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特表2025-502542フェノチアジン系化合物の結晶形、塩、製造方法及び用途
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2025-01-24
(54)【発明の名称】フェノチアジン系化合物の結晶形、塩、製造方法及び用途
(51)【国際特許分類】
C07D 279/20 20060101AFI20250117BHJP
A61K 31/5415 20060101ALI20250117BHJP
A61P 3/00 20060101ALI20250117BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20250117BHJP
A61P 3/10 20060101ALI20250117BHJP
A61P 9/00 20060101ALI20250117BHJP
A61P 9/10 20060101ALI20250117BHJP
A61P 13/12 20060101ALI20250117BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20250117BHJP
A61P 25/16 20060101ALI20250117BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20250117BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20250117BHJP
A61P 37/02 20060101ALI20250117BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20250117BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20250117BHJP
【ＦＩ】
C07D279/20 CSP
A61K31/5415
A61P3/00
A61P1/16
A61P3/10
A61P9/00
A61P9/10
A61P9/10 101
A61P13/12
A61P25/00
A61P25/16
A61P25/28
A61P35/00
A61P37/02
A61P29/00
A61P43/00 111
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024544862
(86)(22)【出願日】2023-01-19
(85)【翻訳文提出日】2024-07-25
(86)【国際出願番号】 CN2023073055
(87)【国際公開番号】W WO2023143350
(87)【国際公開日】2023-08-03
(31)【優先権主張番号】202210108728.0
(32)【優先日】2022-01-28
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(31)【優先権主張番号】202210108746.9
(32)【優先日】2022-01-28
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】524280371
【氏名又は名称】チェンドゥ ヘンハオ イノベイティブ サイエンス アンド テクノロジー カンパニー リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110000855
【氏名又は名称】弁理士法人浅村特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】ユー、ジョウ
(72)【発明者】
【氏名】ハー、ペン
(72)【発明者】
【氏名】ドン、グァンシン
(72)【発明者】
【氏名】リ、イー
(72)【発明者】
【氏名】チャン、ルイ
(72)【発明者】
【氏名】デン、タ
(72)【発明者】
【氏名】イエ、チジュン
(72)【発明者】
【氏名】ホアン、ペイ
(72)【発明者】
【氏名】リ、シャン
(72)【発明者】
【氏名】リ、ボガン
【テーマコード（参考）】
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA02
4C086AA03
4C086AA04
4C086BC89
4C086GA10
4C086GA12
4C086GA13
4C086GA14
4C086GA15
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA02
4C086NA03
4C086NA05
4C086NA11
4C086NA20
4C086ZA01
4C086ZA02
4C086ZA16
4C086ZA36
4C086ZA45
4C086ZA75
4C086ZA81
4C086ZB07
4C086ZB11
4C086ZB26
4C086ZC01
4C086ZC21
4C086ZC35
(57)【要約】
フェノチアジン系化合物の結晶形、塩、及びその製造方法と用途が提供される。該フェノチアジン系化合物の塩酸塩及びその結晶は、フェロトーシス阻害剤として使用でき、また、溶解性、安定性、経口吸収生体利用率及び薬剤形成性が良好である。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記の結晶形Ａを有する２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶。Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＡのＸ線粉末回折パターンは、１０．６８±０．２°、１４．３６±０．２°、１８．５７±０．２°、２１．０８±０．２°、２２．１４±０．２°、２３．４０±０．２°、２９．０３±０．２°の特徴的なピークを有し、
好ましくは、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＡのＸ線粉末回折パターンは、１０．６８±０．２°、１４．３６±０．２°、１７．８４±０．２°、１８．５７±０．２°、２１．０８±０．２°、２２．１４±０．２°、２３．４０±０．２°、２７．５０±０．２°、２９．０３±０．２°の特徴的なピークを有し、
好ましくは、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＡのＸ線粉末回折パターンは、１０．６８±０．２°、１４．３６±０．２°、１６．５４±０．２°、１７．８４±０．２°、１８．５７±０．２°、２０．８９±０．２°、２１．０８±０．２°、２２．１４±０．２°、２２．９２±０．２°、２３．４０±０．２°、２５．８８±０．２°、２７．５０±０．２°、２９．０３±０．２°の特徴的なピークを有し、
好ましくは、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＡのＸ線粉末回折パターンは、１０．６８±０．２°、１２．６３±０．２°、１４．３６±０．２°、１６．０６±０．２°、１６．５４±０．２°、１７．８４±０．２°、１８．５７±０．２°、２０．８９±０．２°、２１．０８±０．２°、２２．１４±０．２°、２２．９２±０．２°、２３．４０±０．２°、２５．１１±０．２°、２５．５１±０．２°、２５．８８±０．２°、２７．５０±０．２°、２８．５４±０．２°、２９．０３±０．２°、３３．５５±０．２°の特徴的なピークを有し、
より好ましくは、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＡのＸ線粉末回折パターンは図１に示される。
【請求項2】
下記の結晶形Ｂを有する２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶。Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＢのＸ線粉末回折パターンは、１６．４６±０．２°、２２．０１±０．２°の特徴的なピークを有し、
好ましくは、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＢのＸ線粉末回折パターンは、１６．４６±０．２°、２２．０１±０．２°、２７．６２±０．２°、２８．９１±０．２°、３３．４１±０．２°の特徴的なピークを有し、
好ましくは、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＢのＸ線粉末回折パターンは、５．４１±０．２°、１０．９２±０．２°、１６．４６±０．２°、２２．０１±０．２°、２７．６２±０．２°、２８．９１±０．２°、３３．４１±０．２°の特徴的なピークを有し、
より好ましくは、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＢのＸ線粉末回折パターンは図３に示される。
【請求項3】
請求項１に記載の塩酸塩の結晶形Ａ、又は請求項２に記載の塩酸塩の結晶形Ｂ、及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項4】
がん、臓器損傷及び変性疾患の予防及び／又は治療のための薬剤の製造における、請求項１に記載の塩酸塩の結晶形Ａ、又は請求項２に記載の塩酸塩の結晶形Ｂ、又は請求項３に記載の医薬組成物の使用。
【請求項5】
がん、神経変性疾患、心血管疾患・脳血管疾患、免疫関連疾患、肝腎不全、炎症、代謝性疾患の予防及び／又は治療のための薬剤の製造における、請求項１に記載の塩酸塩の結晶形Ａ、又は請求項２に記載の塩酸塩の結晶形Ｂ、又は請求項３に記載の医薬組成物の使用であって、好ましくは、前記疾患は、がん、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中、虚血再灌流傷害、アテローム性動脈硬化症、免疫関連疾患、肝腎不全、炎症、糖尿病、または糖尿病の合併症であり、
好ましくは、前記脳卒中は出血性脳卒中及び／又は虚血性脳卒中である、使用。
【請求項6】
フェロトーシス阻害剤の製造における、請求項１に記載の塩酸塩の結晶形Ａ、又は請求項２に記載の塩酸塩の結晶形Ｂ、又は請求項３に記載の医薬組成物の使用。
【請求項7】
化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンを１０～４０℃でメタノールに分散させた後、濃塩酸とメタノールとの混合溶液を滴下し、攪拌・晶析し、濾過し、濾過ケーキをメタノールで洗浄した後、濾過ケーキを真空乾燥し、結晶状物質が得られることを含む、請求項１に記載の塩酸塩の結晶形Ａを製造する方法であって、好ましくは、前記溶媒メタノールと化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンとの重量比は、５：１～１５：１、好ましくは８：１～１２：１であり、
好ましくは、前記化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと濃塩酸との重量比は、１：１～８：１、好ましくは３：１～５：１であり、
好ましくは、前記攪拌・晶析は、１～８時間行われ、好ましくは２～５時間行われる、方法。
【請求項8】
化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンを１０～４０℃でアセトンと水に分散させた後、濃塩酸とアセトンと水との混合溶液を滴下し、攪拌・晶析し、濾過し、濾過ケーキをアセトンで洗浄した後、濾過ケーキを真空乾燥し、結晶状物質が得られることを含む、請求項１に記載の塩酸塩の結晶形Ａを製造する方法であって、好ましくは、前記溶媒アセトンと水と化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンとの重量比は、（１～８）：（０．５～３）：（０．５～３）、好ましくは（４～６）：（０．５～１）：（０．５～１）であり、
好ましくは、前記化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと濃塩酸との重量比は、１：１～８：１、好ましくは３：１～５：１であり、
好ましくは、前記攪拌・晶析は、１～８時間行われ、好ましくは２～５時間行われる、方法。
【請求項9】
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩であって、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンメタンスルホン酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンエタンスルホン酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン－ｐ－トルエンスルホン酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンフマル酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンマレイン酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン酒石酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン臭化水素酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンシュウ酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンリン酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン硫酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン酢酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンプロピオン酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン過塩素酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンリンゴ酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンサリチル酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンマンデル酸塩、
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン乳酸塩、及び
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンコハク酸塩から任意に選択される、塩。
【請求項10】
前記塩が、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩であることを特徴とする、請求項９に記載の塩。
【請求項11】
前記塩酸塩中の２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと塩酸とのモル比が１：（０．５～２）であり、好ましくは、前記モル比が１：１又は１：２であることを特徴とする、請求項９に記載の塩。
【請求項12】
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと酸を反応させて塩を生成することを特徴とする、請求項９に記載の塩を製造する方法であって、好ましくは、前記反応は水及び／又は有機溶媒中で行われ、前記有機溶媒は炭素数２～６のケトン類、酢酸エチル、低級脂肪アルコール、およびテトラヒドロフランから任意に選択された１種又は１種以上の混合物であり、さらに、前記炭素数２～６のケトン類はアセトンであることが好ましく、よりさらに、前記低級脂肪アルコールはメタノール、エタノール、プロパノール及びイソプロパノールから任意に選択され、
好ましくは、前記反応は、アセトン、メタノール及びエタノールから任意に選択された１種の溶媒又は１種以上の混合溶媒中で行われ、
好ましくは、前記酸は、塩酸、ＨＣｌ、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、臭化水素酸、シュウ酸、リン酸、硫酸、酢酸、プロピオン酸、過塩素酸、リンゴ酸、サリチル酸、マンデル酸、乳酸、及びコハク酸から任意に選択された１種であり、より好ましくは塩酸である、方法。
【請求項13】
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと塩酸をアセトン、エタノール、イソプロパノール、又はテトラヒドロフラン中で反応させ、攪拌し、濾過することにより前記塩が得られることを特徴とする、請求項１２に記載の方法。
【請求項14】
請求項９～１２のいずれか１項に記載の塩（好ましくは、前記塩が塩酸塩である）と１つ又は複数の薬学的に許容される担体及び／又は希釈剤とを含むことを特徴とする、医薬組成物。
【請求項15】
がん、臓器損傷、及び変性疾患の予防及び／又は治療のための薬剤の製造における、請求項９～１２のいずれか１項に記載の塩、又は請求項１４に記載の医薬組成物の使用。
【請求項16】
がん、神経変性疾患、心血管疾患・脳血管疾患、免疫関連疾患、肝腎不全、炎症、代謝性疾患の予防及び／又は治療のための薬剤の製造における、請求項９～１２に記載の塩、又は請求項１４に記載の医薬組成物の使用。
【請求項17】
前記疾患が、がん、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中、虚血再灌流傷害、免疫関連疾患、肝腎不全、炎症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病、又は糖尿病の合併症であることを特徴とする、請求項１５に記載の使用。
【請求項18】
前記脳卒中が出血性脳卒中及び／又は虚血性脳卒中であることを特徴とする、請求項１７に記載の使用。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本出願は、２０２２年１月２８日に中国国家知識産権局に提出された出願番号２０２２１０１０８７２８．０及び２０２２１０１０８７４６．９の中国特許出願の優先権を主張し、それらの全内容は援用により本出願に組み込まれる。
【0002】
本発明は、医薬化学の分野に属し、具体的には、医薬用フェノチアジン系化合物の結晶形、塩、その製造方法及び用途に関する。
【背景技術】
【0003】
フェロトーシス（Ｆｅｒｒｏｐｔｏｓｉｓ）は、鉄依存性および脂質過酸化に駆動させるプログラム細胞死の方式である。フェロトーシスの形態学的の特徴は、主にミトコンドリアの体積の減小、ミトコンドリアの膜密度の増加、ミトコンドリアのクリステの減少又は消失、ミトコンドリアの外膜が破裂するが細胞核のサイズが正常であることとして表われる。これは、フェロトーシスがアポトーシス、壊死及びオートファジーと区別する主な形態学的特徴である。フェロトーシスの生化学的特徴は、主に細胞内の鉄及びＲＯＳの蓄積、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）シグナル伝達系の活性化、シスチン／グルタミン酸トランスポーター系の阻害、及びＮＡＤＰＨ酸化の増加などとして表われる。
【0004】
細胞フェロトーシスが多くの病気、障害及び疾患と密に関連しているということがますますに研究によって確信されている。この細胞死モードは小分子誘導性ＲＡＳ腫瘍細胞死に関連しているということがＤｉｘｏｎらによって２０１２年に始めて発見された（Ｓｃｏｔｔ Ｊ Ｄｉｘｏｎら、Ｃｅｌｌ．２０１２ Ｍａｙ ２５；１４９（５）：１０６０－７２．）。がん、臓器損傷、及び変性疾患におけるフェロトーシスの役割は、最近の研究でさらに実証された（Ｘｕｅｊｕｎ Ｊｉａｎｇら、Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．２０２１ Ａｐｒ；２２（４）：２６６－２８２）。具体的には、様々ながん、神経変性疾患、心血管疾患・脳血管疾患、免疫関連疾患、肝腎不全、炎症、代謝性疾患などの発生及び発展が含まれる。特に、アルツハイマー病や、パーキンソン病、腫瘍、脳卒中、虚血再灌流傷害、アテローム性動脈硬化症、肝腎不全、炎症、糖尿病の合併症などの疾患において重要な役割を果たしている。フェロトーシスの発生を刺激又は阻害することにより、関連疾患の発生及び発展が許容可能になるため、フェロトーシス阻害剤は、これらの疾患を治療する可能性を有する医薬品と考えられている。
【0005】
国際出願ＷＯ２０１９２０５８５４Ａ１には、優れたフェロトーシス阻害活性を有する化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン及びその製造方法が開示されている。しかし、従来技術ではその結晶形についての研究は行われていない。
【0006】
薬物の結晶多形は医薬品の研究開発において一般的な現象であり、医薬品の品質を影響する重要な要素である。結晶形が異なると、溶解性、安定性、吸湿性、及び生体利用率が異なくなることが多く、そして医薬品の医薬製剤の品質、人体内での吸収挙動に直接影響し、最終的には人体内でのこの製剤の治療効果及び副作用の利益比に影響する。そのため、医薬品の有効性を最大限に引き出すために、この化合物の結晶形研究を行い、純度が高く、溶解度がよく、安定性がよく、生体利用率が高い結晶形を見つけることが必要であり、これは医薬品開発にとって非常に重要である。
【発明の概要】
【0007】
本発明の目的の１つは、安定性、溶解性、吸湿性、生体利用率など医薬品の薬剤形成性（ｄｒｕｇｇａｂｉｌｉｔｙ）が改善された２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンの複数の結晶形、特にその塩酸塩の複数の結晶形を提供することである。
【0008】
本発明の別の目的は、上記結晶形の医薬組成物、製造方法及び用途を提供することである。
【0009】
上記目的を達成するために、本発明には、以下の技術案を採用する。
【0010】
１つ又は複数の実施形態においては、下記の結晶形Ａを有する２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶が提供される。Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＡのＸ線粉末回折パターンは１０．６８±０．２°、１４．３６±０．２°、１８．５７±０．２°、２１．０８±０．２°、２２．１４±０．２°、２３．４０±０．２°、２９．０３±０．２°の特徴的なピークを有する。
【0011】
１つ又は複数の実施形態において、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＡのＸ線粉末回折パターンは、１０．６８±０．２°、１４．３６±０．２°、１７．８４±０．２°、１８．５７±０．２°、２１．０８±０．２°、２２．１４±０．２°、２３．４０±０．２°、２７．５０±０．２°、２９．０３±０．２°の特徴的なピークを有する。
【0012】
１つ又は複数の実施形態において、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＡのＸ線粉末回折パターンは、１０．６８±０．２°、１４．３６±０．２°、１６．５４±０．２°、１７．８４±０．２°、１８．５７±０．２°、２０．８９±０．２°、２１．０８±０．２°、２２．１４±０．２°、２２．９２±０．２°、２３．４０±０．２°、２５．８８±０．２°、２７．５０±０．２°、２９．０３±０．２の特徴的なピークを有する。
【0013】
１つ又は複数の実施形態において、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＡのＸ線粉末回折パターンは、１０．６８±０．２°、１２．６３±０．２°、１４．３６±０．２°、１６．０６±０．２°、１６．５４±０．２°、１７．８４±０．２°、１８．５７±０．２°、２０．８９±０．２°、２１．０８±０．２°、２２．１４±０．２°、２２．９２±０．２°、２３．４０±０．２°、２５．１１±０．２°、２５．５１±０．２°、２５．８８±０．２°、２７．５０±０．２°、２８．５４±０．２°、２９．０３±０．２°、３３．５５±０．２°の特徴的なピークを有する。
【0014】
１つ又は複数の実施形態において、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＡのＸ線粉末回折パターンは図１に示される。
【0015】
１つ又は複数の実施形態においては、下記の結晶形Ｂを有する２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶が提供される。Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＢのＸ線粉末回折パターンは、１６．４６±０．２°、２２．０１±０．２°の特徴的なピークを有する。
【0016】
１つ又は複数の実施形態において、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＢのＸ線粉末回折パターンは、１６．４６±０．２°、２２．０１±０．２°、２７．６２±０．２°、２８．９１±０．２°、３３．４１±０．２°の特徴的なピークを有する。
【0017】
１つ又は複数の実施形態において、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＢのＸ線粉末回折パターンは、５．４１±０．２°、１０．９２±０．２°、１６．４６±０．２°、２２．０１±０．２°、２７．６２±０．２°、２８．９１±０．２°、３３．４１±０．２°の特徴的なピークを有する。
【0018】
１つ又は複数の実施形態において、Ｃｕ－Ｋａ放射線を使用して２θ角度で表した場合、前記結晶形ＢのＸ線粉末回折パターンは図３に示される。
【0019】
１つ又は複数の実施形態においては、上記の塩酸塩の結晶形Ａ、又は塩酸塩の結晶形Ｂ、及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が提供される。
【0020】
１つ又は複数の実施形態においては、がん、臓器損傷及び変性疾患の予防及び／又は治療のための薬剤の製造における、上記の塩酸塩の結晶形Ａ、又は塩酸塩の結晶形Ｂ、又はその医薬組成物の使用が提供される。
【0021】
１つ又は複数の実施形態においては、がん、神経変性疾患、心血管疾患・脳血管疾患、免疫関連疾患、肝腎不全、炎症、代謝性疾患の予防及び／又は治療のための薬剤の製造における、前記の塩酸塩の結晶形Ａ、又は塩酸塩の結晶形Ｂ、又はその医薬組成物の使用が提供される。
１つ又は複数の実施形態において、前記疾患は、がん、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中、虚血再灌流傷害、アテローム性動脈硬化症、免疫関連疾患、肝腎不全、炎症、糖尿病、及び糖尿病の合併症から選択されることがあるが、これらに限定されない。
１つ又は複数の実施形態において、前記脳卒中は出血性脳卒中及び／又は虚血性脳卒中である。なお、前記虚血性脳卒中は脳梗塞、脳梗死とも呼ばれる。
１つ又は複数の実施形態において、前記疾患は、がん、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中、虚血再灌流傷害、アテローム性動脈硬化症、免疫関連疾患、肝腎不全、炎症、糖尿病、及び糖尿病の合併症から選択されることがあるが、これらに限定されない。
１つ又は複数の実施形態において、前記脳卒中は出血性脳卒中及び／又は虚血性脳卒中である。なお、前記虚血性脳卒中は脳梗塞、脳梗死とも呼ばれる。
【0022】
１つ又は複数の実施形態においては、フェロトーシス阻害剤の製造における、塩酸塩の結晶形Ａ、又は塩酸塩の結晶形Ｂ、又はその医薬組成物の使用が提供される。
【0023】
１つ又は複数の実施形態においては、化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンを１０～４０℃でメタノールに分散させた後、濃塩酸とメタノールとの混合溶液を滴下し、攪拌・晶析し、濾過し、濾過ケーキをメタノールで洗浄した後、濾過ケーキを真空乾燥し、結晶状物質が得られることを含む本出願の塩酸塩の結晶形Ａの製造方法が提供される。
好ましくは、前記溶媒メタノールと化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンとの重量比は、５：１～１５：１であり、例えば５：１、５．５：１、６：１、６．５：１、７：１、７．５：１、８：１、８．５：１、９：１、９．５：１、１０：１、１０．４６：１、１１：１、１１．５：１、１２：１、１２．５：１、１３：１、１３．５：１、１４：１、１４．５：１、又は１５：１である。
好ましくは、前記化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと濃塩酸との重量比は、１：１～８：１であり、例えば１：１、１．５：１、２：１、２．５：１、３：１、３．５：１、４：１、４．１５：１、４．５：１、５：１、５．５：１、６：１、６．５：１、７：１、７．５：１、８：１である。
好ましくは、前記攪拌・晶析は、１～８時間行われ、例えば１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、又は８時間行われる。
好ましくは、前記溶媒メタノールと化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンとの重量比は、５：１～１５：１であり、例えば５：１、５．５：１、６：１、６．５：１、７：１、７．５：１、８：１、８．５：１、９：１、９．５：１、１０：１、１０．４６：１、１１：１、１１．５：１、１２：１、１２．５：１、１３：１、１３．５：１、１４：１、１４．５：１、又は１５：１である。
好ましくは、前記化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと濃塩酸との重量比は、１：１～８：１であり、例えば１：１、１．５：１、２：１、２．５：１、３：１、３．５：１、４：１、４．１５：１、４．５：１、５：１、５．５：１、６：１、６．５：１、７：１、７．５：１、８：１である。
好ましくは、前記攪拌・晶析は、１～８時間行われ、例えば１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、又は８時間行われる。
【0024】
１つ又は複数の実施形態においては、化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンを１０～４０℃でアセトンと水に分散させた後、濃塩酸、アセトンと水の混合溶液を滴下し、攪拌・晶析し、濾過し、濾過ケーキをアセトンで洗浄した後、濾過ケーキを真空乾燥し、結晶状物質が得られることを含む本出願の塩酸塩の結晶形Ａの製造方法が提供される。
好ましくは、前記溶媒アセトンと水と化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンとの重量比は、（１～８）：（０．５～３）：（０．５～３）であり、好ましくは（４～６）：（０．５～１）：（０．５～１）、例えば４：１：１、４．７４：１：１、５：１：１である。
好ましくは、前記化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと濃塩酸との重量比は、１：１～８：１であり、例えば１：１、１．５：１、２：１、２．５：１、３：１、３．６６：１、４：１、４．５：１、５：１、５．５：１、６：１、６．５：１、７：１、７．５：１、８：１である。
好ましくは、前記攪拌・晶析は、１～８時間行われ、好ましくは２～５時間行われる。
上記製造方法における濃塩酸の質量分率は、２０％以上であり、例えば２０％、２５％、３０％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％である。
好ましくは、前記溶媒アセトンと水と化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンとの重量比は、（１～８）：（０．５～３）：（０．５～３）であり、好ましくは（４～６）：（０．５～１）：（０．５～１）、例えば４：１：１、４．７４：１：１、５：１：１である。
好ましくは、前記化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと濃塩酸との重量比は、１：１～８：１であり、例えば１：１、１．５：１、２：１、２．５：１、３：１、３．６６：１、４：１、４．５：１、５：１、５．５：１、６：１、６．５：１、７：１、７．５：１、８：１である。
好ましくは、前記攪拌・晶析は、１～８時間行われ、好ましくは２～５時間行われる。
上記製造方法における濃塩酸の質量分率は、２０％以上であり、例えば２０％、２５％、３０％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％である。
【0025】
本発明の前記臓器損傷とは、臓器又は前記臓器に関連する組織の１つ又は複数の機能のあらゆる損害、傷害、低下又は喪失を指す。損傷は、以下に限定されないが、臓器組織又は構造の変化が挙げられ、その形態として、例えば組織壊死領域の発達、或いは細胞又は組織構造完全性の破壊又は喪失、或いは例えば細胞炎症過程又はアポトーシスからの細胞物質又は破片の異常な蓄積などの正常な状態に対する損害又は変化である。臓器や組織の種類によっては、損傷の病態が異なる可能性があることが理解される。また、臓器損傷は、前記損傷に関連する病気又は疾患（即ち、臓器損傷に関連する病気）の発症メカニズムを齎すおそれもある。
【0026】
本発明の前記塩酸塩結晶において、化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと塩酸とのモル比は、約１：（１±０．５）であり、例として、１：（１±０．４）、１：（１±０．２）、１：（１±０．１）、１：１である。
【0027】
本発明における前記２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａは、結晶形Ａとも呼ばれる。前記２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ｂは、結晶形Ｂとも呼ばれる。
【0028】
本発明では、従来技術と比較して、以下の有益な効果が得られる。
１．本発明では、大量の実験研究を通じて、その物理的及び化学的特性が遊離化合物と比較して大幅に向上した２つの新規な化合物の結晶形が得られた。
１）塩酸塩の結晶形Ａは、非常に高い純度を有し、例えば、本発明の一実施形態におけるこの純度は９９．７６％に達する。水への溶解度は遊離化合物よりも１００００倍向上し、かつ溶解度が大幅に向上すると同時に、良好な安定性も維持する。例えば、本発明の一実施形態において、結晶形Ａは研磨条件下で依然として結晶形を維持し、良好な機械的安定性を有する。本発明の別の実施形態において、結晶形Ａの融点は約２６５．３１℃であり、これは、結晶形が良好な熱安定性を有することを示す。本発明のさらに別の実施形態において、結晶形Ａは加速及び安定の条件下で依然として結晶形を維持し、純度が基本的に変化しない。本発明の更なる別の実施形態において、結晶形Ａは異なる溶媒に溶解したが、磁気撹拌後でも結晶形転移は生じなかった。さらに、結晶形Ａは生体利用率においても遊離化合物と比較して大幅に向上した。
１．本発明では、大量の実験研究を通じて、その物理的及び化学的特性が遊離化合物と比較して大幅に向上した２つの新規な化合物の結晶形が得られた。
１）塩酸塩の結晶形Ａは、非常に高い純度を有し、例えば、本発明の一実施形態におけるこの純度は９９．７６％に達する。水への溶解度は遊離化合物よりも１００００倍向上し、かつ溶解度が大幅に向上すると同時に、良好な安定性も維持する。例えば、本発明の一実施形態において、結晶形Ａは研磨条件下で依然として結晶形を維持し、良好な機械的安定性を有する。本発明の別の実施形態において、結晶形Ａの融点は約２６５．３１℃であり、これは、結晶形が良好な熱安定性を有することを示す。本発明のさらに別の実施形態において、結晶形Ａは加速及び安定の条件下で依然として結晶形を維持し、純度が基本的に変化しない。本発明の更なる別の実施形態において、結晶形Ａは異なる溶媒に溶解したが、磁気撹拌後でも結晶形転移は生じなかった。さらに、結晶形Ａは生体利用率においても遊離化合物と比較して大幅に向上した。
【0029】
２）塩酸塩の結晶形Ｂは、遊離化合物と比較して溶解度の点で予想外の有益な効果も達成した。例えば、本発明の一実施形態において、結晶形Ｂは遊離化合物よりも水への溶解度が１０００倍向上した。
【0030】
２．本発明の塩酸塩の結晶形Ａは塩酸塩の結晶形Ｂよりも物理的及び化学的特性に優れている。
吸湿性について、塩酸塩の結晶形Ａは２５oＣ／８０％ＲＨでの水分吸着率がただ０．３６％であることから、結晶形Ａは吸湿性がわずかであり、結晶形Ｂよりも優れていることが示される。溶解度について、塩酸塩の結晶形Ａは水中及び塩酸中の溶解度がいずれも結晶形Ｂよりも優れており、例えば、水及びｐＨ値が１．０の塩酸溶液中には、塩酸塩結晶形Ａの溶解度が塩酸塩結晶形Ｂの溶解度の１０倍以上である。しかし、安定性について、溶解度のより良い塩酸塩結晶形Ａは、かえってより良い安定性を有する。例えば、本発明の一実施形態において、結晶形Ａは加速及び安定条件下で結晶形を維持していたが、結晶形Ｂは室温で２日以内に結晶形Ａに転移し始めた。安定性について、塩酸塩の結晶形Ａは長期２５℃／６０％ＲＨ及び加速４０℃／７５％ＲＨ条件下で１週間放置された後、純度がほとんど変化せず、化学的安定性が良好であり、サンプルの結晶形の変化が観察されなかった。塩酸塩の結晶形ＡはＲＴ－７５％ＲＨ及びＲＴ－９７％ＲＨ条件下で１週間放置された後、サンプルの結晶形の変化が観察されなかった。また、塩酸塩の結晶形Ａは研磨された後にその結晶形が維持されていた。また、加速（４０℃±２℃、７５％ＲＨ±１０％ＲＨ、６ヶ月）条件では、結晶形Ａは結晶形Ｂより総不純物の含有量が大幅に低く、結晶形Ａの安定性が結晶形Ｂの方よりも優れている。
吸湿性について、塩酸塩の結晶形Ａは２５oＣ／８０％ＲＨでの水分吸着率がただ０．３６％であることから、結晶形Ａは吸湿性がわずかであり、結晶形Ｂよりも優れていることが示される。溶解度について、塩酸塩の結晶形Ａは水中及び塩酸中の溶解度がいずれも結晶形Ｂよりも優れており、例えば、水及びｐＨ値が１．０の塩酸溶液中には、塩酸塩結晶形Ａの溶解度が塩酸塩結晶形Ｂの溶解度の１０倍以上である。しかし、安定性について、溶解度のより良い塩酸塩結晶形Ａは、かえってより良い安定性を有する。例えば、本発明の一実施形態において、結晶形Ａは加速及び安定条件下で結晶形を維持していたが、結晶形Ｂは室温で２日以内に結晶形Ａに転移し始めた。安定性について、塩酸塩の結晶形Ａは長期２５℃／６０％ＲＨ及び加速４０℃／７５％ＲＨ条件下で１週間放置された後、純度がほとんど変化せず、化学的安定性が良好であり、サンプルの結晶形の変化が観察されなかった。塩酸塩の結晶形ＡはＲＴ－７５％ＲＨ及びＲＴ－９７％ＲＨ条件下で１週間放置された後、サンプルの結晶形の変化が観察されなかった。また、塩酸塩の結晶形Ａは研磨された後にその結晶形が維持されていた。また、加速（４０℃±２℃、７５％ＲＨ±１０％ＲＨ、６ヶ月）条件では、結晶形Ａは結晶形Ｂより総不純物の含有量が大幅に低く、結晶形Ａの安定性が結晶形Ｂの方よりも優れている。
【0031】
また、本発明の別の目的の１つは、溶解度および安定性の両方においてその化合物よりも大幅に向上した、化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンの複数の薬学的に許容される塩を提供することである。
本発明の別の目的は、上記化合物の塩の製造方法及び用途を提供することである。
これに対して、本発明の具体的な技術案は次の通りである。
本発明の別の目的は、上記化合物の塩の製造方法及び用途を提供することである。
これに対して、本発明の具体的な技術案は次の通りである。
【0032】
本発明の１つ又は複数の実施形態において、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンメタンスルホン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンエタンスルホン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン－ｐ－トルエンスルホン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンフマル酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンマレイン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン酒石酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン臭化水素酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンシュウ酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンリン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン硫酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン酢酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンプロピオン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン過塩素酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンリンゴ酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンサリチル酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンマンデル酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン乳酸塩、及び２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンコハク酸塩などが提供される。
【0033】
１つ又は複数の実施形態においては、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩が提供される。
【0034】
１つ又は複数の実施形態において、前記塩酸塩中の２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと塩酸とのモル比は、約１：（０．５～２）であり、例えば１：１、１：２である。
【0035】
本発明の前記塩において、化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと酸とのモル比は、以下に例示されるように、許容可能な範囲内で適切に変動する。
１つ又は複数の実施形態において、前記２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと酸とのモル比は、１：（２±０．４）とされてもよく、例えば、１：（２±０．３）、１：（２±０．２）、１：（２±０．１）、又は１：２とされる。前記酸は、塩酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、臭化水素酸、シュウ酸、リン酸、硫酸、酢酸、プロピオン酸、過塩素酸、リンゴ酸、サリチル酸、マンデル酸、乳酸、及びコハク酸から任意に選択される。
１つ又は複数の実施形態において、前記２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと酸とのモル比は、１：（２±０．４）とされてもよく、例えば、１：（２±０．３）、１：（２±０．２）、１：（２±０．１）、又は１：２とされる。前記酸は、塩酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、臭化水素酸、シュウ酸、リン酸、硫酸、酢酸、プロピオン酸、過塩素酸、リンゴ酸、サリチル酸、マンデル酸、乳酸、及びコハク酸から任意に選択される。
【0036】
１つ又は複数の実施形態において、前記２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと酸とのモル比は、１：（１±０．２）とされてもよく、例えば１：（１±０．１５）、１：（１±０．１）、１：（１±０．０５）、又は１：１とされる。前記酸は、塩酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、臭化水素酸、シュウ酸、リン酸、硫酸、酢酸、プロピオン酸、過塩素酸、リンゴ酸、サリチル酸、マンデル酸、乳酸、及びコハク酸から任意に選択される。
【0037】
１つ又は複数の実施形態において、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと酸を反応させて塩を得ることを含む２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンの塩の製造方法が提供される。
好ましくは、前記反応は水及び／又は有機溶媒中で行われる。前記溶媒は炭素数２～６のケトン類、酢酸エチル、低級脂肪アルコール、及びテトラヒドロフランから任意に選択された１種又は１種以上の混合物である。前記低級脂肪アルコールは１～８個の炭素原子を含むアルコール類を指す。
さらに、前記炭素数２～６のケトン類は、アセトンであることが好ましい。
よりさらに、前記低級脂肪アルコールは、メタノール、エタノール、プロパノール、及びイソプロパノールから任意に選択される。
好ましくは、前記反応は、アセトン、メタノール、及びエタノールのうちの１種の溶媒又は１種以上の混合溶媒中で行われる。
好ましくは、前記酸は、塩酸、ＨＣｌ、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、及び酒石酸から任意に選択された１種であり、より好ましくは塩酸である。なお、前記塩酸は、ＨＣｌの水溶液を指し、ＨＣｌはＨＣｌガスを指す。
好ましくは、前記反応は水及び／又は有機溶媒中で行われる。前記溶媒は炭素数２～６のケトン類、酢酸エチル、低級脂肪アルコール、及びテトラヒドロフランから任意に選択された１種又は１種以上の混合物である。前記低級脂肪アルコールは１～８個の炭素原子を含むアルコール類を指す。
さらに、前記炭素数２～６のケトン類は、アセトンであることが好ましい。
よりさらに、前記低級脂肪アルコールは、メタノール、エタノール、プロパノール、及びイソプロパノールから任意に選択される。
好ましくは、前記反応は、アセトン、メタノール、及びエタノールのうちの１種の溶媒又は１種以上の混合溶媒中で行われる。
好ましくは、前記酸は、塩酸、ＨＣｌ、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、及び酒石酸から任意に選択された１種であり、より好ましくは塩酸である。なお、前記塩酸は、ＨＣｌの水溶液を指し、ＨＣｌはＨＣｌガスを指す。
【0038】
１つ又は複数の実施形態において、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと塩酸をアセトン、又はエタノール、又はイソプロパノール、又はテトラヒドロフラン中で反応させ、攪拌し、濾過することにより塩酸塩が得られることを含む２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の製造方法が提供される。
【0039】
１つ又は複数の実施形態においては、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンの塩と１つ又は複数の薬学的に許容される担体及び／又は希釈剤とを含む医薬組成物が提供される。好ましくは、前記塩は塩酸塩である。
【0040】
１つ又は複数の実施形態においては、がん、臓器損傷及び変性疾患の予防及び／又は治療のための薬剤の製造における、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンの塩、又は２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンの塩を含む医薬組成物の使用が提供される。
【0041】
１つ又は複数の実施形態においては、がん、神経変性疾患、心血管疾患・脳血管疾患、免疫関連疾患、肝腎不全、炎症、代謝性疾患の予防及び／又は治療のための薬剤の製造における、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンの塩、又は２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンの塩を含む医薬組成物の使用が提供される。
【0042】
１つ又は複数の実施形態において、前記疾患は、がん、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中、虚血再灌流傷害、免疫関連疾患、肝腎不全、炎症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病、又は糖尿病の合併症である。
【0043】
１つ又は複数の実施形態において、前記脳卒中は出血性脳卒中及び／又は虚血性脳卒中である。なお、前記虚血性脳卒中は脳梗塞、脳梗死とも呼ばれる。
【0044】
本発明では、従来技術と比較して、以下の有益な効果が得られる。
１．２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンは、塩酸塩にされた後、溶解度、安定性及び吸湿性がいずれも改善された。
塩酸塩は遊離化合物よりも溶解度が、大幅に向上する。例えば、本発明の一実施形態において、塩酸塩は、遊離化合物よりも水への溶解度が約７７００倍向上し、さらに、クエン酸塩などの他の塩も、遊離化合物よりも溶解度が大幅に向上する。塩酸塩は遊離化合物よりも安定性が大きく向上する。例えば、本発明の一実施形態において、塩酸塩は、遊離化合物よりも高温、高湿、光照射条件下での安定性が優れており、総不純物の含有量が明らかに低い。さらに、塩酸塩は遊離化合物よりも吸湿性も低い。
１．２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンは、塩酸塩にされた後、溶解度、安定性及び吸湿性がいずれも改善された。
塩酸塩は遊離化合物よりも溶解度が、大幅に向上する。例えば、本発明の一実施形態において、塩酸塩は、遊離化合物よりも水への溶解度が約７７００倍向上し、さらに、クエン酸塩などの他の塩も、遊離化合物よりも溶解度が大幅に向上する。塩酸塩は遊離化合物よりも安定性が大きく向上する。例えば、本発明の一実施形態において、塩酸塩は、遊離化合物よりも高温、高湿、光照射条件下での安定性が優れており、総不純物の含有量が明らかに低い。さらに、塩酸塩は遊離化合物よりも吸湿性も低い。
【0045】
２．２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩は、他の塩よりも性能が大幅に改善される。
溶解度について、塩酸塩は他の塩よりも溶解性能が優れている。例えば、本発明の一実施形態において、塩酸塩は溶解度の良いクエン酸塩に比べでも、溶解度が７倍向上し、マレイン酸塩及びフマル酸塩に比べて３５倍以上向上する。安定性について、塩酸塩は他の塩よりも良い効果を有する。例えば、本発明の一実施形態において、塩酸塩は、他の塩よりも高温、高湿、光照射条件下での安定性が高く、総不純物の含有量が他の塩よりも明らかに低い。別の実施形態において、塩酸塩はｐＨ１．０の塩酸溶液中に溶液の色が変化しなかったことに対して、クエン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩などの他の塩は明らかに変化したから、塩酸塩の安定性がより優れていることが示される。吸湿性についても、塩酸塩は他の塩よりも吸湿性が低い。さらに、塩酸塩は製造過程中に良好に固形化できるが、メタンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩などの他の塩は粘着ペースト状になる。
溶解度について、塩酸塩は他の塩よりも溶解性能が優れている。例えば、本発明の一実施形態において、塩酸塩は溶解度の良いクエン酸塩に比べでも、溶解度が７倍向上し、マレイン酸塩及びフマル酸塩に比べて３５倍以上向上する。安定性について、塩酸塩は他の塩よりも良い効果を有する。例えば、本発明の一実施形態において、塩酸塩は、他の塩よりも高温、高湿、光照射条件下での安定性が高く、総不純物の含有量が他の塩よりも明らかに低い。別の実施形態において、塩酸塩はｐＨ１．０の塩酸溶液中に溶液の色が変化しなかったことに対して、クエン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩などの他の塩は明らかに変化したから、塩酸塩の安定性がより優れていることが示される。吸湿性についても、塩酸塩は他の塩よりも吸湿性が低い。さらに、塩酸塩は製造過程中に良好に固形化できるが、メタンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩などの他の塩は粘着ペースト状になる。
【図面の簡単な説明】
【0046】
【発明を実施するための形態】
【0047】
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン（遊離状態）の具体的な合成方法については、国際出願ＷＯ２０１９２０５８５４Ａ１の製造方法を参照のこと。
【0048】
実施例１：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａの製造方法１
【化1】
【0049】
５０Ｌ反応釜に窒素を導入して反応釜内のガスを置換し、次いで窒素雰囲気条件下で反応釜に１．７０Ｋｇの２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン（遊離状態）及び１７．７８Ｋｇのメタノールを加え、攪拌を開始し、２５±５℃条件下で反応釜に０．４１Ｋｇの濃塩酸（質量分率３６％）と０．８２Ｋｇのメタノールとの混合溶液を滴下し、約１時間程度で滴下が完了した。滴下終了後、反応混合液を２５±５℃条件下で２～４時間保温攪拌しながら晶析し、次いで反応混合液を濾過し、濾過ケーキを１．５０Ｋｇのメタノールで洗浄し、濾過ケーキを４０℃～５０℃の真空条件下（圧力－０．０８ＭＰａ～－０．１０ＭＰａ）で１２～１６時間熱乾燥し、合計１．６４Ｋｇの２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを収集した。結晶収率が８８．３％であった。ＸＲＰＤ検出により結晶形Ａであった（ＸＲＰＤパターンを図１に示す）。
【0050】
製造した結晶形Ａは、純度が９９．７６％であり、最大単一不純物の含有量が０．０６８％であり、総不純物及び単一不純物が国家薬品監督管理局によって発行された「化学薬物中の不純物研究に関する技術ガイドライン」及びＩＣＨＱ３Ａによって規定された管理限界≦０．１５％（この製品の１日の最大投与量≦２グラム／日）より小さかった（図４に示す純度検出パターンにおいては、ＤＡ４１４という名前の主ピークは２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａである）。
【0051】
核磁気データ:1H NMR (400 MHz, DMSO) δ=11.27 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 7.09 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.92 (m, 4H), 6.80 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.71 (t, J = 8.6 Hz, 2H), 6.64 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.60 (d, J = 73.7 Hz, 2H), 3.39 (s, 2H), 3.16 (d, J = 9.1 Hz, 4H), 2.77 (s, 3H), 1.45 (d, J = 7.2 Hz, 3H),(1H NMRパターンを図５に示す）。
【0052】
実施例２：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａの製造方法２
【化2】
【0053】
５０Ｌ反応釜に窒素を導入して反応釜内のガスを置換し、次いで窒素雰囲気条件下で反応釜に１．５０Ｋｇの２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン（遊離状態）、７．１１Ｋｇのアセトン及び１．５０Ｋｇの水を加え、攪拌を開始し、２５±５℃条件下で反応釜に０．４１Ｋｇの濃塩酸（質量分率３６％）と０．６８Ｋｇのアセトン及び０．１５Ｋｇの水との混合溶液を滴下し、約１時間程度で滴下が完了した。滴下終了後、反応混合液を２５±５℃条件下で２～４時間保温攪拌しながらて晶析し、次いで反応混合液を濾過し、濾過ケーキを１．５０Ｋｇのアセトンで洗浄し、濾過ケーキを４０℃～５０℃の真空条件下で（圧力－０．０８ＭＰａ～－０．１０ＭＰａ）で１２～１６時間熱乾燥し、合計１．３０Ｋｇの２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを収集した。結晶収率が７９．５％であった。ＸＲＰＤ検出により結晶形Ａであった（ＸＲＰＤパターンを図２に示す）。
【0054】
実施例３：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ｂの製造方法
約５ｍｇの２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを秤量し、そこに０．２ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを加え、超音波溶解させ、溶液を５ｍＬバイアルに濾過し、スターラーを加えた。室温での攪拌条件下で、４ｍＬの酢酸エチルを滴下し、大量の沈殿物が析出し、濾過し、濾過ケーキを室温で一晩真空乾燥させた。ＸＲＰＤ検出により結晶形Ｂであった（結晶形ＢのＸＲＰＤパターンを図３に示す）。
約５ｍｇの２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを秤量し、そこに０．２ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを加え、超音波溶解させ、溶液を５ｍＬバイアルに濾過し、スターラーを加えた。室温での攪拌条件下で、４ｍＬの酢酸エチルを滴下し、大量の沈殿物が析出し、濾過し、濾過ケーキを室温で一晩真空乾燥させた。ＸＲＰＤ検出により結晶形Ｂであった（結晶形ＢのＸＲＰＤパターンを図３に示す）。
【0055】
実施例４：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形ＡのＸＲＰＤ測定
「中国薬局方」（２０２０版）--第４部--総則０４５１--Ｘ線回折法--第２法--粉末Ｘ線回折法に従って測定を行った。
「中国薬局方」（２０２０版）--第４部--総則０４５１--Ｘ線回折法--第２法--粉末Ｘ線回折法に従って測定を行った。
【0056】
【表1】
【0057】
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩結晶形のＸＲＰＤパターンを図１に示し、ＸＲＰＤデータを表２に示す。該結晶形は結晶形Ａと命名された。
【0058】
【表2】
【0059】
実施例５：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形ＢのＸＲＰＤ測定
「中国薬局方」（２０２０版）--第４部--総則０４５１--Ｘ線回折法--第２法--粉末Ｘ線回折法に従って測定を行った。
「中国薬局方」（２０２０版）--第４部--総則０４５１--Ｘ線回折法--第２法--粉末Ｘ線回折法に従って測定を行った。
【0060】
【表3】
【0061】
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩結晶形のＸＲＰＤパターンを図３に示し、ＸＲＰＤデータを表４に示す。該結晶形は結晶形Ｂと命名された。
【0062】
【表4】
【0063】
実施例６：結晶形ＡのＴＧＡ測定
【表5】
【0064】
結晶形ＡのＴＧＡ検出パターンを図６に示す。
ＴＧＡ測定の結果、結晶形Ａは１２０℃に加熱した場合、サンプルの重量が約０．１５８６％減少したから、結晶形Ａが無水物であったことが示される。
ＴＧＡ測定の結果、結晶形Ａは１２０℃に加熱した場合、サンプルの重量が約０．１５８６％減少したから、結晶形Ａが無水物であったことが示される。
【0065】
実施例７：結晶形ＡのＤＳＣ測定
【表6】
【0066】
結晶形ＡのＤＳＣ検出パターンを図７に示す。
ＤＳＣパターンにより、結晶形Ａは単一の吸熱ピークを有し、融点が約２６５．３１°Ｃであることが示された。この結果は、結晶形Ａが良好な熱安定性を有することを示した。
ＤＳＣパターンにより、結晶形Ａは単一の吸熱ピークを有し、融点が約２６５．３１°Ｃであることが示された。この結果は、結晶形Ａが良好な熱安定性を有することを示した。
【0067】
実施例８：結晶形Ａのイオンクロマトグラフィー（ＩＣ）
【表7】
【0068】
イオンクロマトグラフィー（ＩＣ）測定の結果により、塩形成比が１：１であったから、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンとＨＣｌが１：１で結合していることが示された。
【0069】
実施例９：結晶形Ａの他の製造方法
（１）揮発結晶化法
実験操作：出発物質２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約１０ｍｇずつに秤量して５ｍＬのバイアルに入れ、それぞれ一定体積の表８の混合溶媒を加えて溶解させ、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して別の５ｍＬバイアルに濾過し、様々な温度で揮発するために蓋が開いたままに放置した。得られた固体を収集してＸＲＰＤ測定に供した。表８に示す測定の結果により、塩酸塩結晶形Ａの製品が得られた。
（１）揮発結晶化法
実験操作：出発物質２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約１０ｍｇずつに秤量して５ｍＬのバイアルに入れ、それぞれ一定体積の表８の混合溶媒を加えて溶解させ、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して別の５ｍＬバイアルに濾過し、様々な温度で揮発するために蓋が開いたままに放置した。得られた固体を収集してＸＲＰＤ測定に供した。表８に示す測定の結果により、塩酸塩結晶形Ａの製品が得られた。
【0070】
【表8】
【0071】
（２）貧溶媒添加法
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約５ｍｇずつに秤量して５ｍＬのバイアルに加え、それぞれ表９における対応する第１溶媒で固体を完全に溶解させ、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して別の５ｍＬバイアルに濾過した。固体が析出するまで該清澄溶液に攪拌しながら表９中の第２溶媒を滴下した。なお、溶媒の総体積を５ｍＬに加えても固体が析出しない場合、５℃で磁気撹拌に移し、一晩攪拌した後、まだ清澄なサンプルであったら、室温に移して揮発又は回転乾燥する。遠心分離して固体を収集し、ＸＲＰＤ測定に供した。表９に示す測定の結果により、塩酸塩結晶形Ａの製品が得られた。
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約５ｍｇずつに秤量して５ｍＬのバイアルに加え、それぞれ表９における対応する第１溶媒で固体を完全に溶解させ、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して別の５ｍＬバイアルに濾過した。固体が析出するまで該清澄溶液に攪拌しながら表９中の第２溶媒を滴下した。なお、溶媒の総体積を５ｍＬに加えても固体が析出しない場合、５℃で磁気撹拌に移し、一晩攪拌した後、まだ清澄なサンプルであったら、室温に移して揮発又は回転乾燥する。遠心分離して固体を収集し、ＸＲＰＤ測定に供した。表９に示す測定の結果により、塩酸塩結晶形Ａの製品が得られた。
【0072】
【表9】
【0073】
（３）アンチ貧溶媒添加法
出発物質２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約５ｍｇずつに秤量して５ｍＬのバイアルに加え、それぞれ表１０中の対応する第１溶媒で固体を完全に溶解させ、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して別の５ｍＬバイアルに濾過した。攪拌条件下で、該清澄溶液を表１０中の第２溶媒に滴下した。第２溶媒の体積は３ｍＬにした。固体が析出しない場合、５℃で磁気撹拌に移し、一晩攪拌した後、まだ清澄なサンプルを室温に移して揮発又は回転乾燥した。遠心分離して固体を収集し、ＸＲＰＤ測定に供した。表１０に示す測定の結果により、塩酸塩の結晶形Ａのみが得られた。
出発物質２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約５ｍｇずつに秤量して５ｍＬのバイアルに加え、それぞれ表１０中の対応する第１溶媒で固体を完全に溶解させ、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して別の５ｍＬバイアルに濾過した。攪拌条件下で、該清澄溶液を表１０中の第２溶媒に滴下した。第２溶媒の体積は３ｍＬにした。固体が析出しない場合、５℃で磁気撹拌に移し、一晩攪拌した後、まだ清澄なサンプルを室温に移して揮発又は回転乾燥した。遠心分離して固体を収集し、ＸＲＰＤ測定に供した。表１０に示す測定の結果により、塩酸塩の結晶形Ａのみが得られた。
【0074】
【表10】
【0075】
（４）冷却結晶化法
出発物質２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約１０ｍｇずつに秤量して５ｍＬのバイアルに加え、それぞれ一定体積の表１１中の対応する単一溶媒又は混合溶媒を加え、５０℃超音波条件下で溶解した後、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して別の５ｍＬバイアルに濾過した。該清澄濾液を生化学インキュベーターに入れ、５０℃条件下で１２０ｍｉｎ恒温にし、さらに０．１℃／ｍｉｎの速度で５℃まで冷却し、温度変化中に攪拌を続けた。固体が析出した場合、遠心分離して固体を収集し、ＸＲＰＤ測定に供した。測定の結果を表１１に示す。
出発物質２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約１０ｍｇずつに秤量して５ｍＬのバイアルに加え、それぞれ一定体積の表１１中の対応する単一溶媒又は混合溶媒を加え、５０℃超音波条件下で溶解した後、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して別の５ｍＬバイアルに濾過した。該清澄濾液を生化学インキュベーターに入れ、５０℃条件下で１２０ｍｉｎ恒温にし、さらに０．１℃／ｍｉｎの速度で５℃まで冷却し、温度変化中に攪拌を続けた。固体が析出した場合、遠心分離して固体を収集し、ＸＲＰＤ測定に供した。測定の結果を表１１に示す。
【0076】
【表11】
【0077】
（５）気液拡散法
出発物質２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約１０ｍｇずつに秤量して５ｍＬバイアルに入れ、それぞれ一定体積の表１２中の第１溶媒（単一溶媒又は混合溶媒）を加えて溶解させ、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して別の５ｍＬバイアルに濾過し、さらに２０ｍＬのバイアルを取ってそこに約３ｍＬの第２溶媒を加え、清澄溶液が入った５ｍＬバイアルを蓋が開いたまま２０ｍＬバイアルに置いた後、密封して室温で約１週間静置した。得られた固体を収集してＸＲＰＤ測定に供した。測定の結果を表１２に示す。
出発物質２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約１０ｍｇずつに秤量して５ｍＬバイアルに入れ、それぞれ一定体積の表１２中の第１溶媒（単一溶媒又は混合溶媒）を加えて溶解させ、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して別の５ｍＬバイアルに濾過し、さらに２０ｍＬのバイアルを取ってそこに約３ｍＬの第２溶媒を加え、清澄溶液が入った５ｍＬバイアルを蓋が開いたまま２０ｍＬバイアルに置いた後、密封して室温で約１週間静置した。得られた固体を収集してＸＲＰＤ測定に供した。測定の結果を表１２に示す。
【0078】
【表12】
【0079】
（６）高分子誘導法
出発物質２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約１０ｍｇずつに秤量して５ｍＬバイアルに入れ、それぞれ一定体積の混合溶媒を加えて溶解し（０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して濾過し）、１～２ｍｇのポリマーを加え、バイアルをその上に穴を開けたシーリングフィルムで密封し、、室温に置いてゆっくりと揮発させた。表１３に示す測定の結果により、塩酸塩結晶形Ａの製品が得られた。
出発物質２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約１０ｍｇずつに秤量して５ｍＬバイアルに入れ、それぞれ一定体積の混合溶媒を加えて溶解し（０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して濾過し）、１～２ｍｇのポリマーを加え、バイアルをその上に穴を開けたシーリングフィルムで密封し、、室温に置いてゆっくりと揮発させた。表１３に示す測定の結果により、塩酸塩結晶形Ａの製品が得られた。
【表13】
【0080】
ＸＲＰＤ結果は、実施例９で製造したサンプル結晶形がすべて結晶形Ａであることが示した（ＸＲＰＤパターンは示されていない）。
【0081】
実施例１０：結晶形Ｂの他の製造方法
（１）貧溶媒添加法
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約５ｍｇずつに秤量して５ｍＬのバイアルに加え、それぞれ表１４中の対応する第１溶媒で固体を完全に溶解させ、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して別の５ｍＬバイアルに濾過した。固体が析出するまで該清澄溶液に攪拌しながら表１４中の第２溶媒を滴下した。遠心分離して固体を収集し、ＸＲＰＤ測定に供した。表１４に示す測定の結果により、塩酸塩結晶形Ｂの製品が得られた。
（１）貧溶媒添加法
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約５ｍｇずつに秤量して５ｍＬのバイアルに加え、それぞれ表１４中の対応する第１溶媒で固体を完全に溶解させ、０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して別の５ｍＬバイアルに濾過した。固体が析出するまで該清澄溶液に攪拌しながら表１４中の第２溶媒を滴下した。遠心分離して固体を収集し、ＸＲＰＤ測定に供した。表１４に示す測定の結果により、塩酸塩結晶形Ｂの製品が得られた。
【0082】
【表14】
【0083】
（２）高分子誘導法
出発物質２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約１０ｍｇずつに秤量して５ｍＬバイアルに入れ、それぞれ一定体積の混合溶媒を加えて溶解し（０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して濾過し）、１～２ｍｇのポリマーを加え、バイアルをその上に穴を開けたシーリングフィルムで密封し、室温に置いてゆっくりと揮発させた。表１５に示す測定の結果により、塩酸塩の結晶形Ｂ製品を得た。
出発物質２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約１０ｍｇずつに秤量して５ｍＬバイアルに入れ、それぞれ一定体積の混合溶媒を加えて溶解し（０．４５μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して濾過し）、１～２ｍｇのポリマーを加え、バイアルをその上に穴を開けたシーリングフィルムで密封し、室温に置いてゆっくりと揮発させた。表１５に示す測定の結果により、塩酸塩の結晶形Ｂ製品を得た。
【0084】
【表15】
【0085】
ＸＲＰＤ結果は、実施例１０で製造したサンプル結晶形がすべて結晶形Ｂであることを示した（ＸＲＰＤパターンは示されていない）。
【0086】
実施例１１：吸湿性研究
動的水蒸気収着法（ＤＶＳ）により吸湿性を評価した結果、塩酸塩の結晶形Ａは２５oＣ／８０％ＲＨでの水分吸着率が約０．３６％であったから、結晶形Ａは吸湿性をわずかに有し、吸湿性実験の前後で結晶形は変化しなかったことが示された。
動的水蒸気収着法（ＤＶＳ）により吸湿性を評価した結果、塩酸塩の結晶形Ａは２５oＣ／８０％ＲＨでの水分吸着率が約０．３６％であったから、結晶形Ａは吸湿性をわずかに有し、吸湿性実験の前後で結晶形は変化しなかったことが示された。
【0087】
吸湿性研究の結果から、塩酸塩の結晶形Ａは塩酸塩の結晶形Ｂよりも吸湿性が低く、薬剤形成性がより優れていることが示された。
【0088】
実施例１２：溶解度比較研究
「中国薬局方」（２０２０版）の一般溶解度試験方法に従い、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン（遊離状態）、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａ、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ｂを秤量し、２５℃±２℃条件下で一定容量の溶媒に加え、５分ごとに３０秒間激しく振盪し、３０分以内の溶解を観察し、溶解度を測定した。
「中国薬局方」（２０２０版）の一般溶解度試験方法に従い、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン（遊離状態）、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａ、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ｂを秤量し、２５℃±２℃条件下で一定容量の溶媒に加え、５分ごとに３０秒間激しく振盪し、３０分以内の溶解を観察し、溶解度を測定した。
【0089】
【表16】
【0090】
ここで、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩は実施例１７の方法１により得られた。
【0091】
その結果、水溶液系においては、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａの溶解度が２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン（遊離状態）、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩、及び２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ｂの溶解度よりも明らかに優れた。ｐＨ１．０の塩酸溶液（ほぼ人間の胃液のｐＨ）系においては、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａの溶解度が２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン（遊離状態）、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩、及び２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ｂよりも明らかに優れた。これらの結果から、結晶形Ａは物理的及び化学的特性がより優れ、薬剤形成性がより良いことが示された。２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ｂは、遊離状態よりも水中の溶解度が１０００倍優れており、予想外の効果が得られた。
【0092】
また、発明者は研究中で、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンの他の塩形、例えばクエン酸塩、フマル酸塩及びマレイン酸塩を晶析させて得られた結晶形は、それらの塩形と比較して、水中及びｐＨ１．０の塩酸溶液中の溶解度がほぼ同じであり、大幅に改善されなかったことを発見した。
【0093】
実施例１３：結晶形の安定性試験
（１）結晶形Ａの安定性実験
実験１：温度、湿度に対する安定性実験
（１）結晶形Ａの安定性実験
実験１：温度、湿度に対する安定性実験
【0094】
試験操作１：塩酸塩の結晶形Ａサンプルをそれぞれ長期２５℃／６０％ＲＨ及び加速４０℃／７５％ＲＨの条件下で１週間放置し、結晶形の変化を試験した結果、塩酸塩の結晶形Ａサンプルは２つの試験条件下で１週間放置された後、純度が基本的に変化せず、化学的安定性が良好で、サンプルの結晶形の変化が観察されなかった。サンプル安定性の放置前後のＸＲＰＤ比較図を図８に示す。
【0095】
試験操作２：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを５ｍＬバイアルに約１０ｍｇ秤量し、５ｍＬバイアルを蓋が開いたままに恒湿器内に置いたら、恒湿器を密封した。室温で約１週間静置した後、固体を収集してＸＲＰＤ測定に供したところ、サンプルの結晶形の変化は観察されなかった。測定の結果を表１７に示す。
【0096】
【表17】
【0097】
実験２：機械的安定性の実験
約１０ｍｇの２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを乳鉢に秤量し、０．０５ｍＬの湿潤剤を３回に分けて加えて研磨し、毎回５ｍｉｎ研磨し、固体を収集して試験ＸＲＰＤに供したところ、サンプル結晶形は変化しなかった。測定の結果を表１８に示す。
約１０ｍｇの２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを乳鉢に秤量し、０．０５ｍＬの湿潤剤を３回に分けて加えて研磨し、毎回５ｍｉｎ研磨し、固体を収集して試験ＸＲＰＤに供したところ、サンプル結晶形は変化しなかった。測定の結果を表１８に示す。
【0098】
【表18】
【0099】
実験３：その他の安定性実験
試験操作１：約１０ｍｇの２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを５ｍＬバイアルに秤量し、それぞれ１ｍＬの表１９に列挙された単一溶媒又は混合溶媒を加え、得られた懸濁液を５℃で約３日間磁気撹拌した後、遠心分離して固体を収集し、ＸＲＰＤ測定に供したところ、サンプルの結晶形転移が起こらなかった。測定の結果を表１９に示す。
試験操作１：約１０ｍｇの２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを５ｍＬバイアルに秤量し、それぞれ１ｍＬの表１９に列挙された単一溶媒又は混合溶媒を加え、得られた懸濁液を５℃で約３日間磁気撹拌した後、遠心分離して固体を収集し、ＸＲＰＤ測定に供したところ、サンプルの結晶形転移が起こらなかった。測定の結果を表１９に示す。
【0100】
【表19】
【0101】
試験操作２：出発物質２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約１０ｍｇずつに各５ｍＬバイアルに秤量し、それぞれ０．５ｍＬの表２０に列挙された単一溶媒又は混合溶媒を加え、懸濁液を得た。懸濁液を室温で約３日間磁気撹拌した後、遠心分離して固体を収集し、ＸＲＰＤ測定に供したところ、サンプルの結晶形転移が起こらなかった。測定の結果を表２０に示す。
【0102】
【表20】
【0103】
試験操作３：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａを約１０ｍｇずつに各５ｍＬバイアルに秤量し、それぞれ０．５ｍＬの表２１に列挙された単一溶媒又は混合溶媒を加え、得られた懸濁液を５０℃で約３日間磁気撹拌した後、遠心分離して固体を収集し、ＸＲＰＤ測定に供したところ、サンプルの結晶形転移が起こらなかった。測定の結果を表２１に示す。
【0104】
【表21】
【0105】
（２）結晶形Ｂの安定性試験
試験操作：一定量の塩酸塩の結晶形Ｂサンプルをサンプル瓶に秤量し、次いでサンプル瓶をそれぞれ室温で密閉したまま２日間及び５日間に放置した後、サンプル瓶内のサンプルを一定量取ってＸＲＰＤ測定に供した。測定の結果、塩酸塩の結晶形Ｂサンプルが室温で密閉したまま２日間放置された後に塩酸塩の結晶形Ａに転移して始め、５日間放置された後に結晶形Ｂが部分的に塩酸塩の結晶形Ａに転移したことから、塩酸塩の結晶形Ｂが不安定な結晶形であることが示された。結晶形Ｂの安定性研究から得られたＸＲＰＤパターンを図９に示す。結晶形Ａは結晶形Ｂよりも結晶形安定性に優れていることが分かった。
試験操作：一定量の塩酸塩の結晶形Ｂサンプルをサンプル瓶に秤量し、次いでサンプル瓶をそれぞれ室温で密閉したまま２日間及び５日間に放置した後、サンプル瓶内のサンプルを一定量取ってＸＲＰＤ測定に供した。測定の結果、塩酸塩の結晶形Ｂサンプルが室温で密閉したまま２日間放置された後に塩酸塩の結晶形Ａに転移して始め、５日間放置された後に結晶形Ｂが部分的に塩酸塩の結晶形Ａに転移したことから、塩酸塩の結晶形Ｂが不安定な結晶形であることが示された。結晶形Ｂの安定性研究から得られたＸＲＰＤパターンを図９に示す。結晶形Ａは結晶形Ｂよりも結晶形安定性に優れていることが分かった。
【0106】
また、結晶形Ａは圧縮性、流動性などの特性が良好であり、その比表面積、嵩密度、空隙率及び粒径などの特性が医薬品製剤の開発や製造に非常に適している。一方、結晶形Ｂはこれらの特徴を有しない。
【0107】
さらに、塩酸塩の結晶形Ａ及び塩酸塩の結晶形Ｂに対して影響因子試験研究を行ったところ、高温（温度６０℃）、高湿（２５℃／９０％±５％ＲＨ）、光照射（４５００１ｘ±５００１ｘ）の条件下で３０日間放置した場合、結晶形Ａは結晶形Ｂよりも安定性が優れており、不純物の生成量が低かったことを発見した。
【0108】
同時に、遊離化合物と比較して、塩酸塩の結晶形Ａは安定性に優れており、測定された総不純物の含有量がより低くかった。
【0109】
（３）結晶形Ａ及びＦｏｒｍＢの安定性の比較試験
中国薬局方２０２０版及びＩＣＨＱ１Ａ安定性研究ガイドラインに基づき、結晶形Ａ及びＦｏｒｍＢを加速（４０℃±２℃、７５％ＲＨ±１０％ＲＨ）条件下で６ヶ月置いており、結晶形Ａ及びＦｏｒｍＢの総不純物変化を検出した。結果を表２２に示す。表２２は様々な結晶形の安定性実験を示すものである。その結果、結晶形Ａは加速条件下で６ヶ月置いていた後、総不純物が０．２５％から０．４１％に増加したが、結晶形Ｂは加速条件下で６ヶ月置いていた後、総不純物が０．２８％から０．８８％に増加した。この結果は、結晶形Ｂの安定性が非常に悪く、結晶形Ａの安定性が結晶形Ｂの安定性よりも優れていることを示した。
中国薬局方２０２０版及びＩＣＨＱ１Ａ安定性研究ガイドラインに基づき、結晶形Ａ及びＦｏｒｍＢを加速（４０℃±２℃、７５％ＲＨ±１０％ＲＨ）条件下で６ヶ月置いており、結晶形Ａ及びＦｏｒｍＢの総不純物変化を検出した。結果を表２２に示す。表２２は様々な結晶形の安定性実験を示すものである。その結果、結晶形Ａは加速条件下で６ヶ月置いていた後、総不純物が０．２５％から０．４１％に増加したが、結晶形Ｂは加速条件下で６ヶ月置いていた後、総不純物が０．２８％から０．８８％に増加した。この結果は、結晶形Ｂの安定性が非常に悪く、結晶形Ａの安定性が結晶形Ｂの安定性よりも優れていることを示した。
【0110】
【表22】
【0111】
実施例１４：薬物動態の比較研究
実験方法：３匹の健康な雄ＳＤラットを選択し、一晩絶食させた後、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン（遊離状態）、又は２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａの懸濁液（溶媒：０．５％ＣＭＣ－Ｎａ）をそれぞれ１０ｍｇ／ｋｇで胃内投与した。投薬体積は１０ｍｌ／ｋｇにした。投与前及び投与後０．２５、０．５、１、２、４、８、１２、２４時間後にラット眼窩静脈叢から約２００μＬの全血約を採取し、ＥＤＴＡ－Ｋ２抗凝固剤を含む遠心管に入れ、その後３０００～４０００ｒｐｍ条件下で１０ｍｉｎ遠心分離し、上部の血漿をすべて別の清潔な遠心管に移し、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳの方法で血漿サンプル中の２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンの血中濃度を検出し、非コンパートメントモデルを使用して薬物動態パラメータを算出した。
実験方法：３匹の健康な雄ＳＤラットを選択し、一晩絶食させた後、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン（遊離状態）、又は２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａの懸濁液（溶媒：０．５％ＣＭＣ－Ｎａ）をそれぞれ１０ｍｇ／ｋｇで胃内投与した。投薬体積は１０ｍｌ／ｋｇにした。投与前及び投与後０．２５、０．５、１、２、４、８、１２、２４時間後にラット眼窩静脈叢から約２００μＬの全血約を採取し、ＥＤＴＡ－Ｋ２抗凝固剤を含む遠心管に入れ、その後３０００～４０００ｒｐｍ条件下で１０ｍｉｎ遠心分離し、上部の血漿をすべて別の清潔な遠心管に移し、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳの方法で血漿サンプル中の２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンの血中濃度を検出し、非コンパートメントモデルを使用して薬物動態パラメータを算出した。
【0112】
【表23】
【0113】
その結果、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａは、ラットへの経口投与後によく吸収され、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン（遊離状態）よりもその血液暴露量及び生体利用率が優れたことから、塩酸塩の結晶形Ａは遊離状態よりも薬剤形成性が大幅に向上することが示された。
【0114】
実施例１５：本発明の化合物のフェロトーシスへの阻害率に関する研究
実験方法：本実施例には、フェロトーシスの阻害剤を研究するために、以下のようにフェロトーシスのスクリーニングモデルを構築した。フェロトーシススクリーニングモデルには主にＣＣＫ８細胞生存能力検出法を採用した。まず、マウス海馬神経細胞ＨＴ２２及びヒト神経芽細胞腫ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞をディッシュ内で培養し、対数増殖期の細胞を特定の数（５０００個／ウェル）で１ウェルあたり８０μＬで９６ウェルプレートに播種し、その後３７℃、５％ＣＯ２環境のインキュベーター内で細胞が壁に接着しているように培養した。２４時間後、所定の培地で調製した様々な濃度の本発明の化合物１０μＬ及び最終濃度１０μＭのフェロトーシス誘導剤エラスチン１０μＬを加えた。なお、結果の正確性を保証するために、各化合物に対して３つの重複ウェルを設置した。そして、陽性対照群（上記と同様に、１０μＬの同じ培地で調製した一定濃度の化合物フェロステイン－１及び１０μＬのフェロトーシス誘導剤エラスチンを添加した）、ブランク対照群（上記で指定した等体積量の培地及び培地及び等体積量のＤＭＳＯを添加したが、細胞は含まなかった）、及び溶媒対照群（上記で指定した等体積量の培地及び培地と等体積量のＤＭＳＯを添加したが、細胞は含まなかった）を設置した。なお、結果の准確性を保証するため、各群にも３つの重複ウェルを設置した。薬剤を加えた後、インキュベーターに入れて２４時間培養した。各ウェルに１０μＬのＣＣＫ８溶液を加え、インキュベーターに入れて２～４時間培養を続けた後、マイクロプレートリーダーを使用して４５０ｎｍでの吸光度値を検出し、薬物のフェロトーシスへの阻害率を算出した。阻害率は、次の式を使用して算出した。
実験方法：本実施例には、フェロトーシスの阻害剤を研究するために、以下のようにフェロトーシスのスクリーニングモデルを構築した。フェロトーシススクリーニングモデルには主にＣＣＫ８細胞生存能力検出法を採用した。まず、マウス海馬神経細胞ＨＴ２２及びヒト神経芽細胞腫ＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞をディッシュ内で培養し、対数増殖期の細胞を特定の数（５０００個／ウェル）で１ウェルあたり８０μＬで９６ウェルプレートに播種し、その後３７℃、５％ＣＯ２環境のインキュベーター内で細胞が壁に接着しているように培養した。２４時間後、所定の培地で調製した様々な濃度の本発明の化合物１０μＬ及び最終濃度１０μＭのフェロトーシス誘導剤エラスチン１０μＬを加えた。なお、結果の正確性を保証するために、各化合物に対して３つの重複ウェルを設置した。そして、陽性対照群（上記と同様に、１０μＬの同じ培地で調製した一定濃度の化合物フェロステイン－１及び１０μＬのフェロトーシス誘導剤エラスチンを添加した）、ブランク対照群（上記で指定した等体積量の培地及び培地及び等体積量のＤＭＳＯを添加したが、細胞は含まなかった）、及び溶媒対照群（上記で指定した等体積量の培地及び培地と等体積量のＤＭＳＯを添加したが、細胞は含まなかった）を設置した。なお、結果の准確性を保証するため、各群にも３つの重複ウェルを設置した。薬剤を加えた後、インキュベーターに入れて２４時間培養した。各ウェルに１０μＬのＣＣＫ８溶液を加え、インキュベーターに入れて２～４時間培養を続けた後、マイクロプレートリーダーを使用して４５０ｎｍでの吸光度値を検出し、薬物のフェロトーシスへの阻害率を算出した。阻害率は、次の式を使用して算出した。
【0115】
阻害率％（ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅ，ＩＲ）＝［１－（Ａ実験群－Ａブランク）／（Ａ溶媒－Ａブランク）］×１００％
ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ６ソフトを使用し、阻害率変化曲線を当てはめ、ＩＣ５０を算出した。
ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ６ソフトを使用し、阻害率変化曲線を当てはめ、ＩＣ５０を算出した。
【0116】
実験結果：
【表24】
【0117】
表２４に示す測定の結果から、本発明の化合物２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の結晶形Ａは、複数の細胞系においてフェロトーシスに対する阻害効果を有し、阻害活性が陽性対照群フェロステイン－１よりも大幅に優れていることが分かった。
【0118】
実施例１６：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンの製造
【化3】
【0119】
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンの具体的な合成方法については、国際出願ＷＯ２０１９２０５８５４Ａ１における製造方法を参照のこと。生成物の不純物を測定したところ、総不純物の含有量が１．３６％であった。
【0120】
実施例１７：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の製造
【化4】
【0121】
方法１：
２０～２５℃条件下で５．０ｇの２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン（１２．４５ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を５０ｍＬのアセトンに溶解した。１．１４ｍＬの質量分率３６％の濃塩酸（１３．７０ｍｍｏｌ、１．１ｅｑ）をアセトンで４．５ｍＬに希釈し、次いで反応液にゆっくり滴下して反応させ、１時間攪拌を続けた後に濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩４．４ｇが収率８０．７％で得られた。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ=11.27 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 7.10 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.93 (m, 4H), 6.81 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.72 (t, J = 8.6 Hz, 2H), 6.65 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 3.91 (m, 1H), 3.70 (s, 2H), 3.35 (s, 4H), 3.17 (d, J = 9.1 Hz, 2H), 2.77 (s, 3H), 1.46 (d, J = 7.2 Hz, 3H),（１Ｈ ＮＭＲパターンを図１０に示す）；13C NMR (101 MHz, DMSO-d6) δ=148.29, 146.87, 142.56, 138.00, 128.37, 127.87, 126.54, 122.09, 121.26, 116.89, 116.57, 114.91, 113.98, 52.47, 46.11, 43.12, 42.35, 21.91,（１３Ｃ ＮＭＲパターンを図１１に示す）。構造同定したところ、得られた塩酸塩中の２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと塩酸が１：１で結合している。
２０～２５℃条件下で５．０ｇの２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン（１２．４５ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を５０ｍＬのアセトンに溶解した。１．１４ｍＬの質量分率３６％の濃塩酸（１３．７０ｍｍｏｌ、１．１ｅｑ）をアセトンで４．５ｍＬに希釈し、次いで反応液にゆっくり滴下して反応させ、１時間攪拌を続けた後に濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩４．４ｇが収率８０．７％で得られた。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ=11.27 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 7.10 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.93 (m, 4H), 6.81 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.72 (t, J = 8.6 Hz, 2H), 6.65 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 3.91 (m, 1H), 3.70 (s, 2H), 3.35 (s, 4H), 3.17 (d, J = 9.1 Hz, 2H), 2.77 (s, 3H), 1.46 (d, J = 7.2 Hz, 3H),（１Ｈ ＮＭＲパターンを図１０に示す）；13C NMR (101 MHz, DMSO-d6) δ=148.29, 146.87, 142.56, 138.00, 128.37, 127.87, 126.54, 122.09, 121.26, 116.89, 116.57, 114.91, 113.98, 52.47, 46.11, 43.12, 42.35, 21.91,（１３Ｃ ＮＭＲパターンを図１１に示す）。構造同定したところ、得られた塩酸塩中の２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンと塩酸が１：１で結合している。
【0122】
方法２：
溶媒アセトンをエタノールに置換すること以外には、方法１の操作手順を参照しながら、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の製品を得た。構造同定したところ、この製品は方法１で得られた製品と一致した。
溶媒アセトンをエタノールに置換すること以外には、方法１の操作手順を参照しながら、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の製品を得た。構造同定したところ、この製品は方法１で得られた製品と一致した。
【0123】
方法３：
溶媒アセトンをイソプロパノールに置換すること以外には、方法１の操作手順を参照しながら、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の製品を得た。構造同定したところ、この製品は方法１で得られた製品と一致した。
溶媒アセトンをイソプロパノールに置換すること以外には、方法１の操作手順を参照しながら、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の製品を得た。構造同定したところ、この製品は方法１で得られた製品と一致した。
【0124】
方法４：
溶媒アセトンをテトラヒドロフランに置換すること以外には、方法１の操作手順を参照しながら、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の製品を得た。構造同定したところ、この製品は方法１で得られた製品と一致した。
溶媒アセトンをテトラヒドロフランに置換すること以外には、方法１の操作手順を参照しながら、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩の製品を得た。構造同定したところ、この製品は方法１で得られた製品と一致した。
【0125】
上記の塩酸塩製品の不純物を測定したところ、総不純物の含有量が０．１０％～０．２５％であった。
【0126】
実施例１８：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンメタンスルホン酸塩の製造
【化5】
【0127】
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル２ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液に酢酸エチル２ｍＬとメタンスルホン酸（３６．０ｍｇ、０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）との混合溶液を滴下し、滴下中に多量の綿状固体が析出し、２０～２５℃条件下で１時間攪拌を続けた後に濾過し、濾過ケーキ（濾過ケーキは粘着状になっている）を収集して乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンメタンスルホン酸塩９０．１５ｍｇが収率４８．４％で得られた。
【0128】
実施例１９：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン－ｐ－トルエンスルホン酸塩の製造
【化6】
【0129】
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル２ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液に６５ｍｇのｐ－トルエンスルホン酸（０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、少量の固体が析出し、２０～２５℃条件下で１時間攪拌を続けた後に濾過し、濾過ケーキ（濾過ケーキは粘着状になっている）を収集して乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン－ｐ－トルエンスルホン酸塩１００．２０ｍｇが収率４６．５％で得られた。
【0130】
実施例２０：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩の製造
【化7】
【0131】
方法１：
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）をメタノール４ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた（溶解後に固体がゆっくりと析出した）。次いで、反応液に７２ｍｇクエン酸（０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、濁りを溶解した後、固体を徐々に析出させ、２０～２５℃条件下で４時間攪拌した後に濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩１８３．１０ｍｇが得られた。
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）をメタノール４ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた（溶解後に固体がゆっくりと析出した）。次いで、反応液に７２ｍｇクエン酸（０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、濁りを溶解した後、固体を徐々に析出させ、２０～２５℃条件下で４時間攪拌した後に濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩１８３．１０ｍｇが得られた。
【0132】
方法２：
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）をアセトン４ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液に７２ｍｇのクエン酸（０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、攪拌中に固体を徐々に析出させ、２０～２５℃条件下で２時間攪拌を続けた後に濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩１７９．６３ｍｇが得られた。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ=10.88 (s, 2H), 8.51 (s, 1H), 7.09 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.99 - 6.93 (m, 1H), 6.89 (d, J = 8.4 Hz, 3H), 6.82 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.73 (m, 1H), 6.66 (m, 2H), 6.52 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.91 (m, 1H), 3.22 (s, 4H), 2.92 (d, J = 4.4 Hz, 4H), 2.65 (d, J = 15.2 Hz, 2H), 2.57 (m, 4H), 2.53 (s, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.47 (d, J = 7.2 Hz, 3H),（１Ｈ ＮＭＲパターンを図１２に示す）。構造同定したところ、得られたクエン酸塩中の、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンとクエン酸が１：２で結合している。
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）をアセトン４ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液に７２ｍｇのクエン酸（０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、攪拌中に固体を徐々に析出させ、２０～２５℃条件下で２時間攪拌を続けた後に濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩１７９．６３ｍｇが得られた。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ=10.88 (s, 2H), 8.51 (s, 1H), 7.09 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.99 - 6.93 (m, 1H), 6.89 (d, J = 8.4 Hz, 3H), 6.82 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.73 (m, 1H), 6.66 (m, 2H), 6.52 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.91 (m, 1H), 3.22 (s, 4H), 2.92 (d, J = 4.4 Hz, 4H), 2.65 (d, J = 15.2 Hz, 2H), 2.57 (m, 4H), 2.53 (s, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.47 (d, J = 7.2 Hz, 3H),（１Ｈ ＮＭＲパターンを図１２に示す）。構造同定したところ、得られたクエン酸塩中の、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンとクエン酸が１：２で結合している。
【0133】
方法３：
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル２ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液に７２ｍｇのクエン酸（０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、攪拌中に固体を徐々に析出させ、２０～２５℃条件下で４時間攪拌を続けた後に濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩１８９．４ｍｇが得られた。
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル２ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液に７２ｍｇのクエン酸（０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、攪拌中に固体を徐々に析出させ、２０～２５℃条件下で４時間攪拌を続けた後に濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩１８９．４ｍｇが得られた。
【0134】
上記のクエン酸塩生成物の不純物を測定したところ、総不純物の含有量が０．６４％～０．８０％であった。
【0135】
実施例２１：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンフマル酸塩の製造
【化8】
【0136】
方法１：
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル２ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液にフマル酸４３．４１ｍｇ（ｔｒａｎｓ－２－ブテン二酸；０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、撹拌しながら徐々に固体が析出した。２０～２５℃条件下で４時間～５時間攪拌を続けた後、多量の固体が析出した。濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンフマル酸塩１４６．３ｍｇが収率７５．８％で得られた。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ=8.51 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.99 - 6.93 (m, 1H), 6.91 - 6.84 (m, 3H), 6.81 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.73 (m, 1H), 6.65 (m, 2H), 6.59 (s, 2H), 6.51 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.22 - 3.08 (m, 4H), 2.70 - 2.58 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 1.46 (d, J = 7.2 Hz, 3H),（１Ｈ ＮＭＲパターンを図１３に示す）。構造同定したところ、得られたフマル酸塩中の、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンとフマル酸が１：１で結合している。
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル２ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液にフマル酸４３．４１ｍｇ（ｔｒａｎｓ－２－ブテン二酸；０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、撹拌しながら徐々に固体が析出した。２０～２５℃条件下で４時間～５時間攪拌を続けた後、多量の固体が析出した。濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンフマル酸塩１４６．３ｍｇが収率７５．８％で得られた。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ=8.51 (s, 1H), 7.06 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.99 - 6.93 (m, 1H), 6.91 - 6.84 (m, 3H), 6.81 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.73 (m, 1H), 6.65 (m, 2H), 6.59 (s, 2H), 6.51 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.22 - 3.08 (m, 4H), 2.70 - 2.58 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 1.46 (d, J = 7.2 Hz, 3H),（１Ｈ ＮＭＲパターンを図１３に示す）。構造同定したところ、得られたフマル酸塩中の、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンとフマル酸が１：１で結合している。
【0137】
方法２：
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）をアセトン２ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液にフマル酸４３．４１ｍｇ（ｔｒａｎｓ－２－ブテン二酸；０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、最初、少量の固体が反応瓶の底に析出し、その後徐々に油状物になった。２０～２５℃条件下で４時間～５時間攪拌を続けた後、多量の固体が析出した。濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンフマル酸塩１２１ｍｇが収率６２．５％で得られた。
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）をアセトン２ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液にフマル酸４３．４１ｍｇ（ｔｒａｎｓ－２－ブテン二酸；０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、最初、少量の固体が反応瓶の底に析出し、その後徐々に油状物になった。２０～２５℃条件下で４時間～５時間攪拌を続けた後、多量の固体が析出した。濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンフマル酸塩１２１ｍｇが収率６２．５％で得られた。
【0138】
上記のフマル酸塩生成物の不純物を測定したところ、総不純物の含有量が０．７６％～０．８４％であった。
【0139】
実施例２２：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン酒石酸塩の製造
方法１：
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）をアセトン２ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液に酒石酸５６ｍｇ（ＤＬ型；０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、攪拌中に少量の固体が反応瓶の底に析出し、その後２０～２５℃で攪拌を２時間続け、固体が析出した。濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン酒石酸塩１５５．３ｍｇが得られた。
方法１：
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）をアセトン２ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液に酒石酸５６ｍｇ（ＤＬ型；０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、攪拌中に少量の固体が反応瓶の底に析出し、その後２０～２５℃で攪拌を２時間続け、固体が析出した。濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン酒石酸塩１５５．３ｍｇが得られた。
【0140】
方法２：
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル２ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液に酒石酸５６ｍｇ（ＤＬ型；０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、攪拌中に少量の固体が反応瓶の底に析出し、その後２０～２５℃で攪拌を２時間続け、多量の固体が析出した。濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン酒石酸塩１６６．５ｍｇが得られた。
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル２ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液に酒石酸５６ｍｇ（ＤＬ型；０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、攪拌中に少量の固体が反応瓶の底に析出し、その後２０～２５℃で攪拌を２時間続け、多量の固体が析出した。濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン酒石酸塩１６６．５ｍｇが得られた。
【0141】
実施例２３：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンマレイン酸塩の製造
【化9】
【0142】
２０～２５℃条件下で２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン１５０ｍｇ（０．３７４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル３ｍＬに溶解させ、攪拌しながら清澄になるように溶解させた。次いで、反応液に４３．４１ｍｇのマレイン酸（ｃｉｓ－２－ブテン二酸；０．３７４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）を加え、撹拌しながら、過程中少量の固体が反応瓶の底に析出し、その後徐々に油状物になった。２０～２５℃で４時間～５時間攪拌を続けた後、多量の固体が析出した。濾過し、濾過ケーキを乾燥させた。そして、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンマレイン酸塩１３２．８ｍｇが収率６８．６％で得られ、その総不純物の含有量が０．４２％であった。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ=8.51 (s, 1H), 7.11 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.00 - 6.87 (m, 4H), 6.82 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.73 (m, 1H), 6.66 (dd, J = 8.0, 2.0 Hz, 2H), 6.54 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.05 (s, 2H), 3.92 (m, 1H), 3.28 (s, 8H), 2.83 (s, 3H), 1.47 (d, J = 7.2 Hz, 3H),（１Ｈ ＮＭＲパターンを図１４に示す）。構造同定したところ、得られたマレイン酸塩中の、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンとマレイン酸が１：１で結合している。
【0143】
実施例２４：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン臭化水素酸塩の製造
実施例１７の製造方法を参照しながら、塩酸を臭化水素酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン臭化水素酸塩を製造した。
実施例１７の製造方法を参照しながら、塩酸を臭化水素酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン臭化水素酸塩を製造した。
【0144】
実施例２５：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンリン酸塩の製造
実施例１７の製造方法を参照しながら、塩酸をリン酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンリン酸塩を製造した。
実施例１７の製造方法を参照しながら、塩酸をリン酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンリン酸塩を製造した。
【0145】
実施例２６：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンシュウ酸塩の製造
実施例１７の製造方法を参照しながら、塩酸をシュウ酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンシュウ酸塩を製造した。
実施例１７の製造方法を参照しながら、塩酸をシュウ酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンシュウ酸塩を製造した。
【0146】
実施例２７：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンエタンスルホン酸塩の製造
実施例２１の製造方法を参照しながら、フマル酸をエタンスルホン酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンエタンスルホン酸塩を製造した。
実施例２１の製造方法を参照しながら、フマル酸をエタンスルホン酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンエタンスルホン酸塩を製造した。
【0147】
実施例２８：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンリンゴ酸塩の製造
実施例２１の製造方法を参照しながら、フマル酸をリンゴ酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンリンゴ酸塩を製造した。
実施例２１の製造方法を参照しながら、フマル酸をリンゴ酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンリンゴ酸塩を製造した。
【0148】
実施例２９：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンコハク酸塩の製造
実施例２１の製造方法を参照しながら、フマル酸をコハク酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンコハク酸塩を製造した。
実施例２１の製造方法を参照しながら、フマル酸をコハク酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンコハク酸塩を製造した。
【0149】
実施例３０：２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンプロピオン酸塩の製造
実施例２１の製造方法を参照しながら、フマル酸をプロピオン酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンプロピオン酸塩を製造した。
実施例２１の製造方法を参照しながら、フマル酸をプロピオン酸に置換し、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンプロピオン酸塩を製造した。
【0150】
実施例３１：溶解度の比較研究
「中国薬局方」（２０２０版）の一般溶解度試験方法に従い、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンマレイン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンフマル酸塩を秤量し、２５℃±２℃条件下で一定容量の溶媒に加え、５分ごとに３０秒間激しく振盪し、３０分以内の溶解を観察し、溶解度を測定した。
「中国薬局方」（２０２０版）の一般溶解度試験方法に従い、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンマレイン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンフマル酸塩を秤量し、２５℃±２℃条件下で一定容量の溶媒に加え、５分ごとに３０秒間激しく振盪し、３０分以内の溶解を観察し、溶解度を測定した。
【0151】
【表25】
【0152】
溶解度実験の結果、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩は、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンよりも水及びｐＨ１．０の塩酸溶液中の溶解度、特に水中の溶解度が優れた。２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩は、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンよりも水中の溶解度が１０００倍高かった。
【0153】
さらに、塩酸塩の溶解度は、この化合物の他の塩の溶解度よりも明らかに優れており、その中で、溶解度のより良いクエン酸塩に比べて７倍向上し、マレイン酸塩及びフマル酸塩に比べても３５倍以上向上した。
【0154】
実施例３２：安定性の試験１
試験（１）：高温に対する試験
「中国薬局方」（２０２０版）９００１「原料医薬品及び製剤の安定性試験ガイドライン」方法に従って、試験供試品を蓋が開いたまま適切な恒温装置に置き、温度６０℃条件下で３０日間放置しており、５日目、１０日目及び３０日目にサンプリングした。
試験（１）：高温に対する試験
「中国薬局方」（２０２０版）９００１「原料医薬品及び製剤の安定性試験ガイドライン」方法に従って、試験供試品を蓋が開いたまま適切な恒温装置に置き、温度６０℃条件下で３０日間放置しており、５日目、１０日目及び３０日目にサンプリングした。
【0155】
高温試験の結果、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンは、塩になった後、高温条件下での安定性が遊離状態の２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンよりも高かった。その中で、塩酸塩は高温条件下での安定性が最良で、性状に変化がなく、総不純物の生成量が低かったことが分かった。
【0156】
【表26】
【0157】
試験（２）：高湿試験
「中国薬局方」（２０２０版）９００１「原料医薬品及び製剤の安定性試験ガイドライン」方法に従って、試験供試品を蓋が開いたまま恒湿密閉容器に置き、２５℃でそれぞれ相対湿度９０％±５％条件下で３０日間放置しており、５日目、１０日目及び３０日目にサンプリングした。
「中国薬局方」（２０２０版）９００１「原料医薬品及び製剤の安定性試験ガイドライン」方法に従って、試験供試品を蓋が開いたまま恒湿密閉容器に置き、２５℃でそれぞれ相対湿度９０％±５％条件下で３０日間放置しており、５日目、１０日目及び３０日目にサンプリングした。
【0158】
高湿試験の結果、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンは、塩になった後、高湿条件下での安定性が遊離状態の２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンよりも高かった。その中で、塩酸塩は高湿条件下での安定性が他の塩型よりも優れており、性状に変化がなく、総不純物の生成量が低かったことが分かった。
【0159】
【表27】
【0160】
試験（３）：光照射試験
「中国薬局方」（２０２０版）９００１「原料医薬品与製剤安定性試験ガイドライン」方法に従って、試験供試品を安定性試験箱に置き、照度４５００１ｘ±５００１ｘ、光源総照度１．２ｘ１０６ｌｕｘ・ｈｒ以上、近紫外ランプエネルギー２００Ｗ・ｈｒ／ｍ２以上の条件下で３０日間放置しており、５日目、１０日目及び３０日目にサンプリングした。
「中国薬局方」（２０２０版）９００１「原料医薬品与製剤安定性試験ガイドライン」方法に従って、試験供試品を安定性試験箱に置き、照度４５００１ｘ±５００１ｘ、光源総照度１．２ｘ１０６ｌｕｘ・ｈｒ以上、近紫外ランプエネルギー２００Ｗ・ｈｒ／ｍ２以上の条件下で３０日間放置しており、５日目、１０日目及び３０日目にサンプリングした。
【0161】
光照射試験の結果、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンは、塩になった後、光照射条件下での安定性が遊離状態の２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンよりも高かった。その中で、クエン酸塩は光照射条件下で、外観が５日目で淡黄色から灰色に変化し、１０日目で暗灰色に変化し、塩酸塩は光照射条件下での安定性が他の塩型よりも優れており、性状に変化がなく、総不純物の生成量が低かったことが分かった。
【0162】
【表28】
【0163】
以上より、安定性実験の結果から、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩は、高温、高湿、光照射条件下での安定性が遊離化合物及び他の塩よりも高く、総不純物の含有量が他の塩及び遊離化合物よりも明らかに低かったことが示された。
【0164】
実施例３３：安定性試験２
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンフマル酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンマレイン酸塩を同じ質量で秤量し、２５℃±２℃条件下で一定容量のｐＨ１．０の塩酸溶液（人間の胃液の酸性に類似）に加え、５分ごとに３０秒間激しく振盪し、０．５時間及２４時間以内の溶液の色の状態を観察した。
２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンフマル酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンマレイン酸塩を同じ質量で秤量し、２５℃±２℃条件下で一定容量のｐＨ１．０の塩酸溶液（人間の胃液の酸性に類似）に加え、５分ごとに３０秒間激しく振盪し、０．５時間及２４時間以内の溶液の色の状態を観察した。
【0165】
【表29】
【0166】
実験結果から、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンフマル酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンマレイン酸塩サンプルは、ｐＨ１．０の塩酸溶液において溶液の色が明らかに変化し、安定性が２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩よりも悪かったこと示された。
【0167】
実施例３４：吸湿性の比較実験
「中国薬局方」（２０２０版）第４部の「医薬品吸湿性ガイドライン」に従って、上記実施例で得られた２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩などに対して吸湿性試験を行った。
「中国薬局方」（２０２０版）第４部の「医薬品吸湿性ガイドライン」に従って、上記実施例で得られた２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジンクエン酸塩などに対して吸湿性試験を行った。
【0168】
吸湿性特徴の説明及び吸湿性重量増加の定義は次の通りである。
潮解：十分な水分を吸収して液体を形成すること、
極めて吸湿性があり：引湿による重量増加は１５％以上であること、
吸湿性があり：引湿による重量増加は１５％未満であるが２％以上になること、
わずかに吸湿性があり：引湿による重量増加は２％未満であるが０．２％以上になること、
吸湿性がない又はほとんどない：引湿による重量増加は０．２％未満であること。
潮解：十分な水分を吸収して液体を形成すること、
極めて吸湿性があり：引湿による重量増加は１５％以上であること、
吸湿性があり：引湿による重量増加は１５％未満であるが２％以上になること、
わずかに吸湿性があり：引湿による重量増加は２％未満であるが０．２％以上になること、
吸湿性がない又はほとんどない：引湿による重量増加は０．２％未満であること。
【0169】
実験結果から、２－（１－（４－（４－メチルピペラジン－１－イル）フェニル）エチル）－１０Ｈ－フェノチアジン塩酸塩は、吸湿性が低く、その物理的及び化学的特性が優れており、薬剤形成性が最良であったことが示された。
【0170】
上記実施形態は、本発明の技術的趣旨及び特徴を説明するために使用されたもので過ぎなく、この技術に精通した方が本発明の内容を理解してそれに応じて実施できるようにすることを目的とし、本発明の保護範囲を限定することを意図するものではない。本発明の精神及び本質に基づいて行われたすべての同等の変更又は修正は、本発明の保護範囲に含まれるべきである。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【国際調査報告】