特表 2025-500413 バース症候群を治療するための方法及び組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2025-01-09

(54)【発明の名称】バース症候群を治療するための方法及び組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 45/00 20060101AFI20241226BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20241226BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20241226BHJP

   A61K 31/436 20060101ALI20241226BHJP

   A61K 38/16 20060101ALI20241226BHJP

   A61P 37/02 20060101ALI20241226BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20241226BHJP

   C07K 16/46 20060101ALI20241226BHJP

   C07K 16/28 20060101ALI20241226BHJP

   C12N 15/864 20060101ALN20241226BHJP

   C12N 5/10 20060101ALN20241226BHJP

   C12N 9/10 20060101ALN20241226BHJP

【ＦＩ】

A61K45/00

A61K48/00

A61K39/395 N

A61K31/436

A61K38/16

A61P37/02

A61P43/00 105

A61P43/00 121

C07K16/46 ZNA

C07K16/28

C12N15/864 100Z

C12N5/10

C12N9/10

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024537897

(86)(22)【出願日】2022-12-23

(85)【翻訳文提出日】2024-07-09

(86)【国際出願番号】 US2022082367

(87)【国際公開番号】W WO2023122798

(87)【国際公開日】2023-06-29

(31)【優先権主張番号】63/293,514

(32)【優先日】2021-12-23

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】521155829

【氏名又は名称】プロヴェンション・バイオ・インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】ＰＲＯＶＥＮＴＩＯＮ ＢＩＯ， ＩＮＣ．

(71)【出願人】

【識別番号】500360769

【氏名又は名称】ユニバーシティ オブ フロリダ リサーチ ファウンデーション，インコーポレイティド

(74)【代理人】

【識別番号】100127926

【弁理士】

【氏名又は名称】結田 純次

(74)【代理人】

【識別番号】100216105

【弁理士】

【氏名又は名称】守安 智

(72)【発明者】

【氏名】フランシスコ・レオン

(72)【発明者】

【氏名】ポール・ダンフォード

(72)【発明者】

【氏名】ダイアナ・ミラー

(72)【発明者】

【氏名】バリー・ジョン・バーン

(72)【発明者】

【氏名】マヌエラ・コルティ

【テーマコード（参考）】

4B065

4C084

4C085

4C086

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B065AA90X

4B065AA90Y

4B065AA95Y

4B065AB01

4B065AC14

4B065AC20

4B065BA02

4B065CA29

4B065CA44

4C084AA02

4C084AA03

4C084AA13

4C084AA17

4C084AA19

4C084BA01

4C084BA41

4C084BA44

4C084MA02

4C084NA05

4C084NA14

4C084ZB072

4C084ZB21

4C084ZC51

4C084ZC75

4C085AA14

4C085BB11

4C085CC23

4C085EE01

4C085EE03

4C086AA01

4C086AA02

4C086CB22

4C086MA04

4C086NA05

4C086NA14

4C086ZB07

4C086ZC51

4C086ZC75

4H045AA11

4H045AA30

4H045BA10

4H045BA40

4H045CA40

4H045DA75

4H045EA20

4H045FA74

(57)【要約】

本明細書では、一態様において、ＢＴＨＳ遺伝子治療を受けている又は受けたことがある患者に、非枯渇性である有効量のＢ細胞阻害剤を投与することを含む、免疫原性を低下させる方法が開示される。関連する組成物も提供される。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

バース症候群（ＢＴＨＳ）の遺伝子治療に関連する免疫原性を低下させる方法であって、ＢＴＨＳ遺伝子治療を受けている又は受けたことがある患者に、非枯渇性である有効量のＢ細胞阻害剤を投与することを含む、方法。

【請求項2】

前記ＢＴＨＳ遺伝子治療が、ＴＡＦＡＺＺＩＮ導入遺伝子をコードする組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクターを有する遺伝子組換え細胞を前記患者に投与することを含む、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記Ｂ細胞阻害剤が、ＣＤ３２Ｂのエピトープ及びＣＤ７９Ｂのエピトープを免疫特異的に結合することができるＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体である、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

前記ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体が、
（Ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＬ_{ＣＤ３２Ｂ}ドメイン；
（Ｂ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ_{ＣＤ３２Ｂ}ドメイン；
（Ｃ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＬ_{ＣＤ７９Ｂ}ドメイン；及び
（Ｄ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ_{ＣＤ７９Ｂ}ドメイン
を含む、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

前記ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体が、
（Ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖；
（Ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；及び
（Ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含む第３のポリペプチド鎖
を含むＦｃダイアボディである、請求項４に記載の方法。

【請求項6】

前記Ｆｃダイアボディを、約５ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ、又は約５ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇ、又は約５ｍｇ／ｋｇ～約４０ｍｇ／ｋｇの用量で、週に１回の用量～６週間に１回の用量の投与レジメンで投与することを含む、請求項５に記載の方法。

【請求項7】

前記Ｆｃダイアボディを約１０ｍｇ／ｋｇの用量で、及び１～４週間に１回の用量の投与レジメンで投与することを含む、請求項５に記載の方法。

【請求項8】

約１０ｍｇ／ｋｇの用量で、第１のＢＴＨＳ遺伝子治療送達の１週間前、第１のＢＴＨＳ遺伝子治療送達の２週間後、及び第２のＢＴＨＳ遺伝子治療送達の３～４週間後に、３用量のＦｃダイアボディを投与することを含む、請求項５に記載の方法。

【請求項9】

前記ＢＴＨＳ遺伝子治療の投与の約２日～約６週間前に第１の用量を投与し、前記ＢＴＨＳ遺伝子治療の投与とほぼ同時に第２の用量を投与し、前記ＢＴＨＳ遺伝子治療の投与の約２日～約６週間後に第３の用量を投与することを含む、請求項８に記載の方法。

【請求項10】

前記Ｆｃダイアボディが、投与時にそれ自体の免疫原性の阻害をもたらし、増加した用量での抗薬物抗体（ＡＤＡ）のより低い有病率及び／又は力価を有する、請求項５に記載の方法。

【請求項11】

前記ＡＤＡが前記Ｆｃダイアボディを中和しない、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

前記Ｆｃダイアボディが、用量依存的な様式で、投与時に少なくとも８０％のＢ細胞に結合し、最後の投与後少なくとも４週間、前記Ｂ細胞の少なくとも５０％に結合したままである、請求項５に記載の方法。

【請求項13】

前記Ｆｃダイアボディが、循環Ｂ細胞を枯渇させることなく、免疫グロブリン産生の持続的阻害をもたらす、請求項５に記載の方法。

【請求項14】

前記免疫グロブリンが、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＧ及びＩｇＥの１つ以上を含む、請求項１３に記載の方法。

【請求項15】

ＢＴＨＳ遺伝子治療に対する特異的抗体の存在を検査することによって前記患者をモニタリングすることをさらに含む、請求項１に記載の方法。

【請求項16】

免疫原性をさらに調節するために、前記Ｂ細胞阻害剤の１つ以上の用量を投与することをさらに含む、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

１つ以上の免疫調節剤を共投与することをさらに含む、請求項５に記載の方法。

【請求項18】

前記１つ以上の免疫調節剤が、シロリムス、ラパマイシン、アバタセプト、テプリズマブ及び化膿性連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）の免疫グロブリンＧ分解酵素から選択される、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

シロリムスを共投与することをさらに含む、請求項５に記載の方法。

【請求項20】

バース症候群（ＢＴＨＳ）遺伝子治療に関連する免疫原性を低下させるための医薬品の製造における非枯渇性Ｂ細胞阻害剤の使用であって、任意で、前記ＢＴＨＳ遺伝子治療が、ＴＡＦＡＺＺＩＮ導入遺伝子をコードする組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクターを有する遺伝子組換え細胞を含む、使用。

【請求項21】

バース症候群（ＢＴＨＳ）の遺伝子治療に関連する免疫原性を低下させるための医薬組成物であって、ＢＴＨＳ遺伝子治療の前、同治療と同時、及び／又は同治療の後に、ＣＤ３２Ｂのエピトープ及びＣＤ７９Ｂのエピトープに免疫特異的に結合することができる有効量のＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体を含み、任意で、前記ＢＴＨＳ遺伝子治療が、ＴＡＦＡＺＺＩＮ導入遺伝子をコードする組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクターを有する遺伝子組換え細胞を含む、医薬組成物。

【請求項22】

前記ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体が、
（Ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＬ_{ＣＤ３２Ｂ}ドメイン；
（Ｂ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ_{ＣＤ３２Ｂ}ドメイン；
（Ｃ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＬ_{ＣＤ７９Ｂ}ドメイン；及び
（Ｄ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ_{ＣＤ７９Ｂ}ドメイン
を含む、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項23】

前記ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体が、
（Ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖；
（Ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；及び
（Ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含む第３のポリペプチド鎖
を含むＦｃダイアボディである、請求項２２に記載の医薬組成物。

【請求項24】

前記Ｆｃダイアボディを、約５ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ、又は約５ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇ、又は約５ｍｇ／ｋｇ～約４０ｍｇ／ｋｇの用量で、週に１回の用量～６週間に１回の用量の投与レジメンで含む、請求項２３に記載の医薬組成物。

【請求項25】

前記Ｆｃダイアボディを約１０ｍｇ／ｋｇの用量で、１～４週間に１回の用量で、好ましくは第１のＢＴＨＳ遺伝子治療送達の１週間前、前記第１のＢＴＨＳ遺伝子治療送達の２週間後、及び第２のＢＴＨＳ遺伝子治療送達の３～４週間後のレジメンで含む、請求項２３に記載の医薬組成物。

【請求項26】

前記ＢＴＨＳ遺伝子治療の投与の約２日～約６週間前の第１の用量、前記ＢＴＨＳ遺伝子治療の投与とほぼ同時の第２の用量、及び前記ＢＴＨＳ遺伝子治療の投与の約２日～約６週間後の第３の用量を含む、請求項２５に記載の医薬組成物。

【請求項27】

シロリムス、ラパマイシン、アバタセプト、テプリズマブ及び化膿性連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）の免疫グロブリンＧ分解酵素から選択される１つ以上の免疫調節剤をさらに含む、請求項２１に記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年１２月２３日に出願された米国仮特許出願第６３／２９３，５１４号の優先権及び利益を主張し、その開示はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

配列表
本明細書は、以下のサイズ：１９，７２０バイトを有する、２０２２年１２月２３日に作成された１７８８３３－０１１０１．ｘｍｌという名称のファイルを含む、本明細書と共に提出された配列表を含み、その内容は参照により本明細書に組み込まれる。

【0003】

技術分野
本開示は、一般に、生物学的治療剤の免疫原性を低下させるための組成物及び方法に関し、より具体的には、バース症候群を治療するための遺伝子治療に関連する。

【背景技術】

【0004】

Ｄｒ．Ｐｅｔｅｒ Ｂａｒｔｈによって１９８３年に最初に発見されたバース症候群（ＯＭＩＭ＃３０２０６０；ＢＴＨＳ）は、カルジオリピンのリモデリングに必要なアシルトランスフェラーゼをコードするＴＡＦＡＺＺＩＮ遺伝子の病理学的変異によって引き起こされるまれなＸ連鎖遺伝性障害である。したがって、Ｘｑ２８に位置するＴＡＦＡＺＺＩＮ遺伝子の変異は、カルジオリピン代謝及びミトコンドリア機能障害の中間体の蓄積をもたらすことによって病理学的特徴を引き起こす。効果は、組織特異的遺伝子発現の違いに部分的に起因して、提示及び重症度が異なる。臨床病態には、典型的には、心血管機能障害、ミオパシー、及び感染症の素因となる免疫不全が含まれる。ＢＴＨＳをもたらす変異は典型的には家族性であるが、１３％がｄｅ ｎｏｖｏであると推定されている（Ｇｏｎｚａｌｅｚ ２０１２）。現在生存しているＢＴＨＳの既知の個体は約１５０～２００人であると推定される。しかしながら、この診断されていない状態で生活している個体の数がより多くなる可能性があり、１４０，０００人に１人の出生が罹患していることがますます認識されつつある。

【0005】

心筋症（ＣＭ）は、ＢＴＨＳを有する個体の最大７０％に発生すると推定され、生後１年以内に発症する。心血管病態には、拡張型ＣＭ、左室緻密化不全、肥大型ＣＭ、及びまれにＱＴｃ延長、不整脈、及び心臓突然死が含まれる。ＢＴＨＳにおけるＣＭの診断の遅れは一般的なものであり、個人は心不全について心臓専門医による慎重なモニタリングを必要とする。幸いなことに、ＣＭを有するほとんどの患者は、標準的な医学治療に良好に応答する。しかしながら、ＢＴＨＳ患者の一部は、生後５年以内に心臓移植を必要とするように進行する。さらに、より大規模なコホート試験では、心室性不整脈が一般的であり、患者の１０％超が致死性不整脈のリスクのために植込み型除細動器の留置を必要とすることが注目されている。不整脈は、そうでなければ健康そうに見える期間中にＢＴＨＳを有する個体において起こり得る。

【0006】

重篤な感染症又は敗血症の素因となる免疫不全は、ＢＴＨＳにおいて一般的である。最も一般的なものは好中球減少症であり、これは患者の最大９０％で起こる。好中球減少症は、軽度及び偶発性から重度及び慢性までの範囲であり得る。さらに、汎血球減少症が、ＢＴＨＳを有する個体において認められており、ウイルス誘発性骨髄抑制としばしば間違えられている（Ｒｉｇａｕｄ ２０１３）。Ｂａｒｔｈの元の論文に早期死亡と記載されている患者の半数が感染合併症に屈したことは留意すべきである（Ｂａｒｔｈ １９８３）。好中球減少症の原因に対する主要な仮説は、骨髄中に機能不全の好中球前駆体が存在するということである。顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）の使用は、低好中球数を改善するためにしばしば使用されるが、これにもかかわらず感染は依然として一般的である。

【0007】

神経筋作用が一般的である。骨格筋症には、近位の非進行性の筋力低下が含まれる。小児期の低緊張症は、全体的な運動発達遅延をもたらし、成人期の低緊張症は、易疲労性及び生活の質の低下をもたらす。有酸素訓練を支援することを目的とした臨床試験は、生活の質を改善すると考えられたが、測定可能な生理学的利益はほとんどなかった。

【0008】

測定可能な代謝異常は、尿中３－メチルグルタコン酸の５～２０倍の増加を伴うＢＴＨＳの診断を行うのに有用である。真の代謝続発症はまれであるが、乳酸アシドーシス及び低血糖は乳児期にはより一般的であり、致死的であり得る。現在の治療は、急性疾患中の支持治療を目的としている。

【0009】

標準的な医療の進歩により、ＢＴＨＳは成人期まで生存可能な状態になっている。現在推奨されているＢＴＨＳの治療法は支持的であるが治癒的ではない。補酵素Ｑ、カルニチン、パントテン酸及び他のミトコンドリア病を治療するために典型的に使用される他のビタミンＢなどのサプリメントは、ＢＴＨＳにおいて有効であることは証明されていない（Ｒｕｇｏｌｏｔｔｏ ２００３）。

【0010】

しかしながら、提示には著しい変動性があり、個体が重篤な範囲の疾患にかかると、合併症は生命を脅かす可能性があり、生存するために心臓移植又は体外膜酸素化（ＥＣＭＯ）を必要とする。ＢＴＨＳのより軽度又は中等度の症例でさえ、ほとんど又は全く警告なしに現れる急性代謝クリーゼ又は重度の感染症のリスクがある（ｂａｒｔｈｓｙｎｄｒｏｍｅ．ｏｒｇ）。これは、成人期まで生存する多くの患者にとって大きな不安の原因である。

【0011】

ＢＴＨＳ患者は、筋力低下及び慢性疲労の両方から、生涯にわたる制限及び生活の質の低下に耐える。強度及び持久力を構築するために正式な運動プログラムを利用する臨床試験は、無数のサプリメントと同様に効果がないことが証明されている。したがって、ＢＴＨＳ患者のケアにおける満たされていない必要性がある。患者のパネルは、彼らの懸念を説明し、単なる症状管理を超える治療を提唱するのを助けるために、２０１８年に初めてＦＤＡと面会した。

【0012】

急速に進歩している遺伝子治療の治療分野によってもたらされる進歩は、バース症候群の治療にとって非常に魅力的である。遺伝子治療は、アシルトランスフェラーゼの正常な産生の回復を可能にし、それによって臨床症状を減少させる。

【0013】

遺伝子治療では、遺伝子の欠損コピーを組み込む目的で遺伝子組換え細胞が生成される。しかしながら、細胞の遺伝子改変に利用される「機械」の一部が、改変された細胞によって「提示」され、宿主によって「異物」剤として認識され得るリスクがある。そのような認識は拒絶反応を誘発し、それは潜在的にそのような治療を無効にするか、又は重篤な場合には潜在的に自己免疫反応を引き起こす可能性がある。

【0014】

より最近では、遺伝子療法の出現により、導入遺伝子を投与するために利用されるウイルスベクターの免疫原性、並びにレシピエントの細胞による発現後の導入遺伝子タンパク質自体の免疫原性の実質的な障害が見られている。ベクター及び導入遺伝子の免疫原性は以下をもたらす：１）ベクター及び導入遺伝子がレシピエントによって産生された抗体によって結合及び排除されると、効力が低下する；２）安全性のリスク及びコストを増加させる用量の増加の必要性；３）対象が以前の投与後にベクター又は導入遺伝子に対する抗体を発現する場合、再投与が困難又は不可能である。レシピエントは、天然に存在するウイルスとの交差反応のために、最初の投与前であってもベクターに対する既存の抗体を有する場合がある。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0015】

したがって、バース症候群遺伝子治療によって誘発される免疫原性を低下させるための方法及び組成物が必要とされている。

【課題を解決するための手段】

【0016】

本明細書では、一態様において、バース症候群（ＢＴＨＳ）の遺伝子治療に関連する免疫原性を低下させる方法であって、ＢＴＨＳ遺伝子治療を受けている又は受けたことがある患者に、非枯渇性である有効量のＢ細胞阻害剤を投与することを含む方法が開示される。

【0017】

いくつかの実施形態では、ＢＴＨＳ遺伝子治療は、ＴＡＦＡＺＺＩＮ導入遺伝子をコードする組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクター（ＡＡＶ９ベクターなど）を含むことができる。

【0018】

いくつかの実施形態において、Ｂ細胞阻害剤は、ＣＤ３２Ｂのエピトープ及びＣＤ７９Ｂのエピトープに免疫特異的に結合することができるＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体である。いくつかの実施形態において、ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体は：
（Ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＬ_{ＣＤ３２Ｂ}ドメイン；
（Ｂ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ_{ＣＤ３２Ｂ}ドメイン；
（Ｃ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＬ_{ＣＤ７９Ｂ}ドメイン；及び
（Ｄ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ_{ＣＤ７９Ｂ}ドメインを含む。

【0019】

いくつかの実施形態において、ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体は、
（Ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖；
（Ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；及び
（Ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含む第３のポリペプチド鎖
を含むＦｃダイアボディである。

【0020】

いくつかの実施形態において、本方法は、Ｆｃダイアボディを約５ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ、又は約５ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇ、又は約５ｍｇ／ｋｇ～約４０ｍｇ／ｋｇの用量で、週に１回の用量と６週間に１回の用量との間の投与レジメンで投与することをさらに含み得る。いくつかの実施形態において、本方法は、Ｆｃダイアボディを約１０ｍｇ／ｋｇの用量で、及び１～４週間に１回の用量の投与レジメンで投与することを含み得る。いくつかの実施形態において、本方法は、約１０ｍｇ／ｋｇの用量のＦｃダイアボディを２～６週間間隔で３用量投与することを含み得る。

【0021】

１つの例示的な投薬レジメンは、第１のＢＴＨＳ遺伝子治療送達の１週間前の第１の用量、第１のＢＴＨＳ遺伝子治療送達の２週間後の第２の用量、及び第２のＢＴＨＳ遺伝子治療送達の３～４週間後の第３の用量を含む。

【0022】

いくつかの実施形態において、本方法は、ＢＴＨＳ遺伝子治療の投与の約２日～約６週間前（例えば、２日間、６日間、１週間、２週間、４週間）に第１の用量を投与し、ＢＴＨＳ遺伝子治療の投与とほぼ同時に第２の用量を投与し、ＢＴＨＳ遺伝子治療の投与の約２日～約６週間後（例えば、２日間、６日間、１週間、２週間、４週間）に第３の用量を投与することを含み得る。

【0023】

いくつかの実施形態では、Ｆｃダイアボディは、投与時にそれ自体の免疫原性の阻害をもたらし、増加した用量では抗薬物抗体（ＡＤＡ）のより低い有病率及び／又は力価をもたらす。いくつかの実施形態では、ＡＤＡはＦｃダイアボディを中和しない。

【0024】

いくつかの実施形態では、Ｆｃダイアボディは、用量依存的な様式で、投与時にＢ細胞の少なくとも８０％に結合し、最後の投与後少なくとも４週間、Ｂ細胞の少なくとも５０％に結合したままである。

【0025】

いくつかの実施形態では、Ｆｃダイアボディは、循環Ｂ細胞を枯渇させることなく免疫グロブリン産生の持続的阻害をもたらす。いくつかの実施形態では、免疫グロブリンは、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＧ及びＩｇＥの１つ以上を含む。

【0026】

いくつかの実施形態において、本方法は、ＢＴＨＳ遺伝子治療に対する特異的抗体の存在を調べることによって患者をモニタリングすることをさらに含み得る。いくつかの実施形態において、本方法は、免疫原性をさらに調節するために１つ以上の用量のＢ細胞阻害剤を投与することをさらに含み得る。

【0027】

いくつかの実施形態では、本方法は、シロリムス、ラパマイシン、アバタセプト、テプリズマブ及び化膿性連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）の免疫グロブリンＧ分解酵素などの１つ以上の免疫調節剤を同時投与することをさらに含むことができる。いくつかの実施形態では、本方法は、シロリムスを同時投与することをさらに含むことができる。

【0028】

治療有効単位用量で提供される（例えば、パッケージ化される）、本明細書に開示される非枯渇性Ｂ細胞阻害剤を含む医薬組成物も本明細書で提供される。本明細書中に開示されるような投与レジメンのための説明書も提供され得る。

【0029】

さらなる態様は、任意でバース症候群（ＢＴＨＳ）遺伝子治療が、ＴＡＦＡＺＺＩＮ導入遺伝子をコードする組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクターを有する遺伝子組換え細胞を含む、ＢＴＨＳ遺伝子治療に関連する免疫原性を低下させるための医薬品の製造における、本明細書に開示される非枯渇性Ｂ細胞阻害剤の使用に関する。

【0030】

バース症候群（ＢＴＨＳ）の遺伝子治療に関連する免疫原性を低下させるための医薬組成物であって、ＢＴＨＳ遺伝子治療の前、同治療と同時、及び／又は同治療の後に、ＣＤ３２Ｂのエピトープ及びＣＤ７９Ｂのエピトープに免疫特異的に結合することができる有効量のＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体を含み、任意で、ＢＴＨＳ遺伝子治療が、ＴＡＦＡＺＺＩＮ導入遺伝子をコードする組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ベクターを有する遺伝子組換え細胞を含む、医薬組成物も本明細書で提供される。

【0031】

ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体は、いくつかの実施形態において、
（Ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＬ_{ＣＤ３２Ｂ}ドメイン；
（Ｂ）配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＨ_{ＣＤ３２Ｂ}ドメイン；
（Ｃ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＬ_{ＣＤ７９Ｂ}ドメイン；及び
（Ｄ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ_{ＣＤ７９Ｂ}ドメインを含み得る。

【0032】

ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体は：
（Ａ）配列番号５のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖；
（Ｂ）配列番号６のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；及び
（Ｃ）配列番号７のアミノ酸配列を含む第３のポリペプチド鎖
を含むＦｃダイアボディであり得る。

【0033】

医薬組成物は、いくつかの実施形態において、Ｆｃダイアボディを、約５ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ、又は約５ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇ、又は約５ｍｇ／ｋｇ～約４０ｍｇ／ｋｇの用量で、及び週に１回用量～６週間に１回用量の投与レジメンで含むことができる。

【0034】

医薬組成物は、いくつかの実施形態では、約１０ｍｇ／ｋｇの用量で、２～６週間間隔で、又は１～４週間に１回の用量でＦｃダイアボディを含み得る。特定の実施形態では、投与レジメンは、第１のＢＴＨＳ遺伝子治療送達の１週間前の第１の用量、第１のＢＴＨＳ遺伝子治療送達の２週間後の第２の用量、及び第２のＢＴＨＳ遺伝子治療送達の３～４週間後の第３の用量を含み得る。

【0035】

医薬組成物は、いくつかの実施形態において、ＢＴＨＳ遺伝子治療の投与の約２日～約６週間前の第１の用量、ＢＴＨＳ遺伝子治療の投与とほぼ同時の第２の用量、及びＢＴＨＳ遺伝子治療の投与の約２日～約６週間後の第３の用量を含むことができる。

【0036】

医薬組成物は、いくつかの実施形態において、シロリムス、ラパマイシン、アバタセプト、テプリズマブ及び化膿性連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）の免疫グロブリンＧ分解酵素から選択される１つ以上の免疫調節剤をさらに含むことができる。

【図面の簡単な説明】

【0037】

【図1】例示的なベクトルの概略図である。

【図2】例示的なコンストラクトＢ９５１（ｐｄｓ２ＴＲ－Ｄｅｓ－ｃｏＴＡＺ＿Ｄｕａｌ４）である。

【図3】例示的なコンストラクトＣ０６４（ｐｄｓ２ＴＲ－Ｄｅｓ－ｃｏＴＡＺｉｓｏ２＿Ｄｕａｌ４）である。

【発明を実施するための形態】

【0038】

本明細書では、一態様において、バース症候群（ＢＴＨＳ）の遺伝子治療に関連する免疫原性を低下させる方法であって、ＢＴＨＳ遺伝子治療を受けている又は受けたことがある患者に、非枯渇性である有効量のＢ細胞阻害剤を投与することを含む方法が開示される。いくつかの実施形態では、Ｂ細胞阻害剤は、それぞれその全体が参照により組み込まれる、米国特許出願公開第２０１６／０１９４３９６号明細書、国際公開第２０１５／０２１０８９号パンフレット及び国際公開第２０１７／２１４０９６号パンフレットに開示されているものなどのＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体である。

【0039】

定義
便宜上、本明細書、実施例、及び添付の特許請求の範囲で使用される特定の用語をここに収集する。別段定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術的用語及び科学的用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般的に理解される意味と同様の意味を有する。

【0040】

特許請求の範囲及び／又は明細書において「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語と組み合わせて使用される場合の「ａ」又は「ａｎ」という用語の使用は、「１つ」を意味し得るが、「１つ以上」、「少なくとも１つ」及び「１つ、又は２つ以上」の意味とも一致する。

【0041】

本出願を通して、「約」という用語は、値が、値を決定するために使用されている方法／装置の誤差の固有の変動、又は試験対象の間に存在する変動を含むことを示すために使用される。典型的には、この用語は、状況に応じて、約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％又は２０％未満の変動を包含することを意味する。

【0042】

「実質的に」という用語は、５０％超、好ましくは８０％超、最も好ましくは９０％超又は９５％超を意味する。

【0043】

特許請求の範囲における「又は」という用語の使用は、代替物のみを指すことが明示的に示されていない限り、又は代替物が相互に排他的でない限り、「及び／又は」を意味するために使用されるが、本開示は、代替物及び「及び／又は」のみを指す定義を支持する。

【0044】

本明細書及び特許請求の範囲で使用される場合、「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」（及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」などの任意の形態を含む）、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」（及び「有する（ｈａｖｅ）」及び「有（ｈａｓ）」などの任意の形態を有することができる）、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」（及び「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」及び「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」などの任意の形態を含む）又は「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」（及び「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｓ）」及び「含有する（ｃｏｎｔａｉｎ）」などの含有の任意の形態）という用語は、包括的又はオープンエンドであり、追加の列挙されていない要素又は方法ステップを排除しない。本明細書で論じられる任意の実施形態は、本発明の任意の方法、システム、宿主細胞、発現ベクター、及び／又は組成物に関して実施することができると考えられる。さらに、本発明の組成物、系、宿主細胞及び／又はベクターを使用して、本発明の方法及びタンパク質を達成することができる。

【0045】

本明細書で使用される場合、「から本質的になる」という用語は、所与の実施形態に必要な要素を指す。この用語は、本開示のその実施形態の基本的及び新規又は機能的特性に実質的に影響を及ぼさない追加の要素の存在を可能にする。

【0046】

「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」という用語は、実施形態のその説明に記載されていない要素を除外する、本明細書に記載の組成物、方法、及びそれらのそれぞれの成分を指す。

【0047】

「例えば（ｆｏｒ ｅｘａｍｐｌｅ）」という用語及びその対応する略語「例えば（ｅ．ｇ．）」の使用は、（イタリック体であるか否かにかかわらず）列挙された特定の用語が、特に明記しない限り、参照又は引用された特定の例に限定されることを意図しない本発明の代表的な例及び実施形態であることを意味する。

【0048】

「遺伝子」は、ポリペプチドをコードするヌクレオチドの集合体を指し、ｃＤＮＡ及びゲノムＤＮＡ核酸分子を含む。「遺伝子」はまた、コード配列の前（５’非コード配列）及び後（３’非コード配列）の調節配列として作用することができる核酸断片を指す。

【0049】

本明細書で使用される場合、「ＴＡＦＡＺＺＩＮ」は、カルジオリピン（膜リン脂質）のそのテトラリノレオイル形態への改変を担うことができるリン脂質－リゾリン脂質トランスアシラーゼを指す。いくつかの実施形態では、ＴＡＦＡＺＺＩＮは、完全長ヒトＴＡＦＡＺＺＩＮ又はエクソン５を欠くヒトＴＡＦＡＺＺＩＮを指し得、これらは両方ともトランスアシラーゼ活性を示し得る。特定の実施形態では、ｔａｆａｃｃｉｎは、エクソン５を欠くヒトＴＡＦＡＺＺＩＮと相同である完全長マウスＴＡＦＡＺＺＩＮを指す場合がある。

【0050】

本明細書で使用される「抗体」又は「抗体分子」は、少なくとも１つの免疫グロブリン可変ドメイン配列を含むタンパク質、例えば免疫グロブリン鎖又はその断片を指す。抗体分子は、抗体（例えば、全長抗体）及び抗体断片を包含する。いくつかの実施形態では、抗体分子は、完全長抗体の抗原結合断片若しくは機能性断片、又は完全長免疫グロブリン鎖を含む。例えば、全長抗体は、天然に存在するか、又は正常な免疫グロブリン遺伝子断片の組換えプロセスによって形成される免疫グロブリン（Ｉｇ）分子（例えば、ＩｇＧ）である。いくつかの実施形態では、抗体分子は、抗体断片などの免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な抗原結合部分を指す。抗体断片、例えば機能的断片は、抗体の一部、例えばＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆ（ａｂ）_２、可変断片（Ｆｖ）、ドメイン抗体（ｄＡｂ）、又は一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。機能的抗体断片は、インタクトな（例えば、全長）抗体によって認識されるものと同じ抗原に結合する。「抗体断片」又は「機能的断片」という用語はまた、重鎖及び軽鎖の可変領域からなる「Ｆｖ」断片、又は軽鎖及び重鎖可変領域がペプチドリンカー（「ｓｃＦｖタンパク質」）によって連結されている組換え単鎖ポリペプチド分子などの可変領域からなる単離された断片も含む。いくつかの実施形態では、抗体断片は、Ｆｃ断片又は単一アミノ酸残基などの抗原結合活性のない抗体の部分を含まない。例示的な抗体分子には、完全長抗体及び抗体断片、例えば、ｄＡｂ（ドメイン抗体）、一本鎖、Ｆａｂ、Ｆａｂ’及びＦ（ａｂ’）_２断片、並びに一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）が含まれる。「Ｆａｂ」及び「Ｆａｂ断片」という用語は互換的に使用され、抗体の各重鎖及び軽鎖由来の１つの定常ドメイン及び１つの可変ドメイン、すなわちＶ_Ｌ、Ｃ_Ｌ、Ｖ_Ｈ及びＣ_Ｈ１を含む領域を指す。

【0051】

本明細書を通して、ＩｇＧ重鎖の定常領域中の残基のナンバリングは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５^ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，ＮＨ１，ＭＤ（１９９１）（「Ｋａｂａｔ」）のようなＥＵインデックスのナンバリングであり、これは参照により本明細書に明示的に組み込まれる。「ＫａｂａｔにおけるようなＥＵインデックス」という用語は、ヒトＩｇＧ１ ＥＵ抗体のナンバリングを指す。免疫グロブリンの成熟重鎖及び軽鎖の可変ドメイン由来のアミノ酸は、鎖中のアミノ酸の位置によって示される。Ｋａｂａｔは、抗体のための多数のアミノ酸配列を記載し、各サブグループのためのアミノ酸コンセンサス配列を同定し、各アミノ酸に残基番号を割り当て、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔによって定義されるように同定される（ＣＤＲ_Ｈ１が、Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．＆Ｌｅｓｋ，Ａ．Ｍ．による（（１９８７）“Ｃａｎｏｎｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ”．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７）の定義によると５残基早く開始することは理解されよう）。Ｋａｂａｔのナンバリングスキームは、問題の抗体を、保存されたアミノ酸を参照してＫａｂａｔのコンセンサス配列の１つと整列させることによって、彼の発明の概要に含まれていない抗体に対して拡張可能である。残基番号を割り当てるためのこの方法は、当該分野で標準的なものとなっており、キメラ変異体又はヒト化変異体を含む様々な抗体の同等の位置のアミノ酸を容易に同定する。例えば、ヒト抗体軽鎖の位置５０のアミノ酸は、マウス抗体軽鎖の位置５０のアミノ酸と同等の位置を占める。

【0052】

いくつかの実施形態では、抗体分子は単一特異性であり、例えば、単一エピトープに対する結合特異性を含む。いくつかの実施形態では、抗体分子は多重特異性であり、例えば、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列は第１のエピトープに対する結合特異性を有し、第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列は第２のエピトープに対する結合特異性を有する。いくつかの実施形態において、抗体分子は二重特異性抗体分子である。

【0053】

「二重特異性抗体分子」、「ダイアボディ」及び「二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ（登録商標））」抗体という用語は、本明細書では互換的に使用され、２つ以上の（例えば、２、３、４、又はそれ以上）エピトープ及び／又は抗原に対して特異性を有する抗体分子を指す。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれその全体が参照により組み込まれる、米国特許出願公開第２０１６／０１９４３９６号明細書、国際公開第２０１５／０２１０８９号パンフレット及び国際公開第２０１７／２１４０９６号パンフレットに開示されているものなどの、抗原結合が可能なダイアボディ又は足場であり得る。いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性ダイアボディ（すなわち、「ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂダイアボディ」及びＦｃドメインをさらに含むそのようなダイアボディ（すなわち、「ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ Ｆｃダイアボディ」）であり得る。いくつかの実施形態では、抗体は、１１１．５ｋＤａの分子量を有するチャイニーズハムスター卵巣細胞で産生されるヒト化ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ ＤＡＲＴ（登録商標）抗体であり得る。

【0054】

本明細書で使用される「抗原」（Ａｇ）は、すべてのタンパク質又はペプチドを含む高分子を指す。いくつかの実施形態では、抗原は、例えば特定の免疫細胞の活性化及び／又は抗体生成を含む免疫応答を引き起こすことができる分子である。抗原は抗体生成に関与するだけではない。Ｔ細胞受容体は（ペプチド又はペプチド断片がＭＨＣ分子と複合体を形成する抗原ではあるが）抗原も認識した。ほとんどすべてのタンパク質又はペプチドを含む任意の高分子が抗原であり得る。抗原はまた、ゲノム組換え体又はＤＮＡに由来し得る。例えば、免疫応答を誘発することができるタンパク質をコードするヌクレオチド配列又は部分ヌクレオチド配列を含む任意のＤＮＡは、「抗原」をコードする。いくつかの実施形態では、抗原は、遺伝子の完全長ヌクレオチド配列によってのみコードされる必要はなく、抗原は、遺伝子によってコードされる必要も全くない。いくつかの実施形態では、抗原は、生物学的試料、例えば組織試料、腫瘍試料、細胞、又は他の生物学的成分を含む流体から合成され得るか、又は誘導され得る。本明細書で使用される場合、「腫瘍抗原」又は互換的に、「癌抗原」は、免疫応答を引き起こすことができる癌、例えば癌細胞又は腫瘍微小環境上に存在するか、又はそれに関連する任意の分子を含む。本明細書で使用される場合、「免疫細胞抗原」は、免疫応答を引き起こすことができる免疫細胞上に存在するか、又はそれに関連する任意の分子を含む。

【0055】

抗体分子の「抗原結合部位」又は「抗原結合断片」又は「抗原結合部分」（本明細書では互換的に使用される）は、抗原結合に関与する抗体分子、例えばＩｇＧなどの免疫グロブリン（Ｉｇ）分子の一部を指す。いくつかの実施形態では、抗原結合部位は、重鎖（Ｈ）及び軽鎖（Ｌ）の可変（Ｖ）領域のアミノ酸残基によって形成される。超可変領域と呼ばれる重鎖及び軽鎖の可変領域内の３つの高度に分岐したストレッチは、「フレームワーク領域」（ＦＲ）と呼ばれるより保存された隣接ストレッチの間に配置される。ＦＲは、免疫グロブリン中の超可変領域間及び超可変領域に隣接して天然に見られるアミノ酸配列である。いくつかの実施形態では、抗体分子において、軽鎖の３つの超可変領域及び重鎖の３つの超可変領域は、三次元空間において互いに対して配置されて、結合した抗原の三次元表面に相補的な抗原結合表面を形成する。重鎖及び軽鎖のそれぞれの３つの超可変領域は、「相補性決定領域」又は「ＣＤＲ」と呼ばれる。フレームワーク領域及びＣＤＲは、例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２及びＣｈｏｔｈｉａ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７に定義され、記載されている。各可変鎖（例えば、可変重鎖及び可変軽鎖）は、典型的には、アミノ末端からカルボキシ末端に以下のアミノ酸順序で配置された３つのＣＤＲ及び４つのＦＲで構成される：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３及びＦＲ４。可変軽鎖（ＶＬ）ＣＤＲは、一般に、２７～３２位（ＣＤＲ１）、５０～５６位（ＣＤＲ２）及び９１～９７位（ＣＤＲ３）の残基を含むと定義される。可変重鎖（ＶＨ）ＣＤＲは、一般に、２７～３３位（ＣＤＲ１）、５２～５６位（ＣＤＲ２）及び９５～１０２位（ＣＤＲ３）の残基を含むと定義される。当業者は、フレームワークが抗体全体にわたって一貫したナンバリングを有するように、ループが抗体及びナンバリングシステム、例えばＫａｂａｔ又はＣｈｏｔｈｉａ対照などにわたって異なる長さであり得ることを理解するであろう。

【0056】

いくつかの実施形態では、抗体の抗原結合断片（例えば、融合分子の一部として含まれる場合）は、完全なＦｃドメインを欠いていても、又は完全なＦｃドメインを含まなくてもよい。いくつかの実施形態において、抗体結合断片は、完全なＩｇＧ又は完全なＦｃを含まず、軽鎖及び／又は重鎖からの１つ以上の定常領域（又はその断片）を含み得る。いくつかの実施形態では、抗原結合断片は、任意のＦｃドメインを完全に含まなくてもよい。いくつかの実施形態では、抗原結合断片は、完全なＦｃドメインを実質的に含まなくてもよい。いくつかの実施形態では、抗原結合断片は、完全Ｆｃドメイン（例えば、ＣＨ２若しくはＣＨ３ドメイン又はその一部）の一部を含み得る。いくつかの実施形態では、抗原結合断片は完全Ｆｃドメインを含み得る。いくつかの実施形態では、ＦｃドメインはＩｇＧドメイン、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４ Ｆｃドメインである。いくつかの実施形態では、Ｆｃドメインは、ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含む。

【0057】

本明細書で使用される場合、「投与する」及び同様の用語は、治療される個体に組成物を送達することを意味する。好ましくは、本開示の組成物は、例えば、皮下、筋肉内、又は好ましくは静脈内経路を含む非経口経路によって投与される。

【0058】

本明細書で使用される場合、「有効量」は、任意の医学的治療又は診断試験に対応するような合理的なリスク／利益比で所望の局所的又は全身的効果を提供するのに十分な生物活性剤又は診断剤の量を意味する。これは、患者、疾患、行われる処置、及び薬剤の性質に応じて変化する。治療有効量は、治療される患者及び疾患状態、患者の体重及び年齢、疾患状態の重症度、投与様式などに応じて異なり、当業者によって容易に決定することができる。投与量は、例えば、約１ｎｇ～約１０，０００ｍｇ、約５ｎｇ～約９，５００ｍｇ、約１０ｎｇ～約９，０００ｍｇ、約２０ｎｇ～約８，５００ｍｇ、約３０ｎｇ～約７，５００ｍｇ、約４０ｎｇ～約７，０００ｍｇ、約５０ｎｇ～約６，５００ｍｇ、約１００ｎｇ～約６，０００ｍｇ、約２００ｎｇ～約５，５００ｍｇ、約３００ｎｇ～約５，０００ｍｇ、約４００ｎｇ～約４，５００ｍｇ、約５００ｎｇ～約４，０００ｍｇ、約１μｇ～約３，５００ｍｇ、約５μｇ～約３，０００ｍｇ、約１０μｇ～約２，６００ｍｇ、約２０μｇ～約２，５７５ｍｇ、約３０μｇ～約２，５５０ｍｇ、約４０μｇ～約２，５００ｍｇ、約５０μｇ～約２，４７５ｍｇ、約１００μｇ～約２，４５０ｍｇ、約２００μｇ～約２，４２５ｍｇ、約３００μｇ～約２，０００、約４００μｇ～約１，１７５ｍｇ、約５００μｇ～約１，１５０ｍｇ、約０．５ｍｇ～約１，１２５ｍｇ、約１ｍｇ～約１，１００ｍｇ、約１．２５ｍｇ～約１，０７５ｍｇ、約１．５ｍｇ～約１，０５０ｍｇ、約２．０ｍｇ～約１，０２５ｍｇ、約２．５ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約３．０ｍｇ～約９７５ｍｇ、約３．５ｍｇ～約９５０ｍｇ、約４．０ｍｇ～約９２５ｍｇ、約４．５ｍｇ～約９００ｍｇ、約５ｍｇ～約８７５ｍｇ、約１０ｍｇ～約８５０ｍｇ、約２０ｍｇ～約８２５ｍｇ、約３０ｍｇ～約８００ｍｇ、約４０ｍｇ～約７７５ｍｇ、約５０ｍｇ～約７５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約７２５ｍｇ、約２００ｍｇ～約７００ｍｇ、約３００ｍｇ～約６７５ｍｇ、約４００ｍｇ～約６５０ｍｇ、約５００ｍｇ、又は約５２５ｍｇ～約６２５ｍｇの、本明細書で提供する抗体又はその抗原結合部分であり得る。投与は、例えば、毎週、２週間ごと、３週間ごと、４週間ごと、５週間ごと又は６週間ごとであり得る。投与レジメンは、最適な治療応答を提供するように調整され得る。有効量はまた、薬剤の任意の毒性又は有害効果（副作用）が最小化され、及び／又は有益な効果に勝る量である。投与は、正確に又は約６ｍｇ／ｋｇ若しくは１２ｍｇ／ｋｇで毎週、又は１２ｍｇ／ｋｇ若しくは２４ｍｇ／ｋｇで隔週で静脈内投与され得る。さらなる投与レジメンを以下に記載する。

【0059】

本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される」とは、一般に安全で、非毒性であり、生物学的にも他の点でも望ましくないものではない医薬組成物を調製するのに有用なものを指すものとし、獣医学的使用及びヒトの薬学的使用に許容されるものを含む。「薬学的に許容される液体担体」の例には、水及び有機溶媒が含まれる。好ましい薬学的に許容され得る水性液体としては、ＰＢＳ、生理食塩水及びデキストロース溶液などが挙げられる。

【0060】

「免疫原性」という用語は、抗原又はエピトープなどの特定の物質が、ヒト及び他の動物の体内で、体液性及び／又は細胞媒介性であり得る免疫応答を引き起こす能力を指す。いくつかの実施形態では、本開示の組成物の投与は、治療剤などの生物学的物質の免疫原性を低下させる、及び／又は生物学的物質に対する免疫寛容を増加させる。本明細書で使用される「公差」又は「免疫寛容」は、他の点では実質的に正常な免疫系の状況では特定の抗原（例えば、治療用生物製剤）に対する免疫応答が存在しないことを指す。

【0061】

本明細書で使用される「主要組織適合遺伝子複合体」又は「ＭＨＣ」タンパク質は、脊椎動物の免疫系において重要な役割を果たす大きな遺伝子ファミリーによってコードされる一組の細胞表面分子を指す。これらのタンパク質の重要な機能は、内因性又は外因性（外来性）タンパク質に由来するペプチド断片を結合し、宿主生物の適切なＴ細胞による認識のためにそれらを細胞表面に提示することである。ＭＨＣ遺伝子ファミリーは３つのサブグループに分けられる：クラスＩ、クラスＩＩ、及びクラスＩＩＩ。ヒトＭＨＣクラスＩ及びクラスＩＩ遺伝子は、それぞれヒト白血球抗原（ＨＬＡ）－ＨＬＡクラスＩ及びＨＬＡクラスＩＩとも呼ばれる。ヒトにおいて最も研究されているＨＬＡ遺伝子のいくつかは、９つのＭＨＣ遺伝子：ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－ＤＰＡ１、ＨＬＡ－ＤＰＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、ＨＬＡ－ＤＲＡ、ＨＬＡ－ＤＲＢ１及びＨＬＡ－ＤＲＢ３４５である。

【0062】

本開示の様々な態様は、以下でさらに詳細に説明される。さらなる定義は、本明細書全体を通して示されている。

【0063】

非枯渇性Ｂ細胞阻害剤及び医薬組成物
いくつかの実施形態では、Ｂ細胞阻害剤を使用して免疫原性を低減又は調節することができる。いくつかの実施形態では、そのようなＢ細胞阻害剤は非枯渇性免疫調節剤である。本明細書で使用される場合、「非枯渇性」又は「非枯渇」は、阻害剤又は免疫調節剤がＢ細胞活性を完全に枯渇させないことを意味する。一方、Ｂ細胞の「枯渇」は、作用物質がＢ細胞、例えば抗ＣＤ２０抗体、例えばリツキシマブを排除又は破壊するように作用することを意味する。したがって、いくつかの実施形態において、本明細書中に開示される非枯渇性Ｂ細胞阻害剤又は免疫調節剤はリツキシマブではない。いくつかの実施形態では、非枯渇性Ｂ細胞阻害剤又は免疫調節剤は、抗ＣＤ２０抗体又は他のＣＤ２０阻害剤ではない。

【0064】

例示的な非枯渇性Ｂ細胞阻害剤としては、ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異的阻害剤；ＣＤ３２Ｂモジュレーター；Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）遮断薬、例えば抗ＣＤ２２分子；Ｂ細胞生存及び活性化阻害剤、例えばＢ細胞活性化因子（ＢＡＦＦ）又はＡ増殖誘導リガンド（ＡＰＲＩＬ）阻害剤、例えばベリムマンブ；抗ＣＤ４０及び抗ＣＤ４０Ｌ分子；並びにイブルチニブ（ＰＣＩ－３２７６５）及びアカラブルチニブなどのブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。

【0065】

いくつかの実施形態では、Ｂ細胞阻害剤は、米国特許出願公開第２０１６／０１９４３９６号明細書、国際公開第２０１５／０２１０８９号パンフレット、及び国際公開第２０１７／２１４０９６号パンフレットに開示されているものなどのＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性抗体（すべてその全体が参照により組み込まれる）、又はその抗原結合断片であり得る。

【0066】

例示的なＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ二重特異性ダイアボディは、２つ以上のポリペプチド鎖を含むことができ、
（１）ＣＤ３２Ｂ（ＶＬ_{ＣＤ３２Ｂ}）に結合する抗体のＶＬドメイン、例えば、配列（配列番号１）を有するＶＬ_{ＣＤ３２Ｂ}ドメイン：

【化1】

（２）ＣＤ３２Ｂ（ＶＨ_{ＣＤ３２Ｂ}）に結合する抗体のＶＨドメイン、例えば、配列（配列番号２）を有するＶＨ_{ＣＤ３２Ｂ}：

【化2】

（３）ＣＤ７９Ｂ（ＶＬ_{ＣＤ７９Ｂ}）に結合する抗体のＶＬドメイン、例えば、配列（配列番号３）を有するＶＬ_{ＣＤ７９Ｂ}ドメイン：

【化3】

（４）ＣＤ７９Ｂ（ＶＨ_{ＣＤ７９Ｂ}）に結合する抗体のＶＨドメイン、例えば、配列（配列番号４）を有するＶＨ_{ＣＤ７９Ｂ}：

【化4】

を含み得る。

【0067】

いくつかの実施形態では、Ｂ細胞阻害剤は、１１１．５ｋＤａの分子量を有するチャイニーズハムスター卵巣細胞で産生されるＰＲＶ－３２７９、ヒト化ＣＤ３２Ｂ×ＣＤ７９Ｂ Ｄｕａｌ Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｒｅ－Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ（ＤＡＲＴ（登録商標））タンパク質であり得る。ＤＡＲＴ（登録商標）タンパク質は、２つの異なる抗原に同時に結合することができる二重特異性の抗体ベースの分子である。ＰＲＶ－３２７９は、Ｂリンパ球上のＣＤ３２Ｂ（Ｆｃガンマ受容体ＩＩｂ）及びＣＤ７９Ｂ（Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）複合体の免疫グロブリン関連βサブユニット）を標的とするように設計されている。Ｂリンパ球上の優先的シス結合モードでのＣＤ３２Ｂ及びＣＤ７９Ｂの同時ライゲーションは、ＣＤ３２Ｂ結合免疫受容体チロシンに基づく阻害性モチーフのシグナル伝達を誘因し、広範な枯渇なしに抗原媒介性ナイーブ及びメモリーＢ細胞活性化を減少させる。ｉｎ ｖｉｖｏ半減期を延長するために、ＰＲＶ－３２７９はまた、ＦｃγＲ及び補体への望ましくない結合を大幅に低減又は排除するように変異されたヒト免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）１ Ｆｃ領域を含むが、新生児ＦｃＲ結合に対する親和性を保持して、この受容体によって媒介されるＩｇＧサルベージ経路を利用する。

【0068】

ＣＤ３２Ｂ分子は、Ｂ細胞並びにマクロファージ、好中球及び肥満細胞などの他の免疫エフェクター細胞上に広く発現される膜貫通阻害受容体である。ＰＲＶ－３２７９の抗ＣＤ３２Ｂ成分は、ＭａｃｒｏＧｅｎｉｃｓのマウスモノクローナル抗体（ｍＡｂ）８Ｂ５のヒト化バージョンに基づく。ＣＤ７９Ｂは、Ｂ細胞上にのみ発現されるＢＣＲの必須のシグナル伝達成分である。ＰＲＶ－３２７９の抗ＣＤ７９Ｂ成分は、マウスｍＡｂ ＣＢ３のヒト化バージョンに基づく。

【0069】

いくつかの実施形態では、ＰＲＶ－３２７９は、以下の配列を含む（ＣＤＲには下線が引かれ、コイルドメインは太字である）：
鎖１（Ｆｃ－ＣＤ３２ＢＶＬ－ＣＤ７９ｂＶＨ－Ｅコイル）：（配列番号５）

【化5】

鎖２（ＣＤ７９ｂＶＬ－ＣＤ３２ＢＶＨ－Ｋコイル）：（配列番号６）

【化6】

鎖３（Ｆｃ）：（配列番号７）

【化7】

【0070】

ＰＲＶ－３２７９は、投与時にナイーブ表現型及びメモリー表現型の両方を含む用量依存的様式で大部分のＢ細胞（例えば、＞８０～９０％）に結合し、４週間を超えてＢ細胞の少なくとも５０％に結合したままであり得る。これは、ＰＲＶ－３２７９の潜在的な薬力学（ＰＤ）効果の持続的な耐久性を示し、１ヶ月に１回（又はそれより長期）の投与頻度を支持する。

【0071】

ＰＲＶ－３２７９は、健康な対象においてウイルスワクチン（Ａ型肝炎ワクチン）に対する免疫性を低下させることが以前に示されており、ウイルスベクターに対する免疫原性を阻害することができることを示唆している。さらに、ｈｕＣＤ３２ｂトランスジェニックマウス（ＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０４４３１２及び米国特許出願公開第２０２１／０１３０４６４号明細書（両方ともに、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）参照）における有効性及び免疫原性を評価するために、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を使用する遺伝子治療に対するＰＲＶ－３２７９代用物の効果を評価する目的でパイロット研究を行った。これは、陰性（ＡＡＶ９なし）対照、次いでプラセボと組み合わせたＡＡＶ９、３つの用量レベルでのＰＲＶ－３２７９単独、３つの用量レベルのＰＲＶ－３２７９とのシロリムスの同時投与、及びシロリムス単独を含む９つのアームを用いた用量応答研究であった（表１）。縦断的サンプリングには、研究終了時のＩｇＭ、ＩｇＧ、ＡＡＶ９ベクターコピー及び組織導入遺伝子活性のレベルが含まれた。

【0072】

具体的な試験目的：
１．血液中で検出可能なＡＡＶ９ベクターの量（ベクターのクリアランス速度）
２．組織中で検出可能なＧＡＡ導入遺伝子の量（遺伝子治療トランスフェクションの効率）
３．血中の抗ＡＡＶ９抗体のレベル（ＡＡＶベクターの免疫原性）
４．総ＩｇＭ（ＰＲＶ－３２７９活性のＰＤマーカー）

【0073】

【表1】

【0074】

ＰＲＶ－３２７９による用量依存性及び持続的なＢ細胞結合は、Ｂ細胞を含む循環免疫細胞サブセットを枯渇させることなく、免疫グロブリン産生の永続的阻害をもたらす。末梢血で減少した免疫グロブリンには、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＧ及びＩｇＥが含まれる。阻害は、抗原刺激（例えば、ワクチン接種）の非存在下又は存在下で観察することができる。これは、患者が機能する免疫系の一部としてＢ細胞などの循環免疫細胞を保持することができるように、非枯渇剤としてのＰＲＶ－３２７９の有利な安全上の特徴である。対照的に、細胞枯渇剤（例えば、リツキシマブ、オクレリズマブ、インビリズマブ）を受けている患者は、枯渇した細胞タイプを回復するのにかなりの時間（例えば、最大１年）を要する。これは、免疫不全が存在し、重篤な感染症のリスクが生涯を通じて残るＢＴＨＳの治療を考慮すると特に重要である。免疫能はまた、ＢＴＨＳが出生時から存在するので、小児における一次ワクチン接種シリーズにとって臨床的に重要である。

【0075】

別の態様では、本明細書に開示される方法で使用することができる医薬組成物、すなわち、例えば、有意な免疫原性を引き起こすＢＴＨＳ遺伝子治療を受けている間若しくは受けた後に、又は対象が生物治療剤（例えば、以前の野生型アデノウイルス感染に起因する、又はｒＡＡＶ治療への以前の曝露に起因する既存の抗ＡＡＶ抗体の場合）に対して既存の免疫原性を有していたために、免疫原性の低減又は抑制を必要とする対象において免疫原性を低減又は抑制するための医薬組成物が提供される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される組成物は、免疫原性を予防し、及び／又は既存の抗体を減少させるために、ＢＴＨＳ遺伝子治療を受ける前に患者に投与することができる。

【0076】

いくつかの実施形態では、医薬組成物は、本明細書に開示されるＢ細胞阻害剤及び薬学的に許容される担体を含む。Ｂ細胞阻害剤は、薬学的に許容され得る担体と共に医薬組成物に製剤化され得る。さらに、医薬組成物は、例えば、有意な免疫原性を引き起こす生物学的薬剤の投与中又は投与後に、それを必要とする対象において免疫原性を低減又は抑制するために患者を治療するための組成物の使用説明書を含むことができる。

【0077】

本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」は、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤、緩衝剤、並びに生理学的に適合性である他の賦形剤を含む。好ましくは、担体は、非経口、経口、又は局所投与に適している。投与経路に応じて、活性化合物、例えば、小分子又は生物学的薬剤は、化合物を不活性化し得る酸及び他の自然条件の作用から化合物を保護するために材料でコーティングされ得る。

【0078】

薬学的に許容される担体としては、滅菌水溶液又は分散液及び滅菌注射用溶液又は分散液の即時調製のための滅菌粉末、並びに錠剤、丸剤、カプセル剤などの調製のための従来の賦形剤が挙げられる。薬学的に活性な物質の製剤化のためのそのような媒体及び薬剤の使用は、当技術分野で公知である。任意の従来の媒体又は薬剤が活性化合物と不適合である場合を除いて、本明細書で提供される医薬組成物におけるその使用が企図される。補助活性化合物も組成物に組み込むことができる。

【0079】

薬学的に許容される担体は、薬学的に許容される抗酸化剤を含むことができる。薬学的に許容される酸化防止剤の例としては、以下が挙げられる。（１）アスコルビン酸、システイン塩酸塩、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなどの水溶性酸化防止剤；（２）油溶性酸化防止剤、例えばパルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、アルファ－トコフェロールなど；（３）金属キレート剤、例えばクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸など。

【0080】

本明細書で提供される医薬組成物に使用され得る適切な水性及び非水性担体の例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、及びそれらの適切な混合物、並びにオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルが挙げられる。必要な場合、適切な流動性は、例えば、レシチン等のコーティング材料の使用、分散液の場合には必要な粒径の維持、及び界面活性剤の使用によって維持することができる。多くの場合、等張剤、例えば糖、多価アルコール、例えばマンニトール、ソルビトール又は塩化ナトリウムを組成物に含めることが有用であり得る。注射用組成物の吸収時間の延長は、吸収を遅延させる作用剤、例えば、モノステアレート塩及びゼラチンをその組成物に含めることによって実現できる。

【0081】

これらの組成物はまた、保存剤、湿潤剤、乳化剤及び分散剤などの機能的賦形剤を含有し得る。

【0082】

治療用組成物は、典型的には、製造及び貯蔵の条件下で滅菌され、非系統原性であり、安定でなければならない。組成物は、溶液、マイクロエマルジョン、リポソーム、又は高薬物濃度に適した他の秩序構造として製剤化することができる。

【0083】

滅菌注射用溶液は、必要量の活性化合物を、必要に応じて上に列挙した成分の１つ又は組み合わせと共に適切な溶媒に組み込み、続いて例えば精密濾過によって滅菌することによって調製することができる。一般に、分散液は、塩基性分散媒体及び上に列挙されるものからの必要とされる他の成分を含有する無菌ビヒクルに活性化合物を組み込むことによって調製される。滅菌注射液の調製のための滅菌粉末の場合、調製方法としては、真空乾燥及び凍結乾燥（凍結乾燥）が挙げられ、これにより、活性成分及び任意のさらなる所望の成分の粉末が、予め滅菌濾過されたその溶液から得られる。活性薬剤は、滅菌条件下で、追加の薬学的に許容される担体、及び必要とされ得る任意の保存剤、緩衝剤又は噴射剤と混合され得る。

【0084】

微生物の存在の防止は、上記の滅菌手順によって、及び様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などを含めることによって確実にすることができる。等張剤、例えば糖、塩化ナトリウムなどを組成物に含めることも望ましい場合がある。さらに、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチン等の吸収を遅延させる薬剤を含めることによって、注射用医薬形態の長期吸収がもたらされ得る。

【0085】

投与レジメンは、最適な所望の応答（例えば、治療応答）を提供するように調整される。例えば、単回ボーラスを投与してもよく、いくつかの分割用量を経時的に投与してもよく、又は治療状況の緊急性によって示されるように用量を比例的に減少又は増加させてもよい。

【0086】

抗体を投与するための例示的な投与量範囲には、以下が含まれる：１０～１０００ｍｇ（抗体）／ｋｇ（患者の体重）、１０～８００ｍｇ／ｋｇ、１０～６００ｍｇ／ｋｇ、１０～４００ｍｇ／ｋｇ、１０～２００ｍｇ／ｋｇ、３０～１０００ｍｇ／ｋｇ、３０～８００ｍｇ／ｋｇ、３０～６００ｍｇ／ｋｇ、３０～４００ｍｇ／ｋｇ、３０～２００ｍｇ／ｋｇ、５０～１０００ｍｇ／ｋｇ、５０～８００ｍｇ／ｋｇ、５０～６００ｍｇ／ｋｇ、５０～４００ｍｇ／ｋｇ、５０～２００ｍｇ／ｋｇ、１００～１０００ｍｇ／ｋｇ、１００～９００ｍｇ／ｋｇ、１００～８００ｍｇ／ｋｇ、１００～７００ｍｇ／ｋｇ、１００～６００ｍｇ／ｋｇ、１００～５００ｍｇ／ｋｇ、１００～４００ｍｇ／ｋｇ、１００～３００ｍｇ／ｋｇ、及び１００～２００ｍｇ／ｋｇ。例示的な投与スケジュールには、３日に１回、５日に１回、７日に１回（すなわち、週に１回）、１０日に１回、１４日に１回（すなわち、２週間に１回）、２１日に１回（すなわち、３週間に１回）、２８日に１回（すなわち、４週間に１回）、月に１回、５週間に１回、及び６週間に１回が含まれる。

【0087】

いくつかの実施形態では、ＰＲＶ－３２７９の１用量当たり約５～４０ｍｇ／ｋｇ、約５～２０ｍｇ／ｋｇ又は約１０ｍｇ／ｋｇを、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、５週間に１回又は６週間に１回投与することができる。１用量、２用量又は３用量などの１つ以上の用量を投与することができる。投与はＩＶ注入によるものであり得る。前述の（例えば、１０ｍｇ／ｋｇ／用量の３回の用量、４週間に１回）の任意の組み合わせを、遺伝子治療製品を含む生物治療剤の免疫原性の低減のために使用することができる。いくつかの実施形態では、第１の用量は遺伝子治療の２～６週間前（例えば、４週間）に、第２の用量は遺伝子治療のほぼ同時期に、第３の用量は遺伝子治療の２～６週間後（例えば、４週間）に投与することができる。その後、遺伝子治療ベクター（例えば、ｒＡＡＶ）及び／又は導入遺伝子に対する特異的抗体の量を調べることによって、患者をモニタリングすることができる。抗体が検出されないか又はほとんど検出されない場合、追加のＰＲＶ－３２７９は必要ない。有意な量の抗体が存在する場合、免疫原性をさらに調節するために、ＰＲＶ－３２７９の１つ以上の用量を投与することができる。

【0088】

投与の容易さ及び投与量の均一性のために、単位剤形で非経口組成物を製剤化することが有利であり得る。本明細書で使用される単位剤形は、治療される患者のための単位剤形として適した物理的に別個の単位を指す。各単位は、任意の必要な医薬担体と組み合わせて所望の治療効果をもたらすように計算された所定量の活性薬剤を含む。単位剤形の仕様は、（ａ）活性化合物の固有の特徴及び達成される特定の治療効果、並びに（ｂ）個体における感受性の治療のための活性化合物などの配合技術に固有の制限によって決定され、それらに直接依存する。

【0089】

本明細書に開示される医薬組成物中の活性成分の実際の投与量レベルは、患者に有毒ではなく、特定の患者、組成物、及び投与様式に対して所望の治療応答を達成するのに有効な活性成分の量を得るように変化し得る。投与の文脈において本明細書で使用される「非経口」は、通常は注射による経腸及び局所投与以外の投与様式を意味し、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内、硬膜外及び胸骨内注射、並びに注入が含まれるが、これらに限定されない。

【0090】

本明細書で使用される「非経口投与」及び「非経口的に投与される」という語句は、通常は注射又は注入による経腸（すなわち、消化管を介する）及び局所投与以外の投与様式を指し、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内、硬膜外及び胸骨内注射、並びに注入が含まれるが、これらに限定されない。静脈内注射及び注入は、抗体投与に使用されることが（排他的ではないが）多い。

【0091】

本明細書で提供される薬剤を医薬品としてヒト又は動物に投与する場合、それらは単独で、又は例えば０．００１～９０％（例えば、０．００５～７０％、例えば、０．０１～３０％）の活性成分を薬学的に許容される担体と組み合わせて含有する医薬組成物として投与することができる。

【0092】

治療的使用及び方法
本明細書に開示される組成物は、様々な手段（例えば、ＡＡＶ及び他の野生型及び組換えベクター、レンチウイルス改変ヒト幹細胞）によって送達されるＢＨＴＳ遺伝子治療によって引き起こされる免疫原性を低減又は抑制するために使用することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるＢ細胞免疫調節剤は、例えばＢＨＴＳに関連するＴＡＦＡＺＺＩＮ欠損症などの遺伝性酵素欠損症のための導入遺伝子のｒＡＡＶ（組換えアデノ随伴ウイルス）ベクターベースのウイルス送達を改善するために使用することができる。

【0093】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるＢ細胞免疫調節剤は、全身、筋肉内、眼（高局所用量を必要とすることにより局所免疫応答が生じる）、及び中枢神経系（ＣＮＳ）（ＣＮＳからのウイルスカプシドの漏出がＣＮＳにおけるＡＡＶ取り込みを減少させる全身応答を誘導する）などの複数の送達経路（認識された免疫特権の部位であっても）によって誘発される限定的免疫応答を調節するために使用することができる。

【0094】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるＢ細胞免疫調節剤は、Ｂ細胞依存性である複数の限定的な免疫学的経路を調節するために使用することができ、それには以下が含まれる：
・中和抗体（ｎＡｂ）の開発
・抗体依存性細胞媒介性細胞傷害
・抗体依存性補体媒介性細胞傷害
・例えばＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）を介した自律的Ｂ細胞活性化
・Ｂ細胞媒介性Ｔ細胞共刺激
・Ｂ細胞媒介性抗原提示

【0095】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるＢ細胞免疫調節剤は、反復投与及び／又はＡＡＶ用量の増加などのＢ細胞調節を介して複数のＡＡＶ臨床用途を改善するために使用することができる。

【0096】

いくつかの実施形態では、ＰＲＶ－３２７９の投与後、二重特異性分子の注入終了時にピーク血漿中濃度が生じ、複数回投与時の蓄積は最小限であった。これは、ＰＲＶ－３２７９が良好な薬物動態特性を有することを示す。

【0097】

いくつかの実施形態では、ＰＲＶ－３２７９二重特異性剤の投与は、それ自体の免疫原性の阻害、すなわち薬物の用量の増加に伴う抗薬物抗体（ＡＤＡ）のより低い有病率及び／又は力価をもたらし得る。これは、他の免疫調節剤とは対照的である。さらに、これは、２０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ又は４０ｍｇ／ｋｇなどのＰＲＶ－３２７９の用量の増加が、免疫原性を追加することなく十分に忍容され得ることを示唆している。

【0098】

いくつかの実施形態では、ＰＲＶ－３２７９ ＡＤＡは、薬物動態（ＰＫ）、薬力学（ＰＤ）、安全性又は有効性に影響を及ぼさないことが観察されている。ＡＤＡは通常、少なくともＰＫ及びＰＤに影響を及ぼすため、これは驚くべきことである。理論に拘束されるものではないが、ＡＤＡはＰＲＶ－３２７９を中和しないと仮定されている。

【0099】

いくつかの実施形態では、ＰＲＶ－３２７９二重特異性剤は、用量依存的な様式で、投与時にナイーブ表現型及びメモリー表現型の両方を含むほとんど（例えば、＞８０～９０％）のＢ細胞に結合し、特定のより高用量の薬物の最後の投与後少なくとも４週間、Ｂ細胞の少なくとも５０％に結合したままである。これは、ＰＲＶ－３２７９のＰＤ効果の持続的な耐久性を示し、１ヶ月に１回（又はそれ以上）の投与を支持する。

【0100】

いくつかの実施形態では、ＰＲＶ－３２７９二重特異性薬物による用量依存性及び持続的なＢ細胞結合は、Ｂ細胞を含む任意の循環細胞サブセットの枯渇の非存在下で免疫グロブリン産生の持続的阻害をもたらす。末梢血で減少した免疫グロブリンには、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＧ及びＩｇＥが含まれる。阻害は、抗原刺激の非存在下又は存在下（例えば、ワクチン接種）で観察することができる。これは、患者がＢ細胞などの循環細胞を保持して免疫系の一部として機能することができるように、非枯渇剤としてのＰＲＶ－３２７９の有利な安全上の特徴である。対照的に、枯渇剤（例えば、リツキシマブ、オクレリズマブ、インビリズマブ）を受けている患者は、回復するのに長い時間（例えば、１年）を要する。

【0101】

いくつかの実施形態では、ＢＨＴＳ遺伝子治療は、全長コドン最適化ヒトＴＡＦＡＺＺＩＮ遺伝子を含む組換えＡＡＶベクター血清型９（ＡＡＶ９）であるＡＡＶ－Ｄｅｓ－ＴＡＺを介して提供することができる。選択された血清型は、ヒトウイルスにおいてあまり一般的ではなく、個体が以前のウイルス感染から循環する治療前抗体を有する可能性を低下させる。前臨床試験を実施して、ＢＴＨＳのノックダウン（ＫＤ）マウスモデルにおける臨床的有効性を検証した（Ｓｕｚｕｋｉ－Ｈａｔａｎｏ ２０１９ａ）。マウスでは、ベクターはレシピエントの組織に浸透し、骨格筋細胞及び心筋細胞における導入遺伝子発現及びＴＡＦＦＡＺＩＮ遺伝子産物の産生をもたらし、症候学の逆転をもたらす。

【0102】

ＫＤ ＢＴＨＳマウスモデルにおける遺伝子ベクターを用いた試験は、プロモーターの変化が転写、したがって注射を行った年齢に基づく組織発現の変動をもたらしたことを実証した。これは、ヒトにおける適用及び後の時点での再投与を可能にする投与又は治療の最適なタイミングについて考えるときに重要な概念である。

【0103】

図１は、ＡＡＶ－Ｄｅｓ－ＴＡＺベクター設計の概略図である。デスミンプロモーターは、 全長のヒトコドン最適化ＴＡＺ ｃＤＮＡ＋ポリＡテールの発現を駆動する。この配列はＡＡＶ逆方向末端反復（ＩＴＲ）に隣接しており、ｄｓＡＡＶを得るために必要な変化を含む左の隣接ＩＴＲを有する。

【0104】

図２は、例示的なコンストラクトＢ９５１（ｐｄｓ２ＴＲ－Ｄｅｓ－ｃｏＴＡＺ＿Ｄｕａｌ４）である。Ｂ９５１は、デスミンプロモーターによって制御されるコドン最適化完全長タファジンの自己相補的構築物である。配列を表２に示す。

【0105】

【表2】

【0106】

【表3】

【0107】

【表4】

【0108】

図３は、例示的なコンストラクトＣ０６４（ｐｄｓ２ＴＲ－Ｄｅｓ－ｃｏＴＡＺｉｓｏ２＿Ｄｕａｌ４）である。Ｃ０６４は、デルタ５又はエクソン５欠失タファジンｃＤＮＡを置換する。配列を表３に示す。

【0109】

【表5】

【0110】

【表6】

【0111】

【表7】

【0112】

いくつかの実施形態では、ＰＲＶ－３２７９とＡＡＶ－Ｄｅｓ－ＴＡＺ遺伝子治療との併用治療が提供される。本明細書に開示されるように、Ｂ細胞機能に対するＰＲＶ－３２７９の効果は一過性であり得る。これにより、Ｂ細胞集団を枯渇させず、したがって長期的に感染のリスクを増加させずに、遺伝子治療を送達し、免疫原性を低く保つことが可能になる。ＰＲＶ－３２７９は、免疫原性を低下させることによって遺伝子治療と組み合わせて使用するための理想的な候補であり、それによって遺伝子ベクターの即時有効性を高めると同時に、後の時点で遺伝子治療の再投与も可能にする可能性がある。抗ウイルスベクター抗体の形成の減少は、遺伝子治療の反復送達を必要とする予想される組織及び器官の成長を継続する小児患者にとって特に重要である。さらに、ＰＲＶ－３２７９がナイーブＢ細胞を阻害し、それによって遺伝子ベクターへの初期曝露で免疫応答を低下させるのに役立ち得ることを支持するデータがある。

【0113】

ＰＲＶ－３２７９の機序の知識及び遺伝子治療の免疫原性の理解に基づいて、１つの例示的な計画は、以下のようにＡＡＶ－Ｄｅｓ－ＴＡＺの治療過程中に３回ＰＲＶ－３２７９を投与することを含むことができる：ベクター送達の１週間前、送達の２週間後、及び２回目の投与の３～４週間後。

【実施例】

【0114】

実施された実験及び達成された結果を含む以下の実施例は、例示のみを目的として提供されており、本開示を限定するものと解釈されるべきではない。

【0115】

実施例１：成人を対象とした臨床試験デザイン
２つの全身投与量－３×１０^１３μｇ／ｋｇ及び１×１０^１４μｇ／ｋｇ－の遺伝子治療（ＡＡＶ－Ｄｅｓ－ＴＡＺ）の安全性及び有効性を試験するための９６週間、４×４回の二重交差第Ｉ／ＩＩ相臨床試験が本明細書で提供され、ＢＴＨＳを有する青年及び若年成人（１５～４０歳）の４つのコホート（ｎ＝合計８）において、標準予防を用い、シロリムス＋ＰＲＶ－３２７９を－１週間、＋２週間、＋４週間で投与した。

【0116】

標準的な予防法を有する対象は、投薬の－２１日前から開始して毎週リツキシマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、用量３７５ｍｇ／ｍ２）を受けることができる。前投薬は、リツキシマブの３０～６０分前に投与され、アセトアミノフェン（Ｔｙｌｅｎｏｌ）及びジフェンヒドラミン（Ｂｅｎａｄｒｙｌ）を含み得る。さらに、対象は、投与の－７日前から開始して投与後１２週目まで毎日シロリムス（３～７ｎｇ／ｍＬのトラフ血清シロリムスレベルを維持するように調整された、用量０．６～１ｍｇ／ｍ２／日のＷｙｅｔｈ）を投与することができる。

【0117】

実験的予防法を有する対象は、投与の－７日前、＋１４日前、及び＋２８日前からＰＲＶ－３２７９を受けることができる。前投薬は、ＰＲＶ－３２７９の３０～６０分前に投与することができ、アセトアミノフェン（Ｔｙｌｅｎｏｌ）及びジフェンヒドラミン（Ｂｅｎａｄｒｙｌ）を含むことができる。さらに、対象は、投与の－７日前から開始して投与後１２週目まで毎日シロリムス（３～７ｎｇ／ｍＬのトラフ血清シロリムスレベルを維持するように調整された、用量０．６～１ｍｇ／ｍ２／日のＷｙｅｔｈ）を投与することができる。

【0118】

対象は、身体検査及び定期的な検査評価によって感染についてモニターすることができ、臨床的に必要と考えられる場合は適切に処置することができる。

【0119】

本試験の主な安全性目的は、ＢＴＨＳ中のＰＲＶ－３２７９を含むｒＡＡＶ９－Ｄｅｓ－ＴＡＺの全身ＩＶ送達の安全性及び忍容性を調査することである。安全性転帰は、免疫系応答、安静時の心機能、心不整脈及び主要有害心イベントを含み得る。

【0120】

ＡＡＶ－Ｄｅｓ－ＴＡＺに特異的な臨床目的には以下が含まれる：（１）ＡＡＶ－Ｄｅｓ－ＴＡＺの全身送達の安全性及び忍容性を試験すること、及び（２）ＡＡＶ－Ｄｅｓ－ＴＡＺの全身送達の有効性（ＶＯ２ｐｅａｋ）を試験すること。

【0121】

ＰＲＶ－３２７９に特異的な臨床目的には、以下が含まれる：（１）血液中の抗ＡＡＶ９抗体のレベル（ＡＡＶベクターの免疫原性）、及び（２）総ＩｇＭ（ＰＲＶ－３２７９活性のＰＤマーカー）。

【0122】

コホートＡ（ｎ＝４）では、３人の対象に、３×１０^１３μｇ／ｋｇのＡＡＶ－Ｄｅｓ－ＴＡＺの１回の低用量を投与するように無作為化し、１人の対象に１×１０^１４μｇ／ｋｇの１回の高用量を受けるように無作為化することができる。これは、（リツキシマブ及びシロリムスの再投与を予測するための標準的な予防法を用いて行うことができる。

【0123】

１６週間後、１日目に低用量を受けた３人の対象はクロスオーバーし、１６週目に逆用量又は高用量を受けることができる。

【0124】

１日目に高用量を受けた１人の対象は、１６週目にプラセボを受けることができる。

【0125】

コホートＢ（ｎ＝４）では、３人の対象に、１×１０^１４μｇ／ｋｇ ＡＡＶ９－Ｄｅｓ－ＴＡＺの高用量を１回投与し、１人の対象に３×１０^１３μｇ／ｋｇ ｒＡＡＶ９－Ｄｅｓ－ＴＡＺの低用量を１回投与するように無作為化することができる。１６週間後、１６週目に低用量を受けた１人の対象は、クロスオーバーし、３２週目に高用量を受けることができる。１６週目に高用量を受けた３名の対象は、３２週目にプラセボを受けることができる。これは、リツキシマブ及びシロリムスの再投与を予測するための標準的な予防法を用いて行うことができる。

【0126】

コホートＣ（ｎ＝４）では、３人の対象に、３×１０^１３μｇ／ｋｇのＡＡＶ－Ｄｅｓ－ＴＡＺの１回の低用量を投与するように無作為化し、１人の対象を、１×１０^１４μｇ／ｋｇの１回の高用量を投与するように無作為化することができる。これは、ＰＲＶ－３２７９及びシロリムスの再投与を予測するために実験的予防を用いて行うことができる。

【0127】

コホートＤ（ｎ＝４）では、３人の対象に、１×１０^１４μｇ／ｋｇ ＡＡＶ９－Ｄｅｓ－ＴＡＺの高用量を１回投与し、１人の対象に３×１０^１３μｇ／ｋｇ ｒＡＡＶ９－Ｄｅｓ－ＴＡＺの低用量を１回投与するように無作為化することができる。１６週間後、１６週目に低用量を受けた１人の対象は、クロスオーバーし、３２週目に高用量を受けることができる。１６週目に高用量を受けた３名の対象は、３２週目にプラセボを受けることができる。これは、ＰＲＶ－３２７９及びシロリムスの再投与を予測するために実験的予防を用いて行うことができる。

【0128】

実施例２：ＰＲＶ－３２７９とＡＡＶ－Ｄｅｓ－ＴＡＺ遺伝子治療との併用治療のための毒性試験設計
１２０匹の同齢ｈｕＣＤ３２Ｂマウスを本試験で使用することができる。

【0129】

ＰＲＶ－３２７９サロゲート要件：
６群×２８日間×１０匹のマウス×２５ｇのマウス×５０ｍｇ／ｋｇ＝２１００ｍｇ
６群×８４日間×１０匹のマウス×２５ｇのマウス×５０ｍｇ／ｋｇ＝６３００ｍｇ
＋３０％の過量＝約１１ｇのＰＲＶ－３２７９サロゲート。

【0130】

毒性試験は、以下のスケジュールに従って、低用量（例えば、３×１０^１３μｇ／ｋｇ）又は高用量（例えば、１×１０^１４μｇ／ｋｇ）の遺伝子治療（ＡＡＶ－Ｄｅｓ－ＴＡＺ）５０ｍｇ／ｋｇ／日ＰＲＶ－３２７９を２８日間又は８４日間受けたマウスで行うことができる。

【0131】

【表8】

【0132】

改変
本開示の記載された方法及び組成物の改変及び変形は、本開示の範囲及び精神から逸脱することなく当業者には明らかであろう。本開示を特定の実施形態に関連して説明してきたが、特許請求される本開示はそのような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことを理解されたい。実際、本開示を実施するための記載された態様の様々な修正は、本開示が存在する関連分野の当業者によって意図され理解され、以下の特許請求の範囲によって表される本開示の範囲内にある。

【0133】

参照による組み込み
本明細書で言及されるすべての特許及び刊行物は、あたかも各独立した特許及び刊行物が参照により組み込まれることが具体的且つ個別に示されているのと同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。

【0134】

参考文献：
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【図1】

【図2】

【図3】

【配列表】

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【国際調査報告】