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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-12-24
(54)【発明の名称】中毒および神経障害を治療する方法
(51)【国際特許分類】
A61K 31/4745 20060101AFI20241217BHJP
A61K 31/4045 20060101ALI20241217BHJP
A61K 31/498 20060101ALI20241217BHJP
A61K 31/343 20060101ALI20241217BHJP
A61K 31/437 20060101ALI20241217BHJP
A61K 31/55 20060101ALI20241217BHJP
A61K 31/5377 20060101ALI20241217BHJP
A61K 31/4439 20060101ALI20241217BHJP
A61K 31/496 20060101ALI20241217BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20241217BHJP
A61P 25/30 20060101ALI20241217BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20241217BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20241217BHJP
A61P 25/24 20060101ALI20241217BHJP
A61P 21/02 20060101ALI20241217BHJP
A61P 25/08 20060101ALI20241217BHJP
A61P 25/04 20060101ALI20241217BHJP
A61P 37/06 20060101ALI20241217BHJP
A61P 25/16 20060101ALI20241217BHJP
A61P 9/10 20060101ALI20241217BHJP
A61P 25/32 20060101ALI20241217BHJP
A61P 25/34 20060101ALI20241217BHJP
A61P 25/36 20060101ALI20241217BHJP
A61K 31/403 20060101ALI20241217BHJP
【ＦＩ】
A61K31/4745 ZNA
A61K31/4045
A61K31/498
A61K31/343
A61K31/437
A61K31/55
A61K31/5377
A61K31/4439
A61K31/496
A61P29/00
A61P25/30
A61P25/00
A61P25/28
A61P25/24
A61P21/02
A61P25/08
A61P25/04
A61P37/06
A61P25/16
A61P9/10
A61P25/32
A61P25/34
A61P25/36
A61K31/403
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024534661
(86)(22)【出願日】2022-12-10
(85)【翻訳文提出日】2024-08-09
(86)【国際出願番号】 US2022081330
(87)【国際公開番号】W WO2023108165
(87)【国際公開日】2023-06-15
(31)【優先権主張番号】63/288,365
(32)【優先日】2021-12-10
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＢＲＩＪ
(71)【出願人】
【識別番号】524219614
【氏名又は名称】ジーエーティーシー ヘルス コーポレーション
(74)【代理人】
【識別番号】100114775
【弁理士】
【氏名又は名称】高岡 亮一
(74)【代理人】
【識別番号】100121511
【弁理士】
【氏名又は名称】小田 直
(74)【代理人】
【識別番号】100202751
【弁理士】
【氏名又は名称】岩堀 明代
(74)【代理人】
【識別番号】100208580
【弁理士】
【氏名又は名称】三好 玲奈
(74)【代理人】
【識別番号】100191086
【弁理士】
【氏名又は名称】高橋 香元
(72)【発明者】
【氏名】ジェンキンス，イアン
(72)【発明者】
【氏名】ティンダー，ロバート
(72)【発明者】
【氏名】ナラヤン，ヴァイシュナビ
(72)【発明者】
【氏名】ティペッツ，ノア
(72)【発明者】
【氏名】ミルザイ，サマン
(72)【発明者】
【氏名】リリー，パトリック シー．
(72)【発明者】
【氏名】リリー，グウェンドリン シー．
(72)【発明者】
【氏名】ウフェンズ，ジェイソン
【テーマコード（参考）】
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA02
4C086BA05
4C086BC13
4C086BC17
4C086BC50
4C086BC73
4C086CB05
4C086CB09
4C086CB11
4C086GA07
4C086GA08
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA05
4C086ZA02
4C086ZA06
4C086ZA08
4C086ZA12
4C086ZA16
4C086ZA22
4C086ZA94
4C086ZB08
4C086ZB11
(57)【要約】
実施形態は、神経可塑性を刺激することにより中毒および神経障害を治療することにおける使用のための治療小分子を含む。治療小分子は、ＦＯＳ、ＪＵＮ、ＢＤＮＦ、ＣＤＣ４２およびＣＣＬ２の上流の制御因子に影響することにより神経可塑性を高めかつ神経の機能を改善できる。治療小分子はまた、アミロイドβ（ａ４）との結合を介してアミロイドプラークの低減に役立ち得る。
【選択図】図１
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３の化合物、またはその類似体：【化1】
【請求項2】
式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３、Ｅ３の化合物またはその類似体の有効量の投与を含む病気を治療する方法。
【請求項3】
前記病気は、炎症、中毒、外傷性脳損傷、アルツハイマー病およびうつ病の１種または複数である、請求項２に記載の方法。
【請求項4】
前記病気は、神経障害である、請求項２に記載の方法。
【請求項5】
前記神経障害は、急性脊髄損傷、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、運動失調、ベル麻痺、脳腫瘍、脳動脈瘤、てんかんおよび発作、ギラン・バレー症候群、頭痛、頭部損傷、水頭症、髄膜炎、多発性硬化症、筋ジストロフィー、神経皮膚症候群、パーキンソン病、脳卒中、頭痛、脳炎および重症筋無力症の１種または複数である、請求項４に記載の方法。
【請求項6】
前記有効量は、４ｍｇ～８０ｍｇである、請求項２に記載の方法。
【請求項7】
前記有効量は、４ｍｇ～１．２ｇである、請求項２に記載の方法。
【請求項8】
それを必要としている対象において病気を治療するために神経可塑性を高めるまたは神経機能を改善する方法であって、式Ｉの化合物、またはその類似体を投与することを含む、方法。
【請求項9】
前記病気は、炎症、外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）、外傷性脳損傷、うつ病、急性脊髄損傷、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、運動失調、ベル麻痺、脳腫瘍、脳動脈瘤、てんかんおよび発作、ギラン・バレー症候群、頭痛、頭部損傷、水頭症、髄膜炎、多発性硬化症、筋ジストロフィー、神経皮膚症候群、パーキンソン病、脳卒中、頭痛、脳炎および重症筋無力症の１種または複数である、請求項８に記載の方法。
【請求項10】
式Ｉの化合物またはその類似体の有効量の投与を含む樹状突起分枝の強力な阻害を逆転させる方法。
【請求項11】
ＦＯＳＢ、ＣＤＣ４２およびＥＮＴＰＤ４の１種または複数の発現を調節するステップをさらに含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項12】
式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３、Ｅ３の化合物またはその類似体の有効量の投与を含むチアミン代謝の障害を回復する方法。
【請求項13】
式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３、Ｅ３の化合物またはその類似体の有効量の投与を含む脳におけるチアミン代謝を高める方法。
【請求項14】
式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３、Ｅ３の化合物またはその類似体の有効量の投与を含む神経興奮閾値を回復する方法。
【請求項15】
式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３、Ｅ３の化合物またはその類似体の有効量の投与を含むＣＣＬ２レベルを下げることによる病気を治療する方法。
【請求項16】
前記病気は、炎症である、請求項１５に記載の方法。
【請求項17】
式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３、Ｅ３の化合物またはその類似体の有効量の投与を含む炎症を低減する方法。
【請求項18】
式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３、Ｅ３の化合物またはその類似体の有効量の投与を含む神経機能を改善する方法。
【請求項19】
式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３、Ｅ３の化合物またはその類似体の有効量の投与を含む樹状突起分枝の阻害を逆転させるおよび／または神経代謝を改善する方法。
【請求項20】
（ａ）神経障害を有する患者を特定するステップおよび（ｂ）神経可塑性を促進するために治療分子を投与するステップを含む神経障害を治療する方法であって、前記治療分子は、式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３、Ｅ３の化合物またはその類似体である、方法。
【請求項21】
前記神経障害は、急性脊髄損傷、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、運動失調、ベル麻痺、脳腫瘍、脳動脈瘤、てんかんおよび発作、ギラン・バレー症候群、頭痛、頭部損傷、水頭症、髄膜炎、多発性硬化症、筋ジストロフィー、神経皮膚症候群、パーキンソン病、脳卒中、頭痛、脳炎および重症筋無力症の１種または複数である、請求項１９に記載の方法。
【請求項22】
式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３、Ｅ３の化合物またはその類似体の有効量の投与を含むアミロイドプラークを低減させる方法。
【請求項23】
式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３、Ｅ３の化合物またはその類似体の有効量の投与を含む中毒を治療するまたは予防するための方法。
【請求項24】
前記中毒は、例えば、ニコチン、コカイン、オピオイドアゴニスト、モルヒネ、ヘロイン（他のアヘン剤）、アンフェタミン、コカイン、および／またはアルコールの１種または複数である、請求項２３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願
本出願は、２０２１年１２月１０日出願の米国特許仮出願第６３／２８８，３６５号に対する優先権を主張する。この仮出願の内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０２１年１２月１０日出願の米国特許仮出願第６３／２８８，３６５号に対する優先権を主張する。この仮出願の内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
配列表の参照
本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットで電子申請された配列表を含み、この配列表は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットで電子申請された配列表を含み、この配列表は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【0003】
発明の分野
本発明は、治療用途を有する小分子に関し、特に、それは、神経障害および中毒などの病気を治療するための新規小分子ならびに方法に関する。
本発明は、治療用途を有する小分子に関し、特に、それは、神経障害および中毒などの病気を治療するための新規小分子ならびに方法に関する。
【背景技術】
【0004】
中毒は、有害な結果にもかかわらず報酬刺激における衝動的な関与により特徴づけられる生物心理社会的障害として定義できる。中毒は、米国で１９７０万人を超える人々に影響を及ぼし、大きな財政的および人的損害の原因である。全体の経済的コストは、全てのタイプの糖尿病および全ての癌のものよりも大きい。これらのコストは、例えば、薬物の直接有害作用および関連する保健医療コスト、長期の合併症、生産性の低下および関連する福祉費用、事故、自殺、殺人および投獄から生ずる。現在まで、有効な薬理学的介入はほとんどなく、および中毒の脳に対する損傷を完全に解決するものはなかった。
【0005】
物質使用障害（ＳＵＤ）は、かなり有害で不都合な結果に反する薬物の持続的使用として定義できる。個人は次第に薬物に依存するようになるので、使用の中断は、不快気分などの禁断症状をもたらす。物質使用障害は、慢性的罪悪感、繰り返される試みに関わらず物質を消費することを低減または停止できないこと、飲酒運転および生理学的禁断症状などの種々の精神的／感情的、身体的、および行動的障害を特徴とする。依存の発生は、衝動的薬物使用から強迫的薬物乱用へ進展する神経行動学的障害として概念化されている。
【0006】
用語「行動嗜癖（ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ ａｄｄｉｃｔｉｏｎ）」は、自然報酬－これは、本質的に報われる（即ち、望ましいまたは魅力的な）行動である－に関与する強迫的衝動として定義できる。前臨床証拠は、自然報酬への反復的なおよび過剰な曝露によるΔＦｏｓＢの発現の顕著な増加が、薬物中毒で起こるものと同じ行動的効果および神経可塑性を誘導することを実証した。
【0007】
中毒の脳疾患モデル（ＢＤＭＡ）は、慢性の再発性脳疾患として中毒を特定し、中毒に対する効果的治療は薬学的および他の医療介入を含むことを示唆する。ＢＤＭＡは、ＳＵＤは慢性の再発性脳疾患であること、および再発は症状であり、かつ疾患の予測される経過の一部であることを主張する。他の疾患でのように、ＳＵＤは、行動的、環境的、および生物学的影響を含む、複数の原因を有し得る。２種の特定のタンパク質、ΔＦｏｓＢおよびＢＤＮＦが、中毒およびＳＵＤに関連付けられている。
【0008】
タンパク質ｆｏｓＢは、ＦｏｓＢおよびＧ０／Ｇ１スイッチ調節タンパク質３（Ｇ０Ｓ３）としても知られ、ヒトではＦＢＪマウス骨肉腫ウィルス癌遺伝子相同体Ｂ（ＦＯＳＢ）遺伝子によりコードされるタンパク質である。ΔＦｏｓＢスプライスバリアントは、中毒の発生および維持において、中心的で、非常に重要な（必要十分な）役割を果たすとして特定された。ΔＦｏｓＢ過剰発現（即ち、顕著な遺伝子関連表現型を生成する異常におよび過剰に高レベルのΔＦｏｓＢ発現）は、報償システム全体を通して中毒関連神経可塑性の発生を誘発し、かつ中毒に特徴的な行動表現型を生成する。
【0009】
脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、またはアブリニューリンは、ヒトでは、ＢＤＮＦ遺伝子によりコードされるタンパク質である。ＢＤＮＦは、中枢神経系および末梢神経系の特定のニューロンに作用し、既存のニューロンの生存の支援に役立ち、および新規のニューロンおよびシナプスの成長および分化を促進する。
【0010】
神経可塑性（Ｎｅｕｒｏｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ）は、神経可塑性（ｎｅｕｒａｌ ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ）、または脳可塑性としても知られ、成長または再編成を通して脳中のニューラルネットワークを変化させる能力である。これらの変化は、新規結合を作る個々のニューロン経路～皮質再マッピングのような系統的調節に及ぶ。神経可塑性の例は、新規能力を学習すること、環境の影響、実践および精神的ストレスに起因する、回路およびネットワークの変化を含む。神経可塑性は以前には、小児期中にのみ現れると考えられたが、最近の研究は、脳の多くの状況は、成人期にわたりさらに変えることができる（即ち、「可塑的」である）ことを実証した。しかし、発達中の脳は、成体の脳よりもより高度の可塑性を示す。活性依存的可塑性は、健康的な発育、学習、記憶および脳損傷からの回復のための重要な意義を有し得る。
【0011】
最近の研究に基づき、遺伝子発現の調節が、薬物中毒の機序として提案されている。潜在的遺伝子の中で特に、ＦｏｓＢおよび／またはＢＤＮＦの誘導または阻害が、提案されている。しかし、ＦｏｓＢまたはＢＤＮＦとの直接的相互作用はまだ、中毒の脳の機能障害に対する顕著な改善をもたらしていない。研究は、カンナビノイド療法、頭蓋刺激およびケタミン治療でわずかな改善を示した。しかし、このような改善は、医学界で広く受け入れられていない。
【0012】
中毒に対する従来の治療は一般的に効果がないので、中毒を治療するための医薬品が必要とされている。このような治療は、神経可塑性の促進を介して治療効果を有するはずである。従って、本発明の実施形態は、外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）および大うつ病性障害（ＭＤＤ）などの他の障害と共に中毒を治療するための治療用ペプチドを含む。
【発明の概要】
【0013】
本明細書で記述および請求される本発明は、限定されないが、この概要で示されるまたは記述されるまたは参照されるものを含む、多くの特性および実施形態を有する。本明細書で記述および請求される本発明は、限定でなく例示のみのために含まれる、この発明の概要で特定される特徴または実施形態に、またはそれらにより限定されない。
【0014】
生検用脳組織から得られた分子機序の新規解釈に基づき、出願者らは、中毒脳の再構築および中毒の解消のためのいくつかの根底にある機序を特定した。技術は、外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）および大うつ病性障害（ＭＤＤ）などの病気を治療することにおいて有望な多くのシグナル伝達機序を明らかにした。本明細書で記載される実施形態では、出願者らは、このような病気を治療するための、特定の標的に対する治療方法を示す。
【0015】
従って、本発明の目的は、神経可塑性を刺激する新規化合物を提供することである。本発明の別の目的は、神経障害および／または中毒を治療するための新規化合物を提供することである。
【0016】
一実施形態は、小分子治療薬を用いて神経可塑性を刺激することにより、神経障害および／または中毒を治療する方法である。
【0017】
一実施形態は、小分子治療薬を用いて神経可塑性を刺激する方法である。別の実施形態は、小分子治療薬を用いて神経可塑性を刺激することにより、神経障害および／または中毒を予防する方法である。
【0018】
出願者らは、式Ｉの化合物、またはその類似体を提供する：
【化1】
【0019】
別の実施形態では、本発明は、化合物、またはその薬学的に許容可能なその塩を提供し、化合物は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択される：
【化2】
【0020】
一実施形態では、本明細書で記載の化合物は、神経可塑性を改善することにおいて有用である。別の実施形態は、対象において神経可塑性を刺激する方法であり、神経可塑性を改善することは、神経障害または中毒などの病気を予防するおよび／または治療する。
【0021】
一実施形態は、式Ｉの化合物の治療的有効量を投与することを含む、対象において神経障害を治療する方法である。
【0022】
一実施形態は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択される化合物の治療的有効量を投与することを含む、対象において神経障害を治療する方法である。
【0023】
一実施形態は、認知機能障害を有するまたはその危険のある、または認知機能の低下の危険のある対象において、上記認知機能障害を治療するための、上記認知機能障害の進行を遅延させるまたは遅くするための、または認知機能の低下の速度を下げるための方法であり、方法は、本明細書で開示される化合物の治療量を投与することを含む。
【0024】
一実施形態は、治療量の式Ｉの化合物を投与することにより病気を治療する方法である。病気は、例えば、不安症、炎症、中毒、外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）、外傷性脳損傷、うつ病、急性脊髄損傷、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、運動失調、ベル麻痺、脳腫瘍、脳動脈瘤、てんかんおよび発作、ギラン・バレー症候群、頭痛、頭部損傷、水頭症、髄膜炎、多発性硬化症、筋ジストロフィー、神経皮膚症候群、パーキンソン病、脳卒中、頭痛、脳炎および重症筋無力症であり得る。
【0025】
一実施形態は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択される化合物の治療量を投与することによを病気を治療する方法である。病気は、例えば、炎症、中毒、外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）、外傷性脳損傷、うつ病、急性脊髄損傷、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、運動失調、ベル麻痺、脳腫瘍、脳動脈瘤、てんかんおよび発作、ギラン・バレー症候群、頭痛、頭部損傷、水頭症、髄膜炎、多発性硬化症、筋ジストロフィー、神経皮膚症候群、パーキンソン病、脳卒中、頭痛、脳炎および重症筋無力症であり得る。
【0026】
一実施形態は、式Ｉの化合物の治療的有効量を投与することを含む、対象において中毒を治療する方法である。
【0027】
一実施形態は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択される化合物の治療的有効量を投与することを含む、対象において中毒を治療する方法である。中毒は、例えば、ニコチン、コカイン、オピオイドアゴニストに対する中毒、または刺激剤、ニコチン、モルヒネ、ヘロイン、他のアヘン剤、アンフェタミン、コカイン、および／またはアルコールに対する依存症であり得る。
【0028】
一実施形態は、（ａ）神経障害を有する患者を特定するステップ、および（ｂ）神経可塑性を促進するために治療分子を投与するステップ、を含む神経障害を治療する方法である。治療分子は、式Ｉの化合物または式Ｉの類似体であり得る。
【0029】
一実施形態は、（ａ）神経障害を有する患者を特定するステップ、および（ｂ）神経可塑性を促進するために治療分子を投与するステップ、を含む神経障害を治療する方法である。治療分子は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択できる。
【0030】
一実施形態は、（ａ）中毒を有する患者を特定するステップ、および（ｂ）神経可塑性を促進するために治療分子を投与するステップ、を含む中毒を治療する方法である。治療分子は、式Ｉの化合物または式Ｉの類似体であり得る。
【0031】
一実施形態は、（ａ）中毒を有する患者を特定するステップ、および（ｂ）神経可塑性を促進するために治療分子を投与するステップ、を含む中毒を治療する方法である。治療分子は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択できる。
【0032】
一実施形態は、式Ｉの化合物の治療的有効量を投与することによりＦＯＳＢ、ＣＤＣ４２およびＥＮＴＰＤ４の発現比を再度釣り合わせることを介する、樹状突起分枝の強力な阻害を逆転させる方法である。
【0033】
一実施形態は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択される化合物の治療的有効量を投与することによりＦＯＳＢ、ＣＤＣ４２およびＥＮＴＰＤ４の発現比を再度釣り合わせることを介する、樹状突起分枝の強力な阻害を逆転させる方法である。
【0034】
一実施形態は、式Ｉの化合物の治療的有効量を投与することにより、チアミン代謝の障害を回復する方法である。
【0035】
一実施形態は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択される化合物の治療的有効量を投与することにより、チアミン代謝の障害を回復する方法である。
【0036】
一実施形態は、式Ｉの化合物の治療的有効量を投与することにより、脳のチアミン代謝の存在を高める方法である。
【0037】
一実施形態は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択される化合物の治療的有効量を投与することにより、脳のチアミン代謝の存在を高める方法である。
【0038】
一実施形態は、式Ｉの化合物の治療的有効量を投与することにより、神経代謝を改善する方法である。
【0039】
一実施形態は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択される化合物の治療的有効量を投与することにより、神経代謝を改善する方法である。
【0040】
一実施形態は、式Ｉの化合物の治療的有効量を投与することにより、神経興奮閾値を回復する方法である。
【0041】
一実施形態は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択される化合物の治療的有効量を投与することにより、神経興奮閾値を回復する方法である。
【0042】
一実施形態は、式Ｉの化合物の治療的有効量を投与することにより、ＣＣＬ２の相対存在量を低減する方法である。
【0043】
一実施形態は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択される化合物の治療的有効量を投与することにより、ＣＣＬ２の相対存在量を低減する方法である。
【0044】
一実施形態は、式Ｉの化合物の治療的有効量を投与することにより、ＣＣＬ２の低減を介して炎症を低下させる方法である。
【0045】
一実施形態は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択される化合物の治療的有効量を投与することにより、ＣＣＬ２の低減を介して炎症を低下させる方法である。
【0046】
一実施形態は、式Ｉの化合物の治療的有効量を投与することにより、神経機能を改善する方法である。
【0047】
一実施形態は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択される化合物の治療的有効量を投与することにより、神経機能を改善する方法である。
【0048】
一実施形態は、式Ｉの化合物または式Ｉの類似体の治療的有効量を投与することにより、アミロイドβ（ａ４）との結合を介してアミロイドプラークを低減する方法である。従って、別の実施形態は、式Ｉの化合物または式Ｉの類似体の治療的有効量を投与することにより、パーキンソン病を治療する方法である。
【0049】
一実施形態は、式Ｉの化合物または式Ｉの類似体の治療的有効量を投与することにより、アミロイドβ（ａ４）との結合を介してアミロイドプラークを低減する方法である。従って、別の実施形態は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３から選択される化合物の治療的有効量を投与することにより、パーキンソン病を治療する方法である。
【0050】
一実施形態では、本明細書で開示される治療化合物の有効量は、約４ミリグラム（ｍｇ）である。一実施形態では、安全性の上限は、約１．２グラムである。一実施形態では、臨床投与のための用量範囲は、約４ｍｇ～８０ｍｇである。
【0051】
さらに別の態様では、本明細書は、神経障害または中毒の予防または治療のための薬物の調製物における治療小分子またはそれを含む医薬組成物の使用を提供する。
【0052】
本発明の態様の他の特徴および利点は、本発明の原理を例で示す添付図面と合わせて、以下のより詳細な説明から明らかとなるであろう。
添付図面は、本発明の態様を説明する。
添付図面は、本発明の態様を説明する。
【図面の簡単な説明】
【0053】
【図1】原子に番号を付した式Ｉの化合物（「Ｓｏｍａｈｏｌ」）の化学構造を示す。
【図2】オキシトシンシグナル伝達経路を示す。
【図3】５－ＨＴ７受容体により調節される分子シグナル伝達経路を示す。
【図4】隣接遺伝子と相互作用するＲＮアーゼＩを示す。
【図5】隣接遺伝子と相互作用するＣＣＬ２を示す。
【図6】隣接遺伝子と相互作用するＦＯＳＢを示す。
【図7】隣接遺伝子と相互作用するＳＬＣ３９Ａ８を示す。
【図8】隣接遺伝子と相互作用するＣ９ＯＲＦ１３５を示す。
【図9】隣接遺伝子と相互作用するＥＮＴＰＤ４を示す。
【図10】足場分子を示す。いくつかの実施形態では、ヒドロキシルおよび／またはカルボニル基を、別の官能基で置換できる。
【図11】５－ＨＴ２ＡヒトセロトニンＧＰＣＲ細胞ベースのアゴニストアレスチンアッセイの結果のグラフである。
【図12】５－ＨＴ６ヒトセロトニンＧＰＣＲ細胞ベースのアゴニストアレスチンアッセイの結果のグラフである。
【図13】ＴｒｋＢヒトＲＴＫキナーゼ細胞ベースのアゴニスト機能アッセイの結果のグラフである。
【図14】５－ＨＴ７ヒトセロトニンＧＰＣＲ細胞ベースのアゴニストｃＡＭＰアッセイの結果のグラフである。
【図15】５－ＨＴ２ＢヒトセロトニンＧＰＣＲ細胞ベースのアゴニストカルシウムフラックスアッセイの結果のグラフである。
【図16】各分子：Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３からのアゴニストアッセイの結果の表である。
【発明を実施するための形態】
【0054】
定義
「一実施形態（ｏｎｅ ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔ）／態様」または「ある実施形態（ａｎ ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔ）／態様」への本明細書での参照は、その実施形態／態様に関して記載された特定の特徴、構造、または特性が本開示の少なくとも１つの実施形態／態様に含まれるということを意味する。本明細書中の種々の箇所における「一実施形態／態様では」または「ある実施形態／態様では」という語句の使用は、必ずしも全てが同じ実施形態／態様を参照せず、他の実施形態／態様の相互に排他的な別のまたは代替の実施形態／態様も参照しない。さらに、種々の特徴が、記載され、これらは、いくつかの実施形態／態様により示されてよく他の実施形態／態様により示されなくてよい。同様に、種々の要件が、記載され、これらは、いくつかの実施形態／態様についての要件であり得るが、他の実施形態／態様についてそうでなくてよい。実施形態および態様は、特定の事例では、同じ意味で用いられ得る。
「一実施形態（ｏｎｅ ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔ）／態様」または「ある実施形態（ａｎ ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔ）／態様」への本明細書での参照は、その実施形態／態様に関して記載された特定の特徴、構造、または特性が本開示の少なくとも１つの実施形態／態様に含まれるということを意味する。本明細書中の種々の箇所における「一実施形態／態様では」または「ある実施形態／態様では」という語句の使用は、必ずしも全てが同じ実施形態／態様を参照せず、他の実施形態／態様の相互に排他的な別のまたは代替の実施形態／態様も参照しない。さらに、種々の特徴が、記載され、これらは、いくつかの実施形態／態様により示されてよく他の実施形態／態様により示されなくてよい。同様に、種々の要件が、記載され、これらは、いくつかの実施形態／態様についての要件であり得るが、他の実施形態／態様についてそうでなくてよい。実施形態および態様は、特定の事例では、同じ意味で用いられ得る。
【0055】
本明細書中で使用される用語は一般に、本開示の文脈内で、およびそれぞれの用語が使われる特定の文脈において、当技術分野でのそれらの通常の意味を有する。本開示を記載するために使われる特定の用語は、下で、または本明細書の別の場所で考察されて、本開示の記載に関する実践者への追加の手引きを提供する。同じことが２つ以上の方法で述べられ得ることは理解されよう。
【0056】
従って、代替の用語および同義語が、本明細書で考察されるいずれかの１つまたは複数の用語に対して使われてよい。ある用語が本明細書で詳しく述べられるまたは考察されるかどうかには、何ら特別な意味はない。特定の用語に対する同義語が、提供される。１つまたは複数の同義語の記述は、他の同義語の使用を排除するものではない。本明細書で考察される任意の用語の例を含む、本明細書中のどこかでの例の使用は、例示的な目的のみのためであり、本開示のまたは例示される任意の用語の範囲と意味をさらに限定すると意図されない。同様に、本開示は、本明細書で提示される種々の実施形態に限定されない。
【0057】
本開示の範囲をさらに限定する意図なしに、本開示の実施形態による機器、装置、方法およびそれらの関連する結果が、下で与えられる。見出しまたは小見出しは、読者の便宜上、実施例で使用され得るが、本開示の範囲を限定するものではないことに留意されたい。別に定めのない限り、本明細書で使われる全ての技術および科学用語は、本開示が属する当業者により通常理解されるものと同じ意味を有する。矛盾がある場合には、定義を含み、本文書が支配する。
【0058】
適用可能な場合、用語「約（ａｂｏｕｔ）」または「通常（ｇｅｎｅｒａｌｌｙ）」は、本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、および別段の指示がない限り、±２０％の余地を意味する。また、適用可能な場合には、本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される用語「実質的に（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ）」は、別段の指示がない限り、±１０％の余地を意味する。上記用語の全ての使用は、参照範囲が適用され得るように数値化できるとは限らないことを理解されたい。
【0059】
用語「活性剤（ａｃｔｉｖｅ ａｇｅｎｔ）」または「有効成分（ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ）」は、生物学的に活性であるか、あるいは、それが投与される対象に対して生物学的または生理学的効果を誘導する、物質、化合物、または分子を指す。換言すれば、「活性剤（ａｃｔｉｖｅ ａｇｅｎｔ）」または「有効成分（ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ）」は、組成物の効果の全部または一部の原因である組成物の成分を指す。活性剤は、主要な活性剤であってよく、または換言すれば、組成物の効果の全部または一部の原因である組成物の成分であってよい。活性剤は、二次的薬剤であってよく、または換言すれば、組成物の追加の一部および／または他の効果の原因である組成物の成分であってよい。「医薬組成物」は、治療ペプチドなどの活性剤と、インビトロ、インビボまたはエクスビボで診断または治療用途に好適な無菌組成物中で、不活性なまたは活性な、担体の組み合わせを含んでよい。
【0060】
用語「類似体」または「化学的類似体」は、別の化合物（即ち、Ｓｏｍａｈｏｌ）と類似の構造を有するが、特定の成分に関してそれと異なる、化合物を指す。それは、１つまたは複数の原子、官能基、または部分構造（これらは、他の原子、基、または部分構造と置換される）において異なってよい。
【0061】
単独でまたは別の基の一部として本明細書で用いられる用語「アルキル」は、１～２０個の炭素を含む直鎖および分岐鎖の両方の飽和炭化水素を指す。アルキル基の例は、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、４，４－ジメチルペンチル、オクチル、２，２，４－トリメチルペンチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、およびこれらの種々の分岐鎖異性体である。
【0062】
単独でまたは別の基の一部として本明細書で用いられる用語「アルキレン」は、１～２０個の炭素を含む、上述のアルキル基の二価のラジカルを指す。アルキレン基の例は、メチレン、エチレン、トリメチレン、テトラメチレン、ペンタメチレン、ヘキサメチレン、ヘプタメチレン、オクタメチレン、およびこれらの種々の分岐鎖異性体である。
【0063】
単独でまたは別の基の一部として本明細書で用いられる用語「アルケニル」は、２～２０個の炭素、好ましくは１～１２個の炭素、より好ましくは２～８個の炭素、および１～６個の二重結合を含む直鎖および分岐鎖の両方の飽和炭化水素を含む。アルケニル基の例は、ビニル、２－プロペニル、２－ブテニル、３－ブテニル、３－ペンテニル、４－ペンテニル、２－ヘキセニル、３－ヘキセニル、２－ヘプテニル、４－ヘプテニル、３－オクテニル、３－ノネニル、４－デセニル、３－ウンデセニル、および４，８，１２－テトラデカトリエニルである。
【0064】
単独でまたは別の基の一部として本明細書で用いられる用語「アルキニル」は、２～？個の炭素、好ましくは２～１２個の炭素、およびより好ましくは２～８個の炭素、ならびに１～６個の三重結合および場合により１～３個の二重結合を含む直鎖および分岐鎖の両方の飽和炭化水素を含む。アルキニル基の例は、２－プロピニル、３－ブチニル、４－ペンチニル、２－ヘキシニル、４－ヘプチニル、３－オクチニル、３－ノニニル、４－デシニル、３－ウンデシニルおよび４－ドデシニルである。
【0065】
単独でまたは別の基の一部として本明細書で用いられる用語「アルカノイル」または「アシル」は、カルボニル基に付着されたアルキル基を指す。本発明との関係において、用語「アルカノイル」および「アシル」は、同じ意味を有する。従って、Ｃｎアルカノイルまたはアシル基は、カルボニル基に付着されたＣｎ－１アルキル基である。アルカノイルまたはアシル基の例は、アセチル、プロピオニルおよびブチロイルである。
【0066】
単独でまたは別の基の一部として本明細書で用いられる用語「アルコキシ」は、酸素原子に連結された１～２０個の炭素、好ましくは１～１０個の炭素、より好ましくは１～８個の炭素を含むアルキル基を指す。アルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ－ブトキシ、イソブトキシ、ｔｅｒｔ－ブトキシ、ペントキシ、ヘキシルオキシ、イソヘキシルオキシ、ヘプチルオキシ、４，４－ジメチルペントキシ、オクチルオキシ、２，２，４－トリメチルペントキシ、ノニルオキシ、デシルオキシル、ウンデシルオキシ、ドデシルオキシ、およびこれらの種々の分岐鎖異性体である。
【0067】
単独でまたは別の基の一部として本明細書で用いられる用語「シクロアルキル」は、単環式アルキル、二環式アルキルおよび三環式アルキル系を含む１～３個の環、ならびに環系の一部を形成する合計３～２０個の炭素原子、好ましくは３～１０個の炭素を含む飽和環状炭化水素基を含む。シクロアルキル基の非限定的例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロデシル、シクロドデシル、アダマンチルおよびビシクロ［３．３．３］ウンデカニルである。
【0068】
単独でまたは別の基の一部として本明細書で用いられる用語「シクロアルケニル」は、１または２個の二重結合を含み、単環式アルキル、二環式アルキルおよび三環式アルキル系を含み、かつ環系の一部として、合計４～１２個の炭素、好ましくは５～？個の炭素を含む、１～３個の環を有する部分不飽和環状炭化水素基を含む。シクロアルケニル基の例としては、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、シクロオクテニル、シクロヘキサンジイルおよびシクロヘプタンジイルが挙げられるが、これらに限定されない。
【0069】
単独でまたは別の基の一部として本明細書で用いられる用語「アリール」は、フェニルまたはナフチル（１－ナフチルおよび２－ナフチルを含む）などの環部中に６～１０個の炭素を含み、かつシクロアルキルなどの１～３個の追加の縮合炭素環を任意に含んでもよい、単環式または二環式芳香族基を指す。アリール基の例は、フェニル、１－ナフチル、２－ナフチルおよびテトラヒドロナフチルである。
【0070】
単独でまたは別の基の一部として本明細書で用いられる用語「ヘテロシクリル」は、窒素、酸素および／または硫黄からなる群より選択される１～２個のヘテロ原子を含む、５－、６－、７－員飽和または部分不飽和環を指し、このような環は任意に、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロシクリル環に融合されてもよい。ヘテロシクリル基は、炭素原子またはヘテロ原子を介して連結される。
【0071】
単独でまたは別の基の一部として本明細書で用いられる用語「ヘテロアリール」は、窒素、酸素または硫黄からなる群より選択される１、２、３または４個のヘテロ原子を含む、５－または６－員芳香環を指し、このような環は、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロシクリル環に任意に融合されてもよい。ヘテロアリール基がアリールに融合される場合、それは、「二環式ヘテロアリール」と呼ばれる。
【0072】
本明細書で用いられる用語「グリコシル」は、１－Ｏ－β－Ｄ－ガラクトピラノシル（ガラクトース）、１－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（グルコース）および１－Ｏ－α－Ｄ－グルコピラノシル－α－Ｄ－グルコピラノシル（トレハロース）を指す。
【0073】
用語「機能的パートナー」は、機能を支持するようにシステム中で作用する１種または複数の化合物（例えば、遺伝子またはタンパク質）を指す。機能的パートナーは、１種または複数の中間体（例えば、遺伝子、小分子またはタンパク質）を介して機能できる。
【0074】
用語「樹状突起」は、他の神経細胞から受け取った電気化学的刺激を細胞体、またはそこから樹状突起が突き出るニューロンの神経細胞体に伝える、神経細胞の分岐した原形質延長部（ｐｒｏｔｏｐｌａｓｍｉｃ ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ）を指す。電気的刺激は、樹状突起樹全体にわたる種々の位置に存在するシナプスを介して上流ニューロン（通常、それらの軸索を介して）により樹状突起に伝達される。樹状突起は、無脊椎動物を含む動物の成体期中に可塑的変化ができるように見える。神経樹状突起は、流入刺激を計算できる機能単位として知られる種々のコンパートメントを有する。これらの機能単位は、入力の処理に関与し、スパイン、枝、または枝群（ｇｒｏｕｐｉｎｇｓ ｏｆ ｂｒａｎｃｈｅｓ）などの樹状突起のサブドメインから構成される。従って、樹状突起構造における変化をもたらす可塑性は、細胞中の情報伝達および処理に影響するであろう。発生の間、樹状突起の形態は、細胞のゲノム内の内在性プログラムおよび他の細胞からのシグナルなどの外因性因子により形づくられる。しかし成体期には、外因性シグナルが、発生の間の内因性シグナルに比べてより影響が大きくなりかつ樹状突起構造でのより大きな変化を引き起こす。
【0075】
用語「外傷後ストレス障害」または「ＰＴＳＤ」は、性的暴行、戦争、自動車衝突、暴力、などの外傷性イベントへの曝露のため発症し得る精神的および行動的障害を指す。症状は、イベントに関連した動揺させる思考、感情、または夢、外傷に関連するきっかけに対する精神的または身体的苦悩、トラウマに関連するきっかけを避けようとする試み、人の考え方や感じ方の変化、および闘争－逃走応答の増加を含み得る。ＰＴＳＤは、大うつ病などの他の精神障害とは異なる脳および身体での生化学的変化を引き起こす。
【0076】
用語「外傷性脳損傷」または「ＴＢＩ」は、外力により引き起こされる脳への傷害を指す。ＴＢＩは、重症度（軽度の外傷性脳損傷［ｍＴＢＩ／脳振盪］～重症頭部外傷にわたる）、機序（閉鎖性または穿通性の頭部外傷）、または他の特徴（例えば、特定の場所でのまたは広がった領域での発生）を基準に分類できる。ＴＢＩは、認知、身体的および精神社会的機能の一時的または永久的な障害に繋がる可能性がある。ＴＢＩは、単一の病態生理学的イベントではなく、複雑な疾患過程であり、かつ構造的損傷および一次および二次傷害機序の両方に起因する機能障害を引き起こす。一次障害は、外力への曝露時に起こりかつ挫傷、血管への損傷（出血）、およびニューロンの軸索が引き伸ばされ引き裂かれる軸索剪断作用を含む、脳組織の即時機械的破壊の結果である。二次傷害は、一次障害後に数分～数ヶ月にわたり発生し、最終的に脳細胞死、組織損傷および萎縮につながる代謝の、細胞のおよび分子のイベントのカスケードの結果である。
【0077】
用語「アルコール依存症」は、現在または過去の過剰飲酒、アルコールに対する強力な欲求、飲酒に関連する反復される問題にも関わらず継続される使用およびアルコール消費の制御不能を通常含む、慢性病状を指す。
【0078】
用語「多発性硬化症」または「ＭＳ」は、免疫系と神経細胞の間の複雑な相互作用を伴う中枢神経系（ＣＮＳ）の炎症性の脱髄性疾患を指す。
【0079】
用語「神経障害」は広く、神経系の障害を指す。神経障害は、脳ならびに人体および脊髄全体の神経に影響を与え得る。脳、脊髄または他の神経中の構造的、生化学的または電気的異常が、一連の症状を生じ得る。神経障害は、例えば、急性脊髄損傷、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、運動失調、ベル麻痺、脳腫瘍、脳動脈瘤、てんかんおよび発作、ギラン・バレー症候群、頭痛、頭部損傷、水頭症、髄膜炎、多発性硬化症、筋ジストロフィー、神経皮膚症候群、パーキンソン病、脳卒中、頭痛、脳炎および重症筋無力症を含む。
【0080】
用語「転写制御」は、それにより細胞がＲＮＡへのＤＮＡの変換（転写）を調節し、それにより遺伝子活性を調節する、手段を指す。単一の遺伝子は、転写されるＲＮＡのコピー数を変えることから、遺伝子が転写される際の時間的制御までの、様々な方法で調節され得る。この制御は、細胞または生物が種々の細胞内および細胞外シグナルに応答することを可能にし、従って応答を開始する。転写因子は、所与の遺伝子の発現を調節するために特定のＤＮＡ配列に結合するタンパク質である。
【0081】
用語「オキシトシン」または「ＯＴ」は、視床下部の視索上部（ＳＯＮ）および脳室周囲（ＰＶＮ）核中に位置する巨大細胞ニューロンにより合成されるノナペプチドを指す。それは、多種多様の中枢効果および末梢効果を発揮する。しかし、その最もよく知られ最も確立された役割は、出産中の子宮収縮および授乳中の乳汁分泌の刺激である。オキシトシンはまた、心臓血管の調節および種々の社会的行動に影響を与える。ＯＴの作用は全て、１種類のＯＴ受容体（ＯＴＲ）により媒介される。これは、Ｇタンパク質共役受容体スーパーファミリーに属する膜貫通型受容体である。主要なシグナル伝達経路は、Ｇｑ／ＰＬＣ／Ｉｎｓ３経路であるが、ＭＡＰＫおよびＲｈｏＡ／Ｒｈｏキナーゼ経路もまた、活性化され、増大したプロスタグランジン産生および子宮筋細胞に対する直接収縮性効果に寄与する。
【0082】
用語「タンパク質ｆｏｓＢ」、「ＦｏｓＢ」、「Ｇ０／Ｇ１スイッチ調節タンパク質３」またはＧ０Ｓ３」は、ヒトではＦＢＪマウス骨肉腫ウィルス癌遺伝子相同体Ｂ（ＦＯＳＢ）遺伝子によりコードされるタンパク質を指す。ＦＯＳ遺伝子ファミリーは、４つのメンバー：ＦＯＳ、ＦＯＳＢ、ＦＯＳＬ１、およびＦＯＳＬ２を含む。これらの遺伝子は、ＪＵＮファミリー（例えば、ｃ－Ｊｕｎ、ＪｕｎＤ）のタンパク質と二量体化でき、それにより、転写因子複合体ＡＰ－１を形成する、ロイシンジッパータンパク質をコードする。従って、ＦＯＳタンパク質は、細胞増殖、分化、および形質転換の調節に関連するとされている。
【0083】
用語「脳由来神経栄養因子」、「ＢＤＮＦ」、または「アブリニューリン」は、ヒトにおいて、ＢＤＮＦ遺伝子によりコードされるタンパク質を指す。ＢＤＮＦは、成長因子のニューロトロフィンファミリーのメンバーであり、これは、標準的神経成長因子に関連する。神経栄養因子は、脳および周辺部で見出される。ＦＯＳ、ＪＵＮ、ＢＤＮＦ、ＣＤＣ４２、ＣＣＬ２は上流相互作用のコホート活性を介する。Ｆｏｓ遺伝子ファミリーは、４つのメンバー：ＦＯＳ、ＦＯＳＢ、ＦＯＳＬ１、およびＦＯＳＬ２を含む。これらの遺伝子は、ＪＵＮファミリーのタンパク質と二量体化できそれにより、転写因子複合体ＡＰ－１を形成する、ロイシンジッパータンパク質をコードする。従って、ＦＯＳタンパク質は、細胞増殖、分化、および形質転換の制御因子として関連付けられている。いくつかの事例では、ＦＯＳ遺伝子の発現はまた、アポトーシス細胞死とも関連付けられている。
【0084】
用語「ｃ－Ｊｕｎ」は、ヒトにおいて、ＪＵＮ遺伝子によりコードされるタンパク質を指す。ｃ－Ｊｕｎは、ｃ－ｆｏｓと組み合わせて、ＡＰ－１初期応答転写因子を形成する。それは最初に、Ｆｏｓ結合タンパク質ｐ３９として特定され、後になって初めて、ＪＵＮ遺伝子の産物として再発見された。ｃ－Ｊｕｎは最初に、発癌性転写因子転写因子として発見された。癌原遺伝子ｃ－Ｊｕｎは、ウィルス腫瘍性タンパク質ｖ－Ｊｕｎ（Ｐ０５４１１）の細胞相同体である。ヒトＪＵＮは、特定の標的ＤＮＡ配列と直接相互作用して遺伝子発現を調節する、ウィルスタンパク質と高度に類似性するタンパク質をコードする。
【0085】
用語「脳由来神経栄養因子」、「ＢＤＮＦ」、または「アブリニューリン」は、ヒトにおいて、ＢＤＮＦ遺伝子によりコードされるタンパク質を指す。ＢＤＮＦは、成長因子のニューロトロフィンファミリーのメンバーであり、これは、標準的神経成長因子に関連する。
【0086】
用語「ＣＤＣ４２」または「細胞分裂制御タンパク質４２相同体」は、細胞周期の調節に関与するタンパク質を指す。ヒトＣｄｃ４２は、Ｒｈｏファミリーの低分子のＧＴＰアーゼであり、これは、細胞形態、細胞遊走、エンドサイトーシスおよび細胞周期進行を含む多様な細胞機能を制御する、シグナル伝達経路を調節する。
【0087】
用語「ＣＣＬ２」、「ケモカイン（Ｃ－Ｃモチーフ）リガンド２」または「単球化学誘引物質タンパク質１（ＭＣＰ１）」または「低分子誘導性サイトカインＡ２」は、ＣＣケモカインファミリーに属する低分子のサイトカインを指す。ＣＣＬ２は、組織傷害または感染症のいずれかにより生じた炎症部位に単球、メモリーＴ細胞、および樹状細胞を動員する。ＣＣＬ２は、乾癬、関節リウマチおよびアテローム性動脈硬化症などの、単球性浸潤により特徴づけられるいくつかの疾患の病原体に関連付けられている。
【0088】
神経可塑性（Ｎｅｕｒｏｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ）は、神経可塑性（ｎｅｕｒａｌ ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ）、または脳可塑性としても知られ、成長または再編成を通して脳中のニューラルネットワークを変化させる能力である。これらの変化は、新規結合を作る個々のニューロン経路から皮質の再マッピングのような系統的調節にわたる。神経可塑性の例は、新規能力、環境の影響、実践および精神的ストレスの学習に起因する回路およびネットワークの変化を含む。活性依存的可塑性は、健康的な発育、学習、記憶および脳損傷からの回復のための重要な意義を有し得る。
【0089】
用語「ＳＴＲＩＮＧ」は、遺伝子またはタンパク質間の関係の図形表示を指す。タンパク質間の機能的連結はしばしば、それらをコードする遺伝子間のゲノム関連性から推定でき、同じ機能のために必要とされる遺伝子の群は、類似の種のカバー率を示す傾向があり、しばしばゲノム上で近接して存在し（原核生物において）、かつ遺伝子融合イベントに関与する傾向がある。データベースＳＴＲＩＮＧは、これらの関連性の調査および分析のための、あらかじめ計算された世界的リソースである。３つのタイプの証拠は概念的に異なり、かつ予測される相互作用の数は極めて大きいので、個別の予測の有意性を評価および比較できることが必須である。従って、ＳＴＲＩＮＧは、予測毎に単一の信頼度スコアに統合された、共通の参照セットに対する異なるタイプの関連性のベンチマークに基づくユニークな採点フレームワークを含む。タンパク質相互作用を重み付けした、推定されるネットワークのグラフ表示は、高レベルの機能的連結を提供し、生物学的過程におけるモジュール方式の分析を促進する。
【0090】
用語「樹状突起分枝」または「樹状分岐」は、それによりニューロンが新規樹状突起樹および枝を形成して新規シナプスを生成する、多段階の生物学的過程を指す。樹状成長のためのこの能力は、学習および記憶形成において役割を果たすと考えられる。
【0091】
用語「チアミン」または「ビタミンＢ１」は、主にミトコンドリアに局在する、多数の酵素に対し補因子として機能する、必須栄養素を指す。いくつかのチアミン依存性酵素は、エネルギー代謝および核酸の生合成に関与し、一方で他のものは、抗酸化剤機構の一部である。脳は、ミトコンドリアのＡＴＰ産生に対するその大きい依存性のため、チアミン欠損に対して極めて脆弱である。これは、急速な成長の間（即ち、周産期間および子供）により明白であり、その際チアミン欠損は通常栄養障害または遺伝的欠陥のいずれかに関連する。チアミン欠損は、軽度神経学的および精神症状（錯乱、記憶減退、および睡眠障害）から、重度脳症、運動失調、うっ血性心不全、筋攣縮およびさらには死亡に及ぶ多数の状態に寄与する。
【0092】
用語「対象」または「患者」は、任意の単一の動物、より好ましくは治療が望ましい哺乳類（非ヒト動物、例えば、イヌ、ＣＡＴ、ウマ、ウサギ、動物園の動物、雌ウシ、ブタ、ヒツジ、および非ヒト霊長類）を指す。最も好ましくは、本明細書における患者は、ヒトである。
【0093】
本明細書で使用される用語「薬学的に許容可能な担体」という用語は、薬学的投与に適合する任意のすべての溶媒、分散媒、コーティング、等張剤および吸収遅延剤などを指す。薬学的に活性な物質に対するこのような媒体および薬剤の使用は、当該分野において周知である。組成物はまた、補助的な、追加の、または強化された治療作用を提供する他の活性化合物を含み得る。
【0094】
本明細書で使用される用語「薬学的に許容可能な組成物」は、１種または複数の薬学的に許容可能な担体と共に処方された本明細書で開示される少なくとも１種の化合物を含む組成物を指す。
【0095】
本明細書で使用される「予防」という用語は、それにより疾患の発生が抑制または遅延される全ての作用を意味する。
【0096】
用語「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、（１）疾患を抑制すること（即ち、病態および／または総体症状の更なる進展を阻止すること）；および（２）疾患の重症度を低減することなどの疾患を改善すること（即ち、病態および／または総体症状を回復させること）、の１つまたは複数を指す。
【0097】
用語「投与」は、特定の好適な方法による、患者への一定量の予め決定された物質のある量の導入を指す。本明細書で開示される組成物は、それが目的の組織に到達できる限り、例えば、限定されないが、吸入、腹腔内、静脈内、筋肉内、皮下、皮内、経口、局所、鼻腔内、肺内、または直腸内投与の一般的経路のいずれかを介して投与され得る。
【0098】
範囲を含む、全ての数字表記、例えば、ｐＨ、温度、時間、および分子量は、当該技術分野での慣例に従い、近似値として理解されるべきである。本明細書で使われる場合、用語「約」は、与えられる文脈で適切なように、述べられる量の変化（＋）または（－）１％、５％または１０％を含意し得る。必ずしも明示的に述べられないが、本明細書で記載される試薬は、単に例示的であること、および当技術分野において既知のものと等価であることは理解されたい。
【0099】
多くの既知で有用な化合物などは、様々な種類の投与についての標準的文献である、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１３ｔｈ Ｅｄ），Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡで見つけることができる。本明細書で使用される場合、「製剤」という用語は、少なくとも１種の有効成分と、賦形剤とも一般的に呼ばれる、独立して活性または不活性であってよい１種または複数の他の成分の組み合わせを意味する。用語「製剤」は、ヒトまたは動物に対する投与のための薬学的に許容可能な組成物を指しても指さなくてもよく、貯蔵または研究目的のために有用な中間体である組成物を含んでよい。
【0100】
本明細書で使われる他の技術的用語は、種々の技術的辞書により例示されるように、それらが使用される当該技術分野における通常の意味を有する。これらの非限定例で考察される特定の値および構成は、様々であってよく、単に少なくとも１つの実施形態を説明するために言及され、かつそれらの範囲を限定すると意図されない。
発明を実施するための形態
発明を実施するための形態
【0101】
前述の一般的説明と後述の詳細な説明の両方は、例示的で説明的であり、請求される本願の技術のさらなる説明を提供すると意図されることを理解されたい。本願の技術の追加の特徴と利点は、下の記述で示され、一部にはその記述から明らかである、または本願の技術の実施により知り得るであろう。本願の技術の利点は、明細書およびこれに関する請求項において特に指摘される構成により実現されおよび達成されるであろう。
【0102】
Ｓｏｍａｈａｌ
一実施形態は、式Ｉの化合物、またはその類似体（「Ｓｏｍａｈｏｌ」とも呼ばれる）であり、タンパク質－タンパク質相互作用、畳み込みニューラルネットワーク、経路モデル化および標的受容体部位活性化試験を含むマルチオミックおよび生物情報学ツールの組み合わせの分析により開発された化合物である。
＊ＩＵＰＡＣ名：（４Ｚ）－４－｛Ｎ－［（４－アミノ－２－メチルピリミジン－５－イル）メチル］ホルムアミド｝－５－｛［（２Ｚ）－３－｛Ｎ－［（４－アミノ－２－メチルピリミジン－５－イル）メチル］ホルムアミド｝－６－［（２－｛［２－（４－ヒドロキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル］（メチル）アミノ｝プロパノイル）オキシ］ヘキサ－２－エン－２－イル］ジスルファニル｝ヘキサ－４－エン－１－イル ２－｛［２－（４－ヒドロキシ－１Ｈ－インドール－３－イル）エチル］（メチル）アミノ｝プロパノエート）
一実施形態は、式Ｉの化合物、またはその類似体（「Ｓｏｍａｈｏｌ」とも呼ばれる）であり、タンパク質－タンパク質相互作用、畳み込みニューラルネットワーク、経路モデル化および標的受容体部位活性化試験を含むマルチオミックおよび生物情報学ツールの組み合わせの分析により開発された化合物である。
【化3】
【0103】
構造および合成
実施形態は、ＳｏｍａｈａｌならびにＳｏｍａｈｏｌの実施形態の合成の方法を含む。実施形態は、式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３の化合物ならびにこれらの類似体の合成の方法を含む。
実施形態は、ＳｏｍａｈａｌならびにＳｏｍａｈｏｌの実施形態の合成の方法を含む。実施形態は、式Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３の化合物ならびにこれらの類似体の合成の方法を含む。
【0104】
【化4】
２５ｍｇのインドールを、３ｍＬのトルエンおよび１ｍＬのアセトンならびに２０μＬの酢酸と共に、１４ｍＬの開口試験チューブに充填した。反応混合物を、３０分間還流温度に加熱した。３０分後、反応混合物を、冷却させ、２５ｍｇのホウ化水素ナトリウムを固体として加え、混合物を１時間撹拌した。５ｍＬの水を加え、反応混合物を抽出した。最上層を収集し、硫酸ナトリウムで乾燥し、続いて減圧下で褐色油に濃縮し、これを、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ、１２ｇ、Ｒｅｄｉｓｅｐ Ｇｏｌｄ、酢酸エチル、ヘプタン勾配、１５分間にわたり０－１００％酢酸エチル）で精製して、２１ｍｇの目的のイソプロピル化アミン生成物を得た。
【0105】
生成物画分をその後、組み合わせ、減圧下（ＳｐｅｅｄＶａｃ）で濃縮し、得られた油を、スクリーニングで使用した。
【0106】
【化5】
２５ｍｇのインドールを、３ｍＬのトルエンおよび１ｍＬのアルデヒドならびに２０μＬの酢酸と共に、１４ｍＬの開口試験チューブに充填した。反応混合物を、３０分間還流温度に加熱した。３０分後、反応混合物を冷却させた。５ｍＬの水を加え、反応混合物を抽出した。最上層を、収集し、硫酸ナトリウムで乾燥し、続いて減圧下で褐色油に濃縮し、これを、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ、１２０ｇ、Ｒｅｄｉｓｅｐ Ｇｏｌｄ、酢酸エチル、ヘプタン勾配、１５分間にわたり０－１００％酢酸エチル）で精製して、１０ｍｇの目的の三環式インドール生成物を得た。
【0107】
生成物画分をその後、組み合わせ、減圧下（ＳｐｅｅｄＶａｃ）で濃縮し、得られた油を、スクリーニングで使用した。
【0108】
【化6】
１．５７ｇのブロモアセチルクロリドを、５ｍＬのジクロロメタンと共に、滴加漏斗に充填し、１５ｍＬのジクロロメタンに溶解した１，４７ｇの４－メトキシインドール（１）を含む５０ｍＬの三つ口丸底フラスコに装着した。固体として７５ｍｇの三塩化アルミニウムを加え、反応混合物を、窒素でパージし、室温で３０分間撹拌した。塩化ブロモアセチル溶液をその後、撹拌される反応混合物に３０分間かけて滴加し、反応混合物を室温で１５時間撹拌した。反応混合物をその後、完了について試験し、１５ｍＬの０．１Ｍ酒石酸ナトリウムカリウムを、シリンジを用いて加え、混合物をさらに５分間撹拌し、その後分液漏斗に移した。
【0109】
有機層を次に、１５ｍＬの飽和ブライン溶液で抽出し、収集し硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を、ロータリーエバポレーターにより除去し、溶液を、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ、１２０ｇ、Ｒｅｄｉｓｅｐ Ｇｏｌｄ、酢酸エチル、ヘプタン勾配、１５分間にわたり０－１００％酢酸エチル）により精製した。主要生成物画分を集め、ロータリーエバポレーターにより濃縮し、この時点で生成物を、酢酸エチルの除去後に沈殿させた。生成物をその後、濾別し、１０ｍＬのヘプタンで洗浄し、使用の前に減圧下で乾燥して、１．９５ｇの化合物２（７３％）を得た。
【0110】
化合物Ｃ２、Ａ３、Ｂ３およびＥ３
撹拌棒を装着した１ドラムバイアル中で、５００ｕＬのｎ－メチルピロリドンに溶解した５０ｍｇの化合物２を、４当量のアミンと組み合わせ全て一度に充填した。反応混合物を、撹拌しながらアルミニウム加熱ブロック中で６０℃に加熱し、ＲＰ－Ｃ１８ ＵＰＬＣにより試験して３時間後に完了と決定した。
撹拌棒を装着した１ドラムバイアル中で、５００ｕＬのｎ－メチルピロリドンに溶解した５０ｍｇの化合物２を、４当量のアミンと組み合わせ全て一度に充填した。反応混合物を、撹拌しながらアルミニウム加熱ブロック中で６０℃に加熱し、ＲＰ－Ｃ１８ ＵＰＬＣにより試験して３時間後に完了と決定した。
【0111】
２ｍＬの水を加えて、反応をクエンチし、混合物を分液漏斗に移し、そこで１０ｍＬの酢酸エチル、３ｍＬの０．１Ｍ ＮａＯＨを加え、有機層を抽出し、続いて５ｍＬの飽和ブライン溶液で抽出した。有機層をその後、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、混合物を回転蒸発により濃縮し、そこでそれをシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ、１２ｇ、Ｒｅｄｉｓｅｐ Ｇｏｌｄ、酢酸エチル、ヘプタン勾配、１５分間にわたり０－１００％酢酸エチル）により精製した。
【0112】
生成物画分をその後、組み合わせ、減圧下（ＳｐｅｅｄＶａｃ）で濃縮し、得られた油を、スクリーニングで使用した。
【0113】
【化7】
２３ｍｇの出発生成物（上で「１」として参照される）を、３ｍＬのトルエン、１５ｍｇの２（上記）、および２０ｕＬの酢酸と共に、１４ｍＬの開口試験チューブに充填した。反応混合物を、３０分間還流温度に加熱した。３０分後、反応混合物を冷却させ、その後２５ｍｇのホウ化水素ナトリウムを、固体として加え、混合物を１時間撹拌した。５ｍＬの水を加え、反応混合物を抽出した。最上層を、収集し、硫酸ナトリウムで乾燥し、続いて減圧下で褐色油に濃縮し、これを、シリカゲルクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ、１２ｇ、Ｒｅｄｉｓｅｐ Ｇｏｌｄ、酢酸エチル、ヘプタン勾配、１５分間にわたり０－１００％酢酸エチル）により精製して、１８ｍｇの目的のアミン生成物、３（上に示す）を得た。
【0114】
生成物画分をその後、組み合わせ、減圧下（ＳｐｅｅｄＶａｃ）で濃縮し、得られた油を、スクリーニングで使用した。
【0115】
【化8】
実施形態はまた、化合物Ｇ２、Ｈ２、Ｃ３およびＤ３の合成の方法も含む。化合物を、当該技術分野で既知の方法により調製した（例えば、国際公開第２０２１／１７６５９９Ａ１号を参照）。手短に説明すると、０．５ｍｍｏｌのアリールヒドラジン、０．５ｍｍｏｌのケトン、４ｍＬのエタノールおよび６当量の３７％ＨＣｌを８ｍＬの密閉バイアルに充填した。反応混合物を、一晩１００℃に加熱した。翌日に、溶媒を、ロータリーエバポレーターにより除去し、化合物を、１０ｍＬのジクロロメタンに溶解し、１０ｍＬの０．１ＭのＨＣｌで２回抽出した。ジクロロメタン層を、硫酸ナトリウムで乾燥し、油へと濃縮した。
【0116】
油を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（Ｉｓｃｏ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ、１２ｇ、Ｒｅｄｉｓｅｐ Ｇｏｌｄ、メタノール、ジクロロメタン（両方共、２％の水酸化アンモニウム含有）勾配、１５分間にわたり０－５０％メタノール）により精製した。生成物画分をその後、組み合わせ、減圧下（ＳｐｅｅｄＶａｃ）で濃縮し、得られた油を、スクリーニングで使用した。
【0117】
類似体
実施形態は、Ｓｏｍａｈｏｌの類似体も含む。図１は、番号を付した原子を有するＳｏｍａｈｏｌの構造を示す。分子は、炭素６と７の間および４３と４４の間に５個以上の追加のメチル基を含み得る。部分１０および４８の酸素は、ヒドロキシル基により置換され得る。硫黄は、リンにより置換され得る。あるいは、硫黄は、脂肪酸鎖に付着された三リン酸骨格により置換され得、または硫黄は、マグネシウム含浸コレステロールなどの種々の形態でのリポタンパク質により置換され得る。さらに、炭素（５４および５５）共有結合は、位置５４でカリウムおよびリン酸または他の塩の反復などの塩成分を用いてイオン結合により置換され得る。５４を越える位置の官能基は、別の反復のリン酸中心に直接付着できる。
実施形態は、Ｓｏｍａｈｏｌの類似体も含む。図１は、番号を付した原子を有するＳｏｍａｈｏｌの構造を示す。分子は、炭素６と７の間および４３と４４の間に５個以上の追加のメチル基を含み得る。部分１０および４８の酸素は、ヒドロキシル基により置換され得る。硫黄は、リンにより置換され得る。あるいは、硫黄は、脂肪酸鎖に付着された三リン酸骨格により置換され得、または硫黄は、マグネシウム含浸コレステロールなどの種々の形態でのリポタンパク質により置換され得る。さらに、炭素（５４および５５）共有結合は、位置５４でカリウムおよびリン酸または他の塩の反復などの塩成分を用いてイオン結合により置換され得る。５４を越える位置の官能基は、別の反復のリン酸中心に直接付着できる。
【0118】
実施形態はまた、本明細書で開示される治療分子のプロドラッグも含む。
【0119】
一実施形態では、本明細書で記載の１種または複数の治療分子は、シナプス神経可塑性を刺激できる。シナプス神経可塑性は、シナプス前活性の変化に応答して強くなるまたは弱くなるるシナプスの性質として定義できる。この可塑性はしばしば、特定のニューロン上のシナプスの数の変化として現れ、それにより長期の尺度で脳全体の神経接続を変える。生検用脳組織から得られた分子機序に基づき、出願者らは、中毒脳の再構築および中毒の解消のための機序を特定した。出願者らは、式Ｉの化合物（即ち、Ｓｏｍａｈｏｌ）が脳に対し有益な効果を有し、それが大脳辺縁系の再構築を促進する可能性があることを提案する。
【0120】
理論に束縛されるものではないが、出願者らは、分子が、上流の相互作用のコホート活性を介してＦＯＳ、ＪＵＮ、ＢＤＮＦ、ＣＤＣ４２およびＣＣＬ２の上流の制御因子に影響することを提案する。これらの直接の上流の相互作用は、直接結合、Ｇａ１２アゴニズム、タンパク質の調節的アセチル化およびアセチルコリン生合成を含むアセチルＣｏＡ代謝のアロステリック調節、アセチル化の促進を介する増大されたＭＤＨ２コード化、およびコエンザイム模倣を介するＴＨＤＰ経路のアゴニズムを介する全ての５－ＨＴ受容体アゴニズムのコホートである。
【0121】
出願者らの機構モデルに基づき、これらの相互作用の下流効果は、ＦｏｓＢ、ＪＵＮ、ＢＤＮＦの刺激の恒常性をもたらし、５－ＨＴ７Ｒ、５－ＨＴ２ＡＲ、オキシトシン、Ｇ共役タンパク質、ミトコンドリアの刺激および下流のフィードバックの組み合わされた活性化を介してＣＣＬ２の相対存在量を低減する。この下流の繋がりにおける活性は、オキシトシン、アセチルコリンおよびドーパミンの促進を含む。
【0122】
従って、一実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌ（または他の治療分子）は、５－ＨＴ受容体などの中枢および末梢神経系中で見出される１種または複数のＧタンパク質共役受容体およびリガンド開口型イオンチャネルを調節できる。いくつかの実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌ（または他の治療分子）は、ＦＯＳ、ＪＵＮ、ＢＤＮＦ、ＣＤＣ４２またはＣＣＬ２などの１種または複数の癌原遺伝子に影響を与する。一実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌは、オキシトシン、アセチルコリンおよび／またはドーパミンのレベルを調節する。
【0123】
これらの組み合わされた活性は、神経可塑性の増大に関与する。例えば、本明細書で記載の治療分子は、ＣＤＣ４２刺激を含むＧａ１２シグナル伝達を介して樹状突起形成を効果的に改善する、アロステリックおよび直接結合の両方による機序を示し得る。分子は、特に大脳辺縁皮質、帯状回、縫線核、海馬傍回、歯状回、海馬、海馬台、扁桃体、中隔野および視床下部におけるオキシトシン、アセチルコリンおよびドーパミンに対する上述の効果を含む高められた神経ホルモンシグナル伝達に対する効果を示し得る。
【0124】
経路
神経系の不可欠な特性は、生理学的および環境的刺激に応答して機能的結合性を再構築するその能力である。神経ペプチドを含む内因性シグナルは、神経系可塑性を支配する。特に、オキシトシンは、活性依存性回路変化を媒介するその役割について認識されている。これらのオキシトシン依存性変化は、シナプスレベルで起こり、結果として、回路の細胞組成を成形する。
神経系の不可欠な特性は、生理学的および環境的刺激に応答して機能的結合性を再構築するその能力である。神経ペプチドを含む内因性シグナルは、神経系可塑性を支配する。特に、オキシトシンは、活性依存性回路変化を媒介するその役割について認識されている。これらのオキシトシン依存性変化は、シナプスレベルで起こり、結果として、回路の細胞組成を成形する。
【0125】
図２は、オキシトシンシグナル伝達経路を示す。オキシトシンシグナル伝達の変化は、神経成熟を乱し、短期および長期病理学的結果を有する可能性がある。オキシトシンシグナル伝達の異常な調節は、神経発達障害の病因論に関連付けられる。最近の調査は、神経発達障害におけるシナプス機能不全を示した。従って、病原性機序は、治療的介入の標的であり得る。
【0126】
神経伝達物質セロトニン（５－ＨＴ）は、行動阻害、食欲抑制、気分、認知機能、体温調節および常習行為などの行動学的および精神心理学的機能において主要な役割を果たす。セロトニン（５－ＨＴ）神経伝達物質系は、特に興味深く、複数の５－ＨＴ受容体は、アルコールおよび薬物自己投与および薬物依存の発生において重要な役割を演じると考えられる。セロトニン受容体アゴニストは、１種または複数のセロトニン受容体のアゴニストである。それらは、神経伝達物質およびホルモンであり、セロトニン受容体の内因性リガンドである、セロトニン（５－ヒドロキシトリプタミン、５－ＨＴ）と同様の様式でセロトニン受容体を活性化する。図３は、５－ＨＴ受容体および関連作用を示す。Ｓｏｍａｈｏｌは選択的に、５－ＨＴ７受容体（即ち、５－ＨＴ７Ｒ）を活性化し、これは最終的に、樹状突起伸長部を活性化する。
【0127】
従って、いくつかの実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌ（または他の治療分子）は、行動阻害、食欲抑制、気分、認知機能、体温調節および常習行為の１種または複数を調節できる。他の実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌは、中毒、アルコール依存症を治療するために、および／または薬物依存の発生を防止するために投与され得る。
【0128】
Ｓｏｍａｈｏｌは、そのアゴニスト能力について調査された。最小のＫｉ値は、５－ＨＴ２Ｂおよび５－ＨＴ７受容体で観察された。種々の５－ＨＴ受容体アゴニズム（下表１に示す）は、ＤＪ－１（ＰＡＲＫ７）およびアミロイドβ（ａ４）で高い結合親和性を示す分子の他の部分と関連する。この分子はまた、現在調査されている機序により、タンパク質、ＭＡＲＣＳ、ＶＡＴＡ、ＶＡＴＢ、ＴＨＹ１およびＨＰＬＮ１の相対存在量を高める。
【表1】
【0129】
５－ＨＴ７受容体は、体温調節、サーカディアンリズム、学習記憶、ならびに睡眠に関与する。この受容体はまた、気分調節にも関与することが推測され、それはうつ病の治療における有用な標的であり得ることを示唆する。図２は、５－ＨＴ７受容体により調節されるシグナル伝達経路の概略図である。左部分は、Ｇｓタンパク質により媒介される効果を収載する。同様に、右部分は、Ｇ１２媒介シグナル伝達の過程を収載する。
【0130】
いくつかの実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌは、５－ＨＴ７受容体アゴニストとして患者に投与され得る。いくつかの実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌは、サーカディアンリズム、学習および記憶、睡眠、気分調節および／またはうつ病を調節できる。
【0131】
いくつかの実施形態では、本明細書で開示される治療分子は、５－ＨＴ７受容体アゴニストとして患者に投与され得る。いくつかの実施形態では、分子は、サーカディアンリズム、学習および記憶、睡眠、気分調節および／またはうつ病を調節できる。分子は、Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３および／またはＥ３であり得る。
【0132】
ＲＮアーゼ１
膵臓型リボヌクレアーゼは、ヒトにおいてＲＮアーゼ１遺伝子によりコードされる酵素である。遺伝子は、リボヌクレアーゼＡスーパーファミリーのサブセットである、分泌性リボヌクレアーゼの膵臓型のメンバーをコードする。コードされるエンドヌクレアーゼは、ピリミジン塩基の３’側の内部リン酸ジエステルＲＮＡ結合を切断する。図４は、隣接遺伝子とのＲＮアーゼ１の相互作用を示す。
膵臓型リボヌクレアーゼは、ヒトにおいてＲＮアーゼ１遺伝子によりコードされる酵素である。遺伝子は、リボヌクレアーゼＡスーパーファミリーのサブセットである、分泌性リボヌクレアーゼの膵臓型のメンバーをコードする。コードされるエンドヌクレアーゼは、ピリミジン塩基の３’側の内部リン酸ジエステルＲＮＡ結合を切断する。図４は、隣接遺伝子とのＲＮアーゼ１の相互作用を示す。
【0133】
ＲＮアーゼ１の機能的パートナーとしては、下記が挙げられる：
１．ＲＮＨ１：リボヌクレアーゼ阻害剤；ＲＮアーゼ１、ＲＮアーゼ２、およびＡＮＧを阻害するリボヌクレアーゼ阻害剤。この遺伝子は、レドックス恒常性に関与し得る。
２．ＳＥ１４Ｌ２：ＳＥＣ１４様タンパク質２；担体タンパク質。いくつかの疎水性分子に結合し、異なる細胞性部位間のそれらの移動を促進する。αトコフェロールに高親和性で結合する。また、他のトコフェロールおよびトコトリエノールにより弱い親和性で結合する。αトコフェロールとのその結合を介する転写活性化因子活性を有し得る。いくつかのスクアレン構造をおそらく認識しおよび結合し、それは、細胞中でスクアレンの代謝活性プールへの移動を増やすことにより、コレステロール生合成を調節し得ることを示唆する。
３．ＡＮＸＡ５（アネキシンＡ５）このタンパク質は、血液凝固カスケードに関与するトロンボプラスチン特異的複合体の間接的阻害剤として機能する、抗凝固剤タンパク質である。
４．ＲＮアーゼＴ２（リボヌクレアーゼＴ２）このタンパク質は、リボヌクレアーゼ活性を有し、酸性ｐＨでより高い活性を有する。それは同様に、リボソームＲＮＡのリソソーム分解に関与し（類似性により）、細胞ＲＮＡ異化作用に関与し得る。
５．ＭＢ（ミオグロビン）ＭＢは、酸素の予備物資として役割を果たし、筋肉内での酸素の移動を促進する。
６．Ｃ２ｏｒｆ４９（Ａｓｈｗｎ；染色体２オープンリーディングフレーム４９）。
７．ＡＬＢ（血清アルブミン）それは、血漿の主要タンパク質であり、水、Ｃａ（２＋）、Ｎａ（＋）、Ｋ（＋）、脂肪酸、ホルモン、ビリルビンおよび薬物に対し良好な結合能力を有する。その主要な機能は、血液の膠質浸透圧の調節である。血漿中の主要な亜鉛輸送体であり、通常全ての血漿亜鉛の約８０％を結合する。
８．ＤＮアーゼ１（デオキシリボヌクレアーゼ１）いくつかの特徴の中で特に、ＤＮアーゼ１は、アポトーシスによる細胞死に関与するようである。それは、Ｇ－ＡＣＴＩＮに特異的に結合し、アクチン重合を阻止する。
９．ＣＹＣＳ（シトクロムｃ；電子運搬タンパク質）酸化型のシトクロムｃヘム基は、シトクロムレダクターゼのシトクロムｃ１サブユニットのヘム基から電子を受け取ることができる。シトクロムｃはその後、ミトコンドリアの電子輸送鎖の最終タンパク質担体である、シトクロムオキシダーゼ複合体にこの電子を輸送する。
１０．Ｐ４ＨＢ（タンパク質ジスルフィドイソメラーゼ）この多機能タンパク質は、ジスルフィド結合の形成、切断および転移を触媒する。細胞表面で、それは、細胞に付着したタンパク質のジスルフィド結合を切断するレダクターゼとして機能するように見える。従って、それは、細胞外表面タンパク質の構造的修飾をもたらし得る。細胞内で、それは、新生タンパク質のジスルフィド結合を形成／再配列するように見える。高濃度で、それは、誤って折り畳まれたタンパク質の凝集を抑制するシャペロンとして機能する。低濃度で、それは、凝集を促進する（抗シャペロン活性）。
１．ＲＮＨ１：リボヌクレアーゼ阻害剤；ＲＮアーゼ１、ＲＮアーゼ２、およびＡＮＧを阻害するリボヌクレアーゼ阻害剤。この遺伝子は、レドックス恒常性に関与し得る。
２．ＳＥ１４Ｌ２：ＳＥＣ１４様タンパク質２；担体タンパク質。いくつかの疎水性分子に結合し、異なる細胞性部位間のそれらの移動を促進する。αトコフェロールに高親和性で結合する。また、他のトコフェロールおよびトコトリエノールにより弱い親和性で結合する。αトコフェロールとのその結合を介する転写活性化因子活性を有し得る。いくつかのスクアレン構造をおそらく認識しおよび結合し、それは、細胞中でスクアレンの代謝活性プールへの移動を増やすことにより、コレステロール生合成を調節し得ることを示唆する。
３．ＡＮＸＡ５（アネキシンＡ５）このタンパク質は、血液凝固カスケードに関与するトロンボプラスチン特異的複合体の間接的阻害剤として機能する、抗凝固剤タンパク質である。
４．ＲＮアーゼＴ２（リボヌクレアーゼＴ２）このタンパク質は、リボヌクレアーゼ活性を有し、酸性ｐＨでより高い活性を有する。それは同様に、リボソームＲＮＡのリソソーム分解に関与し（類似性により）、細胞ＲＮＡ異化作用に関与し得る。
５．ＭＢ（ミオグロビン）ＭＢは、酸素の予備物資として役割を果たし、筋肉内での酸素の移動を促進する。
６．Ｃ２ｏｒｆ４９（Ａｓｈｗｎ；染色体２オープンリーディングフレーム４９）。
７．ＡＬＢ（血清アルブミン）それは、血漿の主要タンパク質であり、水、Ｃａ（２＋）、Ｎａ（＋）、Ｋ（＋）、脂肪酸、ホルモン、ビリルビンおよび薬物に対し良好な結合能力を有する。その主要な機能は、血液の膠質浸透圧の調節である。血漿中の主要な亜鉛輸送体であり、通常全ての血漿亜鉛の約８０％を結合する。
８．ＤＮアーゼ１（デオキシリボヌクレアーゼ１）いくつかの特徴の中で特に、ＤＮアーゼ１は、アポトーシスによる細胞死に関与するようである。それは、Ｇ－ＡＣＴＩＮに特異的に結合し、アクチン重合を阻止する。
９．ＣＹＣＳ（シトクロムｃ；電子運搬タンパク質）酸化型のシトクロムｃヘム基は、シトクロムレダクターゼのシトクロムｃ１サブユニットのヘム基から電子を受け取ることができる。シトクロムｃはその後、ミトコンドリアの電子輸送鎖の最終タンパク質担体である、シトクロムオキシダーゼ複合体にこの電子を輸送する。
１０．Ｐ４ＨＢ（タンパク質ジスルフィドイソメラーゼ）この多機能タンパク質は、ジスルフィド結合の形成、切断および転移を触媒する。細胞表面で、それは、細胞に付着したタンパク質のジスルフィド結合を切断するレダクターゼとして機能するように見える。従って、それは、細胞外表面タンパク質の構造的修飾をもたらし得る。細胞内で、それは、新生タンパク質のジスルフィド結合を形成／再配列するように見える。高濃度で、それは、誤って折り畳まれたタンパク質の凝集を抑制するシャペロンとして機能する。低濃度で、それは、凝集を促進する（抗シャペロン活性）。
【0134】
従って、いくつかの実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌ（または本明細書で開示される他の治療分子）は、ＲＮアーゼ１レベルおよび／または活性を調節するために投与され得る。いくつかの実施形態では、ＲＮアーゼ１の機能的パートナーは、ＲＮＨ１、ＳＥ１４Ｌ２、ＡＮＸＡ５、ＲＮＡＳＥＴ２、ＭＢ、Ｃ２ｏｒｆ４９、ＡＬＢ、ＤＮＡＳＥ１、ＣＹＣＳおよびＰ４ＨＢの１種または複数を含む。図１は、隣接遺伝子または「機能的パートナー」とのＲＮアーゼ１の相互作用を示す。
【0135】
ＣＣＬ２
ケモカイン（Ｃ－Ｃモチーフ）リガンド２（ＣＣＬ２）は、単球化学誘引物質タンパク質１（ＭＣＰ１）および低分子誘導性サイトカインＡ２と呼ばれることもある。ＣＣＬ２は、ＣＣケモカインファミリーに属する低分子サイトカインである。それは、単球および好塩基球を誘引するが、好中球または好酸球を誘引しない。それはまた、単球抗腫瘍活性を高め、乾癬、関節リウマチまたはアテローム性動脈硬化症のような単球性浸潤により特徴づけられる疾患の病因に関連付けられている。最近の研究は、ＣＣＬ２治療神経幹細胞が、自己複製、増殖およびニューロン分化の顕著に高められた能力を示したことを示した。同様に、図５は、ＣＣＬ２の隣接遺伝子との相互作用を示す。
ケモカイン（Ｃ－Ｃモチーフ）リガンド２（ＣＣＬ２）は、単球化学誘引物質タンパク質１（ＭＣＰ１）および低分子誘導性サイトカインＡ２と呼ばれることもある。ＣＣＬ２は、ＣＣケモカインファミリーに属する低分子サイトカインである。それは、単球および好塩基球を誘引するが、好中球または好酸球を誘引しない。それはまた、単球抗腫瘍活性を高め、乾癬、関節リウマチまたはアテローム性動脈硬化症のような単球性浸潤により特徴づけられる疾患の病因に関連付けられている。最近の研究は、ＣＣＬ２治療神経幹細胞が、自己複製、増殖およびニューロン分化の顕著に高められた能力を示したことを示した。同様に、図５は、ＣＣＬ２の隣接遺伝子との相互作用を示す。
【0136】
ＣＣＬ２の機能的パートナーとしては、下記が挙げられる：
１．ＣＣＲ２（Ｃ－Ｃケモカイン受容体２型；ＣＣＬ２、ＣＣＬ７およびＣＣＬ１３ケモカインに対する受容体）。ＣＣＲ２は、βデフェンシンＤＥＦＢ１０６Ａ／ＤＥＦＢ１０６Ｂの受容体である。それは、細胞内カルシウムイオンレベルを高めることによりシグナルを伝達する（類似性により）。ＣＣＬ２結紮時に、それは、ＰＩ３Ｋカスケードの活性化、低分子Ｇタンパク質Ｒａｃおよび葉状仮足突出部により、走化性および遊走誘導を媒介する。
２．ＩＬ１０（インターロイキン－１０）ＩＬ１０は、活性化マクロファージにより、およびヘルパーＴ細胞により産生される、ＩＦＮγ、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＴＮＦおよびＧＭ－ＣＳＦを含む、多数のサイトカインの合成を抑制する。
３．ＩＬ４（インターロイキン－４）ＩＬ４は、少なくともいくつかのＢ細胞活性化プロセスならびに他の細胞型の活性化プロセスに関与する。それは、ＤＮＡ合成の共刺激分子である。それは、休止Ｂ細胞上のクラスＩＩ ＭＨＣ分子の発現を誘導する。それは、ＩｇＥおよびＩｇＧ１の分泌および細胞表面発現の両方を強化する。それはまた、リンパ球および単球の両方上のＩｇＥ（ＣＤ２３）の低親和性Ｆｃ受容体の発現を調節する。それはまた、マクロファージ中のＩＬ３１ＲＡ発現を正に調節する。
４．ＩＬ６（インターロイキン－６）ＩＬ６は、広範な生物学的機能を有するサイトカインである。それは、急性期応答の強力な誘発剤である。それは、Ｂ細胞のＩｇ分泌細胞への最終分化で重要な役割を果たし、リンパ球および単球分化に関与する。それは、Ｂ細胞、Ｔ細胞、肝細胞、造血前駆細胞およびＣＮＳの細胞に作用する。Ｔ（Ｈ）１７細胞の生成に必要とされる。それはまた、マイオカインとして作用し、筋肉収縮後に血流中に排出され、油脂の分解を高めるために、およびインスリン抵抗性を改善するために作用する。
５．ＳＴＡＴ３（シグナル伝達性転写因子３）ＳＴＡＴ３は、インターロイキン、ＫＩＴＬＧ／ＳＣＦ、（ＬＥＰ）および他の成長因子に対する細胞応答を媒介するシグナル伝達物質および転写活性化剤である。活性化されると、それは、標的遺伝子のプロモーター領域に、ＮＣＯＡ１またはＭＥＤ１などの活性化補助因子を動員する。活性化されたＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３およびＦＧＦＲ４に対する細胞応答を媒介し得る。種々の急性期プロテイン遺伝子のプロモーター中で特定されるインターロイキン－６（ＩＬ－６）応答配列に結合する。それは、ＩＬ３１ＲＡを介してＩＬ３１により活性化される。
６．ＩＬ１３（インターロイキン－１３；サイトカイン）ＩＬ３は、炎症性サイトカイン産生を抑制する。それは、インターフェロンγ合成の調節において、ＩＬ２と相乗作用し、炎症性および免疫応答の調節において重要であり得る。マクロファージ中のＩＬ３１ＲＡ発現を正に調節する。
７．ＣＸＣＬ８（インターロイキン－８）ＩＬ－８は、好中球、好塩基球、およびＴ細胞を誘引するが、単球を誘引しない、走化性因子である。それはまた、好中球活性化に関与する。それは、炎症性刺激に応答して、いくつかの細胞型から放出される。ＩＬ－８（６－７７）は、好中球活性化に対し５～１０倍高い活性を有し、ＩＬ－８（５－７７）は、好中球活性化に対し増大された活性を有し、ＩＬ－８（７－７７）は、ＩＬ－８（１－７７）と比較して、受容体ＣＸＣＲ１およびＣＸＣＲ２に対しより高い親和性を有する。
８．ＪＵＮ（転写因子ＡＰ－１）ＪＵＮは、エンハンサー七量体モチーフ５’－ＴＧＡ［ＣＧ］ＴＣＡ－３’を認識し結合する転写因子である。それは、ＨＩＰＫ３によりリン酸化されると、ＮＲ５Ａ１活性を促進し、ｃＡＭＰシグナル伝達経路刺激時の増大されたステロイド産生遺伝子発現をもたらし、結腸直腸癌（ＣＲＣ）細胞におけるＵＳＰ２８の活性化ＫＲＡＳ媒介転写活性化に関与する。それは、結腸直腸癌（ＣＲＣ）細胞中のＵＳＰ２８プロモーターに結合し、塩基性ロイシンジッパータンパク質である。
９．ＴＮＦ この遺伝子は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーに属する多機能炎症促進性サイトカインをコードする。このサイトカインは主に、マクロファージにより分泌される。それは、その受容体ＴＮＦＲＳＦ１Ａ／ＴＮＦＲ１およびＴＮＦＲＳＦ１Ｂ／ＴＮＦＢＲに結合し、従って、それらを介して機能する。このサイトカインは、細胞増殖、分化、アポトーシス、脂質代謝、および凝固を含む広い範囲の生物学的過程の調節に関与する。このサイトカインは、自己免疫疾患、インスリン抵抗性、乾癬、関節リウマチ、強直性脊椎炎、結核、常染色体優性多発性嚢胞腎および癌を含む、種々の疾患に関連付けられている。この遺伝子中の変異は、脳マラリア、敗血性ショック、およびアルツハイマー病に対する感受性に影響する。マウスにおけるノックアウト研究はまた、このサイトカインの神経保護機能も示唆した。
１０．ＦＯＳ Ｆｏｓ遺伝子ファミリーは、４つのメンバー：ＦＯＳ、ＦＯＳＢ、ＦＯＳＬ１、およびＦＯＳＬ２からなる。これらの遺伝子は、ＪＵＮファミリーのタンパク質と二量体化でき、それにより転写因子複合体ＡＰ－１を形成する、ロイシンジッパータンパク質をコードする。従って、ＦＯＳタンパク質は、細胞増殖、分化、および形質転換の制御因子として関連付けられている。いくつかの事例では、ＦＯＳ遺伝子の発現はまた、アポトーシス細胞死とも関連付けられている。
１．ＣＣＲ２（Ｃ－Ｃケモカイン受容体２型；ＣＣＬ２、ＣＣＬ７およびＣＣＬ１３ケモカインに対する受容体）。ＣＣＲ２は、βデフェンシンＤＥＦＢ１０６Ａ／ＤＥＦＢ１０６Ｂの受容体である。それは、細胞内カルシウムイオンレベルを高めることによりシグナルを伝達する（類似性により）。ＣＣＬ２結紮時に、それは、ＰＩ３Ｋカスケードの活性化、低分子Ｇタンパク質Ｒａｃおよび葉状仮足突出部により、走化性および遊走誘導を媒介する。
２．ＩＬ１０（インターロイキン－１０）ＩＬ１０は、活性化マクロファージにより、およびヘルパーＴ細胞により産生される、ＩＦＮγ、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＴＮＦおよびＧＭ－ＣＳＦを含む、多数のサイトカインの合成を抑制する。
３．ＩＬ４（インターロイキン－４）ＩＬ４は、少なくともいくつかのＢ細胞活性化プロセスならびに他の細胞型の活性化プロセスに関与する。それは、ＤＮＡ合成の共刺激分子である。それは、休止Ｂ細胞上のクラスＩＩ ＭＨＣ分子の発現を誘導する。それは、ＩｇＥおよびＩｇＧ１の分泌および細胞表面発現の両方を強化する。それはまた、リンパ球および単球の両方上のＩｇＥ（ＣＤ２３）の低親和性Ｆｃ受容体の発現を調節する。それはまた、マクロファージ中のＩＬ３１ＲＡ発現を正に調節する。
４．ＩＬ６（インターロイキン－６）ＩＬ６は、広範な生物学的機能を有するサイトカインである。それは、急性期応答の強力な誘発剤である。それは、Ｂ細胞のＩｇ分泌細胞への最終分化で重要な役割を果たし、リンパ球および単球分化に関与する。それは、Ｂ細胞、Ｔ細胞、肝細胞、造血前駆細胞およびＣＮＳの細胞に作用する。Ｔ（Ｈ）１７細胞の生成に必要とされる。それはまた、マイオカインとして作用し、筋肉収縮後に血流中に排出され、油脂の分解を高めるために、およびインスリン抵抗性を改善するために作用する。
５．ＳＴＡＴ３（シグナル伝達性転写因子３）ＳＴＡＴ３は、インターロイキン、ＫＩＴＬＧ／ＳＣＦ、（ＬＥＰ）および他の成長因子に対する細胞応答を媒介するシグナル伝達物質および転写活性化剤である。活性化されると、それは、標的遺伝子のプロモーター領域に、ＮＣＯＡ１またはＭＥＤ１などの活性化補助因子を動員する。活性化されたＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３およびＦＧＦＲ４に対する細胞応答を媒介し得る。種々の急性期プロテイン遺伝子のプロモーター中で特定されるインターロイキン－６（ＩＬ－６）応答配列に結合する。それは、ＩＬ３１ＲＡを介してＩＬ３１により活性化される。
６．ＩＬ１３（インターロイキン－１３；サイトカイン）ＩＬ３は、炎症性サイトカイン産生を抑制する。それは、インターフェロンγ合成の調節において、ＩＬ２と相乗作用し、炎症性および免疫応答の調節において重要であり得る。マクロファージ中のＩＬ３１ＲＡ発現を正に調節する。
７．ＣＸＣＬ８（インターロイキン－８）ＩＬ－８は、好中球、好塩基球、およびＴ細胞を誘引するが、単球を誘引しない、走化性因子である。それはまた、好中球活性化に関与する。それは、炎症性刺激に応答して、いくつかの細胞型から放出される。ＩＬ－８（６－７７）は、好中球活性化に対し５～１０倍高い活性を有し、ＩＬ－８（５－７７）は、好中球活性化に対し増大された活性を有し、ＩＬ－８（７－７７）は、ＩＬ－８（１－７７）と比較して、受容体ＣＸＣＲ１およびＣＸＣＲ２に対しより高い親和性を有する。
８．ＪＵＮ（転写因子ＡＰ－１）ＪＵＮは、エンハンサー七量体モチーフ５’－ＴＧＡ［ＣＧ］ＴＣＡ－３’を認識し結合する転写因子である。それは、ＨＩＰＫ３によりリン酸化されると、ＮＲ５Ａ１活性を促進し、ｃＡＭＰシグナル伝達経路刺激時の増大されたステロイド産生遺伝子発現をもたらし、結腸直腸癌（ＣＲＣ）細胞におけるＵＳＰ２８の活性化ＫＲＡＳ媒介転写活性化に関与する。それは、結腸直腸癌（ＣＲＣ）細胞中のＵＳＰ２８プロモーターに結合し、塩基性ロイシンジッパータンパク質である。
９．ＴＮＦ この遺伝子は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーに属する多機能炎症促進性サイトカインをコードする。このサイトカインは主に、マクロファージにより分泌される。それは、その受容体ＴＮＦＲＳＦ１Ａ／ＴＮＦＲ１およびＴＮＦＲＳＦ１Ｂ／ＴＮＦＢＲに結合し、従って、それらを介して機能する。このサイトカインは、細胞増殖、分化、アポトーシス、脂質代謝、および凝固を含む広い範囲の生物学的過程の調節に関与する。このサイトカインは、自己免疫疾患、インスリン抵抗性、乾癬、関節リウマチ、強直性脊椎炎、結核、常染色体優性多発性嚢胞腎および癌を含む、種々の疾患に関連付けられている。この遺伝子中の変異は、脳マラリア、敗血性ショック、およびアルツハイマー病に対する感受性に影響する。マウスにおけるノックアウト研究はまた、このサイトカインの神経保護機能も示唆した。
１０．ＦＯＳ Ｆｏｓ遺伝子ファミリーは、４つのメンバー：ＦＯＳ、ＦＯＳＢ、ＦＯＳＬ１、およびＦＯＳＬ２からなる。これらの遺伝子は、ＪＵＮファミリーのタンパク質と二量体化でき、それにより転写因子複合体ＡＰ－１を形成する、ロイシンジッパータンパク質をコードする。従って、ＦＯＳタンパク質は、細胞増殖、分化、および形質転換の制御因子として関連付けられている。いくつかの事例では、ＦＯＳ遺伝子の発現はまた、アポトーシス細胞死とも関連付けられている。
【0137】
従って、いくつかの実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌ（または本明細書で開示される他の治療分子）は、ＣＣＬ２レベルおよび／または活性を調節するために投与され得る。いくつかの実施形態では、ＣＣＬ２の機能的パートナーは、ＣＲ２、ＩＬ１０、ＩＬ４、ＩＬ６、ＳＴＡＴ３、ＩＬ１３、ＣＸＣＬ８、ＪＵＮ、ＴＮＦおよびＦＯＳの１種または複数を含む。
【0138】
ＦＯＳＢ
タンパク質ｆｏｓＢは、ＦＯＳ、ＦｏｓＢおよびＧ０／Ｇ１スイッチ調節タンパク質３（Ｇ０Ｓ３）としても知られ、ヒトではＦＢＪマウス骨肉腫ウィルス癌遺伝子相同体Ｂ（ＦＯＳＢ）遺伝子によりコードされるタンパク質である。図５は、隣接遺伝子とのＦＯＳ相互作用を示す。図６は、隣接遺伝子とのＦｏｓＢ相互作用を示す。
タンパク質ｆｏｓＢは、ＦＯＳ、ＦｏｓＢおよびＧ０／Ｇ１スイッチ調節タンパク質３（Ｇ０Ｓ３）としても知られ、ヒトではＦＢＪマウス骨肉腫ウィルス癌遺伝子相同体Ｂ（ＦＯＳＢ）遺伝子によりコードされるタンパク質である。図５は、隣接遺伝子とのＦＯＳ相互作用を示す。図６は、隣接遺伝子とのＦｏｓＢ相互作用を示す。
【0139】
ＦＯＳＢの機能的パートナーとしては、下記が挙げられる：
１．ＪＵＮ この遺伝子は、トリ肉腫ウィルス１７の推定される形質転換遺伝子である。それは、ウィルスタンパク質と高度に類似するタンパク質をコードし、特定の標的ＤＮＡ配列と直接相互作用して遺伝子発現を調節する。この遺伝子は、イントロンがなく、ヒト悪性腫瘍における転座と欠失の両方に関与する染色体領域である、１ｐ３２－ｐ３１にマップされる。
２．ＪＵＮＤ このイントロンのない遺伝子によりコードされるタンパク質は、ＪＵＮファミリーのメンバーであり、ＡＰ１転写因子複合体の機能的成分である。このタンパク質は、ｐ５３依存性の老化およびアポトーシスから細胞を保護すると提案されている。選択的翻訳開始部位の使用は、異なるアイソフォームの産生をもたらす。
３．ＪＵＮＢ 転写因子ｊｕｎ－Ｂ；一次成長因子応答後の遺伝子活性の調節に関与する転写因子である。ＤＮＡ配列５’－ＴＧＡ［ＣＧ］ＴＣＡ－３’に結合する；ｂＺＩＰファミリーに属する。
４．ＦＯＳ Ｆｏｓ遺伝子ファミリーは、４つのメンバー：ＦＯＳ、ＦＯＳＢ、ＦＯＳＬ１、およびＦＯＳＬ２からなる。これらの遺伝子は、ＪＵＮファミリーのタンパク質と二量体化でき、それにより転写因子複合体ＡＰ－１を形成する、ロイシンジッパータンパク質をコードする。従って、ＦＯＳタンパク質は、細胞増殖、分化、および形質転換の制御因子として関連付けられている。いくつかの事例では、ＦＯＳ遺伝子の発現はまた、アポトーシス細胞死とも関連付けられている。
５．ＣＤＫ５ この遺伝子は、サイクリン依存性キナーゼタンパク質ファミリーのメンバーであるプロリン標的化セリン／トレオニンキナーゼをコードする。ファミリーの他のメンバーとは異なり、この遺伝子によりコードされるタンパク質は、細胞周期調節を直接調節しない。その代わり、このタンパク質は、哺乳類有糸分裂後中枢神経系ニューロンにおいて高レベルで発現され、シナプス可塑性および細胞骨格形成、エンドサイトーシスおよびエキソサイトーシス、ならびにアポトーシスに必要とされるタンパク質のリン酸化を介して神経遊走などの広範なプロセスで機能する。ヒトでは、検出不能レベルのタンパク質を生じるこの遺伝子のアレルバリアントは、致死性常染色体劣性遺伝脳回欠損－７に関連付けられている。選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
６．ＥＰ３００ この遺伝子は、アデノウィルスＥ１Ａ関連細胞性ｐ３００転写性共活性剤タンパク質をコードする。それは、クロマチン再構築を介して転写を調節し細胞増殖および分化のプロセスで重要である、ヒストンアセチルトランスフェラーゼとして機能する。それは、リン酸化されたＣＲＥＢタンパク質に特異的に結合することにより、ｃＡＭＰ遺伝子調節を媒介する。この遺伝子はまた、ＨＩＦ１Ａ（低酸素誘導性因子１α）の共活性剤として特定され、従って、ＶＥＧＦなどの低酸素誘導遺伝子の刺激に関与する。この遺伝子の欠損は、ルービンスタイン－テービ症候群の原因であり、また上皮癌の一因でもあり得る。
７．ＭＡＦＧ グロビン遺伝子発現は、αおよびβ遺伝子クラスターの上流数ｋｂに配置されるエンハンサー様遺伝子座調節領域に位置する核内転写因子ｅｒｙｔｈｒｏｉｄ－２（ＮＦＥ２）配列エンハンサーを介して調節される（Ｂｌａｎｋら、１９９７で概括されている［ＰｕｂＭｅｄ ９１６６８２９］）。ＮＦＥ２ ＤＮＡ結合活性は、ユビキタスな低分子Ｍａｆタンパク質（ＭａｆＦ、ＭＩＭ６０４８７７；ＭａｆＧ；またはＭａｆＫ、ＭＩＭ６００１９７）および組織制限的なタンパク質ｐ４５ ＮＦＥ２（ＭＩＭ６０１４９０）を含むヘテロ二量体からなる。両サブユニットは、塩基性ロイシンジッパー（ｂＺＩＰ）タンパク質の活性化剤タンパク質１様スーパーファミリーのメンバーである。
８．ＥＧＲ１ この遺伝子によりコードされるタンパク質は、Ｃ２Ｈ２型フィンガータンパク質のＥＧＲファミリーに属する。それは、核タンパク質であり、転写制御因子として機能する。それが活性化する標的遺伝子の産物は、分化および有糸分裂誘発に必要とされる。研究は、これが癌サプレッサー遺伝子であることを示唆する。
９．ＭＹＣ（Ｍｙｃ癌原遺伝子タンパク質） ＭＹＣは、非特異的方式でＤＮＡを結合する転写因子であるが、さらにまたコア部配列５’－ＣＡＣ［ＧＡ］ＴＧ－３’を特異的に認識する。成長関連遺伝子の転写を活性化する。ＶＥＧＦＡプロモーターに結合し、ＶＥＧＦＡ産生およびそれに続く発芽による血管新生を促進する；ベーシック・ヘリックス・ループ・ヘリックスタンパク質である。
１０．ＨＩＳＴ１Ｈ２ＢＡ ヒストンは、真核生物における染色体の繊維のヌクレオソーム構造に関与する塩基性核タンパク質である。ヌクレオソームは、４つのコア部ヒストン（Ｈ２Ａ、Ｈ２Ｂ、Ｈ３、およびＨ４）のそれぞれの対からなるヒストン八量体の周りに巻き付いた約１４６ｂｐのＤＮＡからなる。クロマチン繊維は、ヌクレオソーム間のＤＮＡと、リンカーヒストンＨ１の相互作用を介してさらに圧縮されて、より高次のクロマチン構造を形成する。この遺伝子は、イントロン無しであり、ヒストンＨ２Ｂファミリーの精巣／精子特異的メンバーである複製依存性ヒストンをコードする。この遺伝子の転写物は、回文終止配列を含む。
１．ＪＵＮ この遺伝子は、トリ肉腫ウィルス１７の推定される形質転換遺伝子である。それは、ウィルスタンパク質と高度に類似するタンパク質をコードし、特定の標的ＤＮＡ配列と直接相互作用して遺伝子発現を調節する。この遺伝子は、イントロンがなく、ヒト悪性腫瘍における転座と欠失の両方に関与する染色体領域である、１ｐ３２－ｐ３１にマップされる。
２．ＪＵＮＤ このイントロンのない遺伝子によりコードされるタンパク質は、ＪＵＮファミリーのメンバーであり、ＡＰ１転写因子複合体の機能的成分である。このタンパク質は、ｐ５３依存性の老化およびアポトーシスから細胞を保護すると提案されている。選択的翻訳開始部位の使用は、異なるアイソフォームの産生をもたらす。
３．ＪＵＮＢ 転写因子ｊｕｎ－Ｂ；一次成長因子応答後の遺伝子活性の調節に関与する転写因子である。ＤＮＡ配列５’－ＴＧＡ［ＣＧ］ＴＣＡ－３’に結合する；ｂＺＩＰファミリーに属する。
４．ＦＯＳ Ｆｏｓ遺伝子ファミリーは、４つのメンバー：ＦＯＳ、ＦＯＳＢ、ＦＯＳＬ１、およびＦＯＳＬ２からなる。これらの遺伝子は、ＪＵＮファミリーのタンパク質と二量体化でき、それにより転写因子複合体ＡＰ－１を形成する、ロイシンジッパータンパク質をコードする。従って、ＦＯＳタンパク質は、細胞増殖、分化、および形質転換の制御因子として関連付けられている。いくつかの事例では、ＦＯＳ遺伝子の発現はまた、アポトーシス細胞死とも関連付けられている。
５．ＣＤＫ５ この遺伝子は、サイクリン依存性キナーゼタンパク質ファミリーのメンバーであるプロリン標的化セリン／トレオニンキナーゼをコードする。ファミリーの他のメンバーとは異なり、この遺伝子によりコードされるタンパク質は、細胞周期調節を直接調節しない。その代わり、このタンパク質は、哺乳類有糸分裂後中枢神経系ニューロンにおいて高レベルで発現され、シナプス可塑性および細胞骨格形成、エンドサイトーシスおよびエキソサイトーシス、ならびにアポトーシスに必要とされるタンパク質のリン酸化を介して神経遊走などの広範なプロセスで機能する。ヒトでは、検出不能レベルのタンパク質を生じるこの遺伝子のアレルバリアントは、致死性常染色体劣性遺伝脳回欠損－７に関連付けられている。選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
６．ＥＰ３００ この遺伝子は、アデノウィルスＥ１Ａ関連細胞性ｐ３００転写性共活性剤タンパク質をコードする。それは、クロマチン再構築を介して転写を調節し細胞増殖および分化のプロセスで重要である、ヒストンアセチルトランスフェラーゼとして機能する。それは、リン酸化されたＣＲＥＢタンパク質に特異的に結合することにより、ｃＡＭＰ遺伝子調節を媒介する。この遺伝子はまた、ＨＩＦ１Ａ（低酸素誘導性因子１α）の共活性剤として特定され、従って、ＶＥＧＦなどの低酸素誘導遺伝子の刺激に関与する。この遺伝子の欠損は、ルービンスタイン－テービ症候群の原因であり、また上皮癌の一因でもあり得る。
７．ＭＡＦＧ グロビン遺伝子発現は、αおよびβ遺伝子クラスターの上流数ｋｂに配置されるエンハンサー様遺伝子座調節領域に位置する核内転写因子ｅｒｙｔｈｒｏｉｄ－２（ＮＦＥ２）配列エンハンサーを介して調節される（Ｂｌａｎｋら、１９９７で概括されている［ＰｕｂＭｅｄ ９１６６８２９］）。ＮＦＥ２ ＤＮＡ結合活性は、ユビキタスな低分子Ｍａｆタンパク質（ＭａｆＦ、ＭＩＭ６０４８７７；ＭａｆＧ；またはＭａｆＫ、ＭＩＭ６００１９７）および組織制限的なタンパク質ｐ４５ ＮＦＥ２（ＭＩＭ６０１４９０）を含むヘテロ二量体からなる。両サブユニットは、塩基性ロイシンジッパー（ｂＺＩＰ）タンパク質の活性化剤タンパク質１様スーパーファミリーのメンバーである。
８．ＥＧＲ１ この遺伝子によりコードされるタンパク質は、Ｃ２Ｈ２型フィンガータンパク質のＥＧＲファミリーに属する。それは、核タンパク質であり、転写制御因子として機能する。それが活性化する標的遺伝子の産物は、分化および有糸分裂誘発に必要とされる。研究は、これが癌サプレッサー遺伝子であることを示唆する。
９．ＭＹＣ（Ｍｙｃ癌原遺伝子タンパク質） ＭＹＣは、非特異的方式でＤＮＡを結合する転写因子であるが、さらにまたコア部配列５’－ＣＡＣ［ＧＡ］ＴＧ－３’を特異的に認識する。成長関連遺伝子の転写を活性化する。ＶＥＧＦＡプロモーターに結合し、ＶＥＧＦＡ産生およびそれに続く発芽による血管新生を促進する；ベーシック・ヘリックス・ループ・ヘリックスタンパク質である。
１０．ＨＩＳＴ１Ｈ２ＢＡ ヒストンは、真核生物における染色体の繊維のヌクレオソーム構造に関与する塩基性核タンパク質である。ヌクレオソームは、４つのコア部ヒストン（Ｈ２Ａ、Ｈ２Ｂ、Ｈ３、およびＨ４）のそれぞれの対からなるヒストン八量体の周りに巻き付いた約１４６ｂｐのＤＮＡからなる。クロマチン繊維は、ヌクレオソーム間のＤＮＡと、リンカーヒストンＨ１の相互作用を介してさらに圧縮されて、より高次のクロマチン構造を形成する。この遺伝子は、イントロン無しであり、ヒストンＨ２Ｂファミリーの精巣／精子特異的メンバーである複製依存性ヒストンをコードする。この遺伝子の転写物は、回文終止配列を含む。
【0140】
従って、いくつかの実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌ（または本明細書で開示される他の治療分子）は、ＦｏｓＢレベルおよび／または活性を調節するために投与され得る。いくつかの実施形態では、ＦｏｓＢの機能的パートナーは、ＪＵＮ、ＪＵＮＤ、ＪＵＮＢ、ＦＯＳ（即ち、別のメンバー）、ＣＤＫ５、ＥＰ３００、ＭＡＦＧ、ＥＧＲ１、ＭＹＣおよびＨＩＳＴ１Ｈ２ＢＡの１種または複数を含む。
【0141】
ＳＬＣ３９Ａ８
ＳＬＣ３９Ａ８遺伝子は、溶質キャリア遺伝子のＳＬＣ３９ファミリーのメンバーをコードし、これは、亜鉛輸送体の構造的特徴を示す。コードされるタンパク質は、グリコシル化され、細胞膜およびミトコンドリア中で見出され、炎症の開始時に亜鉛の細胞内導入において機能する。それはまた、有害カチオンカドミウムの一次輸送体であると考えられ、これは、たばこの煙中で見出される。異なるアイソフォームをコードする複数転写物バリアントが、この遺伝子で見つかった。この遺伝子の追加の選択的スプライスによる転写物バリアントが報告されたが、それらの完全長の性質は知られていない。図７は、隣接遺伝子と相互作用するＳＬＣ３９Ａ８を示す。
ＳＬＣ３９Ａ８遺伝子は、溶質キャリア遺伝子のＳＬＣ３９ファミリーのメンバーをコードし、これは、亜鉛輸送体の構造的特徴を示す。コードされるタンパク質は、グリコシル化され、細胞膜およびミトコンドリア中で見出され、炎症の開始時に亜鉛の細胞内導入において機能する。それはまた、有害カチオンカドミウムの一次輸送体であると考えられ、これは、たばこの煙中で見出される。異なるアイソフォームをコードする複数転写物バリアントが、この遺伝子で見つかった。この遺伝子の追加の選択的スプライスによる転写物バリアントが報告されたが、それらの完全長の性質は知られていない。図７は、隣接遺伝子と相互作用するＳＬＣ３９Ａ８を示す。
【0142】
ＳＬＣ３９Ａ８の機能的パートナーとしては、下記が挙げられる：
１．ＳＬＣ３０Ａ１（亜鉛輸送体１） ＳＬＣ３０Ａ１は、細胞からの亜鉛輸送に関与し得る；カチオン拡散促進物質（ＣＤＦ）輸送体（ＴＣ２．Ａ．４）に属する。
２．ＳＬＣ３９Ａ１４（亜鉛輸送体ＺＩＰ１４） ＳＬＣ３９Ａ１４は、亜鉛取り込み選好を有する広範囲にわたる金属イオン輸送体である。それはまた、非トランスフェリン結合鉄の細胞取り込みを媒介する；ＺＩＰ輸送体（ＴＣ２．Ａ．５）ファミリーに属する。
３．ＳＬＣ３９Ａ２ この遺伝子は、金属イオン輸送体のＺＩＰファミリーのメンバーをコードする。コードされるタンパク質は、亜鉛輸送体として機能する。この遺伝子中の変異は、頸動脈疾患に対する感受性と関連付けられ得る。複数の転写物バリアントが、記載されている。
４．ＳＬＣ３９Ａ１ この遺伝子は、亜鉛－鉄パーミアーゼファミリーのメンバーをコードする。コードされるタンパク質は、細胞膜に局在化し、亜鉛取込み輸送体として作用する。この遺伝子は、前立腺癌、乳癌、およびアルツハイマー病に関連付けられている
。選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
５．ＳＬＣ３９Ａ９（亜鉛輸送体ＺＩＰ９） この遺伝子は、亜鉛流入輸送体として作用し得る；ＺＩＰ輸送体（ＴＣ２．Ａ．５）ファミリーに属する。
６．ＳＬＣ３０Ａ１０ この遺伝子は、肝臓中で高度に発現され、マンガンにより誘導可能である。そのタンパク質産物は、マンガンレベルの維持に重要であるように見え、亜鉛よりマンガンに対しより高い特異性を有する。機能喪失型変異は、ジストニアおよび成人発症パーキンソニズムを含む、多形性表現型を生ずるように見える。選択的スプライスによる転写物バリアントが、この遺伝子について観察されている。
７．ＳＬＣ３０Ａ７ 亜鉛は、多数の酵素、核内転写因子、およびホルモンに対する補因子として、および細胞内および細胞間シグナルイオンとして、機能する。ＳＬＣ３０Ａ７などのカチオン拡散促進物質ファミリーの亜鉛輸送体（ＺＮＴ）／ＳＬＣ３０亜科のメンバーは、亜鉛の細胞流出を可能にする。
８．ＳＬＣ３０Ａ６ この遺伝子は、亜鉛輸送体として機能するタンパク質のファミリーのメンバーをコードする。このタンパク質は、ゴルジおよび小胞中の亜鉛の細胞内レベルを調節できる。この遺伝子の発現は、アルツハイマー病脳プラーク中で変わる。
９．ＳＬＣ３０Ａ５ この遺伝子は、亜鉛輸送体タンパク質のＳＬＣ３０Ａ／ＺｎＴファミリーのメンバーをコードする。ＺｎＴタンパク質は、細胞性亜鉛流出および膜結合型のオルガネラ中への亜鉛隔離の両方を媒介する。コードされるタンパク質は、亜鉛輸送体６とのヘテロ二量体として初期分泌経路に関与し、また、膵臓ベータ細胞の分泌顆粒中への亜鉛隔離を調節し得る。複数のアイソフォームをコードする選択的スプライスによる転写物バリアントが、この遺伝子について観察され、この遺伝子の偽遺伝子は、染色体１９の長腕上に位置する。
１０．ＳＬＣ３９Ａ１１ 亜鉛輸送体ＺＩＰ１１；細胞性亜鉛輸送体として機能する。
１．ＳＬＣ３０Ａ１（亜鉛輸送体１） ＳＬＣ３０Ａ１は、細胞からの亜鉛輸送に関与し得る；カチオン拡散促進物質（ＣＤＦ）輸送体（ＴＣ２．Ａ．４）に属する。
２．ＳＬＣ３９Ａ１４（亜鉛輸送体ＺＩＰ１４） ＳＬＣ３９Ａ１４は、亜鉛取り込み選好を有する広範囲にわたる金属イオン輸送体である。それはまた、非トランスフェリン結合鉄の細胞取り込みを媒介する；ＺＩＰ輸送体（ＴＣ２．Ａ．５）ファミリーに属する。
３．ＳＬＣ３９Ａ２ この遺伝子は、金属イオン輸送体のＺＩＰファミリーのメンバーをコードする。コードされるタンパク質は、亜鉛輸送体として機能する。この遺伝子中の変異は、頸動脈疾患に対する感受性と関連付けられ得る。複数の転写物バリアントが、記載されている。
４．ＳＬＣ３９Ａ１ この遺伝子は、亜鉛－鉄パーミアーゼファミリーのメンバーをコードする。コードされるタンパク質は、細胞膜に局在化し、亜鉛取込み輸送体として作用する。この遺伝子は、前立腺癌、乳癌、およびアルツハイマー病に関連付けられている
。選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
５．ＳＬＣ３９Ａ９（亜鉛輸送体ＺＩＰ９） この遺伝子は、亜鉛流入輸送体として作用し得る；ＺＩＰ輸送体（ＴＣ２．Ａ．５）ファミリーに属する。
６．ＳＬＣ３０Ａ１０ この遺伝子は、肝臓中で高度に発現され、マンガンにより誘導可能である。そのタンパク質産物は、マンガンレベルの維持に重要であるように見え、亜鉛よりマンガンに対しより高い特異性を有する。機能喪失型変異は、ジストニアおよび成人発症パーキンソニズムを含む、多形性表現型を生ずるように見える。選択的スプライスによる転写物バリアントが、この遺伝子について観察されている。
７．ＳＬＣ３０Ａ７ 亜鉛は、多数の酵素、核内転写因子、およびホルモンに対する補因子として、および細胞内および細胞間シグナルイオンとして、機能する。ＳＬＣ３０Ａ７などのカチオン拡散促進物質ファミリーの亜鉛輸送体（ＺＮＴ）／ＳＬＣ３０亜科のメンバーは、亜鉛の細胞流出を可能にする。
８．ＳＬＣ３０Ａ６ この遺伝子は、亜鉛輸送体として機能するタンパク質のファミリーのメンバーをコードする。このタンパク質は、ゴルジおよび小胞中の亜鉛の細胞内レベルを調節できる。この遺伝子の発現は、アルツハイマー病脳プラーク中で変わる。
９．ＳＬＣ３０Ａ５ この遺伝子は、亜鉛輸送体タンパク質のＳＬＣ３０Ａ／ＺｎＴファミリーのメンバーをコードする。ＺｎＴタンパク質は、細胞性亜鉛流出および膜結合型のオルガネラ中への亜鉛隔離の両方を媒介する。コードされるタンパク質は、亜鉛輸送体６とのヘテロ二量体として初期分泌経路に関与し、また、膵臓ベータ細胞の分泌顆粒中への亜鉛隔離を調節し得る。複数のアイソフォームをコードする選択的スプライスによる転写物バリアントが、この遺伝子について観察され、この遺伝子の偽遺伝子は、染色体１９の長腕上に位置する。
１０．ＳＬＣ３９Ａ１１ 亜鉛輸送体ＺＩＰ１１；細胞性亜鉛輸送体として機能する。
【0143】
従って、いくつかの実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌ（または本明細書で開示される他の治療分子）は、ＳＬＣ３９Ａ８レベルおよび／または活性を調節するために投与され得る。いくつかの実施形態では、ＳＬＣ３９Ａ８の機能的パートナーは、ＳＬＣ３０Ａ１、ＳＬＣ３９Ａ１４、ＳＬＣ３９Ａ２、ＳＬＣ３９Ａ１、ＳＬＣ３９Ａ９、ＳＬＣ３０Ａ１０、ＳＬＣ３０Ａ７、ＳＬＣ３０Ａ６、ＳＬＣ３０Ａ５およびＳＬＣ３９Ａ１１の１種または複数を含む。
【0144】
Ｃ９ｏｒｆ１３５
Ｃ９ＯＲＦ１３５は、２２９－アミノ酸タンパク質をコードする遺伝子である。それは、ホモ・サピエンスゲノムの染色体９上の９ｑ１２．２１に位置する。このタンパク質は、アミノ酸１２４～１４０に膜貫通ドメインを有し、アミノ酸７５にグリコシル化部位を有する。Ｃ９ｏｒｆ１３５は、神経発生と関連付けられている。図８は、隣接遺伝子と相互作用するＣ９ＯＲＦ１３５を示す。
Ｃ９ＯＲＦ１３５は、２２９－アミノ酸タンパク質をコードする遺伝子である。それは、ホモ・サピエンスゲノムの染色体９上の９ｑ１２．２１に位置する。このタンパク質は、アミノ酸１２４～１４０に膜貫通ドメインを有し、アミノ酸７５にグリコシル化部位を有する。Ｃ９ｏｒｆ１３５は、神経発生と関連付けられている。図８は、隣接遺伝子と相互作用するＣ９ＯＲＦ１３５を示す。
【0145】
Ｃ９ｏｒｆ１３５の機能的パートナーとしては、下記が挙げられる：
１．ＴＰＲＧ１（腫瘍タンパク質Ｐ６３調節１） ＴＰＲＧ１はタンパク質コード遺伝子である。ＴＰＲＧ１に関連する疾患は、混合脂肪肉腫を含む。この遺伝子の重要なパラログは、ＴＰＲＧ１Ｌである。
２．ＤＲＩＣＨ１（アスパラギン酸リッチ１） ＤＲＩＣＨ１は、タンパク質コード遺伝子である。ＤＲＩＣＨ１に関連する疾患は、小児期急性リンパ性白血病および網膜色素変性症４９を含む。この遺伝子の重要なパラログは、Ｃ２２ｏｒｆ４２である。
３．ＣＣＤＣ４２（コイルドコイルドメイン含有タンパク質４２） ＣＣＤＣ４２は、精子形成に必要とされる。
４．ＯＤＦ４ この遺伝子は、成熟精子の尾部の外側の密な繊維中に局在するタンパク質をコードする。このタンパク質は、精子尾部中におけるいくつかの重要な役割を有すると考えられる。選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
５．ＨＤＤＣ２（ＨＤドメイン含有２） ＨＤＤＣ２ファミリーに属する。
６．ＦＡＭ１６０Ｂ１（ＦＨＩＰ２Ａ、ＦＨＦ複合体サブユニットＨＯＯＫ相互作用タンパク質２Ａ） タンパク質コード遺伝子である。ＦＨＩＰ２Ａに関連する疾患は、症候性知的障害および無涙症、アカラシア、および精神発達遅滞症候群を含む。この遺伝子の重要なパラログは、ＦＨＩＰ２Ｂである。
７．ＩＧＳＦ３ この遺伝子によりコードされるタンパク質は、いくつかのＶ型免疫グロブリン様ドメインを含む免疫グロブリン様膜タンパク質である。この遺伝子における変異は、両側性鼻涙管閉塞（ＬＣＤＤ）と関連付けられている。
８．ＰＯＵ５１ この遺伝子は、胚発生および幹細胞多能性で重要な役割を果たすＰＯＵホメオドメインを含む転写因子をコードする。成体組織中でのこの遺伝子の異常発現は、腫瘍形成に関連する。この遺伝子は、染色体２１上のユーイング肉腫遺伝子との転座に関与することがあり、これもまた、腫瘍形成をもたらす。選択的スプライシング、ならびにＡＵＧと非ＡＵＧ翻訳開始コドンのどちらかの選択的使用は、複数のアイソフォームを生じる。ＡＵＧ開始コドンの１つは、ヒト集団において多形性である。関連偽遺伝子が、染色体１、３、８、１０、および１２で特定されている。
９．ＬＲＣＨ２ この遺伝子は、ロイシンリッチ反復およびカルポニン相同ドメイン含有タンパク質ファミリーのメンバーをコードする。これらのファミリーメンバーは、アクチンフィラメントとの相互作用を媒介する一種のドメインであるＣ末端カルポニン相同ドメインに加えて、複数のＮ末端ロイシンリッチ反復を含む。これらのタンパク質は、動物種全体にわたり保存され、類似のショウジョウバエ属タンパク質の研究は、細胞骨格の足場タンパク質としての機能を示す。この遺伝子の選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
１０．ＣＬＲＮ３（Ｃｌａｒｉｎ３） ＣＬＲＮ３は、タンパク質コード遺伝子である。ＣＬＲＮ３に関連する疾患は、アッシャー症候群および胃管状腺癌を含む。この遺伝子の重要なパラログは、ＣＬＲＮ２である。
１．ＴＰＲＧ１（腫瘍タンパク質Ｐ６３調節１） ＴＰＲＧ１はタンパク質コード遺伝子である。ＴＰＲＧ１に関連する疾患は、混合脂肪肉腫を含む。この遺伝子の重要なパラログは、ＴＰＲＧ１Ｌである。
２．ＤＲＩＣＨ１（アスパラギン酸リッチ１） ＤＲＩＣＨ１は、タンパク質コード遺伝子である。ＤＲＩＣＨ１に関連する疾患は、小児期急性リンパ性白血病および網膜色素変性症４９を含む。この遺伝子の重要なパラログは、Ｃ２２ｏｒｆ４２である。
３．ＣＣＤＣ４２（コイルドコイルドメイン含有タンパク質４２） ＣＣＤＣ４２は、精子形成に必要とされる。
４．ＯＤＦ４ この遺伝子は、成熟精子の尾部の外側の密な繊維中に局在するタンパク質をコードする。このタンパク質は、精子尾部中におけるいくつかの重要な役割を有すると考えられる。選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
５．ＨＤＤＣ２（ＨＤドメイン含有２） ＨＤＤＣ２ファミリーに属する。
６．ＦＡＭ１６０Ｂ１（ＦＨＩＰ２Ａ、ＦＨＦ複合体サブユニットＨＯＯＫ相互作用タンパク質２Ａ） タンパク質コード遺伝子である。ＦＨＩＰ２Ａに関連する疾患は、症候性知的障害および無涙症、アカラシア、および精神発達遅滞症候群を含む。この遺伝子の重要なパラログは、ＦＨＩＰ２Ｂである。
７．ＩＧＳＦ３ この遺伝子によりコードされるタンパク質は、いくつかのＶ型免疫グロブリン様ドメインを含む免疫グロブリン様膜タンパク質である。この遺伝子における変異は、両側性鼻涙管閉塞（ＬＣＤＤ）と関連付けられている。
８．ＰＯＵ５１ この遺伝子は、胚発生および幹細胞多能性で重要な役割を果たすＰＯＵホメオドメインを含む転写因子をコードする。成体組織中でのこの遺伝子の異常発現は、腫瘍形成に関連する。この遺伝子は、染色体２１上のユーイング肉腫遺伝子との転座に関与することがあり、これもまた、腫瘍形成をもたらす。選択的スプライシング、ならびにＡＵＧと非ＡＵＧ翻訳開始コドンのどちらかの選択的使用は、複数のアイソフォームを生じる。ＡＵＧ開始コドンの１つは、ヒト集団において多形性である。関連偽遺伝子が、染色体１、３、８、１０、および１２で特定されている。
９．ＬＲＣＨ２ この遺伝子は、ロイシンリッチ反復およびカルポニン相同ドメイン含有タンパク質ファミリーのメンバーをコードする。これらのファミリーメンバーは、アクチンフィラメントとの相互作用を媒介する一種のドメインであるＣ末端カルポニン相同ドメインに加えて、複数のＮ末端ロイシンリッチ反復を含む。これらのタンパク質は、動物種全体にわたり保存され、類似のショウジョウバエ属タンパク質の研究は、細胞骨格の足場タンパク質としての機能を示す。この遺伝子の選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
１０．ＣＬＲＮ３（Ｃｌａｒｉｎ３） ＣＬＲＮ３は、タンパク質コード遺伝子である。ＣＬＲＮ３に関連する疾患は、アッシャー症候群および胃管状腺癌を含む。この遺伝子の重要なパラログは、ＣＬＲＮ２である。
【0146】
従って、いくつかの実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌ（または本明細書で開示される他の治療分子）は、Ｃ９ｏｒｆ１３５レベルおよび／または活性を調節するために投与され得る。いくつかの実施形態では、Ｃ９ｏｒｆ１３５の機能的パートナーは、ＴＰＲＧ１、ＤＲＩＣＨ１、ＣＣＤＣ４２、ＯＤＦ４、ＨＤＤＣ２、ＦＡＭ１６０Ｂ１、ＩＧＳＦ３、ＰＯＵ５１、ＬＲＣＨ２およびＣＬＲＮ３の１種または複数を含む。
【0147】
ＥＮＴＰＤ４
ＥＮＴＰＤ４遺伝子は、アピラーゼタンパク質ファミリーのメンバーをコードする。アピラーゼは、カルシウムまたはマグネシウム依存的方式でヌクレオチド二リン酸および三リン酸の加水分解を触媒する酵素である。コードされるタンパク質は、エンドアピラーゼであり、リソソームからのヌクレオチド回収に関与し得る。複数のアイソフォームをコードする選択的スプライスによる転写物バリアントが、この遺伝子について観察され、これらのアイソフォームは、二価の陽イオン依存および基質特異性において異なり得る。図９は、隣接遺伝子と相互作用するＥＮＴＰＤ４を示す。
ＥＮＴＰＤ４遺伝子は、アピラーゼタンパク質ファミリーのメンバーをコードする。アピラーゼは、カルシウムまたはマグネシウム依存的方式でヌクレオチド二リン酸および三リン酸の加水分解を触媒する酵素である。コードされるタンパク質は、エンドアピラーゼであり、リソソームからのヌクレオチド回収に関与し得る。複数のアイソフォームをコードする選択的スプライスによる転写物バリアントが、この遺伝子について観察され、これらのアイソフォームは、二価の陽イオン依存および基質特異性において異なり得る。図９は、隣接遺伝子と相互作用するＥＮＴＰＤ４を示す。
【0148】
ＥＮＴＰＤ４の機能的パートナーとしては、下記が挙げられる：
１．ＡＤＳＳＬ１ この遺伝子は、アデニロコハク酸シンターゼタンパク質ファミリーのメンバーをコードする。コードされる筋肉特異的酵素は、アデノシン一リン酸（ＡＭＰ）へのイノシン一リン酸（ＩＭＰ）の変換における第１ステップを触媒することにより、プリンヌクレオチドサイクルに関与する。この遺伝子の変異は、青年期発症型の遠位型ミオパチーを引き起こし得る。選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
２．ＩＴＰＡ（イノシン三リン酸ピロホスファターゼ） ＩＴＰＡは、非標準プリンヌクレオチドイノシン三リン酸（ＩＴＰ）、デオキシイノシン三リン酸（ＤＩＴＰ）ならびに２’－デオキシ－Ｎ－６－ヒドロキシルアミノプリン三リン酸（ｄＨＡＰＴＰ）およびキサントシン ５’－三リン酸（ＸＴＰ）をそれらのそれぞれの一リン酸誘導体へと加水分解するピロホスファターゼである。この酵素は、デオキシ型とリボース型を区別しない。おそらくＲＮＡおよびＤＮＡ前駆物質プールから非標準プリンを排除し、従ってＲＮＡおよびＤＮＡ中へのそれらの組み込みを防ぎ染色体病変を回避する。
３．ＡＴＩＣ この遺伝子は、新規プリン生合成経路の最後の２つのステップを触媒する二官能性タンパク質をコードする。Ｎ末端ドメインは、ホスホリボシルアミノイミダゾールカルボキサミドホルミルトランスフェラーゼ活性を有し、Ｃ末端ドメインは、ＩＭＰシクロヒドロラーゼ活性を有する。この遺伝子における変異は、ＡＩＣＡ－リボシド尿症を生ずる。
４．ＥＮＰＰ３ この遺伝子によりコードされるタンパク質は、細胞外のヌクレオチドの加水分解に関与する一連のエクトエンザイムに属する。これらのエクトエンザイムは、ＡＴＰアーゼおよびＡＴＰピロホスファターゼ活性を有し、ＩＩ型膜貫通型タンパク質である。関連するラットｍＲＮＡの発現が、未成熟グリア細胞のサブセットおよび消化管中で見つけられた。対応するラットタンパク質は、膵臓、小腸、結腸、および肝臓で検出された。ヒトｍＲＮＡは、神経膠腫細胞、前立腺、および子宮で発現される。ヒトタンパク質の発現は、子宮、好塩基球、およびマスト細胞中で検出された。１つはタンパクをコードし、もう一つ非タンパクをコードしない、２つの転写物バリアントが、この遺伝子で見つかった。
５．ＡＤＳＳ この遺伝子は、アデノシン一リン酸へのイノシン一リン酸の変換の最初のステップを触媒する、酵素アデニロコハク酸シンテターゼをコードする。この遺伝子の偽遺伝子は、染色体１７上で見出される。
６．ＥＮＰＰ１ この遺伝子は、エクトヌクレオチドピロホスファターゼ／ホスホジエステラーゼ（ＥＮＰＰ）ファミリーのメンバーである。コードされるタンパク質は、２つの同一のジスルフィド結合サブユニットを含むＩＩ型膜貫通型糖タンパク質である。このタンパク質は、広範な特異性を有し、ヌクレオチドおよびヌクレオチド糖のリン酸ジエステル結合ならびにヌクレオチドおよびヌクレオチド糖のピロリン酸結合を含む、種々の基質を切断する。このタンパク質は、ヌクレオシド５’三リン酸をそれらの対応する一リン酸へと加水分解するように機能し、またジアデノシンポリリン酸も加水分解し得る。この遺伝子の変異は、「特発性」乳児動脈石灰化症、脊椎の後部長手方向靱帯の骨形成（ＯＰＬＬ）、およびインスリン抵抗性に関連付けられている。
７．ＥＮＴＰＤ６ ＥＮＴＰＤ６は、Ｅ型ヌクレオチダーゼ（ヌクレオチド三リン酸分解酵素）に類似する。ＣＤ３９などのヌクレオチド三リン酸分解酵素は、細胞外ヌクレオチドの異化作用を媒介する。ＥＮＴＰＤ６は、ヌクレオチド三リン酸分解酵素の特徴である４つのアピラーゼ保存領域を含む。選択的スプライシングは、異なるアイソフォームをコードする複数の転写バリアントを生ずる。
８．ＥＮＴＰＤ５ この遺伝子によりコードされるタンパク質は、Ｅ型ヌクレオチダーゼ（ヌクレオチド三リン酸分解酵素）／エクト－ＡＴＰアーゼ／アピラーゼに類似する。ＣＤ３９などのヌクレオチド三リン酸分解酵素は、細胞外ヌクレオチドの異化作用を媒介する。ＥＮＴＰＤ５は、ヌクレオチド三リン酸分解酵素の特徴である４つのアピラーゼ保存領域を含む。
９．ＰＫＭ この遺伝子は、解糖作用に関与するタンパク質をコードする。コードされるタンパク質は、ホスホエノールピルビン酸からＡＤＰへのホスホリル基の転移を触媒するピルビン酸キナーゼである。このタンパク質は、甲状腺ホルモンと相互作用することが示され、甲状腺ホルモンにより誘導される細胞性代謝効果を媒介し得る。このタンパク質は、ヒト細胞の侵入での淋菌付着に関与する細菌性外膜タンパク質である、Ｏｐａタンパク質を結合すると見出され、このタンパク質の細菌性病因における役割を示唆する。少数の別個のアイソフォームをコードする、いくつかの選択的スプライスによる転写物バリアントが、報告されている。
１０．ＵＭＰＳ この遺伝子は、ウリジン５’－一リン酸シンターゼをコードする。コードされるタンパク質は、新規プリン生合成経路の最後の２つのステップを触媒する二官能性タンパク質である。最初の反応は、オロチジン－５’－一リン酸へとオロチン酸を変換する、Ｎ末端酵素オロト酸ホスホリボシルトランスフェラーゼにより実施される。終わりの反応は、ウリジン一リン酸へとオロチジン－５’－一リン酸を変換する、Ｃ末端酵素ＯＭＰデカルボキシラーゼにより実施される。この遺伝子における欠損は、遺伝性オロト酸尿症の原因である。選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
１．ＡＤＳＳＬ１ この遺伝子は、アデニロコハク酸シンターゼタンパク質ファミリーのメンバーをコードする。コードされる筋肉特異的酵素は、アデノシン一リン酸（ＡＭＰ）へのイノシン一リン酸（ＩＭＰ）の変換における第１ステップを触媒することにより、プリンヌクレオチドサイクルに関与する。この遺伝子の変異は、青年期発症型の遠位型ミオパチーを引き起こし得る。選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
２．ＩＴＰＡ（イノシン三リン酸ピロホスファターゼ） ＩＴＰＡは、非標準プリンヌクレオチドイノシン三リン酸（ＩＴＰ）、デオキシイノシン三リン酸（ＤＩＴＰ）ならびに２’－デオキシ－Ｎ－６－ヒドロキシルアミノプリン三リン酸（ｄＨＡＰＴＰ）およびキサントシン ５’－三リン酸（ＸＴＰ）をそれらのそれぞれの一リン酸誘導体へと加水分解するピロホスファターゼである。この酵素は、デオキシ型とリボース型を区別しない。おそらくＲＮＡおよびＤＮＡ前駆物質プールから非標準プリンを排除し、従ってＲＮＡおよびＤＮＡ中へのそれらの組み込みを防ぎ染色体病変を回避する。
３．ＡＴＩＣ この遺伝子は、新規プリン生合成経路の最後の２つのステップを触媒する二官能性タンパク質をコードする。Ｎ末端ドメインは、ホスホリボシルアミノイミダゾールカルボキサミドホルミルトランスフェラーゼ活性を有し、Ｃ末端ドメインは、ＩＭＰシクロヒドロラーゼ活性を有する。この遺伝子における変異は、ＡＩＣＡ－リボシド尿症を生ずる。
４．ＥＮＰＰ３ この遺伝子によりコードされるタンパク質は、細胞外のヌクレオチドの加水分解に関与する一連のエクトエンザイムに属する。これらのエクトエンザイムは、ＡＴＰアーゼおよびＡＴＰピロホスファターゼ活性を有し、ＩＩ型膜貫通型タンパク質である。関連するラットｍＲＮＡの発現が、未成熟グリア細胞のサブセットおよび消化管中で見つけられた。対応するラットタンパク質は、膵臓、小腸、結腸、および肝臓で検出された。ヒトｍＲＮＡは、神経膠腫細胞、前立腺、および子宮で発現される。ヒトタンパク質の発現は、子宮、好塩基球、およびマスト細胞中で検出された。１つはタンパクをコードし、もう一つ非タンパクをコードしない、２つの転写物バリアントが、この遺伝子で見つかった。
５．ＡＤＳＳ この遺伝子は、アデノシン一リン酸へのイノシン一リン酸の変換の最初のステップを触媒する、酵素アデニロコハク酸シンテターゼをコードする。この遺伝子の偽遺伝子は、染色体１７上で見出される。
６．ＥＮＰＰ１ この遺伝子は、エクトヌクレオチドピロホスファターゼ／ホスホジエステラーゼ（ＥＮＰＰ）ファミリーのメンバーである。コードされるタンパク質は、２つの同一のジスルフィド結合サブユニットを含むＩＩ型膜貫通型糖タンパク質である。このタンパク質は、広範な特異性を有し、ヌクレオチドおよびヌクレオチド糖のリン酸ジエステル結合ならびにヌクレオチドおよびヌクレオチド糖のピロリン酸結合を含む、種々の基質を切断する。このタンパク質は、ヌクレオシド５’三リン酸をそれらの対応する一リン酸へと加水分解するように機能し、またジアデノシンポリリン酸も加水分解し得る。この遺伝子の変異は、「特発性」乳児動脈石灰化症、脊椎の後部長手方向靱帯の骨形成（ＯＰＬＬ）、およびインスリン抵抗性に関連付けられている。
７．ＥＮＴＰＤ６ ＥＮＴＰＤ６は、Ｅ型ヌクレオチダーゼ（ヌクレオチド三リン酸分解酵素）に類似する。ＣＤ３９などのヌクレオチド三リン酸分解酵素は、細胞外ヌクレオチドの異化作用を媒介する。ＥＮＴＰＤ６は、ヌクレオチド三リン酸分解酵素の特徴である４つのアピラーゼ保存領域を含む。選択的スプライシングは、異なるアイソフォームをコードする複数の転写バリアントを生ずる。
８．ＥＮＴＰＤ５ この遺伝子によりコードされるタンパク質は、Ｅ型ヌクレオチダーゼ（ヌクレオチド三リン酸分解酵素）／エクト－ＡＴＰアーゼ／アピラーゼに類似する。ＣＤ３９などのヌクレオチド三リン酸分解酵素は、細胞外ヌクレオチドの異化作用を媒介する。ＥＮＴＰＤ５は、ヌクレオチド三リン酸分解酵素の特徴である４つのアピラーゼ保存領域を含む。
９．ＰＫＭ この遺伝子は、解糖作用に関与するタンパク質をコードする。コードされるタンパク質は、ホスホエノールピルビン酸からＡＤＰへのホスホリル基の転移を触媒するピルビン酸キナーゼである。このタンパク質は、甲状腺ホルモンと相互作用することが示され、甲状腺ホルモンにより誘導される細胞性代謝効果を媒介し得る。このタンパク質は、ヒト細胞の侵入での淋菌付着に関与する細菌性外膜タンパク質である、Ｏｐａタンパク質を結合すると見出され、このタンパク質の細菌性病因における役割を示唆する。少数の別個のアイソフォームをコードする、いくつかの選択的スプライスによる転写物バリアントが、報告されている。
１０．ＵＭＰＳ この遺伝子は、ウリジン５’－一リン酸シンターゼをコードする。コードされるタンパク質は、新規プリン生合成経路の最後の２つのステップを触媒する二官能性タンパク質である。最初の反応は、オロチジン－５’－一リン酸へとオロチン酸を変換する、Ｎ末端酵素オロト酸ホスホリボシルトランスフェラーゼにより実施される。終わりの反応は、ウリジン一リン酸へとオロチジン－５’－一リン酸を変換する、Ｃ末端酵素ＯＭＰデカルボキシラーゼにより実施される。この遺伝子における欠損は、遺伝性オロト酸尿症の原因である。選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
【0149】
従って、いくつかの実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌは、ＥＮＴＰＤ４レベルおよび／または活性を調節するために投与され得る。いくつかの実施形態では、ＥＮＴＰＤ４の機能的パートナーは、ＡＤＳＳＬ１、ＩＴＰＡ、ＡＴＩＣ、ＥＮＰＰ３、ＡＤＳＳ、ＥＮＰＰ１、ＥＮＴＰＤ６、ＥＮＴＰＤ５、ＰＫＭおよびＵＭＰＳの１種または複数を含む。
【0150】
ＯＸＴ
オキシトシンは、動物およびヒトの生殖および社会的行動に関与する神経ペプチドである。オキシトシンは、シナプスおよび細胞可塑性機序の両方を介して動作して、脳回路を配線し直して感覚刺激のニューロン表現を高める。この高められた感覚性サリエンスは、複雑な挙動の形成および維持の両方を促進する。次の３つのオキシトシンシグナル伝達遺伝子：ＯＸＴ（オキシトシンのための構造遺伝子）、ＯＸＴＲ（オキシトシン受容体）、およびＣＤ３８（オキシトシン分泌）はしばしば、ヒトの社会的行動に関連付けられている。この遺伝子は、プロセスされてオキシトシンおよびニューロフィジンＩを産生する、前駆体タンパク質をコードする。オキシトシンは、その担体タンパク質ニューロフィジンＩと共に視床下部中で不活性前駆物質として合成される、後部下垂体ホルモンである。ニューロフィジンと共に、それは、神経分泌小胞中にパッケージされ、神経下垂体の神経終末に軸索性に輸送され、そこでそれは、貯蔵されるかまたは血流中に分泌される。前駆物質は、活性化されるように見え、一方でそれは、軸後部下垂体へと索に沿って輸送される。このホルモンは、出産および授乳の間に、平滑筋を収縮させる。それはまた、認知、耐性、適応および複雑な性行動および母性行動、ならびに水排泄および心血管系機能の調節に関与する。
オキシトシンは、動物およびヒトの生殖および社会的行動に関与する神経ペプチドである。オキシトシンは、シナプスおよび細胞可塑性機序の両方を介して動作して、脳回路を配線し直して感覚刺激のニューロン表現を高める。この高められた感覚性サリエンスは、複雑な挙動の形成および維持の両方を促進する。次の３つのオキシトシンシグナル伝達遺伝子：ＯＸＴ（オキシトシンのための構造遺伝子）、ＯＸＴＲ（オキシトシン受容体）、およびＣＤ３８（オキシトシン分泌）はしばしば、ヒトの社会的行動に関連付けられている。この遺伝子は、プロセスされてオキシトシンおよびニューロフィジンＩを産生する、前駆体タンパク質をコードする。オキシトシンは、その担体タンパク質ニューロフィジンＩと共に視床下部中で不活性前駆物質として合成される、後部下垂体ホルモンである。ニューロフィジンと共に、それは、神経分泌小胞中にパッケージされ、神経下垂体の神経終末に軸索性に輸送され、そこでそれは、貯蔵されるかまたは血流中に分泌される。前駆物質は、活性化されるように見え、一方でそれは、軸後部下垂体へと索に沿って輸送される。このホルモンは、出産および授乳の間に、平滑筋を収縮させる。それはまた、認知、耐性、適応および複雑な性行動および母性行動、ならびに水排泄および心血管系機能の調節に関与する。
【0151】
ＯＸＴの機能的パートナーとしては、下記が挙げられる：
１．ＯＸＴＲ（オキシトシン受容体；オキシトシンのための受容体） この遺伝子によりコードされるタンパク質は、Ｇタンパク質結合受容体ファミリーに属し、オキシトシンの受容体として作用する。その活性は、ホスファチジルイノシトール－カルシウムセカンドメッセンジャー系を活性化する、Ｇタンパク質により媒介される。オキシトシン－オキシトシン受容体系は、出産中の子宮で重要な役割を果たす。
２．ＮＰＳ（神経ペプチドＳ） ＮＰＳは、覚醒状態および不安を調節する。それは、重要な食欲抑制の役割（類似性により）を果たす。その受容体ＮＰＳＲ１にナノモルの親和性で結合して、細胞内のカルシウム濃度を高める。
３．ＴＲＨ（プロ甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン） この遺伝子は、チロトロピン放出ホルモンファミリーのメンバーをコードする。コードされるプロタンパク質の切断は、トリペプチド視床下部調節性ホルモンである、成熟チロトロピン放出ホルモンを放出する。ヒトのプロタンパク質は、６つのチロトロピン放出ホルモントリペプチドを含む。チロトロピン放出ホルモンは、甲状腺刺激ホルモン、ならびにプロラクチンの調節および放出に関与する。このホルモンの欠損は、視床下部甲状腺機能低下症に関連付けられている。
４．ＣＣＫ（コレシストキニン） このペプチドホルモンは、胆嚢収縮および腸中での膵臓酵素の放出を誘導する。この遺伝子は、いくつかのガストリン／コレシストキニンタンパク質ファミリーのメンバーをコードする。コードされるプレプロタンパクは、タンパク分解的にプロセスされて、ペプチドホルモンコレシストキニン－８、－１２、－３３などを含む、複数のタンパク質産物を生成する。コードされるペプチドは、胃酸分泌および食物摂取を調節することが示されている。コレシストキニン－８の硫酸化型は、脳中のニューロン活動を調節し得る。選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
５．ＧＮＲＨ１ この遺伝子は、タンパク分解的にプロセスされてゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）ペプチドファミリーのペプチドのメンバーであるペプチドを生成する、プレプロタンパクをコードする。選択的スプライシングは、複数の転写物バリアントを生じ、それらの少なくとも１つは分泌され、その後切断されて、ゴナドリベリン－１およびＧｎＲＨ関連ペプチド１を生成する。ゴナドリベリン－１は、生殖に重要な黄体形成および卵胞刺激ホルモンの放出を刺激する。この遺伝子における変異は、低ゴナドトロピン性性腺機能低下症に関連付けられている。
６．ＡＶＰ この遺伝子は、バソプレシン／オキシトシンファミリーのメンバーおよびタンパク分解的にプロセスされて複数のタンパク質産物を生成する、プレプロタンパクをコードする。これらの産物は、神経ペプチドホルモンアルギニンバソプレシン、および２つの他のペプチドのニューロフィジン２およびコペプチンを含む。アルギニンバソプレシンは、視床下部の視索上部核および室傍核中で合成される後部下垂体ホルモンである。その担体タンパク質であるニューロフィジン２と共に、それは、神経分泌小胞中にパッケージされ、神経下垂体の神経終末に軸索性に輸送され、そこでそれは、貯蔵されるか、または血流中に分泌される。前駆物質は、活性化されると考えられ、一方でそれは、軸索に沿って後部下垂体に輸送される。アルギニンバソプレシンは、酸塩基の輸送システムを介してｐＨ調節を高めることにより、成長因子として作用する。それは、腎臓に対し直接抗利尿作用を有し、また末梢血管の血管収縮を引き起こす。このホルモンは、出産および授乳の間、平滑筋を収縮させことができる。それはまた、認知、耐性、適応および複雑な性行動および母性行動、ならびに水排泄および心血管系機能の調節に関与する。この遺伝子における変異は、常染色体優性神経下垂体尿崩症（ＡＤＮＤＩ）を引き起こす。この遺伝子は、染色体２０上の関連遺伝子オキシトシンを有する遺伝子クラスター中に存在する。
７．ＡＶＰＲ１Ａ この遺伝子によりコードされるタンパク質は、アルギニンバソプレシンの受容体として作用する。この受容体は、ＡＶＰＲ１Ｂ、Ｖ２ＲおよびＯＸＴ受容体を含む、Ｇタンパク質結合受容体の亜科に属する。その活性は、ホスファチジルイノシトール－カルシウムセカンドメッセンジャー系を刺激する、Ｇタンパク質により媒介される。この受容体は、細胞収縮および増殖、血小板凝集、凝固因子の放出およびグリコーゲン分解を媒介する。
８．ＨＣＲＴ この遺伝子は、タンパク分解的プロセシングにより、２つの成熟神経ペプチドのオレキシンＡおよびオレキシンＢを生じる視床下部神経ペプチド前駆体タンパク質をコードする。オレキシンＡおよびオレキシンＢは、オーファンＧタンパク質結合受容体ＨＣＲＴＲ１およびＨＣＲＴＲ２に結合し、睡眠および覚醒状態の調節において機能する。この神経ペプチドの配置はまた、摂食行動、代謝、および恒常性に関与し得る。
９．ＡＶＰＲ１Ｂ この遺伝子によりコードされるタンパク質は、アルギニンバソプレシンの受容体として作用する。この受容体は、ＡＶＰＲ１Ａ、Ｖ２ＲおよびＯＸＴ受容体を含む、Ｇタンパク質結合受容体の亜科に属する。その活性は、ホスファチジルイノシトール－カルシウムセカンドメッセンジャー系を刺激する、Ｇタンパク質により媒介される。この受容体は主に、下垂体前葉中に位置し、そこでそれは、ＡＣＴＨ放出を刺激する。それは、ＡＣＴＨ分泌下垂体腺腫中でならびに異所性ＡＣＴＨ症候群の原因である気管支カルチノイド中で高レベルで発現される。この遺伝子のスプラスされたアンチセンス転写物が報告されたが、その機能は知られていない。
１０．ＴＡＣ１ この遺伝子は、タキキニンペプチドホルモンファミリーの４つの産物：物質ＰおよびニューロキニンＡ、ならびに関連ペプチドの神経ペプチドＫおよび神経ペプチドγをコードする。これらのホルモンは、神経受容体および平滑筋細胞と相互作用する、神経伝達物質として機能すると考えられている。それらは、行動応答を誘導しかつ、血管拡張剤および分泌促進物質として機能することが知られている。物質Ｐは、抗菌および抗真菌特性を有する抗菌性ペプチドである。異なるアイソフォームをコードする複数転写物バリアントが、この遺伝子で見つかっている。
１．ＯＸＴＲ（オキシトシン受容体；オキシトシンのための受容体） この遺伝子によりコードされるタンパク質は、Ｇタンパク質結合受容体ファミリーに属し、オキシトシンの受容体として作用する。その活性は、ホスファチジルイノシトール－カルシウムセカンドメッセンジャー系を活性化する、Ｇタンパク質により媒介される。オキシトシン－オキシトシン受容体系は、出産中の子宮で重要な役割を果たす。
２．ＮＰＳ（神経ペプチドＳ） ＮＰＳは、覚醒状態および不安を調節する。それは、重要な食欲抑制の役割（類似性により）を果たす。その受容体ＮＰＳＲ１にナノモルの親和性で結合して、細胞内のカルシウム濃度を高める。
３．ＴＲＨ（プロ甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン） この遺伝子は、チロトロピン放出ホルモンファミリーのメンバーをコードする。コードされるプロタンパク質の切断は、トリペプチド視床下部調節性ホルモンである、成熟チロトロピン放出ホルモンを放出する。ヒトのプロタンパク質は、６つのチロトロピン放出ホルモントリペプチドを含む。チロトロピン放出ホルモンは、甲状腺刺激ホルモン、ならびにプロラクチンの調節および放出に関与する。このホルモンの欠損は、視床下部甲状腺機能低下症に関連付けられている。
４．ＣＣＫ（コレシストキニン） このペプチドホルモンは、胆嚢収縮および腸中での膵臓酵素の放出を誘導する。この遺伝子は、いくつかのガストリン／コレシストキニンタンパク質ファミリーのメンバーをコードする。コードされるプレプロタンパクは、タンパク分解的にプロセスされて、ペプチドホルモンコレシストキニン－８、－１２、－３３などを含む、複数のタンパク質産物を生成する。コードされるペプチドは、胃酸分泌および食物摂取を調節することが示されている。コレシストキニン－８の硫酸化型は、脳中のニューロン活動を調節し得る。選択的スプライシングは、複数の転写バリアントを生ずる。
５．ＧＮＲＨ１ この遺伝子は、タンパク分解的にプロセスされてゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）ペプチドファミリーのペプチドのメンバーであるペプチドを生成する、プレプロタンパクをコードする。選択的スプライシングは、複数の転写物バリアントを生じ、それらの少なくとも１つは分泌され、その後切断されて、ゴナドリベリン－１およびＧｎＲＨ関連ペプチド１を生成する。ゴナドリベリン－１は、生殖に重要な黄体形成および卵胞刺激ホルモンの放出を刺激する。この遺伝子における変異は、低ゴナドトロピン性性腺機能低下症に関連付けられている。
６．ＡＶＰ この遺伝子は、バソプレシン／オキシトシンファミリーのメンバーおよびタンパク分解的にプロセスされて複数のタンパク質産物を生成する、プレプロタンパクをコードする。これらの産物は、神経ペプチドホルモンアルギニンバソプレシン、および２つの他のペプチドのニューロフィジン２およびコペプチンを含む。アルギニンバソプレシンは、視床下部の視索上部核および室傍核中で合成される後部下垂体ホルモンである。その担体タンパク質であるニューロフィジン２と共に、それは、神経分泌小胞中にパッケージされ、神経下垂体の神経終末に軸索性に輸送され、そこでそれは、貯蔵されるか、または血流中に分泌される。前駆物質は、活性化されると考えられ、一方でそれは、軸索に沿って後部下垂体に輸送される。アルギニンバソプレシンは、酸塩基の輸送システムを介してｐＨ調節を高めることにより、成長因子として作用する。それは、腎臓に対し直接抗利尿作用を有し、また末梢血管の血管収縮を引き起こす。このホルモンは、出産および授乳の間、平滑筋を収縮させことができる。それはまた、認知、耐性、適応および複雑な性行動および母性行動、ならびに水排泄および心血管系機能の調節に関与する。この遺伝子における変異は、常染色体優性神経下垂体尿崩症（ＡＤＮＤＩ）を引き起こす。この遺伝子は、染色体２０上の関連遺伝子オキシトシンを有する遺伝子クラスター中に存在する。
７．ＡＶＰＲ１Ａ この遺伝子によりコードされるタンパク質は、アルギニンバソプレシンの受容体として作用する。この受容体は、ＡＶＰＲ１Ｂ、Ｖ２ＲおよびＯＸＴ受容体を含む、Ｇタンパク質結合受容体の亜科に属する。その活性は、ホスファチジルイノシトール－カルシウムセカンドメッセンジャー系を刺激する、Ｇタンパク質により媒介される。この受容体は、細胞収縮および増殖、血小板凝集、凝固因子の放出およびグリコーゲン分解を媒介する。
８．ＨＣＲＴ この遺伝子は、タンパク分解的プロセシングにより、２つの成熟神経ペプチドのオレキシンＡおよびオレキシンＢを生じる視床下部神経ペプチド前駆体タンパク質をコードする。オレキシンＡおよびオレキシンＢは、オーファンＧタンパク質結合受容体ＨＣＲＴＲ１およびＨＣＲＴＲ２に結合し、睡眠および覚醒状態の調節において機能する。この神経ペプチドの配置はまた、摂食行動、代謝、および恒常性に関与し得る。
９．ＡＶＰＲ１Ｂ この遺伝子によりコードされるタンパク質は、アルギニンバソプレシンの受容体として作用する。この受容体は、ＡＶＰＲ１Ａ、Ｖ２ＲおよびＯＸＴ受容体を含む、Ｇタンパク質結合受容体の亜科に属する。その活性は、ホスファチジルイノシトール－カルシウムセカンドメッセンジャー系を刺激する、Ｇタンパク質により媒介される。この受容体は主に、下垂体前葉中に位置し、そこでそれは、ＡＣＴＨ放出を刺激する。それは、ＡＣＴＨ分泌下垂体腺腫中でならびに異所性ＡＣＴＨ症候群の原因である気管支カルチノイド中で高レベルで発現される。この遺伝子のスプラスされたアンチセンス転写物が報告されたが、その機能は知られていない。
１０．ＴＡＣ１ この遺伝子は、タキキニンペプチドホルモンファミリーの４つの産物：物質ＰおよびニューロキニンＡ、ならびに関連ペプチドの神経ペプチドＫおよび神経ペプチドγをコードする。これらのホルモンは、神経受容体および平滑筋細胞と相互作用する、神経伝達物質として機能すると考えられている。それらは、行動応答を誘導しかつ、血管拡張剤および分泌促進物質として機能することが知られている。物質Ｐは、抗菌および抗真菌特性を有する抗菌性ペプチドである。異なるアイソフォームをコードする複数転写物バリアントが、この遺伝子で見つかっている。
【0152】
従って、いくつかの実施形態では、Ｓｏｍａｈｏｌ（または本明細書で開示される他の治療分子）は、オキシトシンレベルおよび／または活性を調節するために投与され得る。いくつかの実施形態では、オキシトシンの機能的パートナーは、ＯＸＴＲ、ＮＰＳ、ＴＲＨ、ＣＣＫ、ＧＮＲＨ１、ＡＶＰ、ＡＶＰＲ１Ａ、ＨＣＲＴ、ＡＶＰＲ１ＢおよびＴＡＣ１の１種または複数を含む。
【0153】
使用の方法
Ｓｏｍａｈｏｌおよび類似体は、当該技術分野において周知であるように、治療される障害および患者の年齢、状態、および体重に応じて、種々の形態で投与され得る。例えば、組成物が経口投与される場合、それらは、錠剤、顆粒、粉剤、またはシロップとして処方され得る；または非経口的投与のために、それらは、注射薬（静脈内、筋肉内、または皮下注射用の）、液滴注入製剤、または坐剤として処方され得る。任意の好適な投与経路または投与方法を、治療または予防に有効量の治療用ペプチドを患者に提供するために採用できる。例示的投与経路および方法は、非経口（例えば、静脈内、動脈内、筋肉内、皮下、腫瘍内）、経口、局所（経鼻、経皮、皮内または眼内）、粘膜（例えば、経鼻、舌下、頬側、直腸、腟）、吸入、結節内、脊髄内、頭蓋内、腹腔内、気管内、膀胱内、髄腔内、腸内、肺内、結節内、腔内、眼窩内、関節内および経尿道、ならびにカテーテルまたはステントによる局所送達を含む。
Ｓｏｍａｈｏｌおよび類似体は、当該技術分野において周知であるように、治療される障害および患者の年齢、状態、および体重に応じて、種々の形態で投与され得る。例えば、組成物が経口投与される場合、それらは、錠剤、顆粒、粉剤、またはシロップとして処方され得る；または非経口的投与のために、それらは、注射薬（静脈内、筋肉内、または皮下注射用の）、液滴注入製剤、または坐剤として処方され得る。任意の好適な投与経路または投与方法を、治療または予防に有効量の治療用ペプチドを患者に提供するために採用できる。例示的投与経路および方法は、非経口（例えば、静脈内、動脈内、筋肉内、皮下、腫瘍内）、経口、局所（経鼻、経皮、皮内または眼内）、粘膜（例えば、経鼻、舌下、頬側、直腸、腟）、吸入、結節内、脊髄内、頭蓋内、腹腔内、気管内、膀胱内、髄腔内、腸内、肺内、結節内、腔内、眼窩内、関節内および経尿道、ならびにカテーテルまたはステントによる局所送達を含む。
【0154】
本明細書記載の方法は、慢性疼痛および中枢性の過敏化に関連する多数の障害を治療するために使用され得る。これらの傷害としては、例えば、線維筋痛症、関節リウマチ、変形性関節症、慢性関節症、腫瘍および／または椎間板ヘルニアに関連する脊椎神経圧迫症候群、慢性背部痛、慢性関節痛、三叉神経痛、慢性疼痛に関連する慢性代謝神経障害、片頭痛、炎症性疼痛、幻肢痛を含む手術後の痛み症候群、外傷後ストレス障害、過敏性腸症候群、自律神経ニューロパチー、くも膜炎、慢性限局性疼痛症候群、外陰部痛、および中枢性の過敏化経路の活性化に関連する慢性疼痛症候群が挙げられる。
【0155】
本開示による治療小分子を含む医薬組成物は、任意の薬学的に許容可能な担体または賦形剤中で処方され得る。本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容可能な担体」は、生理学的に適合性のあるありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤等を含む。医薬組成物は、好適な固相またはゲル相担体または賦形剤を含んでよい。例示的担体または賦形剤は、炭酸カルシウム、燐酸カルシウム、種々の糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリエチレングリコールなどの高分子を含む。薬学的に許容可能な担体の例は、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノール等の内の１種または複数、ならびにそれらの組み合わせを含む。多くの場合、組成物中に等張剤、例えば、糖、マンニトール、ソルビトールなどのポリアルコール、または塩化ナトリウムを含むことが好ましいであろう。薬学的に許容可能な担体は、治療薬の貯蔵寿命または有効性を高める、湿潤剤または乳化剤、防腐剤または緩衝剤などの少量の補助物質をさらに含み得る。
【0156】
治療小分子は、非経口的投与に好適な医薬組成物中に組み込まれ得る。好適な緩衝液は、限定されないが、コハク酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、リン酸ナトリウムまたはリン酸カリウムを含む。塩化ナトリウムは、０～３００ｍＭ（液体剤形用に最適には１５０ｍＭ）の濃度で、溶液の毒性を変えるために使用され得る。凍結保護物質は、主に０～１０％スクロース（最適には０．５～１．０％）が、凍結乾燥剤形のために含まれ得る。他の好適な凍結保護物質は、トレハロースおよびラクトースを含む。増量剤は、主に１～１０％マンニトール（最適には２～４％）が、凍結乾燥剤形のために含まれ得る。安定剤は、主に１～５０ｍＭのＬ－メチオニン（最適には５～１０ｍＭ）が、液体および凍結乾燥剤形の両方で使用され得る。他の好適な増量剤は、グリシン、アルギニンを含み、０～０．０５％未満のポリソルベート８０（最適には０．００５～０．０１％）として含まれ得る。追加の界面活性物質としては、限定されないが、ポリソルベート２０およびＢＲＩＪ界面活性物質が挙げられる。
【0157】
治療小分子配合物は、好ましくは減圧下で、凍結乾燥され無菌粉末として貯蔵され、その後注入の前に静菌水（例えば、ベンジルアルコール防腐剤を含む）または無菌水で再構成され得る。医薬組成物は、注入、例えば、ボーラス注入、または点滴による非経口投与用に処方され得る。
【0158】
治療小分子は、予防措置として（即ち、病気を回避するために）１回または複数回投与され得る。あるいは、治療小分子は、１回でまたは一連の治療にわたり患者に適宜投与され、診断以後からいつでも患者に投与されてよい。治療小分子は、単独療法として、または当該状態の治療に有用な他の薬物または治療法と併せて、投与されてよい。
【0159】
本発明の特定の実施形態が、発明者らに既知の本発明を実施するための最良の形態を含み、本明細書に記載される。当然のことながら、これらの記載される実施形態に対する変形形態は、これまでの記載を読めば、当業者に明らかとなるであろう。発明者は、当業者が必要に応じてこのような変更を採用することを予期しており、および発明者らは、本発明が本明細書で具体的に記載される方法とは別の方法で実施されることを意図する。従って、本発明は、適用法で認められる本明細書に添付の請求項に記載される主題の全ての変形物および等価物を含む。さらに、その全ての可能な変形物における上述の実施形態のあらゆる組み合わせは、本明細書で特に指示がない限り、またはさもなければ文脈と明確に矛楯することがない限り、本出願に包含される。
【0160】
本発明の代替実施形態、要素、またはステップのグループ分けは、本発明を限定するものと解釈されるべきではない。各グループのメンバーは、個別にまたは、本明細書で開示される他のグループメンバーとの任意の組み合わせで参照され請求されてよい。グループの１つまたは複数のメンバーが、利便性および／または特許性の理由で、グループに含まれるか、またはグループから除去される場合があることが予測される。何らかのこのような包含または削除が生じた場合、明細書は、修正され従って添付の請求項で使用される全てのマーカッシュグループの記述要件を満たすグループを含むものと見なされる。
【0161】
投与
本開示による治療分子を含む医薬組成物は、任意の薬学的に許容可能な担体または賦形剤中で処方され得る。本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容可能な担体」は、生理学的に適合性のあるすべての溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤等を含む。医薬組成物は、好適な固相またはゲル相担体または賦形剤を含み得る。例示的担体または賦形剤は、炭酸カルシウム、燐酸カルシウム、種々の糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリエチレングリコールなどの高分子を含む。薬学的に許容可能な担体の例は、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノール等の内の１種または複数、ならびにそれらの組み合わせを含む。多くの場合、組成物中に等張剤、例えば、糖、マンニトール、ソルビトールなどのポリアルコール、または塩化ナトリウムを含むことが好ましいであろう。薬学的に許容可能な担体は、治療薬の貯蔵寿命または有効性を高める少量の補助物質、例えば、湿潤剤または乳化剤、防腐剤または緩衝剤をさらに含み得る。
本開示による治療分子を含む医薬組成物は、任意の薬学的に許容可能な担体または賦形剤中で処方され得る。本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容可能な担体」は、生理学的に適合性のあるすべての溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤等を含む。医薬組成物は、好適な固相またはゲル相担体または賦形剤を含み得る。例示的担体または賦形剤は、炭酸カルシウム、燐酸カルシウム、種々の糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリエチレングリコールなどの高分子を含む。薬学的に許容可能な担体の例は、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノール等の内の１種または複数、ならびにそれらの組み合わせを含む。多くの場合、組成物中に等張剤、例えば、糖、マンニトール、ソルビトールなどのポリアルコール、または塩化ナトリウムを含むことが好ましいであろう。薬学的に許容可能な担体は、治療薬の貯蔵寿命または有効性を高める少量の補助物質、例えば、湿潤剤または乳化剤、防腐剤または緩衝剤をさらに含み得る。
【0162】
医薬組成物中の治療薬は、「治療的有効量」または「予防的有効量」で処方され得る。「治療的有効量」は、所望の治療結果を達成するために必要な用量でかつ期間の間、効果的な量を指す。治療的有効量は、治療される状態、状態の重症度および経過、投与方法、薬剤が予防目的で投与されるか、治療目的で投与されるかどうか、特定の薬剤の生物学的利用度、個体において治療小分子が目的の応答を誘発する能力、前治療、患者の年齢、体重および性別、患者の臨床歴および薬剤に対する応答、使用する治療小分子のタイプ、主治医の自由裁量、などに応じて変化し得る。治療的有効量はまた、治療上有益な効果がなんらかの毒性のまたは有害な作用を上回る量である。「予防的有効量」は、所望の予防結果を達成するために、必要な用量でおよび期間の間、効果的な量を指す。
【0163】
ＳＯＭＡＨＯＬ（または本明細書で開示される他の治療分子）を含む溶液は、１回または一連の治療にわたり患者に適切に投与され、診断以後からいつでも患者に投与されてよい。あるいは、それは、予防的措置（即ち、病気を回避するために）として投与され得る。液剤は、単独療法として、または当該状態の治療に有用な他の薬物または治療法と併せて、投与されてよい。
【0164】
一般命題として、本明細書で開示される治療分子の治療的有効量または予防的有効量は、１回または複数回の投与によるかに関係なく、約１ｎｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で投与される。特定の実施形態では、各治療小分子は、約１ｎｇ／ｋｇ体重～約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１ｎｇ／ｋｇ体重～約１ｍｇ／ｋｇ体重、約１ｎｇ／ｋｇ体重～約１００ｇ／ｋｇ体重、約１ｎｇ／ｋｇ体重～約１０ｇ／ｋｇ体重、約１ｎｇ／ｋｇ体重／日～約１ｇ／ｋｇ体重、約１ｎｇ／ｋｇ体重～約１００ｎｇ／ｋｇ体重、約１ｎｇ／ｋｇ体重～約１０ｎｇ／ｋｇ体重、約１０ｎｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｎｇ／ｋｇ体重～約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｎｇ／ｋｇ体重～約１ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｎｇ／ｋｇ体重／～約１００ｇ／ｋｇ体重、約１０ｎｇ／ｋｇ体重～約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｎｇ／ｋｇ体重～約１ｍｇ／ｋｇ体重、１０ｎｇ／ｋｇ体重～約１００ｎｇ／ｋｇ体重／、約１００ｎｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重、約１００ｎｇ／ｋｇ体重～約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１００ｎｇ／ｋｇ体重～約１ｍｇ／ｋｇ体重、約１００ｎｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重、約１００ｎｇ／ｋｇ体重～約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１００ｎｇ／ｋｇ体重～約１ｍｇ／ｋｇ体重、約１ｍｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重、約１ｍｇ／ｋｇ体重～約１０ｍｇ／ｋｇ体重／日、約１ｍｇ／ｋｇ体重～約１ｍｇ／ｋｇ体重、約１ｍｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重、約１ｍｇ／ｋｇ体重～約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重～約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重～約１ｍｇ／ｋｇ体重／日、約１０ｍｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重、約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日～約１００ｍｇ／ｋｇ体重、約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日～約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日～約１ｍｇ／ｋｇ体重、約１ｍｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重、約１ｍｇ／ｋｇ体重～約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重～約１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲で投与される。
【0165】
いくつかの実施形態では、本明細書で開示される治療分子は、個別投与当り約１０ｎｇ～約１００ｎｇ、個別投与当り約１０ｎｇ～約１ｇ、個別投与当り約１０ｎｇ～約１０ｇ、個別投与当り約１０ｎｇ～約１００ｍｇ、個別投与当り約１０ｎｇ～約１ｍｇ、個別投与当り約１０ｎｇ～約１０ｍｇ、個別投与当り約１０ｎｇ～約１００ｍｇ、注入当り約１０ｎｇ～約１０００ｍｇ、個別投与当り約１０ｎｇ～約１０，０００ｍｇ、個別投与当り約１００ｎｇ～約１ｍｇ、個別投与当り約１００ｎｇ～約１０ｍｇ、個別投与当り約１００ｎｇ～約１００ｍｇ、個別投与当り約１００ｎｇ～約１ｍｇ、個別投与当り約１００ｎｇ～約１０ｍｇ、個別投与当り約１００ｎｇ～約１００ｍｇ、注入当り約１００ｎｇ～約１０００ｍｇ、個別投与当り約１００ｎｇ～約１０，０００ｍｇ、個別投与当り約１ｍｇ～約１０ｍｇ、個別投与当り約１ｍｇ～約１００ｍｇ、個別投与当り約１ｍｇ～約１ｍｇ、個別投与当り約１ｍｇ～約１０ｍｇ、個別投与当り約１ｍｇ～約１００ｍｇ、注入当り約１ｍｇ～約１０００ｍｇ、個別投与当り約１ｍｇ～約１０，０００ｍｇ、個別投与当り約１０ｍｇ～約１００ｍｇ、個別投与当り約１０ｍｇ～約１ｍｇ、個別投与当り約１０ｍｇ～約１０ｍｇ、個別投与当り約１０ｍｇ～約１００ｍｇ、注入当り約１０ｍｇ～約１０００ｍｇ、個別投与当り約１０ｍｇ～約１０，０００ｍｇ、個別投与当り約１００ｍｇ～約１ｍｇ、個別投与当り約１００ｍｇ～約１０ｍｇ、個別投与当り約１００ｍｇ～約１００ｍｇ、注入当り約１００ｍｇ～約１０００ｍｇ、個別投与当り約１００ｍｇ～約１０，０００ｍｇ、個別投与当り約１ｍｇ～約１０ｍｇ、個別投与当り約１ｍｇ～約１００ｍｇ、注入当り約１ｍｇ～約１０００ｍｇ、個別投与当り約１ｍｇ～約１０，０００ｍｇ、個別投与当り約１０ｍｇ～約１００ｍｇ、注入当り約１０ｍｇ～約１０００ｍｇ、個別投与当り約１０ｍｇ～約１０，０００ｍｇ、注入当り約１００ｍｇ～約１０００ｍｇ、個別投与当り約１００ｍｇ～約１０，０００ｍｇおよび個別投与当り約１０００ｍｇ～約１０，０００ｍｇの範囲で投与される。治療小分子は、毎日、２、３、４、５、６、７または１０日毎に、または１、２、３または４週毎に投与され得る。
【0166】
他の特定の実施形態では、本明細書で開示される治療分子の量は、約０．０００６ｍｇ、０．００１ｍｇ、０．００３ｍｇ、０．００６ｍｇ、０．０１ｍｇ、０．０３ｍｇ、０．０６ｍｇ、０．１ｍｇ、０．３ｍｇ、０．６ｍｇ、１ｍｇ、３ｍｇ、６ｍｇ、１０ｍｇ、３０ｍｇ、６０ｍｇ、１００ｍｇ、３００ｍｇ、６００ｍｇ、１０００ｍｇ、２０００ｍｇ、５０００ｍｇまたは１０，０００ｍｇの用量で投与され得る。予想される通り、投与量は、患者の状態、サイズ、年齢および状態に依存する。
【0167】
この実施形態の他の態様では、本明細書で開示される医薬組成物化合物は、神経障害などの病気の徴候／症状を、例えば、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減させる。この実施形態のさらに他の態様では、本明細書で開示される医薬組成物は、神経障害などの病気の徴候／症状を、例えば、約５％～約１００％、約１０％～約１００％、約２０％～約１００％、約３０％～約１００％、約４０％～約１００％、約５０％～約１００％、約６０％～約１００％、約７０％～約１００％、約８０％～約１００％、約１０％～約９０％、約２０％～約９０％、約３０％～約９０％、約４０％～約９０％、約５０％～約９０％、約６０％～約９０％、約７０％～約９０％、約１０％～約８０％、約２０％～約８０％、約３０％～約８０％、約４０％～約８０％、約５０％～約８０％、または約６０％～約８０％、約１０％～約７０％、約２０％～約７０％、約３０％～約７０％、約４０％～約７０％、または約５０％～約７０％低減させる。
【0168】
本明細書で開示される医薬組成物は、個体への通例の投与を可能にする十分な量である。この実施形態のいくつかの態様では、本明細書で開示される医薬組成物は、例えば、少なくとも５ｍｇ、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも１５ｍｇ、少なくとも２０ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも３０ｍｇ、少なくとも３５ｍｇ、少なくとも４０ｍｇ、少なくとも４５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも５５ｍｇ、少なくとも６０ｍｇ、少なくとも６５ｍｇ、少なくとも７０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇ、少なくとも８０ｍｇ、少なくとも８５ｍｇ、少なくとも９０ｍｇ、少なくとも９５ｍｇ、または少なくとも１００ｍｇの医薬組成物であり得る。この実施形態の他の態様では、本明細書で開示される医薬組成物は、例えば、少なくとも５ｍｇ、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも２０ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇ、少なくとも１００ｍｇ、少なくとも２００ｍｇ、少なくとも３００ｍｇ、少なくとも４００ｍｇ、少なくとも５００ｍｇ、少なくとも６００ｍｇ、少なくとも７００ｍｇ、少なくとも８００ｍｇ、少なくとも９００ｍｇ、少なくとも１，０００ｍｇ、少なくとも１，１００ｍｇ、少なくとも１，２００ｍｇ、少なくとも１，３００ｍｇ、少なくとも１，４００ｍｇ、または少なくとも１，５００ｍｇの医薬組成物であってよい。この実施形態のさらに他の態様では、本明細書で開示される医薬組成物は、例えば、約５ｍｇ～約１００ｍｇ、約１０ｍｇ～約１００ｍｇ、約５０ｍｇ～約１５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約２５０ｍｇ、約１５０ｍｇ～約３５０ｍｇ、約２５０ｍｇ～約５００ｍｇ、約３５０ｍｇ～約６００ｍｇ、約５００ｍｇ～約７５０ｍｇ、約６００ｍｇ～約９００ｍｇ、約７５０ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約８５０ｍｇ～約１，２００ｍｇ、または約１，０００ｍｇ～約１，５００ｍｇの範囲であってよい。この実施形態のさらに他の態様では、本明細書で開示される医薬組成物は、例えば、約１０ｍｇ～約２５０ｍｇ、約１０ｍｇ～約５００ｍｇ、約１０ｍｇ～約７５０ｍｇ、約１０ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約１０ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約５０ｍｇ～約２５０ｍｇ、約５０ｍｇ～約５００ｍｇ、約５０ｍｇ～約７５０ｍｇ、約５０ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約５０ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約１００ｍｇ～約２５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約５００ｍｇ、約１００ｍｇ～約７５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約１００ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約２００ｍｇ～約５００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７５０ｍｇ、約２００ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約２００ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約５ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約５ｍｇ～約１，０００ｍｇ、または約５ｍｇ～約２５０ｍｇの範囲であってよい。
【0169】
本明細書で開示される医薬組成物は、本明細書で開示される医薬組成物を溶解するために十分な量で溶媒、乳剤または他の希釈剤を含み得る。この実施形態の他の態様では、本明細書で開示される医薬組成物は、溶媒、乳剤または希釈剤を、例えば、約９０％（ｖ／ｖ）未満、約８０％（ｖ／ｖ）未満、約７０％（ｖ／ｖ）未満、約６５％（ｖ／ｖ）未満、約６０％（ｖ／ｖ）未満、約５５％（ｖ／ｖ）未満、約５０％（ｖ／ｖ）未満、約４５％（ｖ／ｖ）未満、約４０％（ｖ／ｖ）未満、約３５％（ｖ／ｖ）未満、約３０％（ｖ／ｖ）未満、約２５％（ｖ／ｖ）未満、約２０％（ｖ／ｖ）未満、約１５％（ｖ／ｖ）未満、約１０％（ｖ／ｖ）未満、約５％（ｖ／ｖ）、または約１％（ｖ／ｖ）未満の量で含んでよい。この実施形態の他の態様では、本明細書で開示される医薬組成物は、溶媒、乳剤または他の希釈剤を、例えば、約１％（ｖ／ｖ）～９０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～７０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～６０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～１０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～１０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～１０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～１０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～１５％（ｖ／ｖ）、または約８％（ｖ／ｖ）～１２％（ｖ／ｖ）の範囲の量で含んでよい。
【0170】
本明細書で開示される医薬組成物中の本明細書で開示される医薬組成物の最終濃度は、任意の所望の濃度であり得る。この実施形態の一態様では、医薬組成物中の医薬組成物の最終濃度は、治療的有効量であってよい。この実施形態の他の態様では、医薬組成物中の医薬組成物の最終濃度は、例えば、少なくとも０．００００１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．０００１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．００１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．０１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５００ｍｇ／ｍＬであってよい。この実施形態の他の態様では、医薬組成物中の医薬組成物の最終濃度は、例えば、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約０．０００１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．０００１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．００１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．０１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約０．０１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約０．１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、または約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬの範囲であってよい。
【0171】
本明細書のいくつかの態様は、一部には、病気（例えば、神経障害）もしくは中毒に罹りやすい個体、または病気もしくは中毒に罹患している個体を治療することを開示する。本明細書で使用される場合、「治療」という用語は、病気の徴候／症状を低減させるまたは取り除くこと；または徴候／症状を無くすことを指す。例えば「治療する」という用語は、病気により特徴づけられる状態の症状を、例えば、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％少なくとも９５％、または少なくとも１００％低減させることを指し得る。当業者であれば、特定の種類の病気に関連する特有の症状または指標を理解し、個体が本明細書で開示される治療の対象となり得るか否かを決定する方法を理解するであろう。
【0172】
この実施形態のいくつかの態様では、本明細書で開示される医薬組成物の治療的有効量は、病気の徴候／症状を、例えば、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも１００％低減させる。この実施形態の他の態様では、本明細書で開示される医薬組成物の治療的有効量は、病気の徴候／症状を、例えば、最大で１０％、最大で１５％、最大で２０％、最大で２５％、最大で３０％、最大で３５％、最大で４０％、最大で４５％、最大で５０％、最大で５５％、最大で６０％、最大で６５％、最大で７０％、最大で７５％、最大で８０％、最大で８５％、最大で９０％、最大で９５％、または最大で１００％低減させる。この実施形態のさらに他の態様では、本明細書で開示される医薬組成物の治療的有効量は、病気の徴候／症状を、例えば、約１０％～約１００％、約１０％～約９０％、約１０％～約８０％、約１０％～約７０％、約１０％～約６０％、約１０％～約５０％、約１０％～約４０％、約２０％～約１００％、約２０％～約９０％、約２０％～約８０％、約２０％～約２０％、約２０％～約６０％、約２０％～約５０％、約２０％～約４０％、約３０％～約１００％、約３０％～約９０％、約３０％～約８０％、約３０％～約７０％、約３０％～約６０％、または約３０％～約５０％低減させる。
【0173】
この実施形態のさらに他の態様では、本明細書で開示される医薬組成物の治療的有効量は通常、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇの範囲であり、例えば、３、５、７、１０または１４日毎に投与される。この実施形態のいくつかの態様では、本明細書で開示される医薬組成物の有効量は、例えば、少なくとも０．００１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．０１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５．０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４５ｍｇ／ｋｇ、または少なくとも５０ｍｇ／ｋｇであり、例えば、３、５、７、１０または１４日毎に投与され得る。この実施形態の他の態様では、本明細書で開示される医薬組成物の有効量は、例えば、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ～約１５ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約２５ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約４５ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇ、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約７５ｍｇ／ｋｇ、または約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇの範囲であり、例えば、３、５、７、１０または１４日毎に投与され得る。この実施形態のさらに他の態様では、本明細書で開示される医薬組成物の有効量は、例えば、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約４５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約７５ｍｇ／ｋｇ、または約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇの範囲であり、例えば、３日毎、５、７、１０または１４日毎に投与され得る。この実施形態のさらに他の態様では、本明細書で開示される医薬組成物の有効量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１５ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約２５ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約４５ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約７５ｍｇ／ｋｇ、または約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇの範囲であり、例えば、３、５、７、１０または１４日毎に投与され得る。
【0174】
投与量は、一回用量または、累積投与量（逐次投与）であってよく、かつ当業者により容易に決定できる。例えば、病気または中毒感染症の治療は、本明細書で開示される医薬組成物の有効量の１回のみの投与を含み得る。あるいは、病気または中毒の治療は、例えば、１日１回、１日２回、１日３回、数日毎に１回、または１週間に１回などの期間の範囲にわたって行われる医薬組成物の有効量の複数回の投与を含み得る。投与のタイミングは、個体の症状の重症度などの因子に応じて、個体毎に変わってよい。例えば、本明細書で開示される医薬組成物の有効量は、不確定期間、または個体がそれ以上治療を必要としなくなるまで、１日１回、個体に投与できる。当業者なら、個体の状態が治療の全過程にわたりモニターされること、および投与される本明細書で開示の医薬組成物の有効量がそれに応じて調節できることをわかるであろう。
【0175】
一実施形態では、本明細書で開示される治療薬は、神経障害などの病気の徴候／症状を、同じ治療薬を受けていない患者に比べて、例えば、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減させることができる。この実施形態の他の態様では、神経障害などの病気の徴候／症状は、同じ治療薬を受けていない患者に比べて、例えば、約１０％～約１００％、約２０％～約１００％、約３０％～約１００％、約４０％～約１００％、約５０％～約１００％、約６０％～約１００％、約７０％～約１００％、約８０％～約１００％、約１０％～約９０％、約２０％～約９０％、約３０％～約９０％、約４０％～約９０％、約５０％～約９０％、約６０％～約９０％、約７０％～約９０％、約１０％～約８０％、約２０％～約８０％、約３０％～約８０％、約４０％～約８０％、約５０％～約８０％、または約６０％～約８０％、約１０％～約７０％、約２０％～約７０％、約３０％～約７０％、約４０％～約７０％、または約５０％～約７０％低減される。
【0176】
さらなる実施形態では、治療小分子およびその誘導体は、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、１日間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、１週間、２週間、３週間、４週間、１か月間、２か月間、３か月間、４か月間またはそれを越える期間の半減期を有する。
【0177】
ある実施形態では、本明細書で開示される治療分子の投与の期間は、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日間、３週、４週、５週、６週、７週、８週、９週、１０週、１１週、１２週間、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月の間、またはそれを越える期間である。さらなる実施形態では、投与が停止される期間は、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日間、３週、４週、５週、６週、７週、８週、９週、１０週、１１週、１２週間、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１１ヶ月、１２ヶ月の間、またはそれを超える期間である。
【0178】
この実施形態のいくつかの態様では、本明細書で開示される治療薬の治療的有効量は、神経障害などの病気の徴候／症状を、例えば、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも１００％低減させる。この実施形態の他の態様では、本明細書で開示される治療薬の治療的有効量は、神経障害などの病気の徴候／症状を、例えば、最大で１０％、最大で１５％、最大で２０％、最大で２５％、最大で３０％、最大で３５％、最大で４０％、最大で４５％、最大で５０％、最大で５５％、最大で６０％、最大で６５％、最大で７０％、最大で７５％、最大で８０％、最大で８５％、最大で９０％、最大で９５％、または最大で１００％低減させる。この実施形態のさらに他の態様では、本明細書で開示される治療的有効量は、神経障害などの病気の徴候／症状を、例えば、約１０％～約１００％、約１０％～約９０％、約１０％～約８０％、約１０％～約７０％、約１０％～約６０％、約１０％～約５０％、約１０％～約４０％、約２０％～約１００％、約２０％～約９０％、約２０％～約８０％、約２０％～約２０％、約２０％～約６０％、約２０％～約５０％、約２０％～約４０％、約３０％～約１００％、約３０％～約９０％、約３０％～約８０％、約３０％～約７０％、約３０％～約６０％、または約３０％～約５０％低減させる。
【0179】
ある実施形態では、本明細書で開示される治療分子による治療は、神経障害などの病気の回復時間を、例えば、約１０％～約１００％、約１０％～約９０％、約１０％～約８０％、約１０％～約７０％、約１０％～約６０％、約１０％～約５０％、約１０％～約４０％、約２０％～約１００％、約２０％～約９０％、約２０％～約８０％、約２０％～約２０％、約２０％～約６０％、約２０％～約５０％、約２０％～約４０％、約３０％～約１００％、約３０％～約９０％、約３０％～約８０％、約３０％～約７０％、約３０％～約６０％、または約３０％～約５０％短縮する。
【0180】
ある実施形態では、本明細書で開示される治療分子による治療は、禁断症状などの中毒の徴候／症状を、例えば、約１０％～約１００％、約１０％～約９０％、約１０％～約８０％、約１０％～約７０％、約１０％～約６０％、約１０％～約５０％、約１０％～約４０％、約２０％～約１００％、約２０％～約９０％、約２０％～約８０％、約２０％～約２０％、約２０％～約６０％、約２０％～約５０％、約２０％～約４０％、約３０％～約１００％、約３０％～約９０％、約３０％～約８０％、約３０％～約７０％、約３０％～約６０％、または約３０％～約５０％低減させる。
【0181】
ある実施形態では、本明細書で開示される治療分子による治療は、例えば、約１０％～約１００％、約１０％～約９０％、約１０％～約８０％、約１０％～約７０％、約１０％～約６０％、約１０％～約５０％、約１０％～約４０％、約２０％～約１００％、約２０％～約９０％、約２０％～約８０％、約２０％～約２０％、約２０％～約６０％、約２０％～約５０％、約２０％～約４０％、約３０％～約１００％、約３０％～約９０％、約３０％～約８０％、約３０％～約７０％、約３０％～約６０％、または約３０％～約５０％患者における神経可塑性を高めるおよび／または神経機能を改善する。
【0182】
一実施形態では、組成物の用量は、毎日、週２回、毎週、隔週、または毎月、投与され得る。治療の期間は、１週間、２週間、１か月、２か月、４か月、６か月、８か月、１年の間、またはそれを越える期間であり得る。初期の用量は、維持用量より多くてよい。一実施形態では、用量は、少なくとも０．０１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも０．７５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２５ｍｇ／ｋｇ、または少なくとも３０ｍｇ／ｋｇの毎週の用量の範囲である。一実施形態では、毎週の用量は、最大で１．５ｍｇ／ｋｇ、最大で２ｍｇ／ｋｇ、最大で２．５ｍｇ／ｋｇ、最大で３ｍｇ／ｋｇ、最大で４ｍｇ／ｋｇ、最大で５ｍｇ／ｋｇ、最大で６ｍｇ／ｋｇ、最大で７ｍｇ／ｋｇ、最大で８ｍｇ／ｋｇ、最大で９ｍｇ／ｋｇ、最大で１０ｍｇ／ｋｇ、最大で１５ｍｇ／ｋｇ、最大で２０ｍｇ／ｋｇ、最大で２５ｍｇ／ｋｇ、または最大で３０ｍｇ／ｋｇであってよい。特定の態様では、毎週の用量は、５ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇの範囲であってよい。代替態様では、毎週の用量は、１０ｍｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇの範囲であってよい。
【0183】
本明細書はまた、対象に投与するための医薬組成物を提供する。本明細書で開示される医薬組成物は、薬学的に許容可能なキャリア、賦形剤、または希釈剤をさらに含み得る。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容可能な」という用語は、組成物が、有害な副作用なしに治療効果を達成するのに十分であり、かつ疾患のタイプ、患者の年齢、体重、健康状態、性別、および薬物感受性、投与経路、投与モード、投与頻度、治療期間、本明細書で開示される組成物と組み合わせてまたは同時に使用される薬物、および医学で既知の他の因子に応じて、容易に決定され得ることを意味する。
【0184】
本明細書で医薬組成物は、薬学的に許容可能な担体をさらに含み得る。経口投与のために、担体は、限定されないが、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、賦形剤、可溶化剤、分散剤、安定化剤、懸濁化剤、着色剤、および／または風味剤を含み得る。注射可能配合物のために、担体は、緩衝剤、保存剤、鎮痛薬、可溶化剤、等張剤、および安定化剤を含み得る。局所投与用の配合物のために、担体は、塩基、賦形剤、潤滑剤、および保存剤を含み得る。
【0185】
開示される組成物は、上述の薬学的に許容可能な担体と組み合わせて、種々の剤形へと処方され得る。例えば、経口投与のために、医薬組成物は、錠剤、トローチ剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁液、シロップまたはウェハへと処方され得る。注射可能配合物のために、医薬組成物はまた、単回剤形としてアンプル中に、または複数回投与容器中に処方され得る。医薬組成物は、液剤、懸濁剤、錠剤、丸薬、カプセル、および長時間作用性配合物へと処方され得る。
【0186】
他方では、医薬製剤に好適な担体、賦形剤、および希釈剤の例は、限定されないが、ラクトース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、デンプン、アラビアゴム、アルギネート、ゼラチン、リン酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、セルロース、メチルセルロース、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、水、メチルヒドロキシ安息香酸、プロピルヒドロキシ安息香酸、滑石、ステアリン酸マグネシウムおよび鉱物油を含む。加えて、医薬製剤は、充填剤、抗凝固剤、潤滑剤、保水剤、風味剤、および防腐剤をさらに含み得る。
【0187】
さらに、本明細書で開示される医薬組成物は、錠剤、丸薬、粉剤、顆粒、カプセル、懸濁液、内服用液剤、乳剤、シロップ、無菌水溶液、非水性溶媒、凍結乾燥製剤および坐剤からなる群より選択される任意の製剤の形態を有し得る。
【0188】
組成物は、患者の身体に好適な単一剤形へと処方され、好ましくは皮膚、静脈内、筋肉内、動脈内、髄内、脊髄内、脳室内、肺、吸入、経皮、皮下、腹腔内、鼻腔内、結腸内、局所、舌下、腟、または直腸の投与介する経口、非経口経路により投与されるように、医薬品分野で典型的な方法により小分子薬物に有用な製剤へと処方されるが、これらに限定されない。
【0189】
組成物は、種々の薬学的に許容可能な担体、例えば、生理食塩水または有機溶媒と混合することにより使用され得る。安定性または吸光率を高めるために、グルコース、スクロースまたはデキストランなどの炭水化物、アスコルビン酸またはグルタチオンなどの抗酸化剤、キレート化剤、低分子量タンパク質、または他の安定剤が使用され得る。
【0190】
本明細書で開示される医薬組成物の投与量および頻度は、治療される疾患、投与経路、患者の年齢、性別、および体重、ならびに疾患重症度などの種々の因子に加えて、有効成分のタイプにより決定される。
【0191】
本明細書で開示される組成物の総有効投与量は、患者に単回用量で投与され得るか、または分割治療プロトコルに従い、複数回投与で長期間にわたり投与され得る。本明細書で開示される医薬組成物では、有効成分の含量は、疾患の重症度に応じて変わってよい。好ましくは、本明細書で開示される小分子の合計一日量は、約０．０００１μｇ～約５００ｍｇ／１ｋｇの患者の体重であり得る。しかし、小分子の有効量は、医薬組成物の投与経路および治療頻度に加えて、患者の年齢、体重、健康状態、性別、疾患重症度、食事、および分泌比率を含む各種要因を考慮して決定される。これを考慮して、当業者は、本明細書で開示される医薬組成物の特定の使用にために好適な有効量を容易に決定し得る。本明細書で開示される医薬組成物は、好適な効果を示す限り、製剤、ならびに投与経路およびモードに特に限定されない。
【0192】
さらに、医薬組成物は、単独で、または予防的または治療的効力を示す他の医薬製剤と組み合わせて、または同時に投与される得る。
【0193】
種々の実施形態では、製剤は、限定されないが、製剤中に生物活性剤（本明細書で記載のウィルス、タンパク質、抗体、ペプチドなど）の組み合わせを含み得る。例えば、本明細書で記載の製剤は、限定されないが疾患を含む、１種または複数の状態を治療するために、単一の生物活性剤を含み得る。本明細書で開示される製剤はまた、ある実施形態では、限定されないが、単一または複数の状態に対する２種以上の異なる生物活性剤を含み得る。製剤中の複数の生物活性剤の使用は、例えば、同じまたは異なる適応症を対象とすることができる。同様に、別の実施形態では、製剤中の複数の生物活性剤は、例えば、病的状態および一次治療により引き起こされた１つまたは複数の副作用の両方を治療するために使用できる。さらなる実施形態では、複数の生物活性剤はまた、限定されないが、例えば、同時の、病的状態の治療および病的状態の進行の監視を含む、異なる医療目的を達成するために本明細書で記載される製剤中に含まれ得る。追加の実施形態では、本明細書で例示されるもの、ならびに当該技術分野において周知の他の組み合わせなどの複数の、同時の治療法は、患者コンプライアンスに対し特に有用である。理由は、単一の組成物が、いくつかのまたは全ての示唆される治療および／または診断に十分であり得るためである。当業者は、広範囲の併用療法のために混合できる生物活性剤を分かるであろう。同様に、種々の実施形態では、製剤は、小分子と共に、および１種または複数の小分子医薬品に加えて１種または複数の生物活性剤の組み合わせと共に使用され得る。従って、種々の実施形態では、製剤は、１、２、３、４、５または６種もしくは更に多くの異なる生物活性剤を、ならびに１種または複数の小分子医薬品と組み合わせた１種または複数の生物活性剤を含んで提供される。
【0194】
種々の実施形態では、製剤は、１種または複数の防腐剤および／または当該技術分野において既知の添加物を含み得る。同様に、製剤は、限定されないが、種々の既知の送達製剤へとさらに処方できる。例えば、ある実施形態では、製剤は、界面活性剤、補助剤、生分解性ポリマー、ヒドロゲル、などを含んでよく、このような任意の成分、それらの化学的および機能的特性は、当技術分野において既知である。同様に当該技術分野で知られているのは、投与後に、生物活性剤の急速な、持続的なまたは遅延された放出を促進する製剤である。記載される製剤は、これらのまたは当該技術分野において既知の他の製剤成分を含むように製造され得る。
【0195】
組成物は従って、埋め込み装置またはカテーテルを介して、経時的に、または持続点滴として、単一用量として、または２種以上の用量（これは、所望の分子の同じ量を含んでも、含まなくてもよい）として、投与され得る。適切な投与量の更なる精密化は、当業者により日常的に行われ、かつ当業者により日常的に実施される作業の範囲内である。適切な投与量は、適切な用量反応データの使用により確認され得る。種々の実施形態では、本明細書で記載される製剤中の生物活性剤は、限定されないが、慢性状態に対する長期投与などの、長時間にわたり、患者に投与され得る。組成物は、固体、半固体またはエアロゾルであってよく、医薬組成物は、錠剤、ジェルタブ、ロゼンジ、経口溶解ストリップ、カプセル、シロップ、経口懸濁剤、乳剤、顆粒、スプリンクルまたはペレットとして処方される。
【0196】
ある実施形態では、経口、直腸、腟、非経口、肺、舌下、および／または鼻腔内の送達製剤のために、錠剤が、必要に応じて１種または複数の補助成分または添加物と共に、圧縮もしくは型成形により作製され得る。ある実施形態では、圧縮錠剤は、例えば、必要に応じ結合剤（例えば、限定されないが、ポビドン、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、潤滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤（例えば、限定されないが、グリコール酸ナトリウムデンプン、架橋ポビドン、架橋カルボキシルメチルセルロースナトリウム）、および／または界面活性剤または分散剤と混合された、粉末または顆粒などの易流動性形態の有効成分を好適な打錠機（ｔａｂｌｅｔｔｉｎｇ ｍａｃｈｉｎｅ）中で圧縮することにより調製される。
【0197】
ある実施形態では、成形錠剤は、例えば、限定されないが、不活性液体希釈剤で湿潤された粉末状の化合物の混合物を、好適な打錠機で成形することにより作製される。ある実施形態では、錠剤は、必要に応じ被覆されまたは刻み目を付けられ、および例えば、限定されないが、目的の放出プロファイルを与えるために種々の比率でヒドロキシプロピルメチルセルロースを用いて、有効成分の緩慢なおよび制御された放出を提供するように処方され得る。ある実施形態では、錠剤は、必要に応じ、限定されないが、薄膜、ショ糖被覆、または腸溶コーティングなどの被覆を与えられて、胃以外の腸の一部での放出を提供し得る。ある実施形態では、錠剤およびカプセル製造のための工程、装置、および受託製造会社は、当該技術分野において周知である。
【0198】
ある実施形態では、カプセル製剤は、限定されないが、ゼラチンカプセルまたはヒドロキシメチルプロピルセルロース（ＨＭＰＣ）から作製されるものなどの植物カプセルを含む、硬カプセルまたは軟カプセルを利用できる。ある実施形態では、カプセルのタイプは、ゼラチンカプセルである。ある実施形態では、カプセルは、限定されないが、Ｍｉｒａｎｄａ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌなどの市販の業者から、またはＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃａｐｕｌｅｓ，２．ｓｕｐ．ｎｄ Ｅｄ．，Ｆ．Ｐｏｄｃｚｅｃｋ ａｎｄ Ｂ．Ｊｏｎｅｓ，２００４で詳細に記載されるような、産業界で周知のカプセル製造技術を採用して入手できるものなどの、カプセル充填器を用いて充填され得る。ある実施形態では、カプセル製剤は、限定されないが、Ｃｈａｏ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ ＆ Ｃｏｎｔｒａｃｔ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ，ｌｏｃａｔｅｄ ａｔ Ｐｕｒｄｕｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐａｒｋなどの委託製造センターを用いて作製され得る。
【0199】
パッケージングおよび投与のための装置は、限定されないが、投与される物質の体積、貯蔵状態、熟練保健開業医が投与するかまたは患者自己コンプライアンスかどうか、投与計画、地政学的環境（例えば、発展途上国の場合の極限温度条件への曝露など）、および他の実施上の配慮点などの、種々の考察により決定され得る。
【0200】
注入装置は、ペン型注入器、自動注入装置、安全注射器、注入ポンプ、噴射ポンプ、注入ポンプ、薬剤充填済みガラス注射器、薬剤充填済みプラスチック注射器を含み、および無針注射器は、液体充填済みであってよく、または例えば、凍結乾燥物質と共に使用するために、二重室であってよい。このような使用のための注射器の例は、Ｖｅｔｔｅｒ ＧｍｂＨ，Ｒａｖｅｎｓｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙから入手できるＬｙｏ－Ｊｅｃｔ（商標）、二重室プレフィルリオシリンジである。別の例は、ＬｙｏＴｉｐであり、これは、ＬｙｏＴｉｐ、Ｉｎｃ．，Ｃａｍａｒｉｌｌｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，Ｕ．Ｓ．Ａ．から入手可能である凍結乾燥製剤を都合良く送達するように設計された、プリフィルシリンジである。注射による投与は、限定されないが、必要に応じて、静脈内、筋肉内、腹腔内、または皮下であってよい。非注射経路による投与は、限定されないが、必要に応じて、経鼻、経口、経眼、経皮、または肺を介してであってよい。
【0201】
特定の実施形態では、キットは、本明細書で記載の１種または複数の製剤を投与するための１種または複数の単室または多室注射器（例えば、液体注射器およびリオシリンジ）を含み得る。種々の実施形態では、キットは、注射器への充填および対象への投与の準備ができている形態で、部分真空下でバイアル中に密封された、非経口、皮下、筋肉内またはＩＶ投与用の製剤成分を含み得る。この場合、組成物は、部分真空下でその中に配置され得る。全てのこれらの実施形態などは、キットは、前述のいずれかに従い１種または複数のバイアルを含んでよく、各バイアルは、対象への投与のための単一の単位用量を含む。
【0202】
キットは、本明細書に記載のように配置される、凍結乾燥物を含んでよく、それは再構成時に、それに従いて組成物を提供する。種々の実施形態では、キットは、凍結乾燥物および凍結乾燥物を再構成するための無菌希釈剤を含み得る。
【0203】
また、本明細書で記載されるのは、本明細書で開示される製剤の有効量を対象に投与することを含む、治療を必要としている対象を治療するための方法である。製剤の治療的有効量または投与量は、対象の疾患または状態および実際の臨床設定に依存する。
【0204】
ある実施形態では、本明細書で記載される製剤は、任意の好適な経路により、特に非経口（皮下、筋肉内、静脈内および皮内を含む）投与により投与され得る。好ましい経路は、レシピエントの状態および年齢、ならびに治療される疾患により変化することも理解されよう。最も効果的な投与手段および量を決定する方法は、当業者に既知であり、限定されないが、治療に使用される組成物、治療の目的、治療される対象により変化するであろう。単回または複数回の投与が、行われてよく、限定されないが、投与のレベルおよびパターンは、治療する医師により選択される。好適な投与製剤および薬剤を投与する方法は、当技術分野において既知である。
【0205】
本明細書で記載される製剤は、薬物の製造に使用でき、かつ従来の手順に基づく投与によりヒトおよび他の動物の治療のために使用できる。
【0206】
また本明細書で提供されるのは、アミノ酸の組み合わせを用いて好適なウィルス製剤を開発するためのコンビナトリアル手法である。これらの方法は、安定な液体または凍結乾燥医薬組成物、および特に薬学的ウィルス製剤を開発するために効果的である。
【0207】
本明細書で記載される実施形態による組成物は、望ましい溶解度、粘度、シリンジ通過性および安定性などの、望ましい特性を有する。本明細書で記載される実施形態による凍結乾燥物は、また、望ましい回収率、安定性およびシリンジ通過性および再構成などの、望ましい特性を有する。
【0208】
いくつかの実施形態では、医薬製剤のｐＨは、少なくとも約３．５、３．７５、４、４．２５、４．５、４．７５、５、５．２５、５．５、５．７５、６、６．２５、６．５、６．７５、７、７．２５、７．５、７．７５、８、８．２５、８．５、８．７５、または９である。
【0209】
ある実施形態では、医薬製剤のｐＨは、約３～約９、約４～約１９、約５～約９、約６～約８、約６～約７、約６～約９、約５～約６、約５～約７、約５～約８、約４～約９、約４～約８、約４～約７、約４～約６、約４～約５、約３～約８、約３～約７、約３～約６、約３～約５、約３～約４、約７～約８、約７～約９、約７～約１０である。
【0210】
実施例
以下の非限定的実施例は、現時点で考えられる代表的実施形態のより完全な理解を容易にするために、例示の目的のみで提供される。これらの実施例は、製剤の成分が組み合わされる全ての可能な状況のほんの一部であることが意図される。従って、これらの実施例は、製剤の成分のタイプおよび量、および／または方法および使用に関するものを含む、本明細書で記載される実施形態のいずれかを限定するものと解釈されるべきではない。
以下の非限定的実施例は、現時点で考えられる代表的実施形態のより完全な理解を容易にするために、例示の目的のみで提供される。これらの実施例は、製剤の成分が組み合わされる全ての可能な状況のほんの一部であることが意図される。従って、これらの実施例は、製剤の成分のタイプおよび量、および／または方法および使用に関するものを含む、本明細書で記載される実施形態のいずれかを限定するものと解釈されるべきではない。
【0211】
実施例１
ＰＴＳＤ評価のためのげっ歯類モデル
最近の研究は、げっ歯類モデルが、ストレス誘導および障害発生をシミュレートできることを示した。例えば、Ｖｅｒｂｉｔｓｋｙ ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ（２０２０）１０：１３２を参照されたい。ＰＴＳＤモデルの開発に使用される物理的ストレス要因は、電気ショック、水中外傷、拘束／固定化ストレス、および単一の長期ストレスを含む。ストレスタイプ、強度、持続期間、および頻度を操作することにより、前臨床モデルは、種々の行動試験により測定される、コアＰＴＳＤ表現型を反映する。ＰＴＳＤの治療に適応される２種の薬物：セルトラリンおよびパロキセチン、が存在する。
ＰＴＳＤ評価のためのげっ歯類モデル
最近の研究は、げっ歯類モデルが、ストレス誘導および障害発生をシミュレートできることを示した。例えば、Ｖｅｒｂｉｔｓｋｙ ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ（２０２０）１０：１３２を参照されたい。ＰＴＳＤモデルの開発に使用される物理的ストレス要因は、電気ショック、水中外傷、拘束／固定化ストレス、および単一の長期ストレスを含む。ストレスタイプ、強度、持続期間、および頻度を操作することにより、前臨床モデルは、種々の行動試験により測定される、コアＰＴＳＤ表現型を反映する。ＰＴＳＤの治療に適応される２種の薬物：セルトラリンおよびパロキセチン、が存在する。
【0212】
この実施例で、ラットは、種々のストレス（例えば、電気ショック、拘束／固定化ストレスおよび水中外傷）に曝露される。ラットはその後、Ｓｏｍａｈｏｌで治療され、ＰＴＳＤの徴候／症状について試験される。治療されるラット集団は、対照群と比較される。
【0213】
結果は、Ｓｏｍａｈｏｌ（または本明細書で開示される他の治療分子）で治療されたラットが、対照群よりも急速にＰＴＳＤから回復することを示した。
【0214】
実施例２
中毒評価のためのげっ歯類モデル
ヒトにおける薬物中毒の２つの基本的な特徴（即ち、使用に対する制御の喪失およびその結果の薬物の過剰ままたは衝動的な使用）は、いくつかの異なる方法を用いて動物でモデル化されている。獲得を評価する簡便な方法は、毎日の実験のセッション中に、薬物へのアクセスを動物に与えることであり、送達は、オペラント応答（即ち、レバー押し）を条件として利用可能である。従って、この実施例は、中毒を研究するために効果的な動物モデルに関する。最近の研究は、げっ歯類モデルが物質乱用および中毒をシミュレートできることを示した。例えば、Ｌｉｎｃｈ ｅｔ ａｌ．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（２０１０）Ｖｏｌ．６０，Ｎｏ．３を参照されたい。
中毒評価のためのげっ歯類モデル
ヒトにおける薬物中毒の２つの基本的な特徴（即ち、使用に対する制御の喪失およびその結果の薬物の過剰ままたは衝動的な使用）は、いくつかの異なる方法を用いて動物でモデル化されている。獲得を評価する簡便な方法は、毎日の実験のセッション中に、薬物へのアクセスを動物に与えることであり、送達は、オペラント応答（即ち、レバー押し）を条件として利用可能である。従って、この実施例は、中毒を研究するために効果的な動物モデルに関する。最近の研究は、げっ歯類モデルが物質乱用および中毒をシミュレートできることを示した。例えば、Ｌｉｎｃｈ ｅｔ ａｌ．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（２０１０）Ｖｏｌ．６０，Ｎｏ．３を参照されたい。
【0215】
ラットは、げっ歯類静脈内薬物自己投与パラダイムに供される。具体的には、ラットは、頸静脈に長期留置カテーテルを移植される。カテーテルは、背側でラットを出て、そこで、それは薬物充填シリンジに付着されたテザーおよび配管システム（ｔｅｔｈｅｒ－ａｎｄ－ｔｕｂｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ）に連結される。能動的レバーに対する応答は、薬物の注入をもたらす。
【0216】
薬物自己投与の獲得がその後、摂取の基準レベルに達するのに必要とされるセッションの数として測定され、これは、投与量および薬物利用能のために標準化および調節され得る。非能動的レバー押しに対する能動レバー押し応答の比率は、摂取基準と共に使用される。全ての試験動物は、それらは自己投与を獲得したかどうかに関係なく、分析に含められ、注目点は、如何に急速に自己投与の獲得が起こるか、および薬物自己投与を獲得する各群中の動物の割合である。
【0217】
上述のように、ラットは、オピオイド薬に曝露される。２つのラット集団が、曝露される：第１の集団はその後、Ｓｏｍａｈｏｌで治療され、第２の集団（即ち、対照）は、未治療のままにされるか、または生理食塩水を注射される。治療されたラットの集団は、対照群と比較される。具体的には、非能動的レバー押しに対する能動的レバー押し応答の比率が、集団間で比較される。結果は、Ｓｏｍａｈｏｌで治療したラットのより低い比率のレバー押し応答を示す。結果は、Ｓｏｍａｈｏｌ（または本明細書で開示される他の治療分子）が、中毒を防止する、および／または中毒からの回復を助けることを示唆する。
【0218】
実施例３
ＴＢＩのための動物モデル
次の実施例は、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を試験するために効果的な動物モデルに関する。最近の研究は、げっ歯類モデルが物質乱用および中毒をシミュレートできることを示した。例えば、Ｘｉｏｎｇ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２０１３ Ｆｅｂｒｕａｒｙ；１４（２）：１２８－１４２．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｒｎ３４０７を参照されたい。動物ＴＢＩモデルは、下記を含む：
・液体打撃法（Ｆｌｕｉｄ ｐｅｒｃｕｓｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ）モデル
・制御皮質衝撃損傷モデル（Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｃｏｒｔｉｃａｌ ｉｍｐａｃｔ ｉｎｊｕｒｙ ｍｏｄｅｌ）
・穿通性弾道様脳損傷モデル（Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇ ｂａｌｌｉｓｔｉｃ－ｌｉｋｅ ｂｒａｉｎ ｉｎｊｕｒｙ ｍｏｄｅｌ）
・重量落下ＴＢＩモデル（Ｗｅｉｇｈｔ ｄｒｏｐ ＴＢＩ ｍｏｄｅｌ）
・ブラストＴＢＩモデル（Ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｂｌａｓｔ ＴＢＩ）
・軽度ＴＢＩモデル（Ｍｉｌｄ ＴＢＩ ｍｏｄｅｌ）
ＴＢＩのための動物モデル
次の実施例は、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を試験するために効果的な動物モデルに関する。最近の研究は、げっ歯類モデルが物質乱用および中毒をシミュレートできることを示した。例えば、Ｘｉｏｎｇ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２０１３ Ｆｅｂｒｕａｒｙ；１４（２）：１２８－１４２．ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｒｎ３４０７を参照されたい。動物ＴＢＩモデルは、下記を含む：
・液体打撃法（Ｆｌｕｉｄ ｐｅｒｃｕｓｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ）モデル
・制御皮質衝撃損傷モデル（Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｃｏｒｔｉｃａｌ ｉｍｐａｃｔ ｉｎｊｕｒｙ ｍｏｄｅｌ）
・穿通性弾道様脳損傷モデル（Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇ ｂａｌｌｉｓｔｉｃ－ｌｉｋｅ ｂｒａｉｎ ｉｎｊｕｒｙ ｍｏｄｅｌ）
・重量落下ＴＢＩモデル（Ｗｅｉｇｈｔ ｄｒｏｐ ＴＢＩ ｍｏｄｅｌ）
・ブラストＴＢＩモデル（Ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｂｌａｓｔ ＴＢＩ）
・軽度ＴＢＩモデル（Ｍｉｌｄ ＴＢＩ ｍｏｄｅｌ）
【0219】
この実施例では、液体打撃法モデル（ＦＰＩ）が、ＦＰＩ後のラットに対するＳｏｍａｈｏｌの効果を試験するために使用される。ＦＰＩモデルでは、損傷は、開頭を介して無傷の硬膜への流体圧力パルスを生成するために振り子によるリザーバーの流体へのピストンの打撃により加えられ、それは、中央でまたは正中線のまわりのいずれかで行われる。ラットでは、ＬＦＰＩは、限局性の皮質挫傷および拡散した皮質下（海馬および視床など）のニューロン損傷の組み合わせを生成し、これは、数分の衝撃内に起こり、１２時間までにニューロン消失に進行し、損傷後７日まで、他の脳領域へ顕著に拡大しない。損傷部位下の挫傷皮質は、数週間にわたり拡大して、グリアで覆われた空洞になり、進行する細胞死のため損傷後１年間まで拡大を続ける。数日～数ヶ月にわたり、進行性変性カスケードが、同側海馬、視床、内側隔壁、線条体および扁桃体を含む、選択的に脆弱な脳領域で持続する。ＬＦＰＩは、ＴＢＩの患者で一般的に認められる運動および記憶障害などの神経行動学的（ｎｅｕｒｏｂｅｈａｖｉｏｕｒａｌ）および認知障害を生じる。認知障害および神経学的障害は、重度ＬＦＰＩ後１年を超えて持続する。
【0220】
この手法は、ＭＲＩおよび慢性行動学的後遺症で認められる組織変化、構造変化により定量される、ＬＦＰＩ文献で観察されるものに類似の急性および慢性のＴＢＩの特徴を生じる。
【0221】
この実施例で、ラットは、振り子の打撃を加えられる。ラットはその後、Ｓｏｍａｈｏｌで治療され、ＴＢＩの徴候／症状について試験される。治療されたラットの集団は、対照群と比較される。結果は、Ｓｏｍａｈｏｌ（または本明細書で開示される他の治療分子）で治療されたラットが、対照群よりも急速にＴＢＩからの回復することを示した。
【0222】
実施例４
多発性硬化症のための動物モデル
次の実施例は、多発性硬化症（ＭＳ）を試験するために効果的な動物モデルに関する。３つの最も特徴付けられたＭＳ動物モデルは、（１）実験的自己免疫性／アレルギー性脳脊髄炎（ＥＡＥ）；（２）タイラーマウス脳脊髄炎ウィルス（ＴＭＥＶ）感染症として知られるウィルス誘導慢性脱髄性疾患、および（３）毒素誘導脱髄、である。ＥＡＥは、ＭＳの自己免疫性病因をより良く反映するモデルであり、かつ潜在的実験的治療薬を試験するために有用である。ＭＳは、ＣＮＳの慢性的な免疫媒介性の炎症性疾患である（例えば、Ｆｒｏｈｍａｎ ｅｔ ａｌ．，２００６を参照）。ＭＳの最も試験された動物モデルは、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）であり、そこではＣＮＳ成分に対する自己免疫が、塩基性ミエリンタンパク質由来の自己抗原による免疫化を介して感受性マウスにおいて誘導される。
多発性硬化症のための動物モデル
次の実施例は、多発性硬化症（ＭＳ）を試験するために効果的な動物モデルに関する。３つの最も特徴付けられたＭＳ動物モデルは、（１）実験的自己免疫性／アレルギー性脳脊髄炎（ＥＡＥ）；（２）タイラーマウス脳脊髄炎ウィルス（ＴＭＥＶ）感染症として知られるウィルス誘導慢性脱髄性疾患、および（３）毒素誘導脱髄、である。ＥＡＥは、ＭＳの自己免疫性病因をより良く反映するモデルであり、かつ潜在的実験的治療薬を試験するために有用である。ＭＳは、ＣＮＳの慢性的な免疫媒介性の炎症性疾患である（例えば、Ｆｒｏｈｍａｎ ｅｔ ａｌ．，２００６を参照）。ＭＳの最も試験された動物モデルは、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）であり、そこではＣＮＳ成分に対する自己免疫が、塩基性ミエリンタンパク質由来の自己抗原による免疫化を介して感受性マウスにおいて誘導される。
【0223】
この実施例で、ＥＡＥは、タンパク質またはペプチドによる能動免疫化を介して、または脳炎惹起性Ｔ細胞の受動的導入により、誘導される。いずれの場合も、関連する免疫原は、ミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）、プロテオリピドタンパク質（ＰＬＰ）またはミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質（ＭＯＧ）などの自己ＣＮＳタンパク質由来である。ＰＬＰの免疫優性エピトープ（ＰＬＰ１３９－１５１）によるＳＪＬ／Ｊマウスの免疫化は、再発寛解型（ＲＲ）疾患経過を誘導し（例えば、Ｔｕｏｈｙ ｅｔ ａｌ．，１９８９を参照）、一方でＣ５７Ｂｌ６／Ｊマウスで免疫優性ＭＯＧ３５－５５ペプチドにより誘導される疾患は、慢性的な性質のものである。
【0224】
この実施例では、ラットが対象であり、ＥＡＥが、２つのラット集団で誘導される。第１の集団はまた、Ｓｏｍａｈｏｌ（または本明細書で開示される他の治療分子）で治療され、第２の集団（即ち、対照）は、未治療のままにされるか、または生理食塩水を注射される。治療されるラットの集団は、ＭＳの徴候／症状（例えば、炎症）に関し、対照群と比較される。結果は、Ｓｏｍａｈｏｌで治療したラットが、より重篤でないＭＳの徴候／症状を示すことを実証した。これは、Ｓｏｍａｈｏｌ（または本明細書で開示される他の治療分子）が、自己免疫および関連障害に耐性を付与することを示唆する。
【0225】
実施例５
５－ＨＴ２ＡヒトセロトニンＧＰＣＲ細胞ベースのアゴニストアレスチンアッセイ
本実施例は、ＧＰＣＲ細胞ベースのアッセイで決定される、安定に遺伝子導入されたＵ２ＯＳ細胞におけるヒト５－ＨＴ２Ａ受容体に対する化合物の効力（ＥＣ５０）および有効性（最大応答）を評価するために実施された。
５－ＨＴ２ＡヒトセロトニンＧＰＣＲ細胞ベースのアゴニストアレスチンアッセイ
本実施例は、ＧＰＣＲ細胞ベースのアッセイで決定される、安定に遺伝子導入されたＵ２ＯＳ細胞におけるヒト５－ＨＴ２Ａ受容体に対する化合物の効力（ＥＣ５０）および有効性（最大応答）を評価するために実施された。
【0226】
最初に、細胞を、ホワイトウオール３８４ウエルマイクロプレートに合計体積２０μＬで播種し、３７℃で一晩インキュベートした後、試験した。アゴニスト測定のために、細胞を、試料とインキュベートして、応答を誘導した。試料ストックの中間希釈を行って、アッセイ緩衝液中で５ｘ試料を生成した。５μＬの５ｘ試料を、細胞に加え、３７℃で１２０分間インキュベートした。最終アッセイビークル濃度は、１％であった。結果は、対照リガンドの最大応答に対するパーセント有効性として表される。アッセイ体積は、３８４ウェルプレート中の２０μｌであった。化合物を、５μｌの５ｘ化合物の量で加え、化合物が元々ＤＭＳＯ中である場合、溶媒中で１００ｘに希釈した。アッセイを、最大許容ＤＭＳＯ濃度が１％であるように実施した。アッセイを、３７℃で１２０分間実施した。基準アゴニストは、セロトニンであった。
【0227】
結果を図１１に示す。５－ＨＴ２Ａ受容体外部タンパク質のアミノ酸配列は、配列番号１である：
アミノ酸配列（細胞外部分１－７５、１３３－１４８、２１６－２３３、３４７－３６２ －＞ ＰＤＺドメイン４６９－４７１ －＞ アゴニズムもまた、１５５－１６０、３３６－３４０で示される）
１０ ２０ ３０
ＭＤＩＬＣＥＥＮＴＳ ＬＳＳＴＴＮＳＬＭＱ ＬＮＤＤＴＲＬＹＳＮ
４０ ５０ ６０
ＤＦＮＳＧＥＡＮＴＳ ＤＡＦＮＷＴＶＤＳＥ ＮＲＴＮＬＳＣＥＧＣ
７０ ８０ ９０
ＬＳＰＳＣＬＳＬＬＨ ＬＱＥＫＮＷＳＡＬＬ ＴＡＶＶＩＩＬＴＩＡ
１００ １１０ １２０
ＧＮＩＬＶＩＭＡＶＳ ＬＥＫＫＬＱＮＡＴＮ ＹＦＬＭＳＬＡＩＡＤ
１３０ １４０ １５０
ＭＬＬＧＦＬＶＭＰＶ ＳＭＬＴＩＬＹＧＹＲ ＷＰＬＰＳＫＬＣＡＶ
１６０ １７０ １８０
ＷＩＹＬＤＶＬＦＳＴ ＡＳＩＭＨＬＣＡＩＳ ＬＤＲＹＶＡＩＱＮＰ
１９０ ２００ ２１０
ＩＨＨＳＲＦＮＳＲＴ ＫＡＦＬＫＩＩＡＶＷ ＴＩＳＶＧＩＳＭＰＩ
２２０ ２３０ ２４０
ＰＶＦＧＬＱＤＤＳＫ ＶＦＫＥＧＳＣＬＬＡ ＤＤＮＦＶＬＩＧＳＦ
２５０ ２６０ ２７０
ＶＳＦＦＩＰＬＴＩＭ ＶＩＴＹＦＬＴＩＫＳ ＬＱＫＥＡＴＬＣＶＳ
２８０ ２９０ ３００
ＤＬＧＴＲＡＫＬＡＳ ＦＳＦＬＰＱＳＳＬＳ ＳＥＫＬＦＱＲＳＩＨ
３１０ ３２０ ３３０
ＲＥＰＧＳＹＴＧＲＲ ＴＭＱＳＩＳＮＥＱＫ ＡＣＫＶＬＧＩＶＦＦ
３４０ ３５０ ３６０
ＬＦＶＶＭＷＣＰＦＦ ＩＴＮＩＭＡＶＩＣＫ ＥＳＣＮＥＤＶＩＧＡ
３７０ ３８０ ３９０
ＬＬＮＶＦＶＷＩＧＹ ＬＳＳＡＶＮＰＬＶＹ ＴＬＦＮＫＴＹＲＳＡ
４００ ４１０ ４２０
ＦＳＲＹＩＱＣＱＹＫ ＥＮＫＫＰＬＱＬＩＬ ＶＮＴＩＰＡＬＡＹＫ
４３０ ４４０ ４５０
ＳＳＱＬＱＭＧＱＫＫ ＮＳＫＱＤＡＫＴＴＤ ＮＤＣＳＭＶＡＬＧＫ
４６０ ４７０
ＱＨＳＥＥＡＳＫＤＮ ＳＤＧＶＮＥＫＶＳＣ Ｖ
アミノ酸配列（細胞外部分１－７５、１３３－１４８、２１６－２３３、３４７－３６２ －＞ ＰＤＺドメイン４６９－４７１ －＞ アゴニズムもまた、１５５－１６０、３３６－３４０で示される）
１０ ２０ ３０
ＭＤＩＬＣＥＥＮＴＳ ＬＳＳＴＴＮＳＬＭＱ ＬＮＤＤＴＲＬＹＳＮ
４０ ５０ ６０
ＤＦＮＳＧＥＡＮＴＳ ＤＡＦＮＷＴＶＤＳＥ ＮＲＴＮＬＳＣＥＧＣ
７０ ８０ ９０
ＬＳＰＳＣＬＳＬＬＨ ＬＱＥＫＮＷＳＡＬＬ ＴＡＶＶＩＩＬＴＩＡ
１００ １１０ １２０
ＧＮＩＬＶＩＭＡＶＳ ＬＥＫＫＬＱＮＡＴＮ ＹＦＬＭＳＬＡＩＡＤ
１３０ １４０ １５０
ＭＬＬＧＦＬＶＭＰＶ ＳＭＬＴＩＬＹＧＹＲ ＷＰＬＰＳＫＬＣＡＶ
１６０ １７０ １８０
ＷＩＹＬＤＶＬＦＳＴ ＡＳＩＭＨＬＣＡＩＳ ＬＤＲＹＶＡＩＱＮＰ
１９０ ２００ ２１０
ＩＨＨＳＲＦＮＳＲＴ ＫＡＦＬＫＩＩＡＶＷ ＴＩＳＶＧＩＳＭＰＩ
２２０ ２３０ ２４０
ＰＶＦＧＬＱＤＤＳＫ ＶＦＫＥＧＳＣＬＬＡ ＤＤＮＦＶＬＩＧＳＦ
２５０ ２６０ ２７０
ＶＳＦＦＩＰＬＴＩＭ ＶＩＴＹＦＬＴＩＫＳ ＬＱＫＥＡＴＬＣＶＳ
２８０ ２９０ ３００
ＤＬＧＴＲＡＫＬＡＳ ＦＳＦＬＰＱＳＳＬＳ ＳＥＫＬＦＱＲＳＩＨ
３１０ ３２０ ３３０
ＲＥＰＧＳＹＴＧＲＲ ＴＭＱＳＩＳＮＥＱＫ ＡＣＫＶＬＧＩＶＦＦ
３４０ ３５０ ３６０
ＬＦＶＶＭＷＣＰＦＦ ＩＴＮＩＭＡＶＩＣＫ ＥＳＣＮＥＤＶＩＧＡ
３７０ ３８０ ３９０
ＬＬＮＶＦＶＷＩＧＹ ＬＳＳＡＶＮＰＬＶＹ ＴＬＦＮＫＴＹＲＳＡ
４００ ４１０ ４２０
ＦＳＲＹＩＱＣＱＹＫ ＥＮＫＫＰＬＱＬＩＬ ＶＮＴＩＰＡＬＡＹＫ
４３０ ４４０ ４５０
ＳＳＱＬＱＭＧＱＫＫ ＮＳＫＱＤＡＫＴＴＤ ＮＤＣＳＭＶＡＬＧＫ
４６０ ４７０
ＱＨＳＥＥＡＳＫＤＮ ＳＤＧＶＮＥＫＶＳＣ Ｖ
【0228】
実施例６
５－ＨＴ６ヒトセロトニンＧＰＣＲ細胞ベースのアゴニストアレスチンアッセイ
本実施例は、ＧＰＣＲ細胞ベースのアッセイで決定される、安定に遺伝子導入されたＤＬＤ１細胞中におけるヒト５－ＨＴ６受容体に対する化合物の効力（ＥＣ５０）および有効性（最大応答）を評価するために実施された。
５－ＨＴ６ヒトセロトニンＧＰＣＲ細胞ベースのアゴニストアレスチンアッセイ
本実施例は、ＧＰＣＲ細胞ベースのアッセイで決定される、安定に遺伝子導入されたＤＬＤ１細胞中におけるヒト５－ＨＴ６受容体に対する化合物の効力（ＥＣ５０）および有効性（最大応答）を評価するために実施された。
【0229】
最初に、細胞を、ホワイトウオール３８４ウエルマイクロプレートに合計体積２０μＬで播種し、３７℃で一晩インキュベートした後、試験した。アゴニスト測定のために、細胞を、試料とインキュベートして、応答を誘導した。試料ストックの中間希釈を行って、アッセイ緩衝液中で５ｘ試料を生成した。５μＬの５ｘ試料を、細胞に加え、３７℃で１２０分間インキュベートした。最終アッセイビークル濃度は、１％であった。結果は、対照リガンドの最大応答に対するパーセント有効性として表される。アッセイ体積は、３８４ウェルプレート中の２０μｌであった。化合物を、５μｌの５ｘ化合物の量で加え、化合物が元々ＤＭＳＯ中である場合、溶媒中で１００ｘに希釈した。アッセイを、最大許容ＤＭＳＯ濃度が１％であるように実施した。アッセイを、３７℃で１２０分間実施した。基準アゴニストは、セロトニン／５－ＨＴであった。結果を図１２に示す。
【0230】
実施例７
ＴＲＫＢヒトＲＴＫキナーゼ細胞ベースのアゴニスト機能アッセイ
本実施例はＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ受容体型チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）細胞ベースのアッセイで決定される、、安定に遺伝子導入されたＵ２ＯＳ細胞におけるヒトＴｒｋＢ受容体に対する化合物の効力（ＥＣ５０）および有効性（最大応答）を評価するために実施された。
ＴＲＫＢヒトＲＴＫキナーゼ細胞ベースのアゴニスト機能アッセイ
本実施例はＰａｔｈＨｕｎｔｅｒ受容体型チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）細胞ベースのアッセイで決定される、、安定に遺伝子導入されたＵ２ＯＳ細胞におけるヒトＴｒｋＢ受容体に対する化合物の効力（ＥＣ５０）および有効性（最大応答）を評価するために実施された。
【0231】
最初に、細胞を、ホワイトウオール３８４ウエルマイクロプレートに合計体積２０μＬで播種し、３７℃で一晩インキュベートした後、試験した。アゴニスト測定のために、細胞を、試料とインキュベートして、応答を誘導した。試料ストックの中間希釈を行って、アッセイ緩衝液中で５ｘ試料を生成した。５μＬの５ｘ試料を、細胞に加え、３７℃で１２０分間インキュベートした。最終アッセイビークル濃度は、１％であった。結果は、対照リガンドの最大応答に対するパーセント有効性として表される。アッセイ体積は、３８４ウェルプレート中の２０μｌであった。化合物を、５μｌの５ｘ化合物の量で加え、化合物が元々ＤＭＳＯ中である場合、溶媒中で１００ｘに希釈した。アッセイを、最大許容ＤＭＳＯ濃度が１％であるように実施した。アッセイを、室温で１８０分間実施した。基準アゴニストは、ＢＤＮＦであった。結果を図１３に示す。
【0232】
実施例８
５－ＨＴ７ヒトセロトニンＧＰＣＲ細胞ベースのアゴニストｃＡＭＰアッセイ
本実施例は、ＧＰＣＲ細胞ベースのｃＡＭＰアッセイで決定される、安定に遺伝子導入されたＤＬＤ１細胞におけるヒト５－ＨＴ７受容体に対する化合物の効力（ＥＣ５０）および有効性（最大応答）を評価するために実施された。
５－ＨＴ７ヒトセロトニンＧＰＣＲ細胞ベースのアゴニストｃＡＭＰアッセイ
本実施例は、ＧＰＣＲ細胞ベースのｃＡＭＰアッセイで決定される、安定に遺伝子導入されたＤＬＤ１細胞におけるヒト５－ＨＴ７受容体に対する化合物の効力（ＥＣ５０）および有効性（最大応答）を評価するために実施された。
【0233】
最初に、細胞を、ホワイトウオール３８４ウエルマイクロプレートに合計体積１５μＬで播種し、３７℃で一晩インキュベートした後、試験した。測定の前に、細胞播種培地を、１５μＬのアッセイ緩衝液（ＨＢＳＳ＋１０ｍＭのＨＥＰＥＳ）と交換した。手短に説明すると、試料ストックの中間希釈を行って、アッセイ緩衝液中で４ｘ試料を生成した。５μＬの４ｘ試料を、細胞に加え、３７℃で３０分間インキュベートした。最終アッセイビークル濃度は、１％であった。結果は、対照リガンドの最大応答に対するパーセント有効性として表される。
【0234】
アッセイ体積は、３８４ウェルプレート中の２０μｌであった。化合物を、５μｌの４ｘ化合物の量で加え、化合物が元々ＤＭＳＯ中である場合、溶媒中で１００ｘに希釈した。アッセイを、最大許容ＤＭＳＯ濃度が１％であるように実施した。アッセイを３７℃で３０分間実施した。基準アゴニストは、セロトニン／５－ＨＴであった。
【0235】
結果を図１４に示す。５－ＨＴ７受容体外部タンパク質のアミノ酸配列は、配列番号２である：
アミノ酸配列（細胞外部分１－８３、１３９－１５７、２２３－２３６、３４７－３６７ －＞ 全ての外部部位でまたはその間で可能なＰＤＺドメイン）：
１０ ２０ ３０
ＭＭＤＶＮＳＳＧＲＰ ＤＬＹＧＨＬＲＳＦＬ ＬＰＥＶＧＲＧＬＰＤ
４０ ５０ ６０
ＬＳＰＤＧＧＡＤＰＶ ＡＧＳＷＡＰＨＬＬＳ ＥＶＴＡＳＰＡＰＴＷ
７０ ８０ ９０
ＤＡＰＰＤＮＡＳＧＣ ＧＥＱＩＮＹＧＲＶＥ ＫＶＶＩＧＳＩＬＴＬ
１００ １１０ １２０
ＩＴＬＬＴＩＡＧＮＣ ＬＶＶＩＳＶＣＦＶＫ ＫＬＲＱＰＳＮＹＬＩ
１３０ １４０ １５０
ＶＳＬＡＬＡＤＬＳＶ ＡＶＡＶＭＰＦＶＳＶ ＴＤＬＩＧＧＫＷＩＦ
１６０ １７０ １８０
ＧＨＦＦＣＮＶＦＩＡ ＭＤＶＭＣＣＴＡＳＩ ＭＴＬＣＶＩＳＩＤＲ
１９０ ２００ ２１０
ＹＬＧＩＴＲＰＬＴＹ ＰＶＲＱＮＧＫＣＭＡ ＫＭＩＬＳＶＷＬＬＳ
２２０ ２３０ ２４０
ＡＳＩＴＬＰＰＬＦＧ ＷＡＱＮＶＮＤＤＫＶ ＣＬＩＳＱＤＦＧＹＴ
２５０ ２６０ ２７０
ＩＹＳＴＡＶＡＦＹＩ ＰＭＳＶＭＬＦＭＹＹ ＱＩＹＫＡＡＲＫＳＡ
２８０ ２９０ ３００
ＡＫＨＫＦＰＧＦＰＲ ＶＥＰＤＳＶＩＡＬＮ ＧＩＶＫＬＱＫＥＶＥ
３１０ ３２０ ３３０
ＥＣＡＮＬＳＲＬＬＫ ＨＥＲＫＮＩＳＩＦＫ ＲＥＱＫＡＡＴＴＬＧ
３４０ ３５０ ３６０
ＩＩＶＧＡＦＴＶＣＷ ＬＰＦＦＬＬＳＴＡＲ ＰＦＩＣＧＴＳＣＳＣ
３７０ ３８０ ３９０
ＩＰＬＷＶＥＲＴＦＬ ＷＬＧＹＡＮＳＬＩＮ ＰＦＩＹＡＦＦＮＲＤ
４００ ４１０ ４２０
ＬＲＴＴＹＲＳＬＬＱ ＣＱＹＲＮＩＮＲＫＬ ＳＡＡＧＭＨＥＡＬＫ
４３０ ４４０ ４５０
ＬＡＥＲＰＥＲＰＥＦ ＶＬＲＡＣＴＲＲＶＬ ＬＲＰＥＫＲＰＰＶＳ
４６０ ４７０
ＶＷＶＬＱＳＰＤＨＨ ＮＷＬＡＤＫＭＬＴＴ ＶＥＫＫＶＭＩＨＤ
アミノ酸配列（細胞外部分１－８３、１３９－１５７、２２３－２３６、３４７－３６７ －＞ 全ての外部部位でまたはその間で可能なＰＤＺドメイン）：
１０ ２０ ３０
ＭＭＤＶＮＳＳＧＲＰ ＤＬＹＧＨＬＲＳＦＬ ＬＰＥＶＧＲＧＬＰＤ
４０ ５０ ６０
ＬＳＰＤＧＧＡＤＰＶ ＡＧＳＷＡＰＨＬＬＳ ＥＶＴＡＳＰＡＰＴＷ
７０ ８０ ９０
ＤＡＰＰＤＮＡＳＧＣ ＧＥＱＩＮＹＧＲＶＥ ＫＶＶＩＧＳＩＬＴＬ
１００ １１０ １２０
ＩＴＬＬＴＩＡＧＮＣ ＬＶＶＩＳＶＣＦＶＫ ＫＬＲＱＰＳＮＹＬＩ
１３０ １４０ １５０
ＶＳＬＡＬＡＤＬＳＶ ＡＶＡＶＭＰＦＶＳＶ ＴＤＬＩＧＧＫＷＩＦ
１６０ １７０ １８０
ＧＨＦＦＣＮＶＦＩＡ ＭＤＶＭＣＣＴＡＳＩ ＭＴＬＣＶＩＳＩＤＲ
１９０ ２００ ２１０
ＹＬＧＩＴＲＰＬＴＹ ＰＶＲＱＮＧＫＣＭＡ ＫＭＩＬＳＶＷＬＬＳ
２２０ ２３０ ２４０
ＡＳＩＴＬＰＰＬＦＧ ＷＡＱＮＶＮＤＤＫＶ ＣＬＩＳＱＤＦＧＹＴ
２５０ ２６０ ２７０
ＩＹＳＴＡＶＡＦＹＩ ＰＭＳＶＭＬＦＭＹＹ ＱＩＹＫＡＡＲＫＳＡ
２８０ ２９０ ３００
ＡＫＨＫＦＰＧＦＰＲ ＶＥＰＤＳＶＩＡＬＮ ＧＩＶＫＬＱＫＥＶＥ
３１０ ３２０ ３３０
ＥＣＡＮＬＳＲＬＬＫ ＨＥＲＫＮＩＳＩＦＫ ＲＥＱＫＡＡＴＴＬＧ
３４０ ３５０ ３６０
ＩＩＶＧＡＦＴＶＣＷ ＬＰＦＦＬＬＳＴＡＲ ＰＦＩＣＧＴＳＣＳＣ
３７０ ３８０ ３９０
ＩＰＬＷＶＥＲＴＦＬ ＷＬＧＹＡＮＳＬＩＮ ＰＦＩＹＡＦＦＮＲＤ
４００ ４１０ ４２０
ＬＲＴＴＹＲＳＬＬＱ ＣＱＹＲＮＩＮＲＫＬ ＳＡＡＧＭＨＥＡＬＫ
４３０ ４４０ ４５０
ＬＡＥＲＰＥＲＰＥＦ ＶＬＲＡＣＴＲＲＶＬ ＬＲＰＥＫＲＰＰＶＳ
４６０ ４７０
ＶＷＶＬＱＳＰＤＨＨ ＮＷＬＡＤＫＭＬＴＴ ＶＥＫＫＶＭＩＨＤ
【0236】
実施例９
５－ＨＴ２ＢヒトセロトニンＧＰＣＲ細胞ベースのアゴニストカルシウムフラックスアッセイ
本実施例は、安定に遺伝子導入されたＨＥＫ２９３細胞におけるヒト５－ＨＴ２Ｂ受容体に対する化合物の効力（ＥＣ５０）および有効性（最大応答）を評価するために実施された。アッセイ原理は、カルシウム動員ベースアッセイである。
５－ＨＴ２ＢヒトセロトニンＧＰＣＲ細胞ベースのアゴニストカルシウムフラックスアッセイ
本実施例は、安定に遺伝子導入されたＨＥＫ２９３細胞におけるヒト５－ＨＴ２Ｂ受容体に対する化合物の効力（ＥＣ５０）および有効性（最大応答）を評価するために実施された。アッセイ原理は、カルシウム動員ベースアッセイである。
【0237】
最初に、細胞を、ホワイトウオール３８４ウエルマイクロプレートに合計体積２０μＬで播種し、３７℃で一晩インキュベートした。測定の前に、細胞播種培地を、２０μＬの色素添加液（１ｘ色素、１ｘ添加物Ａおよび２．５ｍＭのプロベネシドを含むＨＢＳＳ＋２０ｍＭのＨＥＰＥＳ）と交換した。プレートを、３７℃で４５分間インキュベートし、続いて室温で１５分間インキュベートした。
【0238】
１０μｌのアッセイ緩衝液（ＨＢＳ＋２０ｍＭのＨＥＰＥＳ）を、細胞に加えた。試料ストックの中間希釈を行って、アッセイ緩衝液中で４ｘ試料を生成した。アッセイプレート、化合物プレートを、ＦＬＩＰＲ装置にロードした。１０μＬの試料を、カルシウム測定開始の５秒後にＦＬＩＰＲオンボードロボットを用いて加えた。最終アッセイビークル濃度は、１％であった。結果は、対照リガンドの最大応答に対するパーセント有効性として表される。
【0239】
アッセイ体積は、３８４ウェルプレート中の３０μｌであった。化合物を、１０μｌの４ｘ化合物の量で加え、化合物が元々ＤＭＳＯ中である場合、溶媒中で１００ｘに希釈した。アッセイを、最大許容ＤＭＳＯ濃度が１％であるように実施した。アッセイを、３７℃で実施し、結果を、化合物が添加されると読み取った。基準アゴニストは、セロトニンであった。
【0240】
結果を図１５に示す。５－ＨＴ２Ａ受容体外部タンパク質のアミノ酸配列は、配列番号３である：
５－ＨＴ２Ｂ受容体外部タンパク質
アミノ酸配列（細胞外部分１－５６、１１４－１２９、１９３－２１６、３４６－３６０）：
１０ ２０ ３０
ＭＡＬＳＹＲＶＳＥＬ ＱＳＴＩＰＥＨＩＬＱ ＳＴＦＶＨＶＩＳＳＮ
４０ ５０ ６０
ＷＳＧＬＱＴＥＳＩＰ ＥＥＭＫＱＩＶＥＥＱ ＧＮＫＬＨＷＡＡＬＬ
７０ ８０ ９０
ＩＬＭＶＩＩＰＴＩＧ ＧＮＴＬＶＩＬＡＶＳ ＬＥＫＫＬＱＹＡＴＮ
１００ １１０ １２０
ＹＦＬＭＳＬＡＶＡＤ ＬＬＶＧＬＦＶＭＰＩ ＡＬＬＴＩＭＦＥＡＭ
１３０ １４０ １５０
ＷＰＬＰＬＶＬＣＰＡ ＷＬＦＬＤＶＬＦＳＴ ＡＳＩＭＨＬＣＡＩＳ
１６０ １７０ １８０
ＶＤＲＹＩＡＩＫＫＰ ＩＱＡＮＱＹＮＳＲＡ ＴＡＦＩＫＩＴＶＶＷ
１９０ ２００ ２１０
ＬＩＳＩＧＩＡＩＰＶ ＰＩＫＧＩＥＴＤＶＤ ＮＰＮＮＩＴＣＶＬＴ
２２０ ２３０ ２４０
ＫＥＲＦＧＤＦＭＬＦ ＧＳＬＡＡＦＦＴＰＬ ＡＩＭＩＶＴＹＦＬＴ
２５０ ２６０ ２７０
ＩＨＡＬＱＫＫＡＹＬ ＶＫＮＫＰＰＱＲＬＴ ＷＬＴＶＳＴＶＦＱＲ
２８０ ２９０ ３００
ＤＥＴＰＣＳＳＰＥＫ ＶＡＭＬＤＧＳＲＫＤ ＫＡＬＰＮＳＧＤＥＴ
３１０ ３２０ ３３０
ＬＭＲＲＴＳＴＩＧＫ ＫＳＶＱＴＩＳＮＥＱ ＲＡＳＫＶＬＧＩＶＦ
３４０ ３５０ ３６０
ＦＬＦＬＬＭＷＣＰＦ ＦＩＴＮＩＴＬＶＬＣ ＤＳＣＮＱＴＴＬＱＭ
３７０ ３８０ ３９０
ＬＬＥＩＦＶＷＩＧＹ ＶＳＳＧＶＮＰＬＶＹ ＴＬＦＮＫＴＦＲＤＡ
４００ ４１０ ４２０
ＦＧＲＹＩＴＣＮＹＲ ＡＴＫＳＶＫＴＬＲＫ ＲＳＳＫＩＹＦＲＮＰ
４３０ ４４０ ４５０
ＭＡＥＮＳＫＦＦＫＫ ＨＧＩＲＮＧＩＮＰＡ ＭＹＱＳＰＭＲＬＲＳ
４６０ ４７０ ４８０
ＳＴＩＱＳＳＳＩＩＬ ＬＤＴＬＬＬＴＥＮＥ ＧＤＫＴＥＥＱＶＳＹ Ｖ
５－ＨＴ２Ｂ受容体外部タンパク質
アミノ酸配列（細胞外部分１－５６、１１４－１２９、１９３－２１６、３４６－３６０）：
１０ ２０ ３０
ＭＡＬＳＹＲＶＳＥＬ ＱＳＴＩＰＥＨＩＬＱ ＳＴＦＶＨＶＩＳＳＮ
４０ ５０ ６０
ＷＳＧＬＱＴＥＳＩＰ ＥＥＭＫＱＩＶＥＥＱ ＧＮＫＬＨＷＡＡＬＬ
７０ ８０ ９０
ＩＬＭＶＩＩＰＴＩＧ ＧＮＴＬＶＩＬＡＶＳ ＬＥＫＫＬＱＹＡＴＮ
１００ １１０ １２０
ＹＦＬＭＳＬＡＶＡＤ ＬＬＶＧＬＦＶＭＰＩ ＡＬＬＴＩＭＦＥＡＭ
１３０ １４０ １５０
ＷＰＬＰＬＶＬＣＰＡ ＷＬＦＬＤＶＬＦＳＴ ＡＳＩＭＨＬＣＡＩＳ
１６０ １７０ １８０
ＶＤＲＹＩＡＩＫＫＰ ＩＱＡＮＱＹＮＳＲＡ ＴＡＦＩＫＩＴＶＶＷ
１９０ ２００ ２１０
ＬＩＳＩＧＩＡＩＰＶ ＰＩＫＧＩＥＴＤＶＤ ＮＰＮＮＩＴＣＶＬＴ
２２０ ２３０ ２４０
ＫＥＲＦＧＤＦＭＬＦ ＧＳＬＡＡＦＦＴＰＬ ＡＩＭＩＶＴＹＦＬＴ
２５０ ２６０ ２７０
ＩＨＡＬＱＫＫＡＹＬ ＶＫＮＫＰＰＱＲＬＴ ＷＬＴＶＳＴＶＦＱＲ
２８０ ２９０ ３００
ＤＥＴＰＣＳＳＰＥＫ ＶＡＭＬＤＧＳＲＫＤ ＫＡＬＰＮＳＧＤＥＴ
３１０ ３２０ ３３０
ＬＭＲＲＴＳＴＩＧＫ ＫＳＶＱＴＩＳＮＥＱ ＲＡＳＫＶＬＧＩＶＦ
３４０ ３５０ ３６０
ＦＬＦＬＬＭＷＣＰＦ ＦＩＴＮＩＴＬＶＬＣ ＤＳＣＮＱＴＴＬＱＭ
３７０ ３８０ ３９０
ＬＬＥＩＦＶＷＩＧＹ ＶＳＳＧＶＮＰＬＶＹ ＴＬＦＮＫＴＦＲＤＡ
４００ ４１０ ４２０
ＦＧＲＹＩＴＣＮＹＲ ＡＴＫＳＶＫＴＬＲＫ ＲＳＳＫＩＹＦＲＮＰ
４３０ ４４０ ４５０
ＭＡＥＮＳＫＦＦＫＫ ＨＧＩＲＮＧＩＮＰＡ ＭＹＱＳＰＭＲＬＲＳ
４６０ ４７０ ４８０
ＳＴＩＱＳＳＳＩＩＬ ＬＤＴＬＬＬＴＥＮＥ ＧＤＫＴＥＥＱＶＳＹ Ｖ
【0241】
実施例１０
撹乱された転写アッセイ
アッセイは、次の３つの段階で試験した神経細胞からなる：１．ベースラインの健康な細胞、２．麻酔薬により撹乱された細胞、３．治療薬リードｎ、ｎ＋１、などにより治療された細胞。
撹乱された転写アッセイ
アッセイは、次の３つの段階で試験した神経細胞からなる：１．ベースラインの健康な細胞、２．麻酔薬により撹乱された細胞、３．治療薬リードｎ、ｎ＋１、などにより治療された細胞。
【0242】
プレートｎ
－ＨＧＨを含む標準的な促進手順でニューロンを成長させる
－ＨＧＨ投与を停止し、平衡を樹立する
－細胞の１００ｕｇまたは１／３を採取し、試験管にバーコードをマークする
－ＲＮＡ ｌａｔｅｒ溶液に入れる、
－－２０℃で貯蔵する
－３７℃のインキュベーションにおいて４８時間麻酔薬で残りの細胞を刺激する
－残りの細胞の１００ｕｇまたは１／２を採取し、試験管にバーコードをマークする
－ＲＮＡ ｌａｔｅｒ溶液に入れる、
－－２０℃で貯蔵する
－細胞を洗浄する
－３７℃のインキュベーションにおいて２４時間治療標的で治療する
－残りの細胞を採取し、試験管にバーコードをマークする
－ＲＮＡ ｌａｔｅｒ溶液に入れる、
－－２０℃で貯蔵する
－ＨＧＨを含む標準的な促進手順でニューロンを成長させる
－ＨＧＨ投与を停止し、平衡を樹立する
－細胞の１００ｕｇまたは１／３を採取し、試験管にバーコードをマークする
－ＲＮＡ ｌａｔｅｒ溶液に入れる、
－－２０℃で貯蔵する
－３７℃のインキュベーションにおいて４８時間麻酔薬で残りの細胞を刺激する
－残りの細胞の１００ｕｇまたは１／２を採取し、試験管にバーコードをマークする
－ＲＮＡ ｌａｔｅｒ溶液に入れる、
－－２０℃で貯蔵する
－細胞を洗浄する
－３７℃のインキュベーションにおいて２４時間治療標的で治療する
－残りの細胞を採取し、試験管にバーコードをマークする
－ＲＮＡ ｌａｔｅｒ溶液に入れる、
－－２０℃で貯蔵する
【0243】
対照プレート
－ＨＧＨを含む標準的な促進手順でニューロンを成長させる
－ＨＧＨ投与を停止し、平衡を樹立する
－細胞の１／３または１００ｕｇを採取し、試験管にバーコードをマークする
－ＲＮＡ ｌａｔｅｒ溶液に入れる、
－－２０℃で貯蔵する
－ＨＧＨを含む標準的な促進手順でニューロンを成長させる
－ＨＧＨ投与を停止し、平衡を樹立する
－細胞の１／３または１００ｕｇを採取し、試験管にバーコードをマークする
－ＲＮＡ ｌａｔｅｒ溶液に入れる、
－－２０℃で貯蔵する
【0244】
３７℃のインキュベーションにおいて４８時間麻酔薬で残りの細胞を刺激する。その後、細胞の１００ｕｇまたは１／２を最低限採取し、試験管にバーコードをマークする。ＲＮＡ ｌａｔｅｒ溶液に入れ、－２０℃で貯蔵する。次に、細胞を洗浄し、３７℃で２４時間細胞をインキュベートする。１００μｇの細胞を採取し、試験管にバーコードをマークし、ＲＮＡ ｌａｔｅｒ溶液に入れ、－２０℃で貯蔵する。
【0245】
実施例１１
インシリコ構造スクリーニング－５ＨＴ受容体結合候補
５ＨＴ受容体結合分子の採点セットを、プロドラッグ様活性を含む合成手法をガイドするＡＩ出力を評価するために作製する。このＡＩ採点を次いで、ドッキングおよび活性と比較して、プロドラッグ、フラグメントまたは完全薬物候補としての合成のために、最も有望な分子を特定する。
インシリコ構造スクリーニング－５ＨＴ受容体結合候補
５ＨＴ受容体結合分子の採点セットを、プロドラッグ様活性を含む合成手法をガイドするＡＩ出力を評価するために作製する。このＡＩ採点を次いで、ドッキングおよび活性と比較して、プロドラッグ、フラグメントまたは完全薬物候補としての合成のために、最も有望な分子を特定する。
【0246】
ＡＵＴＯＤＯＣＫ
Ａｕｔｏｄｏｃｋを使う目的は、化合物活性と構造の間の関連性を生成することであり－これは次に、これらの構造をインシリコで評価することにより、新規薬物候補の設計に使用できる。インシリコモデルの品質をその後、Ｂｉａｃｏｒｅアッセイ、および活性と比較して、結合親和性とアゴニスト／アンタゴニスト活性の間の関連性を理解することができる。
Ａｕｔｏｄｏｃｋを使う目的は、化合物活性と構造の間の関連性を生成することであり－これは次に、これらの構造をインシリコで評価することにより、新規薬物候補の設計に使用できる。インシリコモデルの品質をその後、Ｂｉａｃｏｒｅアッセイ、および活性と比較して、結合親和性とアゴニスト／アンタゴニスト活性の間の関連性を理解することができる。
【0247】
スクリーニングは、種々の５Ｈ１結晶構造へ分子をドッキングして一連の数値スコアを生成することを含み得る。このような構造は、同じタンパク質のアゴニストおよびアンタゴニスト両方の結合分子を含み得る。
【0248】
一次標的は下記である：
－５－ＨＴ２Ａ
－５－ＨＴ２Ｂ
－５－ＨＴ７
－ＴｒｋＢ。
－５－ＨＴ２Ａ
－５－ＨＴ２Ｂ
－５－ＨＴ７
－ＴｒｋＢ。
【0249】
図１６は、各分子：Ａ１、Ｂ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１、Ｆ１、Ｇ１、Ｈ１、Ａ２、Ｂ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２、Ｆ２、Ｇ２、Ｈ２、Ａ３、Ｂ３、Ｃ３、Ｄ３およびＥ３からのアゴニストアッセイの結果の表である。
各分子は、１０μＭの濃度で試験された。示されるように、分子は、各アッセイ：アレスチン、カルシウムフラックス、アレスチン、ｃＡＭＰ、細胞ベースキナーゼ、で試験された。標的は、それぞれ、ＨＴＲ２Ａ、ＨＴＲ２Ｂ、ＨＴＲ６、ＨＴＲ７ＤおよびＴｒｋＢであった。
各分子は、１０μＭの濃度で試験された。示されるように、分子は、各アッセイ：アレスチン、カルシウムフラックス、アレスチン、ｃＡＭＰ、細胞ベースキナーゼ、で試験された。標的は、それぞれ、ＨＴＲ２Ａ、ＨＴＲ２Ｂ、ＨＴＲ６、ＨＴＲ７ＤおよびＴｒｋＢであった。
【0250】
本発明の特定の実施形態が、本発明を実施するための発明者らに既知の最良の形態を含み、本明細書に記載される。当然のことながら、ここに記載した実施形態に対する変形形態は、これまでの記載を読めば、当業者に明らかとなるであろう。発明者は、当業者が必要に応じてこのような変更を採用することを予期しており、また、発明者らは、本明細書で具体的に記載された方法とは別の方法で本発明が実施されることを意図する。従って、本発明は、適用法で認められている本明細書に添付の請求項に記載の主題の全ての変形物および等価物を含む。さらに、その全ての可能な変形物における上述の実施形態の任意の組み合わせもまた、本明細書で特に指示がない限り、または別の理由で文脈と明確に矛楯することがない限り、本出願に包含される。
【0251】
本発明の代替実施形態、要素、またはステップのグループ分けは、限定として解釈されるべきではない。各グループのメンバーは、個別に、または本明細書で開示される他のグループメンバーとの任意の組み合わせでを参照され請求されてよい。グループの１つまたは複数のメンバーが、利便性、および／または特許性の理由で、グループに含まれてよく、またはグループから除去されてよいことが予測される。何らかのこのような包含または削除が生じた場合、明細書は、修正され、従って添付の請求項で使用される全てのマーカッシュグループの記述要件を満たすグループを含むものと見なされる。
【0252】
別段の指示がない限り、本明細書および請求項で使われる特性、項目、量、パラメータ、性質、期間、などを表す全ての数字は、全ての場合において、「約」という語で修飾されるとして理解されるべきである。本明細書で使用する場合、用語の「約」は、そのように限定された、特性、項目、量、パラメータ、性質、期間が、表示された特性、項目、量、パラメータ、性質、期間の値より、プラスまたはマイナス１０％高いまたは低い範囲を包含することを意味する。従って、特に指示がない限り、明細書および添付請求項に記載の数値パラメータは、変わってもよい近似値である。控えめに言っても、また、請求項の範囲に対する均等論の適用を限定しようとするものでもないが、各々の数値表示は少なくとも、報告された有効桁数を考慮に入れて、および通常の丸め技術を適用することにより解釈されなければならない。本発明の広い範囲を記載する数値範囲および値は近似値であるにもかかわらず、具体例な実施例に記載の数値範囲および値は、可能な限り正確に報告される。いずれの数値範囲および値も、しかしながら、それらの各試験測定で認められる標準的なずれに起因して必然的に生じる一定の誤差を本質的に含む。本明細書における値の範囲の記載は、その範囲内に入るそれぞれ別々の値を個別に参照する省略表現法として機能することを意図されるに過ぎない。本明細書で特に指示がない限り、数値範囲のそれぞれの個別値は、あたかもそれが個別に本明細書中に記述されるかのように明細書中に組み込まれる。
【0253】
本発明を記載する文脈において（特に、次の請求項の文脈において）使用される用語「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」は、別段の指示がない限り、または文脈と明らかに矛盾することがない限り、単数形および複数形の両方を包含すると解釈されるべきである。本明細書で記載される全ての方法は、本明細書で別段の指示がない限り、または文脈上明らかに矛盾することがない限り、任意の好適な順序で実施されてよい。本明細書で提供されるいずれかのおよび全ての例、または例示的表現（例えば、「（など）ｓｕｃｈ ａｓ」）の使用は、単に本出願をより明らかにすると意図され、別に請求される本出願の範囲に制限を課すものではない。明細書中のどの用語も、本出願の実施に必須のいずれかの非請求要素を示すものと解釈されるべきではない。
【0254】
本明細書で開示される具体的実施形態は、～から構成される（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）、または本質的に～から構成される（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）という言い方を使って請求項中でさらに制限できる。請求項で用いられる場合、出願されたもの、または補正により追加されたものを問わず、「～からなる」という移行語は、請求項に明示されない要素、段階または成分を一切除外する。「～から実質的になる」という移行語は、明示される材料または段階および基礎となる新規な特徴に実質的には影響を及ぼさない材料または段階に請求項の範囲を限定する。そのように請求された本発明の実施形態は、本質的にまたは明示的に記載され、本明細書で可能になる。
【0255】
本発明の代替実施形態、要素、またはステップのグループ分けは、限定するとして解釈されるべきではない。各グループのメンバーは、個別に、または本明細書で開示される他のグループメンバーとの任意の組み合わせで参照され請求されてよい。グループの１つまたは複数のメンバーが、利便性および／または特許性の理由で、グループに含められるか、またはグループから除去される場合があることが予測される。何らかのこのような包含または削除が生じた場合、明細書は、修正され、従って添付の請求項で使用される全てのマーカッシュグループの記述要件を満たすグループを含むものと見なされる。
【0256】
本明細書で言及され、特定された全ての特許、特許公報、および他の出版物は、例えば、このような出版物に記載され、本発明との関係で使用可能な組成物および方法を説明し、開示するために、個別に、明示的に参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。これらの出版物は、本出願の出願日に先立つそれらの開示のためにのみ提供される。この点に関するいずれも、本発明者らが、先行発明または何らかの他の理由でこのような開示に先行する権利がないことを容認すると解釈されるべきではない。これらの文書の内容に関する日付または表現は、出願者らに入手可能な情報に基づき、かつこれらの文書の日付または内容の正確さに関して何ら承認するものではない。
【0257】
最後に、本明細書の態様は、特定の実施形態に言及することにより強調されるが、当業者は、これらの開示される実施形態は、本明細書で開示される主題の原理の例示に過ぎないことを容易に認識するであろうことを理解されたい。従って、開示される主題は、本明細書で記載の特定の方法、プロトコル、および／または試薬、などに決して限定されないことを理解されたい。従って、開示主題または開示主題の代替構成物に対する種々の修正もしくは変更が、本明細書の趣旨から逸脱することなく本明細書の教示に従い行われてよい。最後に、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを説明する目的のためであり、本発明の範囲を制限すると意図されず、本発明の範囲は請求項によってのみ規定される。従って、本発明は、正確に示され説明されるものに限定されない。
【0258】
配列表
配列番号１（５－ＨＴ２Ａ受容体外部タンパク質）
ＭＤＩＬＣＥＥＮＴＳ ＬＳＳＴＴＮＳＬＭＱ ＬＮＤＤＴＲＬＹＳＮ
ＤＦＮＳＧＥＡＮＴＳ ＤＡＦＮＷＴＶＤＳＥ ＮＲＴＮＬＳＣＥＧＣ
ＬＳＰＳＣＬＳＬＬＨ ＬＱＥＫＮＷＳＡＬＬ ＴＡＶＶＩＩＬＴＩＡ
ＧＮＩＬＶＩＭＡＶＳ ＬＥＫＫＬＱＮＡＴＮ ＹＦＬＭＳＬＡＩＡＤ
ＭＬＬＧＦＬＶＭＰＶ ＳＭＬＴＩＬＹＧＹＲ ＷＰＬＰＳＫＬＣＡＶ
ＷＩＹＬＤＶＬＦＳＴ ＡＳＩＭＨＬＣＡＩＳ ＬＤＲＹＶＡＩＱＮＰ
ＩＨＨＳＲＦＮＳＲＴ ＫＡＦＬＫＩＩＡＶＷ ＴＩＳＶＧＩＳＭＰＩ
ＰＶＦＧＬＱＤＤＳＫ ＶＦＫＥＧＳＣＬＬＡ ＤＤＮＦＶＬＩＧＳＦ
ＶＳＦＦＩＰＬＴＩＭ ＶＩＴＹＦＬＴＩＫＳ ＬＱＫＥＡＴＬＣＶＳ
ＤＬＧＴＲＡＫＬＡＳ ＦＳＦＬＰＱＳＳＬＳ ＳＥＫＬＦＱＲＳＩＨ
ＲＥＰＧＳＹＴＧＲＲ ＴＭＱＳＩＳＮＥＱＫ ＡＣＫＶＬＧＩＶＦＦ
ＬＦＶＶＭＷＣＰＦＦ ＩＴＮＩＭＡＶＩＣＫ ＥＳＣＮＥＤＶＩＧＡ
ＬＬＮＶＦＶＷＩＧＹ ＬＳＳＡＶＮＰＬＶＹ ＴＬＦＮＫＴＹＲＳＡ
ＦＳＲＹＩＱＣＱＹＫ ＥＮＫＫＰＬＱＬＩＬ ＶＮＴＩＰＡＬＡＹＫ
ＳＳＱＬＱＭＧＱＫＫ ＮＳＫＱＤＡＫＴＴＤ ＮＤＣＳＭＶＡＬＧＫ
ＱＨＳＥＥＡＳＫＤＮ ＳＤＧＶＮＥＫＶＳＣ Ｖ
配列番号２（５－ＨＴ７受容体外部タンパク質）
ＭＭＤＶＮＳＳＧＲＰ ＤＬＹＧＨＬＲＳＦＬ ＬＰＥＶＧＲＧＬＰＤ
ＬＳＰＤＧＧＡＤＰＶ ＡＧＳＷＡＰＨＬＬＳ ＥＶＴＡＳＰＡＰＴＷ
ＤＡＰＰＤＮＡＳＧＣ ＧＥＱＩＮＹＧＲＶＥ ＫＶＶＩＧＳＩＬＴＬ
ＩＴＬＬＴＩＡＧＮＣ ＬＶＶＩＳＶＣＦＶＫ ＫＬＲＱＰＳＮＹＬＩ
ＶＳＬＡＬＡＤＬＳＶ ＡＶＡＶＭＰＦＶＳＶ ＴＤＬＩＧＧＫＷＩＦ
ＧＨＦＦＣＮＶＦＩＡ ＭＤＶＭＣＣＴＡＳＩ ＭＴＬＣＶＩＳＩＤＲ
ＹＬＧＩＴＲＰＬＴＹ ＰＶＲＱＮＧＫＣＭＡ ＫＭＩＬＳＶＷＬＬＳ
ＡＳＩＴＬＰＰＬＦＧ ＷＡＱＮＶＮＤＤＫＶ ＣＬＩＳＱＤＦＧＹＴ
ＩＹＳＴＡＶＡＦＹＩ ＰＭＳＶＭＬＦＭＹＹ ＱＩＹＫＡＡＲＫＳＡ
ＡＫＨＫＦＰＧＦＰＲ ＶＥＰＤＳＶＩＡＬＮ ＧＩＶＫＬＱＫＥＶＥ
ＥＣＡＮＬＳＲＬＬＫ ＨＥＲＫＮＩＳＩＦＫ ＲＥＱＫＡＡＴＴＬＧ
ＩＩＶＧＡＦＴＶＣＷ ＬＰＦＦＬＬＳＴＡＲ ＰＦＩＣＧＴＳＣＳＣ
ＩＰＬＷＶＥＲＴＦＬ ＷＬＧＹＡＮＳＬＩＮ ＰＦＩＹＡＦＦＮＲＤ
ＬＲＴＴＹＲＳＬＬＱ ＣＱＹＲＮＩＮＲＫＬ ＳＡＡＧＭＨＥＡＬＫ
ＬＡＥＲＰＥＲＰＥＦ ＶＬＲＡＣＴＲＲＶＬ ＬＲＰＥＫＲＰＰＶＳ
ＶＷＶＬＱＳＰＤＨＨ ＮＷＬＡＤＫＭＬＴＴ ＶＥＫＫＶＭＩＨＤ
配列番号３（５－ＨＴ２Ｂ受容体外部タンパク質）
ＭＡＬＳＹＲＶＳＥＬ ＱＳＴＩＰＥＨＩＬＱ ＳＴＦＶＨＶＩＳＳＮ
ＷＳＧＬＱＴＥＳＩＰ ＥＥＭＫＱＩＶＥＥＱ ＧＮＫＬＨＷＡＡＬＬ
ＩＬＭＶＩＩＰＴＩＧ ＧＮＴＬＶＩＬＡＶＳ ＬＥＫＫＬＱＹＡＴＮ
ＹＦＬＭＳＬＡＶＡＤ ＬＬＶＧＬＦＶＭＰＩ ＡＬＬＴＩＭＦＥＡＭ
ＷＰＬＰＬＶＬＣＰＡ ＷＬＦＬＤＶＬＦＳＴ ＡＳＩＭＨＬＣＡＩＳ
ＶＤＲＹＩＡＩＫＫＰ ＩＱＡＮＱＹＮＳＲＡ ＴＡＦＩＫＩＴＶＶＷ
ＬＩＳＩＧＩＡＩＰＶ ＰＩＫＧＩＥＴＤＶＤ ＮＰＮＮＩＴＣＶＬＴ
ＫＥＲＦＧＤＦＭＬＦ ＧＳＬＡＡＦＦＴＰＬ ＡＩＭＩＶＴＹＦＬＴ
ＩＨＡＬＱＫＫＡＹＬ ＶＫＮＫＰＰＱＲＬＴ ＷＬＴＶＳＴＶＦＱＲ
ＤＥＴＰＣＳＳＰＥＫ ＶＡＭＬＤＧＳＲＫＤ ＫＡＬＰＮＳＧＤＥＴ
ＬＭＲＲＴＳＴＩＧＫ ＫＳＶＱＴＩＳＮＥＱ ＲＡＳＫＶＬＧＩＶＦ
ＦＬＦＬＬＭＷＣＰＦ ＦＩＴＮＩＴＬＶＬＣ ＤＳＣＮＱＴＴＬＱＭ
ＬＬＥＩＦＶＷＩＧＹ ＶＳＳＧＶＮＰＬＶＹ ＴＬＦＮＫＴＦＲＤＡ
ＦＧＲＹＩＴＣＮＹＲ ＡＴＫＳＶＫＴＬＲＫ ＲＳＳＫＩＹＦＲＮＰ
ＭＡＥＮＳＫＦＦＫＫ ＨＧＩＲＮＧＩＮＰＡ ＭＹＱＳＰＭＲＬＲＳ
ＳＴＩＱＳＳＳＩＩＬ ＬＤＴＬＬＬＴＥＮＥ ＧＤＫＴＥＥＱＶＳＹ
配列番号１（５－ＨＴ２Ａ受容体外部タンパク質）
ＭＤＩＬＣＥＥＮＴＳ ＬＳＳＴＴＮＳＬＭＱ ＬＮＤＤＴＲＬＹＳＮ
ＤＦＮＳＧＥＡＮＴＳ ＤＡＦＮＷＴＶＤＳＥ ＮＲＴＮＬＳＣＥＧＣ
ＬＳＰＳＣＬＳＬＬＨ ＬＱＥＫＮＷＳＡＬＬ ＴＡＶＶＩＩＬＴＩＡ
ＧＮＩＬＶＩＭＡＶＳ ＬＥＫＫＬＱＮＡＴＮ ＹＦＬＭＳＬＡＩＡＤ
ＭＬＬＧＦＬＶＭＰＶ ＳＭＬＴＩＬＹＧＹＲ ＷＰＬＰＳＫＬＣＡＶ
ＷＩＹＬＤＶＬＦＳＴ ＡＳＩＭＨＬＣＡＩＳ ＬＤＲＹＶＡＩＱＮＰ
ＩＨＨＳＲＦＮＳＲＴ ＫＡＦＬＫＩＩＡＶＷ ＴＩＳＶＧＩＳＭＰＩ
ＰＶＦＧＬＱＤＤＳＫ ＶＦＫＥＧＳＣＬＬＡ ＤＤＮＦＶＬＩＧＳＦ
ＶＳＦＦＩＰＬＴＩＭ ＶＩＴＹＦＬＴＩＫＳ ＬＱＫＥＡＴＬＣＶＳ
ＤＬＧＴＲＡＫＬＡＳ ＦＳＦＬＰＱＳＳＬＳ ＳＥＫＬＦＱＲＳＩＨ
ＲＥＰＧＳＹＴＧＲＲ ＴＭＱＳＩＳＮＥＱＫ ＡＣＫＶＬＧＩＶＦＦ
ＬＦＶＶＭＷＣＰＦＦ ＩＴＮＩＭＡＶＩＣＫ ＥＳＣＮＥＤＶＩＧＡ
ＬＬＮＶＦＶＷＩＧＹ ＬＳＳＡＶＮＰＬＶＹ ＴＬＦＮＫＴＹＲＳＡ
ＦＳＲＹＩＱＣＱＹＫ ＥＮＫＫＰＬＱＬＩＬ ＶＮＴＩＰＡＬＡＹＫ
ＳＳＱＬＱＭＧＱＫＫ ＮＳＫＱＤＡＫＴＴＤ ＮＤＣＳＭＶＡＬＧＫ
ＱＨＳＥＥＡＳＫＤＮ ＳＤＧＶＮＥＫＶＳＣ Ｖ
配列番号２（５－ＨＴ７受容体外部タンパク質）
ＭＭＤＶＮＳＳＧＲＰ ＤＬＹＧＨＬＲＳＦＬ ＬＰＥＶＧＲＧＬＰＤ
ＬＳＰＤＧＧＡＤＰＶ ＡＧＳＷＡＰＨＬＬＳ ＥＶＴＡＳＰＡＰＴＷ
ＤＡＰＰＤＮＡＳＧＣ ＧＥＱＩＮＹＧＲＶＥ ＫＶＶＩＧＳＩＬＴＬ
ＩＴＬＬＴＩＡＧＮＣ ＬＶＶＩＳＶＣＦＶＫ ＫＬＲＱＰＳＮＹＬＩ
ＶＳＬＡＬＡＤＬＳＶ ＡＶＡＶＭＰＦＶＳＶ ＴＤＬＩＧＧＫＷＩＦ
ＧＨＦＦＣＮＶＦＩＡ ＭＤＶＭＣＣＴＡＳＩ ＭＴＬＣＶＩＳＩＤＲ
ＹＬＧＩＴＲＰＬＴＹ ＰＶＲＱＮＧＫＣＭＡ ＫＭＩＬＳＶＷＬＬＳ
ＡＳＩＴＬＰＰＬＦＧ ＷＡＱＮＶＮＤＤＫＶ ＣＬＩＳＱＤＦＧＹＴ
ＩＹＳＴＡＶＡＦＹＩ ＰＭＳＶＭＬＦＭＹＹ ＱＩＹＫＡＡＲＫＳＡ
ＡＫＨＫＦＰＧＦＰＲ ＶＥＰＤＳＶＩＡＬＮ ＧＩＶＫＬＱＫＥＶＥ
ＥＣＡＮＬＳＲＬＬＫ ＨＥＲＫＮＩＳＩＦＫ ＲＥＱＫＡＡＴＴＬＧ
ＩＩＶＧＡＦＴＶＣＷ ＬＰＦＦＬＬＳＴＡＲ ＰＦＩＣＧＴＳＣＳＣ
ＩＰＬＷＶＥＲＴＦＬ ＷＬＧＹＡＮＳＬＩＮ ＰＦＩＹＡＦＦＮＲＤ
ＬＲＴＴＹＲＳＬＬＱ ＣＱＹＲＮＩＮＲＫＬ ＳＡＡＧＭＨＥＡＬＫ
ＬＡＥＲＰＥＲＰＥＦ ＶＬＲＡＣＴＲＲＶＬ ＬＲＰＥＫＲＰＰＶＳ
ＶＷＶＬＱＳＰＤＨＨ ＮＷＬＡＤＫＭＬＴＴ ＶＥＫＫＶＭＩＨＤ
配列番号３（５－ＨＴ２Ｂ受容体外部タンパク質）
ＭＡＬＳＹＲＶＳＥＬ ＱＳＴＩＰＥＨＩＬＱ ＳＴＦＶＨＶＩＳＳＮ
ＷＳＧＬＱＴＥＳＩＰ ＥＥＭＫＱＩＶＥＥＱ ＧＮＫＬＨＷＡＡＬＬ
ＩＬＭＶＩＩＰＴＩＧ ＧＮＴＬＶＩＬＡＶＳ ＬＥＫＫＬＱＹＡＴＮ
ＹＦＬＭＳＬＡＶＡＤ ＬＬＶＧＬＦＶＭＰＩ ＡＬＬＴＩＭＦＥＡＭ
ＷＰＬＰＬＶＬＣＰＡ ＷＬＦＬＤＶＬＦＳＴ ＡＳＩＭＨＬＣＡＩＳ
ＶＤＲＹＩＡＩＫＫＰ ＩＱＡＮＱＹＮＳＲＡ ＴＡＦＩＫＩＴＶＶＷ
ＬＩＳＩＧＩＡＩＰＶ ＰＩＫＧＩＥＴＤＶＤ ＮＰＮＮＩＴＣＶＬＴ
ＫＥＲＦＧＤＦＭＬＦ ＧＳＬＡＡＦＦＴＰＬ ＡＩＭＩＶＴＹＦＬＴ
ＩＨＡＬＱＫＫＡＹＬ ＶＫＮＫＰＰＱＲＬＴ ＷＬＴＶＳＴＶＦＱＲ
ＤＥＴＰＣＳＳＰＥＫ ＶＡＭＬＤＧＳＲＫＤ ＫＡＬＰＮＳＧＤＥＴ
ＬＭＲＲＴＳＴＩＧＫ ＫＳＶＱＴＩＳＮＥＱ ＲＡＳＫＶＬＧＩＶＦ
ＦＬＦＬＬＭＷＣＰＦ ＦＩＴＮＩＴＬＶＬＣ ＤＳＣＮＱＴＴＬＱＭ
ＬＬＥＩＦＶＷＩＧＹ ＶＳＳＧＶＮＰＬＶＹ ＴＬＦＮＫＴＦＲＤＡ
ＦＧＲＹＩＴＣＮＹＲ ＡＴＫＳＶＫＴＬＲＫ ＲＳＳＫＩＹＦＲＮＰ
ＭＡＥＮＳＫＦＦＫＫ ＨＧＩＲＮＧＩＮＰＡ ＭＹＱＳＰＭＲＬＲＳ
ＳＴＩＱＳＳＳＩＩＬ ＬＤＴＬＬＬＴＥＮＥ ＧＤＫＴＥＥＱＶＳＹ
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16-1】
【図16-2】
【図16-3】
【図16-4】
【配列表】
【国際調査報告】