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特表2024-540924（Ｓ）－１－（１－アクリロイルピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－５，６，７，８，９，１０－ヘキサヒドロシクロヘプタ［ｂ］インドール－４－カルボキサミド、並びに関連の結晶形態、組成物、及びその方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-11-06
(54)【発明の名称】（Ｓ）－１－（１－アクリロイルピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－５，６，７，８，９，１０－ヘキサヒドロシクロヘプタ［ｂ］インドール－４－カルボキサミド、並びに関連の結晶形態、組成物、及びその方法
(51)【国際特許分類】
C07D 401/04 20060101AFI20241029BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20241029BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20241029BHJP
A61K 31/454 20060101ALI20241029BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20241029BHJP
A61K 9/48 20060101ALI20241029BHJP
A61K 9/06 20060101ALI20241029BHJP
A61K 47/10 20170101ALI20241029BHJP
A61K 47/14 20170101ALI20241029BHJP
A61K 47/22 20060101ALI20241029BHJP
【ＦＩ】
C07D401/04
A61P35/00
A61P43/00 111
A61K31/454
A61K45/00
A61K9/48
A61K9/06
A61K47/10
A61K47/14
A61K47/22
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024523549
(86)(22)【出願日】2022-10-18
(85)【翻訳文提出日】2024-06-18
(86)【国際出願番号】 US2022047050
(87)【国際公開番号】W WO2023069458
(87)【国際公開日】2023-04-27
(31)【優先権主張番号】63/257,509
(32)【優先日】2021-10-19
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/393,163
(32)【優先日】2022-07-28
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＬＡＢＲＡＳＯＬ
２．ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ
(71)【出願人】
【識別番号】519051621
【氏名又は名称】ジービー００５， インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110000855
【氏名又は名称】弁理士法人浅村特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】チャン、ベイリ
(72)【発明者】
【氏名】アル － アクラビ、ファフミ
【テーマコード（参考）】
4C076
4C084
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076AA09
4C076AA53
4C076BB01
4C076CC27
4C076DD37
4C076DD46
4C076DD59
4C076EE23
4C076FF70
4C084AA19
4C084MA02
4C084MA28
4C084MA37
4C084MA52
4C084NA03
4C084ZB26
4C084ZC20
4C084ZC41
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086BC21
4C086GA15
4C086MA01
4C086MA02
4C086MA03
4C086MA04
4C086MA05
4C086MA28
4C086MA37
4C086MA52
4C086NA03
4C086ZB26
4C086ZC20
4C086ZC41
(57)【要約】
（Ｓ）－１－（１－アクリロイルピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－５，６，７，８，９，１０－ヘキサヒドロシクロヘプタ［ｂ］インドール－４－カルボキサミドの結晶形態が提供される。（Ｓ）－１－（１－アクリロイルピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－５，６，７，８，９，１０－ヘキサヒドロシクロヘプタ［ｂ］インドール－４－カルボキサミドを含有する医薬組成物、並びにそれらの調製及びキナーゼ全般のモジュレートにおける使用、及び具体的に癌の処置のための関連方法も提供される。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
Ｎ－｛３－［（１Ｓ）－１－｛［６－（３，４－ジメトキシフェニル）－ピラジン－２－イル］アミノ｝エチル］フェニル｝－５－メチルピリジン－３－カルボキサミドの固体結晶形態。
【請求項2】
結晶形態が形態Ｉである、請求項１に記載の固体結晶形態。
【請求項3】
９．２０１１±０．２、１３．９６２０±０．２、及び１６．１５０６±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる、請求項２に記載の固体結晶形態。
【請求項4】
２０．４５１６±０．２、８．０４１６±０．２、及び１３．３４８５±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる、請求項２に記載の固体結晶形態。
【請求項5】
実質的に図１に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる、請求項３に記載の固体結晶形態。
【請求項6】
結晶形態が実質的に純粋な形態Ｉである、請求項２に記載の固体結晶形態。
【請求項7】
結晶形態が形態ＩＩである、請求項１に記載の固体結晶形態。
【請求項8】
４．２７５９±０．２、８．５７９４±０．２、及び２４．２４１１±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる、請求項７に記載の固体結晶形態。
【請求項9】
２０．９８±０．２、１２．０７±０．２、１５．７８±０．２、及び２４．２６±０．２０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる、請求項７に記載の固体結晶形態。
【請求項10】
実質的に図３に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる、請求項７から９までのいずれか一項に記載の固体結晶形態。
【請求項11】
結晶形態が実質的に純粋な形態ＩＩである、請求項７に記載の固体結晶形態。
【請求項12】
結晶形態が形態ＩＩＩである、請求項１に記載の固体結晶形態。
【請求項13】
１０．２５４３±０．２、１３．５００６±０．２、及び１３．９６９１±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる、請求項１２に記載の固体結晶形態。
【請求項14】
２２．２２±０．２、１９．２７±０．２、２０．８１±０．２、及び８．７０±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる、請求項１２に記載の固体結晶形態。
【請求項15】
実質的に図５に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる、請求項１２から１４までのいずれか一項に記載の固体結晶形態。
【請求項16】
結晶形態が実質的に純粋な形態ＩＩＩである、請求項１２に記載の固体結晶形態。
【請求項17】
結晶形態が形態ＩＶである、請求項１に記載の固体結晶形態。
【請求項18】
８．６０２７±０．２、１１．９５９８±０．２、１３．９３６０±０．２、２１．５８４５±０．２、及び２５．４０９０±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる、請求項１７に記載の固体結晶形態。
【請求項19】
１９．７４３８±０．２、８．３６９４±０．２、及び１８．８５３８±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる、請求項１７に記載の固体結晶形態。
【請求項20】
実質的に図９に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる、請求項１７から１９までのいずれか一項に記載の固体結晶形態。
【請求項21】
結晶形態が実質的に純粋な形態ＩＶである、請求項１７に記載の固体結晶形態。
【請求項22】
結晶形態が形態Ｖである、請求項１に記載の固体結晶形態。
【請求項23】
６．４０１４±０．２、９．１９０８±０．２、１４．８１４３±０．２、１７．５５３９±０．２、２１．５８９１±０．２、２３．９８８３±０．２、及び２５．５８０７±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる、請求項２２に記載の固体結晶形態。
【請求項24】
８．４９±０．２、６．１１±０．２、２０．９５±０．２、及び２１．１７±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる、請求項２２に記載の固体結晶形態。
【請求項25】
実質的に図１１に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる、請求項２２から２４までのいずれか一項に記載の固体結晶形態。
【請求項26】
結晶形態が実質的に純粋な形態Ｖである、請求項２２に記載の固体結晶形態。
【請求項27】
結晶形態が形態ＶＩである、請求項１に記載の固体結晶形態。
【請求項28】
６．８３３９±０．２、１０．１４０４±０．２、１５．６７８４±０．２、１６．１２１７±０．２、１７．５９４０±０．２、２０．６７６５±０．２、２５．５１２２±０．２、及び２６．７３６３±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる、請求項２７に記載の固体結晶形態。
【請求項29】
２３．９３±０．２、１３．０５±０．２、１８．３６±０．２、及び８．５４±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる、請求項２７に記載の固体結晶形態。
【請求項30】
実質的に図１３に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる、請求項２７から２９までのいずれか一項に記載の固体結晶形態。
【請求項31】
結晶形態が実質的に純粋な形態ＶＩである、請求項２７に記載の固体結晶形態。
【請求項32】
結晶形態が形態ＶＩＩである、請求項１に記載の固体結晶形態。
【請求項33】
６．７２７、８．４７９９、９．４８５４、１２．０１６１、１７．１９０１、１８．８４０７、１９．０６９１、１９．７２８５及び２０．２２６８±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる、請求項３２に記載の固体結晶形態。
【請求項34】
実質的に図１５に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる、請求項３２から３３までのいずれか一項に記載の固体結晶形態。
【請求項35】
結晶形態が実質的に純粋な形態ＶＩＩである、請求項３２に記載の固体結晶形態。
【請求項36】
請求項１から３５までのいずれか一項に記載の固体結晶形態を含む医薬組成物。
【請求項37】
追加の治療的活性な化合物を含む、請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項38】
経口投与のために製剤化される、請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項39】
ゲルカプセル剤の形態である、請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項40】
ポリエチレングリコールをさらに含む、請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項41】
ポリエチレングリコールモノラウラートをさらに含む、請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項42】
ビタミンＥをさらに含む、請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項43】
ブチル化ヒドロキシトルエンをさらに含む、請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項44】
１～２５ｍｇの（Ｓ）－１－（１－アクリロイルピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－５，６，７，８，９，１０－ヘキサヒドロシクロヘプタ［ｂ］インドール－４－カルボキサミドを含む医薬組成物。
【請求項45】
２ｍｇ、又は５ｍｇ、又は１０ｍｇ、又は２０ｍｇ、又は２５ｍｇの（Ｓ）－１－（１－アクリロイルピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－５，６，７，８，９，１０－ヘキサヒドロシクロヘプタ［ｂ］インドール－４－カルボキサミドを含む、請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項46】
以下：１～２５ｍｇの（Ｓ）－１－（１－アクリロイルピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－５，６，７，８，９，１０－ヘキサヒドロシクロ－ヘプタ［ｂ］インドール－４－カルボキサミド；
ポリエチレングリコール；
プロピレングリコールモノラウラート；
ビタミンＥ；及び
ブチル化ヒドロキシトルエン
を含む医薬組成物。
【請求項47】
キナーゼ阻害によってモジュレートされる疾患又は状態を処置するための方法であって、請求項１から３５までのいずれか一項に記載の固体結晶形態、又は請求項３６から４６までのいずれか一項に記載の医薬組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む、方法。
【請求項48】
キナーゼがチロシンキナーゼである、請求項４７に記載の方法。
【請求項49】
チロシンキナーゼがブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）である、請求項４８に記載の方法。
【請求項50】
疾患又は状態が癌である、請求項４７に記載の方法。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、（Ｓ）－１－（１－アクリロイルピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－５，６，７，８，９，１０－ヘキサヒドロシクロヘプタ［ｂ］インドール－４－カルボキサミドの結晶形態、並びに（Ｓ）－１－（１－アクリロイルピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－５，６，７，８，９，１０－ヘキサヒドロシクロヘプタ［ｂ］インドール－４－カルボキサミドを含む生成物、並びにそれらの使用及び調製の関連方法に関する。
【背景技術】
【0002】
タンパク質キナーゼは、真核細胞における細胞内及び膜貫通シグナル伝達タンパク質の大きいグループである。これらの酵素は、ＡＴＰから標的タンパク質の特定のアミノ酸残基への末端（ガンマ）ホスファートの移動に関与する。標的タンパク質における特定のアミノ酸残基のリン酸化は、それらの活性をモジュレートすることができ、細胞のシグナル伝達及び代謝における甚大な変化に至る。タンパク質キナーゼは、細胞膜、細胞質ゾル及び小器官、例えば、核に見出すことができ、代謝、細胞成長及び分化を含めた複数の細胞機能、細胞シグナル伝達、免疫応答のモジュレーション、並びに細胞死を媒介することに関与する。セリンキナーゼは、標的タンパク質におけるセリン又はスレオニン残基を特異的にリン酸化する。同様に、チロシン受容体キナーゼを含めたチロシンキナーゼは、標的タンパク質におけるチロシン残基をリン酸化する。チロシンキナーゼファミリーとしては、以下が挙げられる：ＴＥＣ、ＳＲＣ、ＡＢＬ、ＪＡＫ、ＣＳＫ、ＦＡＫ、ＳＹＫ、ＦＥＲ、ＡＣＫ、並びにＥＲＢＢ、ＦＧＦＲ、ＶＥＧＦＲ、ＲＥＴ及びＥＰＨを含めた受容体チロシンキナーゼサブファミリー。受容体チロシンキナーゼスーパーファミリーのサブクラスＩとしては、ＥＲＢＢ受容体が挙げられ、以下：ＥｒｂＢ１（上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）とも呼ばれる）、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３及びＥｒｂＢ４、の４つのメンバーを含む。
【0003】
キナーゼは、健康及び疾患に関連する鍵となる生物学的プロセスに対して制御を発揮する。さらに、様々なタンパク質キナーゼの異常活性化又は過剰発現は、良性及び悪性の増殖によって特徴付けられる複数の疾患及び障害、並びに免疫系の不適切な活性化に起因する疾患の機序に関わる。したがって、選択のキナーゼ又はキナーゼファミリーの阻害剤は、限定されないが以下：固形腫瘍、血液悪性腫瘍、血栓、関節炎、グラフト対宿主病、ループス・エリテマトーデス、乾癬、大腸炎、回腸炎、多発性硬化症、ぶどう膜炎、冠状動脈脈管症、全身性硬化症、アテローム動脈硬化症、喘息、移植拒絶反応、アレルギー、虚血、皮膚筋炎、天疱瘡など、を含む、癌、血管疾患、自己免疫疾患、及び炎症状態の処置において有用だと考えられる。
【0004】
Ｔｅｃキナーゼは、限られているわけではないが造血起源の細胞中に優勢に発現される非受容体チロシンキナーゼのファミリーである。Ｔｅｃファミリーとしては、ＴＥＣ、ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）、誘発性Ｔ細胞キナーゼ（ＩＴＫ）、静止リンパ球キナーゼ（ＲＬＫ／チロシンタンパク質キナーゼにはＴＸＫ）、及び骨髄発現キナーゼ（ＢＭＸ／ＥＴＫ）が挙げられる。
【0005】
ＢＴＫは、Ｂ細胞受容体シグナル伝達並びにＢ細胞発達及び活性化の調節において重要である。ヒトにおいてＢＴＫをコード化する遺伝子の突然変異は、Ｘ連鎖無ガンマグロブリン血症に至り、これは、Ｂ細胞の成熟の欠損、免疫グロブリン及び末梢Ｂ細胞のレベルの減少、並びにＴ細胞非依存性免疫応答の低下を含めて、免疫機能の低減によって特徴付けられる。ＢＴＫは、Ｓｒｃ－ファミリーキナーゼによって活性化され、ＰＬＣガンマをリン酸化し、Ｂ細胞機能及び生存に対する効果に至る。追加として、ＢＴＫは、肥満細胞、マクロファージ及び好中球の細胞機能にとって重要であり、ＢＴＫ阻害が、炎症、骨障害、及びアレルギー性疾患を含めた、これらの及び関連の細胞によって媒介される疾患の処置において有効であることを示す。ＢＴＫ阻害はリンパ腫細胞の生存においても重要であり、ＢＴＫの阻害がリンパ腫及び他の癌の処置において有用であることを示す。依って、ＢＴＫ及び関連キナーゼの阻害剤は、抗炎症剤、並びに抗癌剤として大変興味深い。ＢＴＫは、血小板機能及び血栓形成にも重要であり、ＢＴＫ選択的阻害剤も抗血栓剤として有用であることを示す。さらに、ＢＴＫは、インフラマソーム活性化のために必要とされ、ＢＴＫの阻害は、脳卒中、痛風、２型糖尿病、肥満誘発インスリン抵抗性、アテローム動脈硬化症及びマックル・ウエルズ症候群を含めて、インフラマソーム関連障害の処置において使用することができる。加えて、ＢＴＫはＨＩＶ感染Ｔ細胞中に発現され、ＢＴＫ阻害剤を用いる処置は、感染細胞をアポトーシス死に対して感作させ、ウイルス生成の減少をもたらす。したがって、ＢＴＫ阻害剤は、ＨＩＶ－ＡＩＤＳ及び他のウイルス感染症の処置において有用だと考えられる。
【0006】
以降「化合物１」と称される（Ｓ）－１－（１－アクリロイルピペリジン－３－イル）－２－フルオロ－５，６，７，８，９，１０－ヘキサヒドロシクロヘプタ［ｂ］インドール－４－カルボキサミドは、ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）の経口的に利用可能な、選択的な、強力な阻害剤であり、それによって、ＢＴＫ推進疾患における潜在的な処置選択肢を提供する。ＢＴＫ阻害に対する化合物１の効力は、無細胞酵素アッセイ及び全血機能アッセイの両方におけるｎＭ範囲にある。それは中枢神経系（ＣＮＳ）浸透剤であり、末梢組織及びＣＮＳ組織の両方において急速なＢＴＫ不活性化動態を実証する。カイノームスキャンにおいて、化合物１は、３４９のキナーゼに対して高いキナーゼ選択性を呈し、２つのキナーゼ（ＴＥＣ及びＴＸＫ）のみが１μＭで＞５０％阻害を実証する。
【0007】
化合物１の非晶質形態（即ち、化合物５～６）は、米国特許出願公開番号ＵＳ２０２２／０００９９２０として公開されている米国特許出願１７／２２５，９８４に記載されている（参照によりそれ全体で本明細書に組み込まれる）。化合物１は、化学式Ｃ２２Ｈ２６ＦＮ３Ｏ２、３８３．４７、の分子量及び以下：
の構造を有する。
化合物１の臨床的な有望性を考慮すると、経口投与に適当な薬学的薬物生成物の文脈において化合物１の新たな改善及び／又は増強された形態、並びに化合物１を含む組成物及びそれの製造及び使用に関連する方法の必要性がある。本発明は、以下の詳細な記載及び付着されている図面によって証明される通り、これらの及び関連の必要性を満たす。
【化1】
の構造を有する。
化合物１の臨床的な有望性を考慮すると、経口投与に適当な薬学的薬物生成物の文脈において化合物１の新たな改善及び／又は増強された形態、並びに化合物１を含む組成物及びそれの製造及び使用に関連する方法の必要性がある。本発明は、以下の詳細な記載及び付着されている図面によって証明される通り、これらの及び関連の必要性を満たす。
【0008】
固体薬物形態は、非晶質状態又は結晶状態のいずれかで存在することができる。結晶形態の場合において、分子は３次元格子部位に位置付けされる。化合物が溶液又はスラリーから再結晶化する場合、それは「多形」と称される特性である異なる空間格子配置で結晶化し、異なる結晶形態は、「多形体（複数）」と、又は個々に「多形体（単数）」と称される。所与の物質の異なる多形体は、溶解度及び溶解、真密度、結晶形状、圧密挙動、流動特性、及び／又は固体状態安定性など１つ又は複数の物理的特性に関して互いに異なることがある。２つの（又はそれ以上の）多形形態で存在する化学物質の場合において、不安定な形態（単数又は複数）は、一般に、十分な時間期間の後に所与の温度でより熱力学的に安定な形態（単数又は複数）に変換する。この転換が急速でない場合、熱力学的に不安定な形態は、「準安定な」形態と称される。一般に、安定な形態は、最低溶解度、及び最大化学的安定性を呈する。しかしながら、準安定な形態は、市販形態においてそれの使用を可能にするための正常な貯蔵条件下で十分な化学的及び物理的な安定性を呈することができる。この場合において、準安定な形態は、安定性が低くても、増強された溶解度又はより良好な経口生物学的利用能など、安定な形態のものよりも望ましい特性を呈することがある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0009】
したがって、一実施形態において、化合物１の新規な固体結晶形態が提供される。より特定の実施形態において、新規な固体結晶形態は、化合物１の６つの異なる多形体であり、これらは本明細書において「形態Ｉ」、「形態ＩＩ」、「形態ＩＩＩ」、「形態ＩＶ」、「形態Ｖ」、「形態ＶＩ」、及び「形態ＶＩＩ」と称される。
【0010】
ある実施形態において、化合物１の結晶形態が提供され、結晶形態は形態Ｉであり、さらなる実施形態において、実質的に純粋な形態Ｉである。形態Ｉは、（例えば）Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）及びそれによって発生される特徴的なディフラクトグラムを含めて、本明細書において開示されている様々な分析技術によって特徴付けることができる。
【0011】
ある実施形態において、化合物１の結晶形態が提供され、結晶形態は形態ＩＩであり、さらなる実施形態において、実質的に純粋な形態ＩＩである。形態ＩＩは、（例えば）Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）及びそれによって発生される特徴的なディフラクトグラムを含めて、本明細書において開示されている様々な分析技術によって特徴付けることができる。
【0012】
ある実施形態において、化合物１の結晶形態が提供され、結晶形態は形態ＩＩＩであり、さらなる実施形態において、実質的に純粋な形態ＩＩＩである。形態ＩＩＩは、（例えば）Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）及びそれによって発生される特徴的なディフラクトグラムを含めて、本明細書において開示されている様々な分析技術によって特徴付けることができる。
【0013】
ある実施形態において、化合物１の結晶形態が提供され、結晶形態は形態ＩＶであり、さらなる実施形態において、実質的に純粋な形態ＩＶである。形態ＩＶは、（例えば）Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）及びそれによって発生される特徴的なディフラクトグラムを含めて、本明細書において開示されている様々な分析技術によって特徴付けることができる。
【0014】
ある実施形態において、化合物１の結晶形態が提供され、結晶形態は形態Ｖであり、さらなる実施形態において、実質的に純粋な形態Ｖである。形態Ｖは、（例えば）Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）及びそれによって発生される特徴的なディフラクトグラムを含めて、本明細書において開示されている様々な分析技術によって特徴付けることができる。
【0015】
ある実施形態において、化合物１の結晶形態が提供され、結晶形態は形態ＶＩであり、さらなる実施形態において、実質的に純粋な形態ＶＩである。形態ＶＩは、（例えば）Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）及びそれによって発生される特徴的なディフラクトグラムを含めて、本明細書において開示されている様々な分析技術によって特徴付けることができる。
【0016】
ある実施形態において、化合物１の結晶形態が提供され、結晶形態は形態ＶＩＩであり、さらなる実施形態において、実質的に純粋な形態ＶＩＩである。形態ＶＩＩは、（例えば）Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）及びそれによって発生される特徴的なディフラクトグラムを含めて、本明細書において開示されている様々な分析技術によって特徴付けることができる。
【0017】
他の実施形態において、化合物１の結晶形態が提供され、結晶形態は、２つ以上の形態の混合物である。下記に定義されている通り、混合物は、１つの結晶形態が他の結晶形態（単数）又は形態（複数）の５～９５重量％を範囲とする比で存在する場合に提供される（この範囲の上又は下の比は、実質的に純粋な結晶形態の特徴である）。
【0018】
他の実施形態において、化合物１の固体結晶形態を調製するためのプロセスが提供される。
【0019】
他の実施形態において、１種又は複数の薬学的に許容される担体との組合せにおいて化合物１を含む医薬組成物が提供される。こうした組成物は、多様な異なる形態で製剤化することができる。例えば、該組成物は、経口投与のために製剤化することができる。
【0020】
ある実施形態において、医薬組成物は、追加の治療的活性な薬剤（即ち、化合物１に加えて）を含むことができる、又はこうした追加の治療的活性な薬剤は、別々の医薬組成物として存在し、化合物１と同時投与することができる（例えば、同じ時に）。
【0021】
さらなる実施形態において、追加の治療的活性な薬剤は、副腎皮質ステロイド、副腎皮質ステロイド剤、免疫抑制剤及び／又は抗炎症剤である。より特定の実施形態において、免疫抑制剤は、インターフェロンアルファ、インターフェロンガンマ、シクロホスファミド、タクロリムス、ミコフェノール酸モフェチル、メトトレキセート、ダプソーン、スルファサラジン、アザチオプリン、抗ＣＤ２０剤（リツキシマブ、オファツムマブ、オビヌツズマブ、若しくはベルツズマブ、又はそのバイオシミラーバージョンなど）、抗ＴＮＦアルファ剤（エタネルセプト、インフリキシマブ、ゴリムマブ、アダリムマブ、若しくはセルトリズマブ・ペゴル、又はそのバイオシミラーバージョンなど）、リガンド又はそれの受容体に向けての抗ＩＬ６剤（トシリズマブ、サリルマブ、オロキズマブ、エルシリルマブ、又はシルツキシマブなど）、リガンド又はそれの受容体に対する抗ＩＬ１７剤（セクキヌマブ、ウステキヌマブ、ブロダルマブ、又はイキセキズマブなど）、リガンド又はそれの受容体に対する抗ＩＬ１剤（リロナセプト、カナキヌマブ、又はアナキンラなど）、リガンド又はそれの受容体に対する抗ＩＬ２剤（バシリキシマブ又はダクリズマブなど）、アレファセプトなどの抗ＣＤ２剤、ムロモナブ－ｃｄ３などの抗ＣＤ３薬剤、アバタセプト又はベラタセプトなどの抗ＣＤ８０／８６剤、フィンゴリモドなどの抗スフィンゴシン－１－ホスファート受容体剤、エクリズマブなどの抗Ｃ５剤、ナタリズマブなどの抗インテグリンアルファ４剤、ベドリズマブなどの抗α４β７剤、シロリムス又はエバロリムスなどの抗ｍＴＯＲ剤、タクロリムスなどの抗カルシニューリン剤、抗ＢＡＦＦ／ＢｌｙＳ剤（ベリムマブ、ＶＡＹ７３６、又はブリシビモドなど）、レフルノミド及びテリフルノミドから選択される。
【0022】
さらなる実施形態において、追加の治療的活性な薬剤は、リツキシマブ、オファツムマブ、オビヌツズマブ、ベルツズマブ、又はそのバイオシミラーバージョンなどの免疫抑制剤である。
【0023】
さらなる実施形態において、追加の治療的活性な薬剤は、サリドマイド及びそれの類似体（レナリドミド、ポマリドミド及びイベルドミド）などの免疫調節薬イミド（ＩＭｉＤ）、抗ＰＤ１、抗ＣＴＬＡ４、抗Ｔｉｍ３及び抗Ｌａｇ３モノクローナル抗体などのチェックポイント遮断剤、イネビリズマブ及びタファシタマブなどの抗ＣＤ１９モノクローナル抗体、ＩＲＡＫ阻害剤、メトトレキセート及びテモゾロマイドなどの化学療法剤、又は抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞治療である。
【0024】
他の実施形態において、医薬組成物はポリエチレングリコールを含む。別の実施形態において、医薬組成物は、ポリエチレングリコール及び／又はプロピレングリコールモノラウラートを含む。他の実施形態において、医薬組成物はビタミンＥを含む。他の実施形態において、医薬組成物はブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）を含む。一部の実施形態において、医薬組成物は１～２５ｍｇの化合物１を含む。
【0025】
別の実施形態において、キナーゼ阻害によってモジュレートされる疾患又は状態を処置するための方法であって、化合物１の有効量、又はそれを含む医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、方法が提供される。より特定の実施形態において、キナーゼは、（以下に限定されないが）ＢＴＫなどのチロシンキナーゼである。
【0026】
ある実施形態において、疾患又は状態は、癌、自己免疫疾患、炎症性疾患、又は血栓塞栓性疾患である。
一実施形態において、医薬の製造における化合物１又は化合物１の結晶形態、若しくはその医薬組成物の使用が提供される。
一実施形態において、医薬の製造における化合物１又は化合物１の結晶形態、若しくはその医薬組成物の使用が提供される。
【図面の簡単な説明】
【0027】
【図1】形態Ｉ ＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図2】形態Ｉ ＴＧＡ及びＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図3】形態ＩＩ ＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図4】形態ＩＩ ＴＧＡ及びＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図5】形態ＩＩＩ ＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図6】形態ＩＩＩ ＴＧＡ及びＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図7】形態ＩＩＩ ＤＶＳプロットを示す図である。
【図8】ＤＶＳ試験の前後の形態ＩＩＩ ＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図9】形態ＩＶ ＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図10】形態ＩＶ ＴＧＡ及びＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図11】８５℃及び１５５℃に加熱された形態Ｖ ＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図12】形態Ｖ ＴＧＡ及びＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図13】形態ＶＩ ＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図14】形態ＶＩ ＴＧＡ及びＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図15】形態ＶＩＩ ＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図16】形態ＶＩＩ ＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図17】形態ＶＩＩ ＴＧＡサーモグラムを示す図である。
【図18】形態Ｉ～ＶＩＩのＸＲＰＤパターンのオーバーレイを示す図である。
【図19】提案された結晶形態変換を示す図である。
【図20】形態ＩＩＩ ＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図21】形態ＩＩＩ ＴＧＡ及びＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図22】形態ＩＩＩ ＸＲＰＤパターン安定性分析を示す図である。
【図23】形態ＩＩＩ単結晶Ｘ線構造を示す図である。
【図24】製造プロセス概要を示す図である。
【図25】血漿プロファイル平均±ＳＤを示す図である。
【図26】用量によるＣＳＦ対非結合血漿比を示す図である。
【図27】単一及び複数の用量血漿プロファイル（平均±ＳＤ）を示す図である。
【図28】１５ｍｇの絶食、中脂肪食、及び高脂肪食の血漿プロファイル（平均±ＳＤ）を示す図である。
【図29】単独で及びイトラコナゾールとの化合物１の血漿プロファイル（平均±ＳＤ）を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【0028】
本開示によると、化合物１の新規な固体結晶形態が提供される。より特定の実施形態において、新規な固体結晶形態は、化合物１の７つの異なる多形体；すなわち、形態Ｉ、形態ＩＩ、形態ＩＩＩ、形態ＩＶ、形態Ｖ、形態ＶＩ又は形態ＶＩＩである。これらの形態は、結晶格子の構造における化合物１の非晶質形態と異なり、各形態は、特有のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン及び示差走査熱量計（ＤＳＣ）サーモグラムを与える。
【0029】
本明細書で使用される場合、「非晶質」は、反復結晶格子の非存在に起因する良く秩序だった回折線の欠如を指す。
【0030】
一実施形態において、本開示は、９．２０１１、１３．９６２０及び１６．１５０６±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる形態Ｉを提供する。別の実施形態において、実質的に図１に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる形態Ｉが提供される。
【0031】
一実施形態において、本開示は、４．２７５９、８．５７９４及び２４．２４１１±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる形態ＩＩを提供する。別の実施形態において、実質的に図３に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる形態ＩＩが提供される。
【0032】
一実施形態において、本開示は、１０．２５４３、１３．５００６及び１３．９６９１±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる形態ＩＩＩを提供する。別の実施形態において、実質的に図５に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる形態ＩＩＩが提供される。
【0033】
一実施形態において、本開示は、８．６０２７、１１．９５９８、１３．９３６０、２１．５８４５及び２５．４０９０±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる形態ＩＶを提供する。別の実施形態において、実質的に図９に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる形態ＩＶが提供される。
【0034】
一実施形態において、本開示は、６．４０１４、９．１９０８、１４．８１４３、１７．５５３９、２１．５８９１、２３．９８８３及び２５．５８０７±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる形態Ｖを提供する。別の実施形態において、実質的に図１１に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる形態Ｖが提供される。
【0035】
一実施形態において、本開示は、６．８３３９、１０．１４０４、１５．６７８４、１６．１２１７、１７．５９４０、２０．６７６５、２５．５１２２及び２６．７３６３±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる形態ＶＩを提供する。別の実施形態において、実質的に図１３に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる形態ＶＩが提供される。
【0036】
一実施形態において、本開示は、６．７２７、８．４７９９、９．４８５４、１２．０１６１、１７．１９０１、１８．８４０７、１９．０６９１、１９．７２８５及び２０．２２６８±０．２度２シータにピークを有するＸＲＰＤパターンによって特徴付けられる形態ＶＩＩを提供する。別の実施形態において、実質的に図１５に示されている通りのＸＲＰＤパターンによってさらに特徴付けられる形態ＶＩＩが提供される。
【0037】
この発明の実践において、単一の多形体（即ち、形態Ｉ、形態ＩＩ、形態ＩＩＩ、形態ＩＶ、形態Ｖ、形態ＶＩ又は形態ＶＩＩ）は、実質的に純粋な形態で利用することができる、又は１つ若しくは複数の多形体の混合物として利用することができる。
【0038】
さらなる実施形態において、化合物１の固体結晶形態；すなわち、形態Ｉ、形態ＩＩ、形態ＩＩＩ、形態ＩＶ、形態Ｖ、形態ＶＩ又は形態ＶＩＩの有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む、キナーゼ阻害によってモジュレートされる疾患又は状態を処置するための方法が提供される。
【0039】
一実施形態において、キナーゼはチロシンキナーゼであり、より特定の実施形態において、ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）である。
【0040】
一実施形態において、キナーゼ阻害によってモジュレートされる疾患又は状態は、癌である。
【0041】
本発明は、いかなる方法でも限定すると解釈されるべきでない以下の例によってさらに例示される。
【実施例】
【0042】
多形スクリーニング
スラリー、冷却及び蒸発結晶化、抗溶媒沈殿、熱的及び機械的処理を含めて、様々な結晶化方法を使用して、化合物１の多形スクリーニングを行った。
スラリー、冷却及び蒸発結晶化、抗溶媒沈殿、熱的及び機械的処理を含めて、様々な結晶化方法を使用して、化合物１の多形スクリーニングを行った。
【0043】
（例１）
分析方法
（例１Ａ）
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）
Ｘ線回折計（ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ Ｅｍｐｙｒｅａｎ）を用いて、ＸＲＰＤパターンを同定した。該システムは、ＰＩＸｃｅｌ１Ｄ検出器が備えられていた。試料を０．０１３°２θのステップサイズにて３から４０°２θで走査した。管電圧及び電流は、それぞれ４５ＫＶ及び４０ｍＡであった。（形態ＶＩＩは、０．０１１°２θのステップサイズにて４から４０°２θで走査し、管電圧及び電流は、それぞれ４０ＫＶ及び１５ｍＡであった。）
分析方法
（例１Ａ）
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）
Ｘ線回折計（ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ Ｅｍｐｙｒｅａｎ）を用いて、ＸＲＰＤパターンを同定した。該システムは、ＰＩＸｃｅｌ１Ｄ検出器が備えられていた。試料を０．０１３°２θのステップサイズにて３から４０°２θで走査した。管電圧及び電流は、それぞれ４５ＫＶ及び４０ｍＡであった。（形態ＶＩＩは、０．０１１°２θのステップサイズにて４から４０°２θで走査し、管電圧及び電流は、それぞれ４０ＫＶ及び１５ｍＡであった。）
【0044】
（例１Ｂ）
示差走査熱量計（ＤＳＣ）
Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＤＳＣ ２５０（ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、ＵＳ）を使用して、ＤＳＣを行った（形態ＶＩＩには、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＤＳＣ Ｑ２０００を使用した）。試料をアルミニウムピンホール気密パンに入れ、重量を正確に記録した。次いで、試料を２５℃から最終温度に１０℃／ｍｉｎの速度で加熱した。
示差走査熱量計（ＤＳＣ）
Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＤＳＣ ２５０（ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、ＵＳ）を使用して、ＤＳＣを行った（形態ＶＩＩには、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＤＳＣ Ｑ２０００を使用した）。試料をアルミニウムピンホール気密パンに入れ、重量を正確に記録した。次いで、試料を２５℃から最終温度に１０℃／ｍｉｎの速度で加熱した。
【0045】
（例１Ｃ）
熱重量分析（ＴＧＡ）
ＴＧＡをＤｉｓｃｏｖｅｒｙ ＴＧＡ ５５（ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、ＵＳ）上で実施した（形態ＶＩＩには、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＴＧＡ Ｑ５００を使用した）。試料を開口風袋重量アルミニウムパンに入れ、自動秤量し、ＴＧＡ炉に挿入した。試料を室温（ＲＴ）から最終温度に１０℃／ｍｉｎの速度で加熱した。
熱重量分析（ＴＧＡ）
ＴＧＡをＤｉｓｃｏｖｅｒｙ ＴＧＡ ５５（ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、ＵＳ）上で実施した（形態ＶＩＩには、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＴＧＡ Ｑ５００を使用した）。試料を開口風袋重量アルミニウムパンに入れ、自動秤量し、ＴＧＡ炉に挿入した。試料を室温（ＲＴ）から最終温度に１０℃／ｍｉｎの速度で加熱した。
【0046】
（例１Ｄ）
動的蒸気収着（ＤＶＳ）
水分収着／脱着データをＶｓｏｒｐ Ｄｙｎａｍｉｃ Ｍｏｉｓｔｕｒｅ Ｓｏｒｐｔｉｏｎ Ａｎａｌｙｚｅｒ（ＰｒｏＵｍｉｄ ＧｍｂＨ＆Ｃｏ．ＫＧ、Ｇｅｒｍａｎｙ）上で収集した。試料を風袋重量試料チャンバーに入れ、自動秤量した。
動的蒸気収着（ＤＶＳ）
水分収着／脱着データをＶｓｏｒｐ Ｄｙｎａｍｉｃ Ｍｏｉｓｔｕｒｅ Ｓｏｒｐｔｉｏｎ Ａｎａｌｙｚｅｒ（ＰｒｏＵｍｉｄ ＧｍｂＨ＆Ｃｏ．ＫＧ、Ｇｅｒｍａｎｙ）上で収集した。試料を風袋重量試料チャンバーに入れ、自動秤量した。
【表A】
【0047】
（例１Ｅ）
プロトン核磁気共鳴（１Ｈ－ＮＭＲ）
溶媒としてｄ６－ＤＭＳＯを使用する、オートサンプラー（ＳａｍｐｌｅＸｐｒｅｓｓ ６０）が備えられているＢｒｕｋｅｒ ＡＶＡＮＣＥ ＩＩＩ ＨＤ ３００又は４００を使用して、１Ｈ－ＮＭＲを行った。
プロトン核磁気共鳴（１Ｈ－ＮＭＲ）
溶媒としてｄ６－ＤＭＳＯを使用する、オートサンプラー（ＳａｍｐｌｅＸｐｒｅｓｓ ６０）が備えられているＢｒｕｋｅｒ ＡＶＡＮＣＥ ＩＩＩ ＨＤ ３００又は４００を使用して、１Ｈ－ＮＭＲを行った。
【0048】
（例１Ｆ）
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）
Ａｇｉｌｅｎｔ ＨＰＬＣ １２６０シリーズ機器を用いて、ＨＰＬＣ分析を行った。
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）
Ａｇｉｌｅｎｔ ＨＰＬＣ １２６０シリーズ機器を用いて、ＨＰＬＣ分析を行った。
【表B】
【0049】
（例２）
出発材料の特徴付け
薄黄色の固体（２．６６ｇ、９９．７８％の純度）としての化合物１の単一バッチを、多形スクリーンのための出発材料として使用した。材料は、低い結晶化度及び粒子サイズ１０～２０μｍを有するほとんどロッド様の結晶であった。ＸＲＰＤ特徴付けは、材料が形態Ｉ及び１７０℃に加熱した後に形態Ｉに変換される形態ＩＩの混合物であることを明らかにした。
出発材料の特徴付け
薄黄色の固体（２．６６ｇ、９９．７８％の純度）としての化合物１の単一バッチを、多形スクリーンのための出発材料として使用した。材料は、低い結晶化度及び粒子サイズ１０～２０μｍを有するほとんどロッド様の結晶であった。ＸＲＰＤ特徴付けは、材料が形態Ｉ及び１７０℃に加熱した後に形態Ｉに変換される形態ＩＩの混合物であることを明らかにした。
【0050】
（例３）
多形スクリーン
結晶性材料を生成するための様々な技法を評価した。
（例３Ａ）
蒸発結晶化
蒸発結晶化研究をＴＨＦ、メタノール、アセトン、イソプロパノール及びジクロロメタン（即ち、溶解度＞３ｍｇ／ｍＬを提供する溶媒）において、速い及び遅い蒸発速度下で行った：
速い：室温（約２５℃）で窒素パージすることによって乾燥させた溶液
遅い：ドラフトチャンバー内にて室温（約２５℃）で蒸発乾固させた溶液
溶解度をＨＰＬＣによって測定し、残留固体を、蒸発の後に、ＸＲＰＤによって分析した。全ての場合において、非晶質材料のみが得られた。
多形スクリーン
結晶性材料を生成するための様々な技法を評価した。
（例３Ａ）
蒸発結晶化
蒸発結晶化研究をＴＨＦ、メタノール、アセトン、イソプロパノール及びジクロロメタン（即ち、溶解度＞３ｍｇ／ｍＬを提供する溶媒）において、速い及び遅い蒸発速度下で行った：
速い：室温（約２５℃）で窒素パージすることによって乾燥させた溶液
遅い：ドラフトチャンバー内にて室温（約２５℃）で蒸発乾固させた溶液
溶解度をＨＰＬＣによって測定し、残留固体を、蒸発の後に、ＸＲＰＤによって分析した。全ての場合において、非晶質材料のみが得られた。
【0051】
（例３Ｂ）
スラリー
出発材料を１３種の単一溶媒に添加し、結果として得られた懸濁液を３日間室温（約２４℃）又は５０℃で撹拌した。得られた任意の固体を特徴付け、結果は表１に要約されている（負荷濃度はｍｇ／ｍＬである）。形態ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及びＶを示されている通りに単離した。
スラリー
出発材料を１３種の単一溶媒に添加し、結果として得られた懸濁液を３日間室温（約２４℃）又は５０℃で撹拌した。得られた任意の固体を特徴付け、結果は表１に要約されている（負荷濃度はｍｇ／ｍＬである）。形態ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ及びＶを示されている通りに単離した。
【表1】
【0052】
（例３Ｃ）
冷却結晶化
出発材料（約２０ｍｇ）を秤量してバイアルに入れ、溶媒を添加し、ほぼ清澄飽和溶液又は懸濁液をもたらし、これらを５０℃で撹拌した。これらを次いで室温に冷却した（約２４℃、徐冷）、又は濾液を冷蔵庫に直接入れた（２～８℃、急速冷却）。固体をメタノール及びエタノールから得て；これらの固体の冷却は形態ＩＩをもたらした。全ての他の状態は溶液をもたらした。結果は溶媒（表２）に表されている。
冷却結晶化
出発材料（約２０ｍｇ）を秤量してバイアルに入れ、溶媒を添加し、ほぼ清澄飽和溶液又は懸濁液をもたらし、これらを５０℃で撹拌した。これらを次いで室温に冷却した（約２４℃、徐冷）、又は濾液を冷蔵庫に直接入れた（２～８℃、急速冷却）。固体をメタノール及びエタノールから得て；これらの固体の冷却は形態ＩＩをもたらした。全ての他の状態は溶液をもたらした。結果は溶媒（表２）に表されている。
【表2】
【0053】
（例３Ｄ）
抗溶媒沈殿
溶媒／抗溶媒実験を１２種のシステムで行った。高い溶解度を提供する溶媒としては、ＤＭＳＯ、ＴＨＡ、アセトン、酢酸エチル、２－ブタノン及びＩＰＡが挙げられる。低い溶解度を提供する溶媒としては、ＩＰＡｃ、ＡＣＮ、ＭＴＢＥが挙げられ、ヘプタンを抗溶媒として選択した。出発材料（約２０ｍｇ）を溶媒中に溶解させることで、飽和溶液を調製した。濾過の後に、室温（約２５℃）で濁りが観察される又は１０Ｖに到達するまで、抗溶媒を２０～１００μＬのアリコートで濾液に徐々に添加した。沈殿が生じたならば、生成物を適切に特徴付け、結果は表３に示されている。
抗溶媒沈殿
溶媒／抗溶媒実験を１２種のシステムで行った。高い溶解度を提供する溶媒としては、ＤＭＳＯ、ＴＨＡ、アセトン、酢酸エチル、２－ブタノン及びＩＰＡが挙げられる。低い溶解度を提供する溶媒としては、ＩＰＡｃ、ＡＣＮ、ＭＴＢＥが挙げられ、ヘプタンを抗溶媒として選択した。出発材料（約２０ｍｇ）を溶媒中に溶解させることで、飽和溶液を調製した。濾過の後に、室温（約２５℃）で濁りが観察される又は１０Ｖに到達するまで、抗溶媒を２０～１００μＬのアリコートで濾液に徐々に添加した。沈殿が生じたならば、生成物を適切に特徴付け、結果は表３に示されている。
【0054】
形態ＩがＤＭＳＯ／水（１：１）、ＥｔＯｃ／ヘプタン（１／３）及びＩＰＡ／水（１／３）から得られた。
【0055】
形態ＩＩがアセトン／水（１／２）から得られた。
【0056】
形態ＶＩが２－ブタノン／水（１／２）から得られた。残りの状態は、溶液として残るか、分析のための不十分な固体を提供するかのいずれかであった。
【表3】
【0057】
（例４）
同定された多形形態の特徴付け
７つの結晶形態を同定し、形態Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ及びＶＩＩとして割り当てた。
形態Ｉ
高い結晶化度及び微粒子サイズを有する不規則な形状化結晶である形態Ｉをヘプタンスラリーから、又は出発材料を約１７０℃に加熱することによって得た。形態Ｉ ＸＲＰＤは図１に示されており、ＸＲＰＤトレースからの有意なピークは、表４において下記にリストされている：
同定された多形形態の特徴付け
７つの結晶形態を同定し、形態Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ及びＶＩＩとして割り当てた。
形態Ｉ
高い結晶化度及び微粒子サイズを有する不規則な形状化結晶である形態Ｉをヘプタンスラリーから、又は出発材料を約１７０℃に加熱することによって得た。形態Ｉ ＸＲＰＤは図１に示されており、ＸＲＰＤトレースからの有意なピークは、表４において下記にリストされている：
【表4-1】
【表4-2】
【表4-3】
【0058】
ＴＧＡプロファイルにおいて１６５℃の前に０．６％の重量損失があった（図２）。
【0059】
形態ＩＩ
形態ＩＩは、メタノール又はエタノールからスラリー又は冷却することによって得られる高い結晶化度を有する不規則な結晶である。形態ＩＩのＸＲＰＤは図３に示されており、ＸＲＰＤトレースからの有意なピークは、表５において下記にリストされている：
形態ＩＩは、メタノール又はエタノールからスラリー又は冷却することによって得られる高い結晶化度を有する不規則な結晶である。形態ＩＩのＸＲＰＤは図３に示されており、ＸＲＰＤトレースからの有意なピークは、表５において下記にリストされている：
【表5-1】
【表5-2】
【0060】
複数の熱事象がＤＳＣ曲線において観察された（図４）。第１の吸熱ピークは、形態ＩＩの脱水／脱溶媒和であり、第２の吸熱ピークは、形態Ｉの溶融であった。１４０℃の前におよそ４．０％の重量損失がＴＧＡプロファイルにおいて観察され、１．７％エタノールがＮＭＲによって検出された。
【0061】
形態ＩＩＩ
形態ＩＩＩは、単一溶媒におけるスラリーから得られる高い結晶化度を有する不規則な結晶である。形態ＩＩＩのＸＲＰＤは図５に示されており、ＸＲＰＤトレースからの有意なピークは、表６において下記にリストされている：
形態ＩＩＩは、単一溶媒におけるスラリーから得られる高い結晶化度を有する不規則な結晶である。形態ＩＩＩのＸＲＰＤは図５に示されており、ＸＲＰＤトレースからの有意なピークは、表６において下記にリストされている：
【表6-1】
【表6-2】
【0062】
１つの溶融ピークがＤＳＣ曲線において観察され、ＴＧＡプロファイルにおいてＲＴから１６５℃の間で明白な重量損失はなく（図６）、形態ＩＩＩが無水物形態であることを示した。形態Ｉ及び形態ＩＩＩの競合スラリーの結果は、形態ＩＩＩがＲＴから８０℃で最も安定な形態であることを示す。ＤＶＳデータは、形態ＩＩＩが非吸湿性（最大９０％ＲＨまで＜０．５％の重量増加、図７を参照されたい）であるとともに結晶形態がＤＶＳ試験後も未変化のままであることを示した（図８）。
【0063】
形態ＩＶ
形態ＩＶは、ＭＴＢＥスラリーからのみ得られる高い結晶化度を有する不規則な結晶である。形態ＩＶのＸＲＰＤは図９に示されており、ＸＲＰＤトレースからの有意なピークは、表７において下記にリストされている：
形態ＩＶは、ＭＴＢＥスラリーからのみ得られる高い結晶化度を有する不規則な結晶である。形態ＩＶのＸＲＰＤは図９に示されており、ＸＲＰＤトレースからの有意なピークは、表７において下記にリストされている：
【表7-1】
【表7-2】
【0064】
形態ＩＶのＤＳＣ（図１０）は、２００℃の前に２つの吸熱ピークを示し、それぞれ、形態ＩＶの脱溶媒和及び形態Ｉの溶融に対応する。１０５～１７０℃の間でおよそ９．５％の重量損失がＴＧＡプロファイルにおいて観察された。９．８％のＭＴＢＥがＮＭＲによって検出された。
【0065】
形態Ｖ
形態Ｖは、トルエンスラリーからのみ得られる高い結晶化度を有する不規則な結晶である。形態ＶのＸＲＰＤは図１１に示されており、ＸＲＰＤトレースからの有意なピークは、表８において下記にリストされている：
形態Ｖは、トルエンスラリーからのみ得られる高い結晶化度を有する不規則な結晶である。形態ＶのＸＲＰＤは図１１に示されており、ＸＲＰＤトレースからの有意なピークは、表８において下記にリストされている：
【表8-1】
【表8-2】
【表8-3】
【0066】
形態Ｖを８５℃及び１５５℃で加熱し、結果として得られた固体形態をＰＸＲＤによって分析した（図１１、上部のトレース）。８５℃に加熱された形態Ｖは、未変化のままであり；１５５℃に加熱することは、非晶質形態の形成をもたらす。ＤＳＣは、１５０℃の前に２つの吸熱ピークを示した（図１２）。ＴＧＡプロファイルは、９０～１７０℃の間でおよそ１．０％の重量損失を示した。１．０％トルエンがＮＭＲによって検出された。
【0067】
形態ＶＩ
形態ＶＩは、ＭＥＫ／Ｈ２Ｏ抗溶媒結晶化から得られる高い結晶化度を有する不規則な結晶である。形態ＶＩのＸＲＰＤは図１３に示されており、ＸＲＰＤトレースからの有意なピークは、表９において下記にリストされている：
形態ＶＩは、ＭＥＫ／Ｈ２Ｏ抗溶媒結晶化から得られる高い結晶化度を有する不規則な結晶である。形態ＶＩのＸＲＰＤは図１３に示されており、ＸＲＰＤトレースからの有意なピークは、表９において下記にリストされている：
【表9-1】
【表9-2】
【表9-3】
【0068】
ＤＳＣは、１２０℃の前に１３％の重量損失でブロード吸熱ピークを示した（図１４）。１２％のＭＥＫがＮＭＲによって検出された。
【0069】
形態ＶＩＩ
形態ＶＩＩが、ヘプタン／２－メチルテトラヒドロフラン（２－ＭｅＴＨＦ）再結晶化を介する化合物１の単離中に観察され、２－ＭｅＴＨＦ溶媒和物であると決定した。より具体的には、化合物１の溶液を２－ＭｅＴＨＦ（３体積）中に６０℃で溶解させた。ヘプタン抗溶媒（４．１体積）を次いで１時間かけて添加し、温度を６０℃で維持した。混合物を次いで２０℃に冷却し、４時間の間２０℃でかき混ぜた。結果として得られた固体を濾過によって単離し、ウェットケーキをヘプタン（１．４体積）で洗浄し、３０分間乾燥させ、次いで、真空オーブン中にて５５℃で少なくとも１２時間の間乾燥させた。
形態ＶＩＩが、ヘプタン／２－メチルテトラヒドロフラン（２－ＭｅＴＨＦ）再結晶化を介する化合物１の単離中に観察され、２－ＭｅＴＨＦ溶媒和物であると決定した。より具体的には、化合物１の溶液を２－ＭｅＴＨＦ（３体積）中に６０℃で溶解させた。ヘプタン抗溶媒（４．１体積）を次いで１時間かけて添加し、温度を６０℃で維持した。混合物を次いで２０℃に冷却し、４時間の間２０℃でかき混ぜた。結果として得られた固体を濾過によって単離し、ウェットケーキをヘプタン（１．４体積）で洗浄し、３０分間乾燥させ、次いで、真空オーブン中にて５５℃で少なくとも１２時間の間乾燥させた。
【0070】
【0071】
形態ＶＩＩのＤＳＣ及びＴＧＡ（それぞれ、図１６及び１７）は、１２２～１２４℃で１つの吸熱ピークを示し、形態ＶＩＩの脱溶媒和に対応する。１０２～１０５℃の間でおよそ６．６％の重量損失が、ＴＧＡプロファイルにおいて観察された。９．９％の２－メチル－ＴＨＧがＮＭＲによって検出された。
【0072】
同定された固体形態の要約
７つの新たな結晶形態を同定し、形態Ｉ～ＶＩＩとして割り当てた。図１８は、全ての７つの形態のＸＲＰＤオーバーレイを示す。形態Ｉ及びＩＩＩは無水物であり；形態ＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、及びＶＩＩは溶媒和物又は水和物である。形態ＩＩ及び形態ＩＶは、加熱することで形態Ｉに変換し、表１１を参照されたい。表１２は、様々な形態についての特徴付けデータを示している。
７つの新たな結晶形態を同定し、形態Ｉ～ＶＩＩとして割り当てた。図１８は、全ての７つの形態のＸＲＰＤオーバーレイを示す。形態Ｉ及びＩＩＩは無水物であり；形態ＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、及びＶＩＩは溶媒和物又は水和物である。形態ＩＩ及び形態ＩＶは、加熱することで形態Ｉに変換し、表１１を参照されたい。表１２は、様々な形態についての特徴付けデータを示している。
【表11】
【表12】
【0073】
相互変換研究
等量の形態Ｉ及び形態ＩＩＩを水及びヘプタン中で混合することでスラリーを形成し、室温（約２５℃）又は８０℃で撹拌した。残留固体を単離し、特徴付け、全て形態ＩＩＩへの変換を示した。したがって、形態ＩＩＩは形態Ｉよりも安定と考えられる。７つの結晶形態の提案された変換マップは図１９に示されている。
等量の形態Ｉ及び形態ＩＩＩを水及びヘプタン中で混合することでスラリーを形成し、室温（約２５℃）又は８０℃で撹拌した。残留固体を単離し、特徴付け、全て形態ＩＩＩへの変換を示した。したがって、形態ＩＩＩは形態Ｉよりも安定と考えられる。７つの結晶形態の提案された変換マップは図１９に示されている。
【0074】
（例５）
形態ＩＩＩの調製＆特徴付け
（例５Ａ）
形態ＩＩＩの１２０ｍｇ調製物
酢酸イソプロピル（２．５ｍＬ）中の出発材料（１５０ｍｇ）の懸濁液を室温で３日間撹拌した。結果として生じた固体を濾過によって単離することで、不規則な形状化結晶が提供された（１２０ｍｇ；８０％の収率）。参照形態ＩＩＩ材料と比較した場合の、結果として生じた材料のＸＲＰＤ分析は、材料が形態ＩＩＩであることを裏付けている。この形態ＩＩＩ材料を、下に記載されている研究のために使用した。
形態ＩＩＩの調製＆特徴付け
（例５Ａ）
形態ＩＩＩの１２０ｍｇ調製物
酢酸イソプロピル（２．５ｍＬ）中の出発材料（１５０ｍｇ）の懸濁液を室温で３日間撹拌した。結果として生じた固体を濾過によって単離することで、不規則な形状化結晶が提供された（１２０ｍｇ；８０％の収率）。参照形態ＩＩＩ材料と比較した場合の、結果として生じた材料のＸＲＰＤ分析は、材料が形態ＩＩＩであることを裏付けている。この形態ＩＩＩ材料を、下に記載されている研究のために使用した。
【0075】
（例５Ｂ）
ＤＳＣ＆ＴＧＡ分析
以下の通りにＤＳＣを使用して、化合物１、形態ＩＩＩの熱処理を行った：
２５℃で平衡化；
傾斜１０℃／ｍｉｎから１９０℃；
－４０℃で平衡化；及び
傾斜５℃／ｍｉｎから３００℃。
ＤＳＣ＆ＴＧＡ分析
以下の通りにＤＳＣを使用して、化合物１、形態ＩＩＩの熱処理を行った：
２５℃で平衡化；
傾斜１０℃／ｍｉｎから１９０℃；
－４０℃で平衡化；及び
傾斜５℃／ｍｉｎから３００℃。
【0076】
図２０は、結果として生じたＤＳＣ曲線を示しており、下の曲線は、傾斜１０℃／ｍｉｎから１９０℃であり；中間の曲線は、－４０℃で平衡化であり、上の曲線は、傾斜５℃／ｍｉｎから３００℃である。ガラス転移温度は１１０℃である。１７５．８℃の開始温度での吸熱ピークが検出された。
【0077】
図２１は、形態ＩＩＩのＴＧＡ及びＤＳＣサーモグラムのオーバーレイを示している。溶融の前の明白な重量損失は、ＴＧＡプロファイルにおいて観察されなかった。
【0078】
（例５Ｃ）
固体状態安定性
化合物１、形態ＩＩＩの固体状態安定性を二重に（試料１及び試料２）７日間、下記の条件下で検査し、結果として生じた固体をＸＲＰＤによって分析した：
４０℃／７５％相対湿度（開口）；及び
６０℃（蓋をした）。
固体状態安定性
化合物１、形態ＩＩＩの固体状態安定性を二重に（試料１及び試料２）７日間、下記の条件下で検査し、結果として生じた固体をＸＲＰＤによって分析した：
４０℃／７５％相対湿度（開口）；及び
６０℃（蓋をした）。
【0079】
図２２は、出発材料のＸＲＰＤパターン及び上記の条件への曝露後に単離された材料を示しており、形態ＩＩＩが、判定された条件下で化学的及び物理的の両方で安定であったことを示している。
【0080】
化合物１、形態ＩＩＩの固体状態安定性をその上、下記の条件下で３カ月間検査した：
４０℃／７５％相対湿度；及び
２５℃／６０％相対湿度
形態ＩＩＩは、判定された条件下で安定であった。
４０℃／７５％相対湿度；及び
２５℃／６０％相対湿度
形態ＩＩＩは、判定された条件下で安定であった。
【0081】
（例５Ｄ）
溶解度試験
試料の視覚判定を介する溶媒添加方法を使用して、初期の固体のおよその溶解度を決定した。結果は表１３に要約されている。出発材料は、ＤＭＳＯ中に溶けやすく（＞２５０ｍｇ／ｍＬ）ＴＨＦ及びジオキサン中にやや溶けにくく（＞２０ｍｇ／ｍＬ）、ＭＴＢＥ、水、及びｎ－ヘプタン中で非常に低い溶解度（＜０．６ｍｇ／ｍＬ）を有する。
値は、最も近い整数に四捨五入され、溶解が観察されなかったならば「＜」として、溶解が第１のアリコートの添加後に生じたならば「＞」として報告されている。
溶解度試験
試料の視覚判定を介する溶媒添加方法を使用して、初期の固体のおよその溶解度を決定した。結果は表１３に要約されている。出発材料は、ＤＭＳＯ中に溶けやすく（＞２５０ｍｇ／ｍＬ）ＴＨＦ及びジオキサン中にやや溶けにくく（＞２０ｍｇ／ｍＬ）、ＭＴＢＥ、水、及びｎ－ヘプタン中で非常に低い溶解度（＜０．６ｍｇ／ｍＬ）を有する。
【表13】
値は、最も近い整数に四捨五入され、溶解が観察されなかったならば「＜」として、溶解が第１のアリコートの添加後に生じたならば「＞」として報告されている。
【0082】
形態ＩＩＩは非吸湿性であり、４０℃／７５％湿度及び６０℃で１週間、化学的に及び物理的に安定であった。
【0083】
形態ＩＩＩは粉砕後に未変化のままであったが、結晶化度はわずかに減少した。
【0084】
形態ＩＩＩは、ＩＰＡＣ、ＩＰＡ及びＣＡＮなど、単一溶媒からのスラリーによって調製することができる。
【0085】
化合物１、形態ＩＩＩの特徴付け
以下の研究（例６～１０）の各々において、出発材料は化合物１（遊離形態、塩でない）形態ＩＩＩであった。材料は、凝集を有する非吸湿性の不規則な形状化結晶を含む薄黄色の固体であった。例１に記載されているのと同じ分析方法を用いた。
以下の研究（例６～１０）の各々において、出発材料は化合物１（遊離形態、塩でない）形態ＩＩＩであった。材料は、凝集を有する非吸湿性の不規則な形状化結晶を含む薄黄色の固体であった。例１に記載されているのと同じ分析方法を用いた。
【0086】
（例６）
ｐＫａ決定
Ｓｉｒｉｕｓ Ｔ３滴定器を使用して、ｐＫａを判定した。酸性及び塩基性部位は非常に弱く、Ｓｉｒｉｕｓ Ｔ３によって検出不可能であった。平均ｐＫａの個々の結果（２５℃で行われる漸増について）は以下の通りであった：
滴定イオン強度 カイ二乗
ポイント３－５１０．１６８ ０．６２５４
ポイント５２－１０２ ０．１８３０．８０２４
ポイント１０３－１５３ ０．１９６０．６０５１
ｐＫａ決定
Ｓｉｒｉｕｓ Ｔ３滴定器を使用して、ｐＫａを判定した。酸性及び塩基性部位は非常に弱く、Ｓｉｒｉｕｓ Ｔ３によって検出不可能であった。平均ｐＫａの個々の結果（２５℃で行われる漸増について）は以下の通りであった：
滴定イオン強度 カイ二乗
ポイント３－５１０．１６８ ０．６２５４
ポイント５２－１０２ ０．１８３０．８０２４
ポイント１０３－１５３ ０．１９６０．６０５１
【0087】
（例７）
ビヒクルにおける溶解度試験
ビヒクル溶液を以下の通りに調製した：
ビヒクルにおける溶解度試験
ビヒクル溶液を以下の通りに調製した：
【表C】
【0088】
（例８Ａ）
溶解度試験
室温で２４時間及び７２時間の間、並びに４５℃で４時間及び２４時間の間、溶解度を決定した。約３０／１００ｍｇの化合物１をビヒクル（２ｍＬ）に添加し、混合物を室温で２４時間又は７２時間の間撹拌した。懸濁液を濾過又は遠心分離し、濾液をＨＰＬＣによって分析した。溶解度及びｐＨ結果は、表１４及び１５に表されている。２４時間後に、高い溶解度（＞５０ｍｇ／ｍＬ）Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＨＳ １５、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ ４４／１４、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ ４８／１６及びＰＥＧ４００／ＴＰＧＳ（３／１）において観察された。７２時間後に、高い溶解度（＞５０ｍｇ／ｍＬ）がＰＧ、ＰＥＧ４００、Ｃａｐｒｙｏｌ ９０、及びＬａｂｒａｓｏｌにおいて観察された。
溶解度試験
室温で２４時間及び７２時間の間、並びに４５℃で４時間及び２４時間の間、溶解度を決定した。約３０／１００ｍｇの化合物１をビヒクル（２ｍＬ）に添加し、混合物を室温で２４時間又は７２時間の間撹拌した。懸濁液を濾過又は遠心分離し、濾液をＨＰＬＣによって分析した。溶解度及びｐＨ結果は、表１４及び１５に表されている。２４時間後に、高い溶解度（＞５０ｍｇ／ｍＬ）Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＨＳ １５、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ ４４／１４、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ ４８／１６及びＰＥＧ４００／ＴＰＧＳ（３／１）において観察された。７２時間後に、高い溶解度（＞５０ｍｇ／ｍＬ）がＰＧ、ＰＥＧ４００、Ｃａｐｒｙｏｌ ９０、及びＬａｂｒａｓｏｌにおいて観察された。
【表14】
【表15】
【0089】
（例８Ｂ）
さらなる溶解度試験
化合物１（約０．５ｇ）を各賦形剤に、視覚的に飽和されるまで添加した。混合を容易にするためにガラスビーズを用いる温度制御混合器上で、混合物を少なくとも４８時間の間室温（液体賦形剤）又は４０℃（半固体賦形剤）でインキュベートした。０．４５μｍのＰＶＤＦフィルターを使用して、試料を次いで遠心分離することで、液体及び固体部分を分離した。濾液中の溶解化合物の量をＨＰＬＣによって定量化した。そこで確認された任意の固体粉末のＸＲＰＤ分析は、形態の変化がなかった。溶解度結果は表１６に表されており、化合物１が、スクリーニングされた賦形剤のほとんどにおいて高い溶解度（＞３０ｍｇ／ｇ）を有していたことを示す。
さらなる溶解度試験
化合物１（約０．５ｇ）を各賦形剤に、視覚的に飽和されるまで添加した。混合を容易にするためにガラスビーズを用いる温度制御混合器上で、混合物を少なくとも４８時間の間室温（液体賦形剤）又は４０℃（半固体賦形剤）でインキュベートした。０．４５μｍのＰＶＤＦフィルターを使用して、試料を次いで遠心分離することで、液体及び固体部分を分離した。濾液中の溶解化合物の量をＨＰＬＣによって定量化した。そこで確認された任意の固体粉末のＸＲＰＤ分析は、形態の変化がなかった。溶解度結果は表１６に表されており、化合物１が、スクリーニングされた賦形剤のほとんどにおいて高い溶解度（＞３０ｍｇ／ｇ）を有していたことを示す。
【表16】
【0090】
（例９）
バイオ関連の媒体における溶解度試験
ＦａＳＳＩＦの調製
ＦａＳＳＩＦ緩衝溶液：６ｍＬの０．２Ｍ ＮａＯＨ、３８８．７ｍｇのＮａＨ２ＰＯ４、及び６０８．２ｍｇのＮａＣｌを溶解させ、水で１００ｍＬに希釈した。ｐＨは６．５１であった。ＦａＳＳＩＦ媒体：３４．５６ｍｇのＳＩＦ粉末を１５ｍＬのＦａＳＳＩＦ緩衝溶液中に溶解させた。溶液を撹拌し、周囲温度で光保護にて２時間の間平衡化した。ＳＩＦ粉末はＢｉｏｒｅｌｅｖａｎｔ．ｃｏｍから購入した。
バイオ関連の媒体における溶解度試験
ＦａＳＳＩＦの調製
ＦａＳＳＩＦ緩衝溶液：６ｍＬの０．２Ｍ ＮａＯＨ、３８８．７ｍｇのＮａＨ２ＰＯ４、及び６０８．２ｍｇのＮａＣｌを溶解させ、水で１００ｍＬに希釈した。ｐＨは６．５１であった。ＦａＳＳＩＦ媒体：３４．５６ｍｇのＳＩＦ粉末を１５ｍＬのＦａＳＳＩＦ緩衝溶液中に溶解させた。溶液を撹拌し、周囲温度で光保護にて２時間の間平衡化した。ＳＩＦ粉末はＢｉｏｒｅｌｅｖａｎｔ．ｃｏｍから購入した。
【0091】
ＦｅＳＳＩＦの調製
ＦｅＳＳＩＦ緩衝溶液：４０８．４ｍｇのＮａＯＨ、８６８．５ｍｇの酢酸、及び１．１８０２ｇのＮａＣｌを溶解させ、水で１００ｍＬに希釈した。溶液のｐＨは４．９８であった。ＦｅＳＳＩＦ媒体：１６８．４２ｍｇのＳＩＦ粉末を１５ｍＬのＦｅＳＳＩＦ緩衝溶液中に溶解させた。溶液を光から保護した。
ＦｅＳＳＩＦ緩衝溶液：４０８．４ｍｇのＮａＯＨ、８６８．５ｍｇの酢酸、及び１．１８０２ｇのＮａＣｌを溶解させ、水で１００ｍＬに希釈した。溶液のｐＨは４．９８であった。ＦｅＳＳＩＦ媒体：１６８．４２ｍｇのＳＩＦ粉末を１５ｍＬのＦｅＳＳＩＦ緩衝溶液中に溶解させた。溶液を光から保護した。
【0092】
ＦａＳＳＧＦの調製
ＦａＳＳＧＦ緩衝溶液：２２２ｍｇのＮａＣｌを水で溶解させ、次いで、１Ｎ ＨＣｌを添加することで、ｐＨを１．６に調整した。ＦａＳＳＧＦ媒体：１．２ｍｇのＳＩＦ粉末を１０ｍＬのＦａＳＳＩＦ緩衝溶液中に溶解させた。溶液を撹拌し、周囲温度で光保護にて２時間の間平衡化した。
ＦａＳＳＧＦ緩衝溶液：２２２ｍｇのＮａＣｌを水で溶解させ、次いで、１Ｎ ＨＣｌを添加することで、ｐＨを１．６に調整した。ＦａＳＳＧＦ媒体：１．２ｍｇのＳＩＦ粉末を１０ｍＬのＦａＳＳＩＦ緩衝溶液中に溶解させた。溶液を撹拌し、周囲温度で光保護にて２時間の間平衡化した。
【0093】
ＦａＳＳＩＦ－Ｖ２の調製
ＦａＳＳＩＦ－Ｖ２緩衝溶液：１５４．４ｍｇのＮａＯＨ、２４６．７ｍｇのマレイン酸及び４４５．６ｍｇのＮａＣｌを溶解させ、水で１００ｍＬに希釈した。ｐＨは６．５１であった。ＦａＳＳＩＦ－Ｖ２媒体：２８．６４ｍｇのＦａＳＳＩＦ－Ｖ２粉末（Ｂｉｏｒｅｌｅｖａｎｔ．ｃｏｍから購入した）を８ｍＬのＦａＳＳＩＦ－Ｖ２緩衝溶液中に溶解させた。溶液を撹拌し、周囲温度で光保護にて２時間の間平衡化した。
ＦａＳＳＩＦ－Ｖ２緩衝溶液：１５４．４ｍｇのＮａＯＨ、２４６．７ｍｇのマレイン酸及び４４５．６ｍｇのＮａＣｌを溶解させ、水で１００ｍＬに希釈した。ｐＨは６．５１であった。ＦａＳＳＩＦ－Ｖ２媒体：２８．６４ｍｇのＦａＳＳＩＦ－Ｖ２粉末（Ｂｉｏｒｅｌｅｖａｎｔ．ｃｏｍから購入した）を８ｍＬのＦａＳＳＩＦ－Ｖ２緩衝溶液中に溶解させた。溶液を撹拌し、周囲温度で光保護にて２時間の間平衡化した。
【0094】
ＦｅＳＳＩＦ－Ｖ２の調製
ＦｅＳＳＩＦ－Ｖ２緩衝溶液：３６３．３．４ｍｇのＮａＯＨ、７１０ｍｇのマレイン酸、及び８１４．４ｍｇのＮａＣｌを溶解させ、水で１００ｍＬに希釈した。溶液のｐＨは５．８であった。ＦｅＳＳＩＦ－Ｖ２媒体：１５６．１６ｍｇのＦｅＳＳＩＦ－Ｖ２粉末を８ｍＬのＦｅＳＳＩＦ－Ｖ２緩衝溶液中に溶解させた。溶液を光から保護した。
ＦｅＳＳＩＦ－Ｖ２緩衝溶液：３６３．３．４ｍｇのＮａＯＨ、７１０ｍｇのマレイン酸、及び８１４．４ｍｇのＮａＣｌを溶解させ、水で１００ｍＬに希釈した。溶液のｐＨは５．８であった。ＦｅＳＳＩＦ－Ｖ２媒体：１５６．１６ｍｇのＦｅＳＳＩＦ－Ｖ２粉末を８ｍＬのＦｅＳＳＩＦ－Ｖ２緩衝溶液中に溶解させた。溶液を光から保護した。
【0095】
バイオ関連の媒体における溶解度試験
溶解度を疑似胃腸液（ＦａＳＳＧＦ、ＦａＳＳＩＦ、ＦｅＳＳＩＦ、ＦａＳＳＩＦ－Ｖ２、及びＦｅＳＳＩＦ－Ｖ２）及びｐＨ６．５の緩衝液、ｐＨ５．８の緩衝液媒体中にて３７℃で０．５時間、２時間及び２４時間の間測定した。約１５ｍｇの試料を秤量して試料バイアルに入れ、次いで、３．０ｍＬのＦａＳＳＧＦ、ＦａＳＳＩＦ、ＦｅＳＳＩＦ、ＦａＳＳＩＦ－Ｖ２、ＦｅＳＳＩＦ－Ｖ２、ｐＨ６．５の緩衝液及びｐＨ５．８の緩衝液媒体（ＳＩＦ粉末のない緩衝溶液中の溶解度を比較のために行った）をそれぞれ添加した。試料を各媒体について二重に調製した。懸濁液を３７℃で最大２４時間の間振盪した。１時間、４時間及び２４時間で、懸濁液を濾過し、濾液をＨＰＬＣによって分析し、結果を表１７に表した。残留固体はＸＲＰＤ分析のために回収されたが、形態変化を示さなかった。
（例１０）
様々なＰＨでの水性媒体における溶解度試験
ｐＨ１．０の溶液の調製（０．１Ｎ ＨＣｌ）
０．８３３ｍＬの濃塩酸を水で１００ｍＬに希釈した（ｐＨ＝１．０）。
ｐＨ１．２の緩衝溶液の調製
水の適切な量を０．１Ｎ ＨＣｌに添加することで、ｐＨを１．２に調整。
ｐＨ７．４の緩衝溶液の調製
ＫＨ２ＰＯ４（１３６０．０ｍｇ）及びＮａＯＨ（３１０．０ｍｇ）を２００ｍＬの体積フラスコ中で混合する。水を添加することで、固体を溶解し、体積を希釈した。フラスコを振盪することで、良好な混合を達成した。（ｐＨ＝７．４２）。
溶解度を疑似胃腸液（ＦａＳＳＧＦ、ＦａＳＳＩＦ、ＦｅＳＳＩＦ、ＦａＳＳＩＦ－Ｖ２、及びＦｅＳＳＩＦ－Ｖ２）及びｐＨ６．５の緩衝液、ｐＨ５．８の緩衝液媒体中にて３７℃で０．５時間、２時間及び２４時間の間測定した。約１５ｍｇの試料を秤量して試料バイアルに入れ、次いで、３．０ｍＬのＦａＳＳＧＦ、ＦａＳＳＩＦ、ＦｅＳＳＩＦ、ＦａＳＳＩＦ－Ｖ２、ＦｅＳＳＩＦ－Ｖ２、ｐＨ６．５の緩衝液及びｐＨ５．８の緩衝液媒体（ＳＩＦ粉末のない緩衝溶液中の溶解度を比較のために行った）をそれぞれ添加した。試料を各媒体について二重に調製した。懸濁液を３７℃で最大２４時間の間振盪した。１時間、４時間及び２４時間で、懸濁液を濾過し、濾液をＨＰＬＣによって分析し、結果を表１７に表した。残留固体はＸＲＰＤ分析のために回収されたが、形態変化を示さなかった。
【表17】
（例１０）
様々なＰＨでの水性媒体における溶解度試験
ｐＨ１．０の溶液の調製（０．１Ｎ ＨＣｌ）
０．８３３ｍＬの濃塩酸を水で１００ｍＬに希釈した（ｐＨ＝１．０）。
ｐＨ１．２の緩衝溶液の調製
水の適切な量を０．１Ｎ ＨＣｌに添加することで、ｐＨを１．２に調整。
ｐＨ７．４の緩衝溶液の調製
ＫＨ２ＰＯ４（１３６０．０ｍｇ）及びＮａＯＨ（３１０．０ｍｇ）を２００ｍＬの体積フラスコ中で混合する。水を添加することで、固体を溶解し、体積を希釈した。フラスコを振盪することで、良好な混合を達成した。（ｐＨ＝７．４２）。
【0096】
異なるｐＨの媒体及び水における溶解度試験
溶解度をｐＨ１．０の水、ｐＨ１．２の緩衝液及びｐＨ７．４の緩衝液中にて室温及び３７℃で測定した。約１０～１５ｍｇの試料を秤量して試料バイアルに入れ、次いで、２．０／３．０ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌ溶液、ｐＨ１．２の緩衝液及びｐＨ７．４の緩衝液媒体、及び水をそれぞれ添加した。試料を各媒体について二重に実行した。懸濁液を室温又は３７℃で振盪した。４時間、２４時間、４８時間で、懸濁液を遠心分離し、濾液をＨＰＬＣによって分析し；結果を表１８に表した）。残留固体をＸＲＰＤ分析のために回収したが、形態変化は試験中に生じなかった。全ての例において、非常に低い溶解度が観察された。
溶解度をｐＨ１．０の水、ｐＨ１．２の緩衝液及びｐＨ７．４の緩衝液中にて室温及び３７℃で測定した。約１０～１５ｍｇの試料を秤量して試料バイアルに入れ、次いで、２．０／３．０ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌ溶液、ｐＨ１．２の緩衝液及びｐＨ７．４の緩衝液媒体、及び水をそれぞれ添加した。試料を各媒体について二重に実行した。懸濁液を室温又は３７℃で振盪した。４時間、２４時間、４８時間で、懸濁液を遠心分離し、濾液をＨＰＬＣによって分析し；結果を表１８に表した）。残留固体をＸＲＰＤ分析のために回収したが、形態変化は試験中に生じなかった。全ての例において、非常に低い溶解度が観察された。
【表18】
【0097】
（例１１）
化合物１、形態ＩＩＩの単結晶Ｘ線構造
Ｃｕ Ｋα放射（λ＝１．５４１７８Å）が備えられているＢｒｕｋｅｒ Ｓｍａｒｔ ＡＰＥＸ ＩＩ ＣＣＤ回折計上で、単結晶Ｘ線回折研究を実施した。
化合物１、形態ＩＩＩの単結晶Ｘ線構造
Ｃｕ Ｋα放射（λ＝１．５４１７８Å）が備えられているＢｒｕｋｅｒ Ｓｍａｒｔ ＡＰＥＸ ＩＩ ＣＣＤ回折計上で、単結晶Ｘ線回折研究を実施した。
【0098】
化合物１、形態ＩＩＩの結晶をＥｔＯＡｃ／ペンタンから成長させた。
【0099】
無色結晶の０．２３×０．２×０．１７ｍｍの一片を、パラトーン油を有するＣｒｙｏｌｏｏｐに載せた。Φ及びω走査を使用して１００（２）Ｋで窒素ガス流中にて、データを収集した。結晶から検出器の距離は４０ｍｍであり、曝露時間は、１．２５°の走査幅を使用してフレーム当たり２θ範囲に依存して１秒、２秒、３秒、又は５秒であった。データ収集はθにおける６７．６７９°に対して９７．７％完全であった。指数－１１＜＝ｈ＜＝１１、－１１＜＝ｋ＜＝１１、－１３＜＝ｌ＜＝１３をカバーする合計２７５９４の反射を収集した。６８５２の反射が、０．０２３２のＲｉｎｔで、対称非依存性であることが見出された。指数付け及び単位格子の精密化は、三斜晶格子を示した。空間群はＰ１であることが見出された。データは、Ｂｒｕｋｅｒ ＳＡＩＮＴソフトウェアプログラムを使用して統合し、ＳＡＤＡＢＳソフトウェアプログラムを使用して目盛り付けした。直接法（ＳＨＥＬＸＴ）による解は、提案されている構造と一致する完全なフェージングモデルを生成した。
【0100】
全ての非水素原子をフルマトリックス最小二乗（ＳＨＥＬＸＬ－２０１４）によって異方的に精製した。ライディングモデルを使用して、全ての炭素結合水素原子を置いた。ＳＨＥＬＸＬ－２０１４における適切なＨＦＩＸコマンドを使用して、それらの位置をそれらの親原子に対して拘束した。絶対立体化学を最終的に割り当てた（フラック＝０．０４（３））。構造は図２３に示されている。非対称ユニットにおいて該化合物の２つのコピーがある。結晶学的データは以下の通りであった：
結晶系 三斜晶
空間群 Ｐ１
単位格子寸法 ａ＝９．６１２８０（１０）Å α＝１１０．７０５０（１０）°
ｂ＝９．７８８６０（１０）Å β＝９０．９１７０（１０）°
ｃ＝１０．８５１４０（１０）Å γ＝９６．４０６０（１０）°
体積 ９４７．４７０（１７）Å３
Ｚ ２
密度（算出） １．３４４Ｍｇ／ｍ３
吸収係数 ０．７６４ｍｍ－１
Ｆ（０００） ４０８
結晶サイズ ０．２３×０．２×０．１７ｍｍ３
データ収集についてのシータ範囲 ４．３６３から７０．４５３°
指数範囲 －１１＜＝ｈ＜＝１１、－１１＜＝ｋ＜＝１１、－１３＜＝ｌ＜＝１３
収集された反射 ２７５９４
独立反射 ６８５２［Ｒ（ｉｎｔ）＝０．０２３２］
シータに対する完全性＝６７．６７９° ９７．７％
吸収補正 等価物からの半経験的
最大及び最小透過率 ０．５２２０及び０．４３２２
精密化方法 Ｆ２に関するフルマトリックス最小二乗
データ／抑制／パラメータ ６８５２／３／５０５
Ｆ２に関する適合度 １．０２６
最終Ｒ指数［Ｉ＞２シグマ（Ｉ）］ Ｒ１＝０．０２６２、ｗＲ２＝０．０７１５
Ｒ指数（全てのデータ） Ｒ１＝０．０２６６、ｗＲ２＝０．０７２０
絶対構造パラメータ ０．０４（３）
最も大きい回析ピーク及びホール ０．１８１及び－０．１６８ｅ。Å－３
結晶系 三斜晶
空間群 Ｐ１
単位格子寸法 ａ＝９．６１２８０（１０）Å α＝１１０．７０５０（１０）°
ｂ＝９．７８８６０（１０）Å β＝９０．９１７０（１０）°
ｃ＝１０．８５１４０（１０）Å γ＝９６．４０６０（１０）°
体積 ９４７．４７０（１７）Å３
Ｚ ２
密度（算出） １．３４４Ｍｇ／ｍ３
吸収係数 ０．７６４ｍｍ－１
Ｆ（０００） ４０８
結晶サイズ ０．２３×０．２×０．１７ｍｍ３
データ収集についてのシータ範囲 ４．３６３から７０．４５３°
指数範囲 －１１＜＝ｈ＜＝１１、－１１＜＝ｋ＜＝１１、－１３＜＝ｌ＜＝１３
収集された反射 ２７５９４
独立反射 ６８５２［Ｒ（ｉｎｔ）＝０．０２３２］
シータに対する完全性＝６７．６７９° ９７．７％
吸収補正 等価物からの半経験的
最大及び最小透過率 ０．５２２０及び０．４３２２
精密化方法 Ｆ２に関するフルマトリックス最小二乗
データ／抑制／パラメータ ６８５２／３／５０５
Ｆ２に関する適合度 １．０２６
最終Ｒ指数［Ｉ＞２シグマ（Ｉ）］ Ｒ１＝０．０２６２、ｗＲ２＝０．０７１５
Ｒ指数（全てのデータ） Ｒ１＝０．０２６６、ｗＲ２＝０．０７２０
絶対構造パラメータ ０．０４（３）
最も大きい回析ピーク及びホール ０．１８１及び－０．１６８ｅ。Å－３
【0101】
製剤開発
化合物１ソフトゲルカプセル剤の製剤開発及びバッチ製造を調査した。化合物１、形態ＩＩＩを出発材料として使用した。７つの製剤を調製し、それらの溶解度、動態学的溶解度、浸透性、物理的安定性及び化学的安定性を評価した。製剤Ａ７は、化合物１、ＰＥＧ４００、ラウログリコール９０、ビタミンＥＴＰＧＳ及びＢＨＴを含む。製剤Ａ７ソフトゲルカプセル剤を３つの強度（２ｍｇ、５ｍｇ＆２５ｍｇ）で製造した。ソフトゲルシェルは、ゼラチン（１９５型）、ソルビトールスペシャル－グリセリンブレンド、二酸化チタン、ＦＤ＆Ｃ青色＃１、赤色酸化鉄及び精製水を含む。
化合物１ソフトゲルカプセル剤の製剤開発及びバッチ製造を調査した。化合物１、形態ＩＩＩを出発材料として使用した。７つの製剤を調製し、それらの溶解度、動態学的溶解度、浸透性、物理的安定性及び化学的安定性を評価した。製剤Ａ７は、化合物１、ＰＥＧ４００、ラウログリコール９０、ビタミンＥＴＰＧＳ及びＢＨＴを含む。製剤Ａ７ソフトゲルカプセル剤を３つの強度（２ｍｇ、５ｍｇ＆２５ｍｇ）で製造した。ソフトゲルシェルは、ゼラチン（１９５型）、ソルビトールスペシャル－グリセリンブレンド、二酸化チタン、ＦＤ＆Ｃ青色＃１、赤色酸化鉄及び精製水を含む。
【0102】
（例１２）
製剤Ａ１～Ａ６の調製
６つの製剤（Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５及びＡ６）を２２．７ｍｇ／ｇの標的化合物１濃度で調製した。これらの製剤は、グリセリド、界面活性剤、及び親水性共溶媒の比に基づいて様々な製剤型を作り出すように設計した。ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）は、任意の潜在的な酸化分解を最小化するために、抗酸化剤として製剤の各々に含ませた。表１９は製剤組成物を示している。
製剤Ａ１～Ａ６の調製
６つの製剤（Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５及びＡ６）を２２．７ｍｇ／ｇの標的化合物１濃度で調製した。これらの製剤は、グリセリド、界面活性剤、及び親水性共溶媒の比に基づいて様々な製剤型を作り出すように設計した。ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）は、任意の潜在的な酸化分解を最小化するために、抗酸化剤として製剤の各々に含ませた。表１９は製剤組成物を示している。
【表19】
【0103】
（例１３）
製剤Ａ１～Ａ６の溶解度
Ｆｉｂｅｒ Ｏｐｔｉｃを有するＰｉｏｎ Ｒａｉｎｂｏｗ Ｄｙｎａｍｉｃ Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｍｏｎｉｔｏｒ及びＤｉｓｔｅｋ Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ ２５００（Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ Ａｐｐａｒａｔｕｓ Ｔｙｐｅ ＩＩ）を使用し光ファイバー溶解を介して、製剤Ａ１～Ａ６の溶解度を評価した。３つのバイオ関連媒体を評価した：表２０に詳述されている通り、ＦａＳＳＧＦ（ｐＨ＝１．３）、ＦａＳＳＩＦ（ｐＨ＝６．５）、及びＦｅＳＳＩＦ（ｐＨ＝５．５）。
製剤Ａ１～Ａ６の溶解度
Ｆｉｂｅｒ Ｏｐｔｉｃを有するＰｉｏｎ Ｒａｉｎｂｏｗ Ｄｙｎａｍｉｃ Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｍｏｎｉｔｏｒ及びＤｉｓｔｅｋ Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ ２５００（Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ Ａｐｐａｒａｔｕｓ Ｔｙｐｅ ＩＩ）を使用し光ファイバー溶解を介して、製剤Ａ１～Ａ６の溶解度を評価した。３つのバイオ関連媒体を評価した：表２０に詳述されている通り、ＦａＳＳＧＦ（ｐＨ＝１．３）、ＦａＳＳＩＦ（ｐＨ＝６．５）、及びＦｅＳＳＩＦ（ｐＨ＝５．５）。
【表20】
【0104】
各製剤の溶解度を各溶解槽（Ｎ＝１、５００ｍＬの体積、３７℃、７５ｒｐｍのパドル速度）中にて６時間の期間かけて光ファイバープローブによって連続的にモニタリングした。全ての製剤は、各媒体において結晶性化合物１単独（対照として使用された）よりも溶解度の増加を示し、Ａ１、Ａ３及びＡ４は最も高い溶解度を呈した。
【0105】
（例１４）
製剤Ａ１、Ａ３及びＡ４の浸透性
Ｐｉｏｎ μＦｌｕｘ器具（２区画）及び光ファイバープローブを有するＰｉｏｎ Ｒａｉｎｂｏｗ Ｄｙｎａｍｉｃ Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｍｏｎｉｔｏｒを使用して、製剤Ａ１、Ａ３及びＡ４の浸透性を評価した。ＦａＳＳＩＦ媒体を含有する区画に試験製剤を添加し、アクセプターシンク緩衝液を第２の区画に入れた。２つの区画を、ＧＩＴ－０脂質溶液でコーティングされたメンブランフィルターによって分離させた。（この設定は、腸管膜における受動拡散を模倣する）。各区画における光ファイバープローブは、６時間の期間をかけて膜の各側の化合物１濃度を連続的にモニタリングした。表２１は、６時間後の各製剤についての百分率の化合物１浸透性を示している。
製剤Ａ１、Ａ３及びＡ４の浸透性
Ｐｉｏｎ μＦｌｕｘ器具（２区画）及び光ファイバープローブを有するＰｉｏｎ Ｒａｉｎｂｏｗ Ｄｙｎａｍｉｃ Ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｍｏｎｉｔｏｒを使用して、製剤Ａ１、Ａ３及びＡ４の浸透性を評価した。ＦａＳＳＩＦ媒体を含有する区画に試験製剤を添加し、アクセプターシンク緩衝液を第２の区画に入れた。２つの区画を、ＧＩＴ－０脂質溶液でコーティングされたメンブランフィルターによって分離させた。（この設定は、腸管膜における受動拡散を模倣する）。各区画における光ファイバープローブは、６時間の期間をかけて膜の各側の化合物１濃度を連続的にモニタリングした。表２１は、６時間後の各製剤についての百分率の化合物１浸透性を示している。
【表21】
【0106】
（例１５）
物理的安定性評価（室温及び４０℃で温度保持）
製剤Ａ１、Ａ３及びＡ４の物理的安定性を室温（１５～２５℃）及び４０℃で評価した。２つのセットの試料（各々約３ｇ）を単一ガラスバイアル中にアリコートした。一方のセットを室温で７日間保持し、他方を４０℃で７日間保持した。色変化、相分離又は沈殿などの外観における変化を、視覚的観察を介してモニタリングした。室温又は４０℃で物理的不安定性の兆候は観察されなかった。
物理的安定性評価（室温及び４０℃で温度保持）
製剤Ａ１、Ａ３及びＡ４の物理的安定性を室温（１５～２５℃）及び４０℃で評価した。２つのセットの試料（各々約３ｇ）を単一ガラスバイアル中にアリコートした。一方のセットを室温で７日間保持し、他方を４０℃で７日間保持した。色変化、相分離又は沈殿などの外観における変化を、視覚的観察を介してモニタリングした。室温又は４０℃で物理的不安定性の兆候は観察されなかった。
【0107】
（例１６）
物理的安定性評価（温度サイクル約４０℃／－２０℃）
製剤Ａ１、Ａ３及びＡ４の物理的安定性を温度サイクリング条件下で評価した。各試験製剤（Ａ１、Ａ３及びＡ４）の試料（各々約３ｇ）をガラスバイアル中にアリコートし、各温度条件で約２４時間の間、高い（４０℃）及び低い（－２０℃）温度の３つのサイクルに曝露した。表２２に示されている通り、色変化、相分離又は沈殿は観察されなかった。
物理的安定性評価（温度サイクル約４０℃／－２０℃）
製剤Ａ１、Ａ３及びＡ４の物理的安定性を温度サイクリング条件下で評価した。各試験製剤（Ａ１、Ａ３及びＡ４）の試料（各々約３ｇ）をガラスバイアル中にアリコートし、各温度条件で約２４時間の間、高い（４０℃）及び低い（－２０℃）温度の３つのサイクルに曝露した。表２２に示されている通り、色変化、相分離又は沈殿は観察されなかった。
【表22】
【0108】
（例１７）
可塑剤負荷
可塑剤負荷は、ソフトゲルカプセル内のカプセル化後の充填溶液中への可塑剤移行の可能な効果を評価する。２種の可塑剤、ソルビトールソルビタン溶液及びソルビトールスペシャル－グリセリンブレンドＡ８１０を評価した。５％の各可塑剤を各製剤中に添加して、負荷を行った。添加試料を室温（１５～２５℃）及び４０℃で貯蔵し、観察をＴ＝０で及び次いで最大７日の間毎日記述した。沈殿は観察されなかった。相分離が、両方の可塑剤の存在下で製剤の全てにおいてバイアルの底に清澄な液滴として観察され、可塑剤及び充填移行が混和性ではないこと並びに可塑剤がカプセルシェルから移行する可能性がないことを示唆した。表２３及び２４は結果を要約している。
可塑剤負荷
可塑剤負荷は、ソフトゲルカプセル内のカプセル化後の充填溶液中への可塑剤移行の可能な効果を評価する。２種の可塑剤、ソルビトールソルビタン溶液及びソルビトールスペシャル－グリセリンブレンドＡ８１０を評価した。５％の各可塑剤を各製剤中に添加して、負荷を行った。添加試料を室温（１５～２５℃）及び４０℃で貯蔵し、観察をＴ＝０で及び次いで最大７日の間毎日記述した。沈殿は観察されなかった。相分離が、両方の可塑剤の存在下で製剤の全てにおいてバイアルの底に清澄な液滴として観察され、可塑剤及び充填移行が混和性ではないこと並びに可塑剤がカプセルシェルから移行する可能性がないことを示唆した。表２３及び２４は結果を要約している。
【表23】
【表24】
【0109】
（例１８）
製剤Ａ７
製剤Ａ１～Ａ６と同じ条件に従って、製剤Ａ７を調製した。製剤Ａ７は、ラウログリコールＦＣＣ（プロピレングリコールモノラウラート（Ｉ型））の代わりにラウログリコール９０（プロピレングリコールモノラウラート（ＩＩ型））を使用した以外、製剤Ａ４と同じ構成成分及び量を含有する。これらの賦形剤は、異なる比のモノ－及びジエステルを含有する。
製剤Ａ７
製剤Ａ１～Ａ６と同じ条件に従って、製剤Ａ７を調製した。製剤Ａ７は、ラウログリコールＦＣＣ（プロピレングリコールモノラウラート（Ｉ型））の代わりにラウログリコール９０（プロピレングリコールモノラウラート（ＩＩ型））を使用した以外、製剤Ａ４と同じ構成成分及び量を含有する。これらの賦形剤は、異なる比のモノ－及びジエステルを含有する。
【表D】
【0110】
（例１９）
最大の薬物溶解度
製剤Ａ１、Ａ３、Ａ４及びＡ７における化合物１の最大溶解度を評価することで、製剤当たりの最大可能薬物負荷を決定した。
各プロトタイプのプラセボ製剤を調製し、化合物１で過飽和した。ビーズを混合するガラス付の温度制御振盪器上で、混合物を少なくとも４８時間の間４０℃でインキュベートすることで、最大溶解度が達成されることを確実にした。試料を次いで、０．４５μｍのＰＶＤＦフィルターを使用して遠心分離することで、液体及び固体部分を分離した。濾液中の溶解化合物１の量をＨＰＬＣ分析によって定量化し、表２５に示した。
最大の薬物溶解度
製剤Ａ１、Ａ３、Ａ４及びＡ７における化合物１の最大溶解度を評価することで、製剤当たりの最大可能薬物負荷を決定した。
各プロトタイプのプラセボ製剤を調製し、化合物１で過飽和した。ビーズを混合するガラス付の温度制御振盪器上で、混合物を少なくとも４８時間の間４０℃でインキュベートすることで、最大溶解度が達成されることを確実にした。試料を次いで、０．４５μｍのＰＶＤＦフィルターを使用して遠心分離することで、液体及び固体部分を分離した。濾液中の溶解化合物１の量をＨＰＬＣ分析によって定量化し、表２５に示した。
【表25】
【0111】
（例２０）
安定性試験
製剤Ａ１、Ａ３及びＡ７を調製し、４つのセットの試料に分割し、そこに以下を添加した：
何もなし（対照）
５％水
ゲル１：ゲル００４００７－Ｌ３ＤＸＨＢＨＭは、可塑剤としてソルビトールスペシャル－グリセリンブレンドを含有する
ゲル２：ゲル００４０１３－ＬＳＭＨＲＳ１ＨＭは、可塑剤としてソルビトールソルビタン溶液を含有する
安定性試験
製剤Ａ１、Ａ３及びＡ７を調製し、４つのセットの試料に分割し、そこに以下を添加した：
何もなし（対照）
５％水
ゲル１：ゲル００４００７－Ｌ３ＤＸＨＢＨＭは、可塑剤としてソルビトールスペシャル－グリセリンブレンドを含有する
ゲル２：ゲル００４０１３－ＬＳＭＨＲＳ１ＨＭは、可塑剤としてソルビトールソルビタン溶液を含有する
【0112】
着色料として二酸化チタン、酸化鉄、赤色及びＦＤ＆Ｃ青色＃１を使用して、ゲルを調製した。ゲル００４００７の１つの乾燥させた見本をゲル１試料に添加し、００４０１３の１つの乾燥させた見本をゲル２に添加した。
【0113】
試料を６ｍＬの琥珀ガラスバイアル中に室温、４０℃、５０℃及び５℃で最大８週間貯蔵した。対照試料（化合物１単独）を研究試料と並行して分析し、対照ピークを総不純物から減算した。４０℃での貯蔵後の化合物１関連の不純物は、表２６にリストされている。
【表26】
【0114】
安定性結果は表２７～３４に表されている。Ｔ＝０で観察された不純物のほとんどは、化合物１単独出発材料中に存在し、したがって、製剤関連の不純物と考えられなかった。
【表27】
【表28】
【表29】
【表30】
【表31】
【表32】
【表33】
【表34】
【0115】
全ての３つの製剤（Ａ１、Ａ３、及びＡ７）は、４０℃、５０℃及び５℃で最大２週まで同様の安定性を示した。８週後、４０℃でのＡ７の安定性を分析した。
【0116】
（例２１）
バッチ製造－Ａ７に基づいて２ｍｇ、５ｍｇ＆２５ｍｇのカプセル剤
図２４は、バッチ製造プロセスの流れ図表を表している。２ｍｇ、５ｍｇ及び２５ｍｇの化合物１を含有する３つの強度のソフトゲルカプセル剤を製造した。充填製剤の組成物は同等であり、カプセルサイズを変動することによって用量を調整した。充填ミックスを５ｍｇ及び２ｍｇのバッチのために分けた。充填製剤の組成物は表３５に表されている。ソフトゲルシェルの組成物は表３６に示されている。
バッチ製造－Ａ７に基づいて２ｍｇ、５ｍｇ＆２５ｍｇのカプセル剤
図２４は、バッチ製造プロセスの流れ図表を表している。２ｍｇ、５ｍｇ及び２５ｍｇの化合物１を含有する３つの強度のソフトゲルカプセル剤を製造した。充填製剤の組成物は同等であり、カプセルサイズを変動することによって用量を調整した。充填ミックスを５ｍｇ及び２ｍｇのバッチのために分けた。充填製剤の組成物は表３５に表されている。ソフトゲルシェルの組成物は表３６に示されている。
【表35】
【表36】
【0117】
Ｂｅｃｏｍｉｘ ２．５Ｌを使用して、槽を混合することによって、充填混合物を調製した。槽を４０℃に予備加熱した。プロピレングリコールモノラウラート、ビタミンＥＴＰＧＳ、及びＢＨＴをＢｅｃｏｍｉｘ槽に添加し、１．０ｍ／ｓのアジテーター速度（右モードで範囲０．５～１．５ｍ／ｓ）で及び５．０ｍ／ｓのホモジナイザー速度（範囲５～１０ｍ／ｓ）で１５分以上の間、－０．９バールで維持された真空下で混合した。それらのそれぞれの検証された範囲内に必要とされる通りにアジテーター及びホモジナイズ速度を調整することによって、生成温度を混合プロセスの全体にわたって３８℃～４２℃の間に維持した。化合物１を次いで、光から保護するために点灯された黄色光下で添加した。化合物１の容器をポリエチレングリコール４００で濯ぐことで、完全な移動を確実にした。混合物をさらに６０分間４０℃で混合した。溶液を次いで３０分間４０℃で脱気し、Ｂｅｃｏｍｉｘ槽からの放出時に３２５－メッシュインラインフィルターを介して濾過して、任意の非溶解材料を除去した。インプロセスアッセイを充填材料上で行い、標的充填重量を適宜調整した（表３７）。充填材料を、カプセル化の準備が整うまで、ステンレス鋼ホッパーの中に４０℃で貯蔵した。
【表37】
【0118】
４０℃でカプセル化中に、加熱された閉ヘッドホッパーを使用した。３つのダイを３つのカプセル強度について評価し；全ての３つのダイは適当なシールを生成した。
２ｍｇにはＧ２ＶＤを使用した
５ｍｇにはＧ４ＶＨを使用した
２５ｍｇにはＧ２０ＢＡを使用した
ゼラチン、ソルビトールスペシャル－グリセリンブレンドＡ８１０を可塑剤として、及び精製水を使用して、ゲル質量を調製し、二酸化チタン、赤色酸化鉄、ＦＤ＆Ｃ青色＃１、及び精製水を添加することによって不透明な青色に色変換した。インプロセス充填重量、シェル重量及びシール厚を実施の全体にわたって１０分毎にモニタリングした。インプロセスチェックの要約は表３８に表されている。
２ｍｇにはＧ２ＶＤを使用した
５ｍｇにはＧ４ＶＨを使用した
２５ｍｇにはＧ２０ＢＡを使用した
ゼラチン、ソルビトールスペシャル－グリセリンブレンドＡ８１０を可塑剤として、及び精製水を使用して、ゲル質量を調製し、二酸化チタン、赤色酸化鉄、ＦＤ＆Ｃ青色＃１、及び精製水を添加することによって不透明な青色に色変換した。インプロセス充填重量、シェル重量及びシール厚を実施の全体にわたって１０分毎にモニタリングした。インプロセスチェックの要約は表３８に表されている。
【表38-1】
【表38-2】
【0119】
（例２２）
乾燥及び水分含有量
数日にわたって充填水分及び硬さを測定することによって、充填カプセルの乾燥をモニタリングした。カプセルを以下の範囲内の硬さに乾燥させた：
２５ｍｇカプセル：７．０～１０．０ニュートン
２ｍｇ＆５ｍｇカプセル：７．０～１１．０ニュートン
各時点で、Ｂａｒｅｉｓｓ Ｈａｒｄｎｅｓｓ Ｄｕｒｏｍｅｔｅｒを使用して５つのカプセルを硬さについて試験した。プレートに平行な継ぎ目を有する試験プレート上に、カプセルを置いた。硬度計プランジャーを、カプセルと丁度接触するまで調整した。硬さ試験は、ソフトゲルの２ｍｍ変位に必要な適用力を測定する。充填カプセルの水分含有量（ＦＭ）も、Ｋａｒｌ Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｔｉｔｒａｔｏｒを使用して試験した。５つのカプセルからの充填材料を除去し、二重に試験した。硬さ及び水分結果は表３９に表されている。
乾燥及び水分含有量
数日にわたって充填水分及び硬さを測定することによって、充填カプセルの乾燥をモニタリングした。カプセルを以下の範囲内の硬さに乾燥させた：
２５ｍｇカプセル：７．０～１０．０ニュートン
２ｍｇ＆５ｍｇカプセル：７．０～１１．０ニュートン
各時点で、Ｂａｒｅｉｓｓ Ｈａｒｄｎｅｓｓ Ｄｕｒｏｍｅｔｅｒを使用して５つのカプセルを硬さについて試験した。プレートに平行な継ぎ目を有する試験プレート上に、カプセルを置いた。硬度計プランジャーを、カプセルと丁度接触するまで調整した。硬さ試験は、ソフトゲルの２ｍｍ変位に必要な適用力を測定する。充填カプセルの水分含有量（ＦＭ）も、Ｋａｒｌ Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｔｉｔｒａｔｏｒを使用して試験した。５つのカプセルからの充填材料を除去し、二重に試験した。硬さ及び水分結果は表３９に表されている。
【表39】
【0120】
（例２３）
水分進入
水分進入研究をバッチの各々について行った。カプセルシェルから充填材料中への水分進入について試験するため、充填材料をカプセル化プロセスの最初、中盤及び最後に試験した。選択されたカプセルから直ちに、並びに５分、１０分、及び１５分の保持時間の後に、充填材料を除去し、水含有量について試験し、カプセル化中に生じた任意の水進入は著しくなかったことを示した。結果は表４０に要約されている。
水分進入
水分進入研究をバッチの各々について行った。カプセルシェルから充填材料中への水分進入について試験するため、充填材料をカプセル化プロセスの最初、中盤及び最後に試験した。選択されたカプセルから直ちに、並びに５分、１０分、及び１５分の保持時間の後に、充填材料を除去し、水含有量について試験し、カプセル化中に生じた任意の水進入は著しくなかったことを示した。結果は表４０に要約されている。
【表40A】
【0121】
（例２４）
２ｍｇ＆プラセボ；５ｍｇ＆プラセボ；１０ｍｇ、２０ＭＧ、２５ｍｇ＆プラセボカプセル剤
「即時放出」、経口投与のための軟ゼラチンカプセル剤（ソフトゲル）を２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ及び２５ｍｇ強度で調製した。２ｍｇ、５ｍｇ及び１０ｍｇ軟ゼラチンカプセル剤は、不透明、楕円、プリントなしで着色された青色であり、最も大きい寸法で＜２２ｍｍのサイズの淡黄色から緑色の不透明な半固体を含有していた。２５ｍｇ軟ゼラチンカプセル剤は、不透明、長円形、プリントなしで着色された青色であり、淡黄色から緑色の不透明な半固体を含有していた。
２ｍｇ＆プラセボ；５ｍｇ＆プラセボ；１０ｍｇ、２０ＭＧ、２５ｍｇ＆プラセボカプセル剤
「即時放出」、経口投与のための軟ゼラチンカプセル剤（ソフトゲル）を２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ及び２５ｍｇ強度で調製した。２ｍｇ、５ｍｇ及び１０ｍｇ軟ゼラチンカプセル剤は、不透明、楕円、プリントなしで着色された青色であり、最も大きい寸法で＜２２ｍｍのサイズの淡黄色から緑色の不透明な半固体を含有していた。２５ｍｇ軟ゼラチンカプセル剤は、不透明、長円形、プリントなしで着色された青色であり、淡黄色から緑色の不透明な半固体を含有していた。
【表E】
【0122】
カプセルの含有量均一性、残留の溶媒及び元素不純物は、薬学的標準（ＵＳＰ＜９０５＞；ＵＳＰ＜４６７＞Ｏｐｔｉｏｎ １；及びＵＳＰ＜２３２＞／＜２３３＞それぞれ）に適合していた。任意の不特定の分解生成物は＜１．０％で存在し、総分解生成物は＜３．０％であった。
【0123】
化合物１を含有する全てのカプセルは、共通の充填並びに同じゼラチン組成物及び厚さを有している。表４０はカプセル充填構成成分を提示しており、表４１はカプセルシェル構成成分を提示している。表４２はカプセル成分の供給元及び機能を提示している。
【表40B】
【表41】
【0124】
以下の加工助剤（軟ゼラチンカプセル化において典型的に使用される）も用いられた：分画ヤシ油（トリグリセリド、中鎖）はゼラチンリボンを潤滑することで、ツーリングに張り付くことを防止する；漂白されていない大豆レシチンは、カプセルが加工中に互いに張り付くのを最小化する。
【表42】
【0125】
２ｍｇカプセル剤のカプセル化は、最適以下のシールをもたらした。漏出が、安定に加速条件で３カ月時点にて３０℃／６５％ＲＨ及び４０℃／７５％ＲＨ条件の両方で観察され、カプセル化のために使用されたダイによって引き起こされたと決定した。
【0126】
適当なダイセットを確立するために、ツーリング研究を行った。全てのポケットを各ダイについて試験し、Ｇ２ＶＤ（充填ダイ、８ポケッ横及び２００ポケット合計）が最適なシールをもたらすことが確認された。Ｇ３ＶＡＬダイは、試験されたものの中で最良のシールを生成した。
【0127】
１０ｍｇカプセル剤のための適切なツーリングを決定するための研究を行い、ダイセットＧ７．５ＶＫが最適な結果を生成した。充填重量、シェル重量及びシール厚のためのインプロセスチェック（ＩＰＣ）をカプセル化の最初及び最後に行った（表４３）。
【表43】
【0128】
通常瓶にパッケージ化されたソフトゲルが一緒に張り付き、「ブリック」を形成する時にブリック化が起こる。ブリック化の重症度は、瓶を軽くたたくことでブリックを取り外すことができる場合の軽度から、ソフトゲルが分離しない場合の重症までを範囲とすることができる。ブリック化は、典型的に、安定性判定中に加速条件で、最も共通して親水性充填製剤において観察される。ブリック化は、加速条件下で２ｍｇ、５ｍｇ及び２５ｍｇのカプセル剤について観察された。充填材料の平衡水含有量を達成するのに最適な乾燥時間を決定するため、乾燥研究を行った。水ができるだけ多く除去されるのを確実にするため乾燥を完了する前に平衡に達するまでの硬さ、充填水分及び水分活性について、カプセルを試験した。
【0129】
（例２５）
仕上げ製品試験
仕上げカプセルを分析し、結果は表４４に示されている。
仕上げ製品試験
仕上げカプセルを分析し、結果は表４４に示されている。
【表44】
【0130】
（例２６）
Ｉ相臨床試験
以下を評価するための健康な対象における第１相用量漸増研究：
化合物１の安全性、耐容性、薬物動態、及び薬力学、
化合物１薬物動態に対する食物の効果、
化合物１薬物動態に対する製剤の効果、並びに
化合物１を用いるＣＹＰ３Ａ媒介薬物－薬物相互作用。
Ｉ相臨床試験
以下を評価するための健康な対象における第１相用量漸増研究：
化合物１の安全性、耐容性、薬物動態、及び薬力学、
化合物１薬物動態に対する食物の効果、
化合物１薬物動態に対する製剤の効果、並びに
化合物１を用いるＣＹＰ３Ａ媒介薬物－薬物相互作用。
【0131】
研究は、単一及び複数の漸増用量の安全性、耐容性及びＰＫを評価するために健康なヒト対象への化合物１の投与を調査する。追加の目的としては、ＰＫに対する製剤の効果、ＰＫに対する食物の効果、ＰＫに対するＣＹＰ３Ａ阻害剤の効果、及びＣＹＰ３Ａ活性に対する化合物１の効果を判定することが挙げられる。ＡＵＣ、ＡＵＣ、Ｃｍａｘ、及びＴｍａｘを含めたＰＫパラメータが決定される。追加の探索目的は、ＢＴＫ阻害の時間経過につれて、薬力学を評価する。研究は、１８～５５歳の年齢で、４８ｋｇを超える体重、ＢＭＩ１８．５～３０．０ｋｇ／ｍ２を有し、臨床的に重大な異常がない、最大１４４人の健康な男性及び女性対象で行われる。
【0132】
研究は、下に記載されている通りの３つのパート（パートＡ～Ｃ）からなっていた。
【0133】
パートＡ（用量漸増、単一及び複数の漸増用量）
パートＡは、摂食状態（標準的な中程度脂肪食）で投与される、相互用量漸増での、無作為化、二重盲検、プラセボ制御、単一及び多用量研究である。パートＡは、９つのコホート（最大７つの単一漸増用量［ＳＡＤ］コホート［コホート１～６＆１４］、及び最大３つの複数漸増用量［ＭＡＤ］コホート［コホート７～９］）からなる。対象は、以下のいずれかを受けるようにコホート当たり３：１比で無作為化される：化合物１製剤Ａ（コホート１～４はＮ＝６及びコホート５～９＆１４はＮ＝９）；又はプラセボ（ＰＢＯ；コホート１～４はＮ＝２及びコホート５～９＆１４はＮ＝３）。この例の臨床試験プロトコールに使用される製剤Ａは、例１８の製剤Ａ７と同等である。
単一漸増用量コホート：コホート１～６
コホート１～４： １日目、全ての対象は、単一用量の製剤Ａ化合物１又はプラセボを受ける。
コホート５、６＆１４：－１日目、全ての対象は、プラセボを受ける（ベースラインＥＣＧ判定を確立）。
１日目、対象は、単一経口用量の化合物１又はプラセボを受ける。
複数の漸増用量コホート：（コホート７～９）
コホート７及び８：１日目、全ての対象が１０日間の製剤Ａ化合物１又はプラセボの１日１回複数用量投与を開始する。
コホート９： －１日目、全ての対象がプラセボを受ける。
１日目、全ての対象が、１０日間の化合物１又はプラセボの１日１回複数用量投与を開始する。
より高い用量での単一用量コホートの開始は、以前の投薬コホートに登録された全ての対象からの、最後の用量後７日を通した安全性データの審査で決定される。用量制限毒性の非存在下で、次に高い用量のコホートが始まる。
パートＡは、摂食状態（標準的な中程度脂肪食）で投与される、相互用量漸増での、無作為化、二重盲検、プラセボ制御、単一及び多用量研究である。パートＡは、９つのコホート（最大７つの単一漸増用量［ＳＡＤ］コホート［コホート１～６＆１４］、及び最大３つの複数漸増用量［ＭＡＤ］コホート［コホート７～９］）からなる。対象は、以下のいずれかを受けるようにコホート当たり３：１比で無作為化される：化合物１製剤Ａ（コホート１～４はＮ＝６及びコホート５～９＆１４はＮ＝９）；又はプラセボ（ＰＢＯ；コホート１～４はＮ＝２及びコホート５～９＆１４はＮ＝３）。この例の臨床試験プロトコールに使用される製剤Ａは、例１８の製剤Ａ７と同等である。
単一漸増用量コホート：コホート１～６
コホート１～４： １日目、全ての対象は、単一用量の製剤Ａ化合物１又はプラセボを受ける。
コホート５、６＆１４：－１日目、全ての対象は、プラセボを受ける（ベースラインＥＣＧ判定を確立）。
１日目、対象は、単一経口用量の化合物１又はプラセボを受ける。
【表F】
複数の漸増用量コホート：（コホート７～９）
コホート７及び８：１日目、全ての対象が１０日間の製剤Ａ化合物１又はプラセボの１日１回複数用量投与を開始する。
コホート９： －１日目、全ての対象がプラセボを受ける。
１日目、全ての対象が、１０日間の化合物１又はプラセボの１日１回複数用量投与を開始する。
【表G】
より高い用量での単一用量コホートの開始は、以前の投薬コホートに登録された全ての対象からの、最後の用量後７日を通した安全性データの審査で決定される。用量制限毒性の非存在下で、次に高い用量のコホートが始まる。
【0134】
パートＢ
パートＡからの安全性データに基づき、パートＢは、パートＡにおいて評価された最も高い用量以下の用量で開始される。
パートＡからの安全性データに基づき、パートＢは、パートＡにおいて評価された最も高い用量以下の用量で開始される。
【0135】
製剤効果
コホート１０は、無作為化、２処置、２期間、２順序、単一用量レベル製剤効果評価である。
処置順序ＡＢにおいて、対象（Ｎ＝５）は１日目に摂食状態で化合物１製剤Ａを受け、その後、製剤Ｂが８日目に摂食状態で投与される。
処置順序ＢＡにおいて、対象（Ｎ＝５）は、１日目に摂食状態で化合物１製剤Ｂを受け、その後、８日目に摂食状態で製剤Ａが投与される。
２～７日目は休薬日である。
コホート１０は、無作為化、２処置、２期間、２順序、単一用量レベル製剤効果評価である。
処置順序ＡＢにおいて、対象（Ｎ＝５）は１日目に摂食状態で化合物１製剤Ａを受け、その後、製剤Ｂが８日目に摂食状態で投与される。
処置順序ＢＡにおいて、対象（Ｎ＝５）は、１日目に摂食状態で化合物１製剤Ｂを受け、その後、８日目に摂食状態で製剤Ａが投与される。
２～７日目は休薬日である。
【表H】
【0136】
食物効果
コホート１１は、無作為化、２処置、２期間、２順序、単一用量レベル食物効果評価である。コホート１１において使用される製剤は製剤Ａである。処置順序ＦＨにおいて、対象は、１日目に絶食状態で化合物１、及び８日目に摂食状態（高脂肪、高カロリー食）で第２の用量を受ける。処置順序ＨＦにおいて、対象は、１日目に摂食状態（高脂肪、高カロリー食）で化合物１、及び８日目に絶食状態で第２の用量を受ける。２～７日目は休薬日である。
パートＢ（コホート１０及び１１）のための処置期間の概要
コホート１１は、無作為化、２処置、２期間、２順序、単一用量レベル食物効果評価である。コホート１１において使用される製剤は製剤Ａである。処置順序ＦＨにおいて、対象は、１日目に絶食状態で化合物１、及び８日目に摂食状態（高脂肪、高カロリー食）で第２の用量を受ける。処置順序ＨＦにおいて、対象は、１日目に摂食状態（高脂肪、高カロリー食）で化合物１、及び８日目に絶食状態で第２の用量を受ける。２～７日目は休薬日である。
パートＢ（コホート１０及び１１）のための処置期間の概要
【表I】
【0137】
パートＣ（ＣＹＰ３Ａを用いる薬物－薬物相互作用）
パートＣにおいて、摂食投与は、標準的な中脂肪食からなる。利用される製剤は製剤Ａである。パートＣのための用量は、パートＡからの安全性データに基づく。
パートＣにおいて、摂食投与は、標準的な中脂肪食からなる。利用される製剤は製剤Ａである。パートＣのための用量は、パートＡからの安全性データに基づく。
【0138】
コホート１２は、イトラコナゾール（ＩＴＺ）を用いる非盲検、固定順序、多用量ＤＤＩ研究である。対象は、１日目に絶食状態で投与される化合物１の単一経口用量を受ける。３日目に開始するとともに６日目まで通して続けて、対象は、絶食状態で１日１回（ＱＤ）イトラコナゾール２００ｍｇを受ける。５日目に、対象は、イトラコナゾールの投与の１時間後、絶食状態で投与される化合物１を受ける。
【表J】
【0139】
コホート１３は、ミダゾラム（ＭＤＺ）を用いる非盲検、固定順序、多用量ＤＤＩ研究である。対象は、１日目に摂食状態でミダゾラムの経口用量（２ｍｇ）を受ける。３日目に開始するとともに１２日目まで通して続けて、対象は、摂食状態で１日２回（ＢＩＤ）化合物１を受ける。３日目及び１１日目に、対象は、摂食状態で化合物１の朝用量と同時に投与されるミダゾラムの単一経口用量（２ｍｇ）を受ける。
対象の数
パートＡ（Ｎ＝１０４）
コホート１～４：コホート当たり８人の対象 ６人化合物１＋２人プラセボ（合計３２）
コホート５～９＆１４：コホート当たり１２人の対象 ９人化合物１＋３人プラセボ（合計６０）
パートＢ（Ｎ＝２２）
コホート１０：１０人の対象 全て化合物１
コホート１１：１２人の対象 全て化合物１
パートＣ（Ｎ＝１８）
コホート１２～１３：コホート当たり９人の対象 全て化合物１
研究持続期間
スクリーニング：２８日
拘束：
コホート１～４： ４日、３夜（－１日目から３日目）
コホート５、６％１４：５日、４夜（－２日目から３日目）
コホート７＆８： １３日、１２夜（－１日目から１２日目）
コホート９： １４日、１３夜（－２日目から１２日目）
コホート１０＆１１： １１日、１０夜（－１日目から１０日目）
コホート１２： ８日、７夜（－１日目から７日目）
コホート１３： １４日、１３夜（－１日目から１３日目）
追跡調査訪問：最終用量の約７日後
合計研究持続期間、（スクリーニング、拘束、及び追跡調査）：約３９日から４９日
【表K】
対象の数
パートＡ（Ｎ＝１０４）
コホート１～４：コホート当たり８人の対象 ６人化合物１＋２人プラセボ（合計３２）
コホート５～９＆１４：コホート当たり１２人の対象 ９人化合物１＋３人プラセボ（合計６０）
パートＢ（Ｎ＝２２）
コホート１０：１０人の対象 全て化合物１
コホート１１：１２人の対象 全て化合物１
パートＣ（Ｎ＝１８）
コホート１２～１３：コホート当たり９人の対象 全て化合物１
研究持続期間
スクリーニング：２８日
拘束：
コホート１～４： ４日、３夜（－１日目から３日目）
コホート５、６％１４：５日、４夜（－２日目から３日目）
コホート７＆８： １３日、１２夜（－１日目から１２日目）
コホート９： １４日、１３夜（－２日目から１２日目）
コホート１０＆１１： １１日、１０夜（－１日目から１０日目）
コホート１２： ８日、７夜（－１日目から７日目）
コホート１３： １４日、１３夜（－１日目から１３日目）
追跡調査訪問：最終用量の約７日後
合計研究持続期間、（スクリーニング、拘束、及び追跡調査）：約３９日から４９日
【0140】
製剤Ａ及び製剤Ｂ
化合物１は、経口投与のための青色軟ゼラチンカプセル剤として提供される。各カプセル剤は、ＰＥＧ４００、プロピレングリコールモノラウラート、ビタミンＥポリエチレングリコールスクシナート（ＴＰＧＳ）、及びブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）中に溶解させる化合物１で構成された脂質ベースの充填溶液を含有する。カプセルは、２ｍｇ、５ｍｇ又は２５ｍｇの化合物１を含有するために十分な充填溶液で充填される。軟ゼラチンカプセルシェル材料は、ゼラチン（１９５型）、ソルビトール－グリセリンブレンド（Ａ８１０）、二酸化チタン、ＦＤ＆Ｃ青色＃１着色料及び赤色酸化鉄を含有する。製剤Ｂは、パートＡからの安全性及びＰＫデータに基づいて評価される。
化合物１は、経口投与のための青色軟ゼラチンカプセル剤として提供される。各カプセル剤は、ＰＥＧ４００、プロピレングリコールモノラウラート、ビタミンＥポリエチレングリコールスクシナート（ＴＰＧＳ）、及びブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）中に溶解させる化合物１で構成された脂質ベースの充填溶液を含有する。カプセルは、２ｍｇ、５ｍｇ又は２５ｍｇの化合物１を含有するために十分な充填溶液で充填される。軟ゼラチンカプセルシェル材料は、ゼラチン（１９５型）、ソルビトール－グリセリンブレンド（Ａ８１０）、二酸化チタン、ＦＤ＆Ｃ青色＃１着色料及び赤色酸化鉄を含有する。製剤Ｂは、パートＡからの安全性及びＰＫデータに基づいて評価される。
【0141】
（例２７）
臨床試験の結果
健康な対象における化合物１の単一及び複数の漸増用量の安全性、耐容性、及び薬物動態プロファイル
このヒト第１研究は、例２５、パートＡに記載されている通り、臨床研究における投薬及び併用薬物療法を報告するための、化合物１の単一及び複数用量安全性、耐容性、薬物動態（ＰＫ；ＣＮＳ浸透率を含める）及び薬力学（ＰＤ）、食物の効果、薬物相互作用、並びに心臓安全性を評価するために設計した。
臨床試験の結果
健康な対象における化合物１の単一及び複数の漸増用量の安全性、耐容性、及び薬物動態プロファイル
このヒト第１研究は、例２５、パートＡに記載されている通り、臨床研究における投薬及び併用薬物療法を報告するための、化合物１の単一及び複数用量安全性、耐容性、薬物動態（ＰＫ；ＣＮＳ浸透率を含める）及び薬力学（ＰＤ）、食物の効果、薬物相互作用、並びに心臓安全性を評価するために設計した。
【0142】
方法：これは、相互用量漸増及び適応用量選択を用いる、健康な対象における進行中の第１相、二重盲検、無作為化、プラセボ制御、単一の上昇する及び複数の漸増用量（ＳＡＤ、ＭＡＤ）研究である。
【0143】
安全性は、研究の全体にわたって判定され、ＰＫ及びＰＤは、化合物１血漿濃度について用量後最大４８時間で収集される連続血液試料、ＢＴＫ標的占有率（ＴＯ）及び標的係合（ＴＥ）を使用して特徴付けられる。脳脊髄液（ＣＳＦ）試料は、化合物１血漿濃度とＣＮＳ浸透率（ＣＳＦ／非結合血漿濃度）との間の関係を特徴付けるために、用量後２時間で収集される。化合物１ ＰＫパラメータ（例えば、ＡＵＣｌａｓｔ、ＡＵＣｉｎｆ、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、ｔ１／２）は、標準的な非区画方法によって推算される。
【0144】
結果：３つの完了ＳＡＤコホートからの予備的な薬物動態学的結果は、摂食状態（中脂肪食）における４１人の対象（５ｍｇを受容する７人、１５ｍｇを受容する８人、４５ｍｇを受容する８人、５ｍｇ＋１０ｍｇプラセボを受容する８人、１００ｍｇを受容する１２人、及び２００ｍｇを受容する１２人：化合物１又はプラセボを受けるために３：１比で無作為化）を含めて表される。盲検安全性データの審査は、したがって、研究薬物が一般に、重篤な有害事象又は早期研究中断は報告されずに良好な耐容性を示すことを大いに示した。予備的なＰＫパラメータは、表４５に（表４５の全ての薬物動態学的パラメータは、中央値（Ｍｉｎ、Ｍａｘ）として報告されているＴｍａｘ及びｔ１／２を除いて、平均（変動の％係数）として報告されている）、及び化合物１の平均（ＳＤ）血漿濃度－時間プロファイルを表す図２５に表されている。
【表45】
【0145】
化合物１は、１～３時間を範囲とする平均血漿Ｔｍａｘで、経口投与に続いて急速に吸収され、およそ３～４時間の終末半減期を呈する。単一用量化合物１曝露（ＡＵＣｉｎｆ）は、５ｍｇから１５ｍｇの用量比例方式及び１５ｍｇから２００ｍｇのほぼ用量比例よりも多く増加した。平均化合物１ ＣＳＦ：非結合血漿濃度比は１に近似し、ＣＮＳ中への血漿中非結合薬物の無妨害アクセスを示した（例えば、平均（変動の％係数）として報告されている表４６、及び用量によるＣＳＦ対非結合血漿比を示す図２６を参照されたい）。観察された化合物１血漿曝露、ＣＮＳ浸透率、及び予備的なＴＯ及びＴＥＰＤデータは、化合物１の低用量が血液及びＣＮＳにおいて高レベルのＢＴＫ阻害をもたらすことを示したトランスレーショナルＰＫ／ＰＤモデルのものと一致した。
【表46】
【0146】
結果：１つの完了ＭＡＤコホートからの予備的な薬物動態学的結果は、摂食状態（中脂肪食）で、化合物１又はプラセボを受けるために３：１比で無作為化された、１０日間１日１回１５ｍｇを受ける１２人の対象を含めて、表されている。盲検安全性データの審査は、したがって、研究薬物が一般に、重篤な有害事象又は早期研究中断は報告されずに良好な耐容性を示すことを大いに示した。予備的なＰＫパラメータは、表４７に（表４６の全ての薬物動態学的パラメータは、中央値（Ｍｉｎ、Ｍａｘ）として報告されているＴｍａｘ及びｔ１／２を除いて、平均（変動の％係数）として報告されている）、並びに単一及び複数の用量血漿プロファイル（平均±ＳＤ）を示す図２７に表されている。
【表47】
【0147】
化合物１は、１．５時間の平均血漿Ｔｍａｘで、経口投与に続いて急速に吸収され、およそ３時間の終末半減期を呈した。化合物１の最小から無の蓄積が、１日１回の投薬で観察された。
【0148】
結果：化合物１ ＰＫに対する食物の効果を評価する予備的な薬物動態学的な結果は、絶食条件下で、又は摂食状態（中脂肪食を用いる又は高脂肪高カロリー食を用いる）で、１５ｍｇの単一用量を受容する、コホート１１から１２人の対象並びにコホート２及び１５から１５人の対象を含めて、表されている。予備的なＰＫパラメータは、表４８に（表４７の全ての薬物動態学的パラメータは、中央値（Ｍｉｎ、Ｍａｘ）として報告されているＴｍａｘ及びｔ１／２を除いて、平均（変動の％係数）として報告されている）、及び図２８に表されている。
【表48】
【0149】
化合物１は、１．０～２．５時間の平均血漿Ｔｍａｘで、経口投与に続いて急速に吸収され、およそ３時間の終末半減期を呈した。食物（中脂肪、又は高脂肪高カロリー食）は、化合物１のＰＫに対して臨床的に有意な効果を有さなかった。
【0150】
結果：化合物１ ＰＫに対する強いＣＹＰ３Ａ阻害剤（イトラコナゾール）の薬物－薬物相互作用効果を評価する予備的な薬物動態学的な結果は、絶食条件下で２ｍｇの化合物１の単一用量を単独で、又は１日１回のイトラコナゾール２００ｍｇとの組合せで受ける、コホート１２からの９人の対象を含めて、表されている。予備的なＰＫパラメータは、表４９に（表４９の全ての薬物動態学的パラメータは、中央値（Ｍｉｎ、Ｍａｘ）として報告されているＴｍａｘ及びｔ１／２を除いて、平均（変動の％係数）として報告されている）、及び化合物１の平均（ＳＤ）血漿濃度－時間プロファイルを表す図２９に表されている。
【表49】
【0151】
化合物１は、１．０～１．５時間の平均血漿Ｔｍａｘで、経口投与に続いて急速に吸収され、およそ３時間の終末半減期を呈した。イトラコナゾールの同時投与は、化合物１ ＡＵＣｉｎｆ（１５％）及びＣｍａｘ（２３％）を最小に増加した。強いＣＹＰ３Ａ阻害剤と化合物１との同時投与は、化合物１のＰＫに対して臨床的に有意な効果は有さなかった。
【0152】
結論：健康な対象における第１の６つのＳＡＤコホート及び第１のＭＡＤコホートからのデータは、低用量の化合物１が、ＣＮＳにおける所望のＢＴＫ阻害を推進するのに適切な血漿曝露及びＣＳＦ浸透率を提供したことを示す。食物も強いＣＹＰ３Ａ阻害剤の同時投与も化合物１のＰＫの臨床的に有意な効果を有さなかった。盲検安全性データは、単一用量研究薬物投与が用量範囲にわたって良好な耐容性を示したことを示す。
【0153】
上に記載されている様々な実施形態は、さらなる実施形態を提供するために組み合わせることができる。この明細書に言及されている及び／又は出願データシートにリストされている米国特許、米国特許出願公報、米国特許出願、外国特許、外国特許出願及び非特許公報の全ては、それら全体で、参照により本明細書に組み込まれる。実施形態の態様は、必要ならば、なおさらなる実施形態を提供するために様々な特許、出願及び公報の概念を用いて修飾することができる。
【0154】
これらの及び他の変化は、上の詳細な記載に照らして実施形態に対して行うことができる。一般に、以下の請求項において、使用されている用語は、本明細書及び請求項に開示されている特定の実施形態に請求項を限定すると解釈されるべきでないが、全ての可能な実施形態を、権利を与えられるこうした請求項と同等物の全範疇と一緒に含むと解釈されるべきである。したがって、請求項は本開示によって限定されない。
【0155】
この明細書において記述されている全ての公報、特許及び特許出願は、各個々の公報、特許又は特許出願が参照により組み込まれると具体的に及び個々に示されているのと同じ程度に、参照により本明細書に組み込まれる。
【0156】
この出願は、２０２１年１０月１９日に出願された米国仮出願第６３／２５７，５０９号、及び２０２２年７月２８日に出願された米国仮出願第６３／３９３，１６３号に対する優先権の利益を主張し、これらの出願は、本明細書によって参照によりそれら全体で組み込まれる。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26】
【図27】
【図28】
【図29】
【国際調査報告】