2024-545695 ＥＰ４アンタゴニストの結晶塩形態

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-12-10

(54)【発明の名称】ＥＰ４アンタゴニストの結晶塩形態

(51)【国際特許分類】

   C07D 231/20 20060101AFI20241203BHJP

   A61K 31/415 20060101ALI20241203BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20241203BHJP

【ＦＩ】

C07D231/20 Z CSP

A61K31/415

A61P35/00

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024537165

(86)(22)【出願日】2022-12-22

(85)【翻訳文提出日】2024-06-19

(86)【国際出願番号】 US2022053842

(87)【国際公開番号】W WO2023122289

(87)【国際公開日】2023-06-29

(31)【優先権主張番号】63/293,183

(32)【優先日】2021-12-23

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

２．ＳＰＡＮ

(71)【出願人】

【識別番号】506137147

【氏名又は名称】エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100088155

【弁理士】

【氏名又は名称】長谷川 芳樹

(74)【代理人】

【識別番号】100128381

【弁理士】

【氏名又は名称】清水 義憲

(74)【代理人】

【識別番号】100126653

【弁理士】

【氏名又は名称】木元 克輔

(72)【発明者】

【氏名】ベナユード， ファリド

【テーマコード（参考）】

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086AA04

4C086BC36

4C086GA15

4C086GA16

4C086MA01

4C086MA04

4C086MA52

4C086NA03

4C086ZB26

(57)【要約】

【課題】ＥＰ４アンタゴニストの結晶塩形態の提供。
【解決手段】（Ｓ）－４－（１－（３－（ジフルオロメチル）－１－メチル－５－（３－（トリフルオロメチル）フェノキシ）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボキサミド）エチル）安息香酸の結晶性遊離酸形態が提供される。（Ｓ）－４－（１－（３－（ジフルオロメチル）－１－メチル－５－（３－（トリフルオロメチル）フェノキシ）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボキサミド）エチル）安息香酸の結晶性遊離酸形態を作製及び使用する方法も提供される。

【選択図】図なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

化合物１：

【化1】

の結晶形態。

【請求項2】

化合物１の結晶性遊離酸形態である、請求項１に記載の結晶性化合物。

【請求項3】

前記結晶性遊離酸形態化合物が、少なくとも以下の粉末Ｘ線回折ピーク２θ°（±０．２°）：１８．４、２０．４、及び２４．２を示す、請求項２に記載の結晶性遊離酸化合物。

【請求項4】

前記結晶性遊離酸形態化合物が、少なくとも以下の粉末Ｘ線回折ピーク２θ°（±０．２°）：１４．７、１４．８、１８．４、１９．５、２０．４、２３．０、２４．２、及び３３．３を示す、請求項３に記載の結晶性遊離酸化合物。

【請求項5】

前記結晶性遊離酸形態化合物が、少なくとも以下の粉末Ｘ線回折ピーク２θ°（±０．２°）：１４．７、１４．８、１５．３、１６．４、１８．３、１８．４、１９．５、２０．４、２３．０、２４．２、２７．７、３３．３、及び３４．２を示す、請求項４に記載の結晶性遊離酸化合物。

【請求項6】

前記結晶性遊離酸形態化合物が、少なくとも以下の粉末Ｘ線回折ピーク２θ°（±０．２°）：８．２、１０．３、１２．６、１４．２、１４．５、１４．７、１４．８、１５．３、１５．８、１６．４、１７．８、１８．３、１８．４、１９．２、１９．５、２０．４、２３．０、２３．４、２４．２、２５．４、２５．８、２６．３、２６．５、２７．７、２８．９、２９．４、３０．０、３０．４、３１．２、３２．０、３２．６、３３．３、３４．０及び３４．２を示す、請求項５に記載の結晶性遊離酸化合物。

【請求項7】

前記結晶性遊離酸形態が、実質的に図１に示す粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンを特徴とする、請求項２に記載の結晶性遊離酸化合物。

【請求項8】

前記結晶性遊離酸形態が、図２に示すものと実質的に同じ示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラフを特徴とする、請求項２に記載の結晶性遊離酸化合物。

【請求項9】

前記結晶性遊離酸形態が、図３に示すものと実質的に同じ吸湿性を特徴とする、請求項２に記載の結晶性遊離酸化合物。

【請求項10】

請求項１～９のいずれか一項に記載の結晶性化合物と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。

【請求項11】

経口投与用に製剤化されている、請求項１０に記載の医薬組成物。

【請求項12】

請求項２に記載の結晶性遊離酸形態化合物を調製するための方法であって、以下のステップ：
ａ）反応スキームＡに従ってピラゾールを生成するステップ：

【化2】

；
ｂ）反応スキームＢに従って前記ピラゾールを酸化するステップ：

【化3】

；
ｃ）反応スキームＣに従って前記酸化ピラゾールを官能化するステップ：

【化4】

；
ｄ）反応スキームＤに従って前記官能化ピラゾールをアミンにカップリングしてアミドを形成するステップ：

【化5】

；
ｅ）反応スキームＥに従って化合物１の前記結晶性遊離酸形態を生成するステップ：

【化6】

のいずれかのうち１つ以上を含む、方法。

【請求項13】

がんの治療を必要とする対象においてがんを治療する方法であって、前記対象に、治療有効量の請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物又は請求項１０若しくは請求項１１に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。

【請求項14】

前記がんが、皮膚がん、乳がん、結腸直腸がん、前立腺がん、腎臓がん、子宮頸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、神経膠芽腫、頭頸部がん、髄芽腫、肺がん、又は尿路がんである、請求項１３に記載の方法。

【請求項15】

前記がんが、変化したＥＰ４状態を有する、請求項１３に記載の方法。

【請求項16】

前記変化したＥＰ４状態が、ＥＰ４の発現増加を含む、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

がんの治療を必要とする対象においてがんを治療する方法であって、
前記がんの細胞を含有する生物学的試料中の変化したＥＰ４状態を検出することと、前記がんが前記変化したＥＰ４状態を有する場合、
請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物の結晶形態又は請求項１０若しくは請求項１１に記載の医薬組成物を、前記対象に治療有効量で投与することと
を含む、方法。

【請求項18】

前記変化したＥＰ４状態が、ＥＰ４の発現増加を含む、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

がんの治療方法における、請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物の結晶形態又は請求項１０若しくは請求項１１に記載の医薬組成物の使用。

【請求項20】

前記がんが、変化したＥＰ４状態を有する、請求項１９に記載の使用。

【請求項21】

前記変化したＥＰ４状態が、ＥＰ４の発現増加を含む、請求項２０に記載の使用。

【請求項22】

医薬の調製における、請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物の結晶形態の使用。

【請求項23】

前記医薬が、がんの治療用である、請求項２２に記載の使用。

【請求項24】

前記がんが、変化したＥＰ４状態を有する、請求項２３に記載の使用。

【請求項25】

前記変化したＥＰ４状態が、ＥＰ４の発現増加を含む、請求項２４に記載の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年１２月２３日に出願された米国仮特許出願第６３／２９３／１８３号の利益を主張する。その出願は、本明細書に完全に書き換えられているかのように参照により組み込まれる。

【背景技術】

【0002】

アンタゴニストによるＰＧＥ２とプロスタグランジンＥ受容体４（ＥＰ４）との相互作用を介したプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）シグナル伝達の遮断は、炎症の軽減に有効であることが示されている（Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１６０，２９２－３１０）。ＰＧＥ２はまた、多くの固形腫瘍によって作り出される免疫抑制環境における重要な構成要素として関与しており（Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅ（２０１０）Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｔｈｅｒａｐｙ．２０１０．１０，１０１９－１０３５）、アンタゴニストによるＥＰ４シグナル伝達の阻害は、腫瘍動物モデルにおいて腫瘍成長（Ｔｅｒａｄａ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．７０，１６０６－１６１５）及び腫瘍転移を減少させることが示された（Ｙａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６６，９６６５－９６７２）。腫瘍学分野で使用されるＰＧＥ２型ＥＰ４拮抗作用のさらなる報告は、Ｍａ Ｘ．ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２：ｅ２２６４７及びＣｈｅｒｕｋｕｒｉ，Ｄ．Ｐ．ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｅｘｐ．Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ．３１３，２９６９－２９７９；Ｍａｊｕｍｄｅｒ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｓｃｉ．１９，１０１９；及びＴｅｒａｄａ，Ｎ．ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ７０，１６０６－１６１５に見出すことができる。

【0003】

ＥＰ４アンタゴニストの具体例としては、式Ｉによる化学構造の化合物が挙げられ、米国特許第８，６８６，０１８号明細書（これは参照により本明細書に完全に組み込まれる）に記載されている。

【化1】

【0004】

ＥＰ４拮抗作用の有用性は当技術分野において実証されているが、医薬品中の活性医薬成分としてのそれらの製造及び使用は、便利に操作及び処理することができる形態でなければならない。これに関して、活性化合物の化学的安定性及び物理的安定性は重要な考慮事項である。好ましくは、化合物及びそれを含有する医薬組成物は、生理化学的特性の著しい変化を示すことなく長期間にわたって効果的に貯蔵することができる。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0005】

本発明の実施形態は、式ＩＩによる化合物（以下、化合物１）の結晶性遊離酸形態を提供し得る。

【化2】

（Ｓ）－４－（１－（３－（ジフルオロメチル）－１－メチル－５－（３－（トリフルオロメチル）フェノキシ）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボキサミド）エチル）安息香酸

【0006】

化合物１又は本明細書に報告される任意の他の化合物の記載されたＩＵＰＡＣ名とその完全に描かれた化学構造との間に矛盾がある場合、構造が制御されることに留意されたい。

【0007】

いくつかの実施形態では、式ＩＩの化合物の結晶性遊離酸形態は、２θ°（±０．２°）の以下の値の範囲の少なくとも１、２、３、４、５、６又はそれ以上の粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）スペクトルのピークを与える：８．２、１０．３、１２．６、１４．２、１４．５、１４．７、１４．８、１５．３、１５．８、１６．４、１７．８、１８．３、１８．４、１９．２、１９．５、２０．４、２３．０、２３．４、２４．２、２５．４、２５．８、２６．３、２６．５、２７．７、２８．９、２９．４、３０．０、３０．４、３１．２、３２．０、３２．６、３３．３、３４．０及び３４．２。いくつかの実施形態において、化合物１の結晶性遊離酸形態は、実質的に図１に図示されるＸＲＰＤパターンを特徴とする。いくつかの実施形態では、化合物の結晶性遊離酸形態は、２θ°（±０．２°）：８．２、１０．３、１２．６、１４．２、１４．５、１４．７、１４．８、１５．３、１５．８、１６．４、１７．８、１８．３、１８．４、１９．２、１９．５、２０．４、２３．０、２３．４、２４．２、２５．４、２５．８、２６．３、２６．５、２７．７、２８．９、２９．４、３０．０、３０．４、３１．２、３２．０、３２．６、３３．３、３４．０及び３４．２の範囲で粉末Ｘ線回折スペクトルにピークを与える。他の実施形態では、化合物の結晶性遊離酸形態は、２θ°（±０．２°）：１４．７、１４．８、１５．３、１６．４、１８．３、１８．４、１９．５、２０．４、２３．０、２４．２、２７．７、３３．３、及び３４．２の範囲で粉末Ｘ線回折スペクトルにピークを与える。さらなる実施形態では、化合物の結晶性遊離酸形態は、２θ°（±０．２°）：１４．７、１４．８、１８．４、１９．５、２０．４、２３．０、２４．２及び３３．３の範囲で粉末Ｘ線回折スペクトルにピークを与える。いくつかの実施形態では、化合物の結晶性遊離酸形態は、２θ°（±０．２°）：１８．４、２０．４及び２４．２の範囲で粉末Ｘ線回折スペクトルにピークを与える。

【0008】

式ＩＩによる化合物の結晶性遊離酸形態の２θ°値は、５．００°／分の走査速度で連続走査モード及び平行ビーム測定モードで実行される５０ｋＶ及び３００ｍＡのＣｕＫα線を使用する５０ｋＶ、３００ｍＡ Ｘ線回折計、モデル：ＲＩＮＴ ＴＴＲ－ＩＩＩ（Ｒｉｇａｋｕ）の使用によって同定された。検出器はシンチレーションカウンターであり、管電圧は３００ｍＡの管電流で５０ｋＶであった。段差幅は０．０２°とし、０．５０ｍｍの入射スリットボックスを用いた。回折計はまた、室温で５～３５°の走査範囲で作動させた。

【0009】

いくつかの実施形態では、結晶性遊離酸形態は、図２に示すものと実質的に同じ示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラフによって特徴付けられる。他の実施形態では、化合物１の結晶性遊離酸形態は、１５０℃での吸熱ピークを特徴とする。

【0010】

実施形態は、本明細書に記載の化合物１の結晶形態及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供し得る。いくつかの実施形態では、組成物は、経口又は非経口投与用に製剤化される。

【0011】

実施形態は、化合物１の結晶性遊離酸形態を作製する方法を提供し得る。そのような方法は、以下のステップ：
ａ）反応スキームＡに従ってピラゾールを調製するステップ：

【化3】

；
ｂ）反応スキームＢに従ってピラゾールを酸化するステップ：

【化4】

；
ｃ）反応スキームＣに従って酸化ピラゾールを官能化するステップ：

【化5】

；
ｄ）反応スキームＤに従って前記官能化ピラゾールをアミンにカップリングしてアミドを形成するステップ：

【化6】

；
ｅ）反応スキームＥに従って化合物１の結晶性遊離酸形態を調製するステップ：

【化7】

のうちの１つ以上を含むことができる。

【0012】

実施形態は、治療有効量の化合物１の結晶性遊離酸形態を対象に投与することを含む、それを必要とする対象においてがんを治療する方法を提供し得る。

【0013】

実施形態は、それを必要とする対象においてがんを治療する方法であって、細胞の生物学的試料中の変化したＥＰ４状態（例えば、ＥＰ４の発現の増加）を検出することと、前記生物学的試料が変化したＥＰ４状態を有するがん性細胞を有する場合、化合物１の結晶性遊離酸形態を治療有効量で前記対象に投与することとを含む方法を提供し得る。

【0014】

実施形態は、がんの治療方法における化合物１の結晶性遊離酸形態の使用を提供し得る。

【0015】

実施形態は、がんを治療するための医薬の調製における化合物１の結晶性遊離酸形態の使用を提供し得る。

【図面の簡単な説明】

【0016】

【図1】図１は、化合物１の結晶性遊離酸形態から得られたＸＲＰＤスペクトルを示す。

【図2】図２は、化合物１の結晶性遊離酸形態のＤＳＣサーモグラフを示す。

【図3】図３は、化合物１の結晶性遊離酸形態の吸湿性を示す。

【発明を実施するための形態】

【0017】

化合物１：

【化8】

の結晶形態が本明細書で提供され、これは選択的ＥＰ４アンタゴニストとして有用である。

【0018】

いくつかの実施形態では、化合物１の結晶形態は遊離酸形態である。化合物１の結晶性遊離酸形態の一実施形態は、粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）スペクトルにおいて、以下の２θ°（±０．２°）の値の範囲：８．２、１０．３、１２．６、１４．２、１４．５、１４．７、１４．８、１５．３、１５．８、１６．４、１７．８、１８．３、１８．４、１９．２、１９．５、２０．４、２３．０、２３．４、２４．２、２５．４、２５．８、２６．３、２６．５、２７．７、２８．９、２９．４、３０．０、３０．４、３１．２、３２．０、３２．６、３３．３、３４．０及び３４．２のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ以上にピークを与える。例えば、化合物１の結晶性遊離酸形態は、２θ°（±０．２°）：１４．７、１４．８、１５．３、１６．４、１８．３、１８．４、１９．５、２０．４、２３．０、２４．２、２７．７、３３．３及び３４．２からなる群から選択される少なくとも１、２、３、４、５又は６つの値を示し得る。さらなる実施形態では、化合物の結晶性遊離酸形態は、２θ°（±０．２°）：１４．７、１４．８、１８．４、１９．５、２０．４、２３．０、２４．２及び３３．３の範囲で粉末Ｘ線回折スペクトルにピークを与える。いくつかの実施形態では、化合物の結晶性遊離酸形態は、２θ°（±０．２°）：１８．４、２０．４及び２４．２の範囲で粉末Ｘ線回折スペクトルにピークを与える。いくつかの実施形態において、化合物１の結晶性遊離酸形態は、実質的に図１に示されるＸＲＰＤパターンを特徴とする。

【0019】

いくつかの実施形態では、結晶性遊離酸形態は、図２に示すものと実質的に同じ示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラフによって特徴付けられる。

【0020】

いくつかの実施形態では、結晶性遊離酸形態は、図３に示すものと実質的に同じ吸湿性を特徴とする。

【0021】

本明細書で使用される場合、スペクトルなどのデータに関して「実質的に示されるように（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ ａｓ ｓｈｏｗｎ）」、「実質的に同じ（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ ｔｈｅ ｓａｍｅ）」又は「実質的に示されるように（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ ａｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ）」は、当業者が、例えば図１に示すような、同じデータ収集方法を使用して得られたそのようなスペクトルを比較する場合、スペクトルが、本明細書で教示される化合物の同じ結晶性遊離酸形態を示すのに十分に類似していると結論付けることを意味する。

【0022】

本明細書で教示される化合物を合成及び結晶化する方法も提供される。結晶性遊離酸形態の場合、方法は、以下のステップ：
ａ）反応スキームＡに従ってピラゾールを調製するステップ：

【化9】

；
ｂ）反応スキームＢに従ってピラゾールを酸化するステップと、

【化10】

；
ｃ）反応スキームＣに従って酸化ピラゾールを官能化するステップ：

【化11】

；
ｄ）反応スキームＤに従って前記官能化ピラゾールをアミンにカップリングしてアミドを形成するステップ：

【化12】

；
ｅ）反応スキームＥに従って化合物１の結晶性遊離酸形態を生成するステップ：

【化13】

のうち１つ以上を含むことができる。

【0023】

本明細書に記載の結晶性化合物を薬学的に許容される担体と組み合わせて、その薬学的製剤を提供することができる。担体及び製剤の特定の選択は、組成物が意図される特定の投与経路に依存する。いくつかの実施形態では、担体は、投与前に化合物の結晶形態を維持するように選択される。

【0024】

本明細書及び特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、内容が特に指示しない限り、複数の言及を含む。したがって、例えば、「ＨＣｌ塩」への言及は、一塩酸塩、二塩酸塩、１．５塩酸塩、並びに他の化学量論的及び非化学量論的な塩酸塩を指す。

【0025】

本明細書で使用される「薬学的に許容される担体」は、それが製剤化される化合物の薬理活性を破壊しない非毒性の担体、アジュバント、又はビヒクルを指す。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される担体は、化合物の結晶性遊離酸形態を維持するように選択される。薬学的に許容される担体、アジュバント又はビヒクルとしては、限定されないが、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩又は電解質、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイダルシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレングリコール及び羊毛脂が挙げられる。

【0026】

本発明の組成物は、経口、非経口、局所又は移植リザーバー投与に適し得る。いくつかの実施形態では、製剤は、天然源又は非天然源に由来する成分を含む。いくつかの実施形態では、製剤又は担体は、滅菌形態で提供し得る。滅菌担体の非限定的な例としては、エンドトキシンを含まない水又は発熱物質を含まない水が挙げられる。

【0027】

本明細書で使用される「非経口」という用語は、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑膜内、胸骨内、髄腔内、肝内、病巣内及び頭蓋内注射又は注入技術を含む。特定の実施形態では、化合物は、静脈内、経口、皮下、又は筋肉内投与によって投与される。本発明の組成物の滅菌注射可能形態は、水性又は油性懸濁液であり得る。これらの懸濁液は、適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁化剤を使用して、当技術分野で公知の技術に従って製剤化することができる。滅菌注射用調製物はまた、非毒性の非経口的に許容される希釈剤又は溶媒中の滅菌注射用溶液又は懸濁液であり得る。使用され得る許容され得るビヒクル及び溶媒の中には、水、リンゲル液及び等張塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌固定油は、溶媒又は懸濁媒体として従来から使用されている。

【0028】

この目的のために、合成モノグリセリド又はジグリセリドを含む任意の無刺激性固定油を使用することができる。脂肪酸及びそれらのグリセリド誘導体は、特にそれらのポリオキシエチル化バージョンにおいて、オリーブ油又はヒマシ油などの天然の薬学的に許容される油と同様に、注射剤の調製において有用である。これらの油溶液又は懸濁液はまた、カルボキシメチルセルロース又はエマルジョン及び懸濁液を含む薬学的に許容される剤形の製剤に一般的に使用される同様の分散剤などの長鎖アルコール希釈剤又は分散剤を含有し得る。薬学的に許容される固体、液体、又は他の剤形の製造に一般的に使用されるＴｗｅｅｎ、Ｓｐａｎｓ及び他の乳化剤などの他の一般的に使用される界面活性剤もまた、製剤化の目的のために使用され得る。

【0029】

経口投与のために、化合物又は塩は、カプセル、錠剤、水性懸濁液又は溶液を含むがこれらに限定されない許容され得る経口剤形で提供され得る。経口用の錠剤の場合、一般的に使用される担体には、ラクトース及びコーンスターチが含まれる。ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤も添加することができる。カプセル形態での経口投与のために、有用な希釈剤には、ラクトース及び乾燥コーンスターチが含まれる。水性懸濁液が経口使用に必要とされる場合、活性成分を乳化剤及び懸濁化剤と組み合わせてもよい。所望であれば、特定の甘味剤、香味剤又は着色剤を添加してもよい。さらに、防腐剤を添加してもよい。薬学的に許容される防腐剤の適切な例としては、限定されないが、様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えば溶媒、例えばエタノール、プロピレングリコール、ベンジルアルコール、クロロブタノール、第４級アンモニウム塩及びパラベン（例えば、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベンなど）が挙げられる。

【0030】

いくつかの実施形態では、化合物１の結晶性遊離酸形態はカプセルに製剤化され、５ｍｇ～５０ｍｇ、１０ｍｇ～４０ｍｇ又は２０ｍｇ～３０ｍｇの化合物１がカプセル内に存在する。

【0031】

他の実施形態では、カプセルは、ヒプロメロースで作られたカプセルシェルを含む。

【0032】

いくつかの実施形態では、化合物１の結晶性遊離酸形態は錠剤に製剤化され、化合物１は錠剤形成中に湿式造粒プロセスを受ける。

【0033】

他の実施形態では、錠剤は、ラクトース一水和物、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、微結晶性セルロース、ステアリン酸マグネシウム及び／又は水を含む。

【0034】

錠剤は、１ｍｍ～７ｍｍ、２ｍｍ～７ｍｍ、４ｍｍ～６．５ｍｍ又は５．５ｍｍ～６．５ｍｍのサイズを有し得る。いくつかの実施形態では、錠剤は６．５ｍｍのサイズを有する。

【0035】

対象及び使用方法
本明細書で教示される化合物の結晶形態は、皮膚がん、乳がん、結腸直腸がん、前立腺がん、腎臓がん、子宮頸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、神経膠芽腫、頭頸部がん、髄芽腫、肺がん、又は尿路がんなどのがんを治療するために使用され得る。

【0036】

「治療する」、「治療すること」及び「治療」は、本明細書中に記載されるような疾患又は障害を逆転させること、軽減すること、その発症を遅延させること、その進行を阻害すること、又は他の方法で改善することを指す。いくつかの実施形態では、治療は、１つ以上の症状が発症した後に投与し得る。他の実施形態では、治療は、症状の非存在下で投与し得る。例えば、治療は、症状の発症前に（例えば、症歴に照らして、及び／又は遺伝的若しくは他の感受性因子に照らして）感受性個体に投与し得る。治療はまた、症状が解消した後、例えば再発を防止又は遅延させるために継続し得る。

【0037】

本明細書で使用される「患者」又は「対象」は、動物対象、好ましくは哺乳動物対象、特にヒト対象（男性対象及び女性対象の両方を含み、新生児、乳児、若年、青年、成人及び老人の対象を含む）を意味する。対象としては、実験目的又は獣医学目的のための他の哺乳動物対象（例えば、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、サル、鳥類など）も挙げられる。

【0038】

いくつかの実施形態では、ＥＰ４状態が変化したがんを有する対象に治療が提供される。

【0039】

いくつかの実施形態では、治療は、前記がんの細胞を含有する生物学的試料中のＥＰ４状態を分析すること（例えば、測定すること、又は評価すること）を含み得るか、又はそれと併せて行われ得、前記がんがＥＰ４変化を示す場合、本明細書に記載の治療有効量の活性薬剤で対象を治療することを含む。

【0040】

ＥＰ４に関して本明細書で使用される「変更された状態」は、対応する非がん性組織と比較して、その発現の増加（例えば、ｍＲＮＡレベルの増加又はタンパク質レベルの増加）、ゲノム内のコピー数の増加、及び／又は突然変異などの結果としてのコードされたタンパク質の活性の増加を含む。いくつかの実施形態では、ＥＰ４の変化した状態には、活性の増加をもたらすか、そうでなければより侵攻性の形態の肝細胞がんに関連する遺伝子及び／又はコードされたタンパク質変異が含まれる。

【0041】

ＥＰ４の「発現」は、それをコードする遺伝子が転写され、好ましくは翻訳されることを意味する。典型的には、コード領域の発現は、コードされたポリペプチドの産生をもたらす。

【0042】

ＥＰ４タンパク質は公知であり、その変化した状態及び／又は発現は、当技術分野で標準的な技術、例えば核酸増幅、配列決定分析及び／又はハイブリダイズに基づく技術などによる突然変異又はコピー数異常のゲノム分析、ノーザンブロット又はｑＲＴ－ＰＣＲなどのＲＮＡ発現分析、ウェスタンブロット又は他の免疫ブロット又はイムノアッセイ、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）などを使用して測定され得る。

【0043】

本明細書に記載の発明をより完全に理解することができるように、以下の実施例を記載する。これらの実施例は例示のみを目的としており、限定として解釈されるべきではないことを理解されたい。

【実施例】

【0044】

定義：以下の略語は示された意味を有する。
ＡＣＮ アセトニトリル
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＭＦ ジメチルホルムアミド
Ｋ_２ＣＯ_３ 炭酸カリウム
ＭｅＯＨ メタノール
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
分取ＨＰＬＣ 分取高速液体クロマトグラフィー
ＴＥＡ トリエチルアミン
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ＭＴＢＥ メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル
ＡｃＯＨ 酢酸
ＰＯＣｌ_３ 塩化ホスホリル
ｔ－ＢｕＯＨ ｔｅｒｔ－ブタノール
ＩＰＡ イソプロパノール
Ｖ 体積当量

【0045】

実施例１：化合物１の遊離酸結晶形態の合成のための手順：

【化14】

実施例１Ａ：
一般的合成スキームＩ：

【化15】

化合物２～４は、参照により本明細書に全体が組み込まれる米国特許第８，６８６，０１８号明細書に記載されているように調製することができる。

【0046】

ステップ１．１（段階４Ａ）
化合物３（１．０ｋｇ）及び５ＬのＤＭＦを反応器に２０～３０℃で投入し、次いで、反応塊を－５℃～１０℃に冷却した。化合物４（０．５６ｋｇ）及びＨＢＴＵ（１．３６ｋｇ）を－５～１０℃で反応器に順次添加した。トリエチルアミン（ＴＥＡ）（０．６０１９ｋｇ）を－５～１０℃でゆっくりと添加した。反応塊を０～１０℃で１～３時間撹拌した。反応の進行をＨＰＬＣによってモニターした。

【0047】

サンプリング手順：反応塊２ｍｌを取り、ＨＰＬＣに供する。

【0048】

合格基準：化合物３は（ＮＭＴ）１．０％以下である。

【0049】

反応が完了していない場合：反応塊をさらに０～１０℃で１～３時間撹拌し、許容基準に従って化合物３の含有量を確認する。

【0050】

完了すると、４Ｌの水を０～２０℃で反応塊にゆっくり投入し、反応塊を１０Ｌの酢酸エチルで抽出し、再び６Ｌの酢酸エチル（注：層の分離が最初の抽出中に起こらない場合、温度を１０～２０℃に上昇させ、酢酸エチル２Ｌを添加し、１０～３０分間撹拌し、酢酸エチル層を沈降させ、分離する）で抽出した。合わせた酢酸エチル層を、２０～３０℃で８％ ＮａＨＣＯ３溶液（水５Ｌ＋ＮａＨＣＯ_３ ０．４Ｋｇ）及び１０％塩化ナトリウム溶液（水５Ｌ＋塩化ナトリウム０．５Ｋｇ）で順次洗浄した。酢酸エチル層を真空下、５５℃未満で蒸留して、化合物２（収率＝１．４８ｋｇ ｗ／ｗ ｗ．ｒ．ｔ化合物３、収率１００％と仮定）を得て、単離することなくステップ２．１で使用した。

【0051】

キラリティ制御：
化合物２のキラリティは、（Ｓ）－メチル４－（１－アミノエチル）ベンゾエート（化合物４）出発物質から商業的に得られる。

【0052】

ステップ２．１（段階４Ｂ）
ＴＨＦ（２．９６Ｌ）を、５５℃未満の温度で化合物２（粗物質、１．４８ｋｇ）との反応器に投入した。ＴＨＦを真空下で反応器から留去し、反応器に５５℃未満の温度でＴＨＦ（２．９６Ｌ）を再び装入した。ＴＨＦを真空下で反応器から再び留去し、反応器にＴＨＦ（７．４Ｌ）を再び装入した。反応塊を１０から３０℃に冷却した。ＮａＯＨ（水中７．４Ｌで０．３ｋｇ）を反応塊に１０～３０℃で投入した。温度を３５から５０℃に上げ、反応塊を８から１４時間撹拌した。反応の進行をＨＰＬＣによってモニターした。

【0053】

サンプリング手順：ＨＰＬＣ用の反応塊２ｍｌを取る。

【0054】

合格基準：化合物２が１．０％以下である。

【0055】

反応が完了していない場合：反応塊を３５～５０℃で１～３時間さらに撹拌する。

【0056】

完了すると、反応塊を０～１０℃の温度に冷却した。反応塊に１０ＬのＨＣｌ溶液（１３．３２Ｌ水中１．４８Ｌ濃ＨＣｌ）を０～３０℃でゆっくり添加することによって、反応塊のｐＨを１．５～２．５に調整した。反応塊を酢酸エチル（１１．８４Ｌ）で抽出し、再び酢酸エチル（１０．３６Ｌ）で抽出した。合わせた酢酸エチル層を１０％塩化ナトリウム溶液（水７．４Ｌ＋塩化ナトリウム０．７４Ｋｇ）で洗浄した。有機層を、粒子を含まない濾過によって別の反応器に移した。酢酸エチルを真空下、５５℃未満の温度で完全に留去した。ＩＰＡ（１．４８Ｌ）を５５℃未満の温度で残渣に添加した。ＩＰＡを真空下で反応塊から留去した。ＩＰＡ（７．４Ｌ）を再び反応塊に投入し、反応塊を５５～６５℃の温度に加熱して透明な溶液を得た。反応塊を５５～６５℃で１０～３０分間撹拌し、次いで４０～５０℃に冷却した。水（１０．３６Ｌ）を４０～５０℃で反応塊にゆっくり添加し、反応塊を４０～５０℃で３０～６０分間撹拌した。反応塊を２０～３０℃に冷却し、２０～３０℃で６０±１５分間撹拌した。反応塊をさらに５～１５℃に冷却し、５～１５℃で２～４時間撹拌した。次いで、沈殿した固体を濾過し、固体を２．９６Ｌの（１：２Ｖ／Ｖ）ＩＰＡ＋水混合物、次いで１．４８Ｌの水、続いて１．４８Ｌの（１：２ｖ／ｖ ＩＰＡ＋水混合物で順次洗浄した。湿潤材料を５５～６５℃で１０～２０時間乾燥させた。カールフィッシャー滴定を使用して含水量によって材料の乾燥の進行をモニターした。含水率の合格基準は１．０％以下である。含水量が合格基準を満たさない場合、５５～６５℃で２～４時間乾燥を継続し、含水量を確認する。乾燥の目標基準を満たした後、乾燥機から材料を取り出して、粗表題化合物１（０．９～１．３ｋｇ、収率＝７０～９０％）を得る（段階４Ｂ）。

【0057】

ステップ３．１（段階４Ｃ）
メタノール（５Ｌ）を反応器に２０～３０℃で投入した。粗化合物１段階４Ｂからの生成物（１．０ｋｇ）を反応器に添加した。反応塊を５５～６５℃に加熱し、３０～４５分間撹拌して透明な溶液を得た。次いで、反応塊を３０～５０℃に冷却し、粒子を含まない濾過（５ミクロンフィルター）によって別の反応器に移した。反応塊を３０～５０℃でメタノール（２Ｌ）ですすぎ、粒子を含まない濾過（５ミクロンフィルター）によって別の反応器に移した。反応塊を５～１５℃に冷却し、水（１３Ｌ）を５～２５℃で反応塊にゆっくり添加した。水の添加が完了した後、反応塊を２０～３０℃の温度に加熱し、同じ温度で２～４時間撹拌した。沈殿した固体を濾過し、固体を３Ｌの（１：２Ｖ／Ｖ）ＭｅＯＨ＋水混合物で洗浄した。湿潤材料を５５～６５℃で１０～２０時間乾燥させた。材料の乾燥の進行を、（ｉ）カールフィッシャー滴定を使用する含水量及び（ｉｉ）ＧＣによるメタノール含有量によってモニターした。含水率の合格基準は１．０％以下であり、メタノール含有率の合格基準は３０００ｐｐｍである。含水量及びメタノール含有量が合格基準を満たさない場合、５５～６５℃で２～４時間乾燥を継続し、含水量及びメタノール含有量を確認する。乾燥の目標基準を満たした後、乾燥機から材料を取り出して、化合物１の結晶性遊離酸形態を白色固体として得た（０．９～０．９８ｋｇ、収量＝９０～９８％）。

【0058】

実施例１Ｂ：

【化16】

或いは、化合物１は、以下の合成から製造することができる。化合物２は、参照により本明細書に全体が組み込まれる米国特許第８，６８６，０１８号明細書に記載されているように調製することができる。

【0059】

反応器に化合物２（１当量）を投入し、続いてＴＨＦ（５Ｖ）を投入した。反応物を撹拌し、１Ｍ ＮａＯＨ（５Ｖ）を２０～２５℃で添加した。反応物を６０～６５℃に加熱し、完了をモニターした（約４～６時間）。完了すると、反応物を０～１０℃に冷却し、１Ｍ ＨＣｌ（６Ｖ）をゆっくり投入した。次いで、反応物にＥｔＯＡｃ（８Ｖ）を投入し、撹拌し、相分離させ、次いで、有機相を水相から除去した。水相をＥｔＯＡｃ（８Ｖ）で逆抽出した。次いで、有機相を合わせ、１２％ブライン（５Ｖ）で洗浄した。水相を除去し、有機相を濃縮した。次いで、濃縮有機相をＭｅＯＨと２回共沸した（１Ｖ）。次いで、粗有機材料にＭｅＯＨ（２Ｖ）を投入し、溶液が透明になるまで５０～６０℃に加熱した。次いで、水（６Ｖ）を溶液にゆっくり添加した。溶液を０．１℃／分の速度で１５～２０℃の温度まで冷却した。次いで、沈殿した固体を溶液から濾別し、１ＶのＭｅＯＨ：水（１：３ｖ／ｖ）で２回洗浄した。集めた固体を、一定の重量が達成されるまで乾燥させ、全体として、化合物１（０．８５Ｗ、８７％）を白色固体として得た。

【0060】

実施例２：化合物１の結晶性遊離酸形態のＸＲＰＤ特性評価：
化合物１の結晶性遊離酸形態についての粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンを図１に示す。

【0061】

実施例３：ＴＧ－ＤＴＡ化合物１の結晶性遊離酸形態の特性評価：
化合物１の結晶性遊離酸形態の熱重量測定及び示差熱分析（ＴＧ－ＤＴＡ）を図２に示す。ＤＴＡ曲線では、１５０℃付近（オンセット）に吸熱ピークが認められた。ＴＧ曲線において、１８０℃まで測定可能な重量減少は観察されなかった。化合物１の結晶性遊離酸形態の融解範囲は、ＵＳＰ－ＮＦ ３７に従って１５２℃～１５４℃で観察された。

【0062】

実施例４：化合物１の結晶性遊離酸形態の吸湿性の特性決定：
動的水蒸気吸着（ＤＶＳ）法を用いて、化合物１の結晶性遊離酸形態の吸湿性を測定した。化合物１の結晶性遊離酸形態についての吸着及び脱着等温線を図３に示す。２５℃、相対湿度５％～９５％ ＲＨの範囲にわたって、化合物１の結晶性遊離酸形態の有意な重量変化は観察されなかった。結果は、化合物１の結晶性遊離酸形態が非吸湿性であることを示した。

【0063】

化合物１の結晶性遊離酸形態の要約データ：
化合物１の結晶性遊離酸の物理的及び化学的特性を表１に要約する。

【0064】

【表1】

【図1】

【図2】

【図3】

【国際調査報告】