特表 2024-543518 新規の炭水化物結合ポリペプチド

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-11-21

(54)【発明の名称】新規の炭水化物結合ポリペプチド

(51)【国際特許分類】

   C07K 14/00 20060101AFI20241114BHJP

   C12N 15/63 20060101ALI20241114BHJP

   C12N 1/13 20060101ALI20241114BHJP

   C12N 1/15 20060101ALI20241114BHJP

   C12N 1/19 20060101ALI20241114BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20241114BHJP

   C12N 15/11 20060101ALI20241114BHJP

【ＦＩ】

C07K14/00

C12N15/63 Z ZNA

C12N1/13

C12N1/15

C12N1/19

C12N5/10

C12N15/11 Z

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024529212

(86)(22)【出願日】2022-11-15

(85)【翻訳文提出日】2024-07-02

(86)【国際出願番号】 EP2022081942

(87)【国際公開番号】W WO2023084107

(87)【国際公開日】2023-05-19

(31)【優先権主張番号】21208133.5

(32)【優先日】2021-11-15

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】524183005

【氏名又は名称】グリコリンク エービー

(74)【代理人】

【識別番号】100114775

【弁理士】

【氏名又は名称】高岡 亮一

(74)【代理人】

【識別番号】100121511

【弁理士】

【氏名又は名称】小田 直

(74)【代理人】

【識別番号】100202751

【弁理士】

【氏名又は名称】岩堀 明代

(74)【代理人】

【識別番号】100208580

【弁理士】

【氏名又は名称】三好 玲奈

(74)【代理人】

【識別番号】100191086

【弁理士】

【氏名又は名称】高橋 香元

(72)【発明者】

【氏名】マッキー，ローレン

(72)【発明者】

【氏名】ハオ，メングシュ

(72)【発明者】

【氏名】チョウ，チー

(72)【発明者】

【氏名】コスケラ，サラ

【テーマコード（参考）】

4B065

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B065AA01X

4B065AA72X

4B065AA90X

4B065AA95X

4B065AB01

4B065BA02

4B065CA24

4B065CA60

4H045AA10

4H045AA20

4H045BA09

4H045BA18

4H045BA19

4H045BA20

4H045BA21

4H045BA53

4H045EA15

4H045EA20

4H045EA60

4H045FA74

(57)【要約】

本発明は、新規の炭水化物結合ポリペプチド及びハイドロゲルの作製におけるその使用に関する。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ポリペプチドであって、

【化1】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１（Ｒ１）、
またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号８とは異なる、前記機能的バリアント、

【化2】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２（Ｒ２）、
またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０とは異なる、前記機能的バリアント、

【化3】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３（Ｒ３）、
またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２とは異なる、前記機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、前記ポリペプチド。

【請求項2】

ポリペプチドであって、
ａ． 配列番号２２０：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４ＷＥＸ_３７Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１（Ｒ１）
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２は、トリプトファン（Ｗ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）またはアラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、リジン（Ｋ）もしくはアルギニン（Ｒ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_５は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）、アラニン（Ａ）もしくはリジン（Ｋ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_６は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、チロシン（Ｙ）、システイン（Ｃ）、ロイシン（Ｌ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_７は、フェニルアラニン（Ｆ）またはセリン（Ｓ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_８は、グリシン（Ｇ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_９は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_１０は、アスパラギン（Ｎ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタミン（Ｑ）、リジン（Ｋ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１１は、リジン（Ｋ）、グルタミン（Ｑ）、アスパラギン（Ｎ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_１２は、チロシン（Ｙ）、ロイシン（Ｌ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１３は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_１４は、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、システイン（Ｃ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１５は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１６は、グルタミン酸（Ｅ）、リジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、アスパラギン（Ｎ）、グリシン（Ｇ）、グルタミン（Ｑ）またはプロリン（Ｐ）であり、
Ｘ_１８は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン（Ｎ）、トレオニン（Ｔ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１９は、ロイシン（Ｌ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、グリシン（Ｇ）もしくはアラニン（Ａ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、アラニン（Ａ）もしくはアスパラギン（Ｎ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２２は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２３は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２４は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２５は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アラニン（Ａ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２６は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２７は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２８は、アスパラギン（Ｎ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２９は、アルギニン（Ｒ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_３０は、トレオニン（Ｔ）、アスパラギン酸（Ｄ）、プロリン（Ｐ）、イソロイシン（Ｉ）、アスパラギン（Ｎ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_３１は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、グリシン（Ｇ）、リジン（Ｋ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_３２は、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、プロリン（Ｐ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_３３は、グリシン（Ｇ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_３４は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３７は、グルタミン（Ｑ）またはリジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２０とは異なる、前記機能的バリアント、
ｂ． 配列番号２２１：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１ＷＥＸ_３４Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２（Ｒ２）
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）、チロシン（Ｙ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）、ロイシン（Ｌ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_７は、グリシン（Ｇ）もしくはセリン（Ｓ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_８は、アスパラギン（Ｎ）、メチオニン（Ｍ）、グルタミン（Ｑ）、ヒスチジン（Ｈ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_９は、グリシン（Ｇ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_１０は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アスパラギン（Ｎ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_１１は、チロシン（Ｙ）であり、
Ｘ_１２は、バリン（Ｖ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１３は、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）、リジン（Ｋ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１４は、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_１５は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１６は、アスパラギン（Ｎ）、プロリン（Ｐ）、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン酸（Ｄ）、イソロイシン（Ｉ）もしくはアスパラギン（Ｎ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_１８は、バリン（Ｖ）もしくはグリシン（Ｇ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_１９は、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）、ロイシン（Ｌ）、アラニン（Ａ）、もしくはグルタミン酸（Ｅ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、グルタミン（Ｑ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_２２は、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）、メチオニン（Ｍ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２３は、トレオニン（Ｔ）、アスパラギン（Ｎ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２４は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２５は、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）、トレオニン（Ｔ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２７は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、プロリン（Ｐ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_２８は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２９は、イソロイシン（Ｉ）、バリン（Ｖ）、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、チロシン（Ｙ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_３０は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、グルタミン酸（Ｅ）、トレオニン（Ｔ）、セリン（Ｓ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_３１は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン酸（Ｄ）、セリン（Ｓ）、プロリン（Ｐ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_３４は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２１とは異なる、前記機能的バリアント、
ｃ． 配列番号２２２：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４Ｘ_３５ＷＥＸ_３８Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３（Ｒ３）
［式中、
Ｘ_１は、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、チロシン（Ｙ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）、トレオニン（Ｔ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、アルギニン（Ｒ）、リジン（Ｋ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アルギニン（Ｒ）もしくはバリン（Ｖ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_７は、アスパラギン（Ｎ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_８は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_９は、グリシン（Ｇ）、トリプトファン（Ｗ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１０は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、セリン（Ｓ）、アラニン（Ａ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１１は、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１２は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_１３は、セリン（Ｓ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１４は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、ヒスチジン（Ｈ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１５は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１６は、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）、トリプトファン（Ｗ）、メチオニン（Ｍ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１８は、セリン（Ｓ）またはトレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_１９は、アスパラギン（Ｎ）、バリン（Ｖ）もしくはアスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、アラニン（Ａ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、セリン（Ｓ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２２は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２３は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、アルギニン（Ｒ）、トレオニン（Ｔ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_２４は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２５は、トレオニン（Ｔ）、チロシン（Ｙ）、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２７は、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）、トレオニン（Ｔ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_２８は、アルギニン（Ｒ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_２９は、アスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_３０は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_３１は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３２は、イソロイシン（Ｉ）、グルタミン酸（Ｅ）、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_３３は、グリシン（Ｇ）、リジン（Ｋ）もしくはアスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_３４は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、リジン（Ｋ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_３５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはシステイン（Ｃ）であり、
Ｘ_３８は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２２とは異なる、前記機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、前記ポリペプチド。

【請求項3】

先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチドであって、前記ポリペプチドは、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０のアミノ酸配列を含む繰り返し領域１、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０とは異なる、前記機能的バリアントを含み、
ただし、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７、配列番号２２０の前記機能的バリアントの３５位の残基がトリプトファン（Ｗ）であることを条件とする、前記ポリペプチド。

【請求項4】

先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチドであって、前記ポリペプチドは、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８もしくは配列番号２２１のアミノ酸配列を含む繰り返し領域２、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８もしくは配列番号２２１とは異なる、前記機能的バリアントを含み、
ただし、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８、配列番号２２１の前記機能的バリアントの３２位の残基がトリプトファン（Ｗ）であることを条件とする、前記ポリペプチド。

【請求項5】

先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチドであって、前記ポリペプチドは、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９もしくは配列番号２２２のアミノ酸配列を含む繰り返し領域３、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９もしくは配列番号２２２とは異なる、前記機能的バリアントを含み、
ただし、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６または配列番号６９、配列番号２２２の前記機能的バリアントの３６位の残基がトリプトファン（Ｗ）であることを条件とする、前記ポリペプチド。

【請求項6】

先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチドであって、前記ポリペプチドは、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０のアミノ酸配列を含む繰り返し領域１、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０とは異なる、前記機能的バリアントを含み、
ただし、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７、配列番号２２０の前記機能的バリアントの３５位の残基がトリプトファン（Ｗ）であること、
配列番号８、配列番号９、配列番号２２０、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７の前記機能的バリアントの３６位の残基がグルタミン酸（Ｅ）であること、及び／または
配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７、配列番号２２０の前記機能的バリアントの３８位の残基がフェニルアラニン（Ｆ）であることを条件とする、前記ポリペプチド。

【請求項7】

先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチドであって、前記ポリペプチドは、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８もしくは配列番号２２１のアミノ酸配列を含む繰り返し領域２、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８もしくは配列番号２２１とは異なる、前記機能的バリアントを含み、
ただし、
配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８、配列番号２２１の前記機能的バリアントの３２位の残基がトリプトファン（Ｗ）であること、
配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８、配列番号２２１の前記機能的バリアントの３３位の残基がグルタミン酸（Ｅ）であること、及び／または
配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８、配列番号２２１の前記機能的バリアントの３５位の残基がフェニルアラニン（Ｆ）であることを条件とする、前記ポリペプチド。

【請求項8】

先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチドであって、前記ポリペプチドは、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９もしくは配列番号２２２のアミノ酸配列を含む繰り返し領域３、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９もしくは配列番号２２２とは異なる、前記機能的バリアントを含み、
ただし、
配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２の前記機能的バリアントの３６位の残基がトリプトファン（Ｗ）であること、
配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２の前記機能的バリアントの３７位の残基がグルタミン酸（Ｅ）であること、及び／または
配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２の前記機能的バリアントの３９位の残基がフェニルアラニン（Ｆ）であることを条件とする、前記ポリペプチド。

【請求項9】

先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチドであって、前記ポリペプチドは、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０のアミノ酸配列を含む繰り返し領域１、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０とは異なる、前記機能的バリアントを含み、
ただし、
配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７、配列番号２２０の前記機能的バリアントの１２位の残基がチロシン（Ｙ）であること、及び／または
配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７、配列番号２２０の前記機能的バリアントの１３位の残基がバリン（Ｖ）であることを条件とする、前記ポリペプチド。

【請求項10】

先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチドであって、前記ポリペプチドは、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８もしくは配列番号２２１のアミノ酸配列を含む繰り返し領域２、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８もしくは配列番号２２１とは異なる、前記機能的バリアントを含み、
ただし、
配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８、配列番号２２１の前記機能的バリアントの１１位の残基がチロシン（Ｙ）であること、及び／または
配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８、配列番号２２１の前記機能的バリアントの１２位の残基がバリン（Ｖ）であることを条件とする、前記ポリペプチド。

【請求項11】

先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチドであって、前記ポリペプチドは、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２のアミノ酸配列を含む繰り返し領域３、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２とは異なる、前記機能的バリアントを含み、
ただし、
配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２の前記機能的バリアントの１１位の残基がチロシン（Ｙ）であること、及び／または
配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２の前記機能的バリアントの１２位の残基がバリン（Ｖ）であることを条件とする、前記ポリペプチド。

【請求項12】

先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチドであって、
前記繰り返し領域１は、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７、配列番号２２０のアミノ酸配列、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０とは異なる、前記機能的バリアントからなり、
前記繰り返し領域２は、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８、配列番号２２１のアミノ酸配列、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８もしくは配列番号２２１とは異なる、前記機能的バリアントからなり、及び／または
前記繰り返し領域３は、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２のアミノ酸配列、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９もしくは配列番号２２２とは異なる、前記機能的バリアントからなる、前記ポリペプチド。

【請求項13】

前記ポリペプチドは、前記繰り返し領域１、前記繰り返し領域２及び前記繰り返し領域３を含む、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項14】

前記繰り返し領域１、前記繰り返し領域２及び前記繰り返し領域３の各々は、そのＮ末端で少なくとも３つのアミノ酸残基にフランキングされており、そのＣ末端で少なくとも３つのアミノ酸残基にフランキングされており、したがって、
Ｙ_Ｎ－Ｒ１－Ｙ_ＣＺ_Ｎ－Ｒ２－Ｚ_ＣＪ_Ｎ－Ｒ３－Ｊ_Ｃ
であり、ここで、Ｙ_Ｎ、Ｙ_Ｃ、Ｚ_Ｎ、Ｚ_Ｃ、Ｊ_Ｎ、及びＪ_Ｃの各々は、個別に、少なくとも３つのアミノ酸を含むアミノ酸配列であり得る、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項15】

配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０の前記機能的バリアントは、前記バリアントのアミノ酸配列が５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０とは異なる、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項16】

配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０の前記機能的バリアントは、前記バリアントのアミノ酸配列が、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０の残基１～３４または３６～３８のいずれか１つに、例えば配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０の残基１～３４または３７のいずれか１つに、６個の個別のアミノ酸置換、例えば５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０とは異なる、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項17】

配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の前記機能的バリアントは、前記バリアントのアミノ酸配列が５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１とは異なる、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項18】

配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の前記機能的バリアントは、前記バリアントのアミノ酸配列が、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の残基１～３１または３３～３５のいずれか１つに、例えば配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の残基１～３１または３４のいずれか１つに、６個の個別のアミノ酸置換、例えば５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１とは異なる、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項19】

配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２の前記機能的バリアントは、前記バリアントのアミノ酸配列が５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２とは異なる、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項20】

配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２の前記機能的バリアントは、前記バリアントのアミノ酸配列が、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２の残基１～３５または３７～３９のいずれか１つに、例えば配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２の残基１～３５または３８のいずれか１つに、６個の個別のアミノ酸置換、例えば５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２とは異なる、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項21】

前記繰り返し領域１は、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項22】

前記繰り返し領域２は、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項23】

前記繰り返し領域３は、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項24】

前記ポリペプチドは、前記繰り返し領域１及び前記繰り返し領域２、またはそれらの機能的バリアント；前記繰り返し領域１及び前記繰り返し領域３、またはそれらの機能的バリアント；前記繰り返し領域２及び前記繰り返し領域３、またはそれらの機能的バリアント；前記繰り返し領域１、前記繰り返し領域２及び前記繰り返し領域３、またはそれらの機能的バリアントを含む、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項25】

配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３、または配列番号７１～２１９との少なくとも７５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドであって、１つ以上の糖類単位を結合することができる、前記ポリペプチド。

【請求項26】

配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３との少なくとも７５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドであって、１つ以上の糖類単位を結合することができる、前記ポリペプチド。

【請求項27】

前記ポリペプチドは、配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３、または配列番号７１～２１８との少なくとも８０％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３、または配列番号７１～２１９との少なくとも８５％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３、または配列番号７１～２１９との少なくとも９０％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３、または配列番号７１～２１９との少なくとも９５％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３、または配列番号７１～２１９との少なくとも９６％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３、または配列番号７１～２１９との少なくとも９７％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３、または配列番号７１～２１９との少なくとも９８％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３、または配列番号７１～２１９との少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項２５及び２６のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項28】

前記ポリペプチドは、配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも８０％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも８５％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも９０％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも９５％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも９６％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも９７％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも９８％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項２５～２７のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項29】

前記ポリペプチドは、配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３、または配列番号７１～配列番号２１９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる、請求項２５～２８のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項30】

請求項２５～２９のいずれか１項に記載のポリペプチドであって、
ａ． 配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４もしくは配列番号６７のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４もしくは配列番号６７とは異なる、前記機能的バリアント、
ｂ． 配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５もしくは配列番号６８のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５もしくは配列番号６８とは異なる、前記機能的バリアント、及び
ｃ． 配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６もしくは配列番号６９のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３、またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９とは異なる、前記機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、前記ポリペプチド。

【請求項31】

前記繰り返し領域１、前記繰り返し領域２及び前記繰り返し領域３は、請求項２～２３のいずれか１項に記載のものである、請求項２５～３０のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項32】

前記ポリペプチドは、βトレフォイルフォールド構造を有する、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項33】

前記繰り返し領域１、前記繰り返し領域２及び前記繰り返し領域３の各々は、少なくとも１つの二糖類を結合することができる、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項34】

前記繰り返し領域１、前記繰り返し領域２及び前記繰り返し領域３の各々は、少なくとも１つの多糖類を結合することができる、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項35】

前記二糖類または前記多糖類は、少なくとも１つのＧｌｃ－β－１，６－Ｇｌｃ単位を含む、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項36】

前記二糖類または前記多糖類は、少なくとも１つのＧｌｃ－β－１，２－Ｇｌｃ単位を含む、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項37】

前記二糖類または前記多糖類は、少なくとも１つのＧｌｃ－β－１，６－Ｇｌｃ単位を含むグリカンを含む、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項38】

前記二糖類または前記多糖類は、β－１，６－グルカン骨格を有する、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項39】

前記二糖類または前記多糖類は、１つ以上のＧｌｃ－β－１，６－Ｇｌｃ修飾を有する、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項40】

前記二糖類または前記多糖類は、β－１，３－グルカン骨格上に１つ以上のＧｌｃ－β－１，６－Ｇｌｃ修飾（複数可）を有する、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項41】

前記二糖類または前記多糖類はスクレログルカンである、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項42】

前記二糖類または前記多糖類はプスツランである、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項43】

前記糖類は多糖類である、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項44】

前記多糖類は、少なくとも１０．０００Ｄａ、例えば少なくとも５０．０００Ｄａ、例えば少なくとも１００．０００Ｄａ、例えば少なくとも５００．０００Ｄａ、例えば少なくとも１．０００．０００Ｄａ、例えば２．０００．０００Ｄａである、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項45】

前記二糖類または前記多糖類は水分散性である、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項46】

前記多糖類は、糖類１ｍｇ当たり水７０μｇ以上、好ましくは糖類１ｍｇ当たり水７４μｇ以上、例えば糖類１ｍｇ当たり水７７μｇの水分含量を有する、先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチド。

【請求項47】

先行請求項のいずれか１項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。

【請求項48】

前記ポリヌクレオチドは、宿主細胞での発現のためにコドン最適化されている、請求項４７に記載のポリヌクレオチド。

【請求項49】

請求項４７及び４８のいずれか１項に記載のポリヌクレオチド、または請求項１～４６のいずれか１項に記載の炭水化物結合ポリペプチドをコードする核酸配列を含む、組換えベクター。

【請求項50】

プラスミドベクターである、請求項４９に記載のベクター。

【請求項51】

請求項５０に記載の組換えベクターを発現する宿主細胞。

【請求項52】

２つ以上の多糖類を架橋するための、請求項１～４６のいずれか１項に記載の少なくとも１つのポリペプチドの使用。

【請求項53】

各ポリペプチドが３つの多糖類を架橋する、請求項５２に記載の使用。

【請求項54】

請求項１～４６のいずれか１項に記載の少なくとも１つのポリペプチドと２つ以上の多糖類とを含むハイドロゲルであって、架橋構造を有する前記ハイドロゲル。

【請求項55】

前記ハイドロゲルは、請求項１～４６のいずれか１項に記載のポリペプチドである二官能性または多官能性のリンカーで架橋されている、請求項５４に記載のハイドロゲル。

【請求項56】

前記多糖類は、β－１，６結合グルコース修飾を有する１つ以上のβ－１，３－グルカン単位を含む、請求項５４～５５のいずれか１項に記載のハイドロゲル。

【請求項57】

前記多糖類はスクレログルカンである、請求項５４～５６のいずれか１項に記載のハイドロゲル。

【請求項58】

前記ハイドロゲルは、少なくとも０．１ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも０．２ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも０．３ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも０．４ｇ／Ｌのポリペプチドを含む、請求項５４～５７のいずれか１項に記載のハイドロゲル。

【請求項59】

前記ハイドロゲルは、少なくとも２ｇ／Ｌかつ最大で１０ｇ／Ｌの多糖類、好ましくは少なくとも３ｇ／Ｌの多糖類かつ最大で５ｇ／Ｌの多糖類を含む、請求項５４～５８のいずれか１項に記載のハイドロゲル。

【請求項60】

前記ハイドロゲルは、少なくとも２ｇ／Ｌかつ最大で１０ｇ／Ｌのスクレログルカン、好ましくは少なくとも３ｇ／Ｌのスクレログルカンかつ最大で５ｇ／Ｌのスクレログルカンを含む、請求項５４～５９のいずれか１項に記載のハイドロゲル。

【請求項61】

前記ハイドロゲルは、少なくとも９０重量％の水を含む、請求項５４～６０のいずれか１項に記載のハイドロゲル。

【請求項62】

ポリペプチド：多糖類の比が１：２０～１：２である、請求項５４～６１のいずれか１項に記載のハイドロゲル。

【請求項63】

ハイドロゲルを形成するために多糖類を架橋するための架橋剤であって、請求項１～４６のいずれか１項に記載のポリペプチドである、前記架橋剤。

【請求項64】

ハイドロゲルを製造する方法であって、
ａ． 多糖類を含む溶液を準備すること、
ｂ． 請求項１～４６のいずれか１項に記載のポリペプチドを含む溶液を準備すること、
ｃ． 前記溶液を室温で連続的に撹拌しながら混合することを含み、
それによりハイドロゲルを得る、前記方法。

【請求項65】

前記多糖類は、請求項５６～５７のいずれか１項に記載のものである、請求項６４に記載のハイドロゲルを製造する方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、新規の炭水化物結合ポリペプチド及びハイドロゲルの作製におけるその使用に関する。

【背景技術】

【0002】

ハイドロゲルは巨大かつ急成長しているビジネスであり、薬物送達、組織足場、生命科学研究、化粧品産業、バイオベース農業、及び工業用潤滑を含む多くの分野に応用されている。ハイドロゲルの大部分は、依然として、化学的改変及び架橋によって３Ｄネットワークへと構築される化石由来ポリマーから作られている。この生産方法は持続可能ではなく、消費者から好意的に受け止められていないため、ゲル形成のために生物学的ポリマーの使用を開始することが急務となっている。

【0003】

ハイドロゲルは既に、セルロース及び植物または微生物由来の他の多糖類、ならびに動物由来のムチンのような、いくつかの天然ポリマーから生産することができる。しかし、これらには架橋を可能にするための化学的改変が依然として必要であり、その結果、化学廃棄物フットプリントが高く、用途によっては皮膚を刺激したり、他の生物系に干渉したりする可能性のある化合物が含まれる可能性がある。

【0004】

産業界では、セルロース及びスクレログルカンなどの持続可能な方法で調達された多糖類からハイドロゲルを生産する新しい方法の開発が強く推進されている。スクレログルカンは、Ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ ｒｏｌｆｓｉｉなどの産業用真菌によって分泌され、適度に高い収量及び純度で得ることができる（Ｓｃｈｍｉｄ ｅｔ ａｌ．２０１１）。現在の慣行では、ゲル形成前に、スクレログルカンの構造の三重らせんを分離するために、スクレログルカンをＤＭＳＯに溶解するのが一般的である（Ｐａｌｌｅｓｃｈｉ ｅｔ ａｌ．２００５）。次に過ヨウ素酸ナトリウムを使用してこれを酸化し、スクレルアルデヒド誘導体を生成する（Ｍａｅｄａ ｅｔ ａｌ．２００１）。場合によっては、亜塩素酸ナトリウムによって触媒されたさらなる酸化によりカルボキシル基を生成することで、スクレロックスと呼ばれる生成物が得られる（Ｃｒｅｓｃｅｎｚｉ ｅｔ ａｌ．１９８３）。この酸化型を１，６－ヘキサンジブロミドと架橋させてゲル形成ネットワークを形成することができ、異なるスクレロックス：二ハロゲン化物比によって著しく異なる機械的特性及びレオロジー特性が生じる（Ｃｏｖｉｅｌｌｏ ｅｔ ａｌ．１９９９、Ｃｏｖｉｅｌｌｏ ｅｔ ａｌ．２００１）。より最近では、ホウ酸（ホウ砂）を使用して、４，６－グルコ－ボレート結合及び物理的会合によって多糖類を直接架橋し、物理的ゲルを作出する効率的な代替方法が開発された（Ｃｏｖｉｅｌｌｏ ｅｔ ａｌ．２００５、Ｐａｌｌｅｓｃｈｉ ｅｔ ａｌ．２００６）。しかし、ホウ砂は規制対象の高懸念物質（ＳＶＨＣ）（欧州化学物質庁）である。

【0005】

したがって、ハイドロゲル生産の持続可能性を改善する必要性は未だ解決されていない。

【発明の概要】

【0006】

これより、出発ポリマーの改変を必要とせず、化学架橋も使用しない、まったく新しい多糖類架橋方式を提示する。この架橋剤は、実のところ、新規の炭水化物結合モジュール（ＣＢＭ）ファミリーに属するポリペプチドである。ＣＢＭ９２と呼ばれる本明細書で開示される新しいＣＢＭファミリー内の各ポリペプチドは、単糖類、オリゴ糖類、及び多糖類の結合部位である３つの異なる繰り返し領域を含む。この新規ＣＢＭファミリーのポリペプチドは、スクレログルカンなどの高分子量の多糖類に対する結合特異性及びゲル化傾向を有する。本発明者らは、この新規ＣＢＭファミリーのタンパク質がハイドロゲル形成における架橋剤として非常に有利であることを実証した。

【0007】

本開示の一態様は、ポリペプチドであって、

【化1】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１（Ｒ１）、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号８とは異なる、当該機能的バリアント、

【化2】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２（Ｒ２）、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０とは異なる、当該機能的バリアント、

【化3】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３（Ｒ３）、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２とは異なる、当該機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、当該ポリペプチドに関する。

【0008】

本開示の別の態様は、ポリペプチドであって、
ａ． 配列番号２２０：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４ＷＥＸ_３７Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１（Ｒ１）
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２は、トリプトファン（Ｗ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）またはアラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、リジン（Ｋ）もしくはアルギニン（Ｒ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_５は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）、アラニン（Ａ）もしくはリジン（Ｋ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_６は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、チロシン（Ｙ）、システイン（Ｃ）、ロイシン（Ｌ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_７は、フェニルアラニン（Ｆ）またはセリン（Ｓ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_８は、グリシン（Ｇ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_９は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_１０は、アスパラギン（Ｎ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタミン（Ｑ）、リジン（Ｋ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１１は、リジン（Ｋ）、グルタミン（Ｑ）、アスパラギン（Ｎ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_１２は、チロシン（Ｙ）、ロイシン（Ｌ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１３は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_１４は、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、システイン（Ｃ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１５は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１６は、グルタミン酸（Ｅ）、リジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、アスパラギン（Ｎ）、グリシン（Ｇ）、グルタミン（Ｑ）またはプロリン（Ｐ）であり、
Ｘ_１８は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン（Ｎ）、トレオニン（Ｔ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１９は、ロイシン（Ｌ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、グリシン（Ｇ）もしくはアラニン（Ａ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、アラニン（Ａ）もしくはアスパラギン（Ｎ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２２は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２３は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２４は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２５は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アラニン（Ａ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２６は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２７は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２８は、アスパラギン（Ｎ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２９は、アルギニン（Ｒ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_３０は、トレオニン（Ｔ）、アスパラギン酸（Ｄ）、プロリン（Ｐ）、イソロイシン（Ｉ）、アスパラギン（Ｎ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_３１は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、グリシン（Ｇ）、リジン（Ｋ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_３２は、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、プロリン（Ｐ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_３３は、グリシン（Ｇ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_３４は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３７は、グルタミン（Ｑ）またはリジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２０とは異なる、当該機能的バリアント、
ｂ． 配列番号２２１：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１ＷＥＸ_３４Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２（Ｒ２）
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）、チロシン（Ｙ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）、ロイシン（Ｌ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_７は、グリシン（Ｇ）もしくはセリン（Ｓ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_８は、アスパラギン（Ｎ）、メチオニン（Ｍ）、グルタミン（Ｑ）、ヒスチジン（Ｈ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_９は、グリシン（Ｇ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_１０は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アスパラギン（Ｎ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_１１は、チロシン（Ｙ）であり、
Ｘ_１２は、バリン（Ｖ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１３は、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）、リジン（Ｋ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１４は、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_１５は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１６は、アスパラギン（Ｎ）、プロリン（Ｐ）、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン酸（Ｄ）、イソロイシン（Ｉ）もしくはアスパラギン（Ｎ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_１８は、バリン（Ｖ）もしくはグリシン（Ｇ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_１９は、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）、ロイシン（Ｌ）、アラニン（Ａ）、もしくはグルタミン酸（Ｅ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、グルタミン（Ｑ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_２２は、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）、メチオニン（Ｍ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２３は、トレオニン（Ｔ）、アスパラギン（Ｎ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２４は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２５は、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）、トレオニン（Ｔ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２７は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、プロリン（Ｐ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_２８は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２９は、イソロイシン（Ｉ）、バリン（Ｖ）、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、チロシン（Ｙ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_３０は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、グルタミン酸（Ｅ）、トレオニン（Ｔ）、セリン（Ｓ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_３１は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン酸（Ｄ）、セリン（Ｓ）、プロリン（Ｐ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_３４は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２１とは異なる、当該機能的バリアント、
ｃ． 配列番号２２２：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４Ｘ_３５ＷＥＸ_３８Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３（Ｒ３）
［式中、
Ｘ_１は、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、チロシン（Ｙ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）、トレオニン（Ｔ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、アルギニン（Ｒ）、リジン（Ｋ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アルギニン（Ｒ）もしくはバリン（Ｖ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_７は、アスパラギン（Ｎ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_８は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_９は、グリシン（Ｇ）、トリプトファン（Ｗ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１０は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、セリン（Ｓ）、アラニン（Ａ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１１は、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１２は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_１３は、セリン（Ｓ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１４は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、ヒスチジン（Ｈ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１５は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１６は、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）、トリプトファン（Ｗ）、メチオニン（Ｍ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１８は、セリン（Ｓ）またはトレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_１９は、アスパラギン（Ｎ）、バリン（Ｖ）もしくはアスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、アラニン（Ａ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、セリン（Ｓ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２２は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２３は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、アルギニン（Ｒ）、トレオニン（Ｔ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_２４は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２５は、トレオニン（Ｔ）、チロシン（Ｙ）、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２７は、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）、トレオニン（Ｔ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_２８は、アルギニン（Ｒ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_２９は、アスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_３０は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_３１は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３２は、イソロイシン（Ｉ）、グルタミン酸（Ｅ）、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_３３は、グリシン（Ｇ）、リジン（Ｋ）もしくはアスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_３４は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、リジン（Ｋ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_３５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはシステイン（Ｃ）であり、
Ｘ_３８は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２２とは異なる、当該機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、当該ポリペプチドに関する。

【0009】

本開示のさらなる態様は、配列番号３もしくは配列番号４、または配列番号２０～配列番号３３の配列のいずれか、または配列番号７１～配列番号２１９の配列のいずれかとの少なくとも７５％の配列同一性を有するアミノ酸配列に関し、当該ポリペプチドは１つ以上の糖類単位を結合することができる。

【0010】

本開示のさらなる態様は、配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３との少なくとも７５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドに関し、当該ポリペプチドは１つ以上の糖類単位を結合することができる。

【0011】

本開示のさらなる態様は、本明細書で開示されるポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに関する。

【0012】

本開示の別の態様は、本明細書で開示されるポリヌクレオチド、または本明細書で開示される炭水化物結合ポリペプチドをコードする核酸配列を含む、組換えベクターに関する。

【0013】

本開示の別の態様は、本明細書で開示される組換えベクターを発現する宿主細胞に関する。

【0014】

本開示の別の態様は、２つ以上の多糖類を架橋するための、本明細書で開示される少なくとも１つのポリペプチドの使用に関する。

【0015】

本開示のさらなる態様は、本明細書で開示される少なくとも１つのポリペプチドと２つ以上の多糖類とを含むハイドロゲルであって、架橋構造を有する当該ハイドロゲルに関する。

【0016】

本開示のさらなる態様は、多糖類を架橋するための架橋剤であって、本明細書で開示されるポリペプチドである当該架橋剤に関する。

【0017】

本開示の別の態様は、ハイドロゲルを製造する方法であって、
ａ． 多糖類を含む溶液を準備すること、
ｂ． 本開示に係るポリペプチドを含む溶液を準備すること、
ｃ． 当該溶液を室温で連続的に撹拌しながら混合することを含み、
それにより、当該多糖類の架橋を介してハイドロゲルを得る、当該方法に関する。

【図面の簡単な説明】

【0018】

【図1】スクレログルカン多糖類の繰り返し構造単位。

【図2】Ｃｐ－Ｆ１及びＣｐ－Ｆ２の重ね合わせた結晶構造の模式的描写。結合部位のうちの２つにグルコース単糖類リガンドが示されている。上の矢印はアルファ結合部位のグルコースを示し、下の矢印はベータ結合部位のグルコースを示す。

【図3】Ｃｐ－Ｆ１の結晶構造の模式的描写であり、関連するアミノ酸が示された、リガンドグルコースに結合したＣｐ－Ｆ２結合部位のクローズアップを示している。

【図4】固体ゲル形成の描写。上：スクレログルカンのみ。下：スクレログルカン及びＣｐ－Ｆ１タンパク質の混合。

【図5】多糖類：タンパク質の比を変化させると（９：１、８：１及び２：１）、固体性及び透明度などのゲル特性が変化する。これらのハイドロゲルは、５ｇ／Ｌの濃度を有するスクレログルカンの原液を、４ｇ／Ｌの濃度を有するタンパク質（Ｃｐ－Ｆ１）の原液と混合することにより作製された。したがって、これらの比率は混合された原液の体積に基づいている。

【図6A】レオロジー評価の例。示されているすべての分析は、最終濃度４ｇ／Ｌのスクレログルカンを含むハイドロゲルに関する。ハイドロゲル中の最終タンパク質濃度は、低から高の順に、０．０８ｇ／Ｌ、０．２ｇ／Ｌ、０．４ｇ／Ｌ、０．８ｇ／Ｌ、１．２ｇ／Ｌ、１．６ｇ／Ｌ、及び２ｇ／Ｌである。

【図6B】レオロジー評価の例。示されているすべての分析は、最終濃度４ｇ／Ｌのスクレログルカンを含むハイドロゲルに関する。ハイドロゲル中の最終タンパク質濃度は、低から高の順に、０．０８ｇ／Ｌ、０．２ｇ／Ｌ、０．４ｇ／Ｌ、０．８ｇ／Ｌ、１．２ｇ／Ｌ、１．６ｇ／Ｌ、及び２ｇ／Ｌである。

【図7】１２種類のタンパク質及びＣｐ－Ｆ１タンパク質の５種類のバリアントについての多糖類結合データのグレースケールヒートマップ。

【発明を実施するための形態】

【0019】

定義
本明細書で使用される場合、「ポリペプチド」という用語は、非アミノ酸基の付加によって改変されていてもよく改変されていなくてもよい単一のポリペプチド鎖を指す。この用語は産物の特定の長さを指すものではないため、ペプチド、オリゴペプチド、及びタンパク質がポリペプチドの定義に含まれる。一実施形態では、本明細書で使用される「ポリペプチド」という用語には、本明細書に記述される本開示のポリペプチドのバリアント、変異体、改変体、類似体及び／または誘導体も含まれる。本開示のポリペプチドのアミノ酸配列変異体は、適切なヌクレオチド変化を本発明の核酸に導入することによって、または所望のポリペプチドのインビトロ合成によって調製することができる。そのような変異体は、例えば、アミノ酸配列内に残基の欠失、挿入または置換を含む。最終的なポリペプチド産物が所望の特性を有する限り、欠失、挿入、及び置換の組み合わせを行って最終構築物に到達することができる。

【0020】

「アミノ酸残基」は、ペプチド結合またはペプチド結合とは異なる結合によって連結された天然または非天然のアミノ酸残基であり得る。アミノ酸残基はＤ配置でもＬ配置でもよい。アミノ酸残基は、炭素原子または炭素原子鎖を含む中心部分によって分離されたアミノ末端部分（ＮＨ_２）及びカルボキシル末端部分（ＣＯＯＨ）を含み、炭素原子または炭素原子鎖の少なくとも１つは、少なくとも１つの側鎖または官能基を含む。ＮＨ_２はアミノ酸またはペプチドのアミノ末端に存在するアミノ基を指し、ＣＯＯＨはアミノ酸またはペプチドのカルボキシル末端に存在するカルボキシル基を指す。アミノ酸という総称には、天然アミノ酸と非天然アミノ酸との両方が含まれる。Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２４３：３５５２－５９（１９６９）に記載され、３７ Ｃ．Ｆ．Ｒ．セクション１．８２２（ｂ）（２）で採用されている標準命名法の天然アミノ酸は、ここに記載するアミノ酸：Ｙ、Ｇ、Ｆ、Ｍ、Ａ、Ｓ、Ｉ、Ｌ、Ｔ、Ｖ、Ｐ、Ｋ、Ｈ、Ｑ、Ｅ、Ｗ、Ｒ、Ｄ、Ｎ及びＣの群に属する。非天然アミノ酸は直前に記載されていないものである。また、非天然アミノ酸残基は、改変されたアミノ酸残基、Ｌ－アミノ酸残基、及びＤ－アミノ酸残基の立体異性体を含むが、これらに限定されない。

【0021】

ペプチドの「機能的バリアント」は、機能的バリアントの元となるペプチドと本質的に同じ機能を果たすことができるペプチドである。特に、機能的バリアントは、機能的バリアントの元となるペプチドと同じ分子を、好ましくは同じ親和性で結合することができる。

【0022】

「ポリヌクレオチド」及び「核酸」という用語は、本明細書では交換可能に使用され、文脈によって示される目的に必要な情報を含む任意の核酸を指すことができる。つまり、核酸は、例えばコードされたペプチドに関連して適切な情報を表すことができる限り、一本鎖もしくは二本鎖のＤＮＡもしくはＲＮＡ、または他の核酸でもよく、また、核酸ポリマーのセンス鎖及びアンチセンス鎖などの相補的配列を含むことができる。

【0023】

本明細書で使用される場合、「結合部位」という用語は、分子または分子複合体の一領域であって、その形状の結果として、別の分子、分子複合体、化学物質または化合物と好ましく会合する領域を指す。本明細書に記述される本開示のポリペプチドは、炭水化物結合部位、つまり、単糖類、二糖類、及び多糖類などの糖と会合することができる結合部位を含む。

【0024】

本明細書で使用される場合、「ハイドロゲル」または「親水性ゲル」という用語は、水及び他の親水性膨潤剤と接触すると膨潤することができる親水性ポリマーの連続相を指す。この用語は水和状態に関係なく使用される。「ハイドロゲル」は、水を含む固体または半固体の質感の物質を指す。ハイドロゲルは、中に水などの物質が保持され得る分子構造の三次元ネットワークによって形成される。三次元分子ネットワークは、共有化学結合、もしくはイオン結合、またはそれらの任意の組み合わせによって結び付けられ得る。

【0025】

「多糖類」、「炭水化物」または「オリゴ糖類」：「多糖類」、「炭水化物」または「オリゴ糖類」という用語は、糖のポリマーを指す。「多糖類」、「炭水化物」、及び「オリゴ糖類」という用語は、交換可能に使用され得る。典型的に、多糖類またはオリゴ糖類は少なくとも３つの糖を含む。このポリマーは、天然の糖（例えばグルコース、フルクトース、ガラクトース、マンノース、アラビノース、リボース、及びキシロース）及び／または改変された糖（例えば２’－フルオロリボース、２’－デオキシリボース、及びヘキソース）を含み得る。「糖類」という用語は、本明細書では糖のポリマーの総称として使用され、「単糖類」、「二糖類」、「多糖類」、「炭水化物」、または「オリゴ糖類」、及び他の同義語を指す場合がある。

【0026】

炭水化物結合ポリペプチド
炭水化物結合モジュール（ＣＢＭ）は、特定の炭水化物リガンドに結合することができる低分子量の非触媒タンパク質である。ＣＢＭは、ＣＡＺｙデータベース（ｗｗｗ．ｃａｚｙ．ｏｒｇ）において配列相同性によりファミリーに分類されている（Ｌｏｍｂａｒｄ ｅｔ ａｌ．２０１４）。ＣＢＭ－リガンド結合の方式は、ＣＢＭタンパク質構造の表面アーキテクチャによって決定される（Ｂｏｒａｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．２００４）。ほとんどのＣＢＭファミリーにおいて、タンパク質は、タンパク質ごとに１つの炭水化物結合部位を提示する。

【0027】

本開示の一態様は、ＣＢＭファミリー９２（ＣＢＭ９２）のメンバーに属する新規ポリペプチドに関する。一態様では、本開示の新規ポリペプチドは、少なくとも２つの多糖類、好ましくは３つの多糖類を結合することができ、それらを架橋する。こうして得られる、本開示の新規ポリペプチドと２つまたは３つの多糖類とを含む架橋構造は、水の存在下でハイドロゲルを形成する。したがって、本開示の一態様では、新規ポリペプチドは、特定の多糖類に結合することができる２つまたは好ましくは３つのドメインまたは領域を含むことを特徴とする。

【0028】

一態様において、本開示は、ポリペプチドであって、

【化4】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１（Ｒ１）、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号８とは異なる、当該機能的バリアント、

【化5】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２（Ｒ２）、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０とは異なる、当該機能的バリアント、

【化6】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３（Ｒ３）、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２とは異なる、当該機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、当該ポリペプチドに関する。

【0029】

一態様において、本開示は、ポリペプチドであって、
ａ． 配列番号２２０：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４ＷＥＸ_３７Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２は、トリプトファン（Ｗ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）またはアラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、リジン（Ｋ）もしくはアルギニン（Ｒ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_５は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）、アラニン（Ａ）もしくはリジン（Ｋ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_６は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、チロシン（Ｙ）、システイン（Ｃ）、ロイシン（Ｌ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_７は、フェニルアラニン（Ｆ）またはセリン（Ｓ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_８は、グリシン（Ｇ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_９は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_１０は、アスパラギン（Ｎ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタミン（Ｑ）、リジン（Ｋ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１１は、リジン（Ｋ）、グルタミン（Ｑ）、アスパラギン（Ｎ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_１２は、チロシン（Ｙ）、ロイシン（Ｌ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１３は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_１４は、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、システイン（Ｃ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１５は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１６は、グルタミン酸（Ｅ）、リジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、アスパラギン（Ｎ）、グリシン（Ｇ）、グルタミン（Ｑ）またはプロリン（Ｐ）であり、
Ｘ_１８は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン（Ｎ）、トレオニン（Ｔ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１９は、ロイシン（Ｌ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、グリシン（Ｇ）もしくはアラニン（Ａ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、アラニン（Ａ）もしくはアスパラギン（Ｎ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２２は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２３は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２４は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２５は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アラニン（Ａ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２６は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２７は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２８は、アスパラギン（Ｎ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２９は、アルギニン（Ｒ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_３０は、トレオニン（Ｔ）、アスパラギン酸（Ｄ）、プロリン（Ｐ）、イソロイシン（Ｉ）、アスパラギン（Ｎ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_３１は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、グリシン（Ｇ）、リジン（Ｋ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_３２は、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、プロリン（Ｐ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_３３は、グリシン（Ｇ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_３４は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３７は、グルタミン（Ｑ）またはリジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２０とは異なる、当該機能的バリアント、
ｂ． 配列番号２２１：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１ＷＥＸ_３４Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）、チロシン（Ｙ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）、ロイシン（Ｌ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_７は、グリシン（Ｇ）もしくはセリン（Ｓ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_８は、アスパラギン（Ｎ）、メチオニン（Ｍ）、グルタミン（Ｑ）、ヒスチジン（Ｈ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_９は、グリシン（Ｇ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_１０は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アスパラギン（Ｎ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_１１は、チロシン（Ｙ）であり、
Ｘ_１２は、バリン（Ｖ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１３は、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）、リジン（Ｋ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１４は、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_１５は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１６は、アスパラギン（Ｎ）、プロリン（Ｐ）、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン酸（Ｄ）、イソロイシン（Ｉ）もしくはアスパラギン（Ｎ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_１８は、バリン（Ｖ）もしくはグリシン（Ｇ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_１９は、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）、ロイシン（Ｌ）、アラニン（Ａ）、もしくはグルタミン酸（Ｅ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、グルタミン（Ｑ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_２２は、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）、メチオニン（Ｍ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２３は、トレオニン（Ｔ）、アスパラギン（Ｎ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２４は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２５は、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）、トレオニン（Ｔ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２７は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、プロリン（Ｐ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_２８は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２９は、イソロイシン（Ｉ）、バリン（Ｖ）、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、チロシン（Ｙ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_３０は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、グルタミン酸（Ｅ）、トレオニン（Ｔ）、セリン（Ｓ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_３１は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン酸（Ｄ）、セリン（Ｓ）、プロリン（Ｐ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_３４は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２１とは異なる、当該機能的バリアント、
ｃ． 配列番号２２２：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４Ｘ_３５ＷＥＸ_３８Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３
［式中、
Ｘ_１は、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、チロシン（Ｙ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）、トレオニン（Ｔ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、アルギニン（Ｒ）、リジン（Ｋ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アルギニン（Ｒ）もしくはバリン（Ｖ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_７は、アスパラギン（Ｎ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_８は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_９は、グリシン（Ｇ）、トリプトファン（Ｗ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１０は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、セリン（Ｓ）、アラニン（Ａ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１１は、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１２は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_１３は、セリン（Ｓ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１４は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、ヒスチジン（Ｈ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１５は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１６は、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）、トリプトファン（Ｗ）、メチオニン（Ｍ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１８は、セリン（Ｓ）またはトレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_１９は、アスパラギン（Ｎ）、バリン（Ｖ）もしくはアスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、アラニン（Ａ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、セリン（Ｓ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２２は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２３は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、アルギニン（Ｒ）、トレオニン（Ｔ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_２４は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２５は、トレオニン（Ｔ）、チロシン（Ｙ）、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２７は、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）、トレオニン（Ｔ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_２８は、アルギニン（Ｒ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_２９は、アスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_３０は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_３１は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３２は、イソロイシン（Ｉ）、グルタミン酸（Ｅ）、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_３３は、グリシン（Ｇ）、リジン（Ｋ）もしくはアスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_３４は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、リジン（Ｋ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_３５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはシステイン（Ｃ）であり、
Ｘ_３８は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２２とは異なる、当該機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、当該ポリペプチドに関する。

【0030】

本開示の一実施形態では、ポリペプチドの各繰り返し領域は、本明細書で提供されるアミノ酸の付番に基づいて、好ましくは繰り返し領域１の３５位、繰り返し領域２の３２位、及び繰り返し領域３の３６位に、重要なトリプトファン（Ｗ）残基を含む。当該トリプトファン（Ｗ）残基は、トリプトファン（Ｗ）からアラニン（Ａ）への置換を含むノックアウト結合部位変異体から明らかなように、それを含む繰り返し領域と多糖類または二糖類との間の結合において重要な役割を果たす。トリプトファン側鎖の環は、ポリペプチドが結合する二糖類または多糖類の炭素環との主要な相互作用を有する。

【0031】

したがって、本開示の一実施形態では、本明細書に記述されるポリペプチドは、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０のアミノ酸配列を含む繰り返し領域１、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０とは異なる、当該機能的バリアントを含み、
ただし、当該配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０またはそのバリアントの３５位の残基がトリプトファン（Ｗ）であることを条件とする。

【0032】

本開示の別の実施形態では、当該ポリペプチドは、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８もしくは配列番号２２１のアミノ酸配列を含む繰り返し領域２、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８もしくは配列番号２２１とは異なる、当該機能的バリアントを含み、
ただし、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８、または配列番号２２１の当該バリアントの３２位の残基がトリプトファン（Ｗ）であることを条件とする。

【0033】

本開示の別の実施形態では、当該ポリペプチドは、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６もしくは配列番号６９、配列番号２２２のアミノ酸配列を含む繰り返し領域３、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６もしくは配列番号６９、配列番号２２２とは異なる、当該機能的バリアントを含み、
ただし、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６または配列番号６９、配列番号２２２の当該バリアントの３６位の残基がトリプトファン（Ｗ）であることを条件とする。

【0034】

本開示の一実施形態では、ポリペプチドの各繰り返し領域は、本明細書で提供されるアミノ酸の付番に基づいて、Ｒ１の３５位、Ｒ２の３２位またはＲ３の３６位のトリプトファン（Ｗ）残基に加えて、さらに、Ｒ１の３６位、Ｒ２の３３位もしくはＲ３の３７位のグルタミン酸、及び／またはＲ１の３８位、Ｒ２の３５位、もしくはＲ３の３９位のフェニルアラニンを含み、好ましくは、Ｒ１の３６位、Ｒ２の３３位またはＲ３の３７位のグルタミン酸と、Ｒ１の３８位、Ｒ２の３５位、またはＲ３の３９位のフェニルアラニンとの両方を含む。当該グルタミン酸及びフェニルアラニン残基は保存されており、それらを含む繰り返し領域と多糖類または二糖類との間の結合において重要な役割を果たす。これは図３Ｂでも確認できる。トリプトファン、グルタミン酸、及び／またはフェニルアラニンは、１つ、２つ、または３つすべての繰り返し領域において上述のように指定された位置に存在し得る。

【0035】

したがって、本開示のさらなる実施形態では、当該ポリペプチドは、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０のアミノ酸配列を含む繰り返し領域１、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０とは異なる、当該機能的バリアントを含み、
ただし、
配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０の当該バリアントの３５位の残基がトリプトファン（Ｗ）であること、及び
配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０の当該バリアントの３６位の残基がグルタミン酸（Ｅ）であること、及び／または
配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０の当該バリアントの３８位の残基がフェニルアラニン（Ｆ）であることを条件とする。

【0036】

本開示の別の実施形態では、当該ポリペプチドは、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８もしくは配列番号２２１のアミノ酸配列を含む繰り返し領域２、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８もしくは配列番号２２１とは異なる、当該機能的バリアントを含み、
ただし、
配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の当該バリアントの３２位の残基がトリプトファン（Ｗ）であること、
配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の当該バリアントの３３位の残基がグルタミン酸（Ｅ）であること、及び／または
配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の当該バリアントの３５位の残基がフェニルアラニン（Ｆ）であることを条件とする。

【0037】

本開示の別の実施形態では、当該ポリペプチドは、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９もしくは配列番号２２２のアミノ酸配列を含む繰り返し領域３、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９もしくは配列番号２２２とは異なる、当該機能的バリアントを含み、
ただし、
配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２の当該バリアントの３６位の残基がトリプトファン（Ｗ）であること、
配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２の当該バリアントの３７位の残基がグルタミン酸（Ｅ）であること、及び／または
配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２の当該バリアントの３９位の残基がフェニルアラニン（Ｆ）であることを条件とする。

【0038】

本開示の一実施形態では、ポリペプチドの各繰り返し領域は、本明細書で提供されるアミノ酸の付番に基づいて、Ｒ１の１２位もしくはＲ２及びＲ３の１１位のチロシン、及び／またはＲ１の１３位もしくはＲ２及びＲ３の１２位のバリンを含む。これらのチロシン及び／またはバリン残基は、ポリペプチドが二糖類または多糖類に結合するときに、ポリペプチドの３Ｄ構造内の結合部位の近くに位置しているため、二糖類または多糖類に対する繰り返し領域の結合に寄与し得る。

【0039】

本開示のさらなる実施形態では、当該ポリペプチドは、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０のアミノ酸配列を含む繰り返し領域１、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７もしくは配列番号２２０とは異なる、当該機能的バリアントを含み、
ただし、
配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０の当該バリアントの１２位の残基がチロシン（Ｙ）であること、及び／または
配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０の当該バリアントの１３位の残基がバリン（Ｖ）であることを条件とする。

【0040】

本開示の別の実施形態では、当該ポリペプチドは、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８もしくは配列番号２２１のアミノ酸配列を含む繰り返し領域２、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８もしくは配列番号２２１とは異なる、当該機能的バリアントを含み、
ただし、
配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の当該バリアントの１１位の残基がチロシン（Ｙ）であること、及び／または
配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の当該バリアントの１２位の残基がバリン（Ｖ）であることを条件とする。

【0041】

本開示の別の実施形態では、当該ポリペプチドは、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２のアミノ酸配列を含む繰り返し領域２、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２とは異なる、当該機能的バリアントを含み、
ただし、
配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２の当該バリアントの１１位の残基がチロシン（Ｙ）であること、及び／または
配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２の当該バリアントの１２位の残基がバリン（Ｖ）であることを条件とする。

【0042】

本開示の一実施形態では、本明細書で開示されるポリペプチドの繰り返し領域１は、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７、配列番号２２０のアミノ酸配列、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７、配列番号２２０とは異なる、当該機能的バリアントを含むか、またはそれからなる。

【0043】

本開示の一実施形態では、繰り返し領域２は、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８、配列番号２２１のアミノ酸配列、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８、配列番号２２１とは異なる、当該機能的バリアントを含むか、またはそれからなる。

【0044】

本開示の一実施形態では、繰り返し領域３は、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２のアミノ酸配列、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９、配列番号２２２とは異なる、当該機能的バリアントを含むか、またはそれからなる。

【0045】

本開示の一実施形態では、繰り返し領域１、繰り返し領域２及び繰り返し領域３の各々は、そのＮ末端で少なくとも３つのアミノ酸残基にフランキングされており、そのＣ末端で少なくとも３つのアミノ酸残基にフランキングされている。

【0046】

例えば、本開示のポリペプチドにおいて、繰り返し領域１、繰り返し領域２及び繰り返し領域３の各々は、そのＮ末端で少なくとも３つのアミノ酸残基にフランキングされており、そのＣ末端で少なくとも３つのアミノ酸残基にフランキングされており、したがって、
Ｙ_Ｎ－Ｒ１－Ｙ_ＣＺ_Ｎ－Ｒ２－Ｚ_ＣＪ_Ｎ－Ｒ３－Ｊ_Ｃであり、
ここで、
Ｙ_Ｎ、Ｙ_Ｃ、Ｚ_Ｎ、Ｚ_Ｃ、Ｊ_Ｎ、及びＪ_Ｃの各々は、個別に、少なくとも３つのアミノ酸を含むアミノ酸配列であり得る。

【0047】

この構造は一例に過ぎず、Ｙ_Ｎ、Ｙ_Ｃ、Ｚ_Ｎ、Ｚ_Ｃ、Ｊ_Ｎ、及びＪ_Ｃの各々は、個別に、３個を超えるアミノ酸、例えば５個を超えるアミノ酸、例えば１０個を超えるアミノ酸、例えば１５個を超えるアミノ酸、例えば２０個を超えるアミノ酸を含むアミノ酸配列でもよい。さらに、Ｙ_Ｎ、Ｙ_Ｃ、Ｚ_Ｎ、Ｚ_Ｃ、Ｊ_Ｎ、及びＪ_Ｃの各々のアミノ酸の数は同じでもよく、異なっていてもよい。

【0048】

本開示の一実施形態では、機能的バリアントの配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０は、当該バリアントのアミノ酸配列が５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０とは異なる。

【0049】

本開示の一実施形態では、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０の機能的バリアントは、当該バリアントのアミノ酸配列が、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０の残基１～３４または３６～３８のいずれか１つに、６個の個別のアミノ酸置換、例えば５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０とは異なる。

【0050】

本開示の一実施形態では、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０の機能的バリアントは、当該バリアントのアミノ酸配列が、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０の残基１～３４または３７のいずれか１つに、６個の個別のアミノ酸置換、例えば５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７または配列番号２２０とは異なる。

【0051】

本開示の一実施形態では、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の機能的バリアントは、当該バリアントのアミノ酸配列が５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１とは異なる。

【0052】

本開示の一実施形態では、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の機能的バリアントは、当該バリアントのアミノ酸配列が、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の残基１～３１または３３～３５のいずれか１つに、６個の個別のアミノ酸置換、例えば５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１とは異なる。

【0053】

本開示の一実施形態では、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の機能的バリアントは、当該バリアントのアミノ酸配列が、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１の残基１～３１または３４のいずれか１つに、６個の個別のアミノ酸置換、例えば５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８または配列番号２２１とは異なる。

【0054】

本開示の一実施形態では、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２の機能的バリアントは、当該バリアントのアミノ酸配列が５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２とは異なる。

【0055】

本開示の一実施形態では、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２の機能的バリアントは、当該バリアントのアミノ酸配列が、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２の残基１～３５または３７～３９のいずれか１つに、６個の個別のアミノ酸置換、例えば５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２とは異なる。

【0056】

本開示の一実施形態では、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２の機能的バリアントは、当該バリアントのアミノ酸配列が、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２の残基１～３５または３８のいずれか１つに、６個の個別のアミノ酸置換、例えば５個の個別のアミノ酸置換、例えば４個の個別のアミノ酸置換、例えば３個の個別のアミノ酸置換、例えば２個の個別のアミノ酸置換、例えば１個の個別のアミノ酸置換を含むという点で、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９または配列番号２２２とは異なる。

【0057】

本開示の一実施形態では、個別のアミノ酸置換は保存的アミノ酸置換である。

【0058】

本開示の一実施形態では、本明細書に記述されるポリペプチドの繰り返し領域１は、配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４、配列番号６７のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。

【0059】

本開示の一実施形態では、本明細書に記述されるポリペプチドの繰り返し領域２は、配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５、配列番号６８のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。

【0060】

本開示の一実施形態では、本明細書に記述されるポリペプチドの繰り返し領域３は、配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。

【0061】

本開示の一実施形態では、当該ポリペプチドは、繰り返し領域１及び繰り返し領域２、またはそれらの機能的バリアント；繰り返し領域１及び繰り返し領域３、またはそれらの機能的バリアント；繰り返し領域２及び繰り返し領域３、またはそれらの機能的バリアント；繰り返し領域１、繰り返し領域２及び繰り返し領域３、またはそれらの機能的バリアントを含む。

【0062】

さらなる態様において、本開示は、配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３、または配列番号７１～２１９との少なくとも７５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドであって、１つ以上の糖類単位を結合することができる、当該ポリペプチドに関する。

【0063】

本開示の一実施形態は、配列番号３、配列番号４、配列番号２０～配列番号３３との少なくとも７５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドであって、１つ以上の糖類単位を結合することができる、当該ポリペプチドに関する。

【0064】

本開示のさらなる実施形態では、当該ポリペプチドは、配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも８０％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも８５％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも９０％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも９５％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも９６％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも９７％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも９８％の配列同一性、例えば配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0065】

本開示の別の実施形態では、当該ポリペプチドは、配列番号３、配列番号４または配列番号２０～配列番号３３のアミノ酸配列を含むか、またはそれからなる。

【0066】

本開示の一実施形態では、当該ポリペプチドは、
ａ． 配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４もしくは配列番号６７のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４もしくは配列番号６７とは異なる、当該機能的バリアント、
ｂ． 配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５もしくは配列番号６８のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５もしくは配列番号６８とは異なる、当該機能的バリアント、及び
ｃ． 配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６もしくは配列番号６９のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９とは異なる、当該機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む。

【0067】

本開示の一実施形態では、当該ポリペプチドは３つの繰り返し領域を含み、それらは各々、
ａ． 配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４もしくは配列番号６７のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号８、配列番号９、配列番号３４、配列番号３７、配列番号４０、配列番号４３、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５５、配列番号５８、配列番号６１、配列番号６４もしくは配列番号６７とは異なる、当該機能的バリアント、
ｂ． 配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５もしくは配列番号６８のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０、配列番号１１、配列番号３５、配列番号３８、配列番号４１、配列番号４４、配列番号４７、配列番号５０、配列番号５３、配列番号５６、配列番号５９、配列番号６２、配列番号６５もしくは配列番号６８とは異なる、当該機能的バリアント、及び
ｃ． 配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６もしくは配列番号６９のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３、またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２、配列番号１３、配列番号３６、配列番号３９、配列番号４２、配列番号４５、配列番号４８、配列番号５１、配列番号５４、配列番号５７、配列番号６０、配列番号６３、配列番号６６、配列番号６９とは異なる、当該機能的バリアント
からなる群から選択される。

【0068】

本開示の一実施形態では、当該ポリペプチドは、βトレフォイルフォールド構造を有する。好ましくは、この構造は、２つのβストランドによって各々が形成された６つのβヘアピンからなり、おおよそ３回の対称性を示す。

【0069】

本開示のポリペプチドの一機能は、特定の二糖類及び多糖類を結合することができ、さらには特定の多糖類を架橋することができることである。この機能は、少なくとも部分的には、本開示のポリペプチド中に、二糖類及び多糖類を認識して結合することができる領域であり、本明細書で定義される、繰り返し領域１、繰り返し領域２、及び／または繰り返し領域３などの繰り返し領域が２つまたは好ましくは３つ存在することに関係している。

【0070】

したがって、本開示の一実施形態では、繰り返し領域１、繰り返し領域２、及び繰り返し領域３の各々は、少なくとも１つの二糖類を結合することができる。

【0071】

本開示の一実施形態では、繰り返し領域１、繰り返し領域２、及び繰り返し領域３の各々は、少なくとも１つの多糖類を結合することができる。

【0072】

本開示のポリペプチドの繰り返し領域は、異なるアミノ酸配列を有し得るにもかかわらず、単糖類単位間の同じ種類の結合を含むことを特徴とする二糖類及び多糖類を結合することができる。

【0073】

本開示のポリペプチドは、特定のＧｌｃ－β－１，６結合を含むものであれば任意の二糖類またはより長いオリゴ糖類もしくは多糖類を結合することができる。本明細書に記述される複数の多糖類がこの結合を含む。

【0074】

本開示のポリペプチドは、異常な細菌分泌物中に見出される極めて稀なＧｌｃ－β－１，２－Ｇｌｃ構造への結合も示す。

【0075】

本開示の一実施形態では、繰り返し領域１、繰り返し領域２及び／または繰り返し領域３の各々は、少なくとも１つのＧｌｃ－β－１，６－Ｇｌｃ単位を含む二糖類または多糖類を結合することができる。

【0076】

本開示の別の実施形態では、繰り返し領域１、繰り返し領域２及び／または繰り返し領域３の各々は、少なくとも１つのＧｌｃ－β－１，２－Ｇｌｃ単位を含む二糖類または多糖類を結合することができる。

【0077】

本開示の一実施形態では、繰り返し領域１、繰り返し領域２及び／または繰り返し領域３の各々は、少なくとも１つのＧｌｃ－β－１，６－Ｇｌｃ単位を含むグリカンを含む二糖類または多糖類を結合することができる。

【0078】

本開示の一実施形態では、繰り返し領域１、繰り返し領域２及び／または繰り返し領域３の各々は、β－１，６－グルカン骨格を有する二糖類または多糖類を結合することができる。

【0079】

本開示の一実施形態では、繰り返し領域１、繰り返し領域２及び／または繰り返し領域３の各々は、１つ以上のＧｌｃ－β－１，６－Ｇｌｃ修飾を有する二糖類または多糖類を結合することができる。

【0080】

本開示の一実施形態では、繰り返し領域１、繰り返し領域２及び／または繰り返し領域３の各々は、β－１，３－グルカン骨格上に１つ以上のＧｌｃ－β－１，６－Ｇｌｃ修飾（複数可）を有する二糖類または多糖類を結合することができる。

【0081】

本開示の一実施形態では、繰り返し領域１、繰り返し領域２及び／または繰り返し領域３の各々は、多糖類のスクレログルカンを結合することができる。

【0082】

本開示の一実施形態では、繰り返し領域１、繰り返し領域２及び／または繰り返し領域３の各々は、多糖類のプスツランを結合することができる。

【0083】

本開示の一実施形態では、繰り返し領域１、繰り返し領域２及び／または繰り返し領域３の各々は、多糖類のラミナリンを結合することができる。

【0084】

本開示の一実施形態では、繰り返し領域１、繰り返し領域２及び／または繰り返し領域３の各々は、多糖類のゲンチオビオースを結合することができる。

【0085】

本開示の一実施形態では、糖類は、少なくとも二糖類である。

【0086】

本開示の一実施形態では、糖類はオリゴ糖類または多糖類である。

【0087】

炭水化物結合ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド
一態様では、本開示は、本明細書に記述されるポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに関する。

【0088】

本開示の一実施形態では、当該ポリヌクレオチドは、ポリペプチドであって、
ａ． 配列番号２２０：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４ＷＥＸ_３７Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２は、トリプトファン（Ｗ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）またはアラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、リジン（Ｋ）もしくはアルギニン（Ｒ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_５は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）、アラニン（Ａ）もしくはリジン（Ｋ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_６は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、チロシン（Ｙ）、システイン（Ｃ）、ロイシン（Ｌ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_７は、フェニルアラニン（Ｆ）またはセリン（Ｓ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_８は、グリシン（Ｇ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_９は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_１０は、アスパラギン（Ｎ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタミン（Ｑ）、リジン（Ｋ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１１は、リジン（Ｋ）、グルタミン（Ｑ）、アスパラギン（Ｎ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_１２は、チロシン（Ｙ）、ロイシン（Ｌ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１３は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_１４は、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、システイン（Ｃ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１５は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１６は、グルタミン酸（Ｅ）、リジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、アスパラギン（Ｎ）、グリシン（Ｇ）、グルタミン（Ｑ）またはプロリン（Ｐ）であり、
Ｘ_１８は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン（Ｎ）、トレオニン（Ｔ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１９は、ロイシン（Ｌ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、グリシン（Ｇ）もしくはアラニン（Ａ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、アラニン（Ａ）もしくはアスパラギン（Ｎ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２２は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２３は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２４は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２５は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アラニン（Ａ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２６は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２７は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２８は、アスパラギン（Ｎ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２９は、アルギニン（Ｒ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_３０は、トレオニン（Ｔ）、アスパラギン酸（Ｄ）、プロリン（Ｐ）、イソロイシン（Ｉ）、アスパラギン（Ｎ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_３１は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、グリシン（Ｇ）、リジン（Ｋ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_３２は、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、プロリン（Ｐ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_３３は、グリシン（Ｇ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_３４は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３７は、グルタミン（Ｑ）またはリジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２０とは異なる、当該機能的バリアント、
ｂ． 配列番号２２１：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１ＷＥＸ_３４Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）、チロシン（Ｙ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）、ロイシン（Ｌ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_７は、グリシン（Ｇ）もしくはセリン（Ｓ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_８は、アスパラギン（Ｎ）、メチオニン（Ｍ）、グルタミン（Ｑ）、ヒスチジン（Ｈ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_９は、グリシン（Ｇ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_１０は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アスパラギン（Ｎ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_１１は、チロシン（Ｙ）であり、
Ｘ_１２は、バリン（Ｖ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１３は、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）、リジン（Ｋ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１４は、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_１５は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１６は、アスパラギン（Ｎ）、プロリン（Ｐ）、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン酸（Ｄ）、イソロイシン（Ｉ）もしくはアスパラギン（Ｎ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_１８は、バリン（Ｖ）もしくはグリシン（Ｇ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_１９は、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）、ロイシン（Ｌ）、アラニン（Ａ）、もしくはグルタミン酸（Ｅ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、グルタミン（Ｑ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_２２は、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）、メチオニン（Ｍ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２３は、トレオニン（Ｔ）、アスパラギン（Ｎ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２４は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２５は、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）、トレオニン（Ｔ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２７は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、プロリン（Ｐ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_２８は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２９は、イソロイシン（Ｉ）、バリン（Ｖ）、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、チロシン（Ｙ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_３０は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、グルタミン酸（Ｅ）、トレオニン（Ｔ）、セリン（Ｓ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_３１は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン酸（Ｄ）、セリン（Ｓ）、プロリン（Ｐ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_３４は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２１とは異なる、当該機能的バリアント、
ｃ． 配列番号２２２：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４Ｘ_３５ＷＥＸ_３８Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３
［式中、
Ｘ_１は、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、チロシン（Ｙ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）、トレオニン（Ｔ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、アルギニン（Ｒ）、リジン（Ｋ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アルギニン（Ｒ）もしくはバリン（Ｖ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_７は、アスパラギン（Ｎ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_８は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_９は、グリシン（Ｇ）、トリプトファン（Ｗ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１０は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、セリン（Ｓ）、アラニン（Ａ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１１は、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１２は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_１３は、セリン（Ｓ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１４は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、ヒスチジン（Ｈ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１５は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１６は、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）、トリプトファン（Ｗ）、メチオニン（Ｍ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１８は、セリン（Ｓ）またはトレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_１９は、アスパラギン（Ｎ）、バリン（Ｖ）もしくはアスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、アラニン（Ａ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、セリン（Ｓ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２２は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２３は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、アルギニン（Ｒ）、トレオニン（Ｔ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_２４は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２５は、トレオニン（Ｔ）、チロシン（Ｙ）、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２７は、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）、トレオニン（Ｔ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_２８は、アルギニン（Ｒ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_２９は、アスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_３０は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_３１は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３２は、イソロイシン（Ｉ）、グルタミン酸（Ｅ）、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_３３は、グリシン（Ｇ）、リジン（Ｋ）もしくはアスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_３４は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、リジン（Ｋ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_３５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはシステイン（Ｃ）であり、
Ｘ_３８は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２２とは異なる、当該機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、当該ポリペプチドをコードする。

【0089】

本開示の一実施形態では、当該ポリヌクレオチドは、宿主細胞での発現のためにコドン最適化されている。

【0090】

別の態様では、本開示は、本明細書に記述されるポリヌクレオチド、または本明細書に記述される実施形態のいずれかに係る炭水化物結合ポリペプチドをコードする核酸配列を含む、組換えベクターに関する。組換えベクターの例は、プラスミド、ウイルスベクター、コスミド、及び人工染色体を含むが、これらに限定されない。

【0091】

本開示の一実施形態では、ベクターは、プラスミドベクターである。

【0092】

さらなる態様において、本開示は、本明細書に記述される組換えベクターを発現する宿主細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉの標準発現株）に関する。

【0093】

ハイドロゲル
本明細書で提示されるように、本開示のポリペプチドは多糖類を結合することができる。本開示のポリペプチドは各々、最大３つの多糖類鎖を結合することができる。さらに、多糖類と共に本開示のポリペプチドが複数存在する場合、本開示のポリペプチドは、当該多糖類を結合するだけでなく、それらを架橋することもできる場合がある。したがって、本開示のポリペプチドは、特定の多糖類を結合して架橋することができる。特定の多糖類については本明細書に記述する。

【0094】

一態様では、本開示は、２つ以上の多糖類を架橋するための、本明細書の実施形態のいずれかに記述されたポリペプチドの使用に関する。

【0095】

本開示の別の態様は、本明細書に記述される実施形態のいずれかに係る少なくとも１つのポリペプチドと２つ以上の多糖類とを含む組成物に関し、ここで、多糖類はポリペプチドによって架橋されており、例えば、ポリペプチドは多糖類をひとつに連結する架橋剤である。

【0096】

別の態様では、本開示は、本明細書に記述される実施形態のいずれかに係る少なくとも１つのポリペプチドと２つ以上の多糖類とを含むハイドロゲルであって、架橋構造を有する当該ハイドロゲルに関する。

【0097】

別の態様では、本開示は、本明細書に記述される実施形態のいずれかに係る少なくとも２つのポリペプチドと３つ以上の多糖類とを含むハイドロゲルであって、架橋構造を有する当該ハイドロゲルに関する。

【0098】

好ましくは、本開示はまた、本明細書に記述される実施形態のいずれかに係る複数のポリペプチドと複数の多糖類とを含むハイドロゲルであって、架橋構造を有する当該ハイドロゲルに関する。

【0099】

実のところ、本明細書に記述される実施形態のいずれかに係るポリペプチドは、本開示のハイドロゲルにおいて架橋剤として機能する。

【0100】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、本明細書に記述されるポリペプチドである、二官能性または多官能性のリンカー、例えば、２つ以上の多糖類鎖に結合することができるリンカーで架橋される。

【0101】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、各々のサイズが２０．０００Ｄａ以上、例えば５０．０００Ｄａ以上、例えば７０．０００Ｄａ以上、例えば１００．０００Ｄａ以上、例えば１５０．０００Ｄａ以上、例えば２００．０００Ｄａ以上、例えば３００．０００Ｄａ以上、例えば５００．０００Ｄａ以上、例えば７００．０００Ｄａ以上、例えば８００．０００Ｄａ以上、例えば９００．０００Ｄａ以上、例えば１．０００．０００Ｄａ以上である１つ以上の多糖類を含み、例えば、多糖類のサイズは約２．０００．０００Ｄａである。好ましくは、多糖類は少なくとも１００．０００Ｄａ、例えば少なくとも５００．０００Ｄａ、例えば少なくとも１．０００．０００Ｄａ、例えば２．０００．０００Ｄａである。

【0102】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、水分散性である多糖類を含む。さらなる実施形態では、多糖類は、糖類１ｍｇ当たり水７０μｇ以上、好ましくは糖類１ｍｇ当たり水７４μｇ以上、例えば糖類１ｍｇ当たり水７７μｇの水分含量を有する。

【0103】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、バイオポリマーである１つ以上の多糖類であって、各々が、主鎖に対するβ－１，６結合グルコース修飾を有する１つ以上のβ－１，３－グルカン単位を含む、スクレログルカンまたはシゾフィランなどの多糖類を含む。

【0104】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、０．１ｇ／Ｌ～１０ｇ／Ｌの本開示のポリペプチドと、２ｇ／Ｌ～１０ｇ／Ｌの本明細書で定義される多糖類とを含む。好ましくは、ハイドロゲルは、０．１５ｇ／Ｌ～５ｇ／Ｌの本開示のポリペプチドと、３ｇ／Ｌ～５ｇ／Ｌの本明細書で定義される多糖類とを含む。

【0105】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、少なくとも０．１ｇ／Ｌの本開示のポリペプチド、例えば少なくとも０．２ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも０．３ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも０．５ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも０．８ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも１ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも１．３ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも１．７ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも２ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも２．５ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも３ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも３．５ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも４ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも４．５ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも５ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも５．５ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも６ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも６．５ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも７ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも７．５ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも８ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも８．５ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも９ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも９．５ｇ／Ｌのポリペプチド、例えば少なくとも１０ｇ／Ｌの本開示のポリペプチドを含む。

【0106】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、最大で１０ｇ／Ｌの本開示のポリペプチドを含む。

【0107】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、少なくとも２ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも３ｇ／Ｌの多糖類、かつ最大で５ｇ／Ｌの多糖類、例えば最大で６ｇ／Ｌの多糖類、例えば最大で７ｇ／Ｌの多糖類、例えば最大で８ｇ／Ｌの多糖類、例えば最大で９ｇ／Ｌの多糖類、１０ｇ／Ｌの多糖類を含む。好ましくは、本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、少なくとも３ｇ／Ｌの多糖類、かつ最大で５ｇ／Ｌの多糖類を含み、多糖類は少なくとも１つのＧｌｃ－β－１，６－Ｇｌｃ単位を含む。

【0108】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、少なくとも２．５ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも３ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも３．５ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも４ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも４．５ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも５ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも５．５ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも６ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも６．５ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも７ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも７．５ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも８ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも８．５ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも９ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも９．５ｇ／Ｌの多糖類、例えば最大で１０ｇ／Ｌの多糖類を含み、多糖類は少なくとも１つのＧｌｃ－β－１，６－Ｇｌｃ単位を含む。

【0109】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、少なくとも２ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも３ｇ／Ｌのスクレログルカン、かつ最大で１０ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば最大で６ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば最大で７ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば最大で８ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば最大で９ｇ／Ｌのスクレログルカンを含む。好ましくは、本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、少なくとも３ｇ／Ｌのスクレログルカン、かつ最大で５ｇ／Ｌのスクレログルカンを含む。

【0110】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、少なくとも２．５ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも３ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも３．５ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも４ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも４．５ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも５ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも５．５ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも６ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも６．５ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも７ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも７．５ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも８ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも８．５ｇ／Ｌのスクレログルカン、例えば少なくとも９ｇ／Ｌの多糖類、例えば少なくとも９．５ｇ／Ｌの多糖類、例えば最大で１０ｇ／Ｌの多糖類を含み、多糖類は少なくとも１つのＧｌｃ－β－１，６－Ｇｌｃ単位を含む。

【0111】

例えば、本開示の図５及び実施例５に示されるように、ハイドロゲルは、３～５ｇ／Ｌの多糖類スクレログルカン、例えば約４ｇ／Ｌの多糖類スクレログルカンを含むことができる。

【0112】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、少なくとも９０重量％の水、例えば少なくとも９１重量％の水、例えば少なくとも９２重量％の水、例えば少なくとも９３重量％の水、例えば少なくとも９４重量％の水、例えば少なくとも９５重量％の水、例えば少なくとも９６重量％の水、例えば少なくとも９７重量％の水、例えば少なくとも９８重量％の水、例えば少なくとも９９重量％の水、例えば少なくとも９９．５重量％の水を含む。

【0113】

本開示の一実施形態に係るハイドロゲルは、室温にて空気中で乾き切ることができ、その後、水と接触すると再水和することができる。一実施形態では、再水和したゲルは、元のハイドロゲルよりも低い含水量を有し、例えば、再水和したゲルは、７０重量％～９０重量％の水を含み得る。例えば、再水和したハイドロゲルはフィルムの形態であり得る。

【0114】

一実施形態では、再水和したゲルは、元のハイドロゲルに類似する含水量を有し、例えば、再水和したゲルは、少なくとも７０重量％の水、例えば少なくとも８０重量％の水、例えば少なくとも９０重量％の水を含み得る。

【0115】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、架橋構造を保持したまま脱水させ、再び再水和または再膨潤させることができる。脱水及び再水和の過程は、それぞれ、水分喪失、及び再膨潤などの含水量の回復により、ハイドロゲルの物理的形態が変化する過程を意味する。

【0116】

本開示のハイドロゲルの脱水及び再水和は、当技術分野で公知の方法のいずれかによって行うことができる。

【0117】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、再水和したハイドロゲルであり、再水和したハイドロゲルは、少なくとも７０重量％の水、例えば少なくとも７３重量％の水、例えば少なくとも７５重量％の水、例えば少なくとも７８重量％の水、例えば少なくとも８０重量％の水、例えば少なくとも８３重量％の水、例えば少なくとも８５重量％の水、例えば少なくとも８８重量％の水、例えば少なくとも９０重量％の水を含む。

【0118】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、本開示のポリペプチド及び多糖類を、１：２０～１：２のポリペプチド：多糖類の比、例えば１：２０～１：３の比、例えば１：２０～１：５の比、例えば１：２０～１：７の比、例えば１：２０～１：１０の比、例えば１：２０～１：１２の比、例えば１：２０～１：１５の比、例えば１：２０～１：１８の比、例えば１：１８～１：２の比、例えば１：１５～１：２の比、例えば１：１３～１：２の比、例えば１：１０～１：２の比、例えば１：８～１：２の比、例えば１：６～１：２の比、例えば１：４～１：２の比で含む。例えば、多糖類はスクレログルカンであり得る。これらの比率は、室温の水中の５ｇ／Ｌの多糖類の原液と、室温の水中の４ｇ／ｌの本開示のポリペプチドの原液とに基づく体積：体積比である。

【0119】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、
ポリペプチドであって、
ａ． 配列番号２２０：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４ＷＥＸ_３７Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１（Ｒ１）
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２は、トリプトファン（Ｗ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）またはアラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、リジン（Ｋ）もしくはアルギニン（Ｒ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_５は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）、アラニン（Ａ）もしくはリジン（Ｋ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_６は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、チロシン（Ｙ）、システイン（Ｃ）、ロイシン（Ｌ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_７は、フェニルアラニン（Ｆ）またはセリン（Ｓ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_８は、グリシン（Ｇ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_９は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_１０は、アスパラギン（Ｎ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタミン（Ｑ）、リジン（Ｋ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１１は、リジン（Ｋ）、グルタミン（Ｑ）、アスパラギン（Ｎ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_１２は、チロシン（Ｙ）、ロイシン（Ｌ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１３は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_１４は、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、システイン（Ｃ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１５は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１６は、グルタミン酸（Ｅ）、リジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、アスパラギン（Ｎ）、グリシン（Ｇ）、グルタミン（Ｑ）またはプロリン（Ｐ）であり、
Ｘ_１８は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン（Ｎ）、トレオニン（Ｔ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１９は、ロイシン（Ｌ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、グリシン（Ｇ）もしくはアラニン（Ａ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、アラニン（Ａ）もしくはアスパラギン（Ｎ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２２は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２３は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２４は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２５は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アラニン（Ａ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２６は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２７は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２８は、アスパラギン（Ｎ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２９は、アルギニン（Ｒ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_３０は、トレオニン（Ｔ）、アスパラギン酸（Ｄ）、プロリン（Ｐ）、イソロイシン（Ｉ）、アスパラギン（Ｎ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_３１は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、グリシン（Ｇ）、リジン（Ｋ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_３２は、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、プロリン（Ｐ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_３３は、グリシン（Ｇ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_３４は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３７は、グルタミン（Ｑ）またはリジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２０とは異なる、当該機能的バリアント、
ｂ． 配列番号２２１：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１ＷＥＸ_３４Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２（Ｒ２）
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）、チロシン（Ｙ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）、ロイシン（Ｌ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_７は、グリシン（Ｇ）もしくはセリン（Ｓ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_８は、アスパラギン（Ｎ）、メチオニン（Ｍ）、グルタミン（Ｑ）、ヒスチジン（Ｈ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_９は、グリシン（Ｇ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_１０は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アスパラギン（Ｎ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_１１は、チロシン（Ｙ）であり、
Ｘ_１２は、バリン（Ｖ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１３は、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）、リジン（Ｋ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１４は、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_１５は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１６は、アスパラギン（Ｎ）、プロリン（Ｐ）、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン酸（Ｄ）、イソロイシン（Ｉ）もしくはアスパラギン（Ｎ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_１８は、バリン（Ｖ）もしくはグリシン（Ｇ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_１９は、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）、ロイシン（Ｌ）、アラニン（Ａ）、もしくはグルタミン酸（Ｅ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、グルタミン（Ｑ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_２２は、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）、メチオニン（Ｍ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２３は、トレオニン（Ｔ）、アスパラギン（Ｎ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２４は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２５は、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）、トレオニン（Ｔ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２７は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、プロリン（Ｐ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_２８は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２９は、イソロイシン（Ｉ）、バリン（Ｖ）、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、チロシン（Ｙ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_３０は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、グルタミン酸（Ｅ）、トレオニン（Ｔ）、セリン（Ｓ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_３１は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン酸（Ｄ）、セリン（Ｓ）、プロリン（Ｐ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_３４は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２１とは異なる、当該機能的バリアント、
ｃ． 配列番号２２２：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４Ｘ_３５ＷＥＸ_３８Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３（Ｒ３）
［式中、
Ｘ_１は、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、チロシン（Ｙ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）、トレオニン（Ｔ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、アルギニン（Ｒ）、リジン（Ｋ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アルギニン（Ｒ）もしくはバリン（Ｖ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_７は、アスパラギン（Ｎ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_８は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_９は、グリシン（Ｇ）、トリプトファン（Ｗ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１０は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、セリン（Ｓ）、アラニン（Ａ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１１は、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１２は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_１３は、セリン（Ｓ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１４は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、ヒスチジン（Ｈ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１５は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１６は、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）、トリプトファン（Ｗ）、メチオニン（Ｍ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１８は、セリン（Ｓ）またはトレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_１９は、アスパラギン（Ｎ）、バリン（Ｖ）もしくはアスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、アラニン（Ａ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、セリン（Ｓ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２２は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２３は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、アルギニン（Ｒ）、トレオニン（Ｔ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_２４は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２５は、トレオニン（Ｔ）、チロシン（Ｙ）、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２７は、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）、トレオニン（Ｔ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_２８は、アルギニン（Ｒ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_２９は、アスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_３０は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_３１は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３２は、イソロイシン（Ｉ）、グルタミン酸（Ｅ）、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_３３は、グリシン（Ｇ）、リジン（Ｋ）もしくはアスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_３４は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、リジン（Ｋ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_３５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはシステイン（Ｃ）であり、
Ｘ_３８は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２２とは異なる、当該機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、当該ポリペプチドと、
β－１，６結合グルコース修飾を有する１つ以上のβ－１，３－グルカン単位を含む多糖類とを含む。

【0120】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、
ポリペプチドであって、

【化7】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１（Ｒ１）、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号８とは異なる、当該機能的バリアント、

【化8】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２（Ｒ２）、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０とは異なる、当該機能的バリアント、

【化9】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３（Ｒ３）、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２とは異なる、当該機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、当該ポリペプチドと、
β－１，６結合グルコース修飾を有する１つ以上のβ－１，３－グルカン単位を含む多糖類とを含む。

【0121】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、
ポリペプチドであって、
ａ． 配列番号２２０：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４ＷＥＸ_３７Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１（Ｒ１）
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２は、トリプトファン（Ｗ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）またはアラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、リジン（Ｋ）もしくはアルギニン（Ｒ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_５は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）、アラニン（Ａ）もしくはリジン（Ｋ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_６は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、チロシン（Ｙ）、システイン（Ｃ）、ロイシン（Ｌ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_７は、フェニルアラニン（Ｆ）またはセリン（Ｓ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_８は、グリシン（Ｇ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_９は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_１０は、アスパラギン（Ｎ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタミン（Ｑ）、リジン（Ｋ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１１は、リジン（Ｋ）、グルタミン（Ｑ）、アスパラギン（Ｎ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_１２は、チロシン（Ｙ）、ロイシン（Ｌ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１３は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_１４は、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、システイン（Ｃ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１５は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１６は、グルタミン酸（Ｅ）、リジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、アスパラギン（Ｎ）、グリシン（Ｇ）、グルタミン（Ｑ）またはプロリン（Ｐ）であり、
Ｘ_１８は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン（Ｎ）、トレオニン（Ｔ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１９は、ロイシン（Ｌ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、グリシン（Ｇ）もしくはアラニン（Ａ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、アラニン（Ａ）もしくはアスパラギン（Ｎ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２２は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２３は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２４は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２５は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アラニン（Ａ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２６は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２７は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２８は、アスパラギン（Ｎ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２９は、アルギニン（Ｒ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_３０は、トレオニン（Ｔ）、アスパラギン酸（Ｄ）、プロリン（Ｐ）、イソロイシン（Ｉ）、アスパラギン（Ｎ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_３１は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、グリシン（Ｇ）、リジン（Ｋ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_３２は、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、プロリン（Ｐ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_３３は、グリシン（Ｇ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_３４は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３７は、グルタミン（Ｑ）またはリジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２０とは異なる、当該機能的バリアント、
ｂ． 配列番号２２１：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１ＷＥＸ_３４Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２（Ｒ２）
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）、チロシン（Ｙ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）、ロイシン（Ｌ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_７は、グリシン（Ｇ）もしくはセリン（Ｓ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_８は、アスパラギン（Ｎ）、メチオニン（Ｍ）、グルタミン（Ｑ）、ヒスチジン（Ｈ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_９は、グリシン（Ｇ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_１０は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アスパラギン（Ｎ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_１１は、チロシン（Ｙ）であり、
Ｘ_１２は、バリン（Ｖ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１３は、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）、リジン（Ｋ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１４は、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_１５は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１６は、アスパラギン（Ｎ）、プロリン（Ｐ）、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン酸（Ｄ）、イソロイシン（Ｉ）もしくはアスパラギン（Ｎ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_１８は、バリン（Ｖ）もしくはグリシン（Ｇ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_１９は、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）、ロイシン（Ｌ）、アラニン（Ａ）、もしくはグルタミン酸（Ｅ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、グルタミン（Ｑ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_２２は、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）、メチオニン（Ｍ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２３は、トレオニン（Ｔ）、アスパラギン（Ｎ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２４は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２５は、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）、トレオニン（Ｔ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２７は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、プロリン（Ｐ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_２８は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２９は、イソロイシン（Ｉ）、バリン（Ｖ）、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）、チロシン（Ｙ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_３０は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、グルタミン酸（Ｅ）、トレオニン（Ｔ）、セリン（Ｓ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_３１は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン酸（Ｄ）、セリン（Ｓ）、プロリン（Ｐ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_３４は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２１とは異なる、当該機能的バリアント、
ｃ． 配列番号２２２：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４Ｘ_３５ＷＥＸ_３８Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３（Ｒ３）
［式中、
Ｘ_１は、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、チロシン（Ｙ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）、トレオニン（Ｔ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、アルギニン（Ｒ）、リジン（Ｋ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アルギニン（Ｒ）もしくはバリン（Ｖ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_７は、アスパラギン（Ｎ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_８は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）、アラニン（Ａ）、リジン（Ｋ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_９は、グリシン（Ｇ）、トリプトファン（Ｗ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１０は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、セリン（Ｓ）、アラニン（Ａ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１１は、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１２は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_１３は、セリン（Ｓ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１４は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、ヒスチジン（Ｈ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１５は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１６は、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）、トリプトファン（Ｗ）、メチオニン（Ｍ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１８は、セリン（Ｓ）またはトレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_１９は、アスパラギン（Ｎ）、バリン（Ｖ）もしくはアスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２０は、アラニン（Ａ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２１は、セリン（Ｓ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_２２は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であるか、または欠如しており、
Ｘ_２３は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、アルギニン（Ｒ）、トレオニン（Ｔ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_２４は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２５は、トレオニン（Ｔ）、チロシン（Ｙ）、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２７は、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）、トレオニン（Ｔ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_２８は、アルギニン（Ｒ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_２９は、アスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_３０は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_３１は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３２は、イソロイシン（Ｉ）、グルタミン酸（Ｅ）、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_３３は、グリシン（Ｇ）、リジン（Ｋ）もしくはアスパラギン酸（Ｄ）であるか、または欠如しており、
Ｘ_３４は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、リジン（Ｋ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_３５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはシステイン（Ｃ）であり、
Ｘ_３８は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号２２２とは異なる、当該機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、当該ポリペプチドと、
多糖類のスクレログルカンとを含む。

【0122】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、
ポリペプチドであって、

【化10】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１（Ｒ１）、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号８とは異なる、当該機能的バリアント、

【化11】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２（Ｒ２）、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０とは異なる、当該機能的バリアント、

【化12】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３（Ｒ３）、
またはその機能的バリアントであって、当該バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で当該バリアントのアミノ酸配列が配列番号１２とは異なる、当該機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、当該ポリペプチドと、
多糖類のスクレログルカンとを含む。

【0123】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、
配列番号３または配列番号４、配列番号２０～配列番号３３、または配列番号７１～２１９との少なくとも７５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、１つ以上の糖類単位を結合することができる、ポリペプチドと、
β－１，６結合グルコース修飾を有する１つ以上のβ－１，３－グルカン単位を含む多糖類とを含む。

【0124】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、
配列番号３または配列番号４、配列番号２０～配列番号３３、または配列番号７１～２１９との少なくとも７５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、１つ以上の糖類単位を結合することができる、ポリペプチドと、
多糖類のスクレログルカンとを含む。

【0125】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、
配列番号３または配列番号４、または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも７５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、１つ以上の糖類単位を結合することができる、ポリペプチドと、
β－１，６結合グルコース修飾を有する１つ以上のβ－１，３－グルカン単位を含む多糖類とを含む。

【0126】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、
配列番号３または配列番号４、または配列番号２０～配列番号３３との少なくとも７５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、１つ以上の糖類単位を結合することができる、ポリペプチドと、
多糖類のスクレログルカンとを含む。

【0127】

別の態様では、本開示は、ハイドロゲルを形成するために多糖類を架橋するための架橋剤であって、本明細書に記述されるポリペプチドである当該架橋剤に関する。

【0128】

さらに別の態様では、本開示は、ハイドロゲルを製造する方法であって、
ａ． 多糖類を含む溶液を準備すること、
ｂ． 本明細書に記述されるポリペプチドを含む溶液を準備すること、
ｃ． 当該溶液を室温で連続的に撹拌しながら混合することを含み、
それにより、当該多糖類の架橋を介してハイドロゲルを得る、当該方法に関する。

【0129】

本開示の一実施形態では、ハイドロゲルは、本明細書に記述される多糖類を含む。

【実施例】

【0130】

実施例１：ＣＢＭファミリーの一部として識別されたタンパク質ドメイン。
ＢＬＡＳＴＰを使用し、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ）（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）のＧｅｎｂａｎｋデータベースの非冗長タンパク質配列データセットに対するクエリとしてＣ．ｐｉｎｅｎｓｉｓ Ｃｐ－Ｆ１タンパク質を用いて、ＣＢＭドメイン相同体のデータベース検索を行った。Ｃｐ－Ｆ１の相同体を含む配列を選択して、さらなる分析のためにＣＢＭ含有タンパク質のサブセットを生成した。ＮＣＢＩの分類ブラウザ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／Ｔａｘｏｎｏｍｙ）を使用して、このサブセットを評価した。不完全及び冗長なエントリは削除した。さらに、各属から代表的な種を１つだけ選択し、最終的なデータセットには１６４個の配列を含めた。

【0131】

識別されたすべての炭水化物結合タンパク質モジュールを表１にまとめる。この表は、識別されたすべての炭水化物結合タンパク質モジュールについて、遺伝子アクセッション番号、種名、短縮識別子、及び添付のＳＴ．２６配列表を参照する配列識別番号を含む。識別子は、種名の略語と、炭水化物結合ドメインのうちの１つを含む全長マルチモジュールタンパク質内のアミノ酸の数とを含む。天然型では、これらの炭水化物結合ドメインはすべて、炭水化物分解機能を持つマルチモジュールタンパク質の一部である。

【0132】

実施例２：本開示のＣＢＭ９２ドメインタンパク質の組換え生産。
この研究で調査した特定の遺伝子は、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ ＧｅｎｅＡｒｔによって独占権下にあるベクターにおいて合成された。これらはその後、Ｃ末端Ｈｉｓ６タグを有しアンピシリン耐性を付与する発現ベクターｐＥＴ２１ａ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）にサブクローニングされた（表２では「商業的合成」と示されている）。他の遺伝子は、Ｃ．ｐｉｎｅｎｓｉｓゲノムＤＮＡからインハウスでクローニングした（ＤＳＭＺ，Ｇｅｒｍａｎｙ）（表２では「ｇＤＮＡからｐＬＡＴＥ３１にクローニング」と示されている）。

【0133】

表２に記述されているクローニング戦略に従って組換えタンパク質を生成した。ＣＢＭドメインは、大きなマルチモジュール遺伝子からクローニングした。したがって、指定されたヌクレオチドの範囲は、全長遺伝子からクローニングされた断片に関する。サイズ（ｋＤａ）は、結果として得られた組換えＣＢＭタンパク質に関する。ｇＤＮＡ＝ゲノムＤＮＡ。

【0134】

結果：タンパク質の生産及び精製を毎回ＳＤＳ－ＰＡＧＥによって分析した。タンパク質収量は、Ｂｒａｄｆｏｒｄアッセイ及び／またはナノドロップを使用して毎回測定した。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析により、すべての構築物の生産及び精製の成功を確認した（データは示さない）。Ｃｐ－Ｆ１の典型的なタンパク質収量は、過剰発現Ｅ．ｃｏｌｉ細胞の１Ｌ培養物から純タンパク質１５０ｍｇである。他のタンパク質は、１Ｌの培養物から純タンパク質２５～７５ｍｇ及び最大１５０ｍｇの収量で生産及び精製された。

【0135】

実施例３：本開示のＣＢＭ９２ドメインタンパク質は多糖類スクレログルカンを結合することができる。
ＣＢＭ９２ファミリーの一部として識別された１２種類のタンパク質（表３参照）と、１つ（α、β、もしくはγ）、２つ（β／γ）、または３つ（α／β／γ）の結合ドメインにおいて結合部位「ＷＥｘＦ」モチーフ中のトリプトファン（Ｗ／Ｔｒｐ）が部位特異的変異誘発によってアラニン（Ａ／Ａｌａ）に変換された５種類のＦ１バリアントとについて、水不溶性多糖類への結合をプルダウンアッセイによって試験した（図７）。ゆっくり回転するインキュベータを室温で使用して、タンパク質と過剰量の多糖類とを共に水中でインキュベートした。２～３時間のインキュベーション後、不溶性多糖類をペレット化するためにサンプルを軽く遠心分離した。多糖類に結合したタンパク質はすべてこのペレット中にプルダウンされたが、未結合タンパク質は上清に残った。上清からサンプルを採取し、ＳＤＳ－ＰＡＧＥによって分析した。分子量が低いため溶解性の高い多糖類であるラミナリンへの結合を試験するために、異なるアッセイであるアフィニティーゲル電気泳動を使用した（Ｔｏｍｍｅ ｅｔ ａｌ．２０２０も参照されたい）。

【0136】

結果：ＳＤＳ－ＰＡＧＥでタンパク質バンドが存在しなかったことから、タンパク質が多糖類への結合に成功したことが示された（表４）。Ｇｌｃ－β－１，６－Ｇｌｃ結合を含む多糖類、すなわちプスツラン（直鎖β－１，６－グルカン）、ならびにスクレログルカン及び酵母β－グルカン（いずれもβ－１，６結合グルコシル残基の単一置換を含むβ－１，３－グルカン鎖からなる）への一貫した結合親和性が示された。試験したＣＢＭタンパク質のうちのいくつかは、直鎖β－１，３－グルカンであるカードランへのいくらかの結合も示し、場合によっては、β－１，３－及びβ－１，４－結合グルコシル残基を含むリケナンへの結合があった。また、場合によっては樺の木キシランへの弱い結合があり、これは、特定のＣＢＭタンパク質における比較的緩やかな特異性の可能性を示唆している。特筆すべきことに、結合部位のＴｒｐ残基のすべてを天然に欠いているＤｍ－Ｆ１は、試験した多糖類のいずれにも結合しなかった（図７）。試験したすべてのタンパク質について、セルロース、他の種類のキシラン、様々な種類のβ－マンナン、キチン、デンプン、キトサン、または植物由来の混合結合β－１，３：１，４－グルカンへの結合は観察されなかった。

【0137】

スクレログルカンとの結合を示した野生型タンパク質はすべてゲル形成性であることも確認された。

【0138】

実施例４：本開示のＣＭＢ９２ドメインタンパク質は３つのスクレログルカン分子を結合することができる。
Ｃｐ－Ｆ１（配列番号３、配列番号２０）及びＣｐ－Ｆ２（配列番号４、配列番号２１）ならびにその相同体の配列分析により、３つの繰り返し領域（Ｃｐ－Ｆ１については配列番号８、１０及び１２、Ｃｐ－Ｆ２については配列番号９、１１及び１３）が示され、これらは各々、保存されたトリプトファン結合部位を１つ含んでいた。同じ繰り返し領域がＣＢＭ９２ファミリーの他のタンパク質（表１の配列番号２２～配列番号３３に対応するタンパク質）において確認され、これらは各々、配列番号３４～配列番号６９のアミノ酸配列に対応する３つの繰り返し領域を有していた。Ｘ線結晶構造解析によるタンパク質の構造分析では、３つの明らかな結合ポケットが示され、そのうち２つはグルコース単糖類リガンドで結晶化することができた。３つの推定結合部位のすべてが、部位特異的変異誘発によって探索され、確認された。Ｃｐ－Ｆ１タンパク質の変異型バリアントのレオロジー分析により、安定したハイドロゲルの形成が起こるには３つの結合部位すべてが機能する必要があることが示された。各変異について、結合部位「ＷＥｘＦ」モチーフのトリプトファン（Ｗ／Ｔｒｐ）を部位特異的変異誘発によってアラニン（Ａ／Ａｌａ）に変換し、ゲル中スクレログルカンの最終濃度４ｇ／Ｌ及びタンパク質負荷５０％（すなわち、最終タンパク質濃度２ｇ／Ｌ）で実験を行った。

【0139】

結果：
図２は、Ｃｐ－Ｆ１及びＣｐ－Ｆ２の重ね合わせた結晶構造を示す。結合部位のうちの２つにグルコース単糖類リガンドが見える。結合及びゲル形成は一重変異体及び二重変異体では低減し、三重変異体では消失した。これにより、３つの部位が結合に寄与し、したがって３つの多糖類鎖が結合し得ることが確認された。関連するアミノ酸のいくつかを示したＣｐ－Ｆ２の繰り返し領域１の結合部位の拡大画像を示す図３（Ａ及びＢ）も参照されたい。Ｃｐ－Ｆ１の変異型バリアントのレオロジーデータにより、ＣＰ－Ｆ１バリアントである、タンパク質配列中の第１の結合部位にＡｌａを有する変異体１番（結合部位α、配列番号５）と、タンパク質配列中の第３の結合部位にＡｌａを有する変異体３番（結合部位γ、配列番号７）とが、多糖類粘度のごくわずかな増加を示したのに対し、タンパク質配列中の第２の結合部位にＡｌａを有する変異体２番（結合部位β、配列番号６）と三重変異体（配列番号１９）とは、タンパク質不含の陰性対照に類似していることが明らかになった。

【0140】

実施例５：本開示のＣＢＭ９２ドメインタンパク質はスクレログルカンを架橋してハイドロゲルを形成することができる。
水中の出発原液濃度４ｍｇ／ｍｌ（より高い出発原液濃度も使用可能）のタンパク質Ｃｐ－Ｆ１を、室温で水中の出発原液濃度５ｇ／Ｌのスクレログルカンと混合した。連続的にボルテックスした多糖類溶液にタンパク質溶液を加えることにより、２つの溶液を素早く混合した。数秒以内にハイドロゲルが自然に生じ、約１時間後に最大の剛性に達した。ハイドロゲルの剛性を変化させるために、スクレログルカン（例えば、原液として５ｍｇ／ｍｌ）とタンパク質（原液として４～３０ｍｇ／ｍｌ）との両方で一貫した原液濃度を使用し、これらを異なる比率で混合した。次の最終タンパク質濃度を試験した：０．０８ｇ／Ｌ、０．２ｇ／Ｌ、０．４ｇ／Ｌ、０．８ｇ／Ｌ、１．２ｇ／Ｌ、１．６ｇ／Ｌ、及び２ｇ／Ｌ。これは、それぞれ、多糖類含量に対してタンパク質含量２％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、及び５０％に相当する（図６Ａ参照）。スクレログルカンは、いずれの場合も最終濃度４ｇ／Ｌとした。

【0141】

別法では、一貫したスクレログルカン濃度（例えば、最終混合物中で４ｍｇ／ｍｌ、出発原液中で５ｍｇ／ｍｌ）を使用し、異なる濃度のタンパク質原液を事前に調製することによりタンパク質濃度を変化させることになる。

【0142】

例：最終濃度がスクレログルカン４ｍｇ／ｍｌ及びＦ１タンパク質２ｍｇ／ｍｌのハイドロゲル１ｍｌを生産するために、０．８ｍｌのスクレログルカン（水中で５ｍｇ／ｍｌの溶液）を０．２ｍｌのＦ１タンパク質（水中で１０ｍｇ／ｍｌの溶液）と混合した。

【0143】

コーンプレート構成のレオメーターを使用して、ハイドロゲルのレオロジー特性を２５℃で測定した。各ゲルについて、タンパク質及び多糖類の複数の濃度及び比率を測定し、都度、「タンパク質なしの多糖類」のレオロジー測定値と比較した。各レオロジー実験で、貯蔵弾性率Ｇ’と損失弾性率Ｇ”とによって与えられるせん断粘度と動的せん断特性との両方を決定した。

【0144】

結果：Ｃｐ－Ｆ１またはＣｐ－Ｆ２をスクレログルカンと混合すると、数分以内にハイドロゲルが自然に生じ、約１時間でほぼ最大の剛性に達した（図４）。貯蔵弾性率はタンパク質量の増加と共に直線的に増加し、タンパク質機能がゲルの安定化に関与していることを裏付けた（図６Ａ）。ハイドロゲルの貯蔵弾性率は、タンパク質濃度の上昇と直線的に相関する（図６Ｂ）。他のＣＭＢ９２ドメインタンパク質（表２）について分析を繰り返したところ、スクレログルカンへの結合を示した野生型（ネイティブ）タンパク質はすべて、スクレログルカンとのゲル形成性も示した。特に、表２に収載した、３つの繰り返し領域における３つの結合部位の各々にトリプトファン（Ｗ）を有する他のＣＭＢ９２ドメインタンパク質のすべてが、信頼性が高く安定したハイドロゲルを形成した。３つの繰り返し領域における３つの結合部位のうちの１つ以上から１つ以上のトリプトファン（Ｗ）が欠落しているタンパク質は、不安定なハイドロゲルを形成し得る。Ｃｐ－Ｆ１バリアントはいずれもゲルを形成しなかった。

【0145】

タンパク質：糖類の比率が上昇すると、ゲルの固体性が増加し、透明度が減少した（図５）。さらに、図６Ａに示すように、ゲルの強度が増加した。

【0146】

配列の概要
［配列番号１］Ｃｐ－Ｆ１をコードする全核酸配列
［配列番号２］Ｃｐ－Ｆ２をコードする全核酸配列
［配列番号３］Ｃｐ－Ｆ１の全配列：
ＭＡＳＭＴＧＧＱＱＭＧＲＧＳＶＧＫＴＩＷＬＱＧＦＮＮＫＹＶＮＳＫＮＧＱＧＡＭＷＣＤＳＤＡＰＱＡＷＥＬＦＴＶＶＤＡＧＮＧＫＩＡＬＲＧＮＮＧＭＹＶＳＳＥＮＧＥＱＡＩＴＣＮＲＰＡＩＱＧＷＥＡＦＤＷＬＥＴＡＤＧＫＶＳＬＲＧＳＮＧＬＦＩＳＳＥＮＧＡＡＡＭＴＣＴＲＰＴＡＳＧＷＥＡＦＧＹＳＶＶＧＮＡＬＥＨＨＨＨＨ
［配列番号４］Ｃｐ－Ｆ２の全配列：
ＭＰＩＧＫＴＩＷＬＱＧＦＮＳＫＹＶＮＳＲＮＧＱＧＡＭＷＣＤＳＤＴＰＱＡＷＥＬＦＴＶＩＤＡＧＮＧＫＩＡＬＲＧＮＮＧＬＹＶＳＳＥＮＧＥＱＡＭＴＣＮＲＰＡＩＤＧＷＥＶＦＤＷＩＳＮＳＤＧＳＶＳＬＲＧＳＮＧＭＹＶＳＳＥＮＧＥＱＡＩＴＣＮＲＰＡＩＤＧＷＥＲＦＮＷＡＡＡＴＡＬＴＧＨＨＨＨＨＨＧ
［配列番号５］繰り返し領域１の結合部位がノックアウトされたＣｐ－Ｆ１の全配列：
ＭＡＳＭＴＧＧＱＱＭＧＲＧＳＶＧＫＴＩＷＬＱＧＦＮＮＫＹＶＮＳＫＮＧＱＧＡＭＷＣＤＳＤＡＰＱＡＡＥＬＦＴＶＶＤＡＧＮＧＫＩＡＬＲＧＮＮＧＭＹＶＳＳＥＮＧＥＱＡＩＴＣＮＲＰＡＩＱＧＷＥＡＦＤＷＬＥＴＡＤＧＫＶＳＬＲＧＳＮＧＬＦＩＳＳＥＮＧＡＡＡＭＴＣＴＲＰＴＡＳＧＷＥＡＦＧＹＳＶＶＧＮＡＬＥＨＨＨＨＨＨ
［配列番号６］繰り返し領域２の結合部位がノックアウトされたＣｐ－Ｆ１の全配列：
ＭＡＳＭＴＧＧＱＱＭＧＲＧＳＶＧＫＴＩＷＬＱＧＦＮＮＫＹＶＮＳＫＮＧＱＧＡＭＷＣＤＳＤＡＰＱＡＷＥＬＦＴＶＶＤＡＧＮＧＫＩＡＬＲＧＮＮＧＭＹＶＳＳＥＮＧＥＱＡＩＴＣＮＲＰＡＩＱＧＡＥＡＦＤＷＬＥＴＡＤＧＫＶＳＬＲＧＳＮＧＬＦＩＳＳＥＮＧＡＡＡＭＴＣＴＲＰＴＡＳＧＷＥＡＦＧＹＳＶＶＧＮＡＬＥＨＨＨＨＨＨ
［配列番号７］繰り返し領域３の結合部位がノックアウトされたＣｐ－Ｆ１の全配列：
ＭＡＳＭＴＧＧＱＱＭＧＲＧＳＶＧＫＴＩＷＬＱＧＦＮＮＫＹＶＮＳＫＮＧＱＧＡＭＷＣＤＳＤＡＰＱＡＷＥＬＦＴＶＶＤＡＧＮＧＫＩＡＬＲＧＮＮＧＭＹＶＳＳＥＮＧＥＱＡＩＴＣＮＲＰＡＩＱＧＷＥＡＦＤＷＬＥＴＡＤＧＫＶＳＬＲＧＳＮＧＬＦＩＳＳＥＮＧＡＡＡＭＴＣＴＲＰＴＡＳＧＡＥＡＦＧＹＳＶＶＧＮＡＬＥＨＨＨＨＨＨ

【化13】

［配列番号１４］繰り返し領域１－コンセンサス
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９ＷＥＸ_３２Ｆ
［配列番号１５］繰り返し領域２－コンセンサス
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９ＷＥＸ_３２Ｆ
［配列番号１６］繰り返し領域３－コンセンサス
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９ＷＥＸ_３２Ｆ
［配列番号１７］第２及び第３の重要なＴｒｐがＡｌａになった二重変異体Ｃｐ－Ｆ１－Ｗ９０ＡＷ１３２Ａ
ＭＡＳＭＴＧＧＱＱＭＧＲＧＳＶＧＫＴＩＷＬＱＧＦＮＮＫＹＶＮＳＫＮＧＱＧＡＭＷＣＤＳＤＡＰＱＡＷＥＬＦＴＶＶＤＡＧＮＧＫＩＡＬＲＧＮＮＧＭＹＶＳＳＥＮＧＥＱＡＩＴＣＮＲＰＡＩＱＧＡＥＡＦＤＷＬＥＴＡＤＧＫＶＳＬＲＧＳＮＧＬＦＩＳＳＥＮＧＡＡＡＭＴＣＴＲＰＴＡＳＧＡＥＡＦＧＹＳＶＶＧＮＡＬＥＨＨＨＨＨＨ
［配列番号１８］第１及び第３の重要なＴｒｐがＡｌａになった二重変異体Ｃｐ－Ｆ１－Ｗ４８ＡＷ１３２Ａ
ＭＡＳＭＴＧＧＱＱＭＧＲＧＳＶＧＫＴＩＷＬＱＧＦＮＮＫＹＶＮＳＫＮＧＱＧＡＭＷＣＤＳＤＡＰＱＡＡＥＬＦＴＶＶＤＡＧＮＧＫＩＡＬＲＧＮＮＧＭＹＶＳＳＥＮＧＥＱＡＩＴＣＮＲＰＡＩＱＧＷＥＡＦＤＷＬＥＴＡＤＧＫＶＳＬＲＧＳＮＧＬＦＩＳＳＥＮＧＡＡＡＭＴＣＴＲＰＴＡＳＧＡＥＡＦＧＹＳＶＶＧＮＡＬＥＨＨＨＨＨＨ
［配列番号１９］三重変異体、Ｃｐ－Ｆ１－Ｗ４８ＡＷ９０ＡＷ１３２Ａ
ＭＡＳＭＴＧＧＱＱＭＧＲＧＳＶＧＫＴＩＷＬＱＧＦＮＮＫＹＶＮＳＫＮＧＱＧＡＭＷＣＤＳＤＡＰＱＡＡＥＬＦＴＶＶＤＡＧＮＧＫＩＡＬＲＧＮＮＧＭＹＶＳＳＥＮＧＥＱＡＩＴＣＮＲＰＡＩＱＧＡＥＡＦＤＷＬＥＴＡＤＧＫＶＳＬＲＧＳＮＧＬＦＩＳＳＥＮＧＡＡＡＭＴＣＴＲＰＴＡＳＧＡＥＡＦＧＹＳＶＶＧＮＡＬＥＨＨＨＨＨＨ
［配列番号２０］Ｃｐ－Ｆ１の全配列（Ｎ末端タグ及びＣ末端タグなし）
ＶＧＫＴＩＷＬＱＧＦＮＮＫＹＶＮＳＫＮＧＱＧＡＭＷＣＤＳＤＡＰＱＡＷＥＬＦＴＶＶＤＡＧＮＧＫＩＡＬＲＧＮＮＧＭＹＶＳＳＥＮＧＥＱＡＩＴＣＮＲＰＡＩＱＧＷＥＡＦＤＷＬＥＴＡＤＧＫＶＳＬＲＧＳＮＧＬＦＩＳＳＥＮＧＡＡＡＭＴＣＴＲＰＴＡＳＧＷＥＡＦＧＹＳＶＶＧＮＡ
［配列番号２１］Ｃ末端タグなしのＣｐ－Ｆ２の全配列
ＰＩＧＫＴＩＷＬＱＧＦＮＳＫＹＶＮＳＲＮＧＱＧＡＭＷＣＤＳＤＴＰＱＡＷＥＬＦＴＶＩＤＡＧＮＧＫＩＡＬＲＧＮＮＧＬＹＶＳＳＥＮＧＥＱＡＭＴＣＮＲＰＡＩＤＧＷＥＶＦＤＷＩＳＮＳＤＧＳＶＳＬＲＧＳＮＧＭＹＶＳＳＥＮＧＥＱＡＩＴＣＮＲＰＡＩＤＧＷＥＲＦＮＷＡＡＡＴＡＬＴ
［配列番号２２］Ａａ－Ｆ１の全配列
ＩＡＮＲＥＮＩＳＩＲＡＬＳＮＮＬＹＶＳＳＥＮＧＬＲＰＩＴＣＮＲＴＫＶＤＩＷＥＲＦＳＩＥＳＶＧＧＧＲＶＡＩＫＧＳＮＧＳＹＦＳＳＥＤＧＬＫＰＭＲＣＮＲＫＫＡＥＡＷＥＥＦＴＬＥＰＬＧＧＤＬＹＡＩＫＧＮＮＧＡＹＶＳＨＮＮＧＳＶＥＧＬＴＣＮＫＳＩＶＧＤＱＥＫＦＩＩＫＤＡＡＳＫ
［配列番号２３］Ａａ－Ｆ２の全配列
ＴＴＤＡＰＩＧＫＴＩＳＬＲＫＴＮＧＤＫＫＹＶＴＡＥＱＴＡＮＮＫＱＬＩＡＲＡＩＡＶＱＧＷＥＫＦＳＩＥＴＨＰＤＧＧＩＡＬＫＡＬＳＮＡＮＹＶＱＶＱＧＩＮＶＮＡＡＡＡＫＫＤＫＬＴＱＦＩＷＫＮＫＧＮＧＫＶＡＬＫＳＶＳＡＮＫＷＩＱＡＳＷＳＳＤＮＡＶＬＦＡＫＧＩＥＤＫＧＷＥＴＦＤＷＫＩＥＮＴＱＫ
［配列番号２４］Ｃｐ－Ｆ３の全配列
ＴＧＰＩＧＱＳＶＴＬＫＧＦＮＮＱＹＶＳＳＥＮＧＴＱＡＭＮＣＮＲＰＴＡＳＧＷＥＴＦＳＶＶＤＡＧＧＧＫＩＡＬＬＳＱＧＫＹＶＳＳＥＮＧＴＱＡＭＴＣＮＲＬＴＩＧＤＷＥＫＦＤＷＶＶＮＡＤＧＫＩＳＬＲＧＳＮＧＱＹＶＳＳＥＮＧＴＱＰＭＮＣＮＲＡＴＩＳＧＷＥＡＦＧＶＮＱ
［配列番号２５］Ｃｐ－Ｆ４の全配列
ＰＶＧＱＩＩＴＬＲＧＳＮＮＬＹＶＳＧＥＮＧＴＫＡＭＴＣＥＲＴＡＰＱＴＷＥＱＦＳＶＷＮＡＧＰＧＫＶＮＬＲＳＭＧＫＹＶＳＳＥＮＧＬＱＡＩＴＣＮＲＴＴＡＡＳＹＥＡＦＤＷＩＳＮＡＤＧＴＶＳＬＲＧＮＮＧＬＹＶＳＳＥＮＧＡＡＡＭＴＣＴＲＰＴＩＤＧＷＥＫＦＮＦＴＩＶＧＰＡ
［配列番号２６］Ｃｐ－Ｆ５の全配列
ＧＧＴＡＰＩＧＳＴＩＴＩＫＧＳＮＧＬＦＡＳＧＥＮＧＡＱＡＭＴＣＮＲＰＴＡＱＡＷＥＱＦＴＶＶＤＡＧＧＧＫＶＡＬＲＳＱＧＭＹＶＳＳＥＮＧＡＱＡＭＴＣＳＲＰＴＩＱＤＷＥＫＦＮＷＩＤＮＧＤＧＴＦＳＬＲＧＮＮＧＳＹＶＳＳＥＮＧＴＱＡＭＴＣＮＲＰＴＩＱＧＷＥＫＦＴＲ
［配列番号２７］Ｃｐ－Ｆ６の全配列
ＩＧＱＴＶＴＩＫＧＦＮＮＱＹＶＣＳＥＧＮＴＱＰＭＩＣＮＲＡＶＡＱＳＷＥＱＦＴＶＶＤＡＧＧＧＲＶＡＬＲＮＱＧＮＹＶＣＳＥＮＧＴＱＡＶＮＣＮＲＡＳＶＧＰＷＥＱＦＥＷＩＳＮＳＤＧＴＩＳＦＲＧＮＮＧＡＹＬＳＡＥＤＧＭＡＲＭＴＣＴＫＴＴＩＧＡＡＥＫＦＫＩＮＱ
［配列番号２８］Ｃｐ－Ｆ７の全配列
ＶＧＳＩＩＹＬＹＨＤＴＬＬＶＣＳＥＮＧＴＱＡＭＮＣＮＲＴＧＬＧＰＷＥＫＦＥＶＶＤＡＧＮＮＴＶＡＬＫＧＮＮＧＬＹＶＫＡＧＮＰＶＦＣＴＧＴＡＬＤＳＳＴＣＦＮＷＩＳＬＳＳＮＴＶＡＬＱＳＧＫＧＬＹＭＳＳＥＮＧＴＱＡＭＮＷＮＲＴＡＩＧＧＷＥＴＦＲＷＧＴＴＴＡＡ
［配列番号２９］Ｅａ－Ｆ１の全配列
ＰＳＩＤＩＤＥＧＫＩＡＬＫＳＶＨＧＫＹＬＳＡＱＰＤＧＲＡＥＷＮＲＮＩＡＳＥＷＥＹＦＨＬＥＫＲＱＧＤＫＩＴＬＫＧＡＨＧＭＹＶＳＡＱＰＤＧＥＶＱＩＮＲＱＡＡＰＰＴＧＷＥＥＦＴＶＥＤＲＧＮＮＶＩＣＬＫＳＩＨＷＫＹＬＳＡＱＭＤＧＴＶＱＷＮＲＤＳＡＰＫＧＧＷＥＥＦＱＩＶＲＰＧＧＰＧ
［配列番号３０］Ｍｒ－Ｆ１の全配列
ＳＧＡＰＩＧＳＴＩＴＬＫＧＦＮＮＱＹＶＳＳＥＮＧＴＱＡＭＮＣＮＲＰＴＡＳＡＷＥＱＦＬＶＶＤＡＧＡＧＫＩＡＬＱＳＭＧＫＹＶＳＳＥＮＧＴＱＡＩＴＣＮＲＴＴＹＧＤＷＥＫＦＤＷＶＰＴＴＤＧＫＶＴＬＲＧＮＮＧＫＦＩＳＳＥＮＧＴＱＡＭＴＣＴＲＡＴＡＳＧＷＥＡＦＧＶＮＱ
［配列番号３１］Ｍｒ－Ｆ２の全配列
ＰＡＰＰＩＧＴＶＩＳＬＫＧＦＮＧＫＹＶＳＧＥＮＧＴＱＡＭＴＣＮＲＴＶＡＧＤＷＥＨＦＴＶＬＤＡＧＮＧＫＩＹＬＲＳＭＧＫＹＶＳＳＥＮＧＴＱＡＩＴＣＮＲＴＴＰＳＤＷＥＫＦＤＷＩＶＴＴＤＧＫＩＴＬＲＧＮＮＧＫＦＩＳＳＥＮＧＴＱＡＭＴＣＮＲＴＴＡＳＧＷＥＡＦＧＬＮＱ
［配列番号３２］Ｍｒ－Ｆ３の全配列
ＴＰＰＩＧＱＴＩＴＬＫＧＳＮＮＮＹＶＳＳＥＮＧＴＱＰＭＮＣＮＲＰＴＡＧＧＷＥＱＦＴＩＶＮＡＧＳＧＫＶＡＬＬＮＳＧＫＹＶＳＳＥＮＧＴＱＡＩＮＣＮＲＴＳＶＧＰＷＥＱＦＤＷＶＧＮＡＤＧＴＶＳＦＲＧＳＮＧＫＹＩＳＧＥＮＧＴＱＡＭＴＣＮＲＡＴＩＧＧＷＥＳＦＲＶＮＱ
［配列番号３３］Ｐｃ－Ｆ１の全配列
ＡＶＡＡＰＶＧＱＴＩＷＬＫＡＣＳＴＱＱＦＶＳＡＤＱＮＬＧＡＴＡＰＬＶＡＮＲＡＴＶＱＧＷＥＱＦＱＶＶＤＡＧＧＧＴＩＡＬＲＡＴＧＳＧＬＹＶＳＡＤＴＮＶＧＧＱＬＴＡＮＲＰＴＩＱＤＷＥＲＦＥＷＶＥＬＧＮＧＳＩＧＬＫＡＲＳＮＧＬＹＶＳＡＤＬＧＲＮＡＳＡＰＬＹＡＳＲＡＳＩＧＧＣＷＥＡＦＴＷＧＳＶＧＧ

【化14】

［配列番号７０］Ｄｍ－Ｆ１非結合性、非ゲル形成性タンパク質の全配列
ＳＹＩＧＩＧＤＮＶＷＦＥＡＹＮＧＳＦＩＳＳＥＮＧＡＳＰＭＴＣＮＴＦＴＶＧＥＴＥＶＦＴＩＶＤＡＧＤＧＫＩＡＬＬＧＮＮＧＫＹＶＳＳＮＮＧＴＴＳＭＴＣＴＫＤＥＩＧＥＴＥＫＦＹＷＩＮＬＳＮＧＱＭＡＬＬＧＫＧＧＦＶＳＭＥＧＧＳＳＰＩＮＡＮＲＮＡＩＤＧＷＥＩＹＳＷＧＫＱＤＩＱＴ
［配列番号２２０］繰り返し領域１－コンセンサス
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４ＷＥＸ_３７Ｆ
［配列番号２２１］繰り返し領域２－コンセンサス
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１ＷＥＸ_３４Ｆ
［配列番号２２２］繰り返し領域３－コンセンサス
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９Ｘ_３０Ｘ_３１Ｘ_３２Ｘ_３３Ｘ_３４Ｘ_３５ＷＥＸ_３８Ｆ

【0147】

参考文献
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【0148】

条項
１．
ポリペプチドであって、

【化15】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１（Ｒ１）、
またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号Ｘとは異なる、前記機能的バリアント、

【化16】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２（Ｒ２）、
またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１０とは異なる、前記機能的バリアント、

【化17】

のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３（Ｒ３）、
またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号ＸＸＸとは異なる、前記機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、前記ポリペプチド。

【0149】

２．
ポリペプチドであって、
ａ． 配列番号１４：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９ＷＥＸ_３２Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域１（Ｒ１）
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２は、トリプトファン（Ｗ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）またはアラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_４は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、アスパラギン（Ｎ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_６は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_７は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）、セリン（Ｓ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_８は、アスパラギン（Ｎ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_９は、リジン（Ｋ）、グルタミン（Ｑ）またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_１０は、チロシン（Ｙ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１１は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）またはメチオニン（Ｍ）であり、
Ｘ_１２は、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、システイン（Ｃ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１３は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_１４は、グルタミン酸（Ｅ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１５は、アスパラギン（Ｎ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１６は、グリシン（Ｇ）、プロリン（Ｐ）、アスパラギン（Ｎ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_１７は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_１８は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_１９は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２０は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２１は、トレオニン（Ｔ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２２は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２３は、アスパラギン（Ｎ）、アスパラギン酸（Ｄ）、トレオニン（Ｔ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_２４は、アルギニン（Ｒ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_２５は、トレオニン（Ｔ）、アスパラギン酸（Ｄ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_２６は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_２７は、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２８は、グリシン（Ｇ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_２９は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_３２は、グルタミン（Ｑ）またはリジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１４とは異なる、前記機能的バリアント、
ｂ． 配列番号１５：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９ＷＥＸ_３２Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域２（Ｒ２）
［式中、
Ｘ_１は、イソロイシン（Ｉ）、バリン（Ｖ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_４は、グルタミン（Ｑ）、アルギニン（Ｒ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_７は、アスパラギン（Ｎ）、メチオニン（Ｍ）、ヒスチジン（Ｈ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_８は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン（Ｎ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_９は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１０は、チロシン（Ｙ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１１は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_１２は、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_１３は、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_１４は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１５は、アスパラギン（Ｎ）、プロリン（Ｐ）、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１６は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン酸（Ｄ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）、トレオニン（Ｔ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）、トレオニン（Ｔ）、ロイシン（Ｌ）、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１８は、セリン（Ｓ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_１９は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_２０は、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）、メチオニン（Ｍ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２１は、トレオニン（Ｔ）、イソロイシン（Ｉ）、アスパラギン（Ｎ）、バリン（Ｖ）またはアラニン（Ａ）であり、
Ｘ_２２は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはトリプトファン（Ｗ）であり、
Ｘ_２３は、アスパラギン（Ｎ）、アスパラギン酸（Ｄ）、トレオニン（Ｔ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_２４は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２５は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン（Ｎ）、プロリン（Ｐ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２７は、イソロイシン（Ｉ）、バリン（Ｖ）、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、またはロイシン（Ｌ）であり、
Ｘ_２８は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）、グルタミン（Ｑ）、またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_２９は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）、プロリン（Ｐ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_３２は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１５とは異なる、前記機能的バリアント、
ｃ． 配列番号１６：
Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３Ｘ_４Ｘ_５Ｘ_６Ｘ_７Ｘ_８Ｘ_９Ｘ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４Ｘ_１５Ｘ_１６Ｘ_１７Ｘ_１８Ｘ_１９Ｘ_２０Ｘ_２１Ｘ_２２Ｘ_２３Ｘ_２４Ｘ_２５Ｘ_２６Ｘ_２７Ｘ_２８Ｘ_２９ＷＥＸ_３２Ｆ
のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる繰り返し領域３（Ｒ３）
［式中、
Ｘ_１は、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、チロシン（Ｙ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはグルタミン酸（Ｅ）であり、
Ｘ_２は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、システイン（Ｃ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_３は、ロイシン（Ｌ）、フェニルアラニン（Ｆ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_４は、アルギニン（Ｒ）、リジン（Ｋ）、グルタミン（Ｑ）、ロイシン（Ｌ）またはメチオニン（Ｍ）であり、
Ｘ_５は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_６は、アスパラギン（Ｎ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_７は、アスパラギン（Ｎ）、ヒスチジン（Ｈ）またはトレオニン（Ｔ）であり、
Ｘ_８は、グリシン（Ｇ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_９は、リジン（Ｋ）、ロイシン（Ｌ）、アルギニン（Ｒ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１０は、チロシン（Ｙ）またはフェニルアラニン（Ｆ）であり、
Ｘ_１１は、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_１２は、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、システイン（Ｃ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１３は、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、ヒスチジン（Ｈ）、トレオニン（Ｔ）、メチオニン（Ｍ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_１４は、グルタミン酸（Ｅ）、アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン（Ｑ）またはアスパラギン（Ｎ）であり、
Ｘ_１５は、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１６は、グリシン（Ｇ）、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）、またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_１７は、グリシン（Ｇ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_１８は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_１９は、プロリン（Ｐ）、アラニン（Ａ）、グルタミン（Ｑ）またはグリシン（Ｇ）であり、
Ｘ_２０は、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、グルタミン（Ｑ）、バリン（Ｖ）またはイソロイシン（Ｉ）であり、
Ｘ_２１は、トレオニン（Ｔ）、イソロイシン（Ｉ）、アスパラギン（Ｎ）、ロイシン（Ｌ）またはメチオニン（Ｍ）であり、
Ｘ_２２は、アラニン（Ａ）、システイン（Ｃ）またはアルギニン（Ｒ）であり、
Ｘ_２３は、アスパラギン（Ｎ）、アスパラギン酸（Ｄ）、トレオニン（Ｔ）またはセリン（Ｓ）であり、
Ｘ_２４は、アルギニン（Ｒ）、ヒスチジン（Ｈ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）またはリジン（Ｋ）であり、
Ｘ_２５は、トレオニン（Ｔ）、アラニン（Ａ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓ）またはアスパラギン酸（Ｄ）であり、
Ｘ_２６は、アラニン（Ａ）などの任意のアミノ酸であり、
Ｘ_２７は、イソロイシン（Ｉ）、アラニン（Ａ）またはバリン（Ｖ）であり、
Ｘ_２８は、グリシン（Ｇ）、セリン（Ｓ）またはグルタミン（Ｑ）であり、
Ｘ_２９は、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、プロリン（Ｐ）またはシステイン（Ｃ）であり、
Ｘ_３２は、リジン（Ｋ）などの任意のアミノ酸である］、
またはその機能的バリアントであって、前記バリアントのアミノ酸配列が１～６個の個別のアミノ酸置換を含むという点で前記バリアントのアミノ酸配列が配列番号１６とは異なる、前記機能的バリアント
からなる群から選択される少なくとも２つの繰り返し領域を含む、前記ポリペプチド。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6A】

【図6B】

【図7】

【配列表】

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【国際調査報告】