特表 2024-544249 免疫グロブリン富化乳画分

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-11-28

(54)【発明の名称】免疫グロブリン富化乳画分

(51)【国際特許分類】

   A23C 9/142 20060101AFI20241121BHJP

   A23J 1/20 20060101ALI20241121BHJP

   A23C 9/146 20060101ALI20241121BHJP

   A23C 9/152 20060101ALI20241121BHJP

   A23L 33/19 20160101ALI20241121BHJP

【ＦＩ】

A23C9/142

A23J1/20

A23C9/146

A23C9/152

A23L33/19

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024534576

(86)(22)【出願日】2022-12-14

(85)【翻訳文提出日】2024-06-10

(86)【国際出願番号】 EP2022085821

(87)【国際公開番号】W WO2023110999

(87)【国際公開日】2023-06-22

(31)【優先権主張番号】21214662.5

(32)【優先日】2021-12-15

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】505310426

【氏名又は名称】フリースランドカンピーナ ネーデルランド ベスローテン フェンノートシャップ

(74)【代理人】

【識別番号】110000855

【氏名又は名称】弁理士法人浅村特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】リー、ウェイウェイ

(72)【発明者】

【氏名】ドートルモン、クリス テレーズ エミリアンヌ

(72)【発明者】

【氏名】クーネット、クリスティーン

【テーマコード（参考）】

4B018

【Ｆターム（参考）】

4B018LB07

4B018LB08

4B018LB10

4B018MD01

4B018MD09

4B018MD14

4B018MD20

4B018MD23

4B018MD71

4B018ME14

4B018MF06

4B018MF14

(57)【要約】

免疫グロブリンが富化された、好ましくはＩｇＡ及びＩｇＭが富化された乳画分を得る方法であって、（ａ）脱脂乳を精密濾過に供して、ミセルカゼインリッチのＭＦ濾過液及びホエータンパク質リッチのＭＦ残留物を生じさせる工程と、（ｂ）ＭＦ残留物をカゼイン沈殿又はチーズ製造プロセスに供することによって、カゼインリッチ画分及びホエー画分を作出する工程と、（ｃ）工程（ｂ）において得られたホエー画分を精密濾過及び／又は陰イオン交換クロマトグラフィに供することによって、免疫グロブリンが富化した乳画分を得る工程とを含む方法。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

免疫グロブリンが富化された、好ましくはＩｇＡ及びＩｇＭが富化された乳画分を得る方法であって：
ａ）脱脂乳を精密濾過に供して、ミセルカゼインリッチのＭＦ濾過液及びホエータンパク質リッチのＭＦ残留物を生じさせる工程と、
ｂ）前記ＭＦ残留物をカゼイン沈殿又はチーズ製造プロセスに供することによって、カゼインリッチ画分及びホエー画分を作出する工程と、
ｃ）工程ｂ）において得られた前記ホエー画分を精密濾過及び／又は陰イオン交換クロマトグラフィに供することによって、免疫グロブリンが富化した乳画分を得る工程と
を含む方法。

【請求項2】

精密濾過の前に、前記脱脂乳のｐＨは、５．６～６．２、より好ましくは５．６～６．０、最も好ましくは５．６～５．８の範囲内の値に調整される、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記チーズ製造方法は、（ｉ）場合によっては前記ＭＦ残留物の乾燥及び再懸濁後の、脂肪源の、前記ＭＦ残留物への添加、（ｉｉ）以降の、凝固剤及び土壌酸性化剤の添加、並びに（ｉｉｉ）カゼインリッチ画分及びホエー画分を得るための凝固を包含する、請求項１又は２に記載の方法。

【請求項4】

工程ｂ）において得られる前記ホエー画分は、工程ｃ）において精密濾過に供される前に、４～５の範囲内のｐＨに酸性化される、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項5】

工程ｃ）の前記精密濾過は、細孔サイズが５０～１００ｎｍの範囲内であるか、又は分子量カットオフ（ＭＷＣＯ）が５００～８００ｋＤａの範囲内である膜により実行される、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項6】

工程ｃ）の前記精密濾過は、０．１０～０．２５ｍ／秒のクロスフローを用いるスパイラル膜により、又は５～７ｍ／秒のクロスフローを用いるセラミック膜により実行される、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】

工程ｃ）の前記精密濾過は、１０～１５℃の範囲の温度にて実行される、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項8】

工程ｂ）において得られる前記ホエー画分は、陰イオン交換クロマトグラフィに供される前に、６．５～７の範囲内のｐＨに酸性化される、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項9】

総タンパク質含有量と比較して、１０～４０重量％の範囲内の免疫グロブリンの含有量、及び２５～６０重量％、好ましくは４５～６０重量％の範囲内の重量比（ＩｇＡ＋ＩｇＭ）／ＩｇＧを含む乳画分。

【請求項10】

請求項９に記載の乳画分を含む、乳児用調合乳、フォローアップ調合乳、及びグローイングアップ乳から選択される栄養組成物。

【請求項11】

請求項９に記載の乳画分を、少なくとも脂肪源、炭水化物源、ホエータンパク質源、並びにビタミン及びミネラルと組み合わせることによって、請求項１０に記載の栄養組成物を生成する方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、免疫グロブリン含有量が高い乳画分、その生成及び使用に関する。

【背景技術】

【0002】

乳汁は、哺乳類の子孫にとって、他の供給源由来の食物を消化することができるようになるまで、唯一の栄養源となる。全ての泌乳動物の初乳及び乳汁は、微生物の病原体及び毒素に対する免疫学的防御を子孫にもたらし、且つ乳腺を感染から保護する免疫グロブリン（Ｉｇ）を含有する。ウシ乳汁及びヒト乳汁中の免疫グロブリンの主要なクラスは、ＩｇＧ、ＩｇＡ、及びＩｇＭであり、これらは、構造及び生物活性が異なる。ＩｇＧは、ＩｇＧ_１及びＩｇＧ_２に再分割することができる；ＩｇＡは、ＩｇＡ_１及びＩｇＡＩｇＡ_２に再分割することができる。

【0003】

免疫グロブリンは、分子量が異なる。単量体ＩｇＧは、量が約１５０ｋＤａ（正確な重量は、元の動物に依存する）、二量体ＩｇＡは約４００ｋＤａ、そしてＩｇＭは約９００ｋＤａであり、主要なホエータンパク質（約１４～１８ｋＤａ）の重量よりもかなり高く、そして乳汁中に存在するカゼインミセルの重量よりもかなり小さい。

【0004】

ヒト乳汁における主要なＩｇは、ＩｇＡである。ヒト母乳は、総Ｉｇ含有量に基づいて、約８５～９０重量％のＩｇＡ、約２～３重量％のＩｇＧ、及び約８～１０重量％のＩｇＭを含有する（Ｊ．Ａ．Ｃａｋｅｂｒｅａｄ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．，６３（２０１５）７３１１－７３１６）。ヒト母乳中の総Ｉｇ濃度は、ウシ乳汁のＩｇ含有量の約１．５倍である（Ｊ．Ａ．ｖａｎ Ｎｅｅｒｖｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｏｃｔｏｂｅｒ ２０１２，８５３－８５８）。
ウシ乳汁における主要なＩｇは、ＩｇＧである。成熟ウシ乳汁は、総Ｉｇ含有量に基づいて、約８０重量％のＩｇＧ（そのかなりの大部分がＩｇＧ_１である）、約１０重量％のＩｇＭ、及び約１０重量％のＩｇＡを含有する。

【0005】

ウシ初乳のＩｇ含有量は、成熟ウシ乳のＩｇ含有量よりもはるかに高い：初乳の総タンパク質含有量の７０～８０％がＩｇであるが、成熟ウシ乳中では総タンパク質含有量の１～２重量％を提供するに過ぎない。初乳汁中のＩｇＧ／ＩｇＡ比は、熟成ウシ乳汁中のＩｇＧ／ＩｇＡ比よりもずっと高い。

【0006】

乳児用調合乳は、従来は、少なくとも１種のホエータンパク質源、少なくとも１種の乳（カゼイン）タンパク質源、少なくとも１種の脂質源、少なくとも１種の炭水化物源、ビタミン、及びミネラルを組み合わせることによって調製される。ウシ乳汁は、これらのタンパク質、炭水化物、脂質、及びビタミンの使用供給源の１つである。

【0007】

ヒトの母乳に限りなく近い乳児用調合乳を生成することが引き続き望まれている。それゆえに、その目標を達成するために、乳児用調合乳の活性免疫グロブリン含有量及びＩｇＡ含有量を増大させることが望まれている。したがって、本発明の目的の１つは、ＩｇＧと比較してＩｇＡの比率が高い乳画分の供給である；そのため、当該乳画分の、乳児用調合乳への添加が、上述の望みに応ずるであろう。

【0008】

ホエータンパク質を得る効率的な方法は、脱脂乳の、カゼインリッチ残留物及びホエータンパク質リッチ濾過液への精密濾過を包含する。

【0009】

精密濾過から生じたホエータンパク質リッチ濾過液（すなわち、血清タンパク質画分）を用いて、前記濾過液を限外濾過に供してラクトース、灰分、及び水を除去してから（噴霧）乾燥させることによって、血清タンパク質濃縮液（ＳＰＣ）を製造することができる。

【0010】

カゼインリッチ残留物から、残留物をエバポレーション及び（噴霧）乾燥に供することによって、ミセルカゼイン単離物（ＭＣＩ）を得ることができる。例えば、このＭＣＩを、モッツァレッラチーズ及びフェタチーズのようなソフトチーズの生産に用いることができる。このチーズ製造プロセスのホエー画分は、通常、かなりの量のＩｇを含有するという事実にも拘わらず、廃棄物とみなされる。したがって、本発明の別の目的は、このホエー画分内でＩｇを安定させることである。

【0011】

精密濾過の間、ほとんどのＩｇＧは、血清タンパク質画分中に落ち着く。他方では、カゼイン画分は、ＩｇＧの無視できない部分に加えて、ほとんどのＩｇＡ及びＩｇＭを含有する。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0012】

本発明は、カゼインリッチＭＦ残留物中に残る免疫グロブリンを安定させる方法に関する。

【0013】

より詳細には、本発明は、総タンパク質含有量と比較して、１０～４０重量％の範囲内の、ＩｇＧ＋ＩｇＡ＋ＩｇＭの総含有量と定義される免疫グロブリンの含有量、及び２５～６０重量％、好ましくは４５～６０重量％の範囲内の重量比（ＩｇＡ＋ＩｇＭ）／ＩｇＧを含む乳画分に関する。

【0014】

また、本発明は、好ましくはＩｇＡ及びＩｇＭが富化された、Ｉｇ富化乳画分を得るプロセスであって：
ａ）脱脂乳を精密濾過に供して、ミセルカゼインリッチのＭＦ濾過液及びホエータンパク質リッチのＭＦ残留物を生じさせる工程と、
ｂ）ＭＦ残留物をカゼイン沈殿及び／又はチーズ製造プロセスに供することによって、カゼインリッチ画分及びホエー画分を作出する工程と、
ｃ）工程ｂ）において得られたホエー画分を精密濾過及び／又は陰イオン交換クロマトグラフィに供することによって、免疫グロブリンが富化した乳画分を得る工程と
を含むプロセスに関する。

【発明を実施するための形態】

【0015】

本発明のプロセスにおける第１の工程は、脱脂乳の精密濾過を包含する。用語「脱脂乳」は、上澄みが掬われた（ｓｋｉｍｍｅｄ）、そして場合によっては前処理（例えば、低温殺菌、希釈、限外濾過、濃縮、脱塩、及び／又は炭水化物レベルの引下げ）されていてもよい（ただし、カゼインの、ホエータンパク質に対する元のパーセンテージが、実質的には不変のままであった場合に限る）動物乳汁、好ましくはウシ乳汁を指す。

【0016】

脱脂乳を、精密濾過に供して、カゼインリッチ残留物及びホエータンパク質リッチ濾過液を得る。これは、周知のプロセスである。
スパイラル膜、セラミック膜、及び中空繊維膜が挙げられる種々の精密濾過膜を用いることができる。精密濾過膜は、水、ミネラル、及びラクトースに対して透過性であるべきであり、ホエータンパク質に対して少なくとも部分的に透過性であるべきであり、且つカゼインタンパク質及び脂肪の保持が高くあるべきである。適切な精密濾過膜は典型的には、細孔サイズが０．８５～０．５μｍ、より典型的には０．１～０．２μｍである。
精密濾過工程は、好ましくは、４～１５℃又は５０～５５℃の範囲、より好ましくは１０～１５℃又は５０～５２℃の範囲の温度にて行われる。

【0017】

クロスフローは、好ましくは高い： 好ましくは、スパイラル膜について０．１０～０．２５ｍ／秒、中空繊維膜について１．０～２．４ｍ／秒、そしてセラミック膜について５．０～７．０ｍ／秒の範囲内である。

【0018】

望むならば、乳汁のｐＨは、精密濾過の前に調整して、分子及び膜上のイオン電荷を調整することができる。ｐＨは、好ましくは、５．６～６．２、より好ましくは５．６～６．０、最も好ましくは５．６～５．８の範囲内である。

【0019】

膜貫通圧（ＴＭＰ）は、好ましくは、可能な限り低く、より好ましくは０．２５～１バールの範囲内である。

【0020】

免疫グロブリン間の分離をさらに向上させるために、透析濾過が所望される。

【0021】

ＭＦ残留物を、カゼイン沈殿及び／又はチーズ製造プロセスに供して、ＭＦ残留物のカゼイン含有量を引き下げる。

【0022】

当該カゼイン沈殿プロセスは、カゼインの凝固を誘導するための酸の添加を包含し、その結果、酸カゼイン画分（カゼインカード）と酸ホエー画分とが生じる。酸は、好ましくは、ＨＣｌ、Ｈ_２ＳＯ_４、及びクエン酸から選択される。

【0023】

例えば、１Ｍ Ｈ_２ＳＯ_４が、脱脂乳に、４０～４５℃にて十分に撹拌されながら、ｐＨが４．３～４．６の範囲に達するまで加えられ得る。酸性化した乳汁は、カードの形成が完了するまで撹拌される。次いで、カードは、例えばバッグ濾過又は遠心分離によって、ホエーから除去される。

【0024】

チーズ製造プロセスは、好ましくは、（ｉ）場合によってはＭＦ残留物の乾燥及び再懸濁後の、脂肪源の、ＭＦ残留物への添加、（ｉｉ）以降の、凝固剤及び土壌酸性化剤の添加、並びに（ｉｉｉ）カゼインリッチ画分（チーズ又はチーズ前駆物質）及びホエー画分を得るための凝固を包含する。
適切な脂肪源は、無水乳脂肪、無水乳脂肪画分、バター、バター油、脂肪含有量が３０～８０重量％の範囲内のクリーム、及びこれらの２つ以上の混合物であり、無水乳脂肪及びクリームが、好ましい脂肪源である。
脂肪源は、好ましくは、ＭＦ残留物（又は再懸濁された乾燥残留物）に、脂肪源の融点を超える温度にて加えられる。

【0025】

酸性化のために目標となるｐＨは、好ましくは、４．８～５．７、より好ましくは４．９～５．５の範囲内である。適切な酸性化剤として、スターターカルチャー（ラクトースを乳酸に変換する細菌性酸性化剤）、酸、酸味料（例えば、グルコノデルタラクトン又はＧＤＬ等）、及びこれらの２つ以上の組合せが挙げられる。最も一般的なスターターカルチャーとして、好熱性スターター、典型的にはＣＳＫ、Ｃｈｒ．Ｈａｎｓｅｎ、又はＤｕＰｏｎｔのスターターが挙げられる。Ｃｈｒ．Ｈａｎｓｅｎによる好熱性スターターとして、冷凍カルチャーであるＳＴＩ－０２、ＳＴＩ－０３、ＳＴＩ－０４、ＳＴＩ－０６、並びに凍結乾燥カルチャーであるＳＴＩ－１２、ＳＴＩ－１３、及びＳＴＩ－１４が挙げられる。また、中温性スターターが用いられ得る。

【0026】

適切な凝固剤が、当該技術において知られており、例えば、仔牛レンネット、発酵生産レンネット、及び微生物レンネットが挙げられる。仔牛レンネットの例として、ＣＳＫによって製造されているＫａｌａｓｅ、及びＣｈｒ．Ｈａｎｓｅｎによって製造されているＮａｔｕｒｅｎが挙げられる。発酵生産レンネットの例として、ＤＳＭによるＦｒｏｍａｓｅ及びＣＳＫによるＭｉｌａｓｅが挙げられる。微生物レンネットの例として、Ｃｈｒ．ＨａｎｓｅｎによるＣｈｙ－Ｍａｘ及びＤＳＭによるＭａｘｉｒｅｎがある。他の凝固剤として、ペプシン、及び植物起源の種々のタンパク質分解酵素が挙げられる。

【0027】

前記カゼイン沈殿又はチーズ製造プロセスの後に残るホエー画分、すなわち、それぞれ酸ホエー画分又はチーズホエー画分は、その後、精密濾過工程及び／又は陰イオン交換クロマトグラフィ工程に供されることよって、免疫グロブリンが富化した乳画分が生じる。

【0028】

この精密濾過工程は、細孔サイズが５０～１００ｎｍの範囲内、又は分子量カットオフ（ＭＷＣＯ）が５００～８００ｋＤａの範囲内の膜により実行される。
細孔サイズは、ウェッティング液としてのパーフルオロエーテルによるキャピラリフローポロメトリ（ＣＦＰ）としても知られている気体－液体ポロメトリによって求められる。

【0029】

ＭＷＣＯは、９０％のレベルで膜によって拒絶される特定の溶質分子（この場合： デキストラン（２０００ｐｐｍの水溶液））の分子量を表す、実験的に決定されるパラメータである。この決定における膜貫通圧は約３０ｐｓｉであり、デキストラン拒絶は、全有機体炭素（ＴＯＣ）の決定によって測定される。

【0030】

先で定義した細孔サイズ又はＭＷＣＯの膜は、ＩｇＧの少なくとも一部について透過性であるが、ＩｇＡ及びＩｇＭについて、透過性はより低い。それゆえに、結果として生じる残留物、すなわち本発明に従う乳画分は、ＩｇＧと比較して、ＩｇＡ及びＩｇＭが富化されることとなる。

【0031】

微量濾過は、好ましくは、範囲４～５のｐＨへのホエー画分の酸性化の後に実行される。微量濾過に用いられるクロスフローは、好ましくは、スパイラル膜について０．１０～０．２５ｍ／秒、又はセラミック膜について５～７ｍ／秒である。使用した温度は、好ましくは、１０～１５℃である。ホエー画分は、好ましくは、前記微量濾過によって少なくとも１０の容量濃縮係数（ＶＣＦ）にまで濃縮され、そして好ましくは、等しい容量のイオン交換水による透析濾過の少なくとも１つの工程が続く。微量濾過工程由来の残留物は、Ｉｇ、とりわけＩｇＡ及びＩｇＭが富化されている。

【0032】

陰イオン交換クロマトグラフィは、弱イオン交換樹脂及び強イオン交換樹脂が挙げられる種々のタイプの樹脂により、そして種々の対イオンを用いて実行することができる。
用語「弱」イオン交換及び「強」イオン交換は、通常、当該技術において知られている。強イオンエキスチェンジャは、イオンエキスチェンジャが平衡化されると、そのマトリックス上で電荷を大きく放たないので、広いｐＨ範囲（通常、強い酸性のｐＨ～強いアルカリ性のｐＨ）を用いることができる。強陰イオン交換樹脂は、通常、四級アンモニウム基の存在によって特徴付けられる。

【0033】

弱イオンエキスチェンジャは、その電荷を維持することとなるより特定の範囲のｐＨ値（弱陰イオン交換材料の場合、通常、酸性～約中性のｐＨ）を有する。弱陰イオン交換基は、通常、四級アンモニウム基の不在によって特徴付けられる。一般的な弱陰イオン交換基は、三級アミン基である。

【0034】

好ましい実施形態において、強陰イオン交換樹脂、より好ましくは四級アンモニウム基を有する陰イオン交換樹脂（例えば、Ｑ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｂｉｇ Ｂｅａｄｓ）が用いられる。より好ましくは、陰イオン交換樹脂は、Ｃｌ^－の形態である。

【0035】

陰イオン交換クロマトグラフィは、好ましくは、最初にホエー画分のｐＨを６．５～７．０に調整することによって実行される。カラムを通過することによって、ホエー画分は、Ｉｇ、とりわけＩｇＡ及びＩｇＭが富化される；不純タンパク質、例えばベータ－ラクトグロブリンが、樹脂に結合して、低いｐＨ又は高い導電率のバッファ（例えば１Ｍ ＮａＣｌ）でリンスすることによって、カラムから避ける（ｅｌｕｄｅｄ）ことができる。

【0036】

また、最初に微量濾過を実行して、残留物のｐＨを６．５～７．０に調整してから、前記残留物をＩｇの更なる富化用の陰イオン交換カラム上にロードすることによって、微量濾過及び陰イオン交換クロマトグラフィを組み合わせることが可能である。そのような組合せは、チーズ製造又はカゼイン沈殿後のホエー画分のＩｇと比較して、最大約６～８倍のＩｇの更なる富化を可能にする。

【0037】

本明細書では「乳画分」と称される、結果として生じる産物は、免疫グロブリンの総含有量が、総タンパク質含有量と比較して、１０～４０重量％の範囲内、そして重量比（ＩｇＡ＋ＩｇＭ）／ＩｇＧが、２５～６０重量％、好ましくは４５～６０重量％の範囲内である。
免疫グロブリンの総含有量は、Ｒ．Ｌ． Ｖａｌｋ－Ｗｅｅｂｅｒａ，Ｔ．Ｅｓｈｕｉｓ－ｄｅ Ｒｕｉｔｅｒ，Ｌ．Ｄｉｊｋｈｕｉｚｅｎ，ａｎｄ Ｓ．Ｓ．ｖａｎ Ｌｅｅｕｗｅｎ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｄａｉｒｙ Ｊｏｕｒｎａｌ，Ｖｏｌｕｍｅ １１０，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ２０２０，１０４８１４）によって記載されるようにセットしたウシＩｇＧ ＥＬＩＳＡ定量化によって求められるＩｇＧ＋ＩｇＡ＋ＩｇＭの総含有量と定義される。総タンパク質含有量は、周知のケルダール窒素分析法及び６．３８のケルダール係数の使用によって測定される。

【0038】

本発明に従う免疫グロブリン富化乳画分は、栄養組成物、特に調合乳の製造における成分としての使用に特に適している。調合乳は、乳児用調合乳、フォローアップ調合乳、及びグローイングアップ調合乳の群から選択される。したがって、本発明はさらに、栄養組成物、典型的には小児のための栄養組成物、例えば、調合乳、特に乳児用調合乳、フォローアップ調合乳、又はグローイングアップ調合乳に関する。

【0039】

栄養組成物、特に調合乳は、免疫グロブリン富化乳画分を、少なくとも脂質源、炭水化物源、ビタミン、及びミネラルと組み合わせることによって調製することができる。

【0040】

脂質源は、調合乳に用いるのに適したあらゆる脂質又は脂肪であり得る。好ましい脂肪源として、乳脂肪、ベニバナ油、卵黄脂質、キャノーラ油、オリーブ油、ヤシ油、パーム核油、ダイズ油、魚油、パームオレイン酸（ｐａｌｍ ｏｌｅｉｃ）、高オレイン酸ヒマワリ油、及び高オレイン酸ベニバナ油、並びに長鎖多価不飽和脂肪酸を含有する微生物発酵油が挙げられる。一実施形態において、無水乳脂肪が用いられる。また、脂質源は、これらの油に由来する画分、例えば、パームオレイン、中鎖トリグリセリド、及び脂肪酸（例えば、アラキドン酸、リノール酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ドコサヘキサエン酸、リノレン酸、オレイン酸、ラウリン酸、カプリン酸、カプリル酸、カプロン酸等）のエステルの形態であり得る。事前に形成されたアラキドン酸及びドコサヘキサエン酸を多量に含有する少量の油、例えば、魚油又は微生物油が加えられてもよい。当該脂肪源は、好ましくは、ｎ－６脂肪酸の、ｎ－３脂肪酸に対する比が、約５：１～約１５：１、例えば約８：１～約１０：１である。特定の態様において、調合乳は、トリアシルグリセロールにエステル結合したパルミチン酸を含む油混合物を含み、例えば、トリアシルグリセロールのｓｎ－２位においてエステル結合したパルミチン酸は、総パルミチン酸の２０重量％～６０重量％の量であり、トリアシルグリセロールのｓｎ－１／ｓｎ－３位においてエステル結合したパルミチン酸は、総パルミチン酸の４０重量％～８０重量％の量である。

【0041】

好ましくは調合乳中に存在するビタミン及びミネラルの例として、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、葉酸、イノシトール、ナイアシン、ビオチン、パントテン酸、コリン、カルシウム、リン、ヨウ素、鉄、マグネシウム、銅、亜鉛、マンガン、塩化物、カリウム、ナトリウム、セレン、クロム、モリブデン、タウリン、及びＬ－カルニチンがある。ミネラルは、通常、塩の形態で加えられる。

【0042】

好ましくは調合乳中に存在する炭水化物の例として、ラクトース、難消化性オリゴ糖、例えば、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）及び／又はフラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）並びにヒトミルクオリゴ糖（ＨＭＯ）がある。

【0043】

必要に応じて、栄養組成物は、乳化剤及び安定化剤、例えば、ダイズレシチン、モノグリセリド及びジグリセリドのクエン酸エステル等を含有してもよい。また、ラクトフェリン、ヌクレオチド、ヌクレオシド等の、有益な効果を有し得る他の物質を含有してもよい。

【実施例】

【0044】

実施例１
２７０ｐｐｍのＩｇＧ、３０ｐｐｍのＩｇＡ、及び２４ｐｐｍのＩｇＭを含有し、且つ総タンパク質濃度が３．９重量％（総タンパク質と比較したＩｇ含有量：０．８４重量％）である脱脂乳の流を、ポーズサイズが０．１μｍのスパイラル膜を用いる精密濾過に供した。精密濾過を、１５℃にて実行した。濃縮及び透析濾過の後に、ＭＦ残留物（ＭＣＩ）を収集した。

【0045】

結果として生じるＭＦ残留物（ＭＣＩ）は、およそ５００ｐｐｍのＩｇＧ、１７０ｐｐｍのＩｇＡ、及び１００ｐｐｍのＩｇＭを含有し、且つ総タンパク質濃度が１４．７％であった。ＭＦ残留物中のＩｇ含有量は、総タンパク質と比較して、膜を通るＩｇＧの透過に起因して、０．５２％であった（すなわち、脱脂乳のＩｇ含有量よりも低かった）。他方では、（ＩｇＡ＋ＩｇＭ）／ＩｇＧ比は、脱脂乳中のおよそ２２重量％から、ＭＦ残留物中のおよそ５８重量％に増大した。

【0046】

次に、ＭＦ残留物を、４２℃にて２Ｍ Ｈ_２ＳＯ_４を用いてｐＨ＝４．３に酸性化した。溶液を約３０分間静置させることによって、カードを形成させた。続いて、カードを、１００μｍのバッグフィルターを用いてホエーから除去した。結果として生じるホエー画分は依然として、Ｉｇの含有量が同じであったが、総タンパク質含有量は１．３重量％に引き下げられて、総タンパク質に基づいて、６重量％の総Ｉｇ含有量となった。

【0047】

ｐＨが４．３であるホエー画分を、細孔サイズが５００ｋＤのスパイラルＭＦ（膜面積６．７ｍ^２）に直接フィードした。精密濾過を、１５℃にて実行した。０．５バールのＴＭＰを用い、そしてクロスフローは８０ｌ／分であった。ホエーを、１２のＶＣＦに濃縮して、残留物を、等量の脱塩水により一回透析濾過した。残留産物は、総Ｉｇ含有量が、総タンパク質に基づいて１３重量％であった。（ＩｇＡ＋ＩｇＭ）／ＩｇＧ比は、５８重量％のままであった。

【0048】

実施例２
ホエー画分のｐＨを７に調整してから、このホエー画分を、室温での流量３０ＢＶ／時間（毎時床容量）による陰イオン交換クロマトグラフィ（四級アンモニウム機能基及びＣｌ^－対イオンを有する強陰イオン交換樹脂を用いる）に供したこと以外は、実施例１を繰り返した。３床容量のホエー画分をカラムにフィードして、カラムの放出口から収集した。収集した産物は、総Ｉｇ含有量が、総タンパク質に基づいて２０重量％であり、（ＩｇＡ＋ＩｇＭ）／ＩｇＧ比は変化がなかった（５８重量％）。

【0049】

その後、カラムを、１Ｍ ＮａＣｌ溶液により、１０ＢＶ／時間の流量にて避けて、結合した不純物；主にベータ－ラクトグロブリンを除去した。

【0050】

実施例３
実施例１の終わりに得られたＭＦ残留物をｐＨ７に中和して、実施例２の手順に従って陰イオン交換に供したこと以外は、実施例１を繰り返した。結果として生じる産物は、総Ｉｇ含有量が、総タンパク質に基づいて２５重量％であった。（ＩｇＡ＋ＩｇＭ）／ＩｇＧ比（５８重量％）の変化は観察されなかった。

【国際調査報告】