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▶ ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-12-05
(54)【発明の名称】酵素を含有する機械洗浄組成物
(51)【国際特許分類】
C11D 3/386 20060101AFI20241128BHJP
C11D 1/66 20060101ALI20241128BHJP
C12N 15/31 20060101ALI20241128BHJP
C12N 15/60 20060101ALI20241128BHJP
C12N 15/56 20060101ALI20241128BHJP
D06L 1/12 20060101ALI20241128BHJP
C12N 9/88 20060101ALN20241128BHJP
C12N 9/42 20060101ALN20241128BHJP
C12N 9/24 20060101ALN20241128BHJP
C12N 9/26 20060101ALN20241128BHJP
C12N 9/22 20060101ALN20241128BHJP
【ＦＩ】
C11D3/386
C11D1/66
C12N15/31
C12N15/60
C12N15/56
D06L1/12
C12N9/88 ZNA
C12N9/42
C12N9/24
C12N9/26 Z
C12N9/26 A
C12N9/22
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024527832
(86)(22)【出願日】2023-04-24
(85)【翻訳文提出日】2024-05-13
(86)【国際出願番号】 US2023066113
(87)【国際公開番号】W WO2023215680
(87)【国際公開日】2023-11-09
(31)【優先権主張番号】22171692.1
(32)【優先日】2022-05-04
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】590005058
【氏名又は名称】ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー
【氏名又は名称原語表記】ＴＨＥ ＰＲＯＣＴＥＲ ＆ ＧＡＭＢＬＥ ＣＯＭＰＡＮＹ
【住所又は居所原語表記】Ｏｎｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｐｌａｚａ， Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ， ＯＨ ４５２０２，Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ
(74)【代理人】
【識別番号】100110423
【弁理士】
【氏名又は名称】曾我 道治
(74)【代理人】
【識別番号】100111648
【弁理士】
【氏名又は名称】梶並 順
(74)【代理人】
【識別番号】100122437
【弁理士】
【氏名又は名称】大宅 一宏
(74)【代理人】
【識別番号】100209495
【弁理士】
【氏名又は名称】佐藤 さおり
(72)【発明者】
【氏名】ジョーンズ、キャサリン
(72)【発明者】
【氏名】ラント、ニール・ジョゼフ
(72)【発明者】
【氏名】モミン、ナザルモハマド・グラムフセイン
(72)【発明者】
【氏名】モラレス・ガルシア、アナ・エル
(72)【発明者】
【氏名】ヴァレンティーニ、アレッサンドラ
(72)【発明者】
【氏名】ウィラッツ、ウィリアム・ジー・ティー
(72)【発明者】
【氏名】ヤウ、ハミッシュ・チュン・ラム
【テーマコード（参考）】
4H003
【Ｆターム（参考）】
4H003AC08
4H003AE05
4H003DA05
4H003DA14
4H003EA16
4H003EA27
4H003EA28
4H003EB08
4H003EB30
4H003EB32
4H003EB36
4H003EB42
4H003EB46
4H003EC01
4H003ED02
4H003FA26
(57)【要約】
（ａ）（ｉ）アルギン酸リアーゼ酵素、（ｉｉ）Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｉｉ）Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｖ）β－１，３－グルカナーゼ酵素、及び（ｖ）β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素から選択される少なくとも２種の酵素と、（ｂ）洗浄補助剤と、を含む、洗浄機用洗浄組成物、並びに洗浄機の内部を処理する方法、並びにそのような組成物を使用して洗浄機の内部表面上の汚れを分解する方法。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
（ａ）（ｉ）アルギン酸リアーゼ酵素、（ｉｉ）Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｉｉ）Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｖ）エンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、及び（ｖ）エンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素から選択される少なくとも２種の酵素と、（ｂ）洗浄補助剤と、を含む、洗浄機用洗浄組成物。
【請求項2】
界面活性剤を更に含む、請求項１に記載の洗浄機用洗浄組成物。
【請求項3】
前記アルギン酸リアーゼ酵素が、微生物由来、好ましくは細菌由来又は藻類由来、最も好ましくは細菌由来であり、好ましくは、フラボバクテリウム属菌種（Flavobacterium sp）、スフィンゴモナス属菌種（Sphingomonas sp）、ゾベリア・ガラクタニボラン（Zobellia galactanivorans）、好ましくはフラボバクテリウム属菌種（Flavobacterium sp）から得られる、請求項１又は２に記載の洗浄機用洗浄組成物。
【請求項4】
前記アルギン酸リアーゼ酵素が、配列番号１の１つ以上に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号２に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号３に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号４に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号５に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号６に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号７に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；並びにこれらの混合物から選択されるアルギン酸リアーゼ、好ましくは、配列番号１、配列番号５、配列番号６、及び配列番号７、又はこれらの混合物のうちの１つ以上に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ、から選択されるアルギン酸リアーゼを含み、最も好ましくは、前記アルギン酸リアーゼ酵素が、配列番号６、及び配列番号７、並びにこれらの混合物のうちの１つ以上に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼから選択されるアルギン酸リアーゼを含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の洗浄機用洗浄組成物。
【請求項5】
ヌクレアーゼ酵素及び／又はヘキソサミニダーゼ酵素を、０．００００５～５重量％の活性酵素タンパク質の量で更に含む、請求項１～４のいずれか一項に記載の洗浄機用洗浄組成物。
【請求項6】
前記組成物が、非イオン性界面活性剤を更に含み、好ましくは前記組成物の０．５～３０重量％の量で含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の洗浄機用洗浄組成物。
【請求項7】
追加の酵素を含み、好ましくはアミラーゼ、ヌクレアーゼ、マンナナーゼ、キサンタンリアーゼ、キサンタナーゼ、及びこれらの混合物から選択される、請求項１～６のいずれか一項に記載の洗浄機用洗浄組成物。
【請求項8】
汚れの蓄積を防止又は除去するために食器洗浄機又は洗濯機などの洗浄機の内部を処理する方法であって、前記方法が、前記食器洗浄機又は洗濯機の少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に、前記機械の内部に請求項１～７のいずれか一項に記載の機械洗浄組成物を供給する工程を含む、方法。
【請求項9】
洗濯機の内部を処理するための、請求項８に記載の方法。
【請求項10】
食器洗浄機又は洗濯機の内部表面上の汚れを分解する方法であって、方法が、自動食器洗浄機又は洗濯機の少なくとも１回以上の洗浄サイクル又は１回以上のすすぎサイクル中に、請求項１～７のいずれか一項に記載の機械洗浄組成物を提供する工程を含み、前記機械洗浄組成物が、洗浄水又はすすぎ水（水性洗浄液）中に存在する、方法。
【請求項11】
前記洗浄機が、前記少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に物品を少なくとも部分的に投入されることができる、請求項８～１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項12】
前記機械洗浄組成物が、前記洗浄機の２回以上の連続した洗浄及び／又はすすぎサイクルにおいて提供される、請求項８～１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項13】
家庭用又は商業用／業務用のいずれかの洗濯機又は食器洗浄機などの洗浄機を洗浄するための、請求項１～７のいずれか一項に記載の機械洗浄組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
（配列表の参照）
本明細書は、コンピュータ可読形態での配列表を含む。コンピュータ可読形態は、参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書は、コンピュータ可読形態での配列表を含む。コンピュータ可読形態は、参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
（発明の分野）
本発明は、食器洗浄機又は洗濯機、特に洗濯機での使用に特に適した機械洗浄組成物に関する。本発明はまた、食器洗浄機又は洗濯機、特に洗濯機を洗浄するための機械クリーナーの使用に関する。
本発明は、食器洗浄機又は洗濯機、特に洗濯機での使用に特に適した機械洗浄組成物に関する。本発明はまた、食器洗浄機又は洗濯機、特に洗濯機を洗浄するための機械クリーナーの使用に関する。
【背景技術】
【0003】
時間が経つにつれて、洗浄機内、特に汚れが捕捉され得る領域、例えば洗浄機の内側表面、フィルタ、シール、排水領域、及び／又は洗濯機ドラム上、特に外側表面に、汚れが蓄積する。これらの汚れは、洗浄の有効性を低下させ、悪臭を発生させる可能性がある。この問題は、環境に対する懸念に対処するためにより低温でより迅速に洗浄する今日の傾向、及び漂白剤などの洗浄化学薬品の減少によっても深刻になる。これらの条件下では、汚れが堆積して蓄積することがあり、これは微生物の増殖をもたらすことさえあり得る。結果として生じる堆積した汚れ、特に微生物によって産生された汚れは、粘着性であり得、典型的には、例えば、細胞外ＤＮＡ、タンパク質、及び多糖類から一般的に構成されるポリマー集塊である細胞外ポリマー物質（extracellular polymeric substance、ＥＰＳ）を含む。これらの汚れは、除去するのが特に困難である可能性があり、洗浄水及びすすぎ水の循環に伴う問題を引き起こす場合があり、洗浄される物品上及び機械の内部表面上への汚れの再付着の増加、並びに悪臭の増加を含む不十分な洗浄結果につながる。
【0004】
例えば、国際公開第９８／３９４０２号に開示されているように、食器洗浄機を洗浄するための組成物に酵素を使用することは、当該技術分野において周知である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0005】
【特許文献1】国際公開第９８／３９４０２号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0006】
しかしながら、食器洗浄機及び洗濯機などの洗浄機、特に洗濯機の内部の汚れの蓄積を改善し、そのような機械に洗浄を提供するための改善された手段が依然として必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【0007】
本発明は、（ａ）（ｉ）アルギン酸リアーゼ酵素、（ｉｉ）Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｉｉ）Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｖ）エンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、及び（ｖ）エンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素から選択される少なくとも２種の酵素と、（ｂ）洗浄補助剤と、を含む、洗浄機用洗浄組成物を提供する。好ましくは、本組成物は、０．００００５～５重量％のアルギン酸リアーゼ酵素（活性酵素タンパク質）、及び／又は０．００００５重量％～５重量％のＰｅｌ－ａｓｅ（活性酵素タンパク質）、及び／又は０．００００５～５重量％のＰｓｌ－ａｓｅ（活性酵素タンパク質）、及び／又は０．００００５重量％～５重量％の酵素（活性酵素タンパク質）エンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、及び／又は０．００００５重量％～５重量％の酵素（活性酵素タンパク質）エンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素を含む。好ましくは、本組成物はまた、界面活性剤を含み、好ましくは、１～６０重量％の量で含む。
【0008】
本発明はまた、汚れの蓄積を防止又は除去するために自動食器洗浄機及び／又は洗濯機の内部を処理する方法を提供し、方法は、食器洗浄機又は洗濯機の少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に、機械の内部に機械洗浄組成物を供給する工程を含む。具体的には、本方法は、洗濯プロセスによる布地の損傷を最小限に抑えるために、より冷たい洗浄温度と、より中性のｐＨ条件を含むより刺激の少ない洗剤組成物との組み合わせにより、汚れの蓄積及び汚れの性質が特に問題となる場合に、洗濯機の内部を処理するためのものである。
【0009】
本発明はまた、自動食器洗浄機又は洗濯機の内部表面上の汚れを分解する方法を提供し、方法は、自動食器洗浄機又は洗濯機の少なくとも１回以上の洗浄サイクル又は１回以上のすすぎサイクル中に、機械洗浄組成物を提供する工程を含み、機械洗浄組成物は、洗浄水又はすすぎ水（水性洗浄液）中に存在する。
【0010】
本発明はまた、家庭用又は商業用／業務用のいずれかの洗濯機及び／又は食器洗浄機などの洗浄機を洗浄するための、特に洗濯機を洗浄するための、機械洗浄組成物の使用を提供する。
【0011】
洗浄機は、少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に、物品を少なくとも部分的に投入されてもよい。機械洗浄組成物は、洗浄機の２回以上の連続する洗浄サイクル及び／又はすすぎサイクルにわたって使用されてもよい。
【0012】
本発明の組成物、方法、及び使用はまた、バイオフィルム破壊効果及び／又は汚れ再付着防止効果を生じさせ得る。
【発明を実施するための形態】
【0013】
定義
親又は親酵素：「親」又は「親酵素」という用語は、酵素バリアントを産生するために改変が行われる酵素を意味する。親は、天然に存在する（野生型）ポリペプチド又はこのバリアントであり得る。
親又は親酵素：「親」又は「親酵素」という用語は、酵素バリアントを産生するために改変が行われる酵素を意味する。親は、天然に存在する（野生型）ポリペプチド又はこのバリアントであり得る。
【0014】
配列同一性：２つのアミノ酸配列間又は２つのヌクレオチド配列間の関連性は、パラメータ「配列同一性」によって表される。本発明の目的では、２つのアミノ酸配列間の配列同一性の程度は、ＥＭＢＯＳＳパッケージ（ＥＭＢＯＳＳ：Ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｏｐｅｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｓｕｉｔｅ，Ｒｉｃｅ ｅｔ ａｌ．，２０００，Ｔｒｅｎｄｓ Ｇｅｎｅｔ．１６：２７６－２７７）のＮｅｅｄｌｅプログラムにおいて実施されるようなＮｅｅｄｌｅｍａｎ－Ｗｕｎｓｃｈアルゴリズム（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ａｎｄ Ｗｕｎｓｃｈ，１９７０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３－４５３）、好ましくはバージョン３．０．０以降を用いて求められる。必要に応じて用いられるパラメータは、ギャップ開始ペナルティが１０、ギャップ伸長ペナルティが０．５、及びＥＢＬＯＳＵＭ６２（ＢＬＯＳＵＭ６２のＥＭＢＯＳＳバージョン）置換マトリックスである。「最長同一性（longest identity）」と表示されたＮｅｅｄｌｅの出力（－ｎｏｂｒｉｅｆオプションを用いて得られる）を同一率として用い、これは以下のように計算される。
（同一残基×１００）／（アラインメントの長さ－アラインメント中のギャップの総数）
（同一残基×１００）／（アラインメントの長さ－アラインメント中のギャップの総数）
【0015】
あるいは、用いられる任意のパラメータは、ギャップ開始ペナルティが１０、ギャップ伸長ペナルティが０．５、及びＥＤＮＡＦＵＬＬ（ＮＣＢＩ ＮＵＣ４．４のＥＭＢＯＳＳバージョン）置換マトリックスであり得る。「最長同一性」と表示されたＮｅｅｄｌｅの出力（－ｎｏｂｒｉｅｆオプションを用いて得られる）を同一率として用い、これは以下のように計算される。
（同一デオキシリボヌクレオチド×１００）／（アラインメントの長さ－アラインメント中のギャップの総数）
（同一デオキシリボヌクレオチド×１００）／（アラインメントの長さ－アラインメント中のギャップの総数）
【0016】
バリアント：「バリアント」という用語は、酵素活性を有するポリペプチドを意味し、これは、親に対して１つ以上の（例えば、いくつかの）位置で改変／変異、すなわち置換、挿入、及び／又は欠失を含む。置換は、ある位置を占有するアミノ酸を異なるアミノ酸で置き換えることを意味し、欠失は、ある位置を占有するアミノ酸の除去を意味し、挿入は、ある位置を占有するアミノ酸に隣接させ、その直後に、１～３個のアミノ酸を付加することを意味する。
【0017】
野生型酵素：「野生型」酵素という用語は、自然界に見られる細菌、藻類、酵母、又は糸状菌などの天然に存在する微生物によって発現される酵素を意味する。
【0018】
洗浄機用洗浄組成物
洗浄機用洗浄組成物は、液体又は固体の形態であり得る。それは、液体若しくはゲル、又は粉末若しくは錠剤、又は単位用量形態、例えば、水溶性フィルム又は水溶性シート（製織シート又は不織繊維シート（単位用量パウチ）などに封入された液体及び／又は粉末などの固体の形態であってもよい。機械洗浄組成物が単位用量パウチの形態である場合、パウチは、単一若しくは複数の区画を含んでもよく、又は組成物の成分が２つ以上のパウチを加えることによって添加されるようにパウチ間で分割されてもよく、洗浄機内で一緒に使用されるパウチの合計は、機械洗浄組成物の成分の全てを洗浄機に添加する。
洗浄機用洗浄組成物は、液体又は固体の形態であり得る。それは、液体若しくはゲル、又は粉末若しくは錠剤、又は単位用量形態、例えば、水溶性フィルム又は水溶性シート（製織シート又は不織繊維シート（単位用量パウチ）などに封入された液体及び／又は粉末などの固体の形態であってもよい。機械洗浄組成物が単位用量パウチの形態である場合、パウチは、単一若しくは複数の区画を含んでもよく、又は組成物の成分が２つ以上のパウチを加えることによって添加されるようにパウチ間で分割されてもよく、洗浄機内で一緒に使用されるパウチの合計は、機械洗浄組成物の成分の全てを洗浄機に添加する。
【0019】
洗浄機用洗浄組成物は、（ａ）（ｉ）アルギン酸リアーゼ酵素、（ｉｉ）Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｉｉ）Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｖ）エンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、及び（ｖ）エンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素からなる群から選択される少なくとも２種の酵素と、（ｂ）洗浄補助剤と、を含む。
【0020】
アルギン酸リアーゼ酵素
アルギン酸リアーゼは、好ましくは微生物由来であり、好ましくは細菌又は藻類（例えば、Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ、Ｌａｍｉｎａｒａ、Ｍａｃｒｏｃｙｓｔｉｓなどの褐海藻（Ｐｈａｅｏｐｈｙｃｅａｅ）由来）、最も好ましくは細菌由来である。アルギン酸リアーゼ酵素は、アエロモナス属菌種（Aeromonas sp.）、アゾトバクター属菌種（Azotobacter sp.）、バチルス属菌種（Bacillus sp.）、フラボバクテリウム属菌種（Flavobacterium sp.）、クレブシエラ属菌種（Klebsiella sp.）、シュードモナス属菌種（Pseudomonas sp.）、スフィンゴモナス属菌種（Sphingomonas sp.）、ビブリオ属菌種（Vibrio sp.）、ゾベリア・ガラクタニボラン（Zobellia galactanivorans）、最も好ましくはフラボバクテリウム属菌種（Flavobacterium sp）から得ることができる。
アルギン酸リアーゼは、好ましくは微生物由来であり、好ましくは細菌又は藻類（例えば、Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ、Ｌａｍｉｎａｒａ、Ｍａｃｒｏｃｙｓｔｉｓなどの褐海藻（Ｐｈａｅｏｐｈｙｃｅａｅ）由来）、最も好ましくは細菌由来である。アルギン酸リアーゼ酵素は、アエロモナス属菌種（Aeromonas sp.）、アゾトバクター属菌種（Azotobacter sp.）、バチルス属菌種（Bacillus sp.）、フラボバクテリウム属菌種（Flavobacterium sp.）、クレブシエラ属菌種（Klebsiella sp.）、シュードモナス属菌種（Pseudomonas sp.）、スフィンゴモナス属菌種（Sphingomonas sp.）、ビブリオ属菌種（Vibrio sp.）、ゾベリア・ガラクタニボラン（Zobellia galactanivorans）、最も好ましくはフラボバクテリウム属菌種（Flavobacterium sp）から得ることができる。
【0021】
好ましくは、アルギン酸リアーゼ酵素は、配列番号１に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも７５％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも８５％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号２に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも７５％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも８５％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号３に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも７５％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも８５％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号４に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも７５％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも８５％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号５に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも７５％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも８５％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号６に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも７５％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも８５％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号７に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも７５％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも８５％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；又はこれらの混合物から選択されるアルギン酸リアーゼを含む。好ましいアルギン酸リアーゼ酵素は、本明細書に記載の配列番号１、２、３、４、５、６若しくは７のいずれか１つの野生型又は好ましくは野生型のバリアント、又はこれらの混合物に対応するアルギン酸リアーゼ酵素を含む。配列番号６、７及びこれらのバリアント、並びにこれらの混合物が特に好ましい。
【0022】
アルギン酸リアーゼ酵素が親アミノ酸配列のバリアントである場合、親アルギン酸リアーゼ酵素は、好ましくは、配列番号１、２、３、４、５、６、又は７のうちの１つ以上のポリペプチドに対して少なくとも５０％、又は少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、例えば、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９、又は１００％の配列同一性を有し、アルギン酸リアーゼ酵素活性を有する。バリアントアミノ酸配列は、配列番号１、２、３、４、５、６、又は７のうちの１つ以上のポリペプチドからの１５個以下、又は１０個以下のアミノ酸、又は５個以下、又は４個、又は３個、又は２個、又は１個のアミノ酸が親アルギン酸リアーゼとは異なることが好ましい場合がある。
【0023】
アルギン酸リアーゼ酵素が親アミノ酸配列のバリアントである場合、親は、任意の属の微生物から得ることができる。本発明の目的では、「から得られる」という用語は、所与の供給源に関連して本明細書で使用するとき、ポリヌクレオチドによってコードされる親が、当該供給源によって、又は当該供給源からのポリヌクレオチドが挿入された細胞によって産生されることを意味するものとする。一態様では、親は細胞外に分泌される。バリアントは、部位特異的変異誘発、合成遺伝子構築、半合成遺伝子構築、ランダム変異誘発、シャッフリングなどの、当該技術分野において既知である任意の変異誘発手技を用いて調製することができる。
【0024】
アルギン酸リアーゼは、ＰＬ５、ＰＬ６、ＰＬ７、ＰＬ１４、ＰＬ１５、ＰＬ１７、ＰＬ１８、ＰＬ３２、ＰＬ３４、及びＰＬ３６を含む任意の多糖リアーゼ（polysaccharide lyase、ＰＬ）ファミリー由来であり得る。好ましくは、アルギン酸リアーゼは、ＰＬファミリー７由来である。
【0025】
好ましくは、アルギン酸リアーゼ酵素は、ポリ（ベータ－Ｄ－マンヌロネート）に対する活性（ポリＭ活性）及びポリ（アルファ－Ｌ－グルロネート）に対する活性（ポリＧ活性）を有する。アルギン酸リアーゼ酵素は、ポリＭ活性及びポリＧ活性を提供するために単一のアルギン酸リアーゼ酵素を含んでもよく、又は組み合わせでポリＭ及びポリＧ活性を提供する２つ以上のアルギン酸リアーゼ酵素を含んでもよい。好ましくは、アルギン酸リアーゼは、ポリＭ活性及びポリＧ活性の両方を有する酵素を含む。好ましくは、本明細書の試験の項の試験方法１によって定義されるポリＭ活性は、少なくとも０．１吸光度単位、好ましくは少なくとも０．１５吸光度単位、最も好ましくは少なくとも２吸光度単位である。好ましくは、本明細書の試験の項の試験方法１によって定義されるポリＧ活性は、少なくとも０．３吸光度単位、好ましくは少なくとも０．４吸光度単位、又は少なくとも０．５若しくは更に少なくとも０．６吸光度単位である。アルギン酸リアーゼ酵素は、実質的に純粋な酵素の形態で本発明の洗浄組成物及び方法に組み込むことができる。あるいは、特に酵素が野生型酵素のバリアントである場合、バリアントは回収されず、むしろ酵素を発現している宿主細胞が、アルギン酸リアーゼ酵素の供給源として使用される。
【0026】
アルギン酸リアーゼ酵素は、液体又は乾燥組成物の形態であってもよい。例えば、組成物は粒子又は微細粒子の形状であり得る。アルギン酸リアーゼ酵素は、当技術分野で知られている方法に従って、カプセル化によることを含めて安定化させることができる。
【0027】
アルギン酸リアーゼ酵素は、組成物中に、０．００００５～５重量％の活性酵素タンパク質、好ましくは０．０００１～２重量％の活性タンパク質、又は０．０００５若しくは０．００１～１重量％の活性酵素タンパク質、又は０．５重量％若しくは０．１重量％若しくは０．０５重量％までの活性酵素タンパク質の量で存在する。
【0028】
好ましくは、アルギン酸リアーゼ酵素は、酵素の０．０１ｐｐｍ～１０００ｐｐｍ、又は０．０５若しくは０．１ｐｐｍ～７５０若しくは５００ｐｐｍの量で水性洗浄液中に存在する。
【0029】
Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素
Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素は、Ｐｅｌ多糖に対してグリコシドヒドロラーゼ活性を示し、好ましくはエンド－アルファ－１，４－ポリガラクトミニダーゼ（polygalactosminidase）クラス（ＥＣ３．２．１．１０９）の酵素に属し、好ましくは配列番号８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０のうちの１つ以上と、少なくとも６０％又は６５％、又はより好ましくは少なくとも７０％又は少なくとも７５％又は少なくとも８０％又は少なくとも８５％又は少なくとも９０％又は少なくとも９５％、最大１００％の同一性を有する。
Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素は、Ｐｅｌ多糖に対してグリコシドヒドロラーゼ活性を示し、好ましくはエンド－アルファ－１，４－ポリガラクトミニダーゼ（polygalactosminidase）クラス（ＥＣ３．２．１．１０９）の酵素に属し、好ましくは配列番号８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９又は４０のうちの１つ以上と、少なくとも６０％又は６５％、又はより好ましくは少なくとも７０％又は少なくとも７５％又は少なくとも８０％又は少なくとも８５％又は少なくとも９０％又は少なくとも９５％、最大１００％の同一性を有する。
【0030】
好ましくは、Ｐｅｌ－ａｓｅグリコシドヒドロラーゼは、単離されたグリコシドヒドロラーゼである。
【0031】
好ましくは、Ｐｅｌ－ａｓｅグリコシドヒドロラーゼ酵素は、機械洗浄組成物中に、組成物中の活性タンパク質に基づいて０．００１～１重量％、又は組成物の重量に基づいて０．００５～０．５重量％若しくは０．０１～０．２５重量％の量で存在する。
【0032】
好ましくは、グリコシドヒドロラーゼ酵素は、水性洗浄液中に、活性タンパク質に基づいて、０．０１ｐｐｍ～１０００ｐｐｍの酵素量で、又は０．０５若しくは０．１ｐｐｍ～７５０若しくは５００ｐｐｍの量で存在する。
【0033】
本明細書に記載のＰｅｌ－ａｓｅはまた、バイオフィルム破壊効果又は汚れ再付着防止効果を生じさせ得る。
【0034】
Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素
Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素は、Ｐｓｌ多糖に対するグリコシドヒドロラーゼ活性を示す。Ｐｅｌ－ａｓｅは、好ましくは、配列番号４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１又は５２のうちの１つ以上に対して、少なくとも６０％又は６５％、又はより好ましくは少なくとも７０％又は７５％又は８０％又は８５％又は９０％又は９５％、最大１００％の同一性を有する。
Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素は、Ｐｓｌ多糖に対するグリコシドヒドロラーゼ活性を示す。Ｐｅｌ－ａｓｅは、好ましくは、配列番号４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１又は５２のうちの１つ以上に対して、少なくとも６０％又は６５％、又はより好ましくは少なくとも７０％又は７５％又は８０％又は８５％又は９０％又は９５％、最大１００％の同一性を有する。
【0035】
好ましくは、グリコシドヒドロラーゼは、単離されたグリコシドヒドロラーゼである。
【0036】
好ましくは、Ｐｓｌ－ａｓｅグリコシドヒドロラーゼ酵素は、洗浄組成物中に、活性タンパク質に基づいて、０．００１～１重量％、又は０．００５～０．５重量％、又は０．０１～０．２５重量％の量で存在する。
【0037】
好ましくは、Ｐｓｌ－ａｓｅグリコシドヒドロラーゼ酵素は、洗濯水性液中に、活性タンパク質に基づいて、０．０１ｐｐｍ～１０００ｐｐｍの酵素量で、又は０．０５若しくは０．１ｐｐｍ～７５０若しくは５００ｐｐｍの量で存在する。
【0038】
本明細書に記載のＰｓｌ－ａｓｅグリコシドヒドロラーゼを含む組成物はまた、バイオフィルム破壊効果又は汚れ再付着防止効果を生じさせることができ、又は、バイオフィルム破壊効果又は汚れ再付着防止効果に有用な場合がある。
【0039】
エンド－ベータ－１，３（４）－グルカナーゼ酵素
エンド－ベータ－１，３（４）－グルカナーゼ酵素は、エンド－ベータ－１，３－グルカン骨格を有する多糖類（例えば、カードラン、パキマン、ラミナリン、スクレログルカン、シゾフィラン）、並びにベータ－１，３結合及びベータ－１，４結合の両方を含有するいわゆる「混合結合」グルカン多糖類（例えば、オートムギ及びオオムギなどの穀類において見出されるもの）に対して、顕著なエンド－ベータ－１，３－グルカナーゼ活性を示す。これらの基質の両方に対する活性は、試験方法２を用いて確認することができる。エンド－ベータ－１，３（４）－グルカナーゼ酵素は、好ましくはクラスＥ．Ｃ．３．２．１．６に属する。エンド－ベータ－１，３（４）－グルカナーゼは、好ましくは、配列番号５３、５４、５５、５６、５７又は５８のうちの１つ以上に対して、少なくとも６０％又は６５％、又はより好ましくは少なくとも７０％又は少なくとも７５％又は少なくとも８０％又は少なくとも８５％又は少なくとも９０％又は少なくとも９５％、最大１００％の同一性を有する。
エンド－ベータ－１，３（４）－グルカナーゼ酵素は、エンド－ベータ－１，３－グルカン骨格を有する多糖類（例えば、カードラン、パキマン、ラミナリン、スクレログルカン、シゾフィラン）、並びにベータ－１，３結合及びベータ－１，４結合の両方を含有するいわゆる「混合結合」グルカン多糖類（例えば、オートムギ及びオオムギなどの穀類において見出されるもの）に対して、顕著なエンド－ベータ－１，３－グルカナーゼ活性を示す。これらの基質の両方に対する活性は、試験方法２を用いて確認することができる。エンド－ベータ－１，３（４）－グルカナーゼ酵素は、好ましくはクラスＥ．Ｃ．３．２．１．６に属する。エンド－ベータ－１，３（４）－グルカナーゼは、好ましくは、配列番号５３、５４、５５、５６、５７又は５８のうちの１つ以上に対して、少なくとも６０％又は６５％、又はより好ましくは少なくとも７０％又は少なくとも７５％又は少なくとも８０％又は少なくとも８５％又は少なくとも９０％又は少なくとも９５％、最大１００％の同一性を有する。
【0040】
エンド－ベータ－１，３－グルカナーゼ酵素
エンド－ベータ－１，３－グルカナーゼ酵素は、エンド－ベータ－１，３－グルカン骨格（例えば、カードラン、パキマン、ラミナリン、スクレログルカン、シゾフィラン）を有する多糖類に対して顕著なエンド－ベータ－１，３－グルカナーゼ活性を示すが、オートムギ及びオオムギなどの穀類において見出されるもののようなベータ－１，３結合及びベータ－１，４結合の両方を含むいわゆる「混合結合」グルカン多糖類に対してはほとんど又は全く活性を有さない。これらの基質の両方に対する活性は、試験方法２を用いて決定することができる。エンド－ベータ－１，３－グルカナーゼ酵素は、好ましくはクラＥ．Ｃ．３．２．１．３９に属する。エンド－ベータ－１，３－グルカナーゼは、好ましくは、配列番号５９、６０、６１、６２、６３、６４又は６５のうちの１つ以上に対して、少なくとも６０％又は６５％、又はより好ましくは少なくとも７０％又は少なくとも７５％又は少なくとも８０％又は少なくとも８５％又は少なくとも９０％又は少なくとも９５％、最大１００％の同一性を有する。
エンド－ベータ－１，３－グルカナーゼ酵素は、エンド－ベータ－１，３－グルカン骨格（例えば、カードラン、パキマン、ラミナリン、スクレログルカン、シゾフィラン）を有する多糖類に対して顕著なエンド－ベータ－１，３－グルカナーゼ活性を示すが、オートムギ及びオオムギなどの穀類において見出されるもののようなベータ－１，３結合及びベータ－１，４結合の両方を含むいわゆる「混合結合」グルカン多糖類に対してはほとんど又は全く活性を有さない。これらの基質の両方に対する活性は、試験方法２を用いて決定することができる。エンド－ベータ－１，３－グルカナーゼ酵素は、好ましくはクラＥ．Ｃ．３．２．１．３９に属する。エンド－ベータ－１，３－グルカナーゼは、好ましくは、配列番号５９、６０、６１、６２、６３、６４又は６５のうちの１つ以上に対して、少なくとも６０％又は６５％、又はより好ましくは少なくとも７０％又は少なくとも７５％又は少なくとも８０％又は少なくとも８５％又は少なくとも９０％又は少なくとも９５％、最大１００％の同一性を有する。
【0041】
本発明の機械洗浄組成物は、少なくともアルギン酸リアーゼ酵素及びＰｅｌ－ａｓｅ酵素、並びに任意に追加的に、Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素、エンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、及び／又はエンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素を含んでもよい。
【0042】
本発明の機械洗浄組成物は、少なくともアルギン酸溶解酵素及びＰｓｌ－ａｓｅ酵素、並びに任意に追加的に、Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素、エンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、及び／又はエンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素を含んでもよい。
【0043】
本発明の機械洗浄組成物は、少なくともアルギン酸リアーゼ酵素及びエンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、並びに任意に追加的に、Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素、Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素、及び／又はエンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素を含んでもよい。
【0044】
本発明の機械洗浄組成物は、少なくともアルギン酸リアーゼ酵素及びエンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素、並びに任意に追加的に、Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素、Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素、及び／又はエンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素を含んでもよい。
【0045】
本発明の機械洗浄組成物は、少なくともＰｅｌ－ａｓｅ酵素及びＰｓｌ－ａｓｅ酵素、並びに任意に追加的に、アルギン酸リアーゼ酵素、エンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、及び／又はエンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素を含んでもよい。
【0046】
本発明の機械洗浄組成物は、少なくともＰｅｌ－ａｓｅ酵素及びエンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、並びに任意に追加的に、アルギン酸リアーゼ酵素、Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素、及び／又はエンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素を含んでもよい。
【0047】
本発明の機械洗浄組成物は、少なくともＰｅｌ－ａｓｅ酵素及びエンド－β－１，３（４）グルカナーゼ酵素、並びに任意に追加的に、Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素、エンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、及び／又はアルギン酸リアーゼ酵素を含んでもよい。
【0048】
本発明の機械洗浄組成物は、少なくともＰｓｌ－ａｓｅ酵素及びエンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、並びに任意に追加的に、Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素、アルギン酸リアーゼ酵素、及び／又はエンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素を含んでもよい。
【0049】
本発明の機械洗浄組成物は、少なくともＰｓｌ－ａｓｅ酵素及びエンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素、並びに任意に追加的に、Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素、エンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、及び／又はアルギン酸リアーゼ酵素を含んでもよい。
【0050】
本発明の機械洗浄組成物は、少なくともエンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素及びエンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素、並びに任意に追加的に、Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素、Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素、及び／又はアルギン酸リアーゼ酵素を含んでもよい。
【0051】
機械洗浄組成物は、洗浄補助剤を含む。典型的には、洗浄補助剤は、１～９８．９重量％、より典型的には５～９０重量％の洗浄補助剤の量で本組成物中に存在する。好適な洗浄補助剤には、界面活性剤、ビルダー、漂白剤成分、着色剤、キレート剤、分散剤、追加の酵素、及び酵素安定剤、触媒材料、予形成過酸、ポリマー分散剤、泥汚れ除去剤／再付着防止剤、フィラー塩、ヒドロトロープ、抑泡剤、構造伸縮剤、防腐剤、酸化防止剤、殺菌剤、防カビ剤、変色防止剤、防食剤、アルカリ度源、可溶化剤、担体、加工助剤、顔料、染料、香料及びｐＨ調整剤、カプセル化剤、ポリマー、並びにこれらの混合物が含まれる。例えば、これらは、漂白活性化剤などの漂白剤成分、イミン漂白促進剤などの漂白促進剤、漂白触媒、過酸化水素、過炭酸塩及び／又は過ホウ酸塩などの過酸化水素源、特に炭酸塩及び／又は硫酸塩などの材料でコーティングされた過炭酸塩、ケイ酸塩、ホウケイ酸塩、及びこれらの任意の混合物、カプセル化形態の予備形成過酸を含む予備形成過酸、遷移金属触媒；抑泡剤又は抑泡剤系、例えば、シリコーン系抑泡剤及び／若しくは脂肪酸系抑泡剤；ポリエチレンオキシドなどの凝集剤；アルコキシル化ポリアミン及びエトキシル化エチレンイミンポリマーなどの汚れ分散剤及び汚れ再付着防止助剤；ポリエステルなどの再付着防止成分；カルボキシレートポリマー、例えば、マレイン酸ポリマー、又はマレイン酸とアクリル酸とのコポリマー；香料、例えば、香料マイクロカプセル、デンプン封入アコード、香料噴霧剤；美容粒子；審美染料；硫酸ナトリウム及び／又は柑橘類繊維などのフィラー（ただし、組成物はフィラーを実質的に含まないことが好ましい場合がある）；１．６Ｒ及び２．０Ｒケイ酸ナトリウムを含むケイ酸ナトリウム、又はメタケイ酸ナトリウムなどのケイ酸塩；ジカルボン酸とジオールとのコポリエステル；メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエトキシセルロース、又は他のアルキル若しくはアルキルアルコキシセルロースなどのセルロース性ポリマー；１，２プロパンジオール、モノエタノールアミンなどの溶媒；ジエチレングリコール、エタノール、及びこれらの任意の混合物；ヒドロトロープ、例えば、クメンスルホン酸ナトリウム、キシレンスルホン酸ナトリウム、トルエンスルホン酸ナトリウム、及び任意の混合物；有機酸及びこの塩、例えばクエン酸／クエン酸塩；並びにこれらの任意の組み合わせを含み得る。本組成物は、洗浄補助剤が、好ましくは、（ｉ）界面活性剤、（ｉｉ）追加の酵素、（ｉｉｉ）抑泡剤、（ｉｖ）酵素安定剤、（ｖ）溶媒、及び（ｖｉ）これらの混合物からなる群から選択される１つ以上を含むようなものであり得る。本組成物はまた、漂白剤成分を含有してもよい。
【0052】
本発明者らは、酵素の組み合わせが汚れを良好に分解するが、界面活性剤の存在によって、基質及び含有する汚れの分解産物の除去が改善され得ることを見出した。したがって、機械洗浄組成物は、好ましくは、アニオン性、非イオン性、双性イオン性、両性、及びカチオン性界面活性剤から選択されてもよく、好ましくはアニオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、及びこれらの混合物から選択される界面活性剤を、好ましくは１～６０重量％の量で含む。非イオン性界面活性剤が特に好ましい。本組成物は、アニオン性界面活性剤を実質的に含まなくてもよい。
【0053】
好ましくは、界面活性剤と、総活性酵素タンパク質、又は少なくとも２種の酵素のそれぞれの活性酵素タンパク質のいずれかとの重量比は、少なくとも５００：１、好ましくは少なくとも１０００：１、又は少なくとも１５００：１、又は少なくとも２０００：１、好ましくは５０００００：１以下、好ましくは４０００００：１以下、若しくは２０００００：１以下、又は最大１５００００：１、若しくは１０００００：１、若しくは５００００：１、若しくは１００００：１である。好ましくは、界面活性剤と活性酵素タンパクとの重量比は、少なくとも５００：１、好ましくは少なくとも１０００：１又は少なくとも１５００：１又は少なくとも２０００：１であり、好ましくは５０００００：１以下、好ましくは４０００００：１以下、若しくは２０００００：１以下、又は最大１５００００：１、若しくは１０００００：１、若しくは５００００：１、若しくは１００００：１である。
【0054】
好ましいアニオン性界面活性剤は、スルホネート及びサルフェート界面活性剤、好ましくはアルキルベンゼンスルホネート及び／又は（任意にアルコキシル化された）アルキルサルフェートである。特に好ましいアニオン性界面活性剤は、直鎖アルキルベンゼンスルホネート（linear alkylbenzene sulfonate、ＬＡＳ）を含む。好ましいアルキルサルフェートは、アルキルエーテルサルフェート、特にＣ－９～１５アルコールエーテルサルフェート、特に０．５～７、好ましくは１～５の平均エトキシル化度を有するもの、Ｃ８～Ｃ１６エステルサルフェート、及びモノドデシルエステルサルフェートなどのＣ１０～Ｃ１４エステルサルフェートを含む。好ましい組成物では、アニオン性界面活性剤は、アルキルベンゼンスルホネートと、任意に加えて、好ましくは０～７、より好ましくは０．５～３のエトキシル化度を有する任意にエトキシル化されたアルキルサルフェートとを含む。ＬＡＳの異性体、分岐アルキルベンゼンスルホネート（branched alkylbenzenesulfonate、ＢＡＢＳ）、フェニルアルカンスルホネート、アルファ－オレフィンスルホネート（alpha-olefinsulfonate、ＡＯＳ）、オレフィンスルホネート、アルケンスルホネート、アルカン－２，３－ジイルビス（サルフェート）、ヒドロキシアルカンスルホネート及びジスルホネート、アルキルサルフェート（alkyl sulfate、ＡＳ）、例えば、ドデシル硫酸ナトリウム（sodium dodecyl sulfate、ＳＤＳ）、脂肪族アルコールサルフェート（fatty alcohol sulfate、ＦＡＳ）、一級アルコールサルフェート（primary alcohol sulfate、ＰＡＳ）、アルコールエーテルサルフェート（primary alcohol sulfate、ＡＥＳ又はalcohol ethoxy sulfate、ＡＥＯＳ又はfatty alcohol ether sulfate、ＦＥＳ、アルコールエトキシサルフェート又は脂肪族アルコールエーテルサルフェートとしても知られている）、二級アルカンスルホネート（secondary alkanesulfonate、ＳＡＳ）、パラフィンスルホネート（paraffin sulfonate、ＰＳ）、エステルスルホネート、スルホン化脂肪酸グリセロールエステル、アルファ－スルホ脂肪酸メチルエステル（alpha-sulfo fatty acid methyl ester、アルファ－ＳＦＭｅ又はＳＥＳ）（メチルエステルスルホネート（methyl ester sulfonate、ＭＥＳ）を含む）、アルキル－又はアルケニルコハク酸、ドデセニル／テトラデセニルコハク酸（dodecenyl/tetradecenyl succinic acid、ＤＴＳＡ）、アミノ酸の脂肪酸誘導体、スルホコハク酸のジエステル及びモノエステル、又は脂肪酸の塩（石鹸）、並びにこれらの組み合わせも好適なアニオン性界面活性剤である。
【0055】
存在する場合、アニオン性界面活性剤は、好ましくは、塩の形態で機械洗浄組成物に添加される。好ましいカチオンは、ナトリウム及びカリウムなどのアルカリ金属イオンである。しかしながら、界面活性剤の酸形態を水酸化ナトリウムなどのアルカリ、又はモノ－、ジ－、若しくはトリエタノールアミンなどのアミンで中和することによって、アニオン性界面活性剤の塩形態がその位置で形成されてもよい。本組成物は、組成物の１～６０重量％又は１～５０重量％又は２若しくは５～４０重量％のアニオン性界面活性剤を含み得る。界面活性剤は、好ましくは、アニオン性界面活性剤と、更に、半極性及び／又はカチオン性及び／又は双性イオン性及び／又は両性及び／又は半極性非イオン性及び／又はこれらの混合物を含む非イオン性であり得る１つ以上の追加の界面活性剤を含む界面活性剤系を含む。
【0056】
本発明はまた、０．００００５～５重量％（活性酵素タンパク質）の少なくとも２種の酵素のそれぞれ及び界面活性剤を含む機械洗浄組成物を提供し、界面活性剤は、アニオン性界面活性剤及び非イオン性界面活性剤を含み、好ましくはアニオン性と非イオン性との重量比は３０：１～１：２、好ましくは２０：１～２：３又は１：１である。
【0057】
好適な非イオン性界面活性剤としては、アルコールエトキシレート（alcohol ethoxylate、ＡＥ）、アルコールプロポキシレート、プロポキシル化脂肪族アルコール（propoxylated fatty alcohol、ＰＦＡ）、アルコキシル化脂肪酸アルキルエステル、例えばエトキシル化及び／又はプロポキシル化脂肪酸アルキルエステル、アルキルフェノールエトキシレート（alkylphenol ethoxylate、ＡＰＥ）、ノニルフェノールエトキシレート（nonylphenol ethoxylate、ＮＰＥ）、アルキルポリグリコシド（alkylpolyglycoside、ＡＰＧ）、アルコキシル化アミン、脂肪酸モノエタノールアミド（fatty acid monoethanolamide、ＦＡＭ）、脂肪酸ジエタノールアミド（fatty acid diethanolamide、ＦＡＤＡ）、エトキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（ethoxylated fatty acid monoethanolamide、ＥＦＡＭ）、プロポキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（propoxylated fatty acid monoethanolamide、ＰＦＡＭ）、ポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミド、又はグルコサミンのＮ－アシルＮ－アルキル誘導体（グルカミド、glucamide、ＧＡ、又は脂肪酸グルカミド、fatty acid glucamide、ＦＡＧＡ）、並びに商標名ＳＰＡＮ及びＴＷＥＥＮとして入手可能な製品、並びにこれらの組み合わせが挙げられる。アルコールエトキシレートが特に好ましく、好ましくはＣ９～１８又は好ましくはＣ１２～１５のアルキル鎖を有し、好ましくは３～９、より好ましくは３～７の平均エトキシル化度を有する。市販されている非イオン性界面活性剤洗浄としては、ＢＡＳＦ製のＰｌｕｒａｆａｃ（商標）、Ｌｕｔｅｎｓｏｌ（商標）、及びＰｌｕｒｏｎｉｃ（商標）、Ｃｏｇｎｉｓ製のＤｅｈｙｐｏｎ（商標）シリーズ、並びにＣｌａｒｉａｎｔ製のＧｅｎａｐｏｌ（商標）シリーズが挙げられる。
【0058】
機械洗浄組成物は、好ましくは０．５重量％～約４０重量％の非イオン性界面活性剤、好ましくは組成物の１～３０重量％の非イオン性界面活性剤を含む。
【0059】
機械洗浄組成物は、好ましくは、１種以上の追加の酵素を含む。したがって、好ましい組成物は、アミノペプチダーゼ、アミラーゼ、カルボヒドラーゼ、カルボキシペプチダーゼ、カタラーゼ、セルラーゼ、キチナーゼ、クチナーゼ、シクロデキストリングリコシルトランスフェラーゼ、エステラーゼ、アルファ－ガラクトシダーゼ、ベータ－ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、アルファ－グルコシダーゼ、ベータ－グルコシダーゼ、ハロペルオキシダーゼ、ヘキソサミニダーゼ、インベルターゼ、ラッカーゼ、リパーゼ、マンナナーゼ、マンノシダーゼ、ヌクレアーゼ、オキシダーゼ、ペクチン分解酵素、ペプチドグルタミナーゼ、ペルオキシダーゼ、フィターゼ、ポリフェノールオキシダゼゼ、タンパク質分解酵素、トランスグルタミナーゼ、キシラナーゼ、キサンタンリアーゼ、キサンタナーゼ、及びこれらの混合物からなる群から選択される１種以上の追加の酵素を含む。好ましくは、洗浄組成物は、ＤＮａｓｅ又はＲＮａｓｅなどのヌクレアーゼ、マンナナーゼ、キサンタンリアーゼ、キサンタナーゼ、アミラーゼ、及びこれらの混合物から選択される追加の酵素を含む。
【0060】
組成物は、好ましくはキサンタンリアーゼ、キサンタナーゼ、マンナナーゼ、及びこれらの混合物から選択される追加の酵素を含む。マンナナーゼが特に好ましい。
【0061】
追加の酵素は、例えば、アスペルギルス属、例えば、アスペルギルス・アクレタス、アスペルギルス・アワモリ、アスペルギルス・フォエティダス、アスペルギルス－フミガーツフ、アスペルギルス・ジャポニクス、アスペルギルス・ニデュランス、アスペルギルス・ニガー、若しくはアスペルギルス・オリザエ；フザリウム（Fusarium）、例えば、フザリウム・バクトリジオイデス、フザリウム・セレアリス、フザリウム・クロークウェレンス、フザリウム・クルモラム、フザリウム・グラミネアルム、フザリウム・グラミナム、フザリウム・ヘテロスポラム、フザリウム・ネグンジ、フザリウム・オキシスポラム、フザリウム・レチクラタム、フザリウム・ロセウム、フザリウム・サムブシナム、フザリウム・サルコクロウム、フザリウム・スルフレウム、フザリウム・トルロサム、フザリウム・トリコテシオイデス、若しくはフザリウム・ベンニタム；フミコーラ（Humicola）、例えば、フミコーラ・インソレンス（Humicola insolens）、若しくはフミコーラ・ラヌギノサ（Humicola lanuginosa）；又はトリコデルマ（Trichoderma）、例えば、トリコデルマ・ハルジアナム（Trichoderma harzianum）、トリコデルマ・コニンギイ（Trichoderma koningii）、トリコデルマ・ロンギブラキアタム（Trichoderma longibrachiatum）、トリコデルマ・レーシ（Trichoderma reesei）、若しくはトリコデルマ・ビリデ（Trichoderma viride）に属する微生物によって産生されてもよい。
【0062】
好ましくは、組成物は、プロテアーゼ又は２つ以上のプロテアーゼの混合物、リパーゼ又は２つ以上のリパーゼの混合物、ペルオキシダーゼ又は２つ以上のペルオキシダーゼの混合物、１つ以上のデンプン分解酵素、例えば、アルファ－アミラーゼ、グルコアミラーゼ、マルトース生成アミラーゼ、及び／又はセルラーゼ又はこれらの混合物を含む。
【0063】
概して、選択された酵素の性質は、選択された洗剤と適合すべきであり（すなわち、ｐＨ最適条件、他の酵素及び非酵素成分との適合性など）、酵素は、有効量で存在すべきである。好ましくは、本発明の製品は、組成物１グラム当たり、少なくとも０．０１ｍｇ、好ましくは約０．０５～約１０、より好ましくは約０．１～約６、とりわけ約０．２～約５ｍｇの更なる活性酵素を含む。
【0064】
プロテアーゼ：本発明の組成物は、好ましくはプロテアーゼを含む。２つ以上のプロテアーゼの混合物は、より広い温度、サイクル持続時間、及び／又は基質範囲にわたって洗浄の向上に寄与することができる。好適なプロテアーゼとしては、メタロプロテアーゼ及びセリンプロテアーゼが挙げられ、例えば、サブチリシン（ＥＣ３．４．２１．６２）などの中性又はアルカリ性微生物セリンプロテアーゼを含む。好適なプロテアーゼとしては、動物、植物又は微生物起源のものが挙げられる。一態様では、このような好適なプロテアーゼは、微生物起源のものであってもよい。好適なプロテアーゼとしては、前述の好適なプロテアーゼの化学的又は遺伝的に修飾された変異体が挙げられる。一態様では、好適なプロテアーゼは、アルカリ性微生物プロテアーゼ又は／及びトリプシン型プロテアーゼなどのセリンプロテアーゼであってよい。好適な中性又はアルカリ性プロテアーゼの例としては、以下が挙げられる。
【0065】
サブチリシン（ＥＣ３．４．２１．６２）、特に国際公開第２００４０６７７３７号、同第２０１５０９１９８９号、同第２０１５０９１９９０号、同第２０１５０２４７３９号、同第２０１５１４３３６０号、米国特許第６，３１２，９３６（Ｂ１）号、同第５，６７９，６３０号、同第４，７６０，０２５号、独国特許出願公開第１０２００６０２２２１６（Ａ１）号、同第１０２００６０２２２２４（Ａ１）号、国際公開第２０１５０８９４４７号、同第２０１５０８９４４１号、同第２０１６０６６７５６号、同第２０１６０６６７５７号、同第２０１６０６９５５７号、同第２０１６０６９５６３号、同第２０１６０６９５６９号、及び同第２０１６１７４２３４号に記載されたバチルス属菌種（Bacillus sp.）、Ｂ．レンタス（B. lentus）、Ｂ．アルカロフィラス（B. alkalophilus）、Ｂ．サブチリス（B. subtilis）、Ｂ．アミロリケファシエンス（B. amyloliquefaciens）、Ｂ．プミルス（B. pumilus）、Ｂ．ギブソニイ（B. gibsonii）、及びＢ．アキバイ（B. akibaii）などのバチルス属由来のもの。具体的には、変異Ｓ９Ｒ、Ａ１５Ｔ、Ｖ６６Ａ、Ａ１８８Ｐ、Ｖ１９９Ｉ、Ｑ２３９Ｒ、Ｎ２５５Ｄ（ｓａｖｉｎａｓｅ付番システム）。
【0066】
国際公開第８９／０６２７０号に記載されているフサリウム属プロテアーゼ、並びに国際公開第０５／０５２１６１号及び国際公開第０５／０５２１４６号に記載されているセルロモナス属に由来するキモトリプシンプロテアーゼを含むトリプシン（例えば、ブタ又はウシ起源）などのトリプシン型又はキモトリプシン型プロテアーゼ。
【0067】
メタロプロテアーゼ、特に国際公開第０７／０４４９９３（Ａ２）号に記載されたバチルス・アミロリケファシエンス（Bacillus amyloliquefaciens）由来のもの、国際公開第２０１４１９４０３２号、同第２０１４１９４０５４号及び同第２０１４１９４１１７号に記載されたバチルス属（Bacillus）、ブレビバチルス属（Brevibacillus）、サーモアクチノミセス属（Thermoactinomyces）、ゲオバチルス属（Geobacillus）、パエニバチルス属（Paenibacillus）、リシニバチルス属（Lysinibacillus）又はストレプトマイセス属菌種（Streptomyces spp.）由来のもの、国際公開第２０１５１９３４８８号に記載されたクリベラ・アルミノサ（Kribella alluminosa）由来のもの、及び国際公開第２０１６０７５０７８号に記載されたストレプトマイセス属（Streptomyces）及びリソバクター属（Lysobacter）属由来のもの。
【0068】
国際公開第２０１５０２４７３９号及び同第２０１６０６６７５７号に記載されたバチルス属菌種（Bacillus sp）ＴＹ１４５サブチラーゼのバリアントを含めて、国際公開第９２／１７５７７号（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）に記載されたバチルス属菌種（Bacillus sp.）ＴＹ１４５、ＮＣＩＭＢ４０３３９由来のサブチラーゼと少なくとも９０％の同一性を有するプロテアーゼ。
【0069】
本発明の洗浄組成物に特に好ましいプロテアーゼは、バチルス・レンタス由来の野生型酵素と少なくとも９０％、好ましくは少なくとも９５％、より好ましくは少なくとも９８％、更により好ましくは少なくとも９９％、とりわけ１００％同一性を有し、以下の位置：Ｓ９Ｒ、Ａ１５Ｔ、Ｖ６８Ａ、Ｎ７６Ｄ、Ｎ８７Ｓ、Ｓ９９Ｄ、Ｓ９９ＳＤ、Ｓ９９Ａ、Ｓ１０１Ｇ、Ｓ１０１Ｍ、Ｓ１０３Ａ、Ｖ１０４Ｎ／Ｉ、Ｇ１１８Ｖ、Ｇ１１８Ｒ、Ｓ１２８Ｌ、Ｐ１２９Ｑ、Ｓ１３０Ａ、Ｙ１６７Ａ、Ｒ１７０Ｓ、Ａ１９４Ｐ、Ｖ２０５Ｉ、Ｑ２０６Ｌ／Ｄ／Ｅ、Ｙ２０９Ｗ、Ｍ２２２Ｓ、Ｑ２４５Ｒ、及び／又はＭ２２２Ｓ（参照により本明細書に組み込まれる国際公開第００／３７６２７号に例示されるＢＰＮ’付番システム及びアミノ酸略語を使用する）のうちの１つ以上、好ましくは２つ以上、より好ましくは３つ以上に変異を含む、ポリペプチドである。
【0070】
最も好ましくは、プロテアーゼは、ＰＢ９２野生型（国際公開第０８／０１０９２５号の配列番号２）又はサブチリシン３０９野生型（Ｎ８７Ｓの自然変異を含む以外はＰＢ９２主鎖による配列）のいずれかに対して以下の変異（ＢＰＮ付番システム）を含むプロテアーゼの群から選択される。
（ｉ）Ｇ１１８Ｖ＋Ｓ１２８Ｌ＋Ｐ１２９Ｑ＋Ｓ１３０Ａ
（ｉｉ）Ｓ１０１Ｍ＋Ｇ１１８Ｖ＋Ｓ１２８Ｌ＋Ｐ１２９Ｑ＋Ｓ１３０Ａ
（ｉｉｉ）Ｎ７６Ｄ＋Ｎ８７Ｒ＋Ｇ１１８Ｒ＋Ｓ１２８Ｌ＋Ｐ１２９Ｑ＋Ｓ１３０Ａ＋Ｓ１８８Ｄ＋Ｎ２４８Ｒ
（ｉｖ）Ｎ７６Ｄ＋Ｎ８７Ｒ＋Ｇ１１８Ｒ＋Ｓ１２８Ｌ＋Ｐ１２９Ｑ＋Ｓ１３０Ａ＋Ｓ１８８Ｄ＋Ｖ２４４Ｒ
（ｖ）Ｎ７６Ｄ＋Ｎ８７Ｒ＋Ｇ１１８Ｒ＋Ｓ１２８Ｌ＋Ｐ１２９Ｑ＋Ｓ１３０Ａ
（ｖｉ）Ｖ６８Ａ＋Ｎ８７Ｓ＋Ｓ１０１Ｇ＋Ｖ１０４Ｎ
（ｖｉｉ）Ｓ９９ＡＤ
（ｖｉｉｉ）Ｓ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６８Ａ＋Ｎ２１８Ｄ＋Ｑ２４５Ｒ
（ｉ）Ｇ１１８Ｖ＋Ｓ１２８Ｌ＋Ｐ１２９Ｑ＋Ｓ１３０Ａ
（ｉｉ）Ｓ１０１Ｍ＋Ｇ１１８Ｖ＋Ｓ１２８Ｌ＋Ｐ１２９Ｑ＋Ｓ１３０Ａ
（ｉｉｉ）Ｎ７６Ｄ＋Ｎ８７Ｒ＋Ｇ１１８Ｒ＋Ｓ１２８Ｌ＋Ｐ１２９Ｑ＋Ｓ１３０Ａ＋Ｓ１８８Ｄ＋Ｎ２４８Ｒ
（ｉｖ）Ｎ７６Ｄ＋Ｎ８７Ｒ＋Ｇ１１８Ｒ＋Ｓ１２８Ｌ＋Ｐ１２９Ｑ＋Ｓ１３０Ａ＋Ｓ１８８Ｄ＋Ｖ２４４Ｒ
（ｖ）Ｎ７６Ｄ＋Ｎ８７Ｒ＋Ｇ１１８Ｒ＋Ｓ１２８Ｌ＋Ｐ１２９Ｑ＋Ｓ１３０Ａ
（ｖｉ）Ｖ６８Ａ＋Ｎ８７Ｓ＋Ｓ１０１Ｇ＋Ｖ１０４Ｎ
（ｖｉｉ）Ｓ９９ＡＤ
（ｖｉｉｉ）Ｓ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６８Ａ＋Ｎ２１８Ｄ＋Ｑ２４５Ｒ
【0071】
好適な市販のプロテアーゼ酵素としては、商品名Ａｌｃａｌａｓｅ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ（登録商標）、Ｐｒｉｍａｓｅ（登録商標）、Ｄｕｒａｚｙｍ（登録商標）、Ｐｏｌａｒｚｙｍｅ（登録商標）、Ｋａｎｎａｓｅ（登録商標）、Ｌｉｑｕａｎａｓｅ（登録商標）、Ｌｉｑｕａｎａｓｅ Ｕｌｔｒａ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ Ｕｌｔｒａ（登録商標）、Ｏｖｏｚｙｍｅ（登録商標）、Ｎｅｕｔｒａｓｅ（登録商標）、Ｅｖｅｒｌａｓｅ（登録商標）、Ｃｏｒｏｎａｓｅ（登録商標）、Ｂｌａｚｅ（登録商標）、Ｂｌａｚｅ Ｕｌｔｒａ（登録商標）及びＥｓｐｅｒａｓｅ（登録商標）としてＮｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ（Ｄｅｎｍａｒｋ）によって販売されているもの；商品名Ｍａｘａｔａｓｅ（登録商標）、Ｍａｘａｃａｌ（登録商標）、Ｍａｘａｐｅｍ（登録商標）、Ｐｒｏｐｅｒａｓｅ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ Ｐｒｉｍｅ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ Ｏｘ（登録商標）、ＦＮ３（登録商標）、ＦＮ４（登録商標）、Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（登録商標）、Ｕｌｔｉｍａｓｅ（登録商標）及びＰｕｒａｆｅｃｔ ＯＸＰ（登録商標）としてＤｕｐｏｎｔによって販売されているもの；商品名Ｏｐｔｉｃｌｅａｎ（登録商標）及びＯｐｔｉｍａｓｅ（登録商標）としてＳｏｌｖａｙ Ｅｎｚｙｍｅｓによって販売されているもの；並びにＨｅｎｋｅｌ／Ｋｅｍｉｒａから入手可能なもの、すなわち、ＢＬＡＰ（配列は米国特許第５，３５２，６０４号の図２９に示され、Ｓ９９Ｄ＋Ｓ１０１Ｒ＋Ｓ１０３Ａ＋Ｖ１０４Ｉ＋Ｇ１５９Ｓの変異を有する、本明細書において以降ＢＬＡＰと称する）、ＢＬＡＰ Ｒ（Ｓ３Ｔ＋Ｖ４Ｉ＋Ｖ１９９Ｍ＋Ｖ２０５Ｉ＋Ｌ２１７Ｄを有するＢＬＡＰ）、ＢＬＡＰ Ｘ（Ｓ３Ｔ＋Ｖ４Ｉ＋Ｖ２０５Ｉを有するＢＬＡＰ）及びＢＬＡＰ Ｆ４９（Ｓ３Ｔ＋Ｖ４Ｉ＋Ａ１９４Ｐ＋Ｖ１９９Ｍ＋Ｖ２０５Ｉ＋Ｌ２１７Ｄを有するＢＬＡＰ）；並びにＫａｏ製のＫＡＰ（変異Ａ２３０Ｖ＋Ｓ２５６Ｇ＋Ｓ２５９Ｎを有するバチルス・アルカロフィラスのサブチリシン）が挙げられる。
【0072】
Ｐｒｏｐｅｒａｓｅ（登録商標）、Ｂｌａｚｅ（登録商標）、Ｕｌｔｉｍａｓｅ（登録商標）、Ｅｖｅｒｌａｓｅ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ（登録商標）、Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（登録商標）、Ｂｌａｚｅ Ｕｌｔｒａ（登録商標）、ＢＬＡＰ及びＢＬＡＰバリアントからなる群から選択される市販のプロテアーゼは、本明細書に用いるのに特に好ましい。
【0073】
本発明の製品中のプロテアーゼの好ましい濃度としては、組成物１ｇ当たり約０．０５～約１０、より好ましくは約０．５～約７、特に約１～約６ｍｇの活性プロテアーゼが挙げられる。
【0074】
リパーゼ：組成物は、好ましくはリパーゼを含む。油及び／又は脂の存在は、マンナン及び他の多糖類を含む染みの復元力を更に増大させ得る。したがって、酵素パッケージ中にリパーゼが存在すると、このような染みの除去を更に改善することができる。好適なリパーゼとしては、細菌又は真菌又は合成起源のものが挙げられる。化学修飾された又はタンパク質が遺伝子操作を受けた変異体が含まれる。有用なリパーゼの例としては、例えば、Ｈ．ラヌギノサ（H. lanuginosa）（Ｔ．ラヌギノサス）（T. lanuginosus））又はＨ．インソレンス（H. insolens）などのフミコーラ属（別名サーモマイセス属（Thermomyces））由来のリパーゼ；例えば、Ｐ．アルカリゲネス（P. alcaligenes）又はＰ．シュードアルカリゲネス（P. pseudoalcaligenes）、Ｐ．セパシア（P. cepacia）、Ｐ．スタットゼリ（P. stutzeri）、Ｐ．フルオレセンス（P. fluorescens）、シュードモナス属菌種（Pseudomonas sp.）ＳＤ７０５株、Ｐ．ウィスコシネンシス（P. wisconsinensis）などのシュードモナス属のリパーゼ；例えば、Ｂ．サブチリス（Ｄａｒｔｏｉｓ ｅｔ ａｌ．（１９９３），Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ，１１３１，２５３－３６０）、Ｂ．ステアロサーモフィルス、又はＢ．プミルスなどのバチルス属のリパーゼが挙げられる。
【0075】
リパーゼは、米国特許第６，９３９，７０２（Ｂ１）号、及び米国特許出願第２００９／０２１７４６４号に記載されているような「第１サイクルのリパーゼ」であってもよい。一態様では、リパーゼは、第１の洗浄用リパーゼであり、好ましくは、Ｔ２３１Ｒ及びＮ２３３Ｒ変異を含む、サーモマイセス・ラヌギノサス（Thermomyces lanuginosus）由来の野生型リパーゼのバリアントである。野生型配列は、Ｓｗｉｓｓｐｒｏｔのアクセッション番号Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ Ｏ５９９５２（サーモマイセス・ラヌギノサス（フミコーラ・ラヌギノサ）由来の２６９個のアミノ酸（アミノ酸２３～２９１）である。好ましいリパーゼとしては、Ｌｉｐｅｘ（登録商標）、Ｌｉｐｏｌｅｘ（登録商標）、及びＬｉｐｏｃｌｅａｎ（登録商標）の商品名で販売されているものが挙げられる。
【0076】
他の好適なリパーゼとしては、例えば国際公開第２０１３／１７１２４１号に記載されているようなＬｉｐｒｌ１３９、例えば国際公開第２０１１／０８４４１２号及び同第２０１３／０３３３１８号に記載されているようなＴｆｕＬｉｐ２、例えば国際公開第２０１８２２８８８０号に記載されているようなシュードモナス・スツッツェリ（Pseudomonas stutzeri）リパーゼ、例えば国際公開第２０１８２２８８８１号に記載されているようなマイクロバルビファー・サーモトレランス（Microbulbifer thermotolerans）リパーゼ、例えば欧州特許第３２９９４５７号に記載されているようなスルホバチルス・アシドカルダリウス（Sulfobacillus acidocaldarius）リパーゼ、例えば国際公開第２０１８２０９０２６号に記載されているようなＬＩＰ０６２リパーゼ、例えば国際公開第２０１７０３６９０１号に記載されているようなＰｉｎＬｉｐリパーゼ、並びに例えば国際公開第２０１７００５７９８号に記載されているようなアブシディア属（Absidia）の種のリパーゼが挙げられる。
【0077】
好適なリパーゼは、
（ａ）置換Ｔ２３１Ｒ
（ｂ）置換Ｎ２３３Ｒ又はＮ２３３Ｃ
（ｃ）Ｅ１Ｃ、Ｄ２７Ｒ、Ｎ３３Ｑ、Ｇ３８Ａ、Ｆ５１Ｖ、Ｇ９１Ｑ、Ｄ９６Ｅ、Ｋ９８Ｌ、Ｋ９８Ｉ、Ｄ１１１Ａ、Ｇ１６３Ｋ、Ｈ１９８Ｓ、Ｅ２１０Ｑ、Ｙ２２０Ｆ、Ｄ２５４Ｓ、Ｉ２５５Ａ、及びＰ２５６Ｔから選択される少なくとも３つの更なる置換、を含む配列番号５のバリアントであり、
ここでは、位置は配列番号５の位置に対応し、リパーゼバリアントは、配列番号５のアミノ酸配列を有するポリペプチドと少なくとも９０％であるが１００％未満の配列同一性を有し、バリアントはリパーゼ活性を有する。
（ａ）置換Ｔ２３１Ｒ
（ｂ）置換Ｎ２３３Ｒ又はＮ２３３Ｃ
（ｃ）Ｅ１Ｃ、Ｄ２７Ｒ、Ｎ３３Ｑ、Ｇ３８Ａ、Ｆ５１Ｖ、Ｇ９１Ｑ、Ｄ９６Ｅ、Ｋ９８Ｌ、Ｋ９８Ｉ、Ｄ１１１Ａ、Ｇ１６３Ｋ、Ｈ１９８Ｓ、Ｅ２１０Ｑ、Ｙ２２０Ｆ、Ｄ２５４Ｓ、Ｉ２５５Ａ、及びＰ２５６Ｔから選択される少なくとも３つの更なる置換、を含む配列番号５のバリアントであり、
ここでは、位置は配列番号５の位置に対応し、リパーゼバリアントは、配列番号５のアミノ酸配列を有するポリペプチドと少なくとも９０％であるが１００％未満の配列同一性を有し、バリアントはリパーゼ活性を有する。
【0078】
１つの好ましいリパーゼは、以下の置換を含む配列番号５のバリアントである：Ｔ２３１Ｒ、Ｎ２３３Ｒ、Ｄ２７Ｒ、Ｇ３８Ａ、Ｄ９６Ｅ、Ｄ１１１Ａ、Ｇ１６３Ｋ、Ｄ２５４Ｓ、及びＰ２５６Ｔ
【0079】
１つの好ましいリパーゼは、以下の置換を含む配列番号５のバリアントである：Ｔ２３１Ｒ、Ｎ２３３Ｒ、Ｎ３３Ｑ、Ｇ９１Ｑ、Ｅ２１０Ｑ、Ｉ２５５Ａ。
【0080】
好適なリパーゼは、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓから、例えば、Ｌｉｐｅｘ Ｅｖｉｔｙ １００Ｌ、Ｌｉｐｅｘ Ｅｖｉｔｙ ２００Ｌ（いずれも液体原料）、及びＬｉｐｅｘ Ｅｖｉｔｙ １０５Ｔ（顆粒）として市販されている。これらのリパーゼは、本発明の範囲外である製品Ｌｉｐｅｘ １００Ｌ、Ｌｉｐｅｘ １００Ｔ、及びＬｉｐｅｘ Ｅｖｉｔｙ １００Ｔとは異なる構造を有する。
【0081】
セルラーゼ：好適なセルラーゼとしては、細菌由来又は真菌由来のセルラーゼが挙げられる。化学修飾された又はタンパク質が遺伝子操作を受けた変異体が含まれる。好適なセルラーゼとしては、バチルス属、シュードモナス属、フミコーラ属、フザリウム属、チェラビア属（Thielavia）、アクレモニウム属（Acremonium）由来のセルラーゼ、例えば、米国特許第４，４３５，３０７号、同第５，６４８，２６３号、同第５，６９１，１７８号、同第５，７７６，７５７号、及び同第５，６９１，１７８号に開示されているフミコーラ・インソレンス、ミセリオフィソーラ・サーモフィラ（Myceliophthora thermophila）、及びフザリウム・オキシスポラムから生成される真菌セルラーゼが挙げられる。
【0082】
一態様では、好ましい酵素としては、エンド－ベータ－１，４－グルカナーゼ活性（Ｅ．Ｃ．３．２．１．４）を呈する微生物由来のエンドグルカナーゼが挙げられ、好ましくは、以下を含む群から選択される。
（ａ）米国特許第７，１４１，４０３（Ｂ２）号における配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９４％、９７％、更には９９％同一性の配列を有するバチルス属のメンバーに対して内因性の細菌ポリペプチド、好ましい置換は、配列番号２の成熟ポリペプチドの２９２、２７４、２６６、２６５、２５５、２４６、２３７、２２４、及び２２１位に対応する１つ以上の位置を含み、バリアントはセルラーゼ活性を有する；
（ｂ）キシログルカン及び非晶質セルロース基質の両方に対して酵素活性を有するグリコシルヒドロラーゼであって、ＧＨファミリー５、７、１２、１６、４４又は７４から選択されるグリコシルヒドロラーゼ；
（ｃ）国際公開第０９／１４８９８３号の配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９４％、９７％、及び更には９９％同一性の配列を有するグリコシルヒドロラーゼ；
（ｄ）国際公開第２０１７１０６６７６号における配列番号５と少なくとも７０％の同一性を示すバリアント。好ましい置換は、４、２０、２３、２９、３２、３６、４４、５１、７７、８０、８７、９０、９７、９８、９９、１０２、１１２、１１６、１３５、１３６、１４２、１５３、１５４、１５７、１６１、１６３、１９２、１９４、２０４、２０８、２１０、２１２、２１６、２１７、２２１、２２２、２２５、２２７、及び２３２位に対応する１つ以上の位置を含む；
（ｅ）並びにこれらの混合物。
（ａ）米国特許第７，１４１，４０３（Ｂ２）号における配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９４％、９７％、更には９９％同一性の配列を有するバチルス属のメンバーに対して内因性の細菌ポリペプチド、好ましい置換は、配列番号２の成熟ポリペプチドの２９２、２７４、２６６、２６５、２５５、２４６、２３７、２２４、及び２２１位に対応する１つ以上の位置を含み、バリアントはセルラーゼ活性を有する；
（ｂ）キシログルカン及び非晶質セルロース基質の両方に対して酵素活性を有するグリコシルヒドロラーゼであって、ＧＨファミリー５、７、１２、１６、４４又は７４から選択されるグリコシルヒドロラーゼ；
（ｃ）国際公開第０９／１４８９８３号の配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９４％、９７％、及び更には９９％同一性の配列を有するグリコシルヒドロラーゼ；
（ｄ）国際公開第２０１７１０６６７６号における配列番号５と少なくとも７０％の同一性を示すバリアント。好ましい置換は、４、２０、２３、２９、３２、３６、４４、５１、７７、８０、８７、９０、９７、９８、９９、１０２、１１２、１１６、１３５、１３６、１４２、１５３、１５４、１５７、１６１、１６３、１９２、１９４、２０４、２０８、２１０、２１２、２１６、２１７、２２１、２２２、２２５、２２７、及び２３２位に対応する１つ以上の位置を含む；
（ｅ）並びにこれらの混合物。
【0083】
好適なエンドグルカナーゼは、商品名Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎ（登録商標）及びＷｈｉｔｅｚｙｍｅ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ（Ｂａｇｓｖａｅｒｄ，Ｄｅｎｍａｒｋ））として販売されている。例としては、Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎ（登録商標）５０００Ｌ、Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎ（登録商標）Ｃｌａｓｓｉｃ ４００Ｌ、Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎ（登録商標）Ｃｌａｓｓｉｃ ７００Ｔ、Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎ（登録商標）４５００Ｔ、Ｗｈｉｔｅｚｙｍｅ（登録商標）１．５Ｔ、Ｗｈｉｔｅｚｙｍｅ（登録商標）２．０Ｌが挙げられる。
【0084】
他の市販のセルラーゼとしては、Ｃｅｌｌｕｚｙｍｅ（登録商標）、Ｃａｒｅｚｙｍｅ（登録商標）、Ｃａｒｅｚｙｍｅ（登録商標）Ｐｒｅｍｉｕｍ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）、Ｃｌａｚｉｎａｓｅ（登録商標）、Ｐｕｒａｄａｘ ＨＡ（登録商標）、Ｒｅｖｉｔａｌｅｎｚ（登録商標）１０００、Ｒｅｖｉｔａｌｅｎｚ（登録商標）２０００（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃ．）、ＫＡＣ－５００（Ｂ）（登録商標）（Ｋａｏ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、Ｂｉｏｔｏｕｃｈ（登録商標）ＦＣＬ、Ｂｉｏｔｏｕｃｈ（登録商標）ＤＣＬ、Ｂｉｏｔｏｕｃｈ（登録商標）ＤＣＣ、Ｂｉｏｔｏｕｃｈ（登録商標）ＮＣＤ、Ｂｉｏｔｏｕｃｈ（登録商標）ＦＣＣ、Ｂｉｏｔｏｕｃｈ（登録商標）ＦＬＸ１（ＡＢ Ｅｎｚｙｍｅｓ）が挙げられる
【0085】
好適なグルカナーゼとしては、好ましくはＥ．Ｃ．クラス３．２．１．３９由来のエンド－β－１，３－グルカナーゼが挙げられ、好ましくはパエニバチルス属の種（Paenibacillus sp）、ゾベリア・ガラクタニボラン（Zobellia galactanivorans）、サーモトガ・ペトロフィラ（Thermotoga petrophila）、又はトリコデルマ属の種の微生物、好ましくはパエニバチルス属の種又はゾベリア・ガラクタニボラン、最も好ましくはパエニバチルス属の種から得られる。
【0086】
アミラーゼ：好ましくは、本発明の組成物は、アミラーゼを含む。好適なアルファ－アミラーゼとしては、細菌又は真菌起源のものが挙げられる。化学的又は遺伝的に修飾された変異体（バリアント）が含まれる。好ましいアルカリ性アルファ－アミラーゼは、バチルス属の菌種、例えば、バチルス・リケニフォルミス、バチルス・アミロリケファシエンス、バチルス・ステアロサーモフィラス、バチルス・サブチリス、又は他のバチルス属の種、例えば、バチルス属の種ＮＣＢＩ１２２８９、ＮＣＢＩ１２５１２、ＮＣＢＩ１２５１３、ＤＳＭ９３７５（米国特許第７，１５３，８１８号）、ＤＳＭ１２３６８、ＤＳＭＺ番号１２６４９、ＫＳＭ ＡＰ１３７８（国際公開第９７／００３２４号）、ＫＳＭ Ｋ３６、又はＫＳＭ Ｋ３８（欧州特許第１，０２２，３３４号）に由来する。好ましいアミラーゼとしては、以下が挙げられる。
（ａ）米国特許第５，８５６，１６４号、並びに国際公開第９９／２３２１１号、同第９６／２３８７３号、同第００／６００６０号、同第０６／００２６４３号、及び同第２０１７／１９２６５７号に記載のバリアント、特に、国際公開第０６／００２６４３号において配列番号１２として記載されているＡＡ５６０酵素に対して以下の位置：
２６、３０、３３、８２、３７、１０６、１１８、１２８、１３３、１４９、１５０、１６０、１７８、１８２、１８６、１９３、２０２、２１４、２３１、２４６、２５６、２５７、２５８、２６９、２７０、２７２、２８３、２９５、２９６、２９８、２９９、３０３、３０４、３０５、３１１、３１４、３１５、３１８、３１９、３３９、３４５、３６１、３７８、３８３、４１９、４２１、４３７、４４１、４４４、４４５、４４６、４４７、４５０、４６１、４７１、４８２、４８４位に１つ以上の置換を有し、好ましくは、Ｄ１８３＊及びＧ１８４＊の欠失も含むバリアント。
（ｂ）国際公開第０６／００２６４３号における配列番号４と少なくとも８５％、好ましくは９０％の同一性を示すバリアント、バチルス属ＳＰ７２２由来の野生型酵素、特に１８３及び１８４位が欠失しているバリアント、並びに国際公開第００／６００６０号、同第２０１１／１００４１０号、及び同第２０１３／００３６５９号に記載のバリアント、特に、参照によって本明細書に組み込まれる国際公開第０６／００２６４３号における配列番号４に対して以下の位置：
５１、５２、５４、１０９、３０４、１４０、１８９、１３４、１９５、２０６、２４３、２６０、２６２、２８４、３４７、４３９、４６９、４７６、及び４７７位に１つ以上の置換を有するもの。
（ｃ）バチルス属の種７０７（米国特許第６，０９３，５６２号における配列番号７）由来の野生型酵素と少なくとも９０％の同一性を示すバリアント、特に以下の変異：Ｍ２０２、Ｍ２０８、Ｓ２５５、Ｒ１７２、及び／又はＭ２６１のうちの１つ以上を含むもの。好ましくは、当該アミラーゼは、Ｍ２０２Ｌ、Ｍ２０２Ｖ、Ｍ２０２Ｓ、Ｍ２０２Ｔ、Ｍ２０２Ｉ、Ｍ２０２Ｑ、Ｍ２０２Ｗ、Ｓ２５５Ｎ及び／又はＲ１７２Ｑのうちの１つ以上を含む。Ｍ２０２Ｌ又はＭ２０２Ｔ変異を含むものが、特に好ましい。ＳＰ７０７骨格に基づく追加の関連変異／欠失は、Ｗ４８、Ａ５１、Ｖ１０３、Ｖ１０４、Ａ１１３、Ｒ１１８、Ｎ１２５、Ｖ１３１、Ｔ１３２、Ｅ１３４、Ｔ１３６、Ｅ１３８、Ｒ１４２、Ｓ１５４、Ｖ１６５、Ｒ１８２、Ｇ１８２、Ｈ１８３、Ｅ１９０、Ｄ１９２、Ｔ１９３、Ｉ２０６、Ｍ２０８、Ｄ２０９、Ｅ２１２、Ｖ２１３、Ｖ２１４、Ｎ２１４、Ｌ２１７、Ｒ２１８、Ｎ２１９、Ｖ２２２、Ｔ２２５、Ｔ２２７、Ｇ２２９、Ｉ２３５、Ｋ２４２、Ｙ２４３、Ｓ２４４、Ｆ２４５、Ｔ２４６、Ｉ２５０、Ｓ２５５、Ａ２５６、Ｈ２８６、Ｖ２９１、Ｔ３１６、Ｖ３１７、Ｖ３１８、Ｎ４１７、Ｔ４１８、Ａ４１９、Ｈ４２０、Ｐ４２１、Ｉ４２８、Ｍ４２９、Ｆ４４０、Ｒ４４３、Ｎ４４４、Ｋ４４５、Ｑ４４８、Ｓ４５１、Ａ４６５、Ｎ４７０、Ｓ４７２を含む。
（ｄ）国際公開第０９／１４９１３０号に記載のバリアント、好ましくは同第０９／１４９１３０号における配列番号１又は配列番号２、ゲオバチルス・ステアロファーモフィラス（Geobacillus Stearophermophilus）由来の野生型酵素、又はこの切断バージョンと少なくとも９０％の同一性を示すもの。
（ｅ）国際公開第１０／１１５０２１号に記載のバリアント、特に国際公開第１０／１１５０２１号における配列番号２、バチルス属の種ＴＳ－２３由来のアルファ－アミラーゼと少なくとも７５％、又は少なくとも８５％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％を示すもの。
（ｆ）国際公開第２０１６０９１６８８号における配列番号１と少なくとも８９％の同一性を示すバリアント、特にＨ１８３＋Ｇ１８４位に欠失を含み、更に４０５、４２１、４２２、及び／又は４２８位に１つ以上の変異を含むもの。
（ｇ）国際公開第２０１４０９９５２３号に記載のバリアント、特にパエニバチルス・カードラノリティカス（Paenibacillus curdlanolyticus）ＹＫ９由来の「ＰｃｕＡｍｙｌ α－アミラーゼ」（国際公開第２０１４０９９５２３号における配列番号３）と少なくとも６０％のアミノ酸配列同一性を示すもの。
（ｈ）国際公開第２０１４０９９５２３号に記載のバリアント、特にサイトファーガ属（Cytophaga）の種由来の「ＣｓｐＡｍｙ２アミラーゼ」（国際公開第２０１４１６４７７７号における配列番号１及び６と少なくとも６０％のアミノ酸配列同一性を示すもの。特に、国際公開第２０１４１６４７７７号における配列番号１に基づく以下の欠失及び／又は変異のうちの１つ以上を含むもの：Ｒ１７８＊、Ｇ１７９＊、Ｔ３８Ｎ、Ｎ８８Ｈ、Ｎ１２６Ｙ、Ｔ１２９Ｉ、Ｎ１３４Ｍ、Ｆ１５３Ｗ、Ｌ１７１Ｒ、Ｔ１８０Ｄ、Ｅ１８７Ｐ、Ｉ２０３Ｙ、Ｇ４７６Ｋ、Ｇ４７７Ｅ、Ｙ３０３Ｄ。
（ｉ）バチルス・サブチリス（国際公開第２００９１４９２７１号における配列番号１）と少なくとも８５％の同一性を示すバリアント。
（ｊ）受託番号ＡＢ０５１１０２によるＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ＫＳＭ－Ｋ３８由来の野生型アミラーゼと少なくとも９０％の同一性を示すバリアント。
（ｋ）国際公開第２０１６１８０７４８号に記載のバリアント、特に、国際公開第２０１６１８０７４８号における配列番号７のバチルス属の種由来のＡＡＩ１０の成熟アミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を示すもの；国際公開第２０１６１８０７４８号の配列番号８におけるアリシクロバチルス属（Alicyclobacillus）の種のアミラーゼの成熟アミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を示すもの、及び国際公開第２０１６１８０７４８号における配列番号１３の成熟アミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を示すもの、特に、以下の変異Ｈ＊、Ｎ５４Ｓ、Ｖ５６Ｔ、Ｋ７２Ｒ、Ｇ１０９Ａ、Ｆ１１３Ｑ、Ｒ１１６Ｑ、Ｗ１６７Ｆ、Ｑ１７２Ｇ、Ａ１７４Ｓ、Ｇ１８４Ｔ、Ｎ１９５Ｆ、Ｖ２０６Ｌ、Ｋ３９１Ａ、Ｐ４７３Ｒ、Ｇ４７６Ｋのうちの１つ以上を含むもの。
（ｌ）国際公開第２０１８０６０２１６号に記載のバリアント、特に、国際公開第２０１８０６０２１６号における配列番号４の成熟アミノ酸配列と少なくとも７０％の同一性を示すバリアント、バチルス・アミロリケファシエンス及びバチルス・リケニフォルミスの融合分子。特に、Ｈ１、Ｎ５４、Ｖ５６、Ｋ７２、Ｇ１０９、Ｆ１１３、Ｒ１１６、Ｔ１３４、Ｗ１４０、Ｗ１５９、Ｗ１６７、Ｑ１６９、Ｑ１７２、Ｌ１７３、Ａ１７４、Ｒ１８１、Ｇ１８２、Ｄ１８３、Ｇ１８４、Ｗ１８９、Ｅ１９４、Ｎ１９５、Ｖ２０６、Ｇ２５５、Ｎ２６０、Ｆ２６２、Ａ２６５、Ｗ２８４、Ｆ２８９、Ｓ３０４、Ｇ３０５、Ｗ３４７、Ｋ３９１、Ｑ３９５、Ｗ４３９、Ｗ４６９、Ｒ４４４、Ｆ４７３、Ｇ４７６、及びＧ４７７位に１つ以上の置換を含むもの。
（ａ）米国特許第５，８５６，１６４号、並びに国際公開第９９／２３２１１号、同第９６／２３８７３号、同第００／６００６０号、同第０６／００２６４３号、及び同第２０１７／１９２６５７号に記載のバリアント、特に、国際公開第０６／００２６４３号において配列番号１２として記載されているＡＡ５６０酵素に対して以下の位置：
２６、３０、３３、８２、３７、１０６、１１８、１２８、１３３、１４９、１５０、１６０、１７８、１８２、１８６、１９３、２０２、２１４、２３１、２４６、２５６、２５７、２５８、２６９、２７０、２７２、２８３、２９５、２９６、２９８、２９９、３０３、３０４、３０５、３１１、３１４、３１５、３１８、３１９、３３９、３４５、３６１、３７８、３８３、４１９、４２１、４３７、４４１、４４４、４４５、４４６、４４７、４５０、４６１、４７１、４８２、４８４位に１つ以上の置換を有し、好ましくは、Ｄ１８３＊及びＧ１８４＊の欠失も含むバリアント。
（ｂ）国際公開第０６／００２６４３号における配列番号４と少なくとも８５％、好ましくは９０％の同一性を示すバリアント、バチルス属ＳＰ７２２由来の野生型酵素、特に１８３及び１８４位が欠失しているバリアント、並びに国際公開第００／６００６０号、同第２０１１／１００４１０号、及び同第２０１３／００３６５９号に記載のバリアント、特に、参照によって本明細書に組み込まれる国際公開第０６／００２６４３号における配列番号４に対して以下の位置：
５１、５２、５４、１０９、３０４、１４０、１８９、１３４、１９５、２０６、２４３、２６０、２６２、２８４、３４７、４３９、４６９、４７６、及び４７７位に１つ以上の置換を有するもの。
（ｃ）バチルス属の種７０７（米国特許第６，０９３，５６２号における配列番号７）由来の野生型酵素と少なくとも９０％の同一性を示すバリアント、特に以下の変異：Ｍ２０２、Ｍ２０８、Ｓ２５５、Ｒ１７２、及び／又はＭ２６１のうちの１つ以上を含むもの。好ましくは、当該アミラーゼは、Ｍ２０２Ｌ、Ｍ２０２Ｖ、Ｍ２０２Ｓ、Ｍ２０２Ｔ、Ｍ２０２Ｉ、Ｍ２０２Ｑ、Ｍ２０２Ｗ、Ｓ２５５Ｎ及び／又はＲ１７２Ｑのうちの１つ以上を含む。Ｍ２０２Ｌ又はＭ２０２Ｔ変異を含むものが、特に好ましい。ＳＰ７０７骨格に基づく追加の関連変異／欠失は、Ｗ４８、Ａ５１、Ｖ１０３、Ｖ１０４、Ａ１１３、Ｒ１１８、Ｎ１２５、Ｖ１３１、Ｔ１３２、Ｅ１３４、Ｔ１３６、Ｅ１３８、Ｒ１４２、Ｓ１５４、Ｖ１６５、Ｒ１８２、Ｇ１８２、Ｈ１８３、Ｅ１９０、Ｄ１９２、Ｔ１９３、Ｉ２０６、Ｍ２０８、Ｄ２０９、Ｅ２１２、Ｖ２１３、Ｖ２１４、Ｎ２１４、Ｌ２１７、Ｒ２１８、Ｎ２１９、Ｖ２２２、Ｔ２２５、Ｔ２２７、Ｇ２２９、Ｉ２３５、Ｋ２４２、Ｙ２４３、Ｓ２４４、Ｆ２４５、Ｔ２４６、Ｉ２５０、Ｓ２５５、Ａ２５６、Ｈ２８６、Ｖ２９１、Ｔ３１６、Ｖ３１７、Ｖ３１８、Ｎ４１７、Ｔ４１８、Ａ４１９、Ｈ４２０、Ｐ４２１、Ｉ４２８、Ｍ４２９、Ｆ４４０、Ｒ４４３、Ｎ４４４、Ｋ４４５、Ｑ４４８、Ｓ４５１、Ａ４６５、Ｎ４７０、Ｓ４７２を含む。
（ｄ）国際公開第０９／１４９１３０号に記載のバリアント、好ましくは同第０９／１４９１３０号における配列番号１又は配列番号２、ゲオバチルス・ステアロファーモフィラス（Geobacillus Stearophermophilus）由来の野生型酵素、又はこの切断バージョンと少なくとも９０％の同一性を示すもの。
（ｅ）国際公開第１０／１１５０２１号に記載のバリアント、特に国際公開第１０／１１５０２１号における配列番号２、バチルス属の種ＴＳ－２３由来のアルファ－アミラーゼと少なくとも７５％、又は少なくとも８５％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％を示すもの。
（ｆ）国際公開第２０１６０９１６８８号における配列番号１と少なくとも８９％の同一性を示すバリアント、特にＨ１８３＋Ｇ１８４位に欠失を含み、更に４０５、４２１、４２２、及び／又は４２８位に１つ以上の変異を含むもの。
（ｇ）国際公開第２０１４０９９５２３号に記載のバリアント、特にパエニバチルス・カードラノリティカス（Paenibacillus curdlanolyticus）ＹＫ９由来の「ＰｃｕＡｍｙｌ α－アミラーゼ」（国際公開第２０１４０９９５２３号における配列番号３）と少なくとも６０％のアミノ酸配列同一性を示すもの。
（ｈ）国際公開第２０１４０９９５２３号に記載のバリアント、特にサイトファーガ属（Cytophaga）の種由来の「ＣｓｐＡｍｙ２アミラーゼ」（国際公開第２０１４１６４７７７号における配列番号１及び６と少なくとも６０％のアミノ酸配列同一性を示すもの。特に、国際公開第２０１４１６４７７７号における配列番号１に基づく以下の欠失及び／又は変異のうちの１つ以上を含むもの：Ｒ１７８＊、Ｇ１７９＊、Ｔ３８Ｎ、Ｎ８８Ｈ、Ｎ１２６Ｙ、Ｔ１２９Ｉ、Ｎ１３４Ｍ、Ｆ１５３Ｗ、Ｌ１７１Ｒ、Ｔ１８０Ｄ、Ｅ１８７Ｐ、Ｉ２０３Ｙ、Ｇ４７６Ｋ、Ｇ４７７Ｅ、Ｙ３０３Ｄ。
（ｉ）バチルス・サブチリス（国際公開第２００９１４９２７１号における配列番号１）と少なくとも８５％の同一性を示すバリアント。
（ｊ）受託番号ＡＢ０５１１０２によるＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ＫＳＭ－Ｋ３８由来の野生型アミラーゼと少なくとも９０％の同一性を示すバリアント。
（ｋ）国際公開第２０１６１８０７４８号に記載のバリアント、特に、国際公開第２０１６１８０７４８号における配列番号７のバチルス属の種由来のＡＡＩ１０の成熟アミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を示すもの；国際公開第２０１６１８０７４８号の配列番号８におけるアリシクロバチルス属（Alicyclobacillus）の種のアミラーゼの成熟アミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を示すもの、及び国際公開第２０１６１８０７４８号における配列番号１３の成熟アミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を示すもの、特に、以下の変異Ｈ＊、Ｎ５４Ｓ、Ｖ５６Ｔ、Ｋ７２Ｒ、Ｇ１０９Ａ、Ｆ１１３Ｑ、Ｒ１１６Ｑ、Ｗ１６７Ｆ、Ｑ１７２Ｇ、Ａ１７４Ｓ、Ｇ１８４Ｔ、Ｎ１９５Ｆ、Ｖ２０６Ｌ、Ｋ３９１Ａ、Ｐ４７３Ｒ、Ｇ４７６Ｋのうちの１つ以上を含むもの。
（ｌ）国際公開第２０１８０６０２１６号に記載のバリアント、特に、国際公開第２０１８０６０２１６号における配列番号４の成熟アミノ酸配列と少なくとも７０％の同一性を示すバリアント、バチルス・アミロリケファシエンス及びバチルス・リケニフォルミスの融合分子。特に、Ｈ１、Ｎ５４、Ｖ５６、Ｋ７２、Ｇ１０９、Ｆ１１３、Ｒ１１６、Ｔ１３４、Ｗ１４０、Ｗ１５９、Ｗ１６７、Ｑ１６９、Ｑ１７２、Ｌ１７３、Ａ１７４、Ｒ１８１、Ｇ１８２、Ｄ１８３、Ｇ１８４、Ｗ１８９、Ｅ１９４、Ｎ１９５、Ｖ２０６、Ｇ２５５、Ｎ２６０、Ｆ２６２、Ａ２６５、Ｗ２８４、Ｆ２８９、Ｓ３０４、Ｇ３０５、Ｗ３４７、Ｋ３９１、Ｑ３９５、Ｗ４３９、Ｗ４６９、Ｒ４４４、Ｆ４７３、Ｇ４７６、及びＧ４７７位に１つ以上の置換を含むもの。
【0087】
好ましいアミラーゼは、漂白酸化しやすいアミノ酸の１つ以上が、酸化されにくいアミノ酸で置換された、遺伝子操作を受けた酵素である。具体的には、メチオニン残基は、任意の他のアミノ酸で置換されることが好ましい。具体的には、最も酸化しやすいメチオニンが置換されることが好ましい。好ましくは、配列番号１１における２０２に相当する位置のメチオニンが置換される。好ましくは、この位置のメチオニンは、スレオニン又はロイシン、好ましくはロイシンで置換される。
【0088】
好適な市販のアルファ－アミラーゼとしては、ＤＵＲＡＭＹＬ（登録商標）、ＬＩＱＵＥＺＹＭＥ（登録商標）、ＴＥＲＭＡＭＹＬ（登録商標）、ＴＥＲＭＡＭＹＬ ＵＬＴＲＡ（登録商標）、ＮＡＴＡＬＡＳＥ（登録商標）、ＳＵＰＲＡＭＹＬ（登録商標）、ＳＴＡＩＮＺＹＭＥ（登録商標）、ＳＴＡＩＮＺＹＭＥ ＰＬＵＳ（登録商標）、ＦＵＮＧＡＭＹＬ（登録商標）、ＡＴＬＡＮＴＩＣ（登録商標）、ＡＣＨＩＥＶＥ ＡＬＰＨＡ（登録商標）、ＡＭＰＬＩＦＹ（登録商標）ＰＲＩＭＥ、ＩＮＴＥＮＳＡ（登録商標）及びＢＡＮ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ（Ｂａｇｓｖａｅｒｄ，Ｄｅｎｍａｒｋ））、ＫＥＭＺＹＭ（登録商標）ＡＴ９０００（Ｂｉｏｚｙｍ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｔｒａｄｉｎｇ ＧｍｂＨ（Ｗｅｈｌｉｓｔｒａｓｓｅ ２７ｂ Ａ－１２００ Ｗｉｅｎ Ａｕｓｔｒｉａ））、ＲＡＰＩＤＡＳＥ（登録商標）、ＰＵＲＡＳＴＡＲ（登録商標）、ＥＮＺＹＳＩＺＥ（登録商標）、ＯＰＴＩＳＩＺＥ ＨＴ ＰＬＵＳ（登録商標）、ＰＯＷＥＲＡＳＥ（登録商標）、ＰＲＥＦＥＲＥＮＺ Ｓ（登録商標）シリーズ（ＰＲＥＦＥＲＥＮＺ Ｓ１０００（登録商標）及びＰＲＥＦＥＲＥＮＺ Ｓ２０００（登録商標）を含む）、並びにＰＵＲＡＳＴＡＲ ＯＸＡＭ（登録商標）（ＤｕＰｏｎｔ．（Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ））、並びにＫＡＭ（登録商標）（Ｋａｏ（１４－１０ Ｎｉｈｏｎｂａｓｈｉ Ｋａｙａｂａｃｈｏ，１－ｃｈｏｍｅ，Ｃｈｕｏ－ｋｕ Ｔｏｋｙｏ １０３－８２１０，Ｊａｐａｎ））が挙げられる。
【0089】
好ましくは、組成物は、組成物１ｇ当たり少なくとも０．０１ｍｇ、好ましくは約０．０５～約１０、より好ましくは約０．１～約６、特に約０．２～約５ｍｇの活性アミラーゼを含む。
【0090】
ペルオキシダーゼ／オキシダーゼ：好適なペルオキシダーゼ／オキシダーゼとしては、植物、細菌、又は真菌起源のものが挙げられる。化学修飾された又はタンパク質が遺伝子操作を受けた変異体が含まれる。有用なペルオキシダーゼの例としては、コプリナス（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ）属のペルオキシダーゼ、例えば、国際公開第９３／２４６１８号、同第９５／１０６０２号、及び同第９８／１５２５７号に記載のようなＣ．サイネレウス（Ｃ．ｃｉｎｅｒｅｕｓ）及びこのバリアント由来のペルオキシダーゼが挙げられる。
【0091】
市販のペルオキシダーゼとしては、ＧＵＡＲＤＺＹＭＥ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）が挙げられる。
【0092】
ペクチン酸リアーゼ：好適なペクチン酸リアーゼとしては、Ｐｅｃｔａｗａｓｈ（登録商標）、Ｐｅｃｔａｗａｙ（登録商標）、Ｘ－Ｐｅｃｔ（登録商標）、（全てＮｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ（Ｂａｇｓｖａｅｒｄ，Ｄｅｎｍａｒｋ））Ｐｒｅｆｅｒｅｎｚ（登録商標）Ｆ１０００（ＤｕＰｏｎｔ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）の商品名で販売されているものが挙げられる。
【0093】
マンナナーゼ。組成物は、好ましくは、１つ以上の追加のマンナナーゼ酵素を含む。本明細書で使用するとき、「マンナナーゼ」又は「ガラクトマンナナーゼ」という用語は、マンナンエンド－１，４－ベータ－マンノシダーゼとして当該技術分野において既知のものに従って定義され、別名ベータ－マンナナーゼ及びエンド－１，４－マンナナーゼを有し、マンナン、ガラクトマンナン、グルコマンナン、及びガラクトグルコマンナンにおける１，４－ベータ－Ｄ－マンノシド連結の加水分解を触媒するマンナナーゼ酵素を意味する。マンナナーゼは、酵素命名法に従ってＥＣ３．２．１．７８として分類され、グリコシルヒドロラーゼファミリー５、２６、及び１１３に属する。多くの好適なマンナナーゼは、グリコシルヒドロラーゼファミリー５に属する。市販のマンナナーゼとしては、Ｍａｎｎａｗａｙ（登録商標）２００Ｌ及びＭａｎｎａｗａｙ Ｅｖｉｔｙ４．０Ｔなど商品名Ｍａｎｎａｗａｙ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）で販売されている全てのものが挙げられる。他の市販のマンナナーゼとしては、Ｅｆｆｅｃｔｅｎｚ（登録商標）Ｍ１０００、Ｍａｎｎａｓｔａｒ（登録商標）３７５、Ｐｒｅｆｅｒｅｎｚ Ｍ１００、及びＰｕｒａｂｒｉｔｅ（登録商標）（全てＤｕＰｏｎｔ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）及びＢｉｏｔｏｕｃｈ Ｍ７（ＡＢ Ｅｎｚｙｍｅｓ）が挙げられる。他の好適なマンナナーゼは、国際公開第２０１８１９１１３５号、同第２０１５０４０１５９号、同第２０１７０２１５１５号、同第２０１７０２１５１６号、同第２０１７０２１５１７号、及び同第２０１９０８１５１５号に記載されているものなどグリコシルヒドロラーゼファミリー２６に属する。マンナナーゼの好適な混合物としては、国際公開第２０１９０８１５１５号に記載されているグリコシルヒドロラーゼファミリー５マンナナーゼ及びグリコシルヒドロラーゼファミリー２６マンナナーゼの組み合わせが挙げられる。
【0094】
ヌクレアーゼ：好ましくは、本組成物は、ＲＮａｓｅ若しくはＤＮａｓｅなどのヌクレアーゼ酵素、又はこれらの混合物を含む。ヌクレアーゼ酵素は、核酸のヌクレオチドサブユニット間のホスホジエステル結合を切断することができる酵素である。本明細書におけるヌクレアーゼ酵素は、好ましくは、デオキシリボヌクレアーゼ若しくはリボヌクレアーゼ酵素又はこれらの機能的フラグメントである。機能的フラグメント又は部分とは、ＤＮＡ骨格におけるホスホジエステル結合の切断を触媒するヌクレアーゼ酵素の部分を意味し、したがって、触媒活性を保持する当該ヌクレアーゼタンパク質の領域である。したがって、それは機能性が維持されている酵素及び／又はバリアント及び／又は誘導体及び／又は同族体の切断されたが機能的なバージョンを含む。
【0095】
好ましくは、ヌクレアーゼ酵素は、好ましくは、以下の分類のいずれかから選択されるデオキシリボヌクレアーゼである：Ｅ．Ｃ．３．１．２１．ｘ（式中、ｘ＝１、２、３、４、５、６、７、８又は９である）、Ｅ．Ｃ．３．１．２２．ｙ（式中、ｙ＝１、２、４又は５である）、Ｅ．Ｃ．３．１．３０．ｚ（式中、ｚ＝１又は２である）、Ｅ．Ｃ．３．１．３１．１、及びこれらの混合物。
【0096】
ＤＮａｓｅ：好適なＤＮａｓｅとしては、国際公開第２０１７１６２８３６号（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）の配列番号１、２、３、４、５、６、７、８、及び９、及び国際公開第２０１８１０８８６５号の配列番号１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、及び５４によって定義されるＤＮａｓｅの野生型及び変異体、並びに国際公開第２０１８０１１２７７号（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）に記載のものを含むバチルス・シビ（Bacillus cibi）ＤＮａｓｅの変異体が挙げられ、これらの国際公開は、参照により本明細書に組み込まれる。好ましいＤＮａｓｅは、欧州特許第３４７６９３５（Ａ）号に特許請求されているとおりである。
【0097】
ＲＮａｓｅ：好適なＲＮａｓｅとしては、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１８１７８０６１号（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）の配列番号３、６、９、１２、１５、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、７２及び７３、並びに国際公開第２０２００７４４９９号（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）の配列番号８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３及び１０４によって定義されるＤＮａｓｅの野生型及びバリアントが挙げられる。
【0098】
ヘキソサミニダーゼ：本組成物は、好ましくは、１種以上のヘキソサミニダーゼ酵素を追加的に含む。ヘキソサミニダーゼという用語は、「分散剤」及び略語「Ｄｓｐ」を含み、ヘキソサミニダーゼ活性を有するポリペプチドを意味する。好適な酵素は、微生物由来の汚れに見られるＮ－アセチル－グルコサミンポリマーのβ－１，６－グリコシド結合の加水分解を触媒するＥＣ３．２．１．に見出される。用語「ヘキソサミニダーゼ」は、Ｎ－アセチルグルコサミニダーゼ活性及びβ－Ｎ－アセチルグルコサミダーゼ活性を有するポリペプチドを含む。ヘキソサミニダーゼ活性は、国際公開第２０１８１８４８７３号に記載のアッセイＩＩに従って判定され得る。好適なヘキソサミニダーゼとしては、国際公開第２０１７１８６９３６号、同第２０１７１８６９３７号、同第２０１７１８６９４３号、同第２０１７２０７７７０号、同第２０１８１８４８７３号、同第２０１９０８６５２０号、同第２０１９０８６５２８号、同第２０１９０８６５３０号、同第２０１９０８６５３２号、同第２０１９０８６５２１号、同第２０１９０８６５２６号、同第２０２０００２６０４号、同第２０２０００２６０８号、同第２０２０００７８６３号、同第２０２０００７８７５号、同第２０２０００８０２４号、同第２０２００７００６３号、同第２０２００７０２４９号、同第２０２００８８９５７号、同第２０２００８８９５８号、及び同第２０２０２０７９４４号に開示されているものが挙げられる。国際公開第２０２０２０７９４４号の配列番号１によって定義されるテルリバチルス・サッカロフィルス（Terribacillus saccharophilus）ヘキソサミニダーゼの変異体、特に、その公開に開示されている熱安定性が改善された変異体が好ましい。
【0099】
特に好ましいヘキソサミニダーゼ酵素は、配列番号６６と少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも７５％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも８５％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するヘキソサミニダーゼ酵素、及び本明細書中の配列番号６７と少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも７５％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも８５％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するヘキソサミニダーゼ酵素、及びこれらの混合物である。
【0100】
キサンタンガム分解酵素：組成物は、１つ以上のキサンタンガム分解酵素を含み得る。キサンタンガム系汚れの分解に好適な酵素としては、キサンタンエンドグルカナーゼが挙げられ、任意にキサンタンリアーゼと組み合わされる。本明細書で使用するとき、用語「キサンタンエンドグルカナーゼ」は、任意に好適なキサンタンリアーゼ酵素とともに、キサンタンガムの１，４－連結型β－Ｄ－グルコースポリマー骨格の加水分解を触媒することができるエンド－β－１，４－グルカナーゼ活性を示す酵素を意味する。好適なキサンタンエンドグルカナーゼは、国際公開第２０１３１６７５８１号、同第２０１５１８１２９９号、同第２０１５１８１２９２号、同第２０１７０４６２３２号、同第２０１７０４６２６０号、同第２０１８３７０６２号、同第２０１８３７０６５号、同第２０１９０３８０５９号、及び同第２０１９１６２０００号に記載されている。本明細書で使用するとき、用語「キサンタンリアーゼ」は、キサンタンガムのβ－Ｄ－マンノシル－β－Ｄ－１，４－グルクロノシル結合を切断する酵素を意味する。そのような酵素は、Ｅ．Ｃ．４．２．２．１２に属する。好適なキサンタンリーゼは、国際公開第２０１５００１０１７号、同第２０１８０３７０６１号、同第２０１８３７０６４号、同第２０１９０３８０６０号、同第２０１９１６２０００号、及び同第２０１９０３８０５７号に記載されている。
【0101】
ガラクタナーゼ：好ましくは、組成物は、ガラクタナーゼ、すなわち、エンド－ベータ－１，６－ガラクタナーゼ酵素を含む細胞外ポリマー分解酵素を含む。用語「エンド－ベータ－１，６－ガラクタナーゼ」又は「エンド－ベータ－１，６－ガラクタナーゼ活性を有するポリペプチド」は、３よりも高い重合度（ＤＰ）を有する１，６－３－Ｄ－ガラクトオリゴ糖、及び４－Ｏ－メチルグルコシルウロネート又はグルコシルウロネート基を非還元末端に有するその酸性誘導体の加水分解性切断を触媒するグリコシドヒドロラーゼファミリー３０由来のエンド－ベータ－１，６－ガラクタナーゼ活性（ＥＣ３．２．１．１６４）を意味する。本開示の目的のために、エンド－ベータ－１，６－ガラクタナーゼ活性は、アッセイＩにおいて、国際公開第２０１５１８５６８９号に記載の手順に従って求められる。分類ＥＣ３．２．１．１６４由来の好適な例は、国際公開第２０１５１８５６８９号に記載されており、例えば、成熟ポリペプチド配列番号２である。
【0102】
追加の酵素は、追加の酵素を含有する別個の酵素添加剤、又は追加の酵素のうちの２つ又はいくつか又は全てを含む混合酵素添加剤を添加することによって、機械洗浄組成物に含められ得る。そのような酵素添加剤は、顆粒、液体、又はスラリーの形態であってよく、好ましくは追加的に酵素安定剤を更に含む。
【0103】
好ましくは、追加の酵素又は各追加の酵素は、組成物の重量に基づいて、約０．０００１重量％～約０．０１重量％、約０．００１重量％～約０．０１重量％、又は約０．００１重量％～約０．０１重量％など少なくとも０．０００１重量％～約０．１重量％の量の純粋活性酵素タンパク質で存在する。
【0104】
ビルダー：機械洗浄組成物は、ゼオライトＡ、ゼオライトＭＡＰ（Maximum Aluminium type P）などのゼオライトであってよい、炭酸塩、重炭酸塩、又はケイ酸塩に基づくビルダーなどのビルダーを更に含有していてもよい。洗濯に使用可能なゼオライトは、好ましくは、式Ｎａ１２（ＡｌＯ２）１２（ＳｉＯ２）１２・２７Ｈ２Ｏを有し、粒径は、通常、ゼオライトＡでは１～１０μｍ、ゼオライトＭＡＰでは０．７～２ｕｍである。他のビルダーは、メタケイ酸ナトリウム（Ｎａ２ＳｉＯ３・ｎＨ２Ｏ又はＮａ２Ｓｉ２Ｏ５・ｎＨ２Ｏ）であり、強アルカリ性であり、好ましくは食器洗浄に使用される。好ましい実施形態では、洗剤ビルダーの量は、５％超、１０％超、２０％超、３０％超、４０％超、又は５０％超であってもよく、また８０％未満、６５％未満であってもよい。食器洗浄洗剤において、ビルダーの濃度は、典型的には、４０～６５％、特に５０～６５％、又は更には７５～９０％である。
【0105】
カプセル化剤：組成物は、コアと、内面及び外面を有するシェルとを含み、当該シェルが当該コアをカプセル化する、カプセル化された有益剤を含み得る。コアは、香料、酵素、抗菌剤、漂白剤、及びこれらの混合物からなる群から選択される材料を含み得る。シェルは、ポリエチレン、ポリアミド、ポリスチレン、ポリイソプレン、ポリカーボネート、ポリエステル、ポリアクリレート、アミノプラスト（一態様では、当該アミノプラストは、ポリ尿素、ポリウレタン、及び／又はポリ尿素ウレタンを含んでもよく、一態様では、当該ポリ尿素は、ポリオキシメチレン尿素及び／又はメラミンホルムアルデヒドを含んでもよい）、ポリオレフィン、多糖類（一態様では、当該多糖類は、アルギネート及び／又はキトサンを含んでもよい）、ゼラチン、シェラック、エポキシ樹脂、ビニルポリマー、水不溶性無機材料、シリコーン、並びにこれらの混合物からなる群から選択される材料を含み得る。
【0106】
酵素安定剤：本組成物は、好ましくは酵素安定剤を含む。好適な酵素安定剤は、以下からなる群から選択され得る：（ａ）カルシウム塩、マグネシウム塩、及びこれらの混合物からなる群から選択される無機塩；（ｂ）オリゴ糖、多糖類及びこれらの混合物、並びに糖又は糖アルコールからなる群より選択される炭水化物；（ｃ）フェニルボロン酸及びこの誘導体、例えば芳香族ホウ酸エステル、又はフェニルボロン酸誘導体、例えば４－ホルミルフェニルボロン酸、又はペプチドアルデヒド、例えばジ－、トリ－又はテトラペプチドアルデヒド又はアルデヒド類似体（いずれかの形態Ｂ１－Ｂ０－Ｒ［式中、ＲはＨ、ＣＨ３、ＣＸ３、ＣＨＸ２又はＣＨ２Ｘ（Ｘ＝ハロゲン）であり、Ｂ０は単一アミノ酸残基（好ましくは任意に置換された脂肪族又は芳香族側鎖）であり；Ｂ１は、Ｎ末端保護基を任意に含む、１つ以上のアミノ酸残基（好ましくは１つ、２つ又は３つ）からなる］、又は国際公開第０９１１８３７５号、同第９８／１３４５９号に記載されているとおりである）からなる群から選択される質量効率のよい可逆的プロテアーゼ阻害剤；（ｄ）可逆的プロテアーゼ阻害剤、例えばホウ素含有化合物；（ｅ）ポリオール、例えばプロピレングリコール又はグリセロール１－２プロパンジオール；（ｆ）ギ酸カルシウム及び／又はギ酸ナトリウム；（ｇ）ＲＡＳＩ、ＢＡＳＩ、ＷＡＳＩ（イネ、オオムギ及びコムギの二機能性アルファ－アミラーゼ／サブチリシン阻害剤）又はＣＩ２又はＳＳＩなどのタンパク質型のプロテアーゼ阻害剤、並びに（ｈ）これらの任意の組み合わせ。
【0107】
構造化剤：本組成物は、例えば、ジグリセリド及びトリグリセリド、エチレングリコールジステアレート、微結晶セルロース、セルロースベースの材料、マイクロファイバーセルロース、バイオポリマー、キサンタンガム、ジェランガム、並びにこれらの混合物からなる群から選択される構造化剤を含み得る。
【0108】
ポリマー：本組成物は１種以上のポリマーを含み得る。好ましい例には、カルボキシメチルセルロース、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（ビニルピリジン－Ｎ－オキシド）、ポリ（ビニルイミダゾール）、ポリアクリレートなどのポリカルボキシレート、マレイン酸／アクリル酸コポリマー及びメタクリル酸ラウリル／アクリル酸コポリマー、及び両親媒性ポリマー、並びにこれらの混合物がある。
【0109】
両親媒性洗浄ポリマー：好ましくは、両親媒性洗浄ポリマーは、以下の一般構造：ビス（（Ｃ２Ｈ５Ｏ）（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｎ）（ＣＨ３）－Ｎ＋－ＣｘＨ２ｘ－Ｎ＋－（ＣＨ３）－ビス（（Ｃ２Ｈ５Ｏ）（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｎ）（式中、ｎ＝２０～３０であり、ｘ＝３～８である）を有する化合物、又はこの硫酸化若しくはスルホン化バリアントである。
【0110】
両親媒性アルコキシル化グリース洗浄ポリマーは、布地及び表面からグリース粒子を除去するように、親水性と疎水性との特性が釣り合っている任意のアルコキシル化ポリマーを示す。本発明の両親媒性アルコキシル化グリース洗浄ポリマーの具体的な実施形態は、コア構造及びそのコア構造に結合した複数のアルコキシレート基を含む。これらは、好ましくは内側ポリエチレンオキシドブロック及び外側ポリプロピレンオキシドブロックを有するアルコキシル化ポリアルキレンイミンを含んでいてもよい。
【0111】
コア構造は、縮合形態で式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、及び（ＩＶ）の繰り返し単位を含むポリアルキレンイミン構造を含んでもよく：
【0112】
【化1】
【0113】
あるいは、コア構造は、式（Ｉ．ａ）及び／又は（Ｉ．ｂ）のＮ－（ヒドロキシアルキル）アミンから選択される少なくとも１つの化合物の縮合生成物のポリアルカノールアミン構造を含んでよく、
【0114】
【化2】
【0115】
コア構造に結合した複数のアルキレンオキシ基は、式（Ｖ）のアルキレンオキシ単位から独立して選択され
【0116】
【化3】
【0117】
カルボキシレートポリマー：本組成物はまた、マレエート／アクリレートランダムコポリマー又はポリアクリレートホモポリマーなどの１種以上のカルボキシレートポリマーを含み得る。一態様では、カルボキシレートポリマーは、４，０００Ｄａ～９，０００Ｄａ又は６，０００Ｄａ～９，０００Ｄａの分子量を有するポリアクリレートホモポリマーである。
【0118】
汚れ放出ポリマー：組成物は、好ましくは、以下の構造（Ｉ）、（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）のうちの１つによって定義される構造を有する１つ以上の汚れ放出ポリマーも含み：
（Ｉ）－［（ＯＣＨＲ１－ＣＨＲ２）ａ－Ｏ－ＯＣ－Ａｒ－ＣＯ－］ｄ
（ＩＩ）－［（ＯＣＨＲ３－ＣＨＲ４）ｂ－Ｏ－ＯＣ－ｓＡｒ－ＣＯ－］ｅ
（ＩＩＩ）－［（ＯＣＨＲ５－ＣＨＲ６）ｃ－ＯＲ７］ｆ
式中、
ａ、ｂ及びｃは、１～２００であり、
ｄ、ｅ及びｆは、１～５０であり、
Ａｒは、１，４－置換フェニレンであり、
ｓＡｒは、５位がＳＯ３Ｍｅで置換されている１，３－置換フェニレンであり、
Ｍｅは、Ｌｉ、Ｋ、Ｍｇ／２、Ｃａ／２、Ａｌ／３、アンモニウム、モノ－、ジ－、トリ－、若しくはテトラ－アルキルアンモニウム（アルキル基は、Ｃ１～Ｃ１８アルキル又はＣ２～Ｃ１０ヒドロキシアルキルである）、又はこれらの混合物であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６は、独立して、Ｈ又はＣ１～Ｃ１８ｎ－若しくはイソ－アルキルから選択され、
Ｒ７は、直鎖若しくは分岐鎖Ｃ１～Ｃ１８アルキル、又は直鎖若しくは分岐Ｃ２～Ｃ３０アルケニル、又は５～９個の炭素原子を有するシクロアルキル基、又はＣ８～Ｃ３０アリール基、又はＣ６～Ｃ３０アリールアルキル基である。
（Ｉ）－［（ＯＣＨＲ１－ＣＨＲ２）ａ－Ｏ－ＯＣ－Ａｒ－ＣＯ－］ｄ
（ＩＩ）－［（ＯＣＨＲ３－ＣＨＲ４）ｂ－Ｏ－ＯＣ－ｓＡｒ－ＣＯ－］ｅ
（ＩＩＩ）－［（ＯＣＨＲ５－ＣＨＲ６）ｃ－ＯＲ７］ｆ
式中、
ａ、ｂ及びｃは、１～２００であり、
ｄ、ｅ及びｆは、１～５０であり、
Ａｒは、１，４－置換フェニレンであり、
ｓＡｒは、５位がＳＯ３Ｍｅで置換されている１，３－置換フェニレンであり、
Ｍｅは、Ｌｉ、Ｋ、Ｍｇ／２、Ｃａ／２、Ａｌ／３、アンモニウム、モノ－、ジ－、トリ－、若しくはテトラ－アルキルアンモニウム（アルキル基は、Ｃ１～Ｃ１８アルキル又はＣ２～Ｃ１０ヒドロキシアルキルである）、又はこれらの混合物であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６は、独立して、Ｈ又はＣ１～Ｃ１８ｎ－若しくはイソ－アルキルから選択され、
Ｒ７は、直鎖若しくは分岐鎖Ｃ１～Ｃ１８アルキル、又は直鎖若しくは分岐Ｃ２～Ｃ３０アルケニル、又は５～９個の炭素原子を有するシクロアルキル基、又はＣ８～Ｃ３０アリール基、又はＣ６～Ｃ３０アリールアルキル基である。
【0119】
好適な汚れ放出ポリマーは、Ｒｈｏｄｉａによって供給されているＲｅｐｅｌ－ｏ－ｔｅｘ ＳＦ、ＳＦ－２及びＳＲＰ６を含むＲｅｐｅｌ－ｏ－ｔｅｘポリマーなどのポリエステル汚れ放出ポリマーである。他の好適な汚れ放出ポリマーとしては、Ｃｌａｒｉａｎｔによって供給されているＴｅｘｃａｒｅ ＳＲＡ１００、ＳＲＡ３００、ＳＲＮ１００、ＳＲＮ１７０、ＳＲＮ２４０、ＳＲＮ３００及びＳＲＮ３２５を含むＴｅｘｃａｒｅポリマーが挙げられる。他の好適な汚れ放出ポリマーは、Ｓａｓｏｌにより供給されているＭａｒｌｏｑｕｅｓｔポリマー、例えばＭａｒｌｏｑｕｅｓｔ ＳＬである。
【0120】
セルロース系ポリマー：組成物は、好ましくは、アルキルセルロース、アルキルアルコキシアルキルセルロース、カルボキシアルキルセルロース、アルキルカルボキシアルキルセルロースから選択されるものを含む、１つ以上のセルロース系ポリマーを含み得る。一態様では、セルロース系ポリマーは、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース、メチルカルボキシメチルセルロース、及びこれらの混合物を含む群から選択される。一態様では、カルボキシメチルセルロースは、０．５～０．９のカルボキシメチル置換度及び１００，０００Ｄａ～３００，０００Ｄａの分子量を有する。
【0121】
漂白系：組成物は、例えば、テトラアセチルエチレンジアミン又はノナノイルオキシベンゼンスルホネートなどの過酸形成漂白活性化剤と合わせることができる過ホウ酸塩又は過炭酸塩などのＨ２Ｏ２源を含む漂白系を含有し得る。あるいは、漂白系は、例えば、アミド、イミド、又はスルホン型のペルオキシ酸を含んでもよい。一般的に、漂白剤が使用される場合、本発明の組成物は、標記洗浄組成物の約０．１重量％～約３０重量％、又は更に約０．１重量％～約２５重量％の漂白剤を含んでもよい。
【0122】
キレート剤：組成物は、好ましくは組成物の０．００５重量％～約１５重量％、又は更には約３．０重量％～約１０重量％のキレート剤の量で、キレート剤を含むことが好ましい。好適なキレート剤としては、銅、鉄、及び／又はマンガンキレート剤、並びにこれらの混合物が挙げられる。好ましいキレート剤（錯化剤）としては、ＤＴＰＡ（Diethylene triamine pentaacetic acid、ジエチレントリアミン五酢酸）、ＨＥＤＰ（Hydroxyethane diphosphonic acid、ヒドロキシエタンジホスホン酸）、ＤＴＰＭＰ（Diethylene triamine penta(methylene phosphonic acid)、ジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン酸））、１，２－ジヒドロキシベンゼン－３，５－ジスルホン酸二ナトリウム塩水和物、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、エチレンジアミン二コハク酸（ethylenediaminedisuccinic acid、ＥＤＤＳ）、Ｎ－ヒドロキシエチルエチレンジアミン三酢酸（N-hydroxyethylethylenediaminetri-acetic acid、ＨＥＤＴＡ）、トリエチレンテトラアミン六酢酸（triethylenetetraaminehexaacetic acid、ＴＴＨＡ）、Ｎ－ヒドロキシエチルイミノ二酢酸（N-hydroxyethyliminodiacetic acid、ＨＥＩＤＡ）、ジヒドロキシエチルグリシン（dihydroxyethylglycine、ＤＨＥＧ）、エチレンジアミンテトラプロピオン酸（ethylenediaminetetrapropionic acid、ＥＤＴＰ）、メチル－グリシン－二酢酸（methyl-glycine-diacetic acid、ＭＧＤＡ）、グルタミン酸－Ｎ，Ｎ－二酢酸（glutamic-N,N-diacetic acid、ＧＬＤＡ）、イミノジコハク酸（iminodisuccinic acid、ＩＤＳ）、カルボキシメチルイヌリン、並びにこれらの塩、誘導体及びこれらの混合物が挙げられる。好ましいキレート剤は、メチル－グリシン－二酢酸（ＭＧＤＡ）、その塩及びこの誘導体、グルタミン酸－Ｎ、Ｎ－二酢酸（ＧＬＤＡ）、その塩及びこの誘導体、イミノジコハク酸（ＩＤＳ）、その塩及びこの誘導体、カルボキシメチルイヌリン、その塩及びこの誘導体、並びにこれらの混合物からなる群から選択される。ＭＧＤＡ及びその塩が特に好ましく、特にＭＧＤＡの三ナトリウム塩を含む。
【0123】
使用方法
本発明はまた、汚れの蓄積を防止又は除去するために食器洗浄機又は洗濯機などの洗浄機の内部を処理する方法を提供し、方法は、食器洗浄機又は洗濯機の少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に、機械の内部に機械洗浄組成物を供給する工程を含み、機械洗浄組成物は、洗浄水又はすすぎ水（水性洗浄液）中に存在する。
本発明はまた、汚れの蓄積を防止又は除去するために食器洗浄機又は洗濯機などの洗浄機の内部を処理する方法を提供し、方法は、食器洗浄機又は洗濯機の少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に、機械の内部に機械洗浄組成物を供給する工程を含み、機械洗浄組成物は、洗浄水又はすすぎ水（水性洗浄液）中に存在する。
【0124】
特に、この方法は、洗濯機の内部を処理するためのものである。
【0125】
本発明はまた、食器洗浄機又は洗濯機などの洗浄機の内部表面上の汚れを分解する方法を提供し、方法は、洗浄機の少なくとも１回以上の洗浄サイクル又は１回以上のすすぎサイクル中に、機械洗浄組成物を提供する工程を含み、機械洗浄組成物は、洗浄水又はすすぎ水（水性洗浄液）中に存在する。
【0126】
本発明はまた、洗濯機又は食器洗浄機などの洗浄機を洗浄するための機械洗浄組成物の使用を提供する。本発明の組成物及び方法は、家庭用又は商業用／業務用洗浄機のいずれかを洗浄するのに適している。
【0127】
機械洗浄組成物は、引き出し若しくは他のディスペンサーなどの機械に一体化された投入機構を介して、又は機械に投入するカートリッジを介して、又は機械の内部に直接入れることによって、例えば洗濯機の場合にはドラムに直接入れることによってのいずれかで、洗濯機に提供されてもよい。
【0128】
洗浄機は、少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に、物品を少なくとも部分的に投入されてもよい。機械洗浄組成物は、洗浄機の２回以上の連続洗浄サイクル又はすすぎサイクルにわたって使用されてもよい。
【0129】
本発明の機械洗浄組成物が洗浄機の全ての領域により良好にアクセスできるように、少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に機械が空であることが好ましい場合がある。これは特に洗濯機の場合であり、したがって、洗濯機を洗浄するための好ましい方法では、少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクルが空の洗浄機で行われる。
【0130】
本発明の好ましい実施形態では、機械洗浄組成物は、洗浄機の２つ以上の操作において使用され、例えば、これは、同じ洗浄プログラムにおいて例えば、予洗い、洗浄、及びすすぎ工程のうちの２つ以上においてであってもよく、又は連続洗浄プログラムにおいてであってもよい。これらの操作は、逐次操作であることが好ましい。洗浄操作は、予洗い（任意）、洗浄サイクル、及びすすぎサイクルを含んでもよく、又は洗浄のみのサイクル若しくはすすぎのみのサイクルのいずれかを含んでもよい。このすすぎのみのサイクルは、予洗いサイクル又は後洗浄サイクルのいずれかであり得る。洗浄サイクルのみ、又はすすぎサイクルのみにおける本発明の組成物の使用は、組成物を洗浄機に投入し、次いで組成物が存在する状態でそのタイプのサイクルのみで運転することによって達成することができる。あるいは、組成物は、洗浄操作の所望の部分で洗浄組成物が放出されるように、好適な放出機構、例えば、加速放出又は遅延放出を用いて配合されてもよい。ポリマーが、本発明の組成物の加速放出又は遅延放出を達成するために使用される場合、この効果を得るのに適切なポリマーは、当該分野で周知である。
【0131】
洗浄機は、洗浄プログラム及び／又はすすぎプログラムの両方を含む方法の間、そのプログラムのいずれ作動されてもよい。典型的には、洗浄及びすすぎサイクルは、最大２時間継続してもよく、洗浄のみのサイクルは最大１．５時間継続し、すすぎのみのサイクルは最大０．５時間継続する。
【0132】
本発明の組成物は、組成物が洗浄サイクル又はすすぎサイクル中に汚れに適用されるかどうかにかかわらず、少なくとも１０分間、好ましくは少なくとも１５分間、例えば少なくとも２０分間、除去されるべき汚れと接触していることが好ましい。
【0133】
洗浄／すすぎサイクルの間、組成物は洗浄機の空洞全体に分配される。これにより、機械の内部の表面、例えば、パイプ、濾過ドラムなどとの接触をもたらされる。更に、本発明の組成物を含有する水性洗浄液は、フィルタ及び配管を通って排出されなければならず、それによってフィルタ及び配管から汚れを除去するための更なる機会が提供される。
【0134】
水性洗浄液中に、当該又は各酵素は、好ましくは、０．０１ｐｐｍ～１０ｐｐｍ、好ましくは０．１ｐｐｍ～１ｐｐｍの量で存在する。存在する場合、界面活性剤は、好ましくは、０．０５～５ｇ／Ｌ、又は最大２ｇ／Ｌ、又は最大１ｇ／Ｌ、又は最大０．７５ｇ／Ｌ、又は最大０．５ｇ／Ｌの量で存在する。
【0135】
当該又は各酵素は、洗浄液１リットル当たり０．００１～１００ｍｇの活性酵素タンパク質、好ましくは洗浄液１リットル当たり０．００５～５ｍｇの活性酵素タンパク質、より好ましくは洗浄液１リットル当たり０．０１～１ｍｇの酵素タンパク質、特に洗浄１リットル当たり０．１～１ｍｇの酵素タンパク質に相当する量で洗浄液中に存在し得る。
【0136】
洗浄液は、好ましくは、約５又は１０．５、より好ましくは６～８、又は７．５のｐＨを有する。洗浄液は、好ましくは約５℃～約４０℃、又は好ましくは１０～３５℃、又は３０℃、又は２５℃の温度を有する。
【0137】
試験方法
試験方法１
β－Ｄ－マンヌロン酸ブロック（ポリＭ活性）及びα－Ｌ－グルロン酸ブロック（ポリＧ活性）に対する酵素活性
アルギン酸リアーゼ活性は、Ｅｌｉｃｉｔｙｌ Ｆｒａｎｃｅ製のＭａｎｎｕｒｏｎｉｃ Ｂｌｏｃｋ Ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ＤＰ２０－ＤＰ３５（製品コード：ＡＬＧ６０１）及びＧｕｌｕｒｏｎａｔｅ ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ＤＰ２－ＤＰ４５（製品コード：ＡＬＧ６１０）を基質として用いて測定される。Ｍａｎｎｕｒｏｎｉｃ Ｂｌｏｃｋ Ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ＤＰ２０－ＤＰ３５をポリＭ活性の測定に使用し、Ｇｕｌｕｒｏｎａｔｅ ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ＤＰ２－ＤＰ４５をポリＧ活性の測定に使用した。
試験方法１
β－Ｄ－マンヌロン酸ブロック（ポリＭ活性）及びα－Ｌ－グルロン酸ブロック（ポリＧ活性）に対する酵素活性
アルギン酸リアーゼ活性は、Ｅｌｉｃｉｔｙｌ Ｆｒａｎｃｅ製のＭａｎｎｕｒｏｎｉｃ Ｂｌｏｃｋ Ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ＤＰ２０－ＤＰ３５（製品コード：ＡＬＧ６０１）及びＧｕｌｕｒｏｎａｔｅ ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ＤＰ２－ＤＰ４５（製品コード：ＡＬＧ６１０）を基質として用いて測定される。Ｍａｎｎｕｒｏｎｉｃ Ｂｌｏｃｋ Ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ＤＰ２０－ＤＰ３５をポリＭ活性の測定に使用し、Ｇｕｌｕｒｏｎａｔｅ ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ＤＰ２－ＤＰ４５をポリＧ活性の測定に使用した。
【0138】
各基質の２．５％の溶液をｐＨ８．３のトリスバッファに懸濁させ、９６ウェルプレートにおいて２５℃で６０分間、３ｐｐｍの対象となる各アルギン酸リアーゼとともにインキュベートした。
【0139】
各基質に対する活性は、酵素を各基質と接触させたときの、分光光度計における２３５ｎｍでの酵素無し試料に対するデルタ吸光度として与えられる。次いで、これらの値を使用して、それぞれの酵素のβ－Ｄ－マンヌロン酸ブロック（ポリＭ）及び／又はα－Ｌ－グルロン酸ブロック（ポリＧ）に対する活性を評価する。ポリ（ベータ－Ｄ－マンヌロネート）に対する活性（ポリＭ活性）を有する酵素は、好ましくは、少なくとも０．１吸光度単位、より好ましくは少なくとも０．１５吸光度単位、より好ましくは少なくとも０．２吸光度単位の、酵素無しに対するデルタ吸光度を提供する。ポリ（アルファ－Ｌ－グルロネート）に対する活性（ポリＧ活性）を有する酵素は、好ましくは、少なくとも０．３吸光度単位、好ましくは少なくとも０．４又は更に０．５若しくは０．６吸光度単位の、酵素無しに対するデルタ吸光度を提供する。
【0140】
試験方法２
ベータ－１，３－グルカン及びベータ－１，３（４）－グルカンに対する活性の測定
ベータ－１，３－グルカン及びベータ－１，３（４）－グルカンに対する活性を、所与の酵素の１６の異なる活性にわたる同時アッセイを可能にする、ＧｌｙｃｏＳｐｏｔ Ａ／Ｓ（Ｓｏｂｏｒｇ，Ｄｅｎｍａｒｋ）によって供給されるディスカバリーキットの赤色変異体を用いて測定した。アッセイのプロトコールを以下に示す。所与の酵素が、カードラン（ＣＰＨ０００９）及びオオムギ由来のベータグルカン（ＣＰＨ０００３）に対して０．３吸光度単位より大きい吸光度単位を示す場合、酵素は、ベータ－１，３－グルカン及びベータ－１，３（４）－グルカンの両方に対して活性であるとみなされ、すなわち、エンド－ベータ－１，３（４）－グルカナーゼとして分類される。酵素が、カードラン（ＣＰＨ０００９）に対して０．３吸光度単位より大きいが、オオムギ由来のベータグルカン（ＣＰＨ０００３）に対して０．３吸光度単位以下を示す場合、酵素は、エンド－β－１，３－グルカナーゼであるとみなされる。
１．２００μＬの活性化溶液を９６ウェルプレートの各ウェルに添加する。
２．撹拌せずに室温で１０分間インキュベートする。
３．残りの溶液を遠心分離（２７００×ｇで１０分間又は真空）によって除去する。
４．１００μＬの水で２回洗浄して安定剤を完全に除去する。
５．９６ウェルプレートの各ウェルに試料及び対照を加える。対照は、１５０μＬの１Ｍ トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩酸塩（トリス－ＨＣＬ）緩衝液（ｐＨ８）である。試料は、１５０μＬの同じＴｒｉｓ－ＨＣＬ緩衝液に溶解した１ｍｇの活性酵素タンパク質である。
６．「生成物プレート」を基板プレートの下に置く。
７．反応を３０℃で３０時間インキュベートする。
８．反応生成物を遠心分離（２７００×ｇで１０分間又は真空）によって生成物プレートに移す。
９．各ウェルの容量が等しいことを確認する。
１０．吸光度（５１７ｎｍ）を検出する。
ベータ－１，３－グルカン及びベータ－１，３（４）－グルカンに対する活性の測定
ベータ－１，３－グルカン及びベータ－１，３（４）－グルカンに対する活性を、所与の酵素の１６の異なる活性にわたる同時アッセイを可能にする、ＧｌｙｃｏＳｐｏｔ Ａ／Ｓ（Ｓｏｂｏｒｇ，Ｄｅｎｍａｒｋ）によって供給されるディスカバリーキットの赤色変異体を用いて測定した。アッセイのプロトコールを以下に示す。所与の酵素が、カードラン（ＣＰＨ０００９）及びオオムギ由来のベータグルカン（ＣＰＨ０００３）に対して０．３吸光度単位より大きい吸光度単位を示す場合、酵素は、ベータ－１，３－グルカン及びベータ－１，３（４）－グルカンの両方に対して活性であるとみなされ、すなわち、エンド－ベータ－１，３（４）－グルカナーゼとして分類される。酵素が、カードラン（ＣＰＨ０００９）に対して０．３吸光度単位より大きいが、オオムギ由来のベータグルカン（ＣＰＨ０００３）に対して０．３吸光度単位以下を示す場合、酵素は、エンド－β－１，３－グルカナーゼであるとみなされる。
１．２００μＬの活性化溶液を９６ウェルプレートの各ウェルに添加する。
２．撹拌せずに室温で１０分間インキュベートする。
３．残りの溶液を遠心分離（２７００×ｇで１０分間又は真空）によって除去する。
４．１００μＬの水で２回洗浄して安定剤を完全に除去する。
５．９６ウェルプレートの各ウェルに試料及び対照を加える。対照は、１５０μＬの１Ｍ トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩酸塩（トリス－ＨＣＬ）緩衝液（ｐＨ８）である。試料は、１５０μＬの同じＴｒｉｓ－ＨＣＬ緩衝液に溶解した１ｍｇの活性酵素タンパク質である。
６．「生成物プレート」を基板プレートの下に置く。
７．反応を３０℃で３０時間インキュベートする。
８．反応生成物を遠心分離（２７００×ｇで１０分間又は真空）によって生成物プレートに移す。
９．各ウェルの容量が等しいことを確認する。
１０．吸光度（５１７ｎｍ）を検出する。
【実施例】
【0141】
機械洗浄組成物実施例
実施例１－３ 機械洗浄ゲル：
実施例１－３ 機械洗浄ゲル：
【0142】
【表1】
【0143】
実施例４－６ 機械洗浄粉末
【0144】
【表2】
【0145】
実施例７－９ 機械洗浄錠剤
【0146】
【表3】
【0147】
本明細書に開示される寸法及び値は、列挙された正確な数値に厳密に限定されるものとして理解されるべきではない。その代わりに、別途指定のない限り、このような寸法は各々、列挙された値とその値を囲む機能的に同等な範囲との両方を意味することが意図される。例えば、「４０ｍｍ」として開示される寸法は、「約４０ｍｍ」を意味することが意図される。
【配列表】
【手続補正書】
【提出日】2024-05-13
【手続補正1】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【0147】
本明細書に開示される寸法及び値は、列挙された正確な数値に厳密に限定されるものとして理解されるべきではない。その代わりに、別途指定のない限り、このような寸法は各々、列挙された値とその値を囲む機能的に同等な範囲との両方を意味することが意図される。例えば、「４０ｍｍ」として開示される寸法は、「約４０ｍｍ」を意味することが意図される。
本明細書に開示される発明は、以下の通りである。
［１］（ａ）（ｉ）アルギン酸リアーゼ酵素、（ｉｉ）Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｉｉ）Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｖ）エンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、及び（ｖ）エンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素から選択される少なくとも２種の酵素と、（ｂ）洗浄補助剤と、を含む、洗浄機用洗浄組成物。
［２］界面活性剤を更に含む、［１］に記載の洗浄機用洗浄組成物。
［３］前記アルギン酸リアーゼ酵素が、微生物由来、好ましくは細菌由来又は藻類由来、最も好ましくは細菌由来であり、好ましくは、フラボバクテリウム属菌種（Flavobacterium sp）、スフィンゴモナス属菌種（Sphingomonas sp）、ゾベリア・ガラクタニボラン（Zobellia galactanivorans）、好ましくはフラボバクテリウム属菌種（Flavobacterium sp）から得られる、［１］又は［２］に記載の洗浄機用洗浄組成物。
［４］前記アルギン酸リアーゼ酵素が、配列番号１の１つ以上に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号２に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号３に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号４に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号５に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号６に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号７に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；並びにこれらの混合物から選択されるアルギン酸リアーゼ、好ましくは、配列番号１、配列番号５、配列番号６、及び配列番号７、又はこれらの混合物のうちの１つ以上に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ、から選択されるアルギン酸リアーゼを含み、最も好ましくは、前記アルギン酸リアーゼ酵素が、配列番号６、及び配列番号７、並びにこれらの混合物のうちの１つ以上に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼから選択されるアルギン酸リアーゼを含む、［１］～［３］のいずれかに記載の洗浄機用洗浄組成物。
［５］ヌクレアーゼ酵素及び／又はヘキソサミニダーゼ酵素を、０．００００５～５重量％の活性酵素タンパク質の量で更に含む、［１］～［４］のいずれかに記載の洗浄機用洗浄組成物。
［６］前記組成物が、非イオン性界面活性剤を更に含み、好ましくは前記組成物の０．５～３０重量％の量で含む、［１］～［５］のいずれかに記載の洗浄機用洗浄組成物。
［７］追加の酵素を含み、好ましくはアミラーゼ、ヌクレアーゼ、マンナナーゼ、キサンタンリアーゼ、キサンタナーゼ、及びこれらの混合物から選択される、［１］～［６］のいずれかに記載の洗浄機用洗浄組成物。
［８］汚れの蓄積を防止又は除去するために食器洗浄機又は洗濯機などの洗浄機の内部を処理する方法であって、前記方法が、前記食器洗浄機又は洗濯機の少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に、前記機械の内部に［１］～［７］のいずれかに記載の機械洗浄組成物を供給する工程を含む、方法。
［９］洗濯機の内部を処理するための、［８］に記載の方法。
［１０］食器洗浄機又は洗濯機の内部表面上の汚れを分解する方法であって、方法が、自動食器洗浄機又は洗濯機の少なくとも１回以上の洗浄サイクル又は１回以上のすすぎサイクル中に、［１］～［７］のいずれかに記載の機械洗浄組成物を提供する工程を含み、前記機械洗浄組成物が、洗浄水又はすすぎ水（水性洗浄液）中に存在する、方法。
［１１］前記洗浄機が、前記少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に物品を少なくとも部分的に投入されることができる、［８］～［１０］のいずれかに記載の方法。
［１２］前記機械洗浄組成物が、前記洗浄機の２回以上の連続した洗浄及び／又はすすぎサイクルにおいて提供される、［８］～［１１］のいずれかに記載の方法。
［１３］家庭用又は商業用／業務用のいずれかの洗濯機又は食器洗浄機などの洗浄機を洗浄するための、［１］～［７］のいずれかに記載の機械洗浄組成物の使用。
本明細書に開示される発明は、以下の通りである。
［１］（ａ）（ｉ）アルギン酸リアーゼ酵素、（ｉｉ）Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｉｉ）Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｖ）エンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、及び（ｖ）エンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素から選択される少なくとも２種の酵素と、（ｂ）洗浄補助剤と、を含む、洗浄機用洗浄組成物。
［２］界面活性剤を更に含む、［１］に記載の洗浄機用洗浄組成物。
［３］前記アルギン酸リアーゼ酵素が、微生物由来、好ましくは細菌由来又は藻類由来、最も好ましくは細菌由来であり、好ましくは、フラボバクテリウム属菌種（Flavobacterium sp）、スフィンゴモナス属菌種（Sphingomonas sp）、ゾベリア・ガラクタニボラン（Zobellia galactanivorans）、好ましくはフラボバクテリウム属菌種（Flavobacterium sp）から得られる、［１］又は［２］に記載の洗浄機用洗浄組成物。
［４］前記アルギン酸リアーゼ酵素が、配列番号１の１つ以上に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号２に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号３に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号４に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号５に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号６に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号７に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；並びにこれらの混合物から選択されるアルギン酸リアーゼ、好ましくは、配列番号１、配列番号５、配列番号６、及び配列番号７、又はこれらの混合物のうちの１つ以上に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ、から選択されるアルギン酸リアーゼを含み、最も好ましくは、前記アルギン酸リアーゼ酵素が、配列番号６、及び配列番号７、並びにこれらの混合物のうちの１つ以上に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼから選択されるアルギン酸リアーゼを含む、［１］～［３］のいずれかに記載の洗浄機用洗浄組成物。
［５］ヌクレアーゼ酵素及び／又はヘキソサミニダーゼ酵素を、０．００００５～５重量％の活性酵素タンパク質の量で更に含む、［１］～［４］のいずれかに記載の洗浄機用洗浄組成物。
［６］前記組成物が、非イオン性界面活性剤を更に含み、好ましくは前記組成物の０．５～３０重量％の量で含む、［１］～［５］のいずれかに記載の洗浄機用洗浄組成物。
［７］追加の酵素を含み、好ましくはアミラーゼ、ヌクレアーゼ、マンナナーゼ、キサンタンリアーゼ、キサンタナーゼ、及びこれらの混合物から選択される、［１］～［６］のいずれかに記載の洗浄機用洗浄組成物。
［８］汚れの蓄積を防止又は除去するために食器洗浄機又は洗濯機などの洗浄機の内部を処理する方法であって、前記方法が、前記食器洗浄機又は洗濯機の少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に、前記機械の内部に［１］～［７］のいずれかに記載の機械洗浄組成物を供給する工程を含む、方法。
［９］洗濯機の内部を処理するための、［８］に記載の方法。
［１０］食器洗浄機又は洗濯機の内部表面上の汚れを分解する方法であって、方法が、自動食器洗浄機又は洗濯機の少なくとも１回以上の洗浄サイクル又は１回以上のすすぎサイクル中に、［１］～［７］のいずれかに記載の機械洗浄組成物を提供する工程を含み、前記機械洗浄組成物が、洗浄水又はすすぎ水（水性洗浄液）中に存在する、方法。
［１１］前記洗浄機が、前記少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に物品を少なくとも部分的に投入されることができる、［８］～［１０］のいずれかに記載の方法。
［１２］前記機械洗浄組成物が、前記洗浄機の２回以上の連続した洗浄及び／又はすすぎサイクルにおいて提供される、［８］～［１１］のいずれかに記載の方法。
［１３］家庭用又は商業用／業務用のいずれかの洗濯機又は食器洗浄機などの洗浄機を洗浄するための、［１］～［７］のいずれかに記載の機械洗浄組成物の使用。
【手続補正2】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
（ａ）（ｉ）アルギン酸リアーゼ酵素、（ｉｉ）Ｐｅｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｉｉ）Ｐｓｌ－ａｓｅ酵素、（ｉｖ）エンド－β－１，３－グルカナーゼ酵素、及び（ｖ）エンド－β－１，３（４）－グルカナーゼ酵素から選択される少なくとも２種の酵素と、（ｂ）洗浄補助剤と、を含む、洗浄機用洗浄組成物。
【請求項2】
界面活性剤を更に含む、請求項１に記載の洗浄機用洗浄組成物。
【請求項3】
前記アルギン酸リアーゼ酵素が、微生物由来、好ましくは細菌由来又は藻類由来、最も好ましくは細菌由来であり、好ましくは、フラボバクテリウム属菌種（Flavobacterium sp）、スフィンゴモナス属菌種（Sphingomonas sp）、ゾベリア・ガラクタニボラン（Zobellia galactanivorans）、好ましくはフラボバクテリウム属菌種（Flavobacterium sp）から得られる、請求項１に記載の洗浄機用洗浄組成物。
【請求項4】
前記アルギン酸リアーゼ酵素が、配列番号１の１つ以上に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号２に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号３に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号４に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号５に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号６に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；配列番号７に対して少なくとも６０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも９０％、又は少なくとも９５％、又は少なくとも９６％、又は少なくとも９７％、又は少なくとも９８％、又は少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ；並びにこれらの混合物から選択されるアルギン酸リアーゼ、好ましくは、配列番号１、配列番号５、配列番号６、及び配列番号７、又はこれらの混合物のうちの１つ以上に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼ、から選択されるアルギン酸リアーゼを含み、最も好ましくは、前記アルギン酸リアーゼ酵素が、配列番号６、及び配列番号７、並びにこれらの混合物のうちの１つ以上に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するアルギン酸リアーゼから選択されるアルギン酸リアーゼを含む、請求項１に記載の洗浄機用洗浄組成物。
【請求項5】
ヌクレアーゼ酵素及び／又はヘキソサミニダーゼ酵素を、０．００００５～５重量％の活性酵素タンパク質の量で更に含む、請求項１に記載の洗浄機用洗浄組成物。
【請求項6】
前記組成物が、非イオン性界面活性剤を更に含み、好ましくは前記組成物の０．５～３０重量％の量で含む、請求項１に記載の洗浄機用洗浄組成物。
【請求項7】
追加の酵素を含み、好ましくはアミラーゼ、ヌクレアーゼ、マンナナーゼ、キサンタンリアーゼ、キサンタナーゼ、及びこれらの混合物から選択される、請求項１に記載の洗浄機用洗浄組成物。
【請求項8】
汚れの蓄積を防止又は除去するために食器洗浄機又は洗濯機などの洗浄機の内部を処理する方法であって、前記方法が、前記食器洗浄機又は洗濯機の少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に、前記機械の内部に請求項１に記載の機械洗浄組成物を供給する工程を含む、方法。
【請求項9】
洗濯機の内部を処理するための、請求項８に記載の方法。
【請求項10】
食器洗浄機又は洗濯機の内部表面上の汚れを分解する方法であって、方法が、自動食器洗浄機又は洗濯機の少なくとも１回以上の洗浄サイクル又は１回以上のすすぎサイクル中に、請求項１に記載の機械洗浄組成物を提供する工程を含み、前記機械洗浄組成物が、洗浄水又はすすぎ水（水性洗浄液）中に存在する、方法。
【請求項11】
前記洗浄機が、前記少なくとも１回の洗浄サイクル又は少なくとも１回のすすぎサイクル中に物品を少なくとも部分的に投入されることができる、請求項８に記載の方法。
【請求項12】
前記機械洗浄組成物が、前記洗浄機の２回以上の連続した洗浄及び／又はすすぎサイクルにおいて提供される、請求項８に記載の方法。
【請求項13】
家庭用又は商業用／業務用のいずれかの洗濯機又は食器洗浄機などの洗浄機を洗浄するための、請求項１に記載の機械洗浄組成物の使用。
【国際調査報告】