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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-11-21
(54)【発明の名称】ＭＤＳ関連貧血及び他の状態を処置するための化合物
(51)【国際特許分類】
A61K 31/5025 20060101AFI20241114BHJP
A61P 7/06 20060101ALI20241114BHJP
A61K 9/20 20060101ALI20241114BHJP
A61K 9/16 20060101ALI20241114BHJP
【ＦＩ】
A61K31/5025
A61P7/06
A61K9/20
A61K9/16
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024526836
(86)(22)【出願日】2022-11-15
(85)【翻訳文提出日】2024-05-07
(86)【国際出願番号】 US2022049969
(87)【国際公開番号】W WO2023091414
(87)【国際公開日】2023-05-25
(31)【優先権主張番号】63/280,069
(32)【優先日】2021-11-16
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/357,240
(32)【優先日】2022-06-30
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】511223394
【氏名又は名称】アジオス ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100078282
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 秀策
(74)【代理人】
【識別番号】100113413
【弁理士】
【氏名又は名称】森下 夏樹
(74)【代理人】
【識別番号】100181674
【弁理士】
【氏名又は名称】飯田 貴敏
(74)【代理人】
【識別番号】100181641
【弁理士】
【氏名又は名称】石川 大輔
(74)【代理人】
【識別番号】230113332
【弁護士】
【氏名又は名称】山本 健策
(72)【発明者】
【氏名】ベイノン， ヴァネッサ
(72)【発明者】
【氏名】パティア， スマン ジョイ
(72)【発明者】
【氏名】ダン， レニー
(72)【発明者】
【氏名】ディバッコ， メリッサ エル．
(72)【発明者】
【氏名】アイエル， ヴァーシャ ブイ．
(72)【発明者】
【氏名】クン， チャールズ
(72)【発明者】
【氏名】リンチ， メーガン
(72)【発明者】
【氏名】イン， オフィーリア チピン
(72)【発明者】
【氏名】アーブストナイティス， ロランダス
(72)【発明者】
【氏名】シャオ， ジェン
【テーマコード（参考）】
4C076
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076AA31
4C076AA36
4C076BB01
4C076CC14
4C076FF70
4C086AA01
4C086AA02
4C086CB26
4C086MA01
4C086MA04
4C086MA35
4C086MA41
4C086MA52
4C086NA14
4C086ZA55
4C086ZC19
(57)【要約】
本明細書では、ＭＤＳ関連貧血及び他の状態を処置するためのある特定のピルビン酸キナーゼ活性化剤又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物の使用が提供される。
【選択図】なし
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に罹患している対象におけるＭＤＳに関連する貧血を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量の、構造式：【化15】
【請求項2】
骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に罹患している対象におけるＭＤＳに関連する溶血性貧血を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量の、構造式：【化16】
【請求項3】
骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に罹患している対象におけるヘモグロビンレベルを増加させる方法であって、前記対象に、治療有効量の、構造式：【化17】
【請求項4】
骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に罹患している対象における後天性ＰＫ欠損症（ＰＫＤ）を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量の、構造式：【化18】
【請求項5】
骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に罹患している対象における後天性ＰＫ欠損症（ＰＫＤ）に関連する貧血を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量の、構造式：【化19】
【請求項6】
骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に罹患している対象における血球減少症を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量の、構造式：【化20】
【請求項7】
前記対象の前記ヘモグロビンレベルが、処置中に少なくとも４週間、少なくとも６週間、少なくとも８週間、少なくとも１０週間、少なくとも１２週間、少なくとも１４週間、少なくとも１６週間、少なくとも１８週間、又は少なくとも２０週間の期間にわたって改善する、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項8】
前記対象の前記ヘモグロビンレベルが、処置中に１週から２０週まで、１週から１８週まで、１週から１６週まで、４週から２０週まで、４週から１８週まで、４週から１６週まで、６週から２０週まで、６週から１８週まで、６週から１６週まで、８週から２０週まで、８週から１８週まで、８週から１６週まで、１０週から２０週まで、１０週から１８週まで、又は１０週から１６週までベースラインから増加する、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項9】
前記対象の前記ヘモグロビンレベルが、処置中に８週から１６週までベースラインから増加する、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項10】
前記対象の前記ヘモグロビンレベルが、処置中に１週から２０週まで、１週から１８週まで、１週から１６週まで、４週から２０週まで、４週から１８週まで、４週から１６週まで、６週から２０週まで、６週から１８週まで、６週から１６週まで、８週から２０週まで、８週から１８週まで、８週から１６週まで、１０週から２０週まで、１０週から１８週まで、又は１０週から１６週までの２つ以上、３つ以上、４つ以上、５つ以上、又は６つ以上の連続する時点でベースラインから増加する、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項11】
前記対象の前記ヘモグロビンレベルが、処置中に８週から１６週まで、２つ以上の連続する時点でベースラインから増加する、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項12】
前記対象の前記ヘモグロビンレベルが、処置中にベースラインから１．０ｇ／ｄＬ以上増加する、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項13】
前記対象の前記ヘモグロビンレベルが、処置中にベースラインから１．５ｇ／ｄＬ以上増加する、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項14】
前記対象の前記ヘモグロビンレベルが、処置中にベースラインから２．０ｇ／ｄＬ以上増加する、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項15】
前記対象が、処置中に輸血非依存になる、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項16】
前記対象が、処置前に、低い輸血負荷を有するものとして分類される、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項17】
前記対象が、処置中に１週間以上連続して、２週間以上連続して、３週間以上連続して、４週間以上連続して、５週間以上連続して、６週間以上連続して、７週間以上連続して、８週間以上連続して、９週間以上連続して、又は１０週間以上連続して輸血非依存になる、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項18】
前記対象が、処置中に８週間以上連続して輸血非依存になる、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項19】
前記対象の総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位が、処置中にベースラインから１０％以上、２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、又は８０％以上減少する、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項20】
前記対象の前記総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位が、処置中にベースラインから５０％以上減少する、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項21】
前記対象の前記総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位が、処置中に１週間以上連続した、２週間以上連続した、３週間以上連続した、４週間以上連続した、５週間以上連続した、６週間以上連続した、７週間以上連続した、８週間以上連続した、９週間以上連続した、又は１０週間以上連続した期間にわたって、ベースラインから５０％以上減少する、請求項１～２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項22】
前記対象の総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位が、処置中に８週間以上連続した期間にわたって、ベースラインから５０％以上減少する、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項23】
前記ＭＤＳが、低リスクＭＤＳである（ＭＤＳのための改訂国際予後スコアリングシステム（Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ Ｓｃｏｒｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ）（ＩＰＳＳ－Ｒ）によって特徴付けられる場合）、請求項１～２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項24】
前記ＭＤＳが、非常に低リスクのＭＤＳである（ＭＤＳのための改訂国際予後スコアリングシステム（ＩＰＳＳ－Ｒ）によって特徴付けられる場合）、請求項１～２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項25】
前記ＭＤＳが、中等度リスクＭＤＳである（ＭＤＳのための改訂国際予後スコアリングシステム（ＩＰＳＳ－Ｒ）によって特徴付けられる場合）、請求項１～２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項26】
前記対象が、男性である、請求項１～２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項27】
前記対象が、女性である、請求項１～２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項28】
前記対象に投与された前記化合物の前記治療有効量が、１日当たり２ｍｇ、１日当たり３ｍｇ、又は１日当たり５ｍｇである、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項29】
前記対象に投与された前記化合物の前記治療有効量が、２ｍｇ ＱＤ、３ｍｇ ＱＤ、又は５ｍｇ ＱＤである、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項30】
前記化合物又は薬学的に許容される塩が、経口で投与される、請求項１～２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項31】
前記化合物又は薬学的に許容される塩が、錠剤又は１つ以上の顆粒の形態にある、請求項１～３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項32】
前記化合物又は薬学的に許容される塩が、１つ以上の顆粒の形態にある、請求項１～３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項33】
ＭＤＳに罹患している対象における低リスク骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に関連する貧血を処置する方法であって、前記対象に、１日当たり２ｍｇ、１日当たり３ｍｇ、又は１日当たり５ｍｇの構造式：【化21】
【請求項34】
前記対象が、処置前に、低輸血負荷を有するものとして分類される、請求項３３に記載の方法。
【請求項35】
前記化合物又は薬学的に許容される塩が、前記対象に１６週間の期間、投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項36】
前記対象が、１６週間の投与期間中に、８週間以上連続して輸血非依存になる、請求項３４又は３５に記載の方法。
【請求項37】
前記対象の前記ヘモグロビンレベルが、前記１６週間の投与期間の８週から１６週まで、ベースラインから１．０ｇ／ｄＬ以上、１．５ｇ／ｄＬ以上、又は２．０ｇ／ｄＬ以上増加する、請求項３４～３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項38】
前記化合物又は薬学的に許容される塩が、前記対象に２４週間の期間、投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項39】
前記対象が、２４週間の投与期間中に、８週間以上連続して輸血非依存になる、請求項３８に記載の方法。
【請求項40】
前記対象が、処置前に非輸血であるとして分類される、請求項３３に記載の方法。
【請求項41】
前記化合物又は薬学的に許容される塩が、前記対象に２４週間の期間、投与される、請求項４０に記載の方法。
【請求項42】
前記対象のヘモグロビンレベルが、２４週間の投与期間中に、８週間以上連続して、ベースラインから１．０ｇ／ｄＬ以上、１．５ｇ／ｄＬ以上、又は２．０ｇ／ｄＬ以上増加する、請求項４１に記載の方法。
【請求項43】
前記対象が、処置前に、高輸血負荷を有するものとして分類される、請求項３３に記載の方法。
【請求項44】
前記化合物又は薬学的に許容される塩が、前記対象に２４週間の期間、投与される、請求項４２に記載の方法。
【請求項45】
前記対象の総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位が、２４週間の投与期間中に８週間以上連続した期間にわたって、ベースラインから５０％以上減少する、請求項４３に記載の方法。
【請求項46】
ミトコンドリア機能障害に関連する疾患又は障害の処置を必要とする対象におけるミトコンドリア機能障害に関連する疾患又は障害を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量の構造式【化22】
【請求項47】
無効な赤血球生成（ｉｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｓｉｓ）に関連する疾患又は障害の処置を必要とする対象における無効な赤血球生成に関連する疾患又は障害を処置する方法であって、前記対象に、治療有効量の構造式【化23】
【請求項48】
前記対象に投与された前記化合物の前記治療有効量が、１日当たり０．２５ｍｇ～１５ｍｇの範囲にある、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項49】
前記対象に投与された前記化合物の前記治療有効量が、０．２５ｍｇ～２ｍｇのＱＤ若しくはＢＩＤ、又は１．５ｍｇ～５．５ｍｇのＱＤ若しくはＢＩＤ、又は４ｍｇ～６ｍｇのＱＤ若しくはＢＩＤの範囲にある、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項50】
後天性ＰＫ欠損症（ＰＫＤ）に関連する前記貧血が、溶血性貧血である、請求項５及び７～３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項51】
後天性ＰＫ欠損症（ＰＫＤ）に関連する前記貧血が、溶血性貧血である、請求項３３～４５のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願
本出願は、２０２１年１１月１６日に出願された米国仮出願第６３／２８０，０６９号及び２０２２年６月３０日に出願された米国仮出願第６３／３５７，２４０号の優先権を主張し、これらの各々は、それらの全体が本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２１年１１月１６日に出願された米国仮出願第６３／２８０，０６９号及び２０２２年６月３０日に出願された米国仮出願第６３／３５７，２４０号の優先権を主張し、これらの各々は、それらの全体が本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【0002】
骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）は、機能障害の造血、進行性血球減少症、及び急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）への進行のリスクの増加によって特徴付けられる、まれな血液悪性腫瘍の不均一な群である。ＭＤＳは、骨髄中の血液形成細胞が異常（異形成）になり、新しい血液細胞を作ることに問題があるときに発生する。骨髄細胞によって形成された血液細胞の多くは、しばしば死ぬか、又は身体によって破壊され、したがって、個体に十分な正常な血液細胞が残されない。異なる細胞型がこの現象の影響を受けるが、ＭＤＳにおける最も一般的な所見は、赤血球の不足（貧血）である。しかしながら、溶血性貧血は、まれではあるが、ＭＤＳに罹患している患者にも発生することが見出されている。例えば、Ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｒｅｐｏｒｔｓ，Ｖｏｌ．５，２０１６，ｐｐ２３－２６を参照されたい。
【0003】
診断時の平均齢が７１歳であるＭＤＳ患者は、慢性的に低レベルのヘモグロビンによって深刻な影響を受ける可能性がある。これは、疲労、心肺機能の悪化、転倒の増加、及び著しい認知低下を引き起こす可能性がある。このように、貧血の処置は、全体的な健康及び生活の質にとって不可欠である。現在、濃厚赤血球（ＰＲＢＣ）の輸血は、ＭＤＳ関連貧血の標準治療である。しかしながら、輸血依存性ＭＤＳ関連貧血患者の問題は、これらの患者が、鉄過剰及び輸血反応のリスクが高く、生活の質の低下を報告することである。
したがって、ＭＤＳ関連貧血を処置するための代替アプローチが必要である。
したがって、ＭＤＳ関連貧血を処置するための代替アプローチが必要である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0004】
【非特許文献1】Ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｒｅｐｏｒｔｓ，Ｖｏｌ．５，２０１６，ｐｐ２３－２６
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0005】
現在、ピルビン酸キナーゼのある特定の活性化剤はまた、ＭＤＳ関連貧血、特に非常に低リスク、低リスク及び中程度のリスクのＭＤＳに関連する貧血の処置に有効であり得ることが見出されている。これらの活性化剤には、以下の構造式：
を有するもの、並びにその薬学的に許容される塩が含まれる。一態様では、本開示のピルビン酸キナーゼ活性化剤は、ＭＤＳの動物モデルにおいて、ヘモグロビンレベルを増加させ、網状赤血球数を減少させ、かつ／又は赤血球（ＲＢＣ）機能を改善することが見出されている。例えば、図１及び２を参照されたい。
【化1】
【0006】
したがって、本明細書で提供されるのは、対象におけるＭＤＳ関連貧血及び他の状態を処置する方法であって、対象に、開示されるピルビン酸キナーゼ活性化剤、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物のうちの１つ以上を投与することを含む、方法である。
【0007】
同様に提供されるのは、ＭＤＳに罹患している対象におけるヘモグロビンレベルを増加させるための方法であって、対象に、開示されるピルビン酸キナーゼ活性化剤、又はそれらの薬学的に許容される塩若しくは組成物のうちの１つ以上を投与することを含む、方法である。
【0008】
同様に提供されるのは、ＭＤＳに罹患している対象における後天性ＰＫ欠損症（ＰＫＤ）を処置する方法であって、対象に、開示されたピルビン酸キナーゼ活性化剤、又はそれらの薬学的に許容される塩若しくは組成物のうちの１つ以上を投与することを含む、方法である。
【0009】
同様に提供されるのは、ＭＤＳに罹患している対象における後天性ＰＫＤに関連する貧血を処置する方法であって、対象に、開示されるピルビン酸キナーゼ活性化剤、又はそれらの薬学的に許容される塩若しくは組成物のうちの１つ以上を投与することを含む、方法である。
【0010】
同様に提供されるのは、ＭＤＳに罹患している対象における血球減少症を処置する方法であって、対象に、開示されるピルビン酸キナーゼ活性化剤、又はそれらの薬学的に許容される塩若しくは組成物のうちの１つ以上を投与することを含む、方法である。
【0011】
更に提供されるのは、ＭＤＳに罹患している対象における溶血性貧血を処置する方法であって、対象に、開示されているピルビン酸キナーゼ活性化剤、又はそれらの薬学的に許容される塩若しくは組成物のうちの１つ以上を投与することを含む、方法である。
【0012】
更に提供されるのは、ＭＤＳに罹患している対象における無効な赤血球生成（ｉｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｓｉｓ）を処置する方法であって、対象に、開示されているピルビン酸キナーゼ活性化剤、又はそれらの薬学的に許容される塩若しくは組成物のうちの１つ以上を投与することを含む、方法である。
【0013】
更に提供されるのは、ＭＤＳに罹患している対象における疾患進行を低減する方法である。いくつかの態様では、開示されたピルビン酸キナーゼ活性化剤、又はそれらの薬学的に許容される塩若しくは組成物のうちの１つ以上を対象に投与することは、対象の骨髄内の炎症を軽減し、それによって対象の疾患の進行を軽減する。
【0014】
なお更に提供されるのは、それを必要とする対象におけるミトコンドリア機能障害に関連する疾患を処置する方法であって、対象に、開示されるピルビン酸キナーゼ活性化剤、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物のうちの１つ以上を投与することを含む、方法である。
【図面の簡単な説明】
【0015】
【図1A-B】６週間（図１Ａ）、８週間（図１Ｂ）、１２週間（図１Ｃ）、及び１８週間（図１Ｄ）にわたって固形飼料中のミタピバットを投与した後の、ＭＤＳ関連貧血マウスモデルにおけるヘモグロビンレベルの効果を示す。
【図1C-D】同上。
【図2A-B】ミタピバットの投与後のＭＤＳ関連貧血マウスモデルからの赤血球数（ＲＢＣ）（図２Ａ）、網状赤血球割合（図２Ｂ）、網状赤血球濃度（図２Ｃ）、及びヘマトクリット割合（図２Ｄ）の血液学的パラメータ結果を示す。
【図2C-D】同上。
【図3】ＭＤＳ関連貧血の処置のための多相臨床試験設計を示す。
【図4】低リスク骨髄異形成症候群（ＬＲ－ＭＤＳ）に起因する貧血を有する対象における化合物１を用いた第２ａ相研究設計の概要を示す。
【図5】低リスク骨髄異形成症候群（ＬＲ－ＭＤＳ）に起因する貧血を有する対象における化合物１を用いた第２ｂ相研究設計の概要を示す。
【図6A-B】化合物１での処置後のＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスからの骨髄穿刺液のフローサイトメトリーデータを示す。
【図6C-D】同上。
【図6E】同上。
【図7A-B】ミタピバット又は化合物１での処置後のＮＨＤ１３マウスからの骨髄穿刺液のフローサイトメトリーデータを示す。
【図7C-D】同上。
【発明を実施するための形態】
【0016】
第１の実施形態では、本明細書で提供されるのは、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に罹患している対象における骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に関連する貧血を処置するための方法であって、対象に、治療有効量の、
から選択される構造式を有する化合物、又は前述のうちのいずれかの薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法である。
【化2】
【0017】
第２の実施形態では、本明細書で提供されるのは、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に罹患している対象におけるＭＤＳに関連する溶血性貧血を処置するための方法であって、対象に、治療有効量の、
から選択される構造式を有する化合物、又は前述のうちのいずれかの薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法である。
【化3】
【0018】
第３の実施形態では、本明細書で提供されるのは、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に罹患している対象におけるヘモグロビンレベルを上昇させる方法であって、対象に、治療有効量の、
から選択される構造式を有する化合物、又は前述のうちのいずれかの薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法である。
【化4】
【0019】
第４の実施形態では、本明細書で提供されるのは、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に罹患している対象における後天性ＰＫ欠損症（ＰＫＤ）を処置する方法であって、対象に、治療有効量の、
から選択される構造式を有する化合物、又は前述のうちのいずれかの薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法である。
【化5】
【0020】
第５の実施形態では、本明細書で提供されるのは、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に罹患している対象における後天性ＰＫ欠損症（ＰＫＤ）に関連する貧血を処置する方法であって、対象に、治療有効量の、
から選択される構造式を有する化合物、又は前述のうちのいずれかの薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法である。
【化6】
【0021】
第６の実施形態では、本明細書で提供されるのは、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）に罹患している対象における血球減少症を処置する方法であって、対象に、治療有効量の、
から選択される構造式を有する化合物、又は前述のうちのいずれかの薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法である。
【化7】
【0022】
第７の実施形態では、本明細書で提供されるのは、ミトコンドリア機能障害に関連する疾患を処置することを、それを必要とする対象において行う方法であって、対象に、治療有効量の、
から選択される構造式を有する化合物、又は前述のうちのいずれかの薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法である。
【化8】
【0023】
第８の実施形態では、本明細書で提供されるのは、無効な赤血球生成を処置することを、それを必要とする対象において行う方法であって、対象に、治療有効量の、
から選択される構造式を有する化合物、又は前述のうちのいずれかの薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法である。
【化9】
【0024】
本明細書で使用する場合、「溶血性貧血」という用語は、対象の低い赤血球数が、赤血球の生成不足ではなく、むしろ破壊によって引き起こされる貧血のサブタイプを指す。別段の記載がない限り、本明細書で使用される場合、「貧血」という用語は、無効な赤血球生成を含む、赤血球の生成不足によって引き起こされる低い赤血球数を指す。
【0025】
「ＭＤＳ関連貧血」、「ＭＤＳに関連する貧血」、及び「ＭＤＳに起因する貧血」という用語は、同義語であり、ＭＤＳを有するか、又はＭＤＳに罹患した結果として対象において発症したか、又は後天性貧血を指す。
【0026】
「後天性ＰＫ欠損症（ＰＫＤ）に関連する貧血」及び「ＰＫＤ関連貧血」は、同義語であり、ＭＤＳを有するか、又はＭＤＳに罹患することから生じる後天性ＰＫＤの結果として対象において発症した貧血を指す。いくつかの実施形態では、ＭＤＳに罹患している対象における後天性ＰＫ欠損症に関連する貧血は、溶血性貧血である。
【0027】
「対象」及び「患者」という用語は、同義語であり、処置を必要とする哺乳動物、例えば、伴侶動物（例えば、イヌ、ネコなど）、家畜（例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギなど）及び実験動物（例えば、ラット、マウス、モルモットなど）を意味する。反対が述べられない限り、対象は、処置を必要とするヒトである。いくつかの実施形態では、対象は、成人（例えば、１８歳以上）である。他の実施形態では、対象は、ヒトの子供（例えば、１８歳未満）である。更に他の実施形態では、対象は、ヒト女性（成人又は子供）である。更に他の実施形態では、対象は、ヒト男性（成人又は子供）である。
【0028】
「投与する」、「投与すること」、又は「投与」という用語は、本明細書に記載される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物を、対象に、又は対象の中に、又は対象の上に、提供すること、移植すること、吸収させること、摂取させること、注射すること、吸入させること、又はその他の方法で導入することを指す。
【0029】
「処置」、「処置する」、及び「処置すること」という用語は、本明細書に記載されている１つ以上の疾患を逆転、緩和、発症の遅延、又は進行の阻害を指す。いくつかの実施形態では、処置は、１つ以上の疾患の徴候又は症状が発生した後に行われてもよい（すなわち、治療的処置）。他の実施形態では、処置は、疾患の徴候又は症状が存在しない状態で行われてもよい。例えば、処置は、症状が発現する前に（例えば、症状の病歴及び／又は病原体への曝露に照らして）、感受性のある対象に行うことができる（すなわち、予防的処置）。症状が解消した後、例えば、その再発を遅らせるか又は防止するために、処置を継続することもできる。ある特定の実施形態では、処置は、障害の少なくとも１つの症状の発症を一定期間遅らせることを含む。
【0030】
本明細書に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩の「有効量」又は「治療有効量」という用語は、本明細書に記載の状態の処置において治療的利益を提供するのに十分な量の化合物又はその薬学的に許容される塩を指す。一態様では、有効量は、約０．０１～約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の提供される化合物又は薬学的に許容される塩であり、例えば、約０．１～約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日である。別の態様では、有効量は、約０．０１～約２０００ｍｇの提供される化合物又はその薬学的に許容される塩であり、これは１日当たり１回又は２回投与され得る。
【0031】
本明細書で使用される場合、値の範囲の列挙は、範囲に含まれる各別個の値、並びに範囲を定義する最高値及び最低値を個別に参照する簡略方法として機能することが意図され、反対の明示的な記載がない限り、各値は本明細書に個別に列挙されているかのように本明細書に組み込まれる。例えば、ＸからＹまでの値の範囲は、Ｘ及びＹの両方、及びＸとＹとの間の全ての値を含む。
【0032】
本明細書で提供される任意の及び全ての例、又は例示的な用語（例えば、「～など」）の使用は、本開示をよりよく示すことを意図しており、別段の主張がない限り、本開示の範囲を限定するものではない。本明細書中の文言は、本開示の実施に不可欠な、任意の請求されていない要素を示すと解釈されるべきではない。
【0033】
「薬学的に許容される塩」という用語は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などを伴わずに、ヒト及び下等動物の組織と接触させて使用するのに好適であり、合理的な利益／リスク比に見合った塩を指す。薬学的に許容される塩は周知であり、例えば、Ｂｅｒｇｅらは、薬学的に許容される塩を、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９７７，６６，１－１９において詳細に記載している。本明細書に開示される化合物の薬学的に許容される塩としては、好適な無機及び有機酸に由来するものが挙げられる。薬学的に許容される酸付加塩の例は、アミノ基の塩であり、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、及び過塩素酸と形成されるか、又は有機酸、例えば、酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、若しくはマロン酸と形成されるか、又はイオン交換などの当該技術分野で使用される他の方法を使用することによって形成される。他の薬学的に許容される塩としては、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ゲンチシン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルピオロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩 ｐ－トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが挙げられる。
【0034】
一態様では、第９の実施形態の一部として、対象に投与された化合物（例えば、第１の実施形態～第８の実施形態のうちのいずれか１つにあるように）は、構造式：
を有する化合物、又はその薬学的に許容される塩である。この化合物はまた、本明細書では、化学名２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オン、又は単に化合物１としても呼ばれる。
【化10】
【0035】
一態様では、第１０の実施形態の一部として、対象に投与された化合物（例えば、第１の実施形態～第８の実施形態のうちのいずれか１つにあるように）は、構造式：
を有する化合物、又はその薬学的に許容される塩である。この化合物はまた、本明細書では、その化学名２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－４－メチル－６－（（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オン、又は単に化合物２としても呼ばれる。
【化11】
【0036】
一態様では、第１１の実施形態の一部として、対象に投与された化合物（例えば、第１の実施形態～第８の実施形態のうちのいずれか１つにあるように）は、構造式：
を有する化合物、又はその薬学的に許容される塩である。この化合物は、「ミタピバット」、「ＡＧ－３４８」、又はその化学名「Ｎ－（４－（４－（シクロプロピルメチル）ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）キノリン－８－スルホンアミド」としても知られている。代替として、第１１の実施形態の一部として、ミタピバット又はその薬学的に許容される塩を、結晶形態で（例えば、第１から第８の実施形態のいずれか１つにあるように）対象に投与する。別の代替案では、第１１の実施形態の一部として、ミタピバット又はその薬学的に許容される塩を、非晶質形態として（例えば、第１の実施形態～第８の実施形態のうちのいずれか１つにあるように）対象に投与する。更なる代替の実施形態では、第１１の実施形態の一部として、ミタピバット又はその薬学的に許容される塩を、固体形態の混合物（例えば、１つ以上の結晶形態の混合物又は１つ以上の結晶形態と非晶質形態との混合物）として（例えば、第１の実施形態～第８の実施形態のうちのいずれか１つにあるように）対象に投与する。
【化12】
【0037】
一態様では、第１２の実施形態の一部として、（例えば、第１の実施形態～第８の実施形態のうちのいずれか１つにあるように）対象に投与された化合物は、ミタピバットの薬学的に許容される塩である。代替として、第１２の実施形態の一部として、（例えば、第１の実施形態～第８の実施形態のうちのいずれか１つにあるように）対象に投与された化合物は、ミタピバットの硫酸塩である。別の代替案では、第１２の実施形態の一部として、（例えば、第１の実施形態～第８の実施形態のうちのいずれか１つにあるように）対象に投与された化合物は、ミタピバットのヘミ硫酸塩である。別の代替案では、第１２の実施形態の一部として、（例えば、第１の実施形態～第８の実施形態のうちのいずれか１つにあるように）対象に投与された化合物は、ミタピバットの水和ヘミ硫酸塩である。別の代替案では、第１２の実施形態の一部として、（例えば、第１の実施形態～第８の実施形態のうちのいずれか１つにあるように）対象に投与された化合物は、ミタピバット硫酸塩又は式Ａを有する１－（シクロプロピルメチル）－４－（４－（キノリン－８－スルホンアミド）ベンゾイル）ピペラジン－１－イウムヘミスルフェートセスキ水和物としても知られる、ミタピバットのヘミ硫酸セスキ水和物塩である：
式Ａ。別の代替案では、第１２の実施形態の一部として、（例えば、第１の実施形態～第８の実施形態のうちのいずれか１つにあるように）対象に投与された化合物は、ミタピバット三水和物又は１－（シクロプロピルメチル）－４－（４－（キノリン－８－スルホンアミド）ベンゾイル）ピペラジン－１－イウム硫酸塩三水和物とも呼ばれる（及びこれらに相当する）硫酸塩三水和物塩である：
式Ｂ。ミタピバットのヘミ硫酸セスキ水和物塩（すなわち、ミタピバット硫酸塩）は、結晶性、例えば、米国公開第２０２０／０２７７２７９号に開示されている形態Ａであり得る。形態Ａは、Ｃｕ Ｋα放射を使用する、２θ角度（±０．２°）での以下のＸ線粉末回折パターンのうちの１つ以上を特徴とする：９．９°、１５．８°、及び２２．６°；１５．０°、１７．１°、２１．３°、及び２１．９°；９．９°、１５．０°、１５．８°、１７．１°、２１．３°、２１．９°、及び２２．６°；９．９°、１１．４°、１５．０°、１５．３°、１５．８°、１７．１°、１７．７°、２１．３°、２１．９°、２２．６°、及び２３．５°；又は４．９°、９．９°、１１．０°、１１．４°、１１．７°、１２．３°、１２．８°、１３．６°、１３．９°、１４．２°、１５．０°、１５．３°、１５．８°、１７．１°、１７．４°、１７．７°、１８．８°、１９．１°、１９．８°、２１．３°、２１．９°、２２．６°、２３．０°、２３．２°、２３．５°、２３．８°、２４．１°、２４．５°、２５．３°、２５．６°、２６．１°、２７．１°、２８．１°、及び２９．８°。いくつかの実施形態では、形態Ａは、２θ角度（±０．２°）９．９°、１５．８°、及び２２．６°でのＸ線粉末回折ピークを特徴とする。ある特定の実施形態では、形態Ａは、２θ角度（±０．２°）９．９°、１５．８°、及び２２．６°でのＸ線粉末回折ピーク、並びに１５．０°、１７．１°、２１．３°、及び２１．９°から選択される２θ角度（±０．２°）での少なくとも１つの追加のＸ線粉末回折ピークを特徴とする。ある特定の実施形態では、形態Ａは、２θ角度（±０．２°）９．９°、１５．８°、及び２２．６°でのＸ線粉末回折ピーク、並びに１５．０°、１７．１°、２１．３°、及び２１．９°から選択される２θ角度（±０．２°）での少なくとも２つの追加のＸ線粉末回折ピークを特徴とする。更に別の代替案では、形態Ａは、２θ角度（±０．２°）９．９°、１５．８°、及び２２．６°でのＸ線粉末回折ピーク、並びに１５．０°、１７．１°、２１．３°、及び２１．９°から選択される２θ角度（±０．２°）での少なくとも３つの追加のＸ線粉末回折ピークを特徴とする。ある特定の実施形態では、形態Ａは、２θ角度（±０．２°）９．９°、１５．０°、１５．８°、１７．１°、２１．３°、２１．９°、及び２２．６°でのＸ線粉末回折ピークを特徴とする。ある特定の実施形態では、形態Ａは、２θ角度（±０．２°）９．９°、１１．４°、１５．０°、１５．３°、１５．８°、１７．１°、１７．７°、２１．３°、２１．９°、２２．６°、及び２３．５°でのＸ線粉末回折ピークを特徴とする。ある特定の実施形態では、形態Ａは、２θ角度（±０．２°）４．９°、９．９°、１１．０°、１１．４°、１１．７°、１２．３°、１２．８°、１３．６°、１３．９°、１４．２°、１５．０°、１５．３°、１５．８°、１７．１°、１７．４°、１７．７°、１８．８°、１９．１°、１９．８°、２１．３°、２１．９°、２２．６°、２３．０°、２３．２°、２３．５°、２３．８°、２４．１°、２４．５°、２５．３°、２５．６°、２６．１°、２７．１°、２８．１°、及び２９．８°でのＸ線粉末回折ピークを特徴とする。更に別の代替案では、形態Ａは、約１５９℃±５℃及び１９９℃±５℃での吸熱ピークを含む示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラフを特徴とする。更に別の代替案では、結晶形態Ａは、約４．５±０．５％、最大１８０℃±２℃の重量損失を含む熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムを特徴とする。いくつかの実施形態では、ミタピバットのヘミ硫酸セスキ水和物塩は、１－（シクロプロピルメチル）－４－（４－（キノリン－８－スルホンアミド）ベンゾイル）ピペラジン－１－イウムヘミ硫酸セスキ水和物形態Ａである。
【化13】
【化14】
【0038】
「非晶質」という用語は、非結晶状態又は形態で存在する固体を意味する。非晶質固体は、分子の無秩序な配置であり、したがって、区別可能な結晶格子又は単位細胞を有さず、したがって、定義可能な長距離秩序を有しない。固体の固体状態秩序は、当該技術分野で既知の標準的な技術によって、例えば、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）又は示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって決定され得る。非晶質固体も、例えば、偏光顕微鏡を使用した複屈折によって、結晶性固体から区別され得る。
【0039】
本明細書に記載される結晶形態についてのＸ線粉末回折パターンの２－シータ値は、機器ごとにわずかに変動する場合があり、また、温度変動、試料変位、及び内部標準の有無などの要因による試料調製の変動及びバッチ間変動に依存し得る。したがって、別途定義されない限り、本明細書に列挙されるＸＲＰＤパターン／割り当ては、絶対的なものとして解釈されるべきではなく、±０．２度変動することがある。この変動は、結晶形態の明確な識別を妨げることなく、上記の要因を説明することは当業者によく知られている。特に明記しない限り、本明細書で提供する２シータ値は、Ｃｕ Ｋα１放射線を使用して得られた。
【0040】
本明細書に記載の化合物又は薬学的に許容される塩、例えば、第１の実施形態～第１２の実施形態のうちのいずれか１つに記載の化合物又は薬学的に許容される塩は、医薬組成物として製剤化され、投与されてもよい。医薬組成物は、薬理学の分野で知られている方法によって調製され得る。一態様では、医薬組成物は、顆粒又はミニ錠剤、カプセル剤、錠剤、エマルション、並びに水性懸濁液、分散液、及び溶液を含むが、これらに限定されない経口的に許容される剤形で経口投与される。
【0041】
一態様では、第１３の実施形態の一部として、開示される化合物、薬学的に許容される塩、又は組成物（第１、第２、及び第４から第１２の実施形態のうちのいずれか１つに記載される対象及び化合物を含む）によって処置される対象は、ヘモグロビン応答を経験する。
【0042】
本明細書で使用される場合、「ヘモグロビン応答」は、対象のベースラインＨｂレベル（すなわち、Ｈｂ濃度）からの増加を指し、対象のヘモグロビン応答は、本明細書に開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物での処置中に又は本明細書に開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物の投与後の期間にわたって、測定される。反対と明記されない限り、「処置中」又は「投与後」という用語は、開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物と関連して使用される場合、進行中の処置又は投与を指す（すなわち、対象は、開示された化合物、薬学的に許容される塩、又はそれらの組成物で処置又は投与され続ける）。ヘモグロビン（Ｈｂ）レベル及びヘモグロビン濃度という用語は、本明細書で同義的に使用される。本明細書で使用される場合、「ベースライン」という用語は、処置前、又は本明細書に開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、測定又は確立されるレベル又は濃度を指す。例えば、本明細書で使用されるとき、「ベースラインヘモグロビンレベル」という用語は、処置前、又は本明細書に開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、測定又は確立される対象のヘモグロビン（Ｈｂ）レベルを指す。一態様では、「ヘモグロビン応答」は、対象のベースラインＨｂレベル（すなわち、Ｈｂ濃度）からの増加を指し、対象のヘモグロビン応答は、処置中の一定期間にわたって測定される。別の態様では、「ヘモグロビン応答」は、対象のベースラインＨｂレベル（すなわち、Ｈｂ濃度）からの増加を指し、対象のヘモグロビン応答は、投与後、例えば、１週間の処置、２週間の処置、３週間の処置、４週間の処置、３ヶ月の処置、６ヶ月の処置、又は１年以上の処置の期間にわたって測定される。
【0043】
一態様では、第１４の実施形態の一部として、開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、（第１の実施形態～第１３の実施形態のうちのいずれか１つを含む）処置される対象のヘモグロビンレベルは、少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも６週間、少なくとも８週間、少なくとも１０週間、少なくとも１２週間、少なくとも１４週間、少なくとも１６週間、少なくとも１８週間、少なくとも２０週間、少なくとも３０週間、少なくとも４０週間、又は少なくとも５０週間の期間にわたって、ベースラインから増加する。一態様では、第１４の実施形態の一部として、開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、（第１の実施形態～第１３の実施形態のうちのいずれか１つを含む）処置される対象のヘモグロビンレベルは、少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも６週間、少なくとも８週間、少なくとも１０週間、少なくとも１２週間、少なくとも１４週間、少なくとも１６週間、少なくとも１８週間、少なくとも２０週間、少なくとも３０週間、少なくとも４０週間、又は少なくとも５０週間の期間にわたって、ベースラインから増加する。代替として、第１４の実施形態の一部として、開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、（第１の実施形態～第１３の実施形態のうちのいずれか１つを含む）処置される対象のヘモグロビンレベルは、少なくとも４週間、少なくとも６週間、少なくとも８週間、少なくとも１０週間、少なくとも１２週間、少なくとも１４週間、少なくとも１６週間、少なくとも１８週間、又は少なくとも２０週間の期間にわたって、ベースラインから増加する。別の代替案では、第１４の実施形態の一部として、開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、（第１の実施形態～第１３の実施形態のうちのいずれか１つを含む）処置される対象のヘモグロビンレベルは、１週から２０週まで、１週から１８週まで、１週から１６週まで、４週から２０週まで、４週から１８週まで、４週から１６週まで、６週から２０週まで、６週から１８週まで、６週から１６週まで、８週から２０週まで、８週から１８週まで、８週から１６週まで、１０週から２０週まで、１０週から１８週まで、又は１０週から１６週まで、ベースラインから増加する。別の代替案では、第１４の実施形態の一部として、開示される化合物、又は薬学的に許容される塩若しくはその組成物による処置中に、（第１の実施形態～第１３の実施形態のうちのいずれか１つを含む）処置される対象のヘモグロビンレベルは、８週から１６週までベースラインから増加する。別の代替案では、第１４の実施形態の一部として、開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、（第１の実施形態～第１３の実施形態のうちのいずれか１つを含む）処置される対象のヘモグロビンレベルは、１週から２０週まで、１週から１８週まで、１週から１６週まで、４週から２０週まで、４週から１８週まで、４週から１６週まで、６週から２０週まで、６週から１８週まで、６週から１６週まで、８週から２０週まで、８週から１８週まで、８週から１６週まで、１０週から２０週まで、１０週から１８週まで、又は１０週から１６週までの２つ以上、３つ以上、４つ以上、５つ以上、又は６つ以上の連続する時点でベースラインから増加する。別の代替案では、第１４の実施形態の一部として、開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、（第１の実施形態～第１３の実施形態のうちのいずれか１つを含む）処置される対象のヘモグロビンレベルは、８週から１６週までの２つ以上の連続する時点でベースラインから増加する。別の代替案では、第１４の実施形態の一部として、開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、（第１の実施形態～第１３の実施形態のうちのいずれか１つを含む）処置される対象のヘモグロビンレベルは、ベースラインから１週間以上連続して、２週間以上連続して、３週間以上連続して、４週間以上連続して、５週間以上連続して、６週間以上連続して、７週間以上連続して、８週間以上連続して、９週間以上連続して、又は１０週間以上連続して増加する。別の代替案では、第１４の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、（第１の実施形態～第１３の実施形態のうちのいずれか１つを含む）処置される対象のヘモグロビンレベルは、８週間以上連続してベースラインから増加する。
【0044】
一態様では、第１５の実施形態の一部として、開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、（第１の実施形態～第１４の実施形態のうちのいずれか１つを含む）処置される対象のヘモグロビンレベルは、少なくとも１．０ｇ／ｄＬ改善される（例えば、ベースラインから１．０ｇ／ｄＬ以上増加する）。代替として、第１５の実施形態の一部として、開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、（第１の実施形態～第１４の実施形態のうちのいずれか１つを含む）処置される対象のヘモグロビンレベルは、少なくとも１．５ｇ／ｄＬ改善される（例えば、ベースラインから１．５ｇ／ｄＬ以上増加する）。別の代替案では、第１５の実施形態の一部として、開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、（第１の実施形態～第１４の実施形態のうちのいずれか１つを含む）処置される対象のヘモグロビンレベルは、少なくとも２．０ｇ／ｄＬ改善される（例えば、ベースラインから２．０ｇ／ｄＬ以上増加する）。別の代替案では、第１５の実施形態の一部として、開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置中に、（第１の実施形態～第１４の実施形態のうちのいずれか１つを含む）処置される対象のヘモグロビンレベルは、２．０ｇ／ｄＬを超えて改善する（例えば、ベースラインから２．０ｇ／ｄＬを超えて増加する）。
【0045】
一態様では、第１６の実施形態の一部として、開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第１５の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置前に非輸血依存性（ＮＴＤ）である対象として分類される。
【0046】
本明細書で使用される場合、非輸血依存性（ＮＴＤ）及び「非輸血」という用語は、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物による処置前に定期的な輸血を必要としない対象を指す。一態様では、ＮＴＤは、第１の用量の開示される化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物の投与前の１６週間の間に３個未満の赤血球（ＲＢＣ）単位を有し、開示される化合物の第１の用量、又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物の投与前の８週間の間に輸血がない対象を指す。
【0047】
本明細書で使用される場合、輸血依存性（ＴＤ）という用語は、定期的な輸血を必要とする対象を指す。
【0048】
一態様では、第１７の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第１５の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中に輸血非依存になる。いくつかの態様では、第１７の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第１５の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中の一定期間、輸血非依存になる。
【0049】
本明細書で使用される場合、「輸血非依存」又は「輸血非依存性」という用語は、本明細書で互換可能に使用され、一定期間の間、赤血球輸血を受けていない（すなわち、有していない）対象を指す（本明細書では「輸血フリー」とも呼ばれる）。いくつかの態様では、「輸血非依存」又は「輸血非依存性」という用語は、１６週間連続した期間にわたって赤血球輸血を受けていない対象を指す。いくつかの態様では、１６週間連続した期間にわたって赤血球輸血を受けていない対象は、輸血フリーと呼ばれる。他の態様では、「輸血非依存」又は「輸血非依存性」という用語は、８週間以上連続した期間にわたって赤血球輸血を受けていない対象を指す。いくつかの態様では、８週間以上連続した期間にわたって赤血球輸血を受けていない対象は、輸血フリーと呼ばれる。
【0050】
一態様では、第１８の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第１５の実施形態又は第１７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、高輸血負荷（ＨＴＢ）を有するものとして分類される。代替として、第１８の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第１５の実施形態又は第１７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置前に高輸血負荷（ＨＴＢ）を有するものとして分類される。別の代替案では、第１８の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第１５の実施形態又は第１７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、１６週間にわたって少なくとも８個の赤血球（ＲＢＣ）単位を受け、８週間の経過にわたって４回以上の輸血エピソードを有することを特徴とする、高輸血負荷（ＨＴＢ）を有するものとして分類される。別の代替案では、第１８の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第１５の実施形態又は第１７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、対象が１６週間にわたって少なくとも８個のＲＢＣ単位を受け、処置前の８週間の経過にわたって４回以上の輸血エピソードを有することを特徴とする、高輸血負荷（ＨＴＢ）を有するものとして分類される。別の代替案では、第１８の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第１５の実施形態又は第１７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、対象が１６週間の経過にわたって少なくとも８個のＲＢＣ単位を受け、処置前１６週間の経過中８週間の期間にわたって少なくとも４個のＲＢＣ単位を受けることを特徴とする、高輸血負荷（ＨＴＢ）を有するものとして分類される。
【0051】
一態様では、第１９の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第１５の実施形態又は第１７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、低輸血負荷（ＬＴＢ）を有するものとして分類される。代替として、第１９の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第１５の実施形態又は第１７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置前に低輸血負荷（ＬＴＢ）を有するものとして分類される。別の代替案では、第１９の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第１５の実施形態又は第１７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、対象が、処置前の８週間の経過にわたって最大３回の輸血エピソードを伴う、少なくとも２回の輸血エピソードにおいて、１６週間にわたって３～７個のＲＢＣ単位を受けることを特徴とする、低輸血負荷（ＬＴＢ）を有するものとして分類される。別の代替案では、第１９の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第１５の実施形態又は第１７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、対象が、処置中のある時点で、８週間の経過にわたって最大３回の輸血エピソードを伴う、少なくとも２回の輸血エピソードにおいて１６週間にわたって３～７回のＲＢＣ単位を受けることを特徴とする、低輸血負荷（ＬＴＢ）を有するものとして分類される。
【0052】
一態様では、第２０の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２１の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中に１週間以上連続して、２週間以上連続して、３週間以上連続して、４週間以上連続して、５週間以上連続して、６週間以上連続して、７週間以上連続して、８週間以上連続して、９週間以上連続して、又は１０週間以上連続して、輸血非依存になる。代替として、第２０の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２１の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中に８週間以上連続して、輸血非依存になる。別の代替案では、第２０の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２１の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中に８週間以上連続して輸血非依存になり、対象は、処置前に低輸血負荷（ＬＴＢ）を有するものとして分類される。
【0053】
一態様では、第２１の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２０の実施形態までのうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中に総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位のベースラインからの変化を経験する。一態様では、第２１の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２０の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中に、対象のベースラインの総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位と比較して、総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位の減少を経験する。
【0054】
一態様では、第２２の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２１の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中の総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位の１０％以上、２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、又は８０％以上の減少を特徴とする、総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位のベースラインからの変化を経験する。代替として、第２２の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２１の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中に、１週間以上連続した、２週間以上連続した、３週間以上連続した、４週間以上連続した、５週間以上連続した、６週間以上連続した、７週間以上連続した、８週間以上連続した、９週間以上連続した、又は１０週間以上連続した期間にわたって、総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位の１０％以上、２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、又は８０％以上の減少を特徴とする総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位のベースラインからの変化を経験する。別の代替案では、第２２の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２１の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中の総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位の５０％以上の減少を特徴とする、総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位のベースラインからの変化を経験する。別の代替案では、第２２の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２１の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中に、１週間以上連続した、２週間以上連続した、３週間以上連続した、４週間以上連続した、５週間以上連続した、６週間以上連続した、７週間以上連続した、８週間以上連続した、９週間以上連続した、又は１０週間以上連続した期間にわたって、ＲＢＣ単位の５０％以上の減少を特徴とする、総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位におけるベースラインからの変化を経験する。別の代替案では、第２２の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２１の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中の８週間以上連続した期間にわたって総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位の５０％以上の減少を特徴とする、総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位のベースラインからの変化を経験する。別の代替案では、第２２の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２１の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中の８週間以上連続した期間にわたって総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位の５０％以上の減少を特徴とする、総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位のベースラインからの変化を経験し、対象は、処置前に高輸血負荷（ＨＴＢ）を有するとして分類される。
【0055】
一態様では、第２３の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２２の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中に、対象のベースラインの２，３－ＤＰＧ濃度と比較して、２，３－ジホスホグリセリン酸（２，３－ＤＰＧ）濃度の低下を経験する。
【0056】
一態様では、第２４の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２３の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中に（対象のベースラインＡＴＰ濃度と比較して）アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）濃度の増加を経験する。代替として、第２４の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２３の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中に（対象のベースラインＡＴＰ濃度と比較して）５０％を超える、５５％を超える、６０％を超える、６５％を超える、７０％を超える、及び７５％を超えるアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）濃度の増加を経験する。別の代替案では、第２４の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２３の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、処置中に（対象のベースラインＡＴＰ濃度と比較して）アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）濃度が６８％、７１％、又は７４％増加する。別の代替案では、第２４の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２３の実施形態のうちのいずれか１つを含む）によって処置される対象は、１日当たりの投与の１０日後、２０日後、３０日後、４０日後、５０日後、６０日後、又は６５日後に、（対象のベースラインＡＴＰ濃度と比較して）５０％を超える、５５％を超える、６０％を超える、６５％を超える、７０％を超える、及び７５％を超えるアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）濃度の増加を経験する。別の代替案では、第２４の実施形態の一部として、開示される化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物（第１の実施形態～第２３の実施形態のいずれかを含む）によって処置される対象は、（対象のベースラインＡＴＰ濃度と比較して）１日当たりの投与の５６日後に６８％、１日当たりの投与の５６日後に７１％、又は１日の投与の５６日後に７４％のアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）濃度の増加を経験する。
【0057】
一態様では、第２５の実施形態の一部として、本明細書に記載のＭＤＳ（第１の～第６の実施形態及び第１０の～第２４の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、ＭＤＳのための改訂国際予後スコアリングシステム（Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ Ｓｃｏｒｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ）（ＩＰＳＳ－Ｒ）によって特徴付けられる場合の低リスクＭＤＳである。例えば、Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ ＰＬ，Ｔｕｅｃｈｌｅｒ Ｈ，Ｓｃｈａｎｚ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ Ｓｃｏｒｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ．Ｂｌｏｏｄ．２０１２；１２０：２４５４－２４６５を参照されたい。低リスクＭＤＳは、例えば、１．５～３を超えるＩＰＳＳ－Ｒスコアを含む。代替として、第２５の実施形態の一部として、本明細書に記載のＭＤＳ（第１の～第６の実施形態及び第１０の～第２４の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、ＭＤＳのための改訂国際予後スコアリングシステム（ＩＰＳＳ－Ｒ）によって特徴付けられる場合の低リスクＭＤＳである。非常に低リスクＭＤＳは、例えば、１．５以下のＩＰＳＳ－Ｒスコアを含む。別の代替案では、第２５の実施形態の一部として、本明細書に記載のＭＤＳ（第１の～第６の実施形態及び第１０の～第２４の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、ＭＤＳのための改訂国際予後スコアリングシステム（ＩＰＳＳ－Ｒ）によって特徴付けられる場合の中等度リスクＭＤＳである。中等度リスクＭＤＳは、例えば、３～４．５を超えるＩＰＳＳ－Ｒスコアを含む。別の代替案では、第２５の実施形態の一部として、本明細書に記載されるＭＤＳ（第１の実施形態～第６の実施形態まで及び第１０の実施形態～第２４の実施形態までのうちのいずれか１つを含む）、用語「低リスクＭＤＳ」は、上述されるように、非常に低リスクＭＤＳ及び低リスクＭＤＳを包含する。
【0058】
一態様では、第２６の実施形態の一部として、本明細書に記載の対象（第１の実施形態～第２５の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、男性である。代替として、第２６の実施形態の一部として、本明細書に記載される対象（第１の実施形態～第２５の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、女性である。代替として、第２６の実施形態の一部として、本明細書に記載される対象（第１の実施形態～第２５の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、成人男性である。代替として、第２６の実施形態の一部として、本明細書に記載される対象（第１の実施形態～第２５の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、成人女性である。別の代替案では、第２６の実施形態の一部として、本明細書に記載される対象（第１の実施形態～第２５の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、男児又は女児である。代替として、第２６の実施形態の一部として、本明細書に記載される対象（第１の実施形態～第２５の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、成人（すなわち、１８歳以上）である。更に別の代替案では、第２６の実施形態の一部として、本明細書に記載の対象（第１の実施形態～第２５の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、子供（すなわち、１８歳未満）である。
【0059】
一態様では、第２７の実施形態の一部として、本明細書に記載の対象（第１の実施形態～第２６の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、治療有効量の２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オン、又はその薬学的に許容される塩を投与される。代替として、第２７の実施形態の一部として、本明細書に記載の対象（第１の実施形態～第２６の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、治療有効量の２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オン、又はその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体と、を含む組成物を投与される。
【0060】
一態様では、第２８の実施形態の一部として、本明細書に開示される２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オン（第１の実施形態～第２７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）の治療有効量は、１日当たり２ｍｇ、１日当たり３ｍｇ、又は１日当たり５ｍｇである。代替として、第２８の実施形態の一部として、本明細書に開示される２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オン（第１の実施形態～第２７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）の治療有効量は、１日当たり１回（ＱＤ）投与される２ｍｇ、ＱＤ投与される３ｍｇ、又はＱＤ投与される５ｍｇである。別の代替案では、第２８の実施形態の一部として、本明細書に開示される２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オン）（第１の実施形態～第２７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）の薬学的に許容される塩の治療有効量は、遊離塩基としての２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンの１日当たり２ｍｇ、１日当たり３ｍｇ、又は１日当たり５ｍｇに相当する量である。別の代替案では、第２８の実施形態の一部として、本明細書に開示される２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オン（第１～２７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）の薬学的に許容される塩の治療有効量は、遊離塩基としての２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンの１日当たり１回（ＱＤ）投与される２ｍｇ、ＱＤ投与される３ｍｇ、又はＱＤ投与される５ｍｇに相当する量である。別の代替案では、第２８の実施形態の一部として、本明細書に開示される２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンの治療有効量（第１～第２７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、０．５ｍｇ～１０ｍｇ ＱＤの範囲である。別の代替案では、第２８の実施形態の一部として、本明細書に開示される２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オン（第１の実施形態～第２７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）の薬学的に許容される塩の治療有効量は、遊離塩基としての２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンの０．５ｍｇ～１０ｍｇ ＱＤの範囲の量に相当する量である。別の代替案では、第２８の実施形態の一部として、本明細書に開示される２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オン（第１の実施形態～第２７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）の治療有効量は、０．５ｍｇ～１０ｍｇの１日当たり２回（ＢＩＤ）の範囲である。別の代替案では、第２８の実施形態の一部として、本明細書に開示される２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オン（第１の実施形態～第２７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）の薬学的に許容される塩の治療有効量は、遊離塩基としての２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンのＢＩＤの０．５ｍｇ～１０ｍｇの範囲に相当する量である。別の代替案では、第２８の実施形態の一部として、本明細書に開示される化合物１の治療有効量（第１の実施形態～第２７の実施形態までのうちのいずれか１つを含む）は、１日当たり０．２５ｍｇ～１５ｍｇの範囲である。第２８の実施形態の一部としての別の代替案では、本明細書に開示される化合物１の薬学的に許容される塩の治療有効量（第１の実施形態～第２７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、遊離塩基として１日当たり０．２５ｍｇ～１５ｍｇの範囲に相当する量である。別の代替案では、２８番目の実施形態の一部として、治療有効量の、本明細書に開示される化合物１（第１の実施形態～２７番目の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、０．２５ｍｇ～２ｍｇのＱＤ若しくはＢＩＤ、又は１．５ｍｇ～５．５ｍｇのＱＤ若しくはＢＩＤ、又は４ｍｇ～６ｍｇのＱＤ若しくはＢＩＤの範囲である。第２８の実施形態の一部としての別の代替案では、本明細書に開示される化合物１の薬学的に許容される塩の治療有効量（第１の実施形態～第２７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、遊離塩基としての０．２５ｍｇ～２ｍｇのＱＤ若しくはＢＩＤ又は１．５ｍｇ～５．５ｍｇのＱＤ若しくはＢＩＤ又は４ｍｇ～６ｍｇのＱＤ若しくはＢＩＤの範囲に相当する量である。別の代替案では、第２８の実施形態の一部として、本明細書に開示される化合物１の治療有効量（第１の実施形態～第２７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、１ｍｇ又は５ｍｇのＱＤ又はＢＩＤである。第２８の実施形態の一部としての別の代替案では、治療有効量の本明細書に開示される化合物１の薬学的に許容される塩（第１の実施形態～第２７の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、遊離塩基としての１ｍｇ若しくは５ｍｇのＱＤ又はＢＩＤに相当する量である。
【0061】
一態様では、第２９の実施形態の一部として、本明細書に記載の対象（第１の実施形態～第２８の実施形態のうちのいずれか１つを含む）は、少なくとも１２週間、少なくとも１４週間、少なくとも１６週間、少なくとも２４週間、少なくとも３０週間、又は少なくとも６週間の期間、処置される（すなわち、本明細書に記載の化合物、薬学的に許容される塩、又は組成物を投与される）。代替として、第２９の実施形態の一部として、本明細書に記載の対象（第１の実施形態～第２８の実施形態のうちのいずれか１つを含む）を、最大１２週間、最大１４週間、最大１６週間、最大２４週間、最大３０週間、最大３６週間、最大５０週間、最大１００週間、又は最大１６０週間の期間、処置する（すなわち、本明細書に記載の化合物、薬学的に許容される塩、又は組成物を投与する）。別の代替案では、第２９の実施形態の一部として、本明細書に記載の対象（第１の実施形態～第２８の実施形態のうちのいずれか１つを含む）を１６週間、２４週間、又は１５６週間の期間、処置する（すなわち、本明細書に記載の化合物、薬学的に許容される塩、又は組成物を投与する）。別の代替案では、第２９の実施形態の一部として、本明細書に記載の対象（第１の実施形態～第２８の実施形態のうちのいずれか１つを含む）を無期限又は対象の生涯にわたって処置する（すなわち、本明細書に記載の化合物、薬学的に許容される塩、又は組成物を投与する）。
【0062】
一態様では、開示される状態を処置するための薬剤の製造のための（例えば、上記開示される実施形態のうちのいずれか１つにあるように）、開示されるピルビン酸キナーゼ活性化剤又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物のうちの１つ以上の使用が提供される。別の態様では、開示される状態を処置するための（例えば、上記開示される実施形態のうちのいずれか１つにあるように）、開示されるピルビン酸キナーゼ活性化剤又はその薬学的に許容される塩若しくは組成物のうちの１つ以上の使用も提供される。
【0063】
更なる詳細は、以下の例示のセクションに記載され、本発明の一部として含まれる。
【実施例】
【0064】
化合物の調製
実施例１：２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンの調製（化合物１）。
２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンは、米国特許第１１，０４０，０３６号の実施例８Ａの化合物Ｅ８－４のための手順概要に従って調製することができ、その内容全体は、参照により本明細書に組み込まれる。米国特許第１１，０４０，０３６号の開示を考慮して、２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンの薬学的に許容される塩も調製することができる。
実施例１：２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンの調製（化合物１）。
２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンは、米国特許第１１，０４０，０３６号の実施例８Ａの化合物Ｅ８－４のための手順概要に従って調製することができ、その内容全体は、参照により本明細書に組み込まれる。米国特許第１１，０４０，０３６号の開示を考慮して、２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンの薬学的に許容される塩も調製することができる。
【0065】
２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－４－メチル－６－（（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンは、米国特許第１１，０４０，０３６号の化合物Ｅ８－４１の手順概要に従って調製することができ、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。米国特許第１１，０４０，０３６号の開示を考慮して、２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－４－メチル－６－（（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンの薬学的に許容される塩も調製することができる。
【0066】
ミタピバットは、ＷＯ２０１１／００２８１７の化合物ＶＩＩＩ－８について概説される手順に従って調製することができ、その内容全体が、参照により本明細書に組み込まれる。追加の方法、塩、及び結晶形態はまた、ＷＯ２０１６／２０１２２７に見出すことができ、塩及び結晶形態は、ＷＯ２０１９／１０４１３４及びＷＯ２０２０／２３７０４７に見出すことができ、それらの各々は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0067】
ＭＤＳ関連貧血マウスモデル
ＭＤＳ患者に匹敵する無効な赤血球生成の条件下での赤芽球集団の成熟に対するミタピバット及び化合物１の影響を決定するために、インビボマウス研究を行った。これを達成するために、無効な赤血球生成を有することが実証された２つの確立されたマウスモデルを使用した。これらの条件下でのミタピバット及び化合物１の影響を決定するために、病気のマウスから骨髄穿刺液を収集し、フローサイトメトリーを使用して、成熟の様々な段階で赤芽球の集団を評価した。ヘモグロビン（Ｈｂ）、赤血球（ＲＢＣ）数、及び網状赤血球画分もまた、４週間ごとに、Ｓｙｓｍｅｘ ＸＮ－１０００（商標）血液分析器上で全血中でモニタリングして、疾患負荷及び赤芽球成熟への影響が末梢で検出され得るかどうかを決定した。薬力学及び薬物動態分析もまた、化合物の適切な曝露及び標的関与を確認するために行った（データは図示しない）。
ＭＤＳ患者に匹敵する無効な赤血球生成の条件下での赤芽球集団の成熟に対するミタピバット及び化合物１の影響を決定するために、インビボマウス研究を行った。これを達成するために、無効な赤血球生成を有することが実証された２つの確立されたマウスモデルを使用した。これらの条件下でのミタピバット及び化合物１の影響を決定するために、病気のマウスから骨髄穿刺液を収集し、フローサイトメトリーを使用して、成熟の様々な段階で赤芽球の集団を評価した。ヘモグロビン（Ｈｂ）、赤血球（ＲＢＣ）数、及び網状赤血球画分もまた、４週間ごとに、Ｓｙｓｍｅｘ ＸＮ－１０００（商標）血液分析器上で全血中でモニタリングして、疾患負荷及び赤芽球成熟への影響が末梢で検出され得るかどうかを決定した。薬力学及び薬物動態分析もまた、化合物の適切な曝露及び標的関与を確認するために行った（データは図示しない）。
【0068】
実施例２：ＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスモデルにおけるミタピバットの研究
ミトコンドリア破壊は、ＭＤＳ患者における貧血の発症に関連している（例えば、Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２００９；１１４（１９）：４０４５－５３を参照されたい）。ミトコンドリアは、アポトーシスの調節において重要な役割を果たしており、これは、ＭＤＳの不活性な造血において強調されているメカニズムである（Ｇｒｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９８；２８１（５３８１）：１３０９－１３１２、Ｋｅｒｂａｕｙ ｅｔ ａｌ．，Ｅｘｐ Ｈｅｍａｔｏｌ．２００７；３５（１１）：１７３９－１７４６、Ａｈｌｑｖｉｓｔ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ．２０１５；６：６４９４）。Ｂ６．１２９Ｓ７（Ｃｇ）－Ｐｏｌｇｔｍ１Ｐｒｏｌ／Ｊ、又はＰｏｌｇＤ２５７Ａは、ミトコンドリアにおけるプルーフリーディング活性の障害をもたらし、ｍｔＤＮＡ変異誘発の増加をもたらすＤＮＡポリメラーゼγ遺伝子のＮ末端に変異を有するマウスモデルである（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ＃０１７３４１）。Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２００９；１１４（１９）：４０４５－５３及びＡｈｌｑｖｉｓｔ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ．２０１５；６：６４９４を参照されたい。これらの変異の蓄積は、ＭＤＳ患者に見られる疾患のメカニズムに匹敵する、脱制御された造血及び上昇したアポトーシスをもたらす（Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２００９；１１４（１９）：４０４５－５３）。更に、エビデンスの数行は、ＭＤＳにおける後天性ピルビン酸欠損症を示し、ＰＫＲがこの適応症における潜在的な治療標的であり得ることを示唆している（Ｂｏｖｉｎ Ｐ ｅｔ ａｌ．Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ．１９７５；１８（３）：１７５－８７、Ｖａｌｅｎｔｉｎｅ ＷＮ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．１９７３；４１（６）：８５７－７５、Ａｒｎｏｌｄ Ｈ ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ．１９７４；５７：１８７－９、Ｌｉｎ Ｇ ｅｔ ａｌ．Ｃｈｉｎ Ｊ Ｈｅｍａｔｏｌ．１９９７；１８（７）：３５０－３）。ここでは、ＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスモデルを使用して、貧血のこのメカニズムにおけるＰＫ活性化剤であるミタピバットの治療上の利益を評価した。
ミトコンドリア破壊は、ＭＤＳ患者における貧血の発症に関連している（例えば、Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２００９；１１４（１９）：４０４５－５３を参照されたい）。ミトコンドリアは、アポトーシスの調節において重要な役割を果たしており、これは、ＭＤＳの不活性な造血において強調されているメカニズムである（Ｇｒｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９８；２８１（５３８１）：１３０９－１３１２、Ｋｅｒｂａｕｙ ｅｔ ａｌ．，Ｅｘｐ Ｈｅｍａｔｏｌ．２００７；３５（１１）：１７３９－１７４６、Ａｈｌｑｖｉｓｔ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ．２０１５；６：６４９４）。Ｂ６．１２９Ｓ７（Ｃｇ）－Ｐｏｌｇｔｍ１Ｐｒｏｌ／Ｊ、又はＰｏｌｇＤ２５７Ａは、ミトコンドリアにおけるプルーフリーディング活性の障害をもたらし、ｍｔＤＮＡ変異誘発の増加をもたらすＤＮＡポリメラーゼγ遺伝子のＮ末端に変異を有するマウスモデルである（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ＃０１７３４１）。Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２００９；１１４（１９）：４０４５－５３及びＡｈｌｑｖｉｓｔ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ．２０１５；６：６４９４を参照されたい。これらの変異の蓄積は、ＭＤＳ患者に見られる疾患のメカニズムに匹敵する、脱制御された造血及び上昇したアポトーシスをもたらす（Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２００９；１１４（１９）：４０４５－５３）。更に、エビデンスの数行は、ＭＤＳにおける後天性ピルビン酸欠損症を示し、ＰＫＲがこの適応症における潜在的な治療標的であり得ることを示唆している（Ｂｏｖｉｎ Ｐ ｅｔ ａｌ．Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ．１９７５；１８（３）：１７５－８７、Ｖａｌｅｎｔｉｎｅ ＷＮ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．１９７３；４１（６）：８５７－７５、Ａｒｎｏｌｄ Ｈ ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ．１９７４；５７：１８７－９、Ｌｉｎ Ｇ ｅｔ ａｌ．Ｃｈｉｎ Ｊ Ｈｅｍａｔｏｌ．１９９７；１８（７）：３５０－３）。ここでは、ＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスモデルを使用して、貧血のこのメカニズムにおけるＰＫ活性化剤であるミタピバットの治療上の利益を評価した。
【0069】
貧血表現型が血液学分析によって確立されると、雄及び雌のＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスに、固形飼料中の２００ｍｇ／ｋｇ／日のミタピバットを、７．５ヶ月齢から始まって１８週間、適宜投与した。全血を尾静脈を介してＥＤＴＡチューブに採取し、製造業者のプロトコルに従ってＳｙｓｍｅｘ ＸＮ－２０００（商標）血液学システムを使用して分析した。ヘモグロビン、赤血球（ＲＢＣ）、及び網状赤血球を、疾患の進行及び重症度を追跡するために、２～４週間ごとにモニタリングした。１８週間のミタピバット処置後、未処置の変異体と比較して、ＲＢＣ数が４５％上昇し、ヘモグロビンレベルが２．４ｇ／ｄＬ増加した。これに伴い、網状赤血球の頻度は、処置されたマウスで３０％減少し、未処置のマウスよりも改善された赤血球生成を示唆した。
【0070】
図１Ａ～Ｄ及び図２Ａ～Ｄを参照されたい（Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスを対照として使用した）。興味深いことに、雄の突然変異体は、ヘモグロビンの１～２ｇ／ｄＬの増加を伴う処置後６週間に始まる治療上の利益の兆候を示したが、雌の突然変異体は１８週間後に応答した。ヘモグロビンの増加に見合ったのは、網状赤血球数の顕著な減少（約３０％）であった。図２Ｃを参照されたい。
【0071】
実施例３：ＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスモデルにおけるミタピバット及び化合物１の研究
実施例２からのＰｏｌｇＤ２５７Ａモデル（ＲＲＩＤ：ＩＭＳＲ＿ＪＡＸ：０１７３４１）を使用して、第２の実験を行った。この実験において、２０匹のマウス（１群当たり１０匹の雄及び１０匹の雌）に、実施例２に記載されるように、固形飼料中のミタピバット又は化合物１のいずれかを投与した。ミタピバット群では、化合物を２００ｍｇ／ｋｇ／日で投与し、化合物１群では、化合物１を１０ｍｇ／ｋｇ／日で投与した。処置は、マウスが４ヶ月齢であったときに開始され、８ヶ月間継続された（ローリング登録）。８ヶ月の処置後（１２ヶ月齢で）、骨髄穿刺液の評価は、Ｓｕｒａｇａｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｍｅｄ ２０１４ Ａｐｒ；２０（４）：４０８－１４に概説された修正手順に従って、確立された赤血球生成マーカーを使用してフローサイトメトリーにより骨髄吸引物の評価が行われた。骨髄穿刺液をＡＣＫ溶解緩衝液で３分間処理して、試料から赤血球を除去した。残りの細胞を洗浄し、手順の残りの部分を通してＰＢＳ＋５％ ＦＢＳ中で維持した。フローサイトメトリーパネルには、生／死（Ｉｎｄｏ１）、Ｂ２２０（ＢＶ４２１）、ＣＤ５（ＢＶ４２１）、ＣＤ７１（ＡＦ７００）、及びＴｅｒ１１９（ＰＥ）抗体が含まれた。分析に使用されたゲーティング戦略は以下のとおりであった：生／Ｂ２２０－ＣＤ５－／Ｔｅｒ１１９＋。次に、Ｔｅｒ１１９＋細胞を、文献（Ｓｕｒａｇａｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｍｅｄ ２０１４ Ａｐｒ；２０（４）：４０８－１４；図６Ｅ）に概説されているように、ＣＤ７１及びＦＳＣを使用して細胞を集団にゲート開閉した。図６Ａ～Ｄに示される骨髄フローサイトメトリーデータに示されるように、化合物１による処置は、好塩基球性赤芽球（ＥｒｙＡ）の減少と、後期好塩基球性及び多染性赤芽球（ＥｒｙＢ）、並びに正染性及び網状赤血球（ＥｒｙＣ）の増加とを相まってもたらし、化合物１による処置が、ＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスの骨髄における赤芽球成熟を改善したことを示唆する。このエビデンスは、ＰｏｌｇＤ２５７Ａモデルにおける化合物１処置による赤血球生成の改善を示唆する。ＰｏｌｇＤ２５７ＡマウスにおけるＰｒｏＥ（原赤血球）集団の増加も観察されたが、（ビヒクル対照のＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスと比較して）化合物１処置を行ったＰｒｏＥ集団には追加の影響はなかった。図６Ｄ。ミタピバット処置アームがまだ完了していないため、ミタピバット処置ＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスのフローサイトメトリーデータは利用できない。
実施例２からのＰｏｌｇＤ２５７Ａモデル（ＲＲＩＤ：ＩＭＳＲ＿ＪＡＸ：０１７３４１）を使用して、第２の実験を行った。この実験において、２０匹のマウス（１群当たり１０匹の雄及び１０匹の雌）に、実施例２に記載されるように、固形飼料中のミタピバット又は化合物１のいずれかを投与した。ミタピバット群では、化合物を２００ｍｇ／ｋｇ／日で投与し、化合物１群では、化合物１を１０ｍｇ／ｋｇ／日で投与した。処置は、マウスが４ヶ月齢であったときに開始され、８ヶ月間継続された（ローリング登録）。８ヶ月の処置後（１２ヶ月齢で）、骨髄穿刺液の評価は、Ｓｕｒａｇａｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｍｅｄ ２０１４ Ａｐｒ；２０（４）：４０８－１４に概説された修正手順に従って、確立された赤血球生成マーカーを使用してフローサイトメトリーにより骨髄吸引物の評価が行われた。骨髄穿刺液をＡＣＫ溶解緩衝液で３分間処理して、試料から赤血球を除去した。残りの細胞を洗浄し、手順の残りの部分を通してＰＢＳ＋５％ ＦＢＳ中で維持した。フローサイトメトリーパネルには、生／死（Ｉｎｄｏ１）、Ｂ２２０（ＢＶ４２１）、ＣＤ５（ＢＶ４２１）、ＣＤ７１（ＡＦ７００）、及びＴｅｒ１１９（ＰＥ）抗体が含まれた。分析に使用されたゲーティング戦略は以下のとおりであった：生／Ｂ２２０－ＣＤ５－／Ｔｅｒ１１９＋。次に、Ｔｅｒ１１９＋細胞を、文献（Ｓｕｒａｇａｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｍｅｄ ２０１４ Ａｐｒ；２０（４）：４０８－１４；図６Ｅ）に概説されているように、ＣＤ７１及びＦＳＣを使用して細胞を集団にゲート開閉した。図６Ａ～Ｄに示される骨髄フローサイトメトリーデータに示されるように、化合物１による処置は、好塩基球性赤芽球（ＥｒｙＡ）の減少と、後期好塩基球性及び多染性赤芽球（ＥｒｙＢ）、並びに正染性及び網状赤血球（ＥｒｙＣ）の増加とを相まってもたらし、化合物１による処置が、ＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスの骨髄における赤芽球成熟を改善したことを示唆する。このエビデンスは、ＰｏｌｇＤ２５７Ａモデルにおける化合物１処置による赤血球生成の改善を示唆する。ＰｏｌｇＤ２５７ＡマウスにおけるＰｒｏＥ（原赤血球）集団の増加も観察されたが、（ビヒクル対照のＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスと比較して）化合物１処置を行ったＰｒｏＥ集団には追加の影響はなかった。図６Ｄ。ミタピバット処置アームがまだ完了していないため、ミタピバット処置ＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスのフローサイトメトリーデータは利用できない。
【0072】
全血中のＨｂ、ＲＢＣ、及び網状赤血球の分析は、野生型対照マウスにおける１３．９ｇ／ｄＬと比較して、ビヒクル対照ＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスが７．９ｇ／ｄＬの平均Ｈｂ濃度を有し、このモデルにおいて有意な疾患負荷が確立されたことを実証した。データは図示しない。処置の２４週間（これまでの６ヶ月）後、ミタピバットは、ＰｏｌｇＤ２５７Ａマウスにおいて、網状赤血球の変化なしに、Ｈｂ及びＲＢＣ数を７％増加させた。データは図示しない。化合物１による３２週間の処置後、Ｈｂ、ＲＢＣ数、又は網状赤血球画分の変化は観察されなかった。データは図示しない。
【0073】
ＰｏｌｇＤ２５７Ａモデルはまた、ミトコンドリア機能障害に関連する疾患又は障害の処置における、開示されたＰＫ活性化剤の使用を支持する。赤血球はミトコンドリアを欠くが、造血の過程で後期に保持される。したがって、赤血球生成及びヘモグロビン産生の増加に対するＰＫ活性化剤の効果は、血液細胞前駆幹細胞におけるＰＫ活性化の結果である。ＰｏｌｇＤ２５７Ａモデルは、プルーフリーディング欠損ミトコンドリアＤＮＡポリメラーゼを有し、造血幹細胞（ＨＳＣ）分化に拡張効果を有する（Ｃｅｌｌ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｖｏｌｕｍｅ ８，Ｉｓｓｕｅ ５，６ Ｍａｙ ２０１１，Ｐａｇｅｓ ４９９－５１０を参照されたい）。急速に蓄積するミトコンドリアＤＮＡ変異の結果は、前駆幹細胞分化及び下流前駆細胞の喪失を引き起こす。これらの欠損は、機能障害のミトコンドリアからのＡＴＰ生成の減少に起因する可能性が高い。ＨＳＣは、分化中にＰＫＲ及びＰＫＭ２の両方を発現し、開示されたＰＫ活性化剤は、両方のアイソザイムの機能を増強するため、糖分解経路からのＡＴＰ生成の増加は、ミトコンドリア機能障害を有する細胞におけるＡＴＰ生成の損失を補償する。ＰＫ活性化剤によって示されたＨＳＣ多系列幹細胞分化の改善は、ＰＫ活性化剤が、ミトコンドリア機能が損なわれる可能性のある患者における体細胞幹細胞分化をサポートする潜在的な機会を指摘する。
【0074】
実施例４：ＮＨＤ１３マウスモデル
ＮＵＰ９８－ＨＯＸＤ１３（ＮＨＤ１３）トランスジェニックＭＤＳ関連マウスモデルも、開示された化合物の治療上の利益を評価するために使用される。例えば、Ｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ ２００５ Ｊｕｌ １；１０６（１）：２８７－９５及びＳｕｒａｇａｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｍｅｄ ２０１４ Ａｐｒ；２０（４）：４０８－１４を参照されたい。４又は１０ヶ月齢の雄及び雌のＮＨＤ１３マウスに、固形飼料中の開示されている化合物を、適宜（例えば、ミタピバット又は化合物１）で毎日投与する。全血パネル及び赤血球前駆体解析は、２ヶ月の処置後に実施し、結果を解析する。
ＮＵＰ９８－ＨＯＸＤ１３（ＮＨＤ１３）トランスジェニックＭＤＳ関連マウスモデルも、開示された化合物の治療上の利益を評価するために使用される。例えば、Ｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ ２００５ Ｊｕｌ １；１０６（１）：２８７－９５及びＳｕｒａｇａｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｍｅｄ ２０１４ Ａｐｒ；２０（４）：４０８－１４を参照されたい。４又は１０ヶ月齢の雄及び雌のＮＨＤ１３マウスに、固形飼料中の開示されている化合物を、適宜（例えば、ミタピバット又は化合物１）で毎日投与する。全血パネル及び赤血球前駆体解析は、２ヶ月の処置後に実施し、結果を解析する。
【0075】
開示されたＰＫＲ活性化剤が、ＭＤＳ（例えば、非常に低リスク、低リスク及び中等度リスクＭＤＳ）に翻訳すると予想され得る無効な赤血球生成に対する効果に関するエビデンスは、無効な赤血球生成の特徴がサラセミアとＭＤＳとの間で類似していること、ＰＫＲ活性化剤は骨髄中の赤血球系細胞の生存及び分化を改善することができること、並びにＰＫＲ活性化剤は、糖解を活性化することを介してエネルギーＡＴＰ、ヌクレオチド生合成、及び抗酸化ストレス応答を増加させることを介してＲＢＣ機能を改善することを含む。提案されたヒト臨床研究を図３に示す。
【0076】
実施例５：ＮＨＤ１３マウスモデル（４ヶ月齢）におけるミタピバット又は化合物１の研究
実施例４を使用して、４ヶ月齢の２０匹のＮＨＤ１３マウス（１群当たり１０匹の雄及び１０匹の雌；ＲＲＩＤ：ＩＭＳＲ＿ＪＡＸ：０１０５０５）を、ヘモグロビンレベルの一致した分布を使用して処置群に無作為化した。マウスに、ミタピバット又は化合物１のいずれかを、実施例３と同様の方法（固形飼料、適宜）で２０週間投与した。ミタピバット又は化合物１のいずれかによる２０週間の処置の後、ＮＨＤ１３マウスの骨髄穿刺液を上記のように収集し、フローサイトメトリーによって分析した。骨髄中の赤芽球集団の評価からの結果は、野生型からの赤芽球集団とＮＨＤ１３ビヒクル対照マウスとの間にほとんど差を示さなかった。加えて、以前に報告されたような、ビヒクル対照ＮＨＤ１３マウスの生存における有意な低下は観察されなかった（Ｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｏｐｌａｓｉａ ２００５ Ｊｕｌｙ；１０６（１））。総合すると、このデータは、ＮＨＤ１３モデルが、文献に記載されているよりも軽度の形態の疾患を生じさせ、処置効果の評価を複雑にしたことを示唆している。その結果、フローサイトメトリーデータ（図７Ａ～Ｄ）において、ミタピバット又は化合物１のいずれかの投与からの治療上の利益を検出することは困難であった。この軽度の疾患状態は、全血分析においても支持された。９ヶ月齢で、標準固形飼料（ビヒクル対照）上のＮＨＤ１３マウスは、野生型対照よりも４ｇ／ｄＬのみ低い１０．４ｇ／ｄＬの平均ヘモグロビンレベルを有した。ＮＨＤ１３マウスにおける処置の効果を評価したところ、ミタピバット及び化合物１の両方が、網状赤血球画分の有意な減少（２０％）を示した。（図８Ｃ）ミタピバット又は化合物１による処置も、網状赤血球数の有意な減少を示した（ミタピバットが１５％、化合物１が２５％）。データは図示しない。これらのデータは、処置によるＮＨＤ１３マウスの赤血球生成の改善を示すが、しかしながら、ビヒクル対照による進行性貧血と比較して、Ｈｂ又はＲＢＣカウントにおける最小応答が観察された（図８Ａ～Ｂ）。
実施例４を使用して、４ヶ月齢の２０匹のＮＨＤ１３マウス（１群当たり１０匹の雄及び１０匹の雌；ＲＲＩＤ：ＩＭＳＲ＿ＪＡＸ：０１０５０５）を、ヘモグロビンレベルの一致した分布を使用して処置群に無作為化した。マウスに、ミタピバット又は化合物１のいずれかを、実施例３と同様の方法（固形飼料、適宜）で２０週間投与した。ミタピバット又は化合物１のいずれかによる２０週間の処置の後、ＮＨＤ１３マウスの骨髄穿刺液を上記のように収集し、フローサイトメトリーによって分析した。骨髄中の赤芽球集団の評価からの結果は、野生型からの赤芽球集団とＮＨＤ１３ビヒクル対照マウスとの間にほとんど差を示さなかった。加えて、以前に報告されたような、ビヒクル対照ＮＨＤ１３マウスの生存における有意な低下は観察されなかった（Ｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｏｐｌａｓｉａ ２００５ Ｊｕｌｙ；１０６（１））。総合すると、このデータは、ＮＨＤ１３モデルが、文献に記載されているよりも軽度の形態の疾患を生じさせ、処置効果の評価を複雑にしたことを示唆している。その結果、フローサイトメトリーデータ（図７Ａ～Ｄ）において、ミタピバット又は化合物１のいずれかの投与からの治療上の利益を検出することは困難であった。この軽度の疾患状態は、全血分析においても支持された。９ヶ月齢で、標準固形飼料（ビヒクル対照）上のＮＨＤ１３マウスは、野生型対照よりも４ｇ／ｄＬのみ低い１０．４ｇ／ｄＬの平均ヘモグロビンレベルを有した。ＮＨＤ１３マウスにおける処置の効果を評価したところ、ミタピバット及び化合物１の両方が、網状赤血球画分の有意な減少（２０％）を示した。（図８Ｃ）ミタピバット又は化合物１による処置も、網状赤血球数の有意な減少を示した（ミタピバットが１５％、化合物１が２５％）。データは図示しない。これらのデータは、処置によるＮＨＤ１３マウスの赤血球生成の改善を示すが、しかしながら、ビヒクル対照による進行性貧血と比較して、Ｈｂ又はＲＢＣカウントにおける最小応答が観察された（図８Ａ～Ｂ）。
【0077】
実施例６：ＮＨＤ１３マウスモデル（１０ヶ月齢）におけるミタピバット又は化合物１の研究
１０ヶ月齢のＮＨＤ１３マウスでの第２の実験は、実施例５に記載されるように、疾患負荷がより進行し、骨髄においてフローサイトメトリーによって検出可能であることを期待して実施することもできる。この研究のために、ＮＨＤ１３マウスは、１０ヶ月齢でのヘモグロビンレベルの一致した分布を使用して、処置群当たり２０匹のマウス（１０匹の雄及び１０匹の雌）に無作為化することができる。実施例５に記載されるように、ミタピバット及び／又は化合物１のいずれかを、適宜与えられた固形飼料にて８週間投与することができる。ヘモグロビン、赤血球数、及び網状赤血球画分を、４週間ごとにモニタリングすることができる。骨髄フローサイトメトリー分析を含む末端収集は、１２ヶ月齢で生じることができる。
１０ヶ月齢のＮＨＤ１３マウスでの第２の実験は、実施例５に記載されるように、疾患負荷がより進行し、骨髄においてフローサイトメトリーによって検出可能であることを期待して実施することもできる。この研究のために、ＮＨＤ１３マウスは、１０ヶ月齢でのヘモグロビンレベルの一致した分布を使用して、処置群当たり２０匹のマウス（１０匹の雄及び１０匹の雌）に無作為化することができる。実施例５に記載されるように、ミタピバット及び／又は化合物１のいずれかを、適宜与えられた固形飼料にて８週間投与することができる。ヘモグロビン、赤血球数、及び網状赤血球画分を、４週間ごとにモニタリングすることができる。骨髄フローサイトメトリー分析を含む末端収集は、１２ヶ月齢で生じることができる。
【0078】
第２ａ／２ｂ相、低リスク骨髄異形成症候群による貧血を有する対象における２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オンの研究
低リスク骨髄異形成症候群（ＬＲ－ＭＤＳ）に起因する貧血を有する対象における、２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オン（本明細書では、化合物１と称される）の有効性及び安全性を評価する第２ａ／２ｂ相多施設研究を実施する。
低リスク骨髄異形成症候群（ＬＲ－ＭＤＳ）に起因する貧血を有する対象における、２－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）－６－（（６－アミノピリジン－２－イル）メチル）－４－メチル－４Ｈ－チアゾロ［５’，４’：４，５］ピロロ［２，３－ｄ］ピリダジン－５（６Ｈ）－オン（本明細書では、化合物１と称される）の有効性及び安全性を評価する第２ａ／２ｂ相多施設研究を実施する。
【0079】
研究設計
研究の第２ａ相部分は、ＬＲ－ＭＤＳにおける化合物１の概念実証を確立するために、化合物１の１用量レベル（５ｍｇを１日当たり１回［ＱＤ］）の単一アーム評価である。適格な対象は、１６週間のコア期間の経口投与のために化合物１を受け入れる。１６週間のコア期間を完了した対象は、延長期間中に最大１５６週間、同じ用量の化合物１を継続して受け入れる資格がある。第２ａ相研究設計の概要を図４に示す。
研究の第２ａ相部分は、ＬＲ－ＭＤＳにおける化合物１の概念実証を確立するために、化合物１の１用量レベル（５ｍｇを１日当たり１回［ＱＤ］）の単一アーム評価である。適格な対象は、１６週間のコア期間の経口投与のために化合物１を受け入れる。１６週間のコア期間を完了した対象は、延長期間中に最大１５６週間、同じ用量の化合物１を継続して受け入れる資格がある。第２ａ相研究設計の概要を図４に示す。
【0080】
研究の第２ｂ相部分は、プラセボと比較した化合物１（２ｍｇ ＱＤ、３ｍｇ ＱＤ、及び５ｍｇ ＱＤ）の有効性及び安全性の二重盲検無作為化プラセボ対照評価である。研究の第２ｂ相部分の開始は、事前に指定されたＧＯ／ＮＯ－ＧＯ基準に基づいて行われる。適格な対象は、２ｍｇ ＱＤの化合物１（用量レベル１）、３ｍｇの化合物１（用量レベル２）、５ｍｇ ＱＤの化合物１（用量レベル３）、又はＱＤ経口投与のためのマッチドプラセボを受けるために、１：１：１：１の比で無作為化される。２４週間の二重盲検期間を完了した対象は、延長期間中最大１５６週間、化合物１を受け入れる資格がある。無作為化は、ベースライン輸血負荷（低輸血負荷［ＮＴＤである対象及びＬＴＢを有する対象］、高輸血負荷（ＨＴＢ））によって階層化される。第２ｂ相研究設計の概要を図５に示す。
【0081】
第２ｂ相の延長期間中、全ての対象は化合物１を受け入れる。二重盲検期間中にプラセボを受け入れた対象は、２ｍｇ ＱＤの化合物１（用量レベル１）、３ｍｇ ＱＤの化合物１（用量レベル２）、又は５ｍｇ ＱＤの化合物１（用量レベル３）を投与され、これらの複数用量の化合物１の長期的な安全性及び有効性の評価を可能にするために、１：１：１に無作為化される。二重盲検期間中に化合物１を受け入れた対象は、同じ用量の化合物１を継続して受け入れる資格がある。
【0082】
組み入れ基準
以下の全ての基準が適用される場合、対象は、研究の第２ａ相部分に含まれる資格がある。
１．インフォームドコンセントを提供した時点で少なくとも１８歳。
２．スクリーニング期間中の参加者の骨髄生検／吸引物によって決定される、低リスク疾患（リスクスコア：３．５以下）及び５％未満の芽球のＩＰＳＳ－Ｒ分類を満たす、世界保健機関（ＷＨＯ）分類によるＭＤＳの文書化された診断。
３．改訂されたＩＷＧ２０１８基準に従って、参加者の医療記録にある輸血履歴に基づいて、非輸血又はＬＴＢ：ａ．ＮＴＤ：研究薬の第１の用量の投与前の１６週間における３個未満のＲＢＣ単位、及び研究薬の第１の用量の投与前の８週間において輸血なし、又はｂ．ＬＴＢ：研究薬の第１の用量の投与前の１６週間の期間における３～７個のＲＢＣ単位、及び研究薬の第１の用量の投与前の８週間の期間において４個未満のＲＢＣ単位。
４．４週間のスクリーニング期間中、Ｈｂ濃度＜１１．０ｇ／ｄＬ。
５．０、１、又は２のＥａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータススコア。
６．鉄キレート療法を受ける場合、鉄キレート療法の用量は安定しており、研究薬の最初の用量の投与の５６日以上前に開始されていなければならない。
７．妊娠可能性のある女性（ＷＯＣＢＰ）及びＷＯＣＢＰであるパートナーを持つ男性は、通常のライフスタイルの一部として妊娠につながる可能性のある性行為を控えるか、２種類の避妊方法を使用することに同意しなければならず、そのうちの１つは、インフォームドコンセントを提供した時点から、研究を通して、女性の研究薬の最後の投与後２８日間、及び男性の研究薬の最後の投与後９０日間、非常に有効であるとみなされなければならない。第２の形態の避妊は、許容されるバリア法であり得る。
８．研究関連の手順が実施される前に、参加者からの書面によるインフォームドコンセントが行われ、研究期間中、全ての研究手順を順守する意思がある。
以下の全ての基準が適用される場合、対象は、研究の第２ａ相部分に含まれる資格がある。
１．インフォームドコンセントを提供した時点で少なくとも１８歳。
２．スクリーニング期間中の参加者の骨髄生検／吸引物によって決定される、低リスク疾患（リスクスコア：３．５以下）及び５％未満の芽球のＩＰＳＳ－Ｒ分類を満たす、世界保健機関（ＷＨＯ）分類によるＭＤＳの文書化された診断。
３．改訂されたＩＷＧ２０１８基準に従って、参加者の医療記録にある輸血履歴に基づいて、非輸血又はＬＴＢ：ａ．ＮＴＤ：研究薬の第１の用量の投与前の１６週間における３個未満のＲＢＣ単位、及び研究薬の第１の用量の投与前の８週間において輸血なし、又はｂ．ＬＴＢ：研究薬の第１の用量の投与前の１６週間の期間における３～７個のＲＢＣ単位、及び研究薬の第１の用量の投与前の８週間の期間において４個未満のＲＢＣ単位。
４．４週間のスクリーニング期間中、Ｈｂ濃度＜１１．０ｇ／ｄＬ。
５．０、１、又は２のＥａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータススコア。
６．鉄キレート療法を受ける場合、鉄キレート療法の用量は安定しており、研究薬の最初の用量の投与の５６日以上前に開始されていなければならない。
７．妊娠可能性のある女性（ＷＯＣＢＰ）及びＷＯＣＢＰであるパートナーを持つ男性は、通常のライフスタイルの一部として妊娠につながる可能性のある性行為を控えるか、２種類の避妊方法を使用することに同意しなければならず、そのうちの１つは、インフォームドコンセントを提供した時点から、研究を通して、女性の研究薬の最後の投与後２８日間、及び男性の研究薬の最後の投与後９０日間、非常に有効であるとみなされなければならない。第２の形態の避妊は、許容されるバリア法であり得る。
８．研究関連の手順が実施される前に、参加者からの書面によるインフォームドコンセントが行われ、研究期間中、全ての研究手順を順守する意思がある。
【0083】
以下の全ての基準が適用される場合、対象は、研究の第２ｂ相部分に含まれる資格がある。
１．インフォームドコンセントを提供した時点で少なくとも１８歳。
２．スクリーニング期間中の参加者の骨髄生検／吸引物によって決定される、低リスク疾患（リスクスコア：３．５以下）及び５％未満の芽球のＩＰＳＳ－Ｒ分類を満たす、ＷＨＯ分類によるＭＤＳの文書化された診断。
３．改訂されたＩＷＧ２０１８基準に従って、参加者の医療記録にある輸血履歴に基づいて、非輸血、ＬＴＢを有するか、ＨＴＢを有する：ａ．ＮＴＤ：無作為化前の１６週間における３個未満のＲＢＣ単位、及び無作為化前の８週間において輸血なし、又はｂ．ＬＴＢ：無作為化前の１６週間における３～７個のＲＢＣ単位、及び無作為化前の８週間における４個未満のＲＢＣ単位、又はｃ．ＨＴＢ：無作為化前の１６週間における８個以上のＲＢＣ単位、及び無作為化前の８週間における４個以上のＲＢＣ単位。
４．４週間のスクリーニング期間中のＨｂ濃度＜１１．０ｇ／ｄＬ。
５．赤血球生成刺激剤（ＥＳＡ）（例えば、エリスロポエチン［ＥＰＯ］、ＥＰＯ＋顆粒球コロニー刺激因子［Ｇ－ＣＳＦ］）及び／又はルスパテルセプト（ｌｕｓｐａｔｅｒｃｅｐｔ）を含む、最大２つの以前の治療。
６．ＥＣＯＧパフォーマンスステータススコアは、０、１、又は２である。
７．鉄キレート療法を受ける場合、鉄キレート療法の用量は安定しており、無作為化の５６日以上前に開始されていなければならない。
８．ＷＯＣＢＰ及びＷＯＣＢＰであるパートナーを持つ男性は、通常のライフスタイルの一部として妊娠につながる可能性のある性行為を控えるか、２種類の避妊方法を使用することに同意しなければならず、そのうちの１つは、インフォームドコンセントを提供した時点から、研究を通して、女性の研究薬の最後の投与後２８日間、及び男性の研究薬の最後の投与後９０日間、非常に有効であるとみなされなければならない。第２の形態の避妊は、許容されるバリア法であり得る。
９．研究関連の手順が実施される前に、参加者からの書面によるインフォームドコンセントが行われ、研究期間中、全ての研究手順を順守する意思がある
１．インフォームドコンセントを提供した時点で少なくとも１８歳。
２．スクリーニング期間中の参加者の骨髄生検／吸引物によって決定される、低リスク疾患（リスクスコア：３．５以下）及び５％未満の芽球のＩＰＳＳ－Ｒ分類を満たす、ＷＨＯ分類によるＭＤＳの文書化された診断。
３．改訂されたＩＷＧ２０１８基準に従って、参加者の医療記録にある輸血履歴に基づいて、非輸血、ＬＴＢを有するか、ＨＴＢを有する：ａ．ＮＴＤ：無作為化前の１６週間における３個未満のＲＢＣ単位、及び無作為化前の８週間において輸血なし、又はｂ．ＬＴＢ：無作為化前の１６週間における３～７個のＲＢＣ単位、及び無作為化前の８週間における４個未満のＲＢＣ単位、又はｃ．ＨＴＢ：無作為化前の１６週間における８個以上のＲＢＣ単位、及び無作為化前の８週間における４個以上のＲＢＣ単位。
４．４週間のスクリーニング期間中のＨｂ濃度＜１１．０ｇ／ｄＬ。
５．赤血球生成刺激剤（ＥＳＡ）（例えば、エリスロポエチン［ＥＰＯ］、ＥＰＯ＋顆粒球コロニー刺激因子［Ｇ－ＣＳＦ］）及び／又はルスパテルセプト（ｌｕｓｐａｔｅｒｃｅｐｔ）を含む、最大２つの以前の治療。
６．ＥＣＯＧパフォーマンスステータススコアは、０、１、又は２である。
７．鉄キレート療法を受ける場合、鉄キレート療法の用量は安定しており、無作為化の５６日以上前に開始されていなければならない。
８．ＷＯＣＢＰ及びＷＯＣＢＰであるパートナーを持つ男性は、通常のライフスタイルの一部として妊娠につながる可能性のある性行為を控えるか、２種類の避妊方法を使用することに同意しなければならず、そのうちの１つは、インフォームドコンセントを提供した時点から、研究を通して、女性の研究薬の最後の投与後２８日間、及び男性の研究薬の最後の投与後９０日間、非常に有効であるとみなされなければならない。第２の形態の避妊は、許容されるバリア法であり得る。
９．研究関連の手順が実施される前に、参加者からの書面によるインフォームドコンセントが行われ、研究期間中、全ての研究手順を順守する意思がある
【0084】
除外基準
以下の基準のうちのいずれかが当てはまる場合、対象は研究の第２ａ相部分から除外される。
１．急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の既知の病歴。
２．化学傷害又は化学療法による処置及び／又は他の疾患のための放射線療法の結果として生じたことが知られているＭＤＳとして定義される、二次性ＭＤＳ。
３．ピルビン酸キナーゼ活性化剤への事前曝露、高リスクＭＤＳ（低メチル化剤［ＨＭＡ］、イソクエン酸デヒドロゲナーゼ［ＩＤＨ］阻害剤、又は同種若しくは自己幹細胞移植）、及び／又は疾患修飾剤（例えば、レナリドマイドなどの免疫調節薬）のために投与される処置。参加者が、研究薬の第１の用量の投与の８週間以上前に疾患修飾剤による１週間以下の処置を受けた場合、治験責任医師の裁量により、それらを除外しないことがある。
４．現在、ルスパテルセプト、ＥＰＯ、又はＧ－ＣＳＦによる処置を受けている。ＥＰＯ又はＧ－ＣＳＦによる処置は、研究薬の初回投与前に２８日以上中止していなければならず、ルスパテルセプトによる処置は、研究薬の初回投与前に６５日以上中止していなければならない。
５．以下を含むが、これらに限定されない、インフォームドコンセントを提供する前の６ヶ月以内の活動性及び／又は制御されていない心臓又は肺疾患の病歴：
ａ．ニューヨーク心臓協会クラスＩＩＩ又はＩＶ心不全、又は臨床的に有意な不整脈
ｂ．心筋梗塞、不安定狭心症、又は不安定高血圧、高リスク血栓症、出血性、塞栓性、又は血栓性脳卒中、深部静脈血栓症、又は肺又は動脈塞栓症
ｃ．右又は左バンドル分岐ブロックを除いて、女性対象では４７０ミリ秒以上、男性対象では４５０ミリ秒以上のＦｒｉｄｅｒｉｃｉａの方法を使用する心拍数補正ＱＴ間隔
ｄ．重度の低酸素症、右側心不全の証拠、及び５０％を超える放射線肺線維症で定義される重度の肺線維症
ｅ．低酸素症、右側の心不全、及び酸素に関連する重篤な症状によって定義される重度の肺高血圧
６．以下によって定義される肝胆道障害の病歴：
ａ．血清ＡＳＴ＞２．５×正常上限（ＵＬＮ）（溶血及び／又は肝臓の鉄沈着による場合を除く）及びＡＬＴ＞２．５×ＵＬＮ（肝臓の鉄沈着による場合を除く）
ｂ．上昇が、臨床的に症状のある胆管結石症、胆嚢炎、胆道閉塞、又は肝細胞疾患に関連している場合に、血清ビリルビン＞ＵＬＮ
７．４５ｍＬ／分未満の推定糸球体濾過速度（ｅＧＦＲ）によって定義されるような、腎機能障害。
８．インフォームドコンセントの提供時に全身抗菌療法を必要とする活動性感染症。スクリーニング期間中に抗菌療法が必要な場合、抗菌療法の投与中はスクリーニング手順を実行すべきではなく、最終用量の抗菌療法は、研究薬の最初の用量の投与の７日以上前に投与する必要がある。
９．研究薬の第１の用量の投与前の１２週間以内の大手術。対象は、研究薬の第１の用量の投与前に、いずれの以前の手術からも完全に回復していなければならない。
１０．インサイツの上皮内非黒色腫性皮膚がん、インサイツの上皮内子宮頸がん、又はインサイツの上皮内乳がんを除く、任意の悪性腫瘍の病歴。対象は、インフォームドコンセントを提供する前に、活動性疾患を有していないか、又は５年以下の抗がん処置を受けていなければならない。
１１．活性ＨＣＶ感染のエビデンスを有するＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）抗体（Ａｂ）の陽性試験、又はＢ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）の陽性試験。
１２．ＨＩＶ－１ Ａｂ又はＨＩＶ－２ Ａｂの陽性試験。
１３．絶対好中球数（ＡＮＣ）＜５００／μＬ（０．５×１０９／Ｌ）。
１４．スクリーニング前の２８日以内に血小板輸血なしで評価された血小板数≦７５，０００／μＬ（７５×１０９／Ｌ）。
１５．非空腹時トリグリセリド濃度＞５００ｍｇ／ｄＬ。
１６．研究薬の第１の用量の投与前に、５日以上、又は５個の半減期（いずれか長いほう）に相当する時間枠で中止していないＰ－糖タンパク質（Ｐ－ｇｐ）の阻害剤を受け入れること。
１７．治験の処置又はデバイスを含む任意の他の臨床研究における、現在の登録又は過去の参加（研究薬の第１の用量の投与前の治験研究薬の４週間以内又は５つの半減期に相当する時間枠内、又はいずれか長いほう）。
１８．化合物１又はその賦形剤（ケイ化微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、ステアリルフマル酸ナトリウム、及びＯｐａｄｒｙ（登録商標）ＩＩブルーフィルムコート［ポリビニルアルコール、二酸化チタン、マクロゴール／ポリエチレングリコール、タルク、ＦＤ＆Ｃブルー＃２／インディゴカルミンアルミニウムレーキ／Ｅ１３２］）に対する既知のアレルギー。
１９．妊娠中又は授乳中。
２０．治験責任医師の見解において、臨床研究への参加に許容できないリスクを与える可能性がある、及び／又は臨床研究データの解釈を混乱させる可能性のある、医学的、血液学的、心理学的、若しくは行動的状態、又は以前若しくは現在の治療。
以下の基準のうちのいずれかが当てはまる場合、対象は研究の第２ａ相部分から除外される。
１．急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の既知の病歴。
２．化学傷害又は化学療法による処置及び／又は他の疾患のための放射線療法の結果として生じたことが知られているＭＤＳとして定義される、二次性ＭＤＳ。
３．ピルビン酸キナーゼ活性化剤への事前曝露、高リスクＭＤＳ（低メチル化剤［ＨＭＡ］、イソクエン酸デヒドロゲナーゼ［ＩＤＨ］阻害剤、又は同種若しくは自己幹細胞移植）、及び／又は疾患修飾剤（例えば、レナリドマイドなどの免疫調節薬）のために投与される処置。参加者が、研究薬の第１の用量の投与の８週間以上前に疾患修飾剤による１週間以下の処置を受けた場合、治験責任医師の裁量により、それらを除外しないことがある。
４．現在、ルスパテルセプト、ＥＰＯ、又はＧ－ＣＳＦによる処置を受けている。ＥＰＯ又はＧ－ＣＳＦによる処置は、研究薬の初回投与前に２８日以上中止していなければならず、ルスパテルセプトによる処置は、研究薬の初回投与前に６５日以上中止していなければならない。
５．以下を含むが、これらに限定されない、インフォームドコンセントを提供する前の６ヶ月以内の活動性及び／又は制御されていない心臓又は肺疾患の病歴：
ａ．ニューヨーク心臓協会クラスＩＩＩ又はＩＶ心不全、又は臨床的に有意な不整脈
ｂ．心筋梗塞、不安定狭心症、又は不安定高血圧、高リスク血栓症、出血性、塞栓性、又は血栓性脳卒中、深部静脈血栓症、又は肺又は動脈塞栓症
ｃ．右又は左バンドル分岐ブロックを除いて、女性対象では４７０ミリ秒以上、男性対象では４５０ミリ秒以上のＦｒｉｄｅｒｉｃｉａの方法を使用する心拍数補正ＱＴ間隔
ｄ．重度の低酸素症、右側心不全の証拠、及び５０％を超える放射線肺線維症で定義される重度の肺線維症
ｅ．低酸素症、右側の心不全、及び酸素に関連する重篤な症状によって定義される重度の肺高血圧
６．以下によって定義される肝胆道障害の病歴：
ａ．血清ＡＳＴ＞２．５×正常上限（ＵＬＮ）（溶血及び／又は肝臓の鉄沈着による場合を除く）及びＡＬＴ＞２．５×ＵＬＮ（肝臓の鉄沈着による場合を除く）
ｂ．上昇が、臨床的に症状のある胆管結石症、胆嚢炎、胆道閉塞、又は肝細胞疾患に関連している場合に、血清ビリルビン＞ＵＬＮ
７．４５ｍＬ／分未満の推定糸球体濾過速度（ｅＧＦＲ）によって定義されるような、腎機能障害。
８．インフォームドコンセントの提供時に全身抗菌療法を必要とする活動性感染症。スクリーニング期間中に抗菌療法が必要な場合、抗菌療法の投与中はスクリーニング手順を実行すべきではなく、最終用量の抗菌療法は、研究薬の最初の用量の投与の７日以上前に投与する必要がある。
９．研究薬の第１の用量の投与前の１２週間以内の大手術。対象は、研究薬の第１の用量の投与前に、いずれの以前の手術からも完全に回復していなければならない。
１０．インサイツの上皮内非黒色腫性皮膚がん、インサイツの上皮内子宮頸がん、又はインサイツの上皮内乳がんを除く、任意の悪性腫瘍の病歴。対象は、インフォームドコンセントを提供する前に、活動性疾患を有していないか、又は５年以下の抗がん処置を受けていなければならない。
１１．活性ＨＣＶ感染のエビデンスを有するＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）抗体（Ａｂ）の陽性試験、又はＢ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）の陽性試験。
１２．ＨＩＶ－１ Ａｂ又はＨＩＶ－２ Ａｂの陽性試験。
１３．絶対好中球数（ＡＮＣ）＜５００／μＬ（０．５×１０９／Ｌ）。
１４．スクリーニング前の２８日以内に血小板輸血なしで評価された血小板数≦７５，０００／μＬ（７５×１０９／Ｌ）。
１５．非空腹時トリグリセリド濃度＞５００ｍｇ／ｄＬ。
１６．研究薬の第１の用量の投与前に、５日以上、又は５個の半減期（いずれか長いほう）に相当する時間枠で中止していないＰ－糖タンパク質（Ｐ－ｇｐ）の阻害剤を受け入れること。
１７．治験の処置又はデバイスを含む任意の他の臨床研究における、現在の登録又は過去の参加（研究薬の第１の用量の投与前の治験研究薬の４週間以内又は５つの半減期に相当する時間枠内、又はいずれか長いほう）。
１８．化合物１又はその賦形剤（ケイ化微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、ステアリルフマル酸ナトリウム、及びＯｐａｄｒｙ（登録商標）ＩＩブルーフィルムコート［ポリビニルアルコール、二酸化チタン、マクロゴール／ポリエチレングリコール、タルク、ＦＤ＆Ｃブルー＃２／インディゴカルミンアルミニウムレーキ／Ｅ１３２］）に対する既知のアレルギー。
１９．妊娠中又は授乳中。
２０．治験責任医師の見解において、臨床研究への参加に許容できないリスクを与える可能性がある、及び／又は臨床研究データの解釈を混乱させる可能性のある、医学的、血液学的、心理学的、若しくは行動的状態、又は以前若しくは現在の治療。
【0085】
以下の基準のうちのいずれかが当てはまる場合、対象は研究の第２ｂ相部分から除外される。
１．ＡＭＬの既知の病歴。
２．化学傷害又は化学療法による処置及び／又は他の疾患のための放射線療法の結果として生じたことが知られているＭＤＳとして定義される、二次性ＭＤＳ。
３．本研究の第２ａ相部分における化合物１への曝露、高リスクＭＤＳ（ＨＭＡ、ＩＤＨ阻害剤、又は同種若しくは自己幹細胞移植）のために投与される処置、及び／又は疾患修飾剤（例えば、レナリドマイドなどの免疫調節薬）を含む、ピルビン酸キナーゼ活性化剤への事前曝露。参加者が無作為化の８週間以上前に疾患修飾剤による１週間以下の処置を受けた場合、治験責任医師の裁量により、それらを除外しないことがある。
４．現在、ルスパテルセプト、ＥＰＯ、又はＧ－ＣＳＦによる処置を受けている。ＥＰＯ又はＧ－ＣＳＦによる処置は、研究薬の初回投与前に２８日以上中止されていなければならず、ルスパテルセプトによる処置は、無作為化前に６５日以上中止されていなければならない。
５．以下を含むが、これらに限定されない、インフォームドコンセントを提供する前の６ヶ月以内の活動性及び／又は制御されていない心臓又は肺疾患の病歴：
ａ．ニューヨーク心臓協会クラスＩＩＩ又はＩＶ心不全、又は臨床的に有意な不整脈
ｂ．心筋梗塞、不安定狭心症、又は不安定高血圧、高リスク血栓症、出血性、塞栓性、又は血栓性脳卒中、深部静脈血栓症、又は肺又は動脈塞栓症
ｃ．右又は左バンドル分岐ブロックを除いて、女性対象では４７０ミリ秒以上、男性対象では４５０ミリ秒以上のＦｒｉｄｅｒｉｃｉａの方法を使用する心拍数補正ＱＴ間隔
ｄ．重度の低酸素症、右側心不全の証拠、及び５０％を超える放射線肺線維症で定義される重度の肺線維症
ｅ．低酸素症、右側の心不全、及び酸素に関連する重篤な症状によって定義される重度の肺高血圧
６．以下によって定義される肝胆道障害の病歴：
ａ．血清ＡＳＴ＞２．５×ＵＬＮ（溶血及び／又は肝臓の鉄沈着による場合を除く）及びＡＬＴ＞２．５×ＵＬＮ（肝臓の鉄沈着による場合を除く）
ｂ．上昇が、臨床的に症状のある胆管結石症、胆嚢炎、胆道閉塞、又は肝細胞疾患に関連している場合に、血清ビリルビン＞ＵＬＮ
７．４５ｍＬ／分未満のｅＧＦＲによって定義されるような、腎機能障害
８．インフォームドコンセントの提供時に全身抗菌療法を必要とする活動性感染症。スクリーニング期間中に抗菌療法が必要な場合、抗菌療法の投与中はスクリーニング手順を実行すべきではなく、最終用量の抗菌療法は、無作為化の７日以上前に投与する必要がある。
９．無作為化前１２週間以内の大手術。対象は、無作為化の前に、以前の手術から完全に回復していなければならない。
１０．インサイツの上皮内非黒色腫性皮膚がん、インサイツの上皮内子宮頸がん、又はインサイツの上皮内乳がんを除く、任意の悪性腫瘍の病歴。対象は、インフォームドコンセントを提供する前に、活動性疾患を有していないか、又は５年以下の抗がん処置を受けていなければならない。
１１．活性ＨＣＶ感染のエビデンスを有するＨＣＶ Ａｂの陽性試験、又はＨＢｓＡｇの陽性試験。
１２．ＨＩＶ－１ Ａｂ又はＨＩＶ－２ Ａｂの陽性試験。
１３．ＡＮＣ＜５００／μＬ（０．５×１０９／Ｌ）。
１４．スクリーニング前の２８日以内に血小板輸血なしで評価された血小板数＜５０，０００／μＬ（５０×１０９／Ｌ）。
１５．非空腹時トリグリセリド濃度＞５００ｍｇ／ｄＬ。
１６．無作為化前に５日以上又は５つの半減期（いずれか長いほう）に相当する時間枠で中止していないＰ－ｇｐの阻害剤を受け入れること。
１７．治験の処置又はデバイスを含む任意の他の臨床研究における、現在の登録又は過去の参加（無作為化前の研究薬の４週間以内又は５つの半減期に相当する時間枠内、又はいずれか長いほう）。
１８．プラセボ（ケイ化微結晶セルロース、微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、マンニトール、ステアリルフマル酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、及びＯｐａｄｒｙ（登録商標）ＩＩブルーフィルムコート［ポリビニルアルコール、ヒプロメロース、二酸化チタン、ラクトース一水和物、マクロゴール／ポリエチレングリコール、トリアセチン、タルク、ＦＤ＆Ｃブルー＃２／インディゴカルミンアルミニウムレーキ／Ｅ１３２］）を含む、化合物１又はその賦形剤に対する既知のアレルギー。
１９．妊娠中又は授乳中。
２０．治験責任医師の見解において、臨床研究への参加に許容できないリスクを与える可能性がある、及び／又は臨床研究データの解釈を混乱させる可能性のある、医学的、血液学的、心理学的、若しくは行動的状態、又は以前若しくは現在の治療。
１．ＡＭＬの既知の病歴。
２．化学傷害又は化学療法による処置及び／又は他の疾患のための放射線療法の結果として生じたことが知られているＭＤＳとして定義される、二次性ＭＤＳ。
３．本研究の第２ａ相部分における化合物１への曝露、高リスクＭＤＳ（ＨＭＡ、ＩＤＨ阻害剤、又は同種若しくは自己幹細胞移植）のために投与される処置、及び／又は疾患修飾剤（例えば、レナリドマイドなどの免疫調節薬）を含む、ピルビン酸キナーゼ活性化剤への事前曝露。参加者が無作為化の８週間以上前に疾患修飾剤による１週間以下の処置を受けた場合、治験責任医師の裁量により、それらを除外しないことがある。
４．現在、ルスパテルセプト、ＥＰＯ、又はＧ－ＣＳＦによる処置を受けている。ＥＰＯ又はＧ－ＣＳＦによる処置は、研究薬の初回投与前に２８日以上中止されていなければならず、ルスパテルセプトによる処置は、無作為化前に６５日以上中止されていなければならない。
５．以下を含むが、これらに限定されない、インフォームドコンセントを提供する前の６ヶ月以内の活動性及び／又は制御されていない心臓又は肺疾患の病歴：
ａ．ニューヨーク心臓協会クラスＩＩＩ又はＩＶ心不全、又は臨床的に有意な不整脈
ｂ．心筋梗塞、不安定狭心症、又は不安定高血圧、高リスク血栓症、出血性、塞栓性、又は血栓性脳卒中、深部静脈血栓症、又は肺又は動脈塞栓症
ｃ．右又は左バンドル分岐ブロックを除いて、女性対象では４７０ミリ秒以上、男性対象では４５０ミリ秒以上のＦｒｉｄｅｒｉｃｉａの方法を使用する心拍数補正ＱＴ間隔
ｄ．重度の低酸素症、右側心不全の証拠、及び５０％を超える放射線肺線維症で定義される重度の肺線維症
ｅ．低酸素症、右側の心不全、及び酸素に関連する重篤な症状によって定義される重度の肺高血圧
６．以下によって定義される肝胆道障害の病歴：
ａ．血清ＡＳＴ＞２．５×ＵＬＮ（溶血及び／又は肝臓の鉄沈着による場合を除く）及びＡＬＴ＞２．５×ＵＬＮ（肝臓の鉄沈着による場合を除く）
ｂ．上昇が、臨床的に症状のある胆管結石症、胆嚢炎、胆道閉塞、又は肝細胞疾患に関連している場合に、血清ビリルビン＞ＵＬＮ
７．４５ｍＬ／分未満のｅＧＦＲによって定義されるような、腎機能障害
８．インフォームドコンセントの提供時に全身抗菌療法を必要とする活動性感染症。スクリーニング期間中に抗菌療法が必要な場合、抗菌療法の投与中はスクリーニング手順を実行すべきではなく、最終用量の抗菌療法は、無作為化の７日以上前に投与する必要がある。
９．無作為化前１２週間以内の大手術。対象は、無作為化の前に、以前の手術から完全に回復していなければならない。
１０．インサイツの上皮内非黒色腫性皮膚がん、インサイツの上皮内子宮頸がん、又はインサイツの上皮内乳がんを除く、任意の悪性腫瘍の病歴。対象は、インフォームドコンセントを提供する前に、活動性疾患を有していないか、又は５年以下の抗がん処置を受けていなければならない。
１１．活性ＨＣＶ感染のエビデンスを有するＨＣＶ Ａｂの陽性試験、又はＨＢｓＡｇの陽性試験。
１２．ＨＩＶ－１ Ａｂ又はＨＩＶ－２ Ａｂの陽性試験。
１３．ＡＮＣ＜５００／μＬ（０．５×１０９／Ｌ）。
１４．スクリーニング前の２８日以内に血小板輸血なしで評価された血小板数＜５０，０００／μＬ（５０×１０９／Ｌ）。
１５．非空腹時トリグリセリド濃度＞５００ｍｇ／ｄＬ。
１６．無作為化前に５日以上又は５つの半減期（いずれか長いほう）に相当する時間枠で中止していないＰ－ｇｐの阻害剤を受け入れること。
１７．治験の処置又はデバイスを含む任意の他の臨床研究における、現在の登録又は過去の参加（無作為化前の研究薬の４週間以内又は５つの半減期に相当する時間枠内、又はいずれか長いほう）。
１８．プラセボ（ケイ化微結晶セルロース、微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、マンニトール、ステアリルフマル酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、及びＯｐａｄｒｙ（登録商標）ＩＩブルーフィルムコート［ポリビニルアルコール、ヒプロメロース、二酸化チタン、ラクトース一水和物、マクロゴール／ポリエチレングリコール、トリアセチン、タルク、ＦＤ＆Ｃブルー＃２／インディゴカルミンアルミニウムレーキ／Ｅ１３２］）を含む、化合物１又はその賦形剤に対する既知のアレルギー。
１９．妊娠中又は授乳中。
２０．治験責任医師の見解において、臨床研究への参加に許容できないリスクを与える可能性がある、及び／又は臨床研究データの解釈を混乱させる可能性のある、医学的、血液学的、心理学的、若しくは行動的状態、又は以前若しくは現在の治療。
【0086】
主要評価項目第２ａ相
ヘモグロビン応答
ヘモグロビン応答は、８週から１６週までの平均Ｈｂ濃度のベースラインからの１．５－ｇ／ｄＬ以上の増加として定義される。Ｈｂ応答（Ｈｂ応答率）を達成した対象の割合を要約し、Ｃｌｏｐｐｅｒ－Ｐｅａｒｓｏｎ法を用いた両側９５％の正確ＣＩを計算する。ＲＢＣ輸血後１４日以内に評価されたヘモグロビン濃度は、主要評価項目の分析から除外される。この除外が適用されると、８週から１６週までのいかなるＨｂ濃度評価も有しない対象は、非応答者とみなされる。
ヘモグロビン応答
ヘモグロビン応答は、８週から１６週までの平均Ｈｂ濃度のベースラインからの１．５－ｇ／ｄＬ以上の増加として定義される。Ｈｂ応答（Ｈｂ応答率）を達成した対象の割合を要約し、Ｃｌｏｐｐｅｒ－Ｐｅａｒｓｏｎ法を用いた両側９５％の正確ＣＩを計算する。ＲＢＣ輸血後１４日以内に評価されたヘモグロビン濃度は、主要評価項目の分析から除外される。この除外が適用されると、８週から１６週までのいかなるＨｂ濃度評価も有しない対象は、非応答者とみなされる。
【0087】
輸血非依存性
輸血非依存性は、コア期間中に８週間以上連続して無輸血であると定義される（ＬＴＢを有する対象のみ）。ＴＩ（ＴＩ率）を達成した対象の割合を要約し、Ｃｌｏｐｐｅｒ－Ｐｅａｒｓｏｎ法を用いた両側９５％正確ＣＩを計算する。
輸血非依存性は、コア期間中に８週間以上連続して無輸血であると定義される（ＬＴＢを有する対象のみ）。ＴＩ（ＴＩ率）を達成した対象の割合を要約し、Ｃｌｏｐｐｅｒ－Ｐｅａｒｓｏｎ法を用いた両側９５％正確ＣＩを計算する。
【0088】
副次的評価項目第２ａ相
第２ａ相のための副次的評価項目としては、以下が含まれる。
●コア期間中のＡＥ、ＳＡＥ、ＡＥによる中止、及び検査室異常。
●８週から１６週までの平均Ｈｂ濃度のベースラインからの１．０ｇ／ｄＬ以上の増加として定義される、Ｈｂ１．０＋応答。
●コア期間中のＨｂ濃度のベースラインからの変化。
●８週から１６週までの２つ以上の連続する時点でのＨｂ濃度のベースラインからの１．５－ｇ／ｄＬ以上の増加。
●コア期間中の総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位のベースラインからの変化。
●コア期間中のベースラインと比較して８週間以上連続する間、総輸血ＲＢＣ単位の５０％以上の低下。
●コア期間中の化合物１の血漿濃度及び薬物動態パラメータ。
●コア期間中の２，３－ジホスホグリセリン酸（２，３－ＤＰＧ）及びアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）を含む薬力学パラメータの全血濃度。
第２ａ相のための副次的評価項目としては、以下が含まれる。
●コア期間中のＡＥ、ＳＡＥ、ＡＥによる中止、及び検査室異常。
●８週から１６週までの平均Ｈｂ濃度のベースラインからの１．０ｇ／ｄＬ以上の増加として定義される、Ｈｂ１．０＋応答。
●コア期間中のＨｂ濃度のベースラインからの変化。
●８週から１６週までの２つ以上の連続する時点でのＨｂ濃度のベースラインからの１．５－ｇ／ｄＬ以上の増加。
●コア期間中の総輸血赤血球（ＲＢＣ）単位のベースラインからの変化。
●コア期間中のベースラインと比較して８週間以上連続する間、総輸血ＲＢＣ単位の５０％以上の低下。
●コア期間中の化合物１の血漿濃度及び薬物動態パラメータ。
●コア期間中の２，３－ジホスホグリセリン酸（２，３－ＤＰＧ）及びアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）を含む薬力学パラメータの全血濃度。
【0089】
探索的評価項目第２ａ相
第２ａ相のための探索的評価項目としては、以下を含む。
●コア期間中のヘプシジン、エリスロフェロン、可溶性トランスフェリン受容体、及び成長分化因子１１（ＧＤＦ１１）を含む探索的バイオマーカーのベースラインからの変化。
●コア期間中の鉄、血清フェリチン、総鉄結合能、及びトランスフェリン飽和度のベースラインからの変化。
●コア期間中の絶対及びパーセント網状赤血球、並びにエリスロポエチンを含む、赤血球生成のマーカーのベースラインからの変化。
●コア期間中の赤血球前駆体を含む骨髄由来バイオマーカーのベースラインからの変化。
●コア期間中の間接ビリルビン、乳酸デヒドロゲナーゼ、及びハプトグロビンを含む溶血のマーカーのベースラインからの変化。
●コア期間中のＰＫＲ活性のベースラインからの変化。
●以下における延長期間中のベースラインからの変化：
－総輸血ＲＢＣ単位（ＬＴＢを有する対象のみ）
－Ｈｂ濃度
－鉄代謝のマーカー
－赤血球生成及び溶血のマーカー
－赤血球前駆体を含む骨髄由来バイオマーカー
－探索的バイオマーカー
●延長期間中のＡＥ、ＳＡＥ、ＡＥによる中止、及び検査室異常。
第２ａ相のための探索的評価項目としては、以下を含む。
●コア期間中のヘプシジン、エリスロフェロン、可溶性トランスフェリン受容体、及び成長分化因子１１（ＧＤＦ１１）を含む探索的バイオマーカーのベースラインからの変化。
●コア期間中の鉄、血清フェリチン、総鉄結合能、及びトランスフェリン飽和度のベースラインからの変化。
●コア期間中の絶対及びパーセント網状赤血球、並びにエリスロポエチンを含む、赤血球生成のマーカーのベースラインからの変化。
●コア期間中の赤血球前駆体を含む骨髄由来バイオマーカーのベースラインからの変化。
●コア期間中の間接ビリルビン、乳酸デヒドロゲナーゼ、及びハプトグロビンを含む溶血のマーカーのベースラインからの変化。
●コア期間中のＰＫＲ活性のベースラインからの変化。
●以下における延長期間中のベースラインからの変化：
－総輸血ＲＢＣ単位（ＬＴＢを有する対象のみ）
－Ｈｂ濃度
－鉄代謝のマーカー
－赤血球生成及び溶血のマーカー
－赤血球前駆体を含む骨髄由来バイオマーカー
－探索的バイオマーカー
●延長期間中のＡＥ、ＳＡＥ、ＡＥによる中止、及び検査室異常。
【0090】
主要評価項目第２ｂ相
第２ｂ相のための主要評価項目は、ｍＨＩ－Ｅ応答であり、以下のように定義される：１）二重盲検期間中に８週間以上連続してＨｂ濃度がベースラインから１．５－ｇ／ｄＬ以上増加する（ＮＴＤである対象）、２）二重盲検期間中に８週間以上連続して無輸血と定義される輸血非依存性（ＬＴＢのみを有する対象）、及び３）二重盲検期間中に８週間以上連続して総輸血ＲＢＣ単位がベースラインと比較して５０％以上減少する（ＨＴＢのみを有する対象）。ＲＢＣ輸血後１４日以内に評価されたヘモグロビン濃度は、主要評価項目の分析から除外される。この除外が適用されると、ＮＴＤである対象及びＬＴＢを有する対象は、対象が、第２４週までに８週間以上間隔を置いて少なくとも２回のＨｂ濃度評価を有しない場合、非応答者とみなされる。
第２ｂ相のための主要評価項目は、ｍＨＩ－Ｅ応答であり、以下のように定義される：１）二重盲検期間中に８週間以上連続してＨｂ濃度がベースラインから１．５－ｇ／ｄＬ以上増加する（ＮＴＤである対象）、２）二重盲検期間中に８週間以上連続して無輸血と定義される輸血非依存性（ＬＴＢのみを有する対象）、及び３）二重盲検期間中に８週間以上連続して総輸血ＲＢＣ単位がベースラインと比較して５０％以上減少する（ＨＴＢのみを有する対象）。ＲＢＣ輸血後１４日以内に評価されたヘモグロビン濃度は、主要評価項目の分析から除外される。この除外が適用されると、ＮＴＤである対象及びＬＴＢを有する対象は、対象が、第２４週までに８週間以上間隔を置いて少なくとも２回のＨｂ濃度評価を有しない場合、非応答者とみなされる。
【0091】
副次的評価項目第２ｂ相
第２ｂ相のための副次的評価項目としては、以下が含まれる。
●二重盲検期間中のＡＥ、ＳＡＥ、ＡＥによる中止、及び検査室異常。
●二重盲検期間中のＨｂ濃度のベースラインからの変化。
●８週から２４週までの総輸血ＲＢＣ単位のベースラインからの変化。
●二重盲検期間中に８週間以上連続して無輸血と定義される、輸血非依存性。
●二重盲検期間中の最初のｍＨＩ－Ｅ応答までの時間。
●二重盲検期間中のｍＨＩ－Ｅ応答を達成した対象のｍＨＩ－Ｅ応答の最大持続時間。
●二重盲検期間中の化合物１の血漿濃度及び薬物動態パラメータ。
●二重盲検期間中の２，３－ＤＰＧ及びＡＴＰを含む薬力学パラメータの全血濃度。
●二重盲検期間中の臨床活性及び安全性の指標である関連する薬力学パラメータと評価項目との間の曝露反応（又は薬物動態／薬力学）関係。
第２ｂ相のための副次的評価項目としては、以下が含まれる。
●二重盲検期間中のＡＥ、ＳＡＥ、ＡＥによる中止、及び検査室異常。
●二重盲検期間中のＨｂ濃度のベースラインからの変化。
●８週から２４週までの総輸血ＲＢＣ単位のベースラインからの変化。
●二重盲検期間中に８週間以上連続して無輸血と定義される、輸血非依存性。
●二重盲検期間中の最初のｍＨＩ－Ｅ応答までの時間。
●二重盲検期間中のｍＨＩ－Ｅ応答を達成した対象のｍＨＩ－Ｅ応答の最大持続時間。
●二重盲検期間中の化合物１の血漿濃度及び薬物動態パラメータ。
●二重盲検期間中の２，３－ＤＰＧ及びＡＴＰを含む薬力学パラメータの全血濃度。
●二重盲検期間中の臨床活性及び安全性の指標である関連する薬力学パラメータと評価項目との間の曝露反応（又は薬物動態／薬力学）関係。
【0092】
探索的評価項目第２ｂ相
第２ｂ相のための探索的評価項目としては、以下が含まれる。
●二重盲検期間中のＲＢＣ輸血の頻度のベースラインからの変化（ＬＴＢ及びＨＴＢを有する対象のみ）
●二重盲検期間中の最初の輸血までの時間（ＮＴＤのみの対象）
●二重盲検期間中のヘプシジン、エリスロフェロン、可溶性トランスフェリン受容体、及びＧＤＦ１１を含む探索的バイオマーカーのベースラインからの変化
●二重盲検期間中の鉄、血清フェリチン、総鉄結合能、及びトランスフェリン飽和度のベースラインからの変化
●二重盲検期間中の絶対及びパーセント網状赤血球、並びにエリスロポエチンを含む、赤血球生成のマーカーのベースラインからの変化
●二重盲検期間中の赤血球前駆体を含む骨髄由来バイオマーカーのベースラインからの変化
●二重盲検期間中の間接ビリルビン、乳酸デヒドロゲナーゼ、及びハプトグロビンを含む溶血のマーカーのベースラインからの変化
●二重盲検期間中のがん治療機能評価質問票（ＦＡＣＴ－Ａｎ）の貧血サブスケールにおけるベースラインからの二重盲検期間中のＰＫＲ活性のベースラインからの変化
●二重盲検期間中の骨髄異形成スケールにおける生活の質（ＱＵＡＬＭＳ）及びＱＵＡＬＭＳ身体的負担（ＱＵＡＬＭＳ－Ｐ）サブスケールにおけるベースラインからの変化
●重症度の患者の全体的な印象（ＰＧＩＳ）－二重盲検期間中のベースラインと比較して、少なくとも１つのカテゴリーによる貧血の症状、又はベースライン時に貧血の症状がないか軽度の場合は「変化なし」
●変化の患者全体の印象（ＰＧＩＣ）－二重盲検期間中の貧血の症状の改善、又はＰＧＩＳベースラインスコアに基づいてベースラインで貧血の症状がないか軽度の場合は「変化なし」
●二重盲検期間中の患者報告転帰測定情報システム（ＰＲＯＭＩＳ）身体機能４ａアンケートのベースラインからの変化
●以下における延長期間中のベースラインからの変化：
－総輸血ＲＢＣ単位（ＬＴＢ及びＨＴＢを有する対象のみ）
－ＲＢＣ輸血の頻度（ＬＴＢ及びＨＴＢを有する対象のみ）
－Ｈｂ濃度
－鉄代謝のマーカー
－赤血球生成及び溶血のマーカー
－赤血球前駆体を含む骨髄由来バイオマーカー
－探索的バイオマーカー
●延長期間中のＡＥ、ＳＡＥ、ＡＥによる中止、及び検査室異常
第２ｂ相のための探索的評価項目としては、以下が含まれる。
●二重盲検期間中のＲＢＣ輸血の頻度のベースラインからの変化（ＬＴＢ及びＨＴＢを有する対象のみ）
●二重盲検期間中の最初の輸血までの時間（ＮＴＤのみの対象）
●二重盲検期間中のヘプシジン、エリスロフェロン、可溶性トランスフェリン受容体、及びＧＤＦ１１を含む探索的バイオマーカーのベースラインからの変化
●二重盲検期間中の鉄、血清フェリチン、総鉄結合能、及びトランスフェリン飽和度のベースラインからの変化
●二重盲検期間中の絶対及びパーセント網状赤血球、並びにエリスロポエチンを含む、赤血球生成のマーカーのベースラインからの変化
●二重盲検期間中の赤血球前駆体を含む骨髄由来バイオマーカーのベースラインからの変化
●二重盲検期間中の間接ビリルビン、乳酸デヒドロゲナーゼ、及びハプトグロビンを含む溶血のマーカーのベースラインからの変化
●二重盲検期間中のがん治療機能評価質問票（ＦＡＣＴ－Ａｎ）の貧血サブスケールにおけるベースラインからの二重盲検期間中のＰＫＲ活性のベースラインからの変化
●二重盲検期間中の骨髄異形成スケールにおける生活の質（ＱＵＡＬＭＳ）及びＱＵＡＬＭＳ身体的負担（ＱＵＡＬＭＳ－Ｐ）サブスケールにおけるベースラインからの変化
●重症度の患者の全体的な印象（ＰＧＩＳ）－二重盲検期間中のベースラインと比較して、少なくとも１つのカテゴリーによる貧血の症状、又はベースライン時に貧血の症状がないか軽度の場合は「変化なし」
●変化の患者全体の印象（ＰＧＩＣ）－二重盲検期間中の貧血の症状の改善、又はＰＧＩＳベースラインスコアに基づいてベースラインで貧血の症状がないか軽度の場合は「変化なし」
●二重盲検期間中の患者報告転帰測定情報システム（ＰＲＯＭＩＳ）身体機能４ａアンケートのベースラインからの変化
●以下における延長期間中のベースラインからの変化：
－総輸血ＲＢＣ単位（ＬＴＢ及びＨＴＢを有する対象のみ）
－ＲＢＣ輸血の頻度（ＬＴＢ及びＨＴＢを有する対象のみ）
－Ｈｂ濃度
－鉄代謝のマーカー
－赤血球生成及び溶血のマーカー
－赤血球前駆体を含む骨髄由来バイオマーカー
－探索的バイオマーカー
●延長期間中のＡＥ、ＳＡＥ、ＡＥによる中止、及び検査室異常
【0093】
用量の変更
過剰Ｈｂ応答は、ＲＢＣ輸血なしで、ＵＬＮ（性別による）超であるＨｂ濃度の増加として定義される。過剰なＨｂ応答の場合、４週間以上のＲＢＣ輸血なしで、研究薬を中止しなければならない。
過剰Ｈｂ応答は、ＲＢＣ輸血なしで、ＵＬＮ（性別による）超であるＨｂ濃度の増加として定義される。過剰なＨｂ応答の場合、４週間以上のＲＢＣ輸血なしで、研究薬を中止しなければならない。
【0094】
血小板数の急激な減少（例えば、ベースラインから５０％以上の減少）が観察された場合、治験責任医師は血小板数を毎週モニタリングし、臨床的に適応がある場合は最大２８日間研究薬を中断する必要がある。２回目の発生の場合、又はグレード４の血小板数が減少した場合は、研究薬を中止する。
【0095】
いくつかの実施形態が記載されたが、本開示の範囲は、例によって表された特定の実施形態によってではなく、添付の特許請求の範囲によって定義されるべきである。本願全体にわたって引用される、全ての参考文献（文献の参照、発行された特許、公開特許出願、及び同時係属特許出願を含む）は、参照によりそれらの全ての内容が明示的に本明細書に組み込まれる。別途定義されない限り、本明細書において使用される全ての技術的用語及び科学的用語は、当業者に一般的に知られる意味と一致する。
【図1A-B】
【図1C-D】
【図2A-B】
【図2C-D】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6A-B】
【図6C-D】
【図6E】
【図7A-B】
【図7C-D】
【図8】
【国際調査報告】