特表 2024-542989 抗ＩＬ－１３Ｒ抗体製剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-11-19

(54)【発明の名称】抗ＩＬ－１３Ｒ抗体製剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20241112BHJP

   A61K 47/18 20170101ALI20241112BHJP

   A61K 47/22 20060101ALI20241112BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20241112BHJP

   A61K 47/02 20060101ALI20241112BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20241112BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20241112BHJP

   A61P 37/08 20060101ALI20241112BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20241112BHJP

   C07K 16/28 20060101ALN20241112BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 D

A61K39/395 N ZNA

A61K47/18

A61K47/22

A61K9/08

A61K47/02

A61K47/26

A61P29/00

A61P37/08

A61P17/00

C07K16/28

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024525152

(86)(22)【出願日】2022-10-28

(85)【翻訳文提出日】2024-05-28

(86)【国際出願番号】 SG2022050779

(87)【国際公開番号】W WO2023075700

(87)【国際公開日】2023-05-04

(31)【優先権主張番号】10202112096R

(32)【優先日】2021-10-29

(33)【優先権主張国・地域又は機関】SG

(31)【優先権主張番号】63/332,737

(32)【優先日】2022-04-20

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】10202250847P

(32)【優先日】2022-08-29

(33)【優先権主張国・地域又は機関】SG

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＲＩＴＯＮ

２．ＴＷＥＥＮ

(71)【出願人】

【識別番号】523323538

【氏名又は名称】アスラン ファーマシューティカルズ ピーティーイー リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100114775

【弁理士】

【氏名又は名称】高岡 亮一

(74)【代理人】

【識別番号】100121511

【弁理士】

【氏名又は名称】小田 直

(74)【代理人】

【識別番号】100202751

【弁理士】

【氏名又は名称】岩堀 明代

(74)【代理人】

【識別番号】100208580

【弁理士】

【氏名又は名称】三好 玲奈

(74)【代理人】

【識別番号】100191086

【弁理士】

【氏名又は名称】高橋 香元

(72)【発明者】

【氏名】ルク，アラン

(72)【発明者】

【氏名】ムーア，ロバート

(72)【発明者】

【氏名】チョウ，ダニー ケイ．

(72)【発明者】

【氏名】ファン，ロビン

(72)【発明者】

【氏名】クラウス，ニルス

(72)【発明者】

【氏名】レイチェル，アンジェリカ

【テーマコード（参考）】

4C076

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C076AA12

4C076BB11

4C076CC04

4C076CC07

4C076CC18

4C076DD07F

4C076DD23

4C076DD51

4C076DD60Z

4C076DD67

4C076EE23F

4C076FF16

4C076FF36

4C076FF61

4C085AA13

4C085AA14

4C085BB31

4C085CC22

4C085CC23

4C085EE01

4C085EE05

4C085GG01

4H045AA11

4H045AA30

4H045DA76

4H045EA28

(57)【要約】

抗ＩＬ１３Ｒ抗体の安定な製剤。また提供されるのは、治療のための本製剤の使用、本製剤を用いる治療の方法、および本製剤を生産するプロセスである。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

高濃度の抗体製剤であって、
１５０～２１０ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片、例えば１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００、２０５または２１０ｍｇ／ｍｌ、特に１５０ｍｇ／ｍｌ、１７５ｍｇ／ｍｌまたは２００ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；
１７０～２５０ｍＭのアルギニン（Ａｒｇ－ＨＣｌまたはＡｒｇ－Ｇｌｕなど）、例えば１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００、２０５、２１０、２１５、２２０、２２５、２３０、２３５、２４０、２４５または２５０ｍＭ、特に１５０ｍＭ、１７５ｍＭまたは２５０ｍＭのアルギニン；
２０～５０ｍＭのヒスチジン緩衝液、例えば２０、２５、３０、３５、４０、４５または５０ｍＭ、２０ｍＭまたは５０ｍＭなどのヒスチジン緩衝液；
０．０２％ｗ／ｗなどの、０．０１～０．０３％の非イオン性界面活性剤、
を含み；
および
製剤のｐＨが、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９または７．０などの、６．０～７．０の範囲、特にｐＨ６．５であり；かつ
抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片が、
配列番号：１を含むＶＨ ＣＤＲ１、
配列番号：２を含むＶＨ ＣＤＲ２、
配列番号：３を含むＶＨ ＣＤＲ３、
配列番号：４を含むＶＬ ＣＤＲ１、
配列番号：５を含むＶＬ ＣＤＲ２、および
配列番号：６を含むＶＬ ＣＤＲ３、
を含む、
製剤。

【請求項2】

抗ＩＬ－１３Ｒ抗体が、配列番号：７に示されるアミノ酸配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＨドメインを含む、請求項１にしたがう製剤。

【請求項3】

抗ＩＬ－１３Ｒ抗体が、配列番号：８に示されるアミノ酸配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＬドメインを含む、請求項１または２にしたがう製剤。

【請求項4】

１５０、１７５または２００ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片を含む、請求項１～３のいずれか１項にしたがう製剤。

【請求項5】

２５０ｍＭのアルギニンなどの、１７５ｍＭ、２００ｍＭまたは２５０ｍＭのアルギニンを含む、請求項１～４のいずれか１項にしたがう製剤。

【請求項6】

アルギニンが、Ａｒｇ－ＨＣｌまたはＡｒｇ－Ｇｌｕ、特にＡｒｇ－ＨＣｌである、請求項１～５のいずれか１項にしたがう製剤。

【請求項7】

２０ｍＭのヒスチジン緩衝液などの、２０ｍＭまたは５０ｍＭのヒスチジン緩衝液を含む、請求項１～６のいずれか１項にしたがう製剤。

【請求項8】

０．０２％ｗ／ｗのポリソルベート２０などの、０．０２％ｗ／ｗの非イオン性界面活性剤を含む、請求項１～７のいずれか１項にしたがう製剤。

【請求項9】

ｐＨが、６．５などの、６．０、６．５または７．０である、請求項１～８のいずれか１項にしたがう製剤。

【請求項10】

さらなるアミノ酸、例えばフェニルアラニン、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５または８０ｍＭなどの、４５～８５ｍＭのフェニルアラニンをさらに含む、請求項１～９のいずれか１項にしたがう製剤。

【請求項11】

５０、７５または８０ｍＭのフェニルアラニンを含む、請求項１０にしたがう製剤。

【請求項12】

ＣａＣｌ２、例えば５０ｍＭのＣａＣｌ２をさらに含む、請求項１～１１のいずれか１項にしたがう製剤。

【請求項13】

スクロースなどの、５０～２００ｍＭの糖をさらに含む、請求項１～１２のいずれか１項にしたがう製剤。

【請求項14】

１８０ｍＭのスクロースなどの、１８０ｍＭの糖を含む、請求項１～１３のいずれか１項にしたがう製剤。

【請求項15】

粘度が、２５ｃＰ未満、特に２０～２５ｃＰ未満、２０ｃＰ未満などである、請求項１～１４のいずれか１項にしたがう製剤。

【請求項16】

１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；
Ａｒｇ－ＨＣｌなどの、２５０ｍＭのアルギニン；
２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；
０．０２％ポリソルベート２０などの、０．０２％の非イオン性界面活性剤；
７５ｍＭのフェニルアラニン、
を含み；
および製剤のｐＨが、６．５である、
請求項１～１５のいずれか１項にしたがう高濃度抗体製剤。

【請求項17】

配列番号：７に示されるアミノ酸配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＨドメインならびに配列番号：８に示されるアミノ酸配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＬドメインを含む１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；
２５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌ；
２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；
０．０２％のポリソルベート２０；
７５ｍＭのフェニルアラニン、
を含み；
および製剤のｐＨが、６．５である、
請求項１～１６のいずれか１項にしたがう高濃度抗体製剤。

【請求項18】

請求項１～１７のいずれか１項にしたがう製剤の治療的有効量を投与することを含む、炎症性障害、例えば中等度～重度のアトピー性皮膚炎などの、アトピー性皮膚炎を治療する方法。

【請求項19】

治療における使用のための、特に中等度～重度のアトピー性皮膚炎などの、アトピー性皮膚炎の治療のための、請求項１～１７のいずれか１項にしたがう製剤。

【請求項20】

中等度～重度のアトピー性皮膚炎などの、アトピー性皮膚炎の治療における使用のための、治療薬剤の製造における請求項１～１７のいずれか１項にしたがう製剤の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、抗ＩＬ１３Ｒ抗体の製剤およびその用途、特に本明細書に開示の病態を治療するための、この製剤を用いる治療の方法、ならびにこの製剤を生産するプロセスに関する。

【背景技術】

【0002】

ＩＬ－１３は様々な病態に関連付けられており、そのような病態としては、各種の呼吸器障害およびアレルギー性障害、線維症、強皮症、アトピー性皮膚炎、炎症性腸疾患および特定の癌が挙げられるが、これらに限定されない；例えば、Ｗｙｎｎ、Ｔ．Ａ．、２００３ Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２１：４２５～４５６；Ｔｅｒａｂｅら、２０００ Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１（６）：５１５－５２０；Ｆｕｓｓら、２００４ Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１３（１０）：１４９０－１４９７；Ｓｉｍｍｓら、２００２ Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．１４（６）：７１７－７２２；およびＨａｓｅｇａｗａら、１９９７ Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．２４（２）：３２８－３３２を参照のこと。したがって、ＩＬ－１３は、そのような疾患の治療に関する魅力的な標的である。

【0003】

ＩＬ－１３の活性を阻害する可能な一手段は、例えばＩＬ－１３Ｒに特異的な抗体（ＩＬ－１３Ｒα１に特異的な抗体など）を用いることにより、その受容体ＩＬ－１３ＲへのＩＬ－１３の結合に干渉することであろう。ＩＬ－１３Ｒα１に対する有効な抗体拮抗薬は、ＩＬ－１３の結合に干渉しかつＩＬ－４ＲαとＩＬ－１３Ｒα１の間のヘテロ二量体化を妨害し得る。そのような抗体は、Ｉ型受容体を介するＩＬ－４シグナル伝達を保持しながら、ＩＩ型受容体を介するＩＬ－１３およびＩＬ－４の両方のシグナル伝達を阻害する。Ｉ型受容体を介するシグナル伝達は、その間にＴｈ２細胞が分化する免疫応答の誘導相にとって必須である。Ｔ細胞はＩＬ－１３Ｒα１を発現しないので、ＩＩ型受容体は、Ｔｈ２分化においては何らの役割も果たさない。したがって、ＩＬ－１３Ｒα１抗体は、全体的なＴｈｌ／Ｔｈ２バランスに、影響を与えないはずである。ＩＩ型ＩＬ－４／ＩＬ－１３受容体を介するシグナル伝達は、確立されたアレルギー性炎症の間の免疫応答のエフェクターの攻撃段階（Ａ ｓｔａｇｅ；エフェクター相）の間重要である。したがって、ＩＩ型受容体の阻害は、喘息およびその他のＩＬ－１３Ｒ媒介性病態の症状の多くに対して有益な効果をもたらすはずであり、それゆえ、有効な疾患修飾性薬剤となるであろう。

【0004】

ＩＬ－１３Ｒα１に対する抗体（モノクローナルおよびポリクローナルの両方）は、当該技術分野において報告されている；例えば、ＷＯ９７／１５６６３、ＷＯ０３／８０６７５；ＷＯ０３／４６００９；ＷＯ０６／０７２５６４；Ｇａｕｃｈａｔら、１９９８ Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４２８６－４２９８；Ｇａｕｃｈａｔら、２０００ Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３０：３１５７－３１６４；Ｃｌｅｍｅｎｔら、１９９７ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ９（１１）：９５９（Ｍｅｅｔｉｎｇ Ａｂｓｔｒａｃｔ）；Ｏｇａｔａら、１９９８ Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７３：９８６４－９８７１； Ｇｒａｂｅｒら、１９９８ Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４２８６－４２９８；Ｃ．Ｖｅｒｍｏｔ－Ｄｅｓｒｏｃｈｅｓら、２０００ Ｔｉｓｓｕｅ Ａｎｔｉｇｅｎｓ ５（Ｓｕｐｐ．ｌ）：５２－５３（Ｍｅｅｔｉｎｇ Ａｂｓｔｒａｃｔ）；Ｐｏｕｄｒｉｅｒら、２０００ Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３０：３１５７－３１６４；Ａｋａｉｗａら、２００１ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ １３：７５－８４；Ｃａｎｃｉｎｏ－Ｄｉａｚら、２００２ Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１１９：１１１４－１１２０；および、Ｋｒａｕｓｅら、２００６ ＭｏＩ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４３：１７９９－１８０７を参照のこと。

【0005】

特に有望な抗ＩＬ－１３Ｒα１抗体の一つは、ＷＯ２００８／０６０８１３において抗体１０Ｇ５－６と記載されるＣＳＬ３３４（現在では、ＡＳＬＡＮ００４／エブラサキマブとよばれている）である。エブラサキマブは、高親和性（例えば、Ｋｄが５００ｐＭ程度であってよい）を有してヒトＩＬ－１３Ｒα１に結合することが示されている。エブラサキマブは、その受容体ＩＬ－１３Ｒα１へのＩＬ－１３の結合を阻害することにより有効にＩＬ－１３機能に拮抗すること、およびＮＨＤＦ細胞におけるＩＬ－１３およびＩＬ－４誘導性エオタキシン放出、ＮＨＤＦ細胞におけるＩＬ－１３およびＩＬ－４誘導性ＳＴＡＴ６リン酸化ならびに血液または末梢血単核細胞におけるＴＡＲＣのＩＬ－１３刺激性放出を阻害することが示されている。

【0006】

しかし、エブラサキマブについて最適化された製剤が必要とされている；その理由は、取り扱いと製造が困難であり得るからである。高濃度の抗体製剤、例えば１５０ｍｇ／ｍｌ超の抗体／断片濃度を有する抗体製剤を作成することは、それがより小さな注射容積を可能にするので、患者にとって有益であるが、その達成は容易ではない。非経口製剤における凝集体および粒子の形成は、患者とって非常に危険であり、避けなければならない。したがって、最適化された製剤が、これらの問題に対処するため、および／また製剤の保存可能期間、送達、効力、および効力を最大化するためにも、必要とされる。

【発明の概要】

【0007】

本開示の概要を、以下の項目で要約する。
［項目１］
高濃度の抗体製剤であって、上記製剤が以下を含み：
１５０～２１０ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片、例えば１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５または２００ｍｇ／ｍｌの、特に１５０ｍｇ／ｍｌ、１７５ｍｇ／ｍｌまたは２００ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；
１７０～２５０ｍＭのアルギニン（Ａｒｇ－ＨＣｌまたはＡｒｇ－Ｇｌｕなど）、例えば１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００、２０５、２１０、２１５、２２０、２２５、２３０、２３５、２４０、２４５または２５０ｍＭの、特に１５０ｍＭ、１７５ｍＭまたは２５０ｍＭのアルギニン；
２０～５０ｍＭのヒスチジン緩衝液、例えば２０、２５、３０、３５、４０、４５または５０ｍＭ（２０ｍＭまたは５０ｍＭなど）のヒスチジン緩衝液；
０．０１～０．０３％の非イオン性界面活性剤、例えば０．０１～０．０３％ｗ／ｗ（０．０２％ｗ／ｗなど）の非イオン性界面活性剤；
ここで製剤のｐＨは、６．０～７．０の範囲（６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９または７．０などの範囲）、特にｐＨ６．５であり；
およびここで抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片が、配列番号：１に示されるようなアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ１、配列番号：２に示されるようなアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ２、および配列番号：３に示されるようなアミノ酸配列を含むＶＨ ＣＤＲ３；ならびに配列番号：４に示されるようなアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ１、配列番号：５に示されるようなアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ２、および配列番号：６に示されるようなアミノ酸配列を含むＶＬ ＣＤＲ３を含む、
高濃度抗体製剤。
［項目２］
項目１にしたがう製剤であって、ここで製剤が、１５０～２００ｍｇ／ｍｌ（１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５または２００ｍｇ／ｍｌなど）の抗ＩＬ１３Ｒ抗体またはその結合断片を含む、製剤。
［項目３］
項目１または２にしたがう製剤であって、ここで製剤が、１５０、１７５または２００ｍｇ／ｍｌの抗体を含む、製剤。
［項目４］
１５０ｍｇ／ｍｌを含む、項目３にしたがう製剤。
［項目５］
１７５ｍｇ／ｍｌを含む、項目３にしたがう製剤。
［項目６］
２００ｍｇ／ｍｌを含む、項目３にしたがう製剤。
［項目７］
項目１～６のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで製剤が、１７５、２００または２５０ｍＭのアルギニンを含む、製剤。
［項目８］
項目１～７のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここでアルギニンが、Ａｒｇ－ＨＣｌである、製剤。
［項目９］
項目１～８のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで製剤が、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液を含む、製剤。
［項目１０］
項目１～９のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで製剤が、フェニルアラニン（４５～８５ｍＭのフェニルアラニンなど）をさらに含む、製剤。
［項目１１］
項目１０にしたがう製剤であって、ここで製剤が、５０、７５または８０ｍＭのフェニルアラニンを含む、製剤。
［項目１２］
項目１～１１のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで製剤が、ＣａＣｌ２（例えば、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５または７０ｍＭのＣａＣｌ２）をさらに含む、製剤。
［項目１３］
項目１２にしたがう製剤であって、ここで製剤が、５０ｍＭのＣａＣｌ２を含む、製剤。
［項目１４］
項目１～１３のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで製剤の浸透圧が、３５０～５５０ｍＯｓｍｏ／ｋｇの範囲（例えば３５０、３５５、３６５、３７０、３７５、３８０、３８５、３９０、３９５、４００、４０５、４１０、４１５、４２０、４２５、４３０、４３５、４４０、４４５、４５０、４５５、４６０、４６５、４７０、４７５、４８０、４８５、４９０、４９５、５００、５０５、５１５、５２０、５２５、５３０、５３５、５４０、５４５、５５０ｍＯｓｍｏ／ｋｇ（４０５～４３５ｍＯｓｍｏ／ｋｇなど））である、製剤。
［項目１５］
項目１～１４のいずれか１項にしたがう製剤であって、５０～２００ｍＭの糖（例えば５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００ｍＭの糖（１８０ｍＭの糖など））をさらに含む、製剤。
［項目１６］
項目１５にしたがう製剤であって、ここで製剤が、１８０ｍＭの糖を含む、製剤。
［項目１７］
項目１５または１６にしたがう製剤であって、ここで糖が、マンニトール、ソルビトール、デキストロース、ガラクトース、フルクトース、乳糖、トレハロースおよびスクロースから選択される、製剤。
［項目１８］
項目１７にしたがう製剤であって、ここで糖が、スクロースである、製剤。
［項目１９］
０．０２％ｗ／ｗの非イオン性界面活性剤を含む、項目１～１８のいずれか１項にしたがう製剤。
［項目２０］
項目１～１９のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで非イオン性界面活性剤が、ポリソルベート、例えばポリソルベート２０、４０、６０、または８０、ポリソルベート２０である、製剤。
［項目２１］
項目２０にしたがう製剤であって、ここで非イオン性界面活性剤が、ポリソルベート２０である、製剤。
［項目２２］
項目１～２１のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで製剤が、ＮａＣｌを含まない、製剤。
［項目２３］
項目１～２１のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで製剤が、５０～１５０ｍＭのＮａＣｌ（例えば５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０ｍＭのＮａＣｌ（６２．５または１４０ｍＭのＮａＣｌなど））を含む、製剤。
［項目２４］
項目１～２３のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで製剤が、１０～３０ｃＰの範囲（ｍＰａ．ｓ）で、例えば１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９または３０ｃＰ（１５～２５ｃＰなど、特に２０ｃＰ）の粘度を有する、製剤。
［項目２５］
項目１～２４のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで抗ＩＬ－１３Ｒ抗体が、抗ＩＬ１３Ｒα１抗体である、製剤。
［項目２６］
項目１～２５のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで抗ＩＬ－１３Ｒ抗体が、エピトープＦＦＹＱに結合する、製剤。
［項目２７］
項目１～２６のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで抗ＩＬ－１３Ｒ抗体が、配列番号：７に示されるアミノ酸配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＨドメインを含む、製剤。
［項目２８］
項目１～２７のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで抗ＩＬ－１３Ｒ抗体が、配列番号：８に示されるアミノ酸配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＬドメインを含む、製剤。
［項目２９］
項目１～２８のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで抗ＩＬ１３Ｒ抗体が、配列番号：７に示されるアミノ酸配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＨドメイン、ならびに配列番号：８に示されるアミノ酸配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＬドメインを含む、製剤。
［項目３０］
項目１～２９のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで抗ＩＬ１３Ｒ抗体が、配列番号：７に示されるアミノ酸配列を含むＶＨドメインならびに配列番号：８に示されるアミノ酸配列を含むＶＬドメインを含む、製剤。
［項目３１］
項目１～３０のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで抗ＩＬ１３Ｒ抗体が、ヒト抗体である、製剤。
［項目３２］
項目１～３１のいずれか１項にしたがう製剤であって、ここで製剤が、１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのアルギニン；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％の非イオン性界面活性剤を含み、およびここで製剤のｐＨが、６．５である、製剤。
［項目３３］
項目１～３２のいずれか１項にしたがう製剤であって、１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌ；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％のポリソルベート２０を含み、およびここで製剤のｐＨが、６．５である、製剤。
［項目３４］
項目１～３３のいずれか１項にしたがう製剤であって、１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌ；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％のポリソルベート２０；フェニルアラニン（４５～８５ｍＭのフェニルアラニンなど）を含み、およびここで製剤のｐＨが、６．５である、製剤。
［項目３５］
項目１～３４のいずれか１項にしたがう製剤であって、１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌ；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％のポリソルベート２０；７５ｍＭのフェニルアラニンを含み、およびここで製剤のｐＨが、６．５である、製剤。
［項目３６］
項目１～３５のいずれか１項にしたがう製剤であって、１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片を含み、ここで抗ＩＬ１３Ｒ抗体が、配列番号：８に示されるアミノ酸配列またはそれに対して少なくとも９５％同一の配列を含むＶＬドメイン、ならびに配列番号：７に示されるアミノ酸配列またはそれに対して少なくとも９５％同一の配列を含むＶＨを含み；製剤が、２５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌ；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％のポリソルベート２０；７５ｍＭのフェニルアラニンを含み、およびここで製剤のｐＨが、６．５である、製剤。
［項目３７］
治療における使用のための、項目１～３６のいずれか１項にしたがう製剤。
［項目３８］
炎症または自己免疫疾患、例えば慢性炎症の治療における使用のための、項目３７にしたがう製剤。
［項目３９］
項目３８にしたがう製剤であって、ここで炎症が、線維症（肺線維症（嚢胞性線維症、特発性肺線維症、進行性の広範な線維症など）；肝線維症（肝硬変など）；心臓疾患（心房線維化、心内膜心筋線維症、陳旧性心筋梗塞など）；関節線維化；デュピュイトラン拘縮；ケロイド線維症；縦隔線維症；骨髄線維症；腎性全身性線維症；後腹膜線維化症；および強皮症を含む）、ホジキン病、潰瘍性結腸炎、クローン病、アトピー性皮膚炎、好酸球性食道炎、アレルギー性鼻炎、喘息および慢性肺疾患（慢性閉塞性肺疾患を含む）、特に喘息を含む群から選択される、製剤。
［項目４０］
炎症または自己免疫疾患、例えば慢性炎症の治療のための治療薬剤の製造における使用のための、項目１～３６のいずれか１項にしたがう製剤の使用。
［項目４１］
線維症（肺線維症（嚢胞性線維症、特発性肺線維症、進行性の広範な線維症など）；肝線維症（肝硬など）；心臓疾患（心房線維化、心内膜心筋線維症、陳旧性心筋梗塞など）；関節線維化；デュピュイトラン拘縮；ケロイド線維症；縦隔線維症；骨髄線維症；腎性全身性線維症；後腹膜線維化症；および強皮症を含む）、ホジキン病、潰瘍性結腸炎、クローン病、アトピー性皮膚炎、好酸球性食道炎、アレルギー性鼻炎、喘息および慢性肺疾患（慢性閉塞性肺疾患を含む）、セザリー症候群、特に喘息を含む群から選択される病態の治療のための治療薬剤の製造における項目４０にしたがう製剤の使用。
［項目４２］
項目１～３６のいずれか１項にしたがう製剤の有効量を投与することを含む治療の方法。
［項目４３］
項目１～３６のいずれか１項にしたがう製剤の有効量を投与することを含む、炎症（慢性炎症など）または自己免疫疾患を治療する方法。
［項目４４］
項目４３にしたがう方法であって、ここで：
線維症（肺線維症（嚢胞性線維症、特発性肺線維症、進行性の広範な線維症など）；肝線維症（肝硬変など）；心臓疾患（心房線維化、心内膜心筋線維症、陳旧性心筋梗塞など）；関節線維化；デュピュイトラン拘縮；ケロイド線維症；縦隔線維症；骨髄線維症；腎性全身性線維症；後腹膜線維化症；および強皮症）ホジキン病、潰瘍性結腸炎、クローン病、アトピー性皮膚炎、好酸球性食道炎、アレルギー性鼻炎、喘息および慢性肺疾患（慢性閉塞性肺疾患を含む）、特に喘息を含む群から選択される病態の治療。

【0008】

エブラサキマブなどの抗体は、ヒトにおいて所望の用量が可能な限り少ない容積で投与されることを可能にするために、高濃度に製剤化される必要がある。高濃度製剤は、相分離様の現象が観察され得るので、固有の困難をもたらす。凝集はまた、高濃度の抗体での共通の特徴である。しかし、製剤は、「単量体」として非常に高レベルの抗体分子を含む必要がある（例えば、９９％以上の単量体）。さらに、製剤は、保存時に安定である必要がある。エブラサキマブは、その蛋白質中に疎水性部分を有すると思われ；それは例えば、高塩濃度の不在下で疎水性相互作用カラムと相互作用する。この仮定的な疎水性部分は、抗体を製剤化しつつ凝集を防ぐ場合に、さらなる複雑性を付与する。したがって、本開示の抗体は特に、製剤化するのが困難である。

【0009】

さらに、より高濃度の抗体製剤により提示される困難な問題は、そのような製剤が過度に粘稠である傾向である。したがって、粘度を許容可能な低レベル、すなわち、２０～２５ｃＰの標的粘度範囲に近い値（２０ｃＰなど）に保つために製剤を最適化する必要がある。

【0010】

本発明者らは、本開示の製剤を最適化し、ＩＬ－１３Ｒ抗体（エブラサキマブなど）が狭いパラメータセット内で製剤に最も好適であることを確立した。本開示の製剤は、高抗体濃度で製剤化される場合であっても、高度に単量体性であり、例えば少なくとも９８％が単量体（９８～９９．５％が単量体など）である。本開示の製剤はまた、高い抗体濃度で良好な粘度を有する。さらに、製剤は、好適に安定であり、例えば、いくつかの実施態様において、４℃または２５℃で９０日間保存される場合、単量体量における変化はなく、あるいは単量体における０．５％未満の減少しか認められない。４０℃での加速された「ストレス試験］はまた、本開示の製剤が、例えば効力測定を用いて、６０日間の期間にわたって安定であることも示す。

【0011】

本開示の製剤の特徴の組み合わせ（ｐＨを含む）は、ＩＬ－１３受容体抗体またはその結合断片を安定化することに寄与する。

【0012】

一実施態様においては、本開示の製剤は、例えば周囲温度において、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９または３０ｃＰなどの、１０～３０ｃＰ（センチポイズ）の範囲で粘度、２０ｃＰなどを有する。意外なことに、本開示の製剤の粘度は、抗体が高濃度であっても比較的低い。

【0013】

一実施態様においては、粘度は、回転式粘度計、電磁球回転式（ＥＭＳ）粘度計、またはスタビンガー粘度計などの粘度計を用いて測定される。一実施態様においては、粘度は、剪断レオメーター、ダイナミック剪断レオメーター、伸長レオメーター、キャピラリーレオメーターなどのレオメーターを用いて測定される。一実施態様においては、粘度は、Ｋｉｎｅｘｕｓ－ｕｌｔｒａ＋レオメーター（Ｎｅｔｚｓｃｈ）を用いて測定される。

【0014】

一実施態様においては、製剤の浸透圧は、３５０～４５０ｍＯｓｍｏ／ｋｇの範囲（３９０～４３０ｍＯｓｍｏ／ｋｇなど、特に４１０＋／－５ｍＯｓｍｏ／ｋｇ）である。

【0015】

一実施態様においては、製剤は、１５０～２１０ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ１３Ｒ抗体、例えば１５０～１７５ｍｇ／ｍｌ（１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５ｍｇ／ｍｌなど）の抗ＩＬ１３Ｒ抗体を含む。一実施態様においては、製剤は、１７５ｍｇ／ｍｌ～２１０ｍｇ／ｍｌ（１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００、２０５または２１０ｍｇ／ｍｌなど）を含む。一実施態様においては、製剤は、１５０ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ１３Ｒ抗体を含む。別の一実施態様においては、製剤は、１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ１３Ｒ抗体を含む。一実施態様においては、製剤は、２００ｍｇ／ｍｌを含む。

【0016】

一実施態様においては、製剤は、１７０～２６０ｍＭのアルギニン、例えば１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００、２０５、２１０、２１５、２２０、２２５、２３０、２３５、２４０、２４５、２５０または２６０ｍＭのアルギニンを含む。一実施態様においては、製剤は、１５０ｍＭ、１７５ｍＭ、２００ｍＭまたは２５０ｍＭのアルギニンを含む。一実施態様においては、製剤は、１５０ｍＭのアルギニンを含む。一実施態様においては、製剤は、１７５ｍＭのアルギニンを含む。一実施態様においては、製剤は、２００ｍＭのアルギニンを含む。一実施態様においては、製剤は、２５０ｍＭのアルギニンを含む。

【0017】

一実施態様においては、アルギニンは、Ａｒｇ－ＨＣｌである。別の一実施態様においては、アルギニンは、Ａｒｇ－Ｇｌｕである。一実施態様においては、アルギニンは、Ｌ－アルギニンである。したがって、一実施態様においては、製剤は、１５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌを含む。一実施態様においては、製剤は、１７５ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌを含む。一実施態様においては、製剤は、２００ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌを含む。一実施態様においては、製剤は、２５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌを含む。

【0018】

一実施態様においては、製剤は、２０～５０ｍＭのヒスチジン緩衝液、例えば２０、２５、３０、３５、４０、４５または５０ｍＭ（２０ｍＭまたは５０ｍＭなど）のヒスチジン緩衝液を含む。一実施態様においては、製剤は、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液を含む。別の一実施態様においては、製剤は、５０ｍＭのヒスチジン緩衝液を含む。

【0019】

一実施態様においては、製剤は、０．０１～０．０３％の非イオン性界面活性剤（０．０１、０．０１５、０．０２、０．０２５、または０．０３０％などの、特に０．０２％の非イオン性界面活性剤）を含む。一実施態様においては、製剤は、０．０１～０．０３％（０．０１、０．０１５、０．０２、０．０２５、または０．０３０％などの、特に０．０２％）の容量／容量（ｖ／ｖ）の非イオン性界面活性剤を含む。一実施態様においては、製剤は、０．０１～０．０３％（０．０１、０．０１５、０．０２、０．０２５、または０．０３０％などの、特に０．０２％）の重量／容量（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤を含む。一実施態様においては、製剤は、０．０１～０．０３％（０．０１、０．０１５、０．０２、０．０２５、または０．０３０％などの、特に０．０２％）の重量／重量（ｗ／ｗ）の非イオン性界面活性剤を含む。一実施態様においては、製剤は、０．０２％ｗ／ｗの非イオン性界面活性剤を含む。

【0020】

一実施態様においては、非イオン性界面活性剤は、ポリソルベート（ポリソルベート２０、４０、６０、または８０など）である。一実施態様においては、非イオン性界面活性剤は、ポリソルベート２０である。したがって、一実施態様においては、製剤は、０．０１～０．０３％（０．０２％など）のポリソルベート２０（例えば、％ｗ／ｗとして、％ｗ／ｖとして、％ｖ／ｗ、または％ｖ／ｖとして）を含む。一実施態様においては、製剤は、０．０２％ｗ／ｗのポリソルベート２０を含む。

【0021】

一実施態様においては、製剤のｐＨは、６．０～７．０の範囲（６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、または７．０など）である。一実施態様においては、ｐＨは、６．０、６．５または７．０である。一実施態様においては、ｐＨは、６．５である。

【0022】

一実施態様においては、製剤は、フェニルアラニン（４５～９０ｍＭのフェニルアラニンなど、例えば４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、または９０ｍＭのフェニルアラニン）をさらに含む。一実施態様においては、製剤は、５０、７５、または８０ｍＭのフェニルアラニンを含む。したがって、一実施態様においては、製剤は、５０ｍＭのフェニルアラニンを含む。一実施態様においては、製剤は、７５ｍＭのフェニルアラニンを含む。一実施態様においては、製剤は、８０ｍＭのフェニルアラニンを含む。

【0023】

一実施態様においては、製剤は、ＣａＣｌ２（例えば１０、２０、３０、４０、５０、または６０ｍＭのＣａＣｌ２）をさらに含む。一実施態様においては、製剤は、５０ｍＭのＣａＣｌ２を含む。

【0024】

一実施態様においては、製剤は、５０～２００ｍＭの糖（５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または２００ｍＭの糖など）をさらに含む。一実施態様においては、製剤は、１８０ｍＭの糖を含む。一実施態様においては、糖は、マンニトール、ソルビトール、デキストロース、ガラクトース、フルクトース、乳糖、トレハロース、およびスクロースから選択される。一実施態様においては、糖は、スクロースである。したがって一実施態様においては、製剤は、１８０ｍＭのスクロースを含む。

【0025】

一実施態様においては、本開示の特定の製剤は、例えば２～２５℃の範囲の温度で９０日間保存される場合に、１％以下の蛋白質凝集を有する。

【0026】

本開示の抗ＩＬ１３Ｒ抗体製剤は、抗ＩＬ１３Ｒ抗体の安定な長期保存に特に好適である。一実施態様においては、製剤は、２～８℃の範囲の温度（２、３、４、５、６、７、または８℃など、４℃など）で保存される。

【0027】

一実施態様においては、提供されるのは、例えば点滴または注射のための非経口製剤（特に、液状製剤）である。一実施態様においては、提供されるのは、注射用のグルコース、食塩水または水などの、注射用に液体で希釈する濃縮物として非経口液状製剤である。一実施態様においては、非経口液状製剤は、例えば注射のためまたは点滴のために、希釈せずに投与するための最終濃度で提供される。

【0028】

一実施態様においては、製剤は、１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのアルギニン；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％の非イオン性界面活性剤を含み、およびここで製剤のｐＨは、６．５である。

【0029】

一実施態様においては、製剤は、１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌ；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％のポリソルベート２０を含み、およびここで製剤のｐＨは、６．５である。

【0030】

一実施態様においては、製剤は、１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのアルギニン；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％の非イオン性界面活性剤；フェニルアラニン（４５～８５ｍＭのフェニルアラニンなど）を含み、およびここで製剤のｐＨは、６．５である。

【0031】

一実施態様においては、製剤は、１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのアルギニン；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％の非イオン性界面活性剤；７５ｍＭのフェニルアラニンを含み、およびここで製剤のｐＨは、６．５である。

【0032】

一実施態様においては、製剤は、１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌ；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％のポリソルベート２０；７５ｍＭのフェニルアラニンを含み、およびここで製剤のｐＨは、６．５である。

【0033】

一実施態様においては、本開示の製剤に用いる抗体または結合断片は、モノクローナルである。

【0034】

一実施態様においては、本開示の製剤に用いる抗体または結合断片は、ヒト型である。一実施態様においては、本開示の製剤に用いる抗体または結合断片は、キメラ型またはヒト化された型である。

【0035】

一実施態様においては、抗体またはその結合断片は、配列番号：１に示される配列を有するＣＤＲＨ、配列番号：２に示される配列を有するＣＤＲＨ２、および配列番号：３に示される配列を有するＣＤＲＨ３を含む重鎖可変領域；ならびに配列番号：４に示される配列を有するＣＤＲＬ１、配列番号：５に示される配列を有するＣＤＲＬ２、および配列番号：６に示される配列を有するＣＤＲＬ３を含む軽鎖可変領域を含む。

【0036】

一実施態様においては、抗体またはその結合断片は、配列番号：７に示される配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＨドメインを含む。一実施態様においては、抗体またはその結合断片は、配列番号：８に示される配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＬドメインを含む。

【0037】

一実施態様においては、抗体またはその結合断片は、配列番号：７に示される配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＨドメインおよび配列番号：８に示される配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＬドメインを含む。

【0038】

一実施態様においては、抗体またはその結合断片は、配列番号：７に示される配列を含むＶＨドメインおよび配列番号：８に示される配列を含むＶＬドメインを含む。

【0039】

一実施態様においては、抗体またはその結合断片は、エブラサキマブである。

【0040】

一実施態様においては、製剤は、配列番号：７に示される配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＨドメインおよび配列番号：８に示される配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＬドメインを含む１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのアルギニン；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％の非イオン性界面活性剤を含み、およびここで製剤のｐＨは、６．５である。

【0041】

一実施態様においては、製剤は、配列番号：７に示される配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＨドメインおよび配列番号：８に示される配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＬドメインを含む１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌ；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％のポリソルベート２０を含み、およびここで製剤のｐＨは、６．５である。

【0042】

一実施態様においては、製剤は、配列番号：７に示される配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＨドメインおよび配列番号：８に示される配列を含むＶＬドメインを含む１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのアルギニン；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％の非イオン性界面活性剤；フェニルアラニン（４５～８５ｍＭのフェニルアラニンなど）を含み、およびここで製剤のｐＨは、６．５である。

【0043】

一実施態様においては、製剤は、配列番号：７に示される配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＨドメインおよび配列番号：８に示される配列を含むＶＬドメインを含む１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのアルギニン；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％の非イオン性界面活性剤；７５ｍＭのフェニルアラニンを含み、およびここで製剤のｐＨは、６．５である。

【0044】

一実施態様においては、製剤は、配列番号：７に示される配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＨドメインおよび配列番号：８に示される配列を含むＶＬドメインを含む１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌ；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％のポリソルベート２０；７５ｍＭのフェニルアラニンを含み、およびここで製剤のｐＨは、６．５である。

【0045】

一実施態様においては、製剤は、配列番号：７に示される配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含むＶＨドメインおよび配列番号：８に示される配列を含むＶＬドメインを含む１７５ｍｇ／ｍｌの抗ＩＬ－１３Ｒ抗体またはその抗原結合断片；２５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌ；２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；０．０２％のポリソルベート２０；７５ｍＭのフェニルアラニンを含み、およびここで製剤のｐＨは、６．５である。

【発明を実施するための形態】

【0046】

本明細書で用いられる［長期」は、少なくとも６か月の期間（６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、または３６か月など）を指す。一実施態様においては、本開示の製剤の保存は、少なくとも１２か月（１２か月、１８か月、および２４か月など）である。

【0047】

本明細書で用いられる「非イオン性界面活性剤」は、疎水性の親構造体に結合される、共有結合で結合される酸素含有親水基を有する界面活性剤を指す。非イオン性界面活性剤の例としては：脂肪族アルコールエトキシレート類（狭範囲エトキシレート、オクタエチレングリコールモノドデシルエーテルおよびペンタエチレングリコールモノドデシルエーテルなど）、アルキルフェノールエトキシレート（ノノキシノール類およびＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００など）、脂肪酸エトキシレート類、エトキシル化アミン類および／または脂肪酸アミド類（ポリエトキシル化獣脂アミン、コカミドモノエタノールアミンおよびコカミドジエタノールアミンなど）、末端ブロック型エトキシレート類（ポロクサマー類など）などのエトキシレート類；ポリヒドロキシ化合物の脂肪酸エステル類；グリセロールの脂肪酸エステル類（グリセロールモノステアリン酸塩およびグリセロールモノラウリン酸塩など）；ソルビトールの脂肪酸エステル類（ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノステアレートおよびソルビタントリステアレートなど）；Ｔｗｅｅｎ類（Ｔｗｅｅｎ２０、４０、６０または８０など）；スクロースの脂肪酸エステル類；アルキルポリグルコシド類（デシルグルコシド、ラウリルグルコシドおよびオクチルグルコースなど）；およびポリソルベート（ポリソルベート２０、４０、６０または８０など）が挙げられる。

【0048】

したがって、一実施態様においては、非イオン性界面活性剤は、エトキシレート；ポリヒドロキシ化合物の脂肪酸エステル類；グリセロールの脂肪酸エステル類；ソルビトールの脂肪酸エステル類；Ｔｗｅｅｎ類；スクロースの脂肪酸エステル類；アルキルポリグルコシド類；およびポリソルベートを含む群から選択される。

【0049】

本明細書で用いられる「非経口製剤」は、消化管を介して送達されないように設計された製剤を指す。典型的な非経口送達経路としては、注射（ボーラス注射を含む）、埋め込み、または点滴が挙げられる。一実施態様においては、製剤は、ボーラス送達の形態で提供される。

【0050】

一実施態様においては、非経口製剤は、静脈内投与される。一実施態様においては、非経口製剤は、皮下投与される。

【0051】

本明細書で用いられる「注射」は、注射筒またはシリンジポンプを介する身体中への液状製剤の投与を指す。注射としては、静脈内投与、皮下投与、腫瘍内投与、または筋肉内投与が挙げられる。注射は一般的に、５分間以下などの、短い期間にわたる。しかし、注射は、例えばシリンジポンプを用いて、ゆっくりと、または連続的に投与されてよい。注射は一般的に、点滴よりも小容積の投与を含む。一実施態様においては、注射は、例えば１．５～３０分の期間にわたり、緩慢な注射として投与される。本明細書で用いられる緩慢な注射は、注射筒を用いる用手的注射である。一実施態様においては、製剤の１用量は、シリンジポンプによる投与などの、１００ｍｌ未満、例えば３０ｍｌである。

【0052】

本明細書で用いられる「点滴」は、滴下、輸液ポンプ、または同等のデバイスによる液体の投与を意味する。一実施態様においては、点滴は、１～１２０分間の範囲の時間（例えば１～５分間）、約１、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、６５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、または１２０分間などの時間をかけて投与される。

【0053】

抗ＩＬ１３Ｒ抗体
本明細書で用いられるインターロイキン１３受容体（ＩＬ－１３Ｒ）は、インターロイキン１３に結合するＩ型サイトカイン受容体である。この受容体は、それぞれ、ＩＬ１３Ｒα１およびＩＬ４Ｒによりコードされる２つのサブユニットから成る。これらの２種類の遺伝子は、ＩＬ－１３Ｒα１およびＩＬ－４Ｒαの蛋白質をコードする。これらはＩＬ－１３Ｒα１鎖へのＩＬ－１３の結合を伴う二量体を形成し、ＩＬ－４Ｒαはこの相互作用を安定化する。ＩＬ４Ｒサブユニットの存在により、ＩＬ１３Ｒはまた、ＩＬ－４シグナル伝達を引き起こし得る。いずれの場合においても、これは、ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）／シグナル伝達兼転写活性化因子（ＳＴＡＴ）経路の活性化を介して起こり、ＳＴＡＴ６のリン酸化を引き起こす。ヒトＩＬ－１３Ｒα１は、Ｕｎｉｐｒｏｔ番号：Ｐ３５９７を有する。

【0054】

ＩＬ－１３Ｒα２（以前はＩＬ－１３ＲおよびＩＬ－１３Ｒαとよばれていた）は、ＩＬ－１３に結合できるもう一つの受容体である。しかし、ＩＬ－１３Ｒα１とは対照的に、この蛋白質は高親和性でＩＬ－１３を結合するが、ＩＬ－４を結合しない。ヒトＩＬ－１３Ｒα２は、Ｕｎｉｐｒｏｔ番号：Ｑ１４６２７を有する。

【0055】

本明細書の抗ＩＬ１３Ｒ抗体は、ＩＬ１３Ｒ、例えばＩＬ１３Ｒα１またはＩＬ１３Ｒα２に対する特異性を有する抗体を指す。

【0056】

一実施態様においては、本開示の抗ＩＬ１３Ｒ抗体は、ＩＬ１３Ｒα１に対し特異的である。一実施態様においては、抗ＩＬ１３Ｒ抗体は、アミノ酸配列ＦＦＹＱを含むエピトープに結合する。

【0057】

本開示の抗ＩＬ１３Ｒ抗体は、全長の重鎖および軽鎖を有する完全抗体分子またはその結合断片を含み得る。結合断片としては、Ｆａｂ、修飾Ｆａｂ、Ｆａｂ′、Ｆ（ａｂ′）２、Ｆｖ、単一ドメイン抗体（ＶＨ、ＶＬ、ＶＨＨ、ＩｇＮＡＲのＶドメインなど）、ｓｃＦｖ、二価抗体、三価抗体または四価抗体、Ｂｉｓ－ｓｃＦｖ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ならびに前記のいずれかのエピトープ結合断片（例えば、ＨｏｌｌｉｇｅｒおよびＨｕｄｓｏｎ、２００５、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３（９）：１１２６－１１３６； ＡｄａｉｒおよびＬａｗｓｏｎ、２００５、Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ Ｒｅｖｉｅｗｓ － Ｏｎｌｉｎｅ ２（３）、２０９－２１７を参照のこと）が挙げられるが、これらに限定されない。

【0058】

これらの抗体断片を作成するおよび製造するための方法は、当該技術分野において公知である（例えば、Ｖｅｒｍａら、１９９８、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ、２１６、１６５～１８１を参照のこと）。本発明における使用のための他の抗体断片としては、ＷＯ２００５／００３１６９、ＷＯ２００５／００３１７０およびＷＯ２００５／００３１７１に記載のＦａｂおよびＦａｂ′断片が挙げられる。本発明における使用のための他の抗体断片としては、ＷＯ２０１０／０３５０１２に記載のＦａｂ－ＦｖおよびＦａｂ－ｄｓＦｖ断片ならびにそれらの断片を含む抗体断片が挙げられる。多価抗体は、複数の特異性を含んでよく、あるいは単一特異性であってもよい（例えば、ＷＯ９２／２２８５３およびＷＯ０５／１１３６０５を参照のこと）。

【0059】

本開示における使用のための抗体およびその断片は、例えばマウス、ラット、サメ、ウサギ、ブタ、ハムスター、ラクダ、ラマ、ヤギ、またはヒトを含む、任意の生物種由来であってよい。キメラ抗体は、非ヒト可変領域およびヒト定常領域を有する。

【0060】

本発明における使用のための抗体または結合断片は、免疫グロブリン分子のいずれかのクラス（例えばＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、またはＩｇＡ）またはサブクラスに由来してよい。一実施態様においては、本開示において用いられる抗体は、ＩｇＧ４または２４１Ｐ変異を有するＩｇＧ４である。

【0061】

一実施態様においては、本開示の製剤で用いられる抗体または結合断片は、５ｎＭの親和性またはそれより高い（より高い親和性は、より低い数値である）、例えば５００ｐＭ、２５０ｐＭまたはそれより高い、特に１２５ｐＭまたはそれ未満の、親和性を有する。

【0062】

配列表を、本明細書の付属として提出する。
ＧＹＳＦＴＳＹＷＩＧ （配列番号：１）
ＶＩＹＰＧＤＳＹＴＲ （配列番号：２）
ＭＰＮＷＧＳＬＤＨ （配列番号：３）
ＲＡＳＱＳＩＳＳＳＹＬＡ （配列番号：４）
ＧＡＳＳＲＡＴ （配列番号：５）
ＱＱＹＡＳ （配列番号：６）

配列番号：７
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＥＳＬＫＩＳＣＫＧＳＧＹＳＦＴＳＹＷＩＧＷＶＲＱＭＰＧＫＧＬＥＷＭＧＶＩＹＰＧＤＳＹＴＲＹＳＰＳＦＱＧＱＶＴＩＳＡＤＫＳＩＳＴＡＹＬＱＷＳＳＬＫＡＳＤＴＡＭＹＹＣＡＲＭＰＮＷＧＳＬＤＨＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
配列番号：８
ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＩＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＡＳＦＧＱＧＴＫＶＥＩ＊ （＊ Ｋは、翻訳後修飾で欠失される）。

【0063】

本開示で用いられる抗ＩＬ１３Ｒ抗体または結合断片は、配列番号：１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号：２に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ２、および配列番号：３に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ３を含む。

【0064】

本開示で用いられる抗ＩＬ１３Ｒ抗体または結合断片は、配列番号：４に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号：５に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ２、および配列番号：６に示されるアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ３を含む。

【0065】

一実施態様においては、ＶＨ配列は、配列番号：７またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含む。一実施態様においては、ＶＬ配列は、配列番号：８またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含む。

【0066】

一実施態様においては、ＶＨ配列は配列番号：７またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含み、またＶＬ配列は配列番号：８またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含む。

【0067】

一実施態様においては、ＶＨ配列は配列番号：７であり、ＶＬ配列は配列番号：８である。

【0068】

本明細書で用いられる「可変領域」は、ＣＤＲおよび好適なフレームワークを含む抗体鎖の領域を指す。

【0069】

一実施態様においては、重鎖は、配列番号：９、配列番号：１０、配列番号：１１、配列番号：１２、配列番号：１３、ならびに同上のいずれかに対し少なくとも９５％同一の配列を含む群から独立に選択される配列を含む。

【0070】

一実施態様においては、軽鎖は、配列番号：１４に示されるアミノ酸配列またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含む。

【0071】

一実施態様においては、重鎖は、配列番号：９またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含み、軽鎖は、配列番号１４またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含む。

【0072】

一実施態様においては、重鎖は、配列番号：１０またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含み、軽鎖は、配列番号：１４またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含む。

【0073】

一実施態様においては、重鎖は、配列番号：１１またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含み、軽鎖は、配列番号：１４またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含む。

【0074】

一実施態様においては、重鎖は、配列番号：１２またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含み、軽鎖は、配列番号：１４またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含む。

【0075】

一実施態様においては、重鎖は、配列番号：１３またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含み、軽鎖は、配列番号：１４またはそれに対し少なくとも９５％同一の配列を含む。

【0076】

一実施態様においては、重鎖は、配列番号：９であり、軽鎖は、配列番号：１４である。

【0077】

一実施態様においては、重鎖は、配列番号：１０であり、軽鎖は、配列番号：１４である。

【0078】

一実施態様においては、重鎖は、配列番号：１１であり、軽鎖は、配列番号：１４である。

【0079】

一実施態様においては、重鎖は、配列番号：１２であり、軽鎖は、配列番号：１４である。

【0080】

一実施態様においては、重鎖は、配列番号：１３であり、軽鎖は、配列番号：１４である。

【0081】

本明細書で用いられる「に由来する」は、用いられる配列または用いられる配列に非常に類似した配列が、抗体の軽鎖または重鎖などの、起源の遺伝物質から取得されたことを指す。

【0082】

本明細書で用いられる「少なくとも９５％同一」は、その全長にわたり、参照配列に対し９６、９７、９８、または９９％同一などの、９５％以上同一であるアミノ酸配列を指すことが意図される。ソフトウエアプログラムを、同一性％を算出するために用いることができる。

【0083】

一実施態様においては、本開示の製剤で用いられる抗体またはその結合断片は、ヒト化される。

【0084】

本明細書で用いられる「ヒト化された」（これは、ＣＤＲ移植抗体を含む）は、非ヒト生物種由来の１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）およびヒト免疫グロブリン分子由来のフレームワーク領域を有する分子を指す（例えば、米国特許第５，５８５，０８９号；ＷＯ９１／０９９６７を参照のこと）。ＣＤＲ全体ではなくＣＤＲの特異性決定残基を移植することのみが必要であるということは、理解されるであろう（例えば、Ｋａｓｈｍｉｒｉら、２００５、Ｍｅｔｈｏｄｓ、３６、２５～３４を参照のこと）。ヒト化された抗体は、ＣＤＲが由来する非ヒト生物種の１つ以上のフレームワーク残基を任意選択的にさらに含んでよい。総説としては、Ｖａｕｇｈａｎら、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１６、５３５～５３９、１９９８を参照のこと。

【0085】

ＣＤＲまたは特異性決定残基を移植する場合には、マウス、霊長類およびヒトのフレームワーク領域を含む、ＣＤＲが由来するドナー抗体のクラス／タイプを考慮して、いずれかの適切なアクセプター可変領域フレームワーク配列が用いられてよい。本発明に用いることのできるヒトフレームワークの例は、ＫＯＬ、ＮＥＷＭ、ＲＥＩ、ＥＵ、ＴＵＲ、ＴＥＩ、ＬＡＹ、およびＰＯＭである（Ｋａｂａｔら、上掲）。例えば、ＫＯＬおよびＮＥＷＭは、重鎖に用いることができる；ＲＥＩは、軽鎖に用いることができる；ＥＵ、ＬＡＹおよびＰＯＭは、重鎖および軽鎖の両方に用いることができる。あるいは、ヒト生殖細胞系列配列が、用いられてよい；これらは、ｈｔｔｐ：／／ｖｂａｓｅ．ｍｒｃ－ｃｐｅ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／において入手可能である。

【0086】

本発明で用いられるヒト化抗体では、アクセプター重鎖および軽鎖は、必ずしも同一抗体に由来する必要はなく、必要に応じて、異なる鎖に由来するフレームワーク領域を有する複合鎖を含んでもよい。

【0087】

フレームワーク領域は、アクセプター抗体の配列と全く同じ配列を有する必要はない。例えば、普通でない残基は、そのアクセプター鎖のクラスまたはタイプにおいてより高頻度に起こる残基に交換されてよい。あるいは、アクセプターフレームワーク領域において選択される残基は、それらがドナー抗体において同一位置に存在する残基に対応するように置換されてよい（Ｒｅｉｃｈｍａｎｎら、１９９８、Ｎａｔｕｒｅ、３３２、３２３～３２４を参照のこと）。そのような変化は、ドナー抗体の親和性を回復するのに必要最小限に保たれるべきである。変化させる必要があるかもしれないアクセプターフレームワーク領域における残基を選択するためのプロトコルは、ＷＯ９１／０９９６７に記載される。

【0088】

一実施態様においては、本開示の抗ＩＬ１３Ｒ抗体は、完全にヒト型であり、特に可変ドメインの１つ以上が、完全にヒト型である。

【0089】

完全にヒト型である分子は、重鎖および軽鎖の両方の可変領域および定常領域（存在する場合には）が全てヒト由来である、あるいはヒト由来の配列に対し実質的に同一であるが、必ずしも同じ抗体に由来しない分子である。ヒト完全抗体の例としては、例えば、上記のファージディスプレイ法により作成される抗体、ならびにマウス免疫グロブリンの可変領域遺伝子および任意選択的に定常領域遺伝子が、それらのヒトのカウンターパート、例えば大まかに言えば欧州特許出願第０５４６０７３号Ｂ１、米国特許第５，５４５，８０６号、米国特許第５，５６９，８２５号、米国特許第５，６２５，１２６号、米国特許第５，６３３，４２５号、米国特許第５，６６１，０１６号、米国特許第５，７７０，４２９号、欧州特許第０４３８４７４号、および欧州特許第０４６３１５１号に記載されるようなそれらのヒトのカウンターパートにより置換されているマウスにより産生される抗体を挙げることができる。

【0090】

本明細書で用いられる「定常領域」は、重鎖における２つの可変ドメイン間、例えば非同系可変ドメイン間に位置する定常領域部分を指すことが意図される。したがって、本開示の抗ＩＬ１３Ｒ抗体は、天然の定常ドメインまたは天然のドメインの誘導体などの、１つ以上の定常領域を含んでよい。

【0091】

本明細書で用いられる「天然のドメインの誘導体」は、天然の配列中の１つ、２つ、３つ、４つ、または５つのアミノ酸が、例えば、望ましくない特性を除去することによってなどでドメインの特性を最適化するために置換または欠失されているが、ドメインの特徴は保持されることを指すことが意図される。

【0092】

必要に応じて、本発明における使用のための抗体は、１つ以上のエフェクター分子にコンジュゲートされてよい。エフェクター分子が、単一エフェクター分子、または本発明の抗体に付着され得る単一部分を形成するように連結される２つ以上のそのような分子を含んでよいことは、理解されるであろう。エフェクター分子に連結された抗体断片を取得することが所望される場合、これは、抗体断片が直接的に、あるいはカップリング剤を介して、のいずれかでエフェクター分子に連結される標準的な化学的方法または組換えＤＮＡ法により調製されてよい。そのようなエフェクター分子を抗体にコンジュゲートするための技術は、当該技術分野において公知である（Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍら、制御薬剤送達（Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ）第２版、Ｒｏｂｉｎｓｏｎら編集、１９８７、ｐｐ．６２３－５３；Ｔｈｏｒｐｅら、１９８２、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．、６２：１１９－５８、およびＤｕｂｏｗｃｈｉｋら、１９９９、Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、８３、６７～１２３を参照のこと）。特定の化学手段としては、例えば、ＷＯ９３／０６２３１、ＷＯ９２／２２５８３、ＷＯ８９／００１９５、ＷＯ８９／０１４７６、およびＷＯ０３０３１５８１に記載の手段が挙げられる。あるいは、エフェクター分子が蛋白質またはポリペプチドである場合、連結は、例えば、ＷＯ８６／０１５３３および欧州特許第０３９２７４５号に記載のように、組換えＤＮＡ法を用いて達成されてよい。

【0093】

本明細書で用いられる用語「エフェクター分子」としては、例えば生物学的に活性な蛋白質、例えば酵素、他の抗体または抗体断片、合成または天然のポリマー、核酸およびその断片、例えばＤＮＡ、ＲＮＡおよびその断片、放射性核種、特に放射性ヨウ化物、放射性同位体、キレート金属、ナノ粒子およびレポーター基（蛍光化合物あるいはＮＭＲまたはＥＳＲ分光法により検出されてよい化合物など）が挙げられる。

【0094】

他のエフェクター分子としては、例えば診断において有用な検出可能物質を挙げることができる。検出可能物質の例としては、各種の酵素、補欠分子族、蛍光物質、発光物質、生物発光物質、放射性核種、陽電子放出金属（陽電子断層撮影法における使用のための）、および非放射性常磁性金属イオンが挙げられる。診断法としての使用のための抗体にコンジュゲートされてよい金属イオンについては、米国特許第４，７４１，９００号を参照のこと。好適な酵素としては、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β－ガラクトシダーゼ、またはアセチルコリンエステラーゼが挙げられる；好適な補欠分子族としては、ストレプトアビジン、アビジンおよびビオチンが挙げられる；好適な蛍光物質としては、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセン、塩化ダンシル、およびフィコエリトリンが挙げられる；好適な発光物質としては、ルミノールが挙げられる；好適な生物発光物質としては、ルシフェラーゼ、ルシフェリン、およびエクオリンが挙げられる；および好適な放射性核種としては、１２５Ｉ、１３１Ｉ、１１１Ｉｎ、および９９Ｔｃが挙げられる。

【0095】

他の一例においては、エフェクター分子は、インビボにおける抗体の半減期を延長し得る、および／または抗体の免疫原性を低下させ得る、および／または免疫系への上皮障壁を越える抗体送達を促進し得る。このタイプの好適なエフェクター分子の例としては、ポリマー、アルブミン、アルブミン結合蛋白質、またはアルブミン結合化合物（ＷＯ０５／１１７９８４に記載のものなど）が挙げられる。エフェクター分子がポリマーである場合、それは、一般的に、合成ポリマーまたは天然ポリマーであってよく、例えば任意選択的に置換される直鎖のまたは分岐鎖のポリアルキレン、ポリアルケニレンまたはポリオキシアルキレンポリマーまたは分岐のまたは非分岐の多糖、例えばホモ多糖またはヘテロ多糖であってよい。

【0096】

上記合成ポリマー上に存在してよい具体的な任意選択的な置換基は、１つ以上のヒドロキシ基、メチル基、またはメトキシ基を含む。

【0097】

合成ポリマーの具体的な例は、任意選択的に置換される直鎖のまたは分岐鎖のポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリビニルアルコールまたはその誘導体、特に任意選択的に置換されるポリエチレングリコール（メトキシポリエチレングリコールなど）またはその誘導体を含む。具体的な天然ポリマーは、乳糖、アミロース、デキストラン、グリコーゲンまたはその誘導体を含む。

【0098】

本明細書で用いられる「誘導体」は、反応性誘導体、例えばマレイミド類などのチオール選択的反応基を含むことが意図される。反応基は、ポリマーに直接的にまたはリンカーセグメントを介して連結されてよい。そのような基の残基が、いくつかの場合に抗体断片とポリマーの間の連結基として産物の一部を形成するということは理解されるであろう。

【0099】

好適なポリマーは、ポリアルキレンポリマー（ポリエチレングリコールなど）または特に、メトキシポリエチレングリコールまたはその誘導体、および特に約１５０００Ｄａ～約４００００Ｄａの範囲の分子量を有するものを含む。

【0100】

一例においては、本発明における使用のための抗体は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分に連結される。具体的な一例においては、抗体は、抗体断片であり、ＰＥＧ分子が、いずれかの利用可能なアミノ酸側鎖あるいは抗体断片中に位置する末端アミノ酸の官能基（例えば、いずれかの遊離アミノ、イミノ、チオール、ヒドロキシル、またはカルボキシル基）を介して連結されてよい。そのようなアミノ酸は、抗体断片中に天然に生じてよく、あるいは組換えＤＮＡ法を用いて断片中に工学的に操作されてもよい（例えば、米国特許第５，２１９，９９６号；米国特許第５，６６７，４２５号；ＷＯ９８／２５９７１、ＷＯ２００８／０３８０２４を参照のこと）。一例においては、本発明の抗体分子は、修飾されたＦａｂ断片であり、ここで修飾は、エフェクター分子の連結を可能にするための、その重鎖のＣ末端への１つ以上のアミノ酸の付加である。好適には、付加的アミノ酸は、それにエフェクター分子が連結されてよい１つ以上のシステイン残基を含む修飾されたヒンジ領域を形成する。複数の部位を、２つ以上のＰＥＧ分子を付着するために用いることができる。

【0101】

乳癌、癌関連リンパ液浮腫（ＢＣＲＬ）などの、癌を有する患者において、本開示の製剤は、線維症、過角化症、線維脂肪組織沈着、液体蓄積、四肢の腫脹、皮膚の弾力性の低下、および疼痛などのリンパ液浮腫に関連する影響を予防し得る。過剰な体積を減らすことにより、上記製剤は、リンパ機能および、例えば四肢の機能を改善し得る。

【0102】

リンパ傷害後のリンパ液浮腫発症は、組織炎症、ＣＤ４陽性細胞の浸潤、および２型ヘルパーＴ細胞（Ｔｈ２）表現型へのそれらの細胞の分化に関連する。Ｔｈ２細胞は、リンパ液浮腫関連症状の発生ならびに他のＴｈ２媒介性疾患において主要な役割を担うＩＬ－４およびＩＬ－１３を産生する。

【0103】

一実施態様においては、本明細書に記載の製剤は、別の治療法と組み合わせて投与される。

【0104】

本明細書で用いられる「組み合わせて」は、抗ＩＬ１３Ｒ抗体が、別の治療の前に、同時に、または後に投与される場合を含むことが意図される。

【0105】

本明細書で用いられる「治療用量」は、例えば、特に用量を制限するような副作用を誘起することなく、疾患の症状または病態を改善する好適な治療レジメンにおいて用いられる場合、意図した治療効果の達成に好適な抗ＩＬ１３Ｒ抗体（エブラサキマブなど）の量を指す。好適な治療用量は一般的に、例えば、治療法により達成される恩恵を考慮して副作用および毒性が許容できる、治療効果と忍容毒性との間のバランスである。

【0106】

一実施態様においては、本開示にしたがう製剤（これを含む製剤を含む）は、例えば１治療サイクルにおいてまたは維持療法として、１か月毎に投与される。

【0107】

本明細書との関連で、「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、「を含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」と解釈される。特定の特徴／要素を含む本発明の実施態様はまた、関連する要素／特徴「から成る（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ）」または「本質的に（同上）から成る（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ）」別の実施態様に拡張されることが意図される。技術的に適切であれば、本発明の複数の実施態様は、組み合わされてよい。

【0108】

本明細書の補正は、優先権書類に基づき得る。

【0109】

「背景」の節は、補正を行う場合の基盤として用い得る。

【0110】

特許および出願書類などの技術的参考文献は、参照として本明細書に組み入れられる。

【0111】

本明細書において具体的かつ明示的に列挙される任意の実施態様は、単独でまたは１種類以上のさらなる実施態様と組み合わせで権利放棄の基盤を形成し得る。

【0112】

実施態様は、技術的に適切な場合組み合わされてよい。

【0113】

本明細書中の見出しは、本明細書を節に分けるために用いられ、本明細書で提供される開示の意義を解釈するために用いられると意図されない。

【0114】

本発明を、実例としてのみ以下の実施例によりさらに説明する。

【図面の簡単な説明】

【0115】

【図1A】粘度測定に用いたＫｉｎｅｘｕｓ ｕｌｔｒａ＋レオメーターの概要図を示す。

【図1B】エブラサキマブのバルク薬剤産物（ＢＤＰ）の粘度のグラフを示す。

【図2】製剤１～１５の粘度を示す一連のグラフである。

【図3】異なるＡｒｇ－ＨＣｌの濃度を含む製剤の粘度を比較するグラフを示す。

【図4】１５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌ＋付加的添加剤を含む製剤の粘度を示すグラフを示す。

【図5】製剤１～１５の粘度を比較するグラフを示す。

【図6】第１段階および第２段階のスクリーニングから得られたエブラサキマブＢＤＰの粘度測定の比較を示す。

【図7】製剤３および６の粘度を比較する一連のグラフを示す。

【図8】粘度測定の再現性を確認するための製剤３の反復的な粘度測定のグラフを示す。

【図9】製剤１６～３０の粘度を示す一連のグラフを示す。

【図10】Ａｒｇ－Ｇｌｕ含有製剤対Ａｒｇ－ＨＣｌ製剤の粘度のグラフを示す。

【図11】１５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌ＋付加的添加剤を含む製剤の粘度を示すグラフを示す。

【図12】異なるｐＨにおける１５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌを含む製剤の粘度を比較するグラフを示す。

【図13】２０ｍＭ対５０ｍＭのＨｉｓ緩衝性製剤の粘度を比較するグラフを示す。

【図14】製剤１６～３０の粘度を比較するグラフを示す。

【図15】製剤３および１６との比較における製剤３１および３２についての粘度測定の一連のグラフを示す。

【図16】製剤１６～３０（製剤４０＝２００ｍｇ／ｍｌ、他の全製剤＝１７５ｍｇ／ｍｌ）についての粘度測定の一連のグラフを示す。

【図17】製剤３３～４５についての粘度測定の比較を示す。

【図18】１７５ｍｇ／ｍｌのエブラサキマブ製剤についての粘度測定のグラフを示す。

【図19】１５０ｍｇ／ｍｌのエブラサキマブ製剤についての粘度測定のグラフを示す。

【図20】粘度に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。

【図21】浸透圧に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。

【図22】蛋白質濃度（ｓｏｌｏＶＰＥ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図23】ｐＨに関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図24】製剤の目視検査に基づく３か月間の安定性試験の結果の表を示す。

【図25】濁度に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図26】色に関する３か月間の安定性試験の結果の表を示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図27A】マイクロフローイメージングを用いる肉眼不可視粒子（≧２μｍ）の含量（ＭＦＩ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図27B】肉眼不可視粒子（≧１０μｍ）の含量（ＭＦＩ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図27C】肉眼不可視粒子（≧２５μｍ）の含量（ＭＦＩ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図28】蛋白質の質量回復（ＨＰ－ＳＥＣ）に関する３か月間の安定性試験の結果の表を示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図29A】凝集体含量％（ＨＰ－ＳＥＣ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図29B】単量体含量％（ＨＰ－ＳＥＣ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図29C】断片含量％（ＨＰ－ＳＥＣ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図29D】１００ｍｇ／ｍｌのエブラサキマブ製剤（ＨＰ－ＳＥＣ）における凝集体、単量体、および断片の含量％の比較を示す概要表を示す。

【図30A】非還元凝集体の含量％（ｃＧＥ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図30B】非還元単量体の含量％（ｃＧＥ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図30C】非還元無損傷蛋白質の含量％（ｃＧＥ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図30D】１００ｍｇ／ｍｌのエブラサキマブ製剤における無損傷蛋白質の含量％の比較の概要表を示す。

【図31A】還元非グリコシル化重鎖（ＮＧＨＣ）の含量％（ｃＧＥ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図31B】還元重鎖（ＨＣ）の含量％（ｃＧＥ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図31C】還元軽鎖（ＬＣ）の含量％（ｃＧＥ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図31D】還元ＬＣ＋ＨＣの含量％（ｃＧＥ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図31E】還元不純物の含量％（ｃＧＥ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。各製剤について左から右の順で：ｔ０；ｔ１ｍ、０５Ｃ；ｔ１ｍ、２５Ｃ；ｔ１ｍ、４０Ｃ；ｔ３ｍ、０５Ｃ；ｔ３ｍ、２５Ｃ；およびｔ３ｍ、４０Ｃ。

【図31F】１００ｍｇ／ｍｌのエブラサキマブ製剤（ｃＧＥ）における還元ＬＣ＋ＨＣの含量％およびＮＧＨＣの含量％の比較の概要表を示す。

【図32A】酸性ピーク含量％（ＩＥＸ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。

【図32B】天然ピーク含量％（ＩＥＸ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。

【図32C】塩基性ピーク含量％（ＩＥＸ）に関する３か月間の安定性試験の結果のグラフを示す。

【図32D】１００ｍｇ／ｍｌのＡＳＬＡＮ００４製剤（ＩＥＸ）における酸性ピーク、中性ピーク、および塩基性ピークの含量％の比較の概要表を示す。

【0116】

【表1】

【0117】

実施例
実施例１：第１段階（第１）スクリーニング：製剤１～１５
１５種類の異なる製剤を、最初に作成した。

【0118】

【表2】

【0119】

上記製剤を、以下のように作成した。
（１）エブラサキマブＢＤＰ試料を、約７．５ｍｌへと２倍に濃縮し、７．５ｍｌの製剤緩衝液で希釈した。
（２）製剤を、強制置換方式ピペットを用いてホモジナイズした。
（３）工程１および工程２を、８回反復した。
（４）第８希釈工程後に、各製剤を濃縮して、１５０ｍｇ／ｍｌ、１７５ｍｇ／ｍｌ、または２００ｍｇ／ｍｌの標的濃度を得た。
（５）各製剤を、滅菌濾過した。
（６）ポリソルベート－２０を添加して、０．０２％（ｗ／ｗ）の標的濃度を達成した。
（７）蛋白質濃度（Ｓｏｌｏ－ＶＰＥ）、浸透圧、およびｐＨを、各製剤について測定した。
（８）バイアルを、製剤（１ｘ１ｍｌ）で満たした。
（９）何らかの残りの試料を、２～８℃で保存した（ＣＷ１８粘度／ＨＰ－ＳＥＣ）。

【0120】

粘度試験
各製剤の粘度を、Ｋｉｎｅｘｕｓ ｕｌｔｒａ＋レオメーターを用いて調べた。図１Ａを参照のこと。測定を、２０℃にて１０００ｒｐｍ／秒で実施した。用いたコーンプレートは、以下であった：
・ 試料＜１０ｃＰ（ｍＰａｓ）に関して、４０ｍｍ、角度１°、２４μｍギャップ
・ 試料＞１０ｃＰ（ｍＰａｓ）に関して、２０ｍｍ、角度１°、２４μｍギャップ

【0121】

平均の動的粘度を、５４０～６００秒の範囲の測定値から算出した。

【0122】

エブラサキマブ試料はおそらく、非ニュートン性流体として挙動し、適用される剪断速度は、一定である。したがって、本開示において、動的粘度および剪断粘度は同じとみなされ、これらの用語は、実施例において同義語として用いられる。

【0123】

図１Ｂは、ポリソルベート２０を添加したエブラサキマブＢＤＰについての粘度測定を示す。

【0124】

製剤１～１５に関する粘度測定の結果を、図２に示す。

【0125】

下の表２は、異なる標的濃度範囲における粘度によりランク付けされた製剤を示す。

【0126】

【表3】

【0127】

上記の結果は、１５０ｍｇ／ｍｌ製剤の大部分および複数の１７５ｍｇ／ｍｌ製剤が標的粘度２０～２５ｃＰに近いことを示している。

【0128】

図３は、Ａｒｇ－ＨＣｌ濃度と粘度の間の関連性を示す。これらの結果は、１５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌで最小粘度に達すること、およびより高いＡｒｇ－ＨＣｌ濃度は、粘度をさらに低下させないことを示している。しかし、このことを、下記のようにさらに調べた。

【0129】

図４は、粘度に対する異なる添加剤の影響を示す。この結果は、Ａｒｇ－ＧｌｕがＡｒｇ－ＨＣｌと同様に粘度を低下させること、および１５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌへの付加的添加剤の添加は粘度をさらに低下させなかったことを示す。このことを、下記のようにさらに調べた。

【0130】

図５は、粘度とＡＳＬＡＮ００４濃度の間の相関を示す。

【0131】

結果は、製剤３が３種類の抗体濃度にわたり最も良好な全体的粘度を有したことを示唆する。

【0132】

本明細書のデータは、完全なデータセットではなく、傾向を具体的に示すための例示的データである。

【0133】

実施例２：第２段階（第２）スクリーニング：製剤１６～３０
出発点として製剤３を用い、さらなる１５製剤を、好適な２００ｍｇ／ｍｌのＡＳＬＡＮ００４製剤を開発するための試みにおいて作成した。下の表３を参照のこと。

【0134】

【表4】

【0135】

上記製剤を、以下のように調製した：
（１）１０ｍｌのエブラサキマブＢＤＰ＋５ｍｌの製剤緩衝液を、アミコン１５ユニット（ＭＷＣＯが１００ｋＤａ）中に入れた。
（２）製剤を、約７．５ｍｌへと２倍に濃縮し、７．５ｍｌの製剤緩衝液で希釈した。
（３）製剤を、強制置換方式ピペットを用いてホモジナイズした。
（４）工程２および３を、４回反復した。
（５）第５希釈工程後に、各製剤を濃縮して、１５０ｍｇ／ｍｌ、１７５ｍｇ／ｍｌ、または２００ｍｇ／ｍｌの標的濃度を得た。
（６）各製剤を、滅菌濾過した（０．８／０．２μｍのＰＥＳ）。
（７）ポリソルベート－２０を添加して、０．０２％（ｗ／ｗ）の標的濃度を達成した。
（８）蛋白質濃度（Ｓｏｌｏ－ＶＰＥ）、浸透圧、およびｐＨを、各製剤について測定した。
（９）何らかの残りの試料を、２～８℃で保存した（粘度決定のため）。

【0136】

粘度試験
各製剤の粘度を、上記実施例１に記載の方法と同じ方法を用いて調べた。

【0137】

図６は、第１スクリーニング（実施例１）および第２スクリーニング（実施例２）からのエブラサキマブＢＤＰについての粘度測定の比較を示す。図から分かるように、粘度値は非常に類似しており、両スクリーニングで用いたＡＳＬＡＮ００４ ＢＤＰが同程度であったことを示唆している。

【0138】

図７は、製剤３と製剤１６の比較を示す。図８が、製剤３の粘度測定値が再現的であったことを示すことに注意されたい。これらの結果は、測定法は信頼できること、および粘度測定値が製剤の評価に有用であることを実証した。

【0139】

製剤１６～３０についての粘度測定の結果を、図９に示す。

【0140】

下の表４は、異なる標的濃度範囲における粘度によりランク付けされた製剤を示す。

【0141】

【表5】

【0142】

結果は、全ての１５０ｍｇ／ｍｌ製剤および複数の１７５ｍｇ／ｍｌ製剤が標的粘度２０ｃＰに近かったことを示す。意外なことに、２００ｍｇ／ｍｌの製剤の多くは、予測粘度よりも大幅に低い粘度値を有した。高濃度のＡｒｇ－ＨＣｌ（２５０Ｍｍなど）は、２００ｍｇ／ｍｌの製剤において粘度を大幅に低下させた。ＣａＣｌ２（特に、５０Ｍｍ）などの塩および／またはフェニルアラニン（特に、５０～７５ｍＭ）などのアミノ酸と組み合わせて高濃度のＡｒｇ－ＨＣｌ（２５０Ｍｍなど）を含む２００ｍｇ／ｍｌの製剤は、約２０ｃＰの粘度を提供し得る。

【0143】

図１０は、様々な濃度でのＡｒｇ－ＨＣｌ製剤およびＡｒｇ－Ｇｌｕ製剤の粘度を示す。結果は、Ａｒｇ－Ｇｌｕ製剤と比較してＡｒｇ－ＨＣｌについて粘度におけるより顕著な低下があったことを示唆す。特に、１７５ｍＭから２５０ｍＭにＡｒｇ－ＨＣｌを増加させることは、粘度を大幅に低下させるようであった。

【0144】

図１１は、粘度に対する異なる添加剤の影響を示す。結果は、フェニルアラニンとＣａＣｌ２の添加が粘度低下を助けることを示す。

【0145】

図１２は、１５０ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌ製剤についての、粘度に対するｐＨの影響を示す。結果は、６．５から７にｐＨを上昇させること、または６．５から６．０にｐＨを低下させることは、粘度を改善しなかったことを示す。したがって、６．０～７．０の任意のｐＨが好適であると考えられる。

【0146】

図１３は、Ｈｉｓ緩衝液の濃度を増加させることの影響を評価する実験の結果を示す。結果は、１７５ｍｇ／ｍｌおよび２００ｍｇ／ｍｌのＡＳＬＡＮ００４製剤について、２０ｍＭから５０ｍＭにヒスチジン濃度を増加させることは、粘度を低下させることを示唆する。

【0147】

図１４は、粘度とＳＬＡＮ００４濃度の間の相関を示す。

【0148】

結果は、製剤２９が３種類の抗体濃度にわたり最良の全体的粘度を有したことを示唆する。

【0149】

実施例３：第３段階のスクリーニング
第３段階のスクリーニングの目的は、第１段階のスクリーニングと第２段階のスクリーニングの間で観察された粘度の差についてより良い理解を得ること、ならびに製剤ストレス試験のための製剤の粘度範囲を確認することであった。

【0150】

第１段階のスクリーニングと第２段階のスクリーニングに基づき、製剤３／１６および２９が、最良の全体的粘度を有した。さらなる２種類の製剤を、これらの製剤を基盤として調製した。

【0151】

【表6】

【0152】

製剤を、以下のように調製した：
（１）２０ｍｌのＡＳＬＡＮ００４ ＢＤＰ（１００ｍｇ／ｍｌ）を、６３ｍｌ（６２ｍｇ／ｍｌ）に希釈した。
（２）緩衝液の交換を、８容の希釈体積で実施した（約２４時間の実施時間）。
（３）製剤を、タンジェント流濾過（ＴＦＦ）で１６６ｍｇ／ｍｌに濃縮した。
（４）製剤を、アミコンユニットで２０８ｍｇ／ｍｌに濃縮した。
（５）各製剤を、滅菌濾過した（０．８／０．２μｍのＰＥＳ）。
（６）最後に、ポリソルベート－２０を、添加した。
（７）製剤３２に関しては、１００ｍＭのＡｒｇ－ＨＣｌを、添加した。

【0153】

粘度試験
各製剤の粘度を、上記実施例１に記載の方法と同じ方法を用いて調べた。

【0154】

結果を、図１５および下の表５に示す。

【0155】

【表7】

【0156】

製剤２９および３２の粘度間で良好な一致があった。

【0157】

結果は、１５０ｍＭから２５０ｍＭへのアルギニン濃度の増加が、２００ｍｇ／ｍｌのＡＳＬＡＮ００４の粘度に大幅で一貫性のある改善をもたらしたことを示唆する。

【0158】

実施例４：第４段階のスクリーニング
出発点として製剤２９を用いて、さらなる１３種類の製剤を、１７５ｍｇ／ｍｌの製剤をさらに改良するために作成した。下の表６を参照のこと。

【0159】

【表8】

【0160】

製剤を、上記の第２スクリーニング（実施例２）に記載の方法と同じ方法を用いて、調製した。製剤４１～４５を、製剤３３～４０の２週間後に調製した。

【0161】

粘度試験
各製剤の粘度を、上記実施例１に記載の方法と同じ方法を用いて調べた。

【0162】

製剤３３～４５に関する粘度測定の結果を、図１６に示す。

【0163】

下の表７は、粘度によりランク付けした製剤を示す。

【0164】

【表9】

【0165】

図１７は、粘度とエブラサキマブ濃度の間の相関を示す。フェニルアラニン製剤は、より低い粘度値で密集する傾向を示した。このことは、製剤へのフェニルアラニンの添加が、粘度低下を支援することを示唆する。

【0166】

実施例５：製剤選択
第２～第４スクリーニングからの粘度の結果を、安定性試験に進める最良の製剤を決定するために比較した。

【0167】

図１８は、１７５ｍｇ／ｍｌのエブラサキマブ製剤についての第２、第３、および第４スクリーニングの粘度測定の概要を示す。結果は、Ａｒｇ－ＨＣｌおよびフェニルアラニンを含んだ、第４スクリーニングにおいて試験した製剤が、最低の粘度を有したことを示唆する；すなわち製剤３５、３８、３９および４１。

【0168】

図１９は、１５０ｍｇ／ｍｌのエブラサキマブ製剤についての第２および第３スクリーニングの粘度測定の概要を示す。結果は、製剤２１および２９が最低粘度を有したことを示唆する。

【0169】

これらの結果に基づいて、表８に示す製剤の最終リストを選択した。

【0170】

【表10】

【0171】

これらの製剤を作成し、安定性／ストレス試験研究に進める。

【0172】

実施例６：安定性試験 ３か月の暫定的結果
表８の６種類の製剤を、安定性試験研究に進め、それにより製剤を、２～８℃、２５℃または４０℃にて保存した。３か月間の暫定的結果を、図２０～３２に示す。

【0173】

図２０は、６種類の製剤に関する粘度の結果を示す。結果は、粘度が３か月後に僅かに増加したことを示唆する。特に、５℃および２５℃で保存した試料について粘度は同程度であったが、より顕著な粘度における増加が、４０℃で保存した試料で観察された。

【0174】

図２１は、６種類の製剤に関する浸透圧の結果を示す。認められた差異は、予想される方法の変動内であった。

【0175】

図２２は、６種類の製剤に関する蛋白質濃度の結果を示す。０日目試料と比較して３か月後の試料で認められる明確な変化はなかった。

【0176】

図２３は、６種類の製剤に関するｐＨの結果を示す。認められた差異は、予想される方法の変動内であった。

【0177】

図２４は、６種類の製剤の目視検査の結果を示す。一般的に、製剤は、４０℃におけるＦ４９を例外として、乳白色の外観を呈し、粒子は、可視できる限界であった。このことは、粒子形成が最小限であったことを示唆する。

【0178】

図２５は、６種類の製剤に関する濁度の結果を示す。結果は、製剤の濁度が０日目、１か月、および３か月の試料間で同程度であったことを示唆する。最も低い濁度値が、２５℃で保存した試料について観察された。

【0179】

図２６は、６種類の製剤に関する色変化の結果を示す。４０℃におけるＦ４９を例外として、残りの製剤は、３か月の保存後に依然として褐色スペクトル（Ｂ５）内であった。着色の差異は、２～８℃または２５℃で１か月間および３か月間保存した試料の間で認められなかった。反対に、４０℃での１か月間の保存と比較して、４０℃で３か月間の保存後の着色に僅かな変化が認められた。

【0180】

図２７Ａ～２７Ｃは、マイクロフローイメージング（ＭＦＩ）を用いて実施した肉眼不可視粒子の含量の実験の結果を示す。３か月後にサイズ≧２μｍの粒子の含量増加が、全試料、特に４０℃で保存した試料において認められた。

【0181】

図２８および２９Ａ～２９Ｄは、ＨＰ－ＳＥＣを用いて実施した実験の結果を示す。用いた機器およびパラメータの詳細は、以下である：
機器：Ｄｉｏｎｅｘ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ３０００；カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ＢＥＨ ＳＥＣ、７．８ ｘ ３００ｍｍ
検出：２８０ｎｍでのＵＶ；試料調製：ｐＨ６．５にて２０ｍＭのヒスチジン－ＨＣｌ中で１ｍｇ／ｍｌ（中間体希釈、５０ｍｇ／ｍｌ）に希釈；測定：ｎ＝１

【0182】

図２８は、４０℃で３か月間保存した全ての製剤の蛋白質量回収％が、５℃または２５℃で保存した製剤に比較して僅かに低いことを示唆する。しかしながら、製剤間の有意な差であるようには見えなかった。図２９Ａ～２９Ｃの結果は、６種類の製剤にわたる、同様な単量体含量の低下、高分子量および断片の含量の増加を示す。しかしながら、単量体の消失は相対的に低く、５℃で３か月後にほとんど消失せず、２５℃で３か月後に≦１％消失、４０℃で３か月後に≦４％消失した。より高い凝集体の含量が、他の製剤と比較してＦ４９で観察された。図２９Ｄは、製剤Ｆ４９に関してＳＥＣを用いて測定した無傷の蛋白質％濃度が、１００ｍｇ／ｍｌのエブラサキマブ製剤のものと非常に類似していたことを示す。

【0183】

図３０Ａ～３０Ｄは、非還元試料に関してキャピラリーゲル電気泳動を用いて実施した実験（ｃＧＥ）の結果を示す。用いた機器およびパラメータの詳細は、以下である：
機器：３０．２ｃｍの露出したフューズドシリカ毛細管を備えるＳＣＩＥＸ ＰＡ ８００ ｐｌｕｓ。試料調製：２段階工程のプロセス（標的濃度、５ｍｇ／ｍｌ）での２０ｍＭのヒスチジンによる試料の希釈。測定：試料を異なる日の２回の実施に分割（精度内で、２回測定の日間再現性＝０．８％）、ｎ＝２。

【0184】

図３０Ａ～３０Ｃは、５℃で３か月後に無傷の蛋白質はほとんど消失せず、主に断片化に起因して、２５℃で３か月後に３％未満の消失、および４０℃で３か月後に１５％未満の消失があったことを示唆する。図３０Ｄは、製剤Ｆ４９に関してｃＧＥを用いて測定した無傷の蛋白質％濃度が、１００ｍｇ／ｍｌのエブラサキマブ製剤のものと非常に類似していたことを示す。

【0185】

図３１Ａ～３１Ｆは、還元試料に関してキャピラリーゲル電気泳動を用いて実施した実験（ｃＧＥ）の結果を示す。
図３１Ａ～３１Ｄは、軽鎖（ＬＣ）の相対含量に有意な変化がなかったことを示す。２５℃および４０℃で３か月後の重鎖（ＨＣ）含量には若干の減少があった。ＬＣ含量およびＨＣ含量の両方を同時に考慮に入れると（図３１Ｄ）、結果は、ＬＣ＋ＨＣ含量が５℃で３か月後に≧９９％であり、２５℃で３か月後に≧９８％であったことを示す。図３１Ｅは、１か月の保存後および３か月の保存後の不純物レベルを示す。これらの結果から、本発明者らは、３か月後の相対的ＨＣ含量の減少は部分的には、還元試料の脱グリコシル化、およびまた時間経過に伴う不純物レベルの増加に起因すると考えている。この傾向は、各種の製剤にわたり認められた。

【0186】

図３１Ｆは、製剤Ｆ４９に関して測定したＬＣ＋ＨＣ％およびＮＧＨＣ％が、１００ｍｇ／ｍｌのエブラサキマブ製剤のものと非常に類似していたことを示す。

【0187】

図３２Ａ～３２Ｄは、イオン交換クロマトグラフィー（ＩＥＸ）実験の結果を示す。用いた機器およびパラメータの詳細は、以下である：
機器：Ｖａｎｑｕｉｓｈ ＵＨＰＬＣ；カラム：ＰｒｏＰａｃ ＷＣＸ－１０、４．０ ｘ２５０ｍｍ、１０μｍ；検出：２８０ｎｍでのＵＶ；試料調製：２０ｍＭのＭＥＳ（ｐＨ７．０）中で１ｍｇ／ｍｌ（中間希釈、５０ｍｇ／ｍｌ）に試料希釈；測定：ｎ＝２

【0188】

図３２Ａ～３２Ｃは、３か月間の保存にわたって全製剤について類似の中性種消失、および類似の酸性種増加および塩基性種増加があったことを示す。５℃で３か月後に中性種の消失はほとんど認められず、２５℃で３か月後に中性種消失は１０％未満であり、かつ４０℃で３か月後には中性種消失は４５％未満であった。図３２Ｄは、製剤Ｆ４９について測定した酸性種含量、中性種含量、および塩基性種含量が、１００ｍｇ／ｍｌのエブラサキマブ製剤のものに非常に類似していたことを実証する。

【0189】

まとめると、３か月間の暫定的安定性データは、非常に有望であった；データは、試験した全ての６種類の製剤が３か月の時点で良好な安定性を有したことを示唆する。この結果に基づき、製剤Ｆ４６を、先に進める第１の製剤として選択した。

【図1】

【図2-1】

【図2-2】

【図2-3】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9-1】

【図9-2】

【図9-3】

【図9-4】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16-1】

【図16-2】

【図17】

【図18-1】

【図18-2】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27-1】

【図27-2】

【図28】

【図29-1】

【図29-2】

【図30-1】

【図30-2】

【図31-1】

【図31-2】

【図31-3】

【図32-1】

【図32-2】

【配列表】

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【国際調査報告】