(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2025-01-24
(54)【発明の名称】ポリペプチド化合物及び腸炎の治療におけるその使用
(51)【国際特許分類】
C07K 5/10 20060101AFI20250117BHJP
A61K 38/07 20060101ALI20250117BHJP
A61K 38/08 20190101ALI20250117BHJP
A61K 38/10 20060101ALI20250117BHJP
A61P 1/04 20060101ALI20250117BHJP
【FI】
C07K5/10 ZNA
A61K38/07
A61K38/08
A61K38/10
A61P1/04
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024542145
(86)(22)【出願日】2023-01-19
(85)【翻訳文提出日】2024-07-16
(86)【国際出願番号】 CN2023073068
(87)【国際公開番号】W WO2023138644
(87)【国際公開日】2023-07-27
(31)【優先権主張番号】202210070418.4
(32)【優先日】2022-01-21
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】522500295
【氏名又は名称】スーチョワン グッドドクター パンシー ファーマシューティカル カンパニー リミテッド
【氏名又は名称原語表記】SICHUAN GOODDOCTOR PANXI PHARMACEUTICAL CO., LTD.
【住所又は居所原語表記】No. 115 Section 3, Airport Road, Xichang City, Liangshan Yi Autonomous Prefecture, Sichuan 615000, China
(74)【代理人】
【識別番号】110002871
【氏名又は名称】弁理士法人坂本国際特許商標事務所
(72)【発明者】
【氏名】ジェン、フーノン
【テーマコード(参考)】
4C084
4H045
【Fターム(参考)】
4C084AA02
4C084BA01
4C084BA16
4C084BA17
4C084BA18
4C084CA59
4C084NA14
4C084ZA68
4H045AA10
4H045AA30
4H045BA13
4H045BA14
4H045BA15
4H045BA16
4H045BA17
4H045EA20
4H045FA10
(57)【要約】
本発明は、新しいポリペプチド及びその応用に関する。本発明により提供されるポリペプチドは、そのペプチド鎖が短く、吸収がより速く、より良好である。実験の結果は、本願により提供されるポリペプチドがゼブラフィッシュ炎症性腸疾患モデル及びラット炎症性腸疾患モデルの薬効試験において、腸腔の拡張を明らかに緩和する効果が示されることを表した。本発明により提供されるポリペプチドは、結腸炎に対する顕著な緩和効果を有し、腸炎の治療薬、特に潰瘍性結腸炎の薬物の製造に使用できる。
【選択図】無し
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式(I)に記載の化合物又は生理学的に許容される塩であって、
前記式(I)の化合物は、
H-X
a-Z
1-Z
2-Z
3-Z
4-X
b-OH(I)であり、
ここで、
Z
1はPro、Ala、Gly、D-Proであるか又は欠失し、
Z
2はVal、Ala、D-Val、Ileであるか又は欠失し、
Z
3はPro、Ala、Gly、D-Proであるか又は欠失し、
Z
4はGln、Ala、Glu、Ile、D-Glnであるか又は欠失し、
条件として、Z
1、Z
2、Z
3及びZ
4のうちの2個以下は欠失し、
X
aは0~10個のアミノ酸残基を含む配列であり、
X
bは0~9個のアミノ酸残基を含む配列である、
化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項2】
Z
1、Z
2、Z
3及びZ
4のうちの2個は欠失し、或いはZ
1及びZ
2は欠失し、或いはZ
3及びZ
4は欠失し、或いはZ
1、Z
2、Z
3及びZ
4のうちの1個は欠失し、或いはZ
1は欠失し、或いはZ
4は欠失し、或いはZ
1、Z
2、Z
3及びZ
4のうちの0個は欠失する、
請求項1に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項3】
Z
1、Z
2、Z
3及びZ
4のうちの0個は欠失する、
請求項1に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項4】
Z
1はPro、Z
2はVal、Z
3はPro、及びZ
4はGlnであり、或いはZ
1はD-Pro、Z
2はVal、Z
3はPro、及びZ
4はGlnであり、或いはZ
1はPro、Z
2はVal、Z
3はAla、及びZ
4はGlnであり、或いはZ
1はPro、Z
2はIle、Z
3はPro、及びZ
4はGlnであり、或いはZ
1はPro、Z
2はVal、Z
3はPro、及びZ
4は欠失し、或いはZ
1はPro、Z
2はAla、Z
3はPro、及びZ
4はGlnであり、或いはZ
1はGly、Z
2はVal、Z
3はPro、及びZ
4はGlnであり、或いはZ
1はPro、Z
2はVal、Z
3はGly、及びZ
4はGlnであり、或いはZ
1はAla、Z
2はVal、Z
3はPro、及びZ
4はGlnであり、或いはZ
1はPro、Z
2はVal、Z
3はPro、及びZ
4はGluであり、或いはZ
1はPro、Z
2はVal、Z
3はD-Pro、及びZ
4はGlnであり、或いはZ
1はPro、Z
2はVal、Z
3はPro、及びZ
4はD-Glnである、
請求項1に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項5】
Z
1はPro、Z
2はVal、Z
3はPro、及びZ
4はGlnである、
請求項1に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項6】
X
aはX
a10-X
a9-X
a8-X
a7-X
a6-X
a5-X
a4-X
a3-X
a2-X
a1-*であり、ここで、*はZ
1-Z
2-Z
3-Z
4に連結する位置を表し、ここで、
X
a10はGlyであるか又は欠失し、
X
a9はGly、Pro、Serであるか又は欠失し、
X
a8はPro、Glu、Serであるか又は欠失し、
X
a7はArg、Glu、Thr、Serであるか又は欠失し、
X
a6はLys、Thr、Ala、Asp、Glu、Arg、Serであるか又は欠失し、
X
a5はAsp、Ala、Val、Arg、Phe、Ile、Pro、Lys、Gluであるか又は欠失し、
X
a4はVal、Phe、Pro、Pyro-Glu、Lys、Leu、Ile、Ala、Aspであるか又は欠失し、
X
a3はTyr、Leu、Pro、Asp、Arg、Glu、Lys、Tys、Val、Ileであるか又は欠失し、
X
a2はD-Lys、Lys、Ala、Arg、Val、Glu、Tyrであるか又は欠失し、及び
X
a1はGlu、Ala、D-Glu、Tyr、Gln、Asp、Asnであるか又は欠失する、
請求項1~5の何れか1項に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項7】
X
aはX
aa-X
a2-X
a1-*であり、ここで、*はZ
1-Z
2-Z
3-Z
4に連結する位置を表し、X
a2-X
a1はLys-Glu-*、Arg-Glu-*、Val-Tyr-*、Glu-Glu-*、Lys-Gln-*、Lys-D-Glu-*又はTyr-Glu-*であり、及びX
aaはX
a10-X
a9-X
a8-X
a7-X
a6-X
a5-X
a4-X
a3-であり、ここで、X
a10はGlyであるか又は欠失し、X
a9はGly、Pro、Serであるか又は欠失し、X
a8はPro、Glu、Serであるか又は欠失し、X
a7はArg、Glu、Thr、Serであるか又は欠失し、X
a6はLys、Thr、Ala、Asp、Glu、Arg、Serであるか又は欠失し、X
a5はAsp、Ala、Val、Arg、Phe、Ile、Pro、Lys、Gluであるか又は欠失し、X
a4はVal、Phe、Pro、Pyro-Glu、Lys、Leu、Ile、Ala、Aspであるか又は欠失し、及びX
a3はTyr、Leu、Pro、Asp、Arg、Glu、Lys、Tys、Val、Ileであるか又は欠失する、
請求項6に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項8】
X
aaはArg-Lys-Asp-Val-Tyr-、Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-、Val-Pro-Pro-、Pyro-Glu-Leu-、Arg-Lys-Asp-、Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-、Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-、Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-、Val-Pro-Tys-、Pro-Ala-Tys-、Arg-Lys-Asp-Val-、Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-であるか又は欠失し、ここで、最も右側のハイフン-は-X
a2-X
a1との連結を表す、
請求項7に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項9】
X
aはX
aa-X
a2-X
a1-*であり、ここで、*はZ
1-Z
2-Z
3-Z
4に連結する位置を表し、ここで、X
a2-X
a1はLys-Glu-*であり、及びX
aaは上記に定義される通りである、
請求項7に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項10】
X
aはGlu-*、Ala-*、D-Glu-*、Asp-*、Asn-*、Lys-Glu-*、D-Lys-Glu-*、Ala-Glu-*、Lys-Gln-*、Lys-D-Glu-*、Lys-Ala-*、Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Lys-Glu-*、Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Glu-*、Val-Pro-Pro-Lys-Glu-*、Pyro-Glu-Leu-Lys-Glu-*、Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-*、Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Lys-Glu-*、Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-LysGlu-*、Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Glu-*、Val-Pro-Tys-Lys-Glu-*、Pro-Ala-Tys-Lys-Glu-*、Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Glu-*、Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-*であるか又は欠失し、ここで、*はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表す、
請求項6に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項11】
X
bは**-X
b1-X
b2-X
b3-X
b4-X
b5-X
b6-X
b7-X
b8-X
b9であり、ここで、**はZ
1-Z
2-Z
3-Z
4に連結する位置を表し、ここで、
X
b1はAla、D-Alaであるか又は欠失し、
X
b2はLys、Ala、D-Lys、Argであるか又は欠失し、
X
b3はPro、Gly、D-Pro、Ser、Val、Alaであるか又は欠失し、
X
b4はArg、Ala、Ser、Pro、D-Argであるか又は欠失し、
X
b5はLys、Ala、D-Lys、Glu、Tyrであるか又は欠失し、
X
b6はVal、Asp、D-Val、Alaであるか又は欠失し、
X
b7はAla、D-Ala、Ileであるか又は欠失し、
X
b8はAla、D-Ala、Lysであるか又は欠失し、及び
X
b9はGln、Ala、Glu、Asn、D-Glnであるか又は欠失する、
請求項1~10の何れか1項に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項12】
X
bは**-X
b1-X
b2-X
b3-X
b4-X
b5-X
b6-X
b7-X
b8-X
b9であり、ここで、**はZ
1-Z
2-Z
3-Z
4に連結する位置を表し、ここで、
X
b1はAla又はD-Alaであり、
X
b2はLys、Ala又はD-Lysであり、
X
b3はPro、Gly、又はAlaであり、
X
b4はArg又はD-Argであり、
X
b5はLysであるか又は欠失し、
X
b6はVal、D-Val、Alaであるか又は欠失し、
X
b7はAlaであるか又は欠失し、
X
b8はAlaであるか又は欠失し、及び
X
b9はGln、Asn、D-Glnであるか又は欠失する、
請求項11に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項13】
X
bは**-X
b1-X
b2-X
bbであり、ここで、**はZ
1-Z
2-Z
3-Z
4に連結する位置を表し、X
b1-X
b2-は**-Ala-Lys-、**-Ala-Lys-、**-Ala-D-Lys-、**-Ala-Ala-又は**-D-Ala-Lys-であり、X
bbはX
b3-X
b4-X
b5-X
b6-X
b7-X
b8-X
b9であり、ここで、X
b3はPro、Gly、D-Pro、Ser、Val、Alaであるか又は欠失し、X
b4はArg、Ala、Ser、Pro、D-Argであるか又は欠失し、X
b5はLys、Ala、D-Lys、Glu、Tyrであるか又は欠失し、X
b6はVal、Asp、D-Val、Alaであるか又は欠失し、X
b7はAla、D-Ala、Ileであるか又は欠失し、X
b8はAla、D-Ala、Lysであるか又は欠失し、及びX
b9はGln、Ala、Glu、Asn、D-Glnであるか又は欠失し、或いはX
b3はPro、Gly、又はAlaであり、X
b4はArg又はD-Argであり、X
b5はLysであるか又は欠失し、X
b6はVal、D-Val、Alaであるか又は欠失し、X
b7はAlaであるか又は欠失し、X
b8はAlaであるか又は欠失し、及びX
b9はGln、Asn、D-Glnであるか又は欠失する、
請求項11又は12に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項14】
X
bbはPro-Arg-Lys-Val、-Pro-Arg-Lys、-Pro-Arg、-Ala-Gln、-Ala-Ala、-Pro、-Lys-Val、-Val-Pro-Tyr、-Arg-Lys、-Val-Ala、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala、-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Ala-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Ala-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Ala、-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-D-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-D-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-D-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-D-Ala-Gln、-Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Asn、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-D-Val-Ala-Ala-Gln、-Ala-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Ala-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-D-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-D-Glnであるか又は欠失し、ここで、最も左側のハイフン-はX
b1-X
b2との連結を表す、
請求項13に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項15】
X
bは**-X
b1-X
b2-X
bbであり、ここで、**はZ
1-Z
2-Z
3-Z
4に連結する位置を表し、X
b1-X
b2-は**-Ala-Lys-であり、X
bbは上記に定義される通りである、
請求項13に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項16】
X
bは**-Ala-、**-Ala-Lys、**-Ala-D-Lys-、**-Ala-Ala-、**-D-Ala-Lys、**-Ala-Arg、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys、**-Ala-Lys-Pro-Arg、**-Val-Ala-Ala-Gln、**-Lys-Val-Ala-Ala、**-Ala-Lys-Pro、**-Pro-Arg-Lys-Val、**-Ala-Lys-Val-Pro-Tyr、**-Lys-Pro-Arg-Lys、**-Arg-Lys-Val-Ala、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala、**-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Ala-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Ala-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Ala-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Ala、**-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-D-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-D-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-D-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-D-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Asn、**-Ala-D-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-D-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Ala-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Ala-Ala-Ala-Gln、**-D-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-D-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-D-Glnであるか又は欠失し、ここで、**はZ
1-Z
2-Z
3-Z
4に連結する位置を表す、
請求項1に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項17】
前記化合物は、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物1)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys(化合物2)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg(化合物3)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物4)、
Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物5)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物6)、
Lys-Glu-Pro-Val(化合物7)、
Val-Ala-Ala-Gln(化合物8)、
Glu-Pro-Val-Pro(化合物9)、
Lys-Pro-Arg-Lys(化合物10)、
Ala-Lys-Pro-Arg(化合物11)、
Pro-Val-Pro-Gln(化合物12)、
Val-Pro-Gln-Ala(化合物13)、
Pro-Gln-Ala-Lys(化合物14)、
Arg-Lys-Val-Ala(化合物15)、
Lys-Val-Ala-Ala(化合物16)、
Gln-Ala-Lys-Pro(化合物17)、
Pro-Arg-Lys-Val(化合物18)、
Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物19)、
Lys-Ala-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物20)、
Lys-Glu-Ala-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物21)、
Lys-Glu-Pro-Val-Ala-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物22)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Ala-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物23)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Ala-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物24)、
Lys-Glu-Pro-Ala-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物25)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Ala-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物26)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Ala-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物27)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Ala-Val-Ala-Ala-Gln(化合物28)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Ala-Ala-Ala-Gln(化合物29)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Ala(化合物30)、
Lys-Glu-Gly-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物31)、
Lys-Glu-Pro-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物32)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物33)、
Lys-Glu-Pro-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物34)、
Lys-Glu-Gly-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物35)、
Lys-Glu-Gly-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物36)、
Lys-Glu-Gly-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物37)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys(化合物38)、
Pro-Val-Pro-Gln-Ala(化合物39)、
Pro-Val-Pro-Glu-Ala(化合物40)、
Pro-Val-Pro-Ile-Ala(化合物41)、
Pro-Val-Pro-Ala(化合物42)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala(化合物43)、
Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物44)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Arg(化合物45)、
Ala-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物46)、
Glu-Pro-Val-Pro-Ala-Ala-Lys(化合物47)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Ala(化合物48)、
Asp-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物49)、
Asn-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物50)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala(化合物51)、
Glu-Pro-Ala-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物52)、
Glu-Ala-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物53)、
Glu-Pro-Val-Ala-Gln-Ala-Lys(化合物54)、
Glu-Pro-Val-Pro-Glu-Ala-Lys(化合物55)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val(化合物56)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg(化合物57)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro(化合物58)、
Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg(化合物59)、
Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro(化合物60)、
D-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物61)、
Lys-D-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物62)、
Lys-Glu-D-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物63)、
Lys-Glu-Pro-D-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物64)、
Lys-Glu-Pro-Val-D-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物65)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-D-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物66)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-D-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物67)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-D-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物68)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-D-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物69)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-D-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物70)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-D-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物71)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-D-Val-Ala-Ala-Gln(化合物72)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-D-Ala-Ala-Gln(化合物73)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-D-Ala-Gln(化合物74)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-D-Gln(化合物75)、
Glu-Gly-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物76)、
Glu-Pro-Val-Gly-Gln-Ala-Lys(化合物77)、
D-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物78)、
Glu-D-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物79)、
Glu-Pro-D-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物80)、
Glu-Pro-Val-D-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物81)、
Glu-Pro-Val-Pro-D-Gln-Ala-Lys(化合物82)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-D-Ala-Lys(化合物83)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-D-Lys(化合物84)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro(化合物85)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln(化合物86)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln(化合物87)、
Val-Pro-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物88)、
Pyro-Glu-Leu-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物89)、
Pro-Ala-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物90)、
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物91)、
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物92)、
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物93)、
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Pro-Val-Pro-Gln(化合物94)、
Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物95)、
Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物96)、
Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物97)、
Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物98)、
Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln(化合物99)、
Val-Pro-Pro-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物100)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu(化合物101)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Val-Pro-Tyr(化合物102)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Glu(化合物103)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Asn(化合物104)、
Lys-Gln-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物105)、
Lys-Glu-Pro-Ile-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物106)、
Val-Pro-Gln-Ala(化合物107)、又は
Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物108)から選ばれる、
請求項1に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項18】
前記化合物は、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物1)、
Lys-Glu-D-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物63)、
Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物96)、
Val-Pro-Pro-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物100)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Asn(化合物104)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物6)、
Pro-Val-Pro-Gln(化合物12)、
Glu-Pro-Val-Ala-Gln-Ala-Lys(化合物54)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg(化合物57)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-D-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物68)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-D-Val-Ala-Ala-Gln(化合物72)、
Pyro-Glu-Leu-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物89)、
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物92)、
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Pro-Val-Pro-Gln(化合物94)、
Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物95)、
Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物97)、
Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物98)、
Lys-Gln-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物105)、
Lys-Glu-Pro-Ile-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物106)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物4)、
Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物5)、
Glu-Pro-Val-Pro(化合物9)、
Lys-Pro-Arg-Lys(化合物10)、
Arg-Lys-Val-Ala(化合物15)、
Lys-Glu-Pro-Ala-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物25)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Ala-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物26)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Ala-Ala-Ala-Gln(化合物29)、
Lys-Glu-Gly-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物31)、
Lys-Glu-Pro-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物34)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys(化合物38)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Ala(化合物48)、
Asp-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物49)、
Asn-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物50)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala(化合物51)、
Glu-Ala-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物53)、
Glu-Pro-Val-Pro-Glu-Ala-Lys(化合物55)、
Lys-D-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物62)、
Lys-Glu-Pro-Val-D-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物65)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-D-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物66)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-D-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物67)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-D-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物70)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-D-Gln(化合物75)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-D-Ala-Lys(化合物83)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro(化合物85)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln(化合物86)、
Val-Pro-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物88)、
Pro-Ala-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物90)、
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物93)、
Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln(化合物99)、又は
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Glu(化合物103)から選ばれる、
請求項1に記載の化合物又は生理学的に許容される塩。
【請求項19】
腸炎を治療するための薬物の製造における、請求項1~18の何れか1項に記載の化合物又は生理学的に許容される塩の使用。
【請求項20】
腸炎は特異的腸炎及び非特異的腸炎を含み、更に、特異的腸炎は炎症性腸疾患、壊死性腸疾患及び腸内細菌叢異常症を含み、更に、炎症性腸疾患は潰瘍性結腸炎を含む、
請求項19の使用。
【請求項21】
請求項1~18の何れか1項に記載の化合物又は生理学的に許容される塩と、薬用可能な賦形剤と、を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、新しいポリペプチド及びその応用に関し、本発明のポリペプチドは、炎症性腸疾患を治療する顕著な効果を有し、特に潰瘍性結腸炎を治療する効果を有する。
【背景技術】
【0002】
腸炎は、腸道細菌、ウイルスなどの病原性ビタミンによる感染又は免疫損傷、放射線損傷、食事の刺激、薬物の刺激などの要因である様々な原因によって引き起こされる腸道炎症反応である。臨床症状には主に、発熱、吐気、嘔吐、腹痛、下痢、軟水様便又は粘液性膿血性便が含まれ、一部の患者にはしぶり腹が見られる場合もある。
【0003】
腸炎は炎症の症状により特異的腸炎及び非特異的腸炎に分けられる。特異的腸炎には、炎症性腸疾患、壊死性腸疾患及び腸内細菌叢異常症も含まれる。その中で、より一般的な炎症性腸疾患としては、腸道に影響を及ぼした、特発性、感染によって引き起こされない、慢性、持続性、再発性、炎症性の腸疾患である。臨床症状には、腹痛、下痢、化膿性血便が含まれ、更に発熱、腹部腫瘍、体重減少、栄養失調などの症状も含まれる。炎症性腸疾患は慢性且つ長期にわたる疾患であり、長期にわたる積極的な治療が必要である。
【0004】
一般に、特異的腸炎は原因が明らかであり、例えば、細菌性腸炎、偽膜性腸炎、ウイルス性腸炎、放射線性腸炎など、何れも原因が明らかな腸炎であるが、非特異的腸炎は原因が明らかではなく、潰瘍性結腸炎、クローン病などの免疫系疾患によって引き起こされると考えられている。炎症性腸疾患には、潰瘍性結腸炎及びクローン病も含まれる。潰瘍性結腸炎は、原因不明の慢性非特異的腸道炎症性疾患であり、若年成人に最も一般的に発生する。臨床症状は、持続的又は再発性の下痢、腹痛を伴う粘液性膿血性便、しぶり腹及び様々な程度の全身症状である。皮膚、粘膜、関節、目、肝臓、胆嚢などの腸外症状が現れる場合がある。合併症には、中毒性巨大結腸、腸穿孔、大量の下部消化管出血、上皮内腫瘍及びがんなどが含まれる。中国では、正確なUC発生率データが不足して、地域疫学調査によると、中国のUC発生率は0.42~2.22/10万である。欧米諸国と比較すると罹患率は依然として低いものの、20年前と比較すると明らかな増加傾向を示している。病変は主に結腸の粘膜及び粘膜の下層に影響を及ぼし、範囲は直腸の遠位結腸から始まり、近位端に向かって逆行的に進行し、更に結腸全体に影響を及ぼす場合もあり、5%は回腸末端に影響を及ぼす可能性があり、連続的に分布している。潰瘍性結腸炎の主な臨床症状は、下痢、腹痛及び粘液性膿血性便であり、その原因はまだ解明されておらず、現在、感染症、免疫異常、遺伝及び精神的要因に関連すると考えられている。更に、腸炎患者は一般に、腸腔拡張(腸道拡張又は腸管拡張とも呼ばれる)などの症状があり、炎症により、正常な腸道を制御する神経及び筋肉の調節機構が破壊され、腸腔内の圧力により、腸腔壁の拡張が通常の可動性を超えている。又は、微生物の過剰な成長及びその産生される毒素、粘液の滲出などが原因で引き起こされる。腸腔の拡張を緩和又は阻害することは、腸炎の治療に役立つ。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
現在、潰瘍性結腸炎の治療によく使用される薬物は、一定の予防及び治療効果を有するが、依然として吸収が比較的遅く、治療周期が比較的長く、治療効果が明らかでないなどの欠点がある。
【課題を解決するための手段】
【0006】
従来技術の不足及び欠陥を克服するために、本発明の目的は、新しいポリペプチド化合物及びその応用を提供することである。本発明の発明者らは、本発明のポリペプチド化合物が腸腔の拡張を効果的又は顕著に緩和又は阻害することで、腸炎を治療する役割を果たすことができることを見出した。
【0007】
第1態様によれば、本発明は、式(I)に記載される化合物又は生理学的に許容される塩に関し、ここで、前記式(I)の化合物は、
H-Xa-Z1-Z2-Z3-Z4-Xb-OH(I)であり、
ここで、
Z1はPro、Ala、Gly、D-Proであるか又は欠失し、
Z2はVal、Ala、D-Val、Ileであるか又は欠失し、
Z3はPro、Ala、Gly、D-Proであるか又は欠失し、
Z4はGln、Ala、Glu、Ile、D-Glnであるか又は欠失し、
条件として、Z1、Z2、Z3及びZ4のうちの2個以下は欠失する。
Xaは0~10個のアミノ酸残基を含む配列であり、
Xbは0~9個のアミノ酸残基を含む配列である。
【0008】
一実施形態において、Z1、Z2、Z3及びZ4のうちの2個は欠失する。一実施形態において、Z1及びZ2は欠失する。一実施形態において、Z3及びZ4は欠失する。一実施形態において、Z1、Z2、Z3及びZ4のうちの1個は欠失する。一実施形態において、Z1は欠失する。一実施形態において、Z4は欠失する。一実施形態において、Z1、Z2、Z3及びZ4のうちの0個は欠失する。
【0009】
一実施形態において、Z1はPro、Z2はVal、Z3はPro、及びZ4はGlnである。一実施形態において、Z1はD-Pro、Z2はVal、Z3はPro、及びZ4はGlnである。一実施形態において、Z1はPro、Z2はVal、Z3はAla、及びZ4はGlnである。一実施形態において、Z1はPro、Z2はIle、Z3はPro、及びZ4はGlnである。一実施形態において、Z1はPro、Z2はVal、Z3はPro、及びZ4は欠失する。一実施形態において、Z1はPro、Z2はAla、Z3はPro、及びZ4はGlnである。一実施形態において、Z1はGly、Z2はVal、Z3はPro、及びZ4はGlnである。一実施形態において、Z1はPro、Z2はVal、Z3はGly、及びZ4はGlnである。一実施形態において、Z1はAla、Z2はVal、Z3はPro、及びZ4はGlnである。一実施形態において、Z1はPro、Z2はVal、Z3はPro、及びZ4はGluである。一実施形態において、Z1はPro、Z2はVal、Z3はD-Pro、及びZ4はGlnである。一実施形態において、Z1はPro、Z2はVal、Z3はPro、及びZ4はD-Glnである。
【0010】
一実施形態において、XaはXa10-Xa9-Xa8-Xa7-Xa6-Xa5-Xa4-Xa3-Xa2-Xa1-*であり、ここで、*はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表し、ここで、
Xa10はGlyであるか又は欠失し、
Xa9はGly、Pro、Serであるか又は欠失し、
Xa8はPro、Glu、Serであるか又は欠失し、
Xa7はArg、Glu、Thr、Serであるか又は欠失し、
Xa6はLys、Thr、Ala、Asp、Glu、Arg、Serであるか又は欠失し、
Xa5はAsp、Ala、Val、Arg、Phe、Ile、Pro、Lys、Gluであるか又は欠失し、
Xa4はVal、Phe、Pro、Pyro-Glu、Lys、Leu、Ile、Ala、Aspであるか又は欠失し、
Xa3はTyr、Leu、Pro、Asp、Arg、Glu、Lys、Tys、Val、Ileであるか又は欠失し、
Xa2はD-Lys、Lys、Ala、Arg、Val、Glu、Tyrであるか又は欠失し、及び
Xa1はGlu、Ala、D-Glu、Tyr、Gln、Asp、Asnであるか又は欠失する。
【0011】
一実施形態において、XaはXaa-Xa2-Xa1-*であり、ここで、*はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表し、Xa2-Xa1はLys-Glu-*、Arg-Glu-*、Val-Tyr-*、Glu-Glu-*、Lys-Gln-*、Lys-D-Glu-*又はTyr-Glu-*であり、及びXaaはXa10-Xa9-Xa8-Xa7-Xa6-Xa5-Xa4-Xa3-であり、ここで、Xa10はGlyであるか又は欠失し、Xa9はGly、Pro、Serであるか又は欠失し、Xa8はPro、Glu、Serであるか又は欠失し、Xa7はArg、Glu、Thr、Serであるか又は欠失し、Xa6はLys、Thr、Ala、Asp、Glu、Arg、Serであるか又は欠失し、Xa5はAsp、Ala、Val、Arg、Phe、Ile、Pro、Lys、Gluであるか又は欠失し、Xa4はVal、Phe、Pro、Pyro-Glu、Lys、Leu、Ile、Ala、Aspであるか又は欠失し、及びXa3はTyr、Leu、Pro、Asp、Arg、Glu、Lys、Tys、Val、Ileであるか又は欠失する。一実施形態において、XaaはArg-Lys-Asp-Val-Tyr-、Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-、Val-Pro-Pro-、Pyro-Glu-Leu-、Arg-Lys-Asp-、Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-、Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-、Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-、Val-Pro-Tys-、Pro-Ala-Tys-、Arg-Lys-Asp-Val-、Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-であるか又は欠失し、ここで、最も右側のハイフン-は-Xa2-Xa1との連結を表す。一実施形態において、XaはXaa-Xa2-Xa1-*であり、ここで、*はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表し、ここで、Xa2-Xa1はLys-Glu-*であり、及びXaaは上記に定義される通りである。
【0012】
一実施形態において、XaはXa1-*であり、ここで、*はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表し、ここで、Xa1はGlu、Ala、D-Glu、Asp、Asnであるか又は欠失する。
一実施形態において、XaはXa2-Xa1-*であり、ここで、*はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表し、ここで、Xa2はLysであり、及びXa1はGlu、D-Glu又はGlnである。
【0013】
一実施形態において、XaはGlu-*、Ala-*、D-Glu-*、Asp-*、Asn-*、Lys-Glu-*、D-Lys-Glu-*、Ala-Glu-*、Lys-Gln-*、Lys-D-Glu-*、Lys-Ala-*、Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Lys-Glu-*、Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Glu-*、Val-Pro-Pro-Lys-Glu-*、Pyro-Glu-Leu-Lys-Glu-*、Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-*、Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Lys-Glu-*、Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Lys-Glu-*、Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Glu-*、Val-Pro-Tys-Lys-Glu-*、Pro-Ala-Tys-Lys-Glu-*、Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Glu-*、Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-*であるか又は欠失し、ここで、*はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表す。
【0014】
一実施形態において、Xbは**-Xb1-Xb2-Xb3-Xb4-Xb5-Xb6-Xb7-Xb8-Xb9であり、ここで、**はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表し、ここで、
Xb1はAla、D-Alaであるか又は欠失し、
Xb2はLys、Ala、D-Lys、Argであるか又は欠失し、
Xb3はPro、Gly、D-Pro、Ser、Val、Alaであるか又は欠失し、
Xb4はArg、Ala、Ser、Pro、D-Argであるか又は欠失し、
Xb5はLys、Ala、D-Lys、Glu、Tyrであるか又は欠失し、
Xb6はVal、Asp、D-Val、Alaであるか又は欠失し、
Xb7はAla、D-Ala、Ileであるか又は欠失し、
Xb8はAla、D-Ala、Lysであるか又は欠失し、及び
Xb9はGln、Ala、Glu、Asn、D-Glnであるか又は欠失する。
【0015】
一実施形態において、Xbは**-Xb1-Xb2-Xb3-Xb4-Xb5-Xb6-Xb7-Xb8-Xb9であり、ここで、**はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表し、ここで、
Xb1はAla又はD-Alaであり、
Xb2はLys、Ala又はD-Lysであり、
Xb3はPro、Gly、又はAlaであり、
Xb4はArg又はD-Argであり、
Xb5はLysであるか又は欠失し、
Xb6はVal、D-Val、Alaであるか又は欠失し、
Xb7はAlaであるか又は欠失し、
Xb8はAlaであるか又は欠失し、及び
Xb9はGln、Asn、D-Glnであるか又は欠失する。
【0016】
一実施形態において、Xbは**-Xb1-Xb2-Xbbであり、ここで、**はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表し、Xb1-Xb2-は**-Ala-Lys-、**-Ala-Lys-、**-Ala-D-Lys-、**-Ala-Ala-又は**-D-Ala-Lys-、XbbはXb3-Xb4-Xb5-Xb6-Xb7-Xb8-Xb9であり、ここで、Xb3はPro、Gly、D-Pro、Ser、Val、Alaであるか又は欠失し、Xb4はArg、Ala、Ser、Pro、D-Argであるか又は欠失し、Xb5はLys、Ala、D-Lys、Glu、Tyrであるか又は欠失し、Xb6はVal、Asp、D-Val、Alaであるか又は欠失し、Xb7はAla、D-Ala、Ileであるか又は欠失し、Xb8はAla、D-Ala、Lysであるか又は欠失し、及びXb9はGln、Ala、Glu、Asn、D-Glnであるか又は欠失し、或いはXb3はPro、Gly、又はAlaであり、Xb4はArg又はD-Argであり、Xb5はLysであるか又は欠失し、Xb6はVal、D-Val、Alaであるか又は欠失し、Xb7はAlaであるか又は欠失し、Xb8はAlaであるか又は欠失し、及びXb9はGln、Asn、D-Glnであるか又は欠失する。一実施形態において、XbbはPro-Arg-Lys-Val、-Pro-Arg-Lys、-Pro-Arg、-Ala-Gln、-Ala-Ala、-Pro、-Lys-Val、-Val-Pro-Tyr、-Arg-Lys、-Val-Ala、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala、-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Ala-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Ala-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Ala、-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-D-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-D-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-D-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-D-Ala-Gln、-Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Asn、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-D-Val-Ala-Ala-Gln、-Ala-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Ala-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-D-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-D-Glnであるか又は欠失し、ここで、最も左側のハイフン-はXb1-Xb2との連結を表す。一実施形態において、Xbは**-Xb1-Xb2-Xbbであり、ここで、**はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表し、Xb1-Xb2-は**-Ala-Lys-であり、Xbbは上記に定義される通りである。
一実施形態において、Xbは**-Ala-である。
【0017】
一実施形態において、Xbは**-Ala-、**-Ala-Lys、**-Ala-D-Lys-、**-Ala-Ala-、**-D-Ala-Lys、**-Ala-Arg、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys、**-Ala-Lys-Pro-Arg、**-Val-Ala-Ala-Gln、**-Lys-Val-Ala-Ala、**-Ala-Lys-Pro、**-Pro-Arg-Lys-Val、**-Ala-Lys-Val-Pro-Tyr、**-Lys-Pro-Arg-Lys、**-Arg-Lys-Val-Ala、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala、**-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Ala-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Ala-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Ala-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Ala、**-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-D-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-D-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-D-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-D-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Asn、**-Ala-D-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-D-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Ala-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Ala-Ala-Ala-Gln、**-D-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-D-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln、**-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-D-Glnであるか又は欠失し、ここで、**はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表す。
【0018】
一実施形態において、Z1はPro、Z2はVal、Z3はPro、及びZ4はGlnであり、XaはXaa-Xa2-Xa1-*であり、ここで、*はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表し、ここで、Xa2-Xa1はLys-Glu-*、及びXbは**-Xb1-Xb2-Xbbであり、ここで、**はZ1-Z2-Z3-Z4に連結する位置を表し、Xb1-Xb2-は**-Ala-Lys-であり、ここで、Xaa及びXbbは上記に定義される通りである。
【0019】
一実施形態において、前記化合物は、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物1)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys(化合物2)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg(化合物3)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物4)、
Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物5)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物6)、
Lys-Glu-Pro-Val(化合物7)、
Val-Ala-Ala-Gln(化合物8)、
Glu-Pro-Val-Pro(化合物9)、
Lys-Pro-Arg-Lys(化合物10)、
Ala-Lys-Pro-Arg(化合物11)、
Pro-Val-Pro-Gln(化合物12)、
Val-Pro-Gln-Ala(化合物13)、
Pro-Gln-Ala-Lys(化合物14)、
Arg-Lys-Val-Ala(化合物15)、
【0020】
Lys-Val-Ala-Ala(化合物16)、
Gln-Ala-Lys-Pro(化合物17)、
Pro-Arg-Lys-Val(化合物18)、
Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物19)、
Lys-Ala-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物20)、
Lys-Glu-Ala-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物21)、
Lys-Glu-Pro-Val-Ala-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物22)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Ala-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物23)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Ala-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物24)、
Lys-Glu-Pro-Ala-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物25)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Ala-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物26)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Ala-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物27)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Ala-Val-Ala-Ala-Gln(化合物28)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Ala-Ala-Ala-Gln(化合物29)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Ala(化合物30)、
【0021】
Lys-Glu-Gly-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物31)、
Lys-Glu-Pro-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物32)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物33)、
Lys-Glu-Pro-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物34)、
Lys-Glu-Gly-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物35)、
Lys-Glu-Gly-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物36)、
Lys-Glu-Gly-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物37)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys(化合物38)、
Pro-Val-Pro-Gln-Ala(化合物39)、
Pro-Val-Pro-Glu-Ala(化合物40)、
Pro-Val-Pro-Ile-Ala(化合物41)、
Pro-Val-Pro-Ala(化合物42)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala(化合物43)、
Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物44)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Arg(化合物45)、
【0022】
Ala-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物46)、
Glu-Pro-Val-Pro-Ala-Ala-Lys(化合物47)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Ala(化合物48)、
Asp-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物49)、
Asn-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物50)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala(化合物51)、
Glu-Pro-Ala-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物52)、
Glu-Ala-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物53)、
Glu-Pro-Val-Ala-Gln-Ala-Lys(化合物54)、
Glu-Pro-Val-Pro-Glu-Ala-Lys(化合物55)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val(化合物56)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg(化合物57)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro(化合物58)、
Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg(化合物59)、
Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro(化合物60)、
【0023】
D-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物61)、
Lys-D-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物62)、
Lys-Glu-D-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物63)、
Lys-Glu-Pro-D-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物64)、
Lys-Glu-Pro-Val-D-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物65)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-D-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物66)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-D-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物67)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-D-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物68)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-D-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物69)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-D-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物70)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-D-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物71)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-D-Val-Ala-Ala-Gln(化合物72)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-D-Ala-Ala-Gln(化合物73)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-D-Ala-Gln(化合物74)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-D-Gln(化合物75)、
【0024】
Glu-Gly-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物76)、
Glu-Pro-Val-Gly-Gln-Ala-Lys(化合物77)、
D-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物78)、
Glu-D-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物79)、
Glu-Pro-D-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物80)、
Glu-Pro-Val-D-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物81)、
Glu-Pro-Val-Pro-D-Gln-Ala-Lys(化合物82)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-D-Ala-Lys(化合物83)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-D-Lys(化合物84)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro(化合物85)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln(化合物86)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln(化合物87)、
Val-Pro-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物88)、
Pyro-Glu-Leu-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物89)、
Pro-Ala-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物90)、
【0025】
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物91)、
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物92)、
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物93)、
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Pro-Val-Pro-Gln(化合物94)、
Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物95)、
Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物96)、
Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物97)、
Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物98)、
Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln(化合物99)、
Val-Pro-Pro-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物100)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu(化合物101)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Val-Pro-Tyr(化合物102)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Glu(化合物103)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Asn(化合物104)、
Lys-Gln-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物105)、
Lys-Glu-Pro-Ile-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物106)、
Val-Pro-Gln-Ala(化合物107)、又は
Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物108)から選ばれる。
【0026】
一実施形態において、前記化合物は、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物1)、
Lys-Glu-D-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物63)、
Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物96)、
Val-Pro-Pro-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物100)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Asn(化合物104)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物6)、
Pro-Val-Pro-Gln(化合物12)、
Glu-Pro-Val-Ala-Gln-Ala-Lys(化合物54)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg(化合物57)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-D-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物68)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-D-Val-Ala-Ala-Gln(化合物72)、
Pyro-Glu-Leu-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物89)、
【0027】
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物92)、
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Pro-Val-Pro-Gln(化合物94)、
Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物95)、
Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物97)、
Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物98)、
Lys-Gln-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物105)、
Lys-Glu-Pro-Ile-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物106)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物4)、
Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物5)、
Glu-Pro-Val-Pro(化合物9)、
Lys-Pro-Arg-Lys(化合物10)、
Arg-Lys-Val-Ala(化合物15)、
Lys-Glu-Pro-Ala-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物25)、
【0028】
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Ala-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物26)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Ala-Ala-Ala-Gln(化合物29)、
Lys-Glu-Gly-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物31)、
Lys-Glu-Pro-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物34)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys(化合物38)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Ala(化合物48)、
Asp-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物49)、
Asn-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物50)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala(化合物51)、
Glu-Ala-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物53)、
Glu-Pro-Val-Pro-Glu-Ala-Lys(化合物55)、
Lys-D-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物62)、
Lys-Glu-Pro-Val-D-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物65)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-D-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物66)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-D-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物67)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-D-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物70)、
【0029】
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-D-Gln(化合物75)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln-D-Ala-Lys(化合物83)、
Lys-Glu-Pro-Val-Pro(化合物85)、
Glu-Pro-Val-Pro-Gln(化合物86)、
Val-Pro-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物88)、
Pro-Ala-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物90)、
Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(化合物93)、
Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln(化合物99)、又は
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Glu(化合物103)から選ばれる。
【0030】
第2態様によれば、本発明は、腸炎を治療するための薬物の製造における、前記ポリペプチド化合物又は生理学的に許容される塩の使用、或いは、治療有効量の前記ポリペプチド化合物又は生理学的に許容される塩を対象に投与することを含む、腸炎の治療方法、或いは、腸炎を治療するための、前記ポリペプチド化合物又は生理学的に許容される塩を提供する。
更に、腸炎は特異的腸炎及び非特異的腸炎を含む。更に、特異的腸炎は炎症性腸疾患、壊死性腸疾患及び腸内細菌叢異常症を含む。
更に、炎症性腸疾患は潰瘍性結腸炎を含む。
【0031】
更に、本発明は、本発明のポリペプチド化合物又は生理学的に許容される塩と、薬用可能な賦形剤と、を含む医薬組成物を提供する。
更に、薬物の剤形は錠剤、カプセル剤、溶液剤、散剤及び丸剤を含む。
本発明により提供される新しいポリペプチド及びその応用の有益な効果は以下の通りである。
【0032】
本発明に記載のポリペプチドのペプチド鎖が短いため、吸収がより速く、より良好である。実験の結果は、本願により提供されるポリペプチドが、ラット急性炎症性腸疾患モデル試験において、腸腔の拡張を明らかに緩和する効果が示され、ラット急性炎症性腸疾患モデル試験において、顕著な治療効果を有することを表した。本発明に記載のポリペプチドは、結腸炎に対する顕著な緩和効果を有し、腸炎の治療薬、特に潰瘍性結腸炎の薬物の製造に使用できる。
【図面の簡単な説明】
【0033】
【
図1】ポリペプチドの固相合成ステップの模式図を示す。
【発明を実施するための形態】
【0034】
以下は、具体的な試験と組み合わせて本発明を説明するものであるが、本発明の請求範囲を限定するものではない。
【0035】
本願(添付の特許請求の範囲を含む)で使用されるように、文脈上に別段の指示がない限り、「1個/1種(a、an)」及び「前記(the)」などの単数形の単語は、それらに対応する複数の指示対象を含む。
【0036】
文脈上に別段の明らかな指示がない限り、「又は」という用語は、「及び/又は」という用語を意味し、また、「及び/又は」という用語と互換的に使用される。
【0037】
「有効量」又は「治療有効量」という用語は、疾患或いは疾患若しくは障害の少なくとも1つの臨床症状を治療するために対象に投与する場合に、前記疾患、障害又は症状の治療に十分に影響を与える、活性成分(化合物など)の量を意味する。「治療有効量」は、化合物、疾患、障害及び/又は疾患若しくは障害の症状、疾患、障害及び/又は疾患若しくは障害の症状の重症度、治療を受ける対象の年齢及び/又は治療を受ける対象の体重に伴って変化する。任意の所与の状況における適切な量は、当業者には明らかであるか、又は日常的な実験によって決定することができる。幾つかの実施形態において、「治療有効量」は、対象の疾患若しくは障害の「治療」(上記で定義)における、本願に開示される少なくとも1つの化合物及び/又はその少なくとも1つの立体異性体、及び/又はその少なくとも1つのその薬用可能な塩の有効な量である。併用療法の場合では、「治療有効量」は、疾患、障害又は病状を効果的に治療する組み合わせ対象の総量を指す。
【0038】
「生理学的に適合する塩」という用語は、生理学的適合する(即ち、薬理学的に許容される)と共に、本発明の化合物が投与される個体に対して基本的に無毒な塩形態を指す。本発明の化合物の生理学的に適合する塩には、適切な、非毒性の有機酸若しくは無機酸或いは無機塩基から形成される従来の化学量論的な酸付加塩又は塩基付加塩が含まれる。
【0039】
「腸腔拡張」という用語は、腸道拡張又は腸管拡張を指す。腸炎患者では、腸道損傷、粘液滲出、腸管内のガス又は液体の蓄積、微生物の過剰成長などの様々な要因により引き起こされる腸腔拡張した腸管は、通常の腸管より太く、炎症性腸疾患による腸管拡張、又は腫瘍による腸管拡張や腸道閉塞などの再発性腸炎が臨床的によく見られる。
【0040】
本願で使用される場合、各アミノ酸配の略語は以下の通りである。
【0041】
【0042】
実施例1:ポリペプチドの化学合成
ポリペプチド化合物の合成は、全自動ポリペプチド合成装置による従来の固相合成方法を使用し、樹脂膨潤、脱保護、洗浄、アミノ酸活性化、縮合プロセスを経て、ポリペプチドの化学合成を行った。
Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(化合物1)を例として、ポリペプチド固相合成ステップの模式図を
図1に示した。
【0043】
ステップ1、ポリペプチドを完全に保護したペプチド樹脂の製造
(1)樹脂の膨潤:2-Chlorotrityl Chloride Resin 7.71g(SD=0.73mmol/g)を秤量し、篩板を備えた合成管に加え、100mlのジクロロメタン(DCM)で膨潤した。
(2)Fmoc-Gln(Trt)-樹脂の製造:樹脂、Fmoc-Gln(Trt)-OH、DIPEAが1:1.78:4.31であるモル比で、Fmoc-Gln(Trt)-OH、DIPEAをそれぞれ秤量して合成管に加えた。室温で窒素ガス(N2)を用いて1~3時間バブリングして振とうし、吸引乾燥させた後、ジメチルホルムアミド(DMF)を用いて100ml/回でそれぞれ5回洗浄し、樹脂を吸引乾燥させた。
(3)Fmoc保護基の除去:反応器に100mlの20%ピペリジン-DMF(v/v)溶液を加え、窒素ガスを用いて20minバブリングして反応させ、吸引乾燥させた後、DMFを用いて100ml/回、3分間/回で5回洗浄し、吸引乾燥させ、ニンヒドリン法によりFmocの除去結果が検出された。
【0044】
(4)アミノ酸の予備活性化:250mlのビーカーに、Fmocにより保護された15mmolのアミノ酸、15mmolのHOBt、15mmolのDICを加え、100mlのDMFで溶解し、室温で撹拌し、使用に備えた。
(5)アミノ酸の連結:既に活性化された保護アミノ酸溶液を反応器に注入し、適量のDCMを補充して装置を洗浄した。室温で窒素ガスを用いて1~3時間バブリングして反応させ、ニンヒドリン法によりアミノ酸の連結が完全であるか否かを検出し、完全である場合、吸引乾燥させた。樹脂は、DMFを用いて100ml/回、3min/回で5回洗浄し、吸引乾燥させた。各アミノ酸、縮合剤の用量を表2に示した。
(6)最初のアミノ酸縮合が完了した後、ステップ(4)及び(5)を繰り返し、最後のアミノ酸カップリングが完了するまで、アミノ酸順序に従ってペプチド鎖を延長させた。
(7)樹脂ペプチドは、DMFを用いて150ml/回、3min/回で4回洗浄し、更にDCMを用いて150ml/回、3min/回で5回洗浄し、吸引乾燥させた。
【0045】
【0046】
ステップ2、切断
(1)合成管に切断剤(TFA:TIPS:H2O=95:2.5:2.5、v/v)100mlを加え、窒素ガスを用いて1.5~3時間バブリングして反応させた。
(2)切断反応が完了した後、切断剤を250mlの丸底フラスコに吸引ろ過した。元の切断剤体積の4分の1に真空濃縮させた後、既存体積の10倍のメチルtert-ブチルエーテルを加え、沈降させて白色固体を得た。得られた混合物をろ過し、50mlのメチルtert-ブチルエーテルでそれぞれ3回洗浄した後、得られたペプチド粗製品を砂中子漏斗に入れ、ドラフト内で窒素ガスを用いて乾燥させ、ペプチド粗品が粉末状になるまで溶媒を揮発させた。ペプチド粗品9.04gを得て、粗収率は74.7%であった。
【0047】
ステップ3、精製、塩交換及び凍結乾燥
ポリペプチドHPLCによる直接塩交換(酢酸塩)
A.クロマトグラフィーパラメータ
クロマトグラフィーカラム:動的軸方向圧縮カラム80×250mm、充填物:Daisogel C18(SP-100-8-ODS-P)
溶出液A1:0.1Mの酢酸
溶出液A2:0.025Mの酢酸-0.1Mの酢酸アンモニウム
溶出液B:アセトニトリル
流速:180ml/min
紫外線検出波長:220nm
【0048】
B.操作ステップ
a)水及び/又はアセトニトリルでペプチド粗品の溶解、0.45μmのろ膜によるろ過
b)95%のA1+5%のBによるクロマトグラフィーカラムの平衡
c)注入
d)95%のA2+5%のBによるクロマトグラフィーカラムの平衡
e)A1及びBの勾配溶出
f)目的ペプチド溶出液の収集
g)回転蒸発及び濃縮
h)凍結乾燥
ペプチド粗品8.26gを精製し、純ペプチド4.92gを得て、精製の収率は59.5%であった。
化合物1の合成と類似する方法で他の化合物を合成した。結果は、表3及び明細書の他の部分を参照した。
【0049】
【0050】
【0051】
【0052】
【0053】
【0054】
注:二重電荷ピークは、目的分子が2つのプロトンに結合することを表し、三重電荷ピークは、目的分子が3つのプロトンに結合することを表し、N/Aは計量が困難であるため、実際の重量が含まれないことを表した。
【0055】
化合物1:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:m/z:549.65904([M+3H]3+)、823.98493([M+2H]2+)、1646.96346([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O+CD3CN)δ4.48(dd,J=9.5,4.1Hz,1H)4.42(dd,J=9.2,4.5Hz,1H)4.32-4.27(m,1H)4.27-4.21(m,3H)4.20-4.07(m,6H)4.00(dd,J=8.3,4.8Hz,1H)3.95(d,J=7.5Hz,1H)3.86(t,J=6.7Hz,1H)3.77-3.62(m,3H)3.59-3.43(m,3H)3.04(t,J=6.7Hz,2H)2.87-2.78(m,6H)2.28-2.08(m,9H)2.00-1.80(m,31H,AcOH)1.80-1.41(m,23H)1.40-1.24(m,6H)1.24-1.18(m,9H)0.87-0.73(m,12H).
【0056】
化合物2:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C57H100N18O15;m/z:426.59680([M+3H]3+)、639.39021([M+2H]2+)、1277.77023([M+H]+).
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ4.57(dd,J=8.7,4.9Hz,1H)4.41-4.11(m,10H)3.83(s,1H)3.78(t,J=6.5Hz,1H)3.54(d,J=73.5Hz,7H)3.08(d,J=7.0Hz,2H)2.74-2.68(m,7H)2.32(d,J=9.1Hz,2H)2.23-2.17(m,2H)2.05-1.46(m,AcOH,56H)1.43-1.22(m,7H)1.17(d,J=7.0Hz,3H)0.82(dd,J=19.6,6.7Hz,6H).
【0057】
化合物3:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C51H88N16O14;m/z:383.89927([M+3H]3+)、575.34276([M+2H]2+)、1149.67551([M+H]+).
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ4.58-4.55(m,1H)4.44-4.37(m,2H)4.33(dd,J=8.4,4.2Hz,1H)4.30-4.22(m,3H)4.16-4.12(m,2H)3.79(d,J=6.1Hz,1H)3.64-3.48(m,6H)3.08(t,J=7.0Hz,2H)2.71(d,J=8.2Hz,5H)2.36-2.30(m,2H)2.15(t,J=7.6Hz,2H)2.09-1.41(m,AcOH,46H)1.37-1.29(m,4H)1.16(d,J=7.1Hz,3H)0.85(dd,J=20.7,6.7Hz,6H).
【0058】
化合物4:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C40H69N11O12;m/z:448.76653([M+2H]2+)、896.52058([M+H]+).
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ4.56(dd,J=9.0,4.9Hz,1H)4.39(dd,J=8.3,4.4Hz,1H)4.31-4.24(m,3H)4.13(dd,J=9.1,5.1Hz,2H)3.78(dd,J=7.9,4.3Hz,1H)3.67-3.51(m,4H)2.75-2.70(m,4H)2.38-2.29(m,2H)2.14(t,J=7.8Hz,2H)2.04-1.47(m,AcOH,33H)1.35-1.28(m,4H)1.19(d,J=7.2Hz,3H)0.85(dd,J=22.1,6.8Hz,6H).
【0059】
化合物5:Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C33H60N12O9;m/z:385.24021([M+2H]2+)、769.46971([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.23-4.17(m,1H)4.15-4.07(m,4H)3.95(dd,J=8.5,4.8Hz,1H)3.89(d,J=7.7Hz,1H)3.25-3.15(m,2H)3.00(t,J=7.0Hz,2H)2.78(t,J=7.7Hz,2H)2.30-2.22(m,1H)2.12-2.05(m,2H)1.93-1.80(m,5H)1.75(s,AcOH,10H)1.62-1.40(m,8H)1.19(d,J=7.2Hz,8H)0.73(dd,J=6.7,4.0Hz,6H).
【0060】
化合物6:Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C34H57N9O11;m/z:768.42641([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.46(dd,J=8.4,6.4Hz,1H)4.35-4.27(m,3H)4.26-4.18(m,2H)4.09(dd,J=8.2,5.1Hz,1H)3.84-3.77(m,1H)3.68-3.52(m,3H)2.91(t,J=7.5Hz,2H)2.39(t,J=7.2Hz,2H)2.33(t,J=7.6Hz,2H)2.27-2.17(m,2H)2.12-1.87(m,AcOH,13H)1.83-1.72(m,3H)1.66-1.57(m,3H)1.32(dd,J=11.8,7.5Hz,5H)0.92(dd,J=12.6,6.7Hz,6H).
【0061】
化合物7:Lys-Glu-Pro-Val(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C21H37N5O7;m/z:472.27768([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.43(dd,J=10.2,4.0Hz,1H)4.27(dd,J=8.3,5.3Hz,1H)3.85-3.80(m,2H)3.68-3.60(m,1H)3.59-3.46(m,1H)2.80(t,J=7.6Hz,2H)2.22-2.14(m,2H)2.10-2.06(m,1H)1.96-1.64(m,AcOH,11H)1.52-1.47(m,2H)1.29-1.22(m,2H)0.71(dd,J=15.3,6.9Hz,6H).
【0062】
化合物8:Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C16H29N5O6;m/z:388.2187([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.25(q,J=7.2Hz,1H)4.17(q,J=7.2Hz,1H)4.05(dd,J=8.5,4.8Hz,1H)3.67(d,J=6.0Hz,1H)2.23-2.14(m,2H)2.13-2.05(m,1H)2.04-1.95(m,1H)1.85-1.76(m,1H)1.28(dd,J=7.2,5.0Hz,6H)0.90(dd,J=10.3,6.9Hz,6H).
【0063】
化合物9:Glu-Pro-Val-Pro(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C20H32N4O7;441.23562([M+H]+).
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ4.42(dd,J=8.4,4.6Hz,1H)4.28(t,J=8.3Hz,1H)4.17(dd,J=8.5,4.7Hz,1H)3.78(dd,J=8.3,4.2Hz,1H)3.64-3.45(m,4H)2.37-2.27(m,2H)2.08-1.58(m,AcOH,16H)0.87(dd,J=25.7,6.7Hz,6H).
【0064】
化合物10:Lys-Pro-Arg-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C23H45N9O5;264.68527([M+2H]2+)、528.36210([M+H]+).
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ4.42(dd,J=8.2,5.2Hz,1H)4.23(t,J=6.7Hz,1H)4.14(dd,J=8.9,5.2Hz,1H)4.09(d,J=7.9Hz,1H)3.64(dd,J=9.9,6.6Hz,1H)3.45-3.40(m,1H)3.07(s,2H)2.72(t,J=6.3Hz,4H)2.11-2.04(m,1H)1.92-1.66(m,AcOH,18H)1.56-1.48(m,8H)1.45-1.38(m,2H)1.33-1.29(m,2H).
【0065】
化合物11:Ala-Lys-Pro-Arg(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C20H38N8O5;236.15638([M+2H]2+)、471.30462([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O))δ4.55(dd,J=8.3,5.6Hz,1H)4.34(dd,J=8.4,5.9Hz,1H)4.09-3.96(m,2H)3.82-3.74(m,1H)3.64-3.55(m,1H)3.12(t,J=6.9Hz,2H)2.93(t,J=7.6Hz,2H)2.28-2.20(m,1H)2.04-1.83(m,3H)1.82(s,AcOH,6H)1.79-1.60(m,6H)1.58-1.51(m,2H)1.42(d,J=7.1Hz,5H).
【0066】
化合物12:Pro-Val-Pro-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C20H33N5O6;m/z:440.25122([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.33-4.18(m,3H)3.97(dd,J=8.9,4.8Hz,1H)3.74-3.65(m,1H)3.53-3.46(m,1H)3.25-3.16(m,2H)2.29-2.22(m,1H)2.17-2.10(m,3H)1.99-1.66(m,AcOH,12H)0.82(d,J=6.8Hz,3H)0.76(d,J=6.7Hz,3H).
【0067】
化合物13:Val-Pro-Gln-Ala(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C18H31N5O6;m/z:414.23575([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.37(t,J=7.5Hz,1H)4.15(dd,J=8.6,6.0Hz,1H)4.07(d,J=5.5Hz,1H)4.03(t,J=7.2Hz,1H)3.68-3.61(m,1H)3.55-3.48(m,1H)2.35-2.26(m,2H)2.26-2.15(m,2H)2.04-1.74(m,AcOH,7H)1.22(d,J=7.2Hz,3H)0.98(d,J=7.0Hz,3H)0.87(d,J=6.8Hz,3H).
【0068】
化合物14:Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C19H34N6O6;m/z:222.13480([M+2H]2+)、443.26183([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.28(dd,J=8.7,6.1Hz,1H)4.25-4.15(m,2H)4.01(dd,J=8.1,5.2Hz,1H)3.34-3.22(m,2H)2.86(t,J=7.5Hz,2H)2.37-2.29(m,1H)2.26(t,J=7.6Hz,2H)2.00-1.84(m,5H)1.73-1.64(m,1H)1.62-1.50(m,3H)1.30-1.24(m,5H).
【0069】
化合物15:Arg-Lys-Val-Ala(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C20H40N8O5;m/z:237.16465([M+2H]2+)、473.32087([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.28(t,J=7.3Hz,1H)4.00-3.94(m,2H)3.90(t,J=6.4Hz,1H)3.07(t,J=7.0Hz,2H)2.85(t,J=7.6Hz,2H)2.01-1.92(m,1H)1.80-1.75(m,AcOH,8H)1.73-1.59(m,2H)1.59-1.40(m,4H)1.35-1.22(m,2H)1.19(d,J=7.2Hz,3H)0.81(t,J=6.9Hz,6H).
【0070】
化合物16:Lys-Val-Ala-Ala(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C17H33N5O5;m/z:388.25660([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.18(q,J=7.1Hz,1H)4.03-3.91(m,3H)2.87(t,J=7.7Hz,2H)1.98-1.89(m,1H)1.83-1.74(m,AcOH,6H)1.60-1.53(m,2H)1.36-1.27(m,2H)1.26(d,J=7.2Hz,3H)1.19(d,J=7.2Hz,3H)0.83(d,J=6.8Hz,6H).
【0071】
化合物17:Gln-Ala-Lys-Pro(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C19H34N6O6;m/z:443.26161([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.48(dd,J=8.2,5.6Hz,1H)4.26-4.20(m,1H)4.10(dd,J=8.5,5.4Hz,1H)3.91(t,J=6.6Hz,1H)3.68-3.61(m,1H)3.55-3.43(m,1H)2.88(t,J=7.5Hz,2H)2.39-2.27(m,2H)2.15-1.96(m,3H)1.92-1.69(m,8H)1.66-1.49(m,3H)1.43-1.29(m,2H)1.28-1.22(m,3H).
【0072】
化合物18:Pro-Arg-Lys-Val(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C22H42N8O5;m/z:250.17158([M+2H]2+)、499.33464([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.27(dd,J=8.7,6.0Hz,1H)4.24-4.17(m,2H)3.88(d,J=6.2Hz,1H)3.33-3.20(m,2H)3.09-3.02(m,2H)2.85(t,J=7.5Hz,2H)2.37-2.28(m,1H)1.98-1.86(m,4H)1.78(s,AcOH,6H)1.72-1.42(m,8H)1.38-1.23(m,2H)0.75(dd,J=11.2,6.8Hz,6H).
【0073】
化合物19:Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C70H120N22O20;m/z:530.64499([M+3H]3+)、795.46224([M+2H]2+)、1589.91350([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.53-4.43(m,2H)4.33(dd,J=8.3,6.0Hz,1H)4.27(t,J=7.7Hz,3H)4.24-4.12(m,6H)4.06-3.94(m,3H)3.77(q,J=7.6Hz,1H)3.73-3.67(m,2H)3.63-3.53(m,2H)3.51(q,J=7.6Hz,1H)3.08(t,J=6.9Hz,2H)2.91-2.83(m,4H)2.29(t,J=7.6Hz,2H)2.26-2.12(m,7H)2.03-1.46(m,AcOH,38H)1.39(d,J=7.1Hz,4H)1.36-1.30(m,2H)1.30-1.22(m,10H)0.92-0.77(m,12H).
【0074】
化合物20:Lys-Ala-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C71H125N23O18;m/z:530.32804([M+3H]3+)、794.98683([M+2H]2+)、1588.96546([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.51(q,J=7.1Hz,1H)4.48-4.43(m,1H)4.31-4.25(m,3H)4.24-4.11(m,6H)4.03(dd,J=8.4,4.9Hz,1H)3.98(d,J=7.6Hz,1H)3.87(t,J=6.7Hz,1H)3.79-3.67(m,3H)3.60-3.47(m,3H)3.08(t,J=6.9Hz,2H)2.91-2.83(m,6H)2.28(t,J=7.6Hz,2H)2.21-2.13(m,5H)2.03-1.64(m,AcOH,33H)1.64-1.47(m,11H)1.44-1.28(m,6H)1.28-1.21(m,12H)0.89-0.76(m,12H).
【0075】
化合物21:Lys-Glu-Ala-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C71H125N23O20;m/z:540.99125([M+3H]3+)、810.98235([M+2H]2+)、1620.94722([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.45(dd,J=9.4,4.9Hz,1H)4.30-4.24(m,3H)4.24-4.11(m,8H)4.02(dd,J=8.4,4.9Hz,1H)3.97(d,J=7.6Hz,1H)3.89(t,J=6.7Hz,1H)3.79-3.66(m,2H)3.60-3.47(m,2H)3.08(t,J=6.9Hz,2H)2.91-2.83(m,6H)2.28(t,J=7.6Hz,2H)2.22-2.12(m,6H)2.02-1.46(m,AcOH,41H)1.43-1.28(m,6H)1.28-1.20(m,12H)0.88-0.75(m,12H).
【0076】
化合物22:Lys-Glu-Pro-Val-Ala-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C71H125N23O20;m/z:540.99088([M+3H]3+)、810.98168([M+2H]2+)、1620.95237([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.51(dd,J=9.6,4.4Hz,1H)4.46(dd,J=9.4,4.8Hz,1H)4.35(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.28(dd,J=8.3,6.1Hz,1H)4.25-4.13(m,7H)4.03(dd,J=8.3,4.9Hz,1H)3.98(d,J=7.6Hz,1H)3.94-3.88(m,2H)3.75-3.67(m,2H)3.63-3.56(m,1H)3.51(q,J=7.3Hz,1H)3.09(t,J=6.9Hz,2H)2.91-2.83(m,6H)2.29-2.21(m,4H)2.21-2.13(m,4H)2.03-1.65(m,AcOH,31H)1.64-1.46(m,11H)1.45-1.28(m,6H)1.28-1.22(m,12H)0.89-0.78(m,12H).
【0077】
化合物23:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Ala-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C71H124N22O19;m/z:398.24191([M+4H]4+)、530.65344([M+3H]3+)、795.97791([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.51(dd,J=9.6,4.4Hz,1H)4.44(dd,J=9.4,4.9Hz,1H)4.33(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.31-4.08(m,9H)4.03(dd,J=8.4,4.9Hz,1H)3.97(d,J=7.6Hz,1H)3.92-3.87(m,1H)3.79-3.73(m,1H)3.73-3.66(m,2H)3.62-3.52(m,2H)3.51-3.46(m,1H)3.07(t,J=6.9Hz,2H)2.90-2.81(m,6H)2.29-2.21(m,2H)2.21-2.10(m,5H)2.02-1.64(m,AcOH,37H)1.64-1.45(m,11H)1.44-1.27(m,6H)1.27-1.20(m,12H)0.91-0.74(m,12H).
【0078】
化合物24:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Ala-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C70H120N22O20;m/z:398.23245([M+4H]4+)、530.64075([M+3H]3+)、795.45752([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.51(dd,J=9.7,4.4Hz,1H)4.45(q,J=7.1Hz,1H)4.33(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.31-4.24(m,3H)4.23-4.12(m,6H)4.03(dd,J=8.4,4.8Hz,1H)3.97(d,J=7.6Hz,1H)3.92-3.87(m,1H)3.79-3.73(m,1H)3.73-3.64(m,2H)3.62-3.48(m,3H)3.08(t,J=6.9Hz,2H)2.91-2.83(m,4H)2.32-2.21(m,4H)2.20-2.11(m,5H)2.03-1.71(m,AcOH,32H)1.71-1.45(m,10H)1.37-1.27(m,4H)1.27-1.17(m,12H)0.90-0.76(m,12H).
【0079】
化合物25:Lys-Glu-Pro-Ala-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C71H123N23O20;m/z:405.48935([M+4H]4+)、540.31677([M+3H]3+)、809.97144([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.51(dd,J=9.5,4.4Hz,1H)4.48-4.41(m,2H)4.32-4.25(m,3H)4.21(dd,J=8.1,6.7Hz,1H)4.19-4.12(m,5H)4.02(dd,J=8.4,4.9Hz,1H)3.97(d,J=7.6Hz,1H)3.92-3.85(m,1H)3.74-3.64(m,3H)3.60-3.46(m,3H)3.07(t,J=6.9Hz,2H)2.90-2.83(m,6H)2.30-2.20(m,4H)2.20-2.12(m,5H)2.02-1.45(m,AcOH,48H)1.43-1.27(m,6H)1.27-1.21(m,12H)0.80(dd,J=6.8,4.4Hz,6H).
【0080】
化合物26:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Ala-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C71H125N23O20;m/z:405.99350([M+4H]4+)、540.98883([M+3H]3+)、810.97961([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.51(dd,J=9.6,4.4Hz,1H)4.33(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.31-4.23(m,2H)4.23-4.09(m,8H)4.03(dd,J=8.4,4.9Hz,1H)3.97(d,J=7.6Hz,1H)3.93-3.86(m,1H)3.81-3.66(m,2H)3.62-3.52(m,2H)3.07(t,J=6.9Hz,2H)2.86(m,6H)2.31-2.11(m,8H)2.03-1.41(m,AcOH,48H)1.40-1.27(m,6H)1.25(dd,J=13.7,7.3Hz,12H)0.90-0.76(m,12H).
【0081】
化合物27:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Ala-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C70H120N20O20 ;m/z:391.23177([M+4H]4+)、781.45496([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.52-4.43(m,2H)4.33(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.31-4.22(m,3H)4.21-4.10(m,6H)4.02(dd,J=8.5,4.8Hz,1H)3.96(d,J=7.7Hz,1H)3.92-3.84(m,1H)3.81-3.73(m,1H)3.73-3.65(m,2H)3.61-3.52(m,2H)3.52-3.45(m,1H)2.91-2.81(m,6H)2.30-2.10(m,9H)2.02-1.62(m,AcOH,31H)1.62-1.51(m,8H)1.41-1.27(m,6H)1.27-1.20(m,12H)0.90-0.75(m,12H).
【0082】
化合物28:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Ala-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C70H120N22O20;m/z:398.23303([M+4H]4+)、530.64142([M+3H]3+)、795.45850([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.52-4.42(m,2H)4.33(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.30-4.24(m,3H)4.23-4.09(m,6H)4.02(dd,J=8.5,4.8Hz,1H)3.95(d,J=7.5Hz,1H)3.92-3.85(m,1H)3.79-3.73(m,1H)3.72-3.67(m,2H)3.62-3.42(m,3H)3.08(t,J=6.9Hz,2H)2.87(t,J=7.6Hz,4H)2.30-2.25(m,2H)2.24-2.10(m,7H)2.02-1.65(m,AcOH,29H)1.64-1.48(m,8H)1.42-1.29(m,4H)1.28-1.19(m,12H)0.90-0.75(m,12H).
【0083】
化合物29:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Ala-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C71H123N23O20;m/z:405.48969([M+4H]4+)、540.31714([M+3H]3+)、809.97205([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.49(dd,J=9.6,4.3Hz,1H)4.45(dd,J=9.3,4.9Hz,1H)4.33(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.29-4.24(m,3H)4.19-4.13(m,7H)4.02(dd,J=8.4,4.8Hz,1H)3.89(t,J=6.8Hz,1H)3.79-3.66(m,3H)3.61-3.47(m,3H)3.08(t,J=6.9Hz,2H)2.86(q,J=8.0Hz,6H)2.28(t,J=7.6Hz,2H)2.23-2.13(m,7H)2.02-1.46(m,AcOH,47H)1.42-1.18(m,20H)0.85(dd,J=14.2,6.7Hz,6H).
【0084】
化合物30:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Ala(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C71H124N22O19;m/z:398.24493([M+4H]4+)、530.65551([M+3H]3+)、795.47815([M+2H]2+)、1589.94194([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.51(dd,J=9.6,4.4Hz,1H)4.46(dd,J=9.4,4.9Hz,1H)4.34(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.31-4.24(m,3H)4.24-4.20(m,1H)4.20-4.09(m,5H)4.02-3.96(m,2H)3.93-3.86(m,1H)3.80-3.74(m,1H)3.74-3.67(m,2H)3.63-3.43(m,3H)3.08(t,J=6.9Hz,2H)2.91-2.82(m,6H)2.31-2.12(m,7H)2.01-1.65(m,AcOH,34H)1.64-1.46(m,11H)1.35(dd,J=16.0,8.1Hz,6H)1.27-1.20(m,12H)0.92-0.77(m,12H).
【0085】
化合物31:Lys-Glu-Gly-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C70H123N23O20;m/z:402.49240([M+4H]4+)、536.31955([M+3H]3+)、803.97442([M+2H]2+)、1606.91471([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.45(dd,J=9.4,4.9Hz,1H)4.32(d,J=8.1Hz,1H)4.30-4.25(m,2H)4.24-4.19(m,2H)4.19-4.11(m,5H)4.02(dd,J=8.4,4.9Hz,1H)3.97(d,J=7.6Hz,1H)3.91-3.84(m,2H)3.82-3.73(m,2H)3.69(q,J=7.7,7.0Hz,1H)3.59-3.52(m,1H)3.52-3.46(m,1H)3.07(t,J=6.9Hz,2H)2.90-2.82(m,6H)2.28(t,J=7.6Hz,2H)2.23-2.12(m,6H)2.02-1.64(m,AcOH,35H)1.63-1.45(m,11H)1.44-1.27(m,6H)1.27-1.21(m,9H)0.88-0.73(m,12H).
【0086】
化合物32:Lys-Glu-Pro-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(TOF-HRMS)、分子式:C70H123N23O20;m/z:402.49278([M+4H]4+)、536.31975([M+3H]3+)、803.97422([M+2H]2+)、1606.92969([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.51(dd,J=9.7,4.4Hz,1H)4.46(dd,J=9.4,4.9Hz,1H)4.36(dd,J=8.3,5.9Hz,1H)4.28(dd,J=8.3,6.1Hz,1H)4.24-4.14(m,6H)4.03(dd,J=8.3,4.9Hz,1H)3.97(dd,J=10.0,7.5Hz,2H)3.90(t,J=6.8Hz,1H)3.87-3.78(m,2H)3.76-3.67(m,2H)3.61-3.54(m,1H)3.54-3.47(m,1H)3.08(t,J=6.9Hz,2H)2.91-2.83(m,6H)2.26-2.13(m,8H)2.03-1.87(m,9H)1.87-1.45(m,AcOH,33H)1.44-1.28(m,6H)1.26(dd,J=18.4,7.2Hz,9H)0.89-0.79(m,12H).
【0087】
化合物33:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C70H123N23O20;m/z:402.48917([M+4H]4+)、536.31647([M+3H]3+)、803.97101([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.51(dd,J=9.6,4.4Hz,1H)4.34(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.31-4.11(m,9H)4.03(dd,J=8.4,4.9Hz,1H)3.97(d,J=7.6Hz,1H)3.92-3.86(m,1H)3.85-3.74(m,3H)3.74-3.66(m,1H)3.62-3.52(m,2H)3.06(t,J=7.0Hz,2H)2.91-2.83(m,6H)2.31-2.11(m,8H)2.03-1.43(m,AcOH,45H)1.40-1.27(m,6H)1.27-1.23(m,9H)0.91-0.77(m,12H).
【0088】
化合物34:Lys-Glu-Pro-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C67H119N23O20;m/z:392.48178([M+4H]4+)、522.97314([M+3H]3+)、784.45752([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.51(dd,J=9.6,4.4Hz,1H)4.35(dd,J=8.3,5.9Hz,1H)4.25-4.12(m,7H)4.03(dd,J=8.4,4.8Hz,1H)3.96(dd,J=10.6,7.5Hz,2H)3.92-3.86(m,1H)3.85-3.77(m,4H)3.75-3.68(m,1H)3.60-3.53(m,1H)3.06(t,J=7.0Hz,2H)2.92-2.83(m,6H)2.28-2.12(m,7H)2.05-1.41(m,AcOH,42H)1.40-1.27(m,6H)1.27-1.24(m,9H)0.85(dd,J=11.0,6.7Hz,6H)0.80(dd,J=6.8,5.1Hz,6H).
【0089】
化合物35:Lys-Glu-Gly-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C64H115N23O20;m/z:382.47363([M+4H]4+)、509.62903([M+3H]3+)、763.93982([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.27-4.13(m,8H)4.05-4.00(m,2H)3.97(d,J=7.6Hz,1H)3.93-3.87(m,2H)3.85-3.76(m,5H)3.06(t,J=7.0Hz,2H)2.90-2.83(m,6H)2.24-2.12(m,6H)2.02-1.41(m,AcOH,40H)1.39-1.27(m,6H)1.27-1.22(m,9H)0.85-0.76(m,12H).
【0090】
化合物36:Lys-Glu-Gly-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Gly-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C67H119N23O20;m/z:392.48172([M+4H]4+)、522.97314([M+3H]3+)、783.95605([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.32(d,J=8.0Hz,1H)4.28(dd,J=8.2,6.7Hz,1H)4.25-4.12(m,8H)4.03(dd,J=8.4,4.8Hz,1H)3.97(d,J=7.6Hz,1H)3.92-3.83(m,2H)3.83-3.73(m,4H)3.60-3.53(m,1H)3.06(t,J=7.0Hz,2H)2.91-2.83(m,6H)2.28(t,J=7.5Hz,2H)2.24-2.12(m,5H)2.02-1.42(m,AcOH,43H)1.41-1.27(m,6H)1.27-1.22(m,9H)0.91-0.72(m,12H).
【0091】
化合物37:Lys-Glu-Gly-Val-Gly-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C67H119N23O20;m/z:392.48172([M+4H]4+)、522.97314([M+3H]3+)、783.95605([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.44(dd,J=9.4,4.9Hz,1H)4.29-4.12(m,8H)4.04-3.99(m,2H)3.96(d,J=7.6Hz,1H)3.91-3.82(m,3H)3.81(s,2H)3.72-3.65(m,1H)3.52-3.44(m,1H)3.06(t,J=6.9Hz,2H)2.89-2.81(m,6H)2.23-2.12(m,7H)2.01-1.45(m,AcOH,43H)1.42-1.26(m,6H)1.26-1.20(m,9H)0.83-0.77(m,12H).
【0092】
化合物38:Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C51H88N16O14;m/z:383.89569([M+3H]3+)、575.33978([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.45(dd,J=9.2,5.0Hz,1H)4.39(dd,J=8.3,6.4Hz,1H)4.29-4.21(m,4H)4.19-4.12(m,3H)4.01(dd,J=7.8,5.5Hz,1H)3.78-3.73(m,1H)3.72-3.67(m,1H)3.61-3.48(m,4H)3.08(t,J=6.8Hz,2H)2.88-2.83(m,4H)2.30-2.26(m,4H)2.20-2.13(m,3H)2.08-1.46(m,AcOH,38H)1.39-1.22(m,7H)0.86(dd,J=10.3,6.7Hz,6H).
【0093】
化合物39:Pro-Val-Pro-Gln-Ala(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C23H38N6O7;m/z:511.2871([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.41(d,J=7.3Hz,1H)4.38-4.32(m,2H)4.20(dd,J=8.7,5.9Hz,1H)4.11-4.04(m,1H)3.85-3.77(m,1H)3.62(dt,J=10.3,7.2Hz,1H)3.39-3.29(m,2H)2.39-2.31(m,3H)2.28-2.20(m,1H)2.08-1.90(m,AcOH,10H)1.86-1.80(m,1H)1.26(d,J=7.3Hz,3H)0.94(d,J=6.8Hz,3H)0.88(d,J=6.8Hz,3H).
【0094】
化合物40:Pro-Val-Pro-Glu-Ala(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C23H37N5O8;m/z:512.27081([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.41(d,J=7.3Hz,1H)4.38-4.32(m,2H)4.23(dd,J=8.9,5.6Hz,1H)4.13-4.09(m,1H)3.86-3.76(m,1H)3.62(dt,J=10.2,7.2Hz,1H)3.38-3.28(m,2H)2.43-2.35(m,3H)2.26-2.16(m,1H)2.12-1.72(m,AcOH,12H)1.28(d,J=7.2Hz,3H)0.94(d,J=6.8Hz,3H)0.87(d,J=6.8Hz,3H).
【0095】
化合物41:Pro-Val-Pro-Ile-Ala(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C24H41N5O6;m/z:496.31158([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.36-4.27(m,3H)4.03(q,J=7.2Hz,1H)3.98(d,J=7.8Hz,1H)3.79-3.72(m,1H)3.60-3.53(m,1H)3.34-3.21(m,2H)2.36-2.25(m,1H)2.21-2.12(m,1H)2.03-1.96(m,1H)1.96-1.81(m,AcOH,7H)1.80-1.69(m,2H)1.43-1.33(m,1H)1.20(d,J=7.2Hz,3H)1.13-1.02(m,1H)0.88(d,J=6.8Hz,3H)0.85-0.80(m,6H)0.80-0.77(m,1H)0.74(t,J=7.4Hz,3H).
【0096】
化合物42:Pro-Val-Pro-Ala
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C18H30N4O5;m/z:383.22791([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.36(d,J=7.2Hz,1H)4.30(dd,J=8.5,6.3Hz,1H)4.24(dd,J=8.1,6.5Hz,1H)4.00(q,J=7.2Hz,1H)3.79-3.72(m,1H)3.60-3.52(m,1H)3.31-3.23(m,2H)2.33-2.26(m,1H)2.20-2.13(m,1H)2.09-1.69(m,AcOH,10H)1.21(d,J=7.3Hz,3H)0.88(d,J=6.9Hz,3H)0.81(d,J=6.8Hz,3H).
【0097】
化合物43:Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C28H45N7O10;m/z:640.32892([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.34(dd,J=8.3,6.5Hz,1H)4.25-4.15(m,3H)4.08(dd,J=8.8,5.9Hz,1H)4.04-4.00(m,1H)3.73-3.65(m,1H)3.57-3.41(m,3H)2.35(t,J=7.3Hz,2H)2.24-2.20(m,2H)2.16-2.07(m,2H)2.04-1.75(m,AcOH,11H)1.73-1.63(m,2H)1.17(d,J=7.2Hz,3H)0.80(dd,J=12.9,6.8Hz,6H).
【0098】
化合物44:Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C29H50N8O8;m/z:320.19421([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.29-4.19(m,3H)4.13-4.06(m,2H)3.95(dd,J=8.2,5.1Hz,1H)3.73-3.68(m,1H)3.52-3.47(m,1H)3.24-3.16(m,2H)2.79(t,J=7.5Hz,2H)2.25-2.19(m,3H)2.14-2.08(m,1H)1.97-1.57(m,AcOH,17H)1.53-1.45(m,3H)1.21-1.17(m,5H)0.82(d,J=6.8Hz,3H)0.75(d,J=6.7Hz,3H).
【0099】
化合物45:Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Arg(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C34H57N11O11;m/z:398.71835([M+2H]2+)、796.42944([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.38(dd,J=8.3,6.4Hz,1H)4.27-4.19(m,3H)4.19-4.10(m,2H)4.03(dd,J=8.3,4.9Hz,1H)3.78-3.70(m,1H)3.60-3.46(m,3H)3.07-3.02(m,2H)2.30(t,J=7.2Hz,2H)2.25(t,J=7.6Hz,2H)2.19-2.11(m,2H)2.06-1.78(m,AcOH,12H)1.76-1.67(m,3H)1.60-1.53(m,1H)1.48-1.42(m,2H)1.24(d,J=7.1Hz,3H)0.85(dd,J=12.8,6.7Hz,6H)
【0100】
化合物46:Ala-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C32H55N9O9;m/z:355.71259([M+2H]2+)、710.41809([M+H]+).
1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ8.23(d,J=7.7Hz,1H)8.08(d,J=8.1Hz,1H)7.87(d,J=8.4Hz,1H)7.68(s,1H)7.38(d,J=6.4Hz,1H)6.75(s,1H)4.40-4.37(m,1H)4.33-4.25(m,3H)4.15(t,J=7.2Hz,3H)3.78(d,J=6.4Hz,1H)3.66(dd,J=32.4,8.0Hz,2H)3.58-3.51(m,2H)3.43(d,J=7.0Hz,1H)3.36-3.27(m,1H)2.67(t,J=7.7Hz,3H)2.19-2.07(m,4H)2.01-1.69(m,AcOH,24H)1.63-1.60(m,1H)1.55-1.41(m,5H)1.26(d,1H)1.18(d,J=7.2Hz,6H)1.11(d,J=6.7Hz,3H)1.04(d,J=6.6Hz,1H)0.87(d,J=6.7Hz,3H)0.83(d,J=6.9Hz,3H).
【0101】
化合物47:Glu-Pro-Val-Pro-Ala-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C32H54N8O10;m/z:356.20514([M+2H]2+)、711.40198([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.45(dd,J=8.4,6.4Hz,1H)4.33-4.27(m,3H)4.21(dd,J=15.1,7.2Hz,2H)4.07(dd,J=8.1,5.1Hz,1H)3.86-3.75(m,1H)3.67-3.54(m,3H)2.91(t,J=7.5Hz,2H)2.37(t,J=6.9Hz,2H)2.26-2.18(m,2H)2.14-1.69(m,AcOH,13H)1.65-1.58(m,3H)1.35-1.29(m,9H)0.92(dd,J=13.6,6.8Hz,6H).
【0102】
化合物48:Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Ala(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C31H50N8O11;m/z:356.18692([M+2H]2+)、711.36597([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.34(dd,J=8.3,6.5Hz,1H)4.24-4.16(m,3H)4.12-4.06(m,2H)4.03-3.99(m,1H)3.73-3.65(m,1H)3.56-3.41(m,3H)2.35(t,J=7.3Hz,2H)2.22-2.18(m,2H)2.15-2.07(m,2H)2.04-1.73(m,AcOH,11H)1.71-1.63(m,2H)1.18(dd,J=11.2,7.2Hz,6H)0.80(dd,J=13.0,6.8Hz,6H).
【0103】
化合物49:Asp-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C33H55N9O11;m/z:377.70767([M+2H]2+)、754.40814([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.36-4.29(m,2H)4.23-4.14(m,2H)4.13-4.06(m,2H)3.97(dd,J=8.3,5.0Hz,1H)3.74-3.65(m,1H)3.56-3.46(m,2H)3.44-3.39(m,1H)2.79(t,J=7.5Hz,2H)2.65(dd,J=17.5,3.3Hz,1H)2.38(dd,J=17.5,10.7Hz,1H)2.21(t,J=7.6Hz,2H)2.15-2.06(m,2H)1.93-1.75(m,AcOH,9H)1.72-1.61(m,3H)1.54-1.45(m,3H)1.21(dd,J=13.1,7.5Hz,5H)0.80(dd,J=11.0,6.7Hz,6H).
【0104】
化合物50:Asn-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C33H56N10O10;m/z:377.21542([M+2H]2+)、753.42365([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.55(dd,J=9.3,4.0Hz,1H)4.47(dd,J=8.4,6.1Hz,1H)4.34-4.29(m,2H)4.26-4.19(m,2H)4.07(dd,J=8.1,5.1Hz,1H)3.83-3.77(m,1H)3.69-3.53(m,3H)2.94-2.90(m,3H)2.72(dd,J=17.0,9.3Hz,1H)2.33(t,J=7.6Hz,2H)2.27-2.19(m,2H)2.05-1.71(m,AcOH,15H)1.65-1.57(m,3H)1.34-1.30(m,5H)0.91(dd,J=13.4,6.7Hz,6H).
【0105】
化合物51:Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C59H102N18O16;m/z:440.59735([M+3H]3+)、660.39252([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.38(dd,J=9.3,4.8Hz,1H)4.33(dd,J=8.3,6.5Hz,1H)4.22-4.12(m,5H)4.10-4.04(m,3H)3.93-3.88(m,2H)3.75-3.67(m,1H)3.66-3.58(m,1H)3.56-3.41(m,4H)3.00(t,J=6.9Hz,2H)2.82-2.76(m,4H)2.24-2.19(m,4H)2.14-2.06(m,3H)1.97-1.41(m,AcOH,37H)1.33-1.12(m,10H)0.80(dd,J=9.7,6.7Hz,6H)0.74(dd,J=11.0,6.8Hz,6H).
【0106】
化合物52:Glu-Pro-Ala-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C32H53N9O11;m/z:370.6998([M+2H]2+)、740.39221([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.43(q,J=7.1Hz,1H)4.33(dd,J=8.4,6.5Hz,1H)4.26(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.22(dd,J=7.6,4.6Hz,1H)4.18-4.11(m,2H)4.01(dd,J=8.3,5.0Hz,1H)3.67(dt,J=10.0,6.7Hz,1H)3.61-3.54(m,1H)3.53-3.44(m,2H)2.84(t,J=7.5Hz,2H)2.30(t,J=7.2Hz,2H)2.25(t,J=7.6Hz,2H)2.21-2.12(m,2H)2.08-1.77(m,AcOH,11H)1.77-1.63(m,3H)1.60-1.49(m,3H)1.24(dd,J=10.4,7.1Hz,6H).
【0107】
化合物53:Glu-Ala-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C32H55N9O11;m/z:371.7081([M+2H]2+)、742.4089([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.23-4.18(m,3H)4.13-4.06(m,2H)3.95(dd,J=8.3,5.0Hz,1H)3.85-3.82(m,1H)3.73-3.66(m,1H)3.53-3.47(m,1H)2.79(t,J=7.5Hz,2H)2.22-2.17(m,4H)2.13-2.07(m,1H)1.99-1.70(m,AcOH,9H)1.69-1.59(m,2H)1.53-1.45(m,3H)1.26-1.12(m,9H)0.79(d,J=6.7Hz,3H)0.76(d,J=6.7Hz,3H).
【0108】
化合物54:Glu-Pro-Val-Ala-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C32H55N9O11;m/z:371.70767([M+2H]2+)、742.40802([M+H]+).
1H NMR(600MHz,DMSO-d6+D2O)δ4.34(dd,J=8.3,6.0Hz,1H)4.15-4.05(m,4H)3.97-3.87(m,2H)3.51(d,J=9.8Hz,1H)3.46-3.38(m,1H)2.74(t,J=7.5Hz,2H)2.23(t,J=7.1Hz,2H)2.17-2.06(m,3H)1.95-1.67(m,AcOH,10H)1.65-1.59(m,1H)1.53-1.42(m,3H)1.22-1.13(m,8H)0.78(d,J=6.8Hz,6H).
【0109】
化合物55:Glu-Pro-Val-Pro-Glu-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C34H56N8O12;m/z:385.2083([M+2H]2+)、769.4092([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.33(dd,J=8.3,6.5Hz,1H)4.21-4.16(m,3H)4.11(t,J=7.1Hz,1H)4.07(dd,J=8.8,5.7Hz,1H)3.98(dd,J=8.5,4.8Hz,1H)3.71-3.66(m,1H)3.55-3.41(m,3H)2.78(t,J=7.5Hz,2H)2.36-2.14(m,5H)2.13-2.05(m,2H)1.99-1.74(m,AcOH,11H)1.70-1.61(m,3H)1.53-1.45(m,3H)1.20(dd,J=15.4,7.5Hz,5H)0.80(dd,J=12.5,6.7Hz,6H).
【0110】
化合物56:Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C56H97N17O15;m/z:416.91827([M+3H]3+)、624.87354([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.43(dd,J=9.3,4.9Hz,1H)4.38(dd,J=8.4,6.4Hz,1H)4.27-4.19(m,5H)4.16-4.10(m,3H)3.88(d,J=6.2Hz,1H)3.74(dt,J=10.1,6.9Hz,1H)3.71-3.63(m,1H)3.60-3.46(m,4H)3.07-3.02(m,2H)2.87-2.82(m,4H)2.29-2.24(m,4H)2.19-2.11(m,3H)2.04-1.43(m,AcOH,37H)1.37-1.20(m,7H)0.85(dd,J=10.1,6.8Hz,6H)0.74(dd,J=11.8,6.9Hz,6H).
【0111】
化合物57:Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C45H76N14O13;m/z:511.29254([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.39(dd,J=8.6,5.5Hz,1H)4.32(dd,J=8.3,6.5Hz,1H)4.22-4.13(m,4H)4.10-4.03(m,2H)3.93(dd,J=7.9,5.2Hz,1H)3.72-3.60(m,2H)3.54-3.40(m,4H)3.00(t,J=6.9Hz,2H)2.80(t,J=7.5Hz,2H)2.24-2.18(m,4H)2.14-2.06(m,3H)1.98-1.70(m,AcOH,19H)1.69-1.60(m,4H)1.55-1.47(m,4H)1.45-1.39(m,2H)1.34-1.24(m,2H)1.16(d,J=7.1Hz,3H)0.80(dd,J=10.4,6.7Hz,6H).
【0112】
化合物58:Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C39H64N10O12;m/z:433.24188([M+2H]2+)、865.47662([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.41(dd,J=8.5,5.5Hz,1H)4.33(dd,J=8.3,6.5Hz,1H)4.22-4.14(m,3H)4.11-4.02(m,3H)3.75-3.67(m,1H)3.59-3.41(m,5H)2.81(t,J=7.4Hz,2H)2.25-2.19(m,4H)2.15-1.61(m,AcOH,26H)1.57-1.48(m,3H)1.37-1.23(m,2H)1.16(d,J=7.0Hz,3H)0.80(dd,J=11.5,6.7Hz,6H).
【0113】
化合物59:Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C40H69N13O10;m/z:298.18314([M+3H]3+)、446.77118([M+2H]2+)、892.53497([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.40(dd,J=8.6,5.5Hz,1H)4.30-4.19(m,4H)4.11-4.05(m,2H)3.93(dd,J=7.9,5.2Hz,1H)3.73-3.63(m,2H)3.52-3.45(m,2H)3.26-3.17(m,2H)3.01(t,J=6.9Hz,2H)2.81(t,J=7.5Hz,2H)2.26-2.19(m,3H)2.14-2.09(m,2H)1.94-1.62(m,AcOH,24H)1.57-1.40(m,7H)1.34-1.26(m,2H)1.16(d,J=7.3Hz,3H)0.82(d,J=6.8Hz,3H)0.76(d,J=6.7Hz,3H).
【0114】
化合物60:Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C34H57N9O9;m/z:368.7207([M+2H]2+)、736.4343([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.46(dd,J=8.4,5.6Hz,1H)4.34(d,J=7.4Hz,1H)4.29(dd,J=8.5,6.2Hz,1H)4.27-4.24(m,1H)4.16-4.07(m,3H)3.78-3.70(m,1H)3.66-3.60(m,1H)3.58-3.45(m,2H)3.30-3.22(m,2H)2.86(t,J=7.5Hz,2H)2.32-2.24(m,3H)2.19-2.13(m,1H)2.12-2.03(m,1H)2.02-1.69(m,AcOH,19H)1.61-1.52(m,3H)1.42-1.27(m,2H)1.23-1.20(m,3H)0.87(d,J=6.8Hz,3H)0.81(d,J=6.7Hz,3H).
【0115】
化合物61:D-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4978([M+4H]4+)、549.6611([M+3H]3+)、823.9882([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.46-4.35(m,2H)4.27(dd,J=8.3,6.1Hz,1H)4.22-4.04(m,9H)3.96(dd,J=8.4,4.8Hz,1H)3.90(d,J=7.7Hz,1H)3.84(t,J=6.6Hz,1H)3.74-3.59(m,3H)3.56-3.38(m,3H)3.01(t,J=6.9Hz,2H)2.83-2.76(m,6H)2.23-2.06(m,9H)1.96-1.39(m,AcOH,48H)1.18(dd,J=22.0,7.2Hz,15H)0.83-0.67(m,12H).
【0116】
化合物62:Lys-D-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4976([M+4H]4+)、549.6608([M+3H]3+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.50(dd,J=9.8,4.4Hz,1H)4.37(dd,J=9.4,4.9Hz,1H)4.25-4.03(m,10H)3.95(dd,J=8.5,4.8Hz,1H)3.89(d,J=7.7Hz,1H)3.83(t,J=6.6Hz,1H)3.74-3.68(m,1H)3.64-3.55(m,2H)3.52-3.38(m,2H)3.00(t,J=6.9Hz,2H)2.83-2.75(m,6H)2.20(t,J=7.6Hz,2H)2.12-2.06(m,6H)1.92-1.41(m,AcOH,47H)1.32-1.13(m,15H)0.78(dd,J=9.7,6.7Hz,6H)0.73(dd,J=6.8,4.1Hz,6H).
【0117】
化合物63:Lys-Glu-D-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4976([M+4H]4+)、549.6609([M+3H]3+)、823.9878([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.45(dd,J=9.4,4.4Hz,1H)4.37(dd,J=9.4,4.9Hz,1H)4.29-4.25(m,1H)4.21-4.04(m,8H)3.96-3.94(m,1H)3.89(d,J=7.7Hz,1H)3.79(d,J=6.9Hz,1H)3.68-3.59(m,2H)3.54-3.35(m,3H)3.00(t,J=6.9Hz,2H)2.82-2.74(m,6H)2.23-2.19(m,2H)2.15-2.02(m,6H)1.95-1.41(m,AcOH,48H)1.17(dd,J=21.6,7.2Hz,15H)0.83-0.64(m,12H).
【0118】
化合物64:Lys-Glu-Pro-D-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4978([M+4H]4+)、549.6609([M+3H]3+)、823.9878([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.46(dd,J=10.2,3.9Hz,1H)4.41-4.31(m,2H)4.27-4.18(m,3H)4.15-4.02(m,7H)3.95-3.92(m,1H)3.89(d,J=7.7Hz,1H)3.83(t,J=6.6Hz,1H)3.67-3.50(m,5H)3.47-3.25(m,2H)3.00(t,J=6.9Hz,2H)2.81-2.76(m,6H)2.23-2.06(m,10H)1.94-1.41(m,AcOH,50H)1.17(dd,J=19.9,7.1Hz,17H)0.76-0.68(m,12H).
【0119】
化合物65:Lys-Glu-Pro-Val-D-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4979([M+4H]4+)、549.6612([M+3H]3+)、823.9883([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.42(dd,J=9.9,4.2Hz,1H)4.34(dd,J=9.2,5.2Hz,1H)4.31-4.23(m,2H)4.22-4.18(m,2H)4.15-4.05(m,6H)3.94(dd,J=8.4,4.8Hz,1H)3.89(d,J=7.7Hz,1H)3.82(t,J=6.7Hz,1H)3.65(d,J=6.8Hz,3H)3.57-3.36(m,3H)3.00(t,J=6.9Hz,2H)2.82-2.75(m,6H)2.18-2.03(m,9H)1.95-1.40(m,AcOH,46H)1.37-1.08(m,16H)0.80-0.68(m,12H).
【0120】
化合物66:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-D-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4978([M+4H]4+)、549.6611([M+3H]3+)、823.9881([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.44-4.35(m,2H)4.26-4.04(m,10H)3.94(dd,J=8.5,4.8Hz,1H)3.89(d,J=7.7Hz,1H)3.82(t,J=6.8Hz,1H)3.76-3.68(m,1H)3.64(d,J=8.7Hz,2H)3.55-3.37(m,3H)3.00(t,J=6.9Hz,2H)2.83-2.75(m,6H)2.19-2.05(m,9H)2.02-1.38(m,AcOH,47H)1.34-1.15(m,15H)0.78(dd,J=11.2,6.7Hz,6H)0.73(dd,J=6.7,3.9Hz,6H).
【0121】
化合物67:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-D-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4961([M+4H]4+)、549.6615([M+3H]3+)、823.9886([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.47-4.38(m,2H)4.26(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.22-4.04(m,9H)3.95(dd,J=8.5,4.8Hz,1H)3.89(d,J=7.7Hz,1H)3.82(t,J=6.8Hz,1H)3.74-3.56(m,3H)3.54-3.35(m,3H)3.00(t,J=6.9Hz,2H)2.86-2.74(m,6H)2.23-2.05(m,9H)1.94-1.38(m,AcOH,46H)1.29-1.14(m,15H)0.78(dd,J=10.5,6.7Hz,6H)0.73(dd,J=6.8,3.9Hz,6H).
【0122】
化合物68:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-D-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4977([M+4H]4+)、549.6615([M+3H]3+)、823.9879([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.47-4.40(m,2H)4.26(dd,J=8.4,5.9Hz,1H)4.23-4.15(m,3H)4.14-4.01(m,6H)3.95(dd,J=8.5,4.8Hz,1H)3.89(d,J=7.7Hz,1H)3.82(t,J=6.8Hz,1H)3.71-3.44(m,5H)3.01(t,J=6.9Hz,2H)2.82-2.73(m,6H)2.23-2.05(m,9H)1.93-1.40(m,AcOH,46H)1.30-1.14(m,15H)0.79(dd,J=12.5,6.7Hz,6H)0.73(dd,J=6.8,4.6Hz,6H).
【0123】
化合物69:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-D-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4976([M+4H]4+)、549.6608([M+3H]3+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.42(dt,J=8.2,4.3Hz,2H)4.26(dd,J=8.4,5.9Hz,1H)4.23-4.14(m,3H)4.14-4.05(m,6H)3.94(dd,J=8.5,4.8Hz,1H)3.89(d,J=7.7Hz,1H)3.81(q,J=7.7,7.2Hz,1H)3.74-3.58(m,3H)3.55-3.38(m,3H)2.98(t,J=7.0Hz,2H)2.82-2.75(m,6H)2.23-2.05(m,9H)1.93-1.13(m,AcOH,62H)0.79(dd,J=13.2,6.7Hz,6H)0.73(dd,J=6.8,4.7Hz,6H).
【0124】
化合物70:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-D-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4978([M+4H]4+)、549.6611([M+3H]3+)、823.9883([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.45-4.36(m,2H)4.27-4.14(m,6H)4.12-4.05(m,4H)3.95(dd,J=8.4,4.8Hz,1H)3.90(d,J=7.7Hz,1H)3.82(t,J=6.8Hz,1H)3.66(dd,J=35.9,8.3Hz,3H)3.55-3.39(m,3H)2.99(t,J=7.0Hz,2H)2.82-2.75(m,6H)2.23-2.07(m,9H)1.93-1.15(m,AcOH,63H)0.79(dd,J=13.9,6.7Hz,6H)0.74(dd,J=6.8,2.0Hz,6H).
【0125】
化合物71:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-D-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4976([M+4H]4+)、549.6609([M+3H]3+)、823.9878([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.45-4.36(m,2H)4.26(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.22-4.16(m,3H)4.12-4.05(m,6H)3.96-3.91(m,2H)3.82(t,J=6.8Hz,1H)3.73-3.58(m,3H)3.54-3.36(m,3H)3.00(t,J=7.0Hz,2H)2.82-2.75(m,6H)2.22-2.06(m,9H)1.93-1.41(m,AcOH,45H)1.32-1.14(m,15H)0.79(dd,J=13.8,6.7Hz,6H)0.74(d,J=6.8Hz,3H)0.70(d,J=6.8Hz,3H).
【0126】
化合物72:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-D-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4976([M+4H]4+)、549.6609([M+3H]3+)、823.9876([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O δ4.45-4.35(m,2H)4.26(dd,J=8.4,5.9Hz,1H)4.21-4.05(m,9H)3.94-3.88(m,2H)3.82(t,J=6.8Hz,1H)3.73-3.57(m,3H)3.55-3.37(m,3H)2.99(t,J=6.8Hz,2H)2.82-2.75(m,6H)2.23-2.06(m,9H)1.96-1.36(m,AcOH,50H)1.32-1.14(m,15H)0.78(dd,J=13.9,6.7Hz,6H)0.73(d,J=6.7Hz,6H).
【0127】
化合物73:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-D-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4977([M+4H]4+)、549.6609([M+3H]3+)、823.9879([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.48(dd,J=9.7,4.3Hz,1H)4.43(dd,J=9.3,4.9Hz,1H)4.32(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.27-4.23(m,3H)4.21-4.17(m,3H)4.15-4.10(m,3H)3.97(dd,J=9.2,4.6Hz,1H)3.89-3.85(m,2H)3.76-3.66(m,3H)3.59-3.45(m,3H)3.05(t,J=6.9Hz,2H)2.87-2.81(m,6H)2.26(t,J=7.7Hz,2H)2.22-2.12(m,7H)2.00-1.48(m,AcOH,47H)1.37-1.20(m,16H)0.86-0.77(m,12H).
【0128】
化合物74:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-D-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4977([M+4H]4+)、549.6610([M+3H]3+)、823.9879([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.48(dd,J=9.6,4.3Hz,1H)4.44(dd,J=9.3,4.9Hz,1H)4.32(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.28-4.17(m,5H)4.17-4.09(m,4H)4.05(dd,J=9.1,4.7Hz,1H)3.95(d,J=7.7Hz,1H)3.88(t,J=6.8Hz,1H)3.78-3.63(m,3H)3.60-3.37(m,3H)3.06(t,J=6.9Hz,2H)2.89-2.81(m,6H)2.29-2.09(m,9H)2.02-1.46(m,AcOH,45H)1.39-1.19(m,15H)0.84(dd,J=14.0,6.7Hz,6H)0.78(dd,J=14.3,6.8Hz,6H).
【0129】
化合物75:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-D-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H127N23O20;m/z:412.4978([M+4H]4+)、549.6611([M+3H]3+)823.9881([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.49-4.42(m,2H)4.32(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.27-4.10(m,9H)4.04(dd,J=8.4,4.6Hz,1H)3.96(d,J=7.4Hz,1H)3.90-3.84(m,1H)3.73(d,J=7.7Hz,1H)3.71-3.64(m,2H)3.60-3.32(m,3H)3.06(t,J=6.9Hz,2H)2.89-2.79(m,6H)2.28-2.06(m,9H)1.99-1.47(m,AcOH,44H)1.39-1.18(m,15H)0.84(dd,J=13.9,6.7Hz,6H)0.78(dd,J=6.8,3.3Hz,6H).
【0130】
化合物76:Glu-Gly-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C31H53N9O11;m/z:364.7022([M+2H]2+)、728.3929([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.30(d,J=7.8Hz,1H)4.26(dd,J=8.2,6.7Hz,1H)4.19-4.11(m,2H)4.02(dd,J=8.3,5.0Hz,1H)3.95(t,J=6.5Hz,1H)3.91-3.82(m,2H)3.78-3.72(m,1H)3.58-3.51(m,1H)2.84(t,J=7.5Hz,2H)2.29-2.24(m,4H)2.20-2.11(m,1H)2.01-1.82(m,AcOH,10H)1.77-1.65(m,2H)1.60-1.50(m,3H)1.25(dd,J=7.5,4.7Hz,5H)0.84(d,J=6.8Hz,3H)0.80(d,J=6.7Hz,3H).
【0131】
化合物77:Glu-Pro-Val-Gly-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C31H53N9O11;m/z:364.7004([M+2H]2+)、728.3932([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.40(dd,J=8.3,6.5Hz,1H)4.23(dd,J=7.7,4.4Hz,1H)4.20-4.15(m,2H)4.01(dd,J=8.3,5.1Hz,1H)3.95(d,J=7.4Hz,1H)3.83-3.76(m,2H)3.63-3.55(m,1H)3.50-3.45(m,1H)2.85(t,J=7.5Hz,2H)2.32(t,J=7.2Hz,2H)2.23-2.15(m,3H)2.05-1.67(m,AcOH,12H)1.59-1.50(m,3H)1.26(dd,J=9.7,7.5Hz,5H)0.84(dd,J=14.3,6.8Hz,6H).
【0132】
化合物78:D-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C34H57N9O11;m/z:384.716([M+2H]2+)、768.4245([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.36(dd,J=8.8,4.3Hz,1H)4.29-4.21(m,3H)4.18-4.11(m,2H)4.01(dd,J=8.2,5.1Hz,1H)3.78-3.72(m,1H)3.63-3.49(m,3H)2.84(t,J=7.5Hz,2H)2.28-2.23(m,4H)2.19-2.12(m,2H)1.98-1.66(m,AcOH,15H)1.59-1.50(m,3H)1.25(dd,J=11.6,7.4Hz,5H)0.85(dd,J=15.5,6.8Hz,6H).
【0133】
化合物79:Glu-D-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C34H57N9O11;m/z:384.7159([M+2H]2+)、768.4244([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.36(dd,J=8.8,3.9Hz,1H)4.33(d,J=8.1Hz,1H)4.28(dd,J=8.3,6.6Hz,1H)4.23(dd,J=7.1,5.1Hz,1H)4.19-4.13(m,2H)4.02(dd,J=8.2,5.1Hz,1H)3.76-3.68(m,1H)3.61-3.51(m,3H)2.84(t,J=7.5Hz,2H)2.31-2.06(m,7H)2.00-1.66(m,AcOH,16H)1.58-1.50(m,3H)1.27-1.23(m,5H)0.81(dd,J=22.8,6.7Hz,6H).
【0134】
化合物80:Glu-Pro-D-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C34H57N9O11;m/z:384.7158([M+2H]2+)、768.4241([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.46(d,J=7.3Hz,1H)4.36(dd,J=8.3,6.6Hz,1H)4.30-4.20(m,3H)4.17(dd,J=8.1,6.1Hz,1H)4.03-4.00(m,1H)3.72-3.66(m,1H)3.63-3.57(m,2H)3.53-3.49(m,1H)2.85(t,J=7.5Hz,2H)2.36-2.21(m,6H)2.18-2.13(m,1H)2.05-1.78(m,AcOH,17H)1.70-1.66(m,1H)1.58-1.51(m,3H)1.28-1.23(m,6H)0.78(dd,J=15.0,6.7Hz,6H).
【0135】
化合物81:Glu-Pro-Val-D-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C34H57N9O11;m/z:384.7157([M+2H]2+)、768.4240([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.43-4.30(m,2H)4.28-4.21(m,2H)4.21-4.13(m,2H)4.03-3.98(m,1H)3.72-3.53(m,3H)3.50-3.44(m,1H)2.85(t,J=7.5Hz,2H)2.33(t,J=7.2Hz,2H)2.23-2.11(m,4H)2.07-1.74(m,AcOH,14H)1.73-1.64(m,2H)1.58-1.50(m,3H)1.29-1.23(m,5H)0.81(dd,J=15.1,6.7Hz,6H).
【0136】
化合物82:Glu-Pro-Val-Pro-D-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C31H53N9O11;m/z:384.7158([M+2H]2+)、768.4242([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.38(dd,J=8.3,6.4Hz,1H)4.27-4.14(m,5H)4.03(dd,J=8.4,5.0Hz,1H)3.80-3.75(m,1H)3.62-3.45(m,3H)2.85(t,J=7.5Hz,2H)2.32(t,J=7.3Hz,2H)2.24-2.12(m,4H)2.09-1.67(m,AcOH,15H)1.60-1.50(m,3H)1.28(d,J=7.3Hz,5H)0.88-0.80(m,6H).
【0137】
化合物83:Glu-Pro-Val-Pro-Gln-D-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C31H53N9O11;m/z:384.7159([M+2H]2+)、768.4243([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.38(dd,J=8.3,6.4Hz,1H)4.28-4.20(m,3H)4.19-4.12(m,2H)4.05(dd,J=8.6,5.0Hz,1H)3.77-3.72(m,1H)3.60-3.45(m,3H)2.85-2.80(m,2H)2.32(t,J=7.2Hz,2H)2.26(t,J=8.0Hz,2H)2.20-2.12(m,2H)2.08-1.77(m,AcOH,13H)1.75-1.66(m,3H)1.57-1.47(m,3H)1.26-1.18(m,5H)0.85(dd,J=13.0,6.7Hz,6H).
【0138】
化合物84:Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-D-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C31H53N9O11;m/z:384.7160([M+2H]2+)、768.4246([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.39(dd,J=8.3,6.4Hz,1H)4.30-4.20(m,3H)4.19-4.11(m,2H)4.05(dd,J=8.3,4.8Hz,1H)3.79-3.71(m,1H)3.61-3.47(m,3H)2.86-2.81(m,2H)2.32(t,J=7.2Hz,2H)2.27(t,J=7.5Hz,2H)2.21-2.12(m,2H)2.05-1.78(m,AcOH,12H)1.78-1.68(m,3H)1.60-1.50(m,3H)1.27-1.20(m,5H)0.86(dd,J=12.5,6.7Hz,6H).
【0139】
化合物85:Lys-Glu-Pro-Val-Pro(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C26H44N6O8;m/z:454.2655([M+2H]2+)、569.3287([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.50(dd,J=9.9,4.2Hz,1H)4.36-4.22(m,3H)4.09(dd,J=8.5,5.8Hz,1H)3.89(t,J=6.7Hz,1H)3.70-3.65(m,2H)3.60-3.53(m,2H)3.51-3.26(m,1H)2.87(d,J=7.5Hz,2H)2.28-2.09(m,5H)2.00-1.68(m,AcOH,18H)1.58-1.55(m,2H)1.35-1.29(m,2H)0.88(d,J=6.8Hz,3H)0.82(d,J=6.7Hz,3H).
【0140】
化合物86:Glu-Pro-Val-Pro-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C25H40N6O9;m/z:569.2919([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.40(dd,J=8.3,6.4Hz,1H)4.31-4.23(m,3H)4.09(dd,J=9.0,4.8Hz,1H)3.78-3.72(m,1H)3.61-3.48(m,3H)2.41(t,J=7.3Hz,2H)2.25-2.14(m,4H)2.09-1.70(m,AcOH,13H)0.86(dd,J=15.3,6.7Hz,6H).
【0141】
化合物87:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C31H52N8O10;m/z:349.1971([M+2H]2+)、697.3868([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.51(dd,J=9.8,4.3Hz,1H)4.34-4.25(m,3H)4.03(dd,J=8.8,4.7Hz,1H)3.89(t,J=6.7Hz,1H)3.79-3.65(m,2H)3.63-3.52(m,2H)2.86(t,J=7.5Hz,2H)2.28-2.13(m,6H)2.00-1.73(m,AcOH,17H)1.60-1.54(m,2H)1.36-1.28(m,2H)0.86(d,J=6.8Hz,3H)0.83(d,J=6.6Hz,3H).
【0142】
化合物88:Val-Pro-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C92H152N26O24;m/z:502.2934([M+4H]4+)、669.3699([M+3H]3+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ6.97-6.94(m,2H)6.70-6.66(m,2H)4.44(dd,J=9.4,4.8Hz,1H)4.35-4.08(m,17H)4.05-4.00(m,2H)3.96(d,J=7.6Hz,1H)3.76-3.67(m,3H)3.64-3.53(m,3H)3.48(dd,J=10.2,6.3Hz,3H)3.07(t,J=6.9Hz,2H)2.94(dd,J=13.6,6.6Hz,1H)2.88-2.79(m,7H)2.76(dd,J=13.6,9.2Hz,1H)2.27(t,J=7.6Hz,2H)2.21(t,J=7.6Hz,2H)2.18-2.08(m,8H)2.01-1.45(m,AcOH,59H)1.30-1.10(m,16H)0.95(d,J=6.9Hz,3H)0.87-0.77(m,18H).
【0143】
化合物89:pyro-Glu-Leu-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C84H145N25O24;m/z:468.7766([M+4H]4+)、624.6998([M+3H]3+)、936.5460([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.47-4.42(m,2H)4.32-4.10(m,13H)4.02(dd,J=8.4,4.8Hz,1H)3.96(d,J=7.6Hz,1H)3.82-3.60(m,3H)3.58-3.45(m,3H)3.07(t,J=6.9Hz,2H)2.90-2.80(m,6H)2.45-2.36(m,1H)2.31-2.24(m,4H)2.23-2.03(m,7H)1.99-1.44(m,AcOH,47H)1.39-1.19(m,15H)0.85(dd,J=12.5,6.8Hz,6H)0.81-0.77(m,9H)0.75(d,J=6.0Hz,3H).
【0144】
化合物90:Pro-Ala-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C90H148N26O24;m/z:495.2855([M+4H]4+)、660.0449([M+3H]3+)、989.5637([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ6.99-6.92(m,2H)6.71-6.64(m,2H)4.47-4.42(m,1H)4.36(t,J=7.8Hz,1H)4.32-4.06(m,15H)4.04-3.99(m,1H)3.96(d,J=7.6Hz,1H)3.79-3.65(m,3H)3.60-3.46(m,3H)3.30-3.22(m,2H)3.07(t,J=6.9Hz,2H)2.89-2.79(m,8H)2.33-2.06(m,11H)1.99-1.45(m,AcOH,51H)1.39-1.14(m,19H)0.87-0.77(m,12H).
【0145】
化合物91:Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C103H174N32O28;m/z:578.0856([M+4H]4+)、770.4463([M+3H]3+)、1155.1642([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ6.96(d,J=8.5Hz,2H)6.70-6.64(m,2H)4.50-4.43(m,2H)4.38(t,J=8.0Hz,1H)4.30-4.11(m,13H)4.02(dd,J=8.4,4.9Hz,1H)3.96(d,J=7.6Hz,1H)3.94-3.90(m,2H)3.79-3.65(m,3H)3.62-3.46(m,3H)3.11-3.05(m,4H)2.88-2.79(m,10H)2.51(dd,J=15.9,5.3Hz,1H)2.42(dd,J=16.0,8.5Hz,1H)2.29-2.11(m,9H)1.99-1.64(m,AcOH,45H)1.63-1.45(m,19H)1.41-1.14(m,18H)0.87-0.77(m,12H)0.72(d,J=6.7Hz,6H).
【0146】
化合物92:Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C70H116N20O20;m/z:390.2233([M+4H]4+)、519.9619([M+3H]3+)、779.4393([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ6.96(d,J=8.6Hz,2H)6.67(d,J=8.5Hz,2H)4.49(dd,J=8.4,5.3Hz,1H)4.38(t,J=8.0Hz,1H)4.31-4.23(m,5H)4.19-4.10(m,3H)4.01(dd,J=8.2,5.1Hz,1H)3.93-3.89(m,2H)3.77-3.67(m,2H)3.61-3.50(m,2H)3.10-3.05(m,2H)2.86-2.79(m,8H)2.51(dd,J=16.0,5.3Hz,1H)2.42(dd,J=15.9,8.5Hz,1H)2.28-2.20(m,4H)2.18-2.10(m,2H)1.97-1.65(m,AcOH,29H)1.61-1.45(m,13H)1.26(dd,J=11.1,7.4Hz,10H)0.83(dd,J=19.0,6.7Hz,6H)0.72(d,J=5.6Hz,6H).
【0147】
化合物93:Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C64H104N18O19;m/z:715.3917([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ6.96(d,J=8.6Hz,2H)6.66(d,J=8.5Hz,2H)4.48-4.42(m,3H)4.26-4.12(m,6H)4.02(dd,J=8.2,5.0Hz,1H)3.95-3.89(m,2H)3.77-3.68(m,1H)3.56-3.47(m,2H)3.43-3.36(m,1H)3.10-3.04(m,2H)2.87-2.80(m,6H)2.54(dd,J=16.0,5.1Hz,1H)2.45(dd,J=16.0,8.4Hz,1H)2.27(t,J=7.6Hz,2H)2.17-2.08(m,4H)1.98-1.66(m,AcOH,27H)1.65-1.45(m,9H)1.26(dd,J=11.3,7.4Hz,7H)0.84(dd,J=13.0,6.7Hz,6H)0.70(dd,J=6.8,2.8Hz,6H).
【0148】
化合物94:Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-Pro-Val-Pro-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C50H80N14O14;m/z:367.8727([M+3H]3+)、551.3051([M+2H]2+)、1101.6030([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.45(dd,J=8.9,4.8Hz,1H)4.36-4.22(m,4H)4.04-3.98(m,1H)3.90(dd,J=7.0,5.8Hz,2H)3.76(dd,J=10.1,6.4Hz,1H)3.69-3.63(m,1H)3.60-3.43(m,2H)3.09-3.05(m,2H)2.95(dd,J=14.3,5.2Hz,1H)2.86-2.82(m,2H)2.74-2.67(m,1H)2.52-2.31(m,2H)2.22-2.08(m,4H)1.99-1.46(m,AcOH,29H)1.32-1.23(m,2H)0.90-0.81(m,6H)0.75(dd,J=10.3,6.8Hz,2H)0.67(dd,J=17.1,6.7Hz,4H).
【0149】
化合物95:Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C113H188N34O31;m/z:504.6906([M+5H]5+)、630.6115([M+4H]4+)、840.4796([M+3H]3+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ7.22(t,J=7.4Hz,2H)7.16(t,J=7.3Hz,1H)7.12-7.07(m,2H)4.47-4.41(m,3H)4.35-4.03(m,19H)4.02(dd,J=8.4,4.8Hz,1H)3.95(d,J=3.6Hz,1H)3.86(s,1H)3.75(s,1H)3.68(t,J=8.5Hz,2H)3.58-3.42(m,5H)3.06(t,J=6.9Hz,4H)2.91-2.81(m,7H)2.29-2.11(m,12H)2.00-1.19(m,AcOH,80H)1.14(d,J=7.1Hz,3H)1.06(d,J=6.3Hz,3H)0.84(dd,J=13.7,6.7Hz,6H)0.81-0.76(m,9H)0.72(d,J=5.6Hz,3H).
【0150】
化合物96:Gly-Pro-Glu-Thr-Ala-Phe-Leu-Arg-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C74H118N20O22;m/z:547.2972([M+3H]3+)、820.4424([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ7.21(dd,J=8.2,6.6Hz,2H)7.16(t,J=7.3Hz,1H)7.12-7.07(m,2H)4.50-4.42(m,2H)4.36-4.22(m,4H)4.21-4.09(m,7H)4.07-4.00(m,2H)3.93(d,J=16.5Hz,1H)3.84(d,J=16.5Hz,1H)3.78-3.70(m,1H)3.68-3.60(m,1H)3.56-3.42(m,4H)3.10-2.97(m,3H)2.90-2.82(m,3H)2.29-2.09(m,9H)2.00-1.81(m,AcOH,19H)1.77-1.66(m,5H)1.61-1.37(m,9H)1.26(dd,J=11.9,7.4Hz,5H)1.14(d,J=7.2Hz,3H)1.05(d,J=6.4Hz,3H)0.84(dd,J=15.5,6.7Hz,6H)0.77(d,J=5.9Hz,3H)0.72(d,J=5.7Hz,3H).
【0151】
化合物97:Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C105H179N31O35;m/z:488.0708([M+5H]5+)、609.8367([M+4H]4+)、812.7799([M+3H]3+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.48-4.41(m,3H)4.34(t,J=5.4Hz,1H)4.31(dd,J=8.4,5.8Hz,1H)4.28-4.22(m,3H)4.22-4.09(m,11H)4.04-3.88(m,5H)3.81-3.72(m,3H)3.71-3.62(m,2H)3.59-3.43(m,3H)3.07(t,J=6.9Hz,2H)2.90-2.80(m,8H)2.58(dd,J=16.0,6.3Hz,1H)2.48(dd,J=16.0,7.9Hz,1H)2.29-2.09(m,13H)2.00-1.47(m,AcOH,51H)1.40-1.20(m,18H)1.12-1.05(m,1H)0.89-0.70(m,18H).
【0152】
化合物98:Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C66H109N17O26;m/z:519.5973([M+3H]3+)、778.8925([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.54-4.47(m,2H)4.37-4.30(m,2H)4.27-4.10(m,8H)4.05-3.99(m,2H)3.94-3.88(m,2H)3.79-3.73(m,3H)3.70-3.62(m,1H)3.61-3.50(m,2H)2.85(t,J=7.6Hz,4H)2.63(dd,J=16.2,6.2Hz,1H)2.51(dd,J=16.2,7.9Hz,1H)2.37-2.06(m,11H)1.99-1.49(m,AcOH,30H)1.34-1.24(m,8H)1.10-1.01(m,1H)0.84(dd,J=13.8,6.7Hz,6H)0.77-0.71(m,6H).
【0153】
化合物99:Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C52H85N13O21;m/z:614.806([M+2H]2+)、1228.605([M+H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.54-4.48(m,2H)4.36(t,J=5.5Hz,1H)4.34-4.24(m,3H)4.23-4.18(m,2H)4.12-4.05(m,2H)4.01(d,J=7.9Hz,1H)3.94-3.88(m,2H)3.79-3.72(m,3H)3.70-3.62(m,1H)3.60-3.50(m,2H)2.85(t,J=7.6Hz,2H)2.65(dd,J=16.3,6.0Hz,1H)2.53(dd,J=16.4,8.0Hz,1H)2.40-2.03(m,9H)2.01-1.51(m,AcOH,21H)1.34-1.22(m,3H)1.08-1.01(m,1H)0.89-0.80(m,6H)0.76-0.70(m,6H).
【0154】
化合物100:Val-Pro-Pro-Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C88H150N26O23;m/z:389.0348([M+5H]5+)、480.0415([M+4H]4+)、647.7197([M+3H]3+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.49-4.42(m,2H)4.34-4.06(m,13H)4.05-4.00(m,2H)3.96(d,J=7.6Hz,1H)3.80-3.73(m,1H)3.69(d,J=9.8Hz,4H)3.58-3.45(m,5H)3.07(t,J=6.9Hz,2H)2.88-2.83(m,6H)2.27(t,J=7.7Hz,3H)2.20-2.11(m,9H)2.01-1.45(m,AcOH,55H)1.24(dd,J=21.5,7.2Hz,16H)0.97(d,J=6.9Hz,3H)0.88-0.78(m,15H).
【0155】
化合物101:Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Ser-Ser-Glu-Asp-Ile-Lys-Glu(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C66H109N17O26;m/z:519.5978([M+3H]3+)、778.8933([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.50(dd,J=8.0,6.0Hz,1H)4.40(dd,J=8.4,6.4Hz,1H)4.36-4.30(m,2H)4.27-4.19(m,6H)4.18-4.11(m,2H)4.08(dd,J=8.8,4.9Hz,1H)4.01(d,J=8.1Hz,1H)3.82-3.71(m,5H)3.62-3.47(m,3H)2.86(t,J=7.5Hz,4H)2.65(dd,J=16.4,6.0Hz,1H)2.51(dd,J=16.3,8.1Hz,1H)2.34(t,J=7.2Hz,2H)2.31-2.10(m,9H)2.06-1.52(m,AcOH,28H)1.35-1.23(m,8H)1.08-1.00(m,1H)0.86(dd,J=11.5,6.7Hz,6H)0.76-0.70(m,6H).
【0156】
化合物102 Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Val-Pro-Tyr(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C53H82N12O15;m/z:564.3073([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ7.01-6.95(m,2H)6.69(d,J=8.5Hz,2H)4.40(dd,J=8.3,6.4Hz,1H)4.29-4.10(m,9H)3.79-3.71(m,1H)3.68-3.45(m,5H)2.92-2.81(m,4H)2.33(t,J=7.3Hz,2H)2.26(t,J=7.7Hz,2H)2.20-2.13(m,2H)2.06-1.52(m,AcOH,25H)1.33-1.21(m,5H)0.86(dd,J=11.3,6.7Hz,6H)0.77(dd,J=17.6,6.7Hz,6H).
【0157】
化合物103:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Glu(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H126N22O21;m/z:824.4799([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.49(dd,J=9.6,4.4Hz,1H)4.45(dd,J=9.4,4.9Hz,1H)4.36-4.05(m,11H)4.01-3.96(m,2H)3.92-3.87(m,1H)3.82-3.64(m,3H)3.60-3.46(m,3H)3.07(t,J=7.0Hz,2H)2.88-2.83(m,6H)2.29-2.09(m,9H)1.99-1.46(m,AcOH,47H)1.39-1.20(m,16H)0.85(dd,J=14.2,6.7Hz,6H)0.80(dd,J=6.7,3.7Hz,6H).
【0158】
化合物104:Lys-Glu-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Asn(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C72H125N23O20;m/z:408.9938([M+4H]4+)、544.9891([M+3H]3+)、816.9801([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.49(dd,J=9.7,4.4Hz,1H)4.45(dd,J=9.4,4.8Hz,1H)4.34-4.10(m,11H)3.96(d,J=7.6Hz,1H)3.92-3.84(m,1H)3.78-3.66(m,3H)3.62-3.43(m,3H)3.07(t,J=6.9Hz,2H)2.90-2.82(m,6H)2.63(dd,J=15.1,4.9Hz,1H)2.53(dd,J=15.1,8.1Hz,1H)2.30-2.11(m,7H)2.03-1.42(m,AcOH,44H)1.39-1.19(m,15H)0.85(dd,J=14.0,6.7Hz,6H)0.80(dd,J=6.8,3.0Hz,6H).
【0159】
化合物105:Lys-Gln-Pro-Val-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C73H128N24O19;m/z:412.2515([M+4H]4+)、549.3327([M+3H]3+)、823.4955([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.53(dd,J=9.0,5.0Hz,1H)4.44(dd,J=9.4,4.8Hz,1H)4.34(dd,J=8.4,6.0Hz,1H)4.30-4.23(m,3H)4.22-4.11(m,6H)4.02(dd,J=8.4,4.8Hz,1H)3.96(d,J=7.6Hz,1H)3.90(t,J=6.7Hz,1H)3.80-3.63(m,3H)3.60-3.42(m,3H)3.07(t,J=6.9Hz,2H)2.89-2.82(m,6H)2.34-2.24(m,4H)2.22-2.07(m,5H)2.01-1.45(m,AcOH,50H)1.39-1.20(m,15H)0.85(dd,J=15.5,6.7Hz,6H)0.80(dd,J=6.8,4.3Hz,6H).
【0160】
化合物106:Lys-Glu-Pro-Ile-Pro-Gln-Ala-Lys-Pro-Arg-Lys-Val-Ala-Ala-Gln(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C74H129N23O20;m/z:416.0015([M+4H]4+)、554.3328([M+3H]3+)、830.9956([M+2H]2+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.50(dd,J=9.6,4.4Hz,1H)4.45(dd,J=9.3,4.9Hz,1H)4.36-4.22(m,4H)4.22-4.10(m,6H)4.02(dd,J=8.4,4.9Hz,1H)3.96(d,J=7.6Hz,1H)3.92-3.84(m,1H)3.82-3.74(m,1H)3.73-3.63(m,2H)3.61-3.41(m,3H)3.07(t,J=6.9Hz,2H)2.90-2.82(m,6H)2.32-2.12(m,9H)2.00-1.46(m,AcOH,46H)1.43-1.05(m,17H)0.84(d,J=6.8Hz,3H)0.80(dd,J=6.8,4.3Hz,6H)0.75(t,J=7.4Hz,3H).
【0161】
化合物107:Val-Pro-Gln-Ala(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C18H31N5O6;m/z:414.2341([M+1H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.29(t,J=7.6Hz,1H)4.07(dd,J=8.5,6.1Hz,1H)4.01-3.91(m,2H)3.61-3.53(m,1H)3.46-3.41(m,1H)2.24-2.10(m,4H)1.95-1.69(m,AcOH,6H)1.14(d,J=7.3Hz,3H)0.91(d,J=7.0Hz,3H)0.80(d,J=6.8Hz,3H).
【0162】
化合物108:Val-Pro-Gln-Ala-Lys(酢酸塩)
高分解能質量分析(Orbitrap-HRMS)、分子式:C24H43N7O7;m/z:271.6681([M+2H]2+)、542.3289([M+1H]+).
1H NMR(600MHz,D2O)δ4.28(t,J=7.6Hz,1H)4.13-4.06(m,2H)3.99(d,J=5.5Hz,1H)3.94(dd,J=8.2,5.1Hz,1H)3.60-3.54(m,1H)3.46-3.41(m,1H)2.78(t,J=7.5Hz,2H)2.21(t,J=7.6Hz,2H)2.17-2.09(m,2H)1.93-1.58(m,AcOH,11H)1.53-1.44(m,3H)1.20(dd,J=9.7,7.5Hz,5H)0.91(d,J=6.9Hz,3H)0.80(d,J=6.9Hz,3H).
【0163】
実施例2:ポリペプチド化合物は結腸炎の緩和効果がある実験
実験動物:自然つがい交配により繁殖した野生型AB種ゼブラフィッシュ。年齢は受精後3日(3dpf)のゼブラフィッシュ。ゼブラフィッシュは全て28℃の魚類養殖水(水質:逆浸透水1Lに200mgのインスタント海塩を加え、導電率が450~550μS/cm、pHが6.5~8.5、硬度が50~100mg/LであるCaCO3)で飼育された。実験動物使用許可証番号:SYXK(浙)2012-0171、飼育管理は国際AAALAC認証(認証番号:001458)の要件を満たした。
【0164】
実験方法:
(1)群分け:ポリペプチド群:超純水で20.0mg/mLの母液を調製し、-20℃で保存した。
陽性対照群:プレドニゾン、白色粉末、ロット番号C10016501、上海マクリーンバイオテクノロジー有限公司、4℃で保存し、DMSOで15.0mg/mLの母液を調製し、-20℃で分注して保存した。
正常対照群及びモデル対照群。
(2)実験方法:3dpf野生型AB種ゼブラフィッシュを6ウェルプレートにランダムに選択し、各ウェル(実験群)で何れも、30匹のゼブラフィッシュを処理した。正常対照群を除いて、他の各実験群には何れも、ゼブラフィッシュ腸粘膜損傷モデルを確立するために水溶性TNBSを与えた。28℃で2日間処理した後、TNBSを除去し、水溶性ポリペプチド化合物(濃度は表4を参照)、陽性対照プレドニゾン15.0μg/mLをそれぞれ与えると同時に、各ウェル(実験群)の容量が3mLとなるように、正常対照群(健康群)及びモデル対照群(腸粘膜損傷群)を設定した。28℃で2日間処理を続けた後、各実験群から10匹のゼブラフィッシュをランダムに選択して解剖顕微鏡下で写真を取り、NIS-Elements D3.20高度な画像処理ソフトウェアを用いて分析し、データを収集し、ゼブラフィッシュの腸腔面積を分析し、この指標の統計学的分析結果を用いて結腸炎を緩和するサンプルの効果を評価した。統計学的処理結果はmean±SEで表した。SPSS26.0ソフトウェアを用いて統計学的分析を行い、p<0.05は統計学的差異があることを示した。
実験の結果:ポリペプチド化合物は結腸炎の緩和効果があるという結果は表4に示された。
【0165】
【0166】
モデル対照群と比較して、*p<0.05、**p<0.01、***p<0.001であった。
表4データから分かるように、化合物1、4、5、6、12、15などのポリペプチド化合物群は、モデル対照群と比較して、顕著な統計学的差異(p<0.05、p<0.01、p<0.001)が生じ、且つ効果はプレドニゾン群よりも優れた。実験の結果は、本願により提供されるポリペプチド化合物は、結腸炎の緩和効果を有し、具体的に腸腔拡張の顕著な緩和として現れると表した。
【0167】
この実験システムで設定した被検物の投与濃度勾配は、250μg/mL、500μg/mL、1000μg/mLであり、各群の介入後のゼブラフィッシュ腸腔面積を統計するによって、結腸炎の緩和効果を有する大部分の被検物は1000μg/mLの濃度で作用が比較的明らか(p<0.05、p<0.01、p<0.001)であることが分かった。一方で、被検物の濃度が上昇し続けて介入すると、群内のゼブラフィッシュの死亡が見られるため、その後の複数回の活性評価では、各被検物ポリペプチド化合物を均一に1000μg/mLで投与し介入して、結果を表5にまとめた。
【0168】
【0169】
注:各化合物によるゼブラフィッシュ結腸炎の腸腔拡張活性の緩和は、マルチバッチ試験に分けて完了させた。比較の便宜上、その抗腸腔拡張活性は、同じバッチの実験モデル対照群に対して比較した。*p<0.05、**p<0.01、***p<0.001であり、NDは試験されていないことを表し、「-」は活性がないことを表し、「+」は一定の腸腔拡張の緩和作用を表し、「#」は実験中に全てのゼブラフィッシュが死亡したことを表し、「&」は実験中に13匹のゼブラフィッシュが死亡したことを表した。
【0170】
表4及び表5のデータから分かるように、ポリペプチド群は、モデル対照群と比較して顕著な統計学的差異(p<0.05、p<0.01又はp<0.001)が生じ、且つ効果はプレドニゾン群よりも優れた。この実験条件で、化合物1、4~6、9、10、12、15、25、26、29、31、34、38、48~51、53~55、57、62、63、65~68、70、72、75、83、85、86、88~90、92~100、103~106は何れも、結腸炎に対する顕著な緩和効果を有し、具体的には腸腔拡張の緩和として現れ(p<0.05)、化合物7、8、11、14、16、17、19、21~24、27、28、30、32、33、36、37、39~42、46、47、52、58、59、64、69、71、74、76、78~82、84、87、91及び102は、一定の腸腔拡張の緩和作用を有した。
【0171】
実施例3:ポリペプチド化合物によるTNBS誘導性SDラット急性炎症性腸疾患(UC)モデルの治療効果の評価
目的:ポリペプチド化合物によるTNBS誘導性SDラット急性炎症性腸疾患モデルの治療作用を評価する。
【0172】
材料及び方法:
この実験では、トリニトロベンゼンスルホン酸(TNBS)を使用して実験動物の雄SDラットに単回の浣腸介入を実施し、ラット潰瘍性結腸炎モデルを構築した。ラットにおけるトリニトロベンゼンスルホン酸(TNBS)誘導性急性結腸炎は、Thl型細胞によって分泌されるサイトカイン誘導性免疫反応であり、モデル対照群の動物の結腸は明らかな萎縮及び腸壁の肥厚が示され、その結腸の重量と長さの比は顕著に増加し、腸壁粘膜の表面に亀裂様の潰瘍病変が見られ、粘膜の下層及び筋層に典型的な肉芽腫が見られ、内部にリンパ球及び形質細胞を主とする炎症細胞の浸潤が伴い、同時に小さな血管及び締結組織増殖(線維芽細胞)が明らかであり、潰瘍病変の周囲に陰窩構造の破壊及び出血が見られた。当該モデルは、製造が簡単であり、再現性が良好であり、炎症性腸疾患の治療薬の評価に広く適用される実験動物モデルである。実験動物(雄SDラット)を、実験初日に体重パラメータに従って、何れも10匹/群で、それぞれ正常対照群、モデル対照群、陽性薬物メサラジン治療群、化合物1低用量治療群、化合物1高用量治療群、化合物6低用量治療群、化合物6高用量治療群及び化合物12治療群を含む、合計6群にランダムに群分けした。群分けの当日(D0)、溶媒を投与した正常対照群を除き、残りの各実験群の動物に何れも、モデル誘導のためにTNBSエタノール溶液を浣腸投与し、モデル誘導の翌日から、試験品及び陽性対照薬物の治療を開始した。化合物1の治療用量はそれぞれ3.0mg/kg及び6.0mg/kg、化合物6の治療用量はそれぞれ1.4mg/kg及び2.8mg/kg、化合物12の治療用量は0.8mg/kg、陽性対照薬物メサラジンの治療用量は30.0mg/kgであり、投与方法は何れも、1日1回の頻度で連続14日間浣腸投与され、実験の治療周期(D1~D14)内に、各実験群の動物の体重及び一般的な臨床観察指標(摂食、飲水、活動レベル及び排便などを含むが、これらに限定されない)を動的に収集し、同時に潰瘍性結腸炎疾患活動性関連の採点基準に基づいて、TNBS誘導後の各実験群の動物の体重減少の程度、糞便の形態と性状及び便血などの反応を採点し、潰瘍性結腸炎疾患活動性(DAI)を1日1回で連続14日間計算し、実験終了時に各実験群の動物の結腸組織を収集し、結腸の長さを測定し、重量を量った後に非剖検画像を収集した後、腸壁に沿って縦方向に切り開き、剖検画像を収集した。『結腸肉眼的形態学的表現採点基準』に基づいて、各実験群の動物の結腸癒着、結腸潰瘍及び炎症の肉眼的損傷を観察して採点した。実体顕微鏡下で潰瘍画像を収集し、結腸潰瘍病変の面積を計算し、その後、通常の固定が行われ、様々な薬力学的検査指標の統計学的分析結果に基づいて、設定された治療計画での潰瘍性結腸炎疾患モデルの試験ポリペプチド化合物の治療効果を評価した。
【0173】
結果及び結論:
この実験研究システムにおいて、モデル対照群の動物は、体重増加の阻害、軟便及び希便、潰瘍性結腸炎疾患活動性のDAI採点の顕著な増加、肉眼的観察できる結腸萎縮及び典型的な潰瘍病変と結腸融合性潰瘍病変を含む、明らかな潰瘍性結腸炎の疾患特徴を示した。試験化合物1は、設定された治療計画でモデル動物の体重増加阻害状態に対して明らかな改善効果を有し、その改善の程度は、同じ期間のモデル対照群の動物体重の変化程度と比較して統計学的差異(P<0.05)を有する一方で、試験化合物6及び12は、モデル動物の体重増加阻害の治療効果に対する明らかな改善を示さなかった。
【0174】
【0175】
注:全てのデータは、平均値(Mean)±標準偏差(SD)を用いて統計学的分析を行い、*P<0.05、**P<0.01、***P<0.001、****P<0.0001は、モデル対照群及び正常対照群の統計学的分析結果を表し、#P<0.05、##P<0.01は、試験ポリペプチド化合物治療群動物及びモデル対照群の統計学的分析結果を表す。
【0176】
実験周期のDAI採点結果は、試験化合物1、6及び12が設定された治療計画でモデル動物の潰瘍性結腸炎疾患の進行に対して明らかな改善効果を有し、対応する治療群動物の糞便の性状病変特徴及び体重減少反応が何れも明らかに緩和し、DAI採点の平均値が何れも降下し、同じ期間のモデル対照群と比較して明らかな統計学的差異(P<0.05)を有し、化合物1の治療効果に対する改善が最も明らかであると同時に、化合物1及び6の治療効果が明らかな用量依存性があることを示した。
【0177】
【0178】
注:全てのデータは、平均値(Mean)±標準偏差(SD)を用いて統計学的分析を行い、*P<0.05、**P<0.01、***P<0.001、****P<0.0001は、モデル対照群及び正常対照群の統計学的分析結果を表し、#P<0.05、##P<0.01、###P<0.001、####P<0.0001は、試験ポリペプチド化合物治療群動物及びモデル対照群の統計学的分析結果を表し、+P<0.05、++P<0.01、+++P<0.001、++++P<0.0001は、化合物1又は6用量群間の統計学的分析結果を表す。
【0179】
実験終了時の肉眼的解剖及び結腸組織損傷の採点結果は、試験化合物1、6及び12がTNBS誘導性結腸の肉眼的損傷状態(結腸癒着、潰瘍及び炎症)、結腸潰瘍病変の面積及び結腸の重量/長さの比の異常な増加プロセスに対して明らかな治療効果を有し、その改善の程度が同じ期間のモデル対照群と比較して何れも統計学的差異(P<0.05)を有し、化合物1の治療効果が最も明らかであり、同時にその治療効果が明らかな用量依存性があることを示した。
【0180】
【0181】
注:全てのデータは、平均値(Mean)±標準偏差(SD)を用いて統計学的分析を行い、*P<0.05、**P<0.01、***P<0.001、****P<0.0001は、モデル対照群及び正常対照群の統計学的分析結果を表し、#P<0.05、##P<0.01、###P<0.001、####P<0.0001は、試験ポリペプチド化合物治療群動物及びモデル対照群の統計学的分析結果を表し、+P<0.05、++P<0.01、+++P<0.001、++++P<0.0001は、化合物1又は6用量群間の統計学的分析結果を表す。
【0182】
【0183】
注:全てのデータは、平均値(Mean)±標準偏差(SD)を用いて統計学的分析を行い、*P<0.05、**P<0.01、***P<0.001、****P<0.0001は、モデル対照群及び正常対照群の統計学的分析結果を表し、#P<0.05、##P<0.01、###P<0.001、####P<0.0001は、試験ポリペプチド化合物治療群動物及びモデル対照群の統計学的分析結果を表し、+P<0.05、++P<0.01、+++P<0.001、++++P<0.0001は、化合物1又は6用量群間の統計学的分析結果を表す。
【0184】
この試験では、TNBSを用いて雄SDラットに浣腸介入を実施し、その結腸病変を誘導し、臨床発症特徴を満たす潰瘍性結腸炎モデルを確立した。モデル誘導の翌日から、試験化合物1、6、12及び陽性対照薬物メサラジンの治療を開始した。治療周期(D1~D14)内に実験動物の体重変化、潰瘍性結腸炎疾患活動性DAIの採点、結腸の肉眼的損傷表現(結腸癒着、潰瘍及び炎症反応)の採点、結腸組織の潰瘍面積及び結腸の重量/長さの比などの指標の変化を監視することにより、試験品によるTNBS誘導SDラット潰瘍性結腸炎モデルの治療作用を評価し、その結果から以下が分かった。
【0185】
1)実験動物は、TNBS誘導後に、主に顕著な体重減少、潰瘍性結腸炎疾患活動性採点(DAI採点)の顕著な増加、結腸癒着及び潰瘍採点の顕著な増加、結腸組織の潰瘍面積の増加及び結腸の重量/長さの比の顕著な増加を含む、明らか潰瘍性結腸炎疾患が示され、ラット潰瘍性結腸炎モデルの構築に成功し、この実験の薬力学的研究に適することを示唆した。
2)試験化合物1は、設定された治療計画でモデル動物の体重減少に対して明らかな改善効果を有し、その改善の程度は、同じ期間のモデル対照群と比較して統計学的差異(P<0.05)を有する一方で、試験化合物6、12及び陽性対照薬物メサラジンは、明らかな体重改善効果が示さなかった。
3)試験化合物1、6及び12は、設定された治療計画でモデル動物潰瘍性結腸炎疾患プロセスに対して明らかな改善効果を有し、そのDAI採点は何れも、同じ期間のモデル対照群と比較して顕著な減少を示し、試験化合物1の治療効果が最も明らかであり、同時に試験化合物1及び6の改善及び治療効果は明らかな用量依存性を有する一方で、陽性対照薬物メサラジンは、モデル動物の潰瘍性結腸炎疾患症状に明らかな影響を与えなかった。
【0186】
4)試験化合物1、6及び12は、設定された治療計画でモデル動物の結腸の肉眼的損傷表現に対して明らかな治療効果を有し、同じ期間のモデル対照群と比較して、その結腸癒着の採点、結腸潰瘍及び炎症の採点、並びに結腸組織の潰瘍病変の面積は何れも、顕著に減少し、改善の程度は統計学的意味(P<0.05)を有し、試験化合物1の治療効果が最も明らかであり、また、その改善及び治療効果は明らかな用量依存性を有した。
5)試験化合物1、6及び12は、設定された治療計画でモデル動物の結腸萎縮プロセスに対して明らかな改善効果を有し、同じ期間のモデル対照群と比較して、その結腸の重量/長さの比は顕著に減少した(P<0.05)。
この試験は臨床発症特徴を満たすラット潰瘍性結腸炎モデルを確立し、このモデルでの薬効評価結果は試験化合物1、6及び12が何れも顕著な治療効果を有することを表すことが分かった。
【0187】
実施例4:ポリペプチド化合物による細胞CaCo-2の体外増殖の影響の研究
下記細胞株を用いてポリペプチド化合物の体外増殖を研究した。
【0188】
【0189】
実験方法:
細胞は、表10に示される培養条件に従って蘇生して維持された。
1日目(細胞播種):対数成長期の細胞を収集し、再懸濁させた後、細胞カウンターを使用してカウントし、活性を検出した。播種密度の要件に従って細胞懸濁液を希釈し、96ウェルプレートの各ウェルに90μLの細胞懸濁液を加えた(細胞播種密度は履歴データ又は密度最適化実験に基づいて調整された)。播種の同時に、各細胞をT0プレートとして3つの平行ウェルに播種した。全ての96ウェルプレートを37℃、5%のCO2の恒温インキュベータに入れて一晩置いた。
【0190】
2日目(液体交換):platemapに従って、90μL/ウェルで血清濃度に対応する培地を交換した。2日目:T0プレートを読み取って、測定される化合物を処理した。T0プレートの各ウェルに10μLの培地を加えて総体積を100μLに補充した。各ウェルに50μLのCellTiter-Glo(R)試薬を加えた。細胞を十分に溶解させるように5分間混合して振とうした。発光シグナルを安定させるために、室温で10分間インキュベートした(注意:温度、細胞密度及びエッジ効果が何れも発光シグナルの不均一を引き起こす)。EnVision Multi Label Readerを使用して蛍光シグナルを検出した。測定される化合物は、対応する分子量設定に従ってC1=91.08μM、C2=9.108μM、C3=0.9108μM希釈した。Cisplatinは、表11に示すように希釈し、10×化合物作動液を調製した。各ウェルに10μLの作動液(10×)を加え、全てのプレートの各ウェルの最終体積は100μLであった。細胞を37°C、5%のCO2のインキュベータに入れて培養した。
【0191】
5日目に、測定される化合物を72時間処理した(プレート読み取り)。顕微鏡下で投与群及び対照群の状態が正常であるか否かを観察した。各ウェルに50μLのCTG試薬を加えた。細胞を十分に溶解させるようにシェーカーで5分間混合した。発光シグナルを安定させるために、室温で10分間インキュベートした。EnVision Multi Label Readerを使用して蛍光シグナルを読み取った。
【0192】
【0193】
細胞生存率(%)=Lum測定される化合物/Lum溶媒対照×100%
実験結果:選択されるポリペプチド化合物の増殖促進活性の統計学的結果は表12に示された。
【0194】
【0195】
この実験システムで設定した被検物の投与濃度勾配は、0.88%のFBSを参照として、C1=91.08μM、C2=9.108μM、C3=0.9108μM希釈した。実験の結果は、本願のポリペプチド化合物1が、Caco-2細胞増殖を促進する活性を有し、具体的には介入後の細胞生存率の増加として現れることを表した。
【0196】
要するに、本発明の上記ポリペプチド化合物は、そのペプチド鎖が短く、吸収がより速く、より良好である。実験の結果は、本願により提供されるポリペプチド化合物が、ゼブラフィッシュ結腸炎の腸腔拡張活性を緩和し、ラット急性炎症性腸疾患モデル試験において、顕著な治療効果を有することを表した。本発明の上記ポリペプチド化合物は、結腸炎に対する顕著な緩和効果を有し、腸炎の治療薬、特に潰瘍性結腸炎の薬物の製造に使用できる。
【0197】
本発明は上記の実施例を開示しているが、本発明の実施形態は上記の実施例に限定されず、本発明から逸脱することない他の任意の変化、修飾、置換、組み合わせ、簡略化は、何れも等価置換であり、何れも本発明の保護範囲内に含まれる。
【国際調査報告】