特表 2025-500619 皮膚吸収増進のための陽イオン性リポソーム、及びその製造方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2025-01-09

(54)【発明の名称】皮膚吸収増進のための陽イオン性リポソーム、及びその製造方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 8/14 20060101AFI20241226BHJP

   A61K 8/55 20060101ALI20241226BHJP

   A61K 8/68 20060101ALI20241226BHJP

   A61K 8/63 20060101ALI20241226BHJP

   A61K 8/73 20060101ALI20241226BHJP

   A61Q 19/00 20060101ALI20241226BHJP

   B01J 13/02 20060101ALI20241226BHJP

【ＦＩ】

A61K8/14

A61K8/55

A61K8/68

A61K8/63

A61K8/73

A61Q19/00

B01J13/02

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024540895

(86)(22)【出願日】2022-12-28

(85)【翻訳文提出日】2024-07-05

(86)【国際出願番号】 KR2022021511

(87)【国際公開番号】W WO2023132553

(87)【国際公開日】2023-07-13

(31)【優先権主張番号】10-2022-0002164

(32)【優先日】2022-01-06

(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】517039760

【氏名又は名称】コスマックス、インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110000729

【氏名又は名称】弁理士法人ユニアス国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】キム、ス ジ

(72)【発明者】

【氏名】イ、ジュン ベ

(72)【発明者】

【氏名】パク、ミョン サム

【テーマコード（参考）】

4C083

4G005

【Ｆターム（参考）】

4C083AC112

4C083AC122

4C083AC542

4C083AC641

4C083AC642

4C083AC852

4C083AD042

4C083AD092

4C083AD321

4C083AD322

4C083AD352

4C083AD491

4C083AD492

4C083AD571

4C083AD572

4C083AD632

4C083CC01

4C083CC05

4C083DD23

4C083DD45

4C083EE12

4C083EE16

4C083FF05

4G005AA07

4G005AB02

4G005AB03

4G005BB06

4G005BB08

4G005BB17

4G005DB30Z

4G005DC15W

4G005DE05Z

4G005EA03

(57)【要約】

高圧乳化装置を利用し、陽イオン性リポソームを製造する方法、該方法によって製造された陽イオン性リポソーム、該陽イオン性リポソームを含む化粧料組成物、食品組成物及び薬学的組成物を提供する。該陽イオン性リポソームを製造する方法によれば、高圧乳化装置を利用し、毒性有機溶媒を使用せずに皮膚に安全なリポソームを製造し、リポソームの量産が可能である。また、該方法によって製造された陽イオン性リポソームは、剤形安定性にすぐれ、正電荷を帯びるので、内部に担持された有効成分の皮膚吸収能を増進させうる。従って、該陽イオン性リポソームを化粧品、食品、医薬品などに使用しうる。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

リン脂質、セラミド及びコレステロールを含む第１溶液を製造する段階と、
陽イオン供与物質を含む第２溶液と、前記第１溶液との混合物を撹拌する段階と、
高圧乳化装置を利用し、前記撹拌された混合物から、陽イオン性リポソームを製造する段階と、を含む、陽イオン性リポソームを製造する方法。

【請求項2】

前記リン脂質は、水添レシチンである、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記リン脂質及び前記コレステロールの重量比は、４．５：１ないし１．５：１である、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

前記コレステロールは、陽イオン性リポソーム総重量につき、０．１ないし５．０重量％で含まれる、請求項１に記載の方法。

【請求項5】

前記陽イオン供与物質は、キトサンである、請求項１に記載の方法。

【請求項6】

前記陽イオン供与物質は、陽イオン性リポソーム総重量につき、０．０１超過ないし５．０重量％で含まれる、請求項１に記載の方法。

【請求項7】

前記高圧乳化装置の圧力条件は、８００ないし１，５００ｂａｒである、請求項１に記載の方法。

【請求項8】

請求項１ないし７のうちいずれか１項に記載の方法によって製造された、陽イオン性リポソーム。

【請求項9】

前記陽イオン性リポソームの粒子サイズは、５０ないし３００ｎｍである、請求項１に記載の陽イオン性リポソーム。

【請求項10】

前記陽イオン性リポソームのゼータ電位は、２０ないし５０ｍＶである、請求項１に記載の陽イオン性リポソーム。

【請求項11】

前記陽イオン性リポソームは、二重層または多重層の構造を有する、請求項１に記載の陽イオン性リポソーム。

【請求項12】

請求項８に記載の陽イオン性リポソームを含む、化粧料組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は、２０２２年１月６日に出願された大韓民国特許出願第１０－２０２２－０００２１６４号を優先権として主張し、前述の明細書全体は、本出願の参考文献である。

【0002】

本発明は、有効成分の皮膚吸収増進のための陽イオン性リポソーム、それを含む化粧料組成物、及びそれらの製造方法に関する。

【背景技術】

【0003】

皮膚障壁は、角質層細胞間の細胞外空間を充填する脂質分子によって構成されていることにより、皮膚の恒常性維持、並びに多様な外部物理的刺激、及び水和／脱水などに係わる変化からの皮膚の保護に非常に重要な役割を行う。しかしながら、有効成分を皮膚内に伝達するとき、そのような皮膚障壁は、若干不利に作用する。特に、該有効成分は、最も普遍的に、細胞内経路（ｉｎｔｅｒ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｐａｔｈｗａｙ）を介して皮膚内に伝達されると知られているが、親水性有効成分の場合、脂質分子によって構成されているそのような経路を通過することは、さらに困難である。従って、それを克服するためには、生体親和性皮膚伝達システムが必要である。

【0004】

リポソームは、有効成分の皮膚吸収増進のために使用される代表的な皮膚伝達体であり、生体内物質であるリン脂質（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ）によって構成されており、生体親和性が高く、化粧品分野においても、活用度が高い方である。特に、親水性物質と親油性物質とを同時に担持することができる特徴を有しており、多様な効能成分の皮膚伝達に有利である。また、該有効成分を、二重層（ｂｉ－ｌａｙｅｒ）構造内または多重層（ｍｕｌｔｉ－ｌａｙｅｒ）構造内に安定して担持することができ、乳化剤形だけではなく、外観が透明な可溶化剤形まで、多様な化粧品剤形に適用が可能である。リポソームは、膜の構成成分により、弾性リポソーム、高分子コーティングリポソーム、陽イオンリポソームなどに製造されうる。そのうち、陽イオンリポソームは、正のゼータ電位を有するリポソームであり、負電荷を帯びる皮膚表面との静電気的引力により、皮膚への接近がさらに容易であり、該有効成分の皮膚吸収増進に役に立つ。

【0005】

リポソームの原料化のためには、安定性と、実際の剤形に適用されたとき、担持された有効成分の効能発揮が良好になされるか否かの評価が最も重要である。リポソームは、薄膜水和法（ｔｈｉｎ ｆｉｌｍ ｈｙｄｒａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ）を介して製造されることが、最も基本的な方法であるが、安定性や量産化などにおいては、限界がある。最近では、リポソーム製造のために、マイクロフルイダイザ（ＭＦ：ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ）を活用する製造方法が報告されている。しかしながら、該マイクロフルイダイザを介して製造するとき、リポソーム特有粒子形態である二重層（ｂｉ－ｌａｙｅｒ）形態または多重層（ｍｕｌｔｉ－ｌａｙｅｒ）形態の粒子が生成され難いという側面がある。従って、そのように製造されたリポソームの形態確認時、及び剤形内への適用時、有効成分の皮膚伝達に実際に一助となるか否かということに係わる効能評価を介して確認する必要がある。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

一態様は、高圧乳化装置を利用し、陽イオン性リポソームを製造する方法を提供する。

【0007】

他の態様は、前記方法によって製造された陽イオン性リポソームを提供する。

【0008】

さらに他の態様は、前記陽イオン性リポソームを含む化粧料組成物を提供する。

【0009】

さらに他の態様は、前記陽イオン性リポソームを含む皮膚外用剤組成物を提供する。

【0010】

さらに他の態様は、前記陽イオン性リポソームを含む薬学的組成物を提供する。

【0011】

さらに他の態様は、前記陽イオン性リポソームを含む食品組成物を提供する。

【課題を解決するための手段】

【0012】

一態様は、高圧乳化装置を利用し、陽イオン性リポソームを製造する方法を提供する。
前記方法は、リン脂質（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ）、セラミド及びコレステロールを含む第１溶液を製造する段階と、陽イオン供与物質を含む第２溶液と、前記第１溶液との混合物を撹拌する段階と、高圧乳化装置を利用し、前記撹拌された混合物から、陽イオン性リポソームを製造する段階と、を含む。

【0013】

従来のリポソーム製造方法において、薄膜水和法は、有機溶媒が使用され、量産が困難であるという問題点がある。それと異なり、前述の一態様による陽イオン性リポソームの製造方法は、高圧乳化装置を利用して製造されるために、有機溶媒の使用が不要であり、量産も容易である。

【0014】

前記方法は、リン脂質、セラミド及びコレステロールを含む第１溶液を製造する段階を含む。

【0015】

前記第１溶液は、第１溶液に含まれる成分を加温溶解させることによって製造されうる。前記加温溶解時の温度は、６０ないし９０℃、６０ないし８５℃、６０ないし８０℃、６５ないし９０℃、６５ないし８５℃、６５ないし８０℃、７０ないし９０℃、７０ないし８５℃、または７０ないし８０℃であり得る。

【0016】

前記リン脂質は、極性を帯びるリン酸塩と、非極性である脂肪酸と、を含む脂質の一種であり、生体膜の主要成分である。前記リン脂質は、天然リン脂質または合成リン脂質であり得る。前記リン脂質は、レシチン（ｌｅｃｉｔｈｉｎ）、水添（ｈｙｄｒｏｇｅｎａｔｅｄ）レシチン、ホスファチジルコリン（ＰＣ）、ホスファチジルグリセロール（ＰＧ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、ホスファチド酸（ＰＡ）、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）、卵ホスファチジルコリン（ＥＰＣ）、卵ホスファチジルグリセロール（ＥＰＧ）、卵ホスファチジルエタノールアミン（ＥＰＥ）、卵ホスファチジルセリン（ＥＰＳ）、卵ホスファチド酸（ＥＰＡ）、卵ホスファチジルイノシトール（ＥＰＩ）、大豆ホスファチジルコリン（ＳＰＣ）、大豆ホスファチジルグリセロール（ＳＰＧ）、大豆ホスファチジルエタノールアミン（ＳＰＥ）、大豆ホスファチジルセリン（ＳＰＳ）、大豆ホスファチド酸（ＳＰＡ）、大豆ホスファチジルイノシトール（ＳＰＩ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）、ヘキサデシルホスホコリン（ＨＥＰＣ）、水添大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルグリセロール（ＤＳＰＧ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、パルミトイルステアロイルホスファチジルコリン（ＰＳＰＣ）、パルミトイルステアロイルホスファチジルグリセロール（ＰＳＰＧ）、モノオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＭＯＰＥ）、１－パルミトイル－２－オレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、ポリエチレングリコールジステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ－ＤＳＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルセリン（ＤＰＰＳ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスファチジルセリン（ＤＯＰＳ）、ジミリストイルホスファチジルセリン（ＤＭＰＳ）、ジステアロイルホスファチジルセリン（ＤＳＰＳ）、ジパルミトイルホスファチド酸（ＤＰＰＡ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスファチド酸（ＤＯＰＡ）、ジミリストイルホスファチド酸（ＤＭＰＡ）、ジステアロイルホスファチド酸（ＤＳＰＡ）、ジパルミトイルホスファチジルイノシトール（ＤＰＰＩ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスファチジルイノシトール（ＤＯＰＩ）、ジミリストイルホスファチジルイノシトール（ＤＭＰＩ）、ジステアロイルホスファチジルイノシトール（ＤＳＰＩ）、またはその組み合わせであり得るが、それらに制限されるものではない。前記リン脂質は、水添レシチンであり得る。

【0017】

前記リン脂質は、陽イオン性リポソーム総重量につき、０．１ないし５．０重量％、０．１ないし４．０重量％、０．１ないし３．０重量％、０．１ないし２．０重量％、０．１ないし１．０重量％、０．１ないし０．７重量％、０．３ないし５．０重量％、０．３ないし４．０重量％、０．３ないし３．０重量％、０．３ないし２．０重量％、０．３ないし１．０重量％、０．３ないし０．７重量％、０．４ないし２．０重量％、０．４ないし１．０重量％、０．４ないし０．７重量％、または０．４ないし０．６重量％で含まれるものであり得る。

【0018】

前記セラミドは、セラミドＮＳ、セラミドＡＳ、セラミドＥＯＳ、セラミドＮＤＳ、セラミドＡＤＳ、セラミドＥＯＤＳ、セラミドＮＰ、セラミドＡＰ、セラミドＥＯＰ、セラミドＮＨ、セラミドＡＨ、セラミドＥＯＨ、またはその組み合わせであり得るが、それらに制限されるものではない。

【0019】

前記セラミドは、陽イオン性リポソーム総重量につき、０．００１ないし０．５重量％、０．００１ないし０．１重量％、０．００５ないし０．５重量％、０．００５ないし０．１重量％、０．０１ないし０．５重量％、０．０１ないし０．１重量％、または０．０１ないし０．０５重量％で含まれるものであり得る。前記セラミドの含量は、生体皮膚との類似性を高めるために、通常の技術者が、適切な範囲のうちから選択しうる。

【0020】

前記リン脂質及び前記コレステロールの重量比は、５：１ないし１：１、４．５：１ないし１．５：１、４：１ないし１．５：１、３．５：１ないし１．５：１、３：１ないし１．５：１、２．５：１ないし１．５：１、４．５：１ないし２：１、４：１ないし２：１、３．５：１ないし２：１、３：１ないし２：１、２．５：１ないし２：２、または２：１であり得る。前記コレステロールの含量が、リン脂質含量に比べ、過度に少ない（例：リン脂質及びコレステロールの重量比が５：１である）か、あるいはリン脂質含量と同等以上に多い（例：リン脂質及びコレステロールの重量比が１：１である）場合、相が分離されるか、あるいは懸濁現象が生じうる。従って、前記リン脂質及び前記コレステロールの重量比は、５未満：１、ないし１超過：１であり得る。前記重量比のリン脂質及びコレステロールを使用することにより、高圧乳化装置を介するリポソーム製造方法を使用しても、リポソーム特有の粒子形態である二重層（ｂｉ－ｌａｙｅｒ）形態または多重層（ｍｕｌｔｉ－ｌａｙｅｒ）形態の粒子を得ることができる。一実施例において、リン脂質及びコレステロールの重量比が２：１である場合、常温において５週以上、粒子サイズ及びゼータ電位（ｚｅｔａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ）が変化せずに安定していることを確認した。

【0021】

前記コレステロールは、陽イオン性リポソーム総重量につき、０．１ないし５．０重量％、０．１ないし４．０重量％、０．１ないし３．０重量％、０．１ないし２．０重量％、０．１ないし１．０重量％、０．１ないし０．５重量％、０．１ないし０．４重量％、０．１ないし０．３重量％、０．２ないし５．０重量％、０．２ないし４．０重量％、０．２ないし３．０重量％、０．２ないし２．０重量％、０．２ないし１．０重量％、０．２ないし０．５重量％、０．２ないし０．４重量％、または０．２ないし０．３重量％で含まれるものであり得る。該コレステロールの含量が前記範囲を外れる場合、リポソームの膜安定性が低下されうる。

【0022】

前記第１溶液は、リン脂質、コレステロール及びセラミドを溶解させうる溶媒を含むものであり得る。前記第１溶液は、ポリオールをさらに含むものであり得る。前記第１溶液は、ジプロピレングリコールをさらに含むものであり得る。前記ジプロピレングリコールは、脂質部または油状物質を溶解させるために使用されうる。前記ジプロピレングリコールは、陽イオン性リポソーム総重量につき、５ないし２０重量％、５ないし１５重量％、５ないし１２重量％、８ないし２０重量％、８ないし１５重量％、８ないし１２重量％、または１０重量％で含まれるものであり得るが、それらに制限されるものではない。
前記第１溶液は、前記陽イオン性リポソームの物性に実質的な影響を及ぼさない追加成分をさらに含むものであり得る。前記追加成分の含量は、目的とするところにより、陽イオン性リポソームの物性に実質的な影響を及ぼさない範囲内において、通常の技術者が適切に選択しうる。

【0023】

前記第１溶液は、水添レシチン、コレステロール、セラミド及びジプロピレングリコールによって構成されうるが、それらに制限されるものではない。
前記方法は、陽イオン供与物質を含む第２溶液と、前記第１溶液との混合物を撹拌する段階を含む。

【0024】

前記第２溶液は、陽イオン供与物質を含むことにより、最終的に製造されるリポソームが、正電荷（＋）を帯びるようにしうる。前記陽イオン供与物質は、ラウルジモニウムヒドロキシプロピル加水分解小麦タンパク質（ｌａｕｒｄｉｍｏｎｉｕｍ ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ ｈｙｄｒｏｌｙｚｅｄ ｗｈｅａｔ ｐｒｏｔｅｉｎ）、グアーヒドロキシプロピルトリモニウムクロリド（ｇｕａｒ ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌｔｒｉｍｏｎｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ポリクアテルニウム－７（ｐｏｌｙｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ－７）、ポリクアテルニウム－１０（ｐｏｌｙｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ－１０）、ポリクアテルニウム－１１（ｐｏｌｙｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ－１１）、ポリクアテルニウム－２２（ｐｏｌｙｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ－２２）、ポリクアテルニウム－５１（ｐｏｌｙｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ－５１）、ポリクアテルニウム－６７（ｐｏｌｙｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ－６７）、ポリクアテルニウム－８０（ｐｏｌｙｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ－８０）、コカミドプロピルアミンオキシド（ｃｏｃａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｅ ｏｘｉｄｅ）、ステアルアミドプロピルジメチルアミン（ｓｔｅａｒａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）、ベヘントリモニウムクロリド（ｂｅｈｅｎｔｒｉｍｏｎｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）及びキトサンによってなる群のうちから選択された１種以上であり得るが、それらに制限されるものではない。前記陽イオン供与物質は、陽イオン性多糖類であり得る。前記陽イオン性多糖類は、天然多糖類または合成多糖類であり得る。前記陽イオン供与物質は、キトサンであり得る。

【0025】

前記陽イオン供与物質は、陽イオン性リポソーム総重量につき、０．０１重量％超過、０．０１超過ないし５．０重量％、０．０１超過ないし４．０重量％、０．０１超過ないし３．０重量％、０．０１超過ないし２．０重量％、０．０５重量％以上、０．０５ないし５．０重量％、０．０５ないし４．０重量％、０．０５ないし３．０重量％、０．０５ないし２．０重量％、０．０５ないし１．５重量％、０．０５ないし１．０重量％、０．０５ないし０．５重量％、０．０５ないし０．２重量％、または０．０５ないし０．１重量％で含まれるものであり得る。前記陽イオン供与物質が陽イオン性リポソーム総重量につき、０．０１重量％以下で含まれる場合、リポソームのゼータ電位がマイナス（－）でもあり、それにより、陰イオン性リポソームが得られる。従って、前記陽イオン供与物質は、陽イオン性リポソーム総重量につき、０．０１重量％超過で含まれることが望ましい。前記陽イオン供与物質が陽イオン性リポソーム総重量につき、０．０５重量％以上含まれる場合、ゼータ電位２０ｍＶ以上の陽イオン性リポソームを得ることができる。
前記第２溶液は、陽イオン供与物質を溶解させうる溶媒を含むものであり得る。前記第２溶液は、親水性溶媒を含むものであり得る。例えば、前記親水性溶媒は、水（例：蒸留水）であり得るが、それに制限されるものではない。

【0026】

前記第２溶液は、ブチレングリコールをさらに含むものであり得る。前記ブチレングリコールを含めることにより、リポソーム内に担持される成分の溶解度を向上させ、かつ／あるいは皮膚保湿力が向上されうる。前記ブチレングリコールは、陽イオン性リポソーム総重量につき、５ないし２０重量％、５ないし１５重量％、５ないし１２重量％、８ないし２０重量％、８ないし１５重量％、８ないし１２重量％、または１０重量％で含まれるものであり得るが、それらに制限されるものではない。

【0027】

前記第２溶液は、親水性有効成分をさらに含むものであり得る。前記親水性有効成分は、皮膚機能性有効成分であり得る。前記皮膚機能性は、皮膚美白、保湿、皮膚障壁強化、抗酸化、抗炎、抗老化、しわ改善、皮膚鎮静などであり得るが、それらに制限されるものではない。前記親水性有効成分は、公知されたものでるならば、その種類を制限するものではなく、使用しうる。例えば、前記親水性有効成分は、ニアシンアミドであり得る。
前記親水性有効成分の含量は、成分の種類及び目的を考慮し、陽イオン性リポソームの物性に実質的な影響を及ぼさない範囲内において、通常の技術者が適切に選択しうる。具体的には、前記親水性有効成分は、陽イオン性リポソーム総重量につき、０．００１ないし３０重量％、０．００１ないし２０重量％、または０．００１ないし１０重量％で含まれるものであり得る。例えば、前記親水性有効成分がニアシンアミドである場合、前記ニアシンアミドは、陽イオン性リポソーム総重量につき、０．００１ないし３０重量％、０．００１ないし２０重量％、０．００１ないし１５重量％、０．０１ないし３０重量％、０．０１ないし２０重量％、０．０１ないし１５重量％、０．１ないし３０重量％、０．１ないし２０重量％、０．１ないし１５重量％、１ないし３０重量％、１ないし２０重量％、または１ないし１５重量％で含まれるものであり得るが、それらに制限されるものではない。

【0028】

前記第２溶液は、前記陽イオン性リポソームの物性に実質的な影響を及ぼさない追加成分をさらに含むものであり得る。前記追加成分の含量は、目的とするところにより、陽イオン性リポソームの物性に実質的な影響を及ぼさない範囲内において、通常の技術者が適切に選択しうる。

【0029】

前記撹拌は、前記第２溶液に、前記第１溶液を徐々に投入または混合しながら行われうる。

【0030】

前記撹拌は、室温、例えば、１５ないし３５℃、１５ないし３０℃、２０ないし３５℃、または２０ないし３０℃で行われうる。

【0031】

前記撹拌は、１，５００ないし３，５００ｒｐｍ、１，５００ないし３，０００ｒｐｍ、２，０００ないし３，５００ｒｐｍ、または２，０００ないし３，０００ｒｐｍで行われうる。前記撹拌は、３０秒ないし３０分、３０秒ないし２０分、３０秒ないし１０分、３０秒ないし５分、１分ないし３０分、１分ないし２０分、１分ないし１０分、または１分ないし５分間行われうる。

【0032】

前記撹拌は、一般的な方法によって行われ、例えば、ホモミキサを使用して行われうる。

【0033】

前記方法は、高圧乳化装置を利用し、前記撹拌された混合物から、陽イオン性リポソームを製造する段階を含む。

【0034】

前記陽イオン性リポソームを製造する段階において、高圧乳化装置を利用し、前記撹拌された混合物を高圧乳化（ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｍｕｌｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ）処理しうる。
前記高圧乳化装置は、公知されたものであるならば、その種類を制限するものではないが、例えば、マイクロフルイダイザ（ＭＦ：ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ）または高圧均質機（ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ）であり得る。

【0035】

前記高圧乳化装置の圧力条件は、８００ないし１，５００ｂａｒ、８００ないし１，２００ｂａｒ、８００ないし１，１００ｂａｒ、８００ないし１０００ｂａｒ、９００ないし１，５００ｂａｒ、９００ないし１，２００ｂａｒ、９００ないし１，１００ｂａｒ、９００ないし１，０００ｂａｒ、１，０００ないし１，５００ｂａｒ、１，０００ないし１，２００ｂａｒ、１，０００ないし１，１００ｂａｒ、または１，０００ｂａｒであり得る。前記圧力が過度に低い場合、ナノ粒子が正しく形成されないのである。前記圧力が過度に高い場合、物理的力が過度に適用されて、安定度が下落しうる。

【0036】

前記高圧乳化装置は、２サイクル（ｃｙｃｌｅ）以上、３サイクル以上、２サイクルないし５サイクル、２サイクルないし４サイクル、３サイクルないし５サイクル、または３サイクルの条件で適用されうる。

【0037】

前記高圧乳化装置の圧力条件及びサイクル条件において陽イオン性リポソームを製造する場合、剤形安定性にすぐれる陽イオン性ナノリポソームを得ることができる。
前記高圧乳化装置の圧力条件及びサイクル条件において、前記陽イオン性リポソームを製造する場合、リポソーム特有の粒子形態である二重層（ｂｉ－ｌａｙｅｒ）形態または多重層（ｍｕｌｔｉ－ｌａｙｅｒ）形態の粒子を得ることができる。

【0038】

前記陽イオン性リポソームは、高圧乳化装置を利用して製造されるので、製造過程において、毒性有機溶媒を使用せずに安全であり、リポソームの量産が可能である。

【0039】

他の態様は、前記一態様による方法によって製造された陽イオン性リポソームを提供する。

【0040】

前記方法によって製造された陽イオン性リポソームは、製造過程において、毒性有機溶媒を使用しないので、無毒性であり得る。一実施例において、前記方法によって製造された陽イオン性リポソーム、及びそれを含む化粧料組成物は、皮膚刺激指数評価結果、無刺激であり、皮膚に安全であることを確認した。従って、前記陽イオン性リポソームは、化粧品、食品、医薬品などに安全に使用されうる。

【0041】

前記陽イオン性リポソームの粒子サイズは、５０ないし３００ｎｍ、５０ないし２５０ｎｍ、１００ないし３００ｎｍ、１００ないし２５０ｎｍ、１５０ないし３００ｎｍ、１５０ないし２５０ｎｍ、２００ないし３００ｎｍ、または２００ないし２５０ｎｍであり得る。前記陽イオン性リポソームの平均粒子サイズは、２００ないし２５０ｎｍであり得る。従って、前記陽イオン性リポソームは、ナノリポソームであり得る。前記陽イオン性リポソームは、ナノサイズであるので、皮膚透過効能にすぐれてもいる。

【0042】

前記陽イオン性リポソームのゼータ電位は、２０ないし５０ｍＶ、２０ないし４５ｍＶ、２５ないし５０ｍＶ、または２５ないし４０ｍＶであり得る。前記陽イオン性リポソームは、正電荷（＋）を帯びるために、負電荷（－）を帯びる皮膚表面に、静電気的引力を利用し、効果的に吸着され、それにより、リポソーム内に担持された皮膚効能成分の皮膚吸収能を向上させうる。

【0043】

前記陽イオン性リポソームは、室温において５週以上保管しても、粒子サイズ及びゼータ電位が良好に維持されるので、剤形安定性にすぐれてもいる。

【0044】

前記陽イオン性リポソームは、二重層（ｂｉ－ｌａｙｅｒ）または多重層（ｍｕｌｔｉ－ｌａｙｅｒ）の構造を有することであり得る。前記陽イオン性リポソームは、二重層（ｂｉ－ｌａｙｅｒ）構造のリポソーム、及び多重層（ｍｕｌｔｉ－ｌａｙｅｒ）構造のリポソームが混合されたものであり得る。一実施例において、前記陽イオン性リポソームは、高圧乳化装置を利用して製造したにもかかわらず、二重層（ｂｉ－ｌａｙｅｒ）または多重層（ｍｕｌｔｉ－ｌａｙｅｒ）のリポソーム特有形態を有することを確認した。

【0045】

前記陽イオン性リポソームは、リポソーム内に、皮膚機能性有効成分が担持されたものであり得る。前記皮膚機能性有効成分は、親水性有効成分であり得る。前記皮膚機能性有効成分は、ニアシンアミドであり得るが、それに制限されるものではない。一実施例において、前記陽イオン性リポソーム内にニアシンアミドを担持し、皮膚に伝達する場合、前記陽イオン性リポソームを使用せず、組成物内にニアシンアミドを含め、皮膚に伝達する場合に比べ、皮膚明度変化量、メラニン変化量及び肝斑変化量が有意に増大することを確認した。従って、前記陽イオン性リポソームは、リポソーム内に担持された皮膚機能性有効成分の皮膚吸収能が増進されたものであり得る。

【0046】

他の態様は、陽イオン性リポソームを含む組成物を提供する。

【0047】

前記組成物は、陽イオン性リポソームに担持された有効成分を伝達するための組成物であり得る。具体的には、前記組成物は、陽イオン性リポソームに担持された有効成分を皮膚に伝達するための組成物であり得る。

【0048】

前記組成物は、組成物総重量につき、陽イオン性リポソームを０．００１ないし５０重量％、０．００１ないし４０重量％、０．００１ないし３０重量％、０．００１ないし２０重量％、０．０１ないし５０重量％、０．０１ないし４０重量％、０．０１ないし３０重量％、０．０１ないし２０重量％、０．１ないし５０重量％、０．１ないし４０重量％、０．１ないし３０重量％、または０．１ないし２０重量％で含むものであり得る。
一具体例において、前記組成物は、化粧料組成物であり得る。

【0049】

前記化粧料組成物は、本明細書に開示された有効成分以外に、化粧料組成物に一般的に利用される成分、機能性添加物などを追加して含むものでもあり、例えば、抗酸化剤、安定化剤、溶解化剤、界面活性剤、分散剤、増粘剤、保湿剤、防腐剤、ビタミン、顔料、香料のような一般的な補助剤、そして化粧品学的に許容可能な担体を含むものであり得る。

【0050】

前記化粧料組成物は、一般的に製造されるいかなる剤形にも製造されうる。例えば、前記化粧料組成物は、化粧水、クリーム、エキス、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、パック、アンプル、ボディローション、ボディオイル、ボディゲル、シャンプー、リンス、ヘアコンディショナー、ヘアゲル、ファウンデーション、リップスティック、マスカラまたはメーキャップベースの化粧料剤形を有するものであり得る。

【0051】

一具体例において、前記組成物は、皮膚外用剤組成物であり得る。

【0052】

前記皮膚外用剤は、クリーム、ゲル、軟膏、皮膚乳化剤、皮膚懸濁液、経皮伝達性パッチ、薬物含有包帯、ローション、またはその組み合わせであり得る。前記皮膚外用剤は、通常化粧品や医薬品のような皮膚外用剤に使用される成分、例えば、水性成分、油性成分、粉末成分、アルコール類、保湿剤、増粘剤、紫外線吸収剤、美白剤、防腐剤、酸化防止剤、界面活性剤、香料、色剤、各種皮膚栄養剤、またはそれらの組み合わせと、必要によって適切に配合されうる。

【0053】

一具体例において、前記組成物は、食品組成物であり得る。前記食品組成物は、健康機能食品組成物であり得る。

【0054】

前記健康機能食品組成物は、前記陽イオン性リポソーム単独、あるいは他の食品または食品成分と共に使用され、一般的な方法によって適切に使用されうる。有効成分の混合量は、使用目的（予防的、健康的または治療的な処置）により、適して決定されうる。前記健康機能食品の種類には、特別な制限はない。健康機能食品の種類において、飲料組成物は、通常の飲料と共に、さまざまな香味剤または天然炭水化物などを追加成分として含むものであり得る。前記天然炭水化物は、ブドウ糖、果糖のようなモノサッカライド；マルトース、ショ糖のようなジサッカライド；及びデキストリン、シクロデキストリンのようなポリサッカライド；並びにキシリトール、ソルビトール、エリトリトールなどの糖アルコールである。甘味剤としては、ソーマチン、ステビア抽出物のような天然甘味剤や、サッカリン、アスパルテームのような合成甘味剤などを使用しうる。前記健康機能食品組成物は、また栄養剤、ビタミン、電解質、風味剤、着色剤、ペクチン酸及びその塩、アルギン酸及びその塩、有機酸、保護性コロイド増粘剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に使用される炭酸化剤、またはその組み合わせを含むものであり得る。前記健康機能食品組成物は、また、天然果物ジュース、果物ジュース飲料、野菜飲料の製造のための果肉、またはその組み合わせを含むものであり得る。

【0055】

一具体例において、前記組成物は、薬学的組成物であり得る。

【0056】

前記薬学的組成物は、薬剤学的に許容可能な希釈剤または担体を追加して含むものであり得る。前記希釈剤は、乳糖、とうもろこし澱粉、大豆油、微晶質セルロースまたはマンニトール、滑沢剤としては、ステアリン酸マグネシウム、タルク、またはその組み合わせであり得る。前記担体は、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、またはその組み合わせであり得る。前記賦形剤は、微晶質セルロース、乳糖、低置換度ヒドロキシセルロース、またはその組み合わせであり得る。前記崩壊剤は、カルボキシメチルセルロースカルシウム、澱粉グリコール酸ナトリウム、無水リン酸一水素カルシウム、またはその組み合わせであり得る。前記結合剤は、ポリビニルピロリドン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、またはその組み合わせであり得る。前記滑沢剤は、ステアリン酸マグネシウム、二酸化ケイ素、タルク、またはその組み合わせであり得る。
前記薬学的組成物は、経口投与剤形または非経口投与剤形に剤形化されうる。該経口投与剤形は、顆粒剤、散剤、液剤、錠剤、カプセル剤、乾燥シロップ剤、またはその組み合わせであり得る。該非経口投与剤形は、注射剤であり得る。

【0057】

重複される内容は、本明細書の複雑性を考慮し、省略し、本明細書において、取り立てて定義されない用語は、本発明が属する技術分野において一般的に使用される意味を有するのである。

【発明の効果】

【0058】

一態様による陽イオン性リポソームを製造する方法によれば、高圧乳化装置を利用し、毒性有機溶媒を使用せずに、皮膚に安全なリポソームを製造し、リポソームの量産が可能である。

【0059】

また、前記方法によって製造された陽イオン性リポソームは、剤形安定性にすぐれ、正電荷を帯びるので、内部に担持された有効成分の皮膚吸収能を増進させうる。従って、前記陽イオン性リポソームを化粧品、食品、医薬品などに使用しうる。

【図面の簡単な説明】

【0060】

【図1】製造後５週間、実施例２－２の陽イオン性リポソームの粒子サイズ（ｎｍ）変化を測定した結果である。

【0061】

【図2】製造後５週間、実施例２－２の陽イオン性リポソームのゼータ電位（ｍＶ）変化を測定した結果である。

【0062】

【図3】実施例２－２の陽イオン性リポソームの粒子構造を示した結果である。

【0063】

【図4】比較例及び製造例のエキス剤形使用後の皮膚明度（Ｌ－ｖａｌｕｅ）を示したグラフである。

【0064】

【図5】比較例及び製造例のエキス剤形使用後の皮膚明度変化量を示したグラフである。

【0065】

【図6】比較例及び製造例のエキス剤形使用後のメラニン指数（Ｍ．Ｉ：ｍｅｌａｎｉｎ ｉｎｄｅｘ）を示したグラフである。

【0066】

【図7】比較例及び製造例のエキス剤形使用後の皮膚メラニン変化量を示したグラフである。

【0067】

【図8】比較例及び製造例のエキス剤形使用後の皮膚肝斑（ｍｍ^２）を確認した結果である。

【0068】

【図9】比較例及び製造例のエキス剤形使用後の皮膚肝斑変化量を示したグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0069】

以下、本発明について、実施例を介してさらに詳細に説明する。しかしながら、それら実施例は、本発明を例示的に説明するためのものでり、本発明の範囲は、それら実施例に限定されるものではない。

【0070】

実施例１．キトサン含量による陽イオン性リポソームの物性評価
キトサン含量を異ならせ、陽イオン性リポソームを製造し、そのゼータ電位（ｚｅｔａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ）を測定する実験を行った。

【0071】

まず、下記表１の成分及び含量（重量％）でもって、陽イオン性ナノリポソームを製造した。実施例１－１ないし１－５の陽イオン性リポソームは、キトサンの含量だけに違いがある。

【0072】

具体的な製造方法は、以下の通りである。レシチンとジプロピレングリコールとによって構成されたＡ相を７０～８０℃に加温溶解させた。キトサンが含まれた室温の水相部Ｂ相にＡ相を徐々に投入しながら、ホモミキサでもって、２，０００ないし３，０００ｒｐｍで５分間撹拌した。一次撹拌後、１，０００ｂａｒ，３サイクル条件で、高圧乳化処理し、最終的にリポソームを製造した。

【0073】

【表1】

【0074】

次に、キトサンの含量による陽イオン性リポソームのゼータ電位（ｚｅｔａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ）を測定した。測定装置として、動的光散乱装置（ＤＬＳ：ｄｙｎａｍｉｃ ｌｉｇｈｔ ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ（ＳＺ－１００ ＨＯＲＩＢＡ））を使用した。キトサン含量による陽イオン性リポソームのゼータ電位測定結果は、表２に示した。

【0075】

【表2】

【0076】

前記表２に示されているように、キトサンが含まれていない陽イオン性リポソーム（実施例１－１）のゼータ電位は、－３４．９ｍＶであった。キトサンの含量が増大するほど、ゼータ電位も増大したが、キトサン含量０．１重量％以上からは、ゼータ電位がそれ以上大幅に増大しなかった。それにより、陽イオン性リポソーム製造において、キトサンの含量は、０．０５重量％に設定し、追って実験を進めた。

【0077】

実施例２．コレステロール含量による陽イオン性リポソームの物性評価
キトサンの含量を一定に固定させ、コレステロールの含量を異ならせ、陽イオン性リポソームを製造し、その粒子サイズ及びゼータ電位を測定し、安定度を評価した。

【0078】

まず、実施例１と同一の方法を使用し、下記表３の成分及び含量（重量％）でもって、陽イオン性リポソームを製造した。実施例２－１ないし２－３の陽イオン性リポソームは、コレステロールの含量だけに違いがある。生体との類似性、及び皮膚安全性を高めるために、セラミドとコレステロールとを使用した。コレステロールの場合、リポソームの膜安定性向上に一助になると知られているために、コレステロールの含量を異ならせて製造した。

【0079】

【表3】

【0080】

次に、製造直後と、室温保管３日後とにおいて、肉眼評価を介し、安定度を確認した。肉眼評価結果、レシチンよりコレステロールの含量がはるかに少ないか、あるいはそれと同一である場合（実施例２－１及び２－３）、相が分離されるか、あるいは色がぼやけるようになる懸濁現象が生じた。なお、実施例２－２の陽イオン性リポソームは、相が分離されておらず、懸濁現象も生じていない。

【0081】

従って、動的光散乱装置を利用し、製造直後、及び室温保管５週間、毎週、実施例２－２の陽イオン性リポソームの粒子サイズ及びゼータ電位を測定した。

【0082】

図１は、製造後５週間、実施例２－２の陽イオン性リポソームの粒子サイズ（ｎｍ）変化を測定した結果である。

【0083】

図２は、製造後５週間、実施例２－２の陽イオン性リポソームのゼータ電位（ｍＶ）変化を測定した結果である。

【0084】

図１及び図２に示されているように、レシチンとコレステロールとの重量比が２：１である実施例２－２の陽イオン性リポソームは、粒子サイズ及びゼータ電位が５週間安定している。

【0085】

なお、前記実施例１の製造方法において、高圧乳化条件だけを異ならせ、実施例２－１ないし２－３の陽イオン性リポソームをそれぞれ製造し、その粒子サイズを測定する実験を別途に進めた。該高圧乳化条件は、以下のように、３種に設定した：（ｉ）１，０００ｂａｒ、１サイクル、（ｉｉ）１，０００ｂａｒ、３サイクル、（ｉｉｉ）１，０００ｂａｒ、５サイクル。

【0086】

統計プログラムを利用し、粒子サイズを比較した結果、１サイクルと３サイクルは、有意な違いがあったが、３サイクルと５サイクルは、有意な違いがなかった。従って、高圧乳化条件（ｉｉ）が最も適しているということ確認した。

【0087】

実験例１．陽イオン性リポソームの粒子構造分析
実施例２－２の陽イオン性リポソームの粒子構造分析を行った。
製造された陽イオン性リポソーム粒子の構造分析のために、Ｃｒｙｏ－ＴＥＭ（ｃｒｙｏｇｅｎｉｃ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ）を利用した。Ｃｒｙｏ－ＴＥＭは、サンプルを超低温状態に維持し、本来の形態構造観察が可能であるために、リポソーム粒子の二重層（ｂｉ－ｌａｙｅｒ）構造または多重層（ｍｕｌｔｉ－ｌａｙｅｒ）構造の確認に適する。具体的な分析方法は、以下の通りである。実施例２－２の陽イオン性リポソーム５μＬを、２００メッシュｃａｒｂｏｎ ｌａｃｅｙ ｆｉｌｍ Ｃｕ－ｇｒｉｄにローディングした後、Ｖｉｔｒｏｂｏｔによって液化されたエタン（約－１７０℃）に浸し、落下凍結させた（ｐｌｕｎｇｅ ｆｒｅｅｚｅ）。作られた凍結試料を、加速電圧２００ｋＶ以下において、Ｃｒｙｏ－ＴＥＭ（Ｔｅｃｎａｉ Ｆ２０（ＦＥＩ））で観察した。

【0088】

図３は、実施例２－２の陽イオン性リポソームの粒子構造を示した結果である。

【0089】

図３に示されているように、実施例２－２の陽イオン性リポソームは、粒子サイズが約１００ないし３００ｎｍほどであった。また、リポソームの特徴と言うことができる二重層（ｂｉ－ｌａｙｅｒ）構造と多重層（ｍｕｌｔｉ－ｌａｙｅｒ）構造とが混合されて形成されているところを確認することができた。

【0090】

実施例３．陽イオン性リポソームの製造
実施例１及び２を介し、安定度に最もすぐれる条件と確認された実施例２－２の陽イオン性リポソームに、ニアシンアミド１０重量％を担持させた。具体的には、実施例１と同一の方法を使用し、下記表４の成分及び含量（重量％）でもって陽イオン性リポソームを製造した。

【0091】

【表4】

【0092】

製造例及び比較例：陽イオン性リポソーム含有エキスの製造
製造例として、実施例３の陽イオン性リポソームを含むエキス剤形の化粧料組成物を製造した。実施例３の陽イオン性リポソームは、ニアシンアミド１０重量％を含むので、前記陽イオン性リポソーム２０重量％を含むエキス剤形の化粧料組成物は、最終的に、ニアシンアミド含量が約２重量％になる。

【0093】

比較例として、陽イオン性リポソームを含んでいない代わりに、ニアシンアミド２重量％を含むエキス剤形の化粧料組成物を製造した。

【0094】

製造例及び比較例のエキス剤形化粧料組成物の成分及び含量（重量％）は、下記表５に示されている。

【0095】

【表5】

【0096】

実験例２．皮膚安全性評価
実施例３の陽イオン性リポソームと、製造例及び比較例のエキス剤形とに係わる皮膚安全性評価を行った。

【0097】

具体的には、皮膚疾患がない成人男女２０名を対象にし、実施例３の陽イオン性リポソームと、製造例及び比較例のエキス剤形との刺激程度を以下のように評価した。試験者の腕前膊に２０μＬの試料を塗布した後、試験部位を密閉した後、２４時間貼布した。貼布を除去した後、３０分後及び２４時間後、皮膚における反応をＣＴＦＡ（Ｔｈｅ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ， Ｔｉｏｌｅｔｒｙ ａｎｄ Ｆｒａｇｒａｎｃｅ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）ガイドラインに提示された用語（ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ）に基づいて検査した。判定基準によって得られた試験者の皮膚刺激指数（ＰＩＩ：ｐｒｉｍａｒｙ ｉｒｒｉｔａｔｉｏｎ ｉｎｄｅｘ）点数を平均し、１未満ならば、低刺激と評価し、２未満ならば、軽刺激と評価し、３．５未満ならば、中刺激と評価し、３．５以上ならば、強刺激と評価した。その結果は、下記表６に示した。

【0098】

【表6】

【0099】

その結果、前記表６に示されているように、実施例３の陽イオン性リポソームと、製造例及び比較例のエキス剤形とのいずれも無刺激と、製品に安全に使用が可能であることを確認した。

【0100】

実験例３．美白効能の評価
製造例（陽イオン性リポソーム含有）及び比較例（陽イオン性リポソーム未含有）のエキス剤形は、美白有効成分であるニアシンアミドを、それぞれ２重量％含む。従って、各剤形を使用したとき、美白効果が高く示されるのは、皮膚内に、有効成分の伝達がさらに効率的になされたものであると見ることができる。前記製造例及び前記比較例のエキス剤形の美白効能評価のために、皮膚明度、皮膚メラニン及び皮膚肝斑の３種項目測定を実施した。

【0101】

具体的には、女性２１名（満３６～５８歳、平均５０．０４８歳）の被験者を対象に、顔半々に（ｈａｌｆ－ｔｅｓｔ）、４週間１日２回（朝／夕方）、比較例と製造例との製品を、それぞれ使用するようにした。皮膚明度、メラニン及び肝斑の測定のために、使用２週後と使用４週後とのそれぞれの値が使用前対比で、どれほど変化したかということを測定した。

【0102】

（１）皮膚明度の改善効能
皮膚明度は、Ｍａｒｋ－Ｖｕ（ＰＳＩＰＬＵＳ ＣＯ．， ＬＴＤ、韓国）を利用し、顔面部正面を撮影し、撮影されたイメージにつき、Ｉ－Ｍａｘ ｐｌｕｓプログラムを利用し、試験部位の皮膚明度値（Ｌ－ｖａｌｕｅ）を分析した。Ｌ－ｖａｌｕｅが増大するほど、皮膚明度が改善されることを意味する。

【0103】

図４は、比較例及び製造例のエキス剤形使用後の皮膚明度（Ｌ－ｖａｌｕｅ）を示したグラフである。図５は、比較例及び製造例のエキス剤形使用後の皮膚明度変化量を示したグラフである。

【0104】

図４及び図５に示されているように、製造例が比較例より、約１．５倍さらにすぐれた皮膚明度改善効果を示した。

【0105】

（２）皮膚メラニンの減少効能
皮膚メラニンは、Ｍｅｘａｍｅｔｅｒ ＭＸ１８（Ｃｏｕｒａｇｅ Ｋｈａｚａｋａ ｅｌｅｃｔｒｏｎｉ、ドイツ）を利用し、色を示すメラニン値を測定した。Ｍ．Ｉ（ｍｅｌａｎｉｎ ｉｎｄｅｘ）値が低減されるほど、皮膚メラニンが改善されることを意味する。

【0106】

図６は、比較例及び製造例のエキス剤形使用後のメラニン指数（Ｍ．Ｉ：ｍｅｌａｎｉｎ ｉｎｄｅｘ）を示したグラフである。図７は、比較例及び製造例のエキス剤形使用後の皮膚メラニン変化量を示したグラフである。

【0107】

図６及び図７に示されているように、製造例が比較例より、皮膚メラニン低減効果がさらにすぐれている。

【0108】

（３）皮膚肝斑の改善効能
皮膚肝斑測定は、Ａｎｔｅｒａ ３Ｄ ＣＳ（Ｍｉｒａｖｅｘ、アイルランド）を利用し、Ｍｅｌａｎｉｎ－Ｈｙｐｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ分析モードのａｆｆｅｃｔｅｄ ａｒｅａ（ｍｍ^２）を評価した。肝斑が改善されるほど、面積ａｆｆｅｃｔｅｄ ａｒｅａ（ｍｍ^２）値が低減される。

【0109】

図８は、比較例及び製造例のエキス剤形使用後の皮膚肝斑（ｍｍ^２）を確認した結果である。図９は、比較例及び製造例のエキス剤形使用後の皮膚肝斑変化量を示したグラフである。

【0110】

図８及び図９に示されているように、製造例が比較例より、さらに高い肝斑改善効果を示した。

【0111】

実験例３の結果を総合すれば、製造例の皮膚明度変化量、メラニン変化量及び肝斑変化量が、比較例対比で、使用２週後、使用４週後において、いずれも有意な違いを示した。それを介し、実施例３の陽イオン性リポソーム内に、ニアシンアミドを担持させたとき、美白効能がさらに良好に発揮されたと見ることができる。それは、陽イオン性リポソームが、有効成分を皮膚内にさらに良好に伝達したためであると見ることができる。従って、実施例３の陽イオン性リポソームは、担持された有効成分のすぐれた皮膚伝達効能を有するということを知ることができる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【国際調査報告】