸分子および前記細胞の比が、１００００細胞当たり少なくとも約０．００１ｎｇである、実施形態９２から１８２のいずれか一項に記載の方法。
１８４
前記接触させるステップにおける前記核酸分子および前記細胞の比が、１００００細胞当たり少なくとも約０．０１ｎｇである、実施形態１８３に記載の方法。
１８５
前記接触させるステップにおける前記核酸分子および前記細胞の比が、１００００細胞当たり少なくとも約０．１ｎｇである、実施形態１８４に記載の方法。
１８６
前記細胞内でのタンパク質発現の前記変化が、前記細胞内の前記核酸分子によってコードされる転写物の増加した発現を含む、実施形態９２から１８５のいずれか一項に記載の方法。
１８７
前記細胞内の前記核酸分子によってコードされる前記転写物が、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＱＲＴ－ＰＣＲ）によって測定した場合に、（１）前記糖と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；（２）前記核酸分子と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；または（３）それらの組合せよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、５０％、１００％、１５０％、２倍、５倍、１０倍、１００倍または１０００倍高い、実施形態１８６に記載の方法。
１８８
前記細胞内でのタンパク質発現の前記変化が、前記細胞内の前記核酸分子によってコードされない転写物の増加した発現を含む、実施形態９２から１８５のいずれか一項に記載の方法。
１８９
前記細胞内の前記核酸分子によってコードされない前記転写物が、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＱＲＴ－ＰＣＲ）によって測定した場合に、（１）前記糖と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；（２）前記核酸分子と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；または（３）それらの組合せよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、５０％、１００％、１５０％、２倍、５倍、１０倍、１００倍または１０００倍高い、実施形態１８８に記載の方法。
１９０
前記細胞内でのタンパク質発現の前記変化が、前記細胞内の前記核酸分子によってコードされない転写物の減少した発現を含む、実施形態９２から１８５のいずれか一項に記載の方法。
１９１
前記細胞内の前記核酸分子によってコードされない前記転写物が、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＱＲＴ－ＰＣＲ）によって測定した場合に、（１）前記糖と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；（２）前記核酸分子と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；または（３）それらの組合せよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％ ５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または９９％低い、実施形態１８８に記載の方法。
１９２
実施形態９２から１９１のいずれか一項に記載の方法によって調製された食用製品。
１９３
実施形態９２から１９１のいずれか一項に記載の方法によって調製された医薬品活性成分。
１９４
実施形態９２から１９１のいずれか一項に記載の方法によって調製された組織。
番号付き実施形態
１
糖、および細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている核酸分子；および前記細胞をカプセル封入するまたは前記細胞に接着するように構成されているポリマー性材料を含む組成物。
２
前記ポリマー性材料がポリマーを含む、実施形態１に記載の組成物。
３
前記ポリマーが、多糖ベースのポリマー、ポリペプチドベースのポリマー、脂質ベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む、実施形態２に記載の組成物。
４
前記多糖ベースのポリマーが、アルジネートベースのポリマー、ジェランガムベースのポリマー、キャッサバベースのポリマー、トウモロコシベースのポリマー、コーンスターチベースのポリマー、キサンタンガムベースのポリマー、ローカストビーンベースのポリマー、プルランベースのポリマー、デキストランベースのポリマー、セルロースベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む、実施形態３に記載の組成物。
５
前記ポリマー性材料が、前記細胞をカプセル封入するように構成されている、実施形態１から４のいずれか一項に記載の組成物。
６
前記ポリマー性材料がヒドロゲルを含む、実施形態１から５のいずれか一項に記載の組成物。
７
前記ポリマー性材料が２次元ポリマーを含む、実施形態６に記載の組成物。
８
前記ポリマーが３次元ポリマーを含む、実施形態６に記載の組成物。
９
前記ポリマー性材料が、生分解性であるように構成されている、実施形態１から８のいずれか一項に記載の組成物。
１０
細胞内でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されているリボ核酸（ＲＮＡ）を含む核酸分子および糖を含む組成物。
１１
前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化が、中胚葉系統、内胚葉系統または外胚葉系統への前記細胞の分化を容易にする、実施形態１０に記載の組成物。
１２
前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化が、前記細胞の脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎または網膜分化を容易にする、実施形態１１に記載の組成物。
１３
前記細胞の前記分化が、前記細胞の分化転換または前記細胞の指向性分化を含む、実施形態１２に記載の組成物。
１４
前記細胞が、体細胞またはナイーブ細胞を含む、実施形態１０から１３のいずれか一項に記載の組成物。
１５
前記細胞が、脂肪細胞、血管細胞、心細胞、軟骨細胞、内皮細胞、上皮細胞、造血細胞、肝細胞、筋肉細胞、ニューロンまたは骨原性細胞を含む、実施形態１から１４のいずれか一項に記載の組成物。
１６
前記細胞が前記筋肉細胞を含む、実施形態１５に記載の組成物。
１７
前記筋肉細胞が、筋線維、筋管、筋細胞、筋芽細胞、筋原性スフェロイドまたは筋肉細胞前駆体を含む、実施形態１６に記載の組成物。
１８
細胞内でのタンパク質発現における変化を集合的に容易にするように構成されている糖および核酸分子を含む組成物であって、前記細胞が、胚性幹細胞、不死化幹細胞、間葉系幹細胞、筋肉前駆細胞または誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含む幹細胞である、組成物。
１９
前記細胞が前記ｉＰＳＣを含む、実施形態１８に記載の組成物。
２０
前記核酸分子がリボ核酸（ＲＮＡ）を含む、実施形態１から９および１８から１９のいずれか一項に記載の組成物。
２１
前記ＲＮＡが、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む、実施形態１０から１７および２０のいずれか一項に記載の組成物。
２２
前記ＲＮＡが、前記ｍＲＮＡ、前記ｓａＲＮＡ、前記ｅＲＮＡ、前記ｔａ－ＲＮＡ、またはそれらの組合せを含む、実施形態２１に記載の組成物。
２３
前記ＲＮＡが、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする、実施形態２２または実施形態２３に記載の組成物。
２４
前記ＲＮＡがモノシストロン性である、実施形態２１から２３のいずれか一項に記載の組成物。
２５
前記ＲＮＡがポリシストロン性である、実施形態２１から２３のいずれか一項に記載の組成物。
２６
前記核酸分子が前記ｍＲＮＡを含む、実施形態２１から２５のいずれか一項に記載の組成物。
２７
前記核酸分子が前記ｓａＲＮＡを含む、実施形態２１から２５のいずれか一項に記載の組成物。
２８
前記核酸分子が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡを含む、実施形態２１から２７のいずれか一項に記載の組成物。
２９
前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡが、前記細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む、実施形態２８に記載の組成物。
３０
前記細胞の多能性の前記低減が、前記細胞の前記分化を容易にする、実施形態２９に記載の組成物。
３１
前記ポリヌクレオチド配列が、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む、実施形態２９または実施形態３０に記載の組成物。
３２
前記核酸分子が、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、前記第１の核酸分子が、前記ｍＲＮＡまたは前記ｓａＲＮＡであり、前記第２の核酸が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡである、実施形態２１から３１のいずれか一項に記載の組成物。
３３
核酸分子および修飾糖を含む組成物であって、前記核酸分子が、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含み；前記修飾糖が、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含み；前記核酸または前記修飾糖が、細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするように構成されている、組成物。
３４
前記修飾糖が、キトサン、ヒアルロン酸、プルラン、ヘパリン、アルジネート、またはそれらの組合せもしくは誘導体を含む、実施形態３３に記載の組成物。
３５
前記修飾糖が修飾キトサンを含む、実施形態３４に記載の組成物。
３６
前記修飾糖が、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、糖 フェノール修飾糖、またはそれらの組合せを含む、実施形態３３から３５のいずれか一項に記載の組成物。
３７
前記脂肪族アルデヒド修飾糖が、ヘキサナールアルデヒド修飾糖、ヘプタナールアルデヒド修飾糖、オクタナールアルデヒド修飾糖、ノナナールアルデヒド修飾糖またはデカナールアルデヒド修飾糖を含む、実施形態３３から３６のいずれか一項に記載の組成物。
３８
前記脂肪族アルデヒド修飾糖が、デカナールアルデヒド修飾糖を含む、実施形態３６または実施形態３７に記載の組成物。
３９
前記芳香族アルデヒド修飾糖が、ベンズアルデヒド修飾糖またはシンナムアルデヒド修飾糖を含む、実施形態３３から３８のいずれか一項に記載の組成物。
４０
前記ポリアミン誘導体化糖が、スペルミン修飾糖、スペルミジン修飾糖、プトレシン修飾糖、ジエチルエチルアミン修飾糖、ジメチルエチルアミン修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖またはアルギニン修飾糖を含む、実施形態３３から３９のいずれか一項に記載の組成物。
４１
前記脂質付加物を有する前記糖が、レシチンを有する糖またはホスファチジルコリンを有する糖を含む、実施形態３３から４０のいずれか一項に記載の組成物。
４２
前記糖修飾糖が単糖修飾糖を含む、実施形態３３から４１のいずれか一項に記載の組成物。
４３
前記単糖修飾糖が、ラクトース修飾糖、マンノース修飾糖、グルコース修飾糖、ガラクトース修飾糖、グルコサミン修飾糖、スクロース修飾糖、キシロース修飾糖、リボース修飾糖、フルクトース修飾糖またはグリセルアルデヒド修飾糖を含む、実施形態４２に記載の組成物。
４４
前記糖修飾糖が多糖修飾糖を含む、実施形態３３から４１のいずれか一項に記載の組成物。
４５
前記多糖修飾糖が、アニオン性多糖修飾糖、マルトース修飾糖、還元多糖修飾糖、またはそれらの組合せを含む、実施形態４４に記載の組成物。
４６
前記アニオン性多糖修飾糖が、アルジネート修飾糖、カルボキシメチル化セルロース修飾糖、ヒアルロン酸修飾糖、ペクチン修飾糖、プルラン修飾糖、デンプン修飾糖またはキサンタンガム修飾糖を含む、実施形態４５に記載の組成物。
４７
前記還元多糖修飾糖が、マルトデキストリン修飾糖またはセロビオース修飾糖を含む、実施形態４５または実施形態４６に記載の組成物。
４８
前記還元多糖修飾糖がカチオン性脂質付加物を含む、実施形態４５から４７のいずれか一項に記載の組成物。
４９
前記フェノール修飾糖が、クロロゲン酸修飾糖、フェルラ酸修飾糖、コーヒー酸修飾糖、没食子酸修飾糖、またはそれらの組合せを含む、実施形態３６から４８のいずれか一項に記載の組成物。
５０
前記核酸分子が、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする、実施形態３３から４９のいずれか一項に記載の組成物。
５１
前記核酸分子がモノシストロン性である、実施形態３３から５０のいずれか一項に記載の組成物。
５２
前記核酸分子がポリシストロン性である、実施形態３３から５０のいずれか一項に記載の組成物。
５３
マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）またはサイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）をさらに含む、実施形態３３から５２のいずれか一項に記載の組成物。
５４
前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡが、前記細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む、実施形態５３に記載の組成物。
５５
前記細胞の多能性における前記低減が、前記細胞の前記分化を容易にする、実施形態５４に記載の組成物。
５６
前記ポリヌクレオチド配列が、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む、実施形態５５に記載の組成物。
５７
前記核酸分子が、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、前記第１の核酸分子が、前記ｍＲＮＡまたは前記ｓａＲＮＡであり、前記第２の核酸が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡである、実施形態５３から５６のいずれか一項に記載の組成物。
５８
前記細胞内での前記タンパク質発現における前記変化が、前記細胞の分化を容易にする、実施形態１から５７のいずれか一項に記載の組成物。
５９
脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む、実施形態１から５８のいずれか一項に記載の組成物。
６０
前記糖が、水性溶液中または中性溶液中でカチオン性である、実施形態１から５９のいずれか一項に記載の組成物。
６１
前記糖のカチオン性部分のカチオン性電荷が、前記糖１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む、実施形態１から６０のいずれか一項に記載の組成物。
６２
前記糖の前記カチオン性部分の前記カチオン性電荷が、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む、実施形態１から６１のいずれか一項に記載の組成物。
６３
前記糖が、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む、実施形態１から６２のいずれか一項に記載の組成物。
６４
前記糖が、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む、実施形態１から６３のいずれか一項に記載の組成物。
６５
前記糖が多糖を含む、実施形態１から６４のいずれか一項に記載の組成物。
６６
前記糖および前記核酸分子が、互いに自己アセンブルするように構成されている、実施形態１から６５のいずれか一項に記載の組成物。
６７
前記糖および前記核酸分子が、ポリプレックスを形成するように構成されている、実施形態１から６６のいずれか一項に記載の組成物。
６８
前記核酸分子が、前記ポリプレックスの表面またはその近傍にある、実施形態６７に記載の組成物。
６９
前記核酸分子が、前記ポリプレックス内にカプセル封入される、実施形態６７に記載の組成物。
７０
前記ポリプレックスが、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である、実施形態６７から６９のいずれか一項に記載の組成物。
７１
前記ポリプレックスが、球状または直鎖状である、実施形態６７から６９のいずれか一項に記載の組成物。
７２
前記ポリプレックスの見掛けの直径が、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である、実施形態６７から７１のいずれか一項に記載の組成物。
７３
前記ポリプレックスの見掛けの直径が、前記ＤＬＳまたは前記顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである、実施形態６７から７２のいずれか一項に記載の組成物。
７４
前記ポリプレックスが、ナノ粒子をさらに含む、実施形態６７から７３のいずれか一項に記載の組成物。
７５
前記核酸分子がＲＮＡ調節エレメントを含む、実施形態１から７４のいずれか一項に記載の組成物。
７６
前記ＲＮＡ調節エレメントが、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む、実施形態７５に記載の組成物。
７７
前記ＲＮＡ調節エレメントが、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む、実施形態７５に記載の組成物。
７８
前記糖が、前記核酸分子を安定化する、実施形態１から７７のいずれか一項に記載の組成物。
７９
前記糖が、前記核酸分子の分解を阻害または低減する、実施形態１から７８のいずれか一項に記載の組成物。
８０
前記糖が、前記核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減する、実施形態１から７９のいずれか一項に記載の組成物。
８１
前記核酸分子が化学的修飾を含む、実施形態１から８０のいずれか一項に記載の組成物。
８２
前記核酸分子がアンロックド核酸を含む、実施形態１から８１のいずれか一項に記載の組成物。
８３
前記核酸分子が、少なくとも２つの型の核酸を含む、実施形態１から８２のいずれか一項に記載の組成物。
８４
前記細胞が、哺乳動物細胞、鳥類細胞、魚類細胞、軟体動物細胞または両生類細胞を含む、実施形態１から８３のいずれか一項に記載の組成物。
８５
前記哺乳動物細胞が、ブタ細胞、ウシ細胞、スイギュウ類細胞、ヒツジ細胞、ヤギ細胞、シカ類細胞、バイソン類細胞、ラクダ類細胞、アカシカ類細胞またはウサギ細胞を含む、実施形態８４に記載の組成物。
８６
前記哺乳動物細胞が前記ブタ細胞を含む、実施形態８５に記載の組成物。
８７
前記ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、前記ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比が、少なくとも約１である、実施形態１から８６のいずれか一項に記載の組成物。
８８
前記ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、前記ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比が、最大で約６０である、実施形態１から８７のいずれか一項に記載の組成物。
８９
前記組成物が、前記核酸、前記ポリマー性材料および前記脂質を含み、前記ポリマー性材料の前記核酸に対する第１の質量比が、１：１以上であり、前記脂質の前記ポリマー性材料に対する第２の質量比が、１：１以上である、実施形態５９から８８のいずれか一項に記載の組成物。
９０
前記第１の質量比が２：１以上であり、前記第２の質量比が２：１以上である、実施形態８９に記載の組成物。
９１
前記第１の質量比が１００：１以上である、実施形態９０に記載の組成物。
９２
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法であって、
（ａ）細胞を、
ｉ．糖、および
ｉｉ．核酸分子
を含む組成物と接触させるステップ；
（ｂ）ポリマー性材料を使用して、前記細胞および前記組成物をカプセル封入するまたは接着させるステップ
を含み、それにより、前記細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にする、方法。
９３
前記ポリマー性材料がポリマーを含む、実施形態９２に記載の方法。
９４
前記ポリマーが、多糖ベースのポリマー、ポリペプチドベースのポリマー、脂質ベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む、実施形態９３に記載の方法。
９５
前記多糖ベースのポリマーが、アルジネートベースのポリマー、ジェランガムベースのポリマー、キャッサバベースのポリマー、トウモロコシベースのポリマー、コーンスターチベースのポリマー、キサンタンガムベースのポリマー、ローカストビーンベースのポリマー、プルランベースのポリマー、デキストランベースのポリマー、セルロースベースのポリマー、またはそれらの組合せを含む、実施形態９４に記載の方法。
９６
前記ポリマー性材料が、前記細胞をカプセル封入するように構成されている、実施形態９２から９５のいずれか一項に記載の方法。
９７
前記ポリマー性材料がヒドロゲルを含む、実施形態９２から９６のいずれか一項に記載の方法。
９８
前記ポリマー性材料が２次元ポリマーを含む、実施形態９７に記載の方法。
９９
前記ポリマーが３次元ポリマーを含む、実施形態９８に記載の方法。
１００
前記ポリマー性材料が、生分解性であるように構成されている、実施形態９２から９９のいずれか一項に記載の方法。
１０１
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法であって、
前記細胞を、
ｉ．糖、および
ｉｉ．リボ核酸（ＲＮＡ）を含む核酸分子
を含む組成物と、前記細胞が前記組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップ
を含み、それにより、前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化を容易にする、方法。
１０２
前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化が、中胚葉系統、内胚葉系統または外胚葉系統への前記細胞の分化を容易にする、実施形態１０１に記載の方法。
１０３
前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化が、前記細胞の脂肪生成、血管新生、心原性、軟骨形成、内皮、上皮、造血、肝性、筋原性、神経原性、骨原性、実質、腎または網膜分化を容易にする、実施形態１０２に記載の方法。
１０４
前記細胞の前記分化が、前記細胞の分化転換または前記細胞の指向性分化を含む、実施形態１０１から１０３のいずれか一項に記載の方法。
１０５
前記細胞が、体細胞またはナイーブ細胞を含む、実施形態１０１から１０４のいずれか一項に記載の方法。
１０６
前記細胞が、脂肪細胞、血管細胞、心細胞、軟骨細胞、内皮細胞、上皮細胞、造血細胞、肝細胞、筋肉細胞、ニューロンまたは骨原性細胞を含む、実施形態１０１から１０５のいずれか一項に記載の方法。
１０７
前記細胞が前記筋肉細胞を含む、実施形態１０６に記載の方法。
１０８
前記筋肉細胞が、筋線維、筋管、筋細胞、筋芽細胞、筋原性スフェロイドまたは筋肉細胞前駆体を含む、実施形態１０７に記載の方法。
１０９
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法であって、
前記細胞を、
ｉ．糖、および
ｉｉ．核酸分子
を含む組成物と、前記細胞が前記組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップ
を含み、前記細胞が、胚性幹細胞、不死化幹細胞、間葉系幹細胞、筋肉前駆細胞または誘導多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含む幹細胞を含み、それにより、前記幹細胞中での前記タンパク質発現における前記変化を容易にする、方法。
１１０
前記細胞が前記ｉＰＳＣを含む、実施形態１０９に記載の方法。
１１１
前記核酸分子がリボ核酸（ＲＮＡ）を含む、実施形態９２から１００および１０９から１１０のいずれか一項に記載の方法。
１１２
前記ＲＮＡが、メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）、トランスファーリボ核酸（ｔＲＮＡ）、サイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、またはそれらの組合せを含む、実施形態１０１から１０８および１１１のいずれか一項に記載の方法。
１１３
前記ＲＮＡが、前記ｍＲＮＡ、前記ｓａＲＮＡ、前記ｅＲＮＡ、前記ｔａ－ＲＮＡ、またはそれらの組合せを含む、実施形態１１２に記載の方法。
１１４
前記ＲＮＡが、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする、実施形態１１２または実施形態１１３に記載の方法。
１１５
前記ＲＮＡがモノシストロン性である、実施形態１１２に記載の方法。
１１６
前記ＲＮＡがポリシストロン性である、実施形態１１２に記載の方法。
１１７
前記核酸分子が前記ｍＲＮＡを含む、実施形態１１２から１１６のいずれか一項に記載の方法。
１１８
前記核酸分子が前記ｓａＲＮＡを含む、実施形態１１２から１１６のいずれか一項に記載の方法。
１１９
前記核酸分子が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡを含む、実施形態１１２から１１８のいずれか一項に記載の方法。
１２０
前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡが、前記細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む、実施形態１１９に記載の方法。
１２１
前記細胞の多能性における前記低減が、前記細胞の前記分化を容易にする、実施形態１２０に記載の方法。
１２２
前記ポリヌクレオチド配列が、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む、実施形態１２０または実施形態１２１に記載の方法。
１２３
前記核酸分子が、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、前記第１の核酸分子が、前記ｍＲＮＡまたは前記ｓａＲＮＡであり、前記第２の核酸が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡである、実施形態１１２から１２２のいずれか一項に記載の方法。
１２４
細胞内でのタンパク質発現における変化を容易にするための方法であって、
前記細胞を、
ｉ．脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、脂質付加物を有する糖、またはそれらの組合せを含む修飾糖、ならびに
ｉｉ．メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）、自己増幅性ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）、エンドレス／環状ＲＮＡ（ｅＲＮＡ）、トランス増幅性ＲＮＡ（ｔａ－ＲＮＡ）、およびそれらの組合せを含む核酸分子
を含む組成物と、前記細胞が前記組成物を取り込むのに十分な条件下で接触させるステップ
を含み、それにより、前記細胞内でのタンパク質発現における前記変化を容易にする、方法。
１２５
前記修飾糖が、キトサン、ヒアルロン酸、プルラン、ヘパリン、アルジネート、またはそれらの組合せもしくは誘導体を含む、実施形態１２４に記載の方法。
１２６
前記修飾糖が修飾キトサンを含む、実施形態１２５に記載の方法。
１２７
前記修飾糖が、脂肪族アルデヒド修飾糖、芳香族アルデヒド修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖、ポリアミン誘導体化糖、糖修飾糖、糖 フェノール修飾糖、またはそれらの組合せを含む、実施形態１２４から１２６のいずれか一項に記載の方法。
１２８
前記脂肪族アルデヒド修飾糖が、ヘキサナールアルデヒド修飾糖、ヘプタナールアルデヒド修飾糖、オクタナールアルデヒド修飾糖、ノナナールアルデヒド修飾糖またはデカナールアルデヒド修飾糖を含む、実施形態１２４から１２７のいずれか一項に記載の方法。
１２９
前記脂肪族アルデヒド修飾糖が、デカナールアルデヒド修飾糖を含む、実施形態１２７または実施形態１２８に記載の方法。
１３０
前記芳香族アルデヒド修飾糖が、ベンズアルデヒド修飾糖またはシンナムアルデヒド修飾糖を含む、実施形態１２４から１２９のいずれか一項に記載の方法。
１３１
前記ポリアミン誘導体化糖が、スペルミン修飾糖、スペルミジン修飾糖、プトレシン修飾糖、ジエチルエチルアミン修飾糖、ジメチルエチルアミン修飾糖、第４級アンモニウム修飾糖またはアルギニン修飾糖を含む、実施形態１２４から１３０のいずれか一項に記載の方法。
１３２
前記脂質付加物を有する前記糖が、レシチンを有する糖またはホスファチジルコリンを有する糖を含む、実施形態１２４から１３１のいずれか一項に記載の方法。
１３３
前記糖修飾糖が単糖修飾糖を含む、実施形態１２４から１３２のいずれか一項に記載の方法。
１３４
前記単糖修飾糖が、ラクトース修飾糖、マンノース修飾糖、グルコース修飾糖、ガラクトース修飾糖、グルコサミン修飾糖、スクロース修飾糖、キシロース修飾糖、リボース修飾糖、フルクトース修飾糖またはグリセルアルデヒド修飾糖を含む、実施形態１３３に記載の方法。
１３５
前記糖修飾糖が多糖修飾糖を含む、実施形態１２４から１３４のいずれか一項に記載の方法。
１３６
前記多糖修飾糖が、アニオン性多糖修飾糖、マルトース修飾糖、還元多糖修飾糖、またはそれらの組合せを含む、実施形態１３５に記載の方法。
１３７
前記アニオン性多糖修飾糖が、アルジネート修飾糖、カルボキシメチル化セルロース修飾糖、ヒアルロン酸修飾糖、ペクチン修飾糖、プルラン修飾糖、デンプン修飾糖またはキサンタンガム修飾糖を含む、実施形態１３６に記載の方法。
１３８
前記還元多糖修飾糖が、マルトデキストリン修飾糖またはセロビオース修飾糖を含む、実施形態１３６または実施形態１３７に記載の方法。
１３９
前記還元多糖修飾糖がカチオン性脂質付加物を含む、実施形態１３６から１３８のいずれか一項に記載の方法。
１４０
前記フェノール修飾糖が、クロロゲン酸修飾糖、フェルラ酸修飾糖、コーヒー酸修飾糖、没食子酸修飾糖、またはそれらの組合せを含む、実施形態１２７から１３９のいずれか一項に記載の方法。
１４１
前記核酸分子が、ＭＹＯＤ１、ＭＹＯＧ、ＭＹＦ５、ＭＹＦ６、ＰＡＸ３、ＰＡＸ７、ＰＰＡＲＹ、アディポネクチン、ＦＡＴＰ１～６、ＦＡＢＰ４、ＧＬＵＴ４、レプチン、ＡｄｉｐｏＲ１～２、ＣＤ１３７、それらの断片、またはそれらのバリアントをコードする、実施形態１２４から１４０のいずれか一項に記載の方法。
１４２
前記核酸分子がモノシストロン性である、実施形態１２４から１４１のいずれか一項に記載の方法。
１４３
前記核酸分子がポリシストロン性である、実施形態１２４から１４１のいずれか一項に記載の方法。
１４４
前記組成物が、マイクロリボ核酸（ｍｉＲＮＡ）またはサイレンシングリボ核酸（ｓｉＲＮＡ）をさらに含む、実施形態１２４から１４３のいずれか一項に記載の方法。
１４５
前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡが、前記細胞の多能性の低減を容易にするポリヌクレオチド配列を含む、実施形態１４４に記載の方法。
１４６
前記細胞の多能性における前記低減が、前記細胞の前記分化を容易にする、実施形態１４５に記載の方法。
１４７
前記ポリヌクレオチド配列が、ＰＯＵＦ５１（ＯＣＴ３／４）、ＫＬＦ４もしくはＳＯＸ２、またはそれらの相補配列を含むポリヌクレオチド配列を含む、実施形態１４６に記載の方法。
１４８
前記核酸分子が、第１の核酸分子および第２の核酸分子を含み、前記第１の核酸分子が、前記ｍＲＮＡまたは前記ｓａＲＮＡであり、前記第２の核酸が、前記ｍｉＲＮＡまたは前記ｓｉＲＮＡである、実施形態１４４から１４７のいずれか一項に記載の方法。
１４９
前記細胞内での前記タンパク質発現における前記変化が、前記細胞の分化を容易にする、実施形態９２から１４８のいずれか一項に記載の方法。
１５０
前記組成物が、脂質、アニオン性ポリマー、またはそれらの組合せをさらに含む、実施形態９２から１４９のいずれか一項に記載の方法。
１５１
前記糖が、水性溶液中または中性溶液中でカチオン性であるように構成されている、実施形態９２から１５０のいずれか一項に記載の方法。
１５２
前記糖のカチオン性部分のカチオン性電荷が、前記糖１グラム当たり少なくとも約０．５ｍ当量（ｍ当量／ｇ）の塩基性基を含む、実施形態９２から１５１のいずれか一項に記載の方法。
１５３
前記糖の前記カチオン性部分の前記カチオン性電荷が、最大で約２０ｍ当量／ｇを含む、実施形態９２から１５２のいずれか一項に記載の方法。
１５４
前記糖が、少なくとも約２０キロダルトン（ｋＤａ）の平均分子質量を含む、実施形態９２から１５３のいずれか一項に記載の方法。
１５５
前記糖が、最大で約２０００ｋＤａの平均分子質量を含む、実施形態９２から１５４のいずれか一項に記載の方法。
１５６
前記糖が多糖を含む、実施形態９２から１５５のいずれか一項に記載の方法。
１５７
前記糖および前記核酸分子が、互いに自己アセンブルするように構成されている、実施形態９２から１５６のいずれか一項に記載の方法。
１５８
前記糖および前記核酸分子が、ポリプレックスを形成するように構成されている、実施形態９２から１５７のいずれか一項に記載の方法。
１５９
前記核酸分子が、前記ポリプレックスの表面またはその近傍にある、実施形態１５８に記載の方法。
１６０
前記核酸分子が、前記ポリプレックス内にカプセル封入される、実施形態１５８に記載の方法。
１６１
前記ポリプレックスが、規則的な形状、不規則な形状または分岐状である、実施形態１５８から１６０のいずれか一項に記載の方法。
１６２
前記ポリプレックスが、球状または直鎖状である、実施形態１５８から１６０のいずれか一項に記載の方法。
１６３
前記ポリプレックスの見掛けの直径が、動的光散乱（ＤＬＳ）または顕微鏡によって測定した場合に、少なくとも約５ナノメートル（ｎｍ）である、実施形態１５８から１６２のいずれか一項に記載の方法。
１６４
前記ポリプレックスの見掛けの直径が、前記ＤＬＳまたは前記顕微鏡によって測定した場合に、最大で約５０００ｎｍである、実施形態１５８から１６３のいずれか一項に記載の方法。
１６５
前記ポリプレックスが、ナノ粒子をさらに含む、実施形態１５８から１６４のいずれか一項に記載の方法。
１６６
前記核酸分子がＲＮＡ調節エレメントを含む、実施形態９２から１６５のいずれか一項に記載の方法。
１６７
前記ＲＮＡ調節エレメントが、転写調節エレメント、共転写調節エレメント、転写後調節エレメント、翻訳調節エレメント、またはそれらの任意の組合せを含む、実施形態１６６に記載の方法。
１６８
前記ＲＮＡ調節エレメントが、５’－キャップ、５’－非翻訳領域（ＵＴＲ）、３’－ＵＴＲ、ポリＡテイル修飾、またはそれらの任意の組合せを含む、実施形態１６６に記載の方法。
１６９
前記糖が、前記核酸分子を安定化するように構成されている、実施形態９２から１６８のいずれか一項に記載の方法。
１７０
前記糖が、前記核酸分子の分解を阻害または低減するように構成されている、実施形態９２から１６９のいずれか一項に記載の方法。
１７１
前記糖が、前記核酸分子のヌクレアーゼ分解を阻害または低減するように構成されている、実施形態９２から１７０のいずれか一項に記載の方法。
１７２
前記核酸分子が化学的修飾を含む、実施形態９２から１７１のいずれか一項に記載の方法。
１７３
前記核酸分子がアンロックド核酸を含む、実施形態９２から１７２のいずれか一項に記載の方法。
１７４
前記核酸分子が、少なくとも２つの型の核酸を含む、実施形態９２から１７３のいずれか一項に記載の方法。
１７５
前記細胞が、哺乳動物細胞、鳥類細胞、魚類細胞、軟体動物細胞または両生類細胞を含む、実施形態９２から１７４のいずれか一項に記載の方法。
１７６
前記哺乳動物細胞が、ブタ細胞、ウシ細胞、スイギュウ類細胞、ヒツジ細胞、ヤギ細胞、シカ類細胞、バイソン類細胞、ラクダ類細胞、アカシカ類細胞またはウサギ細胞を含む、実施形態１７５に記載の方法。
１７７
前記哺乳動物細胞が前記ブタ細胞を含む、実施形態１７６に記載の方法。
１７８
前記ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、前記ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比が、少なくとも約１である、実施形態９２から１７７のいずれか一項に記載の方法。
１７９
前記ポリプレックスのポリカチオンアミノ基の、前記ポリプレックスの核酸リン酸基に対するモル比が、最大で約６０である、実施形態９２から１７８のいずれか一項に記載の方法。
１８０
前記組成物が、前記核酸、前記ポリマー性材料および前記脂質を含み、前記ポリマー性材料の前記核酸に対する第１の質量比が、１：１以上であり、前記脂質の前記ポリマー性材料に対する第２の質量比が、１：１以上である、実施形態９２から１７９のいずれか一項に記載の方法。
１８１
前記第１の質量比が２：１以上であり、前記第２の質量比が２：１以上である、実施形態１８０に記載の方法。
１８２
前記第１の質量比が１００：１以上である、実施形態１８１に記載の方法。
１８３
前記接触させるステップにおける前記核酸分子および前記細胞の比が、１００００細胞当たり少なくとも約０．００１ｎｇである、実施形態９２から１８２のいずれか一項に記載の方法。
１８４
前記接触させるステップにおける前記核酸分子および前記細胞の比が、１００００細胞当たり少なくとも約０．０１ｎｇである、実施形態１８３に記載の方法。
１８５
前記接触させるステップにおける前記核酸分子および前記細胞の比が、１００００細胞当たり少なくとも約０．１ｎｇである、実施形態１８４に記載の方法。
１８６
前記細胞内でのタンパク質発現の前記変化が、前記細胞内の前記核酸分子によってコードされる転写物の増加した発現を含む、実施形態９２から１８５のいずれか一項に記載の方法。
１８７
前記細胞内の前記核酸分子によってコードされる前記転写物が、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＱＲＴ－ＰＣＲ）によって測定した場合に、（１）前記糖と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；（２）前記核酸分子と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；または（３）それらの組合せよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、５０％、１００％、１５０％、２倍、５倍、１０倍、１００倍または１０００倍高い、実施形態１８６に記載の方法。
１８８
前記細胞内でのタンパク質発現の前記変化が、前記細胞内の前記核酸分子によってコードされない転写物の増加した発現を含む、実施形態９２から１８５のいずれか一項に記載の方法。
１８９
前記細胞内の前記核酸分子によってコードされない前記転写物が、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＱＲＴ－ＰＣＲ）によって測定した場合に、（１）前記糖と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；（２）前記核酸分子と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；または（３）それらの組合せよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、５０％、１００％、１５０％、２倍、５倍、１０倍、１００倍または１０００倍高い、実施形態１８８に記載の方法。
１９０
前記細胞内でのタンパク質発現の前記変化が、前記細胞内の前記核酸分子によってコードされない転写物の減少した発現を含む、実施形態９２から１８５のいずれか一項に記載の方法。
１９１
前記細胞内の前記核酸分子によってコードされない前記転写物が、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ＱＲＴ－ＰＣＲ）によって測定した場合に、（１）前記糖と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；（２）前記核酸分子と接触されていない細胞内の前記転写物のレベル；または（３）それらの組合せよりも、少なくとも約１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％ ５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または９９％低い、実施形態１８８に記載の方法。
１９２
実施形態９２から１９１のいずれか一項に記載の方法によって調製された食用製品。
１９３
実施形態９２から１９１のいずれか一項に記載の方法によって調製された医薬品活性成分。
１９４
実施形態９２から１９１のいずれか一項に記載の方法によって調製された組織。
【0294】
本開示の好ましい実施形態が本明細書で示され記載されてきたが、かかる実施形態が例としてのみ提供されていることは、当業者に明らかであり得る。本開示が本明細書内に提供される具体的な例によって限定されることは意図しない。本開示は、上述の明細書を参照して記載されてきたが、本明細書の実施形態の記載および実例は、限定的な意味で解釈されることを意味しない。多数のバリエーション、変化および置換が、本開示から逸脱することなしに、当業者に想起され得る。さらに、本開示の全ての態様が、種々の条件および変数に依存する本明細書に示される具体的な描写にも、構成にも相対的割合にも限定されないことが理解されるべきである。本明細書に記載される本開示の実施形態に対する種々の代替法が、本開示を実施する際に用いられ得ることが理解され得る。したがって、本開示は、任意のかかる代替法、修飾、バリエーションまたは等価物もまたカバーするものとすることが企図される。以下の特許請求の範囲が本開示の範囲を規定すること、ならびにこれらの特許請求の範囲内の方法および構造ならびにそれらの等価物がそれによりカバーされることが意図される。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【国際調査報告】