特表 2024-544972 ＳＩＲＰ１Ａ及びＣＤ４０Ｌベースのキメラタンパク質

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-12-05

(54)【発明の名称】ＳＩＲＰ１Ａ及びＣＤ４０Ｌベースのキメラタンパク質

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/17 20060101AFI20241128BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20241128BHJP

   G01N 33/53 20060101ALI20241128BHJP

   G01N 33/543 20060101ALI20241128BHJP

   G01N 33/536 20060101ALI20241128BHJP

   C07K 19/00 20060101ALN20241128BHJP

   C12N 15/09 20060101ALN20241128BHJP

   C12N 15/62 20060101ALN20241128BHJP

   C07K 16/18 20060101ALN20241128BHJP

【ＦＩ】

A61K38/17

A61P35/00

G01N33/53 D

G01N33/53 M

G01N33/543 545A

G01N33/536 D

C07K19/00 ZNA

C12N15/09 Z

C12N15/62 Z

C07K16/18

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024527845

(86)(22)【出願日】2022-11-11

(85)【翻訳文提出日】2024-07-12

(86)【国際出願番号】 US2022079702

(87)【国際公開番号】W WO2023086929

(87)【国際公開日】2023-05-19

(31)【優先権主張番号】63/371,083

(32)【優先日】2022-08-11

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/278,567

(32)【優先日】2021-11-12

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】519302132

【氏名又は名称】シャタック ラボ，インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110001519

【氏名又は名称】弁理士法人太陽国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】パンディット、アランダシー

(72)【発明者】

【氏名】ランワーラ、ファティマ

(72)【発明者】

【氏名】ランプキン、トーマス

(72)【発明者】

【氏名】シュライバー、テイラー

(72)【発明者】

【氏名】フロム、ジョージ

(72)【発明者】

【氏名】デ シルヴァ、サレシュ

【テーマコード（参考）】

4C084

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C084AA02

4C084BA01

4C084BA08

4C084BA22

4C084BA23

4C084BA41

4C084CA53

4C084MA17

4C084MA66

4C084NA05

4C084ZB261

4C084ZB262

4H045AA10

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA09

4H045BA10

4H045BA41

4H045CA40

4H045DA50

4H045DA75

4H045EA28

4H045FA74

(57)【要約】

本開示は、部分的には、がんの免疫療法などの疾患の治療に利用可能なキメラタンパク質を含む組成物及び方法に関する。
【選択図】図１０Ａ

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ヒト対象におけるがんの治療方法であって、前記方法が、
（ｉ）Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造であって、
式中、
（ａ）が、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、
（ｂ）が、前記第１のドメイン及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、前記リンカーが、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、
（ｃ）が、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである、前記一般構造を有するキメラタンパク質の第１の用量を前記ヒト対象に投与することと、
ここで、前記第１の用量の投与前に前記対象から採取した投与前生体試料中の細胞のバックグラウンドレベルが測定されており、前記細胞が、ＣＤ８０＋細胞、ＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、Ｋｉ６７＋細胞、及びＰＤ－Ｌ１＋免疫細胞のうちの１つ以上から選択されるものであり、
（ｉｉ）投与後の前記細胞のレベルが前記細胞の前記バックグラウンドレベルよりも高い場合に、前記ヒト対象に前記キメラタンパク質の第２の用量を投与することと、を含み、
前記第１の用量の投与から少なくとも約４８時間後に前記第２の用量を投与する、前記方法。

【請求項2】

前記生体試料が、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記生体試料が、生検試料または外科標本であり、任意選択で、前記生体試料が、腫瘍生検試料または腫瘍外科標本である、請求項２に記載の方法。

【請求項4】

前記腫瘍生検試料または腫瘍外科標本が、卵巣癌、卵管癌、腹膜癌、皮膚扁平上皮癌（ＣＳＣＣ）、及び頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）から選択される腫瘍に由来する、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

前記細胞のレベルを、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項6】

前記試料を、ＣＤ８０、ＣＤ８、グランザイムＢ、ＣＤ６８、Ｋｉ６７、及びＰＤ－Ｌ１のうちの１つ以上に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、前記細胞のレベルを測定する、請求項５に記載の方法。

【請求項7】

前記１つ以上の分子に特異的に結合する前記薬剤が、抗体またはその断片である、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

前記抗体が、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはそれらの断片である、請求項７に記載の方法。

【請求項9】

前記試料を、ＣＤ８０、ＣＤ８、グランザイムＢ、ＣＤ６８、Ｋｉ６７、及びＰＤ－Ｌ１の１つ以上をコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、前記細胞のレベルを測定する、請求項５に記載の方法。

【請求項10】

１つ以上の前記核酸に特異的に結合する前記薬剤が、核酸プライマーまたはプローブである、請求項９に記載の方法。

【請求項11】

ヒト対象におけるがんの治療方法であって、前記方法が、
（ｉ）Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造であって、
式中、
（ａ）が、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、
（ｂ）が、前記第１のドメイン及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、前記リンカーが、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、
（ｃ）が、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである、前記一般構造を有するキメラタンパク質の第１の用量を前記ヒト対象に投与することと、
ここで、前記第１の用量の投与前に前記対象から採取した第１の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性が測定されており、
前記第１の用量の投与後に前記対象から採取した第２の生体試料中の、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が測定されており、Ｎが、１～２４の数値であり、前記投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低く、
前記第１の用量の投与後に前記対象から採取した第３の生体試料中の、投与からＭ日後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が測定されており、Ｍが、１～２８の数値であり、
（ｉｉ）前記投与からＭ日後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、前記投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性に比べて少なくとも約５０％高い場合に、前記ヒト対象に前記キメラタンパク質の第２の用量を投与することと、を含み、
前記第１の用量の投与から少なくとも約４８時間後に前記第２の用量を投与する、前記方法。

【請求項12】

Ｎが、１２未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは３未満、もしくは２未満、もしくは１未満であり、及び／または
Ｍが、２１未満、もしくは１４未満、もしくは１２未満、もしくは１０未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは２未満である、請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

Ｎが、１２未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは３未満、もしくは２未満、もしくは１未満であり、及び
Ｍが、２１未満、もしくは１４未満、もしくは１２未満、もしくは１０未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは２未満である、請求項１１に記載の方法。

【請求項14】

前記投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも高い、請求項１１～１３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項15】

前記投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い、請求項１１～１３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項16】

前記投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性の約１０％、約２０％、約３０％、または約４０％以内である、請求項１１～１３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項17】

前記第１の生体試料、前記第２の生体試料、及び前記第３の生体試料が、独立して、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される、請求項１１に記載の方法。

【請求項18】

前記第１の生体試料、前記第２の生体試料、及び前記第３の生体試料が血液である、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する、請求項１１～１８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項20】

前記試料を、ＣＤ４０及び／またはＢ細胞マーカーに特異的に結合する薬剤と接触させることによって、前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定する、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

前記Ｂ細胞マーカーが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＣＤ４５Ｒ、ＣＤ８６、ＣＤ９５、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＣＤ４０から選択される、請求項２０に記載の方法。

【請求項22】

前記１つ以上の分子に特異的に結合する前記薬剤が、抗体またはその断片である、請求項２０または請求項２１に記載の方法。

【請求項23】

前記抗体が、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはそれらの断片である、請求項２２に記載の方法。

【請求項24】

前記試料を、ＣＤ４０及び／またはＢ細胞マーカーをコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定する、請求項１９に記載の方法。

【請求項25】

前記Ｂ細胞マーカーが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＣＤ４５Ｒ、ＣＤ８６、ＣＤ９５、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＣＤ４０から選択される、請求項２４に記載の方法。

【請求項26】

１つ以上の前記核酸に特異的に結合する前記薬剤が、核酸プライマーまたはプローブである、請求項２４または請求項２５に記載の方法。

【請求項27】

ヒト対象におけるがんの治療方法であって、前記方法が、
（ｉ）Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造であって、
式中、
（ａ）が、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、
（ｂ）が、前記第１のドメイン及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、前記リンカーが、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、
（ｃ）が、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである、前記一般構造を有するキメラタンパク質の第１の用量を前記ヒト対象に投与することと、
ここで、前記第１の用量の投与前に前記対象から採取した第１の生体試料中の、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮα、ＩＬ１５、ＩＬ２３、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣから選択されるサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性が測定されており、
前記第１の用量の投与後に前記対象から採取した第２の生体試料中の、投与からＮ時間後の前記サイトカインの量及び／または活性が測定されており、Ｎが、１～２４の数値であり、前記投与からＮ時間後の前記サイトカインの量及び／または活性が、前記サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも高く、
前記第１の用量の投与後に前記対象から採取した第３の生体試料中の、投与からＭ日後の前記サイトカインの量及び／または活性が測定されており、Ｍが、１～２８の数値であり、
（ｉｉ）前記投与からＭ日後の前記サイトカインの量及び／または活性が、前記投与からＮ時間後の前記サイトカインの量及び／または活性に比べて少なくとも約３０％低い場合に、前記ヒト対象に前記キメラタンパク質の第２の用量を投与することと、を含み、
前記第１の用量の投与から少なくとも約４８時間後に前記第２の用量を投与する、前記方法。

【請求項28】

Ｎが、１２未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは３未満、もしくは２未満、もしくは１未満であり、及び／または
Ｍが、２１未満、もしくは１４未満、もしくは１２未満、もしくは１０未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは２未満である、請求項２７に記載の方法。

【請求項29】

Ｎが、１２未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは３未満、もしくは２未満、もしくは１未満であり、及び
Ｍが、２１未満、もしくは１４未満、もしくは１２未満、もしくは１０未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは２未満である、請求項２７に記載の方法。

【請求項30】

前記投与からＮ時間後の前記サイトカインの量及び／または活性が、前記サイトカインの前記バックグラウンド量及び／または活性よりも高い、請求項２７～２９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項31】

前記投与からＮ時間後の前記サイトカインの量及び／または活性が、前記サイトカインの前記バックグラウンド量及び／または活性よりも低い、請求項２７～２９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項32】

前記投与からＮ時間後の前記サイトカインの量及び／または活性が、前記サイトカインの前記バックグラウンド量及び／または活性の約１０％、約２０％、約３０％、または約４０％以内である、請求項２７～２９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項33】

前記第１の生体試料、前記第２の生体試料、及び前記第３の生体試料が、独立して、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される、請求項２７に記載の方法。

【請求項34】

前記第１の生体試料、前記第２の生体試料、及び前記第３の生体試料が血液である、請求項３３に記載の方法。

【請求項35】

前記サイトカインの量及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する、請求項２７～３４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項36】

前記試料を、前記サイトカインに特異的に結合する薬剤と接触させることによって、前記サイトカインの量及び／または活性を測定する、請求項３５に記載の方法。

【請求項37】

前記１つ以上の分子に特異的に結合する前記薬剤が、抗体またはその断片であり、任意選択で、前記抗体が、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはその断片である、請求項３６に記載の方法。

【請求項38】

前記試料を、前記サイトカインをコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、前記サイトカインの量及び／または活性を測定する、請求項３５に記載の方法。

【請求項39】

１つ以上の前記核酸に特異的に結合する前記薬剤が、核酸プライマーまたはプローブである、請求項３８に記載の方法。

【請求項40】

前記第２の用量を、前記第１の用量の投与から少なくとも約３日、または少なくとも約４日、または少なくとも約５日、または少なくとも約６日、または少なくとも約７日、または少なくとも約８日、または少なくとも約９日、または少なくとも約１０日、または少なくとも約１４日、または少なくとも約２１日、または少なくとも約２８日後に投与する、請求項１～３９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項41】

治療を必要とする対象におけるがん治療の有効性の評価方法であって、前記対象が、がんに罹患しており、前記評価方法が、
（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている前記対象から生体試料を採取することと、
ここで、前記キメラタンパク質が、
Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、
式中、
（ａ）が、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、
（ｂ）が、前記第１のドメイン及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、前記リンカーが、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、
（ｃ）が、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインであり、
前記第１の用量の投与前に前記対象から採取した生体試料中の細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性が測定されており、前記細胞が、ＣＤ８０＋細胞、ＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、Ｋｉ６７＋細胞、及びＰＤ－Ｌ１＋免疫細胞のうちの１つ以上から選択されるものであり、
（ｉｉ）前記生体試料中の、投与後の前記細胞のレベル及び／または活性を測定することと、
（ｉｉｉ）前記投与後の前記細胞のレベル及び／または活性が、前記細胞の前記バックグラウンドレベル及び／または活性よりも高い場合に、前記キメラタンパク質が有効であると判定することと、を含む、前記評価方法。

【請求項42】

がん治療法による治療のための対象の選択方法であって、
（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている前記対象から生体試料を採取することと、
ここで、前記キメラタンパク質が、
Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、
式中、
（ａ）が、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、
（ｂ）が、前記第１のドメイン及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、前記リンカーが、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、
（ｃ）が、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインであり、
前記第１の用量の投与前に前記対象から採取した生体試料中の細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性が測定されており、前記細胞が、ＣＤ８０＋細胞、ＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、Ｋｉ６７＋細胞、及びＰＤ－Ｌ１＋免疫細胞のうちの１つ以上から選択されるものであり、
（ｉｉ）前記生体試料中の、投与後の前記細胞のレベル及び／または活性を測定することと、
（ｉｉｉ）前記投与後の前記細胞のレベル及び／または活性が、前記細胞の前記バックグラウンドレベル及び／または活性よりも高い場合に、前記キメラタンパク質による治療のために前記対象を選択することと、を含む、前記選択方法。

【請求項43】

前記生体試料が、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される、請求項４１または請求項４２に記載の方法。

【請求項44】

前記生体試料が、生検試料または外科標本である、請求項４３に記載の方法。

【請求項45】

前記生体試料が、腫瘍生検試料または腫瘍外科標本である、請求項４４に記載の方法。

【請求項46】

前記腫瘍生検試料または腫瘍外科標本が、卵巣癌、卵管癌、腹膜癌、皮膚扁平上皮癌（ＣＳＣＣ）、及び頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）から選択される腫瘍に由来する、請求項４５に記載の方法。

【請求項47】

前記細胞のレベルを、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する、請求項４１～４６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項48】

前記試料を、ＣＤ８０、ＣＤ８、グランザイムＢ、ＣＤ６８、Ｋｉ６７、及びＰＤ－Ｌ１から選択される１つ以上の分子に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、前記細胞のレベルを測定する、請求項４７に記載の方法。

【請求項49】

前記１つ以上の分子に特異的に結合する前記薬剤が、抗体またはその断片である、請求項４８に記載の方法。

【請求項50】

前記抗体が、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはそれらの断片である、請求項４９に記載の方法。

【請求項51】

前記試料を、ＣＤ８０、ＣＤ８、グランザイムＢ、ＣＤ６８、Ｋｉ６７、及びＰＤ－Ｌ１の１つ以上をコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、前記細胞のレベルを測定する、請求項４７に記載の方法。

【請求項52】

１つ以上の前記核酸に特異的に結合する前記薬剤が、核酸プライマーまたはプローブである、請求項５１に記載の方法。

【請求項53】

治療を必要とする対象におけるがん治療の有効性の評価方法であって、前記対象が、がんに罹患しており、前記評価方法が、
（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている前記対象から採取される第１の生体試料を取得することと、
ここで、前記キメラタンパク質が、
Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、
式中、
（ａ）が、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、
（ｂ）が、前記第１のドメイン及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、前記リンカーが、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、
（ｃ）が、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインであり、
（ｉｉ）前記第１の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性を測定することと、
（ｉｉｉ）投与からＮ時間後に前記対象から採取される第２の生体試料を取得し、ここでＮが、１～２４の数値であり、かつ前記第２の生体試料中の、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定することと、
（ｉｖ）投与からＭ日後に前記対象から採取される第３の生体試料を取得し、ここでＭが、１～２８の数値であり、かつ前記第３の生体試料中の、投与からＭ日後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定することと、
（ｖ）前記投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い場合、及び／または前記投与からＭ日後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、前記投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性に比べて少なくとも約５０％高い場合に、前記キメラタンパク質が有効であると判定することと、を含む、前記評価方法。

【請求項54】

がん治療法による治療のための対象の選択方法であって、
（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている前記対象から採取される生体試料を取得することと、
ここで、前記キメラタンパク質が、
Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、
式中、
（ａ）が、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、
（ｂ）が、前記第１のドメイン及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、前記リンカーが、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、
（ｃ）が、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインであり、
（ｉｉ）前記第１の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性を測定することと、
（ｉｉｉ）投与からＮ時間後に前記対象から採取される第２の生体試料を取得し、ここでＮが、１～２４の数値であり、かつ前記第２の生体試料中の、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定することと、
（ｉｖ）投与からＭ日後に前記対象から採取される第３の生体試料を取得し、ここでＭが、１～２８の数値であり、かつ前記第３の生体試料中の、投与からＭ日後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定することと、
（ｖ）前記投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い場合、及び／または前記投与からＭ日後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、前記投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性に比べて少なくとも約５０％高い場合に、前記キメラタンパク質による治療のために前記対象を選択することと、を含む、前記選択方法。

【請求項55】

Ｎが、１２未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは３未満、もしくは２未満、もしくは１未満であり、及び／または
Ｍが、２１未満、もしくは１４未満、もしくは１２未満、もしくは１０未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは２未満である、請求項５３または請求項５４に記載の方法。

【請求項56】

Ｎが、１２未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは３未満、もしくは２未満、もしくは１未満であり、及び
Ｍが、２１未満、もしくは１４未満、もしくは１２未満、もしくは１０未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは２未満である、請求項５３または請求項５４に記載の方法。

【請求項57】

前記投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも高い、請求項５３～５６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項58】

前記投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い、請求項５３～５６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項59】

前記投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性の約１０％、約２０％、約３０％、または約４０％以内である、請求項５３～５６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項60】

前記第１の生体試料、前記第２の生体試料、及び前記第３の生体試料が、独立して、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される、請求項５３または請求項５４に記載の方法。

【請求項61】

前記第１の生体試料、前記第２の生体試料、及び前記第３の生体試料が血液である、請求項６０に記載の方法。

【請求項62】

前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する、請求項５３～６１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項63】

前記試料を、ＣＤ４０及び／またはＢ細胞マーカーに特異的に結合する薬剤と接触させることによって、前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定する、請求項６２に記載の方法。

【請求項64】

前記Ｂ細胞マーカーが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＣＤ４５Ｒ、ＣＤ８６、ＣＤ９５、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＣＤ４０から選択される、請求項６３に記載の方法。

【請求項65】

前記１つ以上の分子に特異的に結合する前記薬剤が、抗体またはその断片である、請求項６３または請求項６４に記載の方法。

【請求項66】

前記抗体が、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはそれらの断片である、請求項６５に記載の方法。

【請求項67】

前記試料を、ＣＤ４０及び／またはＢ細胞マーカーをコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、前記Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定する、請求項６２に記載の方法。

【請求項68】

前記Ｂ細胞マーカーが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＣＤ４５Ｒ、ＣＤ８６、ＣＤ９５、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＣＤ４０から選択される、請求項６７に記載の方法。

【請求項69】

１つ以上の前記核酸に特異的に結合する前記薬剤が、核酸プライマーまたはプローブである、請求項６７または請求項６８に記載の方法。

【請求項70】

治療を必要とする対象におけるがん治療の有効性の評価方法であって、前記対象が、がんに罹患しており、前記評価方法が、
（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている前記対象から採取される第１の生体試料を取得することと、
ここで、前記キメラタンパク質が、
Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、
式中、
（ａ）が、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、
（ｂ）が、前記第１のドメイン及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、前記リンカーが、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、
（ｃ）が、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインであり、
（ｉｉ）前記第１の生体試料中の、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮα、ＩＬ１５、ＩＬ２３、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣから選択されるサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性を測定することと、
（ｉｉｉ）投与からＮ時間後に前記対象から採取される第２の生体試料を取得し、ここでＮが、１～２４の数値であり、かつ前記第２の生体試料中の、投与からＮ時間後の前記サイトカインの量及び／または活性を測定することと、
（ｉｖ）投与からＭ日後に前記対象から採取される第３の生体試料を取得し、ここでＭが、１～２８の数値であり、かつ前記第３の生体試料中の、投与からＭ日後の前記サイトカインの量及び／または活性を測定することと、
（ｖ）前記投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性が、前記サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも高い場合、及び／または前記投与からＭ日後のサイトカインの量及び／または活性が、前記投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性に比べて少なくとも約５０％低い場合に、前記キメラタンパク質が有効であると判定することと、を含む、前記評価方法。

【請求項71】

がん治療法による治療のための対象の選択方法であって、
（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている前記対象から採取される生体試料を取得することと、
ここで、前記キメラタンパク質が、
Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、
式中、
（ａ）が、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、
（ｂ）が、前記第１のドメイン及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、前記リンカーが、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、
（ｃ）が、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインであり、
（ｉｉ）前記第１の生体試料中の、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮα、ＩＬ１５、ＩＬ２３、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣから選択されるサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性を測定することと、
（ｉｉｉ）投与からＮ時間後に前記対象から採取される第２の生体試料を取得し、ここでＮが、１～２４の数値であり、かつ前記第２の生体試料中の、投与からＮ時間後の前記サイトカインの量及び／または活性を測定することと、
（ｉｖ）投与からＭ日後に前記対象から採取される第３の生体試料を取得し、ここでＭが、１～２８の数値であり、かつ前記第３の生体試料中の、投与からＭ日後の前記サイトカインの量及び／または活性を測定することと、
（ｖ）前記投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性が、前記サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも高い場合、及び／または前記投与からＭ日後のサイトカインの量及び／または活性が、前記投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性に比べて少なくとも約５０％低い場合に、前記キメラタンパク質による治療のために前記対象を選択することと、を含む、前記選択方法。

【請求項72】

Ｎが、１２未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは３未満、もしくは２未満、もしくは１未満であり、及び／または
Ｍが、２１未満、もしくは１４未満、もしくは１２未満、もしくは１０未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは２未満である、請求項７０または請求項７１に記載の方法。

【請求項73】

Ｎが、１２未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは３未満、もしくは２未満、もしくは１未満であり、及び
Ｍが、２１未満、もしくは１４未満、もしくは１２未満、もしくは１０未満、もしくは８未満、もしくは６未満、もしくは４未満、もしくは２未満である、請求項７０または請求項７１に記載の方法。

【請求項74】

前記投与からＮ時間後の前記サイトカインの量及び／または活性が、前記サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも高い、請求項７０～７３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項75】

前記投与からＮ時間後の前記サイトカインの量及び／または活性が、前記サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも低い、請求項７０～７３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項76】

前記投与からＮ時間後の前記サイトカインの量及び／または活性が、前記サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性の約１０％、約２０％、約３０％、または約４０％以内である、請求項７０～７３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項77】

前記第１の生体試料、前記第２の生体試料、及び前記第３の生体試料が、独立して、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される、請求項７０または請求項７１に記載の方法。

【請求項78】

前記第１の生体試料、前記第２の生体試料、及び前記第３の生体試料が血液である、請求項７７に記載の方法。

【請求項79】

前記サイトカインの量及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する、請求項７０～７８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項80】

前記試料を、前記サイトカインに特異的に結合する薬剤と接触させることによって、前記サイトカインの量及び／または活性を測定する、請求項７９に記載の方法。

【請求項81】

前記１つ以上の分子に特異的に結合する前記薬剤が、抗体またはその断片である、請求項８０に記載の方法。

【請求項82】

前記抗体が、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはそれらの断片である、請求項８１に記載の方法。

【請求項83】

前記試料を、前記サイトカインをコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、前記サイトカインの量及び／または活性を測定する、請求項７９に記載の方法。

【請求項84】

１つ以上の前記核酸に特異的に結合する前記薬剤が、核酸プライマーまたはプローブである、請求項８３に記載の方法。

【請求項85】

前記キメラタンパク質の前記第１の用量が、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの範囲である、請求項１～８４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項86】

前記第１の用量が、約０．００３、または約０．０１、または約０．０３、または約０．１、または約０．３、または約１、または約２、または約３、または約４、または約６、または約８、または約１０ｍｇ／ｋｇである、請求項８５に記載の方法。

【請求項87】

前記キメラタンパク質の第２の用量を投与することをさらに含む、請求項４１～８６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項88】

前記第２の用量を、前記第１の用量の投与から少なくとも約３日、または少なくとも約４日、または少なくとも約５日、または少なくとも約６日、または少なくとも約７日、または少なくとも約８日、または少なくとも約９日、または少なくとも約１０日、または少なくとも約１４日、または少なくとも約２１日、または少なくとも約２８日後に投与する、請求項８７に記載の方法。

【請求項89】

前記キメラタンパク質の前記第２の用量が、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの範囲である、請求項８７または請求項８８に記載の方法。

【請求項90】

前記第２の用量が、約０．００３、または約０．０１、または約０．０３、または約０．１、または約０．３、または約１、または約２、または約３、または約４、または約６、または約８、または約１０ｍｇ／ｋｇである、請求項８７～８９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項91】

前記第１のドメインが、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）リガンドに結合することができる、請求項１～９０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項92】

前記第１のドメインが、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインの実質的にすべてを含む、請求項１～９１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項93】

前記第２のドメインが、ＣＤ４０受容体に結合することができる、請求項１～９２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項94】

前記第２のドメインが、ＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインの実質的にすべてを含む、請求項１～９３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項95】

前記リンカーが、ＩｇＧ４に由来するヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む、請求項１～９４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項96】

前記リンカーが、ヒトＩｇＧ４に由来するヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む、請求項９５に記載の方法。

【請求項97】

前記リンカーが、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む、請求項１～９６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項98】

前記第１のドメインが、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む、請求項１～９７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項99】

前記第２のドメインが、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む、請求項１～９８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項100】

（ａ）前記第１のドメインが、配列番号５７のアミノ酸配列を含み、
（ｂ）前記第２のドメインが、配列番号５８のアミノ酸配列を含み、
（ｃ）前記リンカーが、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む、請求項１～９９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項101】

前記キメラタンパク質が、配列番号５または配列番号７のアミノ酸配列をさらに含む、請求項１～１００のいずれか１項に記載の方法。

【請求項102】

前記キメラタンパク質が、配列番号５及び配列番号７のアミノ酸配列をさらに含む、請求項１～１０１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項103】

前記キメラタンパク質が、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む、請求項１～１０２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項104】

前記キメラタンパク質が、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む、請求項１０３に記載の方法。

【請求項105】

前記キメラタンパク質が、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列に関して、１つ、または２つ、または３つ、または４つ、または５つ、または６つ、または７つ、または８つのアミノ酸変異を含む、請求項１０３または請求項１０４に記載の方法。

【請求項106】

前記ヒト対象が、進行した固形腫瘍またはリンパ腫に罹患しているか、または罹患していると疑われる、請求項１～１０５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項107】

前記ヒト対象が、卵巣癌、卵管癌、腹膜癌、皮膚扁平上皮癌（ＣＳＣＣ）、及び頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）から選択されるがんに罹患しているか、または罹患していると疑われる、請求項１～１０６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項108】

前記ヒト対象が、１つ以上のプラチナベースの治療に失敗している、請求項１～１０７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項109】

前記ヒト対象が、さらなるプラチナ療法について不適格である、請求項１０８に記載の方法。

【請求項110】

前記ヒト対象が、プラチナ療法について不適格である、請求項１～１０８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項111】

前記ヒト対象が、同時化学療法、免疫療法、生物学的療法またはホルモン療法を受けておらず、及び／または前記ヒト対象が、標準療法を受けているか、耐性があるか、または不適格であり、及び／または前記がんに標準治療と見なされる承認済みの治療法がない、請求項１～１００のいずれか１項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本技術は、特に、用量、二相性投与を含む投与計画、または３サイクルを含む投与計画を含む、がんの免疫療法などの疾患の治療に用いられるキメラタンパク質を含む組成物及び方法に関する。

【0002】

優先権
本出願は、２０２１年１１月１２日に出願された米国仮出願第６３／２７８，５６７号、及び２０２２年８月１１日に出願された米国仮出願第６３／３７１，０８３号の利益及び優先権を主張し、それぞれの内容は、その全体が参照により本明細書に援用される。

【0003】

配列表
本出願は、ＥＦＳ－Ｗｅｂ経由でＸＭＬ形式にて提出された配列表を含む。２０２２年１１月９日に作成された「ＳＨＫ－０５５ＰＣ＿１１６９８１－５０５５＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ」という名称のＸＭＬコピーの内容は、サイズが８２，５４７バイトであり、その内容の全体が参照により本明細書に援用される。

【背景技術】

【0004】

がん免疫療法の分野は、ここ数年で飛躍的に成長している。これは主に、多くの腫瘍型におけるチェックポイント分子ファミリー（例えば、ＣＴＬＡ－４及びＰＤ－１／Ｌ１）を標的とする抗体の臨床的有効性によって推進されてきた。しかしながら、この成功にもかかわらず、これらの薬剤を単独療法として臨床的に反応を示す患者は少数（様々な固形腫瘍で１０～４５％）であり、これらの治療は副作用によって妨げられている。

【0005】

合理的な用量の選択と投与計画の最適化は臨床的に重要であり、患者の服薬コンプライアンスを高め、最大限の臨床的有用性を得るための前提条件である。投与計画の開発は、通常、動物モデルで実施される薬物動態／薬力学試験に依存する。しかしながら、免疫療法はがん細胞に対して直接的な抗増殖作用を発揮するのではなく、腫瘍免疫を利用することが期待されるため、一部の動物研究では一般的にマウスの代替物が使用され、薬物動態／薬力学試験は利用できない。さらに、医師は、患者の腫瘍の免疫原性、病期、及び身体状態に基づいて免疫療法の投与計画を変更する場合がある。したがって、投与及びレジメンを開発するための新たな戦略が必要である。

【発明の概要】

【0006】

したがって、様々な態様において、本開示は、がん免疫療法の用量及び投与計画を開発するための戦略の開発に有用な組成物及び方法を提供する。本開示は、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質の投与後に腫瘍微小環境（ＴＭＥ）においてＣＤ８０＋細胞、ＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、Ｋｉ６７＋細胞、及びＰＤ－Ｌ１＋免疫細胞が増加するという発見、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞が投与後数時間以内に末梢血から辺縁趨向し、数日以内に末梢血に戻るという発見、ならびにＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質の投与後、特定の血清サイトカインのレベルが投与後数時間以内に増加し、数日以内に減少するという発見に部分的に基づいている。

【0007】

本開示の一態様は、ヒト対象におけるがんの治療方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）ヒト対象に、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有するキメラタンパク質の第１の用量を投与することを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、第１の用量の投与前に対象から採取した投与前生体試料中の細胞のバックグラウンドレベルが測定されており、マーカーは、ＣＤ８０＋細胞、ＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、Ｋｉ６７＋細胞、及びＰＤ－Ｌ１＋免疫細胞のうちの１つ以上から選択される。ある実施形態では、本方法はさらに、投与後の細胞のレベルが細胞のバックグラウンドレベルよりも高い場合に、ヒト対象にキメラタンパク質の第２の用量を投与することを含む。ある実施形態では、第１の用量の投与から少なくとも約４８時間後に第２の用量を投与する。ある実施形態では、生体試料は、生検試料または外科標本である。ある実施形態では、生体試料は、腫瘍生検試料または腫瘍外科標本である。ある実施形態では、細胞のレベルを、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。

【0008】

本開示の一態様は、ヒト対象におけるがんの治療方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）ヒト対象に、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有するキメラタンパク質の第１の用量を投与することを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、第１の用量の投与前に対象から採取した第１の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、第１の用量の投与後に対象から採取した第２の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＮ時間後のレベル及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性は、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い。ある実施形態では、第１の用量の投与後に対象から採取した第３の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＭ日後のレベル及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）投与からＭ日後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性に比べて少なくとも約５０％高い場合に、ヒト対象にキメラタンパク質の第２の用量を投与することを含む。ある実施形態では、第１の用量の投与から少なくとも約４８時間後に第２の用量を投与する。ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は血液である。ある実施形態では、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。

【0009】

本開示の一態様は、ヒト対象におけるがんの治療方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）ヒト対象に、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有するキメラタンパク質の第１の用量を投与することを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、第１の用量の投与前に対象から採取した第１の生体試料中の、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮα、ＩＬ１５、ＩＬ２３、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣから選択されるサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、第１の用量の投与後に対象から採取した第２の生体試料中の、サイトカインのＮ時間後の量及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、サイトカインの投与からＮ時間後の量及び／または活性は、サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも高い。ある実施形態では、第１の用量の投与後に対象から採取した第３の生体試料中の、サイトカインのＭ日後の量及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）投与からＭ日後のサイトカインの量及び／または活性が、投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性に比べて少なくとも約３０％低い場合に、ヒト対象にキメラタンパク質の第２の用量を投与することを含む。ある実施形態では、第１の用量の投与から少なくとも約４８時間後に第２の用量を投与する。ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は血液である。ある実施形態では、サイトカインの量及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。

【0010】

本開示の一態様は、がんに罹患しており、がん治療を必要とする対象におけるがん治療の有効性の評価方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている対象から採取される生体試料を取得することを含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、第１の用量の投与前に対象から採取した生体試料中の細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、細胞は、ＣＤ８０＋細胞、ＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、Ｋｉ６７＋細胞、及びＰＤ－Ｌ１＋免疫細胞のうちの１つ以上から選択される。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）生体試料中の細胞の投与後レベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉｉ）投与後の細胞レベル及び／または活性が細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも高い場合に、キメラタンパク質が有効であると判定することを含む。ある実施形態では、生体試料は、腫瘍生検試料または腫瘍外科標本である。ある実施形態では、細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。

【0011】

本開示の一態様は、がんの治療法による治療対象の選択方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている対象から採取される生体試料を取得することを含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、第１の用量の投与前に対象から採取した生体試料中の細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、細胞は、ＣＤ８０＋細胞、ＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、Ｋｉ６７＋細胞、及びＰＤ－Ｌ１＋免疫細胞のうちの１つ以上から選択される。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）生体試料中の細胞の投与後レベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉｉ）投与後の細胞レベル及び／または活性が細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも高い場合に、キメラタンパク質による治療のために対象を選択することを含む。ある実施形態では、生体試料は、腫瘍生検試料または腫瘍外科標本である。ある実施形態では、細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。

【0012】

本開示の一態様は、がんに罹患しており、がん治療を必要とする対象におけるがん治療の有効性の評価方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている対象から採取される第１の生体試料を取得することを含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、本方法はさらに、第１の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉｉ）投与からＮ時間後に対象から採取した第２の生体試料を取得することを含み、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第２の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＮ時間後のレベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｖ）投与からＭ日後に対象から採取した第３の生体試料を取得することを含み、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第３の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＭ日後のレベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｖ）投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い場合、及び／または投与からＭ日後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性に比べて少なくとも約５０％高い場合に、キメラタンパク質が有効であると判定することを含む。ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は血液である。ある実施形態では、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。

【0013】

本開示の一態様は、がんの治療法による治療対象の選択方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている対象から採取される第１の生体試料を取得することを含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、本方法はさらに、第１の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉｉ）投与からＮ時間後に対象から採取した第２の生体試料を取得することを含み、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第２の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＮ時間後のレベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｖ）投与からＭ日後に対象から採取した第３の生体試料を取得することを含み、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第３の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＭ日後のレベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｖ）投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い場合、及び／または投与からＭ日後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性に比べて少なくとも約５０％高い場合に、キメラタンパク質による治療のために対象を選択することを含む。ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は血液である。ある実施形態では、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。

【0014】

本開示の一態様は、がんに罹患しており、がん治療を必要とする対象におけるがん治療の有効性の評価方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている対象から採取される第１の生体試料を取得することを含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）第１の生体試料中のサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、サイトカインは、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮα、ＩＬ１５、ＩＬ２３、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣから選択される。ある実施形態では、方法はさらに、（ｉｉｉ）投与からＮ時間後に対象から採取した第２の生体試料を取得することを含み、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第２の生体試料中の、投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｖ）投与からＭ日後に対象から採取した第３の生体試料を取得することを含み、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第３の生体試料中の、投与からＭ日後のサイトカインの量及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｖ）投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性がサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも高い場合、及び／または投与からＭ日後のサイトカインの量及び／または活性が、投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性に比べて少なくとも約５０％低い場合に、キメラタンパク質が有効であると判定することを含む。ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は血液である。ある実施形態では、サイトカインの量及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。

【0015】

本開示の一態様は、がんの治療法による治療対象の選択方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている対象から採取される第１の生体試料を取得することを含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）第１の生体試料中のサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、サイトカインは、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮα、ＩＬ１５、ＩＬ２３、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣから選択される。ある実施形態では、方法はさらに、（ｉｉｉ）投与からＮ時間後に対象から採取した第２の生体試料を取得することを含み、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第２の生体試料中の、投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｖ）投与からＭ日後に対象から採取した第３の生体試料を取得することを含み、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第３の生体試料中の、投与からＭ日後のサイトカインの量及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｖ）投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性がサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも高い場合、及び／または投与からＭ日後のサイトカインの量及び／または活性が、投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性に比べて少なくとも約５０％低い場合に、キメラタンパク質による治療のために対象を選択することを含む。ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は血液である。ある実施形態では、サイトカインの量及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。

【0016】

ある実施形態では、第１のドメインは、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）リガンドに結合することができる。ある実施形態では、第１のドメインは、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインの実質的にすべてを含む。ある実施形態では、第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む。

【0017】

ある実施形態では、第２のドメインは、ＣＤ４０受容体に結合することができる。ある実施形態では、第２のドメインは、実質的にＣＤ４０Ｌの細胞外ドメイン全体を含む。ある実施形態では、第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む。

【0018】

ある実施形態では、リンカーは、ＩｇＧ４に由来するヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。ある実施形態では、リンカーは、ヒトＩｇＧ４に由来するヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む。

【0019】

ある実施形態では、（ａ）第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列を含み、（ｂ）第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列を含み、（ｃ）リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５または配列番号７のアミノ酸配列をさらに含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５及び配列番号７のアミノ酸配列をさらに含む。

【0020】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む。

【0021】

ある実施形態では、キメラタンパク質の第１の用量は、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。ある実施形態では、第１の用量は、約０．００３、または約０．０１、または約０．０３、または約０．１、または約０．３、または約１、または約２、または約３、または約４、または約６、または約８、または約１０ｍｇ／ｋｇである。

【0022】

ある実施形態では、本明細書に開示されるいずれかの態様の方法は、キメラタンパク質の第２の用量をさらに含む。ある実施形態では、第２の用量を、第１の用量の投与から少なくとも約３日、または少なくとも約４日、または少なくとも約５日、または少なくとも約６日、または少なくとも約７日、または少なくとも約８日、または少なくとも約９日、または少なくとも約１０日、または少なくとも約１４日、または少なくとも約２１日、または少なくとも約２８日後に投与する。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２の用量は、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。ある実施形態では、第２の用量は、約０．００３、または約０．０１、または約０．０３、または約０．１、または約０．３、または約１、または約２、または約３、または約４、または約６、または約８、または約１０ｍｇ／ｋｇである。

【0023】

本特許または出願書類は、カラーで作成された少なくとも１つの図面を含む。カラー図面を含む本特許または特許出願公開の複写は、要請かつ必要な料金の支払により特許庁より提供される。

【図面の簡単な説明】

【0024】

【図1】ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（ＳＬ－１７２１５４）の模式図を示す。ＳＬ－１７２１５４（ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌ）は、ＣＤ４０Ｌ（ＣＤ４０への結合親和性は４．７４ｎＭである）にＦｃリンカータンパク質を介して連結したＳＩＲＰα（ＣＤ４７への結合親和性は０．６２８ｎＭである）からなる六量体の二機能性融合タンパク質である。

【図2】修正毒性発現確率区間（ｍＴＰＩ－２）デザイン（Ｎ＝１５）による用量漸増を示す。計画される用量漸増は半対数増加である。少なくとも３人の対象を連続用量レベル（ＤＬ）に登録し、治療の第１のサイクルで用量制限毒性（ＤＬＴ）を評価した。疾患の進行、許容不可能な毒性、または同意の撤回が生じるまで、スケジュール１またはスケジュール２に従ってＳＬ－１７２１５４を対象に静脈内（ＩＶ）投与する。

【図3】腫瘍応答及び治療期間を示す。ｉＵＰＤ＝未確認進行性疾患（ｉＲＥＣＩＳＴ）ＮＥ＝評価不能、ＰＤ＝進行性疾患、ＳＤ＝不変

【図4】ＳＬ－１７２１５４の反復投与後の血清サイトカインの再現可能な増加を示す。ＣＣＬ２（ＭＣＰ－１）（Ａ）、ＣＣＬ４（ＭＩＰ－１β）（Ｂ）、ＣＣＬ３（ＭＩＰ－１α）（Ｃ）、及びＣＣＬ２２（ＭＤＣ）（Ｄ）のレベルの変化を示す。

【図5A】血清ＩＬ－１２の用量依存的かつ再現可能な増加を示す。経時的なＴＨ１炎症誘発反応のメディエーターであるインターロイキン１２（ＩＬ－１２）の対象レベルを示し、これは、試験対象で観察される周期的なエフェクターサイトカイン応答を典型的に表している。

【図5B】血清ＩＬ－１２の用量依存的かつ再現可能な増加を示す。第１の注入時の応答中央値（水平バー）を示しており、予備的には用量依存的であると考えられる。

【図6】ＳＬ－１７２１５４が白血球上のＣＤ４７に優先的に結合するが、ＲＢＣには結合しないことを示す。Ａは、全血を使用した蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）分析によって評価した、赤血球（ＲＢＣ）と白血球（ＷＢＣ，白血球）の両方のＣＤ４７受容体占有率（ＲＯ）を示している。サイクル１の１日目（Ｃ１Ｄ１）の注入後１時間で、白血球上のＣＤ４７ ＲＯの中央値（水平バー）は約８０％である。Ｂは、赤血球上のＣＤ４７ ＲＯがすべての用量レベルで５％未満であることを示している。

【図7A】ＳＬ－１７２１５４が用量依存的にＢ細胞の辺縁趨向及び活性化を刺激することを示す。辺縁趨向細胞の出現頻度の中央値が用量依存的に増加することを示している（水平バー）。受容体の関与は、すべての用量レベルで約１００％である（データ未掲載）。

【図7B】ＳＬ－１７２１５４が用量依存的にＢ細胞の辺縁趨向及び活性化を刺激することを示す。Ｂ細胞出現頻度の中央値が次の注入までに注入前のレベルに戻り、各注入サイクルで放出と戻りの周期的なパターンを維持することを示している。

【図7C】ＳＬ－１７２１５４が用量依存的にＢ細胞の辺縁趨向及び活性化を刺激することを示す。戻ってきたＢ細胞が共刺激マーカーＣＤ８６と成熟マーカーＣＤ９５の増加を示すことを示しており、ＳＬ－１７２１５４が表現型の変化を誘発できることを示唆している。

【図8A】ＣＤ４０ ｍＡｂと比較したＴＮＦα及びインターロイキン－６（ＩＬ－６）の明確な特性を示す。ＣＰ－８７０，８９３（左パネル）またはＳＬ－１７２１５４（右パネル）の様々な用量でのＴＮＦαの誘導を示す。ＣＰ－８７０，８９３のデータは、Ｖｏｎｄｅｒｈｅｉｄｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２５：８７６－８８３（２００７）から引用したものである。

【図8B】ＣＤ４０ ｍＡｂと比較したＴＮＦα及びインターロイキン－６（ＩＬ－６）の明確な特性を示す。ＣＰ－８７０，８９３（左パネル）またはＳＬ－１７２１５４（右パネル）の様々な用量でのＩＬ－６の誘導を示す。ＣＰ－８７０，８９３のデータは、Ｖｏｎｄｅｒｈｅｉｄｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２５：８７６－８８３（２００７）から引用したものである。

【図9】ＳＬ－１７２１５４が腫瘍微小環境（ＴＭＥ）において自然免疫応答を誘導することを示す。Ａは、ＳＬ－１７２１５４の投与前と投与後の患者Ａの生検試料の免疫組織化学分析を示す。ＣＤ６８（単球系細胞で高度に発現するタンパク質）の染色によって単球を検出した。Ｂは、ＳＬ－１７２１５４による治療後の腫瘍生検試料中のＴＭＥにおける活性化マーカーＣＤ４０及びＭＨＣクラスＩＩの上方制御を、治療前の生検試料と比較して示す。

【図10】ＳＬ－１７２１５４が腫瘍微小環境（ＴＭＥ）において適応免疫応答を誘導することを示す。Ａは、ＳＬ－１７２１５４の投与前と投与後の患者Ａの生検試料中のＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、及びＫｉ６７＋細胞を示す。治療前の生検試料と比較して、治療後の生検試料ではＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、及びＫｉ６７＋細胞が増加している。Ｂは、腫瘍比率スコア（ＴＰＳ）と複合陽性スコア（ＣＰＳ）を比較したグラフである。

【図11】ＳＬ－１７２１５４についての計画された臨床開発戦略を示す。この戦略には、卵巣癌におけるＳＬ－１７２１５４単独療法、卵巣癌におけるＳＬ－１７２１５４＋リポソームドキソルビシンの併用療法、ＡＭＬにおけるＳＬ－１７２１５４＋アザシチジン＋ベネトクラクスの併用療法、ＨＲ－ＭＤＳにおけるＳＬ－１７２１５４＋アザシチジンの併用療法、及びＴＰ５３変異型ＡＭＬにおけるＳＬ－１７２１５４＋アザシチジンの併用療法の試験が含まれる。

【図12】ＳＬ－１７２１５４の投与後の腫瘍におけるＣＤ８０＋細胞の存在量及び／またはＣＤ８０発現の増加を示す。

【発明を実施するための形態】

【0025】

本開示は、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質の投与後に腫瘍微小環境（ＴＭＥ）内でＣＤ８０＋細胞、ＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、Ｋｉ６７＋細胞、及びＰＤ－Ｌ１＋免疫細胞が増加するという発見に部分的に基づいており、このタンパク質は、ＤＬＴ、または貧血、血小板減少症、肝機能障害、サイトカイン放出症候群、もしくは肺炎のエビデンスがなく、忍容性が良好である。本開示はまた、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク 質の投与後数時間以内にＢ細胞及び／またはＣＤ４０^＋細胞が末梢血から辺縁趨向し、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮα、ＩＬ１５、ＩＬ２３、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣなどの自然及び適応性血清サイトカインのレベルが上昇し、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質の投与後約１日以内にＢ細胞及び／またはＣＤ４０^＋細胞が末梢血に戻り、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮα、ＩＬ１５、ＩＬ２３、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣなどの自然及び適応性血清サイトカインのレベルが減少するという発見に部分的に基づいている。いくつかの実施形態では、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０^＋細胞のレベル、ならびにＣＣＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮα、ＩＬ１５、ＩＬ２３、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣなどの自然及び適応性血清サイトカインのレベルは、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質の投与後１日または２日以内にバックグラウンドレベルに近づく。

【0026】

重要なことに、本開示のキメラタンパク質は（ＣＤ１７２ａの細胞外ドメイン（ＳＩＲＰα）が、がん細胞上のその受容体／リガンドに結合することにより）、例えば、貪食及び／または破壊を回避しようとしているがん細胞に由来する免疫抑制シグナルの伝達を妨害、遮断、低減、阻害、及び／または隔離し、（ＣＤ４０Ｌが受容体に結合することにより）抗がん免疫細胞への免疫刺激シグナルの伝達を増強、増加、及び／または刺激するため、２つの異なる経路によって抗腫瘍効果をもたらすことができ、この二重の作用により、患者に任意の抗腫瘍効果をもたらし、及び／または患者に増強された抗腫瘍効果をもたらす可能性が高くなる。さらに、そのようなキメラタンパク質は、２つの異なる経路を介して作用することができるため、２つの経路のうちの１つを標的とする治療への応答が不十分な患者には少なくとも有効であり得る。したがって、２つの経路のうちの１つを介して作用する治療に対して不十分なレスポンダーである患者は、複数の経路を標的とすることによって治療効果を達成することができる。

【0027】

キメラタンパク質
本発明のキメラタンパク質は、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインとＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインを含み、これらを組み合わせることで、免疫抑制シグナルを同時に遮断し、免疫活性化シグナルを刺激することができる。

【0028】

本開示の態様は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を含むキメラタンパク質を提供し、式中、（ａ）は、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメイン及び第２のドメインに隣接するリンカー、例えば、ジスルフィド結合を形成することが可能である少なくとも１つのシステイン残基を含む、及び／またはヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含むリンカーであり、（ｃ）は、ＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインを含む第２のドメインであり、リンカーは、第１のドメイン及び第２のドメインを接続する。

【0029】

ある実施形態では、第１のドメインは、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインの実質的にすべてを含む。ある実施形態では、第１のドメインは、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）リガンドに結合することができる。ある実施形態では、第１のドメインは、がん細胞表面に発現するＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）リガンド（例えば、ＣＤ４７）に結合することができる。ある実施形態では、第１のドメインは、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）リガンド（例えば、ＣＤ４７）の、骨髄及び造血幹細胞及びニューロンに位置するＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）タンパク質への結合を阻害することができる。ある実施形態では、第１のドメインは、免疫抑制シグナルを阻害することができる。ある実施形態では、第１のドメインは、免疫抑制シグナルを阻害することができる。ある実施形態では、第１のドメインは、マクロファージチェックポイントまたは「ｄｏ ｎｏｔ ｅａｔ ｍｅ」シグナルを阻害することができる。ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）による治療法は、マクロファージを刺激して腫瘍細胞を貪食し、貪食された腫瘍細胞の腫瘍抗原をＴ細胞に効果的に提示する。

【0030】

ある実施形態では、第２のドメインは、ＣＤ４０受容体に結合することができる。ある実施形態では、第２のドメインは、ＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインの実質的にすべてを含む。ある実施形態では、第２のドメインは、免疫刺激シグナルを活性化することができる。

【0031】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、組換え融合タンパク質、例えば、本明細書に開示される細胞外ドメインを有する単一のポリペプチドである。例えば、ある実施形態では、キメラタンパク質は、原核細胞、真核細胞、または無細胞発現系において単一の単位として翻訳される。

【0032】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、分泌可能かつ完全に機能する単一のポリペプチド鎖として哺乳動物宿主細胞内で産生可能である。

【0033】

ある実施形態では、キメラタンパク質とは、複数のポリペプチド、例えば、本明細書に開示される複数の細胞外ドメインの組換えタンパク質を指し、それらは組み合わされて（共有または非共有結合を介して）、例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏで単一の単位（例えば、本明細書に開示される１つ以上の合成リンカーと共に）を生成する。

【0034】

ある実施形態では、キメラタンパク質を、１つのポリペプチドとして化学的に合成するか、または各ドメインを別々に化学的に合成し、次いで組み合わせる。ある実施形態では、キメラタンパク質の一部を翻訳し、一部を化学的に合成する。

【0035】

ある実施形態では、細胞外ドメインとは、細胞外環境と相互作用することができる膜貫通タンパク質の一部を指す。ある実施形態では、細胞外ドメインは、リガンドまたは受容体と結合するのに十分であり、細胞にシグナルを伝達するのに有効である膜貫通タンパク質の一部を指す。ある実施形態では、細胞外ドメインは通常、細胞または細胞膜の外部に存在する膜貫通タンパク質のアミノ酸配列全体である。ある実施形態では、細胞外ドメインは、細胞または細胞膜の外部にあり、当技術分野で公知の方法を使用してアッセイされ得るような（例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのリガンド結合及び／または細胞活性化アッセイ）、シグナル伝達及び／またはリガンド結合に必要とされる膜貫通タンパク質のアミノ酸配列の一部である。

【0036】

膜貫通タンパク質は通常、細胞外ドメイン、１つまたは一連の膜貫通ドメイン、及び細胞内ドメインからなる。理論に拘束されることを望まないが、膜貫通タンパク質の細胞外ドメインは、可溶性受容体またはリガンドまたは膜結合受容体またはリガンド（すなわち、隣接する細胞の膜）との相互作用に関与する。理論に拘束されることを望まないが、膜貫通ドメイン（複数可）は、膜貫通タンパク質を原形質膜に局在化させる役割を果たす。理論に拘束されることを望まないが、膜貫通タンパク質の細胞内ドメインは、細胞内シグナル伝達分子との相互作用を調整して、細胞内応答を細胞外環境と調整する（またはその逆の）役割を果たす。

【0037】

シングルパス膜貫通タンパク質には、一般的に２つの種類があり、細胞外アミノ末端及び細胞内カルボキシ末端を有するＩ型膜貫通タンパク質、及び細胞外カルボキシ末端及び細胞内アミノ末端を有するＩＩ型膜貫通タンパク質である。Ｉ型及びＩＩ型膜貫通タンパク質は、受容体またはリガンドのいずれかであり得る。Ｉ型膜貫通タンパク質（例えば、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））について、タンパク質のアミノ末端は、細胞の外側を向いており、したがって、細胞外環境において他の結合パートナー（リガンドまたは受容体のいずれか）との相互作用に関与する機能ドメインを含む。ＩＩ型膜貫通タンパク質（例えば、ＣＤ４０Ｌ）について、タンパク質のカルボキシ末端は、細胞の外側を向いており、したがって、細胞外環境において他の結合パートナー（リガンドまたは受容体のいずれか）との相互作用に関与する機能ドメインを含む。したがって、これらの２つの種類の膜貫通タンパク質は、細胞膜に対して互いに反対の配向を有する。

【0038】

ＣＤ４７が広範囲のがんにおける「ｄｏ ｎｏｔ ｅａｔ ｍｅ」シグナルとして説明されたことから、ＣＤ４７を遮断した状況において、いかなる組み合わせの「ｅａｔ ｍｅ」シグナルが抗腫瘍免疫を増強し得るかについての探究が促された。Ｗｉｌｌｉｎｇｈａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ ＣＤ４７－ｓｉｇｎａｌ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｌｐｈａ（ＳＩＲＰａ）ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｉｓ ａ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｒｓ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １０９：６６６２－６６６７（２０１２）；Ｊａｉｓｗａｌ ｅｔ ａｌ．，ＣＤ４７ ｉｓ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｏｎ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ａｖｏｉｄ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ． Ｃｅｌｌ １３８：２７１－２８５（２００９）；Ｗｅｉｓｋｏｐｆ ｅｔ ａｌ．，Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ＳＩＲＰａｌｐｈａ ｖａｒｉａｎｔｓ ａｓ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｄｊｕｖａｎｔｓ ｔｏ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ． Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４１：８８－９１（２０１３）。ＣＤ４７遮断薬ならびにリツキシマブ及びトラスツズマブなどのＡＤＣＰ応答性抗体の前臨床的併用により、腫瘍の貪食作用が増強される。Ｋａｕｄｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＡＬＸ１４８ ｂｌｏｃｋｓ ＣＤ４７ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｉｎｎａｔｅ ａｎｄ ａｄａｐｔｉｖｅ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｉｍｍｕｎｉｔｙ ｗｉｔｈ ａ ｆａｖｏｒａｂｌｅ ｓａｆｅｔｙ ｐｒｏｆｉｌｅ． ＰＬｏＳ Ｏｎｅ １３：ｅ０２０１８３２（２０１８）；Ｃｈａｏ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉ－ＣＤ４７ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｓｙｎｅｒｇｉｚｅｓ ｗｉｔｈ ｒｉｔｕｘｉｍａｂ ｔｏ ｐｒｏｍｏｔｅ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ ａｎｄ ｅｒａｄｉｃａｔｅ ｎｏｎ－Ｈｏｄｇｋｉｎ ｌｙｍｐｈｏｍａ． Ｃｅｌｌ １４２：６９９－７１３（２０１０）；Ｃｈａｏ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｌｒｅｔｉｃｕｌｉｎ ｉｓ ｔｈｅ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｐｒｏ－ｐｈａｇｏｃｙｔｉｃ ｓｉｇｎａｌ ｏｎ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｈｕｍａｎ ｃａｎｃｅｒｓ ａｎｄ ｉｓ ｃｏｕｎｔｅｒｂａｌａｎｃｅｄ ｂｙ ＣＤ４７． Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ２：６３ｒａ９４（２０１０）；Ａｄｖａｎｉ ｅｔ ａｌ．，ＣＤ４７ Ｂｌｏｃｋａｄｅ ｂｙ Ｈｕ５Ｆ９－Ｇ４ ａｎｄ ｒｉｔｕｘｉｍａｂ ｉｎ ｎｏｎ－Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ ｌｙｍｐｈｏｍａ． Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３７９：１７１１－１７２１（２０１８）；Ｚｈａｏ ｅｔ ａｌ．，ＣＤ４７－ｓｉｇｎａｌ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎ－ａｌｐｈａ（ＳＩＲＰａｌｐｈａ）ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｆｏｒｍ ａ ｂａｒｒｉｅｒ ｆｏｒ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｏｎ． Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ １０８：１８３４２－１８３４７（２０１１）。ヒト化ＩｇＧ４アイソタイプＣＤ４７遮断ｍＡｂであるＨｕ５Ｆ９－Ｇ４をリツキシマブと併用投与した再発性または難治性のびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫または濾胞性リンパ腫の患者の少なくとも５０％は、客観的奏効を示す。Ａｄｖａｎｉ ｅｔ ａｌ．，ＣＤ４７ Ｂｌｏｃｋａｄｅ ｂｙ Ｈｕ５Ｆ９－Ｇ４ ａｎｄ ｒｉｔｕｘｉｍａｂ ｉｎ ｎｏｎ－Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ ｌｙｍｐｈｏｍａ． Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３７９：１７１１－１７２１（２０１８）。ＣＤ４７遮断により、免疫ネグレクト腫瘍における抗原提示が増強されるが（Ｔｓｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉ－ＣＤ４７ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｂｙ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｐｒｉｍｅｓ ａｎ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ Ｔ－ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅ． Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １１０：１１１０３－１１１０８（２０１３））、しかし、ＣＤ４７／ＳＩＲＰα遮断薬を単剤療法として、またはＰＤ－１／Ｌ１遮断抗体と併用して使用した場合には、散発的な臨床応答しか観察されていない。

【0039】

ＳＩＲＰαへのＣＤ４７結合の遮断は、標的抗体の抗体依存性細胞貪食作用（ＡＤＣＰ）を増強することにより、進行がんに対する有望な免疫治療戦略として注目されている。前臨床的には、ＣＤ４７／ＳＩＲＰα遮断により、マクロファージによる腫瘍細胞の貪食が増加し、樹状細胞によるＣＤ８＋Ｔ細胞への腫瘍抗原の交差提示が増強されることによって抗腫瘍活性が誘導されるが、これらのプロセスは両方とも、ＣＤ４０シグナル伝達によって増強される。本明細書では、中央Ｆｃドメインに隣接したＳＩＲＰα及びＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインを組み込んだ、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌと呼ばれる新規両側融合タンパク質を生成した。本明細書に示すように、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、ＣＤ４７及びＣＤ４０に高い親和性で結合し、Ｆｃ受容体架橋が存在しない状態でＣＤ４０シグナル伝達を活性化した。ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはカニクイザルにおいて、溶血、赤血球凝集、または血小板減少のエビデンスは観察されなかった。さらに、本明細書で示されているように、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、マウスＣＴ２６腫瘍モデルにおいてＣＤ４７遮断抗体及びＣＤ４０アゴニスト抗体よりも優れており、ＰＤ－１及びＣＴＬＡ４の免疫チェックポイント遮断と相乗効果を示した。ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌは、マクロファージ内のＩ型インターフェロン応答を活性化し、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏの両方でＡＤＣＰ応答性標的抗体の活性を増強した。これらのデータは、ＣＤ４７／ＳＩＲＰα阻害が腫瘍細胞の貪食作用を増強し得る一方で、ＣＤ４０を介したＩ型インターフェロン応答の活性化がマクロファージ媒介免疫とＴ細胞媒介免疫の間に橋渡しを行い、これにより、持続的な腫瘍制御及び拒絶が有意に増強されたことを示している。

【0040】

本発明のキメラタンパク質は、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインとＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインを含む。したがって、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインを含む第１のドメインを含み、これは、直接またはリンカーを介して、ＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインを含む第２のドメインに接続される。ドメインがアミノ末端からカルボキシ末端の配向に連結される場合、第１のドメインは、キメラタンパク質の「左」に位置し、かつ「外向き」となり、第２のドメインは、キメラタンパク質の「右」に位置し、かつ「外向き」となる。

【0041】

第１及び第２のドメインの他の構成、例えば、第１のドメインが外向きであり、かつ第２のドメインが内向きであること、第１のドメインが内向きであり、かつ第２のドメインが外向きであること、第１及び第２のドメインが両方とも内向きであることが想定される。両方のドメインが「内向き」である場合、キメラタンパク質は、ＣＤ４０Ｌの細胞外ドメイン、リンカー、及びＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインを含む、アミノ末端からカルボキシ末端への構成を有するであろう。そのような構成では、それは、キメラタンパク質の結合ドメインがその受容体／リガンドの一方または両方と結合することを可能にするために、本明細書の他の場所に記載されるように、キメラタンパク質が余分な「緩み」を含むことが必要であり得る。

【0042】

構築物は、３つの断片（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメイン、それに続くリンカー配列、それに続くＣＤ４０Ｌの細胞外ドメイン）をコードする核酸をベクター（プラスミド、ウイルス、またはその他）にクローニングすることによって生成でき、完全な配列のアミノ末端は、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインを含む分子の「左側」に対応しており、完全な配列のカルボキシ末端は、ＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインを含む分子の「右側」に対応する。いくつかの実施形態では、上記のように、他の構成の１つを有するキメラタンパク質の構築物は、生成される翻訳されたキメラタンパク質が所望の構成、例えば、二重の内向きのキメラタンパク質を有するように、３つの核酸を含むであろう。したがって、ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質を、そのように改変する。

【0043】

ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質
ある実施形態では、キメラタンパク質は、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）リガンドとヒトＣＤ４０受容体に同時に結合することができ、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）リガンドはＣＤ４７であり、ＣＤ４０Ｌ受容体はＣＤ４０である。

【0044】

キメラタンパク質は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、リンカーは、ジスルフィド結合を形成することが可能である少なくとも１つのシステイン残基を含む。

【0045】

本開示のキメラタンパク質は、そのリガンド／受容体と立体的に結合することが可能である第１のドメイン、及び／またはそのリガンド／受容体と立体的に結合することが可能である第２のドメインを有する。これは、細胞外ドメインのリガンド／受容体結合ドメインがそのリガンド／受容体の結合を立体的に妨げられないように、キメラタンパク質及び／または細胞外ドメイン（またはその一部）と残りのキメラタンパク質との間の物理的距離に十分な全体的な柔軟性があることを意味する。この柔軟性及び／または物理的距離（本明細書では「緩み」と称される）は通常、細胞外ドメイン（複数可）に存在し、通常はリンカーに存在し、及び／または通常はキメラタンパク質に（全体として）存在し得る。代替的にまたは追加的に、キメラタンパク質は、立体障害を回避するために必要な追加の緩みを提供する１つ以上の追加のアミノ酸配列（例えば、以下に記載される結合リンカー）または合成リンカー（例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）リンカー）を含むことによって修飾され得る。

【0046】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインのバリアントを含む。例として、このバリアントは、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）、例えばヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の既知のアミノ酸配列に対して、少なくとも約６０％、または少なくとも約６１％、または少なくとも約６２％、または少なくとも約６３％、または少なくとも約６４％、または少なくとも約６５％、または少なくとも約６６％、または少なくとも約６７％、または少なくとも約６８％、または少なくとも約６９％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約７１％、または少なくとも約７２％、または少なくとも約７３％、または少なくとも約７４％、または少なくとも約７５％、または少なくとも約７６％、または少なくとも約７７％、または少なくとも約７８％、または少なくとも約７９％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約８１％、または少なくとも約８２％、または少なくとも約８３％、または少なくとも約８４％、または少なくとも約８５％、または少なくとも約８６％、または少なくとも約８７％、または少なくとも約８８％、または少なくとも約８９％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約９１％、または少なくとも約９２％、または少なくとも約９３％、または少なくとも約９４％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有し得る。

【0047】

ある実施形態では、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインは、以下のアミノ酸配列を有する：
ＥＥＥＬＱＶＩＱＰＤＫＳＶＬＶＡＡＧＥＴＡＴＬＲＣＴＡＴＳＬＩＰＶＧＰＩＱＷＦＲＧＡＧＰＧＲＥＬＩＹＮＱＫＥＧＨＦＰＲＶＴＴＶＳＤＬＴＫＲＮＮＭＤＦＳＩＲＩＧＮＩＴＰＡＤＡＧＴＹＹＣＶＫＦＲＫＧＳＰＤＤＶＥＦＫＳＧＡＧＴＥＬＳＶＲＡＫＰＳＡＰＶＶＳＧＰＡＡＲＡＴＰＱＨＴＶＳＦＴＣＥＳＨＧＦＳＰＲＤＩＴＬＫＷＦＫＮＧＮＥＬＳＤＦＱＴＮＶＤＰＶＧＥＳＶＳＹＳＩＨＳＴＡＫＶＶＬＴＲＥＤＶＨＳＱＶＩＣＥＶＡＨＶＴＬＱＧＤＰＬＲＧＴＡＮＬＳＥＴＩＲＶＰＰＴＬＥＶＴＱＱＰＶＲＡＥＮＱＶＮＶＴＣＱＶＲＫＦＹＰＱＲＬＱＬＴＷＬＥＮＧＮＶＳＲＴＥＴＡＳＴＶＴＥＮＫＤＧＴＹＮＷＭＳＷＬＬＶＮＶＳＡＨＲＤＤＶＫＬＴＣＱＶＥＨＤＧＱＰＡＶＳＫＳＨＤＬＫＶＳＡＨＰＫＥＱＧＳＮＴＡＡＥＮＴＧＳＮＥＲＮＩＹ （配列番号５７）。

【0048】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインのバリアントを含む。例として、このバリアントは、配列番号５７に対して、少なくとも約６０％、または少なくとも約６１％、または少なくとも約６２％、または少なくとも約６３％、または少なくとも約６４％、または少なくとも約６５％、または少なくとも約６６％、または少なくとも約６７％、または少なくとも約６８％、または少なくとも約６９％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約７１％、または少なくとも約７２％、または少なくとも約７３％、または少なくとも約７４％、または少なくとも約７５％、または少なくとも約７６％、または少なくとも約７７％、または少なくとも約７８％、または少なくとも約７９％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約８１％、または少なくとも約８２％、または少なくとも約８３％、または少なくとも約８４％、または少なくとも約８５％、または少なくとも約８６％、または少なくとも約８７％、または少なくとも約８８％、または少なくとも約８９％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約９１％、または少なくとも約９２％、または少なくとも約９３％、または少なくとも約９４％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有し得る。

【0049】

ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９７％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。

【0050】

当業者は、例えば、以下の文献を参照してＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の既知のアミノ酸配列のバリアントを選択してもよい。Ｈａｔｈｅｒｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，“Ｐａｉｒｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｅｘｐｌａｉｎｅｄ ｂｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ｓｉｇｎａｌ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ａｌｏｎｅ ａｎｄ ｃｏｍｐｌｅｘｅｄ ｗｉｔｈ ＣＤ４７．”Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ ３１：２６６－２７７（２００８）；Ｈａｔｈｅｒｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，“Ｔｈｅ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ Ｓｉｇｎａｌ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｌｐｈａ（Ｓｉｒｐａｌｐｈａ）Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｒｅｖｅａｌｓ ａ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｆａｃｅ Ｒｅｍｉｎｉｓｃｅｎｔ ｏｆ ｔｈａｔ Ｕｓｅｄ ｂｙ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．” Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２８２：１４５６７（２００７）；Ｈａｔｈｅｒｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，“Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ Ｓｉｇｎａｌ－Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｌｐｈａ：Ａ Ｌｉｎｋ ｔｏ Ａｎｔｉｇｅｎ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ．” Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２８４：２６６１３（２００９）；Ｈａｔｈｅｒｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，“Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｈｕｍａｎ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ Ｓｉｇｎａｌ－Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｌｐｈａ Ｄｏ ｎｏｔ Ａｆｆｅｃｔ Ｂｉｎｄｉｎｇ ｔｏ ｉｔｓ Ｌｉｇａｎｄ Ｃｄ４７．” Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２８９：１００２４（２０１４）；Ｒｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，“Ａｎｔｉ－ＳＩＲＰ ａｌｐｈａ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ａｎｄ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ．” Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ １１４：Ｅ１０５７８－Ｅ１０５８５（２０１７）（各文献はその全体が参照により援用される）。

【0051】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、ＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインのバリアントを含む。例として、このバリアントは、ＣＤ４０Ｌ、例えばヒトＣＤ４０Ｌの既知のアミノ酸配列に対して、少なくとも約６０％、または少なくとも約６１％、または少なくとも約６２％、または少なくとも約６３％、または少なくとも約６４％、または少なくとも約６５％、または少なくとも約６６％、または少なくとも約６７％、または少なくとも約６８％、または少なくとも約６９％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約７１％、または少なくとも約７２％、または少なくとも約７３％、または少なくとも約７４％、または少なくとも約７５％、または少なくとも約７６％、または少なくとも約７７％、または少なくとも約７８％、または少なくとも約７９％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約８１％、または少なくとも約８２％、または少なくとも約８３％、または少なくとも約８４％、または少なくとも約８５％、または少なくとも約８６％、または少なくとも約８７％、または少なくとも約８８％、または少なくとも約８９％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約９１％、または少なくとも約９２％、または少なくとも約９３％、または少なくとも約９４％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有し得る。

【0052】

ある実施形態では、ＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインは、以下のアミノ酸配列を有する：
ＨＲＲＬＤＫＩＥＤＥＲＮＬＨＥＤＦＶＦＭＫＴＩＱＲＣＮＴＧＥＲＳＬＳＬＬＮＣＥＥＩＫＳＱＦＥＧＦＶＫＤＩＭＬＮＫＥＥＴＫＫＥＮＳＦＥＭＱＫＧＤＱＮＰＱＩＡＡＨＶＩＳＥＡＳＳＫＴＴＳＶＬＱＷＡＥＫＧＹＹＴＭＳＮＮＬＶＴＬＥＮＧＫＱＬＴＶＫＲＱＧＬＹＹＩＹＡＱＶＴＦＣＳＮＲＥＡＳＳＱＡＰＦＩＡＳＬＣＬＫＳＰＧＲＦＥＲＩＬＬＲＡＡＮＴＨＳＳＡＫＰＣＧＱＱＳＩＨＬＧＧＶＦＥＬＱＰＧＡＳＶＦＶＮＶＴＤＰＳＱＶＳＨＧＴＧＦＴＳＦＧＬＬＫＬ （配列番号５８）。

【0053】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、ＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインのバリアントを含む。例として、このバリアントは、配列番号５８に対して、少なくとも約６０％、または少なくとも約６１％、または少なくとも約６２％、または少なくとも約６３％、または少なくとも約６４％、または少なくとも約６５％、または少なくとも約６６％、または少なくとも約６７％、または少なくとも約６８％、または少なくとも約６９％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約７１％、または少なくとも約７２％、または少なくとも約７３％、または少なくとも約７４％、または少なくとも約７５％、または少なくとも約７６％、または少なくとも約７７％、または少なくとも約７８％、または少なくとも約７９％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約８１％、または少なくとも約８２％、または少なくとも約８３％、または少なくとも約８４％、または少なくとも約８５％、または少なくとも約８６％、または少なくとも約８７％、または少なくとも約８８％、または少なくとも約８９％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約９１％、または少なくとも約９２％、または少なくとも約９３％、または少なくとも約９４％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有し得る。

【0054】

ある実施形態では、キメラタンパク質の第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９７％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。

【0055】

当業者は、例えば、以下の文献を参照してＣＤ４０Ｌの既知のアミノ酸配列のバリアントを選択してもよい。Ｋａｒｐｕｓａｓ ｅｔ ａｌ．，“２ Ａ ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ａｎ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｆｒａｇｍｅｎｔ ｏｆ ｈｕｍａｎ ＣＤ４０ ｌｉｇａｎｄ．” Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ３：１０３１－１０３９（１９９５）；Ｋａｒｐｕｓａｓ ｅｔ ａｌ．，“Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ＣＤ４０ ｌｉｇａｎｄ ｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘ ｗｉｔｈ ｔｈｅ Ｆａｂ ｆｒａｇｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ ｈｕｍａｎｉｚｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｙ．” Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ９：３２１－３２９（２００１）；Ｓｉｌｖｉａｎ ｅｔ ａｌ．，“Ｓｍａｌｌ Ｍｏｌｅｃｕｌｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＴＮＦ Ｆａｍｉｌｙ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ＣＤ４０ Ｌｉｇａｎｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ａ Ｓｕｂｕｎｉｔ Ｆｒａｃｔｕｒｅ Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．” ＡＣＳ Ｃｈｅｍ Ｂｉｏｌ ６：６３６－６４７（２０１１）；Ａｎ ｅｔ ａｌ．，“Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｉｃ ａｎｄ ｍｕｔａｔｉｏｎａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ＣＤ４０－ＣＤ１５４ ｃｏｍｐｌｅｘ ａｎｄ ｉｔｓ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．” Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２８６：１１２２６－１１２３５（２０１１）；Ｋａｒｎｅｌｌ ｅｔ ａｌ．，“Ａ ＣＤ４０Ｌ－ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｒｅｄｕｃｅｓ ａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｄｉｓｅａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ．” Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ １１（２０１９）（各文献はその全体が参照により援用される）。

【0056】

ある実施形態では、キメラタンパク質のリンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質のリンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質のリンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９７％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質のリンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質のリンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質のリンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。

【0057】

ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（１）配列番号５７と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む第１のドメイン、（ｂ）配列番号５８と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む第２のドメイン、及び（ｃ）配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含むリンカーを含む。

【0058】

ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（１）配列番号５７と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む第１のドメイン、（ｂ）配列番号５８と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む第２のドメイン、及び（ｃ）配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むリンカーを含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（１）配列番号５７と少なくとも９７％同一のアミノ酸配列を含む第１のドメイン、（ｂ）配列番号５８と少なくとも９７％同一のアミノ酸配列を含む第２のドメイン、及び（ｃ）配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９７％同一のアミノ酸配列を含むリンカーを含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（１）配列番号５７と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む第１のドメイン、（ｂ）配列番号５８と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む第２のドメイン、及び（ｃ）配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含むリンカーを含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（１）配列番号５７と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む第１のドメイン、（ｂ）配列番号５８と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む第２のドメイン、及び（ｃ）配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含むリンカーを含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（１）配列番号５７のアミノ酸配列を含む第１のドメイン、（ｂ）配列番号５８のアミノ酸配列を含む第２のドメイン、及び（ｃ）配列番号１、配列番号２、または配列番号３と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むリンカーを含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、（１）配列番号５７と同一のアミノ酸配列を含む第１のドメイン、（ｂ）配列番号５８と同一のアミノ酸配列を含む第２のドメイン、及び（ｃ）配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含むリンカーを含む。

【0059】

ある実施形態では、本開示のＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、以下のアミノ酸配列を有する（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインを太字で示し、ＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインを下線で示し、Ｆｃドメインを斜体で示す：

【化1】

【0060】

ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（ＳＬ－１７２１５４）の７９２アミノ酸配列（リーダー配列は含まない）を上に示す。ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、オリゴマー形態の特性として存在する。アミノ酸配列には１７個のシステインがあり、そのうち８個はおそらくジスルフィド対である。Ｎ結合型及びＯ結合型グリコシル化の両方が同定されている。

【0061】

ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個の潜在的なＮグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも２つの潜在的なＮグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも４つの潜在的なＮグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも６つの潜在的なＮグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも８つの潜在的なＮグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも１０個の潜在的なＮグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、または８つの潜在的なＯグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも２つの潜在的なＯグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも４つの潜在的なＯグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも６つの潜在的なＯグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも８つの潜在的なＯグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも２つの潜在的なＮグリコシル化部位、及び少なくとも２つの潜在的なＯグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも４つの潜在的なＮグリコシル化部位、及び少なくとも４つの潜在的なＯグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも６つの潜在的なＮグリコシル化部位、及び少なくとも６つの潜在的なＯグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも８つの潜在的なＮグリコシル化部位、及び少なくとも８つの潜在的なＯグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、少なくとも１０個の潜在的なＮグリコシル化部位、及び少なくとも８つの潜在的なＯグリコシル化部位を含む。ある実施形態では、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞において発現するキメラタンパク質はグリコシル化されている。

【0062】

ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質には１７個のシステインが存在する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質はジスルフィド結合を有さない。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、少なくとも１つ、または少なくとも２つ、または少なくとも３つ、または少なくとも４つ、または少なくとも５つ、または少なくとも６つ、または少なくとも７つ、または少なくとも８つ、または少なくとも９つ、または少なくとも１０個のジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、少なくとも１つ、または少なくとも２つの鎖間ジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、少なくとも１つ、または少なくとも２つ、または少なくとも３つ、または少なくとも４つ、または少なくとも５つ、または少なくとも６つ、または少なくとも７つ、または８つの鎖間ジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、Ｃ３５０＝Ｃ３５０鎖間ジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、Ｃ３５３＝Ｃ３５３鎖間ジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、Ｃ１５３＝Ｃ１５３鎖間ジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、Ｃ２５＝Ｃ９１ジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、Ｃ１４０＝Ｃ１９８ジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、Ｃ２４３＝Ｃ３０１ジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、Ｃ３８５＝Ｃ４４５ジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、Ｃ４９１＝Ｃ５４９ジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、Ｃ６０３＝Ｃ６１５ジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、Ｃ７０９＝Ｃ７２５ジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、Ｃ１４０＝Ｃ２４３＝Ｃ７０９／Ｃ７２５スクランブルジスルフィド結合を有する。いくつかの実施形態では、ＳＬ－１７２１５４キメラタンパク質は、Ｃ６１５（鎖１）＝Ｃ６１５（鎖２）のスクランブルジスルフィド結合を有する。

【0063】

いくつかの実施形態では、本開示のＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、以下のヌクレオチド配列によってコードされる（リーダー配列を太字の下線付きフォントで示す）：

【化2-1】

【化2-2】

いくつかの実施形態では、配列番号６０は、以下のアミノ酸配列を有する本開示のＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質の前駆体をコードする（リーダー配列を斜体フォントで示す）：

【化3】

配列番号５９のキメラタンパク質（本明細書ではＳＬ－１７２１５４とも呼ばれる）は、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）（ＰＤＣＤ１，ＣＤ２７２ａ）の細胞外ドメイン、ヒト免疫グロブリン定常γ４（阻害性受容体ＳＨＰＳ－１，ＩｇＧ４）のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３領域を含む中央ドメイン、及びヒトＣＤ４０Ｌ（ＴＮＦＳＦ５，ＴＲＡＰ，ＣＤ１５４）の細胞外ドメインを含む組換え融合糖タンパク質である。ＳＬ－１７２１５４の線形構成はＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌである。

【0064】

配列番号５９の単量体キメラタンパク質の予測分子量は８８．１ｋＤａである。配列番号５９のグリコシル化単量体キメラタンパク質の予測分子量は約１１５ｋＤａである。

【0065】

本明細書に開示されるキメラタンパク質、例えばＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）の二面性は、腫瘍微小環境（ＴＭＥ）内の重要な免疫抑制経路の１つであるＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－ＣＤ４７マクロファージチェックポイントを遮断するように設計されている。

【0066】

腫瘍細胞は、細胞表面にＣＤ４７を発現している場合があり、これはマクロファージが発現するＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）に結合して腫瘍細胞の貪食を抑制することができる。したがって、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）は、腫瘍の表面に発現するＣＤ４７に結合することができ、本明細書に開示されるＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質のＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）ドメインは、ＣＤ４７の競合的阻害を提供し、ＣＤ４７阻害シグナルを、機能的に三量体化／六量体化されたＣＤ４０Ｌに置き換えるように意図されており、その結果、入ってくるＴ細胞はＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）相互作用による抑制ではなく、そのＣＤ４０受容体を介した結合によって共刺激を受ける。言い換えれば、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）とＣＤ４０Ｌの細胞外ドメイン（ＥＣＤ）は物理的に相互に連結し、ＴＭＥに局在するため、腫瘍浸潤Ｔ細胞は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を介して腫瘍抗原を認識すると同時に共刺激を受ける。重要な点は、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）とＣＤ４０ＬのＥＣＤが物理的に相互に連結し、ＴＭＥに局在するため、腫瘍浸潤Ｔ細胞は、Ｔ細胞受容体を介して腫瘍抗原を認識すると同時に共刺激を受けるということである。これらを組み合わせることにより、阻害性ＣＤ４７シグナルが共刺激性ＣＤ４０Ｌシグナルに置き換えられ、Ｔ細胞の抗腫瘍活性が増強されるだろう。

【0067】

ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）を含む、本明細書に開示されるキメラタンパク質の３つの構成成分は、二量体化またはオリゴマー化を促進するユニークな特性を有する。ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインは通常は単量体として存在し、高次のホモマー複合体を形成することは知られていない。中央のＦｃドメインは、ジスルフィド結合して二量体構造を形成することができるシステイン残基を含む。ある実施形態では、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）などの本明細書に開示されるキメラタンパク質は、Ｆａｂアームの交換を防ぐために、Ｆｃドメインのヒンジ領域にＳ２２８Ｐ変異を含む。ＣＤ４０Ｌドメインは、ホモ三量体複合体を形成することが知られており、これは非共有結合の静電相互作用によって安定化される。ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）などの本明細書に開示されるキメラタンパク質は、産生細胞株によって連続した単量体タンパク質として発現されるが、結果として生じる単量体タンパク質は、ＣＤ４０Ｌのジスルフィド及び電荷に基づく相互作用（三量体を形成する）及びこれらの引力の複合影響に基づいて高次種に自己組織化し、六量体（三量体の二量体）となる。ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）の大部分（＞８０％）は、同様の活性を有する六量体及び三量体形態で構成される。重要な点は、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）は、六量体と三量体からなり、Ｆｃ受容体または任意の他の架橋剤による架橋がなくてもＣＤ４０シグナル伝達を刺激することである。ジスルフィド（Ｆｃ）及び電荷ベース（ＣＤ４０Ｌ）の相互作用に基づく、単量体及び様々なオリゴマー状態のＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）の予測される三次構造は、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）六量体（上の２つの画像）及びＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）三量体（下の２つの画像）の電子顕微鏡による可視化を示す。したがって、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）は、三量体／六量体を形成し、架橋を必要とせずにＣＤ４０を活性化する。モノクローナル抗体とは異なり、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）の機能活性にはＦｃ受容体の架橋が必要ないことは注目に値する。

【0068】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質のバリアント（例えば、配列番号５９または配列番号６１）を含む。例として、このバリアントは、配列番号５９または配列番号６１に対して、少なくとも約６０％、または少なくとも約６１％、または少なくとも約６２％、または少なくとも約６３％、または少なくとも約６４％、または少なくとも約６５％、または少なくとも約６６％、または少なくとも約６７％、または少なくとも約６８％、または少なくとも約６９％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約７１％、または少なくとも約７２％、または少なくとも約７３％、または少なくとも約７４％、または少なくとも約７５％、または少なくとも約７６％、または少なくとも約７７％、または少なくとも約７８％、または少なくとも約７９％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約８１％、または少なくとも約８２％、または少なくとも約８３％、または少なくとも約８４％、または少なくとも約８５％、または少なくとも約８６％、または少なくとも約８７％、または少なくとも約８８％、または少なくとも約８９％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約９１％、または少なくとも約９２％、または少なくとも約９３％、または少なくとも約９４％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％、または少なくとも約９９．２％、または少なくとも約９９．４％、または少なくとも約９９．６％、または少なくとも約９９．８％の配列同一性を有し得る。

【0069】

ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９７％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。

【0070】

ある実施形態では、第１のドメインは、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）リガンドに結合することができる。

【0071】

ある実施形態では、第１のドメインは、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインの実質的にすべてを含む。

【0072】

ある実施形態では、第２のドメインは、ＣＤ４０受容体に結合することができる。

【0073】

ある実施形態では、第２のドメインは、実質的にＣＤ４０Ｌの細胞外ドメイン全体を含む。

【0074】

ある実施形態では、リンカーは、ＩｇＧ４、例えば、ヒトＩｇＧ４に由来するヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。

【0075】

ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９７％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。

【0076】

ある実施形態では、第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９７％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。

【0077】

ある実施形態では、第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９７％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。

【0078】

ある実施形態では、（ａ）第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列を含み、（ｂ）第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列を含み、（ｃ）リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。

【0079】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５及び／または配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列をさらに含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５及び／または配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列をさらに含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５及び／または配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列をさらに含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５及び／または配列番号７のアミノ酸配列をさらに含む。

【0080】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも約９５％同一のアミノ酸配列、例えば、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも約９８％同一のアミノ酸配列、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも約９９．２％同一のアミノ酸配列、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも約９９．４％同一のアミノ酸配列、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも約９９．６％同一のアミノ酸配列、または配列番号５９または配列番号６１と少なくとも約９９．８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列を含む。

【0081】

任意の本明細書に開示される態様及び実施形態では、キメラタンパク質は、本明細書に開示されるタンパク質配列のうちのいずれかと比較して１つ以上のアミノ酸変異を有するアミノ酸配列を含み得る。ある実施形態では、１つ以上のアミノ酸変異は独立して、置換、挿入、欠失、及び短縮から選択され得る。

【0082】

ある実施形態では、アミノ酸変異は、アミノ酸置換であり、保存的及び／または非保存的置換を含み得る。「保存的置換」は、例えば、関与するアミノ酸残基の極性、電荷、サイズ、溶解度、疎水性、親水性、及び／または両親媒性の性質における類似性に基づいて行われ得る。２０個の天然に存在するアミノ酸は、（１）疎水性：Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ；Ａｓｎ、Ｇｌｎ；（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；（５）鎖配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；及び（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅの６つの標準的なアミノ酸グループに分類できる。本明細書で使用される場合、「保存的置換」とは、上記の６つの標準的なアミノ酸グループの同じグループ内に列挙される別のアミノ酸によるアミノ酸の交換として定義される。例えば、ＧｌｕによるＡｓｐの交換は、そのように改変されたポリペプチドに１つの負電荷を保持する。さらに、グリシンとプロリンは、α－ヘリックスを破壊するそれらの能力に基づいて互いに置換し得る。本明細書で使用される場合、「非保存的置換」は、上記の６つの標準的なアミノ酸グループ（１）～（６）の異なるグループに列挙される別のアミノ酸によるアミノ酸の交換として定義される。

【0083】

ある実施形態では、置換はまた、非古典的なアミノ酸も含み得る（例えば、セレノシステイン、ピロリシン、Ｎ－ホルミルメチオニンβ－アラニン、ＧＡＢＡ及びδ－アミノレブリン酸、４－アミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）、一般的なアミノ酸のＤ－異性体、２，４－ジアミノ酪酸、α－アミノイソ酪酸、４－アミノ酪酸、Ａｂｕ、２－アミノ酪酸、γ－Ａｂｕ、ε－Ａｈｘ、６－アミノヘキサン酸、Ａｉｂ、２－アミノイソ酪酸、３－アミノプロピオン酸、オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、ヒドロキシプロリン、サルコスメ、シトルリン、ホモシトルリン、システイン酸、ｔ－ブチルグリシン、ｔ－ブチルアラニン、フェニルグリシン、シクロヘキシルアラニン、β－アラニン、フルオロアミノ酸、デザイナーアミノ酸、例えば、βメチルアミノ酸、Ｃ α－メチルアミノ酸、Ｎ α－メチルアミノ酸、及び一般的なアミノ酸類似体）。

【0084】

コドン縮重を考慮に入れることを含めて、遺伝暗号を参照することによって、キメラタンパク質のヌクレオチド配列に変異を作製することもできる。

【0085】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、ヒトリガンド（複数可）／受容体（複数可）と結合することが可能である。

【0086】

ある実施形態では、キメラタンパク質の各細胞外ドメイン（またはそのバリアント）は、約１ｎＭ～約５ｎＭ、例えば、約１ｎＭ、約１．５ｎＭ、約２ｎＭ、約２．５ｎＭ、約３ｎＭ、約３．５ｎＭ、約４ｎＭ、約４．５ｎＭ、または約５ｎＭのＫ_Ｄでその同族の受容体またはリガンドと結合する。ある実施形態では、キメラタンパク質は、約５ｎＭ～約１５ｎＭ、例えば、約５ｎＭ、約５．５ｎＭ、約６ｎＭ、約６．５ｎＭ、約７ｎＭ、約７．５ｎＭ、約８ｎＭ、約８．５ｎＭ、約９ｎＭ、約９．５ｎＭ、約１０ｎＭ、約１０．５ｎＭ、約１１ｎＭ、約１１．５ｎＭ、約１２ｎＭ、約１２．５ｎＭ、約１３ｎＭ、約１３．５ｎＭ、約１４ｎＭ、約１４．５ｎＭ、または約１５ｎＭのＫ_Ｄで同族の受容体またはリガンドと結合する。

【0087】

ある実施形態では、キメラタンパク質の各細胞外ドメイン（またはそのバリアント）は、約１μＭ、約９００ｎＭ、約８００ｎＭ、約７００ｎＭ、約６００ｎＭ、約５００ｎＭ、約４００ｎＭ、約３００ｎＭ、約２００ｎＭ、約１５０ｎＭ、約１３０ｎＭ、約１００ｎＭ、約９０ｎＭ、約８０ｎＭ、約７０ｎＭ、約６０ｎＭ、約５５ｎＭ、約５０ｎＭ、約４５ｎＭ、約４０ｎＭ、約３５ｎＭ、約３０ｎＭ、約２５ｎＭ、約２０ｎＭ、約１５ｎＭ、約１０ｎＭ、または約５ｎＭ、または約１ｎＭ未満（例えば、表面プラズモン共鳴または生体層干渉法によって測定される）のＫ_Ｄでその同族の受容体またはリガンドと結合する。

【0088】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、約１ｎＭ～約５ｎＭ、例えば、約１ｎＭ、約１．５ｎＭ、約２ｎＭ、約２．５ｎＭ、約３ｎＭ、約３．５ｎＭ、約４ｎＭ、約４．５ｎＭ、または約５ｎＭのＫ_ＤでヒトＣＤ４７と結合する。ある実施形態では、キメラタンパク質は、約３ｎＭ、約２ｎＭ、約１ｎＭ、約９００ｐＭ、約８００ｐＭ、約７００ｐＭ、約６００ｐＭ、約５００ｐＭ、約４００ｐＭ、約３００ｐＭ、約２００ｐＭ、約１００ｐＭ、約９０ｐＭ、約８０ｐＭ、約７０ｐＭ、約６０ｐＭ、約５５ｐＭ、約５０ｐＭ、約４５ｐＭ、約４０ｐＭ、約３５ｐＭ、約３０ｐＭ、約２５ｐＭ、約２０ｐＭ、約１５ｐＭ、または約１０ｐＭ、または約１ｐＭ未満（例えば、表面プラズモン共鳴または生体層干渉法によって測定される）のＫ_ＤでヒトＣＤ４７と結合する。

【0089】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、約１ｎＭ、約９００ｐＭ、約８００ｐＭ、約７００ｐＭ、約６００ｐＭ、約５００ｐＭ、約４００ｐＭ、約３００ｐＭ、約２００ｐＭ、約１００ｐＭ、約９０ｐＭ、約８０ｐＭ、約７０ｐＭ、約６０ｐＭ、約５５ｐＭ、約５０ｐＭ、約４５ｐＭ、約４０ｐＭ、約３５ｐＭ、約３０ｐＭ、約２５ｐＭ、約２０ｐＭ、約１５ｐＭ、または約１０ｐＭ、または約１ｐＭ未満（例えば、表面プラズモン共鳴または生体層干渉法によって測定される）のＫ_ＤでヒトＣＤ４０と結合する。

【0090】

本明細書で使用される場合、細胞外ドメインのバリアントは、天然の細胞外ドメインの受容体／リガンドと結合することが可能である。例えば、バリアントは、その受容体／リガンドとのその結合親和性に影響を及ぼさない細胞外ドメインの１つ以上の変異を含み得、代替的に、細胞外ドメインにおける１つ以上の変異は、受容体／リガンドに対する結合親和性を改善し得るか、または細胞外ドメインにおける１つ以上の変異は、受容体／リガンドに対する結合親和性を低下させ得るが、結合を完全に排除しない。ある実施形態では、１つ以上の変異は、細胞外ドメインがその受容体／リガンドと相互作用する結合ポケットの外側に位置する。ある実施形態では、１つ以上の変異は、変異が結合を完全に排除しない限り、細胞外ドメインがその受容体／リガンドと相互作用する結合ポケットの内側に位置する。受容体－リガンド結合に関する当業者の知識及び当技術分野の知識に基づいて、どの変異が結合を可能にし、どれが結合を排除するかを理解するであろう。

【0091】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、増強された安定性及びタンパク質半減期を有する。

【0092】

本開示のキメラタンパク質は、２つを超える細胞外ドメインを含み得る。例えば、キメラタンパク質は、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０個、またはそれ以上の細胞外ドメインを含み得る。本明細書に開示されるように、第２の細胞外ドメインは、リンカーを介して第３の細胞外ドメインから分離され得る。代替的に、第２の細胞外ドメインは、第３の細胞外ドメインと直接的に連結され得る（例えば、ペプチド結合を介して）。ある実施形態では、本明細書に開示されるように、キメラタンパク質は、直接的に連結される細胞外ドメイン及びリンカーを介して間接的に連結される細胞外ドメインを含む。

【0093】

リンカー
ある実施形態では、キメラタンパク質は、リンカーを含む。

【0094】

ある実施形態では、リンカーは、ジスルフィド結合を形成することが可能である少なくとも１つのシステイン残基を含む。少なくとも１つのシステイン残基は、１対（またはそれ以上）のキメラタンパク質の間にジスルフィド結合を形成することができる。理論に拘束されることを望まないが、そのようなジスルフィド結合形成は、キメラタンパク質の有用な多量体状態が維持される要因となる。これにより、キメラタンパク質の効率的な産生が可能となり、それにより、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏで所望される活性が得られる。

【0095】

本開示のキメラタンパク質では、リンカーは、柔軟なアミノ酸配列、ＩｇＧヒンジ領域、または抗体配列から選択されるポリペプチドである。

【0096】

ある実施形態では、リンカーは、天然のマルチドメインタンパク質に由来するか、または、例えば、Ｃｈｉｃｈｉｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉ．２２（２）：１５３－１６７（２０１３）；Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ．６５（１０）：１３５７－１３６９（２０１３）（その全内容は、参照により本明細書に援用される）に記載されるような経験的なリンカーである。ある実施形態では、Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ． ６５（１０）：１３５７－１３６９（２０１３）；及びＣｒａｓｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．１３（５）：３０９－３１２（２０００）（その全内容は、参照により本明細書に援用される）に記載されているようなリンカー設計データベース及びコンピュータプログラムを使用してリンカーを設計してよい。

【0097】

ある実施形態では、リンカーは、ポリペプチドを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、約５００アミノ酸長、約４５０アミノ酸長、約４００アミノ酸長、約３５０アミノ酸長、約３００アミノ酸長、約２５０アミノ酸長、約２００アミノ酸長、約１５０アミノ酸長、または約１００アミノ酸長未満である。例えば、リンカーは、約１００、約９５、約９０、約８５、約８０、約７５、約７０、約６５、約６０、約５５、約５０、約４５、約４０、約３５、約３０、約２５、約２０、約１９、約１８、約１７、約１６、約１５、約１４、約１３、約１２、約１１、約１０、約９、約８、約７、約６、約５、約４、約３、または約２アミノ酸長未満であり得る。

【0098】

ある実施形態では、リンカーは、柔軟性である。

【0099】

ある実施形態では、リンカーは、剛性である。

【0100】

ある実施形態では、リンカーは、実質的にグリシン及びセリン残基からなる（例えば、約３０％、または約４０％、または約５０％、または約６０％、または約７０％、または約８０％、または約９０％、または約９５％、または約９７％、または約９８％、または約９９％、または約１００％のグリシン及びセリン）。

【0101】

ある実施形態では、リンカーは、抗体（例えば、サブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４、ならびにＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）を含むＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥ）のヒンジ領域を含む。ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥクラス抗体に見られるヒンジ領域は、柔軟なスペーサーとして機能し、Ｆａｂ部分が空間内を自由に移動することを可能とする。定常領域とは対照的に、ヒンジドメインは、構造的に多様であり、免疫グロブリンクラス及びサブクラス間で配列及び長さの両方が異なる。例えば、ヒンジ領域の長さ及び可塑性は、ＩｇＧサブクラス間で異なる。ＩｇＧ１のヒンジ領域はアミノ酸２１６～２３１を包括し、自由に可塑性であるため、Ｆａｂフラグメントはその対称軸を中心に回転し、２つの重鎖間ジスルフィド架橋の第１の中心にある球内を移動し得る。ＩｇＧ２は、ＩｇＧ１よりも短いヒンジを有し、１２個のアミノ酸残基及び４個のジスルフィド架橋を有する。ＩｇＧ２のヒンジ領域は、グリシン残基を欠いており、比較的短く、追加の重鎖間ジスルフィド架橋によって安定化された剛性のポリプロリン二重らせんを含む。これらの特性は、ＩｇＧ２分子の可塑性を制限する。ＩｇＧ３は、６２個のアミノ酸（２１個のプロリン及び１１個のシステインを含む）を含み、可塑性がないポリプロリン二重らせんを形成する、その固有の拡張ヒンジ領域（ＩｇＧ１ヒンジの約４倍の長さ）が他のサブクラスと異なる。ＩｇＧ３では、Ｆａｂフラグメントは、Ｆｃフラグメントから比較的離れており、分子の可塑性が高まる。ＩｇＧ３における細長いヒンジは、他のサブクラスと比較してその高分子量の原因でもある。ＩｇＧ４のヒンジ領域は、ＩｇＧ１のヒンジ領域よりも短く、その可塑性は、ＩｇＧ１及びＩｇＧ２の中間である。ヒンジ領域の柔軟性は、ＩｇＧ３＞ＩｇＧ１＞ＩｇＧ４＞ＩｇＧ２の順に減少すると報告されている。ある実施形態では、リンカーは、ヒトＩｇＧ４に由来し、二量体形成（Ｓ２２８Ｐを含む）またはＦｃＲｎ結合を増強するための１つ以上の変異を含み得る。

【0102】

結晶学的研究によれば、免疫グロブリンヒンジ領域は、機能的に、上部ヒンジ領域、コア領域、及び下部ヒンジ領域の３つの領域にさらに細分化され得る。Ｓｈｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ １３０：８７（１９９２）を参照されたい。上部ヒンジ領域には、Ｃ_Ｈ１のカルボキシル末端から、動きを制限するヒンジにおける第１の残基、通常は２つの重鎖間に鎖間ジスルフィド結合を形成する第１のシステイン残基までのアミノ酸が含まれる。上部ヒンジ領域の長さは、抗体のセグメントの可塑性と相関する。コアヒンジ領域には、重鎖間ジスルフィド架橋が含まれ、下部ヒンジ領域は、Ｃ_Ｈ２ドメインのアミノ末端と結合し、Ｃ_Ｈ２の残基が含まれる。同上。野生型ヒトＩｇＧ１のコアヒンジ領域は、配列ＣＰＰＣ（配列番号２４）を含み、これは、ジスルフィド結合形成によって二量体化されると、回転軸として作用すると考えられる環状オクタペプチドをもたらし、したがって柔軟性が与えられる。ある実施形態では、本発明のリンカーは、任意の抗体（例えば、サブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４、ならびにＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）を含むＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥ）の上部ヒンジ領域、コア領域、及び下部ヒンジ領域のうちの１つ、２つ、または３つを含む。ヒンジ領域はまた、１つ以上のグリコシル化部位を含み得、これは、炭水化物付着のためのいくつかの構造的に異なる種類の部位を含む。例えば、ＩｇＡ１は、ヒンジ領域の１７個のアミノ酸セグメント内に５つのグリコシル化部位を含み、分泌型免疫グロブリンにとって有利な特性と考えられる、腸のプロテアーゼに対するヒンジ領域ポリペプチドの抵抗性を付与する。ある実施形態では、本開示のリンカーは、１つ以上のグリコシル化部位を含む。

【0103】

ある実施形態では、リンカーは、抗体（例えば、サブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４、ならびにＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）を含むＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥ）のＦｃドメインを含む。

【0104】

本開示のキメラタンパク質では、リンカーは、ＩｇＧ４に由来するヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。ある実施形態では、リンカーは、ヒトＩｇＧ４に由来するヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１～配列番号３のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一であるアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１～配列番号３のいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列（例えば、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一の）を含む。ある実施形態では、リンカーは、１つ以上の結合リンカーを含み、そのような結合リンカーは、独立して配列番号４～５０（またはそのバリアント）から選択される。ある実施形態では、リンカーは、２つ以上の結合リンカーを含み、各結合リンカーは独立して、配列番号４～５０（またはそのバリアント）から選択され、一方の結合リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインに対してＮ末端であり、他方の結合リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインに対してＣ末端である。

【0105】

ある実施形態では、リンカーは、ヒトＩｇＧ１抗体に由来するヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。ある実施形態では、Ｆｃドメインは、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対して増加した親和性及び増強した結合を示す。ある実施形態では、Ｆｃドメインは、ＦｃＲｎに対する親和性を増加させ、ＦｃＲｎとの結合を増強する１つ以上の変異を含む。理論に拘束されることを望まないが、ＦｃＲｎに対する親和性の増大及び結合の増強は、本発明のキメラタンパク質のｉｎ ｖｉｖｏでの半減期を増大させると考えられる。

【0106】

ある実施形態では、リンカーにおけるＦｃドメインは、アミノ酸残基２５０、２５２、２５４、２５６、３０８、３０９、３１１、４１６、４２８、４３３、もしくは４３４（参照により本明細書に明示的に援用される、Ｋａｂａｔ，ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）の場合と同様に、Ｋａｂａｔの番号付けに従って）、またはそれらの同等物での１つ以上のアミノ酸置換を含む。ある実施形態では、アミノ酸残基２５０でのアミノ酸置換は、グルタミンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基２５２でのアミノ酸置換は、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、またはスレオニンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基２５４でのアミノ酸置換は、スレオニンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基２５６でのアミノ酸置換は、セリン、アルギニン、グルタミン、グルタミン酸、アスパラギン酸、またはスレオニンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基３０８でのアミノ酸置換は、スレオニンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基３０９でのアミノ酸置換は、プロリンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基３１１でのアミノ酸置換は、セリンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基３８５でのアミノ酸置換は、アルギニン、アスパラギン酸、セリン、スレオニン、ヒスチジン、リジン、アラニン、またはグリシンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基３８６でのアミノ酸置換は、スレオニン、プロリン、アスパラギン酸、セリン、リジン、アルギニン、イソロイシン、またはメチオニンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基３８７でのアミノ酸置換は、アルギニン、プロリン、ヒスチジン、セリン、スレオニン、またはアラニンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基３８９でのアミノ酸置換は、プロリン、セリン、またはアスパラギンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基４１６でのアミノ酸置換は、セリンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基４２８でのアミノ酸置換は、ロイシンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基４３３でのアミノ酸置換は、アルギニン、セリン、イソロイシン、プロリン、またはグルタミンによる置換である。ある実施形態では、アミノ酸残基４３４でのアミノ酸置換は、ヒスチジン、フェニルアラニン、またはチロシンによる置換である。

【0107】

ある実施形態では、Ｆｃドメインリンカー（例えば、ＩｇＧ定常領域を含む）は、アミノ酸残基２５２、２５４、２５６、４３３、４３４、または４３６（参照により本明細書に明示的に組み込まれる、Ｋａｂａｔ，ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）の場合と同様に、Ｋａｂａｔの番号付けに従って）での置換などの１つ以上の変異を含む。ある実施形態では、ＩｇＧ定常領域は、トリプルＭ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ変異またはＹＴＥ変異を含む。ある実施形態では、ＩｇＧ定常領域は、トリプルＨ４３３Ｋ／Ｎ４３４Ｆ／Ｙ４３６Ｈ変異またはＫＦＨ変異を含む。ある実施形態では、ＩｇＧ定常領域は、ＹＴＥ及びＫＦＨ変異の組み合わせを含む。

【0108】

ある実施形態では、リンカーは、アミノ酸残基２５０、２５３、３０７、３１０、３８０、４２８、４３３、４３４、及び４３５（参照により本明細書に明示的に組み込まれる、Ｋａｂａｔ，ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）の場合と同様に、Ｋａｂａｔの番号付けに従って）での１つ以上の変異を含むＩｇＧ定常領域を含む。例示的な変異には、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、Ｉ２５３Ａ、Ｈ３１０Ａ、Ｍ４２８Ｌ、Ｈ４３３Ｋ、Ｎ４３４Ａ、Ｎ４３４Ｆ、Ｎ４３４Ｓ、及びＨ４３５Ａが含まれる。ある実施形態では、ＩｇＧ定常領域は、Ｍ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓ変異またはＬＳ変異を含む。ある実施形態では、ＩｇＧ定常領域は、Ｔ２５０Ｑ／Ｍ４２８Ｌ変異またはＱＬ変異を含む。ある実施形態では、ＩｇＧ定常領域は、Ｎ４３４Ａ変異を含む。ある実施形態では、ＩｇＧ定常領域は、Ｔ３０７Ａ／Ｅ３８０Ａ／Ｎ４３４Ａ変異またはＡＡＡ変異を含む。ある実施形態では、ＩｇＧ定常領域は、Ｉ２５３Ａ／Ｈ３１０Ａ／Ｈ４３５Ａ変異またはＩＨＨ変異を含む。ある実施形態では、ＩｇＧ定常領域は、Ｈ４３３Ｋ／Ｎ４３４Ｆ変異を含む。ある実施形態では、ＩｇＧ定常領域は、Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ及びＨ４３３Ｋ／Ｎ４３４Ｆ変異の組み合わせを含む。

【0109】

ＩｇＧ定常領域における追加の例示的な変異は、例えば、Ｒｏｂｂｉｅ，ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ５７（１２）：６１４７－６１５３（２０１３）；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２８１（３３）：２３５１４－２４（２００６）；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １６９：５１７１－８０（２００２）；Ｋｏ ｅｔ ａｌ． Ｎａｔｕｒｅ ５１４：６４２－６４５（２０１４）；Ｇｒｅｖｙｓ ｅｔ ａｌ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １９４（１１）：５４９７－５０８（２０１５）、及び米国特許第７，０８３，７８４号に記載されており、その全内容は参照により本明細書に援用される。

【0110】

例示的なＦｃ安定化変異体は、Ｓ２２８Ｐである。例示的なＦｃ半減期延長変異体は、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ、Ｖ３０８Ｔ、Ｌ３０９Ｐ、及びＱ３１１Ｓであり、本発明のリンカーは、これらの変異体の１つ、２つ、３つ、４つ、または５つを含み得る。

【0111】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、高い親和性でＦｃＲｎと結合する。ある実施形態では、キメラタンパク質は、約１ｎＭ～約８０ｎＭのＫ_ＤでＦｃＲｎと結合し得る。例えば、キメラタンパク質は、約１ｎＭ、約２ｎＭ、約３ｎＭ、約４ｎＭ、約５ｎＭ、約６ｎＭ、約７ｎＭ、約８ｎＭ、約９ｎＭ、約１０ｎＭ、約１５ｎＭ、約２０ｎＭ、約２５ｎＭ、約３０ｎＭ、約３５ｎＭ、約４０ｎＭ、約４５ｎＭ、約５０ｎＭ、約５５ｎＭ、約６０ｎＭ、約６５ｎＭ、約７０ｎＭ、約７１ｎＭ、約７２ｎＭ、約７３ｎＭ、約７４ｎＭ、約７５ｎＭ、約７６ｎＭ、約７７ｎＭ、約７８ｎＭ、約７９ｎＭ、または約８０ｎＭのＫ_ＤでＦｃＲｎと結合し得る。ある実施形態では、キメラタンパク質は、約９ｎＭのＫ_ＤでＦｃＲｎと結合し得る。ある実施形態では、キメラタンパク質は、エフェクター機能を有する他のＦｃ受容体（すなわち、ＦｃＲｎ以外）と実質的に結合しない。

【0112】

ある実施形態では、リンカーにおけるＦｃドメインは、配列番号１（以下の表１を参照されたい）、またはそれと少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一性のアミノ酸配列を有する。ある実施形態では、変異は、安定性及び／または半減期を増加させるために、配列番号１に対して行われる。例えば、ある実施形態では、リンカーにおけるＦｃドメインは、配列番号２（以下の表１を参照されたい）、またはそれと少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一性のアミノ酸配列を含む。例えば、ある実施形態では、リンカーにおけるＦｃドメインは、配列番号３（以下の表１を参照されたい）、またはそれと少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一性のアミノ酸配列を含む。

【0113】

さらに、１つ以上の結合リンカーは、リンカーにおけるＦｃドメイン（例えば、配列番号１、配列番号２、配列番号３、またはそれと少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一性であるもののうちの１つ）及び細胞外ドメインを接続するために使用され得る。例えば、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、またはそのバリアントのうちのいずれか１つが、本明細書に開示される細胞外ドメイン、及び本明細書に開示されるリンカーにおけるＦｃドメインを接続し得る。任意で、配列番号４～５０、またはそのバリアントのうちのいずれか１つは、本明細書に開示される細胞外ドメインと本明細書に開示されるＦｃドメインとの間に位置する。

【0114】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、以下の表１に開示される結合リンカーのバリアントを含み得る。例えば、リンカーは、配列番号４～５０のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して、少なくとも約６０％、または少なくとも約６１％、または少なくとも約６２％、または少なくとも約６３％、または少なくとも約６４％、または少なくとも約６５％、または少なくとも約６６％、または少なくとも約６７％、または少なくとも約６８％、または少なくとも約６９％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約７１％、または少なくとも約７２％、または少なくとも約７３％、または少なくとも約７４％、または少なくとも約７５％、または少なくとも約７６％、または少なくとも約７７％、または少なくとも約７８％、または少なくとも約７９％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約８１％、または少なくとも約８２％、または少なくとも約８３％、または少なくとも約８４％、または少なくとも約８５％、または少なくとも約８６％、または少なくとも約８７％、または少なくとも約８８％、または少なくとも約８９％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約９１％、または少なくとも約９２％、または少なくとも約９３％、または少なくとも約９４％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有し得る。

【0115】

ある実施形態では、第１及び第２の結合リンカーは異なっていてもよく、またはそれらは同じであってもよい。

【0116】

理論に拘束されることを望まないが、キメラタンパク質においてＦｃドメインの少なくとも一部を含むリンカーを含めることは、不溶性であり、非機能性の可能性のあるタンパク質コンカテマー及び／または凝集体の形成を回避する助けとなる。これは、キメラタンパク質間にジスルフィド結合を形成することが可能であるＦｃドメイン内にシステインが存在するためである。

【0117】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、本明細書に開示されるように、１つ以上の結合リンカーを含んでいてもよく、本明細書に開示されるように、Ｆｃドメインリンカーを欠損していてもよい。

【0118】

ある実施形態では、第１及び／または第２の結合リンカーは独立して、配列番号４～５０のアミノ酸配列から選択され、以下の表１に提供される：

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【0119】

ある実施形態では、結合リンカーは、実質的にグリシン及びセリン残基を含む（例えば、約３０％、または約４０％、または約５０％、または約６０％、または約７０％、または約８０％、または約９０％、または約９５％、または約９７％、または約９８％、または約９９％、または約１００％のグリシン及びセリン）。例えば、ある実施形態では、結合リンカーは、（Ｇｌｙ_４Ｓｅｒ）_ｎであり、配列中、ｎは、約１～約８、例えば、１、２、３、４、５、６、７、または８（それぞれ、配列番号２５～配列番号９）である。ある実施形態では、結合リンカー配列は、ＧＧＳＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３３）である。追加の例示的な結合リンカーとしては、ＬＥ、（ＥＡＡＡＫ）_ｎ（ｎ＝１～３）（配列番号３６～配列番号３８）、Ａ（ＥＡＡＡＫ）_ｎＡ（ｎ＝２～５）（配列番号３９～配列番号４２）、Ａ（ＥＡＡＡＫ）_４ＡＬＥＡ（ＥＡＡＡＫ）_４Ａ（配列番号４３）、ＰＡＰＡＰ（配列番号４４）、ＫＥＳＧＳＶＳＳＥＱＬＡＱＦＲＳＬＤ（配列番号４５）、ＧＳＡＧＳＡＡＧＳＧＥＦ（配列番号４６）、及び（ＸＰ）_ｎ（Ｘは、例えば、Ａｌａ、Ｌｙｓ、またはＧｌｕなどの任意のアミノ酸を示す）の配列を有するリンカーが挙げられるが、これらに限定されない。ある実施形態では、結合リンカーは、ＧＧＳである。ある実施形態では、結合リンカーは、配列（Ｇｌｙ）_ｎを有し、配列中、ｎは、１～１００の任意の数値、例えば、（Ｇｌｙ）_８（配列番号３４）及び（Ｇｌｙ）_６（配列番号３５）である。

【0120】

ある実施形態では、結合リンカーは、ＧＧＧＳＥ（配列番号４７）、ＧＳＥＳＧ（配列番号４８）、ＧＳＥＧＳ（配列番号４９）、ＧＥＧＧＳＧＥＧＳＳＧＥＧＳＳＳＥＧＧＧＳＥＧＧＧＳＥＧＧＧＳＥＧＧＳ（配列番号５０）、ならびに４アミノ酸間隔ごとにＧ、Ｓ、及びＥがランダムに配置された結合リンカーのうちの１つ以上である。

【0121】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５及び／または配列番号７のアミノ酸配列を含む結合リンカーを含む。

【0122】

ある実施形態では、キメラタンパク質が、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）、Ｆｃドメインに先行する１つの結合リンカー、Ｆｃドメインに続く第２の結合リンカー、及びＣＤ４０ＬのＥＣＤを含む場合、キメラタンパク質は、以下の構造を含み得る：
ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）のＥＣＤ － 結合リンカー１ － Ｆｃドメイン － 結合リンカー２ － ヒトＣＤ４０ＬのＥＣＤ
第１の結合リンカー、Ｆｃドメインリンカー、及び第２の結合リンカーの組み合わせは、本明細書において「モジュラーリンカー」と称される。ある実施形態では、キメラタンパク質は、表２に示されるようなモジュラーリンカーを含む。

【表2-1】

【表2-2】

【0123】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、上記の表２に開示されるモジュラーリンカーのバリアントを含み得る。例えば、リンカーは、配列番号５１～５６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列と少なくとも約６０％、または少なくとも約６１％、または少なくとも約６２％、または少なくとも約６３％、または少なくとも約６４％、または少なくとも約６５％、または少なくとも約６６％、または少なくとも約６７％、または少なくとも約６８％、または少なくとも約６９％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約７１％、または少なくとも約７２％、または少なくとも約７３％、または少なくとも約７４％、または少なくとも約７５％、または少なくとも約７６％、または少なくとも約７７％、または少なくとも約７８％、または少なくとも約７９％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約８１％、または少なくとも約８２％、または少なくとも約８３％、または少なくとも約８４％、または少なくとも約８５％、または少なくとも約８６％、または少なくとも約８７％、または少なくとも約８８％、または少なくとも約８９％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約９１％、または少なくとも約９２％、または少なくとも約９３％、または少なくとも約９４％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有し得る。

【0124】

ある実施形態では、リンカーは、高い柔軟性であることを含むがこれに限定されない柔軟性であり得る。ある実施形態では、リンカーは、剛性αヘリックスを含むがこれに限定されない剛性であり得る。例示的な結合リンカーの特徴を以下の表３に示す：

【表3】

【0125】

ある実施形態では、リンカーは、機能性であり得る。例えば、限定されないが、リンカーは、本発明のキメラタンパク質の折り畳み及び／または安定性を改善し、発現を改善し、薬物動態を改善し、及び／または生物活性を改善するように機能し得る。別の例では、リンカーは、キメラタンパク質を特定の細胞型または位置に標的化するように機能し得る。

【0126】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、１つの結合リンカーのみを含む。

【0127】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、結合リンカーを欠く。

【0128】

ある実施形態では、リンカーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの合成リンカーである。

【0129】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、そのリガンド／受容体と立体的に結合することが可能である第１のドメイン、及び／またはそのリガンド／受容体と立体的に結合することが可能である第２のドメインを有する。したがって、細胞外ドメインのリガンド／受容体結合ドメインがそのリガンド／受容体の結合を立体的に妨げられないように、キメラタンパク質及び／または細胞外ドメイン（またはその一部）と残りのキメラタンパク質との間の物理的距離に十分な全体的な柔軟性がある。この柔軟性及び／または物理的距離（「緩み」と称される）は通常、細胞外ドメイン（複数可）に存在し、通常はリンカーに存在し、及び／または通常はキメラタンパク質に（全体として）存在し得る。代替的にまたは追加的に、アミノ酸配列（例えば）は、立体障害を回避するために必要な緩みを提供するために、１つ以上の細胞外ドメイン及び／またはリンカーに追加され得る。緩みを提供する任意のアミノ酸配列を追加してもよい。ある実施形態では、追加されるアミノ酸配列は、配列（Ｇｌｙ）_ｎを含み、配列中、ｎは、１～１００の任意の数値である。追加可能なアミノ酸配列の追加の例には、表１及び表３に記載される結合リンカーが含まれる。ある実施形態では、立体障害を回避するために必要な緩みを提供するために、細胞外ドメインとリンカーとの間にポリエチレングリコール（ＰＥＧ）リンカーを追加してもよい。そのようなＰＥＧリンカーは、当技術分野において周知である。

【0130】

ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）（またはそのバリアント）の細胞外ドメイン、リンカー、及びヒトＣＤ４０Ｌ（またはそのバリアント）の細胞外ドメインを含む。ある実施形態では、リンカーは、例えば、ヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４などのＩｇＧ１由来またはＩｇＧ４由来のヒンジＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。したがって、ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）（またはそのバリアント）の細胞外ドメイン、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含むリンカー、及びヒトＣＤ４０Ｌ（またはそのバリアント）の細胞外ドメインを含む。そのようなキメラタンパク質は、本明細書では「ｈＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌ」または「ＳＬ－１７２１５４」と称され得る。

【0131】

疾患、治療法、及び作用機序
本開示の一態様は、ヒト対象におけるがんの治療方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）ヒト対象に、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有するキメラタンパク質の第１の用量を投与することを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、第１の用量の投与前に対象から採取した生体試料中の細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性が測定されており、マーカーは、ＣＤ８０＋細胞、ＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、Ｋｉ６７＋細胞、及びＰＤ－Ｌ１＋免疫細胞のうちの１つ以上から選択される。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）投与後の細胞のレベル及び／または活性が細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも高い場合に、ヒト対象にキメラタンパク質の第２の用量を投与することを含む。ある実施形態では、第１の用量の投与から少なくとも約４８時間後に第２の用量を投与する。

【0132】

ある実施形態では、生体試料は、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される。ある実施形態では、生体試料は、生検試料または外科標本である。ある実施形態では、生体試料は、腫瘍生検試料または腫瘍外科標本である。ある実施形態では、腫瘍生検試料は、卵巣癌、卵管癌、腹膜癌、皮膚扁平上皮癌（ＣＳＣＣ）、及び頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）から選択される腫瘍に由来する。

【0133】

ある実施形態では、細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。ある実施形態では、試料を、ＣＤ８０、ＣＤ８、グランザイムＢ、ＣＤ６８、Ｋｉ６７、及びＰＤ－Ｌ１から選択される１つ以上の分子に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、細胞のレベル及び／または活性を測定する。ある実施形態では、１つ以上の分子に特異的に結合する薬剤は、抗体またはその断片である。ある実施形態では、抗体は、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはその断片である。

【0134】

ある実施形態では、試料を、ＣＤ８０、ＣＤ８、グランザイムＢ、ＣＤ６８、Ｋｉ６７、及びＰＤ－Ｌ１の１つ以上をコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、細胞のレベル及び／または活性を測定する。ある実施形態では、１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤は、核酸プライマーまたはプローブである。

【0135】

本開示の一態様は、ヒト対象におけるがんの治療方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）ヒト対象に、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有するキメラタンパク質の第１の用量を投与することを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、第１の用量の投与前に対象から採取した第１の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、第１の用量の投与後に対象から採取した第２の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＮ時間後のレベル及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性は、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い。ある実施形態では、第１の用量の投与後に対象から採取した第３の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＭ日後のレベル及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）投与からＭ日後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性に比べて少なくとも約５０％高い場合に、ヒト対象にキメラタンパク質の第２の用量を投与することを含む。ある実施形態では、第１の用量の投与から少なくとも約４８時間後に第２の用量を投与する。

【0136】

ある実施形態では、Ｎは、１２未満、または８未満、または６未満、または４未満、または３未満、または２未満、または１未満である。ある実施形態では、Ｍは、２１未満、または１４未満、または１２未満、または１０未満、または８未満、または６未満、または４未満、または２未満である。ある実施形態では、Ｎは、１２未満、または８未満、または６未満、または４未満、または３未満、または２未満、または１未満であり、Ｍは、２１未満、または１４未満、または１２未満、または１０未満、または８未満、または６未満、または４未満、または２未満である。

【0137】

ある実施形態では、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性は、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも高い。ある実施形態では、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性は、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い。ある実施形態では、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性は、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性の約１０％、約２０％、約３０％、または約４０％以内である。

【0138】

ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は、独立して、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される。ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は血液である。

【0139】

ある実施形態では、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。ある実施形態では、試料を、ＣＤ４０及び／またはＢ細胞マーカーに特異的に結合する薬剤と接触させることによって、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定する。ある実施形態では、Ｂ細胞マーカーは、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＣＤ４５Ｒ、ＣＤ８６、ＣＤ９５、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＣＤ４０から選択される。ある実施形態では、１つ以上の分子に特異的に結合する薬剤は、抗体またはその断片である。ある実施形態では、抗体は、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはその断片である。ある実施形態では、試料を、ＣＤ４０及び／またはＢ細胞マーカーをコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定する。ある実施形態では、Ｂ細胞マーカーは、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＣＤ４５Ｒ、ＣＤ８６、ＣＤ９５、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＣＤ４０から選択される。ある実施形態では、１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤は、核酸プライマーまたはプローブである。

【0140】

本開示の一態様は、ヒト対象におけるがんの治療方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）ヒト対象に、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有するキメラタンパク質の第１の用量を投与することを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、第１の用量の投与前に対象から採取した第１の生体試料中の、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮα、ＩＬ１５、ＩＬ２３、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣから選択されるサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、第１の用量の投与後に対象から採取した第２の生体試料中の、投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、サイトカインの投与からＮ時間後の量及び／または活性は、サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも高い。ある実施形態では、第１の用量の投与後に対象から採取した第３の生体試料中の、サイトカインのＭ日後の量及び／または活性が測定されており、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）投与からＭ日後のサイトカインの量及び／または活性が、投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性に比べて少なくとも約３０％低い場合に、ヒト対象にキメラタンパク質の第２の用量を投与することを含む。ある実施形態では、第１の用量の投与から少なくとも約４８時間後に第２の用量を投与する。

【0141】

本開示の一態様は、ヒト対象におけるがんの治療方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）ヒト対象に、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有するキメラタンパク質の第１の用量を投与することを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、第１の用量の投与前に対象から採取した投与前生体試料中の細胞のバックグラウンドレベルが測定されており、マーカーは、ＣＤ８０＋細胞、ＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、Ｋｉ６７＋細胞、及びＰＤ－Ｌ１＋免疫細胞のうちの１つ以上から選択される。ある実施形態では、本方法はさらに、投与後の細胞のレベルが細胞のバックグラウンドレベルよりも高い場合に、ヒト対象にキメラタンパク質の第２の用量を投与することを含む。ある実施形態では、第１の用量の投与から少なくとも約４８時間後に第２の用量を投与する。

【0142】

ある実施形態では、生体試料は、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される。ある実施形態では、生体試料は、生検試料または外科標本である。ある実施形態では、生体試料は、腫瘍生検試料または腫瘍外科標本である。ある実施形態では、腫瘍生検試料または腫瘍外科標本は、卵巣癌、卵管癌、腹膜癌、皮膚扁平上皮癌（ＣＳＣＣ）、及び頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）から選択される腫瘍に由来する。

【0143】

ある実施形態では、細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。ある実施形態では、試料を、ＣＤ８０、ＣＤ８、グランザイムＢ、ＣＤ６８、Ｋｉ６７、及びＰＤ－Ｌ１から選択される１つ以上の分子に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、細胞のレベル及び／または活性を測定する。ある実施形態では、１つ以上の分子に特異的に結合する薬剤は、抗体またはその断片である。ある実施形態では、抗体は、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはその断片である。ある実施形態では、試料を、ＣＤ８０、ＣＤ８、グランザイムＢ、ＣＤ６８、Ｋｉ６７、及びＰＤ－Ｌ１の１つ以上をコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、細胞のレベル及び／または活性を測定する。ある実施形態では、１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤は、核酸プライマーまたはプローブである。

【0144】

本開示の一態様は、ヒト対象におけるがんの治療方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）ヒト対象に、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有するキメラタンパク質の第１の用量を投与することを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、第１の用量の投与前に対象から採取した第１の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、第１の用量の投与後に対象から採取した第２の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＮ時間後のレベル及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性は、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い。ある実施形態では、第１の用量の投与後に対象から採取した第３の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＭ日後のレベル及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）投与からＭ日後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性に比べて少なくとも約５０％高い場合に、ヒト対象にキメラタンパク質の第２の用量を投与することを含む。ある実施形態では、第１の用量の投与から少なくとも約４８時間後に第２の用量を投与する。

【0145】

ある実施形態では、Ｎは、１２未満、または８未満、または６未満、または４未満、または３未満、または２未満、または１未満である。ある実施形態では、Ｍは、２１未満、または１４未満、または１２未満、または１０未満、または８未満、または６未満、または４未満、または２未満である。ある実施形態では、Ｎは、１２未満、または８未満、または６未満、または４未満、または３未満、または２未満、または１未満であり、Ｍは、２１未満、または１４未満、または１２未満、または１０未満、または８未満、または６未満、または４未満、または２未満である。

【0146】

ある実施形態では、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性は、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも高い。ある実施形態では、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性は、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い。ある実施形態では、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性は、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性の約１０％、約２０％、約３０％、または約４０％以内である。

【0147】

ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は、独立して、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される。ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は血液である。

【0148】

ある実施形態では、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。ある実施形態では、試料を、ＣＤ４０及び／またはＢ細胞マーカーに特異的に結合する薬剤と接触させることによって、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定する。ある実施形態では、Ｂ細胞マーカーは、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＣＤ４５Ｒ、ＣＤ８６、ＣＤ９５、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＣＤ４０から選択される。ある実施形態では、１つ以上の分子に特異的に結合する薬剤は、抗体またはその断片である。ある実施形態では、抗体は、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはその断片である。ある実施形態では、試料を、ＣＤ４０及び／またはＢ細胞マーカーをコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定する。ある実施形態では、Ｂ細胞マーカーは、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＣＤ４５Ｒ、ＣＤ８６、ＣＤ９５、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＣＤ４０から選択される。ある実施形態では、１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤は、核酸プライマーまたはプローブである。

【0149】

本開示の一態様は、ヒト対象におけるがんの治療方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）ヒト対象に、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有するキメラタンパク質の第１の用量を投与することを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、第１の用量の投与前に対象から採取した第１の生体試料中の、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮα、ＩＬ１５、ＩＬ２３、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣから選択されるサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、第１の用量の投与後に対象から採取した第２の生体試料中の、サイトカインのＮ時間後の量及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、サイトカインの投与からＮ時間後の量及び／または活性は、サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも高い。ある実施形態では、第１の用量の投与後に対象から採取した第３の生体試料中の、サイトカインのＭ日後の量及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）投与からＭ日後のサイトカインの量及び／または活性が、投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性に比べて少なくとも約３０％低い場合に、ヒト対象にキメラタンパク質の第２の用量を投与することを含む。ある実施形態では、第１の用量の投与から少なくとも約４８時間後に第２の用量を投与する。

【0150】

ある実施形態では、Ｎは、１２未満、または８未満、または６未満、または４未満、または３未満、または２未満、または１未満である。ある実施形態では、Ｍは、２１未満、または１４未満、または１２未満、または１０未満、または８未満、または６未満、または４未満、または２未満である。ある実施形態では、Ｎは、１２未満、または８未満、または６未満、または４未満、または３未満、または２未満、または１未満であり、Ｍは、２１未満、または１４未満、または１２未満、または１０未満、または８未満、または６未満、または４未満、または２未満である。

【0151】

ある実施形態では、サイトカインの投与からＮ時間後の量及び／または活性は、サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも高い。ある実施形態では、サイトカインの投与からＮ時間後の量及び／または活性は、サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも低い。ある実施形態では、サイトカインの投与からＮ時間後の量及び／または活性は、サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性の約１０％、約２０％、約３０％、または約４０％以内である。

【0152】

ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は、独立して、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される。ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は血液である。

【0153】

ある実施形態では、サイトカインの量及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。ある実施形態では、試料を、サイトカインに特異的に結合する薬剤と接触させることによって、サイトカインの量及び／または活性を測定する。ある実施形態では、１つ以上の分子に特異的に結合する薬剤は、抗体またはその断片である。ある実施形態では、抗体は、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはその断片である。ある実施形態では、試料を、サイトカインをコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、サイトカインの量及び／または活性を測定する。ある実施形態では、１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤は、核酸プライマーまたはプローブである。

【0154】

ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）を含む、本明細書に開示されるキメラタンパク質は、進行性固形腫瘍及び進行性リンパ腫の両方を治療する方法に使用される。これらの腫瘍型には、黒色腫、非小細胞肺癌（扁平上皮癌、腺癌、腺扁平上皮癌）、尿路上皮癌、腎細胞癌、扁平上皮子宮頸癌、胃癌または胃食道接合部腺癌、肛門扁平上皮癌、頭頸部扁平上皮癌、皮膚扁平上皮癌、及び中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍以外の高頻度マイクロサテライト不安定性またはミスマッチ修復欠損固形腫瘍が含まれる。関心対象の他の腫瘍としては、ホジキンリンパ腫（ＨＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、及び高リスク骨髄異形成症候群（ＨＲ－ＭＤＳ）が挙げられる。

【0155】

ある実施形態では、がんは、進行した固形腫瘍（局所性及び／または転移性）を含む。ある実施形態では、ヒト対象はがんに罹患しており、治療対象のがんは、腫瘍微小環境内にマクロファージが存在すること、及び／または腫瘍内にＣＤ４７＋細胞である腫瘍細胞が存在することを特徴とする。ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質の投与により、腫瘍細胞の「ｄｏｎ’ｔ ｅａｔ ｍｅ」シグナルが遮断され、及び／または「ｅａｔ ｍｅ」シグナルが刺激される。ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）による治療法は、マクロファージを刺激して腫瘍細胞を貪食させ、貪食された腫瘍細胞の腫瘍抗原をＴ細胞に効果的に提示する。

【0156】

ある実施形態では、がんは固形癌である。ある実施形態では、がんは固形腫瘍である。ある実施形態では、がんは転移性癌である。ある実施形態では、がんは血液癌である。ある実施形態では、がんは、ＣＤ４７を発現する。

【0157】

ある実施形態では、がんは、進行したリンパ腫を含む。ある実施形態では、がんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を含む。ある実施形態では、がんは、ｐ５３変異型ＡＭＬを含む。ある実施形態では、がんは、高リスク骨髄異形成症候群（ＨＲ－ＭＤＳ）を含む。

【0158】

本開示の態様は、がんの治療方法を提供する。その方法は、本明細書に開示されるように、例えば医薬組成物中の、有効量のキメラタンパク質を、それを必要とする対象に投与するステップを含む。

【0159】

多くの場合、免疫刺激シグナル伝達を増強して免疫応答をブーストし、例えば患者の抗腫瘍免疫応答を増強することが望ましい。

【0160】

ある実施形態では、本開示のキメラタンパク質は、例えば、検出され、及び／または破壊されることを回避しようとしているがん細胞に由来する免疫抑制シグナルの伝達を妨害、遮断、低減、阻害、及び／または隠退させるヒトＣＤ１７２ａの細胞外ドメイン（ＳＩＲＰα）、ならびに抗がん免疫細胞への免疫刺激シグナルの伝達を増強、増加、及び／または刺激するヒトＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインを含む。したがって、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインがそのリガンド／受容体に同時に結合し、ＣＤ４０Ｌの細胞外ドメインがその受容体に結合すると、がん細胞からの免疫抑制シグナルの伝達が妨げられ、免疫系細胞の免疫活性が刺激される。言い換えれば、本開示のキメラタンパク質は、２つの異なるメカニズムを介してがんを治療することができる。

【0161】

ある実施形態では、本開示は、がん及び／または腫瘍、例えば、がん及び／または腫瘍の治療または予防に関する。本明細書の他の箇所で開示されているように、ある実施形態では、がんの治療は、本発明のキメラタンパク質を用いて免疫系を調節し、免疫刺激シグナルの増加または活性化を促進することを含む。ある実施形態では、本方法は、未治療の対象、またはＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）、ＣＤ４０Ｌ、及び／またはそれらのそれぞれのリガンドもしくは受容体に対する抗体で治療した対象と比較して、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の量または活性を減少させる。ある実施形態では、本方法は、未治療の対象、またはＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）、ＣＤ４０Ｌ、及び／またはそれらのそれぞれのリガンドもしくは受容体に対する抗体で治療した対象と比較して、対象の流入領域リンパ節におけるエフェクターＴ細胞のプライミングを増加させる。ある実施形態では、本方法は、未治療の対象、またはＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）、ＣＤ４０Ｌ、及び／またはそれらのそれぞれのリガンドもしくは受容体に対する抗体で治療した対象と比較して、免疫抑制細胞の全体的な減少、及びより炎症性の腫瘍環境への移行を引き起こす。

【0162】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、免疫応答の大きさを調節、例えば、エフェクター出力のレベルを調節することができるか、またはそれを含む方法で使用することができる。ある実施形態では、例えば、がんの治療に使用される場合、本発明のキメラタンパク質は、免疫阻害と比較して免疫刺激の程度を改変し、サイトカイン産生、増殖、または標的を殺傷する潜在性のレベルの増加を刺激することを含むが、これらに限定されないＴ細胞応答の振幅を増加させる。ある実施形態では、患者のＴ細胞は、キメラタンパク質によって、活性化及び／または刺激され、活性化Ｔ細胞がサイトカインを分離及び／または分泌することを可能とする。

【0163】

がんまたは腫瘍とは、細胞の無秩序な増殖、及び／または細胞生存率の異常な増大、及び／または身体の器官及び系の正常な機能を妨げるアポトーシス阻害を指す。良性及び悪性のがん、ポリープ、過形成、ならびに休止状態の腫瘍または微小転移巣が含まれる。また、免疫系によって妨げられない異常な増殖を有する細胞（例えば、ウイルス感染細胞）も含まれる。がんは、原発性癌であっても、または転移性癌であってもよい。原発性癌は、臨床的に検出可能になる起点部位のがん細胞の領域であってもよく、原発性腫瘍であってもよい。対照的に、転移性癌とは、ある器官または部分から別の隣接していない器官または部分への疾患の広がりであり得る。転移性癌は、局所領域の周囲の正常組織に浸透及び浸潤する能力を獲得したがん細胞によって引き起こされ、局所転移であり得る新しい腫瘍を形成する。がんはまた、リンパ管及び／または血管の壁を貫通する能力を獲得したがん細胞によって引き起こされる場合もあり、その後、がん細胞は血流を介して、身体の他の部位及び組織に循環し得る（したがって、循環腫瘍細胞になる）。がんは、リンパ系または血行性拡散などのプロセスに起因する場合がある。がんはまた、腫瘍細胞が別の部位で静止し、血管または壁を再浸透して増殖し続け、最終的に別の臨床的に検出可能な腫瘍を形成することによって引き起こされ得る。がんは、この新しい腫瘍である場合もあり、転移性（または続発性）腫瘍である場合もある。

【0164】

がんは、転移した腫瘍細胞によって引き起こされる可能性があり、二次的な腫瘍であってもまたは転移性腫瘍であってもよい。腫瘍の細胞は、元の腫瘍の細胞と似ている場合がある。例として、乳癌または結腸癌が肝臓に転移した場合、二次腫瘍は肝臓に存在するが、異常な肝臓細胞ではなく、異常な乳房細胞または結腸細胞で構成される。したがって、肝臓における腫瘍は、肝臓癌ではなく、転移性乳癌または転移性結腸癌であり得る。

【0165】

がんは、任意の組織が起源であり得る。がんは、黒色腫、結腸、乳房、または前立腺起源であり得、したがって、元々それぞれが皮膚、結腸、乳房、または前立腺組織であった細胞からなる場合がある。がんはまた、白血病またはリンパ腫であり得る、血液学的悪性腫瘍であり得る。がんは、肝臓、肺、膀胱、または腸などの組織に浸潤し得る。

【0166】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、治療不応性癌を有する対象を治療するために使用される。ある実施形態では、キメラタンパク質は、１つ以上の免疫調整剤に対して不応性である対象を治療するために使用される。例えば、ある実施形態では、キメラタンパク質を、約１２週間の治療後、治療に応答を示さないか、またはその疾患が進行する対象を治療するために使用する。例えば、ある実施形態では、対象は、１つ以上のＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）及び／またはＣＤ４７薬剤に対して不応性であり、これには、例えば、マグロリマブ（５Ｆ９）、Ｈｕ５Ｆ９－Ｇ４、ＣＣ－９０００２、Ｔｉ－０６１、ＳＲＦ２３１、ＴＴＩ－６２１、ＴＴＩ－６２２、またはＡＬＸ１４８不応性患者が含まれる。例えば、ある実施形態では、対象は、抗ＣＴＬＡ－４剤に不応性であり、例えば、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ）不応性患者（例えば、黒色腫患者）である。したがって、ある実施形態では、本開示は、１つ以上の免疫調節剤の単剤療法を含む、様々な治療法に非応答性である患者を救済するがん治療法を提供する。

【0167】

ある実施形態では、本開示は、腫瘍微小環境内の細胞または組織を標的とするキメラタンパク質を提供する。ある実施形態では、腫瘍微小環境内の細胞または組織は、キメラタンパク質の１つ以上の標的または結合パートナーを発現する。腫瘍微小環境とは、腫瘍が存在する、細胞、分泌タンパク質、生理学的小分子、及び血管を含む細胞環境を指す。ある実施形態では、腫瘍微小環境内の細胞または組織は、腫瘍血管系、腫瘍浸潤リンパ球、線維芽細網細胞、内皮前駆細胞（ＥＰＣ）、がん関連線維芽細胞、周皮細胞、他の間質細胞、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の成分、樹状細胞、抗原提示細胞、Ｔ細胞、制御性Ｔ細胞、マクロファージ、好中球、及び腫瘍の近位に位置する他の免疫細胞のうちの１つ以上である。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、がん細胞を標的とする。ある実施形態では、がん細胞は、キメラタンパク質の１つ以上の標的または結合パートナーを発現する。

【0168】

制御性Ｔ細胞の活性化は、共刺激及び共抑制性シグナルによって決定的に影響を受ける。共刺激分子の２つの主要なファミリーには、Ｂ７及び腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）ファミリーが含まれる。これらの分子は、それぞれＣＤ２８またはＴＮＦ受容体ファミリーに属するＴ細胞上の受容体と結合する。多くの明確に定義された共阻害剤及びその受容体は、Ｂ７及びＣＤ２８ファミリーに属する。

【0169】

ある実施形態では、免疫刺激シグナルは、免疫応答を増強するシグナルを指す。例えば、腫瘍学的には、そのようなシグナルは、抗腫瘍免疫を増強し得る。例えば、限定されないが、免疫刺激シグナルは、白血球の増殖、サイトカイン産生、殺傷活性、または食作用活性を直接的に刺激することによって特定され得る。例えば、キメラタンパク質は、個々のＴ細胞サブセットの増殖とサイトカイン産生を直接刺激し得る。別の例としては、そのような免疫抑制細胞の活性を阻害する受容体を介した免疫抑制細胞の直接的な刺激が挙げられる。これには、例えば、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋制御性Ｔ細胞の刺激が含まれ、これは、制御性Ｔ細胞が従来のＣＤ４＋またはＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖を抑制する能力を減少させる。別の例では、これには、抗原提示細胞の表面上でのＣＤ４０の刺激が含まれ、Ｂ７またはＴＮＦスーパーファミリーにおけるものを含む適切な天然共刺激分子との関連で抗原を提示するそれらの細胞の増強された能力を含む抗原提示細胞の活性化を引き起こす。別の例では、キメラタンパク質は、リンパ系細胞の活性化及び／または炎症誘発性サイトカインもしくはケモカインの産生を引き起こし、場合により、腫瘍内で免疫応答をさらに刺激する。

【0170】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、免疫調節を増強、回復、促進、及び／または刺激することができるか、またはそれを要する方法に使用することができる。ある実施形態では、本明細書に記載される本発明のキメラタンパク質は、限定するものではないが、Ｔ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球、Ｔヘルパー細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、抗腫瘍マクロファージ（例えば、Ｍ１マクロファージ）、Ｂ細胞及び樹状細胞を含む、腫瘍細胞に対する１つ以上の免疫細胞の活性または活性化を修復、促進及び／または刺激する。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、非限定的な例として、生存促進シグナル、オートクリンもしくはパラクリン成長シグナル；ｐ３８ ＭＡＰＫ－、ＥＲＫ－、ＳＴＡＴ－、ＪＡＫ－、ＡＫＴ－、もしくはＰＩ３Ｋ－媒介のシグナル；抗アポトーシスシグナル、及び／または炎症誘発性サイトカイン産生もしくはＴ細胞遊走もしくはＴ細胞腫瘍浸潤のうちの１つ以上を促進するか及び／またはそれに必要とするシグナルを含む、１つ以上のＴ細胞固有シグナルを活性化及び／または刺激することを含めて、Ｔ細胞の活性及び／または活性化を増強、回復、促進、及び／または刺激する。

【0171】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、腫瘍または腫瘍微小環境へのＴ細胞（限定されないが、細胞傷害性Ｔリンパ球、Ｔヘルパー細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞を含む）、Ｂ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、樹状細胞、単球、及びマクロファージ（例えば、Ｍ１及びＭ２のうちの１つ以上）のうちの１つ以上の増大を引き起こすことができるか、またはそれを要する方法に使用することができる。ある実施形態では、キメラタンパク質は、ＣＤ８＋Ｔ細胞、特に腫瘍微小環境に浸潤しているＴ細胞による腫瘍抗原の認識を増強する。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、ＣＤ１９発現を誘導する、及び／またはＣＤ１９陽性細胞（例えば、ＣＤ１９陽性Ｂ細胞）の数を増加させる。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、ＩＬ－１５Ｒα発現を誘導する、及び／またはＩＬ－１５Ｒα陽性細胞（例えば、ＩＬ－１５Ｒα陽性樹状細胞）の数を増加させる。

【0172】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、特に腫瘍及び／または腫瘍微小環境（ＴＭＥ）内で、免疫抑制細胞（例えば、骨髄由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、腫瘍関連好中球（ＴＡＮ）、Ｍ２マクロファージ、及び腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ））の低減を阻害及び／または引き起こすことができるか、またはそれを要する方法に使用することができる。ある実施形態では、本治療法は、腫瘍部位及び／またはＴＭＥにおけるＭ１対Ｍ２マクロファージの比率を改変し、Ｍ１マクロファージを支持することができる。ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、Ｓｉｐｒ１ａ／ＣＤ４７を介して「ｄｏｎ’ｔ ｅａｔ ｍｅ」シグナルが腫瘍細胞に伝達されることを抑制／低減／排除する。ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、腫瘍が対象の免疫系によって攻撃される可能性を高める。ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、腫瘍が対象の自然免疫系によって攻撃される可能性を高める。ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、腫瘍が対象の適応免疫系によって攻撃される可能性を高める。ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、腫瘍で過剰発現したＣＤ４７と貪食細胞で発現したＳＩＲＰαとの結合を抑制／低減／排除して、がん細胞の貪食除去及び／またはマクロファージ及び／または樹状細胞による腫瘍抗原の免疫原性プロセシングを可能にすることができる。ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質の投与により、腫瘍細胞の「ｄｏｎ’ｔ ｅａｔ ｍｅ」シグナルが遮断され、及び／または「ｅａｔ ｍｅ」シグナルが刺激される。ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）による治療法は、マクロファージを刺激して腫瘍細胞を貪食させ、貪食された腫瘍細胞の腫瘍抗原をＴ細胞に効果的に提示する。

【0173】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、ＩＦＮγ、ＴＮＦα、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、及びＩＬ－２２のうちの１つ以上を含むがこれらに限定されない、様々なサイトカインの血清レベルを増大し得る。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、治療対象の血清中のＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－２２、またはＩＦＮγを増強し得る。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、特定のサイトカインの血清レベルを増加させない。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、血清中のＩＬ－６及び／またはＴＮＦαのレベルを増加させない。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、治療対象の血清中のｆ ＩＬ－６及び／またはＴＮＦαの血清レベルを増加させない。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、治療対象の血清中のｆ ＩＬ－６及び／またはＴＮＦαの血清レベルを増加させないが、治療対象の血清中のＣＣＬ２、ＩＬ－８、及びＣＸＣＬ９を含むがこれらに限定されない他のサイトカインのレベルを増加させる。そのようなサイトカイン応答の検出により、指定されたキメラタンパク質の最適な投与計画を決定する方法が提供され得る。

【0174】

本開示のキメラタンパク質では、キメラタンパク質は、ＣＤ４＋及び／またはＣＤ８＋Ｔ細胞の部分集団を増加させるか、または減少することを予防することができる。

【0175】

本開示のキメラタンパク質では、キメラタンパク質は、Ｔ細胞による腫瘍殺傷活性を増強することができる。

【0176】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、ヒト対象のＴ細胞を、キメラタンパク質のＣＤ４０Ｌドメインと結合した場合に活性化し、（ａ）キメラタンパク質の第１のドメインと結合した場合に、１つ以上の腫瘍細胞が免疫抑制シグナルを伝達することが防止され、（ｂ）対象の末梢血において定量化可能なサイトカイン応答が達成され、及び／または（ｃ）ＣＤ４０アゴニスト抗体及び／またはＣＤ４７遮断抗体で治療した対象と比較して、それを必要とする対象の腫瘍増殖が減少する。

【0177】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、抗腫瘍ＣＤ８＋及び／もしくはＣＤ４＋Ｔ細胞の細胞死を阻害、遮断、及び／または減少させるか、または腫瘍誘導性Ｔ細胞の細胞死を刺激、誘導、及び／または増大させる。Ｔ細胞枯渇は、増殖及びエフェクター機能の進行性の喪失を特徴とするＴ細胞機能不全の状態であり、クローン欠失に至る。したがって、腫瘍誘導性Ｔ細胞は、多くの慢性感染症、炎症性疾患、及びがんの間に生じるＴ細胞機能不全の状態を指す。この機能不全は、機能的エフェクターまたはメモリーＴ細胞とは異なる不十分な増殖、及び／またはエフェクター機能、阻害性受容体の持続的発現、及び転写状態によって定義される。消耗は、感染及び腫瘍の最適な制御を妨げる。例示的な腫瘍誘導性Ｔ細胞には、これらに限定されないが、Ｔｒｅｇ、１つ以上のチェックポイント阻害性受容体を発現するＣＤ４＋及び／またはＣＤ８＋Ｔ細胞、Ｔｈ２細胞、ならびにＴｈ１７細胞が含まれる。チェックポイント阻害性受容体は、非制御な免疫応答を防止または阻害する免疫細胞に発現する受容体を指す。対照的に、抗腫瘍ＣＤ８＋及び／またはＣＤ４＋Ｔ細胞は、腫瘍に対する免疫応答を開始できるＴ細胞を指す。

【0178】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、制御性Ｔ細胞に対するエフェクターＴ細胞の比率を増大させることができ、そしてそれを含む方法において使用することができる。例示的なエフェクターＴ細胞としては、ＩＣＯＳ^＋エフェクターＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞（例えば、αβ ＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ８^＋、ＣＤ４５ＲＯ^＋）、ＣＤ４^＋エフェクターＴ細胞（例えば、αβ ＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ４^＋、ＣＣＲ７^＋、ＣＤ６２Ｌ高、ＩＬ^－７Ｒ／ＣＤ１２７^＋）、ＣＤ８^＋エフェクターＴ細胞（例えば、αβ ＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ８^＋、ＣＣＲ７^＋、ＣＤ６２Ｌ高、ＩＬ^－７Ｒ／ＣＤ１２７^＋）；エフェクターメモリーＴ細胞（例えば、ＣＤ６２Ｌ低、ＣＤ４４^＋、ＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＩＬ^－７Ｒ／ＣＤ１２７^＋、ＩＬ－１５Ｒ^＋、ＣＣＲ７低）、セントラルメモリーＴ細胞（例えば、ＣＣＲ７^＋、ＣＤ６２Ｌ^＋、ＣＤ２７^＋、またはＣＣＲ７高、ＣＤ４４^＋、ＣＤ６２Ｌ高、ＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＩＬ－７Ｒ／ＣＤ１２７^＋、ＩＬ－１５Ｒ^＋）；ＣＤ６２Ｌ^＋エフェクターＴ細胞、初期エフェクターメモリーＴ細胞（ＣＤ２７^＋ＣＤ６２Ｌ^－）及び後期エフェクターメモリーＴ細胞（ＣＤ２７^－ＣＤ６２Ｌ^－）（それぞれＴｅｍＥ及びＴｅｍＬ）を含むＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞（ＴＥＭ）；ＣＤ１２７（^＋）ＣＤ２５（低／－）エフェクターＴ細胞；ＣＤ１２７（^－）ＣＤ２５（^－）エフェクターＴ細胞；ＣＤ８^＋幹細胞メモリーエフェクター細胞（ＴＳＣＭ）（例えば、ＣＤ４４（低）ＣＤ６２Ｌ（高）ＣＤ１２２（高）ｓｃａ（^＋））；ＴＨ１エフェクターＴ細胞（例えば、ＣＸＣＲ３^＋、ＣＸＣＲ６^＋、及びＣＣＲ５^＋、またはαβ ＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ４^＋、ＩＬ－１２Ｒ^＋、ＩＦＮγＲ^＋、ＣＸＣＲ３^＋）、ＴＨ２エフェクターＴ細胞（例えば、ＣＣＲ３^＋、ＣＣＲ４^＋、及びＣＣＲ８^＋；またはαβ ＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ４^＋、ＩＬ－４Ｒ^＋、ＩＬ－３３Ｒ^＋、ＣＣＲ４^＋、ＩＬ－１７ＲＢ^＋、ＣＲＴＨ２^＋）；ＴＨ９エフェクターＴ細胞（例えば、αβ ＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ４^＋）；ＴＨ１７エフェクターＴ細胞（例えば、αβ ＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ４^＋、ＩＬ－２３Ｒ^＋、ＣＣＲ６^＋、ＩＬ－１Ｒ^＋）；ＣＤ４^＋ＣＤ４５ＲＯ^＋ＣＣＲ７^＋エフェクターＴ細胞、ＣＤ４^＋ＣＤ４５ＲＯ^＋ＣＣＲ７（^－）エフェクターＴ細胞；ならびにＩＬ－２、ＩＬ－４、及び／またはＩＦＮ－γを分泌するエフェクターＴ細胞が挙げられる。例示的な制御性Ｔ細胞としては、ＩＣＯＳ^＋制御性Ｔ細胞、ＣＤ４^＋ＣＤ２５^＋ＦＯＸＰ３^＋制御性Ｔ細胞、ＣＤ４^＋ＣＤ２５^＋制御性Ｔ細胞、ＣＤ４^＋ＣＤ２５^－制御性Ｔ細胞、ＣＤ４^＋ＣＤ２５高制御性Ｔ細胞、ＴＩＭ－３^＋ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）^＋制御性Ｔ細胞、リンパ球活性化遺伝子－３（ＬＡＧ－３）^＋制御性Ｔ細胞、ＣＴＬＡ－４／ＣＤ１５２^＋制御性Ｔ細胞、ニューロピリン－１（Ｎｒｐ－１）^＋制御性Ｔ細胞、ＣＣＲ４^＋ＣＣＲ８^＋制御性Ｔ細胞、ＣＤ６２Ｌ（Ｌ－セレクチン）^＋制御性Ｔ細胞、ＣＤ４５ＲＢ低制御性Ｔ細胞、ＣＤ１２７低制御性Ｔ細胞、ＬＲＲＣ３２／ＧＡＲＰ^＋制御性Ｔ細胞、ＣＤ３９^＋制御性Ｔ細胞、ＧＩＴＲ^＋制御性Ｔ細胞、ＬＡＰ^＋制御性Ｔ細胞、１Ｂ１１^＋制御性Ｔ細胞、ＢＴＬＡ^＋制御性Ｔ細胞、１型制御性Ｔ細胞（Ｔｒ１細胞）、Ｔヘルパー３型（Ｔｈ３）細胞、ナチュラルキラーＴ細胞表現型（ＮＫＴｒｅｇ）の制御性細胞、ＣＤ８^＋制御性Ｔ細胞、ＣＤ８^＋ＣＤ２８^－制御性Ｔ細胞、及び／またはＩＬ－１０、ＩＬ－３５、ＴＧＦ－β、ＴＮＦ－α、ガレクチン－１、ＩＦＮ－γ、及び／またはＭＣＰ１を分泌する制御性Ｔ細胞が挙げられる。

【0179】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、エフェクターＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋ＣＤ２５－Ｔ細胞）の増加を引き起こす。

【0180】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、制御性Ｔ細胞（例えば、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ細胞）の減少を引き起こす。

【0181】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、例えば、再発を予防するか、もしくは動物を再発から保護し、及び／または転移を予防するか、もしくは転移の可能性を減少させることができる記憶応答を生成する。したがって、キメラタンパク質で治療される動物は、キメラタンパク質による初期の治療後に再チャレンジされた場合に、腫瘍細胞を攻撃し、及び／または腫瘍の発達を予防することができる。したがって、本開示のキメラタンパク質は、活性な腫瘍破壊、及びさらに腫瘍抗原の免疫認識の両方を刺激し、これらは、再発を防ぐことが可能である記憶応答をプログラミングするのに不可欠である。

【0182】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、抗原提示細胞の活性化を引き起こすことができる。ある実施形態では、キメラタンパク質は、抗原提示細胞の抗原提示能力を増強することができる。

【0183】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、エフェクターＴ細胞を約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、または約９６時間、または約１週間、または約２週間よりも長く、一過性に刺激することができ、それを含む方法で使用することができる。ある実施形態では、エフェクターＴ細胞の一過性の刺激は実質的に、患者の血流、または例えば、骨髄、リンパ節、脾臓、胸腺、粘膜関連リンパ組織（ＭＡＬＴ）などのリンパ組織、非リンパ組織、もしくは腫瘍微小環境を含む特定の組織／位置で生じる。

【0184】

本開示のキメラタンパク質では、本発明のキメラタンパク質は、予想外に、細胞外ドメイン成分とそれぞれの結合パートナーとの結合を遅い解離速度（ＫｄまたはＫ_ｏｆｆ）でもたらす。ある実施形態では、これは、受容体とリガンド、及びその逆の予想外に長い相互作用をもたらす。そのような効果は、より長い正のシグナル効果、例えば、免疫刺激シグナルの増加または活性化を可能にする。例えば、本発明のキメラタンパク質は、例えば、長い解離速度の結合を介して、免疫細胞増殖をもたらすのに十分なシグナル伝達を可能とし、抗腫瘍攻撃を可能とし、刺激シグナル、例えばサイトカインの放出をもたらすのに十分なシグナル伝達を可能とする。

【0185】

本発明のキメラタンパク質は、細胞間に安定したシナプスを形成することができる。キメラタンパク質によって促進される細胞の安定性シナプス（例えば、負のシグナルを保有する細胞間）は、腫瘍細胞を攻撃するようにＴ細胞を配置し、及び／または本発明のキメラタンパク質によって遮蔽されたものを超える負のシグナルを含む負のシグナルを腫瘍細胞が送達するのを立体的に防ぐなど、腫瘍の縮小に有利な空間的配向をもたらす。ある実施形態では、これは、キメラタンパク質の血清半減期（ｔ_１／２）と比較して、より長い標的上の（例えば、腫瘍内）ｔ_１／２をもたらす。そのような特性は、キメラタンパク質の全身的な分布に関連する標的外毒性を減少させるという複合的な利点を有する可能性がある。

【0186】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、持続的な免疫調節効果をもたらすことができる。

【0187】

２つの免疫療法剤の部位特異的相互作用を向上させることができるため、本発明のキメラタンパク質は、相乗的な治療効果（例えば、抗腫瘍効果）をもたらす。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、オフサイト及び／または全身毒性を低減する可能性を提供する。

【0188】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、安全特性の増強を示す。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、毒性の低下を示す。例えば、本発明のキメラタンパク質の投与により、副作用、例えば、下痢、炎症（例えば、腸の）、体重低下のうちの１つ以上が減少し得るが、これらは、本発明のキメラタンパク質の細胞外ドメインによって標的化されるリガンド（複数可）／受容体（複数可）に指向する抗体を投与した後に生じる。ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、本発明のキメラタンパク質の細胞外ドメインによって標的化されるリガンド（複数可）／受容体（複数可）に指向する抗体と比較して、有効性を犠牲にすることなく、安全性を向上させる。

【0189】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、現在の免疫療法、例えば、本発明のキメラタンパク質の細胞外ドメインによって標的化されるリガンド（複数可）／受容体（複数可）に指向する抗体と比較して、副作用、例えば、ＧＩ合併症を軽減させる。例示的なＧＩ合併症としては、腹痛、食欲不振、自己免疫効果、便秘、痙攣、脱水症、下痢、摂食問題、倦怠感、鼓腸、腹部における流体すなわち腹水、胃腸（ＧＩ）内毒素症、ＧＩ粘膜炎、炎症性腸疾患、過敏性腸症候群（ＩＢＳ－Ｄ及びＩＢＳ－Ｃ）、悪心、疼痛、便もしくは尿の変化、潰瘍性大腸炎、嘔吐、流体保持による体重増加、及び／または脱力感が挙げられる。

【0190】

医薬組成物
本開示の態様は、本明細書に開示される治療有効量のキメラタンパク質を含む医薬組成物を含む。

【0191】

本明細書に開示される任意のキメラタンパク質を、医薬組成物に使用してよい。

【0192】

ある実施形態では、本明細書に開示されるキメラタンパク質は、バイアル内の滅菌凍結溶液として、またはバイアル内の滅菌液体溶液として提供される。本明細書に開示されるキメラタンパク質を含む医薬品は、滅菌濾過され、製剤化された本明細書に開示されるキメラタンパク質溶液を含み、Ｆｌｕｒｏｔｅｃ（登録商標）ゴム栓で栓をされ、アルミニウムフリップオフシールで密封された１０ｍＬの使い捨てガラスバイアルに充填される。ある実施形態では、本明細書に開示されるキメラタンパク質は、注射用水中の約３０ｍＭ～約７０ｍＭのＬ－ヒスチジン、例えば約５０ｍＭのＬ－ヒスチジン、及び約１２５ｍＭ～約４００ｍＭのスクロース、例えば約２５０ｍＭのスクロース中に、約１０ｍｇ／ｍＬ～約３０ｍｇ／ｍＬ、例えば約２０ｍｇ／ｍＬで製剤化される。ある実施形態では、各バイアルは、約１ｍＬの医薬品または約２０ｍｇの本明細書に開示されるキメラタンパク質を含有する。

【0193】

ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）を含む本明細書に開示されるキメラタンパク質は、薬学的に許容される塩を形成するために、無機酸または有機酸と反応することができる十分に塩基性の官能基、または無機塩基または有機塩基と反応することができるカルボキシル基を有し得る。当技術分野で周知のように、薬学的に許容される酸付加塩は、薬学的に許容される酸から形成される。そのような塩としては、例えば、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６，２－１９（１９７７）、及びＴｈｅ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ；Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ． Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ（ｅｄｓ．），Ｖｅｒｌａｇ，Ｚｕｒｉｃｈ（Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）２００２に列挙されている薬学的に許容される塩が挙げられ、これらは、参照によりその全体が本明細書に援用される。

【0194】

ある実施形態では、本明細書に開示される組成物は、薬学的に許容される塩の形態である。

【0195】

さらに、本明細書に開示される任意のキメラタンパク質を、薬学的に許容される担体または媒体を含む組成物、例えば医薬組成物の成分として対象に投与することができる。そのような医薬組成物は、適切な投与のための形態を提供するために、任意選択で、好適な量の薬学的に許容される賦形剤を含むことができる。薬学的賦形剤は、水、及び例えばピーナッツ油、ダイズ油、鉱物油、ゴマ油といった石油、動物、植物、もしくは合成起源のものを含む油などの液体であり得る。薬学的賦形剤は、例えば、生理食塩水、アカシアゴム、ゼラチン、デンプンのり、タルク、ケラチン、コロイダルシリカ、尿素、及び類似物であり得る。加えて、助剤、安定剤、増粘剤、滑沢剤、及び着色剤を使用することができる。ある実施形態では、薬学的に許容される賦形剤は、対象に投与される場合に無菌である。水は、本明細書に開示される任意の薬剤が静脈内投与される場合に有用な賦形剤である。食塩水溶液ならびにデキストロース及びグリセロールの水溶液はまた、特に注入溶液のために液体賦形剤として用いられ得る。好適な薬学的賦形剤には、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、コメ、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥脱脂乳、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノールなども含まれる。本明細書に開示される任意の薬剤は、必要に応じて、少量の湿潤もしくは乳化剤、またはｐＨ緩衝剤を含むこともできる。

【0196】

ある実施形態では、本明細書に開示される組成物、例えば、医薬組成物を、生理食塩水緩衝液（ＴＢＳ、ＰＢＳなどを含むがこれらに限定されない）に再懸濁する。

【0197】

ある実施形態では、キメラタンパク質を別の薬剤とコンジュゲート及び／または融合させて、半減期を延長するか、さもなければ薬力学的及び薬物動態学的特性を向上させてもよい。ある実施形態では、キメラタンパク質を、ＰＥＧ、ＸＴＥＮ（例えば、ｒＰＥＧとして）、ポリシアル酸（ＰＯＬＹＸＥＮ）、アルブミン（例えば、ヒト血清アルブミンまたはＨＡＳ）、エラスチン様タンパク質（ＥＬＰ）、ＰＡＳ、ＨＡＰ、ＧＬＫ、ＣＴＰ、トランスフェリンなどのうちの１つ以上と融合させるか、またはコンジュゲートしてもよい。ある実施形態では、個々のキメラタンパク質の各々を、Ｓｔｒｏｈｌ，ＢｉｏＤｒｕｇｓ ２９（４）：２１５－２３９（２０１５）（その全内容は、参照により本明細書に援用される）に記載される薬剤のうちの１つ以上と融合させる。

【0198】

本開示は、医薬組成物の様々な製剤中の開示されるキメラタンパク質を含む。本明細書に開示される任意のキメラタンパク質は、液剤、懸濁剤、乳剤、点滴、錠剤、丸剤、ペレット、カプセル剤、液体含有カプセル剤、粉末剤、徐放性製剤、坐剤、乳濁液、エアロゾル、噴霧、懸濁剤、または使用に適した他の形態をとり得る。タンパク質配列をコードするＤＮＡまたはＲＮＡ構築物も使用してもよい。ある実施形態では、組成物は、カプセルの形態である（例えば、米国特許第５，６９８，１５５号を参照されたい）。好適な医薬賦形剤の他の例は、参照により本明細書に援用されるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １４４７－１６７６（Ａｌｆｏｎｓｏ Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ ｅｄｓ．，１９ｔｈ ｅｄ．１９９５）に記載されている。

【0199】

必要に応じて、キメラタンパク質を含む医薬組成物は、可溶化剤も含み得る。また、当技術分野で公知のように、薬剤は、好適な媒体または送達装置で送達することができる。投与用組成物は、注射部位の痛みを軽減するために、例えばリグノカインなどの局所麻酔剤を任意選択で含み得る。

【0200】

本開示のキメラタンパク質を含む医薬組成物は、単位投与形態で好都合に提供してもよく、薬学分野で周知の方法のいずれかによって調製され得る。そのような方法は一般に、治療剤を１つ以上の副成分を構成する担体と会合させるステップを含む。一般的には、医薬組成物は、治療剤を液体担体、細かく分割した固体担体、またはその両方と会合させることによって均一かつ密接に調製され、次に必要に応じて、生成物を所望の製剤の剤形に成形する（例えば、湿式または乾式造粒、粉末ブレンドなど、その後、当技術分野で公知の従来の方法を使用して錠剤化する）。

【0201】

ある実施形態では、本明細書に開示される任意のキメラタンパク質を、本明細書に開示される投与方法に適合した医薬組成物として通常の手順に従って製剤化する。

【0202】

投与、用量、及び治療計画
本開示の一態様は、がんに罹患しており、がん治療を必要とする対象におけるがん治療の有効性の評価方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている対象から採取される生体試料を取得することを含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、第１の用量の投与前に対象から採取した生体試料中の細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、細胞は、ＣＤ８０＋細胞、ＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、Ｋｉ６７＋細胞、及びＰＤ－Ｌ１＋免疫細胞のうちの１つ以上から選択される。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）生体試料中の細胞の投与後レベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉｉ）投与後の細胞レベル及び／または活性が細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも高い場合に、キメラタンパク質が有効であると判定することを含む。ある実施形態では、生体試料は、腫瘍生検試料または腫瘍外科標本である。ある実施形態では、細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。

【0203】

本開示の一態様は、がんの治療法による治療対象の選択方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている対象から採取される生体試料を取得することを含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、第１の用量の投与前に対象から採取した生体試料中の細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性が測定されている。ある実施形態では、細胞は、ＣＤ８０＋細胞、ＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、Ｋｉ６７＋細胞、及びＰＤ－Ｌ１＋免疫細胞のうちの１つ以上から選択される。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）生体試料中の細胞の投与後レベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉｉ）投与後の細胞レベル及び／または活性が細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも高い場合に、キメラタンパク質による治療のために対象を選択することを含む。ある実施形態では、生体試料は、腫瘍生検試料または腫瘍外科標本である。ある実施形態では、細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。

【0204】

ある実施形態では、生体試料は、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される。ある実施形態では、生体試料は、生検試料または外科標本である。ある実施形態では、生体試料は、腫瘍生検試料または腫瘍外科標本である。ある実施形態では、腫瘍生検試料または腫瘍外科標本は、卵巣癌、卵管癌、腹膜癌、皮膚扁平上皮癌（ＣＳＣＣ）、及び頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）から選択される腫瘍に由来する。

【0205】

ある実施形態では、細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。ある実施形態では、試料を、ＣＤ８０、ＣＤ８、グランザイムＢ、ＣＤ６８、Ｋｉ６７、及びＰＤ－Ｌ１から選択される１つ以上の分子に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、細胞のレベル及び／または活性を測定する。ある実施形態では、１つ以上の分子に特異的に結合する薬剤は、抗体またはその断片である。ある実施形態では、抗体は、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはその断片である。ある実施形態では、試料を、ＣＤ８０、ＣＤ８、グランザイムＢ、ＣＤ６８、Ｋｉ６７、及びＰＤ－Ｌ１の１つ以上をコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、細胞のレベル及び／または活性を測定する。ある実施形態では、１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤は、核酸プライマーまたはプローブである。

【0206】

本開示の一態様は、がんに罹患しており、がん治療を必要とする対象におけるがん治療の有効性の評価方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている対象から採取される第１の生体試料を取得することを含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、本方法はさらに、第１の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉｉ）投与からＮ時間後に対象から採取した第２の生体試料を取得することを含み、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第２の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＮ時間後のレベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｖ）投与からＭ日後に対象から採取した第３の生体試料を取得することを含み、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第３の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＭ日後のレベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｖ）投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い場合、及び／または投与からＭ日後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性に比べて少なくとも約５０％高い場合に、キメラタンパク質が有効であると判定することを含む。

【0207】

本開示の一態様は、がんの治療法による治療対象の選択方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている対象から採取される第１の生体試料を取得することを含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、本方法はさらに、第１の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉｉ）投与からＮ時間後に対象から採取した第２の生体試料を取得することを含み、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第２の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＮ時間後のレベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｖ）投与からＭ日後に対象から採取した第３の生体試料を取得することを含み、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第３の生体試料中のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞の、投与からＭ日後のレベル及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｖ）投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い場合、及び／または投与からＭ日後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性が、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性に比べて少なくとも約５０％高い場合に、キメラタンパク質による治療のために対象を選択することを含む。

【0208】

ある実施形態では、Ｎは、１２未満、または８未満、または６未満、または４未満、または３未満、または２未満、または１未満である。ある実施形態では、Ｍは、２１未満、または１４未満、または１２未満、または１０未満、または８未満、または６未満、または４未満、または２未満である。ある実施形態では、Ｎは、１２未満、または８未満、または６未満、または４未満、または３未満、または２未満、または１未満であり、Ｍは、２１未満、または１４未満、または１２未満、または１０未満、または８未満、または６未満、または４未満、または２未満である。

【0209】

ある実施形態では、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性は、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも高い。ある実施形態では、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性は、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性よりも低い。ある実施形態では、投与からＮ時間後のＢ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性は、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のバックグラウンドレベル及び／または活性の約１０％、約２０％、約３０％、または約４０％以内である。

【0210】

ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は、独立して、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される。ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は血液である。

【0211】

ある実施形態では、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。ある実施形態では、試料を、ＣＤ４０及び／またはＢ細胞マーカーに特異的に結合する薬剤と接触させることによって、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定する。ある実施形態では、Ｂ細胞マーカーは、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＣＤ４５Ｒ、ＣＤ８６、ＣＤ９５、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＣＤ４０から選択される。ある実施形態では、１つ以上の分子に特異的に結合する薬剤は、抗体またはその断片である。ある実施形態では、抗体は、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはその断片である。ある実施形態では、試料を、ＣＤ４０及び／またはＢ細胞マーカーをコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、Ｂ細胞及び／またはＣＤ４０＋細胞のレベル及び／または活性を測定する。ある実施形態では、Ｂ細胞マーカーは、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２４、ＣＤ２７、ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＣＤ４５Ｒ、ＣＤ８６、ＣＤ９５、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＣＤ４０から選択される。ある実施形態では、１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤は、核酸プライマーまたはプローブである。

【0212】

本開示の一態様は、がんに罹患しており、がん治療を必要とする対象におけるがん治療の有効性の評価方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている対象から採取される第１の生体試料を取得することを含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）第１の生体試料中のサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、サイトカインは、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮα、ＩＬ１５、ＩＬ２３、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣから選択される。ある実施形態では、方法はさらに、（ｉｉｉ）投与からＮ時間後に対象から採取した第２の生体試料を取得することを含み、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第２の生体試料中の、投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｖ）投与からＭ日後に対象から採取した第３の生体試料を取得することを含み、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第３の生体試料中の、投与からＭ日後のサイトカインの量及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｖ）投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性がサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも高い場合、及び／または投与からＭ日後のサイトカインの量及び／または活性が、投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性に比べて少なくとも約５０％低い場合に、キメラタンパク質が有効であると判定することを含む。

【0213】

本開示の一態様は、がんの治療法による治療対象の選択方法である。ある実施形態では、本方法は、（ｉ）キメラタンパク質の第１の用量を受けている対象から採取される第１の生体試料を取得することを含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１のドメインと第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｉ）第１の生体試料中のサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、サイトカインは、ＣＣＬ２、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＩＦＮα、ＩＬ１５、ＩＬ２３、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣから選択される。ある実施形態では、方法はさらに、（ｉｉｉ）投与からＮ時間後に対象から採取した第２の生体試料を取得することを含み、Ｎは、１～２４の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第２の生体試料中の、投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｉｖ）投与からＭ日後に対象から採取した第３の生体試料を取得することを含み、Ｍは、１～２８の数値である。ある実施形態では、本方法はさらに、第３の生体試料中の、投与からＭ日後のサイトカインの量及び／または活性を測定することを含む。ある実施形態では、本方法はさらに、（ｖ）投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性がサイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも高い場合、及び／または投与からＭ日後のサイトカインの量及び／または活性が、投与からＮ時間後のサイトカインの量及び／または活性に比べて少なくとも約５０％低い場合に、キメラタンパク質による治療のために対象を選択することを含む。

【0214】

ある実施形態では、Ｎは、１２未満、または８未満、または６未満、または４未満、または３未満、または２未満、または１未満である。ある実施形態では、Ｍは、２１未満、または１４未満、または１２未満、または１０未満、または８未満、または６未満、または４未満、または２未満である。ある実施形態では、Ｎは、１２未満、または８未満、または６未満、または４未満、または３未満、または２未満、または１未満であり、Ｍは、２１未満、または１４未満、または１２未満、または１０未満、または８未満、または６未満、または４未満、または２未満である。

【0215】

ある実施形態では、サイトカインの投与からＮ時間後の量及び／または活性は、サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも高い。ある実施形態では、サイトカインの投与からＮ時間後の量及び／または活性は、サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性よりも低い。ある実施形態では、サイトカインの投与からＮ時間後の量及び／または活性は、サイトカインのバックグラウンド量及び／または活性の約１０％、約２０％、約３０％、または約４０％以内である。ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は、独立して、血液、血漿、血清、血球、涙液、涙、骨髄、腹水、組織または細針生検試料、細胞含有体液、浮遊核酸、痰、唾液、尿、脳脊髄液、腹水、胸水、糞便、リンパ液、婦人科液、皮膚スワブ、膣スワブ、口腔スワブ、鼻腔スワブ、洗浄または洗浄液、吸引物、掻爬物、骨髄標本、生検標本、及び外科標本から選択される。ある実施形態では、第１の生体試料、第２の生体試料、及び第３の生体試料は血液である。

【0216】

ある実施形態では、サイトカインの量及び／または活性を、ＲＮＡ配列決定、免疫組織化学染色、ウエスタンブロッティング、細胞内ウエスタン、免疫蛍光染色、ＥＬＩＳＡ、及び蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）、またはそれらの組み合わせによって測定する。ある実施形態では、試料を、サイトカインに特異的に結合する薬剤と接触させることによって、サイトカインの量及び／または活性を測定する。ある実施形態では、１つ以上の分子に特異的に結合する薬剤は、抗体またはその断片である。ある実施形態では、抗体は、組換え抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、またはその断片である。ある実施形態では、試料を、サイトカインをコードする１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤と接触させることによって、サイトカインの量及び／または活性を測定する。ある実施形態では、１つ以上の核酸に特異的に結合する薬剤は、核酸プライマーまたはプローブである。

【0217】

ある実施形態では、キメラタンパク質の第１の用量は、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。ある実施形態では、第１の用量は、約０．００３、または約０．０１、または約０．０３、または約０．１、または約０．３、または約１、または約２、または約３、または約４、または約６、または約８、または約１０ｍｇ／ｋｇである。

【0218】

ある実施形態では、本明細書に開示されるいずれかの態様の方法は、キメラタンパク質の第２の用量をさらに含む。ある実施形態では、第２の用量を、第１の用量の投与から少なくとも約３日、または少なくとも約４日、または少なくとも約５日、または少なくとも約６日、または少なくとも約７日、または少なくとも約８日、または少なくとも約９日、または少なくとも約１０日、または少なくとも約１４日、または少なくとも約２１日、または少なくとも約２８日後に投与する。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２の用量は、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。ある実施形態では、第２の用量は、約０．００３、または約０．０１、または約０．０３、または約０．１、または約０．３、または約１、または約２、または約３、または約４、または約６、または約８、または約１０ｍｇ／ｋｇである。

【0219】

ある実施形態では、本明細書に開示されるいずれかの態様の方法は、キメラタンパク質の第２の用量をさらに含む。ある実施形態では、第２の用量を、第１の用量の投与から少なくとも約３日、または少なくとも約４日、または少なくとも約５日、または少なくとも約６日、または少なくとも約７日、または少なくとも約８日、または少なくとも約９日、または少なくとも約１０日、または少なくとも約１４日、または少なくとも約２１日、または少なくとも約２８日後に投与する。ある実施形態では、キメラタンパク質の第２の用量は、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。ある実施形態では、第２の用量は、約０．００３、または約０．０１、または約０．０３、または約０．１、または約０．３、または約１、または約２、または約３、または約４、または約６、または約８、または約１０ｍｇ／ｋｇである。

【0220】

ある実施形態では、第１のドメインは、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）リガンドに結合することができる。ある実施形態では、第１のドメインは、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインの実質的にすべてを含む。ある実施形態では、第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む。

【0221】

ある実施形態では、第２のドメインは、ＣＤ４０受容体に結合することができる。ある実施形態では、第２のドメインは、実質的にＣＤ４０Ｌの細胞外ドメイン全体を含む。ある実施形態では、第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む。

【0222】

ある実施形態では、リンカーは、ＩｇＧ４に由来するヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。ある実施形態では、リンカーは、ヒトＩｇＧ４に由来するヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む。

【0223】

ある実施形態では、（ａ）第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列を含み、（ｂ）第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列を含み、（ｃ）リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５または配列番号７のアミノ酸配列をさらに含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５及び配列番号７のアミノ酸配列をさらに含む。

【0224】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、または少なくとも約９６％、または少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも約９９．２％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも約９９．４％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも約９９．６％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも約９９．８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列を含む。

【0225】

ある実施形態では、ヒト対象は、進行した固形腫瘍またはリンパ腫に罹患しているか、または罹患していると疑われる。ある実施形態では、ヒト対象は、卵巣癌、卵管癌、腹膜癌、皮膚扁平上皮癌（ＣＳＣＣ）、及び頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）から選択されるがんに罹患しているか、または罹患していると疑われる。ある実施形態では、対象は、１つ以上のプラチナベースの治療に失敗している。ある実施形態では、ヒト対象は、プラチナ療法を受けることができない。ある実施形態では、ヒト対象は、同時化学療法、免疫療法、生物学的療法またはホルモン療法を受けておらず、及び／またはヒト対象は、標準療法を受けているか、耐性があるか、または不適格であり、及び／またはそのがんに標準治療と見なされる承認済みの治療法がない。

【0226】

ある実施形態では、本明細書に開示されるキメラタンパク質は、約２０ｍｇ／ｍＬの濃度及び 約１ｍＬの総容量の滅菌凍結溶液として、任意選択で１０ｍＬのガラスバイアル中に提供される。ある実施形態では、本明細書に開示されるキメラタンパク質を、通常の生理食塩水で希釈した後、点滴静注（ＩＶ）によって投与する。特定の実施形態の開始用量、用量漸増スキーム、及び用量スケジュールを以下に示す。

【0227】

ある実施形態では、投与するキメラタンパク質の用量は、少なくとも０．０００１ｍｇ／ｋｇ、例えば、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態では、投与するキメラタンパク質の用量は、少なくとも約０．３ｍｇ／ｋｇ、例えば、少なくとも約０．３ｍｇ／ｋｇ、または約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ、または約３、約４ｍｇ／ｋｇ、または約６ｍｇ／ｋｇ、または約８ｍｇ／ｋｇ、または約１０ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態では、投与するキメラタンパク質の用量は、少なくとも約１ｍｇ／ｋｇ、例えば、少なくとも約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ、または約３、約４ｍｇ／ｋｇ、または約６ｍｇ／ｋｇ、または約８ｍｇ／ｋｇ、または約１０ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質の用量は、貧血または他の血球減少症の影響によって制限されないため、特定の他の治療薬（例えば、抗ＣＤ４７抗体またはＳＩＲＰαＦｃ融合タンパク質）と比較して、その許容される用量よりも高くなる。さらに、ある実施形態では、低用量プライミングは必要ない。

【0228】

ある実施形態では、投与は静脈内である。ある実施形態では、投与は腫瘍内である。ある実施形態では、投与は注射による。ある実施形態では、投与は輸液による。ある実施形態では、投与は、点滴静注によって行われる。ある実施形態では、投与は、腫瘍内注射によって行われる。

【0229】

ある実施形態では、キメラタンパク質を、初期用量（例えば、約０．０００１、約０．００１、約０．００３、約０．０１、約０．０３、約０．１、約０．３、約１、約２、約３、約４、約６、約８、または約１０ｍｇ／ｋｇのいずれか１つ）で投与し、キメラタンパク質を、１回以上の後続投与で投与する。ある実施形態では、約１回以上の後続投与は、約０．０００１、約０．００１、約０．００３、約０．０１、約０．０３、約０．１、約０．３、約１、約２、約３、約４、約６、約８、及び約１０ｍｇ／ｋｇのうちの１つ以上の用量を有する。

【0230】

ある実施形態では、開始用量及び／または後続用量は、最大耐用量であるか、または最大耐用量未満である。

【0231】

ある実施形態では、１回以上の後続用量の間で、例えば、０．０００１ｍｇ／ｋｇ～０．００１ｍｇ／ｋｇ、０．００１ｍｇ／ｋｇ～０．０１ｍｇ／ｋｇ、及び０．０１ｍｇ／ｋｇ～０．１ｍｇ／ｋｇのように、対数増分で用量を漸増させる。

【0232】

ある実施形態では、１回以上の後続用量の間で、例えば、０．００１ｍｇ／ｋｇ～０．００３ｍｇ／ｋｇ、及び０．００３ｍｇ／ｋｇ～０．０１ｍｇ／ｋｇのように、約半対数増分で用量を漸増させる。

【0233】

ある実施形態では、ヒト対象は、１つ以上のプラチナベースの療法に失敗しており、場合によりプラチナ療法を受ける資格がない。ある実施形態では、ヒト対象は、同時化学療法、免疫療法、生物学的療法またはホルモン療法を受けておらず、及び／またはヒト対象は、標準療法を受けているか、耐性があるか、または不適格であり、及び／またはそのがんに標準治療と見なされる承認済みの治療法がない。

【0234】

ある実施形態では、初期用量は、後続投与の少なくとも１つ、例えば、後続投与のそれぞれについての用量よりも低い。

【0235】

ある実施形態では、初期用量は、後続投与の少なくとも１つ、例えば、後続投与のそれぞれについての用量と同量である。

【0236】

ある実施形態では、キメラタンパク質を、少なくとも月に約１回投与する。

【0237】

ある実施形態では、キメラタンパク質を、少なくとも月に約２回投与する。

【0238】

ある実施形態では、キメラタンパク質を、少なくとも月に約３回投与する。

【0239】

ある実施形態では、キメラタンパク質を、最初に３週間にわたって週１回投与し、次いでキメラタンパク質を３週間に１回または４週間に１回投与する。

【0240】

ある実施形態では、キメラタンパク質を、最初に３週間にわたって週１回投与し、次いでキメラタンパク質を月に約２回投与する。例えば、キメラタンパク質を、最初に３週間にわたって週１回投与し、次いでキメラタンパク質を２週間に約１回投与する。

【0241】

ある実施形態では、キメラタンパク質を、少なくとも月に約４回投与する。例えば、キメラタンパク質を、週に約１回投与する。ある実施形態では、キメラタンパク質を毎週１回（７日間に１回）投与する。ある実施形態では、キメラタンパク質を２週間に１回投与する。

【0242】

ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質の投与は、患者に貧血または他の血球減少症を引き起こさない。ある実施形態では、投与は、ＲＢＣの溶解を引き起こさない。ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質の投与は、例えば抗ＣＤ４７抗体よりも貧血または別の血球減少症を引き起こす可能性が低い。ある実施形態では、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質の用量は、貧血または他の血球減少症の影響によって制限されないため、特定の他の治療薬（例えば、抗ＣＤ４７抗体またはＳＩＲＰαＦｃ融合タンパク質）と比較して、その許容される用量よりも高くなる。さらに、ある実施形態では、低用量プライミングは必要ない。

【0243】

ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（例えば、配列番号５９または配列番号６１）が与えるもう一つの利点は、標的化にもかかわらず、患者に貧血または他の血球減少症を引き起こさないことである。これは、本明細書に示されているように、ＣＤ４７／ＳＩＲＰα相互作用が赤血球の溶解に重要な役割を果たしているにもかかわらず、ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質がＲＢＣの溶解を引き起こさないためである。したがって、本発明の方法は、例えば抗ＣＤ４７抗体よりも貧血または他の血球減少症を引き起こす可能性が低い。

【0244】

キメラタンパク質を、点滴静注または血流へのボーラス注射によって静脈内に投与してもよい。キメラタンパク質を、進行した卵巣癌、卵管癌、原発性腹膜癌に罹患している患者に点滴静注によって静脈内に投与してもよい。

【0245】

キメラタンパク質を、腫瘍内注射によって投与してもよい。ある実施形態では、腫瘍内投与の治療用量は、点滴静注の治療用量と同等かそれ未満である。ある実施形態では、腫瘍内投与の治療用量は、点滴静注の治療用量と同等である。ある実施形態では、腫瘍内投与の治療用量は、点滴静注の治療用量未満である。ある実施形態では、進行性または転移性のＣＳＣＣ及びＨＮＳＣＣに罹患している患者に対する腫瘍内投与の治療用量。

【0246】

ある実施形態では、本発明のキメラタンパク質は、従来の免疫療法（例えば、ＯＰＤＩＶＯ、ＫＥＹＴＲＵＤＡ、ＹＥＲＶＯＹ、及びＴＥＣＥＮＴＲＩＱのうちの１つ以上による治療）で見られるよりも副作用が少ない二重効果を可能とする。例えば、本発明のキメラタンパク質は、皮膚、胃腸管、腎臓、末梢及び中枢神経系、肝臓、リンパ節、目、膵臓、ならびに内分泌系を含む様々な組織及び器官に影響を与える一般的に観察される免疫関連の有害事象、例えば、下垂体炎、大腸炎、肝炎、間質性肺炎、発疹、及びリウマチ性疾患などを軽減または予防する。

【0247】

静脈内投与に好適な剤形としては、例えば、溶液、懸濁液、分散液、乳濁液などが挙げられる。それらはまた、使用直前に無菌注射用媒体に溶解または懸濁し得る、無菌の固体組成物（例えば、凍結乾燥組成物）の形態で製造され得る。それらは、例えば、当技術分野で公知の懸濁剤または分散剤を含んでもよい。

【0248】

本明細書に開示される任意のキメラタンパク質の用量及び投与スケジュールは、治療する疾患、対象の一般的な健康状態、及び投与する医師の裁量を含むがこれらに限定されない様々なパラメータに依存し得る。

【0249】

一態様では、本開示は、治療を必要とするヒト対象におけるがんの治療方法に関し、方法は、一般構造：Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端を有するキメラタンパク質の有効量をヒト対象に投与するステップを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインであり、投与のステップは、二相性投与を含む。ある実施形態では、第１段階及び第２段階は、それぞれ独立して、週に約２回～２か月に約１回の投与頻度を含む。ある実施形態では、リンカーは、ジスルフィド結合を形成することが可能である少なくとも１つのシステイン残基を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、例えば、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．７ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約２．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２．５ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１．５ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約０．５ｍｇ／ｋｇの用量範囲で線形用量反応を示す。ある実施形態では、キメラタンパク質は、ベル型の用量反応を示さない。

【0250】

ある実施形態では、第１段階の投与頻度と第２段階の投与頻度は同じである。他の実施形態では、第１段階の投与頻度と第２段階の投与頻度は異なる。

【0251】

ある実施形態では、第１段階の投与頻度は、約３日毎、週に約２回、約毎週、約１０日毎、３週間に約２回、約２週間毎、約３週間毎、約４週間毎、約１か月毎、約５週間毎、約６週間毎、約７週間毎、約８週間毎、及び約２か月毎から選択される。ある実施形態では、第１段階の投与頻度は、約３日毎～約１０日毎、約１週間毎～約２週間毎、約１０日毎～約３週間毎、約２週間毎～約４週間毎、約３週間毎～約５週間毎、約４週間毎～約６週間毎、約５週間毎～約７週間毎、約６週間毎～約８週間毎、及び約６週間毎～約２か月毎から選択される。

【0252】

ある実施形態では、第２段階の投与頻度は、約３日毎、週に約２回、約毎週、約１０日毎、３週間に約２回、約２週間毎、約３週間毎、約４週間毎、約１か月毎、約５週間毎、約６週間毎、約７週間毎、約８週間毎、及び約２か月毎から選択される。ある実施形態では、第２段階の投与頻度は、約３日毎～約１０日毎、約１週間毎～約２週間毎、約１０日毎～約３週間毎、約２週間毎～約４週間毎、約３週間毎～約５週間毎、約４週間毎～約６週間毎、約５週間毎～約７週間毎、約６週間毎～約８週間毎、及び約６週間毎～約２か月毎から選択される。

【0253】

ある実施形態では、第１段階の投与頻度は、約３日毎～約１０日毎、約１週間毎～約２週間毎、約１０日毎～約３週間毎から選択され、第２段階の投与頻度は、約１週間毎～約２週間毎、約１０日毎～約３週間毎、約２週間毎～約４週間毎、約３週間毎～約５週間毎、約４週間毎～約６週間毎から選択される。

【0254】

さらに、または代替的に、ある実施形態では、第１段階及び第２段階は、それぞれ独立して、約２日間～約１２か月間続く。ある実施形態では、第１段階は約２週間～約２か月間続き、第２段階は約２週間～約１２か月間続く。ある実施形態では、第１段階は約２週間～約１か月間続き、第２段階は約２週間～約１２か月間続く。ある実施形態では、第１段階は約２週間～約１か月間続き、第２段階は約４週間～約１２か月間続く。

【0255】

さらに、または代替的に、ある実施形態では、第１段階、第２段階、及び第３段階の有効量は、それぞれ独立して、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｍｌを含む。ある実施形態では、第１段階、第２段階、及び第３段階の有効量は、それぞれ独立して、約０．０３ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、及び前述の値の任意の２つを含む及び／またはその間の任意の範囲から選択される。ある実施形態では、第１段階、第２段階、及び第３段階の有効量は、それぞれ独立して、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、及び約１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇから選択される。ある実施形態では、第１段階、第２段階、及び第３段階の有効量は同じである。ある実施形態では、第１段階、第２段階、及び第３段階の有効量は異なる。ある実施形態では、第１段階の有効量は、第２段階の有効量より高い。ある実施形態では、第１段階の有効量は、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇであり、第２段階の有効量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇである。

【0256】

ある実施形態では、本明細書に開示されるキメラタンパク質は、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質である。

【0257】

一態様では、本開示は、治療を必要とするヒト対象におけるがんの治療方法に関し、方法は、一般構造：Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端を有するキメラタンパク質の有効量をヒト対象に投与するステップを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインであり、投与のステップは、第１サイクル、第２サイクル、及び第３サイクルを含む。ある実施形態では、リンカーは、ジスルフィド結合を形成することが可能である少なくとも１つのシステイン残基を含む。ある実施形態では、第１サイクル、第２サイクル、及び第３サイクルは、それぞれ独立して、週に約２回～２か月に約１回の投与頻度を含む。ある実施形態では、第１サイクルの投与頻度、第２サイクルの投与頻度、及び第３サイクルの投与頻度は同じである。ある実施形態では、第１サイクルの投与頻度、第２サイクルの投与頻度、及び第３サイクルの投与頻度は異なる。ある実施形態では、第１サイクルの投与頻度は、約３日毎、週に約２回、約毎週、約１０日毎、３週間に約２回、約２週間毎、約３週間毎、約４週間毎、約１か月毎、約５週間毎、約６週間毎、約７週間毎、約８週間毎、及び約２か月毎から選択される。ある実施形態では、キメラタンパク質は、例えば、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．７ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約２．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２．５ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１．５ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約０．５ｍｇ／ｋｇの用量範囲で線形用量反応を示す。ある実施形態では、キメラタンパク質は、ベル型の用量反応を示さない。

【0258】

ある実施形態では、第１サイクルの投与頻度は、約３日毎～約１０日毎、約１週間毎～約２週間毎、約１０日毎～約３週間毎、約２週間毎～約４週間毎、約３週間毎～約５週間毎、約４週間毎～約６週間毎、約５週間毎～約７週間毎、約６週間毎～約８週間毎、及び約６週間毎～約２か月毎から選択される。ある実施形態では、第２サイクルの投与頻度は、約３日毎、週に約２回、約毎週、約１０日毎、３週間に約２回、約２週間毎、約３週間毎、約４週間毎、約１か月毎、約５週間毎、約６週間毎、約７週間毎、約８週間毎、及び約２か月毎から選択される。ある実施形態では、第２サイクルの投与頻度は、約３日毎～約１０日毎、約１週間毎～約２週間毎、約１０日毎～約３週間毎、約２週間毎～約４週間毎、約３週間毎～約５週間毎、約４週間毎～約６週間毎、約５週間毎～約７週間毎、約６週間毎～約８週間毎、及び約６週間毎～約２か月毎から選択される。ある実施形態では、第３サイクルの投与頻度は、約３日毎、週に約２回、約毎週、約１０日毎、３週間に約２回、約２週間毎、約３週間毎、約４週間毎、約１か月毎、約５週間毎、約６週間毎、約７週間毎、約８週間毎、及び約２か月毎から選択される。ある実施形態では、第３サイクルの投与頻度は、約３日毎～約１０日毎、約１週間毎～約２週間毎、約１０日毎～約３週間毎、約２週間毎～約４週間毎、約３週間毎～約５週間毎、約４週間毎～約６週間毎、約５週間毎～約７週間毎、約６週間毎～約８週間毎、及び約６週間毎～約２か月毎から選択される。ある実施形態では、第１サイクルの投与頻度は、約３日毎～約１０日毎、約１週間毎～約２週間毎、約１０日毎～約３週間毎から選択され、第２サイクルの投与頻度は、約１週間毎～約２週間毎、約１０日毎～約３週間毎、約２週間毎～約４週間毎、約３週間毎～約５週間毎、約４週間毎～約６週間毎から選択される。

【0259】

さらに、または代替的に、ある実施形態では、第１サイクル、第２サイクル、及び第３サイクルは、それぞれ独立して、約２日間～約１２か月間続く。ある実施形態では、第１サイクルは約２週間～約２か月間続き、第２サイクルは約２週間～約１２か月間続く。ある実施形態では、第１サイクルは約２週間～約２か月間続き、第２サイクルは約２週間～約１２か月間続き、第３サイクルは約２週間～約６か月間続く。

【0260】

さらに、または代替的に、ある実施形態では、第１サイクル、第２サイクル、及び第３サイクルの有効量は、それぞれ独立して、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｍｌを含む。ある実施形態では、第１サイクル、第２サイクル、及び第３サイクルの有効量は、それぞれ独立して、約０．０３ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、及び前述の値の任意の２つを含む及び／またはその間の任意の範囲から選択される。ある実施形態では、第１サイクル、第２サイクル、及び第３サイクルの有効量は、それぞれ独立して、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、及び約１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇから選択される。

【0261】

ある実施形態では、第１サイクル、第２サイクル、及び第３サイクルの有効量は同じである。他の実施形態では、第１サイクル、第２サイクル、及び第３サイクルの有効量は異なる。ある実施形態では、第１サイクルの有効量は、第２サイクルの有効量より高い。他の実施形態では、第１サイクルの有効量は、第２サイクルの有効量より低い。さらに他の実施形態では、第１サイクルの有効量と第２サイクルの有効量は同じである。

【0262】

ある実施形態では、第１サイクルの有効量は、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇであり、第２サイクルの有効量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇである。

【0263】

ある実施形態では、本明細書に開示されるキメラタンパク質は、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質である。

【0264】

一態様では、本開示は、治療を必要とするヒト対象におけるがんの治療方法に関し、方法は、一般構造：Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端を有するキメラタンパク質の有効量を投与計画によってヒト対象に投与するステップを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインであり、投与計画は、約３日毎～約２か月毎の範囲の頻度で投与することを含む。ある実施形態では、リンカーは、ジスルフィド結合を形成することが可能である少なくとも１つのシステイン残基を含む。ある実施形態では、投与計画は、約３日毎、週に約２回、約毎週、約１０日毎、３週間に約２回、約２週間毎、約３週間毎、約４週間毎、約１か月毎、約５週間毎、約６週間毎、約７週間毎、約８週間毎、及び約２か月毎から選択される。ある実施形態では、投与計画は、約毎週、約１０日毎、約２週間毎、約３週間毎、約４週間毎、約１か月毎、約５週間毎、約６週間毎、約７週間毎、約８週間毎、及び約２か月毎から選択される。ある実施形態では、投与計画は、約２週間毎、約３週間毎、または約４週間毎である。

【0265】

一態様では、本開示は、治療を必要とするヒト対象におけるがんの治療方法に関し、方法は、一般構造：Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端を有するキメラタンパク質の有効量を、約３日毎～約１０日毎、約１週間毎～約２週間毎、約１０日毎～約３週間毎、約２週間毎～約４週間毎、約３週間毎～約５週間毎、約４週間毎～約６週間毎、約５週間毎～約７週間毎、約６週間毎～約８週間毎、及び約６週間毎～約２か月毎から選択される投与計画によってヒト対象に投与するステップを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、リンカーは、ジスルフィド結合を形成することが可能である少なくとも１つのシステイン残基を含む。ある実施形態では、投与計画は、約１週間毎～約２週間毎、約１０日毎～約３週間毎、または約２週間毎～約４週間毎である。ある実施形態では、キメラタンパク質は、例えば、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．７ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約２．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２．５ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１．５ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約０．５ｍｇ／ｋｇの用量範囲で線形用量反応を示す。ある実施形態では、キメラタンパク質は、ベル型の用量反応を示さない。

【0266】

本明細書に開示される態様のいずれかのいくつかの実施形態では、第１のドメインは、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）リガンドに結合することができる。ある実施形態では、第１のドメインは、ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）の細胞外ドメインの実質的にすべてを含む。ある実施形態では、第２のドメインは、ＣＤ４０受容体に結合することができる。ある実施形態では、第２のドメインは、実質的にＣＤ４０Ｌの細胞外ドメイン全体を含む。ある実施形態では、リンカーは、ＩｇＧ４、例えば、ヒトＩｇＧ４に由来するヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。

【0267】

本明細書に開示される態様のいずれかのいくつかの実施形態では、第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。本明細書に開示される態様のいずれかのいくつかの実施形態では、第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。本明細書に開示される態様のいずれかのいくつかの実施形態では、第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一のアミノ酸配列を含む。本明細書に開示される態様のいずれかのいくつかの実施形態では、第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９７％同一のアミノ酸配列を含む。本明細書に開示される態様のいずれかのいくつかの実施形態では、第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。本明細書に開示される態様のいずれかのいくつかの実施形態では、第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。本明細書に開示される態様のいずれかのいくつかの実施形態では、第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、（ａ）第１のドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列を含み、（ｂ）第２のドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列を含み、（ｃ）リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。

【0268】

ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５または配列番号７のアミノ酸配列をさらに含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５及び配列番号７のアミノ酸配列をさらに含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９７％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも約９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む。

【0269】

さらに、または代替的に、ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも約９９．２％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも約９９．４％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも約９９．６％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも約９９．８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒト対象は標準治療を受けたことがあるか、耐性があるか、または不適格であり、及び／またはがんに標準治療とみなされる承認済みの治療法がない。

【0270】

一態様では、本開示は、治療を必要とするヒト対象における末梢血から二次リンパ器官（例えば、リンパ節及び脾臓）へのリンパ球の遊走を促進する方法に関し、方法は、一般構造：Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端を有するキメラタンパク質の有効量をヒト対象に投与するステップを含み、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。

【0271】

本明細書に開示される態様のいずれかのいくつかの実施形態では、ヒト対象は、同時化学療法、免疫療法、生物学的療法、またはホルモン療法を受けていない。

【0272】

一態様では、本開示は、本明細書に開示される実施形態のいずれかの方法で使用するためのキメラタンパク質に関する。

【0273】

一態様では、本開示は、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも約９８％同一のアミノ酸配列を含むキメラタンパク質に関する。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも約９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、キメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。

【0274】

第１段階の投与頻度と第２段階の投与頻度は、同じであっても異なっていてもよい。ある実施形態では、第１段階の投与頻度と第２段階の投与頻度は、それぞれ独立して、約３日毎、週に約２回、約毎週、約１０日毎、３週間に約２回、約２週間毎、約３週間毎、約４週間毎、約１か月毎、約５週間毎、約６週間毎、約７週間毎、約８週間毎、及び約２か月毎から選択される。ある実施形態では、第１段階の投与頻度は、約３日毎～約１０日毎、約１週間毎～約２週間毎、約１０日毎～約３週間毎、約２週間毎～約４週間毎、約３週間毎～約５週間毎、約４週間毎～約６週間毎、約５週間毎～約７週間毎、約６週間毎～約８週間毎、及び約６週間毎～約２か月毎から選択される。

【0275】

ある実施形態では、第１段階及び第２段階は、それぞれ独立して、約２日間～約１２か月間続く。例えば、ある実施形態では、第１段階は約２週間～約２か月間続き、第２段階は約２週間～約１２か月間続く。ある実施形態では、第１段階は約２週間～約１か月間続き、第２段階は約２週間～約１２か月間続く。ある実施形態では、第１段階は約２週間～約１か月間続き、第２段階は約４週間～約１２か月間続く。

【0276】

第１段階、第２段階、及び第３段階の有効量は、同じであっても異なっていてもよい。ある実施形態では、第１段階、第２段階、及び第３段階の有効量は、それぞれ独立して、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｍｌを含む。ある実施形態では、第１段階の有効量は、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇであり、第２段階の有効量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態では、本明細書に開示されるキメラタンパク質は、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質である。

【0277】

ある実施形態では、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、持続的な免疫調節効果を提供することができる。

【0278】

ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、リンカーは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。

【0279】

ある実施形態では、リンカーは、ＩｇＧ由来のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。ある実施形態では、リンカーは、ＩｇＧ１及びＩｇＧ４から選択されるＩｇＧ由来のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。ある実施形態では、リンカーは、ヒトＩｇＧ１またはヒトＩｇＧ４に由来するヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。ある実施形態では、リンカーは、ＩｇＧ４由来のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含む。ある実施形態では、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ ＦｃドメインはヒトＩｇＧ４由来である。

【0280】

さらに、または代替的に、ある実施形態では、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一のアミノ酸配列を含む。実施 形態では、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインは、配列番号５７のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。

【0281】

さらに、または代替的に、ある実施形態では、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインは、配列番号５８のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。

【0282】

さらに、または代替的に、ある実施形態では、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１と少なくとも９０％、または９３％、または９５％、または９７％、または９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９６％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９７％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９８％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含む。ある実施形態では、ヒトＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα）－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質は、配列番号５９または配列番号６１のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。

【0283】

一態様では、本開示は、（ｉ）ヒト対象に、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造を有するキメラタンパク質を投与し（（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ジスルフィド結合を形成することができる少なくとも１つのシステイン残基を含み、及び／またはヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである）、（ｉｉ）第２の治療剤を投与することを含む、ヒト対象におけるがんの治療方法に関する。ある実施形態では、キメラタンパク質を、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。ある実施形態では、投与するキメラタンパク質の用量は、少なくとも約０．３ｍｇ／ｋｇ、例えば、少なくとも約０．３ｍｇ／ｋｇ、または約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ、または約３、約４ｍｇ／ｋｇ、または約６ｍｇ／ｋｇ、または約８ｍｇ／ｋｇ、または約１０ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態では、投与するキメラタンパク質の用量は、少なくとも約１ｍｇ／ｋｇ、例えば、少なくとも約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ、または約３、約４ｍｇ／ｋｇ、または約６ｍｇ／ｋｇ、または約８ｍｇ／ｋｇ、または約１０ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態では、キメラタンパク質は、例えば、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．７ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約２．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２．５ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１．５ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約０．５ｍｇ／ｋｇの用量範囲で線形用量反応を示す。ある実施形態では、キメラタンパク質は、ベル型の用量反応を示さない。

【0284】

ある実施形態では、キメラタンパク質の投与により、キメラタンパク質の投与前、キメラタンパク質を投与しない第２の対象、及び／または外部対照の受容体占有率（ＲＯ）と比較して、少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約６５％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約７５％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約８５％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％となるＣＤ４７のＲＯが白血球上に生じる。ある実施形態では、キメラタンパク質の投与により、キメラタンパク質の投与前、キメラタンパク質を投与しない第２の対象、及び／または外部対照の受容体占有率（ＲＯ）と比較して、少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％、または少なくとも約６０％、または少なくとも約６５％、または少なくとも約７０％、または少なくとも約７５％、または少なくとも約８０％、または少なくとも約８５％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％となるＣＤ４７のＲＯがＢ細胞上に生じる。ある実施形態では、キメラタンパク質の投与により、キメラタンパク質の投与前、キメラタンパク質を投与しない第２の対象、及び／または外部対照のＲＯと比較して、ＩＬ－１２、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、ＭＩＰ－１α、及びＭＤＣ％のうちの１つ以上の量または活性が増加する。

【0285】

一態様では、本開示は、治療を必要とする対象に、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造のキメラタンパク質を投与することを含む、ヒト対象におけるがんの治療方法に関し、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ジスルフィド結合を形成することができる少なくとも１つのシステイン残基を含み、及び／またはヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインであり、対象は、第２の治療剤による治療を受けているか、または受けたことがある。ある実施形態では、キメラタンパク質を、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。ある実施形態では、投与するキメラタンパク質の用量は、少なくとも約０．３ｍｇ／ｋｇ、例えば、少なくとも約０．３ｍｇ／ｋｇ、または約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ、または約３、約４ｍｇ／ｋｇ、または約６ｍｇ／ｋｇ、または約８ｍｇ／ｋｇ、または約１０ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態では、投与するキメラタンパク質の用量は、少なくとも約１ｍｇ／ｋｇ、例えば、少なくとも約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ、または約３、約４ｍｇ／ｋｇ、または約６ｍｇ／ｋｇ、または約８ｍｇ／ｋｇ、または約１０ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態では、キメラタンパク質は、例えば、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．７ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約２．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２．５ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１．５ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約０．５ｍｇ／ｋｇの用量範囲で線形用量反応を示す。ある実施形態では、キメラタンパク質は、ベル型の用量反応を示さない。

【0286】

一態様では、本開示は、治療を必要とする対象に第２の抗がん治療剤を投与することを含む、ヒト対象におけるがんの治療方法に関し、対象は、Ｎ末端－（ａ）－（ｂ）－（ｃ）－Ｃ末端の一般構造のキメラタンパク質による治療を受けているか、または受けたことがあり、（ａ）は、ヒトシグナル調節タンパク質α（ＣＤ１７２ａ（ＳＩＲＰα））の細胞外ドメインを含む第１のドメインであり、（ｂ）は、第１及び第２のドメインに隣接するリンカーであり、リンカーは、ジスルフィド結合を形成することができる少なくとも１つのシステイン残基を含み、及び／またはヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ Ｆｃドメインを含み、（ｃ）は、ヒトＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）の細胞外ドメインを含む第２のドメインである。ある実施形態では、キメラタンパク質を、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。ある実施形態では、キメラタンパク質は、例えば、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．７ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約１．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約２．５ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２．５ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１．５ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約０．３ｍｇ／ｋｇ～約０．５ｍｇ／ｋｇの用量範囲で線形用量反応を示す。ある実施形態では、キメラタンパク質は、ベル型の用量反応を示さない。

【0287】

ある実施形態では、キメラタンパク質を、第２の治療剤の前に投与する。ある実施形態では、第２の治療剤を、キメラタンパク質の前に投与する。ある実施形態では、第２の治療剤とキメラタンパク質を、実質的に一緒に投与する。

【0288】

ある実施形態では、第２の治療剤は、抗体、及び化学療法剤から選択される。ある実施形態では、抗体は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）が可能である。ある実施形態では、抗体は、セツキシマブ、リツキシマブ、オビヌツズマブ、Ｈｕｌ４．１８Ｋ３２２Ａ、Ｈｕ３Ｆ８、ジニツキシマブ、及びトラスツズマブから選択される。ある実施形態では、抗体は、抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）が可能である。ある実施形態では、抗体は、セツキシマブ、ダラツムマブ、リツキシマブ、及びトラスツズマブから選択される。ある実施形態では、抗体は、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ－２、上皮細胞接着分子（ＥｐＣＡＭ）、ヒト上皮ムチン－１、ＣＤ２０、ＣＤ３０、ＣＤ３８、ＣＤ４０、及びＣＤ５２から選択される分子に結合することができる。ある実施形態では、抗体は、ＥＧＦＲと結合することができる。ある実施形態では、抗体は、Ｍａｂ Ａ１３、ＡＭＧ５９５、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ，Ｃ２２５）、パニツムマブ（ＡＢＸ－ＥＧＦ，Ｖｅｃｔｉｂｉｘ）、デパツキシズマブ（ＡＢＴ８０６）、デパツキシズマブ、マフォドチン、デュリゴツズマブ（ＭＥＨＤ７９４５Ａ，ＲＧ７５９７）、フツキシマブ（Ｓｙｍ００４）、ＧＣ１１１８、イムガツズマブ（ＧＡ２０１）、マツズマブ（ＥＭＤ７２０００）、ネシツムマブ（Ｐｏｒｔｒａｚｚａ）、ニモツズマブ（ｈ－Ｒ３）、アニツムマブ（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ，ＡＢＸ－ＥＧＦ）、ザルツムマブ、ｈｕｍＭＲ１、及びトムゾツキシマブから選択される。ある実施形態では、抗体はセツキシマブである。

【0289】

ある実施形態では、化学療法剤はアントラサイクリンである。ある実施形態では、アンタサイクリンは、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン及びイダルビシン、ならびにそれらの薬学的に許容される塩、酸、または誘導体から選択される。ある実施形態では、化学療法剤はドキソルビシンである。

【0290】

ある実施形態では、投与するキメラタンパク質の用量は、少なくとも約０．０００１ｍｇ／ｋｇ、例えば、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ～約１０．０ｍｇ／ｋｇである。キメラタンパク質を、初期用量で（例えば、約０．０００１、約０．００１、約０．００３、約０．０１、約０．０３、約０．１、約０．３、約１、約２、約３、約４、約６、または約１０．０ｍｇ／ｋｇのうちの１つで）投与してもよく、キメラタンパク質を、１回以上の後続投与において（例えば、約０．０００１、約０．００１、約０．００３、約０．０１、約０．０３、約０．１、約０．３、約１、約２、約３、約４、約６、約８、及び約１０ｍｇ／ｋｇの１つ以上で）投与する。ある実施形態では、投与するキメラタンパク質の用量は、少なくとも約０．３ｍｇ／ｋｇ、例えば、少なくとも約０．３ｍｇ／ｋｇ、または約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ、または約３、約４ｍｇ／ｋｇ、または約６ｍｇ／ｋｇ、または約８ｍｇ／ｋｇ、または約１０ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態では、投与するキメラタンパク質の用量は、少なくとも約１ｍｇ／ｋｇ、例えば、少なくとも約１．０ｍｇ／ｋｇ、または約２ｍｇ／ｋｇ、または約３、約４ｍｇ／ｋｇ、または約６ｍｇ／ｋｇ、または約８ｍｇ／ｋｇ、または約１０ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態では、初期用量は、後続投与の少なくとも１つ（例えば、後続投与のそれぞれ）の用量よりも少ないか、または初期用量は、後続投与の少なくとも１つ（例えば、後続投与のそれぞれ）の用量と同じである。ある実施形態では、開始用量及び／または後続用量は、最大耐用量であるか、または最大耐用量未満である。ある実施形態では、キメラタンパク質を、少なくとも月に約１回、例えば、少なくとも月に約２回、少なくとも月に約３回、及び少なくとも月に約４回投与する。ある実施形態では、キメラタンパク質を、最初に３週間にわたって週１回投与し、次いでキメラタンパク質を、約３週間に１回または４週間に１回投与するか、あるいは、キメラタンパク質を、最初に３週間にわたって週１回投与し、次いでキメラタンパク質を、月に約２回、例えば、３週間にわたって週１回投与し、次いでキメラタンパク質を、２週間に約１回投与する。

【0291】

ある実施形態では、がんは、進行した固形腫瘍（局所性及び／または転移性）またはリンパ腫を含む。ある実施形態では、がんは、卵巣癌、卵管癌、腹膜癌、皮膚扁平上皮癌（ＣＳＣＣ）、及び頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）から選択される。ある実施形態では、がんは、進行した固形腫瘍（局所性及び／または転移性）または進行したリンパ腫を含む。

【実施例】

【0292】

本明細書の実施例は、本技術の利点及び有用性を説明するため、ならびに本技術のキメラタンパク質の調製または使用に関して当業者をさらに支援するために示される。本明細書の実施例は、本技術の好ましい態様をより完全に説明するためにも提示される。実施例は、添付の特許請求の範囲によって定義される本技術の範囲を限定するものとしては決して解釈されるべきではない。これらの実施例は、上述した本技術の変形例、態様、または実施形態のいずれかを含んでも、または組み込んでもよい。上述の変形例、態様または実施形態は、それぞれ、本技術のいずれかまたはすべての他の変形例、態様または実施形態の変形例をさらに含んでも、または組み込んでもよい。

【0293】

実施例１：ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（ＳＬ－１７２１５４）の第１相臨床試験
このヒト初の第１相用量漸増試験では現在、プラチナ耐性卵巣癌を有する対象において、単剤療法としてのＳＬ－１７２１５４を評価している。この試験の主要目的は、安全性を評価し、ＳＬ－１７２１５４の最大耐用量または最大投与用量を同定することである。この試験の副次的目的は、用量とスケジュール（すなわち、推奨される第２相用量［ＲＰ２Ｄ］）を同定し、ＰＫと免疫原性を特徴決定し、固形腫瘍についてＲＥＣＩＳＴｖ１．１に従って抗腫瘍活性を評価することである。探索的目的は、ＰＢＭＣ上のＳＩＲＰα及びＣＤ４０の受容体占有率を評価し、血液及び腫瘍における薬力学的（ＰＤ）効果を調査することである。

【0294】

計画される用量漸増は半対数増加である（図１）。少なくとも３人の対象が連続用量レベル（ＤＬ）に登録され、治療の第１サイクルで用量制限毒性（ＤＬＴ）を評価した。疾患の進行、許容不可能な毒性、または同意の撤回が生じるまで、スケジュール１またはスケジュール２に従ってＳＬ－１７２１５４を対象に静脈内（ＩＶ）投与する。現在１０ｍｇ／ｋｇを登録中である。

【0295】

主要な包含基準は以下のとおりである：
・局所進行性または転移性卵巣癌、原発性腹膜癌、または卵管癌。
・既存の治療法（複数可）に対して不応性であり、プラチナ療法が不適格である。相同組換え欠損陽性疾患の対象は、ベバシズマブの有無にかかわらず、以前にＰＡＲＰｉの投与を受けている必要がある。
・１８歳以上
・ＥＣＯＧパフォーマンスステータス０または１
・ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１に基づく測定可能な疾患
主要な除外基準は以下のとおりである：
・ｕｐｆｒｏｎｔプラチナ療法の期間中または１か月以内での進行と定義される、一次プラチナ療法への不応性
・抗ＣＤ４７または抗ＳＩＲＰα標的化剤またはＣＤ４０アゴニストによる前治療。
・自己免疫疾患または活動性肺炎の既往歴
・全身性コルチコステロイドまたは他の免疫抑制薬の併用

【0296】

対象の特性を表４に示す。

【表4】

【0297】

年齢中央値６７歳（範囲３３～７９歳）で、以前に全身療法を中央値で５回（範囲２～７回）受けている１５人の対象を、２つのスケジュールで４つの用量レベルにわたってＩＶ ＳＬ－１７２１５４で治療した。１５人の対象のうち１３人が、ベースラインにおいてＥＣＯＧ ＰＳが１であった。６人の対象を、スケジュール１（１、８、１５、２９日目、２週間毎）で、０．１ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝３）及び０．３ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝３）の用量で治療した。９人の対象を、スケジュール２（週１回）で、０．３ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝３）、１．０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝３）、及び３．０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝３）の用量で治療した。表１に示すように、対象のほとんどが、原発性卵巣癌（ｎ＝９；６０％）、ＦＩＧＯステージＩＶ（ｎ＝９；６０％）、高悪性度疾患（ｎ＝１１；７３％）、及び漿液性癌の組織学的所見（ｎ＝１１；７３％）を有していた。有害事象を表５に列挙する。

【表5】

【0298】

ＳＬ－１７２１５４では、いずれのスケジュールでも０．１ｍｇ／ｋｇ～３．０ｍｇ／ｋｇの範囲の用量でＤＬＴは観察されなかった。１５人の対象（１００％）が治療中に有害事象（ＡＥ）を経験した。３名以上の対象に発生した最も一般的なＡＥ（すべての因果関係）は、疲労、輸注反応（ＩＲＲ）、吐き気、下痢、食欲減退、脱水、及び掻痒であった（表２）。１４人（９３％）の対象に治療関連ＡＥ（ＴＲＡＥ）が認められた。２人以上の対象に発生した最も一般的なＴＲＡＥは、ＩＲＲ（ｎ＝８；５３％）、疲労（ｎ＝７；４７％）、吐き気（ｎ＝４；２７％）、食欲減退（ｎ＝３；２０％）、悪寒（ｎ＝２；１３％）、下痢（ｎ＝２；１３％）、及び呼吸困難（ｎ＝２，１３％）であった。Ｇ３以上のＴＲＡＥは報告されていない。８人（５３％）の対象が、０．３ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝３）、１．０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝２）、３．０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝３）の用量で輸注反応（ＩＲＲ）を有し、１件のＩＲＲ事象はＧ３であり、鉄注入に起因するものと考えられ、１４件のＩＲＲは重症度がＧ２であり、２件のＩＲＲは重症度がＧ１であった。ＩＲＲは前投薬で管理可能であり、ＩＶ投与の完了を妨げたり、ＳＬ－１７２１５４の投与中止につながったりすることはなかった。１３人（８７％）の対象がＳＬ－１７２１５４の投与を中止したが、１２人が放射線学的または臨床的進行により投与を中止し、１人が治療を中止することを選択した。

【0299】

図３は、腫瘍の応答と治療期間を示している。ベースライン後のスキャンで有効性を評価した１４人の対象の中で最良の応答は以下のとおりであった：
‐ＳＤ，ｎ＝４
‐ＰＤ，ｎ＝９
‐ＮＥ，ｎ＝１（対象は、ＳＤを有していたが、ＳＤについてプロトコルで指定された最小間隔を満たさなかった）
‐１人の対象（３ｍｇ／ｋｇ）は、８週目に最初の治療中の疾患評価に到達しなかった。

【0300】

薬物動態：
・最大濃度（Ｃ_ｍａｘ）及び時間０から無限大に外挿した曲線下面積（ＡＵＣ_ｉｎｆ）は、用量の増加に伴って不釣り合いに増加した。
・クリアランスは、用量の増加とともに減少した。
・ＰＫは、１．０及び３．０ｍｇ／ｋｇで二相性であるように見えた。
・試験した用量では、曲線の消失段階は完全には特徴付けられなかった。

【0301】

図４Ａ～図４Ｄは、ＳＬ－１７２１５４の反復投与後の血清サイトカインの再現可能な増加を示している。示された時間に対象の血液採取から血漿を調製した。マルチプレックスＥＣＬ ＥＬＩＳＡ法を使用してサイトカインレベルを測定し、選択された用量レベルのサイトカインを示している。炎症誘発性ケモカインであるＣＣＬ２（ＭＣＰ－１）（図４Ａ）、ＣＣＬ４（ＭＩＰ－１β）（図４Ｂ）、ＣＣＬ３（ＭＩＰ－１α）（図４Ｃ）、及びＣＣＬ２２（ＭＤＣ）（図４Ｄ）は、注入後のすべての測定において、血漿レベルの用量依存的な増加を示した。これらの増加は、すべての注入間隔にわたって等しい期間及び大きさであった。

【0302】

図５Ａ及び図５Ｂは、血清ＩＬ－１２の用量依存的かつ再現可能な増加を示す。図５Ａは、経時的なＴＨ１炎症誘発反応のメディエーターであるインターロイキン１２（ＩＬ－１２）の対象レベルを示し、これは、試験対象で観察される周期的なエフェクターサイトカイン応答を典型的に表している。図５Ｂは、第１の注入時の応答中央値（水平バー）を示しており、予備的には用量依存的であると考えられる。

【0303】

図６Ａ及び図６Ｂは、ＳＬ－１７２１５４が白血球上のＣＤ４７に優先的に結合するが、ＲＢＣには結合しないことを示す。図６Ａは、全血を使用した蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）分析によって評価した、赤血球（ＲＢＣ）と白血球（ＷＢＣ，白血球）の両方のＣＤ４７受容体占有率（ＲＯ）を示している。サイクル１の１日目（Ｃ１Ｄ１）の注入後１時間で、白血球上のＣＤ４７ ＲＯの中央値（水平バー）は約８０％である。図６Ｂは、赤血球上のＣＤ４７ ＲＯがすべての用量レベルで５％未満であることを示している。

【0304】

図７Ａ～図７Ｃは、ＳＬ－１７２１５４が用量依存的にＢ細胞の辺縁趨向及び活性化を刺激することを示している。Ｂ細胞は、高レベルのＣＤ４０を発現する循環免疫細胞の大きなプールを表す。蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）パネルを設計して、ＣＤ４０受容体の占有率ならびに活性化及び成熟の状態を調べた。Ｃ１Ｄ１では、注入後１時間以内にほぼすべて（約８０％）のＣＤ４０＋Ｂ細胞が辺縁趨向し、すなわち循環から排出される。図７Ａは、辺縁趨向細胞の出現頻度中央値が用量依存的に増加することを示している（水平バー）。受容体の関与は、すべての用量レベルで約１００％である（データ未掲載）。図７Ｂは、Ｂ細胞出現頻度の中央値が次の注入までに注入前のレベルに戻り、各注入サイクルで放出と戻りの周期的なパターンを維持することを示している。図７Ｃは、戻ってきたＢ細胞が共刺激マーカーＣＤ８６と成熟マーカーＣＤ９５の増加を示すことを示しており、ＳＬ－１７２１５４が表現型の変化を誘発できることを示唆している。同様に、ＣＤ１４＋単球は、注入後１時間以内に辺縁趨向、すなわち循環から排出され、次の注入までに注入前のレベルに戻り、各注入サイクルで循環の出入りの周期的なパターンを維持する。観察される辺縁趨向パターンは、主にＣＤ８６＋古典的及び非古典的単球によって駆動される（データ未掲載）。

【0305】

図８Ａ及び図８Ｂは、ＣＤ４０ ｍＡｂと比較したＴＮＦα及びインターロイキン－６（ＩＬ－６）の明確な特性を示す。図８Ａは、ＣＰ－８７０，８９３（左パネル）またはＳＬ－１７２１５４（右パネル）の様々な用量でのＴＮＦαの誘導を示す。図８Ｂは、ＣＰ－８７０，８９３（左パネル）またはＳＬ－１７２１５４（右パネル）の様々な用量でのＩＬ－６の誘導を示す。ＣＰ－８７０，８９３のデータは、Ｖｏｎｄｅｒｈｅｉｄｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２５：８７６－８８３（２００７）から引用したものである。これらの結果は、特に、ＳＬ－１７２１５４がＣＤ４０ ｍＡｂと比較して、ＴＮＦα及びインターロイキン－６（ＩＬ－６）を誘導しないことを示している。用量制限毒性（ＤＬＴ）は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）に起因すると考えられており、これにより、ＣＤ４０アゴニストｍＡｂの用量漸増が制限されている。興味深いことに、ＳＬ－１７２１５４では、ＴＮＦαとＩＬ－６の顕著な増加は観察されていない。その結果、現在、ＳＬ－１７２１５４をＣＰ－８７０，８９３の１０倍の用量で投与している。

【0306】

図９Ａ及び図９Ｂは、ＳＬ－１７２１５４が腫瘍微小環境（ＴＭＥ）において自然免疫応答を誘導することを示す。図９Ａは、ＳＬ－１７２１５４の投与前と投与後の患者Ａの生検試料の免疫組織化学分析を示す。ＣＤ６８（単球系細胞で高度に発現するタンパク質）の染色によって単球を検出した。図９Ｂは、ＳＬ－１７２１５４による治療後の腫瘍生検試料中のＴＭＥにおける活性化マーカーＣＤ４０及びＭＨＣクラスＩＩの上方制御を、治療前の生検試料と比較して示す。

【0307】

図１０Ａ及び図１０Ｂは、ＳＬ－１７２１５４が腫瘍微小環境（ＴＭＥ）において適応免疫応答を誘導することを示す。図９Ａは、ＳＬ－１７２１５４の投与前と投与後の患者Ａの生検試料中のＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、及びＫｉ６７＋細胞を示す。治療前の生検試料と比較して、治療後の生検試料ではＣＤ８＋細胞、グランザイムＢ＋細胞、ＣＤ６８＋細胞、及びＫｉ６７＋細胞が増加していた。図９Ｂは、腫瘍比率スコア（ＴＰＳ）と複合陽性スコア（ＣＰＳ）を比較したグラフである。免疫細胞におけるＰＤ－Ｌ１の誘導は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の活性化の結果である。

【0308】

これらの結果は、ＳＬ－１７２１５４が、ＤＬＴ、または貧血、血小板減少症、肝機能障害、サイトカイン放出症候群、もしくは肺炎のエビデンスがなく、忍容性が良好であったことを示唆している。１０ｍｇ／ｋｇで用量の漸増を継続する。ＳＬ－１７２１５４についての予備的なＰＫパラメータは、受容体結合を介した標的媒介薬物動態を示唆している。試験した用量では、ＣＤ４７＋白血球上のＳＬ－１７２１５４の受容体占有率が高く、ＲＢＣへの結合は最小限であったことが観察された。ＳＬ－１７２１５４がＣＤ４０＋Ｂ細胞及び単球に結合すると、注入後に急速な活性化及び辺縁趨向が生じた。先天性及び適応性血清サイトカインの周期的な増加は、ＣＤ４０受容体の結合及び活性化と一致していた。ＩＬ－６またはＴＮＦαの増加はなく、ベル型の用量反応のエビデンスもなかった。ＳＬ－１７２１５４は、ＣＤ４０とＣＤ４７の両方を飽和させる用量で忍容性が良好であり、まだプラトーに達していないオンターゲットのＰＤ活性のエビデンスがあり、さらなる用量漸増が正当化される。理論に拘束されることを望まないが、これらの結果は、ＳＬ－１７２１５４が、腫瘍微小環境（ＴＭＥ）において自然免疫応答と適応免疫応答の両方を誘導することをさらに示している。

【0309】

図１１は、ＳＬ－１７２１５４についての計画された臨床開発戦略を示す。この戦略には、卵巣癌におけるＳＬ－１７２１５４単独療法、卵巣癌におけるＳＬ－１７２１５４＋リポソームドキソルビシンの併用療法、ＡＭＬにおけるＳＬ－１７２１５４＋アザシチジン＋ベネトクラクスの併用療法、ＨＲ－ＭＤＳにおけるＳＬ－１７２１５４＋アザシチジンの併用療法、及びＴＰ５３変異型ＡＭＬにおけるＳＬ－１７２１５４＋アザシチジンの併用療法の試験が含まれる。

【0310】

実施例２：ＳＩＲＰα－Ｆｃ－ＣＤ４０Ｌキメラタンパク質（ＳＬ－１７２１５４）の投与後の腫瘍におけるＣＤ８０の発現の増加
ＳＬ－１７２１５４を卵巣癌患者の腫瘍内に投与した。ＳＬ－１７２１５４の投与前及び投与後に患者から腫瘍生検試料を採取した。腫瘍内のＣＤ８０の発現を調べるために、生検試料を分析した。図１２に示すように、ＳＬ－１７２１５４の投与前に採取した生検試料と比較して、ＳＬ－１７２１５４の投与後に採取した試料では、ＳＬ－１７２１５４の投与後の腫瘍におけるＣＤ８０＋細胞の存在量及び／またはＣＤ８０発現の増加が示された。

【0311】

参照による援用
本明細書で参照されるすべての特許及び刊行物は、その全体が参照により本明細書に援用される。

【0312】

本明細書で論じられる刊行物は、本出願の出願日前のそれらの開示に対してのみ提供される。本明細書におけるいずれの内容も、本開示が先行発明によりそのような刊行物に先行する資格がないことを認めるものと解釈されるべきではない。

【0313】

本明細書で使用される、すべての見出しは単に構成のためのものであり、いかなる様式においても本開示を制限することを意図したものではない。あらゆる個々のセクションの内容は、すべてのセクションに等しく適用可能であり得る。

【0314】

均等物
本発明は、その特定の実施形態に関連して開示したが、さらなる修正が可能であり、本出願は、一般に、本発明の原理に従って、本発明の任意の変型、使用、または適応を網羅するものであり、本発明が属する技術分野において知られているか、または慣行に含まれるような本開示からの逸脱、及び前述される本質的な特徴に適用され得るもの、ならびに添付の請求項の範囲に含まれるような本開示からの逸脱を含むことを理解されたい。

【0315】

当業者であれば、単なる日常的な実験を使用して、本明細書に詳細に記載される特定の実施形態の多数の均等物を認識するか、または確認することができるであろう。そのような均等物は、以下の特許請求の範囲内に包含されることが企図される。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5A】

【図5B】

【図6】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図8A】

【図8B】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【配列表】

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【国際調査報告】