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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-12-03
(54)【発明の名称】ＨＢＶの処置のための医薬組合せ
(51)【国際特許分類】
A61K 31/7088 20060101AFI20241126BHJP
C12N 15/113 20100101ALI20241126BHJP
C12Q 1/02 20060101ALI20241126BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20241126BHJP
A61P 31/20 20060101ALI20241126BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20241126BHJP
A61K 48/00 20060101ALI20241126BHJP
A61K 38/21 20060101ALI20241126BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20241126BHJP
A61K 31/7052 20060101ALI20241126BHJP
C12N 15/85 20060101ALN20241126BHJP
【ＦＩ】
A61K31/7088
C12N15/113 Z ZNA
C12Q1/02
A61P43/00 121
A61P31/20
A61K45/00
A61K48/00
A61K38/21
A61K39/395 S
A61K39/395 N
A61K31/7052
C12N15/85 Z
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024527533
(86)(22)【出願日】2022-11-09
(85)【翻訳文提出日】2024-05-10
(86)【国際出願番号】 EP2022081355
(87)【国際公開番号】W WO2023083906
(87)【国際公開日】2023-05-19
(31)【優先権主張番号】21207715.0
(32)【優先日】2021-11-11
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】591003013
【氏名又は名称】エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー
【氏名又は名称原語表記】Ｆ． ＨＯＦＦＭＡＮＮ－ＬＡ ＲＯＣＨＥ ＡＫＴＩＥＮＧＥＳＥＬＬＳＣＨＡＦＴ
(74)【代理人】
【識別番号】100118902
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 修
(74)【代理人】
【識別番号】100106208
【弁理士】
【氏名又は名称】宮前 徹
(74)【代理人】
【識別番号】100196508
【弁理士】
【氏名又は名称】松尾 淳一
(74)【代理人】
【識別番号】100196243
【弁理士】
【氏名又は名称】運 敬太
(72)【発明者】
【氏名】ルアンサイ，スーファローネ
(72)【発明者】
【氏名】ミュラー，ヘンリク
(72)【発明者】
【氏名】ビセンテ，ヨハンナ・マリエ・ポーズ
(72)【発明者】
【氏名】アイト－ググルテ，マリカ
(72)【発明者】
【氏名】ドリーセン，ワウター・ヘンドリク・ピーター
【テーマコード（参考）】
4B063
4C084
4C085
4C086
【Ｆターム（参考）】
4B063QA01
4B063QA20
4B063QQ08
4B063QR35
4B063QS05
4B063QS33
4B063QX02
4C084AA13
4C084AA19
4C084AA22
4C084BA44
4C084DA22
4C084MA02
4C084NA05
4C084ZB331
4C084ZC412
4C084ZC751
4C085AA14
4C085BA89
4C085EE03
4C086AA01
4C086AA02
4C086EA16
4C086MA02
4C086MA03
4C086MA04
4C086MA66
4C086NA05
4C086ZB33
4C086ZC75
(57)【要約】
本発明は、少なくとも２つ、好ましくは２つ又は３つの異なるＨＢＶ治療薬を投与することを含む、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染を処置するための医薬組合せに関する。特に、本発明は、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを含む医薬組合せに関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチド、ＴＬＲ７アゴニスト、インターフェロン－アルファ、抗ＨＢＶ抗体、ＰＤ１シグナル伝達に拮抗する抗体、及びヌクレオチド類似体からなる群から選択される少なくとも２つのＨＢＶ治療薬を含む、ＨＢＶを処置するための医薬組合せ。
【請求項2】
前記組合せが、表２及び表３に列挙される組合せＣ１～Ｃ１２０のいずれか１つである、請求項１に記載の医薬組合せ。
【請求項3】
前記組合せが、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを含む、請求項１に記載の医薬組合せ。
【請求項4】
前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡを標的とし、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡの発現を減少させるｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドである、請求項３に記載の医薬組合せ。
【請求項5】
前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、１９～３０ヌクレオチド長のアンチセンス鎖を含むオリゴヌクレオチドであり、前記アンチセンス鎖が、ＡＣＡＡＮＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡ（配列番号１）として示されるＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡの配列に対して相補性の領域を含む、請求項３又は４に記載の医薬組合せ。
【請求項6】
前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、ＵＵＮＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＮ（配列番号２）として示される配列に対して相補性の領域を有するセンス鎖を含む、請求項３～５のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項7】
前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、配列ＧＡＣＡＡＮＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号８）を含むセンス鎖を含み、前記センス鎖上の－ＧＡＡＡ－配列のヌクレオチドの１つ又は複数がＧａｌＮａｃ部分にコンジュゲートしており、好ましくは、前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、配列ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＮＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号４）を含むアンチセンス鎖をさらに含む、請求項３～６のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項8】
前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、アンチセンス鎖と二重鎖領域を形成するセンス鎖を含むオリゴヌクレオチドであり、前記センス鎖が、配列ＧＡＣＡＡＡＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号９）であって、３位、８～１０位、１２位、１３位及び１７位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、２位、４～７位、１１位、１４～１６位、１８～２６位及び３１～３６位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間のホスホロチオエート結合を含む、配列からなり、前記センス鎖上の－ＧＡＡＡ－配列の各ヌクレオチドは、一価ＧａｌＮａｃ部分にコンジュゲートされており；
前記アンチセンス鎖が、配列ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＵＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号６）であって、２位、３位、５位、７位、８位、１０位、１２位、１４位、１６位及び１９位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、４位、６位、９位、１１位、１３位、１５位、１７位、１８位及び２０～２２位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間、２位と３位のヌクレオチド間、３位と４位のヌクレオチド間、２０位と２１位のヌクレオチド間、及び２１位と２２位のヌクレオチド間のホスホロチオエート結合を含む、配列からなり、
前記アンチセンス鎖の５’－ヌクレオチドの糖の４’－炭素が、メトキシホスホネート（ＭＯＰ）を含む、請求項３～７のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項9】
前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、アンチセンス鎖と二重鎖領域を形成するセンス鎖を含むオリゴヌクレオチドであり、前記センス鎖が、配列ＧＡＣＡＡＡＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号９）であって、３位、８～１０位、１２位、１３位及び１７位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、２位、４～７位、１１位、１４～１６位、１８～２６位及び３１～３６位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間の１つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む、配列を含み、前記センス鎖上の－ＧＡＡＡ－配列の各ヌクレオチドは、一価ＧａｌＮａｃ部分にコンジュゲートされており、前記－ＧＡＡＡ－配列は、以下の構造：
【化1】
前記アンチセンス鎖が、ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＵＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号６）に記載の配列であって、２位、３位、５位、７位、８位、１０位、１２位、１４位、１６位及び１９位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、４位、６位、９位、１１位、１３位、１５位、１７位、１８位及び２０－２２位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びにヌクレオチド１と２、２と３、３と４、２０と２１、及び２１と２２の間に５つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む、配列を含み、前記アンチセンス鎖の５’－ヌクレオチドは、以下の構造：
【化2】
【請求項10】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、ＰＤＬ１を標的とし、ＰＤＬ１の発現を減少させるアンチセンスオリゴヌクレオチドである、請求項３～９のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項11】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、ＰＤＬ１ ｍＲＮＡのＲＮＡｓｅＨ媒介性分解を誘導するＮ－アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）コンジュゲート化ロックド核酸（ＬＮＡ）一本鎖オリゴヌクレオチド（ＳＳＯ）である、請求項３～１０のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項12】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、配列ＣＣＴＡＴＴＴＡＡＣＡＴＣＡＧＡＣ（配列番号１１）を含む、請求項３～１１のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項13】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、式ＧＮ２－Ｃ６ｏｃｏａｏＣＣｔａｔｔｔａａｃａｔｃＡＧＡＣ（式中、Ｃ６は６個の炭素を有するアミノアルキル基を表し、大文字はβ－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシドを表し、小文字はＤＮＡヌクレオシドを表し、すべてのＬＮＡ Ｃは５－メチルシトシンであり、下付き文字ｏはホスホジエステルヌクレオシド結合を表し、特に指示しない限り、すべてのヌクレオシド間結合はホスホロチオエートヌクレオシド間結合であり、ＧＮ２は、以下の三価ＧａｌＮＡｃクラスター：
【化3】
さらに、前記三価ＧａｌＮＡｃクラスターの波線は、前記Ｃ６アミノアルキル基への前記三価ＧａｌＮＡｃクラスターのコンジュゲート部位を示す）
又はその薬学的に許容され得る塩を有している、請求項３～１２のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項14】
前記組合せが、ビヒクル対照と比較して、患者の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及び／又はＨＢＶ－ＤＮＡを減少させることができる、請求項３～１３のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項15】
前記組合せが、患者の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及び／又はＨＢＶ－ＤＮＡを減少させることができ、前記減少が、ａ）抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドなしで投与した場合にＨＢＶを標的とする同じ用量のＲＮＡｉオリゴヌクレオチドによって提供される減少、及び／又はｂ）ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドなしで投与した場合に同じ用量の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドによって提供される減少よりも大きい、請求項３～１４のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項16】
前記組合せが、患者の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及び／又はＨＢＶ－ＤＮＡを減少させることができ、前記減少が、ａ）抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドなしで投与した場合にＨＢＶを標的とする同じ用量のＲＮＡｉオリゴヌクレオチドによって提供される減少及びｂ）ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドなしで投与した場合に同じ用量の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドによって提供される減少の合計よりも大きい、請求項３～１５のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項17】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、請求項３～１６のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項18】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約９ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約９ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、請求項３～１７のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項19】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、請求項３～１７のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項20】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、請求項３～１９のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項21】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ又は約６ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、請求項３～２０のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項22】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、請求項３～２１のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項23】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、約７ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、請求項３～２０又は２２のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項24】
前記医薬組合せが、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドからなるか、又はそれらから本質的になる、請求項３～２３のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項25】
さらなる異なるＨＢＶ治療薬をさらに含む、請求項３～２３のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項26】
前記さらなる異なるＨＢＶ治療薬が、ＴＬＲ７アゴニスト、インターフェロン－アルファ、抗ＨＢＶ抗体、ＰＤ１シグナル伝達を阻害する抗体、又はヌクレオチド類似体である、請求項２５に記載の医薬組合せ。
【請求項27】
前記さらなる異なるＨＢＶ治療薬がＴＬＲ７アゴニストである、請求項２６に記載の医薬組合せ。
【請求項28】
前記ＨＢＶ治療薬の１つ又は２つ又はすべてが薬学的に許容され得る塩の形態である、請求項３～２７のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項29】
前記ＨＢＶ治療薬の１つ又は２つ又はすべてがプロドラッグの形態である、請求項３～２８のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項30】
前記ＨＢＶ治療薬の１つ又は２つ又はすべてが各々、薬学的に許容され得る担体、賦形剤、希釈剤又はアジュバントと共に組成物に含まれる、請求項３～２９のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項31】
請求項３～３０のいずれか一項に記載の医薬組合せを含む組成物。
【請求項32】
Ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための、請求項３～２９のいずれか一項に記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドと共に投与するための説明書とを含む、パーツのキット。
【請求項33】
前記説明書において言及される前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、請求項３～３０のいずれか一項に記載の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドである、請求項３２に記載のパーツのキット。
【請求項34】
前記キットが、請求項９に記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び請求項１３に記載の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む、請求項３２又は３３に記載のパーツのキット。
【請求項35】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが皮下注射用に製剤化され、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが皮下投与用に製剤化される、請求項３２～３４のいずれか一項に記載のパーツのキット。
【請求項36】
前記説明書に慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染症の処置が記載されている、請求項３２～３５のいずれか一項に記載のパーツのキット。
【請求項37】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び／又は前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、細胞内で前記オリゴヌクレオチドを発現するように操作された導入遺伝子の形態である、請求項３～３６のいずれか一項に記載の医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項38】
Ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための、請求項３～３７のいずれか一項に記載の医薬組合せ、組成物、又はキットの使用。
【請求項39】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの初回用量又は単回用量が、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量又は単回用量の投与前に投与される、請求項３８に記載の使用。
【請求項40】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量の少なくとも約１週間後、少なくとも約２週間後、少なくとも約３週間後、少なくとも約４週間後、少なくとも約５週間後、少なくとも約６週間後、少なくとも約７週間後、少なくとも約８週間後、又は８週間超後に投与される、請求項３８又は３９に記載の使用。
【請求項41】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量の少なくとも約４週間後に投与される、請求項３８～４０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項42】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、請求項３８～４１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項43】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、請求項３８～４２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項44】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが少なくとも５回投与される、請求項３８～４３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項45】
前記医薬組合せが４８週間にわたって投与される、請求項３８～４４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項46】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが薬学的有効量で投与される、請求項３８～４５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項47】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項３８～４６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項48】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約９ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項３８～４７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項49】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項３８～４８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項50】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約７ｍｇ／ｋｇの用量、又は約７ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、好ましくは、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、最大５回の約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、前記用量が、２週間ごとに少なくとも１回投与される、請求項３８～４９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項51】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項３８～５０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項52】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項３８～５１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項53】
抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇである、請求項３８～５２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項54】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、請求項３８～５３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項55】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇである、請求項３８～５４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項56】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇであり；前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの各用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、請求項３８～５５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項57】
処置される前記Ｂ型肝炎ウイルス感染症が慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染症である、請求項３８～５６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項58】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形であり、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形である、請求項３８～５７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項59】
前記医薬組合せが、ＨＢＶ ｍＲＮＡ転写物をコードする非表面抗原を標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドによる処置の非存在下で投与される、請求項３８～５８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項60】
対象に、ＨＢｘＡｇ ｍＲＮＡ転写物を選択的に標的化するＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが投与されない、請求項３８～５９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項61】
対象に有効量のエンテカビルを投与することをさらに含む、請求項３８～６０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項62】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び／又は前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、細胞内で前記オリゴヌクレオチドを発現するように操作された導入遺伝子の形態で送達される、請求項３８～６１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項63】
薬に使用するための、請求項３～３７のいずれか一項に記載の医薬組合せ、組成物、又はキット。
【請求項64】
Ｂ型肝炎ウイルス感染症の処置での使用のための、請求項３～３７のいずれか一項に記載の医薬組合せ、組成物、又はキット。
【請求項65】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量が、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量の投与前に投与される、請求項６３又は６４に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項66】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量の少なくとも約１週間後、少なくとも約２週間後、少なくとも約３週間後、少なくとも約４週間後、少なくとも約５週間後、少なくとも約６週間後、少なくとも約７週間後、少なくとも約８週間後、又は８週間超後に投与される、請求項６３～６５のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項67】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量の少なくとも約４週間後に投与される、請求項６３～６６のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項68】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、請求項６３～６７のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項69】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、請求項６３～６８のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項70】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが少なくとも５回投与される、請求項６３～６９のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項71】
前記医薬組合せが４８週間にわたって投与される、請求項６３～７０のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項72】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが薬学的有効量で投与される、請求項６３～７１のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項73】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項６３～７２のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項74】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約９ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項６３～７３のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項75】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項６３～７４のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項76】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約７ｍｇ／ｋｇの用量、又は約７ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、好ましくは、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、最大５回の約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、前記用量が、２週間ごとに少なくとも１回投与される、請求項６３～７５のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項77】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項６３～７６のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項78】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項６３～７７のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項79】
抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇである、請求項６３～７８のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項80】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、請求項６３～７９のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項81】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇである、請求項６３～８０のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項82】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇであり；前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの各用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、請求項６３～８１のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項83】
処置される前記Ｂ型肝炎ウイルス感染症が慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染症である、請求項６３～８２のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項84】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形であり、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形である、請求項６３～８３のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項85】
前記医薬組合せが、ＨＢＶ ｍＲＮＡ転写物をコードする非表面抗原を標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドによる処置の非存在下で投与される、請求項６３～８４のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項86】
対象に、ＨＢｘＡｇ ｍＲＮＡ転写物を選択的に標的化するＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが投与されない、請求項６３～８５のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項87】
対象に有効量のエンテカビルを投与することをさらに含む、請求項６３～８６のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項88】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び／又は前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、細胞内で前記オリゴヌクレオチドを発現するように操作された導入遺伝子の形態で送達される、請求項６３～８７のいずれか一項に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【請求項89】
医薬の製造における、請求項３～３７のいずれか一項に記載の医薬組合せ、組成物、又はキットの使用。
【請求項90】
Ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための医薬の製造における、請求項３～３７のいずれか一項に記載の医薬組合せ、組成物、又はキットの使用。
【請求項91】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量が、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量の投与前に投与される、請求項８９又は９０に記載の使用。
【請求項92】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量の少なくとも約１週間後、少なくとも約２週間後、少なくとも約３週間後、少なくとも約４週間後、少なくとも約５週間後、少なくとも約６週間後、少なくとも約７週間後、少なくとも約８週間後、又は８週間超後に投与される、請求項８９～９１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項93】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量の少なくとも約４週間後に投与される、請求項８９～９２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項94】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、請求項８９～９３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項95】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、請求項８９～９４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項96】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが少なくとも５回投与される、請求項８９～９５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項97】
前記医薬組合せが４８週間にわたって投与される、請求項８９～９６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項98】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが薬学的有効量で投与される、請求項８９～９７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項99】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項８９～９８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項100】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約９ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項８９～９９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項101】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項８９～１００のいずれか一項に記載の使用。
【請求項102】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約７ｍｇ／ｋｇの用量、又は約７ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、好ましくは、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、最大５回の約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、前記用量が、２週間ごとに少なくとも１回投与される、請求項８９～１０１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項103】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項８９～１０２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項104】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項８９～１０３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項105】
抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇである、請求項８９～１０４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項106】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、請求項８９～１０５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項107】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇである、請求項８９～１０６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項108】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇであり；前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの各用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、請求項８９～１０７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項109】
処置される前記Ｂ型肝炎ウイルス感染症が慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染症である、請求項８９～１０８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項110】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形であり、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形である、請求項８９～１０９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項111】
前記医薬組合せが、ＨＢＶ ｍＲＮＡ転写物をコードする非表面抗原を標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドによる処置の非存在下で投与される、請求項８９～１１０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項112】
対象に、ＨＢｘＡｇ ｍＲＮＡ転写物を選択的に標的化するＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが投与されない、請求項８９～１１１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項113】
対象に有効量のエンテカビルを投与することをさらに含む、請求項８９～１１２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項114】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び／又は前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、細胞内で前記オリゴヌクレオチドを発現するように操作された導入遺伝子の形態で送達される、請求項８９～１１３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項115】
Ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための方法であって、治療有効量の、請求項３～３７のいずれか一項に記載の医薬組合せ、組成物、又はキットを、Ｂ型肝炎ウイルス感染症に感染した対象に投与することを含む、方法。
【請求項116】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量が、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量の投与前に投与される、請求項１１５に記載の方法。
【請求項117】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量の少なくとも約１週間後、少なくとも約２週間後、少なくとも約３週間後、少なくとも約４週間後、少なくとも約５週間後、少なくとも約６週間後、少なくとも約７週間後、少なくとも約８週間後、又は８週間超後に投与される、請求項１１５又は１１６に記載の方法。
【請求項118】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの前記単回用量又は初回用量の少なくとも約４週間後に投与される、請求項１１５～１１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項119】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、請求項１１５～１１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項120】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、請求項１１５～１１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項121】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが少なくとも５回投与される、請求項１１５～１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項122】
前記医薬組合せが４８週間にわたって投与される、請求項１１５～１２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項123】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが薬学的有効量で投与される、請求項１１５～１２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項124】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１１５～１２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項125】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約９ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１１５～１２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項126】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１１５～１２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項127】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約７ｍｇ／ｋｇの用量、又は約７ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、好ましくは、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、最大５回の約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、前記用量が、２週間ごとに少なくとも１回投与される、請求項１１５～１２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項128】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１１５～１２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項129】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項１１５～１２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項130】
抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇである、請求項１１５～１２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項131】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、請求項１１５～１３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項132】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇである、請求項１１５～１３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項133】
前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの前記初回用量が、ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇであり；前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの各用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、請求項１１５～１３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項134】
処置される前記Ｂ型肝炎ウイルス感染症が慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染症である、請求項１１５～１３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項135】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形であり、前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形である、請求項１１５～１３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項136】
前記医薬組合せが、ＨＢＶ ｍＲＮＡ転写物をコードする非表面抗原を標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドによる処置の非存在下で投与される、請求項１１５～１３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項137】
前記対象に、ＨＢｘＡｇ ｍＲＮＡ転写物を選択的に標的化するＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが投与されない、請求項１１５～１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項138】
前記対象に有効量のエンテカビルを投与することをさらに含む、請求項１１５～１３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項139】
ＨＢＶを標的とする前記ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び／又は前記抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、細胞内で前記オリゴヌクレオチドを発現するように操作された導入遺伝子の形態で送達される、請求項１１５～１３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項140】
細胞におけるＢ型肝炎ウイルス表面抗原の発現を減少させる方法であって、請求項３～３７のいずれか一項に記載の医薬組合せ又は組成物を前記細胞に送達することを含む、方法。
【請求項141】
前記細胞が肝細胞である、請求項１４０に記載の方法。
【請求項142】
前記細胞がインビボである、請求項１４０又は１４１に記載の方法。
【請求項143】
前記細胞がインビトロである、請求項１４０又は１４１に記載の方法。
【請求項144】
治療用オリゴヌクレオチドが、前記細胞内で前記オリゴヌクレオチドを発現するように操作された導入遺伝子の形態で送達される、請求項１４０～１４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項145】
本明細書中において添付の図面を参照して実質的に記載される医薬組合せ、組成物、キット、使用、又は方法。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、少なくとも２つ、好ましくは２つ又は３つの異なるＨＢＶ治療薬を投与することを含む、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染を処置するための医薬組合せに関する。特に、本発明は、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを含む医薬組合せに関する。
【背景技術】
【0002】
ＨＢＶ感染は、推定３億５０００万人の慢性キャリアに関する世界的に大きな健康問題のままである。キャリアのおおよそ２５％は、慢性肝炎、肝硬変、又は肝臓癌で死亡すると予測することができる。Ｂ型肝炎ウイルスは、タバコに次いで２番目に重要な発癌物質であり、全原発性肝臓癌の６０％～８０％を引き起こす。
【0003】
ＨＢＶの外側エンベロープタンパク質は、Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）として集合的に知られている。ＨＢｓＡｇは、重複するオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）によってコードされるＳ、Ｍ、及びＬと呼ばれる３つの関連するポリペプチドからなる。最小のエンベロープタンパク質は、Ｓ－ＯＲＦと呼ばれる２２６アミノ酸のＳである。Ｍ及びＬは上流の翻訳開始部位から産生され、それぞれ５５及び１０８アミノ酸をＳに付加する。ＨＢＶのＳ、Ｍ、及びＬの糖タンパク質は、Ｄａｎｅ粒子と呼ばれる無傷の感染性ＨＢＶビリオンのウイルスエンベロープに見られ、３つすべてが非常に過剰に産生及び分泌されて、慢性ＨＢＶ患者の血液に見られる非感染性の亜ウイルス球状及び糸状粒子（両方ともデコイ粒子と呼ばれる）を形成する。デコイ粒子の表面上のＨＢｓＡｇの存在量は、慢性ＨＢＶ感染（ＣＨＢ）患者の体液性免疫及び自発的クリアランスを阻害すると考えられている。
【0004】
慢性ＨＢＶ感染の現在の標準治療は、ＨＢＶ ＤＮＡ合成を阻害することによってＨＢＶ複製の抑制を提供するが、ＨＢｓＡｇなどのウイルス抗原には直接作用しない、エンテカビル又はテノホビルなどの経口ヌクレオシ（チ）ド類似体による処置である。ヌクレオシ（チ）ド類似体は、長期間の治療であっても、低レベルのＨＢｓＡｇクリアランスしか示さない。この点において、慢性Ｂ型肝炎患者は、非常に弱いＨＢＶ Ｔ細胞応答を示し、抗ＨＢｓ抗体を欠いており、これが、これらの患者がウイルスを除去することができない理由の１つであると考えられる。
【0005】
臨床的に重要な目標は、ＨＢｓＡｇセロコンバージョン及び血清ＨＢＶ－ＤＮＡ除去として定義される慢性ＨＢＶ感染の機能的治癒を達成することである。これにより、持続的な応答がもたらされ、それによって肝硬変及び肝臓癌の発症が予防され、生存期間が延長されると予想される。現在、慢性ＨＢＶ感染は、感染肝細胞の核内の共有結合的に閉じた環状ＤＮＡ（ｃｃｃＤＮＡ）としてのウイルスゲノムの長期又は永続性のために完全に根絶することはできない。慢性ＨＢＶ感染からの完全な治癒は、感染肝細胞からのこのｃｃｃＤＮＡの除去を必要とするであろう。
【0006】
総説論文Ｓｏｒｉａｎｏ ｅｔ ａｌ ２０１７ Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｏｎ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ Ｄｒｕｇｓ Ｖｏｌ．２６，ｐｐ ８４３は、ＨＢＶの機能的治癒又は完全治癒のいずれかを達成することを目的とした薬物開発の現状を記載している。この論文は、ＨＢＶ療法において現在試験されている３０を超える薬物のいくつかを強調しており、治癒をもたらす任意の有効な処置がおそらくウイルス標的化療法と免疫療法の組合せを必要とすることにも言及している。
【0007】
アンチセンスオリゴヌクレオチドは、標的核酸にハイブリダイズすることによって標的遺伝子の発現を調節することができる本質的に一本鎖オリゴヌクレオチドである。標的調節は、ＲＮアーゼＨ媒介性分解又は転写の遮断による下方制御であり得る。アンチセンスオリゴヌクレオチドはまた、例えばスプライススイッチング又はマイクロＲＮＡ抑制を介して標的を上方制御することができる。肝臓における標的について、ＧａｌＮＡｃコンジュゲーションは、アンチセンスオリゴヌクレオチドを送達するために非常に有効であることが証明されている。国際公開第２０１４／１７９６２７号及び国際公開第２０１５／１７３２０８号は、ＧａｌＮＡｃコンジュゲーションと組み合わせて一本鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドを使用する肝細胞におけるＨＢＶ ｍＲＮＡの分解によるＨＢＶ処置を記載している。ＴＬＲ７アゴニストＧＳ－９６２０を含む様々な併用療法が国際公開第２０１５／１７３２０８号に簡単に言及されている。
【0008】
国際公開第２０１６／０７７３２１号は、センス鎖上のＧａｌＮＡｃコンジュゲーションと組み合わせて二本鎖ｓｉＲＮＡを使用する肝細胞におけるＨＢＶ ｍＲＮＡの分解によるＨＢＶ処置を記載している。ＴＬＲ７アゴニストを含む様々な併用療法が簡単に言及される。
【0009】
国際公開第２０１７／１５７８９９号は、ＰＤ－Ｌ１発現を減少させるための一本鎖ＬＮＡオリゴヌクレオチドコンジュゲートを記載している。国際公開第２０１９／０７９７８１号は、ＨＢｓＡｇを標的とするＲＮＡｉ治療薬を記載している。
【0010】
本発明者らの知る限りでは、ＨＢＶに対する治療用オリゴヌクレオチドの特定の組合せは、当技術分野においてインビトロ又はインビボで試験されていない。
【0011】
本発明の目的
本発明は、単剤療法処置を超える利点を提供するＨＢＶ治療薬の新規な医薬組合せを特定する。特に、本発明は、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとの新規な医薬組合せ、及びその有利な投薬計画を特定する。ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとの特異的な組合せは、これらの個々の治療薬単独で予想され得るものを超えて、ＨＢＶ血清マーカーに対して驚くべき相乗効果を得る。
本発明は、単剤療法処置を超える利点を提供するＨＢＶ治療薬の新規な医薬組合せを特定する。特に、本発明は、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとの新規な医薬組合せ、及びその有利な投薬計画を特定する。ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとの特異的な組合せは、これらの個々の治療薬単独で予想され得るものを超えて、ＨＢＶ血清マーカーに対して驚くべき相乗効果を得る。
【発明の概要】
【0012】
本発明は、特許請求の範囲によって定義される。本説明は、本発明による実施形態及び代替形態のさらなる例示を提供する。
【0013】
一態様では、本発明は、少なくとも２つのＨＢＶ治療薬を含む医薬組合せを提供する。本明細書では、ＨＢＶ治療薬は、ＨＢＶ感染症に対して有用な任意の薬物又は処置である。ＨＢＶ治療薬は、活性成分、プロドラッグ、組成物、コンジュゲート、又はその形態が患者に投与された場合に薬物の治療効果の実現をもたらす任意の他の形態であり得る。
【0014】
好ましい実施形態では、医薬組合せは、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１オリゴヌクレオチドを含む。
【0015】
一実施形態では、医薬組合せは、本明細書で治療薬Ｔ１と定義されるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド、及び本明細書で治療薬Ｔ２と定義される抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む。
【0016】
さらなる態様では、本発明は、本発明の医薬組合せを含む組成物を提供する。好ましくは、医薬組合せでは、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが第１の組成物に含まれ、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが第２の組成物に含まれ、任意の追加のＨＢＶ治療薬が第３の組成物に任意に含まれる。
【0017】
さらなる態様では、本発明は、Ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための、本明細書で定義される医薬組合せに含まれる第１のＨＢＶ治療薬と、本明細書で定義される医薬組合せに含まれる第２のＨＢＶ治療薬と共に投与するための説明書とを含む、パーツのキットを提供する。いくつかの実施形態では、キットは、組合せに含まれる両方又はすべてのＨＢＶ治療薬を含む。
【0018】
さらなる態様では、本発明は、Ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための本発明の医薬組合せ、組成物又はキットの使用を提供する。
【0019】
さらなる態様では、本発明は、薬に使用するための本発明の医薬組合せ、組成物又はキットを提供する。
【0020】
さらなる態様では、本発明は、Ｂ型肝炎ウイルス感染症の処置に使用するための、本発明の医薬組合せ、組成物又はキットを提供する。
【0021】
さらなる態様では、本発明は、医薬の製造における本発明の医薬組合せ、組成物又はキットの使用を提供する。
【0022】
さらなる態様では、本発明は、Ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための医薬の製造における本発明の医薬組合せ、組成物又はキットの使用を提供する。
【0023】
さらなる態様では、本発明は、治療有効量の本発明の医薬組合せ、組成物、又はキットを、Ｂ型肝炎ウイルス感染症に感染した対象に投与することを含む、Ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための方法を提供する。
【0024】
さらなる態様では、本発明は、本発明の医薬組合せ又は組成物を細胞に送達することを含む、細胞におけるＢ型肝炎ウイルス表面抗原の発現を減少させる方法を提供する。
【0025】
本発明はさらに、本発明の医薬組合せを投与するための有利な投薬計画を提供する。
【図面の簡単な説明】
【0026】
【図1】本明細書の研究の経過中のＨＢｓＡｇの血清レベル（パネルＡ）及びＨＢｓＡｇ血清レベルの変化（パネルＢ）を示す。
【図2】本明細書の研究の経過中のＨＢｅＡｇの血清レベル（パネルＡ）及びＨＢｅＡｇ血清レベルの変化（パネルＢ）を示す。
【図3】本明細書の研究の経過中のＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベル（パネルＡ）及びＨＢＶ－ＤＮＡ血清レベルの変化（パネルＢ）を示す。
【図4】試験の０日目と比較した、本明細書の研究の経過中のＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡ血清レベルの変化を示す。ＨＢＶ ｓｉＲＮＡ代用物＝ｓＴ１、ＰＤＬ１ ＬＮＡ＝ｓＴ２。本発明の医薬組合せ（Ｇ１０）を投与した研究群の結果を、ビヒクルコントロール（Ｇ１）、単剤療法としてＨＢＶを標的とする等価な用量のＲＮＡｉオリゴヌクレオチド（Ｇ０３）及び単剤療法として等価な用量の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチド（Ｇ０６）を投与した試験群とは対照的に示す。
【図5-1】本発明の好ましい医薬組合せで使用されるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである治療薬Ｔ１の特定の具体的な定義を示す。
【図5-2】本発明の好ましい医薬組合せで使用されるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである治療薬Ｔ１の特定の具体的な定義を示す。
【図5-3】本発明の好ましい医薬組合せで使用されるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである治療薬Ｔ１の特定の具体的な定義を示す。
【図5-4】本発明の好ましい医薬組合せで使用されるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである治療薬Ｔ１の特定の具体的な定義を示す。
【図6-1】同等の代用治療薬Ｔ１及び治療薬Ｔ３を単独及び組合せで投与したときの血清ＨＢｓＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡレベルの変化を含む実施例２の結果を示す。Ｔ１とＴ３との本発明の組合せでは、ＨＢｓＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの有意な低下が見られる。
【図6-2】同等の代用治療薬Ｔ１及び治療薬Ｔ３を単独及び組合せで投与したときの血清ＨＢｓＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡレベルの変化を含む実施例２の結果を示す。Ｔ１とＴ３との本発明の組合せでは、ＨＢｓＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの有意な低下が見られる。
【図7-1】実施例３で定義された同等の代用治療薬Ｔ１及びＴ５の投与時の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ及びＨＢｅＡｇレベルの変化を含む、実施例３の結果を示す。Ｔ１とＴ５との本発明の組合せでは、血清マーカーの有意な減少が見られ、特にこの組合せは、２１～３３日目のＴ５処置期間中にＨＢｓＡｇとＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルの有意に低下させた。
【図7-2】実施例３で定義された同等の代用治療薬Ｔ１及びＴ５の投与時の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ及びＨＢｅＡｇレベルの変化を含む、実施例３の結果を示す。Ｔ１とＴ５との本発明の組合せでは、血清マーカーの有意な減少が見られ、特にこの組合せは、２１～３３日目のＴ５処置期間中にＨＢｓＡｇとＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルの有意に低下させた。
【図7-3】実施例３で定義された同等の代用治療薬Ｔ１及びＴ５の投与時の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ及びＨＢｅＡｇレベルの変化を含む、実施例３の結果を示す。Ｔ１とＴ５との本発明の組合せでは、血清マーカーの有意な減少が見られ、特にこの組合せは、２１～３３日目のＴ５処置期間中にＨＢｓＡｇとＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルの有意に低下させた。
【図8-1】実施例３で定義された同等の代用治療薬Ｔ１及びＴ５の投与時の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ及びＨＢｅＡｇレベルの変化を含む、実施例３の結果を示す。Ｔ１とＴ５との本発明の組合せでは、血清マーカーの有意な減少が見られ、特にこの組合せは、２１～３３日目のＴ５処置期間中にＨＢｓＡｇとＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルの有意に低下させた。
【図8-2】実施例３で定義された同等の代用治療薬Ｔ１及びＴ５の投与時の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ及びＨＢｅＡｇレベルの変化を含む、実施例３の結果を示す。Ｔ１とＴ５との本発明の組合せでは、血清マーカーの有意な減少が見られ、特にこの組合せは、２１～３３日目のＴ５処置期間中にＨＢｓＡｇとＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルの有意に低下させた。
【図8-3】実施例３で定義された同等の代用治療薬Ｔ１及びＴ５の投与時の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ及びＨＢｅＡｇレベルの変化を含む、実施例３の結果を示す。Ｔ１とＴ５との本発明の組合せでは、血清マーカーの有意な減少が見られ、特にこの組合せは、２１～３３日目のＴ５処置期間中にＨＢｓＡｇとＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルの有意に低下させた。
【0027】
定義
オリゴヌクレオチド
本明細書で用いられる「オリゴヌクレオチド」という用語は、２つ以上の共有結合したヌクレオシドを含む分子として当業者に一般に理解されるように定義される。このような共有結合したヌクレオシドはまた、核酸分子又はオリゴマーとも称されうる。オリゴヌクレオチドは、通常、固相化学合成と、その後の精製及び単離によって研究室内で作製される。オリゴヌクレオチドの配列に言及する場合には、共有結合したヌクレオチド又はヌクレオシドの核酸塩基部分の配列又は順序、若しくはその修飾が言及される。本発明のオリゴヌクレオチドは、人工のものであり、化学的に合成され、通常は精製又は単離される。本発明のオリゴヌクレオチドは、例えば２’糖修飾ヌクレオシド等の１種以上の修飾ヌクレオシド又はヌクレオチドを含んでもよい。
オリゴヌクレオチド
本明細書で用いられる「オリゴヌクレオチド」という用語は、２つ以上の共有結合したヌクレオシドを含む分子として当業者に一般に理解されるように定義される。このような共有結合したヌクレオシドはまた、核酸分子又はオリゴマーとも称されうる。オリゴヌクレオチドは、通常、固相化学合成と、その後の精製及び単離によって研究室内で作製される。オリゴヌクレオチドの配列に言及する場合には、共有結合したヌクレオチド又はヌクレオシドの核酸塩基部分の配列又は順序、若しくはその修飾が言及される。本発明のオリゴヌクレオチドは、人工のものであり、化学的に合成され、通常は精製又は単離される。本発明のオリゴヌクレオチドは、例えば２’糖修飾ヌクレオシド等の１種以上の修飾ヌクレオシド又はヌクレオチドを含んでもよい。
【0028】
さらに、オリゴヌクレオチドは、例えば、１００ヌクレオチド長未満の短い核酸である。オリゴヌクレオチドは、一本鎖又は二本鎖であってよい。オリゴヌクレオチドは、二重鎖領域を有していても有していなくてもよい。一連の非限定的な例として、オリゴヌクレオチドは、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、短鎖ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、ダイサー基質干渉ＲＮＡ（ｄｓｉＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、短鎖ｓｉＲＮＡ、又は一本鎖ｓｉＲＮＡであり得るが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、二本鎖オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである。
【0029】
合成
本明細書で使用される場合、「合成」という用語は、人工的に合成された（例えば、機械（例えば、固体核酸合成装置）を使用する）か、そうでなければ、分子を通常産生する天然源（例えば、細胞又は生物）に由来しない核酸又は他の分子を指す。
本明細書で使用される場合、「合成」という用語は、人工的に合成された（例えば、機械（例えば、固体核酸合成装置）を使用する）か、そうでなければ、分子を通常産生する天然源（例えば、細胞又は生物）に由来しない核酸又は他の分子を指す。
【0030】
二本鎖オリゴヌクレオチド
本明細書で使用される場合、「二本鎖オリゴヌクレオチド」という用語は、実質的に二重鎖形態のオリゴヌクレオチドを指す。いくつかの実施形態において、二本鎖オリゴヌクレオチドの二重鎖領域の相補的な塩基対合は、共有結合的に分離した核酸鎖のヌクレオチドの逆平行配列の間に形成される。いくつかの実施形態において、二本鎖オリゴヌクレオチドの二重鎖領域の相補的な塩基対合は、共有結合している核酸鎖のヌクレオチドの逆平行配列の間に形成される。いくつかの実施形態において、二本鎖オリゴヌクレオチドの二重鎖領域の相補的な塩基対合は、一緒に塩基対合するヌクレオチドの相補的な逆平行配列を提供するために（例えば、ヘアピンを介して）折り畳まれる一本鎖核酸から形成される。いくつかの実施形態において、二本鎖オリゴヌクレオチドは、互いと完全に二重鎖化された２本の共有結合的に分離した核酸鎖を含む。しかしながら、いくつかの実施形態では、二本鎖オリゴヌクレオチドは、部分的に二重鎖化されている、例えば一端又は両端にオーバーハングを有する２本の共有結合的に分離した核酸鎖を含む。いくつかの実施形態では、二本鎖オリゴヌクレオチドは、部分的に相補的なヌクレオチドの逆平行配列を含み、したがって、内部ミスマッチ又は末端ミスマッチを含み得る１つ又は複数のミスマッチを有し得る。
本明細書で使用される場合、「二本鎖オリゴヌクレオチド」という用語は、実質的に二重鎖形態のオリゴヌクレオチドを指す。いくつかの実施形態において、二本鎖オリゴヌクレオチドの二重鎖領域の相補的な塩基対合は、共有結合的に分離した核酸鎖のヌクレオチドの逆平行配列の間に形成される。いくつかの実施形態において、二本鎖オリゴヌクレオチドの二重鎖領域の相補的な塩基対合は、共有結合している核酸鎖のヌクレオチドの逆平行配列の間に形成される。いくつかの実施形態において、二本鎖オリゴヌクレオチドの二重鎖領域の相補的な塩基対合は、一緒に塩基対合するヌクレオチドの相補的な逆平行配列を提供するために（例えば、ヘアピンを介して）折り畳まれる一本鎖核酸から形成される。いくつかの実施形態において、二本鎖オリゴヌクレオチドは、互いと完全に二重鎖化された２本の共有結合的に分離した核酸鎖を含む。しかしながら、いくつかの実施形態では、二本鎖オリゴヌクレオチドは、部分的に二重鎖化されている、例えば一端又は両端にオーバーハングを有する２本の共有結合的に分離した核酸鎖を含む。いくつかの実施形態では、二本鎖オリゴヌクレオチドは、部分的に相補的なヌクレオチドの逆平行配列を含み、したがって、内部ミスマッチ又は末端ミスマッチを含み得る１つ又は複数のミスマッチを有し得る。
【0031】
鎖
本明細書で使用される「鎖」という用語は、ヌクレオチド間結合（例えば、ホスホジエステル結合、ホスホロチオエート結合）を介して互いに連結されたヌクレオチドの単一の連続した配列を指す。いくつかの実施形態において、鎖は、２つの自由端、例えば、５’末端及び３’末端を有する。
本明細書で使用される「鎖」という用語は、ヌクレオチド間結合（例えば、ホスホジエステル結合、ホスホロチオエート結合）を介して互いに連結されたヌクレオチドの単一の連続した配列を指す。いくつかの実施形態において、鎖は、２つの自由端、例えば、５’末端及び３’末端を有する。
【0032】
二重鎖
本明細書で使用される場合、核酸（例えば、オリゴヌクレオチド）に関して「二重鎖」という用語は、２つの逆平行配列のヌクレオチドの相補的塩基対合によって形成される構造を指す。
本明細書で使用される場合、核酸（例えば、オリゴヌクレオチド）に関して「二重鎖」という用語は、２つの逆平行配列のヌクレオチドの相補的塩基対合によって形成される構造を指す。
【0033】
オーバーハング
本明細書で使用される「オーバーハング」という用語は、一方の鎖又は領域が二重鎖を形成する相補鎖の末端を越えて延びる一方の鎖又は領域から生じる末端非塩基対合ヌクレオチド（複数可）を指す。いくつかの実施形態では、オーバーハングは、二本鎖オリゴヌクレオチドの５’末端又は３’末端の二重鎖領域から延びる１つ又は複数の不対ヌクレオチドを含む。ある特定の実施形態では、オーバーハングは、二本鎖オリゴヌクレオチドのアンチセンス鎖又はセンス鎖上の３’又は５’オーバーハングである。
本明細書で使用される「オーバーハング」という用語は、一方の鎖又は領域が二重鎖を形成する相補鎖の末端を越えて延びる一方の鎖又は領域から生じる末端非塩基対合ヌクレオチド（複数可）を指す。いくつかの実施形態では、オーバーハングは、二本鎖オリゴヌクレオチドの５’末端又は３’末端の二重鎖領域から延びる１つ又は複数の不対ヌクレオチドを含む。ある特定の実施形態では、オーバーハングは、二本鎖オリゴヌクレオチドのアンチセンス鎖又はセンス鎖上の３’又は５’オーバーハングである。
【0034】
ループ
本明細書で使用される用語「ループ」は、適切なハイブリダイゼーション条件下（例えば、リン酸緩衝液中、細胞中）で、不対合領域に隣接する２つの逆平行領域がハイブリダイズして二重鎖（「ステム」と呼ばれる）を形成するように互いに十分相補的な核酸の２つの逆平行領域に隣接する核酸（例えば、オリゴヌクレオチド）の不対合領域を指す。
本明細書で使用される用語「ループ」は、適切なハイブリダイゼーション条件下（例えば、リン酸緩衝液中、細胞中）で、不対合領域に隣接する２つの逆平行領域がハイブリダイズして二重鎖（「ステム」と呼ばれる）を形成するように互いに十分相補的な核酸の２つの逆平行領域に隣接する核酸（例えば、オリゴヌクレオチド）の不対合領域を指す。
【0035】
ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド
本明細書で使用される「ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド」という用語は、（ａ）センス鎖（パッセンジャー）及びアンチセンス鎖（ガイド）を有する二本鎖オリゴヌクレオチドであって、アンチセンス鎖又はその一部が、標的ｍＲＮＡの切断においてアルゴノート２（Ａｇｏ２）エンドヌクレアーゼによって使用される、二本鎖オリゴヌクレオチド、又は（ｂ）一本鎖アンチセンス鎖を有する一本鎖オリゴヌクレオチドであって、そのアンチセンス鎖（又はその一部）が、標的ｍＲＮＡの切断においてＡｇｏ２エンドヌクレアーゼによって使用される、一本鎖オリゴヌクレオチドのいずれかを指す。
本明細書で使用される「ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド」という用語は、（ａ）センス鎖（パッセンジャー）及びアンチセンス鎖（ガイド）を有する二本鎖オリゴヌクレオチドであって、アンチセンス鎖又はその一部が、標的ｍＲＮＡの切断においてアルゴノート２（Ａｇｏ２）エンドヌクレアーゼによって使用される、二本鎖オリゴヌクレオチド、又は（ｂ）一本鎖アンチセンス鎖を有する一本鎖オリゴヌクレオチドであって、そのアンチセンス鎖（又はその一部）が、標的ｍＲＮＡの切断においてＡｇｏ２エンドヌクレアーゼによって使用される、一本鎖オリゴヌクレオチドのいずれかを指す。
【0036】
ＲＮＡｉ剤
本明細書で同じ意味で用いられる、用語「ｉＲＮＡ」、「ＲＮＡｉ剤」、「ｉＲＮＡ剤」、及び「ＲＮＡ干渉剤」は、本明細書におけるＲＮＡヌクレオシドを含有し、ＲＮＡが誘導するサイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）経路により、ＲＮＡ転写産物の標的開裂を媒介する、作用物質、例えばＲＮＡｉオリゴヌクレオチドを意味する。ｉＲＮＡは、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）として知られるプロセスを通して、ｍＲＮＡの配列特異的分解を指令する。ｉＲＮＡは、細胞、例えば、哺乳動物対象などの対象内の細胞における、標的核酸発現を調節する、例えば阻害する。ＲＮＡｉ剤は、一本鎖ＲＮＡｉ剤及び二本鎖ｓｉＲＮＡ、並びに短鎖ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）を含む。本発明のオリゴヌクレオチド、又はその連続ヌクレオチド配列は、ＲＮＡｉ剤の形態であることができる、又は、ｓｉＲＮＡ若しくはｓｈＲＮＡなどのＲＮＡｉ剤の一部を形成することができる。本発明のいくつかの実施形態では、本発明のオリゴヌクレオチド、又はその連続ヌクレオチド配列は、ｓｉＲＮＡなどのＲＮＡｉ剤である。
本明細書で同じ意味で用いられる、用語「ｉＲＮＡ」、「ＲＮＡｉ剤」、「ｉＲＮＡ剤」、及び「ＲＮＡ干渉剤」は、本明細書におけるＲＮＡヌクレオシドを含有し、ＲＮＡが誘導するサイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）経路により、ＲＮＡ転写産物の標的開裂を媒介する、作用物質、例えばＲＮＡｉオリゴヌクレオチドを意味する。ｉＲＮＡは、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）として知られるプロセスを通して、ｍＲＮＡの配列特異的分解を指令する。ｉＲＮＡは、細胞、例えば、哺乳動物対象などの対象内の細胞における、標的核酸発現を調節する、例えば阻害する。ＲＮＡｉ剤は、一本鎖ＲＮＡｉ剤及び二本鎖ｓｉＲＮＡ、並びに短鎖ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）を含む。本発明のオリゴヌクレオチド、又はその連続ヌクレオチド配列は、ＲＮＡｉ剤の形態であることができる、又は、ｓｉＲＮＡ若しくはｓｈＲＮＡなどのＲＮＡｉ剤の一部を形成することができる。本発明のいくつかの実施形態では、本発明のオリゴヌクレオチド、又はその連続ヌクレオチド配列は、ｓｉＲＮＡなどのＲＮＡｉ剤である。
【0037】
ｓｉＲＮＡ
用語「ｓｉＲＮＡ」は、小型の干渉性リボ核酸ＲＮＡｉ剤を意味し、二本鎖ＲＮＡ分子の一種であり、当該技術分野においては、短鎖干渉ＲＮＡ又はサイレンシングＲＮＡとしても知られている。ｓｉＲＮＡは典型的には、（パッセンジャー鎖とも呼ばれる）センス鎖、及び（ガイド鎖とも呼ばれる）アンチセンス鎖を含み、各鎖は１７～３０ヌクレオチド長、典型的には１９～２５ヌクレオシド長であり、アンチセンス鎖は、標的核酸（好適には成熟ｍＲＮＡ配列）に、完全に相補性であるといった、相補性であり、センス鎖はアンチセンス鎖に相補性であるために、センス鎖とアンチセンス鎖は二重鎖又は二重鎖領域を形成する。ｓｉＲＮＡ鎖は、平滑末端二重鎖を形成することができ、又は有利には、センス鎖及びアンチセンス鎖の３’末端は、例えば１、２、又は３個のヌクレオシドの３’オーバハングを形成することができる。いくつかの実施形態では、センス鎖及びアンチセンス鎖の両方は、２ｎｔ３’オーバーハングを有する。したがって、二重鎖領域は、例えば１７～２５ヌクレオチド長、例えば２１～２３ヌクレオチド長であり得る。
用語「ｓｉＲＮＡ」は、小型の干渉性リボ核酸ＲＮＡｉ剤を意味し、二本鎖ＲＮＡ分子の一種であり、当該技術分野においては、短鎖干渉ＲＮＡ又はサイレンシングＲＮＡとしても知られている。ｓｉＲＮＡは典型的には、（パッセンジャー鎖とも呼ばれる）センス鎖、及び（ガイド鎖とも呼ばれる）アンチセンス鎖を含み、各鎖は１７～３０ヌクレオチド長、典型的には１９～２５ヌクレオシド長であり、アンチセンス鎖は、標的核酸（好適には成熟ｍＲＮＡ配列）に、完全に相補性であるといった、相補性であり、センス鎖はアンチセンス鎖に相補性であるために、センス鎖とアンチセンス鎖は二重鎖又は二重鎖領域を形成する。ｓｉＲＮＡ鎖は、平滑末端二重鎖を形成することができ、又は有利には、センス鎖及びアンチセンス鎖の３’末端は、例えば１、２、又は３個のヌクレオシドの３’オーバハングを形成することができる。いくつかの実施形態では、センス鎖及びアンチセンス鎖の両方は、２ｎｔ３’オーバーハングを有する。したがって、二重鎖領域は、例えば１７～２５ヌクレオチド長、例えば２１～２３ヌクレオチド長であり得る。
【0038】
一旦細胞内に入ると、アンチセンス鎖は、標的核酸の標的分解又は標的阻害を媒介するＲＩＳＣ複合体に組み込まれる。ｓｉＲＮＡは、典型的には、ＲＮＡヌクレオシドに加えて修飾ヌクレオシドを含むか、又はいくつかの実施形態では、ｓｉＲＮＡ鎖のヌクレオチドのすべてが修飾され得る（ＬＮＡ（例えば、国際公開第２００４０８３４３０号、国際公開第２００７０８５４８５号を参照）、２’－フルオロ、２’－Ｏ－メチル又は２’－Ｏ－メトキシエチルなどのセンス２’糖修飾ヌクレオシドがｓｉＲＮＡに組み込まれてもよい）。いくつかの実施形態では、ｓｉＲＮＡのパッセンジャー鎖は不連続であることができる（例えば、国際公開第２００７１０７１６２号を参照のこと）。ｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖のシード領域にて生じる、熱不安定化ヌクレオチドの組み込みが、ｓｉＲＮＡのオフターゲット活性の減少に有用であると、報告されている（例えば、国際公開第１８０９８３２８号を参照）。
【0039】
いくつかの実施形態では、本発明のｓｉＲＮＡなどの、ｄｓＲＮＡ剤は、少なくとも１つの修飾ヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、センス鎖のヌクレオチドの実質的に全てが修飾を含む；アンチセンス鎖のヌクレオチドの実質的に全てが修飾を含む、又は、センス鎖のヌクレオチドの実質的に全て、及び、アンチセンス鎖のヌクレオチドの実質的に全てが修飾を含む。更に別の実施形態では、センス鎖のヌクレオチドの全てが修飾を含む；アンチセンス鎖のヌクレオチドの全てが修飾を含む；又は、センス鎖のヌクレオチドの全て、及び、アンチセンス鎖のヌクレオチドの全てが修飾を含む。
【0040】
いくつかの実施形態では、修飾ヌクレオチドは、独立して、デオキシ－ヌクレオチド、３’末端デオキシ－チミン（ｄＴ）ヌクレオチド、２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、２’－デオキシ修飾ヌクレオチド、ロックドヌクレオチド、アンロックドヌクレオチド、配座的に制限されたヌクレオチド、拘束されたエチルヌクレオチド、無塩基ヌクレオチド、２’－アミノ修飾ヌクレオチド、２’－Ｏ－アリル修飾ヌクレオチド、２’－Ｃ－アルキル修飾ヌクレオチド、２’－ヒドロキシル修飾ヌクレオチド、２’－メトキシエチル修飾ヌクレオチド、２’－Ｏ－アルキル修飾ヌクレオチド、モルホリノヌクレオチド、ホスホルアミダート、ヌクレオチドを含む非天然塩基、非連結ヌクレオチド、テトラヒドロピラン修飾ヌクレオチド、１，５－アンヒドロヘキシトール修飾ヌクレオチド、シクロヘキセニル修飾ヌクレオチド、ホスホロチオエート基を含むヌクレオチド、メチルホスホネート基を含むヌクレオチド、５’－ホスフェートを含むヌクレオチド、５’－ホスフェート模倣物を含むヌクレオチド、グリコール修飾ヌクレオチド、及び２－Ｏ－（Ｎ－メチルアセトアミド）修飾ヌクレオチド、並びにそれらの組合せからなる群から選択され得る。好適には、ｓｉＲＮＡは、アンチセンス鎖の５’末端に５’リン酸基又は５’リン酸模倣物を含む。いくつかの実施形態では、アンチセンス鎖の５’末端は、ＲＮＡヌクレオシドである。
【0041】
一実施形態では、ｄｓＲＮＡ剤は、少なくとも１つのホスホロチオエート又はメチルホスホネートヌクレオチド間結合をさらに含む。ホスホロチオエート若しくはメチルホスホネートのヌクレオチド間結合は一方若しくは両方の鎖の３’末端にあり得る（例えば、アンチセンス鎖又はセンス鎖）か、又はホスホロチオエート若しくはメチルホスホネートのヌクレオシド間結合は一方若しくは両方の鎖の５’末端にあり得る（例えば、アンチセンス鎖又はセンス鎖）か、又はホスホロチオエート若しくはメチルホスホネートのヌクレオシド間結合は一方又は両方の鎖の５’末端及び３’末端の両方にあり得る（例えば、アンチセンス鎖又はセンス鎖）。いくつかの実施形態では、残りのヌクレオシド間結合は、ホスホジエステル結合である。
【0042】
ｄｓＲＮＡ剤はリガンドを更に含むことができる。いくつかの実施形態では、リガンドは、センス鎖の３’末端に結合する。生物学的分布については、ｓｉＲＮＡを標的リガンドに結合させるか、及び／又は例えば、脂質ナノ粒子に製剤化することができる。
【0043】
本発明の他の態様は、治療的使用に適したｓｉＲＮＡ分子といったこれらのｄｓＲＮＡを含む医薬組成物と、例えば本明細書に開示されている種々の疾患症状の処置のために、本発明のｓｉＲＮＡといったｄｓＲＮＡ分子を投与することによって標的遺伝子の発現を阻害する方法と、に関する。
【0044】
テトラループ
本明細書で使用される場合、「テトラループ」という用語は、ヌクレオチドの隣接配列のハイブリダイゼーションによって形成される隣接二重鎖の安定性を増加させるループを指す。安定性の増加は、ランダムに選択されたヌクレオチドの配列からなる同等の長さのループのセットから平均して予想される隣接ステム二重鎖のＴｍよりも高い隣接ステム二重鎖の融解温度（Ｔｍ）の増加として検出可能である。例えば、テトラループは、１０ｍＭのＮａＨＰＯ４中、少なくとも５０℃、少なくとも５５℃、少なくとも５６℃、少なくとも５８℃、少なくとも６０℃、少なくとも６５℃又は少なくとも７５℃の融解温度を、長さが少なくとも２塩基対の二重鎖を含むヘアピンに与えることができる。いくつかの実施形態では、テトラループは、スタッキング相互作用によって隣接するステム二重鎖の塩基対を安定化し得る。さらに、テトラループ中のヌクレオチド間の相互作用には、非ワトソン・クリック塩基対合、スタッキング相互作用、水素結合及び接触相互作用（Ｃｈｅｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ １９９０ Ａｕｇ．１６；３４６（６２８５）：６８０－２；Ｈｅｕｓ ａｎｄ Ｐａｒｄｉ，Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９１ Ｊｕｌ．１２；２５３（５０１６）：１９１－４）が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、テトラループは４～５個のヌクレオチドを含む。ある特定の実施形態では、テトラループは、修飾されていてもされていなくてもよい（例えば、標的化部分にコンジュゲートされていてもされていなくてもよい）、３、４、５、又は６個のヌクレオチドを含むか、又はそれらからなる。一実施形態では、テトラループは４つのヌクレオチドからなる。任意のヌクレオチドをテトラループに使用してもよく、Ｃｏｒｎｉｓｈ－Ｂｏｗｄｅｎ（１９８５）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１３：３０２１－３０３０に記載されるように、そのようなヌクレオチドの標準ＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ記号を使用してもよい。例えば、文字「Ｎ」は、任意の塩基がその位置にあり得ることを示すために使用され得、文字「Ｒ」は、Ａ（アデニン）又はＧ（グアニン）がその位置にあり得ることを示すために使用され得、「Ｂ」は、Ｃ（シトシン）、Ｇ（グアニン）又はＴ（チミン）がその位置にあり得ることを示すために使用され得る。テトラループの例には、テトラループのＵＮＣＧファミリー（例えば、ＵＵＣＧ）、テトラループのＧＮＲＡファミリー（例えば、ＧＡＡＡ）、及びＣＵＵＧテトラループ（Ｗｏｅｓｅ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．１９９０ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ；８７（２１）：８４６７－７１；Ａｎｔａｏ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１９９１ Ｎｏｖ．１１；１９（２１）：５９０１－５）が含まれる。ＤＮＡテトラループの例には、テトラループのｄ（ＧＮＮＡ）ファミリー（例えば、ｄ（ＧＴＴＡ））、テトラループのｄ（ＧＮＲＡ）ファミリー、テトラループのｄ（ＧＮＡＢ）ファミリー、テトラループのｄ（ＣＮＮＧ）ファミリー、及びテトラループのｄ（ＴＮＣＧ）ファミリー（例えば、ｄ（ＴＴＣＧ））が含まれる。例えば、Ｎａｋａｎｏ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４１（４８），１４２８１－１４２９２，２００２．ＳＨＩＮＪＩ ｅｔ ａｌ．Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｇａｋｋａｉ Ｋｏｅｎ Ｙｏｋｏｓｈｕ ＶＯＬ．７８ｔｈ；ＮＯ．２；ＰＡＧＥ．７３１（２０００）を参照のこと。これらの文献は関連する開示に関して本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態では、テトラループは、ニックが入ったテトラループ構造内に含まれる。
本明細書で使用される場合、「テトラループ」という用語は、ヌクレオチドの隣接配列のハイブリダイゼーションによって形成される隣接二重鎖の安定性を増加させるループを指す。安定性の増加は、ランダムに選択されたヌクレオチドの配列からなる同等の長さのループのセットから平均して予想される隣接ステム二重鎖のＴｍよりも高い隣接ステム二重鎖の融解温度（Ｔｍ）の増加として検出可能である。例えば、テトラループは、１０ｍＭのＮａＨＰＯ４中、少なくとも５０℃、少なくとも５５℃、少なくとも５６℃、少なくとも５８℃、少なくとも６０℃、少なくとも６５℃又は少なくとも７５℃の融解温度を、長さが少なくとも２塩基対の二重鎖を含むヘアピンに与えることができる。いくつかの実施形態では、テトラループは、スタッキング相互作用によって隣接するステム二重鎖の塩基対を安定化し得る。さらに、テトラループ中のヌクレオチド間の相互作用には、非ワトソン・クリック塩基対合、スタッキング相互作用、水素結合及び接触相互作用（Ｃｈｅｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ １９９０ Ａｕｇ．１６；３４６（６２８５）：６８０－２；Ｈｅｕｓ ａｎｄ Ｐａｒｄｉ，Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９１ Ｊｕｌ．１２；２５３（５０１６）：１９１－４）が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、テトラループは４～５個のヌクレオチドを含む。ある特定の実施形態では、テトラループは、修飾されていてもされていなくてもよい（例えば、標的化部分にコンジュゲートされていてもされていなくてもよい）、３、４、５、又は６個のヌクレオチドを含むか、又はそれらからなる。一実施形態では、テトラループは４つのヌクレオチドからなる。任意のヌクレオチドをテトラループに使用してもよく、Ｃｏｒｎｉｓｈ－Ｂｏｗｄｅｎ（１９８５）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１３：３０２１－３０３０に記載されるように、そのようなヌクレオチドの標準ＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ記号を使用してもよい。例えば、文字「Ｎ」は、任意の塩基がその位置にあり得ることを示すために使用され得、文字「Ｒ」は、Ａ（アデニン）又はＧ（グアニン）がその位置にあり得ることを示すために使用され得、「Ｂ」は、Ｃ（シトシン）、Ｇ（グアニン）又はＴ（チミン）がその位置にあり得ることを示すために使用され得る。テトラループの例には、テトラループのＵＮＣＧファミリー（例えば、ＵＵＣＧ）、テトラループのＧＮＲＡファミリー（例えば、ＧＡＡＡ）、及びＣＵＵＧテトラループ（Ｗｏｅｓｅ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．１９９０ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ；８７（２１）：８４６７－７１；Ａｎｔａｏ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１９９１ Ｎｏｖ．１１；１９（２１）：５９０１－５）が含まれる。ＤＮＡテトラループの例には、テトラループのｄ（ＧＮＮＡ）ファミリー（例えば、ｄ（ＧＴＴＡ））、テトラループのｄ（ＧＮＲＡ）ファミリー、テトラループのｄ（ＧＮＡＢ）ファミリー、テトラループのｄ（ＣＮＮＧ）ファミリー、及びテトラループのｄ（ＴＮＣＧ）ファミリー（例えば、ｄ（ＴＴＣＧ））が含まれる。例えば、Ｎａｋａｎｏ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４１（４８），１４２８１－１４２９２，２００２．ＳＨＩＮＪＩ ｅｔ ａｌ．Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｇａｋｋａｉ Ｋｏｅｎ Ｙｏｋｏｓｈｕ ＶＯＬ．７８ｔｈ；ＮＯ．２；ＰＡＧＥ．７３１（２０００）を参照のこと。これらの文献は関連する開示に関して本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態では、テトラループは、ニックが入ったテトラループ構造内に含まれる。
【0045】
ニックが入ったテトラループ構造
「ニックが入ったテトラループ構造」は、別個のセンス（パッセンジャー）鎖及びアンチセンス（ガイド）鎖の存在を特徴とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの構造であり、センス鎖はアンチセンス鎖と相補性の領域を有し、鎖の少なくとも１つ、一般にセンス鎖は、少なくとも１つの鎖内に形成された隣接するステム領域を安定化するように構成されたテトラループを有する。
「ニックが入ったテトラループ構造」は、別個のセンス（パッセンジャー）鎖及びアンチセンス（ガイド）鎖の存在を特徴とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの構造であり、センス鎖はアンチセンス鎖と相補性の領域を有し、鎖の少なくとも１つ、一般にセンス鎖は、少なくとも１つの鎖内に形成された隣接するステム領域を安定化するように構成されたテトラループを有する。
【0046】
アンチセンスオリゴヌクレオチド
本明細書で使用される場合、「アンチセンスオリゴヌクレオチド」という用語は、標的核酸、特に標的核酸上の連続配列にハイブリダイズすることによって標的遺伝子の発現を調節することができるオリゴヌクレオチドとして規定される。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、本質的に二本鎖ではなく、したがってｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡではない。好ましくは、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは一本鎖である。本発明の単鎖オリゴヌクレオチドは、自己内又は自己間の相補性の程度がオリゴヌクレオチドの全長にわたって５０％未満である限り、ヘアピン又は分子間二重構造（同じオリゴヌクレオチドの２つの分子間の二重鎖）を形成することができるものと理解される。
本明細書で使用される場合、「アンチセンスオリゴヌクレオチド」という用語は、標的核酸、特に標的核酸上の連続配列にハイブリダイズすることによって標的遺伝子の発現を調節することができるオリゴヌクレオチドとして規定される。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、本質的に二本鎖ではなく、したがってｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡではない。好ましくは、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは一本鎖である。本発明の単鎖オリゴヌクレオチドは、自己内又は自己間の相補性の程度がオリゴヌクレオチドの全長にわたって５０％未満である限り、ヘアピン又は分子間二重構造（同じオリゴヌクレオチドの２つの分子間の二重鎖）を形成することができるものと理解される。
【0047】
有利には、本発明の一本鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ヌクレアーゼ耐性を低下させるためＲＮＡヌクレオシドを含まない。
【0048】
有利には、本発明のオリゴヌクレオチドは、例えば２’糖修飾ヌクレオシドなどの１つ以上の修飾ヌクレオシド又はヌクレオチドを含む。さらに、修飾されていないヌクレオシドがＤＮＡヌクレオシドであることは有利である。
【0049】
連続ヌクレオチド配列
「連続ヌクレオチド配列」という用語は、標的核酸に相補的なオリゴヌクレオチドの領域を指す。この用語は、本明細書で「連続核酸塩基配列」という用語及び「オリゴヌクレオチドモチーフ配列」という用語と互換的に用いられる。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドのすべてのヌクレオチドが連続ヌクレオチド配列を構成する。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、連続ヌクレオチド配列、例えばＦ－Ｇ－Ｆ’ギャップマー領域を含み、任意に、さらなるヌクレオチド（複数可）、例えば、官能基を連続ヌクレオチド配列に結合するのに使用され得るヌクレオチドリンカー領域を含んでもよい。ヌクレオチドリンカー領域は、標的核酸に相補的であっても相補的でなくてもよい。オリゴヌクレオチドの連続ヌクレオチド配列は、それ自体としてオリゴヌクレオチドより長くなることはできないことと、オリゴヌクレオチドは連続ヌクレオチド配列より短くなることはできないことと、が理解される。
「連続ヌクレオチド配列」という用語は、標的核酸に相補的なオリゴヌクレオチドの領域を指す。この用語は、本明細書で「連続核酸塩基配列」という用語及び「オリゴヌクレオチドモチーフ配列」という用語と互換的に用いられる。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドのすべてのヌクレオチドが連続ヌクレオチド配列を構成する。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、連続ヌクレオチド配列、例えばＦ－Ｇ－Ｆ’ギャップマー領域を含み、任意に、さらなるヌクレオチド（複数可）、例えば、官能基を連続ヌクレオチド配列に結合するのに使用され得るヌクレオチドリンカー領域を含んでもよい。ヌクレオチドリンカー領域は、標的核酸に相補的であっても相補的でなくてもよい。オリゴヌクレオチドの連続ヌクレオチド配列は、それ自体としてオリゴヌクレオチドより長くなることはできないことと、オリゴヌクレオチドは連続ヌクレオチド配列より短くなることはできないことと、が理解される。
【0050】
ヌクレオチド
ヌクレオチドは、オリゴヌクレオチド及びポリヌクレオチドの構成要素であり、本発明の目的では、天然に存在するヌクレオチド及び天然に存在しないヌクレオチドの両方を含む。本来、ＤＮＡヌクレオチド及びＲＮＡヌクレオチドなどのヌクレオチドは、リボース糖部分、核酸塩基部分、及び１つ以上のリン酸基（ヌクレオシドには存在しない）を含む。ヌクレオシド及びヌクレオチドはまた、互換的に「単位」又は「モノマー」と呼ぶことができる。
ヌクレオチドは、オリゴヌクレオチド及びポリヌクレオチドの構成要素であり、本発明の目的では、天然に存在するヌクレオチド及び天然に存在しないヌクレオチドの両方を含む。本来、ＤＮＡヌクレオチド及びＲＮＡヌクレオチドなどのヌクレオチドは、リボース糖部分、核酸塩基部分、及び１つ以上のリン酸基（ヌクレオシドには存在しない）を含む。ヌクレオシド及びヌクレオチドはまた、互換的に「単位」又は「モノマー」と呼ぶことができる。
【0051】
デオキシリボヌクレオチド
本明細書で使用される「デオキシリボヌクレオチド」という用語は、リボヌクレオチドと比較して、そのペントース糖の２’位にヒドロキシルの代わりに水素を有するヌクレオチドを指す。修飾デオキシリボヌクレオチドは、糖、リン酸基又は塩基の修飾又は置換を含む、２’位以外の原子の１つ又は複数の修飾又は置換を有するデオキシリボヌクレオチドである。
本明細書で使用される「デオキシリボヌクレオチド」という用語は、リボヌクレオチドと比較して、そのペントース糖の２’位にヒドロキシルの代わりに水素を有するヌクレオチドを指す。修飾デオキシリボヌクレオチドは、糖、リン酸基又は塩基の修飾又は置換を含む、２’位以外の原子の１つ又は複数の修飾又は置換を有するデオキシリボヌクレオチドである。
【0052】
リボヌクレオチド
本明細書中で使用される用語「リボヌクレオチド」は、そのペントース糖としてリボースを有し、その２’位にヒドロキシル基を含有するヌクレオチドのことを指す。修飾リボヌクレオチドは、リボース、リン酸基又は塩基の修飾又は置換を含む、２’位以外の原子の１つ又は複数の修飾又は置換を有するリボヌクレオチドである。
本明細書中で使用される用語「リボヌクレオチド」は、そのペントース糖としてリボースを有し、その２’位にヒドロキシル基を含有するヌクレオチドのことを指す。修飾リボヌクレオチドは、リボース、リン酸基又は塩基の修飾又は置換を含む、２’位以外の原子の１つ又は複数の修飾又は置換を有するリボヌクレオチドである。
【0053】
修飾ヌクレオシド
本明細書で用いられる「修飾ヌクレオシド」又は「ヌクレオシド修飾」という用語は、糖部分又は（核酸）塩基部分の１つ以上の修飾の導入によって、同等のＤＮＡ又はＲＮＡヌクレオシドと比較して修飾されたヌクレオシドを指す。好ましい実施形態では、修飾ヌクレオシドは、修飾された糖部分を含む。修飾ヌクレオシドという用語はまた、「ヌクレオシド類似体」又は修飾「ユニット」又は修飾「モノマー」という用語と互換的に使用されてもよい。非修飾ＤＮＡ又はＲＮＡ糖部分を有するヌクレオシドは、本明細書ではＤＮＡ又はＲＮＡヌクレオシドと称される。ＤＮＡ又はＲＮＡヌクレオシドの塩基領域に修飾を有するヌクレオシドは、それらがワトソン・クリック塩基対合可能な場合には、依然として一般的にＤＮＡ又はＲＮＡと称される。
本明細書で用いられる「修飾ヌクレオシド」又は「ヌクレオシド修飾」という用語は、糖部分又は（核酸）塩基部分の１つ以上の修飾の導入によって、同等のＤＮＡ又はＲＮＡヌクレオシドと比較して修飾されたヌクレオシドを指す。好ましい実施形態では、修飾ヌクレオシドは、修飾された糖部分を含む。修飾ヌクレオシドという用語はまた、「ヌクレオシド類似体」又は修飾「ユニット」又は修飾「モノマー」という用語と互換的に使用されてもよい。非修飾ＤＮＡ又はＲＮＡ糖部分を有するヌクレオシドは、本明細書ではＤＮＡ又はＲＮＡヌクレオシドと称される。ＤＮＡ又はＲＮＡヌクレオシドの塩基領域に修飾を有するヌクレオシドは、それらがワトソン・クリック塩基対合可能な場合には、依然として一般的にＤＮＡ又はＲＮＡと称される。
【0054】
修飾ヌクレオチド
本明細書で使用される「修飾ヌクレオチド」という用語は、アデニンリボヌクレオチド、グアニンリボヌクレオチド、シトシンリボヌクレオチド、ウラシルリボヌクレオチド、アデニンデオキシリボヌクレオチド、グアニンデオキシリボヌクレオチド、シトシンデオキシリボヌクレオチド及びチミジンデオキシリボヌクレオチドから選択される対応する参照ヌクレオチドと比較して１つ又は複数の化学修飾を有するヌクレオチドを指す。いくつかの実施形態では、修飾ヌクレオチドは、天然に存在しないヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、修飾ヌクレオチドは、その糖、核酸塩基及び／又はリン酸基に１つ又は複数の化学修飾を有する。いくつかの実施形態では、修飾ヌクレオチドは、対応する参照ヌクレオチドにコンジュゲートされた１つ又は複数の化学部分を有する。典型的には、修飾ヌクレオチドは、修飾ヌクレオチドが存在する核酸に１つ又は複数の望ましい特性を付与する。例えば、修飾ヌクレオチドは、熱安定性、分解に対する耐性、ヌクレアーゼ耐性、溶解性、バイオアベイラビリティ、生物活性、免疫原性の低下などを改善し得る。
本明細書で使用される「修飾ヌクレオチド」という用語は、アデニンリボヌクレオチド、グアニンリボヌクレオチド、シトシンリボヌクレオチド、ウラシルリボヌクレオチド、アデニンデオキシリボヌクレオチド、グアニンデオキシリボヌクレオチド、シトシンデオキシリボヌクレオチド及びチミジンデオキシリボヌクレオチドから選択される対応する参照ヌクレオチドと比較して１つ又は複数の化学修飾を有するヌクレオチドを指す。いくつかの実施形態では、修飾ヌクレオチドは、天然に存在しないヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、修飾ヌクレオチドは、その糖、核酸塩基及び／又はリン酸基に１つ又は複数の化学修飾を有する。いくつかの実施形態では、修飾ヌクレオチドは、対応する参照ヌクレオチドにコンジュゲートされた１つ又は複数の化学部分を有する。典型的には、修飾ヌクレオチドは、修飾ヌクレオチドが存在する核酸に１つ又は複数の望ましい特性を付与する。例えば、修飾ヌクレオチドは、熱安定性、分解に対する耐性、ヌクレアーゼ耐性、溶解性、バイオアベイラビリティ、生物活性、免疫原性の低下などを改善し得る。
【0055】
修飾ヌクレオシド間結合
「修飾ヌクレオシド間結合」という用語は、２つのヌクレオシドを共に共有結合する、ホスホジエステル（ＰＯ）結合以外の結合として当業者に一般的に理解されるように定義される。したがって、本発明のオリゴヌクレオチドは、修飾ヌクレオシド間結合を含み得る。いくつかの実施形態では、修飾ヌクレオシド間結合は、ホスホジエステル結合と比較して、オリゴヌクレオチドのヌクレアーゼ耐性を増大させる。天然に存在するオリゴヌクレオチドでは、ヌクレオシド間結合は、隣接するヌクレオシド間のホスホジエステル結合を生成するリン酸基を含む修飾ヌクレオシド間結合は、インビボ使用のためのオリゴヌクレオチドの安定化に特に有用であり、本発明のオリゴヌクレオチドのＤＮＡ又はＲＮＡヌクレオシドの領域、例えばギャップマーオリゴヌクレオチドのギャップ領域Ｇ内、並びに領域Ｆ及びＦ’などの修飾ヌクレオシドの領域におけるヌクレアーゼ切断から保護する役割を果たし得る。
「修飾ヌクレオシド間結合」という用語は、２つのヌクレオシドを共に共有結合する、ホスホジエステル（ＰＯ）結合以外の結合として当業者に一般的に理解されるように定義される。したがって、本発明のオリゴヌクレオチドは、修飾ヌクレオシド間結合を含み得る。いくつかの実施形態では、修飾ヌクレオシド間結合は、ホスホジエステル結合と比較して、オリゴヌクレオチドのヌクレアーゼ耐性を増大させる。天然に存在するオリゴヌクレオチドでは、ヌクレオシド間結合は、隣接するヌクレオシド間のホスホジエステル結合を生成するリン酸基を含む修飾ヌクレオシド間結合は、インビボ使用のためのオリゴヌクレオチドの安定化に特に有用であり、本発明のオリゴヌクレオチドのＤＮＡ又はＲＮＡヌクレオシドの領域、例えばギャップマーオリゴヌクレオチドのギャップ領域Ｇ内、並びに領域Ｆ及びＦ’などの修飾ヌクレオシドの領域におけるヌクレアーゼ切断から保護する役割を果たし得る。
【0056】
一実施形態では、オリゴヌクレオチドは、１つ以上の修飾ヌクレオシド間結合が、例えばヌクレアーゼ攻撃に対してより耐性であるように、天然のホスホジエステルから修飾された１つ以上のヌクレオシド間結合を含む。ヌクレアーゼ耐性は、オリゴヌクレオチドを血清中でインキュベートすることによって、又はヌクレアーゼ耐性アッセイ（例えば、ヘビ毒ホスホジエステラーゼ（ＳＶＰＤ））を使用することによって決定することができ、これらの両方は当該技術分野でよく知られている。オリゴヌクレオチドのヌクレアーゼ耐性を増強することができるヌクレオシド間結合は、ヌクレアーゼ耐性ヌクレオシド間結合と呼ばれる。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列の少なくとも５０％のヌクレオシド間結合が修飾されており、例えばオリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列の、少なくとも６０％、例えば少なくとも７０％、例えば少なくとも７５％、例えば少なくとも８０％、又は例えば少なくとも９０％のヌクレオシド間結合が、修飾されている。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列のヌクレオシド間結合のすべてが修飾されている。いくつかの実施形態では、本発明のオリゴヌクレオチドを非ヌクレオチド官能基、例えばコンジュゲートに結合するヌクレオシドは、ホスホジエステルであり得ることが認識されるであろう。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列のヌクレオシド間結合はすべて、ヌクレアーゼ耐性ヌクレオシド間結合である。
【0057】
本発明のオリゴヌクレオチドでは、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合を用いることが有利である。
【0058】
ホスホロチオエートヌクレオシド間結合は、ヌクレアーゼ耐性、有益な薬物動態、及び製造の容易さに起因して、特に有用である。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列の少なくとも５０％のヌクレオシド間結合がホスホロチオエートであり、オリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列の少なくとも６０％、例えば少なくとも７０％、例えば少なくとも７５％、例えば少なくとも８０％又は例えば少なくとも９０％のヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエートである。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列のヌクレオシド間結合のすべてが、ホスホロチオアートである。
【0059】
いくつかの実施形態では、本発明のオリゴヌクレオチドは、ホスホロジチオエート結合（複数可）に加えて、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合と、２、３、又は４ホスホジエステル結合などの少なくとも１つのホスホジエステル結合との両方を含む。ギャップマーオリゴヌクレオチドでは、ホスホジエステル結合は、存在する場合には、ギャップ領域Ｇ内の連続ＤＮＡヌクレオシド間に適切に位置していない。
【0060】
ホスホロチオエート結合などのヌクレアーゼ耐性結合は、標的核酸と二重鎖を形成するときにヌクレアーゼを動員することができるオリゴヌクレオチド領域、例えばギャップマーの領域Ｇにおいて特に有用である。しかしながら、ホスホロチオエート結合は、非ヌクレアーゼ動員領域及び／又は親和性増強領域、例えばギャップマーの領域Ｆ及びＦ’においても有用でありうる。ギャップマーオリゴヌクレオチドは、いくつかの実施形態では、領域Ｆ若しくはＦ’、又は領域Ｆ及びＦ’の両方に１つ以上のホスホジエステル結合を含んでもよく、領域Ｇのヌクレオシド間結合の全てはホスホロチオエートであり得る。
【0061】
有利には、オリゴヌクレオチドの連続ヌクレオチド配列のすべてのヌクレオシド間結合がホスホロチオエートであるか、又はオリゴヌクレオチドのすべてのヌクレオシド間結合がホスホロチオエート結合である。特に、アンチセンスオリゴヌクレオチドの連続ヌクレオチド配列のすべてのヌクレオシド間結合がホスホロチオエートであるか、又はアンチセンスオリゴヌクレオチドのすべてのヌクレオシド間結合がホスホロチオエート結合である。
【0062】
欧州特許第２７４２１３５号に開示されているように、治療用オリゴヌクレオチドは、他のヌクレオシド間結合（ホスホジエステル及びホスホロチオエート以外の）、例えばアルキルホスホネート／メチルホスホネートヌクレオシド間結合を含んでもよいことが認識され、これは欧州特許第２７４２１３５号によれば、例えば別のＤＮＡホスホロチオエートのギャップ領域内で耐性であり得る。
【0063】
核酸塩基
核酸塩基という用語は、ヌクレオシド及びヌクレオチドに存在するプリン（例えばアデニン及びグアニン）及びピリミジン（例えばウラシル、チミン及びシトシン）部分を含み、これらは核酸ハイブリダイゼーションにおいて水素結合を形成する。本発明の文脈において、核酸塩基という用語はまた、天然に存在する核酸塩基とは異なっていてもよいが、核酸ハイブリダイゼーション中に機能する修飾核酸塩基も包含する。この文脈において、「核酸塩基」とは、アデニン、グアニン、シトシン、チミジン、ウラシル、キサンチン、及びヒポキサンチンなどの天然に存在する核酸塩基と、天然に存在しないバリアントとの両方を指す。このようなバリアントは、例えば、Ｈｉｒａｏ ｅｔ ａｌ（２０１２）Ａｃｃｏｕｎｔｓ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｖｏｌ ４５ ｐａｇｅ ２０５５及びＢｅｒｇｓｔｒｏｍ（２００９）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｓｕｐｐｌ．３７ １．４．１に記載されている。
核酸塩基という用語は、ヌクレオシド及びヌクレオチドに存在するプリン（例えばアデニン及びグアニン）及びピリミジン（例えばウラシル、チミン及びシトシン）部分を含み、これらは核酸ハイブリダイゼーションにおいて水素結合を形成する。本発明の文脈において、核酸塩基という用語はまた、天然に存在する核酸塩基とは異なっていてもよいが、核酸ハイブリダイゼーション中に機能する修飾核酸塩基も包含する。この文脈において、「核酸塩基」とは、アデニン、グアニン、シトシン、チミジン、ウラシル、キサンチン、及びヒポキサンチンなどの天然に存在する核酸塩基と、天然に存在しないバリアントとの両方を指す。このようなバリアントは、例えば、Ｈｉｒａｏ ｅｔ ａｌ（２０１２）Ａｃｃｏｕｎｔｓ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｖｏｌ ４５ ｐａｇｅ ２０５５及びＢｅｒｇｓｔｒｏｍ（２００９）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｓｕｐｐｌ．３７ １．４．１に記載されている。
【0064】
いくつかの実施形態では、核酸塩基部分は、プリン又はピリミジンを修飾プリン又はピリミジン、例えば置換プリン又は置換ピリミジン、例えばイソシトシン、シュードイソシトシン、５－メチルシトシン、５－チオゾロ－シトシン、５－プロピニル－シトシン、５－プロピニル－ウラシル、５－ブロモウラシル５－チアゾロ－ウラシル、２－チオ－ウラシル、２’－チオ－チミン、イノシン、ジアミノプリン、６－アミノプリン、２－アミノプリン、２，６－ジアミノプリン及び２－クロロ－６－アミノプリンから選択される核酸塩基に変えることにより修飾される。
【0065】
核酸塩基部分は、対応する各核酸塩基についての文字コード、例えば、Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ又はＵにより示されてもよく、ここで、各文字は、任意に等価機能の改変された核酸塩基を含んでもよい。例えば、例示したオリゴヌクレオチドにおいて、核酸塩基部分は、Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ、及び５－メチルシトシンから選択される。任意に、ＬＮＡギャップマーについて、５－メチルシトシンＬＮＡヌクレオシドが使用され得る。
【0066】
修飾オリゴヌクレオチド
修飾オリゴヌクレオチドという用語は、１つ以上の糖修飾ヌクレオシド及び／又は修飾ヌクレオシド間結合を含むオリゴヌクレオチドを表す。「キメラ」オリゴヌクレオチドという用語は、修飾ヌクレオシドを有するオリゴヌクレオチドを説明するために、文献で用いられている用語である。
修飾オリゴヌクレオチドという用語は、１つ以上の糖修飾ヌクレオシド及び／又は修飾ヌクレオシド間結合を含むオリゴヌクレオチドを表す。「キメラ」オリゴヌクレオチドという用語は、修飾ヌクレオシドを有するオリゴヌクレオチドを説明するために、文献で用いられている用語である。
【0067】
相補性
本明細書で使用される「相補的」は、（例えば、２つの対向する核酸上又は１本の核酸鎖の対向する領域上にある）２つのヌクレオチド間、又はヌクレオチドの２つの配列間の構造的関係であって、２つのヌクレオチド又はヌクレオチドの２つの配列が互いに塩基対を形成することを可能にする構造的関係を指す。例えば、対向する核酸のピリミジンヌクレオチドに相補的な１つの核酸のプリンヌクレオチドは、互いに水素結合を形成することによって塩基対を形成し得る。いくつかの実施形態において、相補的なヌクレオチドは、ワトソン－クリック様式で、又は安定な二重鎖の形成を可能にする任意の他の様式で塩基対合することができる。ワトソン・クリック塩基対は、グアニン（Ｇ）－シトシン（Ｃ）及びアデニン（Ａ）－チミン（Ｔ）／ウラシル（Ｕ）である。オリゴヌクレオチドは修飾核酸塩基を有するヌクレオシドを含んでいてもよく、例えば５－メチルシトシンは、しばしばシトシンの代わりに用いられ、したがって、相補性という用語は、非修飾核酸塩基と修飾核酸塩基との間のワトソン・クリック塩基対合を包含することが理解されよう（例えば、Ｈｉｒａｏ ｅｔ ａｌ（２０１２）Ａｃｃｏｕｎｔｓ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｖｏｌ ４５ ｐａｇｅ ２０５５ ａｎｄ Ｂｅｒｇｓｔｒｏｍ（２００９）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｓｕｐｐｌ．３７ １．４．１を参照されたい）。
本明細書で使用される「相補的」は、（例えば、２つの対向する核酸上又は１本の核酸鎖の対向する領域上にある）２つのヌクレオチド間、又はヌクレオチドの２つの配列間の構造的関係であって、２つのヌクレオチド又はヌクレオチドの２つの配列が互いに塩基対を形成することを可能にする構造的関係を指す。例えば、対向する核酸のピリミジンヌクレオチドに相補的な１つの核酸のプリンヌクレオチドは、互いに水素結合を形成することによって塩基対を形成し得る。いくつかの実施形態において、相補的なヌクレオチドは、ワトソン－クリック様式で、又は安定な二重鎖の形成を可能にする任意の他の様式で塩基対合することができる。ワトソン・クリック塩基対は、グアニン（Ｇ）－シトシン（Ｃ）及びアデニン（Ａ）－チミン（Ｔ）／ウラシル（Ｕ）である。オリゴヌクレオチドは修飾核酸塩基を有するヌクレオシドを含んでいてもよく、例えば５－メチルシトシンは、しばしばシトシンの代わりに用いられ、したがって、相補性という用語は、非修飾核酸塩基と修飾核酸塩基との間のワトソン・クリック塩基対合を包含することが理解されよう（例えば、Ｈｉｒａｏ ｅｔ ａｌ（２０１２）Ａｃｃｏｕｎｔｓ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｖｏｌ ４５ ｐａｇｅ ２０５５ ａｎｄ Ｂｅｒｇｓｔｒｏｍ（２００９）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｓｕｐｐｌ．３７ １．４．１を参照されたい）。
【0068】
用語「％相補的」とは、本明細書で使用される場合、連続ヌクレオチド配列にわたって参照配列（例えば、標的配列又は配列モチーフ）に相補的である、核酸分子（例えば、オリゴヌクレオチド）の連続ヌクレオチド配列のヌクレオチドの割合（パーセント）を指す。したがって、相補性のパーセンテージは、２つの配列間（標的配列５’－３’と３’－５’からのオリゴヌクレオチド配列とを整列させた場合）で（例えばワトソン・クリック塩基対から）相補的である整列した核酸塩基の数を数え、その数をオリゴヌクレオチド中のヌクレオチドの総数で割り、１００を掛けることによって計算される。このような比較において、整列（例えば塩基対を形成）しない核酸塩基／ヌクレオチドは、ミスマッチと称される。挿入及び欠失は、連続ヌクレオチド配列の％相補性の計算において許容されない。相補性の決定において、核酸塩基の化学的修飾は、核酸塩基が、例えばワトソン・クリック塩基対合を形成する機能的能力が保持される限り、無視されることが理解されるであろう（例えば、５－メチルシトシンは、％同一性の計算の目的のために、シトシンと同一であると見なされる）。
【0069】
「完全に相補的な」という用語は、１００％の相補性を指す。
【0070】
いくつかの実施形態では、２つの核酸は、本明細書に記載されるように、相補性の領域を形成するように互いに相補的な複数のヌクレオチドの領域を有し得る。
【0071】
相補性の領域
本明細書で使用される「相補性の領域」という用語は、適切なハイブリダイゼーション条件下、例えば、リン酸緩衝液中、細胞中などでヌクレオチドの２つの配列間のハイブリダイゼーションを可能にする、ヌクレオチドの逆平行配列に十分に相補的な核酸（例えば、二本鎖オリゴヌクレオチド）のヌクレオチドの配列を指す。
本明細書で使用される「相補性の領域」という用語は、適切なハイブリダイゼーション条件下、例えば、リン酸緩衝液中、細胞中などでヌクレオチドの２つの配列間のハイブリダイゼーションを可能にする、ヌクレオチドの逆平行配列に十分に相補的な核酸（例えば、二本鎖オリゴヌクレオチド）のヌクレオチドの配列を指す。
【0072】
同一性
本明細書で使用される「同一性」という用語は、連続ヌクレオチド配列にわたって参照配列（例えば、配列モチーフ）と同一である、核酸分子（例えば、オリゴヌクレオチド）内の連続ヌクレオチド配列のヌクレオチドの割合（パーセントで表される）を指す。したがって、同一性のパーセンテージは、２つの配列（本発明の化合物の連続ヌクレオチド配列及び参照配列における）の間で同一の（一致する）整列された核酸塩基の数を数え、その数をオリゴヌクレオチドのヌクレオチドの総数で割り、１００を掛けることにより計算される。したがって、同一性の百分率＝（一致数×１００）／整列領域（例えば、連続ヌクレオチド配列）の長さ。挿入及び欠失は、連続ヌクレオチド配列の同一性の百分率の計算において許容されない。同一性の決定において、核酸塩基の化学的修飾は、核酸塩基がＷａｔｓｏｎ Ｃｒｉｃｋ塩基対を形成する機能的能力が保持される限り、無視されることが理解されよう（例えば、５－メチルシトシンは、同一性％の計算の目的のために、シトシンと同一であると見なされる）。
本明細書で使用される「同一性」という用語は、連続ヌクレオチド配列にわたって参照配列（例えば、配列モチーフ）と同一である、核酸分子（例えば、オリゴヌクレオチド）内の連続ヌクレオチド配列のヌクレオチドの割合（パーセントで表される）を指す。したがって、同一性のパーセンテージは、２つの配列（本発明の化合物の連続ヌクレオチド配列及び参照配列における）の間で同一の（一致する）整列された核酸塩基の数を数え、その数をオリゴヌクレオチドのヌクレオチドの総数で割り、１００を掛けることにより計算される。したがって、同一性の百分率＝（一致数×１００）／整列領域（例えば、連続ヌクレオチド配列）の長さ。挿入及び欠失は、連続ヌクレオチド配列の同一性の百分率の計算において許容されない。同一性の決定において、核酸塩基の化学的修飾は、核酸塩基がＷａｔｓｏｎ Ｃｒｉｃｋ塩基対を形成する機能的能力が保持される限り、無視されることが理解されよう（例えば、５－メチルシトシンは、同一性％の計算の目的のために、シトシンと同一であると見なされる）。
【0073】
ハイブリダイゼーション
本明細書で用いられる「ハイブリダイズ」又は「ハイブリダイズする」という用語は、２つの核酸鎖（例えば、オリゴヌクレオチド及び標的核酸）が対向する鎖上の塩基対間に水素結合を形成することにより二重鎖を形成することと理解されるべきである。２つの核酸鎖の間の結合の親和性は、ハイブリダイゼーションの強度である。これは、オリゴヌクレオチドの半分が標的核酸と二重鎖を形成する温度として定義される、融解温度（Ｔｍ）によって説明されることが多い。生理学的条件では、Ｔｍは親和性に厳密に比例しない（Ｍｅｒｇｎｙ及びＬａｃｒｏｉｘ（２００３年）「Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ」第１３巻第５１５～５３７頁）。標準状態ギブス自由エネルギーΔＧ°は、結合親和性をより正確に表し、ΔＧ°＝－ＲＴｌｎ（Ｋｄ）によって反応の解離定数（Ｋｄ）に関連付けられ、式中、Ｒは気体定数であり、Ｔは絶対温度である。したがって、オリゴヌクレオチドと標的核酸との間の反応の非常に低いΔＧ°は、オリゴヌクレオチドと標的核酸との間の強いハイブリダイゼーションを反映している。ΔＧ°は、水性濃度が１Ｍ、ｐＨが７、温度が３７℃の反応に関連したエネルギーである。標的核酸へのオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションは、自発反応であり、自発反応の場合、ΔＧ°はゼロ未満である。ΔＧ°は、Ｈａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９６５，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．３６－３８及びＨｏｌｄｇａｔｅ ｅｔ ａｌ．，２００５，Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｏｄａｙに記載されているように、例えば等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）方法により、実験的に測定し得る。当業者は、ΔＧ°測定のために市販の装置が入手可能であることを知るであろう。ΔＧ°はまた、ＳａｎｔａＬｕｃｉａ，１９９８，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．９５：１４６０－１４６５によって記載された最近傍モデルを使用することによって、Ｓｕｇｉｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３４：１１２１１－１１２１６及びＭｃＴｉｇｕｅ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ４３：５３８８－５４０５によって記載された適切に導出された熱力学パラメータを使用して、数値的に推定することができる。その意図した核酸標的をハイブリダイゼーションによって調節する可能性を確保するために、本発明のオリゴヌクレオチドは、１０～３０ヌクレオチド長のオリゴヌクレオチドに対して－１０ｋｃａｌ未満の概算ΔＧ°値で標的核酸にハイブリダイズする。いくつかの実施形態では、ハイブリダイゼーションの程度又は強度は、標準状態ギブス自由エネルギーΔＧ°により測定される。オリゴヌクレオチドは、８～３０ヌクレオチド長のオリゴヌクレオチドに対して－１０ｋｃａｌの範囲未満、例えば－１５ｋｃａｌ未満、例えば－２０ｋｃａｌ未満、及び例えば－２５ｋｃａｌ未満の概算ΔＧ°値で標的核酸にハイブリダイズし得る。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、－１０から－６０ｋｃａｌ、例えば－１２から－４０、例えば－１５から－３０ｋｃａｌ、又は－１６から－２７ｋｃａｌ、例えば－１８から－２５ｋｃａｌの推定ΔＧ°値で、標的核酸にハイブリダイズする。
本明細書で用いられる「ハイブリダイズ」又は「ハイブリダイズする」という用語は、２つの核酸鎖（例えば、オリゴヌクレオチド及び標的核酸）が対向する鎖上の塩基対間に水素結合を形成することにより二重鎖を形成することと理解されるべきである。２つの核酸鎖の間の結合の親和性は、ハイブリダイゼーションの強度である。これは、オリゴヌクレオチドの半分が標的核酸と二重鎖を形成する温度として定義される、融解温度（Ｔｍ）によって説明されることが多い。生理学的条件では、Ｔｍは親和性に厳密に比例しない（Ｍｅｒｇｎｙ及びＬａｃｒｏｉｘ（２００３年）「Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ」第１３巻第５１５～５３７頁）。標準状態ギブス自由エネルギーΔＧ°は、結合親和性をより正確に表し、ΔＧ°＝－ＲＴｌｎ（Ｋｄ）によって反応の解離定数（Ｋｄ）に関連付けられ、式中、Ｒは気体定数であり、Ｔは絶対温度である。したがって、オリゴヌクレオチドと標的核酸との間の反応の非常に低いΔＧ°は、オリゴヌクレオチドと標的核酸との間の強いハイブリダイゼーションを反映している。ΔＧ°は、水性濃度が１Ｍ、ｐＨが７、温度が３７℃の反応に関連したエネルギーである。標的核酸へのオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションは、自発反応であり、自発反応の場合、ΔＧ°はゼロ未満である。ΔＧ°は、Ｈａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９６５，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．３６－３８及びＨｏｌｄｇａｔｅ ｅｔ ａｌ．，２００５，Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｏｄａｙに記載されているように、例えば等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）方法により、実験的に測定し得る。当業者は、ΔＧ°測定のために市販の装置が入手可能であることを知るであろう。ΔＧ°はまた、ＳａｎｔａＬｕｃｉａ，１９９８，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．９５：１４６０－１４６５によって記載された最近傍モデルを使用することによって、Ｓｕｇｉｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３４：１１２１１－１１２１６及びＭｃＴｉｇｕｅ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ４３：５３８８－５４０５によって記載された適切に導出された熱力学パラメータを使用して、数値的に推定することができる。その意図した核酸標的をハイブリダイゼーションによって調節する可能性を確保するために、本発明のオリゴヌクレオチドは、１０～３０ヌクレオチド長のオリゴヌクレオチドに対して－１０ｋｃａｌ未満の概算ΔＧ°値で標的核酸にハイブリダイズする。いくつかの実施形態では、ハイブリダイゼーションの程度又は強度は、標準状態ギブス自由エネルギーΔＧ°により測定される。オリゴヌクレオチドは、８～３０ヌクレオチド長のオリゴヌクレオチドに対して－１０ｋｃａｌの範囲未満、例えば－１５ｋｃａｌ未満、例えば－２０ｋｃａｌ未満、及び例えば－２５ｋｃａｌ未満の概算ΔＧ°値で標的核酸にハイブリダイズし得る。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、－１０から－６０ｋｃａｌ、例えば－１２から－４０、例えば－１５から－３０ｋｃａｌ、又は－１６から－２７ｋｃａｌ、例えば－１８から－２５ｋｃａｌの推定ΔＧ°値で、標的核酸にハイブリダイズする。
【0074】
標的核酸
本発明によれば、標的核酸は、例えば遺伝子、ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ウイルスｍＲＮＡ、又はｃＤＮＡ配列であり得る。
本発明によれば、標的核酸は、例えば遺伝子、ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ウイルスｍＲＮＡ、又はｃＤＮＡ配列であり得る。
【0075】
インビボ又はインビトロ用途に関して、本発明のオリゴヌクレオチドは、典型的には、ＨＢＶ標的核酸を発現する細胞内で、ＨＢＶ標的核酸の発現を阻害することが可能である。本発明のオリゴヌクレオチドの核酸塩基の連続配列は、典型的には、オリゴヌクレオチドの長さにわたって測定され、任意に１つ又は２つのミスマッチを除いて、また任意に、オリゴヌクレオチドをコンジュゲートなどの任意の官能基に結合し得るヌクレオチドベースのリンカ領域、又は他の非相補的末端ヌクレオチド（例えば、Ｄ’又はＤ’’）を除いて、ＨＢＶ標的核酸に相補的である。
【0076】
標的配列
本明細書で使用される用語「標的配列」は、本発明のオリゴヌクレオチドに相補的な核酸塩基配列を含む、標的核酸中に存在するヌクレオチドの配列を指す。いくつかの実施形態では、標的配列は、本発明のオリゴヌクレオチドの連続ヌクレオチド配列に相補的な核酸塩基配列を有する標的核酸上の領域からなる。標的核酸のこの領域は、互換的に標的ヌクレオチド配列、標的配列、又は標的領域と称され得る。いくつかの実施形態では、標的配列は、単一オリゴヌクレオチドの相補的配列よりも長く、例えば本発明のいくつかのオリゴヌクレオチドによって標的化され得る標的核酸の好ましい領域を表すことができる。
本明細書で使用される用語「標的配列」は、本発明のオリゴヌクレオチドに相補的な核酸塩基配列を含む、標的核酸中に存在するヌクレオチドの配列を指す。いくつかの実施形態では、標的配列は、本発明のオリゴヌクレオチドの連続ヌクレオチド配列に相補的な核酸塩基配列を有する標的核酸上の領域からなる。標的核酸のこの領域は、互換的に標的ヌクレオチド配列、標的配列、又は標的領域と称され得る。いくつかの実施形態では、標的配列は、単一オリゴヌクレオチドの相補的配列よりも長く、例えば本発明のいくつかのオリゴヌクレオチドによって標的化され得る標的核酸の好ましい領域を表すことができる。
【0077】
標的細胞
本明細書で使用される用語「標的細胞」は、標的核酸を発現している細胞を指す。いくつかの実施形態では、標的細胞は、インビボ又はインビトロであり得る。いくつかの実施形態では、標的細胞は、マウス細胞又はヒト細胞などのげっ歯類細胞、特にＨＢＶ感染肝細胞などの、ＨＢＶ感染哺乳動物細胞である。
本明細書で使用される用語「標的細胞」は、標的核酸を発現している細胞を指す。いくつかの実施形態では、標的細胞は、インビボ又はインビトロであり得る。いくつかの実施形態では、標的細胞は、マウス細胞又はヒト細胞などのげっ歯類細胞、特にＨＢＶ感染肝細胞などの、ＨＢＶ感染哺乳動物細胞である。
【0078】
好ましい実施形態では、標的細胞はＨＢＶ ｍＲＮＡを発現し、ＨＢｓＡｇ及びＨＢｅＡｇを分泌する。
【0079】
肝細胞
本明細書で使用される「肝細胞」（単数又は複数）という用語は、肝臓の実質組織の細胞を指す。これらの細胞は、肝臓の質量のおおよそ７０～８５％を構成し、血清アルブミン、フィブリノーゲン、及び凝固因子のプロトロンビン群（因子３及び４を除く）を産生する。肝細胞系統細胞のマーカーとしては、トランスサイレチン（Ｔｔｒ）、グルタミンシンセターゼ（Ｇｌｕｌ）、肝細胞核因子１ａ（Ｈｎｆ１ａ）及び肝細胞核因子４ａ（Ｈｎｆ４ａ）が挙げられ得るが、これらに限定されない。成熟肝細胞のマーカーとしては、シトクロムＰ４５０（Ｃｙｐ３ａ１１）、フマリルアセト酢酸ヒドロラーゼ（Ｆａｈ）、グルコース６－リン酸（Ｇ６ｐ）、アルブミン（Ａｌｂ）及びＯＣ２－２Ｆ８が挙げられ得るが、これらに限定されない。例えば、Ｈｕｃｈ ｅｔ ａｌ．，（２０１３）、Ｎａｔｕｒｅ，４９４（７４３６）：２４７－２５０を参照のこと（その内容は参照により本明細書に組み込まれる）。
本明細書で使用される「肝細胞」（単数又は複数）という用語は、肝臓の実質組織の細胞を指す。これらの細胞は、肝臓の質量のおおよそ７０～８５％を構成し、血清アルブミン、フィブリノーゲン、及び凝固因子のプロトロンビン群（因子３及び４を除く）を産生する。肝細胞系統細胞のマーカーとしては、トランスサイレチン（Ｔｔｒ）、グルタミンシンセターゼ（Ｇｌｕｌ）、肝細胞核因子１ａ（Ｈｎｆ１ａ）及び肝細胞核因子４ａ（Ｈｎｆ４ａ）が挙げられ得るが、これらに限定されない。成熟肝細胞のマーカーとしては、シトクロムＰ４５０（Ｃｙｐ３ａ１１）、フマリルアセト酢酸ヒドロラーゼ（Ｆａｈ）、グルコース６－リン酸（Ｇ６ｐ）、アルブミン（Ａｌｂ）及びＯＣ２－２Ｆ８が挙げられ得るが、これらに限定されない。例えば、Ｈｕｃｈ ｅｔ ａｌ．，（２０１３）、Ｎａｔｕｒｅ，４９４（７４３６）：２４７－２５０を参照のこと（その内容は参照により本明細書に組み込まれる）。
【0080】
低下した発現
本明細書で使用される、遺伝子の「低下した発現」という用語は、適切な参照細胞又は対象と比較して、細胞又は対象における遺伝子によってコードされるＲＮＡ転写物又はタンパク質の量の減少及び／又は遺伝子の活性の量の減少を指す。例えば、医薬組合せ又は二本鎖オリゴヌクレオチド（例えば、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡ配列に相補的なアンチセンス鎖を有するもの）で細胞を処理する行為は、それぞれ医薬組合せ又は二本鎖オリゴヌクレオチドで処理されていない細胞と比較して、ＲＮＡ転写物、タンパク質及び／又は酵素活性（例えば、ＨＢＶゲノムのＳ遺伝子によってコードされる）の量の低下をもたらし得る。同様に、本明細書で使用される「発現を減少させる」とは、遺伝子（例えば、ＨＢＶゲノムのＳ遺伝子）の発現の低下をもたらす行為を指す。
本明細書で使用される、遺伝子の「低下した発現」という用語は、適切な参照細胞又は対象と比較して、細胞又は対象における遺伝子によってコードされるＲＮＡ転写物又はタンパク質の量の減少及び／又は遺伝子の活性の量の減少を指す。例えば、医薬組合せ又は二本鎖オリゴヌクレオチド（例えば、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡ配列に相補的なアンチセンス鎖を有するもの）で細胞を処理する行為は、それぞれ医薬組合せ又は二本鎖オリゴヌクレオチドで処理されていない細胞と比較して、ＲＮＡ転写物、タンパク質及び／又は酵素活性（例えば、ＨＢＶゲノムのＳ遺伝子によってコードされる）の量の低下をもたらし得る。同様に、本明細書で使用される「発現を減少させる」とは、遺伝子（例えば、ＨＢＶゲノムのＳ遺伝子）の発現の低下をもたらす行為を指す。
【0081】
天然に存在するバリアント
「その天然に存在するバリアント」という用語は、ＨＢＶ遺伝子型Ａ～Ｈなどの定義された分類群内に天然に存在する標的核酸のバリアントを指す。典型的には、ポリヌクレオチドの「天然に存在するバリアント」に言及する場合、この用語は、染色体転座又は重複によって見出されるゲノムＤＮＡ、及びそれに由来するＲＮＡ、例えばｍＲＮＡをコードする標的配列の任意の対立遺伝子バリアントも包含し得る。「天然に存在するバリアント」には、標的配列ｍＲＮＡの選択的スプライシングに由来するバリアントも含まれ得る。例えば特定のポリペプチド配列に言及される場合、この用語は、例えばシグナルペプチド切断、タンパク質分解切断、グリコシル化などの同時又は翻訳後修飾によってプロセシングされ得る天然に存在する形態のタンパク質も含む。
「その天然に存在するバリアント」という用語は、ＨＢＶ遺伝子型Ａ～Ｈなどの定義された分類群内に天然に存在する標的核酸のバリアントを指す。典型的には、ポリヌクレオチドの「天然に存在するバリアント」に言及する場合、この用語は、染色体転座又は重複によって見出されるゲノムＤＮＡ、及びそれに由来するＲＮＡ、例えばｍＲＮＡをコードする標的配列の任意の対立遺伝子バリアントも包含し得る。「天然に存在するバリアント」には、標的配列ｍＲＮＡの選択的スプライシングに由来するバリアントも含まれ得る。例えば特定のポリペプチド配列に言及される場合、この用語は、例えばシグナルペプチド切断、タンパク質分解切断、グリコシル化などの同時又は翻訳後修飾によってプロセシングされ得る天然に存在する形態のタンパク質も含む。
【0082】
高親和性修飾ヌクレオシド
高親和性修飾ヌクレオシドは、修飾されたヌクレオチドであり、これは、オリゴヌクレオチドに組み込まれる場合、例えば融解温度（Ｔｍ）によって測定されるように、その相補的標的に対するオリゴヌクレオチドの親和性を高める。本発明の高親和性修飾ヌクレオシドは、好ましくは、修飾ヌクレオシドあたり＋０．５～＋１２℃、より好ましくは＋１．５～＋１０℃、最も好ましくは＋３～＋８℃の融解温度の上昇をもたらす。数多くの高親和性修飾ヌクレオシドが当該技術分野において知られており、例えば、多くの２’置換ヌクレオシド及びロックド核酸（ＬＮＡ）が挙げられる（例えば、Ｆｒｅｉｅｒ＆Ａｌｔｍａｎｎ；Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．，１９９７，２５，４４２９－４４４３及びＵｈｌｍａｎｎ；Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２０００，３（２），２９３－２１３を参照されたい）。
高親和性修飾ヌクレオシドは、修飾されたヌクレオチドであり、これは、オリゴヌクレオチドに組み込まれる場合、例えば融解温度（Ｔｍ）によって測定されるように、その相補的標的に対するオリゴヌクレオチドの親和性を高める。本発明の高親和性修飾ヌクレオシドは、好ましくは、修飾ヌクレオシドあたり＋０．５～＋１２℃、より好ましくは＋１．５～＋１０℃、最も好ましくは＋３～＋８℃の融解温度の上昇をもたらす。数多くの高親和性修飾ヌクレオシドが当該技術分野において知られており、例えば、多くの２’置換ヌクレオシド及びロックド核酸（ＬＮＡ）が挙げられる（例えば、Ｆｒｅｉｅｒ＆Ａｌｔｍａｎｎ；Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．，１９９７，２５，４４２９－４４４３及びＵｈｌｍａｎｎ；Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２０００，３（２），２９３－２１３を参照されたい）。
【0083】
糖修飾
本発明のオリゴマーは、修飾された糖部分、すなわち、ＤＮＡ及びＲＮＡに見られるリボース糖部分と比較して、糖部分が修飾された１つ以上のヌクレオシドを含み得る。
本発明のオリゴマーは、修飾された糖部分、すなわち、ＤＮＡ及びＲＮＡに見られるリボース糖部分と比較して、糖部分が修飾された１つ以上のヌクレオシドを含み得る。
【0084】
リボース糖部分の修飾を有する数多くのヌクレオシドは、親和性及び／又はヌクレアーゼ耐性などのオリゴヌクレオチドのある特定の性質を改善することを主な目的として作製されてきた。
【0085】
そのような修飾には、例えばヘキソース環（ＨＮＡ）又は二環式環（典型的には、リボース環（ＬＮＡ）のＣ２とＣ４炭素の間にバイラジカル架橋を有する）、又は典型的にはＣ２とＣ３炭素の間の結合を欠く非結合リボース環（例えば、ＵＮＡ）で置き換えることにより、リボース環構造が修飾されているものが含まれる。他の糖修飾ヌクレオシドには、例えばビシクロヘキソース核酸（国際公開第２０１１／０１７５２１号）又は三環式核酸（国際公開第２０１３／１５４７９８号）が含まれる。修飾ヌクレオシドにはまた、糖部分が例えばペプチド核酸（ＰＮＡ）又はモルホリノ核酸の場合には非糖部分で置き換えられているヌクレオシドが含まれる。
【0086】
糖修飾にはまた、リボース環上の置換基を、水素以外の基、又はＤＮＡ及びＲＮＡヌクレオシド中に天然に存在する２’－ＯＨ基に変更することによってなされる修飾も含まれる。置換基は、例えば２’、３’、４’、又は５’位で導入され得る。
【0087】
２’糖修飾ヌクレオシド
２’糖修飾ヌクレオシドは、２’位にＨ若しくは－ＯＨ以外の置換基を有するヌクレオシド（２’置換ヌクレオシド）、又はリボース環の２’炭素と第２の炭素との間に架橋を形成できる２’結合バイラジカルを含むヌクレオシド、例えばＬＮＡ（２’－４’バイラジカル架橋）ヌクレオシドである。
２’糖修飾ヌクレオシドは、２’位にＨ若しくは－ＯＨ以外の置換基を有するヌクレオシド（２’置換ヌクレオシド）、又はリボース環の２’炭素と第２の炭素との間に架橋を形成できる２’結合バイラジカルを含むヌクレオシド、例えばＬＮＡ（２’－４’バイラジカル架橋）ヌクレオシドである。
【0088】
実際、２’糖置換ヌクレオシドの開発には多くの注目が集まっており、数多くの２’置換ヌクレオシドが、オリゴヌクレオチドに組み込まれた際に有益な特性を有することが見出されている。例えば、２’修飾糖は、高められた結合親和性及び／又は増大されたヌクレアーゼ耐性をオリゴヌクレオチドにもたらすことができる。２’置換修飾ヌクレオシドの例は、２’－Ｏ－アルキル－ＲＮＡヌクレオシド、２’－Ｏ－メチル－ＲＮＡヌクレオシド、２’－アルコキシ－ＲＮＡヌクレオシド、２’－Ｏ－メトキシエチル－ＲＮＡ（ＭＯＥ）ヌクレオシド、２’－アミノ－ＤＮＡヌクレオシド、２’－フルオロ－ＲＮＡヌクレオシド及び２’－Ｆ－ＡＮＡヌクレオシドである。更なる例については、例えばＦｒｅｉｅｒ＆Ａｌｔｍａｎｎ；Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．，１９９７，２５，４４２９－４４４３及びＵｈｌｍａｎｎ；Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２０００，３（２），２９３－２１３、及びＤｅｌｅａｖｅｙ ａｎｄ Ｄａｍｈａ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２０１２，１９，９３７を参照されたい。以下は、いくつかの２’置換修飾ヌクレオシドの例示である。
【化1】
【0089】
本発明に関して、２’置換糖修飾ヌクレオシドは、ＬＮＡのような２’架橋ヌクレオシドを含まない。
【0090】
ロックド核酸ヌクレオシド（ＬＮＡヌクレオシド）
「ＬＮＡヌクレオシド」は、上記ヌクレオシドのリボース糖環のＣ２’とＣ４’とを結合するバイラジカル（「２’－４’架橋」とも称される）を含む２’修飾ヌクレオシドであり、これはリボース環のコンホメーションを制限又は固定する。これらのヌクレオシドはまた、文献において、架橋核酸又は二環式核酸（ＢＮＡ）とも称されている。リボースの立体配座の固定は、ＬＮＡが相補的ＲＮＡ又はＤＮＡ分子のオリゴヌクレオチドに組み込まれる場合、ハイブリダイゼーションの親和性の向上（二重鎖の安定化）に関連している。これは、オリゴヌクレオチド／相補二重鎖の融解温度を測定することによって、日常的に決定され得る。
「ＬＮＡヌクレオシド」は、上記ヌクレオシドのリボース糖環のＣ２’とＣ４’とを結合するバイラジカル（「２’－４’架橋」とも称される）を含む２’修飾ヌクレオシドであり、これはリボース環のコンホメーションを制限又は固定する。これらのヌクレオシドはまた、文献において、架橋核酸又は二環式核酸（ＢＮＡ）とも称されている。リボースの立体配座の固定は、ＬＮＡが相補的ＲＮＡ又はＤＮＡ分子のオリゴヌクレオチドに組み込まれる場合、ハイブリダイゼーションの親和性の向上（二重鎖の安定化）に関連している。これは、オリゴヌクレオチド／相補二重鎖の融解温度を測定することによって、日常的に決定され得る。
【0091】
非限定的で例示的なＬＮＡヌクレオシドは、国際公開第９９／０１４２２６、国際公開第００／６６６０４、国際公開第９８／０３９３５２、国際公開第２００４／０４６１６０、国際公開第００／０４７５９９、国際公開第２００７／１３４１８１、国際公開第２０１０／０７７５７８、国際公開第２０１０／０３６６９８、国際公開第２００７／０９００７１、国際公開第２００９／００６４７８、国際公開第２０１１／１５６２０２、国際公開第２００８／１５４４０１、国際公開第２００９／０６７６４７、国際公開第２００８／１５０７２９、Ｍｏｒｉｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１２，７３－７６、Ｓｅｔｈ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１０，Ｖｏｌ ７５（５）ｐｐ．１５６９－８１、及びＭｉｔｓｕｏｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２００９，３７（４），１２２５－１２３８、及びＷａｎ ａｎｄ Ｓｅｔｈ，Ｊ．Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１６，５９，９６４５－９６６７に開示されている。
【0092】
さらなる非限定的な例示的ＬＮＡヌクレオシドを、スキーム１に開示する。
【化2】
【0093】
特定のＬＮＡヌクレオシドは、ベータ－Ｄ－オキシ－ＬＮＡ、６’－メチル－ベータ－Ｄ－オキシＬＮＡ、例えば（Ｓ）－６’－メチル－ベータ－Ｄ－オキシ－ＬＮＡ（ＳｃＥＴ）及びＥＮＡである。特定の有利なＬＮＡは、ベータ－Ｄ－オキシ－ＬＮＡである。
【0094】
リン酸類似体
本明細書で使用される「リン酸模倣物」という用語は、リン酸基の静電特性及び／又は立体特性を模倣する化学部分を指す。いくつかの実施形態において、リン酸類似体は、酵素的除去を受けやすいことが多い５’－リン酸の代わりに、オリゴヌクレオチドの５’末端ヌクレオチドに配置される。いくつかの実施形態において、５’リン酸類似体は、ホスファターゼ耐性連結を含有する。リン酸類似体の例としては、５’メチレンホスホネート（５’－ＭＰ）及び５’－（Ｅ）－ビニルホスホネート（５’－ＶＰ）などの５’ホスホネートが挙げられる。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、５’末端ヌクレオチドに、糖の４’－炭素位置にリン酸類似体（「４’－リン酸類似体」と呼ばれる）を有する。４’－リン酸類似体の例は、オキシメチル基の酸素原子が糖部分（例えばその４’－炭素）に結合しているオキシメチルホスホネート又はその類似体である。例えば、２０１６年９月２日に出願された米国仮特許出願第６２／３８３，２０７号及び２０１６年９月１２日に出願された米国仮特許出願第６２／３９３，４０１号を参照されたい。これらのリン酸類似体に関するそれぞれの内容は、参照により本明細書に組み込まれる。オリゴヌクレオチドの５’末端に対する他の修飾が開発されている（例えば、国際公開第２０１１／１３３８７１号；米国特許第８，９２７，５１３号明細書；及びＰｒａｋａｓｈ ｅｔ ａｌ．（２０１５），Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，４３（６）：２９９３－３０１１を参照されたい。リン酸類似体に関するそれぞれの内容は参照により本明細書に組み込まれる）。
本明細書で使用される「リン酸模倣物」という用語は、リン酸基の静電特性及び／又は立体特性を模倣する化学部分を指す。いくつかの実施形態において、リン酸類似体は、酵素的除去を受けやすいことが多い５’－リン酸の代わりに、オリゴヌクレオチドの５’末端ヌクレオチドに配置される。いくつかの実施形態において、５’リン酸類似体は、ホスファターゼ耐性連結を含有する。リン酸類似体の例としては、５’メチレンホスホネート（５’－ＭＰ）及び５’－（Ｅ）－ビニルホスホネート（５’－ＶＰ）などの５’ホスホネートが挙げられる。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、５’末端ヌクレオチドに、糖の４’－炭素位置にリン酸類似体（「４’－リン酸類似体」と呼ばれる）を有する。４’－リン酸類似体の例は、オキシメチル基の酸素原子が糖部分（例えばその４’－炭素）に結合しているオキシメチルホスホネート又はその類似体である。例えば、２０１６年９月２日に出願された米国仮特許出願第６２／３８３，２０７号及び２０１６年９月１２日に出願された米国仮特許出願第６２／３９３，４０１号を参照されたい。これらのリン酸類似体に関するそれぞれの内容は、参照により本明細書に組み込まれる。オリゴヌクレオチドの５’末端に対する他の修飾が開発されている（例えば、国際公開第２０１１／１３３８７１号；米国特許第８，９２７，５１３号明細書；及びＰｒａｋａｓｈ ｅｔ ａｌ．（２０１５），Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，４３（６）：２９９３－３０１１を参照されたい。リン酸類似体に関するそれぞれの内容は参照により本明細書に組み込まれる）。
【0095】
ヌクレアーゼ媒介性分解
ヌクレアーゼ媒介性分解は、相補的なヌクレオチド配列と二重鎖を形成するときに、そのような配列の分解を媒介することができるオリゴヌクレオチドを指す。
ヌクレアーゼ媒介性分解は、相補的なヌクレオチド配列と二重鎖を形成するときに、そのような配列の分解を媒介することができるオリゴヌクレオチドを指す。
【0096】
いくつかの実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、標的核酸のヌクレアーゼ媒介性分解を介して機能することができ、本発明のオリゴヌクレオチドは、ヌクレアーゼ、特にエンドヌクレアーゼ、好ましくはＲＮアーゼＨなどのエンドリボヌクレアーゼ（ＲＮアーゼ）を動員することができる。ヌクレアーゼ媒介機構を介して作用するオリゴヌクレオチド設計の例は、典型的には少なくとも５個又は６個の連続ＤＮＡヌクレオシドの領域を含み、親和性増強ヌクレオシド、例えばギャップマー、ヘッドマー及びテールマーが片側又は両側に隣接するオリゴヌクレオチドである。
【0097】
ＲＮａｓｅ Ｈの活性及び動員
一実施形態では、治療用オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ Ｈを動員することができるアンチセンスオリゴヌクレオチドである。アンチセンスオリゴヌクレオチドのＲＮａｓｅ Ｈ活性とは、相補的ＲＮＡ分子との二重鎖にあるときにＲＮアーゼＨを動員する能力を指す。国際公開第０１／２３６１３号は、ＲＮａｓｅ Ｈを動員する能力を決定するために使用され得る、ＲＮａｓｅ Ｈ活性を決定するためのインビトロ方法を提供する。典型的には、オリゴヌクレオチドが、相補的標的核酸配列が提供された場合に、試験されている修飾オリゴヌクレオチドと同じ塩基配列を有するが、オリゴヌクレオチド中の全てのモノマー間にホスホロチオアート結合を有するＤＮＡモノマーのみを含有するオリゴヌクレオチドを使用し、国際公開第０１／２３６１３号（参照により本明細書に組み込まれる）の実施例９１～９５により提供される方法論を使用したときに決定された初期速度の少なくとも５％、例えば、少なくとも１０％又は２０％超のｐｍｏｌ／ｌ／分で測定された初期速度を有する場合に、このオリゴヌクレオチドはＲＮａｓｅ Ｈを動員し得ると見なされる。ＲＮａｓｅ Ｈ活性の決定に使用するために、組換えヒトＲＮａｓｅ Ｈ１が、Ｌｕｂｉｏ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＧｍｂＨ、Ｌｕｃｅｒｎｅ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄから入手可能である。
一実施形態では、治療用オリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ Ｈを動員することができるアンチセンスオリゴヌクレオチドである。アンチセンスオリゴヌクレオチドのＲＮａｓｅ Ｈ活性とは、相補的ＲＮＡ分子との二重鎖にあるときにＲＮアーゼＨを動員する能力を指す。国際公開第０１／２３６１３号は、ＲＮａｓｅ Ｈを動員する能力を決定するために使用され得る、ＲＮａｓｅ Ｈ活性を決定するためのインビトロ方法を提供する。典型的には、オリゴヌクレオチドが、相補的標的核酸配列が提供された場合に、試験されている修飾オリゴヌクレオチドと同じ塩基配列を有するが、オリゴヌクレオチド中の全てのモノマー間にホスホロチオアート結合を有するＤＮＡモノマーのみを含有するオリゴヌクレオチドを使用し、国際公開第０１／２３６１３号（参照により本明細書に組み込まれる）の実施例９１～９５により提供される方法論を使用したときに決定された初期速度の少なくとも５％、例えば、少なくとも１０％又は２０％超のｐｍｏｌ／ｌ／分で測定された初期速度を有する場合に、このオリゴヌクレオチドはＲＮａｓｅ Ｈを動員し得ると見なされる。ＲＮａｓｅ Ｈ活性の決定に使用するために、組換えヒトＲＮａｓｅ Ｈ１が、Ｌｕｂｉｏ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＧｍｂＨ、Ｌｕｃｅｒｎｅ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄから入手可能である。
【0098】
ギャップマー
本発明の治療用オリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドであるいくつかの実施形態において、本発明の核酸分子又はその連続ヌクレオチド配列は、ギャップマーアンチセンスオリゴヌクレオチドである。アンチセンスギャップマーは、通常、ＲＮａｓｅ Ｈ媒介性分解を介した標的核酸の阻害に用いられる。本発明の一実施形態では、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ Ｈを動員することが可能である。
本発明の治療用オリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドであるいくつかの実施形態において、本発明の核酸分子又はその連続ヌクレオチド配列は、ギャップマーアンチセンスオリゴヌクレオチドである。アンチセンスギャップマーは、通常、ＲＮａｓｅ Ｈ媒介性分解を介した標的核酸の阻害に用いられる。本発明の一実施形態では、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ Ｈを動員することが可能である。
【0099】
ギャップマーアンチセンスオリゴヌクレオチドは、少なくとも３つの区別される構造領域、５’－フランク、ギャップ、及び３’－フランク、Ｆ－Ｇ－Ｆ’を、５’－＞３’配向で含む。「ギャップ」領域（Ｇ）は、オリゴヌクレオチドがＲＮａｓｅ Ｈを動員することを可能にする連続ＤＮＡヌクレオチドのストレッチを含む。ギャップ領域は、１つ又は複数の糖修飾ヌクレオシド、有利には高親和性糖修飾ヌクレオシドを含む５’フランキング領域（Ｆ）と、１つ又は複数の糖修飾ヌクレオシド、有利には高親和性糖修飾ヌクレオシドを含む３’フランキング領域（Ｆ’）が隣接する。領域Ｆ及びＦ’の１つ又は複数の糖修飾ヌクレオシドは、標的核酸に対するオリゴヌクレオチドの親和性を向上させる（すなわち、親和性向上糖修飾ヌクレオシドである）。いくつかの実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の１つ又は複数の糖修飾ヌクレオシドは、例えばＬＮＡ及び２’－ＭＯＥから独立して選択される、高親和性２’糖修飾などの２’糖修飾ヌクレオシドである。
【0100】
ギャップマー設計において、ギャップ領域の最も５’及び３’のヌクレオシドはＤＮＡヌクレオシドであり、それぞれ、５’（Ｆ）又は３’（Ｆ’）領域の糖修飾ヌクレオシドに隣接して配置されている。フランクはさらに、ギャップ領域から最も遠い端、即ち５’フランクの５’末端及び３’フランクの３’末端に少なくとも１つの糖修飾ヌクレオシドを有することによって定義されてもよい。
【0101】
領域Ｆ－Ｇ－Ｆ’は、連続ヌクレオチド配列を形成する。本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列は、式Ｆ－Ｇ－Ｆ’のギャップマー領域を含み得る。
【0102】
ギャップマー設計Ｆ－Ｇ－Ｆ’の全長は、例えば１２から３０ヌクレオシド、例えば１３から２４、例えば１４から２２ヌクレオシド、例えば１３から１７、例えば１４から１６ヌクレオシドでありうる。
【0103】
例として、本発明のギャップマーオリゴヌクレオチドは、以下の式によって表すことができる：
Ｆ１－６－Ｇ６－１６－Ｆ’１－６、例えば
Ｆ１－４－Ｇ７－１０－Ｆ’２－４
ただし、ギャップマー領域Ｆ－Ｇ－Ｆ’の全長は、少なくとも１２、例えば少なくとも１３ヌクレオチド長であることを条件とする。
Ｆ１－６－Ｇ６－１６－Ｆ’１－６、例えば
Ｆ１－４－Ｇ７－１０－Ｆ’２－４
ただし、ギャップマー領域Ｆ－Ｇ－Ｆ’の全長は、少なくとも１２、例えば少なくとも１３ヌクレオチド長であることを条件とする。
【0104】
本発明の一態様では、アンチセンスオリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列は、式５’－Ｆ－Ｇ－Ｆ’－３’のギャップマーからなるか又はそれを含み、式中、領域Ｆ及びＦ’が独立して１～８個のヌクレオシドを含むか又はそれらからなり、そのうち１～４個が２’糖修飾され、Ｆ及びＦ’領域の５’及び３’末端を規定し、ＧがＲＮａｓｅ Ｈを動員することができる６～１６個のヌクレオシドの領域である。
【0105】
本発明の一実施形態では、連続ヌクレオチド配列は、式５’－Ｆ－Ｇ－Ｆ’－３’のギャップマーであり、領域Ｆ及びＦ’は、独立して、２～４個の２’糖修飾ヌクレオチドからなり、Ｆ及びＦ’領域の５’及び３’末端を規定し、Ｇは、ＲＮアーゼＨを動員することができる６～１０個のＤＮＡヌクレオシド領域である。
【0106】
いくつかの実施形態では、ギャップ領域Ｇは、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は１６個の連続するホスホロチオエート結合ＤＮＡヌクレオシドからなっていてもよい。いくつかの実施形態では、ギャップ領域Ｇは、７個～１０個のＤＮＡヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、ギャップ内のすべてのヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエート結合である。
【0107】
いくつかの実施形態では、領域Ｆ及びＦ’は、独立して、糖修飾ヌクレオシドの連続する配列からなるか、又はそれを含む。いくつかの実施形態では、領域Ｆの糖修飾ヌクレオシドは、独立して、２’－Ｏ－アルキル－ＲＮＡ単位、２’－Ｏ－メチル－ＲＮＡ、２’－アミノ－ＤＮＡ単位、２’－フルオロ－ＤＮＡ単位、２’－アルコキシ－ＲＮＡ、ＭＯＥ単位、ＬＮＡ単位、アラビノ核酸（ＡＮＡ）単位及び２’－フルオロ－ＡＮＡ単位から選択されてもよい。
【0108】
いくつかの実施形態では、領域Ｆ若しくはＦ’、又はＦ及びＦ’の全ヌクレオシドは、例えばベータ－Ｄ－オキシＬＮＡ、ＥＮＡ又はＳｃＥＴヌクレオシドから独立して選択されるような、ＬＮＡヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、領域Ｆは、１～５つ、例えば２～４つ、例えば３～４つ、例えば１、２、３、４又は５つの連続するＬＮＡヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の全ヌクレオシドは、ベータ－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシドである。
【0109】
いくつかの実施形態では、領域Ｆ若しくはＦ’、又はＦ及びＦ’の全ヌクレシドは、２’置換ヌクレオシド、例えばＯＭｅ又はＭＯＥヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、領域Ｆは、１、２、３、４、５、６、７又は８つの連続するＯＭｅ又はＭＯＥヌクレオシドからなる。いくつかの実施形態では、フランキング領域の一方のみが、２’置換ヌクレオシド、例えばＯＭｅ又はＭＯＥヌクレオシドからなり得る。いくつかの実施形態では、２’置換ヌクレオシド、例えばＯＭｅ又はＭＯＥヌクレオシドからなるのは５’（Ｆ）フランキング領域であり、一方、３’（Ｆ’）フランキング領域は、少なくとも１つのＬＮＡヌクレオシド、例えばベータ－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシド又はｃＥＴヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、２’置換ヌクレオシド、例えばＯＭｅ又はＭＯＥヌクレオシドからなるのは３’（Ｆ’）フランキング領域であり、一方、５’（Ｆ）フランキング領域は、少なくとも１つのＬＮＡヌクレオシド、例えばベータ－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシド又はｃＥＴヌクレオシドを含む。
【0110】
さらなるギャップマー設計は、参照することによって本明細書に組み込まれる、国際公開第２００４／０４６１６０号、国際公開第２００７／１４６５１１号、及び国際公開第２００８／１１３８３２号に開示されている。
【0111】
ＬＮＡギャップマー
ＬＮＡギャップマーは、領域Ｆ及びＦ’の一方又は両方に、ＬＮＡヌクレオシドを含むか、若しくはそれからなるギャップマーである。ベータ－Ｄ－オキシギャップマーは、領域Ｆ及びＦ’の一方又は両方に、ベータ－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシドを含むか、若しくはそれからなるギャップマーである。
ＬＮＡギャップマーは、領域Ｆ及びＦ’の一方又は両方に、ＬＮＡヌクレオシドを含むか、若しくはそれからなるギャップマーである。ベータ－Ｄ－オキシギャップマーは、領域Ｆ及びＦ’の一方又は両方に、ベータ－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシドを含むか、若しくはそれからなるギャップマーである。
【0112】
いくつかの実施形態では、ＬＮＡギャップマーは、式：［ＬＮＡ］１－５－［領域Ｇ］６－１０－［ＬＮＡ］１－５であり、領域Ｇはギャップマー領域Ｇの定義で定義したとおりである。
【0113】
ＭＯＥギャップマー
ＭＯＥギャップマーは、領域Ｆ及びＦ’がＭＯＥヌクレオシドからなるギャップマーである。いくつかの実施形態では、ＭＯＥギャップマは、設計［ＭＯＥ］１－８－［領域Ｇ］５－１６－［ＭＯＥ］１－８、例えば［ＭＯＥ］２－７－［領域Ｇ］６－１４－［ＭＯＥ］２－７、例えば［ＭＯＥ］３－６－［領域Ｇ］８－１２－［ＭＯＥ］３－６のものであり、ここで、領域Ｇはギャップマの定義に規定した通りである。５－１０－５設計（ＭＯＥ－ＤＮＡ－ＭＯＥ）を有するＭＯＥギャップマーは、当技術分野で広く使用されている。
ＭＯＥギャップマーは、領域Ｆ及びＦ’がＭＯＥヌクレオシドからなるギャップマーである。いくつかの実施形態では、ＭＯＥギャップマは、設計［ＭＯＥ］１－８－［領域Ｇ］５－１６－［ＭＯＥ］１－８、例えば［ＭＯＥ］２－７－［領域Ｇ］６－１４－［ＭＯＥ］２－７、例えば［ＭＯＥ］３－６－［領域Ｇ］８－１２－［ＭＯＥ］３－６のものであり、ここで、領域Ｇはギャップマの定義に規定した通りである。５－１０－５設計（ＭＯＥ－ＤＮＡ－ＭＯＥ）を有するＭＯＥギャップマーは、当技術分野で広く使用されている。
【0114】
混合ウイングギャップマー
混合ウイングギャップマーは、領域Ｆ及びＦ’の一方又は両方が、２’置換ヌクレオシド、例えば２’－Ｏ－アルキル－ＲＮＡ単位、２’－Ｏ－メチル－ＲＮＡ、２’－アミノ－ＤＮＡ単位、２’－フルオロ－ＤＮＡ単位、２’－アルコキシ－ＲＮＡ、ＭＯＥ単位、アラビノ核酸（ＡＮＡ）単位、及び２’－フルオロ－ＡＮＡ単位からなる群から独立して選択される２’置換ヌクレオシド、例えばＭＯＥヌクレオシドを含むＬＮＡギャップマーである。領域Ｆ及びＦ’の少なくとも一方、又は領域Ｆ及びＦ’の両方が少なくとも１つのＬＮＡヌクレオシドを含むいくつかの実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の残りのヌクレオシドは、ＭＯＥ及びＬＮＡからなる群から独立して選択される。領域Ｆ及びＦ’の少なくとも一方、又は領域Ｆ及びＦ’の両方が少なくとも２つのＬＮＡヌクレオシドを含むいくつかの実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の残りのヌクレオシドは、ＭＯＥ及びＬＮＡからなる群から独立して選択される。いくつかの混合ウイング実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の一方又は両方が、１つ又は複数のＤＮＡヌクレオシドをさらに含んでもよい。
混合ウイングギャップマーは、領域Ｆ及びＦ’の一方又は両方が、２’置換ヌクレオシド、例えば２’－Ｏ－アルキル－ＲＮＡ単位、２’－Ｏ－メチル－ＲＮＡ、２’－アミノ－ＤＮＡ単位、２’－フルオロ－ＤＮＡ単位、２’－アルコキシ－ＲＮＡ、ＭＯＥ単位、アラビノ核酸（ＡＮＡ）単位、及び２’－フルオロ－ＡＮＡ単位からなる群から独立して選択される２’置換ヌクレオシド、例えばＭＯＥヌクレオシドを含むＬＮＡギャップマーである。領域Ｆ及びＦ’の少なくとも一方、又は領域Ｆ及びＦ’の両方が少なくとも１つのＬＮＡヌクレオシドを含むいくつかの実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の残りのヌクレオシドは、ＭＯＥ及びＬＮＡからなる群から独立して選択される。領域Ｆ及びＦ’の少なくとも一方、又は領域Ｆ及びＦ’の両方が少なくとも２つのＬＮＡヌクレオシドを含むいくつかの実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の残りのヌクレオシドは、ＭＯＥ及びＬＮＡからなる群から独立して選択される。いくつかの混合ウイング実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の一方又は両方が、１つ又は複数のＤＮＡヌクレオシドをさらに含んでもよい。
【0115】
混合ウイングギャップマー設計は、国際公開第２００８／０４９０８５号及び国際公開第２０１２／１０９３９５号（これらのいずれもが参照により本明細書に組み込まれる）に開示されている。
【0116】
オリゴヌクレオチド内の領域Ｄ’又はＤ’’
【0117】
本発明のオリゴヌクレオチドは、いくつかの実施形態では、標的核酸に相補的なオリゴヌクレオチドの連続ヌクレオチド配列、例えばギャップマーＦ－Ｇ－Ｆ’、並びにさらに５’及び／又は３’ヌクレオシドを含むか、又はそれからなり得る。さらなる５’及び／又は３’ヌクレオシドは、標的核酸に完全に相補的であっても、完全に相補的でなくてもよい。このようなさらなる５’及び／又は３’ヌクレオシドは、本明細書では領域Ｄ’及びＤ’’と称され得る。
【0118】
領域Ｄ’又はＤ’’の付加は、連続ヌクレオチド配列、例えばギャップマーをコンジュゲート部分又は別の官能基に連結する目的のために使用され得る。連続ヌクレオチド配列をコンジュゲート部分と連結するために使用される場合、それは生体切断可能なリンカーとして働くことができる。あるいは、それはエキソヌクレアーゼ保護を提供するために、又は合成若しくは製造を容易にするために使用され得る。
【0119】
領域Ｄ’及びＤ’’は、それぞれ、領域Ｆの５’末端又は領域Ｆ’の３’末端に結合して、以下の式Ｄ’－Ｆ－Ｇ－Ｆ’、Ｆ－Ｇ－Ｆ’－Ｄ’’又はＤ’－Ｆ－Ｇ－Ｆ’－Ｄ’’の設計を生成することができる。この場合、Ｆ－Ｇ－Ｆ’はオリゴヌクレオチドのギャップマー部分であり、領域Ｄ’又はＤ’’は、オリゴヌクレオチドの別個の部分を構成する。領域Ｄ’とＦ領域との間及び領域Ｆ’とＤ’’領域との間の移行は、Ｄ’又はＤ’’領域に向かうホスホジエステル結合及びＦ又はＦ’領域に向かうホスホロチオエート結合を有するヌクレオシドによって特徴付けられ、ヌクレオシドはギャップマー（標的核酸に相補的な連続ヌクレオチド配列）の一部であると考えられる。
【0120】
領域Ｄ’又はＤ’’は、独立して、１、２、３、４又は５個の追加のヌクレオチドを含むか、又はそれからなり、標的核酸に相補的であっても、相補的でなくてもよい。Ｆ又はＦ’領域に隣接するヌクレオチドは、ＤＮＡ又はＲＮＡなどの糖修飾ヌクレオチドではなく、若しくはこれらの塩基修飾バージョンでもない。Ｄ’又はＤ’’領域は、ヌクレアーゼ感受性の生体切断可能なリンカーとしての役割を果たしうる（リンカーの定義を参照されたい）。いくつかの実施形態では、追加の５’及び／又は３’末端ヌクレオチドは、ホスホジエステル結合で結合されており、ＤＮＡ又はＲＮＡである。領域Ｄ’又はＤ’’としての使用に好適なヌクレオチドベースの生体切断性リンカーは、国際公開第２０１４／０７６１９５号に開示されており、これには例としてホスホジエステル結合ＤＮＡジヌクレオチドが含まれる。いくつかの実施形態では、領域Ｄ’又はＤ’’は、標的核酸に対して相補的ではないか、又は少なくとも５０％のミスマッチを含む。
【0121】
いくつかの実施形態では、領域Ｄ’又はＤ’’は、配列ＡＡ、ＡＴ、ＡＣ、ＡＧ、ＴＡ、ＴＴ、ＴＣ、ＴＧ、ＣＡ、ＣＴ、ＣＣ、ＣＧ、ＧＡ、ＧＴ、ＧＣ、又はＧＧのジヌクレオチドを含むか又はそれからなり、Ｃは５－メチルシトシンであってよく、及び／又はＴはＵで置き換えられてよい。ジヌクレオチド中のヌクレオシド間結合はホスホジエステル結合である。いくつかの実施形態では、領域Ｄ’又はＤ’’は、配列ＡＡＡ、ＡＡＴ、ＡＡＣ、ＡＡＧ、ＡＴＡ、ＡＴＴ、ＡＴＣ、ＡＴＧ、ＡＣＡ、ＡＣＴ、ＡＣＣ、ＡＣＧ、ＡＧＡ、ＡＧＴ、ＡＧＣ、ＡＧＧ、ＴＡＡ、ＴＡＴ、ＴＡＣ、ＴＡＧ、ＴＴＡ、ＴＴＴ、ＴＴＣ、ＴＡＧ、ＴＣＡ、ＴＣＴ、ＴＣＣ、ＴＣＧ、ＴＧＡ、ＴＧＴ、ＴＧＣ、ＴＧＧ、ＣＡＡ、ＣＡＴ、ＣＡＣ、ＣＡＧ、ＣＴＡ、ＣＴＧ、ＣＴＣ、ＣＴＴ、ＣＣＡ、ＣＣＴ、ＣＣＣ、ＣＣＧ、ＣＧＡ、ＣＧＴ、ＣＧＣ、ＣＧＧ、ＧＡＡ、ＧＡＴ、ＧＡＣ、ＣＡＧ、ＧＴＡ、ＧＴＴ、ＧＴＣ、ＧＴＧ、ＧＣＡ、ＧＣＴ、ＧＣＣ、ＧＣＧ、ＧＧＡ、ＧＧＴ、ＧＧＣ、及びＧＧＧのトリヌクレオチドからなるか、又はそれからなり、Ｃは５－メチルシトシンであってよく、及び／又は、Ｔは、Ｕで置き換えられてよい。ヌクレオシド間結合は、ホスホジエステル結合である。（天然に存在する）核酸塩基Ａ（アデニン、Ｔ（チミン）、Ｕ（ウラシル）、Ｇ（グアニン）、Ｃ（シトシン）に言及する場合、これらは、同等の天然核酸塩基（例えば、相補的ヌクレオシドとの塩基対）として機能する核酸塩基類似体で置換され得ることが理解されるであろう。
【0122】
一実施形態では、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ギャップマーを構成する連続ヌクレオチド配列に加えて、領域Ｄ’及び／又はＤ’’を含む。
【0123】
いくつかの実施形態において、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、以下の式によって表すことができる：
Ｄ’－Ｆ－Ｇ－Ｆ’、特に、Ｄ’１－３－Ｆ１－４－Ｇ６－１０－Ｆ’２－４
Ｆ－Ｇ－Ｆ’－Ｄ’’、特に、Ｆ１－４－Ｇ６－１０－Ｆ’２－４－Ｄ’’１－３
Ｄ’－Ｆ－Ｇ－Ｆ’－Ｄ’’、特に、Ｄ’１－３－Ｆ１－４－Ｇ６－１０－Ｆ’２－４－Ｄ’’１－３。
Ｄ’－Ｆ－Ｇ－Ｆ’、特に、Ｄ’１－３－Ｆ１－４－Ｇ６－１０－Ｆ’２－４
Ｆ－Ｇ－Ｆ’－Ｄ’’、特に、Ｆ１－４－Ｇ６－１０－Ｆ’２－４－Ｄ’’１－３
Ｄ’－Ｆ－Ｇ－Ｆ’－Ｄ’’、特に、Ｄ’１－３－Ｆ１－４－Ｇ６－１０－Ｆ’２－４－Ｄ’’１－３。
【0124】
いくつかの実施形態では、領域Ｄ’と領域Ｆとの間に位置するヌクレオシド間結合は、ホスホジエステル結合である。いくつかの実施形態では、領域Ｆ’と領域Ｄ’’との間に位置するヌクレオシド間結合は、ホスホジエステル結合である。
【0125】
コンジュゲート
本明細書で使用されるコンジュゲートという用語は、治療用オリゴヌクレオチドに共有結合することができるＧａｌＮＡｃクラスターなどの非ヌクレオチド部分（コンジュゲート）を指す。コンジュゲート及びクラスター又はコンジュゲート部分という用語は、互換的に使用され得る。いくつかの例において、コンジュゲートされた治療用オリゴヌクレオチドは、オリゴヌクレオチドコンジュゲートとも称され得る。一実施形態では、コンジュゲートは標的化リガンドである。
本明細書で使用されるコンジュゲートという用語は、治療用オリゴヌクレオチドに共有結合することができるＧａｌＮＡｃクラスターなどの非ヌクレオチド部分（コンジュゲート）を指す。コンジュゲート及びクラスター又はコンジュゲート部分という用語は、互換的に使用され得る。いくつかの例において、コンジュゲートされた治療用オリゴヌクレオチドは、オリゴヌクレオチドコンジュゲートとも称され得る。一実施形態では、コンジュゲートは標的化リガンドである。
【0126】
標的化リガンド
本明細書で使用される「標的化リガンド」という用語は、目的の組織又は細胞の同族分子（例えば、受容体）に選択的に結合する分子であって、目的の組織又は細胞に他の物質を標的化する目的で他の物質にコンジュゲート可能な分子（例えば、炭水化物、アミノ糖、コレステロール、ポリペプチド又は脂質）を指す。例えば、いくつかの実施形態では、標的化リガンドは、オリゴヌクレオチドを目的の特定の組織又は細胞に標的化する目的でオリゴヌクレオチドにコンジュゲートされ得る。いくつかの実施形態において、標的化リガンドは細胞表面受容体に選択的に結合する。したがって、いくつかの実施形態では、標的化リガンドは、オリゴヌクレオチドにコンジュゲートされた場合、細胞の表面に発現される受容体への選択的結合、並びに、オリゴヌクレオチド、標的化リガンド及び受容体を含む複合体の細胞によるエンドソーム内部移行によって、特定の細胞へのオリゴヌクレオチドの送達を容易にする。いくつかの実施形態において、標的化リガンドは、オリゴヌクレオチドが細胞内の標的化リガンドから放出されるように、細胞の内在化の後又は細胞の内在化の間に切断されるリンカーを介してオリゴヌクレオチドにコンジュゲートされる。
本明細書で使用される「標的化リガンド」という用語は、目的の組織又は細胞の同族分子（例えば、受容体）に選択的に結合する分子であって、目的の組織又は細胞に他の物質を標的化する目的で他の物質にコンジュゲート可能な分子（例えば、炭水化物、アミノ糖、コレステロール、ポリペプチド又は脂質）を指す。例えば、いくつかの実施形態では、標的化リガンドは、オリゴヌクレオチドを目的の特定の組織又は細胞に標的化する目的でオリゴヌクレオチドにコンジュゲートされ得る。いくつかの実施形態において、標的化リガンドは細胞表面受容体に選択的に結合する。したがって、いくつかの実施形態では、標的化リガンドは、オリゴヌクレオチドにコンジュゲートされた場合、細胞の表面に発現される受容体への選択的結合、並びに、オリゴヌクレオチド、標的化リガンド及び受容体を含む複合体の細胞によるエンドソーム内部移行によって、特定の細胞へのオリゴヌクレオチドの送達を容易にする。いくつかの実施形態において、標的化リガンドは、オリゴヌクレオチドが細胞内の標的化リガンドから放出されるように、細胞の内在化の後又は細胞の内在化の間に切断されるリンカーを介してオリゴヌクレオチドにコンジュゲートされる。
【0127】
オリゴヌクレオチドリンカー
結合又はリンカーは、１つ以上の共有結合を介して目的の１つの化学基又はセグメントを目的の別の化学基又はセグメントに連結する、２つの原子間の接続である。コンジュゲート基は、直接又は連結部分（例えば、リンカー又はテザー）を介してオリゴヌクレオチドに結合させることができる。リンカーは、コンジュゲート基を、標的核酸に相補的なオリゴヌクレオチド又は連続ヌクレオチド配列に共有結合的にコンジュゲートするのに役立つ。
結合又はリンカーは、１つ以上の共有結合を介して目的の１つの化学基又はセグメントを目的の別の化学基又はセグメントに連結する、２つの原子間の接続である。コンジュゲート基は、直接又は連結部分（例えば、リンカー又はテザー）を介してオリゴヌクレオチドに結合させることができる。リンカーは、コンジュゲート基を、標的核酸に相補的なオリゴヌクレオチド又は連続ヌクレオチド配列に共有結合的にコンジュゲートするのに役立つ。
【0128】
本発明のいくつかの実施形態では、治療用オリゴヌクレオチドは、任意に、標的核酸に相補的なオリゴヌクレオチド又は連続ヌクレオチド配列とコンジュゲートとの間に位置するリンカー領域を含む。
【0129】
そのようなリンカーは、哺乳動物の体内で通常遭遇する又は遭遇するものに類似した条件下で切断可能である生理学的に不安定な結合を含むか、又はそれからなる生体切断可能なリンカーであり得る。一実施形態では、生体切断可能なリンカーは、Ｓ１ヌクレアーゼ切断の影響を受けやすい。
【0130】
コンジュゲートと治療用オリゴヌクレオチドとの間に配置された生体切断可能なリンカーについては、標的組織（例えば、筋肉、肝臓、腎臓又は腫瘍）に見られる切断速度が血清に見られるものよりも大きいことが好ましい。いくつかの実施形態では、生体切断可能なリンカーは、標準と比較した場合、少なくとも約２０％切断され、例えば少なくとも約３０％切断され、例えば少なくとも約４０％切断され、例えば少なくとも約５０％切断され、例えば少なくとも約６０％切断され、例えば少なくとも約７０％切断され、例えば少なくとも約７５％切断される。
【0131】
好ましい実施形態では、ヌクレアーゼ感受性リンカーは、少なくとも２つの連続したホスホジエステル結合、例えば、少なくとも３つ又は４つ又は５つの連続したホスホジエステル結合を含む、１から１０の間のヌクレオシド、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０のヌクレオシド、より好ましくは２から６の間のヌクレオシド、最も好ましくは２から４の間の結合したヌクレオシドを含む。好ましくは、ヌクレオシドは、ＤＮＡ又はＲＮＡである。ホスホジエステルを含む生体切断可能なリンカー（ＰＯリンカー）は、国際公開第２０１４／０７６１９５号（参照することによって本明細書に組み込まれる）により詳細に記載されている。
【0132】
必ずしも生体切断可能ではないが、主にコンジュゲートをオリゴヌクレオチドに共有結合的に連結するのに役立つ追加の又は代替のリンカーも、単独で又はＰＯリンカーと組み合わせて使用され得る。切断不可能なリンカーは、エチレングリコール、アミノ酸単位、又はアミノアルキル基などの繰り返し単位の鎖構造又はオリゴマーを含みうる。いくつかの実施形態では、切断不可能なリンカーは、例えばＣ６～Ｃ１２アミノアルキル基を含むＣ２～Ｃ３６アミノアルキル基などのアミノアルキルである。好ましい実施形態では、リンカーは、Ｃ６アミノアルキル基である。
【0133】
Ｂ型肝炎ウイルス
本明細書で使用される「Ｂ型肝炎ウイルス」又は「ＨＢＶ」は、おおよそ３，２００塩基対の小さな二本鎖ＤＮＡゲノム及び肝細胞に対する親和性を有するヘパドナウイルス科のメンバーを指す。「ＨＢＶ」には、様々な哺乳動物（例えば、ヒト、非ヒト霊長類など）及び鳥類（アヒル等）の宿主のいずれかに感染するＢ型肝炎ウイルスが含まれる。「ＨＢＶ」は、任意の既知のＨＢＶ遺伝子型、例えば血清型Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、及びＧ；任意のＨＢＶ血清型又はＨＢＶサブタイプ；任意のＨＢＶ分離物；ＨＢＶバリアント、例えばＨＢｅＡｇ陰性バリアント、薬剤耐性ＨＢＶバリアント（例えば、ラミブジン耐性バリアント；アデホビル耐性突然変異体；テノホウイルス耐性突然変異体；エンテカビル耐性突然変異体等）；などを含む。
本明細書で使用される「Ｂ型肝炎ウイルス」又は「ＨＢＶ」は、おおよそ３，２００塩基対の小さな二本鎖ＤＮＡゲノム及び肝細胞に対する親和性を有するヘパドナウイルス科のメンバーを指す。「ＨＢＶ」には、様々な哺乳動物（例えば、ヒト、非ヒト霊長類など）及び鳥類（アヒル等）の宿主のいずれかに感染するＢ型肝炎ウイルスが含まれる。「ＨＢＶ」は、任意の既知のＨＢＶ遺伝子型、例えば血清型Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、及びＧ；任意のＨＢＶ血清型又はＨＢＶサブタイプ；任意のＨＢＶ分離物；ＨＢＶバリアント、例えばＨＢｅＡｇ陰性バリアント、薬剤耐性ＨＢＶバリアント（例えば、ラミブジン耐性バリアント；アデホビル耐性突然変異体；テノホウイルス耐性突然変異体；エンテカビル耐性突然変異体等）；などを含む。
【0134】
「ＨＢＶ」は、オルトヘパドナウイルス属のタイプ種に分類される、ヘパドナウイルス科に属する小ＤＮＡウイルスである。ＨＢＶウイルス粒子（ビリオン）は、外側脂質エンベロープと、タンパク質で構成された正二十面体ヌクレオカプシドコアとを含む。ヌクレオカプシドは、一般に、ウイルスＤＮＡ及びレトロウイルスと同様の逆転写酵素活性を有するＤＮＡポリメラーゼを封入する。ＨＢＶ外側エンベロープは、感受性細胞のウイルス結合及びその中への侵入に関与する埋め込みタンパク質を含む。肝臓を攻撃するＨＢＶは、配列に基づいて少なくとも１０の遺伝子型（Ａ～Ｊ）に従って分類されている。一般に、ゲノムによってコードされる４つの遺伝子があり、これらの遺伝子はＣ、Ｐ、Ｓ及びＸと呼ばれる。コアタンパク質は、遺伝子Ｃ（ＨＢｃＡｇ）によってコードされ、その開始コドンの前には上流のインフレームＡＵＧ開始コドンがあり、そこからプレコアタンパク質が産生される。ＨＢｅＡｇは、プレコアタンパク質のタンパク質分解プロセシングによって産生される。ＤＮＡポリメラーゼは遺伝子Ｐによってコードされる。遺伝子Ｓは表面抗原（ＨＢｓＡｇ）をコードする。ＨＢｓＡｇ遺伝子は１つの長いオープンリーディングフレームであるが、遺伝子を３つのセクション（ｐｒｅ－Ｓ１、ｐｒｅ－Ｓ２、及びＳ）に分ける３つのインフレーム「開始」（ＡＴＧ）コドンを含む。複数の開始コドンのために、大、中、小と呼ばれる３つの異なるサイズのポリペプチド（プＳ１＋プレＳ２＋Ｓ、プレＳ２＋Ｓ、又はＳ）が産生される。これらは、１：１：４の比を有し得る（Ｈｅｅｒｍａｎｎ ｅｔ ａｌ，１９８４）。
【0135】
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）タンパク質は、いくつかのカテゴリ及び機能に編成することができる。ポリメラーゼは、逆転写酵素（ＲＴ）として機能してプレゲノムＲＮＡ（ｐｇＲＮＡ）からウイルスＤＮＡを作製し、またＤＮＡ依存性ポリメラーゼとして機能してウイルスＤＮＡから共有結合閉環状ＤＮＡ（ｃｃｃＤＮＡ）を作製する。それらは、マイナス鎖の５’末端に共有結合している。コアタンパク質は、ウイルスキャプシド及び分泌されたＥ抗原を作製する。表面抗原は、肝細胞内在化リガンドであり、またウイルス球状粒子及び糸状粒子の主成分でもある。Ａｖｉｒａｌ粒子は、Ｄａｎｅ粒子（感染性ビリオン）の１０００倍よりも多く産生され、免疫デコイとして作用し得る。
【0136】
Ｂ型肝炎ウイルス表面抗原
本明細書で使用される「Ｂ型肝炎ウイルス表面抗原」又は「ＨＢｓＡｇ」という用語は、ＨＢＶゲノムの遺伝子Ｓ（例えば、ＯＲＦ Ｓ）によってコードされるＳドメインタンパク質を指す。Ｂ型肝炎ウイルス粒子は、大きな表面タンパク質、中間の表面タンパク質及び主要な表面タンパク質である、遺伝子Ｓによってコードされる３つのタンパク質によって包まれたコア粒子内にウイルス核酸を保有する。これらのタンパク質のうち、主要な表面タンパク質は、一般に約２２６アミノ酸であり、Ｓドメインのみを含む。
本明細書で使用される「Ｂ型肝炎ウイルス表面抗原」又は「ＨＢｓＡｇ」という用語は、ＨＢＶゲノムの遺伝子Ｓ（例えば、ＯＲＦ Ｓ）によってコードされるＳドメインタンパク質を指す。Ｂ型肝炎ウイルス粒子は、大きな表面タンパク質、中間の表面タンパク質及び主要な表面タンパク質である、遺伝子Ｓによってコードされる３つのタンパク質によって包まれたコア粒子内にウイルス核酸を保有する。これらのタンパク質のうち、主要な表面タンパク質は、一般に約２２６アミノ酸であり、Ｓドメインのみを含む。
【0137】
Ｂ型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）：
本明細書で使用される場合、「Ｂ型肝炎ｅ抗原」又は「ＨＢｅＡｇ」という用語はウイルス複製の指標であるが、ウイルスのいくつかのバリアントはＨＢｅＡｇを発現しない。活動性感染は、ＨＢｅＡｇが分泌されるかどうかに応じて、ＨＢｅＡｇ陽性又はＨＢｅＡｇ陰性として説明することができる。
本明細書で使用される場合、「Ｂ型肝炎ｅ抗原」又は「ＨＢｅＡｇ」という用語はウイルス複製の指標であるが、ウイルスのいくつかのバリアントはＨＢｅＡｇを発現しない。活動性感染は、ＨＢｅＡｇが分泌されるかどうかに応じて、ＨＢｅＡｇ陽性又はＨＢｅＡｇ陰性として説明することができる。
【0138】
感染
本明細書で使用される「感染」という用語は、対象におけるウイルスなどの微生物の病原性の侵入及び／又は増殖を指す。感染は溶原性であり得、例えば、ウイルスＤＮＡが細胞内に休眠している。あるいは、感染は溶解性であり得、例えば、ウイルスが活発に増殖し、感染細胞の破壊を引き起こす。感染は、臨床的に明らかな症候を引き起こしても、引き起こさなくてもよい。感染は、局所的なままであってもよく、又は、例えば、対象の血液又はリンパ系を介して伝播してもよい。例えば、ＨＢＶ感染を有する個体は、ウイルス量、表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）、及び当技術分野で公知のＨＢＶ感染を検出するための様々な他のアッセイの１つ又は複数を検出することによって識別することができる。ＨＢＶ感染を検出するためのアッセイは、ＨＢｓＡｇ及び／又はＨＢｅＡｇの存在について血清又は血液試料を試験すること、並びに任意に、ＨＢＶ抗原が検出不能なレベルであり得る任意の期間を補うために１つ又は複数のウイルス抗体（例えば、ＩｇＭ及び／又はＩｇＧ）の存在についてさらにスクリーニングすることを含み得る。
本明細書で使用される「感染」という用語は、対象におけるウイルスなどの微生物の病原性の侵入及び／又は増殖を指す。感染は溶原性であり得、例えば、ウイルスＤＮＡが細胞内に休眠している。あるいは、感染は溶解性であり得、例えば、ウイルスが活発に増殖し、感染細胞の破壊を引き起こす。感染は、臨床的に明らかな症候を引き起こしても、引き起こさなくてもよい。感染は、局所的なままであってもよく、又は、例えば、対象の血液又はリンパ系を介して伝播してもよい。例えば、ＨＢＶ感染を有する個体は、ウイルス量、表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）、及び当技術分野で公知のＨＢＶ感染を検出するための様々な他のアッセイの１つ又は複数を検出することによって識別することができる。ＨＢＶ感染を検出するためのアッセイは、ＨＢｓＡｇ及び／又はＨＢｅＡｇの存在について血清又は血液試料を試験すること、並びに任意に、ＨＢＶ抗原が検出不能なレベルであり得る任意の期間を補うために１つ又は複数のウイルス抗体（例えば、ＩｇＭ及び／又はＩｇＧ）の存在についてさらにスクリーニングすることを含み得る。
【0139】
ＨＢＶ感染
用語「Ｂ型肝炎ウイルス感染症」又は「ＨＢＶ感染症」とは、当該技術分野では一般的に知られており、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）によって引き起こされ、かつ肝臓に影響を及ぼす感染性疾患を指す。ＨＢＶ感染症は急性感染症又は慢性感染症であり得る。感染者の中には、初期感染中に症候がなく、嘔吐、黄色がかった皮膚、疲労、暗色尿及び腹痛を伴う病気を急速に発症する者もいる（「Ｂ型肝炎ファクトシート２０４番」。ｗｈｏ．ｉｎｔ．２０１４年７月。２０１４年１１月４日検索）。多くの場合、これらの症候は数週間続き、死に至る可能性がある。症候が始まるのに３０～１８０日かかることがある。出生時の頃に感染した人の９０％が慢性Ｂ型肝炎感染を発症し、５歳以降に感染した人の１０％未満が発症する（２０１１年１１月２９日に検索された米国疾病管理予防センター（ＣＤＣ）の「公衆伝染に関するＢ型肝炎のＦＡＱｓ」）。慢性疾患を有する人の大部分は症候を有しないが、肝硬変及び肝臓癌が最終的に発症し得る（Ｃｈａｎｇ，２００７，Ｓｅｍｉｎ Ｆｅｔａｌ Ｎｅｏｎａｔａｌ Ｍｅｄ，１２：１６０－１６７）。これらの合併症は、慢性疾患を有する者の１５～２５％の死亡をもたらす（「Ｂ型肝炎ファクトシート２０４番」。ｗｈｏ．ｉｎｔ．２０１４年７月。２０１４年１１月４日検索）。本明細書において、「ＨＢＶ感染」という用語は、急性及び慢性Ｂ型肝炎感染を含む。「ＨＢＶ感染」という用語はまた、ＨＢＶ感染の初期感染の無症候性段階、症候性段階、並びに無症候性慢性段階を含む。
用語「Ｂ型肝炎ウイルス感染症」又は「ＨＢＶ感染症」とは、当該技術分野では一般的に知られており、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）によって引き起こされ、かつ肝臓に影響を及ぼす感染性疾患を指す。ＨＢＶ感染症は急性感染症又は慢性感染症であり得る。感染者の中には、初期感染中に症候がなく、嘔吐、黄色がかった皮膚、疲労、暗色尿及び腹痛を伴う病気を急速に発症する者もいる（「Ｂ型肝炎ファクトシート２０４番」。ｗｈｏ．ｉｎｔ．２０１４年７月。２０１４年１１月４日検索）。多くの場合、これらの症候は数週間続き、死に至る可能性がある。症候が始まるのに３０～１８０日かかることがある。出生時の頃に感染した人の９０％が慢性Ｂ型肝炎感染を発症し、５歳以降に感染した人の１０％未満が発症する（２０１１年１１月２９日に検索された米国疾病管理予防センター（ＣＤＣ）の「公衆伝染に関するＢ型肝炎のＦＡＱｓ」）。慢性疾患を有する人の大部分は症候を有しないが、肝硬変及び肝臓癌が最終的に発症し得る（Ｃｈａｎｇ，２００７，Ｓｅｍｉｎ Ｆｅｔａｌ Ｎｅｏｎａｔａｌ Ｍｅｄ，１２：１６０－１６７）。これらの合併症は、慢性疾患を有する者の１５～２５％の死亡をもたらす（「Ｂ型肝炎ファクトシート２０４番」。ｗｈｏ．ｉｎｔ．２０１４年７月。２０１４年１１月４日検索）。本明細書において、「ＨＢＶ感染」という用語は、急性及び慢性Ｂ型肝炎感染を含む。「ＨＢＶ感染」という用語はまた、ＨＢＶ感染の初期感染の無症候性段階、症候性段階、並びに無症候性慢性段階を含む。
【0140】
肝臓炎症
本明細書で使用される「肝臓炎症」又は「肝炎」という用語は、特に肝毒性薬への曝露によって引き起こされ得る損傷又は感染の結果として、肝臓が腫脹、機能不全及び／又は有痛性になる身体症状を指す。症候としては、黄疸（皮膚又は眼の黄変）、疲労、脱力感、吐き気、嘔吐、食欲不振、及び体重減少が挙げられ得る。肝臓炎症は、処置せずに放置すると、線維症、肝硬変、肝不全、又は肝臓癌に進行する可能性がある。
本明細書で使用される「肝臓炎症」又は「肝炎」という用語は、特に肝毒性薬への曝露によって引き起こされ得る損傷又は感染の結果として、肝臓が腫脹、機能不全及び／又は有痛性になる身体症状を指す。症候としては、黄疸（皮膚又は眼の黄変）、疲労、脱力感、吐き気、嘔吐、食欲不振、及び体重減少が挙げられ得る。肝臓炎症は、処置せずに放置すると、線維症、肝硬変、肝不全、又は肝臓癌に進行する可能性がある。
【0141】
肝線維症
本明細書で使用される「肝線維症」又は「肝臓の線維症」という用語は、炎症及び肝細胞死に起因するコラーゲン（Ｉ、ＩＩＩ、及びＩＶ）、フィブロネクチン、ウンドリン（ｕｎｄｕｌｉｎ）、エラスチン、ラミニン、ヒアルロナン、及びプロテオグリカンを含み得る細胞外マトリックスタンパク質の肝臓への過剰な蓄積を指す。肝線維症は、処置せずに放置すると、肝硬変、肝不全、又は肝臓癌に進行し得る。
本明細書で使用される「肝線維症」又は「肝臓の線維症」という用語は、炎症及び肝細胞死に起因するコラーゲン（Ｉ、ＩＩＩ、及びＩＶ）、フィブロネクチン、ウンドリン（ｕｎｄｕｌｉｎ）、エラスチン、ラミニン、ヒアルロナン、及びプロテオグリカンを含み得る細胞外マトリックスタンパク質の肝臓への過剰な蓄積を指す。肝線維症は、処置せずに放置すると、肝硬変、肝不全、又は肝臓癌に進行し得る。
【0142】
ＴＬＲ７
本明細書で使用される「ＴＬＲ７」は、任意の起源種（例えば、ヒト、マウス、ウッドチャックなど）のＴｏｌｌ様受容体７を指す。
本明細書で使用される「ＴＬＲ７」は、任意の起源種（例えば、ヒト、マウス、ウッドチャックなど）のＴｏｌｌ様受容体７を指す。
【0143】
ＴＬＲ７アゴニスト
本明細書中で使用される「ＴＬＲ７アゴニスト」とは、ＴＬＲ７のアゴニストとして作用する化合物のことを指す。別段示されない限り、ＴＬＲ７アゴニストは、任意の異性体（例えば、ジアステレオマー又はエナンチオマー）、塩、溶媒和物、多形などを含む任意の薬学的に許容され得る形態の化合物を含むことができる。特定の化合物に対するＴＬＲアゴニズムは、任意の適切な様式で決定され得る。例えば、試験化合物のＴＬＲアゴニズムを検出するためのアッセイは、例えば、２００２年１２月１１日に出願された米国仮特許出願第６０／４３２，６５０号に記載されており、そのようなアッセイに使用するのに適した組換え細胞株は、例えば、２００２年１２月１１日に出願された米国仮特許出願第６０／４３２，６５１号に記載されている。ＴＬＲ７アゴニストを評価するためのさらなるアッセイは、国際公開第２０１６／０９１６９８号の実施例４３に記載されるＨＥＫ２９３－Ｂｌｕｅ－ｈＴＬＲ－７細胞アッセイである（このアッセイは参照により本明細書に組み込まれる）。
本明細書中で使用される「ＴＬＲ７アゴニスト」とは、ＴＬＲ７のアゴニストとして作用する化合物のことを指す。別段示されない限り、ＴＬＲ７アゴニストは、任意の異性体（例えば、ジアステレオマー又はエナンチオマー）、塩、溶媒和物、多形などを含む任意の薬学的に許容され得る形態の化合物を含むことができる。特定の化合物に対するＴＬＲアゴニズムは、任意の適切な様式で決定され得る。例えば、試験化合物のＴＬＲアゴニズムを検出するためのアッセイは、例えば、２００２年１２月１１日に出願された米国仮特許出願第６０／４３２，６５０号に記載されており、そのようなアッセイに使用するのに適した組換え細胞株は、例えば、２００２年１２月１１日に出願された米国仮特許出願第６０／４３２，６５１号に記載されている。ＴＬＲ７アゴニストを評価するためのさらなるアッセイは、国際公開第２０１６／０９１６９８号の実施例４３に記載されるＨＥＫ２９３－Ｂｌｕｅ－ｈＴＬＲ－７細胞アッセイである（このアッセイは参照により本明細書に組み込まれる）。
【0144】
ジアステレオマージアステレオマー
本明細書において用いられる用語「ジアステレオマー」とは、２つ以上のキラル中心を有し、その分子が互いに鏡像ではない立体異性体を意味する。ジアステレオマーは、例えば、融点、沸点、スペクトル特性、活性及び反応性等の異なる物理特性を有する。
本明細書において用いられる用語「ジアステレオマー」とは、２つ以上のキラル中心を有し、その分子が互いに鏡像ではない立体異性体を意味する。ジアステレオマーは、例えば、融点、沸点、スペクトル特性、活性及び反応性等の異なる物理特性を有する。
【0145】
１個又は数個のキラル中心を含む一般式（Ｉ）～（Ｖ）の化合物は、ラセミ体、ジアステレオマー混合物、又は光学活性単一異性体のいずれかとして存在することができる。ラセミ体は、既知の方法に従ってエナンチオマーに分離することができる。特に、結晶化によって分離することができるジアステレオマー塩は、例えば、Ｄ－若しくはＬ－酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸、乳酸又はカンファースルホン酸などの光学活性酸との反応によって、ラセミ混合物から形成される。
【0146】
薬学的に許容され得る塩
本発明による化合物は、その薬学的に許容され得る塩の形態で存在し得る。
本発明による化合物は、その薬学的に許容され得る塩の形態で存在し得る。
【0147】
用語「薬学的に許容され得る塩」は、生物学的に又はそれ以外の点で望ましくないものではない、遊離塩基又は遊離酸の生物学的な有効性及び特性を保持する塩を指す。塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、特に塩酸、並びに、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、サリチル酸、Ｎ－アセチルシステインなどの有機酸と共に形成される。
【0148】
あるいは、これらの塩は、無機塩基又は有機塩基を遊離酸に加えることによって調製することができる。無機塩基から誘導される塩には、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウムの塩が含まれるがこれらに限定されない。有機塩基から誘導される塩には、第一級、第二級、及び第三級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環式アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えばイソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、リジン、アルギニン、Ｎ－エチルピペリジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂の塩が含まれるが、これらに限定されない。式（Ｉ）の化合物は、双性イオンの形態で存在することもできる。特に好ましくは、式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容され得る塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、及びメタンスルホン酸の塩である。
【0149】
医薬化合物の塩への化学修飾は、化合物の物理的及び化学的安定性、吸湿性、流動性並びに溶解性を改善するために、医薬系化学者に周知の技法である。例えば、Ｂａｓｔｉｎ，Ｏｒｇａｎｉｃ Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ２０００，４，４２７－４３５又はＡｎｓｅｌ，Ｉｎ：Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，６ｔｈ ｅｄ．（１９９５），ｐｐ．１９６及び１４５６－１４５７に記載されている。例えば、本明細書で提供される化合物の薬学的に許容され得る塩は、ナトリウム塩であり得る。
【0150】
医薬組合せ
本明細書で使用される医薬組合せは、疾患を処置するための少なくとも２つの異なるＨＢＶ治療薬、例えば活性化合物又はプロドラッグ（医療用化合物又は医薬）の組合せとして理解される。医薬組合せは、物理的、化学的、又は他の方法で組み合わせられる化合物（例えば、同じバイアル内）；一緒にパッケージ化される化合物（例えば、同時投与又は別々の投与のいずれかのための同じパッケージ（パーツのキット）内の２つの別々の物体として）；又は別々に提供されているが一緒に使用されることが意図されている化合物（例えば、組合せが化合物ラベル、説明書又は添付文書に明示的に記載されている）を含み得る。一実施形態では、医薬組合せは、経口投与用に製剤化された医療用化合物及び皮下注射用に製剤化された医療用化合物からなる。
本明細書で使用される医薬組合せは、疾患を処置するための少なくとも２つの異なるＨＢＶ治療薬、例えば活性化合物又はプロドラッグ（医療用化合物又は医薬）の組合せとして理解される。医薬組合せは、物理的、化学的、又は他の方法で組み合わせられる化合物（例えば、同じバイアル内）；一緒にパッケージ化される化合物（例えば、同時投与又は別々の投与のいずれかのための同じパッケージ（パーツのキット）内の２つの別々の物体として）；又は別々に提供されているが一緒に使用されることが意図されている化合物（例えば、組合せが化合物ラベル、説明書又は添付文書に明示的に記載されている）を含み得る。一実施形態では、医薬組合せは、経口投与用に製剤化された医療用化合物及び皮下注射用に製剤化された医療用化合物からなる。
【0151】
おおよそ
本明細書で使用する場合、「おおよそ」又は「約」という用語は、関心対象の１つ以上の値に適用される場合、記載された参照値と同様の値を指す。ある特定の実施形態では、「おおよそ」又は「約」という用語は、特に記載がない限り、又は文脈から特に明白でない限り、記載された参照値のいずれかの方向（より大きいか又はより小さい）において、２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％又はそれより低い範囲内に収まる値の範囲を指す（このような数が、可能な値の１００％を超過するであろう場合を除く）。
本明細書で使用する場合、「おおよそ」又は「約」という用語は、関心対象の１つ以上の値に適用される場合、記載された参照値と同様の値を指す。ある特定の実施形態では、「おおよそ」又は「約」という用語は、特に記載がない限り、又は文脈から特に明白でない限り、記載された参照値のいずれかの方向（より大きいか又はより小さい）において、２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％又はそれより低い範囲内に収まる値の範囲を指す（このような数が、可能な値の１００％を超過するであろう場合を除く）。
【0152】
投与
本明細書で使用される「投与する」又は「投与」という用語は、薬理学的に有用な様式（例えば、対象における症状を処置するため）で対象に物質（例えば、医薬組合せ又はオリゴヌクレオチド）を提供することを意味する。
本明細書で使用される「投与する」又は「投与」という用語は、薬理学的に有用な様式（例えば、対象における症状を処置するため）で対象に物質（例えば、医薬組合せ又はオリゴヌクレオチド）を提供することを意味する。
【0153】
アシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）
本明細書で使用される「アシアロ糖タンパク質受容体」又は「ＡＳＧＰＲ」という用語は、主要な４８ｋＤａのサブユニット（ＡＳＧＰＲ－１）と副次的な４０ｋＤａのサブユニット（ＡＳＧＰＲ－２）によって形成される二成分Ｃ型レクチンを指す。ＡＳＧＰＲは、主に肝細胞の類洞表面に発現され、末端ガラクトース残基又はＮ－アセチルガラクトサミン残基（アシアロ糖タンパク質）を含有する循環糖タンパク質の結合、内在化、及びその後のクリアランスにおいて主要な役割を果たす。
本明細書で使用される「アシアロ糖タンパク質受容体」又は「ＡＳＧＰＲ」という用語は、主要な４８ｋＤａのサブユニット（ＡＳＧＰＲ－１）と副次的な４０ｋＤａのサブユニット（ＡＳＧＰＲ－２）によって形成される二成分Ｃ型レクチンを指す。ＡＳＧＰＲは、主に肝細胞の類洞表面に発現され、末端ガラクトース残基又はＮ－アセチルガラクトサミン残基（アシアロ糖タンパク質）を含有する循環糖タンパク質の結合、内在化、及びその後のクリアランスにおいて主要な役割を果たす。
【0154】
プロドラッグ
本明細書で使用される「プロドラッグ」という用語は、所望の薬理学的効果をもたらすために、生体内で、例えば生物学的流体又は酵素によって、投与後に対象によって化合物の薬理学的に活性な形態に代謝される化合物の形態又は誘導体を指す。プロドラッグは、例えば、Ｒｉｃｈａｒｄ Ｂ．ＳｉｌｖｅｒｍａｎによるＯｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｃｔｉｏｎ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，２００４，Ｃｈａｐｔｅｒ ８ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，ｐｐ．４９７－５５８に記載されている。
本明細書で使用される「プロドラッグ」という用語は、所望の薬理学的効果をもたらすために、生体内で、例えば生物学的流体又は酵素によって、投与後に対象によって化合物の薬理学的に活性な形態に代謝される化合物の形態又は誘導体を指す。プロドラッグは、例えば、Ｒｉｃｈａｒｄ Ｂ．ＳｉｌｖｅｒｍａｎによるＯｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｃｔｉｏｎ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，２００４，Ｃｈａｐｔｅｒ ８ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，ｐｐ．４９７－５５８に記載されている。
【0155】
対象
本明細書で使用される「対象」という用語は、マウス、ウサギ、及びヒトを含む任意の哺乳動物を意味する。一実施形態では、対象は、ヒト又は非ヒト霊長類である。「個体」又は「患者」という用語は、「対象」と互換的に使用され得る。
本明細書で使用される「対象」という用語は、マウス、ウサギ、及びヒトを含む任意の哺乳動物を意味する。一実施形態では、対象は、ヒト又は非ヒト霊長類である。「個体」又は「患者」という用語は、「対象」と互換的に使用され得る。
【0156】
処置
本明細書で使用される「処置」、「処置すること」、「処置する」などの用語は、一般に、所望の薬理学的及び／又は生理学的効果を得ることを意味する。この効果は、疾患及び／又は疾患に起因する有害作用を部分的又は完全に治癒するという点で治療的である。効果は、既存の症状（例えば、既存のＨＢＶ感染）に関して対象の健康及び／又は幸福を改善する目的で、又は、症状の発生の可能性を予防又は低下させる目的（例えば、肝線維症、肝炎、肝臓癌又はＨＢＶ感染に関連する他の症状を予防すること）で、治療剤（例えば、医薬組合せ又はオリゴヌクレオチド）を対象に投与することによって提供される。本明細書で使用される「処置」という用語は、対象におけるＨＢＶ感染の任意の処置を包含し、以下を含む：（ａ）疾患を阻害すること、すなわち、ＨＢｓＡｇ及び／又はＨＢｅＡｇの増加を阻害することのように、その発症を停止させること；又は、（ｂ）疾患を改善すること（すなわち、緩和）、すなわち、ＨＢｓＡｇ及び／又はＨＢｅＡｇ産生の抑制のように、疾患の退縮を引き起こすこと。したがって、ＨＢＶ感染を改善及び／又は阻害する化合物又は化合物の組合せは、ＨＢＶ感染を処置する化合物又は化合物の組合せである。好ましくは、本明細書で使用される「処置」という用語は、既に定義され顕在化したＨＢＶ感染、特に慢性ＨＢＶ感染の処置のような、既に顕在化した障害の医学的介入に関する。
本明細書で使用される「処置」、「処置すること」、「処置する」などの用語は、一般に、所望の薬理学的及び／又は生理学的効果を得ることを意味する。この効果は、疾患及び／又は疾患に起因する有害作用を部分的又は完全に治癒するという点で治療的である。効果は、既存の症状（例えば、既存のＨＢＶ感染）に関して対象の健康及び／又は幸福を改善する目的で、又は、症状の発生の可能性を予防又は低下させる目的（例えば、肝線維症、肝炎、肝臓癌又はＨＢＶ感染に関連する他の症状を予防すること）で、治療剤（例えば、医薬組合せ又はオリゴヌクレオチド）を対象に投与することによって提供される。本明細書で使用される「処置」という用語は、対象におけるＨＢＶ感染の任意の処置を包含し、以下を含む：（ａ）疾患を阻害すること、すなわち、ＨＢｓＡｇ及び／又はＨＢｅＡｇの増加を阻害することのように、その発症を停止させること；又は、（ｂ）疾患を改善すること（すなわち、緩和）、すなわち、ＨＢｓＡｇ及び／又はＨＢｅＡｇ産生の抑制のように、疾患の退縮を引き起こすこと。したがって、ＨＢＶ感染を改善及び／又は阻害する化合物又は化合物の組合せは、ＨＢＶ感染を処置する化合物又は化合物の組合せである。好ましくは、本明細書で使用される「処置」という用語は、既に定義され顕在化したＨＢＶ感染、特に慢性ＨＢＶ感染の処置のような、既に顕在化した障害の医学的介入に関する。
【0157】
いくつかの実施形態では、処置は、対象が経験する症状（例えば、ＨＢＶ感染又は関連する症状）の少なくとも１つの徴候、症候又は寄与因子の頻度又は重症度を減少させることを含む。ＨＢＶ感染の間、対象は、皮膚及び眼の黄変（黄疸）、暗色尿、極度の疲労、悪心、嘔吐及び腹痛などの症候を示し得る。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書で提供される処置、例えば医薬組合せは、そのような症候の１つ又は複数の頻度又は重症度の減少をもたらし得る。しかしながら、ＨＢＶ感染は、肝硬変、肝線維症、肝臓炎症又は肝臓癌などの１つ又は複数の肝臓症状に発展し得る。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書で提供される処置、例えば医薬組合せは、そのような症状の１つ又は複数の、頻度若しくは重症度の減少、又は予防若しくは軽減をもたらし得る。
【0158】
治療有効量
「治療有効量」という用語は、対象へ投与されると、（ｉ）特定の疾患、症状若しくは障害を処置する若しくは予防する、（ｉｉ）特定の疾患、症状若しくは障害のうちの１つ以上の症候を減弱させる、寛解させる、若しくは除去する、又は（ｉｉｉ）本明細書に説明する特定の疾患、症状若しくは障害のうちの１つ以上の症候の発症を予防する若しくは遅延させる、本発明の化合物又は医薬組合せの量を表す。治療有効量は、化合物、処置される疾患の状態、処置される疾患の重症度、対象の齢及び相対的な健康状態、投与の経路及び形式、担当の医師又は獣医の判断、並びに他の因子によって変わることになる。
「治療有効量」という用語は、対象へ投与されると、（ｉ）特定の疾患、症状若しくは障害を処置する若しくは予防する、（ｉｉ）特定の疾患、症状若しくは障害のうちの１つ以上の症候を減弱させる、寛解させる、若しくは除去する、又は（ｉｉｉ）本明細書に説明する特定の疾患、症状若しくは障害のうちの１つ以上の症候の発症を予防する若しくは遅延させる、本発明の化合物又は医薬組合せの量を表す。治療有効量は、化合物、処置される疾患の状態、処置される疾患の重症度、対象の齢及び相対的な健康状態、投与の経路及び形式、担当の医師又は獣医の判断、並びに他の因子によって変わることになる。
【0159】
賦形剤
本明細書で使用される「賦形剤」という用語は、例えば、所望の稠度又は安定化効果を提供又は寄与するために、医薬組合せの一部である医薬を含む組成物の１つ又は複数に含まれ得る非治療剤を指す。
本明細書で使用される「賦形剤」という用語は、例えば、所望の稠度又は安定化効果を提供又は寄与するために、医薬組合せの一部である医薬を含む組成物の１つ又は複数に含まれ得る非治療剤を指す。
【発明を実施するための形態】
【0160】
発明の詳細な説明
本発明は、少なくとも２つのＨＢＶ治療薬を含む医薬組合せに関する。より詳細には、本発明は、本明細書で定義される、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを含む医薬組合せに関する。
本発明は、少なくとも２つのＨＢＶ治療薬を含む医薬組合せに関する。より詳細には、本発明は、本明細書で定義される、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを含む医薬組合せに関する。
【0161】
ここで、本発明の医薬組合せに使用されるＨＢＶ治療薬及び投薬計画を詳細に説明する。
【0162】
ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬は、治療的利益を達成するために使用することができるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである。このＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡの発現を減少させることができる。
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬は、治療的利益を達成するために使用することができるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである。このＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡの発現を減少させることができる。
【0163】
一実施形態では、本発明の医薬組合せ中のＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡを標的とするオリゴヌクレオチドである。
【0164】
一実施形態では、本発明の医薬組合せ中のＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡを標的とし、それによりＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡの発現を減少させるオリゴヌクレオチドである。
【0165】
ＨＢＶ表面抗原ｍＲＮＡの検査及び異なるオリゴヌクレオチドの試験を通して、ＨＢＶ感染を処置するためにＨＢＶ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）の発現を減少させるための強力なオリゴヌクレオチドが開発された。本明細書で提供されるＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、いくつかの実施形態では、すべての既知の遺伝子型にわたって既知のＨＢＶゲノムの＞９５％をカバーするＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡ配列を標的とするように設計される。いくつかの実施形態において、そのようなオリゴヌクレオチドは、本発明の医薬組合せの一部として使用される場合、肝臓においてＨＢＶプレゲノムＲＮＡ（ｐｇＲＮＡ）及びＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡの９０％を超える減少をもたらす。いくつかの実施形態では、ＨＢｓＡｇ発現の減少は、医薬組合せの処置レジメン後に長期間持続する。
【0166】
したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、細胞内の転写物を標的化し、その発現を阻害する目的で、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡに対して相補性の領域を有するように設計される。相補性の領域は、一般に、オリゴヌクレオチド（又はその鎖）をＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡに、その発現を阻害する目的でアニーリングすることを可能にするのに適した長さ及び塩基含有量である。いくつかの実施形態では、相補性の領域は、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９又は少なくとも２０ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるオリゴヌクレオチドは、１２～３０（例えば、１２～３０、１２～２２、１５～２５、１７～２１、１８～２７、１９～２７、又は１５～３０）ヌクレオチド長の範囲にあるＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡに対して相補性の領域を有する。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９又は３０ヌクレオチド長である、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡに対して相補性の領域を有する。
【0167】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、ＨＢｓＡｇをコードするｍＲＮＡ配列を標的とするように設計される。例えば、いくつかの実施形態では、以下に示される配列に対して相補性の領域を有するアンチセンス鎖を有するＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが提供される：ＡＣＡＡＮＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡ（配列番号１）、式中、Ｎは任意のヌクレオチド（Ａ、Ｇ、Ｔ／Ｕ、又はＣ）を指す。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、アンチセンス鎖と二重鎖領域を形成するセンス鎖をさらに含む。いくつかの実施形態では、センス鎖は、以下に示される配列に対して相補性の領域を有する：ＵＵＮＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＮ（配列番号２）。いくつかの実施形態では、センス鎖は、以下に示される配列（５’から３’に示される）に対して相補性の領域を含む：ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＮＵＵＧＵＣ（配列番号３）。
【0168】
いくつかの実施形態では、アンチセンス鎖は、以下に示される配列を含むか、又はそれからなる：ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＮＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号４）。いくつかの実施形態では、アンチセンス鎖は、以下に示される配列を含むか、又はそれからなる：ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＣＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号５）。いくつかの実施形態では、アンチセンス鎖は、以下に示される配列を含むか、又はそれからなる：ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＵＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号６）。いくつかの実施形態では、センス鎖は、以下に示される配列を含むか、又はそれからなる：ＡＣＡＡＮＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡ（配列番号７）。いくつかの実施形態では、センス鎖は、以下に示される配列を含むか、又はそれからなる：ＧＡＣＡＡＮＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号８）。いくつかの実施形態では、センス鎖は、以下に示される配列を含むか、又はそれからなる：ＧＡＣＡＡＡＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号９）。いくつかの実施形態では、センス鎖は、以下に示される配列を含むか、又はそれからなる：ＧＡＣＡＡＧＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号１０）。
【0169】
いくつかの実施形態では、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡの発現を減少させるためのＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、アンチセンス鎖と二重鎖領域を形成するセンス鎖を含み、該センス鎖は、配列番号７～１０のいずれか１つに記載の配列を含み、該アンチセンス鎖は、配列番号４～６のいずれか１つに記載の配列を含む。いくつかの実施形態では、センス鎖は、２’－フルオロ及び２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド並びに少なくとも１つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む。いくつかの実施形態では、センス鎖は、Ｎ－アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）部分にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態では、アンチセンス鎖は、２’－フルオロ及び２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド並びに少なくとも１つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む。いくつかの実施形態では、アンチセンス鎖の５’－ヌクレオチドの糖の４’－炭素は、リン酸類似体を含む。いくつかの実施形態では、アンチセンス鎖及びセンス鎖の各々は、２’－フルオロ及び２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド並びに少なくとも１つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含み、アンチセンス鎖の５’－ヌクレオチドの糖の４’－炭素は、リン酸類似体を含み、センス鎖は、Ｎ－アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）部分にコンジュゲートされている。
【0170】
いくつかの実施形態では、配列番号８～１０のいずれか１つに記載の配列を含むセンス鎖は、３位、８～１０位、１２位、１３位及び１７位の位置に２’－フルオロ修飾ヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、センス鎖は、１位、２位、４～７位、１１位、１４～１６位、１８～２６位及び３１～３６位に２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、センス鎖は、１つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む。いくつかの実施形態では、センス鎖は、１位と２位のヌクレオチド間にホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む。いくつかの実施形態では、センス鎖は、Ｎ－アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）部分にコンジュゲートされる。
【0171】
いくつかの実施形態では、配列番号４～６のいずれか１つに記載の配列を含むアンチセンス鎖は、２、３、５、７、８、１０、１２、１４、１６及び１９位に２’－フルオロ修飾ヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、アンチセンス鎖は、１、４、６、９、１１、１３、１５、１７、１８及び２０～２２位に２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、アンチセンス鎖は、３つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む。いくつかの実施形態では、アンチセンス鎖は、１と２位のヌクレオチド間、２と３位のヌクレオチド間、３と４位のヌクレオチド間、２０と２１位のヌクレオチド間、及び、２１と２２位のヌクレオチド間のホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む。いくつかの実施形態では、アンチセンス鎖の５’－ヌクレオチドの糖の４’－炭素は、リン酸類似体を含む。
【0172】
本発明の医薬組合せにおける一実施形態では、ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、１９～３０ヌクレオチド長のアンチセンス鎖を含むオリゴヌクレオチドであり、アンチセンス鎖は、ＡＣＡＡＮＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡ（配列番号１）（Ｎは、任意のヌクレオチドＡ、Ｇ、Ｃ又はＴ／Ｕを指すことができる）として示されるＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡの配列に対して相補性の領域を含む。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、アンチセンス鎖と二重鎖領域を形成するセンス鎖をさらに含む。いくつかの実施形態では、センス鎖は、ＵＵＮＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＮ（配列番号２）として示される配列に対して相補性の領域を有する：いくつかの実施形態では、センス鎖は、ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＮＵＵＧＵＣ（配列番号３）として示される（５’から３’に示される）配列に対して相補性の領域を含む。
【0173】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおけるＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、Ｂ型肝炎ウイルス表面抗原（ＨＢｓＡｇ）ｍＲＮＡの発現を減少させるためのオリゴヌクレオチドであり、該オリゴヌクレオチドは、アンチセンス鎖と二重鎖領域を形成するセンス鎖を含み、
センス鎖は、配列ＧＡＣＡＡＡＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号９）であって、３位、８～１０位、１２位、１３位及び１７位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、２位、４～７位、１１位、１４～１６位、１８～２６位及び３１～３６位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間のホスホロチオエート結合を含む、配列からなり、センス鎖上の－ＧＡＡＡ－配列の各ヌクレオチドは、一価ＧａｌＮａｃ部分にコンジュゲートされており；
アンチセンス鎖は、配列ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＵＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号６）であって、２位、３位、５位、７位、８位、１０位、１２位、１４位、１６位及び１９位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、４位、６位、９位、１１位、１３位、１５位、１７位、１８位及び２０～２２位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間、２位と３位のヌクレオチド間、３位と４位のヌクレオチド間、２０位と２１位のヌクレオチド間、及び２１位と２２位のヌクレオチド間のホスホロチオエート結合を含む、配列からなり、
アンチセンス鎖の５’－ヌクレオチドの糖の４’－炭素は、メトキシホスホネート（ＭＯＰ）を含む。
センス鎖は、配列ＧＡＣＡＡＡＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号９）であって、３位、８～１０位、１２位、１３位及び１７位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、２位、４～７位、１１位、１４～１６位、１８～２６位及び３１～３６位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間のホスホロチオエート結合を含む、配列からなり、センス鎖上の－ＧＡＡＡ－配列の各ヌクレオチドは、一価ＧａｌＮａｃ部分にコンジュゲートされており；
アンチセンス鎖は、配列ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＵＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号６）であって、２位、３位、５位、７位、８位、１０位、１２位、１４位、１６位及び１９位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、４位、６位、９位、１１位、１３位、１５位、１７位、１８位及び２０～２２位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間、２位と３位のヌクレオチド間、３位と４位のヌクレオチド間、２０位と２１位のヌクレオチド間、及び２１位と２２位のヌクレオチド間のホスホロチオエート結合を含む、配列からなり、
アンチセンス鎖の５’－ヌクレオチドの糖の４’－炭素は、メトキシホスホネート（ＭＯＰ）を含む。
【0174】
好ましい実施形態では、本発明の医薬組合せにおけるＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、アンチセンス鎖と二重鎖領域を形成するセンス鎖を含むオリゴヌクレオチドであり、
センス鎖は、配列ＧＡＣＡＡＡＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号９）であって、３位、８～１０位、１２位、１３位及び１７位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、２位、４～７位、１１位、１４～１６位、１８～２６位及び３１～３６位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間の１つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む、配列を含み、センス鎖上の－ＧＡＡＡ－配列の各ヌクレオチドは、一価ＧａｌＮａｃ部分にコンジュゲートされており、－ＧＡＡＡ－配列は、以下の構造：
を含み、
アンチセンス鎖は、ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＵＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号６）に記載の配列であって、２位、３位、５位、７位、８位、１０位、１２位、１４位、１６位及び１９位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、４位、６位、９位、１１位、１３位、１５位、１７位、１８位及び２０－２２位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びにヌクレオチド１と２、２と３、３と４、２０と２１、及び２１と２２の間に５つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む、配列を含み、アンチセンス鎖の５’－ヌクレオチドは、以下の構造：
又はその薬学的に許容され得る塩を有している。本発明の医薬組合せで使用されるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドのこの定義は、本明細書では「Ｔ１」又は「治療薬Ｔ１」と呼ばれる。
センス鎖は、配列ＧＡＣＡＡＡＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号９）であって、３位、８～１０位、１２位、１３位及び１７位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、２位、４～７位、１１位、１４～１６位、１８～２６位及び３１～３６位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間の１つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む、配列を含み、センス鎖上の－ＧＡＡＡ－配列の各ヌクレオチドは、一価ＧａｌＮａｃ部分にコンジュゲートされており、－ＧＡＡＡ－配列は、以下の構造：
【化3】
アンチセンス鎖は、ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＵＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号６）に記載の配列であって、２位、３位、５位、７位、８位、１０位、１２位、１４位、１６位及び１９位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、４位、６位、９位、１１位、１３位、１５位、１７位、１８位及び２０－２２位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びにヌクレオチド１と２、２と３、３と４、２０と２１、及び２１と２２の間に５つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む、配列を含み、アンチセンス鎖の５’－ヌクレオチドは、以下の構造：
【化4】
【0175】
特定の具体的な実施形態では、Ｔ１は、図５の分子としてさらに定義され得る。
【0176】
一実施形態では、ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドを皮下投与する。
【0177】
一実施形態では、ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１２ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．１ｍｇ／ｋｇ～約９ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．５ｍｇ／ｋｇ～約７ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．５ｍｇ／ｋｇ～約６．５ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約１ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約１．５ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約２ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇ、最も好ましくは約３ｍｇ／ｋｇ又は約６ｍｇ／ｋｇの初回用量で投与される。
【0178】
一実施形態では、ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、約６～約８００ｍｇ、好ましくは約１００ｍｇ、約２００ｍｇ又は約４００ｍｇの初回用量で投与される。
【0179】
一実施形態では、初回用量は単回用量であるか、又は投与される唯一の用量である。
【0180】
一実施形態では、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１２ｍｇ／ｋｇの量のＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの１又は複数の後続用量が投与される。一実施形態では、後続用量（複数可）は、約１．５ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ又は約６ｍｇ／ｋｇである。
【0181】
一実施形態では、約６ｍｇ～約８００ｍｇである量のオリゴヌクレオチドの１又は複数の後続用量が投与される。一実施形態では、後続用量（複数可）は、約１００ｍｇ、約２００ｍｇ又は約４００ｍｇである。
【0182】
一実施形態では、各用量は、２週間に少なくとも約１回、３週間に少なくとも約１回、４週間に少なくとも約１回、５週間に少なくとも約１回、６週間に少なくとも約１回、７週間に少なくとも約１回、又は８週間に少なくとも約１回投与される。一実施形態では、用量は、少なくとも約４週間、互いに時間的に分離される。一実施形態では、約１ｍｇ／ｋｇ～６ｍｇ／ｋｇの用量が投与され、それぞれ少なくとも約４週間分離される。
【0183】
一実施形態では、用量は、約４週間、互いに時間的に分離され、約４８週間、約２４週間、約３ヶ月又は約１２週間の期間にわたって投与される。
【0184】
一実施形態では、用量の各々の間の期間は、約４週間、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月又は約６ヶ月からなる群から独立して選択される。
【0185】
本発明の医薬組合せにおけるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドのさらに有用な定義及び置換を以下に提供する。
【0186】
Ｉ．ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡを標的化するための二本鎖オリゴヌクレオチド
ＲＮＡｉ、ｍｉＲＮＡなどを含む、本開示の医薬組合せにおけるＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡ発現を標的化するのに有用なオリゴヌクレオチドの様々な構造が存在する。本明細書又は他の場所に記載される構造のいずれも、本明細書に記載の配列を組み込む又は標的とするためのフレームワークとして使用され得る。ＨＢＶ抗原発現を（例えば、ＲＮＡｉ経路を介して）標的とするための二本鎖オリゴヌクレオチドは、一般に、互いに二重鎖を形成するセンス鎖及びアンチセンス鎖を有する。いくつかの実施形態では、センス鎖及びアンチセンス鎖は共有結合していない。しかしながら、いくつかの実施形態では、センス鎖及びアンチセンス鎖は共有結合している。
ＲＮＡｉ、ｍｉＲＮＡなどを含む、本開示の医薬組合せにおけるＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡ発現を標的化するのに有用なオリゴヌクレオチドの様々な構造が存在する。本明細書又は他の場所に記載される構造のいずれも、本明細書に記載の配列を組み込む又は標的とするためのフレームワークとして使用され得る。ＨＢＶ抗原発現を（例えば、ＲＮＡｉ経路を介して）標的とするための二本鎖オリゴヌクレオチドは、一般に、互いに二重鎖を形成するセンス鎖及びアンチセンス鎖を有する。いくつかの実施形態では、センス鎖及びアンチセンス鎖は共有結合していない。しかしながら、いくつかの実施形態では、センス鎖及びアンチセンス鎖は共有結合している。
【0187】
本発明のいくつかの実施形態では、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡ発現の発現を減少させるための二本鎖オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）に関与する。例えば、ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、１～５ヌクレオチドの少なくとも１つの３’オーバーハングを有する１９～２５ヌクレオチドのサイズを有する各鎖を用いて開発されている（例えば、米国特許第８，３７２，９６８号を参照されたい）。Ｄｉｃｅｒによって処理されて活性ＲＮＡｉ産物を生成する、より長いオリゴヌクレオチドも開発されている（例えば、米国特許第８，８８３，９９６号を参照されたい）。さらなる研究により、鎖の１つが熱力学的に安定化するテトラループ構造を含む構造を含む、少なくとも１つの鎖の少なくとも１つの末端が二重鎖標的化領域を超えて伸長された伸長二本鎖オリゴヌクレオチドが生成された（例えば、米国特許第８，５１３，２０７号及び第８，９２７，７０５号、並びに国際公開第２０１００３３２２５号を参照されたい。これらのオリゴヌクレオチドの開示について、参照により本明細書に組み込まれる）。そのような構造は、一本鎖伸長（分子の片側又は両側）並びに二本鎖伸長を含み得る。
【0188】
いくつかの実施形態では、本明細書において提供されるオリゴヌクレオチドは、Ｄｉｃｅｒ酵素によって切断可能である。そのようなオリゴヌクレオチドは、センス鎖の３’末端にオーバーハング（例えば、１、２又は３ヌクレオチド長）を有し得る。そのようなオリゴヌクレオチド（例えば、ｓｉＲＮＡ）は、標的ＲＮＡ及び相補的なパッセンジャー鎖に対してアンチセンスである２１ヌクレオチドガイド鎖を含み得、両鎖はアニールして１９ｂｐの二重鎖及び３’末端のいずれか又は両方に２つのヌクレオチドオーバーハングを形成する。２３ヌクレオチドのガイド鎖及び２１ヌクレオチドのパッセンジャー鎖を有するオリゴヌクレオチドを含むより長いオリゴヌクレオチド設計も利用可能であり、分子の右側（パッセンジャー鎖の３’末端／ガイド鎖の５’末端）に平滑末端があり、分子の左側（パッセンジャー鎖の５’末端／ガイド鎖の３’末端）に２ヌクレオチドの３’ガイド鎖オーバーハングがある。そのような分子には、２１塩基対の二重鎖領域が存在する。例えば、米国特許第９０１２１３８号、米国特許第９０１２６２１号、及び米国特許第９１９３７５３号を参照されたい。これらの各々は、それらの関連する開示について本明細書に組み込まれる。
【0189】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるオリゴヌクレオチドは、両方とも１７～２６（例えば、１７～２６、２０～２５、１９～２１又は２１～２３）ヌクレオチド長の範囲にあるセンス鎖及びアンチセンス鎖を含み得る。いくつかの実施形態では、センス鎖及びアンチセンス鎖は、等しい長さである。いくつかの実施形態では、両方とも２１～２３ヌクレオチド長の範囲にあるセンス鎖及びアンチセンス鎖を有するオリゴヌクレオチドの場合、センス鎖、アンチセンス鎖、又はセンス鎖及びアンチセンス鎖の両方の３’オーバーハングは、１又は２ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、２３ヌクレオチドのガイド鎖及び２１ヌクレオチドのパッセンジャー鎖を有し、分子の右側（パッセンジャー鎖の３’末端／ガイド鎖の５’末端）に平滑末端があり、分子の左側（パッセンジャー鎖の５’末端／ガイド鎖の３’末端）に２ヌクレオチドの３’ガイド鎖オーバーハングがある。そのような分子には、２１塩基対の二重鎖領域が存在する。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、ｄｉｃｅｒ酵素によって作用されると、成熟ＲＩＳＣに組み込まれるアンチセンス鎖をもたらす２５ヌクレオチドのセンス鎖及び２７ヌクレオチドのアンチセンス鎖を含む。
【0190】
本明細書に開示される組成物及び方法で使用するための他のオリゴヌクレオチド設計には、１６量体ｓｉＲＮＡ（例えば、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ ｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ．Ｂｌａｃｋｂｕｒｎ（ｅｄ．），Ｒｏｙａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００６を参照）、ｓｈＲＮＡ（例えば、１９ｂｐ又はそれより短いステムを有する；例えば、Ｍｏｏｒｅ ｅｔ ａｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０１０；６２９：１４１－１５８）を参照）、ブラントｓｉＲＮＡ（例えば、長さ１９ｂｐｓ；例えば、Ｋｒａｙｎａｃｋ ａｎｄ Ｂａｋｅｒ，ＲＮＡ Ｖｏｌ．１２，ｐ１６３－１７６（２００６）を参照）、非対称ｓｉＲＮＡ（ａｉＲＮＡ；例えば、Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２６，１３７９－１３８２（２００８）を参照）、非対称短鎖二重鎖ｓｉＲＮＡ（例えば、Ｃｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．２００９ Ａｐｒ；１７（４）：７２５－３２を参照）、フォークｓｉＲＮＡ（例えば、Ｈｏｈｊｏｈ，ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，Ｖｏｌ ５５７，ｉｓｓｕｅｓ １－３；Ｊａｎ ２００４，ｐ １９３－１９８を参照）、一本鎖ｓｉＲＮＡ（Ｅｌｓｎｅｒ；Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ３０，１０６３（２０１２））、ダンベル形状環状ｓｉＲＮＡ（例えば、Ａｂｅ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ａｍ Ｃｈｅｍ Ｓｏｃ １２９：１５１０８－１５１０９（２００７）を参照）、及び、低分子内部セグメント化干渉ＲＮＡ（ｓｉｓｉＲＮＡ；例えば、Ｂｒａｍｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２００７ Ｓｅｐ；３５（１７）：５８８６－５８９７を参照）が含まれる。前述の参考文献の各々は、その中の関連する開示についてその全体が参照により組み込まれる。ＨＢｓＡｇの発現を低減又は阻害するためにいくつかの実施形態において医薬組合せで使用され得るオリゴヌクレオチド構造のさらなる非限定的な例は、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、短ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、及び短ｓｉＲＮＡである（例えば、Ｈａｍｉｌｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｅｍｂｏ Ｊ．，２００２，２１（１７）：４６７１－４６７９を参照；米国特許出願第２００９００９９１１５号も参照）。
【0191】
ａ．アンチセンス鎖
いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドのアンチセンス鎖は、「ガイド鎖」と呼ばれる場合がある。例えば、アンチセンス鎖がＲＮＡ誘導性サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）と係合してアルゴノートタンパク質に結合することができるか、又は１つ若しくは複数の同様の因子と係合若しくは結合し、標的遺伝子の直接サイレンシングを行うことができる場合、それはガイド鎖と呼ばれ得る。いくつかの実施形態において、ガイドストランドと相補的なセンス鎖は、「パッセンジャー鎖」と呼ばれ得る。
いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドのアンチセンス鎖は、「ガイド鎖」と呼ばれる場合がある。例えば、アンチセンス鎖がＲＮＡ誘導性サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）と係合してアルゴノートタンパク質に結合することができるか、又は１つ若しくは複数の同様の因子と係合若しくは結合し、標的遺伝子の直接サイレンシングを行うことができる場合、それはガイド鎖と呼ばれ得る。いくつかの実施形態において、ガイドストランドと相補的なセンス鎖は、「パッセンジャー鎖」と呼ばれ得る。
【0192】
いくつかの実施形態において、本明細書中に提供されるオリゴヌクレオチドは、最大５０ヌクレオチド長（例えば、最大３０、最大２７、最大２５、最大２１、又は最大１９ヌクレオチド長）のアンチセンス鎖を含む。いくつかの実施形態において、本明細書中に提供されるオリゴヌクレオチドは、少なくとも１２ヌクレオチド長（例えば、少なくとも１２、少なくとも１５、少なくとも１９、少なくとも２１、少なくとも２５、又は少なくとも２７ヌクレオチド長）であるアンチセンス鎖を含む。いくつかの実施形態において、本明細書中に開示されるオリゴヌクレオチドのアンチセンス鎖は、１２～５０又は１２～３０（例えば、１２～３０、１１～２７、１１～２５、１５～２１、１５～２７、１７～２１、１７～２５、１９～２７、又は１９～３０）ヌクレオチド長の範囲内である。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるオリゴヌクレオチドのいずれか１つのアンチセンス鎖は、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、又は５０ヌクレオチド長である。
【0193】
ｂ．センス鎖
いくつかの実施形態において、二本鎖オリゴヌクレオチドは、最大４０ヌクレオチド長（例えば、最大４０、最大３５、最大３０、最大２７、最大２５、最大２１、最大１９、最大１７、又は最大１２ヌクレオチド長）のセンス鎖を有し得る。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１２ヌクレオチド長（例えば、少なくとも１２、少なくとも１５、少なくとも１９、少なくとも２１、少なくとも２５、少なくとも２７、少なくとも３０、少なくとも３５、又は少なくとも３８ヌクレオチド長）のセンス鎖を有し得る。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、１２～５０（例えば、１２～４０、１２～３６、１２～３２、１２～２８、１５～４０、１５～３６、１５～３２、１５～２８、１７～２１、１７～２５、１９～２７、１９～３０、２０～４０、２２～４０、２５～４０、又は３２～４０）ヌクレオチド長の範囲のセンス鎖を有し得る。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、又は４０ヌクレオチド長のセンス鎖を有し得る。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドのセンス鎖は、２７ヌクレオチドよりも長い（例えば、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０ヌクレオチド）。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドのセンス鎖は、２５ヌクレオチドよりも長い（例えば、２６、２７、２８、２９又は３０ヌクレオチド）。
いくつかの実施形態において、二本鎖オリゴヌクレオチドは、最大４０ヌクレオチド長（例えば、最大４０、最大３５、最大３０、最大２７、最大２５、最大２１、最大１９、最大１７、又は最大１２ヌクレオチド長）のセンス鎖を有し得る。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１２ヌクレオチド長（例えば、少なくとも１２、少なくとも１５、少なくとも１９、少なくとも２１、少なくとも２５、少なくとも２７、少なくとも３０、少なくとも３５、又は少なくとも３８ヌクレオチド長）のセンス鎖を有し得る。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、１２～５０（例えば、１２～４０、１２～３６、１２～３２、１２～２８、１５～４０、１５～３６、１５～３２、１５～２８、１７～２１、１７～２５、１９～２７、１９～３０、２０～４０、２２～４０、２５～４０、又は３２～４０）ヌクレオチド長の範囲のセンス鎖を有し得る。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、又は４０ヌクレオチド長のセンス鎖を有し得る。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドのセンス鎖は、２７ヌクレオチドよりも長い（例えば、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０ヌクレオチド）。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドのセンス鎖は、２５ヌクレオチドよりも長い（例えば、２６、２７、２８、２９又は３０ヌクレオチド）。
【0194】
いくつかの実施形態において、センス鎖は、その３’末端にステムループを含む。いくつかの実施形態において、センス鎖は、その５’末端にステムループを含む。いくつかの実施形態において、ステムループを含む鎖は、２～６６ヌクレオチド長（例えば、２～６６、１０～５２、１４～４０、２～３０、４～２６、８～２２、１２～１８、１０～２２、１４～２６、又は１４～３０ヌクレオチド長）の範囲である。いくつかの実施形態において、ステムループを含む鎖は、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９又は３０ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、ステムは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３又は１４ヌクレオチド長の二重鎖を含む。いくつかの実施形態において、ステムループは、分解（例えば、酵素分解）に対する分子のより良好な保護を提供し、標的細胞への送達のための標的化特性を容易にする。例えば、いくつかの実施形態では、ループは、オリゴヌクレオチドの遺伝子発現阻害活性に実質的に影響を与えることなく修飾を行うことができる付加ヌクレオチドを提供する。ある特定の実施形態において、ここで、センス鎖が以下に記載されるステムループを（例えばその３’末端に）含むオリゴヌクレオチドが本明細書中に提供される：Ｓ１－Ｌ－Ｓ２であって、式中、Ｓ１はＳ２と相補的であり、ＬはＳ１とＳ２との間に最大１０ヌクレオチド長（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０ヌクレオチド長）のループを形成する。
【0195】
いくつかの実施形態において、ステムループのループ（Ｌ）は、テトラループ（例えば、ニックが入ったテトラループ構造内）である。テトラループは、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、修飾ヌクレオチド、及びそれらの組合せを含み得る。典型的には、テトラループは４～５ヌクレオチドを有する。
【0196】
ｃ．二重鎖の長さ
いくつかの実施形態において、センス鎖とアンチセンス鎖との間に形成される二重鎖は、少なくとも１２（例えば、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、少なくとも２０、又は少なくとも２１）ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、センス鎖とアンチセンス鎖との間に形成される二重鎖は、１２～３０ヌクレオチド長（例えば、１２～３０、１２～２７、１２～２２、１５～２５、１８～３０、１８～２２、１８～２５、１８～２７、１８～３０、１９～３０又は２１～３０ヌクレオチド長）の範囲である。いくつかの実施形態において、センス鎖とアンチセンス鎖との間に形成される二重鎖は、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９又は３０ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、センス鎖とアンチセンス鎖との間に形成される二重鎖は、センス鎖及び／又はアンチセンス鎖の全長に及んでいない。いくつかの実施形態において、センス鎖とアンチセンス鎖との間の二重鎖は、センス鎖又はアンチセンス鎖のいずれかの全長に及ぶ。ある特定の実施形態において、センス鎖とアンチセンス鎖との間の二重鎖は、センス鎖とアンチセンス鎖の両方の全長に及ぶ。
いくつかの実施形態において、センス鎖とアンチセンス鎖との間に形成される二重鎖は、少なくとも１２（例えば、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、少なくとも２０、又は少なくとも２１）ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、センス鎖とアンチセンス鎖との間に形成される二重鎖は、１２～３０ヌクレオチド長（例えば、１２～３０、１２～２７、１２～２２、１５～２５、１８～３０、１８～２２、１８～２５、１８～２７、１８～３０、１９～３０又は２１～３０ヌクレオチド長）の範囲である。いくつかの実施形態において、センス鎖とアンチセンス鎖との間に形成される二重鎖は、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９又は３０ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態において、センス鎖とアンチセンス鎖との間に形成される二重鎖は、センス鎖及び／又はアンチセンス鎖の全長に及んでいない。いくつかの実施形態において、センス鎖とアンチセンス鎖との間の二重鎖は、センス鎖又はアンチセンス鎖のいずれかの全長に及ぶ。ある特定の実施形態において、センス鎖とアンチセンス鎖との間の二重鎖は、センス鎖とアンチセンス鎖の両方の全長に及ぶ。
【0197】
ｄ．オリゴヌクレオチド末端
いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、センス鎖及びアンチセンス鎖を含み、それにより、センス鎖若しくはアンチセンス鎖のいずれか、又はセンス鎖及びアンチセンス鎖の両方に３’－オーバーハングが存在する。いくつかの実施形態において、本明細書において提供されるオリゴヌクレオチドは、他の５’末端と比較して熱力学的に安定でない１つの５’末端を有する。いくつかの実施形態において、センス鎖の３’末端に平滑末端を含み、アンチセンス鎖の３’末端にオーバーハングを含む非対称オリゴヌクレオチドが提供される。いくつかの実施形態において、アンチセンス鎖上の３’オーバーハングは１～８ヌクレオチド長（例えば、１、２、３、４、５、６、７又は８ヌクレオチド長）である。
いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、センス鎖及びアンチセンス鎖を含み、それにより、センス鎖若しくはアンチセンス鎖のいずれか、又はセンス鎖及びアンチセンス鎖の両方に３’－オーバーハングが存在する。いくつかの実施形態において、本明細書において提供されるオリゴヌクレオチドは、他の５’末端と比較して熱力学的に安定でない１つの５’末端を有する。いくつかの実施形態において、センス鎖の３’末端に平滑末端を含み、アンチセンス鎖の３’末端にオーバーハングを含む非対称オリゴヌクレオチドが提供される。いくつかの実施形態において、アンチセンス鎖上の３’オーバーハングは１～８ヌクレオチド長（例えば、１、２、３、４、５、６、７又は８ヌクレオチド長）である。
【0198】
典型的には、ＲＮＡｉのオリゴヌクレオチドは、アンチセンス（ガイド）鎖の３’末端に２つのヌクレオチドオーバーハングを有する。しかしながら、他のオーバーハングも可能である。いくつかの実施形態において、オーバーハングは、１～６ヌクレオチド、任意に、１～５、１～４、１～３、１～２、２～６、２～５、２～４、２～３、３～６、３～５、３～４、４～６、４～５、５～６ヌクレオチド又は１、２、３、４、５又は６ヌクレオチドの長さを含む３’オーバーハングである。しかしながら、いくつかの実施形態では、オーバーハングは、１～６ヌクレオチド、任意に、１～５、１～４、１～３、１～２、２～６、２～５、２～４、２～３、３～６、３～５、３～４、４～６、４～５、５～６ヌクレオチド、又は１、２、３、４、５又は６ヌクレオチドの長さを含む５’オーバーハングである。
【0199】
いくつかの実施形態において、センス鎖及び／又はアンチセンス鎖の３’末端又は５’末端の１つ又は複数（例えば、２、３、４個）の末端ヌクレオチドが修飾される。例えば、いくつかの実施形態において、アンチセンス鎖の３’末端の１つ又は２つの末端ヌクレオチドが修飾される。いくつかの実施形態において、アンチセンス鎖の３’末端の最後のヌクレオチドは、修飾されており、例えば、２’－修飾、例えば、２’－Ｏ－メトキシエチルを含む。いくつかの実施形態において、アンチセンス鎖の３’末端における最後の１つ又は２つの末端ヌクレオチドは標的と相補的である。いくつかの実施形態において、アンチセンス鎖の３’末端における最後の１つ又は２つのヌクレオチドは標的と相補的ではない。
【0200】
いくつかの実施形態において、ニックが入ったテトラループ構造を３’末端センス鎖に有し、そのアンチセンス鎖の３’末端に２つの末端オーバーハングヌクレオチドを有する二本鎖オリゴヌクレオチドが提供される。いくつかの実施形態において、２つの末端オーバーハングヌクレオチドはＧＧである。典型的には、アンチセンス鎖の２つの末端ＧＧヌクレオチドの一方又は両方は、標的と相補的であるか、又は相補的ではない。
【0201】
いくつかの実施形態において、センス鎖又はアンチセンス鎖の５’末端及び／又は３’末端は逆キャップヌクレオチドを有する。
【0202】
いくつかの実施形態において、１つ又は複数（例えば、２、３、４、５、６個）の修飾ヌクレオチド間結合が、センス鎖及び／又はアンチセンス鎖の３’末端又は５’末端の末端ヌクレオチドの間に提供される。いくつかの実施形態において、修飾ヌクレオチド間結合が、センス鎖及び／又はアンチセンス鎖の３’末端又は５’末端におけるオーバーハングヌクレオチドの間に提供される。
【0203】
ｅ．ミスマッチ
いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、センス鎖とアンチセンス鎖との間に１つ又は複数（例えば、１、２、３、４、５個）のミスマッチを有し得る。センス鎖とアンチセンス鎖との間に２つ以上のミスマッチがある場合、それらは連続的に（例えば、連続して２、３又はそれ以上）配置され得るか、又は相補性の領域全体に散在し得る。いくつかの実施形態において、センス鎖の３’末端は、１つ又は複数のミスマッチを含有する。一実施形態において、２つのミスマッチがセンス鎖の３’末端に組み込まれる。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドのセンス鎖の３’末端におけるセグメントの塩基ミスマッチ又は不安定化は、おそらくＤｉｃｅｒによるプロセシングを促進することによって、ＲＮＡｉにおける合成二重鎖の効力を改善した。
いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、センス鎖とアンチセンス鎖との間に１つ又は複数（例えば、１、２、３、４、５個）のミスマッチを有し得る。センス鎖とアンチセンス鎖との間に２つ以上のミスマッチがある場合、それらは連続的に（例えば、連続して２、３又はそれ以上）配置され得るか、又は相補性の領域全体に散在し得る。いくつかの実施形態において、センス鎖の３’末端は、１つ又は複数のミスマッチを含有する。一実施形態において、２つのミスマッチがセンス鎖の３’末端に組み込まれる。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドのセンス鎖の３’末端におけるセグメントの塩基ミスマッチ又は不安定化は、おそらくＤｉｃｅｒによるプロセシングを促進することによって、ＲＮＡｉにおける合成二重鎖の効力を改善した。
【0204】
いくつかの実施形態では、アンチセンス鎖は、対応する転写物配列と比較して１つ又は複数のミスマッチを含むＨＢｓＡｇ転写物に対して相補性の領域を有し得る。オリゴヌクレオチド上の相補性の領域は、適切なハイブリダイゼーション条件下で転写物と相補的塩基対を形成する能力を維持する限り、最大１、最大２、最大３、最大４、最大５などのミスマッチを有し得る。あるいは、オリゴヌクレオチドの相補性の領域は、適切なハイブリダイゼーション条件下でＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡと相補的塩基対を形成する能力を維持する限り、１個以下、２個以下、３個以下、４個以下又は５個以下のミスマッチを有し得る。いくつかの実施形態では、相補性の領域に２つ以上のミスマッチがある場合、オリゴヌクレオチドが適切なハイブリダイゼーション条件下でＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡと相補的塩基対を形成する能力を維持する限り、それらは連続的に（例えば、連続して２、３、４、又はそれ以上）配置されるか、又は相補性の領域全体に散在し得る。
【0205】
ＩＩ．一本鎖オリゴヌクレオチド
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＨＢｓＡｇ発現を減少させるためのＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡと相補性を有する一本鎖オリゴヌクレオチドである。そのような構造には、一本鎖ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが含まれ得るが、これらに限定されない。最近の試みにより、一本鎖ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの活性が実証されている（例えば、Ｍａｔｓｕｉ ｅｔ ａｌ．（Ｍａｙ ２０１６），Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｖｏｌ．２４（５），９４６－９５５を参照されたい）。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＨＢｓＡｇ発現を減少させるためのＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡと相補性を有する一本鎖オリゴヌクレオチドである。そのような構造には、一本鎖ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが含まれ得るが、これらに限定されない。最近の試みにより、一本鎖ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの活性が実証されている（例えば、Ｍａｔｓｕｉ ｅｔ ａｌ．（Ｍａｙ ２０１６），Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｖｏｌ．２４（５），９４６－９５５を参照されたい）。
【0206】
そのような一本鎖ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、技術的にはアンチセンスオリゴヌクレオチドと見なされ得るが、依然としてＲＮＡ干渉の機構を介して機能することができ、ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドについて本明細書に記載されるような特徴を有する。
【0207】
ＩＩＩ．オリゴヌクレオチド修飾
このセクションで論じられる修飾は、本発明のＲＮＡｉオリゴヌクレオチドでの実施に特に好ましい。
このセクションで論じられる修飾は、本発明のＲＮＡｉオリゴヌクレオチドでの実施に特に好ましい。
【0208】
オリゴヌクレオチドは、特異性、安定性、送達、バイオアベイラビリティ、ヌクレアーゼ分解からの耐性、免疫原性、塩基対形成特性、ＲＮＡ分布及び細胞取り込み、並びに治療的又は研究的使用に関連する他の特徴を改善又は制御するために様々な方法で修飾され得る。例えば、Ｂｒａｍｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，２００９，３７，２８６７－２８８１；Ｂｒａｍｓｅｎ ａｎｄ Ｋｊｅｍｓ（Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，３（２０１２）：１－２２）を参照のこと。したがって、いくつかの実施形態において、本開示の治療用オリゴヌクレオチドは、１つ又は複数の適切な修飾を含んでいてもよい。いくつかの実施形態において、修飾ヌクレオチドは、その塩基（又は核酸塩基）、糖（例えば、リボース、デオキシリボース）又はリン酸基において修飾を有する。
【0209】
オリゴヌクレオチド上の修飾の数及びそれらのヌクレオチド修飾の位置は、オリゴヌクレオチドの特性に影響を及ぼし得る。例えば、オリゴヌクレオチドは、それらを脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）又は同様の担体にコンジュゲートさせるか又は包含することによって、インビボで送達され得る。しかしながら、オリゴヌクレオチドがＬＮＰ又は同様の担体によって保護されていない場合、そのヌクレオチドの少なくともいくつかが修飾されることが有利であり得る。したがって、本明細書中に提供される治療用オリゴヌクレオチドのいずれかの特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドのヌクレオチドのすべて又は実質的にすべてが修飾される。ある特定の実施形態では、ヌクレオチドの半分よりも多くが修飾される。ある特定の実施形態では、ヌクレオチドの半分未満が修飾される。典型的には、裸の送達では、すべての糖が２’位で修飾される。これらの修飾は可逆的又は不可逆的であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるオリゴヌクレオチドは、所望の特徴（例えば、酵素分解からの保護、インビボ投与後に所望の細胞を標的化する能力、及び／又は熱力学的安定性）を引き起こすのに十分な数及び種類の修飾ヌクレオチドを有する。
【0210】
ＩＶ．糖修飾
いくつかの実施形態では、修飾された糖（本明細書では糖類似体とも呼ばれる）は、修飾されたデオキシリボース又はリボース部分を含み、例えば、１つ又は複数の修飾が糖の２’、３’、４’及び／又は５’炭素位置で起こる。いくつかの実施形態では、修飾された糖はまた、非天然の代替炭素構造、例えば、ロックド核酸（「ＬＮＡ」）（例えばＫｏｓｈｋｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９９８），Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ５４，３６０７－３６３０を参照）、アンロックド核酸（「ＵＮＡ」）（例えば、Ｓｎｅａｄ ｅｔ ａｌ．（２０１３），Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ－Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ，２，ｅ１０３を参照）、及び架橋核酸（「ＢＮＡ」）（例えば、Ｉｍａｎｉｓｈｉ ａｎｄ Ｏｂｉｋａ（２００２），Ｔｈｅ Ｒｏｙａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１６５３－１６５９を参照）に存在するものを含み得る。Ｋｏｓｈｋｉｎ ｅｔ ａｌ．、Ｓｎｅａｄ ｅｔ ａｌ．、及び、Ｉｍａｎｉｓｈｉ ａｎｄ Ｏｂｉｋａは、糖修飾に関するそれらの開示について参照により本明細書に組み込まれる。
いくつかの実施形態では、修飾された糖（本明細書では糖類似体とも呼ばれる）は、修飾されたデオキシリボース又はリボース部分を含み、例えば、１つ又は複数の修飾が糖の２’、３’、４’及び／又は５’炭素位置で起こる。いくつかの実施形態では、修飾された糖はまた、非天然の代替炭素構造、例えば、ロックド核酸（「ＬＮＡ」）（例えばＫｏｓｈｋｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９９８），Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ５４，３６０７－３６３０を参照）、アンロックド核酸（「ＵＮＡ」）（例えば、Ｓｎｅａｄ ｅｔ ａｌ．（２０１３），Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ－Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ，２，ｅ１０３を参照）、及び架橋核酸（「ＢＮＡ」）（例えば、Ｉｍａｎｉｓｈｉ ａｎｄ Ｏｂｉｋａ（２００２），Ｔｈｅ Ｒｏｙａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１６５３－１６５９を参照）に存在するものを含み得る。Ｋｏｓｈｋｉｎ ｅｔ ａｌ．、Ｓｎｅａｄ ｅｔ ａｌ．、及び、Ｉｍａｎｉｓｈｉ ａｎｄ Ｏｂｉｋａは、糖修飾に関するそれらの開示について参照により本明細書に組み込まれる。
【0211】
いくつかの実施形態において、糖におけるヌクレオチド修飾は、２’修飾を含む。２’修飾は、２’－アミノエチル、２’－フルオロ、２’－Ｏ－メチル、２’－Ｏ－メトキシエチル、及び２’－デオキシ－２’－フルオロ－β－ｄ－アラビノ核酸であり得る。典型的には、修飾は、２’－フルオロ、２’－Ｏ－メチル又は２’－Ｏ－メトキシエチルである。いくつかの実施形態では、糖の修飾は、糖環の修飾を含み、これは糖環の１つ又は複数の炭素の修飾を含み得る。例えば、ヌクレオチドの糖の修飾は、糖の２’－酸素が糖の１’－炭素又は４’－炭素に結合しているか、又は２’－酸素がエチレン又はメチレン架橋を介して１’－炭素又は４’－炭素に結合していることを含み得る。いくつかの実施形態において、修飾ヌクレオチドは、２’－炭素－３’－炭素結合を欠く非環式糖を有する。いくつかの実施形態において、修飾ヌクレオチドは、例えば糖の４’位にチオール基を有する。
【0212】
いくつかの実施形態において、末端３’－末端基（例えば、３’－ヒドロキシル）は、リン酸基又は他の基であり、例えば、リンカー、アダプター若しくは標識を付着させるために、又はオリゴヌクレオチドを別の核酸に直接ライゲーションするために使用することができる。
【0213】
Ｖ．５’末端リン酸
いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドの５’末端リン酸基は、アルゴノート２との相互作用を増強する。しかしながら、５’－リン酸基を含むオリゴヌクレオチドは、ホスファターゼ又は他の酵素を介して分解されやすく、インビボでのそれらのバイオアベイラビリティを制限する可能性がある。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、そのような分解に耐性の５’リン酸の類似体を含む。いくつかの実施形態では、リン酸類似体は、オキシメチルホスホネート、ビニルホスホネート、又はマロニルホスホネートであり得る。ある特定の実施形態では、オリゴヌクレオチド鎖の５’末端は、天然の５’リン酸基（「リン酸模倣物」）の静電特性及び立体特性を模倣する化学部分に結合している（例えば、Ｐｒａｋａｓｈ ｅｔ ａｌ．（２０１５），Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２０１５ Ｍａｒ ３１；４３（６）：２９９３－３０１１を参照のこと。リン酸類似体に関するその内容は参照により本明細書に組み込まれる）。５’末端に結合することができる多くのリン酸模倣物が開発されている（例えば、米国特許第８，９２７，５１３号を参照されたい。リン酸類似体に関するその内容が参照により本明細書に組み込まれる）。オリゴヌクレオチドの５’末端に対する他の修飾が開発されている（例えば、国際公開第２０１１／１３３８７１号を参照されたい。リン酸類似体に関するその内容は参照により本明細書に組み込まれる）。ある特定の実施形態において、ヒドロキシル基は、オリゴヌクレオチドの５’末端に結合している。
いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドの５’末端リン酸基は、アルゴノート２との相互作用を増強する。しかしながら、５’－リン酸基を含むオリゴヌクレオチドは、ホスファターゼ又は他の酵素を介して分解されやすく、インビボでのそれらのバイオアベイラビリティを制限する可能性がある。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、そのような分解に耐性の５’リン酸の類似体を含む。いくつかの実施形態では、リン酸類似体は、オキシメチルホスホネート、ビニルホスホネート、又はマロニルホスホネートであり得る。ある特定の実施形態では、オリゴヌクレオチド鎖の５’末端は、天然の５’リン酸基（「リン酸模倣物」）の静電特性及び立体特性を模倣する化学部分に結合している（例えば、Ｐｒａｋａｓｈ ｅｔ ａｌ．（２０１５），Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２０１５ Ｍａｒ ３１；４３（６）：２９９３－３０１１を参照のこと。リン酸類似体に関するその内容は参照により本明細書に組み込まれる）。５’末端に結合することができる多くのリン酸模倣物が開発されている（例えば、米国特許第８，９２７，５１３号を参照されたい。リン酸類似体に関するその内容が参照により本明細書に組み込まれる）。オリゴヌクレオチドの５’末端に対する他の修飾が開発されている（例えば、国際公開第２０１１／１３３８７１号を参照されたい。リン酸類似体に関するその内容は参照により本明細書に組み込まれる）。ある特定の実施形態において、ヒドロキシル基は、オリゴヌクレオチドの５’末端に結合している。
【0214】
いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、糖の４’－炭素位置にリン酸類似体（「４’－リン酸類似体」と呼ばれる）を有する。例えば、２０１６年９月２日に出願され４’－Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ａｎａｌｏｇｓ ａｎｄ Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ Ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ ｔｈｅ Ｓａｍｅと題された米国仮特許出願第６２／３８３，２０７号、及び、２０１６年９月１２日に出願され４’－Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ａｎａｌｏｇｓ ａｎｄ Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ Ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ ｔｈｅ Ｓａｍｅと題された米国仮特許出願第６２／３９３，４０１号 を参照されたい。これらの各々のリン酸類似体に関する内容は、参照により本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態において、本明細書において提供されるオリゴヌクレオチドは、５’末端ヌクレオチドに４’－リン酸類似体を含む。いくつかの実施形態では、リン酸類似体は、オキシメチル基の酸素原子が糖部分（例えばその４’－炭素）に結合しているオキシメチルホスホネート又はその類似体である。他の実施形態では、４’リン酸類似体は、チオメチルホスホネート又はアミノメチルホスホネート（チオメチル基の硫黄原子又はアミノメチル基の窒素原子が糖部分の４’－炭素に結合している）又はその類似体である。ある特定の実施形態において、４’リン酸類似体は、オキシメチルホスホネートである。いくつかの実施形態では、オキシメチルホスホネートは、式－Ｏ－ＣＨ２－ＰＯ（ＯＨ）２又は－Ｏ－ＣＨ２－ＰＯ（ＯＲ）２で表され、式中、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３アルキル基、ＣＨ２ＣＨ２ＣＮ、ＣＨ２ＯＣＯＣ（ＣＨ３）３、ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２Ｓｉ（ＣＨ３）３、又は保護基から独立して選択される。ある特定の実施形態において、アルキル基は、ＣＨ２ＣＨ３である。より典型的には、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３又はＣＨ２ＣＨ３から独立して選択される。
【0215】
ある特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドに結合したリン酸類似体は、メトキシホスホネート（ＭＯＰ）である。ある特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドに結合したリン酸類似体は、５’モノメチル保護ＭＯＰである。いくつかの実施形態では、リン酸類似体を含む以下のウリジンヌクレオチドが、例えば、ガイド（アンチセンス）鎖の１位で使用され得：
この修飾ヌクレオチドは、［Ｍｅホスホン酸－４Ｏ－ｍＵ］又は５’－メトキシ、ホスホン酸－４’オキシ－２’－Ｏ－メチルウリジンと呼ばれる。
【化5】
【0216】
ＶＩ．修飾ヌクレオシド間結合
いくつかの実施形態において、リン酸修飾又は置換は、少なくとも１つ（例えば、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ又は少なくとも５つ）の修飾ヌクレオチド間結合を含むオリゴヌクレオチドをもたらし得る。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるオリゴヌクレオチドのいずれか１つは、１～１０個（例えば、１～１０、２～８、４～６、３～１０、５～１０、１～５、１～３、又は１～２個）の修飾ヌクレオチド間結合を含む。いくつかの実施形態において、本明細書中に開示されるオリゴヌクレオチドのいずれか１つは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の修飾ヌクレオチド間結合を含む。
いくつかの実施形態において、リン酸修飾又は置換は、少なくとも１つ（例えば、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ又は少なくとも５つ）の修飾ヌクレオチド間結合を含むオリゴヌクレオチドをもたらし得る。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるオリゴヌクレオチドのいずれか１つは、１～１０個（例えば、１～１０、２～８、４～６、３～１０、５～１０、１～５、１～３、又は１～２個）の修飾ヌクレオチド間結合を含む。いくつかの実施形態において、本明細書中に開示されるオリゴヌクレオチドのいずれか１つは、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個の修飾ヌクレオチド間結合を含む。
【0217】
修飾ヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエート結合、ホスホロチオエート結合、ホスホトリエステル結合、チオノアルキルホスホネート結合、チオノアルキルホスホトリエステル結合、ホスホラミダイト結合、ホスホネート結合又はボラノホスフェート結合であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるオリゴヌクレオチドのいずれか１つの少なくとも１つの修飾ヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエート結合である。
【0218】
ＶＩＩ．塩基修飾
いくつかの実施形態において、本明細書において提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ又は複数の修飾核酸塩基を有する。いくつかの実施形態において、修飾核酸塩基（本明細書では塩基類似体とも呼ばれる）は、ヌクレオチド糖部分の１’位に連結されている。ある特定の実施形態では、修飾核酸塩基は窒素塩基である。ある特定の実施形態では、修飾核酸塩基は窒素原子を含まない。例えば、米国特許出願公開第２００８０２７４４６２号を参照されたい。いくつかの実施形態において、修飾ヌクレオチドは、ユニバーサル塩基を含む。しかしながら、ある特定の実施形態では、修飾ヌクレオチドは核酸塩基を含有しない（脱塩基性）。
いくつかの実施形態において、本明細書において提供されるオリゴヌクレオチドは、１つ又は複数の修飾核酸塩基を有する。いくつかの実施形態において、修飾核酸塩基（本明細書では塩基類似体とも呼ばれる）は、ヌクレオチド糖部分の１’位に連結されている。ある特定の実施形態では、修飾核酸塩基は窒素塩基である。ある特定の実施形態では、修飾核酸塩基は窒素原子を含まない。例えば、米国特許出願公開第２００８０２７４４６２号を参照されたい。いくつかの実施形態において、修飾ヌクレオチドは、ユニバーサル塩基を含む。しかしながら、ある特定の実施形態では、修飾ヌクレオチドは核酸塩基を含有しない（脱塩基性）。
【0219】
いくつかの実施形態では、ユニバーサル塩基は、修飾ヌクレオチド中のヌクレオチド糖部分の１’位に位置する複素環部分、又は二重鎖中に存在する場合に二重鎖の構造を実質的に変化させることなく２種類以上の塩基の反対側に位置することができるヌクレオチド糖部分置換の等価な位置である。いくつかの実施形態では、標的核酸に完全に相補的な参照一本鎖核酸（例えば、オリゴヌクレオチド）と比較して、ユニバーサル塩基を含有する一本鎖核酸は、相補的核酸で形成された二重鎖よりも低いＴｍを有する標的核酸との二重鎖を形成する。しかし、いくつかの実施形態では、ユニバーサル塩基が塩基で置換されて単一のミスマッチが生じる参照一本鎖核酸と比較して、ユニバーサル塩基を含む一本鎖核酸は、ミスマッチ塩基を含む核酸で形成された二重鎖よりも高いＴｍを有する標的核酸との二重鎖を形成する。
【0220】
ユニバーサル結合ヌクレオチドの非限定的な例としては、イノシン、１－β－Ｄ－リボフラノシル－５－ニトロインドール、及び／又は１－β－Ｄ－リボフラノシル－３－ニトロピロールが挙げられる（Ｑｕａｙらによる米国特許出願公開米国特許第２００７０２５４３６２号明細書；Ｖａｎ Ａｅｒｓｃｈｏｔ ｅｔ ａｌ．，Ａｎ ａｃｙｃｌｉｃ ５－ｎｉｔｒｏｉｎｄａｚｏｌｅ ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ａｎａｌｏｇｕｅ ａｓ ａｍｂｉｇｕｏｕｓ ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１９９５ Ｎｏｖ １１；２３（２１）：４３６３－７０；Ｌｏａｋｅｓ ｅｔ ａｌ．，３－Ｎｉｔｒｏｐｙｒｒｏｌｅ ａｎｄ ５－ｎｉｔｒｏｉｎｄｏｌｅ ａｓ ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ｂａｓｅｓ ｉｎ ｐｒｉｍｅｒｓ ｆｏｒ ＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ａｎｄ ＰＣＲ，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１９９５ Ｊｕｌ １１；２３（１３）：２３６１－６；Ｌｏａｋｅｓ ａｎｄ Ｂｒｏｗｎ，５－Ｎｉｔｒｏｉｎｄｏｌｅ ａｓ ａｎ ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ｂａｓｅ ａｎａｌｏｇｕｅ，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１９９４ Ｏｃｔ １１；２２（２０）：４０３９－４３。上記の各々は、塩基修飾に関するそれらの開示について参照により本明細書に組み込まれる）。
【0221】
ＶＩＩＩ．可逆的修飾
標的細胞に到達する前にオリゴヌクレオチドをインビボ環境から保護するための特定の修飾を行うことができるが、それにより、一旦標的細胞の細胞質ゾルに到達するとオリゴヌクレオチドの効力又は活性を低下し得る。可逆的修飾は、分子が細胞の外側で望ましい特性を保持するように行うことができ、その後、細胞の細胞質ゾル環境に入ると除去される。可逆的修飾は、例えば、細胞内酵素の作用又は細胞内の化学的条件によって（例えば、細胞内グルタチオンによる還元を介して）除去することができる。
標的細胞に到達する前にオリゴヌクレオチドをインビボ環境から保護するための特定の修飾を行うことができるが、それにより、一旦標的細胞の細胞質ゾルに到達するとオリゴヌクレオチドの効力又は活性を低下し得る。可逆的修飾は、分子が細胞の外側で望ましい特性を保持するように行うことができ、その後、細胞の細胞質ゾル環境に入ると除去される。可逆的修飾は、例えば、細胞内酵素の作用又は細胞内の化学的条件によって（例えば、細胞内グルタチオンによる還元を介して）除去することができる。
【0222】
いくつかの実施形態では、可逆的に修飾ヌクレオチドは、グルタチオン感受性部分を含む。典型的には、核酸分子は、環状ジスルフィド部分で化学的に修飾されて、ヌクレオチド間二リン酸結合によって生成される負電荷をマスクし、細胞取り込み及びヌクレアーゼ耐性を改善する。Ｔｒａｖｅｒｓａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．に最初に譲渡された米国特許出願公開第２０１１／０２９４８６９号（「Ｔｒａｖｅｒｓａ」）、Ｓｏｌｓｔｉｃｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ，Ｌｔｄ．のＰＣＴ公開番号ＷＯ２０１５／１８８１９７（「Ｓｏｌｓｔｉｃｅ」）、Ｍｅａｄｅ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１４，３２：１２５６－１２６３（「Ｍｅａｄｅ」）、Ｍｅｒｃｋ Ｓｈａｒｐ＆Ｄｏｈｍｅ ＣｏｒｐのＰＣＴ公開番号ＷＯ２０１４／０８８９２０を参照。これらの各々は、そのような修正の開示について参照により組み込まれる。ヌクレオチド間二リン酸架橋のこの可逆的修飾は、細胞質ゾルの還元環境（例えば、グルタチオン）によって細胞内で切断されるように設計されている。以前の例には、細胞内で切断可能であると報告された中和ホスホトリエステル修飾が含まれる（Ｄｅｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００３，１２５：９４０－９５０）。
【0223】
いくつかの実施形態において、そのような可逆的修飾は、オリゴヌクレオチドがヌクレアーゼ及び他の過酷な環境条件（例えば、ｐＨ）に曝露されるインビボ投与（例えば、血液及び／又は細胞のリソソーム／エンドソーム区画を通過する）中の保護を可能にする。グルタチオンレベルが細胞外空間と比較して高い細胞の細胞質ゾルに放出されると、修飾が逆転し、切断されたオリゴヌクレオチドが得られる。可逆的グルタチオン感受性部分を使用すると、不可逆的な化学修飾を使用して利用可能な選択肢と比較して、目的のオリゴヌクレオチドに立体的により大きな化学基を導入することが可能である。これは、これらのより大きな化学基が細胞質ゾルで除去され、したがって、細胞の細胞質ゾル内のオリゴヌクレオチドの生物学的活性を妨げないからである。結果として、これらのより大きな化学基は、ヌクレアーゼ耐性、親油性、電荷、熱安定性、特異性、及び免疫原性の低下などの様々な利点をヌクレオチド又はオリゴヌクレオチドに与えるように操作することができる。いくつかの実施形態では、グルタチオン感受性部分の構造を、その放出の動態を改変するように操作することができる。
【0224】
いくつかの実施形態では、グルタチオン感受性部分は、ヌクレオチドの糖に結合している。いくつかの実施形態では、グルタチオン感受性部分は、修飾ヌクレオチドの糖の２’－炭素に結合している。いくつかの実施形態では、グルタチオン感受性部分は、特に修飾ヌクレオチドがオリゴヌクレオチドの５’末端ヌクレオチドである場合、糖の５’炭素に位置する。いくつかの実施形態では、グルタチオン感受性部分は、特に修飾ヌクレオチドがオリゴヌクレオチドの３’末端ヌクレオチドである場合、糖の３’炭素に位置する。いくつかの実施形態では、グルタチオン感受性部分はスルホニル基を含む。例えば、２０１６年８月２３日に出願されＣｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ Ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｙ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｏｆと題された米国特許仮出願第６２／３７８，６３５号を参照されたい。その内容は、その関連する開示について参照により本明細書に組み込まれる。
【0225】
ＩＸ．標的化リガンド
いくつかの実施形態において、本開示のオリゴヌクレオチドを１つ若しくは複数の細胞又は１つ若しくは複数の器官に標的化することが望ましい場合がある。そのような戦略は、他の器官における望ましくない影響を回避するのに役立ち得るか、又はオリゴヌクレオチドにとって利益にならない細胞、組織若しくは器官へのオリゴヌクレオチドの過度の喪失を回避し得る。したがって、いくつかの実施形態において、本明細書中に開示されるオリゴヌクレオチドは、特定の組織、細胞又は器官の標的化を容易にするために、例えば、肝臓へのオリゴヌクレオチドの送達を容易にするために修飾され得る。ある特定の実施形態において、本明細書中に開示されるオリゴヌクレオチドは、肝臓の肝細胞へのオリゴヌクレオチドの送達を容易にするために修飾され得る。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、１つ又は複数の標的化リガンドにコンジュゲートさせたヌクレオチドを含む。
いくつかの実施形態において、本開示のオリゴヌクレオチドを１つ若しくは複数の細胞又は１つ若しくは複数の器官に標的化することが望ましい場合がある。そのような戦略は、他の器官における望ましくない影響を回避するのに役立ち得るか、又はオリゴヌクレオチドにとって利益にならない細胞、組織若しくは器官へのオリゴヌクレオチドの過度の喪失を回避し得る。したがって、いくつかの実施形態において、本明細書中に開示されるオリゴヌクレオチドは、特定の組織、細胞又は器官の標的化を容易にするために、例えば、肝臓へのオリゴヌクレオチドの送達を容易にするために修飾され得る。ある特定の実施形態において、本明細書中に開示されるオリゴヌクレオチドは、肝臓の肝細胞へのオリゴヌクレオチドの送達を容易にするために修飾され得る。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、１つ又は複数の標的化リガンドにコンジュゲートさせたヌクレオチドを含む。
【0226】
標的化リガンドは、炭水化物、アミノ糖、コレステロール、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、又は、タンパク質（例えば、抗体又は抗体フラグメント）若しくは脂質の一部を含み得る。いくつかの実施形態において、標的化リガンドはアプタマーである。例えば、標的化リガンドは、腫瘍脈管構造又は神経膠腫細胞を標的化するために使用されるＲＧＤペプチド、腫瘍脈管構造又はストーマを標的化するためのＣＲＥＫＡペプチド、トランスフェリン、ラクトフェリン、又はＣＮＳ脈管構造上に発現されるトランスフェリン受容体を標的化するためのアプタマー、又は神経膠腫細胞上のＥＧＦＲを標的化するための抗ＥＧＦＲ抗体であり得る。ある特定の実施形態において、標的化リガンドは、１つ又は複数のＧａｌＮＡｃ部分である。
【0227】
いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドの１つ又は複数（例えば、１、２、３、４、５又は６個）のヌクレオチドは、それぞれ、別個の標的化リガンドにコンジュゲートされる。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドの２～４個のヌクレオチドは、それぞれ、別個の標的化リガンドにコンジュゲートされる。いくつかの実施形態において、標的化リガンドは、標的化リガンドが歯ブラシの剛毛に類似し、オリゴヌクレオチドが歯ブラシに類似するように、センス鎖又はアンチセンス鎖のいずれかの末端において２～４個のヌクレオチドにコンジュゲートされる（例えば、リガンドは、センス鎖又はアンチセンス鎖の５’末端又は３’末端上の２～４個のヌクレオチドのオーバーハング又は伸長にコンジュゲート化される）。例えば、オリゴヌクレオチドは、センス鎖の５’末端又は３’末端のいずれかにステムループを含み得、ステムのループの１、２、３又は４個のヌクレオチドは、標的化リガンドに個々にコンジュゲートされ得る。
【0228】
いくつかの実施形態では、ＨＢＶ抗原の発現を減少させるオリゴヌクレオチドを対象の肝臓の肝細胞に標的化することが望ましい。この目的のために、任意の適切な肝細胞標的化部分を使用してもよい。
【0229】
ＧａｌＮＡｃは、アシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）に対する高親和性リガンドであり、主に肝細胞の類洞表面に発現され、末端ガラクトース残基又はＮ－アセチルガラクトサミン残基（アシアロ糖タンパク質）を含有する循環糖タンパク質の結合、内在化、及びその後のクリアランスにおいて主要な役割を果たす。ＧａｌＮＡｃ部分の本開示のオリゴヌクレオチドへの（間接的又は直接的な）コンジュゲーションを使用して、これらのオリゴヌクレオチドをこれらの肝細胞上に発現されるＡＳＧＰＲに標的化することができる。
【0230】
いくつかの実施形態において、本開示のオリゴヌクレオチドは、一価ＧａｌＮＡｃに直接的又は間接的にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、２つ以上の一価ＧａｌＮＡｃに直接的又は間接的にコンジュゲートされる（すなわち、２個、３個又は４個の一価のＧａｌＮＡｃ部分にコンジュゲートされ、典型的には、３個又は４個の一価のＧａｌＮＡｃ部分にコンジュゲートされる）。いくつかの実施形態において、本開示のオリゴヌクレオチドは、１つ又は複数の二価ＧａｌＮＡｃ、三価ＧａｌＮＡｃ又は四価ＧａｌＮＡｃ部分にコンジュゲートされている。
【0231】
いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドの１つ又は複数（例えば、１、２、３、４、５又は６個）のヌクレオチドは、それぞれ、ＧａｌＮＡｃ部分にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態において、ステムループのループ（Ｌ）の２～４個のヌクレオチドはそれぞれ、別個のＧａｌＮＡｃにコンジュゲートされる。いくつかの実施形態において、標的化リガンドは、ＧａｌＮＡｃ部分が歯ブラシの剛毛に類似し、オリゴヌクレオチドが歯ブラシに類似するように、センス鎖又はアンチセンス鎖のいずれかの末端において２～４個のヌクレオチドにコンジュゲートされる（例えば、リガンドは、センス鎖又はアンチセンス鎖の５’末端又は３’末端上の２～４個のヌクレオチドのオーバーハング又は伸長にコンジュゲート化される）。例えば、オリゴヌクレオチドは、センス鎖の５’末端又は３’末端のいずれかにステムループを含み得、ステムのループの１、２、３又は４個のヌクレオチドは、ＧａｌＮＡｃ部分に個々にコンジュゲートされ得る。いくつかの実施形態において、ＧａｌＮＡｃ部分は、センス鎖のヌクレオチドにコンジュゲートされる。例えば、４つのＧａｌＮＡｃ部分をセンス鎖のテトラループ中のヌクレオチドにコンジュゲートさせることができ、各ＧａｌＮＡｃ部分は１つのヌクレオチドにコンジュゲートされる。
【0232】
いくつかの実施形態では、本明細書のオリゴヌクレオチドは、以下に示すように、［ａｄｅｍＧ－ＧａｌＮＡｃ］又は２’－アミノジエトキシメタノール－グアニジン－ＧａｌＮＡｃと呼ばれるグアニジンヌクレオチドに結合した一価ＧａｌＮＡｃを含む。
【化6】
【0233】
いくつかの実施形態では、本明細書のオリゴヌクレオチドは、以下に示すように、［ａｄｅｍＡ－ＧａｌＮＡｃ］又は２’－アミノジエトキシメタノール－アデニン－ＧａｌＮＡｃと呼ばれるアデニンヌクレオチドに結合した一価ＧａｌＮＡｃを含む。
【化7】
【0234】
そのようなコンジュゲーションの例を、５’から３’にヌクレオチド配列ＧＡＡＡを含むループについて以下に示す（Ｌ＝リンカー、Ｘ＝ヘテロ原子）。ステム結合点が示される。化学式中、
はオリゴヌクレオチド鎖への結合点である。
【化8】
【化9】
【0235】
適切な方法又は化学（例えば、クリックケミストリー）を使用して、標的化リガンドをヌクレオチドに連結することができる。いくつかの実施形態では、標的化リガンドは、クリックリンカーを使用してヌクレオチドにコンジュゲートされる。いくつかの実施形態では、アセタール系リンカーは、標的化リガンドを本明細書中に記載されるオリゴヌクレオチドのいずれか１つのヌクレオチドにコンジュゲート化するために使用される。アセタール系リンカーは、例えば、２０１６年６月２３日に公開された国際特許出願公開番号ＷＯ２０１６１００４０１ Ａ１に開示されており、そのようなリンカーに関する内容は参照により本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態では、リンカーは不安定なリンカーである。しかしながら、他の実施形態では、リンカーはかなり安定である。
【0236】
ＧａｌＮＡｃ部分がアセタールリンカーを使用してループのヌクレオチドに結合している、５’から３’にヌクレオチドＧＡＡＡを含むループの例を以下に示す。化学式中、
はオリゴヌクレオチド鎖への結合点である。
【化10】
【化11】
【0237】
抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチド
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬は抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬は抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【0238】
一実施形態では、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＰＤＬ１ ｍＲＮＡのＲＮＡｓｅＨ媒介性分解を誘導するＮ－アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）コンジュゲート化ロックド核酸（ＬＮＡ）一本鎖オリゴヌクレオチド（ＳＳＯ）である。
【0239】
一実施形態では、本発明の医薬組合せ中の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、参照により本明細書に完全に組み込まれる国際公開第２０１７／１５７８９９号に開示されている。
【0240】
好ましい実施形態では、本発明の医薬組合せ中の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、国際公開第２０１７／１５７８９９号に開示されるＣＭＰ番号７６８＿２又はその薬学的に許容され得る塩である。
【0241】
一実施形態では、本発明の医薬組合せ中の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列ＣＣＴＡＴＴＴＡＡＣＡＴＣＡＧＡＣ（配列番号１１）を含む。
【0242】
好ましい実施形態では、本発明の医薬組合せ中の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、式ＧＮ２－Ｃ６ｏｃｏａｏＣＣｔａｔｔｔａａｃａｔｃＡＧＡＣ（式中、Ｃ６は６個の炭素を有するアミノアルキル基を表し、大文字はβ－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシドを表し、小文字はＤＮＡヌクレオシドを表し、すべてのＬＮＡ Ｃは５－メチルシトシンであり、下付き文字ｏはホスホジエステルヌクレオシド結合を表し、特に指示しない限り、すべてのヌクレオシド間結合はホスホロチオエートヌクレオシド間結合であり、ＧＮ２は、以下の三価ＧａｌＮＡｃクラスターを表す。
【化12】
【0243】
さらに、三価ＧａｌＮＡｃクラスターの波線は、Ｃ６アミノアルキル基への三価ＧａｌＮＡｃクラスターのコンジュゲート部位を示す）又はその薬学的に許容され得る塩を有している。本発明の医薬組合せに使用される抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドのこの定義は、本明細書では「Ｔ２」又は「治療薬Ｔ２」と呼ばれる。
【0244】
一実施形態では、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは皮下投与される。一実施形態では、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇ、又は約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１５ｍｇ／ｋｇ、又は約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、又は約０．２ ｍ／ｋｇ ｔｏ 約１０ｍｇ／ｋｇ、又は約０．２５ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、又は約０．１ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、又は約０．２ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、又は約０．２５ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【0245】
一実施形態では、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、約７ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【0246】
一実施形態では、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量は、１週間に１回、２週間ごとに１回、３週間ごとに１回又は１ヶ月に１回投与される。
【0247】
本発明の医薬組合せのさらに好ましい実施形態では、特にＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドをさらに含む場合、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを最大５回投与する。好ましくは、各用量は約３ｍｇ／ｋｇである。好ましくは、用量はＱ２Ｗ（２週間ごと）で投与される。
【0248】
Ｉ．アンチセンスオリゴヌクレオチド修飾
このセクションで論じられる修飾は、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドでの実施に特に好ましい。
このセクションで論じられる修飾は、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドでの実施に特に好ましい。
【0249】
連続核酸塩基配列（モチーフ配列）は、例えばヌクレアーゼ耐性及び／又は標的核酸に対する結合親和性を増大させるために修飾され得ることが理解される。
【0250】
一実施形態において、オリゴヌクレオチドの連続する核酸塩基配列は、少なくとも１つの修飾されたヌクレオシド間結合を含む。好適なヌクレオシド間修飾は、「修飾ヌクレオシド間結合」の「定義」セクションに記載されている。連続ヌクレオチド配列内のヌクレオシド間結合の、少なくとも７５％、例えばすべてがヌクレオシド間結合である場合、有利である。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドの連続する配列中の全てのヌクレオチド間結合は、ホスホロチオエート結合である。
【0251】
本発明のオリゴヌクレオチドは、修飾ヌクレオシド及びＤＮＡヌクレオシドを用いて設計される。高親和性修飾ヌクレオシドを用いることが有利である。
【0252】
一実施形態では、オリゴヌクレオチドは、少なくとも３つの修飾ヌクレオシド、例えば少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、又は少なくとも１６個の修飾ヌクレオシドを含む。一実施形態では、オリゴヌクレオチドは、３～８個の修飾ヌクレオシド、例えば４～６個の修飾ヌクレオシド、例えば４、５又は６個のヌクレオシド、例えば５又は６個の修飾ヌクレオシドを含む。好適な修飾は、「修飾ヌクレオシド」、「高親和性修飾ヌクレオシド」、「糖修飾」、「２’糖修飾」、及びロックド核酸（ＬＮＡ）の「定義」セクションに記載されている。
【0253】
一実施形態では、オリゴヌクレオチドは、１つ以上の糖修飾ヌクレオシド、例えば２’糖修飾ヌクレオシドを含む。好ましくは、本発明のオリゴヌクレオチドは、２’－Ｏ－アルキル－ＲＮＡ、２’－Ｏ－メチル－ＲＮＡ、２’－アルコキシ－ＲＮＡ、２’－Ｏ－メトキシエチル－ＲＮＡ、２’－アミノ－ＤＮＡ、２’－フルオロ－ＤＮＡ、アラビノ核酸（ＡＮＡ）、２’－フルオロ－ＡＮＡ、及びＬＮＡヌクレオシドからなる群から独立して選択される１つ以上の２’糖修飾ヌクレオシドを含む。修飾ヌクレオシド（複数可）の１つ又は複数又は全てがロックド核酸（ＬＮＡ）である場合、有利である。
【0254】
いくつかの実施形態では、本発明のオリゴヌクレオチド、例えば連続ヌクレオチド配列は、少なくとも１つのＬＮＡヌクレオシド、例えば１、２、３、４、５、６、７又は８個のＬＮＡヌクレオシド、例えば２～６個のＬＮＡヌクレオシド、例えば３～６個のＬＮＡヌクレオシド、４～６個のＬＮＡヌクレオシド、又は４、５若しくは６個のＬＮＡヌクレオシドを含む。
【0255】
いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドの修飾ヌクレオシドの少なくとも７５％、例えば修飾ヌクレオシドの少なくとも８０％、例えば少なくとも８５％、例えば少なくとも９０％がＬＮＡヌクレオシドである。なおさらなる実施形態では、オリゴヌクレオチドの修飾ヌクレオシドの全ては、ＬＮＡヌクレオシドである。さらなる実施形態では、ＬＮＡヌクレオシドは、ベータ－Ｄ－オキシＬＮＡ、チオＬＮＡ、アミノＬＮＡ、オキシＬＮＡ、ＳｃＥＴ及び／又はＥＮＡから、ベータ－Ｄ若しくはアルファ－Ｌ配置又はそれらの組合せで選択される。さらなる実施形態では、全てのＬＮＡヌクレオシドはベータ－Ｄ－オキシＬＮＡである。さらなる実施形態では、シトシン単位は、５－メチル－シトシンである。オリゴヌクレオチド又は連続ヌクレオチド配列のヌクレアーゼ安定性にとって、ヌクレオチド配列の５’末端に少なくとも１つのＬＮＡヌクレオシドと３’末端に少なくとも２つのＬＮＡヌクレオシドとを有することが有利である。
【0256】
ＴＬＲ７アゴニスト
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬はＴＬＲ７アゴニストである。
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬はＴＬＲ７アゴニストである。
【0257】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおけるＴＬＲ７アゴニストは、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト活性を有する３－置換５－アミノ－６Ｈ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－２，７－ジオン化合物又はそのプロドラッグである。国際公開第２００６／０６６０８０号、国際公開第２０１６／０５５５５３号及び国際公開第２０１６／０９１６９８号には、そのようなＴＬＲ７アゴニスト及びそれらのプロドラッグ並びにそれらの製造が記載されている（参照により本明細書に組み込まれる）。
【0258】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおけるＴＬＲ７アゴニストは、式（Ｉ）：
（式中、ＸはＣＨ２又はＳであり、
Ｒ１は－ＯＨ又は－Ｈであり、
Ｒ２は、１－ヒドロキシプロピル又はヒドロキシメチルである）
又は式（ＩＩ）：
（式中、ＸはＣＨ２又はＳであり、
Ｒ１は、－ＯＨ又は－Ｈ又はアセトキシであり、
Ｒ２は、１－アセトキシプロピル又は１－ヒドロキシプロピル又は１－ヒドロキシメチル又はアセトキシ（シクロプロピル）メチル又はアセトキシ（プロピン－１－イル）メチルである）
によって表される、又はその薬学的に許容され得る塩、エナンチオマー若しくはジアステレオマーである。式（Ｉ）の化合物は、活性ＴＬＲ７アゴニストである。
【化13】
Ｒ１は－ＯＨ又は－Ｈであり、
Ｒ２は、１－ヒドロキシプロピル又はヒドロキシメチルである）
又は式（ＩＩ）：
【化14】
Ｒ１は、－ＯＨ又は－Ｈ又はアセトキシであり、
Ｒ２は、１－アセトキシプロピル又は１－ヒドロキシプロピル又は１－ヒドロキシメチル又はアセトキシ（シクロプロピル）メチル又はアセトキシ（プロピン－１－イル）メチルである）
によって表される、又はその薬学的に許容され得る塩、エナンチオマー若しくはジアステレオマーである。式（Ｉ）の化合物は、活性ＴＬＲ７アゴニストである。
【0259】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおける式（Ｉ）の活性ＴＬＲ７アゴニストのサブセットは、式（Ｖ）：
（式中、Ｒ１は－ＯＨであり、Ｒ２は１－ヒドロキシプロピル又はヒドロキシメチルである）
によって表される、又はその薬学的に許容され得る塩、エナンチオマー若しくはジアステレオマーである。
【化15】
によって表される、又はその薬学的に許容され得る塩、エナンチオマー若しくはジアステレオマーである。
【0260】
一実施形態では、式（Ｉ）又は（Ｖ）のＲ２の置換基は、
から選択される。
【化16】
【0261】
式（ＩＩ）の化合物は、ＴＬＲ７アゴニストプロドラッグである。一実施形態では、プロドラッグは、Ｒ２に、
から選択される置換基を有する単一のプロドラッグである。
【化17】
【0262】
一実施形態では、プロドラッグは、Ｒ２に、
から選択される置換基を有する二重プロドラッグである。
【化18】
【0263】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおける式（ＩＩ）のＴＬＲ７アゴニストプロドラッグのサブセットは、式（ＩＩＩ）：
（式中、Ｒ１は－ＯＨ又はアセトキシであり、Ｒ２は１－アセトキシプロピル又は１－ヒドロキシプロピル又は１－ヒドロキシメチル又は
である）
によって表される、又はその薬学的に許容され得る塩、エナンチオマー若しくはジアステレオマーであるか；
又は式（ＩＶ）：
（式中、Ｒ１は、アセトキシ（シクロプロピル）メチル又はアセトキシ（プロピン－１－イル）メチルであるか、又は
である）
によって表される、又はその薬学的に許容され得る塩、エナンチオマー若しくはジアステレオマーである。
【化19】
【化20】
によって表される、又はその薬学的に許容され得る塩、エナンチオマー若しくはジアステレオマーであるか；
又は式（ＩＶ）：
【化21】
【化22】
によって表される、又はその薬学的に許容され得る塩、エナンチオマー若しくはジアステレオマーである。
【0264】
式（ＩＶ）の化合物は、Ｒ１がＯＨであり、Ｒ２が１－アセトキシプロピルである、式（ＩＩＩ）の化合物と同様に二重プロドラッグである。Ｒ１がアセトキシであり、Ｒ２が三重プロドラッグである式（ＩＩＩ）の化合物。
【0265】
投与後、式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）又は式（ＩＶ）の化合物は、有用なＴＬＲ７アゴニストであるそれらの活性形態に代謝される。
【0266】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおけるＴＬＲ７アゴニストは、
［（１Ｓ）－１－［（２Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（５－アミノ－２－オキソ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－３－イル）－４－ヒドロキシ－テトラヒドロフラン－２－イル］プロピル］アセテート（ＣＭＰ番号ＶＩ）；
５－アミノ－３－［（２Ｒ，３Ｒ，５Ｓ）－３－ヒドロキシ－５－［（１Ｓ）－１－ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン－２－イル］－６Ｈ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－２，７－ジオン（ＣＭＰ番号ＶＩＩ）；
５－アミノ－３－［（２Ｒ，３Ｒ，５Ｓ）－３－ヒドロキシ－５－［（１Ｓ）－１－ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン－２－イル］チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－２－オン（ＣＭＰ番号ＶＩＩＩ）；
５－アミノ－３－（３’－デオキシ－β－Ｄ－リボフラノシル）－３Ｈ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－２－オン（ＣＭＰ番号ＩＸ）；
５－アミノ－３－（２’－Ｏ－アセチル－３’－デオキシ－β－Ｄ－リボフラノシル）－３Ｈ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－２－オン（ＣＭＰ番号Ｘ）；
５－アミノ－３－（３’－デオキシ－β－Ｄ－リボフラノシル）－３Ｈ，６Ｈ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－２，７－ジオン（ＣＭＰ番号ＸＩ）；
［（Ｓ）－［（２Ｓ，５Ｒ）－５－（５－アミノ－２－オキソ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－３－イル）－１，３－オキサチオラン－２－イル］－シクロプロピル－メチル］アセテート（ＣＭＰ番号ＸＩＩ）；及び
（１Ｓ）－１－［（２Ｓ，５Ｒ）－５－（５－アミノ－２－オキソ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－３－イル）－１，３－オキサチオラン－２－イル］ブタ－２－イニル］アセテート（ＣＭＰ番号ＸＩＩＩ）
並びにそれらの薬学的に許容され得る塩、エナンチオマー又はジアステレオマーからなる群から選択される。
［（１Ｓ）－１－［（２Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（５－アミノ－２－オキソ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－３－イル）－４－ヒドロキシ－テトラヒドロフラン－２－イル］プロピル］アセテート（ＣＭＰ番号ＶＩ）；
５－アミノ－３－［（２Ｒ，３Ｒ，５Ｓ）－３－ヒドロキシ－５－［（１Ｓ）－１－ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン－２－イル］－６Ｈ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－２，７－ジオン（ＣＭＰ番号ＶＩＩ）；
５－アミノ－３－［（２Ｒ，３Ｒ，５Ｓ）－３－ヒドロキシ－５－［（１Ｓ）－１－ヒドロキシプロピル］テトラヒドロフラン－２－イル］チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－２－オン（ＣＭＰ番号ＶＩＩＩ）；
５－アミノ－３－（３’－デオキシ－β－Ｄ－リボフラノシル）－３Ｈ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－２－オン（ＣＭＰ番号ＩＸ）；
５－アミノ－３－（２’－Ｏ－アセチル－３’－デオキシ－β－Ｄ－リボフラノシル）－３Ｈ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－２－オン（ＣＭＰ番号Ｘ）；
５－アミノ－３－（３’－デオキシ－β－Ｄ－リボフラノシル）－３Ｈ，６Ｈ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－２，７－ジオン（ＣＭＰ番号ＸＩ）；
［（Ｓ）－［（２Ｓ，５Ｒ）－５－（５－アミノ－２－オキソ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－３－イル）－１，３－オキサチオラン－２－イル］－シクロプロピル－メチル］アセテート（ＣＭＰ番号ＸＩＩ）；及び
（１Ｓ）－１－［（２Ｓ，５Ｒ）－５－（５－アミノ－２－オキソ－チアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－３－イル）－１，３－オキサチオラン－２－イル］ブタ－２－イニル］アセテート（ＣＭＰ番号ＸＩＩＩ）
並びにそれらの薬学的に許容され得る塩、エナンチオマー又はジアステレオマーからなる群から選択される。
【0267】
表１は、本発明の医薬組合せの実施形態におけるＴＬＲ７アゴニストを、それらの製造を記載する文献の参照を含めて列挙する。
【表1-1】
【表1-2】
【0268】
本発明の医薬組合せにおける特に好ましい実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、ＣＭＰ番号ＶＩである。本発明の医薬組合せで使用されるＴＬＲ７アゴニストのこの定義は、本明細書では「Ｔ３」又は「治療薬Ｔ３」と呼ばれる。
【0269】
一実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは経口投与される。
【0270】
一実施形態では、Ｔ３は、８～２６週間、例えば１０～２４週間、例えば１２又は１３週間にわたって１日おき（ＱＯＤ）に１５０～１７０ｍｇの範囲の単位用量として経口投与され、続いて２４～４８週間、例えば３０～４０週間、例えば３５週間にわたって毎週（ＱＷ）投与される。Ｔ３の投与される用量数は、処置期間を通して６０～１００用量、例えば７５～９０用量、例えば８１、８２、８３又は８４用量である。
【0271】
好ましくは、ＴＬＲ７アゴニストは、１２週間以下の期間にわたって投与される。
【0272】
一実施形態では、Ｔ１若しくはＴ２、並びにＴ３、Ｔ１及びＴ３、又はＴ２及びＴ３を含む本発明の医薬組合せは、１ヶ月未満の間隔、例えば１週間未満の間隔、例えば２日の間隔、例えば同日に投与される。
【0273】
一実施形態では、本発明の医薬組合せ中のＴＬＲ７アゴニストは、経腸的に（例えば、経口的に又は消化管を通して）投与される。本発明におけるＴＬＲ７アゴニスト化合物は、任意の便利な投与形態、例えば錠剤、粉末、カプセル、溶液、分散液、懸濁液、シロップ剤、スプレー、座薬、ゲル、エマルションの単位用量で投与され得る。特に、錠剤及びカプセルなどの経口単位剤形を使用することができる。一例では、本発明のＴＬＲ７アゴニスト化合物の薬学的有効量は、約７５～２５０ｍｇ、例えば１００～２００ｍｇ、例えば１５０～１７０ｍｇ ｐｒ．用量の範囲である。投与は、毎日、１日おき（ＱＯＤ）又は毎週（ＱＷ）であり得る。
【0274】
ＴＬＲ７アゴニストを含む本発明の医薬組合せの好ましい実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、少なくとも約１００ｍｇ、又は約１００ｍｇ、又は好ましくは約１５０ｍｇの用量で投与される。一実施形態では、ＴＬＲ７アゴニストは、少なくともＱＷ（毎週）、又はＱＷ、又はより好ましくはＱＯＤ（１日おき）で投与される。
【0275】
好適な担体及び賦形剤は当業者に周知であり、例えば、Ａｎｓｅｌ，Ｈｏｗａｒｄ Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ａｎｓｅｌ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，２００４；Ｇｅｎｎａｒｏ，Ａｌｆｏｎｓｏ Ｒ．，ｅｔ ａｌ．Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００；及びＲｏｗｅ，Ｒａｙｍｏｎｄ Ｃ．Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ．Ｃｈｉｃａｇｏ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，２００５に詳細に記載されている。
【0276】
インターフェロン－アルファ
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬はインターフェロン－アルファ（ＩＦＮα）である。
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬はインターフェロン－アルファ（ＩＦＮα）である。
【0277】
様々な実施形態において、本発明の医薬組合せにおけるインターフェロン－アルファは、インターフェロンアルファ－２ｂ、インターフェロンアルファ－２ａ及びインターフェロンアルファ－１（ペグ化及び非ペグ化）であり得る。
【0278】
さらに様々な実施形態では、本発明の医薬組合せにおけるＩＦＮ－αは、Ｐｅｇａｓｙｓ（登録商標）（Ｒｏｃｈｅ）、ＰＥＧ－Ｉｎｔｒｏｎ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．，Ｉｎｃ．）又はＹ－ペグ化組換えインターフェロンアルファ－２ａ（ＹＰＥＧ－ＩＦＮα－２ａ、Ｘｉａｍｅｎ Ａｍｏｙｔｏｐ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）である。
【0279】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおけるＩＦＮαは、ペグ化ＩＦＮαである。本発明の医薬組合せで使用されるＩＦＮαのこの定義は、本明細書では「Ｔ４」又は「治療薬Ｔ４」と呼ばれる。
【0280】
一実施形態では、インターフェロン－アルファは皮下投与される。
【0281】
抗ＨＢＶ抗体
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬は抗ＨＢＶ抗体である。
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬は抗ＨＢＶ抗体である。
【0282】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおける抗ＨＢＶ抗体は、Ｂ型肝炎表面抗原（抗ＨＢｓＡｇ）に結合する抗体である。
【0283】
一実施形態では、オリゴヌクレオチド治療薬と抗ＨＢＶ抗体とを含む組合せは、患者のＨＢｓＡｇのセロクリアランスをもたらし得る。
【0284】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおける抗ＨＢＶ抗体はモノクローナルである。
【0285】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおける抗ＨＢＶ抗体はモノクローナルであり、ヒトである。
【0286】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおける抗ＨＢＶ抗体は、抗ＨＢｓＡｇモノクローナル抗体である。本発明の医薬組合せで使用される抗ＨＢＶ抗体のこの定義は、本明細書では「Ｔ５」又は「治療薬Ｔ５」と呼ばれる。
【0287】
Ｔ５を含む本発明の医薬組合せの好ましい実施形態では、具体的には、表２及び３で同定される組合せＣ４、Ｃ１１、Ｃ１７、Ｃ２２、Ｃ２７、Ｃ２８、Ｃ２９、Ｃ３０、Ｃ３９、Ｃ４５、Ｃ５０、Ｃ６６、Ｃ７１、Ｃ８６、Ｃ５５、Ｃ５６、Ｃ５７、Ｃ５８、Ｃ７６、Ｃ７７、Ｃ７８、Ｃ７９、Ｃ９１、Ｃ９２、Ｃ９３、Ｃ９４、Ｃ１０１、Ｃ１０２、Ｃ１０３、Ｃ１０４、Ｃ１１１、Ｃ１１２、Ｃ１１３、Ｃ１１４、Ｃ１１５又はＣ１１６のいずれかの実施形態では、Ｔ５は、（ａ）ＮＹＧＭＱ（配列番号１２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）ＩＩＷＡＤＧＴＫＱＹＹＧＤＳＶＫＧ（配列番号１３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）ＤＧＬＹＡＳＡＰＮＤＶ（配列番号１４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）と、（ｄ）ＲＡＳＱＲＩＳＴＹＬＮ（配列番号１５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）ＧＡＳＳＬＱＳ（配列番号１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）ＱＱＴＹＴＬＰＰＮ（配列番号１７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）とを含む、抗ＨＢｓＡｇ抗体である。
【0288】
Ｔ５を含む本発明の医薬組合せの一実施形態では、具体的には、表２及び３で同定される組合せＣ４、Ｃ１１、Ｃ１７、Ｃ２２、Ｃ２７、Ｃ２８、Ｃ２９、Ｃ３０、Ｃ３９、Ｃ４５、Ｃ５０、Ｃ６６、Ｃ７１、Ｃ８６、Ｃ５５、Ｃ５６、Ｃ５７、Ｃ５８、Ｃ７６、Ｃ７７、Ｃ７８、Ｃ７９、Ｃ９１、Ｃ９２、Ｃ９３、Ｃ９４、Ｃ１０１、Ｃ１０２、Ｃ１０３、Ｃ１０４、Ｃ１１１、Ｃ１１２、Ｃ１１３、Ｃ１１４、Ｃ１１５又はＣ１１６のいずれかの実施形態では、Ｔ５は、（ａ）ＳＹＡＭＳ（配列番号１８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）ＡＦＳＧＴＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号１９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）ＤＰＧＨＴＳＮＷＲＤＮＹＱＹＹＱＭＤＶ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）と、（ｄ）ＲＡＳＱＧＩＲＮＤＬＧ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）ＡＡＳＳＬＱＳ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）ＬＱＨＮＳＹＰＲＴ（配列番号２３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）とを含む、抗ＨＢｓＡｇ抗体である。
【0289】
Ｔ５を含む本発明の医薬組合せの一実施形態では、具体的には、表２及び３で同定される組合せＣ４、Ｃ１１、Ｃ１７、Ｃ２２、Ｃ２７、Ｃ２８、Ｃ２９、Ｃ３０、Ｃ３９、Ｃ４５、Ｃ５０、Ｃ６６、Ｃ７１、Ｃ８６、Ｃ５５、Ｃ５６、Ｃ５７、Ｃ５８、Ｃ７６、Ｃ７７、Ｃ７８、Ｃ７９、Ｃ９１、Ｃ９２、Ｃ９３、Ｃ９４、Ｃ１０１、Ｃ１０２、Ｃ１０３、Ｃ１０４、Ｃ１１１、Ｃ１１２、Ｃ１１３、Ｃ１１４、Ｃ１１５又はＣ１１６のいずれかの実施形態では、Ｔ５は、（ａ）ＮＹＨＩＨ（配列番号２４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）ＩＩＮＰＲＲＬＳＴＡＹＡＰＫＦＱＧ（配列番号２５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）ＤＡＧＤＤＴＳＧＰＦＤＳ（配列番号２６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）と、（ｄ）ＲＡＳＱＳＩＮＴＷＬＡ（配列番号２７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）ＫＡＳＳＬＥＳ（配列番号２８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）ＱＱＹＮＴＦＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）とを含む、抗ＨＢｓＡｇ抗体である。
【0290】
Ｔ５を含む本発明の医薬組合せの一実施形態では、具体的には、表２及び３で同定される組合せＣ４、Ｃ１１、Ｃ１７、Ｃ２２、Ｃ２７、Ｃ２８、Ｃ２９、Ｃ３０、Ｃ３９、Ｃ４５、Ｃ５０、Ｃ６６、Ｃ７１、Ｃ８６、Ｃ５５、Ｃ５６、Ｃ５７、Ｃ５８、Ｃ７６、Ｃ７７、Ｃ７８、Ｃ７９、Ｃ９１、Ｃ９２、Ｃ９３、Ｃ９４、Ｃ１０１、Ｃ１０２、Ｃ１０３、Ｃ１０４、Ｃ１１１、Ｃ１１２、Ｃ１１３、Ｃ１１４、Ｃ１１５又はＣ１１６のいずれかの実施形態では、Ｔ５は、（ａ）ＴＮＮＷＷＳ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、（ｂ）ＥＩＨＨＩＧＳＴＮＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号３１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２、及び（ｃ）ＧＲＬＧＩＴＲＤＲＹＹＦＤＳ（配列番号３２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）と、（ｄ）ＱＡＳＱＤＩＳＮＹＬＮ（配列番号３３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１、（ｅ）ＤＴＳＳＬＥＲ（配列番号３４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２、及び（ｆ）ＱＱＹＹＮＬＰＨＴ（配列番号３５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）とを含む、抗ＨＢｓＡｇ抗体である。
【0291】
Ｔ５を含む本発明の医薬組合せの好ましい実施形態では、具体的には、表２及び３で同定される組合せＣ４、Ｃ１１、Ｃ１７、Ｃ２２、Ｃ２７、Ｃ２８、Ｃ２９、Ｃ３０、Ｃ３９、Ｃ４５、Ｃ５０、Ｃ６６、Ｃ７１、Ｃ８６、Ｃ５５、Ｃ５６、Ｃ５７、Ｃ５８、Ｃ７６、Ｃ７７、Ｃ７８、Ｃ７９、Ｃ９１、Ｃ９２、Ｃ９３、Ｃ９４、Ｃ１０１、Ｃ１０２、Ｃ１０３、Ｃ１０４、Ｃ１１１、Ｃ１１２、Ｃ１１３、Ｃ１１４、Ｃ１１５又はＣ１１６のいずれかの実施形態では、Ｔ５は、ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＥＡＳＧＦＴＦＳＮＹＧＭＱＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＩＩＷＡＤＧＴＫＱＹＹＧＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＦＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＧＥＤＴＡＭＹＦＣＡＲＤＧＬＹＡＳＡＰＮＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号３９）のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）と、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＹＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＲＩＳＴＹＬＮＷＹＨＱＲＰＧＫＳＰＳＬＬＩＹＧＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＡＳＡＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＲＰＥＤＬＧＴＹＹＣＱＱＴＹＴＬＰＰＮＳＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号３７）のアミノ酸はイラ悦を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）とを含む、抗ＨＢｓＡｇ抗体である。
【0292】
Ｔ５を含む本発明の医薬組合せの一実施形態では、具体的には、表２及び３で同定される組合せＣ４、Ｃ１１、Ｃ１７、Ｃ２２、Ｃ２７、Ｃ２８、Ｃ２９、Ｃ３０、Ｃ３９、Ｃ４５、Ｃ５０、Ｃ６６、Ｃ７１、Ｃ８６、Ｃ５５、Ｃ５６、Ｃ５７、Ｃ５８、Ｃ７６、Ｃ７７、Ｃ７８、Ｃ７９、Ｃ９１、Ｃ９２、Ｃ９３、Ｃ９４、Ｃ１０１、Ｃ１０２、Ｃ１０３、Ｃ１０４、Ｃ１１１、Ｃ１１２、Ｃ１１３、Ｃ１１４、Ｃ１１５又はＣ１１６のいずれかの実施形態では、Ｔ５は、ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＥＡＳＧＦＴＦＳＮＹＧＭＱＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＩＩＷＡＤＧＴＫＱＹＹＧＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＦＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＧＥＤＴＡＭＹＦＣＡＲＤＧＬＹＡＳＡＰＮＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＹＩＴＲＥＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号３８）の重鎖可変ドメイン（ＶＨ）と、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＹＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＲＩＳＴＹＬＮＷＹＨＱＲＰＧＫＳＰＳＬＬＩＹＧＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＡＳＡＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＲＰＥＤＬＧＴＹＹＣＱＱＴＹＴＬＰＰＮＳＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号３６）の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）とを含む、抗ＨＢｓＡｇ抗体である。
【0293】
一実施形態では、抗ＨＢＶ抗体は皮下投与される。
【0294】
ＰＤ１シグナル伝達に拮抗する抗体
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬は、ＰＤ１シグナル伝達に拮抗する抗体である。一実施形態では、この抗体は抗ＰＤＬ１抗体である。一実施形態では、この抗体は抗ＰＤ１抗体である。
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬は、ＰＤ１シグナル伝達に拮抗する抗体である。一実施形態では、この抗体は抗ＰＤＬ１抗体である。一実施形態では、この抗体は抗ＰＤ１抗体である。
【0295】
好ましい実施形態では、本発明の医薬組合せにおける抗ＰＤ１抗体は、ニボルマブ（商品名ＯＰＤＩＶＯ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂから入手可能）である。本発明の医薬組合せで使用される抗ＰＤ１抗体のこの定義は、本明細書では「Ｔ６」又は「治療薬Ｔ６」と呼ばれる。
【0296】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおける抗ＰＤＬ１抗体は、アテゾリズマブ（商品名Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅから入手可能）である。本発明の医薬組合せで使用される抗ＰＤＬ１抗体のこの定義は、本明細書では「Ｔ７」又は「治療薬Ｔ７」と呼ばれる。
【0297】
ＰＤ１シグナル伝達に拮抗する抗体を含む本発明の最も好ましい医薬組合せは、ＰＤ１シグナル伝達に拮抗する１種類の抗体のみを含む。一実施形態では、ＰＤ１シグナル伝達に拮抗する抗体を皮下投与する。一実施形態では、抗体はＴ６であり、皮下投与される。
【0298】
ヌクレオチド類似体
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬はヌクレオチド類似体である。
一実施形態では、本発明の医薬組合せに使用される治療薬はヌクレオチド類似体である。
【0299】
一実施形態では、本発明の医薬組合せ中のヌクレオチド類似体は、以下の中から選択される：ラミブジン、テルビブジン、エンテカビル、アデホビル、テノホビル、クレブジン、テノホビルアラフェナミド、ＣＭＸ１５７及びＡＧＸ－１００９。
【0300】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおけるヌクレオチド類似体は、エンテカビルである。本発明の医薬組合せで使用されるヌクレオチド類似体のこの定義は、本明細書では「Ｔ８」又は「治療薬Ｔ８」と呼ばれる。
【0301】
一実施形態では、本発明の医薬組合せにおけるヌクレオチド類似体は、テノホビルである。本発明の医薬組合せで使用されるヌクレオチド類似体のこの定義は、本明細書では「Ｔ９」又は「治療薬Ｔ９」と呼ばれる。
【0302】
一実施形態では、ヌクレオチド類似体は皮下投与される。
【0303】
医薬組合せ
本発明は、少なくとも２つのＨＢＶ治療薬、好ましくは２つ又は３つのＨＢＶ治療薬を含む様々な医薬組合せを提供する。
本発明は、少なくとも２つのＨＢＶ治療薬、好ましくは２つ又は３つのＨＢＶ治療薬を含む様々な医薬組合せを提供する。
【0304】
２つの特定のＨＢＶ治療薬を含む本発明の医薬組合せを以下の表２に記載する。
【表2】
【0305】
３つの特定のＨＢＶ治療薬を含む本発明の医薬組合せを以下の表３に記載する。
【表3-1】
【表3-2】
【0306】
本発明の医薬組合せを説明したので、本発明の医薬組合せの特定の好ましい実施形態を本明細書に記載する。好ましい実施形態では、本発明の医薬組合せは、同じ組合せが治療薬Ｔ６と治療薬Ｔ７の両方を含まないものである。好ましい実施形態では、本発明の医薬組合せは、１つ又は複数のさらなるＨＢＶ治療薬と組み合わせて治療薬Ｔ１を含むものである。好ましい実施形態では、本発明の医薬組合せは、治療薬Ｔ１及び治療薬Ｔ２を、任意にさらなる第３のＨＢＶ治療薬、好ましくはＴ３、Ｔ４、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、Ｔ８又はＴ９のいずれか１つと組み合わせて含むものである。好ましい実施形態では、本発明の医薬組合せは、Ｔ１及びＴ２を、任意にＴ３と組み合わせて含む。
【0307】
典型的には、上記の組合せは、列挙された要素を含む、すなわち、列挙されたＨＢＶ治療薬を包含するが、さらなる列挙されていないＨＢＶ治療薬の包含を排除しない。しかしながら、別の実施形態では、上で定義された組合せは、列挙された要素に限定され、すなわち、医薬組合せは、任意の他のＨＢＶ治療薬を除外して列挙された要素から本質的になる。これは、組合せにおける任意の担体、賦形剤、アジュバント、希釈剤又は塩の存在を排除するものではない。したがって、別の実施形態では、本発明の医薬組合せは、表２又は３にその組合せについて列挙された関連要素から本質的になる。
【0308】
好ましい実施形態では、本発明の医薬組合せにおけるＨＢＶ治療薬のそれぞれは、薬学的に許容され得る担体中に製剤化される。より好ましくは、各ＨＢＶ治療薬は、問題のＨＢＶ治療薬の投与に適した薬学的に許容され得る担体中に製剤化される。
【0309】
本発明の医薬組合せは、含まれる個々のＨＢＶ治療薬単独よりも効果的にＨＢＶ感染症を処置するために使用することができる。一実施形態では、本発明の医薬組合せを使用して、含まれる個々のＨＢＶ治療薬単独よりも迅速にＨＢＶを阻害し、持続時間を延長してＨＢＶを阻害し、及び／又はより大きな効果でＨＢＶを阻害することができる。これらの効果は、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ又はＨＢＶ－ＤＮＡ滴定の減少によって測定することができる。一実施形態では、本発明の医薬組合せは、含まれる個々のＨＢＶ治療薬単独よりもＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ又はＨＢＶ－ＤＮＡ力価のより迅速な減少を生じさせる。一実施形態では、本発明の医薬組合せは、含まれる個々のＨＢＶ治療薬単独よりもＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ又はＨＢＶ－ＤＮＡ力価のより長期の減少を生じさせる。一実施形態では、本発明の医薬組合せは、含まれる個々のＨＢＶ治療薬単独よりもＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ又はＨＢＶ－ＤＮＡ力価のより大きな低下を生じさせる。主に、ＨＢｓＡｇがこの目的のために測定される。
【0310】
本発明の医薬組合せはまた、キット又はパーツのキット中に存在し得る。「キット」又は「パーツのキット」という用語は、ＨＢＶ感染個体の処置を実施する際に使用される材料のアセンブリを指し、処置をどのように行うかの説明を含む。
【0311】
本発明の一態様は、本明細書中に記載のＨＢＶ治療薬から選択される２つ又は複数の治療有効成分（例えば、医療成分又は医薬）を含有するパーツのキットである。
【0312】
本発明の一実施形態は、本明細書に記載の第１のＨＢＶ治療薬と、本明細書に記載の第２のＨＢＶ治療薬とを含むパーツのキットであり、任意に、本明細書に記載の第３のＨＢＶ治療薬を医療成分としてさらに含む。
【0313】
一実施形態では、本発明のキットは、皮下注射用に製剤化されたＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである第１の医薬と、同じく皮下投与用に製剤化された抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドである第２の医薬とを含む。ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、別々に製剤化される。ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドのそれぞれは、１回又は複数回の用量を含むバイアル中、又は１つの薬学的に有効な用量を含むプレフィルドシリンジ中の、液体として製剤化することができる。あるいは、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドのそれぞれは、凍結乾燥粉末の形態であり得、キットは注射用の調製のための溶媒和剤を含む。注射用の全ての医薬は無菌であることが理解される。ＴＬＲ７アゴニストがキットに含まれる場合、それは、単一の薬学的有効用量ｐｒ．錠剤を有する錠剤形態（又はカプセル及びゲルなどの経口投与のための代替の単位用量形態）であり得、キットは複数の錠剤を含むことができる。
【0314】
さらなる実施形態では、本発明のパーツのキットは、Ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するために、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドと組み合わせてＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドを投与するための説明書をさらに含む。特に、説明書には、慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染症の処置が記載されている。
【0315】
キットは、医療成分の１つのみ、及び他の医療成分との併用のための説明書を含んでいてもよい。一実施形態では、本発明のパーツのキットは、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである第１の医薬と、別個に購入されるが第２の薬剤として抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドと組み合わせて使用するための説明書とを含むか又は含有する。別の実施形態では、本発明のパーツのキットは、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドである第１の医薬と、別個に購入されるが第２の薬剤としてＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと組み合わせて使用するための説明書とを含むか又は含有する。
【0316】
いくつかの実施形態において、本発明の医薬組合せは、第３の治療剤又はさらなる治療剤（複数可）と組み合わせて使用され得、これらは、パーツのキットに含まれ得るか、又は別々に供給され得る。一実施形態では、さらなる治療剤は、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５、Ｔ６、Ｔ７、Ｔ８又はＴ９のいずれかである。好ましくは、さらなる治療剤はＴ３である。
【0317】
医薬組合せの投与順序
上で定義した本発明の医薬組合せ（組合せＣ１～Ｃ１２０）内でのＨＢＶ治療薬の投与の具体的な順序は、このセクションに記載されている。
上で定義した本発明の医薬組合せ（組合せＣ１～Ｃ１２０）内でのＨＢＶ治療薬の投与の具体的な順序は、このセクションに記載されている。
【0318】
上記で使用される「要素」表記（元素Ａ、元素Ｂ及び元素Ｃ）は、純粋に参照のみを目的としており、特定の医薬組合せにおける治療薬が投与されるべき順序に関するいかなることも意味しないことに留意されたい。むしろ、本発明の医薬組合せにおける治療薬の投与順序は、要素が最初及び２番目に（関連する場合は３番目に）投与される点に関して本明細書に明示的に記載されている。
【0319】
例えば、本発明の医薬組合せ「Ｃ１」に関する実施形態では、要素Ａが最初に投与され、要素Ｂが２番目に投与される。組合せＣ１のこの実施形態では、組合せＣ１の要素Ａ（本明細書ではＴ１として定義されるＨＢＶ治療薬）の第１又は初回用量は、組合せＣ１の要素Ｂ（本明細書ではＴ２として定義されるＨＢＶ治療薬）の第１又は初回用量の前に投与される。
【0320】
ここで、本発明の特定の医薬組合せの要素の投与に関する指定された順序は、その医薬組合せの明示的な一部である要素のみに関連する。例えば、「最初に投与される」と指定された要素は、患者が、本発明の医薬組合せの投与の一部として投与されなかった異なるＨＢＶ治療薬を以前に投与されたことがないことを必ずしも排除しない。
【0321】
本明細書において、本発明の医薬組合せの要素は、単一の時点で、例えば、単回用量として、又は一定期間にわたって与えられる複数回用量として投与することができることも理解されるべきである。したがって、本明細書で「投与される」要素への言及は、その要素が投与される特定の時間（単一の時点で１つの用量が与えられる）、又は要素の投与が開始される時間（一定期間にわたって複数の用量が与えられる）のいずれかを指すことができる。このため、本発明の医薬組合せは、重複する投薬計画を含み得ることが想定される。例えば、要素Ａが最初に投与され、要素Ｂが２番目に投与される本発明の医薬組合せでは、要素Ａが一定期間にわたっていくつかの用量として投与される場合、要素Ａの初回用量が要素Ｂの単回用量又は初回用量の前に投与されるならば、要素Ａのさらなる用量の投与は要素Ｂの投与と重複し得る。
【0322】
組合せＣ１
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0323】
組合せＣ２
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0324】
組合せＣ３
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0325】
組合せＣ４
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0326】
組合せＣ５
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0327】
組合せＣ６
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0328】
組合せＣ７
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0329】
組合せＣ８
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0330】
組合せＣ９
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0331】
組合せＣ１０
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0332】
組合せＣ１１
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0333】
組合せＣ１２
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0334】
組合せＣ１３
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0335】
組合せＣ１４
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0336】
組合せＣ１５
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0337】
組合せＣ１６
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0338】
組合せＣ１７
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0339】
組合せＣ１８
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0340】
組合せＣ１９
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ１９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0341】
組合せＣ２０
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0342】
組合せＣ２１
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0343】
組合せＣ２２
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0344】
組合せＣ２３
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0345】
組合せＣ２４
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0346】
組合せＣ２５
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0347】
組合せＣ２６
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0348】
組合せＣ２７
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0349】
組合せＣ２８
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0350】
組合せＣ２９
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ２９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0351】
組合せＣ３０
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0352】
組合せＣ３１
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0353】
組合せＣ３２
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0354】
組合せＣ３３
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0355】
組合せＣ３４
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0356】
組合せＣ３５
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0357】
組合せＣ３６
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表２に定義される要素Ａ及び要素Ｂを含む組合せＣ３６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは、要素Ｂの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ａの投与の前に投与される。
【0358】
組合せＣ３７
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ３７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ３７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0359】
組合せＣ３８
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ３８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ３８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0360】
組合せＣ３９
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ３９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ３９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0361】
組合せＣ４０
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0362】
組合せＣ４１
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0363】
組合せＣ４２
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0364】
組合せＣ４３
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0365】
組合せＣ４４
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0366】
組合せＣ４５
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0367】
組合せＣ４６
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0368】
組合せＣ４７
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0369】
組合せＣ４８
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0370】
組合せＣ４９
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ４９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0371】
組合せＣ５０
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0372】
組合せＣ５１
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0373】
組合せＣ５２
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0374】
組合せＣ５３
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0375】
組合せＣ５４
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0376】
組合せＣ５５
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0377】
組合せＣ５６
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0378】
組合せＣ５７
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0379】
組合せＣ５８
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0380】
組合せＣ５９
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ５９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0381】
組合せＣ６０
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0382】
組合せＣ６１
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0383】
組合せＣ６２
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0384】
組合せＣ６３
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0385】
組合せＣ６４
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0386】
組合せＣ６５
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0387】
組合せＣ６６
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0388】
組合せＣ６７
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0389】
組合せＣ６８
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0390】
組合せＣ６９
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ６９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0391】
組合せＣ７０
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0392】
組合せＣ７１
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0393】
組合せＣ７２
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0394】
組合せＣ７３
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0395】
組合せＣ７４
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0396】
組合せＣ７５
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0397】
組合せＣ７６
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0398】
組合せＣ７７
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0399】
組合せＣ７８
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0400】
組合せＣ７９
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ７９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0401】
組合せＣ８０
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0402】
組合せＣ８１
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0403】
組合せＣ８２
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0404】
組合せＣ８３
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0405】
組合せＣ８４
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0406】
組合せＣ８５
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0407】
組合せＣ８６
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0408】
組合せＣ８７
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0409】
組合せＣ８８
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0410】
組合せＣ８９
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ８９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0411】
組合せＣ９０
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0412】
組合せＣ９１
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0413】
組合せＣ９２
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0414】
組合せＣ９３
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0415】
組合せＣ９４
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0416】
組合せＣ９５
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0417】
組合せＣ９６
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0418】
組合せＣ９７
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0419】
組合せＣ９８
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0420】
組合せＣ９９
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ９９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0421】
組合せＣ１００
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１００である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１００である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0422】
組合せＣ１０１
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0423】
組合せＣ１０２
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0424】
組合せＣ１０３
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0425】
組合せＣ１０４
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0426】
組合せＣ１０５
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0427】
組合せＣ１０６
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0428】
組合せＣ１０７
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0429】
組合せＣ１０８
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0430】
組合せＣ１０９
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１０９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0431】
組合せＣ１１０
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0432】
組合せＣ１１１
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１１である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0433】
組合せＣ１１２
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１２である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0434】
組合せＣ１１３
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１３である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0435】
組合せＣ１１４
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１４である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0436】
組合せＣ１１５
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１５である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0437】
組合せＣ１１６
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１６である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0438】
組合せＣ１１７
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１７である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0439】
組合せＣ１１８
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１８である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0440】
組合せＣ１１９
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１１９である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0441】
組合せＣ１２０
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１２０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ｃの投与の前に投与され、要素Ｃは、要素Ａの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
本発明の一実施形態では、医薬組合せは、上記の表３に定義される要素Ａ、要素Ｂ及び要素Ｃを含む組合せＣ１２０である。この組合せの一実施形態では、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与され、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｃの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｂは、要素Ｃの投与の前に投与され、要素Ｃは、要素Ａの投与の前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ａの投与前に投与され、要素Ａは要素Ｂの投与前に投与される。この組合せのさらなる実施形態では、要素Ｃは要素Ｂの投与前に投与され、要素Ｂは要素Ａの投与前に投与される。
【0442】
投与順序の好ましい特徴
以上、本発明の投与順序について説明したので、本発明のより好ましい投与順序を示す。本発明の医薬組合せが治療薬Ｔ１を含む好ましい実施形態では、治療薬Ｔ１が最初に投与される。本発明の医薬組合せが治療薬Ｔ１及び治療薬Ｔ２を含む好ましい実施形態では、治療薬Ｔ１は、治療薬Ｔ２の投与前に、好ましくは治療薬Ｔ２の投与の少なくとも１週間（７日）前に、より好ましくは治療薬Ｔ２の投与の少なくとも４週間前に投与される。本発明の医薬組合せが治療薬Ｔ１、治療薬Ｔ２及び追加の第３のＨＢＶ治療薬を含む好ましい実施形態では、治療薬Ｔ１は、治療薬Ｔ２及び追加の第３のＨＢＶ治療薬の投与前に、好ましくは治療薬Ｔ２及び追加の第３のＨＢＶ治療薬の投与の少なくとも１週間前に投与される。
以上、本発明の投与順序について説明したので、本発明のより好ましい投与順序を示す。本発明の医薬組合せが治療薬Ｔ１を含む好ましい実施形態では、治療薬Ｔ１が最初に投与される。本発明の医薬組合せが治療薬Ｔ１及び治療薬Ｔ２を含む好ましい実施形態では、治療薬Ｔ１は、治療薬Ｔ２の投与前に、好ましくは治療薬Ｔ２の投与の少なくとも１週間（７日）前に、より好ましくは治療薬Ｔ２の投与の少なくとも４週間前に投与される。本発明の医薬組合せが治療薬Ｔ１、治療薬Ｔ２及び追加の第３のＨＢＶ治療薬を含む好ましい実施形態では、治療薬Ｔ１は、治療薬Ｔ２及び追加の第３のＨＢＶ治療薬の投与前に、好ましくは治療薬Ｔ２及び追加の第３のＨＢＶ治療薬の投与の少なくとも１週間前に投与される。
【0443】
組合せＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ３７、Ｃ３８、Ｃ３９、Ｃ４０、Ｃ４１、Ｃ４２、Ｃ４３、Ｃ４４、Ｃ４５、Ｃ４６、Ｃ４７、Ｃ４８、Ｃ４９、Ｃ５０、Ｃ５１、Ｃ５２、Ｃ５３、Ｃ５４、Ｃ５５、Ｃ５６、Ｃ５７、Ｃ５８、Ｃ５９、Ｃ６０、Ｃ６１、Ｃ６２、Ｃ６３又はＣ６４のいずれかを投与する好ましい実施形態では、治療薬Ｔ１は、最初に、好ましくは他の含まれるＨＢＶ治療薬の投与の少なくとも１週間前に投与される。組合せＣ１、Ｃ３７、Ｃ３８、Ｃ３９、Ｃ４０、Ｃ４１、Ｃ４２又はＣ４３のいずれかを投与する好ましい実施形態では、治療薬Ｔ１は、治療薬Ｔ２の投与前に、好ましくは治療薬Ｔ２の投与の少なくとも１週間前に、より好ましくは治療薬Ｔ２の投与の少なくとも４週間前に投与される。組合せＣ３７、Ｃ３８、Ｃ３９、Ｃ４０、Ｃ４１、Ｃ４２又はＣ４３のいずれかを投与する好ましい実施形態では、治療薬Ｔ１は、治療薬Ｔ２及び追加のＨＢＶ治療薬の投与前に、好ましくは治療薬Ｔ２及び追加のＨＢＶ治療薬の投与の少なくとも１週間前に投与される。
【0444】
特に有利な組合せ及びその投与量
本発明の最も好ましい医薬組合せは、本明細書で定義されるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと本明細書で定義される抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを含む。本発明者らは、医薬組合せで使用される場合、これらのＨＢＶ治療薬間の有利な相乗効果を予想外に見出した。本明細書で定義されるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを組合せで使用すると、ＨＢＶウイルスマーカー（血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡ）の減少を達成することができ、これは単剤療法単独としてのいずれかのＨＢＶ治療薬によって達成される減少よりも大きく、単剤療法としての各ＨＢＶ治療薬によって達成される両方の効果の合計よりもさらに大きい。
本発明の最も好ましい医薬組合せは、本明細書で定義されるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと本明細書で定義される抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを含む。本発明者らは、医薬組合せで使用される場合、これらのＨＢＶ治療薬間の有利な相乗効果を予想外に見出した。本明細書で定義されるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを組合せで使用すると、ＨＢＶウイルスマーカー（血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡ）の減少を達成することができ、これは単剤療法単独としてのいずれかのＨＢＶ治療薬によって達成される減少よりも大きく、単剤療法としての各ＨＢＶ治療薬によって達成される両方の効果の合計よりもさらに大きい。
【0445】
この組合せは、本明細書に記載のさらなる異なる第３のＨＢＶ治療薬を任意に含む。一実施形態では、第３のＨＢＶ治療薬は、ＴＬＲ７アゴニスト、インターフェロン－アルファ、抗ＨＢＶ抗体、抗ＰＤＬ１抗体、又は本明細書で定義されるヌクレオチド類似体から選択される。好ましい実施形態では、第３のＨＢＶ治療薬は、ＴＬＲ７アゴニスト、好ましくは本明細書でＴ３として定義されるＴＬＲ７アゴニストである。好ましい実施形態では、この組合せにおけるＴＬＲ７アゴニストの投与量は、上記の対応するセクションのＴＬＲ７アゴニストについて開示されている投与量に従う。
【0446】
この医薬組合せに関連する一般的な実施形態では、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ、好ましくは少なくとも約１ｍｇ／ｋｇ、好ましくは少なくとも約２ｍｇ／ｋｇ、好ましくは少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの１つ又は複数の用量で投与される。一実施形態では、用量は３ｍｇ／ｋｇを超える。より具体的な実施形態では、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約２ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約３ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約７ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの１つ又は複数の用量で投与される。
【0447】
一実施形態では、この組合せは、ビヒクル対照と比較して、ＨＢｓＡｇの血清レベルの連続的かつ有意な低下をもたらす。一実施形態では、この組合せは、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド又は抗ＰＤ－Ｌ１アンチセンスオリゴヌクレオチド単独による同等の単剤療法によって提供される減少よりも大きい血清ＨＢｓＡｇの減少を提供する。一実施形態では、減少は、これらの等価な単剤療法の合計よりも大きい。
【0448】
一実施形態では、この組合せは、ビヒクル対照と比較して、ＨＢｅＡｇの血清レベルの連続的かつ有意な低下をもたらす。一実施形態では、この組合せは、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド又は抗ＰＤ－Ｌ１アンチセンスオリゴヌクレオチド単独による同等の単剤療法によって提供される減少よりも大きい血清ＨＢｅＡｇの減少を提供する。一実施形態では、減少は、これらの等価な単剤療法の合計よりも大きい。
【0449】
一実施形態では、この組合せは、ビヒクル対照と比較して、ＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルの連続的かつ有意な低下をもたらす。一実施形態では、この組合せは、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド又は抗ＰＤ－Ｌ１アンチセンスオリゴヌクレオチド単独による同等の単剤療法によって提供される減少よりも大きい血清ＨＢＶ－ＤＮＡの減少を提供する。一実施形態では、減少は、これらの等価な単剤療法の合計よりも大きい。
【0450】
一実施形態では、この組合せは、ビヒクル対照と比較して、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルの連続的かつ有意な低下をもたらす。一実施形態では、血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ及びＨＢｅＡｇの減少は、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド又は抗ＰＤ－Ｌ１アンチセンスオリゴヌクレオチド単独による同等の単剤療法によって提供される減少よりも大きい。一実施形態では、減少は、これらの等価な単剤療法の合計よりも大きい
【0451】
同等の単剤療法単独によって、本発明の医薬組合せは、組合せに含まれるのと同じ医薬のいずれかの同じ用量にわたってＨＢＶ血清マーカーのより大きな減少を得ることを意味する。同等の単剤療法の合計とは、医薬組合せが、そこに含まれる医薬のそれぞれ（ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１オリゴヌクレオチド）を単剤療法として投与した場合に見られるであろう減少の合計よりも大きいＨＢＶ血清マーカーの改善された減少を得ることを意味する。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡを含むＨＢＶ血清マーカーの減少は、医薬組合せが投与される患者の血清で見られる。
【0452】
一実施形態では、本明細書で定義されるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと、本明細書で定義される抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを含む医薬組合せは、ＨＢＶ血清ウイルスマーカーの減少、好ましくはＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの１つ又は複数又は全部に対する相乗効果を提供する。この組合せによって得られる相乗効果は、予想外にも、１）ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び２）抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの個々の効果（すなわちそれらがそれぞれ同等の単剤療法として投与される場合）の合計よりも大きい。
【0453】
一実施形態では、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドを最初に投与する。一実施形態では、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの初回用量又は単回用量は、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量又は単回用量の前に投与される。
【0454】
一実施形態では、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇ、好ましくは３ｍｇ／ｋｇを超える、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇ、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの１つ又は複数の用量で投与される。
【0455】
一実施形態では、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇ、好ましくは３ｍｇ／ｋｇを超える、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの１つ又は複数の用量で投与される。
【0456】
一実施形態では、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが最初に投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが２番目に投与される。一実施形態では、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを少なくとも２以上の用量で週に１回又は２週間に１回投与する前に、最初に単回用量（処置のＤ０）で投与される。一実施形態では、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量は、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量の投与の少なくとも約１週間前、少なくとも約２週間前、少なくとも約３週間前、少なくとも約４週間前、少なくとも約５週間前、少なくとも約６週間前、少なくとも約７週間前、少なくとも約８週間前、又は８週間超前に投与される。この投薬計画の一実施形態では、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドを３ｍｇ／ｋｇ～９ｍｇ／ｋｇの用量で投与し、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを約３ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。
【0457】
一実施形態では、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを週に１回、３～６ｍｇ／ｋｇの少なくとも５回の用量で投与する前に、３～９ｍｇ／ｋｇの単回用量で投与される。好ましくは、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの初回用量は、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも７日前、好ましくは少なくとも１ヶ月前に投与される。
【0458】
非常に好ましい実施形態では、２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、週に１回又は２週間に１回投与され、単回用量又は初回用量のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量の少なくとも約７日前に投与される。
【0459】
非常に好ましい実施形態では、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量は、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇである。
【0460】
非常に好ましい実施形態では、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量は、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである。
【0461】
非常に好ましい実施形態では、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週に１回又は２週間に１回投与され、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量の少なくとも約７日前に投与され；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量は３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである。
【0462】
非常に好ましい実施形態では、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週に１回投与され、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量の少なくとも約７日前に投与され；ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量は３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇである。
【0463】
最も好ましい実施形態では、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が週に１回投与され、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量の少なくとも約７日前に投与され；ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量は、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇであり；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの各用量は、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである。
【0464】
医薬組成物
さらなる態様では、本発明は、本明細書に記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドのそれぞれと、薬学的に許容され得る賦形剤、希釈剤、担体、塩及び／又はアジュバントとを含む、医薬組成物を提供する。一実施形態では、本発明の医薬組合せにおけるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、別々の組成物中に存在する。一実施形態では、治療用オリゴヌクレオチドはそれぞれ、皮下投与のためにリン酸緩衝生理食塩水に製剤化される。
さらなる態様では、本発明は、本明細書に記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドのそれぞれと、薬学的に許容され得る賦形剤、希釈剤、担体、塩及び／又はアジュバントとを含む、医薬組成物を提供する。一実施形態では、本発明の医薬組合せにおけるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、別々の組成物中に存在する。一実施形態では、治療用オリゴヌクレオチドはそれぞれ、皮下投与のためにリン酸緩衝生理食塩水に製剤化される。
【0465】
本発明の医薬組合せにおける治療用オリゴヌクレオチドは、医薬組成物又は製剤の調製のために、薬学的に許容され得る活性又は不活性物質と混合することができる。医薬組成物の調製のための組成物及び方法は、限定されるものではないが、投与経路、疾患の程度、又は投与される用量を含む多くの基準に依存する。治療用オリゴヌクレオチドの薬学的に許容され得る希釈剤には、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）が含まれ、薬学的に許容され得る塩には、限定するものではないが、ナトリウム塩及びカリウム塩が含まれる。いくつかの実施形態において、治療用オリゴヌクレオチドの薬学的に許容され得る希釈剤は、無菌リン酸緩衝生理食塩水である。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、薬学的に許容され得る希釈剤中５０～１５０ｍｇ／ｍｌ溶液の濃度で使用される。治療用オリゴヌクレオチド又は治療用オリゴヌクレオチドを含む医薬組成物は、静脈内、動脈内、皮下又は筋肉内の注射又は注入を含む非経口経路によって投与される。一実施形態では、オリゴヌクレオチドコンジュゲートは、静脈内投与される。治療用オリゴヌクレオチドの場合、皮下投与することが有利である。
【0466】
これらの組成物は、従来の滅菌技術によって滅菌されても、又は滅菌フィルタにかけられてもよい。得られた水溶液は、そのまま使用するために包装するか、又は凍結乾燥することができ、凍結乾燥された調製物は、投与前に滅菌水性担体と組み合わされる。調製物のｐＨは、典型的には３～１１、より好ましくは５～９又は６～８、最も好ましくは７～８、例えば７～７．５であろう。得られた固体形態の組成物は、錠剤又はカプセルの密封パッケージなどのように、各々が上記の薬剤又は薬剤群の固定量を含む複数の単回用量単位で包装することができる。
【0467】
治療用オリゴヌクレオチドの製剤
治療用オリゴヌクレオチドの使用を容易にするために様々な製剤が開発されており、これは本発明の医薬組合せに使用される治療用オリゴヌクレオチドに適用可能であり得る。例えば、オリゴヌクレオチドは、分解を最小限に抑え、送達及び／又は取り込みを容易にし、又は製剤中のオリゴヌクレオチドに別の有益な特性を提供する製剤を使用して、対象又は細胞環境に送達され得る。いくつかの実施形態では、ＨＢＶ抗原（例えば、ＨＢｓＡｇ）の発現を減少させるためのオリゴヌクレオチド（例えば、一本鎖又は二本鎖オリゴヌクレオチド）を含む組成物である第１の医薬を含む医薬組合せが本明細書で提供される。そのような組成物は、標的細胞の直接環境又は全身のいずれかで対象に投与された場合、オリゴヌクレオチドの十分な部分が細胞に入り、ＨＢＶ抗原発現を減少させるように適切に製剤化することができる。本明細書に開示されるＨＢＶ抗原の減少のためのオリゴヌクレオチドを送達するために、様々な適切なオリゴヌクレオチド製剤のいずれかを使用することができる。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドは、リン酸緩衝生理食塩水などの緩衝液、リポソーム、ミセル構造及びキャプシド中に製剤化される。
治療用オリゴヌクレオチドの使用を容易にするために様々な製剤が開発されており、これは本発明の医薬組合せに使用される治療用オリゴヌクレオチドに適用可能であり得る。例えば、オリゴヌクレオチドは、分解を最小限に抑え、送達及び／又は取り込みを容易にし、又は製剤中のオリゴヌクレオチドに別の有益な特性を提供する製剤を使用して、対象又は細胞環境に送達され得る。いくつかの実施形態では、ＨＢＶ抗原（例えば、ＨＢｓＡｇ）の発現を減少させるためのオリゴヌクレオチド（例えば、一本鎖又は二本鎖オリゴヌクレオチド）を含む組成物である第１の医薬を含む医薬組合せが本明細書で提供される。そのような組成物は、標的細胞の直接環境又は全身のいずれかで対象に投与された場合、オリゴヌクレオチドの十分な部分が細胞に入り、ＨＢＶ抗原発現を減少させるように適切に製剤化することができる。本明細書に開示されるＨＢＶ抗原の減少のためのオリゴヌクレオチドを送達するために、様々な適切なオリゴヌクレオチド製剤のいずれかを使用することができる。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドは、リン酸緩衝生理食塩水などの緩衝液、リポソーム、ミセル構造及びキャプシド中に製剤化される。
【0468】
カチオン性脂質を有するオリゴヌクレオチドの製剤を使用して、細胞へのオリゴヌクレオチドのトランスフェクションを容易にすることができる。例えば、カチオン性脂質、例えば、リポフェクチン、カチオン性グリセロール誘導体及びポリカチオン性分子（例えば、ポリリジン）を使用することができる。適切な脂質には、オリゴフェクトアミン、リポフェクトアミン（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ＮＣ３８８（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，Ｂｏｕｌｄｅｒ，Ｃｏｌｏ．）、又はＦｕＧｅｎｅ ６（Ｒｏｃｈｅ）が含まれ、これらはすべて製造業者の説明書に従って使用することができる。
【0469】
したがって、いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチド製剤は、脂質ナノ粒子を含む。いくつかの実施形態では、賦形剤は、リポソーム、脂質、脂質複合体、ミクロスフェア、微粒子、ナノスフェア若しくはナノ粒子を含むか、又はそれを必要とする対象の細胞、組織、器官若しくは身体への投与のために他の方法で製剤化され得る（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２ｎｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，２０１３を参照のこと）。
【0470】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される製剤は賦形剤を含む。いくつかの実施形態では、賦形剤は、活性成分の改善された安定性、改善された吸収、改善された溶解度及び／又は治療強化を組成物に与える。いくつかの実施形態では、賦形剤は緩衝剤（例えば、クエン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、トリス塩基、又は水酸化ナトリウム）又はビヒクル（例えば、緩衝溶液、ワセリン、ジメチルスルホキシド、又は鉱油）である。いくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドは、その貯蔵寿命を延ばすために凍結乾燥され、次いで、使用（例えば、対象への投与）前に溶液にされる。したがって、本明細書に記載のオリゴヌクレオチドのいずれか１つを含む組成物中の賦形剤は、凍結保護剤（例えば、マンニトール、ラクトース、ポリエチレングリコール、又はポリビニルピロリドン）又は崩壊温度調整剤（例えば、デキストラン、フィコール又はゼラチン）であり得る。
【0471】
本発明の医薬組合せのいくつかの実施形態において、オリゴヌクレオチドを含む組成物は、その意図される投与経路と適合するように製剤化される。投与経路の例としては、非経口、例えば、静脈内、皮内、皮下、経口（例えば、吸入）、経皮（局所）、経粘膜及び直腸投与が挙げられる。皮下用製剤は、本発明の医薬組合せ中のオリゴヌクレオチドがＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである場合に特に有利である。
【0472】
注射用途に適した医薬組成物には、滅菌水溶液（水溶性の場合）又は分散液、及び滅菌注射液又は分散液の即時調製のための滅菌粉末が含まれる。適切な担体としては、生理食塩水、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ．ＴＭ．（ＢＡＳＦ，Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，Ｎ．Ｊ．）又はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。担体は、水又は溶媒又は分散媒であり得る。溶媒又は分散媒は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコール等）及びそれらの適切な混合物を含んでよい。多くの場合、等張剤、例えば、糖、多価アルコール、例えば、マンニトール、ソルビトール、及び塩化ナトリウムを組成物に含むことが好ましい。滅菌注射溶液は、必要に応じて、上に列挙した成分の１つ又は組合せを含む選択された溶媒中に必要量のオリゴヌクレオチドを組み込み、続いて濾過滅菌することによって調製することができる。
【0473】
本発明の医薬組合せのいくつかの実施形態では、組合せ中の組成物は、少なくとも約０．１％以上の治療剤（例えば、ＨＢＶ抗原発現を減少させるためのオリゴヌクレオチド）を含有し得るが、活性成分（複数可）のパーセンテージは、全組成物の重量又は体積の約１％～約８０％以上であり得る。溶解度、バイオアベイラビリティ、生物学的半減期、投与経路、製品貯蔵寿命、並びに他の薬理学的考慮事項などの要因は、そのような医薬製剤を調製する当業者によって企図され、したがって、様々な投与量及び処置レジメンが望ましい場合がある。
【0474】
いくつかの実施形態は、本明細書に開示されるオリゴヌクレオチドのいずれかの肝臓標的化送達を対象としているが、他の組織の標的化も企図される。
【0475】
用途
本発明の医薬組合せは、Ｂ型肝炎ウイルス感染症の処置、特に慢性ＨＢＶを有する患者の処置に使用するためのものである。本発明の医薬組合せは、治療薬として及び予防に利用することができる。
本発明の医薬組合せは、Ｂ型肝炎ウイルス感染症の処置、特に慢性ＨＢＶを有する患者の処置に使用するためのものである。本発明の医薬組合せは、治療薬として及び予防に利用することができる。
【0476】
本発明の医薬組合せは、Ｂ型肝炎ウイルス標的化療法と免疫療法の併用として使用することができる。特に、本発明の医薬組合せは、感染細胞におけるＨＢＶの処置に使用される場合、ｉ）細胞ＨＢＶ ｍＲＮＡを減少させる、ｉｉ）血清中のＨＢＶ ＤＮＡを減少させる、及び／又はｉｉｉ）ＨＢｓＡｇ及びＨＢｅＡｇなどのＨＢＶウイルス抗原を減少させる、ＨＢＶ感染パラメータの１つ又は複数に影響を及ぼすことができる。本発明の一実施形態では、これらのパラメータの１つ又は複数に対する効果は、医薬組合せの個々の医療成ＨＢＶ治療薬で処置を実施するときに達成される効果と比較して改善される。
【0477】
ＨＢＶ感染に対する効果は、ＨＢＶ感染初代ヒト肝細胞又はＨＢＶ感染ＨｅｐａＲＧ細胞又はＡＳＧＰＲ－ＨｅｐａＲＧ細胞を使用してインビトロで測定することができる（例えば、ＰＣＴ／ＥＰ２０１８／０７８１３６を参照）。ＨＢＶ感染に対する効果はまた、ＨＢＶゲノムを保有する組換えアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）に感染したマウスのＡＡＶ／ＨＢＶマウスモデル（ＡＡＶ／ＨＢＶ）（Ｄａｎ Ｙａｎｇ，ｅｔ ａｌ．２０１４ Ｃｅｌｌｕｌａｒ＆Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １１，７１－７８）又はＨＢＶミニサークルマウス（Ｃｏｖａｎｃｅ Ｓｈａｎｇｈａｉで入手可能、Ｇｕｏ ｅｔ ａｌ ２０１６ Ｓｃｉ Ｒｅｐ ６：２５５２及びＹａｎ ｅｔ ａｌ ２０１７ Ｊ Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ６６（６）：１１４９－１１５７も参照）又はヒト化肝細胞ＰＸＢマウスモデル（ＰｈｏｅｎｉｘＢｉｏで入手可能であり、Ｋａｋｕｎｉ ｅｔ ａｌ ２０１４ Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｓｃｉ．１５：５８－７４も参照）を使用してインビボで測定することもできる。ＨＢｓＡｇ及び／又はＨＢｅＡｇの分泌阻害は、製造業者の説明書に従って、例えばＣＬＩＡ ＥＬＩＳＡキット（Ａｕｔｏｂｉｏ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ）を用いてＥＬＩＳＡにより測定することができる。ＨＢＶ ｍＲＮＡ及びｐｇＲＮＡの減少は、ｑＰＣＲによって測定され得る。試験化合物がＨＢＶ感染を阻害するかどうかを評価するための更なる方法は、例えば国際公開第２０１５／１７３２０８号に記載されている通りｑＰＣＲにより、又はノーザンブロット、インサイチュハイブリダイゼーション、又は免疫蛍光を用いて、ＨＢＶ ＤＮＡの分泌を測定することである。
【0478】
本発明の一実施形態では、本明細書に記載の医薬組合せは、対応する一化合物処置を超える利点を提供する。利点は、例えば、ｉ）単剤療法と比較して長期の血清ＨＢＶ－ＤＮＡ減少；ｉｉ）単剤療法と比較したＨＢｓＡｇのリバウンドの遅延、及び／又はｉｉｉ）治療域の増加であり得る。薬物に関する「治療域」又は「薬学域」という用語は、毒性作用を有することなく疾患を効果的に処置することができる薬物投与量の範囲である。本発明の一実施形態では、単剤療法と比較して、併用処置によって治療域の増加を達成することができる。
【0479】
本発明は、ＨＢＶ感染を処置又は予防するための方法であって、治療的又は予防的有効量の本発明の医薬組合せを、ＨＢＶ感染を患う、又はそれに罹り易い対象に投与することを含む、方法を提供する。
【0480】
本発明の更なる態様は、慢性ＨＢＶ感染の発症を阻害又は処置するための本発明の医薬組合せの使用に関する。
【0481】
本発明の一態様は、ＨＢＶに感染した個体、例えば慢性ＨＢＶ感染症を有する個体を処置する方法であって、薬学的有効量のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び薬学的有効量の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを投与することを含む方法である。
【0482】
本発明はまた、併用処置における医薬として使用するためのＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドに関する。本発明はまた、併用処置において医薬として使用するための抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドに関する。
【0483】
特に、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、Ｂ型肝炎ウイルス感染症の処置に使用するためのものである。
【0484】
本発明の一実施形態は、慢性ＨＢＶウイルス感染などのＢ型肝炎ウイルス感染症を処置するための第１の医薬の製造におけるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの使用であり、第１の医薬は、本出願に記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドであり、第１の医薬は、第２の医薬と組み合わせて投与され、第２の医薬は、本出願に記載の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチド。
【0485】
本発明の一実施形態では、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド又は抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを含有する医療用組成物は、皮下用量として投与される。本発明のさらなる実施形態では、任意のＴＬＲ７アゴニストは、経口用量として投与されるべきである。医療用組成物は異なる投与経路を介して投与され得、異なる投与計画に従うことができる。
【0486】
本発明による医薬組合せは、典型的には有効量で投与される。
【0487】
一実施形態では、出願に記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び本抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを、２４週間～７２週間、例えば３６週間～６０週間、例えば４８週間、毎週又は毎月の用量で皮下投与する。隔日投与の期間中、１０週間～１４週間、例えば１２週間の処置休止期間があり得る。
【0488】
使用方法
Ｉ．ＨＢｓＡｇ発現の減少
いくつかの実施形態では、ＨＢｓＡｇの発現を減少させる目的で、有効量の本発明の医薬組合せのいずれか１つ、特に本明細書に記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞に送達する方法が提供される。本明細書で提供される方法は、任意の適切な細胞型において有用である。いくつかの実施形態では、細胞は、ＨＢＶ抗原を発現する任意の細胞（例えば、肝細胞、マクロファージ、単球由来細胞、前立腺癌細胞、脳の細胞、内分泌組織、骨髄、リンパ節、肺、胆嚢、肝臓、十二指腸、小腸、膵臓、腎臓、消化管、膀胱、脂肪及び軟部組織並びに皮膚）である。いくつかの実施形態では、細胞は、対象から得られた初代細胞であり、限定された数の継代を受けていてもよく、その結果、細胞はその天然の表現型特性を実質的に維持する。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドが送達される細胞は、エクスビボ又はインビトロである（すなわち、培養中の細胞又は細胞が存在する生物に送達することができる）。具体的な実施形態では、肝細胞のみにおけるＨＢｓＡｇの発現を減少させる目的で、有効量の本明細書に記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む医薬組合せを細胞に送達する方法が提供される。
Ｉ．ＨＢｓＡｇ発現の減少
いくつかの実施形態では、ＨＢｓＡｇの発現を減少させる目的で、有効量の本発明の医薬組合せのいずれか１つ、特に本明細書に記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを細胞に送達する方法が提供される。本明細書で提供される方法は、任意の適切な細胞型において有用である。いくつかの実施形態では、細胞は、ＨＢＶ抗原を発現する任意の細胞（例えば、肝細胞、マクロファージ、単球由来細胞、前立腺癌細胞、脳の細胞、内分泌組織、骨髄、リンパ節、肺、胆嚢、肝臓、十二指腸、小腸、膵臓、腎臓、消化管、膀胱、脂肪及び軟部組織並びに皮膚）である。いくつかの実施形態では、細胞は、対象から得られた初代細胞であり、限定された数の継代を受けていてもよく、その結果、細胞はその天然の表現型特性を実質的に維持する。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドが送達される細胞は、エクスビボ又はインビトロである（すなわち、培養中の細胞又は細胞が存在する生物に送達することができる）。具体的な実施形態では、肝細胞のみにおけるＨＢｓＡｇの発現を減少させる目的で、有効量の本明細書に記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む医薬組合せを細胞に送達する方法が提供される。
【0489】
いくつかの実施形態では、本発明の医薬組合せにおけるオリゴヌクレオチド治療薬は、適切な核酸送達方法を使用して導入することができ、この方法には、オリゴヌクレオチドを含有する溶液の注入、オリゴヌクレオチドによって覆われた粒子による衝撃、オリゴヌクレオチドを含有する溶液に細胞又は生物を曝露すること、又はオリゴヌクレオチドの存在下での細胞膜のエレクトロポレーションが含まれる。細胞にオリゴヌクレオチドを送達するための他の適切な方法、例えば脂質媒介キャリア輸送、化学媒介輸送、及びカチオン性リポソームトランスフェクション、例えばリン酸カルシウムなどを使用してもよい。
【0490】
阻害の結果は、細胞又は対象の１つ又は複数の特性を評価するための適切なアッセイによって、又はＨＢＶ抗原発現を示す分子（例えば、ＲＮＡ、タンパク質）を評価する生化学的技術によって確認することができる。いくつかの実施形態では、本明細書において提供される医薬組合せのオリゴヌクレオチドがＨＢＶ抗原の発現レベルを低下させる程度は、ＨＢＶ抗原の発現レベル（例えば、ｍＲＮＡ又はタンパク質レベル）を適切な対照（例えば、医薬組合せが送達されていないか、又は陰性対照が送達されている細胞又は細胞集団におけるＨＢＶ抗原発現のレベル）と比較することによって評価される。いくつかの実施形態では、ＨＢＶ抗原発現の適切な制御レベルは、制御レベルが毎回測定される必要がないように、所定のレベル又は値であり得る。所定のレベル又は値は、様々な形態をとることができる。いくつかの実施形態では、所定のレベル又は値は、中央値又は平均値などの単一のカットオフ値であり得る。
【0491】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のオリゴヌクレオチド、特に本明細書に記載のＲＮＡｉオリゴヌクレオチドを含む医薬組合せの投与は、細胞におけるＨＢＶ抗原（例えば、ＨＢｓＡｇ）発現レベルの減少をもたらす。いくつかの実施形態では、ＨＢＶ抗原発現レベルの減少は、ＨＢＶ抗原の適切な対照レベルと比較して、１％以下、５％以下、１０％以下、１５％以下、２０％以下、２５％以下、３０％以下、３５％以下、４０％以下、４５％以下、５０％以下、５５％以下、６０％以下、７０％以下、８０％以下、又は９０％以下への減少であり得る。適切な対照レベルは、本明細書に記載のオリゴヌクレオチド、特にＲＮＡｉオリゴヌクレオチドを含む医薬組合せと接触していない細胞又は細胞集団におけるＨＢＶ抗原発現のレベルであり得る。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法による細胞への本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドの送達の効果は、有限期間後に評価される。例えば、ＨＢＶ抗原のレベルは、オリゴヌクレオチドを細胞に導入してから、少なくとも８時間、１２時間、１８時間、２４時間、又は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６、６３、７０、７７、８４、９１、９８、１０５、１１２、１１９、１２６、１３３、１４０、若しくは１４７日後に、細胞内で分析することができる。
【0492】
いくつかの実施形態では、ＨＢＶ抗原（例えば、ＨＢｓＡｇ）発現レベルの減少は、投与後長期間持続する。いくつかの実施形態において、ＨＢｓＡｇ発現の検出可能な減少は、特にオリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである場合、本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドの投与後７～７０日の期間内で持続する。例えば、いくつかの実施形態において、検出可能な減少は、オリゴヌクレオチドの投与後１０～７０、１０～６０、１０～５０、１０～４０、１０～３０、又は１０～２０日の期間内で持続する。いくつかの実施形態において、検出可能な減少は、特にオリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである場合、本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドの投与後２０～７０、２０～６０、２０～５０、２０～４０又は２０～３０日の期間内で持続する。いくつかの実施形態において、検出可能な減少は、特にオリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである場合、本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドの投与後３０～７０、３０～６０、３０～５０又は３０～４０日の期間内で持続する。いくつかの実施形態において、検出可能な減少は、特にオリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである場合、本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドの投与後４０～７０、４０～６０、４０～５０、５０～７０、５０～６０又は６０～７０日の期間内で持続する。
【0493】
いくつかの実施形態において、ＨＢｓＡｇ発現の検出可能な減少は、特にオリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである場合、本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドの投与後２週間～２１週間の期間内で持続する。例えば、いくつかの実施形態において、検出可能な減少は、特にオリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである場合、本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドの投与後２～２０、４～２０、６～２０、８～２０、１０～２０、１２～２０、１４～２０、１６～２０又は１８～２０週間の期間内で持続する。いくつかの実施形態において、検出可能な減少は、特にオリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである場合、本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドの投与後２～１６、４～１６、６～１６、８～１６、１０～１６、１２～１６又は１４～１６週間の期間内で持続する。いくつかの実施形態において、検出可能な減少は、特にオリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである場合、本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドの投与後２～１２、４～１２、６～１２、８～１２又は１０～１２週間の期間内で持続する。いくつかの実施形態において、検出可能な減少は、特にオリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである場合、本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドの投与後２～１０、４～１０、６～１０又は８～１０週間の期間内で持続する。
【0494】
いくつかの実施形態において、本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドは、特にオリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである場合、細胞内でオリゴヌクレオチド（例えば、そのセンス鎖及びアンチセンス鎖）を発現するように操作された導入遺伝子の形態で送達される。いくつかの実施形態において、本発明の医薬組合せのオリゴヌクレオチドは、特にオリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである場合、本明細書中に開示される任意のオリゴヌクレオチを発現するように操作された導入遺伝子を使用して送達される。導入遺伝子は、ウイルスベクター（例えば、アデノウイルス、レトロウイルス、ワクシニアウイルス、ポックスウイルス、アデノ随伴ウイルス又は単純ヘルペスウイルス）又は非ウイルスベクター（例えば、プラスミド又は合成ｍＲＮＡ）を使用して送達され得る。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組合せの導入遺伝子を対象に直接注射することができる。
【0495】
ＩＩ．処置方法
本開示の態様は、対象におけるＨＢＶ感染の処置のためのＨＢｓＡｇ発現を減少させる（例えば、ＨＢｓＡｇ発現を減少させる）方法に関する。いくつかの実施形態では、本方法は、有効量本明細書に記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む医薬組合せを、それを必要とする対象に投与することを含み得る。本開示は、ＨＢＶ感染のリスクがある（又は感受性がある）対象及び／又はＨＢＶ感染に関連する疾患若しくは障害を処置する予防的及び治療的方法の両方を提供する。
本開示の態様は、対象におけるＨＢＶ感染の処置のためのＨＢｓＡｇ発現を減少させる（例えば、ＨＢｓＡｇ発現を減少させる）方法に関する。いくつかの実施形態では、本方法は、有効量本明細書に記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む医薬組合せを、それを必要とする対象に投与することを含み得る。本開示は、ＨＢＶ感染のリスクがある（又は感受性がある）対象及び／又はＨＢＶ感染に関連する疾患若しくは障害を処置する予防的及び治療的方法の両方を提供する。
【0496】
ある特定の態様では、本開示は、対象に治療剤（例えば、医薬組合せ、オリゴヌクレオチド若しくはベクター、又はそれをコードする導入遺伝子）を投与することによって、対象において本明細書に記載の疾患又は障害を予防する方法を提供する。いくつかの実施形態では、特に医薬組合せのオリゴヌクレオチドがＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである場合、処置される対象は、例えば肝臓におけるＨＢｓＡｇタンパク質の量の減少から治療上利益を得る対象である。疾患又は障害のリスクがある対象は、例えば、当技術分野で公知の診断アッセイ又は予後アッセイ（例えば、肝硬変及び／又は肝臓炎症の同定）の１つ又は組合せによって同定することができる。予防剤の投与は、疾患又は障害が予防されるか、あるいはその進行が遅延されるように、疾患又は障害に特徴的な症候の検出又は発現の前に行うことができる。
【0497】
本明細書に記載の方法は、典型的には、有効量の医薬組合せ、すなわち、望ましい治療結果をもたらすことができる量を対象に投与することを含む。治療上許容され得る量は、疾患又は障害を処置することができる量であり得る。任意の１人の対象の適切な投与量は、対象の大きさ、体表面積、年齢、投与される特定の組成物、組成物中の活性成分（複数可）、投与の時間及び経路、全身の健康状態、並びに同時に投与される他の薬物を含む特定の因子に依存する。
【0498】
いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に開示される医薬組合せの組成物のいずれか１つを、経腸（例えば、経口、胃栄養チューブ、十二指腸栄養チューブ、胃瘻造設術又は直腸によって）、非経口（例えば、皮下注射、静脈内注射又は注入、動脈内注射又は注入、骨内注入、筋肉内注射、脳内注射、脳室内注射、髄腔内）、局所（例えば、皮膚上、吸入、点眼剤を介して、又は粘膜を介して）、又は標的器官（例えば、対象の肝臓）への直接注射のいずれかによって投与される。典型的には、本明細書に開示される医薬組合せのオリゴヌクレオチドは、静脈内又は皮下に投与される。
【0499】
いくつかの実施形態では、処置される対象は、ヒト若しくは非ヒト霊長類又は他の哺乳動物対象である。他の例示的な対象としては、イヌ及びネコなどの家畜；ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ニワトリ等の家畜；マウス、ラット、モルモット、ハムスターなどの動物が挙げられる。
【0500】
実施形態
本発明の以下の実施形態は、本明細書に記載される任意の他の実施形態と組み合わせて使用することができる。
本発明の以下の実施形態は、本明細書に記載される任意の他の実施形態と組み合わせて使用することができる。
【0501】
１．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチド、ＴＬＲ７アゴニスト、インターフェロン－アルファ、抗ＨＢＶ抗体、ＰＤ１シグナル伝達に拮抗する抗体、及びヌクレオチド類似体からなる群から選択される少なくとも２つのＨＢＶ治療薬を含む、ＨＢＶを処置するための医薬組合せ。
【0502】
２．組合せが、表２及び表３に列挙される組合せＣ１～Ｃ１２０のいずれか１つである、実施形態１に記載の医薬組合せ。
【0503】
３．組合せが、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを含む、実施形態１に記載の医薬組合せ。
【0504】
４．ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡを標的とし、ＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡの発現を減少させるｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドである、実施形態３に記載の医薬組合せ。
【0505】
５．ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、１９～３０ヌクレオチド長のアンチセンス鎖を含むオリゴヌクレオチドであり、アンチセンス鎖が、ＡＣＡＡＮＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡ（配列番号１）として示されるＨＢｓＡｇ ｍＲＮＡの配列に対して相補性の領域を含む、実施形態３又は４に記載の医薬組合せ。
【0506】
６．ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、ＵＵＮＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＮ（配列番号２）として示される配列に対して相補性の領域を有するセンス鎖を含む、実施形態３～５のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0507】
７．ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、配列ＧＡＣＡＡＮＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号８）を含むセンス鎖を含み、センス鎖上の－ＧＡＡＡ－配列のヌクレオチドの１つ又は複数がＧａｌＮａｃ部分にコンジュゲートしており、好ましくは、ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、配列ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＮＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号４）を含むアンチセンス鎖をさらに含む、実施形態３～６のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0508】
８．ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、アンチセンス鎖と二重鎖領域を形成するセンス鎖を含むオリゴヌクレオチドであって、
センス鎖が、配列ＧＡＣＡＡＡＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号９）であって、３位、８～１０位、１２位、１３位及び１７位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、２位、４～７位、１１位、１４～１６位、１８～２６位及び３１～３６位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間のホスホロチオエート結合を含む、配列からなり、センス鎖上の－ＧＡＡＡ－配列の各ヌクレオチドは、一価ＧａｌＮａｃ部分にコンジュゲートされており；
アンチセンス鎖が、配列ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＵＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号６）であって、２位、３位、５位、７位、８位、１０位、１２位、１４位、１６位及び１９位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、４位、６位、９位、１１位、１３位、１５位、１７位、１８位及び２０～２２位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間、２位と３位のヌクレオチド間、３位と４位のヌクレオチド間、２０位と２１位のヌクレオチド間、及び２１位と２２位のヌクレオチド間のホスホロチオエート結合を含む、配列からなり、
アンチセンス鎖の５’－ヌクレオチドの糖の４’－炭素が、メトキシホスホネート（ＭＯＰ）を含む、実施形態３～７のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
センス鎖が、配列ＧＡＣＡＡＡＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号９）であって、３位、８～１０位、１２位、１３位及び１７位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、２位、４～７位、１１位、１４～１６位、１８～２６位及び３１～３６位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間のホスホロチオエート結合を含む、配列からなり、センス鎖上の－ＧＡＡＡ－配列の各ヌクレオチドは、一価ＧａｌＮａｃ部分にコンジュゲートされており；
アンチセンス鎖が、配列ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＵＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号６）であって、２位、３位、５位、７位、８位、１０位、１２位、１４位、１６位及び１９位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、４位、６位、９位、１１位、１３位、１５位、１７位、１８位及び２０～２２位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間、２位と３位のヌクレオチド間、３位と４位のヌクレオチド間、２０位と２１位のヌクレオチド間、及び２１位と２２位のヌクレオチド間のホスホロチオエート結合を含む、配列からなり、
アンチセンス鎖の５’－ヌクレオチドの糖の４’－炭素が、メトキシホスホネート（ＭＯＰ）を含む、実施形態３～７のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0509】
９．ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、アンチセンス鎖と二重鎖領域を形成するセンス鎖を含むオリゴヌクレオチドであって、
センス鎖が、配列ＧＡＣＡＡＡＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号９）であって、３位、８～１０位、１２位、１３位及び１７位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、２位、４～７位、１１位、１４～１６位、１８～２６位及び３１～３６位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間の１つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む、配列を含み、センス鎖上の－ＧＡＡＡ－配列の各ヌクレオチドは、一価ＧａｌＮａｃ部分にコンジュゲートされており、－ＧＡＡＡ－配列は、以下の構造：
を含み、
アンチセンス鎖が、ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＵＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号６）に記載の配列であって、２位、３位、５位、７位、８位、１０位、１２位、１４位、１６位及び１９位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、４位、６位、９位、１１位、１３位、１５位、１７位、１８位及び２０－２２位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びにヌクレオチド１と２、２と３、３と４、２０と２１、及び２１と２２の間に５つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む、配列を含み、アンチセンス鎖の５’－ヌクレオチドは、以下の構造：
又はその薬学的に許容され得る塩を有している、実施形態３～８のいずれか１つに記載の医薬組合。
センス鎖が、配列ＧＡＣＡＡＡＡＡＵＣＣＵＣＡＣＡＡＵＡＡＧＣＡＧＣＣＧＡＡＡＧＧＣＵＧＣ（配列番号９）であって、３位、８～１０位、１２位、１３位及び１７位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、２位、４～７位、１１位、１４～１６位、１８～２６位及び３１～３６位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びに１位と２位のヌクレオチド間の１つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む、配列を含み、センス鎖上の－ＧＡＡＡ－配列の各ヌクレオチドは、一価ＧａｌＮａｃ部分にコンジュゲートされており、－ＧＡＡＡ－配列は、以下の構造：
【化23】
アンチセンス鎖が、ＵＵＡＵＵＧＵＧＡＧＧＡＵＵＵＵＵＧＵＣＧＧ（配列番号６）に記載の配列であって、２位、３位、５位、７位、８位、１０位、１２位、１４位、１６位及び１９位の２’－フルオロ修飾ヌクレオチド、１位、４位、６位、９位、１１位、１３位、１５位、１７位、１８位及び２０－２２位の２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチド、並びにヌクレオチド１と２、２と３、３と４、２０と２１、及び２１と２２の間に５つのホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む、配列を含み、アンチセンス鎖の５’－ヌクレオチドは、以下の構造：
【化24】
【0510】
１０．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、ＰＤＬ１を標的とし、ＰＤＬ１の発現を減少させるアンチセンスオリゴヌクレオチドである、実施形態３～９のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0511】
１１．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、ＰＤＬ１ ｍＲＮＡのＲＮＡｓｅＨ媒介性分解を誘導するＮ－アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）コンジュゲート化ロックド核酸（ＬＮＡ）一本鎖オリゴヌクレオチド（ＳＳＯ）である、実施形態３～１０のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0512】
１２．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、配列ＣＣＴＡＴＴＴＡＡＣＡＴＣＡＧＡＣ（配列番号１１）を含む、実施形態３～１１のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0513】
１３．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、式ＧＮ２－Ｃ６ｏｃｏａｏＣＣｔａｔｔｔａａｃａｔｃＡＧＡＣ
（式中、Ｃ６は６個の炭素を有するアミノアルキル基を表し、大文字はβ－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシドを表し、小文字はＤＮＡヌクレオシドを表し、すべてのＬＮＡ Ｃは５－メチルシトシンであり、下付き文字ｏはホスホジエステルヌクレオシド結合を表し、特に指示しない限り、すべてのヌクレオシド間結合はホスホロチオエートヌクレオシド間結合であり、ＧＮ２は、以下の三価ＧａｌＮＡｃクラスターを表し：
さらに、三価ＧａｌＮＡｃクラスターの波線は、Ｃ６アミノアルキル基への三価ＧａｌＮＡｃクラスターのコンジュゲート部位を示す）
又はその薬学的に許容され得る塩を有している、実施形態３～１２のいずれか１つに記載の医薬組合せ．
（式中、Ｃ６は６個の炭素を有するアミノアルキル基を表し、大文字はβ－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシドを表し、小文字はＤＮＡヌクレオシドを表し、すべてのＬＮＡ Ｃは５－メチルシトシンであり、下付き文字ｏはホスホジエステルヌクレオシド結合を表し、特に指示しない限り、すべてのヌクレオシド間結合はホスホロチオエートヌクレオシド間結合であり、ＧＮ２は、以下の三価ＧａｌＮＡｃクラスターを表し：
【化25】
又はその薬学的に許容され得る塩を有している、実施形態３～１２のいずれか１つに記載の医薬組合せ．
【0514】
１４．組合せが、ビヒクル対照と比較して、患者の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及び／又はＨＢＶ－ＤＮＡを減少させることができる、実施形態３～１３のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0515】
１５．組合せが、患者の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及び／又はＨＢＶ－ＤＮＡを減少させることができ、減少が、ａ）抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドなしで投与した場合にＨＢＶを標的とする同じ用量のＲＮＡｉオリゴヌクレオチドによって提供される減少、及び／又はｂ）ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドなしで投与した場合に同じ用量の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドによって提供される減少よりも大きい、実施形態３～１４のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0516】
１６．組合せが、患者の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及び／又はＨＢＶ－ＤＮＡを減少させることができ、減少が、ａ）抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドなしで投与した場合にＨＢＶを標的とする同じ用量のＲＮＡｉオリゴヌクレオチドによって提供される減少及びｂ）ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドなしで投与した場合に同じ用量の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドによって提供される減少の合計よりも大きい、実施形態３～１５のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0517】
１７．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、実施形態３～１６のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0518】
１８．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約９ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約９ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、実施形態３～１７のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0519】
１９．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、実施形態３～１８のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【0520】
２０．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、実施形態３～１９のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0521】
２１．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ又は約６ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、実施形態３～２０のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0522】
２２．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、実施形態３～２１のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0523】
２３．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、約７ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量をもたらす量で存在する、実施形態３～２０又は２２のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0524】
２４．医薬組合せが、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドからなるか、又はそれらから本質的になる、実施形態３～２３のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0525】
２５．さらなる異なるＨＢＶ治療薬をさらに含む、実施形態３～２３のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0526】
２６．さらなる異なるＨＢＶ治療薬が、ＴＬＲ７アゴニスト、インターフェロン－アルファ、抗ＨＢＶ抗体、ＰＤ１シグナル伝達を阻害する抗体、又はヌクレオチド類似体である、実施形態２５に記載の医薬組合せ。
【0527】
２７．さらなる異なるＨＢＶ治療薬がＴＬＲ７アゴニストである、実施形態２６に記載の医薬組合せ。
【0528】
２８．ＨＢＶ治療薬の１つ又は２つ又はすべてが薬学的に許容され得る塩の形態である、実施形態３～２７のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0529】
２９．ＨＢＶ治療薬の１つ又は２つ又はすべてがプロドラッグの形態である、実施形態３～２８のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0530】
３０．ＨＢＶ治療薬の１つ又は２つ又はすべてが各々、薬学的に許容され得る担体、賦形剤、希釈剤又はアジュバントと共に組成物に含まれる、実施形態３～２９のいずれか１つに記載の医薬組合せ。
【0531】
３１．実施形態３～３０のいずれか１つに記載の医薬組合せを含む組成物。
【0532】
３２．Ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための、実施形態３～２９のいずれか１つに記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドと共に投与するための説明書とを含む、パーツのキット。
【0533】
３３．説明書において言及される抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、実施形態３～３０のいずれか１つに記載の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドである、実施形態３２に記載のパーツのキット。
【0534】
３４．キットが、実施形態９に記載のＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び実施形態１３に記載の抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む、実施形態３２又は３３に記載のパーツのキット。
【0535】
３５．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが皮下注射用に製剤化され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが皮下投与用に製剤化される、実施形態３２～３４のいずれか１つに記載のパーツのキット。
【0536】
３６．説明書に慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染症の処置が記載されている、実施形態３２～３５のいずれか１つに記載のパーツのキット。
【0537】
３７．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び／又は抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、細胞内でオリゴヌクレオチドを発現するように操作された導入遺伝子の形態である、実施形態３～３６のいずれか１つに記載の医薬組合せ、組成物又はキット。
【0538】
３８．Ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための、実施形態３～３７のいずれか１つに記載の医薬組合せ、組成物、又はキットの使用。
【0539】
３９．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの初回用量又は単回用量が、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量又は単回用量の投与前に投与される、実施形態３８に記載の使用。
【0540】
４０．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量の少なくとも約１週間後、少なくとも約２週間後、少なくとも約３週間後、少なくとも約４週間後、少なくとも約５週間後、少なくとも約６週間後、少なくとも約７週間後、少なくとも約８週間後、又は８週間超後に投与される、実施形態３８又は３９に記載の使用。
【0541】
４１．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量の少なくとも約４週間後に投与される、実施形態３８～４０のいずれか１つに記載の使用。
【0542】
４２．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、実施形態３８～４１のいずれか１つに記載の使用。
【0543】
４３．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、実施形態３８～４２のいずれか１つに記載の使用。
【0544】
４４．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが少なくとも５回投与される、実施形態３８～４３のいずれか１つに記載の使用。
【0545】
４５．医薬組合せが４８週間にわたって投与される、実施形態３８～４４のいずれか１つに記載の使用。
【0546】
４６．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが薬学的有効量で投与される、実施形態３８～４５のいずれか１つに記載の使用。
【0547】
４７．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態３８～４６のいずれか１つに記載の使用。
【0548】
４８．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約９ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態３８～４７のいずれか１つに記載の使用。
【0549】
４９．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態３８～４８のいずれか１つに記載の使用。
【0550】
５０．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約７ｍｇ／ｋｇの用量、又は約７ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、好ましくは、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、最大５回の約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、用量が、２週間ごとに少なくとも１回投与される、実施形態３８～４９のいずれか１つに記載の使用。
【0551】
５１．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態３８～５０のいずれか１つに記載の使用。
【0552】
５２．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態３８～５１のいずれか１つに記載の使用。
【0553】
５３．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇである、実施形態３８～５２のいずれか１つに記載の使用。
【0554】
５４．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、実施形態３８～５３のいずれか１つに記載の使用。
【0555】
５５．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇである、実施形態３８～５４のいずれか１つに記載の使用。
【0556】
５６．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇであり；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの各用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、実施形態３８～５５のいずれか１つに記載の使用。
【0557】
５７．処置されるＢ型肝炎ウイルス感染症が慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染症である、実施形態３８～５６のいずれか１つに記載の使用。
【0558】
５８．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形であり、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形である、実施形態３８～５７のいずれか１つに記載の使用。
【0559】
５９．医薬組合せが、ＨＢＶ ｍＲＮＡ転写物をコードする非表面抗原を標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドによる処置の非存在下で投与される、実施形態３８～５８のいずれか１つに記載の使用。
【0560】
６０．対象に、ＨＢｘＡｇ ｍＲＮＡ転写物を選択的に標的化するＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが投与されない、実施形態３８～５９のいずれか１つに記載の使用。
【0561】
６１．対象に有効量のエンテカビルを投与することをさらに含む、実施形態３８～６０のいずれか１つに記載の使用。
【0562】
６２．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び／又は抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、細胞内でオリゴヌクレオチドを発現するように操作された導入遺伝子の形態で送達される、実施形態３８～６１のいずれか１つに記載の使用。
【0563】
６３．薬に使用するための、実施形態３～３７のいずれか１つに記載の医薬組合せ、組成物、又はキット。
【0564】
６４．Ｂ型肝炎ウイルス感染症の処置での使用のための、実施形態３～３７のいずれか１つに記載の医薬組合せ、組成物、又はキット。
【0565】
６５．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量の投与前に投与される、実施形態６３又は６４に記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0566】
６６．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量の少なくとも約１週間後、少なくとも約２週間後、少なくとも約３週間後、少なくとも約４週間後、少なくとも約５週間後、少なくとも約６週間後、少なくとも約７週間後、少なくとも約８週間後、又は８週間超後に投与される、実施形態６３～６５のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0567】
６７．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量の少なくとも約４週間後に投与される、実施形態６３～６６のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0568】
６８．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、実施形態６３～６７のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0569】
６９．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、実施形態６３～６８のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0570】
７０．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが少なくとも５回投与される、実施形態６３～６９のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0571】
７１．医薬組合せが４８週間にわたって投与される、実施形態６３～７０のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0572】
７２．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが薬学的有効量で投与される、実施形態６３～７１のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0573】
７３．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態６３～７２のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0574】
７４．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約９ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態６３～７３のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0575】
７５．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態６３～７４のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0576】
７６．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約７ｍｇ／ｋｇの用量、又は約７ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、好ましくは、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、最大５回の約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、用量が、２週間ごとに少なくとも１回投与される、実施形態６３～７５のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0577】
７７．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態６３～７６のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0578】
７８．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態６３～７７のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0579】
７９．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇである、実施形態６３～７８のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0580】
８０．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、実施形態６３～７９のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0581】
８１．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇである、実施形態６３～８０のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0582】
８２．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇであり；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの各用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、実施形態６３～８１のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0583】
８３．処置されるＢ型肝炎ウイルス感染症が慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染症である、実施形態６３～８２のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0584】
８４．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形であり、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形である、実施形態６３～８３のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0585】
８５．医薬組合せが、ＨＢＶ ｍＲＮＡ転写物をコードする非表面抗原を標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドによる処置の非存在下で投与される、実施形態６３～８４のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0586】
８６．対象に、ＨＢｘＡｇ ｍＲＮＡ転写物を選択的に標的化するＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが投与されない、実施形態６３～８５のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0587】
８７．対象に有効量のエンテカビルを投与することをさらに含む、実施形態６３～８６のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0588】
８８．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び／又は抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、細胞内でオリゴヌクレオチドを発現するように操作された導入遺伝子の形態で送達される、実施形態６３～８７のいずれか１つに記載の使用のための医薬組合せ、組成物又はキット。
【0589】
８９．医薬の製造における、実施形態３～３７のいずれか１つに記載の医薬組合せ、組成物、又はキットの使用。
【0590】
９０．Ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための医薬の製造における、実施形態３～３７のいずれか１つに記載の医薬組合せ、組成物、又はキットの使用。
【0591】
９１．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量の投与前に投与される、実施形態８９又は９０に記載の使用。
【0592】
９２．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量の少なくとも約１週間後、少なくとも約２週間後、少なくとも約３週間後、少なくとも約４週間後、少なくとも約５週間後、少なくとも約６週間後、少なくとも約７週間後、少なくとも約８週間後、又は８週間超後に投与される、実施形態８９～９１のいずれか１つに記載の使用。
【0593】
９３．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量の少なくとも約４週間後に投与される、実施形態８９～９２のいずれか１つに記載の使用。
【0594】
９４．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、実施形態８９～９３のいずれか１つに記載の使用。
【0595】
９５．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、実施形態８９～９４のいずれか１つに記載の使用。
【0596】
９６．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが少なくとも５回投与される、実施形態８９～９５のいずれか１つに記載の使用。
【0597】
９７．医薬組合せが４８週間にわたって投与される、実施形態８９～９６のいずれか１つに記載の使用。
【0598】
９８．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが薬学的有効量で投与される、実施形態８９～９７のいずれか１つに記載の使用。
【0599】
９９．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態８９～９８のいずれか１つに記載の使用。
【0600】
１００．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約９ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態８９～９９のいずれか１つに記載の使用。
【0601】
１０１．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態８９～１００のいずれか１つに記載の使用。
【0602】
１０２．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約７ｍｇ／ｋｇの用量、又は約７ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、好ましくは、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、最大５回の約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、用量が、２週間ごとに少なくとも１回投与される、実施形態８９～１０１のいずれか１つに記載の使用。
【0603】
１０３．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態８９～１０２のいずれか１つに記載の使用。
【0604】
１０４．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態８９～１０３のいずれか１つに記載の使用。
【0605】
１０５．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇである、実施形態８９～１０４のいずれか１つに記載の使用。
【0606】
１０６．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、実施形態８９～１０５のいずれか１つに記載の使用。
【0607】
１０７．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇである、実施形態８９～１０６のいずれか１つに記載の使用。
【0608】
１０８．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇであり；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの各用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、実施形態８９～１０７のいずれか１つに記載の使用。
【0609】
１０９．処置されるＢ型肝炎ウイルス感染症が慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染症である、実施形態８９～１０８のいずれか１つに記載の使用。
【0610】
１１０．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形であり、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形である、実施形態８９～１０９のいずれか１つに記載の使用。
【0611】
１１１．医薬組合せが、ＨＢＶ ｍＲＮＡ転写物をコードする非表面抗原を標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドによる処置の非存在下で投与される、実施形態８９～１１０のいずれか１つに記載の使用。
【0612】
１１２．対象に、ＨＢｘＡｇ ｍＲＮＡ転写物を選択的に標的化するＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが投与されない、実施形態８９～１１１のいずれか１つに記載の使用。
【0613】
１１３．対象に有効量のエンテカビルを投与することをさらに含む、実施形態８９～１１２のいずれか１つに記載の使用。
【0614】
１１４．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び／又は抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、細胞内でオリゴヌクレオチドを発現するように操作された導入遺伝子の形態で送達される、実施形態８９～１１３のいずれか１つに記載の使用。
【0615】
１１５．Ｂ型肝炎ウイルス感染症を処置するための方法であって、治療有効量の実施形態３～３７のいずれか一項に記載の医薬組合せ、組成物、又はキットを、Ｂ型肝炎ウイルス感染症に感染した対象に投与することを含む、方法。
【0616】
１１６．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量の投与前に投与される、実施形態１１５に記載の方法。
【0617】
１１７．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量の少なくとも約１週間後、少なくとも約２週間後、少なくとも約３週間後、少なくとも約４週間後、少なくとも約５週間後、少なくとも約６週間後、少なくとも約７週間後、少なくとも約８週間後、又は８週間超後に投与される、実施形態１１５又は１１６に記載の方法。
【0618】
１１８．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの単回用量又は初回用量の少なくとも約４週間後に投与される、実施形態１１５～１１７のいずれか１つに記載の方法。
【0619】
１１９．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、実施形態１１５～１１８のいずれか１つに記載の方法。
【0620】
１２０．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、毎週投与され、少なくとも２回投与される、実施形態１１５～１１９のいずれか１つに記載の方法。
【0621】
１２１．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが少なくとも５回投与される、実施形態１１５～１２０のいずれか１つに記載の方法。
【0622】
１２２．医薬組合せが４８週間にわたって投与される、実施形態１１５～１２１のいずれか１つに記載の方法。
【0623】
１２３．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが薬学的有効量で投与される、実施形態１１５～１２２のいずれか１つに記載の方法。
【0624】
１２４．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態１１５～１２３のいずれか１つに記載の方法。
【0625】
１２５．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約９ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態１１５～１２４のいずれか１つに記載の方法。
【0626】
１２６．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約９ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態１１５～１２５のいずれか１つに記載の方法。
【0627】
１２７．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約０．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約１．５ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約２ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は少なくとも約７ｍｇ／ｋｇの用量、又は約７ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、好ましくは、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、最大５回の約３ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、用量が、２週間ごとに少なくとも１回投与される、実施形態１１５～１２６のいずれか１つに記載の方法。
【0628】
１２８．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、約３ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇの用量、又は約３ｍｇ／ｋｇの用量、又は約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態１１５～１２７のいずれか１つに記載の方法。
【0629】
１２９．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、３ｍｇ／ｋｇを超える用量、又は少なくとも約６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、実施形態１１５～１２８のいずれか１つに記載の方法。
【0630】
１３０．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇである、実施形態１１５～１２９のいずれか１つに記載の方法。
【0631】
１３１．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、実施形態１１５～１３０のいずれか１つに記載の方法。
【0632】
１３２．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇである、実施形態１１５～１３１のいずれか１つに記載の方法。
【0633】
１３３．抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの２回以上、好ましくは少なくとも５回の用量が、週１回投与され、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの初回用量が、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量の少なくとも約７日後に投与され；ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約９ｍｇ／ｋｇであり；抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの各用量が、３ｍｇ／ｋｇを超え、好ましくは少なくとも約６ｍｇ／ｋｇである、実施形態１１５～１３２のいずれか１つに記載の方法。
【0634】
１３４．処置されるＢ型肝炎ウイルス感染症が慢性Ｂ型肝炎ウイルス感染症である、実施形態１１５～１３３のいずれか１つに記載の方法。
【0635】
１３５．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形であり、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが皮下投与用の剤形である、実施形態１１５～１３４のいずれか１つに記載の方法。
【0636】
１３６．医薬組合せが、ＨＢＶ ｍＲＮＡ転写物をコードする非表面抗原を標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドによる処置の非存在下で投与される、実施形態１１５～１３５のいずれか１つに記載の方法。
【0637】
１３７．対象に、ＨＢｘＡｇ ｍＲＮＡ転写物を選択的に標的化するＲＮＡｉオリゴヌクレオチドが投与されない、実施形態１１５～１３６のいずれか１つに記載の方法。
【0638】
１３８．対象に有効量のエンテカビルを投与することをさらに含む、実施形態１１５～１３７のいずれか１つに記載の方法。
【0639】
１３９．ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び／又は抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが、細胞内でオリゴヌクレオチドを発現するように操作された導入遺伝子の形態で送達される、実施形態１１５～１３８のいずれか１つに記載の方法。
【0640】
１４０．細胞におけるＢ型肝炎ウイルス表面抗原の発現を減少させる方法であって、実施形態３～３７のいずれか１つに記載の医薬組合せ又は組成物を細胞に送達することを含む、方法。
【0641】
１４１．細胞が肝細胞である、実施形態１４０に記載の方法。
【0642】
１４２．細胞がインビボである、実施形態１４０又は１４１に記載の方法。
【0643】
１４３．細胞がインビトロである、実施形態１４０又は１４１に記載の方法。
【0644】
１４４．治療用オリゴヌクレオチドが、細胞内でオリゴヌクレオチドを発現するように操作された導入遺伝子の形態で送達される、実施形態１４０～１４３のいずれか１つに記載の方法。
【0645】
１４５．本明細書中において添付の図面を参照して実質的に記載される医薬組合せ、組成物、キット、使用、又は方法。
【0646】
代用等価分子
本発明は、上記に定義されるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと、上記に定義される抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを含む医薬組合せに関する。最も具体的には、これらの医薬組合せは、上記のＴ１及びＴ２として定義されるＨＢＶ治療薬を含む。
本発明は、上記に定義されるＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと、上記に定義される抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを含む医薬組合せに関する。最も具体的には、これらの医薬組合せは、上記のＴ１及びＴ２として定義されるＨＢＶ治療薬を含む。
【0647】
以下の実施例のセクションでは、実際的な目的のために、上記で定義したＴ１及びＴ２の代わりに代用等価分子を使用した。特に、マウスにおける使用のために調整された治療薬を使用した。しかしながら、これらの代用分子を用いて本明細書の実施例に開示される結果は、本明細書で定義されるＨＢＶを標的とする他のＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチド、例えばＴ１及びＴ２で得ることができる結果と実質的に同等であることが当業者によって理解されるであろう。
【0648】
例えば、実施例は特にマウスに関するので、本明細書の実施例で使用される特定の代用物を使用した。しかしながら、当業者は、ヒト細胞、組織及び対象において同等の結果を得るために、例えばＴ１及びＴ２を同様に使用することができるであろう。
【0649】
当業者は、ＨＢＶを標的とする代用ＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む医薬組合せに関する本明細書の実施例の結果を所有しているので、当業者は、本明細書で定義されるＨＢＶを標的とする他の適切なＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチド、例えば上記で定義されるＴ１及びＴ２で同等の結果を得ることができる。
【0650】
特に、本明細書の実施例で使用されたＨＢＶを標的とする代用ＲＮＡｉオリゴヌクレオチドは、Ｔ１と同等であり、「ｓＴ１」と呼ばれ、以下の通りである。
【0651】
以下の式のセンス鎖：５’ ｍＧ－Ｓ－ｍＡ－ｆＣ－ｍＡ－ｍＡ－ｍＧ－ｍＡ－ｆＡ－ｆＵ－ｆＣ－ｍＣ－ｆＵ－ｆＣ－ｍＡ－ｍＣ－ｍＡ－ｆＡ－ｍＵ－ｍＡ－ｍＡ－ｍＧ－ｍＣ－ｍＡ－ｍＧ－ｍＣ－ｍＣ－ｍＧ－［ａｄｅｍＡ－ＧａｌＮＡｃ］－［ａｄｅｍＡ－ＧａｌＮＡｃ］－［ａｄｅｍＡ－ＧａｌＮＡｃ］－ｍＧ－ｍＧ－ｍＣ－ｍＵ－ｍＧ－ｍＣ ３’（配列番号４０）；
以下の式のアンチセンス鎖にハイブリダイズされている：５’ ［ＭｅＰｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ－４Ｏ－ｍＵ］－Ｓ－ｆＵ－Ｓ－ｆＡ－Ｓ－ｍＵ－ｆＵ－ｍＧ－ｆＵ－ｆＧ－ｍＡ－ｆＧ－ｍＧ－ｆＡ－ｍＵ－ｆＵ－ｍＣ－ｆＵ－ｍＵ－ｍＧ－ｆＵ－ｍＣ－Ｓ－ｍＧ－Ｓ－ｍＧ ３’（配列番号４１）；
式中、ｍＸは２’－Ｏ－メチルリボヌクレオチドを示し；ｆＸは、２’－フルオロ－デオキシリボヌクレオチドを示し；［ａｄｅｍＡ－ＧａｌＮＡｃ］は、２’－Ｏ－ＧａｌＮＡｃ修飾アデノシンを示し；［ＭｅＰｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ－４Ｏ－ｍＵ］は、４’－Ｏ－モノメチルホスホネート－２’－Ｏ－メチルウリジンを示し、含まれる結合のうち、「－」はホスホジエステルを示し、「－Ｓ－」はホスホロチオエートを示す。
以下の式のアンチセンス鎖にハイブリダイズされている：５’ ［ＭｅＰｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ－４Ｏ－ｍＵ］－Ｓ－ｆＵ－Ｓ－ｆＡ－Ｓ－ｍＵ－ｆＵ－ｍＧ－ｆＵ－ｆＧ－ｍＡ－ｆＧ－ｍＧ－ｆＡ－ｍＵ－ｆＵ－ｍＣ－ｆＵ－ｍＵ－ｍＧ－ｆＵ－ｍＣ－Ｓ－ｍＧ－Ｓ－ｍＧ ３’（配列番号４１）；
式中、ｍＸは２’－Ｏ－メチルリボヌクレオチドを示し；ｆＸは、２’－フルオロ－デオキシリボヌクレオチドを示し；［ａｄｅｍＡ－ＧａｌＮＡｃ］は、２’－Ｏ－ＧａｌＮＡｃ修飾アデノシンを示し；［ＭｅＰｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ－４Ｏ－ｍＵ］は、４’－Ｏ－モノメチルホスホネート－２’－Ｏ－メチルウリジンを示し、含まれる結合のうち、「－」はホスホジエステルを示し、「－Ｓ－」はホスホロチオエートを示す。
【0652】
特に、本明細書の実施例で使用された代用抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、Ｔ２と同等であり、「ｓＴ２」と呼ばれ、以下の通りである。
５’ ［ＧａｌＮＡｃ－Ｃ６］－ｃ－ａ－Ａ－Ｓ－［５ｍｅＣ］－Ｓ－Ｇ－Ｓ－ｇ－Ｓ－ｔ－Ｓ－ａ－Ｓ－ｔ－Ｓ－ｔ－Ｓ－ｔ－Ｓ－ｔ－Ｓ－ｃ－Ｓ－ａ－Ｓ－ｃ－Ｓ－Ａ－Ｓ－Ｇ－Ｓ－Ｇ ３’（配列番号４２）
式中、大文字のヌクレオチドはＬＮＡを示し；小文字のヌクレオチドはＤＮＡを示し；［５ｍｅＣ］は５－メチルシトシンＬＮＡを示し；［ＧａｌＮＡｃ－Ｃ６］は、Ｃ６アルキルリンカーとの三価ＧａｌＮＡｃコンジュゲートを示し、含まれる結合のうち、「－」はホスホジエステルを示し、「－Ｓ－」はホスホロチオエートを示す。
５’ ［ＧａｌＮＡｃ－Ｃ６］－ｃ－ａ－Ａ－Ｓ－［５ｍｅＣ］－Ｓ－Ｇ－Ｓ－ｇ－Ｓ－ｔ－Ｓ－ａ－Ｓ－ｔ－Ｓ－ｔ－Ｓ－ｔ－Ｓ－ｔ－Ｓ－ｃ－Ｓ－ａ－Ｓ－ｃ－Ｓ－Ａ－Ｓ－Ｇ－Ｓ－Ｇ ３’（配列番号４２）
式中、大文字のヌクレオチドはＬＮＡを示し；小文字のヌクレオチドはＤＮＡを示し；［５ｍｅＣ］は５－メチルシトシンＬＮＡを示し；［ＧａｌＮＡｃ－Ｃ６］は、Ｃ６アルキルリンカーとの三価ＧａｌＮＡｃコンジュゲートを示し、含まれる結合のうち、「－」はホスホジエステルを示し、「－Ｓ－」はホスホロチオエートを示す。
【0653】
したがって、「ｓＴ１」及び「ｓＴ２」が本明細書の実施例及び図面で言及される場合、これは、それぞれＴ１及びＴ２のこれらの特定の同等の代用バージョンへの言及である。
【実施例】
【0654】
実施例１
概要
本研究の目的は、アデノ随伴ウイルス－Ｂ型肝炎ウイルス（ＡＡＶ－ＨＢＶ）マウスモデルにおける、本発明の医薬組合せにおける試験化合物の薬理学的有効性を調査することであった。上記でＴ１として定義されたＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの同等の代用物「ｓＴ１」及び上記でＴ２として定義された抗ＰＤＬ１オリゴヌクレオチドの同等の代用物「ｓＴ２」を、単剤療法として及び医薬組合せの一部として試験した。
概要
本研究の目的は、アデノ随伴ウイルス－Ｂ型肝炎ウイルス（ＡＡＶ－ＨＢＶ）マウスモデルにおける、本発明の医薬組合せにおける試験化合物の薬理学的有効性を調査することであった。上記でＴ１として定義されたＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの同等の代用物「ｓＴ１」及び上記でＴ２として定義された抗ＰＤＬ１オリゴヌクレオチドの同等の代用物「ｓＴ２」を、単剤療法として及び医薬組合せの一部として試験した。
【0655】
６８匹のＡＡＶ－ＨＢＶ感染マウスを選択し、投与前２８日目の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡレベル及び体重に基づいて１０個の群に分類した。
【0656】
ビヒクル（群０１）を０～３５日目に週１回投与した。ｓＴ２を６ｍｇ／ｋｇ（群０６、０９及び１０）で７～３５日目に週１回投与した。ｓＴ２を３ｍｇ／ｋｇ（群０４及び０７）及び６ｍｇ／ｋｇ（群０５及び０８）で２１～４９日目に週１回投与した。ｓＴ１を３ｍｇ／ｋｇ（群０２及び０７～０９）及び９ｍｇ／ｋｇ（群０３及び１０）で０日目に１回投与した。全ての化合物を５ｍＬ／ｋｇで皮下注射によって投与した。
【0657】
０～９１日目の間、動物の臨床徴候を１日２回モニタリングし、体重を週２回測定した。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルを週に１回測定した。
【0658】
材料及び方法
本研究は、以下に概説する手順に従って実施した。研究の過程で、データの品質又は完全性を変化させたであろう不都合な状況は生じなかった。
本研究は、以下に概説する手順に従って実施した。研究の過程で、データの品質又は完全性を変化させたであろう不都合な状況は生じなかった。
【0659】
本研究は、Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｏｒｇａｎｉｓａｔｉｏｎ（ＣＲＯ）Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（ＳＯＰ）及びＧｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒａｃｔｉｃｅ（ＧＲＰ）に従って実施した。
【0660】
組換えＡＡＶ－ＨＢＶ溶液は、主催者によって提供され、適切に希釈された。
【0661】
Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）及びＢ型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）の血清レベルを、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ ｉ２０００（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｌａｋｅ Ｂｌｕｆｆ，ＩＬ，ＵＳＡ）及び支持試薬によって検出した。血清ＨＢＶ－ＤＮＡを、ＡＢＩ ７５００（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡ，ＵＳＡ）及び検出キット（Ｓａｎｓｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ，Ｃｈｉｎａ）によって検出した。
【0662】
４～５週齢の８８匹の雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスを使用した。
【0663】
マウスを、温度（２１～２５℃）、湿度（４０～７０％）及び１２時間明／１２時間暗サイクル（７：００ＡＭ～７：００ＰＭの点灯）を制御したコーンコブベッドを備えたポリカーボネートケージに収容した。マウスには、通常の食餌（Ｒｏｄｅｎｔ Ｄｉｅｔ ＃５Ｃ０２，ＰＭＩ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，ＬＬＣ，ＩＮ，ＵＳＡ）及び滅菌水を自由に摂取させた。
【0664】
この研究におけるすべての手順は、地域の動物福祉法、ＣＲＯのグローバルポリシー及び手順、並びに実験動物の管理及び使用のための指針を遵守していた。
【0665】
マウスを到着後３日間（順化０日目～２日目）動物施設で順化させた。投与前０日目に、全てのマウスに、２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中、１×１０１１ベクターゲノムのＡＡＶ－ＨＢＶを尾静脈から注射した。
【0666】
動物の臨床徴候を、順化段階及び処置前段階の間に１日２回モニタリングした。順化０日目及び投与前２８日目に体重を測定した。投与前２８日目（ＡＡＶ－ＨＢＶ注射の２８日後）に、顎下静脈を介して血液試料を採取し、遠心分離して血清試料（マウスあたり１５μＬ）を調製した。血清試料をＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡについて測定した。
【0667】
投与前２８日目に測定したウイルスマーカーの血清レベル及び体重に基づいて、６８匹のマウスを選択し、群あたり６～８匹のマウスで１０個の群に無作為化した（表４）。
【0668】
ビヒクル（群０１）を０～３５日目に週１回投与した。ｓＴ２を６ｍｇ／ｋｇ（群０６、０９及び１０）で７～３５日目に週１回投与した。ｓＴ２を３ｍｇ／ｋｇ（群０４及び０７）及び６ｍｇ／ｋｇ（群０５及び０８）で２１～４９日目に週１回投与した。ｓＴ１を３ｍｇ／ｋｇ（群０２及び０７～０９）及び９ｍｇ／ｋｇ（群０３及び１０）で０日目に１回投与した。全ての化合物を５ｍＬ／ｋｇで皮下注射によって投与した。
【0669】
動物の臨床徴候を０～９１日目に１日２回モニタリングした。０、７、１４、２１、２８、３５、４２、４９及び５６日目に、すべての群のマウスから血清調製（マウスあたり１５＋１５μＬ）のために採血した。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ ＤＮＡの定量的検出のために、１５μＬの血漿試料を使用した。
【表4-1】
【0670】
結果
図１～図４に示すように、ビヒクル対照群におけるＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルは、０～９１日目の間安定に維持された。ビヒクル対照群と比較して、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチド（ｓＴ２）と組み合わせたＨＢＶを標的とするｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチド（ｓＴ１）の処置は、７～９１日目の間、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルを連続的かつ有意に低下させた。
図１～図４に示すように、ビヒクル対照群におけるＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルは、０～９１日目の間安定に維持された。ビヒクル対照群と比較して、抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチド（ｓＴ２）と組み合わせたＨＢＶを標的とするｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチド（ｓＴ１）の処置は、７～９１日目の間、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルを連続的かつ有意に低下させた。
【0671】
考察
これらの結果は、ＨＢＶを標的とするＴ１又はｓＴ１などのＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと、Ｔ２又はｓＴ２などの抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを含む医薬組合せのインビボでの有効性を示す。
これらの結果は、ＨＢＶを標的とするＴ１又はｓＴ１などのＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと、Ｔ２又はｓＴ２などの抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドとを含む医薬組合せのインビボでの有効性を示す。
【0672】
ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの両方を含む医薬組合せ（Ｇ０７～Ｇ１０）は、ＨＢＶ血清マーカーＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡのレベルを連続的かつ有意に低下させ、ＨＢＶに対する強力な阻害効果を示した。驚くべきことに、この組合せによって得られた効果は両方とも非常に有利であり、いずれかの個々の治療薬よりも大きな応答を誘発した。この効果はまた、驚くべき相乗的であり、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド単独によって得られた減少（Ｇ０２及びＧ０３）及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチド単独によって得られた減少（Ｇ０４～Ｇ０６）の両方の合計よりも、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡ血清レベルのより大きな減少を伴った。
【0673】
これらのインビボ試験の前に、ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチド及び抗ＰＤＬ１アンチセンスオリゴヌクレオチドの両方を含むＧ０７～Ｇ１０の医薬組合せのＨＢＶに対する有利で相乗的な効果は予測することができなかった。
【0674】
理論に拘束されることを望むものではないが、ＨＢＶを標的とするためのＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの治療薬クラス、特にｓｉＲＮＡは、ＰＤＬ１を標的化するためのアンチセンスオリゴヌクレオチドの治療薬クラスと組み合わせると、予想外に有利な結果に寄与すると考えられる。一般的なＲＮＡｉオリゴヌクレオチド配列、ＧａｌＮＡｃコンジュゲーション及びＬＮＡの使用など、本明細書に記載されるこれらの治療薬の有利な形態及び修飾も、予想外の有利な結果にさらに寄与し得る。
【0675】
これらの効果は、マウスにおいて（代用治療薬ｓＴ１及びｓＴ２を利用する場合）、インビボで本発明の医薬組合せについて証明されているので、ヒトのものなどの他の細胞／組織／対象において、Ｔ１及びＴ２などの同等の治療薬を使用する場合、インビボで本発明の医薬組合せについて同等の結果を得ることができることを理解されたい。
【0676】
実施例２
概要
本研究の目的は、アデノ随伴ウイルス－Ｂ型肝炎ウイルス（ＡＡＶ－ＨＢＶ）マウスモデルにおける、本発明の医薬組合せにおける試験化合物の薬理学的有効性を調査することであった。上記でＴ１として定義されたＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの同等の代用物「ｓＴ１」及び上記でＴ３として定義されたＴＬＲ７アゴニストの同等の代用物「ｓＴ３」を、単剤療法として及び医薬組合せの一部として試験した。ＡＡＶ－ＨＢＶ感染マウスを選択し、投与前２８日目の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡレベル及び体重に基づいて６匹の動物の群に分類した。ビヒクル（群０１）に、生理食塩水対照を０日目に１回、緩衝液対照を２１～５６日目に週１回投与した。１００ｍｇ／ｋｇのｓＴ３を２１～５６日目に毎週投与した（群３及び４）。３ｍｇ／ｋｇのｓＴ１を、５ｍＬ／ｋｇの皮下注射によって０日目に１回投与した。ｓＴ３を１０ｍＬ／ｋｇで経口投与した。０～１４０日目の間、動物の臨床徴候を１日２回モニタリングし、体重を週２回測定した。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルを週に１回測定した。
概要
本研究の目的は、アデノ随伴ウイルス－Ｂ型肝炎ウイルス（ＡＡＶ－ＨＢＶ）マウスモデルにおける、本発明の医薬組合せにおける試験化合物の薬理学的有効性を調査することであった。上記でＴ１として定義されたＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの同等の代用物「ｓＴ１」及び上記でＴ３として定義されたＴＬＲ７アゴニストの同等の代用物「ｓＴ３」を、単剤療法として及び医薬組合せの一部として試験した。ＡＡＶ－ＨＢＶ感染マウスを選択し、投与前２８日目の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡレベル及び体重に基づいて６匹の動物の群に分類した。ビヒクル（群０１）に、生理食塩水対照を０日目に１回、緩衝液対照を２１～５６日目に週１回投与した。１００ｍｇ／ｋｇのｓＴ３を２１～５６日目に毎週投与した（群３及び４）。３ｍｇ／ｋｇのｓＴ１を、５ｍＬ／ｋｇの皮下注射によって０日目に１回投与した。ｓＴ３を１０ｍＬ／ｋｇで経口投与した。０～１４０日目の間、動物の臨床徴候を１日２回モニタリングし、体重を週２回測定した。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルを週に１回測定した。
【0677】
材料及び方法
本研究は、以下に概説する手順に従って実施した。研究の過程で、データの品質又は完全性を変化させたであろう不都合な状況は生じなかった。本研究は、Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｏｒｇａｎｉｓａｔｉｏｎ（ＣＲＯ）Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（ＳＯＰ）及びＧｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒａｃｔｉｃｅ（ＧＲＰ）に従って実施した。組換えＡＡＶ－ＨＢＶ溶液は、主催者によって提供され、適切に希釈された。Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）及びＢ型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）の血清レベルを、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ ｉ２０００（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｌａｋｅ Ｂｌｕｆｆ，ＩＬ，ＵＳＡ）及び支持試薬によって検出した。血清ＨＢＶ－ＤＮＡを、ＡＢＩ ７５００（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡ，ＵＳＡ）及び検出キット（Ｓａｎｓｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ，Ｃｈｉｎａ）によって検出した。４～５週齢のＣ５７ＢＬ／６雄マウスを使用した。マウスを、温度（２１～２５℃）、湿度（４０～７０％）及び１２時間明／１２時間暗サイクル（７：００ＡＭ～７：００ＰＭの点灯）を制御したコーンコブベッドを備えたポリカーボネートケージに収容した。マウスには、通常の食餌Ｒｏｄｅｎｔ Ｄｉｅｔ ＃５Ｃ０２（ＰＭＩ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，ＬＬＣ，ＩＮ，ＵＳＡ）及び滅菌水を自由に摂取させた。この研究におけるすべての手順は、地域の動物福祉法、ＣＲＯのグローバルポリシー及び手順、並びに実験動物の管理及び使用のための指針を遵守していた。マウスを到着後６日間（順化０日目～５日目）動物施設で順化させた。投与前０日目に、全てのマウスに、２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中、１×１０１１ベクターゲノムのＡＡＶ－ＨＢＶを尾静脈から注射した。動物の臨床徴候を、順化段階及び処置前段階の間に１日２回モニタリングした。順化０日目及び投与前２８日目に体重を測定した。投与前２８日目（ＡＡＶ－ＨＢＶ注射の２８日後）に、顎下静脈を介して血液試料を採取し、遠心分離して血清試料（マウスあたり１０μＬ）を調製した。血清試料をＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡについて測定した。投与前２８日目に測定したウイルスマーカーの血清レベル及び体重に基づいて、マウスを選択し、群あたり６匹のマウスで群に無作為化した（表４）。ビヒクル（群０１）に、生理食塩水対照を０日目に１回、緩衝液対照を２１、２８、３５、４２、５６日目に毎週投与した。１００ｍｇ／ｋｇのｓＴ３を２１、２８、３５、４２、５６日目に毎週、単独療法で（群３）、又は０日目に１回投与される３ｍｇ／ｋｇのｓＴ１との併用療法（群０４）で投与した。ｓＴ１を５ｍＬ／ｋｇで皮下注射によって投与し、ｓＴ３を１０ｍＬ／ｋｇで経口投与した。動物の臨床徴候を０～１４０日目の間、１日２回モニタリングし、体重を週に２回測定した。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ ＤＮＡの血清レベルを、０～１４０日目まで毎週測定した。
本研究は、以下に概説する手順に従って実施した。研究の過程で、データの品質又は完全性を変化させたであろう不都合な状況は生じなかった。本研究は、Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｏｒｇａｎｉｓａｔｉｏｎ（ＣＲＯ）Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（ＳＯＰ）及びＧｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒａｃｔｉｃｅ（ＧＲＰ）に従って実施した。組換えＡＡＶ－ＨＢＶ溶液は、主催者によって提供され、適切に希釈された。Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）及びＢ型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）の血清レベルを、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ ｉ２０００（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｌａｋｅ Ｂｌｕｆｆ，ＩＬ，ＵＳＡ）及び支持試薬によって検出した。血清ＨＢＶ－ＤＮＡを、ＡＢＩ ７５００（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡ，ＵＳＡ）及び検出キット（Ｓａｎｓｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ，Ｃｈｉｎａ）によって検出した。４～５週齢のＣ５７ＢＬ／６雄マウスを使用した。マウスを、温度（２１～２５℃）、湿度（４０～７０％）及び１２時間明／１２時間暗サイクル（７：００ＡＭ～７：００ＰＭの点灯）を制御したコーンコブベッドを備えたポリカーボネートケージに収容した。マウスには、通常の食餌Ｒｏｄｅｎｔ Ｄｉｅｔ ＃５Ｃ０２（ＰＭＩ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，ＬＬＣ，ＩＮ，ＵＳＡ）及び滅菌水を自由に摂取させた。この研究におけるすべての手順は、地域の動物福祉法、ＣＲＯのグローバルポリシー及び手順、並びに実験動物の管理及び使用のための指針を遵守していた。マウスを到着後６日間（順化０日目～５日目）動物施設で順化させた。投与前０日目に、全てのマウスに、２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中、１×１０１１ベクターゲノムのＡＡＶ－ＨＢＶを尾静脈から注射した。動物の臨床徴候を、順化段階及び処置前段階の間に１日２回モニタリングした。順化０日目及び投与前２８日目に体重を測定した。投与前２８日目（ＡＡＶ－ＨＢＶ注射の２８日後）に、顎下静脈を介して血液試料を採取し、遠心分離して血清試料（マウスあたり１０μＬ）を調製した。血清試料をＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡについて測定した。投与前２８日目に測定したウイルスマーカーの血清レベル及び体重に基づいて、マウスを選択し、群あたり６匹のマウスで群に無作為化した（表４）。ビヒクル（群０１）に、生理食塩水対照を０日目に１回、緩衝液対照を２１、２８、３５、４２、５６日目に毎週投与した。１００ｍｇ／ｋｇのｓＴ３を２１、２８、３５、４２、５６日目に毎週、単独療法で（群３）、又は０日目に１回投与される３ｍｇ／ｋｇのｓＴ１との併用療法（群０４）で投与した。ｓＴ１を５ｍＬ／ｋｇで皮下注射によって投与し、ｓＴ３を１０ｍＬ／ｋｇで経口投与した。動物の臨床徴候を０～１４０日目の間、１日２回モニタリングし、体重を週に２回測定した。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ ＤＮＡの血清レベルを、０～１４０日目まで毎週測定した。
【表4-2】
【0678】
結果及び考察
図６Ａ及び６Ｂに示すように、ビヒクル対照群のＨＢｓＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルは、０～１４０日目の間、比較的安定したレベルで維持された。ＨＢＶを標的とするｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドの単剤療法群（ｓＴ１、群０２）及びＴＬＲ７アゴニストの単剤療法群（ｓＴ３、群０３）と比較して、ＨＢＶを標的とするｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドとＴＬＲ７アゴニストとの組合せ（ｓＴ１＋ｓＴ３、群０４）は、ＨＢｓＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルのさらなる減少を示す。
図６Ａ及び６Ｂに示すように、ビヒクル対照群のＨＢｓＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルは、０～１４０日目の間、比較的安定したレベルで維持された。ＨＢＶを標的とするｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドの単剤療法群（ｓＴ１、群０２）及びＴＬＲ７アゴニストの単剤療法群（ｓＴ３、群０３）と比較して、ＨＢＶを標的とするｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドとＴＬＲ７アゴニストとの組合せ（ｓＴ１＋ｓＴ３、群０４）は、ＨＢｓＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルのさらなる減少を示す。
【0679】
これらの結果は、ＨＢＶを標的とするＴ１などのＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと、Ｔ３などのＴＬＲ７アゴニストとを含む医薬組合せのインビボでの有効性を示す。ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドとＴＬＲ７アゴニストの両方を含む医薬組合せ（群０４）は、ＨＢＶ血清マーカーＨＢｓＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡのレベルのさらなる低下を示し、ＨＢＶに対する阻害効果を示す。これらの効果は、マウスにおいて（代用治療薬ｓＴ１及びｓＴ３を利用する場合）、インビボで本発明の医薬組合せについて証明されているので、ヒトのものなどの他の細胞／組織／対象において、Ｔ１及びＴ３などの同等の治療薬を使用する場合、インビボで本発明の医薬組合せについて同等の結果を得ることができることを理解されたい。
【0680】
実施例３
概要
本研究の目的は、アデノ随伴ウイルス－Ｂ型肝炎ウイルス（ＡＡＶ－ＨＢＶ）ＳＣＩＤマウスモデルにおける、本発明の医薬組合せにおける試験化合物の薬理学的有効性を調査することであった。上記でＴ１として定義されたＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの同等の代用物「ｓＴ１」及び上記でＴ５として定義された抗ＨＢＶ抗体の同等の代用物「Ｔ５」を、単剤療法として及び医薬組合せの一部として試験した。特に、本研究では、Ｔ５は、ａ）配列番号１２を含むＣＤＲ－Ｈ１、ｂ）配列番号１３を含むＣＤＲ－Ｈ２、及びｃ）配列番号１４を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨドメイン、並びにｄ）配列番号１５を含むＣＤＲ－Ｌ１、ｅ）配列番号１６を含むＣＤＲ－Ｌ２、及びｆ）配列番号１７を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬドメインを含む抗体であった。より詳細には、本研究では、Ｔ５は、配列番号３９を含むＶＨドメインと、配列番号３７を含むＶＬドメインとを含む抗体であった。より詳細には、本研究では、Ｔ５は、配列番号３８を含む重鎖と、配列番号３６を含む軽鎖とを含む抗体であった。
概要
本研究の目的は、アデノ随伴ウイルス－Ｂ型肝炎ウイルス（ＡＡＶ－ＨＢＶ）ＳＣＩＤマウスモデルにおける、本発明の医薬組合せにおける試験化合物の薬理学的有効性を調査することであった。上記でＴ１として定義されたＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドの同等の代用物「ｓＴ１」及び上記でＴ５として定義された抗ＨＢＶ抗体の同等の代用物「Ｔ５」を、単剤療法として及び医薬組合せの一部として試験した。特に、本研究では、Ｔ５は、ａ）配列番号１２を含むＣＤＲ－Ｈ１、ｂ）配列番号１３を含むＣＤＲ－Ｈ２、及びｃ）配列番号１４を含むＣＤＲ－Ｈ３を含むＶＨドメイン、並びにｄ）配列番号１５を含むＣＤＲ－Ｌ１、ｅ）配列番号１６を含むＣＤＲ－Ｌ２、及びｆ）配列番号１７を含むＣＤＲ－Ｌ３を含むＶＬドメインを含む抗体であった。より詳細には、本研究では、Ｔ５は、配列番号３９を含むＶＨドメインと、配列番号３７を含むＶＬドメインとを含む抗体であった。より詳細には、本研究では、Ｔ５は、配列番号３８を含む重鎖と、配列番号３６を含む軽鎖とを含む抗体であった。
【0681】
ＡＡＶ－ＨＢＶ感染ＳＣＩＤマウスを選択し、投与前１４日目の血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡレベル及び体重に基づいて６匹の動物の群に分類した。ビヒクル（群０１）に、生理食塩水対照を０日目に、緩衝液対照を２１、２５、２９、３３日目に１回投与した。２０ｍｇ／ｋｇのＴ５を２１、２５、２９、３３日目に投与した（群３及び６）。９ｍｇ／ｋｇのｓＴ１を、５ｍＬ／ｋｇの皮下注射によって０日目に１回投与した。Ｔ５を１０ｍＬ／ｋｇで静脈内注射によって投与した。０～７７日目の間、動物の臨床徴候を１日２回モニタリングし、体重を週２回測定した。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルを週に１回測定した。
【0682】
材料及び方法
本研究は、以下に概説する手順に従って実施した。研究の過程で、データの品質又は完全性を変化させたであろう不都合な状況は生じなかった。本研究は、Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｏｒｇａｎｉｓａｔｉｏｎ（ＣＲＯ）Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（ＳＯＰ）及びＧｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒａｃｔｉｃｅ（ＧＲＰ）に従って実施した。組換えＡＡＶ－ＨＢＶ溶液は、主催者によって提供され、適切に希釈された。Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）及びＢ型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）の血清レベルを、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ ｉ２０００（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｌａｋｅ Ｂｌｕｆｆ，ＩＬ，ＵＳＡ）及び２０個の支持試薬によって検出した。血清ＨＢＶ－ＤＮＡを、ＡＢＩ ７５００（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡ，ＵＳＡ）及び検出キット（Ｓａｎｓｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ，Ｃｈｉｎａ）によって検出した。４～５週齢のＣＢ１７ ＳＣＩＤ雄マウスを使用した。マウスを、温度（２１～２５℃）、湿度（４０～７０％）及び１２時間明／１２時間暗サイクル（７：００ＡＭ～７：００ＰＭの点灯）を制御したコーンコブベッドを備えたポリカーボネートケージに収容した。マウスには、通常の食餌（Ｒｏｄｅｎｔ Ｄｉｅｔ ＃５ＣＪＬ，ＰＭＩ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，ＬＬＣ，ＩＮ，ＵＳＡ）及び滅菌水を自由に摂取させた。この研究におけるすべての手順は、地域の動物福祉法、ＣＲＯのグローバルポリシー及び手順、並びに実験動物の管理及び使用のための指針を遵守していた。マウスを到着後６日間（順化０日目～５日目）動物施設で順化させた。投与前０日目に、全てのマウスに、２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中、１×１０１１ベクターゲノムのＡＡＶ－ＨＢＶを尾静脈から注射した。動物の臨床徴候を、順化段階及び処置前段階の間に１日２回モニタリングした。順化０日目及び投与前１４日目に体重を測定した。投与前１４日目（ＡＡＶ－ＨＢＶ注射の１４日後）に、顎下静脈を介して血液試料を採取し、遠心分離して血清試料（マウスあたり１０μＬ）を調製した。血清試料をＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡについて測定した。投与前１４日目に測定したウイルスマーカーの血清レベル及び体重に基づいて、マウスを選択し、群あたり６匹のマウスで群に無作為化した（表５）。ビヒクル（群０１）に、生理食塩水対照を０日目に、緩衝液対照を２１、２５、２９、３３日目に１回投与した。２０ｍｇ／ｋｇのＴ５を２１、２５、２９、３３日目に単剤療法（群３）で、又は９ｍｇ／ｋｇのｓＴ１を０日目に１回投与する併用療法（群０６）で投与した。ｓＴ１を５ｍＬ／ｋｇの皮下注射によって投与し、Ｔ５及びＩｇＧコントロールを１０ｍＬ／ｋｇの静脈内注射によって投与した。動物の臨床徴候を０～７７日目の間、１日２回モニタリングし、体重を週に２回測定した。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ ＤＮＡの血清レベルを、０、７、１４、２１、２５、２８、３３、３５、４２、４９、５６、６３、７０及び７７日目に測定した。
本研究は、以下に概説する手順に従って実施した。研究の過程で、データの品質又は完全性を変化させたであろう不都合な状況は生じなかった。本研究は、Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｏｒｇａｎｉｓａｔｉｏｎ（ＣＲＯ）Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（ＳＯＰ）及びＧｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒａｃｔｉｃｅ（ＧＲＰ）に従って実施した。組換えＡＡＶ－ＨＢＶ溶液は、主催者によって提供され、適切に希釈された。Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）及びＢ型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）の血清レベルを、ＡＲＣＨＩＴＥＣＴ ｉ２０００（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｌａｋｅ Ｂｌｕｆｆ，ＩＬ，ＵＳＡ）及び２０個の支持試薬によって検出した。血清ＨＢＶ－ＤＮＡを、ＡＢＩ ７５００（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡ，ＵＳＡ）及び検出キット（Ｓａｎｓｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｉｎｃ．，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ，Ｃｈｉｎａ）によって検出した。４～５週齢のＣＢ１７ ＳＣＩＤ雄マウスを使用した。マウスを、温度（２１～２５℃）、湿度（４０～７０％）及び１２時間明／１２時間暗サイクル（７：００ＡＭ～７：００ＰＭの点灯）を制御したコーンコブベッドを備えたポリカーボネートケージに収容した。マウスには、通常の食餌（Ｒｏｄｅｎｔ Ｄｉｅｔ ＃５ＣＪＬ，ＰＭＩ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，ＬＬＣ，ＩＮ，ＵＳＡ）及び滅菌水を自由に摂取させた。この研究におけるすべての手順は、地域の動物福祉法、ＣＲＯのグローバルポリシー及び手順、並びに実験動物の管理及び使用のための指針を遵守していた。マウスを到着後６日間（順化０日目～５日目）動物施設で順化させた。投与前０日目に、全てのマウスに、２００μＬのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中、１×１０１１ベクターゲノムのＡＡＶ－ＨＢＶを尾静脈から注射した。動物の臨床徴候を、順化段階及び処置前段階の間に１日２回モニタリングした。順化０日目及び投与前１４日目に体重を測定した。投与前１４日目（ＡＡＶ－ＨＢＶ注射の１４日後）に、顎下静脈を介して血液試料を採取し、遠心分離して血清試料（マウスあたり１０μＬ）を調製した。血清試料をＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡについて測定した。投与前１４日目に測定したウイルスマーカーの血清レベル及び体重に基づいて、マウスを選択し、群あたり６匹のマウスで群に無作為化した（表５）。ビヒクル（群０１）に、生理食塩水対照を０日目に、緩衝液対照を２１、２５、２９、３３日目に１回投与した。２０ｍｇ／ｋｇのＴ５を２１、２５、２９、３３日目に単剤療法（群３）で、又は９ｍｇ／ｋｇのｓＴ１を０日目に１回投与する併用療法（群０６）で投与した。ｓＴ１を５ｍＬ／ｋｇの皮下注射によって投与し、Ｔ５及びＩｇＧコントロールを１０ｍＬ／ｋｇの静脈内注射によって投与した。動物の臨床徴候を０～７７日目の間、１日２回モニタリングし、体重を週に２回測定した。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ ＤＮＡの血清レベルを、０、７、１４、２１、２５、２８、３３、３５、４２、４９、５６、６３、７０及び７７日目に測定した。
【表5】
【0683】
結果
図７及び８に示すように、ビヒクル対照群におけるＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルは、０～７７日目の間安定に維持された。ＩｇＧ対照と組み合わせたＨＢＶを標的とするｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチド（ｓＴ１）群（群５）と比較して、抗ＨＢＶ抗体（Ｔ５）と組み合わせたＨＢＶを標的とするｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチド（ｓＴ１）との組合せ（群０６）は、２１～３３日目の抗ＨＢｓ抗体処置期間中にＨＢｓＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルを有意に低下させた。
図７及び８に示すように、ビヒクル対照群におけるＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルは、０～７７日目の間安定に維持された。ＩｇＧ対照と組み合わせたＨＢＶを標的とするｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチド（ｓＴ１）群（群５）と比較して、抗ＨＢＶ抗体（Ｔ５）と組み合わせたＨＢＶを標的とするｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチド（ｓＴ１）との組合せ（群０６）は、２１～３３日目の抗ＨＢｓ抗体処置期間中にＨＢｓＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡの血清レベルを有意に低下させた。
【0684】
考察
これらの結果は、Ｔ１又はｓＴ１などのＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと、本研究で使用されるＴ５などの抗ＨＢＶ抗体（抗ＨＢｓ）とを含む医薬組合せのインビボでの有効性を示す。ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと抗ＨＢＶ抗体の両方を含む医薬組合せ（群０６）は、ＨＢＶ血清マーカーＨＢｓＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡのレベルを急速かつ有意に低下させ、ＨＢＶに対する強力な阻害効果を示した。これらの効果は、マウスにおいて（代用治療薬ｓＴ１を利用する場合）、インビボで本発明の医薬組合せについて証明されているので、ヒトのものなどの他の細胞／組織／対象において、Ｔ１などの同等の治療薬を使用する場合、インビボで本発明の医薬組合せについて同等の結果を得ることができることを理解されたい。
これらの結果は、Ｔ１又はｓＴ１などのＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと、本研究で使用されるＴ５などの抗ＨＢＶ抗体（抗ＨＢｓ）とを含む医薬組合せのインビボでの有効性を示す。ＨＢＶを標的とするＲＮＡｉオリゴヌクレオチドと抗ＨＢＶ抗体の両方を含む医薬組合せ（群０６）は、ＨＢＶ血清マーカーＨＢｓＡｇ及びＨＢＶ－ＤＮＡのレベルを急速かつ有意に低下させ、ＨＢＶに対する強力な阻害効果を示した。これらの効果は、マウスにおいて（代用治療薬ｓＴ１を利用する場合）、インビボで本発明の医薬組合せについて証明されているので、ヒトのものなどの他の細胞／組織／対象において、Ｔ１などの同等の治療薬を使用する場合、インビボで本発明の医薬組合せについて同等の結果を得ることができることを理解されたい。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5-1】
【図5-2】
【図5-3】
【図5-4】
【図6-1】
【図6-2】
【図7-1】
【図7-2】
【図7-3】
【図8-1】
【図8-2】
【図8-3】
【配列表】
【国際調査報告】