特表 2024-541269 放射性標識化合物及びその前駆体化合物、その調製方法並びにその用途

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-11-08

(54)【発明の名称】放射性標識化合物及びその前駆体化合物、その調製方法並びにその用途

(51)【国際特許分類】

   C07F 9/38 20060101AFI20241031BHJP

   A61K 31/675 20060101ALI20241031BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20241031BHJP

   A61P 35/04 20060101ALI20241031BHJP

   A61P 19/00 20060101ALI20241031BHJP

   A61K 51/04 20060101ALI20241031BHJP

【ＦＩ】

C07F9/38 C CSP

A61K31/675

A61P35/00

A61P35/04

A61P19/00

A61K51/04 200

A61K51/04 100

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024525938

(86)(22)【出願日】2022-01-06

(85)【翻訳文提出日】2024-04-26

(86)【国際出願番号】 CN2022070444

(87)【国際公開番号】W WO2023092830

(87)【国際公開日】2023-06-01

(31)【優先権主張番号】202111419244.X

(32)【優先日】2021-11-26

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】524161759

【氏名又は名称】ザ アフィリエイテッド ホスピタル オブ サウスウェスト メディカル ユニバーシティー

【氏名又は名称原語表記】ＴＨＥ ＡＦＦＩＬＩＡＴＥＤ ＨＯＳＰＩＴＡＬ ＯＦ ＳＯＵＴＨＷＥＳＴ ＭＥＤＩＣＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ

(74)【代理人】

【識別番号】100107456

【弁理士】

【氏名又は名称】池田 成人

(74)【代理人】

【識別番号】100162352

【弁理士】

【氏名又は名称】酒巻 順一郎

(74)【代理人】

【識別番号】100123995

【弁理士】

【氏名又は名称】野田 雅一

(72)【発明者】

【氏名】チェン， ユェ

(72)【発明者】

【氏名】ワン， インウェイ

(72)【発明者】

【氏名】ワン， チーシン

(72)【発明者】

【氏名】チウ， リン

(72)【発明者】

【氏名】フェン， ユェ

(72)【発明者】

【氏名】ワン， リー

(72)【発明者】

【氏名】チェン， ザン

(72)【発明者】

【氏名】ヤン， ジアン

(72)【発明者】

【氏名】ペン， デンサイ

(72)【発明者】

【氏名】リウ， グァンフー

(72)【発明者】

【氏名】シュー， ティンティン

(72)【発明者】

【氏名】シン， ナイグオ

(72)【発明者】

【氏名】リウ， ハンシャン

【テーマコード（参考）】

4C084

4C085

4C086

4H050

【Ｆターム（参考）】

4C084AA12

4C084NA13

4C084NA14

4C084NA20

4C084ZA961

4C084ZA962

4C084ZB261

4C084ZB262

4C084ZC781

4C084ZC782

4C084ZC801

4C084ZC802

4C085KA09

4C085KA26

4C085KA29

4C085KB02

4C085KB07

4C085KB12

4C085KB59

4C085LL18

4C085LL20

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086DA38

4C086HA28

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA13

4C086NA14

4C086ZA96

4C086ZB26

4C086ZC78

4C086ZC80

4H050AA01

4H050AA03

4H050AB20

4H050AC90

(57)【要約】

式（Ｉ）に示す、放射性標識化合物の前駆体化合物、前記前駆体化合物の放射性標識化合物又は前記放射性標識化合物の薬学的に許容される塩。放射性標識化合物は、水溶性が高く、室温でのインビトロ安定性が良好であり、血漿タンパク質結合率が高く、マウスにおけるインビボ分布とニュージーランドウサギの造影の両方で高い長時間の骨取込性を示し、動物実験によって、開発効果が^９９ｍＴｃ－ＭＤＰよりも良好であることが示される。

【選択図】 図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式Ｉ：

【化1】

で表される構造を有する、放射性標識化合物又は前記放射性標識化合物の薬学的に許容される塩の、前駆体化合物。

【請求項2】

式ＩＩ：

【化2】

式中、Ａは放射性核種、好ましくは^６８Ｇａ、^１７７Ｌｕ、^２２５Ａｃ、^６４Ｃｕ、又は^２２１Ａｔを表す、
で表される構造を有することにより特徴付けられている、式Ｉで表される化合物の放射性標識化合物又は前記放射性標識化合物の薬学的に許容される塩。

【請求項3】

９５％以上の放射化学的純度を有することにより特徴付けられている、請求項２に記載の放射性標識化合物又は前記放射性標識化合物の薬学的に許容される塩。

【請求項4】

ステップ１、化合物１をｔｅｒｔ－ブチルアクリレートと反応させて化合物２を形成するステップと、
ステップ２、化合物２のＥｔＯＡｃ溶液にＨＣｌ／ＥｔＯＡｃを滴下し、反応させて化合物３を生成するステップと、
ステップ３、化合物３をＰｈＣｌに添加し、窒素保護下でＰＯＣｌ_３及びＨ_３ＰＯ_３を添加し、加熱し、反応させ、冷却し、次いでクロロベンゼン溶液を注ぎ出し、Ｈ_２Ｏを添加し、加熱し、撹拌して、化合物４を生成するステップと、
ステップ４、化合物４の水溶液にＤＯＴＡ－ＮＨＳ－エステル溶液を添加し、次いでトリエチルアミンを添加し、反応させて、前記式Ｉで表される化合物を生成するステップと、
を含み、
反応手順が、

【化3】

であることにより特徴付けられている、請求項１に記載の放射性標識化合物の前駆体化合物の調製方法。

【請求項5】

前記式Ｉで表される化合物と放射性核種塩溶液とを反応させて、前記式ＩＩで表される放射性標識化合物を得るステップを含むことにより特徴付けられている、請求項２又は３に記載の放射性標識化合物の調製方法。

【請求項6】

前記放射性核種が^６８Ｇａ、^１７７Ｌｕ又は^６４Ｃｕである場合、前記式Ｉで表される化合物の溶液と、酢酸ナトリウム溶液と、放射性核種塩溶液とを均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を調整し、反応させ、再度ｐＨ値を調整し、滅菌し、濾過することによって、前記放射性標識化合物を得ることと、
前記放射性核種が^２２５Ａｃである場合、前記式Ｉで表される化合物の溶液と、クエン酸ナトリウム溶液と、アスコルビン酸ナトリウム溶液と、放射性核種塩溶液とを均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を調整し、反応させ、再度ｐＨ値を調整し、滅菌し、濾過することによって、前記放射性標識化合物を得ることと、
前記放射性核種が^２１１Ａｔである場合、前記式Ｉで表される化合物の溶液と、ホウ酸ナトリウム溶液と、放射性核種塩溶液とを均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を調整し、反応させ、再度ｐＨ値を調整し、滅菌し、濾過することによって、前記放射性標識化合物を得ることと、
を特徴とする、請求項５に記載の調製方法。

【請求項7】

前記放射性核種が^６８Ｇａである場合、前記式Ｉで表される化合物２０～３０μｇを、濃度０．２５Ｍの酢酸ナトリウム溶液０．８～１．４ｍｌに添加し、次いで、２０ｍＣｉの活性を有する^６８Ｇａ塩溶液を添加し、均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を４～７、好ましくは５に調整し、８０～１００℃、好ましくは９５℃で、反応時間１０～３０分、好ましくは１５分で反応させ、反応後、前記ｐＨ値を５に調整し、ここで、前記式Ｉで表される化合物の溶液の濃度は１ｍｇ／ｍｌであり、前記^６８Ｇａ塩溶液の濃度は５ｍＣｉ／ｍｌ～１０ｍＣｉ／ｍｌであり、
前記放射性核種が^１７７Ｌｕである場合、前記式Ｉで表される化合物２０～３０μｇを、濃度０．２５Ｍの酢酸ナトリウム溶液０．８～１．４ｍｌに添加し、次いで、２ｍＣｉの活性を有する^１７７Ｌｕ塩溶液を添加し、均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を４～７、好ましくは５に調整し、８０～１００℃、好ましくは９５℃で、反応時間１０～３０分、好ましくは１５分で反応させ、反応後、前記ｐＨ値を４．５に調整し、ここで、前記式Ｉで表される化合物の溶液の濃度は１ｍｇ／ｍｌであり、前記^１７７Ｌｕ塩溶液の濃度は１０ｍＣｉ／ｍｌ～２０ｍＣｉ／ｍｌであり、
前記放射性核種が^２２５Ａｃである場合、前記式Ｉで表される化合物２０～３０μｇを、濃度０．１Ｍのアスコルビン酸ナトリウム溶液０．８～１．４ｍｌ及び濃度０．１Ｍのクエン酸ナトリウム溶液０．８～１．４ｍｌに添加し、次いで、０．０１ｍＣｉの活性を有する^２２５Ａｃ塩溶液を添加し、均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を４～７、好ましくは５に調整し、８０～１００℃、好ましくは９５℃で、反応時間１０～３０分、好ましくは１５分で反応させ、反応後、前記ｐＨ値を４．５に調整し、ここで、前記式Ｉで表される化合物の溶液の濃度は１ｍｇ／ｍｌであり、前記^２２５Ａｃ塩溶液の濃度は０．０１ｍＣｉ／ｍｌ～０．０２ｍＣｉ／ｍｌであり、
前記放射性核種が^６４Ｃｕである場合、前記式Ｉで表される化合物２０～３０μｇを、濃度０．２５Ｍの酢酸ナトリウム溶液０．８～１．４ｍｌに添加し、次いで、５ｍＣｉの活性を有する^６４Ｃｕ塩溶液を添加し、均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を４～７、好ましくは５に調整し、８０～１００℃、好ましくは９５℃で、反応時間１０～３０分、好ましくは１５分で反応させ、反応後、前記ｐＨ値を４に調整し、ここで、前記式Ｉで表される化合物の溶液の濃度は１ｍｇ／ｍｌであり、前記^６４Ｃｕ塩溶液の濃度は５ｍＣｉ／ｍｌ～１０ｍＣｉ／ｍｌであり、
前記放射性核種が^２１１Ａｔである場合、前記式Ｉで表される化合物２０～３０μｇを、濃度０．２５Ｍのホウ酸ナトリウム溶液０．８～１．４ｍｌに添加し、次いで、１ｍＣｉの活性を有する^２１１Ａｔ塩溶液を添加し、均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を４～７、好ましくは５に調整し、８０～１００℃、好ましくは９５℃で、反応時間１０～３０分、好ましくは１５分で反応させ、反応後、前記ｐＨ値を７に調整し、ここで、前記式Ｉで表される化合物の溶液の濃度は１ｍｇ／ｍｌであり、前記^２１１Ａｔ塩溶液の濃度は１．０ｍＣｉ／ｍｌ～２．０ｍＣｉ／ｍｌである、
ことを特徴とする、請求項６に記載の調製方法。

【請求項8】

転移性骨腫瘍の造影及び治療の両方のための薬剤の製造における、請求項１に記載の式Ｉで表される化合物の使用。

【請求項9】

転移性骨腫瘍の造影及び治療の両方のための薬剤の製造における、請求項２又は３に記載の式ＩＩで表される化合物の使用。

【発明の詳細な説明】

【発明の詳細な説明】

【0001】

［技術分野］
本開示は、核医学の技術分野に属し、具体的には、放射性標識化合物、その前駆体化合物、その調製方法及びその用途に関する。

【0002】

［背景技術］
骨は、悪性腫瘍が遠隔転移する一般的な部位であり、遠隔転移の発生率は肺及び肝臓に次いで多い。転移性骨腫瘍の早期診断及び治療は、患者の予後及び生活の質を効果的に改善することができる。

【0003】

転移性骨腫瘍の現在の治療には、主に放射線療法、化学療法、放射性核種療法、ビスホスホネート療法、鎮痛療法及び緩和手術が含まれる。転移性骨腫瘍のための標的化放射性核種療法は、骨痛を有意に軽減し、腫瘍細胞を死滅させることができ、毒性副作用がほとんどなく、したがって安全かつ効果的な治療方法である。現在、転移性骨腫瘍を治療するために中国で一般的に使用されている放射性医薬品には、^８９ＳｒＣｌ_２及び^１５３Ｓｍ－ＥＤＴＭＰが含まれる。それらは、骨痛を有意に軽減し、骨格関連事象の発生率を低下させることができる。しかし、いずれも原子炉で製造する必要があり、比較的高価であり、^８９ＳｒＣｌ_２を造影に用いることは困難であるため、^８９ＳｒＣｌ_２には一定の使用上の制約がある。より効果的で安価で容易に入手可能な治療用放射性医薬品に対する、喫緊の臨床的必要性がある。

【0004】

^６８Ｇａ、^１７７Ｌｕ、^２２５Ａｃ、^６４Ｃｕ、及び^２２１Ａｔは全て、優れた核特性を有する医療用同位体である。^６８Ｇａは、^６８Ｇｅ／^６８Ｇａ発生器によって得られ、これは入手が簡便で低費用である。β^＋線を放出することができ、ＰＥＴ造影に使用される。^１７７Ｌｕ、^２２５Ａｃ、^６４Ｃｕ、及び^２２１Ａｔは、いずれも海外から購入され、供給経路は円滑で安定している。^１７７Ｌｕは、半減期（Ｔ１／２）が６．７日であり、治療に用いることができる４９７ｋｅＶ（７８．６％）、３８４ｋｅＶ（９．１％）、１７６ｋｅＶ（１２．２％）のエネルギーをそれぞれ有する３種類のβ粒子を放出し、また、インビボでの局在化及び造影に適した１１３ｋｅＶ（６．４％）及び２０８ｋｅＶ（１１％）のγ線を放出する。^２２５Ａｃは、αイオンがより高い線エネルギー移動、高い光線エネルギー、短い飛程を有するα線を放出するため、相対的に高い生物学的効果と、腫瘍細胞に対する最も強い殺傷効果とを有する。^２２５Ａｃは半減期（Ｔ１／２）が９．９日であり、^２２５Ａｃの娘核種である^２１３Ｂｉは半減期（Ｔ１／２）が４６分である。^６４Ｃｕ核種は、好適な半減期（１２．７時間）、固有の崩壊特性（β^＋減衰、β^－減衰、電子捕獲）などの特性、及び様々なリガンドと配位して錯体を形成する能力のために、ＰＥＴ分子プローブ及びセラノスティクス医療の分野において集中的に研究されている。^２１１Ａｔの減衰によって放出されるα線は、平均エネルギー６．８ＭｅＶであり、組織内で５５～８８μｍの飛程を有する。^２１１Ａｔは、半減期が７．２時間であり、強い臨床応用的価値を有する。現在、^９９ｍＴｃ－ＭＤＰは最も一般的に使用されている臨床骨造影剤であるが、単一光子造影剤としての、病変の局在化及び表示能力は、陽電子造影剤の能力よりもはるかに低い。ホスホネート（ＨＥＤＰ）は、転移性骨腫瘍の造影及び標的療法のための臨床研究において一般的に使用される薬物である。しかしながら、第１世代の無窒素ビスホスホネートとして、ＨＥＤＰは、アレンドロン酸及びイバンドロン酸などの第２及び第３世代の窒素含有ビスホスホネートよりも効果が著しく低い。したがって、より良好な造影効果、より良好な治療効果、並びに転移性骨腫瘍の造影及び治療の両方の能力を有する薬物を提供することは、当業者にとって喫緊の問題となっている。

【0005】

［本開示の内容］
本開示の第１の目的は、核種標識された後に、転移性骨腫瘍の造影及び治療の両方に適した薬物を生成することができる、式Ｉで表される前駆体化合物を提供することである。

【0006】

本開示の第２の目的は、式Ｉで表される化合物を核種で標識して得られる、式ＩＩで表される放射性標識化合物を提供することである。

【0007】

本開示の第３の目的は、式Ｉで表される前駆体化合物を調製する方法を提供することである。

【0008】

本開示の第４の目的は、式ＩＩで表される放射性標識化合物を調製する方法を提供することである。

【0009】

本開示の第５の目的は、式Ｉで表される前駆体化合物の用途を提供することである。

【0010】

本開示の第６の目的は、式ＩＩで表される放射性標識化合物の用途を提供することである。

【0011】

上記の目的を達成するために、本開示によって採用される技術的解決策は以下の通りである。

【0012】

本開示は、式Ｉで表される構造を有する、放射性標識化合物又は前記放射性標識化合物の薬学的に許容される塩の、前駆体化合物を提供する。

【化1】

【0013】

本開示は、式ＩＩで表される構造を有する、式Ｉで表される化合物の放射性標識化合物又は前記放射性標識化合物の薬学的に許容される塩を提供する。

【化2】

式中、Ａは核種、好ましくは^６８Ｇａ、^１７７Ｌｕ、^２２５Ａｃ、^６４Ｃｕ、又は^２２１Ａｔを表す。

【0014】

本開示は、発明的な方法でキレート剤ＤＯＴＡをイバンドロン酸と結合させて、新たな化合物であるＤＯＴＡ－イバンドロン酸を形成する。放射性核種^６８Ｇａ、^１７７Ｌｕ、^２２５Ａｃ、^６４Ｃｕ、又は^２１１Ａｔで標識する場合、前駆体の使用量は、イバンドロン酸単独の使用量よりもはるかに少ない。本発明者らは、転移性骨腫瘍の造影及び治療の両方のための新しい薬物である様々な放射性核種標識ＤＯＴＡ－イバンドロン酸を提供する。この種の薬物は、転移性骨腫瘍に対して放射性核種^６８Ｇａ、^１７７Ｌｕ、^２２５Ａｃ、^６４Ｃｕ、又は^２１１Ａｔ及びＤＯＴＡ－イバンドロン酸の造影及び治療効果をより良好に発揮できることによって、１＋１が２より大きくなる相乗効果を生み出す。

【0015】

本開示のいくつかの実施形態において、放射性核種標識されたＤＯＴＡ－イバンドロン酸は、９５％以上の放射化学的純度を有する。

【0016】

本開示は、以下の
ステップ１、化合物１をｔｅｒｔ－ブチルアクリレートと反応させて化合物２を形成することと、
ステップ２、化合物２のＥｔＯＡｃ溶液にＨＣｌ／ＥｔＯＡｃを滴下し、反応させて化合物３を生成することと、
ステップ３、化合物３をＰｈＣｌに添加し、窒素保護下でＰＯＣｌ_３及びＨ_３ＰＯ_３を添加し、加熱し、反応させ、冷却し、次いでクロロベンゼン溶液を注ぎ出し、Ｈ_２Ｏを添加し、加熱し、撹拌して、化合物４を生成することと、
ステップ４、化合物４の水溶液にＤＯＴＡ－ＮＨＳ－エステル溶液を添加し、次いでトリエチルアミンを添加し、反応させて、式Ｉで表される化合物を生成することと、
を含み、反応手順が以下の通りである、式Ｉで表される放射性標識化合物の前駆体化合物の調製方法を提供する。

【化3】

【0017】

本開示は、式Ｉで表される化合物を反応させることを含む、式ＩＩで表される放射性標識化合物の調製方法を提供する。

【0018】

本開示のいくつかの実施形態では、放射性核種が^６８Ｇａ、^１７７Ｌｕ又は^６４Ｃｕである場合、式Ｉで表される化合物の溶液と、酢酸ナトリウム溶液と、放射性核種塩溶液とを均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を調整し、反応させ、再度ｐＨ値を調整し、滅菌し、濾過することによって、放射性標識化合物が得られ、
放射性核種が^２２５Ａｃである場合、式Ｉで表される化合物の溶液と、クエン酸ナトリウム溶液と、アスコルビン酸ナトリウム溶液と、放射性核種塩溶液とを均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を調整し、反応させ、再度ｐＨ値を調整し、滅菌し、濾過することによって、放射性標識化合物が得られ、
放射性核種が^２１１Ａｔである場合、式Ｉで表される化合物の溶液と、ホウ酸ナトリウム溶液と、放射性核種塩溶液とを均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を調整し、反応させ、再度ｐＨ値を調整し、滅菌し、濾過することによって、放射性標識化合物が得られる。

【0019】

本開示のいくつかの実施形態では、放射性核種が^６８Ｇａである場合、式Ｉで表される化合物２０～３０μｇを、濃度０．２５Ｍの酢酸ナトリウム溶液０．８～１．４ｍｌに添加し、次いで、２０ｍＣｉの活性を有する^６８Ｇａ塩溶液を添加し、均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を４～７、好ましくは５に調整し、８０～１００℃、好ましくは９５℃で、反応時間１０～３０分、好ましくは１５分で反応させ、反応後、ｐＨ値を５に調整することによって放射性標識化合物が得られ、ここで、式Ｉで表される化合物の溶液の濃度は１ｍｇ／ｍｌであり、^６８Ｇａ塩溶液の濃度は５ｍＣｉ／ｍｌ～１０ｍＣｉ／ｍｌであり、
放射性核種が^１７７Ｌｕである場合、式Ｉで表される化合物２０～３０μｇを、濃度０．２５Ｍの酢酸ナトリウム溶液０．８～１．４ｍｌに添加し、次いで、２ｍＣｉの活性を有する^１７７Ｌｕ塩溶液を添加し、均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を４～７、好ましくは５に調整し、８０～１００℃、好ましくは９５℃で、反応時間１０～３０分、好ましくは１５分で反応させ、反応後、ｐＨ値を４．５に調整することによって放射性標識化合物が得られ、ここで、式Ｉで表される化合物の溶液の濃度は１ｍｇ／ｍｌであり、^１７７Ｌｕ塩溶液の濃度は１０ｍＣｉ／ｍｌ～２０ｍＣｉ／ｍｌであり、
放射性核種が^２２５Ａｃである場合、式Ｉで表される化合物２０～３０μｇを、濃度０．１Ｍのアスコルビン酸ナトリウム溶液０．８～１．４ｍｌ及び濃度０．１Ｍのクエン酸ナトリウム溶液０．８～１．４ｍｌに添加し、次いで、０．０１ｍＣｉの活性を有する^２２５Ａｃ塩溶液を添加し、均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を４～７、好ましくは５に調整し、８０～１００℃、好ましくは９５℃で、反応時間１０～３０分、好ましくは１５分で反応させ、反応後、ｐＨ値を４．５に調整することによって放射性標識化合物が得られ、ここで、式Ｉで表される化合物の溶液の濃度は１ｍｇ／ｍｌであり、^２２５Ａｃ塩溶液の濃度は０．０１ｍＣｉ／ｍｌ～０．０２ｍＣｉ／ｍｌであり、
放射性核種が^６４Ｃｕである場合、式Ｉで表される化合物２０～３０μｇを、濃度０．２５Ｍの酢酸ナトリウム溶液０．８～１．４ｍｌに添加し、次いで、５ｍＣｉの活性を有する^６４Ｃｕ塩溶液を添加し、均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を４～７、好ましくは５に調整し、８０～１００℃、好ましくは９５℃で、反応時間１０～３０分、好ましくは１５分で反応させ、反応後、ｐＨ値を４に調整することによって放射性標識化合物が得られ、ここで、式Ｉで表される化合物の溶液の濃度は１ｍｇ／ｍｌであり、^６４Ｃｕ塩溶液の濃度は５ｍＣｉ／ｍｌ～１０ｍＣｉ／ｍｌであり、
放射性核種が^２１１Ａｔである場合、式Ｉで表される化合物２０～３０μｇを、濃度０．２５Ｍのホウ酸ナトリウム溶液０．８～１．４ｍｌに添加し、次いで、１ｍＣｉの活性を有する^２１１Ａｔ塩溶液を添加し、均一に混合し、混合溶液のｐＨ値を４～７、好ましくは５に調整し、８０～１００℃、好ましくは９５℃で、反応時間１０～３０分、好ましくは１５分で反応させ、反応後、ｐＨ値を７に調整することによって放射性標識化合物が得られ、ここで、式Ｉで表される化合物の溶液の濃度は１ｍｇ／ｍｌであり、^２１１Ａｔ塩溶液の濃度は１．０ｍＣｉ／ｍｌ～２．０ｍＣｉ／ｍｌである。

【0020】

本開示は、転移性骨腫瘍の造影及び治療の両方のための薬剤の製造における、式Ｉで表される化合物の使用を提供する。

【0021】

本開示は、転移性骨腫瘍の造影及び治療の両方のための薬剤の製造における、式ＩＩで表される化合物の使用を提供する。

【0022】

従来技術と比較して、本開示は以下の有利な効果を有する。

【0023】

本開示は、科学的な設計及び簡易な方法を提供する。本開示は、発明的な方法でイバンドロン酸をキレート剤と結合させてＤＯＴＡ－イバンドロン酸を得、次いでＤＯＴＡ－イバンドロン酸を放射性核種^６８Ｇａ、^１７７Ｌｕ、^２２５Ａｃ、^６４Ｃｕ、又は^２１１Ａｔで標識して^６８Ｇａ－、^１７７Ｌｕ－、^２２５Ａｃ－、^６４Ｃｕ－、又は^２１１Ａｔ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸を得る。本開示の^６８Ｇａ－、^１７７Ｌｕ－、^２２５Ａｃ－、^６４Ｃｕ－、又は^２１１Ａｔ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸は、マウスにおけるインビボ分布及びニュージーランドウサギの造影によって示されるように、高い水溶性、室温での良好なインビトロ安定性、高い血漿タンパク質結合速度、及び高い長期の骨取込性を有するため、優れた性能を有した転移性骨腫瘍のための骨造影剤及び放射性治療剤である。薬力学的実験は、^６８Ｇａ－、^１７７Ｌｕ－、^２２５Ａｃ－、^６４Ｃｕ－、又は^２１１Ａｔ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸が、対応する^６８ＧａＣｌ_３、^１７７ＬｕＣｌ_３、^２２５ＡｃＣｌ_３、^６４ＣｕＣｌ_２、Ｎａ^２１１Ａｔ、又はＤＯＴＡ－イバンドロン酸の群よりも診断又は治療のいずれかに良好な効果を有することを示し、悪性腫瘍骨転移の診断及び治療における^６８Ｇａ－、^１７７Ｌｕ－、^２２５Ａｃ－、^６４Ｃｕ－、又は^２１１Ａｔ－イバンドロン酸の実現可能性及び有効性を示している。

【0024】

^６８Ｇａ－、^１７７Ｌｕ－、^２２５Ａｃ－、^６４Ｃｕ－、又は^２１１Ａｔ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸を調製するための本開示の標識方法は簡易であり、反応時間が短く、標識収率が高く、前駆体の使用量が非常に少ない（マイクログラムレベル）。標識化合物についての標的病変と非標的組織との比（Ｔ／Ｎ値）は非常に高く、最大１０倍以上である。文献報告によれば、Ｔ／Ｎ値が４～５より大きい場合に高い治療能力値を有する。

【図面の簡単な説明】

【0025】

【図1】実験例５における、１時間後及び３時間後の、ニュージーランドウサギの^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－ＩＢＡのＰＥＴ造影を示す図である。

【図2】実験例６における、１日後、３日後、５日後及び７日後の、ニュージーランドウサギの^１７７Ｌｕ－ＤＯＴＡ－ＩＢＡのＳＰＥＣＴ全身静的造影を示す図である。

【図3】実験例７における、１日後、３日後及び５日後の、ニュージーランドウサギの^２２５Ａｃ－ＤＯＴＡ－ＩＢＡのＳＰＥＣＴ全身静的造影を示す図である。

【図4】式Ｉで表される前駆体化合物の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）図を示す。

【図5】式Ｉで表される前駆体化合物の液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ－ＭＳ）図を示す。

【0026】

［本開示を実施するための具体的な様式］
本開示の実施例の目的、技術的解決策及び利点をより明確にするために、本開示の実施例における技術的解決策を以下に明確かつ完全に説明する。具体的な条件が実施例に明記されていない場合、条件は、従来の条件又は製造業者によって推奨される条件に従って実施されるものとする。使用される試薬又は機器の製造業者が示されない場合、試薬又は機器は全て、商業的に購入することができる従来の製品である。

【0027】

実施例１
この実施例では、本開示の式Ｉで表される前駆体化合物の調製方法が開示され、前駆体化合物の合成経路は以下の通りであった。

【化4】

【0028】

ステップ１ 化合物２の調製

【化5】

ｔｅｒｔ－ブチルアクリレート（６．３４ｇ、４９．４ｍｍｏｌ）を化合物１（５．００ｇ、２４．７ｍｍｏｌ）に添加した。２５℃で３時間、撹拌しながら反応させた。薄層紙クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を用いて、反応が完了したこと、及び新たなスポットが生成されたことを監視した。反応溶液を濃縮し、無色油状の化合物２（７．９０ｇ、収率９６．７％）を得た。粗生成物を精製せずに次の反応に直接使用した。

【0029】

ステップ２ 化合物３の調製

【化6】

ＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ（４Ｍ、２０．０ｍＬ）を、氷浴条件下で化合物２（１．９０ｇ、５．７５ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（２．００ｍＬ）溶液に滴下した。反応溶液を２５℃で２時間撹拌した。液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ－ＭＳ）により、原料の反応が完了したことを検出した。反応溶液を真空下で濃縮して、無色油状の粗化合物３（８００ｍｇ、収率７９．９％）を得、これを更に精製することなく次の反応に直接使用した。

【0030】

ステップ３ 化合物４の調製

【化7】

化合物３（８００ｍｇ、３．２４ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）をＰｈＣｌ（１００ｍＬ）に添加し、ＰＯＣｌ_３（９．９３ｇ、６４．７ｍｍｏｌ）及びＨ_３ＰＯ_３（５．３１ｇ、６４．７ｍｍｏｌ）を窒素保護下で添加した。反応混合物を８０℃に加熱し、１６時間撹拌した。冷却後、クロロベンゼン溶液を注ぎ出し、Ｈ_２Ｏ（２０．０ｍＬ）を加え、８０℃で５時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳにより、生成物の集塊の存在を監視した。反応溶液を濾過し、真空下で濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣ（ＹＭＣ－Ａｃｔｕｓ Ｔｒｉａｒｔ Ｄｉｏｌ－ＨＩＬＩＣ、１５０＊３０ｍｍ、５μｍ、１２０Å 移動相：０．２％ ＣＨ_３ＣＯＯＨ、ＣＨ_３ＣＮ）により精製して、化合物４を白色固体（９０．０ｍｇ、収率８．６８％）として得た。

【0031】

ステップ４ 式Ｉで表される化合物Ｃａｒｂｓの調製

【化8】

化合物４（６０．０ｍｇ、１８７μｍｏｌ）のＨ_２Ｏ（２００μＬ）溶液に、ＤＯＴＡ－ＮＨＳ－エステル（１４１ｍｇ、２８１μｍｏｌ）のＤＭＦ（２００μＬ）溶液を加え、トリエチルアミン（１１４ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を添加した。反応溶液を２５℃で１６時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳにより、生成物の集塊の存在を監視した。反応溶液を濾過、濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣ（Ｈｉｌｉｃ、０．２％ ＣＨ_３ＣＯＯＨ）により精製し、式Ｉで表される化合物Ｃａｒｂｓを白色固体（４．００ｍｇ、収率３．０２％、純度８６．８％）として得た。

【0032】

図４に、式Ｉで表される化合物のＨＰＬＣ図を示し、図５に、ＬＣ－ＭＳ図を示した。

【0033】

実施例２
この実施例では、^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸を調製するためのＤＯＴＡ－イバンドロン酸の量を調査し、以下のように特定した。

【0034】

８本のＥＰチューブを用意し、それぞれに５μｇ、１０μｇ、１５μｇ、２０μｇ、２５μｇ、３０μｇ、３５μｇ、４０μｇのＤＯＴＡ－イバンドロン酸（１ｍｇ／ｍｌ）を加えた。各チューブに、酢酸ナトリウム溶液（０．２５Ｍ）１ｍＬを加え、次いで、新たにすすいだ^６８ＧａＣｌ_３溶出液（５ｍｃｉ／ｍｌ）４ｍｌを加えた。酢酸ナトリウム溶液０．２５Ｍと塩酸０．０１ＭとでｐＨ値を約５に調整し、混合溶液を十分に振盪及び混合し、９５℃の金属浴中で１５分間反応させた。反応終了後、反応溶液を室温まで冷却し、各チューブのｐＨ値を４－６に調整し、反応液を滅菌し、０．２２μｍの濾過膜で濾過した。続いて、^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の放射化学的純度を、薄層紙クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を用いて測定した。結果を表１に示した。

【表1】

【0035】

表１から分かるように、他の条件を固定した場合、^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の放射化学的純度は、ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の量が２０～３０μｇである場合に最適であり、この範囲より低い又は高い場合、放射化学的純度は徐々に低下する。

【0036】

実施例３
この実施例では、本開示におけるｐＨ値を調査し、以下のように特定した。

【0037】

７本のＥＰチューブを用意し、ＤＯＴＡ－イバンドロン酸（１ｍｇ／ｍｌ）２５μｇと、酢酸ナトリウム溶液（０．２５Ｍ）１ｍｌと、新たにすすいだ^６８ＧａＣｌ_３溶出液（５ｍｃｉ／ｍｌ）４ｍｌとを各チューブに順次加えた。酢酸ナトリウム溶液０．２５Ｍと塩酸０．１Ｍとを用いて、これらのチューブ内のｐＨ値をそれぞれ２、３、４、５、６、７及び８に調整した。混合液を十分に振盪及び混合し、９５℃の金属浴中で１５分間反応させた。反応終了後、反応溶液を室温まで冷却し、滅菌し、０．２２μｍの濾過膜で濾過した。続いて、^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の放射化学的純度を、薄層紙クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を用いて測定した。結果を表２に示した。

【表2】

【0038】

表２から、ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の放射化学的純度は、ｐＨ値が５の場合に最適であることが分かる。ｐＨ値が５より高い又は低い場合、放射化学的純度は徐々に低下する。ｐＨ値が６を超える場合、放射化学的純度は急速に低下する。

【0039】

実施例４
この実施例では、本開示における酢酸ナトリウムの量を調査し、以下のように特定した。

【0040】

８本のＥＰチューブを用意し、それぞれ０．２ｍｌ、０．４ｍｌ、０．６ｍｌ、０．８ｍｌ、１．０ｍｌ、１．２ｍｌ、１．４ｍｌ、及び１．６ｍｌの酢酸ナトリウム溶液（０．２５Ｍ）を加えた。各チューブに、ＤＯＴＡ－イバンドロン酸（１ｍｇ／ｍｌ）２５μｇと、新たにすすいだ^６８ＧａＣｌ_３溶出液（５ｍｃｉ／ｍｌ）４ｍｌとを添加し、酢酸ナトリウム溶液０．２５Ｍと塩酸０．１ＭとでｐＨ値をそれぞれ５に調整した。混合液を十分に振盪及び混合し、９５℃の金属浴中で１５分間反応させた。反応終了後、反応溶液を室温まで冷却し、各チューブのｐＨ値を５に調整し、反応液を滅菌し、０．２２μｍの濾過膜で濾過した。続いて、^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の放射化学的純度を、薄層紙クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を用いて測定した。結果を以下の表３に示した。

【表3】

【0041】

表３から分かるように、他の条件が不変である場合、^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の放射化学的純度は、酢酸ナトリウム溶液の量が０．８～１．４ｍｌである場合に最適であり、この範囲より低い又は高い場合、放射化学的純度は徐々に低下する。

【0042】

実施例５
この実施例では、本開示における反応温度及び持続時間を調査し、以下のように特定した。

【0043】

１８本のＥＰチューブを用意し、Ａ群（室温２５±２℃）、Ｂ群（６０℃）、及びＣ群（９５℃）の３つの群に分けた。各群６本のチューブを取り、番号Ａ／Ｂ／Ｃ_１～６と記した。各チューブに、ＤＯＴＡ－イバンドロン酸（１ｍｇ／ｍｌ）２５μｇと、酢酸ナトリウム溶液（０．２５Ｍ）１ｍｌと、新たにすすいだ^６８ＧａＣｌ_３溶出液（５ｍｃｉ／ｍｌ）４ｍｌとを事前に順次加え、酢酸ナトリウム溶液０．２５Ｍと塩酸０．１ＭとでｐＨ値をそれぞれ約５に調整した。混合溶液を十分に振盪及び混合し、次いで、各群の６本のチューブを各群の温度でそれぞれ５分、１０分、１５分、２０分、２５分及び３０分反応させた。反応終了後、反応溶液を室温まで冷却し、各チューブのｐＨ値を５に調整し、反応液を滅菌し、０．２２μｍの濾過膜で濾過した。続いて、^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の放射化学的純度を、薄層紙クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を用いて測定した。結果を以下の表４に示した。

【表4】

【0044】

表４から、他の条件が不変である場合、^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の放射化学的純度は、反応を９５℃で１５分間実施した場合に最適であることが分かる。反応時間が長すぎる、短すぎる、又は温度が低すぎると、放射化学的純度は低下する。

【0045】

実施例６
この実施例では、本開示の^１７７Ｌｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の調製方法を開示し、以下のように特定した。

【0046】

ＤＯＴＡ－イバンドロン酸（２５μｇ）に、酢酸ナトリウム溶液（０．２５Ｍ）１ｍｌ、次いで新たにすすいだ^１７７ＬｕＣｌ_３溶出液（約２．０ｍｃｉ）０．２ｍｌを加えた。酢酸ナトリウム溶液０．２５Ｍと塩酸０．０１Ｍとで混合溶液のｐＨ値を約５に調整し、９５℃の金属浴中で１５分間反応させた。反応溶液を取り出し、塩酸０．０４ＭでｐＨ約４．５に調整した。次いで、反応溶液をＣＭカラムに通し（遊離^１７７Ｌｕを除去するため）、次いで生成物を滅菌フィルタ膜に通し、最終的に^１７７Ｌｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸を得た。

【0047】

実施例７
この実施例では、本開示の^２２５Ａｃ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の新たな調製方法を開示し、以下のように特定した。

【0048】

ＤＯＴＡ－イバンドロン酸（２５μｇ）に、アスコルビン酸溶液（０．１Ｍ）１ｍｌと、クエン酸ナトリウム溶液（０．１Ｍ）１ｍｌ、次いで新たにすすいだ^２２５ＡｃＣｌ_３溶出液（約０．０１ｍｃｉ）１００μｌとを加えた。混合溶液を塩酸０．０４ＭでｐＨ約４．５に調整し、９５℃の金属浴中で１５分間反応させた。反応溶液を取り出し、塩酸０．０４ＭでｐＨ約４．５に調整し、次いで生成物を滅菌濾過膜で濾過し、^２２５Ａｃ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸を得た。

【0049】

実施例８
この実施例では、本開示の^６４Ｃｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の新たな調製方法が開示され、以下のように特定された。

【0050】

ＤＯＴＡ－イバンドロン酸（２５μｇ）に、酢酸ナトリウム溶液（０．２５Ｍ）１ｍｌ、次いで新たにすすいだ^６４ＣｕＣｌ_２溶出液（約５ｍｃｉ）１ｍｌを添加した。混合溶液を塩酸０．０４ＭでｐＨ約４に調整し、９５℃の金属浴中で１５分間反応させた。反応溶液を取り出し、塩酸０．０４ＭでｐＨ約４に調整し、次いで生成物を滅菌濾過膜に通して、^６４Ｃｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸を得た。

【0051】

実施例９
この実施例では、本開示の^２１１Ａｔ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の新たな調製方法を開示し、以下のように特定した。

【0052】

ＤＯＴＡ－イバンドロン酸（２５μｇ）に、ホウ酸ナトリウム溶液（０．２５Ｍ）１ｍｌ、次いで新たにすすいだＮａ^２１１Ａｔ溶出液（約１．０ｍｃｉ）１ｍｌを加えた。混合溶液をｐＨ約７に調整し、９５℃の金属浴中で１５分間反応させた。反応溶液をｐＨ約７に調整し、次いで生成物を滅菌濾過膜に通して、最終的に^２１１Ａｔ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸を得た。

【0053】

実験例１～５では、用いられた^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸は、実施例２の表１の５番の方法に従って調製した。

【0054】

実験例１
この実験例では、本開示の^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸のインビトロ安定性試験を開示し、以下のように特定した。

【0055】

４本のＥＰチューブを用意し、順に番号１～４と記し、番号１及び２に生理食塩水０．１ｍｌをそれぞれ加え、番号３及び４に１０倍希釈した新鮮なヒト血清０．１ｍｌをそれぞれ加え、次いで、これらの４本のチューブに、新たに調製した^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸１．０ｍｃｉをそれぞれ加えた。番号１及び３を室温（２５±２℃）に置き、番号２及び４をインキュベートのために３７℃の金属浴に置いた。番号１から４の放射化学的純度値を、薄層紙クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を用いて、それぞれ１０分、３０分、１時間、２時間、３時間、４時間で測定した。結果を以下の表５に示した。

【表5】

【0056】

表５から、^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸は、室温で良好なインビトロ安定性を有し、その放射化学的純度は、通常の生理食塩水及び血清中に室温で４時間置いた後も依然として＞９０％であることが分かる。

【0057】

実験例２
この実験例では、本開示の^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の脂質－水分配係数を調査し、以下のように特定した。

【0058】

３本の５ｍｌ遠心管を用意し、それぞれ番号Ａ－１、Ａ－２及びＡ－３と記した。ｎ－オクタノール０．５ｍｌと、脱イオン水０．４８５ｍｌと、新たに調製した約０．５ｍｃｉの^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸０．２５ｍｌとを各チューブに加え、遠心管をボルテックスミキサーによって２０分間振盪し、次いで、２０００ｒ／分で５分間遠心分離し、そこから上側液体（有機相）０．１ｍｌを３本の対応する試験管（それぞれ番号Ｂ－１、Ｂ－２、Ｂ－３と記した）にそれぞれ収集し、下側液体（水相）０．１ｍｌを３本の対応する試験管（それぞれ番号Ｃ－１、Ｃ－２、Ｃ－３と記した）にそれぞれ収集した。有機相と水相の全放射能計数をそれぞれγカウンタで測定し、脂質－水分配係数を式より算出した。

【0059】

結果は、本開示の^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の脂質－水分配係数ｌｇＰが－２．３３であることを示し、標識化合物が高い水溶性と低い脂溶性を有することを示している。

【0060】

実験例３
この実験例では、本開示の^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の血漿タンパク質結合率を調査し、以下のように特定した。

【0061】

ヘパリンで抗凝固処理した新鮮なヒト血漿１ｍＬを後に使用するために用意した。３本のＥＰチューブを用意し、番号Ａ－１、Ａ－２及びＡ－３と記し、それぞれに、新鮮なヒト血漿０．１ｍｌと、新たに調製した約０．５ｍｃｉの^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸０．２５ｍｌとを加えた。次いで、それらを３７℃の金属浴中で３０分間インキュベートした。３本の５ｍｌ遠心管を用意し、それぞれ番号Ｂ－１、Ｂ－２及びＢ－３と記した。インキュベートした溶液をそれぞれ対応する遠心管に移した。次いで、２５％トリクロロ酢酸溶液１ｍｌを各遠心管に加え、十分に混合し、次いで、２０００ｒ／分で５分間遠心分離した。上清をそれぞれ３つの対応する試験管（それぞれ番号Ｃ－１、Ｃ－２、Ｃ－３と記した）に回収した。遠心分離及び上清回収を３回繰り返した。遠心管内の沈殿物及び試験管内の上清の総放射能計数をそれぞれγカウンタで測定し、血漿タンパク質結合率（ＰＰＢ）を算出した。

【0062】

結果は、本開示の^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸が、血漿中での３０分間のインキュベート後に８１％のＰＰＢを有することを示す。血漿タンパク質結合率が高いことは、標識化合物が体内に長時間保持され、除去されにくく、良好な造影効果を達成できることを示す。

【0063】

実験例４
この実験例では、本開示の^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸のインビボ分布を調査し、以下のように特定した。

【0064】

健康なＫｕｎｍｉｎｇ（昆明）マウス（体重１８～２２ｇ）を２０匹用意し、各群５匹の４つの群に無作為に分けた。マウスの半分は雄性であり、半分は雌性であった。新たに調製した^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸０．５ｍｃｉ／０．１ｍｌを、尾静脈より注入した。動物を、それぞれ１５分、３０分、１時間及び２時間後に断頭した。頸動脈血液、脳、心臓、肝臓、脾臓、肺、腎臓、胃、小腸、筋肉及び大腿骨組織を秤量し、γカウンタでそれらの放射能計数を測定し、時間減衰補正後、組織１グラム当たりの注入用量百分率（％ＩＤ／ｇ）を算出した。マウスにおける^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸のインビボ分布結果を以下の表６に示した。

【表6】

【0065】

表６から、骨は^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の高い取込率を有し、２時間で最大値（８．３６５％ＩＤ／ｇ）に達することが分かる。その後、骨への取り込みは経時的に減少するが、骨の組織１グラム当たりの注入用量百分率は、４時間まで依然として４．２６８％ＩＤ／ｇに達することができ、これは他の器官及び組織のものよりも有意に高く、^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸が骨に対して強い効果及び長期滞留性を有し、したがって理想的な造影効果を達成することができることを示している。

【0066】

実験例５
この実験例では、ニュージーランドウサギにおける本開示の^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の様々な時点での造影を調査し、以下のように特定した。

【0067】

約２Ｋｇのニュージーランドウサギを１匹用意し、新たに調製した^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸約１．０ｍｃｉ／０．２ｍｌを耳静脈より注入し、注入の１時間後及び３時間後にそれぞれＰＥＴ全身造影を行った（図１）。

【0068】

図１から、注入の１時間後、腎臓及び膀胱は明瞭な画像を示し、胸腔及び軟組織は明瞭な画像を示し、全身の骨は明確な画像を示し、四肢の関節は明瞭な画像を示すことが分かる。図２は、時間が経過するにつれて、胸腔及び軟組織の画像が徐々に薄くなり、両腎臓の画像が徐々に薄くなり、徐々に膀胱へ移行し、膀胱の画像が徐々に濃くなり、尿が排出されるにつれて膀胱の画像が徐々に消えることを示す。したがって、^６８Ｇａ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸は、軟組織によって速やかに排除され、骨取込性が高く、泌尿器系により排泄され、比較的長時間骨に留まる造影剤である。転移性骨癌患者に適用すれば、良好な造影結果が得られる。

【0069】

実験例６
ニュージーランドウサギにおける、実施例６の方法に従って調製された^１７７Ｌｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の様々な時点での造影を調査し、以下のように特定した。

【0070】

約２Ｋｇのニュージーランドウサギを１匹用意し、新たに調製した^１７７Ｌｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸約２．０ｍｃｉ／０．２ｍｌを耳静脈より注入し、注入の１日後、３日後、５日後及び７日後にそれぞれＰＥＴ全身造影を行った（図２）。

【0071】

実験例７
ニュージーランドウサギにおける、実施例７の方法に従って調製された^２２５Ａｃ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の様々な時点での造影を調査し、以下のように特定した。

【0072】

約２Ｋｇのニュージーランドウサギを１匹用意し、上記の最適な標識条件下で新たに調製した^２２５Ａｃ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸約０．０１ｍｃｉ／２ｍｌを耳静脈より注入し、注入の１日後、３日後及び５日後にそれぞれＰＥＴ全身造影を行った（図３）。

【0073】

実験例８
この実験例では、担癌マウス（ＰＣ－３、Ｈ１９７５、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１骨転移モデル）に対する本開示の^１７７Ｌｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の治療効果を調査した。本実験例で用いた^１７７Ｌｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸は、実施例６の方法に従って調製した。

【0074】

（１）担癌マウスモデルの確立：ＳＰＦ雄ヌードマウス２４匹及びＳＰＦ雌ヌードマウス１２匹を用意し、イソフルランで麻酔した。その後、左膝関節周囲の皮膚を消毒し、左後肢を屈曲させた。インスリン針（２９Ｇ針）を脛骨の関節窩の凹点から垂直に脛骨に挿入し、ゆっくり回転させ、髄腔内に挿入して、ＰＣ－３（雄１２匹）、Ｈ１９７５（雄１２匹）及びＭＤＡ－ＭＢ－２３１（雌１２匹）の細胞培養物２５μｌ（およそ２×１０^６）を注入した。次いで、消毒を行い、穴を滅菌骨ワックスで密封した。再加温のために、動物を３７℃のホットプレート上に置いた。蘇生後、ケージに戻し、飼育を継続した。

【0075】

（２）担癌マウスモデルの試験：接種４週間後、ヌードマウス３６匹をそれぞれＭｉｃｒｏ－ＣＴを用いて走査した。ヌードマウスはそれぞれ、様々な程度の骨破壊を有し、様々な程度の軟組織腫脹を伴うことが観察され、骨転移モデルの確立に成功したことが示された。

【0076】

（３）異なる処置及びグループ分けの方法：モデル化に成功した担癌マウス３６匹を無作為に４つの群に分けた。これらのうち、２つの群は、各群３匹の動物について、低放射能及び高放射能（１００μＣｉ、５００μＣｉ）を有する^１７７Ｌｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸を尾静脈内にそれぞれ注入した。ブランク対照群の動物には、生理食塩水を注入し、各群３匹の少量群と大量群（１０μｌ、５０μｌ）とに分けられた。

【0077】

（４）治療効果の検出及び結果：自由運動疼痛行動スコアリングを、０日目、７日目、１４日目、２１日目、２８日目及び３５日目に行い、担癌マウスにおける骨疼痛軽減の主な指標として使用した。対応する時点で、担癌マウスを透明で滑らかな平底プラスチック箱に入れた。担癌マウスは箱の中で自由に動くことができ、３０分間の順化後に観察された。疼痛行動スコアリングは以下の基準に従って実施した。スコア０、運動は正常、モデル側と対照側の後肢の運動は同じであった。スコア１、モデル側の後肢にわずかな跛行があった。スコア２、モデル側後肢の跛行の程度がスコア１とスコア３との間であった。スコア３、モデル側の後肢に重度な跛行があった。スコア４、モデル側の後肢は全く動けず、地面に触れることができなかった。結果を以下の表７に示した。

【表7】

【0078】

表７から、０日目を基準線として、高活性^１７７Ｌｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸（５００μＣｉ）の投与により治療した５週間後の生存担癌マウスの自由運動疼痛行動スコアの平均減少数は、全群の中で最も大きく、生存数は相対的に最多であり、異なる活性の^１７７Ｌｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の投与により治療した５週間後の生存担癌マウスの自由運動疼痛行動スコアの平均減少数は、対応する対照群の平均減少数よりも高いことが分かる。

【0079】

上記の結果は、担癌マウスを高活性^１７７Ｌｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸（５００μＣｉ）の投与により治療した場合、骨痛が最も大きく軽減され、投与５週間以内の生存率が相対的に最も高く、異なる^１７７Ｌｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の投与の治療有効性は、対応する対照群の治療有効性よりも高く、悪性腫瘍骨転移の治療における^１７７Ｌｕ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸の実現可能性及び有効性を示す。

【0080】

上記の実施例１～９及び実験例１～８に基づいて、^６８Ｇａ／^１７７Ｌｕ／^２２５Ａｃ／^６４Ｃｕ／^２２１Ａｔ－ＤＯＴＡ－イバンドロン酸は、反応時間が短く、標識収率が高い簡易な標識方法によって提供され、高い水溶性、室温での良好なインビトロ安定性、高い血漿タンパク質結合率を有し、マウスにおけるインビボ分布及びニュージーランドウサギにおける造影の両方において長期の高い骨取込性を示し、本出願で発明された調製物が優れた性能を有する骨造影剤及び転移性骨腫瘍の治療のための放射性薬物であることを示す。

【0081】

上述の例は、本開示の例の一部にすぎず、全てではない。本開示の実施例の詳細な説明は、本開示の範囲を限定することを意図するものではなく、むしろ本開示の選択された実施例を表すことを意図している。本開示の実施例に基づいて、進歩的な努力をすることなく当業者によって得られる他の全ての実施例は、本開示によって保護されることが求められる範囲内に入る。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【国際調査報告】