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特表2024-541822環境に優しく拡張可能な新しいプロセスを使用することによるコーヒーベースの供給原料からのコーヒーオイルの抽出
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-11-13
(54)【発明の名称】環境に優しく拡張可能な新しいプロセスを使用することによるコーヒーベースの供給原料からのコーヒーオイルの抽出
(51)【国際特許分類】
A23F 5/48 20060101AFI20241106BHJP
B01D 11/02 20060101ALI20241106BHJP
C11B 1/10 20060101ALN20241106BHJP
【ＦＩ】
A23F5/48
B01D11/02 A
C11B1/10
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024520822
(86)(22)【出願日】2022-10-11
(85)【翻訳文提出日】2024-06-03
(86)【国際出願番号】 EP2022078285
(87)【国際公開番号】W WO2023062026
(87)【国際公開日】2023-04-20
(31)【優先権主張番号】2114488.6
(32)【優先日】2021-10-11
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】524126600
【氏名又は名称】リヴァイヴ エコ リミテッド
【氏名又は名称原語表記】ＲＥＶＩＶＥ ＥＣＯ ＬＴＤ
(74)【代理人】
【識別番号】100139723
【弁理士】
【氏名又は名称】樋口 洋
(72)【発明者】
【氏名】テイラー，ライアン
(72)【発明者】
【氏名】トンプソン，ダウン
(72)【発明者】
【氏名】ポッツ，ネイサン
(72)【発明者】
【氏名】ケネディ，スコット
(72)【発明者】
【氏名】ムーア，ファーガス
【テーマコード（参考）】
4B027
4D056
【Ｆターム（参考）】
4B027FB28
4B027FQ09
4B027FR04
4D056AB17
4D056AC09
4D056BA13
4D056CA18
4D056CA23
4D056DA01
4D056DA02
4D056DA06
(57)【要約】
本発明は、コーヒーベースの供給原料から抽出溶媒を用いてコーヒーオイルを抽出する方法であって、コーヒーベースの供給原料と抽出溶媒との混合物を機械的または磁気的攪拌下で少なくとも３０分間保持し、次いで抽出溶媒を含む液相を分離し、抽出溶媒を液相から除去してコーヒーオイルを得、抽出溶媒はエステル溶媒である、方法、および、前記方法によって得られるコーヒーオイルに関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
抽出溶媒を用いてコーヒーベースの供給原料からコーヒーオイルを抽出する方法であって、前記コーヒーベースの供給原料および前記抽出溶媒の混合物を、機械的または磁気的撹拌下で少なくとも３０分間保持し、その後、前記抽出溶媒を含む液相を分離し、前記抽出溶媒を前記液相から除去して、コーヒーオイルを取得し、前記抽出溶媒は、式（Ｉ）で表されるエステル溶媒であり、【化1】
ことを特徴とする、方法。
【請求項2】
前記方法は、１５～２５℃の温度で行われることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記方法は、少なくとも３０分間、より好ましくは少なくとも１時間、さらにより好ましくは少なくとも１６時間行われることを特徴とする、請求項１または２に記載の方法。
【請求項4】
前記方法は、大気圧で行われることを特徴とする、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項5】
前記方法は、標準的な酸素リッチまたは不活性雰囲気中で行われることを特徴とする、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項6】
前記式（Ｉ）において、Ｒは、１～１２個の炭素原子または１～６個の炭素原子を有する脂肪族基であることを特徴とする、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項7】
前記式（Ｉ）において、Ｒは、直鎖または分岐鎖のＣ１～Ｃ４アルキル基であることを特徴とする、請求項６に記載の方法。
【請求項8】
前記式（Ｉ）において、Ｒ’は直鎖または分岐鎖のアルキル基であることを特徴とする、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項9】
前記式（Ｉ）を有する化合物は酢酸エチルであることを特徴とする、請求項８に記載の方法。
【請求項10】
前記コーヒーベースの供給原料は、焙煎コーヒー豆および使用済みコーヒー粉から選択されることを特徴とする、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項11】
前記コーヒーオイルは、以下の工程：－得られたコーヒーオイルを精製溶媒に溶解する工程と、活性炭を添加する工程と、機械的または磁気的撹拌下で少なくとも３時間維持してスラリーを得る工程；
－得られたスラリーを濾過し、前記コーヒーオイルを含む液相を分離する工程；
－好ましくは真空中で前記液相から前記精製溶媒を除去し、精製されたアラビカコーヒーオイルを単離する工程
を含む精製プロセスをさらに受けることを特徴とする、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項12】
前記精製溶媒はヘプタンであることを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項13】
前記精製プロセスは、得られたスラリーを濾過してコーヒーオイルを含有する液相を分離する工程、および、前記精製溶媒を好ましくは真空中で除去して精製されたコーヒーオイルを単離する工程をさらに含むことを特徴とする、請求項１０または１１に記載の方法。
【請求項14】
トリグリセリド、脂肪酸、ステロール、メラノイジンおよびリン脂質を含むコーヒーオイルであって、前記脂肪酸およびトリグリセリドの組成は：パルミチン酸 ２１～８７ピーク面積％
ステアリン酸 ４～２１％ピーク面積％
オレイン酸 ４～１５％ピーク面積％
リノール酸 ≦５０％ピーク面積％
リノレン酸 ≦２％ピーク面積％
アラキジン酸 １～８％ピーク面積％
ベヘン酸 ≦３％ピーク面積％
であることを特徴とする、コーヒーオイル。
【請求項15】
－４ｍｇ ＫＯＨ／ｇオイル以下の酸価－１３～１３８ｇ／１００ｇのヨウ素価
－１３２～１９２のＳＡＰ値
－５ｍＥｑ 酸素／Ｋｇ以下の過酸化物価
－コーヒーオイルの総重量に基づいて１．５質量％以下のカフェイン含有量
－コーヒーオイルの総重量に基づいて２質量％以下のトコフェロール含有量
－０～１ｇ／ｍＬの密度
を有することを特徴とする、請求項１４に記載のコーヒーオイル。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、コーヒーベースの供給原料からコーヒーオイルを抽出するためのプロセス、および前記プロセスを使用して抽出されたコーヒーオイルに関する。
【0002】
コーヒーは、世界中で最も人気のある飲料の１つであり、したがって、コーヒー産業およびその消費は、大量の残渣をもたらしている。いわゆる「残渣」から新しい価値のある製品を見出すことへの関心が高まっており、「コーヒーオイル」は、化粧品産業、食品産業またはバイオディーゼル生産において、および潜在的に医薬品産業において使用することができる製品として同定されている。
【0003】
コーヒーオイルは、主にトリグリセリド、脂肪酸、ステロール、メラノイジンおよびリン脂質を含有する。それは、アラビカコーヒー植物の様々な部分、コーヒー生豆または焙煎コーヒー豆、アラビカコーヒー使用済み粉などからの抽出によって得られる。工業的使用のために大量のコーヒーオイルの需要があり、したがって、コーヒーオイルの抽出のための高収率の工業的プロセスが必要とされる。アラビカコーヒーオイルを含む天然オイルについて一般的に報告されている品質パラメータは、酸価、脂肪酸組成、ヨウ素価、過酸化物価および鹸化価である。
【背景技術】
【0004】
使用済み粉からアラビカコーヒーオイルを抽出するための広く知られている方法は、超臨界流体抽出を使用することによるものである。この方法は、典型的には、高温および高圧を使用して、液化ガスでコーヒーオイルを抽出する。最も一般的な超臨界流体の１つはＣＯ２である。ＣＯ２を使用する場合、必要とされる温度および圧力は他の超臨界流体よりも低いが、依然として、超臨界流体の使用のスケールアップに関連する爆発性の危険がある。閉鎖空間におけるＣＯ２の蓄積はまた、人間に窒息リスクをもたらす。
【0005】
使用済みの粉からアラビカコーヒーオイルを得る別の一般的な方法は、ソックスレー抽出を利用する。この抽出法は、有機溶媒の沸騰を必要とする。次いで、凝縮蒸気が、コーヒー粉からコーヒーオイルを抽出する。プロセスの間にわたって有機溶媒を加熱して還流させる必要があるため、コストが増加し、プロセスのエネルギー効率が低下する。
【0006】
さらなる開発により、コーヒー抽出のための様々な抽出溶媒の効率が評価され、ヘキサンが最良の収率を提供することが示された（非特許文献１）。高収率をもたらすが、ヘキサンは毒性であり、特に大量に必要とされる工業規模で使用される場合、環境問題を引き起こす。
【0007】
毒性のヘキサンに代わる溶媒が特許文献１に開示されており、例えば、クロロホルム、アセトン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、石油エーテルおよびエタノールを含む溶媒が、超音波抽出プロセスで使用される。超音波周波数は３０～７０ＫＨＺであり、超音波処理時間は５～４０分である。超音波抽出原理は、音響または超音波キャビテーションの作動原理に基づく。しかしながら、そのようなプロセスは、通常の工業設備では見出されず高価である、超音波の発生のための特殊な設備を必要とする。さらに、コーヒーオイルの品質は、超音波処理によって影響を受け、コーヒーオイル中のトリグリセリドに損傷を与える可能性がある。例えば、コーヒーオイル中のトリグリセリドの骨格の分解が観察され、オイルの長期安定性に影響を及ぼし得るより多くの遊離脂肪酸を生じ得る。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0008】
【特許文献1】中国特許出願公開第１０５９２５３６４号明細書
【非特許文献】
【0009】
【非特許文献1】Ｋ． Ｓｏｍｎｕｋ， Ｐ． Ｅａｗｌｅｘ， Ｇ． Ｐｒａｔｅｅｐｃｈａｉｋｕｌ； Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｎａｔｕｒａｌ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ； Ｖｏｌ ５１ （２０１７）； １８１－１８９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0010】
したがって、本発明の目的は、高品質のコーヒーオイルを抽出するための高収率のプロセスを提供することであり、このプロセスは、簡単で標準的な工業設備を使用して工業規模で容易に適用することができ、簡単で、費用効率が高く、エネルギー効率が高く、環境に優しい。得られたオイルは、簡単で、費用効果的かつ拡張可能なプロセスを使用してさらに精製され、望ましくない成分の含有量が低いコーヒーオイルを単離することができる。
【課題を解決するための手段】
【0011】
第１の態様では、本発明は、抽出溶媒を使用することによって、コーヒーベースの供給原料からコーヒーオイルを抽出するプロセスに関し、コーヒーベースの供給原料と抽出溶媒との混合物を機械的または磁気的撹拌下で少なくとも３０分間保持し、その後、抽出溶媒および抽出されたコーヒーオイルを含む液相を分離する。さらに、液相から抽出溶媒を除去してコーヒーオイルを得る。本発明によれば、抽出溶媒はエステル溶媒である。驚くべきことに、エステル溶媒を使用する場合、溶媒を加熱する必要なく抽出プロセスについて良好な収率が得られることが見出された。これにより、拡張可能で、使用が容易であり、望ましくない成分が回避されたコーヒーオイルがもたらされ、したがって、必要とされる処理および精製工程がより少ない、効率的な抽出プロセスが可能になる。
【0012】
このプロセスは、例えば、大型ジャケット付き反応器、機械的または磁気的撹拌およびヌッチェ濾過のような標準的なスケールアップ装置および工程を使用して実施することができる。開発されたプロセスは、ヘキサンなどの毒性溶媒を必要とせず、代わりに持続可能かつ容易に拡張可能な低毒性エステル溶媒を使用する。
【0013】
好ましい実施形態では、プロセスは、周囲温度（約１５～２５℃）で行われる。
【0014】
別の好ましい実施形態では、前述のものと自由に組み合わせることができ、プロセスは少なくとも１時間行われる。
【0015】
さらに好ましい実施形態では、前述のものと自由に組み合わせることができ、このプロセスは大気圧で行われる。
【0016】
さらに好ましい実施形態では、前述のものと自由に組み合わせることができ、プロセスは、標準的な酸素リッチ雰囲気または不活性雰囲気（窒素、アルゴンまたはＣＯ２）下で行われる。
【0017】
好ましくは、エステル溶媒は、脂肪族および芳香族、直鎖および分岐のアセテート、プロピオネートおよびブチレートの群から選択される。
【0018】
最も好ましい実施形態では、エステル溶媒は酢酸エチルである。
【0019】
さらなる実施形態では、前述のものと自由に組み合わせることができ、コーヒーベースの供給原料は、焙煎コーヒー豆およびコーヒー使用済み粉から選択される。
【0020】
さらなる実施形態では、前述のものと自由に組み合わせることができ、コーヒーオイルは、さらに精製プロセス（脱色および脱臭）を受けて、望ましくない成分を除去し、淡黄色から無色のオイルを得る。望ましくない成分の含有量が低いため、精製プロセスは非常に単純であり、費用効果が高く、スケールアップが容易である。
【0021】
さらなる好ましい実施形態では、前述のものと自由に組み合わせることができ、精製のプロセスは、以下の工程を含む：
－オイルを好適な溶媒に溶解する工程と、活性炭を溶液に添加する工程と、機械的または磁気的撹拌下で溶液を少なくとも３時間維持する工程；
－得られたスラリーを濾過し、コーヒーオイルを含む液相を分離する工程；
－好ましくは真空中で溶媒を除去し、精製コーヒーオイルを単離する工程。
－オイルを好適な溶媒に溶解する工程と、活性炭を溶液に添加する工程と、機械的または磁気的撹拌下で溶液を少なくとも３時間維持する工程；
－得られたスラリーを濾過し、コーヒーオイルを含む液相を分離する工程；
－好ましくは真空中で溶媒を除去し、精製コーヒーオイルを単離する工程。
【0022】
好適な溶媒は、例えば、非極性有機溶媒、好ましくはヘプタンである。
【0023】
さらに、プロセスは、ケーキを溶媒で洗浄する工程、および、溶媒を除去する前に得られた洗浄物を濾液と混合する工程を含んでもよい。
【0024】
第２の態様において、本発明は、トリグリセリド、脂肪酸、ステロール、メラノイジンおよびリン脂質を含むコーヒーオイルに関し、脂肪酸およびトリグリセリドの組成は以下の通りである：
パルミチン酸 ２１～８７ピーク面積％
ステアリン酸 ４～２１％ピーク面積％
オレイン酸 ４～１５％ピーク面積％
リノール酸 ≦５０％ピーク面積％
リノレン酸 ≦２％ピーク面積％
アラキジン酸 １～８％ピーク面積％
ベヘン酸 ≦３％ピーク面積％。
パルミチン酸 ２１～８７ピーク面積％
ステアリン酸 ４～２１％ピーク面積％
オレイン酸 ４～１５％ピーク面積％
リノール酸 ≦５０％ピーク面積％
リノレン酸 ≦２％ピーク面積％
アラキジン酸 １～８％ピーク面積％
ベヘン酸 ≦３％ピーク面積％。
【0025】
好ましい実施形態によれば、得られたオイルは以下を有する：
－任意選択的に、４ｍｇ ＫＯＨ／ｇオイル以下の酸価、および／または
－任意選択的に、１３～１３８ｇ／１００ｇのヨウ素価、および／または
－任意選択的に、１３２～１９２のＳＡＰ値、および／または
－任意選択的に、５ｍＥｑ 酸素／Ｋｇ以下の過酸化物価、および／または
－任意選択的に、コーヒーオイルの総重量に基づいて１．５質量％以下のカフェイン含有量、および／または
－任意選択的に、コーヒーオイルの総重量に基づいて２質量％以下のトコフェロール含有量、および／または
－任意選択的に、０～１ｇ／ｍＬの密度。
－任意選択的に、４ｍｇ ＫＯＨ／ｇオイル以下の酸価、および／または
－任意選択的に、１３～１３８ｇ／１００ｇのヨウ素価、および／または
－任意選択的に、１３２～１９２のＳＡＰ値、および／または
－任意選択的に、５ｍＥｑ 酸素／Ｋｇ以下の過酸化物価、および／または
－任意選択的に、コーヒーオイルの総重量に基づいて１．５質量％以下のカフェイン含有量、および／または
－任意選択的に、コーヒーオイルの総重量に基づいて２質量％以下のトコフェロール含有量、および／または
－任意選択的に、０～１ｇ／ｍＬの密度。
【0026】
分析方法を以下に記載する。
【0027】
本発明の異なる態様および実施形態は、例示的な実施形態の以下の説明および図面においてより詳細に説明される。
【図面の簡単な説明】
【0028】
【図1】廃棄される使用済みの粉からコーヒーオイルを得るための抽出プロセスの概要を示す図
【図2】本発明によるコーヒーオイルサンプル中のα－トコフェロールの標準溶液から得られる検量線
【図3】本発明によるコーヒーオイルサンプル中の過酸化物価の計算のために得られる検量線
【図4】本発明によるコーヒーオイルサンプル中のカフェイン含有量を特定するための標準溶液のＨＰＬＣクロマトグラム
【図5】カフェイン含有量を特定するための本発明によるコーヒーオイルサンプルのＨＰＬＣクロマトグラム
【図6】本発明によるコーヒーオイルサンプル中の脂肪酸組成を特定するためのブランクサンプルのＧＣクロマトグラム
【図7】本発明によるコーヒーオイルサンプル中の脂肪酸組成を特定するためのリノール酸メチルマーカーのＧＣクロマトグラム
【図8】本発明によるコーヒーオイルサンプル中の脂肪酸組成を特定するための脂肪酸メチルエステルＵＳＰリファレンススタンダード混合物のＧＣクロマトグラム
【図9】本発明によるコーヒーオイルサンプルのＧＣクロマトグラム
【発明を実施するための形態】
【0029】
＜コーヒーベースの供給原料＞
本発明によれば、コーヒーベースの供給原料は、コーヒーオイルが抽出される投入材料として使用される。好ましい例の中で、コーヒーベースの供給原料は、焙煎コーヒー豆およびアラビカコーヒー使用済み粉、または一般に入手可能な任意の他の通常使用される種類のコーヒーを含む。焙煎コーヒー豆は、加熱プロセス（焙煎プロセス）に供されるコーヒー生豆から得られる。好ましい実施形態では、コーヒー使用済み粉が使用され、これは、抽出プロセス中に得られる残渣として既存のコーヒー産業の副産物であり、抽出プロセスに費用効率が高く環境に優しい代替物を提供する。
本発明によれば、コーヒーベースの供給原料は、コーヒーオイルが抽出される投入材料として使用される。好ましい例の中で、コーヒーベースの供給原料は、焙煎コーヒー豆およびアラビカコーヒー使用済み粉、または一般に入手可能な任意の他の通常使用される種類のコーヒーを含む。焙煎コーヒー豆は、加熱プロセス（焙煎プロセス）に供されるコーヒー生豆から得られる。好ましい実施形態では、コーヒー使用済み粉が使用され、これは、抽出プロセス中に得られる残渣として既存のコーヒー産業の副産物であり、抽出プロセスに費用効率が高く環境に優しい代替物を提供する。
【0030】
開発されたプロセスへの投入材料は、好ましくは１０質量％以下の含水量を有する。水分が１０％を超える場合、ボトリチス・シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）（腐敗した果実／ベッグに見られる一般的な灰色のカビ）などの微生物は、例えば、使用済みの粉上で繁殖し始める可能性があり、これは、リパーゼ酵素を産生しトリグリセリドを分解する生物をもたらす可能性がある。したがって、生物を死滅させるために注意深く乾燥を実施する必要がある。ＩＲ加熱を使用する水分計を使用して、例えば加熱の関数として質量損失を追跡して、投入材料中の含水量を重量測定することができる。あるいは、ＩＲプローブを用いた乾燥トンネル、ならびにＩＲ乾燥を用いて、同じアプローチが使用されてもよい。
【0031】
＜抽出溶媒＞
コーヒーオイルの抽出は固液抽出プロセスであり、上記のような固体投入材料を機械的撹拌下で液体溶媒と混合して抽出混合物を形成する。プロセス中、コーヒーオイルは、抽出溶媒とも呼ばれる液体溶媒の助けによって固体投入材料から浸出される。エステル溶媒が抽出溶媒として使用される場合、持続可能で拡張可能かつ費用効果の高い抽出プロセスが実施されることが見出された。
コーヒーオイルの抽出は固液抽出プロセスであり、上記のような固体投入材料を機械的撹拌下で液体溶媒と混合して抽出混合物を形成する。プロセス中、コーヒーオイルは、抽出溶媒とも呼ばれる液体溶媒の助けによって固体投入材料から浸出される。エステル溶媒が抽出溶媒として使用される場合、持続可能で拡張可能かつ費用効果の高い抽出プロセスが実施されることが見出された。
【0032】
エステル溶媒は、カルボン酸ＲＣＯＯＨの少なくともヒドロキシル基が、例えばアルコールＲ’－ＯＨに由来するアルコキシ基で置換された化合物を表す。本発明によれば、エステル溶媒は、式（Ｉ）で現れる：
式中、ＲおよびＲ’は、独立して、置換または非置換の脂肪族または芳香族基を表す。好ましくは、Ｒは、１～１２個の炭素原子を有する脂肪族基である。
【化1】
【0033】
より好ましくは、Ｒは、直鎖または分枝鎖のＣ１～Ｃ４アルキル基である。さらにより好ましくは、Ｒは、直鎖または分枝鎖のＣ２～Ｃ４アルキル基である。例示的なＲはＣ１～Ｃ４アルキル基であり、本発明の範囲を限定することなく、メチル、エチル、プロピル、ブチルである。このような溶媒は非毒性であり、抽出プロセスのための環境に優しい代替物を提供する。
【0034】
好ましくは、Ｒ’は直鎖または分岐鎖アルキル基である。より好ましくは、Ｒ’はＣ１～Ｃ６アルキル基である。例示的な芳香族基は、本発明の範囲を限定することなく、フェニル基およびベンジル基である。例示的なＣ１～Ｃ６アルキル基は、本発明の範囲を限定することなく、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチルおよびヘキシルである。さらにより調製すると、Ｒ’はエチルである。
【0035】
式（Ｉ）を有する化合物の好ましい例としては、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸ｎ－プロピル、酢酸イソプロピル、酢酸ｎ－ブチル、酢酸ｔ－ブチル、酢酸ベンジル、酢酸イソアミル、フェニル酢酸エチル、プロピオン酸エチルまたは酪酸エチルが挙げられる。
【0036】
＜撹拌＞
本発明による抽出プロセスは、機械的および／または磁気的撹拌下で行われ、これは、固体投入材料が液体抽出溶媒中に懸濁され、機械的および／または磁気的撹拌を使用することによって混合物が均一に懸濁されたままであるプロセスを意味する。機械的撹拌は、機械的動力を流体循環または撹拌に変換する機械的撹拌機を使用することによって得られる。例示的な撹拌機としては、タービン撹拌機、パドル撹拌機、アンカー撹拌機、プロペラ撹拌機、ヘリカル撹拌機などが挙げられるが、これらに限定されない。磁気的撹拌は、磁化されたスターラーバー（楕円形、長円形または十字形）および電流を用いてスターラーバーを動かし、懸濁液を撹拌することによって達成される。反応器に組み込まれたバッフルは、磁気的であろうと機械的であろうと撹拌を改善する。したがって、抽出混合物の超音波処理は、本発明による撹拌下では行われないことが理解される。
本発明による抽出プロセスは、機械的および／または磁気的撹拌下で行われ、これは、固体投入材料が液体抽出溶媒中に懸濁され、機械的および／または磁気的撹拌を使用することによって混合物が均一に懸濁されたままであるプロセスを意味する。機械的撹拌は、機械的動力を流体循環または撹拌に変換する機械的撹拌機を使用することによって得られる。例示的な撹拌機としては、タービン撹拌機、パドル撹拌機、アンカー撹拌機、プロペラ撹拌機、ヘリカル撹拌機などが挙げられるが、これらに限定されない。磁気的撹拌は、磁化されたスターラーバー（楕円形、長円形または十字形）および電流を用いてスターラーバーを動かし、懸濁液を撹拌することによって達成される。反応器に組み込まれたバッフルは、磁気的であろうと機械的であろうと撹拌を改善する。したがって、抽出混合物の超音波処理は、本発明による撹拌下では行われないことが理解される。
【0037】
＜撹拌時間＞
本発明によれば、コーヒーベースの供給原料および抽出溶媒から形成される抽出混合物は、少なくとも３０分間、機械的または磁気的撹拌下に保たれる。プロセスを３０分未満で行う場合、収率の著しい低下が観察される。
本発明によれば、コーヒーベースの供給原料および抽出溶媒から形成される抽出混合物は、少なくとも３０分間、機械的または磁気的撹拌下に保たれる。プロセスを３０分未満で行う場合、収率の著しい低下が観察される。
【0038】
好ましくは、抽出混合物は、少なくとも３０分および最大で２４時間、さらにより好ましくは少なくとも１時間および最大で１６時間、機械的および／または磁気的撹拌下に保たれる。プロセスが２４時間以上行われる場合、所与の時間内に処理できる材料が少なくなるため、プロセス効率が低下する。
【0039】
＜反応温度＞
好ましくは、抽出プロセスは周囲温度で行われる。周囲温度とは、１５～２５℃、５９～７７°Ｆまたは２８８．１５～２９８．１５Ｋの温度であると理解される。この温度より高い温度で加熱すると、エネルギー効率が低下し、トリグリセリドとエステル溶媒とのトランスエステル化（例えば、脂肪酸がエチルエステル（ＥＥＦＡ）に変換される）またはオイルの熱分解が生じ得る。
好ましくは、抽出プロセスは周囲温度で行われる。周囲温度とは、１５～２５℃、５９～７７°Ｆまたは２８８．１５～２９８．１５Ｋの温度であると理解される。この温度より高い温度で加熱すると、エネルギー効率が低下し、トリグリセリドとエステル溶媒とのトランスエステル化（例えば、脂肪酸がエチルエステル（ＥＥＦＡ）に変換される）またはオイルの熱分解が生じ得る。
【0040】
プロセスが１５℃より低い温度で実施される場合、温度と共に溶媒容量が低下し得るので、オイルの収率の低下が観察される可能性がある。同時に、冷却はエネルギーの消費を必要とし、したがって、反応温度を周囲温度に維持するよりエネルギー効率が低くなる。
【0041】
＜反応圧力＞
好ましくは、抽出プロセスは大気圧で行われる。「大気圧」なる用語は、１．０１３２５ｂａｒ、１０１３２５Ｐａ、１０１３．２５ｈＰａ、１０１３．２５ｍｂａｒ、７６０ｍｍＨｇ、２９．９２１２インチＨｇまたは１４．６９６ｐｓｉと定義される。より高い圧力がプロセスにおいて使用される場合、エネルギーの消費が必要となり、したがって、エネルギー効率が低くなる。また、圧力が高くなると、オイルの劣化につながり得る。
好ましくは、抽出プロセスは大気圧で行われる。「大気圧」なる用語は、１．０１３２５ｂａｒ、１０１３２５Ｐａ、１０１３．２５ｈＰａ、１０１３．２５ｍｂａｒ、７６０ｍｍＨｇ、２９．９２１２インチＨｇまたは１４．６９６ｐｓｉと定義される。より高い圧力がプロセスにおいて使用される場合、エネルギーの消費が必要となり、したがって、エネルギー効率が低くなる。また、圧力が高くなると、オイルの劣化につながり得る。
【0042】
＜不活性雰囲気＞
抽出は、標準的な酸素リッチ雰囲気下で小規模で行うことができる。スケールアップ設備では、抽出溶媒の引火点によるリスクを低減するために、不活性雰囲気下でプロセスを実施することが好ましい。引火点とは、抽出溶媒が気化して空気中で発火性混合物を形成することができる最低温度であると理解される。不活性雰囲気は、例えば窒素またはアルゴンのような不活性ガスによって得られる。より大きな規模では、抽出は、好ましくは、適切なジャケット付き反応器中で行われる。反応器材料としては、ステンレス鋼、ハステロイ、プラスチック、軟鋼およびガラスが挙げられるが、これらに限定されない。ジャケットは、反応器の外側の温度に関係なく内部温度を制御する能力を提供する。
抽出は、標準的な酸素リッチ雰囲気下で小規模で行うことができる。スケールアップ設備では、抽出溶媒の引火点によるリスクを低減するために、不活性雰囲気下でプロセスを実施することが好ましい。引火点とは、抽出溶媒が気化して空気中で発火性混合物を形成することができる最低温度であると理解される。不活性雰囲気は、例えば窒素またはアルゴンのような不活性ガスによって得られる。より大きな規模では、抽出は、好ましくは、適切なジャケット付き反応器中で行われる。反応器材料としては、ステンレス鋼、ハステロイ、プラスチック、軟鋼およびガラスが挙げられるが、これらに限定されない。ジャケットは、反応器の外側の温度に関係なく内部温度を制御する能力を提供する。
【0043】
＜抽出溶媒からのオイルの分離＞
抽出溶媒は、当業者に既知の任意の方法によってコーヒーオイルから除去することができる。例えば、抽出溶媒は、ロータリーエバポレーターまたはワイプドフィルムエバポレーターを使用し、約６０℃まで最小限に加熱することによって、減圧下でコーヒーオイルから除去することができる。
抽出溶媒は、当業者に既知の任意の方法によってコーヒーオイルから除去することができる。例えば、抽出溶媒は、ロータリーエバポレーターまたはワイプドフィルムエバポレーターを使用し、約６０℃まで最小限に加熱することによって、減圧下でコーヒーオイルから除去することができる。
【0044】
＜得られたコーヒーオイルの収率の算出＞
得られたコーヒーオイルの収率は、下記式１に基づいて算出される：
式中、算出されたコーヒーオイルの質量は、溶媒の除去後に計量されるコーヒーオイルの質量を表し、乾燥された使用済みコーヒー粉の質量は、抽出溶媒と混合される使用済みコーヒー粉の質量を表す。使用済みコーヒー粉に乾燥工程を実施してその水分を低減する場合、使用済みコーヒー粉の質量は、乾燥された使用済みコーヒー粉の質量を表す。
得られたコーヒーオイルの収率は、下記式１に基づいて算出される：
【数1】
【0045】
＜精製プロセス＞
本発明によるコーヒーオイルは、そのまま使用してもよいし、さらなる精製プロセスに供してもよい。精製は、例えば、オイルの脱色および／または脱臭を得るために、または望ましくない成分を除去するために行われ得る。好ましい用途では、除去される望ましくない成分はメラノイジンである。メラノイジンは、糖とアミノ酸が結合すると（メイラード反応を介して）形成される褐色の高分子量不均質ポリマーである。メラノイジンは、オイルの褐色の原因である。コーヒー豆の焙煎プロセス中に、メラノイジンはさらに生成され、その結果、いくつかの用途では、コーヒーオイル中のメラノイジンの含有量が、所望の用途には高すぎる場合がある。メラノイジンはオイル中に沈殿し、二相生成物をもたらし、これはその後の適用において処理することが困難である（例えば、サンプリングの再現性が低下する）。
本発明によるコーヒーオイルは、そのまま使用してもよいし、さらなる精製プロセスに供してもよい。精製は、例えば、オイルの脱色および／または脱臭を得るために、または望ましくない成分を除去するために行われ得る。好ましい用途では、除去される望ましくない成分はメラノイジンである。メラノイジンは、糖とアミノ酸が結合すると（メイラード反応を介して）形成される褐色の高分子量不均質ポリマーである。メラノイジンは、オイルの褐色の原因である。コーヒー豆の焙煎プロセス中に、メラノイジンはさらに生成され、その結果、いくつかの用途では、コーヒーオイル中のメラノイジンの含有量が、所望の用途には高すぎる場合がある。メラノイジンはオイル中に沈殿し、二相生成物をもたらし、これはその後の適用において処理することが困難である（例えば、サンプリングの再現性が低下する）。
【0046】
精製のプロセスは、以下の工程を含む：
－オイルを適切な溶媒に溶解する工程、活性炭を溶液に添加する工程、および溶液を機械的または磁気的撹拌下で少なくとも３時間維持する工程；
－得られたスラリーを濾過し、アラビカコーヒーオイルを含む液相を分離する工程；
－好ましくは真空中で溶媒を除去して、精製されたアラビカコーヒーオイルを単離する工程。
－オイルを適切な溶媒に溶解する工程、活性炭を溶液に添加する工程、および溶液を機械的または磁気的撹拌下で少なくとも３時間維持する工程；
－得られたスラリーを濾過し、アラビカコーヒーオイルを含む液相を分離する工程；
－好ましくは真空中で溶媒を除去して、精製されたアラビカコーヒーオイルを単離する工程。
【0047】
好適な溶媒は、例えば、非極性有機溶媒、好ましくはヘプタンである。
【0048】
任意選択的に、プロセスは、ケーキを溶媒で洗浄する工程、および、溶媒を除去する前に得られた洗浄物を濾液と混合する工程を含む。好ましくは、洗浄は２回行われる。
【0049】
精製プロセスは、濾過済みまたは未濾過の得られたコーヒーオイルに対して行うことができる。濾過されていないコーヒーオイルについては、オイルは、最初に、オイル中に存在する任意の固体粒子を除去するプロセスを受ける。好ましくは、濾過プロセスは真空下で行われる。非限定的な例として、濾過プロセス中、オイルを真空下でフリット３焼結漏斗に通す。
【0050】
＜得られたコーヒーオイル中の望ましくない成分の含有量の算出＞
望ましくない成分（例えば、メラノイジン）の含有量は、以下の式２に基づいて算出される：
式中、元のコーヒーオイルの質量は、溶媒と混合する前に精製プロセスを受けるコーヒーオイルの質量であり、精製されたアラビカコーヒーオイルの質量は、精製プロセスで使用される溶媒の蒸発後に生じるオイルの質量を表す。
望ましくない成分（例えば、メラノイジン）の含有量は、以下の式２に基づいて算出される：
【数2】
【0051】
＜コーヒーオイル組成物＞
本発明によれば、上述の抽出プロセスを使用することによって、改善された特性を有するコーヒーオイルを得ることができる。
本発明によれば、上述の抽出プロセスを使用することによって、改善された特性を有するコーヒーオイルを得ることができる。
【0052】
コーヒーオイルまたはアラビカコーヒー種子オイルは、主にトリグリセリド、脂肪酸、ステロール、メラノイジンおよびリン脂質を含有する脂質オイルを指す。アラビカコーヒー種子オイルは、ＮＭＲにより最大９５％のトリグリセリドを含有し得る。
【0053】
好ましい実施形態では、脂肪酸組成物は、以下を含む：
パルミチン酸 ２１～８７ピーク面積％
ステアリン酸 ４～２１％ピーク面積％
オレイン酸 ４～１５％ピーク面積％
リノール酸 ≦５０％ピーク面積％
リノレン酸 ≦２％ピーク面積％
アラキジン酸 １～８％ピーク面積％
ベヘン酸 ≦３％ピーク面積％。
パルミチン酸 ２１～８７ピーク面積％
ステアリン酸 ４～２１％ピーク面積％
オレイン酸 ４～１５％ピーク面積％
リノール酸 ≦５０％ピーク面積％
リノレン酸 ≦２％ピーク面積％
アラキジン酸 １～８％ピーク面積％
ベヘン酸 ≦３％ピーク面積％。
【0054】
ピーク面積％を特定する方法は、米国薬局方、 USP 43-NF38 p.6676 <401> Fixed Fats and Oilsに開示されているｃＧＭＰ分析によって行われる。例えば、ＵＳＰによれば、個々の脂肪酸量を計算する式は、以下の通りである：
【数3】
【0055】
分析および計算の方法の例は、本特許出願において以下に記載されている。
【0056】
脂肪酸組成物という用語は、本明細書で使用される場合、コーヒーオイル加水分解の生成物中に存在する異なる脂肪酸の量を指し、全てコーヒーオイル中に存在する、トリグリセリド中の遊離脂肪酸および結合脂肪酸の両方を含む。脂肪酸組成は、ガスクロマトグラフィーから生成されたクロマトグラムにおける積分シグナルから得られるピーク面積のパーセンテージとして記録される。
【0057】
本発明の好ましい実施形態によれば、５ｍＥｑ酸素／ｇ以下の過酸化物価を有するコーヒーオイルを得ることができる。過酸化物価という用語は、オイル中に存在する酸化の尺度を指す。この値が高い場合、ラジカル分解／酸化の兆候である。
【0058】
上記と自由に組み合わせ可能な別の好ましい実施形態によれば、ヨウ素価が１３０ｇ／１００ｇオイル以下のコーヒーオイルを得ることができる。ヨウ素価という用語は、オイルの不飽和の尺度を指し、オイル１００ｇ当たり消費されるヨウ素のグラム（ｇ／１００ｇ）として測定される。
【0059】
上記のいずれかの実施形態と自由に組み合わせ可能なさらに別の好ましい実施形態によれば、３ｍｇＫＯＨ／ｇ以下の酸価を有するコーヒーオイルを得ることができる。酸価（または遊離脂肪酸）という用語は、オイル中に存在する遊離脂肪酸を中和するのに必要な水酸化カリウムの量を指す。遊離脂肪酸または酸価は、オイル１グラム当たりの水酸化カリウムのミリグラム（ｍｇ／ｇ）で測定される。酸価は、オイル中に存在する非結合脂肪酸のレベルを示し、様々なレベルがオイルのｐＨおよび品質に潜在的に影響を及ぼす。
【0060】
上記の実施形態のいずれかと自由に組み合わせ可能なさらに別の好ましい実施形態によれば、１４０ｍｇ／ｇ以上１８５ｍｇ／ｇ以下の鹸化値を有するコーヒーオイルを得ることができる。鹸化値という用語は、オイル中に存在する遊離脂肪酸を中和し、オイル１ｇ中のエステルを鹸化するために必要とされる水酸化カリウムの量を指す。鹸化値は、オイル１グラム当たりの水酸化カリウムのミリグラム（ｍｇ／ｇ）で測定される。鹸化値は、オイル中に存在する、トリグリセリド中のエステルとして結合した総脂肪酸および結合していない遊離脂肪酸の量を示す。
【0061】
上記の実施形態のいずれかと自由に組み合わせ可能なさらに別の好ましい実施形態によれば、コーヒーオイルの総重量に基づいて１．５質量％以下のカフェイン含有量を有するコーヒーオイルを得ることができる。
【0062】
上記の実施形態のいずれかと自由に組み合わせ可能なさらに別の好ましい実施形態によれば、コーヒーオイルの総重量に基づいて２質量％以下のトコフェロール含有量を有するコーヒーオイルを得ることができる。
【0063】
上記の実施形態のいずれかと自由に組み合わせ可能なさらに別の好ましい実施形態によれば、０．８６１ｇ／ｍＬ以下および０．９８９ｇ／ｍＬ以上の密度を有するコーヒーオイルを得ることができる。密度という用語は、オイルの単位体積当たりの質量を指し、油は水よりも密度が低いため、オイルの親油性を示す。
【実施例】
【0064】
以下、廃棄される使用済みの粉からコーヒーオイルを得るための抽出プロセスの例示的な実施形態について、図面を参照して詳細に説明する。図１は、そうでなければ埋め立て地に送られる廃棄される使用済みの粉からコーヒーオイルを得るための抽出プロセスの概要を示す。このプロセスは、本発明に記載されるようなコーヒーベースの供給原料のものであれば、任意の他のタイプの投入材料に等しく適用可能であり得る。第１に、廃棄されるコーヒー粉を、含水率が１０質量％以下になるまで乾燥させる。乾燥された使用済みコーヒー粉を、周囲温度および大気圧で本発明による抽出溶媒と混合し、機械的および／または磁気的撹拌下で少なくとも３０分間保持する。コーヒー粉を濾別し、濾液を真空中で濃縮して、褐色のアラビカコーヒーオイルを得る。
【0065】
出発材料は、様々の地元のカフェ店によって提供された。
【0066】
全ての抽出に使用される使用済みコーヒー粉は、異なるカフェの廃棄コーヒー粉の混合物である。各バッチを使用前に混合して、均質な内容物を確保した。
【0067】
これらのカフェの１つから、バージン豆（ダークロースト）を回収した。豆を「ＵＵＯＵＵ Ｍｉｎｉ Ｇｒｉｎｄｅｒ」を用いて粉砕し、篩に通して、粉砕されていない豆を除去した。篩にかけた生成物を、使用済みコーヒー粉の抽出との直接比較のために抽出プロセスに使用した。
【0068】
＜様々な溶媒を用いてコーヒーオイルを抽出するプロセス－実験室規模の実験＞
実施例１～１１、２１～２４および比較例１は、地元のカフェから得られた同じバッチの使用済みコーヒー粉を用いて行った。
実施例１～１１、２１～２４および比較例１は、地元のカフェから得られた同じバッチの使用済みコーヒー粉を用いて行った。
【0069】
実施例１
使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ、１０．０７ｇ）を、１００ｍＬ丸底フラスコ中で、周囲温度および大気圧で１６時間、酢酸メチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）と共に撹拌した。コーヒー粉を濾過し、ケーキを酢酸メチル（１０．０７ｍＬ；１ｖｏｌ）で２回洗浄した。濾液を真空中で濃縮して、１．３１ｇの褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１３．１％）。
使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ、１０．０７ｇ）を、１００ｍＬ丸底フラスコ中で、周囲温度および大気圧で１６時間、酢酸メチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）と共に撹拌した。コーヒー粉を濾過し、ケーキを酢酸メチル（１０．０７ｍＬ；１ｖｏｌ）で２回洗浄した。濾液を真空中で濃縮して、１．３１ｇの褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１３．１％）。
【0070】
収率の計算は、式１に基づいて行われる：
【数4】
【0071】
実施例２
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸エチル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度、大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１４．１％）。
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸エチル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度、大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１４．１％）。
【0072】
実施例３
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸ｎ－プロピル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度、大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１４．３％）。
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸ｎ－プロピル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度、大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１４．３％）。
【0073】
実施例４
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸イソプロピル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度、大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１４．４％）。
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸イソプロピル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度、大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１４．４％）。
【0074】
実施例５
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸ｔｅｒｔ－ブチル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度、大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１６．４％）。
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸ｔｅｒｔ－ブチル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度、大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１６．４％）。
【0075】
実施例６
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸ｎ－ブチル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度、大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１４．２％）。
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸ｎ－ブチル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度、大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１４．２％）。
【0076】
実施例７
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸イソアミル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度、大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１３．１％）。
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸イソアミル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度、大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１３．１％）。
【0077】
実施例８
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）をプロピオン酸エチル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度および大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１３．１％）。
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）をプロピオン酸エチル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度および大気圧で１６時間攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１３．１％）。
【0078】
実施例９
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酪酸エチル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度および大気圧で１６時間撹拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１３．２％）。
実施例１と同様にして、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酪酸エチル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度および大気圧で１６時間撹拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１３．２％）。
【0079】
実施例１０
実施例１と同様にして、１００ｍＬ丸底フラスコ中で、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸ベンジル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。コーヒー粉を濾過し、ケーキを酢酸ベンジル（１ｖｏｌ）で２回洗浄した。褐色の溶液が得られ、これは、前述の実施例の全てのオイルと同様の色であった。使用した有機溶媒の揮発性が低いため、オイルを単離することができなかった。溶液を脂肪酸組成について分析し、結果は先の実施例と同様であった。
実施例１と同様にして、１００ｍＬ丸底フラスコ中で、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）を酢酸ベンジル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。コーヒー粉を濾過し、ケーキを酢酸ベンジル（１ｖｏｌ）で２回洗浄した。褐色の溶液が得られ、これは、前述の実施例の全てのオイルと同様の色であった。使用した有機溶媒の揮発性が低いため、オイルを単離することができなかった。溶液を脂肪酸組成について分析し、結果は先の実施例と同様であった。
【0080】
実施例１１
実施例１と同様にして、１００ｍＬ丸底フラスコ中で、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）をフェニル酢酸エチル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。コーヒー粉を濾過し、ケーキをフェニル酢酸エチル（１ｖｏｌ）で２回洗浄した。褐色の溶液が得られ、これは、前述の実施例の全てのオイルと同様の色であった。使用した有機溶媒の揮発性が低いため、オイルを単離することができなかった。溶液を脂肪酸組成について分析し、結果は先の実施例と同様であった。
実施例１と同様にして、１００ｍＬ丸底フラスコ中で、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ）をフェニル酢酸エチル（５ｖｏｌ）と共に周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。コーヒー粉を濾過し、ケーキをフェニル酢酸エチル（１ｖｏｌ）で２回洗浄した。褐色の溶液が得られ、これは、前述の実施例の全てのオイルと同様の色であった。使用した有機溶媒の揮発性が低いため、オイルを単離することができなかった。溶液を脂肪酸組成について分析し、結果は先の実施例と同様であった。
【0081】
比較例１
１００ｍＬ丸底フラスコ中で、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ、１０．０２ｇ）をヘキサン（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）と共に周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。コーヒー粉を濾過し、ケーキをヘキサン（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で２回洗浄した。濾液を真空中で濃縮して、１．２３ｇの褐色アラビカコーヒーオイル（収率１２．３％）を得た。
１００ｍＬ丸底フラスコ中で、使用済みコーヒー粉（制限試薬；ＬＲ、１０．０２ｇ）をヘキサン（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）と共に周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。コーヒー粉を濾過し、ケーキをヘキサン（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で２回洗浄した。濾液を真空中で濃縮して、１．２３ｇの褐色アラビカコーヒーオイル（収率１２．３％）を得た。
【0082】
収率の計算は、式１に基づいて行われる：
【数5】
【0083】
これらの実施例からの結果を表１に要約する。
【表1】
【0084】
表１から、抽出溶媒としてヘキサンを使用することは、環境に優しくなく、効率が低く、本発明による抽出溶媒を使用することによって得られるよりも収率が明らかに低いことが観察できる。
【0085】
＜コーヒーオイルの抽出プロセス；経時的な収率評価＞
次に、抽出溶媒として酢酸エチルを使用して、周囲温度および大気圧で、乾燥した使用済みコーヒー粉からコーヒーオイルを抽出する際の、経時的な収率の発展が観察される。結果を表２にまとめる。
次に、抽出溶媒として酢酸エチルを使用して、周囲温度および大気圧で、乾燥した使用済みコーヒー粉からコーヒーオイルを抽出する際の、経時的な収率の発展が観察される。結果を表２にまとめる。
【0086】
実施例２１
使用済みコーヒー粉（６０．８７ｇ；制限試薬；ＬＲ）を、５００ｍｌの丸底フラスコ中で、周囲温度および大気圧で３０分間、酢酸エチル（３００ｍｌ；５ｖｏｌ）と共に撹拌した。コーヒー粉を濾過し、ケーキを酢酸エチル（６０ｍｌ；１ｖｏｌ）で２回洗浄した。濾液を真空中で濃縮して、褐色アラビカコーヒーオイル（収率１３．４％）を得た。
使用済みコーヒー粉（６０．８７ｇ；制限試薬；ＬＲ）を、５００ｍｌの丸底フラスコ中で、周囲温度および大気圧で３０分間、酢酸エチル（３００ｍｌ；５ｖｏｌ）と共に撹拌した。コーヒー粉を濾過し、ケーキを酢酸エチル（６０ｍｌ；１ｖｏｌ）で２回洗浄した。濾液を真空中で濃縮して、褐色アラビカコーヒーオイル（収率１３．４％）を得た。
【0087】
実施例２２
周囲温度および大気圧で１時間であることを除いて、実施例２１と同様にして、使用済みコーヒー粉を酢酸エチルと共に攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１３．０％）。
周囲温度および大気圧で１時間であることを除いて、実施例２１と同様にして、使用済みコーヒー粉を酢酸エチルと共に攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１３．０％）。
【0088】
実施例２３
周囲温度および大気圧で６時間であることを除いて、実施例２１と同様にして、使用済みコーヒー粉を酢酸エチル共に攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１３．６％）。
周囲温度および大気圧で６時間であることを除いて、実施例２１と同様にして、使用済みコーヒー粉を酢酸エチル共に攪拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１３．６％）。
【0089】
実施例２４
周囲温度および大気圧で４８時間であることを除いて、実施例２１と同様にして、使用済みコーヒー粉を酢酸エチルと共に撹拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１４．０％）。
周囲温度および大気圧で４８時間であることを除いて、実施例２１と同様にして、使用済みコーヒー粉を酢酸エチルと共に撹拌し、褐色アラビカコーヒーオイルを得た（収率１４．０％）。
【0090】
結果を表２にまとめる。
【表2】
【0091】
表２から、１６時間後の収率は同様の値のままであることが観察できる。１６～４８時間の収率は同様であるので、追加の時間にわたってプロセスを稼働させ続けるために必要とされるエネルギーは正当化されず、プロセスは非効率になる。
【0092】
＜脱脂された使用済みコーヒー粉からコーヒーオイルを再抽出するプロセス＞
実施例３１
実施例２２と同様に、酢酸エチルを用いて抽出した使用済みコーヒー粉を、その後１０％以下まで乾燥させ、酢酸エチルで再抽出した。乾燥脱脂使用済みコーヒー粉（６０．４２ｇ；ＬＲ）を、５００ｍＬ丸底フラスコ中で、周囲温度および大気圧で１６時間、酢酸エチル（３００ｍＬ；５ｖｏｌ）と共に撹拌した。コーヒー粉を濾過し、ケーキを酢酸エチル（６０ｍＬ；１ｖｏｌ）で２回洗浄した。濾液を真空中で濃縮して、褐色アラビカコーヒーオイル（１．１７ｇ；収率１．９％）を得た。見ての通り、再抽出後に回収されるコーヒーオイルの量は非常に少なく、これは、本発明による第１の抽出において効率的なプロセスが実行されることを意味する。
実施例３１
実施例２２と同様に、酢酸エチルを用いて抽出した使用済みコーヒー粉を、その後１０％以下まで乾燥させ、酢酸エチルで再抽出した。乾燥脱脂使用済みコーヒー粉（６０．４２ｇ；ＬＲ）を、５００ｍＬ丸底フラスコ中で、周囲温度および大気圧で１６時間、酢酸エチル（３００ｍＬ；５ｖｏｌ）と共に撹拌した。コーヒー粉を濾過し、ケーキを酢酸エチル（６０ｍＬ；１ｖｏｌ）で２回洗浄した。濾液を真空中で濃縮して、褐色アラビカコーヒーオイル（１．１７ｇ；収率１．９％）を得た。見ての通り、再抽出後に回収されるコーヒーオイルの量は非常に少なく、これは、本発明による第１の抽出において効率的なプロセスが実行されることを意味する。
【0093】
＜スケールアップ実験＞
実施例４１～４２は、地元のカフェから得られた使用済みコーヒー粉の別のバッチを使用して実施した。２０Ｌのガラスジャケット付き反応器を抽出プロセスに使用した。
実施例４１～４２は、地元のカフェから得られた使用済みコーヒー粉の別のバッチを使用して実施した。２０Ｌのガラスジャケット付き反応器を抽出プロセスに使用した。
【0094】
実施例４１
使用済みコーヒー粉（２ｋｇ；制限試薬；ＬＲ）を、２０Ｌのガラスジャケット付き反応器中で、周囲温度および大気圧で１時間、酢酸エチル（１０Ｌ；５ｖｏｌ）中で撹拌した。コーヒー粉を焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。反応器およびケーキを酢酸エチル（２Ｌ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキをさらなる酢酸エチル（２Ｌ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒を、大気圧および高温で反応器から蒸留により除去した。最終濃縮をロータリーエバポレーターにおいて真空中で完了し、褐色の天然アラビカコーヒーオイル（２３５ｇ；１１．８％）を得た。
使用済みコーヒー粉（２ｋｇ；制限試薬；ＬＲ）を、２０Ｌのガラスジャケット付き反応器中で、周囲温度および大気圧で１時間、酢酸エチル（１０Ｌ；５ｖｏｌ）中で撹拌した。コーヒー粉を焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。反応器およびケーキを酢酸エチル（２Ｌ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキをさらなる酢酸エチル（２Ｌ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒を、大気圧および高温で反応器から蒸留により除去した。最終濃縮をロータリーエバポレーターにおいて真空中で完了し、褐色の天然アラビカコーヒーオイル（２３５ｇ；１１．８％）を得た。
【0095】
実施例４２
使用済みコーヒー粉（２ｋｇ；制限試薬；ＬＲ）を、２０Ｌのガラスジャケット付き反応器中で、周囲温度および大気圧で２時間、酢酸エチル（１０Ｌ；５ｖｏｌ）中で撹拌した。コーヒー粉を焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。反応器およびケーキを酢酸エチル（２Ｌ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキをさらなる酢酸エチル（２Ｌ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒を、大気圧および高温で反応器から蒸留により除去した。最終濃縮をロータリーエバポレーターにおいて真空中で完了し、褐色の産出アラビカコーヒーオイル（２２６ｇ；１２．７％）を得た。
使用済みコーヒー粉（２ｋｇ；制限試薬；ＬＲ）を、２０Ｌのガラスジャケット付き反応器中で、周囲温度および大気圧で２時間、酢酸エチル（１０Ｌ；５ｖｏｌ）中で撹拌した。コーヒー粉を焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。反応器およびケーキを酢酸エチル（２Ｌ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキをさらなる酢酸エチル（２Ｌ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒を、大気圧および高温で反応器から蒸留により除去した。最終濃縮をロータリーエバポレーターにおいて真空中で完了し、褐色の産出アラビカコーヒーオイル（２２６ｇ；１２．７％）を得た。
【0096】
＜望ましくない成分（例えば、メラノイジン）の含有量＞
同じバッチからの使用済みコーヒー粉を、周囲温度および大気圧で１時間、および還流で１時間、酢酸エチルで抽出した。得られたコーヒーオイルを以下の実験で使用した。
同じバッチからの使用済みコーヒー粉を、周囲温度および大気圧で１時間、および還流で１時間、酢酸エチルで抽出した。得られたコーヒーオイルを以下の実験で使用した。
【0097】
実施例５１
周囲温度および大気圧で１時間、酢酸エチルで抽出することによって得られたアラビカコーヒーオイル（１６．３４ｇ；ＬＲ）をヘプタン（６５ｍＬ；４ｖｏｌ）に溶解した。ヘプタン中のコーヒーオイルの溶液を、活性炭（１２．３５ｇ；７５質量％）を含有する５００ｍＬフラスコに添加した。フラスコをヘプタン（１６ｍＬ；１ｖｏｌ）ですすぎ、洗浄液を、木炭、ヘプタンおよびオイルを含有するフラスコに加えた。スラリーを周囲温度および大気圧で３時間撹拌した。スラリーを濾過した。フラスコおよびケーキをヘプタン（１６ｍＬ；１ｖｏｌ）で２回洗浄した。ケーキのみをヘプタン（１６ｍＬ；１ｖｏｌ）でさらに２回洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で濃縮し、黄色脱色および脱臭されたアラビカコーヒーオイル（１３．９９ｇ；８５．６％）を得た。アンビエント抽出した産出アラビカコーヒーオイルの脱色中の質量損失は２．３５ｇ（１４．４％）である。
周囲温度および大気圧で１時間、酢酸エチルで抽出することによって得られたアラビカコーヒーオイル（１６．３４ｇ；ＬＲ）をヘプタン（６５ｍＬ；４ｖｏｌ）に溶解した。ヘプタン中のコーヒーオイルの溶液を、活性炭（１２．３５ｇ；７５質量％）を含有する５００ｍＬフラスコに添加した。フラスコをヘプタン（１６ｍＬ；１ｖｏｌ）ですすぎ、洗浄液を、木炭、ヘプタンおよびオイルを含有するフラスコに加えた。スラリーを周囲温度および大気圧で３時間撹拌した。スラリーを濾過した。フラスコおよびケーキをヘプタン（１６ｍＬ；１ｖｏｌ）で２回洗浄した。ケーキのみをヘプタン（１６ｍＬ；１ｖｏｌ）でさらに２回洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で濃縮し、黄色脱色および脱臭されたアラビカコーヒーオイル（１３．９９ｇ；８５．６％）を得た。アンビエント抽出した産出アラビカコーヒーオイルの脱色中の質量損失は２．３５ｇ（１４．４％）である。
【0098】
実施例５２
還流下で１時間の酢酸エチルによる抽出によって得られたアラビカコーヒーオイル（１７．８８ｇ；ＬＲ）をヘプタン（７１ｍＬ；４ｖｏｌ）に溶解した。ヘプタン中のコーヒーオイルの溶液を、活性炭（１３．４３ｇ；７５質量％）を含有する５００ｍＬフラスコに添加した。フラスコをヘプタン（１８ｍＬ；１ｖｏｌ）ですすぎ、洗浄液を、木炭、ヘプタン、およびオイルを含有するフラスコに加えた。スラリーを周囲温度および大気圧で３時間撹拌した。スラリーを濾過した。フラスコおよびケーキをヘプタン（１８ｍＬ；１ｖｏｌ）で２回洗浄した。ケーキのみをヘプタン（１８ｍＬ；１ｖｏｌ）でさらに２回洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で濃縮して、黄色脱色および脱臭されたアラビカコーヒーオイル（１４．６４ｇ；８１．９％）を得た。アンビエント抽出した産出アラビカコーヒーオイルの脱色中の質量損失は３．２４ｇ（１８．１％）である。
還流下で１時間の酢酸エチルによる抽出によって得られたアラビカコーヒーオイル（１７．８８ｇ；ＬＲ）をヘプタン（７１ｍＬ；４ｖｏｌ）に溶解した。ヘプタン中のコーヒーオイルの溶液を、活性炭（１３．４３ｇ；７５質量％）を含有する５００ｍＬフラスコに添加した。フラスコをヘプタン（１８ｍＬ；１ｖｏｌ）ですすぎ、洗浄液を、木炭、ヘプタン、およびオイルを含有するフラスコに加えた。スラリーを周囲温度および大気圧で３時間撹拌した。スラリーを濾過した。フラスコおよびケーキをヘプタン（１８ｍＬ；１ｖｏｌ）で２回洗浄した。ケーキのみをヘプタン（１８ｍＬ；１ｖｏｌ）でさらに２回洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で濃縮して、黄色脱色および脱臭されたアラビカコーヒーオイル（１４．６４ｇ；８１．９％）を得た。アンビエント抽出した産出アラビカコーヒーオイルの脱色中の質量損失は３．２４ｇ（１８．１％）である。
【0099】
この結果により、還流下で酢酸エチルによる抽出によって得られたコーヒーオイルは、周囲温度および大気圧で酢酸エチルによる抽出によって得られるコーヒーオイルよりも、メラノイジンの含有量が高いことが分かった。
【0100】
＜様々なエステルを用いた抽出＞
以下の実施例は、同じバッチからの使用済みコーヒー粉を使用して行った。
以下の実施例は、同じバッチからの使用済みコーヒー粉を使用して行った。
【0101】
実施例６１
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０７ｇ；ＬＲ）および酢酸メチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸メチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸メチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．３７ｇ；収率１３．６％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０７ｇ；ＬＲ）および酢酸メチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸メチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸メチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．３７ｇ；収率１３．６％）。
【0102】
実施例６２
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０６ｇ；ＬＲ）および酢酸メチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸メチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸メチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．０２ｇ；収率１０．１％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０６ｇ；ＬＲ）および酢酸メチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸メチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸メチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．０２ｇ；収率１０．１％）。
【0103】
比較例２
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０４ｇ；ＬＲ）および酢酸メチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸メチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸メチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、暗褐色／黒色の固体沈殿物が存在した（１．０５ｇ；収率１０．５％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０４ｇ；ＬＲ）および酢酸メチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸メチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸メチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、暗褐色／黒色の固体沈殿物が存在した（１．０５ｇ；収率１０．５％）。
【0104】
実施例６３
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０２ｇ；ＬＲ）および酢酸ｎ－プロピル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｎ－プロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ｎ－プロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．２３ｇ；収率１２．３％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０２ｇ；ＬＲ）および酢酸ｎ－プロピル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｎ－プロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ｎ－プロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．２３ｇ；収率１２．３％）。
【0105】
実施例６４
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０４ｇ；ＬＲ）および酢酸ｎ－プロピル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｎ－プロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ｎ－プロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．０３ｇ；収率１０．３％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０４ｇ；ＬＲ）および酢酸ｎ－プロピル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｎ－プロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ｎ－プロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．０３ｇ；収率１０．３％）。
【0106】
比較例３
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０８ｇ；ＬＲ）および酢酸ｎ－プロピル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｎ－プロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ｎ－プロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、褐色固体沈殿物が存在した（１．２３ｇ；収率１２．２％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０８ｇ；ＬＲ）および酢酸ｎ－プロピル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｎ－プロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ｎ－プロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、褐色固体沈殿物が存在した（１．２３ｇ；収率１２．２％）。
【0107】
実施例６５
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０８ｇ；ＬＲ）および酢酸イソプロピル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸イソプロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸イソプロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．２９ｇ；収率１２．８％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０８ｇ；ＬＲ）および酢酸イソプロピル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸イソプロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸イソプロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．２９ｇ；収率１２．８％）。
【0108】
実施例６６
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０５ｇ；ＬＲ）および酢酸イソプロピル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸イソプロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸イソプロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．１１ｇ；収率１１．０％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０５ｇ；ＬＲ）および酢酸イソプロピル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸イソプロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸イソプロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．１１ｇ；収率１１．０％）。
【0109】
比較例４
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０７ｇ；ＬＲ）および酢酸イソプロピル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸イソプロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸イソプロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、暗褐色／黒色の固体沈殿物が存在した（１．２２ｇ；収率１２．１％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０７ｇ；ＬＲ）および酢酸イソプロピル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸イソプロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸イソプロピル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、暗褐色／黒色の固体沈殿物が存在した（１．２２ｇ；収率１２．１％）。
【0110】
実施例６７
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０５ｇ；ＬＲ）および酢酸ｎ－ブチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｎ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるｎ－ブチルアセテート（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．２５ｇ；収率１２．４％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０５ｇ；ＬＲ）および酢酸ｎ－ブチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｎ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるｎ－ブチルアセテート（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．２５ｇ；収率１２．４％）。
【0111】
実施例６８
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．００ｇ；ＬＲ）および酢酸ｎ－ブチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｎ－ブチル（１０ｍｌ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるｎ－ブチルアセテート（１０ｍｌ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．０２ｇ；収率１０．２％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．００ｇ；ＬＲ）および酢酸ｎ－ブチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｎ－ブチル（１０ｍｌ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるｎ－ブチルアセテート（１０ｍｌ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．０２ｇ；収率１０．２％）。
【0112】
比較例５
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０４ｇ；ＬＲ）および酢酸ｎ－ブチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｎ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるｎ－ブチルアセテート（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、固体沈殿物が存在した（１．２５ｇ；収率１２．５％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０４ｇ；ＬＲ）および酢酸ｎ－ブチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｎ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるｎ－ブチルアセテート（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、固体沈殿物が存在した（１．２５ｇ；収率１２．５％）。
【0113】
実施例６９
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０４ｇ；ＬＲ）および酢酸ｔ－ブチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｔ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ｔ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．１４ｇ；収率１１．４％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０４ｇ；ＬＲ）および酢酸ｔ－ブチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｔ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ｔ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．１４ｇ；収率１１．４％）。
【0114】
実施例７０
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０３ｇ；ＬＲ）および酢酸ｔ－ブチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｔ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ｔ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．００ｇ；収率１０．０％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０３ｇ；ＬＲ）および酢酸ｔ－ブチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｔ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ｔ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色オイルであった（１．００ｇ；収率１０．０％）。
【0115】
比較例６
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０７ｇ；ＬＲ）および酢酸ｔ－ブチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｔ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ｔ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色－黒色沈殿物を有する褐色オイルであった（１．１７ｇ；収率１１．６％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０７ｇ；ＬＲ）および酢酸ｔ－ブチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ｔ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ｔ－ブチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色－黒色沈殿物を有する褐色オイルであった（１．１７ｇ；収率１１．６％）。
【0116】
実施例７１
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０６ｇ；ＬＲ）および酢酸ベンジル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ベンジル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ベンジル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒の揮発性が低いため、生成物を単離することができなかったが、得られた溶液を外観について分析した。得られた溶液は淡褐色－黄色の透明溶液であった。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０６ｇ；ＬＲ）および酢酸ベンジル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ベンジル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ベンジル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒の揮発性が低いため、生成物を単離することができなかったが、得られた溶液を外観について分析した。得られた溶液は淡褐色－黄色の透明溶液であった。
【0117】
実施例７２
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０５ｇ；ＬＲ）および酢酸ベンジル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ベンジル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ベンジル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒の揮発性が低いため、生成物を単離することができなかったが、得られた溶液を外観について分析した。得られた溶液は淡褐色－黄色の透明溶液であった。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０５ｇ；ＬＲ）および酢酸ベンジル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ベンジル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ベンジル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒の揮発性が低いため、生成物を単離することができなかったが、得られた溶液を外観について分析した。得られた溶液は淡褐色－黄色の透明溶液であった。
【0118】
比較例７
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０８ｇ；ＬＲ）および酢酸ベンジル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ベンジル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ベンジル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒の揮発性が低いため、生成物を単離することができなかったが、得られた溶液を外観について分析した。得られた溶液は暗褐色の透明溶液であった。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０８ｇ；ＬＲ）および酢酸ベンジル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸ベンジル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸ベンジル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒の揮発性が低いため、生成物を単離することができなかったが、得られた溶液を外観について分析した。得られた溶液は暗褐色の透明溶液であった。
【0119】
実施例７３
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０７ｇ；ＬＲ）および酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．１９ｇ；収率１１．８％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０７ｇ；ＬＲ）および酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．１９ｇ；収率１１．８％）。
【0120】
実施例７４
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０５ｇ；ＬＲ）および酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．０４ｇ；収率１０．３％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０５ｇ；ＬＲ）および酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．０４ｇ；収率１０．３％）。
【0121】
比較例８
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０９ｇ；ＬＲ）および酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗褐色オイルであり、固体沈殿物が存在した（１．１３ｇ；収率１１．２％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０９ｇ；ＬＲ）および酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は暗褐色オイルであり、固体沈殿物が存在した（１．１３ｇ；収率１１．２％）。
【0122】
実施例７５
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０１ｇ；ＬＲ）およびエチルフェニルアセテート（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキをフェニル酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるエチルフェニルアセテート（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒の揮発性が低いため、生成物を単離することができなかったが、得られた溶液を外観について分析した。得られた溶液は淡褐色－黄色の透明溶液であった。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０１ｇ；ＬＲ）およびエチルフェニルアセテート（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキをフェニル酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるエチルフェニルアセテート（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒の揮発性が低いため、生成物を単離することができなかったが、得られた溶液を外観について分析した。得られた溶液は淡褐色－黄色の透明溶液であった。
【0123】
実施例７６
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０３ｇ；ＬＲ）およびエチルフェニルアセテート（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキをフェニル酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるエチルフェニルアセテート（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒の揮発性が低いため、生成物を単離することができなかったが、得られた溶液を外観について分析した。得られた溶液は淡褐色－黄色の透明溶液であった。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０３ｇ；ＬＲ）およびエチルフェニルアセテート（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキをフェニル酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるエチルフェニルアセテート（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒の揮発性が低いため、生成物を単離することができなかったが、得られた溶液を外観について分析した。得られた溶液は淡褐色－黄色の透明溶液であった。
【0124】
比較例９
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０３ｇ；ＬＲ）およびエチルフェニルアセテート（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキをフェニル酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるエチルフェニルアセテート（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒の揮発性が低いため、生成物を単離することができなかったが、得られた溶液を外観について分析した。得られた溶液は暗褐色の透明溶液であった。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０３ｇ；ＬＲ）およびエチルフェニルアセテート（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキをフェニル酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるエチルフェニルアセテート（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。溶媒の揮発性が低いため、生成物を単離することができなかったが、得られた溶液を外観について分析した。得られた溶液は暗褐色の透明溶液であった。
【0125】
実施例７７
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０７ｇ；ＬＲ）および酢酸イソアミル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸イソアミル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸イソアミル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて７０～７５℃で真空濃縮した。オイルの最終濃縮中に酢酸エチルとの共沸蒸留を使用して、生成物から残留酢酸イソアミルを除去した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．３７ｇ；収率１３．６％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０７ｇ；ＬＲ）および酢酸イソアミル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸イソアミル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸イソアミル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて７０～７５℃で真空濃縮した。オイルの最終濃縮中に酢酸エチルとの共沸蒸留を使用して、生成物から残留酢酸イソアミルを除去した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．３７ｇ；収率１３．６％）。
【0126】
実施例７８
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０８ｇ；ＬＲ）および酢酸イソアミル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸イソアミル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸イソアミル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて７０～７５℃で真空濃縮した。オイルの最終濃縮中に酢酸エチルとの共沸蒸留を使用して、生成物から残留酢酸イソアミルを除去した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．３２ｇ；収率１３．１％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０８ｇ；ＬＲ）および酢酸イソアミル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸イソアミル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸イソアミル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて７０～７５℃で真空濃縮した。オイルの最終濃縮中に酢酸エチルとの共沸蒸留を使用して、生成物から残留酢酸イソアミルを除去した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．３２ｇ；収率１３．１％）。
【0127】
比較例１０
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０９ｇ；ＬＲ）および酢酸イソアミル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸イソアミル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸イソアミル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて７０～７５℃で真空濃縮した。オイルの最終濃縮中に酢酸エチルとの共沸蒸留を使用して、生成物から残留酢酸イソアミルを除去した。単離した生成物は褐色オイルであり、暗褐色／黒色の固体沈殿物が存在した（１．３２ｇ；収率１３．１％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０９ｇ；ＬＲ）および酢酸イソアミル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸イソアミル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸イソアミル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて７０～７５℃で真空濃縮した。オイルの最終濃縮中に酢酸エチルとの共沸蒸留を使用して、生成物から残留酢酸イソアミルを除去した。単離した生成物は褐色オイルであり、暗褐色／黒色の固体沈殿物が存在した（１．３２ｇ；収率１３．１％）。
【0128】
実施例７９
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０６ｇ；ＬＲ）およびプロピオン酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキをプロピオン酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるプロピオン酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて５５～６０℃で真空中で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．２５ｇ；収率１２．４％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０６ｇ；ＬＲ）およびプロピオン酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキをプロピオン酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるプロピオン酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて５５～６０℃で真空中で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．２５ｇ；収率１２．４％）。
【0129】
実施例８０
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０１ｇ；ＬＲ）およびプロピオン酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキをプロピオン酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるプロピオン酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて５５～６０℃で真空中で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．０４ｇ；収率１０．４％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０１ｇ；ＬＲ）およびプロピオン酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキをプロピオン酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるプロピオン酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて５５～６０℃で真空中で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．０４ｇ；収率１０．４％）。
【0130】
比較例１１
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０４ｇ；ＬＲ）およびプロピオン酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキをプロピオン酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるプロピオン酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて５５～６０℃で真空中で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、暗褐色／黒色の固体沈殿物が存在した（１．２６ｇ；収率１２．５％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０４ｇ；ＬＲ）およびプロピオン酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキをプロピオン酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなるプロピオン酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて５５～６０℃で真空中で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、暗褐色／黒色の固体沈殿物が存在した（１．２６ｇ；収率１２．５％）。
【0131】
実施例８１
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０１ｇ；ＬＲ）および酪酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酪酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる量の酪酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて５５～６０℃で真空中で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．２５ｇ；収率１２．５％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０１ｇ；ＬＲ）および酪酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酪酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる量の酪酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて５５～６０℃で真空中で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．２５ｇ；収率１２．５％）。
【0132】
実施例８２
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０２ｇ；ＬＲ）および酪酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酪酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる量の酪酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて５５～６０℃で真空中で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．１５ｇ；収率１１．５％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０２ｇ；ＬＲ）および酪酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酪酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる量の酪酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて５５～６０℃で真空中で濃縮した。単離した生成物は暗橙色－褐色オイルであった（１．１５ｇ；収率１１．５％）。
【0133】
比較例１２
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０７ｇ；ＬＲ）および酪酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酪酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる量の酪酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて５５～６０℃で真空中で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、暗褐色／黒色の固体沈殿物が存在した（１．４５ｇ；収率１４．４％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、使用済みコーヒー粉（１０．０７ｇ；ＬＲ）および酪酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酪酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる量の酪酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて５５～６０℃で真空中で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、暗褐色／黒色の固体沈殿物が存在した（１．４５ｇ；収率１４．４％）。
【0134】
実施例６１～８２の結果は、周囲温度および大気圧での抽出が、還流抽出と同様の効率を有することを示した。これは、特にプロセスが少なくとも１６時間行われる場合に当てはまる。さらに、周囲温度および大気圧での抽出によって得られたオイルは、還流での抽出によって得られたオイルよりも官能特性が改善された。
【0135】
＜抽出温度の影響＞
実験６１～７３と同じバッチからの使用済みコーヒー粉を以下の実験に使用した。
実験６１～７３と同じバッチからの使用済みコーヒー粉を以下の実験に使用した。
【0136】
実施例９１
１００ｍＬの丸底フラスコに、酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。溶媒を５０±２．５℃に加熱した。熱い溶媒に、使用済みコーヒー粉（１０．０５ｇ；ＬＲ）を添加した。スラリーを５０±２．５℃で１時間撹拌した。スラリーを周囲温度（２２．８℃）に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離された生成物は、固体が存在しない暗橙色－褐色オイルであった（１．１０ｇ；収率１０．９％）。
１００ｍＬの丸底フラスコに、酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。溶媒を５０±２．５℃に加熱した。熱い溶媒に、使用済みコーヒー粉（１０．０５ｇ；ＬＲ）を添加した。スラリーを５０±２．５℃で１時間撹拌した。スラリーを周囲温度（２２．８℃）に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離された生成物は、固体が存在しない暗橙色－褐色オイルであった（１．１０ｇ；収率１０．９％）。
【0137】
周囲温度から５０℃へ抽出温度を上昇させることによって、周囲温度と比較して収率の点でわずかな改善しか示されなかった。したがって、温度の上昇は、予想されたように有意な影響を収率に及ぼさない。
【0138】
＜未使用の焙煎コーヒー粉の抽出＞
実施例１０１
１００ｍＬ丸底フラスコに、未使用の焙煎コーヒー粉（１０．０１ｇ；ＬＲ）および酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離された生成物は褐色オイルであり、褐色－黒色沈殿物（１．５４ｇ；１５．４％収率）が存在した。
実施例１０１
１００ｍＬ丸底フラスコに、未使用の焙煎コーヒー粉（１０．０１ｇ；ＬＲ）および酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１６時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離された生成物は褐色オイルであり、褐色－黒色沈殿物（１．５４ｇ；１５．４％収率）が存在した。
【0139】
実施例１０２
１００ｍＬ丸底フラスコに、未使用の焙煎コーヒー粉（１０．０８ｇ；ＬＲ）および酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、黒色－褐色沈殿物が存在した（１．３２ｇ；収率１３．１％）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、未使用の焙煎コーヒー粉（１０．０８ｇ；ＬＲ）および酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを周囲温度および大気圧で１時間撹拌した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、黒色－褐色沈殿物が存在した（１．３２ｇ；収率１３．１％）。
【0140】
実施例１０３
１００ｍＬ丸底フラスコに、未使用の焙煎コーヒー粉（１０．０４ｇ；ＬＲ）および酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、黒色－褐色沈殿物が存在した（１．５３ｇ；１５．２％収率）。
１００ｍＬ丸底フラスコに、未使用の焙煎コーヒー粉（１０．０４ｇ；ＬＲ）および酢酸エチル（５０ｍＬ；５ｖｏｌ）を添加した。スラリーを還流下で１時間撹拌した。内容物を周囲温度に冷却した。スラリーを焼結漏斗（フリット３）を通して濾過した。フラスコおよびケーキを酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。ケーキのみをさらなる酢酸エチル（１０ｍＬ；１ｖｏｌ）で洗浄した。濾液および洗浄液を合わせて真空中で４５～５０℃で濃縮した。単離した生成物は褐色オイルであり、黒色－褐色沈殿物が存在した（１．５３ｇ；１５．２％収率）。
【0141】
＜定性分析＞
分析方法の例は、実施例２２に関連して以下に記載されている。しかしながら、同じ方法を使用して、本発明による任意のコーヒーオイル組成物を特徴付けることができる。
分析方法の例は、実施例２２に関連して以下に記載されている。しかしながら、同じ方法を使用して、本発明による任意のコーヒーオイル組成物を特徴付けることができる。
【0142】
＜酸価＞
酸価は、USP 43-NF38 p.6676 <401> Fixed Fats and Oilsに説明されるように特定される。
酸価は、USP 43-NF38 p.6676 <401> Fixed Fats and Oilsに説明されるように特定される。
【0143】
各実施例についてデータを収集したので、データを傾向分析し、各値について許容範囲が得られた。データセットについて、データ点の数および各々の値は既知である。これから、式２に従って平均値を計算した：
【数6】
【0144】
許容範囲の上限値および下限値を得るために、上方管理限界（ＵＣＬ）および下方管理限界（ＬＣＬ）を計算した。以下、各式について、標準偏差の算出に用いた式（式３）と共に説明する：
式中、
ｘｉ＝データセットからの各値
μ＝データセットの平均
Ｎ＝データセット中のデータ点の数。
【数7】
ｘｉ＝データセットからの各値
μ＝データセットの平均
Ｎ＝データセット中のデータ点の数。
【0145】
表３に示される以下のデータは、実施例２２について得られたものである：
【表3】
【0146】
【数8】
【0147】
数値は、計算されたＵＣＬおよびＬＣＬを包含するように四捨五入される。このデータセットについて、範囲を最も近いｍｇに四捨五入した。抽出したコーヒーオイルの酸価は４ｍｇ／ｇ以下であった。
【0148】
＜密度＞
質量をＯＨＡＵＳ Ｎａｖｉｇａｔｏｒ（商標）ＮＶ４２２天秤で記録した。エッペンドルフシングルチャネルピペット（１～１０ｍｌ）を用いて体積を測定した。
質量をＯＨＡＵＳ Ｎａｖｉｇａｔｏｒ（商標）ＮＶ４２２天秤で記録した。エッペンドルフシングルチャネルピペット（１～１０ｍｌ）を用いて体積を測定した。
【0149】
実施例２２からのコーヒーオイル１ｍＬを正確に測定し、秤量した（０．９７ｇ）。式４を用いて密度を算出した：
式中、
ρ＝試料の密度（ｇ／ｍＬ）
ｍ＝採取した試料の正確な質量（ｇ）
Ｖ＝秤量した試料の総体積（ｍＬ）。
【数9】
ρ＝試料の密度（ｇ／ｍＬ）
ｍ＝採取した試料の正確な質量（ｇ）
Ｖ＝秤量した試料の総体積（ｍＬ）。
【0150】
式４を用いたコーヒーオイルの計算例：
【数10】
【0151】
＜ＳＡＰ値＞
ＳＡＰ値は、USP 43-NF38 p.6676 <401> Fixed Fats and Oilsに説明されるように特定される。水酸化カリウムペレット（≧８５％）は、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｕｐｐｌｉｅｓから入手した。メタノール（９９％）をＡｌｆａ Ａｃｅｒから入手した。フェノールフタレイン溶液（Indicator; Reag. Ph.Eur.; 1% in ethanol）および０．５Ｎ塩酸（Volumetric; Reag. Ph.Eur., 0.5M; 0.5N）は、Ｈｏｎｅｙｗｅｌｌ Ｆｌｕｋａから入手した。質量をＯＨＡＵＳ Ｎａｖｉｇａｔｏｒ（商標）ＮＶ４２２天秤で記録した。使用したガラス製体積計は、クラスＡ分析グレードであった。エッペンドルフシングルチャネルピペット（１～１０ｍＬ）を使用して、より小さい体積を測定した。
ＳＡＰ値は、USP 43-NF38 p.6676 <401> Fixed Fats and Oilsに説明されるように特定される。水酸化カリウムペレット（≧８５％）は、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｕｐｐｌｉｅｓから入手した。メタノール（９９％）をＡｌｆａ Ａｃｅｒから入手した。フェノールフタレイン溶液（Indicator; Reag. Ph.Eur.; 1% in ethanol）および０．５Ｎ塩酸（Volumetric; Reag. Ph.Eur., 0.5M; 0.5N）は、Ｈｏｎｅｙｗｅｌｌ Ｆｌｕｋａから入手した。質量をＯＨＡＵＳ Ｎａｖｉｇａｔｏｒ（商標）ＮＶ４２２天秤で記録した。使用したガラス製体積計は、クラスＡ分析グレードであった。エッペンドルフシングルチャネルピペット（１～１０ｍＬ）を使用して、より小さい体積を測定した。
【0152】
手順は以下の通りであった：実施例２２からの１．４９ｇのコーヒーオイルを５００ｍＬ丸底フラスコに秤量した。これに、２５ｍＬの０．５Ｎアルコール性水酸化カリウムを添加した。内容物を９０分間還流した。内容物を冷却した。これに、１ｍＬのフェノールフタレインＴＳを添加した。溶液を０．２５Ｎ塩酸ＶＳで、ピンク色が除去され、初期の色が観察されるまで滴定した。必要とされる０．２５Ｎ塩酸ＶＳの体積は２１．８ｍＬであった。１ｍＬのフェノールフタレインを含む２５ｍＬの０．５Ｎ水酸化カリウム溶液でブランク滴定を行った。ブランク力価は４５．０ｍＬであった。
【0153】
鹸化価は、式５に従って計算した：
式中、
Ｍｒ＝水酸化カリウムの分子量（５６．１１）
ＶＢ＝ブランク試験で消費された塩酸の体積（ｍＬ）
ＶＴ＝実際の試験で消費された塩酸の体積（ｍＬ）
Ｎ＝塩酸溶液の正確な規定度
Ｗ＝試験に使用された物質の質量。
【数11】
Ｍｒ＝水酸化カリウムの分子量（５６．１１）
ＶＢ＝ブランク試験で消費された塩酸の体積（ｍＬ）
ＶＴ＝実際の試験で消費された塩酸の体積（ｍＬ）
Ｎ＝塩酸溶液の正確な規定度
Ｗ＝試験に使用された物質の質量。
【0154】
実施例２２については、式５によるＳＡＰ値は、以下である：
【数12】
【0155】
＜遊離脂肪酸値＞
遊離脂肪酸値は、USP 43-NF38 p.6676 <401> Fixed Fats and Oilsに説明されるように決定される。メタノール（ＨＰＬＣグレード、９９．９％）および１Ｎ水酸化カリウム溶液をＦｉｓｈｅｒから入手し、ジエチルエーテル（純度、＞９９．５％）をハネウェルから入手した。使用したガラス製体積計は、クラスＡ分析グレードであった。質量をＯＨＡＵＳ Ｎａｖｉｇａｔｏｒ（商標）ＮＶ４２２天秤で記録した。手順は以下の通りである：
実施例２２からの１．０２ｇのコーヒーオイルを、ジエチルエーテルおよびメタノールの１：１混合物５０ｍＬに溶解した。この混合物を、沈殿が形成されるまで少なくとも３０秒間、０．０１Ｎ水酸化カリウム溶で滴定した（力価＝１．８ｍＬ水酸化カリウム、０．０１Ｎ）。
遊離脂肪酸値は、USP 43-NF38 p.6676 <401> Fixed Fats and Oilsに説明されるように決定される。メタノール（ＨＰＬＣグレード、９９．９％）および１Ｎ水酸化カリウム溶液をＦｉｓｈｅｒから入手し、ジエチルエーテル（純度、＞９９．５％）をハネウェルから入手した。使用したガラス製体積計は、クラスＡ分析グレードであった。質量をＯＨＡＵＳ Ｎａｖｉｇａｔｏｒ（商標）ＮＶ４２２天秤で記録した。手順は以下の通りである：
実施例２２からの１．０２ｇのコーヒーオイルを、ジエチルエーテルおよびメタノールの１：１混合物５０ｍＬに溶解した。この混合物を、沈殿が形成されるまで少なくとも３０秒間、０．０１Ｎ水酸化カリウム溶で滴定した（力価＝１．８ｍＬ水酸化カリウム、０．０１Ｎ）。
【0156】
０．０１Ｎ水酸化カリウムの力価を用いて、式６を使用して試料の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）値を特定することができる：
Ｍｒ＝水酸化カリウムの分子量（５６．１１ｇ／ｍｏｌ－１）
Ｖ＝滴定に使用した０．０１Ｎ水酸化カリウムの力価（ｍＬ）
Ｎ＝使用した水酸化カリウム溶液の正確な規定度（Ｎ）
Ｗ＝滴定に使用した試料の質量（ｇ）。
【数13】
Ｖ＝滴定に使用した０．０１Ｎ水酸化カリウムの力価（ｍＬ）
Ｎ＝使用した水酸化カリウム溶液の正確な規定度（Ｎ）
Ｗ＝滴定に使用した試料の質量（ｇ）。
【0157】
以下の計算は、実施例２２に適用可能である：
ＦＦＡ＝（５６．１１×１．８）×（０．０１／１．０２）
ＦＦＡ＝０．９９ｍｇ／ｇ。
ＦＦＡ＝（５６．１１×１．８）×（０．０１／１．０２）
ＦＦＡ＝０．９９ｍｇ／ｇ。
【0158】
＜ヨウ素価＞
ヨウ素価は、USP 43-NF38 p.6676 <401> Fixed Fats and Oilsに説明されるように特定される。一臭化ヨウ素（９８％）、ヨウ化カリウム（９９％）およびデンプン指示薬溶液（1%, Acculute Standard Volumetric Solution）をＡｌｆａ Ａｃｅｒから入手し、酢酸、氷酢酸（９９％）をＦｉｓｈｅｒから入手し、０．１Ｎチオ硫酸ナトリウム溶液をハネウェルから入手した。使用したガラス製体積計は、クラスＡ分析グレードであった。エッペンドルフシングルチャネルピペット（１～１０ｍＬ）を使用して、より小さい体積を測定した。質量をＯＨＡＵＳ Ｎａｖｉｇａｔｏｒ（商標）ＮＶ４２２天秤で記録した。手順は以下の通りである：
ヨードブロミド試験溶液（ＴＳ）－２．０３ｇのヨードブロミドを１００ｍＬの氷酢酸に溶解し、遮光したガラス容器に保存した。ヨウ化カリウム試験溶液（ＴＳ）－１６．４９ｇのヨウ化カリウムを１００ｍＬの脱イオン水に溶解し、遮光したガラス容器に保存した。
ヨウ素価は、USP 43-NF38 p.6676 <401> Fixed Fats and Oilsに説明されるように特定される。一臭化ヨウ素（９８％）、ヨウ化カリウム（９９％）およびデンプン指示薬溶液（1%, Acculute Standard Volumetric Solution）をＡｌｆａ Ａｃｅｒから入手し、酢酸、氷酢酸（９９％）をＦｉｓｈｅｒから入手し、０．１Ｎチオ硫酸ナトリウム溶液をハネウェルから入手した。使用したガラス製体積計は、クラスＡ分析グレードであった。エッペンドルフシングルチャネルピペット（１～１０ｍＬ）を使用して、より小さい体積を測定した。質量をＯＨＡＵＳ Ｎａｖｉｇａｔｏｒ（商標）ＮＶ４２２天秤で記録した。手順は以下の通りである：
ヨードブロミド試験溶液（ＴＳ）－２．０３ｇのヨードブロミドを１００ｍＬの氷酢酸に溶解し、遮光したガラス容器に保存した。ヨウ化カリウム試験溶液（ＴＳ）－１６．４９ｇのヨウ化カリウムを１００ｍＬの脱イオン水に溶解し、遮光したガラス容器に保存した。
【0159】
試料滴定：実施例２２からの０．２０ｇのコーヒーオイルを２５ｍＬのジクロロメタンに溶解した。これに、２５ｍＬのヨードブロミドＴＳを添加した。溶液を、１０分毎に混合しながら、遮光して３０分間静置した。これに、３０ｍＬのヨウ化カリウムＴＳおよび１００ｍＬの脱イオン水を添加した。溶液を、ヨウ素色が淡くなるまで０．１Ｎチオ硫酸ナトリウム溶液で滴定し、この時点で、３ｍｌのデンプン指示薬溶液を添加した。０．１Ｎチオ硫酸ナトリウムの滴定を、水相中のヨウ素色が完全になくなるまで続けた。力価は３６．８ｍＬと記録された。
【0160】
ブランク滴定：２５ｍＬのジクロロメタンを容器に加え、これに２５ｍＬのヨードブロミドＴＳを加えた。溶液を、１０分毎に混合しながら、遮光して３０分間静置した。これに、３０ｍＬのヨウ化カリウムＴＳおよび１００ｍＬの脱イオン水を添加した。溶液を、ヨウ素の色が淡くなるまで０．１Ｎチオ硫酸ナトリウム溶液で滴定した。この時点で、３ｍｌのデンプン指示薬溶液を添加した。０．１Ｎチオ硫酸ナトリウムの滴定を、水相中のヨウ素色が完全になくなるまで続けた。力価は４６．４ｍＬと記録された。
【0161】
試料力価およびブランク力価を用いて、式７を使用して、オイル中の不飽和度を表すヨウ素価を計算することができる：
式中、
Ａｒ＝ヨウ素の原子量（１２６．９０）
ＶＢ＝ブランクによって消費された０．１Ｎチオ硫酸ナトリウムの体積（ｍＬ）
ＶＳ＝試料によって消費された０．１Ｎチオ硫酸ナトリウムの体積（ｍＬ）
Ｎ＝チオ硫酸ナトリウム溶液の正確な規定度（Ｎ）
Ｗ＝採取された試料の質量（ｇ）。
【数14】
Ａｒ＝ヨウ素の原子量（１２６．９０）
ＶＢ＝ブランクによって消費された０．１Ｎチオ硫酸ナトリウムの体積（ｍＬ）
ＶＳ＝試料によって消費された０．１Ｎチオ硫酸ナトリウムの体積（ｍＬ）
Ｎ＝チオ硫酸ナトリウム溶液の正確な規定度（Ｎ）
Ｗ＝採取された試料の質量（ｇ）。
【0162】
以下の計算は、実施例２２に適用可能である：
ヨウ素価＝［１２６．９０×（４６．４－３６．８）×０．１］／（１０×０．２）
ヨウ素価＝６０．９ｇＩ２／１００ｇ。
ヨウ素価＝［１２６．９０×（４６．４－３６．８）×０．１］／（１０×０．２）
ヨウ素価＝６０．９ｇＩ２／１００ｇ。
【0163】
＜トコフェロール含有量＞
全てのＵＶ－可視分光光度測定をＪｅｎｗａｙ ７２０５分光光度計で行った。α－トコフェロール（９５％；合成）をＡＣＲＯＳ Ｏｒｇａｎｉｃｓから得た。イソプロパノールはＲｅＡｇｅｎｔから入手した。質量をＯＨＡＵＳ Ｎａｖｉｇａｔｏｒ（商標）ＮＶ４２２天秤で記録した。使用したガラス製体積計は、クラスＡ分析グレードであった。エッペンドルフシングルチャネルピペット（１～１０ｍＬ）を使用して、より小さい体積を測定した。
全てのＵＶ－可視分光光度測定をＪｅｎｗａｙ ７２０５分光光度計で行った。α－トコフェロール（９５％；合成）をＡＣＲＯＳ Ｏｒｇａｎｉｃｓから得た。イソプロパノールはＲｅＡｇｅｎｔから入手した。質量をＯＨＡＵＳ Ｎａｖｉｇａｔｏｒ（商標）ＮＶ４２２天秤で記録した。使用したガラス製体積計は、クラスＡ分析グレードであった。エッペンドルフシングルチャネルピペット（１～１０ｍＬ）を使用して、より小さい体積を測定した。
【0164】
トコフェロール標準溶液：０．１０ｇのα－トコフェロールを１００ｍＬメスフラスコに秤量した。これをイソプロパノールで体積希釈した。混合物を、α－トコフェロールの完全な溶解が観察されるまで振盪した。この溶液（Ａ－１０００μｇ／ｍＬ）を使用して、１～１００μｇ／ｍＬ（Ｂ～Ｌ）の範囲のさらなる１１種の標準溶液を作製した。
【0165】
試料溶液：実施例２２から採取した０．９７ｇの試料をバイアルに秤量した。これに、１０ｍＬのイソプロパノールを添加した。この溶液（試料溶液１）を、試料が完全に溶解するまで振盪した。１００ｍＬメスフラスコに、１ｍＬの試料溶液１を添加した。これをイソプロパノールで体積希釈し、完全に混合するまで振盪した（試料溶液２）。１００ｍＬメスフラスコに、１ｍＬの試料溶液２を添加した。これをイソプロパノールで体積希釈し、完全に混合するまで振盪した（試料溶液３）。
【0166】
ＵＶ－Ｖｉｓ分析：表４による試料溶液Ａ～Ｌを、２９０ｎｍにおけるＵＶ－Ｖｉｓによって分析した。イソプロパノールのみからなるブランクも２９０ｎｍで分析した。標準溶液から検量線を得た。吸光度について２．０～２．５０の範囲内の任意の値を廃棄し、これらによって検出器が飽和した。グラフに最も適合する直線を適合させ、式を用いて試料中のトコフェロール含有量を計算した。全ての試料溶液をＵＶ－Ｖｉｓによって分析した。標準溶液から得られたデータ点において最も中心に位置する値をトコフェロールの計算に使用した。少なくとも８つのデータ点がグラフ上に残っていれば、標準に対する最良適合線に対する任意の明らかな外れ値をグラフから除去した。最良適合線からの式を式８に示す：
式中、
ｙ＝吸光度
ｘ＝濃度（μｇ／ｍＬ）
ｍ＝勾配
Ｃ＝ｙ切片。
【数15】
ｙ＝吸光度
ｘ＝濃度（μｇ／ｍＬ）
ｍ＝勾配
Ｃ＝ｙ切片。
【0167】
したがって、ＵＶ－Ｖｉｓによって測定された希釈試料中のα－トコフェロール濃度は、式９に従う：
【数16】
【0168】
α－トコフェロール／コーヒーオイル１グラムの値は、上記の濃度計算および元の試料中のコーヒーオイルの質量から計算することができる。
【0169】
以下の計算は、実施例２２に適用可能である：
【表4】
【0170】
【0171】
試料溶液３の吸光度は０．４２３であった。試料中のα－トコフェロールの量は、以下のように計算することができる：
【数18】
【0172】
＜過酸化物価＞
全てのＵＶ－可視分光光度測定を、Ｊｅｎｗａｙ ７２０５分光光度計で行った。過酸化水素（水中３０％）を、Ｆｉｓｈｅｒ、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）定量的過酸化物アッセイから得た：脂質適合性製剤をＴｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから得た。
全てのＵＶ－可視分光光度測定を、Ｊｅｎｗａｙ ７２０５分光光度計で行った。過酸化水素（水中３０％）を、Ｆｉｓｈｅｒ、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）定量的過酸化物アッセイから得た：脂質適合性製剤をＴｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから得た。
【0173】
作業試薬調製－１００μＬの試薬Ａ（Ｐｉｅｒｃｅ（商標）定量的過酸化物アッセイ：脂質適合性製剤）を１０ｍＬの試薬Ｃ（Ｐｉｅｒｃｅ（商標）定量的過酸化物アッセイ：脂質適合性製剤）に添加した。
【0174】
過酸化水素の３０％（９．８Ｍ）ストック溶液を連続希釈して、１０～１００μＭの範囲の７つの標準溶液を得た。
【0175】
各標準溶液９０μＬを作業試薬９００μＬに添加し、続いてメタノール１０μＬを添加し、各溶液を２０分間放置した後、各溶液の吸光度を５６０ｎｍで測定し、検量線を作成した。
【0176】
実施例２２からの９０μＬのコーヒーオイルを９００μＬの作業試薬に添加し、続いて１０μＬのメタノールを添加した。溶液を２０分間静置した後、吸光度を５６０ｎｍで測定した。試料の吸光度値を検量線と比較して、コーヒーオイルの過酸化物価を計算した。
【0177】
試料溶液１～７をＵＶ－Ｖｉｓにより５６０ｎｍで分析した。水および作業試薬のみからなるブランクも５６０ｎｍで分析した。標準溶液から検量線を得た。吸光度について２．０～２．５０の範囲内の任意の値を廃棄し、これらによって検出器が飽和した。グラフに最も適合する直線を適合させ、式を用いて試料の過酸化物価を計算した。全ての試料溶液をＵＶ－Ｖｉｓによって分析した。標準溶液から得られたデータ点において最も中心に位置する値を過酸化物価の計算に使用した。最良適合線からの式は、式１０に従って以下の通りである：
式中、
ｙ＝吸光度
ｘ＝濃度（μｇ／ｍＬ）
ｍ＝勾配
Ｃ＝ｙ切片。
【数19】
ｙ＝吸光度
ｘ＝濃度（μｇ／ｍＬ）
ｍ＝勾配
Ｃ＝ｙ切片。
【0178】
したがって、ＵＶ－Ｖｉｓによって測定された試料の過酸化物価は、式１１で計算される：
【数20】
【0179】
コーヒーオイルのｍｍｏｌの値は、濃度計算から産出することができる。
【0180】
過酸化物価は、脂肪またはオイル１キログラム当たりの過酸化物酸素の量として定義され、ミリ当量単位で表される。（注記：１ミリ当量＝０．５ミリモル；
１ｍＥｑのＯ２＝１ｍｍｏｌ／２＝０．５ｍｍｏｌのＯ２、式中２は原子価である）。
１ｍＥｑのＯ２＝１ｍｍｏｌ／２＝０．５ｍｍｏｌのＯ２、式中２は原子価である）。
【0181】
以下の計算は、実施例２２に適用可能である：
【表5】
【0182】
図３は、過酸化物価の計算のために表５のデータから得られた検量線を示す。最良適合線について得られる式は、以下の通りである：
ｙ＝０．０１０８ｘ＋－０．１４４
ｙ＝０．０１０８ｘ＋－０．１４４
【0183】
コーヒーオイルの試料の吸光度は０．７５４であり、過酸化物価の濃度は以下のように計算した：
Ｘ＝（ｙ＋０．１４４）／０．０１０８＝（０．７５４＋０．１４４）／０．０１０８＝８３μＭ
＝（８３／１０００）×２×０．９７＝０．１６１ｍＥｑＯ２／ｋｇ。
Ｘ＝（ｙ＋０．１４４）／０．０１０８＝（０．７５４＋０．１４４）／０．０１０８＝８３μＭ
＝（８３／１０００）×２×０．９７＝０．１６１ｍＥｑＯ２／ｋｇ。
【0184】
＜カフェイン含有量＞
カフェイン含有量は、USP29-NF24 Page 338に説明されるようにＨＰＬＣクロマトグラフィーによって特定される。
カフェイン含有量は、USP29-NF24 Page 338に説明されるようにＨＰＬＣクロマトグラフィーによって特定される。
【0185】
テトラヒドロフラン（ＨＰＬＣグレード、９９．８％）、アセトニトリル（ＨＰＬＣグレード、９９．８％）および氷酢酸（９９％）は、Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃによって供給された。カフェイン（９９．７％）および無水酢酸ナトリウム（９９％）は、Ａｌｆａ Ａｃｅｒによって供給された。テオフィリン（９９＋％）は、Ａｃｒｏｓ Ｏｒｇａｎｉｃｓによって供給された。
【0186】
手順は以下の通りである－
移動相調製において、１．６４ｇの無水酢酸ナトリウムを２Ｌの脱イオン水に溶解した。溶液を０．２ミクロンフィルターで濾過した。１９１０ｍＬのこの溶液を取り、別の容器に移した。これに、５０ｍＬのアセトニトリルおよび４０ｍＬのテトラヒドロフランを添加した。溶液を注意深く混合し、氷酢酸を用いてｐＨを約４．５に調整した。
移動相調製において、１．６４ｇの無水酢酸ナトリウムを２Ｌの脱イオン水に溶解した。溶液を０．２ミクロンフィルターで濾過した。１９１０ｍＬのこの溶液を取り、別の容器に移した。これに、５０ｍＬのアセトニトリルおよび４０ｍＬのテトラヒドロフランを添加した。溶液を注意深く混合し、氷酢酸を用いてｐＨを約４．５に調整した。
【0187】
システム適合性調製溶液１について－０．１０ｇのテオフィリンを１００ｍＬメスフラスコ中に測定した。これに約８０ｍＬの移動相を加え、全ての固体が完全に溶解するまで溶液を４５℃に加熱した。溶液を移動相で容量まで希釈し、振盪して混合した。
【0188】
システム適合性調製溶液２について－２ｍＬのシステム適合性溶液１を１００ｍＬメスフラスコ中に正確に測定した。溶液を移動相で容量まで希釈し、振盪して混合した。
【0189】
標準調製溶液３について－０．１０ｇのカフェインを１００ｍＬメスフラスコ中に正確に測定し、約５０ｍＬの移動相を添加した。固体が完全に溶解するまで溶液を振盪した。溶液を移動相で容量まで希釈した。混合物を振盪して合わせた。
【0190】
標準調製溶液４について－２０ｍＬの標準溶液３を１００ｍＬのメスフラスコ中に測定し、これに２０ｍＬのシステム適合性溶液２および２０ｍＬの移動相を添加した。混合物を振盪して合わせ、移動相を容量まで添加した。
【0191】
試料調製－実施例２２のコーヒーオイル０．２ｇを秤量し、１０ｍＬの移動相で希釈した。溶液を一晩撹拌した。試料を注入前に０．２２μｍフィルターに通した。
【0192】
ダイオードアレイ検出器（Ｇ１３１５Ｂダイオードアレイ検出器）を備えた高速液体クロマトグラフ（ＨＰＬＣ；Ａｇｉｌｅｎｔ １１００）によって、ＨＰＬＣアッセイを実施し分析した。ＢＤＳ Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ５μｍ－Ｃ１８カラム（Ｔｈｅｒｍｏ、４．６ｍｍ×１５０ｍｍ）を２５℃で使用した。注入容量は１０μＬであった。１０ｍＭ酢酸ナトリウム緩衝液ｐＨ４．５／アセトニトリル／テトラヒドロフラン（９５５：２５：２０ｖ／ｖ／ｖ）からなる定組成移動相で化合物を溶出した。分離した化合物を２７５ｎｍでモニターし、流速を１ｍＬ／分に設定した。
【0193】
標準溶液４および試料をクロマトグラフィーにかけ、ピーク応答を記録した。カフェインおよびテオフィリンについての相対保持時間は、それぞれ１．０および０．７０であり、USP29-NF24、p.338に説明されるカフェインアッセイについてのＵＳＰ仕様に準拠した。
【0194】
【0195】
【0196】
米国薬局方モノグラフ（USP29-NF24 Page 338）から指示されるように、カフェインおよびテオフィリンについての相対保持時間は、それぞれ約１．０および０．６９であるべきである。ピークＸ対ピークＹの相対保持時間を計算するために、式１２が適用される：
式中、
ＲＲＴ（Ｘ）は、ピークＹに対するピークＸの相対保持時間である。
ＲＴ（Ｘ）は、ピークＸの保持時間である。
ＲＴ（Ｙ）は、ピークＹの保持時間である。
【数21】
ＲＲＴ（Ｘ）は、ピークＹに対するピークＸの相対保持時間である。
ＲＴ（Ｘ）は、ピークＸの保持時間である。
ＲＴ（Ｙ）は、ピークＹの保持時間である。
【0197】
この具体例について：
ＲＲＴ（１）＝３．３３７／４．６１６
ＲＲＴ（１）＝０．７２。
ＲＲＴ（１）＝３．３３７／４．６１６
ＲＲＴ（１）＝０．７２。
【0198】
標準溶液４および／アッセイにおけるカフェインのピーク応答を使用して、アッセイ試料中のＣ８Ｈ１０Ｎ４Ｏ２のｍｇ量を、式１３を使用して計算することができる：
式中、
ｍａｓｓ＝ｍｇ単位の試料中のカフェインの質量
Ｃ＝標準溶液４中のｍｇ／ｍｌ単位のカフェインの濃度。
【数22】
ｍａｓｓ＝ｍｇ単位の試料中のカフェインの質量
Ｃ＝標準溶液４中のｍｇ／ｍｌ単位のカフェインの濃度。
【0199】
ｒｕおよびｒｓは、それぞれ試料調製物および標準溶液４調製物から得られたカフェインのピーク応答である。
【0200】
計算例：
質量＝５０×０．２×（１５１．０２６／７２７．４７６）
質量＝２．０８ｍｇ／２００ｍｇ
質量＝１．０４ｍｇ／１００ｍｇ。
質量＝５０×０．２×（１５１．０２６／７２７．４７６）
質量＝２．０８ｍｇ／２００ｍｇ
質量＝１．０４ｍｇ／１００ｍｇ。
【0201】
＜コーヒーオイル中の脂肪酸組成＞
コーヒーオイル中の脂肪酸組成は、米国薬局方、USP 43-NF38 p.6676 <401> Fixed Fats and Oilsに説明されるようにガスクロマトグラフィー（ＧＣ）によって特定される。
コーヒーオイル中の脂肪酸組成は、米国薬局方、USP 43-NF38 p.6676 <401> Fixed Fats and Oilsに説明されるようにガスクロマトグラフィー（ＧＣ）によって特定される。
【0202】
以下の方法および計算は、実施例２２に適用可能である。
【0203】
試薬：水酸化カリウムペレット（≧８５％）は、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｕｐｐｌｉｅｓから入手した。メタノール（９９％）をＡｌｆａ Ａｃｅｒから入手した。メタノール性三フッ化ホウ素（１２％；１．５Ｍ）およびｎ－ヘプタン（ＨＰＬＣグレード；９９％）をＡＣＲＯＳ Ｏｒｇａｎｉｃｓから入手した。硫酸ナトリウム（無水；９９％）をＡｌｆａ Ａｃｅｒから入手した。リノール酸メチル（９９％）は、ＡＣＲＯＳ Ｏｒｇａｎｉｃｓから入手した。脂肪酸メチルエステル混合物（ＵＳＰリファレンススタンダード；ＦＡＭＥ標準混合物；１００ｍｇ；２５ＦＡＭＥ’ｓ）は、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｓｕｐｐｌｉｅｓから入手した。使用したガスクロマトグラフィーシステムは、Ｇ１５３０Ａ Ａｇｉｌｅｎｔ ６８９０ ＧＣであった。ＧＣカラムはＡｇｉｌｅｎｔから購入した（ＤＢ－Ｗａｘ；品番１２２－７０３２；３０ｍ×０．２５ｍｍ；０．２５μｍ；７インチ；溶融シリカ）。ＧＣ法は、Agilent Technologies; Column Selection for the Analysis of Fatty Acid Methyl Esters; Application; Food Analysis; Page 4-5; Method 1に基づいた。
【0204】
標準溶液：１００ｍｇのリノール酸メチルを１０ｍＬのｎ－ヘプタン（１０ｍｇ／ｍＬ）に溶解した。１ｍＬのリノール酸メチル１０ｍｇ／ｍＬ溶液を９ｍＬのｎ－ヘプタンで希釈することによって、１ｍｇ／ｍＬのリノール酸メチル溶液を作製した。リファレンススタンダード混合物およびマーカーとして使用した１ｍｇ／ｍＬのリノール酸メチル標準の両方をガスクロマトグラフィーによって分析した。パルミチン酸メチル、ステアリン酸メチル、オレイン酸メチル、リノレン酸メチル、アラキジン酸メチルおよびベヘン酸メチルの他の標準溶液を同様に作製し、ガスクロマトグラフィーによって分析して、保持時間のマーカーを得た。
【0205】
試料消化：実施例２２によるコーヒーオイルの試料０．１ｇを丸底フラスコに秤量した。これに、２ｍＬの２０ｇ／Ｌメタノール性水酸化カリウムを添加した。内容物を３０分間還流した。これに、凝縮器を通して２ｍＬのメタノール性三フッ化ホウ素溶液を添加した。内容物を３０分間還流した。これに、凝縮器を通して４ｍＬのｎ－ヘプタンを添加した。内容物を５分間還流した。内容物を３０～６０分間冷却した。冷却した混合物に、１５ｍＬの飽和塩化ナトリウム溶液を添加した。混合物を分液漏斗に移した。水相を廃棄した。有機相を１０ｍＬの脱イオン水で洗浄した。水相を廃棄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥した有機相を綿毛栓付きピペットで濾過した。得られた溶液をガスクロマトグラフィーによって分析した。機器および実験条件の詳細を以下の表８に提供する。
【表8】
【0206】
すべての脂肪酸エステルシグナルのピーク面積を積分する。次いで、ピーク面積を使用して、各シグナルのピーク面積％を計算することができる。すべてのシグナルを積分した後、％ピーク面積＜０．０５％を有する任意のシグナルを除去する。各シグナルは、保持時間を標準脂肪酸エステル混合物で観察された保持時間と比較することによって同定される。式１４を用いて、以下のようにしてピーク面積％を算出する：
式中、
Ａ＝各シグナルについて得られたピーク面積応答
Ｂ＝クロマトグラムで積分された全シグナルのピーク面積の合計から溶媒シグナルを差し引いたもの。
【数23】
Ａ＝各シグナルについて得られたピーク面積応答
Ｂ＝クロマトグラムで積分された全シグナルのピーク面積の合計から溶媒シグナルを差し引いたもの。
【0207】
本実施例の結果を表１２に示す。
【0208】
本実施例によれば、以下のＧＣクロマトグラムおよびデータが得られた：
－ブランク試料のＧＣクロマトグラムを図６に示し、対応するデータを以下の表９に示す
－リノール酸メチルマーカーのＧＣクロマトグラムを図７に示し、対応するデータを以下の表１０に示す
－リファレンススタンダード混合物のＧＣクロマトグラムを図８に示し、対応するデータを以下の表１１に示す；および
－コーヒーオイルのサンプルのＧＣクロマトグラムを図９に示し、対応するデータおよびピーク面積の計算を以下の表１２に示す。
－ブランク試料のＧＣクロマトグラムを図６に示し、対応するデータを以下の表９に示す
－リノール酸メチルマーカーのＧＣクロマトグラムを図７に示し、対応するデータを以下の表１０に示す
－リファレンススタンダード混合物のＧＣクロマトグラムを図８に示し、対応するデータを以下の表１１に示す；および
－コーヒーオイルのサンプルのＧＣクロマトグラムを図９に示し、対応するデータおよびピーク面積の計算を以下の表１２に示す。
【0209】
【表9】
【0210】
【表10】
【0211】
【表11-1】
【表11-2】
【0212】
【表12-1】
【表12-2】
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【国際調査報告】