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特表2024-542183がんの処置において有用な免疫原性細胞死（ＩＣＤ）を誘導するプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体組成物、ならびにその方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-11-13
(54)【発明の名称】がんの処置において有用な免疫原性細胞死（ＩＣＤ）を誘導するプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体組成物、ならびにその方法
(51)【国際特許分類】
A61K 47/54 20170101AFI20241106BHJP
A61K 47/69 20170101ALI20241106BHJP
A61K 31/704 20060101ALI20241106BHJP
A61K 47/62 20170101ALI20241106BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20241106BHJP
【ＦＩ】
A61K47/54
A61K47/69
A61K31/704
A61K47/62
A61P35/00
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024529181
(86)(22)【出願日】2022-11-17
(85)【翻訳文提出日】2024-07-11
(86)【国際出願番号】 US2022000028
(87)【国際公開番号】W WO2023091168
(87)【国際公開日】2023-05-25
(31)【優先権主張番号】63/361,075
(32)【優先日】2021-11-18
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】522185368
【氏名又は名称】ナミ セラピューティクス， インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100078282
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 秀策
(74)【代理人】
【識別番号】100113413
【弁理士】
【氏名又は名称】森下 夏樹
(74)【代理人】
【識別番号】100181674
【弁理士】
【氏名又は名称】飯田 貴敏
(74)【代理人】
【識別番号】100181641
【弁理士】
【氏名又は名称】石川 大輔
(74)【代理人】
【識別番号】230113332
【弁護士】
【氏名又は名称】山本 健策
(72)【発明者】
【氏名】ストーバー， デイビッド
(72)【発明者】
【氏名】バラリ， ドゥルバ
(72)【発明者】
【氏名】ヘイ， ブルース エー．
(72)【発明者】
【氏名】サファイエ， タハミネー
【テーマコード（参考）】
4C076
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076AA19
4C076AA65
4C076AA95
4C076CC27
4C076CC42
4C076DD41
4C076EE41
4C076EE59
4C086AA01
4C086AA02
4C086EA10
4C086MA03
4C086MA24
4C086MA38
4C086NA13
4C086NA15
4C086ZB26
(57)【要約】
ＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（例えば、ＬＮＰおよび／またはＳＬＮＰ）、ならびにナノ担体を作製する方法が、本明細書において開示される。ＩＣＤプロドラッグ組成物は、薬物部分と、脂質部分と、免疫原性細胞死（ＩＣＤ）を誘導する連結ユニットとを含む。ＩＣＤプロドラッグは、標的化された薬物送達ビヒクルを利用することによって、がん、免疫学的障害、および他の疾患を処置する方法を提供するために、ナノ担体に製剤化および／または共製剤化され得る。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ＩＣＤプロドラッグ組成物であって、（ｉｖ）薬物部分と、
（ｖ）脂質部分と、
（ｖｉ）連結ユニット（「ＬＵ」）と
を含み、
前記薬物部分が、ＩＣＤを誘導する薬剤を含み、前記ＬＵが、前記薬物部分を前記脂質部分にコンジュゲートする、
ＩＣＤプロドラッグ組成物。
【請求項2】
前記薬物部分が、ＩＣ１として記載される化学構造を含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
【請求項3】
前記ＬＵが、ヒドラゾンリンカーである、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
【請求項4】
前記脂質部分が、表ＩＩＩに記載される脂質を含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
【請求項5】
前記脂質部分が、ステアリン酸を含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
【請求項6】
前記薬物部分が、ＩＣ１として記載される化学構造を含み、前記脂質部分が、ステアリン酸を含み、化合物が、以下の化学構造：【化27】
【請求項7】
ＩＣＤプロドラッグ組成物であって、（ｉｖ）ＩＣ１を含む、薬物部分と、
（ｖ）ステアリン酸を含む、脂質部分と、
（ｖｉ）ヒドラゾンリンカーを含む、ＬＵと
を含む、ＩＣＤプロドラッグ組成物。
【請求項8】
以下の化学構造：【化28】
【請求項9】
ＩＣＤプロドラッグを含むナノ担体であって、ＬＵの切断後に免疫原性細胞死（ＩＣＤ）を誘導する薬剤を放出する、ナノ担体。
【請求項10】
前記ＬＵが、ヒドラゾンリンカーである、請求項９に記載のナノ担体。
【請求項11】
表ＩＩに記載されるヘルパー脂質をさらに含む、請求項９に記載のナノ担体。
【請求項12】
請求項９～１１のいずれか一項に記載のナノ担体を含む、キット。
【請求項13】
前記ナノ担体が、固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）である、請求項９に記載のナノ担体。
【請求項14】
前記ＩＣＤプロドラッグが、ＩＣ１を含み、ＳＬＮＰ－ＩＣ１と称される、請求項１３に記載のＳＬＮＰ。
【請求項15】
請求項８に記載のＩＣ１プロドラッグを含む、固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）。
【請求項16】
ＳＬＮＰ－ＩＣ１と称される、請求項１５に記載のＳＬＮＰ。
【請求項17】
ＴＲ１２と共製剤化される、請求項１５に記載のＳＬＮＰ。
【請求項18】
ＲＧＤと共製剤化される、請求項１５に記載のＳＬＮＰ。
【請求項19】
前記ＳＬＮＰが、ＴＲ１２と共製剤化されたＩＣ１をさらに含む（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２と称される）、請求項１５に記載のＳＬＮＰ。
【請求項20】
前記ＳＬＮＰが、ＲＧＤと共製剤化されたＩＣ１をさらに含む（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤと称される）、請求項１５に記載のＳＬＮＰ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願への相互参照
本出願は、２０２１年１１月１８日に提出された米国仮特許出願第６３／３６１，０７５号に基づく優先権を主張し、その内容は、すべてが参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２１年１１月１８日に提出された米国仮特許出願第６３／３６１，０７５号に基づく優先権を主張し、その内容は、すべてが参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
連邦政府による資金提供を受けた研究下でなされた発明に対する権利の記述
該当なし。
該当なし。
【0003】
発明の分野
本明細書に記載される発明は、プロドラッグおよびそのようなプロドラッグを含むナノ製剤からの活性誘導剤／阻害剤の放出後に免疫原性細胞死（ＩＣＤ）を誘導する、プロドラッグ組成物に関する。具体的には、本発明は、ナノ担体（例えば、リポソーム）内に製剤化され、ヒトにおいてがん療法のビヒクルとして使用される、プロドラッグ組成物に関する。本発明はまた、そのようなプロドラッグの、他の免疫モジュレーション剤もしくはプロドラッグまたはそれらの様々な組合せとの共製剤にも関する。本発明はさらに、がんならびに他の免疫学的障害および疾患の処置に関する。
本明細書に記載される発明は、プロドラッグおよびそのようなプロドラッグを含むナノ製剤からの活性誘導剤／阻害剤の放出後に免疫原性細胞死（ＩＣＤ）を誘導する、プロドラッグ組成物に関する。具体的には、本発明は、ナノ担体（例えば、リポソーム）内に製剤化され、ヒトにおいてがん療法のビヒクルとして使用される、プロドラッグ組成物に関する。本発明はまた、そのようなプロドラッグの、他の免疫モジュレーション剤もしくはプロドラッグまたはそれらの様々な組合せとの共製剤にも関する。本発明はさらに、がんならびに他の免疫学的障害および疾患の処置に関する。
【背景技術】
【0004】
発明の背景
がんは、冠状動脈疾患に次いで世界で２番目に多い死因である。毎年、数百万人ががんで死亡しており、米国単独で年間５０万をはるかに超えるがんによる死亡があり、２０１７年には、１，６８８，７８０件の新しいがん症例が診断されている（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｏｃｉｅｔｙ）。心臓疾患による死亡は著しく低下してきたが、がんによるものは、一般に増加している。来世紀の初期には、医療の発展により現在の傾向が変化しない限り、がんが１番の死因となることが予測される。
がんは、冠状動脈疾患に次いで世界で２番目に多い死因である。毎年、数百万人ががんで死亡しており、米国単独で年間５０万をはるかに超えるがんによる死亡があり、２０１７年には、１，６８８，７８０件の新しいがん症例が診断されている（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｏｃｉｅｔｙ）。心臓疾患による死亡は著しく低下してきたが、がんによるものは、一般に増加している。来世紀の初期には、医療の発展により現在の傾向が変化しない限り、がんが１番の死因となることが予測される。
【0005】
いくつかのがんは、高い死亡率を有するものとして際立っている。具体的には、肺の癌腫（すべてのがん死亡数の１８．４％）、乳房の癌腫（すべてのがん死亡数の６．６％）、結腸直腸の癌腫（すべてのがん死亡数の９．２％）、肝臓の癌腫（すべてのがん死亡数の８．２％）、および胃の癌腫（すべてのがん死亡数の８．２％）が、世界ですべての年齢で両性別について、がんによる死亡の主な原因となっている（ＧＬＯＢＯＣＡＮ ２０１８）。これらおよび事実上すべての他の癌腫は、それらが、原発性腫瘍から遠位の部位へと転移し、ほとんど例外なく、転移性疾患が致死となるという点で、共通した致死特性を共有している。さらに、初期に原発性がんから生き残ったがん患者であっても、その生活が激変するという一般的な経験が示されている。多くのがん患者は、再発または処置失敗の可能性を意識することによる強い不安を経験する。多くのがん患者はまた、処置後に身体的衰弱も経験する。さらに、多くのがん患者は、その疾患の再発を経験する。
【0006】
がん療法は過去数十年間にわたって向上し、生存率は増加したが、がんの不均一性により、複数の処置モダリティを利用する新しい治療戦略が依然として必要である。これは、解剖学的に重大な部位における固形腫瘍（例えば、神経膠芽腫、頭頸部の扁平上皮癌、および肺腺癌）の処置において特に当てはまり、これらは、標準的な放射線療法および／または化学療法に限定されることがある。いずれにせよ、これらの治療法の有害作用は、化学療法および放射線療法耐性であり、これらは、患者の生活の質を低減させる重篤な副作用に加えて、局所領域的再発、遠位転移、および二次原発性腫瘍を促進する。
【0007】
一般的に述べると、ＩＣＤは、免疫応答を誘起する任意の種類の細胞死である。ＩＣＤは、いずれの応答も誘起せずそれどころか免疫寛容を媒介する他の形態の細胞死（例えば、アポトーシス、オートファジー、およびその他のもの）とは対照的である。ＩＣＤは、膜完全性を維持するアポトーシス形態学によって特徴付けられる。GARG, et. al., Int. J. Dev. Biol. 59: pp. 131-140 (2015)を参照されたい。加えて、ＩＣＤは、損傷関連分子パターン（ＤＡＭＰ）の分泌によって特徴付けられる。一般に、ＩＣＤの際に細胞表面に曝露される３つの主要なＤＡＭＰが存在する。第１のものは、通常は小胞体のルーメンに存在するＤＡＭＰ分子のうちの１つであるカルレティキュリン（ＣＲＴ）であり、免疫原性死の誘導後に死滅する細胞の表面に転位される。そこで、それが、プロフェッショナル食細胞に対する「私を食べて」のシグナルとして機能する。第２のものは、熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）、すなわち、ＨＳＰ７０およびＨＳＰ９０として公知の表面曝露ＤＡＭＰであり、これは、ストレス条件下において、さらに形質膜へと転位する。細胞表面上で、それらは、ＣＤ９１およびＣＤ４０といったいくつかの抗原提示細胞（ＡＰＣ）表面受容体との相互作用に基づいて、免疫刺激性作用を有し、また、ＭＨＣクラスＩ分子上の腫瘍細胞に由来する抗原の交差提示を促進し、次いで、これが、ＣＤ８＋ Ｔ細胞応答を引き起こす。ＩＣＤに特徴的な第３のＤＡＭＰは、分泌型ＨＭＧＢ１およびＡＴＦである。ＨＭＧＢ１は、後期ＩＣＤのマーカーであると考えられており、細胞外空間へのその放出は、樹状細胞による最適な抗原提示に必要とされることが示されている。それは、ＡＰＣに発現されるいくつかのパターン認識受容体（ＰＲＲ）、例えば、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）２および４に結合する。免疫原性細胞死の際に放出されるＡＴＰは、分泌されると食細胞に対する「私を見つけて」のシグナルとして機能し、ＩＣＤの部位へのそれらの誘引を誘導する。加えて、標的細胞上のプリン受容体へのＡＴＰの結合は、インフラマソーム活性化を通じて免疫刺激性作用を有する。ＩＣＤの際に放出されるＤＮＡおよびＲＮＡ分子は、死滅する細胞および食細胞の両方において、ＴＬＲ３およびｃＧＡＳ応答を活性化することが示されている。GALLUZZI, et. al., Cell Death and Diff. (2018) 25:pp. 486-451を参照されたい。
【0008】
一般的に、２つの群のＩＣＤ誘導剤が、当該技術分野において認識されている。Ｉ型誘導剤は、付随的な損傷としてのみ小胞体（ＥＲ）に対するストレスを引き起こし、主として、ＤＮＡまたはクロマチン維持装置または膜成分を標的とする。ＩＩ型誘導剤は、ＥＲを特異的に標的とする。
【0009】
ＩＣＤは、一部の細胞増殖抑制剤、例えば、アントラサイクリン、オキサリプラチン、およびボルテゾミブ、または放射線療法および光線力学的療法（ＰＤＴ）によって誘導される。加えて、ＩＣＤの生物学的原因のなかでもとりわけ、いくつかのウイルスを挙げることができる。感染細胞の免疫原性死が感染作用物質に対する免疫応答を誘導するように、がん細胞の免疫原性死は、樹状細胞（ＤＣ）の活性化および結果としての特異的Ｔ細胞応答の活性化を通じて、有効な抗腫瘍免疫応答を誘導し得る。この作用は、抗腫瘍療法において使用されている。KRYSKO, et. al., Nat. Revs, Cancer 12(12):pp860-875 (2012)およびSPISEK, et. al., Cell Cycle 6(16)pp. 1962-1965 (Aug. 2007)を参照されたい。
【0010】
細胞死を誘導するために使用される様々な薬剤が使用され、現在、がん療法として評価されている。とりわけ、ドキソルビシンは、１９７４年以来、米国において医療使用が認められている。ドキソルビシンは、インターカレーションおよび高分子生合成の阻害によって、ＤＮＡと相互作用する。これは、転写のためにＤＮＡにおけるスーパーコイルを弛緩させる酵素であるトポイソメラーゼＩＩの進行を阻害する。ドキソルビシンは、ＤＮＡ鎖を複製のために破壊した後にトポイソメラーゼＩＩ複合体を安定化させ、ＤＮＡ二重ヘリックスが放出されるのを防止し、それによって、複製のプロセスを停止させる。TACAR, et. al., J. Pharm. & Pharmcol, 65, pp. 157-170 (2012)を参照されたい。
【0011】
ドキソルビシンのペグ化バージョン（ＭＹＯＣＥＴ）およびリポソームバージョン（ＤＯＸＩＬ）もまた、がんおよび他の疾患の処置について、米国および他の国々において市販入手可能である。
【0012】
プロドラッグは、投与後に薬理学的に活性な薬物へと代謝される（すなわち、体内で変換される）医薬品または化合物である。薬物を直接的に投与するのではなく、対応するプロドラッグを、医薬がどのように吸収され、分配され、代謝され、および／または排出されるかを改善するために代わりに使用する。プロドラッグは、例えば、薬物自体が消化管から吸収されにくい場合に、バイオアベイラビリティを改善するようにデザインされることが多い。プロドラッグは、薬物がその意図される標的ではない細胞またはプロセスとどれほど選択的に相互作用するかを改善するために使用され得る。これによって、薬物の有害なまたは意図されない効果が低減され、これは、特に、重篤な意図されないおよび望ましくない副作用を有する場合のある化学療法などの処置において重要である。プロドラッグは、したがって、親分子の望ましくない特性を変更または排除するために一過的な様式で使用される、特化した非毒性保護基を含む薬物とみなすことができる。
【0013】
最後に、ナノ担体は、別の物質、例えば、薬物の輸送手段として使用されているナノ材料である。多数の異なるタイプのナノ担体が存在する。例えば、ナノ担体としては、数例挙げると、ポリマーコンジュゲート、ポリマーナノ粒子、脂質に基づく担体、およびデンドリマーが挙げられる。ナノ担体において異なるタイプのナノ材料が使用されることにより、疎水性および親水性の薬物が身体全体に送達されることが可能となる。ヒトの身体は主として水を含んでいるため、疎水性薬物をヒトにおいて効果的に送達する能力は、ナノ担体の主要な治療上の利点である。ナノ担体は、薬物を部位特異的標的に送達することができ、薬物を、その他のものではなくある特定の器官または細胞に送達することを可能にするため、薬物送達プロセスにおいて有望である。部位特異性は、薬物が誤った位置へと送達されるのを防止するため、主要な治療上の利点である。加えて、ナノ担体は、身体の健常な成長速度の早い細胞に対する化学療法の有害なより広範な毒性を減少させるのに役立ち得るため、化学療法における使用に特に有望である。化学療法薬は、ヒト細胞に対して極めて毒性であり得るため、それらが身体の他の部位に放出されることなく腫瘍へと送達されることが重要である。
【0014】
上記のことから、当業者であれば、がんおよび他の免疫学的疾患の処置において、新しい処置パラダイムが必要とされることは容易に明らかであろう。新規なプロドラッグを、現代のナノ担体モダリティと併せて使用することによって、新しい疾患処置が、がんの処置、特に、固形腫瘍におけるがんの処置において、より有効な処置、低減された副作用、およびより高い治療上の有用性を全体目標として、達成することができる。
がん処置と関連する現在の欠陥を踏まえ、ナノ担体内にカプセル封入されたプロドラッグを利用して、がん、免疫学的障害、および他の疾患を処置する新規かつ改善された方法を提供することが、本発明の目的である。
がん処置と関連する現在の欠陥を踏まえ、ナノ担体内にカプセル封入されたプロドラッグを利用して、がん、免疫学的障害、および他の疾患を処置する新規かつ改善された方法を提供することが、本発明の目的である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0015】
【非特許文献1】GARG, et. al., Int. J. Dev. Biol. 59: pp. 131-140 (2015)
【非特許文献2】GALLUZZI, et. al., Cell Death and Diff. (2018) 25:pp. 486-451
【非特許文献3】KRYSKO, et. al., Nat. Revs, Cancer 12(12):pp860-875 (2012)
【非特許文献4】SPISEK, et. al., Cell Cycle 6(16)pp. 1962-1965 (Aug. 2007)
【非特許文献5】TACAR, et. al., J. Pharm. & Pharmcol, 65, pp. 157-170 (2012)
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0016】
発明の概要
本発明は、ＩＣＤ誘導剤と、脂質と、生物学的切断性リンカーとを含む、ＩＣＤ誘導プロドラッグ（「ＩＣＤプロドラッグ」）組成物を提供する。ある特定の実施形態では、ＩＣＤプロドラッグを含むナノ担体は、ヒト疾患、例えば、固形腫瘍がんを含むがん、ならびに他の免疫学的障害を処置するための送達モダリティとしての使用のために製剤化される。ある特定の実施形態では、ナノ担体は、薬物送達ビヒクル（すなわち、リポソーム）に組み込むことができる脂質二重層を含む。さらなる実施形態では、ナノ担体は、固体脂質ナノ粒子（「ＳＬＮＰ」）を含む。さらなる好ましい実施形態では、リポソームは、ヘミコハク酸コレステロール（「ＣＨＥＭＳ」）を含む。さらなる好ましい実施形態では、本発明のリポソームは、ステアリン酸を含む。さらなる好ましい実施形態では、本発明のリポソームは、ステアリン酸およびヒドラゾンを含む。
本発明は、ＩＣＤ誘導剤と、脂質と、生物学的切断性リンカーとを含む、ＩＣＤ誘導プロドラッグ（「ＩＣＤプロドラッグ」）組成物を提供する。ある特定の実施形態では、ＩＣＤプロドラッグを含むナノ担体は、ヒト疾患、例えば、固形腫瘍がんを含むがん、ならびに他の免疫学的障害を処置するための送達モダリティとしての使用のために製剤化される。ある特定の実施形態では、ナノ担体は、薬物送達ビヒクル（すなわち、リポソーム）に組み込むことができる脂質二重層を含む。さらなる実施形態では、ナノ担体は、固体脂質ナノ粒子（「ＳＬＮＰ」）を含む。さらなる好ましい実施形態では、リポソームは、ヘミコハク酸コレステロール（「ＣＨＥＭＳ」）を含む。さらなる好ましい実施形態では、本発明のリポソームは、ステアリン酸を含む。さらなる好ましい実施形態では、本発明のリポソームは、ステアリン酸およびヒドラゾンを含む。
【0017】
さらなる実施形態では、本開示のＩＣＤプロドラッグは、ＩＣ１プロドラッグを含む。
【0018】
さらなる実施形態では、本発明は、ＩＣＤ誘導剤を腫瘍に送達する方法であって、（ｉ）ＩＣＤプロドラッグを合成するステップと、（ｉｉ）本発明のＩＣＤプロドラッグを、本発明のナノ担体において製剤化するステップと、（ｉｉｉ）ナノ担体を患者に投与するステップとを含む、方法を含む。
【0019】
別の実施形態では、本発明は、１つまたは複数の追加の免疫モジュレーション剤を有するＩＣＤ誘導剤を腫瘍に送達する方法であって、（ｉ）ＩＣＤプロドラッグを合成するステップと、（ｉｉ）本発明のＩＣＤプロドラッグを、ナノ担体において本発明の１つまたは複数の追加の免疫モジュレーション剤と共製剤化するステップと、（ｉｉｉ）ナノ担体を患者に投与するステップとを含む、方法を含む。
【0020】
別の実施形態では、免疫モジュレーション剤は、Ａ２ａＲアンタゴニスト、ＰＤ－１アンタゴニスト、ｔｏｌｌ受容体アゴニスト、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＣＴＬＡ４阻害剤、ＣＤ１Ｄアゴニスト、ＴＧＦｂ阻害剤、および／またはこれらのプロドラッグを含む。加えて、追加の免疫原性細胞死を誘導する化学療法薬および／またはそのプロドラッグとの共製剤化が、本明細書において企図される。
【0021】
別の実施形態では、本開示は、ＩＣＤプロドラッグを合成する方法を教示する。
【0022】
別の実施形態では、本開示は、ＩＣ１プロドラッグを合成する方法を教示する。
【0023】
別の実施形態では、本開示は、リポソームを含むがこれに限定されないナノ担体内にＩＣＤプロドラッグを製剤化する方法を教示する。
【0024】
別の実施形態では、本開示は、リポソームを含むがこれに限定されないナノ担体内にＩＣ１プロドラッグを製剤化する方法を教示する。
【0025】
別の実施形態では、本開示は、ＳＬＮＰを含むがこれに限定されないナノ担体内にＩＣ１プロドラッグを製剤化する方法を教示する。
【0026】
別の実施形態では、本開示は、本開示のナノ担体を使用して、ヒトにおけるがん、免疫学的障害、および他の疾患を処置する方法を教示する。
【図面の簡単な説明】
【0027】
【図1】ＩＣ１プロドラッグの化学合成。
【図2】カルボン酸官能性を用いたＩＣＤ誘導剤プロドラッグ合成スキーム。
【図3】アルコール官能性を用いたＩＣＤ誘導剤プロドラッグ合成スキーム。
【図4】第二級アミン、アミド、またはアニリン官能性を用いたＩＣＤ誘導剤プロドラッグ合成スキーム。
【図5】ＳＬＮＰ－ＩＣ１固体脂質ナノ担体の特徴付け。
【図6】ＳＬＮＰ－ＩＣ１固体脂質ナノ担体の特徴付け（ゼータ電位）。
【図7】ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤ固体脂質ナノ担体の特徴付け。
【図8】ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤ固体脂質ナノ担体の特徴付け（ゼータ電位）。
【図9】ＳＬＮＰ－Ｄｏｘ固体脂質ナノ担体の特徴付け。
【図10】ＳＬＮＰ－Ｄｏｘ固体脂質ナノ担体の特徴付け（ゼータ電位）。
【図11】ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２固体脂質ナノ担体の特徴付け。
【図12】ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２固体脂質ナノ担体の特徴付け（ゼータ電位）。
【図13】ドキソルビシン（ＳＬＮＰ－ＤｏｘおよびＬＮＰ－Ｄｏｘ）ならびにＩＣ１（ＳＬＮＰ－ＩＣ１およびＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤ）の血清安定性／放出動態。
【図14】ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＥＭＴ－６細胞におけるＩＣ１の細胞傷害性評価。
【図15】ｉｎ ｖｉｔｒｏでの４Ｔ－１細胞におけるＩＣ１の細胞傷害性評価。
【図16】ｉｎ ｖｉｖｏでのＥＭＴ－６細胞を使用したＤｏｘｉｌ（ＬＮＰ－Ｄｏｘ）と比較した複数用量でのＳＬＮＰ－ＩＣ１の腫瘍阻害。
【図17】ＥＭＴ－６腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図18】ＥＭＴ－６乳がん腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図19】ＥＭＴ－６腫瘍モデルにおける固体脂質ナノ粒子（「ＳＬＮＰ」）での単独および／またはＤＳＲ－６４３４－ステアリン酸と組み合わせた複数用量のドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図20】Ｂａｌｂ／ｃマウスモデルにおける固体脂質ナノ粒子（「ＳＬＮＰ」）での単独およびＤＳＲ－６４３４－ステアリン酸と組み合わせたドキソルビシンプロドラッグの最大耐用用量（「ＭＴＤ」）。
【図21】Ｂ１６Ｆ１０黒色腫腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図22】ＭＰＣ１１多発性骨髄腫腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図23】Ｎｅｕｒｏ２Ａ神経芽細胞腫腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図24】ＣＴ２６結腸腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図25】ＭＣ３８結腸腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図26】Ｒｅｎｃａ腎臓腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図27】Ｈ２２肝臓腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図28】Ｈｅｐａ１－６肝臓腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図29】ＬＬＣ１肺腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図30】ＫＬＮ２０５肺腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図31】Ｂ１６ＢＬ６黒色腫腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図32】Ｐａｎ－０２．０３膵臓腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図33】ＲＭ－１前立腺腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図34】ＭＢＴ２膀胱腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図35】クローンＭ－３黒色腫腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【図36】４Ｔ１乳房同所性腫瘍モデルにおけるドキソルビシンプロドラッグ有効性のｉｎ－ｖｉｖｏ検証。
【発明を実施するための形態】
【0028】
発明の詳細な説明
節の概要
Ｉ．）定義
ＩＩ．）プロドラッグ
ＩＩＩ．）化学的化合物
ＩＶ．）脂質
Ｖ．）連結ユニット（「ＬＵ」）
ＶＩ．）ナノ担体
ＶＩＩ．）リポソーム
ＶＩＩＩ．）医薬製剤
ＩＸ．）組合せ療法
Ｘ．）プロドラッグを含むリポソームを細胞に送達する方法
ＸＩ．）がんおよび他の免疫学的障害を処置する方法
ＸＩＩ．）キット／製造物品
節の概要
Ｉ．）定義
ＩＩ．）プロドラッグ
ＩＩＩ．）化学的化合物
ＩＶ．）脂質
Ｖ．）連結ユニット（「ＬＵ」）
ＶＩ．）ナノ担体
ＶＩＩ．）リポソーム
ＶＩＩＩ．）医薬製剤
ＩＸ．）組合せ療法
Ｘ．）プロドラッグを含むリポソームを細胞に送達する方法
ＸＩ．）がんおよび他の免疫学的障害を処置する方法
ＸＩＩ．）キット／製造物品
【0029】
Ｉ．）定義：
別途定義されない限り、本明細書に使用されるすべての専門用語、表記、および他の科学用語または用語法は、別途文脈により明確に示されない限り、本発明が関係する技術分野の当業者によって一般に理解されている意味を有することが意図される。一部の場合には、一般的に理解されている意味を有する用語は、明確さおよび／または即時参考のために本明細書において定義されており、そのような定義を本明細書に含めることは、必ずしも当該技術分野において一般的に理解されているものとの実質的な違いを表すと解釈されるものではない。
別途定義されない限り、本明細書に使用されるすべての専門用語、表記、および他の科学用語または用語法は、別途文脈により明確に示されない限り、本発明が関係する技術分野の当業者によって一般に理解されている意味を有することが意図される。一部の場合には、一般的に理解されている意味を有する用語は、明確さおよび／または即時参考のために本明細書において定義されており、そのような定義を本明細書に含めることは、必ずしも当該技術分野において一般的に理解されているものとの実質的な違いを表すと解釈されるものではない。
【0030】
商標名が本明細書において使用されている場合、商標名への参照は、別途文脈により示されない限り、商標名製品の製品配合、ジェネリック薬、および活性医薬成分も指す。
【0031】
本明細書において使用される場合、「約」という用語は、値またはサイズの量（すなわち、直径）、重量、濃度、またはパーセンテージに言及する場合、指定された量から、１つの例では±２０％または±１０％、別の例では±５％、別の例では±１％、なおも別の例では±０．１％の変動を包含することを意味し、そのような変動は、開示される方法を行うのに適切であるようなものである。
【0032】
本明細書において使用される場合、「および／または」という用語は、実体の一覧の文脈で使用される場合、単独または組合せで存在する実体を指す。したがって、例えば、「Ａ、Ｂ、Ｃ、および／またはＤ」という語句は、Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤを個別に含むだけでなく、Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤのありとあらゆる組合せおよび部分組合せも含む。
【0033】
本明細書において端点によって列挙される数値範囲は、その範囲内に含まれるすべての数および分数を含む（例えば、１～５は、１、１．５、２、２．７５、３、３．９０、４、および５を含むがこれらに限定されない）。
【0034】
本明細書において使用される場合、「から本質的になる」という語句は、本特許請求の範囲を、指定された材料またはステップ、さらにそれらに加えて、特許請求される主題の基本的かつ新規な特徴に実質的に影響を及ぼさないものに限定する。
【0035】
「進行がん」、「局所進行がん」、「進行疾患」、および「局所進行疾患」という用語は、関連する組織カプセルを通じて拡大されたがんを意味し、これらは、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ（ＡＵＡ）システム下におけるステージＣの疾患、Ｗｈｉｔｍｏｒｅ－Ｊｅｗｅｔｔシステム下におけるステージＣ１～Ｃ２の疾患、ならびにＴＮＭ（腫瘍、節、転移）システム下におけるステージＴ３～Ｔ４およびＮ＋の疾患を含むことを意味する。一般に、外科手術は、局所進行疾患を有する患者には推奨されず、これらの患者は、臨床的に局在化した（器官が限定された）がんを有する患者と比較して、実質的にあまり好ましくない予後を有する。
【0036】
本明細書において使用される場合、「アルキル」という用語は、Ｃ１～Ｃ２０（端点を含む）、線形（すなわち、「直鎖」）、分岐鎖、または環状の飽和または少なくとも部分的におよび一部の場合には不飽和の（すなわち、アルケニルおよびアルキニル）炭化水素鎖を指し得、これには、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、ヘキシル、オクチル、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、オクテニル、ブタジエニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、およびアレニル基が挙げられる。「分岐鎖」とは、低級アルキル基、例えば、メチル、エチル、またはプロピルが、線形アルキル鎖に結合した、アルキル基を指す。「低級アルキル」とは、１～約８個の炭素原子（すなわち、Ｃ１～Ｃ８アルキル）、例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、または８個の炭素原子を有するアルキル基を指す。「高級アルキル」とは、約１０個～約２０個の炭素原子、例えば、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、または２０個の炭素原子を有するアルキル基を指す。ある特定の実施形態では、「アルキル」は、特に、Ｃ１～Ｃ８直鎖アルキルを指す。他の実施形態では、「アルキル」は、特に、Ｃ１～８分岐鎖アルキルを指す。
【0037】
アルキル基は、必要に応じて、同じかまたは異なってもよい１つまたは複数のアルキル基置換基で置換され得る（「置換アルキル」）。「アルキル基置換基」という用語は、アルキル、置換アルキル、ハロ、アリールアミノ、アシル、ヒドロキシル、アリールオキシル、アルコキシル、アルキルチオ、アリールチオ、アラルキルオキシル、アラルキルチオ、カルボキシル、アルコキシカルボニル、オキソ、およびシクロアルキルを含むが、これらに限定されない。一部の実施形態では、必要に応じて、アルキル鎖に沿って、１つまたは複数の酸素、硫黄、または置換もしくは非置換窒素原子が挿入されてもよく、ここで、窒素置換基は、水素、低級アルキル（本明細書において、「アルキルアミノアルキル」とも称される）、またはアリールである。
【0038】
したがって、本明細書において使用される場合、「置換アルキル」という用語は、アルキル基の１つまたは複数の原子または官能基が、例えばアルキル、置換アルキル、ハロゲン、アリール、置換アリール、アルコキシル、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、硫酸、およびメルカプトを含む別の原子または官能基と置き換えられた、本明細書に定義されるアルキル基を含む。
【0039】
「アリール」という用語は、単一の芳香環であり得るか、あるいは一緒に縮合されたか、共有結合で連結されたか、またはメチレンもしくはエチレン部分などであるがこれらに限定されない共通の基に連結された、複数の芳香環であり得る、芳香族置換基を指して本明細書に使用される。共通の連結基はまた、ベンゾフェノンにあるようなカルボニル、またはジフェニルエーテルにあるような酸素、またはジフェニルアミンにあるような窒素であり得る。「アリール」という用語は、具体的には、複素環式芳香族化合物を包含する。芳香環は、とりわけ、フェニル、ナフチル、ビフェニル、ジフェニルエーテル、ジフェニルアミン、およびベンゾフェノンを含み得る。特定の実施形態では、「アリール」という用語は、約５～約１０個の炭素原子、例えば、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個の炭素原子を含む芳香環を意味し、これには、５および６員の芳香環および複素芳香環が含まれる。アリール基は、必要に応じて、同じかまたは異なってもよい１つまたは複数のアリール基置換基で置換されていてもよく（「置換アリール」）、ここで、「アリール基置換基」としては、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、アラルキル、ヒドロキシル、アルコキシル、アリールオキシル、アラルキルオキシル、カルボキシル、アシル、ハロ、ニトロ、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アラルコキシカルボニル、アシルオキシル、アシルアミノ、アロイルアミノ、カルバモイル、アルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、アリールチオ、アルキルチオ、アルキレン、および－ＮＲ’Ｒ”が挙げられ、ここで、Ｒ’およびＲ”は、それぞれ独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、およびアラルキルであり得る。アリール基の具体的な例としては、シクロペンタジエニル、フェニル、フラン、チオフェン、ピロール、ピラン、ピリジン、イミダゾール、ベンズイミダゾール、イソチアゾール、イソキサゾール、ピラゾール、ピラジン、トリアジン、ピリミジン、キノリン、イソキノリン、インドール、カルバゾールなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【0040】
「ヘテロアリール」は、本明細書において使用される場合、環構造の骨格において１つまたは複数の非炭素原子（例えば、Ｏ、Ｎ、Ｓ、Ｓｅなど）を含む、アリール基を指す。窒素含有ヘテロアリール部分としては、ピリジン、イミダゾール、ベンズイミダゾール、ピラゾール、ピラジン、トリアジン、ピリミジンなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【0041】
「抗がん薬」、「化学療法薬」、および「抗がんプロドラッグ」という用語は、がんを処置する（すなわち、がん細胞を殺滅させるか、がん細胞の増殖を阻止するか、またはがんに関連する症状を処置する）ことが公知であるか、またはそれが可能であると疑われる薬物（すなわち、化学的化合物）またはプロドラッグを指す。一部の実施形態では、「化学療法薬」という用語は、本明細書において使用される場合、がんを処置するために使用される、および／または細胞傷害性能力を有する、非ＰＳ分子を指す。より古典的または従来的な化学療法剤は、作用機序または化学的化合物のクラスによって説明することができ、これらとしては、アルキル化剤（例えば、メルファラン）、アントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン）、細胞骨格破壊剤（例えば、パクリタキセル）、エポチロン、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（例えば、ボリノスタット）、トポイソメラーゼＩまたはＩＩの阻害剤（例えば、イリノテカンもしくはエトポシド）、キナーゼ阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）、ヌクレオチドアナログまたはその前駆体（例えば、メトトレキサート）、ペプチド抗生物質（例えば、ブレオマイシン）、白金系薬剤（例えば、シスプラチンもしくはオキサリプラチン）、レチノイド（例えば、トレチノイン）、ならびにビンカアルカロイド（例えば、ビンブラスチン）を挙げることができるが、これらに限定されない。
【0042】
「アラルキル」は、－アルキル－アリール基を指し、必要に応じて、アルキルおよび／またはアリール部分は、置換される。
【0043】
「アルキレン」は、１個～約２０個の炭素原子、例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、または２０個の炭素原子を有する、直鎖または分岐鎖の二価脂肪族炭化水素基を指す。アルキレン基は、直鎖、分岐鎖、または環状であり得る。アルキレン基はまた、必要に応じて、不飽和であってもよく、および／または１つもしくは複数の「アルキル基置換基」で置換されてもよい。必要に応じて、アルキレン基に沿って、１つまたは複数の酸素、硫黄、または置換もしくは非置換窒素原子が挿入されてもよく（本明細書において、「アルキルアミノアルキル（alkylaminoalkyi）」とも称される）、窒素置換基は、前述のように、アルキルである。例示的なアルキレン基としては、メチレン（－ＣＨ２－）、エチレン（－ＣＨ２－ＣＨ２－）、プロピレン（－（ＣＨ２）３－）、シクロヘキシレン（－Ｃ６Ｈ１０－）、－ＣＨ＝ＣＨ－ＣＨ＝ＣＨ－、－ＣＨ＝ＣＨ－ＣＨ２－、－（ＣＨ２）ｑ－Ｎ（Ｒ）－（ＣＨ２），－（式中、ｑのそれぞれは、０～約２０の整数、例えば、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０であり、Ｒは、水素または低級アルキルである）、メチレンジオキシル（－Ｏ－ＣＨ２－Ｏ－）、ならびにエチレンジオキシル（－Ｏ－（ＣＨ２）２－Ｏ－）が挙げられる。アルキレン基は、約２個～約３個の炭素原子を有し得、さらに、６個～２０個の炭素を有し得る。
【0044】
「アリーレン」という用語は、二価芳香族基、例えば、二価フェニルまたはナフチル基を指す。アリーレン基は、必要に応じて、１つもしくは複数のアリール基置換基で置換され得、および／または１つもしくは複数のヘテロ原子を含み得る。
【0045】
「アミノ」という用語は、基－Ｎ（Ｒ）２を指し、ここで、それぞれのＲは、独立して、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、アラルキル、または置換アラルキルである。「アミノアルキル」および「アルキルアミノ」という用語は、基－Ｎ（Ｒ）２を指し得、ここで、それぞれのＲは、Ｈ、アルキル、または置換アルキルであり、少なくとも１つのＲは、アルキルまたは置換アルキルである。「アリールアミン」および「アミノアリール」は、基－Ｎ（Ｒ）２を指し、ここで、それぞれのＲは、Ｈ、アリール、または置換アリールであり、少なくとも１つのＲは、アリールまたは置換アリール、例えば、アニリン（すなわち、－ＮＨＣ６Ｈ５）である。
【0046】
「バルク薬」（原薬としても知られる）は、分配のための最終容器に充填されていない、原薬または薬物製品を意味する。最終製剤化バルク薬は、一般に、製剤化され、充填する前に保管または保持されている薬物製品を指す。原薬は、薬物製品への製剤化の前に、「バルク薬」または「濃縮バルク薬」として保管または保持されてもよい。
【0047】
「カルボキシレート」および「カルボン酸」という用語は、それぞれ、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－および－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨという基を指し得る。「カルボキシル」という用語はまた、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ基を指し得る。
【0048】
「コンジュゲート」および「コンジュゲートされた」という用語は、本明細書において使用される場合、２つまたはそれよりも多くの成分（例えば、化学的化合物、ポリマー、生体分子、粒子など）の互いとの結合（例えば、共有結合）を指し得る。一部の実施形態では、コンジュゲートは、二価リンカー部分（例えば、必要に応じて置換されたアルキレンまたはアリーレン）を介して共有結合的に連結された２つの異なる化学的化合物に由来する一価の部分を含み得る。一部の実施形態では、リンカーは、プロドラッグが特定の生理学的環境または酵素（例えば、エステラーゼ）に曝露されるとリンカー内の１つまたは複数の結合が破壊され得るように、１つまたは複数の生体分解性結合を含み得る。
【0049】
「化合物」という用語は、化学的化合物（例えば、プロドラッグ）自体、ならび明示的に言及されるかどうかにかかわらず、かつ以下のものが除外されることが文脈により明らかでない限り、次のものを包含する：多型形態を含む化合物の非晶質形態および結晶質形態、これらの形態は混合物の一部であり得るかまたは単離状態にあり得る；化合物の遊離酸および遊離塩基の形態、これらは典型的には本明細書に提供される構造に示される形態である；化合物の異性体、これは、光学異性体および互変異性体を指し、ここで、光学異性体は、エナンチオマーおよびジアエステレオマー、キラル異性体および非キラル異性体を含み、光学異性体は、単離された光学異性体ならびにラセミ混合物および非ラセミ混合物を含む光学異性体の混合物を含み、異性体は、単離された形態であり得るか、または１つもしくは複数の他の異性体との混合物の状態にあり得る；化合物の同位体、これには、重水素およびトリチウムを含む化合物が含まれ、また治療および診断に有効な放射性同位体を含めた放射性同位体を含む化合物が含まれる；化合物の多量体形態、これには、二量体、三量体などの形態が含まれる；化合物の塩、好ましくは、薬学的に許容される塩、これには、酸付加塩および塩基付加塩が含まれ、有機対イオンおよび無機対イオンを有する塩、ならびに双性イオン形態が含まれ、ここで、化合物が２つまたはそれよりも多くの対イオンと会合する場合、２つまたはそれよりも多くの対イオンは同じであっても異なってもよい；ならびに化合物の溶媒和物、これには、半溶媒和物、一溶媒和物、二溶媒和物など、有機溶媒和物および無機溶媒和物が含まれ、前記無機溶媒和物には水和物が含まれ、化合物が２つまたはそれよりも多くの溶媒分子と会合する場合、２つまたはそれよりも多くの溶媒分子は、同じであっても異なってもよい。一部の事例では、本明細書においてなされる本発明の化合物への参照は、上述の形態のうちの１つまたは複数、例えば、塩および／または溶媒和物への明示的な参照を含むが、しかしながら、この参照は、強調のみのために行われ、上記に特定された上述の形態のその他のものを排除すると解釈されるものではない。
【0050】
「薬物製品」とは、概して、不活性成分が付随するが、必ずしもそうとは限らない、活性医薬成分（すなわち、ＩＣＤ誘導プロドラッグを含むリポソーム）を含む最終製剤を意味する。この用語はまた、活性成分を含まないが、プラセボとして使用されることが意図される最終剤形も含む。
【0051】
「ジスルフィド」という用語は、－Ｓ－Ｓ－基を指し得る。
【0052】
「空の小胞」という用語は、ロードされていない脂質小胞自体を意味する。
【0053】
「エステル」という用語は、本明細書において使用される場合、少なくとも１つの－ＯＨヒドロキシル基が－Ｏ－アルキル（アルコキシ）またはＯ－アリール（アリールオキシ）基によって置き換えられた、酸（有機または無機）に由来する化学的化合物を意味する。
【0054】
「エステラーゼ」という用語は、本明細書において使用される場合、エステルを酸とアルコールとに分割するヒドロラーゼ酵素である。
【0055】
「賦形剤」とは、ワクチンなどの薬物において活性成分の担体として使用される不活性物質を意味する。賦形剤はまた、便宜的かつ正確な投薬量を可能にするために、非常に強力な活性成分を有する製剤をかさ増しするために使用されることもある。賦形剤の例としては、抗接着剤、結合剤、コーティング剤、崩壊剤、増量剤、希釈剤、香味剤、着色剤、滑沢剤、および保存剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【0056】
「ハロ」、「ハロゲン化物」、または「ハロゲン」という用語は、本明細書において使用される場合、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨード基を指す。
【0057】
「ヒドラゾン（hydrazone）」または「ヒドラゾン（hydrazones）」という用語は、構造Ｒ１Ｒ２Ｃ＝ＮＮＨ３を有する有機化合物のクラスを指す。
【0058】
「ヒドラゾンリンカー」という用語は、血液循環の中性ｐＨにおいて安定なままであるが、細胞コンパートメントの酸性環境において加水分解を受けて連結された化合物を放出するように特にデザインされている、酸切断性リンカーを意味する。
【0059】
「ヒドロキシル」および「ヒドロキシ」という用語は、－ＯＨ基を指す。
【0060】
「阻害する」または「の阻害」という用語は、本明細書において使用される場合、測定可能な量で低減させること、または完全に防止することを意味する。
【0061】
「個体」または「患者」という用語は、本開示の文脈において使用される場合、互換可能に使用され得る。
【0062】
本明細書において使用される場合、「リガンド」という用語は、一般的に、なんらかの手段で別の種と相互作用、例えば、結合する、１つの種、例えば、分子またはイオンを指す。Martell, A. E., and Hancock, R. P., Metal Complexes in Aqueous Solutions, Plenum: New York (1996)を参照されたく、これは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【0063】
「脂質」という用語は、本明細書において使用される場合、極性溶媒中に不溶性である天然に存在する（有機）化合物のクラスを指す。本開示の文脈において、脂質は、従来的な脂質、リン脂質、コレステロール、ＰＥＧおよびリガンドの結合のための化学的に官能化された脂質などを指す。
【0064】
「脂質二重層」または「ＬＢ」という用語は、炭化水素尾部が内側を向いて連続的な非極性相を形成した配向の両親媒性脂質分子の任意の二重層を指す。
【0065】
「リポソーム」または「脂質小胞」または「小胞」という用語は、従来的に定義されるように脂質二重層によって封入された水性コンパートメントを指して互換可能に使用される（Stryer (1981) Biochemistry, 2d Edition, W. H. Freeman & Co., p. 213を参照されたい）。
【0066】
「哺乳動物」という用語は、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、およびヒトを含む、哺乳動物として分類される任意の生物を指す。本発明の一実施形態では、哺乳動物は、マウスである。本発明の別の実施形態では、哺乳動物は、ヒトである。
【0067】
「メルカプト」または「チオール」という用語は、－ＳＨ基を指す。
【0068】
「転移性がん」および「転移性疾患」という用語は、領域リンパ節または遠位部位へと拡がったがんを意味し、ＡＵＡシステム下におけるステージＤの疾患およびＴＮＭシステム下におけるステージＴ×Ｎ×Ｍ＋を含むことを意味する。
【0069】
「ナノ担体」、「ナノ粒子」、および「ナノ粒子薬物担体」という用語は、互換可能に使用され、水溶性、固体、またはポリマー性の内部コアを有するナノ構造体を指す。ある特定の実施形態では、ナノ担体は、多孔質粒子コアを包み込む（または包囲または封入する）脂質二重層を含む。ある特定の実施形態では、ナノ担体は、リポソーム、脂質ナノ粒子（「ＬＮＰ」）、または固体脂質ナノ粒子（「ＳＬＮＰ」）である。
【0070】
「ナノスケール粒子」、「ナノ材料」、「ナノ担体」、および「ナノ粒子」という用語は、約１，０００ｎｍ未満の寸法（例えば、長さ、幅、直径など）を有する少なくとも１つの領域を有する構造体を指す。一部の実施形態では、寸法は、より小さい（例えば、約５００ｎｍ未満、約２５０ｎｍ未満、約２００ｎｍ未満、約１５０ｎｍ未満、約１２５ｎｍ未満、約１００ｎｍ未満、約８０ｎｍ未満、約７０ｎｍ未満、約６０ｎｍ未満、約５０ｎｍ未満、約４０ｎｍ未満、約３０ｎｍ未満、またはさらには約２０ｎｍ未満）。一部の実施形態では、寸法は、約２０ｎｍ～約２５０ｎｍ（例えば、約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、または２５０ｎｍ）である。
【0071】
「ナノ小胞」という用語は、約２０ｎｍから、または約３０ｎｍから、または約４０ｎｍから、または約５０ｎｍから、最大約５００ｎｍ、または最大約４００ｎｍ、または最大約３００ｎｍ、または最大約２００ｎｍ、または最大約１５０ｎｍまで、または最大約１００ｎｍまで、または最大約８０ｎｍまでの範囲に及ぶ直径を有する「脂質小胞」（またはそのような平均直径を有する小胞の集団）を指す。ある特定の実施形態では、ナノ小胞は、約４０ｎｍから最大約８０ｎｍまで、または約５０ｎｍから最大約７０ｎｍまでの範囲に及ぶ直径を有する。
【0072】
「薬学的に許容される」とは、ヒトまたは他の哺乳動物と生理学的に適合性のある非毒性、不活性、および／または組成物を指す。
【0073】
「医薬製剤化」とは、異なる化学物質を組み合わせて純粋な原薬にして、最終薬物製品を産生させるプロセスを意味する。
【0074】
「ホスホネート」という用語は、－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ）２基を指し、ここで、それぞれのＲは、独立して、Ｈ、アルキル、アラルキル、アリール、または負電荷（すなわち、有効に、酸素原子に結合するＲ基が存在せず、酸素原子上に共有されていない電子対が存在する）であり得る。したがって、換言すると、それぞれのＲは、存在しても存在しなくてもよく、存在する場合には、Ｈ、アルキル、アラルキル、またはアリールから選択される。
【0075】
「ホスフェート」という用語は、－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ’）２基を指し、ここで、Ｒ’は、Ｈまたは負電荷である。
【0076】
「プロドラッグ」という用語は、投与後に薬理学的に活性な薬物へと代謝される、医薬品または化合物を意味する。本開示の目的で、本発明のプロドラッグは、以下の３つの成分：（ｉ）薬物部分、（ｉｉ）脂質部分、および（ｉｉｉ）連結ユニット（「ＬＵ」）を含む。
【0077】
「ＩＣＤプロドラッグ」という用語は、薬物部分がＩＣＤ誘導剤を含む、本発明のプロドラッグを意味する。
【0078】
「ピロ脂質（pyrolipid）」という用語は、脂質と、ポルフィリン、ポルフィリン誘導体、またはポルフィリンアナログとのコンジュゲートを指す。一部の実施形態では、ピロ脂質は、ポルフィリンまたはその誘導体もしくはアナログが、脂質側鎖に共有結合的に結合した、脂質コンジュゲートを含み得る。例えば、米国特許出願公開第２０１４／０１２７７６３号を参照されたい。
【0079】
本明細書において使用される場合、「特異的」、「特異的に結合する（specifically binds）」、および「特異的に結合する（binds specifically）」という用語は、ＩＣＤを誘導する、対象標的への本発明のナノ担体の選択的結合を指す。
【0080】
「支持型脂質二重層」という用語は、多孔質粒子コアを封入している脂質二重層を意味する。本開示に記載されるこの定義は、脂質二重層が表面上に位置しており、多孔質粒子コアによって支持されているため、示される。ある特定の実施形態では、脂質二重層は、約６ｎｍ～約７ｎｍの範囲に及ぶ厚さを有し得、これには、３～４ｎｍの厚さの疎水性コアに加えて、水和した親水性頭部基層（それぞれ約０．９ｎｍ）に加え、２つの部分的に水和したそれぞれ約０．３ｎｍの領域が含まれる。様々な実施形態では、リポソームの周囲の脂質二重層は、ＩＣＤ誘導剤を効果的に封入および封止する連続した二重層または実質的に連続した二重層を含む。
【0081】
「チオアルキル」という用語は、－ＳＲ基を指し得、ここで、Ｒは、Ｈ、アルキル、置換アルキル、アラルキル、置換アラルキル、アリール、および置換アリールから選択される。同様に、「チオアラルキル」および「チオアリール」という用語は、－ＳＲ基を指し、ここで、Ｒは、それぞれ、アラルキルおよびアリールである。
【0082】
本明細書において使用される場合、「処置するため」または「治療用」および文法的に関連する用語は、疾患の任意の結果の任意の改善、例えば、生存期間の延長、病態の減少、および／または代替的な治療モダリティの副産物である副作用の減少を指し、当該技術分野で容易に理解されているように、疾患の完全な根絶は、好ましくはあるが処置作用の要件ではない。
【0083】
「治療有効量」という用語は、組織、系、動物、個体、またはヒトにおいて生物学的または医学的応答を誘起する、活性プロドラッグ、ナノカプセル封入プロドラッグ、または薬学的薬剤の量を指す。
【0084】
「非支持型脂質二重層」という用語は、脂質小胞またはリポソームにおいてコーティングされていない脂質二重層を意味する。
【0085】
ＩＩ．）プロドラッグ
本開示において示されるように、また本発明の目的で、好適なプロドラッグは、本発明の薬物部分（薬物部分と題される節を参照されたい）を、本開示のＬＵ（連結ユニットと題される節を参照されたい）を介して本発明の脂質部分（脂質と題される節を参照されたい）にコンジュゲートすることによって形成される。本開示の目的で、ＩＣＤプロドラッグの形成は、いくつかの戦略を利用し得る。（例えば、図２、図３、および図４を参照されたい）。
本開示において示されるように、また本発明の目的で、好適なプロドラッグは、本発明の薬物部分（薬物部分と題される節を参照されたい）を、本開示のＬＵ（連結ユニットと題される節を参照されたい）を介して本発明の脂質部分（脂質と題される節を参照されたい）にコンジュゲートすることによって形成される。本開示の目的で、ＩＣＤプロドラッグの形成は、いくつかの戦略を利用し得る。（例えば、図２、図３、および図４を参照されたい）。
【0086】
したがって、一部の実施形態では、プロドラッグは、本開示のＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分である。
【0087】
一実施形態では、プロドラッグは、図２に記載されるＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分である。
【0088】
一実施形態では、プロドラッグは、図３に記載されるＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分である。
【0089】
一実施形態では、プロドラッグは、図４に記載されるＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分である。
【0090】
さらなる実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本開示の脂質を含む薬物－脂質部分である。
【0091】
さらなる実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、脂質がＣＨＥＭＳである薬物－脂質部分である。
【0092】
さらなる実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、脂質がステアリン酸である薬物－脂質部分である。
【0093】
さらなる実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本開示のＬＵを含む薬物－脂質部分である。
【0094】
さらなる実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ＬＵがヒドロメチルカルバメートリンカーである薬物－脂質部分である。
【0095】
さらなる実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ＬＵがヒドラゾンリンカーである薬物－脂質部分である。
【0096】
さらなる実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ＬＵがヒドラゾンである薬物－脂質部分である。
【0097】
さらなる実施形態では、プロドラッグは、本発明のＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分であり、ここで、ＩＣＤ誘導剤は、ＩＣ１と称される化学的組成物を含む。
【0098】
さらなる実施形態では、プロドラッグは、本発明のＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分であり、ここで、ＩＣＤ誘導剤は、ＩＣ１を含み、以下の化学構造：
を有する。
【化1】
【0099】
さらなる実施形態では、プロドラッグは、本発明のＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分であり、ここで、ＩＣＤ誘導剤は、ＩＣ１を含み、以下の化学式：
を有する本開示の脂質をさらに含む。
【化2】
【0100】
さらなる実施形態では、プロドラッグは、本発明のＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分であり、ここで、ＩＣＤ誘導剤は、ＩＣ１を含み、ＣＨＥＭＳをさらに含む。
【0101】
さらなる実施形態では、プロドラッグは、本発明のＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分であり、ここで、ＩＣＤ誘導剤は、ＩＣ１を含み、ステアリン酸をさらに含む。
【0102】
さらなる実施形態では、プロドラッグは、本発明のＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分であり、ここで、ＩＣＤ誘導剤は、ＩＣ１を含み、ＣＨＥＭＳをさらに含み、ＬＵは、ヒドロメチルカルバメートリンカーである。
【0103】
さらなる実施形態では、プロドラッグは、本発明のＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分であり、ここで、ＩＣＤ誘導剤は、ＩＣ１を含み、ステアリン酸をさらに含み、ＬＵは、ヒドロメチルカルバメートリンカーである。
【0104】
さらなる実施形態では、プロドラッグは、本発明のＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分であり、ここで、ＩＣＤ誘導剤は、ＩＣ１を含み、ＣＨＥＭＳをさらに含み、ＬＵは、ヒドラゾンリンカーである。
【0105】
さらなる実施形態では、プロドラッグは、本発明のＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分であり、ここで、ＩＣＤ誘導剤は、ＩＣ１を含み、ステアリン酸をさらに含み、ＬＵは、ヒドラゾンリンカーである。
【0106】
さらなる実施形態では、プロドラッグは、本発明のＩＣＤ誘導剤を含む薬物－脂質部分であり、ここで、ＩＣＤ誘導剤は、ＩＣ１を含み、以下の構造：
を有するステアリン酸をさらに含む。
【化3】
【0107】
本開示の追加の実施形態では、本主題は、脂質にコンジュゲートされた治療剤親薬物を含む、ＩＣＤ誘導剤プロドラッグを提供する。一部の実施形態では、プロドラッグは、（ａ）一価薬物部分、（ｂ）一価脂質部分、および（ｃ）ｉｎ ｖｉｖｏで分解される連結ユニットを含む二価リンカー部分、例えば、ジスルフィド結合を含み、ここで、一価薬物部分および一価脂質部分は、リンカーを介して連結（例えば、共有結合的に連結）される。一価薬物部分および一価脂質部分は、それぞれ、化学的化合物および脂質の一価誘導体であってもよい。例えば、一価誘導体は、ヒドロキシル、チオール、アミノ、またはカルボン酸基を含む化学的化合物または脂質の脱プロトン化誘導体であり得る。
【0108】
本開示のさらなる実施形態では、本主題は、脂質にコンジュゲートされた治療剤親薬物を含む、ＩＣＤ誘導剤プロドラッグを提供する。一部の実施形態では、プロドラッグは、（ａ）二価薬物部分、（ｂ）二価脂質部分、および（ｃ）ｉｎ ｖｉｖｏで分解される連結を含む二価リンカー部分を含み、ここで、二価薬物部分および二価脂質部分は、リンカーを介して連結（例えば、共有結合的に連結）される。二価薬物部分および二価脂質部分は、それぞれ、化学的化合物および脂質の二価誘導体であってもよい。例えば、二価誘導体は、ヒドロキシル、チオール、アミノ、またはカルボン酸基を含む化学的化合物または脂質の脱プロトン化誘導体であり得る。
【0109】
当業者であれば、本明細書に開示される本発明の機能および目的を変更することなく、開示される実施形態に対する変動形態および改変形態を理解し、それを作製することができるであろう。そのような変動形態および改変形態は、本開示の範囲内であることが意図される。
【0110】
ＩＩＩ．）薬物部分
本発明の別の態様は、ＩＣ１と称される以下の式を有するＩＣＤ誘導剤を含む新規なＩＣＤプロドラッグ化合物を提供する。
本発明の別の態様は、ＩＣ１と称される以下の式を有するＩＣＤ誘導剤を含む新規なＩＣＤプロドラッグ化合物を提供する。
【0111】
当業者であれば、化合物が、当該技術分野において公知の様々な手段により免疫原性細胞死を誘導または媒介するという点で、ＩＣＤ誘導剤として有用であることを理解するであろう。簡略的な背景として、ＩＣＤは、危険関連分子パターン（ＤＡＭＰ）ファミリーのクラスである特定の分子の放出によって特徴付けられるアポトーシスの形態である。ＤＡＭＰは、生きた細胞において典型的には見られない、死滅する細胞によって曝露または分泌されると免疫刺激性特性を獲得する、細胞内因子である。ＤＡＭＰは、そのステージおよび局在化／放出の場所に応じて、３つの主なサブクラスに分割され得る。ＤＡＭＰの１つのサブクラスは、細胞表面上に出現する（例えば、ＣＲＴ、ＨＳＰ ７０、ＨＳＰ ９０）。ＤＡＭＰの別のサブクラスは、細胞外に出現する（例えば、ＨＭＧＢ１、尿酸、および炎症促進性サイトカイン）。ＤＡＭＰの最後のサブクラスは、後期分解因子として出現する（例えば、ＡＴＰ、ＤＮＡ、およびＲＮＡ）。
【0112】
一般的に、ＤＡＭＰは、ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）、ＮＯＤ様受容体（ＮＬＲ）、およびレチノイン酸誘導性遺伝子Ｉ様受容体（ＲＩＧ－Ｉ様受容体（ＲＬＲ））を含む、パターン認識受容体によって感作される。主要なＤＡＭＰとしては、ＣＲＴ、ＨＭＧＢ１、ＡＴＰ、ＨＳＰ ７０および９０、ならびに１型インターフェロンおよびＡＮＸＡ１が挙げられる。これらの分子は、それらの受容体を感作することによって、免疫細胞を動員およびトリガーし、これによって、ファゴサイトーシスおよびＴリンパ球の活性化が引き起こされて、腫瘍細胞が根絶される。KROEMER, et. al., Annu. Rev. Immunol. 2013, 31, pp. 51-72を参照されたい。ＩＣＤの際に産生されるＤＡＭＰの能力は、同時発生したかまたは活性酸素種（ＲＯＳ）によって活性化された、小胞体（ＥＲ）ストレスに依存する。ASADZADEH, et. al., Cancers 2020, 12, 1047 (pp. 1-38)を参照されたい。
【0113】
当該技術分野において公知のいくつかのＩＣＤを誘導する化合物が存在し、これらとしては、ダウノルビシン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ミトキサントロン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ジギトキシン、ドゴトキシン、およびスプタシジンが挙げられるが、これらに限定されない。KEPP, et. al., Oncotarget (July 2014): 5(14): pp. 5190-5191を参照されたい。
【0114】
上記のことに基づいて、本開示は、ＩＣＤ誘導剤のクラスについて説明する。
【0115】
一実施形態では、本開示の薬物部分は、以下の化学構造：
を有する化合物（ＩＣ１と称される）を含む。
【化4】
【0116】
当業者であれば、本明細書に開示される本発明の機能および目的を変更することなく、開示される実施形態に対する変動形態および改変形態を理解し、それを作製することができるであろう。そのような変動形態および改変形態は、本開示の範囲内であることが意図される。
【0117】
ＩＶ．）脂質
一般的に述べると、また本開示の目的で、「脂質」という用語は、そのもっとも広範な意味で使用され、リン脂質／脂肪酸を含むがこれらに限定されないいくつかの部分カテゴリーの脂質を含む。当業者には理解されるように、リン脂質は、すべての細胞膜の主要な成分である脂質のクラスを表す。リン脂質は、それらの両親媒性特徴に起因して、脂質二重層を形成し得る。リン脂質分子の構造は、一般的に、２つの疎水性脂肪酸「尾部」と、単純な有機分子、例えば、コリン、エタノールアミン、またはセリンで改変されていてもよいリン酸基からなる親水性「頭部」とからなる。これらの２つの構成要素は、通常、グリセロール分子によって一緒に結合されている。本発明のリン脂質／脂肪酸の代表的なリストは、表ＩＩＩに記載されている。
一般的に述べると、また本開示の目的で、「脂質」という用語は、そのもっとも広範な意味で使用され、リン脂質／脂肪酸を含むがこれらに限定されないいくつかの部分カテゴリーの脂質を含む。当業者には理解されるように、リン脂質は、すべての細胞膜の主要な成分である脂質のクラスを表す。リン脂質は、それらの両親媒性特徴に起因して、脂質二重層を形成し得る。リン脂質分子の構造は、一般的に、２つの疎水性脂肪酸「尾部」と、単純な有機分子、例えば、コリン、エタノールアミン、またはセリンで改変されていてもよいリン酸基からなる親水性「頭部」とからなる。これらの２つの構成要素は、通常、グリセロール分子によって一緒に結合されている。本発明のリン脂質／脂肪酸の代表的なリストは、表ＩＩＩに記載されている。
【0118】
簡略的な背景として、もっとも基礎的なレベルで、リポソームの特性は、その組成における様々な脂質種の間の緻密な物理化学的相互作用に依存する。個々の脂質が組み合わされて、二重層を含む多数の上位構造が形成され得、二重層の特性は、薬物放出および膜安定性をモジュレートするように調整され得る。単純化された二重層モデルでは、アシル鎖の長さにより、二重層の厚さおよび相転移温度（Ｔｍ）が決定され、アシル鎖の飽和により、二重層の流動性が制御され、頭部基の相互作用により、脂質分子間力および脂質分子内力が影響を受ける。リポソームの挙動は、合成脂質、例えば、脂質プロドラッグ、融合性脂質、および官能化可能な脂質を二重層に組み込むことによって、調節することができる。KOHLI, et. al., J. Control Release, 0: pp. 274-287 (Sept. 28, 2014)を参照されたい。
【0119】
本開示の一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、一価脂質部分を含む。
【0120】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、二価脂質部分を含む。
【0121】
一実施形態では、脂質は、以下の化学構造：
を有するコレステロールを含む。
【化5】
【0122】
一実施形態では、脂質は、以下の化学構造：
を有するＤＰＰＧを含む。
【化6】
【0123】
一実施形態では、脂質は、以下の化学構造：
を有するＤＭＰＧを含む。
【化7】
【0124】
一実施形態では、脂質は、以下の化学構造：
を有するＬｙｓｏ ＰＣを含む。
【化8】
【0125】
一実施形態では、脂質は、以下の化学構造：
を有する（Δ９－Ｃｉｓ）ＰＧを含む。
【化9】
【0126】
一実施形態では、脂質は、以下の化学構造：
を有するＳｏｙ Ｌｙｓｏ ＰＣを含む。
【化10】
【0127】
一実施形態では、脂質は、以下の化学構造：
を有するＰＧを含む。
【化11】
【0128】
一実施形態では、脂質は、以下の化学構造：
を有するＣ１６ ＰＥＧ２０００セラミド（Ceramde）を含む。
【化12】
【0129】
一実施形態では、脂質は、以下の化学構造：
を有するヘミコハク酸コレステロール（「ＣＨＥＭＳ」）を含む。
【化13】
【0130】
参照として、本明細書に開示される脂質の化学式および略語の完全なリストは、表Ｉに記載される。
【0131】
追加の実施形態では、脂質は、本明細書に開示され表ＩＩＩに記載されるリン脂質／脂肪酸を含む。
【0132】
さらなる実施形態では、脂質は、ステアリン酸を含む。
【0133】
加えて、本開示のＩＣＤプロドラッグおよび／またはリポソームは、本明細書において「ヘルパー脂質成分」とも称される１つまたは複数のヘルパー脂質を含み得る。ヘルパー脂質成分は、好ましくは、リン脂質およびステロイドを含む群から選択される。リン脂質は、好ましくは、リン酸のジエステルおよびモノエステルである。リン脂質の好ましいメンバーは、ホスホグリセリドおよびスフィンゴ脂質である。ステロイドは、本明細書において使用される場合、部分的に水素化されたシクロペンタ［ａ］フェナントレンに基づく天然に存在する化合物および合成化合物である。好ましくは、ステロイドは、２１～３０個のＣ原子を含む。特に好ましいステロイドは、コレステロールである。
【0134】
いずれの理論によっても束縛されることを望むものではないが、ヘルパー脂質がＰＥＧ不含ヘルパー脂質であるか、または特にＰＥＧ含有ヘルパー脂質であるかのいずれであってもよい本発明による脂質組成物に含まれるヘルパー脂質の具体的なｍｏｌパーセンテージに起因して、より具体的には、この種類のヘルパー脂質のいずれかの含有量が本明細書に指定される濃度範囲内に含まれる場合に、驚くべき作用が実現され得ることに留意されたい。
【0135】
本発明のさらなる態様では、好ましくはリポプレックスまたはリポソームとして存在する脂質組成物は、好ましくは、中性または全体的にアニオン性の電荷を示す。アニオン性脂質は、好ましくは、本明細書に記載される任意の中性またはアニオン性脂質である。脂質組成物は、好ましい実施形態では、任意のヘルパー脂質またはヘルパー脂質の組合せ、ならびに本明細書に記載される任意のＩＣＤ誘導剤（例えば、ＩＣ１）を含む。さらなる実施形態では、核酸を含む本発明による組成物は、リポプレックスを形成する。好ましい実施形態では、リポプレックスという用語は、本明細書において使用される場合、本発明の中性またはアニオン性脂質、中性ヘルパー脂質、およびＩＣＤ誘導剤から構成される組成物を指す。当該技術分野におけるヘルパー脂質の使用への参照については、例として、米国特許出願公開第２０１１／０１７８１６４号、OJEDA, et. al., Int. J. of Pharmaceutics (March 2016)、DABKOWSKA, et. al., J. R. Soc. Interface 9, pp. 548-561 (2012)、およびMOCHIZUKI, et. al., Biochimica et. Biophysica Acta, 1828, pp. 412-418 (2013)を参照されたい。
【0136】
好ましい実施形態では、本発明のヘルパー脂質は、表ＩＩに記載されるヘルパー脂質を含む。
【0137】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はＣＨＥＭＳであり、薬物部分はＩＣ１である。
【0138】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はＣＨＥＭＳであり、薬物部分はＩＣ１のうちのいずれかであり、さらにＬＵを含み、ＬＵはヒドロメチルカルバメートリンカーである。
【0139】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はＣＨＥＭＳであり、薬物部分はＩＣ１のうちのいずれかであり、さらにＬＵを含み、ＬＵはヒドラゾンリンカーである。
【0140】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はＣＨＥＭＳであり、薬物部分はＩＣ１のうちのいずれかであり、さらにＬＵを含み、ＬＵはヒドロメチルカルバメートリンカーであり、さらにヘルパー脂質成分を含み、ヘルパー脂質成分は表ＩＩのヘルパー脂質を含む。
【0141】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はＣＨＥＭＳであり、薬物部分はＩＣ１のうちのいずれかであり、さらにＬＵを含み、ＬＵはヒドラゾンリンカーであり、さらにヘルパー脂質成分を含み、ヘルパー脂質成分は表ＩＩのヘルパー脂質を含む。
【0142】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はＣＨＥＭＳであり、薬物部分はＩＣ１のうちのいずれかであり、ＣＨＥＭＳは一価である。
【0143】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はステアリン酸であり、薬物部分はＩＣ１のうちのいずれかである。
【0144】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はステアリン酸であり、薬物部分はＩＣ１のうちのいずれかであり、ステアリン酸は一価である。
【0145】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はステアリン酸であり、薬物部分はＩＣ１のうちのいずれかであり、さらにＬＵを含み、ＬＵはヒドロメチルカルバメートリンカーである。
【0146】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はステアリン酸であり、薬物部分はＩＣ１のうちのいずれかであり、さらにＬＵを含み、ＬＵはヒドラゾンリンカーである。
【0147】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はステアリン酸であり、薬物部分はＩＣ１のうちのいずれかであり、さらにＬＵを含み、ＬＵはヒドラゾンである。
【0148】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はステアリン酸であり、化学的組成物はＩＣ１のうちのいずれかであり、さらにＬＵを含み、ＬＵはヒドロメチルカルバメートリンカーであり、さらにヘルパー脂質成分を含み、ヘルパー脂質成分は表ＩＩのヘルパー脂質を含む。
【0149】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はステアリン酸であり、化学的組成物はＩＣ１のうちのいずれかであり、さらにＬＵを含み、ＬＵはヒドラゾンリンカーであり、さらにヘルパー脂質成分を含み、ヘルパー脂質成分は表ＩＩのヘルパー脂質を含む。
【0150】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はステアリン酸であり、薬物部分はＩＣ１のうちのいずれかである。
【0151】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はステアリン酸であり、薬物部分はＩＣ１のうちのいずれかであり、ＡＲプロドラッグは、本明細書に記載される実施例１に従って合成される。
【0152】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はステアリン酸であり、薬物部分はＩＣ１のうちのいずれかであり、ＡＲプロドラッグは、本明細書に記載される図１に従って合成される。
【0153】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、本発明の脂質を含み、ここで、脂質はステアリン酸であり、薬物部分は、以下の化学構造：
を有するＩＣ１のうちのいずれかである。
【化14】
【0154】
一実施形態では、ヒドラゾン脂質のクラスが、本明細書に開示される。上記のこれまでの教示のように、一般的なヒドラゾン脂質は、表ＩＩＩに記載されている。加えて、本開示のヒドラゾン脂質は、以下の化学式：
に記載され、
式中、ｎ＝８～３０である。
【化15】
式中、ｎ＝８～３０である。
【0155】
さらなる実施形態では、本開示のヒドラゾン脂質は、以下の化学式：
に記載され、
式中、ｘ＝３～１６であり、
式中、ｙ＝３～１６である。
【化16】
式中、ｘ＝３～１６であり、
式中、ｙ＝３～１６である。
【0156】
当業者であれば、本明細書に開示される本発明の機能および目的を変更することなく、開示される実施形態に対する変動形態および改変形態を理解し、それを作製することができるであろう。そのような変動形態および改変形態は、本開示の範囲内であることが意図される。
【0157】
Ｖ．）連結ユニット（「ＬＵ」）
一部の実施形態では、本開示の主題は、生体分解性連結、例えば、エステル、チオエステル、および当該技術分野において公知の他のリンカーを含む、薬物－脂質コンジュゲートを含むプロドラッグを提供する。
一部の実施形態では、本開示の主題は、生体分解性連結、例えば、エステル、チオエステル、および当該技術分野において公知の他のリンカーを含む、薬物－脂質コンジュゲートを含むプロドラッグを提供する。
【0158】
エステル化学反応の例示的な実施形態が、本明細書に記載されている：
【化17】
【0159】
一部の実施形態では、プロドラッグは、薬物－脂質コンジュゲートであり、薬物－脂質コンジュゲートは、エステラーゼによって切断される。
【0160】
一実施形態では、本発明のプロドラッグは、以下のスキームを使用して、第二級アミン、アミド、またはアニリンを介したＬＵを含む：
例示的な合成は、以下の通りである：
第二級アミン、アミド、またはアニリンを含むプロドラッグ構造の切断は、以下の例示的な合成下における第二級アミン、アミド、またはアニリンプロドラッグのエステラーゼ加水分解によって得られる：
式中、
Ｒ１－ＮＨ－Ｒ２は、第二級アミン、アミド、またはアニリンを有する任意の分子であり得る。
【化18】
【化19】
【化20】
Ｒ１－ＮＨ－Ｒ２は、第二級アミン、アミド、またはアニリンを有する任意の分子であり得る。
【0161】
一実施形態では、ＩＣ１薬物部分の第二級アミドの窒素は、ヒドロメチルカルバメートリンカーを介してＣＨＥＭＳにコンジュゲートされる。
【0162】
一実施形態では、ＩＣ１薬物部分の第二級アミドの窒素は、ヒドロメチルカルバメートリンカーを介してステアリン酸にコンジュゲートされる。
【0163】
さらなる実施形態では、本開示の主題は、水性酸性条件下において、以下の例示的な合成を利用して、薬物を遊離ケトンおよび脂質－ヒドラジン誘導体として放出するヒドラゾン加水分解を含むプロドラッグを提供する。
【化21】
【0164】
さらなる好ましい実施形態では、本開示のＩＣ１プロドラッグは、水性酸性条件下におけるヒドラゾン加水分解を利用して、ＩＣ１薬物部分（「薬物部分」と題される節を参照されたい）を放出して、以下の例示的な合成下において、ＩＣ１および脂質－ヒドラジン誘導体を放出する。
【化22】
【0165】
当業者であれば、本明細書に開示される本発明の機能および目的を変更することなく、開示される実施形態に対する変動形態および改変形態を理解し、それを作製することができるであろう。そのような変動形態および改変形態は、本開示の範囲内であることが意図される。
【0166】
ＶＩ．）ナノ担体
一般的に述べると、また本開示の目的で、ナノ担体は、本発明の範囲内である。ナノ担体は、別の物質、例えば、薬物の輸送モジュールとして使用されているナノ材料である。一般的に使用されるナノ担体としては、ミセル、ポリマー、炭素に基づく材料、リポソーム、および他の物質が挙げられる。それらのサイズが小さいことから、ナノ担体は、それ以外ではアクセスできない身体内の部位に、薬物を送達することができる。ナノ担体としては、ポリマーコンジュゲート、ポリマーナノ粒子、脂質に基づく担体、デンドリマー、カーボンナノチューブ、および金ナノ粒子を挙げることができる。脂質に基づく担体は、リポソームおよびミセルの両方を含む。ある特定の実施形態では、ナノ担体は、リポソーム、脂質ナノ粒子（「ＬＮＰ」）、または固体脂質ナノ粒子（「ＳＬＮＰ」）である。
一般的に述べると、また本開示の目的で、ナノ担体は、本発明の範囲内である。ナノ担体は、別の物質、例えば、薬物の輸送モジュールとして使用されているナノ材料である。一般的に使用されるナノ担体としては、ミセル、ポリマー、炭素に基づく材料、リポソーム、および他の物質が挙げられる。それらのサイズが小さいことから、ナノ担体は、それ以外ではアクセスできない身体内の部位に、薬物を送達することができる。ナノ担体としては、ポリマーコンジュゲート、ポリマーナノ粒子、脂質に基づく担体、デンドリマー、カーボンナノチューブ、および金ナノ粒子を挙げることができる。脂質に基づく担体は、リポソームおよびミセルの両方を含む。ある特定の実施形態では、ナノ担体は、リポソーム、脂質ナノ粒子（「ＬＮＰ」）、または固体脂質ナノ粒子（「ＳＬＮＰ」）である。
【0167】
加えて、ナノ担体は、薬物を部位特異的標的に送達することができ、薬物を、その他のものではなくある特定の器官または細胞に送達することを可能にするため、薬物送達プロセスにおいて有用である。部位特異性は、薬物が誤った位置へと送達されるのを防止するため、主要な治療上の利点をもたらす。加えて、ナノ担体は、身体の健常な成長速度の早い細胞に対する化学療法の有害なより広範な毒性を減少させるのに役立ち得るため、化学療法における使用に有望である。化学療法薬は、ヒト細胞に対して極めて毒性であり得るため、それらが身体の他の部位に放出されることなく腫瘍へと送達されることが重要である。
【0168】
一般的に述べると、ナノ担体が薬物を送達することができる方法は４つ存在し、それらには、受動的標的化、能動的標的化、ｐＨ特異性、および温度特異性が含まれる。
【0169】
受動的標的化は、腫瘍の血管系へと移動し、そこで捕捉され、腫瘍に蓄積する、ナノ担体の能力を指す。この蓄積は、透過性および保持作用の増強によって引き起こされる。腫瘍のリーキー血管系（leaky vasculature）は、多数の細孔を含む、腫瘍において形成される血管のネットワークである。これらの細孔は、ナノ担体の進入を可能にするだけでなく、ナノ担体が捕捉された状態となることを可能にする多数の屈曲部も含む。より多くのナノ担体が捕捉された状態となるにつれて、薬物が腫瘍部位に蓄積される。この蓄積により、多用量の薬物が腫瘍部位に直接的に送達される。
【0170】
能動的標的化は、身体内のある特定の種類の細胞に特異的な標的化モジュール、例えば、リガンドまたは抗体をナノ担体の表面上に組み込むことを含む。一般的に、ナノ担体は、体積に対する表面積の比が高く、複数のリガンドをそれらの表面上に組み込むことが可能である。
【0171】
加えて、ある特定のナノ担体は、特定のｐＨ範囲でのみ、それらが含む薬物を放出する。ｐＨ特異性もまた、ナノ担体が薬物を腫瘍部位に直接的に送達することを可能にする。これは、腫瘍が、一般的に、およそ６．８のｐＨを有し、正常なヒト細胞よりも酸性であるという事実に起因する。正常組織は、およそ７．４のｐＨを有する。したがって、ある特定のｐＨ範囲でのみ薬物を放出するナノ担体は、したがって、酸性腫瘍環境内でのみ薬物を放出させるように使用することができる。高い酸性環境は、ナノ担体の構造を分解する酸性環境に起因して、薬物が放出されることを引き起こす。一般的に、これらのナノ担体は、中性または塩基性環境においては薬物を放出せず、腫瘍の酸性環境を効果的に標的化しながら、正常な身体細胞は影響を受けないまま残す。このｐＨ感受性はまた、ｐＨ非依存性様式で作用することが決定されているミセルにコポリマー鎖を付加することにより、ミセル系において誘導することも可能である。WU, et. al., Biomaterials, 34(4): 1213-1222 (2012)を参照されたい。これらのミセル－ポリマー複合体はまた、がん細胞が多剤耐性を生じることを予防するのにも役立つ。低ｐＨ環境は、ミセルポリマーの迅速な放出をトリガーし、他の薬物処置のように緩徐にではなく、薬物の大半を一度に放出させる。
【0172】
加えて、一部のナノ担体はまた、ある特定の温度において、より効果的に薬物を送達することが示されている。腫瘍温度は、一般的に、４０℃程度であり、身体の残部全体よりも温度が高いため、この温度勾配は、腫瘍特異的な部位送達の防御として作用するのに役立つ。REZAEI, et. al., Polymer, 53(16): 3485-3497 (2012)を参照されたい。
【0173】
本明細書に開示されるように、脂質に基づくナノ担体、例えば、リポソームは、本発明の範囲内である。脂質に基づくナノ粒子（ＬＢＮＰまたはＬＮＰ）、例えば、リポソーム、固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮ）、およびナノ構造化脂質担体（ＮＬＣ）は、疎水性および親水性分子を輸送することができ、最小限の毒性を示すかまたは毒性を示さず、半減期の延長および薬物放出の制御を用いて、薬物作用の時間を増加させることができる。脂質ナノ粒子は、免疫系による検出を回避するため（ガングリオシドもしくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ））または薬物の可溶性を改善するための化学的改変を含み得る。加えて、それらは、酸性環境において薬物放出を促進するために、ｐＨ感受性の製剤に調製することができ、また、腫瘍細胞およびそれらの受容体（例えば、葉酸（ＦｏＡ））を認識する小分子または抗体と会合させることができる。ナノ薬物はまた、患者の応答を改善するために他の治療戦略と組み合わせて使用することもできる。GARCIA-PINEL, et. al., Nanomaterials 9(639) (2019)を参照されたい。
【0174】
様々な実施形態では、本明細書に記載されるシリカソーム（silicasome）薬物担体は、脂質二重層でコーティングされた多孔質シリカ（または他の材料）ナノ粒子（例えば、表面を有し、中に分子を受容するのに好適な複数の細孔を定める、シリカ体）を含む。ナノ粒子がシリカナノ粒子と称されるという事実は、シリカ以外の材料もまたシリカナノ粒子内に組み込まれていることを除外するものではない。一部の実施形態では、シリカナノ粒子は、実質的に球状であり得、細孔へのアクセスを提供する表面を通る複数の細孔開口部を有する。しかしながら、様々な実施形態では、シリカナノ粒子は、実質的に球状の形状以外の形状を有してもよい。したがって、例えば、ある特定の実施形態では、シリカナノ粒子は、実質的に卵形、ロッド形状、実質的に正多角形、不規則な多角形などであってもよい。
【0175】
一般的に、シリカナノ粒子は、細孔開口部間の外表面ならびに細孔内の側壁を定めるシリカ体を含む。細孔は、シリカ体から別の細孔開口部へと延在していてもよく、または細孔は、シリカ体によって定められる底面を有するように、シリカ体から部分的にのみ延在していてもよい。
【0176】
一部の実施形態では、シリカ体は、メソポーラスである。他の実施形態では、シリカ体は、マイクロポーラスである。本明細書において使用される場合、「メソポーラス」とは、直径が約２ｎｍ～約５０ｎｍである細孔を有することを意味し、一方で「マイクロポーラス」とは、直径が約２ｎｍよりも小さい細孔を有することを意味する。一般的に、細孔は、任意のサイズのものであってもよいが、典型的な実施形態では、１つまたは複数の治療用化合物を中に含むために十分な大きさである。そのような実施形態では、細孔は、小分子、例えば、治療用化合物、例えば、抗がん化合物が、細孔の内部表面に付着または結合し、治療目的で使用される場合にはシリカ体から放出されることを可能にする。一部の実施形態では、細孔は、実質的に円筒状である。
【0177】
ある特定の実施形態では、ナノ粒子は、約１ｎｍ～約１０ｎｍの直径、または約２ｎｍ～約８ｎｍの細孔径を有する細孔を含む。ある特定の実施形態では、ナノ粒子は、約１ｎｍ～約６ｎｍ、または約２ｎｍ～約５ｎｍの細孔径を有する細孔を含む。他の実施形態は、２．５ｎｍ未満の細孔径を有する粒子を含む。
【0178】
他の実施形態では、細孔径は、１．５～２．５ｎｍである。他の細孔サイズを有するシリカナノ粒子は、例えば、シリカナノ粒子の調製中に異なる界面活性剤または膨張剤を使用することによって、調製され得る。様々な実施形態では、ナノ粒子は、約１０００ｎｍ程度の大きさ（例えば、平均、または中央値直径（または他の特徴寸法）の粒子を含み得る。しかしながら、様々な実施形態では、一般的に、３００ｎｍよりも大きな粒子は、生きた細胞または血管の穿孔部（fenestration）に進入するのにあまり有効ではない可能性があるため、ナノ粒子は、典型的に、５００ｎｍ未満または約３００ｎｍ未満である。ある特定の実施形態では、ナノ粒子は、サイズが、約４０ｎｍまたは約５０ｎｍまたは約６０ｎｍから、最大約１００ｎｍまたは最大約９０ｎｍまたは最大約８０ｎｍまたは最大約７０ｎｍまでの範囲に及ぶ。ある特定の実施形態では、ナノ粒子は、サイズが約６０ｎｍ～約７０ｎｍの範囲に及ぶ。一部の実施形態は、約５０ｎｍ～約１０００ｎｍの平均最大寸法を有するナノ粒子を含む。他の実施形態は、約５０ｎｍ～約５００ｎｍの平均最大寸法を有するナノ粒子を含む。他の実施形態は、約５０ｎｍ～約２００ｎｍの平均最大寸法を有するナノ粒子を含む。
【0179】
一部の実施形態では、平均最大寸法は、約２０ｎｍを上回るか、約３０ｎｍを上回るか、４０ｎｍを上回るか、または約５０ｎｍを上回る。他の実施形態は、約５００ｎｍ未満、約３００ｎｍ未満、約２００ｎｍ未満、約１００ｎｍ未満、または約７５ｎｍ未満の平均最大寸法を有するナノ粒子を含む。本明細書において使用される場合、ナノ粒子のサイズは、透過電子顕微鏡法（ＴＥＭ）または当該技術分野において公知の類似の視覚化技法によって測定される、主要な粒子の平均または中央値サイズを指す。メソポーラスシリカナノ粒子のさらなる例としては、ＭＣＭ－４１、ＭＣＭ－４８、およびＳＢＡ－１５が挙げられるが、これらに限定されない。KATIYARE, et. al., J. Chromotog. 1122(1-2): 13-20 (2006)を参照されたい。
【0180】
多孔質シリカナノ粒子を作製する方法は、当業者に周知である。ある特定の実施形態では、メソポーラスシリカナノ粒子は、オルトケイ酸テトラエチル（ＴＥＯＳ）をミセル状ロッドから作製された鋳型とともに反応させることによって合成される。結果は、規則的な配置の細孔で充填されたナノサイズの球体またはロッドの集合体である。鋳型は、次いで、適切なｐＨに調節した溶媒で洗浄することによって除去することができる（例えば、TREWYN et al. (2007) Chem. Eng. J. 137(1): 23-29を参照されたい）。
【0181】
ある特定の実施形態では、メソポーラス粒子はまた、単純なゾル－ゲル方法を使用して合成することもできる（例えば、NANDIYANTO, et al. (2009) Microporous and Mesoporous Mat. 120(3): 447-453を参照されたい）。ある特定の実施形態では、オルトケイ酸テトラエチルはまた、鋳型として追加のポリマーモノマーとともに使用され得る。ある特定の実施形態では、３－メルカプトプロピル）トリメトキシシラン（ＭＰＴＭＳ）が、ＴＥＯＳの代わりに使用される。
【0182】
ある特定の実施形態では、メソポーラスシリカナノ粒子は、MENG et. al. (2015) ACS Nemo, 9(4): 3540-3557によって記載されるゾル／ゲル手順の改変形態によって合成されるコアである。
【0183】
本明細書に記載される方法は、多孔質シリカナノ粒子（例えば、メソポーラスシリカ）に関して示されているが、当業者であれば、類似の方法を他の多孔質ナノ粒子で使用することができることを認識するであろう。薬物送達ナノ粒子において使用することができる多数の他のメソポーラス材料が、当業者に公知である。例えば、ある特定の実施形態では、メソポーラスカーボンナノ粒子が、利用され得る。
【0184】
メソポーラスカーボンナノ粒子は、当業者に周知である（例えば、HUANG et. al. (2016) Carbon, 101: 135-142、ZHU et. al. (2014) Asian J. Pharm. Sci., 9(2): 82-91などを参照されたい）。
【0185】
同様に、ある特定の実施形態では、メソポーラスポリマー粒子が、利用され得る。蒸発に誘導される自己アセンブリ戦略による、可溶性の低分子量フェノール樹脂前駆体（ｒｅｓｏｌ）を用いたトリブロックコポリマーの有機－有機アセンブリからの高次メソポーラスポリマーおよびカーボンフレームワークの合成が、MENG, et. al. (2006) Chem. Mat. 6(18): 4447-4464によって報告されている。
【0186】
本明細書に記載されるナノ粒子は、例示的であり、非限定的である。本明細書に提供される教示を使用することで、多数の他の脂質二重層でコーティングされたナノ粒子が、当業者には利用可能となろう。
【0187】
一実施形態では、本発明は、ＩＣＤプロドラッグを含むナノ担体を教示する。
【0188】
一実施形態では、本発明は、リポソームを含むナノ担体であって、脂質がＣＨＥＭＳを含む、ナノ担体を教示する。
【0189】
一実施形態では、本発明は、リポソームを含むナノ担体であって、脂質がステアリン酸を含む、ナノ担体を教示する。
【0190】
一実施形態では、本発明は、リポソームを含むナノ担体であって、脂質がＣＨＥＭＳを含み、リポソームがＩＣＤプロドラッグをさらに含む、ナノ担体を教示する。
【0191】
一実施形態では、本発明は、リポソームを含むナノ担体であって、脂質がＣＨＥＭＳを含み、リポソームがＩＣ１をさらに含む、ナノ担体を教示する。
【0192】
一実施形態では、本発明は、リポソームを含むナノ担体であって、脂質がステアリン酸を含み、リポソームがＩＣＤ誘導剤をさらに含む、ナノ担体を教示する。
【0193】
一実施形態では、本発明は、リポソームを含むナノ担体であって、脂質がステアリン酸を含み、リポソームがＩＣ１をさらに含む、ナノ担体を教示する。
【0194】
一実施形態では、本発明は、リポソームを含むナノ担体であって、脂質がステアリン酸およびヒドラゾンを含み、リポソームがＩＣ１をさらに含む、ナノ担体を教示する。
【0195】
一実施形態では、本発明は、リポソームを含むナノ担体であって、脂質がステアリン酸を含み、リポソームがＩＣ１をさらに含む、ナノ担体を教示する（ＬＮＰ－ＩＣ１と称される）。
【0196】
さらなる実施形態では、本発明は、リポソームを含むナノ担体であって、脂質がステアリン酸を含み、リポソームがＩＣ１をさらに含み、リポソームがｔｏｌｌ様受容体アゴニストと共製剤化され、ｔｏｌｌ様受容体アゴニストが、ＴＲ１２と称されるｔｏｌｌ様受容体アゴニストを含む、ナノ担体を教示する（ＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２と称される）。
【0197】
好ましい実施形態では、脂質粒子は、ＩＣＤプロドラッグを含むリポソームを含む固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）を含む。
【0198】
一実施形態では、本発明は、固体脂質ナノ粒子（「ＳＬＮＰ」）を含むナノ担体であって、固体脂質ナノ粒子がドキソルビシンを含む、ナノ担体を教示する（ＳＬＮＰ－Ｄｏｘと称される）。
【0199】
好ましい実施形態では、脂質粒子は、ＩＣＤプロドラッグを含むリポソームを含む固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）を含み、ここで、ＩＣＤプロドラッグは、ＩＣ１を含む。
【0200】
一実施形態では、本発明は、固体脂質ナノ粒子（「ＳＬＮＰ」）を含むナノ担体であって、固体脂質ナノ粒子がステアリン酸を含み、固体脂質ナノ粒子がＩＣ１をさらに含む、ナノ担体を教示する（ＳＬＮＰ－ＩＣ１と称される）。
【0201】
さらなる実施形態では、本発明は、ＳＬＮＰを含むナノ担体であって、脂質がステアリン酸を含み、ＳＬＮＰがＩＣ１をさらに含み、ＳＬＮＰがｔｏｌｌ様受容体アゴニストと共製剤化され、ｔｏｌｌ様受容体アゴニストが、ＴＲ１２と称されるｔｏｌｌ様受容体アゴニストを含む、ナノ担体を教示する（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２と称される）。
【0202】
さらなる実施形態では、本発明は、ＳＬＮＰを含むナノ担体であって、脂質がステアリン酸を含み、ＳＬＮＰがＩＣ１をさらに含み、ＳＬＮＰがＲＧＤペプチドと共製剤化される、ナノ担体を教示する（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤと称される）。
【0203】
さらなる好ましい実施形態では、本発明の固体脂質ナノ粒子は、以下の比：
を有する組成物を含む。
【表1】
【0204】
さらなる好ましい実施形態では、本発明の固体脂質ナノ粒子は、以下の比：
を有する組成物を含む。
ここで、脂質１は、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、ステアリン酸を含み、ヘルパー脂質は、表ＩＩに記載されるヘルパー脂質であり、安定化剤は、ポリビニルアルコール（例えば、Ｍｏｌｉｗｏｌ ４８８）、ポロキサマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、ＰＥＧ４００、およびＫｏｌｌｉｐｈｏｒ ＲＨ ４０からなる群から選択され、脂質２および脂質３（脂質プロドラッグ）は、本開示の脂質プロドラッグ、またはＩＤ３、ＰＤ３、ＴＲ３、ＴＢ４阻害剤（例えば、ＩＤ３－ＳＴＥＡ、ＩＤ３－ＣＨＥＭ、ＰＤ３－ＳＴＥＡ、ＴＲ３－ＳＴＥＡ、ＴＢ４－ＳＴＥＡなど）、ＭＰＬＡ、およびテルラトリモドからなる群から選択される脂質プロドラッグを含む。
【表2】
ここで、脂質１は、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、ステアリン酸を含み、ヘルパー脂質は、表ＩＩに記載されるヘルパー脂質であり、安定化剤は、ポリビニルアルコール（例えば、Ｍｏｌｉｗｏｌ ４８８）、ポロキサマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、ＰＥＧ４００、およびＫｏｌｌｉｐｈｏｒ ＲＨ ４０からなる群から選択され、脂質２および脂質３（脂質プロドラッグ）は、本開示の脂質プロドラッグ、またはＩＤ３、ＰＤ３、ＴＲ３、ＴＢ４阻害剤（例えば、ＩＤ３－ＳＴＥＡ、ＩＤ３－ＣＨＥＭ、ＰＤ３－ＳＴＥＡ、ＴＲ３－ＳＴＥＡ、ＴＢ４－ＳＴＥＡなど）、ＭＰＬＡ、およびテルラトリモドからなる群から選択される脂質プロドラッグを含む。
【0205】
当業者であれば、本明細書に開示される本発明の機能および目的を変更することなく、開示される実施形態に対する変動形態および改変形態を理解し、それを作製することができるであろう。そのような変動形態および改変形態は、本開示の範囲内であることが意図される。
【0206】
本開示の範囲は、本発明の製剤化されたプロドラッグを使用して、３つの可能性のある処置モダリティを教示する。ＰＣＴ特許公開第ＷＯ２０１８／２１３６３１号を参照されたい。
【0207】
第１の処置モダリティは、腫瘍部位への全身的（または局所的）な生体分布および薬物送達を可能にする、単一のリポソームへの、別の治療薬（例えば、ＩＣＤを誘導する別の製剤化されたプロドラッグ、および他のファミリーメンバー、追加の化学療法剤（例えば、ＩＣＤ誘導性化学療法）など）と組み合わせたＩＣＤプロドラッグの組合せを含む。二重送達アプローチは、獲得免疫および自然免疫の相乗的な増強を達成し、動物の生存に著しい改善をもたらす。ある特定の実施形態では、ナノ担体は、小胞（すなわち、流体を封入した脂質二重層）を含む。
【0208】
第２の処置モダリティは、ＩＣＤを誘導する薬剤および／または他のファミリーメンバーのＩＣＤを誘導する追加の薬剤を含む脂質（例えば、リポソーム）との組合せの腫瘍または腫瘍周囲の領域への局所的な送達を含む。
【0209】
第３の処置モダリティは、死滅するがん細胞（例えば、ＫＰＣ細胞）を利用したワクチン接種を含み、ＩＣＤは、ｅｘ ｖｉｖｏで誘導される。そのようなワクチン接種は、遠位部位で腫瘍成長を妨害することができる全身的な免疫応答を生じ得ること、ならびに非免疫動物への養子移入を可能にすることが発見されている。当業者であれば、本明細書に提供される処置モダリティの方法を理解し、それを実行することが可能であろう。
【0210】
ＶＩＩ．）リポソーム
一態様では、本開示の主題は、対応するプロドラッグの送達の増強を提供するための脂質コーティング層を含むナノ担体への組込みに好適な本開示のＩＣＤプロドラッグ（プロドラッグと題される節を参照されたい）を提供するためおよびプロドラッグを含む組合せ療法を提供するためのアプローチに基づく。本発明のプロドラッグを使用する利点としては、本開示のＬＮＰ（例えば、リポソーム）への制御された製剤化の促進を含む。これは、プロドラッグを、全身循環中は不活性形態で維持することを可能にし、これにより、例えば腫瘍内の細胞によって取り込まれた後に、リポソームが活性剤を放出することが可能となる。
一態様では、本開示の主題は、対応するプロドラッグの送達の増強を提供するための脂質コーティング層を含むナノ担体への組込みに好適な本開示のＩＣＤプロドラッグ（プロドラッグと題される節を参照されたい）を提供するためおよびプロドラッグを含む組合せ療法を提供するためのアプローチに基づく。本発明のプロドラッグを使用する利点としては、本開示のＬＮＰ（例えば、リポソーム）への制御された製剤化の促進を含む。これは、プロドラッグを、全身循環中は不活性形態で維持することを可能にし、これにより、例えば腫瘍内の細胞によって取り込まれた後に、リポソームが活性剤を放出することが可能となる。
【0211】
ある特定の実施形態では、１つまたは複数のＩＣＤプロドラッグ（例えば、本開示において教示されるＩＣＤプロドラッグ阻害剤のうちのいずれか１つもしくは複数、および／またはＩＣ１プロドラッグ）（プロドラッグと題される節を参照されたい）は、水溶液中で小胞（例えば、リポソーム）構造を形成するか、またはリポソームを含む脂質二重層の成分を形成し得る、脂質部分に製剤化される。リポソームは、直接的に使用されてもよく、組合せ製剤（例えば、本明細書に開示される別の薬物部分または治療モダリティとの組合せ）中の成分として提供されてもよい。
【0212】
ある特定の実施形態では、ＩＣＤプロドラッグとともに製剤化されるリポソームは、脂質、ＰＨＧＰ、ビタミンＥ、コレステロール、および／または脂肪酸を含む。
【0213】
一実施形態では、リポソームは、コレステロールを含む。
【0214】
一実施形態では、リポソームは、ＤＳＰＣを含む。
【0215】
一実施形態では、リポソームは、ＨＳＰＣを含む。
【0216】
一実施形態では、リポソームは、ＤＳＰＥ－ＰＥＧ２０００を含む。
【0217】
一実施形態では、リポソームは、ＤＰＰＧを含む。
【0218】
一実施形態では、リポソームは、ＤＭＰＧを含む。
【0219】
一実施形態では、リポソームは、Ｌｙｓｏ ＰＣを含む。
【0220】
一実施形態では、リポソーム、（Δ９－Ｃｉｓ）ＰＧを含む。
【0221】
一実施形態では、リポソームは、Ｓｏｙ Ｌｙｓｏ ＰＣを含む。
【0222】
一実施形態では、リポソームは、ＰＧを含む。
【0223】
一実施形態では、リポソームは、ＰＡ－ＰＥＧ３－マンノースを含む。
【0224】
一実施形態では、リポソームは、Ｃ１６ ＰＥＧ２０００セラミドを含む。
【0225】
一実施形態では、リポソームは、ＭＰＬＡを含む。
【0226】
一実施形態では、リポソームは、ＣＨＥＭＳを含む。
【0227】
一実施形態では、リポソームは、ステアリン酸を含む。
【0228】
一実施形態では、リポソームは、表ＩＩＩに記載されるリン脂質を含む。
【0229】
一実施形態では、リポソームは、ＩＣ１を含み、ＣＨＥＭＳをさらに含み、ＬＵをさらに含み、前記ＬＵはヒドロメチルカルバメートリンカーである。
【0230】
一実施形態では、リポソームは、ＩＣ１を含み、ステアリン酸をさらに含み、ＬＵをさらに含み、前記ＬＵはヒドロメチルカルバメートリンカーである。
【0231】
一実施形態では、リポソームは、ＩＣ１を含み、ステアリン酸をさらに含み、ＬＵをさらに含み、前記ＬＵはヒドラゾンリンカーである。
【0232】
一実施形態では、リポソームは、ＩＣ１を含み、ＣＨＥＭＳをさらに含み、ＬＵをさらに含み、前記ＬＵはヒドロメチルカルバメートリンカーであり、表ＩＩに記載されるヘルパー脂質をさらに含む。
【0233】
一実施形態では、リポソームは、ＩＣ１を含み、ステアリン酸をさらに含み、ＬＵをさらに含み、前記ＬＵはヒドロメチルカルバメートリンカーであり、表ＩＩに記載されるヘルパー脂質をさらに含む。
【0234】
一実施形態では、リポソームは、ＩＣ１を含み、ステアリン酸をさらに含み、ＬＵをさらに含み、前記ＬＵはヒドラゾンリンカーであり、表ＩＩに記載されるヘルパー脂質をさらに含む。
【0235】
一実施形態では、本開示のリポソームは、１つまたは複数の追加の免疫モジュレーション剤と共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含み、免疫モジュレーション剤は、免疫原性細胞死を誘導する化学療法薬、ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト、ｓｔｉｎｇアゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＣＴＬＡ４阻害剤、ＰＤ－１阻害剤、および／またはそれらのプロドラッグを含むが、これらに限定されない。
【0236】
好ましい実施形態では、リポソームは、ＩＣＤを誘導する化学療法薬と共製剤化されたＩＣ１プロドラッグを含む。
【0237】
好ましい実施形態では、リポソームは、以下のリスト：ドキソルビシン（ＤＯＸ）、ミトキサントロン（ＭＴＯ）、オキサリプラチン（ＯＸＡ）、シクロホスファミド（ＣＰ）、ボルテゾミブ、カルフィルジミブ（Carfilzimib）、またはパクリタキセルから選択されるＩＣＤを誘導する化学療法薬と共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0238】
好ましい実施形態では、リポソームは、Ｔｏｌｌ様受容体ＴＬＲアゴニスト／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0239】
好ましい実施形態では、リポソームは、以下のリスト：ＴＲ１２、レシキモド（Ｒ８４８）、ガーディキモド、８５２Ａ、ＤＳＲ ６４３４、テルラトリモド、ＣＵ－Ｔ１２－９、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬＡ）、３Ｄ（６－アシル）－ＰＨＡＤ（登録商標）、ＳＭＵ１２７、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、もしくは３Ｄ－ＰＨＡＤ（登録商標）、またはこれらのプロドラッグから選択されるＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0240】
好ましい実施形態では、リポソームは、ＰＤ－１阻害剤／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0241】
好ましい実施形態では、リポソームは、以下のリスト：ＰＤ３、ＡＵＮＰ１２、ＣＡ－１７０、もしくはＢＭＳ－９８６１８９、またはこれらのプロドラッグから選択されるＰＤ－１阻害剤／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0242】
好ましい実施形態では、リポソームは、ＩＤＯ－１阻害剤／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0243】
好ましい実施形態では、リポソームは、以下のリスト：ＩＤ３、エパカドスタット、Ｌ－１－メチルトリプトファン（インドキシモド）、Ｄ－１－メチルトリプトファン、リンロドスタットメシル酸塩（ＢＭＳ ９８６２０５）、ＭＫ－７１６２、ＬＹ－３３８１９１６、ＫＨＫ－２４５５、ＨＴＩ－１０９０、ＤＮ－１４０６１３１、またはＢＧＢ－５７７７から選択されるＩＤＯ－１阻害剤／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0244】
好ましい実施形態では、リポソームは、ドキソルビシン（ＤＯＸ）と共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0245】
好ましい実施形態では、リポソームは、ミトキサントロン（ＭＴＯ）と共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0246】
好ましい実施形態では、リポソームは、ドキソルビシン（ＤＯＸ）およびＰＤ－１プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0247】
好ましい実施形態では、リポソームは、ミトキサントロン（ＭＴＯ）およびＰＤ－１プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0248】
好ましい実施形態では、リポソームは、ドキソルビシン（ＤＯＸ）およびＩＤＯ－１プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0249】
好ましい実施形態では、リポソームは、ミトキサントロン（ＭＴＯ）およびＩＤＯ－１プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0250】
好ましい実施形態では、リポソームは、ドキソルビシン（ＤＯＸ）およびＴＬＲアゴニスト／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0251】
好ましい実施形態では、リポソームは、ミトキサントロン（ＭＴＯ）およびＴＬＲアゴニスト／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0252】
好ましい実施形態では、リポソームは、ドキソルビシン（ＤＯＸ）およびＰＤ－１プロドラッグおよびＴＬＲアゴニスト／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0253】
好ましい実施形態では、リポソームは、ミトキサントロン（ＭＴＯ）およびＰＤ－１プロドラッグおよびＴＬＲアゴニスト／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0254】
好ましい実施形態では、リポソームは、ＴＬＲアゴニスト／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0255】
好ましい実施形態では、リポソームは、ＴＧＦｂ阻害剤／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0256】
好ましい実施形態では、リポソームは、ＩＤＯアンタゴニスト／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0257】
好ましい実施形態では、リポソームは、ＣＴＬＡ４アゴニスト／プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0258】
好ましい実施形態では、リポソームは、ＴＬＲアゴニスト／プロドラッグおよびＰＤ－１プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0259】
好ましい実施形態では、リポソームは、ＴＬＲアゴニスト／プロドラッグおよびＩＤＯ－１プロドラッグと共製剤化されたＩＣＤプロドラッグを含む。
【0260】
好ましい実施形態では、リポソームは、ミトキサントロン（ＭＴＯ）と共製剤化されたＩＣ１プロドラッグを含む。
【0261】
好ましい実施形態では、リポソームは、ドキソルビシン（ＤＯＸ）および／またはＩＤＯプロドラッグおよび／またはＴＬＲアゴニスト／プロドラッグと共製剤化されたＩＣ１プロドラッグを含む。
【0262】
好ましい実施形態では、リポソームは、ミトキサントロン（ＭＴＯ）および／またはＩＤＯプロドラッグおよび／またはＴＬＲアゴニスト／プロドラッグと共製剤化されたＩＣ１プロドラッグを含む。
【0263】
当業者であれば、可溶性が、薬物開発プロセスにおいて技術者が直面するもっとも一般的な問題の１つであることを認識し、理解するであろう。脂質分子を介した薬物／抗がん剤の化学的コンジュゲーション（すなわち、脂質に基づくプロドラッグ）は、薬物を水性懸濁液において製剤化する問題を解決するためのプラットフォームを提供する。脂質コンジュゲーション（脂質に基づくプロドラッグ）を用いて薬物を送達する主要な利点は、薬物動態／半減期および標的化送達を改善するその能力に依存する。
【0264】
脂質分子を好適に選択することにより、脂質に基づくプロドラッグは、当該技術分野において公知の技法を使用してリポソーム製剤に組み込むこと／製剤化することができ、これは、従来的な薬物送達系よりも多くの利点を有する。（KOHLI, et. al., J. Control Release, 0: pp 274-287 (Sept. 28, 2014)、およびGARCIA-PINEL, et. al., Nanomaterials 9:638 (2019)。脂質プロドラッグをリポソームと組み合わせる利点は、二重にある：（ｉ）脂質プロドラッグを含むリポソームは、薬物／プロドラッグ自体の可溶性を増加させるだけでなく、（ｉｉ）複数の薬物を封入する能力も有する（親水性および親油性の両方）（ナノ担体と題される節を参照されたい）。
【0265】
本開示の目的で、リポソーム製剤の主要な利点は、以下の通りである。
ｉ）リポソーム製剤には生体適合性／生体分解性があり、一般毒性がないこと。
ｉｉ）サイズおよび表面電荷の柔軟性、ならびに必要とされる目的に応じたそれらの操作。リポソーム製剤は、本開示の目的で、４０～１５０ｎｍのサイズ範囲の直径、および－４０～＋４０ｍＶの範囲の表面電荷を有し得る。
ｉｉｉ）本発明のリポソームは、リポソームの構成要素脂質部分として、単一または複数の脂質プロドラッグを有する。加えて、複数の薬物（例えば、異なる作用機序で機能するもの）、および異なる可溶性プロファイル（親水性または親油性）を、これらのリポソームにおいて（脂質二重層または親水性コアのいずれかで）製剤化することができる。
ｉ）リポソーム製剤には生体適合性／生体分解性があり、一般毒性がないこと。
ｉｉ）サイズおよび表面電荷の柔軟性、ならびに必要とされる目的に応じたそれらの操作。リポソーム製剤は、本開示の目的で、４０～１５０ｎｍのサイズ範囲の直径、および－４０～＋４０ｍＶの範囲の表面電荷を有し得る。
ｉｉｉ）本発明のリポソームは、リポソームの構成要素脂質部分として、単一または複数の脂質プロドラッグを有する。加えて、複数の薬物（例えば、異なる作用機序で機能するもの）、および異なる可溶性プロファイル（親水性または親油性）を、これらのリポソームにおいて（脂質二重層または親水性コアのいずれかで）製剤化することができる。
【0266】
当業者には理解されるように、リポソームを作製するすべての方法は、以下の４つの基本的ステージを含む：
（ｉ）脂質を有機溶媒から乾燥させること、
（ｉｉ）脂質を水溶液中に分散させること、
（ｉｉｉ）結果として得られるリポソームを精製すること、および
（ｉｖ）最終産物を分析すること。
AKBARZADEH, et. al., Nanoscale Research Letters, 8:102 (2013)を参照されたい。
（ｉ）脂質を有機溶媒から乾燥させること、
（ｉｉ）脂質を水溶液中に分散させること、
（ｉｉｉ）結果として得られるリポソームを精製すること、および
（ｉｖ）最終産物を分析すること。
AKBARZADEH, et. al., Nanoscale Research Letters, 8:102 (2013)を参照されたい。
【0267】
本発明の別の態様は、薬物を移送するために使用される送達技法であるリポソーム封入技術（ＬＥＴ）を開示する。ＬＥＴは、多数の材料を封入する、リポソームと称される超顕微鏡的泡沫体を生成する方法である。これらの「リポソーム」は、内容物の周囲にバリアを形成し、これは、ヒトの身体において生成される口内および胃内の酵素、アルカリ性溶液、消化液、胆汁塩、ならびに腸内フローラ、ならびにフリーラジカルに対して耐性である。リポソームの内容物は、したがって、酸化および分解から保護される。この保護的リン脂質シールドまたはバリアは、リポソームの内容物が、内容物が利用されるであろう正確な標的腺、器官、または系に送達されるまで、損傷を受けないままとどまる（ナノ担体と題される節を参照されたい）。
【0268】
一実施形態では、本開示のリポソームは、複数の異なる比のＩＣＤプロドラッグ、脂質、および／または脂質プロドラッグを使用して合成される。本明細書において開示されるように、ＩＣＤプロドラッグは、本明細書に開示されるヘルパー脂質を含み得る（例えば、表ＩＩを参照されたい）。
【0269】
一実施形態では、本開示のリポソームは、複数の異なる比のＩＣＤプロドラッグ、脂質、および／または脂質プロドラッグを使用して合成される。本明細書において開示されるように、ＩＣＤプロドラッグは、ＤＳＰＥ－ＰＥＧをさらに含み得る。
【0270】
好ましい実施形態では、本発明のリポソームは、以下の比：
を有する組成物を含む。
【表3】
【0271】
さらなる好ましい実施形態では、本発明のリポソームは、以下の比：
を有する組成物を含む。
【表4】
【0272】
さらなる好ましい実施形態では、本発明のリポソームは、以下の比：
を有する組成物を含む。
ここで、脂質１は、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、ＣＨＥＭＳを含む。
【表5】
ここで、脂質１は、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、ＣＨＥＭＳを含む。
【0273】
さらなる好ましい実施形態では、本発明のリポソームは、以下の比：
を有する組成物を含む。
ここで、脂質１は、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、ステアリン酸を含む。
【表6】
ここで、脂質１は、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、ステアリン酸を含む。
【0274】
さらなる好ましい実施形態では、本発明のリポソームは、以下の比：
を有する組成物を含む。
ここで、脂質１は、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分はステアリン酸を含み、脂質２および脂質３（脂質プロドラッグ）は、本開示の脂質プロドラッグまたはＩＤ３、ＰＤ３、ＴＲ３、ＴＲ１２、ＲＧＤ、およびＴＢ４阻害剤（例えば、ＩＤ３－ＳＴＥＡ、ＩＤ３－ＣＨＥＭ、ＰＤ３－ＳＴＥＡ、ＴＲ３－ＳＴＥＡ、ＴＢ４－ＳＴＥＡなど）、ＭＰＬＡ、ならびにテルラトリモドからなる群から選択される脂質プロドラッグを含む。
【表7】
ここで、脂質１は、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分はステアリン酸を含み、脂質２および脂質３（脂質プロドラッグ）は、本開示の脂質プロドラッグまたはＩＤ３、ＰＤ３、ＴＲ３、ＴＲ１２、ＲＧＤ、およびＴＢ４阻害剤（例えば、ＩＤ３－ＳＴＥＡ、ＩＤ３－ＣＨＥＭ、ＰＤ３－ＳＴＥＡ、ＴＲ３－ＳＴＥＡ、ＴＢ４－ＳＴＥＡなど）、ＭＰＬＡ、ならびにテルラトリモドからなる群から選択される脂質プロドラッグを含む。
【0275】
当業者であれば、本明細書に開示される本発明の機能および目的を変更することなく、開示される実施形態に対する変動形態および改変形態を理解し、それを作製することができるであろう。そのような変動形態および改変形態は、本開示の範囲内であることが意図される。
【0276】
ＶＩＩＩ．）医薬製剤化
本明細書において使用される場合、「薬物」という用語は、「医薬」と同義である。ある特定の実施形態では、本開示のナノ担体は、封入された剤形として製造され、疾患の処置のために患者に提供される。
本明細書において使用される場合、「薬物」という用語は、「医薬」と同義である。ある特定の実施形態では、本開示のナノ担体は、封入された剤形として製造され、疾患の処置のために患者に提供される。
【0277】
一般的に述べると、医薬製剤化は、異なる化学物質を組み合わせて純粋な原薬にして、最終薬物製品を産生させるプロセスである。製剤化研究は、安定であり、かつ患者に許容される、薬物の調製を開発することを含む。経口で服用される薬物に関して、これは、通常、薬物を錠剤またはカプセルに組み込むことを含む。剤形が、薬物自体とは別の様々な他の物質を含むこと、薬物がこれらの他の物質と適合性があることを確実にするために研究を行う必要があることを理解することが、重要である。
【0278】
賦形剤は、薬物製品の活性成分の担体として使用される不活性物質であり、本事例では、ＩＣＤプロドラッグを含むナノ担体である。加えて、賦形剤は、薬物製品が製造されるプロセスを補助するために使用され得る。活性物質は、そのため、賦形剤で溶解されるか、またはそれと混合される。賦形剤はまた、便宜的かつ正確な投薬量を可能にするために、非常に強力な活性成分を有する製剤をかさ増しするために使用されることもある。活性成分が精製されると、それは、長期間精製された形態でとどまることができない。多くの場合、それは、変性するか、溶液から出るか、または容器の側面に付着することになる。
【0279】
活性成分を安定させるために、賦形剤を添加して、活性成分が、活性なままとどまり、製品の寿命が他の製品と競合でき、最終使用者にとって安全となるのに十分に長期間、安定となることを確実にする。賦形剤の例としては、抗接着剤、結合剤、コーティング剤、崩壊剤、増量剤、希釈剤、香味剤、着色剤、滑沢剤、および保存剤が挙げられるが、これらに限定されない。最終製剤は、活性成分および賦形剤を含み、これらは、次いで、医薬剤形に封入される。
【0280】
前製剤化は、他の成分のどれを調製物において使用すべきかを選択するために、薬物の物理的、化学的、および機械的特性の特徴付けを含む。製剤化研究は、次いで、安定性、粒子サイズ、多型性、ｐＨ、および可溶性といった因子のすべてが薬物のバイオアベイラビリティおよびしたがって活性に影響を及ぼし得るため、これらの因子を考慮する。薬物は、存在する薬物の量がそれぞれの投薬単位（例えば、それぞれのバイアル）において一定であることを確実にする方法によって、不活性添加剤と組み合わされなければならない。投薬形態は、均一な外観を有するべきである。
【0281】
これらの研究が、臨床試験が始まる時点で完了している可能性は低い。これは、単純な調製物が、フェーズＩ臨床試験において使用するためにまず開発されることを意味する。これらは、典型的に、バイアル、少量の薬物を含む手作業で充填されたカプセル、および希釈剤から構成される。これらの製剤の長期安定性の証明は、それらが数日間で使用（試験）されるため、必要とされない。しかしながら、長期安定性は、最終製剤がパッケージングされてから患者に届くまでの期間が、数カ月間または数年間となり得るため、サプライチェーンマネジメントにおいては極めて重要である。薬物ロード（すなわち、用量の総内容量に対する活性薬物の比）と称されるものに対して、考察がなされるべきである。低薬物ロードは、均質性の問題を引き起こし得る。高薬物ロードは、流動性の問題をもたらし得るか、または化合物が低いバルク密度を有する場合には大きなカプセルを必要とし得る。フェーズＩＩＩ臨床試験に到達するまでに、薬物の製剤は、最終的に市場において使用されるであろう調製物に近くなるように開発されている必要がある。
【0282】
安定性に関する知識は、このステージに必須であり、薬物が調製物において安定であることを確実にするような条件が、開発されていなければならない。薬物が不安定であることが証明された場合、投与された用量が実際にどうであったかを把握することは不可能となるため、臨床試験による結果は無効となるであろう。安定性研究は、温度、湿度、酸化、または光分解（紫外光または可視光）が、なんらかの作用を有するかどうかを試験するために行われ、調製物は、任意の分解産物が形成されたかどうかを確認するために分析される。調製物と容器との間になんらかの望ましくない相互作用が存在するかどうかを調べることもまた、重要である。プラスチック製の容器が使用される場合、成分のうちのいずれかがプラスチックに吸着されるようになるかどうか、および任意の可塑剤、滑沢剤、顔料、または安定化剤が、プラスチックから調製物中に滲出するかどうかを確認するために、試験が行われる。容器ラベルの接着剤がプラスチック製容器を通って調製物中へと滲出しないことを確認するために、それさえも試験する必要がある。薬物が製剤化される手段により、経口投与と関連する問題のうちのいくつかを回避することができる。薬物は、通常、錠剤またはカプセル剤として経口で服用される。薬物（活性物質）自体は、制御された速度で水溶液中に可溶性である必要がある。粒子サイズおよび結晶形態といった因子は、溶解に著しく影響を及ぼし得る。高速な溶解が必ずしも理想的とは限らない。例えば、緩徐な溶解速度は、作用の持続期間を延長することができるか、または初期の高血漿レベルを回避することができる。
【0283】
一部の実施形態では、免疫モジュレーション剤と共製剤化されたナノ担体（例えば、ＩＣＤプロドラッグを含むリポソームもしくはＳＬＮＰ）および／またはＩＣＤプロドラッグを含むリポソームもしくはＳＬＮＰは、単独で、または投与経路および標準的な医薬実務に応じて選択される生理学的に許容される担体（例えば、生理食塩水もしくはリン酸緩衝液）との混合物で、投与される。例えば、注射剤として使用される場合、ナノ担体は、薬学的に許容される担体を用いた滅菌懸濁液、分散液、またはエマルションとして製剤化され得る。ある特定の実施形態では、生理食塩水を、薬学的に許容される担体として利用することができる。他の好適な担体としては、例えば、水、緩衝化水、０．４％生理食塩水、０．３％グリシン、５％グルコースなどが挙げられ、これは、安定性の増強のための糖タンパク質、例えば、アルブミン、リポタンパク質、グロブリンなどを含む。食塩水または他の塩含有担体を含む組成物において、担体は、好ましくは、ナノ担体形成の後に添加される。したがって、ナノ担体が形成され、好適な薬物がロードされた後に、ナノ担体は、薬学的に許容される担体、例えば、生理食塩水中に希釈され得る。同様に、ＩＣＤプロドラッグリポソームまたはＳＬＮＰは、ナノ材料の懸濁化（例えば、乳化、希釈など）を促進する担体中に導入され得る。
【0284】
医薬組成物は、従来的な周知の滅菌技法によって、滅菌することができる。結果として得られる水溶液、懸濁液、分散液、エマルションなどは、使用のためにパッケージングされ得るか、無菌条件下において濾過され得る。ある特定の実施形態では、薬物送達ナノ担体（例えば、ＬＮＰまたはＳＬＮＰでコーティングされたナノ粒子）は、凍結乾燥され、凍結乾燥された調製物は、投与の前に滅菌水溶液と合わされる。組成物はまた、生理学的条件を微調整するために必要とされる薬学的に許容される補助物質、例えば、ｐＨ調節剤および緩衝化剤、等張剤など、例えば、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウムなどを含み得る。
【0285】
加えて、ある特定の実施形態では、医薬製剤は、フリーラジカルおよび保管時の脂質過酸化反応による損傷から脂質を保護する脂質保護剤を含み得る。親油性フリーラジカルクエンチャー、例えば、アルファ－トコフェロールおよび水溶性鉄特異的キレート剤、例えば、フェリオキサミンが、好適であり、本明細書において企図される。医薬製剤中のナノ担体（例えば、ＩＣＤプロドラッグを含むＳＬＮＰまたはリポソーム）の濃度は、広範に、例えば、およそ０．０５重量％未満、通常は少なくともおよそ２～５重量％から、１０～５０重量％まで、または４０重量％まで、または３０重量％まで、変動し得、選択される具体的な投与様式に応じて、主として、流体体積、粘度などによって選択される。例えば、濃度は、処置と関連する流体ロードを低下させるように、増加させてもよい。これは、アテローム性動脈硬化症関連のうっ血性心不全または重篤な高血圧を有する患者において、特に望ましい場合がある。あるいは、刺激性脂質から構成されるナノ担体は、投与の部位における炎症を減少させるために、低い濃度に希釈させてもよい。投与されるナノ担体の量は、使用される具体的な薬物、処置されている疾患状態、および医師の判断に依存することになるが、一般に、体重１キログラム当たりおよそ０．０１～およそ５０ｍｇ、好ましくは、体重１ｋｇ当たりおよそ０．１～およそ５ｍｇであろう。
【0286】
当業者であれば、正確な投薬量が、具体的なＩＣＤプロドラッグおよび任意の共製剤化される免疫モジュレーション剤、ならびに望ましい医薬作用、ならびに患者の因子、例えば、年齢、性別、全般的な状態などに応じて変動するであろうことを理解するであろう。当業者であれば、容易にこれらの因子を考慮に入れ、それらを使用して過度の実験を行うことなく有効な治療濃度を確立することができる。
【0287】
本明細書に記載される疾患の治癒的、寛解的、遅延的、または予防的処置におけるヒト（または非ヒト哺乳動物）への投与のために、処方医師が、最終的に、所与のヒト（または非ヒト）対象に適切な薬物の投薬量を決定し、これは、個体の年齢、体重、および応答、ならびに患者の疾患の性質および重篤性に応じて変動することが予測され得る。ある特定の実施形態では、ナノ担体によって提供される薬物の投薬量は、遊離薬物に利用されるものにほぼ等しくてもよい。しかしながら、上述のように、本明細書に記載されるナノ担体は、それによって投与される薬物の毒性を有意に低減させることができ、治療ウインドウを有意に増加させることができる。したがって、一部の場合には、遊離薬物に処方されるものを超える投薬量が、利用されることになる。
【0288】
当業者であれば、本明細書に開示される本発明の機能および目的を変更することなく、開示される実施形態に対する変動形態および改変形態を理解し、それを作製することができるであろう。そのような変動形態および改変形態は、本開示の範囲内であることが意図される。
【0289】
ＩＸ．）組合せ療法
当業者であれば認識および理解するように、がん細胞の成長および生存は、複数のシグナル伝達経路によって影響を受け得る。したがって、活性をモジュレートする標的において異なる優先度を示す異なる酵素／タンパク質／受容体阻害剤を組み合わせて、そのような状態を処置することが、有用である。１つを上回るシグナル伝達経路（または１つの所与のシグナル伝達経路に関与する１つを上回る生物学的分子）を標的とすることは、細胞集団において生じる薬物耐性の可能性を低減させ得、かつ／または処置の毒性を低減させ得る。
当業者であれば認識および理解するように、がん細胞の成長および生存は、複数のシグナル伝達経路によって影響を受け得る。したがって、活性をモジュレートする標的において異なる優先度を示す異なる酵素／タンパク質／受容体阻害剤を組み合わせて、そのような状態を処置することが、有用である。１つを上回るシグナル伝達経路（または１つの所与のシグナル伝達経路に関与する１つを上回る生物学的分子）を標的とすることは、細胞集団において生じる薬物耐性の可能性を低減させ得、かつ／または処置の毒性を低減させ得る。
【0290】
したがって、本開示のＩＣＤプロドラッグを含むリポソームまたはＳＬＮＰは、１つもしくは複数の他の酵素／タンパク質／受容体阻害剤、または疾患、例えば、がんもしくは感染症の処置のための１つもしくは複数の治療法と組み合わせて使用することができる。組合せ療法で処置することができる疾患および適応症の例としては、本開示に記載されるものが挙げられる。がんの例としては、固形腫瘍および液性腫瘍、例えば、血液がんが挙げられるが、これらに限定されない。感染症の例としては、ウイルス感染症、細菌感染症、真菌感染症、または寄生生物感染症が挙げられる。
【0291】
例えば、本開示のＩＣＤプロドラッグを含むリポソームまたはＳＬＮＰは、がんの処置のために、以下のキナーゼの１つまたは複数の阻害剤と組み合わせることができる：Ａｋｔ１、Ａｋｔ２、Ａｋｔ３、ＴＧＦ－βＲ、ＰＫＡ、ＰＫＧ、ＰＫＣ、ＣａＭ－キナーゼ、ホスホリラーゼキナーゼ、ＭＥＫＫ、ＥＲＫ、ＭＡＰＫ、ｍＴＯＲ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＨＥＲ４、ＩＮＳ－Ｒ、ＩＧＦ－１Ｒ、ＩＲ－Ｒ、ＰＤＧＦαＲ、ＰＤＧＦβＲ、ＰＩ３Ｋ（アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ）、ＣＳＦＩＲ、ＫＩＴ、ＦＬＫ－ＩＩ、ＫＤＲ／ＦＬＫ－１、ＦＬＫ－４、ｆｌｔ－１、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ｃ－Ｍｅｔ、Ｒｏｎ、Ｓｅａ、ＴＲＫＡ、ＴＲＫＢ、ＴＲＫＣ、ＴＡＭキナーゼ（Ａｘｌ、Ｍｅｒ、Ｔｙｒｏ３）、ＦＬＴ３、ＶＥＧＦＲ／Ｆｌｔ２、Ｆｌｔ４、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ４、Ｔｉｅ２、Ｓｒｃ、Ｆｙｎ、Ｌｃｋ、Ｆｇｒ、Ｂｔｋ、Ｆａｋ、ＳＹＫ、ＦＲＫ、ＪＡＫ、ＡＢＬ、ＡＬＫおよびＢ－Ｒａｆ。
【0292】
さらなる実施形態では、本開示のＩＣＤプロドラッグを含むリポソームまたはＳＬＮＰは、がんまたは感染症の処置のために、以下の阻害剤のうちの１つまたは複数と組み合わせることができる。がんおよび感染症の処置のために本開示の化合物と組み合わせることができる阻害剤の非限定的な例としては、ＦＧＦＲ阻害剤（ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、もしくはＦＧＦＲ４、例えば、ＩＮＣＢ５４８２８、ＩＮＣＢ６２０７９、およびＩＮＣＢ６３９０４）、ＪＡＫ阻害剤（ＪＡＫ１および／もしくはＪＡＫ２、例えば、ルキソリチニブ、バリシチニブ、もしくはＩＮＣＢ３９１１０）、ＩＤＯ阻害剤（例えば、エパカドスタット、ＮＬＧ９１９、もしくはＢＭＳ－９８６２０５）、ＬＳＤ１阻害剤（例えば、ＩＮＣＢ５９８７２およびＩＮＣＢ６０００３）、ＴＤＯ阻害剤、ＰＩ３Ｋ－デルタ阻害剤（例えばＩＮＣＢ５０７９７およびＩＮＣＢ５０４６５）、ＰＩ３Ｋ－ガンマ阻害剤、例えば、ＰＩ３Ｋ－ガンマ選択的阻害剤、Ｐｉｍ阻害剤（例えば、ＩＮＣＢ５３９１４）、ＣＳＦ１Ｒ阻害剤、ＴＡＭ受容体チロシンキナーゼ（Ｔｙｒｏ－３、Ａｘｌ、およびＭｅｒ）、アデノシン受容体アンタゴニスト（例えば、Ａ２ａ／Ａ２ｂ受容体アンタゴニスト）、ＨＰＫ１阻害剤、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ＨＤＡＣ）、例えば、ＨＤＡＣ８阻害剤、血管新生阻害剤、インターロイキン受容体阻害剤、ブロモおよび余剰末端ファミリーメンバー阻害剤（例えば、ブロモドメイン阻害剤もしくはＢＥＴ阻害剤、例えば、ＩＮＣＢ５４３２９およびＩＮＣＢ５７６４３）、ポリＡＤＰリボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害剤、例えば、ルカパリブ、オラパリブ、ニラパリブ、ベリパリブ、もしくはタラゾパリブ、アルギナーゼ阻害剤（ＩＮＣＢ０１１５８）、ＴＧＦｂ阻害剤、ＰＤ－１阻害剤、ＰＤ－１／Ｌ－１阻害剤、ＰＤ－１／Ｌ－２阻害剤、ＣＴＬＡ－４アンタゴニスト、ならびにアデノシン受容体アンタゴニスト、またはこれらの組合せが挙げられる。
【0293】
加えて、本開示のＩＣＤプロドラッグを含むリポソームまたはＳＬＮＰは、さらに、例えば、化学療法、放射線療法、腫瘍標的化療法、アジュバント療法、免疫療法、または外科手術による、がんを処置する他の方法と組み合わせて使用することができる。
【0294】
免疫療法の例としては、サイトカイン処置（例えば、インターフェロン、ＧＭ－ＣＳＦ、Ｇ－ＣＳＦ、ＩＬ－２）、ＣＲＳ－２０７免疫療法、がんワクチン、モノクローナル抗体、養子Ｔ細胞移入、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト、ＳＴＩＮＧアゴニスト、腫瘍溶解性ウイルス療法、および免疫モジュレーション小分子が挙げられ、これにはサリドマイドまたはＪＡＫ１／２阻害剤などが含まれる。
【0295】
ＩＣＤプロドラッグを含むリポソームまたはＳＬＮＰは、１つまたは複数の抗がん薬、例えば、化学療法薬と組み合わせて投与され得る。化学療法薬の例としては、アバレリクス、アルデスロイキン、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アルトレタミン、アナストロゾール、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、アザシチジン、ベバシズマブ、ベキサロテン、バリシチニブ、ブレオマイシン、ボルテゾンビ（bortezombi）、ボルテゾミブ、静脈内用ブスルファン、経口用ブスルファン、カルステロン、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、セツキシマブ、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、クロファラビン、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダルテパリンナトリウム、ダサチニブ、ダウノルビシン、デシタビン、デニロイキン、デニロイキンジフチトクス、デクスラゾキサン、ドセタキセル、ドキソルビシン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エクリズマブ、エピルビシン、エルロチニブ、エストラムスチン、リン酸エトポシド、エトポシド、エキセメスタン、クエン酸フェンタニル、フィルグラスチム、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、フルベストラント、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ゲムツズマブオゾガマイシン、酢酸ゴセレリン、酢酸ヒストレリン、イブリツモマブチウキセタン、イダルビシン、イホスファミド、メシル酸イマチニブ、インターフェロンアルファ２ａ、イリノテカン、ジトシル酸ラパチニブ（lapatinib ditosylate）、レナリドマイド、レトロゾール、ロイコボリン、酢酸ロイプロリド、レバミゾール、ロムスチン、メクロレタミン、酢酸メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、メトトレキサート、メトキサレン、マイトマイシンＣ、ミトタン、ミトキサントロン、フェンプロピオン酸ナンドロロン（nandrolone phenpropionate）、ネララビン、ノフェツモマブ、オラパリブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロネート、パニツムマブ、ペグアスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペメトレキセド二ナトリウム、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、プロカルバジン、キナクリン、ラスブリカーゼ、リツキシマブ、ルキソリチニブ、ルカパリブ、ソラフェニブ、ストレプトゾシン、スニチニブ、リンゴ酸スニチニブ、タモキシフェン、テモゾロミド、テニポシド、テストラクトン、サリドマイド、チオグアニン、チオテパ、トポテカン、トレミフェン、トシツモマブ、トラスツズマブ、トレチノイン、ウラシルマスタード、バルルビシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ボリノスタット、ニラパリブ、ベリパリブ、タラゾパリブ、およびゾレドロネートのうちのいずれかが挙げられる。
【0296】
他の抗がん剤としては、抗体治療薬、例えば、トラスツズマブ（ハーセプチン）、共刺激性分子に対する抗体、例えば、ＣＴＬＡ－４（例えば、イピリムマブ）、４－１ＢＢ（例えば、ウレルマブ、ウトミルマブ）、ＰＤ－１およびＰＤ－Ｌ１／Ｌ２に対する抗体、またはサイトカイン（ＩＬ－１０、ＴＧＦ－ベータなど）に対する抗体が挙げられる。
【0297】
がんまたは感染症、例えば、ウイルス、細菌、真菌、および寄生生物感染症の処置のために本開示の化合物と組み合わせることができるＰＤ－１および／またはＰＤ－Ｌ１／Ｌ２に対する抗体の例としては、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ－４７３６、およびＳＨＲ－１２１０が挙げられるが、これらに限定されない。
【0298】
加えて、本開示のＩＣＤプロドラッグを含むリポソームまたはＳＬＮＰは、疾患、例えば、がんまたは感染症の処置のために、１つまたは複数の免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて使用することができる。免疫チェックポイント阻害剤の例としては、免疫チェックポイント分子、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＣＤ１２２、ＣＤ９６、ＣＤ７３、ＣＤ４７、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＳＦ１Ｒ、ＪＡＫ、ＰＩ３Ｋデルタ、ＰＩ３Ｋガンマ、ＴＡＭ、アルギナーゼ、ＣＤ１３７（４－１ＢＢとしても公知である）、ＩＣＯＳ、Ａ２ＡＲ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ－４、ＬＡＧ３、ＴＩＭ３、ＶＩＳＴＡ、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、およびＰＤ－Ｌ２に対する阻害剤が挙げられる。
【0299】
一部の実施形態では、免疫チェックポイント分子は、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、およびＣＤ１３７から選択される刺激性チェックポイント分子である。さらなる実施形態では、免疫チェックポイント分子は、Ａ２ａＲ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ－４、ＩＤＯ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＰＤ－１、ＴＩＭ３、およびＶＩＳＴＡから選択される阻害性チェックポイント分子である。さらなる実施形態では、本明細書に提供されるＩＣＤプロドラッグを含むリポソームまたはＳＬＮＰは、ＫＩＲ阻害剤、ＴＩＧＩＴ阻害剤、ＬＡＩＲ１阻害剤、ＣＤ１６０阻害剤、２Ｂ４阻害剤、およびＴＧＦベータ（「ＴＧＦｂ」）阻害剤から選択される１つまたは複数の薬剤と組み合わせて使用することができる。
【0300】
Ｘ．）ＩＣＤプロドラッグを含むナノ担体を細胞に送達する方法
当該技術分野において公知のように、プロドラッグおよび／またはナノ担体を使用して腫瘍細胞を殺滅させるための広範な組成物および方法が、当該技術分野において公知である。がんの文脈において、典型的な方法は、腫瘍を有する哺乳動物に、生物学的に有効な量の本開示のＩＣＤプロドラッグ、および／またはＩＣＤプロドラッグを含む本開示のナノ担体を投与するステップを含む。
当該技術分野において公知のように、プロドラッグおよび／またはナノ担体を使用して腫瘍細胞を殺滅させるための広範な組成物および方法が、当該技術分野において公知である。がんの文脈において、典型的な方法は、腫瘍を有する哺乳動物に、生物学的に有効な量の本開示のＩＣＤプロドラッグ、および／またはＩＣＤプロドラッグを含む本開示のナノ担体を投与するステップを含む。
【0301】
典型的な実施形態は、治療剤を細胞に送達する方法であって、本開示の薬物部分を、連結ユニットを介して本開示の脂質にコンジュゲートすることによってＩＣＤプロドラッグを形成するステップ、および細胞をＩＣＤプロドラッグに曝露するステップを含む、方法である。
【0302】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ヒドロメチルカルバメートリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされた、薬物部分およびＣＨＥＭＳを含む。
【0303】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ヒドロメチルカルバメートリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされた、薬物部分およびステアリン酸を含む。
【0304】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ヒドラゾンリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされた、薬物部分およびステアリン酸を含む。
【0305】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、ヒドロメチルカルバメートリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされたＣＨＥＭＳを含む。
【0306】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、ヒドロメチルカルバメートリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされたステアリン酸を含む。
【0307】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、ヒドラゾンリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされたステアリン酸を含む。
【0308】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、図１に示されるように合成されたヒドラゾンリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされたステアリン酸を含む。
【0309】
別の例示的な実施形態は、転移がんを患うことが疑われる個体を処置する方法であって、前記個体に、薬物部分を連結ユニットを介して本開示の脂質にコンジュゲートすることによって産生された治療有効量のＩＣＤプロドラッグを含む医薬組成物を非経口投与するステップ、および細胞をＩＣＤプロドラッグに曝露するステップを含む、方法である。
【0310】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ヒドロメチルカルバメートリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされた、薬物部分およびＣＨＥＭＳを含む。
【0311】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ヒドロメチルカルバメートリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされた、薬物部分およびステアリン酸を含む。
【0312】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ヒドラゾンリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされた、薬物部分およびステアリン酸を含む。
【0313】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、ヒドロメチルカルバメートリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされたＣＨＥＭＳを含む。
【0314】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、ヒドロメチルカルバメートリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされたステアリン酸を含む。
【0315】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、ヒドラゾンリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされたステアリン酸を含む。
【0316】
一実施形態では、ＩＣＤプロドラッグは、ＩＣ１プロドラッグを含み、脂質部分は、図１に示されるように合成されたヒドラゾンリンカーを含むＬＵを介してコンジュゲートされたステアリン酸を含む。
【0317】
本開示のＩＣＤプロドラッグ、ＳＬＮＰ、リポソーム、共製剤化されたリポソーム、および共製剤化されたＳＬＮＰは、免疫原性細胞死を誘導し、したがって、ＩＣＤ活性と関連する疾患および障害ならびにＤＡＭＰタンパク質分泌と関連する疾患および障害を処置するのに有用である。本開示のさらなる実施形態では、ＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、またはその薬学的に許容される塩もしくは立体異性体は、がん、慢性感染症、または敗血症において、ワクチン接種に対する応答の増強を含め、免疫を増強、刺激、および／または増加させるための治療的投与に有用である。
【0318】
さらなる実施形態では、本開示は、細胞においてＩＣＤを誘導するための方法を提供する。本方法は、個体または患者に、ＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、ならびに／または本明細書に記載される式のうちのいずれかのもの（例えば、ＩＣ１および／もしくはＩＣ１プロドラッグ）、または特許請求のいずれかにおいて列挙され本明細書に記載されるＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、およびナノカプセル封入されたＩＣＤ誘導剤プロドラッグ、またはその薬学的に許容される塩もしくは立体異性体を投与するステップを含む。本開示のＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、およびナノカプセル封入されたＩＣＤ誘導剤プロドラッグは、単独で、またはがんおよび他の疾患を含む疾患もしくは障害の処置のための他の薬剤もしくは治療法もしくはアジュバントもしくはネオアジュバントと組み合わせて、使用することができる。本明細書に記載される使用および方法に関して、本開示のＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、およびナノカプセル封入されたＩＣＤプロドラッグのうちのいずれかが、その実施形態のうちのいずれかを含め、使用され得る。
【0319】
加えて、本開示のＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、およびナノカプセル封入されたＩＣＤプロドラッグは、ＩＣＤおよび／またはＴ細胞機能を誘導し、ＤＡＭＰタンパク質分泌をもたらす。
【0320】
さらなる実施形態では、本開示は、がん性腫瘍の成長が阻害されるように、ＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、およびナノカプセル封入されたＩＣＤプロドラッグ、またはその塩もしくは立体異性体を使用した、ｉｎ ｖｉｖｏでの個体または患者の処置を提供する。
【0321】
ＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、およびナノカプセル封入されたＩＣＤプロドラッグ、または本明細書に記載される式のうちのいずれかのもの（例えば、ＩＣ１プロドラッグ）、または特許請求の範囲のうちのいずれかに列挙され本明細書に記載されるＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、およびナノカプセル封入されたＩＣＤプロドラッグ、またはその塩もしくは立体異性体は、がん性腫瘍の成長を阻害するために使用することができる。
【0322】
代替法において、本開示のＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、およびナノカプセル封入されたＩＣＤプロドラッグ、または本明細書に記載される式のうちのいずれかのもの、または特許請求の範囲のうちのいずれかに列挙され本明細書に記載される化合物（例えば、ＩＣ１プロドラッグ）、またはその塩もしくは立体異性体は、本開示に記載されるように、他の薬剤または標準的ながん処置とともに使用することができる。
【0323】
さらなる実施形態では、本開示は、腫瘍細胞の成長をｉｎ ｖｉｔｒｏで阻害するための方法を提供する。本方法は、腫瘍細胞を、ｉｎ ｖｉｔｒｏで、本開示のＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、およびナノカプセル封入されたＩＣＤプロドラッグ、または本明細書に記載される式のうちのいずれかのもの（例えば、ＩＣ１プロドラッグ）、または特許請求の範囲のうちのいずれかにおいて列挙され本明細書に記載されるＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、およびナノカプセル封入されたＩＣＤプロドラッグ、またはその塩もしくは立体異性体と接触させるステップを含む。
【0324】
さらなる実施形態では、本開示は、患者において腫瘍細胞の成長を阻害するための方法を提供する。本方法は、腫瘍細胞を、本開示のＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、およびナノカプセル封入されたＩＣＤプロドラッグ、または本明細書に記載される式のうちのいずれかのもの（例えば、ＩＣ１プロドラッグ）、または特許請求の範囲のうちのいずれかにおいて列挙され本明細書に記載されるＩＣＤプロドラッグ、リポソーム、ＳＬＮＰ、およびナノカプセル封入されたＩＣＤプロドラッグ、またはその塩もしくは立体異性体と接触させるステップを含む。
【0325】
ＸＩ．）がんおよび他の免疫学的障害を処置する方法
本開示の別の実施形態は、がんを処置するための方法である。本方法は、患者に、治療有効量の本明細書におけるＩＣＤプロドラッグ（すなわち、ＩＣ１プロドラッグ）を含むナノ担体、特許請求の範囲のうちのいずれかに列挙され本明細書に記載される化合物、またはその塩を投与するステップを含む。がんの例としては、その成長が本開示のＩＣＤ誘導剤および本開示のＩＣＤプロドラッグを使用して媒介され得るもの、ならびに典型的に免疫療法に応答性であるがんが挙げられる。
本開示の別の実施形態は、がんを処置するための方法である。本方法は、患者に、治療有効量の本明細書におけるＩＣＤプロドラッグ（すなわち、ＩＣ１プロドラッグ）を含むナノ担体、特許請求の範囲のうちのいずれかに列挙され本明細書に記載される化合物、またはその塩を投与するステップを含む。がんの例としては、その成長が本開示のＩＣＤ誘導剤および本開示のＩＣＤプロドラッグを使用して媒介され得るもの、ならびに典型的に免疫療法に応答性であるがんが挙げられる。
【0326】
一部の実施形態では、本開示は、患者における免疫応答を増強、刺激、および／または増加させる方法を提供する。本方法は、患者に、治療有効量のＩＣＤプロドラッグおよび／またはそれ（すなわち、ＩＣ１プロドラッグ）を含むリポソームもしくはＳＬＮＰ、特許請求の範囲のうちのいずれかにおいて列挙され本明細書に記載される化合物もしくは組成物、またはその塩を投与するステップを含む。
【0327】
本開示のＩＣＤプロドラッグを含むナノ担体、ＩＣＤプロドラッグ、および共製剤化されたリポソームまたはＳＬＮＰを使用して処置することができるがんの非限定的な例としては、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部のがん、皮膚または眼内の悪性黒色腫、子宮がん、卵巣がん、直腸がん、肛門領域のがん、胃がん、精巣がん、子宮がん、卵管の癌腫、子宮内膜の癌腫、子宮内膜がん、子宮頸の癌腫、膣の癌腫、外陰部の癌腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、食道のがん、小腸のがん、内分泌系のがん、甲状腺のがん、副甲状腺のがん、副腎のがん、軟部組織の肉腫、尿道のがん、陰茎のがん、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ球性白血病を含む慢性または急性白血病、小児の固形腫瘍、リンパ球性リンパ腫、膀胱のがん、腎臓または尿管のがん、腎盂の癌腫、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管新生、脊椎軸腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、表皮がん、扁平上皮細胞がん、Ｔ細胞性リンパ腫、アスベストによって誘導されるものを含む環境に誘導されるがん、ならびに前記がんの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。本開示の化合物はまた、転移性がん、特に、ＩＣＤを誘導することによって媒介される転移性がんの処置に有用である。
【0328】
一部の実施形態では、本開示のリポソーム、ＳＬＮＰ、またはＩＣＤプロドラッグで処置することができるがんとしては、黒色腫（例えば、転移性悪性黒色腫）、腎臓がん（例えば、明細胞癌）、前立腺がん（例えば、ホルモン不応性前立腺腺癌）、乳がん、結腸がん、肺がん（例えば、非小細胞肺がんおよび小細胞肺がん）、扁平上皮細胞頭頸部がん、尿路上皮がん（例えば、膀胱）、ならびに高いマイクロサテライト不安定性（ＭＳＩｈｉｇｈ）を有するがんが挙げられる。加えて、本開示は、その成長を本開示のリポソーム、ＳＬＮＰ、もしくはＩＣＤプロドラッグ、または共製剤化されたリポソームもしくはＳＬＮＰを使用して阻害することができる難治性または再発性悪性腫瘍を含む。
【0329】
追加の実施形態では、本開示の製剤化および／または共製剤化されたリポソームもしくはＳＬＮＰ、またはＩＣＤプロドラッグを使用して処置することができるがんとしては、固形腫瘍（例えば、前立腺がん、結腸がん、食道がん、子宮内膜がん、卵巣がん、子宮がん、腎臓がん、肝臓がん、膵臓がん、胃がん、乳がん、肺がん、頭頸部のがん、甲状腺がん、神経膠芽腫、肉腫、膀胱がんなど）、造血がん（例えば、リンパ腫、白血病、例えば、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ＤＬＢＣＬ、マントル細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫（再発性もしくは難治性ＮＨＬおよび再発性濾胞性を含む）、ホジキンリンパ腫または多発性骨髄腫）、ならびに前記がんの組合せが挙げられるが、これらに限定されない。
【0330】
さらなる実施形態では、本開示の製剤化および／または共製剤化されたリポソーム、ＳＬＮＰ、またはＩＣＤプロドラッグを使用して処置することができるがんとしては、胆管癌、胆管がん、トリプルネガティブ乳がん、横紋筋肉腫、小細胞肺がん、平滑筋肉腫、肝細胞癌、ユーイング肉腫、脳がん、脳腫瘍、星状細胞腫、神経芽細胞腫、神経線維腫、基底細胞癌、軟骨肉腫、類上皮肉腫、目のがん、卵管がん、消化管がん、消化管間質腫瘍、有毛細胞性白血病、腸のがん、膵島細胞がん、口腔がん、口がん、咽頭がん、喉頭がん、口唇がん、中皮腫、頸部がん、鼻腔がん、眼がん、眼内黒色腫、骨盤がん、直腸がん、腎細胞癌、唾液腺がん、鼻のがん、脊髄がん、舌がん、管状癌腫、尿道がん、および尿管がんが挙げられるが、これらに限定されない。
【0331】
加えて、一部の実施形態では、本開示の製剤化および／または共製剤化されたリポソーム、ＳＬＮＰ、またはＩＣＤプロドラッグは、鎌状細胞疾患および鎌状細胞性貧血を処置するために使用することができる。
【0332】
さらに、一部の実施形態では、本開示の製剤化および／または共製剤化されたリポソーム、ＳＬＮＰ、またはＩＣＤプロドラッグを使用して処置することができる疾患および適応症としては、造血がん、肉腫、肺がん、消化管がん、泌尿生殖管がん、肝臓がん、骨がん、神経系がん、婦人科系がん、および皮膚がんが挙げられるが、これらに限定されない。
【0333】
例示的な造血がんとしては、リンパ腫および白血病、例えば、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性前骨髄球性白血病（ＡＰＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、マントル細胞性リンパ腫、非ホジキンリンパ腫（再発性または難治性ＮＨＬおよび再発性濾胞性を含む）、ホジキンリンパ腫、骨髄増殖性疾患（例えば、原発性骨髄線維症（ＰＭＦ）、真性赤血球増加症（ＰＶ）、および本態性血小板増加症（ＥＴ））、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、Ｔ細胞性急性リンパ芽球性リンパ腫（Ｔ－ＡＬＬ）、ならびに多発性骨髄腫（ＭＭ）が挙げられる。
【0334】
例示的な肉腫としては、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、横紋筋肉腫、血管肉腫、線維肉腫、脂肪肉腫、粘液腫、横紋筋腫、横紋肉腫、線維腫、脂肪腫、過誤腫（harmatoma）、および奇形腫が挙げられる。
【0335】
例示的な肺がんとしては、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、小細胞肺がん、気管支癌（扁平上皮細胞、未分化小細胞、未分化大細胞、腺癌）、肺胞（細気管支）癌、気管支腺腫、軟骨性過誤腫、および中皮腫が挙げられる。
【0336】
例示的な消化管がんとしては、食道（扁平上皮細胞癌、腺癌、平滑筋肉腫、リンパ腫）、胃（癌腫、リンパ腫、平滑筋肉腫）、膵臓（膵管腺癌、インスリノーマ、グルカゴノーマ、ガストリノーマ、カルチノイド腫瘍、ビポーマ）、小腸（腺癌、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポジ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫、神経線維腫、線維腫）、大腸（腺癌、管状腺腫、絨毛腺腫、過誤腫、平滑筋腫）、および結腸直腸がんが挙げられる。
【0337】
例示的な泌尿生殖管がんとしては、腎臓（腺癌、ウィルムス腫瘍［腎芽細胞腫］）、膀胱および尿道（扁平上皮細胞癌、移行上皮癌、腺癌）、前立腺（腺癌、肉腫）、ならびに精巣（セミノーマ、奇形腫、胎児性癌、奇形癌、絨毛腫、肉腫、間質細胞癌、線維腫、線維腺腫、類腺腫瘍、脂肪腫）が挙げられる。
【0338】
例示的な肝臓がんとしては、肝臓癌（肝細胞癌）、胆管癌、肝芽腫、血管肉腫、肝細胞腺腫、および血管腫が挙げられる。
【0339】
例示的な骨がんとしては、例えば、骨原性肉腫（骨肉腫）、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性リンパ腫（細網細胞肉腫）、多発性骨髄腫、悪性巨細胞腫 脊索腫、オステオクロンフローマ（osteochronfroma）（骨軟骨性外骨腫）、良性軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫、類骨骨腫、および巨細胞腫瘍が挙げられる。
【0340】
例示的な神経系がんとしては、頭蓋（骨腫、血管腫、肉芽腫、黄色腫、変形性骨炎）、髄膜（髄膜腫、髄膜肉腫、神経膠腫症）、脳（星状細胞腫、髄芽腫（meduoblastoma）、神経膠腫、上衣腫、胚細胞腫（松果体腫）、神経膠芽腫、多型膠芽細胞腫、乏突起神経膠腫、神経鞘腫、網膜芽細胞腫、先天性腫瘍）、および脊髄（神経線維腫、髄膜腫、神経膠腫、肉腫）、ならびに神経芽細胞腫およびレルミット・ダクロス病が挙げられる。
【0341】
例示的な婦人科系がんとしては、子宮（子宮内膜癌）、子宮頸（子宮頸癌、前癌性子宮頸部異形成）、卵巣（卵巣癌（漿液性嚢胞腺癌、粘液性嚢胞腺癌、未分類の癌腫）、顆粒膜－莢膜細胞腫瘍、セルトリ・ライディッヒ細胞腫瘍、未分化胚細胞腫、悪性奇形腫）、外陰部（扁平上皮細胞癌、上皮内癌、腺癌、線維肉腫、黒色腫）、膣（明細胞癌、扁平上皮細胞癌、ブドウ状肉腫（胎児性横紋筋肉腫）、および卵管（癌腫）が挙げられる。
【0342】
例示的な皮膚がんとしては、黒色腫、基底細胞癌、扁平上皮細胞癌、カポジ肉腫、異形成母斑、脂肪腫、血管腫、皮膚線維腫、およびケロイドが挙げられる。一部の実施形態では、本開示の化合物を使用して処置することができる疾患および適応症としては、鎌状細胞疾患（例えば、鎌状細胞性貧血）、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）、骨髄異形成症候群、精巣がん、胆管がん、食道がん、および尿路上皮癌が挙げられるが、これらに限定されない。
【0343】
加えて、本開示の製剤化および／または共製剤化されたリポソーム、ＳＬＮＰ、またはＩＣＤプロドラッグによりＩＣＤを誘導する化合物はまた、感染症、例えば、ウイルス、細菌、真菌、および寄生生物感染症を処置するために使用することもできる。
【0344】
本開示は、感染症、例えば、ウイルス感染症を処置するための方法を提供する。本方法は、患者に、治療有効量の製剤化および／もしくは共製剤化されたリポソーム、ＳＬＮＰ、もしくはＩＣＤプロドラッグ、または特許請求の範囲のうちのいずれかにおいて列挙され本明細書に記載される本明細書に記載される式のうちのいずれかのもの（すなわち、ＩＣ１プロドラッグ）、またはその塩を投与するステップを含む。
【0345】
本開示の方法によって処置することができる感染症を引き起こすウイルスの例としては、ヒト免疫不全ウイルス、ヒトパピローマウイルス、インフルエンザ、Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、またはＤ型肝炎ウイルス、アデノウイルス、ポックスウイルス、単純ヘルペスウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、重症急性呼吸器症候群ウイルス、エボラウイルス、および麻疹ウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。一部の実施形態では、本開示の方法によって処置することができる感染症を引き起こすウイルスとしては、肝炎（Ａ型、Ｂ型、またはＣ型）、ヘルペスウイルス（例えば、ＶＺＶ、ＨＳＶ－１、ＨＡＶ－６、ＨＳＶ－ＩＩ、およびＣＭＶ、エプスタインバーウイルス）、アデノウイルス、インフルエンザウイルス、フラビウイルス、エコーウイルス、ライノウイルス、コクサッキーウイルス、コロナウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス、ロタウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、パルボウイルス、ワクシニアウイルス、ＨＴＬＶウイルス、デング熱ウイルス、パピローマウイルス、伝染性軟属腫ウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、ＪＣウイルス、ならびにアルボウイルス脳炎ウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。
【0346】
加えて、本開示は、細菌感染症を処置するための方法を提供する。本方法は、患者に、治療有効量の製剤化および／または共製剤化されたリポソーム、ＳＬＮＰ、もしくはＩＣＤプロドラッグ、または特許請求の範囲のうちのいずれかにおいて列挙され本明細書に記載される本明細書に記載される式のうちのいずれかのもの（すなわち、ＩＣ１プロドラッグ）、またはその塩を投与するステップを含む。
【0347】
本開示の方法によって処置することができる感染症を引き起こす病原性細菌の例としては、クラミジア、リケッチア菌、マイコバクテリウム属、ブドウ球菌、連鎖球菌、肺炎球菌、髄膜炎菌、およびコノコッカス（conococci）、クレブシエラ属、プロテウス属、セラチア属、シュードモナス属、レジオネラ属、ジフテリア、サルモネラ属、桿菌、コレラ、破傷風、ボツリヌス毒、炭疽菌、ペスト、レプトスピラ、およびライム病菌が挙げられるが、これらに限定されない。
【0348】
加えて、本開示は、真菌感染症を処置するための方法を提供する。本方法は、患者に、治療有効量の製剤化および／または共製剤化されたリポソーム、ＳＬＮＰ、もしくはＩＣＤプロドラッグ、または特許請求の範囲のうちのいずれかにおいて列挙され本明細書に記載される本明細書に記載される式のうちのいずれかのもの（すなわち、ＩＣ１プロドラッグ）、またはその塩を投与するステップを含む。
【0349】
本開示の方法によって処置することができる感染症を引き起こす病原性真菌の例としては、カンジダ（ａｌｂｉｃａｎｓ、ｋｒｕｓｅｉ、ｇｌａｂｒａｔａ、ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓなど）、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ（ｆｕｍｉｇａｔｕｓ、Ｎｉｇｅｒなど）、Ｇｅｎｕｓ Ｍｕｃｏｒａｌｅｓ（Ｍｕｃｏｒ、ａｂｓｉｄｉａ、ｒｈｉｚｏｐｈｕｓ）、Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ ｓｃｈｅｎｋｉｉ、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ、Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｉｍｍｉｔｉｓ、およびＨｉｓｔｏｐｌａｓｍａ ｃａｐｓｕｌａｔｕｍが挙げられるが、これらに限定されない。
【0350】
加えて、本開示は、寄生生物感染症を処置するための方法を提供する。本方法は、患者に、治療有効量の製剤化および／または共製剤化されたリポソーム、ＳＬＮＰ、もしくはＩＣＤプロドラッグ、または特許請求の範囲のうちのいずれかにおいて列挙され本明細書に記載される本明細書に記載される式のうちのいずれかのもの（すなわち、ＩＣ１プロドラッグ）、またはその塩を投与するステップを含む。
【0351】
本開示の方法によって処置することができる感染症を引き起こす病原性寄生生物の例としては、Ｅｎｔａｍｏｅｂａ ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ、Ｂａｌａｎｔｉｄｉｕｍ ｃｏｌｉ、Ｎａｅｇｌｅｒｉａｆｏｗｌｅｒｉ、Ａｃａｎｔｈａｍｏｅｂａ ｓｐ．、Ｇｉａｒｄｉａ ｌａｍｂｉａ、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｓｐ．、Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｃａｒｉｎｉｉ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｖｉｖａｘ、Ｂａｂｅｓｉａ ｍｉｃｒｏｔｉ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｄｏｎｏｖａｎｉ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉ、およびＮｉｐｐｏｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓが挙げられるが、これらに限定されない。
【0352】
本開示の範囲内である実施形態のさらなるセットでは、製剤化および／または共製剤化されたリポソーム、ナノ担体、ＳＬＮＰ、またはＩＣＤプロドラッグ、または本明細書に記載される式のうちのいずれかのもの（すなわち、ＩＣ１プロドラッグ）は、本開示において言及される疾患のうちのいずれかの予防またはそれを発症する危険性の低減、例えば、疾患、状態、または障害の素因を有し得るが、疾患の病態または症状を依然として経験しておらず示してもいない個体における疾患、状態、または障害の予防またはそれを発症する危険性の低減に、有用である。
【0353】
一実施形態では、本明細書に記載される方法は、ＬＮＰ－ＩＣ１および／または治療有効量のＬＮＰ－ＩＣ１を含む。
【0354】
一実施形態では、本明細書に記載される方法は、ＳＬＮＰ－ＩＣ１および／または治療有効量のＳＬＮＰ－ＩＣ１を含む。
【0355】
一実施形態では、本明細書に記載される方法は、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２および／または治療有効量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２を含む。
【0356】
一実施形態では、本明細書に記載される方法は、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤおよび／または治療有効量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤを含む。
【0357】
ＸＩＩ．）キット／製造物品
本明細書に記載される研究室、予後診断、予防、診断、および治療用途での使用に関して、キットは、本発明の範囲内である。そのようなキットは、例えば、本明細書に記載される使用など、使用の説明書を含むラベルまたは添付文書とともに、それぞれの容器が本方法において使用しようとする別個のエレメントのうちの１つを含む、１つまたは複数の容器、例えば、バイアル、チューブなどを受容するようにコンパートメント化された、担体、パッケージ、または容器を含み得る。例えば、容器は、検出可能に標識されているかまたは標識することができる、および／または本開示のＩＣＤプロドラッグがロードされた、製剤化および／または共製剤化されたリポソームを、含み得る。キットは、薬物ユニットを含む容器を含み得る。キットは、製剤化および／または共製剤化されたナノ担体、リポソーム、ＳＬＮＰ、および／またはＩＣＤプロドラッグのすべてまたは一部を含み得る。
本明細書に記載される研究室、予後診断、予防、診断、および治療用途での使用に関して、キットは、本発明の範囲内である。そのようなキットは、例えば、本明細書に記載される使用など、使用の説明書を含むラベルまたは添付文書とともに、それぞれの容器が本方法において使用しようとする別個のエレメントのうちの１つを含む、１つまたは複数の容器、例えば、バイアル、チューブなどを受容するようにコンパートメント化された、担体、パッケージ、または容器を含み得る。例えば、容器は、検出可能に標識されているかまたは標識することができる、および／または本開示のＩＣＤプロドラッグがロードされた、製剤化および／または共製剤化されたリポソームを、含み得る。キットは、薬物ユニットを含む容器を含み得る。キットは、製剤化および／または共製剤化されたナノ担体、リポソーム、ＳＬＮＰ、および／またはＩＣＤプロドラッグのすべてまたは一部を含み得る。
【0358】
本発明のキットは、典型的には、前述の容器、ならびに商業的および使用者の観点から望ましい緩衝化剤、希釈剤、フィルター、ニードル、シリンジを含む材料を含むそれと関連する１つまたは複数の他の容器、内容物および／または使用のための説明書を示す担体、パッケージ、容器、バイアル、および／またはチューブのラベル、ならびに使用のための説明書を有する添付文書を含む。
【0359】
ラベルは、組成物が、特定の治療法または非治療的適用、例えば、予後診断、予防、診断、もしくは研究室用途に使用されることを示すために容器上またはそれに付随して存在してもよく、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏのいずれかでの使用、例えば、本明細書に記載されるもののための案内を示し得る。案内およびまたは他の情報はまた、キットとともにまたはそれに含まれる添付文書またはラベルに含まれてもよい。ラベルは、容器上にあってもよく、それに付随してもよい。ラベルは、ラベルを形成する文字、数字、または他の特徴が容器自体に成形またはエッチングされている場合には容器上にあり、ラベルは、それが容器も保持する入れ物または運搬体内に存在する場合には、例えば、添付文書として、容器に付随し得る。ラベルは、組成物が、状態、例えば、がんまたは他の免疫学的障害を診断、処置、予防、または予後診断するために使用されることを示し得る。
【0360】
「キット」および「製造物品」という用語は、同義として使用され得る。
【0361】
本発明の別の実施形態では、組成物を含む製造物品、例えば、製剤化および／または共製剤化されたナノ担体、リポソーム、ＳＬＮＰ、および／またはＩＣＤプロドラッグは、本開示の範囲内である。製造物品は、典型的には、少なくとも１つの容器および少なくとも１つのラベルを含む。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、および試験管が挙げられる。容器は、ガラス、金属、またはプラスチックなどの様々な材料から形成することができる。容器は、ＩＣＤプロドラッグがロードされた製剤化および／または共製剤化されたリポソームを保持することができる。
【0362】
容器は、代替的に、状態の処置、診断、予後診断、または予防に有効である組成物を保持することができ、滅菌のアクセスポートを有し得る（例えば、容器は、皮下注射用ニードルによって穿刺可能なストッパーを有する静注バッグまたはバイアルであり得る）。組成物中の活性剤は、ＩＣＤプロドラッグおよび／または本明細書に開示されるＩＣＤプロドラッグがロードされた製剤化および／または共製剤化されたナノ担体、リポソーム、またはＳＬＮＰであり得る。
【0363】
製造物品は、薬学的に許容される緩衝液、例えば、リン酸緩衝食塩水、リンガー溶液、および／またはデキストロース溶液を含む第２の容器をさらに含み得る。それは、他の緩衝化剤、希釈剤、フィルター、撹拌子、ニードル、シリンジ、ならびに／または使用のための指示書および／もしくは説明を含む添付文書を含め、商業上および使用者の観点から望ましい他の材料をさらに含み得る。
【0364】
一実施形態では、キットまたは製造物品は、ＬＮＰ－ＩＣ１および／または治療有効量のＬＮＰ－ＩＣ１を含む。
【0365】
一実施形態では、キットまたは製造物品は、ＳＬＮＰ－ＩＣ１および／または治療有効量のＳＬＮＰ－ＩＣ１を含む。
【0366】
一実施形態では、キットまたは製造物品は、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２および／または治療有効量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２を含む。
【0367】
一実施形態では、キットまたは製造物品は、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤおよび／または治療有効量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤを含む。
【0368】
例示的な実施形態
１）ＩＣＤプロドラッグ組成物であって、
（ｉ）薬物部分と、
（ｉｉ）脂質部分と、
（ｉｉｉ）連結ユニット（「ＬＵ」）と
を含み、
薬物部分が、ＩＣＤを誘導する薬剤を含み、ＬＵが、薬物部分を脂質部分にコンジュゲートする、
ＩＣＤプロドラッグ組成物。
２）薬物部分が、ＩＣ１として記載される化学構造を含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
３）ＬＵが、ヒドラゾンリンカーである、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
４）脂質部分が、表Ｉに記載される脂質を含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
５）脂質部分が、表ＩＩＩに記載される脂質を含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
６）脂質部分が、ＣＨＥＭＳを含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
７）脂質部分が、ステアリン酸を含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
８）脂質部分が、ステアリン酸を含み、ヒドラゾンをさらに含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
９）薬物部分が、ＩＣ１として記載される化学構造を含み、脂質部分が、ステアリン酸を含み、化合物が、以下の化学構造：
を有する、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
１０）ＩＣＤプロドラッグ組成物であって、
（ｉ）ＩＣ１を含む、薬物部分と、
（ｉｉ）ＣＨＥＭＳを含む、脂質部分と、
（ｉｉｉ）ヒドロメチルカルバメートリンカーを含む、ＬＵと
を含む、ＩＣＤプロドラッグ組成物。
１１）ＩＣＤプロドラッグ組成物であって、
（ｉ）ＩＣ１を含む、薬物部分と、
（ｉｉ）ステアリン酸を含む、脂質部分と、
（ｉｉｉ）ヒドラゾンリンカーを含む、ＬＵと
を含む、ＩＣＤプロドラッグ組成物。
１２）以下の化学構造：
を有する、請求項１１に記載のＩＣＤプロドラッグ組成物。
１３）ＩＣＤプロドラッグを含むナノ担体であって、ＬＵの切断後に免疫原性細胞死（ＩＣＤ）を誘導する薬剤を放出する、ナノ担体。
１４）ＬＵが、ヒドラゾンリンカーである、請求項１３に記載のナノ担体。
１５）表ＩＩに記載されるヘルパー脂質をさらに含む、請求項１３に記載のナノ担体。
１６）ＩＣＤプロドラッグが、ＩＣ１を含む、請求項１３に記載のナノ担体。
１７）リポソームである、請求項１３に記載のナノ担体。
１８）ＩＣＤプロドラッグがＩＣ１を含み、ＬＮＰ－ＩＣ１と称される、請求項１７に記載のリポソーム。
１９）リポソームが、さらに、１つまたは複数の免疫モジュレーション剤またはその脂質プロドラッグと共製剤化され、免疫モジュレーション剤が、免疫原性細胞死を誘導する化学療法薬、ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＣＴＬＡ－４阻害剤、ＩＤＯ阻害剤、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１阻害剤、ＣＤ１Ｄアゴニスト、Ａ２ａＲ阻害剤、および／またはこれらのプロドラッグからなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
２０）リポソームが、さらに、ＩＣＤを誘導する化学療法薬と共製剤化され、ＩＣＤを誘導する化学療法薬が、ＤＯＸ、ＭＴＯ、ＯＸＡ、ＣＰ、ボルテゾミブ、カーフィルジミブ、またはパクリタキセルからなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
２１）ＯＸＡをさらに含む、請求項１８に記載のリポソーム。
２２）ＭＴＯをさらに含む、請求項１８に記載のリポソーム。
２３）ＯＸＡをさらに含む、請求項２０に記載のリポソーム。
２４）ＭＴＯをさらに含む、請求項２０に記載のリポソーム。
２５）リポソームが、さらに、ｔｏｌｌ受容体アゴニストまたはその脂質プロドラッグと共製剤化され、ｔｏｌｌ受容体アゴニストが、レシキモド（Ｒ８４８）、ガーディキモド、８５２Ａ、ＤＳＲ ６４３４、テルラトリモド、ＣＵ－Ｔ１２－９、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬＡ）、３Ｄ（６－アシル）－ＰＨＡＤ（登録商標）、ＳＭＵ１２７、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、ＴＲ５、ＴＲ６、ＴＲ３、ＴＲ１２、または３Ｄ－ＰＨＡＤ（登録商標）からなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
２６）リポソームが、さらに、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストまたはその脂質プロドラッグと共製剤化され、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストが、ＡＵＮＰ１２、ＣＡ－１７０、ＰＤ３、またはＢＭＳ－９８６１８９からなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
２７）リポソームが、さらに、ＴＧＦｂアンタゴニストと共製剤化され、ＴＧＦｂアンタゴニストが、ＴＢ４からなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
２８）リポソームが、さらに、ＩＤＯ阻害剤と共製剤化され、ＩＤＯ阻害剤が、ＩＤ３からなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
２９）リポソームが、さらに、Ａ２ａＲアンタゴニストと共製剤化され、Ａ２ａＲアンタゴニストが、ＡＲ１、ＡＲ２、ＡＲ３、ＡＲ４、またはＡＲ５からなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
３０）請求項１３～１７のいずれか一項に記載のナノ担体を含む、キット。
３１）請求項１８～２９のいずれか一項に記載のリポソームを含む、キット。
３２）固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）である、請求項１３に記載のナノ担体。
３３）固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）である、請求項１６に記載のナノ担体。
３４）ＩＣＤプロドラッグがＩＣ１を含み、ＳＬＮＰ－ＩＣ１と称される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
３５）ＳＬＮＰ－ＩＣ１と称される、請求項３３に記載のナノ担体。
３６）ＳＬＮＰが、さらに、１つまたは複数の免疫モジュレーション剤またはその脂質プロドラッグと共製剤化され、免疫モジュレーション剤が、免疫原性細胞死を誘導する化学療法薬、ｔｏｌｌ受容体アゴニスト、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＣＴＬＡ－４阻害剤、ＩＤＯ阻害剤、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１阻害剤、ＣＤ１Ｄアゴニスト、および／またはこれらのプロドラッグからなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
３７）ＳＬＮＰが、さらに、ＩＣＤを誘導する化学療法薬と共製剤化され、ＩＣＤを誘導する化学療法薬が、ＤＯＸ、ＭＴＯ、ＯＸＡ、ＣＰ、ボルテゾミブ、カーフィルジミブ、またはパクリタキセルからなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
３８）ＯＸＡをさらに含む、請求項３１に記載のＳＬＮＰ。
３９）ＭＴＯをさらに含む、請求項３１に記載のＳＬＮＰ。
４０）ＯＸＡをさらに含む、請求項３３に記載のＳＬＮＰ。
４１）ＭＴＯをさらに含む、請求項３３に記載のＳＬＮＰ。
４２）リポソームが、さらに、ｔｏｌｌ受容体アゴニストまたはその脂質プロドラッグと共製剤化され、ｔｏｌｌ受容体アゴニストが、レシキモド（Ｒ８４８）、ガーディキモド、８５２Ａ、ＤＳＲ ６４３４、テルラトリモド、ＣＵ－Ｔ１２－９、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬＡ）、３Ｄ（６－アシル）－ＰＨＡＤ（登録商標）、ＳＭＵ１２７、ＴＲ１２、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、または３Ｄ－ＰＨＡＤ（登録商標）からなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
４３）リポソームが、さらに、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストまたはその脂質プロドラッグと共製剤化され、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストが、ＡＵＮＰ１２、ＣＡ－１７０、またはＢＭＳ－９８６１８９からなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
４４）ＳＬＮＰが、さらに、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストまたはその脂質プロドラッグと共製剤化され、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストが、ＡＵＮＰ１２、ＣＡ－１７０、ＰＤ３、またはＢＭＳ－９８６１８９からなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
４５）ＳＬＮＰが、さらに、ＴＧＦｂアンタゴニストと共製剤化され、ＴＧＦｂアンタゴニストが、ＴＢ４からなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
４６）ＳＬＮＰが、さらに、ＩＤＯ阻害剤と共製剤化され、ＩＤＯ阻害剤が、ＩＤ３からなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
４７）ＳＬＮＰが、さらに、Ａ２ａＲアンタゴニストと共製剤化され、Ａ２ａＲアンタゴニストが、ＡＲ１、ＡＲ２、ＡＲ３、ＡＲ４、またはＡＲ５からなる群から選択される、請求項１２に記載のＳＬＮＰ。
４８）請求項３２～４７のいずれか一項に記載のＳＬＮＰを含む、キット。
４９）がんに罹患しているかまたはがんと診断された対象を処置する方法であって、
（ｉ）そのような処置を必要とする対象に、有効量のナノ担体を投与するステップであって、ナノ担体が、ＩＣＤプロドラッグを含む、ステップ、および
（ｉｉ）その薬学的に許容される塩
を含む、方法。
５０）ＩＣＤプロドラッグが、ＩＣ１プロドラッグを含む、請求項４９に記載の方法。
５１）ナノ担体が、さらにｔｏｌｌ様受容体と共製剤化されたＩＣ１プロドラッグを含む、請求項４９に記載の方法。
５２）ナノ担体が、さらに免疫モジュレーション剤と共製剤化されたＩＣ１プロドラッグを含む、請求項４９に記載の方法。
５３）ナノ担体が、リポソームである、請求項４９に記載の方法。
５４）リポソームが、ＬＮＰ－ＩＣ１である、請求項４９に記載の方法。
５５）ナノ担体が、固体脂質ナノ粒子である、請求項４９に記載の方法。
５６）ＳＬＮＰが、ＳＬＮＰ－ＩＣ１である、請求項５５に記載の方法。
５７）ＳＬＮＰ－ＩＣ１が、ＰＤ－１抗体、ＣＴＬＡ４抗体、または免疫原性細胞死を誘導する化学療法薬（例えば、ＯＸＡもしくはＭＴＯ）と組み合わせて使用される、請求項５６に記載の方法。
５８）がんに罹患しているかまたはがんと診断された対象を処置する方法であって、
（ｉ）そのような処置を必要とする対象に、有効量のナノ担体を投与するステップであって、ナノ担体が、ＩＣＤプロドラッグを含む、ステップ、および
（ｉｉ）その薬学的に許容される塩
を含む、方法。
５９）ＩＣＤプロドラッグが、ＩＣ１プロドラッグを含む、請求項５８に記載の方法。
６０）ナノ担体が、さらにｔｏｌｌ様受容体と共製剤化されたＩＣ１プロドラッグを含む、請求項５８に記載の方法。
６１）ナノ担体が、さらに免疫モジュレーション剤と共製剤化されたＩＣ１プロドラッグを含む、請求項５８に記載の方法。
６２）ナノ担体が、固体脂質ナノ粒子（「ＳＬＮＰ」）である、請求項５８に記載の方法。
６３）ＳＬＮＰが、ＳＬＮＰ－ＩＣ１である、請求項６２に記載の方法。
６４）ナノ担体が、リポソームである、請求項５８に記載の方法。
６５）リポソームが、ＬＮＰ－ＩＣ１である、請求項６４に記載の方法。
６６）以下の化学構造：
を有する、ＩＣ１プロドラッグ。
６７）請求項６６に記載のＩＣ１プロドラッグを含む、リポソーム。
６８）ヘルパー脂質をさらに含む、請求項６７に記載のＩＣ１プロドラッグを含むリポソーム。
６９）ヘルパー脂質が、表ＩＩに記載されている、請求項６８に記載のリポソーム。
７０）請求項６６に記載のＩＣ１プロドラッグを含む、固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）。
７１）ＬＮＰ－ＩＣ１と称される、請求項６７に記載のリポソーム。
７２）ＳＬＮＰ－ＩＣ１と称される、請求項７０に記載のＳＬＮＰ。
７３）ＴＲ１２と共製剤化される、請求項７２に記載のＳＬＮＰ。
７４）ＲＧＤと共製剤化される、請求項７２に記載のＳＬＮＰ。
７５）固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）を含む組成物であって、ＳＬＮＰが、ＴＲ１２と共製剤化されたＩＣ１をさらに含む（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２と称される）、組成物。
７６）固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）を含む組成物であって、ＳＬＮＰが、ＲＧＤと共製剤化されたＩＣ１をさらに含む（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤと称される）、組成物。
１）ＩＣＤプロドラッグ組成物であって、
（ｉ）薬物部分と、
（ｉｉ）脂質部分と、
（ｉｉｉ）連結ユニット（「ＬＵ」）と
を含み、
薬物部分が、ＩＣＤを誘導する薬剤を含み、ＬＵが、薬物部分を脂質部分にコンジュゲートする、
ＩＣＤプロドラッグ組成物。
２）薬物部分が、ＩＣ１として記載される化学構造を含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
３）ＬＵが、ヒドラゾンリンカーである、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
４）脂質部分が、表Ｉに記載される脂質を含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
５）脂質部分が、表ＩＩＩに記載される脂質を含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
６）脂質部分が、ＣＨＥＭＳを含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
７）脂質部分が、ステアリン酸を含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
８）脂質部分が、ステアリン酸を含み、ヒドラゾンをさらに含む、請求項１に記載のＩＣＤプロドラッグ。
９）薬物部分が、ＩＣ１として記載される化学構造を含み、脂質部分が、ステアリン酸を含み、化合物が、以下の化学構造：
【化23】
１０）ＩＣＤプロドラッグ組成物であって、
（ｉ）ＩＣ１を含む、薬物部分と、
（ｉｉ）ＣＨＥＭＳを含む、脂質部分と、
（ｉｉｉ）ヒドロメチルカルバメートリンカーを含む、ＬＵと
を含む、ＩＣＤプロドラッグ組成物。
１１）ＩＣＤプロドラッグ組成物であって、
（ｉ）ＩＣ１を含む、薬物部分と、
（ｉｉ）ステアリン酸を含む、脂質部分と、
（ｉｉｉ）ヒドラゾンリンカーを含む、ＬＵと
を含む、ＩＣＤプロドラッグ組成物。
１２）以下の化学構造：
【化24】
１３）ＩＣＤプロドラッグを含むナノ担体であって、ＬＵの切断後に免疫原性細胞死（ＩＣＤ）を誘導する薬剤を放出する、ナノ担体。
１４）ＬＵが、ヒドラゾンリンカーである、請求項１３に記載のナノ担体。
１５）表ＩＩに記載されるヘルパー脂質をさらに含む、請求項１３に記載のナノ担体。
１６）ＩＣＤプロドラッグが、ＩＣ１を含む、請求項１３に記載のナノ担体。
１７）リポソームである、請求項１３に記載のナノ担体。
１８）ＩＣＤプロドラッグがＩＣ１を含み、ＬＮＰ－ＩＣ１と称される、請求項１７に記載のリポソーム。
１９）リポソームが、さらに、１つまたは複数の免疫モジュレーション剤またはその脂質プロドラッグと共製剤化され、免疫モジュレーション剤が、免疫原性細胞死を誘導する化学療法薬、ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＣＴＬＡ－４阻害剤、ＩＤＯ阻害剤、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１阻害剤、ＣＤ１Ｄアゴニスト、Ａ２ａＲ阻害剤、および／またはこれらのプロドラッグからなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
２０）リポソームが、さらに、ＩＣＤを誘導する化学療法薬と共製剤化され、ＩＣＤを誘導する化学療法薬が、ＤＯＸ、ＭＴＯ、ＯＸＡ、ＣＰ、ボルテゾミブ、カーフィルジミブ、またはパクリタキセルからなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
２１）ＯＸＡをさらに含む、請求項１８に記載のリポソーム。
２２）ＭＴＯをさらに含む、請求項１８に記載のリポソーム。
２３）ＯＸＡをさらに含む、請求項２０に記載のリポソーム。
２４）ＭＴＯをさらに含む、請求項２０に記載のリポソーム。
２５）リポソームが、さらに、ｔｏｌｌ受容体アゴニストまたはその脂質プロドラッグと共製剤化され、ｔｏｌｌ受容体アゴニストが、レシキモド（Ｒ８４８）、ガーディキモド、８５２Ａ、ＤＳＲ ６４３４、テルラトリモド、ＣＵ－Ｔ１２－９、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬＡ）、３Ｄ（６－アシル）－ＰＨＡＤ（登録商標）、ＳＭＵ１２７、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、ＴＲ５、ＴＲ６、ＴＲ３、ＴＲ１２、または３Ｄ－ＰＨＡＤ（登録商標）からなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
２６）リポソームが、さらに、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストまたはその脂質プロドラッグと共製剤化され、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストが、ＡＵＮＰ１２、ＣＡ－１７０、ＰＤ３、またはＢＭＳ－９８６１８９からなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
２７）リポソームが、さらに、ＴＧＦｂアンタゴニストと共製剤化され、ＴＧＦｂアンタゴニストが、ＴＢ４からなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
２８）リポソームが、さらに、ＩＤＯ阻害剤と共製剤化され、ＩＤＯ阻害剤が、ＩＤ３からなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
２９）リポソームが、さらに、Ａ２ａＲアンタゴニストと共製剤化され、Ａ２ａＲアンタゴニストが、ＡＲ１、ＡＲ２、ＡＲ３、ＡＲ４、またはＡＲ５からなる群から選択される、請求項１８に記載のリポソーム。
３０）請求項１３～１７のいずれか一項に記載のナノ担体を含む、キット。
３１）請求項１８～２９のいずれか一項に記載のリポソームを含む、キット。
３２）固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）である、請求項１３に記載のナノ担体。
３３）固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）である、請求項１６に記載のナノ担体。
３４）ＩＣＤプロドラッグがＩＣ１を含み、ＳＬＮＰ－ＩＣ１と称される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
３５）ＳＬＮＰ－ＩＣ１と称される、請求項３３に記載のナノ担体。
３６）ＳＬＮＰが、さらに、１つまたは複数の免疫モジュレーション剤またはその脂質プロドラッグと共製剤化され、免疫モジュレーション剤が、免疫原性細胞死を誘導する化学療法薬、ｔｏｌｌ受容体アゴニスト、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＣＴＬＡ－４阻害剤、ＩＤＯ阻害剤、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１阻害剤、ＣＤ１Ｄアゴニスト、および／またはこれらのプロドラッグからなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
３７）ＳＬＮＰが、さらに、ＩＣＤを誘導する化学療法薬と共製剤化され、ＩＣＤを誘導する化学療法薬が、ＤＯＸ、ＭＴＯ、ＯＸＡ、ＣＰ、ボルテゾミブ、カーフィルジミブ、またはパクリタキセルからなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
３８）ＯＸＡをさらに含む、請求項３１に記載のＳＬＮＰ。
３９）ＭＴＯをさらに含む、請求項３１に記載のＳＬＮＰ。
４０）ＯＸＡをさらに含む、請求項３３に記載のＳＬＮＰ。
４１）ＭＴＯをさらに含む、請求項３３に記載のＳＬＮＰ。
４２）リポソームが、さらに、ｔｏｌｌ受容体アゴニストまたはその脂質プロドラッグと共製剤化され、ｔｏｌｌ受容体アゴニストが、レシキモド（Ｒ８４８）、ガーディキモド、８５２Ａ、ＤＳＲ ６４３４、テルラトリモド、ＣＵ－Ｔ１２－９、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬＡ）、３Ｄ（６－アシル）－ＰＨＡＤ（登録商標）、ＳＭＵ１２７、ＴＲ１２、Ｐａｍ３ＣＳＫ４、または３Ｄ－ＰＨＡＤ（登録商標）からなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
４３）リポソームが、さらに、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストまたはその脂質プロドラッグと共製剤化され、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストが、ＡＵＮＰ１２、ＣＡ－１７０、またはＢＭＳ－９８６１８９からなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
４４）ＳＬＮＰが、さらに、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストまたはその脂質プロドラッグと共製剤化され、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストが、ＡＵＮＰ１２、ＣＡ－１７０、ＰＤ３、またはＢＭＳ－９８６１８９からなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
４５）ＳＬＮＰが、さらに、ＴＧＦｂアンタゴニストと共製剤化され、ＴＧＦｂアンタゴニストが、ＴＢ４からなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
４６）ＳＬＮＰが、さらに、ＩＤＯ阻害剤と共製剤化され、ＩＤＯ阻害剤が、ＩＤ３からなる群から選択される、請求項３２に記載のＳＬＮＰ。
４７）ＳＬＮＰが、さらに、Ａ２ａＲアンタゴニストと共製剤化され、Ａ２ａＲアンタゴニストが、ＡＲ１、ＡＲ２、ＡＲ３、ＡＲ４、またはＡＲ５からなる群から選択される、請求項１２に記載のＳＬＮＰ。
４８）請求項３２～４７のいずれか一項に記載のＳＬＮＰを含む、キット。
４９）がんに罹患しているかまたはがんと診断された対象を処置する方法であって、
（ｉ）そのような処置を必要とする対象に、有効量のナノ担体を投与するステップであって、ナノ担体が、ＩＣＤプロドラッグを含む、ステップ、および
（ｉｉ）その薬学的に許容される塩
を含む、方法。
５０）ＩＣＤプロドラッグが、ＩＣ１プロドラッグを含む、請求項４９に記載の方法。
５１）ナノ担体が、さらにｔｏｌｌ様受容体と共製剤化されたＩＣ１プロドラッグを含む、請求項４９に記載の方法。
５２）ナノ担体が、さらに免疫モジュレーション剤と共製剤化されたＩＣ１プロドラッグを含む、請求項４９に記載の方法。
５３）ナノ担体が、リポソームである、請求項４９に記載の方法。
５４）リポソームが、ＬＮＰ－ＩＣ１である、請求項４９に記載の方法。
５５）ナノ担体が、固体脂質ナノ粒子である、請求項４９に記載の方法。
５６）ＳＬＮＰが、ＳＬＮＰ－ＩＣ１である、請求項５５に記載の方法。
５７）ＳＬＮＰ－ＩＣ１が、ＰＤ－１抗体、ＣＴＬＡ４抗体、または免疫原性細胞死を誘導する化学療法薬（例えば、ＯＸＡもしくはＭＴＯ）と組み合わせて使用される、請求項５６に記載の方法。
５８）がんに罹患しているかまたはがんと診断された対象を処置する方法であって、
（ｉ）そのような処置を必要とする対象に、有効量のナノ担体を投与するステップであって、ナノ担体が、ＩＣＤプロドラッグを含む、ステップ、および
（ｉｉ）その薬学的に許容される塩
を含む、方法。
５９）ＩＣＤプロドラッグが、ＩＣ１プロドラッグを含む、請求項５８に記載の方法。
６０）ナノ担体が、さらにｔｏｌｌ様受容体と共製剤化されたＩＣ１プロドラッグを含む、請求項５８に記載の方法。
６１）ナノ担体が、さらに免疫モジュレーション剤と共製剤化されたＩＣ１プロドラッグを含む、請求項５８に記載の方法。
６２）ナノ担体が、固体脂質ナノ粒子（「ＳＬＮＰ」）である、請求項５８に記載の方法。
６３）ＳＬＮＰが、ＳＬＮＰ－ＩＣ１である、請求項６２に記載の方法。
６４）ナノ担体が、リポソームである、請求項５８に記載の方法。
６５）リポソームが、ＬＮＰ－ＩＣ１である、請求項６４に記載の方法。
６６）以下の化学構造：
【化25】
６７）請求項６６に記載のＩＣ１プロドラッグを含む、リポソーム。
６８）ヘルパー脂質をさらに含む、請求項６７に記載のＩＣ１プロドラッグを含むリポソーム。
６９）ヘルパー脂質が、表ＩＩに記載されている、請求項６８に記載のリポソーム。
７０）請求項６６に記載のＩＣ１プロドラッグを含む、固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）。
７１）ＬＮＰ－ＩＣ１と称される、請求項６７に記載のリポソーム。
７２）ＳＬＮＰ－ＩＣ１と称される、請求項７０に記載のＳＬＮＰ。
７３）ＴＲ１２と共製剤化される、請求項７２に記載のＳＬＮＰ。
７４）ＲＧＤと共製剤化される、請求項７２に記載のＳＬＮＰ。
７５）固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）を含む組成物であって、ＳＬＮＰが、ＴＲ１２と共製剤化されたＩＣ１をさらに含む（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２と称される）、組成物。
７６）固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ）を含む組成物であって、ＳＬＮＰが、ＲＧＤと共製剤化されたＩＣ１をさらに含む（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤと称される）、組成物。
【実施例】
【0369】
本発明の様々な態様を、以下のいくつかの実施例を用いてさらに説明および例証するが、これらはいずれも、本発明の範囲を制限することを意図するものではない。
【0370】
（実施例１）
ステアリン酸およびヒドラゾンを含むＩＣ１プロドラッグの化学合成。
ステアリン酸およびヒドラゾンを含むＩＣ１プロドラッグの化学合成を、以下のプロトコールを使用して合成した。簡単に述べると、ＭｅＯＨ（４４０ｍＬ）中のドキソルビシン（１１．０ｇ、１８．９ｍｍｏｌ、１．００当量）およびステアリン酸ヒドラジド（１６．９ｇ、５６．９ｍｍｏｌ、３．００当量）の溶液に、ＴＦＡ（１０．１ｇ、８９．１ｍｍｏｌ、６．６０ｍＬ、４．７０当量）、ＰＴＳＡ（４．４０ｇ、２５．５ｍｍｏｌ、１．３５当量）、および分子篩４Ａ（４４．０ｇ）を添加した。次いで、反応混合物を、５５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより、ドキソルビシンのほとんど（ＲＴ＝０．７８６分）が消費され、８３％の所望される質量（ＲＴ＝１．１１１分）が検出されたことを確認した。混合物を濾過して、濾液を得た。濾液を、順相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＳｉＯＨ ２５０×５０×１０ｕｍ、移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ（０．１％ ＮＨ３．Ｈ２Ｏ）］；Ｂ％：１０％～５０％、１５分間）によって精製して、粗生成物を得、これをＥｔＯＨ（５０．０ｍＬ）で粉砕した。ステアリン酸ドキソルビシン－ヒドラゾン（２．５０ｇ、２．９６ｍｍｏｌ、１５．６％の収率、９７．６％の純度）を、赤みがかった橙色の固体として得、これを、１Ｈ ＮＭＲ、ＬＣＭＳ、およびＨＰＬＣによって確認した（図１）。この実施例に記載される合成により、以下の化学構造：
を有するステアリン酸ヒドラゾンを含むＩＣ１プロドラッグが得られる。
ステアリン酸およびヒドラゾンを含むＩＣ１プロドラッグの化学合成。
ステアリン酸およびヒドラゾンを含むＩＣ１プロドラッグの化学合成を、以下のプロトコールを使用して合成した。簡単に述べると、ＭｅＯＨ（４４０ｍＬ）中のドキソルビシン（１１．０ｇ、１８．９ｍｍｏｌ、１．００当量）およびステアリン酸ヒドラジド（１６．９ｇ、５６．９ｍｍｏｌ、３．００当量）の溶液に、ＴＦＡ（１０．１ｇ、８９．１ｍｍｏｌ、６．６０ｍＬ、４．７０当量）、ＰＴＳＡ（４．４０ｇ、２５．５ｍｍｏｌ、１．３５当量）、および分子篩４Ａ（４４．０ｇ）を添加した。次いで、反応混合物を、５５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより、ドキソルビシンのほとんど（ＲＴ＝０．７８６分）が消費され、８３％の所望される質量（ＲＴ＝１．１１１分）が検出されたことを確認した。混合物を濾過して、濾液を得た。濾液を、順相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＳｉＯＨ ２５０×５０×１０ｕｍ、移動相：［ヘキサン－ＥｔＯＨ（０．１％ ＮＨ３．Ｈ２Ｏ）］；Ｂ％：１０％～５０％、１５分間）によって精製して、粗生成物を得、これをＥｔＯＨ（５０．０ｍＬ）で粉砕した。ステアリン酸ドキソルビシン－ヒドラゾン（２．５０ｇ、２．９６ｍｍｏｌ、１５．６％の収率、９７．６％の純度）を、赤みがかった橙色の固体として得、これを、１Ｈ ＮＭＲ、ＬＣＭＳ、およびＨＰＬＣによって確認した（図１）。この実施例に記載される合成により、以下の化学構造：
【化26】
【0371】
（実施例２）
ＳＬＮＰ－ＩＣ１固体脂質ナノ粒子の合成および特徴付け。
別の実験において、ＩＣ１を含む固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ－ＩＣ１と称される）を、安定化剤ありおよびなしで、溶媒拡散によって合成した。ポリビニルアルコール（例えば、Ｍｏｌｉｗｏｌ ４８８）、ポロキサマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－１２７）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０および２０、ならびにＫｏｌｌｉｐｈｏｒ ＲＨ４０など）を、安定化剤として使用することができる。第１のステップにおいて、ＤＳＰＣ、コレステロール（ＣＨＯＬ）、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧの脂質ストック溶液を、エタノール（２．５ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。別個に、ＩＣ１プロドラッグストック溶液を、エタノール（２．５ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。ＤＳＰＣ、ＣＨＯＬ、ＩＣ１、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧを、３３：５５：７：５のモル比で（およそ２０ｍｇ／ｍｌの脂質濃度で）混合することによって、脂質混合物を得た。この脂質混合物を、次いで、摂氏４０～４５度で加熱した。同様に、適切な安定化剤（例えば、２％重量／体積のＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７）を含有する水性相を、一定の磁気撹拌（３００～４００ｒｐｍ）で磁気加熱プレート撹拌装置を使用して加熱した。ＳＬＮＰは、水性相においてＤＩ水のみを使用して（安定化剤なしで）合成することができる。脂質混合物を、一定の撹拌下において、この水性相と緩徐に混合した。混合が完了した後、全混合物を、水超音波処理槽を使用して、約５分間超音波処理し、次いで、一定の撹拌で磁気撹拌装置プレートにおいてさらに約１時間保持した。最後に、ＤＩ水に対してカットオフが１２ＫＤａのサイズの透析膜（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、少なくとも４～６時間、溶媒を除去した。透析水は、この期間中に少なくとも３回交換した。ＳＬＮＰ－ＩＣ１は、必要に応じて、Ａｍｉｃｏｎ遠心分離濾過デバイス（３０００ｇでカットオフサイズ１０ＫＤａ）を使用して濃縮した。
ＳＬＮＰ－ＩＣ１固体脂質ナノ粒子の合成および特徴付け。
別の実験において、ＩＣ１を含む固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ－ＩＣ１と称される）を、安定化剤ありおよびなしで、溶媒拡散によって合成した。ポリビニルアルコール（例えば、Ｍｏｌｉｗｏｌ ４８８）、ポロキサマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－１２７）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０および２０、ならびにＫｏｌｌｉｐｈｏｒ ＲＨ４０など）を、安定化剤として使用することができる。第１のステップにおいて、ＤＳＰＣ、コレステロール（ＣＨＯＬ）、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧの脂質ストック溶液を、エタノール（２．５ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。別個に、ＩＣ１プロドラッグストック溶液を、エタノール（２．５ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。ＤＳＰＣ、ＣＨＯＬ、ＩＣ１、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧを、３３：５５：７：５のモル比で（およそ２０ｍｇ／ｍｌの脂質濃度で）混合することによって、脂質混合物を得た。この脂質混合物を、次いで、摂氏４０～４５度で加熱した。同様に、適切な安定化剤（例えば、２％重量／体積のＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７）を含有する水性相を、一定の磁気撹拌（３００～４００ｒｐｍ）で磁気加熱プレート撹拌装置を使用して加熱した。ＳＬＮＰは、水性相においてＤＩ水のみを使用して（安定化剤なしで）合成することができる。脂質混合物を、一定の撹拌下において、この水性相と緩徐に混合した。混合が完了した後、全混合物を、水超音波処理槽を使用して、約５分間超音波処理し、次いで、一定の撹拌で磁気撹拌装置プレートにおいてさらに約１時間保持した。最後に、ＤＩ水に対してカットオフが１２ＫＤａのサイズの透析膜（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、少なくとも４～６時間、溶媒を除去した。透析水は、この期間中に少なくとも３回交換した。ＳＬＮＰ－ＩＣ１は、必要に応じて、Ａｍｉｃｏｎ遠心分離濾過デバイス（３０００ｇでカットオフサイズ１０ＫＤａ）を使用して濃縮した。
【0372】
ＳＬＮＰ－ＩＣ１の特徴付けを、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｃｏ．、Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ、ＭＡ、ＵＳＡ）を使用して判定した。簡単に述べると、２ｍｌのＳＬＮＰ－ＩＣ１（リポソームの濃度が０．５～１ｍｇ／ｍｌであったもの）を、４面クリアプラスチックキュベットに入れ、２５℃で直接的に分析した。図５に示される結果は、ナノ粒子のＺａｖサイズが、およそ９９．００ｎｍであり、ＰＤＩがおよそ０．１６１であったことを示す。
【0373】
加えて、水性分散液中のＳＬＮＰ－ＩＣ１固体脂質ナノ粒子のゼータ電位を、Ｍａｌｖｅｒｎ ｚｅｔａ ｓｅｉｚｅｒ機器（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｃｏ、Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ、ＭＡ、ＵＳＡ）を使用して判定した。簡単に述べると、およそ１ｍｌのＳＬＮＰ（ＤＩ水中、およそ３ｍｇ／ｍｌの濃度）を、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒに利用可能な使い捨てキャピラリーゼータ電位セルに入れた。測定を、２５℃で行った。結果は、ＳＬＮＰ－ＩＣ１のゼータ電位判定がおよそ－１１．２ｍＶであったことを示す（図６）。
【0374】
（実施例３）
ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤ固体脂質ナノ粒子の合成および特徴付け。
別の実験において、ＤＳＰＥ－ＰＥＧ－ＲＧＤ（「ＲＧＤ」）と共製剤化されたＩＣ１を含む固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤと称される）を、様々な種類の安定化剤を使用して、溶媒拡散によって合成した。ポリビニルアルコール（例えば、Ｍｏｌｉｗｏｌ ４８８）、ポロキサマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－１２７）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０および２０、ならびにＫｏｌｌｉｐｈｏｒ ＲＨ４０など）を、安定化剤として使用することができる。簡単に述べると、第１のステップにおいて、ＤＳＰＣ、ＣＨＯＬ、ＤＳＰＥ－ＰＥＧ、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧ－ＲＧＤの脂質ストック溶液を、エタノール（２０ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。別個に、ＩＣ１プロドラッグストック溶液を、エタノール（２．５ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。ＤＳＰＣ、ＣＨＯＬ、ＩＣ１、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧ、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧ－ＲＧＤを、３３：５４：７：５．１のモル比で（およそ２０ｍｇ／ｍｌの脂質濃度で）混合することによって、脂質混合物を得た。この脂質混合物を、次いで、摂氏４０～４５度で加熱した。同様に、適切な安定化剤（例えば、５％重量／体積のＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７）を含有する水性相を、一定の磁気撹拌（３００～４００ｒｐｍ）で磁気加熱プレート撹拌装置を使用して加熱した。ＳＬＮＰは、水性相においてＤＩ水のみを使用して（安定化剤なしで）合成することができる。脂質混合物を、一定の撹拌下において、この水性相と緩徐に混合した。混合が完了した後、全混合物を、水超音波処理槽を使用して、約５分間超音波処理し、次いで、一定の撹拌で磁気撹拌装置プレートにおいてさらに約１時間保持した。最後に、ＤＩ水に対してカットオフが１２ＫＤａのサイズの透析膜（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、少なくとも４～６時間、溶媒を除去した。透析水は、この期間中に少なくとも３回交換した。ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤは、必要に応じて、Ａｍｉｃｏｎ遠心分離濾過デバイス（３０００ｇでカットオフサイズ１０ＫＤａ）を使用して濃縮した。
ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤ固体脂質ナノ粒子の合成および特徴付け。
別の実験において、ＤＳＰＥ－ＰＥＧ－ＲＧＤ（「ＲＧＤ」）と共製剤化されたＩＣ１を含む固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤと称される）を、様々な種類の安定化剤を使用して、溶媒拡散によって合成した。ポリビニルアルコール（例えば、Ｍｏｌｉｗｏｌ ４８８）、ポロキサマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－１２７）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０および２０、ならびにＫｏｌｌｉｐｈｏｒ ＲＨ４０など）を、安定化剤として使用することができる。簡単に述べると、第１のステップにおいて、ＤＳＰＣ、ＣＨＯＬ、ＤＳＰＥ－ＰＥＧ、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧ－ＲＧＤの脂質ストック溶液を、エタノール（２０ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。別個に、ＩＣ１プロドラッグストック溶液を、エタノール（２．５ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。ＤＳＰＣ、ＣＨＯＬ、ＩＣ１、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧ、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧ－ＲＧＤを、３３：５４：７：５．１のモル比で（およそ２０ｍｇ／ｍｌの脂質濃度で）混合することによって、脂質混合物を得た。この脂質混合物を、次いで、摂氏４０～４５度で加熱した。同様に、適切な安定化剤（例えば、５％重量／体積のＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７）を含有する水性相を、一定の磁気撹拌（３００～４００ｒｐｍ）で磁気加熱プレート撹拌装置を使用して加熱した。ＳＬＮＰは、水性相においてＤＩ水のみを使用して（安定化剤なしで）合成することができる。脂質混合物を、一定の撹拌下において、この水性相と緩徐に混合した。混合が完了した後、全混合物を、水超音波処理槽を使用して、約５分間超音波処理し、次いで、一定の撹拌で磁気撹拌装置プレートにおいてさらに約１時間保持した。最後に、ＤＩ水に対してカットオフが１２ＫＤａのサイズの透析膜（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、少なくとも４～６時間、溶媒を除去した。透析水は、この期間中に少なくとも３回交換した。ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤは、必要に応じて、Ａｍｉｃｏｎ遠心分離濾過デバイス（３０００ｇでカットオフサイズ１０ＫＤａ）を使用して濃縮した。
【0375】
ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤの特徴付けを、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｃｏ．、Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ、ＭＡ、ＵＳＡ）を使用して判定した。簡単に述べると、２ｍｌのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤ（リポソームの濃度が０．５～１ｍｇ／ｍｌであったもの）を、４面クリアプラスチックキュベットに入れ、２５℃で直接的に分析した。図７に示される結果は、ナノ粒子のＺａｖサイズが、およそ１０２ｎｍであり、ＰＤＩがおよそ０．１４９であったことを示す。
【0376】
加えて、水性分散液中のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤ固体脂質ナノ粒子のゼータ電位を、Ｍａｌｖｅｒｎ ｚｅｔａ ｓｅｉｚｅｒ機器（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｃｏ、Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ、ＭＡ、ＵＳＡ）を使用して判定した。簡単に述べると、およそ１ｍｌのＳＬＮＰ（ＤＩ水中、およそ３ｍｇ／ｍｌの濃度）を、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒに利用可能な使い捨てキャピラリーゼータ電位セルに入れた。測定を、２５℃で行った。結果は、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤのゼータ電位判定がおよそ－９．９ｍＶであったことを示す（図８）。
【0377】
（実施例４）
ＳＬＮＰ－Ｄｏｘ固体脂質ナノ粒子の合成および特徴付け。
別の実験において、ドキソルビシンを含む固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ－Ｄｏｘと称される）を、様々な種類の安定化剤を使用して、溶媒拡散によって合成した。ポリビニルアルコール（例えば、Ｍｏｌｉｗｏｌ ４８８）、ポロキサマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－１２７）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０および２０、ならびにＫｏｌｌｉｐｈｏｒ ＲＨ４０など）を、安定化剤として使用することができる。第１のステップにおいて、ＤＳＰＣ、コレステロール、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧの脂質ストック溶液を、エタノール（２０ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。別個に、ドキソルビシンストック溶液を、ＤＭＳＯ（２０ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。ＤＳＰＣ、コレステロール、ドキソルビシン、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧを、３３：５４：８：５のモル比で（およそ２０ｍｇ／ｍｌの脂質濃度で）混合することによって、脂質混合物を得た。この脂質混合物を、次いで、摂氏４０～４５度で加熱した。同様に、適切な安定化剤（例えば、５％重量／体積のＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７）を含有する水性相を、一定の磁気撹拌（３００～４００ｒｐｍ）で磁気加熱プレート撹拌装置を使用して加熱した。ＳＬＮＰは、水性相においてＤＩ水のみを使用して（安定化剤なしで）合成することができる。脂質混合物を、一定の撹拌下において、この水性相と緩徐に混合した。混合が完了した後、全混合物を、水超音波処理槽を使用して、約５分間超音波処理し、次いで、一定の撹拌で磁気撹拌装置プレートにおいてさらに約１時間保持した。最後に、ＤＩ水に対してカットオフが１２ＫＤａのサイズの透析膜（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、少なくとも４～６時間、溶媒を除去した。透析水は、この期間中に少なくとも３回交換した。ＳＬＮＰ－Ｄｏｘは、必要に応じて、Ａｍｉｃｏｎ遠心分離濾過デバイス（３０００ｇでカットオフサイズ１０ＫＤａ）を使用して濃縮した。
ＳＬＮＰ－Ｄｏｘ固体脂質ナノ粒子の合成および特徴付け。
別の実験において、ドキソルビシンを含む固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ－Ｄｏｘと称される）を、様々な種類の安定化剤を使用して、溶媒拡散によって合成した。ポリビニルアルコール（例えば、Ｍｏｌｉｗｏｌ ４８８）、ポロキサマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－１２７）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０および２０、ならびにＫｏｌｌｉｐｈｏｒ ＲＨ４０など）を、安定化剤として使用することができる。第１のステップにおいて、ＤＳＰＣ、コレステロール、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧの脂質ストック溶液を、エタノール（２０ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。別個に、ドキソルビシンストック溶液を、ＤＭＳＯ（２０ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。ＤＳＰＣ、コレステロール、ドキソルビシン、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧを、３３：５４：８：５のモル比で（およそ２０ｍｇ／ｍｌの脂質濃度で）混合することによって、脂質混合物を得た。この脂質混合物を、次いで、摂氏４０～４５度で加熱した。同様に、適切な安定化剤（例えば、５％重量／体積のＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７）を含有する水性相を、一定の磁気撹拌（３００～４００ｒｐｍ）で磁気加熱プレート撹拌装置を使用して加熱した。ＳＬＮＰは、水性相においてＤＩ水のみを使用して（安定化剤なしで）合成することができる。脂質混合物を、一定の撹拌下において、この水性相と緩徐に混合した。混合が完了した後、全混合物を、水超音波処理槽を使用して、約５分間超音波処理し、次いで、一定の撹拌で磁気撹拌装置プレートにおいてさらに約１時間保持した。最後に、ＤＩ水に対してカットオフが１２ＫＤａのサイズの透析膜（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、少なくとも４～６時間、溶媒を除去した。透析水は、この期間中に少なくとも３回交換した。ＳＬＮＰ－Ｄｏｘは、必要に応じて、Ａｍｉｃｏｎ遠心分離濾過デバイス（３０００ｇでカットオフサイズ１０ＫＤａ）を使用して濃縮した。
【0378】
ＳＬＮＰ－Ｄｏｘの特徴付けを、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｃｏ．、Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ、ＭＡ、ＵＳＡ）を使用して判定した。簡単に述べると、２ｍｌのＳＬＮＰ－Ｄｏｘ（リポソームの濃度が０．５～１ｍｇ／ｍｌであったもの）を、４面クリアプラスチックキュベットに入れ、２５℃で直接的に分析した。図９に示される結果は、ナノ粒子のＺａｖサイズが、およそ９１．００ｎｍであり、ＰＤＩがおよそ０．１２４であったことを示す。
【0379】
加えて、水性分散液中のＳＬＮＰ－Ｄｏｘ固体脂質ナノ粒子のゼータ電位を、Ｍａｌｖｅｒｎ ｚｅｔａ ｓｅｉｚｅｒ機器（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｃｏ、Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ、ＭＡ、ＵＳＡ）を使用して判定した。簡単に述べると、およそ１ｍｌのＳＬＮＰ（ＤＩ水中、およそ３ｍｇ／ｍｌの濃度）を、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒに利用可能な使い捨てキャピラリーゼータ電位セルに入れた。測定を、２５℃で行った。結果は、ＳＬＮＰ－Ｄｏｘのゼータ電位判定がおよそ－１０．６ｍＶ（図１０）であったことを示す。
【0380】
（実施例５）
ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２（ＮＴＩ １２１）固体脂質ナノ粒子の合成および特徴付け。
別の実験において、ＴＲ１２と共製剤化されたＩＣ１を含む固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２と称される）を、様々な種類の安定化剤を使用して、溶媒拡散によって合成した。ポリビニルアルコール（例えば、Ｍｏｌｉｗｏｌ ４８８）、ポロキサマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－１２７）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０および２０、ならびにＫｏｌｌｉｐｈｏｒ ＲＨ４０など）を、安定化剤として使用することができる。簡単に述べると、第１のステップにおいて、ＤＳＰＣ、ＣＨＯＬ、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧの脂質ストック溶液を、エタノール（２０ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。ＩＣ１プロドラッグ溶液を、エタノール中で、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度で調製した。別個に、ＴＲ１２プロドラッグストック溶液を、ＤＭＳＯ（２０ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。ＤＳＰＣ、ＣＨＯＬ、ＩＣ１、ＴＲ１２、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧを、３３：５４：５６：７：０．４４：５のモル比で（およそ２０ｍｇ／ｍｌの脂質濃度で）混合することによって、脂質混合物を得た。この脂質混合物を、次いで、摂氏４０～４５度で加熱した。同様に、適切な安定化剤（例えば、２％重量／体積のＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７）を含有する水性相を、一定の磁気撹拌（３００～４００ｒｐｍ）で磁気加熱プレート撹拌装置を使用して加熱した。ＳＬＮＰは、水性相においてＤＩ水のみを使用して（安定化剤なしで）合成することができる。脂質混合物を、一定の撹拌下において、この水性相と緩徐に混合した。混合が完了した後、全混合物を、水超音波処理槽を使用して、約５分間超音波処理し、次いで、一定の撹拌で磁気撹拌装置プレートにおいてさらに約１時間保持した。最後に、ＤＩ水に対してカットオフが１２ＫＤａのサイズの透析膜（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、少なくとも４～６時間、溶媒を除去した。透析水は、この期間中に少なくとも３回交換した。ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２は、必要に応じて、Ａｍｉｃｏｎ遠心分離濾過デバイス（３０００ｇでカットオフサイズ１０ＫＤａ）を使用して濃縮した。
ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２（ＮＴＩ １２１）固体脂質ナノ粒子の合成および特徴付け。
別の実験において、ＴＲ１２と共製剤化されたＩＣ１を含む固体脂質ナノ粒子（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２と称される）を、様々な種類の安定化剤を使用して、溶媒拡散によって合成した。ポリビニルアルコール（例えば、Ｍｏｌｉｗｏｌ ４８８）、ポロキサマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－６８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ－１２７）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０および２０、ならびにＫｏｌｌｉｐｈｏｒ ＲＨ４０など）を、安定化剤として使用することができる。簡単に述べると、第１のステップにおいて、ＤＳＰＣ、ＣＨＯＬ、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧの脂質ストック溶液を、エタノール（２０ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。ＩＣ１プロドラッグ溶液を、エタノール中で、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度で調製した。別個に、ＴＲ１２プロドラッグストック溶液を、ＤＭＳＯ（２０ｍｇ／ｍｌ）中に調製した。ＤＳＰＣ、ＣＨＯＬ、ＩＣ１、ＴＲ１２、およびＤＳＰＥ－ＰＥＧを、３３：５４：５６：７：０．４４：５のモル比で（およそ２０ｍｇ／ｍｌの脂質濃度で）混合することによって、脂質混合物を得た。この脂質混合物を、次いで、摂氏４０～４５度で加熱した。同様に、適切な安定化剤（例えば、２％重量／体積のＰｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ１２７）を含有する水性相を、一定の磁気撹拌（３００～４００ｒｐｍ）で磁気加熱プレート撹拌装置を使用して加熱した。ＳＬＮＰは、水性相においてＤＩ水のみを使用して（安定化剤なしで）合成することができる。脂質混合物を、一定の撹拌下において、この水性相と緩徐に混合した。混合が完了した後、全混合物を、水超音波処理槽を使用して、約５分間超音波処理し、次いで、一定の撹拌で磁気撹拌装置プレートにおいてさらに約１時間保持した。最後に、ＤＩ水に対してカットオフが１２ＫＤａのサイズの透析膜（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、少なくとも４～６時間、溶媒を除去した。透析水は、この期間中に少なくとも３回交換した。ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２は、必要に応じて、Ａｍｉｃｏｎ遠心分離濾過デバイス（３０００ｇでカットオフサイズ１０ＫＤａ）を使用して濃縮した。
【0381】
ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の特徴付けを、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｃｏ．、Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ、ＭＡ、ＵＳＡ）を使用して判定した。簡単に述べると、２ｍｌのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２（リポソームの濃度が０．５～１ｍｇ／ｍｌであったもの）を、４面クリアプラスチックキュベットに入れ、２５℃で直接的に分析した。図１１に示される結果は、ナノ粒子のＺａｖサイズが、およそ１０２ｎｍであり、ＰＤＩがおよそ０．１６６であったことを示す。
【0382】
加えて、水性分散液中のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２固体脂質ナノ粒子のゼータ電位を、Ｍａｌｖｅｒｎ ｚｅｔａ ｓｅｉｚｅｒ機器（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｃｏ、Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ、ＭＡ、ＵＳＡ）を使用して判定した。簡単に述べると、およそ１ｍｌのＳＬＮＰ（ＤＩ水中、およそ３ｍｇ／ｍｌの濃度）を、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒに利用可能な使い捨てキャピラリーゼータ電位セルに入れた。測定を、２５℃で行った。結果は、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２のゼータ電位判定がおよそ－１１．２ｍＶであったことを示す（図１２）。
【0383】
（実施例６）
ドキソルビシン（ＳＬＮＰ－ＤｏｘおよびＬＮＰ－Ｄｏｘ）ならびにＩＣ１（ＳＬＮＰ－ＩＣ１およびＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤ）の血清安定性／放出動態。
別の実験において、異なる時間間隔におけるドキソルビシンの累積放出／安定性を研究するために、公知の量の様々な製剤（ＳＬＮＰ－ＤＯＸ、ＬＮＰ－ＤＯＸ、ＳＬＮＰ－ＩＣ１、およびＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤ）を、室温で１０ｍｌの２０％ヒト血清中に懸濁させた。所定の時間間隔で、溶液をボルテックスし、１ｍｌのアリコートを取り出した。ナノ製剤から放出されたドキソルビシンを分離させるために、このアリコートを、３．５ｋＤａのカットオフの膜フィルターを通して３０００ｒｐｍで３０分間遠心分離した。放出されたドキソルビシンの濃度を、ＵＶ－Ｖｉｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ（Ｎａｎｏｄｒｏｐ ２０００Ｃ ＵＶ－ｖｉｓ分光光度計）を使用して判定した。
ドキソルビシン（ＳＬＮＰ－ＤｏｘおよびＬＮＰ－Ｄｏｘ）ならびにＩＣ１（ＳＬＮＰ－ＩＣ１およびＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤ）の血清安定性／放出動態。
別の実験において、異なる時間間隔におけるドキソルビシンの累積放出／安定性を研究するために、公知の量の様々な製剤（ＳＬＮＰ－ＤＯＸ、ＬＮＰ－ＤＯＸ、ＳＬＮＰ－ＩＣ１、およびＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤ）を、室温で１０ｍｌの２０％ヒト血清中に懸濁させた。所定の時間間隔で、溶液をボルテックスし、１ｍｌのアリコートを取り出した。ナノ製剤から放出されたドキソルビシンを分離させるために、このアリコートを、３．５ｋＤａのカットオフの膜フィルターを通して３０００ｒｐｍで３０分間遠心分離した。放出されたドキソルビシンの濃度を、ＵＶ－Ｖｉｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ（Ｎａｎｏｄｒｏｐ ２０００Ｃ ＵＶ－ｖｉｓ分光光度計）を使用して判定した。
【0384】
様々なナノ製剤からのドキソルビシンの放出パーセントを、以下の式を使用して計算した：
放出％＝（［Ｄ］ｆ，ｔ）／（［Ｄ］０）×１００
式中、［Ｄ］ｆ，ｔは、時間ｔにおける濾液中のドキソルビシンの濃度であり、
［Ｄ］０は、ナノ製剤中の総ドキソルビシン濃度（放出されたもの＋放出されていないもの）である。
放出％＝（［Ｄ］ｆ，ｔ）／（［Ｄ］０）×１００
式中、［Ｄ］ｆ，ｔは、時間ｔにおける濾液中のドキソルビシンの濃度であり、
［Ｄ］０は、ナノ製剤中の総ドキソルビシン濃度（放出されたもの＋放出されていないもの）である。
【0385】
放出動態データから、ＳＬＮＰ－ＩＣ１からのドキソルビシンの放出が、ヒト血清においてはるかに緩徐であること（これは、最大７２時間のインキュベーション時間でさえも当てはまる）が明らかであり、これは、ヒト血清におけるＳＬＮＰ－ＩＣ１内のドキソルビシンのより良好な安定性／保持可能性を示す。ＳＬＮＰ－ＤＯＸ（５０％を上回る放出％）およびＬＮＰ－Ｄｏｘ（約７０％の放出％）と比較して、ＳＬＮＰ－ＩＣ１の事例では、ヒト血清から放出されたドキソルビシンは２０％未満であった。（図１３）。
【0386】
（実施例７）
ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＥＭＴ－６細胞におけるＩＣ１の細胞傷害性評価。
別の実験において、ＳＮＬＰ－ＩＣ１の細胞傷害性を、以下のプロトコールを使用してＭＴＴアッセイによって、ＥＭＴ－６マウス細胞株において研究した。簡単に述べると、ＥＭＴ－６細胞を、９６ウェルプレートに播種し、２４時間インキュベートした。成長培地を、次いで、（ｉ）ＤＯＸ（ドキソルビシンＨＣＬ）、（ｉｉ）ＬＮＰ－ＤＯＸ（ＤＯＸＩＬ（すなわち、ドキソルビシンリポソーム））、（ｉｉｉ）ＳＬＮＰ－ＤＯＸ（固体脂質ナノ担体形態のドキソルビシン）、（ｉｖ）ＳＬＮＰ－ＩＣ１、および（ｖ）ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤのいずれかを含む調製した培地と置き換え、それぞれ、０、２、３、６、１３、２５、５０、または１００ｕＭの培地濃度で添加した。ＭＴＴ溶液を培養物に添加し、３７℃で４時間インキュベートした。次いで、ＳＤＳ－ＨＣｌ溶液を培養物に添加し、３７℃で４時間インキュベートした。次いで、細胞を、２４時間さらにインキュベートし、細胞傷害活性を、ＭＴＴアッセイを使用して評価した。プレートを読み取る前に、それぞれの試料を、ピペットを使用して混合し、５７０ｎｍで吸光度を読み取り、光学密度（ＯＤ）を生成した。細胞傷害性％を、次の式を使用して以下のように計算した：
１００－（試験細胞のＯＤ／対照細胞のＯＤ）×１００％）。
ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＥＭＴ－６細胞におけるＩＣ１の細胞傷害性評価。
別の実験において、ＳＮＬＰ－ＩＣ１の細胞傷害性を、以下のプロトコールを使用してＭＴＴアッセイによって、ＥＭＴ－６マウス細胞株において研究した。簡単に述べると、ＥＭＴ－６細胞を、９６ウェルプレートに播種し、２４時間インキュベートした。成長培地を、次いで、（ｉ）ＤＯＸ（ドキソルビシンＨＣＬ）、（ｉｉ）ＬＮＰ－ＤＯＸ（ＤＯＸＩＬ（すなわち、ドキソルビシンリポソーム））、（ｉｉｉ）ＳＬＮＰ－ＤＯＸ（固体脂質ナノ担体形態のドキソルビシン）、（ｉｖ）ＳＬＮＰ－ＩＣ１、および（ｖ）ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤのいずれかを含む調製した培地と置き換え、それぞれ、０、２、３、６、１３、２５、５０、または１００ｕＭの培地濃度で添加した。ＭＴＴ溶液を培養物に添加し、３７℃で４時間インキュベートした。次いで、ＳＤＳ－ＨＣｌ溶液を培養物に添加し、３７℃で４時間インキュベートした。次いで、細胞を、２４時間さらにインキュベートし、細胞傷害活性を、ＭＴＴアッセイを使用して評価した。プレートを読み取る前に、それぞれの試料を、ピペットを使用して混合し、５７０ｎｍで吸光度を読み取り、光学密度（ＯＤ）を生成した。細胞傷害性％を、次の式を使用して以下のように計算した：
１００－（試験細胞のＯＤ／対照細胞のＯＤ）×１００％）。
【0387】
結果は、ドキソルビシンＨＣＬ遊離薬物と比較した場合に、リポソーム形態のＤｏｘ（ＬＮＰ－Ｄｏｘ（すなわち、ＤＯＸＩＬ）、ＳＬＮＰ－Ｄｏｘ、ＳＬＮＰ－ＩＣ１、およびＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤは、ＥＭＴ－６細胞に対して、類似の様式で細胞傷害性を誘導し得ることを示す。（図１４）。
【0388】
（実施例８）
ｉｎ ｖｉｔｒｏでの４Ｔ－１細胞におけるＩＣ１の細胞傷害性評価。
別の実験において、ＳＮＬＰ－ＩＣ１の細胞傷害性を、以下のプロトコールを使用してＭＴＴアッセイによって、４Ｔ－１細胞において研究した。簡単に述べると、４Ｔ－１細胞を、９６ウェルプレートに播種し、２４時間インキュベートした。成長培地を、次いで、（ｉ）ＤＯＸ（ドキソルビシンＨＣＬ）、（ｉｉ）ＬＮＰ－ＤＯＸ（ＤＯＸＩＬ（すなわち、ドキソルビシンリポソーム））、（ｉｉｉ）ＳＬＮＰ－ＤＯＸ（固体脂質ナノ担体形態のドキソルビシン）、（ｉｖ）ＳＬＮＰ－ＩＣ１、および（ｖ）ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤのいずれかを含む調製した培地と置き換え、それぞれ、０、２、３、６、１３、２５、５０、または１００ｕＭの培地濃度で添加した。ＭＴＴ溶液を培養物に添加し、３７℃で４時間インキュベートした。次いで、ＳＤＳ－ＨＣｌ溶液を培養物に添加し、３７℃で４時間インキュベートした。次いで、細胞を、２４時間さらにインキュベートし、細胞傷害活性を、ＭＴＴアッセイを使用して評価した。プレートを読み取る前に、それぞれの試料を、ピペットを使用して混合し、５７０ｎｍで吸光度を読み取り、光学密度（ＯＤ）を生成した。細胞傷害性％を、次の式を使用して以下のように計算した：
１００－（試験細胞のＯＤ／対照細胞のＯＤ）×１００％）。
結果は、ドキソルビシンＨＣＬ遊離薬物と比較した場合に、リポソーム形態のＤｏｘ（ＬＮＰ－Ｄｏｘ（すなわち、ＤＯＸＩＬ）、ＳＬＮＰ－Ｄｏｘ、ＳＬＮＰ－ＩＣ１、およびＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤは、４Ｔ－１細胞に対して、類似の様式で細胞傷害性を誘導し得ることを示す。（図１５）。
ｉｎ ｖｉｔｒｏでの４Ｔ－１細胞におけるＩＣ１の細胞傷害性評価。
別の実験において、ＳＮＬＰ－ＩＣ１の細胞傷害性を、以下のプロトコールを使用してＭＴＴアッセイによって、４Ｔ－１細胞において研究した。簡単に述べると、４Ｔ－１細胞を、９６ウェルプレートに播種し、２４時間インキュベートした。成長培地を、次いで、（ｉ）ＤＯＸ（ドキソルビシンＨＣＬ）、（ｉｉ）ＬＮＰ－ＤＯＸ（ＤＯＸＩＬ（すなわち、ドキソルビシンリポソーム））、（ｉｉｉ）ＳＬＮＰ－ＤＯＸ（固体脂質ナノ担体形態のドキソルビシン）、（ｉｖ）ＳＬＮＰ－ＩＣ１、および（ｖ）ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤのいずれかを含む調製した培地と置き換え、それぞれ、０、２、３、６、１３、２５、５０、または１００ｕＭの培地濃度で添加した。ＭＴＴ溶液を培養物に添加し、３７℃で４時間インキュベートした。次いで、ＳＤＳ－ＨＣｌ溶液を培養物に添加し、３７℃で４時間インキュベートした。次いで、細胞を、２４時間さらにインキュベートし、細胞傷害活性を、ＭＴＴアッセイを使用して評価した。プレートを読み取る前に、それぞれの試料を、ピペットを使用して混合し、５７０ｎｍで吸光度を読み取り、光学密度（ＯＤ）を生成した。細胞傷害性％を、次の式を使用して以下のように計算した：
１００－（試験細胞のＯＤ／対照細胞のＯＤ）×１００％）。
結果は、ドキソルビシンＨＣＬ遊離薬物と比較した場合に、リポソーム形態のＤｏｘ（ＬＮＰ－Ｄｏｘ（すなわち、ＤＯＸＩＬ）、ＳＬＮＰ－Ｄｏｘ、ＳＬＮＰ－ＩＣ１、およびＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＲＧＤは、４Ｔ－１細胞に対して、類似の様式で細胞傷害性を誘導し得ることを示す。（図１５）。
【0389】
（実施例９）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＥＭＴ－６細胞を使用した複数用量でのＳＬＮＰ－ＩＣ１の腫瘍阻害。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＥＭＴ－６細胞を使用した複数用量でのＳＬＮＰ－ＩＣ１の腫瘍阻害。
【0390】
この実験において、複数の組合せでのＳＬＮＰ－ＩＣ１の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス乳がんＥＭＴ６細胞（０．５×１０６個）を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの右後側腹部領域に皮下接種した。動物を、（ｉ）ビヒクル対照、（ｉｉ）２ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１、（ｉｉｉ）６ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１、または（ｉｖ）２ｍｇ／ｋｇのＬＮＰ－ＤＯＸ（ＤＯＸＩＬ（すなわち、リポソーム形態のドキソルビシン（ＬＮＰ－Ｄｏｘ）））のいずれかで、１週間に２回、合計６回の投薬で、静脈内注射により処置した。
【0391】
腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、２１日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0392】
結果は、２ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１および６ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１での処置が、ビヒクル対照と比較した場合に、有意な抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、それぞれ、８８．５％（ｐ＜０．０５）および９４．３９％（ｐ＜０．０５）と計算された。加えて、リポソーム形態のドキソルビシン（ＤＯＸＩＬ）と比較した場合に、ＳＬＮＰ－ＩＣ１は、２ｍｇ／ｋｇまたは６ｍｇ／ｋｇのいずれかで腫瘍体積を有意に阻害した。（図１６）。
【0393】
（実施例１０）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＥＭＴ－６細胞を使用した複数用量でのＳＬＮＰ－ＩＣ１の腫瘍阻害。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＥＭＴ－６細胞を使用した複数用量でのＳＬＮＰ－ＩＣ１の腫瘍阻害。
【0394】
この実験において、複数の組合せでのＳＬＮＰ－ＩＣ１および共製剤化されたＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス乳がんＥＭＴ６細胞（０．５×１０６個）を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの右後側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照、２ｍｇ／ｋｇのＬＮＰ－ＤＯＸ（Ｄｏｘｉｌ：リポソーム形態のドキソルビシン）、０．５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＴＲ１２（固体脂質ナノ粒子形態のＴＲ１２－ステアリン酸）、２ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１（固体脂質ナノ粒子形態のドキソルビシンプロドラッグ）、および２／０．５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、合計６回の投薬で、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。
結果は、２ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１単独、または０．５ｍｇ／ｋｇのＴＲ１２と共製剤化されたもの（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２）が、腫瘍成長阻害をもたらしたことを示す。加えて、ＳＬＮＰ－ＩＣ１での処置は、対照ＬＮＰ－ＤＯＸと比較して、改善された腫瘍成長阻害を示した。（図１７）。
結果は、２ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１単独、または０．５ｍｇ／ｋｇのＴＲ１２と共製剤化されたもの（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２）が、腫瘍成長阻害をもたらしたことを示す。加えて、ＳＬＮＰ－ＩＣ１での処置は、対照ＬＮＰ－ＤＯＸと比較して、改善された腫瘍成長阻害を示した。（図１７）。
【0395】
（実施例１１）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＥＭＴ－６細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１の腫瘍阻害。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＥＭＴ－６細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１の腫瘍阻害。
【0396】
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス乳がんＥＭＴ６細胞（０．５×１０６個）を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの右後側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照、２ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１（固体脂質ナノ粒子形態のドキソルビシンプロドラッグ）、０．０１ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＮＫ１（固体脂質ナノ粒子形態のＫＲＮ７０００）、および２／０．０１ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＮＫ１で、１週間に２回、合計６回の投薬で、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。
【0397】
結果は、２ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１単独、または０．０１ｍｇ／ｋｇのＮＫ１と共製剤化されたもの（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＮＫ１）が、腫瘍成長阻害をもたらしたことを示す。（図１８）。
【0398】
（実施例１２）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＥＭＴ－６細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１および／またはＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１の評価を、単独で、またはＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２との組合せのいずれかで、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス乳がんＥＭＴ６細胞（０．５×１０６個）を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの右後側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照、ＳＬＮＰ－ＩＣ１（固体脂質ナノ粒子形態のドキソルビシンプロドラッグ）、ＳＬＮＰ－ＴＲ１２（固体脂質ナノ粒子形態のＴＲ１２－ステアリン酸）、および共製剤化されたＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＥＭＴ－６細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１および／またはＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１の評価を、単独で、またはＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２との組合せのいずれかで、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス乳がんＥＭＴ６細胞（０．５×１０６個）を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの右後側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照、ＳＬＮＰ－ＩＣ１（固体脂質ナノ粒子形態のドキソルビシンプロドラッグ）、ＳＬＮＰ－ＴＲ１２（固体脂質ナノ粒子形態のＴＲ１２－ステアリン酸）、および共製剤化されたＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。
【0399】
結果は、ＳＬＮＰ－ＩＣ１が、単独薬剤またはＴＲ１２（ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２）との組合せのいずれにおいても、両方の用量で腫瘍成長阻害をもたらしたことを示す。（図１９）。
【0400】
（実施例１３）
Ｂａｌｂ／ＣマウスモデルにおけるＳＬＮＰ－ＩＣ１および／またはＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の最大耐容用量。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１の最大耐容用量（「ＭＴＤ」）を、単独で、またはＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２との組合せのいずれかで、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、ｂａｌｂ／ｃマウスを、異なる用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１（ＳＬＮＰ形態のＩＣ１プロドラッグ）、ＳＬＮＰ－ＴＲ１２（ＳＬＮＰ形態のＴＲ１２）、およびＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、静脈内注射によって処置した。動物を、眼窩の締付け、耳の位置、鼻の膨らみ、無気力、および毛並みの乱れを含む毒性に関する臨床兆候について、注射の３０分後および４時間後に観察した。動物の体重は、注射の２４時間後、４８時間後、および７２時間後に測定した。
Ｂａｌｂ／ＣマウスモデルにおけるＳＬＮＰ－ＩＣ１および／またはＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の最大耐容用量。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１の最大耐容用量（「ＭＴＤ」）を、単独で、またはＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２との組合せのいずれかで、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、ｂａｌｂ／ｃマウスを、異なる用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１（ＳＬＮＰ形態のＩＣ１プロドラッグ）、ＳＬＮＰ－ＴＲ１２（ＳＬＮＰ形態のＴＲ１２）、およびＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、静脈内注射によって処置した。動物を、眼窩の締付け、耳の位置、鼻の膨らみ、無気力、および毛並みの乱れを含む毒性に関する臨床兆候について、注射の３０分後および４時間後に観察した。動物の体重は、注射の２４時間後、４８時間後、および７２時間後に測定した。
【0401】
結果は、毒性の即時兆候がいずれの群においても観察されなかったことを示す。注目すべきことに、ＳＬＮＰ－ＩＣ１単独は、わずかな体重減少を引き起こした。また、ＳＬＮＰ－ＴＲ１２は、注射の４８時間後までに、中等度から重篤な体重減少を誘導し、４８時間後に、体重減少は治療介入なしで回復した。最後に、ＳＬＮＰ－ＩＣ１およびＴＲ１２の組合せは、ＳＬＮＰ－ＴＲ１２処置群よりも低い中等度の体重減少を誘導した。（図２０）。
【0402】
（実施例１４）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＢ１６Ｆ１０細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＢ１６Ｆ１０細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
【0403】
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス黒色腫Ｂ１６Ｆ１０細胞（細胞（０．２×１０６個）を、Ｂ５７／ＢＬマウスの右後側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、９日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0404】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、６３．４５％であった。（図２１）。
【0405】
（実施例１５）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＭＰＣ１１細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス多発性骨髄腫ＭＰＣ１１細胞（０．２×１０６個）を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、９日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＭＰＣ１１細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス多発性骨髄腫ＭＰＣ１１細胞（０．２×１０６個）を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、９日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0406】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、５３．３８％であった。（図２２）。
【0407】
（実施例１６）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＮｅｕｒｏ２Ａ細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス神経芽細胞腫Ｎｅｕｒｏ２Ａ細胞（１×１０６個）を、Ａ／Ｊマウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１０日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＮｅｕｒｏ２Ａ細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス神経芽細胞腫Ｎｅｕｒｏ２Ａ細胞（１×１０６個）を、Ａ／Ｊマウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１０日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0408】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、８８．２７％であった。（図２３）。
【0409】
（実施例１７）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＣＴ２６細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＣＴ２６細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
【0410】
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス結腸ＣＴ２６細胞（１×１０６個）を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１２日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0411】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、８１．１６％であった。（図２４）。
【0412】
（実施例１８）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＭＣ３８細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス結腸ＭＣ３８細胞（１×１０６個）を、ＣＳ７／ｂ１６マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１８日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＭＣ３８細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス結腸ＭＣ３８細胞（１×１０６個）を、ＣＳ７／ｂ１６マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１８日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0413】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、８３．５９％であった。（図２５）。
【0414】
（実施例１９）
ｉｎ ｖｉｖｏでの腎臓Ｒｅｎｃａ細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス腎臓Ｒｅｎｃａ細胞（１×１０６個）を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１３日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
ｉｎ ｖｉｖｏでの腎臓Ｒｅｎｃａ細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス腎臓Ｒｅｎｃａ細胞（１×１０６個）を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１３日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0415】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、６８．１８％であった。（図２６）。
【0416】
（実施例２０）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＨ２２細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス肝臓Ｈ２２細胞（２×１０６個）を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、２１日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＨ２２細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス肝臓Ｈ２２細胞（２×１０６個）を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、２１日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0417】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、１００．９６％であった。（図２７）。
【0418】
（実施例２１）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＨｅｐａ１－６細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス肝臓Ｈｅｐａ１－６細胞（５×１０６個）を、Ｃ５７／ＢＬ６マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１６日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＨｅｐａ１－６細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス肝臓Ｈｅｐａ１－６細胞（５×１０６個）を、Ｃ５７／ＢＬ６マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１６日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0419】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、１００．９６％であった。（図２８）。
【0420】
（実施例２２）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＬＬＣ１細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＬＬＣ１細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
【0421】
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス肺ＣＣＬ１細胞（０．３×１０６個）を、Ｃ５７／ＢＬ６マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１６日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0422】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、５６．６５％であった。（図２９）。
【0423】
（実施例２３）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＫＬＮ２０５細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス肺ＫＬＮ２０５細胞（０．８×１０６個）を、ＤＢＡ／２マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、２１日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＫＬＮ２０５細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス肺ＫＬＮ２０５細胞（０．８×１０６個）を、ＤＢＡ／２マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、２１日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0424】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、６４．２１％であった。（図３０）。
【0425】
（実施例２４）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＢ１６ＢＬ６細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス黒色腫Ｂ１６ＢＬ６細胞（０．２×１０６個）を、Ｃ５７ＢＬ６マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１２日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＢ１６ＢＬ６細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス黒色腫Ｂ１６ＢＬ６細胞（０．２×１０６個）を、Ｃ５７ＢＬ６マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１２日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0426】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、７０．５１％であった。（図３１）。
【0427】
（実施例２５）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＰａｎ－０２．０３細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス膵臓Ｐａｎ－０２．０３細胞（３×１０６個）を、Ｃ５７ＢＬ６マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、６２日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＰａｎ－０２．０３細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス膵臓Ｐａｎ－０２．０３細胞（３×１０６個）を、Ｃ５７ＢＬ６マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、６２日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0428】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、９０．４２％であった。（図３２）。
【0429】
（実施例２６）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＲＭ－１細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス前立腺ＲＭ－１細胞（１×１０６個）を、Ｃ５７ＢＬ６マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１４日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＲＭ－１細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス前立腺ＲＭ－１細胞（１×１０６個）を、Ｃ５７ＢＬ６マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１４日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0430】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、５０．２４％であった。（図３３）。
【0431】
（実施例２７）
ｉｎ ｖｉｖｏでのＭＢＴ－２細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス膀胱ＭＢＴ－２細胞（１×１０６個）を、Ｃ３Ｈ／ＨＥマウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１６日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
ｉｎ ｖｉｖｏでのＭＢＴ－２細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス膀胱ＭＢＴ－２細胞（１×１０６個）を、Ｃ３Ｈ／ＨＥマウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１６日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0432】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、６７．８１％であった。（図３４）。
【0433】
（実施例２８）
ｉｎ ｖｉｖｏでのクローンＭ－３細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス黒色腫クローンＭ－３細胞（０．２×１０６個）を、Ｃ５７ＢＬ６マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１２日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
ｉｎ ｖｉｖｏでのクローンＭ－３細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス黒色腫クローンＭ－３細胞（０．２×１０６個）を、Ｃ５７ＢＬ６マウスの右側腹部領域に皮下接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、１２日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0434】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、７４．８８％であった。（図３５）。
【0435】
（実施例２９）
ｉｎ ｖｉｖｏでの４Ｔ１細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス乳がん４Ｔ１を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの乳房脂肪体に接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、２６日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
ｉｎ ｖｉｖｏでの４Ｔ１細胞を使用したＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の腫瘍阻害。
この実験において、ＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２の追加の評価を、以下のプロトコールを使用して行った。簡単に述べると、マウス乳がん４Ｔ１を、Ｂａｌｂ／ｃマウスの乳房脂肪体に接種した。動物を、ビヒクル対照または２／０．２５ｍｇ／ｋｇのＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２で、１週間に２回、静脈内注射により処置した。腫瘍体積を、キャリパーを使用して２次元で３回測定し、体積を、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）×０．５を使用して計算し、式中、Ｖは腫瘍の体積であり、Ｌは腫瘍の長さ（もっとも長い腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍の幅（Ｌに対して垂直なもっとも長い腫瘍寸法）である。体重を、１週間に３回測定した。腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）を、２６日目の腫瘍サイズデータに基づいて計算した。
【0436】
結果は、２週間にわたる６回の用量のＳＬＮＰ－ＩＣ１－ＴＲ１２での処置が、ビヒクル処置群と比較して、抗腫瘍活性をもたらすことを示す。ＴＧＩは、４１．３４％であった。（図３６）。
【0437】
（実施例３０）
ＩＣ１プロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体の使用を通じたヒト癌腫の処置のためのヒト臨床試験。
ＩＣ１プロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体の使用を通じたヒト癌腫の処置のためのヒト臨床試験。
【0438】
腫瘍細胞に特異的に蓄積し、ある特定の腫瘍ならびに他の免疫学的障害および／または他の疾患の処置において使用される、ＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（リポソームまたはＳＬＮＰ）を、本発明に従って使用する。これらの適応症のそれぞれと関連して、２つの臨床アプローチを追求することに成功している。
【0439】
Ｉ．）補助療法：補助療法では、患者を、化学療法薬または薬学的もしくはバイオ薬学的薬剤、またはこれらの組合せと組み合わせたＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（リポソームまたはＳＬＮＰ）で処置する。原発性がん標的を、ＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（リポソームまたはＳＬＮＰ）の追加によって、標準的なプロトコール下で処置する。プロトコールデザインは、以下の例、原発性または転移性病変の腫瘍質量の低減、無増悪生存期間の増加、全生存期間、患者の健康状態の改善、疾患の安定化、ならびに標準的な化学療法および他の生物製剤の通常の用量を低減させる能力を含むがこれらに限定されないものによって評価される有効性に対処する。これらの投薬量の低減は、化学療法薬または生物製剤の用量関連毒性を低減させることによって、治療法の追加および／または延長を可能にする。
【0440】
ＩＩ．）単剤療法：腫瘍の単剤療法でのＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（リポソームまたはＳＬＮＰ）の使用と関連して、ＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（リポソームまたはＳＬＮＰ）は、化学療法薬または薬学的薬剤または生物学的薬剤を伴わずに患者に投与される。一実施形態では、単剤療法は、拡がった転移性疾患を有する後期がん患者において臨床的に行われる。プロトコールデザインは、以下の例、原発性または転移性病変の腫瘍質量の低減、無増悪生存期間の増加、全生存期間、患者の健康状態の改善、疾患の安定化、ならびに標準的な化学療法および他の生物製剤の通常の用量を低減させる能力を含むがこれらに限定されないものによって評価される有効性に対処する。
【0441】
投薬量
投薬レジメンは、最適な所望される応答を提供するように調節され得る。例えば、単回のＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（リポソームまたはＳＬＮＰ）を投与してもよく、いくつかの分割用量を、経時的に投与してもよく、または用量を、治療状況の緊急性によって示されるように比例的に低減もしくは増加させてもよい。「投薬単位形態」とは、本明細書において使用される場合、処置しようとする哺乳動物対象の単位投薬量として好適な物理的に別個の単位を指し、それぞれの単位は、必要とされる薬学的担体と関連して所望される治療作用をもたらすように計算された、所定の量の活性化合物を含む。本発明の投薬単位形態の仕様は、（ａ）ＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（リポソームまたはＳＬＮＰ）の固有の特徴、（ｂ）存在する場合は組合せ化合物の個別の機構、（ｃ）達成しようとする具体的な治療的または予防的作用、ならびに（ｄ）個体において感受性の処置のためのそのような化合物の配合に関する当該技術分野における固有の制限によって決定され、それらに直接的に依存する。
投薬レジメンは、最適な所望される応答を提供するように調節され得る。例えば、単回のＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（リポソームまたはＳＬＮＰ）を投与してもよく、いくつかの分割用量を、経時的に投与してもよく、または用量を、治療状況の緊急性によって示されるように比例的に低減もしくは増加させてもよい。「投薬単位形態」とは、本明細書において使用される場合、処置しようとする哺乳動物対象の単位投薬量として好適な物理的に別個の単位を指し、それぞれの単位は、必要とされる薬学的担体と関連して所望される治療作用をもたらすように計算された、所定の量の活性化合物を含む。本発明の投薬単位形態の仕様は、（ａ）ＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（リポソームまたはＳＬＮＰ）の固有の特徴、（ｂ）存在する場合は組合せ化合物の個別の機構、（ｃ）達成しようとする具体的な治療的または予防的作用、ならびに（ｄ）個体において感受性の処置のためのそのような化合物の配合に関する当該技術分野における固有の制限によって決定され、それらに直接的に依存する。
【0442】
臨床開発計画（ＣＤＰ）
ＣＤＰは、ＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（リポソームまたはＳＬＮＰ）を、補助療法と併せて、または単剤療法で使用する処置に従い、それを開発する。試験は、まず、安全性を示し、その後で、反復投薬での有効性を確認する。試験は、非盲検であり、標準的な化学療法および／または現在の標準的な治療法に加えて、ＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（リポソームまたはＳＬＮＰ）を比較する。理解されるように、患者の登用に関連して利用することができる１つの非限定的な基準は、当該技術分野において公知の標準的な検出方法によって判定される腫瘍におけるＤＡＭＰタンパク質である。
ＣＤＰは、ＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（リポソームまたはＳＬＮＰ）を、補助療法と併せて、または単剤療法で使用する処置に従い、それを開発する。試験は、まず、安全性を示し、その後で、反復投薬での有効性を確認する。試験は、非盲検であり、標準的な化学療法および／または現在の標準的な治療法に加えて、ＩＣＤプロドラッグを含む製剤化および／または共製剤化されたナノ担体（リポソームまたはＳＬＮＰ）を比較する。理解されるように、患者の登用に関連して利用することができる１つの非限定的な基準は、当該技術分野において公知の標準的な検出方法によって判定される腫瘍におけるＤＡＭＰタンパク質である。
【0443】
製剤化および／もしくは共製剤化されたナノ担体（リポソームもしくはＳＬＮＰ）、または本明細書に開示される実施形態のうちのいずれも、十分な薬理学的プロファイルおよび有望なバイオ医薬特性、例えば、毒物学的プロファイル、代謝および薬物動態特性、可溶性、ならびに透過性を有し得ると考えられる。適切なバイオ医薬特性の判定、例えば、細胞における細胞傷害性の判定、または毒性の可能性を判定するためのある特定の標的もしくはチャネルの阻害は、当業者の知識の範囲内であることが理解される。
【0444】
本発明は、本発明の個々の態様の１つの例示を意図している本明細書において開示される実施形態によって範囲が限定されるものではなく、機能的に同等であるものはすべて、本発明の範囲内に含まれる。本発明のモデル、方法、およびライフサイクル手法に対する様々な修正形は、本明細書に記載されるものに加えて、前述の説明および教示から、当業者には明らかであり、同様に、本発明の範囲内に含まれることが意図される。そのような修正形または他の実施形態は、本発明の真の範囲および趣旨から逸脱することなく、実施することができる。
【0445】
【表I】
【0446】
【表II】
【0447】
【表III】
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26】
【図27】
【図28】
【図29】
【図30】
【図31】
【図32】
【図33】
【図34】
【図35】
【図36】
【国際調査報告】