特表 2024-542261 診療に寄与する新規ホウ素リポソーム

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-11-13

(54)【発明の名称】診療に寄与する新規ホウ素リポソーム

(51)【国際特許分類】

   A61K 47/24 20060101AFI20241106BHJP

   A61K 9/127 20060101ALI20241106BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20241106BHJP

   A61K 51/06 20060101ALI20241106BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20241106BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20241106BHJP

   A61K 31/502 20060101ALI20241106BHJP

   A61K 31/4439 20060101ALI20241106BHJP

   A61K 31/55 20060101ALI20241106BHJP

   A61K 31/551 20060101ALI20241106BHJP

   A61K 31/4184 20060101ALI20241106BHJP

   A61K 31/5025 20060101ALI20241106BHJP

   C07F 9/10 20060101ALI20241106BHJP

【ＦＩ】

A61K47/24

A61K9/127

A61K45/00 101

A61K51/06

A61P35/00

A61P43/00 111

A61K31/502

A61K31/4439

A61K31/55

A61K31/551

A61K31/4184

A61K31/5025

C07F9/10 D CSP

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024530544

(86)(22)【出願日】2022-11-08

(85)【翻訳文提出日】2024-06-25

(86)【国際出願番号】 CN2022130606

(87)【国際公開番号】W WO2023088134

(87)【国際公開日】2023-05-25

(31)【優先権主張番号】202111391620.9

(32)【優先日】2021-11-22

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】507232478

【氏名又は名称】北京大学

【氏名又は名称原語表記】ＰＥＫＩＮＧ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ．５， Ｙｉｈｅｙｕａｎ Ｒｏａｄ， Ｈａｉｄｉａｎ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ， Ｂｅｉｊｉｎｇ １００８７１， Ｃｈｉｎａ

(74)【代理人】

【識別番号】100108453

【弁理士】

【氏名又は名称】村山 靖彦

(74)【代理人】

【識別番号】100110364

【弁理士】

【氏名又は名称】実広 信哉

(74)【代理人】

【識別番号】100133400

【弁理士】

【氏名又は名称】阿部 達彦

(72)【発明者】

【氏名】▲劉▼ 志博

(72)【発明者】

【氏名】李 ▲紀▼元

(72)【発明者】

【氏名】郭 志▲浜▼

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4C085

4C086

4H050

【Ｆターム（参考）】

4C076AA19

4C076CC27

4C076CC50

4C076DD63

4C076EE23

4C084AA17

4C084NA10

4C084ZB262

4C084ZC202

4C085HH03

4C085JJ05

4C085KB07

4C085KB74

4C085LL18

4C086AA01

4C086AA02

4C086BC37

4C086BC39

4C086BC50

4C086CB05

4C086CB09

4C086CB11

4C086GA07

4C086GA12

4C086GA16

4C086MA01

4C086MA02

4C086MA05

4C086MA24

4C086NA10

4C086ZB26

4C086ZC20

4H050AA01

4H050AA03

4H050AB20

4H050AC90

(57)【要約】

本発明は、リン脂質の１つの脂質アームの末端にカルボラン基が導入された、カルボラン－リン脂質複合体を提供する。また、本発明は、カルボラン－リン脂質複合体を含むリポソーム組成物、及び、その少なくとも１つの治療剤及び／又は少なくとも１つの診断剤を送達するための使用を提供する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

下記式（１）：

【化1】

で表れる構造を有する、カルボラン－リン脂質複合体。
（式中、Ｒ１とＲ２の中には１つが－Ｌ－カルボラン基であり、もう１つが炭素数１０～２４の直鎖アルキル基又はアルケニル基であり、Ｌが二価連結基であり、Ｘが－Ｈ、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ^＋（ＣＨ_３）_３、－ＣＨ_２ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨ、－ＣＨ_２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_２ＯＨ、又はシクロヘキサン－２，３，４，５，６－ペンタヒドロキシ－１－基であり、ＹがＯＨ又はＯ^－である。）

【請求項2】

前記－Ｌ－カルボラン基におけるカルボラン基が^１０Ｂ富化されている、請求項１に記載の複合体。

【請求項3】

前記Ｘが－ＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ^＋（ＣＨ_３）_３であり、前記ＹがＯ^－である、請求項１～２のいずれか一項に記載の複合体。

【請求項4】

前記Ｒ１又はＲ２をそれぞれ含む脂質アームが、以下の条件を１つ、２つ、又は３つ満たし、好ましくは同時に３つの条件を満たす、請求項１～３のずれか一項に記載の複合体。
（１）長さの差が±１Ａ以内であり、
（２）脂質アーム間の距離が５Ａ以内であり、
（３）二面角が５度以内である。

【請求項5】

前記カルボラン基が１，２－Ｃ_２Ｂ_４Ｈ_５－、１，２－Ｃ_２Ｂ_８Ｈ_９－、１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１－、２，３－Ｃ_２Ｂ_４Ｈ_７－、７，８－Ｃ_２Ｂ_９Ｈ_１２－、又は５，６－Ｃ_２Ｂ_８Ｈ_１１－であり、好ましくは１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１－である、請求項１～４のいずれか一項に記載の複合体。

【請求項6】

前記Ｌが－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－ＣＨ＝ＣＨ－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－ＣＨ＝ＣＨ－（ＣＨ_２）_ｍ－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－ＣＨ＝ＣＨ－（ＣＨ_２）_ｍ－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｓ－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｓ－（ＣＨ_２）_ｍ＋１－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｏ－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）ｎ－Ｏ－（ＣＨ_２）_ｍ＋１－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｎ（ＣＨ_３）－（ＣＨ_２）_ｍ－、又は－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｎ（ＣＨ_３）－（ＣＨ_２）_ｍ＋１－Ｎ（ＣＨ_３）－であり、好ましくは－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－Ｓ－であり、ｎが１～２０の整数であり、ｍが０～２０の整数である、請求項１～５のいずれか一項に記載の複合体。

【請求項7】

下記の式：

【化2】

で表れる構造を有する、請求項６に記載の複合体。
（式中、Ｂｏがカルボラン基であり、ｎが１～２０の整数である。）

【請求項8】

前記Ｂｏが１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１－であり、好ましくはｃｌｏｓｏ－ジカルバドデカボラン基であり、より好ましくはｃｌｏｓｏ－１，２－ジカルバドデカボラン基であり、ｎが３、７、１１又は１５であり、好ましくは１１である、請求項７に記載の複合体。

【請求項9】

請求項１～８のいずれか一項に記載の複合体を含み、
前記複合体が脂質二重層の一部である、リポソーム組成物。

【請求項10】

コレステロールをさらに含む、請求項９に記載のリポソーム組成物。

【請求項11】

さらに、リン脂質を含み、好ましくはジラウロイルホスファチジルコリン（ＤＬＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）、ジステアロイルホスファチジルグリセロール（ＤＳＰＧ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジミリストイルホスファチジルセリン（ＤＭＰＳ）、ジステアロイルホスファチジルセリン（ＤＳＰＳ）、ジオレオイルホスファチジルセリン（ＤＯＰＳ）、ジパルミトイルホスファチジルセリン（ＤＰＰＳ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＳＰＥ）又はジエライドイル（ｄｉｄａｉｄｏｙｌ）ホスファチジルエタノールアミンを含み、より好ましくはＤＰＰＣを含む、請求項９又は１０に記載のリポソーム組成物。

【請求項12】

さらに、ポリエチレングリコール化リン脂質を含み、好ましくはＤＬＰＥ－ＰＥＧ、ＤＰＰＥ－ＰＥＧ、ＤＭＰＥ－ＰＥＧ又はＤＳＰＥ－ＰＥＧを含み、より好ましくはＤＳＰＥ－ＰＥＧを含む、請求項９～１１のいずれか１項に記載のリポソーム組成物。

【請求項13】

少なくとも１つの治療剤及び／又は少なくとも１つの診断剤をさらに含む、請求項９～１２のいずれか一項に記載のリポソーム組成物。

【請求項14】

少なくとも１つの治療剤を含み、
前記治療剤が抗がん剤である、請求項１３に記載のリポソーム組成物。

【請求項15】

前記抗がん剤がモノメチルオーリスタチンＥ、モノメチルオーリスタチンＦ、イブルチニブ、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブ、ドキソルビシン、マイトマイシン－Ｃ、マイトマイシン－Ａ、ダウノルビシン、アミノプテリン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、９－アミノカンプトテシン、Ｎ８－アセチルスペルミジン、１－（２－クロロエチル）－１，２－ジメタンスルホニルヒドラジド、雲南マイシン（Ｙｕｎｎａｎｍｙｃｉｎ）、ゲムシタビン、シタラビン、ドラスタチン、ダカルバジン、５－フルオロウラシル、パクリタキセル、ドセタキセル（Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、ゲムシタビン、シタラビン、６－メルカプトプリン、ビンクリスチン、シスプラチン、オキサリプラチン、ＰＡＲＰ阻害剤から選択される、請求項１４に記載のリポソーム組成物。

【請求項16】

前記抗がん剤がＰＡＲＰ阻害剤から選択され、好ましくはオラパリブ、ニラパリブ、ルカパリブ、フルゾパリブ、パミパリブ、ベリパリブ、タラゾパリブであり、より好ましくはオラパリブである、請求項１５に記載のリポソーム組成物。

【請求項17】

少なくとも一つの診断剤を含み、
前記診断剤が^６４Ｃｕ－ＮＯＴＡ－ＰＥＧ２０００－ＤＳＰＥである、請求項１３に記載のリポソーム組成物。

【請求項18】

請求項９～１７のいずれか一項に記載のリポソーム組成物の、医薬品に用いられる使用。

【請求項19】

請求項９～１７のいずれか一項に記載のリポソーム組成物の、少なくとも１つの治療剤及び／又は少なくとも１つの診断剤を送達するための使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、２０２１年１１月２２日に出願された中国出願番号第２０２１１１３９１６２０．９号の優先権を主張し、その全開示内容は、参考により本願の一部として組み込まれる。

【0002】

本発明は、医療及び診断分野に関し、具体的に診療に寄与する新規ホウ素リポソーム（ｂｏｒｏｎｓｏｍｅ）に関する。

【背景技術】

【0003】

Ｌｉ Ｊ、Ｔｕ Ｚ、Ｌｉｕ Ｚらは、Ａｎ Ｕｎｕｓｕａｌ Ｄｉｒｅｃｔｉｏｎ Ｅｎｔｅｒｉｎｇ Ｄａｗｎ： Ａ Ｂｒｉｅｆ Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ ｔｈｅ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｈｉｓｔｏｒｙ ｏｆ Ｂｏｒｏｎ Ｃａｒｒｉｅｒｓ、Ｓｃｉｅｎｔｉａ Ｓｉｎｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ． ２０２０， ５０： １２９６-１３１９の総説にはホウ素中性子捕捉療法（ＢＮＣＴ）に用いられるホウ素担持剤を記載された。ＢＮＣＴは、二次元、細胞スケール、強い標的性及び高エネルギー線密度の放射線療法であり、メラノーマ、神経膠腫及び再発性頭頸部癌等の局所侵襲性の悪性腫瘍に優れる殺傷作用を有する。ＢＮＣＴの細胞殺傷力の由来は、非放射性同位体^１０Ｂが低エネルギー熱中性子を捕捉した後に核分裂反応を発生させてα粒子及び反跳^７Ｌｉ核を生成し、これらは高い線形エネルギー移動と生物に相対する高い有効性を有し、細胞に致死性傷害を発生させることができ、且つ透過能力に限り（５～９μｍ、約１つ細胞直径）を有し、破壊力を単一細胞のスケールに制限することができる。致死性の^１０Ｂ（ｎ、α）^７Ｌｉ捕捉反応を維持するために、多量の^１０Ｂ原子が選択的に腫瘍細胞に蓄積され、十分な中性子を吸収すると、ＢＮＣＴは悪性腫瘍に顕著な殺傷力を与え、近傍の正常組織にほとんど影響を与えない。悪性腫瘍に対する有効療法の１つは、腫瘍部位に十分な量のホウ素を送達し、中性子照射を実施することである。

【0004】

現在広く使用されているホウ素送達剤は、４－ジヒドロキシボリル－Ｌ－フェニルアラニン（ＢＰＡ）であるが、ホウ素含有量が不足するなどの欠点を有し、その治療効果が制限され、異常なボランを選択することにより、生物毒性及び免疫原性をもたらすことがある。同時に、リポソームが薬剤を封入及び送達することは、封入構造が破損しやすいという問題がある。実際の治療過程において、医師は患者に対して適時の診断を行う必要があるが、現在のＢＮＣＴ薬剤の機能が単一であり、治療のニーズを満たすことしかできず、臨床応用が制限される。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

このような背景の下で、新しい原料を探して新しい構造の分子を合成し、上記問題の解決を実現することが望ましい。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本発明は、式（Ｉ）で表れる構造を有するカルボラン－リン脂質複合体を提供する。

【化1】

（式中、Ｒ１とＲ２の中には１つが－Ｌ－カルボラン基であり、もう１つが炭素数１０～２４の直鎖アルキル基又はアルケニル基であり、Ｌが二価連結基であり、Ｘが－Ｈ、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ^＋（ＣＨ_３）_３、－ＣＨ_２ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨ、－ＣＨ_２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_２ＯＨ、又はシクロヘキサン－２，３，４，５，６－ペンタヒドロキシ－１－基であり、ＹがＯＨ又はＯ^－である。）

【0007】

本発明の一実施形態において、前記－Ｌ－カルボラン基におけるカルボラン基が^１０Ｂ富化されている。
本発明の一実施形態において、Ｘが－ＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ^＋（ＣＨ_３）_３であり、ＹがＯ^－である。
本発明の好ましい実施形態において、Ｒ１又はＲ２をそれぞれ含む脂質アームが、以下の条件を１つ、２つ、又は３つ満たし、好ましくは同時に３つの条件を満たす。
（１）長さの差が±１Ａ以内であり、
（２）脂質アーム間の距離が５Ａ以内であり、
（３）二面角が５度以内である。

【0008】

本発明の一実施形態において、カルボラン基が１，２－Ｃ_２Ｂ_４Ｈ_５－、１，２－Ｃ_２Ｂ_８Ｈ_９－、１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１－、２，３－Ｃ_２Ｂ_４Ｈ_７－、７，８－Ｃ_２Ｂ_９Ｈ_１２－、又は５，６－Ｃ_２Ｂ_８Ｈ_１１－であり、好ましくは１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１－である。

【0009】

本発明の一実施形態において、Ｌが－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－ＣＨ＝ＣＨ－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－ＣＨ＝ＣＨ－（ＣＨ_２）_ｍ－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－ＣＨ＝ＣＨ－（ＣＨ_２）_ｍ－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｓ－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｓ－（ＣＨ_２）_ｍ＋１－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｏ－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）ｎ－Ｏ－（ＣＨ_２）_ｍ＋１－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｎ（ＣＨ_３）－（ＣＨ_２）_ｍ－、又は－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｎ（ＣＨ_３）－（ＣＨ_２）_ｍ＋１－Ｎ（ＣＨ_３）－であり、ここで、ｎが１～２０の整数であり、ｍが０～２０の整数である。
例えば、式（Ｉ）で表れるカルボラン－リン脂質複合体が下記の構造を有する。

【化2】

式中、Ｂｏがカルボラン基であり、ｎが１～２０の整数である。一実施形態において、Ｂｏが１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１－であり、好ましくはｃｌｏｓｏ－ジカルバドデカボラン基であり、より好ましくはｃｌｏｓｏ－１，２－ジカルバドデカボラン基である。この中に、ｎが３、７、１１又は１５であり、好ましくは１１である。

【0010】

本発明の別の態様は、脂質二重層の一部である前記カルボラン－リン脂質複合体を含む、リポソーム組成物を提供する。

【0011】

本発明の一実施形態において、リポソーム組成物は、コレステロールをさらに含む。

【0012】

本発明の一実施形態において、リポソーム組成物は、さらにリン脂質を含み、好ましくはジラウロイルホスファチジルコリン（ＤＬＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）、ジステアロイルホスファチジルグリセロール（ＤＳＰＧ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジミリストイルホスファチジルセリン（ＤＭＰＳ）、ジステアロイルホスファチジルセリン（ＤＳＰＳ）、ジオレオイルホスファチジルセリン（ＤＯＰＳ）、ジパルミトイルホスファチジルセリン（ＤＰＰＳ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＳＰＥ）又はジエライドイル（ｄｉｄａｉｄｏｙｌ）ホスファチジルエタノールアミンを含み、より好ましくはＤＰＰＣを含む。

【0013】

本発明の一実施形態において、リポソーム組成物は、ＰＥＧ化リン脂質をさらに含み、例えば、ＤＬＰＥ－ＰＥＧ、ＤＰＰＥ－ＰＥＧ、ＤＭＰＥ－ＰＥＧ又はＤＳＰＥ－ＰＥＧを含み、好ましくはＤＳＰＥ－ＰＥＧを含む。

【0014】

本発明の一実施形態において、リポソーム組成物は、少なくとも１つの治療剤及び／又は少なくとも１つの診断剤をさらに含む。

【0015】

好ましい実施形態において、リポソーム組成物は、少なくとも１つの治療剤を含み、前記治療剤が抗がん剤である。例えば、前記抗がん剤がモノメチルオーリスタチンＥ、モノメチルオーリスタチンＦ、イブルチニブ、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブ、ドキソルビシン、マイトマイシン－Ｃ、マイトマイシン－Ａ、ダウノルビシン、アミノプテリン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、９－アミノカンプトテシン、Ｎ８－アセチルスペルミジン、１－（２－クロロエチル）－１，２－ジメタンスルホニルヒドラジド、雲南マイシン、ゲムシタビン、シタラビン、ドラスタチン、ダカルバジン、５－フルオロウラシル、パクリタキセル、ドセタキセル（Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、ゲムシタビン、シタラビン、６－メルカプトプリン、ビンクリスチン、シスプラチン、オキサリプラチン、ＰＡＲＰ阻害剤から選択される。一実施形態において、抗がん剤がＰＡＲＰ阻害剤から選択され、好ましくはオラパリブ、ニラパリブ、ルカパリブ、フルゾパリブ、パミパリブ、ベリパリブ、タラゾパリブであり、より好ましくはオラパリブである。

【0016】

本発明の好ましい実施形態において、リポソーム組成物は、少なくとも一つの診断剤を含み、前記診断剤が^６４Ｃｕ－ＮＯＴＡ－ＰＥＧ２０００－ＤＳＰＥである。

【0017】

本発明のさらに別の態様は、前記リポソーム組成物の、医薬品に用いられるの使用を提供する。

【0018】

本発明のさらなる態様は、前記リポソーム組成物の、少なくとも１つの治療剤及び／又は少なくとも１つの診断剤を送達するための使用を提供する。

【図面の簡単な説明】

【0019】

本発明の実施例について、より具体的に説明するために、以下、実施例の図面を簡単に説明し、明らかに、以下の説明における図面は、本発明のいくつかの実施例に関し、本発明の範囲に限定されない。

【図1】新規ホウ素リポソームの構造及び薬剤の封入のストラテジーを示す。

【図2】ホウ素リポソームに封入した異なる薬剤条件でマウスの腫瘍体積の変化（Ｄｏｘ：ドキソルビシンであり、ＰＡＲＰｉ：ポリアデノシン二リン酸リボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害剤オラパリブであり、Ｎ：中性子照射である）を示す。

【図3】透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）によるホウ素リポソームのイメージングである。

【図4】４Ｔ１担腫瘍マウスの^６４Ｃｕ－ＮＯＴＡ－ホウ素リポソームを静脈注射した１２ｈ後の全身最大密度投影ＰＥＴ画像である。腫瘍は白い点線のコイルで囲まれている。

【図5】分子動力学でシミュレーションされたＢｏＰ－１膜構造の断面を示す、

【図6】分子動力学でシミュレーションされたＢｏＰ－２膜構造の断面を示す、

【図7】分子動力学でシミュレーションされたＢｏＰ－３膜構造の断面を示す、

【図8】分子動力学でシミュレーションされたＢｏＰ－４膜構造の断面を示す、

【図9】分子動力学でシミュレーションされたＤＰＰＣ膜構造の断面を示す、

【図10】ＳＲＢを封入した条件でＢｏＰｓ及びＤＰＰＣのＵＶ－ｖｉｓ吸収を測定する結果を示す。

【図11】５０％ウシ血清タンパク質中で３７℃の条件で２４時間培養した後のＳＲＢの漏れパーセンテージを測定する結果を示す。

【図12】異なる濃度のホウ素リポソームと２４時間インキュベーションした４Ｔ１細胞のホウ素摂取量を示す。

【図13】異なる濃度のホウ素リポソームと２４時間インキュベーションした４Ｔ１細胞の活性を示す。

【図14】ＰＡＲＰ阻害剤－ホウ素リポソーム及びＰＡＲＰ阻害剤－ホウ素リポソーム＋Ｎで治療した群のマウスの平均腫瘍体積（ｎ＝９）（対応するｔ検定、＊＊ｐ＜０．０１）を示す。

【図15】ホウ素リポソーム＋Ｎ又はＰＡＲＰ阻害剤－ホウ素リポソーム＋Ｎで処理した各群のマウスの平均体重（ｎ＝９）を示す。

【発明を実施するための形態】

【0020】

本発明の実施例の目的、技術的解決策及び利点をより明確にするために、以下、本発明の実施例の図面を参照して、本発明の実施例の発明を明確に完全に説明する。明らかに、説明される実施例は、本発明の一部の実施例であり、全ての実施例ではない。本発明の記載された実施例に基づいて、当業者は、創造的な労力を必要とせずに得られた他のすべての実施例も、本発明の保護の範囲内に含まれる。

【0021】

本発明は、本発明の基本的な特質から逸脱することなく、他の具体的な形態で実施することができる。本発明のいずれかの実施形態およびすべての実施形態は、矛盾しない限り、他の実施形態又は複数の他の実施形態における技術的特徴と組み合わせて追加の実施形態を得ることができる。本発明は、このような組み合わせで得られる追加の実施形態を含む。

【0022】

別途に定めがない限り、本明細書において使用される技術用語又は科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって理解される通常の意味を有するものとする。

【0023】

本明細書において、「含む」、「含有」又は「からなる」などの類似の単語の使用は、その単語の前に現れる要素が、他の要素を排除することなく、単語の後に列挙される要素およびそれらの等価物を含むことを意味する。

【0024】

実施例又は別途に定めがない限り、明細書及び請求の範囲に記載される材料の量、反応条件、持続時間及び材料の定量的性質などを示すのすべての数値は、あらゆる場合に「約」という用語により修飾されていると理解されるものとする。また、本発明に列挙される任意の数値範囲は、その範囲のすべてのサブ範囲及びその範囲又はサブ範囲の端点の任意の組み合わせを含むことを意図しており、例えば、１～２０の整数には、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９及び２０を含み、ならびにサブ範囲１～３、１～４、１～１０、２～４、２～１０なども含む。

【0025】

本発明は、化学結合の法則及び原理と一致すると解釈されるべきである。置換基を所定の位置に導入するために水素原子が除去される場合がある。

【0026】

本発明は、リン脂質とは、グリセロリン脂質であって、脂肪酸（例えば、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、エルカ酸）、グリセロール及びリン酸などの化合物の誘導体であり、グリセロール中の２つのヒドロキシル基が脂肪酸で置換され、もう１つヒドロキシル基がリン酸及び他の基で置換され、親水性リン酸基と２つの疎水性脂質アーム末端とはグリセロール分子を介して結合されている。本発明において、リン脂質は、天然リン脂質であってもよく、合成リン脂質であってもよい。例示されたリン脂質としては、ホスファチジン酸、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール及びホスファチジルイノシトールが挙げられるが、これらに限定されない。

【0027】

本発明において、カルボラン－リン脂質複合体とは、リン脂質の１つの脂質アームの末端にカルボラン基を導入したリン脂質誘導体を指す。

【0028】

本発明の一態様は、式（Ｉ）で表れるカルボラン－リン脂質複合体を提供する。

【化3】

Ｒ１とＲ２の中には１つが－Ｌ－カルボラン基であり、もう１つが炭素数１０～２４の直鎖アルキル基又はアルケニル基であり、Ｌが二価連結基であり、Ｘが－Ｈ、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ^＋（ＣＨ_３）_３、－ＣＨ_２ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨ、－ＣＨ_２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_２ＯＨ、又はシクロヘキサン－２，３，４，５，６－ペンタヒドロキシ－１－基であり、ＹがＯＨ又はＯ^－である。

【0029】

本発明において、カルボラン－リン脂質複合体は、リン脂質の１つの脂質アームにカルボランを導入し、その構造が細胞のリン脂質構造と類似ているため、細胞との適合性が良好である。

【0030】

カルボランは、多面体のホウ素－炭素分子クラスター化合物の一種である。本発明において、カルボラン基とは、カルボランのＣ－Ｈ結合から水素原子が失われた基を指す。

【0031】

本発明は、一実施形態において、カルボラン基は、以下のようにカルボランのＣ－Ｈ結合から水素原子を失うことによって得られる。

【化4】

【0032】

言い換えると、カルボラン基は、１，２－Ｃ_２Ｂ_４Ｈ_５－、１，２－Ｃ_２Ｂ_８Ｈ_９－、１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１－、２，３－Ｃ_２Ｂ_４Ｈ_７－、７，８－Ｃ_２Ｂ_９Ｈ_１２－、又は５，６－Ｃ_２Ｂ_８Ｈ_１１－である。

【0033】

好ましい実施形態において、カルボラン基は、８～１１つのホウ素原子を含むカルボランのＣ－Ｈ結合に水素原子が失われたにより得られる。より好ましい実施形態において、カルボラン基は、ジカルバ－クロソ－ドデカボラン（ｄｉｃａｒｂａ－ｃｌｏｓｏ－ｄｏｄｅｃａｂｏｒａｎｅ Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１２）のＣ－Ｈ結合から水素原子が失うことにより得られる、すなわち１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１－である。

【0034】

本発明におけるカルボラン／カルボラン基中のホウ素原子は、天然に存在するホウ素元素から構成されてもよく、^１０Ｂ富化されてもよい。一実施形態において、カルボラン／カルボラン基中１つ又は複数のホウ素原子は、^１０Ｂ富化され、例えば、カルボラン／カルボラン基の^１０Ｂ存在比は、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％又は９７％より高く、さらに９８％又は９９％より高い。^１０Ｂ富化されたカルボランは、^１０Ｂ富化されたホウ酸を原料として調製してもよく、又はＫａｔｃｈｅｍ ｓｐｏｌ．ｓ ｒ．ｏ．，Ｃｚｅｃｈ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ（ｈｔｔｐ／／：ｗｗｗ．ｋａｔｃｈｅｍ．ｃｚ／ｅｎ）から市販されてもよい。

【0035】

一実施形態において、カルボラン／カルボラン基中の少なくとも１つのホウ素原子は、^１０Ｂである。

【0036】

一実施形態において、カルボラン－リン脂質複合体中のホウ素原子は、^１０Ｂ富化されている。例えば、カルボラン－リン脂質複合体中の少なくとも１つのホウ素原子は、^１０Ｂである。

【0037】

一実施形態において、一般式（Ｉ）の^１０Ｂ富化された複合体中の１つ又は複数のホウ素原子の^１０Ｂ存在比は、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％又は８０％より高く、好ましくは９０％、９５％、９６％又は９７％より高く、さらにより好ましくは９８％又は９９％より高い。なお、各ホウ素原子の^１０Ｂの存在比は、他のホウ素原子の^１０Ｂの存在比と同じであっても異なっていてもよい。

【0038】

一実施形態において、一般式（Ｉ）の^１０Ｂ富化された複合体中のホウ素原子当たりの^１０Ｂの存在比は、９０％より高い。

【0039】

この中に、Ｘが－Ｈ、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ^＋（ＣＨ_３）_３、－ＣＨ_２ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨ、－ＣＨ_２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_２ＯＨ、又は、シクロヘキサン－２，３，４，５，６－ペンタヒドロキシ－１－基のカルボラン－リン脂質複合体は、それぞれホスファチジン酸、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトールの誘導体である。

【0040】

一実施形態において、Ｘが－ＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ^＋（ＣＨ_３）_３であり、ＹがＯ^－であり、すなわち、カルボラン－リン脂質複合体は、ホスファチジルコリン誘導体である。

【0041】

本発明において、脂質アーム間の長さの差とは、Ｒ１の先端のカルボキシル基ＣからＲ１の末端の非Ｈ原子までの距離から、Ｒ２の先端のカルボキシル基ＣからＲ２の末端の非Ｈ原子の距離を引いたものを指す。

【0042】

本発明において、脂質アーム間の距離は、一般式（Ｉ）の化合物におけるＲ１のグリセロール基の近傍に一番目のＣとＲ２のグリセロール基の近傍に一番目のＣとの距離である。

【0043】

本発明において、脂質アーム間の二面角とは、Ｒ１の末端の非Ｈ原子、Ｒ１の先端のカルボキシル基Ｃ、Ｒ２の先端のカルボキシル基Ｃ、Ｒ２の末端の非Ｈ原子からなる二面角を指す。

【0044】

本発明のカルボラン－リン脂質複合体の一実施形態において、Ｒ１又はＲ２をそれぞれ含む２つの脂質アームは、下記の条件の１つ、２つ又は３つを満たして：

【0045】

長さの差が±３Ａ以内であり、

【0046】

脂質アーム間の距離が１５Ａ以内であり、

【0047】

二面角が１５度以内である。

【0048】

本発明のカルボラン－リン脂質複合体の一実施形態において、Ｒ１又はＲ２をそれぞれ含む２つの脂質アームは、下記の条件の１つ、２つ又は３つを満たして：

【0049】

長さの差が±２Ａ以内であり、

【0050】

脂質アーム間の距離が１０Ａ以内であり、

【0051】

二面角が１０度以内である。

【0052】

本発明のカルボラン－リン脂質複合体の好ましい実施形態において、Ｒ１又はＲ２をそれぞれ含む２つの脂質アームは、下記の条件の１つ、２つ又は３つを満たして：長さの差が±１Ａ以内であり；脂質アーム間の距離が５Ａ以内であり；二面角が５度以内である。本発明のカルボラン－リン脂質複合体のより好ましい実施形態において、好ましくは同時に３つの条件を満たす。

【0053】

Ｒ１とＲ２の中には、１つが炭素数１０～２４の直鎖アルキル基又はアルケニル基である。一実施形態において、前記直鎖アルキル基又はアルケニル基は、１１、１３、１５、１７、１９、２１又は２３個の炭素原子を含む。

【0054】

本明細書に「アルキル基」とは、ｎ個の炭素及び２ｎ＋１個の水素原子のみからなる直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素鎖基を指す。例えば、Ｃ_１０－Ｃ_２４アルキル基とは、１０～２４個の炭素原子の直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素鎖基を指す。例えば、数値範囲「１０～２４個」とは、与えられた範囲内の各整数を指し、例えば、「１０～２４個の炭素原子」は、当該アルキル基が１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３又は２４個の炭素原子を含むことを示す。直鎖アルキル基とは、分岐鎖を持たさないアルキル基を指し、例えば、デシル基（Ｃ_１０Ｈ_２１－）、ラウリル基（Ｃ_１２Ｈ_２５－）、ミリスチル基（Ｃ_１４Ｈ_２９－）、パルミチル基（Ｃ_１６Ｈ_３３－）、ステアリル基（Ｃ_１８Ｈ_３７－）、エイコシル基（Ｃ_２０Ｈ_４１－）、ドコシル基（Ｃ_２２Ｈ_４５－）又はテトラコシル（Ｃ_２４Ｈ_４９－）である。

【0055】

本発明において、アルケニル基とは、炭素と水素原子のみからなり、少なくとも１つの二重結合（例えば、１つ又は２つの二重結合）を含む直鎖又は分岐鎖の炭化水素鎖基を指す。例えば、シス－９－テトラデセニル基、トランス－９－テトラデセニル基、シス－９－ヘキサデセニル基、トランス－９－ヘキサデセニル基、シス－９－オクタデセニル基、トランス－９－オクタデセニル基、シス－１１－オクタデセニル、シス，シス－９，１２－オクタデカジエニル基、トランス，トランス－９，１２－オクタデカジエニル基、シス－１３－ドコセニル等である。直鎖アルケニル基とは、分岐鎖を持たさないアルケニル基を指す。

【0056】

Ｌは、２価の連結基である。好ましい実施形態において、Ｌは、柔軟な疎水鎖を有する基である。より好ましい実施形態において、Ｌは、カルボラン－リン脂質複合体におけるカルボランを含まない脂質アームの疎水性と柔軟性と同等である。例えば、Ｌが、－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_ｎｍ－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－ＣＨ＝ＣＨ－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－ＣＨ＝ＣＨ－（ＣＨ_２）_ｍ－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－ＣＨ＝ＣＨ－（ＣＨ_２）_ｍ－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｓ－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｓ－（ＣＨ_２）_ｍ＋１－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｏ－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）ｎ－Ｏ－（ＣＨ_２）_ｍ＋１－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｎ（ＣＨ_３）－（ＣＨ_２）_ｍ－、又は－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｎ（ＣＨ_３）－（ＣＨ_２）_ｍ＋１－Ｎ（ＣＨ_３）－であり、ここで、ｎが１～２０の整数であり、ｍが０～２０の整数である。１つ具体的な実施形態において、Ｌが－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－Ｓ－であり、ここで、ｎが１～２０の整数であり、ｍが０～２０の整数であり、例えば、Ｌが－（ＣＨ_２）_１２－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_１３－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_１４－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_１５－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_１６－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_１７－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_１８－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_１９－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_２０－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_２１－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_２２－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_２３－Ｓ－、又は－（ＣＨ_２）_２４－Ｓ－である。

【0057】

好ましい実施形態において、Ｌは、分岐鎖を有さない。

【0058】

本発明の好ましい実施形態において、カルボラン－リン脂質複合体は、下記の構造を有する。

【化5】

ここで、Ｂｏはカルボラン基を示す。ｎは１～２０の整数である。本発明のより好ましい実施形態において、Ｂｏが１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１－であり、好ましくはｃｌｏｓｏ－ジカルバドデカボラン基であり、より好ましくはｃｌｏｓｏ－１，２－ジカルバドデカボラン基であり、ｎが３、７、１１又は１５であり、好ましくは１１である。

【0059】

カルボラン－リン脂質複合体の合成

【0060】

本発明は、カルボラン－リン脂質複合体は、脱水剤、例えばジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）の存在下で、触媒、例えば４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下で、Ｃ－置換カルボラン誘導体、例えばカルボラン基－Ｌ－ＣＯＯＨと、リゾリン脂質を合成し得られる。

【0061】

Ｃ－置換カルボラン誘導体の合成

【0062】

カルボランのケージ構造の強い電子求引性により、Ｃ－Ｈ結合のＨは弱い酸性を示し、強塩基例えばアルキルリチウム試薬と反応することで、一連のＣ－置換カルボラン誘導体が得られる。例えば、カルボランは、ブチルリチウムの作用下で、オキセタン、エチレンオキサイド、又はホルムアルデヒドと反応し、それぞれ－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、－ＣＨ_２ＯＨ基をカルボランに導入することができる。

【0063】

カルボラン基－Ｌ－ＣＯＯＨは、カルボラン基－Ｌ－ＣＨ_２ＯＨを、ＣｒＯ_３などの酸化剤によって酸化されることで得られる。

【0064】

カルボラン誘導体は、モノ置換又は二重置換であってもよい。好ましい実施形態において、得られるカルボラン誘導体は、モノ置換である。

【0065】

カルボラン誘導体は、ｔ－ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）又はトリフェニルシリルを用いてＣ－Ｔｏｐ保護基として合成することができる。例えば、Ｃ－Ｔｏｐ保護基としてトリフェニルシリルを用いて、モノ置換又は二重置換のカルボラン誘導体を合成することができる。

【化6】

Ｃ－置換カルボラン誘導体の合成については、Ｊｕｙｏｕ Ｌｕらの合成化学，２０１５，２３（９）：８８３の総説「Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｎ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｃａｒｂｏｒａｎｅ Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ」及びＨｅ Ｙ Ｔ、Ａｇｅｒ Ｊ、Ｃｌａｒｋ Ｓらの「Ａ ｎｅｗ ｓｅｒｉｅｓ ｏｆ ｏｒｇａｎｏｂｏｒａｎｅｓ ＩＩＩ：Ｓｏｍｅ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ １，２－ｄｉｃａｒｂａｃｌｏｖｏｄｏｄｅｃａｂｏｒａｎｅ（１２）ａｎｄ ｉｔｓ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ、ＩｎｏｒｇａｎｉＣＣｈｅｍｉｓｔｒｙ」，１９６３，２：１０９７－１１０５。

【0066】

リゾリン脂質の合成

【0067】

本発明の合成方法では、市販又は自家製のリゾリン脂質を使用できる。リン脂質を酵素的加水分解することにより、リゾリン脂質を作製でき、１－位アシル基をリン脂質酵素Ａ_１による加水分解し、２－位アシル基をリン脂質酵素Ａ_２による加水分解できる。使用されるリゾリン脂質は、例えば、リゾホスファチジルコリン、リゾホスファチジン酸、リゾホスファチジルエタノールアミン、リゾホスファチジルセリン、リゾホスファチジルイノシトール等を含む。一実施形態において、使用されるリゾリン脂質は、リゾホスファチジルコリン（Ｌｙｓｏ－ＰＰＣ）である。

【0068】

リゾリン脂質の具体的な調製方法は、Ｚｈａｏ Ｌｉらの総説ＣｈｉＮａＯｉｌｓ ａｎｄ Ｆａｔｓ、２０１８、４３（６）：１３２－１４３を参照できる。加水分解用のリン脂質は、市販品で購入してもよく、必要に応じて合成してもよい。

【0069】

下記、化合物ＢｏＰ １－４を例にカルボラン－リン脂質複合体の合成を説明する。

【化7】

化合物ＢｏＰの化学合成経路

【0070】

リポソーム

【0071】

本発明の別の様態は、脂質二重層の一部である上記のカルボラン－リン脂質複合体を含むリポソーム組成物を提供する。

【0072】

本発明のリポソームは、単層リポソームであってもよく、すなわち単一の脂質二重層から構成され、かつ直径が約２０ｎｍから約４００ｎｍの範囲である。本発明のリポソームは、多層リポソームであってもよく、その直径が一般的に１μｍから１０μｍの範囲である。

【0073】

本発明のリポソームは、細胞膜様構造を有するため、細胞に対する親和性が高く、活性成分（治療剤及び／又は診断剤）の細胞への透過性を向上させることができ、これにより、疾患部位における活性成分の濃度及び作用を改善することができる。活性成分がリポソームに封入されているため、組織中での拡散速度が低下し、血中への放出速度が遅くなり、活性成分が作用する時間が長くなる。リポーソム二重層の保護下で、活性成分は、酸化、分解、又は人体内の酸又は酵素による破壊から保護され、活性成分の安定性が確保又は持続できる。

【0074】

本発明の一実施形態において、リポソーム組成物は、コレステロールをさらに含む。コレステロールは、脂質二重層膜を強化し、リン脂質二重層膜の流動性を低下させ、膜の透過性を低下させ、有効成分の漏れを減少させることができると考えられる。同時に、脂質膜の一定の柔軟性を維持し、外部条件の変化に抵抗するリポソーム小胞の能力を強化できる。また、リン脂質の酸化に対して一定の保護作用がある。

【0075】

本発明の一実施形態において、リポソーム組成物は、リン脂質をさらに含み、飽和リン脂質が好ましい。リン脂質としては、例えば、ジラウロイルホスファチジルコリン（ＤＬＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）、ジステアロイルホスファチジルグリセロール（ＤＳＰＧ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジミリストイルホスファチジルセリン（ＤＭＰＳ）、ジステアロイルホスファチジルセリン（ＤＳＰＳ）、ジオレオイルホスファチジルセリン（ＤＯＰＳ）、ジパルミトイルホスファチジルセリン（ＤＰＰＳ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、ジエライドイル（ｄｉｄａｉｄｏｙｌ）ホスファチジルエタノールアミン、水素添加大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）等が挙げられ、好ましくはＤＰＰＣである。好ましい実施形態において、リポソーム組成物に含まれるリン脂質は、式Ｉのカルボラン－リン脂質複合体中のリン脂質構造と類似し、即ち、同一又は類似のＲ１又はＲ２（例えば、１以内の炭素鎖長の差）、並びに同一又は類似のＸ及びＹを有する。リン脂質を添加することにより、二重脂質分子の安定性を向上させ、カルボラン－リン脂質複合体の使用量を低減させることができると考えられる。

【0076】

本発明の一実施形態において、リポソーム組成物は、ＰＥＧ化リン脂質をさらに含む。ＰＥＧ化リン脂質は、ＰＥＧ分子とリン脂質分子とを共有結合により結合してＰＥＧ誘導体化リン脂質を形成し得られ、リポソームの漏れ率を低下させ、その凝集と融合を減少させ、有効期間を延長させることができ、体循環において細胞接着を阻害し、ＲＥＳによるリポソームの認識及び摂取を遮蔽し、リポソームの体内のサイクルタイムを延長させることができると考えられる。ＰＥＧ化リン脂質におけるＰＥＧの分子量は、通常、約５００～約５０００ダルトン（Ｄａ；ｇ／ｍｏｌ）、例えば、７５０ Ｄａ、１０００ Ｄａ、２０００ Ｄａ又は５０００ Ｄａの分子量である。ＰＥＧ化リン脂質におけるＰＥＧは、直鎖又は分岐鎖構造を有していてもよい

【0077】

本発明の一実施形態において、ＰＥＧ化リン脂質は、好ましくはＤＬＰＥ－ＰＥＧ、ＤＰＰＥ－ＰＥＧ、ＤＭＰＥ－ＰＥＧ又はＤＳＰＥ－ＰＥＧであり、より好ましくはＤＳＰＥ－ＰＥＧである、例えばＤＳＰＥ－ＰＥＧ２０００及びＤＳＰＥ－ＰＥＧ５０００である。

【0078】

本発明の一実施形態において、リポソーム組成物は、コレステロールとリン脂質を同時に含む。

【0079】

本発明の一実施形態において、リポソーム組成物は、コレステロール、リン脂質及びＰＥＧ化リン脂質を同時に含む。本発明の好ましい実施形態において、リポソーム組成物は、コレステロール、リン脂質及びＰＥＧ化リン脂質を同時に含み、リン脂質及びＰＥＧ化リン脂質の脂質アームの差が０、１、又は２個の炭素原子である。

【0080】

本発明のリポソームは、さらに、安定剤、酸化防止剤、ｐＨ調整剤、矯味剤、担体、希釈剤、賦形剤などの薬学的に許容される製剤助剤を含んでもよい。薬学的に許容されるとは、製剤助剤が製剤の他の成分と適合していなければならず、製剤を投与される被験者に無害であることを意味する。本発明において、被験者とは、哺乳動物を意味し、ヒト又はペットであってもよい。

【0081】

本発明の一実施形態において、リポソーム組成物は、少なくとも１つの治療剤及び／又は少なくとも１つの診断剤をさらに含む。前記治療剤又は診断剤は、リポソームの水コンパートメントに封入されていてもよく、又は脂質二重層に組み込まれていてもよい。図１に示すように、水溶性の化学療法剤は、ホウ素化リン脂質からなるリポソームの水コンパートメントに封入されてもよい。

【0082】

治療剤として使用できる適切な分子には、ポリペプチド、オリゴペプチド、ペプトイド、アミノ酸、酵素阻害剤、ホルモン、トキシン、抗生物質、抗炎症物質、抗がん剤、免疫阻害剤、気管支拡張剤等が含まれるが、これらに限定されない。

【0083】

好ましい実施形態において、リポソーム組成物は、少なくとも１つの治療剤を含み、前記治療剤が抗がん剤である。

【0084】

前記治療剤は、例えば、代謝拮抗薬（例えば、葉酸拮抗薬（例えば、メトトレキサート）、フルオロピリミジン類（例えば、５－フルオロウラシル）、プリン及びアデノシン類縁体、シタラビン）、インターカレーション性抗腫瘍抗生物質（例えば、アントラサイクリン類（例えば、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン（ｉｄａｒｕｂｉｃｉｎ）、マイセマイシンＣ（ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ－Ｃ）、ダクチノマイシン及びミトラマイシン（ｍｉｔｈｒａｍｙｃｉｎ）））、白金誘導体（例えば、シスプラチン及びカルボプラチン）、アルキル化剤（例えば、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロランブシル、ブスルファン、シクロホスファミド、イホスファミド、ニトロソ尿素、チオテパ（ｔｈｉｏｔｅｐａ）、抗有糸分裂薬（例えば、ビンカアルカロイド類（例えばビンクリスチン）及びタキサン類（例えば、（パクリタキセル）、（ドセタキセル））及びより新規な微小管薬（ｍｉｃｒｏｂｔｕｂｕｌｅ ａｇｅｎｔ）（例えば、エポチロン（ｅｐｏｔｈｉｌｏｎｅ）類縁体、ディスコデルモリド（ｄｉｓｐｅｒｓｍｏｌｉｄｅ）類縁体及びエレウスロビン（ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｂｉｎ）類縁体））、トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エピポドフィロトキシン類（例えば、エトポシド、テニポシド、アンサコリン及びトポテカン））、細胞周期阻害剤（例えば、フラボピリドール（ｆｌａｖｏｐｙｒｉｄｏｌ））、生体応答調節剤（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｍｏｄｉｆｉｅｒ）及びプロテアソーム阻害剤（例えば、ボルテゾミブ（ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ）））であってもよい。

【0085】

例えば、前記抗がん剤は、モノメチルオーリスタチンＥ、モノメチルオーリスタチンＦ、イブルチニブ、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブ、ドキソルビシン、マイトマイシン－Ｃ、マイトマイシン－Ａ、ダウノルビシン、アミノプテリン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、９－アミノカンプトテシン、Ｎ８－アセチルスペルミジン、１－（２－クロロエチル）－１，２－ジメタンスルホニルヒドラジド、雲南マイシン、ゲムシタビン、シタラビン、ドラスタチン、ダカルバジン、５－フルオロウラシル、パクリタキセル、ドセタキセル（Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、ゲムシタビン、シタラビン、６－メルカプトプリン、ビンクリスチン、シスプラチン、オキサリプラチン、ＰＡＲＰ阻害剤から選択される。

【0086】

一実施形態において、抗がん剤は、ＰＡＲＰ阻害剤から選択され、好ましくはオラパリブ、ニラパリブ、ルカパリブ、フルゾパリブ、パミパリブ、ベリパリブ、タラゾパリブであり、より好ましくはオラパリブである。

【0087】

本発明のリポソームは、診断剤を含んでもよい。本発明で使用される診断剤には、以下の参考文献によって提供されるような、当該技術分野でしられている任意の診断剤が含まれる：Ａｒｍｓｔｒｏｎｇら，Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｉｍａｇｉｎｇ，第５版，Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ（２００４）；Ｔｏｒｃｈｉｌｉｎ，Ｖ．Ｐ． 編，Ｔａｒｇｅｔｅｄ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ Ｉｍａｇｉｎｇ Ａｇｅｎｔｓ，ＣＲＣＰｒｅｓｓ（１９９５）；Ｖａｌｌａｂｈａｊｏｓｕｌａ，Ｓ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍａｇｉｎｇ：Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｆｏｒ ＰＥＴ ａｎｄ ＳＰＥＣＴ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ（２００９）。診断剤は、γ－線放出信号、放射性信号、エコー源性信号、光学信号、蛍光信号、吸収信号、磁気信号、又は断層撮影信号を含むが、これらに限らない、検出可能な信号を提供及び／又は増強する薬剤を含む、様々な手段によって検出することができる。

【0088】

診断薬をイメージングするための技術は、単光子放射型コンピューター断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）、磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）、光学イメージング、陽電子放出断層撮影術（ＰＥＴ）、コンピューター断層撮影術（ＣＴ）、Ｘ線イメージング、γ線イメージング等が含まれるが、これらに限定されない。前記診断剤は、種々の方法によって治療性リポソームに結合することができ、例えば、前記リポソームに埋め込み又は封入を含む。

【0089】

いくつかの実施形態において、診断剤は、金属イオンに結合して複数の診断イメージング技術に使用されるキレート剤を含んでもよい。キレート剤の例としては、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、［４－（１，４，８，１１－テトラアザシクロテトラデカン－１－イル）メチル］安息香酸（ＣＰＴＡ）、シクロヘキサンジアミン四酢酸（ＣＤＴＡ）、エチレングリコールビス（２－アミノエチルエーテル）四酢酸（ＥＧＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、クエン酸、ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、イミノジ酢酸（ＩＤＡ）、トリエチレンテトラミン六酢酸（ＴＴＨＡ）、１，４，７，１０－テトラアザシクロドデカン１，４，７，１０－テトラキス（メチレンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）、１，４，８，１１－テトラアザシクロドデカン１，４，８，１１－四酢酸（ＴＥＴＡ）、１，４，７，１０－テトラアザシクロドデカン１，４，７，１０－四酢酸（ＤＯＴＡ）及びその誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。

【0090】

放射性同位体は、本明細書に記載のいくつかの診断剤に組み込まれてもよく、γ線、陽電子、β及びα粒子、及びＸ線を放射する放射性核種を含んでもよい。適切な放射性核種としては^２２５Ａｃ、^７２Ａｓ、^２１１Ａｔ、^１１Ｂ、^１２８Ｂａ、^２１２Ｂｉ、^７５Ｂｒ、^７７Ｂｒ、^１４Ｃ、^１０９Ｃｄ、^６２Ｃｕ、^６４Ｃｕ、^６７Ｃｕ、^１８Ｆ、^６７Ｇａ、^６８Ｇａ、^３Ｈ、^１２３Ｉ、^１２５Ｉ、^１３０Ｉ、^１３１Ｉ、^１１１Ｉｎ、^１７７Ｌｕ、^１３Ｎ、^１５Ｏ、^３２Ｐ、^３３Ｐ、^２１２Ｐｂ、^１０３Ｐｄ、^１８６Ｒｅ、^１８８Ｒｅ、^４７Ｓｃ、^１５３Ｓｍ、^８９Ｓｒ、^９９ｍＴｃ、^８８ｙ及び^９０ｙを含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、放射性試薬には、^１１１Ｉｎ－ＤＴＰＡ、^９９ｍＴｃ（ＣＯ）_３－ＤＴＰＡ、^９９ｍＴｃ（ＣＯ）_３－ＥＮＰｙ_２、^{６２／６４／６７}Ｃｕ－ＴＥＴＡ、^９９ｍＴｃ（ＣＯ）_３－ＩＤＡ、及び^９９ｍＴｃ（ＣＯ）_３トリアミン（環状又は直鎖）を含むことができる。他の実施形態において、前記試薬は、ＤＯＴＡ及び^１１１Ｉｎ、^１７７Ｌｕ、^１５３Ｓｍ、^{８８／９０}ｙ、^{６２／６４／６７}Ｃｕ、又は^{６７／６８}Ｇａを有する多様な類縁体が含まれる。いくつかの実施形態において、前記リポソームは、放射標識され、例えば、以下の参考文献に提供されるように、ＤＴＰＡ脂質などのキレート剤に結合した脂質を組み込むことによって放射標識されてもよく：Ｐｈｉｌｌｉｐｓら、Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｄｉｓｃｉｐｌｉｎａｒｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ：Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｎａｎｏｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１ （１）： ６９－８３ （２００８）、Ｔｏｒｃｈｉｌｉｎ、Ｖ．Ｐ． ＆ Ｗｅｉｓｓｉｇ、編、リポソーム第 ２ 版： Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖ． Ｐｒｅｓｓ、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ。 Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ ３３：１１９６－１２０５（２００６）；Ｍｏｕｇｉｎ－Ｄｅｇｒａｅｆ、Ｍ．

【0091】

他の実施形態において、前記診断剤は、蛍光剤、燐光試薬、化学発光試薬などの光学試薬を含んでもよい。種々の試薬（例えば、染料、プローブ、標識又は指示薬）は、当技術分野で既知であり、本発明において使用することができる。（例えば、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｔｈｅ Ｈａｎｄｂｏｏｋ－Ａ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｐｒｏｂｅｓ ａｎｄ Ｌａｂｅｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、第１０版（２００５）を参照する）。蛍光剤は、複数種類の有機及び／又は無機小分子又は複数の蛍光タンパク質及びその誘導体を含んでいてもよい。例えば、蛍光剤としては、特に限定されないが、シアニン、フタロシアニン、ポルフィリン、インジゴ、ローダミン、フェノキサジン、フェニルキサンテン、フェノチアジン、フェノセレナジン、フルオレセイン、ベンゾポルフィリン、スクアリウム、ジピロロピリミジンケトン、テトラセン（ｔｅｔｒａｃｅｎｅｓ）、キノリン、ピラジン、コリン（ｃｏｒｒｉｎ）、クロコン酸（ｃｒｏｃｏｎｉｕｍｓ）、アクリドン、フェナントリジン、ローダミン、アクリジン、アントラキノン、カルコゲノピリリウム（ｃｈａｌｃｏｇｅｎｏｐｙｒｙｌｉｕｍ）類縁体、クロリン、ナフタロシアニン、メチン染料（ｍｅｔｈｉｎｅｄｙｅｓ）、インドレニウム染料（ｉｎｄｏｌｅｎｉｕｍｄｙｅｓ）、アゾ化合物、カモミールブルー、アザカモミールブルー、トリフェニルメタン染料、インドール、ベンゾインドール、インドールカルボシアニン、ベンズインドールカルボシアニン、及び４，４－ジフルオロ－４－ボロン－３ａ，４ａ－ジアザ－ｓ－インダセン誘導体の一般構造を有するＢＯＤＩＰＹ ＴＭ誘導体、及び／又はこれらの複合体及び／又は誘導体が挙げられる。使用可能なその他の試薬としては、これらに限定されないが、例えば、フルオレセイン、フルオレセイン－ポリアスパラギン酸複合体、フルオレセイン－ポリグルタミン酸複合体、フルオレセイン－ポリアルギニン複合体、インディゴグリーン、インジゴ－ドアスパラギン酸複合体、インジゴ－ポリアスパラギン酸複合体、イソスルファンブルー、インドールジスルホネート（ｉｎｄｏｌｅｄｉｓｕｌｆｏｎａｔｅｓ）、ベンズインドールジスルホネート、ビス（エチルカルボキシメチル）インジゴ、ビス（ペンチルカルボキシメチル）インジゴ、ポリヒドロキシインドールスルホネート、ポリヒドロキシベンゾインドールスルホネート、硬質ヘテロ原子インドールスルホネート、インジゴジプロピオン酸、インジゴビスカプロン酸、３，６－ジシアノ－２，５－［（Ｎ，Ｎ，’，Ｎ’－テトラキス（カルボキシメチル）アミノ］ピラジン、３，６－［（Ｎ，Ｎ，’，Ｎ’－テトラキス（２－ヒドロキシエチル）アミノ］ピラジン－２，５－ジカルボン酸、３，６－ビス（Ｎ－アゼチジニル（ａｚａｔｅｄｉｎｏ））ピラジン－２，５－ジカルボン酸、３，６－ビス（Ｎ－モルホリノ）ピラジン－２，５－ジカルボン酸、３，６－ビス（Ｎ－ピペラジノ）ピラジン－２，５－ジカルボン酸、３，６－ビス（Ｎ－チオモルホリノ）ピラジン－２，５－ジカルボン酸、３，６－ビス（Ｎ－チオモルホリノ）ピラジン－２，５－ジカルボン酸Ｓ－オキシド、２、５－ジシアノ－３、６－ビス（Ｎ－チオモルホリノ）ピラジンＳ，Ｓ－ジオキシド、インドカルボシアニンテトラスルホネート（ｉｎｄｏｃａｒｂｏｃｙａｎｉｎｅｔｅｔｒａｓｕｌｆｏｎａｔｅ）、クロロインドールカルボシアニン、及び３，６－ジアミノピラジン－２，５－ジカルボン酸が挙げられる。

【0092】

本発明の好ましい実施形態において、リポソーム組成物は、^６４Ｃｕ－ＮＯＴＡ－ＰＥＧ２０００－ＤＳＰＥである少なくとも１つの診断剤を含む。

【0093】

本発明のリポソームは、当該技術分野で通常の方法、例えば、注入法（エタノール注入法及びエチルエーテル注入法）、薄膜分散法、逆相蒸発法、化学勾配法（ｐＨ勾配法、硫酸アンモニウム勾配法、酢酸カルシウム勾配法）、複エマルジョン法、凍結乾燥法などにより調製することができ、中国薬学雑誌、第４６巻、第１４号、１０８４～１０８８ページ、２０１１年を参照する。

【0094】

一実施形態において、エタノール注入法又は薄膜分散法によって硫酸アンモニウム溶液を含むブランクリポソームを調製し、その後、リポソーム膜の外部硫酸アンモニウムを除去した後に硫酸アンモニウムの勾配を形成し、硫酸アンモニウム勾配法によって治療剤又は診断剤を担持するリポソームを形成する。

【0095】

本発明のリポソームの粒子径は、熱力学的光散乱法、例えばＺｅｔａｓｉｚｅｒ ３０００ＳＨ レーザ粒子測定器（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｌｔｄ）により測定することができ、直径は主に約２０から約１５０ｎｍである。

【0096】

本発明のリポソームの封入効率は、遠心法、透析法、ゲルカラムクロマトグラフィー法などにより測定することができる。

【0097】

本発明によるリポソームは、必要に応じて、経口又は非経口の形態（例えば、静脈内、皮下、腹腔内又は局所）の注入を採用することができ、注入量は、患者の体重、年齢、性別、健康状態、食事、注入時間、注入方法、排泄率及び疾患の重症度などの状況に応じて異なる。例えば、本発明のリポソームは、必要に応じて静脈内投与、肺投与（霧化吸入又は乾燥粉末吸入）、皮膚投与に供することができる。注入量は、上記リポソームに含まれる治療剤又は診断剤で約０．１－１０ｍｇ／ｋｇ体重である。

【実施例】

【0098】

実施例の出発材料は、市販されている及び／又は有機合成分野の当業者に周知の様々な方法で製造することができる。有機合成分野の当業者は、下記の合成方法の中で反応条件（溶媒、反応雰囲気、反応温度、実験の持続時間及び後処理を含む）を適宜選択する。有機合成分野の当業者あれば、分子の各部に存在する官能基が、提案された試薬及び反応と適合するはずであることを理解する。ＮＭＲは、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＶＡＮＣＥ ４００ＭＨｚスペクトロメーターを用いて記録した。高分解能質量スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ Ｆｏｕｒｉｅｒ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍ Ｉｏｎ Ｃｙｃｌｏｔｒｏｎ共振質量分析計を用いて測定した。使用されるＬＣ／ＭＳは、Ｗａｔｅｒｓ ｅ２６９５であり、Ｗａｔｅｒｓ ２９９５ ＰＤＡ及びＷａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＱＤＡ 質量分析計を備えた。

【0099】

１ 一連のＢｏＰの化学合成

【0100】

一連のＢｏＰ（ＢｏＰ １－４）は、上記の合成経路を用いて合成され、そのうち、炭素鎖のメチレン基の数はｎ＝３、７、１１、１５であり、対応する化合物の番号は小さい順から配置され、合計収率は１１％～２０％、純度＞９７％である

【0101】

ＢｏＰ－３の具体的な合成手順と特性評価方法は次のとおりである：

【0102】

（１）カルボランメルカプトトリエチルアミン塩（１）の化学合成：

【0103】

基質（ｏ－カルボラン、１．００ｇ、６．９３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３０ｍＬ）に溶解させ、無水かつ酸素のない条件下で０℃まで冷却した。ｎ－ブチルリチウム（４．４ｍＬ、６．９３ｍｍｏｌ）を溶液に１５分間かけて滴下し、３０分間撹拌した。次に、システムを３０分間室温に戻した。昇華した硫黄（２２５ｍｇ，６．９３ｍｍｏｌ）を加え、氷水浴条件下で３０分間反応させた。次に、システムを３０分間室温に戻した。溶液をスピン乾燥させて、黄色の液体を得た。次いで、未反応のｎ－ブチルリチウムをクエンチングするための塩酸（１Ｍ、７ｍＬ）を添加した。溶液をｎ－ヘキサンで抽出し、水及び飽和食塩水で連続的に洗浄し、スピン乾燥させた。室温条件下で上記生成物のｎ－ヘキサン溶液（６ｍＬ）にトリエチルアミン（１ｍＬ、７．１８ｍｍｏｌ）を滴下し、１５分間撹拌した。白色の沈殿物が形成された後、それを吸引濾過し、６ｍｌのｎ－ヘキサンで３回洗浄し、空気中で乾燥させた。

【0104】

（２）カルボラン化脂肪酸の調製：１－ＨＯＯＣ（ＣＨ_２）_１１Ｂｒ（９．３ｍｍｏｌ）のエタノール（５０ｍＬ）溶液に濃硫酸５ｍＬを滴下し、室温で１５分間撹拌し、１２時間加熱還流した。混合物を冷却し、スピン乾燥させた。酢酸エチル（３０ｍＬ）と水（３０ｍＬ）を加えて抽出し、純水と飽和食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、スピン乾燥した。粗生成物を、溶離剤として石油エーテル及び酢酸エチルを使用するシリカゲルカラムでカラムクロマトグラフィーにより行った。溶媒を減圧下でスピン乾燥させた後、１－Ｃ_２Ｈ_５ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_１１Ｂｒを得た。１（１．８６ｍｍｏｌ）のエタノール（４２ｍＬ）溶液に、Ｂｒ（ＣＨ_２）_１１Ｃ（Ｏ）ＯＣ_２Ｈ_５（１．８６ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５分間撹拌して加熱反応１６ｈを行った。反応混合物を冷却した後、スピン乾燥させた。残りを酢酸エチル（３０ｍＬ）で抽出し、純水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を分離した後、それを水と飽和食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、スピン乾燥した。粗生成物をシリカゲルカラムでカラムクロマトグラフィーを行った。溶媒を減圧下でスピン乾燥させた後、１－Ｃ_２Ｈ_５ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_１１Ｓ－１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１を得た。それを氷酢酸（２９ｍＬ）に溶解し、無色透明の溶液を形成した。室温で１５分間撹拌した後、純水（９．８ｍＬ）及び濃硫酸（９．８ｍＬ）を順次滴下して１６時間加水分解し、１－ＨＯＯＣＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_１１Ｓ－１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１（２）が得られた。

【0105】

（３）ＢｏＰ－３の調製：０．１Ｍカルボラン基脂肪酸（炭素数は１２、２）（２．０当量）のクロロホルム溶液にジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、２．６当量）及び４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ、４．０当量）を加えた。溶液を室温で５分間撹拌した。Ｌｙｓｏ－ＰＰＣ（１．３当量）を加え、反応撹拌を２４時間行った。ロータリーエバポレーターを用いて反応混合物を濃縮した。カラムクロマトグラフィー（６５：２５：４ ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏ）で精製して、ＢｏＰ－３を得た。

【0106】

（４）ＢｏＰ－３の特性評価：分子動力学シミュレーションにより、異なる炭素原子数のＢｏＰｓ（ＢｏＰ－１、ＢｏＰ－２、ＢｏＰ－３、ＢｏＰ－４、）からなる膜構造の配座を観察し、ＢｏＰ－３の配座が最も安定で、長鎖の折り畳み程度が最も小さく、ＤＰＰＣによる膜構造に最も近いことが分かった（図５－図９）。同時に薬剤担持効率のテストを行い、スルホローダミンＢ（ＳＲＢ）を封入し、５５０ｎｍでの吸収を測定し、ＢｏＰ－３の吸収の程度が最も高いことがわかり（図１０）、膜構造が最も完全であることを示す。同時に、ＳＲＢの漏れ状況を測定したところ、３７℃の条件下で５０％のウシ血清で２４ｈ培養し、ＢｏＰ－３のＳＲＢ漏れパーセンテージが最も少ないことがわかった（図１１）。同時に、核磁気共鳴水素スペクトルの手段により特性評価され、正確な構造を示す。ＢｏＰ－３形成膜構造の情報をより直観的に取得するために、ＢｏＰ－３、ＤＰＰＣ、コレステロール及びＤＰＰＥ－ＰＥＧ２０００からなるホウ素リポソームを調製し、透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）により観察した結果、押出機により粒子径及び透析精製を制御し、ホウ素リポソームが直径３０－１００ｎｍの球形担体で、形状が規則的で、且つほとんど破損しなかったことがわかった（図３を参照する）。この球状担体の多分散指数とゼータ電位（ζ電位）を同時に測定し、ドキソルビシン（Ｄｏｘ）を包んだ後、電気的に中性は－３．１ｍＶに達し、有効な薬剤担持性能を示す。

【0107】

ＢｏＰ－１、ＢｏＰ－２、ＢｏＰ－４の製造：

【0108】

ＢｏＰ－１、ＢｏＰ－２、ＢｏＰ－４は、最初にカルボラン化脂肪酸を合成するときに選択されるブロモカルボン酸の炭素鎖長を除いて、ＢｏＰ－３の調製とほぼ同一である。このうち、ＢｏＰ－１の基質は１－ＨＯＯＣ（ＣＨ_２）_３Ｂｒ、ＢｏＰ－２の基質は１－ＨＯＯＣ（ＣＨ_２）_７Ｂｒ、ＢｏＰ－４の基質は１－ＨＯＯＣ（ＣＨ_２）_１５Ｂｒである。詳細は次のとおりである。

【0109】

（１）ＢｏＰ－１：１－ＨＯＯＣ（ＣＨ_２）_３Ｂｒ（９．３ｍｍｏｌ）のエタノール（５０ｍＬ）溶液に濃硫酸５ｍＬを滴下し、室温で１５分間撹拌し、１２時間加熱還流した。混合物を冷却し、スピン乾燥した。酢酸エチル（３０ｍＬ）と水（３０ｍＬ）を加えて抽出し、純水と飽和食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、スピン乾燥した。粗生成物を、溶離剤として石油エーテル及び酢酸エチルを使用するシリカゲルカラムでカラムクロマトグラフィーにより行った。溶媒を減圧下でスピン乾燥させた後、１－Ｃ_２Ｈ_５ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_３Ｂｒが得られた。１（１．８６ｍｍｏｌ）のエタノール（４２ｍＬ）溶液に、Ｂｒ（ＣＨ_２）_３Ｃ（Ｏ）ＯＣ_２Ｈ_５（１．８６ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５分間撹拌して加熱反応１６ｈを行った。反応混合物を冷却した後、スピン乾燥させた。残りを酢酸エチル（３０ｍＬ）で抽出し、純水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を分離した後、それを水と飽和食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、スピン乾燥した。粗生成物をシリカゲルカラムでカラムクロマトグラフィーを行った。溶媒を減圧下でスピン乾燥させた後、１－Ｃ_２Ｈ_５ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_３Ｓ－１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１が得られた。それを氷酢酸（２９ｍＬ）に溶解し、無色透明の溶液を形成した。室温で１５分間撹拌した後、純水（９．８ｍＬ）及び濃硫酸（９．８ｍＬ）を順次滴下して１６時間加水分解し、１－ＨＯＯＣＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_３Ｓ－１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１（３）が得られ、０．１Ｍカルボラン基脂肪酸（炭素数は４、３）（２．０当量）のクロロホルム溶液にジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、２．６当量）及び４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ、４．０当量）を加えた。溶液を室温で５分間撹拌した。Ｌｙｓｏ－ＰＰＣ（１．３当量）を加え、反応撹拌を２４時間行った。ロータリーエバポレーターを用いて反応混合物を濃縮した。カラムクロマトグラフィー（６５：２５：４ ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏ）で精製してＢｏＰ－１が得られた。

【0110】

（２）ＢｏＰ－２：１－ＨＯＯＣ（ＣＨ_２）_７Ｂｒ（９．３ｍｍｏｌ）のエタノール（５０ｍＬ）溶液に濃硫酸５ｍＬを滴下し、室温で１５分間撹拌し、１２時間加熱還流した。混合物を冷却し、スピン乾燥させた。酢酸エチル（３０ｍＬ）と水（３０ｍＬ）を加えて抽出し、純水と飽和食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、スピン乾燥した。粗生成物を、溶離剤として石油エーテル及び酢酸エチルを使用するシリカゲルカラムでカラムクロマトグラフィーにより行った。溶媒を減圧下でスピン乾燥させた後、１－Ｃ_２Ｈ_５ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_７Ｂｒが得られた。１（１．８６ｍｍｏｌ）のエタノール（４２ｍＬ）溶液に、Ｂｒ（ＣＨ_２）_７Ｃ（Ｏ）ＯＣ_２Ｈ_５（１．８６ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５分間撹拌して加熱反応１６ｈを行った。反応混合物を冷却した後、スピン乾燥させた。残りを酢酸エチル（３０ｍＬ）で抽出し、純水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を分離した後、それを水と飽和食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、スピン乾燥した。粗生成物をシリカゲルカラムでカラムクロマトグラフィーを行った。溶媒を減圧下でスピン乾燥させた後、１－Ｃ_２Ｈ_５ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_７Ｓ－１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１が得られた。それを氷酢酸（２９ｍＬ）に溶解し、無色透明の溶液を形成した。室温で１５分間撹拌した後、純水（９．８ｍＬ）及び濃硫酸（９．８ｍＬ）を順次滴下して１６時間加水分解し、１－ＨＯＯＣＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_７Ｓ－１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１（４）が得られ、０．１Ｍカルボラン基脂肪酸（炭素数は８、４）（２．０当量）のクロロホルム溶液にジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、２．６当量）及び４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ、４．０当量）を加えた。溶液を室温で５分間撹拌した。Ｌｙｓｏ－ＰＰＣ（１．３当量）を加え、反応撹拌を２４時間行った。ロータリーエバポレーターを用いて反応混合物を濃縮した。カラムクロマトグラフィー（６５：２５：４ ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏ）で精製してＢｏＰ－２が得られた。

【0111】

（３）ＢｏＰ－４：１－ＨＯＯＣ（ＣＨ_２）_１５Ｂｒ（９．３ｍｍｏｌ）のエタノール（５０ｍＬ）溶液に濃硫酸５ｍＬを滴下し、室温で１５分間撹拌し、１２時間加熱還流した。混合物を冷却し、スピン乾燥させた。酢酸エチル（３０ｍＬ）と水（３０ｍＬ）を加えて抽出し、純水と飽和食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、スピン乾燥した。粗生成物を、溶離剤として石油エーテル及び酢酸エチルを使用するシリカゲルカラムでカラムクロマトグラフィーにより行った。溶媒を減圧下でスピン乾燥させた後、１－Ｃ_２Ｈ_５ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_１５Ｂｒが得られた。１（１．８６ｍｍｏｌ）のエタノール（４２ｍＬ）溶液に、Ｂｒ（ＣＨ_２）_１５Ｃ（Ｏ）ＯＣ_２Ｈ_５（１．８６ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５分間撹拌して加熱反応１６ｈを行った。反応混合物を冷却した後、スピン乾燥させた。残りを酢酸エチル（３０ｍＬ）で抽出し、純水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を分離した後、それを水と飽和食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、スピン乾燥した。粗生成物をシリカゲルカラムでカラムクロマトグラフィーを行った。溶媒を減圧下でスピン乾燥させた後、１－Ｃ_２Ｈ_５ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_１５Ｓ－１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１が得られた。それを氷酢酸（２９ｍＬ）に溶解し、無色透明の溶液を形成した。室温で１５分間撹拌した後、純水（９．８ｍＬ）及び濃硫酸（９．８ｍＬ）を順次滴下して１６時間加水分解し、１－ＨＯＯＣＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_１５Ｓ－１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１（４）が得られ、０．１Ｍカルボラン基脂肪酸（炭素数は１６、５）（２．０当量）のクロロホルム溶液にジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、２．６当量）及び４－ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ、４．０当量）を加えた。溶液を室温で５分間撹拌した。Ｌｙｓｏ－ＰＰＣ（１．３当量）を加え、反応撹拌を２４時間行った。ロータリーエバポレーターを用いて反応混合物を濃縮した。カラムクロマトグラフィー（６５：２５：４ ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏ）で精製してＢｏＰ－４が得られた。

【0112】

２ ホウ素リポソームの組成と調製

【0113】

総質量が２０ｍｇのジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、コレステロール（Ｃｈｏｌ）、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン－ポリエチレングリコール２０００（ＤＳＰＥ－ＰＥＧ ２ｋ）及びＢｏＰを（ＢｏＰ：ＤＰＰＣ：Ｃｈｏｌ：ＤＳＰＥ－ＰＥＧ ２ｋ＝５０：１０：４０：１、ｍｏｌ％）の割合で、６０℃で１ｍＬのエタノールに溶解させた後、６０℃で硫酸アンモニウム緩衝液（４ｍＬ、２５０ｍＭ、ｐＨ＝５．５）を注入した。その後、リポソーム溶液を６０℃でリポソーム押出器に通し、膜孔径を２００ｎｍとし、計１０回押圧した。その後、膜孔径１００ｎｍの膜に換え、計１０回押圧を続けた。遊離した硫酸アンモニウムは、１０％スクロースと１０ｍＭヒスチジン（ｐＨ＝６．５）からなる溶液８００ｍＬ中で透析除去され、１２時間内に少なくとも２回透析液が交換された。

【0114】

３ ホウ素リポソームの薬剤担持

【0115】

スルホローダミン（ＳＲＢ）を担持したホウ素リポソームに対して、前記製剤の脂質をエタノールに溶解し、５０ｍＭ ＳＲＢと水和し、４５℃で３０ｍｉｎ超音波処理した。ドキソルビシン（Ｄｏｘ）は、硫酸アンモニウム勾配法によって担持される。薬脂モル比が１：８のＤｏｘをリポソーム溶液に添加し、６０℃で１ｈ培養し、ＳＲＢ放出率（％ＳＲＢ放出率＝（Ａ_{ｆｉｎａｌ}－Ａ_{ｉｎｉｔｉａｌ}）／（Ａ_{Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ－１００}－Ａ_{ｉｎｉｔｉａｌ}）×１００％を吸光度とし、その安定性と封止能力を評価した。

【0116】

４ ホウ素リポソームの特性評価（動的光散乱、ζ電位解析、形態学的検査、三次元モデル構築）

【0117】

ＭａｌｖｅｒｎのＺｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳで動的光散乱及びゼータ電位解析を行った。ホウ素リポソームの形態学的検査は２００ｋＶ（ＪＥＭ－２１００、ＪＥＯＬ、Ｊａｐａｎ）のＴＥＭにより行った。リポソーム溶液の一滴を超薄炭素膜で被覆された銅メッシュに添加し、室温で１０分間乾燥させた。酢酸ウラニル溶液（４％ｗ／ｖ）でネガティブ染色する前に過剰な溶液を除去した後、水で洗浄し、在密度汎関数法／Ｂｅｃｋｅ、三パラメータ、Ｌｅｅ－Ｙａｎｇ－Ｐａｒｒ及び６－３１Ｇ＊基底（ＤＦＴ／Ｂ３ＬＹＰ／６－３１Ｇ＊）で最適化を行った後、Ｓｐａｒｔａｎ１４ソフトウェアを用いてＢｏＰｓの三次員構造を予測した。炭素アームの長さＩ_ｂ、ホウ素アームの長さΔｌ、脂質アームの長さ差ｄ、脂質アームのピッチθ、脂質アームの二面角（°）などのパラメータを測定して評価した。

【0118】

【表1】

【0119】

５ ホウ素リポソームの放射性標識

【0120】

北京大学腫瘍病院から提供された^６４ＣｕＣｌ_２を０．０１Ｍ塩酸に溶解した。ＮＯＴＡ－ホウ素リポソームは、指定された成分（ＢｏＰ－３：ＤＰＰＣ：コレステロール：ＤＳＰＥ－ＰＥＧ２ｋ－ＮＯＴＡ＝５０：１０：４０：１、ｍｏｌ％）に従って調製された。ＮａＡｃバッファー（１ｍＬ，ｐＨ＝５．５，０．２Ｍ）をホウ素リポソーム溶液（１００μＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ）に加え、^６４ＣｕＣｌ_２（１８．５ＭＢｑ）とともに３７℃で２時間インキュベートし、溶離剤としてＰＢＳを使用する。ＰＤ－１０サイズ排除クロマトグラフィーにより^６４Ｃｕ－ＮＯＴＡ－ホウ素リポソームを精製し、放射化学的な収率は９０％以上である。

【0121】

ホウ素含有分子の選択において、リポソーム膜に結合するホウ素含有分子として、高疎水性かつ低求核性のカルボラン（Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１２）を選択した。カルボランは、ホウ素含有量が多く、良好なＢＮＣＴ効果を提供できる。したがって、リン脂質分子（Ｌｙｓｏ－ＰＰＣ）にホウ素化されたアシル基（カルボラン化脂肪酸）を結合させ、クリックケミストリーに代えてＴｈｉｏｌ－ｈａｌｏ反応を利用してリン脂質の柔軟性を維持するために。しかしながら、三次元構造の分子としてカルボランが存在するため、立体障害による脂質二重層の形成安定性への影響を考慮する必要がある。したがって、異なる長さのカルボラン化脂肪酸（炭素鎖Ｃの原子数はそれぞれ４、８、１２、１６であり、実際の応用では上記炭素数に限定されない）を選別した。最初に、まず、異なる炭素原子数のＢｏＰｓの三次元構造を検証し、ジパルミトイルホスファチジルコリンＤＰＰＣをリファレンスとして、カルボラン化脂肪酸が異なる炭素原子数を有する条件における２本の脂質アームの長さを比較したところ、ＢｏＰ－３の長さの差が最も小さく、さらにＤＰＰＣよりも小さく、これは最も安定な膜構造を形成するのに役立つことがわかった。他のパラメータ、例えば、脂質アーム間の距離、二面角などについて、ＢｏＰ－３がＤＰＰＣに最も近いことがわかった。これに基づいて分子動力学シミュレーション（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｄｙｎａｍｉｃｓ）の手段を結合し、１２８個のＢｏＰ－３とＤＰＰＣ分子が形成する二層系を模擬し、ＢｏＰ－３が形成する膜構造が規則的に整い、鎖の折り畳み変形程度が小さいことがわかった。同時に、実験面において、ＢｏＰ－３薬剤担持能力の測定を行った、スルホローダミンＢ（ＳＲＢ）を被覆することにより薬物担持効率を評価した。脂質を５０ｍＭの溶液で水和し、ゲルろ過してリポソームを得た。ＢｏＰ－３では、５５０ｎｍにおける吸収が最も高く、ＤＰＰＣ群に近いことが分かった。２４時間培養後、３７℃の５０％ウシ血清中でＳＲＢの放出を測定し安定性を評価した。結論として、ＢｏＰ－３で形成されたナノ構造は、ＳＲＢに対して高い保留効力を有する。最終的に、ＢｏＰ－３（炭素鎖Ｃ原子数１２）を自己組織化の最適構造として得た。

【0122】

陽電子放出核種Ｃｕ－６４のキレート剤としてＤＳＰＥ－ＰＥＧ２０００－ＮＯＴＡを適用してＰＥＴイメージングを行った。上記ＮＯＴＡ－脂質は、ホウ素リポソームに取り込まれた後、Ｃｕ－６４イオンの水溶液とインキュベートされた。^６４Ｃｕ－ＮＯＴＡ－ホウ素リポソームをゲルろ過により精製した。放射性薄層クロマトグラフィーにより２４時間の安定性を検証した。そして、放射性標識されたホウ素リポソーム（７．４ＭＢｑ、１５０μＬ）を４Ｔ１担腫瘍マウスの体内に静脈注射し、ＰＥＴ－ＣＴイメージングを行い（図４）、マウスの体内におけるホウ素リポソームの生物分布及び腫瘍特異性を評価し、このような新規なホウ素リポソームの体内における生物分布（腫瘍／正常部位の比）が許容できることをさらに実証した。臨床腫瘍治療の実践において、これにより、腫瘍における位置を判断し、治療効果をリアルタイムに評価し、さらに治療計画を策定することができる。

【0123】

ＩＣＰ－ＯＥＳにより、ホウ素リポソームとインキュベートした後の細胞のホウ素濃度を評価した。マウスの３陰性の乳癌４Ｔ１細胞と濃度が０．１－１０ｍｇ／ｍＬのホウ素リポソームを共に２４時間インキュベートし、実験によりホウ素リポソームのインキュベーション量が増加することにつれて、細胞内のホウ素濃度が徐々に増加することがわかった（図１２）。５ｍｇ／ｍＬの用量で、４Ｔ１細胞におけるホウ素濃度は１８２．５ｐｐｍ（ｎ＝４）に達し、臨床ＢＮＣＴの要求を完全に満たす。

【0124】

次に、ホウ素リポソームの細胞毒性をＣＣＫ－８法で評価した。図１３に示すように、４Ｔ１細胞と異なる濃度のホウ素リポソームとを２４時間インキュベートした細胞活性を測定した。実験により、インキュベーション濃度が５ｍｇ／ｍＬに達すると、細胞がホウ素リポソームに対して良好な耐性を示すことがわかった。

【0125】

以上の研究に基づいて、ホウ素リポソームを用いて４Ｔ１担癌マウスの中性子照射実験を行った。４Ｔ１担腫瘍マウスにＰＢＳ（４００μＬ）、ホウ素リポソーム（５００ｍｇ／ｋｇ）又はＤｏｘ－ホウ素リポソーム（５００ｍｇ／ｋｇ）を尾静脈注射し、１２時間後にマウスを麻酔して遅い中性子ビームの流出口（＠ＩＨＮＩ）に固定し、マウスの頭部を中心に指向させ、腫瘍が熱中性子の照射範囲内に露出してフルパワーで３０分間照射し、肝臓、脾臓及び腸が照射野の外に位置し、不要な損傷を回避した。

【0126】

さらに、ＰＡＲＰｉ－ホウ素リポソーム－ＢＮＣＴのインビボ抗腫瘍効果を検討した。実験により、ＰＡＲＰｉ＠ＢＬＮＰ（即ち、ホウ素リポソームはＰＡＲＰｉを担持して、中性子照射を行っていない）群の腫瘍体積は、治療後日数の増加に伴って顕著に増大し、ＰＡＲＰｉ＠ＢＬＮＰ＋Ｎ（即ち、ホウ素リポソームはＰＡＲＰｉを担持して、中性子照射を行う）群の腫瘍平均体積は、原始体積の５分の１に縮小し（図１４）、腫瘍抑制効果は残りの対照群より優れていることがわかった。

【0127】

化学療法一体化の側面において、封入された薬剤は、まず、ドキソルビシン（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）を選択し、一部の腫瘍が根絶できることを発見し、化学療法が補助するホウ素リポソーム－ＢＮＣＴ治療の効果を初歩的に検証した。次に、ＢＮＣＴの原理から、ＤＮＡ複製過程を破壊する個別薬剤を選択することができれば、その治療効果をさらに増強することが考えられる。そこで、ポリアデノシン二リン酸リボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害剤（オラパリブ）を選択した。γ－ｈ２ａｘ染色法によりＤＮＡ修復システムへの干渉を検証したと同時に、４Ｔ１担癌マウスの体内実験によりＰＡＲＰｉ－ホウ素リポソームがドキソルビシン－ホウ素リポソームよりも良好な治療効果を有することがわかった（図２を参照する）。

【0128】

本発明の明細書において引用された全ての参考文献（文献の参考文献、公開された特許、開示された特許出願及び同時に審査を待つ特許出願を含む）の内容は、ここで参考として明示的に全文導入される。特に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、当業者に一般的に知られている意味と一致する。

【0129】

また、本明細書に開示されている特徴の全てが、任意の組み合わせで組み合わされてもよい。また、本明細書に開示された各特徴は、同一、均等又は類似の目的を有する代替特徴に代替されてもよい。したがって、特に明記しない限り、開示される各特徴は、一連の同等又は類似の特徴の単なる例に過ぎない。

【0130】

以上説明したように、本発明の基本的な特徴は、当業者であれば容易に導き出すことができ、本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、様々な用途及び条件に適応するように、本発明を様々に変更及び修正することができる。したがって、他の実施例も添付の特許請求の範囲に含まれる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【手続補正書】

【提出日】2024-07-23

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

下記式（１）：

【化1】

で表れる構造を有する、カルボラン－リン脂質複合体。
（式中、Ｒ１とＲ２の中には１つが－Ｌ－カルボラン基であり、もう１つが炭素数１０～２４の直鎖アルキル基又はアルケニル基であり、Ｌが二価連結基であり、Ｘが－Ｈ、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ^＋（ＣＨ_３）_３、－ＣＨ_２ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＯＯＨ、－ＣＨ_２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_２ＯＨ、又はシクロヘキサン－２，３，４，５，６－ペンタヒドロキシ－１－基であり、ＹがＯＨ又はＯ^－である。）

【請求項2】

前記－Ｌ－カルボラン基におけるカルボラン基が^１０Ｂ富化されている、請求項１に記載の複合体。

【請求項3】

前記Ｘが－ＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ^＋（ＣＨ_３）_３であり、前記ＹがＯ^－である、請求項１に記載の複合体。

【請求項4】

前記Ｒ１又はＲ２をそれぞれ含む脂質アームが、以下の条件を１つ、２つ、又は３つ満たし、好ましくは同時に３つの条件を満たす、請求項１に記載の複合体。
（１）長さの差が±１Ａ以内であり、
（２）脂質アーム間の距離が５Ａ以内であり、
（３）二面角が５度以内である。

【請求項5】

前記カルボラン基が１，２－Ｃ_２Ｂ_４Ｈ_５－、１，２－Ｃ_２Ｂ_８Ｈ_９－、１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１－、２，３－Ｃ_２Ｂ_４Ｈ_７－、７，８－Ｃ_２Ｂ_９Ｈ_１２－、又は５，６－Ｃ_２Ｂ_８Ｈ_１１－であり、好ましくは１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１－である、請求項１に記載の複合体。

【請求項6】

前記Ｌが－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－ＣＨ＝ＣＨ－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－ＣＨ＝ＣＨ－（ＣＨ_２）_ｍ－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－ＣＨ＝ＣＨ－（ＣＨ_２）_ｍ－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｓ－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｓ－（ＣＨ_２）_ｍ＋１－Ｓ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｏ－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）ｎ－Ｏ－（ＣＨ_２）_ｍ＋１－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｎ（ＣＨ_３）－（ＣＨ_２）_ｍ－、又は－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｎ（ＣＨ_３）－（ＣＨ_２）_ｍ＋１－Ｎ（ＣＨ_３）－であり、好ましくは－（ＣＨ_２）_ｎ＋ｍ－Ｓ－であり、ｎが１～２０の整数であり、ｍが０～２０の整数である、請求項１に記載の複合体。

【請求項7】

下記の式：

【化2】

で表れる構造を有する、請求項６に記載の複合体。
（式中、Ｂｏがカルボラン基であり、ｎが１～２０の整数である。）

【請求項8】

前記Ｂｏが１，２－Ｃ_２Ｂ_１０Ｈ_１１－であり、好ましくはｃｌｏｓｏ－ジカルバドデカボラン基であり、より好ましくはｃｌｏｓｏ－１，２－ジカルバドデカボラン基であり、ｎが３、７、１１又は１５であり、好ましくは１１である、請求項７に記載の複合体。

【請求項9】

請求項１に記載の複合体を含み、
前記複合体が脂質二重層の一部である、リポソーム組成物。

【請求項10】

コレステロールをさらに含む、請求項９に記載のリポソーム組成物。

【請求項11】

さらに、リン脂質を含み、好ましくはジラウロイルホスファチジルコリン（ＤＬＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）、ジステアロイルホスファチジルグリセロール（ＤＳＰＧ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジミリストイルホスファチジルセリン（ＤＭＰＳ）、ジステアロイルホスファチジルセリン（ＤＳＰＳ）、ジオレオイルホスファチジルセリン（ＤＯＰＳ）、ジパルミトイルホスファチジルセリン（ＤＰＰＳ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＳＰＥ）又はジエライドイル（ｄｉｄａｉｄｏｙｌ）ホスファチジルエタノールアミンを含み、より好ましくはＤＰＰＣを含む、請求項９に記載のリポソーム組成物。

【請求項12】

さらに、ポリエチレングリコール化リン脂質を含み、好ましくはＤＬＰＥ－ＰＥＧ、ＤＰＰＥ－ＰＥＧ、ＤＭＰＥ－ＰＥＧ又はＤＳＰＥ－ＰＥＧを含み、より好ましくはＤＳＰＥ－ＰＥＧを含む、請求項９に記載のリポソーム組成物。

【請求項13】

少なくとも１つの治療剤及び／又は少なくとも１つの診断剤をさらに含む、請求項９に記載のリポソーム組成物。

【請求項14】

少なくとも１つの治療剤を含み、
前記治療剤が抗がん剤である、請求項１３に記載のリポソーム組成物。

【請求項15】

前記抗がん剤がモノメチルオーリスタチンＥ、モノメチルオーリスタチンＦ、イブルチニブ、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブ、ドキソルビシン、マイトマイシン－Ｃ、マイトマイシン－Ａ、ダウノルビシン、アミノプテリン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、９－アミノカンプトテシン、Ｎ８－アセチルスペルミジン、１－（２－クロロエチル）－１，２－ジメタンスルホニルヒドラジド、雲南マイシン（Ｙｕｎｎａｎｍｙｃｉｎ）、ゲムシタビン、シタラビン、ドラスタチン、ダカルバジン、５－フルオロウラシル、パクリタキセル、ドセタキセル（Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、ゲムシタビン、シタラビン、６－メルカプトプリン、ビンクリスチン、シスプラチン、オキサリプラチン、ＰＡＲＰ阻害剤から選択される、請求項１４に記載のリポソーム組成物。

【請求項16】

前記抗がん剤がＰＡＲＰ阻害剤から選択され、好ましくはオラパリブ、ニラパリブ、ルカパリブ、フルゾパリブ、パミパリブ、ベリパリブ、タラゾパリブであり、より好ましくはオラパリブである、請求項１５に記載のリポソーム組成物。

【請求項17】

少なくとも一つの診断剤を含み、
前記診断剤が^６４Ｃｕ－ＮＯＴＡ－ＰＥＧ２０００－ＤＳＰＥである、請求項１３に記載のリポソーム組成物。

【請求項18】

請求項９～１７のいずれか一項に記載のリポソーム組成物の、医薬品に用いられる使用。

【請求項19】

請求項９～１７のいずれか一項に記載のリポソーム組成物の、少なくとも１つの治療剤及び／又は少なくとも１つの診断剤を送達するための使用。

【国際調査報告】