(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-11-15
(54)【発明の名称】Ｂ細胞悪性腫瘍の治療
(51)【国際特許分類】
A61K 35/17 20150101AFI20241108BHJP
A61P 35/02 20060101ALI20241108BHJP
C07K 16/28 20060101ALI20241108BHJP
C12N 5/10 20060101ALI20241108BHJP
C12Q 1/6851 20180101ALI20241108BHJP
C07K 19/00 20060101ALI20241108BHJP
C12N 15/62 20060101ALI20241108BHJP
G01N 33/53 20060101ALI20241108BHJP
【ＦＩ】
A61K35/17
A61P35/02
C07K16/28 ZNA
C12N5/10
C12Q1/6851 Z
C07K19/00
C12N15/62 Z
G01N33/53 P
G01N33/53 M
G01N33/53 Y
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024533334
(86)(22)【出願日】2022-12-05
(85)【翻訳文提出日】2024-07-05
(86)【国際出願番号】 US2022051848
(87)【国際公開番号】W WO2023102264
(87)【国際公開日】2023-06-08
(31)【優先権主張番号】63/286,086
(32)【優先日】2021-12-05
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】517171347
【氏名又は名称】アディセット セラピューティクス， インク．
(74)【代理人】
【識別番号】110002077
【氏名又は名称】園田・小林弁理士法人
(72)【発明者】
【氏名】アフタブ， ブレーク
(72)【発明者】
【氏名】ガルミ， フランチェスコ
(72)【発明者】
【氏名】ライ， ローズ カムイ
(72)【発明者】
【氏名】マラー， オリ
【テーマコード（参考）】
4B063
4B065
4C087
4H045
【Ｆターム（参考）】
4B063QA01
4B063QQ08
4B063QQ13
4B063QQ42
4B063QQ52
4B063QR08
4B063QR55
4B063QR62
4B063QS25
4B063QS32
4B063QX02
4B065AA94X
4B065AB01
4B065AC14
4B065BA02
4B065CA24
4B065CA44
4C087AA01
4C087AA02
4C087BB65
4C087CA04
4C087NA14
4C087ZB21
4C087ZB27
4H045AA11
4H045AA30
4H045BA41
4H045DA50
4H045DA76
4H045EA20
4H045FA74
(57)【要約】
本開示の態様は、少なくとも１つ、２つ、または少なくとも３つの以前の療法で以前に治療され、最終的に失敗した、再発／難治性Ｂ細胞悪性腫瘍を効果的に治療することを必要とする患者においてそれを行う方法を含む。一例では、方法は、治療有効量の、悪性Ｂ細胞上のＣＤ２０に特異的に結合する結合ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む、１つ以上の用量を対象に投与することを含む。投与後、主題の方法は、任意選択で、後続の治療レジメンの必要性及び／または種類を知らせる、細胞活性化及び／または治療有効性の１つ以上のバイオマーカーをモニタリングすることをさらに含む。
【選択図】図６
【選択図】図６
【特許請求の範囲】
【請求項1】
再発／難治性（Ｒ／Ｒ）Ｂ細胞悪性腫瘍の治療を必要とする患者においてそれを行う方法であって、治療有効量の、悪性Ｂ細胞上のＣＤ２０に特異的に結合する結合ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を対象に投与し、それによって前記患者を治療することを含み、前記患者が、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または少なくとも３つの以前の療法で以前に治療されている、前記方法。
【請求項2】
前記患者が、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体を含む以前の療法から再発する、及び／または以前の療法に対して難治性であり、任意選択で、前記抗ＣＤ２０モノクローナル抗体が、リツキシマブである、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記患者が、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ αβ Ｔ細胞療法を含む以前の療法から再発する、及び／または以前の療法に対して難治性であり、任意選択で、前記抗ＣＤ１９ ＣＡＲ αβ Ｔ療法が、アキシカブタゲンシロルユーセル及びチサゲンレクロイセルから選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項4】
前記結合ドメインは、前記抗ＣＤ２０モノクローナル抗体によって認識されるＣＤ２０エピトープとは異なるＣＤ２０エピトープに特異的に結合する、請求項２に記載の方法。
【請求項5】
前記治療有効量の前記抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞が、約３×１０７～約１×１０９個のγδ Ｔ細胞である、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項6】
前記治療有効量の前記抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞が、約３×１０７個のγδ Ｔ細胞である、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項7】
前記治療有効量の前記抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞が、約１×１０８個のγδ Ｔ細胞である、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項8】
前記治療有効量の前記抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞が、約３×１０８個のγδ Ｔ細胞である、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項9】
前記治療有効量の前記抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞が、約１×１０９個のγδ Ｔ細胞である、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項10】
前記治療有効量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の第１の用量を前記対象に投与する前に、リンパ枯渇（ＬＤ）レジメンを前記対象に投与することをさらに含む、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項11】
前記ＬＤレジメンが、約３０ｍｇ／ｍ２／日のフルダラビン＋約５００ｍｇ／ｍ２／日のシクロホスファミドを３日間投与することを含み、任意選択で、抗ＣＤ５２抗体及び／または抗ＣＤ１９抗体をさらに含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項12】
前記ＬＤレジメンが、約３０ｍｇ／ｍ２／日のフルダラビンを４日間＋約１０００ｍｇ／ｍ２／日のシクロホスファミドを３日間投与することを含み、任意選択で、抗ＣＤ５２抗体及び／または抗ＣＤ１９抗体をさらに含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項13】
前記方法が、前記第１の用量の少なくとも５日後、少なくとも７日後、少なくとも１０日後、少なくとも１４日後、少なくとも２１日後、少なくとも２８日後、または少なくとも１ヶ月後に、１つ以上の追加の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を投与することをさらに含む、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項14】
前記１つ以上の追加の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞が、追加のＬＤレジメンなしで投与される、請求項１３に記載の方法。
【請求項15】
前記１つ以上の追加の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞が、追加のＬＤレジメン後に投与される、請求項１３に記載の方法。
【請求項16】
前記１つ以上の追加の用量が、増加した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞、減少した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞、または同じ量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む、請求項１３～１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項17】
前記１つ以上の追加の用量が、同じドナーに由来する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む、請求項１３～１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項18】
前記１つ以上の追加の用量が、異なるドナーに由来する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む、請求項１３～１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項19】
前記抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞が、γδ１ Ｔ細胞、γδ２ Ｔ細胞、γδ３ Ｔ細胞、またはγδ４ Ｔ細胞であり、好ましくは、前記γδ Ｔ細胞が、γδ１ Ｔ細胞である、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項20】
前記治療有効量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後に、１つ以上の薬力学／薬物動態バイオマーカーについて前記対象をモニタリングすることをさらに含み、前記バイオマーカーが、ＣＡＲ導入遺伝子発現レベル、ＣＡＲ＋ γδ Ｔ細胞の定量的測定、１つ以上のサイトカイン及び／または血清タンパク質の血清レベル、ならびに微小残存病変（ＭＲＤ）を含むか、またはそれらからなる群から選択される、請求項１～１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項21】
前記１つ以上のサイトカイン／血清タンパク質が、ＩＮＦγ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－１５、ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＭＩＰ１α、ＭＩＰ１β、ＣＲＰ、フェリチン、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＣＬ５、ＩＬ－５、ＩＬ－ＩＲＡ、ＩＬ－１８、可溶型ＭＩＣＡ、ＩＬ－１０、ＩＬ－４、ＩＬ－１３、ＩＬ－１７、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ１２、ＣＣＬ１７、及びＣＣＬ２２を含むか、またはそれらからなる群から選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項22】
前記１つ以上のサイトカインが、ＩＬ－２及び／またはＩＬ－８である、請求項２１に記載の方法。
【請求項23】
定量的ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）を介してＣＡＲ導入遺伝子発現レベルを測定することをさらに含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項24】
前記ＣＡＲ＋ γδ Ｔ細胞の定量的測定が、フローサイトメトリーを介して決定される、請求項２０に記載の方法。
【請求項25】
免疫配列決定方法論を介してＭＲＤの分析を行うことをさらに含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項26】
前記バイオマーカーのうちの１つ以上をモニタリングすることに少なくとも部分的に基づいて、二次治療レジメンを投与することをさらに含む、請求項２０～２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項27】
前記二次治療レジメンが、１つ以上の追加の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項28】
前記１つ以上の追加の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞が、追加のＬＤレジメンなしで投与される、請求項２７に記載の方法。
【請求項29】
前記１つ以上の追加の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞が、追加のＬＤレジメン後に投与される、請求項２７に記載の方法。
【請求項30】
前記１つ以上の追加の用量が、増加した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞、減少した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞、または同じ量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む、請求項２７～２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項31】
前記１つ以上の追加の用量が、異なるドナーに由来する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む、請求項２７～２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項32】
後続の治療レジメンが、シクロホスファミド、ドキソルビシン塩酸塩（ヒドロキシダウノルビシン）、ビンクリスチン硫酸塩、及びプレドニゾン（ＣＨＯＰ）の投与をさらに含む、請求項２６～３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項33】
前記Ｂ細胞悪性腫瘍が、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、及び形質転換濾胞性リンパ腫（ｔＦＬ）を含むか、またはそれらからなる群から選択される、請求項１～３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項34】
再発／難治性（Ｒ／Ｒ）Ｂ細胞悪性腫瘍の治療を必要とする患者においてそれを行う方法であって、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の第１の用量を対象に投与する少なくとも５日前に、リンパ枯渇（ＬＤ）レジメンを前記対象に投与し、続いて、治療有効量の、悪性Ｂ細胞上のＣＤ２０に特異的に結合する結合ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む前記第１の用量を前記対象に投与し、それによって前記患者を治療することを含み、前記患者が、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または少なくとも３つの以前の療法で以前に治療されている、前記方法。
【請求項35】
追加のＬＤレジメンの投与ありまたはなしで、前記第１の用量の少なくとも５日後、少なくとも７日後、少なくとも１０日後、少なくとも１４日後、少なくとも２１日後、少なくとも２８日後、または少なくとも１ヶ月後に、治療有効用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む第２の用量を前記対象に投与することをさらに含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項36】
第２の治療有効用量が、増加した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞、減少した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞、または前記第１の用量と同じ量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項37】
前記第２の用量が、前記第１の用量の７日後に投与され、前記第１及び第２の用量における前記治療有効量の前記抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞が、約３×１０８個のγδ Ｔ細胞であり、前記第２の用量が、追加のＬＤレジメンを投与することなく投与される、請求項３６に記載の方法。
【請求項38】
追加のＬＤレジメンの投与ありまたはなしで、前記第２の用量の少なくとも５日後、少なくとも７日後、少なくとも１０日後、少なくとも１４日後、少なくとも２１日後、少なくとも２８日後、または少なくとも１ヶ月後に、治療有効量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む第３の用量を前記対象に投与することをさらに含む、請求項３５～３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項39】
第３の治療有効用量が、増加した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞、減少した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞、または前記第１及び／または第２の用量と同じ量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む、請求項３８に記載の方法。
【請求項40】
前記第３の用量が、前記第２の用量の７日後に投与され、前記第１、第２、及び第３の用量における前記治療有効量の前記抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞が、約３×１０８個のγδ Ｔ細胞であり、前記第２及び第３の用量が、追加のＬＤレジメンを投与することなく投与される、請求項３９に記載の方法。
【請求項41】
前記ＣＡＲが、配列番号４１のアミノ酸配列を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項42】
前記抗ＣＤ２０ γδ Ｔ細胞は、前記ＣＡＲをコードする単離された核酸をさらに含む、請求項４１に記載の方法。
【請求項43】
前記抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞が、配列番号４６の配列を有する前記ＣＡＲをコードする単離核酸をさらに含む、請求項１～４１のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年１２月５日に出願された米国仮出願第６３／２８６，０８６号の優先権の利益を主張するものであり、その内容は、あらゆる目的のために本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２１年１２月５日に出願された米国仮出願第６３／２８６，０８６号の優先権の利益を主張するものであり、その内容は、あらゆる目的のために本明細書に組み込まれる。
【0002】
本開示は、概して、再発／難治性Ｂ細胞悪性腫瘍に対する非常に効果的なサルベージ療法に関し、１つ以上の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を、１つ以上の代替療法で以前に治療された患者に投与することを含む。
【背景技術】
【0003】
非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）は、リンパ系に影響を及ぼすがんの一種である。ＮＨＬは単一の疾患ではなく、むしろいくつかの密接に関連するがんを含む。様々な種類のＮＨＬは多くの共通の特徴を共有するが、顕微鏡下でのそれらの外観、分子的特徴及び成長パターン、身体への影響、ならびに異なる種類の治療にどのように応答するかを含むある特定の特徴が異なる。ＮＨＬは、世界で１３番目に最も一般的ながんであり、１１番目に主要ながん死因であると推定されている（Ｂｒａｙ ｅｔ ａｌ．（２０１８）ＣＡ Ｃａｎｃｅｒ Ｊ Ｃｌｉｎ．，６８（６）：３９４－４２４、Ｇｌｏｂａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｏｂｓｅｒｖａｔｏｒｙ：Ｃａｎｃｅｒ Ｔｏｍｏｒｒｏｗ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ａｇｅｎｃｙ ｆｏｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ Ｃａｎｃｅｒ）。
【0004】
ＮＨＬのサブタイプは、どのリンパ球サブセットが形質転換されるか、ならびにリンパ腫がどのくらい速く成長及び進行するかによって分類される。ＮＨＬは、Ｂ細胞、Ｔ細胞、及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞で生じるが、ＮＨＬサブタイプの大部分（８５～９０％）は、Ｂ細胞に由来する。ＮＨＬのサブタイプは、無症候性（遅い成長）または侵襲性（急速な成長）のいずれかに指定され、ＮＨＬの全症例の約６０％が侵襲性サブタイプのものである。侵襲性Ｂ細胞リンパ腫のサブタイプの関連例としては、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、及び形質転換濾胞性リンパ腫（ｔＦＬ）が挙げられる。
【0005】
化学療法と組み合わせた抗ＣＤ２０モノクローナル抗体（ｍＡｂ）ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）（リツキシマブ）は、ＣＤ２０陽性Ｂ細胞ＮＨＬの一次誘導療法である。リツキシマブは、ＮＫ細胞及びマクロファージ上のＦｃ受容体に関与し、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）及び抗体依存性細胞傷害／食作用（ＡＤＣＣ／ＡＤＣＰ）を促進し、直接的な抗増殖及びアポトーシス促進効果を発揮する（Ｔｏｂｉｎａｉ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ａｄｖ Ｔｈｅｒ．，３４（２）：３２４－３５６、Ｂｏｒｏｓｓ ａｎｄ Ｌｅｕｓｅｎ（２０１２）Ａｍ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２（６）：６７６－６９０）。リツキシマブの使用は、Ｂ細胞悪性腫瘍を有する一部の患者の転帰を著しく改善したが（Ｌｉｍ ａｎｄ Ｌｅｖｙ（２０１４）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９３（４）：１５１９－１５２４、Ｃｏｉｆｆｉｅｒ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｂｌｏｏｄ，１１６（１２）：２０４０－２０４５、Ｐｆｒｅｕｎｄｓｃｈｕｈ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ．，７（５）：３７９－３９１、Ｈａｌｌｅｋ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｌａｎｃｅｔ，３７６（９７４７）：１１６４－１１７４）、リツキシマブに対する耐性は、長期治療のコース中に患者の約半数で観察される。リツキシマブの耐性の正確なメカニズムは不明であるが、リツキシマブの３つの作用機序（ＣＤＣ、ＡＤＣＣ／ＡＤＣＰ、及びアポトーシス）、及び患者特異的リンパ腫微小環境の複雑な組み合わせの機能であると考えられている（ｖａｎ Ｍｅｅｔｅｒｎ ａｎｄ Ｈａｇｅｎｂｅｅｋ（２００９）Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，６７（７）：２５１－２５９）。代替の抗ＣＤ２０ ｍＡｂが開発されているが、リツキシマブと比較したそれらの有効性及び安全性は依然として議論の余地がある（Ｌｕｏ ｅｔ ａｌ．（２０２１）Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ，１１（３２５５））。
【0006】
養子細胞療法、具体的には自己ＣＡＲ αβ Ｔ細胞療法は、特に、Ｒ／Ｒ ＤＬＢＣＬを有する成人患者の治療のために承認されている抗ＣＤ１９ αβ ＣＡＲ Ｔ細胞療法Ｙｅｓｃａｒｔａ（商標）を含む、再発／難治性Ｂ細胞ＮＨＬのためのサルベージ治療としてますます重要な役割を果たしている。しかしながら、残念ながら、患者の３０％は治療に対する部分奏効のみを有し、治療効果は他の多くの患者では６ヶ月以内に減少する傾向があり、患者の４０％のみが持続的奏効を達成する。（Ｗｉｔｈ ＦＤＡ Ａｐｐｒｏｖａｌ ｆｏｒ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｌｙｍｐｈｏｍａ，Ｓｅｃｏｎｄ ＣＡＲ Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｍｏｖｅｓ ｔｏ ｔｈｅ Ｃｌｉｎｉｃ；（２０１７））。さらに、多くの適格な患者は、製造の失敗及び／または細胞注入の遅延に起因して細胞産物にアクセスできず、これらの細胞療法はまた、それら自身の困難な毒性、すなわち、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）及び免疫原性（すなわち、宿主対移植片拒絶）、ならびにサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を呈し得る。したがって、自己ＣＡＲ αβ Ｔ細胞療法は、Ｂ細胞ＮＨＬの治療パラダイムに正の影響を与えてきたが、製造可能性の課題、非応答性、重篤な有害事象、及び寛解を達成した後の再発を含むが、これらに限定されない無数の問題が残っている。
【0007】
したがって、現在のサルベージ療法の転帰は、多くの再発または難治性（Ｒ／Ｒ）Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）患者にとって依然として乏しく、より効果的な治療選択肢が緊急に必要とされており、特に、重度に前治療された患者にとって必要とされている。
【発明の概要】
【0008】
本開示は、少なくとも１つの用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または少なくとも３つの以前の療法で以前に治療された患者に投与することによって、再発または難治性（Ｒ／Ｒ）Ｂ細胞悪性腫瘍に罹患している患者のためのより効果的なサルベージ療法のための当該技術分野における緊急の満たされていないニーズに対処する。本明細書で初めて実証されるように、主題のγδ Ｔ細胞療法は、以前の抗ＣＤ２０抗体及び／または自己αβ ＣＡＲ Ｔ細胞療法を含む、複数の以前の治療に失敗した患者において、予期しない、真に顕著な結果を提供する。
【0009】
主題の方法は、例えば、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、慢性リンパ球性白血病／小リンパ球性リンパ腫（ＣＬＬ／ＳＬＬ）、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、及び急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を含む広範囲のＢ細胞悪性腫瘍において有利な使用を見出すであろう。実施形態では、Ｂ細胞悪性腫瘍は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、形質転換濾胞性リンパ腫（ｔＦＬ）、原発性縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、及び辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）を含むＮＨＬの一種であり得る。
【0010】
一態様では、本発明は、少なくとも１つ、少なくとも２つ、または少なくとも３つの以前の療法で以前に治療された患者における再発／難治性（Ｒ／Ｒ）Ｂ細胞悪性腫瘍を治療する方法を提供し、方法は、治療有効量の、悪性Ｂ細胞上のＣＤ２０に特異的に結合する結合ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を対象に投与し、それによって対象を治療することを含む。実施形態では、患者は、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体（例えば、リツキシマブまたはオビヌツズマブ）または抗ＣＤ１９ ＣＡＲ αβ Ｔ細胞療法（例えば、アキシカブタゲンシロルユーセルまたはチサゲンレクロイセル）を含む以前の療法から再発し得るか、または以前の療法に対して難治性であり得る。
【0011】
実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の結合ドメインは、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体によって認識されるＣＤ２０エピトープとは異なるＣＤ２０エピトープに特異的に結合する。
【0012】
実施形態では、治療有効量の当該抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、約３×１０７～約１×１０９個のγδ Ｔ細胞である。実施形態では、治療有効量の当該抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、約３×１０７個のγδ Ｔ細胞である。実施形態では、治療有効量の当該抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、約１×１０８個のγδ Ｔ細胞である。実施形態では、治療有効量の当該抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、約３×１０８個のγδ Ｔ細胞である。実施形態では、治療有効量の当該抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、約１×１０９個のγδ Ｔ細胞である。抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、γδ１ Ｔ細胞、γδ２ Ｔ細胞、γδ３ Ｔ細胞、もしくはγδ４ Ｔ細胞、またはそれらの組み合わせを含み得るか、それらから本質的になり得るか、またはそれらからなり得る。例示的な実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、γδ１ Ｔ細胞を含む。
【0013】
実施形態では、方法は、治療有効量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の第１の用量を対象に投与する前に、リンパ枯渇（ＬＤ）レジメンを対象に投与することをさらに含み得る。いくつかの実施形態では、ＬＤレジメンは、約３０ｍｇ／ｍ２／日のフルダラビンを３日間＋約５００ｍｇ／ｍ２／日のシクロホスファミドを３日間投与することを含み、任意選択で、抗ＣＤ５２抗体及び／または抗ＣＤ１９抗体をさらに含む。いくつかの実施形態では、ＬＤレジメンは、約３０ｍｇ／ｍ２／日のフルダラビンを４日間＋約１０００ｍｇ／ｍ２／日のシクロホスファミドを３日間投与することを含み、任意選択で、抗ＣＤ５２抗体及び／または抗ＣＤ１９抗体をさらに含む。
【0014】
実施形態では、主題の方法は、第１の用量の少なくとも５日後、少なくとも７日後、少なくとも１０日後、少なくとも１４日後、少なくとも２１日後、少なくとも２８日後、または少なくとも１ヶ月後に、１つ以上の追加の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を投与することをさらに含む。実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の１つ以上の追加の用量は、追加のＬＤレジメンなしで投与される。実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の１つ以上の追加の用量は、追加のＬＤレジメン後に投与される。実施形態では、１つ以上の追加の用量は、増加した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む。実施形態では、１つ以上の追加の用量は、減少した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む。実施形態では、１つ以上の追加の用量は、同じ量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む。実施形態では、１つ以上の追加の用量は、同じドナーに由来する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む。実施形態では、１つ以上の追加の用量は、異なるドナーに由来する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む。
【0015】
例示的な実施形態では、方法は、対象にＬＤレジメンを－５日目に投与し、続いて、治療有効量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞（例えば、約３×１０７～約１×１０９個のγδ Ｔ細胞）を含む第１の用量を対象に１日目に投与することを含む。実施形態では、治療有効量の当該抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、約３×１０７個のγδ Ｔ細胞である。実施形態では、治療有効量の当該抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、約１×１０８個のγδ Ｔ細胞である。実施形態では、治療有効量の当該抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、約３×１０８個のγδ Ｔ細胞である。実施形態では、治療有効量の当該抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、約１×１０９個のγδ Ｔ細胞である。抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、γδ１ Ｔ細胞、γδ２ Ｔ細胞、γδ３ Ｔ細胞、もしくはγδ４ Ｔ細胞、またはそれらの組み合わせを含み得るか、それらから本質的になり得るか、またはそれらからなり得る。好ましい実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、γδ１ Ｔ細胞を含む、から本質的になる、またはそれからなる。
【0016】
さらなる例示的な実施形態では、主題の方法は、任意選択で、追加のＬＤレジメンの投与ありまたはなしで、治療有効量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む第２の用量を対象に７日目に投与することをさらに含み得る。第２の治療有効用量は、増加した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞、減少した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞、または第１の用量と同じ量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含み得る。実施形態では、主題の方法は、任意選択で、追加のＬＤレジメンの投与ありまたはなしで、治療有効量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む第３の用量を対象に１４日目に投与することをさらに含み得る。第３の治療用量は、増加した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞、減少した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞、または第１及び／または第２の用量と同じ量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含み得る。実施形態では、治療有効量の当該抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、約３×１０８個のγδ Ｔ細胞である。抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、γδ１ Ｔ細胞、γδ２ Ｔ細胞、γδ３ Ｔ細胞、またはγδ４ Ｔ細胞、またはそれらの組み合わせを含み得るか、それらから本質的になり得るか、またはそれらからなり得る。好ましい実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、γδ１ Ｔ細胞を含むか、それらから本質的になるか、またはそれらからなる。
【0017】
実施形態では、主題の方法は、治療有効量のＩＬ－２を対象に投与することをさらに含み得る。いくつかの実施形態では、治療有効量のＩＬ－２は、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後１～１４日で毎日約２×１０６個のＩＵである。
【0018】
別の態様では、方法は、細胞産物活性化及び／または有効性の指標として、１つ以上の薬力学／薬物動態バイオマーカーについて患者をモニタリングすることをさらに含み得る。実施形態では、主題の方法は、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後に１つ以上の薬力学／薬物動態バイオマーカーについて対象をモニタリングすることをさらに含み、バイオマーカーは、ＣＡＲ導入遺伝子発現レベル、ＣＡＲ＋ γδ Ｔ細胞の定量的測定、１つ以上のサイトカイン及び／または血清タンパク質の血清レベル、ならびに微小残存病変（ＭＲＤ）を含むか、またはそれらからなる群から選択される。実施形態では、１つ以上のサイトカイン／血清タンパク質は、ＩＮＦγ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－１５、ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＭＩＰ１α、ＭＩＰ１β、ＣＲＰ、フェリチン、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＣＬ５、ＩＬ－５、ＩＬ－ＩＲＡ、ＩＬ－１８、可溶型ＭＩＣＡ、ＩＬ－１０、ＩＬ－４、ＩＬ－１３、ＩＬ－１７、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ１２、ＣＣＬ１７、及びＣＣＬ２２を含むか、またはそれらからなる群から選択される。例示的な実施形態では、１つ以上のサイトカインは、ＩＬ－２及び／またはＩＬ－８である。実施形態では、主題の方法は、定量的ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）を介してＣＡＲ導入遺伝子発現レベルを測定することをさらに含み得る。実施形態では、ＣＡＲ＋ γδ Ｔ細胞の定量的測定は、フローサイトメトリーを介して決定される。実施形態では、主題の方法は、免疫配列決定方法論を介してＭＲＤの分析を行うことをさらに含む。
【0019】
さらなる態様では、主題の方法は、前述のバイオマーカーのうちの１つ以上をモニタリングすることに少なくとも部分的に基づいて、二次治療レジメンを投与することをさらに含み得る。実施形態では、二次治療レジメンは、１つ以上の追加の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む。実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の１つ以上の追加の用量は、追加のＬＤレジメンなしで投与される。実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の１つ以上の追加の用量は、追加のＬＤレジメン後に投与される。実施形態では、１つ以上の追加の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、体内に残され得る任意のがん細胞を殺すための強化療法として投与され、好ましくは、１つ以上の追加の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、追加のＬＤレジメンの後に投与される。実施形態では、１つ以上の追加の用量は、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の量の増加を含む。実施形態では、１つ以上の追加の用量は、減少した量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む。実施形態では、１つ以上の追加の用量は、同じ量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む。実施形態では、１つ以上の追加の用量は、同じドナーに由来する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む。実施形態では、１つ以上の追加の用量は、異なるドナーに由来する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含む。実施形態では、後続の治療レジメンは、シクロホスファミド、ドキソルビシン塩酸塩（ヒドロキシダウノルビシン）、ビンクリスチン硫酸塩、及びプレドニゾン（ＣＨＯＰ）の投与をさらに含む。
【0020】
実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲは、配列番号４１のアミノ酸配列を含み得る。実施形態では、抗ＣＤ２０ γδ Ｔ細胞は、配列番号４１のアミノ酸配列をコードする核酸配列をさらに含み得る。実施形態では、抗ＣＤ２０ γδ Ｔ細胞は、ＣＡＲをコードし、かつ配列番号４６の配列を有する核酸配列をさらに含み得る。
【0021】
参照による組み込み
本明細書に記載される全ての刊行物、特許、及び特許出願は、個々の刊行物、特許、または特許出願が参照により組み込まれることが具体的かつ個別に示されているのと同じ範囲で、参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書に記載される全ての刊行物、特許、及び特許出願は、個々の刊行物、特許、または特許出願が参照により組み込まれることが具体的かつ個別に示されているのと同じ範囲で、参照により本明細書に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【0022】
【図1】３×１０７個の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞による治療の前（Ａ及びＣ）及び後（Ｂ及びＤ）の、対象で得られたフルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）画像を示す。
【図2】３×１０７個の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞による治療の前（Ａ及びＣ）及び後（Ｂ及びＤ）の、別の対象で得られたＦＤＧ－ＰＥＴ画像を示す。
【図3】１×１０８個の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞による治療の前（Ａ及びＣ）及び後（Ｂ及びＤ）の、別の対象で得られたＦＤＧ－ＰＥＴ画像を示す。
【図4-1】Ａ及びＢは、リンパ枯渇前、リンパ枯渇後であるが抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の注入前、及び抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の注入後の、対象における様々なサイトカインの血清レベルを示すグラフである。
【図4-2】Ｃは、リンパ枯渇前、リンパ枯渇後であるが抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の注入前、及び抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の注入後の、対象における様々なサイトカインの血清レベルを示すグラフである。
【図5A】抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞のインビボ拡大を示すフローサイトメトリー分析を示す。
【図5B】抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞のインビボ拡大を示すフローサイトメトリー分析を示す。
【図5C】抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞のインビボ拡大を示すフローサイトメトリー分析を示す。
【図5D】抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞のインビボ拡大を示すフローサイトメトリー分析を示す。
【図6】様々なＢ細胞悪性腫瘍を有する成人における抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の最初のヒト研究における現在までの安全性所見の要約を提供する。
【図7】これらの患者の独立した放射線学的評価の要約とともに、これまでに治療された患者のスイマープロットを提供する。ＴＨ、トリプルヒット；ＤＨ、ダブルヒット；ＤＬＢＣＬ、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫；ＨＧＢＣＬ、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫；ＭＣＬ、マントル細胞リンパ腫；ｍＣＲ：代謝的完全奏効（ＰＥＴ陰性）。
【発明を実施するための形態】
【0023】
Ｉ．定義
この仕様を解釈する目的で、以下の定義が適用され、適切な場合、単数形で使用される用語は、複数形も含まれ、その逆も同様である。記載される定義が参照により本書に組み込まれている文書と矛盾する場合は、以下に記載される定義が優先される。別途記載のない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本開示が関係する技術分野の当業者が一般的に理解する意味と同じ意味を有する。
この仕様を解釈する目的で、以下の定義が適用され、適切な場合、単数形で使用される用語は、複数形も含まれ、その逆も同様である。記載される定義が参照により本書に組み込まれている文書と矛盾する場合は、以下に記載される定義が優先される。別途記載のない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本開示が関係する技術分野の当業者が一般的に理解する意味と同じ意味を有する。
【0024】
測定可能値、例えば、量、時間的持続時間などを指す場合に本明細書で使用される「約」は、開示された方法を実行するために適切であるため、指定値から±２０％または±１０％、より好ましくは、±５％、さらに好ましくは、±１％、さらに好ましくは、±０．１％の変動を包含することを意味する。
【0025】
本明細書で使用される場合、「ｗ／ｖ」は、所与の体積の溶液中の構成成分の重量を指す。
【0026】
「範囲」：本開示の全体にわたって、開示の様々な態様が、範囲形式で提示することができる。範囲形式での記載は、単に、便宜上及び簡潔にするためのものであり、開示の範囲に対する柔軟性のない制限として解釈されるべきではないことが理解されるべきである。したがって、範囲の記載は、その範囲内の個々の数値だけでなく、全ての可能なサブ範囲を具体的に開示しているものと考えられるべきである。例えば、１～６などの範囲の記載は、部分範囲、例えば、１～３、１～４、１～５、２～４、２～６、３～６など、ならびに、その範囲内の個々の数字、例えば、１、２、２．７、３、４、５、５．３、及び６が具体的に開示されていると考えられる。これは、範囲の広さに関係なく適用される。これは、範囲の広さに関係なく適用される。
【0027】
「患者」、「対象」、「個体」などの用語は、本明細書では互換的に使用され、本明細書に記載の方法に適合する任意の動物を指す。ある特定の非限定的な実施形態では、患者、対象、または個体は、ヒトである。
【0028】
本明細書で使用される場合、「薬剤」という用語は、任意のタンパク質、核酸分子（化学的に改変された核酸を含む）、化合物、抗体、小分子、有機化合物、無機化合物、他の目的の分子、または細胞（例えば、キメラ抗原受容体を発現するように操作された細胞）を指す。薬剤は、治療薬、診断薬、または薬学的剤を含み得る。治療薬または薬学的剤は、単独で、または追加の薬剤と一緒に、所望の応答を誘導するものである（がん、または他の疾患／状態に罹患している対象を治療することを含む、対象に投与された場合の治療効果または予防効果の誘導など。
【0029】
本明細書で使用される「診断」または「診断すること」という用語は、がんなどの疾患を、徴候、症状、及び／または様々な検査の結果により特定するプロセスを指す。そのようなプロセスを通じて到達した結論が診断である。一般的に行われる検査の形態は、血液検査、医療イメージング、尿検査、生検などを含む。
【0030】
「治療有効量」または単に「有効量」という用語は、研究者、獣医師、医師、または他の臨床医が求めている組織、システム、または対象の生物学的または医学的反応を引き起こす薬剤または組成物（例えば、薬剤を含む組成物）の量を指す。「治療的有効量」という用語は、投与された場合、処置される障害または疾患（例えば、血液腫瘍または固形腫瘍）の１つ以上の徴候または症状の発現を予防するか、またはある程度緩和するのに十分な薬剤または薬剤を含む組成物の量を含む。治療的有効量は、成分、疾患及びその重症度、ならびに処置されるべき対象の年齢、体重などに応じて変動するであろう。
【0031】
本明細書で使用される用語としての疾患の「治療」は、対象が経験する疾患または障害の少なくとも１つの徴候または症状の頻度または重症度を減少または低減することを意味する。一例では、療法（例えば、本開示の治療薬の投与）は、例えば、療法の不在下での応答と比較して、疾患または状態に関連する１つ以上の徴候または症状を減少させることによって、疾患または状態を治療する。例えば、治療薬の投与は、がんに関連する１つ以上の徴候または症状を減少させる抗腫瘍効果を提供し得る。
【0032】
本明細書で使用される場合、「投与」という用語は、任意の有効な経路により、これらに限定されないが、がん（例えば、リンパ腫）、ウイルス感染、細菌感染などを含む状態／障害または疾患に関連する１つ以上の徴候または症状を治療する薬剤などの１つ以上の薬剤を対象に提供することまたは与えることを意味する。例示的な投与経路としては、これらに限定されないが、注射（例えば、皮下、筋肉内、皮内、腹腔内、及び静脈内）、経口、舌下、直腸、経皮、鼻腔内、経膣、及び吸入経路が挙げられる。１つ以上の治療薬と「併用した」投与は、同時（併用）及び任意の順序の逐次的な投与を含む。
【0033】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される」という用語は、化合物の生物学的活性または特性を抑制せず、かつ比較的非毒性である塩、担体、または希釈剤を含むがこれらに限定されない材料を指し、すなわち、材料は、所望されない生物学的効果を引き起こすこと、またはそれが含まれる組成物の構成成分のいずれとも有害な様式で作用することもなく、個体に投与され得る。本開示において有用な薬学的に許容される担体（ビヒクル）は、従来のものである。Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ（１９９５）によるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓは、１つ以上の薬剤、例えば、１つ以上の調節剤の薬学的送達に好適な組成物及び製剤を記載する。一般に、担体の性質は、用いられている特定の投与様式に依存するであろう。例えば、非経口製剤は、薬学的及び生理学的に許容される液体（例えば、水、生理食塩水、平衡塩類溶液、水性デキストロース、グリセロール）をビヒクルとして含む注射用液体を含み得る。生物学的に中性な担体に加えて、投与されるべき薬学的剤は、微量の非毒性の補助物質（例えば、湿潤剤または乳化剤、防腐剤、及びｐＨ緩衝剤など、例えば、酢酸ナトリウムまたはソルビタンモノラウラート、乳酸ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、及びトリエタノールアミンオレアート）を含み得る。例えば、本発明は、本明細書に記載されるように、薬学的に許容される賦形剤と、例えば、γδ Ｔ細胞、好ましくは、ＣＤ２０に指向されたＣＡＲを発現するように操作されたγδ Ｔ細胞と、を含む、薬学的組成物を提供する。
【0034】
本明細書で使用される場合、「薬力学的（ＰＤ）バイオマーカー」及び／または「薬物動態（ＰＫ）バイオマーカー」という用語は、治療薬の対象への投与に関連する１つ以上の測定可能な指標を指す。大まかに言えば、ＰＫマーカーは、身体が治療薬にどのように影響するかに関するが、ＰＤマーカーは、治療薬が対象にどのように影響するかに関する。
【0035】
本明細書で使用される場合、「再発／難治性Ｂ細胞悪性腫瘍」という用語は、これらに限定されないが、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、慢性リンパ球性白血病／小リンパ球性リンパ腫（ＣＬＬ／ＳＬＬ）、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、及び急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を含む、治療に最終的に非応答性である任意のＢ細胞リンパ腫を包含する。したがって、実施形態では、Ｂ細胞悪性腫瘍は、ＮＨＬ、ＣＬＬ、ＡＬＬ、及び／またはＡＭＬを含むか、またはそれらからなる群から選択され得る。実施形態では、Ｂ細胞悪性腫瘍は、Ｂ細胞悪性腫瘍は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、形質転換濾胞性リンパ腫（ｔＦＬ）、原発性縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、及び辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）を含むか、またはそれらからなる群から選択されるＮＨＬの形態であり得る。
【0036】
本明細書で使用される場合、「活性化」は、検出可能な細胞増殖を誘導するために十分に刺激されたＴ細胞の状態を指す。活性化はまた、誘導されたサイトカイン産生及び検出可能なエフェクター機能と関連し得る。「活性化Ｔ細胞」という用語は、とりわけ、細胞分裂を起こしているＴ細胞を指す。
【0037】
本明細書で使用される場合、「抗原」または「Ａｇ」という用語は、免疫応答を誘発する分子として定義される。この免疫応答は、抗体の産生もしくは特定の免疫能細胞の活性化、またはその両方が関与し得る。当業者は、タンパク質またはペプチドを含む任意の高分子が抗原として機能し得ることを理解するであろう。
【0038】
本明細書で使用される場合、「抗体」という用語は、抗原と特異的に結合する免疫グロブリン分子を指す。抗体は、天然供給源または組換え供給源から得られた完全な免疫グロブリンであり得、インタクトな免疫グロブリンの免疫応答性部分であり得る。抗体は、典型的には、免疫グロブリン分子の四量体である。本発明における抗体は、例えば、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体（アゴニスト、アンタゴニスト、中和抗体、全長または完全なモノクローナル抗体を含む）、ポリエピトープ特異性を有する抗体組成物、多価抗体、少なくとも２つのインタクト抗体から形成された多重特異性抗体（例えば、所望の生物学的活性を呈する限り二重特異性抗体）、ダイアボディ、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）（所望の生物学的または免疫学的活性を呈する限り）、Ｆｖ、Ｆａｂ、及びＦ（ａｂ）、ならびに単鎖抗体及びヒト化抗体を含む様々な形態で存在し得る（Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｈ，１９９９，Ｉｎ：Ｕｓｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ：Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｈ，１９８９，Ｉｎ；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．、Ｈｏｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｈ，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９－５８８３：Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｈ，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３－４２６）。
【0039】
「抗体断片」という用語は、インタクト抗体の一部を指し、インタクト抗体の抗原決定可変領域を指す。抗体断片の例としては、これらに限定されないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片、線状抗体、ｓｃＦｖ抗体、ならびに抗体断片から形成される多重特異性抗体が挙げられる。
【0040】
本明細書で使用される場合、「抗体重鎖」は、天然に存在する立体配座で抗体分子に存在する２種類のポリペプチド鎖のうち大きい方を指す。
【0041】
本明細書で使用される場合、「抗体軽鎖」は、天然に存在する立体配座で抗体分子に存在する２種類のポリペプチド鎖のうち小さい方を指す。κ及びλ軽鎖は、２つの主要な抗体軽鎖アイソタイプを指す。
【0042】
本明細書で使用される場合、「合成抗体」という用語は、例えば、本明細書に記載されるように、バクテリオファージにより発現される抗体のように組換えＤＮＡ技術を用いて生成される抗体を意味する。また、この用語は、抗体をコードするＤＮＡ分子を合成することで生成され、そのＤＮＡ分子は抗体タンパク質または抗体を指定するアミノ酸配列を発現する抗体を意味すると解釈されるべきであり、ＤＮＡまたはアミノ酸配列は、利用可能であり、かつ当該技術分野で周知の合成ＤＮＡまたはアミノ酸配列技術を用いて得られる。
【0043】
「エピトープ」という用語は、免疫グロブリンまたは受容体（例えば、Ｔ細胞受容体）に特異的に結合可能な任意のタンパク質決定因子、脂質または炭水化物決定因子を含む。エピトープ決定基は、通常、アミノ酸、脂質または糖側鎖などの分子の活性表面群で構成され、通常、特定の三次元構造特性及び特定の電荷特性を有する。
【0044】
本明細書で使用される場合、「特異的に結合する」という用語は、特定の分子／リガンドを認識するが、試料中の他の分子を実質的に認識または結合しない受容体（これらに限定されないが、抗体または抗体断片を含むことができる）を指す。例えば、ある種の分子に特異的に結合する受容体は、１つ以上の他の種の分子にも結合し得る。しかし、そのような種間の反応性自体は、特定のものとしての分類を変更するものではない。別の例では、ある分子に特異的に結合する受容体は、分子の異なる対立遺伝子型にも結合し得る。しかし、そのような交差反応性自体は、特定のものとしての分類を変更するものではない。いくつかの場合では、「特異的結合」または「特異的に結合する」という用語は、タンパク質（またはペプチド）の第２の化学種との相互作用に関して使用することができ、相互作用が化学種上の特定の構造（例えば、抗原決定基またはエピトープ）の存在に依存することを意味する。例えば、受容体は、一般的なタンパク質ではなく、特定の構造を認識して結合する。受容体がエピトープ「Ａ」に特異的である場合、標識「Ａ」及び受容体を含有する反応において、エピトープＡを含む分子（または不含、未標識Ａ）が存在すると、受容体に結合する標識Ａの量が低減するであろう。
【0045】
いくつかの実施形態では、特異的結合は、少なくとも約１×１０－８Ｍ以下の平衡解離定数によって特徴付けられ得る（例えば、より小さなＫＤは、より緊密な結合を示す）。２つの分子が特異的に結合するかどうかを判定する方法は、当該技術分野で周知であり、例えば、平衡透析、表面プラズモン共鳴などを含む。
【0046】
本明細書で使用される場合、「抗腫瘍効果」という用語は、腫瘍体積の減少、腫瘍細胞の数の減少、腫瘍細胞の代謝活性の減少（例えば、ＰＥＴシグナル）、転移の数の減少、平均余命の延長、またはがん性状態に関連する様々な生理学的症状の改善によって現れ得る生物学的効果を指す。
【0047】
本明細書で使用される場合、「自己」という用語は、個体に由来する任意の物質を指し、これは、後に同じ個体に再導入されることになる。
【0048】
本明細書で使用される場合、「同種異系」という用語は、動物に由来する物質を指し、これは、後に同じ種の別の動物に導入される。
【0049】
本明細書で使用される場合、「γδ Ｔ細胞」または「ガンマデルタＴ細胞」という用語は、１つのγ鎖及び１つのδ鎖からなる、それらの表面上に別個のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）、すなわちγδ ＴＣＲを発現するＴ細胞のサブセットを指す。「γδＴ細胞」という用語は、具体的には、限定されないが、Ｖδ１、Ｖδ２、及びＶδ３ γδ Ｔ細胞、ならびにナイーブ、エフェクターメモリー、セントラルメモリー、及び末端分化γδ Ｔ細胞を含む、γδ Ｔ細胞の全てのサブセットを含む。さらなる例として、「γδＴ細胞」という用語は、Ｖδ４、Ｖδ５、Ｖδ７、及びＶδ８ γδ Ｔ細胞、ならびにＶγ２、Ｖγ３、Ｖγ５、Ｖγ８、Ｖγ９、Ｖγ１０、及びＶγ１１ γδ Ｔ細胞を含む。
【0050】
「コードする」は、ヌクレオチドの定義される配列（すなわち、ｒＲＮＡ、ｔＲＮＡ及びｍＲＮＡ）またはアミノ酸の定義された配列のどちらかを有する生物学的方法で、他のポリマー及び高分子を合成するためのテンプレートとしての役割を果たすための遺伝子、ｃＤＮＡ、またはｍＲＮＡなどのポリヌクレオチド中のヌクレオチドの特定の配列の固有の特性と、それから得られる生物学的特性とを指す。したがって、その遺伝子に対応するｍＲＮＡの転写及び翻訳が、細胞または他の生物学的システムにおいてタンパク質を作製する場合、その遺伝子はタンパク質をコードする。ｍＲＮＡの配列と同一で、通常、配列表で提供されるヌクレオチド配列であるコード鎖と、遺伝子またはｃＤＮＡの転写のテンプレートとして使用される非コード鎖の両方が、その遺伝子またはｃＤＮＡのタンパク質または他の産物をコードすると言うことが可能である。
【0051】
「単離した」とは、自然状態から変化または除去したことを意味する。例えば、生きている動物中に自然に存在する核酸またはペプチドは「単離」されないが、その自然状態の共存物質から部分的または完全に分離された同じ核酸またはペプチドは「単離」される。単離した核酸またはタンパク質は、実質的に精製された形態で存在することができ、または、例えば、宿主細胞などの非天然環境に存在し得る。
【0052】
特に明記しない限り、「アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列」は、相互の縮重バージョンでありかつ同じアミノ酸配列をコードする全ヌクレオチド配列を含む。タンパク質及びＲＮＡをコードするヌクレオチド配列は、イントロンを含んでもよい。
【0053】
「発現カセット」は、発現される転写物またはポリペプチドをコードする核酸に操作可能に連結された発現制御配列を含む核酸を指す。発現カセットは、発現に十分なシス作用エレメントを含み、発現のための他のエレメントは、宿主細胞により、またはインビトロ発現系において供給され得る。発現カセットは、コスミド、プラスミド（例えば、リポソーム中のネイキッドもしくはリポソームに含まれるもの）、またはウイルス（例えば、レンチウイルス、レトロウイルス、アデノウイルス及びアデノ随伴ウイルス）などのベクターの構成成分であり得る。発現カセットは、γδ Ｔ細胞などの宿主細胞に存在し得る。
【0054】
キメラ抗原受容体構築物
本発明の態様には、ＣＡＲをコードする核酸、ならびにそのような核酸を含む構築物及びベクターが含まれる。いくつかの場合では、核酸は、例えば、異種性の、発現カセットの構成成分である。いくつかの実施形態では、核酸は、例えば、異種性の、レトロウイルスベクターの構成成分である。いくつかの実施形態では、核酸は、例えば、異種性の、γδ Ｔ細胞の構成成分である。いくつかの実施形態では、核酸は、例えば、異種性の、γ＋ Ｔ細胞及び／またはδ＋ Ｔ細胞の構成成分である。
本発明の態様には、ＣＡＲをコードする核酸、ならびにそのような核酸を含む構築物及びベクターが含まれる。いくつかの場合では、核酸は、例えば、異種性の、発現カセットの構成成分である。いくつかの実施形態では、核酸は、例えば、異種性の、レトロウイルスベクターの構成成分である。いくつかの実施形態では、核酸は、例えば、異種性の、γδ Ｔ細胞の構成成分である。いくつかの実施形態では、核酸は、例えば、異種性の、γ＋ Ｔ細胞及び／またはδ＋ Ｔ細胞の構成成分である。
【0055】
本明細書に記載されているのは、血液腫瘍細胞の表面で発現される腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）に特異的に結合するＣＡＲ結合ドメインをコードする核酸である。好ましい実施形態では、結合ドメインは、米国特許出願第２００９／００３５３２２号及びＷＯ２０２０／０７２５３６Ａ９に記載のＣＤ２０結合ドメインなどのＣＤ２０結合ドメインであり、その参考文献の各々の内容は、あらゆる目的のためにその全体が、特に結合ドメイン、抗体、抗体断片、相補性決定領域、当該相補性決定領域を含むポリペプチド、当該相補性決定領域をコードする核酸、ならびに本明細書に記載のエピトープ特異性を決定するためのエピトープ特異性及びアッセイが参照により組み込まれる。典型的には、結合ドメインをコードする領域は、リンカー領域（例えば、ＣＤ８αヒンジドメインをコードする領域）の５’である。
【0056】
例示的なＣＤ２０結合ドメインには、これらに限定されないが、３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７、９Ｃ１１もしくは１０Ｆ２、または３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７もしくは９Ｃ１１または３Ｈ７と結合するＣＤ２０内のエピトープと選択的に結合する、あるいは、その３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７、９Ｃ１１もしくは１０Ｆ２、または３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７もしくは９Ｃ１１または３Ｈ７との結合について競合する結合ドメインが含まれる。追加的または代替的に、ＣＤ２０結合ドメインは、３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７、９Ｃ１１及び１０Ｆ２からなる群から選択される、３Ｂ９、３Ｈ７、２Ｂ７及び９Ｃ１１からなる群から選択される、または３Ｈ７からなる群から選択される抗ＣＤ２０抗体の相補性決定領域を含む抗ＣＤ２０抗体の相補性決定領域を含み得る。本開示はまた、本明細書に提供される配列との結合について競合するＣＤ２０結合ドメインを企図する。
【0057】
既知の方法を用いることにより、ＣＤ２０結合ドメインが、参照抗体もしくは結合ドメインと同じエピトープに結合する、またはその参照抗体もしくは結合ドメインと結合するために競合するかどうかを決定することが可能である。例えば、試験抗体が参照結合ドメインと同じエピトープに結合するかどうかを決定するためには、参照結合ドメインを飽和条件下でＣＤ２０に結合させることで可能になる。次に、ＣＤ２０分子に結合する試験結合ドメインの能力を評価することが可能である。この試験する結合ドメインが、参照結合ドメインとの飽和結合に続いてＣＤ２０に結合することが可能である場合、この試験結合ドメインは、参照結合ドメインとは異なるエピトープに結合すると結論付けられる。一方で、試験結合ドメインが、参照結合ドメインとの飽和結合に続いてＣＤ２０に結合できない場合、この試験結合ドメインは、参照結合ドメインにより結合されるエピトープと同じエピトープに結合し得る。
【0058】
結合ドメインが参照結合ドメインとの結合について競合するかどうかを決定するために、上記の結合方法論は、２つのオリエンテーションで実行される。第１のオリエンテーションでは、参照結合ドメインを、飽和条件下でＣＤ２０に結合させ、続いて、試験結合ドメインのＣＤ２０分子への結合の評価を行う。第２のオリエンテーションでは、試験結合ドメインを飽和条件下でＣＤ２０分子に結合させ、続いて、参照結合ドメインのＣＤ２０分子への結合を評価する。両方のオリエンテーションでは、第１の（飽和）結合ドメインのみがＣＤ２０分子に結合可能である場合は、試験結合ドメイン及び参照結合ドメインは、ＣＤ２０への結合について競合すると結論付けられる。当業者により理解されるように、参照結合ドメインと結合するために競合する結合ドメインは、必ずしも参照結合ドメインと同一のエピトープに結合し得るとは限らないが、重複するまたは隣接するエピトープに結合することにより参照結合ドメインの結合を立体的に遮断し得る。
【0059】
２つの結合ドメインは、各々が抗原への他方の結合を競合的に阻害する（遮断する）場合、同じエピトープまたは重複するエピトープに結合する。すなわち、１倍、５倍、１０倍、２０倍、または１００倍過剰な一方の結合ドメインは、競合的結合アッセイで測定された場合、他方の結合を少なくとも５０％、例えば、７５％、９０％、またはさらに９９％阻害する（例えば、Ｊｕｎｇｈａｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１９９０ ５０：１４９５－１５０２を参照されたい）。代替的に、一方の結合ドメインの結合を低減または除去する抗原中の本質的に全てのアミノ酸変異が、他方の結合も低減または除去する場合、２つの結合ドメインは、同じエピトープを有する。一方の結合ドメインの結合を低減または除去するいくつかのアミノ酸変異が、他方の結合も低減または除去する場合、２つの結合ドメインは、重複するエピトープを有する。
【0060】
さらに日常的な実験（例えば、ペプチド変異及び結合分析）を実施することで、観察された試験結合ドメインの結合の欠如が、実際に参照結合ドメインと同じエピトープへの結合によるものであるか、または立体的障害（または他の現象）が、観察された結合の欠如の原因であるかどうかを確かめることが可能である。この種の実験は、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、表面プラズモン共鳴、フローサイトメトリー、または当該技術分野で利用可能な他の任意の定量的または定性的結合アッセイを用いて実施され得る。
【0061】
実施形態では、本明細書に開示されるＣＤ２０結合ドメインは、リツキシマブによって結合されるＣＤ２０エピトープとは異なるＣＤ２０エピトープと結合する。実施形態では、本明細書に開示されるＣＤ２０結合ドメインは、オクレリズマブによって結合されるＣＤ２０エピトープとは異なるＣＤ２０エピトープと結合する。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるＣＤ２０結合ドメインは、オクレリズマブによって結合される同じまたは重複するＣＤ２０エピトープと結合する。実施形態では、本明細書に開示されるＣＤ２０結合ドメインは、オファツムマブ、またはオビヌツズマブ、またはベルツズマブによって結合されるＣＤ２０エピトープとは異なるＣＤ２０エピトープと結合する。実施形態では、本明細書に開示されるＣＤ２０結合ドメインは、オファツムマブ、またはオビヌツズマブ、またはベルツズマブによって結合される同じまたは重複するＣＤ２０エピトープと結合する。実施形態では、本明細書に開示されるＣＤ２０結合ドメインは、Ｌｕｏ ｅｔ ａｌ．（２０２１）Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ，１１（３２５５）によって記載される１つ以上の抗ＣＤ２０ ｍＡｂとは異なるＣＤ２０エピトープと結合する。実施形態では、本明細書に開示されるＣＤ２０結合ドメインは、Ｌｕｏ ｅｔ ａｌ．（２０２１）Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ，１１（３２５５）によって記載される１つ以上の抗ＣＤ２０ ｍＡｂによって結合される同じまたは重複するＣＤ２０エピトープと結合する。実施形態では、本明細書に開示されるＣＤ２０結合ドメインは、Ｃａｓａｎ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｈｕｍ Ｖａｃｃｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ，１４（１２）：２８２０－２８４１によって記載される１つ以上の抗ＣＤ２０ ｍＡｂとは異なるＣＤ２０エピトープと結合する。実施形態では、本明細書に開示されるＣＤ２０結合ドメインは、Ｃａｓａｎ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｈｕｍ Ｖａｃｃｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ，，１４（１２）：２８２０－２８４１によって記載される１つ以上の抗ＣＤ２０ ｍＡｂによって結合される同じまたは重複するＣＤ２０エピトープと結合する。
【0062】
本開示は、ＣＤＲまたはフレームワーク領域において、本明細書で提供される配列に対して「実質的同一性」または「実質的類似性」を有する抗体及びＣＡＲを提供する。「実質的同一性」または「実質的に同一」という用語は、核酸またはその断片を指す場合、他の核酸（または他の核酸の相補鎖）と最適に整列させた場合、以下で述べるようにＦＡＳＴＡ、ＢＬＡＳＴまたはＧＡＰなどの任意の既知の配列同一性のアルゴリズムにより測定される通り、ヌクレオチド配列の同一性が、例えば、ヌクレオチド塩基の少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、少なくとも９９．５％、または１００％存在することを示す。参照核酸分子と実質的同一性を有する核酸分子は、特定の例において、参照核酸分子によりコードされるポリペプチドと同じまたは実質的に類似のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードし得る。
【0063】
ポリペプチドに適用する場合、用語「実質的類似性」または「実質的類似の」は、デフォルトのギャップウエイトを用いるプログラムＧＡＰまたはＢＥＳＴＦＩＴなどにより至適に整列させた場合、２つのペプチド配列が少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、少なくとも９９．５％、または１００％の配列同一性を共有していることを意味する。いくつかの態様において、同一ではない残基の位置は、保存的なアミノ酸の置換により異なる。「保存的アミノ酸置換」は、アミノ酸残基が、同様の化学的性質（例えば、電荷または疎水性）を有する側鎖（Ｒ基）を有する別のアミノ酸残基で置換されるものである。一般的に、保存的アミノ酸置換は、タンパク質の機能特性を実質的に変化させないであろう。２つ以上のアミノ酸配列が、保存的置換により互いに異なる場合、置換の保存的性質を補正するために類似性のパーセントまたは程度が上方調整され得る。この調整を行うための手段は、当業者に周知である。例えば、Ｐｅａｒｓｏｎ（１９９４）Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２４：３０７－３３１を参照されたく、これは参照により本明細書に組み込まれる。類似した化学的性質を有する側鎖を有するアミノ酸の群の例としては、以下が挙げられる：１）脂肪族側鎖：グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、及びイソロイシン；２）脂肪族ヒドロキシル側鎖：セリン、及びトレオニン；３）アミド含有側鎖：アスパラギン及びグルタミン；４）芳香族側鎖：フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファン；５）塩基性側鎖：リジン、アルギニン、及びヒスチジン；６）酸性側鎖：アスパラギン酸及びグルタミン酸；ならびに７）硫黄含有側鎖：システイン及びメチオニン。好ましい保存的アミノ酸置換基は、バリン－ロイシン－イソロイシン、フェニルアラニン－チロシン、リジン－アルギニン、アラニン－バリン、グルタメート－アスパルテート、及びアスパラギン－グルタミンである。あるいは、保存的置換は、参照により本明細書に組み込まれるＧｏｎｎｅｔ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５６：１４４３ ４５に開示されるＰＡＭ２５０対数尤度行列に正の値を有する任意の変化である。「適度に保存的な」置換とは、ＰＡＭ２５０対数尤度行列で負でない値を有する任意の変化である。
【0064】
ポリペプチドの配列同一性及び／または類似性は、通常、配列解析ソフトウェアを使用して測定される。タンパク質分析ソフトウェアは、保存的アミノ酸置換を含む様々な置換、欠失、及び他の改変に割り当てられた類似性の尺度を使用して、類似の配列をマッチさせる。例えば、ＧＣＧソフトウェアは、プログラム、例えば、ＧＡＰ及びＢＥＳＴＦＩＴを含み、これは、密接に関連したポリペプチド、例えば、異なる生物種由来の相同ポリペプチド間の、または野生型タンパク質及びその変異タンパク質間の配列相同性または配列同一性を判定するために、デフォルトパラメータで使用することができる。例えば、ＧＣＧバージョン６．１を参照されたい。ポリペプチド配列は、ＧＣＧバージョン６．１のプログラムであるＦＡＳＴＡをデフォルトまたは推奨パラメータを使用して比較することもできる。ＦＡＳＴＡ（例えば、ＦＡＳＴＡ２及びＦＡＳＴＡ３）は、クエリ配列及び検索配列の間で最も重複する領域のアラインメント及び配列同一性のパーセントを提供する（上記のＰｅａｒｓｏｎ（２０００））。ギャップオープンペナルティが１２、ギャップ拡張ペナルティが２、ＢＬＯＳＵＭマトリックスが６２のアフィンギャップ検索を使用するＳｍｉｔｈ－Ｗａｔｅｒｍａｎ相同性検索アルゴリズムを使用して、配列を比較することもできる。異なる生物由来の多数の配列を含むデータベースと、本明細書に開示された配列を比較する場合の別の好ましいアルゴリズムは、デフォルトのパラメータを使用するコンピュータプログラムＢＬＡＳＴ、特に、ＢＬＡＳＴＰまたはＴＢＬＡＳＴＮである。例えば、Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－４１０及び（１９９７）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２５：３３８９－３４０２を参照されたく、この各々は参照により本明細書に組み込まれる。
【0065】
１つ以上の置換（例えば、保存的置換）を有する、本明細書に開示されるＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ、及び／またはＣＤＲアミノ酸配列のうちのいずれかの変異体を含む抗ＣＤ２０ ＣＡＲが本明細書に提供される。例えば、本開示は、本明細書に開示されるＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ及び／またはＣＤＲ（例えばＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２またはＬＣＤＲ３）アミノ酸配列のいずれかと比較して、例えば、２０以下、１９以下、１８以下、１７以下、１６以下、１５以下、１４以下、１３以下、１２以下、１１以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、２以下または１のアミノ酸置換を備えたＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ及び／またはＣＤＲアミノ酸配列を有する抗ＣＤ２０ＣＡＲを含む。例えば、抗ＣＤ２０ＣＡＲは、本明細書に開示されるＨＣＶＲ、ＬＣＶＲ、及び／またはＣＤＲ（例えば、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２またはＬＣＤＲ３）アミノ酸配列のいずれかと比べて、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２または１のアミノ酸置換（保存的アミノ酸置換など）を含み得る。
【0066】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、重鎖相補的決定領域３（ＨＣＤＲ３）及び軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）を有する抗ＣＤ２０結合ドメインをコードし、ＨＣＤＲ３及びＬＣＤＲ３は、配列番号１（ＡＫＤＰＳＹＧＳＧＳＹＨＳＹＹＧＭＤＶ）及び２（ＱＱＲＦＮＷＰＬＴ）、３（ＶＫＤＦＨＹＧＳＧＳＮＹＧＭＤＶ）及び４（ＱＱＳＮＤＷＰＬＴ）、ならびに５（ＴＫＤＧＳＹＧＨＦＹＳＧＬＤＶ）及び６（ＱＱＲＹＹＷＰＬＴ）からなる群から選択される。
【0067】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）配列及び軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）配列を有する抗ＣＤ２０結合ドメインをコードし、ＨＣＶＲ及びＬＣＶＲ配列は、配列番号７（ＥＥＱＬＶＥＳＧＧＤＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＨＤＹＴＭＨ ＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＳＬＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＫＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＰＳＹＧＳＧＳＹＨＳＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ）及び８（ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥ ＲＡＴＬＳＣＷＡＳＱＳＩＳＲＹＬＶＷＹＱＱＫＣＧＱＡＰＲＬＬＩＹＥＡＳＫＲＡＴＧＩＰＶＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＦＮＷＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ）、９（ＥＶＱＬＡＥＳＧＧＤＬＶＱＳＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳ ＧＩＴＦＨＤＹＡＭＨＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＤＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＫＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＰＤＤＴＡＬＹＹＣＶＫＤＦＨＹＧＳＧＳＮＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＰ）及び１０（ＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬ ＳＭＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＲＮＬＡＷＹＱＱＫＶＧＱＡＰＲＬＬＩＳＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＮＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＳＮＤＷＰＬＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫ）、ならびに１１（ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲ ＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＤＴＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＴＫＤＧＳＹＧＨＦＹＳＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ）及び１２（ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＶＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＤＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＹＹＷＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ）からなる群から選択される。
【0068】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、重鎖相補的決定領域３（ＨＣＤＲ３）ドメイン及び軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）ドメインを有する抗ＣＤ２０結合ドメインをコードし、ＨＣＤＲ３ドメインは、式Ｘ１－Ｘ２－Ｘ３－Ｘ４－Ｘ５－Ｘ６－Ｘ７－Ｘ８－Ｘ９－Ｘ１０－Ｘ１１－Ｘ１２－Ｘ１３－Ｘ１４－Ｘ１５－Ｘ１６－Ｘ１７－Ｘ１８－Ｘ１９のアミノ酸配列を含み、式中、Ｘ１＝Ａ、Ｖ、またはＴ、Ｘ２＝Ｋ、Ｘ３＝Ｄ、Ｘ４＝Ｐ、Ｆ、またはＧ、Ｘ５＝ＳまたはＨ、Ｘ６＝Ｙ、Ｘ７＝Ｇ、Ｘ８＝ＳまたはＨ、Ｘ９＝ＧまたはＦ、Ｘ１０＝ＳまたはＹ、Ｘ１１＝Ｙ、Ｎ、またはＳ、Ｘ１２＝Ｙ、Ｇ、またはＨ、Ｘ１３＝Ｇ、Ｌ、またはＳ、Ｘ１４＝Ｙ、Ｍ、またはＤ、Ｘ１５＝Ｙ、Ｄ、またはＶ、Ｘ１６＝Ｇ、Ｖ、または不在、Ｘ１７＝Ｍまたは不在、Ｘ１８＝Ｄまたは不在、Ｘ１９＝Ｖまたは不在であり、ＬＣＤＲ３ドメインは、式Ｘ１－Ｘ２－Ｘ３－Ｘ４－Ｘ５－Ｘ６－Ｘ７－Ｘ８－Ｘ９のアミノ酸配列を含み、式中、Ｘ１＝Ｑ、Ｘ２＝Ｑ、Ｘ３＝ＲまたはＳ、Ｘ４＝Ｎ、Ｙ、またはＦ、Ｘ５＝Ｎ、Ｄ、またはＹ、Ｘ６＝Ｗ、Ｘ７＝Ｐ、Ｘ８＝Ｌ、Ｘ９＝Ｔである。
【0069】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）配列及び軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）配列を有する抗ＣＤ２０結合ドメインをコードし、ＨＣＶＲ及びＬＣＶＲ配列は、配列番号１３（ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ）及び１４（ＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＴＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＬＱＫＰＧＱＡＰＲ ＬＬＩＹＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＩＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩ）である。
【0070】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）及び軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）を有する抗ＣＤ２０結合ドメインと同じエピトープと結合するか、それと競合するか、またはそれである抗ＣＤ２０結合ドメインをコードし、ＨＣＤＲ及びＬＣＤＲ配列は、それぞれ、配列番号１３のＨＣＶＲ配列及び配列番号１４のＬＣＶＲ配列である。
【0071】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、配列番号１５（ＧＦＴＦＹＤＹＡ）であるか、もしくはそれを含むＨＣＤＲ１、配列番号１６（ＩＳＷＮＳＧＹＩ）であるか、もしくはそれを含むＨＣＤＲ２、及び／または配列番号１７（ＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶ）であるか、もしくはそれを含むＨＣＤＲ３を有する抗ＣＤ２０結合ドメインと同じエピトープと結合するか、それと競合するか、またはそれである抗ＣＤ２０結合ドメインをコードする。いくつかの実施形態では、単離された核酸は、配列番号１８（ＱＳＶＳＳＮ）であるか、もしくはそれを含むＬＣＤＲ１、配列番号１９（ＧＡＳ）であるか、もしくはそれを含むＬＣＤＲ２、及び／または配列番号２０（ＱＱＹＮＮＷＰＩＴ）であるか、もしくはそれを含むＬＣＤＲ３を有する抗ＣＤ２０結合ドメインと同じエピトープと結合するか、それと競合するか、またはそれである抗ＣＤ２０結合ドメインをコードする。いくつかの実施形態では、単離された核酸は、配列番号１５であるか、もしくはそれを含むＨＣＤＲ１、配列番号１６であるか、もしくはそれを含むＨＣＤＲ２、配列番号１７であるか、もしくはそれを含むＨＣＤＲ３、配列番号１８であるか、もしくはそれを含むＬＣＤＲ１、配列番号１９であるか、もしくはそれを含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２０であるか、もしくはそれを含むＬＣＤＲ３を有する抗ＣＤ２０結合ドメインと同じエピトープと結合するか、それと競合するか、またはそれである抗ＣＤ２０結合ドメインをコードする。いくつかの実施形態では、単離された核酸は、配列番号１５を含むＨＣＤＲ１、配列番号１６を含むＨＣＤＲ２、配列番号１７を含むＨＣＤＲ３、配列番号１８を含むＬＣＤＲ１、配列番号１９を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２０を含むＬＣＤＲ３を有する抗ＣＤ２０結合ドメインをコードする。
【0072】
本明細書に記載の例示的な結合ドメインは、典型的には、アミノ末端からカルボキシ末端の順に、重鎖領域とそれに続く軽鎖領域（ＶＨ－ＶＬ）を含む。結合ドメインにおけるＶＨ領域及びＶＬ領域のある特定の順序が明示的または暗に説明されている場合、本開示は、例えば、ｓｃＦＶまたはｓｃＦｖ結合ドメインを含むＣＡＲにおいてＶＨ及びＶＬ領域の順番が反転している代替の実施形態を記述しているようにも理解される。したがって、ＶＨ－ＶＬの順序の説明は、例えば、ｓｃＦＶまたはｓｃＦｖ結合ドメインを含むＣＡＲにおける代替のＶＬ－ＶＨの順序も説明するものである。さらに、ＶＬ－ＶＨの順序の説明は、例えば、ｓｃＦＶまたはｓｃＦｖ結合ドメインを含むＣＡＲにおける代替のＶＨ－ＶＬの順序も説明するものである。
【0073】
概して、本明細書に記載のＣＡＲをコードする核酸は、結合ドメインを膜貫通ドメインに連結させるペプチドリンカーをコードする細胞外リンカー部を含む。例示的なリンカー部分としては、限定されないが、ＣＤ８αヒンジドメイン、例えば、配列番号２１（ＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹ）または配列番号２２（ＴＴＴＰＡＰＲＰ ＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹ）をコードするリンカー部分が挙げられる。典型的には、ペプチドリンカーをコードする領域（例えば、ＣＤ８αヒンジドメイン）は、結合ドメインをコードする領域の３’及び膜貫通ドメインをコードする領域の５’である。
【0074】
本明細書に記載のＣＡＲをコードする核酸は、膜貫通ドメインを含む。膜貫通ドメインは、細胞外抗原結合ドメイン、例えばヒンジを、１つ以上の細胞内シグナル伝達成分に連結することが可能である。例えば、膜貫通ドメインは、抗原結合ドメイン、例えばヒンジを、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン及び任意に１つまたは２つの共刺激エンドドメインと連結することが可能である。例示的な膜貫通ドメインとしては、限定されないが、ＣＤ８α膜貫通ドメイン、例えば、配列番号２３（ＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣ）が挙げられる。典型的には、膜貫通ドメイン（例えば、ＣＤ８α膜貫通ドメイン）をコードする領域は、ペプチドリンカー（例えば、ＣＤ８αヒンジドメイン）をコードする領域の３’であり、１つまたは複数の細胞質ドメインをコードする領域の５’である。
【0075】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、１つ以上の細胞質ドメインを含む細胞質領域をコードする。細胞質領域をコードする領域は、典型的には、膜貫通ドメインをコードする領域の３’である。細胞質ドメインは、典型的には、γδ Ｔ細胞増殖、細胞毒性活性及び／または炎症誘発性サイトカイン発現（例えば、ＴＮＦ－αまたはＩＦＮγ）の活性化シグナルを提供するシグナル伝達ドメインである。例示的な細胞質ドメインは、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインである。いくつかの実施形態では、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインは、配列番号２４（ＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲ ＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰ）であるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインは、配列番号２５（ＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰ）であるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態では、細胞質領域は、例えば、配列番号２４及び２５からそれぞれ独立して選択される、複数（例えば、２、３、４、５、または６つ）のＣＤ３ζシグナル伝達ドメインなどの複数（例えば、２、３、４、５、または６つ）のシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、細胞質領域は、複数（例えば、２、３、４、５、または６つ）の非ＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン及びＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、細胞質領域は、非ＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン及び複数（例えば、２、３、４、５、または６つ）のＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを含む。
【0076】
細胞質領域は、１つ以上の共刺激ドメインを含み得る。１つ以上の共刺激ドメインをコードする領域は、シグナル伝達ドメインをコードする領域の５’または３’であり得る。いくつかの実施形態では、１つ以上の共刺激エンドドメインをコードする領域は、シグナル伝達ドメインをコードする領域の５’である。いくつかの実施形態では、１つ以上の共刺激エンドドメインをコードする領域は、シグナル伝達ドメインの５’であり、１つ以上の共刺激エンドドメインをコードする追加の領域は、シグナル伝達ドメインの３’である。例示的な共刺激エンドドメインには、限定されないが、ＣＤ２８、ＣＤ１３７（４－１ＢＢ）、ＣＤ２７８（ＩＣＯＳ）、ＣＤ２７、ＣＤ１３４（ＯＸ４０）、Ｄａｐ１０、Ｄａｐ１２、ＤＮＡｍ－１、２Ｂ４、ＳＬＡＭドメイン及びＴＬＲ２共刺激エンドドメイン、ならびにそれらの組み合わせが含まれる。
【0077】
いくつかの実施形態では、構築物は、少なくとも１つの４－１ＢＢ共刺激エンドドメインと、任意選択で、４－１ＢＢ、２Ｂ４、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、及びＣＤ２７共刺激エンドドメインから選択される第２の共刺激エンドドメインとをコードする。いくつかの実施形態では、構築物は、少なくとも２つの４－１ＢＢ共刺激エンドドメインあるいは４－１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８及びＣＤ２７から選択される１、２、３、もしくは４またはそれ以上の共刺激エンドドメインと組み合わせた２つの４－１ＢＢ共刺激エンドドメインをコードする。いくつかの実施形態では、４－１ＢＢ共刺激エンドドメインは、配列番号２６（ＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴ ＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬ）を含む。
【0078】
いくつかの実施形態では、構築物は、１つのＣＤ２７共刺激エンドドメインと、任意選択で、４－１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＣＤ２８、及びＣＤ２７共刺激エンドドメインから選択される第２の共刺激エンドドメインとをコードする。いくつかの実施形態では、構築物は、ＣＤ２７共刺激エンドドメイン及び４－１ＢＢ共刺激エンドドメインをコードする。いくつかの実施形態では、構築物は、２つのＣＤ２７共刺激エンドドメインをコードする。いくつかの実施形態では、ＣＤ２７共刺激エンドドメインは、配列番号２７（ＱＲＲＫＹＲＳＮＫＧＥＳＰＶＥＰＡＥＰＣＨＹＳＣＰＲＥＥＥＧＳＴＩＰＩＱＥＤ ＹＲＫＰＥＰＡＣＳＰ）を含む。
【0079】
いくつかの実施形態では、構築物は、Ｔ細胞（例えば、ＣＡＲ－Ｔ細胞）の活性化、細胞傷害性、及び／または持続性を支持するサイトカインなどのＣ末端ポリペプチドの分泌を促進するように作動可能に連結された分泌シグナル、例えば、配列番号２８（ＭＡＬＰＶＴＡＬＬＬＰＬＡＬＬＬＨＡＡＲＰ）をコードする。いくつかの実施形態では、構築物は、分泌シグナル、例えば、ＩＬ－１５などの共通のガンマ鎖サイトカインまたはその活性断片、例えば、配列番号２９（ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤ ＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ）の分泌を促進するように作動可能に連結された配列番号２８をコードする。例示的な一般的なガンマ鎖サイトカインには、ＩＬ－２及びＩＬ－１５が含まれる。いくつかの実施形態では、共通ガンマ鎖サイトカインは、ＩＬ－２、ＩＬ－７、及びＩＬ－１５から選択される。いくつかの実施形態では、共通のガンマ鎖サイトカインは、ＩＬ－１５である。ｓＩＬ１５をコードするコドン最適化核酸配列を含むＩＬ－１５配列は、本明細書及びＷＯ２００７／０３７７８０に開示されている。
【0080】
いくつかの実施形態では、構築物は、１つ以上のマルチシストロン性リンカー領域を、例えば、シグナル伝達ドメイン及び／または共刺激エンドドメインと、サイトカインの分泌を促進するように作動可能に連結された分泌シグナルとの間でコードする。マルチシストロン性リンカー領域は、単一の転写産物からの複数の別個のポリペプチドの生成を容易にするポリペプチド配列またはＲＮＡ配列の領域である。いくつかの実施形態では、マルチシストロン性リンカー領域は、切断配列をコードする。好適な切断配列には、Ｐ２Ａ、Ｆ２Ａ、Ｅ２Ａ、もしくはＴ２Ａ切断配列などの自己切断配列及び／またはフーリンなどの内因性プロテアーゼにより切断される配列が含まれる。
【0081】
いくつかの実施形態では、切断配列は、Ｐ２Ａ切断配列である。いくつかの実施形態では、切断配列は、フーリン切断配列である。いくつかの実施形態では、切断配列は、Ｐ２Ａ及びフーリン切断配列である。いくつかの実施形態では、切断配列は、配列番号３０（ＳＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ）のＰ２Ａ切断配列である。いくつかの実施形態では、切断配列は、配列番号３１（ＲＡＫＲ）のフーリン切断配列である。いくつかの実施形態では、切断配列は、配列番号３２（ＲＡＫＲＳＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧ ＤＶＥＥＮＰＧＰ）のＰ２Ａ＋フーリン切断配列である。
【0082】
いくつかの実施形態では、切断配列は、配列番号３３（ＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ）のＰ２Ａ切断配列であるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態では、切断配列は、配列番号３４（ＶＫＱＴＬＮＮＦＤＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ）のＦ２Ａ切断配列であるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態では、切断配列は、配列番号３５（ＱＣＴＮＹＡＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ）のＥ２Ａ切断配列であるか、またはそれを含む。いくつかの実施形態では、切断配列は、配列番号３６（ＥＧＲＳＬＬＴＣＧＤＶＥＥＮＰＧＰ）のＴ２Ａ切断配列であるか、またはそれを含む。ある特定の態様では、複数の自己切断配列は、シグナル伝達及び／または共刺激ドメインのカルボキシ末端、ならびにコードされた分泌サイトカイン（例えば、ＩＬ－１５などの一般的なガンマ鎖サイトカイン）のアミノ末端にコードされ得、複数の自己切断配列は、好ましくはＰ２Ａ切断配列、Ｔ２Ａ切断配列、Ｅ２Ａ切断配列及びＦ２Ａ切断配列からなる群から独立して選択される。ある特定の態様では、１つ以上の自己切断配列と、内因性プロテアーゼにより切断された１つ以上種の配列は、本明細書に記載の構築物でコードされる。ある特定の実施形態では、内因性プロテアーゼ認識部位は、自己切断配列のアミノ末端にコードされる。
【0083】
いくつかの実施形態では、マルチシストロン性リンカー領域は、内部リボソーム侵入部位をコードする。例示的な内部リボソームエントリー部位は、配列番号３７（ＣＴＡＡＣＧＴＴＡＣＴＧＧＣＣＧＡＡＧＣＣＧＣＴＴＧＧＡＡＴＡＡＧＧＣＣＧＧＴＧＴＧＣＧＴＴＴＧＴＣＴＡＴＡＴＧＴＴＡＴＴＴＴＣＣＡＣＣＡＴＡＴＴＧＣＣＧＴＣＴＴＴＴＧＧＣＡＡＴＧＴＧＡＧＧＧＣＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＣＴＧＴＣＴＴＣＴＴＧＡＣＧＡＧＣＡＴＴＣＣＴＡＧＧＧＧＴＣＴＴＴＣＣＣＣＴＣＴＣＧＣＣＡＡＡＧＧＡＡＴＧＣＡＡＧＧＴＣＴＧＴＴＧＡＡＴＧＴＣＧＴＧＡＡＧＧＡＡＧＣＡＧＴＴＣＣＴＣＴＧＧＡＡＧＣＴＴＣＴＴＧＡＡＧＡＣＡＡＡＣＡＡＣＧＴＣＴＧＴＡＧＣＧＡＣＣＣＴＴＴＧＣＡＧＧＣＡＧＣＧＧＡＡＣＣＣＣＣＣＡＣＣＴＧＧＣＧＡＣＡＧＧＴＧＣＣＴＣＴＧＣＧＧＣＣＡＡＡＡＧＣＣＡＣＧＴＧＴＡＴＡＡＧＡＴＡＣＡＣＣＴＧＣＡＡＡＧＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＣＣＡＧＴＧＣＣＡＣＧＴＴＧＴＧＡＧＴＴＧＧＡＴＡＧＴＴＧＴＧＧＡＡＡＧＡＧＴＣＡＡＡＴＧＧＣＴＣＴＣＣＴＣＡＡＧＣＧＴＡＴＴＣＡＡＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＡＡＧＧＡＴＧＣＣＣＡＧＡＡＧＧＴＡＣＣＣＣＡＴＴＧＴＡＴＧＧＧＡＴＣＴＧＡＴＣＴＧＧＧＧＣＣＴＣＧＧＴＧＣＡＣＡＴＧＣＴＴＴＡＣＡＴＧＴＧＴＴＴＡＧＴＣＧＡＧＧＴＴＡＡＡＡＡＡＡＣＧＴＣＴＡＧＧＣＣＣＣＣＣＧＡＡＣＣＡＣＧＧＧＧＡＣＧＴＧＧＴＴＴＴＣＣＴＴＴＧＡＡＡＡＡＣＡＣＧＡＴＧＡＴＡ）によってコードされる。
【0084】
別の例示的な内部リボソームエントリー部位は、配列番号３８（ＡＧＣＡＧＧＴＴＴＣＣＣＣＡＡＣＴＧＡＣＡＣＡＡＡＡＣＧＴＧＣＡＡＣＴＴＧＡＡＡＣＴＣＣＧＣＣＴＧＧＴＣＴＴＴＣＣＡＧＧＴＣＴＡＧＡＧＧＧＧＴＡＡＣＡＣＴＴＴＧＴＡＣＴＧＣＧＴＴＴＧＧＣＴＣＣＡＣＧＣＴＣＧＡＴＣＣＡＣＴＧＧＣＧＡＧＴＧＴＴＡＧＴＡＡＣＡＧＣＡＣＴＧＴＴＧＣＴＴＣＧＴＡＧＣＧＧＡＧＣＡＴＧＡＣＧＧＣＣＧＴＧＧＧＡＡＣＴＣＣＴＣＣＴＴＧＧＴＡＡＣＡＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＧＧＣＣＡＡＡＡＧＣＣＡＣＧＣＣＣＡＣＡＣＧＧＧＣＣＣＧＴＣＡＴＧＴＧＴＧＣＡＡＣＣＣＣＡＧＣＡＣＧＧＣＧＡＣＴＴＴＡＣＴＧＣＧＡＡＡＣＣＣＡＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＡＣＡＴＴＧＡＡＡＣＴＧＧＴＡＣＣＣＡＣＡＣＡＣＴＧＧＴＧＡＣＡＧＧＣＴＡＡＧＧＡＴＧＣＣＣＴＴＣＡＧＧＴＡＣＣＣＣＧＡＧＧＴＡＡＣＡＣＧＣＧＡＣＡＣＴＣＧＧＧＡＴＣＴＧＡＧＡＡＧＧＧＧＡＣＴＧＧＧＧＣＴＴＣＴＡＴＡＡＡＡＧＣＧＣＴＣＧＧＴＴＴＡＡＡＡＡＧＣＴＴＣＴＡＴＧＣＣＴＧＡＡＴＡＧＧＴＧＡＣＣＧＧＡＧＧＴＣＧＧＣＡＣＣＴＴＴＣＣＴＴＴＧＣＡＡＴＴＡＣＴＧＡＣＣＡＣ）によってコードされる。
【0085】
さらなる好適な内部リボソームエントリー部位としては、これらに限定されないが、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２０１０ Ｊａｎ；３８（Ｄａｔａｂａｓｅ ｉｓｓｕｅ）：Ｄ１３１－６．ｄｏｉ：１０．１０９３／ｎａｒ／ｇｋｐ９８１．Ｅｐｕｂ ２００９ Ｎｏｖ １６に記載されているもの、ＷＯ２０１８／２１５７８７に記載されているもの、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＫＰ０１９３８２．１に記載されている配列、及びＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＬＴ７２７３３９．１に開示されているＩＲＥＳエレメントが挙げられる。
【0086】
切断、自己切断、及びＩＲＥＳエレメントを含む追加のマルチシストロン性リンカー領域は、ＵＳ２０１８／０３６０９９２及びＵＳ８，８６５，４６７に開示されている。
【0087】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、配列番号３９（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＴＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＬＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＩＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＱＲＲＫＹＲＳＮＫＧＥＳＰＶＥＰＡＥＰＣＨＹＳＣＰＲＥＥＥＧＳＴＩＰＩＱＥＤＹＲＫＰＥＰＡＣＳＰＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）、以下のドメイン：３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ膜貫通ドメイン、ＣＤ２７共刺激エンドドメイン、及びＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む３Ｈ７－ＣＤ８－ＣＤ２７ｚポリペプチドをコードする。
【0088】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、配列番号４０（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＴＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＮＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＶＩＳＷＮＳＤＳＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＨＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＨＹＧＳＧＳＹＹＹＹＱＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）、以下のドメイン：３Ｂ９結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４－１ＢＢ共刺激エンドドメイン、ならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む３Ｂ９－ＣＤ８－ＢＢｚポリペプチドをコードする。
【0089】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、配列番号４１（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＴＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＬＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＩＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）、以下のドメイン：３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４－１ＢＢ共刺激エンドドメイン、ならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む３Ｈ７－ＣＤ８－ＢＢｚポリペプチドをコードする。
【0090】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、配列番号４２（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＡＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＲＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＲＤＹＴＭＨＷＶＲＱＧＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＤＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＶＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＬＳＧＴＹＲＤＹＦＹＧＶＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ））、以下のドメイン：２Ｂ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４－１ＢＢ共刺激エンドドメイン、ならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む２Ｂ７－ＣＤ８－ＢＢｚポリペプチドをコードする。
【0091】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、配列番号４３（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＶＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＴＳＱＴＴＴＳＹＬＡＷＹＲＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＡＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＮＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＬＲＴＮＷＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＱＶＱＬＶＥＳＧＧＤＳＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＹＭＴＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＦＩＳＳＳＧＳＴＩＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＶＫＫＳＬＹＬＱＭＮＲＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＥＰＧＮＹＶＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ））、以下のドメイン：９Ｃ１１結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４－１ＢＢ共刺激エンドドメイン、ならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む９Ｃ１１－ＣＤ８－ＢＢｚポリペプチドをコードする。
【0092】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、配列番号４４（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＴＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＬＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＩＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ）、以下のドメイン：３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、ならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを順番に含む３Ｈ７－ＣＤ３ｚポリペプチドをコードする。
【0093】
いくつかの実施形態では、３Ｈ７－ＣＤ８－２７ｚポリペプチドをコードする単離された核酸は、配列番号４５（ＡＴＧＴＣＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＡＧＴＧＡＴＧＡＣＧＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＧＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＡＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＴＴＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＧＴＧＣＡＴＣＣＡＣＣＡＧＧＧＣＣＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＧＴＴＣＡＴＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＣＡＧＴＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＡＧＴＡＴＡＡＴＡＡＣＴＧＧＣＣＧＡＴＣＡＣＣＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＡＣＧＧＣＴＧＧＡＧＡＴＴＡＡＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＡＡＧＴＧＣＡＡＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＡＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＴＡＴＧＡＴＴＡＴＧＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＣＣＧＧＣＡＡＧＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＴＣＡＧＧＴＡＴＴＡＧＴＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＧＴＴＡＣＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＧＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＴＣＴＧＡＧＡＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＴＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＴＡＡＣＡＧＣＴＡＴＧＧＡＡＡＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＧＧＴＴＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＧＣＣＡＧＣＧＣＣＧＣＧＡＣＣＡＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＧＣＡＧＣＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＣＧＣＡＧＴＧＣＡＣＡＣＧＡＧＧＧＧＧＣＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＴＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＣＡＡＣＧＡＣＧＣＡＡＧＴＡＣＣＧＣＴＣＣＡＡＴＡＡＡＧＧＡＧＡＧＴＣＡＣＣＡＧＴＡＧＡＡＣＣＣＧＣＣＧＡＡＣＣＴＴＧＴＣＡＣＴＡＴＴＣＡＴＧＴＣＣＡＣＧＣＧＡＡＧＡＧＧＡＧＧＧＴＴＣＡＡＣＧＡＴＣＣＣＴＡＴＴＣＡＧＧＡＡＧＡＴＴＡＣＡＧＡＡＡＧＣＣＧＧＡＡＣＣＴＧＣＴＴＧＴＡＧＣＣＣＣＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＣＧＣＡＧＣＧＣＣＧＡＣＧＣＣＣＣＴＧＣＣＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＧＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＧＡＡＣＣＴＧＧＧＣＡＧＧＣＧＧＧＡＧＧＡＡＴＡＣＧＡＣＧＴＧＣＴＧＧＡＣＡＡＧＣＧＣＡＧＡＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＣＧＧＣＡＡＧＣＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＣＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＴＡＡＣＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＣＡＡＧＡＴＧＧＣＣＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＣＧＡＧＡＴＣＧＧＣＡＴＧＡＡＧＧＧＣＧＡＧＣＧＧＣＧＡＣＧＣＧＧＣＡＡＧＧＧＣＣＡＣＧＡＣＧＧＣＣＴＧＴＡＣＣＡＧＧＧＣＣＴＧＴＣＣＡＣＣＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＧＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＧＴＴＡＧ）の配列を含む。
【0094】
いくつかの実施形態では、３Ｈ７－ＣＤ８－ＢＢｚポリペプチドをコードする単離された核酸は、配列番号４６（ＡＴＧＴＣＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＡＧＴＧＡＴＧＡＣＧＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＧＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＡＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＴＴＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＧＴＧＣＡＴＣＣＡＣＣＡＧＧＧＣＣＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＧＴＴＣＡＴＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＣＡＧＴＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＡＧＴＡＴＡＡＴＡＡＣＴＧＧＣＣＧＡＴＣＡＣＣＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＡＣＧＧＣＴＧＧＡＧＡＴＴＡＡＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＡＡＧＴＧＣＡＡＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＡＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＴＡＴＧＡＴＴＡＴＧＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＣＣＧＧＣＡＡＧＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＴＣＡＧＧＴＡＴＴＡＧＴＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＧＴＴＡＣＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＧＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＴＣＴＧＡＧＡＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＴＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＴＡＡＣＡＧＣＴＡＴＧＧＡＡＡＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＧＧＴＴＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＧＣＣＡＧＣＧＣＣＧＣＧＡＣＣＡＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＧＣＡＧＣＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＣＧＣＡＧＴＧＣＡＣＡＣＧＡＧＧＧＧＧＣＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＴＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＴＡＡ）の配列を含む。
【0095】
いくつかの実施形態では、３Ｂ９－ＣＤ８－ＢＢｚポリペプチドをコードする単離された核酸は、配列番号４７（ＡＴＧＡＧＣＧＴＴＣＣＡＡＣＣＣＡＡＧＴＴＣＴＧＧＧＡＣＴＧＣＴＴＣＴＧＣＴＣＴＧＧＴＴＧＡＣＴＧＡＣＧＣＴＡＧＧＴＧＣＧＡＡＡＴＡＧＴＡＡＴＧＡＣＣＣＡＡＴＣＣＣＣＡＧＣＣＡＣＴＣＴＣＴＣＣＧＴＴＡＧＣＣＣＡＧＧＴＧＡＡＡＧＡＧＣＣＡＣＴＣＴＴＡＧＴＴＧＣＡＧＧＧＣＴＡＧＴＣＡＡＴＣＣＧＴＡＴＣＴＡＧＣＡＡＣＣＴＧＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＡＡＡＧＣＣＣＧＧＡＣＡＡＧＣＧＣＣＧＣＧＧＴＴＧＴＴＧＡＴＣＴＡＴＧＧＧＡＣＧＡＧＣＡＣＡＣＧＡＧＣＴＡＣＧＧＧＴＡＴＴＣＣＧＧＣＣＡＧＧＴＴＣＴＣＡＧＧＧＴＣＴＧＧＣＴＣＣＧＧＡＡＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＡＴＴＧＡＣＧＡＴＣＡＧＴＡＧＴＣＴＧＣＡＡＴＣＡＧＡＧＧＡＴＴＴＣＧＣＣＧＴＴＴＡＣＴＡＴＴＧＣＣＡＡＣＡＧＴＡＣＡＡＴＡＡＴＴＧＧＣＣＧＣＴＣＡＣＡＴＴＣＧＧＧＧＧＡＧＧＡＡＣＣＡＡＧＧＴＣＧＡＧＡＴＴＡＡＧＧＧＡＧＧＴＧＧＧＧＧＴＡＧＴＧＧＧＧＧＣＧＧＧＧＧＧＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＡＧＧＴＡＣＡＧＴＴＧＧＴＡＧＡＡＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＴＴＧＧＴＴＣＡＡＣＣＴＧＧＡＣＧＧＡＧＴＣＴＧＡＧＡＴＴＧＴＣＴＴＧＣＧＴＧＧＣＴＴＣＣＧＧＣＴＴＴＡＣＴＴＴＣＡＡＴＧＡＴＴＡＣＧＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＡＣＧＣＣＡＧＧＣＧＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＴＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＴＴＣＣＧＴＧＡＴＡＴＣＣＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＡＴＡＧＴＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＣＧＡＴＡＧＴＧＴＡＡＡＡＧＧＡＡＧＧＴＴＴＡＣＡＡＴＣＴＣＴＡＧＧＧＡＴＡＡＣＧＣＴＡＡＧＡＡＣＡＧＣＣＴＧＴＡＣＣＴＴＣＡＡＡＴＧＣＡＴＡＧＴＣＴＣＣＧＧＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＡＧＣＣＴＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＴＧＣＴＡＡＧＧＡＣＡＡＴＣＡＴＴＡＴＧＧＡＡＧＣＧＧＧＴＣＡＴＡＴＴＡＴＴＡＣＴＡＴＣＡＡＴＡＴＧＧＧＡＴＧＧＡＴＧＴＧＴＧＧＧＧＴＣＡＧＧＧＡＡＣＧＡＣＣＧＴＴＡＣＧＧＴＡＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＣＡＣＣＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＧＡＣＴＣＣＣＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＡＣＡＧＣＣＴＣＴＴＡＧＣＣＴＧＣＧＡＣＣＧＧＡＡＧＣＡＴＧＣＡＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＧＧＧＧＧＧＧＣＣＧＴＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＧＧＴＴＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＣＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＴＡＡ）の配列を含む。
【0096】
いくつかの実施形態では、２Ｂ７－ＣＤ８－ＢＢｚポリペプチドをコードする単離された核酸は、配列番号４８（ＡＴＧＴＣＣＧＴＡＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＴＧＴＧＴＴＧＡＣＡＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＴＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＧＣＣＧＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＡＣＴＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＡＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＡＴＧＣＡＴＣＣＡＡＣＡＧＧＧＣＣＡＣＴＧＧＣＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＣＴＴＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＡＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＡＧＣＧＴＡＧＣＡＡＣＴＧＧＣＣＧＣＴＣＡＣＴＴＴＣＧＧＣＧＧＡＧＧＧＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧＡＧＡＴＣＡＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＡＡＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＣＧＡＧＡＴＴＡＴＡＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＣＣＧＧＣＡＡＧＧＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＡＴＧＧＧＴＣＴＣＡＧＧＴＡＴＴＡＧＴＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＡＴＴＡＣＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＧＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＴＣＴＧＡＧＡＧＴＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＴＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＡＡＡＧＣＴＣＡＧＴＧＧＧＡＣＣＴＡＣＡＧＧＧＡＣＴＡＣＴＴＣＴＡＣＧＧＡＧＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＣＡＣＣＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＧＡＣＴＣＣＣＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＡＣＡＧＣＣＴＣＴＴＡＧＣＣＴＧＣＧＡＣＣＧＧＡＡＧＣＡＴＧＣＡＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＧＧＧＧＧＧＧＣＣＧＴＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＧＧＴＴＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＣＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＴＡＡ）の配列を含む。
【0097】
いくつかの実施形態では、９Ｃ１１－ＣＤ８－ＢＢｚポリペプチドをコードする単離された核酸は、配列番号４９（ＡＴＧＴＣＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＴＧＴＧＧＴＧＡＣＡＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＴＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＧＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＡＣＣＡＧＴＣＡＧＡＣＴＡＣＴＡＣＣＡＧＣＴＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＧＡＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＡＴＧＣＡＴＣＣＡＡＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＧＧＣＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＣＴＴＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＡＣＡＧＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＴＧＣＧＴＡＣＣＡＡＣＴＧＧＡＴＣＡＣＣＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＡＣＧＡＣＴＧＧＡＧＡＴＴＡＡＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＣＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＡＣＴＣＧＧＴＣＡＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＧＴＣＣＣＴＧＡＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＣＡＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＡＴＧＡＣＴＴＧＧＡＴＣＣＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＧＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＴＴＣＡＴＴＣＡＴＴＡＧＴＡＧＴＡＧＴＧＧＡＡＧＴＡＣＣＡＴＡＴＡＴＴＡＴＧＣＡＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＴＴＣＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＴＣＡＡＧＡＡＧＴＣＡＴＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＡＧＡＣＴＧＡＧＡＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＧＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＧＡＧＡＧＡＡＧＡＡＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＡＣＧＴＣＴＡＴＴＡＣＧＧＴＡＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＣＡＣＣＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＧＡＣＴＣＣＣＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＡＣＡＧＣＣＴＣＴＴＡＧＣＣＴＧＣＧＡＣＣＧＧＡＡＧＣＡＴＧＣＡＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＧＧＧＧＧＧＧＣＣＧＴＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＧＧＴＴＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＣＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＴＡＡ）の配列を含む。
【0098】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、ＣＤ８αヒンジ領域をコードするコドン最適化配列を含む。例示的なコドン最適化ＣＤ８αヒンジ領域核酸配列には、限定されないが、配列番号５０（ＡＣＣＡＣＣＡＣＣＣＣＴＧＣＡＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＣＧＡＣＴＣＣＣＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＡ ＣＡＧＣＣＴＣＴＴＡＧＣＣＴＧＣＧＡＣＣＧＧＡＡＧＣＡＴＧＣＡＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＧＧＧＧＧＧＧＣＣＧＴＧＣＡＴＡＣＧＡＧＡＧＧＴＴＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＣＧＡＴ）が含まれる。いくつかの実施形態では、ＣＤ８αヒンジ領域は、以下の配列配列番号：５１（ＡＣＣＡＣＧＡＣＧＣＣＡＧＣＧＣＣＧＣＧＡＣＣＡＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＧＣＡＧＣＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＣＧＣＡＧＴＧＣＡＣＡＣＧＡＧＧＧＧＧＣＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＴＧＡＴ）によってコードされる。
【0099】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、３Ｂ９結合ドメインをコードし、ＣＤ８αヒンジドメインの配列番号５０をコードする以下の配列を含む。いくつかの実施形態では、単離された核酸は、２Ｂ７結合ドメインをコードし、ＣＤ８αヒンジドメインの配列番号５０をコードする以下の配列を含む。いくつかの実施形態では、単離された核酸は、９Ｃ１１結合ドメインをコードし、ＣＤ８αヒンジドメインの配列番号５０をコードする以下の配列を含む。いくつかの実施形態では、単離された核酸は、３Ｈ７結合ドメインをコードし、ＣＤ８αヒンジドメインの配列番号５１をコードする以下の配列を含む。
【0100】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、配列番号５２（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＴＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＬＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＩＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰＭＡＬＰＶＴＡＬＬＬＰＬＡＬＬＬＨＡＡＲＰＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ＊）、以下のドメイン：３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４－１ＢＢ共刺激エンドドメイン、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン、Ｐ２Ａ切断ドメイン（ＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ、配列番号５３）、分泌シグナル、ならびにｓＩＬ１５ドメインを順番に含む抗ＣＤ２０－ＣＡＲポリペプチドをコードする。
【0101】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、配列番号５４（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＴＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＬＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＩＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰＭＲＩＳＫＰＨＬＲＳＩＳＩＱＣＹＬＣＬＬＬＮＳＨＦＬＴＥＡＧＩＨＶＦＩＬＧＣＦＳＡＧＬＰＫＴＥＡＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ＊）、以下のドメイン：３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４－１ＢＢ共刺激エンドドメイン、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン、配列番号５３のＰ２Ａ切断ドメイン、配列番号５５（ＭＲＩＳＫＰＨＬＲＳＩＳＩＱＣＹＬＣＬＬＬＮＳＨＦＬＴＥＡＧ ＩＨＶＦＩＬＧＣＦＳＡＧＬＰＫＴＥＡ）の分泌シグナル、ならびにｓＩＬ１５ドメインを順番に含む抗ＣＤ２０－ＣＡＲポリペプチドをコードする。
【0102】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ＋ｓＩＬ１５ポリペプチドをコードする単離された核酸は、配列番号５６（ＡＴＧＴＣＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＡＧＴＧＡＴＧＡＣＧＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＧＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＡＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＴＴＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＧＴＧＣＡＴＣＣＡＣＣＡＧＧＧＣＣＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＧＴＴＣＡＴＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＣＡＧＴＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＡＧＴＡＴＡＡＴＡＡＣＴＧＧＣＣＧＡＴＣＡＣＣＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＡＣＧＧＣＴＧＧＡＧＡＴＴＡＡＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＡＡＧＴＧＣＡＡＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＡＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＴＡＴＧＡＴＴＡＴＧＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＣＣＧＧＣＡＡＧＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＴＣＡＧＧＴＡＴＴＡＧＴＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＧＴＴＡＣＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＧＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＴＣＴＧＡＧＡＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＴＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＴＡＡＣＡＧＣＴＡＴＧＧＡＡＡＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＧＧＴＴＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＧＣＣＡＧＣＧＣＣＧＣＧＡＣＣＡＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＧＣＡＧＣＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＣＧＣＡＧＴＧＣＡＣＡＣＧＡＧＧＧＧＧＣＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＴＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＧＧＴＡＧＣＧＧＧＧＣＴＡＣＧＡＡＣＴＴＣＴＣＣＣＴＴＣＴＴＡＡＡＣＡＡＧＣＧＧＧＡＧＡＣＧＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＴＣＣＣＧＧＡＣＣＴＡＴＧＧＣＣＴＴＡＣＣＡＧＴＧＡＣＣＧＣＣＴＴＧＣＴＣＣＴＧＣＣＧＣＴＧＧＣＣＴＴＧＣＴＧＣＴＣＣＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＧＣＣＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＴＧＴＡＡＴＡＡＧＴＧＡＴＴＴＧＡＡＡＡＡＡＡＴＴＧＡＡＧＡＴＣＴＴＡＴＴＣＡＡＴＣＴＡＴＧＣＡＴＡＴＴＧＡＴＧＣＴＡＣＴＴＴＡＴＡＴＡＣＧＧＡＡＡＧＴＧＡＴＧＴＴＣＡＣＣＣＣＡＧＴＴＧＣＡＡＡＧＴＡＡＣＡＧＣＡＡＴＧＡＡＧＴＧＣＴＴＴＣＴＣＴＴＧＧＡＧＴＴＡＣＡＡＧＴＴＡＴＴＴＣＡＣＴＴＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＡＴＧＣＡＡＧＴＡＴＴＣＡＴＧＡＴＡＣＡＧＴＡＧＡＡＡＡＴＣＴＧＡＴＣＡＴＣＣＴＡＧＣＡＡＡＣＡＡＣＡＧＴＴＴＧＴＣＴＴＣＴＡＡＴＧＧＧＡＡＴＧＴＡＡＣＡＧＡＡＴＣＴＧＧＡＴＧＣＡＡＡＧＡＡＴＧＴＧＡＧＧＡＡＣＴＧＧＡＧＧＡＡＡＡＡＡＡＴＡＴＴＡＡＡＧＡＡＴＴＴＴＴＧＣＡＧＡＧＴＴＴＴＧＴＡＣＡＴＡＴＴＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＣＡＣＴＴＣＴＴＧＡ）の配列を含む。
【0103】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ＋ｓＩＬ１５ポリペプチドをコードする単離された核酸は、配列番号５７（ＡＴＧＴＣＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＡＧＴＧＡＴＧＡＣＧＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＧＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＡＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＴＴＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＧＴＧＣＡＴＣＣＡＣＣＡＧＧＧＣＣＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＧＴＴＣＡＴＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＣＡＧＴＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＡＧＴＡＴＡＡＴＡＡＣＴＧＧＣＣＧＡＴＣＡＣＣＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＡＣＧＧＣＴＧＧＡＧＡＴＴＡＡＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＡＡＧＴＧＣＡＡＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＡＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＴＡＴＧＡＴＴＡＴＧＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＣＣＧＧＣＡＡＧＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＴＣＡＧＧＴＡＴＴＡＧＴＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＧＴＴＡＣＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＧＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＴＣＴＧＡＧＡＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＴＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＴＡＡＣＡＧＣＴＡＴＧＧＡＡＡＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＧＧＴＴＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＧＣＣＡＧＣＧＣＣＧＣＧＡＣＣＡＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＧＣＡＧＣＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＣＧＣＡＧＴＧＣＡＣＡＣＧＡＧＧＧＧＧＣＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＴＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＧＧＴＡＧＣＧＧＧＧＣＴＡＣＧＡＡＣＴＴＣＴＣＣＣＴＴＣＴＴＡＡＡＣＡＡＧＣＧＧＧＡＧＡＣＧＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＴＣＣＣＧＧＡＣＣＴＡＴＧＡＧＡＡＴＴＴＣＧＡＡＡＣＣＡＣＡＴＴＴＧＡＧＡＡＧＴＡＴＴＴＣＣＡＴＣＣＡＧＴＧＣＴＡＣＴＴＧＴＧＴＴＴＡＣＴＴＣＴＡＡＡＣＡＧＴＣＡＴＴＴＴＣＴＡＡＣＴＧＡＡＧＣＴＧＧＣＡＴＴＣＡＴＧＴＣＴＴＣＡＴＴＴＴＧＧＧＣＴＧＴＴＴＣＡＧＴＧＣＡＧＧＧＣＴＴＣＣＴＡＡＡＡＣＡＧＡＡＧＣＣＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＴＧＴＡＡＴＡＡＧＴＧＡＴＴＴＧＡＡＡＡＡＡＡＴＴＧＡＡＧＡＴＣＴＴＡＴＴＣＡＡＴＣＴＡＴＧＣＡＴＡＴＴＧＡＴＧＣＴＡＣＴＴＴＡＴＡＴＡＣＧＧＡＡＡＧＴＧＡＴＧＴＴＣＡＣＣＣＣＡＧＴＴＧＣＡＡＡＧＴＡＡＣＡＧＣＡＡＴＧＡＡＧＴＧＣＴＴＴＣＴＣＴＴＧＧＡＧＴＴＡＣＡＡＧＴＴＡＴＴＴＣＡＣＴＴＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＡＴＧＣＡＡＧＴＡＴＴＣＡＴＧＡＴＡＣＡＧＴＡＧＡＡＡＡＴＣＴＧＡＴＣＡＴＣＣＴＡＧＣＡＡＡＣＡＡＣＡＧＴＴＴＧＴＣＴＴＣＴＡＡＴＧＧＧＡＡＴＧＴＡＡＣＡＧＡＡＴＣＴＧＧＡＴＧＣＡＡＡＧＡＡＴＧＴＧＡＧＧＡＡＣＴＧＧＡＧＧＡＡＡＡＡＡＡＴＡＴＴＡＡＡＧＡＡＴＴＴＴＴＧＣＡＧＡＧＴＴＴＴＧＴＡＣＡＴＡＴＴＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＣＡＣＴＴＣＴＴＧＡ）の配列を含む。
【0104】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、配列番号５８（ＭＳＶＰＴＱＶＬＧＬＬＬＬＷＬＴＤＡＲＣＥＩＶＭＴＱＳＰＡＴＬＳＶＳＰＧＥＲＴＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡＷＹＬＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＴＲＡＴＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＩＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＮＷＰＩＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＹＤＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＳＧＹＩＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＤＮＳＹＧＫＦＹＹＧＬＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＱＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ＊）、以下のドメイン：３Ｈ７結合ドメイン、ＣＤ８αヒンジ及び膜貫通ドメイン、４－１ＢＢ共刺激エンドドメイン、ならびにＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを含む抗ＣＤ２０－ＣＡＲポリペプチドをコードし、配列番号５８をコードする領域の内部リボソーム侵入部位（例えば、配列番号３７によってコードされる）３’を介して、単離された核酸は、配列番号５９（ＭＡＬＰＶＴＡＬＬＬＰＬＡＬＬＬＨＡＡＲＰＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰ ＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ＊）、配列番号２８の分泌シグナル、及びｓＩＬ１５ドメインをさらにコードする。
【0105】
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ＋ｓＩＬ１５ポリペプチドをコードする単離された核酸は、配列番号６０（ＡＴＧＴＣＣＧＴＧＣＣＴＡＣＣＣＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧＣＣＡＧＡＴＧＣＧＡＡＡＴＡＧＴＧＡＴＧＡＣＧＣＡＧＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＴＧＴＧＴＣＴＣＣＡＧＧＧＧＡＡＡＧＡＡＣＣＡＣＣＣＴＣＴＣＣＴＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＴＧＴＴＡＧＣＡＧＣＡＡＣＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＣＣＴＴＣＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＡＴＣＴＡＴＧＧＴＧＣＡＴＣＣＡＣＣＡＧＧＧＣＣＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＧＴＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＧＴＴＣＡＴＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＣＡＧＴＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＧＴＴＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＧＣＡＧＴＡＴＡＡＴＡＡＣＴＧＧＣＣＧＡＴＣＡＣＣＴＴＣＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＡＣＧＧＣＴＧＧＡＧＡＴＴＡＡＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＡＡＧＴＧＣＡＡＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＴＧＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴＧＧＴＡＣＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＡＧＡＣＴＣＴＣＣＴＧＴＧＣＡＧＣＣＴＣＴＧＧＡＴＴＣＡＣＣＴＴＴＴＡＴＧＡＴＴＡＴＧＣＣＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＣＣＧＧＣＡＡＧＣＴＣＣＡＧＧＧＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＣＴＣＡＧＧＴＡＴＴＡＧＴＴＧＧＡＡＴＡＧＴＧＧＴＴＡＣＡＴＡＧＧＣＴＡＴＧＣＧＧＡＣＴＣＴＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＡＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＴＣＴＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＴＣＴＧＡＧＡＧＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣＧＧＣＣＴＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＴＡＡＣＡＧＣＴＡＴＧＧＡＡＡＧＴＴＣＴＡＣＴＡＣＧＧＴＴＴＧＧＡＣＧＴＣＴＧＧＧＧＣＣＡＡＧＧＧＡＣＣＡＣＧＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＧＣＣＡＧＣＧＣＣＧＣＧＡＣＣＡＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＧＴＣＧＣＡＧＣＣＣＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＧＣＣＣＡＧＡＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＧＣＧＧＧＧＧＧＣＧＣＡＧＴＧＣＡＣＡＣＧＡＧＧＧＧＧＣＴＧＧＡＣＴＴＣＧＣＣＴＧＴＧＡＴＡＴＣＴＡＣＡＴＣＴＧＧＧＣＧＣＣＣＴＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＴＴＧＴＧＧＧＧＴＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＴＣＡＣＴＧＧＴＴＡＴＣＡＣＣＣＴＴＴＡＣＴＧＣＡＡＡＣＧＧＧＧＣＡＧＡＡＡＧＡＡＡＣＴＣＣＴＧＴＡＴＡＴＡＴＴＣＡＡＡＣＡＡＣＣＡＴＴＴＡＴＧＡＧＡＣＣＡＧＴＡＣＡＡＡＣＴＡＣＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＴＧＴＡＧＣＴＧＣＣＧＡＴＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＣＴＧＡＧＡＧＴＧＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＧＧＡＧＣＧＣＡＧＡＣＧＣＣＣＣＣＧＣＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＣＴＣＴＡＴＡＡＣＧＡＧＣＴＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡＣＧＡＡＧＡＧＡＧＧＡＧＴＡＣＧＡＴＧＴＴＴＴＧＧＡＣＡＡＧＡＧＡＣＧＴＧＧＣＣＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＧＡＴＧＧＧＧＧＧＡＡＡＧＣＣＧＣＡＧＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＡＣＣＣＴＣＡＧＧＡＡＧＧＣＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＡＡＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＡＴＡＡＧＡＴＧＧＣＧＧＡＧＧＣＣＴＡＣＡＧＴＧＡＧＡＴＴＧＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＣＧＡＧＣＧＣＣＧＧＡＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＣＡＣＧＡＴＧＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＡＧＴＡＣＡＧＣＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＴＡＣＧＡＣＧＣＣＣＴＴＣＡＣＡＴＧＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＣＣＣＣＴＣＧＣＴＡＧＡＧＴＡＣＴＧＣＧＧＣＣＧＣＴＡＣＧＴＡＡＡＴＴＣＣＧＣＣＣＣＴＣＴＣＣＣＴＣＣＣＣＣＣＣＣＣＣＴＡＡＣＧＴＴＡＣＴＧＧＣＣＧＡＡＧＣＣＧＣＴＴＧＧＡＡＴＡＡＧＧＣＣＧＧＴＧＴＧＣＧＴＴＴＧＴＣＴＡＴＡＴＧＴＴＡＴＴＴＴＣＣＡＣＣＡＴＡＴＴＧＣＣＧＴＣＴＴＴＴＧＧＣＡＡＴＧＴＧＡＧＧＧＣＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＧＣＣＣＴＧＴＣＴＴＣＴＴＧＡＣＧＡＧＣＡＴＴＣＣＴＡＧＧＧＧＴＣＴＴＴＣＣＣＣＴＣＴＣＧＣＣＡＡＡＧＧＡＡＴＧＣＡＡＧＧＴＣＴＧＴＴＧＡＡＴＧＴＣＧＴＧＡＡＧＧＡＡＧＣＡＧＴＴＣＣＴＣＴＧＧＡＡＧＣＴＴＣＴＴＧＡＡＧＡＣＡＡＡＣＡＡＣＧＴＣＴＧＴＡＧＣＧＡＣＣＣＴＴＴＧＣＡＧＧＣＡＧＣＧＧＡＡＣＣＣＣＣＣＡＣＣＴＧＧＣＧＡＣＡＧＧＴＧＣＣＴＣＴＧＣＧＧＣＣＡＡＡＡＧＣＣＡＣＧＴＧＴＡＴＡＡＧＡＴＡＣＡＣＣＴＧＣＡＡＡＧＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＣＣＡＧＴＧＣＣＡＣＧＴＴＧＴＧＡＧＴＴＧＧＡＴＡＧＴＴＧＴＧＧＡＡＡＧＡＧＴＣＡＡＡＴＧＧＣＴＣＴＣＣＴＣＡＡＧＣＧＴＡＴＴＣＡＡＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＡＡＧＧＡＴＧＣＣＣＡＧＡＡＧＧＴＡＣＣＣＣＡＴＴＧＴＡＴＧＧＧＡＴＣＴＧＡＴＣＴＧＧＧＧＣＣＴＣＧＧＴＧＣＡＣＡＴＧＣＴＴＴＡＣＡＴＧＴＧＴＴＴＡＧＴＣＧＡＧＧＴＴＡＡＡＡＡＡＡＣＧＴＣＴＡＧＧＣＣＣＣＣＣＧＡＡＣＣＡＣＧＧＧＧＡＣＧＴＧＧＴＴＴＴＣＣＴＴＴＧＡＡＡＡＡＣＡＣＧＡＴＧＡＴＡＴＴＡＡＴＴＡＡＧＣＣＡＣＣＧＣＣＡＴＧＧＣＣＴＴＡＣＣＡＧＴＧＡＣＣＧＣＣＴＴＧＣＴＣＣＴＧＣＣＧＣＴＧＧＣＣＴＴＧＣＴＧＣＴＣＣＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＧＣＣＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＴＧＴＡＡＴＡＡＧＴＧＡＴＴＴＧＡＡＡＡＡＡＡＴＴＧＡＡＧＡＴＣＴＴＡＴＴＣＡＡＴＣＴＡＴＧＣＡＴＡＴＴＧＡＴＧＣＴＡＣＴＴＴＡＴＡＴＡＣＧＧＡＡＡＧＴＧＡＴＧＴＴＣＡＣＣＣＣＡＧＴＴＧＣＡＡＡＧＴＡＡＣＡＧＣＡＡＴＧＡＡＧＴＧＣＴＴＴＣＴＣＴＴＧＧＡＧＴＴＡＣＡＡＧＴＴＡＴＴＴＣＡＣＴＴＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＡＴＧＣＡＡＧＴＡＴＴＣＡＴＧＡＴＡＣＡＧＴＡＧＡＡＡＡＴＣＴＧＡＴＣＡＴＣＣＴＡＧＣＡＡＡＣＡＡＣＡＧＴＴＴＧＴＣＴＴＣＴＡＡＴＧＧＧＡＡＴＧＴＡＡＣＡＧＡＡＴＣＴＧＧＡＴＧＣＡＡＡＧＡＡＴＧＴＧＡＧＧＡＡＣＴＧＧＡＧＧＡＡＡＡＡＡＡＴＡＴＴＡＡＡＧＡＡＴＴＴＴＴＧＣＡＧＡＧＴＴＴＴＧＴＡＣＡＴＡＴＴＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＣＡＣＴＴＣＴＴＧＡ）の配列を含む。
【0106】
いくつかの実施形態では、単離された核酸は、直鎖状核酸である。いくつかの実施形態では、単離された核酸は、環状核酸である。いくつかの実施形態では、単離した核酸は、プラスミドベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、ウイルスベクター、レトロウイルスベクター、またはレンチウイルスベクターなどのベクターである。いくつかの実施形態では、単離した核酸、または例えば、結合ドメイン膜貫通ドメイン及び１つ以上のシグナル伝達及び／または共刺激エンドドメインを含む、単離された核酸の連続した一部は、宿主γδ Ｔ細胞などの宿主細胞のゲノムに組み込まれる。例示的な実施形態では、単離された核酸は、レトロウイルスベクターである。
【0107】
γδ Ｔ細胞
本発明の態様は、本明細書に記載の単離された核酸を機能的に発現し、それによりγδ Ｔ細胞の表面でＣＡＲを発現するγδ Ｔ細胞を含む。
本発明の態様は、本明細書に記載の単離された核酸を機能的に発現し、それによりγδ Ｔ細胞の表面でＣＡＲを発現するγδ Ｔ細胞を含む。
【0108】
本発明の態様は、所望の腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）、例えば、ＣＤ２０の細胞表面発現を示す血液腫瘍細胞に対してインビトロまたはインビボ細胞毒性活性を有するγδ Ｔ細胞を代用的または追加的に含み得る。場合によっては、細胞毒性活性は生来の活性である。場合によっては、細胞毒性は、血液腫瘍細胞の表面で発現するＴＡＡに特異的に結合する結合ドメインを有するＣＡＲ構築物の存在に起因して、少なくとも部分的に、有意に（＞約２５％）、または完全にある。場合によっては、γδ Ｔ細胞は、対照γδ Ｔ細胞におけるインビトロ及び／またはインビボ血液腫瘍細胞傷害活性の生来のレベルよりも高い血液腫瘍細胞傷害活性を呈する。場合によっては、対照γδ Ｔ細胞は、ＣＡＲ構築物を含まない。場合によっては、対照γδ Ｔ細胞は、本明細書に記載の結合ドメイン、本明細書に記載のヒンジ領域、本明細書に記載の膜貫通ドメイン、本明細書に記載のシグナル伝達ドメイン及び／または本明細書に記載の共刺激エンドドメインを欠くＣＡＲ構築物を含む。
【0109】
場合によっては、細胞毒性は、ＣＤ２０またはＣＤ２０内のエピトープに特異的に結合する結合ドメインを有するＣＡＲ構築物の存在に起因して、少なくとも部分的に、有意に（＞約２５％）、または完全にある。場合によっては、γδ Ｔ細胞は、本明細書に記載の単離された核酸によりコードされるＣＤ２０特異的ＣＡＲを機能的に発現する。
【0110】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のγδ Ｔ細胞は、ＨＬＡ制限（例えば、制限されたＨＬＡクラスＩ）細胞毒性を示し得る。他の実施形態においては、ほとんど（＞５０％）、実質的に全て（＞９０％）、または全ての細胞毒性活性は、ＨＬＡに制限（例えば、ＨＬＡクラスＩに制限）されない。ＨＬＡ制限細胞傷害活性は、ＨＬＡ（例えば、ＨＬＡクラスＩ）（ヌル）腫瘍細胞株に対するインビトロ細胞傷害性と、ＨＬＡ＋（例えば、ＨＬＡクラスＩ＋）腫瘍細胞株に対するインビトロ細胞傷害性とを比較することによって評価することができる。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ制限細胞毒性活性は、Ｔ細胞受容体様結合ドメインの使用により、少なくとも部分的に、有意に（＞２５％）、または完全に提供される。結合ドメインのようなＴ細胞受容体は、ＭＨＣ分子と複合体の中の細胞の表面に提示されたときに抗原を特異的に認識する結合ドメインである。Ｔ細胞受容体様結合ドメインは、例えば、ＷＯ２０１６／１９９１４１にさらに記載されている。
【0111】
本明細書に記載のγδ Ｔ細胞は、堅牢及び／または持続的な血液腫瘍細胞傷害活性を呈し得る。場合によっては、血液腫瘍細胞傷害活性は、血液腫瘍細胞との最初の接触から少なくとも約６日～１２０日間、または少なくとも約６日～１８０日間持続し得る。場合によっては、本明細書に記載のγδ Ｔ細胞またはその子孫の血液腫瘍細胞傷害活性は、血液腫瘍細胞との最初の接触からまたは本明細書に記載のγδ Ｔ細胞の投与から、少なくとも約６日～１２０日、または少なくとも約６日～１８０日間持続し得る。この持続的な血液腫瘍細胞傷害活性は、インビトロ、インビボ、またはインビトロ及びインビボの両方で呈され得る。
【0112】
本発明の態様は、追加的または代替的に、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）（例えば、ＣＤ２０）の細胞表面発現または過剰発現を呈する細胞との接触に応答して増殖するγδ Ｔ細胞を含み得る。腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現を呈する細胞は、正常なＢ細胞などの正常な血液細胞であり得る。腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現または過剰発現を呈する細胞は、血液腫瘍細胞であり得る。場合によっては、増殖は生来の活性である。場合によっては、増殖は、血液細胞または血液腫瘍細胞の表面で発現するＴＡＡに特異的に結合する結合ドメインを有するＣＡＲ構築物の存在に起因して、少なくとも部分的に、有意に（＞約２０％または＞約２５％）、または完全にある。場合によっては、γδ Ｔ細胞は、対照のγδ Ｔ細胞と比較して、インビトロ及び／またはインビボのより高いレベルの増殖を呈する。場合によっては、対照γδ Ｔ細胞はＣＡＲ構築物を含まない。場合によっては、対照γδ Ｔ細胞は、本明細書に記載の結合ドメイン、本明細書に記載のヒンジ領域、本明細書に記載の膜貫通ドメイン、本明細書に記載のシグナル伝達ドメイン及び／または本明細書に記載の共刺激エンドドメインを欠くＣＡＲ構築物を含む。
【0113】
場合によっては、増殖は、ＣＤ２０またはＣＤ２０内のエピトープに特異的に結合する結合ドメインを有するＣＡＲ構築物の存在に起因して、少なくとも部分的に、有意に（＞約２０％または＞約２５％）、または完全にある。場合によっては、ＣＤ２０の細胞表面発現を呈する血液細胞または血液腫瘍細胞との接触に応答して増殖を呈するγδ Ｔ細胞は、本明細書に記載の単離された核酸によりコードされるＣＤ２０特異的ＣＡＲを機能的に発現する。
【0114】
本明細書に記載のγδ Ｔ細胞は、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）（例えば、ＣＤ２０）の細胞表面発現または過剰発現を呈する血液学的細胞または血液学的腫瘍細胞を含む宿主生物において、堅牢及び／または持続的な増殖を呈し得る。場合によっては、増殖は、血液腫瘍細胞との最初の接触から、またはγδ Ｔ細胞の宿主生物への投与日から、少なくとも約６日～１２０日間、または少なくとも約６日～１８０日間持続し得る。場合によっては、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）の細胞表面発現または過剰発現を呈する血液細胞または血液腫瘍細胞を含む宿主生物における、本明細書に記載のγδ Ｔ細胞またはその子孫の増殖は、血液細胞または血液腫瘍細胞との最初の接触から、またはγδ Ｔ細胞の宿主生物への最初の投与日から、少なくとも約６日～１２０日間、または少なくとも約６日～１８０日間持続し得る。場合によっては、宿主生物中の増殖は、ＣＤ２０またはＣＤ２０内のエピトープに特異的に結合する結合ドメインを有するＣＡＲ構築物の存在に起因して、少なくとも部分的に、有意に（＞約２０％または＞約２５％）、または完全にある。場合によっては、ＣＤ２０の細胞表面発現を呈する血液細胞または血液腫瘍細胞を含む宿主生物中の増殖を示すγδ Ｔ細胞は、本明細書に記載の単離された核酸によりコードされるＣＤ２０特異的ＣＡＲを機能的に発現する。
【0115】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のγδ Ｔ細胞は、これらに限定されないが、血液細胞または血液腫瘍細胞との接触後に、腫瘍壊死因子αまたはインターフェロンガンマなどの炎症誘発性サイトカインを発現するか、または持続的に発現する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のγδ Ｔ細胞またはその子孫は、血液細胞または血液腫瘍細胞を含む宿主生物中などで、血液細胞または血液腫瘍細胞との接触後に、腫瘍壊死因子アルファまたはインターフェロンガンマなどの炎症誘発性サイトカインを発現するか、または持続的に発現する。
【0116】
いくつかの実施形態では、γδ Ｔ細胞またはγδ Ｔ細胞を含む医薬組成物は、同種異系宿主に導入されたときに、移植片対宿主応答を実質的に呈さないか、または示さない。いくつかの実施形態では、γδ Ｔ細胞またはγδ Ｔ細胞を含む医薬組成物は、同種異系宿主に導入されたときに、移植片対宿主応答を臨床的に許容されるレベルで呈する。いくつかの実施形態では、臨床的に許容されるレベルとは、治療上有効な治療を達成するためにγδ Ｔ細胞治療の中止を必要としない移植片対宿主応答の量である。いくつかの実施形態では、移植片対宿主応答（ＧｖＨＤ）の臨床的に許容されるレベルは、適用可能なＩＢＭＴＲ評価尺度により、グレードＣよりも重症度が低い急性応答である。急性移植片対宿主反応の重症度は、皮膚、肝臓及び消化管の関与の程度を評価することで決定される。個々の臓器の病変のステージが組み合わされて、予後的意義を有する全体的なグレードが作製される。グレードＩ（Ａ）ＧｖＨＤは軽度の疾病、グレードＩＩ（Ｂ）ＧｖＨＤは中等度、グレードＩＩＩ（Ｃ）は重度、グレードＩＶ（Ｄ）は生命を脅かすものとして特徴付けられる。ＩＢＭＴＲグレーディングシステムでは、急性ＧｖＨＤの重症度を次のように定義している（Ｒｏｗｌｉｎｇｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ Ｊ Ｈａｅｍａｔｏｌ １９９７；９７：８５５）：
●グレードＡ－肝臓や胃腸の病変がなく、ステージ１の皮膚病変のみ（体の＜２５％の斑状丘疹状皮疹）
●グレードＢ－ステージ２の皮膚病変、ステージ１から２の腸または肝臓の病変
●グレードＣ－任意の臓器系のステージ３の病変（全身性紅皮症、ビリルビン６．１～１５．０ｍｇ／ｄＬ、下痢１５００～２０００ｍＬ／日）
●グレードＤ－任意の臓器系のステージ４の病変（水疱の形成を伴う全身性紅皮症、ビリルビン＞１５ｍｇ／ｄＬ、下痢＞２０００ｍＬ／日または疼痛またはイレウス）。
急性ＧｖＨＤを評価及びグレーディングするための基準を開示している、Ｓｃｈｏｅｍａｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｅ ５３，ｐａｇｅｓ１４０１－１４１５（２０１８）の例えば、表１及び２もまた参照されたい。
●グレードＡ－肝臓や胃腸の病変がなく、ステージ１の皮膚病変のみ（体の＜２５％の斑状丘疹状皮疹）
●グレードＢ－ステージ２の皮膚病変、ステージ１から２の腸または肝臓の病変
●グレードＣ－任意の臓器系のステージ３の病変（全身性紅皮症、ビリルビン６．１～１５．０ｍｇ／ｄＬ、下痢１５００～２０００ｍＬ／日）
●グレードＤ－任意の臓器系のステージ４の病変（水疱の形成を伴う全身性紅皮症、ビリルビン＞１５ｍｇ／ｄＬ、下痢＞２０００ｍＬ／日または疼痛またはイレウス）。
急性ＧｖＨＤを評価及びグレーディングするための基準を開示している、Ｓｃｈｏｅｍａｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｅ ５３，ｐａｇｅｓ１４０１－１４１５（２０１８）の例えば、表１及び２もまた参照されたい。
【0117】
いくつかの実施形態では、γδ Ｔ細胞、またはγδ Ｔ細胞を含む医薬組成物は、同種異系宿主に投与された、対照αβ Ｔ細胞または対照αβ Ｔ細胞を含む対照医薬組成物により示された移植片対宿主応答と比較して、同種異系宿主に導入された場合、移植片対宿主応答の減少または実質的な減少を示す。場合によっては、対照αβ Ｔ細胞は、同種異系の操作されていない対照αβ Ｔ細胞である。場合によっては、対照αβ Ｔ細胞は、ＣＡＲを含まないか、または参照γδ Ｔ細胞と同じＣＡＲを含まない。
【0118】
本明細書に記載のγδ Ｔ細胞は、δ１、δ２、δ３もしくはδ４ γδ Ｔ細胞、またはそれらの組み合わせであり得る。場合によっては、γδ Ｔ細胞は、ほとんど（＞５０％）、実質的に（＞９０％）、本質的に全て、または完全にδ２－ γδ Ｔ細胞である。場合によっては、γδ Ｔ細胞は、ほとんど（＞５０％）、実質的に（＞９０％）、本質的に全て、または完全にδ１ γδ Ｔ細胞である。
【0119】
γδ Ｔ細胞は、同種異系または自己由来ドナーから入手可能である。γδ Ｔ細胞は、エクスビボで、部分的または完全的に精製または精製されないかつ増幅され得る。エクスビボで拡大するための方法及び組成物には、限定されないが、ＷＯ２０１７／１９７３４７に記載されているものが含まれる。拡大は、ＣＡＲ構築物がγδ Ｔ細胞（複数可）に導入される前もしくは後、または前後に実施され得る。
【0120】
本明細書に記載のγδ Ｔ細胞は、養子細胞移植で用いるために、例えば、凍結保存して保存され得る。
【0121】
バイオマーカー、検出方法、及びその使用
バイオマーカーは、生体医学／分子イメージング、及び他のインビトロまたは実験室方法によってインビボで測定することができる疾患または治療効果の生物学的指標である。本明細書に開示されるように、１つ以上のバイオマーカーは、細胞の活性化、治療の有効性、及び／または後続の治療レジメンを知らせるために有利に信頼され得る。本明細書に記載されるように、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の、それを必要とする対象への投与に関して、１つ以上のバイオマーカーは、例えば、対象における抗腫瘍効果を促進するという点で、有効性、有効性の可能性、または有効性の欠如の指標（複数可）として信頼され得る。実施形態では、１つ以上のバイオマーカーは、例えば、１つ以上の追加の投与レジメンを投与するかどうか、及びその場合、投与量レベルを調整する（例えば、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の同じ投与量を増加、減少、または維持する）かどうか、１つ以上の追加または代替療法を含むかどうか、以前に計画された投与スケジュールを調整するかどうか、同じもしくは異なるドナーに由来する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を投与するかどうか、または治療を停止／延期するかどうかもしくは治療を完全に中止するかどうかなどを決定するために信頼され得る。
バイオマーカーは、生体医学／分子イメージング、及び他のインビトロまたは実験室方法によってインビボで測定することができる疾患または治療効果の生物学的指標である。本明細書に開示されるように、１つ以上のバイオマーカーは、細胞の活性化、治療の有効性、及び／または後続の治療レジメンを知らせるために有利に信頼され得る。本明細書に記載されるように、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の、それを必要とする対象への投与に関して、１つ以上のバイオマーカーは、例えば、対象における抗腫瘍効果を促進するという点で、有効性、有効性の可能性、または有効性の欠如の指標（複数可）として信頼され得る。実施形態では、１つ以上のバイオマーカーは、例えば、１つ以上の追加の投与レジメンを投与するかどうか、及びその場合、投与量レベルを調整する（例えば、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の同じ投与量を増加、減少、または維持する）かどうか、１つ以上の追加または代替療法を含むかどうか、以前に計画された投与スケジュールを調整するかどうか、同じもしくは異なるドナーに由来する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を投与するかどうか、または治療を停止／延期するかどうかもしくは治療を完全に中止するかどうかなどを決定するために信頼され得る。
【0122】
実施形態では、投与された抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の活性化及び／または拡大は、ＣＡＲ＋ γδ Ｔ細胞のフローサイトメトリー検出によって、及び／または抗ＣＤ２０ ＣＡＲ導入遺伝子の定量的ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）検出を介してモニタリングすることができる。好ましくは、そのような方法論（複数可）は、末梢血中のＣＡＲ－Ｔ細胞の存在及び状態が経時的に変化し得ることが周知であるため、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後のいくつかの時点で、例えば、毎日、１日おき、３日おき、４日おきなど、例えば、最大１４日、２８日、２ヶ月、３ヶ月、またはそれ以上実施される（Ｓｈａｈ ｅｔ ａｌ．（２０２０）Ｎａｔ Ｍｅｄ．，２６：１５６９－７５）。当該技術分野では、ＰＣＲ結果は、フローサイトメトリーによってモニタリングされるＣＡＲ表面発現と相関することが報告されているが、フローサイトメトリーは、ＣＡＲ－Ｔ細胞亜集団及び患者の免疫細胞を迅速かつ単一の細胞レベルで特定及び特徴付けすることを可能にするという利点を有する。さらに、フローサイトメトリーは、プロテオミクスレベルでＣＡＲを検出し、したがって、ＣＡＲ細胞機能に関する情報を提供することができる。抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の活性化及び／または拡大をモニタリングするためにフローサイトメトリー、ｑＰＣＲ、及び／または他の検出方法論のうちの１つ以上に依存する方法における実験様式は、例えば、以下の実施例１に示され、記載され、かつ例えば、Ｈｕ ａｎｄ Ｈｕａｎｇ（２０２０）Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１１（１７７０）によって記載されるように、当業者によって容易に決定される。
【0123】
実施形態では、対象に投与される抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞は、１つ以上のサイトカインの放出を誘導し得る。実施形態では、１つ以上のサイトカインは、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞から分泌される。追加または代替の実施形態では、１つ以上のサイトカインは、例えば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、樹状細胞、及びマクロファージを含む、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞以外の細胞から分泌される。実施形態では、１つ以上の炎症性サイトカインの誘導は、腫瘍微小環境によって引き起こされる免疫抑制を緩和し、次に、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞療法に対する臨床応答を改善することができる。
【0124】
実施形態では、１つ以上のサイトカインは、本明細書に開示される抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞療法の細胞活性化及び／または治療有効性のバイオマーカーである。関連するサイトカインとしては、これらに限定されないが、ＩＮＦγ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－１５、ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＭＩＰ１α、ＭＩＰ１β、ＣＲＰ、フェリチン、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＣＬ５、ＩＬ－５、ＩＬ－ＩＲＡ、ＩＬ－１８、可溶型ＭＩＣＡ、ＩＬ－１０、ＩＬ－４、ＩＬ－１３、ＩＬ－１７、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ１２、ＣＣＬ１７、及びＣＣＬ２２が挙げられ得る。好ましい実施形態では、１つ以上のサイトカインは、ＩＬ－２及びＩＬ－８を含むか、またはそれらからなる。
【0125】
実施形態では、治療有効性のバイオマーカーとして使用するためのサイトカインの誘導は、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後１日以下～２８日間の時間枠内に行われる。実施形態では、当該時間枠は、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後１日以下～２１日間、または１８日間、または１４日間、または１０日間である。いくつかの実施形態では、サイトカインバイオマーカーは、ＩＬ－８を含み、ＩＬ－８の誘導は、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後１日以下～２８日間、例えば、１日以下～２１日間、例えば、１日以下～１４日間行われる。いくつかの追加または代替の実施形態では、サイトカインバイオマーカーは、ＩＬ－２を含み、ＩＬ－２の誘導は、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後１日以下～２８日間、例えば、１日以下～２１日間、例えば、１日以下～１４日間行われる。いくつかの追加または代替の実施形態では、バイオマーカーとして使用するためのサイトカインの誘導は、ＬＤ後１日以下～抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後２８日間の時間枠内に行われる。実施形態では、そのような時間枠は、ＬＤ後１日以下～抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後２１日間、または１８日間、または１４日間、または１０日間である。いくつかの実施形態では、サイトカインバイオマーカーは、ＩＬ－８を含み、ＩＬ－８の誘導は、ＬＤ後１日以下～抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後２８日間、例えば、ＬＤ後１日以下～抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後２１日間、例えば、ＬＤ後１日以下～抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後１４日間行われる。いくつかの追加または代替の実施形態では、サイトカインバイオマーカーは、ＩＬ－２を含み、ＩＬ－２の誘導は、ＬＤ後１日以下～抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後２８日間、例えば、ＬＤ後１日以下～抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後２１日間、例えば、ＬＤ後１日以下～抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後１４日間行われる。
【0126】
単一サイトカインの血清レベルの測定は、一般的に、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）及び／または化学発光アッセイを使用して行われ、多重ビーズベースのアッセイを使用して、単一の試験における複数のサイトカインの血清レベルを決定することができる（Ｋｎｉｇｈｔ ｅｔ ａｌ．（２０２０）Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ＆Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１４４（１０））。実施形態では、１つ以上のサイトカインの血清レベルは、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与前、例えば、リンパ枯渇の前及び／またはリンパ枯渇の後／間であるが、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の前に測定される。追加または代替の実施形態では、１つ以上のサイトカインの血清レベルは、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後に測定される。実施形態では、バイオマーカーとして使用するための１つ以上のサイトカインの血清レベルは、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与前（例えば、投与の１～７日前）に測定され、及び／または抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後、最大約２８日間、１回以上測定される。実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与前及び／または投与後の時間枠を包含する、１つ以上のサイトカインの血清レベルの複数の測定は、１つ以上のサイトカインの誘導の時間経過を提供する。そのような時間経過を使用して、当該１つ以上のサイトカインのピーク血清レベルを確立することができ、及び／または時間経過を使用して、時間経過中のサイトカイン誘導のおおよその総レベルを確立することができる。１つ以上のサイトカインのピークレベルがバイオマーカーメトリックとして使用されることは、本開示の範囲内である。加えてまたは代替的に、１つ以上のサイトカインの総放出レベルがバイオマーカーメトリックとして使用されることは、本開示の範囲内である。
【0127】
実施形態では、バイオマーカー（例えば、サイトカイン）の存在は、例えば、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後に、ある所定の閾値を超えて測定されている当該バイオマーカーに応答して確認される。実施形態では、バイオマーカーは、ＩＬ－８であり、バイオマーカーの存在は、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後所定の期間（例えば、２１日以下）内に、約１００ｐｇ／ｍＬ、または約１２５ｐｇ／ｍＬ、または約１５０ｐｇ／ｍＬ、または約１７５ｐｇ／ｍＬ、または約２００ｐｇ／ｍＬに達するか、またはそれを超えるＩＬ－８の血清レベルに応答して確認される。追加または代替の実施形態では、バイオマーカーは、ＩＬ－２であり、バイオマーカーの存在は、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後所定の期間（例えば、２１日以下）内に、約７５ｐｇ／ｍＬ、または約８０ｐｇ／ｍＬ、または約８５ｐｇ／ｍＬに達するか、またはそれを超えるＩＬ－２の血清レベルに応答して確認される。
【0128】
実施形態では、本明細書に記載の１つ以上のサイトカインバイオマーカーの存在の確認を使用して、後続の治療を知らせる。例えば、第１の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後のサイトカインバイオマーカーの確認に応答して、第２の用量は任意であってもよいか、または対応する第２の用量の投与量は、それに応じて調整されてもよい（例えば、第１の用量と同じものを維持するか、または減少される）。追加または代替の実施形態では、第１の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与後のサイトカインバイオマーカーの確認の欠如は、第２の用量（例えば、別のリンパ枯渇ステップありまたはなしで）、細胞投与量が当該第２の用量に対して増加されること、及び／または第２の用量が第１の用量と比較して異なるドナーに由来する抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞を含むことの必要性を示し得る。同様の論理は、加えてまたは代替的に、上記のように、投与された抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞のインビボ活性化及び／または拡大を示すバイオマーカーの存在または不在の指標に適用される。
【0129】
追加または代替の実施形態では、微小残存病変（ＭＲＤ）の指標は、後続の治療レジメンを知らせるためのバイオマーカーとして役立ち得る。本明細書で議論される場合、ＭＲＤは、治療のコース後（例えば、１つ以上の用量の抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与）に対象の体内に残存するある量のがん細胞を指す。実施形態では、ＭＲＤ分析は、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の最後の投与の後に、いくらかの所定の持続時間実施される。実施形態では、当該持続時間は、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の最後の投与後の少なくとも２０日間、例えば、少なくとも２５日間、例えば、少なくとも２８日間、例えば、少なくとも３０日間である。実施形態では、ＭＲＤ陽性試験は、治療後も検出され続ける疾患を示すが、ＭＲＤ陰性試験は、治療後も検出されない疾患を示す。実施形態では、ＭＲＤ陽性試験は、追加の治療 レジメン、例えば、好ましくはより高い細胞投与量で、好ましくは追加のリンパ枯渇ステップを含む、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の別のラウンドの投与を含む治療の第２のコースの必要性を示し得る。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ２０ ＣＡＲ γδ Ｔ細胞の投与を含む治療の第１のコースは、リンパ枯渇の標準的なコース（例えば、３０ｍｇ／ｍ２／日のフルダラビン＋５００ｍｇ／ｍ２／日のシクロスポラミドを３日間含むか、またはそれからなる）に続き得、ＭＲＤ陽性試験に応答して、治療の第２のコースは、強化されたリンパ枯渇ステップ（例えば、４日間の３０ｍｇ／ｍ２／日のフルダラビン＋１０００ｍｇ／ｍ２／日のシクロスポラミドを３日間含むか、またはそれからなる）を含み得る。
【0130】
実施形態では、ＭＲＤ分析は、当該技術分野で既知のマルチパラメータフローサイトメトリー及び免疫配列決定のうちの１つ以上を介して行われる（例えば、Ｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｂｌｏｏｄ，１３１（１２）：１３５０－１３５９を参照されたい）。
【0131】
腫瘍細胞を阻害または殺傷する方法
血液腫瘍細胞に対して細胞毒性活性を有する、１つ以上の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団及び／またはそれらの混合物を、任意の順序でまたは同時に対象に投与し得る。同時に投与される場合、本発明の複数の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物は、静脈内注射などの単一の統一された形態で、または複数の静脈内注入、皮下注射または錠剤などの複数の形態で提供され得る。本発明の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物は、単一のパッケージまたは複数のパッケージに一緒にまたは別々にパッケージングされ得る。本発明の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物の１つまたはその全ては、複数の用量で与えられ得る。同時に投与されない場合、複数の投与間のタイミングは、約１週間、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、または約１年まで変化し得る。場合によっては、本発明の操作されていない濃縮されたγδ Ｔ細胞集団、操作された濃縮されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物は、対象への投与後にインビボで、対象の体内で増殖し得る。１つ以上の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、１つ以上の操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物を凍結して、同じ細胞調製物での複数の処置をするための細胞を提供することが可能である。本開示の１つ以上の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、１つ以上の操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物ならびにそれを含む医薬組成物は、キットとしてパッケージングされ得る。キットは、操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団及び／またはそれらの混合物ならびにそれを含む組成物の使用に関する指示（書面による指示など）を含み得る。
血液腫瘍細胞に対して細胞毒性活性を有する、１つ以上の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団及び／またはそれらの混合物を、任意の順序でまたは同時に対象に投与し得る。同時に投与される場合、本発明の複数の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物は、静脈内注射などの単一の統一された形態で、または複数の静脈内注入、皮下注射または錠剤などの複数の形態で提供され得る。本発明の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物は、単一のパッケージまたは複数のパッケージに一緒にまたは別々にパッケージングされ得る。本発明の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物の１つまたはその全ては、複数の用量で与えられ得る。同時に投与されない場合、複数の投与間のタイミングは、約１週間、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、または約１年まで変化し得る。場合によっては、本発明の操作されていない濃縮されたγδ Ｔ細胞集団、操作された濃縮されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物は、対象への投与後にインビボで、対象の体内で増殖し得る。１つ以上の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、１つ以上の操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物を凍結して、同じ細胞調製物での複数の処置をするための細胞を提供することが可能である。本開示の１つ以上の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、１つ以上の操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物ならびにそれを含む医薬組成物は、キットとしてパッケージングされ得る。キットは、操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団及び／またはそれらの混合物ならびにそれを含む組成物の使用に関する指示（書面による指示など）を含み得る。
【0132】
場合によっては、Ｂ細胞悪性腫瘍を治療する方法は、治療有効量の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物を対象に投与することを含み、投与は、Ｂ細胞悪性腫瘍を治療する（例えば、細胞表面上にＣＤ２０を発現する）。いくつかの実施形態では、治療有効量の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物は、少なくとも約１０秒、３０秒、１分、１０分、３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、１２時間、２４時間、２日、３日、４日、５日、６日、１週間、２週間、３週間、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、または１年投与される。いくつかの実施形態では、治療有効量の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物は、少なくとも１週間投与される。いくつかの実施形態では、治療有効量の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物は、少なくとも２週間投与される。
【0133】
本明細書に記載の操作されていないγδ Ｔ細胞集団、操作されたγδ Ｔ細胞集団、及び／またはそれらの混合物は、疾病もしくは症状の発生前、発生中もしくは発生後に投与することが可能であり、γδ Ｔ細胞集団を含む医薬組成物を投与するタイミングは変化し得る。例えば、γδ Ｔ細胞集団は、予防薬として用いることが可能であり、疾病もしくは症状が発生する可能性を低減するために、症状または疾病の傾向が見られる対象に連続的に投与することが可能である。初回投与は、本明細書に記載の任意の製剤を用いる本明細書に記載の任意の経路によるなどの実用的な任意の経路を介して行われ得る。いくらかの実施例において、本開示のγδＴ細胞集団の投与は、静脈内投与である。γδ Ｔ細胞集団の１回または複数回の投与量は、血液がんの発症後、実行可能になり次第すぐと、例えば、約２４時間～約４８時間、約４８時間～約１週間、約１週間～約２週間、約２週間～約１ヶ月、約１ヶ月～約３ヶ月の免疫病を治療するために必要な時間の間投与され得る。いくつかの実施形態では、γδ Ｔ細胞集団の１回または複数回の投与量は、がんの発症後と、他の治療の前後とに何年も投与され得る。
【0134】
いくつかの実施形態では、γδ Ｔ細胞集団は、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つ以上の方法で同時にまたは連続して投与される。本明細書で使用される場合、「一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の方法」は、少なくとも１つの一般的なガンマ鎖サイトカインのレベルが対象において上昇するように、対象の生理的状態を変化させる方法または方法の組み合わせを指す。いくつかの実施形態では、この方法は、ＩＬ－２、ＩＬ－７及びＩＬ－１５からなる群から選択される１つ以上の一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）のレベルを上昇させ、好ましくは、そこにおいて、この方法は対象におけるＩＬ－１５のレベルを上昇させる。いくつかの実施形態では、この方法はリンパ球の枯渇化を含む。いくつかの実施形態では、方法は、対象に１つ以上の一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を投与することを含む。場合によっては、ＩＬ－２、ＩＬ－７、及び／またはＩＬ－１５、好ましくはＩＬ－１５が投与される。いくつかの実施形態では、この方法は、投与されたγδ Ｔ細胞などから、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を分泌することを含む。場合によっては、ＩＬ－２、ＩＬ－７及び／またはＩＬ－１５、好ましくはＩＬ－１５が分泌される。
【0135】
いくつかの実施形態では、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つまたは複数の投与方法は、γδ Ｔ細胞（複数可）を導入する前のリンパ球の枯渇化を含む。いくつかの実施形態では、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つ以上の投与方法は、γδ Ｔ細胞（複数可）の導入と同時に、または一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）の有効量を連続して投与することで、その導入したγδ Ｔ細胞（複数可）の増殖、細胞毒性活性、持続性、またはその組み合わせを増大させることを含み、好ましくは、方法は、ＩＬ－２またはその１つ以上の模倣物を投与することを含み、より好ましくは、方法は、ＩＬ－１５またはその１つ以上の模倣物を投与することを含む。一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）の投与量は、γδ Ｔ細胞（複数可）を導入する前及び／または導入後に、導入したγδ Ｔ細胞（複数可）の増殖、細胞毒性活性、持続性、またはその組み合わせを増大し得る。ＩＬ－１５の例示的な量には、限定されないが、ＩＬ－１５に対して２４時間毎に０．０１～１０μｇ／ｋｇ／用量が含まれる。例示的な量のＩＬ－２としては、８～４８時間毎に約３×１０６～約２２×１０６単位が挙げられる。例えば、ＲＣＣでのＩＬ２の投与計画は、最大１４回の投与で１５分間にわたって注入される６００，０００国際単位／ｋｇ（０．０３７ｍｇ／ｋｇ）静注、８時間おきである。
【0136】
いくつかの実施形態では、一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）を上昇させる１つ以上の投与方法は、γδ Ｔ細胞（複数可）の投与前と、γδ Ｔ細胞（複数可）の導入との同時の投与前と、またはその導入したγδ Ｔ細胞（複数可）の増殖、細胞毒性活性、持続性、またはそれらの組み合わせを増大させるために有効な一般的なガンマ鎖サイトカイン（複数可）の連続した投与前とのリンパ球の枯渇化を含む。
【0137】
他の好適なリンパ枯渇法を本開示の方法で利用することができることを理解されたい。例示的なリンパ枯渇法は、例えば、Ａｍｉｎｉ，ｅｔ ａｌ．，“Ｐｒｅｐａｒｉｎｇ ｆｏｒ ＣＡＲ Ｔ ｃｅｌｌ ｔｈｅｒａｐｙ：ｐａｔｉｅｎｔ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ｂｒｉｄｇｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ａｎｄ ｌｙｍｐｈｏｄｅｐｌｅｔｉｏｎ，”Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１９（５）：３４２－３５５（Ｍａｙ ２０２２）及びＢｅｃｈｍａｎ，Ｎ．ａｎｄ Ｍａｈｅｒ，Ｊ．，“Ｌｙｍｐｈｏｄｅｐｌｅｔｉｏｎ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｔｏ ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅ ａｄｏｐｔｉｖｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ－ｗｈａｔ ａｒｅ ｗｅ ｄｏｉｎｇ；ｗｈｅｒｅ ａｒｅ ｗｅ ｇｏｉｎｇ，”Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．２１（５）：６２７－６３７（Ｍａｙ ２０２１）に開示されており、これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【0138】
以下の実施例は、本発明の方法及び組成物の製造方法及び使用方法の完全な開示及び記載を当業者らに提供するために提示されており、発明者らが発明とみなす範囲を制限することを意図するものではない。使用される数値（例えば、量、温度など）に関しては正確性を確保する取り組みがなされているが、ある程度の実験誤差及び偏差が考慮されるべきである。別途指示のない限り、部は、重量部であり、分子量は、平均分子量、温度は、摂氏度であり、圧力は、大気圧または大気圧付近である。
【0139】
実施例１．ヒトにおける第Ｉ相抗ＣＤ２０ γδ ＣＡＲ Ｔ細胞
本実施例は、抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞療法に関する安全性プロファイル、細胞拡大の証拠、及び薬力学的関与を実証する。
本実施例は、抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞療法に関する安全性プロファイル、細胞拡大の証拠、及び薬力学的関与を実証する。
【0140】
少なくとも３つの以前の治療ラインから再発したＮＨＬ患者のセットについて、ファースト・イン・ヒューマン（ＦＩＨ）試験を実施した。６名の患者が登録された。患者のうち５人は、３×１０７個のＣＡＲ＋細胞で投与されたが、登録された５人の患者のうちの２人は、非用量制限毒性が評価可能であり、したがって、さらなる分析から除外された。最初に登録された６人の患者のうち、１人の患者が１×１０８個のＣＡＲ＋細胞で投与された。したがって、研究の状況において、安全性サブセットは、６人の患者（抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞療法を受けた全ての患者）を含み、有効性サブセットは、少なくとも１つの反応評価を完了した４人の患者を含んだ。
【0141】
研究設計は、４つの段階で構成されていた。第１の段階（－５日目～０日目）は、リンパ枯渇（ＬＤ）のステップを含み、続いて、第２の段階（０日目～２８日目）での治療を行った。第２の段階は、抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞療法を用いた用量漸増試験を含んだ。第２の段階の終了時に、患者の応答及び安全性評価を実施した。第３の段階（２８日目～１２ヶ月目）には、初期のフォローアップ段階（３、６、９、及び１２ヶ月目の応答及び安全性評価）が含まれた。第４の段階には、長期フォローアップ研究が含まれていた。第１の段階でのＬＤは、標準ＬＤ（ｓＬＤ）または強化ＬＤ（ｅＬＤ）のいずれかを含んだ。ｓＬＤは、３０ｍｇ／ｍ２／日のフルダラビン＋５００ｍｇ／ｍ２／日のシクロスポラミドの３日間の投与を含んでいた。ｅＬＤは、４日間の３０ｍｇ／ｍ２／日のフルダラビン＋３日間の１０００ｍｇ／ｍ２／日のシクロスポラミドを含んでいた。
【0142】
患者の特徴
対象１０１－１０４－００１は、形質転換ＤＬＢＣＬ（ＣＬＬ由来）を有する６２歳の女性である。この対象は、進行性疾患（ＰＤ）を最良の応答として、５つの以前の療法ラインで以前に治療されており、５つの以前の療法ラインは、１）Ｒ－ＣＨＯＰ、２）リツキシマブ－ａｂｂｓ、ゲムシタビン、及びＣＤＤＰ、３）リツキシマブ－ａｂｂｓ、ゲムシタビン、カルボプラチン、４）ポラツズマブ＋ＢＲ×２、ならびに５）オビヌツズマブ－ハイパーシクロホスファミド及びデキサメタゾンを含む。研究のために、この対象は、ｓＬＤを受け、３×１０７個の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞を投与された。
対象１０１－１０４－００１は、形質転換ＤＬＢＣＬ（ＣＬＬ由来）を有する６２歳の女性である。この対象は、進行性疾患（ＰＤ）を最良の応答として、５つの以前の療法ラインで以前に治療されており、５つの以前の療法ラインは、１）Ｒ－ＣＨＯＰ、２）リツキシマブ－ａｂｂｓ、ゲムシタビン、及びＣＤＤＰ、３）リツキシマブ－ａｂｂｓ、ゲムシタビン、カルボプラチン、４）ポラツズマブ＋ＢＲ×２、ならびに５）オビヌツズマブ－ハイパーシクロホスファミド及びデキサメタゾンを含む。研究のために、この対象は、ｓＬＤを受け、３×１０７個の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞を投与された。
【0143】
対象１０１－１０８－００９は、形質転換高悪性度Ｂ細胞腫瘍（ＦＬ由来）を有する６６歳の女性である。この対象は、１）Ｒ－ＣＨＯＰ、２）イブルチニブ、３）ベンダムスチン／リツキシマブ、及び４）リツキシマブを含む４つの以前の治療ラインで以前に治療された。研究のために、この対象は、ｓＬＤを受け、３×１０７個の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞を投与された。
【0144】
対象１０１－１０８－０１０は、ＤＬＢＣＬを有する７５歳の男性である。この対象は、１）Ｒ－ＣＨＯＰ；ＩＴ ＭＴＸ、２）ｌｉｓｏ－ｃｅｌ、３）ｌｉｓｏ－ｃｅｌ（再注入）、４）レブラミド、及び５）タファシタマブ－ｃｘｉｘを含む５つの以前の療法ラインで以前に治療された。研究のために、この対象は、ｅＬＤを受け、３×１０７個の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞を投与された。
【0145】
対象１０１－１０８－０１２は、ＭＣＬを有する６２歳の男性である。この対象は、１）ベンダムスチン／リツキシマブ、２）ザヌブルチニブ、３）ベンダムスチン／オビヌツズマブ、４）ベンダムスチン／リツキシマブ、及び５）リツキシマブ／ゲムシタビン／ｄｅｘ／カルボプラチンを含む５つの以前の療法ラインで以前に治療された。研究のために、この対象は、ｅＬＤを受け、１×１０８個の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞を投与された。
【0146】
上記の対象は全て、ＤＬＴプロトコルを完了した。以下の２人の患者は、ＤＬＴ期間を完了しなかったが、参照のために本明細書に含まれる。
【0147】
対象１０１－１０４－００２は、原発性難治性バーキットリンパ腫を有する２９歳の男性である。この対象は、１）Ｒ－ＣＯＤＯＣ－Ｍ／Ｒ－ＩＶＡＣ、２）ｃｙ／ｆｌｕ／リツキシマブ＋ＮＫ細胞試験（ＦＫ５１６）、及び３）Ｒ－ＥＰＯＣＨを含む３つの以前の療法ラインで以前に治療された。研究のために、この対象は、ｓＬＤを受け、３×１０７個の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞を投与された。
【0148】
対象１０１－１０２－００４は、ダブルヒットＤＬＢＣＬを有する５２歳の男性である。この対象は、１）ＩＴ ＭＴＸ／ＡＲＡ－Ｃを有するＤＡ－ＥＰＯＣＨ Ｒ、２）Ｒ－ＩＣＥ、３）ポラツズマブ／リツキシマブ、４）チサゲンレクロイセル、及び５）ゲムシタビン／オキシリプラチンを含む５つの以前の治療ラインで以前に治療された。研究のために、この対象は、ｓＬＤを受け、３×１０７個の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞を投与された。
【0149】
以下の表１は、研究に対応する安全性プロファイルデータを示す。
【表1】
【0150】
表１に示されるデータに関して、データは、６のＮ（全ての登録された患者）に対応する。ＤＬＴは観察されず、ＩＣＡＮは観察されず、ＧｖＨＤは観察されず、グレード３＋ＣＲＳは観察されなかった。感染のサブカテゴリーに関しては、１人の対象がＣＯＶＩＤ－１９及び肺炎を有し、１人の対象がカンジダを有していた。
【0151】
以下の表２は、有効性評価が可能な患者で得られた応答を示す。
【表2】
【0152】
したがって、表２に示されるデータは、７５％（３／４の患者）の全奏効率（ＯＲＲ）及び５０％（２／４の患者）のＣＲを示す。
【0153】
抗腫瘍応答
フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）を使用して、抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞を用いた研究に登録された対象の治療前後のがん性病変をモニタリングした。図１Ａ～１Ｄは、対象１０１－１０８－００９から得られたデータを示す。図１Ａ及び１Ｃは、それぞれ正面及び側面から撮像した腫瘍病変によるベースラインＦＤＧ取り込みを示し、図１Ｂ及び図１Ｄは、それぞれ正面及び側面からの抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の投与後２８日目に得られた腫瘍応答の部位を示す。図１Ａ～１Ｄの各々は、正常な組織によるＦＤＧの取り込みも示す。腫瘍応答は、Ｌｕｇａｎｏ ２０１４に従って免疫関連応答（ＰＲ）として評価した。この対象は、３×１０７個の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の投与からほぼ完全な応答を有した（上記の表２を参照されたい）。
フルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）を使用して、抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞を用いた研究に登録された対象の治療前後のがん性病変をモニタリングした。図１Ａ～１Ｄは、対象１０１－１０８－００９から得られたデータを示す。図１Ａ及び１Ｃは、それぞれ正面及び側面から撮像した腫瘍病変によるベースラインＦＤＧ取り込みを示し、図１Ｂ及び図１Ｄは、それぞれ正面及び側面からの抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の投与後２８日目に得られた腫瘍応答の部位を示す。図１Ａ～１Ｄの各々は、正常な組織によるＦＤＧの取り込みも示す。腫瘍応答は、Ｌｕｇａｎｏ ２０１４に従って免疫関連応答（ＰＲ）として評価した。この対象は、３×１０７個の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の投与からほぼ完全な応答を有した（上記の表２を参照されたい）。
【0154】
図２Ａ～２Ｄは、対象１０１－１０８－０１０から得られたＦＤＧ－ＰＥＴデータを示す。図２Ａ及び２Ｃは、それぞれ、右脚の矢状面及び骨盤の横断図から示される、腫瘍病変によるベースラインＦＤＧ取り込みを示す。図２Ｂ及び２Ｄは、それぞれ、右脚の矢状面及び骨盤の横断図からの、抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の投与後２８日目に得られた腫瘍応答の部位を示す。この対象は、３×１０７個の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の投与から完全な応答を有した（上記の表２を参照されたい）。
【0155】
図３Ａ～３Ｄは、対象１０１－１０８－０１２から得られたＦＤＧ－ＰＥＴデータを示す。図３Ａ及び３Ｃは、それぞれ、正面及び骨盤の横断図から示される、腫瘍病変によるベースラインＦＤＧ取り込みを示す。図３Ｂ及び３Ｄは、それぞれ、正面及び骨盤の横断図からの、抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の投与後２８日目に得られた腫瘍応答の部位を示す。図３Ａ～３Ｂの各々は、正常な組織によるＦＤＧの取り込みも示す。この対象は、１×１０８個の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の投与から完全な応答を有した（上記の表２を参照されたい）。
【0156】
インビボ拡張及び薬力学的バイオマーカー
薬力学的バイオマーカー
血清サイトカイン分析のための血液試料を、リンパ枯渇前の－５日目、リンパ枯渇後の－１日目、注入前の１日目、ならびに注入後２時間及び６時間（＋／－１５分）、ならびに抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の投与後２日目、３日目、５日目、７日目、１０日目、１１日目、１日目、２１日目、２８日目、及び３ヶ月目（＋／－１日）に収集した。分析のために、収集した試料を中央研究所に出荷した。
薬力学的バイオマーカー
血清サイトカイン分析のための血液試料を、リンパ枯渇前の－５日目、リンパ枯渇後の－１日目、注入前の１日目、ならびに注入後２時間及び６時間（＋／－１５分）、ならびに抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞の投与後２日目、３日目、５日目、７日目、１０日目、１１日目、１日目、２１日目、２８日目、及び３ヶ月目（＋／－１日）に収集した。分析のために、収集した試料を中央研究所に出荷した。
【0157】
結果を、対象１０１－１０４－００２、１０１－１０４－００１、１０１－１０２－００４、及び１０１－１０８－００９について図４Ａ～４Ｃにグラフで示す。「Ｘ」の形状のデータ点は、より低いレベルの定量化（＜ＬＬＯＱ）を下回っていた。
【0158】
インビボ拡大
末梢血中の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞レベルを、－１日目、１日目、３日目、５日目、１０日目、及び２１日目のフローサイトメトリーによって測定した。図５Ａは、ＣＤ３＋細胞にゲーティングされたフローサイトメトリーデータを示し、図５Ｂは、ＰＢＭＣを使用した陰性対照を示す。図５Ｃは、ＣＤ３＋及びＶδ１＋細胞にゲーティングされたフローサイトメトリーデータを示し、図５Ｄは、（ＣＤ３＋細胞にゲーティングされた）ＰＢＭＣにスパイクされたＣＡＲ＋Ｊｕｒｋａｔ細胞を使用した陽性対照を示す。このデータは、ＣＡＲ＋ γδ Ｔ細胞のインビボ拡大を示す。
末梢血中の抗ＣＤ２０同種異系γδ ＣＡＲ Ｔ細胞レベルを、－１日目、１日目、３日目、５日目、１０日目、及び２１日目のフローサイトメトリーによって測定した。図５Ａは、ＣＤ３＋細胞にゲーティングされたフローサイトメトリーデータを示し、図５Ｂは、ＰＢＭＣを使用した陰性対照を示す。図５Ｃは、ＣＤ３＋及びＶδ１＋細胞にゲーティングされたフローサイトメトリーデータを示し、図５Ｄは、（ＣＤ３＋細胞にゲーティングされた）ＰＢＭＣにスパイクされたＣＡＲ＋Ｊｕｒｋａｔ細胞を使用した陽性対照を示す。このデータは、ＣＡＲ＋ γδ Ｔ細胞のインビボ拡大を示す。
【0159】
臨床試験の更新
方法－この多施設第Ｉ相臨床試験は、再発／難治性Ｂ細胞リンパ腫を有する成人におけるＡＤＩ－００１を評価している。適格性基準には、測定可能な病変の存在、腫瘍細胞でのＣＤ２０の発現、及び≧２の以前の全身療法が含まれた。全ての患者は、フルダラビン及びシクロホスファミドによるコンディショニング療法を受けた。ＡＤＩ－００１は、３＋３用量漸増スキームにおいて４つの用量レベル（ＤＬ）（ＤＬ１：３Ｅ７、ＤＬ２：１Ｅ８、ＤＬ３：３Ｅ８、及びＤＬ４：１Ｅ９ ＣＡＲ＋細胞）で投与することができる。２８日間のＤＬＴ期間を完了した患者を評価可能とみなした。ＤＬ３では、最初の２８日間にＤＬＴがなく、２８日目にＰＥＴ／ＣＴ評価で進行性疾患がなく、血球減少症から回復している場合、患者はコンディショニング療法の第２のコースを受け、ＡＤＩ－００１を再投与することができた。治療中に出現した有害事象は、ＣＴＣＡＥ ｖ５．０によって分類され、免疫エフェクター細胞関連神経学的症候群（ＩＣＡＮＳ）及びサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）評価は、ＡＳＴＣＴ基準に従って行った。客観的奏効率（ＯＲＲ）は、Ｌｕｇａｎｏ ２０１４基準に従って、独立した放射線学的レビューによって評価された。
方法－この多施設第Ｉ相臨床試験は、再発／難治性Ｂ細胞リンパ腫を有する成人におけるＡＤＩ－００１を評価している。適格性基準には、測定可能な病変の存在、腫瘍細胞でのＣＤ２０の発現、及び≧２の以前の全身療法が含まれた。全ての患者は、フルダラビン及びシクロホスファミドによるコンディショニング療法を受けた。ＡＤＩ－００１は、３＋３用量漸増スキームにおいて４つの用量レベル（ＤＬ）（ＤＬ１：３Ｅ７、ＤＬ２：１Ｅ８、ＤＬ３：３Ｅ８、及びＤＬ４：１Ｅ９ ＣＡＲ＋細胞）で投与することができる。２８日間のＤＬＴ期間を完了した患者を評価可能とみなした。ＤＬ３では、最初の２８日間にＤＬＴがなく、２８日目にＰＥＴ／ＣＴ評価で進行性疾患がなく、血球減少症から回復している場合、患者はコンディショニング療法の第２のコースを受け、ＡＤＩ－００１を再投与することができた。治療中に出現した有害事象は、ＣＴＣＡＥ ｖ５．０によって分類され、免疫エフェクター細胞関連神経学的症候群（ＩＣＡＮＳ）及びサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）評価は、ＡＳＴＣＴ基準に従って行った。客観的奏効率（ＯＲＲ）は、Ｌｕｇａｎｏ ２０１４基準に従って、独立した放射線学的レビューによって評価された。
【0160】
結果－２０２２年７月１５日時点で、１１人の患者が登録され、９人が評価可能であった。これらの９人の患者のうち、６人（６７％）は男性であり、年齢中央値は６２歳（４５～７５歳の範囲）であった。８人の患者が大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＬＢＣＬ）を有し、１人がマントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）を有した。ＬＢＣＬを有する８人の患者のうち、５人はびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）を有し、２人はダブル／トリプルヒットを伴う高悪性度Ｂ細胞リンパ腫（ＨＧＢＣＬ）を有し、１人は他に特定されていないＨＧＢＣＬを有した。ベースラインでは、腫瘍量の中央値は２，９７４（１５０～７，９１９）ｍｍ２であり、８９％（８／９）がステージＩＩＩ／ＩＶの疾患を有していた。以前の療法の中央値は４であった（範囲２～５）。４人の患者が、以前の抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞療法（２人はＬｉｓｏ－ｃｅｌ、及び２人はＡｘｉ－ｃｅｌ）を受けていた。評価可能な９人の患者のうち、３人の患者をＤＬ１、ＤＬ２、及びＤＬ３の各々で治療した。ＤＬ３の２人の患者に、ＡＤＩ－００１の第２のコースを再投与した。
【0161】
図６に示されるように、２人の患者がＣＲＳを発症した：１人はグレード１、１人はグレード２であった。１人の患者がグレード１のＩＣＡＮＳを発症し、それは２４時間以内に解消された。≧グレード３のＣＲＳまたはＩＣＡＮＳはなかった。関連するＳＡＥは、グレード２のＣＲＳ、グレード１のＩＣＡＮＳ、及びグレード３のアデノウイルス血症のみであった。ＧｖＨＤまたはプロトコル定義されたＤＬＴ事象は報告されなかった。図７に示されるように、最良のＯＲＲは７８％（７／９）であり、完全奏効（ＣＲ）率は７８％（７／９）であった。以前のＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ療法を受けた４人の患者では、ＯＲＲは１００％（４／４）であり、ＣＲ率も１００％であった。データのカットオフ日時点で、ＣＲを達成した７人の患者のうち、２人の患者が進行し、１人が完全寛解中に死亡し、４人がＣＲ及び積極的フォローアップ中であり、フォローアップ期間の範囲は１．２～８．８ヶ月であった。フローサイトメトリーに基づいて、ＣＡＲ＋ γδ Ｔ細胞動態は用量依存的様式で改善され、ピーク細胞拡大はＤＬ３で７日目～１０日目の間に生じる。
【0162】
結論－ＡＤＩ－００１ γδ ＣＡＲ Ｔ細胞は、良好な安全性プロファイルを維持した。予備的有効性は、ＣＡＲ Ｔ療法に以前に曝露された患者を含む患者における奨励的なＣＲ率及び持続的な耐久性を示した。
【0163】
本明細書に開示される配列情報を以下の表３に要約する。
【表3-1】
【表3-2】
【表3-3】
【表3-4】
【表3-5】
【表3-6】
【表3-7】
【表3-8】
【表3-9】
【表3-10】
【表3-11】
【表3-12】
【表3-13】
【表3-14】
【表3-15】
【表3-16】
【表3-17】
【表3-18】
【表3-19】
【表3-20】
【表3-21】
【0164】
上記の実施形態及び実施例は、単に例示的であり、非限定的であることを意図している。当業者は、ほんの日常的な実験して、特定の化合物、材料、及び手順の多数の等価物を認識するか、または確認することができるであろう。そのような等価物は全て、本発明の範囲内であるとみなされ、添付の特許請求の範囲によって包含される。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4-1】
【図4-2】
【図5A】
【図5B】
【図5C】
【図5D】
【図6】
【図7-1】
【図7-2】
【配列表】
【国際調査報告】